RS60068B1

RS60068B1 - Liofilisani preparati melfalan flufenamida

Info

Publication number: RS60068B1
Application number: RS20200116A
Authority: RS
Inventors: Jack Spira; Fredrik Lehmann
Original assignee: Oncopeptides Ab
Priority date: 2012-10-26
Filing date: 2013-10-24
Publication date: 2020-05-29
Also published as: JP2015535243A; EP2928463A1; CA2889753A1; AU2013335359B2; RU2015118581A; EP2928463A4; CN108685860B; JP6284945B2; HK1216501A1; KR20150070375A; NZ708016A; IL238398B; BR112015009280A2; IL238398A0; EP3628318A1; WO2014065751A1; EP2928463B1; US10285946B2; US20150335578A1; MX365205B

Description

Opis oblasti tehnike

[0001] Ovaj pronalazak za koji se zaštita patentom traži u patentnim zahtevima je usmeren na liofilisane farmaceutske preparate koji obuhvataju melfalan flufenamid hidrohlorid, postupke za njihovo dobijanje, supstance koje obuhvataju liofilisane farmaceutske preparate i njihovu upotrebu za lečenje kancera.

[0002] Obim ovog pronalaska je definisan patentnm zahtevima. Svako upućivanje u ovom opisu na postupke terapije se odnosi na jedinjenja, farmaceutske supstance i lekove iz ovog pronalaska za upotrebu za lečenje humanog (ili životinjskog) organizma terapijom (ili dijagnozu).

Stanje tehnike

[0003] Kancer je bolest koju je teško izlečiti i koja može biti fatalna. Prema tome, napori da se razviju nove terapije za kancer se neprestano odvijaju u krugovima istaživača. Prisutan je ogroman broj kancera kao čvrsti tumori, npr. kancer pluća, kancer dojke, kancer prostate, pri čemu su ostali hematološki i limfoidni maligniteti, npr. leukemije i limfomi.

[0004] Hemoterapija se često koristi u pokušajima da se izleči ili umiri bolest. Ćelije kancera se obično brzo dele, hemoterapija obično deluje brzim ubijanjem ćelija koje se dele. U širem smislu, većina hemoterapijskih lekova radi oštećenjem mitoze (t.j. deobom ćelije), efikasnim ciljanjem ćelija koje se brzo dele. Kako ovi lekovi prouzrokuju oštećenje ćelija oni se nazivaju citotoksici. Neki lekovi prouzrokuju da ćelija prođe apoptozu (takozvana "programirama smrt ćelije"). Često se koristi kombinovana hemoterapija, kada dva ili više lekova imaju različite režime dejstva koji se koriste zajedno da bi se optimizovalo antitumorsko dejstvo, da bi se smanjila neželjena dejstva, i da bi se sprečio razvoj otpornosti. Rezultati dobijeni hemoterapijom variraju u skladu sa tipom tumora. Neki tumori su veoma osetljivi i lečenje u tom slučaju ima veliku verovatnoću da dovede do izlečenja.

[0005] Hemoterapijski lekovi mogu generalno da budu podeljeni na agense alkilacije, antimetabolite, antracikline, alkaloide biljke, inhibitore topoizomeraze, i druge antitumorske agense. Lekovi utiču na deobu ćelije ili sintezu DNK.

[0006] Agensi alkilacije, kao što su lekovi izvedeni iz azotnog iperita, koji je derivat bis(2hloroetil)amina, se koriste kao hemoterapijski lekovi za lečenje velikog broja neoplastičnih oboljenja. Agensi alkilacije imaju sposobnost da kovalentno spoje alkil grupe na elektronegativna mesta u ćelijama. Dakle, ovi agensi deluju oštećenjem funkcije formiranjem kovalentnih veza sa heteroatomima u biološki važnim molekulima kao što je RNK, DNK i proteini. Primeri agenasa alkilacije su mehloretamin, ciklofosfamid, hlorambucil, ifosfamid, temozolomid i melfalan koji hemijski modifikuju DNK ćelije.

[0007] WO01/96367 opisuje dipeptide i tripeptide alkilacije i jednu ili dve dodatne amino kiseline ili derivata amino kiseline. Ovi derivati su pokazali da imaju poboljšanu efikansost na raznovrsne tipove tumora.

[0008] Liofilizacija ili sušenje zamrzavanjem je postupak za dehidriranje uzoraka korišćenih da se očuva ili poveća stabilnost ili zaustavi razgradnja. Usled nižeg sadržaja vode liofilisanih proizvoda, obično oko 1-4%, aktivnosti mikroorganizama i enzima je inhibirano i time se proizvodu povećava vek upotrebe. Kod liofilizacije, uzorak koji treba liofilisati je rastvoren u vodenom rastvoru i naknadno zamrznut posle čega se smanjuje okolni pritisak. Uzorak je zatim podvrgnut sublimaciji, opciono primenom toplote, da bi se pročistila (sublimirala) zamrznuta voda direktno iz čvrste faze u fazu gasa. Krajnji sadržaj vode u proizvodu je veoma nizak, najčešće oko 1% do 4%. Liofilizacija se često koristi u oblasti farmacije da bi se povećalo vreme čuvanja na polici tih farmaceutskih proizvoda.

Kratak opis pronalaska

[0009] Ovaj pronalazak tako kako je opisan u patentnim zahtevima, se odnosi na liofilisane preparate koji obuhvataju melfalanil- L-p-fluorofenilalanin etil estar hidrohlorid, poznat kao melfalan flufenamid hidrohlorid, ili J1.

[0010] Melfalan flufenamid boluje od slabe rastvorljivosti u vodenim rastvorima. Samim tim, upotreba organskih rastvarača, kao što je DMA (dimetilacetamid), je neophodna da bi se rastvorilo to jedinjenje. Međutim, organski rastvarači su često toksični i mogu takođe da prouzrokuju uništenje medicinskih uređaja korišćenih za isporuku jedinjenja subjektima, kao što su pacijenti koji boluju od kancera. Samim tIm, da bi se prevazišli problemi sa rastvarajem i obezbedilo jedinjenje u organskom rastvaraču, postoji potreba za alternativnim farmaceutskim preparatima melfalan flufenamida koji ima dovoljnu rastvorljivost i optimizovanu stopu rastvaranja u fiziološki prihvatljivim rastvorima.

[0011] Jedno varijantno rešenje ovog pronalaska je usmereno na liofilisan farmaceutski preparat koji obuhvata melfalan flufenamid hidrohlorid, i saharozu pri čemu je odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i saharoze od 1:25 do 1:75.

[0012] Ovde je opisan liofilisan farmaceutski preparat koji je rastvorljiv u vodenom rastvoru.

[0013] Još jedno varijantno rešenje ovog pronalaska je vrsta delova, koji obuhvataju liofilisani farmaceutski preparat kako je ovde definisan, i fiziološki prihvatljiv rastvor.

[0014] Još jedno varijantno rešenje ovog pronalaska je liofiilisan farmaceutski preparat kako je ovde opisano, za upotrebu kao lek.

[0015] Ovde je takođe opisan komplet delova kako je ovde opisano, za upotrebu kao lek.

[0016] Jedno varijantno rešenje ovog pronalaska je liofilisani farmaceutski preparat kako je ovde opisano, za upotrebu za lečenje i/ili sprečavanje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezioteliom, višestruki mijelom, kancer dojke, i/ili bilo koji čvrst ili hematološki kancer.

[0017] Još jedno varijantno rešenje ovog pronalaska je komplet delova kao što je ovde opisano, za upotrebu za lečenje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezioteliom, višestruki mijelom, kancer dojke, i/ili bilo koji čvrst ili hematološki kancer.

[0018] Takođe je opisan postupak za lečenje i/ili sprečavanje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke, i/ili bilo koji čvrst ili hematološki kancer, pri čemu je liofilisan farmaceutski preparat ko što je ovde opisano, isporučen u terapijski delotvornoj dozi subjektu kom je potrebno.

[0019] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni pojmovi koji se ovde koriste imaju isto značenje kako ga najčešće shvata prosečan stručnjak u ovoj oblasti na koju se ovaj pronalazak odnosi. Iako metode i materijali slični ili ekvivalentni onima koje su ovde opisani mogu da se koriste u praksi ili testiranju ovog pronalaska, pogodni metodi i materijali su opisani dole u tekstu.

[0020] Druga svojstva i prednosti ovog pronalaska će biti očigledni iz sledećeg detaljnog opisa, primera, i iz patentnih zahteva.

Detaljan opis pronalaska

[0021] Melfalan flufenamid ili njegove farmaceutski prihvatljive soli imaju nisku rastvorljivost u vodenim rastvorima, što može da učini neophodnom upotrebu organskih rastvarača, kao što je DMA (dimetilacetamid), za rastvaranje pomenutog jedinjenja ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli. Samim tim, kada treba isporučiti pacijentu melfalan flufenamid, supstancu prvo treba rastvoriti u organskom rastvaraču, kao što je DMA, i posle toga razblažiti u rastvoru za infuziju pre isporuke pacijentu. Pacijent je ovim postupkom izložen organskim rastvaračima, izloženost organskim rastvaračima može biti opasna za pacijenta. Takođe, organski rastvarač može uništiti medicinske uređaje korišćene za isporuku melfalan flufenamida subjektima, kao što su pacijenti koji boluju od kancera.

[0022] Ovi pronalazači su sada neočekivano otkrii da kada je melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so liofilisani u prisustvu saharoze, pri čemu je odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i saharoze od 1:25 do 1:75, liofilisan farmaceutski preparat dobijen kao rezultat ima višu rastvorljivost u fiziološki prihvatljivom rastvoru i dalje, stopa rastvaranja je visoka, što može da bude korisno kako bi se sprečila razgradnja melfalan flufenamida tokom rastvaranja pre i posle isporuke pacijentu.

[0023] U prethodnim preparatima, melfalan flufenamid je dobijen iz sinteze kao beli prah u kristalnom obliku. Ovaj kristalni oblik može samo da bude rastvoren u visoko kiselim vodenim rastvorima, što je zbog praktičnih proizvodnih svrha nemoguće. Prisustvo ekscipijenata kao takvo, nije dovoljno poboljšalo rastvorljivost. Samim tim, prethodno melfalan flufenamid je umesto toga rastvoren u DMA (dimetilacetamid) u rastvoru glukoze. Preparat je izvodljiv ali nestabilan: 7% razgradnje/h. Pored toga, nastaje dimerizacija i rastvor se pretvara u svetlo žutu. Ovaj preparat je bio, međutim, nepouzdan i stopa polimerizacije je bila različita na neprihvatljiv način.

[0024] Shodno tome, postoji potreba za identifikovanjem alternativnih načina obezbeđivanja preparata koji obuhvata melfalan flufenamid hidrohlorid koji je rastvorljiv, sa dovoljnom stopom rastvaranja i povećanom stabilnošću. Pored toga, preparat treba da bude rastvorljiv u vodi da bi se izbegli negativni problemi toga što je organski rastvarač u proizvodu dat pacijentu (kao što je DMA).

[0025] Ovde je opisan liofilisani farmaceutski preparat koji obuhvata melfalan flufenamid, ili njegovu farmaceutski prihvaljivu so, i saharozu.

[0026] Pomenuti melfalan flufenamid je melfalan flufenamid hidrohlorid (J1).

[0027] Odnos težine (w/w) za koji se traži zaštita patentom između pomenutog melfalan flufenamida i saharoze je od 1:25 do 1:75.

[0028] U jednom drugom opisu ovog varijantnog rešenja, odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamida i saharoze je 1:50.

[0029] U još jednom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuti liofilisani farmaceutski preparat obuhvata 25 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i 1,25 g saharoze.

[0030] U još jednom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuti liofilisani farmaceutski preparat obuhvata 50 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i 2,5 g saharoze.

[0031] U još jednom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuti liofilisani farmaceutski preparat obuhvata 15 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i 0,75 g saharoze.

[0032] U još jednom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuti liofilisani farmaceutski preparat obuhvata 20 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i 1,0 g saharoze.

[0033] U još jednom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuti liofilisani farmaceutski preparat obuhvata 40 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i 2,0 g saharoze.

[0034] U još jednom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuti liofilisani farmaceutski preparat obuhvata 55 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i 2,75 g saharoze.

[0035] U drugom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuti liofilisani farmaceutski preparat obuhvata 200 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) ili više, kao što je 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg ili 800 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i pri čemu je težinski odnos (w/w) između pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i saharoze od 1:25 do 1:75. Takvi preparati mogu biti posebno korisni kao visoka pojedinačna doza, kao što je pre transplantacije.

[0036] U drugom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuti liofilisani farmaceutski preparat je bez, ili pretežno bez organskih rastvarača.

[0037] Pre upotrebe, liofilisani farmaceutski preparat koji obuhvata melfalan flufenamid hidrohlorid i saharozu, će biti razblažen u fiziološki prihvatljivom rastvoru, da bi se dobila korisna supstanca.

[0038] Samim tim, u drugom izvođenju ovog varijantnog rešenja data je supstanca koja obuhvata farmaceutski preparat od melfalan flufenamid hidrohlorida prema ovom pronalasku.

[0039] U jednom drugom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuta supstanca obuhvata fiziološki prihvatljiv rastvor. Preporučljivo, pomenuti fiziološki prihvatljiv rastvor je rastvor glukoze. Najčešće, količina glukoze jeste 4,5-5,5 % težine liofilisanog preparata.

[0040] Ovaj pronalazak obezbeđuje liofilisani preparat kako je opisano u patentnim zahtevima koji je stabilan u suvom obliku i rastvorljiv u vodenom rastvoru bez prisustva organskog rastvarača. Iako je prethodno bilo moguće pripremiti liofilisani preparat melfalan flufenamid sam, takva preparat se sporo rastvarao u vodenim rastvorima u poređenju sa vremenom razgradnje. Inkorporiranje saharoze u liofilisanom preparatu melfalan flufenamida (preko početnog rastvora u organskom rastvaraču) značajno poboljšava vreme rekonstrukcije, ali ne menja značajno stabilnost rekonstituisanog melfalan flufenamida. Kao rezultat, vremenski interval za rekonstituisani melfalan flufenamid je proširen, i ovo poboljšava terapije pacijenata, npr. omogućavanjem nižih brzina infuzije, gde je potrebno. Preparat "bez prisustva organskog rastvarača" bi mogao da obuhvati količine organskog rastvarača u tragovima, obično manje od 0,5% (w/w).

[0041] Liofilisani farmaceutski preparat melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) kako je ovde opisano, je beli, pahuljasti prah nasuprot neliofilisanom melfalan flufenamidu ili njegovoj farmaceutski prihvatljivoj soli, koja može biti u obliku gustog, blago žućkastog praha.

[0042] Najčešće, liofilizacija obuhvata četiri koraka, prethodnu obradu, zamrzavanje, primarno sušenje, i sekundarno sušenje. U koraku prethodne obrade, supstanca koju treba liofilisati se sprema za liofilizaciju npr. pripremanjem rastvora koji ima željenu koncentraciju ili mešanjem supstance sa daljim komponentama kako bi se dobio prihvatljiv rezultat. Korak zamrzavanja je moguće izvesti u laboratorijskoj tikvi za sušenje zamrzavanjem u kupki ohlađenoj npr. mehaničkim rashlađivanjem, suvim ledom i metanolom, ili tečnim azotom. Mašine koje suše zamrzavanjem su dostupne za liofilizaciju u većoj razmeri. Obično, temperature zamrzavanja jesu između -50 °C i -80 °C.

[0043] U primarnom koraku sušenja, pritisak se spušta do opsega od nekoliko milibara, i toplota može da se dopremi da bi se voda sublimirala iz materijala. Količinu neophodne toplote moguće je izračunati korišćenjem latentne toplote sublimacije sublimizujućih molekula. Trajanje ovog perioda zavisi, ali može trajati tokom dana kako bi se očuvala struktura materijala.

[0044] Cilj krajnjeg sekundarnog koraka sušenja je da se uklone svi nezamrznuti molekuli vode. U ovoj fazi, temperatura može biti najviše iznad 0°C, da bi se prekinule fizikohemijske interakcije koje su formirane između molekula vode i zamrznutog materijala.

[0045] U kontekstu ovog opisa, treba razumeti da je melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) liofilisan. Pojam "liofilisan farmaceutski preparat melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) se razume u značenju da je melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) liofilisan.

[0046] Dalja varijantna rešenja ovog opisa obezbeđuju liofilisan melfalan flufenamid hidrohlorid, komplet delova koji obuhvata takav melfalan flufenamid, postupci za dobijanje takvih supstanci melfalan flufenamid hidrohlorida obuhvataju takav liofilisan melfalan flufenamid hidrohlorid, i njegove upotrebe. "Liofilizacija", "liofilisano" itd. može u ovom kontekstu biti korišćen ravnopravno sa "sušenjem zamrzavanjem", "osušeno zamrzavanjem" itd.

[0047] Melfalan flufenamid može takođe sadržati neprirodne proporcije atomskih izotopa na jednom ili više njegovih atoma, kao što je deuterijum (2H). Jedinjenja mogu biti označana radioaktivnim izotopima, kao što je na primer tricijum (<3>H), jod -125 (<125>I) ili ugljenik -14 (<14>C).

[0048] Uključivanje saharoze obezbeđuje liofilisan preparat koji je stabilan kao takav i rastvorljiv u vodi bez prisustva organskog rastvarača u dovoljnoj količini u poređenju sa stopom razgradnje, i time je koristan u terapiji i manje toksičan.

[0049] Farmaceutski prihvatljive soli za sva varijantna rešenja iz ovog opisa mogu biti, na primer, so sa dodatom kiselinom jedinjenja opisanog ovde koje je dovoljno bazno, na primer, so sa dodatom kiselinom sa, na primer, neorganskom ili organskom kiselinom, na primer hlorovodoničnom, bromvodoničnom, azotnom, metansulfonskom, sumpornom, fosfornom, trifluorosirćetnom, paratoluen sulfonskom, 2-mezitilen sulfonskom, limunskom, sirćetnom, tartarnom, fumarnom, mlečnom, sukcinskom, jabučnom, malonskom, maleinskom, 1,2-etandisulfonskom, adipinskom, asparaginskom, benzensulfonskom, benzojevom, etansulfonskom ili nikotinskom kiselinom.

[0050] Kao što je pomenuto ovde gore u trekstu, kada je melfalan flufenamid hidrohlorid liofilisan u prisustvu saharoze, moguće je dobiti neočekivano visoko povećanje rastvorljivosti liofilisanog farmaceutskog preparata, što omogućava direktno rastvaranje liofilisanog melfalan flufenamida u vodenom rastvoru, kao što je fiziološki prihvatljiv rastvor. Ovo je nasuprot neliofilisanom melfalan flufenamidu koji ne može da se rastvori direktno u vodenom rastvoru već prvo mora da se rastvori u organskom rastvaraču pre rastvaranja u vodenom rastvoru. Ovde je dakle obezbeđen liofilisan farmaceutski preparat koji obuhvata melfalan flufenamid hidrohlorid, pri čemu je melfalan flufenamid liofilisan u prisustvu saharoze.

[0051] Usled slabe rastvorljivosti neliofilisanog melfalan flufenamida u vodenim fiziološki prihvatljivim rastvorima korišćenim za isporuku leka pacijentu, neophodno je prvo rastvoriti neliofilisani melfalan flufenamid u organskom rastvaraču, kao što je DMA. Melfalan flufenamid se dakle često čuva rastvoren u DMA. Prethodno nije bilo moguće da se direktno rastvori melfalan flufenamid u vodenom rastvoru, ali organske rastvarače je bilo neophodno koristiti. Pošto se rastvori u organskom rastvaraču, ovaj rastvor melfalan flufenamida i organski rastvarač mogu biti rastvoreni u fiziološki prihvatljivim rastvorima za isporuku subjektu.

[0052] Kako je melfalan flufenamid veoma toksičan, da bi se svela na minimum izloženost medicinskog osoblja takvim lekovima, koriste se specijalni uređaji za prenos lekova posle rastvaranja u organskim rastvaračima u rastvor za isporuku pacijentu. Ovi uređaji za prenos su često plastične cevčice koje obuhvataju polikarbonat. Međutim, takve cevčice su osetljive na, i mogu biti uništene, organske rastvarače, kao što je DMA. Samim tim, u slučajevima gde lek koji treba da se isporuči jeste rastvoren u takvom organskom rastvaraču, može biti nemoguće da se koristi uređaj za prenos, i rastvoren lek umesto toga mora biti direktno dodat u korišćen fiziološki prihvatljiv rastvor za isporuku neposredno pre vremena isporuke pacijentu. Ovo može biti opasno za medicinsko osoblje, koje se u tom slučaju izlaže toksičnom leku.

[0053] Kao što je pomenuto gore u tekstu, liofilizacija melfalan flufenamida povećava njegovu rastvorljivost u fiziološki prihvatljivim rastvorima. Ovo povećanje može biti još izraženije kada je melfalan flufenamid liofilisan u prisustvu saharoze. Kako je ovde opisano, kada je melfalan flufenamid liofilisan u prisustvu saharoze, rastvorljivost melfalan flufenamida je moguće povećati, u poređenju sa neliofilisanim melfalan flufenamidom. Upotrebu organskog rastvarača, kao što je DMA, da bi se prvo rastvorio melfalan flufenamid je moguće izbeći.

[0054] Melfalan flufenamid koji je liofilisan u prisustvu saharoze, može biti direktno rastvoren u fiziološki prihvatljivom rastvoru, kao što je 4,5-5,5 tež.%, npr. 5%, rastvora glukoze ili vodenog NaCl rastvora (npr. 0,9 tež% NaCI). Prema tome, uređaje koji obuhvataju polikarbonat i koji se koriste za isporuku melfalan flufenamida je moguće koristiti, uz svođenje na minimum rizika od izlaganja medicinskog osoblja leku. Takođe, na ovaj način isporuka toksičnog DMA pacijentu se izbegava. Ovo omogućava direktno pripremanje rastvora koji obuhvata melfalan flufenamid u koncentraciji pogodnoj za isporuku pacijentu. Alternativno, koncentrovani rastvor koji obuhvata liofilisani farmaceutski preparat melfalan flufenamid u fiziološki prihvatljivom rastvoru moguće je prvo pripremiti i zatim preneti u vreću za infuziju korišćem uobičajeno korišćenih uređaja za prenos.

[0055] Takođe, kada je melfalan flufenamid rastvoren u DMA, obično se formira adukt između melfalan flufenamida i DMA. Upotrebom liofilisanog farmaceutskog preparata obezbeđenog u skladu sa ovim pronalaskom, moguće je rastvoriti liofilisani melfalan flufenamid direktno u fiziološki prihvatljiv rastvor, uz izbegavanje prvog rastvaranja melfalan flufenamida u DMA. Pri tome, formiranje DMA melfalan flufenamid adukata moguće je izbeći i ni adukt ni DMA ne moraju biti isporučeni pacijentu.

[0056] Ovde je takođe opisana farmaceutska supstanca koja obuhvata liofilisani farmaceutski preparat melfalan flufenamid hidrohlorida kako je ovde definisano, opciono ga je moguće dobiti postupkom za dobijanje takvog liofilisanog preparata opisanog ovde. Takva farmaceutska supstanca može još da obuhvata fiziološki prihvatljiv rastvor, kao što je vodeni NaCl (npr. 0,9 tež.%) ili rastvor glukoze (npr. 4,5-5,5 tež%, kao što je 5 tež%, glukoze). Ova farmaceutska supstanca može biti koncentrovani rastvor predviđen za razblaživanje pre isporuke subjektu ili kao rastvor koji omogućava direktnu isporuku pacijentu.

[0057] Usled povećane rastvorljivosti melfalan flufenamida posle liofilizacije u prisustvu saharoze kako je ovde opisano, moguće je pripremiti rastvoreni rastvor melfalan flufenamida, kao što je farmaceutska supstanca koja obuhvata melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, koja je pretežno bez organskih rastvarača kao što je DMA, dihlorometan, tetrahidrofuran, 2-metil tetrahidrofuran, etil acetat, aceton, dimetilformamid, acetonitril, dimetil sulfoksid, dioksan, dietil etar, sirćetna kiselina, nbutanol, izopropanol, n-propanol, tert-butanol, sek-butanol, metanol, etanol, i sirćetna kiselina.

[0058] U ovom dokumentu se pod "pretežno bez" misli na farmaceutsku supstancu koja obuhvata količine samo u tragovima organskog rastvarača, kao što je manje od ukupno 1 tež% organskog rastvarača, poželjno manje od ukupno 0,5 tež% organskog rastvarača, još preporučljivije manje od ukupno od 0,1 tež% organskog rastvarača. U jednom varijantnom rešenju, liofilisani preparat ili farmaceutska supstanca ne obuhvata bilo koje merljive količine organskog rastvarača. Takvi preparati bi bili manje toksični i samim tim prihvatljiviji pacijentu, t.j. dali bi manje neželjenih dejstava kao što je povraćanje, mučnina ili drugi opšti simptomi kada se infuziraju.

[0059] U jednom varijantnom rešenju, dat je liofilisani farmaceutski preparat kako je ovde opisano, koji je bez, ili pretežno bez organskih rastvarača.

[0060] Farmaceutska supstanca može obuhvatiti liofilisani farmaceutski preparat kako je ovde opisano, koji obuhvata melfalan flufenamid hidrohlorid i fiziološki prihvatljiv rastvor, kao što je rastvor glukoze.

[0061] Formulacija "fiziološki prihvatljiv rastvor" je ovde definisana, jeste vodeni rastvor, kao što je NaCl rastvor (kao što je 0,9 tež.-% NaCl) ili rastvor glukoze, kao što je 4,5-5,5 tež.-% glukoze, npr. 5 tež.-%, ili drugi fiziološki prihvatljiv rastvor. Bilo koji takav rastvor je moguće opcioo puferisati.

[0062] Farmaceutska supstanca koja obuhvata liofilisani melfalan flufenamid i fiziološki prihvatljiv rastvor za direktnu isporuku subjektu, generalno obuhvata melfalan flufenamid u koncentraciji od 1 mg/ml ili manje, kao što je 0,2 mg/ml. Međutim, farmaceutska supstanca može obuhvatiti melfalan flufenamid u koncentraciji od najviše do 4 mg/ml za rastvor u fiziološki prihvatljivom rastvoru pre isporuke pacijentu.

[0063] Ovde je takođe opisan postupak za dobijanje liofilisanog farmaceutskog preparata, pri čemu je:

a. melfalan flufenamid hidrohlorid rastvoren u organskom rastvaraču da bi se dobio

1

rastvor melfalan flufenamida;

b. rastvor melfalan flufenamida se dodaje saharozi u odnosu težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida i saharoze od 1:25 do 1:75, da bi se dobio vodeni melfalan flufenamid/saharozni rastvor; i

c. vodeni rastvor melfalan flufenamida/saharoze se podvrgava liofilizaciji.

[0064] Odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamida i saharoze je od 1:25, 1:50, i 1:75.

[0065] U jednom drugom izvođenju ovog varijantnog rešenja, odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamida i saharoze je 1:50.

[0066] Prema ovom pronalasku, dobija se postupak, pri čemu je odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamida i saharoze od 1:25 do 1:75. Poželjno, odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamida i saharoze je 1:50.

[0067] Organski rastvarač je moguće izabrati iz jednog od etanola, etanola koji obuhvata kiselinu, glicerina, propilen glikola, benzil alkohola, dimetilacetamida (DMA), N-metil-2-pirolidona, izopropanola, n-butanola, tert-butanola, metil tert-butil etra, propilen glikola, dimetilsulfoksida, tetrahidrofurana, 2-metil tetrahidrofurana, acetona, dimetilformamida, acetonitrila, dioksana, sirćetne kiseline, mlečne kiseline, propionske kiseline, n-butanola, izopropanola, n-propanola, tert-butanola, mešavine tert-butanola i vode, sek-butanola, metanola, i mešavine etanola i vode. Preporučljivo, pomenuti organski rastvarač je tertbutanol ili mešavina tert-butanola i vode, još preporučljivije mešavina tert-butanola i vode u zapreminskom odnosu od 1:1.

[0068] Takođe je opisan postupak za dobijanje liofilisanog farmaceutskog preparata kako je ovde opisan, pri čemu je

a) melfalan flufenamid hidrohlorid rastvoren u organskom rastvaraču;

b) voda dodata u rastvor dobijen u koraku a) da bi se dobio rastvor pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida u koncentraciji od 0,2-3,0 mg/ml;

c) saharoza je dodata u rastvor dobijen u koraku b); i

d) rastvor je dobijen u koraku c) je podvrgnut liofilizaciji.

[0069] Preporučljivo, pomenuti organski rastvarač je tert-butanol.

[0070] Takođe je opisan postupak za dobijanje liofilisanog farmaceutskog preparata kako je ovde opisan, pri čemu je

a) melfalan flufenamid hidrohlorid (J1), je rastvoren u mešavini u odnosu od 1:1 (v/v) tert-butanola i vode da bi se dobio rastvor;

b) rastvor u koraku a) je dodat liofilisanoj saharozi, da bi se dobio rastvor melfalan flufenamid hidrohlorida (J1), tert-butanola, vode i saharoze, pri čemu je odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i saharoze od 1:25 do 1:75; i

c) rastvor dobijen u koraku c) je podvrgnut liofilizaciji.

[0071] Primeri organskih rastvarača korisnih za rastvaranje melfalan flufenamida, hidrohlorida u koraku a), mogu biti bilo koji izabrani iz etanola, etanola koji obuhvata kiselinu, glicerin, propilen glikol, benzil alkohol, dimetilacetamid (DMA), N-metil-2-pirolidon, izopropanol, n-butanol, tert-butanol, metil tert-butil etar, propilen glikol, dimetilsulfoksid, tetrahidrofuran, 2-metil tetrahidrofuran, aceton, dimetilformamid, acetonitril, dioksan, sirćetnu kiselinu, mlečnu kiselinu, propionsku kiselinu, n-butanol, izopropanol, n-propanol, tert-butanol, mešavinu tert-butanola i vode, sek- butanol, metanol, i mešavinu etanola i vode.

[0072] Kada je melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so rastvoren u tert-butanolu i vodi, koncentracija tert-butanola može biti 10-100 vol-%, kao što je 10-90 vol-%, 30-70 vol-%, ili 50 vol-%.

[0073] Voda korišćena za rastvaranje i/ili razblaživanje uzoraka liofilisanog farmaceutskog preparata u skladu sa ovim pronalaskom, je sterilna ili prečišćena voda, ili voda za ubrizgavanje (WFI).

[0074] Informacija oko načina izvođenja liofilizacije može da se nađe npr. u (Rey, L. and May, J. Freeze Drying/Lyophilization of Pharmaceutical and Biological Products (Sušenje zamrzavanjem/lifilizacija farmaceutskih i bioloških proizvoda) (2010), ISBN 978-1439B2575-4). U koraku zamrzavanja, uzorak je na primer zamrznut u kupki suvog ledenog acetona na temperaturi od -70 °C do -90 °C, kao što je -70 °C, -75 °C, -78 °C, -80 °C, -82 °C, -85 °C, -88 °C ili -90 °C na primer tokom 10 minuta do 120 minuta.

[0075] Alternativno, uzorak je moguće smrznuti u zamrzivaču na temperaturi -14 °C do -25 °C, kao što je -14 °C, -16 °C, -18 °C, -20 °C, -22 °C, ili -25 °C, na primer 10 min do 24 sata. Takođe je moguće da se zamrzne uzorak u tečnom azotu.

[0076] U primarnom koraku zamrzavanja, pritisak je moguće spustiti do 0,1 mbar do 50 mbar, kao što je 1 mbar do 10 mbar. Temperatura je obično ispod 0°C, kao što je -50 do 0 °C, ili -20 do -1 °C, npr. -50, -40, -30, -20, -10, ili -5 °C. Ova faza može na primer trajati 4 sata do 48 sati, npr.12 sati do 24 sata.

[0077] U krajnjem koraku sušenja, kada ispari najveća količina vode, temperatura može biti kao u primarnom koraku sušenja ili iznad 0°C.

[0078] Saharozu je moguće dodati pre ili posle razblaživanja rastvora dobijenog u koraku a) i pre izvođenja liofilizacije. Saharoza je obično u obliku praha ali može biti dodata kao vodeni rastvor.

[0079] Ovde je takođe opisan liofilisani farmaceutski preparat kako je ovde definisano dobijen pomoću gore opisanog postupka.

[0080] Ovde je takođe dat komplet kombinacije delova koji obuhvata:

(i) liofilisani farmaceutski preparat koji obuhvata melfalan flufenamid za koji se traži zaštita patentnom; i

(ii) fiziološki prihvatljiv rastvor, kao što je NaCl rastvor (kao što je 0,9 tež% NaCl) ili rastvor glukoze, kao što je 4,5-5,5 tež% rastvor glukoze, npr.5 tež% rastvor glukoze, ili drugi fiziološki prihvatljiv rastvor.

[0081] Takav komplet takođe može obuhvatiti uređaj za mešanje sadržaja dve posude jedne sa drugim i/ili prenos mešavine dobijene kao rezultat u uređaj, kao što je vreća koja obuhvata rastvor glukze, za isporuku pacijentu.

[0082] Takav komplet može obuhvatiti prvu posudu koja obuhvata liofilisani farmaceutski preparat koji obuhvata melfalan flufenamid kao što je opisano ovde i drugu posudu koja obuhvata fiziološki prihvatljiv rastvor. Melfalan flufenamid u kompletu može takođe da bude u mešavini sa farmaceutski prihvatljivim nosačem i/ili ekscipijentom. Jedan primer je 5% glukoze sa npr. 1% albumina ili drugog proteina ili jedinjenja. Količina fiziološki prihvatljivog rastvora može biti bilo mala količina da bi se pripremio koncentrovani rastvor liofilisanog farmaceutskog preparata koji obuhvata melfalan flufenamid, ili veću količinu kako bi se omogućila priprema rastvora koji ima željenu koncentraciju za isporuku pacijentu. Alternativno, komplet može obuhvatiti i posudu koja obuhvata fiziološki prihvatljiv rastvor za dobijanje koncentrovanog rastvora liofilisanog farmaceutskog preparata i drugu posudu; kao što je vreća za infuziju, koja obuhvata veću količinu fiziološki prihvatljivog rastvora za dobijanje razblaženijeg rastvora za isporuku subjektu.

[0083] Liofilisani farmaceutski preparat, farmaceutska supstanca ili komplet opisan ovde može obuhvatiti samo melfalan flufenamid hidrohlorid kao antitumorski agens. Međutim, melfalan flufenamid je moguće kombinovati i sa jednim ili više antitumorskih agenasa, kao što su druge antitumorske supstance kao što je gemcitabin, etoposid, doksorubicin

1

ili taksani ili druge terapijski delotvorne supstance. Kada su kombinovani sa drugim antitumorskim agensima oni mogu biti pomešani bilo sa melfalan flufenamidom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju pre liofilizacije i kao posledica toga liofilisani zajedno sa melfalan flufenamidom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju ili kombinovani sa liofilisanim melfalan flufenamidom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju posle liofilizacije, kao što je u kompletu ili farmaceutskoj supstanci. Liofilisani melfalan flufenamid moguće je takođe pomešati sa jednom ili više antitumorskih supstanci u suvom obliku, iako nisu liofilisani, posle liofilizacije melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0084] Melfalan flufenamid dat ovde ima citotoksičnu aktivnost i može dakle da se koristi za sprečavanje i/ili lečenje kancera opisanih ovde na drugom mestu (videti npr. WO 01/96367). Smanjenje opstanka ćelija tumora od melfalan flufenamida je u WO 01/96367 pokazano za različite hematološke i/ili čvrste tumore, npr. kancer pluća, mijelom, limfom, leukemiju, kancer dojke, i karcinom jajnika. Pored toga, za melfalan flufenamid je u WO 01/96367 pokazano da zaobilazi otpornost melfalana. Melfalan flufenamid je moguće dakle koristiti za sprečavanje i/ili lečenje kancera, smanjenje rasta tumora i/ili ubijanje ćelija tumora. Zato, melfalan flufenamid je moguće koristiti za lečenje i/ili produženje opstanka pacijenata pogođenih oboljenjima kancera. Melfalan flufenamid je moguće koristiti i kao visoku pojedinanu dozu, pre transplantacije, pacijenta obolelog od kancera [0085] Još jedno varijantno rešenje ovog pronalaska obezbeđuje upotrebu liofilisanog farmaceutskog preparata, komplet farmaceutske supstance kako je ovde opisano i za koji se traži zaštita, za upotrebu kao lek.

[0086] Još jedno varijantno rešenje ovog pronalaska obezbeđuje upotrebu liofilisanog farmaceutskog preparata, komplet ili farmaceutsku supstancu kako je ovde opisano za koju se traži zaštita, za upotrebu za lečenje i/ili sprečavanje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke i/ili bilo koji čvrsti ili hematološki kancer.

[0087] U jednom izvođenju ovog varijantnog rešenja, pomenuti liofilisani farmaceutski preparat, komplet ili farmaceutska supstanca kako je ovde opisano i za koji se traži zaštita, za upotrebu za lečenje i/ili sprečavanje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke i/ili bilo koji drugi čvrsti ili hematološki kancer, je dat svake 3. nedelje, obično tokom 3 do 6 ciklusa terapija.

[0088] Još jedno varijantno rešenje ovog pronalaska obezbeđuje upotrebu liofilisanog farmaceutskog preparata, komplet ili farmaceutsku supstancu kako je ovde opisano za koju se traži zaštita, za upotrebu pre transplantacije kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke i/ili bilo koji čvrsti ili hematološki kancer. U tom slučaju, preparat obuhvata oko 200 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) ili više, kao što je 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg ili 800 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) pri čemu je odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i saharoze od 1:25 do 1:75. Takvi preparati mogu biti posebno korisni kao visoka pojedinačna doza, pre transplantacije.

[0089] Još jedno varijantno rešenje ovog pronalaska obezbeđuje upotrebu liofilisanog farmaceutskog preparata, komplet ili farmaceutsku supstancu kako je ovde opisano za koju se traži zaštita, za pripremanje leka za lečenje i/ili sprečavanje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke i/ili bilo koji čvrsti ili hematološki kancer.

[0090] Još jedno varijantno rešenje ovog pronalaska obezbeđuje upotrebu liofilisanog farmaceutskog preparata, komplet ili farmaceutsku supstancu kako je ovde opisano za koju se traži zaštita, za pripremanje leka pre transplantacije kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke i/ili bilo koji čvrsti ili hematološki kancer. Pri takvoj upotrebi, preparat obuhvata 200 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) ili više, kao što je 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg ili 800 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1). Takvi preparati mogu biti posebno korisni kao visoka pojedinačna doza, pre transplantacije.

[0091] Drugo varijantno rešenje ovog pronalaska obezbeđuje liofilisani farmaceutski preparat, komplet ili farmaceutsku supstancu koja obuhvata melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) u combinaciji sa nekim drugim lekom korisnim za lečenje kancera, za upotrebu za lečenje i/ili sprečavanje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke i/ili bilo koji drugi čvrst ili hematološki kancer.

[0092] Ovde je takođe opisan postupak za lečenje i/ili sprečavanje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke i/ili bilo koji drugi čvrsti ili hematološki kancer. Taj postupak može obuhvatiti isporuku liofilisanog farmaceutskog preparata, komplet ili farmaceutsku supstancu kako je ovde data u terapijski delotvornoj dozi subjektu kom je potrebna. Subjekat je obično ljudsko biće ili domaća životinja.

[0093] U jednom izvođenju ovog varijantnog rešenja, liofilisani farmaceutski preprarat za koji se traži zaštita, komplet ili farmaceutska supstanca kako je ovde dato u terapijski delotvornoj dozi subjektu kom je potrebno svake 3. nedelje obično tokom 3 do 6 ciklusa terapije.

1

[0094] Ovde je takođe opisan postupak za lečenje i/ili sprečavanje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke i/ili bilo koji čvrsti ili hematološki kancer, pri čemu je liofilisani farmaceutski preparat za koji se traži zaštita, komplet ili farmaceutska supstanca koja obuhvata melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) dati u terapijski delotvornoj dozi subjektu kom je potrebno, u kombinaciji sa drugim lekom, korisno za lečenje kancera. Subjekat je obično ljudsko biće ili domaća životinja.

[0095] Ovde je takođe opisan postupak za lečenje i /ili sprečavanje kancera, kao što je kancer jajnika, kancer pluća, kancer bešike, mezoteliom, višestruki mijelom, kancer dojke i/ili bilo koji čvrsti ili hematološki kancer, pri čemu je liofilisani farmaceutski preparat za koji se traži zaštita, komplet ili farmaceutska supstanca koja obuhvata melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) je dati u terapijski delotvornoj dozi pre transplantacije subjektu kom je potrebno. Subjekat je obično ljudsko biće ili domaća životinja. U takvom postupku, preparat obuhvata oko 200 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) ili više, kao što je 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg ili 800 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i pri čemu je odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i saharoze od 1:25 do 1:75. Takvi preparati mogu biti posebno korisni kao visoka pojedinačna doza, pre transplantacije.

[0096] Isporuka liofilisanog farmaceutskog preparata za koji se traži zaštita patentom, kompleta ili farmaceutske supstance subjektu kom je potrebno može da se izvrši i intravenoznim injekcijama. Takođe je moguće isporučiti liofilisani melfalan flufenamid ili farmaceutsku supstancu koja obuhvata takav liofilisan melfalan flufenamid u telesne šupljine, kao što je usađivanje u bešiku, ili u peritonealnu ili pleuralnu šupljinu.

[0097] Melfalan flufenamid hidrohlorid je moguće isporučiti u količini od 20-130 mg, kao što je 25-75 mg, na primer 15, 20, 25, 40, 50 ili 55 mg ukupne količine melfalan flufenamida po isporuci pacijentu. Farmaceutska supstanca, ili komplet, data ovde koja obuhvata melfalan flufenamid može dakle da ima količinu liofilisanog melfalan flufenamida za koji se traži zaštita takvu da je ovu količinu moguće isporučiti pacijentu.

[0098] Melfalan flufenamid hidrohlorid je moguće isporučiti u količini od 20-130 mg, kao što je 25-75 mg, na primer 15, 20, 25, 40, 50 ili 55 mg ukupne količine melfalan flufenamida po isporuci pacijentu. Farmaceutska supstanca ili komplet dat ovde koji obuhvata melfalan flufenamid tako da je ovu količinu moguće isporučiti svake 3. nedelje, obično tokom 3 do 6 ciklusa terapije.

[0099] Liofilisan melfalan flufenamid hidrohlorid moguće je isporučiti dnevno, svakog drugog ili trećeg dana, nedeljno, svake druge, treće ili 4. nedelje ili čak u višoj

1

pojedinačnoj dozi, kao što je pre transplantracije, zavisno od subjektai oblika kancera koji treba lečiti. Visoka pojedinačna doza može biti 200 mg, ili viša, melfalan flufenamida, kao što je 300, 400, 500, 600, 700, ili 800 mg melfalan flufenamida.

[0100] Formulacija "sprečavanje" kako je ovde korišćeno, je predviđena da obuhvati terapiju kod pacijenta koji je podvrgnut hemoterapiji protiv bilo kog oblika kancera kako je ovde opisano, i koji je podvrgnut kontinualnoj terapiji sa ciljem sprečavanja bilo kakvih metastaza koje nastaju iz pomenutog kancera.

[0101] U još jednom varijantnom rešenju ovaj opis obezbeđuje upotrebu saharoze kao ekscipijenta, u liofilisanom preparatu melfalan flufenamida, ili njegovoj farmaceutski prihvatljivoj soli, za smanjenje vremena rekonstrukcije liofilisanog preparata pomenutog melfalan flufenamida, kada je rekonstituisan u vodenom rastvaraču.

[0102] Pomenuti melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, je melfalan flufenamid hidrohlorid (J1).

[0103] Pomenuti melfalan flufenamid hidrohlorid je poželjno rastvoren u tert-butanolu ili mešavini tert-butanola i vode, pre podvrgavanja pomenutog melfalan flufenamida pomenutom ekscipijentu.

[0104] U ovom dokumentu "liofilizacija", "sušenje zamrzavanjem", "liofilisan", "osušen zamrzavanjem", i slično mogu biti korišćeni ravnopravno.

[0105] Saharozu npr. prodaje Dansukker, sa CAS brojem registra 57-50-1.

[0106] U još jednom varijantnom rešenju ovaj pronalazak obezbeđuje upotrebu tertbutanola, opciono u mešavini sa vodom, u postupku za dobijanje liofilisanog farmaceutskog preparata melfalan flufenamida, preporučljivo melfalan flufenamid hidrohlorida (J1). Preporučljivo, pomenuti tert-butanol je u mešavini sa vodom u odnosu zapremine od 1:1.

[0107] Melfalan flufenamid hidrohlorid je moguće pripremiti kako je opisano u WO 01/96367. Primer 1 od WO 01/96367 opisuje sintetički postupak za pravljenje melfalan flufenamida (L-melfalanil-L-p-fluorofenilalanin etil estar), kao i njegovu so hidrohlorida -melfalan flufenamid hidrohlorid J1 (L-melfalanil-L-p-fluorofenilalanin etil estar, jedinjenje J1). U WO 01/96367, za melfalan flufenamid je pokazano da ima povećanu aktivnost ubijanja ćelija protiv tumora, čak i kada je korišćen u nižim koncentracijama od melfalana. Pored toga, otpornost melfalana je moguće zaobići.

[0108] Ovaj pronalazak će biti detaljnije opisan pomoću sledećih primera.

Primer 1. Dejstvo saharoze na stopu rastvaranja liofilisanog melfalan flufenamida

1

[0109] Brzina rastvaranja melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) dodavanjem saharoze u postupak sušenja zamrzavanjem je testirana za J1. Saharoza je agens formulacije koji se generalno smatra bezbednim (GRAS) a prema FDA (Agencija za hranu i lekove u SAD).

Korak 1 - pripremanje i liofilizacija za J1 (nisu u obimu patentnih zahteva)

[0110] Rastvor J1 (5 mg) je napravljen u tert-butanolu:vodi 1:1 (5 ml).100 µl rastvora je dodato u farmaceutsku bočicu koja obuhvata 0,2 mg saharoze. Farmaceutska bočica je pokrivena aluminijumskom folijom i zamrznuta na suvo ledenom acetonu. Farmaceutska bočica se sastojala od 0,1 mg J1 i 0,2 mg saharoze. Bočica sa uzorkom je posle toga tokom noći osušena zamrzavanjem. Sušenje zamrzavanjem je izvedeno na opremi Leybold Lyovac GT2.

Korak 2 - Rastvor glukoze za rastvaranje

[0111] 5% rastvora glukoze (100 ml) je pripremljeno i interni marker 3-metoksi-benzojeve kiseline (0,8 mg/ml) je dodat u rastvor.

Korak 3 - Određivanje stope rastvaranja

[0112] 0,5 ml rastvora glukoze iz koraka 2, je dodato u bočicu za sušenje zamrzavanjem sa J1 uzorkom iz koraka 1. Bočica je mućkana na sobnoj temperaturi tokom 15 sekundi i posle toga filtrirana i preneta u staklenu bočicu za merenje koncentracije J1, sa HPLC. Količina rastvorenog J1 je određena korišćenjem HPLC i kalibracione krivulje.

Rezultati

[0113] Koncentracija J1, je rastvorena u rastvoru glukoze tokom 15 sekundi iz koraka 3 je bila 0,08 mg/ml, što predstavlja približno 40 % od J1 rastvorenog u roku od 15 sekundi.

Primer 2. Testiranje dejstva količine saharoze na brzinu rastvaranja melfalan flufenamida u rastvoru vode

[0114] Brzina rastvaranja dodavanjem saharoze u različitim količinama za postupak sušenja zamrzavanjem melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) je testirana.

1

Eksperimentisanje je izvedeno kao što je izneto u Primeru 1 iznad ali količina saharoze je menjana: Rastvor J1 (5 mg) je napravljen u tert-butanolu:vodi 1:1 (5 ml).100 µl rastvora je dodato u bočice koje sadrže saharozu osušenu zamrzavanjem od 0,2 mg, 5 mg i 50 mg, prema opisanom redosledu. Farmaceutske bočice su pokrivene aluminijumskom folijom i zamrznute na suvo ledenom acetonu. Bočice su sadržale 0,1 mg J1 i 0,2 mg saharoze (odnos 1:2 w/w), 0,1 mg J1 i 5 mg saharoze (odnos 1:50 w/w) i 0,1 mg J1 i 50 mg saharoze (odnos 1:500 w/w). Bočice sa uzorcima su posle toga tokom noći osušene zamrzavanjem. Sušenje zamrzavanjem je izvedeno na opremi Leybold Lyovac GT2. Rastvor vode (100 ml) je pripremljen i interni marker 3-metoksi-benzojeve kiseline (0,08 mg/ml) je dodat u rastvor. 0,5 ml rastvora glukoze je dodato u svaku od bočica osušenih zamrzavanjem sa J1 uzorkom. Bočice su mućkane na sobnoj temperaturi tokom 15 sekundi i posle toga filtrirane i prenete u staklenu bočicu za merenje koncentracije J1, sa HPLC. Količina rastvorenog J1 u svakoj bočici je određena korišćenjem HPLC i kalibracionom krivuljom. Koncentracija J1, rastvorenog u rastvoru vode tokom 15 sekundi za svaku bočicu je prikazana u Tabeli 1.

Tabela 1.

[0115] Rezultati u Tabeli 1 pokazuju da je nastalo neočekivano povećanje stope rastvaranja kada je odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamida i saharoze bio oko 1:50, međutim, značajno povećanje brzine rastvaranja je nastalo kada je odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamida i saharoze bio 1:2.

Primer 3. Testiranje dejstva količine saharoze na brzinu rastvaranja melfalan flufenamida u rastvoru glukoze

[0116] 1 mg/mL rastvora od J1 je pripremljeno u tert-butanolu/vodi 1:1. 100 uL ovog rastvora je dodato u sedam 2 mL prozirnih staklenih bočica koje su sadržale saharozu (0,2 mg, 1 mg, 2,5 mg, 5,0 mg, 7,5 mg, 10 mg i 50 mg). Staklene bočice su korišćene tako da bi mogle biti nadgledane da li je formirana homogenena mešavina između J1 i saharoze pre sušenja zamrzavanjem. Bočice su povremeno mućkane. Bočice 1-3 su

1

pokazale bistar rastvor (vizuelnom proverom) posle 1-2 minuta dok je za bočice 4-7 koje su sadržale veću količinu saharoze trebalo najviše 20 minuta pre nego što su se rastvorile sve kocke šećera. Za bočicu 6 i 7 dvofazni sistem je primećen (t-butanol/voda) i homogeni rastvor nije dobijen. Ohlađeno je i osušeno zamrzavanjem 7 bočica tokom 36 sati.

[0117] 5%-ni rastvor glukoze koji obuhvata 0,08 mg/mL od 3-metoksi-benzojeve kiseline (0,5 mL) je dodat u svaku od polipropilenske bočice koje obuhvataju liofilisanu mešavinu J1:suharozi, jedna po jedna. Bočica je mućkana na sobnoj temperaturi tokom 15 sekundi, rastvor je filtriran kroz uređaj za filtriranje isporučen sa bočicom, i prenet na staklenu bočicu za analizu J1 koncentracija sa HPLC. Upoređivanje HPLC integralnih vrednosti za J1 vršne vrednosti sa kalibracionom krivuljom, koncentracije u mg/mL bi moglo biti izračunato. Rezultati su prikazani u Tabeli 2.

Tabela 2. Rastvaranje J1 posle 15 sekundi u 5%-om rastvoru glukoze

[0118] Tabela 2 pokazuje da je brzina rastvaranja J1 posle 15 sekundi su brze za sve odnose saharoze izuzev za uzorak 6 pri čemu je samo 36% rastvoreno. Kako je pomenuto gore u tekstu, uzorak 6 i 7 su bili nehomogeni pre suvog zamrzavanja i ovo bi moglo biti prihvatljivo objašnjenje.

Primer 4. Testiranje dejstva količine saharoze na brzinu rastvaranja melfalan flufenamida u rastvoru glukoze sa prenosom u bočicu

[0119] Primer 3 iznad je ponovljen, međutim, s razlikom što je posle filtracije, ta mešavina preneta iz polipropilenske filter bočice u staklenu da bi se sprečilo dalje rastvaranje.

2

Rezultati su prikazani u Tabeli 3.

Tabela 3. Rastvaranje J1 posle 15 sekundi u 5%-om rastvoru glukoze.

[0120] Rastvorljivost J1 je bila nešto niža nego kako je opisano u primeru 3. Samim tim, prenos u staklenu bočicu kada se izvode ove studije može biti od značaja za sprečavanje daljeg rastvaranja. Imajte u vidu da je interni standard 10% niži u ovim eksperimentima. Ovo bi se moglo objasniti razlikama pritiska u filter bočici naspram staklene bočice i daje kao rezultat razlike u količii ubirzgavanja na HPLC.

Primer 5. Testiranje dejstva količine saharoze na brzinu rastvaranja melfalan flufenamida u rastvoru vode

[0121] Dalji eksperimenti su izvedeni da bi se ispitalo dejstvo glukoze na rastvaranje J1 posle 15 sekundi. Sušenje zamrzavanjem je izvedeno kao gore u tekstu, ali umesto 5%-og rastvora glukoze, rastvor vode koji obuhvata 0,08 mg/mL 3-metoksibenzojeve kiseline (0,5 mL) je dodato u svaku od staklenih bočica, jedna po jedna. Bočica je mućkana na sobnoj temperaturi tokm 15 sekundi i preneta na polipropilensku bočicu, filtrirana i preneta na staklenu bočicu da bi se sprečilo dalje rastvaranje. J1 koncentracija je utvrđena sa HPLC. Eksperiment je urađen u duplikatu (a i b). Rezultati su prikazani u Tabeli 4.

Tabela 4. Rastvaranje J1 posle 15 sekundi u rastvoru vode.

[0122] Tabela 4 naspram Tabele 3 pokazuje da je količina rastvorenog J1 posle 15 sekundi više ili manje ista kada je voda korišćena umesto 5% rastvora glukoze. Najvažniji parametar se čini da je količina saharoze u bočicama osušenim zamrzavanjem. Rezultati sa odnosom J1:saharozi ≤1:50 se čine doslednijim od rezultata sa višim odnosima J1:saharozi.

Primer 6. Test stabilnosti rastvora J1:tert-butanola

[0123] Testirana je stabilnost rastvora koji obuhvata J1 i tert-butanol:voda, 1:1 (v/v). Rastvor koji obuhvata tert- butanol:vodu 1:1 (v/v) i J1 u koncentraciji od 1 mg/ml, je ostavljen na sobnoj temperaturi tokom 5 dana. Količina J1 je izmerena HPLC tehnikom i signal je smanjen tokom 97,2% do 85,5%, t.j. smanjenje od 11,7%. Sličan eksperiment, gde je J1 rastvoren u kiselinskom rastvoru etanol-voda je dao razgradnju koja se činila mnogo bržom.

Primer 7. Režimi doziranja preparata iz ovog pronalaska

[0124] Liofilisani farmaceutski preparati iz ovog pronalaska, koji obuhvataju melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) i saharozu su testirani klinički. Pacijenti sa uznapredovalim malignitetom u dobrom statusu učinka, sa očuvanim glavnim funkcijama organa i kod kojih nije bilo moguće izmeniti standardnu terapiju protiv kancera ali im je trebalo medicinsko lečenje, će se prijaviti u ovu studiju. Na početku je izabran plan ubrzane doze titracije da bi se sveo na minimum broj pacijenata ispod biološki aktivnog nivoa, što smanjuje verovatnoću za korisnost terapije. Jedan pacijent će biti lečen svakim nivoom doze sve dok se ne primeti ograničavajuća toksičnost doze. Studija se zatim prebacuje na konzervativni plan sa kohortama od 3 do 6 pacijenata po nivou doze sve dok nije dostignuta maksimalna doza koju je bilo moguće tolerisati.

[0125] Početna doza za ovu studiju će biti fiksna doza 25 mg J1 (približno 14 mg/m<2>) koja predstavlja podjednake uslove molarnosti melfalan doze od 14 mg ili 8 mg/m<2>. Te doze će biti povećane/smanjene u skladu sa primećenom toksičnošću, posle čega sledi unapred definisan plan doziranja. Režim eskalacije doze je zasnovan na želji i potrebi da se što je moguće brže obezbedi teraijska korisnost za pojedinačne pacijente a da se istovremeno uzme u obzir zaštita njega/nje od neželjene toksičnosti. J1 rasvor će biti isporučen kao iv infuzija svake 3. nedelje tokom 3 do 6 ciklusa terapije zavisno od tolerancije i odgovora koji da tumor.

[0126] Svi pacijenti će primiti J1 rastvor kao 30 minutnu iv infuziju 1. dana svakog ciklusa tretiranja, sa 21 danom između tretiranja i uz mogućnost da se odloži i do 3 nedelje čekanja za klinički relevantne neželjene događaje da bi se vratili na razred 1 ili niži. Planirano je da pacijenti prime barem 3 ciklusa terapije. Ti pacijenti će se vratiti na kliniku radi bezbednosnih provera 8, 10-12, 15. i 21. dana svakog ciklusa. Raspored događaja će biti ponovljen svakog ciklusa terapije sve do 6 ciklusa terapije, zavisno od primećene toksičnosti i odgovora tumora.

Isporuka terapije

[0127] Planirano je da svi pacijenti u ovoj studiji prime barem 3 ciklusa lečenja sa 21 danom između terapijskih isporuka pacijentu. Za pacijente sa stabilnim oboljenjem ili objektivnom remisijom tumora i prihvatljivijom toksičnošću na kraju ciklusa 3, terapiju je moguće proširiti na još 3 ciklusa unutar studije a prema diskrecionoj odluci rukovodioca ispitivanja. Posle toga pacijent izlazi iz studije. Terapija u okviru studije će biti isporučena kateterom u centralnu venu, koji će biti implantiran/umetnut u skladu sa standardnim klimičkim procedurama. J1 koncentrat će biti razblažen pomoću leka u 250 ml 5% glukoze. Komplet cevčica za infuziju treba da bude prethodno napunjuen sa 5% glukoze.

2

Vreme od početka do kraja infuzije ne treba da prekorači 60 minuta, t.j. infuziju treba početi što je moguće ranije, ali ne kasnije od 30 minuta od pripreme i treba da bude isporučena kao 30-minutna centralna iv infuzija. Profilaktička terapija sa antiemetičkim lekom (npr. Navoban; 5 mg iv i Betapred; 4 mg iv) pre isporuke J1 rastvora pacijentu. Naknadni emetici protiv odložene emeze će biti isporučeni po diskrecionoj odluci ovog istraživača. Pacijenti će ostati u kliničkom isptitivanju pre prekdia isporuke leka koji je predmet studijskog proučavanja. Obično, početna doza za fazu Ila će biti 50 mg.

Odgovor tumora

[0128] Odgovor tumoura će biti procenjen na početku i/ili svake 3 ili 9 nedelja /3. ciklusa lečenja.

[0129] Na početku, lezije tumora će biti kategorisane kao u nastavku:

Merljive lezije koje je moguće precizno izmeriti u barem jednoj dimenziji (treba registrovati najduži prečnik) kao ≥ 20 mm sa uobičajenim tehnikama ili kao ≥ 10 mm sa spiralnim CT snimkom ili MRI.

Nije merljivo Sve druge lezije, uključujući male lezije (najduži prečnik < 20 mm sa uobičajenim tehnikama ili < 10 mm sa spiralnim CT snimkom ili MRI) i istinski nemerljive lezije (t.j. koštane lezije, leptomeningealno oboljenje, ascite, pleuralna/perikardijalna efuzija, oboljenje dojke sa upalom, limfangitis kutis/pulmonis, abdominalne mase koje nisu potvrđene i prate se tehnikama snimanja, i cističnim lezijama).

[0130] Merljive lezije do maksimalno 5 lezija po organu i 10 lezija ukupno, predstavinici obuhvaćenih organa, treba da budu identifikovani kao ciljne lezije i biće zabeleženi i mereni na početku. Ciljne lezije treba izabrati na bazi njihove veličine (one sa najdužim prečnicima) i njihovom pogodnošću za precizna ponovljiva merenja. Zbir najdužeg prečnika za sve ciljne lezije će biti izračunat i prijavljen kao polazni zbir najdužeg prečnika. Polazni zbir najdužeg prečnika će biti korišćen kao referenca po kojoj se karakteriše objektivni odgovor tumora.

[0131] Sve druge lezije (ili mesta bolesti) treba identifikovati kao neciljne lezije i treba ih takođe registrovati kao lezije na početku. Merenja ovih lezija nisu neophodna, ali prisustvo ili odustvo svake treba da bude zabeleženo tokom praćenja.

Kriterijumi odgovora za procenu ciljnih lezija

[0132]

Potpun odgovor (CR) Nestanak ciljnih lezija.

Delimični odgovor (PR) Barem 30% smanjenja u zbiru najdužeg prečnika ciljnih lezija, uzima kao referencu zbir najdužeg prečnika lezije na početku, uzimajući kao referencu zbir najdužeg prečnika lezije na početku. Stabilno oboljenje (SD) Ni dovoljno skupljanje da bi se kvalifikovalo kao delimični odgovor, niti dovoljno povećanje da bi se kvalifikovalo kao progresivno oboljenje, uzimajući kao referencu najmanji zbir najdužeg prečnika od početka tretiranja.

Progresivno oboljenje (PD) Barem 20% povećanja u zbiru najdužeg prečnika ciljnih lezija, uzima kao referencu najniži zbir najdužeg prečnika zabeleženog od kada je započeto lečenje ili pojave jedne ili više novih lezija.

Kriterijumi odgovora za procenu neciljnih lezija

[0133]

Kompletan odgovor (CR) Nestajanje svih neciljnih lezija i normalizacija nivoa tumor markera.

Stabilno oboljenje (SD) Upornost jedne ili više neciljnih lezija i/ili održavanje nivoa tumor markera iznad normalnih granica.

Progresivno oboljenje (PD) Pojava jedne ili više novih lezija i/ili nedvosmislena progresija postojećih neciljnih lezija.

2

Claims

Patentni zahtevi

1. Liofilisani farmaceutski preparat koji obuhvata melfalan flufenamid hidrohlorid (J1), i saharozu pri čemu je odnos težine (w/w) između pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i saharoze od 1:25 do 1:75.

2. Liofilisan farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je težinski odnos (w/w) između pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i saharoze 1:50.

3. Liofilisani farmaceutiski preparat prema patentnom zahtevu 1 ili 2, obuhvata 50 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i 2,5 g saharoze.

4. Liofilisan farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3, koji je bez, ili pretežno bez organskih rastvarača.

5. Supstanca koja obuhvata liofilisan farmaceutski preparat melfalan flufenamid hidrohlorid (J1), prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4.

6. Supstanca prema patentnom zahtevu 5, obuhvata fiziološki prihvatljiv rastvor.

7. Komplet kombinacije delova obuhvata

(i) liofilisan farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4; i

(ii) fiziološki prihvatljiv rastvor.

8. Liofilisan farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, za upotrebu kao lek.

9. Liofilisani farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, za upotrebu u lečenju i/ili sprečavanju kancera.

10. Liofilisan farmaceutski preparat za upotrebu prema patentnom zahtevu 9, pri čemu je pomenuti kancer bilo koji od kancera jajnika, kancera pluća, kancera bešike, mezotelioma, multiplog mijeloma, kancera dojke ili hematološkog kancera.

2

11. Liofilisani farmaceutski preparat za upotrebu prema patentnom zahtevu 9 ili 10, pri čemu je pomenuti liofilisani farmaceutski preparat obezbeđen svake 3. nedelje.

12. Liofilisani farmaceutski preparat za upotrebu prema patentnom zahtevu 11, pri čemu je pomenuti liofilisani farmaceutski preparat dat svake 3. nedelje u 3 do 6 ciklusa lečenja.

13. Liofilisani farmaceutski preparat za upotrebu prema patentnom zahtevu 9, pre transplantacije.

14. Komplet kombinacije delova prema patentnom zahtevu 7, za upotrebu za lečenje kancera.

Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5