[go: up one dir, main page]

RS59906B1 - Pirimidindionska jedinjenja protiv srčanih stanja - Google Patents

Pirimidindionska jedinjenja protiv srčanih stanja

Info

Publication number
RS59906B1
RS59906B1 RS20200149A RSP20200149A RS59906B1 RS 59906 B1 RS59906 B1 RS 59906B1 RS 20200149 A RS20200149 A RS 20200149A RS P20200149 A RSP20200149 A RS P20200149A RS 59906 B1 RS59906 B1 RS 59906B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
pharmaceutically acceptable
mmol
dione
acceptable salt
Prior art date
Application number
RS20200149A
Other languages
English (en)
Inventor
Johan Oslob
Robert Anderson
Danielle Aubele
Marc Evanchik
Jonathan Charles Fox
Brian Kane
Puping Lu
Robert Mcdowell
Hector Rodriguez
Yonghong Song
Arvinder Sran
Original Assignee
Myokardia Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=51177189&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS59906(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Myokardia Inc filed Critical Myokardia Inc
Publication of RS59906B1 publication Critical patent/RS59906B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/52—Two oxygen atoms
    • C07D239/54—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/52—Two oxygen atoms
    • C07D239/54—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals
    • C07D239/545—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals with other hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/52—Two oxygen atoms
    • C07D239/54—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals
    • C07D239/545—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals with other hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/553—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals with other hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms with halogen atoms or nitro radicals directly attached to ring carbon atoms, e.g. fluorouracil
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Description

OSNOV PRONALASKA
[0001] Genetička (nasledna) hipertrofična kardiomiopatija (hypertrophic cardiomyopathy, HCM) obuhvata grupu visokoispoljavajućih, monogenskih, autozomno-dominantnih oboljenja miokarda. HCM je izazvana jednom ili većim brojem od preko 1000 poznatih tačkastih mutacija u nekom od gena za strukturne proteine koji doprinose funkcionalnoj jedinici miokarda, sarkomeri. Otkriveno je da u opštoj populaciji, oko 1 od 500 osoba ima hipertrofiju leve komore koja se ne može objasniti drugim poznatim uzrocima (npr., hipertenzijom ili oboljenjem zalistaka), a za mnoge od njih se posle isključivanja nekih drugih naslednih (npr., lizozomska bolest skladištenja), metaboličkih ili infiltrativnih uzročnika, može pokazati da imaju HCM.
[0002] Mutacije sarkomernih gena koje prouzrokuju HCM visoko su ispoljive, ali postoji velika varijabilnost u jačini kliničke slike i kliničkom toku. Neki genotipovi udruženi su sa zloćudnijim tokom, ali postoji prilična varijabilnost između, pa čak i unutar familija koje nose istu mutaciju. Zapažene su i polne razlike, pri čemu su muški pacijenti obično teže pogođeni od ženskih pacijenata. Iako mnogi pacijenti sa HCM saopštavaju minimalne simptome ili su bez simptoma tokom dugog vremenskog perioda, HCM je progresivna bolest sa značajnim kumulativnim morbiditetom. Preovlađujući su simptomi nemogućnosti tolerisanja napora, i oni se mogu pojačati vežbanjem i drugim postupcima koji povišavaju broj otkucaja srca i/ili snižavaju dijastolno opterećenje srca (preload). Kao i kod mnogih drugih poremećaja, postoji tendencija pogoršanja simptoma tokom godina. Daleko najčešća klinička smetnja za pacijente sa HCM je dispneja u toku napora, što ograničava njihove svakodnevne životne aktivnosti i može biti onesposobljavajuća.
[0003] Pacijenti sa HCM često su simptomatski u odsustvu dokumentovanih hemodinamičkih abnormalnosti kao što je opstrukcija levog ventrikularnog izlaznog trakta (sa ili bez mitralne regurgitacije). Pacijentovi simptomi dispneje u toku napora mogu se brzo pogoršavati, uz pojavu atrijalne fibrilacije, česte komplikacije HCM koja može dovesti do akutnog plućnog edema koji povećava rizik za sistemsku arterijsku tromboembolijsku bolest, uključujući moždani udar. Drugi neželjeni događaji udruženi sa HCM obuhvataju netoleranciju hipovolemije ili hipervolemije i sinkopu. Istovremeno oboljenje koronarnih arterija može povećati rizik za akutne koronarne sindrome, u poređenju sa pacijentima bez HCM. Iznenadna smrt usled otkazivanja rada srca (sudden cardiac death, SCD) kod pacijenata sa HCM je i neuobičajena i teško predvidljiva, ali je kod mladih odraslih osoba vodeći uzrok smrtnosti, kada se isključe traume. Za osobe koje su preživele SCD, postavljanje ICD predstavlja standardnu praksu, a kod drugih HCM pacijenata, profilisanje rizika, iako nedovoljno precizno, koristi se za identifikovanje onih za koje bi postavljanje ICD u cilju primarne prevencije, bilo smisleno.
[0004] Medicinska terapija za HCM ograničena je na lečenje simptoma i ne bavi se suštinskim, osnovnim uzrocima bolesti - poremećajem normalnog funkcionisanja sarkomere. Trenutno raspoloživi načini lečenja različito su efikasni u ublažavanju simptoma, ali tipično pokazuju smanjenje efikasnosti sa produženjem trajanja bolesti. Pacijenti se tako empirijski drže pod kontrolom pomoću beta-blokatora, nedihidropiridinskih blokatora kalcijumskih kanala, i/ili dizopiramida. Ni za jedno od ovih sredstava nije navedeno da je indikovano za lečenje HCM, i suštinski na raspolaganju nema dokaza dobijenih iz strogih kliničkih ispitivanja kojima bi se rukovodilo pri njihovom korišćenju. Ovu nepovoljnu situaciju još složenijom čini činjenica da već duži niz godina nema identifikovanih novih medicinskih terapija za HCM. Kod pacijenata sa hemodinamički značajnom opstrukcijom izlaznog trakta (gradijent mirovanja >30 mm Hg), koji su pravilno odabrani, hirurška mioektomija ili alkoholna septalna ablacija obično su potrebne za ublažavanje hemodinamičke opstrukcije. Obezbeđena su nova terapijska sredstva i metodi koji ublažavaju dugotrajnu potrebu za poboljšanjem lečenja HCM i srodnih srčanih poremećaja. WO 2004/014868 objavljuje pirimidin-2-dionske derivate sa MMP-13 aktivnošću. WO2004014868 odnosi se na jedinjenja za inhibiranje MMP-13 enzima. US5008267 odnosi se na jedinjenja izvedena iz pirimidindiona korisna za medicinski tretman srčanih aritmija. SAEKI T ET AL, "SELECTIVE BLOCK OF DELAYED RECTIFYING POTASSIUM CURRENT IN THE RABBIT SINOATRIAL NODE BY A NOVEL CLASS III ANTIARRHYTHMIC AGENT MS-551”, HEART AND VESSELS, SPRINGER, BERLIN, DE, (19940101), vol. 9, br. 2, ISSN 0910-8327, strane 87-95 odnosi se na antiaritmijska sredstva klase III. JPH06128238 odnosi se na pirimidindionske derivate koji se mogu primenjivati za lečenje i prevenciju poremećaja.
KRATAK OPIS PRONALASKA
[0005] U jednom aspektu, obezbeđeno je jedinjenje koje ima formulu:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. R1 se bira iz grupe koju čine:
(a) C3-C4alkil, C3-C5cikloalkil, i 4- do 6-člani heterocikloalkil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1-2 Ra; ili
(b) fenil i 5- do 6-člani heteroaril, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1-3 R<a>; R<2>je fenil koji je opciono supstituisan sa 1-5 Rb; R3 je član koji se bira iz grupe koju čine C1-C4alkil, C3-C4cikloalkil, i 4- do 7-člani heterocikloalkil gde je svaki R3 opciono supstituisan sa 1-2 Rc; R4 je H; X je član koji se bira između H i F. Svaki R<a>, kada je prisutan, nezavisno se bira iz grupe koju čine halo, CN, C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, -CORal , -CO2Ral , -SO2Ral , -SO2NRalRa2 , i -CONRa1Ra2 , gde se svaki Ra1 i Ra2 nezavisno bira iz grupe koju čine H i C1-C4alkil ili opcionoRa1 i Ra2 kada su vezani za atom azota kombinuju se da formiraju 4- do 6-člani prsten. Slično tome, svaki R<b>, kada je prisutan, bira se nezavisno iz grupe koju čine halo, CN, C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, -CORb1 , -CO2Rb1 , -SO 1
2Rb , -SO2NRb1Rb2 , CONRb1Rb2 , NRb1Rb2 , 5- do 6-člani heteroaril i 5- do 6-člani heterociklil opciono supstituisan sa okso, pri čemu se svaki R<b1>i R<b2>nezavisno bira iz grupe koja se sastoji od H i C1-C4alkil ili opciono Rb1 i Rb2 kada su vezani za atom azota kombinuju se da formiraju 4- do 6-člani prsten; i svaki Rc, kada je prisutan, nezavisno se bira iz grupe koju čine halo i C1-C2alkoksi. Svaki cikloalkil je zasićen ili delimično nezasićen prstenasti sistem. Svaki heterocikloalkil je zasićen prstenasti sistem koji uključuje od 1 do 4 heteroatoma odabrana između N, O, i S. Svaki heteroaril je aromatični prstenasti sistem koji uključuje od 1 do 5 heteroatoma odabranih između N, O, i S. Svaka alkoksi grupa je opciono supstituisana jednim ili većim brojem komponenti odabranih između halo, hidroksil, amino, alkilamino, nitro, cijano, i alkoksi.
[0006] U sledećem aspektu, obezbeđena je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje ili farmaceutski prihvatljivu so, opisane u ovom tekstu, i farmaceutski prihvatljivi ekscipijent.
[0007] U sledećem aspektu, obezbeđeno je jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so, opisani u ovom tekstu, za upotrebu u metodu lečenja hipertrofične kardiomiopatije (HCM), dijastolne srčane insuficijencije uz očuvanje ejekcione frakcije, ishemijske bolesti srca, angine pektoris, restriktivne kardiomiopatije, hronične mitralne regurgitacije, hronične aortne stenoze i hronične sistemske hipertenzije.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0008] Slika 1 prikazuje šemu puta sinteze jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivih soli opisanih u ovom tekstu (Slika 1A) i put pripremanja hiralnih amina (Slika 1B).
DETALJAN OPIS PRONALASKA
I. Opšte
[0009] Za niz pirimidindionskih jedinjenja i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli nađeno je da smanjuju preveliku kontraktilnost u hiperkontraktilnim stanjima i/ili pokreću srčanu relaksaciju u srcima sa dijastolnom disfunkcijom, stabilisanjem konformacije srčanog beta miozina posle hidrolize ATP, ali pre čvrstog vezivanja aktinskog filamenta i oslobađanja fosfata, na taj način smanjujući udeo miozinskih molekula raspoloživih za učestvovanje u delu ciklusa kontrakcije mišića nazvanom “powerstroke” ("snažni zamah"). Kao takva, jedinjenja mogu poboljšati srčanu elastičnost, smanjiti dinamičku ili statičku opstrukciju izlaznog toka leve komore, poboljšati dijastolnu relaksaciju leve komore, sniziti dijastolni (puneći) pritisak leve komore, smanjiti funkcionalnu mitralnu regurgitaciju, i/ili sniziti pritisak u levoj pretkomori i plućnoj kapilarnoj mreži, kod pacijenata sa HCM, pomažući u prevazilaženju onesposobljavajuće dispneje pri naporu i/ili simptoma u vezi sa opstrukcijom izlaznog toka leve komore (presinkopa ili sinkopa), često udruženih sa bolešću. Jedinjenja se mogu koristiti i za lečenje drugih srčanih poremećaja.
II. Definicije
[0010] Kako se koristi u ovom tekstu, izraz “alkil” odnosi se na linearni ili granati, zasićeni, alifatični radikal sa navedenim brojem ugljenikovih atoma. Alkil može uključivati bilo koji broj ugljenika, kao što je C1-2, C1-3, C1-4, C1-5, C1-6, C1-7, C1-8, C2-3, C2-4, C2-5, C2-6, C3-4, C3-5, C3-6, C4-5, C4-6i C5-6. Na primer, C1-6alkil uključuje, ali se ne ograničava na, metil, etil, propil, izopropil, butil, izobutil, sec-butil, terc-butil, pentil, izopentil, heksil, itd. Alkil može da se odnosi na alkil grupe sa do 20 ugljenikovih atoma, kao što su, ali bez ograničavanja, heptil, oktil, nonil, decil, itd. Ukoliko nije drugačije naznačeno, alkil grupe su nesupstituisane. “Supstituisana alkil” grupa može biti supstituisana jednom ili većim brojem komponenti odabranih između halo, hidroksi, amino, alkilamino, nitro, cijano, i alkoksi.
[0011] Kako se koristi u ovom tekstu, izraz “cikloalkil” odnosi se na zasićeni ili delimično nezasićeni, monociklični, fuzionisani biciklični ili premošćeni policiklični prstenasti sastav koji sadrži od 3 do 12 atoma u prstenu, ili naznačeni broj atoma. Cikloalkil može uključivati bilo koji broj ugljenika, kao što je C3-6, C4-6, C5-6, C3-8, C4-8, C5-8, i C6-8. Zasićeni monociklični cikloalkil prstenovi uključuju, na primer, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, i ciklooktil. Zasićeni biciklični i policiklični cikloalkil prstenovi uključuju, na primer, norboman, [2.2.2] biciklooktan, dekahidronaftalen i adamantan. Cikloalkil grupe mogu biti i delimično nezasićene, sa jednom ili više dvostrukih veza u prstenu. Reprezentativne cikloalkil grupe koje su delimično nezasićene uključuju, ali se ne ograničavaju na ciklobuten, ciklopenten, cikloheksen, cikloheksadien (1,3- i 1,4-izomeri), ciklohepten, cikloheptadien, ciklookten, ciklooktadien (1,3-, 1,4- i 1,5-izomeri), norbomen, i norbomadien. Ukoliko nije drugačije rečeno, cikloalkil grupe su nesupstituisane. “Supstituisana cikloalkil” grupa može biti supstituisana jednom ili većim brojem komponenti odabranih između halo, hidroksi, amino, alkilamino, nitro, cijano, i alkoksi.
[0012] Kako se koristi u ovom tekstu, izraz “heterocikloalkil” odnosi se na zasićeni prstenasti sistem sa 3 do 12 članova u prstenu i 1 do 4 heteroatoma odabrana između N, O i S. Dodatni heteroatomi koji uključuju, ali se ne ograničavaju na B, Al, Si i P takođe mogu biti prisutni u heterocikloalkil grupi. Heteroatomi mogu da se oksidišu da formiraju komponente kao što su, bez ograničavanja, -S(O)- i -S(O)2-. Heterocikloalkil grupe mogu uključivati bilo koji broj atoma u prstenu, na primer, 3 do 6, 4 do 6, 5 do 6, ili 4 do 7 članova prstena. Svaki pogodan broj heteroatoma može biti uključen u heterocikloalkil grupe, na primer, 1, 2, 3, ili 4, ili 1 do 2, 1 do 3, 1 do 4, 2 do 3, 2 do 4, ili 3 do 4. Primeri heterocikloalkil grupa uključuju, ali se ne ograničavaju na aziridin, azetidin, pirolidin, piperidin, azepan, azokan, hinuklidin, pirazolidin, imidazolidin, piperazin (1,2-, 1,3- i 1,4-izomeri), oksiran, oksetan, tetrahidrofuran, oksan (tetrahidropiran), oksepan, tiiran, tietan, tiolan (tetrahidrotiofen), tian (tetrahidrotiopiran), oksazolidin, izoksazolidin, tiazolidin, izotiazolidin, dioksolan, ditiolan, morfolin, tiomorfolin, dioksan, ili ditian. Heterocikloalkil grupe su nesupstituisane, ali mogu biti opisane, u nekim primerima izvođenja, kao supstituisane. “Supstituisane heterocikloalkil” grupe mogu biti supstituisane jednom ili većim brojem komponenti odabranih između halo, hidroksi, amino, alkilamino, nitro, cijano, i alkoksi.
[0013] Kako se koristi u ovom tekstu, izraz “heteroaril” odnosi se na monociklični ili fuzionisani biciklični ili triciklični aromatični prstenasti sastav koji sadrži 5 do 16 atoma u prstenu, gde su od 1 do 5 atoma u prstenu heteroatomi kao N, O ili S. Dodatni heteroatomi koji uključuju, ali se ne ograničavaju na B, Al, Si i P takođe mogu biti prisutni u heteroaril grupi. Heteroatomi mogu da se oksidišu da formiraju komponente kao što su, bez ograničavanja, -S(O)- i -S(O)2-. Heteroaril grupe mogu uključivati bilo koji broj atoma u prstenu, na primer, 5 do 6, 5 do 8, 6 do 8, 5 do 9, 5 do 10, 5 do 11, ili 5 do 12 članova u prstenu. Svaki pogodan broj heteroatoma može biti uključen u heteroaril grupe, na primer 1,2, 3, 4, ili 5, ili 1 do 2, 1 do 3, 1 do 4, 1 do 5, 2 do 3, 2 do 4, 2 do 5, 3 do 4, ili 3 do 5. Heteroaril grupe mogu imati od 5 do 8 članova u prstenu i od 1 do 4 heteroatoma, ili od 5 do 8 članova u prstenu i od 1 do 3 heteroatoma, ili od 5 do 6 članova u prstenu i od 1 do 4 heteroatoma, ili od 5 do 6 članova u prstenu i od 1 do 3 heteroatoma. Primeri heteroaril grupa uključuju, ali se ne ograničavaju na pirol, piridin, imidazol, pirazol, triazol, tetrazol, pirazin, pirimidin, piridazin, triazin (1,2,3-, 1,2,4- i 1,3,5-izomeri), tiofen, furan, tiazol, izotiazol, oksazol, i izoksazol. Heteroaril grupe su nesupstituisane, ali mogu biti opisane, u nekim primerima izvođenja, kao supstituisane. “Supstituisane heteroaril” grupe mogu biti supstituisane jednom ili većim brojem komponenti odabranih između halo, hidroksi, amino, alkilamino, nitro, cijano, i alkoksi.
[0014] Kako se koristi u ovom tekstu, izraz “alkoksi” odnosi se na alkil grupu sa atomom kiseonika koji povezuje alkil grupu za tačku spoja: tj., alkil-O-. Kao i alkil deo, alkoksi grupe mogu imati bilo koji pogodan broj ugljenikovih atoma, kao što je C1-6ili C1-4. Alkoksi grupe uključuju, na primer, metoksi, etoksi, propoksi, izopropoksi, butoksi, 2-butoksi, izobutoksi, sec-butoksi, tert-butoksi, pentoksi, heksoksi, itd. Alkoksi grupe su nesupstituisane, ali mogu biti opisane, u nekim primerima izvođenja, kao supstituisane. “Supstituisane alkoksi” grupe mogu biti supstituisane jednom ili većim brojem komponenti odabranih između halo, hidroksi, amino, alkilamino, nitro, cijano, i alkoksi.
[0015] Kako se koriste u ovom tekstu, izrazi “halo” i “halogen” odnose se na fluor, hlor, brom i jod.
[0016] Kako se koristi u ovom tekstu, izraz “farmaceutski prihvatljivo” odnosi se na supstancu koja je kompatibilna sa jedinjenjem ili solju, kako je opisano u ovom tekstu, kao i sa svim drugim sastojcima sa kojima se jedinjenje formuliše. Pored toga, farmaceutski prihvatljiva supstanca nije štetna za primaoca te supstance.
[0017] Kako se koristi u ovom tekstu, izraz “so” odnosi se na kiselu ili baznu so jedinjenja opisanog u ovom tekstu. Farmaceutski prihvatljive soli mogu biti izvedene, na primer, iz mineralnih kiselina (hlorovodonične kiseline, bromovodonične kiseline, fosforne kiseline i slično), organskih kiselina (sirćetne kiseline, propionske kiseline, glutaminske kiseline, limunske kiseline i slično), i kvaternarnih amonijum jona. Podrazumeva se da farmaceutski prihvatljive soli nisu toksične. Dodatne informacije o pogodnim farmaceutski prihvatljivim solima mogu se naći u Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985. Neutralna forma jedinjenja može se regenerisati dovođenjem u kontakt soli sa bazom ili kiselinom i izolovanjem matičnog jedinjenja na uobičajen način.
[0018] Kako se koristi u ovom tekstu, izraz “farmaceutska kompozicija” odnosi se na proizvod koji uključuje jedinjenje ili farmaceutski prihvatljivu so, opisane u ovom tekstu, ekscipijent kao što je definisano u ovom tekstu, i druge opcione sastojke u navedenim količinama, kao i svaki drugi proizvod koji je rezultat, direktni ili indirektni, kombinacije navedenih sastojaka u navedenim količinama.
[0019] Kako se koristi u ovom tekstu, izraz “ekscipijent” odnosi se na supstancu koja pomaže prilikom primene aktivnog sredstva kod subjekta. Farmaceutski ekscipijenti uključuju, ali se ne ograničavaju na povezivače, potporna sredstva, dezintegrišuća sredstva, lubrikanse, sredstva za oblaganje, zaslađivače, sredstva za poboljšanje ukusa i sredstva za davanje boje. Stručnjak u oblasti prepoznaće da i drugi ekscipijenti mogu biti od koristi.
[0020] Kako se koriste u ovom tekstu, izrazi “lečiti/tretirati”, “leči/tretira” i “lečenje/tretiranje” označavaju svaki pokazatelj uspeha u lečenju ili ublažavanju patologije, povrede, stanja ili simptoma u vezi sa hipertrofičnom kardiomiopatijom, uključujući svaki objektivni ili subjektivni parametar kao što su sniženje; remisija; smanjenje simptoma; činjenje da patologija, povreda, stanje ili simptom budu tolerabilniji za pacijenta; smanjenje učestalosti ili trajanja patologije, povrede, stanja ili simptoma; ili, u nekim slučajevima, preveniranje pojave patologije, povrede, stanja ili simptoma. Lečenje ili ublažavanje mogu se zasnivati na objektivnom ili subjektivnom parametru; uključujući, npr., rezultat fizičkog pregleda.
III. Jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli
[0021] U jednom aspektu, obezbeđeno je jedinjenje koje ima formulu:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0022] U gornjoj formuli, R1 se bira iz grupe koju čine:
(a) C3-C4alkil, C3-C5cikloalkil, i 4- do 6-člani heterocikloalkil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1-2 Ra; ili (b) fenil i 5- do 6-člani heteroaril, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1-3 Ra; R2 je fenil, koji je opciono supstituisan sa 1-5 Rb; R3 je član koji se bira iz grupe koju čine C1-C4alkil, C3-C4cikloalkil, i 4- do 7-člani heterocikloalkil gde je svaki R3 opciono supstituisan sa 1-2 Rc; R4 je H; X je član odabran iz grupe koju čine H i F. Svaki R<a>, kada je prisutan, nezavisno se bira iz grupe koju čine halo, CN, C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, -CORa1 , -CO a1
2Ra1 , -SO2Ra1 , -SO2NRa1Ra2 , i -CONR Ra2 , gde se svaki Ra1 i Ra2 nezavisno bira iz grupe koju čine H i C1-C4alkil ili opciono Ra1 i Ra2 kada su vezani za atom azota, kombinuju se da formiraju 4- do 6-člani prsten. Slično tome, svaki R<b>, kada je prisutan, bira se nezavisno iz grupe koju čine halo, CN, C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, -CORb1 , -CO2Rb1 , -SO2Rb1 , -SO2NRb1Rb2 , CONRb1Rb2 , NRb1Rb2 , 5- do 6-člani heteroaril, i 5- do 6-člani heterociklil opciono supstituisan sa okso, gde se svaki Rb1 i Rb2 nezavisno bira iz grupe koju čine H i C1-C4alkil ili opciono Rb1 i Rb2 kada su vezani za atom azota kombinuju se da formiraju 4- do 6-člani prsten; i svaki R<c>, kada je prisutan, bira se nezavisno iz grupe koja se sastoji od halo i C1-C2alkoksi. Svaki cikloalkil je zasićen ili delimično nezasićen prstenasti sistem. Svaki heterocikloalkil je zasićeni prstenasti sistem koji uključuje od 1 do 4 heteroatoma odabrana između N, O, i S. Svaki heteroaril je aromatični prstenasti sistem koji uključuje od 1 do 5 heteroatoma odabrana između N, O, i S. Svaka alkoksi grupa je opciono supstituisana jednom ili većim brojem komponenti odabranih između halo, hidroksil, amino, alkilamino, nitro, cijano, i alkoksi.
[0023] U nekim primerima izvođenja, X je H.
[0024] U nekim primerima izvođenja, R<1>je C3-C4alkil, C3-C5cikloalkil, ili 4- do 6-člani heterocikloalkil.
[0025] U nekim primerima izvođenja, R<1>je 4- do 6-člani heterocikloalkil, opciono supstituisan sa 1-2 Ra odabrana između C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, CORa1 , CO2Ral , -SO2Ra1 , -SO2NRa1Ra2 , i -CONRa1Ra2 , gde je svaki Ra1 i Ra2 nezavisno H ili C1-C4alkil.
[0026] U nekim primerima izvođenja, R<1>je ciklobutil, izopropil, izobutil, 1-metoksipropan-2-il, ciklopentil, 4-tetrahidropiranil, 1-(metilsulfonil)piperidin-4-il, 1-(metoksikarbonil)piperidin-4-il, fenil, 2-piridil, 3-piridil, 3-izoksazolil, 5-izoksazolil, ili 1-metil-3-pirazolil.
[0027] U nekim primerima izvođenja, R<2>je opciono supstituisan sa 1-2 R<b>.
[0028] U nekim primerima izvođenja, R<2>je fenil, 3-metilfenil, 2-fluorofenil, 3- fluorofenil, 4-fluorofenil, 2,5-difluorofenil, 3,5-difluorofenil, 3-hlorofenil, 3-metoksifenil, 3-(3-oksazolidin-2-onil)fenil, 3-(2-metil-1-imidazil)fenil, 3-(1-pirazolil)fenil, ili 3-(l,2,4-triazol-1-il)fenil.
[0029] U nekim primerima izvođenja, R<3>je C1-C4alkil, C1-C4alkoksialkil, ili C3-C4cikloalkil.
[0030] U nekim primerima izvođenja, R<3>je metil, etil, propil, ciklopropil, ciklobutil ili 2-metoksimetil.
[0031] U nekim primerima izvođenja, R<3>je metil.
[0032] Jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli, opisani u ovom tekstu, mogu imati bilo koju kombinaciju R1 , R2 , R3, R4 , Ra, Ra1 , Ra2 , Rb, Rb1 , Rb2 , Rc, i X grupa navedenih gore. Određeni primeri izvođenja navedeni za R<2>, na primer, mogu se kombinovati sa bilo kojim od odabranih primera izvođenja navedenih za R<1>koji se, dalje, mogu kombinovati sa bilo kojim od odabranih primera izvođenja navedenih za R<3>.
[0033] U nekim primerima izvođenja, na primer, R<1>je izopropil; R<2>je opciono supstituisan sa 1-2 Rb; i R3 je metil.
[0034] U nekim primerima izvođenja, R<1>je 4- do 6-člani heterocikloalkil, opciono supstituisan sa 1-2 Ra odabrana između C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, CORa1 , CO2Ra1 , SO2Ra1 , SO2NRa1Ra2 , i CONRa1Ra2 , gde svaki Ra1 i Ra2 mogu nezavisno biti H ili C1-C4alkil; R2 je opciono supstituisan sa 1-2 Rb; i R3 je metil.
[0035] U nekim primerima izvođenja, R<1>je fenil ili 5- do 6-člani heteroaril, gde je svaki R<1>opciono supstituisan sa 1-3 Ra; R2 je opciono supstituisan sa 1-2 Rb; i R3 je metil.
[0036] X može biti H u bilo kojem od gore navedenih primera izvođenja. U drugim primerima izvođenja, X može biti F u bilo kojem od gore navedenih primera izvođenja. Pored toga, jedinjenja obezbeđena u ovom tekstu sa identifikovanom stereohemijom (označena kao R ili S, ili sa vezom označenom isprekidanom linijom ili u vidu klina), kako će razumeti stručnjak u oblasti, suštinski neće sadržati drugi izomer (npr., najmanje 80%, 90%, 95% do 100% bez drugog izomera).
[0037] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje se bira između sledećih:
(S)-3-izopropil-6-((1-fenil etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-5-fluoro-3-izopropil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-hlorofenil)etil)amino)-5-fluoro-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3,5-difluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((ciklopropil(fenil)metil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((ciklobutil(fenil)metil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-fluorofenil)etil)amino)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirimidin-2,4(1H,3H)- dion; (S)-6-((1-(3-metoksifenil)etil)amino)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion; 6-(((S)-1-feniletil)amino)-3-(tetrahidrofuran-3-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)- dion; metil (S)-4-(2,6-diokso-4-((1-feniletil)amino)-3,6-dihidropirimidin-1(2H)-il)piperidin-1-
1
karboksilat;
3-((R)-sec-butil)-6-(((S)-1-(3-metoksifenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion
(S)-6-((1-feniletil)amino)-3-(piridin-3-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-(izoksazol-3-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-(1H-pirazol-1-il)fenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-6-((1-(3-metoksifenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-6-((1-(2-metoksifenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-6-((1-fenilpropil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-5-metil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(2-fluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-fluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-hlorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(4-fluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-5-fluoro-3-izopropil-6-((1-fenilpropil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-5-fluoro-6-((1-(3-fluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-5-fluoro-3-izopropil-6-((1-(3-metoksifenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(2,5-difluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-bromofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-ciklopropil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-feniletil)amino)-3-(piridin-2-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-(izoksazol-5-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-(1H-1,2,4-triazol-1-il)fenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion; (S)-3-izopropil-6-((1-(3-(2-metil-1H-imidazol-1-il)fenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-6-((1-(3-(2-oksooksazolidin-3-il)fenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)- dion; (S)-3-fenil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-feniletil)amino)-3-propilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-(3,5-difluorofenil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-6-((1-(m-tolil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(4-fluorofenil)propan-2-il)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-2-(1-((1-izopropil-2,6-diokso-1,2,3,6-tetrahidropirimidin-4-il)amino)etil)benzonitril (S)-3-(2,6-difluorofenil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(2,6-difluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion; (S)-3-(6-metilpiridin-2-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-6-((1-(o-tolil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-ciklobutil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-(1-metilciklopropil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-(1H-imidazol-1-il)fenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1 H,3H)-dion; (S)-6-((1-feniletil)amino)-3-(piridazin-4-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-4-((1-feniletil)amino)-2H-[1,5'-bipirimidin]-2,6(3H)-dion;
(S)-6-((1-feniletil)amino)-3-(pirazin-2-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-6-((1-(piridin-3-il)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-(1-metil-1 H-pirazol-4-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1 H,3H)-dion; (S)-3-izopropil-6-((1-fenilbutil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
6-(((S)-1 -feniletil)amino)-3-((R)-tetrahidro-2H-piran-3-il)pirimidin-2,4(1H,3H)- dion; (S)-3-ciklopentil-6-((1-fenil etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-6-((2-metil-1-fenilpropil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-(pentan-3-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
metil (S)-2-(2,6-diokso-4-((1-feniletil)amino)-3,6-dihidropirimidin-1(2H)-il)acetat; (S)-3-(tert-butil)-6-((1-fenil etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(2-hlorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-izopropil-6-((1-(4-metoksifenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-fluorofenil)etil)amino)-3-propilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(3-hlorofenil)etil)amino)-3-propilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-3-ciklobutil-6-((1-(4-fluorofenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
3-((S)-sec-butil)-6-(((S)-1-(4-fluorofenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion;
(S)-6-((1-(4-fluorofenil)etil)amino)-3-propilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion; i
(S)-3-(6-fluoropiridin-2-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion, ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kojeg od gore navedenih.
[0038] U nekim primerima izvođenja, jedinjenje se bira između
ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli.
[0039] Jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli, opisani u ovom tekstu, (I) mogu se pripremiti bilo kojim pogodnim metodom. Jedinjenja se mogu pripremiti, na primer, putem naznačenim na Slici 1. Kako je prikazano na Slici 1A, pirimidin trion v može da se sintetiše kondenzacijom uree iii sa malonatom iv. Urea iii može da se pripremi reakcijom amina i sa odgovarajućim cijanatom ii. Pirimidin trion v se derivatizuje pogodnom odlazećom grupom (leaving group, Lg) obezbeđujući intermedijarni vi. Odlazeća grupa može biti, bez ograničavanja, halogen kao hlorid ili jodid. Halogenisani intermedijar vi može da se pripremi od pirimidin triona metodima kao što su oni koje je opisao Brown (The Chemistry of Heterocyclic Compounds, The Pyrimidines, John Wiley & Sons, 2009). Intermedijar vi može da se konvertuje u jedinjenja formule I reakcijom sa aminima vii. Određeni hiralni amini mogu da se pripreme od ketona ili aldehida ix kako je pokazano na Slici 1B; sulfinil imin xii izveden iz ketona ili aldehida može da reaguje sa Gringard reagensom xiii da se dobije hiralni amin vii. Stručnjak u oblasti razumeće da jedinjenja opisana u ovom tekstu mogu da se pripreme drugim metodima, kao što su oni koje je opisao LaRock (Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, Wiley, 1999).
IV. Kompozicije
1
[0040] Obezbeđene su i farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje ili farmaceutski prihvatljivu so, opisane u ovom tekstu, i farmaceutski prihvatljivi ekscipijent. Kompozicije mogu biti korisne za lečenje hipertrofične kardiomiopatije kod ljudi i drugih subjekata.
[0041] Farmaceutske kompozicije za primenu jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivih soli, opisane u ovom tekstu, mogu pogodno biti predstavljene jediničnom doznom formom i mogu se pripremiti bilo kojim od metoda poznatih u oblasti farmacije i dostave lekova. Svi metodi uključuju korak dovođenja aktivnog sastojka u vezu sa nosačem koji sadrži jedan ili više dodatnih sastojaka. Uopšteno, farmaceutske kompozicije se pripremaju ujednačenim i bliskim udruživanjem aktivnog sastojka sa tečnim nosačem ili fino usitnjenim čvrstim nosačem ili oba, i zatim, po potrebi, uobličavanjem proizvoda u željenu formulaciju. U farmaceutskoj kompoziciji, aktivno sredstvo je obično prisutno u količini dovoljnoj da se proizvede željeni efekat na kontraktilnost miokarda (tj. da se smanji često supranormalna sistolna kontraktilnost u HCM) i da se poboljša relaksacija leve komore u dijastoli. Tako poboljšana relaksacija može olakšati simptome u hipertrofičnoj kardiomiopatiji i drugim etiologijama dijastolne disfunkcije. Isto tako, može ublažiti efekte dijastolne disfunkcije koji prouzrokuju ometenost koronarnog protoka krvi, poboljšavajući ovo drugo, kao dodatno sredstvo u angini pektoris i ishemičnoj boelsti srca. Isto tako, može korisno delovati na obnavljajuće remodeliranje leve komore u HCM, kao i kod drugih uzroka hipertrofije leve komore usled hroničnog volumenskog preopterećenja ili preopterećenja usled pritiska zbog, npr., bolesti srčanih zalistaka ili sistemske hipertenzije.
[0042] Farmaceutske kompozicije koje sadrže aktivni sastojak mogu biti u obliku pogodnom za oralnu upotrebu, na primer u obliku tableta, troheja, lozengi, vodenih ili uljanih suspenzija, disperzibilnih praškova ili granula, emulzija, tvrdih ili mekih kapsula, sirupa, eliksira, rastvora, bukalnih flastera, oralnog gela, žvakaće gume, tableta za žvakanje, efervescentnog praška i efervescentnih tableta. Kompozicije namenjene za oralnu upotrebu mogu se pripremiti u skladu sa bilo kojim metodom poznatim u struci za izradu farmaceutskih kompozicija i takve kompozicije mogu sadržati jedno ili više sredstava odabranih iz grupe koju čine sredstva za zaslađivanje, sredstva za poboljšanje ukusa, sredstva za bojenje, antioksidanti i prezervansi, sa ciljem obezbeđivanja farmaceutski elegantnih i ukusnih preparata. Tablete sadrže aktivni sastojak pomešan sa netoksičnim farmaceutski prihvatljivim ekscipijentima koji su pogodni za izradu tableta. Ovi ekscipijenti mogu na primer biti inertni razblaživači, kao što su celuloza, silicijum dioksid, aluminijum oksid, kalcijum karbonat, natrijum karbonat, glukoza, manitol, sorbitol, laktoza, kalcijum fosfat ili natrijum fosfat; granulišuća i dezintegrišuća sredstva, na primer, kukuruzni skrob ili alginska kiselina; povezujuća sredstva, na primer PVP, celuloza, PEG, skrob, želatin ili akacija, i lubrikansi kao, na primer, magnezijum stearat, stearinska kiselina ili talk. Tablete mogu biti neobložene ili se mogu obložiti, enterično ili na drugi način, poznatim tehnikama, da bi se odložila dezintegracija i apsorpcija u gastrointestinalnom traktu i tako obezbedilo produženo dejstvo tokom dužeg perioda. Na primer, može se koristiti materijal koji doprinosi vremenskom odlaganju, na primer gliceril monostearat ili gliceril distearat. Isto tako, mogu biti obložene kako bi se formirale osmotske terapijske tablete sa kontrolisanim oslobađanjem.
[0043] Formulacije za oralnu upotrebu mogu biti predstavljene i tvrdim želatinskim kapsulama gde je aktivni sastojak pomešan sa inertnim čvrstim razblaživačem, na primer, kalcijum karbonatom, kalcijum fosfatom ili kaolinom, ili mekim želatinskim kapsulama gde je aktivni sastojak pomešan sa vodom ili uljanim medijumom, uljem kikirikija, tečnim parafinom ili maslinovim uljem. Dodatno, emulzije se mogu pripremiti sa sastojcima koji nisu rastvorljivi u vodi kao što su ulja, i stabilisati pomoću surfaktanata kao što su monodigliceridi, PEG estri i slično.
[0044] Vodene suspenzije sadrže aktivne materijale u mešavini sa ekscipijentima pogodnim za izradu vodenih suspenzija. Takvi ekscipijenti su suspendujuća sredstva, na primer, natrijum karboksimetilceluloza, metilceluloza, hidroksi-propilmetilceluloza, natrijum alginat, polivinilpirolidon, tragantova guma i akacijina guma; dispergujuća ili vlažeća sredstva mogu biti prirodni fosfatid, na primer lecitin, ili kondenzacioni proizvodi alkilen oksida sa masnim kiselinama, na primer polioksietilen stearat, ili kondenzacioni proizvodi etilen oksida sa dugolančanim alifatičnim alkoholima, na primer heptadekaetilenoksicetanol, ili kondenzacioni proizvodi etilen oksida sa parcijalnim estrima izvedenim iz masnih kiselina i heksitola kao što su polioksietilen sorbitol monooleat, ili kondenzacioni proizvodi etilen oksida sa parcijalnim estrima izvedenim iz masnih kiselina i heksitol anhidrida, na primer polietilen sorbitan monooleat. Vodene suspenzije mogu sadržati i jedan ili više prezervanasa, na primer etil, ili n- propil, p-hidroksibenzoat, jedno ili više sredstava za bojenje, jedno ili više sredstava za poboljšanje ukusa, i jedno ili više sredstava za zaslađivanje, kao što su saharoza ili saharin.
[0045] Uljane suspenzije mogu se formulisati suspendovanjem aktivnog sastojka u biljnom ulju, na primer ulju kikirikija, maslinovom ulju, susamovom ulju ili kokosovom ulju ili u mineralnom ulju kao što je tečni parafin. Uljane suspenzije mogu sadržati sredstvo za zgušnjavanje, na primer pčelinji vosak, čvrsti parafin ili cetil alkohol. Sredstva za zaslađivanje kao što su ona navedena gore, i sredstva za poboljšanje ukusa mogu se dodati da
1
bi se obezbedio ukusan oralni preparat. Ove kompozicije mogu se prezervirati dodavanjem antioksidanta kao što je askorbinska kiselina.
[0046] Disperzibilni praškovi i granule pogodni za pripremanje vodene suspenzije dodavanjem vode obezbeđuju aktivni sastojak u mešavini sa dispergujućim ili vlažećim sredstvom, suspendujućim sredstvom i jednim ili više prezervanasa. Primeri pogodnih dispergujućih ili vlažećih sredstava i suspendujućih sredstava već su pomenuti gore. Mogu biti prisutni i dodatni ekscipijenti, na primer sredstva za zaslađivanje, poboljšanje ukusa ili davanje boje.
[0047] Farmaceutske kompozicije opisane u ovom tekstu mogu biti i u obliku emulizija ulja u vodi. Uljana faza može biti biljno ulje, na primer maslinovo ulje ili ulje kikirikija, ili mineralno ulje, na primer tečni parafini, ili njihove mešavine. Pogodna emulgujuća sredstva mogu biti prirodne gume, na primer guma akacije ili traganova guma, prirodni fosfatidi na primer seme soje, lecitin, i estri ili parcijalni estri izvedeni iz masnih kiselina i anhidrida heksitola, na primer sorbitan monooleat, i kondenzacioni proizvodi pomenutih parcijalnih estara sa etilen oksidom, na primer polioksietilen sorbitan monooleat. Emulzije mogu sadržati i sredstva za zaslađivanje i poboljšanje ukusa.
[0048] Sirupi i eliksiri mogu da se formulišu sa sredstvima za zaslađivanje, na primer glicerolom, propilen glikolom, sorbitolom ili saharozom. Takve formulacije mogu sadržati i demulcent, prezervans i sredstva za poboljšanje ukusa i davanje boje. Oralni rastvori mogu se pripremiti u kombinaciji sa, na primer, ciklodekstrinom, PEG i surfaktantima.
[0049] Farmaceutske kompozicije mogu biti u obliku sterilne injektabilne vodene ili uljane suspenzije. Ova suspenzija može se formulisati prema poznatom stanju tehnike korišćenjem gore pomenutih pogodnih dispergujućih ili vlažećih sredstava. Sterilni injektabilni preparat može biti i sterilni injektabilni rastvor ili suspenzija u netoksičnom parenteralno prihvatljivom razblaživaču ili rastvaraču, na primer kao rastvor u 1,3-butan diolu. Među prihvatljivim prenosnicima i rastvaračima koji se mogu koristiti su i voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Pored toga, sterilna, fiksirana ulja obično se koriste kao rastvarač ili suspendujući medijum. U tu svrhu, može se koristiti svako blago, fiksirano ulje uključujući sintetske mono- ili digliceride. Pored toga, masne kiseline kao oleinska kiselina, nalaze primenu u pripremanju injektabilnih preparata.
[0050] Jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli, opisani u ovom tekstu, mogu se primeniti i u obliku supozitorija za rektalnu primenu leka. Ove kompozicije se mogu pripremiti mešanjem leka sa pogodnim neiritirajućim ekscipijentom koji je u čvrstom stanju na uobičajenim temperaturama, ali u tečnom na rektalnoj temperaturi i prema tome, otopiće se u
1
rektumu da bi se oslobodio lek. Takvi materijali uključuju kakao buter i polietilen glikole. Pored toga, jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli mogu se primeniti dostavom preko oka, putem rastvora ili masti. Dodatno, transdermalna dostava predmetnih jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivih soli može se izvršiti putem jonoforetskih flastera i slično. Za površinsku upotrebu, koriste se kremovi, masti, želei, rastvori ili suspenzije, itd., koji sadrže jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli opisane u ovom tekstu. Kako se ovde koristi, površinska primena uključuje i upotrebu vodica za ispiranje usta i grla.
[0051] Jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli, opisani u ovom tekstu, mogu se takođe povezati sa nosačem koji je pogodan polimer za ciljanu dostavu. Takvi polimeri mogu uključivati polivinilpirolidon, piranski kopolimer, polihidroksi-propil-metakrilamid-fenol, polihidroksietil-aspartamid-fenol, ili polietilenoksid-polilizin supstituisan palmitoilskim reziduama. Pored toga, jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli, opisani u ovom tekstu, mogu se povezati sa nosačem koji je biodegradabilni polimer koristan za postizanje kontrolisanog oslobađanja leka, na primer polilaktična kiselina, poliglikolna kiselina, kopolimeri polilaktične i poliglikolne kiseline, poliepsilon kaprolakton, polihidroksi buterna kiselina, poliortoestri, poliacetali, polidihidropirani, policijanoakrilati i unakrsno povezani ili amfipatični blok-kopolimeri hidrogelova. Polimeri i semipermeabilni polimerni matriksi mogu se uobličiti u oblikovane artrikle, kao što su zalisci, stentovi, kateteri, proteze i slično.
V. Metodi lečenja srčanih poremećaja
[0052] Mutacije koje dovode do HCM izazivaju značajne smetnje u mehanici miozina. Ove mutacije svoje efekte ispoljavaju različitim mehanizmima u zavisnosti od svoje lokacije u miozinskom genu. Dobro izučene HCM mutacije, R403Q i R453C, locirane su u različitim delovima motornog domena i izazivaju različite mehaničke smetnje koje obično dovode do proizvodnje povećane sile. Bez želje za ograničavanjem nekom određenom teorijom, veruje se da jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli, opisani u ovom tekstu, mogu da se vežu direktno za mutantne proteine sarkomere i koriguju njihovu aberantnu funkciju, bilo na cis (utičući na istu specifičnu funkciju) ili trans (menjajući komplementarnu funkciju) način. Kao takvi, mogu obezbediti terapijsku korist za HCM pacijente suprotstavljajući se hiperkontraktilnosti i/ili ometenoj relaksaciji, udruženim sa bolešću.
[0053] Isto tako, obezbeđen je metod lečenja hipertrofične kardiomiopatije (HCM) ili srčanog poremećaja koji ima jednu ili više patofizioloških osobina udruženih sa HCM. Metod
1
uključuje primenu, kod subjekta kojem je to potrebno, efikasne količine jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli, opisanih u ovom tekstu.
[0054] Jedinjenja pronalaska ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu izmeniti prirodni tok HCM i drugih bolesti, a ne samo ublažiti simptome. Mehanizmi kojima se postiže klinička korist kod HCM pacijenata mogu se koristiti i kod pacijenata sa drugim oblicima srčanih oboljenja koja imaju sličnu patofiziologiju, sa ili bez dokazivog genetičkog uticaja. Na primer, efikasno lečenje HCM pacijenata poboljšanjem ventrikularne relaksacije tokom dijastole, može biti efikasno i kod šire populacije kod koje postoji dijastolna disfunkcija. Jedinjenja pronalaska ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu specifično ciljati osnovne uzroke stanja ili delovati na druge nishodne puteve. Prema tome, jedinjenja pronalaska ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu biti od koristi i za pacijente koji pate od dijastolnog popuštanja srca sa očuvanom ejekcionom frakcijom, ishemične bolesti srca, angine pektoris, ili restriktivne kardiomiopatije. Jedinjenja pronalaska ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu takođe pokrenuti obnavljajuće ventrikularno u hipertrofiji leve komore usled volumenskog preopterećenja ili preopterećenja zbog pritiska; npr., hronične mitralne regurgitacije, hronične aortne stenoze ili hronične sistemske hipertenzije; zajedno sa terapijama namenjenim korigovanju ili ublažavanju primarnog uzroka volumenskog opterećenja ili opterećenja zbog pritiska (reparacija/zamena zalistaka, efikasna antihipertenzivna terapija). Sniženjem pritiska punjenja leve komore jedinjenja mogu smanjiti rizik za nastanak plućnog edema i respiratorne insuficijencije. Smanjenje ili eliminisanje funkcionalne mitralne regurgitacije i/ili snižavanje pritiska leve pretkomore može smanjiti rizik za pojavu paroksizmalne ili stalne atrijalne fibrilacije i, zajedno sa tim, smanjiti rizik za prateće tromboembolijske komplikacije uključujući, ali ne ograničavajući se na moždani udar usled arterijske embolije. Smanjenje ili eliminisanje dinamičke i/ili statičke opstrukcije izlaznog toka leve komore može smanjiti verovatnoću potrebe za lečenjem septalnom redukcijom, hirurškom ili perkutanom, sa njenim pratećim kratkoročnim ili dugoročnim komplikacijama. Jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu smanjiti jačinu hroničnog ishemijskog stanja udruženog sa HCM i time smanjiti rizik od iznenadne srčane smrti (sudden cardiac death, SCD) ili njenog ekvivalenta kod pacijenata sa implantabilnim kardioverter-defibrilatorima (česta i/ili ponavljana ICD pražnjenja) i/ili potrebu za potencijalno toksičnim antiaritmijskim lekovima. Jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu biti od koristi u smanjenju ili eliminisanju potrebe za istovremenom primenom lekova, sa njihovom potencijalnom toksičnošću, interakcijama između lekova i/ili sporednim efektima. Jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu smanjiti
1
intersticijalnu fibrozu miokarda i/ili usporiti progresiju, zaustaviti ili revertovati hipertrofiju leve komore.
[0055] U zavisnosti od bolesti koju treba lečiti i stanja subjekta, jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli opisani u ovom tekstu, mogu se primeniti oralno, parenteralno (npr., intramuskularnom, intraperitonealnom, intravenskom, ICV, intracistenalnom injekcijom ili infuzijom, subkutanom injekcijom ili implantom), implantacijom (npr., kada se jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so povežu sa stentom), inhalacionim sprejom, nazalnim, vaginalnim, rektalnim, sublingvalnim ili površinskim putem primene i mogu se formulisati sami ili zajedno, u pogodnim doznim jediničnim formulacijama koje sadrže uobičajene netoksične farmaceutski prihvatljive nosače, adjuvanse, i prenosnike pogodne za svaki od puteva primene.
[0056] Za lečenje ili preveniranje stanja koja zahtevaju poboljšanu ventrikularnu relaksaciju tokom dijastole odgovarajući dozni nivo će obično biti oko 0.001 do 100 mg po kg telesne težine pacijenta na dan, koji se može primeniti u jednoj ili više doza. U nekim primerima izvođenja, dozni nivo će iznositi oko 0.01 do oko 25 mg/kg na dan; u nekim primerima izvođenja, oko 0.05 do oko 10 mg/kg na dan. Pogodan dozni nivo može iznositi oko 0.01 do 25 mg/kg na dan, oko 0.05 do 10 mg/kg na dan, ili oko 0.1 do 5 mg/kg na dan. U ovom opsegu doza može iznositi 0.005 do 0.05, 0.05 do 0.5 ili 0.5 do 5.0 mg/kg na dan. U nekim primerima izvođenja za oralnu primenu, kompozicije su obezbeđene u obliku tableta koje sadrže 1.0 do 1000 miligrama aktivnog sastojka, posebno 1.0, 5.0, 10.0, 15.0, 20.0, 25.0, 50.0, 75.0, 100.0, 150.0, 200.0, 250.0, 300.0, 400.0, 500.0, 600.0, 750.0, 800.0, 900.0, i 1000.0 miligrama aktivnog sastojka za simptomatsko prilagođavanje doze pacijentu koji treba da se leči. Jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli mogu biti namenjene za primenu po režimu od 1 do 4 puta na dan, u nekim primerima izvođenja jednom ili dva puta na dan.
[0057] Razume se, međutim, da specifični dozni nivo i učestalost doziranja za svakog pojedinačnog pacijenta mogu varirati i da će zavisiti od različitih faktora uključujući aktivnost specifičnog upotrebljenog jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli, metaboličku stabilnost i dužinu delovanja tog jedinjenja ili farmaceutski prihvatljive soli, starost, telesnu težinu, nasledne karakteristike, opšte zdravstveno stanje, pol i način ishrane subjekta, kao i način i vreme primene, stopu ekskrecije, kombinaciju lekova i jačinu određenog stanja kod subjekta koji je podvrgnut lečenju.
[0058] Jedinjenja i kompozicije obezbeđeni u ovom tekstu mogu se koristiti u kombinaciji sa drugim lekovima koji se koriste za lečenje, prevenciju, supresiju ili ublažavanje bolesti ili stanja za koja su korisna jedinjenja i kompozicije obezbeđeni u ovom tekstu. Takvi drugi
1
lekovi mogu se primeniti putem i u količini kako se uobičajeno koriste, istovremeno ili sekvencijalno sa jedinjenjem ili kompozicijom, obezbeđenim u ovom tekstu. Kada se jedinjenje ili kompozicija, obezbeđeni u ovom tekstu, koriste istovremeno sa jednim ili više drugih lekova, poželjna je farmaceutska kompozicija koja sadrži takve druge lekove, pored jedinjenja ili kompozicije, datih u ovom tekstu. Prema tome, farmaceutske kompozicije obezbeđene u ovom tekstu uključuju one koje sadrže i jedno ili više drugih aktivnih sastojaka ili terapijskih sredstava, pored jedinjenja ili kompozicije, obezbeđenih u ovom tekstu. Pogodna dodatna aktivna sredstva uključuju, na primer: lekove za usporavanje napredovanja srčane insuficijencije nishodnom regulacijom heurohormonske stimulacije srca i pokušajem prevencije remodeliranja srca (npr., ACE inhibitori, blokatori angiotenzinskog receptora (angiotensin receptor blockers, ARB), β-blokatori, antagonisti aldosterosnkih receptora, ili inhibitori neuralne endopeptidaze); lekove za poboljšavanje srčane funkcije stimulacijom kontraktilnosti srca (npr., pozitivna inotropna sredstva, kao što su β-adrenergički agonist dobutamin ili inhibitor fosfodiesteraze milrinon); i lekove koji smanjuju dijastolno opterećenja srca (npr., diuretici kao furosemid) ili sistolno opterećenje srca (vazodilatatori bilo koje klase uključujući, ali ne ograničavajući se na blokatore kalcijumskih kanala, inhibitore fosfodiesteraze, antagoniste endotelinskog receptora, inhibitore renina ili modulatore miozina glatkih mišićnih ćelija). Težinski odnos jedinjenja obezbeđenog u ovom tekstu prema drugom aktivnom sastojku može varirati i zavisiće od efikasne doze svakog sastojka. Obično, koristiće se efikasna doza svakog od njih.
VI. Primeri
Skraćenice:
aq: vodeni
BBR3: bor tribromid
CH2Cl2: dihlorometan
CH3CN: acetonitril
CH3OH: metanol
DIAD: diizopropil azodikarboksilat
DIEA: diizopropil etilamin
DMF: dimetil formamid
DMSO: dimetil sulfoksid
eq.: ekvivalenti
2
Et3N: trietilamin
Et2O: dietil etar
EtOH: etanol
FeSO4: fero sulfat
h: sat(i)
HCl: hlorovodonik
H2O: voda
K2CO3: kalijum karbonat
KHSO4: kalijum bisulfat
KNCO: kalijum izocijanat
LiBr: litijum bromid
MgSO4: magnezijum sulfat
mL: mililitar
MW: mikrotalasno (reakcija obavljen au mikrotalasnom reaktoru) NaCl: natrijum hlorid
NaH: natrijum hidrid
NaHCO3: natrijum bikarbonat
NaOEt: natrijum etoksid
NaOH: natrijum hidroksid
NaOMe: natrijum metoksid
Na2SO4: natrijum sulfat
NH4CI: amonijum hlorid
NMP: n-metil pirolidinon
pH: -log [H+]
POCl3: fosforil trihlorid
PPTS: piridinijum p-toluensulfonat
RP-HPLC: reverzno-fazna tečna hromatografija pod visokim pritiskom RT: sobna temperatura
SEMCl: 2-(trimetilsilil)etoksimetil hlorid
TEBAC: trietilbenzilamonijum hlorid
TFA: trifluorosirćetna kiselina
THF: tetrahidrofuran
TLC: tankoslojna hromatografija
Primer 1. Pripremanje (S)-3-izopropil-6-((1-feniletil) amino) pirimidin-2,4(1H,3H) diona.
[0059] Jedinjenje 1.1. Izopropilurea. U mešani rastvor izopropilamina (15.3 g, 0.258 mol, 1.0 eq) u CH2Cl2(200 mL) pod argonom na 0 °C, u kapima se doda trimetilsilil izocijanat (30 g, 0.26 mol, 1.0 eq). Dobijena mešavina se ostavi da dostigne ambijentalnu temperaturu i meša preko noći. Posle hlađenja na 0 °C, u kapima se doda CH3OH (100 mL). Dobijeni rastvor se meša 2 sata (h) na sobnoj temperaturi i zatim koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirova rezidua se rekristališe iz CH3OH:Et2O (1:20) da se dobije 15.4 g (58%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 103 (M+H)<+>.
[0060] Jedinjenje 1.2. 1-izopropil barbiturna kiselina. U mešani rastvor 1.1 (14.4 g, 0.14 mol, 1.00 eq) u CH3OH (500 mL) dodaju se dimetil malonat (19.55 g, 0.148 mol, 1.05 eq) i natrijum metoksid (18.9 g, 0.35 mol, 2.50 eq). Dobijena mešavina se meša preko noći na 65 °C. Posle hlađenja na ambijentalnu temperaturu, a zatim na 0 °C, pH se pažljivo podesi na 3 korišćenjem vodenog rastvora koncentrovane HC. Dobijena mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom. Rezidua se preuzme u EtOH (200 mL) i filtrira. Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i rezidua se prečisti hromatografijom na koloni od silika gela uz korišćenje CH2Cl2/CH3OH (20:1) kao eluenta da se dobije 16.8 g (50%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 171 (M+H)<+>.<1 1>H-NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 11.19 (s, 1H), 4.83 (m, 1H), 3.58 (s, 2H), 1.32 (d, J = 6.0 Hz, 6H).
[0061] Jedinjenje 1.3. 6-hloro-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 100 mL-ski flakon sa okruglim dnom, koji sadrži jedinjenje 1.2 (11.4 g, 66.99 mmol, 1.00 eq) pod argonom dodaju se trietilbenzilamonijum hlorid (21.3 g, 93.51 mmol, 1.40 eq) i POCl3(30 mL). Dobijena mešavina se meša preko noći na 50 °C. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom. Rezidua se rastvori u CH2Cl2(150 mL) posle čega sledi sporo dodavanje H2O (100 mL). Faze se razdvoje i organski sloj se ispere pomoću H2O (100 mL), osuši anhidrovanim Na2SO4, i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirova rezidua se prečisti hromatografijom na koloni od silika gela uz korišćenje EtOAc/petrolej etra (1:1) kao eluenta da se dobije 5.12 g (40%) jedinjenja iz naslova u vidu svetložute čvrste supstance.<1>H-NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ 12.22 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.95 (m, 1H), 1.34 (d, J = 6.0 Hz, 6H).
[0062] Jedinjenje 1. (S)-3-izopropil-6-((1-feniletil) amino) pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U rastvor 6-hloro-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona (1.3, 1.0g, 5.31 mmol) u 1,4-dioksanu (20 mL) doda se (S)-α-metilbenzilamin (Sigma-Aldrich, 1.43 g, 11.7 mmol, 2.2 eq). Reakciona mešavina se meša na 80 °C, 24 h. Posle hlađenja na ambijentalnu temperaturu, mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom. Rezidua se preuzme u EtOAc (70 mL) i ispere vodenim 1 N rastvorom HCl (2 x 50 mL) i zasićenim rastvorom soli (40 mL). Organski sloj se suši anhidrovanim Na2SO4i zatim koncentruje pod sniženim pritiskom do polovine originalne zapremine dajući precipitat. Doda se heksan (20 mL) i mešavina se meša na sobnoj temperaturi. Dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtracijom, ispere heksanom (20 mL), i suši da se dobije 1.0 g (69%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 274 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ 9.77 (s, 1H), 7.32 (m, 4H), 7.24 (m, 1H), 6.50 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.52 (m, 1H), 4.31 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 1.37 (m, 3H ), 1.24 (m, 6H). 'HNMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7.39-7.20 (m, 5H), 5.01 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 1.49 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.36 (m, 6H).
Primer 2, Pripremanje (S)-5-fluoro-3-izopropil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2.4(1H,3H)-diona (2).
2
[0063] U rastvor 1 (80 mg, 0.293 mmol) u sirćetnoj kiselini (2.0 mL) doda se selektfluor (104 mg, 0.293 mmol, 1.0 eq.). Mešavina se meša na sobnoj temperaturi 2 h. Zatim se koncentruje pod sniženim pritiskom. Rezidua se prečisti hromatografijom na koloni od silika gela, eluira korišćenjem 0-50% EtOAc u heksanima da se dobije 6 mg (7%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 292 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): δ ppm 7.36-7.24 (m, 5H), 5.04-4.97 (m, 1H), 4.94-4.88 (m, 1H), 1.54 (d, J = 8.0 Hz, 3H), 1.39 (m, 6H).
Referentni primer 3. Pripremanje (S)-5-bromo-3-izopropil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(lH,3H)-diona (3).
[0064] U rastvor 1 (55 mg, 0.201 mmol) u sirćetnoj kiselini (1.0 mL) doda se N-bromosukcinamid (35 mg, 0.196 mmol). Mešavina se meša na sobnoj temperaturi 1 sat. Zatim se koncentruje pod sniženim pritiskom. Rezidua se prečisti hromatografijom na koloni od silika gela, eluira korišćenjem 0-40% EtOAc u heksanima da se dobije 52 mg (74%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 352, 354 (M+H, obrazac broma)+ .1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.96 (br s, 1H), 7.43-7.28 (m, 5H), 5.28 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.14 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 1.62 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.45-1.39 (m, 6H).
Primer 4, Pripremanje (S)-6-((1-(3-hlorofeniletil)amino)-5-fluoro-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0065] Jedinjenje 4.1. 5-fluoro-1-izopropilpirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion. U 100 mL-ski flakon sa okruglim dnom koji sadrži rastvor 1.1 (1.31 g, 0.013 mol, 1.00 eq) u CH3OH (15 mL) dodaju se dietil fluoromalonat (2.41 g, 0.014 mol, 1.05 eq) i natrijum metoksid (1.74 g, 0.032 mol, 2.50 eq). Reakcioni flakon se poveže sa refluksnim kondenzorom i meša se 4 h u uljanom kupatilu zagrejanom na 85 °C. Reakcija se ohladi na 0 °C i prekida pažljivim dodavanjem koncentrovane HCl, uz podešavanje na pH=2 dodavanjem viška koncentrovane HCl. Reakciona mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijena rezidua se suši 18 h pod visokim vakuumom dajući 2.65 g jedinjenja iz naslova (98%).<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 5.53 (d, J = 24.0 Hz, 1H), 4.91 (m, 2H), 1.46 (m, 6H).
[0066] Jedinjenje 4.2. 6-hloro-5-fluoro-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 100 mL-ski flakon sa okruglim dnom, snabdeven refluksnim kondenzorom, koji sadrži 4.1 (2.65 g, 0.014 mmol, 1.00 eq) dodaju se trietilbenzilamonijum hlorid (4.50 g, 0.019 mmol, 1.40 eq) i POCl3(25 mL). Reakciona mešavina se meša 4 h na 50 °C i zatim ohladi na sobnu temperaturu. Mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijena rezidua se rastvori u CH2Cl2(50 mL). Polako se dodaje voda (50 mL) i slojevi se razdvoje. Organski sloj se ispere drugi put pomoću H2O (100 mL), suši anhidrovanim MgSO4, i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, 30% EtOAc u heksanima) da se dobije 2.67 g (93%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 5.19-5.05 (m, 2H), 1.48 (d, J=7.04 Hz, 6H).
[0067] Jedinjenje 4. (S)-6-((1-(3-hlorofenil)etil)amino)-5-fluoro-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U rastvor 4.2 (150 mg, 0.70 mmol, 1 eq) u DMF (2 mL) u sudu sa debelim zidom za rad pod pritiskom, dodaju se (S)-3-hloro-α-metilbenzilamin (150 mg, 0.70 mmol, 1.0 eq) i protonski sunđer (Proton sponge, 190 mg, 0.90 mol, 1.25 eq). Sud za rad pod
2
pritiskom se hermetički zatvori u reakciona mešavina se zagreva do 95 °C 3 h, iza zaklona zbog moguće eksplozije. Reakciona mešavina se ohladi na sobnu temperaturu i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se prečisti preparativnom RP-HPLC uz korišćenje Shimadzu, Prominence LC-20AP sistema opremljenog Phenomenex Gemini-NX Cl8 kolonom (eluiranje korišćenjem 10-90% CH3CN/H2O za 30 min., 20 mL/min (oba sadrže 0.1% TFA)). Frakcije koje sadrže čisto jedinjenje kombinuju se i liofilizuju da bi se dobilo 30 mg (13%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 326 (M+H)<+>.
1 H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.47 (br s, 1H), 7.35-7.27 (m, 3H), 7.22-7.16 (m, 1H), 5.12 (m, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.69 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 1.59 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.43 (m, 6H).
Primer 5. Pripremanje (S)-6-((1-(3.5-difluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0068] Jedinjenje 5.1. ((R,E)-N-(3,5-difluorobenziliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid. U rastvor 3,5-difluorobenzaldehida (1.00 g, 7.04 mmol, 1.00 eq) u CH2Cl2(20 mL) dodaju se piridinijum p-toluensulfonat (0.089 g, 0.35 mmol, 0.05 eq), (R)-(+)-2-metilpropan-2-sulfinamid (0.852 g, 7.03 mmol, 1.00 eq), i MgSO4(4.2 g, 35.00 mmol, 5.00 eq). Dobijena mešavina se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona mešavina se filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, 20% EtOAc u petrol etru) da se dobije 500 mg (29%) jedinjenja iz naslova u vidu žutog ulja.
[0069] Jedinjenje 5.2. (R)-N-((S)-1-(3,5-difluorofenil)etil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.
Metilmagnezijum bromid (5.17 mL, 3M, 2.00 eq) se u kapima doda u rastvor 5.1 (1.9 g, 7.75 mmol, 1.00 eq) u CH2Cl2(50 mL) pod argonom na -48 °C. Reakciona mešavina se zagreje na
2
sobnu temperaturu i meša preko noći. Reakcija se pažljivo prekine zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (20 mL). Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ekstrahuje korišćenjem CH2Cl2(3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko anhidrovanog MgSO4i koncentruju pod sniženim pritiskom da se dobije 1.3 g (64%) jedinjenja iz naslova u vidu žutog ulja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ ppm 6.92-6.81 (m, 2H), 6.75-6.65 (m, 1H), 4.65-4.55, (m, 1H), 3.46-3.42 (m, 1H), 1.53-1.44 (m, 3H), 1.26-1.22 (m, 9H).
[0070] Jedinjenje 5.3. (S)-1-(3,5-difluorofenil)etan-1-amin hidrohlorid. U rastvor 5.2 (1.3 g, 4.97 mmol, 1.00 eq) u CH3OH (10 mL) doda se 4 N HCl u 1,4- dioksanu (2.67 mL, 2.00 eq). Reakciona mešavina se meša 0.5 h na sobnoj temperaturi i zatim koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se rastvori u CH3OH (3 mL) i doda se Et2O (300 mL). Nastali precipitat se izoluje filtracijom da se dobije 0.80 g (83%) jedinjenja iz naslova. 1H NMR (300 MHz, D20): δ ppm 6.98-6.83 (m, 3H), 4.45-4.38 (m, 1H), 1.51-1.48 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
[0071] Jedinjenje 5. (S)-6-((1-(3,5-difluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Jedinjenje 5.3 (50 mg, 0.32 mmol, 1.00 eq) rastvori se u 1N NaOH (10 mL), i dobijena mešavina se meša na 25 °C. Posle 1 h, mešavina se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (5 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi se suše anhidrovanim Na2SO4, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua i jedinjenje 1.3 (35.6 mg, 0.19 mmol, 0.60 eq) se kombinuju. Mešavina se meša na 100 °C 18 h, zatim se ohladi na sobnu temperaturu i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se prečisti preparativnom RP-HPLC dajući 28 mg (29%) jedinjenja iz naslova u vidu beličaste čvrste supstance.
2
LC/MS: m/z (ES+) 310 (M+H)+ .1H- NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.83 (s, 1H), 7.06-7.12 (m, 3H), 6.54 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 4.91-4.82 (m, 1H), 4.54-4.46 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 1.34 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.22 (d, J = 6.9 Hz, 6H).
Primer 6. Pripremanje (S)-6-((ciklopropil(fenil)metil)amino)-3-izopropilpirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0072] Jedinjenje 6.1. (R,E)-N-benziliden-2-metilpropan-2-sulfinamid. Jedinjenje iz naslova priprema se na isti način kao 5.1 osim što se benzaldehid (5.0 g, 47.12 mmol, 1.00 eq) koristi umesto 3,5-difluorobenzaldehida da se dobije 2.8 g (28%) jedinjenja iz naslova. 1H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ ppm 8.62 (s, 1H), 7.89-7.87 (m, 2H), 7.55- 7.49 (m, 3H), 1.31 (s, 9H).
[0073] Jedinjenje 6.2. (S)-N-((S)-ciklopropil(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.
Jedinjenje iz naslova priprema se korišćenjem protokola sličnog onom koji je korišćen za pripremanje 5.2 osim što se 6.1 (1.0 g, 4.78 mmol, 1.00 eq) i ciklopropilmagnezijum bromid (9.6 mL, 1 M, 2.00 eq) koriste umesto 5.1 i metilmagnezijum bromida da se dobije 0.5 g (35%) jedinjenja iz naslova u vidu žutog ulja.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.36-7.23 (m, 5H), 3.67-3.51 (m, 2H), 1.31 (m, 10H), 0.85-0.15 (m, 4H).
2
[0074] Jedinjenje 6.3. (S)-ciklopropil(fenil)metanamin hidrohlorid. Jedinjenje iz naslova priprema se korišćenjem protokola sličnog onom koji je korišćen za pripremanje 5.3 osim što se 6.2 (500 mg, 1.69 mmol, 1.00 eq) koristi umesto 5.2 da se dobije 220 mg (88%) jedinjenja iz naslova u vidu žutog ulja.<1>H NMR (300 MHz, d6-DMSO): δ ppm 7.37-7.31 (m, 5H), 3.53 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 1.37-1.25 (m, 1H), 0.75-0.55 (m, 1H), 0.53-0.31 (m, 2H), 0.25-0.15 (m, 1H).
[0075] Jedinjenje 6. (S)-6-((ciklopropil(fenil)metil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Jedinjenje iz naslova priprema se korišćenjem procedure slične onoj koja je korišćena za pripremanje 5 osim što se 6.3 (200 mg, 1.36 mmol, 1.00 eq) koristi umesto 5.3 i 1,4-dioksan se koristi kao rastvarač. Posle koncentrovanja pod sniženim pritiskom, prečišćavanja korišćenjem hiralne HPLC (Phenomenex Lux 5µ Cellulose- 4, 2.12*25, 5 µm kolona) sa izokratskom mešavinom EtOH:heksan (1:4) kao eluenta dobija se 22 mg (5%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 300 (M+H)<+>.<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.82 (s, 1H), 7.39-7.25 (m, 5H), 7.25-7.32 (m, 1H), 6.72 (m, 1H), 4.90 (m, 1H), 4.22 (s, 1H), 3.78 (m, 1H), 1.27 (m, 6H), 1.57 (m, 1H), 0.60 (m, 1H), 0.56-0.32 (m, 2H).
Primer 7. Pripremanje (S)-6-((ciklopropil(3-metoksifenil)metil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0076] Rastvor 6-hloro-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona (1.3, 50 mg, 0.265 mmol), (S)-ciklopropil-(3-metoksifenil)metil amina (Sigma-Aldrich, 104 mg, 0.587 mmol), i protonskog sunđera (85 mg, 0.397 mmol) u NMP (0.5 mL) meša se na 130 °C 2 h. Posle
2
hlađenja na sobnu temperaturu, mešavina se prečisti preparativnom RP-HPLC (Shimadzu, Prominence LC-20AP sistem opremljen Phenomenex Gemini-NX C18 kolonom), i eluira korišćenjem 20-90% CH3CN u H2O (oba sadrže 0.1% TFA). Frakcije koje sadrže čisto jedinjenje kombinuju se i liofilizuju da se dobije 10 mg (11%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 330 (M+H)<+>.<1>H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ ppm 7.26 (t, J = 7.8 Hz, H), 6.92-6.79 (m, 3H), 5.00 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.74 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 1.36 (d, J = 7.0 Hz, 6H), 1.23-1.13 (m, 1H), 0.68-0.60 (m, 1H), 0.58-0.50 (m, 1H), 0.50-0.42 (m, 1H), 0.41-0.34 (m, 1H).
Primer 8. Pripremanje (S)-6-((ciklobutil(fenil)metil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0077] Jedinjenje 8.1. (S,E)-N-(ciklobutilmetilen)-2-metilpropan-2-sulfinamid. U rastvor ciklobutankarbaldehida (1.0 g, 11.89 mmol, 1.00 eq) u CH2Cl2(10 mL) dodaju se piridinijum p-toluensulfonat (0.143 g, 0.57 mmol, 0.05 eq), (S)-(-)-2-metilpropan-2-sulfinamid (1.22 g, 10.07 mmol, 0.85 eq), i magnezijum sulfat (7.14 g, 59.32 mmol, 5.00 eq). Dobijena mešavina se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona mešavina se filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, 30% EtOAc u petrol etru) dajući 2.0 g (90%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8.08 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.36-3.32 (m, 1H), 2.25-2.16 (m, 4H), 2.03-1.90 (m.2H). 1.15 (s.9H).
[0078] Jedinjenje 8.2. (S)-N-((S)-ciklobutil(fenil)metil)-2-metilpropan-2-sulfinamid.
Fenilmagnezijum bromid (3M u Et2O, 15.3 mL, 2.00 eq) se doda u kapima u rastvor 8.1 (4.3 g, 22.96 mmol, 1.00 eq) u THF (40 mL). Reakciona mešavina se greje 3 h na 65 °C. Zatim se ohladi na sobnu temperaturu i reakcija se pažljivo prekine zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (30 mL). Dobijena mešavina se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3 x 30 mL), i kombinovani organski slojevi se suše anhidrovanim Na2SO4i koncentruju pod sniženim pritiskom dajući 5.8 g (95%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7.30-7.21 (m, 5H), 4.23 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.73-2.68 (m, 1H), 1.95-1.60 (m, 6H), 1.14 (s, 9H).
[0079] Jedinjenje 8.3. (S)-ciklobutil(fenil)metanamin hidrohlorid. Jedinjenje iz naslova priprema se korišćenjem procedure slične onoj koja je korišćena za pripremanje 5.3 osim što se 8.2 (5.8 g, 0.022 mol, 1.00 eq) koristi umesto 5.2 da se dobije 3.20 g (91%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H NMR (300 MHz, D2O): δ ppm 7.36-7.28 (m, 5H), 4.18 (m, 1H), 2.87-2.73 (m, 1H), 2.11-2.01 (m, 1H), 1.90-1.69 (m, 5H).
[0080] Jedinjenje 8. (S)-6-((ciklobutil(fenil)metil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Jedinjenje 8.3 (0.200 g, 1.24 mmol, 1.00 eq) rastvori se u 1N NaOH (10 mL), i meša 1 h na 25 °C. Reakciona mešavina se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (5 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko anhidrovanog Na2SO4, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se rastvori u NMP i kombinuje sa 1.3 i protonskim sunđerom i greje kako je opisano za pripremanje 7. Jedinjenje iz naslova (35 mg, 9%) se izoluje u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 314 (M+H)<+>.<1>H NMR (300 MHz, CD3OD): δ ppm 7.38-7.26 (m, 5H), 5.08-4.97 (m, 1H), 4.25 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 2.68-2.58 (m, 1H), 2.19-2.13 (m, 1H), 1.98-1.83 (m, 5H), 1.36 (d, J = 6.9 Hz, 6H).
Primer 9. Pripremanje (S)-6-((1-feniletil)amino)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
1
[0081] Jedinjenje 9.1. 1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)urea. Mešavina tetrahidro-2H-piran-4-amina (5.0 g, 49.4 mmol, 1.0 eq.) i kalijum izocijanata (4.0 g, 49.5 mmol, 1.0 eq.) drži se na refluksu u H2O (50 mL) preko noći. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i višak NaCl se doda da bi se vodeni sloj doveo do zasićenja. Precipitat se izoluje filtracijom da bi se dobio željeni proizvod (1.28 g, 8.88 mmol). Vodeni sloj se ispere korišćenjem EtOAc (3 x 15 mL) i zatim koncentruje i azeotropiše toluenom (3 x 100 mL). Dobijena čvrsta supstanca se suspenduje u CH3OH:EtOAc, 1:4 (100 mL) i filtrira ukupno četiri puta. Kombinovani organski slojevi se koncentruju pod sniženim pritiskom i kombinuju sa izolovanim precipitatom dajući 5.01 g (70%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 145 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.14 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.47 (s, 2H), 3.85 (dt, J = 11.6, 3.6 Hz, 2H), 3.65-3.52 (m, 1H), 3.38 (td, J = 11.4, 2.2 Hz, 2H), 1.80-1.72 (m, 2H), 1.42-1.27 (m, 2H).
[0082] Jedinjenje 9.2. 1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion.
Jedinjenje 9.1 (2.8 g, 19.4 mmol) rastvori se u EtOH (30 mL), i dodaju se diethil malonat (2.45 mL, 21.4 mmol, 1.1 eq.) i NaOEt (7.55 mL, 23.3 mmol, 1.2 eq.). Reakcija se meša na 85 °C preko noći, i zatim se ohladi na sobnu temperaturu. Reakciona mešavina se razblaži korišćenjem H2O (5 mL), i doda se KHSO4u višku da bi se zasitio vodeni sloj. Reakciona mešavina se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi se suše anhidrovanim MgSO4, filtriraju i koncentruju pod snižnim pritiskom. Dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, 0-25% CH3OH u CH2Cl2) da se dobije 1.57 g mešavine koja sadrži jedinjenje iz naslova koje se koristi bez dodatnog prečišćavanja. LC/MS: m/z (ES-) 211 (M-H)- .
2
[0083] Jedinjenje 9.3. 6-hloro-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U rastvor 9.2 (1.57 g, 7.4 mmol, 1 eq.) u CH3CN (15 mL) doda se POC13(0.551 mL, 5.9 mmol, 0.8 eq.). Reakciona mešavina se meša na 80 °C preko noći. Dodatni alkvot POC13(0.4 eq.) se doda i reakciona mešavina se meša na 80 °C 3 h. Dodatni alikvoti POCl3(0.4 eq.) se dodaju posle 3 h i 5 h mešanja na 80 °C. Reakciona mešavina se zatim meša na 90 °C 1 h. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu, koncentruje, pomeša sa Et2O (15 mL) i dekantuje. Dobijena rezidua se ispere korišćenjem Et2O (15 mL) i dekantuje dok dekantovani Et2O ne bude bistar. Dobijena rezidua se pažljivo suspenduje u CH3OH (10 mL), i filtrira. Filtrat se koncentruje da se dobije mešavina polaznog materijala i jedinjenja iz naslova (-85% čistoća, 1.6 g). LC/MS: m/z (ES-) 229 (M-H)-.
[0084] Jedinjenje 9. (S)-6-((1-feniletil)amino)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Mešavina 9.3 (0.15 g, 0.65 mmol, 1 eq.) i (S)-(-)- α-metilbenzilamina (470 mg, 3.88 mmol, 6.0 eq.) meša se preko noći na 90 °C. Reakciona mešavina se hladi na sobnoj temperaturi i dobijena rezidua prečisti se preparativnom RP-HPLC (0-40% CH3CN u H2O za 30 min.), što je praćeno drugim prečišćavanjem na preparatornoj TLC ploči (2000 um) (7% CH3OH u CH2C12) da se obezbedi 23 mg (11%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 316 (M+H)+ .1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.23 (s, 1H), 7.40-7.32 (m, 4H), 7.31-7.17 (m, 1H), 6.93 (s, 1H), 4.84-4.71 (m, 1H), 4.56- 4.43 (m, 1H), 4.35 (s, 1H), 3.93-3.78 (m, 2H), 3.28 (t, J = 12.1 Hz, 2H), 2.63-2.39 (m, 2H), 1.40 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.35-1.16 (m, 2H).
Primer 10. Pripremanje (S)-6-((1-(3-metoksifenil)etil)amino)-3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)pirimidin-2.4(1H,3H)-diona (10).
[0085] U rastvor 9.3 (0.58 g, 0.25 mmol) u mešavini 2-propanola i H2O (4:1, 1 mL) doda se (S)-1-(3-metoksifenil)-etilamin (0.113 g, 0.75 mmol, 3.0 eq.). Reakciona mešavina se greje na 120 °C 2 h. Posle hlađenja, reakciona mešavina se koncentruje pod snižnim pritiskom, razblaži u CH3OH i filtrira. Filtrat se prečisti preparativnom RP-HPLC (20-100% CH3CN u H2O za 40 min, pri 25 mL/min.) da se dobije 18 mg (21%) jedinjenja iz naslova u vidu beličaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 346 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, aceton-d6) δ 8.90 (s, 1H), 7.15 (dd, J = 8.3, 8.1 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.86 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.15 (s, 1H), 4.74 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.35 (s, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.2 (m, 2H), 2.55 (m, 2H) 1.44 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.15 (m, 2H).
Primer 11. Pripremanje 6-(((S)-1-feniletil)amino)-3-(tetrahidrofuran-3-il)pirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0086] Jedinjenje 11.1. 6-hloro-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U mešavinu 6-hloro-uracila (3.0 g, 20.47 mmol, 1 eq.) i LiBr (1.78 g, 20.5 mmol, 1.0 eq.) u NMP (70 mL) na 0 °C doda se NaH (60% disperzija u mineralnom ulju, 0.82 g, 20.5 mmol, 1.0 eq.). Reakciona mešavina se meša na 0 °C 10 min, i polako se dodaje 2-(trimetilsilil)etoksimetil hlorid (3.75g, 22.5 mmol, 1.1 eq.) levkom za dodavanje. Reakciona mešavina se meša preko noći na sobnoj temperaturi i zatim se razblaži korišćenjem EtOAc (150 mL). Mešavina se ispere zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (50 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL), i zasićenim rastvorom soli (50 mL). Organski sloj se suši anhidrovanim Na2SO4i koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije 3.2 g (57%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 299 (M+Na)<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 9.00-8.80 (br-s, 1H), 5.95 (s, 1H), 5.45 (s, 2H)), 3.63 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.48 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 0.01 (s, 9H).
4
[0087] Jedinjenje 11.2. 6-hloro-3-(tetrahidrofuran-3-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil) pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U rastvor 11.1 (277 mg, 1.0 mmol, 1 eq.), 3-hidroksitetrahidrofurana (106 mg, 1.2 mmol, 1.2 eq.), i trifenilfosfina (320 mg, 1.2 mmol, 1.2 eq.) u THE (7.5 mL) na 0 °C, doda se diizopropil azodikarboksilat (0.240 g, 1.2 mmol, 1.2 eq.) u kapima. Reakciona mešavina se meša na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijena rezidua se prečisti preparativnom RP-HPLC (20-100% CH3CN u H2O uz 0.1% pufer koji sadrži mravlju kiselinu za 40 min, pri 25 mL/min.) da se dobije 102 mg (29%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 347 (M+H)+ .1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.92 (s, 1H), 5.58 (m, 1H), 5.41(s, 2H), 4.20 (m, 1H), 4.00-3.85 (m, 3H), 3.65 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.35-2.20 (m, 1H), 2.20-2.08 (m, 1H), 0.95 (t, 2H), 0.01 (s, 9H); 13C NMR (CDCI3) δ 160.7, 150.7, 145.6, 102.0, 74.8, 68.7, 67.9, 67.5, 51.9, 28.7, 18.0, 0.0.
[0088] Jedinjenje 11.3. 6-hloro-3-(tetrahidrofuran-3-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion.
Jedinjenje 11.2 (0.50 g, 1.4 mmol, 1.0 eq.) rastvori se u trifluorosirćetnoj kiselini (1 mL). Reakciona mešavina se meša na sobnoj temperaturi 30 minuta i zatim koncentruje na sniženom pritisku. Dobijena rezidua se prečisti preparativnom RP- HPLC (10% CH3CN u H2O za 40 min, pri 25 mL/min.) da se dobije 300 mg (96%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 217 (M+H)<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 5.90 (s, 1H), 5.35 (m, 1H), 4.00 (m, 1H), 3.85-3.68 (m, 3H), 2.20 (m, 1H), 2.01 (m, 1H).
[0089] Jedinjenje 11. 6-(((S)-1-feniletil)amino)-3-(tetrahidrofuran-3-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Jedinjenje iz naslova priprema se korišćenjem postupka sličnog onome koji je korišćen za pripremanje 9 osim što se 11.3 (22 mg, 0.10 mmol, 1.00 eq) koristi umesto 9.3 da se dobije 15 mg (50%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 302 (M+H)+ . 1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 10.50 (1H), 7.50-7.20 (m, 5H), 5.90 (m, 1H), 5.60 (m, 1H), 4.78 (m, 1H), 4.45 (s, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.05-3.90 (m, 2H), 3.90-3.80 (m, 1H), 2.45-2.10 (m, 2H), 1.55 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Primer 12, Pripremanje (S)-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)-6-(1-feniletilamino)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0090] Jedinjenje 12.1. tert-butil 4-(3-benzoilureido)piperidin-1-karboksilat. U rastvor benzoilizocijanata (4.8 g, 32.6 mmol) u CH2Cl2(180 mL) na 0°C doda se 4-amino-1-N-bocpiperidin (6.0 g, 30 mmol). Reakciona mešavina se meša na sobnoj temperaturi 4 h i koncentruje. Rezidua se tretira korišćenjem Et2O (100 mL). Precipitat se filtrira i ispere pomoću Et2O da se dobije 5.70 g (55%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 337 (M+H)+ .
[0091] Jedinjenje 12.2. tert-butil 4-ureidopiperidin-1-karboksilat. U mešavinu 12.1 (5.60 g, 16.1 mmol) u CH3OH (70 mL) i H2O (70 mL) doda se natrijum hidroksid (11.6 g, 290 mmol) u porcijama. Reakciona mešavina se meša na sobnoj temperaturi preko noći i zatim drži na refluksu 1 h. Mešavina se ohladi na sobnu temperaturu i koncentruje pod sniženim pritiskom da se ukloni CH3OH. Precipitat se filtrira, ispere korišćenjem H2O, i suši da se dobije 3.2 g (82%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 266 (M+Na)+ .
[0092] Jedinjenje 12.3. tert-butil 4-(2,4,6-triokso-tetrahidropirimidin-1(2H)-il)piperidin-1-karboksilat. U mešavinu 12.2 (3.63 g, 14.9 mmol), dietilmalonata (2.6 mL, 16.5 mmol, 1.1 eq.) i anhidrovanog etanola (60 mL) doda se NaOEt (21% u EtOH, 6.6 mL, 17.7 mmol, 1.2 eq.). Mešavina se drži na refluksu 14 h i koncentruje. Rezidua se preuzme u H2O (15 mL) i ispere korišćenjem EtOAc (2 x 30 mL). Vodeni sloj se izdvoji i pH se podesi na 5 korišćenjem koncentrovane HCl. Precipitat se filtrira, ispere korišćenjem H2O i suši dajući 3.70 g (80%) jedinjenja iz naslova u vidu beličaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 334 (M+Na)+ .
[0093] Jedinjenje 12.4. 6-hloro-3-(piperidin-4-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U mešavinu 12.3 (2.55 g, 8.19 mmol) i POCl3(10 mL, 100.65 mmol) doda se H2O (0.41 mL, 22.78 mmol) u kapima. Mešavina se meša na 120 °C 30 min i zatim koncentruje. Rezidua se pažljivo preuzme u ledenu vodu (20 g). U mešavinu se doda K2CO3(~8.0 g) u porcijama dok pH ne bude ~7. Precipitat se filtrira, ispere korišćenjem H2O (20 mL) i EtOAc (50 mL). Dobijeni materijal se suši da se dobije 1.45 g (77%) jedinjenja iz naslova u vidu beličaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 230 (M+H)+ .
[0094] Jedinjenje 12.5. 6-hloro-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U mešavinu 12.4 (380 mg, 1.65 mmol, 1.0 eq.) i CH2Cl2(8 mL) dodaju se Et3N (0.70 mL, 4.95 mmol, 3 eq.) i metansulfonil hlorid (0.23 mL, 2.5 mmol, 1.5 eq.). Mešavina se meša na sobnoj temperaturi 2 h i zatim se reakcija prekida korišćenjem H2O (3 mL) da se dobije precipitat. Precipitat se filtrira i ispere korišćenjem CH2Cl2(3 x 3 mL). Filtrat se koncentruje do ~ 1.5 mL. Filtracija drugog precipitata praćena je ispiranjem korišćenjem H2O (2 x 1 mL) i CH2Cl2(3 x 2 mL). Precipitati se kombinuju da se dobije 320 mg (63%) jedinjenja iz naslova u vidu beličaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 308 (M+H)<+>.
[0095] Jedinjenje 12. (S)-3-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)-6-(1- feniletilamino) pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Mešavina 12.5 (20 mg, 0.065 mmol) i (S)-α-metilbenzilamina (180 mg, 1.5 mmol, 23 eq.) meša se na 125 °C 1 h. Mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom, rastvori u CH3OH i filtrira. Filtrat se prečisti korišćenjem preparativne RP-HPLC uz eluiranje linearnim gradijentom 20% do 100% CH3CN u H2O (0.1% pufer sa mravljom kiselinom) tokom 40 min dajući 16 mg (63%) jedinjenja iz naslova u vidu beličaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 393 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.40 (br s, 1H), 7.35-7.25 (m, 4H), 7.15 (m, 1H), 6.55 (s, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.52 (m, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.70 -2.62 (m, 2H), 2.50-2.48 (m, 2H), 1.48-1.38 (m, 2H), 1.32 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
Primer 13. Pripremanje (S)-metil 4-(2.6-diokso-4-(1-feniletilamino)-2.3-dihidropirimidin-1(6H)-il)piperidin-1-karboksilata.
[0096] Jedinjenje 13.1. Metil 4-(4-hloro-2,6-diokso-2,3-dihidropirimidin-1(6H)-il)piperidin-1-karboksilat. U mešavinu 12.4 (115 mg, 0.5 mmol, 1.0 eq.) i CH2Cl2(2 mL) doda se Et3N (0.14 mL, 1.5 mmol, 3.0 eq.), zatim metil hloroformat (95 mg, 1.0 mmol, 2.0 eq.). Mešavina se meša na sobnoj temperaturi 1 h, razblaži korišćenjem CH2Cl2(8 mL), ispere zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(1 mL), H2O (1 mL), zasićenim rastvorom soli (1 mL), suši anhidrovanim Na2SO4i koncentruje da se dobije 105 mg (73%) beličaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 288 (M+H)+ .
[0097] Jedinjenje 13. (S)-metil 4-(2,6-diokso-4-(1-feniletilamino)-2,3-dihidropirimidin-1(6H)-il)piperidin-1-karboksilat. Mešavina 13.1 (58 mg, 0.20 mmol) i (S)-αmetilbenzilamina (240 mg, 1.5 mmol) meša se na 120 °C 0.5 h. Jedinjenje iz naslova se priprema korišćenjem procedure slične onoj koja se koristi za pripremanje 9 da se dobije 40 mg (63%) jedinjenja iz naslova u vidu beličaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 373 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 9.85 (s, 1H), 7.29-7.15 (m, 5H), 5.75 (br s, 1), 4.80 (m, 1H), 4.60 (s, 1H), 4.35 (m, 1H), 4.20 - 4.00 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 2.80 - 2.70 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.38 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Primer 14, Pripremanje 3-(R)-sec-butil-6-((S)-1-(3-metoksifenil)etilamino)pirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0098] Jedinjenje 14.1. (R)-1-sec-butilurea. Benzoil izocijanat (5.36 g, 36.5 mmol, 1.05 eq.) se rastvori u CH2Cl2(20 mL) i ohladi na 0 °C u vodenom kupatilu. (R)-butan-2-amin (2.54 g, 34.7 mmol, 1 eq.) u CH2Cl2(10 mL) pažljivo se dodaje uz mešanje. Mešavina se ostavi da se meša 3 h na sobnoj temperaturi. Kada se smatra da je reakcija završena, mešavina se koncentruje. Rezidua se suspenduje u Et2O (20 mL) i filtrira. Čvrsta supstanca se preuzme u mešavinu CH3OH i H2O, 1:1 (200 mL), što je praćeno dodavanjem NaOH (6.9 g, 174 mmol, 5 eq.). Reakcija se meša preko noći na sobnoj temperaturi. CH3OH evaporiše iz rastvora i dobijeni precipitat (1.66 g, 39%) se sakuplja. LC/MS: m/z (ES+) 117 (M+H)+ .
[0099] Jedinjenje 14.2. (R)-1-sec-butilpirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion. Jedinjenje 14.1 (1.66 g, 14.3 mmol, 1.0 eq.) rastvori se u EtOH (10 mL), i dodaju se dietil malonat (1.8 mL, 15.7 mmol, 1.1 eq.), i NaOEt (5.6 mL, 17.1 mmol, 1.2 eq.). Reakcija se meša na 80 °C 2 h i zatim ohladi na sobnu temperaturu. Doda se voda (20 mL), a zatim se ukloni EtOH evaporacijom. KHSO4(u višku) doda se da se zasiti vodeni sloj koji se onda ekstrahuje korišćenjem EtOAc. Kombinovani organski slojevi suše se anhidrovanim MgSO4i koncentruju dajući 1.6 g (61%) jedinjenja iz naslova u vidu sirove rezidue koja se koristi bez dodatnog prečišćavanja. LC/MS: m/z (ES-) 183 (M-H)-.
[0100] Jedinjenje 14.3. (R)-3-sec-butil-6-hloropirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Mešavina 14.2 (1.6 g, 8.7 mmol, 1 eq.) i POCl3(648 µL, 7.0 mmol, 0.8 eq.) u CH3CN (10 mL) meša se na 90 °C 2 h. Dodatni POCl3(0.8 eq.) doda se i meša na 90 °C 3 h. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu, pažljivo prekida korišćenjem CH3OH (10 mL), meša 30 minuta i prečišćava normalno-faznom HPLC 0-25% CH3OH/CH2Cl2, što je praćeno ispiranjem korišćenjem CH3OH. Proizvod i polazni materijal se koeluiraju. Mešavina se koncentruje, rezidua se preuzme u CH3CN (10 mL) i doda se POCl3(648 uL). Reakcija se meša na 90 °C 3 h i zatim ohladi na sobnu temperaturu. Reakcija se pažljivo prekine korišćenjem CH3OH (10 mL) i meša 30 minuta. Reakciona mešavina se prečisti normalno-faznom HPLC uz prethodne uslove, koncentruje i suši pod vakuumom da se dobije 450 mg (32%) jedinjenja iz naslova u vidu beličaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES-) 201 (M-H)-.
[0101] Jedinjenje 14. 3-(R)-sec-butil-6-((S)-1-(3-metoksifenil)etilamino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Mešavina 14.3 (150 mg, 0.74 mmol, 1.0 eq.) u čistom (S)-1-(3-metoksifenil)etanaminu (400 uL) meša se preko noći na 90 °C. Reakcija se prečisti korišćenjem preparativne RP-HPLC na Agilent sistemu uz gradijent 0-40% CH3CN u H2O tokom 45 min da se dobije 13 mg (6%) jedinjenja iz naslova u vidu beličaste čvrste supstance.
4
LC/MS: m/z (ES+) 318 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.79 (s, 1H), 7.28 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 6.94-6.88 (m, 2H), 6.84 (dd, J = 8.2, 1.7 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.72-4.59 (m, 1H), 4.47 (m, 1H), 4.35 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 1.98-1.84 (m, 1H), 1.61 (m, 1H), 1.39 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.70 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Primer 15. Pripremanje (S)-6-(1-feniletilamino)-3-(piridin-3-il)pirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0102] Jedinjenje 15.1. 1-(piridin-3-il)urea. Benzoil izocijanat (3.28 g, 22.3 mmol, 1.05 eq.) preuzme se u CH2Cl2(30 mL) i ohladi na -10 °C. Piridin-3-amin (2 g, 21.2 mmol, 1 eq.) dodaje se u porcijama uz mešanje. Mešavina se ostavi da se meša 3 h na sobnoj temperaturi. Kada se smatra da je reakcija završena, koncentruje se i preuzme u mešavinu CH3OH i H2O, 1:1 (100 mL), što je praćeno dodavanjem NaOH (4.25 g, 106.3 mmol, 5 eq.). Reakcija se ostavi da se meša preko noći na sobnoj temperaturi, koncentruje se do suvog, a zatim azeotropiše tri puta toluenom. Mešavina 10% CH3OH u EtOAc (100 mL) doda se čvrstoj supstanci i meša 10 minuta, a zatim filtrira. Čvrsta supstanca se suspenduje i filtrira još dva puta. Kombinovinai filtrati se još jednom filtriraju da se ukloni svaki mogući zaostali čvrsti materijal koji je prošao kroz filter, i zatim koncentruje. Rezidua se trituriše uz korišćenje EtOAc (5 mL) i suši pod vakuumom da se dobije 3.5 g sirovog materijala (beličasta čvrsta supstanca) koji se koristi bez dodatnog prečišćavanja. LC/MS: m/z (ES+) 138 (M+H)+ .
[0103] Jedinjenje 15.2. 1-(piridin-3-il)pirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion. Jedinjenje 15.1 (3.0 g, 21.8 mmol, 1.0 eq.) preuzme se u EtOH (20 mL), što je praćeno dodavanjem dietil malonata (2.75 mL, 24.1 mmol, 1.1 eq.), i NaOEt (8.5 mL, 26.3 mmol, 1.2 eq.). Reakcija se meša na 85°C preko noći i zatim ohladi na sobnu temperaturu. Voda (100 mL) se polako doda, što je praćeno pažljivim dodavanjem natrijum bikarbonata (8 g). Dobijena mešavina se ispere tri puta korišćenjem EtOAc. Vodeni sloj se koncentruje do 50 mL i doda se CH3OH (150 mL). Precipitat se ukloni filtracijom i filtrat se koncentruje. Dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, 0-25% CH3OH/CH2Cl2) da se dobije 1.70 g (38%) jedinjenja iz naslova u vidu svetložućkaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 206 (M+H)<+>.
[0104] Jedinjenje 15.3. 6-hloro-3-(piridin-3-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Mešavina 15.2 (700 mg, 3.41 mmol, 1.0 eq.) i POCl3(255 µL, 2.7 mmol, 0.8 eq.) u CH3CN (10 mL) meša se na 90 °C 2 h. Dodatni POCl3(0.8 eq) se doda i mešanje se nastavlja na 90 °C 2 h. Doda se još POCl3(1.6 eq.) što je praćeno pažljivim dodavanjem H2O (150 ul 2.5 eq.) Reakcija se meša preko noći na 90 °C. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, mešavina se filtrira i čvrsta supstanca se pažljivo ispere korišćenjem CH3OH (1 mL). Etil acetat (20 mL) se doda filtratu i dobijeni precipitat se sakupi filtracijom i suši pod vakuumom da se dobije 230 mg (30%) jedinjenja iz naslova u vidu svetložućkaste čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 224 (M+H)<+>.
[0105] Jedinjenje 15. (S)-6-(1-feniletilamino)-3-(piridin-3-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion.
Mešavina 15.3 (100 mg, 0.45 mmol, 1 eq.) u čistom (S)-(-)-α- metilbenzilaminu (500 uL) meša se preko noći na 100 °C. Posle hlađenja, reakcija se prečisti korišćenjem preparativne RP-HPLC na Agilent sistemu uz gradijent 0-40% CH3CN u H2O tokom 45 min, praćeno drugim prečišćavanjem na preparatornoj TLC ploči (2000 um) sa 7% CH3OH /CH2Cl2da se dobije 39.5 mg (28%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 309 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11.15 (s, 1H), 8.49 (dd, J = 4.8, 1.4 Hz, 1H), 8.34 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.65-7.58 (m, 1H), 7.44 (dd, J = 8.1, 4.8 Hz, 1H), 7.37 (m, 5H), 7.26 (m, 1H), 4.61-4.53 (m, 1H), 4.48 (s, 1H), 1.39 (d, J= 6.8 Hz, 3H).
Primer 16. Pripremanje (S)-3-(izoksazol-3-il)-6-(1–feniletilamino)pirimidin-2.4(1H.3H)-diona (16).
Jedinjenje iz naslova priprema se korišćenjem postupaka sličnih onima koji su korišćeni za pripremanje jedinjenja 15 osim što se izoksazol-3-amin koristi umesto piridin-3-amina. LC/MS: m/z (ES+) 299 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.96 (s, 1H), 7.38 (d, J = 3.9 Hz, 4H), 7.28 (dd, J = 8.4, 4.3 Hz, 2H), 7.10 (s, 1H), 6.63 (s, 1H), 4.74-4.52 (m, 1H), 4.48 (s, 1H), 1.44 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
Primer 17. Pripremanje (S)-6-((1-(3-(1H-pirazol-1-il)fenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona (17).
[0107] Jedinjenje iz naslova priprema se Ullmanovim kuplovanjem (P.E. Fanta. "The Ullmann Synthesis of Biaryls". Synthesis, 1974, 9-21) 35 sa 1H-pirazolom u prisustvu bakar jodida, cezijum karbonata, i trans-N,N'-dimetilcikloheksan-1,2-diamina. LC/MS: m/z (ES+) 340 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, CD3OD): δ ppm 8.26 (s, 1H), 7.70 (m, 2H), 7.66 (m, 1H), 7.51 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 6.55 (s, 1H), 5.05 (m, 1H), 4.62 (m, 1H), 1.58 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.37 (m, 6H).
Primer 18. Pripremanje dodatnih pirimidindionskih jedinjenja.
[0108] Jedinjenja u Tabeli 1 pripremljena su prema primerima opisanim ranije u ovom tekstu. U Tabeli 1, jedinjenja 19R, 20R, 25, 36, 44, 46 i 47 su referentna jedinjenja.
Tabela 1. Jedinjenja i analitički podaci
4
4
4
Primer 48. Pripremanje (S)-6-((1-feniletil)amino)-3-propilpirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
4
[0109] Jedinjenje 48.1. 1-propilurea. U mešani rastvor n-propilamina (2.15 g, 36.5 mmol, 1.00 eq) u CH2Cl2(35 mL) na 0°C doda se u kapima trimetilsilil izocijanat (4.94 g (85% čistoća), 36.5 mmol, 1.00 eq). Reakciona mešavina se meša na sobnoj temperaturi 72 h i zatim ohladi na 0 °C. Ohlađena mešavina se gasi dodavanjem CH3OH (10 mL) u kapima i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena čvrsta supstanca se suspenduje u Et2O (30 mL) i filtrira. Čvrsta supstanca se dodatno ispere korišćenjem Et2O (30 mL) i suši da se dobije 2.0 g (38%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.
[0110] Jedinjenje 48.2. 1-propilpirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion. U 48.1 (600 mg, 5.88 mmol, 1.00 eq) u CH3OH (1 mL) dodaju se dietil malonat (960 mg, 6.0 mmol, 1.02 eq.) i natrijum metoksid (1 mL, 25% NaOCH3u CH3OH, težinski). Reakciona mešavina se greje u mikrotalasnom reaktoru na 130 °C 1 h. Mešavina se ohladi i pažljivo se podesi na pH=3 koncentrovanom HCl. Isparljive materije se uklone i doda se H2O (10 mL). Čvrsta supstanca precipitira i filtrira se. Ovo se zatim dodatno ispere H2O (10 mL) i suši da se dobije 560 mg (56%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.
[0111] Jedinjenje 48.3. 6-hloro-3-propilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Jedinjenje 48.2 (560 mg, 3.30 mmol) i POCl3(2 mL) dodaju se u sud sa debelim zidom za rad pod pritiskom, koji se zatim hermetički zatvori. Dobijeni rastvor se greje do 70 °C i meša 50 minuta iza zaklona zbog opasnosti od eksplozije. Reakciona mešavina se ohladi i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijenoj rezidui se doda CH2Cl2(30 mL) koji se zatim ukloni pod sniženim pritiskom. Dodavanje i isparavanje CH2Cl2(30 mL) izvedu se još jednom i tada se dobijena
4
rezidua razblaži korišćenjem CH2Cl2(50 mL). U organski sloj se pažljivo doda zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(50 mL). Slojevi se razdvoje i organski sloji se dalje ispira korišćenjem H2O (30 mL) i zasićenog rastvora soli (30 mL). Organski sloj se koncentruje i prečisti fleš-hromatografijom na koloni (silika gel, uz korišćenje 10% EtOAc u CH2Cl2) da se dobije 160 mg (26%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.
[0112] Jedinjenje 48. (S)-6-((1-feniletil)amino)-3-propilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 48.3 (160 mg, 0.85 mmol, 1.0 eq.) u 1,4-dioksanu (1.5 mL) dodaju se Et3N (200 µL) i (S)- α-metilbenzilamin (235 mg, 1.94 mmol, 2.3 eq.). Mešavina se greje u mikrotalasnom reaktoru na 130 °C 2 h. Mešavina se hladi i koncentruje. Dobijena rezidua se tretira mešavinom H2O:CH3CN, 8:3, što rezultira precipitacijom. Čvrsta supstanca se filtrira i sukcesivno ispira korišćenjem H2O (10 mL) i EtOAc (10 mL). Čvrsta supstanca se suši dajući 67 mg (29%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 274 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.92 (br s, 1H), 7.36-7.22 (m, 5H), 6.54 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.50 (kvin, J = 6.7 Hz, 1H), 4.35 (s, 1H), 3.54 (dd, J = 8.0, 6.9 Hz, 2H), 1.42-1.36 (m, 5H), 0.76 (t, J = 7.6 Hz, 3H).
Primer 49. Pripremanje (S)-3-(3.5-difluoronfenil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0113] Jedinjenje 49.1. 1-(3,5-difluorofenil)urea. U mešani rastvor 3,5- difluoroanilina (4.0 g, 31 mmol, 1.00 eq) u CH2Cl2(50 mL) pod argonom na sobnoj temperaturi doda se u kapima trimetilsilil izocijanat (3.56 g, 30.90 mmol, 1.00 eq). Reakciona mešavina se meša preko noći i reakcija gasi dodavanjem CH3OH (50 mL) u kapima. Reakciona mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, eluiranje korišćenjem CHCl3/CH3OH (10:1 do 7:1)) da se dobije 2.0 g (38%) jedinjenja iz
4
naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.96 (s, 1H), 7.16-7.10 (m, 2H), 6.72-6.66 (m, 1H), 6.07 (br s, 2H).
[0114] Jedinjenje 49.2. 1-(3,5-difluorofenil)pirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion. U mešani rastvor 49.1 (1.6 g, 0.0093 mol, 1.1 eq) u CH3OH (20 mL) dodaju se dietil malonat (1.4 g, 0.0087 mol, 1.0 eq) i natrijum metoksid (1.25 g, 0.0231 mol, 2.7 eq). Dobijena mešavina se meša preko noći na 65 °C. Posle hlađenja na ambijentalnu temperaturu, pH se pažljivo podesi na 5 korišćenjem vodenog rastvora 1N HCl. Dobijeni rastvor se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3 x 50 mL). Organski slojevi se kombinuju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Rezidua se ispere korišćenjem CH3OH (50 mL) i dobijena čvrsta supstanca se izoluje filtracijom dajući 700 mg (31%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-nMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11.66 (s, 1H), 7.43-7.35 (m, 1H), 7.11-7.08 (m, 2H), 3.77 (s, 2H).
[0115] Jedinjenje 49.3. 6-hloro-3-(3,5-difluorofenil)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 25 mL-ski flakon sa okruglim dnom pod argonom, koji sadrži 49.2 (740 mg, 3.08 mmol, 1.00 eq) dodaju se trietilbenzilamonijum hlorid (840 mg, 1.20 eq) i POCl3(3 mL). Dobijeni rastvor se meša 4 h na 50 °C. Reakcija se ohladi i prekida pažljivi dodavanjem vode/leda (20 mL). Vrednost pH rastvora podesi se na 5 korišćenjem 2 N natrijum hidroksida. Dobijeni rastvor se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (2 x 10 mL) i organski slojevi se kombinuju. Organski sloj se ispere zasićenim rastvorom soli (10 mL), suši preko anhidrovanog MgSO4, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ovim nastaje 500 mg (sirovo) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.60 (br, 1H), 7.38-7.32 (m, 1H), 7.21-7.16 (m, 2H), 6.05 (s, 1H).
[0116] Jedinjenje 49. (S)-3-(3,5-difluorofenil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 49.3 (200 mg, 0.77 mmol) doda se (S)-α-metilbenzilamin (1.5 mL). Dobijeni rastvor se meša 2 h na 120 °C. Reakciona mešavina se razblaži korišćenjem DMF (3 mL) i sirovi proizvod (100 mg) se prečišćava preparativnom RP-HPLC uz sledeće uslove: XBridge Prep C18 OBD kolona, 5 um, 19*150 mm; mobilna faza, H2O sa 0.05%TFA i CH3CN (40.0% CH3CN do 90.0% za 10 min). Ovim se dobija 21.6 mg (8%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 344 (M+H)<+>.<1>H- NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.25 (br s, 1H), 7.38-7.35 (m, 4H), 7.28-7.21 (m, 2H), 7.03-6.98 (m, 2H), 6.76 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.59 (qvin, J = 6.7 Hz, 1H), 4.50 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 1.42 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Primer 50. Pripremanje (S)-3-izopropil-6-((1-(m-tolil)etil)amino)pirimidin-2.4(1H.3H)-diona.
[0117] Jedinjenje 50.1. (R,E)-2-metil-N-(1-(m-tolil)etiliden)propan-2-sulfinamid. U mešani rastvor 1-(3-metilfenil)etanona (1.61 g, 12.0 mmol, 1.00 eq.) i (R)-(+)-2-metil-2-propansulfinamida (1.94 g, 14 mmol, 1.33 eq.) u THF (50 mL) doda se Ti(OEt)4(3.19 g, 14 mmol, 1.17 eq.) u kapima. Reakciona mešavina se meša 16 h na 60 °C, ohladi na sobnu temperaturi i reakcija se prekida zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL). Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se dodatno ekstrahuje korišćenjem EtOAc (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi se koncentruju i dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, eluiranje korišćenjem 0-5% CH3OH u CH2Cl2) da se dobije 1.51 g (53%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 238 (M+H)<+>.
1
[0118] Jedinjenje 50.2. (R)-2-metil-N-((S)-1-(m-tolil)etil)propan-2-sulfinamid. U rastvor 50.1 (1.51 g, 6.37 mmol) u THF (30 mL) na -78 °C u atmosferi N2doda se L-selektrid (u kapima, 10 mL, 1.0 M u THF, 10 mmol). Reakciona mešavina se greje do 0 °C, meša 1 h, i pažljivo gasi zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (30 mL). Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se dodatno ekstrahuje korišćenjem EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi se koncentruju i dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, eluiranje korišćenjem 0-5% CH3OH u CH2Cl2) da se dobije 0.85 g (56%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 240 (M+H)+ .
[0119] Jedinjenje 50.3. (S)-1-(m-tolil)etan-1-amin hidrohlorid. U apsolutni EtOH (10 mL) doda se AcCl (1.5 mL, u kapima). Mešavina se meša 10 minuta i zatim se doda u 50.2 (0.85 g, 3.56 mmol) u EtOH (3 mL). Reakciona mešavina se meša 2 h na ambijentalnoj temperaturi i koncentruje. Dobijena čvrsta supstanca se suspenduje u Et2O i filtrira. Čvrsta supstanca se ispere dodatnim Et2O i suši dajući 402 mg (66%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 136 (M+H)<+>.
[0120] Jedinjenje 50.4. (S)-1-(m-tolil)etan-1-amin. U mešani rastvor 50.3 (205 mg, 1.20 mmol) u CH2Cl2(10 mL) doda se MP-karbonat (10 g, 3.18 mmol/g). Reakciona mešavina se meša na sobnoj temperaturi 1 h i zatim filtrira. Čvrste kuglice se isperu sa još 10 mL CH2Cl2i kombinovani filtrati se koncentruju dajući jedinjenje iz naslova koje se dalje koristi bez prečišćavanja.
2
[0121] Jedinjenje 50. (S)-3-izopropil-6-((1-(m-tolil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 50.4 (pretpostavljen ~1.2 mmol iz prethodne reakcije, 2.0 eq.) u 0.5 do 2.0 mL epruveti za rad u mikrotalasnom reaktoru doda se jedinjenje 1.3 (110 mg, 0.59 mmol, 1.0 eq.). Epruveta za rad u mikrotalasnom reaktoru zatvori se hermetički i greje na 120 °C iza zaklona zbog opasnosti od eksplozije, 2.5 h. Posle hlađenja (na ~60 °C), u reakcionu mešavinu se doda NMP (2.5 mL). Mešavina se sonifikuje i zagreje (do ~60 °C) dok se čvrsta supstanca potpuno ne rastvori. Dobijeni rastvor se ohladi na 40 °C i doda se mešavina H2O/CH3CN, 3:1 (5 mL). Čvrsta supstanca precipitira i sakupi se filtracijom. Svetlobež čvrsta supstanca se zatim ispere korišćenjem H2O i suši dajući 97 mg (57%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 288 (M+H)<+>.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.73 (br s, 1H), 7.22 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.12-7.04 (m, 3H), 6.45 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.90-4.86 (m, 1H), 4.42 (q, J = 6.7 Hz, 1H), 4.31 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.36 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.27-1.23 (m, 6H).
Referentni primer 51. Pripremanje (S)-6-((1-(4-fluorofenil)propan-2-il)amino)-3-izopropilpirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0122] Jedinjenje 51.1. 2-(4-fluorofenil)-N-metoksi-N-metilacetamid. U mešani rastvor 2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline (15 g, 97.32 mmol, 1.00 eq) u CH2Cl2(300 mL) dodaju se metoksi(metil)amin hidrohlorid (11.1 g, 113.79 mmol, 1.20 eq), 4-dimetilaminopiridin (12 g, 98.22 mmol, 1.00 eq), 1-etil-3-(3- dimetilaminopropil) karbodiimid hidrohlorid (28.2 g, 147.10 mmol, 1.50 eq) i DIEA (37.5 g, 290.14 mmol, 3.00 eq). Dobijeni rastvor se meša na sobnoj temperaturi 16 h i zatim razblaži korišćenjem EtOAc (150 mL). Organski slojevi se isperu vodenim rastvorom 1 N HCl (2 x 150 mL) i zasićenim rastvorom soli (2 x 150 mL). Zatim se suši preko anhidrovanog Na2SO4i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirova rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, eluiranje korišćenjem EtOAc/petrol etar (1:3)). Ovim se dobija 18 g (88%) jedinjenja iz naslova u vidu žutog ulja.<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 7.29-7.25 (m, 2H), 7.03-6.99 (m, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.21 (s, 3H).
[0123] Jedinjenje 51.2. 2-(4-fluorofenil)acetaldehid. U mešani rastvor 51.1 (3 g, 15.21 mmol, 1.00 eq) u THF (60 mL) pod argonom na -10 °C doda se LiAlH4(1.15 g, 30.30 mmol, 2.00 eq) u nekoliko partija (PAŽLJIVO... EGZOTERMNA REAKCIJA). Dobijeni rastvor se meša 1 h na sobnoj temperaturi pre nego što se ohladi na -10 °C. Reakcija se zatim prekine pažljivim dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (50 mL). Dobijena čvrsta supstanca se filtrira i filtrat se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3 x 50 mL). Organski slojevi se kombinuju, isperu zasićenim rastvorom soli (50 mL), suše anhidrovanim Na2SO4i koncentruju pod sniženim pritiskom dajući 2.5 g (sirovo) jedinjenja iz naslova u vidu žutog ulja.
[0124] Jedinjenje 51.3. (S)-1-(4-fluorofenil)propan-2-amin hidrohlorid. Jedinjenje iz naslova sintetiše se po metodima koji su opisani za pripremanje 5.3, uz korišćenje 51.2 umesto 3,5-difluorobenzaldehida. LC/MS: m/z (ES+) 154 (M+H)+ .
[0125] Jedinjenje 51.4. (S)-1-(4-fluorofenil)propan-2-amin. U vodeni rastvor 1 N NaOH (5 mL) doda se 51.3 (300 mg, 1.59 mmol). Dobijena mešavina se meša jedan sat na 25 °C. Dobijeni rastvor se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (2 x 10 mL). Organski slojevi se suši preko
4
anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom dajući 160 mg (65%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 154 (M+H)+ .
[0126] Jedinjenje 51. (S)-6-((1-(4-fluorofenil)propan-2-il)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U mešani rastvor 51.4 (160 mg, 1.04 mmol, 2.00 eq) u NMP (0.5 mL) dodaju se 1.3 (99 mg, 0.52 mmol, 1.00 eq) i protonski sunđer (168 mg, 0.78 mmol, 1.50 eq). Dobijeni rastvor se meša 5 h na 100 °C u uljanom kupatilu. Reakciona mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom. Rezidua (100 mg) se prečisti preparativnom RP-HPLC da se dobije 30 mg (19%) jedinjenja iz naslova u vidu sive čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 306 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.81 (br s, 1H), 7.27 (dd, J = 8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.17-7.12 (m, 2H), 5.89 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.00- 4.92 (m, 1H), 4.58 (s, 1H), 3.69-3.65 (m, 1H), 2.74 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.31 (d, J = 6.8 Hz, 6H), 1.08 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
Referentni primer 52, Pripremanje (R)-3-izopropil-6-((2.2.2-trifluoro-1-feniletil)amino)pirimidin-2.4(1H,3H)-diona (52),
[0127] U 0.2-0.5 mL fiolu za rad u mikrotalasnom reaktoru dodaju se 1.3 (85 mg, 0.45 mmol) i (R)-2,2,2- trifluoro-1-feniletan-1-amin (200 μL, u višku). Reakciona mešavina se hermetički zatvori i greje na 180 °C u mikrotalasnom reaktoru 40 minuta. Reakciona mešavina se ohladi na ambijentalnu temperaturu i zatim se doda NMP (1 mL) da se čvrsta supstanca potpuno rastvori. Zatim se doda mešavina H2O/CH3CN, 2:1 (6 mL), što za rezultat ima precipitaciju. Čvrsta supstanca se izoluje filtracijom, ispere korišćenjem H2O i suši dajući 50 mg (34%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 328 (M+H)<+>.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.79 (br s, 1H), 7.50-7.40 (m, 5H), 5.66-5.56 (m, 2H), 4.92-4.87 (m, 2H), 1.28-1.25 (m, 6H).
Referentni primer 53. Pripremanje 3-((R)-1-(benziloksi)propan-2-il)-6-(((S)-1– feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0128] Jedinjenje 53.1. (R)-1-(1-hidroksipropan-2-il)urea. U mešani rastvor (R)-(-)-2-amino-1-propanola (0.65 g, 8.68 mmol, 1 eq.) u CH2Cl2(10 mL) pod N2na 0°C dodaje se u kapima trimetilsilil izocijanat (1.00 g, 8.68 mmol, 1.0 eq.). Reakciona mešavina se meša preko noći uz sporo zagrevanje do sobne temperature. Posle hlađenja na 0 °C, u kapima se doda CH3OH (10 mL). Dobijeni rastvor se meša 2 h na sobnoj temperaturi i zatim se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije jedinjenje iz naslova (1.02 g, 99%) u vidu bele čvrste supstance.
[0129] Jedinjenje 53.2. (R)-1-(1-(benziloksi)propan-2-il)urea. U suspenziju natrijum hidrida (0.52 g, 13.2 mmol, 1.5 eq.) u THF (10 mL) na 0 °C doda se 53.1 (1.02 g, 8.67 mmol, 1 eq.). Reakciona mešavina se meša 20 minuta na 0 °C pod N2pre nego što se doda benzil bromid (1.03 mL, 8.67 mmol, 1 eq.). Reakciona mešavina se meša preko noći uz sporo zagrevanje do sobne temperature. Reakciona mešavina se gasi korišćenjem H2O (3 mL) i ekstrahuje u EtOAc (15 mL), suši anhidrovanim Na2SO4, filtrira i koncentruje. Dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (10% CH3OH u CH2Cl2) da se dobije 510 mg (28%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 209 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 7.42 - 7.27 (m, 5H), 4.79 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 3.91 (s, 1H), 3.51 (dd, J = 9.4, 3.9 Hz, 1H), 3.40 (dd, J = 9.2, 5.3 Hz, 1H), 1.19 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[0130] Jedinjenje 53.3. (R)-1-(1-(benziloksi)propan-2-il)pirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion. U fiolu za rad u mikrotalasnom reaktoru koja sadrži 53.2 (0.51 g, 2.42 mmol, 1 eq.) u CH3OH (10 mL) doda se dietil malonat (2.55 g, 2.55 mmol, 1.05 eq.) zatim natrijum metoksid (25% tež. rastv. u CH3OH, 1.31 g, 6.06 mmol, 2.5 eq.). Fiola se zaklopi i reakciona mešavina se greje u mikrotalasnom reaktoru 15 minuta na 150 °C. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, reakcionamešavina se gasi korišćenjem H2O (2 mL) i pH se podesi na 3 koncentrovanom HCl. Reakciona mešavina se prenese u flakon sa okruglim dnom i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (5% CH3OH u CH2Cl2) da se dobije 0.62 g (92%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 277 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 7.99 (s, 1H), 7.38-7.22 (m, 5H), 5.16-5.11 (m, 1H), 4.52 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.45 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.02 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 3.56 (q, J = 1.57 Hz, 2H), 1.37 (d, J = 7.00 Hz, 3H).
[0131] Jedinjenje 53.4. (R)-3-(1-(benziloksi)propan-2-il)-6-hloropirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U fiolu za rad u mikrotalasnom reaktoru koja sadrži 53.3 (0.25 g, 0.91 mmol, 1 eq.) dodaju se trietilbenzilamonijum hlorid (0.28 g, 1.26 mmol, 1.4 eq.) i POCl3(1mL). Fiola se zaklopi i reakciona mešavina se greje u mikrotalasnom reaktoru 1 minut na 130 °C. Reakciona mešavina se prenese u flakon sa okruglim dnom i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se rastvori u CH2Cl2(5 mL) i voda (2 mL) se pažljivo doda. Mešavina se meša 10 minuta. Slojevi se razdvoje i organski sloj se suši korišćenjem Na2SO4, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se prečisti flešhromatografijom (silika gel, 5% CH3OH u CH2Cl2) da se dobije 150 mg (55%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 295 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 10.27 (s, 1H), 7.36-7.20 (m, 5H), 5.32- 5.21 (m, 2H), 4.57 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.48 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 10.0, 9.2 Hz, 1H), 1.40 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[0132] Jedinjenje 53. 3-((R)-1-(benziloksi)propan-2-il)-6-(((S)-1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U fiolu za rad u mikrotalasnom reaktoru koja sadrži (S)- α-metilbenzilamina (1.5 mL) doda se 53.4 (0.12 g, 0.42 mmol). Fiola se zaklopi i reakciona mešavina se greje u mikrotalasnom reaktoru 10 minuta na 150 °C. Posle hlađenja, reakciona mešavina se filtrira kroz jastuče od silika gela (10% CH3OH u CH2Cl2) i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se rastvori u CH2Cl2(10 mL) i ispere korišćenjem 10% HCl (5 mL). Organski sloj se suši anhidrovanim Na2SO4, filtrira i koncentruje da se obezbedi 150 mg (94%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 380 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 9.96 (br s 1H), 7.35- 7.24 (m, 10H), 4.70 (br s, 1H), 4.53-4.41 (m, 4H), 4.03-3.99 (m, 1H), 3.65-3.61 (m, 1H), 1.49 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.37 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
Referentni primer 54, Pripremanje 3-((R)-1-hidroksipropan-2-il)-6-(((S)-1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona (54).
[0133] U rastvor 53 (0.10 g, 0.26 mmol, 1 eq.) u EtOH (2 mL) doda se paladijum na ugljeniku (10 tež. % punjenje (suva osnova), matriks - aktivni ugalj, vlažna podloga, Degussa tip, 0.025 g). Reakcioni flakon se prečisti azotom i poveže sa H2(g)balonom. Reakciona mešavina se vakumira i zatim napuni H2(g). Ovaj proces pumpanja/prečišćavanja ponavlja se tri puta i reakciona mešavina se meša 4 h na sobnoj temperaturi. Posle prečišćavanja azotom, reakciona mešavina se filtrira i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se suspenduje u CH3CN (2 mL) i precipitat se izoluje filtracijom. Precipitat se rastvori u CH2Cl2: CH3OH (1:1, 2 mL) i filtrira kroz .2 µM PTFE 25 mm filter i koncentruje pod sniženim pritiskom dajući 27 mg (35%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 290 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 9.67 (s, 1H), 7.35-7.24 (m, 5H), 5.64 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.08-5.04 (m, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.42-4.35 (m, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.04-3.91 (m, 1H), 3.78-3.68 (m, 1H), 1.50 (d, J = 6.70 Hz, 3H), 1.35 (d, J = 7.00 Hz, 3H).
Referentni primer 55. Pripremanje (S)-3-izopropil-6-((1-(3-(trifluorometil)fenil)etil)amino) pirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0134] Jedinjenje 55.1. (S)-1-(3-(trifluorometil)fenil)etan-1-amin hidrohlorid. Jedinjenje iz naslova sintetiše se prema metodima opisanim za pripremanje 5.3, uz korišćenje 3-(trifluorometil)benzaldehida umesto 3,5- difluorobenzaldehida.
[0135] Jedinjenje 55. (S)-3-izopropil-6-((1-(3-(trifluorometil)fenil)etil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U mešani rastvor 55.1 (59.8 mg, 0.27 mmol, 1.00 eq) u DMSO (1.5 mL) u atmosferi inertnog gasa dodaju se Et3N (0.2 mL) i 1.3 (50 mg, 0.27 mmol, 1.00 eq). Dobijeni rastvor se meša 6 h na 120 °C u uljanom kupatilu. Posle hlađenja, mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijena rezidua (75 mg) se prečisti preparativnom RP-HPLC dajući 6.5 mg (7%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 342 (M+H)+ . 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d6): δ ppm 7.78 (s, 1H), 7.74-7.60 (m, 3H), 7.20 (br, 1H), 6.02 (br, 1H), 4.96 (dt, J = 10.1, 5.1 Hz, 1H), 4.67-4.64 (m, 1H), 4.36 (s, 1H), 1.44 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 1.31-1.28 (m, 6H).
Primer 56. Pripremanje (S)-3-izopropil-6-((1-(2-cijanofenil)etil)amino)pirimidin-2.4(1H.3H)-diona (56).
56.1
[0136] Intermedijar 56.1 priprema se korišćenjem potupaka sličnih onima za pripremanje jedinjenja 35, uz korišćenje 1.3 i (S)-1-(2-bromofenil)etan-1-amin hidrohlorida (sintetisanog iz odgovarajućeg 2-bromobenzaldehida korišćenjem metoda opisanih za primer 6.3). U mešani rastvor 56.1 (40 mg, 0.11 mmol, 1.00 eq, ) u DMF (2 mL) dodaju se Zn(CN)2(20 mg, 0.17 mmol, 1.50 eq) i tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (131 mg, 0.11 mmol, 0.20 eq). OPREZ: REAKCIJA SADRŽI CIJANID. Dobijeni rastvor se meša u atmosferi argona na 100 °C u uljanom kupatilu 2 h. Posle hlađenja, reakcija se gasi zasićenim vodenim rastvorom FeSO4(5 mL). Dobijena mešavina se razblaži korišćenjem EtOAc (20 mL) i ispere zasićenim vodenim rastvorom FeSO4(2 x 20 mL). Organski sloj se suši anhidrovanim Na2SO4, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod (5 mg) se prečisti hiralnom preparativnom HPLC uz sledeće uslove: kolona Phenomenex Fux-2 5μ Cellulose-2, 30* 150 mm; mobilna faza, heksani i EtOH (zadržavanje 50.0% EtOH za 35 min); što za rezultat ima 2.1 mg (6%) jedinjenja iz naslova. FC/MS: m/z (ES+) 299 (M+H)+ . 1H-NMR (300 MHz, CD3CN): δ ppm 8.59 (br s, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.61-7.56 (m, 1H), 7.48-7.45 (m, 2H), 5.09-4.94 (m, 3H), 1.46 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.34-1.26 (m, 6H).
Referentni primer 57. Pripremanje (S)-3-benzil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0137] Jedinjenje 57.1. 3-etoksi-3-okso-1-(1-etoksi)propan-1-iminijum hlorid. U mešani rastvor etil cijanoacetata (5.0 g, 44 mmol) u anhidrovanom Et2O (5 mL) doda se apsolutni EtOH (3 mL). Reakciona mešavina se ohladi na 0 °C i gasoviti HCl se uvodi 10 minuta. Reakciona mešavina se zagreje do sobne temperature i meša 16 h. Beli precipitat koji se formira filtrira se i ispere korišćenjem Et2O (40 mL) i suši dajući (6.99 g) jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 160 (M+H)<+>.
[0138] Jedinjenje 57.2. Etil (S,E/Z)-3-amino-3-((1-feniletil)amino)akrilat. U mešani rastvor 57.1 (585 mg, 3.0 mmol) u EtOH (15 mL) dodaju se DIEA (0.8 mL), i (S)- αmetilbenzilamin (290 mg, 2.4 mmol). Reakcija se meša 16 h i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti fleš-hromatografijom na koloni (silika gel, eluiranje korišćenjem CH3OH u CH2Cl2(0 do 10%)) da se dobije 0.57 g (98%) jedinjenja iz naslova u vidu bistrog ulja. NMR analiza pokazuje da je proizvod mešavina E/Z izomera. LC/MS: m/z (ES+) 235 (M+H)<+>.
[0139] Jedinjenje 57.3. Etil (S,Z)-3-(3-benzilureido)-3-((1- feniletil)amino)akrilat. Dve reakcije se postave paralelno i kasnije kombinuju jer obe za rezultat imaju formiranje proizvoda (putem HPLC). U prvoj reakciji, benzil izocijanat (150 μL, 1.2 mmol) se doda u mešani rastvor 57.2 (143 mg, 0.61 mmol) u CH3CN (1 mL). Posle 10 min., doda se DIEA (300 μL). Reakcija se meša još 10 min i prekida korišćenjem H2O (12 mL). Čvrsta supstanca precipitira i uklanja se filtracijom. U drugoj reakciji, benzil izocijanat (150 μL, 1.2 mmol) se doda u mešani rastvor 57.2 (143 mg, 0.61 mmol) kao i DIEA (300 μL) u CH3CN (1 mL). Posle 10 min, reakciona mešavina se gasi korišćenjem H2O (10 mL). Dobijena mešavina se razblaži pomoću EtOAc (40 mL) i slojevi se razdvoje. U organski sloj doda se filtrat iz prve reakcije. Slojevi se razdvoje i organski slojevi se koncentruju dajući jedinjenje iz naslova koje se koristi bez dodatnog prečišćavanja.
[0140] Jedinjenje 57. (S)-3-benzil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Dve reakcije se izvode i kasnije kombinuju pošto obe za rezultat imaju formiranje proizvoda (putem HPLC). U prvoj reakciji se koristi 1/3 sirovog 57.3 u CH3OH (1 mL). Ovo se greje u mikrotalasnom reaktoru na 120 °C 10 min. Preostale 2/3 sirovog 57.3 u CH3OH (2 mL) greju se u mikrotalasnom reaktoru na 120°C 20 min. Posle hlađenja na ambijentalnu temperaturu, reakcije se kombinuju i CH3OH se uklanja pod sniženim pritiskom. Mešavina 50/50 CH3CN/H2O sa 0.1% TFA (5 mL) doda se rezultujućoj rezidui. Čvrsta supstanca precipitira i filtrira se. Dobijena braon čvrsta supstanca se ispira korišćenjem EtOAc dajući 7 mg
1
jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 322 (M+H)<+>.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.05 (br s, 1H), 7.35-7.31 (m, 4H), 7.26- 7.16 (m, 6H), 6.61 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.52 (kvin, J = 6.8 Hz, 1H), 4.42 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 1.39 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Primer 58. Pripremanje (S)-3-(2,6-difluorofenil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2.4(1H.3H)-diona (58).
[0141] Jedinjenje iz naslova se sintetiše prema malo modifikovanom postupku opisanom u Primeru 50. Ovde se 1,4-dioksan koristi kao rastvarač i reakcija se greje na 110 °C 16 h. Dobijena mešavina se hladi i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti preparativnom RP-HPLC dajući 19 mg jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 344 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.44 (br s, 1H), 7.52-7.42 (m, 2H), 7.39-7.36 (m, 3H), 7.34-7.16 (m, 3H), 6.91 (br s, 1H), 4.65-4.56 (m, 1H), 4.52 (s, 1H), 1.43 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
Primer 59. Pripremanje (S)-6-((1-(2,6-difluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0142] Jedinjenje 59.1. 2,6-difluorobenzaldehid. Jedinjenje iz naslova se sintetiše prema metodima opisanim za pripremanje 51.2. Ovde se komercijalno dostupna 2,6-difluorobenzoeva kiselina koristi umesto 2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline.
2
[0143] Jedinjenje 59.2. (S)-1-(2,6-difluorofenil)etan-1-amin hidrohlorid. Jedinjenje iz naslova se sintetiše prema metodima opisanim za pripremanje 5.3. Ovde, 59.1 se koristi umesto 3,5-difluorobenzaldehida.
[0144] Jedinjenje 59. (S)-6-((1-(2,6-difluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Reakcija 59.1 sa 1.3 izvodi se na sličan način kao postupak opisan u Primeru 51. Ovde se, međutim, reakciona mešavina greje na 130 °C 5 h. Analiza reakcione mešavine hiralnom HPLC pokazuje netrivijalne količine enantiomera. Razdvajanje enantiomera se izvodi korišćenjem preparativne hiralne HPLC sa izokratskom mešavinom EtOH:heksan (1:4) kao eluenta sa Phenomenex Lux-2 5µ Cellulose-2, 30* 150 mm kolone (40 min prolaz). LC/MS: m/z (ES+) 310 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.80 (br s, 1H), 7.45-7.41 (m, 1H), 7.18-7.14 (m, 2H), 6.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.94-4.88 (m, 1H), 4.79 (kvint, J = 7.6 Hz, 1H), 4.41 (s, 1H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.30-1.26 (m, 6H).
Referentni primer 60. Pripremanje (R)-6-((1-(2,6-difluorofenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona (60R).
[0145] Jedinjenje iz naslova stvara se kao sporedni proizvod hemijske reakcije izvedene u Primeru 59. Izolovano je preparativnom hiralnom HPLC sa izokratskom mešavinom EtOH:heksan (1: 4) kao eluentom sa Phenomenex Lux-2 5 µ Cellulose-2, 30* 150 mm kolone (40 min prolaz). LC/MS: m/z (ES+) 310 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.98-9.61 (br, 1H), 7.45-7.41 (m, 1H), 7.18-7.14 (m, 2H), 6.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.94-4.88 (m, 1H), 4.79 (kvint, J = 7.6 Hz, 1H), 4.41 (s, 1H), 1.56 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.30-1.26 (m, 6H).
Referentni primer 61. Pripremanje (S)-3-izopropil-6-((1-piridin-4-il)propan-2-il)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0146] Jedinjenje 61.1. N-metoksi-N-metil-2-(piridin-4-il)acetamid. Jedinjenje iz naslova sintetiše se prema metodima opisanim za pripremanje 51.1. Ovde, komercijalno dostupna 4-piridinsirćetna kiselina koristi se umesto 2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline.
[0147] Jedinjenje 61.2. 1-(piridin-4-il)propan-2-on. U 250 mL-ski 3-grli flakon sa okruglim dnom koji je prečišćen i držan u inertnoj atmosferi argona, doda se THF (70 mL) i N-metoksi-N-metil-2-(piridin-4-il)acetamid (7.0 g, 0.039 mol, 1.0 eq). Mešavina se ohladi na 0 °C i CH3MgBr (3 M u THF, 65 mL, 5.0 eq) se doda u kapima. Dobijeni rastvor se zagreje na ambijentalnu temperaturu i meša 16 h. Reakciona mešavina se ohladi na 0 °C i gasi dodavanjem zasićenog NH4Cl (aq, 100 mL). Dobijeni rastvor se ekstrahuje korišćenjem EtOAc (3 x 200 mL). Organski slojevi se kombinuju, suše preko anhidrovanog Na2SO4i koncentruju pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, CH2/Cl2/CH3OH (20:1)) da se dobije 2.7 g (51%) jedinjenja iz naslova u vidu žutog ulja.
1H-NMR (400 MHz,CDCl3): δ ppm 8.58 (m, 2H), 7.17 (d, J = 0.4 Hz, 2H), 3.75 (s, 2H), 2.24 (s, 3H).
[0148] Jedinjenje 61.3. (R)-2-metil-N-((S)-1-(piridin-4-il)propan-2-il)propan-2-sulfinamid. Jedinjenje iz naslova priprema se prema postupcima opisanim u Primeru 50 uz korišćenje 61.2 umesto 1-(3-metilfenil)etanona. Ovde, smanjenje korišćenja L-selektrida
4
rezultuje izolacijom jedinjenja iz naslova (61.3) (20% enantiomerni višak, enantiomeric excess, ee).
[0149] Jedinjenje 61.4. (S)-1-(piridin-4-il)propan-2-amin. Jedinjenje iz naslova priprema se korišćenjem postupka iz dva koraka kako je opisano u Primeru 5. Prvo se sulfonamid 61.3 konvertuje u hidrohloridnu so tretmanom korišćenjem HCl u 1,4-dioksanu (vidi protokol za Jedinjenje 5.3). Prevođenje hidrohloridne soli u slobodnu bazu, koje sledi (vidi protokol za Jedinjenje 5) rezultuje jedinjenjem iz naslova (~20% ee).
[0150] Jedinjenje 61. (S)-3-izopropil-6-((1-(piridin-4-il)propan-2-il)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Jedinjenje iz naslova priprema se prema protokolu opisanom za 51. Ovde, reakciona mešavina se meša na 100 °C 1 h. Reakciona mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom i rezidua (100 mg) se prečisti korišćenjem prep-HPLC dajući 13.1 mg jedinjenja iz naslova u vidu mešavine enatiomera. Enantiomeri (13.1 mg) se razdvajaju hiralnom preparativnom HPLC sa Chiralpak IC, 2*25cm, 5 um kolone, uz korišćenje izokratske mešavine EtOH:heksan (1:3) kao eluenta (20 min protok). Ovo za rezultat ima 8.2 mg (8%) jedinjenja iz naslova u vidu svetložute čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 289 (M+H)<+>.<1>H-NMR (300 MHz,CD3OD): δ ppm 8.41 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 5.06-4.96 (m, 1H), 4.68 (s, 1H), 3.82-3.75 (m, 1H), 2.87-2.83 (m, 2H), 1.36 (d, J = 7.2 Hz, 6H), 1.12 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
Referentni primer 62, Pripremanje (S)-6-((1-(4-(benziloksi)fenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0151] Jedinjenje 62.1. (S)-2-(1-(4-(metoksi)fenil)etil)izoindolin-1,3-dion. U ftalimid (1.3 g, 0.0088 mol) u 2-5 mL-skoj fioli za rad u mikrotalasnom reaktoru dodaju se (S)-1-(4-metoksifenil)etan-1-amin (2.20 mL, 0.015 mol) i K2CO3(1.2 g, 0.0087 mol). Reakciona mešavina se poklopi i greje na 160 °C 2 minuta. Dobijena sirova čvrsta supstanca se suspenduje u n-BuOH i filtrira. Filtrat se ostavi na stranu. Čvrsta supstanca se ispere korišćenjem H2O i filtrat se odbaci. Čvrsta supstanca se ispere korišćenjem CH2Cl2i dobijeni filtrat se raspodeli pomoću H2O. Organski materijali (n-BuOH i CH2Cl2sloj) se kombinuju i koncentruju. Sirova rezidua se prečisti hromatografijom na koloni od silika gela uz korišćenje CH2Cl2kao eluenta da se dobije 1.6 g (64%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 282 (M+H)+ .
[0152] Jedinjenje 62.2. (S)-2-(1-(4-hidroksifenil)etil)izoindolin-1,3-dion. U mešani rastvor 62.1 (640 mg, 2.28 mmol) u CH2Cl2(8 mL) na 0 °C doda se BBR3 (1.0 M u CH2Cl2, 3 mL, u kapima). Reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu tokom 30 minuta. Zaostane značajna količina polaznog materijala pa se reakcija ponovo ohladi na 0 °C. Doda se još BBR3 (2 mL, 1.0 M u CH2Cl2) i reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu tokom 30 minuta. Reakciona mešavina se izlije na 5% NaHCO3(aq) u ledu. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ekstrahuje korišćenjem CH2Cl2. Kombinovani organski slojevi se isperu zasićenim rastvorom soli, suše anhidrovanim Na2SO4i koncentruju dajući 500 mg (82%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 268 (M+H)<+>.
[0153] Jedinjenje 62.3. (S)-2-(1-(4-(benziloksi)fenil)etil)izoindolin-1,3-dion. U mešani rastvor 62.2 (500 mg, 1.87 mmol) u DMF (10 mL) dodaju se K2CO3(560 mg, 4.05 mmol, 2.17 eq.) i benzil bromid (0.30 mL, 420 mg, 2.45 mmol, 1.3 eq.). Reakcija se meša na 120 °C 5 h. Reakcija se ohladi i filtrira. Doda se voda (20 mL) i EtOAc (60 mL) se upotrebi za ekstrahovanje proizvoda. Organski sloj se ispere sukcesivno pomoću H2O, 10% Na2CO3(aq), H2O, i zasićenog rastvora soli (2x). Organski materijal se suši preko anhidrovanog MgSO4i koncentruje. Sirova rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, eluiranje pomoću CH2Cl2) da se dobije 480 mg (72%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 358 (M+H)+ .
[0154] Jedinjenje 62.4. (S)-1-(4-(benziloksi)fenil)etan-1-amin. U mešani rastvor 62.3 (480 mg, 1.34 mmol) u mešavini 70/30 EtOH/H2O (20 mL) doda se N2H4H2O (1.5 mL). Reakcija se meša 16 h i koncentruje. Dobijeni materijal se raspodeli između EtOAc i 5% Na2CO3(aq). Slojevi se razdvoje i EtOAc sloj se ispere zasićenim rastvorom soli i koncentruje dajući 280 mg (92%) jedinjenja iz naslova koje se koristi bez dodatnog prečišćavanja. LC/MS: m/z (ES+) 228 (M+H)+ .
[0155] Jedinjenje 62. (S)-6-((1-(4-(benziloksi)fenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 0.5-2.0 mL fiolu za rad u mikrotalasnom reaktoru dodaju se 1,4-dioksan (1 mL), 62.4 (280 mg, 1.23 mmol), 1.3 (250 mg, 1.33 mmol) i DIEA (400 μL). Reakciona mešavina se zaklopi, greje na 135 °C u mikrotalasnom reaktoru 1.5 h, ostavi se da se ohladi i zatim koncentruje. Sirova reakciona mešavina se tretira korišćenjem 50/50 CH3CN/H2O (0.1% TFA) što dovodi do precipitacije. Čvrsta supstanca se izoluje filtracijom i suši dajući 45 mg (10%) bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 380 (M+H)<+>.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.73 (br, 1H), 7.43-7.29 (m, 5H), 7.23 (d, J = 14.5 Hz, 2H), 6.97 (d, J = 14.5 Hz, 2H), 6.42 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.06 (s, 2H), 4.93-4.85 (m, 1H), 4.42 (kvin, J = 6.8 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 1.35 (d, J = 6.7 Hz, 3H), (m, 1H) 1.27-1.23 (m, 6H).
Referentni primer 63. Pripremanje (S)-6-((1-(4-hidroksifenil)etil)amino)-3-izopropilpirimidin-2.4(1H,3H)-diona (63).
[0156] U mešani rastvor 62 (43 mg, 0.11 mmol) u CH3OH (20 mL) doda se paladijum na ugljeniku (50 mg, 10 tež. % punjenje (suva osnova), matriks - aktivni ugalj, vlažna podloga, Degussa tip). Sud se prečisti azotom, zatim vodonikom. Reakciona mešavina se meša u atmosferi H22 h. Posle prečišćavanja sistema azotom, mešavina se filtrira kroz celit i koncentruje. Dobijena čvrsta supstanca se rastvori u 8 mL CH3CN i zatim se doda 20 mL H2O (0.1% TFA). Rastvor se zamrzne i liofilizuje dajući 29 mg (90%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 290 (M+H)<+>.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.70 (br, 1H), 9.32 (s, 1H), 7.10 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.71 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.36 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.92-4.85 (m, 1H), 4.37-4.33 (m, 2H), 1.33 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.27-1.23 (m, 6H).
Referentni primer 64. Pripremanje (R)-6-((2-(benziloksi)-1-feniletil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0157] Jedinjenje 64.1. (R)-2-(2-hidroksi-1-feniletil)izoindolin-1,3-dion. U 2.0-5.0 mL-sku fiolu za rad u mikrotalasnom reaktoru dodaju se (R)-2-amino-2-feniletan-1-ol (1.53 g, 0.0112 mol) i ftalinski anhidrid (1.65 g, 0.0112 mol). Reakciona mešavina se poklopi i greje do 150 °C 2 minuta u mikrotalasnom reaktoru. Mešavina se ohladi i razblaži korišćenjem CH3CN (2 mL), ponovo poklopi i greje u mikrotalasnom reaktoru drugi put, na 140 °C 20 minuta. Isparljive supstance se uklone pod sniženim pritiskom i dobijena čvrsta supstanca se suspenduje u EtOAc (50 mL). Organski sloj se ispere korišćenjem 5% NaHCO3(aq), H2O, i zasićenog rastvora soli, suši anhidrovanim MgSO4i koncentruje. Sirova rezidua se prečisti fleš-hromatografijom (silika gel, eluiranje sa CH3OH u CH2Cl2(0 do 5%) da se dobije 2.81 g (94%) jedinjenja iz naslova. LC/MS: m/z (ES+) 268 (M+H)+ .
[0158] Jedinjenje 64.2. (R)-2-(2-(benziloksi)-1-feniletil)izoindolin-1,3-dion. Jedinjenja iz naslova napravi se na sličan način kao što je postupak opisan za 62.3. Međutim, u ovom slučaju NaH (60% disperzija u mineralnom ulju, 1.2 eq.) koristi se umesto K2CO3. Specifično, NaH se doda na 0 °C i meša na sobnoj temperaturi 45 minuta. Reakcija se ohladi ponovo na 0 °C i zatim se doda benzil bromid (1.2 eq.). Radni postupak kao što je opisano za 62.3 praćen fleš-hromatografijom (silka gel, eluiranje korišćenjem CH2Cl2) daje jedinjenja iz naslova sa prinosom od 59%. LC/MS: m/z (ES+) 358 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 7.84-7.79 (m, 2H), 7.72-7.67 (m, 2H), 7.52-7.48 (m, 2H), 7.37- 7.20 (m, 8H), 5.62 (dd, J = 10.2, 5.9 Hz, 1H), 4.63 (t, J = 10.2 Hz, 1 H), 4.58 (s, 2H), 4.06- 4.01 (m, 1H).
[0159] Jedinjenje 64.3. (R)-2-(benziloksi)-1-feniletan-1-amin. Jedinjenja iz naslova priprema se na sličan način kao što je postupak opisan za 62.4. LC/MS: m/z (ES+) 228 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ ppm 7.40-7.24 (m, 10H), 4.56 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 4.25 (dd, J = 8.8, 3.7 Hz, 1 H), 3.65-3.60 (m, 1H), 3.49-3.44 (m, 1H).
[160] Jedinjenje 64. (R)-6-((2-(benziloksi)-1-feniletil)amino)-3-izopropilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Jedinjenje iz naslova priprema se na sličan način kao što je postupak opisan za 62. Ovde se međutim, reakcija greje na 140 °C 1 h. Posle hlađenja, sirova reakciona mešavina se tretira korišćenjem 50/50 CH3CN/H2O (0.1% TFA) što dovodi do precipitacije. LC/MS: m/z (ES+) 380 (M+H)+ . 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.01 (br, 1H), 7.36-7.26 (m, 10H), 6.62 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.93-4.83 (m, 1H), 4.67-4.62 (m, 1H), 4.50 (dd, J = 12.0, 2.0 Hz, 2H), 4.30 (s, 1H), 3.68-3.64 (m, 1H), 3.60-3.55 (m, 1H) 1.27-1.23 (m, 6H).
Primer 65. Pripremanje (S)-3-(6-metilpiridin-2-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0161] Jedinjenje 65.1. 1-(6-metilpiridin-2-il)urea. U 25 mL-ski flakon sa okruglim dnom koji je pročišćen i držan u inertnoj atmosferi argona, dodaju se urea (1.48 g, 24.64 mmol, 1.00 eq) i 6-metilpiridin-2-amin (3 g, 27.74 mmol, 1.00 eq). Rezultujuća mešavina se meša 2 h na 145 °C. Posle hlađenja, sirovi proizvod (4 g) se prečisti korišćenjem CombiFlash: kolona, C18 silika gel; uz korišćenje mobilne faze CH3CN:H2O = 0:100 do CH3CN:H2O = 50:50 tokom 40 min. Ovo za rezultat ima izolovanje 1.2 g (32%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.07 (s, 1H), 7.56-7.52 (m, 1H), 7.18-7.14 (m, 1H), 6.80-6.75 (m, 1H), 2.36 (s, 3H).
[0162] Jedinjenje 65.2. 1-(6-metilpiridin-2-il)pirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion. Jedinjenje iz naslova priprema se na sličan način kao što je postupak opisan za 1.2. Ovde se, međutim, posle mešanja preko noći na 65 °C, reakciona mešavina koncentruje pod sniženim pritiskom i sirovi proizvod precipitira iz CH3OH:Et2O (1:50). Čvrsta supstanca se sakupi filtracijom i rastvori u CH3OH (50 mL). Vrednost pH rastvora podesi se na 7 pomoću katjonske jonoizmenjivačke smole (Dowex 50WX8-100, 5 g). Čvrste supstance se filtriraju i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom dajući 0.5 g (29%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.27 (br s, 1H), 7.69 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.18 (s, 2H), 2.44 (s, 3H).
[0163] Jedinjenje 65.3. 6-hloro-3-(6-metilpiridin-2-il)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U mešani rastvor 65.2 (500 mg, 2.28 mmol, 1.00 eq) u POCl3(5 mL) na 0 °C doda se kap (~20 µL) H2O. Dobijeni rastvor se zagreje na sobnu temperaturu, meša 30 min., greje do 70 °C i meša 2 h. Posle hlađenja, dobijena mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se pažljivo rastvori u 10 mL ledene vode. Vrednost pH se podesi na 7 anjonskom jonoizmenjivačkom smolom (aktivirana 201x4(711) snažna bazna stirenska anjonska izmenjivačka smola, 20 g) i čvrsti materijal se isfiltrira. Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom dajući 0.2 g (37%) jedinjenja iz naslova u vidu žute čvrste supstance.
1
[0164] Jedinjenje 65. (S)-3-(6-metilpiridin-2-il)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 10 mL-ski flakon sa okruglim dnom koji je pročišćen i držan u inertnoj atmosferi argona, dodaju se (S)- α-metilbenzilamin (0.5 mL) i 65.3 (200 mg, 0.84 mmol, 1.00 eq). Dobijeni rastvor se meša 3 h na 110 °C. Posle hlađenja dobijena mešavina se koncentruje pod vakuumom. Rezidua (100 mg) se prečisti preparativnome RP-HPLC uz sledeće uslove: kolona, XBridge Prep C18 OBD kolona, 5 μm, 19*150 mm,; mobilna faza, H2O sa 0.05% NH4(HCO3) i CH3CN (15% CH3CN do 80% za 8 min); ovo za rezultat ima 28.8 mg (11%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 323 (M+H)<+>.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.76 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.39- 7.22 (m, 7H), 7.05 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.82 (br, 1H), 4.63-4.59 (m, 1H), 4.46 (s, 1H), 2.43 (s, 3H), 1.44 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
Referentni primer 66. Pripremanje (S)-3-(2,2-difluoroetil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona.
[0165] Jedinjenje 66.1. 6-hloro-3-(2,2-difluoroetil)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil) pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U mešani rastvor 11.1 (130 mg, 0.47 mmol) i Et3N (0.2 mL) u CH2Cl2(2 mL) na 0 °C doda se 2,2- difluoroetil trifluorometansulfonat (0.10 mL). Reakcija se zagreje na sobnu temperaturu i meša 30 minuta. Mešavina se koncentruje dajući jedinjenje iz naslova u sirovoj mešavini.
[0166] Jedinjenje 66.2. 6-hloro-3-(2,2-difluoroetil)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Sirovi 65.1 rastvori se u CH2Cl2/TFA (1:1, 4 mL) i meša 3 h i koncentruje. Dobijeni materijal tretira se korišćenjem 5% NaHCO3(aq) dok pH ne bude 7. Etil acetat se doda mešavini i slojevi se razdvoje. Vodeni sloj se koncentruje. Dobijena čvrsta supstanca se suspenduje u CH3CN (15 mL) i ukloni filtracijom. Filtrat se koncentruje dajući 52 mg jedinjenja iz naslova.
2
[0167] Jedinjenje 66. (S)-3-(2,2-difluoroetil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 66.2 (52 mg, 0.25 mmol) u 1,4-dioksanu (1.5 mL) dodaju se Et3N (100 μL) i (S)- αmetilbenzilamin (188 mg, 1.55 mmol). Reakciona mešavina se greje u mikrotalasnom reaktoru na 100 °C 32 minuta, ohladi na sobnu temperaturu i zatim koncentruje. Dobijena rezidua se rastvori u CH3CN/H2O, 2:3 (10 mL), sa 2 kapi TFA (~40 μL). Mešavina se prečisti preparativnom RP-HPLC dajući 8 mg (11%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 296 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.20 (br s, 1H), 7.37-7.32 (m, 4H), 7.26- 7.23 (m, 1H), 6.71 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.07 (tt, J = 56.0, 4.5 Hz, 1H), 4.54 (kvin, J = 6.8 Hz, 1H), 4.43 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 4.02 (td, J = 14.3, 4.7 Hz, 2H), 1.40 (d, J= 6.7 Hz, 3H).
Referentni primer 67. Pripremanje (S)-6-((1-(benzo[d][1.3]dioksol-5-il)etil)amino)-3-(2,2,2-trifluoroetil)pirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0168] Jedinjenje 67.1. 2H-1,3-benzodioksol-5-karbaldehid. U mešani rastvor 3,4-dihidroksibenzaldehida (10 g, 72.40 mmol, 1.00 eq) u DMF (150 mL) dodaju se cezijum karbonat (35.4 g, 108.31 mmol, 1.50 eq) i dibromometan (18.7 g, 107.57 mmol, 1.50 eq). Dobijeni rastvor se meša 2 h na 110 °C. Rastvor se ohladi na sobnu temperaturu i čvrsta supstanca se ukloni filtracijom. Filtrat se razblaži pomoću H2O (300 mL). Dobijeni rastvor se ekstrahuje korišćnjem EtOAc (2 x 300 mL). Organski slojevi se kombinuju, suše preko natrijum sulfata, i koncentruju pod sniženim pritiskom. Sirova rezidua se prečisti hromatografijom na koloni od silika gela, eluira korišćenjem EtOAc/petrol etra (1:9) da se dobije 8 g (74%) jedinjenja iz naslova u vidu žute čvrste supstance.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ ppm 9.81 (s, 1H), 7.41 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.93 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.08 (s, 2H).
[0169] Jedinjenje 67.2. (S)-1-(benzo[d][l,3]dioksol-5-il)etan-1-amin hidrohlorid.
Jedinjenje iz naslova sintetiše se prema metodima opisanim za pripremanje 5.3. Ovde, 67.1 se koristi umesto 3,5-difluorobenzaldehida. LC/MS: m/z (ES+) 166 (M+H)+ .
[0170] Jedinjenje 67. (S)-6-((1-(benzo[d][l,3]dioksol-5-il)etil)amino)-3-(2,2,2-trifluoroetil)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. Jedinjenje iz naslova sintetiše se prema metodima opisanim u Primeru 59. Ovde, 67.2 se koristi umesto (S)-1-(2,6- difluorofenil)etan-1-amin hidrohlorida i 6-hloro-3-(2,2,2-trifluoroetil)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion se koristi (sintetisan prema metodima opisanim u Primeru 1) umesto 1.3. LC/MS: m/z (ES+) 358 (M+H)+. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 10.27 (br s, 1H), 6.94 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 6.89-6.82 (m, 3H), 6.72 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.99 (s, 2H), 4.48-4.40 (m, 4H), 1.38 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Primer 68. Pripremanje (S)-3-izopropil-6-((1-(o-tolil)etil)amino)pirimidin-2.4(1H.3H)-diona (68).
[0171] U mešani rastvor (1S)-1-(2-metilfenil)etan-1-amina (310 mg, 2.29 mmol, 1.50 eq) u NMP (1 mL) dodaju se protonski sunđer (491.4 mg, 2.30 mmol, 1.50 eq) i 1.3 (288 mg, 1.53 mmol, 1.00 eq). Dobijeni rastvor se meša 1 h na 130 °C u uljanom kupatilu, ohladi na sobnu temperaturu, a zatim razblaži korišćenjem DMSO (2 mL). Čvrste supstance se filtriraju i filtrat se prečisti fleš-prep-HPLC uz sledeće uslove: kolona: X Bridge C18, 19*150 mm, 5 μm; mobilna faza A: H2O/0.05% TFA, mobilna faza B: CH3CN; stopa protoka: 20 mL/min; gradijent: 30%B do 70% B za 10 min. Ovim se dobija 50 mg sirovog proizvoda koji se zatim
4
razdvaja hiralnom preparativnom HPLC uz sledeće uslove: kolona, Chiralpak IC, 2*25cm. 5 μm; mobilna faza, heksani i etanol (9:1, 15 min). Ovo za rezultat ima 35.6 mg (8%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 288 (M+H)<+>.<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.76 (br s, 1H), 7.28 (d, J = 7.2 Hz, 1H) 7.24-7.14 (m, 3H), 6.48 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 4.95-4.86 (m, 1H), 4.60 (kvin, J = 6.9 Hz, 1H), 4.19 (s, 1H), 2.34 (s, 3H), 1.37 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.27 (d, J = 6.9 Hz, 6H).
Primer 69. Pripremanje (S)-3-ciklobutil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H.3H)-diona.
[0172] Jedinjenje 69.1. 1-ciklobutilurea. U mešani rastvor ciklobutanamina (40 g, 562.42 mmol, 1.00 eq) u CH2Cl2(400 mL) na 0°C doda se trimetilsilil izocijanat (64.70 g, 561.60 mmol, 1.00 eq.) u porcijama. Dobijeni rastvor se meša preko noći na sobnoj temperaturi i gasi se dodavanjem CH3OH (80 mL). Dobijena mešavina se meša 1 h na sobnoj temperaturi i zatim koncentruje pod sniženim pritiskom. Rezidua se ispere korišćenjem Et2O (2 x 100 mL) i filtrira čime se dobija 53 g (83%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 6.17 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H), 3.99-3.91 (m, 1H), 2.16-2.07 (m, 2H), 1.81-1.68 (m, 2H), 1.61- 1.45 (m, 2H).
[0173] Jedinjenje 69.2. 1-ciklobutilpirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion. U mešani rastvor natrijum metoksida (62.43g, 1.156 mol, 2.40 eq) u CH3OH (500 mL) dodaju se dimetil malonat (76.42 g, 0.578 mol, 1.20 eq) i 69.1 (55 g, 0.48 mol, 1.00 eq). Dobijeni rastvor se greje do 65 °C i meša preko noći. Reakcija se ohladi i prekida dodavanjem H2O (100 mL). pH rastvora se podesi na 1 koncentrovanom HCl. Dobijena mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom. Rezidua se prečisti hromatografijom na koloni od silika gela uz korišćenje CH2Cl2/CH3OH (20:1) kao eluenta da se dobije 60 g (68%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11.20 (s, 1H), 4.95-4.86 (m, 1H), 3.56 (s, 2H), 2.72-2.62 (m, 2H), 2.16- 2.09 (m, 2H), 1.78-1.60 (m, 2H).
[0174] Jedinjenje 69.3. 6-hloro-3-ciklobutilpirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 69.2 (80 g, 0.44 mol, 1.00 eq) i trietilbenzilamonijum hlorid (140.2 g, 0.615 mol, 1.40 eq) se doda (300 mL). Reakcija se meša 1 h na 65 °C i zatim koncentruje pod sniženim pritiskom. Reakcija se prekida pažljivim dodavanjem 1 L vode/leda i zatim se pH vrednost rastvora podesi na 1 korišćenjem 2 N NaOH (aq). Čvrsta supstanca se filtrira, ispere korišćenjem CH3OH (300 mL) i Et2O (2 x 300 mL), i suši. Ovim se dobija 78 g (89%) jedinjenja iz naslova u vidu svetložute čvrste supstance.<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 12.23 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 5.13-5.01 (m, 1H), 2.87-2.73 (m, 2H), 2.13-2.3 (m, 2H), 1.80-1.56 (m, 2H).
[0175] Jedinjenje 69. (S)-3-ciklobutil-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 500 mL-ski flakon sa okruglim dnom pročišćen i držan u inertnoj atmosferi argona, dodaju se 69.3 (78 g, 388.79 mmol, 1.00 eq) i (S)- α-metilbenzilamin (150 mL, 2.00 eq). Reakciona mešavina se meša 3 h na 120 °C. Reakciona mešavina se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži CH3OH (1 L) i dalje hladi do 0 °C. Dobijena čvrsta supstanca se filtrira, ispere korišćenjem Et2O (2 x 300 mL), i suši pod vakuumom da se dobije 57.25 g (52%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 286 (M+H)<+>.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.94 (br s, 1H), 7.40-7.32 (m, 4H), 7.30-7.26 (m, 1H), 6.40 (br s, 1H), 5.19-5.10 (m, 1H), 4.56-4.49 (m, 1H), 4.35 (s, 1H), 2.91-2.81 (m, 2H), 2.02-1.95 (m, 2H), 1.76-1.58 (m, 2H), 1.42 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
Referentni primer 70. Pripremanje (S)-3-izopropil-6-((1-(2-(trifluorometil)fenil)etil)amino) pirimidin-2.4(1H,3H)-diona.
[0176] Jedinjenje 70.1. (R,E)-2-metil-N-(2-(trifluorometil)benziliden)propan-2-sulfinamid. U 100 mL-ski flakon sa okruglim dnom pročišćen i držan u inertnoj atmosferi argona, dodaju se CH2Cl2(50 mL), 2-(trifluorometil)benzaldehid (2.01 g, 11.54 mmol, 1.00 eq), (R)-(+)-2-metilpropan-2-sulfinimid (1.68 g, 13.86 mmol, 1.20 eq), piridinijum ptoluensulfonat (0.145 g, 0.05 eq) i magnezijum sulfat (6.93 g, 5.0 eq). Dobijeni rastvor meša se 48 h na 40 °C. Mešavina se ohladi na sobnu temperaturu i čvrsti materijal se filtrira. Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijena rezidua se prečisti fleš-hromatografijom na koloni (silika gel, eluiranje korišćenjem EtOAc/petrol etar (1:20)). Ovo za rezultat ima 0.96 g (30%) jedinjenja iz naslova u vidu svetložute čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 278 (M+H)+ .1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.82-8.80 (m, 1H), 8.24 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.95-7.80 (m, 3H), 1.22 (s, 9H).
[0177] Jedinjenje 70.2. (R)-2-metil-N-((1S)-1-(2-(trifluorometil)fenil)-etil)propan-2-sulfinamid. U mešani rastvor 70.1 (578 mg, 2.08 mmol, 1.00 eq) u THF (20 mL) na -50 °C doda se 3 M metilmagnezijum bromid u Et2O (1.4 mL, 4.20 mmol, 2.0 eq) u kapima. Dobijeni rastvor se meša na -50 °C 2.5 h i još 10 h na sobnoj temperaturi. Reakcija se prekida dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (10 mL) i zatim koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se tretira korišćenjem H2O (50 mL) i ekstrahuje pomoću CH2Cl2(2 x 50 mL). Organski slojevi se kombinuju, suše preko Na2SO4, i koncentruju pod sniženim pritiskom. Ovo za rezultat ima 700 mg (60% de) jedinjenja iz naslova u vidu žute čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 294 (M+H)+ . 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.77-7.74 (m, 1H), 7.67-7.60 (m, 2H), 7.43-7.38 (m, 1H), 5.53 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.70-4.60 (m, 1H), 1.42 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.02 (s, 9H).
[0178] Jedinjenje 70.3. (S)-1-(2-(trifluorometil)fenil)etan-1-amin hidrohlorid. U mešani rastvor 70.2 (700 mg, 2.39 mmol, 1.00 eq) u CH3OH (4 mL) doda se 4 N HCl u 1,4-dioksanu (2 mL) u kapima. Dobijeni rastvor se meša 1 h na sobnoj temperaturi i zatim koncentruju pod sniženim pritiskom. Čvrsta supstanca precipitira dodavanjem Et2O (5 mL). Čvrsta supstanca se filtrira i suši dajući jedinjenje iz naslova u vidu bele čvrste supstance (0.32 g, 60%).
[0179] Jedinjenje 70.4. (S)-1-(2-(trifluorometil)fenil)etan-1-amin. U 50 mL-ski flakon sa okruglim dnom dodaju se 70.3 (320 mg, 1.43 mmol, 1.00 eq) i natrijum hidroksid (80 mg, 2.00 mmol, 1.40 eq) u H2O (20 mL). Dobijeni rastvor se meša 1 h na sobnoj temperaturi i zatim ekstrahuje korišćenjem EtOAc (20 mL). Organski sloj se kombinuje i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ovim se dobija 190 mg (70%) jedinjenja iz naslova u vidu svetložutog ulja.
[0180] Jedinjenje 70. (S)-3-izopropil-6-((1-(2-(trifluorometil)fenil)etil)amino) pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 10 mL-ski flakon sa okruglim dnom pročišćen i držan u inertnoj atmosferi argona, dodaju se NMP (2 mL), 70.4 (160 mg, 0.85 mmol, 1.00 eq), 1.3 (160 mg, 0.85 mmol, 1.00 eq), i protonski sunđer (273 mg, 1.28 mmol, 1.5 eq.). Dobijeni rastvor se meša 4 h na 130 °C. Sirovi proizvod (200 mg) se prečisti hiralnom preparativnom HPLC uz sledeće uslove: kolona, Phenomenex Lux-2 5 μ Cellulose-2, 30*150 mm; mobilna faza, Hex-HPLC i etanol-HPLC (zadržavanje 20% etanol-HPLC za 14 min); Detektor, uv 254/220nm. Dobija se 160 mg sirovog proizvoda. Dobijeni materijal (60 mg) dodatno se prečišćava korišćenjem hiralne preparativne HPLC uz sledeće uslove: kolona: Phenomenex Lux-2 5 u Cellulose-2 30*150 mm; mobilna faza i gradijent: heks:EtOH = 80:20; vreme retencije (pik 2) (min): 11.106. Rezultat ovoga je 30 mg jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 342 (M+H)+ .1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.84 (br, 1H), 7.787.68 (m, 3H), 7.56-7.52 (m, 1H), 6.75 (br s, 1H), 4.93-4.86 (m, 1H), 4.68-4.63 (m, 1H), 4.13 (s, 1H), 1.46 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 7.215 Hz, 6H).
Primer 71. Pripremanje (S)-3-(1-metilciklopropil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2.4(1H,3H)-dion.
[0181] Jedinjenje 71.1. 1-(1-metilciklopropil)urea. U mešani rastvor 1-metilciklopropan-1-amin hidrohloridne soli (429 mg, 3.99 mmol, 1.00 eq) i trietilamina (268 mg, 2.65 mmol, 1.00 eq) u CH2Cl2(6 mL) doda se trimetilsilil izocijanat (366 mg, 3.18 mmol, 1.20 eq). Dobijena mešavina se meša na sobnoj temperaturi preko noći i zatim gasi dodavanjem CH3OH (2 mL) u kapima, na 0 °C. Dobijeni rastvor se zagreje na sobnu temperaturu i meša još 1 h. Dobijena mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod precipitira iz CH3OH:Et2O (1:40) dajući 300 mg (66%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.
[0182] Jedinjenje 71.2. 1-(1-metilciklopropil)pirimidin-2,4,6(1H,3H,5H)-trion. U mešani rastvor 71.1 (320 mg, 2.80 mmol, 1.0 eq) u CH3OH (2 mL) dodaju se natrijum metoksid (390 mg, 7.2 mmol, 2.5 eq) i dimetil malonat (380 mg, 2.88 mmol, 1.0 eq). Dobijeni rastvor se meša preko noći na 65 °C. Posle hlađenja reakcija se prekida dodavanjem H2O (100 mL). pH rastvora se podesi na 2 koncentrovanom HCl i dobijena mešavina se koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirova rezidua se prečisti hromatografijom na koloni od silika gela uz korišćenje EtOAc/petrol etra (1:3) kao eluenta. Ovim se dobija 100 mg (20%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ ppm 8.04 (br, 1H), 3.61 (s, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.0-, 0.86 (m, 4H).
[0183] Jedinjenje 71.3. 6-hloro-3-(1-metilcilopropil)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 71.2 (100 mg, 0.55 mmol, 1.00 eq) i trietilbenzilamonijum hlorid (180 mg, 0.79 mmol, 1.00 eq) doda se POCl3(2 mL). Dobijeni rastvor se meša 3 h na 50 °C i zatim koncentruje pod sniženim pritiskom. Rezidua se pažljivo gasi dodavanjem 10 mL vode/leda i ekstrahuje korišćenjem EtOAc (2 x 30 mL). Organski slojevi se kombinuju i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirova rezidua se prečisti hromatografijom na koloni od silika gela uz korišćenje CH2Cl2/CH3OH (10:1) kao eluenta da se dobije 40 mg (36%) jedinjenja iz naslova u vidu žute čvrste supstance.
[0184] Jedinjenje 71. (S)-3-(1-metilciklopropil)-6-((1-feniletil)amino)pirimidin-2,4(1H,3H)-dion. U 71.3 (40 mg, 0.20 mmol, 1.00 eq) doda se (S)- α-metilbenzilamin (0.5 mL). Reakciona mešavina se meša 2 h na 130 °C i zatim koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijena rezidua se prečisti preparativnom RP-HPLC uz sledeće uslove: kolona: X Bridge C18, 19*150 mm, 5 um; mobilna faza A: H2O /0.05% TFA, mobilna faza B: CH3CN; stopa protoka: 20 mL/min; gradijent: 30% B do 70% B za 10 min. Ovim se dobija 15.1 mg (27%) jedinjenja iz naslova u vidu bele čvrste supstance. LC/MS: m/z (ES+) 286 (M+H)<+>.<1>H-NMR (300 MHz, CD3CN): δ ppm 8.41 (br, 1H), 7.42-7.29 (m, 5H), 5.79 (br, 1H), 4.48-4.44 (m, 1H), 4.30 (s, 1H), 1.47 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.27 (s, 3H), 0.87-0.77 (m, 4H).
Primer 72. Pripremanje dodatnih pirimidindionskih jedinjenja.
[0185] Jedinjenja u Tabeli 1B pripremljena su prema Primerima opisanim gore (primeri metoda dati kao ‘Referenca. Pr. br.’). U Tabeli 1B, Jedinjenja 60R, 82, 84-86, 90, 91-95, 99, 100, 102, 103-116, 117, 119, 122-128, 131, 133 i 134 su referentna jedinjenja.
1 +
, .70 (br, Hz, , 1.6 8.0 Hz, .6, 4.8 1H), .62-s, 1H), 3H),
, 0.69 (br 7.40-kvin, J = , 1H), (d,J =
, 8 (br s, H), s, 1H), .71 (m, H), .92 (t, J
, 0-7.20 m, 1H), .62 (m, 6.7 Hz, .00 (t, J 7-3.59 m, 1H), .48-1.45 (m, Hz,
, .82 (br s, H), 1H), .50-
s, 1H),
2
4
1
2
Primer 73. Test inhibicije miozina
[0186] Sposobnost malih molekulskih sredstava da inhibiraju enzimsku aktivnost goveđeg srčanog miozina procenjuje se korišćenjem biohemijskog testa koji povezuje oslobađanje ADP (adenosine diphosphate, adenozin difhosfat) sa srčanog miozina na enzimski kuplujući sistem koji se sastoji od piruvat kinaze i laktat dehidrogenaze (pyruvate kinase, lactate dehydrogenase, PK/LDH) i praćenjem smanjenja apsorbance NADH (na 340 nm) u funkciji vremena. PK konvertuje ADP u ATP (adenosine triphosphate, adenozin trifosfat) konvertovanjem PEP (phosphoenolpyruvate, fosfoenolpiruvat) u piruvat. Piruvat se zatim konvertuje u laktat putem LDH, konvertovanjem NADH (nicotinamide adenine dinucleotide, nikotinamid adenin dinukleotid) u NAD (oxidized nicotinamide adenine dinucleotide, oksidisani nikotinamid adenin dinukleotid). Srčani miozin poticao je iz srca goveda i bio je u vidu izolovanih miofibrila. Pre testiranja malih molekulskih sredstava, goveđi miofibrili su procenjivani u pogledu odgovora na kalcijum, a koncentracija kalcijuma kojom se postiže 50% (pCa50) ili 75% (pCa75) aktivacije sistema miofibrila odabrana je kao finalni uslov za procenu inhibitorne aktivnosti malih molekulskih sredstava. Sva enzimska aktivnost merena je u puferisanom rastvoru koji sadrži 12 mM PIPES (piperazine-N,N'-bis(2-ethanesulfonic acid, piperazin-N,N'-bis(2-etansulfonska kiselina), 2 mM magnezijum hlorid na pH 6.8
4
(PM12 pufer). Finalni testni uslovi bili su 1 mg/mL goveđih srčanih miofibrila, 0.4 mM PK/LDH, 50 μM ATP, 0.1 mg/mL BSA (goveđi serum albumin), 10 ppm sredstva protiv stvaranja pene, 1 mM DTT, 0.5 mM NADH, 1.5 mM PEP pri željenoj koncentraciji kalcijuma potrebnoj za postizanje 50% ili 75% aktivacije miofibrila.
[0187] Serija razblaženja jedinjenja napravljena je u DMSO tako da finalna željena koncentracija jedinjenja bude dostignuta u zapremini od 100 µL uz fiksiranu koncentraciju DMSO od 2% (v/v). Tipično 2 µL serijskog razblaženja doda se u ploču sa 96 bunarčića da se dostigne 8 ili 12 tačaka doznog odgovora. Posle dodavanja 50 µL rastvora koji sadrži goveđe srčane miofibrile, PK/LDH i rastvora kalcijuma (koji postiže željenu aktivaciju), enzimska reakcija počinje dodavanjem 50 µL rastvora koji sadrži ATP, PEP i NADH. Napredovanje reakcije prati se na Molecular Devices M5e čitaču ploča, na ambijentalnoj temperaturi, korišćenjem ploča sa prepolovljenom zapreminom. Čitač ploča konfigurisan je za očitavanje apsorbance na 340 nm u kinetičkom modu, za 15 minuta. Podaci se beleže kao nagib odgovora apsorbance u odnosu na vreme. Nagibi odgovora apsorbance u funkciji vremena normalizovani su u odnosu na ploču koja sadrži DMSO. Ova stopa normalizacije se zatim nanosi kao funkcija koncentracije malih molekula i podaci se podešavaju prema četvoroparametarskom podešavanju korišćenjem GraphPad Prism. Srednja tačka ovog grafikona je IC50i to je koncentracija pri kojoj je inhibirano pedeset procenata ukupnog odgovora. Svako sredstvo koje ne postigne pedesetprocentnu inhibiciju pri najvišoj testiranoj koncentraciji saopštava se kao IC50veća od najviše koncentracije koja je testirana (tj. IC50> 25 uM).
Tabela 2. Aktivnost odabranih jedinjenja u inhibiciji miozinaa
a ++ odgovara IC50 vrednostima ispod 1 uM. + odgovara IC50 vrednostima od 1 do 15 uM. odgovara IC50 vrednostima iznad 15 uM. U Tabeli 2, jedinjenja 3, 25, 36, 44, 46, 47, 51-55, 57, 61-64, 566, 67, 70, 82, 84-86, 90, 91-95, 99, 100, 102, 103-116, 117, 119, 122-128, 131, 133 i 134 su referentna jedinjenja.
[0188] Selektivnost prema zečjim skeletnim miofibrilima procenjivana je kako je gore opisano, osim što je miozin bio iz miofibrila brzokontrahujućih skeletnih mišića zeca. Dozni odgovori miofibrila skeletne muskulature zeca određivani su kako je gore opisano.
Primer 74. Stereohemijska sklonost ka aktivnosti
[0189] Odgovarajući parovi stereoizomera testirani su u pogledu sposobnosti da inhibiraju miozinsku aktivnost, kako je gore opisano. Rezultati su sumirani u Tabeli 3. U svim slučajevima, (R) stereoizomer je značajno manje aktivan nego (S) stereoizomer.
Tabela 3. Relativne aktivnosti (S) i (R) stereoizomeraa
a test je izveden korišćenjem 0.5 μM miozina, dakle IC50 vrednosti ispod 1.0 μM su aproksimativne.
Primer 75. Test kontraktilnosti kardiomiocita
[0190] Kontraktilnost ventrikularnih miocita odraslih pacova određuje se metodom detekcije ivice (edge detection) uz korišćenje sistema za beleženje kontraktilnosti IonOptix. Alikvoti miocita u Tyrodeovom puferu (137 mM NaCl, 3.7 mM KCl, 0.5 mM MgCl2, 1.5 mM CaCl2, 4 mM HEPES, 11 mM glukoza) stave se u perfuzionu komoru (Series 20 RC-27NE; Warner Instruments), ostave se da adheriraju za pokrovnu pločicu, a zatim perfunduju Tyrodeovim puferom temperature 37°C. Miociti se stimulišu pri 1 Hz i 10 V. Za eksperimente kontraktilnosti koriste se samo miociti sa jasnim strijacijama, mirni pre stimulacije, sa dužinom ćelije od 120-180 mikrona, bazalnim frakcionim skraćenjem jednakim 3-8% dužine ćelije, i brzinom kontrakcije većom od 100 mikrona u sekundi. Da bi se odredio odgovor na jedinjenja, miociti se prvo 60 sekundi perfunduju Tyrodeovim puferom, što je praćeno izlaganjem jedinjenju tokom 5 minuta i ispiranjem Tyrodeovim puferom 140 sekundi. Podaci se kontinuirano snimaju korišćenjem IonOptix softvera. Podaci o kontraktilnosti analiziraju se korišćenjem Ionwizard softvera (IonOptix). Za svaku ćeliju, 10-20 tranzijenata kontraktilnosti uproseči se i uporedi pod bazalnim uslovima (bez jedinjenja) i uslovima tretmana jedinjenjem. Aktivnost jedinjenja meri se efektima na frakciono skraćenje (fractional shortening, FS), gde frakciono skraćenje predstavlja odnos pika dužine ćelije u kontrakciji podeljen sa bazalnom dužinom ćelije, normalizovan prema 100% za netretiranu ćeliju.
Tabela 4. Inhibicija kontrakcije kardiomiocita odabranim jedinjenjimaa
a predstavlja vrednosti inhibicije frakcionog skraćenja manje od 33%. + predstavlja vrednosti inhibicije frakcionog skraćenja od 33% do 66%. ++ predstavlja vrednosti inhibicije frakcionog skraćenja veće od 66%. U Tabeli 4, jedinjenje 67 je referentno jedinjenje.
Primer 76. Akutni farmakokinetički efekat kod pacova.
[0191] Testirana je sposobnost reprezentativnih jedinjenja da modulišu srčanu kontraktilnost kod pacova, kao mera in vivo ciljne angažovanosti. Frakciono skraćenje, mera kontraktilnosti, određeno je beleženjem promene dijametra leve komore na kraju sistole/kontrakcije (LVESd) u odnosu na dijastolu/relaksaciju (LVEDd) i izražavanjem ove promene kao odnosa FS = (LVEDd - LVESd)/LVEDd. Nahranjeni mužjaci Sprague-Dawley pacova blago su anestezirani izofluoranom i bazalni nivo frakcionog skraćenja meren je u parasternalnoj poziciji korišćenjem transtorakalne ehokardiografije (transthoracic echocardiography, TTE). Posle ovih merenja, životinje se oporavljaju i primaju jednu dozu jedinjenja (4 mg/kg) oralnim putem. Tri sata posle doziranja, drugi i treći ehokardiogram se urade pod lakom anestezijom da se odrede efekti leka na kontraktilnost. Efekti su predstavljeni u Tabeli 5 kao procenat redukcije bazalnog frakcionog skraćenja.
Tabela 5. Inhibicija kontraktilnosti odabranim jedinjenjima, kod pacovaa
1
a predstavlja relativnu promenu frakcionog skraćenja manju od 15%. + predstavlja relativnu promenu frakcionog skraćenja između 15-30%. ++ predstavlja relativnu promenu frakcionog skraćenja veću od 30%. U Tabeli 5, jedinjenje 70 je referentno jedinjenje.
[0192] Iako je napred navedeni pronalazak opisan u nekim detaljima putem ilustracije i primera kako bi se olakšalo njegovo razumevanje, stručnjak u oblasti će prepoznati da određene promene i modifikacije mogu da se izvedu unutar okvira priloženih patentnih zahteva. Kada postoji konflikt između ove patentne prijave i reference date u ovom tekstu, važiće ova patentna prijava.
1 1
12
a ++ odgovara IC50vrednostima ispod 1 μM. + odgovara IC50vrednostima od 1 do 15 μM. odgovara IC50vrednostima iznad 15 μM.
[0201] Selektivnost prema zečjim skeletnim miofibrilima procenjivana je kako je gore opisano, osim što je miozin bio iz miofibrila brzokontrahujućih skeletnih mišića zeca. Dozni odgovori miofibrila skeletne muskulature zeca takođe su određivani kako je gore opisano.
1
Primer 74. Stereohemijska sklonost ka aktivnosti
[0202] Odgovarajući parovi stereoizomera testirani su u pogledu sposobnosti da inhibiraju aktivnost miozina, kako je gore opisano. Rezultati su sumirani u Tabeli 3. U svim slučajevima, (R) stereoizomer je značajno manje aktivan od (S) stereoizomera.
Tabela 3. Relativne aktivnosti (S) i (R) stereoizomeraa
<a>test izveden korišćenjem 0.5 µM miozina, dakle IC50vrednosti ispod 1.0 µM su aproksimativne.
Primer 75. Test kontraktilnosti kardiomiocita
[0203] Kontraktilnost ventrikularnih miocita odraslih pacova određuje se metodom detekcije ivice (edge detection) uz korišćenje sistema za beleženje kontraktilnosti IonOptix. Alikvoti miocita u Tyrodeovom puferu (137 mM NaCl, 3.7 mM KCl, 0.5 mM MgCl2, 1.5 mM CaCl2, 4 mM HEPES, 11 mM glukoza) stave se u perfuzionu komoru (Series 20 RC-27NE; Warner Instruments), ostave se da adheriraju za pokrovnu pločicu, a zatim perfunduju Tyrodeovim puferom temperature 37°C. Miociti se stimulišu pri 1 Hz i 10 V. Za eksperimente kontraktilnosti koriste se samo miociti sa jasnim strijacijama, mirni pre stimulacije, sa dužinom ćelije od 120-180 mikrona, bazalnim frakcionim skraćenjem jednakim 3-8% dužine ćelije, i brzinom kontrakcije većom od 100 mikrona u sekundi. Da bi se odredio odgovor na jedinjenja, miociti se prvo 60 sekundi perfunduju Tyrodeovim puferom, što je praćeno izlaganjem jedinjenju tokom 5 minuta i ispiranjem Tyrodeovim puferom 140 sekundi. Podaci se kontinuirano snimaju korišćenjem IonOptix softvera. Podaci o kontraktilnosti analiziraju se korišćenjem Ionwizard softvera (IonOptix). Za svaku ćeliju, 10-20 tranzijenata kontraktilnosti uproseči se i uporedi pod bazalnim uslovima (bez jedinjenja) i uslovima tretmana jedinjenjem. Aktivnost jedinjenja meri se efektima na frakciono skraćenje (fractional shortening, FS), gde frakciono skraćenje predstavlja odnos pika dužine ćelije u kontrakciji podeljen sa bazalnom dužinom ćelije, normalizovan prema 100% za netretiranu ćeliju.
1 4
Tabela 4. Inhibicija kontrakcije kardiomiocita odabranim jedinjenjimaa
<a>+ predstavlja vrednosti inhibicije frakcionog skraćenja manje od 33%. + predstavlja vrednosti inhibicije frakcionog skraćenja od 33% do 66%. ++ predstavlja vrednosti inhibicije frakcionog skraćenja veće od 66%.
Primer 76. Akutni farmakodinamički efekat kod pacova.
[0204] Testirana je sposobnost reprezentativnih jedinjenja da modulišu srčanu kontraktilnost kod pacova, kao mera in vivo ciljne angažovanosti. Frakciono skraćenje, mera kontraktilnosti, određeno je beleženjem promene dijametra leve komore na kraju sistole/kontrakcije (LVESd) u odnosu na dijastolu/relaksaciju (LVEDd) i izražavanjem ove promene kao odnosa FS = (LVEDd - LVESd)/LVEDd. Nahranjeni mužjaci Sprague-Dawley pacova blago su anestezirani izofluoranom i bazalni nivo frakcionog skraćenja meren je u parasternalnoj poziciji korišćenjem transtorakalne ehokardiografije (transthoracic echocardiography, TTE). Posle ovih merenja, životinje se oporavljaju i primaju jednu dozu jedinjenja (4 mg/kg) oralnim putem. Tri sata posle doziranja, drugi i treći ehokardiogram se urade pod lakom anestezijom da se odrede efekti leka na kontraktilnost. Efekti su predstavljeni u Tabeli 5 kao procenat redukcije bazalnog frakcionog skraćenja.
Tabela 5. Inhibicija kontraktilnosti odabranim jedinjenjima, kod pacovaa
1
a predstavlja relativnu promenu frakcionog skraćenja manju od 15%. + predstavlja relativnu promenu frakcionog skraćenja između 15 i 30%. ++ predstavlja relativnu promenu frakcionog skraćenja veću od 30%.
[0205] Iako je napred navedeni pronalazak opisan u nekim detaljima putem ilustracije i primera kako bi se olakšalo njegovo razumevanje, stručnjak u oblasti će prepoznati da određene promene i modifikacije mogu da se izvedu unutar okvira priloženih patentnih zahteva.
1

Claims (19)

  1. PATENTNI ZAHTEVI 1. Jedinjenje koje ima formulu:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R1 bira iz grupe koju čine (a) C3-C4alkil, C3-C5cikloalkil, i 4- do 6-člani heterocikloalkil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1-2 Ra; ili (b) fenil i 5- do 6-člani heteroaril, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1-3 Ra; R2 je fenil, koji je opciono supstituisan sa 1-5 Rb; R3 je član koji se bira iz grupe koju čine C1-C4alkil, C3-C4cikloalkil, i 4- do 7-člani heterocikloalkil, gde je svaki R3 opciono supstituisan sa 1-2 Rc; R4 je H; X je član koji se bira iz grupe koju čine H i F; svaki Ra se nezavisno bira iz grupe koju čine halo, CN, C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, -CORa1 , -CO2Ra1 , -SO2Ra1 , -SO2NRa1Ra2 , i -CONRa1Ra2 , gde se svaki Ra1 i Ra2 nezavisno bira iz grupe koju čine H i C1-C4alkil ili se opciono Ra1 i Ra2 kada su povezani sa atomom azota kombinuju da formiraju 4- do 6-člani prsten; svaki Rb se nezavisno bira iz grupe koju čine halo, CN, C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, -CORb1 , -CO , -SO b2 , CONRb1Rb2 2Rb1 , -SO2Rb1 2NRb1R , NRb1Rb2 , 5- do 6-člani heteroaril, i 5- do 6-člani heterociklil opciono supstituisan sa okso, gde se svaki Rb1 i Rb2 nezavisno bira iz grupe koju čine H i C1-C4alkil ili se opciono Rb1 i Rb2 kada su povezani sa atomom azota kombinuju da formiraju 4- do 6-člani prsten; i svaki Rc se nezavisno bira iz grupe koju čine halo i C1-C2alkoksi, gde je svaki cikloalkil zasićen ili delimično nezasićen prstenasti sistem; svaki heterocikloalkil je zasićen prstenasti sistem koji uključuje od 1 do 4 heteroatoma koji se biraju između N, O, i S; svaki heteroaril je aromatični prstenasti sistem koji uključuje od 1 do 5 heteroatoma koji se biraju između N, O, i S; i svaka alkoksi grupa je opciono supstituisana jednom ili više komponenti koje se biraju između halo, hidroksil, amino, alkilamino, nitro, cijano, i alkoksi.
  2. 2. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što je X H.
  3. 3. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R<1>bira iz grupe koju čine C3-C4alkil, C3-C5cikloalkil, i 4- do 6-člani heterocikloalkil.
  4. 4. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R<1>bira iz grupe koju čine ciklobutil, izopropil, izobutil, 1-metoksipropan-2-il, cilkopentil, 4-tetrahidropiranil, 1-(metilsulfonil)piperidin-4-il, 1-(metoksikarbonil)piperidin-4- il, fenil, 2-piridil, 3-piridil, 3-izoksazolil, 5-izoksazolil, i 1-metil-3-pirazolil.
  5. 5. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što je R<2>opciono supstituisan sa 1-2 R<b>.
  6. 6. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R<2>bira iz grupe koju čine fenil, 3-metilfenil, 2-fluorofenil, 3-fluorofenil, 4-fluorofenil, 2,5-difluorofenil, 3,5-difluorofenil, 3-hlorofenil, 3-metoksifenil, 3-(3-oksazolidin-2-onil)fenil, 3-(2-metil-1-imidazil)fenil, 3-(1-pirazolil)fenil, i 3-(1,2,4-triazol-1-il)fenil.
  7. 7. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R<3>bira iz grupe koju čine metil, etil, propil, ciklopropil, ciklobutil i 2-metoksimetil. 1
  8. 8. Jedinjenje iz bilo kojeg od patentnih zahteva 1 do 7, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što je R<3>metil.
  9. 9. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što je R<1>izopropil; R<2>je opciono susptituisan sa 1-2 R<b>; i R<3>je metil.
  10. 10. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što je R<1>4- do 6-člani heterocikloalkil, opciono supstituisan sa 1-2 R<a>koji se biraju iz grupe koju čine C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, -CORa1 , -CO2Ra1 , -SO2Ra1 , -SO a1 2NRa1Ra2 , i -CONRa1Ra2 , gde se svaki R i Ra2 nezavisno bira iz grupe koju čine H i C 2 1-C4alkil; R je opciono supstituisan sa 1-2 Rb; i R3 je metil.
  11. 11. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeni time, što se R<1>bira iz grupe koju čine fenil i 5- do 6-člani heteroaril, gde je svaki R<1>opciono supstituisan sa 1-3 Ra; R2 je opciono supstituisan sa 1-2 Rb; i R3 je metil.
  12. 12. Farmaceutska kompozicija, naznačena time, što uključuje jedinjenje iz bilo kojeg od patentnih zahteva 1 do 11 ili 13, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv ekscipijent.
  13. 13. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, naznačeno time, što se bira iz grupe koju čine:
    1 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  14. 14. Jedinjenje iz bilo kojeg od patentnih zahteva 1 do 11 ili 13, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u metodu lečenja bolesti ili stanja odabranih iz grupe koju čine: hipertrofična kardiomiopatija (HCM), srčani poremećaj sa patofiziološkim osobinama udruženim sa HCM, dijastolno popuštanje srca sa očuvanom ejekcionom frakcijom, ishemično oboljenje srca, angina pektoris, restriktivna kardiomiopatija, hronična mitralna regurgitacija, hronična aortna stenoza, i hronična sistemska hipertenzija.
  15. 15. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, naznačeno time, što ima formulu:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  16. 16. Farmaceutska kompozicija iz patentnog zahteva 12, naznačena time, što pomenuta kompozicija uključuje jedinjenje iz patentnog zahteva 15, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
  17. 17. Jedinjenje iz patentnog zahteva 15, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju HCM.
  18. 18. Jedinjenje iz patentnog zahteva 15, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju dijastolnog popuštanja srca sa očuvanom ejekcionom frakcijom.
  19. 19. Jedinjenje iz patentnog zahteva 15, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju dijastolne disfunkcije. 11
RS20200149A 2013-06-21 2014-06-19 Pirimidindionska jedinjenja protiv srčanih stanja RS59906B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361838088P 2013-06-21 2013-06-21
US201461939655P 2014-02-13 2014-02-13
US201461981366P 2014-04-18 2014-04-18
EP14738986.0A EP3010910B1 (en) 2013-06-21 2014-06-19 Pyrimidinedione compounds against cardiac conditions
PCT/US2014/043192 WO2014205223A1 (en) 2013-06-21 2014-06-19 Pyrimidinedione compounds against cardiac conditions

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59906B1 true RS59906B1 (sr) 2020-03-31

Family

ID=51177189

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20200149A RS59906B1 (sr) 2013-06-21 2014-06-19 Pirimidindionska jedinjenja protiv srčanih stanja

Country Status (38)

Country Link
US (9) US9181200B2 (sr)
EP (2) EP3010910B1 (sr)
JP (5) JP6603213B2 (sr)
KR (4) KR102359158B1 (sr)
CN (2) CN105473576B (sr)
AU (5) AU2014281408B2 (sr)
BR (1) BR112015031864B1 (sr)
CA (1) CA2915967C (sr)
CL (1) CL2015003689A1 (sr)
CR (1) CR20160032A (sr)
CY (2) CY1122964T1 (sr)
DK (1) DK3010910T3 (sr)
DO (1) DOP2015000300A (sr)
EA (2) EA030846B1 (sr)
ES (1) ES2773250T3 (sr)
FI (1) FIC20230036I1 (sr)
FR (1) FR23C1047I2 (sr)
GT (1) GT201500348A (sr)
HR (1) HRP20200379T1 (sr)
HU (2) HUE047566T2 (sr)
IL (7) IL302299A (sr)
LT (2) LT3010910T (sr)
MX (3) MX2021005326A (sr)
MY (1) MY190860A (sr)
NL (1) NL301253I2 (sr)
NO (1) NO2023043I1 (sr)
PE (1) PE20160208A1 (sr)
PH (2) PH12021552715A1 (sr)
PL (1) PL3010910T3 (sr)
PT (1) PT3010910T (sr)
RS (1) RS59906B1 (sr)
SG (2) SG10201803459TA (sr)
SI (1) SI3010910T1 (sr)
SM (1) SMT202000071T1 (sr)
TN (1) TN2015000553A1 (sr)
UA (1) UA117929C2 (sr)
WO (1) WO2014205223A1 (sr)
ZA (1) ZA201508959B (sr)

Families Citing this family (58)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103491900B (zh) 2010-12-23 2017-03-01 托尔福公司 用于二尖瓣修复和替换的系统
EP4623867A3 (en) 2011-06-21 2025-11-05 Twelve, Inc. Prosthetic heart valve devices
CA2848334C (en) 2011-10-19 2020-10-20 Twelve, Inc. Devices, systems and methods for heart valve replacement
WO2013059747A1 (en) 2011-10-19 2013-04-25 Foundry Newco Xii, Inc. Prosthetic heart valve devices, prosthetic mitral valves and associated systems and methods
US9039757B2 (en) 2011-10-19 2015-05-26 Twelve, Inc. Prosthetic heart valve devices, prosthetic mitral valves and associated systems and methods
US11202704B2 (en) 2011-10-19 2021-12-21 Twelve, Inc. Prosthetic heart valve devices, prosthetic mitral valves and associated systems and methods
US9579198B2 (en) 2012-03-01 2017-02-28 Twelve, Inc. Hydraulic delivery systems for prosthetic heart valve devices and associated methods
SMT202000071T1 (it) * 2013-06-21 2020-03-13 Myokardia Inc Composti di pirimidinadione contro le condizioni cardiache
US9199945B2 (en) * 2013-06-21 2015-12-01 MyoKardia, Inc. Cycloalkyl-substituted pyrimidinedione compounds
US9428470B2 (en) 2014-02-13 2016-08-30 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic compound
US9346776B2 (en) 2014-02-13 2016-05-24 Takeda Pharmaceutical Company Limited Fused heterocyclic compound
TWI720451B (zh) 2014-02-13 2021-03-01 美商英塞特控股公司 作為lsd1抑制劑之環丙胺
US9670210B2 (en) 2014-02-13 2017-06-06 Incyte Corporation Cyclopropylamines as LSD1 inhibitors
WO2015123437A1 (en) 2014-02-13 2015-08-20 Incyte Corporation Cyclopropylamines as lsd1 inhibitors
TWI687419B (zh) 2014-07-10 2020-03-11 美商英塞特公司 作為ｌｓｄ１抑制劑之咪唑并吡啶及咪唑并吡嗪
WO2016007722A1 (en) 2014-07-10 2016-01-14 Incyte Corporation Triazolopyridines and triazolopyrazines as lsd1 inhibitors
MX373154B (es) 2015-04-03 2020-04-22 Incyte Holdings Corp Compuestos heterocíclicos como inhibidores de demetilasa 1 específica de lisina (lsd1).
LT3334709T (lt) 2015-08-12 2025-03-10 Incyte Holdings Corporation Lsd1 inhibitoriaus druskos
CN106432222A (zh) * 2016-09-19 2017-02-22 丹诺医药(苏州）有限公司 8‑氯‑1‑环丙基‑7‑氟‑9‑甲基‑4‑氧‑4‑氢‑喹嗪‑3‑羧酸酯及其制备方法
CN106946851B (zh) * 2017-03-14 2019-11-12 牡丹江医学院 一种用于预防和治疗肾结石的药物
US10575950B2 (en) 2017-04-18 2020-03-03 Twelve, Inc. Hydraulic systems for delivering prosthetic heart valve devices and associated methods
US10646338B2 (en) 2017-06-02 2020-05-12 Twelve, Inc. Delivery systems with telescoping capsules for deploying prosthetic heart valve devices and associated methods
SG10202112960QA (en) * 2017-08-04 2021-12-30 Myokardia Inc Mavacamten for use in the treatment of hypertrophic cardiomyopathy
CN117924208A (zh) 2018-01-19 2024-04-26 赛特凯恩蒂克公司 作为心肌节抑制剂的二氢苯并呋喃和茚类似物
EP3814343B1 (en) 2018-06-26 2023-01-11 Cytokinetics, Inc. Cardiac sarcomere inhibitors
JP7438148B2 (ja) 2018-06-26 2024-02-26 サイトキネティックス， インコーポレイテッド 心臓サルコメア阻害剤
AU2019328556B2 (en) 2018-08-31 2025-09-04 Cytokinetics, Inc. Cardiac sarcomere inhibitors
US10968200B2 (en) 2018-08-31 2021-04-06 Incyte Corporation Salts of an LSD1 inhibitor and processes for preparing the same
EP4464321A3 (en) * 2018-10-29 2025-01-01 MyoKardia, Inc. Tetrahydropyran (thp)-substituted bicyclic-pyrimidinedione compounds
CN111116492B (zh) * 2019-01-25 2021-07-09 青岛吉澳医药科技有限公司 氘代苯甲氨嘧啶二酮衍生物及其用途
CN110698415B (zh) * 2019-10-21 2023-05-09 上海先行医药开发有限公司 一种肌球蛋白抑制剂及其制备方法和用途
TW202134259A (zh) * 2019-11-10 2021-09-16 美商邁奧卡迪亞公司 用肌凝蛋白調節劑之治療方法
SI4097091T1 (sl) 2020-01-28 2025-05-30 Assia Chemical Industries Ltd. Trdne oblike mavacamtena in postopek za njihovo pripravo
IL300775A (en) * 2020-08-28 2023-04-01 Myokardia Inc Treatment methods with myosin modulator
JP2023550444A (ja) * 2020-11-20 2023-12-01 江▲蘇▼恒瑞医▲薬▼股▲フン▼有限公司 トリアジンジオン系誘導体、その調製方法及びその医薬的応用
CN116507621B (zh) * 2020-11-24 2025-10-17 江苏恒瑞医药股份有限公司 嘧啶二酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN114539229B (zh) * 2020-11-24 2024-10-22 江苏恒瑞医药股份有限公司 嘧啶二酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
MX2023008810A (es) * 2021-02-01 2023-08-04 Dr Reddys Laboratories Ltd Proceso de preparacion de mavacamten y formas en estado solido del mismo.
CA3209693A1 (en) * 2021-02-25 2022-09-01 Xiaobing Yan Substituted pyridine-2,4-dione derivatives
WO2022187501A1 (en) 2021-03-04 2022-09-09 Cytokinetics, Inc. Cardiac sarcomere inhibitors
CN112939876A (zh) * 2021-03-10 2021-06-11 杭州科巢生物科技有限公司 Mavacamten的晶型I及其制备方法
WO2022189599A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Sandoz Ag Crystalline forms of mavacamten for the treatment of hcm
JP2024510001A (ja) * 2021-03-17 2024-03-05 ハンソー・バイオ・エルエルシー 窒素含有複素環式ケトン、その調製方法及び医薬使用
WO2023286719A1 (ja) * 2021-07-13 2023-01-19 日本曹達株式会社 ウラシル化合物の製造方法
JP7315632B2 (ja) * 2021-09-16 2023-07-26 楽天グループ株式会社 特典付与システム、特典付与方法、及びプログラム
CN116410143A (zh) * 2021-12-29 2023-07-11 杭州奥默医药股份有限公司 一种多取代脲嘧啶衍生物及其制备方法和应用
CA3243426A1 (en) * 2022-01-27 2025-02-28 Soter Biopharma Pte. Ltd. CRYSTALLINE FORM OF A 7-AZASPIRO[4,5]DECANE-6,10-DIONE COMPOUND AND RELATED PREPARATION METHOD
CA3248508A1 (en) 2022-04-13 2023-10-19 Assia Chemical Industries Ltd. SOLID STATE FORMS OF MAVACAMTEN AND THEIR PREPARATION METHOD
US20250288586A1 (en) * 2022-04-26 2025-09-18 MyoKardia, Inc. Methods of Administering Myosin Inhibitors
WO2023222103A1 (zh) 2022-05-20 2023-11-23 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种三嗪二酮类衍生物的晶型及制备方法
WO2024056096A1 (zh) * 2022-09-16 2024-03-21 江苏豪森药业集团有限公司 一种含氮杂环酮化合物的晶型及其制备方法
WO2024182469A1 (en) 2023-02-28 2024-09-06 MyoKardia, Inc. Myosin inhibitors for use in the treatment of hypertrophic cardiomyopathy
WO2024206339A1 (en) 2023-03-27 2024-10-03 Edgewise Therapeutics, Inc. Quinolinone amide compounds and uses thereof
WO2024218783A1 (en) * 2023-04-17 2024-10-24 Dasha Pharmaceuticals Private Limited Green chemistry approach for synthesis of mavacamten and its intermediate using novel methodology
IT202300016653A1 (it) 2023-08-03 2025-02-03 Olon Spa Processo per preparare mavacamten e intermedio di processo.
WO2025046606A1 (en) 2023-08-26 2025-03-06 Micro Labs Limited Granules of mavacamten for oral administration
WO2025096779A2 (en) 2023-11-01 2025-05-08 Bristol Myers Squibb Company Methods of treatment with a myosin inhibitor using protein levels
WO2025130408A1 (zh) * 2023-12-20 2025-06-26 福石生物科技(合肥)有限公司 一种肌球蛋白抑制剂及其应用

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1280877B (de) 1960-11-16 1968-10-24 Robugen Gmbh Verfahren zur Herstellung von in 1-Stellung substituierten 4-Aminouracilen
JPS61205261A (ja) 1985-03-08 1986-09-11 Sagami Chem Res Center ６―置換―５―フルオロウラシル誘導体
JPH0637479B2 (ja) * 1987-12-28 1994-05-18 三井東圧化学株式会社 新規ピリミジン誘導体、その製造法およびそれを含有する抗不整脈剤
US5008267A (en) * 1988-10-29 1991-04-16 Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated Pyrimidinedione compounds, method of producing the same and antiarrythmic agents containing the same
JPH03173885A (ja) 1989-12-01 1991-07-29 Mitsui Toatsu Chem Inc ピリミジンジオン誘導体化合物、該化合物の製造法および該化合物を含む抗不整脈剤
FR2659656B1 (fr) 1990-03-15 1994-09-09 Sanofi Sa Derives de pyrimidinedione-2,4 et medicaments les contenant.
JPH0413669A (ja) * 1990-04-27 1992-01-17 Mitsui Toatsu Chem Inc 新規ピリミジンジオン誘導体及び該化合物を含有する抗不整脈剤
JPH06128238A (ja) * 1992-10-20 1994-05-10 Mitsui Toatsu Chem Inc 新規ピリミジンジオン誘導体
DE69500377T2 (de) 1994-08-19 1997-10-09 Mitsui Toatsu Chemicals Pyrimidin-Dion-Derivate und diese enthaltende antiarrhythmische Zusammensetzungen
US5516905A (en) 1994-08-30 1996-05-14 University Of Massachusetts Medical Center Antibiotic compounds and methods to treat gram-positive bacterial and mycoplasmal infections
DK0967209T3 (da) 1998-06-26 2003-03-24 Crompton Vinyl Additives Gmbh Hidtil ukendte NH2-modificerede 6-aminouraciler som stabilisatorer af halogenholdige polymerer
US7202051B1 (en) 1999-05-18 2007-04-10 Cytokinetics, Inc. Compositions and assays utilizing ADP or phosphate for detecting protein modulators
US7416856B2 (en) 1999-05-18 2008-08-26 Cytokinetics, Inc. High sensitivity assay for detection of nucleoside diphosphate production
WO2001029010A1 (en) 1999-10-21 2001-04-26 Merck & Co., Inc. Gram-positive selective antibacterial compounds, compositions containing such compounds and methods of treatment
US6495337B1 (en) 2000-03-29 2002-12-17 Cytokinetics, Inc. High throughput sarcomeric assay
US20030114445A1 (en) 2001-06-15 2003-06-19 Chengxin Zhi N3-substituted 6-anilinopyrimidines and methods to treat-Gram-positive bacterial and mycoplasmal infections
WO2002102769A2 (en) 2001-06-15 2002-12-27 University Of Massachusetts Methods for synthesizing substituted pyrimidines
US20030114414A1 (en) 2001-06-15 2003-06-19 Chengxin Zhi Methods for synthesizing substituted pyrimidines
DE10208460A1 (de) 2002-02-27 2003-09-04 Bayer Ag Uracil-Thioether
JP2006500351A (ja) * 2002-08-13 2006-01-05 ワーナー−ランバート・カンパニー、リミテッド、ライアビリティ、カンパニー マトリックスメタロプロテアーゼ−１３阻害剤としてのピリミジン−２，４−ジオン誘導体
CN102079743B (zh) 2004-03-15 2020-08-25 武田药品工业株式会社 二肽基肽酶抑制剂
US20060194821A1 (en) 2005-02-18 2006-08-31 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Compounds inhibiting the aggregation of superoxide dismutase-1
JP2011507910A (ja) * 2007-12-21 2011-03-10 ユニバーシティー オブ ロチェスター 真核生物の寿命を変更するための方法
GB0908193D0 (en) * 2009-05-13 2009-06-24 Albright Patents Treatment of disease state
US9199945B2 (en) * 2013-06-21 2015-12-01 MyoKardia, Inc. Cycloalkyl-substituted pyrimidinedione compounds
SMT202000071T1 (it) * 2013-06-21 2020-03-13 Myokardia Inc Composti di pirimidinadione contro le condizioni cardiache

Also Published As

Publication number Publication date
IL275837A (en) 2020-08-31
CN105473576A (zh) 2016-04-06
AU2020204271B2 (en) 2022-01-06
JP6980734B2 (ja) 2021-12-15
EA030846B1 (ru) 2018-10-31
CY2023027I1 (el) 2024-02-16
LTPA2023535I1 (sr) 2023-12-27
JP7376556B2 (ja) 2023-11-08
US9181200B2 (en) 2015-11-10
CR20160032A (es) 2016-04-01
MX2015017865A (es) 2016-09-06
MY190860A (en) 2022-05-12
CY2023027I2 (el) 2024-09-20
PH12015502794B1 (en) 2022-09-02
CN109384729B (zh) 2023-06-30
UA117929C2 (uk) 2018-10-25
CY1122964T1 (el) 2021-10-29
KR102359158B1 (ko) 2022-02-08
KR20160026997A (ko) 2016-03-09
IL317628A (en) 2025-02-01
IL323967A (en) 2025-12-01
IL243222A0 (en) 2016-02-29
EP3702352A1 (en) 2020-09-02
HUE047566T2 (hu) 2020-04-28
US9585883B2 (en) 2017-03-07
EP3010910A1 (en) 2016-04-27
CA2915967C (en) 2021-07-20
CN109384729A (zh) 2019-02-26
MX2021005326A (es) 2022-11-17
DOP2015000300A (es) 2016-03-15
KR20210118470A (ko) 2021-09-30
LTC3010910I2 (sr) 2025-08-25
WO2014205223A1 (en) 2014-12-24
NO2023043I1 (no) 2023-12-01
FR23C1047I2 (fr) 2024-11-15
FR23C1047I1 (fr) 2024-01-12
ES2773250T3 (es) 2020-07-10
PL3010910T3 (pl) 2020-07-27
BR112015031864A2 (pt) 2017-07-25
SG11201510163TA (en) 2016-01-28
IL275837B (en) 2021-09-30
JP2016522263A (ja) 2016-07-28
IL243222B (en) 2020-07-30
JP6603213B2 (ja) 2019-11-06
DK3010910T3 (da) 2020-02-17
AU2024202464A1 (en) 2024-05-02
AU2014281408B2 (en) 2018-08-16
PH12021552715A1 (en) 2022-05-11
IL310829A (en) 2024-04-01
IL302299A (en) 2023-06-01
JP2020019809A (ja) 2020-02-06
PT3010910T (pt) 2020-02-21
KR102304121B1 (ko) 2021-09-24
AU2018264088A1 (en) 2018-12-06
HK1223930A1 (en) 2017-08-11
KR20220020410A (ko) 2022-02-18
CN105473576B (zh) 2018-10-30
AU2020204271A1 (en) 2020-07-16
NL301253I2 (nl) 2024-01-10
PE20160208A1 (es) 2016-05-04
IL285971A (en) 2021-10-31
EP3010910B1 (en) 2020-02-05
HUS2300042I1 (hu) 2024-01-28
PH12015502794A1 (en) 2016-03-21
LT3010910T (lt) 2020-03-10
EA201690066A1 (ru) 2016-05-31
GT201500348A (es) 2018-12-20
NZ715456A (en) 2021-01-29
TN2015000553A1 (en) 2017-04-06
AU2022202298A1 (en) 2022-04-28
AU2014281408A1 (en) 2016-01-21
US20170281626A1 (en) 2017-10-05
CL2015003689A1 (es) 2016-10-14
JP2022036966A (ja) 2022-03-08
JP2024010108A (ja) 2024-01-23
FIC20230036I1 (fi) 2023-12-01
HRP20200379T1 (hr) 2020-06-12
US20240382486A1 (en) 2024-11-21
US20180311242A1 (en) 2018-11-01
CA2915967A1 (en) 2014-12-24
MX2022014414A (es) 2022-12-07
SMT202000071T1 (it) 2020-03-13
MX382520B (es) 2025-03-13
US20200297726A1 (en) 2020-09-24
USRE50050E1 (en) 2024-07-23
SG10201803459TA (en) 2018-05-30
US20230165860A1 (en) 2023-06-01
EA201891009A1 (ru) 2018-09-28
US20140378464A1 (en) 2014-12-25
ZA201508959B (en) 2022-09-28
BR112015031864B1 (pt) 2022-02-15
KR20230144117A (ko) 2023-10-13
NL301253I1 (sr) 2023-12-13
SI3010910T1 (sl) 2020-04-30
JP2025163126A (ja) 2025-10-28
US20160030428A1 (en) 2016-02-04
US20210346379A1 (en) 2021-11-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7376556B2 (ja) 心臓状態に対するピリミジンジオン化合物
HK40032330A (en) Pyrimidinedione compound against cardiac conditions
HK1223930B (en) Pyrimidinedione compounds against cardiac conditions
OA17651A (en) Pyrimidinedione compounds against cardiac conditions.
EA048949B1 (ru) Соединения пиримидиндиона
NZ715456B2 (en) Pyrimidinedione compounds against cardiac conditions
EA042175B1 (ru) Соединения пиримидиндиона