RS59687B1 - Oblici doziranja i terapeutske primene l-4-hlorkinurenina - Google Patents

Description

Opis

Oblast pronalaska

Ovo otkriće odnosi se na kompozicije L-4-hlorkinurenina (L-4-Cl-KYN) u obliku jedinične doze i na primenu ovih kompozicija za lečenje neuroloških stanja. Ovaj pronalazak se odnosi na kompozicije L-4-hlorkinurenina (L-4-Cl-KYN) u obliku jedinične doze i na primenu ovih kompozicija za lečenje depresije i diskinezija povezanih sa L-DOPA, pri čemu je ova kompozicija formulisana za oralno davanje. Ovaj pronalazak se odnosi na L-4-hlorkinurenin za primenu u postupku lečenja depresije, oralnim davanjem pacijentu terapeutski efikasne količine L-4-hlorkinurenina.

Pozadina pronalaska

Glutaminska kiselina je glavni egzitacioni neurotransmiter u centralnom nervnom sistemu sisara i ona je uključena u regulaciju nekoliko različitih mehanizama. Saopštene su povezanosti između prekomerne endogene glutaminske kiseline i različitih neuroloških poremećaja, kako akutnih tako i hroničnih, kao što su cerebralna ishemija, epilepsija, amiotrofična lateralna skleroza, Hantingtonova bolest, Parkinsonova bolest i Alchajmerova bolest.

Poznato je da preterano aktivan glutamatergički prenos preko N-metil-D-aspartatnih (NMDA) receptora (NMDA-R) igra ključnu ulogu u nekoliko neuroloških stanja, kao što je, na primer, neuropatski bol. Međutim, direktno delovanje NMDA-R antagonista proizvodi nekoliko sporednih neželjenih efekata, kao što je psihoza, koja je ograničila njihovu terapeutsku korisnost. Antagonizam NMDA-Receptora se takođe može postići preko blokade modulatornog mesta na ovim NMDA-Receptorima, koje je poznato kao glicin B (GlyB) koagonistno mesto. (Referenca 8, i citati za ovu referencu i druge reference citirane na ovaj način su dole prikazani). Kada se porede sa klasičnim NMDA-R antagonistima, GlyB antagonisti imaju mnogo bolji sigurnosni profil i ne prouzrokuju neželjene štetne sporedne efekte koji su povezani sa „klasičnim“ NMDA-R antagonistima. (Reference 1, 6 i 10).

Takođe je pokazano da GlyB antagonisti smanjuju hiperalgeziju i alodiniju u ex vivo i životinjskim modelima neuropatskog bola, i imaju manje neželjenih sporednih efekata nego klasični NMDA-R antagonisti, što ih čini sigurnijom alternativom kao potencijalnih analgetika. Videti, na primer, Referencu 2.

Jedan od najsnažnijih i najspecifičnijih GlyB antagonista koji je sada poznat je 7-hlorkinurenska kiselina (7-Cl-KYNA), koja je sintetički, hlorovan analog endogenog neuromodulatora, kinurenske kiseline. Pokazano je da 7-hlorkinurenska kiselina sprečava egzitotoksično i ishemijsko oštećenje neurona ali kao većina GlyB antagonista ne prelazi krvno-moždanu barijeru. Na taj način, njena klinička primena je ograničena. (Reference 4 i 9).

Nasuprot tome, L-4-hlorkinurenin, prolek 7-hlorkinurenske kiseline, posle davanja lako dobija pristup centralnom nervnom sistemu (CNS) (Reference 3, 5, 11 i 12). Unutar aktiviranih astrocita L-4-hlorkinurenin se efikasno pretvara u 7-hlorkinurensku kiselinu (Referenca 5), i nivoi 7-hlorkinurenske kiseline u mozgu se povećavaju na mestima povrede neurona ili egzitotoksičnog napada kao rezultat aktiviranja astrocita. (Referenca 5). Aktivnost i metabolizam L-4-hlorkinurenina u životinjskom testiranju su opisani, na primer, u referencama Wu H. et al. (European Journal of Pharmacology 390 (2000) 267-274), Lee S. et al. (Neuroscience Letters 304 (2001) 185-188), Guidetti P. et al. (Experimental Neurology 163 (1) (2000) 123-130), Linderholm K. L. et al. (Neuropharmacology 53 (2007) 918-924) and Wu H. et al. (European Journal of Pharmacology 319 (1997) 13-20).

U predkliničkim ispitivanjima, L-4-hlorkinurenin je pokazao aktivnost u borbi protiv napada kod pacova. (Referenca 11). Takođe je nađeno da ovo jedinjenje povećava brzinu paljenja i rafalnog paljenja dejstva dopaminergičnih neurona u mozgovima pacova. (Referenca 7).

Postupci za sintezu jedne klase 4,6-disupstituisanih derivata kinurenina, uključujući L-4-hlorkinurenin, i njihovu primenu kao antagonista prema NMDA receptoru su opisani u U.S. Patentu No. 5,547,991 prema Palfreyman et al. (1996). Takođe su opisane farmaceutske kompozicije koje sadrže ova jedinjenja i njihova terapeutska primena. Dokument US 2011/306674 opisuje farmaceutsku kombinaciju koja sadrži NMDA-antagonist i jedinjenje 3-(3-dimetilamino-1-etil-2-metil-propil)-fenol za lečenje bola.

Rezime pronalaska

Ovaj pronalazak i različita izvođenja su izloženi u zahtevima koji formiraju deo ove patentne prijave.

U jednom pogodnom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutske kompozicije koje se po jediničnoj dozi uglavnom sastoje od L-4-hlorkinurenina u količini od oko 360, 1.080 ili 1.440 mg, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim sastojcima kao što su nosači i ekscipijensi pri čemu je ova kompozicija formulisana za oralno davanje. Drugi aspekt ovog otkrića obuhvata davanje terapeutski efikasnih količina ovih jedinjenja da se leče stanja, poremećaji i bolesti koji su prouzrokovani neurološkom disfunkcijom.

Drugi aspekt ovog pronalaska se odnosi na protokole doziranja za inventivne kompozicije, kao što su davanje dnevne doze od 1 do oko 14 ili od 1 do oko 30 dana, pogodnije od oko 7 do oko 24 dana, i najpogodnije od oko 12 do oko 16 dana.

Još jedan aspekt ovog otkrića se odnosi na kompozicije za primenu u postupcima za lečenje depresije i za lečenje različitih tipova bola, uključujući hiperalgeziju, davanjem terapeutski efikasne količine L-4-hlorkinurenina.

U jednom drugom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutske kompozicije za primenu u terapeutskim postupcima davanja L-4-hlorkinurenina u količini koja proizvodi u krvnoj plazmi nivoe 7-hlorkinurenske kiseline kao što je opisano u ovoj prijavi. Jedan pogodan aspekt ovog pronalaska se odnosi na L-4-hlorkinurenin za primenu u postupku koji obuhvata davanje L-4-hlorkinurenina pri dozi dovoljnoj da proizvodi u krvnoj plazmi nivoe 7-hlorkinurenske kiseline u opsegu od oko 15 ng/mL do 550 ng/mL.

Drugi aspekt ovog pronalaska se odnosi na kombinaciju farmaceutskog proizvoda za primenu u postupcima koji obuhvataju formulacije koje uključuju L-DOPA i farmaceutsku kompoziciju L-4-hlorkinurenina koja je opisana u ovoj prijavi, i njihovo zajedničko davanje, bilo simultano ili sekvenciono pri doziranjima opisanim u ovoj prijavi u cilju smanjenja diskinezija povezanih sa L-DOPA.

Kratak opis crteža

Sledeće slike, koje su dole opisane i koje su uključene u ovu specifikaciju i čine jedan njen deo, ilustruju tipična izvođenja prema ovom otkriću i ne mogu se smatrati ograničavajućim za opseg ovog pronalaska, jer se ovaj pronalazak može primeniti na druga podjednako efektivna izvođenja. Ove slike nisu neophodno u razmeri i neke osobine i neki delovi ovih slika mogu se prikazati povećanim u razmeri ili shematski u cilju jasnoće i konciznosti.

Slika 1 predstavlja srednju vrednost (n = 12 ili 13) koncentracije L-4-hlorkinurenina u krvnoj plazmi u dane 1 i 14 posle oralnog davanja jednodnevnih doza L-4-hlorkinurenina.

Slika 2 predstavlja srednju vrednost (n = 12 ili 13) koncentracije 7-hlorkinurenske kiseline u krvnoj plazmi u dane 1 i 14 posle oralnog davanja jednodnevnih doza L-4-hlorkinurenina.

Detaljan opis pronalaska

Ovaj pronalazak je dole opisan sa referencom na detaljna slikovita izvođenja. Biće očigledno da se ovaj pronalazak može izvesti prema širokom izboru varijanti oblika, od kojih neki mogu biti sasvim različiti od onih koji su opisani u izloženim izvođenjima. Shodno tome, dole opisani specifični strukturni i funkcionalni detalji su samo reprezentativni i ne ograničavaju opseg ovog pronalaska.

U radu koji je potpomognut od strane Nacionalnih Instituta za zdravlje, pokazano je da L-4- hlorkinurenin (takođe poznat kao VistaGen AV-101) ima snažna antihiperalgetična dejstva u tri životinjska modela zapaljenja perifernih tkiva i povrede živaca pri čemu nisu evidentirani neželjeni sporedni efekti. Ukupno uzevši, u životinjskim modelima, L-4-hlorkinurenin je dobro tolerisan i nije proizveo bezbednosne ili toksične efekte pri dozama koje proizvode antihiperalgetične efekte u životinjskim modelima.

Ovaj pronalazak se bazira na kliničkim nalazima ovih pronalazača da su izvesne doze L-4-hlorkinurenina ustvari sigurne i ljudi mogu da ih tolerišu bez bitnih neželjenih sporednih efekata ili bilo kakvih značajnih štetnih efekata. Osim toga, iznenađujuće je nađeno da pri takvim doziranjima, subjekti su saopštili oslobađanje od neuropatskog bola, naročito, hiperalgetičnog bola. Ovo jedinjenje je antihiperalgetično. Takođe je iznenađujuće nađeno da je bitan broj subjekata u ovoj kliničkoj studiji saopštio pozitivna osećanja „dobrog stanja“ od davanja L-4-hlorkinurenina, što je jedan indikator antidepresivnog dejstva, dok ovo nije saopšteno od strane placebo kontrola.

Ovo otkriće se odnosi na kompozicije za primenu u terapeutskim postupcima da se leče različiti tipovi neuroloških poremećaja, neuropatija (kako centralnih tako i perifernih) i disfunkcije kao što su one prouzrokovane (a) povredom i toksičnostima leka kao što je rezultat iz hemoterapije i antivirusnih lekova; (b) bolestima i neurodegenerativnim poremećajima kao što su dijabetes, kancer, virusna infekcija, multipla skleroza, spondilitis, polineuritis, hirurške operacije, amputacija, epilepsija, konvulzije, Parkinsonova bolest, Hantingtonova bolest i Alchajmerova bolest i onim bolestima i stanjima koja obuhvataju prekomerno aktivnu glutamatergičku transmisiju preko N-metil-D-aspartatnih receptora; i (c) neravnotežama u neurotransmiterima, receptorima i signalizujućim mehanizmima povezanim sa depresijom i drugim psihijatrijskim poremećajima. Lečenje bola se izrazito razmatra, uključujući ali ne ograničavajući se na neurogenski bol, spontani bol, bol alodinijske hiperalgezije, bol mehaničke hiperalgezije i bol toplotne hiperalgezije. Osim toga, ova primena u postupku lečenja depresije je jedan aspekt ovog pronalaska.

Definicije

„Koji se sastoji uglavnom od specificirane količine farmaceutski aktivnog agensa“ znači da nema dodatne količine tog agensa. Nije isključeno prisustvo drugih sastojaka, na primer, ekscipijenasa i/ili maziva, i tome sličnog, ili različitih farmaceutski aktivnih sastojaka u kombinaciji. Na primer, izrazito se razmatra kombinacija L-DOPA sa 4-hlorkinureninom, kao i druge kompozicije i postupci za njihovo davanje što uključuje 4-hlorkinurenin plus neki drugi aktivni sastojak koje se daju simultano ili sekvenciono, ali u vremenskom okviru u kojem oni suštinski imaju isti terapeutski efekat kao i kada se oni daju u jednostrukoj kombinaciji farmacutskog proizvoda.

„Farmaceutska jedinična doza“, „jedinična doza“ ili „oblik jedinične doze“ označava jednostruku dozu L-4-hlorkinurenina, koja može biti davana nekom subjektu i sa kojom se lako može rukovati i pakovati, pri čemu ostaje fizički i hemijski stabilna jedinična doza.

„Terapeutski efikasan“ znači da ova količina L-4-hlorkinurenina koja je data i pretvorena u 7-hlorkinurensku kiselinu deluje tako da potpuno reguliše transmisiju signala posredovanu sa NMDA-R koja je dovoljna da proizvodi kliničko poboljšanje u neurološkoj funkciji, kao što je smanjenje neuropatskog bola ili pojačanje u osećajima dobrog stanja.

„Bez značajnog štetnog efekta“ znači da suštinski svi pacijenti kojima je dat L-4-hlorkinurenin neće imati više od „blagog“ neželjenog štetnog događaja kao što je definisano od strane U. S. Food and Drug Administration (FDA). FDA definiše jedan „blag štetan događaj“ kao događaj koji se lako može tolerisati od strane subjekta, koji prouzrokuje minimalnu nelagodnost i ne ometa normalne svakodnevne aktivnosti. Nasuprot tome, „umereni štetni neželjeni događaj“ je događaj koji dovoljno uznemirava prouzrokujući da ometa normalne svakodnevne aktivnosti.

Farmaceutske kompozicije

L-4-hlorkinurenin je sintetizovan pomoću postupaka Palfreyman-a et al, U.S. Patent No. 5,547,991. U medicinskoj literaturi su takođe saopšteni skoriji postupci sinteze, kao što su Salituro et al. „Enzyme-Activated Antagonists of the Strychnine-Insensitive Glycine/NMDA Receptor“, J. Med. Chem. 1994:37-334, 336. L-4-hlorkinurenin je takođe komercijalno raspoloživ iz različitih izvora, uključujući BOC Sciences (Shirley, NY, USA) i Advanced Technology & Industrial Co., Ltd. (Hong Kong, China). Cambridge Major Laboratories (Germantown, WI, USA) su proizvodile L-4-hlorkinurenin koji je upotrebljavan u kliničkoj studiji koja je diskutovana u ovoj patentnoj prijavi.

Jedan pogodan primer izvođenja ovog pronalaska se odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže jediničnu dozu terapeutski efektivne količine L-4-hlorkinurenina koje su formulisane za oralno davanje, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačima i ekscipijensima.

Farmaceutska kompozicija ovog pronalaska može se formulisati u farmaceutskom obliku za oralno davanje koji sadrži L-4-hlorkinurenin prema ovom pronalasku i koji proizvodi u krvnoj plazmi nivo 7-hlorkinurenske kiseline kao što je opisano u ovoj prijavi. Smatra se da precizna doziranja L-4-hlorkinurenina koja treba da se daju u opsezima opisanim za ovaj pronalazak treba da budu bezbedna i efektivna, i da ona proizvode nivoe u krvnoj plazmi 7-hlorkinurenske kiseline koji rezultuju iz davanja L-4-hlorkinurenina kao što je opisano u ovoj patentnoj prijavi na Slici 2 i na drugim mestima. Na taj način se izrazito razmatraju opsezi nivoa u krvnoj plazmi 7-hlorkinurenske kiseline od oko 15 ng/mL do oko 65 ng/mL, od oko 65 ng/mL do oko 300 ng/mL i od oko 300 ng/mL do oko 550 ng/mL. Takođe se razmatra da se jedinična doza formulacije ovog pronalaska može davati jedanput ili više puta na dan, u cilju da se produži vremenski period u kojem se nivoi 4-hlorkinurenina povišavaju do terapeutski efektivne količine 7-hlorkinurenske kiseline.

Jedinična doza farmaceutskih kompozicija L-4-hlorkinurenina za oralno davanje pogodno sadrži oko 50 mg do oko 1.800 mg, pogodnije oko 260 mg do oko 1.540 mg, još pogodnije oko 260 mg do oko 460 mg, oko 310 mg do oko 410 mg, oko 980 mg do oko 1.180 mg, oko 1.030 mg do oko 1.130 mg, oko 1.340 mg

1

do oko 1.540 mg, oko 1.390 mg do oko 1.490 mg i najpogodnije oko 360, 1.080 ili 1.440 mg.

Razmatra se da su režimi doziranja za kompozicije ovog pronalaska terapeutski efektivni. Dok se razmatra dnevni režim doziranja, kao što je gore opisano, on će pogodno biti od oko 5 do oko 30 dana, uključujući kraće i duže režime doziranja kao što određuje pacijentov lekar. Posebno se izrazito razmatraju režimi doziranja od oko 7 do oko 24 dana, i oko 12 do oko 16 dana.

Jedan pogodan aspekt ovog pronalaska obuhvata 4-hlorkinurenin u sprezi sa L-DOPA za primenu u postupku da se smanji diskinezija asocirana sa održavajućim dozama (tipično, određenim empirijski za svakog pacijenta od strane lekara) L-DOPA; ili da se smanji minimalna efektivna doza L-DOPA, čime se odlaže napad i/ili smanjuje ozbiljnost ove diskinezije. Farmaceutske kompozicije prema ovom pronalasku mogu se davati u kombinaciji sa L-DOPA, konkurentno ili dovoljno blisko u vremenskoj blizini da se poboljšaju sporedni neželjeni efekti davanja L-DOPA. Protokoli za davanje L-DOPA su dobro poznati kao i asocirane diskinezije. Videti, na primer, Tambasco, N. et al. „Clinical Aspects and Management of Levodopa-Induces Dyskiesia,“ Parkinson’s Disease 2012, Article ID 745947, doi:10.1155/2012/745947.

Farmaceutska kompozicija prema ovom pronalasku može biti, na primer, tableta, kapsula, tečna suspenzija, čvrst rastvor, mekan gel, u obliku injekcije, lokalno ili transdermalno, ili supozitorija i nazalno uzimanje. Farmaceutska kompozicija za oralno davanje prema ovom pronalasku može biti, na primer, tableta, kapsula, tečna suspenzija, čvrst rastvor ili mekan gel. Dodatno, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska takođe može biti modifikovan oblik za oslobađanje, kao što je, ali nije ograničena na to, bimodalni ili prošireni oblik oslobađanja.

Uopšte, farmaceutske kompozicije ovog pronalaska mogu se pripremiti pomoću konvencionalnih postupaka koji su poznati u tehnici farmaceutskih formulacija. Na primer, videti Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18th Ed., (Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1990). U čvrstom dozirajućem obliku, L-4-hlorkinurenin se može pomešati sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom, kao što je, na primer, natrijum-citrat ili dikalcijumfosfat ili (a) sa punilima ili proširivačima, kao što su, na primer, skrobovi, laktoza, saharoza, glukoza, manitol i silicijumska kiselina, (b) sa vezivima, kao što su, na primer, derivati celuloze, skrob, alginati, želatin, polivinilpirolidon, saharoza i gumi-akacija, (c) sa sredstvima za održavanje vlage, kao što je, na primer, glicerol, (d) sa sredstvima za dezintegraciju, kao što su, na primer, agar-agar, kalcijum-karbonat, skrob od krompira ili tapioke, alginska kiselina, natrijumkroskarmeloza, kompleksni silikati i natrijum-karbonat, (e) sa usporivačima rastvaranja, kao što je, na primer, parafin, (f) sa ubrzivačima apsorpcije, kao što su, na primer, kvaternerna amonijumova jedinjenja, (g) sa sredstvima za vlaženje, kao što su, na primer, cetil-alkohol i glicerol-monostearat, magnezijum-stearat i slično, (h) sa adsorbensima, kao što su, na primer, kaolin i bentonit, i (i) sa mazivima, kao što su, na primer, talk, kalcijum-stearat, magnezijum-stearat, čvrsti polietilen-glikoli, natrijum-lauril-sulfat, ili njihove smeše. U slučaju kapsula, tableta i pilula, ovi oblici doziranja takođe mogu sadržati sredstva za puferovanje.

Farmaceutski prihvatljivi adjuvansi koji su poznati u tehnici farmaceutske formulacije takođe se mogu upotrebiti u farmaceutskim kompozicijama ovog pronalaska. Oni obuhvataju, ali nisu ograničeni na njih, sredstva za konzerviranje, sredstva za kvašenje, sredstva za suspendovanje, sredstva za zaslađivanje, sredstva za ukus, sredstva za miris, emulzifikatore i sredstva za delenje. Sprečavanje dejstva mikroorganizama može se osigurati uključivanjem različitih antibakterijskih i antifungalnih sredstava, na primer, parabena, hlorbutanola, fenola, sorbinske kiseline i sličnog. Takođe može biti poželjno da se uključe izotonski agensi, na primer, šećeri, natrijum-hlorid i slično. Ako se to želi, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska takođe može sadržati manje količine pomoćnih supstanci kao što su sredstva za vlaženje ili emulzifikatori, sredstva koja puferuju pH, antioksidansi i slično, kao što su, na primer, limunska kiselina, sorbitan-monolaurat, trietanolamin-oleat, butilovan hidroksitoluen, itd.

Čvrsti oblici doziranja kao što je gore opisano mogu se pripremiti sa prevlakama i omotačima, kao što su crevne prevlake i druge dobro poznate prevlake u ovoj oblasti medicine. Oni mogu sadržati umirujuće agense i takođe mogu biti takve vrste kompozicija da one oslobađaju aktivno jedinjenje ili jedinjenja u nekom delu intestinalnog trakta na odlažući način. Neograničavajući primeri umetnutih kompozicija koje se mogu primeniti su polimerne supstance i voskovi. Ova aktivna jedinjenja takođe mogu biti u mikrokapsuliranom obliku, ako je to odgovarajuće, sa jednim ili više gore pomenutih ekscipijenasa.

Suspenzije, pored aktivnih jedinjenja, mogu sadržati agense za suspendovanje, kao što su, na primer, etoksilovani izostearil-alkoholi, polioksietilen-sorbitol i sorbitanski estri, mikrokristalna celuloza, aluminijummetahidroksid, bentonit, agar-agar i tragakant, ili smeše ovih supstanci i slično.

Kompozicije za rektalno davanje su, na primer, supozitorije koje se mogu dobiti mešanjem L-4-hlorkinurenina prema ovom pronalasku sa, na primer, pogodnim neiritirajućim ekscipijensima ili nosačima, kao što su puter od kakaa, polietilen-glikol ili vosak za supozitorije, koji može biti čvrst na običnim temperaturama ali može biti tečan na temperaturi ljudskog tela i zbog toga se topi dok je u pogodnoj šupljini tela i tu oslobađa aktivnu komponentu.

1

Kliničko ispitivanje:

U fazi 1b, na jednom mestu, sa nasumice podeljenim subjektima, dvostruko slepo, placebo kontrolisano, ispitivanje je izvođeno obuhvatajući višestruke oralne doze AV-101 u zdravim muškim i ženskim subjektima. Subjekti su nasumično odabrani i podeljeni u jednu od tri kohorte (360, 1.080 i 1.440 mg) i primili dnevnu oralnu dozu za 14 uzastopnih dana. Svaka kohorta je originalno uključivala 12 subjekata na aktivnom leku i 4 subjekta na placebo probi. Procenjeni su sigurnost, farmakokinetika (PK), podnošljivost lečenja i antihiperalgetički efekat AV-101 na hiperalgeziju indukovanu sa kapsaicinom.

Sledeći PK parametri su dobiveni iz profila koncentracije plazme u zavisnosti od vremena da se odredi jednostruka doza i višestruka doza PK profila AV-101 (L-4-hlorkinurenina) i aktivnog metabolita, 7-hlorkinurenske kiseline: maksimalna koncentracija (Cmax), poluživot terminalne eliminacije (t1/2), vreme do maksimalne koncentracije (Tmax), površina ispod krive proučavanja koncentracije leka u plazmi u zavisnosti od vremena i to od vremena 0 do vremena poslednje merljive koncentracije (AUC0-t) i površina ispod krive proučavanja koncentracije leka u plazmi u zavisnosti od vremena polazeći od vremena 0 ekstrapolisanog do beskonačnosti (AUC0-∞).

Krv je sakupljena u Vacutainer litijum-heparinske epruvete od 6 ml. Uzorci su centrifugirani i plazma je odvojena od ćelija i zamrznuta u toku 30 minuta posle centrifugiranja. Centrifugirani uzorci su držani na ledu dok nisu stavljeni u frižider. Uzorci plazme su skladišteni zamrznuti na približno -20<o>C do njihove otpreme u kontraktor za analizu.

Uzorci sa osnovne linije (0 minuta) su sakupljeni pre nego što je lek davan na Dan 1 i Dan 14. Uzorci su zatim sakupljani pri 0,5, 1, 1,5, 2, 4, 6, 8, 12 i 24 sata posle doziranja na Dan 1 i Dan 14.

Analiza pomoću tečne hromatografije u tandemu sa masenom spektrometrijom je upotrebljena za određivanje 7-hlorkinurenske kiseline i L-4-hlorkinurenina u humanoj plazmi. Standardni opseg krive je bio od 2,00 do 1.000 ng/mL za 7-hlorkinurensku kiselinu, sa donjom granicom kvantifikacije od 2,00 ng/mL. Standardni opseg krive je bio od 0,05 do 50 μg/mL za L-4-Cl-KYN sa donjom granicom kvantifikacije od 0,05 μg/mL. Obe analize su koristile zapreminu uzorka plazme od 50,0 μL.

PK AV-101 je potpuno okarakterisana preko opsega doza u ovom proučavanju. Profili koncentracije plazme u zavisnosti od vremena koji su dobiveni za L-4-hlorkinurenin i 7-hlorkinurensku kiselinu posle davanja jednostrukih i višestrukih oralnih doza, jedanput dnevno od 360, 1.080 ili 1.440 mg bili su konzistentni sa brzom apsorpcijom oralne doze i eliminacijom prvog reda oba analita, sa dokazom kinetike više pregrada, naročito za metabolit 7-hlorkinurensku kiselinu. Srednje vrednosti Tmax L-4-hlorkinurenina su se povećavale sa povećavanjem nivoa doze, dostižući blizu 2 sata za najvišu doznu grupu. Srednje vrednosti t1/2 bile su sasvim konzistentne preko doza, protežući se od 1,64 do 1,82 sata. Srednje vrednosti Cmax i AUC0-∞ L-4-hlorkinurenina izgleda da su približno linearne doze iako ne i proporcionalne. Srednje vrednosti Cmax na Dan 1 protezale su se od 27,7 μg/mL posle doze od 360-mg do 64,4 μg/mL posle doze od 1.440-mg. Srednje vrednosti AUC0-t na Dan 1 protezale su se od 64 μg·h/mL posle najniže doze do 196 μg·h/mL posle doze od 1.440-mg. Srednje vrednosti Cmax i AUC0-t većinu vremena su bile nešto niže na Dan 14 nego one na Dan 1.

1

Uopšte, kao što se očekivalo za metabolit, 7-hlorkinurensku kiselinu maksimalne koncentracije su se javile pri istom vremenu ili kasnije nego one za L-4-hlorkinurenin, sa srednjim Tmax vrednostima koje se protežu od 1,67 do 2,34 časa. Ovo je pokazano na Slikama 1 i 2. Srednje t1/2 vrednosti, koje se protežu od 2,52 do 3,23 sata, bile su malo varijabilnije preko doza nego one za L-4-hlorkinurenin. Izgleda da srednje t1/2 vrednosti nisu bile u vezi sa dozom. Srednje vrednosti Cmax i AUC0-t za 7-hlorkinurensku kiselinu takođe izgleda da su približno linearne u odnosu na dozu. Srednje vrednosti Cmax na Dan 1 protezale su se od 42,7 ng/mL posle 360-mg doze do 314 ng/mL posle 1.440-mg doze. Srednje vrednosti AUC0-t na Dan 1 protezale su se od 156 ng·h/mL posle najniže doze do 985 ng·h/mL posle doze od 1.440-mg. Slično roditeljskom jedinjenju, srednje Cmax i AUC0-t vrednosti za 7-hlorkinurensku kiselinu su generalno malo niže na Dan 14 nego one na Dan 1.

PRIMER 1: Antihiperalgetični efekat L-4-hlorkinurenina na hiperalgeziju indukovanu kapsaicinom (referentni primer).

Na Dan 1 i Dan 14 ove kliničke studije, dve intradermalne injekcije od 250 μg kapsaicina su sekvenciono ubrizgane u volarni aspekt izmeničnih podlaktica da se proizvede gorući bol, sekundarna hiperalgezija i iznenadni plamsaj. Kapsaicin USP (United States Pharmacopeia) je pripremljen prema standardnoj proceduri i rastvoren u 20% ciklodekstrinu pri koncentraciji od 10 mg/mL.

Prva injekcija kapsaicina je data u jednu podlakticu 1 sat posle oralnog davanja AV-101 ili placebo, a druga injekcija kapsaicina je data u drugu podlakticu 2 sata posle davanja AV-101 ili placebo probe. Neurosenzorno ispitivanje je počelo odmah pri svakoj injekciji kapsaicina. Serijske procene bola su vršene uz primenu 100-mm vizuelne analogne skale (VAS) pri predinjekciji i 0, 5, 10, 15, 30, 45 i 60 minuta posle svake injekcije kapsaicina. Ispitivač je pitao

1

subjekte da stepenuju intenzitet, uz primenu VAS, spontanog bola i izazvanog bola iz aplikacije 5.18 von Frey-ove kose, probe na 40<o>C i blagog milovanja sa četkicom za penu od 1 inča. VAS se sastojao od 100-mm dugačke linije sa oznakom „nema bola“ napisanom na 0-mm kraju i oznakom „najgori zamisliv bol“ napisanom na 100-mm kraju. Rastojanje u milimetrima obezbedilo je merenje bola.

Granice hiperalgetičke površine do 5.18 von Frey-ove kose su određene kretanjem od jedne površine kože koja nije proizvodila bol tangencijalno prema centru oblasti pune bola pri progresivno bližem radijusu dok subjekt nije saopštio bol ili osetljivost. Izvršeno je najmanje osam određivanja granica hiperalgetičke oblasti uz primenu istih procenjivanja i polazeći pri različitim uglovima. Dodatno, subjekti su pitani da stepenuju intenzitet bola 1-minutnog toplotnog na 45<o>C stimulansa (kratke termičke stimulacije) primenjenog na prednje bedro pri 4,5 sata (±5 minuta) posle davanja proučavanog leka, zatim svakih 30 minuta (±5 minuta) do 6 sati posle davanja proučavanog leka. Radijantna proba temperature je primenjena da se fiksira temperatura kože na 36<o>C za vreme procenjivanja bola. Subjekti su koristili VAS za sve procene bola.

Sve vremenske tačke procene proučavanja su usidrene na Vreme 0, vreme davanja leka u studiji. Za injekciju kapsaicina 1 sat posle doziranja, interval procene (tj., vreme posle doziranja proučavanog leka) bilo je 60 do 120 minuta, za koje vreme su vršene procene pri približno 60, 65, 70 i 75 minuta i zatim svakih 15 minuta do 120-minutne vremenske tačke (tj., 0, 5, 10, 15, 30, 45 i 60 minuta posle injekcije kapsaicina). Druga injekcija kapsaicina je data približno 2 sata posle doziranja klinički ispitivanog materijala (CTM) i interval procene (tj., vreme posle doziranja CTM) je bio 120 do 180 minuta. Serijske procene bola su sledile isti raspored, kao što je opisano posle prve injekcije kapsaicina.

1

Primarni krajnji ishod efikasnosti je bio analgetički odgovor na spontani bol pri svakom nivou doze AV-101, 120 do 180 minuta posle doziranja na Dan 14. Nije bilo značajne promene u površini ispod vremenske krive bola (AUPC) za procenu spontanog bola između lečenih grupa i placebo grupa. Na isti način, nije bilo značajnih promena između lečenih grupa i placebo grupa za bilo koju od sekundarnih krajnjih tačaka efikasnosti (AUPC za spontani bol za vremenski interval od 120 do 180 minuta posle doziranja na Dan 1; i AUPC za spontani bol, izazvani bol iz kose von Frey-a i izazvani bol iz ispitivanja na 40<o>C za vremenski interval od 60 do 180 minuta posle doziranja na Dane 1 i 14). Međutim, ovi pronalazači su našli konzistentno smanjenje u srednjim vrednostima najmanjih kvadrata AUPC za alodinijski bol, bol mehaničke hiperalgezije i bol toplotne hiperalgezije između subjekata koji su primili 1.080 mg AV-101 (kohorta 2) i subjekata koji su primili placebo. Ovi rezultati su prikazani na Tabeli 1.

1

Tabela 1: Rezultati procene bola

toplotna alogezija

n MAXBOL MP StdDiv

placebo 4 84,75 5,74

1080 mg 13 78,85 16,22

mehanička alogezija

n MAXBOL MP StdDiv

placebo 4 79,75 7,93

1080 mg 13 66,23 25,60

alodinijski bol (četkica za penu)

n MAXBOL MP StdDiv

placebo 4 79,50 9,68

1080 mg 13 70,92 21,63

spontani bol

n MAXBOL MP StdDiv

placebo 4 77,00 10,23

1080 mg 13 75,08 23,33

PRIMER 2: Antidepresivna aktivnost L-4-hlorkinurenina

Ovi pronalazači su iznenađujuće takođe našli da L-4-hlorkinurenin pokazuje aktivnost koja obogaćuje raspoloženje ili ima antidepresivnu aktivnost. U kliničkoj studiji koja je opisana u ovoj prijavi, 5 od 26 subjekata (u suprotnosti sa nula subjektima u placebo grupi) afirmativno je saopštilo osećanja dobrog stanja. Ovo je konzistentno sa saopštenjima da glutamatergički sistem doprinosi

1

patofiziologiji depresije i da stres može indukovati promene u NMDA receptorima. Videti, na primer, Calabrese et al. „Stress-Induced Changes of Hippocampal NMDA Receptors: Modulation by Duloxetine Treatment.“ PLoS ONE 2012.7(5): e37916.doi:10.1371/journal.pone.0037916.

Uzevši sažeto, ovo otkriće se odnosi na dozirajuće oblike L-4-hlorkinurenina i njihovu primenu u postupcima za lečenje neuroloških stanja okarakterisanih sa prekomerno aktivnom glutamatergičkom transmisijom posredovanom pomoću N-metil-D-aspartatnih receptora, kao što je gore opisano. Kako su neka tipična izvođenja gore detaljno opisana i prikazana u priloženim slikama crteža, treba razumeti da su takva izvođenja samo ilustrativna i nisu restriktivna u odnosu na širinu ovog pronalaska. Naročito, treba prepoznati da se učenja ovog otkrića primenjuju u širokom izboru različitih bolesti. Osobe koje su verzirane u ovoj oblasti medicine će prepoznati da se mogu načiniti različite modifikacije da se ilustruju i druga izvođenja gore opisanog otkrića. Na taj način, treba razumeti da ovaj pronalazak nije ograničen na posebna izvođenja ili pronađene aranžmane, već pre postoji namera da se pokriju bilo kakve promene, adaptacije ili modifikacije koje su u okviru opsega i duha ovog pronalaska kao što je definisano pomoću priključenih patentnih zahteva.

Pogodna izvođenja ovog pronalaska su sledeća:

1. Farmaceutska kompozicija koja se po jediničnoj dozi uglavnom sastoji od L-4-hlorkinurenina u količini od oko 360, 1.080 ili 1.440 mg, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim sastojcima kao što su nosači i ekscipijensi za primenu u postupku za lečenje depresije, pri čemu je ova kompozicija formulisana za oralno davanje.

2

2. Farmaceutska kompozicija za primenu prema izvođenju 1 za primenu u postupku lečenja stanja prouzrokovanih neurološkom disfunkcijom koji obuhvata davanje farmaceutske kompozicije prema izvođenju 1.

3. Farmaceutska kompozicija za primenu izvođenja 2, u kojem se ova farmaceutska kompozicija daje u dnevnoj dozi od jedan do oko 30 dana.

4. L-4-hlorkinurenin za primenu u postupku lečenja depresije oralnim davanjem terapeutski efikasne količine L-4-hlorkinurenina.

5. L-4-hlorkinurenin za primenu u postupku izvođenja 4 koji obuhvata davanje farmaceutske kompozicije prema izvođenju 1.

6. L-4-hlorkinurenin za primenu u postupku lečenja hiperalgezije davanjem terapeutski efikasne količine L-4-hlorkinurenina.

7. L-4-hlorkinurenin za primenu u postupku izvođenja 6 koji obuhvata davanje farmaceutske kompozicije prema izvođenju 1.

8. Farmaceutska formulacija za primenu prema izvođenju 1 koja se po jediničnoj dozi sastoji uglavnom od L-4-hlorkinurenina u količini koja proizvodi u krvnoj plazmi nivoe 7-hlorkinurenske kiseline konzistentne sa farmaceutskom kompozicijom izvođenja 1.

9. Farmaceutska formulacija za primenu izvođenja 8 u kojem su u krvnoj plazmi nivoi 7-hlorkinurenske kiseline u opsegu od oko 15 ng/mL do 550 ng/mL.

10. Kombinacija farmaceutskog proizvoda koji sadrži L-DOPA i farmaceutsku kompoziciju izviđenja 1.

11. L-4-hlorkinurenin za primenu u postupku za smanjenje diskinezija asociranih sa L-DOPA koji obuhvata davanje terapeutski efikasne količine L-4-hlorkinurenina.

12. Farmaceutska kompozicija koja po jediničnoj dozi sadrži L-4-hlorkinurenin u količini od 50 do 1.800 mg i L-DOPA, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim sastojcima kao što su nosači i ekscipijensi za primenu u postupku za smanjenje diskinezija asociranih sa L-DOPA, pri čemu je ova kompozicija formulisana za oralno davanje.

13. Farmaceutska kompozicija koja se po jediničnoj dozi sastoji uglavnom od L-4-hlorkinurenina u količini od 50 do 1800 mg i L-DOPA, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim sastojcima kao što su nosači i ekscipijensi za primenu u postupku za smanjenje diskinezija asociranih sa L-DOPA, pri čemu je ova kompozicija formulisana za oralno davanje.

Reference:

U ovoj prijavi su pomenuti sledeći članci u časopisima i sve druge publikacije, patenti i tekstovi.

(1) Carter AJ. Glycine antagonist: Regulation of the NMDA receptor channel complex by the strychnine-insensitive glycine site. Drugs Future 1992; 17:595-613.

(2) Catarzi et al., Competitive Gly/NMDA receptor antagonists, Curr. Top. Med. Chem. 2006;6(8):809-21.

(3) Hokari M, Wu H-Q, Schwarcz R, Smith QR. Facilitated brain uptake of 4-chlorokynurenine and conversion to 7-chlorokynurenic acid. Neuroreport 1996;8(1):15-18.

(4) Kemp JA, Foster AC, Leeson PD, Priestley T, Tridgett R, Iversen LL, et al. 7-Chlorokynurenic acid is a selective antagonist at the glycine modulatory site of the N-methyl-D-aspartate receptor complex. Proc Natl Acads Sci U.S.A. 1988;85(17):6547-6550.

(5) Lee S-C, Schwarcz R. Excitotoxic injury stimulates pro-drug-induced 7-chlorokynurenate formation in the rat striatum in vivo. Neuroscience Lett 2001;304(3):185-188.

(6) Leeson PD, Iversen LL. The glycine site on the NMDA receptor: Structure-activity relationships and therapeutic potential. J Med Chem 1994;37(24):4053-4067.

(7) Linderholm, et al., Activation of rat ventral tegmental area dopamine neurons by endogenous kynurenic acid: a pharmacological analysis, Neuropharmacology 2007;53(8):918-924.

(8) Parsons CG, Danysz W, Quack G, Hartmann S, Lorenz B, Wollenburg C, et al. Novel systemically active antagonists of the glycine site of the N-methyl-D-aspartate receptor: electrophysiological, biochemical and behavioral characterization. J Pharmacol Exp Ther 1997;283(3):1264-1275.

(9) Rao TS, Gray NM, Dappen MS, Cler JA, Mick SJ, Emmett MR, et al. Indole-2-carboxylates, novel antagonists of the N-methyl-D-aspartate (NMDA)-associated glycine recognition sites: in vivo characterization. Neuropharmacol 1993;32(2):139-147.

(10) Rundfeldt C, Wlaz P, Loscher W. Anticonvulsant activity of antagonists and partial agonists for the NMDA receptor-associated glycine site in the kindling model of epilepsy. Brain Res 1994;653(1-2):125-130.

2

(11) Wu HQ, Lee SC, Scharfman HE, Schwarcz R. L-4-chlorokynurenine attenuates kainate-induced seizures and lesions in the rat. Exp Neurol 2002;177(1):222-232.

(12) Wu H-Q, Lee S-C, Schwarcz R. Systemic administration of 4-chlorokynurenine prevents quinolinate neurotoxicity in the rat hippocampus. Eur J Pharm 2000;390:267-274.

Claims (14)

Patentni zahtevi

1. L-4-hlorkinurenin za primenu u postupku za lečenje depresije oralnim davanjem pacijentu terapeutski efikasne količine L-4-hlorkinurenina.

2. Farmaceutska kompozicija koja po jediničnoj dozi sadrži L-4-hlorkinurenin u količini od 50 do 1.800 mg, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim sastojcima kao što su nosači i ekscipijensi, za primenu u postupku za lečenje depresije, pri čemu je ova kompozicija formulisana za oralno davanje.

3. Farmaceutska kompozicija koja se po jediničnoj dozi uglavnom sastoji od L-4-hlorkinurenina u količini od 50 do 1.800 mg, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim sastojcima, kao što su nosači i ekscipijensi za primenu u postupku za lečenje depresije, pri čemu je ova kompozicija formulisana za oralno davanje.

4. Farmaceutska kompozicija za primenu u postupku za lečenje depresije prema zahtevu 2 ili zahtevu 3, naznačena time, što se ova kompozicija po jediničnoj dozi uglavnom sastoji od L-4-hlorkinurenina u količini od 260 do 1.800 mg.

5. Farmaceutska kompozicija za primenu u postupku za lečenje depresije prema zahtevu 2 ili zahtevu 3, naznačena time, što se ova kompozicija po jediničnoj dozi uglavnom sastoji od L-4-hlorkinurenina u količini od 360, 1.080 ili 1.440 mg.

2

6. Farmaceutska kompozicija za primenu u postupku za lečenje depresije prema zahtevu 2 ili zahtevu 3, naznačena time, što se ova kompozicija daje bez značajnog štetnog dejstva izazvanog lekovima.

7. Farmaceutska kompozicija za primenu u postupku za lečenje depresije prema zahtevu 2 ili zahtevu 3, naznačena time, što davanje L-4-hlorkinurenina proizvodi nivo u krvnoj plazmi 7-hlorkinurenske kiseline od oko 15 ng/mL do oko 550 ng/mL.

8. Farmaceutska kompozicija za primenu u postupku za lečenje depresije prema zahtevu 2 ili zahtevu 3, naznačena time, što davanje L-4-hlorkinurenina proizvodi nivo u krvnoj plazmi 7-hlorkinurenske kiseline od oko 5 ng/mL do oko 550 ng/mL u toku oko 0,5 do oko 6 sati posle njegovog davanja.

9. Farmaceutska kompozicija za primenu u postupku za lečenje depresije prema zahtevu 2 ili zahtevu 3, naznačena time, što se ova kompozicija daje dnevno u toku 1 do 30 dana.

10. Farmaceutska kompozicija za primenu u postupku za lečenje depresije prema zahtevu 2 ili zahtevu 3, naznačena time, što se ova kompozicija daje dnevno u toku 7 do 24 dana, pogodnije 12 do 16 dana.

11. Farmaceutska kompozicija za primenu u postupku za lečenje depresije prema zahtevu 2 ili zahtevu 3, naznačena time, što davanje ove kompozicije povećava osećanja dobrog stanja u pacijentu.

12. Farmaceutska kompozicija koja po jediničnoj dozi sadrži L-4-hlorkinurenin u količini od 50 do 1.800 mg i L-DOPA, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim sastojcima kao što su nosači i ekscipijensi, za primenu u postupku za smanjenje diskinezija asociranih sa L-DOPA, pri čemu je ova kompozicija formulisana za oralno davanje.

13. Farmaceutska kompozicija koja se po jediničnoj dozi uglavnom sastoji od L-4-hlorkinurenina u količini od 50 do 1.800 mg i L-DOPA, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim sastojcima, kao što su nosači i ekscipijensi za primenu u postupku za smanjenje diskinezija asociranih sa L-DOPA, pri čemu je ova kompozicija formulisana za oralno davanje.

14. Farmaceutska kompozicija za primenu u postupku smanjenja diskinezija asociranih sa L-DOPA prema zahtevu 12 ili zahtevu 13, naznačena time, što se ova kompozicija daje bez značajnog štetnog sporednog dejstva izazavnog lekovima.

Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5

2