[go: up one dir, main page]

RS56189B1 - Postupci, cev i uređaj za dobijanje kompozicije za zarastanje rana - Google Patents

Postupci, cev i uređaj za dobijanje kompozicije za zarastanje rana

Info

Publication number
RS56189B1
RS56189B1 RS20170821A RSP20170821A RS56189B1 RS 56189 B1 RS56189 B1 RS 56189B1 RS 20170821 A RS20170821 A RS 20170821A RS P20170821 A RSP20170821 A RS P20170821A RS 56189 B1 RS56189 B1 RS 56189B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
cells
composition
cell
tube
tissue
Prior art date
Application number
RS20170821A
Other languages
English (en)
Inventor
Antoine Turzi
Original Assignee
Antoine Turzi
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=42261435&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS56189(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Antoine Turzi filed Critical Antoine Turzi
Publication of RS56189B1 publication Critical patent/RS56189B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • A61K38/4833—Thrombin (3.4.21.5)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/15—Cells of the myeloid line, e.g. granulocytes, basophils, eosinophils, neutrophils, leucocytes, monocytes, macrophages or mast cells; Myeloid precursor cells; Antigen-presenting cells, e.g. dendritic cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/18—Erythrocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/19—Platelets; Megacaryocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
    • A61K38/363—Fibrinogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/981—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of mammals or bird
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/981—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of mammals or bird
    • A61K8/983—Blood, e.g. plasma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
    • A61L26/0057—Ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L26/00—Chemical aspects of, or use of materials for, wound dressings or bandages in liquid, gel or powder form
    • A61L26/0061—Use of materials characterised by their function or physical properties
    • A61L26/0066—Medicaments; Biocides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/02—Blood transfusion apparatus
    • A61M1/0209—Multiple bag systems for separating or storing blood components
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/02—Blood transfusion apparatus
    • A61M1/029—Separating blood components present in distinct layers in a container, not otherwise provided for
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00—Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/36—Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M5/00—Devices for bringing media into the body in a subcutaneous, intra-vascular or intramuscular way; Accessories therefor, e.g. filling or cleaning devices, arm-rests
    • A61M5/178—Syringes
    • A61M5/19—Syringes having more than one chamber, e.g. including a manifold coupling two parallelly aligned syringes through separate channels to a common discharge assembly
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D21/00—Separation of suspended solid particles from liquids by sedimentation
    • B01D21/26—Separation of sediment aided by centrifugal force or centripetal force
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21005—Thrombin (3.4.21.5)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/30—Compounds of undetermined constitution extracted from natural sources, e.g. Aloe Vera
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/412—Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M2202/00—Special media to be introduced, removed or treated
    • A61M2202/04—Liquids
    • A61M2202/0413—Blood
    • A61M2202/0415—Plasma
    • A61M2202/0425—Thrombin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M2202/00—Special media to be introduced, removed or treated
    • A61M2202/04—Liquids
    • A61M2202/0413—Blood
    • A61M2202/0427—Platelets; Thrombocytes

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)

Description

Opis
Stanje tehnike
Ovaj pronalazak se odnosi na oblast regeneracije tkiva. Određenije, on se bavi novim postupcima, cevima i uređajima za dobijanje kompozicija trombina, koncentrata krvnih pločica (u daljem tekstu pločica) i preparata za zarastanje rana, kao i njihovim upotrebama.
Stanje tehnike
U procesu zarastanja dobro je poznat značaj biološki autogenih materijala. Pokazano je najbitnije, da su dva biološki autogena materijala, direktno implicirana u stvaranje strukture krvnih ugrušaka, koji stvaraju hemostatsku barijeru, čija je uloga da se obezbedi hemostaza i zatvori rana, a to su: (1) fibrin, koji se preko delovanja trombina izdvaja iz fibrinogena plazme u dva struka, i (2) aktivirane membrane pločica. Proces zarastanja rane obično se predstavlja kao nastavak faze koagulacije u nekom inflamatornom procesu ili nekom procesu regeneracije. Faza koagulacije (zgrušavanje krvi ili stvaranje ugruška) je jedan složen proces, pri kome se zid povređenog krvnog suda prekriva sa ugruškom fibrina da se zaustavi krvarenje, a popravka oštećenog krvnog suda počinje sa oslobađanjem velikih količina citokina i faktora rasta iz alfa granula pločica. Dobro je poznato da stvaranje krvnih ugrušaka (koji nastaju pod fiziološkim uslovima uz pomoć fibrina, pločica i crvenih krvnih zrnaca, između ostalih komponenata krvi) predstavlja prirodni fenomen, koji se javlja posle povrede tkiva, kao i njihova uloga u procesu zarastanja rane, i u spajanju fraktura kosti.
Koagulacija krvi je rezultat kaskade kompleksnih interakcija brojnih proteinskih faktora zgrušavanja. Obično se sa oštećenjem vaskularnog endotelijuma otvaraju sub-endotelijane strukture, koje privlače pločice i izazivaju ih da grade reversibilne agregate. Protein trombin, koji se stvara tokom puta koagulacije, generiše nerastvorne umrežene fibrile proteina fibrina i prouzrokuje ireversibilno stvaranje agregata pločica. Nastali ugrušak pločica-fibrin predstavlja efikasnu barijeru za gubitak krvi iz vaskularnog sistema, pa tako deluje kao noseća konstrukcija za narednu popravku obloge krvnog suda.
Proces inflamacije, koji sledi posle stvaranja krvnog ugruška, stimulišu brojni vazoaktivni medijatori i hemotaktički faktori (specifični signali u obliku proteina), koje oslobađaju bela krvna zrnca i pločice. Ovi signali privlače makrofage da ”očiste” to mesto od bakterija i stranih čestica, isto trako kao i crvene krvne ćelije pre migracije novih ćelija. Ova faza regeneracije tkiva uključuje i hemoprivlačenje i mitozu neizdiferenciranih ćelija u nosećoj konstrukciji (rastuće matrice) koju formira krvni ugrušak. Nove ćelije, koje se multipliciraju stimulacijom faktora rasta pločica, zameniće oštećene ili uništene ćelije koje zadržavaju makrofage. Faktori rasta i brojni proteini plazme, koji se takođe nazivaju molekuli signalizacije, promovišu migraciju i deobe unutar krvnih ugrušaka i igraju presudnu ulogu u procesu zarastanja rane.
Bioadhezivni zaptivači i fibrinski lepkovi predstavljaju relativno nov tehnološki napredak, koji udvostručava biološki proces u završnom stupnju koagulacije krvi. Postoje dokumenti kliničkih ispitivanja koristi od fibrinskog lepka u raznim hirurškim oblastima, kao što su kardiovaskularna, torakalna, transplantaciona, glave i vrata, oralna, astrointestinalna, ortopedijska, neurohirurgija i plastična hirurgija. U hirurgiji, dve primarne komponente koje čine fibrinski lepak, fibrinogen i trombin, zajedno se mešaju stvarajući ugrušak. Ovaj ugrušak adherira uz neophodno tkivo, kost ili nerv, unutar sekundi, ali ga zatim telo polako readsorbuje fubrinolizom, tokom približno 10 dana. Značajna karakteristika fibrinskog lepka je njegova sposobnost da: (1) ostvari hemostazu na vaskularnim anastomozama, posebno na mestima gde je zašivanje skoro nemogućće ili gde sam čin zašivanja predstavlja dodatni rizik; (2) kontroliše krvarenje iz rupa nastalih od igle, ili arterijskih suza, koji se ne mogu kontrolisati samim zašivanjem; i (3) daje hemostaze kod hepariniziranih pacijenata ili onih sa koagulopatijom. Videti, Borst, H. G., et al., J. Thorac. Cardiovasc. Surg., 84:548-553 (1982); Walterbusch, G. J, et al., Thorac Cardiovasc. Surg., 30:234-235 (1982); i Wolner, F. J, et al., Thorac. Cardiovasc. Surg., 30:236-237 (1982).
Teorijski, efekte ovih prvih faza u kaskadi zarastanja rane, moguće je pojačati otklanjanjem crvenih krvnih zrnaca i povećavanjem koncentracije faktora rasta.
Pojačavanje zgrušavanja krvi se može definisati kao stvaranje jednog "obogaćenog ugruška (EC)" (EC, od engleski enriched cloth). Ovi EC se dobijaju upotrebom koncentrata pločica, a opisani su u Platelets and Megacaryocytes 2004, vol 1 & 2, kao i u "Structure and signals", Ed. Gibbins and MaHKut-Smith, Humana Press, New Jersey. Plazma obogaćena pločicama, u daljem tekstu skraćeno PRP, (od engleski platelet-rich plasma), može se definisati kao autogeni koncentrat pločica u maloj zapremini plazme; ona se razvija kao autogeni biomaterijal, a dokazano je da je korisna u zarastanju i regeneraciji tkiva (Marx et al, 2004, J. Oral Maxillofac. Surg., 62, 489-496). PRP ne samo da se sastoji od koncentrata pločica, nego takođe sadrži i faktore rasta, kao što je faktor rasta izveden iz pločica, PDGF (od engleski plateletderived growth factor), vaskularni endotelijalni faktor rasta, VEGF (od engleski vascular endothelial growth factor: VEGF, transformišući faktor rasta, TGF (od engleski, transforming growth factor) i epidermalni faktor rasta, EGF (od engleski epidermal growth factor) itd.), koje aktivno izlučuju pločice, a poznato je da igraju fundamentalnu ulogu u započinjanju procesa zarastanja rane.
Na primer, poznato je da PDGF inicira ozdravljenje veznog tkiva, uključujući regenerisanje i obnovu kosti. Takođe, PDGF pojačava mitogenezu (ozdravljenje ćelija), angiogenezu (endotelialna mitoza u funkcionisanju kapilara) aktivaciju makrofaga. Poznato je takođe, da VEGF, koji oslobađaju leukociti, ima snažnu angiogenu, mitogenu i vaskularnu aktivnost pojačavanja permeabilnosti u ćelijama endotelijuma. TGF-[beta] promoviše mitozu i diferencijaciju ćelija veznog tkiva i kosti, deluje na mezenhimalne matične ćelije, osteoblaste i fibrioblaste, i inhibira stvaranje osteoklasta. Poznato je da EGF izaziva razvoj epitela i da promoviše angiogenezu. Koncentrati pločica se obično koriste u dentalnoj implantologiji i hirurgiji kosti, značajno u USA. Razvijene su razne tehnike dobijanja PRP procesima centrifugiranja. Međutim, zahvaljujući osetljivosti ćelija pločica i varijabilnosti efikasnosti ovih postupaka separacije pločica od crvenih krvnih zrnaca, postoji velika varijabilnost između postupaka koji se koriste za pripremanje koncentrata pločica. Automatizovani režim firme Biomet PCCS & GPS (Marx et al, 2004, gore), ima nedostatak, jer predstavlja kompleksan proces sa onemogućavajućim troškovima postupaka koji zahtevaju velike količine krvi. U tim sistemima, dolazi takođe do znatnog gubitka vrednog biološkog tkiva pacijenata, pa stoga postoji potreba za razvojem jednog pouzdanog postupka sakupljanja ćelija plazme, sa visokim prinosom, jednostavnošću korišćenja i pristupačnom cenom.
Pored toga, dobijanje koncentrata pločica još uvek zahteva upotrebu relativno kompleksnih kompleta i skupocenu prateću opremu, i isto tako skupo uključivanje specijalizovanog osoblja. Ovaj nedostatak čini danas poznate postupke dobijanja PRP neprilagođenim za upotrebu u ovu svrhu.
U dokumentu WO 2008/023026 opisan je jedan postupak i uređaj za dobijanje plazme obogaćene pločicama.
U dokumentu WO 2008/022651 opisan je jedan postupak i uređaj za dobijanje plazme obogaćene pločicama.
U dokumentu US 2004/0151709 opisana je jedna kompozicija i postupak za stvaranje, regenerisanje i obnavljanje tkiva, upotrebom jednog biološkog implanta koji sadrži ćelije.
U dokumentu WO 99/66923 opisan je preparat obogaćenih pločica za zarastanje rana.
U dokumentu EP1547606 opisan je jedan postupak za dobijanje plazme obogaćene pločicama.
Okabe et al. (2009) Cytotherapy 11(3):307-316 opisuju jedno injektibilno poboljšanje mekog tkiva.
Pored toga, dobijanje ćelija, u smislu regeneracije ćelija ili tkiva, za upotrebu u transplantaciji, post-operativnoj regeneraciji ili u estetske svrhe, suočeno je sa problemom dugotrajne konzervacije ćelija i tkiva. Krio-konzervacija tkiva ili ćelija obično se koristi za dugotrajno održavanje tkiva ili ćelija, zapravo pločica, ali pokazalo se da ova tehnika ima ozbiljne nedostatke i probleme, kao što su formiranje kristala, osmostski problemi, agregacija, inhibicija sposobnosti sinteze proteina, ispoljavanje stresa proteina, kao odgovor na termalni stres. Prema tome, poznato je da krio-konzervacija tkiva ili ćelija menja vitalnost i stabilnost ćelija (Agence française de sécurité sanitaire, 2003; Arnaud et al., 1999, Cryobiology, 38, 192-199; Tablin et al., 2001, Cryobiology, 43(2), 114-23). Neki od sporednih efekata krio-konzervacije može da se ograniči korišćenjem agenasa protiv zamrzavanja, kao što su DMSO ili glicerin ili drugi krioprezervativi (US 5, 5891, 617, Oh et al., Cornea, 26, 840-846), ali koncentracija ovih agenasa mora da se prilagodi, da bi se ograničila njihova toksičnost i sporedni efekti.
Prema tome, postoji potreba za novim ili alternativnim postupkom dobijanja ćelija i tkiva, prilagođenog za ekstemporano korišećenje, uz očuvanje njegovog integriteta, u pogledu sposobnosti izlučivanja faktora rasta i vitalnosti.
Izlaganje suštine pronalaska
Ovaj pronalazak daje jedan postupak za dobijanje kompozicije za zalečenje rana ili kompozicije za zalečenje tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanjacelovite krvi u cevi koja sadrži hijaluronsku kiselinu i neki tiksotropni gel,
b) Centrifugiranje pomenute cevi, i
c) Sakupljanje supernatanta, u kome je sadržana pomenuta hijaluronska kiselina i plazma obogaćena pločicama.
Ovaj pronalazak daje još jednu cev, koja sadrži hijaluronsku kiselinu i tiksotropni gel.
Ovaj pronalazak daje još i jedan komplet ili medicinsko sredstvo, koji sadrži cev iz ovog pronalaska.
Ovaj pronalazak se odnosi na oblast regeneracije tkiva. Određenije, on se odnosi na nove postupke, cevi i uređaje za dobijanje trombina, koncentrata pločica i preparata za zarastanje, na njihove kompozicije i upotrebe. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na nove formulacije ćelija, nove formulacije plazme obogaćene pločicama, u daljem tekstu PRP (od engleski, platlet-rich plasma), na postupke dobijanja novih formulacija ćelija ili formulacija PRP, na upotebu tih ćelija ili preparata PRP, opciono pomešanih sa nekim ekstraktom ćelija, kao što su neki autogeni ekstrakti keratinocita, ćelija koštane srži, fibroblasta, ćelija periosteuma ili rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; masnog tkiva, ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasta; hondrocita; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnih matičnih ćelija (MSC), preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija ili Achilles-ovih ćelija tetiva.
U jednom aspektu, ovde je opisan postupak za dobijanje jedne kompozicije za kompletno autogeno i spontano zarastanje rana ili tkiva. Sve komponente krvi za ovu autogenu kompoziciju za zarastnje rana ili tkiva su izvedene iz jednog pacijenta, na kome će biti upotrebljena ova autogena kompozicija za zarastanje rana ili tkiva (isti pacijent).
U jednom aspektu, ovde je opisan jedan proces ili postupak za dobijanje seruma trombina, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanja celovite krvi u jednoj cevi koja sadrži neki tiksotropni gel, b) Centrifugiranja ove cevi do oslobađanja trombina u serumu, i
c) Sakupljanje ovog trombina u serumu.
U sledećem aspektu, ovde je opisan jedan proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanje celovite krvi u neku cev, koja sadrži hijaluronsku kiselinu, neki tiksotropni gel i/ili neki antikoagulant, poželjno natrijum-citrat,
b) Centrifugiranje ove cevi, poželjno do migrcije crvenih krvnih zrnaca ispod tiksotropnog gela i poželjno do migracije hijaluronskee kiseline iznad obogaćene plazme,
c) Opciono, mešanje hijaluronske kiseline i obogaćene plazme, poželjno izokretanjem ove cevi,
d) Sakupljanje supernatanta, koji sadrži hijaluronsku kiselinu i obogaćenu plazmu.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje jedna cev za sakupljanje i separaciju nekog uzorka fluida koji sadrži
i) dva jasna dela, koji se razlikuju po veličini i prečniku,
ii) neki filter, koji razdvaja ova dva dela, i
iii) opciono, neki tiksotropni gel i neki antikoagulant.
U jednoj poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, ova cev ima karakteristike ilustrovane na Slikama 1 do 14.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje sistem vreće za krv ili uređaja u obliku cevi za sakupljanje krvi, koji sadrži više vreća ili cevi, korisnih za sakupljanje, čuvanje, upotrebi i uzimanje komponenata krvi.
U jednom poželjnom aspektu, ovde se opisuje sistem vreće za krv ili uređaj u obliku cevi za sakupljanje krvi, koji je prikazan na Slici 15.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje sistem vreće za krv ili uređaj u obliku cevi, koji sadrži jedan ulazni otvor, povezan sa adapterom sa mnoštvom otvora adaptera, koji su povezani sa najmanje dve vreće ili cevi, pri čemu je svaki od otvora adaptera, u adapteru sa moštvom otvora, povezan sa samo jednom vrećom ili cevi.
Cevi za sakupljanje krvi poželjno je da se evakuišu, hermetički zatvore i napune tiksotropnim gelom i antikoagulantom.
Opis slika nacrta
U nastavku se daju slike, koje predstavljaju deo ove prijave, ilustrovanjem poželjnih realizacija ovog pronalaska, pa zajedno sa opisom služe objašnjavanju principa ovog pronalaska.
Slike 1A i 1B su shematske predstave cevi.
Slike 2 i 3 su shematske predstave unutrašnjosti cevi.
Slika 4 je shematska predstava unutrašnjosti filtera cevi. Ovaj filter sadrži unutrašnji sloj, sa levkovima, i spoljašnji sloj, sa strukturama nalik trapezoidu.
Slika 5a je shematska predstava unutrašnjosti cevi.
Slika 5b je shematska predstava poklopca i spojnice cevi.
Slika 6 je shematska predstava poklopca.
Slike 7A i 7B predstaljaju dva različita pogleda na filter cevi.
Slika 8 predstavlja pogled odozdo na filter cevi. Slika 8 takođe predstavlja četri simetrična niza 3 opsega otvora spoljašnjeg sloja ili donjeg sloja.
Slika 9 predstavlja pogled odozgo na filter cevi. Slika 9 takođe predstavlja četri simetrična niza 2 opsega otvora unutrašnjeg sloja ili gornjeg sloja.
Slike 10 i 11 predstavljaju detaljan pogled na filter cevi.
Slika 12 predstavlja detaljan pogled na centralni deo filtera cevi.
Slika 13 je detaljan prikaz unutrašnjosti fitera cevi. Ovaj filter sadrži unutrašnji sloj sa levkovima i spoljašnji sloj sa strkturama nalik trapezu. Svaki ovaj levak i trapezoid je integrisan u filter na naizmenični način (prvi trapezoid sledi prvi levak, koga sledi drugi trapezoid, a ovog sledi drugi levak, završno sa trećim trapezoidom).
Slika 14 je detaljan pogled na filter koji sadsrži levkove i tapezoide cevi.
Slika 15 je pogled na sitem kese za krv, ili uređaj cevi za skupljanje krvi.
Slika 16 je shematska predstava postupka dobijanja kompozicije za zarastanje rane ili tkiva, koja sadrži PRP i hijaluronsku kiselinu.
Detaljni opis pronalaska
U tekstu koji sledi daju se definicije naziva u skladu sa ovim pronalaskom, a namera je da se dosledno primenjuju kroz ovu prijavu i patentne zahteve, ukoliko se izričito drugačije ne naglasi i pruži definicija u širem značenju.
Pojam "tiksotropno” označava neki gel, koji postaje fluidniji kao posledica mešanja ili pritiska, tj. neki gel čija se viskoznost smanjuje kao posledica mešanja ili pritiska. Termin viskoznost se odnosi na one karakteristike naznačenog materijala koje određuju stepen geliranja, kao što su na primer čvrstoća ili tvrdoća materijala, stepen do koga se taj materijal opire tečenju kao fluid.
Tiksotropni gel, u skladu sa ovim pronalaskom, sadrži neki poliestarski gel, ili njegovu smešu, koji je nerastvoran u vodi i hemijski inertan prema sastavnim delovima krvi, a koji se može upotrebiti u skladu sa ovim pronalaskom. Tipični tiksotropni gelovi se koriste kod razdvajanja krvnih ćelija za dijagnostičke svrhe i metabolizam proteina. Tiksotropni gel se ovde takođe odnosi na neki "gel selektor ćelija". U ovom pronalasku se mogu koristiti i drugi gelovi.
Izraz "nega" označav sve usluge koje se pružaju pacijentima dok leže u krevetu.
Izraz "pribor za flebotomiju" ili "pribor za punktiranje vene" označava pribor koji omogućava punktiranje vene sa iglom u svrhu vađenja krvi.
Alternativni izrazi za "sredstvo za zalečenje rane" ili "sredstvo za zatvaranje rane" ili "sredstvo za zarastanje tkiva" ili "sredstvo za zatvaranje tkiva" ili "kompozicija za zarastanje rane" ili "kompozicija za zarastanje tkiva" su "bioadhezivni zaptivač" ili "fibrinski lepak".
Izraz "sredstvo za zalečenje rane" ili "sredstvo za zaptivanje rane" ili ”sredstvo za zarastanje tkiva” ili "sredstvo za zatvaranje tkiva" ili "kompozicija za zarastanje rane" ili "kompozicija za zarastanje tkiva", "bioadhezivni zaptivač" ili " fibrinski lepak" označava neki agens ili neku kompoziciju koja je u stanju da pomogne i/ili poveća brzinu i/ili kvalitet cikatrizacije rane. Sredstva za zarastanje ili zatvaranej rane su u stanju da pomognu regeneraciju tkiva. Izraz "rana" ozačava bilo koje oštećenje tkiva, na primer, koje sledi posle traume ili hirurgije. Rane kod sisara su, na primer, osipi u krevetu, čirevi, razderotine i opekotine, graftovi (mesta kod donora grafta i kod primaoca grafta), fistule, oštećenja periodoncijumalnog tkiva, nezarastajuće rane kod dijabetesa, posledice traumi ili bilo kog hirurškog zahvata. U generalnom smislu, ovim izrazom je namera da se takođe obuhvate oštećenja kože, kada na površini kože postoji neko udubljenje, bez neophog zasecanja površine, kao što su oštećenja kože povezana sa starenjem (npr. bore) i ožiljci, kao što su na primer akne (naročito posle tretmana dermabrazije) ili ožiljci rubele. Izraz "PRP" označava plazmu obogaćenu pločicama (od engleski, platelet-rich-plasma), poželjno sisarskog porekla ili humanog porekla, poželjnije autogenu, dobijenu postupkom iz ovog pronalaska, sa ciljem sakupljanja i uklanjanja eritrocita i koncentrisanja leukocita, trombocita i adhezionih proteina u plazmi, u poređenju sa polaznom celovitom krvlju. Izraz "autogen" ili "autogeni" ili "autogeno" označava neki postupak in-vivo u kome se koristi krv, tkivo ili ćelije jednog donora, a pri tome se ta krv, tkivo ili ćelije ekstrahuju iz donora sa namerom da ih upotrebi isti donor. Suprotno tome, "alogeni" postupci koriste krv, tkivo ili ćelije jednog ili više trećih lica za upotrebu u donoru ("homologni" ili "heterologni"). Autogeni proizvod izbegava neke od uobičajenih problema povezanih sa upotrebom bioloških materijala trećeg lica, kao što je na primer skrining, da se obezbedi da je donor biološki i imunološki kompatibilan sa pacijentom i zaštiti od potencijalne kontaminacije sa hepatitisom, HIV, prionom, Creutzfeld-Jacob-ovom bolešću i slično. Izraz "aktivator koagulacije" označava neki agens, na primer neki enzim, koji je u stanju da pokrene ili aktivira koagulaciju plazme i agregaciju pločica. Aktivator koagulacije sadrži neki aktivator trombina i/ili neki aktivator fibrinogena i/ili trombina i/ili neki autogeni trombin i/ili neki autogeni serum trombina i/ili kalcijum-hlorida i/ili kalcijum-glukonata. Koagulacija može biti kombinovana, sa ciljem da se promeni čvrstina kompozicije.
Izraz "aktivator trombina" označava neki agens koji je u stanju da aktivira trombin i započne koagulaciju. Tipičan aktivator trombina predstavljaju izvesni ko-faktori, kao što su natrijum ili kalcijum. U realizaciji ovog pronalaska, aktiviranje trombina poželjno je da se dešava u prisustvu jona kalcijums. Kalcijumovi joni se obično dodaju kao neki slani rastvor u koncentrat pločica, tako da se dobije konačna koncentracija od ili oko 0.1 mg/mL pločica u koncentratu. Pogodne kalcijumove soli<su, bez ograničavanja, CaCO>3<, CaSO>4<ili CaCl>2<. Poželjna kalcijumova so za>upotrebu u ovom pronalasku je kalcijum-glukonat (CaGL). CaGL je dostupan kao injekcija kalcijumovog gela, USP 10% (Regen Lab, Switzerland). Izraz "aktivator fibrinogena" označava neki agens koji je u stanju da aktivira konverziju fibrinogena u fibrin i započne stvaranje ugruška. Tipični aktivatori fibrinogena su trombin ili batroksobin. Termin trombin može da obuhvati kalcifikovani trombin, naročito od oko 100 do oko 10 jedinica trombina na 1 mL 10% vodenog rastvora kalcijum-glukonata; može da obuhvati i kalcifikovani goveđi trombin, alogeni trombin ili rekombinantni humana trombin, poželjno autogeni trombin. Aktivator fibrinogena može biti neka obogaćena kompozicija trombina, kao što su kompozicije trombina opisane u dokumentu US 6,472,162 ili neki autogeni serum trombina. Izraz "terapeutski efikasna količina" označava količinu ili količine konstitutivnih elemenata, ili njihovu kombinaciju, potrebne da se unapredi zarastanje rane, kao što su, na primer, smanjenje zapremine ili površine oko rane, povećanje količine granulacionog tkiva ili drugog biološkog materijala koji olakšava taloženje kolagena, vaskularno urastanje, proliferaciju fibroblasta ili opšte zarastanje; sve verzije ovog pronalaska, koji je ovde opisan, predpostavlja se da imaju terapeutski efikasne količine sastavnih supstanci, ili njihove kombinacije. Pod izrazom "farmaceutski prihvatljiv nosač" podrazumeva se farmaceutski prihvatljiv dodatni sastojak, kao što su stabilizatori, antimikrobni agensi, puferi, adjuvanti, anestetici, kortikosteroidi i slično. Pod izrazom "kozmetički prihvatljiv nosač" podrazumeva se kozmetički prihvatljiv dodatni sastojak, kao što su stabilizatori, puferi, agensi za bojenje, agensi za aromatizovanje, adjuvanti i slično.
Izraz "Ciklični Olefinski Kopolimer" (COK) ili "Ciklični Olefinski Polimer" (COP) označava neki amorfni polimer, Etilenski Kopolimer; COK; COP; Ciklo Olefinski kopolimer; Ciklični Olefinski Polimer; Etilen-norborn Kopolimer. Ovi COP se upotrebljavaju kao jedna vrsta monomera, dok pomenuti COK ima razne vrste monomera. Ovaj opis obuhvata Ciklične Olefinske Kopolimere zasnovane na raznim vrstama cikličnih monomera i postupaka polimerizacije. Ciklični Olefinski Kopolimeri ili polimeri mogu se dobiti lančanom kopolimerizacijom cikličnih monomera, kao što su 8,9,10-trinorborn-2-en (norbornen) ili 1,2,3,4,4a,5,8,8a-oktahidro-1,4:5,8-dimetanonaftalin sa etenom, Ticona’s TOPAS, Mitsui Chemical’s APEL, ili pomoću metateze polimeraizacije sa otvaranjem prstena raznih cikličnih monomera, posle koje sledi hidrogenizacija (na primer, Japan Synthetic Rubber’s ARTON, Zeon Chemical’s Zeonex and Zeonor).
Izraz "hijaluronska kiselina" (naziva se takođe hijaluronon ili hijaluronat) označava jedan anjonski, ne-sulfatizovani glikozaminoglikan, koji je široko rasprostranjen u veznom, epitelnom i neurološkom tkivu. Ona je jedinstvena među glikozaminoglikanima po tome, što nije sulfatizovana, što se stvara u membrani plazme umesto Golgi, a može biti vrlo velika, sa molarnom masom koja često dostiže milion. Kao jedna od glavnih komponenata vanćelijske matrice, hijaluronan značajno doprinosi proliferaciji i migraciji ćelija.
Izraz "hitozan" označava jedan linearni polisaharid, sačinjen od nasumično raspoređenih β-(1-4)-povezanih D-glukozamina (deacetilovana jedinica) i N-acetil-D-glukozamina (acetilovana jedinica). Hitozan se komercijalno dobija deacetilovanjem hitina, koji je strukturni element spoljašnjeg skeleta ljuskara (krabe, rakovi, itd.) i ćelijskih zidova gljiva. Stepen deacetilovanja (%DD) se može odrediti pomoću NMR spektroskopije, a %DD u komercijalnim hitozanima je u opsegu 60-100 %. U proseku, molarna masa komercijalno dobijenog hitozana je između 3800 do 20.000 daltona. Uobičajeni postupak za sintezu hitozana je deacetilovanje hitina, korišćenjem natrijum-hidroksida u višku, kao reagensa, i vode kao rastvarača. Ovaj reakcioni put, kada se ostavi da teče do kraja (kompletno deacetilovanje), daje do 98% proizvoda. Amino grupa u hitozanu ima vrednost pKaod ∼6.5, što dovodi do protonacije u kiselim i neutralnim rastvorima, sa gustinom naelektrisanja koja zavisi od pH i vrednosti %DA. Ovo čini hitozan rastvornim u vodi i bioadhezivom koji se lako vezuje za negativno naelektrisane površine, kao što su membrane sluzokože. Hitozan poboljšava transport polarnih lekova kroz epitelne površine, a biokompatibilan je i biorazgradiv.
U jednom aspektu, ovde je opisan jedan proces ili postupak za dobijanje seruma trombina, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanja celovite krvi, poželjno u nekoj cevi, koja poželjno
sadrži neki tiksotropni gel,
b) Centrifugiranje ove cevi do oslobađanja seruma trombina, i
c) Sakupljanje seruma trombina.
Činom uzimanja krvi, u krvi počinju reakcije zgrušavanja, pa ukoliko se nešto ne preduzme da se taj proces zaustavi, ugrušak će se prirodnim putem stvoriti.
Poželjno je da se tiksotropni gel smesti blizu dna cevi. Tokom centrifugiranja, će migrirati ispod gela. U međuvremenu, dolazi do polimerizacije fibrinogena, uz stvaranje ugruška na gelu. Pri dovoljnoj sili centrifugiranja i/ili dovoljnom vemenu centrifugiranja, ovaj ugrušak će se dalje taložiti, formirajući fibrinsku mrežu, iz koje će se osloboditi tečan supernatant, zvani serum, koji sadrži obogaćeni aktivirani trombin. Trombin je enzim koji stimuliše koagulaciju.
Pogodno je da se serum trombina, u skladu sa ovim opisom, može dobiti u nekoliko koraka jednostavnim centrifugiranjem cevi koja sadži celovitu krv i neki tiksotropni gel, tokom dovoljno dugog vremena centrifugiranja. Pogodonost postupka za dobijanje seruma trombina, u skladu sa ovim opisom, je da se dobija serum trombina spreman za upotrebu.
Serum trombina se ovde takođe pominje kao preparat obogaćen trombinom, serum obogaćen trombinom, serum obogaćen aktiviranim trombinom, preparat obogaćen aktiviranim trombinom, aktivirani serum obogaćen trombinom, aktivirani preparat obogaćen trombinom.
U sledećem aspektu, ovde je opisan jedan proces ili postupak za dobijanje seruma trombina, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanje celovite krvi, poželjno u nekoj cevi, poželjno koja sadrži neki tiksotropni gel,
b) Centrifugiranje ove cevi sve dok crvena krvna zrnca migriraju ispod tiksotropnog gela, poželjno sve dok se ne stvori mrežica od fibrina na ovom tiksotropnom gelu, i
c) Sakupljanje supernatanta, ili seruma trombina.
U jednoj poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, korak centrifugiranja se obavlja sa silom od oko 1500g, tokom približno 30 min. U sledećoj realizaciji, korak centrifugiranja se obavlja sa silom između oko 1000g i do oko 2000g, tokom vremena koje se bira od oko 20 min do oko 40 min, poželjno sa 1500g tokom vremena koje se bira od oko 25 min do oko 35 min, poželjno sa 1500g oko 30 min.
Poželjno je da se korak centrifugiranja obavlja dovoljno dugo vremena da se oslobodi serum trombina.
Pogodnost postupaka iz ovog pronalaska je da se dozvoljava konzervisanje tečnog seruma, u kome trombin ostaje rastvoran.
Standardni postupci se sastoje u trituriranju ugruška dok se ne oslobodi serum trombina. Pogodnost je da ovaj korak nije neophodan prilikom dobijanja seruma trombina prema ovom opisu. Ovaj alternativni serum trombina se može takođe upotrebiti kao preparat obogaćen trombinom u kontekstu ovog pronalaska.
Pogodnost je da se ne koristi agens za koagulaciju, a koagulacija se spontano dešava. Prednost ovog je ušteda troška i pojednostavljenje postupka. Pošto u cevi nije prisutan citrat, pogodnost je da nema agensa koagulacije (takođe se naziva agensom za oporavljanje) koji je potreban za iniciranje koagulacije. Pogodnost predstavlja i da nema potrebe za rastvorom etanola i/ili kalcijum-hlorida.
Pogodnost je, da se proces ili postupak za dobijanje seruma trombina, koji je ovde opisan, jednostavno obavlja, da zahteva smanjeno vreme prisustva humanog bića, zato što nije potrebno trituriranje ugruška, što čini ekonomsku prednost u odnosu na stare postupke dobijanja.
Alternativni autogeni serum trombina, koji se koristi kao preparat obogaćen trombinom, u kontekstu ovog opisa, dobija se starim procesom, koji se sastoji od dodavanja uzorka celovite krvi pacijenta (npr. 10 mL) sakupljenog u nekoj epruveti, sa 95 vol% rastvorom etanola (npr.1 mL) i 10% kalcijum-hloridom (npr. 1 mL). Ova smeša se zatim ostavi oko 30 min da se taloži, na sobnoj temperaturi.
Posle 30 min istaloži se skoro 80 % anti-trombina (među ostalim, proteinima je fibrinogen); zatim se ova cev centrifugira sa oko 1500g tokom oko 8 do 10 min, a ovaj autogeni serum trombina je spreman za upotrebu, u kombinaciji sa koncentratom obogaćenih pločica.
Poželjno je da je ovde opisan jedan proces ili postupak za dobijanje of autogenog seruma trombina. Poželjno je što su svi aspekti i/ili realizacije ovog pronalaska za autogenu upotrebu. U skladu sa tim, ovde se opisuje postupak za dobijanje potpuno autogenog seruma trombina, pri čemu su donor i primaoc ista osoba ili animalno biće.
U jednoj realizaciji ovog opisa, cev za dobijanje seruma trombina je napravljena od stakla, poželjno neka cev-stakleni separator, koja sadrži tiksotropni gel na bazi nekog poliestra.
U najpoželjnijoj realizaciji, ovaj postupak za dobijanje seruma trombina koristi cev u skladu sa ovim opisom, pri čemu se ne dodaje citrat.
U sledećem aspektu, ovde je opisan jedan proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanje celovite krvi, poželjno u nekoj cevi, koja poželjno sadrži neki tiksotropni gel,
b) Centrifugiranje ove cevi, poželjno do oslobađanja seruma trombina, c) Sakupljanje supernatanta, ili seruma trombina, i
d) Mešanje ovog seruma trombina sa kompozicijom PRP ili nekom izolovanom kompozicijom koncentrata pločica.
U sledećem aspektu, ovde je opisan jedan proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, kompozicije ćelija i/ili preparata ćelija, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanje celovite krvi, poželjno u cevi, koja poželjno sadrži neki tiksotropni gel,
b) Centrifugiranje ove cevi, poželjno do oslobađanja seruma trombina, c) Sakupljanje ovog seruma trombina,
d) Mešanje ovog seruma trombina sa nekom kompozicijom PRP ili nekim koncentratom izolovanih pločica, i
e) Mešanje dobijene kompozicije u koraku d) sa nekim ekstraktom ćelija, kompozicijom ćelija, TKF, hitozanom, hijaluronskom kiselinom, kremom, kremom za masku, masnim ćelijama, masnim tkivom, koncentratom koštane srži, lubricinom, cd-želatinom, toksinom botulina i/ili matičnim ćelijama.
U jednoj realizaciji, sakupi se celokupna krv u najmanje jednu cev. Ova cev se ovde može nazvati separatorska cev. Poželjno je da svi postupci i/ili procesi iz ovog pronalaska mogu da koriste jednu ili više cevi u skladu sa ovim pronalaskom.
U jednoj realizaciji, svi postupci i/ili procesi iz ovog pronalaska mogu koristiti celovitu krv, u sistemu sa kesom za sakupljanje krvi ili u uređaju sa cevima za sakupljanje krvi, u skladu sa ovim opisom, ili u nekom uređaju ili kompletu koji sadrži neki takav sistem sa kesom za krv, ili uređaj sa cevima za sakupljanje krvi .
"Prazna" cev, ovde se odnosi na neku cev u kojoj nema ubačenih supstanci, ili u kojoj nema kompozicija ubačenih ili dodatih u tu cev.
Bilo koji proces ili postupak iz ovog pronalaska se može obaviti korišćenjem bar jedne cevi u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećem aspektu, ovde je opisan jedan proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanja celovite krvi u jednu cev,
b) Centrifugiranja ove cevi,
c) Sakupljanje ugruška.
Pogodno je da se ne koristi agens za koagulaciju prilikom dobijanja ove kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva. Pogodno je da kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva predstavlja kompoziciju spremnu za upotrebu. Ta kompozicija se može direktno primeniti na dijabetske čireve. Poželjno je da se ovaj proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva upotrebljava u stomatologiji i/ili ortopediji.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje jedna kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva koja sadrži neki ugrušak za upotrebu u stomatologiji, ortopediji, artritisu, pseudo-artritisu ili drugde. U jednoj realizaciji, kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva koja sadrži ugrušak se primenjuje u šupljini zuba, na dijabetskom čiru, perforiranom čiru, dijabetskom peforiranom čiru, ili drugde. Opisan je takođe postupak tretmana i upotrebe kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koja sadrži neki ugrušak.
U jednoj realizaciji, kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva se može kombinovati sa trikalcijum-fosfatom (TKF) ili sa bilo kojim supstitutom za kosti, poželjno pre stvaranja ugruška.
Kompozicija za zarastanje rana, koja sadrži TKF, poželjno je da se dobija u nekoj fioli.
U jednoj realizaciji, kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva se može kombinovati sa hijaluronskom kiselinom (HK), poželjno pre stvaranja ugruška.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje jeda postupak ili proces za dobijanje kompozicije koncentrata pločica ili kompozicije plazme obogaćene pločicama, koji se sastoji od koraka:
a) Centrifugiranja celovite krvi u nekoj cevi, u skladu sa ovim pronalaskom, koja poželjno sadrži natrijum-citrat i neki tiksotropni gel, i
b) Sakupljanja ove plazme obogaćene pločicama.
Korak centrifugiranja će eliminisati ćelije crvenih krvnih zrnaca, RBC, (od engleski, Red Blood Cells) iz plazme. Gornju fazu predstavlja plazma obogaćena pločicama (PRP), a donju fazu antikoagulisana celovita krv umanjena za plazmu obogaćenu pločicama.
Poželjno je da se korak centrifugiranja obavlja sa silom od ili oko 1500g do oko 2000g. Poželjno je da se korak centrifugiranja obavlja dovoljno dugo vremena, dok se ne formira barijera između plazme, koja sadrži pločice, limfocite i monocite, i gela, koji sadrži eritrocite.
Poželjno je da se separacija u koraku b) obavi sakupljanjem supernatanta, iz gornjeg dela pomenute barijere. U jednoj realizaciji, plazma obogaćena pločicama se izdvaja iz celovite plazme uklanjanjem polovine supernatanta koji sadrži plazmu osiromašenu pločicama. Poželjno je da je obogaćena plazma obogaćena leukocitima, trombocitima i adhezionim proteinima (na primer, fibronektinom (rastvoran protein) ili vitronektinom (protein koji izlučuju pločice), u poređenjiu sa polaznom prirodnom celokupnom krvlju.
U jednoj realizaciji, cev, koja se koristi za dobijanje plazme obogaćene pločicama, bira se između:
i) staklene separatorske cevi, koja sadrži tiksotropni gel na bazi poliestra i puferovani rastvor 0.10 M natrijum-citrata,
ii) separatorsku cev od polietilen tereftalata, koja sadrži visoko tiksotropan gel, formiran iz smeše polimera i anhidrovanog natrijum-citrata sa 3.5 mg/mL, iii) separatorsku cev od 0.10 M Cikličnog Olefinskog Kopolimera (COK) ili Cikličnog Olefinskog Polimera (COP), koja sadrži tiksotropni gel na bazi poliestra i puferovanog rastvora 0.10 M natrijum-citrata, ili
iv) separatorsku filter cev od Cikličnog Olefinskog Kopolimera (COK) ili Cikličnog Olefinskog Polimera (COP), koja sadrži puferovani rastvor 0.10 M natrijum-citrata ili anhidrovani natrijum-citrat sa 3.5 mg/mL.
U najpoželjnijoj realizaciji, postupak za dobijanje koncentrata pločica koristi cev u skladu sa ovim pronalaskom, sa dodatkom citrata (na primer puferovanog rastvora 0.10 M natrijum-citrata ili anhidrovanog natrijum-citrata, sa 3.5 mg/mL).
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje postupak ili proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili ili kompozicije za zarastanje tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Centrifugiranja celovite krvi u nekoj cevi, u skladu sa ovim pronalaskom, koja poželjno sadrži natrijum-citrat i neki tiksotropni gel,
b) Sakupljenje plazme obogaćene pločicama, i
c) Mešanje plazme obogaćene pločicama sa ekstraktom ćelija, kompozicijom ćelija TKF, hitozanom, hijaluronskom kiselinom, kremom, kremom za masku, masnim ćelijama, masnim tkivom, koncentratom koštane srži, lubricinom, cdželatinom, toksinom botulina i/ili matičnim ćelijama.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje sredstvo za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva koja sadrži:
a) plazmu obogaćenu pločicama ili koncentrat plazme, i
b) TKF, hitozan, hijaluronsku kiselinu, kremu, kremu za masku, masne ćelije, masno tkivo, koncentrat koštane srži, lubricin, cd-želatin, toksin botulina i/ili matične ćelije.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje sredstvo za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva, koji sadrže:
a) serum trombina,
b) plazmu obogaćenu pločicama ili koncentrat plazme, i
c) TKF, hitozan, hijaluronsku kiselinu, kremu, kremu za masku, masne ćelije, masno tkivo, koncentrat koštane srži, lubricin, cd-želatin, toksin botulina i/ili matične ćelije.
Stvaranje ugruška je stupnjeviti proces, ili kaskada, a u nekoliko od tih koraka zahteva se prisustvo jona kalcijuma. Uklanjanjem jona kalcijuma iz celovite krvi, kao što je efekat kada se krv skuplja u citratu, može se sprečiti zgrušavanje krvi. Agens za helatiranje kalcijuma je hemikalija koja reaguje sa kalcijumom, prisutnim u krvi, na takav način da kalcijum više ne može da funkcioniše pri koagulaciji krvi. Najobičniji agens za helatiranje je so limunsjke kiseline (citrat), zato što ima najmanje sporednih efekata na komponente sistema za zagrušavanje. Skupljanjem krvi u neki medijum koji sadrži agens za helatiranje kalcijuma, kao što je citrat, uzimanje uzorka i naknadno preparisanje uzorka sa citratom može se obaviti u periodu vremena do nekoliko sati. Poželjan agens za helatiranje kalcijuma je natrijum-citrat.
Pošto se uzimanje uzorka u medijum sa 3.5 mg/ml natrijum-citrata često koristi pri uzimanju i čuvanju krvi, osoba verzirana u stanju tehnike shvata da odnos natrijumcitrata prema celokupnoj krvi može biti u različitim opsezima.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje izolovana kompozicija koncentrata pločica, koja sadrži:
a) plazmu;
b) pločice, sa koncentracijom od najmanje 300×10<9>ćelija/L;
c) bela krvna zrnca, sa koncentracijom od najmanje 7×10<9>ćelija/L;
d) fibrinogen, sa koncentracijom od najmanje 3 mg/L; a pri tome je koncentracija eritrocita manja od 0.6×10<12>ćelija/L.
Kompozicija plazme obogaćene pločicama se takođe ovde navodi kao kompozicija koncentrata plazme.
U jednoj realizaciji, kompozicija koncentrata pločica, ili kompozicija plazme obogaćene pločicama, može biti kombinovana sa trikalcijum-fosfatom (TKF) i/ili bilo kojom zamenom koja se koristi kao korektor zapremine (TKF sa 10-30 µm), u stomatologiji, ortopediji (TKF od 50 µm).
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak ili proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Centrifugiranja celovite krvi u nekoj cevi koja sadrži hijaluronsku kiselinu, b) Opciono, separacije plazme obogaćene pločicama i hijaluronske kiseline iz čiste plazme, i
c) Opciono, mešanja plazme obogaćene pločicama i hijaluronske kiseline.
Poželjno je da cev sadrži hijaluronsku kiselinu, poželjno pri dnu cevi, preko koje dolazi tiksotropni gel, a zatim neki antikoagulant, poželjno natrijum-citrat (Slika 16).
Poželjno je da se korak separacije b) obavlja sakupljanjem supernatanta, koji sadrži plazmu obogaćenu pločicama i hijaluronsku kiselinu, sa vrha pomenute barijere. U jednoj realizaciji, ova plazma obogaćena pločicama i hijaluronska kiselina se separišu od čiste plazme uklanjanjem polovine supernatanta koji, sadrži plazmu osiromašenu pločicama. Poželjno je da je obogaćena plazma obogaćena leukocitima, trombocitima i adhezionim proteinima (na primer, fibronektinom (rastvornim proteinom) ili vitronektinom (proteinom koji izličuju pločice)), u poređenju sa čistom celovitom krvlju.
U sledećem aspektu, ovog pronalaska daje se proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanje celovite krvi, poželjno u cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu, neki tiksotropni gel i/ili neki antikoagulant, poželjno natrijum-citrat,
b) Centrifugiranja ove cevi, poželjno do migracije crvenih krvnih zrnaca ispod tiksotropnog gela i poželjno do migracije hijaluronske kiseline iznad obogaćene plazme,
c) Opciono, mešanja hijaluronske kiseline i obogaćene plazme, poželjno izokretanjem te cevi,
d) Sakupljanje supernatanta, koji sadrži hijaluronsku kiselinu i obogaćenu plazmu, i
e) Opciono, daljeg mešanja pomenute hijaluronske kiseline i pomenute obogaćene plazme.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanje celovite krvi, poželjno u neku cev, koja sadrži hijaluronsku kiselinu, neki tiksotropni gel i/ili neki antikoagulant, poželjno natrijum-citrat, b) Centrifugiranje ove cevi, poželjno dok se ne formira sloj hijaluronske kiseline kao prvi sloj sa vrha cevi, koga sledi drugi sloj, koji se sastoji od obogaćene plazme ili PRP,
c) Opciono, mešanje hijaluronske kiseline i obogaćene plazme, poželjno izokretanjem te cevi,
d) Sakupljanje supernatanta, koji sadrži hijaluronsku kiselinu i obogaćenu plazmu, i
e) Opciono, dodatnog mešanja pomenute hijaluronske kiseline i pomenute obogaćene plazme.
Korak centrifugiranja će eliminisati crvena krvna zrnca iz plazme. Posle centrifugiranja, fazu na vrhu cevi čini hijaluronska kiselina, ispod nje je plazma obogaćena pločicama (PRP), pa sledi tiksotropni gel i na dnu faza antikoagulisane celovite krvi, koja sadrži crvena krvna zrnca, a umanjena je za plazmu obogaćenu pločicama (Slika 16). Za vreme centrifugiranja, hijaluronska kiselina migrira iznad plazme (Slika 16).
Poželjno je da ova cev sadrži oko 1 mL dooko 2 mL hijaluronske kiseline, oko 2 g selektora ćelija ili tiksotropnog gela i oko 1 mL 0.109 M natrijum-citrata.
Shematski prikaz postupka za dobijanje kompozicije za zarastanje rana, koja sadrži hijaluronsku kiselinu i PRP, data je na Slici 16.
Poželjno je da se plazma obogaćena pločicama i hijaluronska kiselina pomešaju jednostavnim izokretanjem cevi.
Pogodno je da se, dok se mešaju plazma obogaćena pločicama i hijaluronska kiselina, hijaluronska kiselina obloži plazmom i ćelijama.
Pogodno je da su dobijena kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva spremne za upotrebu. Pogodno je da dobijena kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva budu u viskoznom gelu ili biološkom lepku pogodnom za injekcije, pa se, na primer, mogu upotrebiti kao mehanički nosač ili punilac.
Pogodno je da je postupak ili proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana, kompozicije za zarastanje tkiva, ili viskoznog gela ekonomičan, jednostavan i brz.
Poželjno je da se korak centrifugiranja obavlja dovoljno dugo vremena, do migracije crvenih krvnih zrnaca ispod tiksotropnog gela i poželjno, do migracije hijaluronske kiseline iznad obogaćene plazme.
U jednoj poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, korak centrifugiranja se obavlja sa silom od oko 1500g, tokom približno 5 min. U sledećoj realizaciji, korak centrifugiranja se obavlja sa silom između oko 1000g do oko 2000g, tokom vremena koje bira od oko 3 min do oko 7 min, poželjno sa 1500g tokom vremena koje se bira od oko 3 min do oko 7 min.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu i neki antikoagulant. U sledećem aspektu ovog pronalaska, ovaj pronalazak daje jednu cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu, neki antikoagulant i celovitu krv. Poželjno je da antikoagulant predstavlja natrijum-citrat.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu i gel selektor ćelija. U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu, gel selektor ćelija i celovitu krv. Poželjno je da gel, selektor ćelija, bude neki tiksotropni gel.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu, neki antikoagulant i neki gel selektor ćelija. U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu, neki antikoagulant, neki gel selektor ćelija i celovitu krv. Poželjno je da je antikoagulant natrijum-citrat. Poželjno je da je gel selektor ćelija neki tiksotropni gel. Poželjno je da je hijaluronska kiselina locirana na dnu ove cevi, posle koje sledi neki tiksotropni gel, a iznad njih neki antikoagulant, poželjno natrijum-citrat (Slika 16).
U sledećem aspektu, ovde se opisuje cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu i PRP. U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu, PRP i gel selektor ćelija. U sledećem aspektu, ovde se opisuje cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu, PRP i neki antikoagulant. U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu, PRP, neki antikoagulant i neki gel selektor ćelija. Poželjno je da je antikoagulant natrijum-citrat. Poželjno je da je gel selektor ćelija neki tiksotropni gel.
Poželjno je da se cev, u skladu sa ovim pronalaskom, koristi u postupku ili procesu u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje kompozicija koja sadrži hijaluronsku kiselinu i PRP. U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje kompoziciju koja sadrži hijaluronsku kiselinu i PRP, pri čemu se ova kompozicija dobija po postupku za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje jedan komplet kit ili medicinsko sredstvo koje sadrži cev u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećim realizacijama ovaj pronalazak daje cev, koja se može koristiti za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koja se bira između:
i) staklene separatorske cevi, koja sadrži neki tiksotropni gel na bazi poliestra, puferovani rastvor 0.10 M natrijum-citrata i hijaluronsku kiselinu,
ii) polietilentereftalatnu separatorsku cev, koja sadrži visoko tiksotropan gel, formiran iz smeše polimera, anhidrovanog natrijum-citrata, sa 3.5 mg/mL i hijaluronske kiseline,
iii) separatorsku cev od Cikličnog Olefinskog Kopolimera (COK) ili Cikličnog Olefinskog Polimera (COP), koja sadrži tiksotropni gel na bazi poliestra, puferovani rastvori 0.10 M natrijum-citrata i hijaluronsku kiselinu, ili
iv) separatorsku filter cev od Cikličnog Olefinskog Kopolimera (COK) ili Cikličnog Olefinskog Polimera (COP), koja sadrži hijaluronsku kiselinu i puferovani rastvor 0.10 M natrijum-citrata ili anhidrovani natrijum-citrat, sa 3.5 mg/mL.
U sledećoj poželjnoj realizaciji, ovaj pronalazak daje cev u skladu sa ovim pronalaskom, koja se može koristiti za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koja još sadrži citrat i hijaluronsku kiselinu (na primer hijaluronska kiselina i puferovani rastvor 0.10 M natrijum-citrata, ili anhidrovani natrijum-citrat, sa 3.5 mg/mL).
Poželjno je da se ftalat ne koristi za humanu upotrebu.
Alternativno, kao antikoagulanti se mogu koristiti hirudin, benzilsilfonil-d-Arg-Pro-4-amidinobenzilamid (BAPA), heparin, citrat, kiseli citrat dekstroze (ACD), citratteofilin-adenozin-dipiridamol (CTAD) ili kalijum-etilendiaminetetra-kiselina (EDTA).
U sledećem aspektu, ovde se opisuje kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva koja sadrži:
a) plazmu;
b) pločice, sa koncentracijom od najmanje 300×10<9>ćelija/L;
c) bela krvna zrnca, sa koncentracijom od najmanje 7×10<9>ćelija/L;
d) fibrinogen, sa koncentracijom od najmanje 3 mg/L;
e) oko 1 mL do oko 2 mL hijaluronske kiseline;
a pri tome je koncentracija eritrocita manja od 0.6×10<12>ćelija/L.
U jednoj realizaciji, kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva može da se kombinuje sa trikalcijum-fosfatom (TKF) i/ili bilo kojom zamenom koja se upotrebljava kao korektor zapremine (TKF od 10-30 µm), u stomatologiji, ortopediji (TKF od 50 µm).
U jednoj realizaciji, mogu se kombinovati kompozicija za zarastanje rana, kompozicija za zarastanje tkiva, neki hemostatski agens, neka kompozicija koncentrata pločica i neka kompozicija plazme obogaćene pločicama, u cevi za sakupljanje krvi sa hijaluronskom kiselinom.
U sledećem aspektu, ovde je opisan jedan proces ili postupak nekog hemostatskog agensa, neke kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koji se sastoji od koraka mešanja seruma trombina ili seruma trombina sa kompozicijom plazme obogaćene pločicama, kompozicijom plazme obogaćene pločicama, kompozicijom sredstva za zarastanje rana ili kompozicijom za zarastanje tkiva.
U sledećem aspektu, ovde je opisan jedan proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana, kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa, koji se sastoji od:
a) dobijanja koncentrata pločica,
b) mešanja ovog koncentrata pločica sa nekim aktivatorom koagulacije, serumom trombina ili serumom trombina, i
c) opciono, mešanja nekog ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt keratinocita, koštane srži, fibroblasta, periosteuma ili ćelija rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasta; hondrocita; krvnih progenitornih ćelija, ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnih matičnih ćelija MSC (od engleski, mesenchimal stem cells), preadipocita, pre-endotelijalni ćelija, Schwann-ovih ćelija ili Achilles-ovih ćelija tetiva.
Poželjno je da se koriste autogeni koncentrat pločica, autogeni trombin i/ili autogeni ekstrakt ćelija. Poželjnije je da se koriste autogeni koncentrat pločica i autogeni trombin i autogeni ekstrakt ćelija. Poželjno je da se koriste cevi u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa, koji se sastoji od:
a) Mešanja koncentrata pločica s autogenim serumom trombina, i
b) Opciono, mešanjem najmanje jednog autogenog ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt keratinocita, koštane srže, fibroblasta, periosteuma ili ćelija rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasta; hondrocita; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnih matičnih ćelija (MSC), preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija ili Achilles-ovih ćelija tetiva.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa koji se sastoji od:
a) Mešanja autogenog koncentrata pločica sa serumom trombina, pri čemu se autogeni koncentrat pločica i/ili serum trombina dobijaju korišćenjem cevi, i b) Opciono, mešanjem najmanje jednog autogenog ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt of keratinocita, koštane srži, fibroblasta, periosteuma ili ćelija rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasta; hondrocita; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnih matičnih ćelija (MSCs), preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija ili Achilles-ovih ćelija tetiva.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje proces ili postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa, koji se sastoji od:
a) Dobijanja koncentrata pločica, poželjno autogenog koncentrata pločica, b) Mešanja ovog koncentrata pločica sa serumom trombina, i
c) Opciono, mešanja najmanje jednog ekstrakta ćelija, poželjno autogenog ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt keratinocita, koštane srži, fibroblasta, periosteuma ili ćelija rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasta; hondrocita; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnih matičnih ćelija (MSCs), preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija ili Achilles-ovih ćelija tetiva.
Poželjno je da ovaj pronalazak daje postupak ili proces za dobijanje autogene kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa. Ovde se podrazumeva da autogena kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva ili hemostatski agens ozačavaju kompoziciju u kojoj su ili koncentrat pločica ili serum trombina autogeni.
U najpoželjnijem aspektu, ovaj pronalazak daje postupak ili proces za dobijanje potpuno autogene kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa. Potpuno autogena kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa ovde označavaju kompoziciju u kojoj su koncentrat pločica ili serum trombina autogeni. Unutar ovog poželjnog aspekta pronalaska, sve krvne komponente za kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatske agense izvedene su iz istog paijenta ili animalnog bića, kome će se ta kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva ili hemostatski agens ordinirati.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje postupak ili proces za dobijanje potpuno autogene kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa u kombinaciji sa najmanje jednim autogenim ekstraktom ćelija. U ovom aspektu, koncentrat pločica, serum trombina i ekstrakt(i) ćelija su svi autogeni, pa su stoga izvedeni iz istog pacijenta ili animalnog bića.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje proces ili postupak za dobijanje autogene kompozicije za zarastanje rana ili autogene kompozicije za zarastanje tkiva ili autogenog hemostatskog agensa, koji se sastoji od:
a) Mešanja autogenog koncentrata pločica sa autogenim serumom trombina, i b) Opciono, mešanja najmanje jednog ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt keratinocita, koštane srži, fibroblasta, periosteuma ili ćelija rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasa; hondrocita; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnig matičnih ćelija, preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija ili Achilles-ovih ćelija tetiva, a pri tome su autogeni koncentrat pločica i autogeni trombin izvedeni iz istog pacijenta ili animalnog bića.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje proces ili postupak za dobijanje autogene kompozicije za zarastanje rana ili autogene kompozicije za zarastanje tkiva ili autogenog hemostatskog agensa, koji se sastoji od:
a) Mešanja autogenog koncentrata pločica sa autogenim serumom trombina, i b) Opciono, mešanja najmanje jednog autogenog ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt keratinocita, koštane srži, fibroblasta, periosteuma ili ćelija rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasa; hondrocita; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnig matičnih ćelija, preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija ili Achilles-ovih ćelija tetiva, a pri tome su autogeni koncentrat pločica i autogeni trombin izvedeni iz istog pacijenta ili animalnog bića.
Plazma obogaćena pločicama, autogena plazma obogaćena pločicama, serum trombina, autogeni serum trombina, kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva ili hemostatski agens se mogu kombinovati sa jednim ili više ekstrakta ćelija. U jednoj realizaciji, ekstrakt ćelija se bira između keratinocita, koštane srži, fibroblasta, periosteuma ili ćelija rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasta; hondrocita; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnih matičnih ćelija, preadipocita, preendotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija ili Achilles-ovih ćelija tetiva.
Kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva ili hemostatski agens iz ovog pronalaska će stimulisati regeneraciju ćelija, delujući kao biološki lepak u promovisanju adhezije tkiva.
U jednoj realizaciji, umesto seruma trombina, može da se koristi alternativni aktivator koagulacije, kao što je kalcijum-hlorid, a poželjan je kalcijum-glukonat.
U jednoj realizaciji, može se koristiti kombinacija više aktivatora koagulacije, poželjno serum trombina sa kalcijum-glukonatom.
Poželjno je da se aktivator koagulacije ili serum trombina pomešaju sa koncentratom pločica u zapreminskom odnosu (koncentrat pločica: aktivator koagulacije) od oko 10:1 do oko 10:3.
U jednoj poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, tečni serum se sakuplja u proporciji 1:1, proporciji 3:1 ili proporciji 10:1 prema plazmi obogaćenoj pločicama. Ova specifična proporcija će promeniti čvrstoću hemostatskog agensa. Pri proporciji 3:1 dobija se jak hemostatski agens. Pri proporciji 10:1 dobija se mekši agens.
U jednoj realizaciji, PRP ili koncentrat plazme, sami ili u kombinaciji sa nekim ekstraktom ćelija, a isto tako preparati ili kompozicije, se mogu kombinovati ili integrisati natapanjem sa vanćelijskom matricom, za direktno apliciranje po rani, ili se mogu u laboratoriji kultivisati pre aplikacije. Miože se koristiti kolagenska matrica ili sintetička matrica, na primer Integra matrica.
Sledeća realizacija podrazumeva mešanje humanog rekombinantnog tromboplastina direktno sa plazmom obogaćenom pločicama, pri formiranju kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa. Alternativno, koristi se humani rekombinantni tromboplastin za generisanje trombina u malom alikvotu plazme, a zatim se dobijeni trombin kombinuje sa plazmom obogaćenom pločicama da se formira kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva ili hemostatski agens.
U jednoj realizaciji, cevi koje se koriste mogu imati kvašljive površine (kao što su, silicijum-dioksid, dijatomejska zemlja, kaolin, itd.) ili nekvašljive površine (kao što su, plastika, silikonizirano staklo, itd.). Pošto površina igra ulogu u aktivaciji koagulacije krvi, izbor površine separatorske cevi zavisi od toga da li se želi brzo ili sporo stvaranje ugruška. Hemijski aktivatori, kao što je kaolin, mogu se takođe koristiti za ubtzavanje vremena zgrušavanja; međutim, neophodno je takođe njihovo naknadno uklanjanje.
Pogodnost predstavlja da za dobijanje plazme obogaćene pločicama, koncentrata pločica, seruma trombina, kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa nije neophodno prisustvo etanola i/ili kalcijuma. Kod korišćenja autogenog trombina, ovim opisom se ne zahteva obnavljanje procesa formiranja ugruška. Stoga, nije potreban agens (ili agens a obnavljanje) kao što su kalcijum-hlorid ili kalcijum-glukonat, za vraćanje efekata agensa antikoagulacije (u obnavljanju koagulacije aktivnost krvi sa citratom).
Mada je kalcijum-hlorid dobro poznata kalcijumova so koja se koristi kao agens za obnavljanje, na sličan način će delovati bilo koja kalcijumova so, pa se može smatrati agensom za obnavljanje. Slično, mada se danas smatra da mnoge reakcije u koagulaciji krvi zahtevaju kalcijumove jone, kao kofaktore, bilo koja supstanca za koju se zna ili se naknadno pronađe da je funkcionalno ekvivalentna kalcijumu u olakšavanju reakcija koagulacije, može se smatrati agensom za obnavljanje, bilo individualno, ili u kombinaciji sa kalcijumom. Ukoliko je heparin upotrebljen kao antikoagulacijski agens, tada će se kao agens za obnavljanje koristiti heparinaza, da bi se povratio efekat antikoagulacijskog agensa.
Pogodnost, koja se ovde opisuje je da su za plazmu obogaćenu pločicama, koncentrat pločica, serum trombina, kompoziciju za zarastanje rana ili kompoziciju za zarastanje tkiva ili za hemostatski agens eliminisani rizici povezani sa korišćenjem goveđeg i rekombinantnog humanog trombina.
Pogodnost je da se veća koncentracija PRP, faktora rasta, leukocita, fibrinogena i/ili drugih proteina dobija po postupcima iz ovog pronalaska.
Pogodnost je da se dobija dvostruka koncentracija PRP, faktora rasta, leukocita, fibrinogena i/ili drugih proteina, u poređenju sa noramalnim hematološkim sadržajima.
Pogodnost je da postupci iz ovog pronalaska pružaju optimalnu ćelijsku produktivnost pri umnožavanju ćelija.
Pogodnost je da postupci iz ovog pronalaska dozvoljavaju manipulisanje sa krvlju u potpuno zatvorenom sistemu tokom čitavog procesa, od uzimanja krvi, manipulacije, pa do pa do apliciranja ili injektiranja pacijentu. Svi uređaji i kompleti su prilagođeni manipulisanju u potpuno zatvorenom sistemu, sa ciljem da se izbegne direktan kontakt krvi sa vazduhom.
Pogodnost je da postupci iz ovog pronalaska smanjuju oksidacioni stres i smanjuju vreme manipulacije ex-vivo.
Pogodnost je da postupci iz ovog pronalaska dozvoljavaju stvaranje čvrste autogene srasle membrane, sačinjene od agregata pločica i aktiviranog polimerizovanog fibrinogena.
Preparati (na primer, preparat ćelija koštane srži) se mogu koristit sami ili se mogu pomešati sa koncentratom pločica, ili ponovo centrifugirati sa kalcijum-glukonatom, za formiranje srasle membrane, pa aplicirati ili injektovati sa aplikatorom na povređeno mesto pacijenta.
Preparat ćelija koštane srži je koristan u tretmanu defekata kosti ili defekta hrskavice. Ovaj preparat kosti se može koristiti sam ili u kombinaciji sa koncentratom plazme. Membrana hrskavice se može koristiti isto kao sa kalcijum-glukonatom.
U jednoj poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, korak centrifugiranja (npr. za srastanje membrane) obavlja se sa silom od oko 3000g tokom 15 do 25 min. U jednoj realizaciji, korak centrifugiranja se obavlja sa silom između oko 2500g ido oko 3500g tokom vremena koje se bira od oko 10 min do oko 30 min.
U jednoj realizaciji, uzima se uzorak celovite krvi iz nekog humanog ili animalnog bića. U poželjnoj realizaciji uzima se uzorak celovite krvi iz nekog humanog bića.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje kompozicije za zarastanje rane ili tkiva ili hemostatski agens, dobijen u skladu sa ovim pronalaskom, koji se sastoji od:
a) plazme;
b) pločica, sa koncentracijom od najmanje 300×10<9>ćelija/L;
c) belihkrvnih zrnaca, sa koncentracijom od najmanje 7×10<9>ćelija/L;
d) fibrinogena, sa koncentracijom od najmanje 3 mg/L;
e) aktivatora koagulacije autogenog seruma trombina,
f) opciono, autogenog ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt keratinocita, ćelija koštane srži, osteoblasta; hondrocita, fibroblasta, periosteuma ili ćelija rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija mišića, kao što su mioblasti i satelitske ćelije; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnih matičnioh ćelija, preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija, tetiva ćelija ili ćelija ostrvaca pankreasa;
a pri tome je koncentracija eritrocita manja od 0.6×10<12>ćelija/L.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje kompozicija za zarastanje rane ili tkiva, ili hemostatski agens, koji se sastoje od:
a) plazme;
b) pločica, sa koncentracijom od najmanje 300×10<9>ćelija/L;
c) belih krvnih zrnaca, sa koncentracijom od najmanje 7×10<9>ćelija/L;
d) fibrinogena, sa koncentracijom od najmanje 3 mg/L;
e) autogenog seruma trombina;
f) opciono, autogenog ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt keratinocita, ćelija koštane srži, osteoblasta; hondrocita, fibroblasa, periosteuma ili ćelija rožnjače, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnih matičnih ćelija, preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija, ćelija tetiva ili ćelija ostrvaca pankreasa;
a pri tome jekoncentracija eritrocita manja od 0.6×10<12>ćelija/L.
Poželjno je da su aktivator koagulacije ili autogeni serum trombina u zapreminskom odnosu (koncentrat pločica: aktivator koagulacije) od oko 10:1 do oko 10:3.
Pogodnost je da plazma iz ovog pronalska predstavlja idealan medijum za kulturu ćelija, u poređenju sa poznatim. Pogodnost je da plazma iz ovog pronalska predstavlja idealan medijum za transport ćelija. U skladu sa tim, plazma iz ovog pronalaska sadrži sve ćelije i faktore rasta za optimalan rast i preživljavanje ćelija. U skladu sa tim, plazma iz ovog pronalaska predstavlja vrlo pogodan medijum za implantaciju ćelija pacijentu, na primer za atopične aplikacije, kao što su hirurške rane, za injekcije protiv starenja, za intra-artikularne injekcije, intra-muskularne injekcije, ili za regeneraciju pankreasa (ostrvca pankreasa).
U sledećem aspektu, ovde se opisuje uređaj za dobijanje kompozicija koncentrata pločica ili kompozicija plazme obogaćene pločicama ili hemostatskog agensa, ili kompozicije za zarastanje rana ili tkiva ili autogenog seruma trombina, u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje uređaj, koji se sastoji od najmanje jedne cevi, u skladu sa ovim pronalaskom.
Poželjno je da ovaj uređaj ima ulaz za unošenje pomenutog uzorka celovite krvi, da se drži pod vakuumom, sa namerom da se aspirira ceo uzorak celovite krvi, da je sterilan, da ima upotrebljiv vakuum za oko 8 do oko 10 mL, i da je pogodan za podvrgavanje centrifugiranju.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje upotreba kompozicija koncentrata pločica ili kompozicija plazme obogaćene pločicama ili hemostatskog agensa ili kompozicija za zarastanje rana ili tkiva, ili seruma trombina, uskladu sa proizvodnjom medikamenta za zarastanje rana ili za promociju kosti ili rasta periodoncijuma i/ili kosti i/ili regeneraciju tkiva.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje upotreba kompozicije koncentrata pločica ili kompozicije plazme obogaćene pločicama ili hemostatskog agensa ili kompozicije za zarastanje rana ili tkiva ili seruma trombina, za proizvodnju kozmetičkog preparata koji se koristi kao agens protiv starenja, ili agens za obnavljanje kože, kao što su agens za popravku ožiljka, ispunjvanje bora i/ili agens za obnavljanje.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje kompozicija koncentrata pločica ili kompozicija plazme obogaćene pločicama ili hemostatski agens ili kompozicija za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili serum trombina za upotrebu u obliku kozmetičkog preparata, estetskog preparata, tretiranja starenja, korektora zapremine, ispunjavanja bora, smanjenja tamnih mrlja na koži i/ili stimulator rasta kose. U jednoj realizaciji, kompozicija koncentrata pločica ili kompozicija plazme obogaćene pločicama ili hemostatski agens ili kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva se aplicira na i/ili oko očiju, usana, kapaka, lica, vrata, grudi, skalpa, kose, ruku i ostalih delova tela i/ili muških i ženskih genitalija.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje kompozicija koncentrata pločica ili kompozicija plazme obogaćene pločicama ili hemostatski agens ili kompozicij za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili serum trombina za upotrebu rekonstitucije ligamenta i/ili hrskavice. Pogodnost je u tome, što se rekonstitucija ligamenta i/ili hrskavice upotrebom kompozicije iz ovog pronalaska snižava za faktor 2 ili 3, u poređenju sa poznatim postupcima.
U jednoj realizaciji, kozmetički preparat i/ili estetski preparat se kombinuje sa nekim kozmetičkim agensom, kozmetičkom kremom ili kozmetičkom maskom.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje farmaceutska kompozicija, koja se sastoji od koncentrata pločica kompozicije ili kompozicija plazme obogaćene pločicama ili hemostatskog agensa ili kompozicije za zarastanje rana ili tkiva ili seruma trombina, sa nekim farmaceutski prihvatljivim nosačem.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje kozmetička kompozicija, koja se sastoji od kompoziciju koncentrata pločica ili kompoziciju plazme obogaćene pločicama ili hemostatskog agensa ili kompozicije za zarastanje rana ili tkiva ili seruma trombina, sa nekim kozmetički prihvatljivim nosačem.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje uređaj za implantaciju, za uptrebu u terapiji regeneracije tkiva, koji se sastoji od:
a) permeabilnog jezgra, koje se sastoji od kompozicije koncentrata pločica ili kompozicije plazme obogaćene pločicama, ili hemostatskog agensa ili kompozicije za zarastanje rana, opciono u kombinaciji sa hijaluronskom kiselinom, i
b) opciono, spoljašnje obloge koja uokvirava pomenuto jezgro, a pomenuta obloga se sastoji od nekog biokompatibilnog materijala, poželjno bioresorbibilnog, poželjno hijaluronske kiseline.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje komplet, koji se sastoji od najmanje jedne cevi u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje komplet, koji se sastoji od cevi za dobijanje koncentrata pločica u skladu sa ovim opisom i/ili cevi za dobijanje seruma trombina u skladu sa ovim opisom.
U sledećem aspektu, ovde se daje komplet, koji se sastoji od najmanje jedne cevi za dobijanje kompozicije koncentrata pločica ili kompozicija plazme obogaćene pločicama ili hemostatskog agensa ili kompozicije za zarastanje rana ili tkiva ili seruma trombina, u skladu sa ovim opisom.
U jednoj realizaciji, ovaj komplet sadrži još jednu ili više cevi za dobijanje kompozicija koncentrata pločica ili kompozicija plazme obogaćene pločicama ili hemostatskog agensa ili kompozicije za zarastanje rana ili tkiva ili seruma trombina, u skladu sa ovim opisom.
U jednoj realizaciji, ovaj komplet sadrži još pribor za flebotomiju za zarastanje rana ili tkiva i uređaj aplikator (npr. dvostruki špric) za istovremeno zalivanje po rani kompozicije koncentrata pločica ili kompozicije plazme obogaćene pločicama ili hemostatskog agensa ili kompozicije za zarastanje rana ili tkiva ili seruma trombina, u skladu sa ovim opisom.
U jednoj realizaciji, ovaj komplet je prilagođen za regenearciju tkiva.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za unapređenje zarastanja rane ili zarastanja tkiva i/ili zaptivanja i/ili regeneraciju tkiva i/ili kosti u rani ili tkivu humanog ili animalnog bića, koji se sastoji od:
a) Davanja sredstva za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine sredstva za zarastanje rane ili tkiva ili hemostatskpg agensa na ranu, oštećeno tkivo ili oštećenu kost.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak tretmana, koji se sastoji od:
a) Davanja sredstva za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva ili hemostatskog agensa, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine sredstva za zarastanje rane ili tkiva ili hemostatskpg agensa na ranu, oštećeno tkivo ili oštećenu kost.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za regeneraciju rane na periodoncijumu ili periodoncijumalnog oštećenja kod nekog sisara, sa bolešću periodoncijuma ili nekim drugim stanjem koje zahteva regeneraciju periodoncijuma, a koji se sastoji od:
a) Davanja sredstva za zarastanje rane ili tkiva ili hemostatskog agensa, u skladu sa ovim opisom,
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine kompozicije za zarastanje rane ili tkiva ili hemostatskog agensa na ranu ili tkivo ili defekt periodoncijuma ili šupljinu,
c) Opciono, ubacivanja barijere za periodoncijum, i
d) Zatvaranja rane ili tkiva.
Poželjno je da se ova barijera postavi između tkiva gingive i rane ili tkiva koji se tretiraju u skladu sa koraacima a) i b). U jednoj realizaciji, barijera se bira između neke membrane, nekog biodegradibilnog polimera i/ili nekog biokompatiibilnog poroznog materijala.
Membrana se može dobiti kombinovanjem PRP i 10% kalcijum-glukonata, u proporciji od 30 do 70 ili 50 do 50, respektivno. Centrifugiranje se obavlja tokom približno 30 min.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za promovisanje regeneracije kože, u slučaju ožiljaka ili bora kod humanog ili animalnog bića, koji se sastoji od:
a) Davanja kompozicije za zarastanje rana ili tkiva i hemostatskog agensa, u skladu sa ovim opisom, i
b) Punjenja kože ožiljka ili bore sa pomenutom kompozicijom za zarastanje rane ili tkiva ili hemostatskim agensom.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje ćelijske kompozicije, koji se sastoji od koraka:
a) Centrifugiranja celovite krvi u nekoj cevi, u skladu sa ovim pronalaskom, b) Opciono, separisanja plazme obogaćene pločicama iz celovite plazme, i c) Re-suspendovanja obogaćene plazme,
d) Dobijanja ekstrakta ćelija, kao što je ekstrakt ćelija kože, kao što su keratinociti, fibroblasti, melanociti i Langheran-ove ćelije; masne ćelije; ćelije koštane srži; ćelije mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasti; hondrociti; periostealne filter ćelije; ćelije rožnjače; ćelije pupčane vrpce; mezenhimalne matične ćelije, preadipociti, pre-endotelijalne ćelije, Schwannove ćelije, ćelije tetiva ili ćelije ostrvaca pankreasa, i
e) mešanja koncentrata pločica, dobijenog ukoraku (c) sa ekstraktom ćelija ćelija dobijenih pod d).
Poželjno je da se korak centrifugiranja obavlja sa silom od ili oko 1500g do oko 2000g. Poželjno je da se korak centrifugiranja obavlja dovoljno dugo vremena da se formira barijera između plazme, koja sadrži pločice, limfocite i monocite, i pelete, koja sadrži eritrocite.
Poželjno, da se korak separacije b) obavlja sakupljanjem supernatanta, sa vrha pomenute barijere. U jednoj realizaciji, plazma obogaćena pločicama se separiše iz celovite plazme, uklanjanjem polovine supernatanta, koja sadrži plazmu osiromašenu pločicama. Poželjno je da je obogaćena plazma obogaćena leukocitima, trombocitima i adhezionmi proteinima (na primer, fibronektinom), u poređenju sa normalnom celovitom krvlju.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Centrifugiranja celovite krvi u nekoj cevi ili u nekoj separatorskoj cevi, u skladu sa ovim pronalaskom,
b) Opciono, separacije plazme obogaćene pločicama iz celovite plazme, c) Re-suspendovanja obogaćene plazme,
d) Mešanja koncentrata pločica, dobijenog u koraku c), sa nekim aktivatorom koagulacije, serumom trombina ili autogenim serumom trombina,
e) Dobijanja ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt ćelija kože, kao što su keratinociti, fibroblasti, melanociti i Langheran-ove ćelije; masne ćelije; ćelije koštane srži; ćelije mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasti; hondrociti; periostealne filter ćelije; ćelije rožnjače; ćelije pupčane vrpce; mezenhimalne matične ćelije, preadipociti, pre-endotelijalne ćelije, Schwannove ćelije, ćelije tetiva ili ćelije ostrvaca pankreasa;
f) Mešanja smeše koncentrata pločica, dobijene u koraku d), sa ekstraktom ćelija dobijenim u koraku e).
Poželjno je da se korak centrifugiranja obavlja sa silom od ili oko 1500g do oko 2000g. Poželjno je da se korak centrifugiranja obavlja dovoljno dugo vremena da se formira barijera između plazme, koja sadrži pločice, limfocite i monocite, i pelete, koja sadrži eritrocite.
Poželjno je da se korak separacije b) obavi sakupljanjem supernatanta, sa vrha pomenute barijere. U jednoj realizaciji, plazma obogaćena pločicama se separiše iz celovite plazme uklanjanjem polovine supernatanta, koja sadrži plazmu osiromašenu pločicama. Poželjno je da je obogaćena plazma obogaćena leukocitima, trombocitima i adhezionim proteinima (na primer, fibronektinom) u poređenju sa prirodnom celovitom krvlju.
Poželjno je da su aktivator koagulacije ili autogeni serum trombina u zapreminskom odnosu (koncentrat pločica: aktivator koagulacije) od oko 10:1 do oko 10:3.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje izolovanu kompoziciju ćelija, dobijenu u skladu sa ovim pronalaskom, koji se sastoji od:
a) plazme,
b) pločica, sa koncentracijom od najmanje 300×10<9>ćelija/L,
c) belih krvnih zrnaca, sa koncentracijom od najmanje 7×10<9>ćelija/L, d) fibrinogena, sa koncentracijom od najmanje 3 mg/L,
e) ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakt ćelija kože, kao što su keratinociti, fibroblasti, melanociti i Langheran-ove ćelije; masne ćelije; ćelije koštane srži; ćelije mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasti; hondrociti; periostealne filter ćelije; ćelije rožnjače; ćelije pupčane vrpce; mezenhimalne matične ćelije, preadipociti, pre-endotelijalne ćelije, Schwann-ove ćelije, ćelije tetiva ili ćelije ostrvaca pankreasa.
Poželjno je da je koncentracija ćelija plazme ili obogaćene plazme od oko 10<5>do oko 10<6>ćelija/mL, a koncentracija eritrocita da je manja od 0.6×10<12>ćelija/L.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje kompoziciju izolovanih ćelija dobijenu u skladu sa ovim pronalaskom, koja se sastoji od:
a) plazme,
b) pločica, sa koncentracijom od najmanje 300×10<9>ćelija/L,
c) belih krvnih zrnaca, sa koncentracijom od najmanje 7×10<9>ćelija/L, d) fibrinogena, sa koncentracijom od najmanje 3 mg/L,
e) aktivatora koagulacije, seruma trombina ili autogenog seruma trombina, f) ekstrakta ćelija, kao što je ekstrakt ćelija kože, kao što su keratinociti, fibroblasti, melanociti i Langheran-ove ćelije; masnih ćelija; ćelija koštane srži; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasta; hondrocita; periostealnih filter ćelija; ćelija rožnjače; ćelija pupčane vrpce; mezenhimalnih matičnih ćelija, preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, Schwann-ovih ćelija, tetiva ili ćelija ostrvaca pankreasa.
Poželjno je da je aktivator koagulacije ili autogeni serum trombina u zapreminskom odnosu (koncentrat pločica: aktivator koagulacije) od oko 10:1 do oko 10:3.
Poželjno je da je koncentracija ćelija plazme ili obogaćene plazme od oko 10<5>do oko 10<6>ćelija/mL, a koncentracija eritrocita da je manja od 0.6×10<12>ćelija/L.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje kompozicija za zarastanje rana ili tkiva ili hemostatski agens, koja se sastoji od kompozicije izolovanih ćelija u skladu sa ovim opisom.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za poboljšanje zarastanja rana ili tkiva i/ili zaptivanje i/ili regenraciju tkiva i/ili hrskavice i/ili kosti i/ili nerava humanog ili animalnog bića, koji se sastoji od:
a) Dobijanja kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa ili kompozicije ćelija, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa ili kopozicije ćelija na ranu, oštećeno tkivo ili oštećenu hrskavicu ili ošećenu kost.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za povećanje zapremine adipoznog tkiva kod nekog sisara, sa masnim graftom kože ili nekim drugim stanjem, koje zahteva regeneraciju adipoznog tkiva, a koji se sastoji od:
a) Dobijanja kompozicije masnih ćelija, u skladu sa ovim opisom,
b) Apliciranja terapeutski ili kozmetički efikasne količine kompozicije masnih ćelija, u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, masni graft kože ili adipozno tkivo zahteva regeneraciju tkiva, i c) Opciono, ubacivanja hirurškog umetka ili implanta, a pri tome je ovaj hirurški umetak ili implant pozicioniran na mestu koje zahteva regeneraciju ili amplfikaciju zapremine, a pomenuti hirurški umetak ili implant sadrži neku kombinaciju preparata masnih ćelija, u skladu sa ovim opisom, i PRP, koncentrat plazme ili materijal obogaćene plazme.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak izazivanje regeneracije miokarda, kod nekog sisara sa oštećenjem miokarda ili nekim drugim stanjem koje zahteva regeneraciju tkiva miokarda, a koji se sastoji od:
a) Dobijanja kompozicije ćelija mišića ili ćelija koštane srži, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine ove kompozicije ćelija mišića, u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, na tkivo miokarda koje zahteva regenerisanje.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za regeneraciju rožnjače kod nekog sisara koji ima oštećenje rožnjače ili neko drugo stanje koje zahteva regeneraciju rožnjače, a koji se sastoji od:
a) Dobijanja kompozicije ćelija rožnjače, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine kompozicije ćelija rožnjače u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, na tkivo rožnjače koje zahteva regeneraciju.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za izvođenje regeneracije zglobova i hrskavice kod nekog sisara sa ošećenjem zgloba ili hrskavice ili nekog drugog stanja koje zahteva regeneraciju tkiva zgloba ili hrskavice, a koji se sastoji od:
a) Dobijanja kompozicije sa ćelijama hondrocita ili ćelijama koštane srži, u skladu sa ovim opisom,
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine kompozicije ćelija hondrocita, u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, po tkivu zgloba ili hrskavice koji zahtevaju regeneraciju, i
c) Opciono, ubacivanja hirurškog umetka ili implanta, a pri tome je ovaj hirurški umetak ili implant pozicioniran na oštećenju hrskavice ili pokosnice, ili implant sadrži kombinaciju hondrocita ili kompoziciju ćelija koštane srži, u skladu sa ovim opisom, i PRP, koncentrat plazme ili materijal obogaćene plazme.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za unapređenje regeneracije kože u ožiljku, bori ili nedostatku masti humanog ili nižeg animalnog bića, koji se sastoji od: a) Dobijanja kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa ili kompozicije ćelija u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, i
b) Popunjavanja kože ožiljka, linije bore ili nedostatka masti sa kompozicijom za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskim agensom ili kompozicijom ćelija, u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za izazivanje regeneracije perifernog nerva u nekom sisaru sa oštećenjem perifernog nerva, zašivenim nervom ili povredom kičmene moždine ili nekim drugim stanjem koje zahteva regeneraciju perifernog nerva, a koji se sastoji od:
a) Dobijanja kompozicije Schwann-ovih ćelija u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine kompozicije Schwann-ovih ćelija u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme po perifernom nervu koji zahteva regenerisanje.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za izazivanje regeneracije kosti u nekom sisaru sa oštećenjem kosti, ili nekim drugim stanjem koje zahteva regeneraciju kosti, a koji se sastoji od:
a) Dobijanje kompozicije ćelija koštane srži ili ćelija osteoblasta u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine kompozicije ćelija koštane srži ili ćelija osteoblasta, u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, po kosti koja zahteva regenerisanje.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za tretman dijabetesa tipa I, dijabetesa zavisnog od insulina, ili hiperglikemije kod nekog sisara, koji se sastoji od:
a) Dobijanja kompozicije ćelija ostrvaca pankreasa u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja pacijentu, na primer injekcijom, terapeutski efikasne količine kompozicije ćelija ostrvaca pankreasa, u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom.
[U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za tretman urinarne inkontinencije u nekom sisaru, ili nekog drugog stanja koje zahteva regeneraciju bešike, a koji se sastoji od:
a) Dobijanja kompozicije ćelija mioblasta, u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine kompozicije ćelija mioblasta, u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, u vrat bešike koja zahteva regeneraciju.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za tretman analne inkontinencije u nekom sisaru, ili nekog drugog stanja koje zahteva regeneraciju analnog mišića, a koji se sastoji od:
a) Dobijanje kompozicije ćelija mioblasta u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine kompozicije ćelija mioblasta u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, u paraanalnu oblast koja zahteva regenerisanje.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje postupak za tretman poremećaja refluksa jednjaka ili gastroezofagealnog refluksa u nekom sisaru, ili nekog drugog stanja koje zahteva regeneraciju ezofagealnog sfinktera, a koji se sastoji od:
a) Dobijanja kompozicije ćelija mioblasta u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, i
b) Apliciranja terapeutski efikasne količine kompozicije ćelija mioblasta u kombinaciji sa PRP ili koncentratom plazme, u skladu sa ovim opisom, u ezofagealni sfinkter koji zahteva regenerisanje.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje upotreba kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija za proizvodnju medikamenta za zarastanje rana ili tkiva i regeneraciju, mezoterapiju, intramuskularno, ili za promociju rasta kosti ili periodoncijuma i/ili kosti i/ili regeneraciju tkiva, kao što su koža, hrskavica, mišić, tetiva, adipozno tkivo, rožnjača, periferni nervi, kičma ili kosti.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje upotreba kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija za proizvodnju kozmetičkog preparata, koji se koristi kao agens protiv starenja ili agens za reparaturu kože, kao što su agens za popravku ožiljka, agens za ispravljanje lipoatrofije ili popunjavanja bora i/ili agens za ispravljanje oštećenja.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje farmaceutska kompozicija, koja se sastoji od a kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija i nekog farmaceutski prihvatljivog nosača.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje kozmetička kompozicija, koja se sastoji od a kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija i nekog kozmetički prihvatljivog nosača.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje uređaj za implantiranje, za upotrebu u terapiji regeneracije tkiva, a koji se sastoji od:
a) permeabilnog jezgra, koje se sastoji od kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, opciono, u kombinaciji sa hijaluronskom kiselinom, i
b) spoljašnjeg omotača oko pomenutog jezgra, a pomenuti omotač se sastoji od nekog biokompatibilog materijala, poželjno bioresorbibilnog, poželjno hijaluronske kiseline.
U jednoj realizaciji, ove kompozicije, kiompozicije za zarastanje rana, ekstrakti ćelija, kompozicije ćelija, koncentrat plazme i preparati trombina, koriste alogene supstance, kompozicije, krv ili ćelije.
Upotrebe, postupci i kompozicije u skladu sa ovim opisom su korisni za regenerisanje i/ili podmlađivanje tkiva, kostiju i/ili hrskavica. Upotrebe, piostupci i kompozicije u skladu sa ovim opisom su naročito korisne u trtemanu dijabetskih neuropatskih čireva ili dekubitusa; oštećenja kosti i hrskavica, kao što su hrskavice duboko u zglobu ili hondralna oštećenja, kao što hirurške ispravke izraslina na tetivama; artritisa u zglobu izazvanog traumom ili starenjem; poremećaja rotacije oko zgloba; nezarastajuće rane, kao što su rane izazvane vaskulitisom, na primer u donjim udovima konja; bolesti periodoncijuma; hirurški implanti; kardiovaskularna, torakalna, transplantaciona, na glavi i vratu, oralna, gastrointestinalna, ortopedijska, neurohirurška i plastična hirurgija; mezoterapija i/ili mezoterapijske injekcije; oštećenja srčanog mišića, kao što su hronična srčana smetnja, slabost srca, ishemični i non-ishemični poremećaji, kardiomiopatija; bolest gastro-ezofagealnog refluksa; analna ili urinarna inkontinencija; facijalna hirurgija, kao što su facijalna hirurgija izazvana alopecijom (alopecija usled gubitka folikula kose na bočnim stranama), gubitak kose, alopecija, hirurgija fejs-liftinga (ritidektomija), rinoplastika, dermalni graftovi masnoće (u tretmanu facijalnog povećanja, kongenitalne hemiatrofije lica, kao što su kongenitalna atrofija hrskavicte nosa i lipoatrofija, kao kod pacijenata koji pate od HIV/ AIDS, genitalna disfunkcija, eroziona i artroskopija); komplikacije oko zarastanja rana, kao posle blefaroplastike očnih kapaka; poremećaji rožnjača, kao što su mutnoća rožnjače kao i one koje su izazvane hemijskim opekotinama, patnje od Steven’s Johnson-ovog sindroma, čirovi rožnjače; stvaranje ožiljaka na rožnjači; sindrom suvog oka; hematološke bolesti, kao što su talasemija; oštećenje perifernog nerva, zašivanje nerva i povrede kičmene moždine; defekti ili pormećaji na kostima, kao što su graft kosti ili fraktura kosti, oštećenja i poremećaji kože, kao što su akne (naročito posle tretmana dermabrazije), opekotine, ožiljci od rubele ili velikih boginja, vitiligo, lipoatrofija, Kaposi-ev sarkom, keloidi kože ili Dupuytren-ova fibromatoza dlana.
Upotrebe, postupci i kompozicije u skladu sa ovim opisom su korisni za ozdravljenje tkiva, uključujući regeneraciju i popravke na kosti, mitogenezu, angiogennezu i/ili aktiviranje makrofaga.
Dodatne pogodnosti i nove karakteristike ovog pronalaska biće delom izneti u opisu koji sledi, i delimično će postati jasne verziranima u stanju tehnike, nakon isptivanja sledeće prijave, ili se mogu shvatiti kroz praktkovanje ovog pronalaska. Predmet i prednosti ovog pronalaska mogu se shvatiti i postići instrumentalizovanjem, kombinacijama, kompozicijama i postupcima koji su dati u priloženim patentnim zahtevima.
Kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom, su posebno korisni za hemostazu, regeneroisanje, evitalizaciju, hidrataciju i/ili stimulaciju tkiva, kao biološkog lepka, bioadhezivnog zaptivača ili biološkog punioca.
Pogodnost predstavlja podatak da snažan biološki lepak iz ovog pronalaska ima veću mehaničku jačinu, nego drugi poznati lepkovi, naročito kod invazivnih hirurških intervencija. Ti biološki lepkovi iz ovog pronalaska imaju povećani kapacitet za lečenje oštećenog tkiva, time što sadrže odgovarajuće ćelije, pločice, leukocite, faktore rasta i druge faktore, uz smanjivanje/prevenciju eventualnih infekcija.
Kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom naročito su korisni u lečenju rana, hirurgiji, injekcijama u ortopediji i injekcijama za estetske, kozmetičke zapreminske korekcije.
U sledećem aspektu, upotrebe, postupci i kompozicije u skladu sa ovim opisom su korisni za regeneraciju i/ili podmlađivanje tkiva kože, naročito u promocij i/ili inicijaciji regeneracije kože, kao što su smanjenje bora kože, dubokih bora, akni (naročito posle tretmana dermabrazijce), opekotina, ožiljaka rubele ili velikih boginja, vitiliga i lipoatrofije (npr. anti-ejdžing kompozicije kompozicije za regeneraciju kože), ublažavanje nazolabjalnih linija i tretman oštećenja ili poremećaja kože, kao što opekotine kože, Kaposi-ev sarkom, keloidi kože ili Dupuytren-ova fibromatoza dlana, u smanjenju bola povezanog sa regeneracijom tkiva kože kod tamponiranja hemoroida, erektilne disfunkcije, kaverni, kavernozalne fibroze, lapeyronie-ve bolesti, vagine i/ili usana.
Kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u lečenju rana ili tkiva, tretmanima regeneracije ili sportskoj medicini za koleno, lakt, (trn) mišiće, kičmu, disk kičme, tetivu, ligament, tretman traumatskih ili hirurških rana, pri fitovanju i/ili držanju i/ili zaptivanju prirodnih ili protetskih graftova (posebno kože, graftova kosti i/ili dentalnih proteza ili implanata i slično, uključujući takođe mesto na donoru grafta); tretman artritisa, gonartritisa, tendinitisa, manžetne rotatora, tretman vaskulitisa; čirevi, kao što su dijabetski neuropatni čirevi ili ojedi dekubitusa; radiodermatitis (npr. posle zračenja epidermoidalnopg karcinoma kože) i zatvaranja fistula (kao što su za cikliste).
Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu srčanih poremećaja, regeneracije srca, kao u tretmanu srčanih smetnji, hronične srćane smetnje, ishemijske i ne-ishemijske srčane smetnje i kardiomiopatije.
Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu urinarnih i/ili analnih inkontinencija.
Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu refluksa jednjaka i/ili poremećaja gastro-ezofagealnog refluksa.
Pored toga Kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu oštećenja kože, kao što je koža ošećena radijacijom (radiodermatitis ili kože opečena suncem), staračkih koža ili opekotina kože i/ili kod ublažavanja bora na licu, ritidisa, akna (naročito posle tretmana dermabrazije), opekotina, ožiljaka od rubele ili velikih boginja, vitiligoa, lipoatrofija ili lipodistrofija, Kaposi-evog sarkoma, keloida kože ili Dupuytren-ove fibromatoze dlana i/ili kod tretmana podmlađivanja kože.
Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu lipoatrofije, kao što je kod pacijenata HIV/AIDS i drugih kongenitalnih hemiatrofija lica, kao što je kongentialna atrofija hrskavice nosa. Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu kosti, hrskavice i artikularnih poremećaja, kao što su hondralno oštećenje, artritis, povrede hrskavice i/ili kosti, kao što su duboka oštećenja hrskavice i/ili erozije i/ili artroskopije, trnovi na tetivi i manžetna rotatora ramena.
Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu hematoločkih bolesti, kao što je talasemija.
Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu poremećaja rožnjače, kao što su sindrom suvog oka; mutnoća rožnjače, kao ona koju izazivaju hemijske opekotine, patnje kod Steven’s Johnsonovog sindroma; ožiljci rožnjače i čirevi rožnjače.
Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu oštećenja perifernih nerava, zašivenih nerava i povreda kičmene moždine.
Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu dijabetesa tipa I, dijabetesa zavisnog od insulina i/ili hiperglikemije.
Pored toga, kompozicije, upotrebe i postupci u skladu sa ovim opisom su naročito korisni u tretmanu defekata ili poremećaja na kostima, kao što su graft kosti ili fraktura kosti.
Pored toga, upotreba dobijenih kompozicija iz ovog pronalaska se može, modifikovati pre aplikacije, a u skladu sa terapeutskim potrebama.
Kompozicije se mogu koristiti zajedno sa materijalima za popunjavanje kostiju, naročito materijalima za punjenje koji su resorbibilni, kao što su hidroksiapatit (kalcijum-fosfatna keramika, koja se koristi kao biomaterijal) ili demineralizovane kosti, ili se koriste u smeši sa ekstraktima kosti u procesima ponovnog rasta kosti, na primer u kraniofacijalnim i ortopedskim procedurama.
Zavisno od upotrebe ili bolesti, ove kompozicije se mogu koristiti zajedno sa 10% hijaluronskom kiselinom, 20% hijaluronskom kiselinom, 30% hijaluronskom kiselinom, 40% hijaluronskom kiselinom i/ili 50% hijaluronskom kiselinom.
Kompozicije se mogu koristiti kao zaptivač za rane u plastičnoj hirurgiji, uključujući grafting kod opekotina i drugih aplikacija graftova na slobodnoj koži, na primer u onkologiji za favorizovanje regeneracije tkiva, ukljućujući ubrzanje vaskularizacije, (neo)vaskularizacija. Ove kompozicije su naročito korisne u tretmanima lečenja ranjenih mesta na koži kod donora grafta. Uklanjanje grafta kože na zdravoj koži stvara novu ranu kod donora, koja normalno zaceljuje spontano za 12 do 14 dana.
Međutim, ova cikatrizacija je ekstremno zahtevna za telo, naročito ukoliko je mesto kod donora široko ili je osoba manje rezistentna (npr. žrtve opekotina, ljudi koji pate od višestrukih opekotina, ljudi koji su tretirani kortikoidima, deca ili starci), a energetski gubici su povećani usled gubitka minerala, elemenata u tragovima i proteina, izazvanih gubitkom fluida iz nove rane. Pored toga, na mestu grafta donora često je prisutan značajan bol tokom prvih 8 dana. Često se koriste tretmani za smanjivanje bola, kao što je upotreba analgetika (npr. morfijuma) i/ili hidrocelularnih preliva za rane, međutim, bol je prisutan, naročito prilikom promene ovih preliva, koja se neophodno obavlja na svakih 48 h, pa do nedelju dana, posle uklanjanja grafta. Pored toga, ovi hidrocelularni prelivi za rane imaju nedostatke, ne samo što su prilično skupi, već i zato što održavaju vlažnost na rani, sprečavajući njeno sušenje, štpo većava dubinu rane, potpomaže nastajanje bakterijske infekcije i dovodi do ne-estetskog ožiljka. Stoga je stimulisanje ozdravljenja mesta na koži donora grafta veoma poželjno.
Kompozicije iz ovog opisa su naročito prilagođene za hronične rane, kod kojih može da nedostaje dovojno cirkulacije krvi, koja olakšava kaskadu izlečenja rane.
Kompozicije i postupci u skladu sa ovim opisom mogu se takođe koristiti u tretmanu bolesti periodoncijuma, gde se opaža gubitak i/ili oštećenje periodoncijumalnog tkiva, tretmanu koji se sastoji od, na primer, stavljanja neke kompozicije u skladu sa ovim pronalaskom na to mesto ili u šupljinu u periodoncijuma, nekog humanog bića ili nižeg animalnog bića, kome je potrebna regeneracija tkiva periodoncijuma.
Kompozicije u skladu sa ovim opisom su efikasne u eliminaciji ili velikom smanjenju post-operativnog krvarenja ili gubitka ekstravazacije seruma ili drugog fluida u ovakvim aplikacijama, ili u smanjenju rizika od infekcije, izazvanog većinom bakterijama i/ili ubrzava stvaranje veznog tkiva, u poređenju sa prirodnim lečenjem (tj. bez dodavanja egzogenih agenasa) ili prema lečenju koje se dobija upotrebom drugih koncentrata pločica, dobijenih poznatim metodama. Kompozicije u skladu sa ovim opisom su naročito korisne za dobijanje farmaceutskih agenasa za promovisanje i/ili iniciranje zarastanja rana i/ili regeneraciju tkiva ili za dobijanje kozmetičkih kompozicija za regeneraciju kože, kao što su smanjenje bora na koži, akne (naročito posle tretmana dermabrazije), ožiljaka od rubele ili velikih boginja, vitiligoa i lipoatrofije (npr. anti-aging kompozicije i kompozicije za regenerisanje kože).
Kompozicije iz ovog opisa mogu se ordinirati lokalno ili ubrizgavati u ranu ili njenu okolinu, u graftovani organ ili potkožnim injekcijama. Lokalno ordiniranje može biti injekcijom na mesto povrede ili ubacivanjem ili pripajanjem nekog čvrstog nosača na to mesto, ili mešanjem sa kremom ili emulzijom, ili ubacivanjem tkiva ili papira ili hidrogel nosača, ili direktnom, površinskom aplikacijom kompozicije iz ovog opisa, kao što je u obliku kapi za oči. Poželjno je da su ove kompozicije spremne za ubrizgavanje. Način ordiniranja prepisane doze pojedincu, kao jedna ili više doza, variraće zavisno od brojnih faktora, uključujući farmakokinetička svojstva, stanje i karakteristike pacijenta (pol, starost, telesna masa, zdravlje, veličina), broj i domašaj simptoma, paralelni tretmani, učestalost tretmana i željeni efekat.
Kompozicije iz ovog opisa mogu se ordinirati u kombinaciji sa nekim ko-agensom, koji je koristanl u tretmanu regeneracije tkiva, kao što su agens za izlečenje, punilac bora, agens protiv starenja, kao što je neki anti-aging vitaminski kompleks, neki antibakterijski agens, antibiotički agens, neki kortikosteroidni agens, neki antalgijski i analgetički agens, ili neki anestetički agens, kao adrenalin, itd. Ovde su opisane kompozicije kombinovane sa nekim ko-agensom, korisnim u tretmanu regeneracije tkiva, za paralelnu, separatnu ili sekvencijalnu upotrebu u terapiji regeneracije tkiva, kao što su zarastanje rane, pomoć u rastu kosti ili periodoncijuma.
Ove kompozicije, uređaji i procedure za dobijanje autogenog koncentrata pločica ili kompozicija ćelija iz ovog opisa, naročito su korisni u therapeutske svrhe, naročito kao autogeni biološki lepak u nekom hemostatskom sistemu, sa namenom ubrzavanja fiziološkog procesa regeneracije tkiva, na primer u stomatološkoj implantologiji, hirurgiji kože i kosti, hirurgiji hrskavica i tetiva, regeneraciji rožnjače i perifernih nerava i u hirurgiji srca. Ove kompozicije, uređaji i procedure za dobijanje autogenih koncentrata pločica i kompozicija ćelija iz ovog opisa, su naročito korisni za kozmetičku upotrebu, posebno kao autogeni materijal za podmlađivanje, sa namenom da se koristi, na primer, kao punilac bora, ožiljaka ili manjka masnog tkiva, sami ili u kombinaciji sa najmanje jednim anti-aging agensom.
Koncentrat pločica se može kombinovati sa autogenim ekstraktom preparata ćelija, kao što su na primer keratinociti, ćelije koštane srži, osteoblasti, hondrociti, fibroblasti, periosteum, melanociti i Langheran-ove ćelije; masne ćelije; ćelije koštane srži; ćelije mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; periostealne filter ćelije; mezenhimalne matične ćelije, preadipociti pre-endotelijalne ćelije, ćelije rožnjače; ćelije pupčane vrpce; ćelije tetiva ili ćelije ostrvaca pankreasa. Keratinociti se mogu sakupljati po postupku koji su opisali Reinwald and Green, 1975, Cell, 6(3):331-43. Ostale pomenute ćelije se mogu sakupljati postupcima koji su opisani u dokumentu "Culture de cellules animales; méthologies-applications", 2003, Ed. Barlovatz-Meimom and Adolphe, INSERM editions, Paris. Alternativno, ekstrakt ćelija se izvodi iz banke ćelija, ili ćelijske kulture, ili se sakuplja kao što je opisano u Primerima u nastavku.
Koncentrati pločica i kompozicije ćelija iz ovog pronalaska dokazano je da su stvarno korisni u ubrzavanju i/ili promociji procesa zarastanja rana, čak i hroničnih neizlečivih rana, vodeći uspešnom ishodu i u slučajevima kada su zakazale nedelje konvencionalnih terapija, a omogućavaju smanjenje rizika od infekcija, poboljšavaju oporavak i komfor pacijenata, smanjuju troškove medicinskog tretmana i daju estetski bolje konačne rezultate.
Kompozicije se naravno mogu, dobiti takođe iz plazme izvedene od nekoliko identifikovanih donora. Ovaj pronalazak nije ograničen samo na autogene biološke materijale, kao što je kolekcija koncentrisanih pločica iz vlastitog biološkog materijala povređenog. Ovaj pronalazak obuhvata upotrebu bioloških materijala dobijenih iz jednog ili više drugih izvora, koji ne moraju biti od iste vrste kao pacijent čija se rana tretira sa kompozicijom za zarastanje rana opisanom ovde, izuzev ako bioinkompatiibilnost potiče od uporebe bioloških materijala drugih osoba. U jednoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije koncentrata pločica ili kompozicije ćelija, kao što je ovde opisano.
U sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje uređaj za dobijanje kompozicija koncentrata pločica iz celovite krvi, kao što je ovde opisano.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje proces za dobijanje seruma trombina i/ili kompozicija koncentrata pločica, pri čemu se korak centrifugiranja obavlja sa od oko 1500g, pa do oko 1700g, tokom vremena koje se bira od oko 3 min do oko 15 min, poželjno sa 1500g tokom oko 8 min.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovde se opisuje proces za dobijanje kompozicije koncentrata pločica, pri čemu cev, koja ima ulaz za unošenje pomenute celovite krvi, koji se drži pod vakuumom, namenjenom aspiriranju čitavog uzorka celovite krvi, koja je sterilna, i ima upotrebljiv vakuum za zapreminu od 8 do 10 mL, a ova cev je pogodna za naredno centrifugiranje.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovde se opisuje proces za dobijanje kompozicije koncentrata pločica, u kome je cev polietilentereftalatna cev, koja sadrži visoko tiksotropan gel, formiran iz smeše polimera i anhidrovanog natrijum-citrata, sa 3.5 mg/mL.
U sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje izolovanu kompoziciju koncentrata pločica, koja se dobija iz procesa u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje izolovanu kompoziciju koncentrata pločica, dobijenu procesom, u skladu sa ovim pronalaskom, koji se sastoji od:
a) plazme,
b) pločica, sa koncentracijom od najmanje 300x10<9>ćelija/L, poželjno od najmanje 350x10<9>ćelija/L, poželjnije od najmanje 400x10<9>ćelija/L,
c) belih krvnih zrnaca, sa koncentracijom od najmanje 7×10<9>ćelija/L, poželjno od najmanje 8x10<9>ćelija/L, i
d) fibrinogena, sa koncentracijom od najmanje 3 mg/L.
Poželjno je da je koncentracijacrvenih krvnih zrnaca manja od 0.4×10<12>ćelija/L ili 0.5×10<12>ćelija/L.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kmozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva, koja se sastoji od:
a) plazme,
b) pločica, sa koncentracijom od najmanje 300×10<9>ćelija/L, poželjno od njamanje 350×10<9>ćelija/L, poželjnije od najmanje 400×10<9>ćelija/L,
c) belih krvnih zrnaca, sa koncentracijom od najmanje 7×10<9>ćelija/L, poželjno od najmanje 8×10<9>ćelija/L,
d) fibrinogena, sa koncentracijom od najmanje 3 mg/L,
e) seruma trombina, u skladu sa ovim opisom, i
f) opciono, autogenog ekstrakta ćelija, kao što su ekstrakti keratinocita, ćelija koštane srži, fibroblasta, periosteuma, melanocita i Langheran-ovih ćelija; masnih ćelija; ćelija koštane srži; ćelija mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasta; hondrocita; mezenhimalnih matičnih ćelija, preadipocita, pre-endotelijalnih ćelija, periostealnih filter ćelija; ćelija rožnjače; ćelija pupčane vrpce; ćelija tetiva ili ćelija ostrvaca pankreasa.
Poželjno je da su aktivator koagulacije ili seruma trombina u zapreminskom odnosu (koncentrat pločica: aktivator koagulacije) od oko 10:1 do oko 10:3.
Poželjno je da je koncentracija ćelija od oko 10<5>do oko 10<6>ćelija/mL plazme ili obogaćene plazme, a koncentracija eritrocita da je manja od 0.4×10<12>ćelija/L ili 0.5×10<12>ćelija/L.
U sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, kao što je ovde opisano.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, pri čemu aktivator koagulacije, koji je umešan, predstavlja kalcijum-glukonat ili 10% kalcijum-hlorid.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, pri čemu aktivator koagulacije, koji je pomešan sa koncentratom pločica (PRP), je preparat obogaćen trombinom, koji se, pored toga, može kombinovati sa kalcijum-glukonatom ili kalcijum-hloridom. Postupak za dobijanje trombina, za upotrbu kao biološki lepak, je opisan u dokumentu US 6,472,162, dodavanjem 8 do 20% ETOH u zapreminu plazme, a taj preparat se može koristiti kao preparat obogaćen trombinom u kontekstu ovog pronalaska. Alternativno, autogeni serum trombina (ATS) se može koristiti kao preparat obogaćen trombinom, u kontekstu ovog pronalaska. Alternativni autogeni serum trombina, u skladu sa ovim opisom, se dobija procesom, koji se sastoji od: (i) dodavanja pacijentovog uzorka celovite krvi (npr.8 mL), sakupljenog u separatorskoj cevi u skladu sa ovim pronalaskom, u 10% konačne zapremine 10% kalcijum-hlorida (npr. 1 mL) i u 10% konačne zapremine preparata rastvora 95 vol% etanola (npr. 1 mL), i (ii) taloženja, tokom oko 30 min, na sobnoj temperaturi. Posle 30 min, obavi se centrifugiranje sa ili oko 1500g, tokom oko 8 do 10 min. Pored toga, u poželjnoj realizaciji, preparat obogaćen trombinom i poželjno autogeni serum trombina, u skladu sa ovim opisom, se pomešaju sa koncentratom pločica (PRP) direktno na rani.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva u skladu sa ovim pronalaskom, koji se sastoji od a koraka b’), pri čemu ova kompozicijaj aktiviranog obogaćenog preparata (dobijena mešanjem koncentrata pločica sa aktivatorom koagulacije ili autogenim serumom trombina), dobijena u koraku b), može biti delimično dehidratisana pri kontaktu sa prelivom za ranu, koja je prekrivena sa mekim hidrofobnim slojem, da se izbegne kontaminacija sa mikro tračicama iz preliva, da bi se dobio polu-čvrst gel, sa kojim se može manipulisati sa odgovarajućim instrumentima, na primer da se popuni šupljina ili nedostatak tkiva, ili matrica za rast ("noseći skelet"), dok se čeka rekonstituisanje autogene vanćelijske matrice. Dobijeno sredstvo za zarastanje rane ili tkiva naročito je pogodno u postupku izazivanja regeneracije rane ili tkiva periodoncijuma, ili nekog defekta ili šupljine u periodoncijumu.
Pored toga, u sledećoj realizaciji koncentrat pločica, kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva i kompozicija ćelija mogu da se kombinuju sa nekim hidrogelom, kao što je Albugel (EP1543846) preparat 100% albumina, ili nekim drugim hidrogelom, koji potiče od retikulacije albumina i drugog hemijskog jedinjenja, kao što je polietilen glikol ili nekog drugog sastojka, korišćenjem papira čija je osnova visoko hidrofilna, kao nosačem, koji će ostati u kontaktu sa kožom dok se ne absorbuje plazma obogaćena pločicama.
Na jačinu na kidanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva može se uticati dodavanjem kalcijumovih jona. Prema tome, ukoliko se želi jača kompozicija za zarastanje rana ili tkiva, može se dodati više kalcijumovih jona, u trenutku kada se meša serum sa koncentratom pločica. Alternativno, kalcijumovi joni se mogu dodavati direktno u koncentrat pločica, formirajući kompoziciju za zarastanje rana ili tkiva.
Pored toga, kao što će se detaljnije razmatrati u nastavku, vremenski period, neophodan za formiranje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva zavisi od količine dodatog seruma. Odnos 1:4, 1:2 i 3:4 seruma prema koncentratu pločica ima za rezultat formiranje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva tokom približno 90, 55 i 30 s, respektivno. Pored toga, poželjnije je da se trombin upotrebljava tokom pet sati dobijanja, poželjno tokom dva sata, a idealno odmah. Pošto je trombin aktivan na sobnoj temperaturi i posle 10 dana, trombin se može korisiti i u nekoj kasnijoj fazi. Alternativno, serum se može rashladiti ili smrznuti neograničeno, a poželjno je da se koristi pre manju od 1 mesec skladištenja.
Kompozicije za zarastanje rana ili tkiva iz ovog opisa se mogu koristiti za zaptivanje hirurške rane, apliciranjem na ranu pogodne količine koncentrata pločica, kada on počinje da gelira. Pored toga, zahvaljujući činjenici da kompozicije za zarastanje rana ili tkiva iz ovog pronalaska mogu da se dobijaju isključivo iz komponenata krvi, uzete iz pacijenta koji treba da primi te kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, postoji nulta verovatnoća za unošenje nove prenosive krvne bolesti pacijentu.
Pored toga, postupci iz ovog pronalaska se mogu modifikovati tako da formirane kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva funkcionišu ne samo kao neki hemostatski agens, nego takođe i kao dopuna u zarastanju rane i kao neka matrica za oslobađanje lekova i proteina u drugim biološkim aktivnostima. Na primer, dobro je poznato da fibrinski lepak ima veliki afinitet ka vezivanju fragmenata kosti, što je korisno kod rekonstrukcije kosti, kao i u plastičnoj hirurgiji ili ispravljanju velikih lomova kosti. Prema tome, za održavanje autogene prirode kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, može se autogena kost pacijenta samleti ili pretvoriti u prah, pa pomešati sa koncentratom pločica. Zatim se serum, koji se sastoji od trombina, pomeša sa koncentratom pločica i fragmentima kosti, u količini dovoljnoj da dopusti nastalom gelu da se aplicira na željeno lokalno mesto, gde će zatim da kongelira.
U slučajevima kada željene kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, pored toga treba da funkcionišu i kao sredstvo za oslobađanje lekova i proteina, za druge biološke aktivnosti, postupak iz ovog pronalaska se može modifikovati kao što sledi. Pre dodavanja seruma, koji se sastoji od trombina, u koncentrat pločica, ovom koncentratu pločica se mogu dodati brojni lekovi ili proteini, sa drugim biološkim aktivnostima. Primeri agenasa za dodavanje u koncentrat pločica, pre dodavanja seruma, su, ali ne i ograničeni istima, analgetička jedinjenja, antibakterijska jedinjenja, uključujući baktericidna i bakteriostatska jedinjenja, antibiotici (npr., adriamicin, eritromicin, gentimicin, penicilin, tobramicin), jedinjenja protiv gljivica, anti-inflammatorna jedinjenja, antiparazitska jedinjenja, antivirusna jedinjenja, enzimi, inhibitori enzima, glikoproteini, faktori rasta, rekombinovani (npr. limfokini, citokini), hormoni, steroidi, glukokortikosteroidi, imunomodulatori, imunoglobulini, minerali, neuroleptici, proteini, peptidi, lipoproteini, tumoricidna jedinjenja, tumorstatčna jedinjenja, toksini i vitamini (npr., Vitamin A, Vitamin E, Vitamin B, Vitamin C, Vitamin D, ili njihovi derivati). Predviđeno je takođe da se mogu koristiti odabrani fragmenti, delovi, derivati ili analozi nekih od ili svih gore pomenutih.
Za merenje i određivanje koagulacije i aktivnosti povezanih sa koagulacijom krvi postoje brojni medicinski aparati i postupci testiranja. Ti aparati i postupci se mogu koristiti da pomognu u određivanju optimalne formulacije aktivatira, to jest, trombina, koncentrata pločica i plazme, neophodnih za formiranje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva. Neke od uspešnijih tehnika za vrednovanje zgrušavanja krvi i koagulacije, su tehnike klipa, koje su ilustrovane u dokumenima U.S. Pat. Nos.
4,599,219 to Cooper et al., 4, 752,449 to Jackson et al., i 5,174,961 to Smith.
Koncentrat plazme i kompozicija PRP se mogu mešati sa bilo kojim od dodataka, kao što su: trikalcijum-fosfat (TKF), hijaluronska kiselina (HK), hitozan, krema, krema za maske, ekstrakt čelija, masne ćelije, lubricin, cd-žealtin, i/ili toksin botulina.
U jednoj realizaciji, koncentrat plazme ili kompozicija PRP se mogu pomešati sa trikalcijum-fosfatom (TKF), hijaluronskom kiselinom (HK), hitozanom, kremom, kremom za maske, ekstraktima ćelija, masnim ćelijama, lubricinom, cd-žealtinom i/ili toksinom botulina.
U jednoj realizaciji, koncentrat plazme ili kompozicija PRP se mogu pomešati sa trombinom, poželjno serumom trombina iz ovog opisa, a pored toga, pomešati i sa trikalcijum-fosfatom (TKF), hijaluronskom kiselinom (HK), hitozanom, kremom, kremom za maske, ekstraktima ćelija, masnim ćelijama, lubricinom, cd-žealtinom i/ili toksinom botulina.
U jednoj realizaciji, koncentrat plazme ili kompozicije PRP se može pomešati sa trombinom, poželjno sa serumom trombina iz ovog opisa, a pored toga, pomešati sa nekim ekstraktom ćelija i trikalcijum-fosfatom (TKF), hijaluronskom kiselinom (HK), hitozanom, kremom, kremom za maske, ekstraktima ćelija, masnim ćelijama, lubricinom, cd-žealtinom i/ili toksinom botulina.
Automatizovani aparati, koji koriste tehniku klipa za merenje i detekciju koagulacije i aktivnosti povezanih sa koagulacijom, obično sadrže neki kartridž ili kartridže i neki aparat sa mikroprocesorom, u koji je ubačen kartridž. Aparat radi preko kartridža, a uzorak krvi se stavlja u njega, čime se pokreće i detektuje događanje povezano sa koagulacijom. Ovaj kartridž uključuje brojne ćelije za testiranje, od kojih je svaka definisana pomoću nekog cevastog člana, koji ima gornju reakcionu komoru, gde je smešten sklop klipa i gde se obavlja analitički test, i komoru za reagense, u kojoj se nalazi reagens ili reagensi. Na primer, u testu aktiviranog vremena zgrušavanja (ACT, od engleski activated clotting time), reagense predstaljaju neki reagensi za aktivaciju, koji aktiviraju koagulaciju krvi. Deo klipa zaptiva dno komore sa reagensom. Dok test traje, sadržaj komore sa reagensom se potiskuje, da bi se pomešao sa uzorkom fluida, obično humane krvi, ili njenim komponentama. Pokretač, koji je deo aparature, podiže sklop klipa i snižava ga, i tako ponavlja kretanje sklopa klipa kroz masu fluida u reakcionoj komori. Sklop klipa se spušta pod dejstvom sile gravitacije, čemu se suprotstavlja fluid u reakcionoj komori, svojstvom kao što je viskoznost. Kada se svojstvo uzorka promeni na unapred predviđen način, kao što je usled početka neke aktivnosti povezane sa koagulacijom, brzina spuštanja sklopa klipa, koja je povezana sa aktivnošu povezanom sa koagulacijom, se detektuje i prikazuje na aparatu.
Kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatski agensi, kompozicije ćelija, izolovane kompozicije ćelija, preparati ćelija ili ekstrakt ćelija, kao što je ovde opisano, mogu biti kombinovani sa koncentratom pločica (PRP).
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt keratinocita.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja neki autogeni ekstrakt keratinocita.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja neki ekstrakt ćelija skeletnih mišića, kao što su ćelije mišića progenitora ili prateće matične ćelije.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt fibroblasta.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt adipocita, preadipocita, pre-endothelialnih ćelija, mezenhimalnih matičnih ćelija.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt hondrocita.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt matičnih ćelija, kao što su matične ćelije pupčane vrpce.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt ćelija tetiva.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstalja ekstrakt periostealnog filtera ili ćelija gingive.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt ćelija rožnjače.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt ćelija koštane srži.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt ćelija osteoblasta.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt Schwann-ovih ćelija.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatskog agensa, kompozicije ćelija ili preparata ćelija, pri čemu ekstrakt ćelija predstavlja ekstrakt ćelija ostrvaca pankreasa.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, izolovana kompozicija koncentrata pločica, kompozicija za zarastanje rana ili kompozicija za zarastanje tkiva, serum obogaćen trombinom, ekstrakt ćelija, kompozicije za zarastanje rana ili tkiva, hemostatski agens, kompozicija ćelija i/ili preparat ćelija je (ili su) autogeni.
Pored toga, u sledećem aspektu, ovde se opisuje komplet, prilagođen za regeneraciju tkiva u skladu sa ovim opisom, pri čemu ovaj komplet sadrži odvojene fiole koje sadrže kalcijum-glukonat, albumin, hitozan, kremu, lubricin, TKF, ETOH i/ili CaCl2, držače špriceva, držač i/ili aplikator vrha sa dvojnim izazom. Upotreba autogenog seruma trombina, u skladu sa ovim opisom, ima prednost, zato što se za dobijanje sredstva za zarastanje rana ili dobijanje PRP ne zahtevaju aditivi, kao što su ETOH, CaCl2.
U sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, gde se ekstrakt ćelija, koji je dat u koracima d) ili e), dobija u procesu, koji se sastoji od koraka:
(A) Dobijanje pomenutih ćelija u koncentratu pločica, u skladu sa ovim pronalaskom,
(B) Opciono, kultivisanje ćelija, i
(C) Re-suspendovanje kultivisanih ćelija, dobijenh u koraku (B), u koncentratu pločica, u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu se umnožavanje ćelija iz koraka (A) obavlja u koncentratu pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, tako što finalna koncentracija pločica sadrži između oko 5 vol% i oko 40 vol% medijuma kulture.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, gde korak kultivisanja ćelija (B) sadrži najmanje jedan korak razlivanja ćelija, na primer na površini suda za kultivisanje ćelija, kao što su Petri-eva šolja ili balon za kultivisanje.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija u skladu, sa ovim pronalaskom, koji se sastoji od bar jednog koraka sakupljanja ćelija, posle koraka kultivisanja (B).
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu se korak kultivisanja ćelija (B) obavlja na 37°C.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija u skladu, sa ovim pronalaskom, pri čemu se korak kultivisanja ćelija (B) obavlja uz protok gasa, koji se sastoji od kiseonika ili vazduha i ugljendioskida, tipično ovaj protočni gas sadrži 95% kiseonika ili vazduha i 5% ugljendioksida.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija u skladu, sa ovim pronalaskom, pri čemu korak kultivisanja ćelija (B) traje od oko 3 do oko 4 nedelje.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija u skladu, sa ovim pronalaskom, pri čemu se tokom koraka kultivisanja ćelija (B), medijum kulture ćelija tokom inkubacije regularno menja, tipično na svakih oko 3 dana.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija u skladu, sa ovim pronalaskom, pri čemu korak kultivisanja ćelija (B), sadrži najmanje jedan korak izlaganja ćelija vidljivoj svetlosti, tipično talasne dužine oko 633 nm, u trajanju oko 10 min. U sledećem aspektu, ovaj korak izlaganja vidljivoj svetlosti se ponavlja jedanput nedeljno tokom inkubacije ćelija.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija u skladu, sa ovim pronalaskom, pri čemu kompoziciju ćelija predstavlja kompozicija ćelija keratinocita ili fibroblasta u kulturi ćelija iz koraka (B), koji se sastoji od bar jednog koraka izlaganja vidljivoj svetlosti, tipično talasne dužine oko 633 nm, u trajanju oko 10 min. U sledećem aspektu, ovaj korak izlaganja vidljivoj svetlosti se ponavlja jedanput nedeljno, tokom inkubacije ćelija.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija u skladu, sa ovim pronalaskom, pri čemu korak kultivisanja ćelija (B), sadrži najmanje jedan korak dodavanja razblaženog koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, tako da se u konačnoj konncentraciji pločica sadrži između oko 5 vol% i oko 40 vol% medijuma kulture.
Pored toga, u sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje proces za dobijanje kompozicije ćelija u skladu, sa ovim pronalaskom, pri čemu kompoziciju ćelija predstavlja kompozicija ćelija keratinocita ili fibroblasta, a korak kultivisanja ćelija (B), sadrži najmanje jedan korak dodavanja razblaženog koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, tako da se u konačnoj koncentraciji pločica sadrži između oko 5 vol% i oko 40 vol% nedijuma kulture.
U sledećoj realizaciji, ovaj pronalazak daje kompoziciju izolovanih ćelija dobijenih iz procesa u skladu sa ovim pronalaskom.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu ovu kompoziciju izolovanih ćelija predstavlja kompozicija ćelija masnog tkiva, kao što je kompozicija ćelija adipocita.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija mišićnih ćelija, kao što je kompozicija ćelija mioblasta ili pratećih matičnih ćelija.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija ćelija rožnjače.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija ćelija hrskavice, kao što je kompozicija ćelija hondrocita.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija ćelija kože, kao što je kompozicija ćelija fibroblasta ili ćelija keratinocita.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija ćelija periostealnog filtera ili gingive.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija ćelija tetive, kao što je kompozicija ćelija tetive.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija matičnih ćelija, kao što je kompozicija matičnih ćelija pupčane vrpce.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija ćelija koštane srži.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija Schwann-ovih ćelija.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija ćelija ostrvaca pankreasaa.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je ova kompozicija izolovanih ćelija kompozicija ćelija osteoblasta.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje kompozicija izolovanih ćelija, pri čemu je njihova koncentracija od oko 3×10<5>do oko 10<6>ćelija/mL plazme ili obogaćene plazme.
U sledećoj realizaciji, ovde su opisani kompozicije, postupci i uporebe za promovisanje zatvaranja rana i/ili tkiva i/ili regeneracije kosti u rani nekog humanog ili nekog nižeg animanog bića, kao što je ovde opisano.
U sledećoj realizaciji, ovde su opisani kompozicije, postupci i uporebe za promovisanje zarastanja rana i/ili tkiva i/ili regeneracije kosti u rani nekog sisara, poželjno humanog bića. U sledećoj realizaciji, ovde su opisani kompozicije, postupci i uporebe za izazivanje regeneracije periodoncijuma u rani ili defektu periodoncijuma nekog sisara sa bolešću periodoncijuma ili drugim stanjem, kao što je ovde opisano.
Pored toga, u sledećoj realizaciji se opisuje postupak za izazivanje regeneracije periodoncijuma u rani ili šupljini defekta periodoncijuma sisara sa bolešću periodoncijuma ili nekim drugim stanjem, pri čemu je taj sisar humano biće.
Pored toga, u sledećoj realizaciji se opisuje postupak za izazivanje regeneracije periodoncijuma u rani ili šupljini defekta periodoncijuma, u skladu sa ovim opisom, pri čemu se pomenuta terapeutski efikasna količina pomenute kompozicije za zarastanje rane ili tkiva aplicira u obliku polučvrstog gela ili neke matrice za rast, po pomenutoj rani ili pomenutom defektu ili šuplljini periodoncijuma, kao što je opisano, na primer, u dokumentu Garg et al, 2000, Dental Implantology Update, 11(6), 41-44.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje postupak za promovisanje regenerisanja tkiva kože u nekom ožiljku ili bori, kao što je ovde opisano.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje postupak za regeneraciju miokarda, u skladu sa ovim opisom, pri čemu se pomenuta terapeutski efikasna količina pomenute kompozicije mišićnih ćelija, u skladu sa ovim opisom, injektira u kombinaciji sa a koncentratom pločica (PRP) u miokard, tipično u levu komoru miokarda. Injektiranje se može obaviti direktnom injekcijom ili višestrukom injekcijom kroz kateter. Mioblasts ili prateće ćelije se mogu dobiti ex vivo, kao što je opisano u ovom opisu, na de-epitelizovanom i UV ozračenom humanom biološkom amnionu i biokompozitnom konstruktu, kao monosloju, u ovom opisu. Ovaj amnion se zatim zašije za ishemični epikardijum, sa ciljem da se popuni podložno tkivo sa matičnim ćelijama, sa ciljem poboljšanja kontraktivne sile zida komore i miocita.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje postupak za regeneraciju miokarda, u skladu sa ovim opisom, pri čemu se pomenuta terapeutski efikasna količina pomenute kompozicije mišićnih ćelija, u skladu sa ovim opisom, injektira u kombinaciji sa a koncentratom pločica (PRP) u miokard, zajedno sa terapeutski efikasnom količinom kompozicije ćelija fibroblasta, u skladu sa ovim opisom, u kombinaciji sa koncentratom pločica (PRP). U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje postupak za regeneraciju miokarda u skladu sa ovim opisom, pri čemu se pomenuta terapeutski efikasna količina pomenute kompozicije mišićnih ćelija, u skladu sa ovim opisom, aplicira u kombinaciji sa koncentratom pločica (PRP) po površini komore, u obliku skrame amniona, prethodno inkubirane u kompoziciji ćelija mioblasta i pratećih matičnih ćelija, u skladu sa ovim opisom.
U sledećoj realizaciji, ovde se opisuje postupak za izazivanje regeneracije rožnjače, u skladu sa ovim opisom, pri čemu se pomenuta terapeutski efikasna količina pomenute kompozicije ćelija rožnjače, u skladu sa ovim opisom, u kombinaciji sa koncentratom pločica (PRP), aplicira po tkivu rožnjače, u obliku neke obvojnice razmazane po rastvorljivom kontaktnom sočivu.
Pomenuti postupak tretiranja rane, tkiva ili bolesti može uključivati upotrebu bilo koje od kompozicija opisanih ovde; takođe, on može uključivati upotrebu bilo koje kompozicije napravljene po bilo kom od postupaka opisanih ovde.
Postupci, uređaji i komplet, u skladu sa ovim pronalaskom, predstavljaju prednosti koje obezbeđuju vremenski efikasan i relativno jeftin način za dobijanje koncentrata pločica u jednoj operaciji, koja se lako sprovodi i prilagođava za neku aplikaciju. Postupci iz ovog pronalaska predstavljaju prednost koja ne samo da vodi obogaćenim preparatima, a pri tome se dobijaju pločice u tako visokom pronosu, uz nizak sadržaj eritrocita. Kompozicije iz ovog pronalaska imaju prednost u tome što imaju visok sadržaj pločica, a nizak sadržaj eritrocita, uz kompletno održavanje svojstava za njihovu narednu terapeutsku upotrebu in vivo. Određenije, održava se sposobnost ovih pločica da oslobađaju glavne faktore rasta, uključene u regeneraciju tkiva (PDGF, TGF-beta, IGF, VEGF i EGF), na nivou od nekoliko dana (ili 30 dana trajanja života trombocita). Pored toga, sve dok se kompozicije iz ovog pronalaska prave od autogene krvi, pronalazak koji je ovde opisan, fliminiše prenos bolesti i rizike od imunoreakcija, povezane sa upotrebom materijala za tretman, napravljenih od bioloških materijala dobijenih iz jednog ili više izvora trećih lica. Prema tome, ovaj pronalazak daje poboljšan regeneracioni materijal za biološko zarastanje rana ili tkiva, koji je poželjno autogen, za tkiva, kao što su, koža, hrskavica i regeneracija kosti, naročito cikatrizacija i/ili podmlađivanje. Benefite ovog pronalaska čine jednostavan i brz postupak za dobijanje regeneracionih materijala i poboljšano zarastanje rana ili tkiva, koje je prilagođeno servisiranju nege, a za koji je dokazano da skraćuje vreme zarastanja, smanjuje prateći bol i medicinske troškove. Pored toga, ovi regeneracioni materijali za zarastanje rana i tkiva smanjuju odbacivanje grafta, a poboljšavaju procenat uspešnog graftovanja. Pored toga, ovi poboljšani regeneracioni materijali za zarastanje rana i tkiva vode ožiljcima koji imaju mnogo bolji konačni estetski aspekt i trajnom punjenju ožiljaka i bora.
Tipično, ekstrakt ćelija se dobija iz tkiva biopsijom, a pri tome je poželjno a se ova biopsija obavlja istog dana kada se dobija smeša sa koncetratom pločica. Veličina biopsije se prilagođava ciljanoj terapeutskoj svrsi i vrsti ćelija koje se koriste za dobijanje kompozicije ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom. Primeri biopsija za razne vrste tkiva su dati u Primerima u nastavku. U sledećem aspektu, ovde se opisuje cev, koja se sastoji od najmanje jdnog filtera koji razdvaja cev na dva dela.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje cev, razdvojena na dva dela pomoću, poželjno jednog filtera.
U jednoj realizaciji cev se koristi za sakupljanje i/ili separaciju uzoraka fluida.
Poželjno je da se ova dva dela razlikuju po veličini i prečniku.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje cev za sakupljanje i separaciju uzorka fluida, koja se sastoji od
i) dva odvojena dela, koji se razlikuju po veličini i prečniku,
ii) najmanje jednog filtera, koji je razdvaja na dva dela, i
iii) opciono, nekog antikoagulanta.
U jednoj poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, ova cev se sastoji od karakteristika ilustrovanih na Slikama 1 do 14.
U jednoj poželjnoj realiizaciji, ova cev je napravljena od cikličnog olefinskog polimera (COP) ili cikličnog olefinskog kopolimera (COK).
U jednoj realizaciji, ova cev sadrži neki antikoagulant, poželjno puferovani rastvor natrijum-citrata ili anhidrovani natrijum-citrat.
U jednoj poželjnoj realiizaciji, ova cev sadrži puferovani rastvor 0.10 M natrijumcitrata ili anhidrovani natrijum-citrat, sa 3.5 mg/mL.
U jednoj poželjnoj realiizaciji, filter je fiksiran za cev. Poželjno je da se filter prostire vertikalno duž cevi, sa ciljem da ima povećanu površinu u kontaktu sa cevi (prostire se duž vertikalne ose cevi). Ovo ima prednost zbog povećanja stabilnosti filtera, a pored toga, sprečava bilo kakvo pokretanje filtera. U jednoj poželjnoj realiizaciji, ova cev sadrži filter, koji je napravljen od dva sloja. Poželjno je da se ova 2 sloja preklapaju (jedan iznad drugog; Slika 4, Slike 10 do 14). Poželjno je da se spoljašnji sloj prostire vertikalno da bi imao proširenu površinu u kontaktu sa cevi (prostire se duž vertikalne ose cevi; Slike 2, 3, i 5A). Poželjno je da je unutrašnji sloj takođe izdužen, sa ciljem da bude poravnat sa spoljašnjim slojem. U jednoj realizaciji, unutrašnji sloj nije uzdužan (samo duž horizontalne ose). U jednoj realizaciji, u cevi je sadržano 2, 3, 4, 5 ili više filtera.
U jednoj poželjnoj realiizaciji, prvi deo cevi je smešten u gornjem, ili u vršnom delu cevi, i veće je zapremine nego drugi deo, smešten u donjem, ili pri dnu cevi. Pored toga, u poželjnoj realizaciji, prvi deo cevi, koji sadrži filter, ima zapreminu od oko 9.5 cm<3>, a drugi deo cevi ima zapreminu od oko 3.5 cm<3>(Slika 5A).
U jednoj poželjnoj realiizaciji, zapremina prvog dela cevi, koja je locirana u gornjem delu cevi, koji se sastoji od filtera, predstavlja oko 70% od ukupne zapremine cevi. U jednoj realizaciji, zapremina prvog dela cevi, koja je locirana u gornjem delu cevi, koji se sastoji od filtera, predstavlja oko 51%, 55%, 60%, 65%, 68%, 70%, 73%, 75%, 80%, 90%, 95% ili više, od ukupne zapremine cevi. Pored toga, u poželjnoj realizaciji zapremina drugog dela, smeštena u donjem delu cevi, predstavlja oko 30% od ukupne zapremine cevi. U jednoj realizaciji, zapremina drugog dela, smeštena u donjem delu cevi, predstavlja oko 49%, 45%, 40%, 35%, 32%, 30%, 27%, 25%, 20%, 15%, 10% ili 5% ili manje, od ukupne zapremine cevi.
U jednoj poželjnoj realizaciji, cev ima ukupnu zapreminu od oko 13 cm<3>(Slika 5A).
U jednoj poželjnoj realiizaciji, drugi deo cevi, smešten u donjem delu cevi, ima manji prečnik nego prvi deo cevi, smešten u gornjem delu cevi. Ovo daje prednost da filter može stajati na svom mestu i u njegovom položaju prilkom centrifugiranja ili bilo kakvog drugog mehaničkog udara.
U jednoj poželjnoj realiizaciji, spoljašnji prečnik prvog dela cevi, lociranog u gornjem delu cevi, je oko 15.5 mm ili oko 15.4 mm (Slika 3). U jednoj poželjnoj realizaciji, unutrašnji prečnik prvog dela cevi, smeštene u gorjem delu cevi, je oko 13.32 mm ili 13.31 mm (Slika 3).
U jednoj poželjnoj realiizaciji, spoljašnji prečnik drugog dela cevi, lociranog u donjem delu cevi, je oko 13.7 mm (Slika 5A). U jednoj poželjnoj realiizaciji, unutrašnji prečnik drugog dela cevi, smeštene u donjem delu cevi, je oko 11.6 mm.
U jednoj poželjnoj realiizaciji, filter, napravljen od dva sloja, razdvaja dva dela cevi. Poželjno, je da se ova 2 sloja preklapaju (jedan iznad drugog; Slika 4, Slike 10 do 14).
Poželjan filter je prikazan na Slici 4 i Slikama 7 do 14. Poželjno je da ovaj filter sadrži spoljašnji i unutrašnji sloj (Slike 10, 11 i 13).
U jednoj poželjnoj realiizaciji, filter je fiksiran za cev. U sledećoj realizaciji, filter nije fiksiran za cev.
U jednoj realizaciji, filter sadrži simetričan niz opsega sa otvorima, prikazan na Slikama 7A, 7B, 8 i 9. Poželjno je da se filter sastoji od 4 simetrična niza opsega, sa 2 pregrade po nizu, a svaki opseg sadrži otvor. Otvori prvog opsega su smešteni prema centru cevi, a rastojanje između unutrašnjeg dela jednog otvora i unutrašnjeg dela drugog otvora je oko 5.13 mm (Slika 4, detalj 4). Za otvore prvog niza, otvori su smešteni bliže centru cevi, a rastojanje između spoljašnjeg dela jednog otvora i spoljašnjeg dela sledećeg ovora je oko 5.67 mm (Slika 4, detalj 3). Za otvore drugog niza otvori su smešteni bliže granici cevi, a rastojanje između unutrašnjeg dela jednog otvora i unutrašnjeg dela drugog otvora je oko 7.73 mm (Slika 4, detalj 2). Za drugi niz otvori su smešteni bliže granici cevi, a rastojanje između spoljašnjeg dela jednog otvora i spoljašnjeg dela drugog otvora je oko 8.27 mm (Slika 4, detalj 1). U jednoj realizaciji, rastojanje svakog otvora je oko 0.53 ili 0.54 mm (Slika 9 i Slika 14, detalj 21).
Poželjno je da se gornji unutrašnji sloj sastoji od 4 četiri simetrična opsega, sa 2 opsega po nizu (Slika 9, 13 i 14), a svaki opseg se sastoji od odgovarajućeg broja levkova, pravilno raspoređenih (Slike 13 i 14). Poželjno je da se na dnu svakog levka nalazi prorez ili otvor, i da ima dužinu od oko 0.27 mm (Slika 14, detalj 26). Poželjno je da rastojanje od jednog do drugog ekstremiteta na levku bude oko 1 mm, što odgovara debljini gornjeg sloja (Slika 14, detalj 24). Poželjno je da je debljina gornjeg sloja oko 1 mm (Slika 12, detalj 34 i Slika 14, detalj 24). Broj levaka će zavisiti od veličine sloja. Poželjno je da levak sadrži zatvoreni prorez na njegovoj osnovi (detalj 26 na Slici 14) .
Poželjno je da se donji ili spoljašnji sloj sastoje od 4 simetrična niza opsega sa 3 opsega po nizu (Slika 8, 13 i 14), a svaki opseg se sastoji od odgovarajućeg broja pravilno raspoređenih trapezoida (Slike 13 i 14). Broj trapezoida će zavisiti od veličine sloja. Poželjno je da je svaki trapezoid odvojen rastojanjem od oko 0.53 mm (Slika 14). Osnova svakog trapezoida ima dužinu od oko 0.77 mm (Slika 14). Poželjno je da je visina svakog trapezoida oko 0.5 mm (Slika 14). Poželjno je da je debljina donjeg sloja oko 1 mm (Slike 12 i 14).
Poželjno je da su opsezi gornjeg i donjeg sloja uvek naizmenični. Poželjno je da prvi opseg trapezoida donjeg sloja sledi prvi opseg levaka gornjeg sloja, koga će slediti drugi opseg trapezoida donjeg sloja, a ovoga sledi drugi opseg levaka gornjeg sloja, koga će konačno slediti treći opseg trapezoida donjeg sloja (Slike 4, 13 i 14).
Poželjno je da je svaki levak gornjeg sloja lociran na takav način da produžetak centra levka padne približno između dva trapezoida donjeg sloja (Slike 4, 13 i 14).
Poželjnije je da je svaki levak gornjeg sloja lociran na takav način da produžetak centra levka padne tačno između dva trapezoida donjeg sloja (Slike 4, 13 i 14). Poželjno je da je trapezoid kontinualno naizmeničan sa levkom.
Kada se cev iz ovog pronalaska centrifugira, zatvoreni prorez na osnovi levka (detalj 26 na Slici 14) se otvara zahvaljujući centrifugalnoj sili, dozvoljavajući prolaz crvenim krvnim zrncima, koja su usmerena između dva trapezoida i konačno u donji deo cevi. Kada centrifugiranje prestane, prorezi na levkovima će biti zatvoreni sprečavajući refluks crvenih krvnih zrnaca ugornji deo cevi. Trapezoidi donjeg sloja, locirani ispod svakog levka će olakšati prolaz crvenih krvnih zrnaca u donji deo cevi i pomoći u sprečavanju refluksa crvenih krvnih crnaca.
Poželjno je da je zapremina gornjeg sloja oko 0.26 cm<3>. Poželjno je da je zapremina donjeg sloja oko 0.29 cm<3>.
Poželjno je da je gornji sloj napravljen od polipropilena (PP). Poželjno je da je donji sloj napravljen od nekog termoplastičnog elastomera (TPE). Ostale komponente se mogu koristiti kao što je opisano u ovom pronalasku, ili kao što je poznato verziranoj osobi.
Poželjno je da je centar filtera zakrivljen (Slike 4, 10 do 13). Ovo daje prednost usmeravanja celovite krvi ka levkovima. Poželjno je da je filter zakrivljen na takav način da od centra cevi do osnove donjeg sloja ima dužinu oko 0.5 mm (Slika 12, detalj 36).
Poželjno je da je visina donjeg sloja oko 8 mm (Slika 2 i Slika 10, detalj 14). Poželjno je da je spoljašnji prečnik donjeg sloja oko 12.74 mm (Slika 10, detalj 17). Poželjno je da je unutrašnji prečnik gornjeg sloja oko 9.6 mm (Slika 10, detalj 16). Poželjno je da je visina sloja gornje nezakrivljene površine gornjeg sloja oko 6 mm (Slika 10, detalj 9). Poželjno je da je visina sloja centra zakrivljene gornje površine gornjeg sloja oko 5.5 mm (Slika 10, detalj 11).
U jednoj realizaciji ovog pronalaska, cev sadrži samo filter sa levkovima.
U sledećoj realizaciji ovog pronalaska, broj levkova i/ili trapezoida može da varira. U sledećoj realizaciji ovog pronalaska, broj opsega levkova i/ili trapezoida može da varira. U sledećoj realizaciji ovog pronalaska, brj simetričnih nizova opsega levkova i/ili trapezoida može da varira. U sledećoj realizaciji ovog pronalaska, cev se sastoji od 2 simetrična niza opsega levkova i/ili trapezoida.
Ovaj pronalazak obuhvata takođe cev u kojoj se dužine svih komponenata razlikuju od ovih, koje su ovde naznačene. Ovaj pronalazak obuhvata takođe cev u kojoj se dužine svih komponenata razlikuju od naznačenih ovde, za dužinu od oko 0.1 mm, 0.2 mm, 0.3 mm, 0.5 mm, 1 mm, 1.5 mm, 2 mm, 5 mm, 8 mm, 10 mm, 15 mm, 20 mm, 50 mm, 75 mm, 1 cm, 2 cm, 5 cm, 10 cm ili više.
U jednoj realizaciji, filter je oblikovan i modeliran pomoću lasera.
Cevi iz ovog pronalaska imaju prednost što sa visokom efikasnošću razdvajaju crvena krvna zrnca od plazme. Korišćenjem cevi iz ovog pronalaska, procenat crvenih krvnih zrnaca u plazmi se smanjuje za više od 99%, 98%, 95%, 93%, 90%, 85%, 80%, 75%, 70%, 65% ili 60%, u poređenju sa procentom crvenih krvnih zrnaca u celovitoj krvi.
Materijali COK ili COP, izuziimajući uštedu u ceni i što su krut i jak medicinski materijal, imaju prednost zato što je u njihovom prirodnom obliku njihova providnost slična staklu. Tipičan COK materijal će imati veći modulus nego polietilen visoke gustine HDPE (od engleski, High-density polietilen) ili polietilen visoke gustine PEHD (od englski, polietilen high-density) (polietilen je termoplastičan i napravljen og petroleuma, a PP (polipropilen ili polipropen, je termoplastičan polimer). Takođe, COK predstavlja visoku barijeru prema vlazi za providan polimer, zajedno sa niskom brzinom absorpcije. U medicinskim primenama COK je označen kao proizvod visoke čistoće sa niskom ekstrakcijom. Takođe, COK je proizvod bez halogenih elemenata.
COK je materijal koji ima odličnu optičku bistrinu i predstavlja visoku barijeru za vodenu paru. On poseduje karakteristike velike pouzdanosti, izdržava sve poznate metode sterilizacije, rezistentan je prema hidrolizi i prema širokom opsegu hemikalija.
Kao materijal COK poseduje takođe visoku rezistentnost prema toploti, zatim dobra mehanička svojstva, tvrdoću, dimenzionu stabionost i elektroizolaciona svojstva. Zato što se vrlo malo ekstrahuje, on poseduje odličnu biokompatibilnost in-vivo i invitro, zadovoljavajući zahteve USP Class VI i ISO 10993, a prihvaćen je i od strane FDA Drug i Device Master File numbers.
Pored toga, COK, zahvaljujući njegovoj transparentnosti, krutosti, niskoj masi, rezistentnosti prema toploti i hemikalijama, biokompatibilnosti, dimenzionoj stabilnosti, barijeri prema vlazi (niska permeabilnost vodene pare), sposobnosti da se lije u kalupe i nedostaku halogena, pruža mnogo benfita u upotrebi. U poređenju sa staklom, smanjuje lom u uređajima i pakovanjima, produžava vek skladištenja lekova, omogućuje dijagnostička očitavanja na UV talasnim dužinama i omogućuje manju i bržu dijagnostičku opremu. Pored toga, vrste COK mogu takođe da se podvrgnu sterilizaciji gama zračenjem, vodenom parom, etilenoksidom, tako da se mogu sterilisati svim poznatim postupcima.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje jedan sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi, u skladu sa Slikom 15.
Sakupljanje i/ili čuvanje krvi u nekom sistemu kese za krv ili uređaju sa cevi za uzimanje krvi, u skladu sa ovim opisom, može se upotrebljavati u bilo kojim procesima, kompozicijama, proizvodima i upotrebam, u skladu sa ovim opisom.
Cevi ili kese za uzimanje krvi se mogu evakuisati i/ili hermetički zatvoriti. Cevi ili kese za uzimanje krvi se mogu puniti tiksotropnim gelom i/ili antikoagulantom.
Sistem kese za krv ili uređaja sa cevi za uzimanje krvi iz ovog opisa u nekom višekanalnom kolektoru krvi, omogućuje oslobađanje plazme i komponenata ćelija u više kesa ili cevi.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi, koji se sastoji od jednog ulaznog cevovoda povezanog sa adapterom višestrukog cevovoda, s tim da su cevovodi adaptera povezani sa najmanje dve kese ili cevi, a pri tome je svaki cevovod adaptera višestrukog cevovoda adaptera povezan sa jednom kesom ili cevi.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi, koji se sastoji od:
a) jednog ulaznog cevovoda,
b) adaptera višestrukog cevovoda, sa ceovodima adaptera, i
c) najmanje dve kese ili cevi, pri čemu je jedan ulazni cevovod povezan sa adapterom višestrukog cevovoda, a pri tiome je svaki cevovod adaptera u adapteru sa više cevovoda povezan sa jednom kesom ili cevi.
U jednoj realizaciji, ovde se opisuje sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi, u skladu sa ovim opisom, za sakupljanje komponenata krvi.
Poželjno je da ovaj sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi sadrži ulazni cevovod (1), adapter višestrukog cevovoda (2), adapter cevovoda (3) i najmanje dve kese ili cevi (4), kao što pokazuje Slika 15.
U jednoj realizaciji, ovaj sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi, pored toga sadrži jedan ili više elemenata za fiksiranje (5) (Slika 15). Poželjno je da se obezbedi po jedan elment za fiksiranje za svaki adapter cevovoda. U jednoj realizaciji, za svaki adapter cevovoda daju se dva ili više elemenata za fiksiranje.
Poželjno je da svaki sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi, pored toga, sadrži i neki poklopac. Slika 15 illustruje jedan sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi u kome svaka kesa (4) sadrži poklopac (6). Poželjno je da se ovaj poklopac može otvoriti ili odvrnuti da bi se povezao sa sterilnim špricem. Ovaj poklopac ima prednost što dozvoljava jednostavno usisavanje sadržaja kese pod sterilnim uslovima. U jednoj realizaciji, može se koristit špric Luer-Lock. Alternativno, umesto poklopca može se koristiti igla.
Poželjno je da su ulazni cevovod i adapter cevovoda fleksibilni. Poželjno je da su ulazni cevovod i adapter cevovod u obliku cevi.
U jednoj realizaciji, sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi sadrži 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20 ili više kesa ili cevi. Poželjno je da ovaj sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi sadrži 8 kesa ili cevi.
Poželjno je da se ovde opisuju potrošne kese ili cevi, samo za jednu upotrebu.
U jednoj realizaciji, svaka kesa može sadržati oko 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 16, 18, 20, 25, 30 mL ili više krvi. Poželjno je da svaka kesa sadrži 10 mL krvi. Poželjno je da je zapremina svake kese prilagođena za jednu upotrebu. Poželjno je da je količina uzete krvi u svakoj kesi, količina koja je dovoljna za jednu upotrebu.
Poželjno je da sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi obezbeđuje hermetičku komunikaciju tečenja. Poželjnije je da ovaj sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi obezbeđuje hermetičnu i sterilnu komunikaciju tečenja.
Poželjno je da se svaka kesa može pojedinačno hermetički zatvoriti kada se napuni ta kesa ili cev. Prednost ovoga je da se imaju na raspolaganju pojedinačne, spremne za korišćenje kese ili cevi, za samo jedno pražnjenje.
Poželjno je da se svaka kesa podvrgava koraku vakuumiranja. Poželjno je da se svaki ovaj sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi podvrgava koraku vakuumiranja.
U jednoj poželjnoj realizaciji, svaka kesa se ubacuje u drugi zaštitni omot. Prednost ovoga je u pružanju dvostruke zaštite, saglasno sa ISO standardima pakovanja (ISO11607-1 i/ili ISO11607-2).
Poželjno je da se posle vakuumiranja svaka kesa ubaci u drugi omot. Poželjno je da se ovaj drugi omot podvrgava vakuumu i hermetičkom zatvaranju. Sterilizacija, koraci vakuumiranja i dvostruka zaštita kesa ili cevi čine njhovu upotrebu vrlo bezbednom.
U jednoj realizaciji, protok fluida se može kontrolisati konvencionalnim ventilskim sistemima, kao što su utiskivanje čepa, zamenjivi čepovi ili klizne kleme.
Sistem kesa i cevi za krv može biti konvncionalne konstrukcije, naporavljene od plastičnog materijala koji je kompatibilan sa krvlju, fleksibilan, proziran i da se može sterilisati. Plastika može biti polivinilhlorid, poliestar, poliolefin, poliuretan i tako dalje, a to mogu biti i smeše gornjih materijala. Ulazni cevovod i/ili adapter cevovoda može biti napravljen od plastičnog materijala, koji je isti ili različit od plastičnog materijala kesa ili cevi za krv.
U jednoj realizaciji, sredstvo za filtriranje može biti integrisano u sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi iz ovog opisa. Sredstvo za filtriranje može da obuhvata i kućište, napravljeno od tvrdog polivinilhlorida ili slično i fitinga za cevi. Sredstvo za filtriranje može biti ispunjeno sa nekim medijumom za filtriranje, pamučnom vatom ili acetatom celluloze ili drugim sintetskim vlaknima, kao što su poliestar, poliamidi i slično. Količina medijuma za filtriranje zavisi od količine crvenih krvnih zrnaca koja treba da se profiltriraju. Obično se koristi oko 20-50 g medijuma za filtriranje na 200-250 mL koncentrata crvenih krvnih zrnaca.
U jednoj realizaciji, dodaje se dodatni rastvor za produžavanje vremena skladištenja crvenih krvnih zrnaca. Ovaj dodatni rastvor može biti, na primer, neki konvencionalni rastvor za čuvanje crvenih krvnih zrnaca, kao što su oni koji su opisani u dokumentima Ginzburg et al, Bibl. HKemotol., 1971, No. 3, Pt. 2, 217-220; Wood et al, Blood, Vol. 42, No. 1, 1973, 17-25; Beutler, "The Red Cell in Vitro", Grum i Stratton, New York, N.Y., 1974, p.201; Lovric et al, Medical Journal of Australia, Vol.
2, 183-186, 1977; U.S. Pat. No.4,267,269; u količioni od oko 50-100 mL na 200-250 mL koncentrata crvenih krvnih zrnaca.
U jednoj realizaciji, sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi iz ovog opisa može sadržati neki antikoagulant, kao što su Adenin-Citrat-Dekstroza (ACD), Citrat-Fosfat-Dekstroza (CPD), Citrat Fosfat-277 milimola Dekstroza (CP2D), CPD plus adenin, ili neki drugi konvencionalni antikoagulant, sa kojima se meša uzeta krv. Uzeta krv se zatim može direktno obrađivati ili čuvati, obično na oko 4 - 6°C. Prilikom obrade, ovaj sistem kese se može centrifugirati, što je uobičajeno u stanju tehnike, izazivajući taloženje crvenih krvnih zrnaca iz krvi na dnu kese. Krvna plazma se dobija konvencionalnim tehnikama, iz sveže plazme i koncentrata pločica.
Krv koja se nalazi u kesi ili cevi, može da se koriisti u bilo kom aspektu i/ili realizaciji iz ovog opisa.
Ovaj sistem kese za krv ili uređaja sa cevi za uzimanje krvi se lako proizvodi i dobija veliku upotrebu u oblasti medicine. Korišćenjem ovog opisa, uzimanje krvi se obavlja lako, postaje sigurnije i efikasnije. Pogodnost koju ovaj opis daje je i lakši ulazak u trag. Ovde je opisan sistem koji se sastoji od sistema kese za krv ili uređaja sa cevi za uzimanje krvi koji dozvoljava lako, brzo i bezbedno uzimanje, čuvanje i oslobađanje bilo koje krvne komponente. Pored toga, prednost je da se uzimanje, čuvanje i oslobađanje krvnih komponenata obavlja pod sterilnim uslovima, saglasno standardima ISO. Pored toga, pednost je da su sistem kese za krv ili uređaja sa cevi za uzimanje krvi i/ili kompleta i/ili sredstva naročito podešeni za upotrebu na odabranom mestu.
Poželjno je da se uzimanje, čuvanje i oslobađanje krvnih komponenata obavlja pod sterilnim uslovima.
U jednoj realizaciji, daje se ventil koji može biti potrošan, korišćenjem materijala, kao što je akrilna smola, za njegovu proizvodnju.
U sledećem aspektu, ovde se opisuje sterilni komplet i/ili uređaj, koji se sastoji od najmanje jednog sistema kese za krv ili uređaja sa cevi za uzimanje krvi, u skladu sa ovim opisom. Svi aparati neophodni za sakupljanje komponenata krvi su dati u sterilnom kompletu, što čini sakupljanje komponenata krvi bezbednim i ekonomičnim.
Krv koja se dobija iz sistema kese za krv ili uređaja sa cevi za uzimanje krvi i/ili kompleta i/ili sredstva, u skladu sa ovim opisom, mogu se koristiti za dobijanje trombina, plazme obogaćene pločicama, koncentrata pločica, ekstrakta ćelija, kompozicije agensa za zarastanje rana i/ili agensa za zarastanje tkiva, ili hemostatskog agensa, ili biološkog lepka, u skladu sa bilo kojim od aspekata i/ili realizacija opisanih ovde.
Krv koja se dobija pomoću sistema kese za krv ili uređaja sa cevi za uzimanje krvi, u skladu sa ovim opisom, može se upotrebiti u svim aplikacijama koje su ovde opisane. Na primer, krv koja se dobija iz sistema kese za krv ili uređaja sa cevi za uzimanje krvi, i/ili kompleta, u skladu sa ovim opisom, može da se koristi u hirurgiji, ambulantnim uslovima ili po hroničnim ranama.
Krv koja se dobija iz sistema kese za krv ili uređaja sa cevi za uzimanje krvi i/ili kompleta, i/ili ueđaja, u skladu sa ovim opisom, može se upotrebiti kao homogena ili autogena komponenta.
Kada se koristi kao homogena komponenta, krv i/ili krvne komponente koje daje sistem kese za krv ili uređaj sa cevi za uzimanje krvi i/ili komplet, i/ili sredstvo, u skladu sa ovim opisom, predstavlja pogodan, efikasan, jednostavan i jeftin alternativni put u odnosu na poznate sisteme. Pogotovo, kada uzimanje autogene krvi nije moguće.
Primeri koji ilustruju ovaj pronalazak biće na detaljniji način opisani u nastavku, pozivanjem na realizacije predstvljene na slikama.
Primeri
Sledeće skraćenice se odnose na respektivne definicije u nastavku:
ATS (autogeni serum trombina);
BU (Baksotrobinska jedinica);
DMEM (Dulbecco-ov minimalni esencijalni medijum);
DMSO (dimetilsulfoksid);
EC (obogaćeni ugrušak);
FCS (serum telećeg fetusa);
HT (vreme zarastanja);
IU (Internacionalna jedinica);
PBS (puferovani fosfatni slani rastvor);
PET (polietilentereftalat);
PRP (plazma obogaćena pločicama);
PPP (plazma osiromašena pločicama);
USP (Farmakopeja SAD);
cm (centimetar);
dL (decilitar);
g (gram);
Gy (grej);
J (džul;
L (litar);
min (minut);
mm (milimetar);
M (molarni);
mL (mililitar);
nm (nanometar);
rpm (obrt na minut);
Vol. (zapreminski).
OPŠTE PROCEDURE I USLOVI
Da bi se odredia efikasnost kompozicija iz ovog pronalaska u promovisanju regeneracije, prilikom zarastanja rane i/ili kosti i/ili tkiva, obavljeni su sledeći eksperimenti. Sakupe se uzorci celovite humane krvi u separatorsku cev, u skladu sa ovim pronalaskom. Cev, koja se može upotrebiti je, na primer, staklena cev (prečnika 16 mm, dužine 120 do 130 mm) od približno 10 to 15 mL, koja sadrži 2 do 3 mL tiksotropnog gela na bazi poliestra, kao i 1 mL rastvora 0,1 M natrijum-citrata, a ima upotrebljiv vakuum za oko 8.0 mL do 10 mL. Ova cev predstavlja uređaj za neposrednu upotrebu, koji se koristi za dobijanje kompozicija koncentrata pločica iz ovog pronalaska.
Sledeći primer cevi koja se može upotrebiti je PET (polietilentereftalat) cev od približno 10 mL, koja sadrži 2 mL tiksotropnog gela, sačinjenog od smeše polimera i rastvora natrijum-citrata (oko 0.1 M), sa upotrebljivim vakuumom za oko 8 mL do 10 mL, predstavljajući tako uređaj za neposrednu upotrebu, koji omogućava dobijanje koncentrata pločica u skladu sa ovim pronalaskom. Sledeći primer cevi koja se može koristiti, je cev u skladu sa ovim pronalaskom. Ove cevi se pune sa 2 komponente, aspiriraju vakuumom, sterilišu zračenjem (kao što propisuje ISO 11137, UNI EN ISO 11737-2, UNI EN 552, UNI EN 556) i hermetički zaptivaju sa tradicionalnim poklopcem, kao što je konvencionalni zapušač od bromobutil gume za staklenu cev i zapušač od hlorobutil gume, koji ima polietilensku oblogu, za bezbednost pri radu. Zatim se ova cev centrifugira sa od oko 1500g, pa do oko 2000g, tokom oko 3 do 10 min, tj. sa oko 2.500 o/min, pa do oko 3.800 o/min, u centrifugi sa ljuljajućim rotorom, koja ima poluiprečnik od 14 cm. U slučaju kada centrifuga ima rotor sa fiksim uglom od oko 45°, vreme centrifugiranja treba da traje od 5 do oko 15 min. Alternativno, cev se centrifugira u skladu sa ovim pronalaskom.
Posle centrifugiranja sakupi se koncentrat pločica za upotrebu u nekoj therapeutskoj ili kozmetičkoj aplikaciji, ili za dalje pripremanje kompozicija koje sadrže dobijeni koncentrat pločica, mešanjem sa dodatnim agensima, kao što su ekstrakti ćelija, poželjno autogenih (npr. keratinocita, fibroblasta, ćelija koštane srži, osteoblasta, hondrocita, mioblasta, ćelija rožnjače, Schwann-ovih ćelija, masnih ćelija, matičnih ćelija iz pupčane vrpce, ćelija tetiva, ćelija ostrvaca pankreasa, ćelija ligamenata i gingive, ćelija periostealne membrane) i/ili zamena za kosti i/ili aktivator koagulacije.
Kompozicije koncentrata plazme, PRP se mogu pomešati sa trikalcijum-fosfatom (TKF), hijaluronskom kiselinom (HK), hitozanom, kremom, kremom za masku, ekstraktima ćelija, masnim ćelijama, lubricinom, cd-žealtinom i/ili toksinom botulina.
Za dobijanje kompozicija ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, ćelije se dobijaju u skladu sa opštim protokolom, kao što sledi:
a) Biopsija
Biopsija odgovarajućeg tkiva se uzima pod sterilnim uslovima, korišćenjem standardnih postupaka, prilagođenih sopecifičnosti ćelija koje treba da se saskupe. Ove ćelije se mogu prečistiti pranjem, centrifugiranjem ili sedimentacijom. Ćelije se mogu izolovati centrifugiranjem, digestijom pomoću enzima (tripsin kolagenaza ili rekombinovani tripsin).
Ćelije se koriste ekstemporalno ili opciono, posle ex-vivo kultivisanja i proliferacije ćelija, kao što sledi.
b) Kultivisanje ex-vivo i proliferacija ćelija
Ćelije koje se koriste za dobijanje kompozicija ćelija, kao što su: keratinociti, ćelije koštane srži, fibroblasti; ćelije periosteuma ili ćelije rožnjače, kao što su matične ćelije limba rožnjače; melanociti i Langheran-ove ćelije; masne ćelije; ćelije mišića, kao što su mioblasti i prateće ćelije; osteoblasti; hondrociti; ćelije pupčane vrpce; Schwann-ove čelije, mezenhimalne matične ćelije, preadipociti, pre-endotelijalne ćelije, ćelije tetiva ili pankreasa, tradicionano se umnožavaju u nekom nosećem ćelijskom medijumu (npr. DMEM ili Ham’s), na pločama (npr. u Petri-eva šolja ili balon za kultivisanje) obloženim sa koncentratom pločica, poželjno autogenim, obogaćenim sa fibronektinom. Pogodno je da noseći medijum za ćelije, kao što je DMEM ili Ham’s, ne zahteva upotrebu koncentrata plazme ili PRP, sa koncentracijom od oko 5% do oko 20%. Pored toga, pogodno je što se ovako pravi preparat ćelija 20% efikasnije. Preparat ćelija može konačno biti obogaćen sa fibronektinom. Medijum kulture poželjno je da se obogati sa DMEM, na primer u slučaju keratinocita. Za ćelije, kao što su osteoblasti kosti, hondrociti i mioblasti, neophodna je digestija pomoću enzima odgovarajućeg tkiva, u prisustvu, na primer kolagenaze ili tripsina, pre zasejavanja. Inkubacija zasejanih ćelija se obavlja na 37°C, uz proticanje 95% kiseonika ili vazduha i 5% ugljen-dioksida.
Tipično, vreme inkubacije varira od 10 do 20 min. Konačno, umnožavanje ćelija (kao na primer, u slučaju ćelija mioblasta, fibroblasta i hondrocita) može biti pojačano fototerapijom (npr. izlaganjem svetlosti talasne dužiine 633 nm, utrajanju oko 10 min, sa 2J/cm<2>, jedanput nedeljno, tokom faze inkubacije).
Eksplanti se mogu kultivisati u Petri-evim šoljama i balonima za kultivisanje, korišćenjem tehnike barbotiranja vazduha (Molnar et al., 1996, Tissue & Cell, 28:547-556) i postupka vazdušnog interfejsa (Meller et al, 2002, Br. J. Opht., 86, 463-471), sa izlaganjem vazduhu polovine eksplanta. Tokom inkubacije regularno se menja medijum za kultivisanje, kao što je na svakih 3 dana. Umnožavanje ćelija po 2D modelu, u obliku planarnih monoslojeva, dobija se, na primer, za ćelije mioblasta, fibroblastai hondrocita. Shemom rasta po 3D modelu mogu da se dobiju, na primer, ćelije rožnjače, mioblasta, fibroblasta, hondrocita, adipocita i keratinocita, dodavanjem u medijum za kultivisanje razblažene autogene kompozicije koncentrata pločica, sa 5 do oko 40 vol% plazme ili obogaćene plazme. Tipično, dodavanje razblažene autogene kompozicije koncentrata pločica se može obaviti dva ili tri puta tokom trajanja inkubacije. Ovako dobijena biološka 3D struktura dozvoljava zatim da se pojača vanćelijska matrica, koja je korisna za transfer autogenih matičnih ćelija.
Posle inkubacije, ćelije se mogu osloboditi iz sudova laganom digestijom pomoću tripsina, čime se odvajaju ćelije i dozvoljava se peletiranje. Alternativno, ćelije koje se načine termosenzibilnim, mogu se osloboditi toplotom (može se upotrebiti Petrieva šolja obložena nekim termosenzibilnim polimerom).
c) Kvalitet ćelija i provera bezbednosti
Vitalnost ćelija u ovako dobijenim preparatima ćelija se proverava prebrojavanjem ćelija pod mikroskopom, prebrojavanjem ćelija protočnim citometrom sa markerima za imunohemiju tkiva, korišćenjem standardnih tehnika. Vitalnost ćelija se takođe testira pomoću tripan-plavog, odmah posle oslobađanja tripsina. Bezbednost preparata se takođe proverava proverom kontaminacije, pomoću mikrobiološkog testa, da bi se isključila kontaminacija sa virusima ili bakterijama i da se izbegne prenošenje neke zoonotske infekcije. Izbegava se upotreba seruma telećeg fetusa (FCS), jer se tako sprečava prenošenje bolesti ludih krava.
d) Ordiniranje preparata ćelija
Preparat ćelija, dobijen gore, stavi se u autogenu kompoziciju koncentrata pločica, u krajnjem slučaju kao tečnog nosača za transportovanje ćelija, pre oslobađanja u pacijentu. Zatim se ovaj preparat, dobijen gore, injektira ili transplatira pacijentu. Način injektiranja ili transplantiranja se mora prilagoditi vrsti ćelija sadržanih u ovom preparatu, i ciljanom terapeutskom ili estetskom efektu koji se očekuje. Detaljnije i specifičnije više se daje u Primerima u nastavku, u pogledu postupka za dobijanje i upotrebe ovih kompozicija ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, zavisno od vrste ćelija i ciljanog terapeutskog ili estetskog efekta.
Preparat ćelija keratinocita ili fibroblasta, u skladu sa ovim pronalaskom, lako se može upotrebiti posle sakupljanja, ili posle kultivisanja ćelija, kao što je opisano gore. Međutim, preparat ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti posle kultivisanja ćelija, kao što je opisano gore.
Preparat ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, daje bolju vitalnost i stabilnost (uključujući integritet sačuvanih osobina ćelija, kao što su sposobnost sinteze proteina i oslobađanja faktora rasta), u poređenju sa ćelijama dobijenim u nekom medijumu bez autogene kompozicije koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Pored toga, proliferacija ovako dobijenih ćelija je pojačana: ćelije rastu brže (oko 2 do 5 dana brže) i gušće su, u poređenju sa kontrolnim medijumima i medijumima sa izgladnjavanjem seruma. Prednost ovog procesa za dobijanje kompozicije ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, je da se ista količina autogenog mediuma upotrebljava kao vektor za kultivisanje ćelija, prezervaciju ćelija, injektiranje ćelija, kao vektor za bio-stimulaciju ćelija i regeneraciju tkiva.
Primer 1: Terapeutska upotreba autogenog koncentrata pločica iz ovog pronalaska, u kombinaciji sa autogenim serumom obogaćenim trombinom
Autogeni serum trombina, koji treba da se koristi kao preparat obogaćen trombinom, dobijen je u skladu sa ovim pronalaskom.
Jedna originalnost ovog procesa je da separacione cevi iz ovog pronalaska, koje sadrže preparat autogenog seruma trombina i preparat koncentrata pločica, mogu da ih daju paralelno. Staklena cev za dobijanje autogenog seruma trombina (ATS) se centrifugira od oko 8 min do oko 10 min. Plastična cev (COK ili COP) ili staklena cev za dobijanje koncentrata plazme ili kompozicij PRP, se cenrifugira od oko 8 min do oko 10 min. Dakle, pogodnost je što su ATS i kompozicija PRP spremne za upotrebu približno istovremeno.
Da bi se omogućila polimerizacija fibrinogena u fibrinsku mrežicu (što se dešava tokom procesa koagulacije) u samom momentu aplikacije na ranu, preparat obogaćen pločicama i kompozicija koncentrata pločica i autogenog seruma trombina (aktivator koagulacije) se apliciraju na ranu paralelno, u zapreminskom odnosu od oko 10:1, 10:3 do oko 10:10 (odnos koncentrata prema aktivatoru koagulacije), zavisno od aplikacije. Razlika u ovoj proporciji menja brzinu koagulacije i efekat lepka.
Paralelno oslobađanje ova ova preparata se postiže, na primer, pomoću nekog uređaja koji se sastoji od dva šprica (npr. špric od 10 mL za kompoziciju koncentrata pločica, a špric od 1 mL ili 3 mL za serum serum trombina), koji oslobađa ove preparate istovremeno, tako da se oni mešaju i polimerizuju nakon kontakta sa ranom.
Primer 2: Kozmetička upotreba autogenog koncentrata pločica iz ovog pronalaska
Primeri kozmetičke upotrebe autogenog koncentrata pločica iz ovog pronalaska su:
Mešanje koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, sa nekom kremom, poželjno emulzijom, pre aplikacije na ranu, posle hirurgije ili na zdravu kožu. Tokom procesa absorpcije, preparat pločica se nanosi na kožu pomoću kreme ili emulzije, sa ciljem da se pojača benefit hidratacije i da se bio-stimuliše regeneracija ili podmalađivanje kože. Injekcija u sloj kože može da se obavi tehnikom mezoterapije, ponavljanjem injekcija iz ruke ili pomoću nekog uređaja bez igle. Injekcija se može davati subkutano u boru, za korekciju zapremine. Injekcija koncentrata pločica kombinovana u odnosu 10:1 ili 10:3 sa autogenim serumom trombina, za efekat punjenja i/ili konzistentne korekcije zapremine, može da se obavi u boru, čelo, vilične kosti, region kutnjaka, obraze, bradu, vrat i/ili grudi. Po potrebi, injekcija koncetrata plazme kombinovana sa sveže aspiriranim masnim tkivom, u odnosu od oko 10:10, može se obaviti subkutano za značajne korekcije zapremine lica. Po potrebi, injekcija koncentrata plazme, kombinovana sa sveže aspiriranim masnim tkivom, u odnosu oko 10:3 ili oko 10:2, može se davati subkutano, za značajne korekcije zapremine grudi ili obrisa lica.
Korišćenjem preparata nalik hidrogelu, Albugel (EP 1 543 846) 100% albumina ili bilo kog drugog hidrogela, koji potiče od umrežavanja albumina i drugih hemijskih jedinjenja, kao što je polietilen glikol, ili nekog drugog sastojka, korišćenjem visoko hidrofilnog, natopljenog papira, kao nosača, koji se dovodi u kontaktu sa kožom, da se plazma obogaćena pločicama absorbuje.
Ovde se opisuju postupci injektiranja mezoterapije:
- u papilarnu dermu,
- subkutano, u retikularnu dermu, ili
- u nivo duboko iznad periosteuma.
Injekcija na 3 nivoa, takođe poznata kao ”Medicinski lifting lica”, može se obavljati samo sa plazmom, plazmom i adipoznim tkivom i/ili plaznom sa trikalcijum-fosfatom.
Primer 3: Dobijanje preparata autogenog skupa mišićnih ćelija
Primer jednog autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su ćelije skeletnih mišića, (ćelije mišića progenitora ili prateće matične ćelije) date u koraku (d) ili (e).
a) Matične ćelije progenitora mioblasta
Biopsija skeletnog mišića se uzima sa Vastus lateralis-a i iznosi 7×3 cm. Mišić se pripremi dan pre biopsije, sa intra-muskularnom injekcijom na predviđeno mesto biopsije (površina kože 10 × 15 cm na lateralnom aspektu butine, iznad mišića Vastus lateralis, odmah iznad zgloba kolena, na bilo kojoj strani) sa Decadon-om i Marcaine-om (Lignocaine dugog delovanja). Mišić se iseče i enzimatski digestira sa kombinacijom kolagenaze, pronaze i tripsina (Worthington). Eksplanti mišića se stave u Petri-eve šolje, obložene autogenom kompozicijom koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, pa inkubiraju 3 do 4 nedelje u 95% kiseoniku i 5% ugljen-dioksidu, na 37°C. Koristi se Desmin ili ekspresija CD-56, kao marker mioblasta, da bi se identifikovali mioblasti u odnosu na fibroblaste. Proliferacija progenitora ćelija mioblasta u 3D modelu je prikazana na Slici 3. Proliferacija ćelija se može pojačati izlaganjem svetlosti talasne dužine 633 nm, sa 2 J/ cm<2>, tokom 10 min, za vreme kultivisanja. Na dan transplantacije (npr. posle 3 do 4 nedelje inkubacije), ćelije skeletnih mišića, se mogu osloboditi pomoću tripsina, ili nekim postupkom koji je ovde opisan, pa prebaciti u autogenu kompoziciju koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Injekcije u miokard se mogu davati kao direktna injekcija ili višestruke injekcije kroz kateter, u levu komoru miokarda. Preparat ćelija mioblasta, u skladu sa ovim pronalaskom, je koristan kod srčanih poremećaja, kao što su regeneracija srca, tretman srčanih smetnji, hronična srčana smetnja, ishemična i ne-ishemična srčana smetnja i ne-ishemična kardiomiopatija. Ubrizgana frakcija se može pojačati za 9%, za srčane primaoce skeletnih mioblasta.
Gornji preparat ćelija može takođe biti koristan u tretmanu urinarne inkontinencije (ekstrakt ćelija mioblasta, dobijen kao što je opisano gore, se injektira u vrat bešike), poremećaja ezofagealnog refluksa ili gastroezofagealnog refluksa (ekstrakt ćelija mioblasta, dobijen kao šo je oipisano gore, se injektira u donji deo sfinktera ezofagusa) i analne inkontinencije (ekstrakt ćelija mioblasta, dobijen kao što je opisano gore, se injektira u para-analnu oblast).
Alternativno, može se dobiti kombinovani preparat fibroblasta i mioblasta (fibroblasti su prisutni u biopsiji mišića i kao izdanak iz perimysium-a duž strana miotubica i pratećih matičnih ćelija). U slučaju tretmana srčanih poremećaja, smeša preparata ćelija fibroblasta i preparata ćelija mioblasta (dobijena kao što je pokazano gore) ubacuje se u miokard, u odnosu fibroblast/mioblast od oko 30:70.
Za tretman inkontinencije vrata bešike, pravi se posebna kultura fibroblasta, istovremeno kada i mioblasta, kao što je gore opisano, a preparat ćelija fibroblasta se injektira para-uretralno, a preparat ćelija mioblasta se injektira u rabdosfinkter, sa ultrazvučnom kontrolom.
b) Prateće matične ćelije
Mioblasti i prateće matične ćelije se kultiivišu ex vivo, u prisustvu kompozicije autogenog koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Proliferacija ćelija se opaža posle 7 dana od primarne kulture.
Ćelije se sakupe posle inkubacije od oko 3-4 nedelje, pa prebace u medijum za kultivisanje tkiva (DMEM plus 5-20 vol% autogene kompozicije koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom), koji sadrži humanu de-epitelizovanu skramu amniona, dimenzija 4×4 cm, i autogenu kompoziciju koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Alternativno, može se koristiti parče autogeno aktiviranog polimera fibrina. Ovaj autogeno aktivirani polimer fibrina se dobija centrifugiranjem plazme sa kalcijum-glukonatom, u odnosu od oko 10:3 ili oko 10:10. Ovaj preparat se zatim podvrgne UV ozračivanju, tokom 10 min. Za vreme inkubacije (tipično od oko 2 do oko 3 nedelje), ove ćelije se rasprostru preko konstrukta od amniona, i formiraju monosloj. Pokretljivost i napredovanje ovog monolsloja se testira dva puta nedeljno biopsijom, sa ivice parčeta ove skrame i histološki se utvrđuje debljina monosloja.
Na dan transplantacije (npr. posle oko 3 do 4 nedelje inkubacije), po ventrikularnoj površini se razmaže autogena kompozicija koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, pa se zatim, parče dobijeno gore, donjom stranom, sa ćelijama , stavi na sirovu površinu ishemične komore, da bi se dozvolilo matičnim ćelijama na pomenutom parčetu da nasele ishemični segment, posle injekcije u komoru. Retencija ćelija se održava pomoću amniona, koji je inertan i ne izaziva imunološke reakcije.
Preparat pratećih matičnih ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, je koristan za regeneraciju srca i tretman srčane smetnje, kao preparat inženjeringa tkiva za kardiomioplaziju.
Primer 4: Autogeni preparat skupa ćelija fibroblasta
Primer autogenog skupa ćelija fibroblasta, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su dermalne ćelije fibroblasta date u koracima (d) ili (e).
Dermalni fibroblasti su izolovani i umnoženi u skladu sa sledećom procedurom: Mesec dana pre biopsije pripremi se deo kože donora (iza prednjeg dela uha, npr. oblast koja nije osunčana) tretira se kremom sa vitaminom A, da bi se aktivirali dermalni fibroblasti. Obavi se biopsija, veličine 10×6 mm, kože sa celokupnom debljinom, pa se pod mikroskopom odvoji sav epitel. Ovako epitelizovana biopsija (dermis), se zatim iseče u blokove 3×3 mm, kao eksplante. Papilarni dermis se zatim okrene nagore i kultiviše korišćenje tehnika air-lifting (Molnar et ah, 1996, above) i vazdušnog interfejsa (Metier et al, 2002, above), sa polovinom eksplanta izloženom prema vazduhu. Ovi eksplani se zatim zaseju na ploče (npr. 6 ekplanta po bazenčiću) u DMEM i kultivišu na 37°C, sa 95% kiseonika i 5% CO2, u trajanju od oko 3-5 do oko 9 dana, u Petri-evoj šolji ili balonu za kultivisanje. Medijum se menja svakih 3 dana. Tokom inkubacije je opaženo razmnožavanje fibroblasta po 2D modelu, kao planarnih monoslojeva, sa statičkim rastom. Nakon 7 do 9 dana posle početka inkubacije, dolazi do promene proliferacije i sheme fenotipa u 3D model, dodavanjem u medijum kulture, razblažene 5-20% autogene kompozicije koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom: ćelije se prevlače autogenom kompozicijom koncentrata pločica (0.2 mL po bazenčiću) samo da bi prekrile osnovu. Zatim ćelije rastu kao 3D matrica fibrinskog gela. Ćelije se zatim diferenciraju, formirajući biološki skelet ili mrežu u fibrinskom gelu. Broj ćelija se svakodnevno meri, brojanjem ispod mrežice, da se oceni apoptoza: upotrebom invertne mikroskopije (Olympus<®>).
Posle 3 do 6 nedelja inkubacije, ćelije se sakupe iz fibrinskog gela. Vitalnnost ćelija se testira klasičnom metodom Trypan-plavog i sa bakteriološkim vrednovanjem, uključujući kontaminaciju virusima. Ekstrakt ćelija ekspandiranoh fibroblasta, dobijenih gore, prebaci se u špric, u prisutvu kompozicije autogenog koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, pa se ovaj preparat injektira u bore lica, određenije, ipod bora. Injektiranje se mora obaviti preko celog lica, da se pokrije čelo, vilice, oblast kutnjaka, obrazi, brada i vrat. Razmnožavanje ćelija se može povećati izlaganjem kultue ćelija svetlosti talasne dužine 633 nm. Preparat ćelija fibroblasta, u skladu sa ovim pronalaskom, je koristan za podmlađivanje lica, ublažavanje bora na licu i izboranost, za tretman kože oštećene zračenjem (radiodermatitis ili koža opečena suncem), ostarelih koža ili opečenih koža i/ili za ublažavanje bora lica, izboranosti, akni (naročito posle tretmana dermabrazije), opekotina, ožiljaka od rubele ili velikih boginja, vitiligoa, lipoatrofije ili lipodistrofije, kao što je lipodistrofija usled AIDS; Kaposi-ev sarkom, pa keloida kože ili Dupuytrenova fibromatoze dlana i/ili u tretmanima za podmlađivanje kože.
Primer 5: Preparat autogenog skupa ćelija adipoznog i masnog tkiva
Poželjno je da se adipozno tkivo aspirira iz donjeg dela abdomena, prečisti pranjem pomoću PBS, centrifugira uz sedimentaciju, sa ciljem da se izoluje masno tkivo od triglicerida i otpadnog materijala. U međuvremenu uzme se krv i centrifugira, za dobijanje koncentrata plazme ili kompozicije PRP, u skladu sa ovim pronalaskom. Kombinovanje masnog tkiva i kompozicije PRP obavlja se u špricu, koji se upotrebljava za aspiraciju masnoće, kada su trigliceridi odvojeni, korišćenjem sterilnog uređaja za transfer, za aspiraciju kompozicije PRP. Odnos koncentrata plazme i masnog tkiva je 10:10 za lice, a 10:3 za grudi i figuru.
Poželjno je da se injektiranje nekom sisaru obavi ekstratemporano, i da je vreme dobijanja oba koncentrata ćelija, sa minimumom vremena manipulisanja ćelija exvivo.
Primer jednog skupa autogenih ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su, na primer, adipozne matične ćelije i mezenhimalne matične ćelije date u koraku (d) ili (e). Mezenhimalne matične ćelije se mogu izolovati kolagenazom (preadipociti, preendothelialne ćelije), pa staviti u suspenziju sa PRP, a preparat injektirati, uključujući subkutano, intra-artikularno, ili koristiti za ortopedsku hidrurgiju. Ovaj preparat se može kombinovati sa izluženom vanćelijskom matricom, pa se direktno aplicira na ranu, ili se može kultiivisati u laboratoriji, pre aplikacije. Adipozne matične ćelije odraslih se izoluju standarnim postupkom kultivisanja, u 5-20 vol% autogenoj kompoziciji koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Ovaj preparat se zatim injektira, pomoću aplikatora, pacijentu koji pati od defekata tkiva, kao što su post-traumatski nedostatci ili nedostatci povezani sa starošću, za pacijente koji su stari oko 40 godina. Preparat ćelija masti, u skladu sa ovim pronalaskom, je koristan u tretmanu lipoatrofije, kod pacijenata od HIV/AIDS, i drugih kongenitalnih hemiatrofija lica.
Primer 6: Preparat autogenog skupa ćelija hondrocita
Primer autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može da se dobije korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, a ćelije hondrocita date su u koraku (d) ili (e).
Hrskavica je izolovana iz kolena donora (dimenzije biopsije 10 × 5 mm) i iseckana. Ćelije hondrocita hrskavice su kultivisane 4-6 nedelja u medijumu obogaćenom sa razblaženom 5-20% kompozicijom koncentrata autogenih pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Ćelije hrskavice su zatim dobijene enzimatskom digestijom (kolagenaza i pronaza). Ovaj preparat ćelija je zatim hirurški ugrađen u pacijenta sa dubokim hondralnim defektima i oštećenjem.
Preparat ćelija hondrocita, u skladu sa ovim pronalaskom, je koristan za tretman dubokih oštećenja i erozije hrskavice ili u artroskopiji.
Sledeći primer upotrebe peparata ćelija hondrocita, u skladu sa ovim pronalaskom, je uporeba u rinoplastici bez hirurgije, procedurom jedne injekcije: za pacijenta koji pati od kongenitalne atrofije hrskavice nosa.
Dan pre injekcije, obavljena je biopsija hrskavice, dimenzija 0.4×0.4 cm i stavljena u sterilni sud napunjen sa DMEM i antibiotikom. Biopsija se treatira enzimatskom digestijom, uključujući pepsin i kolagenazu. Oslobođeni hondrociti se zatim resuspenduju autogenoj kompoziciji koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Pacijent prvo primi lokalnu anesteziju i dezinfekciju nosa. Zatim se gornji preparat hondrocita injektira po površini hrskavice i/ili po membrani periosteuma na mestu gde se zahteva povećanje zapremine ili podizanje. U drugoj fazi, injektira se autogena kompozicija koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, u površinski deo kože nosa, da bi se biostimulisala regeneracija i podmlađivanje kože. Jedan sat posle primanja injekcije pacijent može da se vrati kući. Opaženo je izuzetno obnavljanje vitalnih ćelija: količina ćelija hondrocita i ćelija plazme, obnovljenih i injektiranih, iznosila je oko 10<9>ćelija. Prema tome, preparat ćelija hondrocita u skladu sa ovim pronalaskom je koristan u tretmanu defekta nosne hrskavice, bez hirurške procedure, samo pomoću injekcije.
Primer 7: Preparat autogenog skupa matičnih ćelija pupčane vrpce
Primer autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može da se dobije korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su matične ćelije pupčane vrpce date u koraku (d) ili (e). Matične ćelije pupčane vrpce su izolovane, a zatim krio-prezervirane, pa korišćene za tretiranje krvnih poremećaja.
Preparat matičnih ćelija pupčane vrpce, u skladu sa ovim pronalaskom, je koristan za tretman hematoloških bolesti (kao što je talasemija).
Proces pre injektiranja sastoji se od resuspendovanje matičnih ćelija u koncentratu plazme, posle čega sledi injektiranje.
Primer 8: Prepatrat autogenog skupa ćelija tetive
Primer autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može da se dobije korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su ćelije tetive date u koraku (d) ili (e).
Ćelije fibroblasta su izolovane u skladu sa standardnom procedurom, u 5-20 vol% autogenoj kompoziciji koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Ćelije fibrioblasta tetive se kultivišu od oko 1 do oko 3 nedelje u medijumu za kultivisanje, obogaćenom sa autogenom kompozicijom koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Pre injekcije, ćelije se resuspenduju u sveže pripremljenom koncentratu plazme. Ovaj preparat ćelija se zatim injektira na mesto povrede pacijenta (npr. u trn tetive, artritičnu sredinu). Injekcija može da se navodi pomoću ehografije, za lokalizaciju povrđenog mesta, i bolji graft implantiranog rastvora.
Injekcija preparata ćelija fibroblasta tetive može takođe da se daje pored manžetne rotatora u ramenu: prvo se manžetna rotatora popravi artroskopski, a zatim se preparat ćelija fibroblasta tetive injektira kroz dug kateter po mestu zašivanja. Ovo ubrzava zalečenje fibroblasta tetive na ivici manžetne rotatora, sprečava hematom, u stišnjenom delu ispod akromiona, i ukočenje ramena, ubrzavanjem izlečenja, poboljšavanjem rehabilitacije i pokreta zgloba. Preparat ćelija tetive, u skladu sa ovim pronalaskom, je koristan za tretman trna tetive, artritisa zgloba, izazvanog traumama ili starenjem, manžetne rotatora ramena.
Primer 9: Preparat autogenog skupa ćelija ligamenata i gingive
Primer autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su ćelije periostealne membrane i ćelije gingive date u koraku (d) ili (e).
Pod opštom i lokalnom anestezijom, sa bukalne strane tela mandibule četiri zdrave ženke pasa, rase bigl, pod aseptičkim uslovima, uzet je periosteum (približno 10×10 mm). Uzeti periosteum je isečen na blokove 3x3 mm. Ovo tkivo je stavljeno direktno na ploču sa šest bazenčića i kultivisano (od oko 3 do oko [beta] nedelja), u vlažnoj atmosferi sa 5% CO2i 95% vazduha, na 37°C, u medijumu kulture sa 5-20% autogene kompozicije koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Ćelije periostealne membrane i gingive su izolovane enzimatskom digestijom, pa kultivisane statičnom tehnikom.
Tipično, dovoljno je 6 nedelja kultivisanja, da se dobije odgovarajuća debljina periostealne membrane za graftovanje.
Ova autogena kompozicija koncentrata pločica i preparata ćelija se posle resuspendovanja injektira pacijentu na mesto povrede.
Primer 10: Preparat autogenog skupa ćelija rožnjače
Dobijanje skupa ćelija bez rastvaranja pomoću enzima (kao što su kolagen ili tripsin), u Petri-evoj šolji obloženoj termo-senzitivnom membranom.
Primer autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su ćelije rožnjače date u koraku (d) ili (e).
Biopsija se uzme sa kožnog nabora na ivici rožnjače, a limbalne matične ćelije rožnjače se umnože autogenim transplantom iz iste osobe, posle 4 nedelje kultivisanja u Petri-evim šoljama ili balonima, obloženim sa autogenom kompozicijom koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom.
Kultivisane matične ćelije rožnjače (limbalnog porekla) mogu se ex vivo proizvesti na površini de-epitelizovanog monosloja humanog amniona, posle zasejavanja konstrukta sa suspenzijom kultivisanih i vitalnih keratinocita rožnjače, u skladu sa ovim pronalaskom. Za zasejavanje se koristi oko 500.000 ćelija, a ćelijama se dozvoli da prekriju površinu konstrukta, posle inkubacije od oko sledećih 3 nedelje. Inženjering ćelija se dešava posle oko tri nedelje kultivisanja primarnih ćelija, tako da može biti neophodno resuspendovanje. Nastali biološki konstrukt, ćelija-biokompozit, se sastoji od kolagena, vlakana amniona i keratinocita rožnjače, čineći membranu i monosloj ćelija. Preparat ćelija rožnjače, u skladu sa ovim pronalaskom, može da se nanese po rastvornim kontaktnim sočivima i aplicira na oštećenu rožnjaču. Kontaktna sočiva nestanu, a ove ćelije zatvore defekat na rožnjači. Preparat ćelija rožnjače, u skladu sa ovim pronalaskom, može se pacijentima koji pate od simptoma suvog oka ordinirati površinski kapima za oči. Alternativno, gornji amnion se može koristiti kao takav na ožiljačnoj rožnjači, ili ovaj konstrukt i preparat ćelija u skladu sa ovim pronalaskom se može naneti na unutrašnji deo bioloških ili veštačkih kontaktnih sočiva, pa zatim aplicirati na rožnjaču i prekriti oblogom za oko.
Alternativno, ćelije rožnjače se pre aplikacije resuspenduju u sveže pripremljenom koncentratu plazme.
Preparat ćelija rožnjače, u skladu sa ovim pronalaskom, je koristan za ublažavanje bola kod suvog oka, za tretman of Steven’s Johnson Sindroma i slepila rožnjače usled opekotina kiselinom i korozivnom alkalijom u industriji, i čireva rožnjače, kao što su rekalcitrantno neurotofni, herpetički i imunološki izazvani čirevi rožnjače.
Primer 11: Preparat autogenog skupa ćelija koštane srži
Primer autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su ćelije koštane srži date u koraku (d) ili (e).
Aspirira se koštana srž kuka, sakupi i centrifugira u nekom uređaju za neposrednu upotrebu, tako da se dobije koncentrat koštane srži, s tim da se odvoje crvena krvna zrnca.
Ovaj preparat koštane srži se koristi sam, ili se zatim pomeša sa koncentratom pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, ili se ponovo centrifugira sa kalcijumglukonatom, da se formira spojiva membrana, pa se uz pomoć aplikatora nanese ili injektira na povređeno mesto pacijenta. Preparat ćelija koštane srži, u skladu sa ovim pronalaskom, se koristi za tretman defekta kosti ili defekta hrskavice. Preparat ćelija koštane srži se može koristiti sam ili u kombinaciji sa koncentratom plazme, u skladu sa ovim pronalaskom. Može se koristiti sa membranom hrskavice, kao i sa kalcijum-glukonatom.
Primer 12: Preparat autogenog skupa Schwann-ovih ćelija
Primer autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su Schwann-ove ćelije date u koraku (d) ili (e).
Pod lokalnom anestezijom, biopsija se obavlja na N. safeni N. SURALIS, na jednom od donjih ekstremiteta. Biopsija nerva se iseče na male blokove, a primarno kultivisanje se obavlja u Petri-evim šoljama, obogaćenim sa autogenom kompozicijom koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom.
Monoslojevi se prošire u 3D, a ćelije se na kraju sakupe digestijom sa tripsinom i resuspenduju u sveže pripremljenom koncentratu pločica, u špricu za lokalno infiltriranje na oštećeno mesto, hirurški otvorene kičmene moždine. Pokazano je da ovako pripremjene ćelije sadrže mijelin. Preparat Schwann-ovih ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, koristan je za tretman oštećenih perifernih nerava, zašivenih nerava i povrede kičmene moždine.
Primer 13: Preparat autogenih humanih ćelija ostrvaca pankreasa
Primer autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su ćelije ostrvaca pankreasa date u koraku (d) ili (e).
Ostrvca pankreasa se sakupljaju iz otvorene biopsije, pa izdvajaju konvencionalnom enzimatskom digestijom i separacijom Ficol ili Hypaqe (Page et ah, 2007, Diba. Vas. Dis. Res., 7-12), a zatim resuspenduju u nekom medijumu obogaćenom sa autogenom kompozicijom koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom.
Ovaj preparat ćelija ostrvaca pankreasa se zatim injektira u portalnu venu jetre.
Preparat ćelija ostrvaca pankreasa, u skladu sa ovim pronalaskom, je koristan za tretman tipa I dijabetesa ili dijabetesa zavisnog od insulina i za ublažavanje hiperglikemije kod dijabetes mellitusa.
Primer 14: Preparat autogenih humanih ćelija osteoblasta
Primer autogenog skupa ćelija, u skladu sa ovim pronalaskom, može se dobiti korišćenjem procesa u skladu sa ovim pronalaskom, pri čemu su ćelije osteoblasta date u koraku (d) ili (e).
Biopsija kosti, pomoću srčanog probojca, obavi se iz ilijačne krune ili ekvivalentnog mesta (maksila), pod lokalnom anestezijom. Oni koji su verzirani u stanju tehnike za rukovanje kulturom kosti i osteoblasta ex vivo, prebace ovu biopsiju kosti pod aseptičkim uslovima u medijum DMEM, na 4°C, ili ekvivalentni transportni medijum. Ova biopsija kosti se usitni, pa digestira u 10% kolagenazi tip-1 (Sigma ili Boehringer), na 37°C, tokom 15 min, u kapeli sa laminarnim strujanjem. Alternativno, digestija se može obaviti tripsinom (Worthington). Enzimatska digestija se završava sa tri ispiranja sa autogenom 10% kompozicijom koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom, u DMEM, na 4°C. Preparat se centrifugira, peletira i resuspenduje. Fragmenti kosti se kao eksplanti zaseju na Petri-evim šoljama ili balonima, pomoću tehnologije air-lifting, u autogenoj kompoziciji koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Preparat se kultiviše na 37°C sa antibiotikom gentimicinom i amfotericinom-B, u protočnoj atmosferi, sastava 95% vazduha i 5% CO2. Medijum kulture se menja tri puta nedeljno, a svaki put u medijum DMEM se doda 10-20 vol% autogene kompozicije koncentrata pločica, u skladu sa ovim pronalaskom. Vitalnost i morfologija ćelija se ocenjuju tri puta nedeljno, da se proveri pokretljivost, apoptoza i 3-dimenziono napredovanje monosloja. Stvaranje mikrovlakana i diferencijacija se testiraju pomoću invertne mikroskopije (Olympus<®>). Proverava se odsustvo bakterijske i virusne kontaminacije. Osteoblasti se mogu obrađivati u sveže pripremljenoj autogenoj membrani polimera fibrina, dobijenoj centrifugiranjem koncentrata pločica sa kalcijum-glukonatom, u odnosu od oko 10:3 ili oko 10:10. Spoji se ovaj fibrinski polimer. Osteoblasti se mogu obrađivati na humanom amnionu, da bi nastao skelet biokompozita ćelija i monosloja ćelija nosača/konstrukta, posle zasejavanja membrane sa 100.000 gore dobijenih ćelija, čime se omogućava da se ova membrana tokom 3-4 nedelje ekspandira, dajući konstruktu osteoblast-amnion-membrana jedinstvenu konstrukciju, za prenošenje i korišćenje u pokrivanju defekta kosti ili graftovane oblasti, nakon frakture sa dislokacijom na nekom mestu. Alternativno, osteoblasti se mogu pomešati sa svežim koncentratom koštane srži i koncentratom pločica, pre injektiranja/apliciranja, i još kombinovati sa autogenim serumom trombina, ukoliko postoji potreba za mekim gelom.
Preparat ćelija osteoblasta, u skladu sa ovim pronalaskom, koristan je u tretmanu defekata kosti, graftova kosti ili poremećaja kosti.

Claims (13)

PATENTNI ZAHTEVI
1. Postupak za dobijanje kompozicije za zarastanje rana ili kompozicije za zarastanje tkiva, koji se sastoji od koraka:
a) Sakupljanja celovite krvi u jednu cev, koja sadrži hijaluronsku kiselinu i neki tiksotropni gel,
b) Centrifugiranja pomenute cevi, i
c) Sakupljanja supernatanta, koji sadrži pomenutu hijaluronsku kiselinu i plazmu obogaćenu pločicama.
2. Postupak prema Zahtevu 1, što taj postupak sadrži još i sledeći korak:
d) Mešanje pomenute hijaluronske kiseline i pomenute plazme obogaćene pločicama.
3. Postupak prema Zahtevu 1 ili Zahtevu 2, što pomenuta cev u koraku a) sadrži još i neki antikoagulant.
4. Postupak prema Zahtevu 3, što je pomenuti antikoagulant natrijum-citrat.
5. Postupak prema bilo kom od Zahteva 1 - 4, što se pomenuti korak centrifugiranja obavlja dovoljno dugo vremena da se obavi migracija hijaluronske kiseline iznad plazme obogaćene pločicama.
6. Postupak prema bilo kom od Zahteva 1 - 4, što se pomenuti korak centrifugiranja obavlja sa silom između oko 1000g, pa do oko 2000g, tokom vemena koje se bira od oko 3 min do oko 7 min.
7. Postupak prema Zahtevu 6, što se pomenuti korak centrifugiranja obavlja sa silom od oko 1500g, tokom vemena koje se bira od oko 3 min do oko 7 min.
8. Postupak prema Zahtevu 7, što se pomenuti korak centrifugiranja obavlja sa silom od oko 1500g, tokom vremena od oko 5 min.
9. Postupak prema bilo kom od Zahteva 1 - 4, što se pomenuti korak centrifugiranja obavlja dovoljno dugo vremena da crvena krvna zrnca migriraju ispod pomenutog tiksotropnog gela.
10. Cev koja sadrži hijaluronsku kiselinu i neki tiksotropni gel.
11. Cev prema Zahtevu 10, što pomenuta cev sadrži još i neki antikoagulant.
12. Cev prema Zahtevu 11, što je pomenuti tiksotropni gel smešten između pomenute hijaluronske kiseline i pomenutog antikoagulanta.
13. Komplet ili medicinsko sredstvo, koji sadrži cev prema bilo kom od Zahteva 10 do 12.
RS20170821A 2010-03-11 2011-03-11 Postupci, cev i uređaj za dobijanje kompozicije za zarastanje rana RS56189B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB201004072A GB201004072D0 (en) 2010-03-11 2010-03-11 Process, tube and device for the preparation of wound healant composition
PCT/IB2011/000684 WO2011110948A2 (en) 2010-03-11 2011-03-11 Process,tube and device for the preparation of wound healant composition
EP11719062.9A EP2544697B1 (en) 2010-03-11 2011-03-11 Process,tube and device for the preparation of wound healant composition

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56189B1 true RS56189B1 (sr) 2017-11-30

Family

ID=42261435

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170821A RS56189B1 (sr) 2010-03-11 2011-03-11 Postupci, cev i uređaj za dobijanje kompozicije za zarastanje rana

Country Status (23)

Country Link
US (6) US8945537B2 (sr)
EP (5) EP3184114B1 (sr)
JP (5) JP6076091B2 (sr)
KR (2) KR102136314B1 (sr)
CN (4) CN103079577B (sr)
AU (1) AU2011225828B2 (sr)
CA (2) CA2915649C (sr)
CY (1) CY1119255T1 (sr)
DK (1) DK2544697T3 (sr)
ES (2) ES2638537T3 (sr)
GB (1) GB201004072D0 (sr)
HR (2) HRP20171249T1 (sr)
HU (2) HUE033098T2 (sr)
IL (2) IL221133A (sr)
LT (1) LT2544697T (sr)
ME (1) ME02868B (sr)
PL (1) PL2544697T3 (sr)
PT (2) PT3184114T (sr)
RS (1) RS56189B1 (sr)
RU (2) RU2667964C1 (sr)
SI (2) SI2544697T1 (sr)
SM (1) SMT201700389T1 (sr)
WO (1) WO2011110948A2 (sr)

Families Citing this family (80)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6979307B2 (en) 1997-06-24 2005-12-27 Cascade Medical Enterprises Llc Systems and methods for preparing autologous fibrin glue
WO2008022651A1 (en) 2006-08-21 2008-02-28 Antoine Turzi Process and device for the preparation of platelet rich plasma for extemporaneous use and combination thereof with skin and bone cells
GB201118586D0 (en) * 2011-10-27 2011-12-07 Turzi Antoine New A-PRP medical device, manufacturing machine and process
EP2806914B1 (en) 2012-01-23 2021-09-22 Estar Technologies Ltd A system and method for obtaining a cellular sample enriched with defined cells such as platelet rich plasma(prp)
WO2014052496A1 (en) * 2012-09-25 2014-04-03 Stem Cell Partners Llc Method and apparatus for preparing single donor thrombin serum
US10166009B2 (en) 2012-11-20 2019-01-01 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Medical apparatus and method for collecting biological samples
US10016459B1 (en) 2013-03-13 2018-07-10 BioDlogics, LLC Platelet-rich plasma derived from human umbilical cord blood
CN103543279B (zh) * 2013-09-22 2015-05-13 冯晓均 一种便携式血液定量检测装置
US10874152B2 (en) 2014-05-01 2020-12-29 Legionarius, Llc Wearable device for reducing fluid loss
GB201421013D0 (en) * 2014-11-26 2015-01-07 Turzi Antoine New standardizations & medical devices for the preparation of platelet rich plasma (PRP) or bone marrow centrate (BMC)
JP6768676B2 (ja) * 2015-01-22 2020-10-21 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 多血小板血漿および骨髄穿刺液細胞分離および除去方法および装置
US9931436B2 (en) * 2015-02-02 2018-04-03 Kerastem Technologies LLC Methods and devices to stimulate the follicular niche using adipose derived regenerative cells and adipose tissue
JP6875619B2 (ja) * 2015-02-26 2021-05-26 株式会社細胞応用技術研究所 多血小板血漿の保存方法
CN105708478A (zh) * 2015-04-20 2016-06-29 李彦清 富含血小板血浆融合玻尿酸prp&ha血液采集制备管
EP3092987A1 (de) * 2015-05-11 2016-11-16 3M Innovative Properties Company System zur wundbehandlung mit serum
KR102517749B1 (ko) * 2015-07-30 2023-04-05 주식회사 휴림바이오셀 백반증 치료용 약학 제제
EP3132809A1 (en) * 2015-08-21 2017-02-22 Bioskinco GmbH Composition and products comprising senescent cells for use in tissue regeneration
CN105193847A (zh) * 2015-09-15 2015-12-30 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 一种含有脂肪干细胞的凝胶制剂及其制备方法和医用敷料
KR101749932B1 (ko) * 2015-09-25 2017-06-23 주식회사 엔바이오텍 지방조직 유래 기질혈관분획 분리용 키트 및 이를 이용한 지방조직 유래 기질혈관분획의 분리 방법
US10420802B2 (en) 2015-12-10 2019-09-24 Aesthetics Biomedical, Inc. Topical formulation for skin care
EP3400029B1 (en) * 2016-01-07 2022-03-02 Eio Biomedical Ltd Compositions for reducing tissue adhesions
US10596236B2 (en) 2016-03-10 2020-03-24 Arthrex, Inc. Systems and methods for preparing a thrombin serum
US10960026B2 (en) 2016-03-10 2021-03-30 Arthrex, Inc. Systems and methods for preparing protein enhanced serums
RU2626691C1 (ru) * 2016-08-19 2017-07-31 Общество с ограниченной ответственностью "Плазмолифтинг ТМ" Способ изготовления барьерной мембраны для предотвращения прорастания слизистых тканей в зону формирования кости при челюстно-лицевых операциях
EP3504320A4 (en) * 2016-08-29 2020-04-15 Hackensack University Medical Center Compositions and methods for programming adult cells with platelet rich fraction of blood containing platelet-like cells
CN106404483A (zh) * 2016-08-31 2017-02-15 上海科华生物工程股份有限公司 一种血清的制备方法
RU2762607C2 (ru) 2016-09-13 2021-12-21 Аллерган, Инк. Стабилизированные небелковые композиции клостридиального токсина
CN106265741A (zh) * 2016-10-11 2017-01-04 青岛大学 一种促进皮肤伤口愈合的生物制剂
CN106729955A (zh) * 2016-11-28 2017-05-31 广州军区广州总医院 一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法
RU2629527C1 (ru) * 2016-12-07 2017-08-29 Юлия Николаевна Быкова Способ коррекции возрастных изменений мягких тканей лица и/или тела
EP3558326A1 (en) * 2016-12-22 2019-10-30 Omrix Biopharmaceuticals Ltd. Hemostatic composition comprising an anion exchanger and a calcium salt
CN110520045A (zh) * 2017-02-03 2019-11-29 斯特里克公司 带防腐剂的采样管
CN107412878B (zh) * 2017-08-07 2018-04-24 上海交通大学医学院附属第九人民医院 复合纤维支架及其制备方法
US11173992B2 (en) 2017-12-28 2021-11-16 Legionarus, Llc Buoyancy garment
CN108187141A (zh) * 2018-01-31 2018-06-22 广州沙艾生物科技有限公司 一种心脏肌球衍生细胞在生物材料中的应用
CN112118849A (zh) 2018-02-06 2020-12-22 瑞珍实验室 交联透明质酸及与prp/bmc的组合
RU2682763C1 (ru) * 2018-04-12 2019-03-21 Санкт-Петербургское Государственное Бюджетное Учреждение Здравоохранения "Кожно-Венерологический Диспансер N4" (Спб Гбуз Квд N4) Способ лечения андрогенетической алопеции
RU2700258C1 (ru) * 2018-05-08 2019-09-13 Федеральное Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования Дагестанский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ стимуляции регенерации мышечных ветвей лицевого нерва в эксперименте
JP2021534231A (ja) * 2018-08-07 2021-12-09 アイフィックス メディカル プロプライアタリー リミティド 血小板溶解物組成物およびその使用
US11638918B2 (en) * 2018-08-23 2023-05-02 Truvian Sciences, Inc. Blood plasma separation device
CN111068117A (zh) * 2018-10-18 2020-04-28 鲁峰 脂肪萃取液、脂肪脱细胞基质及其制备方法、应用
US20220008518A1 (en) * 2018-11-08 2022-01-13 The Schepens Eye Research Institute, Inc. Therapeutic approaches for tissue reconstruction and wound healing treatment
PL3880217T3 (pl) * 2018-11-14 2024-05-20 Onderzoeks en Ontwikkelingsfonds Rode Kruis-Vlaanderen Sposoby otrzymywania materiału uwalnianego z płytek krwi
US11471112B2 (en) 2018-11-21 2022-10-18 Legionarius, Llc Mobile application for wearable device
US12440835B2 (en) 2019-01-21 2025-10-14 Vias Partners, Llc Methods, systems and apparatus for separating components of a biological sample
US20220096562A1 (en) * 2019-02-08 2022-03-31 Regrow Biosciences Private Limited Osteoblast cell-mixture, and implementations thereof
WO2020168085A2 (en) * 2019-02-13 2020-08-20 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Medical apparatus and method for collection and preparation of biological samples
USD905935S1 (en) 2019-02-20 2020-12-29 Legionarius, Llc Shirt with back pocket
US12478324B2 (en) 2019-02-20 2025-11-25 Legionarius, Llc Sensors for wearable devices
CN112107723B (zh) * 2019-06-20 2021-10-12 重庆医科大学附属口腔医院 医用水性黏胶及其使用方法
TR201908181A2 (tr) * 2019-05-29 2020-12-21 Univ Istanbul Rektoerluegue Trombosi̇t konsantresi̇ i̇le vi̇tami̇n/mi̇neral i̇laç/hormon/enzi̇m/bi̇yomateryal bi̇leşi̇mi̇ni̇n eldesi̇
US20220241154A1 (en) * 2019-07-22 2022-08-04 Aquavit Pharmaceuticals, Inc. System and method for dual-function syringe design compounding device for personalized treatments
GB2601672A (en) * 2019-07-26 2022-06-08 Pandorum Tech Private Limited Bio-ink formulations, bio-printed corneal lenticule, and applications thereof
CN112516410A (zh) * 2019-09-18 2021-03-19 天津大学 一种具有可调节止血—抗凝功能的智能留置针及其制备方法和应用
WO2021087222A1 (en) 2019-10-31 2021-05-06 Eclipse Medcorp, Llc Systems, methods and apparatus for separating components of a sample
IT201900022947A1 (it) * 2019-12-04 2021-06-04 Prometheus Srl Contenitore di separazione, dispositivo adattatore per postazioni di centrifuga, dispositivo di produzione di una medicazione comprendente plasma arricchito di piastrine, metodo di produzione manuale di plasma arricchito di piastrine e metodo di produzione manuale di detta medicazione
EP3875074A1 (en) 2020-03-05 2021-09-08 Novystem S.p.A. Blood preparation useful for wound healing and tissue regeneration
US11499124B2 (en) 2020-03-13 2022-11-15 YFY Consumer Products, Co. Solid granules used for cleaning agents
GB2593712A (en) * 2020-03-30 2021-10-06 Regen Lab Sa Viral infections - treatment with convalescent plasma /serum
CN111468204A (zh) * 2020-06-08 2020-07-31 珠海朗泰生物科技有限公司 一种可控组分的富血小板血浆制备管及其制备方法
EP4168001B1 (en) * 2020-06-19 2025-07-30 The Board of Trustees of the Leland Stanford Junior University An inhibitor of the activator protein 1 (ap-1) for preventing and treating adhesions
RU2749633C1 (ru) * 2020-07-09 2021-06-16 Общество с ограниченной ответственностью "ГЕМОДЖЕНИКС" Система для лиофилизации, хранения и использования биологического материала
RU2743609C1 (ru) * 2020-08-06 2021-02-20 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное предприятие Биотех-М" Сдвоенный контейнер для гемокомпонентов и способ его применения
WO2022077320A1 (en) * 2020-10-15 2022-04-21 Kartigen Biomedical Inc. Kit for isolation of platelet-rich plasma and the method using the same
RU2755347C1 (ru) * 2020-12-11 2021-09-15 Денис Григорьевич Кайгородов Композиция для коррекции возрастных изменений кожи и способ ее получения
CN112569343A (zh) * 2020-12-22 2021-03-30 北京唐颐惠康生物医学技术有限公司 一种用于治疗脱发的复合物及其制备方法
AU2022299561B2 (en) * 2021-06-25 2025-02-13 Regen Lab Sa Preparation method and container for a topical wound healing gel
CN113546218A (zh) * 2021-07-21 2021-10-26 南昌大学第二附属医院 用于不同组织再生的prp凝胶组织工程复合物原位构建的方法与配方
AU2022339610A1 (en) * 2021-08-31 2024-02-29 Board Of Regents, The University Of Texas System Compositions and methods for treating bone injuries
EP4419254A1 (en) 2021-10-19 2024-08-28 T-Biyoteknoloji Laboratuvar Estetik Medikal Kozmetik San. ve Tic. Ltd. Sti. A tube for advanced method of obtaining platelet rich fibrin
IL289281B2 (en) * 2021-12-22 2023-06-01 Reddress Ltd Method and kit for the treatment of damaged connective tissues
CN114515610B (zh) * 2022-03-16 2024-01-19 山东省科学院能源研究所 一种离心管及其在提取蛋白肽和聚谷氨酸方面的应用
WO2023201283A2 (en) * 2022-04-13 2023-10-19 The Regents Of The University Of California Methods of producing plasma or serum and uses thereof
EP4356731A1 (en) 2022-10-19 2024-04-24 Olga Alekseevna Gra Medium and device for collecting, storing and transporting biological samples, as well as their use for the stabilization of extracellular nucleic acids
CN116350837B (zh) * 2022-12-02 2025-02-18 浙江大学 一种搭载纳米血小板囊泡的生物凝胶及其制备方法和应用
GB202219505D0 (en) 2022-12-22 2023-02-08 Turzi Antoine Medical composition
KR20250014433A (ko) * 2023-07-20 2025-02-03 주식회사 테라시온 바이오메디칼 지혈용 조성물 및 이를 포함하는 지혈용 키트
WO2025073913A1 (en) 2023-10-05 2025-04-10 Regen Lab Sa Composition comprising extracellular vesicles, and the preparation thereof
GB202320146D0 (en) 2023-12-29 2024-02-14 Hyspinlab Sa Silk biomaterials
CN118831042A (zh) * 2024-06-27 2024-10-25 广西科技大学第一附属医院 一种自体富血小板凝胶的制备方法及应用

Family Cites Families (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3852194A (en) 1972-12-11 1974-12-03 Corning Glass Works Apparatus and method for fluid collection and partitioning
JPS49137392U (sr) * 1973-03-23 1974-11-26
US4101422A (en) 1977-05-11 1978-07-18 Emery Industries, Inc. Copolyesters useful in blood separation assemblies
US4350593A (en) 1977-12-19 1982-09-21 Becton, Dickinson And Company Assembly, compositions and method for separating blood
US4190535A (en) 1978-02-27 1980-02-26 Corning Glass Works Means for separating lymphocytes and monocytes from anticoagulated blood
JPS5640451A (en) * 1979-09-11 1981-04-16 Terumo Corp Liquid separating agent
US4267269A (en) 1980-02-05 1981-05-12 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Red cell storage solution
US4752449A (en) 1982-10-15 1988-06-21 Hemotec, Inc. Apparatus for coagulation detection by gas flow or plunger sensing techniques
US4599219A (en) 1982-10-15 1986-07-08 Hemotec, Inc. Coagulation detection by plunger sensing technique
US4946601A (en) * 1988-08-22 1990-08-07 Sherwood Medical Company Blood serum separator tube
US5174961A (en) 1991-01-18 1992-12-29 Hemotec, Inc. High sensitivity coagulation detection apparatus
US5236604A (en) 1991-05-29 1993-08-17 Sherwood Medical Company Serum separation blood collection tube and the method of using thereof
SE9101853D0 (sv) * 1991-06-17 1991-06-17 Jonas Wadstroem Improved tissue ashesive
JPH05157747A (ja) * 1991-12-06 1993-06-25 Nissho Corp 採血管
US5494590A (en) * 1992-06-11 1996-02-27 Becton Dickinson Method of using anticoagulant solution in blood separation
JP3260219B2 (ja) * 1992-11-12 2002-02-25 日本ペイント株式会社 血清分離用シーラント
US5589167A (en) 1993-02-23 1996-12-31 Genentech, Inc. Excipient stabilization of polypeptides treated with organic solvents
CN1046036C (zh) * 1993-06-09 1999-10-27 中国科学院大连化学物理研究所 一种血清分离胶
US5455009A (en) * 1993-09-14 1995-10-03 Becton, Dickinson And Company Blood collection assembly including clot-accelerating plastic insert
US5891617A (en) 1993-09-15 1999-04-06 Organogenesis Inc. Cryopreservation of harvested skin and cultured skin or cornea equivalents by slow freezing
US5560830A (en) 1994-12-13 1996-10-01 Coleman; Charles M. Separator float and tubular body for blood collection and separation and method of use thereof
US5906744A (en) 1997-04-30 1999-05-25 Becton Dickinson And Company Tube for preparing a plasma specimen for diagnostic assays and method of making thereof
US6979307B2 (en) * 1997-06-24 2005-12-27 Cascade Medical Enterprises Llc Systems and methods for preparing autologous fibrin glue
JPH1164330A (ja) * 1997-08-22 1999-03-05 Mitsubishi Materials Corp ゲル状血液分離材および血液分離器
JP2000000228A (ja) * 1998-06-12 2000-01-07 Terumo Corp 採血管
AU768543B2 (en) * 1998-06-22 2003-12-18 Nuo Therapeutics, Inc. Improved enriched platelet wound healant
JP2000237294A (ja) * 1999-02-18 2000-09-05 Denki Kagaku Kogyo Kk ヒアルロン酸ゲルを含有する医用材料
US6472162B1 (en) * 1999-06-04 2002-10-29 Thermogenesis Corp. Method for preparing thrombin for use in a biological glue
RU2195262C2 (ru) * 1999-08-13 2002-12-27 Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Фармакологическое средство на основе гиалуроновой кислоты, обладающее антимикробным, ранозаживляющим и противовоспалительным действием
US20020187130A1 (en) 2001-01-23 2002-12-12 George Kindness Adjuvant immune therapy in the treatment of solid tumors through modulation of signaling pathways following engagement of humoral and cell mediated responses
US20030152639A1 (en) 2001-07-03 2003-08-14 Calvin Britton Novel wound healing composition not containing bovine-derived activating reagents
US7456025B2 (en) * 2001-08-28 2008-11-25 Porex Corporation Sintered polymer membrane for analyte detection device
EP1464697B1 (en) * 2002-01-09 2011-06-08 Alberto Gorrochategui Barrueta COMPOSITION for CREATING, REGENERATING AND REPAIRING TISSUES USING A CELL-CARRYING BIOLOGICAL IMPLANT WHICH IS ENRICHED WITH A PLATELET CONCENTRATE AND SUPPLEMENTS
CZ12015U1 (cs) * 2002-01-18 2002-02-25 Cpn Spol. S R.O. Přípravek pro prevenci adheze bandáľe na ránu
EP1547606A4 (en) * 2002-08-02 2006-07-12 Emi Sumida PROCESS FOR PREPARING PLASMA RICH IN PLATELETS
US6913932B2 (en) * 2002-08-23 2005-07-05 Beckman Coulter, Inc. Formaldehyde-ammonium salt complexes for the stabilization of blood cells
US20040120942A1 (en) * 2002-12-23 2004-06-24 Mcginnis Daniel Device and process for the preparation of autologous thrombin serum
JP4525173B2 (ja) * 2003-05-21 2010-08-18 株式会社ジェイ・エム・エス 血清調製装置
DE60328899D1 (de) 2003-12-18 2009-10-01 Antoine Turzi Bioresorbierbares vernetztes Hydrogel bestehend aus Albumin
CH696752A5 (fr) 2004-04-27 2007-11-30 Antoine Turzi Dispositif et procédé pour la préparation d'un concentré plaquettaire autologue.
ITRM20040638A1 (it) * 2004-12-24 2005-03-24 Advance Holdings Ltd Gel piastrinico semisintetico e metodo per la sua preparazione.
JPWO2006123579A1 (ja) * 2005-05-17 2008-12-25 国立大学法人名古屋大学 骨組織形成用細胞の調製方法、及び骨組織形成用細胞の利用
JP2007108065A (ja) * 2005-10-14 2007-04-26 Tama Tlo Kk 濃度測定具および濃度測定方法
CA2529905A1 (en) * 2005-12-12 2007-06-12 Astley E. Smith Autologous activated platelets
JP2007167124A (ja) * 2005-12-19 2007-07-05 Fujifilm Corp 真空採血管
KR101457231B1 (ko) * 2006-04-19 2014-11-12 고쿠리츠 다이가쿠 호우징 나고야 다이가쿠 치주 연조직 재생용 조성물 및 그 제조 방법
KR101209625B1 (ko) * 2006-05-25 2012-12-07 세키스이가가쿠 고교가부시키가이샤 혈청 또는 혈장 분리용 조성물 및 혈액 검사용 용기
WO2008022651A1 (en) * 2006-08-21 2008-02-28 Antoine Turzi Process and device for the preparation of platelet rich plasma for extemporaneous use and combination thereof with skin and bone cells
ES2333498B1 (es) * 2007-08-02 2011-01-10 Biotechnology Institute, I Mas D, S.L. Metodo y compuesto para el tratamiento de enfermedades o dolencias articulares o para el tratamiento de la piel con fines esteticos u otros, y el metodo de preparacion del compuesto.
JP2009235004A (ja) * 2008-03-27 2009-10-15 J Hewitt Kk 細胞組織増加促進方法及び肌問題改善方法並びにこれらに用いるキット
US20100196497A1 (en) * 2009-02-02 2010-08-05 Therapy Products, Inc. Method of Treating Tissue Using Platelet-Rich Plasma in Combination with Low-Level Laser Therapy
CN101659939A (zh) * 2009-09-28 2010-03-03 成都瑞琦科技实业有限责任公司 单核细胞分离方法

Also Published As

Publication number Publication date
PT2544697T (pt) 2017-08-29
US12102668B2 (en) 2024-10-01
JP2013522186A (ja) 2013-06-13
LT2544697T (lt) 2017-09-11
PL2544697T3 (pl) 2017-12-29
RU2012143493A (ru) 2014-04-20
CA2915649A1 (en) 2011-09-15
EP3184114A1 (en) 2017-06-28
EP3403659B1 (en) 2022-04-27
US8945537B2 (en) 2015-02-03
KR20180127538A (ko) 2018-11-28
HUE043138T2 (hu) 2019-08-28
IL221133A (en) 2017-05-29
SI3184114T1 (sl) 2019-08-30
ES2638537T3 (es) 2017-10-23
US9517255B2 (en) 2016-12-13
JP2015232028A (ja) 2015-12-24
EP2544697B1 (en) 2017-05-24
CY1119255T1 (el) 2018-02-14
JP2017149786A (ja) 2017-08-31
EP3854406B1 (en) 2023-07-26
JP2017061538A (ja) 2017-03-30
US20180153969A1 (en) 2018-06-07
EP4241856A2 (en) 2023-09-13
US20240415941A1 (en) 2024-12-19
RU2614722C2 (ru) 2017-03-28
EP3854406A1 (en) 2021-07-28
KR20130067247A (ko) 2013-06-21
JP6359495B2 (ja) 2018-07-18
HUE033098T2 (en) 2017-11-28
CA2789533C (en) 2016-01-19
US20170087228A1 (en) 2017-03-30
HRP20190517T1 (hr) 2019-06-14
JP6892485B2 (ja) 2021-06-23
US10226516B2 (en) 2019-03-12
IL252122B (en) 2020-06-30
RU2667964C1 (ru) 2018-09-25
IL252122A0 (en) 2017-07-31
US20190201504A1 (en) 2019-07-04
CN112220802A (zh) 2021-01-15
CN103079577B (zh) 2016-08-03
SMT201700389T1 (it) 2017-09-07
AU2011225828A1 (en) 2012-11-08
CA2789533A1 (en) 2011-09-15
EP3184114B1 (en) 2018-10-31
CN103079577A (zh) 2013-05-01
CN115624569A (zh) 2023-01-20
US10272139B2 (en) 2019-04-30
AU2011225828B2 (en) 2015-07-16
CA2915649C (en) 2021-10-12
JP6588499B2 (ja) 2019-10-09
JP2019206594A (ja) 2019-12-05
GB201004072D0 (en) 2010-04-28
WO2011110948A2 (en) 2011-09-15
HRP20171249T1 (hr) 2017-10-20
PT3184114T (pt) 2019-03-19
SI2544697T1 (sl) 2017-10-30
DK2544697T3 (en) 2017-09-11
EP2544697A2 (en) 2013-01-16
US20130058906A1 (en) 2013-03-07
ES2961589T3 (es) 2024-03-12
US20150125436A1 (en) 2015-05-07
ME02868B (me) 2018-04-20
JP6076091B2 (ja) 2017-02-08
EP4241856A3 (en) 2023-10-18
WO2011110948A3 (en) 2012-03-22
KR101922538B1 (ko) 2019-02-20
JP6321119B2 (ja) 2018-05-09
EP3403659A1 (en) 2018-11-21
CN105998067A (zh) 2016-10-12
KR102136314B1 (ko) 2020-07-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20240415941A1 (en) Process, Tube And Device For The Preparation Of Wound Healant Composition
AU2013203115B2 (en) Process,tube and device for the preparation of wound healant composition
HK40096177A (en) Tube for the preparation of wound healant composition
HK40050052A (en) Tube for the preparation of wound healant composition
HK1179507A (en) Process, tube and device for the preparation of wound healant composition
HK1179507B (en) Process, tube and device for the preparation of wound healant composition