RU2682763C1 - Способ лечения андрогенетической алопеции - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, трихологии и косметологии. Осуществляют забор крови путем венопункции в стерильную вакуумную пробирку с антикоагулянтом при их соотношении 10:1. Первое центрифугирование пробирки проводят не менее 5 минут при 1800 об/мин. Затем из пробирки шприцом 5 мл с иглой не более 18G забирают плазму, лейкоцитарный слой и верхнюю часть эритроцитарного слоя. Переносят эту смесь в другую вакуумную стерильную пробирку, которую затем центрифугируют не менее 8 минут при 2500 об/мин. После этого иглой не более 18G, помещенной нижним концом среза в слой плазмы на 1 мм выше лейкоцитарной пленки, забирают 2 мл плазмы в шприц для инъекций объемом 2-3 мл, содержащим 0,1 мл 10% раствора хлористого кальция в соотношении хлористый кальций: плазма 1:20. Осуществляют последующее суспендирование вручную путем переворачивания шприца не менее 10 раз. Полученную аутологичную активированную, обогащенную тромбоцитами плазму линейной ретроградной техникой вводят в виде инъекций по всей поверхности алопеции на уровне нижних слоев дермы по 0.15 мл на одну инъекцию. Такие инъекции осуществляют 1 раз в месяц в течение 4 месяцев с возможностью повторения аналогичного курса лечения в случае рецидива. Способ обеспечивает высокий и быстрый результативный эффект по показателям плотности волос, толщины стержней волос и интенсивности выпадения волос с сохранением клинического результата до 16 месяцев. 2 ил., 1 табл., 2 пр.

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, трихологии, косметологии, и может найти применение при лечении андрогенетической алопеции.

Андрогенетическая алопеция (АГА) является наиболее распространенным типом потери волос и поражает до 80% мужчин и 40% женщин. Уменьшение длины волос и диаметра волос, а также снижение плотности волос на скальпе является результатом комбинации изменения в цикле роста волос (преждевременное начало фазы катагена и постепенное сокращение продолжительности фазы анагена) и миниатюризации фолликулов. В ходе развития облысения относительный вклад этих двух компонентов варьирует между пациентами.

В патогенезе АГА основную роль отводят андроген-конвертирующему ферменту 5а-редуктазе, катализирующему превращение тестостерона в более активную форму - 5 альфа-дигидротестостерон. В присутствии дигидротестостерона рецепторы андрогенов претерпевают конформационные изменения, в результате чего образуется "активированный комплекс". Этот комплекс гормон-рецептор после взаимодействия с ядерным акцептором переходит в клеточное ядро и связывается со специфическими рецепторами ядерного хроматина. Активируется экспрессия специфичных генов, запускается глобальный процесс изменения первичной морфологии и физиологии волосяного фолликула, в котором реализуется андрогенный эффект.

Результатом реализации патогенетических механизмов АГА является прогрессирующее истончение стержней волос до состояния веллуса и миниатюризация волосяных фолликулов вплоть до полной потери волосяного покрова в андроген-зависимых зонах волосистой части головы.

Являясь выраженным косметическим дефектом, АГА создает ряд социальных (ограничение выбора профессии, устройство личной жизни и т.п.) и экономических (большие затраты на лечение) проблем. Кроме того, облысение оказывает влияние на психоэмоциональное состояние человека, что существенно снижает качество жизни. Некоторые авторы считают, что данный процесс является нормальным биологическим явлением, а не заболеванием. Независимо от того, как классифицируется их состояние, люди, имеющие АГА, воспринимают ее как отклонение от нормы, явлением, неприемлемым с психосоциальной точки зрения, и, следовательно, обращаются к врачу для получения лечения.

Несмотря на высокую распространенность АГА, первые Европейские рекомендации по ее лечению были разработаны только в 2011 году.

Миноксидил для наружного применения является препаратом первой линии для лечения АГА во многих странах и входит в стандарт оказания медицинской помощи пациентам с АГА в Российской Федерации. Миноксидил продлевает стадию анагена (роста волоса), увеличивает размер волосяного фолликула путем активации калиевых каналов и простагландин эндопероксидсинтазы-1, повышающей уровень простагландина Е2 (PGE2). Препарат имеет ряд существенных недостатков: отсутствие желаемой для пациента эффективности лечения, наличие побочных действий, необходимость постоянного использования, выраженный симптом отмены, неэффективность в случае миноксидил-резистентности пациента.

Для специфического системного лечения андрогенетического облысения у мужчин в Европейских Рекомендациях прописан один из самых сильных ингибиторов 5а-редуктазы с доказанной эффективностью при АГА, блокирующий превращение тестостерона в дигидротестостерон на уровне органов-мишеней - финастерид в дозе 1 мг в день. Антиандрогенная терапия способствует остановке выпадения волос, улучшению качества волос. Недостатками является отсутствие восстановления густоты волос, наличие противопоказаний и побочных действий. Финастерид зарегистрирован на территории Российской Федерации как препарат для применения в урологии и андрологии в дозировке 5 мг, финастерид (в рекомендуемой дозе 1 мг) для лечения АГА в России не применяется.

При выраженном облысении методом выбора является хирургическая коррекция, которая состоит в пересадке андроген-резистентных фолликулов в зону алопеции, с кожи участков головы, не затронутых облысением, чтобы полностью или частично покрыть облысевшие участки головы. Пересадка волос весьма успешный метод лечения, но сопряжен с множеством различных аспектов: страхом пациента перед хирургическим вмешательством и связанным с ним рисками, его высокой стоимостью, необходимостью продолжения применения медикаментов, предотвращающих выпадение сохранившихся андроген-чувствительных волос. По нашим наблюдениям, пациенты, особенно те, кто находятся на ранних стадиях облысения, предпочитают консервативную медикаментозную терапию, нежели хирургическое вмешательство.

Количество исследований, доказывающих положительный эффект других препаратов и методик, весьма немногочисленны, как и количество достоверных данных и доказательств, свидетельствующих о том, что они улучшают состояние волос при АГА или предотвращают ее прогрессирование. Оставленное без лечения облысение неуклонно прогрессирует. Терапию необходимо проводить длительное время, прекращение лечения приводит к возобновлению выпадения волос. Наиболее эффективное лечение АГА возможно на ранней стадии заболевания (до замещения длинных волос пушковыми). Медикаментозное лечение преследует 2 цели, одно из них - увеличить площадь оволосения кожи головы в случае ее уменьшения с течением АГА, второе - остановить прогрессирующее истончение и/или выпадение волос.

Лечение АГА на современном этапе имеет ряд недостатков, связанных с противопоказаниями к применению, побочными действиями, необходимостью пожизненного применения системных и топических препаратов, отсутствие ожидаемых пациентом результатов лечения, страхом пациентов перед хирургическим лечением и сопряженными с ним рисками и до сегодняшнего дня остается одной из актуальных проблем дерматологии.

В настоящее время в комплексном лечении АГА используются инъекционные методы. В качестве одного из таких методов обсуждается терапия плазмой, обогащенной тромбоцитами (Platelet Rich Plasma, PRP).

Настоящее изобретение касается решения проблемы АГА именно с использованием PRP.

PRP - это аутологичная плазма с более высокой, чем в цельной крови, концентрацией тромбоцитов, получаемая путем центрифугирования собственной крови пациента, в ходе которого разделение форменных элементов крови происходит за счет их различия в весе. Клинические и молекулярно-биологические эффекты PRP исследуются с 1970-х годов, а метод используется во многих областях медицины, таких как травматология и ортопедия, челюстно-лицевая хирургия, пластическая хирургия, дерматология.

До 2011 года в литературе можно было найти лишь единичные публикации о применении PRP при лечении алопеций, относящиеся к пилотным исследованиям. С 2011 года количество исследований, в том числе рандомизированных, плацебо-контролируемых, в ходе которых были получены данные, подтверждающих положительное влияние инъекций PRP на рост волос и их морфометрические параметры при АГА, возросло.

Основной клинический эффект, полученный в ходе исследований, проявлялся в снижении выпадения волос и увеличении плотности волос. Однако, как отмечено в публикациях, получаемый эффект во многом зависит от способа приготовления PRP, количества процедур с ее использованием и интервала между ними. Отличны и методы оценки получаемых результатов.

Традиционно процедура PRP-терапии состоит из нескольких этапов: забор крови у пациента, ее центрифугирование, последующее активирование плазмы и введение ее пациенту.

Ключевым моментом на всех стадиях приготовления PRP является сохранение целостности и жизнеспособности тромбоцитов, поскольку центрифугирование крови при больших оборотах является травматичным и тромбоциты при этом могут подвергаться механическому разрушению. В процессе активации тромбоциты проходят стадию дегранулирования с высвобождением факторов роста и других биоактивных веществ в окружающее межклеточное пространство. Большинство факторов роста, хранящихся в тромбоцитах в неактивном состоянии, взаимодействуют с определенными структурами на клеточной мембране, в результате чего тромбоциты трансформируются в активную форму и становятся биодоступными. Если же тромбоцит грубо разрушен неадекватной технологией приготовления препарата, то в окружающую среду попадают неактивные субстанции, а это значит, что и ожидаемого клинического эффекта не будет. При возрастании скорости центрифугирования морфологические изменения и реакционная способность тромбоцитов, характеризующие их способность к активации, уменьшаются.

Тромбоциты содержат различные факторы роста, основными мишенями которых являются клетки кровеносных сосудов, фибробласты, стволовые мезенхимальные клетки, «направляемые» на путь дифференцировки для пополнения пула функционально активных клеток. Взаимосвязь репаративной и гемостатической функций тромбоцитов обеспечивает формирование новой кожной ткани в процессе заживления ран и структурные изменения ткани, выражающиеся в клеточном росте, дифференцировке клеток, росте кровеносных сосудов, что является основными эффектами в ответ на инъекционное введение PRP.

Заключительная стадия в приготовлении препарата - это активация тромбоцитов с последующей дегрануляцией биоактивных веществ. В естественных условиях активация тромбоцитов происходит под действием тромбина после их прикрепления к фибриновому сгустку. Во многих коммерческих технологиях получения PRP, применяемых в трихологии и косметологии, вариант получения фибринового матрикса, на котором адсорбируются активирующиеся тромбоциты (они в свою очередь будут служить источником факторов роста и других биоактивных веществ), заключается в добавлении к PRP кальция глюконата или кальция хлорида. Ионы кальция стимулируют высвобождение из тромбоцитов собственного фибрина со всеми вытекающими последствиями - формирование фибринового геля, адсорбирование на нем тромбоцитов, их активация и дегрануляция. Физиологическая концентрация тромбоцитов в крови находится в пределах 150-300 тыс./мкл цельной крови. В PRP эта концентрация возрастает от 2 до 9 раз, причем эта цифра варьирует в зависимости от технологии приготовления препарата. Имеет значение первоначальный объем цельной крови, однократное или двукратное центрифугирование крови, количество оборотов центрифуги, изначальное содержание тромбоцитов в цельной крови.

В настоящее время в мировой медицинской практике известны 4 базовых варианта приготовления PRP.

1. С применением однократного центрифугирования и предполагает активирование тромбоцитов естественным путем под действием тромбина с низким количеством высвобождаемых факторов роста и других биоактивных веществ. В этом случае количество тромбоцитов в плазме повышается не более чем в 2-2,5 раза.

2. С применением однократного центрифугирования с активацией тромбоцитов путем добавления ионов кальция, предполагающего большее количество высвобождаемых факторов роста и других биоактивных веществ, чем в варианте п. 1. Количество же тромбоцитов в плазме также повышается не более чем в 2-2,5 раза.

3. С применением двукратного центрифугирования, увеличивающего количество тромбоцитов в 5 и более раз, и предполагает активирование тромбоцитов естественным путем под действием тромбина.

Изделия медицинского назначения для получения PRP по первым трем вариантам зарегистрированы на территории РФ и используются в челюстно-лицевой хирургии, травматологии и косметологии.

4. С применением двукратного центрифугирования с активацией путем добавления ионов кальция.

По технической сущности и достигаемому результату лечения АГА с использованием PRP, получаемой по данному методу, наиболее близким к предлагаемому является изделие медицинского назначения для приготовления обогащенной плазмы «GLO PRP», который взят нами в качестве прототипа. Изделие медицинского назначения для возможности получения PRP данным способом (GLO PRP, Корея) зарегистрировано и разрешено к применению в медицинской практике на территории Республики Казахстан, но недоступно на территории РФ (Рег. Удостоверение РК-ИМН-5 №011357 от 03.05.2013)

По прототипу приготовление PRP осуществляется следующим образом: в шприц объемом 10 мл, содержащий антикоагулянт - 3,8% раствор цитрата натрия 1,5 мл - путем венопункции и применения «иглы-бабочки» отбирается кровь у пациента в количестве 8,5 мл, перемешивается. Соотношение антикоагулянт : кровь приблизительно 1:5,5. Для возможности центрифугирования в этом же шприце предусмотрен съемный поршень. Первое центрифугирование производится при скорости вращения 1800g (около 3200 об/мин) в течение 3-х минут. Далее эритроцитарный слой сбрасывается вертикально вниз в емкость с дезинфицирующим раствором путем надавливания на поршень до границы с плазмой, визуально определяемой в шприце. Второе центрифугирование производится в этом же шприце на той же скорости - 3200 об/мин - в течение 6 минут. Перенос PRP из шприца осуществляется непосредственно в шприц для инъекций с помощью вертикально их соединяющей специальной соединительной шприцевой муфты, входящей в набор. В качестве PRP может использоваться 1, 2, 3 или 4 мл нижнего слоя плазмы с различной концентрацией тромбоцитов в каждом миллилитре - от высокой 6-8 кратной концентрации в первом миллилитре PRP до низкой 1,5-2 кратной концентрации в четвертом миллилитре. Изделие «GLO PRP» предполагает только получение плазмы, обогащенной тромбоцитами, дальнейшее же ее применение - цель использования, активация PRP, режим лечения - остается на усмотрение врача без конкретного протокола. Использование PRP, приготовленной по этому методу, используется в ортопедии, лечении ран, косметологии, офтальмологии. В практических рекомендациях разработчика при лечении АГА показана папульная техника введения PRP в кожу пациента без указания режима лечения. Техника заключается в формировании папул различного размера с целью улучшения депонирования лекарственных веществ, PRP вводится на глубину 2-3 мм, угол наклона иглы составляет 45 градусов, диаметр папул 2-4 мм, приблизительно 0,1 мл на одну инъекцию. В случае введения 4 мл PRP требуется около 40 инъекций.

Практические рекомендации и клинические результаты применения «GLO PRP» в лечения АГА наглядно отражены и доступны по ссылке http://www.glofinn.com/applications/hair-loss (приложение 1).

Публикация приготовления PRP доступна по ссылке https://www.youtube.com/watch?v=XJrOrCm8h2w

Достоинствами прототипа является простота способа приготовления обогащенной плазмы, который осуществляется в одной и той же емкости (шприце) без переноса плазмы между 1 и 2 центрифугированием, что обеспечивает минимальную возможность инфицирования, а также возможность получения высокой концентрации тромбоцитов в PRP при условии активации тромбоцитов.

Существенным недостатком прототипа является центрифугирование крови и в последующем плазмы со скоростью вращения центрифуги более 3000 об/мин., как известно из других источников и доказано нами, является травматичным для тромбоцитов и значительно снижает количество жизнеспособных клеток, что уменьшает терапевтический потенциал PRP. Разработчиком заявлено, что методика позволяет собрать более 60% тромбоцитов. Этого количества достаточно для получения клинического результата, но при условии использования активации тромбоцитов. Хотя авторы не акцентируют возможность активации, повторение нами этой методики получения PRP, но с ее активированием подтвердило хороший клинический результат при лечении АГА. Без активирования эффект был несколько ниже. И все же мы внесли активацию плазмы в ограничительную часть нашей формулы как общее с прототипом, поскольку в других источниках этого же разработчика она упомянута. Считаем, что у нас достаточно других отличий от прототипа.

В настоящее время закупить наборы «GLO PRP KIT» можно в стране компании разработчика (Корея) или в странах Евросоюза, на территории РФ представительство компании отсутствует. Стоимость одного шприца-контейнера составляет 50 евро без учета доставки и оплаты госпошлины. Для проведения лишь одного курса лечения АГА с помощью получаемой таким образом плазмы нередко требуется 2 шприца. Безусловно, получение PRP в одной емкости удобно, но, учитывая высокую стоимость таких шприцов и необходимость неоднократных курсов лечения АГА, использование их значительно удорожает лечение и делает его недоступным для большинства пациентов. К тому же использование такого шприца, на наш взгляд, не является принципиальным для получения необходимого и достаточного качества плазмы, обеспечивающей эффективное и безопасное лечение АГА.

Технический результат настоящего изобретения состоит в достижении результата лечения АГА, не уступающего эффекту, получаемому в других известных способах лечения АГА, и выше эффекта прототипа за счет использовании для лечения плазмы, получаемой в условиях, обеспечивающих сохранение необходимого и достаточного количества жизнеспособных тромбоцитов, а также удешевление способа.

Этот результат достигается тем, что в известном способе лечения АГА путем внутридермального введения аутологичной плазмы крови, получаемой в стерильном контейнере, содержащем кровь пациента и 3,8% раствор цитрата натрия в качестве антикоагулянта, с последующим двойным центрифугированием и отделением плазмы, богатой тромбоцитами, согласно изобретению, забор крови осуществляют путем венопункции в вакуумную стерильную пробирку с антикоагулянтом при их соотношении 10:1, первое центрифугирование пробирки проводят не менее 5 минут при 1800 об/мин, затем из пробирки шприцом 5 мл с иглой не более 18G медленно забирают плазму, лейкоцитарный слой и 1-2 мл верхней части эритроцитарного слоя и переносят эту смесь в другую стерильную пробирку, которую затем центрифугируют не менее 8 минут при 2500 об/мин, после чего иглой не более 18G, помещенной в слой плазмы на 1-2 мм выше лейкоцитарной пленки, забирают 2 мл плазмы в шприц для инъекций объемом 2-3 мл, содержащим 0,1 мл 10% раствора хлористого кальция в соотношении хлористый кальций/плазма 1:20, с последующим суспендированием вручную путем мягкого переворачивания шприца не менее 10 раз и полученную аутологичную активированную обогащенную тромбоцитами плазму, линейной ретроградной техникой вводят в виде инъекций по всей поверхности алопеции на уровне нижних слоев дермы по 0.15 мл на одну инъекцию на глубину 2-4 мм и такие инъекции осуществляют 1 раз в месяц в течение 4-6 месяцев.

Осуществление первого центрифугирования при 1800 об/мин. и второго - при 2500 об/мин позволяет исключить механическое разрушение тромбоцитов и, самое главное, сохранить их жизнеспособность. Ранее нами показано, что центрифугирование при оборотах выше 3000 является травматичным, подвергающим разрушению более 20% тромбоцитов и соответственно снижению их жизнеспособности. Известно, что для высокой биологической активности получаемой плазмы важным является не только количество тромбоцитов, которое само по себе не может быть достаточным маркером для прогнозирования биологической активности плазмы, также важна их жизнеспособность.

Время первого центрифугирования в течение не менее 5 минут и второго - не менее 8 минут, как нами показано, является необходимым и достаточным для сохранения жизнеспособности более 80% тромбоцитов.

Медленное взятие из пробирки после ее первого центрифугирования плазмы, лейкоцитарного слоя и 1-2 мл верхней части эритроцитарного слоя в другую стерильную пробирку шприцом с иглой не более 18G, а после второго центрифугирования - слоя PRP, находящегося в пробирке над лейкоцитарной пленкой, шприцом для инъекций с иглой не более 18G, помещенной на 1-2 мм выше этой пленки, обеспечивает получение плазмы, содержащей высокое содержание тромбоцитов. При этом отбор 1-2 мл верхней части эритроцитарного слоя плазмы для второго центрифугирования, как нами показано, является обязательным, поскольку в нем после мягкого спина также присутствует некоторое количество тромбоцитов, которые суммируются с тромбоцитами из плазмы и повышают их общее количество в PRP.

Использование в том и другом случаях иглы не более 18G является необходимым для дополнительного исключения завихрений, как в случае втягивании плазмы шприцом с иглой более узкого диаметра, и перемешивания в пробирке нижнего слоя с PRP и верхнего слоя с бедной тромбоцитами плазмой. В случае же перемешивания верхняя, бедная тромбоцитами часть плазмы, «разбавит» PRP и количество тромбоцитов в PRP в итоге будет снижено.

Забор 2 мл плазмы в шприц для инъекций, содержащий 0,1 мл 10% раствора хлористого кальция в соотношении 1 часть хлористого кальция на 20 частей плазмы с последующим суспендированием вручную путем мягкого переворачивания пробирки не менее 10 раз, обеспечивает равномерное перемешивание активатора и плазмы и получение PRP, пригодной для внутрикожного введения пациентам.

Соотношение активатора и плазмы 1:20 обеспечивает достаточное количество времени (около 20 минут) для проведения процедуры до запуска каскада процессов свертываемости, который делает процедуру невозможной. Добавление же большего количества активатора, например, в соотношении 1:10, оставляет для медицинских манипуляций около 10 минут, что может быть недостаточным ввиду коагуляции в шприце и непроходимости плазмы через иглу. Применение линейной ретроградной техники введения способствует более равномерному распределению PRP во всех слоях кожи за счет формирования линейного канала в дерме (в ростковой зоне волосяных фолликулов) и равномерного его заполнения на обратном ходе иглы. Кроме того известно, что использование линейной ретроградной техники позволяет почти в 1,5 раза снизить количество инъекций в кожу головы за счет большей площади обработки и большего количества плазмы за одну инъекцию, что является существенным с точки зрения болезненности процедуры.

Использование линейной ретроградной техники введения PRP в нашем способе лечения АГА в область алопеции на уровне нижних слоев дермы на глубину около 2-4 мм, в объеме 0,15 мл на инъекцию, 1 раз в месяц в течение 4-6 месяцев найдены нами опытным путем и обеспечивают, наряду с другими его достоинствами, получение клинического результата, превосходящего по эффективности прототип и другие известные нам из целого ряда публикаций.

Сущность способа заключается в следующем.

В вакуумную стерильную пробирку объемом 9 мл добавляется 0,8 мл 3,8% цитрата натрия в качестве антикоагулянта, в эту же пробирку забирают 8 мл крови пациента путем венопункции, пробирку переворачивают 6-8 раз для перемешивания крови и антикоагулянта. Далее пробирку помещают в центрифугу с горизонтальным ротором и проводят первое центрифугирование в течение не менее 5 минут при скорости 1800 об/мин., используя функцию «мягкий старт». После первого центрифугирования отбирают всю полученную плазму, находящуюся в верхней половине пробирки, а также лейкоцитарный и верхнюю часть эритроцитарного слоев и переносят в другую вакуумную стерильную пробирку без наполнителей, что осуществляется шприцом 5 мл с иглой не более 18G. Эта пробирка помещается в центрифугу, и второе центрифугирование осуществляется на скорости 2500 об/мин в течение не менее 8 минут. В качестве PRP используется 2 мл плазмы, находящейся сразу над лейкоцитарной пленкой. Забор PRP проводится медленно, во избежание перемешивания фракций, в шприц для инъекций, объемом 2,5-3 мл с иглой, толщиной не более 18G, помещенной на 1-2 мм выше лейкоцитарной пленки. После чего в этот шприц в качестве активатора добавляется 10% раствор хлористого кальция из расчета 0.1 мл на 2 мл PRP и смесь суспендируется вручную путем мягкого переворачивания пробирки не менее 10 раз.

PRP-терапия проводится в условиях процедурного кабинета с соблюдением всех санитарных норм. После суспендирования игла 18G на шприце заменяется на иглу для инъекций, размером 0,3×13мм. Кожу волосистой части головы обрабатывают стандартным раствором хлоргексидина. Инъекции проводят в области алопеции линейной ретроградной техникой на уровне нижних слоев дермы, глубина около 2-4 мм, в зависимости от толщины кожи, в объеме 0,15 мл на инъекцию. Процедуры проводят 1 раз в месяц, на курс 4 процедуры в случае 1-3 стадии АГА по шкале Норвуда-Гамильтона. При более тяжелых стадиях рекомендуется 6 процедур с тем же интервалом.

Пример 1. Пациент С., мужчина 40 лет, V стадия АГА, длительность заболевания около 10 лет. Обследован для исключения эндокринопатий, влияющих на рост волос. Начал курс лечения в январе 2017 г.

Забор крови осуществляли в 2 стерильные вакуумные пробирки по 9 мл, поскольку область облысения была достаточно большой, в каждую пробирку добавляли антикоагулянт - 3,8% цитрат натрия в количестве 0,9 мл, пробирки переворачивали 6-8 раз для перемешивания крови и антикоагулянта. Первое центрифугирование в течение 5 минут осуществляли при скорости 1800 об/мин., отбирали всю полученную плазму, находящуюся в верхней половине пробирки, а также лейкоцитарный и верхнюю часть эритроцитарного слоев и переносили в другие вакуумные стерильные пробирки без наполнителей, с помощью шприца 5 мл с иглой 18G. Эти пробирки помещали в центрифугу, и второе центрифугирование осуществляли на скорости 2500 об/мин в течение 10 минут. В качестве PRP использовали по 2 мл плазмы из каждой пробирки, находящейся сразу над лейкоцитарной пленкой, сформированной над слоем эритроцитов.

Забор PRP проводили медленно в шприцы для инъекций, объемом 2,5-3 мл, толщиной иглы 18G, помещенной на 1-2 мм выше лейкоцитарной пленки. После этого в каждый шприц в качестве активатора добавляли по 0.1 мл 10% раствора хлористого кальция и смесь суспендировали вручную путем мягкого переворачивания пробирок 10 раз. Из двух пробирок в общей сложности было получено 4 мл PRP, по 2 мл из каждой.

Полученная аутологичная активированная PRP была использована в течение 15 минут после активации. Кожу волосистой части головы пациента обрабатывали стандартным раствором хлоргексидина. Инъекции проводили в области алопеции (теменная и лобная зоны) линейной ретроградной техникой, на уровне нижних слоев дермы, глубина 2-4 мм, в зависимости от толщины кожи, в объеме 0,15 мл на инъекцию. За одну процедуру выполнено 26 инъекций. Всего было проведено 4 процедуры PRP с интервалом 1 месяц.

Результаты терапии оценили через 1 месяц после последней процедуры, в июне 2017 г. Метод оценки - фототрихограммы, полученные до и после курса лечения (Фиг. 1а и Фиг. 1б), которые приложены к описанию и выполнены с использованием специализированной компьютерной программы для оценки параметров роста волос TrichoSciencePro v1.3. Как видно из снимков, у пациента плотность волос уже после первого курса лечения увеличилась с 300 до 512/см2 (+70%), доля веллусных волос уменьшилась с 33 до 24% (-27%), интенсивность выпадения волос уменьшилась, что отразилось в снижении доли телогеновых волос с 32 до 10% (-69%).

Заключение: лечение АГА у пациента с выраженным облысением позволило получить высокий и быстрый результативный эффект по показателям плотности волос, толщины стержней волос и интенсивности выпадения волос. Данные фототрихограммы, полученные через 10 месяцев после начала лечения (ноябрь 2017 г.) показали стабильность полученного результата. Пациенту рекомендовано динамическое наблюдение с проведением фототрихограммы еще через 6 месяцев (в мае 2018 г.) и при необходимости и желании пациента повторить курс лечения.

Пример 2. Пациент М., 35 лет, 2 стадия АГА, теменная зона, длительность заболевания около 2-х лет. Обследован для исключения эндокринопатий, влияющих на рост волос. Получил аналогичный курс лечения.

После первого курса лечения с мая по август 2015 г. и контролем в сентябре 2017 г. плотность волос изменилась с 501 до 546 на см2 (+9%), средний диаметр волос изменился с 55 до 58 мкм (+5,5%), доля веллусных и телогеновых волос осталась без изменений, по 18%, что является допустимым у мужчин.

Заключение: лечение на начальной стадии АГА у пациента позволило получить положительный результат по плотности и диаметру волос с пролонгированным эффектом. Незначительная положительная динамика после лечения обусловлена начальной стадией АГА и не выраженными отклонениями в качестве волос. Контрольное измерение морфометрических параметров роста волос проводилось через год после начала лечения - в мае 2016 г., еще через 10 месяцев - в марте 2017 г., показатели роста волос оставались стабильными. В январе 2018 г. наблюдалось некоторое ухудшение показателя среднего диаметра волос, что было расценено нами как рецидив. Пациенту рекомендован повторный курс из 4-х процедур с последующим контролем результата лечения через месяц после проведения последней процедуры.

Для сравнения мы провели курс лечения у волонтеров с применением PRP, полученной по методу прототипа на одной половине головы, и настоящего изобретения - на другой половине. Прирост количества волос на половине головы с применением PRP, полученной предлагаемым способом, на 15,4% был выше, чем прирост количества волос с применением PRP, полученной по прототипу; увеличение среднего диаметра всех волос был выше на 13,2%, терминальных волос - выше на 15,3%; снижение доли телогеновых волос на 14,4% интенсивнее, чем у прототипа. Разница в динамике показателя доли веллусных волос была 2,3%, что статистически не являлось значимым. Эти данные приведены в таблице 1, свидетельствующие о преимуществах нашего способа лечения АГА.

С 2013 года к настоящему времени предлагаемым способом проведено лечение у более 100 мужчин с АГА 2-4 степени тяжести и длительностью заболевания от 1 до 12 лет с достижением хорошего клинического результата, который сохранялся от 4 до 16 месяцев. Поскольку АГА является хроническим прогрессирующим процессом с неизбежными рецидивами после окончания любого лечения - сохранение клинического результата в течение такого длительного времени является очень хорошим показателем пролонгирования эффекта.

Разработать предлагаемый способ побудили нас известные данные о возможности применения PRP терапии с высоким положительным результатом лечения АГА. Однако, как отмечено нами выше, в настоящее время закупить наборы «GLO PRP KIT» можно в стране разработчика (Корея) или в странах Евросоюза. Стоимость одного шприца составляет 50 евро. Поскольку для проведения полного курса лечения АГА с применением PRP, получаемой с использованием таких шприцов, требуется далеко не один шприц, стоимость лечения возрастает в несколько раз и составляет значительную сумму, что делает лечение недоступным для большинства пациентов. Это побудило нас разработать отечественный способ получения PRP с использованием медицинских изделий, доступных в любом медицинском учреждении данного профиля. Как показывают приведенные нами примеры лечения АГА с использованием широко используемых в медицинской практике устройств (пробирок) нам удалось создать способ, не уступающий и даже превосходящий все известные способы как в получении PRP, так и в способе ее введения.

Мы использовали стандартные стерильные вакуумные пробирки «VACUETTE» (производитель «Greiner Bio-One», Австрия), доступные на всей территории РФ. Стоимость одной пробирки на январь 2018 г. около 13 рублей. Себестоимость одной процедуры при условии использования двух пробирок, с учетом шприцев, игл и других расходных материалов не превышает 100 руб.

В соответствии с вышеизложенным, предлагаемый способ по сравнению с известными имеет ряд существенных преимуществ, основными из которых является то, что он не уступает по эффективности другим известным способам лечения АГА, выше эффективности прототипа и одновременно является доступным для широкого круга пациентов.

Способ разработан в ООО «Трихологический Центр Здоровья и Лечения Волос» (Россия, Санкт-Петербург) и прошел клиническую апробацию к настоящему времени более чем у 100 пациентов с положительным результатом.

Claims (1)

1. Способ лечения андрогенетической алопеции путем внутридермального введения аутологичной плазмы крови, получаемой в стерильном контейнере, содержащем кровь пациента и 3,8% раствор цитрата натрия в качестве антикоагулянта, с последующим двойным центрифугированием и отделением плазмы, богатой тромбоцитами, отличающийся тем, что забор крови осуществляют путем венопункции в стерильную вакуумную пробирку с антикоагулянтом при их соотношении 10:1, первое центрифугирование пробирки проводят не менее 5 минут при 1800 об/мин, затем из пробирки шприцом 5 мл с иглой не более 18G забирают плазму, лейкоцитарный слой и верхнюю часть эритроцитарного слоя, переносят эту смесь в другую вакуумную стерильную пробирку, которую затем центрифугируют не менее 8 минут при 2500 об/мин, после чего иглой не более 18G, помещенной нижним концом среза в слой плазмы на 1 мм выше лейкоцитарной пленки, забирают 2 мл плазмы в шприц для инъекций объемом 2-3 мл, содержащим 0,1 мл 10% раствора хлористого кальция в соотношении хлористый кальций : плазма 1:20, с последующим суспендированием вручную путем переворачивания шприца не менее 10 раз, и полученную аутологичную активированную, обогащенную тромбоцитами плазму линейной ретроградной техникой вводят в виде инъекций по всей поверхности алопеции на уровне нижних слоев дермы по 0.15 мл на одну инъекцию и такие инъекции осуществляют 1 раз в месяц в течение 4 месяцев с возможностью повторения аналогичного курса лечения в случае рецидива.

Images