[go: up one dir, main page]

RS54730B1 - Inhibitori beta sekretaze - Google Patents

Inhibitori beta sekretaze

Info

Publication number
RS54730B1
RS54730B1 RS20160246A RSP20160246A RS54730B1 RS 54730 B1 RS54730 B1 RS 54730B1 RS 20160246 A RS20160246 A RS 20160246A RS P20160246 A RSP20160246 A RS P20160246A RS 54730 B1 RS54730 B1 RS 54730B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
mmol
pharmaceutically acceptable
disease
mixture
Prior art date
Application number
RS20160246A
Other languages
English (en)
Inventor
Yuri Bukhtiyarov
Salvacion Cacatian
Lawrence Wayne Dillard
Cornelia Dorner-Ciossek
Klaus Fuchs
Lanqi Jia
Deepak S Lala
Angel Morales-Ramos
Georg Rast
Jonathan Reeves
Suresh B Singh
Shankar Venkatraman
Zhenrong Xu
Jing Yuan
Yi Zhao
Yajun Zheng
Original Assignee
Boehringer Ingelheim Int
Vitae Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Ingelheim Int, Vitae Pharmaceuticals Inc filed Critical Boehringer Ingelheim Int
Publication of RS54730B1 publication Critical patent/RS54730B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/46—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino or carboxyl groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C229/50—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino or carboxyl groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino groups and carboxyl groups bound to carbon atoms being part of the same condensed ring system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/45—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings
    • C07C255/47—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings to carbon atoms of rings being part of condensed ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C313/00—Sulfinic acids; Sulfenic acids; Halides, esters or anhydrides thereof; Amides of sulfinic or sulfenic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfinic or sulfenic groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C313/02—Sulfinic acids; Derivatives thereof
    • C07C313/06—Sulfinamides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C331/00—Derivatives of thiocyanic acid or of isothiocyanic acid
    • C07C331/02—Thiocyanates
    • C07C331/14—Thiocyanates having sulfur atoms of thiocyanate groups bound to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/587—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring
    • C07C49/687—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing halogen
    • C07C49/697—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing halogen containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/587—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring
    • C07C49/703—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing hydroxy groups
    • C07C49/747—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing hydroxy groups containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/587—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring
    • C07C49/753—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C07C49/755—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing ether groups, groups, groups, or groups a keto group being part of a condensed ring system with two or three rings, at least one ring being a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
    • C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
    • C07C2603/93—Spiro compounds
    • C07C2603/94—Spiro compounds containing "free" spiro atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Jedinjenje predstavljeno strukturnom formulom izabranom između:ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.Prijava sadrži još 13 patentnih zahteva.

Description

Opis pronalaska
OBLAST TEHNIKE
[0001]Predmetni pronalazak se odnosi na spirociklične acilgvanidine i njihovu primenu kao inhibitora aktivnosti enzima (3-sekretaze (BACE1), na farmaceutske kompozicije koje sadrže iste, kao i na ove terapeutske agense za primenu u lečenju neurodegenerativnih poremećaja, poremećaja karakterisanih opadanjem kognitivnih sposobnosti, kognitivnog oštećenja, demencije i bolesti karakterisanih proizvodnjom (3-amiloidnih depozita ili neurofibrilarnih spletova.
SUŠTINA PRONALASKA
[0002]Depoziti (3-amiloida (ovde se takođe naziva i "Abeta" ili "A|3") i neurofibrilarni spletovi su dve glavne patološke karakterizacije koje su povezane sa Alchajmerovom bolešću (AD), uključujući tu i ranu pojavu genetski uzrokovanih porodičnih oblika usled mutacije u amiloidnom prekursorskom proteinu (APP), presenilinu 1 i 2, kao i pojavu kasne sporadične AD. AD je klinički karakterisana gubitkom pamćenja, kognicije, odn. shvatanja, rasuđivanja, procene, i orijentacije. Takođe su pogođene, kako bolest napreduje, motorne, čulne i lingvističke sposobnosti sve dok ne dođe do pojave globalnog oštećenja više kognitivnih funkcija. Ovi kognitivni gubici se pojavljuju polako, ali obično dovode do ozbiljnog oštećenja i konačno do smrti u roku od 4-12 godina.
[0003]Depoziti p-amiloida su prevashodno agregati Abeta peptida, koji sa svoje strane predstavlja proizvod proteolize APP. Još preciznije, AP peptid nastaje usled cepanja APP na C-kraju pomoću jedne ili više y-sekretaza i na N-kraju pomoću enzima (3-sekretaza (BACE1), takođe poznatog kao aspartil proteaza i memapsin2, kao dela p-amiloidogene putanje.
[0004]BACE aktivnost je direktno povezana sa stvaranjem A(3 peptida od APP, a studije sve češće pokazuju da inhibicija BACE inhibira stvaranje A(3 peptida.
[0005]Amiloidogene naslage i vaskularna amiloidna angiopatija takođe karakterišu mozak pacijenata sa Trizomijom 21 (Daunov sindrom), naslednim cerebralnim krvarenjem sa amiloidozom holandskog tipa (HCHVVA-D) i drugim neurodegenerativnim poremećajima. Neurofibrilarni spletovi se takođe javljaju kod drugih neurodegenerativnih poremećaja uključujući tu i poremećaje koji izazivaju demenciju.
[0006]Nedavno je objavljeno da je Abeta uključen u razvoj apoptoze retinalnih ganglijskih ćelija (RGC) kod glaukoma, uz dokazanu abnormalnu preradu prekursora amiloidnog proteina posredovanu kaspazom-3, povećanu ekspresiju Abeta u RGCs kod eksperimentalnog glaukoma i smanjenje nivoa staklastog A(3 (konzistentno sa retinalnim taloženjem A(3) kod pacijenata sa glaukomom. Depoziti amiloida su takođe povezani sa makularnom degeneracijom kod pacijenata koji boluju od suve senilne makularne degeneracije (AMD) i u životinjskim modelima AMD.
[0007]U WO 2010/021680, VVO2011/106414 i WO 2010/105179 su opisani spirociklični acilgvanidini sa spirocikličnim skeletom kao inhibitori beta-sekretaze.
SUŠTINA PRONALASKA
[0008]Predmetnim pronalaskom su realizovana jedinjenja koja su BACE1 inhibitori i koja su korisna kao terapeutski agensi u lečenju bolesti ili poremećaja karakterisanih povišenim depozitima p-amiloida ili nivoima p-amiloida kod pacijenta. Opisani BACE1 inhibitori nisu samo vrlo potentni inhibitori BACE1 enzima (test 1) već takođe ispoljavaju:
(1) vrlo potentnu inhibitornu aktivnost u ćelijskom Abeta testu (test 2),
(2) selektivnost prema srčanom hERG kanalu u ćelijskom testu (test 3), i
(3) takođe i nisku sklonost ka izazivanju fosfolipidoze u ćelijskom fosfolipidoznom testu (test 4). Tako su predmetnim pronalaskom realizovana jedinjenja koja ispoljavaju kombinaciju visoke potencije kao BACE1 inhibitori, visoku selektivnost prema srčanom hERG kanalu, i nisku fosfolipidoznu aktivnost.
[0009]Jedan primer izvođenja pronalaska je jedinjenje koje je predstavljeno strukturnom formulom izabranom između: ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kog od gore navedenih jedinjenja. Neposredno gore navedena jedinjenja se ovde navode kao "jedinjenja prema predmetnom pronalasku".
[0010]Sledeći primer izvođenja pronalaska jejedinjenje prema predmetnom pronalasku ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu kao lek.
[0011]Sledeći primer izvođenja pronalaska je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema predmetnom pronalasku ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u smeši sa farmaceutski prihvatljivim adjuvansom, rastvaračem ili nosačem.
[0012]Sledeći primer izvođenja pronalaska jejedinjenje prema predmetnom pronalasku ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu u lečenju poremećaja ili bolesti posredovanih sa BACE1 kod pacijenta. Sledeći primer izvođenja pronalaska je primena jedinjenja prema predmetnom pronalasku ili njegove farmaceutski prihvatljive soli za proizvodnju leka za lečenje poremećaja posredovanog sa BACE1 kod pacijenta.
[0013]Sledeći primer izvođenja pronalaska je farmaceutska kompozicija za lečenje poremećaja ili bolesti posredovanog sa BACE1 kod pacijenta koja sadrži jedinjenje prema predmetnom pronalasku.
[0014]Takođe je otkriven i metod lečenja poremećaja ili bolesti posredovanog sa BACE1 kod subjekta, koji obuhvata davanje pacijentu efektivne doze jedinjenja prema predmetnom pronalasku ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0015] Još jedan drugi primer izvođenja pronalaska je među proizvod koji se koristi za dobijanje jedinjenja prema predmetnom pronalasku. Ovi međuproizvodi su predstavljeni strukturnom formulom izabranom između:
ili so bilo kog od napred navedenih jedinjenja.
DETALJNI OPIS PRONALASKA
[0016]Jedinjenja prema predmetnom pronalasku ispoljavaju potentnu aktivnost protiv BACE1 enzima i formiranja Abeta zajedno sa selektivnošću prema hERG kanalu i niskom sklonosti prema izazivanju fosfolipidoze. Na primer, jedinjenja prema predmetnom pronalasku ispoljavaju inhibiciju BACE1 sa ICso< 15 nM, inhibiciju ćelijske proizvodnje Abeta sa IC50< 2 nM, inhibiciju hERG <50% za 10 uM, i fosfolipidozu sa prvom efektivnom koncentracijom (FEC) od > 150 uM. Ova kombinovana svojstva čine jedinjenja prema predmetnom pronalasku korisnim za lečenje patoloških stanja kod ljudi, a naročito za lečenje Alchajmerove bolesti, kao i drugih poremećaja i bolesti posredovanih sa BACE1.
[0017]Inhibicija hERG (ljudski Ether-a-go-go-Related Gen) kanala pomoću ksenobiotika i sledstvena odložena srčana repolarizacija su povezane sa povećanim rizikom od specifične polimorfne ventrikularne tahiaritmije, torsade de pointes, kao što su potvrdili Sanguinetti et al. (1995, Cell, Apr. 21, 81(2):299-307) i veliki broj kasnijih dokaza. Da bi se rano izbegao ovaj rizik, provera protiv hERG interakcije uin vitrosistemu korišćenjem heterologe ekspresije hERG kanala je postala uobičajena praksa, a test ovog tipa je takođe bitan deo kasnijeg prekliničkog profilisanja kandidata kao što je preporučeno ICH vodičem S7B (Međunarodna konferencija o harmonizaciji, engl. International Conference on Harmonization
(2005): ICH Topic S 7 B The nonclinical Evaluation of the Potential fordelaved
Ventricular Repolarization; (QT Interval Proiongation) od strane Human Pharmaceuticals (www.ich.org/products/guidelines/safety/article/safety-guidelines.html)). Kao takva, za lečenje je vrlo poželjna mala inhibicija hERG kanala, kao što je ona kakvu ispoljavaju jedinjenja prema predmetnom pronalasku.
[0018]Fosfolipidoza je poremećaj skladištenja lipida, pri čemu se višak fosfolipida akumulira u ćelijama. Fosfolipidoza izazvana lekovima je neželjeni efekat fekova. Dakle, da bi se izbegla štetna neželjena dejstva, za primenu u lečenju ljudi su poželjna jedinjenja sa malim fosfolipidoznim potencijalom.
[0019]Podaci prikazani dole u Tabeli 1 pokazuju da jedinjenja prema predmetnom pronalasku imaju ovu kombinaciju visoke ćelijske aktivnosti BACE1, selektivnost prema srčanom hERG i malu sklonost ka izazivanju fosfolipidoze. Veruje se da jedinjenja koja služe kao primeri u WO 2010/021680 i WO 2010/105179 nemaju ovu kombinaciju poželjnih osobina. Dodatno tome, u Tabeli 2 se nalaze podaci koji pokazuju da određena jedinjenja prema predmetnom pronalasku imaju značajno niže IC50inhibitorne vrednosti u BACE1 enzimskom testu, a takođe i u ćelijskom Abeta testu u odnosu na određena uporediva jedinjenja opisana u WO 2010/105179,
[0020]Izrazima koji ovde nisu posebno definisani treba dati ono značenje koje bi im dao stručnjak iz odgovarajuće oblasti u skladu sa otkrivanjem i kontekstom. Međutim, kada se koriste u opisu pronalaska, osim ako nije drukčije naglašeno, sledeći izrazi imaju dole navedena značenja i pridržavaju se sledećih konvencija.
[0021]Kada je jedinjenje prema predmetnom pronalasku opisano imenom ili strukturom bez navođenja svih tautomernih oblika, onda se podrazumeva da to jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli obuhvataju sve tautomere.
[0022]Kada je jedinjenje prema predmetnom pronalasku opisano imenom ili strukturom bez navođenja stereohemije, onda se podrazumeva da jedinjenje i njegove farmaceutski prihvatljive soli obuhvataju sve stereo, optičke i geometrijske izomere (npr. enantiomere, dijastereomere, E/Z izomere, itd.) i njihove racemate, kao i smeše posebnih enantiomera u različitim proporcijama, smeše dijastereomera, ili smeše bilo kojih od napred navedenih oblika.
[0023]Kada je stereo, optički ili geometrijski izomer opisan imenom ili strukturom, onda se podrazumeva da čistoća stereo, optičkog i/ili geometrijskog izomera navedenog ili opisanog stereo, optičkog ili geometrijskog izomera iznosi najmanje 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ili 99,9% čistoće po težini. Čistoća stereo, optičkog i/ili geometrijskog izomera se određuje deljenjem težine navedenog ili opisanog stereo, optičkog ili geometrijskog izomera u smeši sa ukupnom težinom svih stereo, optičkih i geometrijskih izomera u smeši.
[0024]Kada su jedinjenje prema predmetnom pronalasku ili njegove farmaceutski prihvatljive soli navedeni ili opisani strukturom, onda se podrazumeva da su pronalaskom obuhvaćeni solvati, hidrati i anhidrovani oblici jedinjenja i solvati, hidrati i anhidrovani oblici njegovih farmaceutski prihvatljivih soli. "Solvati" se odnosi na kristalne oblike, pri čemu su molekuli rastvarača uključeni u kristalnu rešetku tokom kristalizacije. Solvati mogu obuhvatati vodu i nevodene rastvarače, kao što su etanol, izopropanol, DMSO, sirćetna kiselina, etanolamin, i EtOAc. Solvati, kod kojih je rastvarač voda, imaju molekul rastvarača koji je uključen u kristalnu rešetku i obično se nazivaju "hidrati." Hidrati obuhvataju stehiometrijske hidrate, kao i kompozicije koje sadrže promenljvu količinu vode. "Anhidrovani oblik" se odnosi na jedinjenja bez rastvarača ili vode ili u suštini bez rastvarača ili vode uključenih u kristalnu strukturu (npr. molarni odnos rastvarača ili vode prema jedinjenju je manji od 1:10, 1:20; 1:100; ili 1:200).
Soli
[0025]Izraz "farmaceutski prihvatljiv" se ovde koristi da označi ona jedinjenja, materijale, kompozicije, i/ili dozirane oblike koji su, u okviru razumnog medicinskog prosuđivanja, pogodni za korišćenje u kontaktu sa tkivima ljudskih bića i životinja bez prevelike toksičnosti, iritacije, alergijske reakcije ili drugih problema ili komplikacija, i sa srazmerno razumnim odnosom korist/rizik.
[0026]Kada se ovde koristi, izraz "farmaceutski prihvatljive soli" se odnosi na derivate opisanih jedinjenja pri čemu je roditeljsko jedinjenje modifikovano pravljenjem njihovih kiselih ili baznih soli. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli obuhvataju, ali nisu ograničeni na soli neorganskih ili organskih kiselina baznih ostataka, kao što su amini; alkalne ili organske soli kiselih ostataka, kao što su karboksilne kiseline; i slično. Na primer, takve soli obuhvataju soli amonijaka, L-arginina, betaina, benetamina, benzatina, kalcijum hidroksida, holina, deanola, dietanolamina (2,2'-iminobis(etanol)), dietilamina, 2-(dietilamino)-etanola, 2-aminoetanola, etilendiamina, N-etil-glukamina, hidrabamina, 1H-imidazola, lizina, magnezijum hidroksida, 4-(2-hidroksietil)-morfolina, piperazina, kalijum hidroksida, 1-(2-hidroksietil)-pirolidina, natrijum hidroksida, trietanolamin {2,2',2"-nitrilotris(etanola)), trometamina, cink hidroksida, sirćetne kiseline, 2,2-dihloro-sirćetne kiseline, adipinske kiseline, alginske kiseline, askorbinske kiseline, L-asparaginske kiseline, benzensulfonske kiseline, benzojeve kiseline, 2,5-dihidroksibenzojeve kiseline, 4-acetamido-benzojeve kiseline, (+)-kamforne kiseline, (+)-kamfor-10-sulfonske kiseline, ugljene kiseline, cimetne kiseline, limunske kiseline, ciklaminske kiseline, dekanoične kiseline, dodecilsumporne kiseline, etan-1,2-disulfonske kiseline, etansulfonske kiseline, 2-hidroksi-etansulfonske kiseline, etilendiamintetrasirćetne kiseline, mravlje kiseline, fumarne kiseline, galaktarne kiseline, gentizinske kiseline, D-glukoheptonske kiseline, D-glukonske kiseline, D-glukuronske kiseline, glutaminske kiseline, glutarne kiseline, 2-okso-glutarne kiseline, glicerofosforne kiseline, glicina, glikolne kiseline, kapronske kiseline, hipurne kiseline, bromovodonične kiseline, hlorovodonične kiseline, izobuterne kiseline, DL-mlečne kiseline, laktobionske kiseline, laurinske kiseline, lizina, maleinske kiseline, (-)-L-jabučne kiseline, malonske kiseline, DL-bademove kiseline, metansulfonske kiseline, galaktarne kiseline, naftalen-1,5-disulfonske kiseline, naftalen-2-sulfonske kiseline, 1-hidroksi-2-naftalinkarbonske kiseline, nikotinske kiseline, azotne kiseline, oktanske kiseline, oleinske kiseline, orotne kiseline, oksalne kiseline, palmitinske kiseline, pamoične kiseline (embonične kiseline), fosforne kiseline, propionske kiseline, (-)-L-piroglutaminske kiseline, salicilne kiseline, 4-amino-salicilne kiseline, sebacinske kiseline, stearinske kiseline, ćilibarne kiseline, sumporne kiseline, taninske kiseline, (+)-L-vinske kiseline, tiocijanske kiseline, p-toluensulfonske kiseline i undecilenske kiseline. Druge farmaceutski prihvatljive soli mogu biti obrazovane sa katjonima metala kao što su aluminijum, kalcijum, litijum, magnezijum, kalijum, natrijum, cink i slični (videti takođe Pharmaceutical salts,
Berge, S.M. etal., J . Pharm. Sci., (1977), 66, 1-19).
[0027]Farmaceutski prihvatljive soli prema predmetnom pronalasku mogu biti sintetizovane od roditeljskog jedinjenja koje sadrži bazni ili kiseli radikal uobičajenim hemijskim postupcima. Generalno, takve soli se mogu dobiti reakcijom slobodnog kiselog ili baznog oblika ovih jedinjenja sa dovoljnom količinom odgovarajuće baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču, poput etra, etil acetata, etanola, izopropanola, ili acetonitrila, ili njihove smeše.
[0028]Soli kiselina pored onih gore pomenutih koje su korisne, na primer, za prečišćavanje ili izo lova nje jedinjenja prema predmetnom pronalasku (npr. trifluoro acetatne soli) takođe predstavljaju deo pronalaska.
Biološki podaci
BACE1 test (Testl)
[0029]Inhibitorna aktivnost jedinjenja je ocenjivana testom fluorescentnog gašenja BACE1 aktivnosti korišćenjem komercijalno raspoloživog supstrata Hilvte Fluor™488-Glu-Val-Asn-Leu-Asp-Ala-Glu-Phe-Lys-(QXL™ 520)-OH (SEQ ID NO:1) AnaSpec, San Jose, CA) i skraćene humane beta-sekretaze, BACE1 (amino kiseline 1-454) spojenih u myc-his tagu i izlučenih iz HEK293/BACEect ćelija u OptiMEM™
(Invitrogen). Supstrat je rastvoren sa 1 mg/ml u DMSO.
[0030]Test je izvršen u prisustvu OptiMEM (supernatant je sakupljen tokom 24 h i prečišćen iz ćelijskih ostataka centrifugiranjem) koji je sadržao ektodomen BACE1, 25 ul vode koja je sadržala željenu 2-struku koncentraciju testiranog jedinjenja i 2% DMSO, 1 uM supstrata peptida, 20 mM NaOAc, pH 4,4, i 0,04% Triton-X100 u ukupnoj testiranoj zapremini od 50 ul u ploči sa 384 bunarčića. Generalno je na ploču stavljeno 25 ul razređenja jedinjenja, a zatim je usledilo dodavanje 10 ul BACE1 koji je sadržao OptiMEM™ razblažen u odnosu 1:10 u vodi sa 0,2% Triton X-100. Reakcija je započeta dodavanjem 15 ul supstrata u NaOAc puferu. Reakcija je inkubirana na st (mrak) u Envision® višekanalnom čitaču (Perkin Elmer), a cepanje supstrata je beleženo kao brzina za 60 min na ex: 485 nm, em: 538 nm. Na svaku ploču su bili uključeni prazni kontrolni bunarčići koji nisu sadržali enzime.
[0031]Intenzitet fluorescencije se smanjivao sa vremenom da bi se odredile brzine reakcija u svih 384 bunarčića. Ove brzine su korišćene za izračunavanje procenta kontrole korišćenjem neinhibirane kontrole koja je sadržala 1% DMSO kao 100% i prazne kontrole izvršene u odsustvu enzima kao 0%. ICso vrednosti su izračunate fitovanjem procenta kontrole prema koncentraciji testiranog jedinjenja korišćenjem Assay Explorera.
H4-APPwt test baziran na ćelijama (Test 2)
[0032]Ćelijska potencija jedinjenja prema pronalasku je ocenjivana u testu praćenja produkcije Abeta1-x peptida u H4 neuroglioma ćelijskoj liniji (ATCC, Cat. #HTB-148) koja stabilno izražava humani APP, primenom imunotesta kao što je AlphaLISA
(PerkinEImer, Cat.# AL288). Testirano jedinjenje je rastvoreno u DMSO i prethodno razređeno u medijumu za kultivaciju (DMEM koji je sadržao 10% FBS i 1% penicilin/streptomicin) da bi se postigla dvostruka krajnja koncentracija jedinjenja u ovom testu. Podjednake zapremine 2x rastvora testiranog jedinjenja i suspenzije ćelija su dodate u ploče za kultivaciju sa 96-bunarčića, tako da je svaki bunarčić sadržao -10.000 ćelija u konačnoj zapremini od 200 ul. Krajnja koncentracija DMSO u testu je bila 0,2%. Ploče su inkubirane tokom 5 h na 37°C, pri 5% CO2da bi se ćelijama omogućilo da se prikače za dno bunarčića u prisustvu testiranih jedinjenja. Zatim su medijumi odstranjeni, pa su zamenjeni sa svežim medijumima koji su sadržali testirana jedinjenja u istoj finalnoj koncentraciji. Ploče su inkubirane tokom 18 h na 37<C>C, pri 5% C02, Koncentracije Ab1-x su određene korišćenjem AlphaLISA imunotesta (PerkinEImer, Cat.# AL288) uz praćenje protokola proizvođača. Koncentracije Abeta1-x u bunarčićima koji su sadržali ili DMSO ili 10 uM inhibitora beta-sekretaze (BACE inhibitor IV, EMD Bioscience, Cat. #565788) su korišćene kao neinhibirane i pozadinske kontrole, shodno tome, za računanje procentualne vrednosti inhibicije za svaki bunarčić sa testiranim jedinjenjima. Ove procentualne vrednosti inhibicije su regresirane u odnosu na koncentracije jedinjenja korišćenjem četvoro-parametarskog fitovanja krive, a IC50vrednosti (koncentracija jedinjenja na kojoj je uočeno 50% inhibitornog efekta) su izračunate kao koncentracija jedinjenja koja odgovara prevojnoj tački na krivoj.
hERG-kanalni test (Test 3)
Ćelije:
[0033]HEK (humane embrionske bubrežne) 293 ćelije su stabilno transfektovane sa hERG cDNK.
Pipete i rastvori:
[0034]Ćelije su superfuzionisane sa rastvorom kupatila koji je sadržao (mM): NaCI
(137), KCI (4,0), MgCI2(1,0), CaCb (1,8), glukozu (10), HEPES (10), pH 7,4 sa NaOH. "Patch" pipete, odn. pipete za priklještenje membrana su bile napravljene od borosilikatnih staklenih cevčica korišćenjem horizontalnog povlakača i napunjene su rastvorom za pipete koji je sadržao (mM): K-aspartat (130), MgCb (5,0), EGTA (5,0), K2ATP (4,0), HEPES (10,0), pH 7,2 sa KOH. Otpornost mikroelektroda je bila u opsegu između 2 i 5 MO.
Stimulacija i beleženje:
[0035]Struje u membranama su merene korišćenjem EPC-10 pojačivača za priklještenje membrana i PatchMaster softvera. Sa hERG-posredovane struje u membranama su merene na 35°C, uz korišćenjem tehnike priklještenja membrana za konfiguracije celih ćelija. Transfektovane HEK293 ćelije su bile vezane na potencijal održavanja od -60 mV, a sa hERG-posredovane inaktivirajuće prateće struje su pobuđene uz korišćenje impulsnog obrasca sa fiksnim amplitudama (aktivacija/deaktivacija: 40 mV tokom 2000 ms; povratak: -120 mV tokom 2 ms; uspon do 40 mV u 2 ms; deaktivacija prateće struje: 40 mV tokom 50 ms) ponavljanog u intervalima od 15 s. Za vreme svakog intervala između impulsa su bila merena 4 impulsa umanjena za faktor 0,2 zbog procedure P/n oduzimanja gubitka. Rs kompenzacija je primenjena do nivoa koji je omogućavao bezbedno merenje bez zvonjenja.
Priprema jedinjenja i primena:
[0036]Različite koncentracije testiranog jedinjenja su primenjivane redom na svaku od različitih ćelija koje su ispitivane. Nivo stacionarnog stanja referentne struje je meren bar 6 puta pre primene prve koncentracije testiranog jedinjenja.
[0037]Testirano jedinjenje je rastvoreno u DMSO da bi se dobio osnovni gotovi rastvor koji je dalje razređen u DMSO u gotove rastvore potrebne za niže koncentracije. Finalni rastvor u ekstraćelijskom puferu je bio sveže dobijen iz ovih gotovih rastvora razređivanjem u odnosu 1:1000 u svakom koraku pre početka eksperimenata.
Analiza podataka:
[0038]Vrhovi amplituda struje su mereni 3 ms posle uspona do +40 mV. Za referentnu vrednost i svaku koncentraciju su uprosečene vršne vrednosti struje bar tri poslednja puta pre primene stedeće koncentracije. Rezidualne struje (l/lo) su izračunavane za svaku ćeliju kao deo stvarne srednje vršne vrednosti struje, a prosečne kao referentne vršne vrednosti struje. Rezultati su prikazani kao procenti (%) inhibicije (1-l/lo)<*>100% na 10 uM.
In vitrofosfoiipidozni test (Test 4)
[0039]Fosfolipidogeni potencijal testiranog jedinjenja je testiran primenom humane hematopoezne U937 ćelijske linije. Princip testa je bio da se analizira sadržaj fosfolipida bojenjem ćelija fluorescentnom bojom Nil crvena.
[0040]U937 ćelije su zasejane u ploče za kultivaciju ćelija sa 0,5 x 10<5>ćelija/mL u RPMI medijum koji je sadržao 10 % FBS, 1 % DMSO, i 0,005 % gentamicina. Ćelije su zatim gajene sa ili bez različitih koncentracija testiranog jedinjenja tokom 48 h, pod standardnim uslovima za kultivaciju.
[0041]Radi sakupljanja ćelije su centrifugirane na 130x g tokom 4 min, a onda su jednom isprane sa PBS. Zatim je pripremljena suspenzija 2x 0,5 ml_ ćelija radi merenja ne-fiksiranih ćelija (0,5 ml_ za propidijum jodidno (Pl) merenje vijabilnosti i 0,5 ml_ za merenje Nil crvenom).
[0042]Preostale ćelije su fiksirane pomoću 3,7 % formaldehida tokom 30 min. Posle narednog koraka centrifugiranja ćelije su ponovo suspendovane sa 1,3 ml_ Nil crvenog radnog rastvora (1 ug/mL), a onda su inkubirane tokom 5 min na st. Suspenzija ćelija je zatim dva puta isprana sa 3 mL PBS i potom je centrifugi rana na 130x g tokom 4 min. Supernatant je odbačen, pa su ćelije ponovo suspendovane sa 0,5 mL PBS i čuvane su radi merenja protočnom citometrijom.
[0043]Za bojenje Nile crvenom je uzorcima od 0,5 mL ne-fiksiranih ćelija bilo dodato 50 uL rastvora Nile crvene spremnog za upotrebu (10 ug/mL) po uzorku. Uzorci su bili čuvani na ledu tokom 5 min. Posle toga, oni su bili jednom isprani sa 4 mL PBS (4°C, 250x g tokom 8 min) i na kraju su ponovo suspendovani u 400 uL PBS i čuvani su radi merenja protočnom citometrijom.
[0044]Za merenje vijabilnosti, 12,5 uL Pl rastvora spremnog za upotrebu (10 ug/mL) je bilo dodato u 0,5 mL suspenzije ne-fiksiranih ćelija. Posle 15 min inkubacije na ledu, uzorci su bili izmereni protočnom citometrijom uz korišćenje Coulter Epics XL/MCL protočnog citometra.
[0045]Vijabilnost ćelija svakog uzorka je bila određena merenjem protočnom citometrijom Pl sadržaja na kanalu 2 (568-590 nm). Granice odsecanja za diferencijaciju između živih i mrtvih ćelija zavisnu od fluorescencije su bile definisane na osnovu analize kontrolnih uzoraka medijuma za kultivaciju ćelija.
[0046]U pogledu fosfolipidoze su bili analizirani samo uzorci sa vijabilnošću ćelija
>= 90 % u odnosu na kontrolne uzorke. Za te svrhe, svaki uzorak Nile crvene (ne-fiksirani i fiksirani uzorci) je bio meren protočnom citometrijom na kanalu 1 (504-541 nm) i kanalu 4 (660-680 nm).
[0047]Za svaki kanal je bio izračunat intenzitet relativne Nile crvene fluorescencije testiranog uzorka poređenjem sa kontrolnim uzorcima i bio je izražen kao procenat intenziteta fluorescencije kontrole. Određivanje fosfolipidogenog potencijala i prve efektivne koncentracije (FEC) testiranog jedinjenja je bilo izvršeno manuelno na osnovu intenziteta fluorescencije na obe talasne dužine za fiksirane ćelije, kao i za ne-fiksirane ćelije.
Testsnižavanja Afi u pacovskom mozgu(Test 5)
[0048]In vivo efikasnost jedinjenja prema pronalasku je bila demonstrirana u testu snižavanja (redukcije) A(3 u pacovskom mozgu, a podaci su prezentovani u Tabeli 3. Mužjaci Sprague-Dawley pacova, starosti od 5 do 6 nedelja su bili korišćeni za demonstriranje sposobnosti jedinjenja prema pronalasku da redukuju amiloidne peptide A61-x u mozgu. Jedinjenja su bila davana oralnom sondom, odn. gavažom u 1% Polysorbate-80 i 0,5% Natrosol<®>, kao pojedinačne doze navedene Tabeli 3. Životinje su bile usmrćene 3 h posle doziranja, pa su mozgovi bili izvađeni, disektovani na mali mozak i levi i desni režanj velikog mozga i zatim su fleš zamrznuti u tečnom azotu.
[0049]Veliki mozak je bio homogenizovan (5 zapremina po težini) u 20 mM Tris-HCL, pH 8,5, 0,2% Triton-X100 uz dodatak inhibitora proteaze (cOmplete, Roche Applied Science) na 4°C uz korišćenje staklenog Dounce homogenizatora. Homogenat je bio centrifugiran na 120,000xg tokom 60 min na 4°C, a supernatant je sakupljen i analiziran na Ab1-x korišćenjem imunotesta sa detekcijom hemiluminescencije (Meso-Scale Discovery, Rockville, MD (MSD)).
[0050]Ploče sa 96 bunarčića sa streptavidinom (MSD) su bile prethodno blokirane sa 5% Blocker A rastvora (MSD) tokom 1 h na st na orbitalnom tresaču, pa su zatim isprane 4 puta sa fosfatnim puferovanim slanim rastvorom (PBS). Bunarčići su bili prethodno obloženi sa 20 ng/bunarčiću biotinilovanog antitela SIG-39155 (Clone M3,2, specifičnog za amino kiseline 10-15 glodarskog Ap) tokom 1 h na st i onda su isprani 4 puta sa PBS. Za Ap1-x analizu je bilo inkubirano 25 pl izbistrenih lizata mozga ili Ap1-40 standarda (8-500 pg/ml, sa 2x inkrementom) tokom 1 h na st uz konstantno trešenje. Bunarčići su bili isprani 4 puta sa PBS, i onda im je bilo dodato 25 pl detekcionog antitela (Sulfo-TAG obeleženo anti-Ap40 antitelo nabavljeno od MSD), pa su inkubirani tokom 1 h na st. Posle 4 ispiranja sa PBS, bilo im je dodato 150 pl hemiluminescentnog detekcionog reagensa (Read BufferT, MSD), pa je ploča bila očitana na MSD Sector Imager 6000 instrumentu. Kalibraciona kriva je bila fitovana u nelinearnom četvoroparametarskom regresionom modelu, a Api-x koncentracije su bile izračunate za svaki bunarčić koji je sadržao izbistrene lizate mozga. Procenat snižavanja AP je bio izračunat na osnovu razlike prosečnih Ap koncentracija dobijenih iz mozgova životinja tretiranih samo sa nosačem.
[0051]Tabela 1 pokazuje sledeća svojstva jedinjenja prema predmetnom pronalasku: BACE1 inhibitornu potenciju koja je izmerena u testu 1, ćelijsku inhibitornu potenciju koja je izmerena u testu 2, hERG inhibiciju koja je izmerena u testu 3, i prvu efektivnu koncentraciju (FEC) fosfolipidoze koja je izmerena u testu 4.
[0052]U Tabeli 2 nalaze se podaci koji pokazuju da određena jedinjenja prema predmetnom pronalasku imaju značajno niže IC50inhibitorne vrednosti u BACE1 enzimskom testu (Test 1) i u ćelijskom Abeta testu (Test 2) u odnosu na izvesna komparativna jedinjenja opisana u WO 2010/105179,
[0053]Sposobnost jedinjenja prema pronalasku da smanje moždani Ap je pokazana na pacovima, kao što je opisano u Testu 5, a podaci oin vivoefikasnosti su prikazani u Tabeli 3.
Metode tečenja
[0054]Predmetni pronalazak je usmeren na jedinjenja koja su korisna u lečenju poremećaja ili bolesti karakterisanih povišenim nivoima B-amiloidnih depozita ili (3-amiloida kod subjekta kod koga je inhibicija aktivnosti enzima B-sekretaze (BACE1) terapeutski korisna, uključujući, ali bez ograničavanja na lečenje, ublažavanje ili prevenciju neurodegenerativih poremećaja, poremećaja karakterisanih opadanjem kognitivnih sposobnosti, kognitivnog oštećenja, demencije i bolesti karakterisanih proizvodnjom p-amiloidnih depozita ili neurofibrilarnih spletova.
[0055]Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su korisna za lečenje Alchajmerove bolesti, Trizomije 21 (Daunov sindrom), nasledne cerebralne hemoragije sa amiloidozom holandskog tipa (HCHVVA-D), senilne demencije, cerebralne amiloidne angiopatije, degenerativne demencije, demencija mešovitog vaskularnog i degenerativnog porekla, demencije povezane sa Parkinsonovom bolesti, demencije povezane sa progresivnom supranuklearnom paralizom, demencije povezane sa kortikalnom bazalnom degeneracijom, Alchajmerove bolesti tipa sa difuznim Levijevim tetima, suve senilne makuiarne degeneracije (AMD), i glaukoma. "Suvi" oblik AMD, koji je takođe poznat kao "centralna geografska atrofija", nastaje usled atrofije retinalnog pigmentnog epitelnog sloja ispod neurosenzorske retine, koja izaziva gubitak vida usled gubitka fotoreceptora (štapića i čepića) u centralnom delu oka. Za ovo stanje ne postoji na raspolaganju tretman lekovima ili hirurškim putem. Do sada raspoloživi tretmani (npr. sugerisani od strane the National Eve Instituta) obuhvataju primenu vitaminskih suplemenata sa visokim dozama antioksidanasa, luteina i zeaksantina, koji mogu usporiti progresiju suve makuiarne degeneracije. Glaukom je bolest gde se pritisak fluida unutar oka povećava, što izaziva nepovratno oštećenje optičkog nerva i gubitak vida. Abeta kolokalizuje sa apoptotičnim retinalnim ganglijskim ćelijama u eksperimentalnom glaukomu i indukuje značajnu apoptozu retinalnih ganglijskih ćelija na način koji je zavisan od doze i vremena.
[0056]Shodno tome, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za primenu kao lek.
[0057]Pored toga, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje za primenu u lečenju bolesti i/ili stanja kod kojih je inhibicija aktivnosti enzima p-sekretaze (BACE1) terapeutski korisna.
[0058]Pored toga, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje za primenu u lečenju neurodegenerativnih poremećaja, poremećaja karakterisanih opadanjem kognitivnih sposobnosti, kognitivnog oštećenja, demencije i bolesti karakterisanih proizvodnjom p-amiloidnih depozita ili neurofibrilarnih spletova.
[0059]Zbog toga se predmetni pronalazak odnosi na jedinjenje prema predmetnom pronalasku za primenu u lečenju Alchajmerove bolesti, Trizomije 21 (Daunov sindrom), nasledne cerebralne hemoragije sa amiloidozom holandskog tipa (HCHVVA-D), senilne demencije, cerebralne amiloidne angiopatije, degenerativne demencije, demencija mešovitog vaskularnog i degenerativnog porekla, demencije povezane sa Parkinsonovom bolesti, demencije povezane sa progresivnom supranuklearnom paralizom, demencije povezane sa kortikalnom bazalnom degeneracijom, Alchajmerove bolesti tipa sa difuznim Levijevim telima, suve senilne makuiarne degeneracije (AMD), i glaukoma.
[0060]Takođe je opisan metod lečenja poremećaja koji se odnose ili su povezani sa prekomernom BACE1 aktivnosti kod pacijenta kome je to potrebno, koji sadrži administraciju pomenutom pacijentu efektivne količine opisanog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Dalje su opisani metodi inhibicije aktivnosti BACE1 kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrže administraciju subjektu i/ili dovođenje u kontakt njegovog receptora sa efektivnom količinom najmanje jednog opisanog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Takođe su opisani metodi ublažavanja p-amiloidnih depozita kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrže administraciju pomenutom subjektu efektivne količine najmanje jednog opisanog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0061]Opisan je terapeutski metod za lečenje ili ublažavanje poremećaja posredovanog sa BACE1 kod subjekta kome je to potrebno, koji sadrži administraciju subjektu kome je to potrebno efektivne količine jedinjenja prema pronalasku koje je ovde opisano, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njegove kompozicije.
[0062]Kada se ovde koriste, izrazi "subjekt" i "pacijent" se mogu koristiti jedan umesto drugog, i označavaju sisara kome je potrebno lečenje, npr. kućne ljubimce (npr. pse, mačke i slično), životinje na farmama {npr. krave, svinje, konje, ovce, koze i slično) i laboratorijske životinje (npr. pacove, miševe, zamorčiće i slično). Obično je subjekat čovek kome je potrebno lečenje.
[0063]Kada se ovde koriste, izrazi "lečiti" ili lečenje" se odnose na ostvarivanje željenog farmakološkog i/ili fiziološkog efekta. Efekat može biti profilaktički (tj. smanjenje verovatnoće razvoja poremećaja ili bolesti) ili terapeutski, koji obuhvata ostvarivanje, delimično ili suštinsko, jednog ili više od sledećih rezultata: delimično ili potpuno smanjenje obima bolesti, poremećaja ili sindroma; ublažavanje ili poboljšanje kliničkog simptoma ili indikatora povezanog sa poremećajem; ili usporavanje, inhibiranje ili smanjenje verovatnoće progresije bolesti, poremećaja ili sindroma.
[0064]Opseg doza jedinjenja prema predmetnom pronalasku koji se može primeniti dnevno je obično od 0,1 do 3000 mg, a prvenstveno od 1 do 2000 mg, još poželjnije od 10 do 1000 mg, te najpoželjnije od 50 ili 500 mg. Svaka dozirana jedinica može podesno sadržati od 0,1 do 1000 mg, a prvenstveno od 25 do 250 mg. Aktuelna farmaceutska efektivna količina ili terapeutska doza će naravno zavisiti od faktora koji su poznati stručnjacima iz odgovarajuće oblasti, kao što su starost i težina pacijenta, način primene i ozbiljnost bolesti. U svakom slučaju, kombinacija će se davati u dozama i na način koji omogućava da bude data farmaceutski efektivna količina u skladu sa jedinstvenim stanjem pacijenta.
Farmaceutske kompozicije
[0065] Podesni preparati za administraciju jedinjenja prema predmetnom pronalasku će biti očigledni za one koji su prosečni stručnjaci u odgovarajućoj oblasti i obuhvataju, na primer, tablete, pilule, kapsule, supozitorije, lozenge, dražeje, rastvore, sirupe, eliksire, kesice, injektabilne, inhalativne i praškove, itd. Sadržaj farmaceutski aktivnog, odnosno aktivnih jedinjenja bi trebao da bude u opsegu od 0,1 do 95 tež. %, a prvenstveno od 5 do 90 tež. % kompozicije kao celine.
[0066] Podesne tablete se mogu dobiti, na primer, mešanjem jednog ili više jedinjenja prema pronalasku sa poznatim ekscipijensima, na primer, inertnim rastvaračima, nosačima, agensima za raspadanje, adjuvansima, surfaktantima, vezivima i/ili lubrikansima. Tablete se takođe mogu sastojati od nekoliko slojeva.
Kombinovana terapija
[0067] Prema jednom primeru izvođenja, predmetni pronalazak obuhvata kombinovanu terapiju za lečenje ili ublažavanje ovde opisanih bolesti ili poremećaja. Kombinovana terapija sadrži administraciju kombinacije najmanje jednog jedinjenja prema predmetnom pronalasku sa jednim ili više agenasa izabranih iz grupe, na primer, sledećih: inhibitori ili moduiatori gama-sekretaze; inhibitori amiloidne agregacije koji blokiraju formiranje Abeta oligomera ili Abeta fibrila (npr. ELND-005); supstance koje direktno ili indirektno deluju neuroprotektivno i/ili modifikuju bolest; antioksidansi (npr. vitamin E ili ginkolid); antiinflamatorne supstance (npr. Cox inhibitori, NSAlDs koji dodatno ili isključivo imaju svojstva snižavanja Abeta); inhibitori HMG-CoA reduktaze (statini); inhibitori acetilholinesteraze (npr. donepezil, rivastigmin, takrin, galantamin; takrin); antagonisti NMDA receptora (npr. memantin); agonisti AMPA receptora; pozitivni moduiatori AMPA receptora, AMPAkini, inhibitori resorpcije monoaminskog receptora, supstance koje modulišu koncentraciju ili oslobađanje neurotransmitera; supstance koje indukuju izlučivanje hormona rasta (npr. ibutamoren mezilat i kapromorelin); antagonisti ili inverzni agonisti CB-1 receptora; antibiotici (npr. minociklin ili rifampicin); PDE2, PDE4, PDE5, PDE9, PDE10 inhibitori, inverzni agonisti GABAA receptora, antagonisti GABAA receptora, agonisti ili parcijalni agonisti ili pozitivni moduiatori nikotinskog receptora, agonisti ili parcijalni agonisti ili pozitivni moduiatori alfa4beta2 nikotinskog receptora, agonisti ili parcijalni agonisti ili pozitivni moduiatori alfa7 nikotinskog receptora, antagonisti histamina H3, 5HT-4 agonisti ili parcijalni agonisti, 5HT-6 antagonisti, antagonisti alfa2-adrenoreceptora, antagonisti kalcijuma, agonisti ili parcijalni agonisti ili pozitivni moduiatori muskarinskog receptora M1, antagonisti muskarinskog receptora M2, antagonisti muskarinskog receptora M4, pozitivni moduiatori metabotropnog glutamatnog-receptora 5, antidepresivi, kao što su citalopram, fluoksetin, paroksetin, sertralin i trazodon; anksiolitici, kao što su lorazepam i oksazepam; antipsihotici, kao što su aripiprazol, klozapin, haloperidol, olanzapin, kvetiapin, risperidon i ziprasidon, i druge supstance koje modulišu receptore ili enzime tako da se efikasnost i/ili bezbednost jedinjenja prema pronalasku poveća i/ili da se smanje neželjena dejstva. Jedinjenja prema pronalasku se takođe mogu primeniti u kombinaciji sa imunoterapijama (npr. aktivnom imunizacijom sa Abeta ili njegovim delovima ili pasivnom imunizacijom sa humanizovanim anti-Abeta antitelima ili nanotelima) za lečenje gore navedenih bolesti i stanja. Kombinovana terapija obuhvata ko-administraciju jedinjenja prema pronalasku sa jednim ili više drugih agenasa, sukcesivnu administraciju jedinjenja i jednog ili više drugih agenasa, administraciju kompozicije koja sadrži jedinjenje i jedan ili više agenasa, ili istovremenu administraciju posebnih kompozicija koje sadrže jedinjenje i jedan ili više drugih agenasa.
Eksperimentalni deo
Postupci dobijanja jedinjenja
[0068]Jedinjenja prema pronalasku se mogu dobiti primenom konvencionalnih postupaka koji koriste dostupne reagense i početne materijale. Reagensi korišćeni u dobijanju jedinjenja prema ovom pronalasku mogu biti ili komercijalno nabavljeni ili se mogu dobiti standardnim postupcima opisanim u literaturi.
[0069]Mikrotalasne reakcije su vršene u CEM reaktoru uz korišćenje SP sistema za otkrivanje.
[0070]Tamo gde su dati NMR podaci, spektri su dobijeni pomoću instrumenta Varian-400 (400 MHz) i izraženi su u ppm u donjem delu polja od tetrametilsilana sa brojem protona, umnošcima i konstantama kuplovanja navedenim u zagradama zajedno sa referencom za deuterizovani rastvarač.
[0071]Jedinjenja su prečišćena pomoću baznog preparativnog HPLC postupka kao što je dole opisano.
Postupak 1:
[0072]Mobilna faza A: voda sa 0,05% rastvorom amonijaka; Mobilna faza B: ACN; Protok: 25 mL/min;
Detekcija: UV 220 nm / 254 nm; Kolona: Phenomenex Gemini C18 250<*>30mm<*>5um Temperatura kolone: 30°C
Postupak 2:
[0073]Mobilna faza A: voda sa 0,05% rastvorom amonijaka; Mobilna faza B: ACN; Protok: 25 mL/min;
Detekcija: UV 220 nm / 254 nm; Kolona: Durashell C18 250<*>30mm<*>5um; Temperatura kolone: 30°C
[0074]LC-MS vrednosti su dobijene korišćenjem sledećeg hromatografskog uslova: HPLC Sistem: VVaters ACQUITY; kolona: VVaters ACQUITY CSH™C18 1,7 uM Guard kolona: VVaters Assy. Frit, 0,2uM, 2,1 mm; temp. kolone: 40 °C Mobilna faza: A: TFA: Voda (1 : 1000, v:v) Mobilna faza B: TFA: ACN (1: 1000, v:v); Protok: 0,65 mL/min;
Zapremina ubrizgavanja: 2 uL; Vreme akvizicije: približno 1,5 min.
Gradijentni Program:
[0075]
Parametri Masenog Spektrometra
[0076]Maseni Spektrometar: VVaters SQD; Jonizacija: Pozitivna Elektrosprej Jonizacija (ESI); Mod Skeniranja (100-1400 m/z na svake 0,2 sekunde); ES kapilarni napon:3,5 kv; ES konus napona: 25 v Temperatura izvora: 120 °C; Temperatura rastvaranja: 500 °C; Protok gasa za rastvaranje: Podešavanje za azot650 (L/h); Protok konusa gasa: Podešavanje za azot 50 (L/h)
[0077]Za Primer 10, korak 2, ialternativnu sintezumeđu proizvoda 38, korak 1 i 2 su korišćeni sledeći hromatografski uslovi i instrumentacija:
LC-MS podaci su dobijeni korišćenjem sledećih hromatografskih uslova:
Gradijentni Program:
[0078]
Parametri Masenog Spektrometra Maseni Spektrometar: Agilent 77
[0079]
[0080]Za Primer 27 su korišćeni sledeći hromatografski uslovi i instrumentacija:
[0081]SFC separacija i karakterizacija jedinjenja su izvršeni pod siedećim uslovima sledećim metodom.
Metod A:
[0082]Instrument: Thar SFC 80; Kolona: AD 250mm<*>30mm, 5um; Mobilna faza: A: Superkritični C02, B: IPA (0,05% DEA), A: B =80:20 pri 60ml/min; Temp. Kolone: 38 °C; Pritisak mlaznice: 100 Bar; Temp. mlaznice: 60<C>C; Temp. isparivača: 20 °C; Temp. trimera: 25 °C; Talasna dužina: 220nm.
Metod B:
[0083]Instrument: SFC MG2; Kolona: OJ 250mm<*>30mm, 5um; Mobilna faza: A: Superkritični CO2, B: MeOH(0,05% DEA), A:B =90:10 pri 70ml/min; Temp. Kolone: 38 °C; Pritisak mlaznice: 100 Bar, Temp. mlaznice: 60<D>C; Temp. isparivača: 20 °C; Temp. trimera: 25 °C; Talasna dužina: 220nm
[0084] Na sledeće tehnike, rastvarače i reagense se može pozivati njihovim sledećim skraćenicama:
Primer1
[0085]
Korak 1: Sinteza međuproizvoda 3
[0086]
[0087]Smeša jedinjenja 1 (50,0 g, 236 mmol) i metil akrilata (42,0 g, 472 mmol) u anhidrovanom THF (900 mL) je rashlađena na 0°C i onda joj je dodavan t-BuOK (31,8 g, 284 mmol, 1,1 ekv.) u jednakim dozama tokom 30 min, pa je smeša zatim zagrejana do st tokom 1 h i mešana je tokom 40 min na st. U ovu reakcionu smešu su dodati DMF (200ml_) i Etl (74 g, 472 mmoi), a zatim je mešana na st preko noći. THF je odstranjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen sa H2O (300 mL) i ekstrahovan je pomoću EtOAc, te je koncentrovan da bi se dobilo sirovo jedinjenje 2 (120,0 g). Ovaj proizvod je korišćen kao takav u siedećem koraku.
[0088]Smeša jedinjenja 2 (120,0 g, 310 mmol) i LiCI (130,0 g, 3100 mmol) u DMSO (900 mL) je refluksovana preko noći. Smeša je ugašena sa vodom (3L) i zatim je ekstrahovana pomoću EtOAc (3 3400 mL). Izdvojena organska faza je osušena i onda je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (petroleum etar: EtOAc = 20:1) da bi se dobio međuproizvod 3 (15 g, 20%). <1>H NMR: (CDCI3): 6 7,91 (s, 1H), 7,74 (dd,J =8,0 Hz, 1H), 7,41 (d,J =8,0 Hz, 1H), 3,80 (s, 2H), 2,48-2,53 (m, 2H), 2,33-2,49 (m, 1H), 2,15-2,23 (m, 1H), 1,75-1,95 (m, 4H), 1,21-1,40 (m, 1H), 0,88 (t,J= 8,0 Hz, 3H).
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 5
[0089]
[0090]U smešu THF (20 mL) i MeOH (5 mL) na -78 °C su dodati međuproizvod 3 (6,0 g, 18,7 mmol), NaBH4(355 mg, 9,3 mmol) i CeCb.7H20 (70 mg, 0,19 mmol). Smeša je mešana na -78 °C tokom 20 min, a zatim je ugašena pomoću zasićenog rastvora NH4CI (30 mL), te je ekstrahovana pomoću EtOAc (400 mL X 4). EtOAc faze su kombinovane i koncentrovane da bi se dobilo sirovo jedinjenje 4 (6,5 g, sirovo). U smešu jedinjenja 4 (6,5 g, 20,0 mmol) i NaH (3,2 g, 80,0 mmol) u DMF (100 mL) na 0°C je dodat Mel (11,4 g, 80,0 mmol). Smeša je mešana na st preko noći. Smeša je ugašena pomoću H2O, pa je ekstrahovana pomoću EtOAc, i koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen na koloni sa silika gelom (eluent: petroleum etar: eti! acetat od 20: 1 do 15: 1) da bi se dobilo međuproizvod 5 (3,5 g, 56%). LC-MS: tR= 1,315 min, MS (ESI) m/z 339,1 [M+H]<+>. <1>H NMR: (CDCb): 5 7,88 (s, 1H), 7,69 (dd,J =8,4, 2,0 Hz, 1H), 7,31 (d,J= 8,4 Hz, 1H), 3,39 (s, 3H), 2,97 (s, 2H), 2,88-2,94 (m, 1H), 2,21-2,26 (m, 1H), 1,81-1,87 (m, 1H), 1,70-1,78 (m, 1H), 1,40-1,59 (m, 4H), 1,12-1,39 (m, 2H), 0,88 (t,J=8,0 Hz, 3H).
Korak 3: Sinteza međuproizvoda 6A & 6B
[0091]
[0092]Smeša međuproizvoda 5 (3,5 g, 10,4 mmol) i titanijum (IV) etoksida (23,7 g, 104 mmol) u suvom THF (40 mL) je mešana na st tokom 1 h. Dodat joj je( S)- N- terc-butilsulfinamid (1,6 g, 11,6 mmol), a dobijena smeša je preko noći mešana na 80 °C pod atmosferom N2. Reakciona smeša je zatim ohlađena i dodata joj je voda (400 mL), a onda je isfiitrirana. Vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc (3 x 400 mL). Izdvojene organske faze su kombinovane, pa su osušene i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (petroleum etar: EtOAc = 20:1) i jedinjenja su zatim eluirana na sledeći način da bi se dobili međuproizvodi 6A (1,5 g, 33%) i 6B (1,5 g, 33%).
Korak 4: Sinteza međuproizvoda 7B
[0093]
[0094]U smešu etoksi-etena (1,3 g, 17,0 mmol) u anhidrovanom THF (20 mL) na - 78 °C pod atmosferom N2 je ukapan t-BuLi (13,0 mL, 17,0 mmol, 1,3 M u heksanu) i mešan je tokom 20 min. Dobijena smeša je zatim mešana na 0<C>C tokom dodatnih 45 min. U ovu smešu na -78 °C, je ukapan međuproizvod 6B (1,5 g, 3,4 mmol) u anhidrovanom THF (20 mL) i mešan je tokom 2,5 h. Reakcija je prekinuta pomoću zas. NH4CI (50 mL) i ekstrahovana je pomoću EtOAc (3 X 300 mL). Organske faze su sjedinjene i koncentrovane da bi se dobio ostatak koji je prečišćen pomoću kolone sa silika gelom (petroleum etar: EtOAc = 20: 1) da bi se dobio međuproizvod 7B(1,2g, 69%).
Korak 5: Sinteza međuproizvoda 8B
[0095]
[0096]Međuproizvod 7B (1,2 g, 2,4 mmol) je dodat u DCM: MeOH (5:1, 20 mL), pa je smeša ohlađena do - 78 °C, a ozon je barbotiran kroz smešu tokom 20 min. Smeša je zatim očišćena pomoću N2i tretirana je pomoću Me?S na -78 °C. Zatim je ostavljeno da se reakcija zagreje na st i mešana je tokom 3 h. Rastvarač je odstranjen pod vakuumom, a ostatak je prečišćen preparativnom TLC (petroleum etar: EtOAc = 3: 1) da bi se dobilo jedinjenje 8B (860 mg, 70%).
LC-MS: tR= 1,351 min, MS (ESI) m/z 516,1 [M+H]<+>.
Korak 6: Sinteza međuproizvoda 9B
[0097]U jedinjenje8B(860 mg, 1,7 mmol) u MeOH (10 mL) je dodato 4 M rastvora HCI u dioksanu (2 mL). Dobijena smeša je mešana tokom 30 min. Rastvarao je odstranjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje9B(800 mg). Ostatak je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 7, Sinteza međuproizvoda 10B
[0098]
[0099]Suspenzija međuproizvoda9B(500 mg, 1,9 mmol), Zn(CN)2(300 mg, 2,6 mmol), Pd2(dba)3(150 mg, 0,16 mmol), dppf (160 mg, 0,32 mmol) i praškastog Zn (60 mg, 0,9 mmol) u DMF (15 mL) je zagrevana na 120 °C tokom 3 h u CEM mikrotalasnom reaktoru. Smeša je koncentrovana pod vakuumom, a ostatak je prečišćen pomoću kolone sa silika gelom (eluent: petroleum etar: EtOAc od 20: 1 do 8: 1) da bi se dobilo jedinjenje10B(150 mg, 40%).
Korak 8: Sinteza međuproizvoda 11B
[0100]
[0101]Međuproizvod10B(150 mg, 0,42 mmoi) je dodat u DCM (10 mL), H2O (10 mL) i NaHCCh (350 mg, 4,2 mmol). U ovu smešu je uz energično mešanje dodat
tiofozgen (100 mg, 0,84 mmol), pa je mešana tokom 50 min na st i ekstrahovana je pomoću DCM (3 X 40 mL). Organski sloj je ispran sa slanim rastvorom (2 X 40 mL), te je osušen, a rastvarač je odstranjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje11B(150 g, 93%), koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 9: Sinteza međuproizvoda 12B
[0102]
[0103]U smešu jedinjenja11B(150 mg, 0,39 mmol) u THF (5 mL) su dodati 2-aminometilpirimidin (67 mg, 0,78 mmol) i TEA (395 mg, 3,90 mmol). Smeša je mešana preko noći na st. Reakcija je razređena sa vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc (30 mL). Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom (petroleum etar: etil acetat = 10: 1) da bi se dobilo12B(100 mg, 70%). LC-MS: tR= 1,204 min MS (ESI) m/z 462,2 [M+H]<+>.
Korak 1: Sinteza primera 1
[0104]
[0105] Bilo je dodato jedinjenje 12B (100 mg, 0,22 mmol) u MeOH (10 mL)i NH4OH (3 mL), stoje bilo praćeno sa t-BuChH (1 mL). Posle dodavanja, smeša je mešana na st tokom 24 h. Smeša je prekinuta pomoću zasićenog rastvora Na2S20s (0,5 mL). Ostatak je raspodeljen između EtOAc (20 mL) i H2O (10 mL). Organski sloj je izdvojen, pa je ispran slanim rastvorom (10 mL), te je osušen, isfiltriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću HPLC (metod 1) da bi se dobilo jedinjenje izPrimera1 (14,60 mg, 15%).
LC-MS: tR = 0,933 min, MS (ESI) m/z 445,2 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CD3OD): 5 8,74 (d,J =5,2 Hz, 2H), 7,61 (dd,J =7,6, 1,6 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,45 (d,J=8,0 Hz, 1H), 7,35 (t,J =5,2 Hz, 1H), 4,94 (s, 2H), 3,38 (s, 3H), 3,17 (s, 2H), 2,80-2,87 (m, 1H), 2,08-2,13 (m, 1H), 1,90-1,94 (m, 1H), 1,38-1,85 (m, 2H), 1,22-1,39 (m, 3H), 1,12-1,18 (m, 2H), 0,76 (t,J = 8,0 Hz,3H).
Primer 2
[0106]
[0107]Ovo jedinjenje je sintetisano od međuproizvoda10Biz Primera 1 kao što je prikazano na donjoj šemi.
Korak 1: Sinteza međuproizvoda 13
[0108] U mešani rastvor tiouree (23 g, 302 mmol) u THF (5,0 L) pod argonom na 0 °C je dodat natrijum hidrid (29,9 g, 755 mmol, 60% u mineralnom ulju). Posle 5 min, ledeno kupatilo je uklonjeno, a reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min. Smeša je ponovo ohlađena na 0 X, i dodat je dhferc.-butil dikarbonat (138 g, 635 mmol), a ledeno kupatilo je uklonjeno posle 30 min mešanja na toj temperaturi. Dobijeni mulj je mešan tokom sledeća 2 h na st. Zatim je reakcija prekinuta pomoću vodenog rastvora zasićenog NaHC03(500 mL). Reakciona smeša je onda sipana u vodu (5,0 L) i ekstrahovana je pomoću EtOAc (3 X 2,0 L). Sjedinjeni organski sloj je osušen, pa je isfiltriran, i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio međuproizvod 13 (80 g, 96%) u obliku čvrste bele materije, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
[0109] U smešu međuproizvoda 13 (4,14 g, 15,0 mmol) i anhidrovanog THF (300 mL) je dodat NaH (60% u mineralnom ulju, 720 mg, 18,0 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h, a zatim joj je dodat TFAA (3,47 g/2,33 mL, 16,5 mmol) i mešanje je nastavljeno tokom 1 h. Zatim joj je dodat 4-(aminometil)tetrahidropiran (2,5 g, 16,5 mmol) i Et3N (3,03 g/4,16 mL, 30,0 mmol) u anhidrovanom THF (130 mL), a dobijena reakciona smeša je mešana na st preko noći. Dodat je H2O (150 mL) da bi se reakcija prekinula, a smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (3 X 200 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni, i rastvarač je onda odstranjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću fleš koionske hromatografije da bi se dobilo jedinjenje 13 (3,54 g, 86%) u obliku čvrste bele materije.
LCMS: tR= 0,973 min; MS (ESI) m/z219 [M-t-Bu]<+>.
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 14
[0110]U smešu jedinjenja10B(2,5 g, 7,0 mmol) u 30 mL DMF je dodato jedinjenje 13 (2,3 g, 8,4 mmol), EDCI (2,5 g, 14,0 mmol) i DIEA (1,7 g, 14,0 mmol). Smeša je mešana na st preko noći. Ekstrahovana je pomoću EtOAc (3 X 80 mL), pa je isprana sa slanim rastvorom (3 X 50 mL), te je osušena, a rastvarač je odstranjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom (petroleum etar: etil acetat = 5: 1) da bi se dobilo 14 (2,7 g, 75%).
LC-MS: tR= 0,972 min, MS (ESI) m/z 495,3 [M-t-Bu]<+.>
Korak 3: Sinteza primera 2
[0111]U smešu međuproizvoda 14 (2,7 g,4,9 mmol) u DCM (30 mL) je dodat TFA (6 mL). Posle dodavanja, smeša je mešana na st tokom 1 h. Reakcija smeše je podešena pomoću rastvora NaHC03na pH 8,0-9,0. Organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom (petroleum etar: etil acetat = 1: 1) da bi se dobilo jedinjenje izPrimera2 (1,83 g, 83%) u obliku čvrste bele materije.
LC-MS: tR= 0,897 min, MS (ESI) m/z 451,2 [M+H]<+>.
1H-NMR: (CD3OD): 5 7,66 (dd, J= 8,0,1,6 Hz, 1H), 7,51 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 7,33 (s, 1H), 3,92-3,98 (m, 2H), 3,37-3,43 (m, 7H), 3,20 (m, 2H), 2,78-2,83 (m, 1H), 2,16-2,20 (m, 1H), 1,87-2,03 (m, 1H), 1,71-1,77 (m, 1H), 1,58-1,62 (m, 1H), 1,51-1,54 (m, 2H), 1,28-1,37 (m, 7H), 1,09-1,10 (m, 1H), 0,76(t, J =7,6 Hz, 3H).
Primer 3
[0112]
Sinteza međuproizvoda 18
[0113]
Korak1:Sintezameđuproizvoda16
[0114]Smeša jedinjenja15(2,0 g, 10,6 mmol) u anhidrovanom THF (20 mL) je dodata u rastvor metil magnezijum bromida (14 mL, 42 mmol, 3,0 ivi u Et20) na -30 °C pod atmosferom azota. Smeša je mešana na -30 °C tokom 4 h, a zatim je prekinuta dodavanjem vode (40 mL) i aq. HCI (50 mL, 1 M) uz mešanje na 0<D>C. Smeša je izdvojena, a vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc (2 X 50 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanim rastvorom (2 X 50 mL), pa su osušeni, isfiltrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio sirovi međuproizvod16(2,1 g, 100% sirovo) u obliku bezbojnog ulja, koje je korišćeno neposredno u sledećem koraku bez prečišćavanja. <1>H NMR: (CDCb): o 4,97 (br, 1H), 3,10 (s, 2H), 2,17 (br, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,20 (s, 6H).
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 17
[0115]U smešu međuproizvoda16(3,0 g, 15,9 mmol, sirovo) u anhidrovanom DCM (50 mL) je dodat DAST (2,3 mL, 17,4 mmol) na -78 °C pod atmosferom azota. Smeša je mešana na -78 °C tokom 1 h, i onda je ostavljeno da se zagreje do st preko noći. Smeša je zatim ohlađena do 0 °C, pa je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog sloja NaHC03(30 mL) uz lagano mešanje na 0 °C. Smeša je razdvojena, i vodeni sloj je ekstrahovan pomoću DCM (2 X 20 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanim rastvorom (2 X 30 mL), te su osušeni, isfiltrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio sirovi međuproizvod 17 (2,5 g, 76% sirovo), koji je korišćen neposredno u sledećem koraku bez prečišćavanja. <1>H NMR: (CDCb): 5 4,82 (br, 1H),3,30-3,35 (d, J= 6,0 Hz,1H), 3,24-3,26(d, J=6,0 Hz, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,37 (s, 3H), 1,35 (s, 3H).
<19>F NMR: (CDCb 400 MHz): 5 -144,93.
Korak 3: Sinteza međuproizvoda 18
[0116]U smešu međuproizvoda17(2,0 g, 10,5 mmol, sirovo) u anhidrovanom DCM (10 mL) je uz mešanje dodata smeša HCI-dioksan (10 mL, 40 mmol, 4 M u dioksanu). Smeša je mešana na st tokom 2 h, posle kog vremena je rastvarao koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je ispran sa smešom DCM: petroleum etar (1:1) (3 X 10 mL), a talog je sakupljen i osušen pod vakuumom da bi se dobilo sirovo jedinjenje18(1,1 g), koje je korišćeno neposredno u sledećem koraku bez prečišćavanja.
<1>H NMR: (CD3OD): 5 3,15-3,25 (d,J = 20,0 Hz,2H), 1,51 (s, 3H), 1,48 (s, 3H).
<19>F NMR: (CDCb 400 MHz): 5 -147,59,
Primer 3
[0117]
[0118] Primer3 je sintetisan iz međuproizvoda11Biz Primera 1 praćenjem iste procedure kao u Primeru 1 i korišćenjem međuproizvoda18u koraku 9 Primera 1. LC-MS: tR= 1,12 min, MS (ESI) m/z 427 [M+H]<+>. <1>H-NMR: (CD3OD) 5 7,65 (dd,1H, J= 8, 2 Hz),7,51 (d,1H, J= 8 Hz), 7,31(s, 1H), 3,72 (dd, 2H,J =22, 4 Hz), 3,37 (s, 3H), 3,20(ap q, 2H, J =16 Hz), 2,82 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,79-1,70 (m, 1H), 1,52-11,22 (m, 10H), 1,21-1,09 (m, 1H), 0,77 (t,3H, J = 7 Hz).
Primer 4
[0119]
Sinteza međuproizvoda 25
[0120]
Korak 1: Sinteza međuproizvoda 20
[0121]Smeša dihidro-2H-piran-4(3H)-ona (19, 50,0 g, 500 mmol) i 2-hloroacetonitrila (35,0 g, 350 mmol) u terc.-buta no I u (50 mL) je mešana tokom 30 min. U ovu smešu je dodavan rastvor t-BuOK (60 g, 550 mmol) u terc.butanolu (500 mL) tokom 40 min. Reakciona smeša je mešana na st tokom 16 h. Onda je razređena sa vodom i ugašena je pomoću 10% HCI. Reakciona smeša je koncentrovana do jedne trećine svoje početne zapremine, pa je ekstrahovana pomoću dietil etra četiri puta. Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanim rastvorom, te su osušeni preko MgS04, isfiltrirani, i koncentrovani da bi se dobio međuproizvod20(57 g), koji je korišćen neposredno u sledećem koraku bez prečišćavanja.
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 21
[0122]Međuproizvod 20 (57 g) je mešan sa dihlorometanom (200 mL) u polipropilenskoj boci. Boca je ohlađena do 0 X i onda je polako dodavan 70% hidrogen fluorid-piridin (50 mL). Ostavljeno je da se smeša zagreje do sobne temperature preko noći. Reakciona smeša je razređena sa etil acetatom (500 mL) i onda je sipana u zasićeni vodeni NaHCOs. Korišćen je dodatni čvrsti NaHC03da bi se smeša pažljivo neutralisala sve dok nisu prestali da se pojavljuju mehurići. Organski sloj je izolovan, a vodeni sloj je ekstrahovan pomoću etil acetata (3 X 500 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa 1% vodenim rastvorom HCI, slanim rastvorom, pa su osušeni (MgS04), isfiltrirani i koncentrovani da bi se dobio sirovi međuproizvod21(54 g), koji je korišćen neposredno u sledećem koraku bez prečišćavanja.
1H NMR: (CDCb): 5 4,37 (m, 2H), 3,96-2,70 (m, 4H), 1,97-1,81 (m, 4H).
Korak 3: Sinteza međuproizvoda 22
[0123]U smešu međuproizvoda 21 (54 g; 340 mmol) u 2-propanolu (1000 mL) i vodi (250 mL) na 0X je dodat natrijum borohidrid (20 g, 509 mmol). Smeša je mešana i ostavljena je da se zagreje do st tokom 3 h. Reakcija je prekinuta sa acetonom, i mešana je tokom još 1 h. Bistra tečnost je izdvojena iz čvrste materije odlivanjem. Dodatni EtOAc je korišćen da se čvrste materija opere, i odliven je. Sjedinjeni organski rastvor je koncentrovan. Ostatak je prečišćen sa fleš kolonskom hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 5-20% EtOAc u heksanima da bi se dobio međuproizvod 22 (22 g, 40% za 3 koraka) kao tečnost. <1>H NMR: (CDCb): 5 :3,82-3,77 (m, 4H), 3,72-3,52 (dd,J =20,8, 6,4 Hz, 2H), 2,69(s, 1H), 1,82-1,60 (m, 4H).
Korak 4: Sinteza međuproizvoda 23
[0124]U smešu međuproizvoda 22 (20 g, 150 mmol) i trietilamina (22,7 g, 225 mmol) u DCM (200 mL) je dodat MsCI (25,8 g, 225 mmol) na 0 X. Smeša je mešana na st tokom 2 h, a zatim joj je dodata voda. Vodeni sloj je ekstrahovan pomoću DCM (2 X 200 mL). Rastvarač je osušen i odstranjen da bi se dobio sirovi međuproizvod 23 (30 g, 100%), koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. <1>H NMR: (CDCb): 6 :4,22 (d,J=20,0 Hz, 2H), 3,87-3,82 (m, 4H), 3,06(s, 3H), 1.88-1,68 (m,4H).
Korak 5: Sinteza međuproizvoda 24
[0125]U smešu međuproizvoda 23 (10 g, 47 mmol) sa DMF (150 mL) su dodati NaNs (16 g, 250 mmol) i NaHC03(9,3 mg, 100 mmol) na 120 X. Smeša je mešana na 120 X tokom 20 h, pa je reakcija prekinuta pomoću vode, te je ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X 300 mL). Rastvarač je osušen i odstranjen pod vakuumom da bi se dobio sirovi međuproizvod 24 (8 g), koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 6: Sinteza međuproizvoda 25
[0126]U smešu međuproizvoda 24 (8 g, 50 mmol) u etil acetatu (100 mL) je dodat Pd/C (0,8 g, 10% sadržaj) pod atmosferom azota, pa je smeša degazirana i izvršena je izmena sa vodonikom 3 puta. Finalna smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom vodonika od 1 atm. tokom 24 h. Katalizator je isfiltriran kroz podlogu od Celita<®>i ispran je sa EtOAc (2 X 50 mL). Sjedinjeni filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio međuproizvod 25 (5,3 g, 80%). 1H NMR: (CD3OD): 5 3,83-3,79 (m, 4H), 2,76-2,71 (d,J =8,0 Hz, 2H), 1,83-1,65 (m, 4H).
<19>F NMR: (CD3OD, 400 MHz) 5 : -169,66.
Primer 4
[0127]
[0128]Primer 4 je sintetisan iz međuproizvoda11Bpraćenjem iste procedure kao što je opisano za Primer 1 uz korišćenje međuproizvoda 25 umesto 2-pirimidilmetanamina u koraku 9.
LC-MS: tR= 0,98 min, MS (ESI) m/z 469 [M+H]<+>.
<1>H-NMR: (CD3OD) 5 7,64 (d,1H, J = 8 Hz), 7,50 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,31(s, 1H), 3,84-3,65 (m, 6H), 3,36 (s, 3H), 3,19 (ap q,2H, J= 16 Hz), 2,81(m, 1H), 2,17 (m, 1H), 1,89-1,66 (m, 6H), 1,50-1,37 (m, 3H), 1,34 (m, 2H), 1,20-1,11 (m, 1H), 0,76 (t, 3H,J =8 Hz).
Primer 5
[0129]
Korak 4: Sinteza međuproizvoda 7A
[0130]
[0131]U smešu etoksietena (1,3 g, 17,0 mmol) u anhidrovanom THF (20 mL) na -78 °C pod N2atmosferom je ukapan t-BuLi (13,0 mL, 17,0 mmol, 1,3 M u heksanu) i smeša je onda mešana tokom 20 min. Dobijena smeša je zatim mešana na 0 °C tokom sledećih 45 min i dodato joj jejedinjenje 6A (1,5 g, 3,4 mmol) u anhidrovanom THF {20 mL), pa je mešana tokom 2,5 h. Reakcija je prekinuta pomoću zas. NH4CI {50 mL) i onda je ekstrahovana pomoću EtOAc (3 X 300 mL). Organske faze su sjedinjene i koncentrovane da bi se dobio sirovi proizvod. On je prečišćen kolonom na silika gelu (petroleum etar: EtOAc= 20: 1) da bi se dobilo jedinjenje 7A (1,2 g, 69%) koje je korišćeno kao takvo u sledećem koraku.
Korak 5: Sinteza međuproizvoda 8A
[0132]
[0133]Smeša jedinjenja7A(1,2 g, 2,4 mmol) u DCM: MeOH = 5:1 (20 mL) je ohlađena do -78 °C, pa je ozon barbotiran kroz smešu tokom 20 min. Smeša je
prečišćena sa N2i onda je tretirana sa Me2S (5 mL) na -78 °C, a zatim je ostavljeno da se zagreje do st i mešana je tokom 3 h. Rastvarač je odstranjen pod vakuumom, a ostatak je prečišćen pomoću preparativne TLC (petroleum etar: EtOAc= 3: 1) da bi se dobilo jedinjenje8A(860 mg, 70%). LC-MS: tR= 1,333 min; MS (ESI) m/z 516,1
[M+H]<+>.
Korak 6: Sinteza međuproizvoda 9A
[0134]
[0135]U smešu jedinjenja8A(860 mg, 1,7 mmol) u MeOH (10 mL) je dodato 4 M rastvora HCI u dioksanu (2 mL). Dobijena smeša je mešana tokom 30 min na st. Rastvarao je odstranjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje9A(800 mg) koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LC-MS:\ r=0,976 min; MS (ESI) m/z 361,1 [M+H]<+>.
Korak 7: Sinteza međuproizvoda 10A
[0136]
[0137]Smeša jedinjenja9A(500 mg, 1,9 mmol), Zn(CN)2(300 mg, 2,6 mmol), Pd2(dba)3(150 mg, 0,16 mmol), dppf (160 mg, 0,32 mmol) i praškastog Zn (60 mg, 0,9 mmol) u DMF (15 mL) je zagrevana do 120<D>C tokom 3 h u CEM mikrotalasnom reaktoru. Smeša je koncentrovana pod vakuumom, a ostatak je prečišćen pomoću kolone sa silika gelom (eluent: petroleum etar: EtOAc od 20: 1 do 8: 1) da bi se dobilo jedinjenje10A(300 mg, 40%). LC-MS: tR= 0,880; MS (ESI) m/z 308,1
[M+H]<+>.
Korak 8: Sinteza međuproizvoda 11A
[0138]
[0139]U smešu10A(300 mg, 0,84 mmol) u DCM (10 mL), H20 (10 mL) i NaHCOs (655 mg, 8,4 mmol) je dodat tiofozgen (180 mg, 1,68 mmol). Smeša je mešana tokom 50 min, a zatim je ekstrahovana pomoću DCM (3 X 40 mL), te je isprana sa slanim rastvorom (2 X 40 mL), osušena je i rastvarač je odstranjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje11A(300 g,), koji je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 9: Sinteza međuproizvoda 12A
[0140]
[0141]Jedinjenju11A(200 mg, 0,50 mmol) u THF (10 mL) su dodati R-(2-aminometil)tetrahidrofuran (61mg, 0,6 mmol) i trietilamin (2 mL, 5,0 mmol). Smeša je mešana na st preko noći. Reakcija je razređena sa vodom i zatim je ekstrahovana pomoću EtOAc (30 mL). Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom (petroleum etar: EtOAc= 10: 1) da bi se dobilo12A(180 mg, 79%).
Korak 10: Sinteza primera 5
[0142]
^jv)'1'0NH3-H20Kj^ J\)' n°
12A
[0143]U smešu međuproizvoda12A(250 mg, 0,54 mmol) u MeOH (10 mL) i NH4OH (3 mL) je dodat rastvor LBUO2H (1 mL, 9M u heksanu) i zatim je mešan na st tokom 24 h. Reakcija je prekinuta zasićenom Na2S203(0,5 mL). Ostatak je raspodeljen između EtOAc (20 mL) i H2O (10 mL). Organski sloj je izdvojen i onda je ispran sa slanim rastvorom (10 mL), pa je osušen, isfiltriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću HPLC (postupak 1) da bi se dobio Primer 5 (89,10 mg, 52%).
LC-MS: tR= 0,971 min, MS (ESI)m/z437,2 [M+H]<+>.
<1>HNMR: (CD3OD): 5 7,60 (dd, J= 8,0, 1,6 Hz,1H), 7,46(d, J =7,6 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 4,08-4,01 (m, 1H), 3,63-3,90 (m, 4H), 3,33 (s, 3H), 3,09-3,20 (m, 2H), 2,74-2,79 (m, 1H), 1,80-2,06 (m, 5H), 1,65-1,78 (m, 1H), 1,55-1,64 (m, 2H), 1,29-1,35 (m, 3H), 1,07-1,29 (m, 1H), 0,89-0,96 (m, 1H), 0,85 (t,J =7,6 Hz, 3H).
Primer 6
[0144]
Korak 1: Sinteza međuproizvoda 27
[0145]
[0146]U pećnici osušena boca od 3 L je napunjena sa 6-bromo-1-indanonom (100 g, 473,8 mmol), metil akrilatom (86,4 g, 90 mL, 995 mmol, 2,1 ekv.) i anhidrovanim THF (800 mL), pa je boca potopljena u kupatilo sa ledeno hladnom vodom i mešana. Inicijalno je pažljivo dodat tBuOK (0,5 g), a posle 2 min je dodata druga Šarža tBuOK (0,5 g). Rashladno kupatilo je uklonjeno, a preostali tBuOK (63 g) je dodavan u podjednakim šaržama tokom 20 min (total 64 g, 568,6 mmol, 1,2 ekv.). Smeša je mešana tokom sledećih 2 h na st. DMF (240 mL) je dodat u reakcionu smešu, a zatim je sledio Mel (134,6 g, 60 mL, 947,6 mmol, 2,0 ekv.) i smeša je onda mešana tokom sledećih 2 h. Reakcija je prekinuta sa 10% rastvorom limunske kiseline. Zatim je reakciona smeša koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se odstranio veći deo rastvarača pre nego što je isfiltrirana. Kolač je ispran sa vodom, a zatim sa MeOH da bi se dobio sirovi međuproizvod 26 (200 g) koje je korišćen neposredno u sledećem koraku.
[0147]U rastvor jedinjenja26(200 g, 547,6 mmol, sirovo) u THF/H2O (1,8 L/1,8 L) je dodat LiOH H2O (92 g, 2190 mmol, 4,0 ekv.). Smeša je mešana tokom 16 h na st, a zatim 12 h na 70°C. Reakciona smeša je koncentrovana po skraćenom postupku da bi se odstranio THF i onda je isfiltrirana. Kolač je ispran sa H2O, a zatim je mešan sa MeOH (50 mL) tokom nekoliko min, pa je ponovo isfiltriran, i ispran sa dodatnom količinom MeOH (50 mL). Čvrsta materija je sakupljena da bi se dobio međuproizvod27 (75 g,51,7%).
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 29
[0148]
[0149]Trogrla boca je napunjena sa CeCb,7H20 (1,2 g, 3,3 mmol) i anhidrovanim MeOH (60 mL) pod atmosferom azota, koji su mešani da bi se dobio bistar rastvor. Dodati suJedinjenje 27(10,0 g, 32,6 mmol) i anhidrovani THF (240 mL) pod atmosferom azota, pa je smeša je ohlađena do -78 °C. Dodat joj je NaBH4(0,4 g, 13,0 mmol) na -78 °C pod atmosferom azota uz energično mešanje. Smeša je mešana na -78 °C tokom 20 min. Reakciona smeša je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog NhUCI (100 mL) i H2O (200 mL) na -78<D>C uz mešanje. Ostavljeno je da se smeša polako zagreje do sobne temperature. Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (3 X 150 mL). Sjedinjeni organski siojevi su isprani sa H2O (2 X 200 mL), slanim rastvorom (2 X 200 mL), pa su osušeni, isfiltrirani i koncentrovani pod vakuumom, a ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa petroleum etrom: EtOAc (20: 1 do 3: 1) da bi se dobio međuproizvod 28 (7,5 g, 75%). LC-Ms: tR= 3,195 min: MS (ESI) m/z 311,0 [M+H]<+>.<1>H NMR: (CDCb): 5 7,59 (s, 1H), 7,22-7,25 (d,J=8,4 Hz, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,88-6,91 (dd, J=2,4, 8,4 Hz, 1H), 6,80-6,81 (d,J = 2,4Hz, 1H), 5,84 (s, 1H),4,87 (s, 2H), 4,31-4,36 (m, 2H), 3,50-3,55 (q,J =6,8 Hz, 2H), 3,15-3,25 (m, 1H), 3,09-3,14 (d, J= 15,6 Hz, 1H), 3,00-3,06 (d, J= 15,2 Hz, 1H), 1,90-2,10 (m, 3H), 1,25-1,50 (m, 5H), 1,15-1,25 (t, J = 6,4 Hz, 3H).
[0150] U smešu jedinjenja 28 (6,18 g, 20 mmol)u DMF (20 mL) je dodat NaH (60% u mineralnom ulju, 0,96 g, 40 mmol) na 0<Q>C. Zatim je smeša mešana na 0 °C tokom 2 h, a onda je u smešu dodat Mel (3,5 mL) i mešana je preko noći. Smeša je razređena sa EtOAc (40 mL) i H2O (40 mL), pa je ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X 60 mL). Sjedinjene organske faze su osušene, a rastvarač je odstranjen da bi se dobio međuproizvod29(5,0 g).
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 30A & 30B
[0151]
[0152]U rastvor međuproizvoda 29 (5,0 g, 15,3 mmol) u THF (100 mL) je dodat Ti(OEt)4(35,0 g, 153 mmol). Postoje mešan na st tokom 1 h, dodat mu je (S)-/V-terc.-butilsulfinamid (7,4 g, 61,2 mmol). Reakciona smeša je mešana na refluksu preko noći, pa je smeša raspodeljena između H2O (80 mL) i EtOAc (80 mL). Smeša je isfiltrirana, a filtrat je ekstrahovan pomoću EtOAc (3 X 80 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanim rastvorom (50 mL), pa su osušeni i koncentrovani do ostatka. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (petroleum etar: EtOAc = 20:1) uz eluiranje sledećim redosledom da bi se dobili međuproizvodi30A(1,6 g, 35%) i30B(1,4 g, 33%).
Sinteza primera 6
[0153]
[0154]Međuproizvod 30Aje dalje prerađen kao što je prikazano u koracima 4 do 10 u Primeru 5. U koraku 9 je korišćen 2-aminometilpirimidin umesto R-(2-am i nometi I )tetra h id rof u ran a.
LC-MS: tR= 1,05 MS (ESI) m/z 431,4 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CD3OD): 5 8,78 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 7,76 (s, 1H), 7,75(dd, J = 6,0, 1,6Hz,1H), 7,56 (d, J= 8,4 Hz,1H)7,44 (t,J=5,2 Hz 1H), 5,16 (m, 2H), 3,38 (s, 3H), 3,24 (m, 2H), 2,79(m, 1H), 2,15 (m, 1H), 1,74 (m, 1H), 1,65 (d, J=6,8 Hz, 1H), 1,39-1,57 (m, 4H), 0,99 (d, J=6,4 Hz, 3H).
Primer 7
[0155]
[0156]Ovo je sintetisano postupkom sličnim kao što je opisano u Primeru 6. Međuproizvod30Aje dalje prerađen kao što je opisano u Primeru 1 kroz korake 4-10. U koraku 9 je korišćen (2-metoksi) etilamin, što je bilo praćeno oksidacijom kao što je opisano u koraku 10 da bi de dobio Primer 7.
LC-MS: tR= 1,08 min, MS (ESI) m/z 397 [M+H]<+>.
1H NMR: (CD3OD)5 7,74 (d, 1H, J=8 Hz), 7,63 (d,1H, J=1 Hz), 7,57 (d, 1H, J= 8 Hz), 4,02-3,95 (m, 1H), 3,89-3,83 (m, 1H), 3,54 (m, 2H), 3,36 (s, 3H), 3,35 (s, 3H),3,24 (ap q, 2H, J=16 Hz)), 2,75 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,79 (dt,1H, J=13, 2 Hz), 1,56 (m, 1H), 1,41 (m, 3H), 1,14 (t,1H, J=13 Hz), 1,01 (d, 3H, J=6 Hz).
Primer 8
[0157]
[0158]Ovo je sintetisano postupkom sličnim kao što je opisano u Primeru 6. Korišćen je (3-metiloksetan-3-il)metanamin, kao što je opisano za Primer 1 u koraku 9, što je bilo praćeno oksidacijom, kao što je opisano za korak 10 da bi se dobio Primer 8.
LC-MS: tR= 0,930 min, MS (ESI) m/z 423,0 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CD3OD): 5 7,66-7,64 (d,J= 7,2 Hz, 1H), 7,51-7,49 (d,J =7,6 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,72-4,67 (m, 2H), 4,29-4,25 (m, 2H), 3,74-3,59 (m, 2H), 3,37 (s, 3H), 3,25-3,14 (m, 2H), 2,74-2,67 (m, 1H), 2,08-2,03 (m, 1H), 1,80-1,53 (m, 3H), 1,30 (m, 5H), 1,08 (m, 1H), 0,90 (m, 3H).
Primer 9
[0159]
[0160]Ono je sintetisano postupkom sličnim kao stoje opisano u Primeru 6. Korišćen je 4-(aminometil)pirimidin kao što je opisano u Primeru 1 u koraku 9, što je bilo praćeno oksidacijom, kao što je opisano u koraku 10 u Primeru 6 da bi se dobio Primer 9.
LCMS: tR= 0,88 min, MS (ESI) m/z431,2 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CD3OD): 5 9,05 (s, 1H), 8,70-8,71 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,60-7,62 (d,J =7,6 Hz, 1H), 7,44-7,47 (m, 3H), 4,86 (s, 2H), 3,35 (s, 3H), 3,10-3,20 (q, 2H), 2,70-2,71 (m, 1H), 2,04-2,06 (m, 1H), 1,70 (m, 2H), 1,491 (m, 1H), 1,30-1,33 (m, 2H), 1,15-1,18 (m, 1H), 0,95-0,96(d, J=6,0 Hz, 3H).
Primer 10
[0161]
Korak 1: Sinteza međuproizvoda 32
[0162]
[0163]U smešu 6-bromo-indan-1-ona (100,00 g, 473,8 mmol) u anhidrovanom THF (1 L) na 0°C je dodat t-BuOK (58,5 g, 521,2 mmol, 1,1 ekv.), 2 min kasnije smeša je zagrejana do st i onda je mešana tokom sledećih 10 min pre nego što je odjednom dodat metil metakrilat (49,8 g, 53,2 mL, 497,5 mmol, 1,05 ekv.). Posle 2h, u reakcionu smešu je dodat metil akrilat (49,0 g, 51,2 mL, 568,6 mmol, 1,2 ekv.). Posle 3 h na st, u reakcionu smešu je dodat Mel (101 g, 44,3 mL, 710,7 mmol, 1,5 ekv.) i ona je onda mešana tokom 16 h. Dodata je H2O (1 L), što je bilo praćeno sa LiOH<*>H20 (79,5 g, 1895,2 mmol, 4,0 ekv.), a smeša je mešana tokom 28 h na sobnoj temperaturi. THF je odstranjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je razređen sa H2O (1 L) i zatim je isfiltriran, pa je ispiran sa H2O sve dok filtrat nije postao neutralan. Proizvod je ispran sa MeOH da bi se dobilo 50 g međuproizvoda 32.
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 33
[0164]
[0165]U smešu međuproizvoda 32 (60,0 g, 186,9 mmol) i FeCb (33,0 g, 205,5 mmol, 1,1 ekv.) u THF (600 mL) je dodat NaBH3CN (29,4 g, 367,1 mmol, 2,5 ekv.) na 0 °C. Ostavljeno je da se smeša zagreje do sobne temperature i onda je mešana tokom 1h na st. Reakcija je prekinuta dodavanjem vode, a THF je odstranjen pod vakuumom. On je ekstrahovan sa DCM (3 x 200 mL). Sjedinjene organske faze su isprane sa H2O i slanim rastvorom, pa su osušene, i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu da bi se dobilo jedinjenje 33 (25,2 g, 42%) i 33A (12,0 g).
LC-MS: tR= 1,239 min, MS (ESI)m/z323,1 [M+H]<+>.
<1>H-NMR (CDCb): 5 : 7,889-7,894 (s, 1H), 7,671-7,696 (d, 1H), 7,311-7,332 (d, 1H), 3,605 (s, 1H), 2,981 (s, 2H), 1,769-1,797 (m, 4H), 1,072-1,082 (m, 2H), 1,019-1,056 (m, 6H).
Korak 2: Alternativna sinteza međuproizvoda 33
[0166]
[0167]Smeša FeCb (6,0 g, 37,0 mmol) sa toluenom (60 mL) je ohlađena na 0 °C. Smeša jedinjenja 32 (11,9 g, 37,0 mmol) u THF (48 mL) je zatim dodata u tu smešu. Smeša je mešana tokom 5 min na 0 °C a zatim je ohlađena na -10 °C. Rastvor t-BUNH2-BH3(3,5 g, 40,7 mmol) u THF (12 mL) je ukapan u reakcionu smešu na -10 °C. Reakciona smeša je mešana na oko -10 °C tokom 30 min, pa je ugašena sa 6N aq rastvora HCI (10 mL), a onda je mešana oko 0 °C tokom 30 min i zatim je ostavljeno da se zagreje do sobne temperature. Smeša je koncentrovana da bi se odstranio THF, i dodat joj je toluen (60 mL). Vodeni sloj je odstranjen, a organska faza je isprana sa vodom (3 x 60 mL). Organska faza je koncentrovana do Vi zapremine, pa je zagrejana do 50 °C da bi se dobio rastvor, a zatim je on ohlađen do 0 °C tokom 1 h i držan je na 0 °C tokom 1 h. Čvrsta materija je isfiltrirana, pa je isprana sa hladnim (0<C>C) toluenom (12 mL), i osušena pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje 33 (9,93 g, 83%).
LC-MS: tR= 2,36 min, MS (ESI) m/z 323,0/325,0 [M+H]<+>.
Korak 3: Sinteza međuproizvoda 34
[0168]
[0169]U smešu jedinjenja 33 (20,0 g, 61,9 mmol) sa DMF (200 mL) je dodat NaH (5,0 g, 123,8 mmol, 2,0 ekv.) na 0°C. Onda je mešana tokom 15 min na 0°C, pa joj je dodat Mel (17,6 g, 123,8 mmol, 2,0 ekv.) na 0°C. Zatim je zagrejana do st i mešana je tokom 1,5 h na st. Smeša je ugašena sa H2O i potom je ekstrahovana pomoću EtOAc. Sjedinjene organske faze su isprane sa H2O i slanim rastvorom, te su osušene i koncentrovane da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću kolone na silika gelu (eluent: petroleum etar: EtOAc od 100/1 do 5/1) da bi se dobio međuproizvod34(20 g, 96,2%).
Korak 4: Sinteza međuproizvoda 35
[0170]
[0171]Smeša jedinjenja 34 (20,0 g, 59,3 mmol) i titanijum (IV) etoksida (108,2 g, 474,4 mmol) u suvom THF (200 ml) je mešana na st tokom 1 h. Dodat joj je (S)-/V-terc.-butilsulfinamid (29 g, 237,2 mmol). Dobijena smeša je mešana na 80 °C pod N2atmosferom preko noći. Reakciona smeša je zatim ohlađena i dodata joj je voda (400 ml). Smeša je isfiltrirana, a vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc (3 X 400 mL). Izdvojena organska faza je osušena i onda je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (petroleum etar: EtOAc= 20:1) da bi se dobio međuproizvod 35(18,4 g, 70,5%).
Korak 5: Sinteza međuproizvoda 36
[0172]
[0173]t-BuLi (131 mL, 170,3 mmol, 1,3 M u heksanu) je ukapan u rastvor etil vinil etra (12,3 g, 170,3 mmol, 5,0 ekv.) u anhidrovanom THF (100 mL) na -78 °C pod N2i zatim je mešan tokom 20 min. Dobijena smeša je onda mešana na 0<D>C tokom sledećih 45 min. Rastvor je ponovo ohlađen na -78 °C, pa je ukapano jedinjenje 35 (15,0 g, 34,1 mmol) u anhidrovanom THF (50 mL) i smeša je zatim mešana tokom 2 h na -78 °C. Reakciona smeša je ugašena pomoću zas. NH4CI (50 mL) i potom je ekstrahovana pomoću EtOAc (3 X 300 mL). Organska faza je koncentrovana da bi se dobio ostatak, koji je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu da bi se dobio međuproizvod 36 (11 g, 64,7%) i36A(1,441 g, 100% čistoća).
LC-MS tR= 5,676 min; MS (ESI) m/z 514,2 [M+H]<+>.
<1>H-NMR (CD3OD): 5 7,546 (s, 1H), 7,454-7,479 (d, 1H), 7,208-7,228 (d, 1H), 4,620-4,755 (d, 1H), 4,373-4,381 (m, 1 H),4,048-4,055 (m, 1H), 3,844-3,903 (m, 2H), 3,458-3,474 (s, 3H), 2,986-3,000 (m, 2H), 2,326-2,377 (m, 1H), 1,969-2,001 (m, 1H), 1,671 (s, 1H),1,457-1,520 (t, J=12 Hz, 3H),1,373-1,408 (m, 2H), 1,328 (s, 9H), 1,169-1,278 (m, 5H), 1,073-1,106(d, 3H).
Korak 5: Sinteza međuproizvoda 37
[0174]
[0175]Smeša međuproizvoda 36 (4,8 g, 9,37 mmol) u DCM:MeOH = 5:1 (40 mL), je ohlađena do -78<Q>C, pa je ozon barbotiran kroz smešu tokom 20 min. Smeša je onda prečišćena sa N2 i tretirana sa Me2S (10 mL) na -78 °C, a zatim je ostavljeno da se zagreje do st i mešana je tokom 3 h. Rastvarač je odstranjen pod vakuumom, a ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (petroleum etar: EtOAc= 20:1 do 8:1) da bi se dobio međuproizvod 37(3,5 g, 72,9%). LC-MS tR = 1,297 min; MS (ESI) m/z 516,1 [M+H]\ <1>H NMR (CDCb): 5 7,84 (s, 1H), 7,42-7,44(d, J=8,0 Hz, 1H), 7,09-7,11 (d,J = 8,0Hz, 1H), 4,40 (s, 1H), 4,26-4,39 (m, 2H), 3,44 (s, 3H), 2,93-2,97 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 2,70-2,74 (d,J=15,2 Hz, 1H), 2,22-2,30 (t, J= 10,0 Hz, 1H), 1,75-1,79 (m, 1H), 1,61-1,66 (m, 1H), 1,54-1,57 (m, 2H), 1,32-1,38 (m, 4H), 1,14 (s, 9H), 1,06-1,08 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 0,89-0,91 (d,J =5,0 Hz, 3H), 0,67-0,74 (m, 1H).
Korak 6: Sinteza međuproizvoda 38
[0176]
[0177]Ujedinjenje 37 (860 mg, 1,7 mmol) u MeOH (10 mL) je dodato 4 M rastvora HCI u dioksanu (2 mL). Dobijena smeša je mešana tokom 30 min. Rastvaraš je odstranjen pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi međuproizvod 38 (800 mg). Ostatak je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Alternativna sinteza međuproizvoda 38
Korak 1: Sinteza međuproizvoda 39
[0178]
NCN-( HN, y-CN/
l!^L^)\)'n0Me LDA.THF X^Ov_)'<,,OMe>639
[0179]Smeša međuproizvoda 6 (5,00 g, 11,4 mmol), dietoksiacetonitrila (3,5 mL, 24,4 mmol) i THF (50 mL) je ohlađena na -7 °C i tretirana je ukapavanjem LDA (25,0 mL, 45,0 mmol, 1,8M u THF/heptanu/etilbenzenu). Smeša je mešana na -7 do -2 °C tokom 2 h, a zatim je ugašena sa vodom (50 mL) i zasićenim vodenim NH4CI (25 mL). Dodati su heksani (100 mL), i slojevi su razdvojeni. Organski sloj je ispran sa vodom, slanim rastvorom, pa je koncentrovan da bi se dobio sirovi međuproizvod 39 (9,00 g, 139%) koji je korišćen neposredno u sledećem koraku.
LC-MS: tR= 3,74 min, MS (ESI) m/z 523,2/525,2 [M-OEt+H]<+>.
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 38
[0180]
[0181]Smeša gornjeg međuproizvoda39(9,00 g, 11,4 mmol) u EtOH (30 mL) je tretirana sa 6N vodenog HCI (20 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 75 °C tokom 24 h i onda je ohlađena do st. Reakcija je ekstrahovana pomoću toluena (50 mL), a vodena faza je zatim alkalizovana do pH = 8 sa 2N vodenog NaOH (-60 mL). Dodat joj je toluen (100 mL), a slojevi su mešani i razdvojeni. Organski sloj je ispran sa vodenim NaHC03 i slanim rastvorom, pa je koncentrovan. Dodat je heksan i rastvor je zatim ponovo koncentrovan da bi se dobio sirovi međuproizvod38(3,47 g, 74%) koji je korišćen neposredno u sledećem koraku. LC-MS: tR= 0,86 min, MS (ESI) m/z 410,2/412,2 [M+H]<+>
Korak 7: Sinteza međuproizvoda 40
[0182]
[0183]Međuproizvod 40 je sintetisan na analogni način kao što je opisano u koraku 7 međuproizvoda10A.On je korišćen neposredno u sledećem koraku.
Korak 8: Sinteza međuproizvoda 41
[0184]
[0185]Međuproizvod41je sintetisan na analogni način kao što je opisano u koraku 8 za međuproizvod11 A.Sirovi međuproizvod41je korišćen neposredno u sledećem koraku.
Korak 9: Sinteza međuproizvoda 42
[0186]
[0187]Međuproizvod42je sintetisan na analogni način kao što je opisano u koraku 9 za međuproizvod12A.Sirovi međuproizvod42je korišćen neposredno u sledećem koraku.
Korak 10: Sinteza primera 10
[0188]
[0189]U rastvor međuproizvoda42(400 mg, 0,8 mmol) u EtOH (8 mL) su dodati NH3-H2O (1 mL) i ferc.-butil hidroperoksid (1 mL). Posle adicije, smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Rastvaračje odstranjen uparavanjem pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC, postupak 1 da bi se dobio Primer 6 (65,0 mg, 20% prinos).
LC-Ms: tR= 0,945 min, MS (ESI)m/z463,2 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CD3OD) 5 8,65-8,70 (s, 2H), 7,60-7,65 (d,J =7,2 Hz, 1H), 7,45-7,55 (m, 2H), 4,95-5,00 (s, 2H), 3,40-3,45 (s, 3H), 3,10-3,20 (m, 2H), 2,30-2,40 (m, 1H), 1,70-1,80 (m, 3H), 1,45-1,55 (m, 1H), 1,25-1,35 (m, 2H), 0,90-1,00 (m, 6H).
<19>F NMR (400 MHz, MeOD): -141,57
Primer 11
[0190]
[0191]Primer11je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru10.U koraku 9 je korišćen (3-metiloksetan-3-il)metanamin umesto (5-fluoropirimidin)-2-metilamina da bi se dobio Primer11.
LC-MS: tR = 0,96 min, MS (ESI) m/z 437 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CD3OD): 5 7,75 (dd, J = 7,6, 1,6 Hz, 1H), 7,68 (d,J =1,6 Hz, 1H), 7,56 (d, J= 7,6 Hz,1H), 4,60 (d, J =6,4 Hz, 2H), 4,32 (dd, J= 8,0, 6,4 Hz, 2H), 3,97 (d,J =15,6 Hz, 1H), 3,69 (d,J =15,6 Hz, 1H), 3,44 (s, 3H), 3,25 (m, 2H), 2,44 (t,J =10,0
Hz, 1H), 1,81-1,75 (m, 2H), 1,67 (m, 1H), 1,41 (s, 3H), 1,36 (m, 1H), 1,30-1,21 (m, 2H), 1,07 (d,J =6,4 Hz, 3H), 0,98 (d,J= 6,4 Hz, 3H}.
Primer 12
[0192]
[0193]Primer12je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 10. U koraku 9 je korišćen 2-aminooksetan umesto (5-fluoropirimidin)-2-metilamina da bi se dobio Primer 12.
LC-MS: tR= 0,91 min, MS (ESI) m/z 409 [M+H]<+>.
1H NMR: (CD3OD): 5 7,75 (dd, J= 7,6, 1,2 Hz, 1H), 7,71 (d, J= 1,2 Hz, 1H), 7,56 (d,J= 7,6 Hz,1H), 5,28 (m, 1H), 5,13(dd, J= 14,0, 6,8Hz, 2H), 4,87(dd, J=8,0, 6,4 Hz, 2H), 3,44 (s, 3H), 3,26 (m, 2H), 2,43 (t,J=10,0 Hz, 1H), 1,85-1,77 (m, 2H), 1,68 (m, 1H), 1,35-1,18 (m, 3H), 1,03(d, J=6,4 Hz, 3H), 0,97 (d, J = 6,4 Hz, 3H).
Primer13
[0194]
[0195]Primer 13 je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 10. U koraku 9 je korišćen oksetan-3-ilmetanamin umesto (5-fluorpiriminid)-2metilamina da bi se dobio Primer 13.
LC-MS: tR= 0,904 min; MS (ESI) m/z423,3 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CD3OD): 5 7,60-7,62 (d,J =8,0 Hz, 1H), 7,45-7,47 (d, J - 8,0 Hz, 1H), 7,27 (s, 1H), 4,69-4,73 (d,J =7,2 Hz, 2H), 4,44-4,49 (d,J =7,2 Hz, 2H), 3,85-3,91 (m, 1H), 3,74-3,80 (m, 1H), 3,42 (s, 3H), 3,34-3,38 (m, 1H), 3,08-3,22 (m, 2H), 2,32-2,37 (t, J=10,0 Hz, 1H), 1,61-1,71 (m, 3H), 1,38 (m, 1H), 1,19-1,23 (m, 1H), 0,92-0,99 (m, 7H).
Primer 14
[0196]
[0197]Primer14je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 10. U koraku 9 je korišćen (S)-2-(aminometil)-tetrahidrofuran umesto (5-fluoropirimidin)-2-metilamina da bi se dobio Primer 14.
LC-MS: tR= 1,02 min, MS (ESI) m/z 437 [M+H]<+>.
<1>H NMR :(CD3OD): 5 7,75 (d,J =7,6 Hz, 1H), 7,53 (d,J =7,6 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 4,16 (m, 1H), 3,96 (m, 1H), 3,83 (m, 1H), 3,70 (m, 2H), 3,50 (s, 3H),3,30 (d, J= 15,6Hz, 1H), 3,19(d,J =15,6 Hz, 1H), 2,42 (t,J =10,0 Hz, 1H), 2,08-1,95 (m, 3H), 1,88-1,1,63 (m, 4H), 1,55 (m, 1H), 1,40-1,30 (m, 2H), 1,05 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,01(d, J =6,4 Hz, 3H).
Primer 15
[0198]
[0199]Primer 15 je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 10. U koraku 9 je korišćen (R)-2-(aminometil)-tetrahidrofuran umesto (5-fluoropirimidin)-2-metilamina da bi se dobio Primer 15. LC-MS: tR= 1,02 min, MS (ESI)m/z437 [M+H]<+>. <1>H NMR: (CDaOD): 5 7,61(d, J= 8,0 Hz,1H), 7,46 (d,J=8,0 Hz,1H), 7,25 (s, 1H), 4,07 (m 1H), 3,88 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,66(dd, J =14,8, 3,2 Hz,1H), 3,57 (dd, J= 14,8, 6,8 Hz, 1H), 3,42 (s, 3H), 3,23 (d,J= 16,0 Hz, 1H), 3,10 (d, 16,0 Hz, 1H),2,35 (t, J= 10,4 Hz,1H), 2,01-1,86 (m, 3H), 1,76-1,50 (m, 4H), 1,44 (t,J=13,2 Hz, 1H), 1,24 (m, 1H), 1,03 (t,J=12,8 Hz, 1H),0,98 (d, J = 6,4 Hz,3H), 0,93 (d, J = 6,4 Hz, 1H).
Primer 16
[0200]
[0201]Primer16je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru10.U koraku 9 je korišćen 2-(aminometil)-tetrahidropiran umesto (5-fluoropirimidin)-2-metilamina da bi se dobio Primer16.
LC-MS: tR= 0,958 min, MS (ESI) m/z 451,3 [M+H]<+>.
<1>H NMR (CD3OD): 5 7,62-7,65 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,48-7,50 (d,J = 8,0Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), 3,93-3,96 (m, 2H), 3,37-3,45 (m, 7H), 3,23-3,27(d, J=16,0 Hz, 1H),
3,11-3,15(d,J=16,0 Hz, 1H), 2,35-2,40 (t,J =10,0 Hz, 1H), 1,96-2,03 (m, 1H), 1,53-1,80 (m, 5H), 1,23-1,46 (m, 4H), 0,92-1,08 (m, 7H).
Primer 17
[0202]
[0203]Primer17je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 10. U koraku 9 je korišćen međuproizvod 18 umesto (5-fluoropirimidin)-2-metilamina da bi se dobio Primer 17.
LC-MS: tR= 0,969 min, MS (ESI) m/z 427,2 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CD3OD): 5 7,63-7,65 (d,J =8,0 Hz, 1 H), 7,49-7,51 (d,J =8,0 Hz, 1 H), 7,30 (s, 1H), 3,70-3,76 (m, 2H), 3,45 (s, 3H), 3,13-3,28 (m, 2H), 2,36-2,41 (t,J =10,0 Hz, 1H), 1,65-1,84 (m, 3H), 1,48-1,51 (m, 1H), 1,37-1,42 (m, 6H), 1,26-1,33 (m, 1H), 1,02-1,09 (m, 1H), 0,92-1,00 (m, 6H). 19F NMR: (CD3OD): 5 -139,58.
Primer 18
[0204]
Korak 9: Sinteza međuproizvoda 43
[0205]
[0206]U rastvor jedinjenja 41 (1 g, 2,51 mmol) u THF (25 mL) je dodato jedinjenje 2-(2-aminometil)oksetan (262 mg, 3,01 mmol) i trietilamin (760 mg, 7,53 mmol). Smeša je mešana na st preko noći. Reakciona smeša je razređena sa EtOAc (45 mL), a posle toga sa zasićenim vodenim NaHC03(2 X 35 mL) i slanim rastvorom (2 X 35 mL). Rastvarao je odstranjen posle sušenja da bi se dobilo sirovo jedinjenje43i43Akoje je prečišćeno po SFC-postupku A. Dijastereomeri su razdvojeni pomoću SFC-postupka B. Pod ovim uslovima je izoiovan željeni dijastereomer 43 kao drugi vrh. Ovo je dalje prerađeno kao što je opisano u koraku 10 Primera 10 da bi se dobio Primer 18.
LC-MS: tR= 0,863 min, MS (ESI) m/z 423,1 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CDsOD): 6 7,61-7,63(d, J=8, 0Hz, 1H), 7,47-7,49(d, J=7,6Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), 4,95-5,01 (m, 1H), 4,65-4,70 (m, 1H), 4,52-4,58 (m, 1H), 3,73-3,85 (m, 2H), 3,43 (s, 3H), 3,22-3,26(d, J=16,0 Hz, 1H), 3,10-3,14(d, J =16,4 Hz, 1H), 2,64-2,72 (m, 1H), 2,33-2,45 (m, 2H), 1,59-1,76 (m, 3H), 1,40-1,49 (m, 1H), 1,22-1,27 (m, 1H), 0,93-1,07 (m, 7H).
Primer 19
[0207]
Sinteza 3-(( 2- amino) etii) oksetana
[0208]
Korak 1: Sinteza međuproizvoda 44
[0209]U 3-oksanon (0,42 g, 6 mmol) u DCM (20 mL) je dodat 2-(trifenilfosforaniliden)acetonitril (1,8 g, 6 mmol) i onda su mešani preko noći na st. Posle tog vremena, rastvarač je odstranjen pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod (260 mg, sirovo), koji je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (petroleum: EtOAc, 3:1) da bi se dobio međuproizvod44(260 mg, prinos 46%) u obliku Čvrste bele materije.
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 45
[0210]U smešu međuproizvoda44(260 mg, 2,74 mmol) u MeOH (10 mL) je dodat Rejni-Ni (100 mg) i onda su mešani na st pod atmosferom vodonika tokom 12 h. Smeša je zatim isfiltrirana kroz podlogu od Celita<®>. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio međuproizvod45(200 mg, sirovo).
Primer 19
[0211]
[0212]Primer 19 je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 10. U koraku 9 je korišćen međuproizvod 45 da bi se dobio Primer 19.
LCMS: tR= 2,358 min, MS (ESI) m/z 437,3 [M+H]<+>.
1H NMR: (CD30D): 5 7,64-7,6 (d, 1H), 7,49-7,51(d, J = 8,0 Hz,1H), 7,31 (s, 1H), 4,74-4,79 (d, 2H), 4,40-4,43 (d, 2H), 3,49-3,52 (m, 2H), 3,45 (s, 3H), 2,95-3,27 (m, 3H), 2,36-2,41 (m, 1H), 1,97-2,05 (m, 2H), 1,21-1,80 (m, 5H), 1,01-1,09 (m, 4H), 0,92-0,99 (m, 3H).
Primer 20
[0213]
Korak 1: Sinteza međuproizvoda 46
[0214]
[0215]U rastvor jedinjenja41(100 mg, 0,25 mmol) u suvom THF (3 mL) su dodati 2-aminoaceton hidrohlorid (41 mg, 0,377 mmol) i trietilamin (76 mg, 0,754 mmol). Smeša je mešana preko noći na st. Reakcija je prekinuta dodavanjem vode (3 mL) i zatim je ekstrahovana pomoću EtOAc (2X5 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni, pa su upareni pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobilo jedinjenje46(50 mg, 24%).
Korak 2: Sinteza međuproizvoda 47
[0216]
[0217]U rastvor jedinjenja 46 (50 mg, 0,118 mmol) u toluenu (3 mL) su dodati etilen glikol (0,03 mL) i p-toluen sulfonske kiseline (1,1 mg, 0,0068 mmol). Rastvor je zagrevan do refluksa tokom 2 dana. Reakciona smeša je ohlađena do st, pa joj je dodat slani rastvor (3 mL). Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (2 X 5 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni i onda su upareni pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen pomoću prep-TLC da bi se dobilo jedinjenje 47 (51 mg, %).
Korak 3: Sinteza primera 20
[0218]
[0219]U smešu jedinjenja 47 (51 mg, 0,113 mmol) u MeOH (2,5 mL) su dodati vodeni amonijak (0,8 mL), t-BuOOH (2,5 mL). Smeša je mešana preko noći na st. Zatim je dodat zas. Na2S203(2,5 mL) da prekine reakciju. Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (2X5 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni i onda su upareni pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen pomoću bazne prep-HPLC da bi se dobio Primer20(12,8 mg, 25%) u obliku čvrste bele materije. 1H-NMR (CDsOD): 5 7,60 (d, J= 8,1 Hz,1H), 7,50 (d, J= 8,1Hz, 1H), 7,22 (s, 1H), 3,86-4,01 (m, 4H), 3,64-3,75 (m, 2H), 3,42 (s, 3H), 3,03-3,23 (m, 2H), 2,34 (t,1H), 1,61-1,84 (m, 3H), 1,43 (s, 1H), 1,20-1,37(m, 4H), 0,89-1,08 (m, 7H).
LC-MS tR= 0,891 min, MS (ESI) m/z 453,3 [M+H]<+>
Primer 21
[0220]
[0221]Primer21je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru10.U koraku 9 je korišćen (R)-(1,4-dioksan-2-il)metanamin da bi se dobio Primer 21.
LC-MS: tR= 0,928 min, MS (ESI) m/z 453,3 [M+H]+.
<1>H NMR: (CD3OD): 5 7,63-7,61 (dd,J~1,6 Hz, 4,0 Hz, 1H), 7,48 (d, 1H), 7,3 (s, 1H), 3,6-3,8 (m, 6H), 3,6-3,5 (m, 2H), 3,45 (s, 3H), 3,3-3,1 (m, 3H), 2,4 (m, 1H), 1,8-1,6 (m, 3H), 1,6-1,4 (m, 1H), 1,3-1,2 (m, 1H), 1,1 (m, 1H), 0,9-1,01 (m, 6H).
Primer 22
[0222]
[0223]Primer22je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 10. U koraku 9 je korišćen (S)-(1,4-dioksan-2-il)metanamin umesto (5-fluoropirimidin)-2-metilamina da bi se dobio Primer 22.
LC-MS: tR= 0,928 min, MS (ESI) m/z453,3 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CD3OD); č 7,63-7,61 (dd,J=1,6 Hz, 4,0 Hz, 1H), 7,48 (d, 1H), 7,3 (s, 1H), 3,6-3,8 (m, 6H), 3,6-3,5 (m, 2H), 3,45 (s, 3H), 3,3-3,1 (m, 3H), 2,4 (m, 1H), 1,8-1,6 (m, 3H), 1,6-1,4 (m, 1H), 1,3-1,2 (m, 1H), 1,1 (m, 1H), 0,9-1,01 (m, 6H).
Primer 23
[0224]
[0225]Primer23je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 10. U koraku 9 je korišćen međuproizvod25da bi se dobio Primer23.
LC-MS: tR = 0,918 min, MS (ESI) m/z 469,2[M+H]\
'H NMR: (CD3OD): 5 7,62 (d, J- 8,0 Hz, 1H), 7,48 (d,J=8,0 Hz, 1H), 7,27 (s, 1H), 3,88-3,79 (m, 3H), 3,73-3,62 (m, 3H), 3,43 (s, 3H), 3,25-3,09 (m, 2H), 2,36 (t, 1H), 1,81-1,60 (m, 7H), 1,46 (m, 1H), 1,23 (m, 1H), 1,06 (m, 1H), 0,99-0,92 (m, 6H).
<19>F NMR: (CD3OD 400 MHz): 5 -160,19.
Primer 24
[0226]
[0227]Primer24je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 10. U koraku 9 je korišćen 3-pirimidilmetanamin umesto (5-fluoropirimidin)-2-metilamina da bi se dobio Primer 24.
LC-MS: tR= 0,867 min, MS (ESI) m/z445,1 [M+H]<+>.
1H NMR: (CD3OD): 5 9,08 (s, 1H), 8,74(d, J=5,2 Hz, 1H), 7,65(d, J =7,6 Hz, 1H), 7,48 (m, 3H), 4,90 (s, 2H), 3,46 (s, 3H), 3,12-3,24 (m, 2H), 2,41 (m, 1H), 1,63-1,75 (m, 3H), 1,49 (m, 1H), 1,28 (m, 2H),1,02 (d, J= 6,4 Hz, 3H), 0,96 (d, J = 6,4 Hz,3H).
Primer 25
[0228]
[0229]Primer 25 je sintetisan prema postupku sličnom onom u Primeru 18. U koraku 9 je korišćen (tetrahidrofuran-3-il)metanamin i dva dijastereomera su razdvojena pomoću SFC-Postupka B. Dalja prerada međuproizvoda koji se pojavljuje kao drugi vrh iz SFC-Postupka B dala je za prinos Primer 26.
LCMS: tR= 0,845 min; m/z 430,3 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (CDsOD): 5 7,63-7,66 (m, 1H), 7,49-7,51 (m, 1H), 7,31 (s, 1H), 3,84-3,93 (m, 1H), 3,71-3,81 (m, 2H), 3,48-3,63 (m, 3H), 3,43 (s, 3H), 3,11-3,31 (m, 2H), 2,51-2,78 (m,2H), 1,22-2,09 (m, 7H), 1,00-1,06 (m, 4H), 0,93-0,99 (m, 3H).
Primer 26
[0230]
[0231]Primer26je sintetisan prema postupku sličnom onom u Primeru 1, U sintezi Primera 28, u koraku 1 iz Primera 1, metil metakrilat je korišćen umesto metil akrilata. U koraku 3 je izolovan odgovarajući polarni izomer6B i dalje je prerađen kao što je opisano u Primeru 1. U koraku 9 je korišćen međuproizvod17da bi se dobio Primer 28.
LC-MS: tR= 1,16 min, MS (ESI) m/z 441 [M+H]<+>.
1H NMR (CDsOD): č 7,64 (dd, 1H, J = 8" 2 Hz), 7,50 (d,1H, J= 8 Hz), 7,30 (s,1H), 3,73 (dd, 2H, J = 22, 4 Hz), 3,44 (s, 3H), 3,19 (ap q,2H, J=16 Hz), 2,49 (t, 1H,J =10 Hz), 1,82-1,72 (m, 2H), 1,71 -1,63 (m, 1H), 1,55 (m, 1H), 1,42-1,33 (m, 8H), 1,22-1,12 (m, 1H), 1,08 (t,1H, J= 13 Hz),1,01(d, 3H, J = 6 Hz), 0,79 (t,3H, J = 7 Hz).
Primer 27
[0232]
[0233]Primer 27 je sintetisan prema postupku opisanom u Primeru 6, (1,4-dioksan-2-il)metanamin je korišćen u koraku 9, posle čega je sledila oksidacija, kao što je opisano u koraku 10 da bi se dobio Primer 27.
LC-MS: tR= 0,68 min, MS (ESI) m/z 439 [M+H]<+>
<1>H NMR: (CD3OD, 400 MHz) 5 7,67 (nije određeno, 1H), 7,48 (d, 1H), 7,20 (nije određeno, 1H), 6,66 (s, 2H), 3,78-2,97 (m, 14H), 2,59 (m, 1H), 1,92 (m, 1H), 1,66 (m, 2H), 1,42 (m, 1H), 1,28 - 1,03 (m, 2H), 0,89 (d, 3H), 0,88 (m, 1H)
Primer 28
[0234]
[0235]Primer28je sintetisan iz međuproizvoda11Bu Primeru 1 praćenjem iste procedure kao u Primeru 1 i primenom -S-2-(aminometil)dioksana u koraku 9 iz primera 1.
LC-MS: tR= 0,894 min, MS (ESI) m/z 453,2 [M+H]<+>
<1>H NMR: (CD3OD): 5 7,63 (dd, J = 7,6, 1,2 Hz, 1H), 7,48 (d,J=7,6 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 3,61-3,85 (m, 8H), 3,58 (s, 3H), 3,56 (s, 1H), 3,17 (m, 2H), 2,77-2,82 (m, 1H), 2,10-2,17 (m, 1H), 1,85-1,88 (m, 1H), 1,69-1,75 (m, 1H), 1,37-1,45 (m, 3H), 1,24-1,34 (m,2H), 1,09-1,15 (m, 1H), 0,75(t, J =7,6 Hz, 3H).
Primer 29
[0236]
[0237]Polazeći od 6-fluoro-3-indanona, Primer 29 je sintetisan prema postupku sličnom onom u Primeru 20.
LC-MS tR= 1,02 min; MS (ESI) m/z 446 [M+H]<+>.
<1>H NMR (CD3OD): 5 7,26 (dd,J =8,4, 5,2 Hz, 1H), 6,95 (m, 1H), 6,62 (dd,J =8,4, 2,4 Hz, 1H), 4,02-3,89 (m, 4H), 3,70 (d,J=14,8 Hz, 1H), 3,65 (d,J=14,8 Hz, 1H), 3,42 (s, 3H), 3,12 (d,J =15,2 Hz, 1H), 2,98 (d,J =15,2 Hz, 1H), 2,34 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 1,79-1,60 (m, 3H), 1,43 (m, 1H), 1,34 (m, 1H), 1,32 (m, 1H), 1,30 (s, 3H), 1,00 (m, 1H), 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 3H),0,94 (d, J = 6,0 Hz, 3H).
LISTA SEKVENCI
[0238]
<110> BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GMBH VITAE PHARMACEUTICALS, INC.
<120> INHIBITORi BETA-SEKRETAŽE
<130> 120573-00420
<140> NEW APPLICATION
<141> Concurrentiv Herewith
<150> 61/606,786

Claims (14)

1.Jedinjenje predstavljeno strukturnom formulom izabranom između: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
2. Jedinjenje prema zahtevu 1 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu kao lek.
3. Farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedno jedinjenje prema zahtevu 1 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u smeši sa farmaceutski prihvatljivim adjuvansom, rastvaračem i/ili nosačem.
4. Jedinjenje prema zahtevu 1 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu u lečenju poremećaja ili bolesti posredovanih sa BACE1.
5. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu prema zahtevu 4, pri čemu su poremećaji ili bolesti posredovani sa BACE1 izabrani iz grupe koja se sastoji od neurodegenerativnog poremećaja, opadanja kognitivnih sposobnosti, kognitivnog oštećenja, demencije i bolesti karakterisane proizvodnjom 3-amiloidnih depozita ili neurofibrilarnih spletova.
6. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu prema zahtevu 5, pri čemu je poremećaj ili bolest izabrana iz grupe koja se sastoji od Alchajmerove bolesti, Trizomije 21 (Daunov sindrom), nasledne cerebralne hemoragije sa amiloidozom holandskog tipa (HCHVVA-D), senilne demencije, cerebralne amiloidne angiopatije, degenerativne demencije, demencija mešovitog vaskularnog i degenerativnog porekla, demencije povezane sa Parkinsonovom bolesti, demencije povezane sa progresivnom supranuklearnom paralizom, demencije povezane sa kortikalnom bazalnom degeneracijom, Alchajmerove bolesti tipa sa difuznim Levijevim telima, suve senilne makuiarne degeneracije (AMD), i glaukoma.
7. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu prema zahtevu 6, pri čemu je poremećaj ili bolest Alch ajme rova bolest.
8. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu prema zahtevu 6, pri čemu je poremećaj ili bolest glaukom.
9. Primena jedinjenja prema zahtevu 1 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli za proizvodnju leka za lečenje poremećaja posredovanog sa BACE1 kod subjekta.
10. Primena jedinjenja prema zahtevu 9 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu su bolest ili poremećaj posredovani sa BACE1 izabrani iz grupe koja se sastoji od neurodegenerativnog poremećaja, opadanja kognitivnih sposobnosti, kognitivnog oštećenja, demencije i bolesti karakterisane proizvodnjom B-amiloidnih depozita ili neurofibrilarnih spletova.
11. Primena jedinjenja prema zahtevu 10 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu su bolest ili poremećaj izabrani iz grupe koja se sastoji od Alchajmerove bolesti, Trizomije 21 (Daunov sindrom), nasledne cerebralne hemoragije sa amiloidozom holandskog tipa (HCHVVA-D), senilne demencije, cerebralne amiloidne angiopatije, degenerativne demencije, demencija mešovitog vaskularnog i degenerativnog porekla, demencije povezane sa Parkinsonovom bolesti, demencije povezane sa progresivnom supranuklearnom paralizom, demencije povezane sa kortikalnom bazalnom degeneracijom, Alchajmerove bolesti tipa sa difuznim Levijevim telima, suve senilne makuiarne degeneracije (AMD), i glaukoma.
12. Primena jedinjenja prema zahtevu 11 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je bolest ili poremećaj Alchajmerova bolest.
13. Primena jedinjenja prema zahtevu 11 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu je bolest ili poremećaj glaukom.
14.Jedinjenje izabrano iz grupe koja se sastoji od: ili njegova so.
RS20160246A 2012-03-05 2013-03-04 Inhibitori beta sekretaze RS54730B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261606786P 2012-03-05 2012-03-05
PCT/US2013/028796 WO2013134085A1 (en) 2012-03-05 2013-03-04 Inhibitors of beta-secretase
EP13710937.7A EP2822930B1 (en) 2012-03-05 2013-03-04 Inhibitors of beta-secretase

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS54730B1 true RS54730B1 (sr) 2016-10-31

Family

ID=47902355

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20160246A RS54730B1 (sr) 2012-03-05 2013-03-04 Inhibitori beta sekretaze

Country Status (39)

Country Link
US (4) US8981112B2 (sr)
EP (1) EP2822930B1 (sr)
JP (1) JP6161643B2 (sr)
KR (1) KR20140138774A (sr)
CN (1) CN104271558B (sr)
AP (1) AP4029A (sr)
AR (1) AR090241A1 (sr)
AU (2) AU2013230523B2 (sr)
BR (1) BR112014021269A2 (sr)
CA (1) CA2864143C (sr)
CL (1) CL2014002334A1 (sr)
CO (1) CO7091177A2 (sr)
CY (1) CY1117543T1 (sr)
DK (1) DK2822930T3 (sr)
EA (1) EA024995B1 (sr)
EC (1) ECSP14020640A (sr)
ES (1) ES2568928T3 (sr)
HR (1) HRP20160415T1 (sr)
HU (1) HUE027289T2 (sr)
IL (1) IL233887A (sr)
IN (1) IN2014DN06710A (sr)
MA (1) MA35945B1 (sr)
ME (1) ME02390B (sr)
MX (1) MX353432B (sr)
MY (1) MY171091A (sr)
NZ (1) NZ629239A (sr)
PE (1) PE20141972A1 (sr)
PH (1) PH12014501963A1 (sr)
PL (1) PL2822930T3 (sr)
RS (1) RS54730B1 (sr)
SG (1) SG11201404600VA (sr)
SI (1) SI2822930T1 (sr)
SM (1) SMT201600114B (sr)
TN (1) TN2014000326A1 (sr)
TW (1) TWI557112B (sr)
UA (1) UA113641C2 (sr)
UY (1) UY34654A (sr)
WO (1) WO2013134085A1 (sr)
ZA (1) ZA201405846B (sr)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104987416A (zh) 2008-05-23 2015-10-21 Siwa有限公司 促进再生的方法、组合物及设备
EP2801570A1 (en) 2009-03-13 2014-11-12 Vitae Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of beta-secretase
EP2539322B1 (en) 2010-02-24 2014-01-01 Vitae Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of beta-secretase
TWI557112B (zh) 2012-03-05 2016-11-11 百靈佳殷格翰國際股份有限公司 β－分泌酶抑制劑
EP2847177B1 (en) 2012-05-09 2017-10-11 Boehringer Ingelheim International GmbH Methods for making oxetan-3-ylmethanamines
TW201422592A (zh) * 2012-08-27 2014-06-16 Boehringer Ingelheim Int β－分泌酶抑制劑
WO2014052398A1 (en) 2012-09-28 2014-04-03 Vitae Pharmaceuticals, Inc. Inhibitor of beta-secretase
US9079832B2 (en) 2012-11-21 2015-07-14 Boehringer Ingelheim International Gmbh Process for making N-sulfinyl α-amino amides
RU2721568C2 (ru) 2014-09-19 2020-05-20 Сива Корпорейшн Анти-age антитела для лечения воспаления и аутоиммунных нарушений
WO2016055858A1 (en) * 2014-10-07 2016-04-14 Astrazeneca Ab Compounds and their use as bace inhibitors
US9993535B2 (en) 2014-12-18 2018-06-12 Siwa Corporation Method and composition for treating sarcopenia
US10358502B2 (en) 2014-12-18 2019-07-23 Siwa Corporation Product and method for treating sarcopenia
AU2017219749B2 (en) 2016-02-19 2022-01-06 Siwa Corporation Method and composition for treating cancer, killing metastatic cancer cells and preventing cancer metastasis using antibody to advanced glycation end products (AGE)
WO2017181116A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Siwa Corporation Anti-age antibodies for treating neurodegenerative disorders
JP2019518763A (ja) 2016-06-23 2019-07-04 シワ コーポレーション 様々な疾患及び障害の治療において使用するためのワクチン
KR102571296B1 (ko) * 2016-09-07 2023-08-28 더 리전트 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 P-tau를 감소시키고 인지를 개선하는 알로스테릭 코르티코트로핀-방출 인자 수용체 1 (crfr1) 길항제
US10919957B2 (en) 2017-04-13 2021-02-16 Siwa Corporation Humanized monoclonal advanced glycation end-product antibody
US11518801B1 (en) 2017-12-22 2022-12-06 Siwa Corporation Methods and compositions for treating diabetes and diabetic complications
CN113993585B (zh) 2019-03-27 2024-10-01 英矽智能科技知识产权有限公司 双环jak抑制剂及其用途
US12297244B2 (en) 2019-06-05 2025-05-13 Rensselaer Polytechnic Institute Systems and methods for inhibiting γ-secretase production of amyloid-β peptides
BE1027699B1 (fr) * 2021-01-28 2022-04-01 Trasis S A Procédé de purification de macro-agrégats de sérumalbumine humaine radiomarqués
CN113082209A (zh) * 2021-03-31 2021-07-09 中国科学技术大学 Cd4+t细胞源性bace1、ep2、ep4作为阿尔茨海默病治疗靶点的应用

Family Cites Families (48)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5745185A (en) 1980-07-21 1982-03-13 Eisai Co Ltd Hydantoin derivative and its preparation
AU655666B2 (en) 1991-08-28 1995-01-05 Pharmacia & Upjohn Company Spirocyclic benzopyran imidazolines
EP0758313A4 (en) 1994-05-06 1999-09-15 Pharmacopeia Inc COMBINATORIAL LIBRARY OF DIHYDROBENZOPYRANES
US7763609B2 (en) 2003-12-15 2010-07-27 Schering Corporation Heterocyclic aspartyl protease inhibitors
EP2153832B1 (en) 2003-12-15 2016-03-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Heterocyclic aspartyl protease inhibitors
US7700603B2 (en) 2003-12-15 2010-04-20 Schering Corporation Heterocyclic aspartyl protease inhibitors
US7592348B2 (en) 2003-12-15 2009-09-22 Schering Corporation Heterocyclic aspartyl protease inhibitors
MXPA06014792A (es) 2004-06-16 2007-02-16 Wyeth Corp Difenilimidazopirimidina y aminas imidazol como inhibidores de ??-secretasa.
DE602005017033D1 (de) 2004-06-16 2009-11-19 Wyeth Corp Amino-5,5-diphenylimidazolon-derivate zur beta-sekretase-hemmung
CN101068545A (zh) 2004-10-13 2007-11-07 默克公司 作为β－分泌酶抑制剂用于治疗阿尔茨海默病的螺哌啶化合物
US7759353B2 (en) 2005-06-14 2010-07-20 Schering Corporation Substituted spiro iminopyrimidinones as aspartyl protease inhibitors, compositions, and methods of treatment
CN101198609A (zh) 2005-06-14 2008-06-11 先灵公司 天冬氨酰基蛋白酶抑制剂
TW200738683A (en) 2005-06-30 2007-10-16 Wyeth Corp Amino-5-(5-membered)heteroarylimidazolone compounds and the use thereof for β-secretase modulation
MX2008000212A (es) 2005-06-30 2008-03-24 Wyeth Corp Compuestos amino-5-(6 miembros)heteroarilimidazolona y el uso de estos para la modulacion de la (-secretasa.
TW200730523A (en) 2005-07-29 2007-08-16 Wyeth Corp Cycloalkyl amino-hydantoin compounds and use thereof for β-secretase modulation
EP1913193B1 (en) 2005-07-29 2018-12-05 Koninklijke Philips N.V. Steam ironing devive for generating a burst of steam
KR20080050430A (ko) 2005-09-26 2008-06-05 와이어쓰 베타-세크레타제 (ｂａｃｅ) 억제제로서아미노-5-[4-(디플루오로메톡시)페닐]-5-페닐이미다졸론화합물
CN103936690B (zh) 2005-10-25 2016-06-08 盐野义制药株式会社 氨基二氢噻嗪衍生物
US7872009B2 (en) 2005-11-21 2011-01-18 Amgen Inc. Beta-Secretase modulators and methods of use
DE102005057688A1 (de) 2005-12-01 2007-06-14 Endress + Hauser Flowtec Ag Vorrichtung zur Bestimmung und/oder Überwachung des Massedurchflusses eines gasförmigen Mediums
CN101360737A (zh) 2005-12-19 2009-02-04 惠氏公司 2-氨基-5-哌啶咪唑酮化合物和其用于β分泌酶调节的用途
EP1974278A4 (en) 2005-12-20 2012-01-04 Fieldbus Foundation SYSTEM AND METHOD FOR IMPLEMENTING INSTRUMENTED SAFETY SYSTEMS
WO2007100536A1 (en) 2006-02-24 2007-09-07 Wyeth DIHYDROSPIRO[DIBENZO[A,D][7]ANNULENE-5,4'-IMIDAZOL] COMPOUNDS FOR THE INHIBITION OF β-SECRETASE
CA2653650A1 (en) 2006-06-12 2007-12-21 Schering Corporation Heterocyclic aspartyl protease inhibitors
PT2042480E (pt) 2006-07-18 2013-06-24 Astellas Pharma Inc Derivado de aminoindano ou um seu sal
WO2008030412A2 (en) 2006-09-07 2008-03-13 Merck & Co., Inc. Spiropiperidine beta-secretase inhibitors for the treatment of alzheimer's disease
TW200831484A (en) 2006-12-20 2008-08-01 Astrazeneca Ab New compounds
WO2008076043A1 (en) 2006-12-20 2008-06-26 Astrazeneca Ab Novel 2-amino-5,5-diaryl-imidazol-4-ones
TW200831091A (en) 2006-12-20 2008-08-01 Astrazeneca Ab New compounds
CL2008000784A1 (es) 2007-03-20 2008-05-30 Wyeth Corp Compuestos amino-5-[-4-(diflourometoxi) fenil sustituido]-5-fenilmidazolona, inhibidores de b-secretasa; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y su uso para tratar alzheimer, deterioro cognitivo, sindrome de down, disminucion co
AR065814A1 (es) 2007-03-23 2009-07-01 Wyeth Corp Derivados de 5-fenilimidazolona,inhibidores de beta-secretasa,composiciones farmaceuticas que los contienen y usos para prevenir y/o tratar trastornos asociados a niveles beta-amiloides elevados.
WO2008133273A1 (ja) 2007-04-24 2008-11-06 Shionogi & Co., Ltd. アルツハイマー症治療用医薬組成物
RU2476430C2 (ru) 2007-04-24 2013-02-27 Сионоги Энд Ко., Лтд. Производные аминодигидротиазина, замещенные циклической группой
TW200902503A (en) 2007-05-15 2009-01-16 Astrazeneca Ab New compounds
EP2077637B1 (en) 2007-12-12 2020-03-11 Alcatel Lucent System and method for protecting payload information in radio transmission
WO2009103626A1 (en) 2008-02-18 2009-08-27 F. Hoffmann-La Roche Ag 4, 5-dihydro-oxazol-2-yl amine derivatives
TWI431004B (zh) 2008-05-02 2014-03-21 Lilly Co Eli Ｂａｃｅ抑制劑
WO2010013302A1 (ja) 2008-07-28 2010-02-04 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 スピロアミノジヒドロチアジン誘導体
CN102105475B (zh) 2008-07-28 2014-04-09 卫材R&D管理有限公司 螺氨基二氢噻嗪衍生物
WO2010021680A2 (en) 2008-08-19 2010-02-25 Vitae Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of beta-secretase
KR20110073511A (ko) 2008-09-11 2011-06-29 암젠 인크 베타세크레타제 조절제로서의 스피로-테트라사이클릭 고리 화합물 및 사용 방법
KR20110086769A (ko) * 2008-11-23 2011-07-29 화이자 인코포레이티드 베타 세크레타제 억제제로서의 락탐
EP2801570A1 (en) * 2009-03-13 2014-11-12 Vitae Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of beta-secretase
WO2011072064A1 (en) 2009-12-08 2011-06-16 Array Biopharma Inc. S piro [chroman - 4, 4 ' - imidazol] ones as beta - secretase inhibitors
EP2539322B1 (en) 2010-02-24 2014-01-01 Vitae Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of beta-secretase
WO2011123674A1 (en) 2010-03-31 2011-10-06 Array Biopharma Inc. Compounds for treating neurodegenerative diseases
US8415483B2 (en) * 2010-12-22 2013-04-09 Astrazeneca Ab Compounds and their use as BACE inhibitors
TWI557112B (zh) 2012-03-05 2016-11-11 百靈佳殷格翰國際股份有限公司 β－分泌酶抑制劑

Also Published As

Publication number Publication date
SMT201600114B (it) 2016-08-31
AR090241A1 (es) 2014-10-29
US20130289050A1 (en) 2013-10-31
JP2015511958A (ja) 2015-04-23
AU2017236042A1 (en) 2017-10-26
PE20141972A1 (es) 2014-12-28
SI2822930T1 (sl) 2016-09-30
UY34654A (es) 2013-09-30
MA35945B1 (fr) 2014-12-01
IN2014DN06710A (sr) 2015-05-22
NZ629239A (en) 2016-04-29
JP6161643B2 (ja) 2017-07-12
IL233887A0 (en) 2014-09-30
EP2822930B1 (en) 2016-01-20
AU2013230523B2 (en) 2017-10-05
WO2013134085A1 (en) 2013-09-12
SG11201404600VA (en) 2014-10-30
HUE027289T2 (en) 2016-09-28
US20170196867A1 (en) 2017-07-13
AP4029A (en) 2017-02-05
CY1117543T1 (el) 2017-04-26
TW201339139A (zh) 2013-10-01
EA201491534A1 (ru) 2014-12-30
ES2568928T3 (es) 2016-05-05
HRP20160415T1 (hr) 2016-06-03
US20180344734A1 (en) 2018-12-06
US20150150872A1 (en) 2015-06-04
TWI557112B (zh) 2016-11-11
MX353432B (es) 2018-01-11
AP2014007900A0 (en) 2014-08-31
WO2013134085A8 (en) 2014-09-04
TN2014000326A1 (en) 2015-12-21
US9526727B2 (en) 2016-12-27
ZA201405846B (en) 2017-08-30
US8981112B2 (en) 2015-03-17
CL2014002334A1 (es) 2015-04-17
ME02390B (me) 2016-09-20
PL2822930T3 (pl) 2016-09-30
EA024995B1 (ru) 2016-11-30
DK2822930T3 (en) 2016-04-25
UA113641C2 (xx) 2017-02-27
HK1205739A1 (zh) 2015-12-24
MX2014010625A (es) 2015-04-08
AU2013230523A1 (en) 2014-09-18
CN104271558A (zh) 2015-01-07
CO7091177A2 (es) 2014-10-21
PH12014501963B1 (en) 2014-11-17
AU2017236042B2 (en) 2019-01-03
MY171091A (en) 2019-09-25
US9949975B2 (en) 2018-04-24
IL233887A (en) 2017-09-28
KR20140138774A (ko) 2014-12-04
EP2822930A1 (en) 2015-01-14
ECSP14020640A (es) 2015-06-30
PH12014501963A1 (en) 2014-11-17
CA2864143C (en) 2020-04-14
CN104271558B (zh) 2016-08-24
CA2864143A1 (en) 2013-09-12
BR112014021269A2 (pt) 2017-07-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2017236042B2 (en) Inhibitors of beta-secretase
US9018391B2 (en) Inhibitors of beta-secretase
Bukhtiyarov et al. Inhibitors of β-Secretase
US9290477B2 (en) Inhibitors of β-secretase
HK1205739B (en) Inhibitors of beta-secretase
OA17087A (en) Inhibitors of beta-secretase.
OA17202A (en) Inhibitors of beta-secretase.