RS51294B - Inhibitorna jedinjenja za hepatitis c - Google Patents

Description

Oblast tehnike

Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja, postupke za njihove sinteze, kompozicije i metode za tretman infekcije izazvane virusom hepatitisa C (HCV). Posebno, ovaj pronalazak obezbedjuje nove peptidne analoge, farmaceutske kompozicije koje sadrže takve analoge i metode za korišćenje ovih analoga u tretmanu HCV infekcije.

STANJE TEHNIKE

Hepatitis C virus (HCV) je glavni etiološki agens za post-transfuzioni i kontaktom stečeni hepatitis koji nije A i B tipa i rasprostranjen je širom sveta. Obračunato je da je preko 200 miliona ljudi širom sveta inficirano ovim virusom. Visok procenat nosioca virusa postaje hronično inficiran i u mnogim slučajevima bolest napreduje sve do pojave hroničnog oboljenja jetre, takozvanog hroničnog hepatitisa C. Ova grupa je za uzvrat u visokom riziku za ozbiljna oboljenja jetre kao što su ciroza jetre, hepatocelularni karcinom i terminalna oboljenja jetre koja dovode do smrtnog ishoda.

Mehanizam kojim HCV uspostavlja viralnu istrajnost i dovodi do visokog stepena hroničnog oboljenja jetre još nije u potpunosti objašnjen. Nije poznato kako HCV utiče na i kako izbegava delovanje imunog sistema domaćina. Pored toga, uloge celularnih i humoralnih imunih odgovora u zaštiti protiv HCV infekcije i oboljenja još treba ustanoviti. Imunoglobulini su zabeleženi u profilaksi viralnog hepatitisa nastalog putem transfuzije, medjutim, Centar za Kontrolu Oboljenja do sada nije preporučio tretman sa imunoglobulinom za ove svrhe. Nedostatak efikasnog zaštitnog imunog odgovora je smetnja razvoju vakcine ili adekvatnih mera profilakse nakon izlaganja, tako da se najbliže rečeno, velike nade polažu u antiviralne intervencije.

Različita klinička ispitivanja su dirigovana sa ciljem da se identifikuju farmaceutski agensi sposobni za efikasno tretiranje HCV infekcije kod pacijenata koji pate od hroničnog hepatitisa C. Ova ispitivanja uključuju korišćenje interferona-alfa, pojedinačno i u kombinaciji sa drugim antiviralnim agensima. Ova ispitivanja su pokazala da znatan broj učesnika ne reaguje na ove terapije i ustanovljeno je da veliki procenat onih koji reaguju povoljno, recidivira nakon prekida tretmana.

Do skora, interferon (IFN) je bio jedina dostupna terapija sa dokazanim korisnim efektom koja je odobrena u klinici za pacijente sa hroničnim hepatitisom C. Medjutim, održivi stepen odgovora je nizak i tretman sa interferonom takodje indukuje neke sporedne efekte (npr. retinopatije, tiroiditis, akutni pankreatitis, depresiju) koji umanjuju kvalitet života tretiranih pacijenata. Skoro je interferon, u kombinaciji sa ribavirinom odobren za pacijente koji ne daju odgovor na pojedinačnu primenu IFN. Medjutim, sporedni efekti do kojih dovodi IFN nisu ublaženi sa ovom kombinovanom terapijom. Pegilovani oblici interferona, kao što je PEG-Intron® i Pegasvs® mogu vidno delom umanjiti ove štetne sporedne efekte ali antiviralni lekovi još uvek ostaju put izbora za oralni tretman HCV.

Prema tome, postoji potreba za razvoj efikasnih antiviralnih agenasa za tretman HCV infekcije koji prevazilaze ograničenja postojeće farmaceutske terapije.

HCV je obmotani virus sa pozitivnim lancem RNK iz familije Flaviviridae. Jednostruki lanac HCV RNKgenoma je dužine od oko 9500 nukleotida i ima jednostruki otvoreni okvir čitanja (ORF) koji kodira jedinični veliki poliprotein sa oko 3000 aminokiselina. U inficiranim ćelijama, ovaj poliprotein se čepa na više mesta uz pomoć ćelijskih i viralnih proteaza pri čemu se dobijaju strukturalni i nestrukturalni (NS) proteini. U slučaju HCV, stvaranje zrelih nestrukturalnih proteina (NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A, i NS5B) je pod uticajem dve viralne proteaze. Prva, koja je do sada slabo okarakterisana, deluje na spoju NS2-NS3 (u daljem tekstu se navodi kao NS2/3 proteaza); druga je serin proteaza koja se nalazi u okviru N-terminalnog regiona NS3 (NS3 proteaza) i posreduje u svim narednim cepanjima duž NS3 regiona, kako ucis,na NS3-NS4A mestu cepanja, tako i utrans,za. preostala NS4A-NS4B, NS4B-NS5A, NS5A-NS5B mesta. NS4A protein izgleda da poseduje multiple funkcije, deluje kao kofaktor za NS3 proteazu i verovatno pomaže u membranskoj lokalizaciji NS3 i drugih viralnih komonenti replikaze. Formiranje kompleksa NS3 proteaze sa NS4A izgleda daje neophodno za odigravanje procesa, pojačavanje proteolitičke efikasnosti na svim mestima. NS3 protein takodje pokazuje nukleozidno trifosfataznu i RNK helikaznu aktivnost. NS5B je RNK-zavisna PvNK polimeraza koja je uključena u replikaciju HCV.

Opšta strategija za razvoj antiviralnih agenasa je da se inaktiviraju viralno kodirani enzimi koji su esencijalni za replikaciju virusa.

U skorije vreme, nadjeno je da NS3 proteaza potencijalno ima dodatni uticaj pomoću blokiranja IFN-posredovane ćelijske antivirusne aktivnosti u inficiranoj ćeliji (Foy i sar.,Science, 17April 2003). To navodi na verovanje u hipotezu da NS3/NS4A proteaza može predstavljati dualni terapeutski cilj, čijom inhibicijom se može, kako blokirati viralna replikacija tako i obnoviti interferonski odgovor kod HCV inficiranih ćelija.

U WO 00/09543, jedinjenja sa formulom

u kojoj poželjno značenje za R<2>je nesupstituisani ili mono- ili disupstituisani hinolinil ostatak kako je definisano tamo, su opisana kao inhibitori hepatitis C viralne NS3 proteaze, enzima koji je esencijalan za replikaciju hepatitis C virusa.

Ovaj pronalazak obezbedjuje tripeptidna jedinjenja koja imaju poboljšanu potentnost protiv HCVNS3 proteaza. Pored toga, obezbedjena su jedinjenja koja su visoko aktivna u kulturi ćelija.

Prednost jednog aspekta ovog pronalaska leži u činjenici da jedinjenja prema ovom pronalasku posebno inhibiraju NS3 proteazu i ne pokazuju značajnu inhibitornu aktivnost protiv drugih humanih serin proteaza, kao što je humana leukocitna elastaza (HLE), ili cistein proteaza, kao što je humani katepsin B (Kat B) jetre.

U poredjenju sa jedinjenjima koja su opisana u WO 00/09543, jedinjenja koja su obezbedjena u ovom pronalasku pokazuju neočekivane prednosti. Generalno, ona pokazuju jednu ili više od sledećih prednosti: niže IC50vrednosti u NS3-NS4A proteaza ispitivanjima;

niže EC50vrednosti u HCV RNK replikacionim analizama na bazi ćelija;

- bolju rastvorljivost; i/ili

- viši nivo u plazmi kada se primenjuju oralno kod pacova.

Kratak o<p>is<p>ronalaska

Uključen u obim pronalaska je racemat, dijastereoizomer, ili optički izomer jedinjenja sa formulom (I):

u kojoj

B je (CMo) alkil, (C3.7)cikloalkil, ili (C14) alkil-(C3.7)cikloalkil,

a) u kojoj navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C 1.3) alkil; i b) u kojoj navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono- ili di-supstituisani sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi i 0-(C 1.4)alkil; i c) u kojoj svaka od navedenih alkil grupa može biti mono-, di- ili tri-supsittuisana sa halogenom; i d) u kojoj svaka od navedenih cikloalkil grupa je 4-, 5-, 6- ili 7-o člana koja ima opciono, jednu (za 4-, 5,6, ili 7-o člane) ili dve (za 5-, 6- ili 7-o člane) -CH2- grupe koje nisu

direktno vezane jedna za drugu, zamenjenu sa -0- tako da je O-atom vezan za grupu X preko najmanje dva C-atoma;

X je O ili NH;

R<3>je (C2-8) alkil, (C3.7) cikloalkil ili (C1.3) alkil- (C3.7) cikloalkil, gde svaka od navedene alkil,

cikloalkil, i alkil-cikloalkil grupe može biti mono-, di- ili tri-supsittuisana sa (C^ 4) alkil;

L° je H, halogen, (C^alkil, -OH, -0-(Cw)alkil, -NH2, -NH(C14)alkil ili -N((CM)alkil)2;

L<1>, L<2>su svaki nezavisno halogen, cijano, (C1.4) alkil, -0-(C 1.4)alkil, -S-(C 1.4)alkil, -SO-(C1.4) alkil, ili -S02-(Ci-4) alkil, gde svaka od navedenih alkil grupa je opciono supstituisana sa od jedan do tri halogena atoma; i

bilo L<1>ili L<2>(ali ne oba u isto vreme) mogu takodje biti H; ili

L° i L1iU

L° i L<2>mogu biti kovalentno vezani tako da formiraju, zajedno sa dva Gatoma za koje su oni vezani, 5- ili &-o člani karbociklični prsten u kome jedna ili dve -CH2- grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu, mogu biti zamenjene svaka nezavisno sa -0- ili NR<a>gde R<a>je H ili (C1.4) alkil, i gde navedeni karbo-ili heterociklični prstenje opciono mono- ili di-supstituisan sa (Cm) alkil;

R<2>je R<2>0, -NR2<2>COR<20>, -NR<22>COOR<20>-NR22R<21>i -NR<22>CONR<21>R23, gde

R20 je odabran od (Ci^) alkil, (C3.7) cikloalkil i (C14) alkil-(C3.7) cikloalkil, gde navedeni cikloalkil i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C 1.3) alkil;

R<21>je H iliR2<0>kako je gore definisano,

R22 iR2<3>su nezavisno odabrani od H i metil,

R<1>je etil ili vinil;

R<c>je hidroksi ili NHS02R<s>u kojoj R<s>je (C^) alkil, (C3.7)cikloalkil, (Ci^) alkil-(C3.7)cikloalkil, fenil, naftil, piridinil, (C1.4)alkil-fenil, (Ci.4)alkil-naftil ili (Ci-4)alkil-piridinil; od kojih je svaki opciono mono-, di- ili tri-supstituisan sa supstituentima koji su odabrani od halogen, hidroksi, cijano, (Cu)alkil,0-( C\. e) a\ ki\, -CO-NH2, -CO-NH(CM)alkil, -CO-N((CM)alkil)2, -NH2, -NH(C14) alkil i -N((Ci.4)alkil)2) gde (C 1.4) alkil i 0-(Ci-6) alkil su opciono supstituisani sa jednim do tri atoma halogena; i od kojih je svaki opciono monosupstituisan sa nitro;

ili Rs je -N(RN2)RN1), gde R<N1>i R<N2>su nezavisno odabrani od H, (Cj^alkil, (C3.

7)cikloalkil, (C 1.6) alkil-(C3.7)cikloalkil, aril i (Ci.6)alkil-aril; gde navedeni (Ci^alkil, (C3.7)cikloalkil, ( Ci. q) alkil-(03.7) cikloalkil, aril i (Ci.6)alkil-aril su opciono supstituisani sa jednim ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani od halogen, (C 1.6) alkil, hidroksi, cijano, 0-(C,.6)alkil, -NH2>-NH(CM)alkil, -N((C14)alkil)2, -CO-NH2, -CO-NH(Ci4) alkil, -CO-N((Ci.4) alkil) 2, -COOH, i -COO(C!.6) alkil; ili RN2 i R<N1>su povezani, zajedno sa azotom za koji su vezani, tako da formiraju 3- do 7-o člani monociklični zasićeni ili nezasićeni heterocikl ili 9- ili lO-o člani biciklični zasićeni ili nezasićeni heterocikl, od kojih svaki opciono sadrži od jedan do tri dalja heteroatoma koji su nezavisno odabrani od N, S i 0, i od kojih je svaki opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani od halogen, (Ci.6)alkil, hidroksi, cijano, 0-(Ci.6) alkil, -NH2, -NH(C 1.4) alkil, -N ((Cw) alkil) 2, -CO-NH2, -CO-NH(C14) alkil, -CO-N((C14) alkil) 2, -COOH, i -COO(Ci.6) alkil;

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov estar.

Uključen u okvir obima ovog pronalaska je farmaceutska kompozicija koja obuhvata anti-hepatitis C viralne efikasne količine jedinjenja sa formulom I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili njegov estar, u smeši sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim medijumom nosača ili pomoćnim agensom.

Prema daljim aspektima ovog rešenja, farmaceutska kompozicija prema ovom pronalasku dalje obuhvata terapeutski efikasnu količinu najmanje jednog od drugih antiviralnih agenasa.

Još jedan važan aspekt pronalaska obuhvata metod za tretman ili prevenciju hepatitis C viralne infekcije kod sisara uz pomoć primene kod sisara anti-hepatitis C viralne efikasne količine jedinjenja sa formulom I, njegove farmaceutski prihvatljive soli ili njegovog estra, ili kompoziciju kako je opisano gore, pojedinačno ili u kombinaciji sa najmanje jednim od drugih antiviralnih agenasa, koji se primenjuju zajedno ili odvojeno.

Takodje u okvir obima ovog pronalaska je korišćenje jedinjenja sa formulom I, ili njegove farmaceutski prihvatljive sob' ili njegovog estra, kako je opisano ovde, za proizvodnju medikamenata za tretman ili prevenciju hepatitis C viralne infekcije kod sisara.

Detaljni o<p>is<p>oželjnihrešenja

Definicije

Kako je ovde korišćeno, sledeće definicije su primenjene ukoliko nije drugačije naznačeno: Uz reference za primere gde su( R)ili( S)korišćeni da označe apsolutnu konfiguraciju supstituenta ili asimetrični centar jedinjenja sa formulom I, označavanje je učinjeno u kontekstu celog jedinjenja i nije u kontekstu samog supstituenta ili asimetričnog centra.

Oznake "Pl, P2, i P3" kako su ovde korišćene se odnose na poziciju aminokiselinskih ostataka polazeći od C-završnog kraja peptidnog analoga i pružajući se prema N-završetku (odnosno, Pl se odnosi na poziciju 1 od C-završetka, P2: drugu poziciju od C-završetka i td.) (videti Berger A. & Schechter I., Transactions of Royal Societv London series B257.249 - 264

(1970)).

Kako je ovde korišćeno termin "(li?, 2S)-vinil-ACCA" se odnosi na jedinjenje sa formulom:

pod nazivom,( 1R, 2S)l-amino-2-etenilciklopropankarboksilna kiselina.

Termin "(Ci_n) alkil" kako je ovde korišćen, bilo pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim supstituentom, ima značenje acikličnih, ravnih ili razgranatih lančanih alkil supstituenata koji sadrže od 1 do n atoma ugljenika. "(Ci.6)alkil" uključuju, ali nisu ograničeni na metil, etil, n-propil, n-butil, 1-metileril (i-propil), 1-metilpropil, 2-metilpropil, 1,1-đimetiletil (ferc-butil), pentil i heksil. Skraćenice Me i Pr označavaju metil grupu i n-propil respektivno.

Termin "(€3.7)cikloalkil" kako je ovde korišćen, bilo pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim supstituentom, ima značenje cikloalkil supstituenta koji sadrži od 3 do 7 atoma ugljenika i uključuje, ali nije ograničen na, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil i cikloheptil.

Termin" (Ci_n) alkil- (C3.7) cikloalkil" kako je ovde korišćen ima značenje alkilen radikala koji sadrži 1 do n atoma ugljenika za koje je cikloalkil radikal koji sadrži od 3 do 7 atoma ugljenika direktno vezan; i uključuje, ali nije ograničen na, ciklopropilmetil, ciklobutilmetil, ciklopentilmetil, 1-ciklopentiletil, 2-ciklopentiletil, cikloheksilmetil, 1-cikloheksiletil, 2-cikloheksiletil i cikloheptilpropil.

Termin aril ili "C6ili Cioaril" kako je ovde korišćen zamenljivo, bilo pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim radikalom, ima značenje bilo daje aromatična monociklična grupa koja sadrži 6 atoma ugljenika ili aromatična biciklična grupa koja sadrži 10 atoma ugljenika. Aril uključuje, ati nije ograničen na, fenil, 1-naftil ili 2-naftil.

Kako je ovde korišćen, termin " (Ci.n)alkil-aril" ima značenje alkil radikala koji sadrži od 1 do n atoma ugljenika za koji je aril vezan. Primeri za (Ci-3)alkil-aril uključuju, ali nisu ograničeni na, benzil (fenilmetil), 1-feniletil, 2-feniletil i fenilpropil.

Termin "0-(Ci.n)alkil" ili "(Ci.n)alkoksi" kako je ovde korišćen, bilo pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim radikalom, ima značenje radikala -0-(Ci-n)alkil gde alkil, kako je gore definisano, sadrži od 1 do n atoma ugljenika, i uključuje metoksi, etoksi, propoksi, 1-metiletoksi, butoksi i 1,1-dimetiletoksi. Poslednji radikal je obično poznat kao terc-butoksi.

Termin "halo" ili "halogen" kako je ovde korišćen ima značenje halogen supstituenta koji je odabran od fluora, hlora, broma ili joda.

Termin "farmaceutski prihvatljivi estar" kako je ovde korišćen, bilo pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim supstituentom, ima značenje estara jedinjenja sa formulom I u kojima je bilo koja karboksilna funkcionalna grupa molekula, ali poželjno je daje karboksi završetak, zamenjena sa nekom alkoksikarbonilnom funkcijom:

u kojoj R deo estra je odabran od alkil (uključujući ali ne ograničavajući se na, metil, etil,n-propil, t-butil,/j-butil); alkoksialkil (uključujući ali ne ograničavajući se na metoksimetil); alkoksiacil (uključujući ali ne ograničavajući se na acetoksimetil); alkil-aril (uključujući ali ne ograničavajući se na benzil); ariloksialkil (uključujući ali ne ograničavajući se na fenoksimetil); aril (uključujući ali ne ograničavajući se na fenil), je opciono supstituisan sa halogenom, (C 1.4) alkil ili (Ci.4)alkoksi. Drugi pogodni proderivatni estri se mogu naći u Design of prodrugs, Bundgaard, H. Ed. Elsevier (1985). Takvi farmaceutski prihvatljivi estri se obično hidrolizujui' n vivokada se ubrizgaju kod sisara i transformišu u kiseline iz jedinjenja sa formulom I. U odnosu na estre koji su gore opisani, ukoliko nije drugačije specifikovano, bilo koji prisutan alkilni deo, pogodno je da sadrži 1 do 16 atoma ugljenika, posebno 1 do 6 atoma ugljenika. Bilo koji arilni deo koji je prisutan u takvim estrima pogodno je da obuhvataju fenil grupu. Posebno estri mogu biti C146alkil estri, nesupstituisani benzil estri ili benzil estri supstituisani sa najmanje jednim halogenom, Ci-6alkil, Ci-ealkoksi, nitro ili trifluormetilom.

Termin "farmaceutski prihvatljive soli" ima značenje soli jedinjenja sa formulom (I) koja je, u okviru polja ispravne medicinske ocene, pogodna za korišćenje u kontaktu sa humanim tkivom i tkivom nižih životinja bez nepogodne toksičnosti, iritacija, alergijskih reakcija i slično, srazmerno razumnom odnosu koristi/rizika, generalno u vodi ili ulju rastvorna ili disperzibilna, i efikasna za svoje namensko korišćenje. Termin uključuje farmaceutski prihvatljive soli sa dodatkom kiselina i farmaceutski prihvatljive soli sa dodatkom baza. Liste pogodnih soli se mogu naći u na pr., S.M. Birge i sar., J. Pharm. Sci., 1977,66, str. 1 -19.

Termin "farmaceutski prihvatljive soli sa dodatkom kiselina" ima značenje onih soti koje zadržavaju biološku efikasnost i svojstva slobodnih baza i koje nisu biološki ili na drugi način nepoželjne, koje su formirane sa neorganskim kiselinama kao što su hlorovođonična kiselina, bromovodonična kisetina, sumporna kiselina, sulfamska kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina, i slično i organskim kiselinama kao što su sirćetna kiselina, trifluorsirćetna kiseb'na, adipinska kiselina, askorbinska kiselina, aspartinska kiselina, benzensulfonska kiselina, benzoeva kiselina, buterna kiselina, kamforna kiselina, kamforsulfonska kiselina, cinaminska kiselina, limunska kiselina, diglukonska kiselina, etansulfonska kiselina, glutaminska kiselina, glikolna kiselina, glicerofosforna kiselina, hemisulfitna kiselina, heksanska kiselina, mravlja kiselina, fumarna kisetina, 2-hidroksietansulfonska kiselina (izetionska kiselina), mlečna kiselina, hidroksimaleinska kiselina, malinska kiselina, malonska kiselina, bademova kiselina, mezitilensulfonska kiselina, metansulfonska kiselina, naftalensulfonska kiselina, nikotinska kiselina, 2-naftalensulfonska kiselina, oksalna kiselina, pamoinska kiselina, pektinska kiselina, fenilsirćetna kiselina, 3-fenilpropionska kisefina, pivalinska kiselina, propionska kiselina, piruvinska kiselina, salicilna kiselina, stearinska kiselina, sukcinilna kisetina, sulfanilna kiselina, tartarna kiselina, p-toluensulfonska kiselina, andekanonska kiselina, i slično.

Termin "farmaceutski prihvatljive sofi sa dodatkom baza" ima značenje onih soli koje zadržavaju biološku efikasnost i svojstva slobodnih kiselina i koje nisu biološki ili na drugi način nepoželjne, koje su formirane sa neorganskim bazama kao što su amonijak ili hidroksid, karbonat, ili bikarbonat amonijum ili sa metalnim katjonima kao što su natrijum, kalijum, litijum, kalcijum, magnezijum, gvoždje, cink, bakar, mangan, aluminijum, i slično. Posebno su poželjne amonijumove, kalijumove, natrijumove, kalcijumove i magnezijumove soli. Sofi dobijene iz farmaceutski prihvatljivih organskih netoksičnih baza uključuju soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, kvaternarnarnih aminskih jedinjenja, supstituisanih amina uključujući prirodne supstituisane amine, ciklične amine i bazne jonoizmenjivačke smole, kao što su metilamin, dimetilamin, trimetilamin, etilamin, dietilamin, trietilamin, izopropilamin, tripropilamin, tributilamin, etanolamin, dietanolamin, 2-dimetilaminoetanol, 2-dietilaminoetanol, dicikloheksilamin, lizin, arginin, histidin, kafein, hidrabamin, holin, betain, etilendiamin, glukozamin, metilglukamin, teobromin, purini, piperazin, piperidin, N-etilpiperidin, tetrametilamonijumova jedinjenja, tetraetilamonijumova jedinjenja, piridin, N,N-dimetilanilin, N-metilpiperidin, N-metilmorfolin, dicikloheksilamin, dibenzilamin, N,N-dibenzilfenetilamin, 1-efenamin, N,N'-dibenziletilendiamin, poliaminske smole, i slično. Posebno poželjne netoksične baze su izopropilamin, dietilamin, etanolamin, trimetilamin, dicikloheksilamin, holin, i kafein.

Termin "sisar" kako je ovde korišćen ima značenje koje obuhvata ljude, kao i ne-humane sisare koji su osetljivi na infekcije sa hepatitis C virusom uključujući domaće životinje, kao što su krave, svinje, konji, psi i mačke i ne-domaće životinje.

Termin "antiviralni agens" kako je ovde korišćen ima značenje nekog agensa (hemijskog ili biološkog) koji je efikasan u inhibiranju formiranja i/ili replikacije virusa kod sisara. To uključuje agense koji ometaju mehanizme bilo domaćina ili viralne mehanizme koji su neophodni za formiranje i/ili replikaciju virusa kod sisara. Takvi agensi mogu biti odabrani od: drugih anti-HCV agenasa, EIV inhibitora, HAV inhibitora i HBV inhibitora. Antiviralni agensi uključuju, na primer, ribavirin, amantadin, VX-497 (merimepodib, Vertex Pharmaceuticals), VX-498 (Vertex Pharmaceuticals), Levovirin, Viramidin, Ceplen (maksamin), XTL-001 i XTL-002 (XTL Biopharmaceuticals).

Termin "drugi anti-HCV agensi" kako je ovde korišćen, ima značenje onih agenasa koji su efikasni za smanjenje ili prevenciju napredovanja simptoma srodnih sa hepatitis C oboljenjem. Takvi agensi se mogu odabrati od: imunomodulatornih agenasa, inhibitora HCV NS3 proteaza, inhibitora HCV polimeraze ili inhibitora drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu.

Termin "imunomodulatorni agensi" kako je ovde korišćen ima značenje onih agenasa (hemijskih ili bioloških) koji su efikasni u pojačavanju ili potenciranju odgovora imunog sistema kod sisara. Imunomodulatorni agensi uključuju, na primer, interferone klase I (kao što su a-, p-, 5- ,co- iT-interferoni, konsenzus interferoni i azialo-interferoni), interferone klase II (kao što su y-interferoni) i njihovi pegilovani oblici.

Termin "inhibitori HCV NS3 proteaza" kako je ovde korišćen ima značenje nekog agensa (hemijskog ili biološkog) koji je efikasan u inhibiciji funkcije HCV NS3 proteaza kod sisara. Inhibitori HCV NS3 proteaza uključuju, na primer, ona jedinjenja koja su opisana u WO 99/07733, WO 99/07734, WO 00/09558, WO 00/09543, WO 00/59929, WO 03/064416, WO 03/064455, WO 03/064456, WO 02/060926, WO 03/053349, WO 03/099316 ili WO 03/099274, i Verteks pre-razvojni kandidat koji je identifikovan kao VX-950.

Termin "inhibitori HCV polimeraze" kako je ovde korišćen, ima značenje nekog agensa (hemijskog ili biološkog) koji je efikasan u inhibiciji funkcije HCV polimeraze kod sisara. To uključuje, na primer, inhibitore HCV NS5B polimeraze. Inhibitori HCV polimeraze uključuju ne-nukleozide, na primer, ona jedinjenja koja su opisana u: • US Patentnoj prijavi Br. 60/441,674 popunjenoj Januara 22,2003, ovde inkorporisanoj referencom u svojoj celosti (Boehringer Ingelheim), • US Patentnoj prijavi Br. 60/441,871 popunjenoj Januara 22,2003, ovde inkorporisanoj referencom u svojoj celosti (Boehringer Ingelheim),

WO 04/005286 (Gilead), WO 04/002977 (Pharmacia), WO 04/002944 (Pharmacia), WO 04/002940 (Pharmacia), WO 03/101993 (Neogenesis), WO 03/099824 (Wyeth), WO 03/099275 (Wyeth), WO 03/099801 (GSK)), WO 03/097646 (GSK), WO 03/095441 (Pfizer), WO 03/090674 (Viropharma), WO 03/084953 (B&C Biopharm), WO 03/082265 (Fujisawa), WO 03/082848 (Pfizer), WO 03/062211 (Merck), WO 03/059356 (GSK), EP 1321463 (Shire), WO 03/040112 (Rigel), WO 03/037893 (GSK), WO 03/037894 (GSK), WO 03/037262 (GSK), WO 03/037895 (GSK), WO 03/026587 (BMS), WO 03/002518 (Dong Wha), WO 03/000254 (JapanTobacco), WO 02/100846 Al (Shire), WO 02/100851A2 (Shire), WO 02/098424 Al (GSK), WO 02/079187 (Dong Wha), WO 03/02/20497 (Shionogi), WO 02/06246 (Merck), WO 01/47883 (JapanTobacco), WO 01/85172 Al (GSK), WO 01/85720 (GSK), WO 01/77091 CMarik), WO 00/18231 (Viropharma), WO 00/13708 (Viropharma), WO 01/10573 (Viropharma) WO 00/06529 (Merck), EP 1 256 628 A2 (Agouron), WO 02/04425 (Boehringer Ingelheim) WO 03/007945 (Boehringer Ingelheim), WO 03/010140 (Boehringer Ingelheim) i WO 03/010141 (Boehringer Ingelheim). Pored toga drugi inhibitori HCV polimeraze takodje uključuju nukleozidne analoge, na primer, ona jedinjenja koja su opisana u: WO 04/007512 (Merck/Isis), WO 04/003000 (Idenk), WO 04/002999 (Idenbc), WO 04/0002422 (Idenix), WO 04/003138 (Merck), WO 03/105770 (Merck), WO 03/105770 (Merck), WO 03/093290 (Genelabs), WO 03/087298 (Biocryst), WO 03/062256 (Ribapharm), WO 03/062255 (Ribapharm), WO 03/061385 (Ribapharm), WO 03/026675

(Idenk), W0 03/026589 (Idenk), WO 03/020222 (Merck), WO 03/000713 (Glaxo), WO 02/100415 (Hoffinann-La Roche), WO 02/1094289 (Hof&nann-La Roche), WO 02/051425 (Mitsubishi), WO 02/18404 (Hof/mann-LaRoche), WO 02/069903 (BiocrvstPharmaceuticals Inc.), WO 02/057287 (Merck/Isis), WO 02/057425 (Merck/Isis), WO 01/90121 (Idenk), WO 01/60315 (Shire) i WO 01/32153 (Shire). Specifični primeri za inhibitore HCV polimeraze, uključuju JTK-002, JTK-003 i JTK-109 (Japan Tobacco).

Termin "inhibitori drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu" kako je ovde korišćen, ima značenje nekog agensa (hemijskog ili biološkog) koji je efikasan u inhibiciji formiranja i/ili replikacije HCV kod sisara korišćenjem mehanizma koji je drugačiji od inhibiranja funkcije HCVNS3 proteaza. To uključuje agense koji ometaju bilo mehanizme domaćina bilo HCV viralne mehanizme koji su neophodni za formiranje i/ili replikaciju HCV kod sisara. Inhibitori drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu uključuju, na primer, agense koji inhibiraju ciljeve koji su odabrani od helikaze, NS2/3 proteaze i unutrašnjeg ulaznog mesta na ribozomu (IRES). Specifični primeri za inhibitore drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu uključuju ISIS-14803 (ISIS Pharmaceuticals).

Termin "HP7 inhibitori" kako je ovde korišćen, ima značenje nekog agensa (hemijskog ili biološkog) koji je efikasan u inhibiciji formiranja i/ili replikacije HrV kod sisara. To uključuje agense koji ometaju bilo mehanizme domaćina bilo viralne mehanizme koji su neophodni za formiranje i/ili replikaciju HIV kod sisara. HIV inhibitori uključuju, na primer, nukleozidne inhibitore, ne-nukleozidne inhibitore, proteaza inhibitore, inhibitore fuzije i inhibitore integraze.

Termin "HAV inhibitori" kako je ovde korišćen, ima značenje nekog agensa fliemijskog ili biološkog) koji je efikasan u inhibiciji formiranja i/ili replikacije HAV kod sisara. To uključuje agense koji ometaju bilo mehanizme domaćina bilo viralne mehanizme koji su neophodni za formiranje i/ili replikaciju HAV kod sisara. HAV inhibitori uključuju Hepatitis A vakcine, na primer, Havrk® (GlaxoSmithKline), VAOTA® (Merck) i Avaxim® (Aventis Pasteur).

Termin "HBV inhibitori" kako je ovde korišćen, ima značenje nekog agensa Ohemijskog ili u:'-xl,, \ :„ .,* zJ :u:t ■ ~:::c ,: :~ :/:i:1:1 :■ t 1 r>\1 1 • ^ 1 v 1 _ 1: • ■

agense koji ometaju bilo mehanizme domaćina bilo viralne mehanizme koji su neophodni za formiranje i/ili replikaciju HBV kod sisara. HBV inhibitori uključuju, na primer, agense koji inhibiraju HBVviralnu DNK polimerazu ili HBVvakcine. Specifični primeri za HBV inhibitore uključuju Lamivudin (Epivir-HBV<®>), Adefovir Dipivoksil, Entecavir, FTC (Coviracil<®>), DAPD (DXG), L-FMAU (Clevudine<®>), AM365 (Amrad), Ldt CTelbivudin), monoval-LdC (Valtorcitabin), ACH-126,443 (L-Fd4C) (Acilion), MCC478 (Eli Lilly), Racivir (RCV), Fluor-Li D nukleozide, Robustaflavon, ICN 2001-3 (ICN), Bam 205 (Novelos),XTL{)01 (XTL), Imino-ŠVećere (Nonil-DNJ) (Synergy), HepBzim; i imunomodulatorne proizvode kao što su: interferon alfa 2b, HE2000 (Hollis-Eden), Teradigm (Epimun), EHT899 (Enzo Biochem), Timozin alfa-1 (Zadaxin<®>), HBV DNK vakcine (Prahaject), HBV DNK vakcine Qefferon centar), HBV antigen (OraGen), BayHep B<®>(Bayer), Nabi-HB<®>(Nabi) i Anti-hepatitis B (Cangene); i HBVvakcinske proizvode kao što su sledeći: Engeriks B, Rekombivaks HB, GenHevak B, Hepakar, Bio-Hep B, TvinRiks, Komvaks, Heksavak.

Termin "interferoni klase I" kako je ovde korišćen, ima značenje interferona koji su odabrani od grupe interferona koji se vezuju za receptore tipa I. To uključuje i prirodne i sintetički dobijene interferone klase I. Primeri za interferone klase I uključuju a-,<p->, 5-, a> i t-interferone, konsenzus interferone, azialo-interferone i njihove pegilovane oblike.

Termin "interferoni klase II" kako je ovde korišćen, ima značenje interferona koji su odabrani od grupe interferona koji se vezuju za receptore tipa II. Primeri interferona klase II uključuju/-interferone.

Specifični poželjni primeri nekih od ovih agenasa su navedeni dole:

■ antiviralni agensi: ribavirin ili amantadin; ■ imunomodulatorni agensi: interferoni klase I, interferoni klase II ili njihovi pegilovani oblici; ■ inhibitori HCV polimeraze: nukleozidni analozi ili ne-nukleozidni; ■ inhibitori drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu koji inhibiraju ciljeve koji su odabrani od: NS3 helikaza, NS2/3 proteaza ili unutrašnjeg ulaznog mesta ribozoma (IRES); ■ HIV inhibitori: nukleozidni inhibitori, ne-nukleozidni inhibitori, inhibitori proteaza,

inhibitori fuzije ili inhibitori integraze; ili

■ HBV inhibitori: agensi koji inhibiraju viralnu DNK polimerazu ili su HBV vakcina.

Kao stoje rečeno gore, kombinovana terapija je ona u kojoj jedinjenje sa formulom (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, se primenjuju uporedo sa najmanje jednim dodatnim agensom koji je odabran od: nekog antiviralnog agensa, nekog imunomodulatornog agensa, drugog inhibitora HCV NS3 proteaza, nekog inhibitora HCV polimeraze, nekog inhibitora drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu, nekog HIV inhibitora, nekog HAV inhibitora i nekog HBV inhibitora. Primeri za takve agense su dati u gore navedenom odeljku Definicija. Ovi dodatni agensi mogu biti kombinovani sa jedinjenjima iz ovog pronalaska kako bi se stvorili jedinični dozni oblici. Alternativno, ovi dodatni agensi mogu biti odvojeno primenjeni kod pacijenta kao deo multiplog doznog oblika, na primer, korišćenjem kit opreme. Takvi dodatni agensi mogu biti primenjeni kod pacijenta pre, u toku ili nakon primene jedinjenja sa formulom (I), ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli.

Kako je ovde korišćen, termin "tretman" ima značenje primene jedinjenja ili kompozicije prema ovom pronalasku za ublažavanje ili eliminisanje simptoma hepatitis C oboljenja i/ili za smanjenje viralnog nakupa kod pacijenta.

Kako je ovde korišćen, termin "prevencija" ima značenje primene jedinjenja ili kompozicije prema ovom pronalasku nakon izlaganja osobe virusu ali pre pojave simptoma oboljenja i/ili pre detekcije virusa u krvi, kako bi se sprečila pojava simptoma oboljenja.

Kako je ovde korišćeno, označavanje veza za supstituent R pomoću linija koje izlaze iz centra prstena, kao što su, na primer,

ima značenje da supstituent R može biti vezan za bilo koju slobodnu poziciju na prstenu koja bi inače bila supstituisana sa atomom vodonika, ukoliko nije drugačije naznačeno.

Sledeće oznake — ili —> su korišćene promenljivo u pod-formulama da ukazu na vezu koja je povezana za ostatak molekula kako je definisano.

Poželjna rešenja

U sledećim poželjnim rešenjima, grupe i supstituenti jedinjenja prema ovom pronalasku su detaljno opisani.

Bje poželjno odabran od (C2.8) alkil, (C3.7) cikloalkil i (C1.3) alkil- (C3.7) cikloalkil,

a) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supsittuisani sa (Ci.3)alkil;i b) gde navedeni alkil, cikloalkil i alkil-cikloalkil mogu biti mono- ili di-supstituisani sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi i 0-(Ci_4)alkil; i c) gde svaka od navedenih alkil grupa može biti mono-, di- ili tri-supsittuisana sa fluorom ili mono-supstituisana sa hlorom ili bromom; i d) gde u svakoj od navedenih cikloalkil grupa koje su 5-, 6- ili 7-o člane, jedna ili dve -CH2-grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu, mogu biti zamenjene sa -0- tako daje 0-atom vezan za grupu X preko najmanje dva C-atoma. Poželjnije je da, B je odabrano od etil, n-propil, i-propil, n-butil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, terc-butil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil, a) gde svaka od navedenih grupa je opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta koji su odabrani od metil i etil; b) gde svaka od navedenih grupa je opciono mono- ili di-supstituisana sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi, metoksi i etoksi; i c) gde svaka od navedenih alkil grupa može biti mono-, di- ili tri-supstituisana sa fluorom ili mono-supsittuisana sa hlorom ili bromom; i d) gde u svakoj od navedenih cikloalkil grupa koje su 5-, 6- iti 7-o člane, jedna ili dve -CH2-grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu, mogu biti zamenjene sa -0- tako daje 0-atom vezan za grupu X preko najmanje dva C-atom.

Bje čak poželjnije, odabrano od etil, 1-metiletil, 1,1-dimetiletil, propil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, 1,1-dimetilpropil, 1,2-dimetilpropil, 2,2-dimetilpropil, 1,1,2-trimetilpropil, 1,2,2-trimetilpropil, 1-etilpropil, l-etil-2-metilpropil, l-(l-metiletil)-2-metilpropil, l-etil-2,2-dimetilpropil, butil, 1-metilbutil, 2-metilbutil, 3-metilbutil, 1,2-dimetilbutil, 1,1-dimetilbutil, 1,3-dimetilbutil, 2,2-dimetilbutil, 2,3-dimetilbutil, 3,3-dimetilbutil, 1,2,2-trimetilbutil, 1,2,3-trimetilbutil, 2,2,3-trimetilbutil, 2,3,3-trimetilbutil i 2,2,3-trimetilbutil, gde ove alkil-grupe mogu biti supstituisane sa hlorom ili bromom, ili sa 1,2 ili 3 fluor supstituentima. Primeri poželjnih fluorisanih alkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, 2-fluoretil, 3-fluorpropil i 3,3,3-trifluorpropil.

Pored toga, čak poželjnije je da, B je ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, ili cikloheksil ili je odabrano od sledećih formula, u kojima su jedna ili dve CH^grupe iz cikloalkil grupe zamenjene sa kiseonikom:

Iz gornje liste, cikloalkil i alkil-cikloalkil grupa koje opciono obuhvataju 1 ili 2 O-atoma su opciono supstituisana sa 1,2 ili 3 metil-grupe. Posebno su poželjne one cikloalkil grupe, koje opciono obuhvataju 1 ili 2 O-atoma, u kojima oc-C-atom je supstituisan sa metil.

Dalji primeri poželjnih supstituisanih cikličnih grupa su

Najpoželjnije je da B je odabrano od etil, n-propil,te/r-butil,2-meul<p>ro<p>il, 1,2-dimetilpropil, 1,2,2-trimetilpropil, 2-fluoretil, 3-fluorpropil, 3,3,3-trifluorpropil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, 1-metilciklopenril i 1-metilcikloheksil, i od grupa koje su odabrane od: I dalje, najpoželjnije je da B je odabrano od etil,/hpropil, terc-butil, ciklopentil, 1-metilciklopentil, 2-fluoretil ili 3-fluorpropil.

Prema jednom rešenju ovog pronalaska X je 0.

Prema drugom rešenju ovog pronalaska X je NH.

R3 je poželjno (C2-6) alkil, (C3.7) cikloalkil ili (C1.3) alkil-(C3.7) cikloalkil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su odabrani od (C 1.4) alkil.

R<3>je poželjnije odabran od etil, propil, butil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, ciklopropilmetil, ciklobutilmetil, ciklopentilmetil, ili cikloheksilmetil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta koji su odabrani od metil, etil i propil.

Čak poželjnije je da R3 je odabran od 1-metiletil, 1,1-dimetiletil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, 1,1-dimetilpropil, 1,2-dimetilpropil, 2,2-dimetilpropil, ciklopentil, cikloheksil, 1-metilciklopentil, 1-metilcikloheksil, ciklopentilmetil, cikloheksilmetil, (1-metilciklopentil) metil i (1-metilcikloheksil) metil.

R3 je najpoželjnije odabran od 1,1-dimetiletil, ciklopentil, cikloheksil i 1-metilcikloheksil.

I dalje, R3 je najpoželjnije odabran od 1,1-dimetiletil i cikloheksil.

L° je poželjno odabran od H, halogen, CH3, -OH, -OCH3, -OC2H5, -OC3H7, -OCH(CH3)2, -NHCH3, -NHC2H5, -NHC3H7, -NHCH(CH3)2, -N(CH3)2, -N(CH3)C2H5, -N(CH3)C3H7 i

-N(CH3)CH(CH3)2.

Najpoželjnije L° je odabran od H, -OH, -OCH3>halogen i -N(CH3)2.

Čak najpoželjnije, L° je H, -OH ili -OCH3.

I dalje, najpoželjnije, L° je H ili -OCH3-

L<1>i L<2>su poželjno svaki nezavisno odabrani od: halogena, -CH3, -C2H5, -OCH3, -OC2H5, -OC3H7, -OCH(CH3)2, CF3, -SMe, -SOMe, i S02Me gde svaki L<1>ili L<2>može biti H.

Poželjnije je da bilo koji od L<1>i L2 je -CH3, -F, -Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili -S02Me i drugi od L<1>i L<2>jeH.

Najpoželjnije L<1>je CH3, -F, -Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili -S02Me i L2 je H.

Prema tome, poželjno je da L° je odabran od: H, -OH i -OCH3; i bilo koji od L<1>i L2 je CH3, -F,

-Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili -S02Me i drugi od L<1>i L2 je H.

Poželjnije je da L° je odabran od H, -OH i -OCH3; L<1>je - CH3, -F, -Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili

-S02Me;iL<2>jeH.

Najpoželjnije L° je H iU -OCH3; L<1>je-CH3, Cl ili Br; i L2 je H.

U slučaju kada L° i L<1>su kovalentno vezani tako da formiraju zajedno sa kinolin ostatkom za koji su oni vezani, prstenov sistem, taj prstenov sistem je poželjno odabran od:

gde

X<a>, X<b>su nezavisno odabrani od CH2,0 i NR<a>; najpoželjnije 0;

R<a>je svaki nezavisno H ili (Cm) alkil;

R<b>je svaki nezavisno (Cm) alkil;

L<2>je kao što je definisano; poželjno H ili metil, posebno H.

U slučaju kada L° i L<2>su kovalentno vezani tako da formiraju zajedno sa kinofin ostatkom za koji su oni vezani, prstenov sistem, taj prstenov sistem je poželjno odabran od:

gde

X<a>, X<b>su nezavisno odabrani od CH2,0 i NR<a>; najpoželjnije 0;

R<a>je svaki nezavisno H ili (Cm) alkil;

R<b>je svaki nezavisno (Cm) alkil;

L<1>je kao što je definisano; poželjno H ili metil, posebno H.

Poželjnije je da, L° i L<1>su kovalentno vezani tako da formiraju, zajedno sa kinolin ostatkom za koji su oni vezani, prstenov sistem koji je odabran od:

gde svaki R<b>je nezavisno (Cm)alkil i L<2>je kao što je definisano; poželjno H ili metil, posebno H. Najpoželjnije je da, L° i L<1>su kovalentno vezani tako da formiraju zajedno sa kinolin ostatkom za koji su oni vezani prstenov sistem koji je odabran od

gde L<2>je H ili -CH3, poželjno H.

R<2>je poželjnoR2<0>, -NHCOR2<0>, -NHCOOR<20>, -NHR<21>i -NHCONR21R23,

gde

R20je odabran od (Ci.s)alkil, (C3.7)cikloalkil, (Ci.3)aMl-(C37)cikloalkil,gde navedeni cikloalkil i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C 1.3) alkil; i R<21>je H iliR2<0>kako je gore definisano; i

R<23>je H ili metil; najpoželjnije H.

Poželjnije je da, R<2>jeR<20>, NHCOR2<0>, -NHCOOR<20>, -NHR21- i -NHCONR21R23, gde

R<20>je odabran od metil, etil,^propil, /•propil, Tj-butil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, terc-butil, 2,2-dimetilpropil, 1,1-dimeitlpropil, 1,2-dimetilpropil, 1,2,2-trimeitlpropil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, ciklopropil-metil, ciklobutilmetil, ciklopentilmetil, i cikloheksilmetil, svaka od navedenih cikloalkil i alkil-cikloalkil grupa je opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta koji su odabrani od metil i etil, posebno metil; i

R<21>je H iliR2<0>kako je gore definisano; i

R<23>je H ili metil; najpoželjnije H.

Poželjno je da R<2>je odabran od:

a) amino, N-metilamino, TV-etilamino, A^-propilamino, jV-(l-metiletil)amino,AKl,l-dimetiletil)amino,A/-(2-metilpropil)amino, ^-(l-metilpropil)amino,

^-(2,2-dimetilpropil)amino, N-(l,2-dimetilpropil) amino, 7V-(1,1-

dimetilpropil)amino, TV-ciklopropilamino, A^-ciklobuitlamino-,

A^iklopenitlamino-, N-cikloheksilamino-, A^ciklopropilmetil) amino, AKciklobutilmetil) amino, ^-(ciklopentilmetil)amino, i

^-(cikloheksilmetil) amino;

b) metilkarbonilamino, etilkarbonilamino, 1-metiletilkarbonilamino, propilkarbonil-

amino, 2-metilpropilkarbonilamino, 1-metilpropilkarbonilamino, 2,2- dimetilpropilkarbonil

amino, 1,2-dimetilpropilkarbonilamino, 1,1-dimetilpropil-

karbonil amino, ciklopropilkarbonilamino, ciklobutilkarbonilamino, ciklopentil-karbonilamino, cikloheksilkarbonilamino, ciklopropilmetilkarbonilamino, ciklobutilmetilkarbonilamino, ciklopentilmetilkarbonilamino,

cikloheksilmetilkarbonilamino; i

c) metoksikarbonilamino, etoksikarbonilamino, 1-metiletoksikarbonilamino, propoksikarbonilamino, terc-butoksikarbonilamino, ciklopropiloksikarbonil-

amino, ciklobutiloksikarbonilamino, ciklopentiloksikarbonilamino, cikloheksiloksikarbonilamino, ciklopropilmetoksikarbonilamino, ciklobutilmetoksikarbonilamino, ciklopentilmetoksikarbonilamino,

cikloheksilmetoksikarbonilamino;

gde sve navedene cikloalkil ili alkil-cikloalkil grupe mogu biti mono- ili disupstituisane sa metil.

Najpoželjnije R2 je -NHCOR<20>, -NHCOOR<20>, ili -NHR<21>, gdeR20 iR21su kao što je definisano ovde.

Poželjno, R<20>i R<21>su nezavisno odabrani od: metil, etil,/>propil, /propil, /7-butil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, terc-butil, 2,2-dimetilpropil, 1,1-dimetilpropil, 1,2-dimetilpropil, 1,2,2-trimetilpropil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, ciklopropilmetil, ciklobutilmetil, ciklopenitlmetil, cikloheksilmetil, svaka od navedenih cikloalkil ili alkil-cikloalkil grupa je opciono mono- ili di-supstituisana sa metil ili etil.

Poželjnije je da, R<20>i R<21>su nezavisno odabrani od: metil, etil,/>propil, /-propil, 2,2-dimetilpropil, ciklopentil i ciklopenitlmetil.

U delu Pl supstituent R<1>i karbonil zauzimajusinorjentaciju.

Prema tome, u slučaju gde R<1>je etil, asimetrični atom ugljenika u ciklopropil grupi zauzimaRRkonfiguracijuprema podformuli:

U slučaju gde R<1>je vinil, asimetrični atoma ugljenika u ciklopropil grupizauzima. R, Skonfiguraciju prema podformuli:

R<1>je poželjno vinil.

Rc je poželjno odabran od hidroksi ili NHSC>2RS

gde Rs je metil, etil,/i-propil, /propil, /j-butil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, terc-butil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, ciklopropilmetil, ciklobutilmetil, ciklopentilmetil, cikloheksilmetil, fenil, naftil, piridinil, fenilmetil (benzil), naftilmetil ili piridinibnetil;

a) gde je svaki opciono mono-, di- ili tri-supstituisan sa supstituentima koji su odabrani od fluor i metil; i b) gde je svaki opciono mono- ili disupstituisan sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi, trifluormetil, metoksi i trifluormetoksi; i c) gde je svaki opciono monosupstituisan sa supstituentima koji su odabrani od hlor, brom, cijano, nitro, -CO-NH2, -CO-NHCH3, -CO-N(CH3)2, -NH2, -NH(CH3) i -N(CH3)2.

Alternativno je poželjno da, Rc je NHS02R<s>, gde Rs je -N(RN2)RN1), gde RN<1>i R<N2>su nezavisno odabrani od H, (C1.4) alkil, (03.7)cikloalkil, (C^) alkil-(C3-7)cikloalkil, fenil, i (C^3)alkil-fenil; gde navedeni (C-1.4) alkil, (C^) cikloalkil, (Ci_3) alkil-(C3.7) cikloalkil, fenil i (Ci. 3) alkil-fen.il su opciono supstituisani sa jednim, dva ili tri supstituenta koji su nezavisno odabrani od halogen, (Ci^)alkil, hidroksi, cijano, 0-(Ci.6)alkil, -NH2, -NH(C 1.4)alkil, -N((Ci.4)alkil)2, -CO-NH2>-CO-NH(CM) alkil, -CO-N((Ci.4)alkil)2, -COOH, i

-COO (Ci.«;) alkil; ili

R<N2>i R<N1>su povezani, zajedno sa azotom za koji su vezani, tako da formiraju 5 ili 6-0člani monociklični heterocikl koji može biti zasićen ili nezasićen, koji opciono sadrži od jedan do tri dalja heteroatoma koji su nezavisno odabrani od N, S i 0, i opciono supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta koji su nezavisno odabrani od halogen, (C^g) alkil, hidroksi, cijano, 0-(Ci.fi) alkil, -NH2, -NH(Ci.4) alkil, -N((Ci.4) alkil) 2, -C0-NH2, -CO-NH(Ci.4) alkil,

-CO-N((Ci.4)alkil)2, -COOH, i -COO (Ci.6) alkil.

Poželjno je da grupa Rc je hidroksi, NHSOrmetil, NHSO^etil, NHSOHl-metiDetil, NHSO2-propil, NHS02-ciklopropil, NHSO^CHrciklopropil, NHS02-ciklobutil, NHSO^ciklopentil, ili NHS02-fenil.

Poželjnije je da, R<c>je hidroksi, ili NHSO^ciklopropil.

Prema najpoželjnijem rešenju, grupa R<c>je hidroksi. Prema alternativno najpoželjnijem rešenju, grupa R<c>je NHSO^ciklopropil. Prema drugom alternativno najpoželjnijem rešenju, grupa Rc je NHS02N(CH3)2.

Takodje obuhvaćena u okviru polja ovog pronalaska, su jedinjenja sa formulom (I) u kojoj:

B je (Ci.io)alkil, (C3.7)cikloalkil, ili (Ci.4)alkil-(C3.7)cikloalkil,

a) gde navedeni cikloalkil, i alkil-cikloalkil može biti mono-, di- ili tri-supstituisan sa (C1.3) alkil; i b) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil može biti mono- ili di-supstituisan sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi i 0-(Ci.4) alkil; i c) gde sve navedene alkil-grupe mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisane sa halogenomom; i d) gde sve navedene ciklo alkil-grupe koje su 4-, 5-, 6- ili 7-o člane imaju opciono jednu (za 4-, 5, 6, ili 7-o člane) ili dve (za 5-, 6- ili 7-o člane) -CH^ grupe koje nisu direktno

vezane jedna za drugu, zamenjenu sa -0- tako da je O-atom vezan za grupu X preko najmanje dva C-atoma;

X je 0 ili NH;

R<3>je (C2-8) alkil, (C3.7) cikloalkil ili (C1.3) alkil- (C3.7) cikloalkil, gde navedena cikloalkil

grupa može biti mono-, di- ili tri-supstituisana sa (C14) alkil;

L° je H, -OH, -0-(CM)alkil, -NH2, -NH(CM)aM iH -N((Ci.4)alkil)2;

L<1>, L<2>su svaki nezavisno halogen, (Ci4)alkil, -0-(Ci4) alkil ili -S-(C 1.4)alkil (u bilo kom oksidovanom stanju kao što je SO ili S02); i

bilo L<1>ili L<2>(ali ne oba u isto vreme) mogu takodje biti H; ili

L° i L1 ili

L° i L<2>mogu biti kovalentno vezani tako da formiraju, zajedno sa dva C-atoma za koji su oni vezani, 5- ili 6-0člani karbociklični prsten u kome jedna ili dve -CH2- grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu mogu biti zamenjene svaka nezavisno sa -0- ili NR<a>gde Ra je H ili (C 1.4) alkil, i gde navedeni karbo- ili heterociklični prstenje opciono mono- ili di-supstituisan sa (C 1.4) alkil;

R<2>je R<20>, -NR<22>COR<20>, -NR<22>COOR<20>-NR22R2<1>i -NR<22>CONR<21>R23, gde

R20 je odabran od (Ci^) alkil, (C3.7) cikloalkil i (C 1.4) alkil-(C3-7) cikloalkil, gde navedeni cikloalkil i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supsittuisani sa (C 1.3) alkil;

R<21>je H ili ima jedno od značenja za R<20>kako je gore definisano,

R22 iR2<3>su nezavisno odabrani od H i metil,

R<1>je etil ili vinil;

R<c>je hidroksi ili NHS02R<s>gde R<s>je (Ci.6)alkil, (C3.7) cikloalkil, (Ci.6) alkil-(03.7) cikloaM, fenil, naftil, piridinil, (C1.4)alkil-fenil, (Ci4)alkil-naftil ili (Ci4)alkil-piridinil; od kojih su svi opciono mono-, di- ili tri-supstituisani sa supstituentima koji su odabrani od halogen, hidroksi, cijano, (C14)alkil, 0-(Ci.g)alkil, -CO-NH2, -CO-NH(Ci.4)alkil, -CO-N((d.4)alkil)2, -NH2, -NH(Ci.4) alkil i -N((CW) alkil) 2; i od kojih su svi opciono monosupstituisani sa nitro;

ili R<s>može dalje biti odabran od: -NH(Ci.6)alkil, N((Ci-6)alkil)2, -Het,

ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili njegovi estri.

Poželjno je da,

B je (C2-8)alkil, (C3-7)cikloalkil ili (Ci^alkiKC^cikloalkil,

a) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C 1.3) alkil; i b) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono- ili di-supstituisani sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi i 0-(Ci.4)alkil; i c) gde svaka od navedenih alkil grupa može biti mono-, di- ili tri-supstituisana sa fluorom ili mono-supsittuisana sa hlorom ili bromom; i d) gde u svakoj od navedenih cikloalkil grupa koje su 5-, 6- ili 7-o člane, jedna ili dve -CH?- grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu mogu biti zamenjene sa -O- tako da je O-atom vezan za grupu X preko najmanje dva C-atoma; X je 0 ih NH; R<3>je (C2.6) alkil ili (C3.7) cikloalkil, od kojih su oba opciono supstituisani sa 1 do 3 supstituenta koji su odabrani od (C1.4) alkil; L° je H, -OH, -OCH3, halogen ili -N(CH3)2; L<1>i L<2>su svaki nezavisno odabrani od: halogen, -CH3, -C2Hs, -OCH3, -OC2Hs, -OC3H7, -OCH(CH3)2, CF3, -SMe, -SOMe, i S02Me, gde bilo koji L<1>ili L<2>može biti H;

R<2>jeR20, -NHCOR20, -NHCOOR<20>, -NHR<21>i -NHC0NR21R23,

gde

R<20>je odabran od (C^alkil, (C^) cikloalkil, (Ci_3)alkil-(C3.7)cikloalkil, gde svaka od navedenih cikloalkil i alkil-cikloalkil grupa može biti mono-, di- ili tri-supstituisana sa (C 1.3) alkil; i

R<21>je H iliR2<0>kako je gore definisano; i

R23 je H ili metil;

R<1>je etil ili vinil; i

R<c>je hidroksi, NHSO^metil, NHSO^etil, NHS02-(l-metil)etil, NHSO^propil, NHSO2-ciklopropil, NHSO^CH^đklopropil, NHSOrciklobutil, NHSOrciklopentil ili NHSO^fenil.

Poželjnije je da, Bje odabrano od: etil, n-propil, ferc-butil, 2-metilpropil, 1,2-dimetilpropil, 1,2,2-trimetilpropil, 2-fluoretil, 3-fluorpropil, 3,3,3-trifluorpropil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, 1-metilciklopentil i 1-metilcikloheksil, i grupa koja je odabrana od:

R3 je odabran od 1,1-dimetiletil, ciklopentil, cikloheksil i 1-metilcikloheksil; L° je H, -OH ili -OCH3; L<1>je CH3, -F, -Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili -S02Me; L<2>je H;

R<2>je -NHCOR<20>, -NHCOOR<20>ili -NHR<2>1, gde R<20>i R<21>su nezavisno odabrani od metil, etil,n-propil, /propil, 2,2-dimeitlpropil, ciklopentil i ciklopentilmetil;

R<1>je vinil; i R<c>je hidroksi ili NHS02-ciklopropil.

Najpoželjnije je da, B je odabrano od etil, tf-propil, terc-butil, ciklopentil, 1-meitlciklopentil, 2-fluoretil i 3-fluorpropil; R<3>je odabran od 1,1-dimetiletil i cikloheksil; L° je H ili -OCH3; L<1>je

-CH3, -Cl, ili -Br; L<2>je H; i R<c>je hidroksi.

Primeri za poželjna rešenja prema ovom pronalasku su sva pojedinačna jedinjenja koja su navedena u sledećim Tabelama 1,2,3,4,5 i 6.

Prema jednom alternativnom rešenju, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska može dodatno obuhvatati najmanje jedan dodatni anti-HCV agens. Primeri za anti-HCV agense uključuju, a- (alfa), p- (beta), 8- (delta), y- (gamma), co- (omega) ili t- (tau) interferone, pegilovane a-interferone, ribavirin i amantadin.

Prema drugom alternativnom rešenju, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska može

dodatno obuhvatati najmanje jedan dodatni inhibitor HCV NS3 proteaza.

Prema još jednom alternativnom rešenju, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska može dodatno obuhvatati najmanje jedan inhibitor HCV polimeraze.

Prema još jednom alternativnom rešenju, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska

može dodatno obuhvatati najmanje jedan inhibitor drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu, uključujući, ali ne ograničavajući se na, helikazu, NS2/3 proteaze ili unutrašnje ulazno mesto na ribozomu (IRES).

Farmaceutska kompozicija ovog pronalaska može biti primenjena oralno, parenteralno ili preko implantiranog rezervoara. Oralna primena ili primena uz pomoć injekcija je poželjna. Farmaceutska kompozicija ovog pronalaska može sadržati bilo koji konvencionalni netoksični farmaceutski prihvatljivi nosač, pomoćna sredstva ili prenosioce. U nekim slučajevima, pH formulacije može biti podešena sa farmaceutski prihvatljivim kiselinama, bazama ili puferima za poboljšanje stabilnosti formulisanog jedinjenja ili njegovog oblika za primenu. Termin parenteralno, kako je ovde korišćen, uključuje subkutane, intrakutane, intravenozne, intramuskularne, intra-artikularne, intrasinovijalne, intrasternalne, intratekalne i intralezione injekcije ili infuzione tehnike.

Farmaceutska kompozicija može biti u obliku sterilnog injekcionog preparata, na primer, kao sterilna injekciona vodena ili uljana suspenzija. Ova suspenzija može biti formulisana prema tehnikama koje su poznate u oblasti korišćenjem pogodnog disperzionog ili vlažećeg agensa (kao što su, na primer Tween 80) i suspendujućih agenasa.

Farmaceutska kompozicija ovog pronalaska može biti oralno primenjena u bilo kom oralno prihvatljivom doznom obliku, uključujući ali ne ograničavajući se na, kapsule, tablete i vodene suspenzije i rastvore. U slučaju tableta za oralnu upotrebu, nosači koji se obično koriste uključuju laktozu i kukuruzni škrob. Lubrikatni agensi, kao što je magnezijum stearat, se takodje obično dodaju. Za oralnu primenu u obliku kapsula, korisni diluenti uključuju laktozu i osušeni kukuruzni škrob. Kada se vodene suspenzije primenjuju oralno, aktivni sastojci se kombinuju sa emulgujućim i suspendujućim agensima. Ako je potrebno, neki zasladjivači i/ili agensi za ukus i/ili bojeni agensi mogu se dodati.

Drugi pogodni prenosioci ili nosači za gore pomenute formulacije i kompozicije se mogu naći u standardnim farmaceutskim tekstovima, na pr. u "Remington's Pharmaceutical Sciences", The Science and Practice of Pharmacv, 19* Ed. Mack Publishing Companv, Easton, Penn.,

(1995).

Dozni nivoi od izmedju oko 0,01 i oko 100 mg/kg telesne težine dnevno, poželjno izmedju oko 0,1 i oko 50 mg/kg telesne težine dnevno proteaza inhibitora, jedinjenja koje je ovde opisano su korisni u monoterapiji za prevenciju i tretman oboljenja izazvanih sa HCV. Obično, farmaceutska kompozicija ovog pronalaska se primenjuje od oko 1 do oko 5 puta dnevno ili alternativno, kao kontinualna infuzija. Takva primena se može koristiti kao hronična ili akutna terapija. Količina aktivnog sastojka koji se može kombinovati sa materijalom nosača da se proizvede jedinični dozni oblik, će varirati u zavisnosti od tretiranog domaćina i posebno od načina primene. Tipični preparat će sadržati od oko 5 % do oko 95 % aktivnog jedinjenja{ t/ t).Poželjno je da takvi preparati sadrže od oko 20 % do oko 80 % aktivnog jedinjenja.

Kao što bi onaj sa iskustvom u oblasti shvatio, niže ili više doze od onih koje su navedene gore, mogu biti potrebne. Specifične doze i raspored tretmana za bilo kog pojedinačnog pacijenta će zavisiti od različitih faktora, uključujući aktivnost specifičnog jedinjenja koje je upotrebljeno, starosne dobi, telesne težine, opšteg zdravstvenog statusa, pola, ishrane, vremena primene, stepena izlučivanja, kombinacije lekova, jačine i toka infekcije, pacijentovih predispozicija za infekcije i ocene lekara koji ga leći. Generalno, tretman se započinje sa malim dozama znatno manjim od optimalnih doza peptida. Nakon toga, doza se povećava sa malim stepenom povećanja dok se pod datim okolnostima ne dostigne optimalni efekat. Generalno, jedinjenje je najpoželjnije primenjivati u nivou koncentracije koji će uopšteno pružiti efikasne antiviralne rezultate bez uzrokovanja bilo kakvih štetnih ili škodljivih sporednih efekata.

Kada kompozicija ovog pronalaska obuhvata kombinaciju jedinjenja sa formulom I i jednog ili više dodatnih terapeutskih ili profilaktičnih agenasa, oba će, jedinjenje i dodatni agens, biti prisutni u doznom nivou od izmedju oko 10 do 100 %, i poželjnije je da su izmedju oko 10 i 80 % od doze koja se obično primenjuje u rasporedu monoterapije.

Kada su ova jedinjenja, uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli i estre, formulisana zajedno sa farmaceutski prihvatijivim nosačem, dobijena kompozicija se može primenitiin vivokod sisara, kao što je čovek, u inhibiciji HCV NS3 proteaza ili za tretman ili prevenciju HCV virusne infekcije. Takav tretman se može takodje postići korišćenjem jedinjenja ovog pronalaska u kombinaciji sa drugim antiviralnim agensima. Poželjni drugi antiviralni agensi su opisani u okviru odeljka Definicije i odeljka sa poželjnim farmaceutskim kompozicijama prema ovom pronalasku i uključuju, ali nisu ograničeni na: a-, p\ 5-, co-, y- iliT-interferone, ribavirin, amantadin; druge inhibitore HCV NS3 proteaza; inhibitore HCV polimeraze; inhibitore drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu, koji uključuju ali nisu ograničeni na, helikaze, NS2/3 proteaze, ili unutrašnje ulazno mesto na ribozomu (IRES); ili njihove kombinacije. Dodatni agensi mogu biti kombinovani sa jedinjenjima ovog pronalaska tako da se dobija jedinični dozni oblik. Alternativno, ovi dodatni agensi mogu biti primenjeni odvojeno kod sisara kao deo multiplog doznog oblika.

Prema tome, drugo rešenje ovog pronalaska obezbedjuje metod za inhibiranje HCV NS3 proteazne aktivnosti kod sisara uz pomoć primene jedinjenja sa formulom I, uključujući njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili njegov estar.

U poželjnom rešenju, ovaj metod je koristan u smanjenju NS3 proteazne aktivnosti kod, sa hepatitis C virusom, inficiranih sisara.

Kao što je rečeno ranije, kombinovana terapija je zamišljena na takav način da u njoj jedinjenje sa formulom (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov estar, se uporedo primenjuju sa najmanje jednim dodatnim antiviralnim agensom. Poželjni antiviralni agensi su opisani ranije ovde i primeri takvih agenasa su dati u odeljku Definicije. Ovi dodatni agensi se mogu kombinovati sa jedinjenjima ovog pronalaska kako bi se dobio jedinični farmaceutski dozni oblik. Alternativno, ovi dodatni agensi se mogu odvojeno primenjivati kod pacijenta kao deo multiplog doznog oblika, na primer, korišćenjem kit opreme. Takvi dodatni agensi se mogu primeniti kod pacijenta pre, uporedo sa ili nakon primene jedinjenja sa formulom (I), iti njegovih farmaceutski prihvatljivih soli ili njegovih estara.

Jedinjenje sa formulom (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov estar, koji su ovde izloženi mogu takodje biti korišćeni kao laboratorijski reagensi. Pored toga, jedinjenje ovog pronalaska, uključujući njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili njegov estar, može takodje da se koristi za tretman ili prevenciju viralne kontaminacije materijala i na taj način smanjenje rizika od viralne infekcije laboratorijskog ili medicinskog personala ili pacijenata koji dolaze u kontakt sa takvim materijalima (na pr. krv, tkivo, hirurški instrumenti i odevni predmeti, laboratorijski instrumenti i odevni predmeti, i oprema za sakupljanje krvi i materijala).

Jedinjenje sa formulom (I), uključujući njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili njegov estar, koji su ovde izloženi mogu takodje biti korišćeni kao reagensi za istraživanje. Jedinjenje sa formulom (I), uključujući njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili njegov estare, mogu takodje biti korišćeni kao pozitivna kontrola za validaciju surogata u analizama ćelijskih kultura iliin vitroti' i in vivo analizama viralnereplikacije.

METODOLOGIJA

Nekoliko načina za izvodjenje sinteza jedinjenja sa formulom I sa različitim hinolin derivatima je opisano u WO 00/09558. Dipeptidni intermedijer 15 (Shema 2) i 2-karbometoksi-4-hidroksi-7-metoksikinolin 9 (Shema 1) su sintetizovani prema opštoj metodi koja je opisana u WO 00/09543.

Jedinjenja sa formulom I u kojoj R<c>je NHSG"2RS kao što je ovde definisano su dobijena kuplovanjem odgovarajućih kiselina sa formulom I (odnosno, Rc je hidroksi) sa pogodnim sulfonamidom sa formulom R<S>S02NH2u prisustvu agensa za kuplovanje pod standardnim uslovima. Mada se nekoliko obično korišćenih agenasa za kuplovanje može primeniti, nadjeno je da su TBTU i HATU praktični. Sulfonamidi su dostupni komercijalno ili se mogu dobiti uz pomoć poznatih metoda.

Sledeće sheme ilustruju dva pogodna postupka korišćenjem poznatih metoda za dobijanje jedinjenja sa formulom 1 kada R<1>je vinil i R<c>je OH.

Ukratko, sinteza dipeptida 3 je izvedena kuplovanjem Pl ostatka za odgovarajuće zaštićeni ćrans-hidroksi prolin pod standardnim uslovima. Stereohemija hidroksilne grupe je obrnuta uz pomoć dobro poznate Micunobijeve (Mitsunobu) reakcije korišćenjem pare-nitrobenzoeve kiseline. Kuplovanjem dipeptida sa P3 delom (dobijenim korišćenjem standardne metodologije koji je dat kao primer u odeljku sa primerima) dobija se tripeptid 6. Uvodjenje hinolin dela u hidroksilnu grupu tripeptida 7 sa inverzijom stereohemije može se izvesti korišćenjem bilo Micunobijeve reakcije ili uz pomoć konverzije slobodne hidroksilne grupe u dobru odlazeću grupu (kao što su brosilati) i njenim izmeštanjem sa hidroksil hinolin derivatom 9. Za sintezu 2-(2-amino-4-tiazolil) derivata, hinolin koji se koristi sadrži 2-karbometoksi grupu kao što je prikazano u 9. Konverzija karboksilatne grupe do aminotiazol derivata je izvedena uz pomoć dobro poznate metodologije sinteza i opisana je i data kao primer u WO 00/09543 i WO 00/09598. Na kraju, C-završni estar je hidrolizovan pod baznim vodenim uslovima.

Shema 2 opisuje još jedan reakcioni niz za dobijanje jedinjenja sa formulom I. U ovom slučaju hinolin deo je uveden u dipeptid na sličan način kao što je opisano u Shemi 1. Na kraju, P3 deo je kuplovan pod standardnim uslovima za dipeptid 21. Konverzija dobijenog tripeptida do krajnjeg jedinjenja je izvedena kao što je opisano u Shemi 1.

SINTEZA Pl FRAGMENATA

Pl delovi jedinjenja sa formulom (I) su dobijeni korišćenjem postupaka navedenih u WO 00/59929, koji je publikovan Oktobra 12,2000, i WO 00/09543, koji je publikovan Februara 24,2000. Posebno, referenca je data za strane 33 - 35, Primera 1 iz WO 00/59929 i za strane 56 - 69, Primera 9 - 20 iz WO 00/09543 za dobijanje 1-aminociklopropankarboksilne kiseline Pl delova.

SINTEZA P2 SUPSTITUENATA

Jedinjenja sa formulom 9 se mogu sintetisati iz komercijalno dostupnih materijala korišćenjem tehnika koje su opisane u Internacionalnaoj Patentnoj Prijavi WO 00/59929, WO 00/09543, WO 00/09558 i U.S. Patentu 6,323,180 BI.

Primeri za sintezu različitih 2-karbometoksi-4-hidroksikinolin derivata su izvedeni kao

što sledi:

Sinteza 2-karbometoksi-4-hidroksi-hinolin derivata je izvedena iz odgovarajućih anilina prema postupku datom u: Unangst, P.C.; Connor,Đ. T. J. Heterocyc. Chem.29, 5,1992,1097-1100. Postupak je prikazan u shemi 3 dole:

Ukratko, odgovarajuće supstituisani anilini na 2,3 i/ili 4 poziciji su ostavljeni da reaguju sa dimetil acetilen dikarboksilatom i dobijeni enamin je zagrevan na visokim temperaturama do postizanja efekta ciklizacije.

Odgovarajući anilini su komercijalno dostupni ih' mogu zahtevati neke dobro poznte hemijske transformacije. Na primer može se desiti daje nitro komercijalno dostupan i daje zatim konvertovan do odgovarajućeg amina korišćenjem redukujućeg agensa. Takodje, kada je karboksilna kiselina komercijalno dostupna, ona se može transformisati u odgovarajući amin preko Kurtijusovog (Curtius) pregrupisavanja.

Ostali detalji pronalaska su ilustrovani u sledećim primerima za koje se podrazumeva da nisu ograničavajući u odnosu na pripojene zahteve. Drugi specifični načini za sintezu ili razlaganje jedinjenja ovog pronalaska se mogu naći u WO 00/09543; WO 00/09558 & WO 00/59929 i u uporednoj nerešenoj prijavi 09/368,670, koji su svi ovde inkorporisani referencom.

PRIMERI

Temperature su date u Celzijusovim stepenima. Procenti rastvora su izraženi u težinskom prema zapreminskom odnosu i proporcije rastvora su izražene u zapreminskom prema zapreminskom odnosu, ukoliko nije drugačije naznačeno. Spektri nuklearno magnetne rezonancije (NMR) su zabeleženi na Bruker 400 MHz spektrometru; hemijska pomeranja (8) su data u delovima na milion. Brza hromatografija je izvedena na silika gelu (SiC^) prema tehnici Stilove brze hromatografije (StiU's flash) (W.C. Still i sar., J. Org. Chem., (1978), 43, 2923).

Skraćenice korišćene u primerima uključuju:

BOK ili Bok: terc-butiloksikarbonil; DBU: l,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en; DCM: dihlorometan; DIAD: diizopropilazodikarboksilat; DIEA: diizopropiletilamin; DIPEA: diizopropiletil amin;DMF: N,A^-dimetilformamid; DMAP: 4-(dimetilamino)piridin; DMSO: dimetilsulfoksid; EtOAc: etil acetat; HATU: [0-7-azabenzotriazol-l-il)-l,l,3,3-tetrametiluronijum heksafluorfosfat]; HPLC: tečna hromatografija visokih performansi; MS: masena spektrometrija (MALDI-TOF: Vreme prolaska laserske jonizacije desorpcijom potpomognute matriksom (Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight), FAB: Brzo bombardovanje atoma (Fast Atom Bombardment)); Me: metil; MeOH: metanol; Fen: fenil; S.T.: sobna temperatura (18 do 22°); terc-butil ili t-butil: 1,1-dimetiletil; Tbg: terc-butil glicin: terc-leucin; TBTU: 2-(lH-benzotriazol-l-il)-l,l,3,3-tetrametil uronijum tetrafluorborat; TEA: trietilamin; TFA: trifluorsirćetna kiselina; i THF: tetrahidrofuran.

Primeri

Sinteza P3 derivata:

Sinteza karbamata 4a

THF (350 mL) je dodat u bocu koja sadrži ciklopentil estar karbonske kiseline 2,5-diokso-pirolidin-l-il estar (9,00 g; 39,6 mmol) i terc-butil glicin (6,24 g; 47,5 mmol) pri čemu se dobija suspenzija. Destilovana voda (100 mL) je dodata uz jako mešanje. Mala količina čvrste supstance ostaje nerastvorena. Trietilamin (16,6 mL; 119 mmol) je zatim dodat pri čemu se dobija homogeni rastvor koji je mešan na S.T. Nakon 2,5 h, THF je uparen i vodeni ostatak je razblažen sa vodom (100 mL). Reakcija je zaalkalisana dodavanjem 1 N NaOH (25 mL - krajnji pH > 10). Rastvor je ispran sa EtOAc (2 x 200 mL) i vodena faza je zakišeljena sa 1 N HC1 (ca. 70 mL - krajnji pH < 2). Mutan rastvor je ekstrahovan sa EtOAc (200 +150 mL). Ekstrakt je osušen (MgSO^ i uparen do dobijanja karbamata 4a u obliku bele čvrste supstance (8,68 g).

Pobijanje Uree 5a

Rastvor sa terc-butil glicin benzil estar hidrohloridnom soli (2,55 g; 9,89 mmol) u THF (20 mL) i piridinom (2,0 mL; 24,73 mmol) je ohladjen do 0 °C. Fenil hloroformat (1,30 mL; 10,19 mmol) je dodat u kapima u ohladjen rastvor. Dobijena suspenzija je mešana u toku 5 min na 0 °C, a zatim na S.T. u toku 1,5 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, isprana je sa 10 % rastvorom limunske kiseline (2x), vodom (2x), zasićenim rastvorom NaHC03(2x), vodom (2x) i slanim rastvorom (lx), osušena (MgS04), filtrirana i uparena kako bi se dobilo sirovo jedinjenje u obliku skoro bezbojnog ulja (3,73 g; > 100 %; pretpostavljeno 9,89 mmol). Sirovi proizvod (1,01 g; 2,97 mmol) je razblažen u DMSO (6,5 mL) i ciklopentilamin je dodat u kapima. Reakciona smeša je mešana na S.T. u toku 45 min i zatim razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa 10 % rastvorom limunske kiseline (2x), vodom (2x), zasićenim rastvorom NaHC03(2x), vodom (2x) i slanim rastvorom (lx), osušena (MgS04), filtrirana i uparena kako bi se dobio sirovi ciklopentil urea -Tbg-OBn proizvod u obliku skoro bezbojnog ulja. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni sa silika gelom korišćenjem smeše heksan : EtOAc 9 :1 za uklanjanje manje polarnih nečistoća i 7 :3 za eluiranje prečišćenog proizvoda u obliku gustog bezbojnog ulja (936 mg; 95 %). Benzil estarski proizvod (936 mg; 2,82 mmol) je deprotektovan ispod balona napunjenog sa vodonikom na S.T. u rastvoru apsolutnog etanola (15 mL) uz pomoć mešanja rastvora sa 10 % Pd/C (93,6 mg) u toku 5,5 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz filter sa porama od 0,45 mikrona i uparena do suva kako bi se dobila urea 5a u obliku bele čvrste supstance (669 mg; 98%)

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 12,39 (s, IH), 6,09 (d, J = 7,4 Hz, IH), 5,93 (d, J = 9,4 Hz, IH), 3,90 (d, J = 9,4 Hz, IH), 3,87-3,77 (m, IH), 1,84-1,72 (m, 2H), 1,63-1,42 (m, 4H), 1,30-1,19

(m, 2H),0,89(s, 9H), M.S. (elektrosprejna): 241,0 (M-H)'243,0 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):99%.

Primer 2

Sinteza Tiouree 8

Sinteza tiouree 8a:

U rastvor sa terc-butil izotiocijanatom (5,0 mL; 39,4 mmoL) u DCM (200 mL) je dodat ciklopentilamin (4,67 mL; 47,3 mmoL) a zatim DIPEA i reakciona smeša je mešana na S.T. u toku 2 h. Smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana je sa 10 % vodenim rastvorom limunske kiseline (2x), zasićenim rastvorom NaHC03(2x), H20 (2x) i slanim rastvorom (lx). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog MgS04, filtriran i uparen do dobijanjaN- terc-butil-A^ciklopentiltiouree u obliku bele čvrste supstance (3,70 g; 47 % prinosa).A<f->ferc-butil-A^ciklopenitltiourea (3,70 g) je razblažena u koncentrovanoj HC1 (46 mL). Tamno žuti rastvor je zagrevan na umerenom refluksu. Nakon 40 min reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do S.T. i zatim je ohladjena u ledu i zaalkalisana do pH 9,5 sa čvrstim i sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03. Proizvod je ekstrahovan u EtOAc (3x). Kombinovani EtOAc ekstrakti su isprani sa H20 (2x) i slanim rastvorom (lx). Organski sloj je osušen (MgS04), filtriran i koncentrovan do dobijanja čvrste supstance bež boje (2,46 g sirovog proizvoda). Usitnjavanjem sirovog materijala pod slojem smeše heksan / EtOAc 95/5 dobija se, nakon filtracije, A^-ciklopentiltiourea 8a u obliku bele čvrste supstance (2,38 g; 90 % prinosa).

<J>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 7,58 (bs, IH), 7,19 (bs, IH), 6,76 (bs, IH), 4,34 (bs, IH), 1,92-1,79 (m,2H), 1,66-1,55 (m, 2H), 1,55-1,30 (m,4H). MS; es<+>144,9 (M + H)<+>, es": 142,8 (M

-H)-.

Pobijanje Tiouree 8b

Tiourea (5,0 g, 66 mmol) je razblažena u toluenu (50 mL) i terc-butilacetil hlorid (8,88 g, 66 mmol) je dodat. Smeša je zagrevana na refluksu u toku 14 h kako bi se dobio žuti rastvor. Smeša je koncentrovana do suva, i ostatak je raspodeljen izmedju EtOAc i zasić. NaHCOs, Žuta organska faza je osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana kako bi se dobila žuta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je razblažena u minimalnoj količini EtOAc i usitnjena ispod sloja heksana kako bi se dobila 8b u obliku bele čvrste supstance (8,52 g; 75 %). M.S.

(elektrosprejna): 173 (M-H)" 175 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN:H20):99 %.

Pobijanje Tiouree 8c

i

Korišćenjem postupka koji je opisan gore aU korišćenjem komercijalno dostupnog ciklopentil acetil hlorida umesto terc-butilacetil hlorida dobija se tiourea 8c.

Sinteza 2-karbometoksi-4-hidroksiktnolinderivata

Primer 3A

Sinteza 2-karbometoksi4-hidroksi-7-metoksi-8-metilhinolina (A5)

Korak A

U rastvor sa 2-metil-3-nitro anizolom Al (5,1 g; 30,33 mmol; potrebno~30 min za rastvaranje) u apsolutnom etanolu (85 mL) je dodato 10 % Pd/C katalizatora (500 mg). Rastvor je hidrogenovan ispod balona ispunjenog vodonikom pri atmosferskom pritisku i sobnoj temperaturi u toku 19 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celitnu podlogu, isprana i uparena do suva kako bi se dobio 2-metil-3-metoksianilin A2 u obliku ulja boje tamnog sleza (4,1 g;

29,81 mmol; 98% prinosa).

MS 137 (MH)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost @ 220 nm (0,06 %TFA; CH3CN : H20): 99 %.

Korak B

Dimetil acetilen dikarboksilat A3 (3,6 mL, 29,28 mmol) je dodat u kapima u rastvor sa 2-metil-3-metoksianilinom A2 (3,95 g, 28,79 mmol) u MeOH (100 mL) (reakcija je egzotermna). Smeša je zagrevana na umerenom refluksu u toku 5 sati ohladjena i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni sa silika gelom, sa smešom heksan: EtOAc (95:5) kako bi se dobio, nakon uparavanja čistih frakcija, proizvod A4 (6,5 g; 23,27 mmol; 81 % prinosa).

Reverzno Fazna HPLC Homogenost @ 220 nm (0,06 %TFA; CH3CN : H20): 95 %.

KorakC

Diestar A4 (6,5 g, 23,27 mmol) je razblažen u difenil etru (12 mL) i reakciona smeša je stavljena u prethodno zagrejano peščano kupatilo sa temperaturom kupatila od 350 - 400 °C. Kada reakciona smeša postigne unutrašnju temperaturu od 240 °C (posmatranjem MeOH evolucije na 230-240 °C) odbrojavanje šest minuta započinje pre nego se kupatilo (temperaturna krajnja tačka: 262 °C) ukloni i reakcija se ostavi da se ohladi do sobne temperature. Čvrsta supstanca formirana nakon hladjenja, koja je razblažena sa etrom, filtrirana je i osušena kako bi se dobila žuto mrka braon čvrsta supstanca (3,48 g sirovog proizvoda). Sirovi materijal je hromatografisan na koloni sa silika gelom, sa smešom heksan: EtOAc; 5 : 5 za uklanjanje nečistoća, zatim sa 2 : 8 i zatim 100 % EtOAc do potpunog eluiranja proizvoda kako bi se dobio A5, nakon uparavanja, u obliku bledo žute čvrste supstance (2,1 g, 37% prinosa).

MS (M + H)<+>; 246, i (M - H)-; 248,1. Reverzno Fazna HPLC Homogenost @ 220 nm (0,06 % TFA; CH3CN :H20):99 %.

Primer 3B

Sinteza 2-karbometoksi-8-bromo4-Wdroksi-7-metoksihmolina (B6)

Korak A

2-Amino-3-nitrofenol BI (5 g; 32,4 mmol) je razblažen u H2O (29,5 mL) i 1,4-dioksanu (14,7

mL). Smeša je zagrevana do refluksa i bromovodonična kiselina (48 96; 16,7 mL; 147 mmol) je dodata u kapima u periodu od 20 min. Do završetka dodavanja, refluks je održavan dodatnih 15 min. Reakcija je ohladjena do 0 °C (ledeno kupatilo), i natrijum nitrit (2,23 g; 32,3 mmol) u H2O (20 mL) je dodavan u periodu od 30 min. Mešanje je nastavljeno u toku 15 min na 0 °C, zatim je smeša prebačena u obmotani levak za ukapavanje (0 °C) i dodata u kapima u izmešanu smešu sa Cu(I)Br (5,34 g; 37,2 mmol) u H20 (29,5 mL) i HBr (48 96; 16,7 mL; 147 mmol) na 0 °C. Reakcija je mešana u toku 15 min na 0 °C, zagrevana do 60 °C, mešana u toku dodatnih 15 min, ohladjena do sobne temperature, i ostavljena da se meša preko noći. Reakciona smeša je prebačena u levak za razdvajanje i ekstrahovana sa etrom (3x 150 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani su slanim rastvorom (lx), osušeni (Na2S04), filtrirani i koncentrovani do dobijanja sirovog proizvoda (7,99 g) u obliku crveno-braon ulja. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni (1: 25 ultra čist silika gel, 230-400 meša, 40-60 mm, 60 angstrema; CH2C12kao rastvarač) do dobijanja čistog 2-bromo-3-nitrofenola B2 (45 96; 3,16 g) u obliku narandžasto-braon čvrste supstance.

MS 217,8 (MH)". Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 97 96.

Korak B

Nitrofenolni polazni materijal B2 (3,1 g; 14,2 mmol) je razblažen u DMF (20 mL) i u rastvor je dodat samleveni cezijum karbonat (5,58 g; 17,1 mmol) a zatim Mel (2,6 mL; 42,5 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. DMF je uparen, ostatak je stavljen u etar (lx 200 mL), ispran je sa vodom (lx 200 mL), slanim rastvorom (4x 100 mL), osušen (MgSCi), filtriran i uparen do dobijanja sirovog 2-bromo-3-nitroanizola B3 (94 %; 3,1 g) u obliku narandžaste čvrste supstance.

MS 234 (M+2H)<+>; Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 98 %.

Korak C

2-Bromo-3-nitroanizol B3 (1,00 g; 4,31 mmol) je razblažen u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (11,0 mL) i etanolu (11,0 mL). U taj rastvor je dodato gvoždje u prahu (0,98 g; 17,5 mmol). Smeša je mešana na refluksu u toku 3,5 h i doterana. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (35 mL), neutralisana sa čvrstim Na2C03i proizvod je ekstrahovan sa CH2CI2(3x 50 mL). Ekstrakti su osušeni (Na2S04), filtrirani i koncentrovani u vakuumu do dobijanja sirovog proizvoda, 2-bromo-3 metoksianilina B4 (91 %; 0,79 g) u obliku bledo žutog ulja.

MS 201,8 (MH)<+>; Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 95 %.

Korak D

U rastvor sa 2-bromo-3-metoksianilinom B4 (0,79 g; 3,9 mmol) u MeOH (7,6 mL) je dodat dimetil acetilen dikarboksilat A3 (0,53 mL; 4,3 mmol) u kapima na 0 °C (oprez: reakcija je egzotermna!). Rastvor je zagrevan preko noći na refluksu i doteran. MeOH je uparen i sirovi proizvod je osušen pod visokim vakuumom do dobijanja crvene gume, prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni (1: 30 ultra čist silika gel, 230-400 meša, 40-60 mm, 60 angstrema; 4 :1 heksan/EtOAc) do dobijanja navedenog B5 (86 %; 1,16 g) u obliku bledo žute čvrste supstance.

MS 344,0 (MH)<+>; Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm: 72 %.

Korak E

U prethodno zagrejano peščano kupatilo na oko 440 °C(spoljašnja temperatura) je stavljen diestar navedenog B5 (1,1 g; 3,16 mmol) u difenil etru (3,6 mL). Reakcija je mešana na izmedju 230 °C - 245 °C (unutrašnja temperatura; MeOH započinje isparavanje na oko 215 °C) u toku 7 min i zatim je ohladjena do sobne temperature. Kada se rastvor ohladi proizvod kristališe iz reakcione smeše. Dobijena braon čvrsta supstanca je filtrirana, isprana je sa etrom i osušena pod visokim vakuumom do dobijanja sirovog bromokinolin B6 proizvoda (74 96; 0,74 g) u obliku braon čvrste supstance. NMR analiza otkriva daje ovaj proizvod smeša sa oko 1:1 tautomera.

NMR (DMSO; 400 MHz) ok(l: 1 smeša of tautomera); MS 311,9 (MH)<+>; Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 96 96.

PRIMER 3C

Sinteza 2-karbometoksi-8-hloro4-hidroksi7-metoksihinolina (C6)

Korak A

2-Amino-3-nitrofenol BI (5 g; 32,4 mmol) je razblažen u koncentrovanoj HC1 (75 mL) i 1,4-dioksanu (14,7 mL). Smeša je zagrevana do 70 °C dok veći deo čvrste supstance ne predje u rastvor. Reakciona smeša je ohladjena do 0 °C Oedeno kupatilo), i natrijum nitrit (2,23 g; 32,3 mmol) u H20 (5,4 mL) je dodat u periodu od 3 sata u braon rastvor. Temperatura je održavana ispod 10 °C tokom dodavanja i mešanje je nastavljeno u toku dodatnih 15 min na 0 °C. Ovaj diazonijum intermedijer je stavljen u rastvor sa Cu(I)Cl (3,8 g; 38,9 mmol) u H20 (18,5 mL) i konc. HC1 (18,5 mL) na 0 °C. Reakcija je mešana u toku 15 min na 0 °C, zagrevana je do 60 °C, i mešana u toku dodatnih 15 min. Reakciona smeša je zatim dovedena do sobne temperature, i ostavljena da se meša preko noći. Reakciona smeša je prebačena u levak za razdvajanje i ekstrahovana je sa etrom (3x 150 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani su slanim rastvorom (lx), osušeni (Na2S04), filtrirani i koncentrovani do dobijanja sirovog proizvoda (5,83 g) u obliku crveno-braon ulja. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni (1: 25 ultra čist silika gel, 230-400 meša, 40-60 mm, 60 angstrema; 3 : 1 heksan/EtOAc kao rastvarač) do dobijanja čistog 2-hloro-3-nitrofenola C2 (48 96; 2,7 g) u obliku narandžaste čvrste supstance.

MS 171,8 (MH)": Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 96 96.

Relevantna literatura za Sandmajerovu (Sandmever) Reakciju: /Med. Chem, 1982,25(4), 446-451.

Korak B

Nitrofenolni polazni materijal C2 (1,3 g; 7,49 mmol) je razblažen u DMF (10 mL) i u taj rastvor je dodat samleveni cezijum karbonat (2,92 g; 8,96 mmol), a zatim Mel (1,4 mL; 22,5 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. DMF je uparen u vakuumu i ostatak je stavljen u etar (150 mL), ispran je sa vodom (150 mL), slanim rastvorom (4x 100 mL), i zatim osušen preko (MgSO^. Organska faza je filtrirana i uparena do dobijanja sirovog 2-hloro-3-nitroanizola C3 (98 96; 1,38 g) u obliku narandžaste čvrste supstance.

Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 93 96.

Korak C

2-Hloro-3-nitroanizol C3 (1,38 g; 7,36 mmol) je razblažen u smeši glacijalne sirćetne kiseline (19 mL)/etanol (19 mL). U taj rastvor je dodato gvoždje u prahu (1,64 g; 29,4 mmol). Smeša je mešana na refluksu u toku 3,5 h i doterana. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (70 mL), neutralisana sa čvrstim Na2C03i proizvod je ekstrahovan sa CH2CI2(3x 150 mL). Ekstrakti su kombinovani i isprani sa zasićenim slanim rastvorom i zatim osušeni preko (Na2S04), filtrirani i koncentrovani u vakuumu do dobijanja sirovog proizvoda, 2-hloro-3-metoksianilina C4 (100 96; 1,2 g) u obliku žutog ulja. Ovaj materijal je korišćen kao takav u narednim koracima.

MS 157,9 (MH)<+>; Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 86 96.

Korak D

U rastvor sa 2-hloro-3-metoksianilinom C4 (1,2 g; 7,61 mmol) u MeOH (15 mL) je dodat dimetil acetilen dikarboksilat A3 (1,0 mL; 8,4 mmol) u kapima na 0 °C (oprez: reakcija je egzotermna!). Rastvor je zagrevan preko noći na refluksu i doguran. MeOH je uparen i sirovi proizvod je osušen pod visokim vakuumom do dobijanja crvene gume koja je prečišćena uz pomoć brze hromatografije na koloni (1: 30 ultra čist silika gel, 230-400 meša, 40-60 mm, 60 angstrema; 4 :1 heksan/EtOAc) do dobijanja navedenog C5 (74 96; 1.68 g) u obliku žute čvrste supstance.

MS 300 (MH)<+>; Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 90 96.

Korak E

U prethodno zagrejano peščano kupatilo na oko 440 °C (spoljašnja temperatura) je stavljen diestar navedenog C5 (1,68 g; 5,6 mmol) u difenil etru (6,3 mL). Reakcija je mešana na izmedju 230 °C - 245 °C (unutrašnja temperatura; MeOH započinje isparavanje na oko 215 °C) u toku 7 min i zatim je ohladjena do sobne temperature. Kada je rastvor ohladjen proizvod kristališe iz reakcione smeše. Dobijena braonkasta čvrsta supstanca je filtrirana, isprana je sa etrom i osušena pod visokim vakuumom do dobijanja kinolina C6 (83 %; 1,25 g) u obliku čvrste supstance bež boje. NMR analiza je otkrila daje ovaj proizvod smeša sa oko 1:1 tautomera (keto/fenol oblici).

MS 267,9 (MH)<+>; Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 92 %.

PRIMER 3D

Sinteza 2-karbometoksi-8-fluor-4-hidroksi-7-metoksihinolinaCDS)

Korak A

Rastvor sa 2-fluor-3-metoksi benzoevom kiselinom Dl (1,68 g, 9,87 mmol) i DIPEA (2,07 mL, 11,85 mmol, 1,2 ekviv.) u smeši sa toluenom (8 mL) i t-BuOH (8 mL) je mešana preko aktiviranog 4A molekulskog sita u toku 1 h što je praćeno dodavanjem difenil fosforil azida (DPPA, 2,55 mL, 11,85 mmol) i ova smeša je refluksovana preko noći. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan u vakuumu, ostatak je prebačen u EtOAc (50 mL), ispran je sa H20 (2x 30 mL) i slanim rastvorom (lx 30 mL). Organska faza je osušena (MgSO^, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod D2 (2,38 g, 96 %) je korišćen kao takav u narednom koraku. MS analize pokazuju gubitak Bok grupe: 141,9 ((M+H)-Bok)+, 139,9 ((M-H)-Bok)".

Korak B

Jedinjenje D2 (2,28 g, 9,45 mmol) je tretirano sa 4N HCl/dioksan rastvorom (iz Aldrich) (10 mL, 40 mmol) u toku 60 min i HPLC analize su pokazale daje polazni materijal potpuno potrošen. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, resuspendovana u EtOAc i isprana sa vodom, zasićenim rastvorom NaHC03(vod.), i zasićenim slanim rastvorom. Organska faza je osušena (MgSO^, filtrirana i koncentrovana kako bi se dobilo 1,18 g (88 %) D3 u obliku braon ulja, koje je korišćeno kao takvo u narednom koraku. MS: 141,9 (M + H)+, 139,9

(M - H)\

Korak C

Anilin D3 (1,18 g, 8,36 mmol) je kombinovan sa dimetilacetilen dikarboksilatom A3 (1,45 mL, 10,0 mmol) u metanolu (25 mL). Reakcija je rafluksovana u toku 2 sata pre nego je koncentrovana do suva. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije eluiran sa smešom 9/1 (heksan/EtOAc) kako bi se dobio Mihaelov (Michael) rastvor navedenog D4 u obliku žutog ulja, (1,27 g, 54 %).

Korak D

Mihaelov rastvor navedenog D4 je razblažen u toplom difenil etru (6 mL) i stavljen u peščano kupatilo prethodno zagrejano do -350 °C. Unutrašnja temperatura reakcije je praćena i odžavana na~245 °C u toku oko 5 minuta (rastvor postaje braon). Nakon hladjenja do S.T., željeni 4-hidroksikinolin je izlomljen kroz rastvor. Braon čvrsta supstanca je filtrirana i isprana nekoliko puta sa dietil etrom do dobijanja, nakon sušenja, kinolina D5 u obliku braon čvrste supstance (0,51 g, 45 %). MS: 252 (M + H)<+>, 249,9 (M - H)\ Smeša sa 1:1 tautomera, 1H-NMR (DMSO-d6,400 MHz) 12,04 (s, IH), 11,02 (s, IH), 8,0 (d, IH), 7,88 (d, IH), 7,65 (m, IH), 7,39 (s, IH), 7,32 (m, IH), 6,5 (s, IH), 4,0 (s, 3H), 3,98 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 3,91 (s, 3H).

Primer 3E

Sinteza 2-karbometoksi-6,8-dimeu14-mdroksi-7-metoksihinolm (E8)

Korak A

Amid El (5,0 g, 30,63 mmol) je razblažen u smeši sa sirćetnom kiselinom (5 mL) i sumpornom kiselinom (10 mL) i ohladjen do 0 °C. Smeša sa azotnom kiselinom (70 %, 3 mL) i sumpornom kiselinom (2 mL) je dodata u kapima nakon čega je rastvor zagrevan do S.T. i mešan u toku 1 h. Reakciona smeša je zatim stavljena na izlomljeni led i filtrirana (nakon što se led istopio ali je rastvor još uvek hladan) do dobijanja željenog jedinjenja E2 (5,8 g, 91 %) koje je predvidjeno za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja. MS ES<+>= 209,0, ES_ = 206,9.

( Ref: Giumanini, A. G. ; Verardo, G. ; Polana, M. J. Prak. Chem. 1988, 181).

Korak B

Jedinjenje E2 (5,8 g, 27,86 mmol) je tretirano sa 6M HC1 rastvorom (5 mL) u MeOH (10 mL) i zagrevan na refluksu u toku 48 h do dobijanja željenog proizvoda E3 (4,6 g, 99 %). RP-HPLC analiza je pokazala potpuno iskorišćenje polaznog materijala (Rt(E2) = 2,6 min.; Rt(E3)= 3,9 min.). Smeša je koncentrovana i upotrebljena u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.

KorakC

Sumporna kiselina (18 mL) je dodata u rastvor sa anilinom E3 (4,20 g, 25,27 mmol) u vodi (36 mL) na 0 °C što je praćeno dodavanjem natrijum nitrita (2,3 g, 33,33 mmol u vodi (6 mL). U odvojenu bocu je stavljena smeša sa vodom (14 mL) i sumpornom kiselinom (1,5 mL). Ovaj rastvor je doveden do refluksa i zatim je dodat inicijalni rastvor u kapima uz održavanje ključanja. Nakon što je dodavanje završeno, ključanje je nastavljeno u toku 5 min i smeša je zatim stavljena na smešu led /natrijum karbonat uz hladjenje u ledenom kupatilu. Proizvod je ekstrahovan sa vod. EtOAc i koncentrovan do dobijanja tamno braon viskozne tečnosti E4 (2,00 g, 47 %) koja je upotrebljena u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja. MS ES'= 210,9.

Korak D

Mel (1,42 mL, 22,74 mmol) je dodat u rastvor sa polaznim fenolom E4 (1,9 g, 11,37 mmol) i kalijum karbonatom (2 g) u DMF (25 mL) na S.T. Smeša je zagrevana na 50 °C u toku 2 h i zatim ohladjena do S.T. EtOAc je dodat i rastvor je ispran sa vodom (3x) i vod. sloj je zatim ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni, filtrirani i koncentrovani do dobijanja željenog metil etra E5 (2,0 g, 97 %).<J>H-NMR (CDC13,400 MHz) 7,62 (d, J = 8,4 Hz, IH), 7,13 (d, J = 8,4 Hz, IH), 3,74 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,36 (s, 3H).

Korak E

Deset procenata (10 %) Pd/C (200 mg) je dodato u rastvor sa nitro polaznim materijalom E5 (2,0 g, 11,04 mmol) u EtOH koji je stavljen na Par-ov (Parr) šejker pod 40 psi H2atmosfere u toku 2 h. Rastvor je filtriran kroz podlogu od silika/Celit, ispran sa MeOH i koncentrovan do dobijanja željenog anilina E6 (1,5 g, 90 %) koji je upotrebljen bez daljeg prečišćavanja.

Korak F

Anilin E6 (1,9 g, 12,65 mmol) je kombinovan sa dimetilacetilen dikarboksilatom A3 (2,32 mL, 18,85 mmol) u metanolu (3 mL). Reakcija je zagrevana na refluksu u toku 2 h pre nego što je koncentrovana do suva. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije (9 :1 heksan/EtOAc) kako bi se dobio Mihaelov rastvor navedenog E7 u obhku žutog ulja (2,8 g, 76 %).<J>H-NMR (CDCI3,400 MHz) 9,48, (s, br, IH), 6,89 (d, J = 7,9 Hz, IH), 6,47 (d, J = 7,9 Hz, IH), 5,35 (s, IH), 3,74 (s. 3H), 3,70 (s, 3H), 3,65 (s, 3H) 2,27 (s, 3H), 2,24 (s, 3H).

Korak G

Mihaelov rastvor navedenog E7 je razblažen u zagrejanom difenil etru (10 mL) i stavljen u peščano kupatilo koje je prethodno zagrejano do~350 °C. Unutrašnja temperatura reakcije je praćena, odžavana na~245 °C u toku oko 5 minuta (rastvor postaje braon) i ohladjena do S.T. pri čemu je željeni 4-hidroksikinolin precipitiran kroz rastvor. Braon čvrsta supstanca je filtrirana i isprana nekoliko puta sa dietil etrom kako bi se dobio hinolin E8 u obliku žuto-braon čvrste supstance nakon sušenja (1,10 g, 88 %). ^-NMR (CHC13,400 MHz) 8,80, (s, br, IH), 8,06 (s, IH), 7,26 (s, IH), 6,93 (s, IH), 4,04 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 2,45 (s, 3H) 2,39 (s, 3H).

Primer 3F

Sinteza 2-karbometoksi-4-hidroksi-7-metoksi-6-metil hinolina (F4):

Korak A

U suspenziju sa 2-metil-5-nitroanizolom Fl (1,54 g; 9,21 mmol) u apsolutnom etanolu (15 mL) je dodato 10 % Pd/C katalizatora (249 mg). Suspenzija je hidrogenovana ispod balona ispunjenog vodonikom pri atmosferskom pritisku i sobnoj temperaturi u toku 6,5 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Mileksov (Millex) 0,45 mikronski filter i uparena do suva kako bi se dobio 4-metik7?-anizidin F2 (1,22 g; 8,89 mmol; 97 % prinosa)

Korak B

Dimetil acetilen dikarboksilat A3 (1,1 mL, 8,95 mmol) je dodat u kapima u rastvor sa 4-metil-/77-anizidinom F2 (1,22 g, 8,89 mmol) u MeOH (20 mL). Oprezno jer je reakcija egzotermna. Smeša je zagrevana na umerenom refluksu u toku 4 sata, ohladjena i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni na silika gelu sa smešom heksan : EtOAc (92,5 : 7,5) kako bi se dobio, nakon uparavanja čistih frakcija, diestar navedenog F3 (1,8 g; 6,44 mmol; 73 % prinosa).

Korak C

Diestar F3 (1,8 g, 6,44 mmol) je razblažen u difenil etru (5 mL) i reakciona smeša je stavljena u prethodno zagrejano peščano kupatilo sa temperaturom kupatila od 350-400 °C. Kada reakciona smeša postigne unutrašnju temperaturu od 240 °C, započinje odbrojavanje od pet minuta pre nego se kupatilo ukloni i reakcija se ostavi da se ohladi do sobne temperature preko noći. Čvrsta supstanca formirana nakon hladjenja koja je razblažena sa etrom, filtrirana je i osušena kako bi se dobila braon čvrsta supstanca (0,97 g sirove) koja sadrži oba regioizomera u skoro jednakom odnosu. Sirovi materijal je usitnjen pod površinom MeOH i EtOAc, filtriran i osušen kako bi se dobio odgovarajući regioizomer metilhinolin proizvoda F4 u obliku žute čvrste supstance (245 mg, 15 % prinosa).

Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 90 %.

Primer 3G

Sinteza 2-karbometoksi-4-rndroksi-[l,3]dioksolo[4,5-h]hinolina (G5):

Korak A

U refluksujući rastvor sa komercijalno dostupnom 2,3-metilendioksibenzoevom kiselinom Gl (485 mg; 2,92 mmol) u 1,4-dioksanu (8,0 mL) i t-butanolu (2,5 mL) je dodat TEA (430 L; 3,08 mmol) i difenilfosforil azid (DPPA, 630 L; 2,92 mmol) i refluksovan u toku 10 h. Smeša je uparena, razblažena sa hloroformom, isprana sa 5 % limunske kiseline (3x), vodom, zasićenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom, osušena (MgSO^, filtrirana i uparena kako bi se dobio sirov proizvod. Brzo-kolonsko prečišćavanje na silika gelu sa smešom heksan : EtOAc

(75:25) je dalo čisto Bok-amino jedinjenje G2 (257 mg; 37 %).

Korak B

Bok polazni materijal G2 (257 mg; 1,08 mmol) je razblažen u 4M smeši HCl/dioksan (5,0 mL) i mešan na sobnoj temperaturi u toku 1 sata. Rastvarač je uparen i ostatak je razblažen sa zasićenim natrijum bikarbonatom (nekoliko mL) i 1 M NaOH (1 mL), ekstrahovan sa EtOAc (2x), osušen (MgSO^, filtriran i uparen do suva kako bi se dobio sirov 2,3-metilen dioksianilin G3 (158 mg; 106%).

Korak C

Dimetil acetilen dikarboksilat A3 (130yL,1,06 mmol) je dodat u kapima u rastvor sa sirovim 2,3-metilen dioksianilinom G3 (148 mg, 1,08 mmol) u MeOH (2,5 mL). Oprezno jer je reakcija egzotermna. Smeša je zagrevana na umerenom refluksu u toku 3 sata, ohladjena i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni sa silika gelom sa smešom heksan : EtOAc (9 :1) kako bi se dobio, nakon uparavanja čistih frakcija, diestar navedenog G4 (185 mg; 0,662 mmol; 61 % prinosa).

Korak D

Diestar G4 (180 mg, 0,645 mmol) je razblažen u difenil etru (2,5 mL) i reakciona smeša je stavljena u prethodno zagrejano peščano kupatilo sa temperaturom kupatila od 350 - 400 °C. Kada reakciona smeša postigne unutrašnju temperaturu od 250 °C (posmatranjem MeOH evolucije na 220 - 230 °C) započinje odbrojavanje od šest minuta pre nego se kupatilo (krajnja

tačka temperature: 262 °C) ukloni i reakcija se ostavi da se ohladi do sobne temperature,

i Čvrsta supstanca formirana nakon hladjenja koja je razblažena sa etrom, filtrirana je i osušena kako bi se dobio sirov dioksihinolin G5 (125 mg; 78 %). Prečišćavanje nije potrebno i materijal je korišćen kao takav u sledećim reakcijama.

MS (M + H)<+>; 246, i (M - H)"; 248,1.

Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 88 %.

Primer 3H

Sinteza 2-karbometoksi4-hidroksi-8,9-diWdro-mro[2,3-h]hmolina (H7):

Korak A

Trietilamin (5,0 mL, 35,6 mmol) je dodat u bocu koja sadrži amin Hl (2,0 mL, 17,8 mmol) i dihlorometan (100 mL) pod atmosferom azota. Sadržaj je ohladjen u ledenom kupatilu i trimenlacetilhlorid (3,3 mL, 26,7 mmol) je dodat u kapima. Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do S.T. i mešana u toku 14 sati na toj temperaturi. Reakcija je prekinuta sa NaHC03zasićenim rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni, filtrirani i koncentrovani nakon čega je primenjena brza hromatografija na koloni (4:1 do 1:1 smeše heksan: EtOAc) do dobijanja željenog proizvoda H2 u obliku izbeljene čvrste supstance (3,7 g, 97 % prinosa).

Korak B

n-BuLi (15,9 mL, 1,6M, 25,5 mmol) je dodat u kapima u, na plamenu osušenu bocu koja sadrži rastvor sa polaznim amidom H2 (1,6 g, 7,72 mmol) u THF na 0 °C pod atmosferom argona.

Rastvor postaje bledo žuto/narandžaste boje kada se n-BuLi doda. Rastvor je ostavljen da se polako zagreje do S.T. i mešan je u toku 24 h. Rastvor je ponovo ohladjen do 0 °C i etilen oksid (0,46 mL, 9,26 mmol) je dodat u kapima. Rastvor je ostavljen da se polako zagreje do 23 °C, ugašen sa NaHC03zasićenim rastvorom, ekstrahovan sa EtOAc, osušen, filtriran i koncentrovan nakon čega je primenjena brza hromatografija na koloni (4:1 do 1:1 smeše heksan: etil acetat) kako bi se dobio željeni proizvod H3 (1,94 g, 5,01 mmol, 65 % prinosa) Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 99 %.

Korak C

BBr3rastvor (26 mL, 1,0 M, 26,0 mmol) je dodat u kapima u metil-etar H3 u CH2C12na 0 °C. Rastvor je polako zagrevan do 23 °C i mešan u toku 14 h na S.T.. Reakcija je prekinuta sa IM NaOH rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc i CH2C12kako bi se dobila smeša željenog proizvoda H4 i nešto neciklizovanog diola. Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 99 %.

Korak D

HC1 (4,0 mL, 6,0M) je dodat u rastvor sa amidom H4 (0,27 g, 1,22 mmol) u MeOH (4,0 mL) na 23 °C. Reakcija je zatim zagrevana do refluksa u toku 48 h, NaHC03(zasićeni, vod.) je dodat i ekstrahovana je sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni, filtrirani i koncentrovani kako bi se dobio željeni anilin H5 koji je dovoljno čist da se upotrebi u daljim transformacijama.

Korak E

Dimetil acetilen dikarboksilat A3 (0,16 mL, 1,33 mmol) je dodat u rastvor sa anilinom H5 (0,18 g, 1,33 mmol) u MeOH (3,0 mL) na S.T. Rastvor je zagrevan na refluksu u toku 3 h., ohladjen do S.T. i zasićeni NaCl rastvor je dodat. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x) i kombinovani organski slojevi su zatim osušeni, filtrirani i koncentrovani a zatim prečišćeni uz pomoć brze hromatografije na koloni (9 :1 do 1:1 smeše heks.: EtOAc) do dobijanja željenog olefina H6 (0,29 g, 78 96).

Korak F

Boca koja sadrži polazni olefin H6 (0,29 g, 1,04 mmol) u difenil etru (2,0 mL) je spuštena u prethodno zagrejano peščano kupatilo (350 °C). Kada unutrašnja temperatura reakcije dostigne 225 °C, boca je zagrevana u toku 6-7 minuta tokom kog vremena je unutrašnja temperatura podignuta do 240 °C. Reakciona smeša je zatim uklonjena iz peščanog kupatila i ostavljena da se polako ohladi do S.T. Precipitat je formiran tokom stajanja. Dietil etar je dodat i rastvor je filtriran i ispran sa dodatnim dietil etrom do dobijanja svetlo-braon čvrste supstance H7 (0,20 g, 77 96). MS 246,0 (MH)<+>.

Primer 3J

Sinteza 2-karbometoksi-4-m^roksi-8-metilitorunolina (J3):

Korak A

Dimetil acetilen dikarboksilat A3 (5,21 mL, 35,91 mmol) je dodat u kapima u rastvor sa 2-metilmerkaptoanilinom JI (5,0 g, 35,91 mmol) u MeOH (100 xnL). Oprezno jer je reakcija egzotermna. Smeša je zagrevana na umerenom refluksu u toku 2 sata, ohladjena i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni, sa smešom heksan : EtOAc (90:10) kako bi se dobio, nakon uparavanja čistih frakcija,

diestar navedenog J2 (10,53 g; 37,43 mmol; 99 % prinosa),

i Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm: 85 %.

Korak B

Diestar J2 (10,53 g, 37,43 mmol) je razblažen u difenil etru (35 mL) i reakciona smeša je stavljena u prethodno zagrejano peščano kupatilo sa temperaturom kupatila od 350 - 400 °C. Kada reakciona smeša postigne unutrašnju temperaturu od 245 °C, započinje odbrojavanje od šest minuta pre nego se kupatilo ukloni i reakcija se ostavi da se ohladi do sobne temperature. Formirani precipitat, koji je suspendovan u etru, filtriran je i ispran ponovo sa etrom kako bi se dobio C8-SMe kinolin proizvod J3 (6,15 g; 66%). MS (M + H)<+>; 250 Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 99 %.

Primer 3K

Sinteza 7-terc4)uuloksi-2-karbometoksM-^ (K6)

Korak 1:

U rastvor sa 2-metil-3-nitrofenol Kl (1,1 g; 7,18 mmol) u THF (13 mL) je dodat cikloheksan (27 mL; rastvor je sačuvan). Terc-Butil trihloroacetimidat K2 (5,36 mL; 28,73 mmol) je dodat a zatim katalitička količina bor trifluorid eterata (143,8 uL; 1,14 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 15 h. Reakcija je nezavršena (utvrdjeno analizom sa HPLC) i dodatna količina terc-butil trihloroacetimidata (1,4 mL; 7,51 mmol) je dodata (reakcija ostaje

u rastvoru). Reakcija je završena nakon mešanja na sobnoj temperaturi u toku 5 h. Čvrsti

i natrijum bikarbonat je dodat i smeša je filtrirana, isprana sa dihlormetanom i uparena do suva kako bi se dobila bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je usitnjena pod slojem dihlorometana, bela čvrsta supstanca je filtrirana i odbačena (= trihloracetimid). Filtrat je koncentrovan i napunjen u brzu kolonu za prečišćavanje (heksan : EtOAc 9 :1) kako bi se dobio čisti 2-metil-3-ferc-butoksinitrobenzen K3 (1,17 g; 78 %). Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220nm: 96 %

Korak 2:

U rastvor sa 2-metil-3-terc-butoksinitrobenzenom K3 (1,31 g; 6,26 mmol) u apsolutnom etanolu (30 mL) je dodato 10 % Pd/C katalizatora (130 mg). Rastvor je hidrogenovan ispod balona ispunjenog vodonikom pri atmosferskom pritisku i sobnoj temperaturi u toku 63 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz podlogu od Celita, isprana sa apsolutnim EtOH i uparena do suva kako bi se dobio 2-metil-3-ferc-butoksianilin K4 (1,1 g; 6,14 mmol; 98 % prinosa). M.S.

180 (M+H)+. Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220nm : 96 %

Korak 3:

Dimetil acetilen dikarboksilat A3 (749 uL, 5,97 mmol) je dodat u kapima u rastvor sa 2-metil-3-terebutoksianilinom K4 (1,07,5,97 mmol) u MeOH (14 mL). Smeša je zagrevana na umerenom refluksu u toku 2 sata, ohladjena i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni sa smešom heksan : EtOAc (95 :5) kako bi se dobio, nakon uparavanja čistih frakcija, diestar navedenog (1,13 g; 3,52 mmol; 59 % prinosa). M.S. 320,0 (M-H)"322,1 (M+H)<+>. Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm: 92 %.

Korak 4:

Diestar K5 (1,13 g, 3,52 mmol) je razblažen u difenil etru (3,0 mL) i reakciona smeša je stavljena u prethodno zagrejano peščano kupatilo sa temperaturom kupatila od 400 - 440 °C. Kada reakciona smeša postigne unutrašnju temperaturu od 230 °C (posmatranjem MeOH evolucije na 220 °C) započinje odbrojavanje od šest minuta pre nego se kupatilo (krajnja tačka temperature: 242 °C) ukloni i reakcija se ostavi da se ohladi do sobne temperature. Nakon hladjenja nije formirana čvrsta supstanca, prema tome sirova smeša je podvrgnuta brzo-kolonskom prečišćavanju sa smešom heksan : EtOAc (8:2 za uklanjanje difenil etra, zatim, 4: 6 do potpunog eluiranja proizvoda) kako bi se dobioC7-0-ferc-Bu,C8-Mehinolin K6 u obliku čvrste supstance bež boje (838 mg; 82 %). MS 288,0 (M-H)"290,0 (M+H)<+>. Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 99 %.

Ovaj kinolinski deo je korišćen za sintezu jedinjenja 1032 i 1033 iz tabele 1. Za sintezu jedinjenja 1034,1035,1057 i 1058, takodje iz tabele 1, kinolin K6 je korišćen. Konverzija C7-terc-butil-etarske grupe u hidroksilnu grupu je izvršena uz pomoć tretiranja krajnjeg jedinjenja sa 50 % TFA u dihlorometanu u toku 30 min. na 0 °C zatim u toku 30 min. na S.T., uparavanjem do suva, razblaiivanjem sa vodom i liofilizacijom.

Primer 3L

Sinteza 2-karbometoksi4-hidroksi-8-metoksihinolina (L3):

Korak A

Dimetil acetilen dikarboksilat A3 (5,5 mL, 44,74 mmol) je dodat u kapima u rastvor saoanizidinom LI (5,0 mL, 44,33 mmol) u MeOH (100 mL). Oprezno jer je reakcija egzotermna. Smeša je zagrevana na umerenom refluksu u toku 5 sati, ohladjena je i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni sa smešom heksan : EtOAc (95 :5 do 90:10) kako bi se dobio, nakon uparavanja čistih frakcija, diestar navedenog 12 (10 g; 37,70 mmol; 85 % prinosa).

Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 82 %.

Korak B

Diestar12(10 g, 37,70 mmol) je razblažen u difenil etru (15 mL) i reakciona smeša je stavljena u prethodno zagrejano peščano kupatilo sa temperaturom kupatila od 350 - 400 °C. Kada reakciona smeša postigne unutrašnju temperaturu od 240 °C, započinje odbrojavanje od šest minuta pre nego se kupatilo ukloni i reakcija se ostavi da se ohladi do sobne temperature. Nakon hladjenja nije formirana čvrsta supstanca, prema tome, sirova smeša je podvrgnuta brzo-kolonskom prečišćavanju sa smešom heksan: EtOAc (6:4 do 5 :5 za uklanjanje nečistoća, zatim, 2 :8 za završetak eluiranja) kako bi se dobio C8-OMe hinolin proizvod L3 (4,56 g; 52 96). MS (M - H)"; 231,9 Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 99 96.

Primer 4

Dobijanje Dipeptida

Sinteza dipeptida 1

Smeša sa Bok-hidroksiprolinom P2 (50,0 g, 216 mmol), vinil-ACCAmetil estrom Pl (42,25 g, 238 mmol, 1,1 ekviv.), TBTU (76,36g, 238 mmol, 1,1 ekviv.) i DIPEA (113 mL, 649 mmol, 3 ekviv.) u DMF (800 mL) je mešana na S.T. pod atmosferom azota. Nakon 3,5 h, rastvarač je uparen i ostatak je ekstrahovan sa EtOAc. Ekstrakt je ispran sa hlorovodoničnom kiselinom (10 %), zasićenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom. Organska faza je zatim osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana je i uparena do dobijanja ulja. Nakon sušenja preko noći pod visokim vakuumom, dipeptid 1 je dobijen u obliku žute pene (72,0 g, 94 %, čistoće >95 % sa HPLC).

Dobiianie diDeotida 3

Dipeptid 1 (72,0 g, 203 mmol), trifenilfosfin (63,94 g, 243,8 mmol, 1.2 ekviv.) i 4-nitrobenzoeva kiselina (41,08 g, 245,8 mmol, 1,2 ekviv.) su rastvoreni u suvom THF (1,4 L) izmešani rastvor je ohladjen do 0 °C pod atmosferom azota. Dietil azodikarboksilat (38,4 mL, 244 mmol, 1,2 ekviv.) je zatim dodat u kapima u toku 45 min i reakcije je ostavljena da se zagreje do S.T. Nakon 4 h, rastvarač je uparen. Ostatak je podeljen u četiri porcije. Svaka od njih je prečišćena uz pomoć hromatografije preko finog silika gela (10 - 40 [jm meša, prečnik kolone 12 cm, dužina kolone 16 cm) korišćenjem gradijenta smeše od 2 :1 heksan/EtOAc do 1:1 heksan/EtOAc do čistog EtOAc. Na taj način, Bok-dipeptid estar 2 je dobijen u obliku amorfne bele čvrste supstance nakon uparavanja rastvarača i sušenja ostatka pod visokim vakuumom na 70 °C u toku 1 h (108,1 g, kvantitativno). Rastvor sa 4N hlorovodonika u dioksanu je dodat u Bok-dipeptidni estar 2 (108 g, 243 mmol) pri čemu se dobija bezbojni rastvor. Rastvor je mešan na S.T. u toku 1 h. Rastvarač je uparen i ostatak je stavljen pod visokim vakuumom u toku 3 h dajući hidrohloridnu so jedinjenja 3 u obliku amorfne čvrste supstance. Čvrsta supstanca je korišćena kao takva.

Primer 5

Dobijanje Tripeptida

Sinteza tripeptida 6a

Karbamat 4b (6,15 g, 22,5 mmol) i TBTU (7,72 g, 24,7 mmol) je suspendovan u DCM i suspenzija je mešana jako. DIPEA (3,92 mL, 22,5 mmol) je dodat na S.T. i nakon 10 min, reakcija je bila skoro homogena. Rastvor dipeptida 3 (10,39 g, 23,6 mmol) u anhidrovanom DCM (100 mL) koji sadrži DIPEA (4,11 mL, 23,62 mmol) je zatim dodat u reakciju. Dobijeni žuti rastvor je ostavljen da se meša u toku 14 h. Rastvarač je zatim uparen dajući žuti sirup koji je ekstrahovan sa EtOAc (300 + 150 mL) i ispran je sa 0,05N HC1 (2x 200 mL), zasićenim Na2C03(300 mL) i slanim rastvorom (150 mL). Kombinovani ekstrakti su osušeni preko MgS04i upareni do dobijanja tripeptida 6a u obliku bledo žute pene (15,68 g, kvantitativno).

Sinteza tripe<p>tida 7a:

Tripeptid 6a (15,68 g) je razblažen u THF (200 mL) i voda (30 mL) je dodata. Dobijeni rastvor je ohladjen do 0 °C i rastvor sa litijum hidroksid monohidratom (1,18 g, 28,12 mmol) je dodat u toku 3 min uz jako mešanje. Nakon 3 h na 0 °C, višak baze je neutralisan sa IN HC1 (krajnji pHca.6) i THF je uparen, nakon čega se dobija vodena suspenzija (žuta guma). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x 200 mL) i isprana je sa zasićenim rastvorom NaHC03(2x 300 mL). Kombinovani ekstrakti su osušeni preko MgS04i upareni do dobijanja bledo žute pene. Brzom hromatografijom pene preko silika gela korišćenjem EtOAc kao eluenta dobija se 7a u obliku bele amorfne čvrste supstance (9,77 g, 91 %).

Sinteza tripeptida 6b

Ciklopentilurea-Tbg 5 (2,21 g, 9,10 mmol) i TBTU (3,12 g, 10,0 mmol) je rastvoren /suspendovan u anhidrovanom dihlorometanu (40 mL) i DIPEA (1 ekviv.) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota sve dok rastvor ne postane skoro homogen (ca. 10 min). Rastvor sa P1-P2 dipeptidom (4,20 g, 9,56 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (35 mLkoji sadrži 1 ekviv. DIPEA) je zatim dodat u reakciju i dobijeni žuti rastvor je ostavljen da se meša u toku 14 h nakon što je reakcija zaalkalisana dodavanjem DIPEA(ca.1,5 mL). Rastvarač je uparen pri čemu je dobijen žuti sirup koji je ekstrahovan sa etil acetatom (150 + 50 mL) i ispran je sa 0,1N HC1 (150 mL), vodom (100 mL, emulzija rastvorena sa slanim rastvorom), zasićenim rastvorom Na2C03(150 mL) i slanim rastvorom (100 mL). Kombinovani ekstrakti su zatim osušeni preko MgS04i upareni do dobijanja bledo žute čvrste supstance 6b (6,21 g, HPLC čistoće 95 %).

Sinteza tripeptida 7b

Sirovi pNBz estar 6b dobijen gore je razblažen u THF (90 mL) i metanol (40 mL) je dodat. 1,0 N natrijum hidroksidni rastvor (12,0 mL; 12,0 mmol) je zatim dodat uz jako mešanje u toku 10 min (uz pomoć nakapajućeg levka) i započeta je hidroliza na sobnoj temperaturi. Nakon 2 h, višak baze je neutralisan sa pažljivim dodavanjem 1N HC1 (ca. 1,5 mL, dodata u kapima do nestajanja žute boje; krajnji pH ca. 6). Organski rastvarači su upareni i vodeni ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom (150 + 50 mL) i ispran je sa zasićenim natrijum bikarbonatom (3x 150 mL) i slanim rastvorom (100 mL). Kombinovani ekstrakti su osušeni preko MgS04i upareni do bledo žute, amorfne čvrste supstance koja je osušena pod visokim vakuumom 7b (4,11 g, 87 % iz P3-uree, HPLC čistoće 93 %).

Sinteza Brosilat derivata 7aBrs

U ohladjeni rastvor (0°C) tripeptida (10 g; 20,85 mmol), brosil hlorida (11,19 g; 43,79 mmol) i dimetilaminopiridina (254 mg; 2,09 mmol) koji su rastvoreni u dihlorometanu (75 mL), trietilamin (10,2 mL; 72,98 mmol) je dodat u kapima. Žuti rastvor je mešan 1 sat na 0 °C, zatim je ostavljen da se polako zagreje do sobne temperature i mešan je 60 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana do suva, razblažena sa EtOAc, isprana je sa zasićenim natrijum bikarbonatnim rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušena (MgS04), filtrirana i uparena do suva kako bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni sa smešom heksan : EtOAc; 60 : 40 do 50 : 50 kako bi se dobio čist proizvod 7aBrs u obliku bele pene (11,66 g; 80 %).

M.S. 698 (M+H)<+>; 700,2 (MH+2)<+>. Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 99 %.

Primer 6

Uvodjenje hinolin delova u Tripeptide:

Sinteza Intermedijera 10a preko izmeštania brosilata:

Brosilat 7aBrs (0,5 g; 0,71 mmol), bromohinolin B6 (234 mg; 0,75 mmol) i samleveni cezijum karbonat (56 mg; 0,78 mmol) su svi rastvorei u l-metil-2-pirolidinonu (7,6 mL), rastvor je zagrevan do 70 °C i mešan u toku 7 h. Rastvor je zatim ohladjen do sobne temperature i doteran. Reakciona smeša je stavljena u EtOAc, isprana je sa H2O (lx), NaHC03(zasićenim; 2x), slanim rastvorom (5x), osušena, filtrirana i koncentrovana do dobijanja sirovog proizvoda (0,565 g) u obliku izbeljene čvrste supstance. Prečišćavanje uz pomoć brze hromatografije na koloni (1:30 silika gel; 7 :3 EtOAc/heksan) daje čist proizvod 10a (77 96; 0,429 g) u obliku bele čvrste supstance.

MS 775,2 (M+2H)<+>. Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 96 96.

Sinteza Intermediiera 10b preko Micunobijeve reakcije:

U tripeptid 7a (1,55 g; 3,23 mmol) koji je rastvoren u THF (30 mL), hidroksihinolin A5 (1,08 g; 4,37 mmol) je dodat a zatim 0,5 m trifenilfosfin silil estar u THF (13 mL; 6,46 mmol). U žutu suspenziju je dodat, u kapima DIAD reagens (1,27 mL; 6,46 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi u toku 2 sata, doterana je dodatkom u kapima IM TBAF/THF rastvora (11,3 mL; 11,31 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Uz pomoć HPLC analize, bilo je evidentno daje cepanje formiranog fosfin oksidnog sporednog proizvoda (u vodi rastvoran deo) završeno. Reakcija je razblažena sa EtOAc, isprana je sa zasićenim natrijum bikarbonatnim rastvorom (2x), vodom (2x), hladnim IN NaOH (2x; za uklanjanje viška kinolina), vodom (2x) i slanim rastvorom (lx), osušena (MgS04), filtrirana i uparena kako bi se dobila čvrsta supstanca bež boje. Sirovi materijal je brzo-kolonski prečišćen sa smešom heksan : EtOAc (8 :2) kako bi se dobio proizvod 10b u obliku čvrste supstance boje slonovače

(1,92 g; 84%). M.S. 707,4 (M-H)- 709,4 (M+H)<+>. Homogenost sa HPLC (TFA) @ 220 nm : 94 %.

PRIMER 7

Sinteza iedinienia 1007:

Korak 1:Selektivna monohidroliza estra 10b:

Tripeptid 10b (149 mg, 0,210 mmol), u 5 mL 1:1 smeše saTHF-MeOH, je ohladjen do 0°C za dodavanje vodenog rastvora IN NaOH (0,24 mL, 0,240 mmol). Dobijeni rastvor je mešan 15 min na 0 °C, 1,5 h na S.T. i ustanovljeno je daje nedovršen uz pomoć HPLC analize. Dodatna količina IN NaOH (0,05 mL, 0,05 mmol) je dodata i reakcija je mešana u toku dodatnog sata. Smeša je ugašena sa 1 M HC1, uparena skoro do suva, razblažena sa vodom, zamrznuta i liofilizovana kako bi se dobila kiselina 11b (sirovi materijal korišćen za sledeći korak; pretpostavljeno 0,210 mmol).

Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN: H20): 89 %.

Korak2: Sinteza diazoketona 12b:

Natrijumova so 11b (pretpostavljeno 0,210 mmol) je razblažena u THF (5 mL), trietilamin (75 \ xh; 0,538 mmol) je dodat i rastvor je ohladjen do 0°C. Izobutilhloroformat (45 uL; 0,346 mmol) je dodat u kapima i bela suspenzija je mešana na 0 °C u toku 1 sata, što je praćeno dodavanjem rastvora sa diazometanom (IM u dietil etru; 1 mL; 0,999 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 min na 0 °C, 1 sat na S.T. i uparena kako bi se dobila gusta suspenzija. Ova suspenzija je razblažena u EtOAc, isprana je sa zasićenim rastvorom NaHC03(2x), slanim rastvorom (lx), osušena (MgS04), filtrirana i uparena kako bi se dobio sirovi diazoketonski proizvod 12b (145 mg, 95 %). M.S. (elektrosprejna): 717,4 (M-H)'719,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 85 %.

Korak 3: Sinteza bromoketona 13b:

Na 0 °C, u rastvor sa diazoketonom 12b (145 mg, 0,201 mmol) u THF (4 mL) je dodat u kapima rastvor HBr (48 % vod., 0,1 mL) i smeša je mešana u toku 1,25 h. Smeša je ugašena sa zasićenim rastvorom NaHC03, zatim je THF uparen. Ostatak je razblažen sa EtOAc, ispran je sa zasićenim rastvorom NaHCOs(2x), slanim rastvorom (lx), osušen (MgS04), filtriran i uparen kako bi se dobio sirovi bromoketon 13b (139 mg, 89 %).

M.S. (elektrosprejna): 773,3 (MH+2)<+>771,3 (M+H)<+>769 (M-H)\

Korak 4:Sinteza tiazolil tripeptida 14b:

a-Bromoketon 13b (49 mg, 0,0635 mmol) i TV-neopentiltiourea 8a (12 mg; 0,0688 mmol) su rastvoreni u izopropanolu (3 mL) i žuti rastvor je zagrevan na 75 °C u toku 1 sata. Rastvor je ostavljen da se ohladi do S.T. i uparen do suva. Ovaj sirovi materijal 14b je korišćen za sledeći korak (pretpostavljeno 0,0635 mmol).

M.S. (elektrosprejna): 845,5 (M-H)"847,5 (M+H)<+>.

Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 69 % (sadrži 16 % polazne tiouree).

Korak 5: Hidroliza estra 14b:

U rastvor sa metil estrom 14b (53 mg, 0,0626 mmol), u 3,5 mL smeše sa THF: H20 (2,5 :1), je dodat čvrst LiOH-monohidrat (27 mg, 0,643 mmol). 0,5 mL MeOH je potrebno kako bi se dobio homogeni rastvor. Dobijena reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Organski rastvor je ugašen sa sirćetnom kiselinom i koncentrovan kako bi se dobila izbeljena suspenzija. Sirovi materijal je prečišćen uz pomoć preparativne HPLC ( YMC Combiscreen ODS-AQ, 50 x 20 mm ID S-5 mikrona,120 A;X= 220 nm) korišćenjem linearnog gradijenta i 0,06 % TFA CH3CN / H20. Čiste frakcije su kombinovane, koncentrovane i liofilizovane kako bi se dobio proizvod 1007 u obliku TFsoli (21 mg; 40 % prinosa).

<!>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca. 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera:

12,31 (br s, IH), 8,56 (s, IH), 8,20-8,08 (m, IH), 8,05 (d, J = 9,2 Hz, IH), 7,46 (br s, IH), 7,30 (d, J = 9,0 Hz, IH), 6,99 (d, J = 8,6 Hz, IH), 5,79-5,66 (m, IH), 5,50-5,40 (m, IH), 5,23-5,14 (m, IH), 5,10-5,02 (m, IH), 4,70-4,61 (m, IH), 4,484,33 (m, 2H), 4,16-4,08 (m, IH), 4,04-3,93 (m, IH), 3,95 (s, 3H), 2,60 (s, 3H), 2,58-2,49 (m, IH), 2,40 (br s, 2H), 2,32-2,21 (m, IH), 2,08-1,98 (m, IH), 1,80-1,22 (m, 10H), 1,04 (m, 9H), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 831,5 (M-H)"833,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN:H20):99 %.

PRIMER 8

Sinteza jedinjenja 5005

Korak 1:

U rastvor sa brosilatom 7b Brs (1,89 g, 2,71 mmol) i kinolinom F4 (670 mg, 2,71 mmol) u 1-metil-2-pirolidinonu (26 mL) je dodat cezijum karbonat (971 mg, 2,98 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C u toku 12 sati, ohladjena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc (100 mL), isprana je sa vodom (2x 50 mL), zasićenim rastvorom NaHC03koja sadrži IM NaOH (1/5 zapremine) (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organska faza je osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana do dobijanja sirovog proizvoda u obliku žutog ulja, koje je prečišćeno uz pomoć brze hromatografije preko kolone sa silika gelom (250 - 400 meša), eluirana sa smešom EtOAc/heksan (13:7), do dobijanja 1,27 g bledo žute čvrste supstance (kontaminirane sa 20 % polaznog hinolina). Čvrsta supstanca je razblažena u THF (15 mL) i suspenzija je tretirana sa CH2N2(5 mL) na ST. u toku 12 sati, zatim je koncentrovana. Ostatak je prečišćen uz pomoć brze hromatografije preko kolone sa silika gelom (250 - 400 meša), eluiran je sa smešom EtOAc/CHCI3(12 : 6) do dobijanja 0,9 g čistog 10c u obliku bledo žute pene (48 96).

Korak 2:

Konverzija 2-karbometoksi grupe iz 10c u 2-(l-okso-2-bromo)etil grupu iz 13c je izvedena korišćenjem reakcionog niza koji je opisan u primeru 7, koraci 1,2 i 3.

Korak 3:

Reakcije sa tiourea derivatom i krajnja hidroliza:

U rastvor sa 13c (50 mg, 0,065 mmol) u izopropanolu (3 mL) je dodata izopropiltiourea 8g (10 mg, 0,085 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70 °C u toku 45 minuta. HPLC analiza je pokazala potpuno iskorišćenje polaznog materijala. Ohladjena je do sobne temperature i razblažena sa THF (2 mL) i 1,0 N rastvorom natrijum hidroksida (0,325 mL). Mešanjem na sobnoj temperaturi u toku 12 sati, reakciona smeša je koncentrovana do suva. Ostatak je razblažen u DMSO (2 mL) i rastvor je ubrizgan u Combi-Prep HPLC kolonu. Čiste frakcije su udružene i liofilizovane do dobijanja 26,1 mg jedinjenja 5005 u obtiku amorfne žute čvrste supstance (trifluoracetatna so) (50 96 prinosa).

<!>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 8,60 i 8,82 (dva s, IH), 8,01-8,11 (m, IH), 7,98 (s, IH), 7,86 (s, IH), 7,72 i 7,75 (dva s, IH), 5,90-6,03 (m, IH), 5,80-5,90 (d, J= 16Hz, IH), 5,62-5,79 (m, 2H), 5,15-5,26 (m, IH), 4,96-5,13 (m, IH), 4,44-4,61 (m, 2H), 4,16-4,23 (m, 2H), 4,08-4,13 (m, 2H), 3,98-4,01 (dva s, 6H), 3,27-3,38 (m, IH), 2,53-2,70 (m, IH), 2,32 i 2,36 (dva s, 3H), 1,96-2,09 (q,

J = 9 Hz, 17 Hz, IH), 1,31-1,67 (m, 7H), 1,23-1,30 (m, 7H), 1,02-1,13 (m, IH), 0,87 i 0,94 (dva s, 9H).

Primer 9

Sinteza jedinjenja 4004

Korak 1:

U rastvor sa brosilatom 7a Brs (0,14 g, 0,20 mmol) i F4 (0,06 g, 0,24 mmol) u l-metil-2-pirolidinonu (4 mL) je dodat cezijum karbonat (0,08 g, 0,26 mmol). Smeša je zagrevana do 70 °C i mešana u toku 7 sati. Reakciona smeša je ohladjena, stavljena u EtOAc (30 mL), isprana je sa H2O (2x 50 mL), zasić. NaHCOs(2x 50 mL), i slanim rastvorom (3x 50 mL). Organska faza je osušena, filtrirana i koncentrovana do žutog ulja. Ovaj materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije na koloni sa silika gelom (250 - 400 meša) eluiran sa smešom EtOAc/heksan (2 : 8), do dobijanja 56 mg (40% prinosa) proizvoda lOd u obliku bledo žute polučvrste supstance.

Korak 2:

Konverzija 2-karbometoksi grupe iz lOd u 2-(l-okso-2-bromo)etil grupu iz 13d je izvedena korišćenjem reakcionog niza koji je opisan u Primeru 7, koraci 1,2 i 3.

Korak 3:

Reakcija sa derivatom tiouree i finalna hidroliza:

U rastvor sa bromoketonom 13d (34 mg, 0,045 mmol) u izopropanolu (2 mL) je dodata ciklopentiltiourea 8d (8,4 mg, 0,06 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70 °C u toku 45 min, zatim je koncentrovana do suva i ostatak je razblažen u smeši sa THF (1,5 mL) i metanolom (0,3 mL). Voda (0,45 mL) je dodata u ovaj rastvor polako uz mešanje, a zatim LiOH (10,3 mg, 0,24 mmol). Reakciona smeša je mešana na S.T. u toku 16 h. HPLC analiza je pokazala daje reakcija izvedena do kraja. Reakciona smeša je koncentrovana, ostatak je razblažen u DMSO i rastvor je ubrizgan u Combi-prep HPLC kolonu. Ciste frakcije su udružene i liofilizovane do dobijanja 16,5 mg (42 % prinosa) jedinjenja 4004 u obliku amorfne bele čvrste supstance (so trifluorsirćetne kiseline).

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) (smeša rotamera;8 : 2): 8 8,59 i 8,71 (2s, IH), 8,13 (m, 2H), 7,83-7,69 (m, 2H), 7,1 (d, J = 8,2Hz, 0,8H), 6,46 (d, J = 8,2Hz, 0,2H), 5,76-5,67 (m, 2H), 5,21 i 5,17 (2s, IH), 5,05 (d, J = 11Hz, IH), 4,53-4,49 (m, 2H), 4,25 (br, s, IH), 4,04-3,99 (m, 5H), 2,66-2,53 (m, IH), 2,34 (s, 4H), 2,07-1,98 (m, 3H), 1,76-1,25 (m, 16H), 0,95 i 0,7 (2s, 9H).

Primer 10

Dobijanje Dipeptida:

Sinteza dioeDtida 3:

U rastvor sa brosilatom 3 Brs (4,2 g, 7,32 mmol) i hinolinom A5 (1,45 g, 5,86 mmol) u 1-metil-2-pirolidinonu (25 mL) je dodat cezijum karbonat (3,1 g, 9,5 mmol). Smeša je zagrevana do 70 °C u toku 12 h. Reakciona smeša je stavljena u EtOAc (150 mL), isprana je sa H2O (2x 150 mL), sa zasićenim rastvorom NaHCOs(2x 150 mL) i slanim rastvorom (2x 150 mL). Organska faza je odvojena, osušena preko Na2S04, filtrirana i koncentrovana do dobijanja sirovog proizvoda u obliku žutog ulja. Ovaj materijal je prečišćen uz pomoć brze hromatografije preko kolone sa silika gelom (250 - 400 Meša) eluiran sa 65 % EtOAc u heksanu do dobijanja 15a (1,8 g, 42 %) u obliku bele čvrste supstance.

Primer 11

Sinteza jedinjenja 2015

Sinteza je izvedena prema sledećem nizu:

Ell- 1: Kalijum cijanid (1,43 g, 22,0 mmol) je dodat u izmešani rastvor metilciklopentanola (2,00 g, 20,0 mmol) u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (1,00 mL) pri čemu je dobijena gusta suspenzija. U nju je dodata, u kapima, sumporna kiselina (3 mL, oprez: egzotermna) brzinom pri kojoj je temperatura održavana na ca. 30 - 35 °C. Dodatna količina sirćetne kiseline (1 mL) je dodata za olakšavanje mešanja guste paste. Smeša je zatim zagrevana do 55 - 60 °C u toku 30 min a zatim mešana na sobnoj temperaturi u toku 16 h. Ledom ohladjena voda (35 mL) je zatim dodata, smeša je ekstrahovana sa etil etrom (2x 40 mL) i kombinovane organske faze su isprane sa 5 % NaHCOs(5x 30 mL), osušene preko MgS04i rastvarač je uparen do dobijanja bledo braon ulja (1,16 g). pH kombinovanog vodenog ispirka je zatim podignut do pH 11 dodavanjem čvrstog K2CO3i dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa etil etrom (3x 40 mL). Filtrat je ekstrahovan sa etil etrom (2x 40 mL), kombinovani ekstrakti su osušeni preko MgS04i rastvarač je uparen do dobijanja dodatnog proizvoda (0,355 g) koji je kombinovan sa gore dobijenim uljem (1,52 g, 60 %).

Ell- 2: 5N Hlorovodonična kiselina (8 mL) je dodata u rastvor sa Ell-1 (1,50 g, 11,8 mmol) u dioksanu (8,0 mL) pri čemu je došlo do precipitacije. Etanol (4 mL) je zatim dodat i rastvor je zagrevan do refluksa u toku 4 h. Reakcija je zatim ohladjena, organski rastvarači su upareni i vodeni ostatak je ispran sa heksanom (40 mL). Vodeni sloj je zatim uparen do suva (etanol je korišćen za dobijanje azeotropne smeše sa poslednjim tragovima vode) i dobijena čvrsta supstanca je osušena pod visokim vakuumom do dobijanja metilciklopentilamin hidrohlorida u obliku čvrste supstance bež boje (1,38 g, 86 %).

Ell- 3: U izmešani, ledom ohladjeni rastvor sa Bok-Tbg-OH (5,00 g, 21,6 mmol) u acetonitrilu (75 mL) je dodat benzil bromid (2,83 mL, 23,8 mmol) pod atmosferom argona. DBU (3,88 mL, 25,9 mmol) je zatim dodat u malim porcijama u toku ca. 5 min. Dobijena suspenzija je mešana na 0 °C u toku narednih 30 min a zatim je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Nakon 3 h, rastvarač je uparen i ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom (50 mL), ispran je sa IN HC1 (2x 25 mL), 5 % vod. NaHCOs(3x 25 mL) i slanim rastvorom (25 mL), i zatim osušen preko MgS04a rastvarač je uparen do dobijanja benzil estra u obliku bezbojnog ulja (6,83 g, 98%).

Ell- 4: Ell-3 (6,80 g, 21,2 mmol) je razblažen u dioksanu (4 mL) i rastvor sa 4N HC1 u dioksanu (30 mL, 120 mmol) je dodat. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi u toku 2 h, rastvarač je uparen i ostatak je ostavljen da stoji pod strujom azota pri čemu je postignuta spora solidifikacija. Ovaj materijal je zatim usitnjen pod površinom heksana (2x 50 mL), filtriran, osušen na vazduhu u toku 30 min a zatim ostavljen pod visokim vakuumom u toku 5

dana do dobijanja hidrohloridne soli u obliku bele čvrste supstance (4,86 g, 89 96).

Ell- 5 u izmešani, ledom ohladjeni rastvor sa Ell-4 (4,85 g, 18,8 mmol) u tetrahidrofuranu (75 mL) je dodat diizopropiletilamin (8,20 mL, 47,0 mmol) a zatim je u kapima dodat fenilhloroformat (2,60 mL, 20,7 mmol) pod atmosferom argona. Formiran je gusti precipitat koji, nakon jakog mešanja, postaje fina suspenzija. Nakon 4,5 h, smeša je koncentrovana do trećine početne zapremine i zatim je ekstrahovana sa etil acetatom (50 mL) i isprana sa vodom (40 mL), 0,5 M KHS04(40 mL), 5 96 NaHC03(2x 40 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organska faza je osušena preko MgS04i uparena do dobijanja fenil karbamata u obliku bezbojnog ulja koje sporo kristališe u toku narednih dana (6,63 g, kvantitativno).

Ell- 6: u rastvor sa Ell-5 (1,00 g, 2,93 mmol) u DMSO (2,00 mL) koji sadrži acetonitril (1,00 mL) je dodat diizopropiletilamin (817 uL) a zatim amin Ell-2 (477 mg, 3,52 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u toku 2 h i zatim je zagrevana do 70 °C u toku 45 min. Rastvor je zatim razblažen sa etil acetatom (30 mL), ispran je sa 5 96 vod. K2CO3(4x 50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organska faza je osušena preko MgS04, rastvarač je uparen i ostatak prečišćen uz pomoć brze hromatografije preko TLC vrste silika gela korišćenjem 10: 1 do 5:1 (gradijent) smeše heksan / etil acetat kao eluenta što dovodi do nastanka uree Ell-6 u obliku bele kristalne čvrste supstance (798 mg, 79 96).

Ell- 7: u rastvor sa ureom Ell-6 (780 mg, 2,25 mmol) u apsolutnom etanolu (10 mL) pod atmosferom argona je dodat 10 % Pd-C katalizator (100 mg). Sistem je prečišćen tri puta sa H2i zatim jako mešan pod balonom sa vodonikom. Nakon 3 h, katalizator je filtriran preko Celita i filtrat je uparen. Ostatak je zatim rastvoren u metanolu (ca. 10 mL), filtriran kroz Milipor Mileksov 0,45 ?M filter i zatim uparen do dobijanja kiseline Ell-7 u obliku bele čvrste supstance (539 mg, 93 96).

15b: Bok-dipeptid 15a (1,23 g, 2,11 mmol) je razblažen u suvom dioksanu (2 mL) i rastvor sa 4N HC1 u dioksanu (10 mL, 40 mmol) je dodat, pri čemu se dobija svetio žuti rastvor koji je

ostavljen da stoji na sobnoj temperaturi. Nakon 3 h, rastvarač je uparen pri čemu se dobija gumenasta žuta čvrsta supstanca koja je usitnjena pod slojem dihlorometana (ca. 10 mL) i uparena do jarko žutog praha koji je osušen pod visokim vakuumom (1,23 g, kvantitativno).

Ell- 8: urea Ell-7 (239 mg, 0,932 mmol) i TBTU (3,06 mg, 0,979 mmol) su rastvoreni/suspendovaniu anhidrovanom dihlorometanu (4mL) i diizopropiletilamin (157 uL, 0,900 mmol) je dodat. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota dok rastvor ne postane skoro homogen (ca. 5 min). Rastvor dipeptida 15b (494 mg, 0,888 mmol) u dihlorometanu koji sadrži diizopropiletilamin (314 ^L, 1,8 mmol) je zatim dodat i dobijeni rastvor je ostavljen da se meša u toku 3 h nakon što je reakcija zaalkalisana dodavanjem dodatne količine diizopropiletilamina (ca. 0,15 mL). Rastvarač je uparen dajući žuti sirup koji je ekstrahovan sa etil acetatom (2x 50 mL) i ispran je sa zasićenim rastvorom NaHCC>3 (2x 50 mL) i slanim rastvorom (30 mL). Kombinovani ekstrakti su zatim osušeni preko MgSC>4 i upareni do dobijanja tripeptida Ell-8 u obliku vlaknaste bele čvrste supstance (650 mg, 97%).

Ell- 9: estar Ell-8 (645 mg, 0,894 mmol) je razblažen u tetrahidrofuranu (16 mL) koji sadrži metanol (8 mL) i 1,0 N vodeni rastvor natrijum hidroksida (900 mL, 0,900 mmol) je zatim dodat u kapima uz jako mešanje na sobnoj temperaturi. Nakon 5 h, rastvor je uparen (uz održavanje temperature kupatila ispod 30 °C) i zatim ostavljen pod visokim vakuumom preko noći do dobijanja karboksilatne soli u obliku bledo žute čvrste supstance (725 mg, kvantitativno) koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja (ca. 10 % dikiseline je prisutno).

Ell- 10: u izmešanu, ledom ohladjenu suspenziju natrijumove soli Ell-9 (0,894 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) pod atmosferom argona je dodat trietilamin (240 jaL, 1,72 mmol) a zatim je u kapima dodat izobutil hloroformat (174 |iL, 1,34 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na 0 °C u toku 3 h i rastvor sa diazometanom u etil etru (0,7 M, 10 mL, 7 mmol) je zatim dodat. Žuta suspenzija je mešana u toku 30 min na 0 °C i zatim je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Nakon 1 h, azot je barbotiran kroz suspenziju u toku 15 min. za uklanjanje viška diazometana i rastvarač je uparen. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom

(20 mL) i ispran je sa 5 % vodenim rastvorom NaHC03(20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organska faza je osušena preko MgS04i uparena do dobijanja diazoketona Ell-10 u obliku žute čvrste supstance (626 mg, 96 %).

Ell- 11: u izmešani, ledom ohladjeni rastvor sa diazoketonom Ell-10 (620 mg, 0,850 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL) je dodat, u kapima, 48 % vodeni rastvor bromovodonične kiseline (144 uL, 0,850 mmol) i reakcija je mešana u toku 30 min. Rastvor je zatim razblažen i ekstrahovan sa etil acetatom (30 mL) i ispran je sa 5 % vodenim rastvorom NaHCOs(2x 20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organska faza je osušena preko MgS04i uparena do dobijanja bromoketona Ell-11 u obliku žute čvrste supstance (611 mg, 92 %).

Ell- 12: u rastvor sa bromoketonom Ell-11 (75 mg, 0,10 mmol) u izopropanolu (0,30 mL) je dodat diizopropiletilamin (87 uL, 0,50 mmol) i TV-acetiltiourea (18 mg, 0,15 mmol). Izmešana smeša je zagrevana do 70 °C u toku 1 h i zatim ekstrahovana sa etil acetatom (30 mL) i isprana sa 5 % vodenim rastvorom NaHC03(20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organska faza je osušena preko MgS04i uparena do dobijanja sirovog aminotiazola u obliku žute čvrste supstance koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.

Jedinjenje 2015: estar Ell-12 (0,10 mmol) je razblažen u tetrahidrofuranu (0,80 mL) i metanol (0,25 mL) i 1,0 N litijum hidroksid (800\ xL,0,80 mmol) su dodati. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi u toku 2,5, organski rastvarači su upareni i dobijeni vodeni ostatak je razblažen sa DMSO (1 mL) i sirćetnom kiselinom (0,7 mL) i rastvor je ubrizgan u Combi-Prep HPLC kolonu. Čiste frakcije su udružene i liofilizovane do dobijanja finalnog inhibitora 2015 u obliku amorfne žute čvrste supstance (trifluoracetatna so, 16 mg, 20 %): ^-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 0,87 i 0,96 (dva s, 9H), 1,19 i 1,28 (dvas, 3H), 1,24-1,90 (m, 9H), 2,03 (app q4, Japp = 8,8 Hz, IH), 2,20 (s, 3H), 2,2-2,28 (m, IH), 2,60 (s, 3H), 3,83-4,05 (m, 2H), 3,93 (s, 3H), 4,19-4,23 (m, 2H), 4,36-4,46 (m, 3H), 4,81 (app t, Japp = 7 Hz, 0,2H), 5,03-5,07 (dva seta preklapajućih dd, IH), 5,16-5,24 (dva seta preklapajućih dd, IH), 5,38 i 5,42 (dva br, s, IH), 5,67-5,83 (m, IH), 5,95-6,04 (m, 2H), 7,26 (d, J = 9,4 Hz, 0,8H), 7,40 (d, J = 9,4 Hz, 0,2H), 7,43-7,55 (br, m, IH), 7,89 (d, J = 9,2 Hz, 0,2 H), 8,04 (d, J = 9,2 Hz, 0,8H), 8,08 (br, s, IH), 8,54 (s, 0,8H), 8,87 (s, 0,2H), 12,37 i 12,42 (dvabr, s, IH).

Primer 12

Sinteza jedinjenja 1038

Korišćenjem reakcionog niza koji je sličan onom koji je opisan u poseldnjih šest koraka u Primeru 11, ali korišćenjem karbamata 4c (Primer 15) umesto uree 11-7, sledeći karbamat bromoketon E12-1 je dobijen:

Konverzija bromoketona do finalnog jedinjenja je izvedena na sledeći način:

U rastvor sa bromoketonom E12-1 (60 mg, 0,076 mmol) u izopropanolu (3 mL) je dodata izopropiltiourea 8g (11,7 mg, 0,99 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C u toku 45 minuta. HPLC analiza je pokazala potpuno iskrišćenje polaznog materijala. Reakciona smeša je ohladjena do sobne temperature, razblažena sa THF (3 mL) i 1,0 N rastvor natrijum hidroksida (1 mL) je dodat. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi u toku 12 sati, reakciona smeša je koncentrovana do suva. Ostatak je razblažen u DMSO (2 mL) i rastvor je ubrizgan u Combi-Prep HPLC kolonu. Ciste frakcije su udružene i liofilizovane do dobijanja 9 mg jedinjenja 1038 u obliku amorfne žute čvrste supstance (trifluoracetatna so) (15 % prinosa).

<*>H-NMR 400 MHz, DMSO-d6): 5 12,35 (br s, IH), 8,56 i 8,76 (dva s, IH), 7,72-8,27 (m, 2H),

7,23-7,68 (m, 2H), 6,68-6,95 (d, J = 9Hz, 0,8H), 6,18-6,34 (d, J = 9Hz, 0,2H), 5,61-5,81 (m, IH), 5,52 (širok s, IH), 5,13-5,27 (m, IH), 4,96-5,13 (m, IH), 4,31-4,50 (m, 3H), 3,74-4,17 (m, 8H), 2,53-2,60 (m, 3H), 2,20-2,36 (m, IH), 1,95-2,09 (m, IH), 1,70-1,91 (m, 2H), 1,95-2,09 (m, IH), 1,37-1,61, (m, 6H), 1,18-1,32 (m, 9H), 0,87 i 0,96 (dva s, 9H).

PRIMER 13

Sinteza jedinjenja 2013

Ureinska kiselina E13- 1: urea-P3 kiselina je dobijena iz terc-butilamina i Ell-5 uz pomoć istog reakcionog niza kako je opisano u Primeru 11.

Tri<p>eptid estar E13- 2: urea-P3 kiselina je kuplovana sa P1-P2 fragmentom 15b kako je opisano u Primeru 11.

Jedinjenje 2013: finalni inhibitor je dobijen iz E13-2 uz pomoć niza koraka koji su identični sa onima koji su opisani u Primeru 11. Proizvod finalne saponifikacije je izolovan u obliku amorfnog žutog praha (trifluoracetatna so, 21 mg, 28 %).<!>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 0,91 i 0,96 (dva s, 9H), 1,15 i 1,21 (dva s, 9H), 1,26 (dd, J = 5,0, 9,4 Hz, 0.8H), 1,53 (dd, J = 5,0, 7,8 Hz, 0,8H), 1,58 (dd, J = 4,3,9,2 Hz, 0,2H), 2,03 (app q4, Japp = 8,8 Hz, IH), 2,20 (s, 3H), 2,2-2,28 (m, IH), 2,58 (s, 3H), 3,80-4,04 (m, 2H), 3,93 i 3,96 (dva s, 3H), 4,18-4,20 (m, 2H), 4,35-4,45 (m, 3H), 4,83 (app t, Japp = 7 Hz, 0,2H), 5,03-5,07 (dva seta preklapajućih dd, IH), 5,17-5,24 (dva seta preklapajućih dd, IH), 5,36 i 5,42 (dva br, s, IH), 5,66-5,80 (m, IH), 5,86-6,04 (br, m, 2H), 7,25 (d, J = 9,2 Hz, 0,8H), 7,40 (d, J = 9,2 Hz, 0,2H), 7,4-7,50 (br, m, IH), 7,88 (d, J = 9,0 Hz, 0,2 H), 8,03-8,15 (br, m, 1,8H), 8,54 (s, 0,8H), 8,89 (s, 0,2H), 12,38 i 12,42 (dva br. s,

IH).

Primer 14

Sinteza jedinjenja 2018

E14- 2:urea-P3 kiselina E14-2 je dobijena iz Ell-5 i amina E14-1 uz pomoć istog reakcionog niza kako je opisano u Primeru 11.

E14- 3: urea-P3 kiselina je kuplovana sa P1-P2 fragmentom 15b kako je opisano u

Primeru 11.

Finalni inhibitor je dobijen iz E14-3 uz pomoć reakcionog niza koji je identičan onom koji je opisan u Primeru 11. Proizvod finalne saponifikacije je izolovan u obliku amorfnog žutog praha (trifluoracetatna so, 10 mg, 21 %).

<!>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 0,74-0,97 (m, 21H), 1,25 (dd, J=5, 9Hz, IH), 1,47 (dd, J=8,

4Hz, 0,2H), 1,53 (dd, J-8, 5Hz, 0,8H), 2,02 (app q<4>, Jpribi = 8Hz, 0,8H), 2,19 (s, 3H), 2,2-2,27 (m, IH), 2,59 (s, 3H), 3,31-3,43 (m, IH), 3,93 i 3,95 (dva s, 3H), 3,98-4,02<*>(m), 4,22-4,26<*>(m), 4,35-4,39<*>(m), 4,82 (app t, Jpribi = 7Hz, 0,2H), 5,01-5,06 (dva seta preklapajućih dd, IH), 5,16-5,23 (dva seta preklapajućih dd, IH), 5,35 i 5,41 (dva br, s, IH), 5,67-5,79 (m, IH), 5,87 (d, J = 9,4Hz, 0,8H), 5,91 (d, J = 9,4Hz, 0,2H), 6,07 (d, J=8,6Hz, 0,8H), 6,14 (d, J = 9,2Hz, 0,2H), 7,24-7,5 (m, 2H), 7,89 (d, J = 9,2Hz, 0,2H), 8,04-8,12 (m, 1,8H), 8,54 (s, 0.8H), 8,87 (s, 0,2H), 12,37 i 12,41 (dva s, IH).<*>zamagljen sa HOD signalom.

Primer 15

Permutaciona biblioteka:

Oba bromo ketona 18a i 18b su korišćena u permutacionoj biblioteci za paralnu sintezu jedinjenja kako je prikazano u sledećoj shemi:

Korak 1: Formiranje aminotiazolovog prstena

Serija 8-mL bočica je rasporedjeno u reakcionom bloku ACT496 sintetizera (iz Advanced Chemtech). U svaku bočicu je dodat tio-derivat (8) od interesa (0,0688 mmola), bromoketon (0,0625 mmola) i izopropanol (500 uL). Zatvorene bočice su zagrevane na 70 °C u toku 1 h. Rastvarač je zatim uparen korišćenjem vakuumske centrifuge (SpeedVac) i uporedo uparen sa 1,2-dihloroetanom. Sirovi proizvodi su osušeni pod visokim vakuumom preko noći.

Korak 2: Uklanjanje Bok protektivne<g>rupe

Sve bočice su tretirane sa 30 % TFA u DCM (500 uL) u toku 1 h. Sve bočice su prebačene u vakuum centrifugu za uklanjanje isparljivih materijala.

Korak 3: Kuplovanje

U svaku bočicu je dodat odgovarajući karbamat (21c do 21g) i karbamatna kiselina (4b do 4k)

(0,0875 mmola), HATU (0,0875 mmola, 33,27 mg) i DIPEA (0,313 mmola, 55 uL) u 500 ±iL DMSO i reakciona smeša je ostavljena da se odvija preko noći.

Korak 4: Saponifikacija i prečišćavanje

Sve reakcije su razblažene sa 400 uL DMSO i 200 uLTHF. Rastvor sa 500 uL 2N vod. LiOH (1 mmol) je dodat u svaku bočicu i ostavljen da se odvija preko noći nakon kog vremena je smeša neutralisana dodavanjem 400\ xLAcOH. Sva jedinjenja su prečišćena uz pomoć semi-prep reverzno fazne HPLC (Symmetry column 5 cm x 19 cm, CH3CN / H2O 0,06 % TFA gradijent).

Primer 16

Sledeća jedinjenja su dobijena korišćenjem reakcionog niza i metodologija koje su opisane u gornjim primerima:

Jedinjenja iz Tabele 1

Jedinjenje 1006:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85:15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 6 12,31 (br s, IH), 8,56 (s, IH), 8,14 (br s, IH), 8,06 (d, J = 9,0 Hz, IH), 7,47 (br s, IH), 7,34 (d, J = 9,0 Hz, IH), 7,11 (d, J = 8,4 Hz, IH), 5,79-5,66 (m, IH), 5,51-5,41 (m, IH), 5,24-5,15 (m, IH), 5,11-5,03 (m, IH), 4,53-4,40 (m, 2H), 4,40-4,32 (m, IH), 4,07 (d, J = 8,6 Hz, IH), 4,04-3,92 (m, IH), 3,96 (s, 3H), 2,61 (s, 3H), 2,58-2,50 (m, IH), 2,40 (br s, 2H), 2,31-2,17 (m, IH), 2,12-1,95 (m, 3H), 1,91-1,76 (m, 2H), 1,71-1,39 (m, 3H), 1,31-1,23 (m, IH), 1,04 (m, 9H), 0,97 (s, 9H), M.S. (elektrosprejna): 817,4 (M-H)"819,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):99%

Jedinjenje 1030:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85:15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 8 8,56 (s, IH), 8,14 (d, J = 9,0 Hz, IH), 8,00-7,78 (m, IH), 7,73-7,56 (m, IH), 7,52 (s, IH), 7,37 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,97 (d, J = 8,6 Hz, IH), 5,78-5,65 (m, IH), 5,52-5,45 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,13-5,03 (m, IH), 4,58-4,50 (m, IH), 4,50-4,42 (m, IH), 4,39-4,31 (m, IH), 4,10-4,03 (m, IH), 4,01

(s, 3H), 3,99-3,70 (m, pod H20,2H), 2,34-2,23 (m, IH), 2,07-1,98 (ra, IH), 1,70-1,37 (m, 9H), 1,34-1,23 (m, 2H), 1,26 (br d, J = 6,4Hz, 6H), 0,96 (s, 9H).

M.S. (elektrosprejna): 839 (M-H)"841,3 (M-H+2)"841,3 (M+H)<+>843,3 (MH+2)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 98 %

Jedinjenje 1015:

<l>HNMR (400 MHz, DMSO-d6): ca. 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 12,32 (br s, IH), 8,57 (s, IH), 8,15-8,03 (m, IH), 8,04 (d, J - 9,2 Hz, IH), 7,47-7,37 (m, IH), 7,29 (d, J = 8,8 Hz, IH), 7,03 (d, J = 8,6 Hz, IH), 5,78-5,65 (m, IH), 5,45-5,38 (m, IH), 5,23-5,14 (m, IH), 5,09-5,02 (m, IH), 4,724,62 (m, IH), 4,46-4,32 (m, 2H), 4,16-4,08 (m, IH), 4,03-3,90 (m, IH), 3,94 (s, 3H), 2,60 (s, 3H), 2,30-2,19 (m, IH), 2,20 (s, 3H), 2,06-1,97 (m, IH), 1,81-1,21 (m, 1 IH), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 775,4 (M-H)'777,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN:H20):99%

Jedinjenje 1024:

l¥LNMR (400 MHz, DMSO-de): ca. 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 8 12,31 (s, IH), 8,55 (s, IH), 8,20-8,05 (m, IH), 8,03 (d, J = 9,2 Hz, IH), 7,54-7,40 (m, IH), 7,38 (d, J = 8,6

Hz, IH), 7,33 (d, J - 9,4 Hz, IH), 5,79-5,66 (m, IH), 5,49-5,41 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,09-5,02 (m, IH), 4,77-3,85 (m, 8H), 3,95 (s, 3H), 2,60 (s, 3H), 2,58-2,47 (m, IH), 2,43-2,36 (m, 2H), 2,31-2,20 (m, IH), 2,07-1,98 (m, IH), 1,57-1,51 (m, IH), 1,31-1,23 (m, IH), 1,04 (s, 9H), 1,00 (s, 9H).

M.S. (elektrosprejna): 809,4 (M-H)'811,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN:H20):98%

Jedinjenje 1001:

<!>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca. 7 :3 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 8,01 (br s, IH), 7,92 (s, IH), 7,90-7,77 (m, 2H), 7,70 (br s, IH), 7,31 (d, J = 9,4 Hz, IH), 6,72 (d, J = 8,8 Hz, IH), 6,28-6,10 (m, IH), 5,53-5,33 (m, IH), 5,03-5,92 (m, IH), 4,85-4,71 (m, IH), 4,49-4,40 (m, IH),4,19-4,02 (m, 3H), 4,03 (s, 3H), 3,93 (s, 3H), 2,82-2,45 (m, 3H), 2,36-2,23 (m, IH), 1,90-1,79 (m, IH), 1,34 (m, 9H), 1,37-1,14 (m, 2H), 1,03 (s, 9H), 0,98 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 835,4 (M-H)"837,3 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):99%

Jedinjenje 1011:

<l>ENMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 8,53 (s, IH), 7,92 (d, J = 8,8 Hz, IH), 7,69 (d, J = 7,4 Hz, IH), 7,46 (s, IH), 7,39 (s, IH), 7,25 (d, J = 9,0 Hz, IH), 6,99 (d, J = 8,8 Hz, IH), 5,79-5,64 (m, IH), 5,44-5,33 (m, IH), 5,23-5,13 (m, IH), 5,10-5,00 (m, IH), 4,81-4,70 (m, IH), 4,45-4,27 (m, 2H),4,19-4,11 (m, IH), 4,04-3,91 (m, IH), 3,87-3,72 (m, IH), 2,75 (s, 6H), 2,66 (s, 3H), 2,56-2,42 (m, IH), 2,29-2,17 (m, IH), 2,07-1,97 (m, IH), 1,80-1,21 (m, 10H), 1,25 (br d, J = 6,5 Hz, 6H),0,97 (s,9H). M.S. (elektrosprejna): 788,4 (M-H)"790,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):95%

Jedinjenje 1023:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85:15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 512,36 (s, IH), 8,55 (s, IH), 8,09-7,97 (m, 2H), 7,42 (br s, IH), 7,29 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,99 (d, J = 8,6 Hz, IH), 5,79-5,66 (m, IH), 5,45-5,38 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,09-5,02 (m, IH), 4,75-4,66 (m, IH), 4,47-4,31 (m, 2H), 4,164,09 (m, IH), 4,03-3,91 (m, IH), 3,94 (s, 3H), 3,29-3,18 (m, 2H), 2,60-2,43 (m, IH), 2,30-2,18 (m, IH), 2,20 (s, 3H), 2,07-1,97 (m, IH), 1,81-1,33 (m, 9H), 1,31-1,23 (m, IH), 1,18 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 789,3 (M-H)"791,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN:H20):98%

Jedinjenje 1033:

<l>ENMR (400 MHz, DMSO-dg): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis<g>lavnog rotamera: 512,36 (s, IH), 8,53 (s, IH), 8,05 (s, IH), 7,98 (d, J = 9,0 Hz, IH), 7,46 (s, IH), 7,20 (d, J = 9,0 Hz, IH), 7,04 (d, J = 8,4 Hz, IH), 5,80-5,65 (m, IH), 5,44-5,37 (m, IH), 5,24-5,14 (m, IH), 5,10-5,01 (m, IH), 4,85-4,76 (m, IH), 4,45-4,34 (m, 2H), 4,21-4,10 (m, IH), 4,04-3,89 (m, IH), 2,62 (s, 3H), 2,58-2,47 (m, IH), 2,28-2,18 (m, IH), 2,20 (s, 3H), 2,06-1,96 (m, IH), 1,81-1,38 (m, 9H), 1,39 (s, 9H), 1,29-1,22 (m, IH), 0,99 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 817,4 (M-H)"819,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):98%

Jedinjenje 1037:

<:>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 12,29 (s, IH), 8,54 (s, IH), 8,19-8,01 (m, IH), 8,04 (d, J = 9,0 Hz, IH), 7,44 (s, IH), 7,25 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,79 (d, J = 8,4 Hz, IH), 5,78-5,65 (m, IH), 5,47-5,37 (m, IH), 5,22-5,13 (m, IH), 5,08-5,02 (m, IH), 4,454,33 (m, 2H), 4,13-4,06 (m, IH), 3,98-3,90 (m, IH),3,92 (s, 3H), 2,59 (s, 3H), 2,56-2,46 (m, IH), 2,41-2,36 (m, 2H), 2,28-2,18 (m, IH), 2,05-1,96 (m, IH), 1,93-1,43 (m, 9H), 1,33 (br s, 3H), 1,29-1,22 (m, IH), 1,03 (s, 9H), 0,97 (s, 9H).

M.S. (elektrosprejna): 845,5 (M-H)'847,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):96%

Jedinjenje 1051:

<X>U NMR (400 MHz, DMSO-dg): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 12,35 (s, IH), 8,54 (s, IH), 8,03 (s, IH), 7,92 (d, J = 9,2 Hz, IH), 7,47 (s, IH), 7,38 (t, J = 8,3 Hz, IH), 6,98 (d, J = 8,7 Hz, IH), 5,78-5,65 (m, IH), 5,47-5,38 (m, IH), 5,23-5,13 (m, IH), 5,09-5,00 (m, IH), 4,69-4,60 (m, IH), 4,48-4,30 (m, 2H), 4,14-3,90 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 2,60-2,39 (m, 3H), 2,30-2,20 (m, IH), 2,06-1,97 (m, IH), 1,80-1,37 (m, 8H), 1,37-1,20 (m, 2H), 1,12 (t, J = 7,5 Hz, 3H),0,96(s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 793,3 (M-H)- 795,3 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):98%

Jedinjenje 1053:

<[>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 8 12,06 (br s, IH), 8,55 (s, IH), 8,12 (d, J = 9,2 Hz, IH), 8,05 (s, IH), 7,46 (m, IH), 7,39 (d, J = 9,3 Hz, IH), 6,98 (d, J = 8,6 Hz, IH), 5,78-5,66 (m, IH), 5,44-5,38 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,09-5,02

(m, IH), 4,65-4,52 (m, IH), 4,49-4,32 (m, 2H), 4,12-4,05 (m, IH), 4,01 (s, 3H), 3,99-3,91 (m, IH), 3,78 (s, 3H), 2,60-2,45 (m, IH), 2,31-2,20 (m, IH), 2,07-1,97 (m, IH), 1,81-1,37 (m, 8H), 1,37-1,22 (m, 2H),0,96 (s, 9H).

M.S. (elektrosprejna): 811,1 (M-H)"813,2 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 i %TFA;CH3CN:H20):96%

Jedinjenje 1027:

<1>HNMR(400MHz, DMSO-d6): 5 8,58 (s, IH), 8,06 (d, J= 9Hz, IH), 7,91, 7,89 (2s, IH), 7,57 (brs, IH), 7,40,7,38 (2s, IH), 7,25 (d, J=9Hz, IH), 5,57-5,68 (m, IH), 5,55 (brs, IH), 5,20 (d, J=16Hz, IH), 5,06 (d, J= 11Hz, IH)), 4,69 (brs, IH), 4,47 (t, J= 9Hz, IH), 4,30-4,35 (m, IH), 4,08 (d, J= 9Hz, 2H), 4,05-3,96 (m, 2H), 3,97 (s,3H), 3,66-3,40 (m, 8H), 2,56 (s, 3H), 2,35-2,25 (m, IH), 2,08-1,98 (m, IH), 1,60-1,50 (m, 2H), 1,28,1,26 (2s, 6H), 0,97 (s, 9H).

EIMS: (M+H) = 779,3, (M-H) = 777,3

Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 99 %.

Jedinjenje 1041:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-dg): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavno<g>rotamera: 5 12,33 (br s, IH), 8,55 (s, IH), 8,15-8,02 (m, IH), 8,04 (d, J = 9,0 Hz, IH), 7,49-7,38 (m, IH), 7,29 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,99 (d, J = 8,8 Hz, IH), 5,78-5,66 (m, IH), 5,46-5,39 (m, IH), 5,23-5,14 (m, IH), 5,09-5,02 (m, IH), 4,71-4,62 (m, IH), 4,47-4,32 (m, 2H), 4,15-4,09 (m, IH), 4,03-3,92 (m, IH), 3,94 (s, 3H), 2,60 (s, 3H), 2,58-2,40 (m, 2H), 2,30-2,20 (m, IH),2,07-1,97 (m, IH), 1,80-1,21 (m, 11H), 1,13 (t, J - 7,5 Hz, 3H), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 789,4 (M-H)'791,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN:H20):98 %.

Jedinjenje 1026:

<X>HNMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 12,30 (s, IH), 8,56 (s, IH), 8,09 (br s, IH), 8,02 (d, J=9,0 Hz, IH), 7,44 (br s, IH), 7,32 (d, J - 9,2 Hz, IH), 7,24 (d, J = 8,6 Hz, IH), 5,78-5,66 (m, IH), 5,47-5,39 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,10-5,03 (m, IH), 4,804,72 (m, IH), 4,49-4,41 (m, IH), 4,37-4,29 (m, IH), 4,15-4,08 (m, IH), 4,05-3,95 (m, IH), 3,95 (s, 3H), 3,80-3,51 (m, pod H20, 4H), 2,60 (s, 3H), 2,57-2,48 (m, IH), 2,41-2,37 (m, 2H), 2,31-2,21 (m, IH), 2,07-1,98 (m, IH), 1,95-1,83 (m, IH), 1,62-1,46 (m, 2H), 1,31-1,22 (m, IH), 1,04 (s, 9H), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 833,3 (M-H)"835,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN : H20): 99 %

Jedinjenje 1022:

<J>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85:15 smeša rotamera, opis<g>lavnog rotamera: 812,32 (s, IH), 8,55 (s, IH), 8,08-7,97 (ra, 2H), 7,42 (br s, IH), 7,29 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,99 (d, J = 8,8 Hz, IH), 5,79-5,66 (m, IH), 5,44-5,37 (m, IH), 5,24-5,15 (m, IH), 5,09-5,02 (m, IH), 4,75-4,67 (m, IH), 4,434,32 (m, 2H), 4,16-3,95 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,29-3,18 (m, 2H), 2,59-2,48 (m, IH), 2,34-2,20 (m,3H), 2,06-1,98 (m, IH), 1,81-1,16 (m, 19H), 1,18 (t, J = 7,2Hz,3H),0,97 (s,9H). M.S. (elektrosprejna): 857,4 (M-H)"859,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):98%

Jedinjenje 1046:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 8 11,91 (br s, IH), 8,56 (s, IH), 8,08 (br s, IH), 8,04 (d, J = 9,2 Hz, IH), 7,43 (s, IH), 7,30 (d, J = 9,0 Hz, IH), 6,99 (d, J = 8,8 Hz, IH), 5,78-5,66 (m, IH), 5,46-5,38 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,09-5,03 (m, IH), 5,03-4,93 (m, IH), 4,71-4,62 (m, IH), 4,47-4,32 (m, 2H), 4,15-4,08 (m, IH),4,05-3,95 (m, IH), 3,94 (s, 3H), 2,59 (s, 3H), 2,58-2,47 (m, IH), 2,31-2,20 (m, IH), 2,07-1,97 (m, IH), 1,81-1,22 (m, 10H), 1,29 (d, J = 6,3 Hz, 6H), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 819,4 (M-H)"821,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):99%

Jedinjenje 1036:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 12,35 (s, IH), 8,53 (s, IH), 8,12-7,98 (m, 2H), 7,41 (s, IH), 7,24 (d, J - 9,2 Hz, IH), 6,79 (d, J = 8,4 Hz, IH), 5,78-5,64 (m, IH), 5,44-5,34 (m, IH), 5,22-5,13 (m, IH), 5,08-5,01 (m, IH), 4,46-4,33 (m, 2H), 4,15-4,06 (m, IH), 4,04-3,95 (m, IH), 3,92 (s, 3H), 2,59 (s, 3H), 2,57-2,47 (m, IH), 2,28-2,17 (m, IH), 2,19 (s, 3H), 2,06-1,96 (m, IH), 1,94-1,77 (m, 2H), 1,72-1,43 (m, 7H), 1,34 (s, 3H), 1,29-1,21 (m, IH), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 789,4 (M-H)"791,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 95 %

Jedinjenje 1056:

<!>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85:15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 812,35 (s, IH), 8,55 (s, IH), 8,17 (d, J = 9,2 Hz, IH), 8,05 (s, IH), 7,47 (s, IH), 7,35 (d, J - 9,4 Hz, IH), 6,98 (d, J = 8,6 Hz, IH), 5,78-5,66 (m, IH), 5,46-5,40 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,09-5,03 (m, IH), 4,63-4,56 (m, IH), 4,49-4,34 (m, 2H), 4,13-3,90 (m, pod H20,2H), 4,01 (s, 3H), 2,60-2,51

(m, IH), 2,49-2,43 (m, 2H), 2,32-2,21 (m, IH), 2,07-1,98 (m, IH), 1,81-1,37 (m, 9H), 1,36-1,16 (m, 3H), 0,96 (s, 9H), 0,93 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

M.S. (elektrosprejna): 869,1 (M-H)- 871,1 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):98%

Jedinjenje 1181:

<l>ENMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 8,57 (s, IH), 8,2-7,96 (m, IH), 7,88-7,70 (m, 2H), 7,62-7,35 (m, 2H), 7,02 (d, J = 7,2 Hz, IH), 5,78-5,65 (m, IH), 5,65-5,55 (m, IH), 5,19 (d, J = 17,2 Hz, IH), 5,065 (d, J = 11,9 Hz, IH), 4,63-4,52 (m, IH), 4,50-4,40 (m, IH), 4,13-4,08 (m, 2H), 4,06 (s, 3H), 3,98 (bd, J = 10 Hz, IH), 3,92-3,80 (m, IH), 2,62-2,53 (m, IH), 2,38-2,27 (m, IH), 2,02 (dd, J = 8,6,8,6Hz, IH), 1,69-1,52 (m, 6H), 1,51-1,41 (m, 3H), 1,40-1,31 (m, IH), 1,27 (d, J = 6,5 Hz, 6H),0,97 (s, 9H).

MS (elektrosprejna): (M+H)<+>; 763,4 i (M-H)" 761,3.

Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN: H20): 99 %.

Jedinjenja iz Tabele 2

Jedinjenje 2010:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 8 :2 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 8,56 (s, IH), 8,41 (br s, IH), 8,04 (d, J = 9,2 Hz, IH), 7,55 (s, IH), 7,29 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,09-5,99 (m, IH), 5,97-5,88 (m, IH), 5,78-5,65 (m, IH), 5,54-5,48 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,09-5,02 (m, IH), 4,474,33 (m, 2H), 4,27-4,20 (m, IH), 4,19-3,85 (m, pod H20,2H), 3,94 (s, 3H), 3,13 (q, J = 7,5 Hz, 2H),2,60 (s,3H), 2,55-2,42 (m, IH), 2,34-2,23 (m, IH), 2,09-2,00 (m, IH), 1,80-1,37 (m, 7H), 1,40 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,31-1,05 (m,3H), 0,96 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 745,4 (M-H)"747,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 96 %

Jedinjenje 2012:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 8 : 2 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 12,29 (s, IH), 8,54 (s, IH), 8,08 (br s, IH), 8,04 (d, J = 9,0 Hz, IH), 7,44 (br s, IH), 7,25 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,08-5,90 (m, 2H), 5,80-5,65 (m, IH), 5,45-5,37 (m, IH), 5,22-5,13 (m, IH), 5,09-5,02 (m, IH), 4,48-4,34 (m, 2H), 4,26-4,19 (m, IH), 4,04-3,90 (m, IH), 3,93 (s, 3H), 2,60 (s, 3H), 2,68-2,57 (m, IH), 2,42-2,35 (m, 2H), 2,28-2,18 (m, IH), 2,08-1,98 (m, IH), 1,81-1,21 (m, 10H), 1,19 (s, 3H), 1,04 (s, 9H), 0,96 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 844,5 (M-H)"846,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 99 %

Jedinjenje 2002:

<J>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 8:2 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 8 8,57 (s, IH), 8,28-7,77 (m, 3H), 7,66-7,30 (m, 2H), 6,09-5,98 (m, IH), 5,96-5,86 (m, IH), 5,78-5,66 (m, IH), 5,61-5,48 (m, IH), 5,26-5,15 (m, IH), 5,11-5,03 (m, IH), 4,53-4,39 (m, 2H), 4,25-4,15 (m, IH), 4,05-3,93 (m, IH), 3,97 (s, 3H), 3,92-3,50 (m, pod H20,2H), 2,55 (s, 3H), 2,59-2,42 (m, IH), 2,36-2,26 (m, IH), 2,18-1,99 (m, IH), 1,80-1,36 (m, 7H), 1,27 (d, J = 6,3 Hz, 6H), 1,31-1,05 (m, 3H),0,95 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 774,4 (M-H)- 776,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):94%

Jedinjenje 2007:

<l>U NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 8 : 2 smeša rotamera, opis glavno<g>rotamera: 6 12,38 (s, IH), 8,55 (s, IH), 8,09 (br s, IH), 8,06 (d, J - 9,2 Hz, IH), 7,44 (s, IH), 7,28 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,12-6,01 (m, IH), 5,98-5,89 (m, IH), 5,78-5,66 (m, IH), 5,46-5,38 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,10-5,01 (m, IH), 4,47-4,36 (m, 2H), 4,284,20 (m, IH), 4,04-3,92 (m, IH), 3,94 (s, 3H), 3,90-3,50 (m, pod H20, IH), 2,60 (s, 3H), 2,55-2,47 (m, IH), 2,31-2,22 (m, IH), 2,20 (s, 3H), 2,08-1,99 (m, IH), 1,81-1,38 (m,7H), 1,31-1,09 (m,3H),0,96 (s,9H).

M.S. (elektrosprejna): 774,4 (M-H)"776,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):94%

Jedinjenje 2008:

<2>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 8 :2 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 8 12,34 (br s, IH), 8,55 (s, IH), 8,17-8,05 (m, IH), 8,07 (d, J = 9,2 Hz, IH), 7,50-7,42 (m, IH), 7,28 (d, J = 9,2 Hz, IH), 6,11-6,01 (m, IH), 5,98-5,88 (m, IH), 5,78-5,66 (m, IH), 5,46-5,38 (m, IH), 5,24-5,14 (m, IH), 5,10-5,01 (m, IH), 4,48-4,36 (m, 2H),4,28-4,20 (m, IH), 4,07-3,95 (m, IH), 3,94 (s, 3H),3,80-3,65 (m, pod H20, IH), 2,60 (s, 3H), 2,60-2,50 (m, IH), 2,31-2,20 (m, 2H), 2,08-1,98 (m, IH), 1,82-1,37 (m, 15H), 1,31-1,07 (m, 5H), 0,96 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 842,5 (M-H)- 844,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN:H20):97% Jedinjenja iz Tabele 3

Jedinjenje 3002:

<l>UNMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85:15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 8 12,33

(s, IH), 8,55 (s, IH), 7,98 (s, IH), 7,75 (d, J = 8,6 Hz, IH), 7,40 (s, IH), 7,19 (d, J = 8,8 Hz, IH), 6,99 (d, J = 8,6 Hz, IH), 6,26 (s, 2H), 5,79-5,66 (m, IH), 5,46-5,38 (m, IH), 5,23-5,14 (m, IH), 5,10-5,01 (m, IH), 4,76-4,67 (m, IH), 4,47-4,30 (m, 2H), 4,11 (d, J = 8,8 Hz, IH), 4,00-3,91 (m, IH), 2,41-2,36 (m, 2H), 2,29-2,19 (m, IH), 2,08-1,97 (m, IH), 1,82-1,22 (m, 11H), 1,03 (s, 9H), 0,96 (s, 9H).

M.S. (elektrosprejna): 831,5 (M-H)"833,6 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):99%

Jedinjenje 3007:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 8,56 (s, IH), 8,04 (d, J = 8,8 Hz, IH), 7,94-7,64 (m, 3H), 7,49-7,37 (m, IH), 7,09 (d, J = 8,4 Hz, IH), 7,00 (d, J = 8,6 Hz, IH), 5,80-5,66 (m, IH), 5,58-5,46 (m, IH), 5,24-5,14 (m, IH), 5,11-5,01 (m, IH), 4,85-4,70 (m, 2H), 4,69-4,58 (m, IH), 4,49-4,81 (m, 2H), 4,09 (d, J = 8,6 Hz, IH), 4,00-3,88 (m, IH), 3,75-3,30 (m, pod H20,2H), 2,35-2,22 (m, IH), 2,07-1,97 (m, IH), 1,81-1,20 (m, 11H), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 731,3 (M-H)"733,3 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 94 %

Jedinjenje 3010:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-dg): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 8 12,37 (s, IH), 8,56 (s, IH), 8,13-7,96 (m, 2H), 7,43 (s, IH), 7,05 (d, J = 8,8 Hz, IH), 7,00 (d, J = 8,6 Hz, IH), 5,80-5,64 (m, IH), 5,50-5,37 (m, IH), 5,24-5,11 (m, IH), 5,104,98 (m, IH), 4,83-4,63 (m, 3H), 4,47-4,30 (m, 2H), 4,19-4,05 (m, IH), 4,04-3,86 (m, IH), 3,75-3,30 (m, pod H20,2H), 2,34-2,19 (m, 3H), 2,07-1,97 (m, IH), 1,82-1,13 (m, 20H), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 841,3 (M-H)- 843,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):99%

Jedinjenje 3001:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 8 8,55 (s, IH), 7,95-7,76 (m, IH), 7,72 (d, J = 8,8 Hz, IH), 7,49 (s, IH), 7,41 (s, IH), 7,18 (d, J = 8,6 Hz, IH), 6,98 (d, J = 8,6 Hz, IH), 6,25 (s, 2H), 5,80-5,65 (m, IH), 5,52-5,46 (m, IH), 5,24-5,14 (m, IH), 5,10-5,01 (m, IH), 4,75-4,66 (m, IH), 4,484,39 (m, IH), 4,374,27 (m, IH), 4,17-4,07 (m, IH), 4,01-3,92 (m, IH), 3,90-3,75 (m, IH), 2,62-2,44 (m, IH), 2,31-2,20 (m, IH), 2,09-1,97 (m, IH), 1,81-1,20 (m, 10H), 1,25 (br d, J = 6,4 Hz, 6H), 0,96 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 775,5 (M-H)"777,6 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 99 %

Jedinjenje 3004:

Smeša rotamera (približ. 85:15), :H NMR glavnog rotamera (400 MHz, DMSO-d6): 5 8,57 (s, IH); 8,10-8,13 (m, IH); 8,08 (d, J = 8,8 Hz, IH) 7,86-7,88 (m, 2H); 7,53 (s, IH); 7,14 (d, J = 8,5 Hz, IH); 7,00 (d, J = 8,5, IH); 5,68 - 5,78 (m, IH); 5,57 (s, IH); 5,19 (d, J = 17,0 Hz, IH); 5.07 (d, J = 11,9 Hz, IH); 4,78-4,82 (m , 2H); 4,58-4,63 (m, IH); 4,35-4,47 (m, 2H); 3,87-4.08 (m, 8H); 3,58- 3,62 (m, 2H); 2,53 - 2,56 (m, IH); 2,27 - 2,33 (m, IH); 1,99 - 2,04 (m, IH); 1,43 -1,65 (m, 4H); 1,28-1,30 (m, IH); 1,26 (d, J = 6,2 Hz, 6H); 0,96 (s, 9H).

M.S. (elektrosprejna): 775,4 (M+H)<+>, 773,4 (M-H)-.

Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN : H20): 98.8 %

Jedinjenja iz Tabele 4

Jedinjenje 4005:

<l>UNMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 12,36 (br s, IH), 8,57 (s, IH), 8,60-8,20 (m, IH), 7,90 (s, IH), 7,68-7,45 (m, 2H), 6,99 (d, J = 8,3 Hz, IH), 5,78-5,66 (m, IH), 5,66-5,83 (m, IH), 5,80-5,50 (m, IH), 5,23-5,14 (m, IH), 5,10-5,01 (m, IH), 4,62-4,36 (m, 3H), 4,11-3,92 (m, IH), 2,88 (s, 6H), 2,62-2,51 (m, IH), 2,47 (s, 3H), 2,44-2,38 (m, 2H), 2,36-2,19 (m, IH), 2,08-1,96 (m, IH), 1,81-1,20 (m, 10H), 1,03 (s, 9H), 0,96 (s,

9H).

M.S. (elektrosprejna): 844,4 (M-H)- 846,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):99%

Jedinjenje 4007:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 8,59 (s, IH), 8,27-8,12 (m, IH), 8,06-7,97 (m, IH), 7,89 (s, IH), 7,73 (s, IH), 7,64 (s, IH), 6,99 (d, J = 8,5 Hz, IH), 5,79-5,64 (m, 2H), 5,24-5,14 (m, IH), 5,10-5,01 (m, IH), 4,54-4,38 (m, 2H), 4,23-4,08 (m, IH), 4,02 (d, J = 8,4 Hz, IH), 4,00-3,91 (m, IH), 3,70-3,30 (m, pod H20, IH), 2,90 (s, 6H), 2,64-2,52 (m, IH), 2,46 (s, 3H),2,38-2,26 (m, IH), 2,07-1,96 (m, IH), 1,81-1,20 (m, 10H), 1,24 (br d, J = 6,5 Hz, 6H), 0,95 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 788,4 (M-H)"790,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):98%

Jedinjenje 4014:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 8,61 (s, IH), 8,33-7,60 (m, 4H), 7,33 (s, IH), 6,95 (d, J = 8,4 Hz, IH), 5,79-5,67 (m, 2H), 5,24-5,16 (m,

IH), 5,10-5,03 (m, IH), 4,57-4,32 (m, 2H), 4,20-3,88 (m, 3H), 3,99 (s, 3H), 3,93 (s, 3H), 3,65-3,30 (m, pod H20, IH), 2,65-2,55 (m, IH), 2,40-2,28 (m, IH), 2,08-1,98 (m, IH), 1,81-1,21 (m, 10H), 1,25 (br d, J = 6,5 Hz, 6H), 0,95 (s, 9H).

M.S. (elektrosprejna): 791,3 (M-H)- 793,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):86%

Jedinjenje 4001:

<!>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85:15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 812,40 (s, IH), 8,58 (s, IH), 8,50-8,20 (m, IH), 7,95 (br s, IH), 7,72-7,44 (m, 2H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, IH), 5,80-5,67 (m, IH), 5,67-5,51 (m, IH), 5,24-5,14 (m, IH), 5,12-5,02 (m, IH), 4,63-4,45 (m, 2H), 4,45-4,36 (m, IH), 4,14-3,93 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 2,64-2,46 (m, IH), 2,45-2,39 (m, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,39-2,28 (m, IH), 2,08-1,98 (m, IH), 1,82-1,23 (m, 10H), 1,04 (s, 9H), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 831,4 (M-H)"833,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):99%

Jedinjenje 4013:

<l>HNMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera; 8 12,36 (s, IH), 8,59 (s, IH), 8,36-7,96 (m, IH), 7,70-7,42 (m, 2H), 7,32 (s, IH), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, IH), 5,79-5,66 (m, IH), 5,63-5,50 (m, IH), 5,23-5,15 (m, IH), 5,10-5,02 (m, IH), 4,58-4,45 (m, 2H), 4,38-4,28 (m, IH), 4,12-3,90 (m, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 2,62-2,52 (m, IH), 2,37-2,21 (m, 3H), 2,08-1,98 (m, IH), 1,77-1,14 (m, 19H), 0,97 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 859,4 (M-H)'861,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):92% Jedinjenja iz Tabele 5

Jedinjenje 5001:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis davnog rotamera: 8 8,60 (s, IH), 8,34-8,19 (m, IH), 8,04-7,98 (m, IH), 7,97 (s, IH), 7,91-7,81 (m, IH), 7,73 (s, IH), 5,99-5,91 (m, IH), 5,90-5,83 (m, IH), 5,78-5,66 (m, 2H), 5,25-5,15 (m, IH), 5,11-5,04 (m, IH), 4,58-4,46 (m, 2H), 4,15-4,07 (m, IH), 4,00 (s, 3H), 4,03-3,94 (m, IH), 3,60-3,15 (m, pod H20, IH), 3,05 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 2,63-2,55 (m, IH), 2,42-2,30 (m, IH), 2,35 (m, 3H), 2,08-1,99 (m, IH), 1,80-1,22 (m, 9H), 1,13-1,03 (m, IH), 0,94 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 746,3 (M-H)'748,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN : H20): 99 %

Jedinjenje 5002:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 8:2 smeša rotamera, opis glavno<g>rotamera: 8 12,44 (s, IH), 8,59 (s, IH), 8,52-8,25 (m, IH), 7,97 (s, IH),7,70-7,46 (m, 2H), 6,03-5,96 (m, IH), 5,90 (d, J = 9,2 Hz, IH), 5,79-5,66 (m, IH), 5,64-5,54 (m, IH), 5,24-5,16 (m, IH), 5,11-5,04 (m, IH), 4,55-4,43 (m, 2H), 4,19-4,12 (m, IH), 4,05-3,94 (m, IH), 3,99 (s, 3H), 3,80-3,30 (m, pod H20, IH), 2,68-2,54 (m, IH), 2,39-2,28 (m, IH), 2,35 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,08-1,99 (m, IH), 1,80-1,21 (m, 8H), 1,17-1,07 (m, IH), 1,06-0,95 (m, IH), 0,95 (s, 9H). M.S. (elektrosprejna): 774,4 (M-H)"776,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):99%

Jedinjenje 5004:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de): ca, 85:15 smeša rotamera, opis glavno<g>rotamera: 8 8,60 (s, IH), 8,31-8,16 (m, IH), 8,11-8,02 (m, IH), 7,97 (s, IH), 7,89-7,78 (m, IH), 7,75-7,67 (m, IH), 6,00-5,92 (m, IH), 5,90-5,83 (m, IH), 5,80-5,65 (m, 2H), 5,26-5,16 (m, IH), 5,11-5,04 (m, IH), 4,58-4,46 (m, 2H), 4,11 (d,J = 9,2 Hz, IH), 4,05-3,94 (m, IH), 4,00 (s, 3H), 3,65-3,15 (m, pod H20,3H), 2,69-2,54 (m, IH), 2,42-2,30 (m, IH), 2,35 (s, 3H), 2,08-1,99 (m, IH), 1,80-1,21 (m, 8H), 1,24 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,14-1,02 (m, IH), 1,000,87 (m, IH), 0,94 (s, 9H).

M.S. (elektrosprejna): 760,4 (M-H)'762,4 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA;CH3CN:H20):96%

Jedinjenja iz Tabele 6

Jedinjenje 6016:

<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): ca, 85 :15 smeša rotamera, opis glavnog rotamera: 5 12,28 (s, 2H); 8,56 (s, IH); 8,04 (s, IH) 7,79 (s, IH); 7,46 (s, IH); 6,96 - 7,00 (m, IH); 5,68 - 5,75 (m, IH); 5,40 (s, br, IH); 5,19 (d, J = 17,0 Hz, IH); 5,06 (d, J = 10,1 Hz, IH); 4,71 - 4,76 (m, 2H); 4,43 (t, J = 8,3, IH); 4,32- 4,34 (m, IH); 4,13 (d, J = 8,3 Hz, IH); 3,96- 4,03 (m, IH); 3,77 (s, 3H); 2,67 (s, 3H); 2,40 (d, J = 4,1 Hz, 3H); 2,24 - 2,36 (m, 3H); 2,03 (q, J = 8,6 Hz, IH); 1,17 - 1,75 (m, 10H); 1,04 (s, 9H); 0,98 (s, 9H).

M.S. (elektrosprejna): 845,4 (M-H)"847,5 (M+H)<+>. Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 %TFA; CH3CN : H20): 96.7 %

Sinteza jedinjenja sa formulom I u kojoj Rc je NHSC«2RS:

PRIMER 17A

Sinteza jedinjenja 7001:

HATU (20 mg, 0,05 mmol) je dodat u rastvor jedinjenja 17A1 Oedinjenje 3004, Tabela 3; 20 mg, 0,03 mmol) i DIPEA (0,03 mL, 0,16 mmol) u DMF (1,5 mL) na ST. Rastvor je mešan u toku 1 h što je praćeno dodavanjem DMAP (16 mg, 0,13 mmol) i ciklopropansulfonamida (7,0 mg, 0,06 mmol). Nakon što je dodavanje završeno, smeša je ostavljena da se meša u toku 15 min i DBU (0,02 mL, 0,14 mmol) je dodat u kapima. Dobijeni rastvor je mešan u toku 16 h na 23 °C, zatim je razblažen sa DMSO do 2,5 mL ukupne zapremine i prečišćen uz pomoć prep HPLC (H2O/CH3CN + 0,06 % TFA). Frakcije koje sadrže čist proizvod su kombinovane i rastvarači su uklonjeni liofilizacijom do dobijanja 17A2 u obliku žute čvrste supstance (Jedinjenje 7001, Tabela 7,5,4 mg, 23 96).

Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN : H20): 98,9 % (220 nm). MS: 878,8 (M+H)+, 876,4 (M-H)". JH NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 10,47 (s, IH); 8,82 (s, IH); 8,06 (s, br, IH); 7,52 (s, br, IH); 7,15 (m, IH); 7,03 (d, J = 8,0 Hz, IH); 5,58 (m, 2H); 5,20 (d, J = 17,0 Hz, IH); 5,09 (d, J = 11,5, IH); 4,79 (m, 2H); 4,64 (m, IH); 4,36 - 4,52 (m, 2H); 4,06 (d, J - 8,0 Hz, IH); 4,00 - 4,03 (m, IH); 2,88 - 2,96 (m, IH); 2,54 - 2,57 (m, IH); 2,10- 2,20 (m, 2H); 1,32 - 1,71 (m, 11H); 1,24 (dd, J = 6,3,1,2 Hz, 6H); 1,00 -1,08 (m, 8 H); 0,97 (s, 9H).

PRIMER 17B

Sinteza jedinjenja 7002:

Korišćenjem postupka iz Primera 17A ali polazeći od jedinjenja 17B1 (Jedinjenje 6016, Tabela 6), dobijeno je jedinjenje 17B2 Oedinjenje 7002, Tabela 7) u obliku svetio žute čvrste supstance (5,4 mg, 16 % prinosa).

Reverzno Fazna HPLC Homogenost (0,06 % TFA; CH3CN ; H20): 93,1 % (220 nm).

MS: 950,4 (M+H)<+>, 948,4 (M-H)".<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 12,26 (s, IH); 10,48 (s, IH); 8,83 (s, IH); 8,02 (s, IH); 7,79 (s, IH); 7,45 (s, IH); 6,94 - 7,00 (m, IH); 5,56 - 5,65 (m,

IH); 5,40 (s, IH); 5,19 (d, J = 16,9, IH); 5,07 (d, J = 11,4, IH); 4,77 (s, IH); 4,33 - 4,42 (m, 2H); 4,11 (d, J = 8,0 Hz, IH); 3,97 (d, J = 9,6, IH); 3,76 (s, 3H); 3,76 (s, 3H); 2,88 - 2,96 (m, IH); 2,66 (s, 3H); 2,53 - 2,60 (m, IH); 2,31 - 2,33 (m, IH); 2,11 - 2,19 (m, 2H); 1,33 - 1,70 (m, 12H); 1,22 (s, br, IH); 1,05-1,08 (m, 2H); 1,02 (s, 9H); 0,98 (s, 9H).

Primer 17C

Sinteza jedinjenja 7003:

Jedinjenje 17C1 Oedinjenje 1027, Tabela 1; 35 mg, 0,045 mmol), N,N-dimeitlsulfamid 17C2 (22,3 mg, 0,180 mmol) DIPEA (39,3 ul, 0,225 mmol) i DMAP (22 mg, 0,180 mmol) su rastvoreni u DMF (2,5 mL) i u smešu je dodat DBU (28,5 ul, 0,203 mmol). Reakciona smeša je mešana u toku 5 min, zatim je dodat HATU (18,8 mg, 0,05 mmol). Mešanje je nastavljeno u toku 12 h i ostatak je filtriran kroz Mileksov filter i prečišćen uz pomoć Prep HPLC (Combiscreen ODSAQ, 20 x 50mm). Čiste frakcije su udružene i liofilizovane do dobijanja 14 mg (prinos, 35 %) jedinjenja 17C3 (Jedinjenje 7003, Tabela 7) u obliku žute čvrste supstance.

<*>HNMR (400MHz, DMSO-d6): 5 10,23 (s, IH), 8,74 (s, IH), 8,07 (d, J - 8Hz, IH), 7,59 (s, IH), 7,45-7,30 (m, IH), 7,27 (d, J = 8Hz, IH), 5,53-5,49 (m, 2H), 5,20 (d, J = 17Hz, IH), 5,10 (d, J = 12Hz, IH), 4,70 (bs, IH), 4,50-4,30 (m, 3H), 4,15-4,05 (m, 2H), 3,97 (s, 3H), 2,76 (s, 6H), 2,55 (s,3H), 2,38-2,32 (m,lH), 2,23-2,08 (m,2H), 1,97-1,81 (m, IH), 1,75-1,45 (m,4H), 1,32-1,14 (m,9H), 1,04-0,86 (m, 1 IH).

EIMS: (M+H) = 885,4, (M-H) = 883,4

Primer 18

Analiza NS3-NS4A proteaza

Enzimska analiza korišćena za procenu ovog jedinjenja je opisana u WO 00/09543 i WO 00/59929.

Primer 19

Analiza HCVRNKReplikacije na bazi ćelija

Kultura ćelija

Huh7 ćelije koje održavaju stabilan subgenomski HCVreplikon su ustanovljene kao što je ranije opisano (Lohman i sar., 1999. Science 285:110 -113) i obeležene kao S22.3 ćetijska linija. S22.3 ćelije su održavane u Dulbecco's Modified Earle Medijumu (DMEM) obogaćenom sa 10 % FBS i 1 mg/mL neomicina (Standardni Medijum). Tokom analize, DMEM medijum koji je obogaćen sa 10 % FBS, koji sadrži 0,5 % DMSO i bez neomicina je korišćen (Analitički Medijum). 16 sati pre dodavanja jedinjenja, S22.3 ćelije su tripsinizovane i razblažene do 50 000 ćelija/mL u Standardnom Medijumu. 200 |o.L (10 000 ćelija) je podeljeno u svaki od 96 bunarčića mikrotitarske ploče. Ploče su zatim inkubirane na 37 °C sa 5 % C02do sledećeg dana.

Reac<p>nsi i Materijali:

Pobijanje Test Jedinjenja

10 j?L test jedinjenja (u 100 % DMSO) je dodato u 2 mL Analitičkog Medijuma za finalnu DMSO koncentraciju od 0,5 % i rastvor je soniciran u toku 15 min i filtriran kroz 0,22 uM Milipor Filtersku Jedinicu. 900 uL je prebačeno u red A Polipropilenske Titarske ploče sa dubokim bunarčićima. Redovi B do H sadrže 400 uL alikvota Analitičkog Medijuma (koji sadrži 0,5 % DMSO), i korišćeni su za dobijanje serijskih razblaženja (1/2) dobijenih prebacivanjem 400\ iLiz reda u red (red H nije uključivao jedinjenje).

Primena test jedinjenja kod ćelija

Medijum za kulturu ćelija je aspiriran iz mikrotitarske ploče sa 96 bunarčića koja sadrži S22.3 ćelije. 175 uL analitičkog medijuma sa odgovarajućim razblaženjem test jedinjenja je prebačeno iz svakog bunarčića ploče sa jedinjenjem do odgovarajućeg bunarčića na ploči sa kulturom ćelija (red H je korišćen kao "kontrola bez inhibicije"). Ploče sa ćelijskom kulturom su inkubirane na 37 °C sa 5 % C02u toku 72 h.

Ekstrakcija ukupne ćeliiske RNK

Nakon 72 h inkubacionog perioda, ukupna ćelijska RNK je ekstrahovana iz S22.3 ćelija iz ploče sa 96 bunarčića korišćenjem RNeasv 96 kita(Qiagen®, RNeasv Handbook. 1999.). Ukratko, analitički medijum je potpuno uklonjen iz ćelija i 100\ xLRLT pufera (Qiagen®) koji sadrži 143 mM p-merkaptoetanolaje dodat u svaki bunarčić ploče sa 96 bunarčića, sa kulturom ćelija. Mikroploča je blago mešana u toku 20 sec. 100 u.L 70 % etanola je zatim dodato u svaki bunarčić mikroploče i izmešano je pipetiranjem. Lizat je uklonjen i primenjen u bunarčiće RNeasv 96 (OJagen®) ploče koja je stavljena na vrh Qiagen® Square bunarčića Bloka. RNeasy 96 ploče su zatvorene trakom i Square bunarčića Blok sa RNeasv 96 pločama je ubačen u nosač i stavljen u rotorske držače u 4K15C centrifugi. Uzorci su centrifugirani na 6000 rpm (~5600 x g) u toku 4 min na sobnoj temperaturi. Trake su uklonjene sa ploče i 0,8 mL Pufera RW1 (OJagen® RNeasv 96 kit) je dodato u svaki bunarčić RNeasv 96 ploče. RNeasv 96 ploča je zatvorena sa novim parčetom trake i centrifugirana na 6000 rpm u toku 4 min na sobnoj temperaturi. RNeasv 96 ploča je stavljena na vrh drugog čistog Square bunarčića Bloka, traka je uklonjena i 0,8 mL Pufera RPE (OJagen® RNeasv 96 kit) je dodato u svaki bunarčić RNeasv 96 ploče. RNeasv 96 ploča je zatvorena sa novim parčetom trake i centrifugirana na 6000 rpm u toku 4 min na sobnoj temperaturi. Traka je ukonjena i dodatnih 0,8 mL Pufera RPE (Qiagen® RNeasv 96 kit) je dodato u svaki bunarčić RNeasv 96 ploče. RNeasv 96 ploča je zatvorena sa novim parčetom trake i centrifugirana na 6000 rpm u toku 10 min na sobnoj temperaturi. Traka je uklonjena, RNeasv 96 ploča je stavljena na vrh mreže koja sadrži kolekcione mikrotube od 1,2-mL. RNK je eluirana dodavanjem 50 uL vode bez RNaze u svaki bunarčić, ploča je zatvorena sa novim parčetom trake i inkubirana u toku 1 min na sobnoj temperaturi. Ploča je zatim centrifugirana na 6000 rpm u toku 4 min na sobnoj temperaturi. Elucioni korak je ponovljen sa drugom zapreminom od 50 uL vode bez RNaze. Mikrotube sa ukupnom ćelijskom RNK su smeštene na -70 °C.

Kvantifikaciia ukupne ćelijske RNK

RNK je kvantifikovana u STORM® system (Molecular Dvnamics®) korišćenjem RiboGreen® RNK Kita za Kvantifikaciju (Molecular Probes®). Ukratko, RiboGreen reagens je razblažen 200-puta u TE (10 mM Tris-HCl pH =7,5,1mM EDTA). Generalno, 50 uL reagensa je razblaženo u 10 mLTE. Standardna Kriva za ribozomalnu RNK je razblažena u TE do 2 ug/mL i prethodno odredjene količine (100, 50,40,20,10, 5,2 i 0 uL) ribozomalnog RNK rastvora su zatim prebačene u novu ploču sa 96 bunarčića (COSTAR # 3997) i zapremina je dopunjena do 100 uL sa TE. Generalno, kolona 1 ploče sa 96 bunarčića je korišćena za standardnu krivu a drugi bunarčići su korišćeni za RNK uzorke koji su kvantifikovani. 10 uL svakog RNK uzorka koji je kvantifikovan, je prebačeno u odgovarajući bunarčić ploče sa 96 bunarčića i 90 (J.LTE je dodato. Jedna zapremina (100 uL) razblaženog RiboGreen reagensa je dodata u svaki od bunarčića ploče sa 96 bunarčića i inkubirana u toku 2 do 5 minuta na sobnoj temperaturi, zaštićena od svetlosti (10 uL RNK uzorka u 200 uL finalne zapremine daje 20x razblaženje). Intenzitet fluorescencije svakog bunarčića je meren na STORM® sistemu (Molecular Dvnamics®). Standardna kriva je napravljena na osnovu poznatih količina ribozomalne RNK i dobijenih intenziteta fluorescencije. RNK koncentracija u eksperimentalnim uzorcima je odredjena iz standardne krive i korigovana za razblaženje od 20x.

Realnovremenski R. T.- PCR

Realno vremenski R.T.-PCR je izveden na ABI Prism 7700 Sistemu za detekciju sekvenci korišćenjem TaqMan EZ R.T.-PCR Kita iz (Perkin-Elmer Applied Biosvstems®). R.T.-PCRje optimizovan za kvantifikaciju 5' IRES HCV RNK korišćenjem Tagmanove (Taqman) tehnologije (Roche Molecular Diagnostics Svstems) koja je slična tehnici koja je prethodno opisana (Martell i sar., 1999. J. Clin. Microbiol. 37:327 - 332). Sistem koristi 5'-3' nukleolitičku aktivnost AmpliTaq DNK polimeraze. Ukratko, metod koristi dvostruko obeleženu fluorgenu hibridizacionu probu (PUTR Probe) koja se specifično ubacuje u šablon izmedju PCR prajmera (prajmeri 8125 i 7028). 5' kraj probe sadrži fluorescentni reporter (6-karboksi-fluorescein [FAM]) i 3' kraj sadrži fluorescentni kvenčer (6-karboksitetrametilrodamin [TAMRA]). FAM reporterski emisioni spektar je suprimiran sakvenčerom na intaktnoj hibridizacionoj probi. Degradacija nukleaze hibridizacione probe oslobadja reporter, što dovodi do povećanja emisije fluorescencije. ABI Prism 7700 detektor sekvenci meri povećanje emisije fluorescencije kontinualno tokom PCR amplifikacije tako daje amplifikovani proizvod direktno proporcionalan signalu. Amplifikacioni grafikon je analiziran na početku reakcije u tački koja predstavlja logaritamsku fazu akumulacije proizvoda. Tačka koja predstavlja definisani detekcioni prag povećava fluorescentni signal koji je udružen sa eksponencijalnim rastom PCR proizvoda koji je detektor sekvenci definisan kao prag ciklusa( Cj).C^vrednosti su obrnuto proporcionalne količini ubačene HCV RNK; tako da pod identičnim PCR uslovima, veća polazna koncentracija HCV RNK, snižavaC- p.Standardna kriva je napravljena automatski sa ABI Prism 7700 detekcionim sistemom pomoću plotovanja CVprema svakom standardnom razblaženju sa poznatom HCV RNK koncentracijom.

Referentni uzorci za standardnu krivu su uključeni u svaku R.T.-PCR ploču. HCV Replikon RNK je sintetisan (sa T7 transkripcijom)in vitro,prečišćen je i kvantifikovan sa merenjem OD260- Imajući u vidu da 1ugove RNK = 2,15 x IO<11>RNK kopija, razblaženja su napravljena u cilju da imaju 10<8>,10<7>, IO6, IO5, IO4, IO3 ili IO<2>genomskih RNK kopija / 5 uL. Ukupna ćelijska Huh-7 RNK je takodje uključena sa svakim razblaženjem (50 ng / 5 \ xh). 5 uL svakog referentnog standarda (HCV Replikon + Huh-7 RNK) je kombinovano sa 45 uL reagujuće smeše i korišćeno u realno-vremenskoj R.T.-PCR reakciji.

Realno-vremenska R.T.-PCR reakcija je podešena za eksperimentalne uzorke koji su prečišćeni na pločama za RNeasv sa 96 bunarčića pomoću kombinovanja 5 u.L svakog uzorka ukupne ćelijske RNK sa 45 uL reagujuće smeše.

Beleška: ovi prajmeri amplifikuju region od 256-nt prisutnih u okviru 5<*>netranslatovanog regiona HCV.

Nešablonske Kontrole ( NŠK) : Na svakoj ploči, 4 bunarčića je korišćeno kao "NŠK". Za ove kontrole, 5 |j.L vode je dodato u bunarčić umesto RNK.

Uslovi Termalnih Ciklusa:

50 °C 2 min

60 °C 30 min

95 °C 5 min

95 °C 15 sec 1 „ 0 .,,

60 °C lmin Jf Za 2 ciklusa

90 °C 15 sec<1>„<tn>M1

60°C lminJf

Nakon završetka R.T.-PCR reakcije analiza podataka zahteva nameštanje praga fluorescentnog signala za PCR ploče i standardna kriva je konstruisana nanošenjemCjvrednosti prema broju RNK kopija koje su korišćene u svakoj od referentnih reakcija. DobijeneCrvrednostiza analizu uzoraka su korišćene za interpoalciju broja RNK kopija na osnovu standardne krive.

Na kraju, broj RNK kopija je normalizovan (na osnovu RiboGreen RNK kvantifikacije ukupne RNK koja je ekstrahovana iz bunarčića sa kulturom ćelija) i izražen kao genomski ekvivalenti/ u.g ukupne RNK [g.e./ug].

Broj RNK kopija [g.e./ug] iz svakog bunarčića ploča sa kulturom ćelija je mera količine replikujuće HCV RNK u prisustvu različitih koncentracija inhibitora. % inhibicije je izračunat pomoću sledeće jednačine:

100 - [( g. e./ ug inh)/( g. e./ ug cti) x 100].

Fitovanje nelinearne krive sa Hilovim (Hill) modelom je primenjeno na podatke inhibicije-koncentracije, i 50 % efikasne koncentracije (EC50) je obračunato korišćenjem SAS softvera (Statistical Software Svstem; SAS Institute, Inc. Cary, N.C.).

Kada su jedinjenja ovog pronalaska procenjena u prethodnim enzimskim i analizama na bazi ćelija, ustanovljeno je da su jedinjenja visoko aktivna.

Primer 20

Analiza specifičnosti

Analiza specifičnosti je korišćena za procenjivanje selektivnosti ovih jedinjenja koja su opisana u WO 00/09543.

Nakon procene jedinjenja u analizi specifičnsoti, ustanovljeno je da su jedinjenja sa formulom 1 selektivna tako da ne pokazuju značajnu inhibiciju (nema merljive aktivnosti pri koncentracijama do 30 uM) kod Humane Leukocitne Elastaze i Katepsin B analiza.

Primer 21

Farmakokinetička svojstva

Ovaj pronalazak obuhvata jedinjenja koja pokazuju farmakokinetička svojstva kao što su detektabilni nivoi u plazmi kod pacova u 1. satu i u 2. satu nakon oralne doze od 5 mg/kg.

Još eksplicitnije, sledeća analiza odredjivanja orahe apsorbcijein vivo,je korišćena za utvrdjivanje nivoa test jedinjenja u plazmi kod pacova, nakon oralne primene:

Materijali i Metode:

1. Metod korišćen za udruživanje jedinjenja ("selekcija kaseta"):

Odabir jedinjenja koja će biti udružena u "kaseti" je zasnovan na njihovoj strukturalnoj sličnosti i fizičkohemijskim svojstvima. Metod ekstrakcije čvrste faze koji je primenljiv na sva odabrana jedinjenja je ustanovljen. Na osnovu inicijalnog testiranja gde je svako jedinjenje ubrizgano u plazmu pacova i analizirano sa HPLC ili HPLC/MS pri koncentraciji od 0,5\ M.,parametri kao što su retenciono vreme, jonska masa i moguće razdvajanje medju jedinjenjima, odredjeni sa HPLC i/ili HPLC/MS su korišćeni kao osnova za udruživanje 3 - 4 jedinjenja u jednu "kasetu".

2. Priprema oralnih prenosioca i jedinjenja:

Svaka "kaseta" sadrži 3 - 4 jedinjenja sa 5 ili 4 mg/kg za svako jedinjenje. Kasete su dobijene u obliku oralne suspenzije u 0,5 %-tnoj vodenoj metilcelulozi i 0,3 %-tnom polioksietilen (20) sorbitan monooleatu (Tween-80). Dozna zapremina je 10 mL/kg preko oralnog konzumiranja.

3. Doziranje i uzorkovanje plazme:

Mužjaci Sprague Dawley pacova su izgladnjivani preko noći u individualnim kavezima, uz snabdevanje sa vodenim rastvorom 10 %-tne dekstroze. Po dva pacova su dozirana sa svakom "kasetom". Uzorci plazme (-1 mL) su sakupljeni 1 i 2 h nakon doziranja iz 2 pacova i udruženi za ekstrakciju i analize.

4. Ekstrakcija jedinjenje i analize:

Iz svake kasete, uzorci plazme iz 1. i 2, h, plazma za šlepu probu, plazma za šlepu probu sa ubrizganim svim jedinjenjima u koncentraciji od po 0,5 |jM, su ekstrahovani uz pomoć metode ekstrakcije na čvrstoj fazi. Uzorci su analizirani sa HPLC i HPLC/MS za poredjenje. Koncentracije u plazmi su odredjivane na osnovu pojedinačne koncentracije standarda od 0,5 uM.

Rezultati

Nakon analize u prethodnom ispitivanju, za neka jedinjenja ovog pronalaska je ustanovljeno da njihova koncentracija u plazmi u 1. satu i 2. satu nakon oralne primene, dostiže nivo u krvnoj plazmi do 1,5 pM.

TABELA JEDINJENJA

U sledećim primerima, jedinjenja prema ovom pronalasku su navedena u Tabelama 1 do 7, u kojima Me označava metil, Et označava etil i tBu označava terc-butil. Jedinjenja prema ovom pronalasku obično pokazuju IC50vrednosti niže od oko 200 nM i EC50vrednosti niže od oko 300 nM.

Claims (55)

1. Patentni zahtevi su sledeći: 1. Racemat, dijastereoizomer, ili optički izomer jedinjenja sa formulom (I): u kojoj B je (CM0)alkil, (C3.7)cikloalkil, ili (Cm)alkil-(C^7)cikloalkil, a) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C1.3) alkil; i b) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono- ili di-supstituisani sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi i O-(Cm) alkil; i c) gde svaka od navedenih alkil grupa može biti mono-, di- ili tri-supstituisana sa halogenom; i d) u kojoj svaka od navedenih cikloalkil grupa je 4-, 5-, 6- ili 7-o člana koja ima opciono, jednu (za 4-, 5, 6, ili 7-o člane) ili dve (za 5-, 6- ili 7-o člane) -CH2- grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu, zamenjene sa -O- tako da je O-atom vezan za grupu X preko najmanje dva C-atoma; X je 0 ili NH; R<3>je (C2-8)alkil, (03.7)cikloalkil ili (C^)alkil-(€3.7)cikloalkil, gde navedene alkil,

   cikloalkil i alkil-cikloalkil grupe mogu biti mono-, di- ili tri-supsittuisane sa (Cm) alkil; L° je H, halogen, (Cw)alkil, -OH, -0-(CM)alkil, -NH2, -NH(Q.4)alkil ili -N((CM)alkil)2; L<1>, L<2>su svaki nezavisno halogen, cijano, (CM)alkil, -0-(CM)alkil, -S-(CM)alkil, -SO-

   (Cm)alkil, ili -SO^Cm) alkil, gde svaka od navedenih alkil grupa je opciono supstituisana sa od jedan do tri halogena atoma; i

   bilo L<1>ili L<2>(ali ne oba u isto vreme) mogu takodje biti H; ili L° i L1 ili L° i L<2>mogu biti kovalentno vezani tako da formiraju, zajedno sa dva Gatoma za koje su oni

   vezani, 5- ili 6-0člani karbociklični prsten u kome jedna ili dve -CH2- grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu mogu biti zamenjene svaka nezavisno sa -0- ili NR<a>gde Ra je H ili (C 1.4) alkil, i gde navedeni karbo- ili heterociklični prstenje opciono mono- ili di-supstituisan sa (C 1.4) alkil; R<2>jeR20, -NR2<2>COR<2>0, -NR2<2>COOR20 -NR22R<21>ili -NR<22>CONR<21>R23, gde je

   R<20>odabran od (Ci-s)alkil, (C3.7)cikloalkil i (C1.4) alkil-(C3.7)cikloalkil, gde navedeni cikloalkil i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C 1.3) alkil;

   R<21>je H ili R<20>kako je gore definisano,

   R<22>iR2<3>su nezavisno odabrani od H i metil, R<1>je etil ili vinil; R<c>je hidroksi ili NHS02R<s>gde R<s>je (Ci.6) alkil, (C3.7)cikloalkil, (d.6) alkil-

   (C3.7)cikloalkil, fenil, nafffl, piridinil, (Ci.4)alkil-fenil, (C^allđl-nafrilili (Ci.4)alkil-piridinil; od kojih je svaka opciono mono-, di- ili tri-supstituisana sa supstituentima koji su odabrani od halogen, hidroksi, cijano, (Ci4)alkil, 0-(C 1.6)alkil, -CO-NH2, -CO-NH(Ci4)alkil, -C0-N((Ci4)alkil)2, -NH2, -NH(Ci4) alkil i -N((CM)alkil)2, gde (C14) alkil i 0-(Ci_6) alkil su opciono supstituisani sa jednim do tri atoma halogena; i od kojih je svaki opciono monosupstituisan sa nitro;

   ili Rs je -N(R<N2>)R<N1>), gde R<N1>iRN<2>su nezavisno odabrani od H, (Ci.6)alkil, (C3.7>cikloalkil, (C 1.6) alkil-(C3.7) cikloalkil, aril i (Ci_6)alkil-aril; gde navedeni (C1_6)alkil, (C3.7) cikloalkil, (Ci.g) alkil- (C3.7) cikloalkil, aril i (Ci.6)alkil-aril su opciono supstituisani sa jednim ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani od halogena, (Ci_6) alkil, hidroksi, cijano, 0-(d.6) alkil, -NH2, -NHCCm)alkil, -N((CM)alkil)2, -CO-NH2, -C0-NH(Ci4)alkil, -C0-N((Ci4)alkil)2, -COOH, i -COO(C^)alkil; ili R<N2>i R<N1>su povezani, zajedno sa azotom za koji su vezani, tako da formiraju 3- do 7-o člani monociklični zasićeni ili nezasićeni heterocikl ili 9- ili lO-o člani biciklični zasićeni ili nezasićeni heterocikl, od kojih svaki opciono sadrži od jedan do tri dalja heteroatoma koji su nezavisno odabrani od N, S i O, i od kojih je svaki opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji su nezavisno odabrani od halogena, (Ci.6)alkil, hidroksi, cijano, 0-(Ci.6) alkil, -NH2, -NH(CM) alkil, -N ((C14) alkil) 2, -CO-NH2, -CO-NH(Ci.4)alkil, -CO-N((CH)alkil)2, -COOH, i -COO(Ci-6)alkil;

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov estar.
2. 2. Jedinjenje, prema zahtevu 1, u kome

   B je (Ci-i0)alkil, (C3.7) cikloalkil, ili (Ci.4)alkil-(C3.7)cikloalkil, a) gde navedeni cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C 1.3) alkil; i b) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono- ili di-supstituisani sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi i 0-(Ci-4) alkil; i c) u kome sve navedene alkil-grupe mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisane sa halogenom; i d) u kome svaka od navedenih cikloalkil grupa je 4-, 5-, 6- ili 7-o člana koja ima opciono, jednu (za 4-, 5,6, ili 7-o člane) ili dve (za 5-, 6- ili 7-o člane) -CH^ grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu, zamenjenu sa -0- tako da je O-atom vezan za grupu X preko najmanje dva C-atoma;

   X je 0 ili NH;

   R<3>je (C2-8)alkil, (C3.7) cikloalkil ili (C1.3)alkil-(C3_7)cikloalkil, gde navedene

   cikloalkil grupe mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisane sa (Ci_4) alkil;

   L° je H, -OH, -0-(CM) alkil, -NH2, -NH(CM)alkil ili -N((Ci.4) alkil)2; L<1>, L<2>su svaki nezavisno halogen, (C1.4)alkil, -0-(C14) alkil ili -S-(Ci_4)alkil (u bilo

   kom oksidovanom stanju kao što je SO ili S02); i

   bilo L<1>ili L<2>(ali ne oba u isto vreme) mogu takodje biti H; ili L° i L1 ili

   L° i L<2>mogu biti kovalentno vezani tako da formiraju, zajedno sa dva C-atoma za koje

   su oni vezani, 5- ili 6-0člani karbociklični prsten u kome jedna ili dve - CR? grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu mogu biti zamenjene svaka nezavisno sa -0- ili NR<a>gde R<a>je H ili (Ci.4) alkil, i gde navedeni karbo- ili

   heterociklični prstenje opciono mono- ili di-supstituisan sa (C 1.4) alkil;

   R<2>je R<20>, -NR<22>COR<20>, -NR<22>COOR20 -NR22R<21>i -NR<22>CONR<21>R23,

   gde

   R<20>je odabran od (Ci^) alkil, (C3.7) cikloalkil i (C1.4) alkil-(C3.7) cikloalkil, gde navedeni cikloalkil i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C1-3) alkil;

   R<21>je H ili ima jedno od značenja koje ima R<20>kako je gore definisano, R22 i R<23>su nezavisno odabrani od H i metil,

   R<1>je etil ili vinil;

   R<c>je hidroksi ili NHS02R<s>gde R<s>je (Ci.6) alkil, (C3.7)cikloalkil, (Ci.6)alkil-

   (C3.7) cikloalkil, fenil, naftil, piridinil, (Ci.4)alkil-fenil, (C1-4) alkil-naftil ili (Ci. 4) alkil-piridinil; od kojih su svi opciono mono-, di- ili tri-supstituisani sa supstituentima koji su odabrani od halogen, hidroksi, cijano, (Ci.4)alkil, 0-(Ci. 6) alkil, -CO-NH2, -CO-NH(Ci.4) alkil, -CO-N((Ci.4)alkil)2, -NH2, -NH(C14) alkil i -N ((Ci.4) alkil)2; i od kojih su svi opciono monosupstituisani sa nitro;

   ili R<s>može dalje biti odabran od: -NH(Ci.6) alkil, N((Ci.6) alkil) 2, -Het,

   ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili njegov estar.
3. 3. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome B je odabran od (C2.8)alkil, (C3.7)cikloalkil i (C 1.3)alkil-(C3.7)cikloalkil, a) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C 1.3) alkil; i b) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono- ili di-supstituisani sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi i 0-(C 1.4) alkil; i c) gde svaka od navedenih alkil grupa može biti mono-, di- ili tri-supstituisana sa fluorom ili mono-supstituisana sa hlorom ili bromom; i d) u kome u svakoj od navedenih cikloalkil grupa koje su 5-, 6- ili 7-o člane, jedna ili dve -CH^ grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu mogu biti zamenjene sa -0- tako da je O-atom vezan za grupu X preko najmanje dva C-atoma.
4. 4. Jedinjenje, prema zahtevu 3, u kome B je odabran od etil, n-propil,ćerc-butil, 2-metilpropil, 1,2-dimetilpropil, 1,2,2-trimetilpropil, 2-fluoretil, 3-fluorpropil, 3,3,3-trifluorpropil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, 1-metilciklopentil i 1-metilcikloheksil, i grupa koja je odabrana od:
5. 5. Jedinjenje, prema zahtevu 4, u kome Bje odabran od etil, .o-propil, terc-butil, ciklopentil, 1-metilciklopenril, 2-fluoretil ili 3-fluorpropil.
6. 6. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome X je 0.
7. 7. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome X je NH.
8. 8. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome R<3>je (C2-6) alkil, (C3. 7) cikloalkil ili (C1-3) alkil- (C3.7) cikloalkil, od kojih je svaki opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta koji su odabrani od (C 1.4) alkil.
9. 9. Jedinjenje, prema zahtevu 8, u kome R<3>je odabran od 1,1-dimetiletil, ciklopentil, cikloheksil i 1-metilcikloheksil.
10. 10. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome L° je odabran od H, halogena, CH3, -OH, -0CH3, -OC2H5, -0C3H7, -OCH(CH3)2, -NHCH3, -NHC2H5, -NHC3H7, -NHCH(CH3)2, -N(CH3)2, -N(CH3)C2H5, -N(CH3)C3H7 i -N(CH3)CH(CH3)2.
11. 11. Jedinjenje, prema zahtevu 10, u kome L° je odabran od H, -OH, -OCH3_ halogena i -N(CH3)2.
12. 12. Jedinjenje, prema zahtevu 11, u kome L° je odabran od H, -OH ili -OCH3.
13. 13. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome L<1>i L<2>su svaki nezavisno odabrani od: halogen, -CH3, -C2H5, -OCH3, -OC2H5, -OC3H7, -OCH(CH3)2, CF3, -SMe, -SOMe, i S02Me gde bilo koji L<1>ili L<2>može biti H.
14. 14. Jedinjenje, prema zahtevu 13, u kome bilo koji od L<1>i L<2>je -CH3, -F, -Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili -S02Me i drugi od L<1>i L2 je H.
15. 15. Jedinjenje, prema zahtevu 14, u kome L<1>je CH3, -F, -Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili -S02Me i L2je H.
16. 16. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome L° je odabran od H, -OH i -OCH3; i bilo koji od L<1>i L2 je CH3, -F, -Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili -S02Me i drugi od LML<2>jeH.
17. 17. Jedinjenje, prema zahtevu 16, u kome L° je odabran od H, -OH i -OCH3; L<1>je CH3, -F, -Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili -S02Me i L2 je H.
18. 18. Jedinjenje, prema zahtevu 17, u kome L° je odabran od H i -OCH3; L<1>je CH3, -Cl ili -Br iL<2>jeH.
19. 19. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome L° i L<1>su kovalentno vezani tako da formiraju, zajedno sa hinolin ostatkom za koji su oni vezani, prstenov sistem koji ie odabran od:

    u kojima svako Rb je nezavisno (Ci4)alkil i L2 je definisano kao u zahtevu 1.
20. 20. Jedinjenje, prema zahtevu 19, u kome L2 je H ili metil.
21. 21. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome R<2>je R<20>, -NHCOR<20>, -NHCOOR<20>, -NHR21ili -NHCONR21R23, u kojima

    R20 je odabran od (Ci-s) alkil, (C^cikloalkil, i (C1.3)alkil-(C3.7)cikloalkil, gde svaka od navedenih cikloalkil i alkil-cikloalkil grupa može biti mono-, di- ili tri-supstituisana sa (C1.3) alkil; i

    R<21>je H iliR2<0>kako je gore definisano; i

    R23jeHili metil.
22. 22. Jedinjenje, prema zahtevu 21, u kome R<2>je -NHCOR20,-NHCOOR20, ili -NHR21.
23. 23. Jedinjenje, prema zahtevu 22, u kome R<20>i R<21>su nezavisno odabrani od: metil, etil,n-propil, /propil, /?-butil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, terc-butil, 2,2-dimetilpropil, 1,1-dimetilpropil, 1,2-dimetilpropil, 1,2,2-trimetilpropil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, ciklopropilmetil, ciklobutilmetil, ciklopentilmetil, cikloheksilmetil, svaka od navedenih cikloalkil ili alkil-cikloalkil grupa opciono je mono- ili di-supstituisana sa metil ili etil.
24. 24. Jedinjenje, prema zahtevu 23, u kome R<20>i R<21>su nezavisno odabrani od metil, etil,n-propil, /propil, 2,2-dimetilpropil, ciklopentil i ciklopenitlmetil.
25. 25. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome R<1>je vinil.
26. 26. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome R<c>je hidroksi, NHSO^metil, NHSO^etil, NHSO^d-metiOetil, NHSGvpropil, NHSO^ciklopropil, NHSO^CHs-ciklopropil, NHSCvciklobutil, NHSOrciklopentil ili NHSOrfenil.
27. 27. Jedinjenje, prema zahtevu 26, u kome R<c>je hidroksi.
28. 28. Jedinjenje, prema zahtevu 26, u kome R<c>je NHSC>2-ciklopropil.
29. 29. Jedinjenje, prema jednom ili više od prethodnih zahteva, u kome R<c>je NHS02N(R<N2>)R<N1>), gde R<N>1 iRN<2>su nezavisno odabrani od H, (CH)alkil, (C3. 7) cikloalkil, (C1.3) alkil- (C3.7) cikloalkil, fenil, i (C1-3) alkil-fenil; gde navedeni (Cm) alkil, (C3.7)cikloalkil, (C1.3)alkil-(C3_7)cikloalkil, fenil i (C1.3)alkil-fenil su opciono supstituisani sa jednim, dva ili tri supstituenta koji su nezavisno odabrani od halogena, (Ci^alkil, hidroksi, cijano, 0-(C^)alkil, -NH2, -NH (Cm) alkil, -N((CM) alkil) 2, -CO-NH2, -CO-NH (Cm) alkil, -CO-N((Cm)alkil)2, -COOH, i -COO (C^ alkil; ili RN2 i R<N1>su povezani, zajedno sa azotom za koji su vezani, tako da formiraju 5 ili 6-0člani monociklični heterocikl koji može biti zasićen ili nezasićen, opciono sadrži od jedan do tri dalja heteroatoma koji su nezavisno odabrani od N, S i 0, i opciono supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta koji su nezavisno odabrani od halogena, (Ci.6)alkil, hidroksi, cijano, 0-(Ci.6)alkil, -NH2, -NH(CM)alkil, -N((CM)alkil)2, -CO-NH2, -CO-NH(Cm) alkil, -CO-N((C14) alkil)2, -COOH, i -COO (Ci.6) alkil.
30. 30. Jedinjenje, prema zahtevu 1, u kome

    B je (C2.8) alkil, (C3.7) cikloalkil ili (C1.3) alkil- (€3.7) cikloalkil, a) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (C 1.3) alkil; i b) gde navedeni alkil, cikloalkil, i alkil-cikloalkil mogu biti mono- ili di-supstituisani sa supstituentima koji su odabrani od hidroksi i 0-(C 1.4) alkil; i c) gde svaka od navedenih alkil grupa može biti mono-, di- ili tri-supstituisana sa fluorom ili mono-supstituisana sa hlorom ili bromom; i d) gde u svakoj od navedenih cikloalkil grupa koje su 5-, 6- ili 7-o člane, jedna ili dve -CH2- grupe koje nisu direktno vezane jedna za drugu mogu biti zamenjene sa -0- tako da je O-atom vezan za grupu X preko najmanje dva C-atoma;

    X je 0 ili NH;

    R<3>je (C2-6) alkil ili (C3.7) cikloalkil, od kojih su oba opciono supstituisani sa 1 do 3

    supstituenta koji su odabrani od (C14) alkil;

    L° je H, -OH, -OCH3, halogen ili -N (CH3)2;

    L<1>i L<2>su svaki nezavisno odabrani od: halogen, -CH3, -C2H5, -OCH3, -OC2H5, -OC3H7, -OCH(CH3)2, CF3, -SMe, -SOMe, i S02Me, gde bilo koji L<1>ili L<2>može biti H;

    R2 jeR2<0>, -NHCOR<20>, -NHCOOR<20>, -NHR<21>i -NHCONR21R23,

    u kojima

    R20je odabran od (Ci.8)alkil, (C^)cikloalkil, (Ci.3)alkil-(C3.7)cikloalkil,gde navedeni cikloalkil i alkil-cikloalkil mogu biti mono-, di- ili tri-supstituisani sa (Ci.3)alkil;i

    R<21>je H iliR<20>kako je gore definisano; i

    R23 je H ili metil;

    R<1>je etil ili vinil; i

    R<c>je hidroksi, NHSO^metil, NHS02-etil, NHS02-(l-metil)etil, NHSO^propil, NHS02-ciklopropil, NHS02-CH2-ciklopropil, NHS02-ciklobutil, NHS02-ciklopentil ih NHS02-fenil.
31. 31. Jedinjenje, prema zahtevu 30, u kome

    Bje odabran od: etil, n-propil,terc-butil,2-metilpropil, 1,2-dimetilpropil, 1,2,2-trimetilpropil, 2-fluoretil, 3-fluorpropil, 3,3,3-trifluorpropil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, 1-metilciklopentil i 1-metilcikloheksil, i grupa odabrana od:

    R3 je odabran od 1,1-dimetiletil, ciklopentil, cikloheksil i 1-metilcikloheksil; L° je H, -OH ili -OCH3; L<1>je CH3, -F, -Cl, -Br, -OMe, -SMe, ili -S02Me; L<2>je H;

    R<2>je -NHCOR<20>, -NHCOOR<20>ili -NHR<21>, u kojima R<20>i R<21>su nezavisno odabrani od

    metil, etil,/>propil, /propil, 2,2-dimetilpropil, ciklopentil i ciklopentilmetil;

    R<1>je vinil; i R<c>je hidroksi ili NHSOž-ciklopropil.
32. 32. Jedinjenje, prema zahtevu 31, u kome B je odabran od etil, /r-propil, terc-butil, ciklopentil, 1-metilciklopentil, 2-fluoretil i 3-fluorpropil; R3 je odabran od 1,1-dimetiletil i cikloheksil; L° je H ili -OCH3; L<1>je -CH3, -Cl, ili -Br; L<2>je H; i R<c>je hidroksi.
33. 33. Jedinjenje, prema zahtevu 1, sa formulom
34. 34. Jedinjenje, prema zahtevu 1, sa formulom
35. 35. Jedinjenje, prema zahtevu 1, sa formulom u koioi B. "VV1. W<2>i R<2>su definisani kao u donioi Tabeli
36. 36. Tedinienie,Drema zahtevu 1, sa formulom u kojoj B, L°, L<2>i R<2>su definisani kao u donjoj Tabeli
37. 37. Jedinjenje, prema zahtevu 1, sa formulom u koioi B. L°, L<2>i R<2>su definisani kao u donjoj Tabeli
38. 38. Jedinjenje, prema zahtevu 1, sa formulom u kojoj B, L°, L<1>, L<2>i R<2>su definisani kao u donjoj Tabeli
39. 39. Jedinjenje, prema zahtevu 1, sa formulom

    u koioi B. R<Q>i R<s>su definisani kao u donioi Tabeli
40. 40. Farmaceutska kompozicija koja obuhvata anti-hepatitis C viralnu efikasnu količinu jedinjenja sa formulom I, prema jednom ili više zahteva od 1 do 39, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili njegov estar, u smeši sa farmaceutski prihvatljivim medijumom nosačem ili pomoćnim agensom.
41. 41. Farmaceutska kompozicija, prema zahtevu 40, koja dalje obuhvata terapeutski efikasnu količinu najmanje jednog od drugih antiviralnih agenasa.
42. 42. Farmaceutska kompozicija, prema zahtevu 41, u kojoj navedeni antiviralni agens je ribavirin.
43. 43. Farmaceutska kompozicija, prema zahtevu 41, u kojoj navedeni antiviralni agens je odabran od drugog anti-HCV agensa, HIV inhibitora, HAV inhibitora i HBV inhibitora.
44. 44. Farmaceutska kompozicija, prema zahtevu 43, u kojoj navedeni drugi anti-HCV agens je odabran od imunomodulatornih agenasa, drugih inhibitora HCV NS3 proteaze, inhibitora HCV polimeraze i inhibitora drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu.
45. 45. Farmaceutska kompozicija, prema zahtevu 44, u kojoj navedeni imunomodulatorni agens je odabran od a-interferona i pegilovanog ct-interferona.
46. 46. Farmaceutska kompozicija, prema zahtevu 44, u kojoj navedeni inhibitor drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu je odabran od inhibitora za: helikazu, NS2/3 proteazu i unutrašnje ulazno mesto na ribozomu (IRES).
47. 47. Primena jedinjenja formule I prema jednom ili više zahteva 1 do 39, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili njegovog estra za proizvodnju medikamenta za tretman ili prevenciju hepatitis C viralne infekcije kod sisara.
48. 48. Primena jedinjenja formule I prema jednom ili više zahteva 1 do 39, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili njegovog estra u kombinaciji sa najmanje jednim od drugih antiviralnih agenasa za proizvodnju medikamenta za tretman ili prevenciju hepatitis C viralne infekcije kod sisara.
49. 49. Primena, prema zahtevu 48, u kome navedeni antiviralni agens je ribavirin.
50. 50. Primena, prema zahtevu 48, u kome navedeni drugi antiviralni agens je odabran od drugog anti-HCV agensa, HIV inhibitora, HAV inhibitora i HBV inhibitora.
51. 51. Primena, prema zahtevu 50, u kome navedeni drugi anti-HCV agens je odabran od imunomodulatomih agenasa, drugih inhibitora HCV NS3 proteaza, inhibitora HCV polimeraze i inhibitora drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu.
52. 52. Primena, prema zahtevu 51, u kome navedeni imunomodulatorni agens je odabran od a- interferona i pegilovanog a-interferona.
53. 53. Primena, prema zahtevu 51, u kome navedeni inhibitor drugih ciljeva u HCV životnom ciklusu je odabran od inhibitora za: helikazu, NS2/3 proteazu i unutrašnje ulazno mesto na ribozomu (IRES).
54. 54. Primena jedinjenja formule I prema jednom ili više zahteva 1 do 39, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili njegovog estra za proizvodnju medikamenata za tretman ili prevenciju hepatitis C viralne infekcije kod sisara.
55. 55. Predmet proizvodnje koji obuhvata pakovanje unutar koga se sadrži kompozicija efikasna za tretman HCV infekcije ili inhibiciju NS3 proteaza HCV i pakujući materijal koji obuhvata oznaku koja ukazuje da se kompozicija može koristiti za tretman infekcije izazvane sa hepatitis C virusom, i gde navedena kompozicija obuhvata jedinjenje formule (I), prema jednom ili više zahteva 1 do 39, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili njegov estar.