RS51007B - Supstituisani piridinil i pirimidinil derivati kao modulatori metabolizma i lečenje poremećaja proisteklih iz toga - Google Patents

Abstract

Kompozicija, naznačena time, što se sastoji od:(a)inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV); i (b)jedinjenja odabranog od jedinjenja formule (la) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvata i hidrata:pri čemu su:X je N ili CR8 pri čemu je R8 H ili halogen; Y je NH ili O; Z je CH ili N; ,R1 je karbo-C1-6-alkoksi, oksadiazolil ili pirimidinil gde su navedeni karbo-C1-6-alkoksi, oksadiazolil ili pirimidinil svaki opciono supstituisani sa 1 ili 2 supstituentima nezavisno odabranim od: C1-4 alkil, C1-4 alkoksi i C3-5 cikloalkil; R2 je H ili C1-4 alkil;R3 je C1-4 alkoksi, O-C2-4-alkinil ili hidroksil;R4 je odabran od: H, C1-4 alkoksi, C1-4 alkil, C2-4 alkinil i halogen;bilo da:R5 je odabran od:C1-4 acilsulfonamid, C1-4alkoksi, C1-4alkil, C1-4alkilamino, C1-4alkilsulfonil, C1-4alkiltio, cijano, heterociklil, di-C1-4-dialkilamino i silfonamid,pri čemu su navedeni C1-4alkoksi, C1-4alkil, C1-4alkilamino, C1-4alkilsulfonil, C1-4alkiltio, di-C1-4-dialkilamino i heterociklil svaki opciono supstituisani sa 1 ili 2 supstituenata nezavisno odabranih od:C2-4alkinil, C1-4alkoksi, C1-4alkilkarboksamid, C1-4alkilsulfonil, C3-5cikloalkil, C3-5cikloalkiloksi, di-C1-4-alkilkaboksamid, hidroksil i fosfonooksi,pri čemu je navedeni C1-4alkilkarboksamid opciono supstituisan sa hidroksil; iliR5 je grupa Formule (A):pri čemu su:"m", "n" i "q" svaki nezavisno 0, 1, 2 ili 3; "r"je 0, 1 ili 2; i T je 0 ili 1;R6 je H ili halogen; i R7 je H ili C1-4alkil.Prijava sadrži još 61 patentni zahtev.

Description

SUPSTITUISANI PIRIDINIL I

PIRIMIDINIL DERIVATI KAO

MODULATORI METABOLIZMA I

LEČENJE POREMEĆAJA PROISTEKLIH

IZ TOGA

Sadašnji pronalazak se odnosi na određene supstituisane piridinil i pirimidinil derivate koji su modulatori metabolizma glukoze. Prema tome, jedinjenja sadašnjeg pronalaska su korisna u lečenju sa metabolizmom povezanih poremećaja i komplikacija nastalih iz toga, kao što su, dijabetis i gojaznost.

Stanje tehnike

Dijabetis melitus je ozbiljna bolest koja utiče na preko 100 miliona ljudi širom sveta. U Sjedinjenim Američkim Državama, postoji više od 12 miliona dijabetičara, sa 600.000 novih slučajeva dijagnostikovanih svake godine.

Dijbetis melitus je dijagnostički pojam za grupu poremećaja koje karakteriše abnormalna homeostaza glukoze koja rezltira u povišenom šećeru u krvi. Postoje mnogi tipovi dijabetisa, ali dva najčešća su Tip I (takođe se o njemu govori kao o od insulina zavisnog dijabetis melitusa ili IDDM) i Tip II (takođe se o njemu govori kao od insulina nezavisni dijabetis melitus ili NIDDM).

Etiologija različitih tipova dijabetisa nije ista; pa ipak, svako sa dijabetisom ima dve zajedničke karakteristike: prekomernu proizvodnju glukoze od strane jetre i malu i nikakvu sposobnost da se izbaci glukoza iz krvi u ćelije gde postaje primarno gorivo tela.

Ljudi koji nemaju dijabetis zavise od insulina, hormona koji se pravi u pankreasu, da pomeri glukozu iz krvi u telesne ćelije. Nasuprot tome, ljudi koji imaju dijabetis ili ne proizvode insulin ili ne mogu efikasno da iskoriste insulin koji proizvode; pa prema tome, ne mogu da pomere glukozu u sopstvene ćelije. Glukoza se akumulira u krvi stvarajući stanje koje se naziva hiperglikemija, i tokom vremena, može da izazove ozbiljne zdravstvene probleme.

Dijabetis je sindrom sa međuzavisnim metabolitičkim, vaskularnim i neuropatskim komponentama. Metabolitički sindrom, se generalno karakteriše hiperglikemijom, i sadrži promene u metabolizmu ugljenih hidrata, masti i proteina izazvane odsustvom ili značajnim smanjenjem lučenjem insulina i/ili neefikasnim dejstvom insulina. Vaskularni sindrom se sastoji od abnormalnosti u krvnim sudovima koje vode do kardiovaskularnih, retinalnih i renalnih komplikacija. Abnormalnosti u perifernom i autonomnih nervnim sistemima su takođe deo dijabetičkog sindroma.

Ljudi sa IDDM, za koje se računa da ih ima 5% do 10% od svih ljudi koji imaju dijabetis, ne proizvode insulin i prema tome moraju da ubrizgaju insulin ne bili održali nivoe glukoze u krvi normalnim. IDDM se karakteriše niskim ili nivoima koji se ne mogu detektivati endogene proizvodnje insulina izazvane destrukcijom p ćelija koje proizvode insulin u pankreasu, karakteristikom koja je najjasnije razlikuje IDDM od NIDDM. IDDM, nazvan juvenilni početni dijabetis napada mlađe i starije odrasle osobe na sličan način.

Otprilike 90 do 95% ljudi sa dijabetisom imaju Tip II (ili NIDDM). NIDDM subjekti proizvode insulin, ali ćelije u njihovim telima su otporne na insulin: ćelije ne odgovoraju na pravilno na hormon, tako da se glukoza akumulira u njihovoj krvi. NIDDM se karakteriše relativnim disparitetom između proizvodnje endogenog insulina i potražnjama za insulin, što vodi do povišenih nivoa glukoze u krvi. Suprotno od IDDM, uvek postoji određena proivzodnja endogenog insulina kod NIDDM; mnogi NIDDM pacijenti imaju normalne ili čak povišene nivoe insulina u krvi, dok ostali NIDDM pacijenti imaju neadekvatnu proizvodnju insulina (Rotvvein, R et al. N. Engl.J Med. 308, 65-71 (1983)). Mnogi ljudi kod kojih je dijagnostikovan NIDDM su 30 i više godina starosti, a pola novih slučajeva je starosti 55 i starije. Upoređeno sa belcima i azijatima, NIDDM je češći među indijcncima, crncima, ljudima latino i hispano porekla. Dodatno tome, početak bolesti može biti podmukao ili čak klinički neočigledan, što čini teškim dijagnostikovanje.

Primami patogeni organ kod NIDDM ostaje neispitan. Mnogi sugerišu da je primarna otpornost na insulin perifernih tkiva inicijalni događaj. Genetičko epidemiološka proučavanja podržavaju ovakvo mišljenje. Slično tome, od strane drugih abnormalnosti lučenja insulina se pominju kao primarni defekt kod NIDDM. Verovatno je da su oba fenomena važni doprinosioci postupku razvijanja bolesti (Rimoin, D. L, et al. Emery and Rimoin's Principles and Practice of Medical Genetics 3rd Ed. 1:1401-1402 (1996)).

Mnogi ljudi sa NIDDM imaju sedeće životne stilove i gojazni su; teški su otprilike 20% više od preporučene težine za njihovu visinu i građu. Dalje, gojaznost se karakteriše hiperinsulinemijom i otpornošću na insulin, karakteristikom koja se deli sa NIDDM, hipertenzijom i aterosklerozom. Gojaznost i dijabetis su među najčešćim ljudskim zdravstvenim problemima u industrijskim društvima. U industrijskim zemljama trećina populacije je sa bar 20% prekomerne težine. U Sjedinjenim Američkim Državama, procenat gojaznih ljudi se povećao sa 25% krajem 70-tih godina prošlog veka, na 33% početkom 90-tih godina prošlog veka. Gojaznost je jedan od najvažnijih faktora rizika za NIDDM. Definicije gojaznosti se razlikuju, ali generalno, subjekt koji je težak bar 20% više od preporučene težine za njegovu/njenu visinu i građu se smatra gojaznim. Rizik razvoja NIDDM se triplira kod subjekata koji su sa 30% prekomerne težine, i tri četvrtine onih koji imaju NIDDM su prekomerno teški.

Gojaznost, koja je rezultat neizbalansiranosti između kalorijskog unosa i potrošnje energije, je u velikoj meri u korelaciji sa otpornošću na insulin i dijabetis koji eksperimentalnih životinja i ljudi. Pa ipak, molekularni mehanizmi koji su uključeni u gojaznost-dijabetis sindrome nisu jasni. Tokom ranog razvoja gojaznosti, povećanje lučenja insulina balansira otpornost na insulin i štiti pacijente od hiperglikemije (LE Stunff, et al. Diabetes 43, 696-702 (1989)). Naravno, nakon nekoliko dekada, funkcija 0 ćelije se pogoršava i od insulina nezavisni dijabetise se razvija kod otprilike 20% posto od ukupne gojazne populacije (Pederson, P. Diab. Metab. Rev. 5, 505-509 (1989)) i (Brancati, F. L, et al., Arch. Intern. Med. 159, 957-963

(1999)). S obzirom na njenu visoku prevalentnost u modernim društvima, gojaznost tako postaje vodeće faktor rizika za NIDDM (Hill, J. O., et al., Science 280, 1371-1374 (1998)). Pa ipak, faktori koji predisponiraju određeni deo pacijenta ka izmeni lučenja insulina kao odgovor na akumulaciju masnoće ostaju nepoznati.

Da li je neko klasifikovan kao gojazan se generalno određuje na osnovu njihovog indeksa telesne mase (BMI) koji se izračunava deljenjem telesne težine (kg) sa vrednošću visine na kvadrat (m<2>). Tako, jedinice BMI su kg/m<2>i moguće je izračunati BMI raspon povezan sa minimumom smrtnosti u svakoj dekadi života. Prekomerna težina se definiše kao BMI u rasponu 25-30 kg/m<2>, a gojaznost kao BMI veći od 30 kg/m<2>(videti donju TABELU). Postoje problemi sa definicijom u tome što se ne uzima u obzir proporcija telesne mase koja mišić u odnosu na mast (adipoza tkivo). Da bi se to uzelo u obzir, gojaznost se može definisati na osnovu sadržaja masti u telu: veća od 25% kod muškaraca i 30% kod žena.

KLASIFIKACIJA TEŽINE PREMA INDEKSU TELESNE MASE (BMI)

Kako se BMI povećava postoji povećani rizik od smrti zbog različitih uzroka koji su nezavisni od drugih faktora rizika. Najčešće bolesti praćene gojaznošću su kardiovaskularne bolesti (posebno hipertenzija), dijabetis (gojaznost pojačava razvoj dijabetisa), bolest razranavljene bešike (posebno kancer) i reproduktivne bolesti. Proučavanje pokazuje da čak i blago smanjenje u telesnoj težini može da korespondira sa značajnim smanjenjem u riziku od razvoja koronarne srčane bolesti.

Jedinjenja koja se pojavljuju na tržištu kao sredstva protiv gojaznosti uključuju Orlistat (XENICAL™) i Sibutramin. Orlistat (inhibitor lipaze) direktno inhibira absorbciju masti i ima tendenciju da proizvode visoku incidencu neprijatnih (iako relativno bezazlenih) bočnih efekata kao što je dijareja. Sibutramin (smešani 5-HT/inhibitor resorbcije noradrenalena) može da poveća krvni pritisak i ubrza rad srca kod nekih pacijenata. Za sredstvo koje oslobađa serotonin/inhibitore resorbcije fenfluramina (Pondimin™) i dexfenfluramina (Redux™) je izvešteno da smanjuju unos hrane i telesnu težinu tokom prolongiranog perioda (većeg od 6 meseci). Ipak, oba proizvoda su povučena nakon izveštaja o preliminarnoj evidenciji abnormalnosti srčanog zaliska usled njihove upotrebe. U skladu sa tim, postoji potreba za razvoj sigurnijeg sredstva protiv gojaznosti.

Gojaznost takođe značajno povećava rizik razvoja kardiovaskularnih bolesti. Koronarna insuficijencija, ateromatozna bolest, i srčana insuficijencija su prednji red kardiovaskularne komplikacije izazvane putem gojaznosti. Procenjuje se da bi u slučaju idealne težine celokupne populacije, rizik koronarne insuficijencije bio smanjen za 25% a rizik srčane insuficijencije i cerebralnih vaskularnih incidenata za 35%. Incidenca koronarnih bolesti je duplirana kod subjekata koji imaju manje od 50 godina starosti i koji su 30% prekomerno teški. Pacijent sa dijabetisom se suočava sa 30% umanjenim životnim vekom. Nakon 45-te godine starosti ljudi sa dijabetisom imaju tri puta veće šanse od ljudi bez dijabetisa da imaju značajnu srčanu bolest i do pet puta veću šansu da dožive šlog. Ovi nalazi naglašavaju međusobne relacije između faktora rizika za NIDDM i koronarne srčane bolesti i potencijalnu vrednost integrisanog pristupa prevencije ovih stanja zasnovanog na prevenciji ovih stanja na osnovu prevencije gojaznosti (Perry, I. J., et al., BMJ310, 560-564 (1995)).

Dijabetis je takođe umešan u razvoj bolesti bubrega, bolesti očiju i problema nervnog sistema. Bolest bubrega, koja se takođe naziva nefropatija, se pojavljuje kada je bubregov "mehanizam filtera" oštećen i protein curi u urin i povišenim količinama i na kraju bubreg prestaje da radi. Dijabetis je takođe vodeći uzrok oštećenja retina na kraju oka i povećava rizik od katarakte i glaukoma. Konačno, dijabetis je povezan sa oštećenjem nerva, posebno u nogama i stopalima, što utiče na sposobnost da se oseti bol i doprinosi ozbiljnim infekcijama. Sve zajedno uzeto, komplikacije usled dijabetisa su jedne od državnih vodećih uzroka smrti.

WO 2005/121121 otkriva supstituisane aril i heteroaril derivate sledeće formule koji su modulatori metabolizma. Oni se vezuju za i moduliraju aktivnost RUP3 receptora. Jedinjenja su korisna za profilaksu i lečenje za metabolizam povezane poremećaje, kao što su dijabetis i gojaznost.

WO 2004/041164 opisuje jedinjenja sledeće formule koja očigledno inhibiraju, regulišu i/ili moduliraju kinaza signalnu transdukciju. Ovaj jedinjenja su navodno korisna u lečenju kinaza zavisnih bolesti i stanja kao što su angiogeneza, kancer, rast tumora, ateroskleroza, sa starošću povezana makularna degeneracija, dijabetička retinopatija, retinalna ishemija makularnog edema, i inflamatorne bolesti.

W0 2005/007647 otkriva trisupstituisane aril i heteroaril derivate sledeće formule koji su modulatori metabolizma glukoze. Jedinjenje se vezuju za i moduliraju aktivnost RUP3 receptora. Jedinjenja su korisna u profilaksi ili lečenju metabolitičkih poremećaja,kao što su dijabetis i gojaznost.

WO 03/002544 otkriva N-heterociklična jedinjenja sledeće formule koja očigledno blokira proizvodnju citokina, posebno ekspresiju TNF-alfa, putem inhibicije p38 kinaze. Jedinjenja su navodno korisna u lečenju inflamatornih bolesti, kao što je reumatoidni artritis.

W0 2004/076413 opisuje supstituisane aril i heteroaril derivate koji su modulatori metabolizma glukoze i korisni u profilaksi i lečenju metabolitičkih poremećaja kao što su dijabetis i gojaznost. Ova jedinjenja se vezuju za i moduliraju aktivnost RUP3 receptora.

OPIS PRONALASKA

Sadašnji pronalazak se odnosi na jedinjenja koja vezuju i moduliraju aktivnost GPCR, koji se ovde nazivaju RUP3, i njihove upotebe. Pojam RUP3 kao što se ovde koristi uključuje humane sekvence pronađene u GeneBank pod brojm upisa AY288416, prirodno nastalim aleličnim varijantama, sisarskim ortolozima, i njihovim rekombinantnim mutantima. Pretpostavljeni humani RUP3 za upotrebu u pretraživanju i testiranju jedinjenja pronalaska je obezbeđen u nugleotidnoj sekvenci Seq. ID.No:1 i korespondirajućoj sekvenci amino kiseline u Seq. ID.No:2.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska obuhvata određene piridinil i pirimidinil derivate kao stoje to prikazano u Formuli (la):

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

X je N ili CR8pri čemu je R8H ili halogen;

Yje NH iliO;

ZjeCH ili N;

Rtje karbo-C-i-e-alkoksi, oksadiazolil ili pirimidinil gde su navedeni karbo-C^-alkoksi, oksadiazolil ili pirimidinil svaki opciono supstituisani sa 1 ili 2 supstituentima nezavisno odabranim od grupe koja se sastoji od Ci? alkil, Ci? alkoksi i C3.5cikloalkil;

R2 je H ili alkil;

R3 je C-i^ alkoksi, 0-C2-4-alkinil ili hidroksil;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, Ci? alkoksi, C-malkil, C2.4alkinil i halogen;

R5 je odabran od grupe koja se sastoji od Ci? acilsulfonamid, d.4alkoksi, C^alkil, C^alkilamino, C^alkilsulfonil, C^alkiltio, cijano, heterociklil, di-C^-dialkilamino i silfonamid, pri čemu su navedeni Ci.4alkoksi, C^alkil, C1.4alkilamino, C^alkilsulfonil, d^alkiltio, di-C^-dialkilamino i heterociklil svaki opciono supstituisani sa 1 ili 2

supstituenata nezavisno odabranih od grupe koja se sastoji od C2.4alkinil, C^alkoksi, Ci.4alkilkarboksamid, C-|_4alkilsulfonil, C3.5cikloalkil, C3.5cikloalkiloksi, di-C^-alkilkaboksamid, hidroksil i

fosfonooksi, pri čemu je navedeni C^alkilkarboksamid opciono supstituisan sa hidroksil; ili je R5grupa Formule (A):

pri čemu su "m", "n" i "q" svaki nezavisno 0,1,2 ili 3; "r" je 0, 1 ili 2; i T je 0 ili 1;

R6 je H ili halogen; i

R7 je H ili C^alkil.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska odnosi se na famraceutske kompozicije koje se sastoje od najmanje jednog jedinjenja sadašnjeg pronalaska i farmaceutski prihvatljivog nosača.

Ovde su opisani postupci za lečenje sa metabolizmom povezanog poremećaja kod pojedinca koji se sastoje od davanja pojedincu kome je to neophodno tretman sa terapeutski efektivnom količinom jedinjenja sadašnjeg pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije.

Ovde su opisani postupci za smanjenje unosa hrane kod pojedinca koji se sastoje od davanja pojedincu kome je to neophodno terapeutski efektivne količine jedinjenja sadašnjeg pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije.

Ovde su opisani postupci izazivanja zasićenost kod pojedinca koji se sastoje od davanja pojedincu kome je to neophodno terapeutski efektivne količine jedinjenja sadašnjeg pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije.

Ovde su opisani postupci kontrolisanja ili smanjenja dobijanja težine kod pojedinca koji se sastoje od davanja pojedincu kome je to neophodno terapeutski efektivne količine jedinjenja sadašnjeg pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije.

Ovde su opisani postupci moduliranja RUP3 receptora kod pojedinca koji se sastoje od kontaktiranja receptora sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska. U nekim realizacijama, jedinjenje je agonist za RUP3 receptor. U nekim realizacijama, modulacija RUP3 receptora je lečenja sa metabolizmom povezanog poremećaja.

Ovde je opisan postupak moduliranja RUP3 receptora kod pojedinca koji se sastoji od kontaktiranja receptora sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska pri čemu moduliranje RUP3 receptora smanjuje unos hrane kod pojedinca.

Ovde je opisan postupak moduliranja RUP3 receptora kod pojedinca koji se sastoji od kontaktiranja receptora sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska pri čemu moduliranje RUP3 receptora izaziva zasićenost kod pojedinca.

Ovde je opisan postupak moduliranja RUP3 receptora koji se sastoji od kontaktiranja receptora sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska pri čemu moduliranje RUP3 receptora kontroliše ili smanjuje dobijanje težine kod pojedinca.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na upotrebu jedinjenja sadašnjeg pronalaska za proizvodnju medikamenta za upotrebu u lečenju sa metabolizmom povezanog poremećaja.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na upotrebu jedinjenja sadašnjeg pronalaska za proizvodnju medikamenta za upotrebu u smanjivanju unosa hrane kod pojedinca.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na upotrebu jedinjenja sadašnjeg pronalaska za proizvodnju medikamenta za upotrebu u izazivanju zasićenosti kod pojedinca.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na upotrebu jedinjenja sadašnjeg pronalaska za proizvodnju medikamenta za upotrebu u kontrolisanju ili smanjenju dobijanja težine kod pojedinca.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na jedinjenje sadašnjeg pronalaska za upotrebu u postupku lečenja ljudskog ili životinjskog tela putem terapije.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na jedinjenje sadašnjeg pronalaska za upotrebu u postupku lečenja sa metabolizmom povezanog poremećaja ljudskog ili životinjskog tela putem terapije.

U nekim realizacijama pojedinac je sisar. U nekim realizacijama sisar je čovek.

U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 18,5 do oko 45. U nekim realizacijama, čovek ima indeks telesne mase od oko 25 do oko 45. U nekom realizacijama, čovek ima indeks telesne mase od oko 30 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 35 do oko 45.

U nekim realizacijama poremećaj povezan sa metabolizmom je hiperlipidemija, tip 1 dijabetis, tip 2 dijabetis melitus, idiopatski tip 1 dijabetisa (Tip 1b), latenti autoimuni dijabetis kod odraslih (LADA), rani početni tip 2 dijabetis (EOD), mladi početni atipični dijabetis (YOAD), zreli početni dijabetis mladih (MODY), sa nedovoljnom ishranom povezan dijabetis, trudnički dijabetis, coronarna bolest srca, ishemični moždani udar, restenoza nakon angioplastike, periferno vaskularna bolest, hramanje na mahove, miokardijački infarkt (n.pr. nekroza i apoptoza), dislipidemija, lipemija posle obroka, stanja pogoršane tolerancije glukoze (IGT), stanja pogoršane našte plazma glukoze, metabolitička acidoza, ketoza, artritis, gojaznost, osteoporoza, hipertenzija, kongestivni prestanak rada srca, leva ventrikularna hipertrofija, periferna arterijska bolest, dijabetička retinopatija, makularna degeneracija, katarakta, dijabetička nefropatija, glomeruloskleroza, hronični renalni pad, dijabetička neuropatija, metabolitički sindrom, sindrom X, predmenstrualni sindrom, koronarna srčana bolest, angina pektoris, tromboza, ateroskleroza, miokardijački infarkt, prolazni ishemični napadi, šlog, vaskularna restenoza, hiperglikemija, hiperinsulinemija, hiperlipidemija, hipertrigliceridemija, otpornost na insulin, pogoršani metabolizam glukoze, stanja pogoršane tolerancije glukoze, stanja pogoršane našte plazma glukoze, gojaznost, erektivna disfunkcija, poremećaji na koži i vezivnom tkivu, razjedanja stopala i ulcerativni kolitis, endotelijalna disfunkcija i pogoršana vaskularna popustljivost.

U nekim realizacijama, poremećaj povezan sa metabolizmom je tip I dijabetis, tip II dijabetis, neadekvatna tolerancija glukoze, otpornost na insulin, hiperglikemija, hiperlipidemija, hipertrigliceridemija, hiperholesterolemija, dislipidemija ili sindrom X. U nekim realizacijama, poremećaj povezan sa metabolizmom je tip II dijabetis. U nekim realizacijama, poremećaj povezan sa metabolizmom je hiperglikemija. U nekim realizacijama, poremećaj povezan sa metabolizmom je hipertrigliceridemija. U nekim realizacijama, poremećaj povezan sa metabolizmom je tip I dijabetis. U nekim realizacijama, poremećaj povezan sa metabolizmom je dislipidemija. U nekim realizacijama, poremećaj povezan sa metabolizmom je sindrom X.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na postupak proizvodnje farmaceutske kompozicije koja se sastoji od smešanja bar jednog jedinjenja, kako je to ovde opisano, i farmaceutksi prihvatljivog nosača.

Prijavilac zadržava pravo da isključi jedno ili više jedinjenje iz bilo koje od realizacija pronalaska. Prijavilac dodatno zadržava pravo da isključi bilo koju bolest, stanje ili poremećaj iz bilo koje od realizacija pronalaska.

Kratak opis slika

Slika 1A prikazuje RT-PCR analizu RUP3 ekspresije kod humanih tkiva. Analizirano je ukupno dvadeset dva (22) humana tkiva.

Slika 1B prikazuje cDNKI Tačka-Mrlja analizu RUP3 ekspresije kod humanih tkiva.

Slika 1C prikazuje analizu RUP3 putem RT-PCR sa izolovanim humanim pankreasnim insulama Langerhans-a.

Slika1D prikazuje anlizu RUP3 ekspresije sa cDNK-ama pacovskog porekla putem RT-PCR.

Sika 2A prikazuje poliklonalno anti-RUP3 antitelo pripremljeno u zečevima. Slika 2B prikazuje ekspresiju RUP3 u {3 ćelijama koje proizvode insulin pankreasnih insula.

Slika 3 prikazujein vitrofunkcionalne aktivnosti RUP3.

Slika 4 prikazuje RUP3 RNK mrlju.

Detaljan opis pronalaska

Definicije

Naučna literatura koja je evoluirala oko receptora je prihvatila brojne pojmove koji se odnose na ligande koji imaju različita dejstva na receptore. Radi jasnoće i konzistentnosti, sledeće definicije će se upotrebljavati kroz ceo ovaj patentni dokument.

AGONISTI će imati značenje ostataka koji međusobno reaguju i aktiviraju receptor, kao što je RUP3 receptor i iniciraju fiziološki ili farmakološki odgovor karakterističan za taj receptor. Na primer, kada ostatci aktiviraju intracelularni odgovor nakon vezivanja za receptor, ili pojačavaju GTP vezivanje za membrane.

Pojam ANTAGONISTI ima nameru da znači ostatke koji se kompetetivno vezuju za receptor na isto položaju kao agonisti (na primer, endogeni ligand), ali koji ne aktiviraju intracelularni odgovor iniciran od strane aktivnog oblika receptora, i mogu prema tome da inhibiraju intracelularne odgovore od strane agonista ili parcijalnih agonista. Antagonisti ne umanjuju osnovni intracelularne odgovor u odstustvu agonista ili parcijalnog agonista.

HEMIJSKAGRUPA, OSTATAK ILI RADIKAL:

Pojam "C^acil" se odnosi na C1.6alkH radikal direktno zakačen za uglenik karbonil grupe pri čemu je difinicija za alkil kao što je ovde opisano; neki primeri uključuju, ali nisu limitirani na, acetil, propionil, n-butanoil, izobutanoil, sek-butanoil, f-butanoil (takođe se navodi kao pivaloil) i slično.

Pojam "C^acilsulfonamid" se odnosi na CMacil direktno zakačen za azot sulfonamida, pri čemu definicije za C^acil i sulfonamid imaju isto značenje kao što je ovde opisano, i CMacilsulfonamid grupa može biti predstavljena putem sledeće formule:

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska su kada je acilsulfonamid C-i.3acilsulfonamid, neke realizacije su C^acilsulfonamid i neke realizacije (^acilsulfonamid. Primeri acilsulfonamid grupe uključuju, ali nisu limitirane na, acetilsulfamoil [-S(=0)2NHC(=0)Me], propionilsulfamoil [-S(=0)2NHC(=0)Et], izobutirilsulfamoil, butirilsulfamoil, i slično.

Pojam "C^alkoksi" se odnosi na alkil radikal, kao što je ovde definisan, direktno zakačen za atom kiseonika (n.pr., -O-C^alkil). Primeri uključuju metoksi, etoksi, n-propoksi, izo-propoksi, n-butoksi, t-butoksi, izo-butoksi, sek-butoksi i slično.

Pojam "C^alkil" se odnosi na sa lancem u normalno nizu ili račvasti ugljenik radikal koji sadrži 1 do 4 ugljenika, neke realizacije su 1 do 3 ugljenika, neke realizacije su 1 do 2 ugljenika. Primeri alkila uključuju, ali nisu limitirani na, metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, izo-butil, t-butil, sek-butil, i slično.

Pojam "C^alkilamino" se odnosi na jedan alkil radikal direktno zakačen za amino radikal (-HN-C^alkil) pri čemu alkil radikal ima isto značenje kao što je ovde opisano. Neki primeri uključuju, ali nisu limitirani na, metilamino (n.pr., -HNCH3), etilamino, n-propilamino, izo-propilamino, n-butilamino, sek-butilamino, izo-butilamino, t-butilamino, i slično.

Pojam "C^alkilkarboksamid" ili "C^alkilkarboksamido" se odnosi na jednu Ci^alkil grupu zakačenu za azot amid grupe, pri čemu alkil ima istu definiciju kao što je ovde opisano. C^alkilkarboksamido može biti predstavljen sledećim:

Primeri uključuju, ali nisu limitirani na, /V-metilkarboksamid,N-etilkarboksamid, /V-n-propilkarboksamid, A/-/zo-propilkarboksamid,N- n-butilkarboksamid, A/-sec-butilkarboksamid, A/-sec-butilkarboksamid,N- izo-butilkarboksamid, A/-f-butilkarboksamid i slično.

Pojam "C^alkilsulfonil" se odnosi na alkil radikal zakačen za sulfon radikal formule: -S(0)2- pri čemu alkil radikal ima istu definiciju kao što je ovde opisano. Primeri uključuju, ali nisu limitirani na, metilsulfonil, etilsulfonil, n-propilsulfonil, izo-propilsulfonil, n-butilsulfonil, sek-butilsulfonil, izo-butilsulfonil, t-butil, i slično.

Pojam "C^alkiltio" se odnosi na alkil radikal zakačen za sulfid formule: -S-pri čemu alkil radikal ima istu definiciju kao što ovde opisano. Primeri uključuju, ali nisu limitirani na, metilsulfanil (n.pr., CH3S-), etilsulfanil, n-propilsulfanil, izo-propilsulfanil, n-butilsulfanil, sek-butilsulfanil, izo-butilsulfanil, t-butil, i slično.

Pojam "C2^alkinil" se odnosi na radikal koji sadrži 2 do 4 ugljenika i bar jednu ugljenik-ugljenik trogubu vezu (-C=C-), neke realizacije su 2 do 3 ugljenika, i neke realizacije imaju 2 ugljenika (-C=CH). Primeri C^alkinila uključuju, ali nisu limitirani na, etinil, 1-propinil, 2-propinil, 1-butinil, 2-butinil, 3-butinil, i slično. Pojam C^alkinil uključuje di- i tri-ine.

Pojam "amino" se odnosi na grupu -NH2.

Pojam "karbo-C1.6alkoksi"se odnosi na alkoksi grupu direktno zakačenu za ugljenik karbonila i može biti predstavljen formulom -C(=0)0-Ci^-alkil, pri čemu je C^alkil grupa kao što je ovde definisano: U nekim realizacijama karbo-C1.6alkoksi grupa se dalje vezuje za atom azota i zajedno formira karbamat grupu (n.pr., NC(=0)0-C1.6-alkil). Primeri karbo-Ci^alkoksi grupe uključuju, ali nisu limitarni na, metoksikarbonil, etoksikarbonil, propoksikarbonil, izopropoksikarbonil, butoksikarbonil, sek-butoksikarbonil, izo-butoksikarbonil, t-butoksikarbonil, n-pentoksikarbonil, izo-pentoksikarbonil, t-pentoksikarbonil, neo-pentoksikarbonil, n-heksiloksikarbonil, i slično.

Pojam "cijano" se odnosi na grupu -CN.

Pojam "C3.5cikloalkil" se odnosi na zasićeni prstenasti radikal koji sadrži 3 do 5 ugljenika; neke realizacije sadrže 3 do 4 ugljenika; neke realizacije sadrže 3 ugljenika. Primeri uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, i slično.

Pojam "C3.5cikloalkoksi" se odnosi na cikloalkil, kako je ovde definisan, direktno zakačen za atom kiseonika (n.pr., -0-C3_5cikloalkil). Primeri uključuju, ali nisu limitirani na, ciklopropoksi, ciklobutoksi, ciklopentoksi, i slično.

Pojam "di-C^-dialkilamino" se odnosi na amino grupu supstituisanu sa dva od istih ili različitih C-|.4alkil radikala pri čemu alkil radikal ima istu definiciju kao što je ovde opisano. Neki primeri uključuju, ali nisu limitirani na, dimeitilamino, metiletilamino, dietilamino, metilpropilamino, metilizopropilamino, etilpropilamino, etilizopropilamino, dipropilamino, propilizopropilamino i slično.

Pojam "di-C^-alkilkarboksamid" ili "di-C^-alkilkarboksamido" se odnosi na dva C^alkil radikala, koji su isti ili različiti, zakačene za amid grupu, pri čemu alkil ima istu definiciju kao što je ovde opisano. Sledećom grupom može biti predstavljen di-C1.4-alkilkarboksamido:

Gde C1.4ima istu definiciju kao što je ovde opisano. Primeri dialkilkarbokamida uključuju, ali nisu limitirani na, A/,/V-dimetilkarboksamid, A/-metil-A/-etilkarboksamid, A/,/V-dietilkarboksamid, A/-metil-/V-izopropilkarbokamid, i slično.

Pojam "halogen" ili "halo" se odnosi na fluoro, hloro, bromo ili jodo grupu.

Pojam "heterociklil" se odnosi na ne-aromatični prsten ugljenika (n.pr., cikloalkil ili cikloalkenil) gde su jedan, dva ili tri prstena ugljenika zamenjena heteroatomom odabranim od, ali ne limitirano na, grupe koja se sastoji od - O-, -S-, -S(=0)-, -S(=0)2-, i -NH-, i atomi ugljenika u prstenu su opciono supstituisani sa okso ili tiookso tako formirajući karbonil ili tiokarbonil grupu svaku posebno. Heterociklična grupa može biti prsten koji sadrži 3, 4, 5 ili 6-članova. Primeri heterociklične grupe, uključuju ali nisu limitirani na, aziridin-1-il, aziridin-2-il, azetidin-1-il, azetidin-2-il, azetidin-3-il, piperidin-1-il, piperidin-4-il, morfolin-4-il, piperizin-1-il, piperizin-4-il, pirolidin-1-il, pirolidin-3-il, [1,3]-diokso-lan-2-il i slično.

Pojam "hidroksil" se odnosi na grupu -OH.

Pojam "oksadiazolil" se odnosi na grupu predstavljenu sledećim formulama:

Pojam "okso" se odnosi generalno na dvogubo vezani kiseonik; tipični "okso" je supstitucija na ugljeniku i zajedničko formiranje karbonil grupe.

Pojam "fosfonooksi" se odnosi na grupu formule -OP(0)(OH)2i može biti predstavljena sledećom hemijskom strukturom:

Pojam"pirimidinil"se odnosi na grupu predstavljenom sledećim formulama:

Pojam "sulfonamid" se odnosi na grupu -S(=0)2NH2.

KOMPOZICIJAće značiti materijal koji se sastoji do bar dva jedinjenja ili dve komponente; na primer, i bez limitiranja, farmaceutska kompozicija je kompozicija koja se sastoji od jedinjenja sadašnjeg pronalaska i farmaceutski prihvatljivog nosača.

EFIKASNOST JEDINJENJAće značiti meru sposobnosti jedinjenja da inhibira ili stimuliše funkcionalnost receptora, kao suprotnost afinitetu receptora ka vezivanju.

KONTAKTiliKONTAKTIRANJEće značiti dovođenje naznačenih ostataka zajedno, bilo u in vitro sistem ili u in vivo sistem. Tako, "kontaktiranje" RUP3 receptora sa jedinjenjem pronalaska uključuje davanje jdeinjenj sadašnjeg pronalaska pojdincu u uzorku koji sadrži ćelijski ili prečišćeniji preparat koji sadrži RUP3 receptor.

ONAJ KOME JE LEČENJE NEOPHODNOkako se ovde koristi se odnosi na ocenu sačinjenu od strane onoga koji pruža negu (n.pr., lekar, sestra, sestra na praksi, itd., u slučaju ljudi; verinar u slučaju životinja uključujući ne-humane sisare) koja je potrebna pojedincu ili životinji ili će imati koristi od tretmana. Ova ocena se zasniva na različitim faktorima koji su rukama ekspertize pružaoca nege, ali uključuje znanje da je pojedinac bolestan, kao rezultat bolesti, stanja ili poremećaja koji se može lečiti jedinjenjima pronalaska. Pojam "lečenje" takođe se odnosi u alternativi na "profilaksu". Prema tome, generalno govoreći, "kome je lečenje neophodno" se odnosi na ocenu pružaoca nege da je pojedinac već bolestan, pa se u skladu sa tim, jedinjenja sadašnjeg pronalaska upotrebljavaju da olakšaju, inhibiraju ili ublaže bolest, stanje ili poremećaj. Šta više, fraza se takođe odnosi, u alternativi, na ocenu sačinjenu od strane pružaoca nege da će pojedinac postati bolestan. U ovom kontekstu, jedinjenja pronalaska se upotrebljavaju na zaštitni ili preventivni način.

POJEDINACkako se ovde upotrebljava se odnosi na svaku životinju, uključujući sisare, pretpostavljeno miševe, pacove, druge glodare, zečeve, pse, mačke, svinje, goveda, ovde, konje, ili primate, najpoželjnije ljude.

INHIBIRATIiliINHIBIRANJE,u vezi sa pojmom "odgovor" će značiti da je odgovor smanjen ili sprečen u prisustvu jedinjenja nasuprot tome kako bi bilo da jedinjenja nema.

INVERZNI AGONISTće značiti ostatke koji vezuju endogeni oblik receptora ili se vezuju za konstitutivno aktivirani oblik receptora, i koji inhibiraju osnovni intracelularni odgovor iniciran putem aktivnog oblika receptora ispod normalnog osnovnog nivoa aktivnosti, kako se može primetiti u odsustvu agonista ili parcijalnih agonista, ili smanjeuju GTP vezivanja za membrane. Pretpostavljeno, osnovni intracelularni odgovor se inhibira u prisustvu inverznog agonista bar za 30%, poželjnije bar za 50%, najpoželjnije bar za 75%, upoređeno sa osnovnim odgovorom u odsustvu inverznog agonista.

LIGANDće značiti endogeni, prirodno nastajući molekul specifičan za endogeni, prirodno nastajući receptor.

Kako se to ovde koristi, pojmoviMODULIRATIiliMODULIRANJEće značiti da se odnose na povećanje ili smanjenje u količini, kvalitetu, odgovoru ili dejstvu određene aktivnosti, funkcije ili molekula.

FARMACEUTSKA KOMPOZICIJAće imati značenje kompozicije koja se sastoji do bar jednog aktivnog sastojka, pri čemu kompozicija biti pristupačna za istraživanje ili lečenje specifičnog, efikasnog ishoda kod sisara (na primer, bez limitiranja, čoveka). Stručnjaci iz ove oblasti nauke će razumeti i ceniti tehnike koje su odgovarajuće za utvrđivanje da li aktivni sastojak ima željeni efikasni ishod na osnovu potreba zanatlije.

TERAPEUTSKI EFEKTIVNA KOLIČINAkako se to ovde koristi se odnosi na količinu aktivnog jedinjenja ili farmaceutskog sredstva koje izvlači biološki ili medicinski odgovor u tkivu , sistemu, životinji, pojedincu ili čoveku koji je i tražio istraživač, veterinar, doktor ili drugi kliničar, što uključuje jedno ili više od sledećeg: (1) Prevenciju bolesti; na primer, prevenciju bolesti, stanja ili poremećaja kod pojedinca koji može biti predisponiran za bolest, stanje ili poremećaj ali nije još iskusio ili pokazao patologiju ili simptomatologiju bolesti, (2) Inhibiranje bolesti; na primer, inhibiranje bolesti, stanja ili poremećaja kod pojedinca koja prolazi ili prikazuje patologiju ili simptomatologiju bolesti stanja ili poremećaja (n.pr., zaustavljanje daljeg razvoja patologije i/ili simptomatologije), i (3) Ublažavanje bolesti; na primer, ublažavanje bolesti, stanja ili poremećaj kod pojedinca koji prolazi ili prikazuje patologiju ili simptomatologiju bolesti stanja ili poremećaja (n.pr., umanjivanje patologije i/ili simptomatologije).

Jedinjenja sadašnjeg pronalaska:

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska obuhvata određene piridinil i pirimidinil derivate kao što su prikazani u Formuli (la):

ili njihova faramaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat; pri čemu X, Y, Z, R1(R2, R3, R4, R5, R6 i R7imaju iste definicije kao što je to ovde opisano,suprai

infra.

Ceniće se da određene karakteristike pronalaksa, koje su, zbog jasnoće, opisane u kontekstu odvojenih realizacija, mogu takođe biti obezbeđene u kombinaciji u jedinstvenoj realizaciji. Obrnuto, različite karakteristike pronalaska, koje su, zbog kratkotrajnosti, opisane u kontekstu jedinstvene realizacije, mogu takođe biti obezbeđene odvojeno ili u bilo kojoj odgovarajućoj podkombinaciji. Sve kombinacije realizacija koje se odnose na hemijske grupe koje predstavljaju promenjljive (n.pr., R1( R2, R3, R4, R5. R6, R7, X, Y i Z) koje se sadrže u okviru generičkih hemijskih formula koje su ovde opisane [n.pr. (la), (Ma), (llc), (Mg), itd] su specifično prihvaćene od strane sadašnjeg pronalaska na isti način kao da su eksplicitno prikazane, do obima da takve kombinacije prihvataju jedinjenja koja rezultiraju u stabilnim jedinjenjima (n.pr., jedinjenja koja mogu biti izolovana, karakterisan i testirana na biološku aktivnost). Dodatno tome, sve podkombinacije hemijskih grupa koje su navedene u realizacijama opisivanjem takvih promenjljivih, kao i sve podkombinacije upotreba i medicinskih indikacija opisanih ovde, su takođe specifično prihvaćeni od strane sadašnjeg pronalaska kao da je svaka od takvih podkombinacija hemijskih grupa i podkombinacija upotreba i medicinskih indikacija su eksplicitno ovde prikazane.

Kako se to ovde koristi, "supstituisani" naznačuje da je bar jedan atom vodonika hemijske grupe zamenjem sa ne-vodonik supstituentom ili grupom, ne-vodonik supstituentom ili grupom koja može biti jednovalentna ili dvovalentna. Kada je supstituent ili grupa dvovalentna, onda se podrazumevada je ova grupa dalje supstituisana sa sledećim supstituentom ili grupom. Kada je hemijska grupa ovde "supstituisana" može da ima do potpune valence supstitucije; na primer, metil grupa može biti supstituisana putem 1, 2 ili 3 supstituenata, metilen grupa može biti supstituisana sa 1 ili 2 supstituenta, fenil grupa može biti supstituisana sa 1, 2, 3, 4 ili 5 supstituenata, naftil grupa može biti supstituisana sa 1, 2, 3, 4, 5, 6 ili 7 supstituenata ili slično. Na isti način, "supstituisani sa jednim ili više supstituenata" se odnosi na supstituciju grupe sa jednim supstituentom pd ado ukupnog broja supstituenata koji su fizički dopušteni od strane grupe. Dalje, kada je grupa supstituisana sa jednom ili više grupa one mogu biti identične ili mogu biti različite.

Podrazumeva se i ceni da jedinjenja pronalaska mogu imati jedan ili više hiralnih centara, i prema tome mogu postojati kao enantiomeri i/ili diasteromeri. Za pronalazak se podrazumeva da se odnosi i obuhvata sve takve enantiomere, diastereomere i njihove smeše, uključujui, ali ne limitirajući na, racemate. U skladu sa tim, neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja su R enantiomeri. Dalje, neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja su S enantiomeri. Kda je više od jednog hiralnog centra prisutno, na primer dva hiralna centra onda, su neke realizacije sadašnjeg pronalaska jedinjenja koja su RS ili SR enantiomeri. U daljim realizacijama, jedinjenja sadašnjeg pronalaska su RR ili SS enantiomeri. Podrazumeva se da jedinjenja formule (la) i formula upotrebljenih kroz ovo otkriće imaju nameru da predstavljaju sve individualne enantiomere i njihove smeše, osim uloko nije drugačije navedeno ili prikazano.

Jedinjenja pronalaska mogu takođe da uključe tautomerne oblike, kao što su keto-enol tautomeri, i slično. Tautomerni oblici mogu biti u ravnoteži ili sterično zaključani u jedan oblik putem odgovarajuće supstitucije. Podrazumeva se da su različiti tautomerni oblici u okviru raspona jedinjenja sadašnjeg pronalaska.

Jedinjenja pronalaska mogu takođe da uključe sve izotope atoma koji nastaju u intermedijarima i/ili konačnim jedinjenjima, izotopi uključuju one atome koji imaju isti atomski broj ali različite masene brojeve. Na primer, izotopi vodonika uključuju deuterijum i tritijum.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde X je N. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde X je CR8. U nekom realizacijama, R8je H ili F.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde Y je NH. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde Y je O. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde Z je CH. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde Z je N. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde Rije karbo-Cve-alkoli opcionalno supstituisan sa C3.5cikloalkil.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je Riodabran od grupe koja se sastoji od C(0)CH2CH3, C(0)OCH(CH3)2, C(0)OCH(CH3)(CH2CH3), C(0)OCH2-ciklopropil, C(0)OCH(CH3)(ciklopripil), i C(0)OCH(CH2CH3)2.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je Riodabran od grupe kaoja se sastoji od C(0)OCH2CH3) C(0)OCH(CH3)2, C(0)OCH(CH3)(CH2CH3), C(0)OCH2-ciklopropil i C(0)OCH(CH3)(ciklopropil); ovo može biti predstavljeno putem svake od pojedinačnih formula:

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde Rije oksadiazolil opciono supstituisan sa jednom C^alkil grupom.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde Rije 5-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-3-il.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde Rije pirimidinil opciono supstituisan sa jednom d_4alkoksi grupom.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde Rije 5-metoksi-pirimidin-2-il.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R2 je H. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R2je CH3.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R3je C^alkoksi.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R3je OCH3ili OCH2CH3.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R3je OCH3.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R3je OH ili O-CECH.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je R4odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3, CH3, CH2CH3lF, Cl i C=CH. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R4je CH3.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je R5odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3) CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2lNHCH2CH(CH3)S(0)2CH3, N(CH3) CH2CH(CH3)S(0)2CH3l3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NH2, CH3, SCH2CH2CH3) S(0)2CH2CH2CH3, SCH2CH3, SCH(CH3)2, i CH2OH.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je R5odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3) CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2) NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3lN(CH3) CH2CH(CH3)S(0)2CH3, 3-metansulfonil-pirolidin-1 -il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3) NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je R5odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2lS(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH2CH20H, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, amino, NHCH2CH3, NHCH(CH3)2i NHCH(CH3)CH2CH3.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je R5grupa koja nije -CH2-R10, pri čemu je R10odabran od grupe koja se sastoji od C^alkilkarbokamid, C1.4atkilsulfonil, di-C^-alilkarbokamid, i fosfonooksi. U nekim realizacijama R5je grupa koja nije -CH2-R10, pri čemu je R10Cl4alkilkarboksamid. U nekim realizacijama R5 je grupa koja nije -CH2-Ri0, pri čemu je R10Ci_4alkilsulfonil. U nekim realizacijama R5je grupa koja nije - CH2-Rio, pri čemu je R10di-C^-alkilkarboksamid. U nekim realizacijama R5je grupa koja nije -CH2-R10, pri čemu je R10fosfonooksi.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je R5odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3) NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3l N(CH3) CH2CH(CH3)S(0)2CH3, 3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2 i S(0)2NH2.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je R5grupa formule (A):

pri čemu su "m", "n" i "q" svaki nezavisno 0,1,3 ili 3; "r" je 0, 1 ili 2; "t" je 0 ili 1. U nekim realzacijama, "m" i "n" su svaki nezavisno 0 ili 1. U nekim realizacijama, "q" je 0 ili 1 i "r" je 1 ili 2. U nekim realizacijama, "t" je 1. U nekim realizacijama, "t" je 0.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je R5grupa formule (B):

Pri čemu su "m", "n", "q" i "r" opisani ovde,supraiinfra.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde je R5odabran od grupe koja se sastoji od:

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R6 je H. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R6 je F. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R7je H. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja gde R7je CH3.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja imaju formulu (Ha):

ili njihovu farmaceuski prihvatljivu so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

Y je NH ili O;

Rije karbo-Ci-6-alkoksi opciono supstituisan sa C3_5cikloalkil;

R2 je H ili CH3;

R3 je C^alkoksi;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3, CH3, CH2CH3, F i Cl;

R5je odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3| NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3) OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3, N(CH3)CH2CH(CH3)S(0)2CH3, 3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2;

R5 je H ili F; i

R7 je H ili CH3.

Neke od realizacija sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja imaju formulu (Ha):

ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

Yje NH ili O;

Rije karbo-C ^-alkoksi opciono supstituisan sa C^cikloalkil;

R2 je H ili CH3;

R3 je C^alkoksi;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3)CH3, CH2CH3, F i Cl;

R5je odabran od grupe koja se sastoji od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH2CH2OH, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH i S(0)2NH2;

R6 je H ili F; i

R7je H ili CH3.

Neke od realizacija sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja imaju formulu (llc):

ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

Rije karbo-C^-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil;

R2 je H ili CH3;

R3 je CM alkoksi;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3, CH3, CH2CH3, F i Cl;

R5je odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3, N(CH3)CH2CH (CH3)S(0)2CH3, 3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2;

R6 je H ili F; i

R7je H ili CH3.

Neke od realizacija sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja imaju formulu (llc):

ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

Rije karbo-C^-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil;

R2jeHiliCH3;

R3 je Cl4alkoksi;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3, CH3, CH2CH3, F i Cl;

R5je odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3lCH2CH2S(0)2CH3lNHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH2CH20, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH i S(0)2NH2;

R6 je H ili F; i

R7 je H ili CH3.

Neke od realizacija sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja imaju formulu (Me):

ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

Rije karbo-d-6-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil;

R2je H ili CH3;

R3 je C-1.4alkoksi;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3, CH3, CH2CH3) F i Cl;

R5je odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3) OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3, N(CH3)CH2CH(CH3)S(0)2CH3, 3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CHOP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2;

R6 je H ili F; i

R7je H ili CH3.

Neke od realizacija sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja imaju formulu (lle) ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

Rije karbo-Ci-6-alkoksi opciono supstituisan sa C3_5cikloalkil;

R2je H ili CH3;

R3 je Ci^ alkoksi;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3, CH3, CH2CH3, F i Cl;

R5je odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3) NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3l CH2CH2CH2OH, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH i S(0)2NH2;

R6 je H ili F; i

R7je H ili CH3.

Neke od realizacija sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja imaju formulu (llg):

ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

Rije karbo-Ci_6-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil;

R2je H ili CH3;

R3 je C1.4alkoksi;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3, CH3, CH2CH3, F i Cl;

R5je odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3, N(CH3)CH2CH(CH3)S(0)2CH3, 3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1 -il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CHOP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2;

R6je H ili F; i

R7 je H ili CH3.

Neke od realizacija sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja imaju formulu (llg):

ili njihovu farmaceutski prihvatljivi so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

Rije karbo-C-i-6-alkoksi opciono supstituisan sa C3_5cikloalkil;

R2je H ili CH3;

R3 je Ci_4alkoksi;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3, CH3, CH2CH3, F i Cl;

R5je odabran od grupe koja se sastoji od OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH2CH2OH, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH i S(0)2NH2;

R6 je H ili F; i

R7jeH ili CH3.

Neke od realizacija sadašnjeg pronalaska se odnose na jedinjenja koja imaju formulu (Ili):

ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat ili hidrat;

pri čemu:

"m" i "n" su svaki nezavisno 0 ili 1 ;

"q" je 0 ili 1;

"r" je 1 ili 2;

X je N ili O;

R-i je karbo-Ci.6-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil;

R2je H ili CH3;

R3 je Ci_4alkoksi;

R4je odabran od grupe koja se sastoji od H, OCH3, CH3, CH2CH3, F i Cl;

R6je H ili F; i

R7je H ili CH3.

Neke od realizacija sadašnjeg pronalaska uključuju svaku kombinaciju jednog ili više jedinjenje odabranog od sledeće grupe u Tabeli A:

Dodatno, jedinjenja sadašnjeg pronalaska, uključujući ona koja su ilustrovana u TABELI A, obuhvataju sve njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvate, i posebno hidrate.

Generalni sintetički postupci

De novobiosinteza pirimidtn nukleotida obozbeđuje esencijalne prekursore za višestruke, za rastom povezane, događaje u višim eukariotima. Sakupljeni od ATP, bikarbonata i glutamine, uracil i citozin nukleotidi su gorivo za sintezu RNK, DNK, fosfolipide, UDP šećere i glikogen. Tokom poslednje dve dekade učinjen je značajan napredak u razjašnjenju mehanizama putem kojih se ćelijski pirimidini moduliraju da ispune potrebu ćelije. Ova proučavanja upućuju na povećane dokaza o kooperaciji između singalnih putanja ključne ćelije i osnovih elemenata ćelijskog metabolizma, i sugerišu da ovi događaji imaju potencijal da odrede različite ćelijske sudbine, uključujući rast, diferencijaciju i smrt.

Kao rezultat njihove temeljne biološke značajnosti kod viših eukariota i iskorištavanja pirimidin jezgra u brojnim od lekova na tržištu (Šema 1) i u drugim medicinski relevantnim jedinjenjima, pirimidini i piridini igraju odlučujuće uloge kao hemotipovi u kampanjama otkrivanja leka. Kao direktna konsekvenca nečeg ovakvog postoji bogatstvo naučne literature koja opisuje sintetičku konstrukciju, kao i hemijske modifikacije i elaboriranja ovih klasa heterocikala.

Novi supstituisani piridin i pirimidin derivat sadašnjeg pronalaska mogu biti pripremljeni prema različitim sintetičkim manipulacijama, od kojih će sve biti poznate stručnjaku iz oblasti nauke od sintetičkoj organskoj herniji. Određeni postupci za pripremanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska uključuju, ali nisu limitirani na, one opisane u Šemama 2-9 kao što je dato dalje u ovom delu opisa.

Uobičajeni dihloro-supstituisani intermedijarni proizvod 8, koji se upotrebljava kao početna tačka za sintez jedinjenja sadašnjeg pronalaska može biti pripremljen kao što je opisano u Šemi 2a. Ovo se postiže u dva koraka od di-CLe-alkilmalonata, od kojih se kao posebno koristan di-Ci.6-alkilmalonat pokazuje dietil malonat 5. Ciklizacija do 4,6-dihidroksipirimidina 7 se postiže reagovanjem 5 sa formamidinom u prisustvu alkoksida alkalnog metala, mešanjem malonata i celog ili dela formamidina sa alkoksidom ili sa alkoksidom i ostatkom formamida. Alternativni reagensi kao što su dimetilmalonat, natrijum metoksi, formamid, u alkoholnim rastvaračima niske molekularne težine, uključujući metanol, etano. 2-propanol i slično, mogu biti iskorišteni u sintezi putem zagrevanja na temperaturnom rastponu između oko 80 do oko 100°C tokom oko 30 minuta do oko 90 minuta praćeno radom sa minerlanom kiselinom. Pripremanje dihidroksipirimidina može se takođe postići upotrebom mikroorganizama kao što suRhodococcus(videti kao referencu VVO97008152 A1).

Jedan intermedijarni proizvod koji se upotrebljava u pripremanju jedinjenja sadašnjeg pronalaska je Intermedijarni proizvod 8a. Hloriranje 4 i 6 pozicija u prestenu da bi se proizveo intermedijar 8a može se obaviti reagovanjem 7 reagensa za hloriranje kao što je, fozgen, POCI3(kao referencu videti A. Gomtsvan et al., J. Med. Chem. 2002, 45, 3639-3648), tionil hlorid, oksalil hlorid i i smešama gornjih reagenasa uključujući PC13/POCI3pri povišenim reakcionim temperaturama. Pripremanje intermedijarnog proizvoda 8a je ilustrovan u donjoj Šemi 2a:

Sledeći intermedijarni proizvode koji se može upotrebiti za pripremanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska je intermedijarni proizvod 8b. Preparat intermedijarnog proizvoda 8b može biti pripremljen kao što je ilustrovano u Šemi 2b. Nitriranje 2-hloro-3-hidroksi piridina obezbeđuje 2-hloro-4-nitro-piridin-3-ol. Hidroksil može biti zaštićen sa odgovarajućom grupom za upotrebu tokom preostalih koraka šeme ili hidroksil grupa može biti alkilovana, na primer, metilovana upotrebom TMS diazometana da se dobije 2-hloro-3-metoksi-4-nitro-piridin. Nukleofilna supstitucija nitro grupe sa 4-hidroksil piperidinom može da obezbedi intermedijarni proizvod 8b. Upotrebom sličnih koraka, može se pripremiti generalni intermedijarni proizvod 8c.

Konvencionalne termalne aromatične reakcije supstitucije amina.i alkohola sa halogenizovani pirimidinima su vrlo dobro dokumentovane (videti na primer A. G. Arvanitis et al., J. Medicinal Chemistrv, 1999, 42, 805-818 i reference koje se tamo nalaze). Nukleofilne aromatične (SNAr) reakcije supstitucije halogenizovanih pirimidina sa nedostatkom elektrona su uobičajeno brze i sa visokom prinosom. Pa ipak, u određenim slučajevima, kao što su halogenizovani heterocikli bogati elektronom ili neutralni, uspešna supstitucija se omogućuje putem produženog zagrevanja. Da se odradi brz ulazak u mnoga od jedinjenja pronalaska iskorištava se mikrotalasna sinteza (Sheme 3 i 4). Smith uređaj za sintetizovanje proizvođača Personal Chemistrv je komercijalno dostupan instrument za zagrevanje sa poljem u fokusu koji obezbeđuje sigurnije i uniformnije uslove za obavljanje bazno katalizovanih reakcija supstitucije opisanih u Šemi. Baze uposlene za ovakve konverzije uključuju tercijarne amine kao što su trietilamin, Hunig-ova baza (n.pr. diizopropil-etilmamin), N-metilmorfolin i slično. Alternativno, stručnjak iz ove oblasti nauke može da upotrebe hidride alkalnih metala, karbonate alkalnih metala (kao što su, U2CO3, Na2C03, K2C03i slično), hlorkarbonate alkalnih metala (kao što su Li2HC03, Na2HC03, K2HC03i slično). Odgovarajući rastvarači uključuju etarski rastvarač kao što tetrahidrofuran, 1,4-dioksan, i slično. Vremene reakcije da se stigne do tipičnih intermedijarnih proizvada, kao što je intermedijarni proizvod 10, mogu da butu u rasponu od 300 sekundi do 3000 sekundi i kada se upošljavaju konvencionalni termalnim postupci oko 20 minuta do oko 120 minuta. Postupci konverzije intermedijarnog monosupstituisanog piridina i pirimidina 10 su ilustrovani u Šemi 4. Jedan postupak uključuje upotrebu aminacija katalizovanih paladijumom. Odnedavno, sintetička strategija se pojavljuje kao snažno oružje za sintezu supstituisanih aril i heteroaril anilin (za referencu videti S. L Buchvvald. Top. Curr. Chem., 2002, 219, 131 i reference koje se tamo nalaze). Dodatne reakcije mogu se obaviti upotrebom odgovarajuće supstituisanog amina (Intermedijarni proizvod 16) ili alkohola (Intermedijarni proizvod 17) u prisustvu paladijuma ili alternativnog

tranzicionog metalnog katalizatora odabrano od, ali ne limitirano na, Pd2(dba)3, Pd(OAc)2lCul, Cu(OTf)2>Ni(COD)2) Ni(acac)2u odgovarajućem anhidrovanom rastvaraču (kao što su, THF, 1,4-dioksan, i slično)sa jakom alkoksid bazom alkalnog metala (kao što je NaO'Bu, KO<l>Bu i slično). Odgovarajući ligand koji se upošljava u ovom koraku može biti odabran od BINAP, P(o-tolil)3, tBu3P, DPPF, P[N(iBu)CH2-CH3]3N i slično kada je katalizator iz paladijuma izvedeni kompleks.

Alternativno, za "Ullman-tip" aril aminacije katalizovane putem iz bakra izvedenih kompleksa, baza koja se upošljava može biti odabrana od karbonata alkalnog metala u aprotonskom polarnom rastvaraču (kao što su N,N-dimetilacetamid, DMF, DMSO, i slično) sa L-prolinom, N-metilglicinom ili dietilsaliciklamidom kao ligandom (za referencu videti D. Ma, Organic Lett., 2003, 5, 14,2453-2455).

Jedinjenja opštih formula 12 do 15 mogu takođe biti dobijena izmenom reda reakcionih koraka (n.pr., uvođenje Nuc 2 praćena sa Nuc 1), pri čemu se inicijalni korak sastoji od uvođenja bilo intermedijarnog proizvoda 16 ili 17 upotrebom baze u 'PrOH praćeno dodavanjem 4N HCI u dioksanu praćeno dodavanjem supstituisanog 4-hidroksil piperidinila.

Kao što je ilustrovano u Šemi 5, slična tranzicija metalom katalizovanih sparivanja može takođe biti postignuta da bi se dobili molekuli opšte formule 21a (Šema 5a) pri čemu je intermedijarni proizvod 20 (Hal = Br, J i slično) modifikovan da da analoge sa alkil amino supstituentima (n.pr., NRaRb, prie čemu se Rai Rbsvaki nezavisno H, Ci_6alkil ili C,_6alkil opciono supstituisani kao što je to ovde opisano, ili Rai Rbzajedno sa azotom formiraju heterociklični prsten, kao što je pirolidin, piperidin i slično). Alternativno, vezni atom može biti kiseonik iskorištavanjem Cul katalizovanog postupka za aromatično C-0 formiranje opisano od strane Buchvvald (videti radi reference S. L. Buchvvald; Organic Lett., 2002, 4, 5, 973-976) iskorišćavanjem, na primer, 10 mol% Cul, 20 mol% 1,10-fenantrolina, 2 ekvivalenta CS2C03na 110°C tokom 18 sati, sa jodo supstitucijom u intermedijarnom proizvodu 20 (Šema 5b).

Alternativno, jedinjenja formula 21a i 21b mogu biti prirpemljena kao što je ilustrovano u Šerni 5c.

Ovaj postupak je posebno koristan kada je R3alkoksi grupa. Različita alkoholna, amin i tiol jedinjenja mogu biti uvedena rezultirajući u R5grupi da se dobiju intermedijarni proizvodi 21c, 21 d i 21 e. Intermedijarni proizvodi 21c, 21d i 21e mogu potom biti redukovani do korespondirajućih amina i konačno spareni da se obezbede jedinjenja sadašnjeg pronalaska. Postupci sparivanje uključuju one opisane u Šemi 4a do 4d,supra.

Posebna je supstitucija za intermedijarn'e proizvode 12, 13, 14 i 15 gde je R, --■ 0(0)0-0,-6alkil pri čemu je alkil opciono supstituisan kao što je to ovde opisano. Uretani ovog tipa mogu biti pripremljeni direktno iz intermedijarnih proizvoda opisanih u Šemama 3 i 4 kada je Rt= H. U određenim reakcijama, upotreba odgovaraćuje azotne zaštitne krupe (kao što su,<l>Boc, Cbz, Moz, Alloc, Fmoc i slično) može biti neophodna tokom dalje hemijske modifikacije jezgra. Deprotekcija može biti postignuta upotrebom standardnih reagenasa poznatih stručnjacima iz ove oblasti nauke (oni ogu da uključuju TFA, mineralnu kiselinu, Paladijum/vodonik gas i slično u alkoholnom ili etarskom rastvaračkom sistemu odabranom od metanol, etanola, terc-butanol, THF, 1,4-dioksana i slično). U slučaju gde ciljani moleku! sadrži 2 zaštitne grupe, može biti usvojena ortogonalna zaštitna strategija. Deprotektovani sekundarni amin (R, = H) može potom u skladu sa tim biti modifikovan.

Šeme 6 i 7 ilustruju takve gemije gde generisanje karbamata može biti izvršeno upotrebom odgovarajuće reakcije u prisustvu baze, na primer,

baze tercijarnog amina kao što su TEA, DIEA i slično, u inertnom rastvaračkom sistemu.

Ako što je ilustrovano u Šemi 6, Uretan 23 može biti dobijen reakcijom uretana upotrebom RcOC(0)-halida (pri čemu Rcje d-e alkil opciono supstituisan kao što je to ovde opisano, i halid je hloro, bromo, ili jodo, posebno koristan je hloro) u inertnom rastvaraču sa ili bez baze. Odovarajuće baze uključuju karbonat alkalnog metala (kao što su, natrijum karbonat, kalijum karbonat, i slično), vodonik karbonat alkalnog metala (kao što su, natrijum vodonikkarbonat, kalijum vodonikkarbonat, i slično), alkalni hidroksid (kao što su, natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, i slično), tercijarni amin (kao što su, A/,A/-diizopropiletilamin, trietilamin, A/-metilmorfolin, i slično), ili aromatični amin (kao što su, piridin, imidazol, poli-(4-vinilpiridin), i slično).

Inertni rastvarao uključuje niže halougljenik rastvarače (kao što su, dihlorometan, dihloroetan, hloroform, i slično), etarske rastvarače (kao što su, tetrohidrofuran, dioksan, i slično), aromatične rastvarače (kao što su, benzen, toluen, i slično), ili polarne rastvarače (kao što su,N, N-dimetilformamid, dimetil sulfoksid, i slično). Reakciona temperatura je u rasponu od oko -20°C do 120°C, pretpostavljeno 0°C do 100°C.

Šema 7 ilustruje sintezu aril/hetero-alkil sulfona 26 koji se upotrebljavaju kao aril blokovi za građenje u Šemi 4 sadašnjeg pronalaska. Uobičajeni postupci za pripremanje ovih sulfona uključuju oksidaciju sulfida upotrebom oksidacionog sredstva (n.pr., H202) ili sulfonilacijom arena upotrebom aril sulfonil halida ili aril sulfokiselina u prisustvu jakog kiselog katalizatora (videti radi generalne reference: the Organic Chemistru of Sulfur; Oae S., Ed.; Plenum Press: New York, 1977). Optimalna konverzija do opciono 2,5-disupstituisanog arena 26 se postiže termalno pri čemu je Hal pretpostavljeno jodo upotrebom 5 mol% (CuOTf)2-PhH i 10 mol% N,N'-dimetiletilenediamin u DMSO putem postupka kod Wang et al (videti radi reference VVang Z.; Baskin J. M., Org. Lett., 2002, 4, 25, 4423-4425). U nekim realizacijama, R4i R6su svaki nezavisno H, halogen ili C1-6alkil; R7 je H; Hal = Br, J; i Y = O ili NH.

Alternativni standardni organski sintetički postupci mogu biti upotrebljenida se uvedu alternativni supstituenti u Ar komponentu. U jednom primeru gdeje linker atom Y = NH, manipulacija se može izvesti zaštitom anilin amino funkcionalnosti upotrebom standarnih FmocCI i CbzCI zaštita deprotekcija koraka poznatih stručnjaku iz ove oblasti nauke (Šema 8, pri čemu R4, R6i R7 imaju isto značenje kako je to ovde opisano) i potom upotrebom deprotektovanog anilina u potonjim koracima kao što su oni opisani u Šemi 4. U nekim realizacijama pronalaska R4je halogen, i R6je H ili halogen.

Sinteza 3,5-okadiazolil varijante je opisana u Šemi 9. Sparivanje katalizacijom sa cink(ll)hloridom amidokima 34 sa 4-hidroksipiperidinom, CNBr izvedenog 36 daje prinos građevinskog bloka 37 nakon kiselog rada, što se potom iskorištava u reakcionim sekvencama opisanm kao što je ilustrovano u Šemi 3.

Zaštitne grupe mogu biti neophodne za različitu funkcionalnost ili funkcionalnosti tokom sinteze nekih od jedinjenja pronalaska. U skladu sa tim, reprezentativne zaštitne grupe koje su pogodne za široki raspon sintetičkih transformacija su otkriveni kod Greene and VVuts, Protective Groups in Organic Svnthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, Nevv York, 1999.

Sadašnji pronalazak takođe obuhvata diastereomere kao i optičke izomere, n.pr., smeše enantiomera uključujući racemske smeše, kao i pojedinačne enantiomere i diastereomere, koji se pojavljuju kao konsekvenca sturukturalne asimetrije u određenim jedinjenjima sadašnjeg pronalaska. Odvajanje poredinačnog izomera ili selektivan sinteza pojedinačnih izomera se postiže primenom različitih postupaka kaji su vrlo dobro poznati stručnjacima iz ove oblasti nauke.

Indikacije i postupci lečenja

Dodatno prethodnim korisnim upotrebama jedinjenja sadašnjeg pronalaska koja su ovde otkrivena, jedinjenja pronalaska su korisna u lečenju dodatnih bolesti. Bez limitiranja, ovo uključuje sledeće.

Najznačajnije patologije kod Tip II dijabetisa su pogošani insulin koji signalizira na svoja ciljana tkiva ("otpornost na insulin") i nemogućnost ćelija pankreasa koje proizvode insulin da luče odgovarajući stepen insulina u odgovoru na hiperglikemični signal. Trenutne terapije radi lečenja potonjeg uključuju inhibitore (3-ćelija ATP-senzitivnog kalijum kanala da se pokrene oslobaćanje endogenih skladišta insulina, ili davanje egzogenog insulina. Nijedan od ovih postupaka ne poztiže preciznu normalizaciju nivoa glukoze u krvi i oba nose rizik izazivanja hipoglikemije. Iz ovih razloga, postoji intenzivni interes za razvoj farmaceutskih sredstava koji funkcionišu u od glukoze zavisnom dejstvu, odnosno kao potencijatori signaliziranja glukoze. Fiziološki sistemi signaliziranja koji funkcionišu na ovaj način su vrlo dobro izkarakterisani i uključuju gut peptide GLP1, GIP i PACAP. Ovi hormoni dejstvuju putem njihovog kognativnog G-proteina sparenog sa receptorom da stimuliše proizvodnju cAMP kod pankreatičnih (3-ćelija. Povećani cAMP ne izgleda da rezultira u stimulisanju oslobađanja insulina tokom stanja posta ili pre obroka. Pa ipak, serija biohemijskih meta cAMP signaliziranja, uključujući ATP-senzitivni kalijum kanal, na voltažu-senzitivne kalijum kanale i egzocitotička mašinerija, su modifikovani na takav način da je odgovor lučenja insulina na stimulator glukoze posle obroka marketinški pojačan. U skladu sa tim, agonisti, novih, slično funkcionišućih, (3-ćelija GPCR-ova, uključujući RUP3, će takođe stimulisati oslobađanje endogenog insulina i kao konsekvencu promovisati normohlikemiju kod Tip II dijabetisa. Takođe je utvrđeno da povećani cAMP, na primer kao rezultat GLP1 stimulacije, promoviše proliferaciju (3-ćelija, inhibira smrt p-ćelija i tako poboljšava masu u obliku ostrvca. Za ovo pozitivno dejstvo na masu (3-ćelija se očekuje da bude korisno u oba Tipu II dijabetisa, gde se nedovoljno proizvodi insulin, i Tipu I dijab etisa, gde su p-ćelije uništene neodgovarajućim autoimunim odgovorom.

Neki GPCR-ovi p-ćelija, uključuju RUP3, su takođe prisutni u hipotalamusu gde oni moduliraju glad, zasićenost, smanjenje unosa hrane, kontrolisanje ili smanjenje težine i trošenje energije. Tako, imajući u vidu njihovu funkciju u okviru hipotalamusnog kruženja, agonisti ili inverzni agonisti ovih receptora ublažavaju glad, promovišu zasićenost i prema tome moduliraju težinu.

Takođe je vrlo dobro utvrđeno da metabolitičke bolesti ispoljavaju negativan uticaj na druge fiziološke sisteme. Tako, postoje često zajednički razvoj višestrukih stanja bolesti (n.pr., tip I dijabetis, tip II dijabetis, neadekvatna tolerancija glukoze, otpornost na insulin, hiperglikemija, hiperlipidemija, hipertrigliceridemija, hiperholesterolemija, dislipidemija, gojaznost ili kardiovaskularne bolesti kod "Sindroma X") ili sekundarnih bolesti koji jasno nastaju kao sekundarne prema dijabetisu (n.pr. bolest bubrega, perferna neuropatija). Tako se očekuje da će efektivno lečenje dijabetičkog stanja za uzvrat biti od koristi i takvim međusobno pvezanim stanjima bolesti.

U nekim realizacijama sadašnjeg pronalaska sa metbolizmom povezani poremećaj je hiperlipidemija, tip 1 dijabetis, tip 2 dijabetis melitus, idiopatski tip 1 dijabetisa (Tip 1b), latenti autoimuni dijabetis kod odraslih (LADA), rani početni tip 2 dijabetis (EOD), mladi početni atipični dijabetis (YOAD), zreli početni dijabetis mladih (MODY), sa nedovoljnom ishranom povezan dijabetis, trudnički dijabetis, koronarna bolest srca, ishemični moždani udar, restenoza nakon angioplastike, periferno vaskularna bolest, hramanje na mahove, miokardijački infarkt (n.pr. nekroza i apoptoza), dislipidemija, lipemija nakon obroka, stanja pogoršane tolerancije glukoze (IGT), stanja pogoršane našte plazma glukoze, metabolitička acidoza, ketoza, artritis, gojaznost, osteoporoza, hipertenzija, kongestivni prestanak rada srca, leva ventrikularna hipertrofija, periferna arterijska bolest, dijabetička retinopatija, makularna degeneracija, katarakta, dijabetička nefropatija, glomeruloskleroza, hronični renalni pad, dijabetička neuropatija, metabolitički sindrom, sindrom X, predmenstrualni sindrom, koronarna srčana bolest, angina pektoris, tromboza, ateroskleroza, miokardijački infarkt, prolazni ishemični napadi, šlog, vaskularna restenoza, hiperglikemija, hiperinsulinemija, hiperlipidemija, hipertrigliceridemija, otpornost na insulin, pogoršani metabolizam glukoze, stanja pogoršane tolerancije glukoze, stanja pogoršane našte plazma glukoze, gojaznost, erektivna disfunkcija, poremećaji na koži i vezivnom tkivu, razjedanja stopala i ulcerativni kolitis, endotelijalna disfunkcija i pogoršana vaskularna popustljivost.

Ovde su opisani postupci lečenja sa metabolizmom povezanog poremećaja kod pojedinca koji se sastoji od davanja pojedincu kome je neophodno takvo lečenje terapeutski efektivne količine jedinjenja kao što je ovde opisano ili njegove farmaceutske kompozicije. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezan poremećaj je tip I dijabetis, tip II dijabetis, neadekvatna tolerancija glukoze, otpornost na insulin, hiperglikemija, hiperlipidemija, hipertrigliceridemija, hiperholesterolemija, dislipidemija ili sindrom X. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je tip II dijabetis. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je hiperglikemija. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je hiperlipidemija. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je hipertrigliceridemija. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je tip I dijabetis. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je dislipidemija. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je sindrom X. U nekim realizacijama je pojedinac sisar. U nekim realizacijama sisar je čovek.

Ovde su opisani postupci smanjenja unosa hrane pojedinca koji se sastoje od davanja pojedincu kome je to neophodno terapeutski efektivne količine jedinjenja sadašnjeg pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije. U nekom realizacijama pojedinac je sisar. U nekim realizacija sisar je čovek.

Ovde su opisani postupci izazivanja zasićenosti pojedinca koji se sastoje od davanja pojedincu kome je to neophodno terapeutski efektivne količine jedinjenja sadašnjeg pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije. U nekom realizacijama pojedinac je sisar. U nekim realizacija sisar je čovek.

Ovde su opisani postupci konotrolisanja smanjenja dobijanja težine pojedinca koji se sastoje od davanja pojedincu kome je to neophodno terapeutski efektivne količine jedinjenja sadašnjeg pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije. U nekom realizacijama pojedinac je sisar. U nekim realizacija sisar je čovek.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na postupke gde čovek ima indeks telesne mase od oko 18,5 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 25 do oko 45. U nekim realizacijama, čovek ima indeks telesne mase od oko 30 do oko 45. U nekim realizacijama, čovek ima ima indeks telesne mase od oko 35 do oko 45.

Ovde su opisani postupci moduliranja RUP3 receptora kod pojedinca koji se sastoje od kontaktiranja receptora sa jedinjenjem prema bolo kom od zahteva 1 do 127. U nekim realizacijama, jedinjenje je agonist. U nekom realizacijama, jedinjenje je inverzni agonist. U nekim realizacijama, jedinjenje je antagonist. U nekim realizacijama, moduliranje RUP3 receptora je lečenje sa metabolizmom povezanog poremećaja i njegovih komplikacija. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je tip I dijabetis, tip II dijabetis, neadekvatna tolerancija glukoze, otpornost na insulin, hiperglikemija, hiperlipidemija, hipertrigliceridemija, hiperholesterolemija, dislipidemija ili sindrom X. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je tip II dijabetis. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je hiperglikemija. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je hiperlipidemija. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je hipertrigliceridemija. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je tip I dijabetis. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je dislipidemija. U nekim realizacijama sa metabolizmom povezani poremećaj je sindrom X. U nekim realizacijama je pojedinac sisar. U nekim realizacijama sisar je čovek.

Ovde je opisan postupak moduliranja RUP3 receptora kod pojedinca koji se sastoji od kontaktiranja receptora sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska pri čemu moduliranje RUP3 receptora smanjuje unos hrane pojedinca. U nekim realizacijama pojedinac je sisar. U nekim realizacijama sisar je čovek. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne maze od oko 18,5 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 25 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 30 do oko 45. U nekim ralizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 35 do oko 45.

Ovde je opisan postupak modulranja RUP3 receptora kod pojedinca koji se sastoji od kontaktiranja receptora sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska pri čemu moduliranje RUP3 receptora izaziva zasićenost kod pojedinca. U nekim realizacijama pojedinac je sisar. U nekim realizacijama sisar je čovek. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne maze od oko 18,5 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 25 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 30 do oko 45. U nekim ralizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 35 do oko 45.

Ovde je opisan postupak modulranja RUP3 receptora kod pojedinca koji se sastoji od kontaktiranja receptora sa jedinjenjem sadašnjeg pronalaska pri čemu moduliranje RUP3 receptora kontroliše ili smanjuje dobijanje težine kod pojedinca. U nekim realizacijama pojedinac je sisar. U nekim realizacijama sisar je čovek. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne maze od oko 18,5 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 25 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 30 do oko 45. U nekim ralizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 35 do oko 45.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na upotrebu jedinjenja kao što je ovde opisano, za proizvodnju medikamenta za upotrebu u lečnju sa metabolizmom povezanog poremećaja. U nekim realizacijama, sa metabolizmom povezani poremećaj je tip II dijabetis, neadekvatna tolerancija glukoze, otpornost na insulin, hiperglikemija, hiperlipidemija, hipertrigliceridemija, hiperholesterolemija, dislipidemija ili sindrom X.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na upotrebu jedinjenja kao što je ovde opisano, za proizvodnju medikamenta za upotrebu u smanjenju unosa hrane kod pojedinca. U nekim realizacijama, pojedinac je sisar. U nekom realizacijama, sisar je čovek. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne maze od oko 18,5 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 25 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 30 do oko 45. U nekim ralizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 35 do oko 45.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na upotrebu jedinjenja kao što je ovde opisano, za proizvodnju medikamenta za upotrebu u izazivanja zasićenosti kod pojedinca. U nekim realizacijama, pojedinac je sisar. U nekom realizacijama, sisar je čovek. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne maze od oko 18,5 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 25 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 30 do oko 45. U nekim ralizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 35 do oko 45.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na upotrebu jedinjenja kao što je ovde opisano, za proizvodnju medikamenta za upotrebu u kontrolisanju ili smanjenju dobijanja težine kod pojedinca. U nekim realizacijama, pojedinac je sisar. U nekom realizacijama, sisar je čovek. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne maze od oko 18,5 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 25 do oko 45. U nekim realizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 30 do oko 45. U nekim ralizacijama čovek ima indeks telesne mase od oko 35 do oko 45. Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na jedinjenja, kao što je ovde opisano, za upotrebu u postupku lečenja humanog ili životinjskog tela putem terapije.

Jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na jedinejnja, kao što je ovde opisano, za upotrebu u postupku lečanje sa metabolizmom povezanog poremećaja u humanomi ili životinjskom telu putem terapije.

Farmaceutske kompozicije i soli

Dalji aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na farmaceutske kompozicije koje se sastoje od jednog ili više jedinjenja Formule (la) ili bilo koje formule koja je ovde data, i jednog ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. Neke realizacije sadašnjeg pronalaska se odnose na farmaceutske kompozicije koje se sastoje od jedinjenja Formule (la) i farmaceutski prihvatljivog nosača.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska uključuju postupak proizvodnje farmaceutske kompozicije koja se sastoji od smešanja bar jednog jedinjenja prema bio kom od jedinjenja realizacija koje su ovde otkrivene i farmaceutski prihvatljivog nosača.

Formulacije mogu biti pripremljene putem bilo kog pogodnog postupka, tipično putem uniformnog smešanja aktivnog(ih) jedinjenja sa tečnostima ili fino podeljenim čvrstim nosačima, ili sa oba, u potrebnim proporcijama, i potom, ukoliko je to neophodno, formiranjem rezultirajuće smeše u željeni oblik.

Konvencionalni inertni punioci, kao što su sredstva za vezivanje, punioci, prihvatljiva sredstva za vlaženje, lubrikanti tabletiranja, i dezintegranti mogu biti upotrebljeni u tabletama i kapsulama za oralno davanje. Tečni preparati za oralno davanje mogu biti u obliku rastvora, emulzija, vodenih ili uljanih suspenzija, i sirupa. Alternativno, oralni preparati mogu biti u obliku suvog pudera koji onda može biti rekonstituisan sa vodom ili nekim drugom pogodnom tečnošću pre upotrebe. Dodatni aditivi kao što su suspenzivna ili emulgaciona sredstva, nevodeni nosači (uljučujući jestiva ulja), prezervativi, i sredstva za davanje ukusa i boje mogu biti dodati tečnim preparatima. Parenteralni oblici doze mogu biti pripremljeni rastvaranjem jedinjenja pronalaska u odgovarajućem tečnom nosaču i sterilišućem filteru rastvora pre punjenja i pečaćenja u odgovarajući sud ili ampulu. Ovo je samo nekoliko primera od mnogih odgovarajućih postupaka dobro poznatih u nauci pripremanja jediničnih oblika doze.

Jedinjenje sadašnjeg pronalaska može biti formulisano u farmaceutske kompozicije upotrebom tehnika dobro poznatih stručnjacima iz ove oblasti nauke. Odgovarajuće farmaceutski prihvatljivi nosali, van onih koji se ovde pominju, su poznati u nauci, na primer, videti Remington, The Science and Practice of Pharmacv, 20th Edition, 2000, Lippincott VVilliams & VVilkins, (Editors: Gennaro, A.R., et al.).

Dok je moguće da, radi upotrebe u lečenju, jedinjenje pronalaska može, kao alternativna, biti dato kao sirova ili čista hemikalija, poželjno je ipak da se prezentira jedinjenje ili aktivni sastojak kao farmaceutska formulacija ili kompozicija koja se dalje sastoji od farmaceutski prihvatljivog nosača.

Pronalazak tako dalje obezbeđuje farmaceutske formulacije koje se sastoje od jedinjenja pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili derivata zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivim nosačima i/ili profilaktičkim sastojcima. Nosač(i) moraju biti "prihvatljivi" u smislu da su kompatibilni sa drugim sastojcima formulacije i ne preterano škodljiv za njihove primaoce.

Farmaceutske formulacije uključuju one pogodne za oralno, rektalno, nazalno, mesno (uključujući bukalno i podjezično), vaginalno ili parenteralno (uključujući intramuskularno, potkožno ili intravenozno) davanje ili u obliku odgovarajućem za davanje putem inhalacije, uduvavanja ili putem ternsdermalnih flastera. Transdermalni flasteri otpuštaju lek pri kontrolisanoj brzini prezentovanjem leka za absorbciju na efikasan način sa minimumom degradiranja leka. Tipično trensdermalni flasteri se sastoje od nepropustljivog zaštitnog sloja, adheziva osetljivog na jedan pritisak i uklonjivog zaštitnog sloja sa linijom za oslobađanje. Stručnjak iz ove oblasti nauke će razumeti tehnike odgovarajuće za proizvodnju željenog efikasnog transdermalnog flastera koji se zasniva na potrebama stručnjaka.

Jedinjenja pronalaska, zajedno sa konvencionalnim adjuvantom, nosačem, ili razređivačem, mogu tako biti postavljena u obliko farmaceutskih formulacija i njihovih jediničnih oblika doza, i u takvom obliku mogu biti uposleni kao čvrsti oblici, kao što su tablete ili punjene kapsule, ili tečnosti kao što su rastvori, suspenzije, emulzije, eliksiri, gelovi ili kapsule napunjene sa istim, sve za oralnu upotrebu, u obliku supozitorija za rektalno davanje; ili u obliku sterilnih rastvora za ubrizgavanje za perenteralnu (uključujući potkožnu) upotrebu. Takve farmaceutske kompozicije i njihovi jedinični oblici doze mogu da sadrže konvencionalne sastojke u konvencionalnim proporcijama, sa ili bez dodatnih aktivnih jedinjenja ili glavnih sastojaka, i takvi jedinični oblici doza mogu da sadrže bilo koju odgovarajuću efektivnu količinu aktivnog sastojka proporcionalno nameravanom rasponu dnevne doze koja se ima uposliti.

Za oralno davanje, farmaceutska kompozicija može biti u obliku, na primer, tablete, kapsule, suspenzije ili tečnosti. Farmaceutska kompozicija se pretpostavljeno pravi u obliku jediničnog oblika doze koja sadrži određenu količinu aktivnog sastojka. Primeri takvi jediničnih oblika doze su kapsule, tablete, puderi, granule ili suspenzije, sa konvencionalnim aditivima, kao što su laktoza, manitol, kukuruzni škrob ili krompirov škrob; sa vezivnim srestvima kao štu su kristalna celuloza, derivati celuloze, akacija, kukuruzni škrob ili želatini; sa sredstvima za dezintegrisanje kao što su kukuruzni skrom, krompirov škrob ili natrijum karboksimet'lceluloza; i sa lubrikantima kao što su talk ili magnezijum stearat. Aktivni sastojak može takođe da se da ubrizgavanjem kao kompozicija gde, na primer, slani rastvor, dekstroza ili voda mogu biti upotrebljeni kao pogodni farmaceutski prihvatljivi nosač.

Jedinjenja sadašnjeg pronalaska, uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvate, mogu biti upotrebljena kao aktivni sastojci u farmaceutskim kompozicijama, specifično kao modulatori RUP3 receptora. Pojam "aktivni sastojak" se definiše u kontekstu "farmaceutske kompozicije" i značiće komponenta ili farmaceutska kompozicija koja obezbeđuje primarno farmakološko dejstvo, nasuprot "neaktivnom sastojku" koji će generalno biti prepoznat kao da ne obezbeđuje farmaceutsku korist.

Doza kada se upotrebljavaju jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu da variraju u okviru širokih limita, i uobičajeno je i poznato lekaru, da se ima skrojiti prema stanjima pojedinca u svakom individualnom slučaju. Zavisi, na primer, od prirode i ozbiljnosti bolesti koja se ima lečiti, od stanja pacijenta, od jedinejnja koja se upošljava ili od toga da li se akutna ili hronična bolest leći ili se obavlja profilaksa ili dalji su dalja aktivna jedinejnaj data dodatno jedinjenjima sadašnjeg pronalaska. Reprezentativne doze sadašnjeg pronalaska uključuju, ali nisu limitirane na, oko 0,001 mg do oko 5000 mg, oko 0,001 mg do oko 2500 mg, oko 0,001 mg do oko 1000 mg, 0,001 mg do oko 500 mg, 0,001 mg do oko 250 mg, oko 0,001 mg do oko 100 mg, oko 0,001 mg do oko 50 mg, i oko 0,001 mg do oko 25 mg. Višestruke doze se mogu davati tokom dana, posebno kada se ocenjuje da su neophodne relativno velike količine, na primer 2, 3 ili 4 doze. U zavisnosti od pojedinca i prema tome kako se ocenjuje da je odgovarajuće od strane pacijentovog lekara ili onoga koji pruža negu može biti neophodno da se izmeni naviše ili naniže od doza koje su ovde opisane.

Količina aktivnog sastojka, ili njegove aktivne soli ili derivata, koja se zahteva za upotrebu u lečenju će varirati ne samo sa određenom soli koja se odabire već i sa putem davanja, prirodom stanja koje se leči i starosšću i stanjem u kojem se nalazi pacijent pa će na kraju biti to diskreciona odluka prisutnog lekara ili kliničara. Generalno, stručnjak iz ove oblasti nauke razume kako da prevede in vivo podatke date u model sistemu, tipično životinjskom modelu, na druge, kao što je čovek. Tipično, životinjski model uključuje, ali nije limitiran na, model dijabetisa glodara kao što je to opisano u Primeru 5,infra(kao i u drugim životinjskim modelima poznatim u nauci, kao što su oni o kojim je izvešteno kod Reed and Scribner in Diabetes, Obesitv an Metabolism, 1, 1999, 75-86). U određenim prilikama, ovo prevođenje može biti samo bazirano na težini životinje u pojedinačnom modelu u poređenju sa drugim, kao što je sisar, pretpostavljeno čovek, pa ipak, češće, ovo prevođenje nije samo jednostavno bazirano na težinama, već inkorporiše različite faktore. Reprezentativni faktori uključuju, ali nisu limitirani na, tip, starost, težinu, pol, dijetu i medicinsko stanje pacijenta, ozbiljnost bolesti, puta davanje leka, farmkoloških razmatranja kao što su aktivnost, efikasnost, farmakokinetički i toksikološki profili određenog jedinjenja koje se upošljava, da li je sistem isporuke leka optimalno iskorišten, da li je akutno ili hronično stanje bolesti koje se leci ili se obavlja profilaksa ili da li se daju dalja aktivna jedinjenaj dodatno jedinjenjima sadašnjeg pronalaska kao deo kombinacije leka. Režim doze za lečenje bolesnog stanja sa jedinjenjima i/ili kompozicijama ovog pronalaska je odabran u skladu sa različitim faktorima koji su gore navedeni. Tako, aktualni režim doze koji se upošljava može da široko varira i prema tome može bit izmenjen u odnosu na pretpostavljeni režim doze i stručnjak iz ove oblasti nauke će prepoznati da doza ili režim doza van ovih tipičnih raspona može biti testiran i, kada je to odgovarajuće, mogu biti upotrebljeni u postupcima ovog pronalaska.

Željena doza može biti prikladno prezentirana u jediničnoj dozi ili kao podeljene doze koje se dau u odgovarajućim intervalima, na primer, kao dve, tri, četiri ili više pod-doze na dan. Pod-doza sama po sebi može biti dalje podeljena, n.pr. u nekoliko odvojenih lako odvojenih davanja. Dnevna doze može biti podeljena, posebno kada se relativno velike količine koje se imaju dati smatraju odgovarajućim, u nekoliko, na primer 2, 3 ili 4, delimična davanja. Ukoliko je to odgovarajuće, u zavisnosti od individualnog ponašanja, može biti neophodno da se izmeni doziranje naviše ili naniže od dnevne doze koja je naznačena.

Jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti data u različitim oralnim ili parenteralni jediničnim oblicima doze. Biće očigledno stručnjaku iz ovoe oblasti nauke da sledeći oblici doze mogu da se sastoje od, kao aktivnog sastojka, bilo jedinjenja pronalaska ili farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja pronalaska.

Za pripremanje farmaceutskih kompozicija iz jedinjenja sadašnjeg pronalaska, odabiranje odgovarajćeg farmaceutski prihvatljivog nosača može biti u čvrstom obliku, tečnom ili kao smeša oba. Čvrsti oblik preparata uključuje pudere, tablete, pilule, kapsule, kasete, supozitorije, i disperzivne granule. Čvrsti nosači mogu biti jedna ili više supstanci koje mogu da deluju kao razređivači, sredstva za davanje ukusa, rastvarači, maziva, suspenzivna sredstva, vezivan sredstva, prezervativi, sredstva za dezintegraciju tablete, ili materijal za kapsuliranje.

U puderima, nosač je fino podeljen čvrsti oblik koji je u smeši sa fino podeljenom aktivnom komponentom.

U tabletama, aktivna komponenta je smašana sa nosačem koji ima neophodan kapacitet vezivanja u odgovarajućim proporcijama i kompaktno napravljena u željeni oblik i veličinu.

Puderi i tablete mogu da sadrže različite procente količina aktivnog jedinjenja. Reprezentativna količina u puderu ili tableti može da sadrži od 0,5 do 90 procenata aktivnog jedinjenja; pa ipak, stručnjak će znati kada su količine van ovog raspona neophodne. Odgovarajući nosači za pudere i tablete su magnezijum karbonat, magnezijum stearat, talk, šećer, laktoza, pektin, dekstrin, škrob, želatin, tragakant, metilceluloza, natrijum karboksimetilceluloza, vosak koji se topi na niskoj temperaturi, kokosovo ulje, i slično. Pojam "preparat" ima nameru da uključi formulacije aktivnog jedinjenja sa materijalom za kapsuliranje kao nosačem koji obezbeđuje kapsulu u kojoj je aktivna komponenta, sa ili bez nosača, okružena nosačem, koji je na taj način povezan sa njom. Na sličan način uključene su bombone i pastile. Tablete, puderi, kapsule, pilule, bombone i pastile mogu biti upotrebljeni kao čvrsti oblici pogodni za oralno davanje.

Za pripremanje supozitorija, vosak sa niskom temperaturom topljenja, kao što je smeša masnih kiselih glicerida ili kokosovog ulja, se prvo topi a onda sa unutar toga aktivna komponenta rasprši homogeno, putem mešanja. Istopljena homogena smeša se onda sipa u modle odgovarajuće veličine, dopušta im se da se ohlade, i pri tome učvrste.

Formulacije odgovarajuće za vaginalno davanje mogu biti prezentovane kao čepovi, tamponi, kreme, gelovi, pase, pene ili sprejovi koji sadrže dodatno aktivnom sastojku takve nosači kao što su oni koji su već poznati kao odgovarajući u nauci.

Preparati u tečnom obliku uključuju rastvore, suspenzije i emulzije, na primer, vodeni ili voda-propilen glikol rastvori. Na primer, tečni preparati za parenteralno ubrizgavanje mogu biti formulisani kao rastovri u vodenom polietilen glikol rastovoru. Preparati koji se mogu ubrizgati, na primer, sterilne ubrizgavajuće vodene ili masne suspenzije mogu biti formulisane prema stanju tehnike upotrebom odgovarajućih sredstava za dispergovanje ili vlaženje ili suspenzivnih sredstava. Sterilni ubrizgavajući preparat može takođe biti sterilni ubrizgavajući rastvor ili suspenzija u prihvatljivom netoksičnom parenteralnom razređivaču ili rastvaraču, na primer, kao rastvor u 1,3-butandiolu. Među prihvatljivim tečnim nosačima i rastvaračima koji se mogu uposliti su voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Dodatno tome, sterilna, fiksirana ulja se konvencionalno upošljavaju kao rastvarač ili suspenzivni medijum. U ovu svrhu bilo koje blago fiksirano ulje može biti uposleno uključujući sintetičke mono- ili digliceride. Dodatno tome, masne kiseline kao što je oleinska kiselina nalaze upotrebu u preparatima koji se ubrizgavaju.

Jedinjenja prema sadašnjem pronalasku mogu tako biti formulisana za parenteralno davanje (n.pr., putem ubrizgavanja, na primer, bolus injekcijom ili kontinuiranom infuzijom) i mogu biti prezentirana u jediničnom mobliku doze u ampulama, prethodno napunjenim brizgalicama, infuzijama male zapremine ili u multi-doznim kontejnerima sa dodatim prezervativom. Farmaceutske kompozicije mogu da uzmu takve oblike kao suspenzije, rastvori ili emulzije u uljanim ili vodenim tečnim nosačima, i mogu da sadrže formulatorna sredstva kao što su suspenzivan, stabilizirajuća i/ili sredstva za dispergovanje. Alternativno, aktivni sastojak može biti u obliku pudera, dobijen aseptičkim izolovanjem sterilnog čvrstog oblika ili putem liofilizacije iz rastvora, radi konstituisanja sa odgovarajućim tečnim nosačem, n.pr. sterilnom, bez pirogena vodom, pre upotrebe.

Vodene formulacije pogodne za oralnu upotrebu mogu biti pripremljene rastvaranjem ili suspendovanjem aktivne komponente u vodi i dodavanjem pogodnih sredstava za davanje boje, ukusa, stalizirajućih ili sredstava za zgušnjavanje, kako se to već želi.

Vodene suspenzije pogodne za oralnu upotrebu mogu biti sačinjene putem dispergovanja fino izdeljene aktivne komponente u vodi sa viskoznim materijalom, kao što su prirodne ili sintetičke gume, smole, metilceluloza, natrijum karboksimetilceluloza, ili druga vrlo dobro poznata suspenzivna sredstva.

Takođe su uključeni čvrsti oblici preparata koji se imaju konvertovati, kratak vremenski period pre upotrebe, u tečni oblik preparata za oralno davanje. Takvi tečni oblici uključuju rastvore, suspenzije i emulzije. Ovi preparati mogu da sadrže, dodatno aktivnoj komponenti, sredstva za davanje boje, ukusa, pufere, veštačke i prirodne zaslađivače, sredstva za dispergovanje, zgušnjavanje sredstava za rastvaranje, i slično.

Za mesno davanje na epiderm jedinjenja prema pronalasku mogu biti formulisana kao masti, kreme ili losioni, ili kao transdermalni flaster.

Masti i kreme mogu, na primer, biti formulisane u vodenoj ili uljanoj bazi sa dodavanjem odgovarajućih sredstava za zgušnjavanje i/ili stvaranje gela. Losioni mogu biti formulisani sa vodenom ili uljanom bazom i generalno će takođe sadržati jedno ili više sredstava za emulgovanje, sredstava za stabilizovanje, disperzivnih sredstava, supsnzivnih sredstava, sredstava za zgušnjavanje ili sredstava za davanje boje.

Formulacije pogodne za mesno davanje kroz usta uključuju pastile koje se sastoje od aktivnog sredstva u bazi sa dodatim ukusom, uobičajeno sukrozom i akacijom ili tragakantom; pastile koje se sastoje od aktivnog sastojka u inertnoj bazi kao što su želatin i glicerin ili sukroza i akacija; i sredstva za pranje usta koja se sastoje od aktivnog sastojka u odgovarajućem tečnom nosaču.

Rastvori ili suspenzije se nanose direktno u nazalnu šupljinu konvencionalnim sredstvima, na primer sa kapaljkom, pipetom ili sprejom. Formulacije mogu biti obezbeđene u jediničnom ili multi-doznom obliku. U potonjem slučaju kapaljke ili pipete, ovo se može postići davanjem pacijentu u odgovarajućoj, prethodno određenoj zapremini rastvra ili suspenzije. U slučaju spreja, ovo se može postići na primer sredstvima sprej pumpice sa raspršivačem i mernim instrumentom.

Davanje u respiratorni trakt može takođe biti postignuto sredstvima aerosol formulacije u kojima se aktivni sastojak obezbeđuje u pakovanju pod pritiskom sa odgovarajućim reaktivnim sredstvom. Ukoliko se jedinjenja sadašnjeg pronalaska ili farmaceutske kompozicije koje ih sadrže daju kao aerosoli, na pirmer kao nazalni aerosoli ili putem inhalacije, ovo se može obaviti, na primer, upotrebom spreja, raspršivača, pumpe za raspršivanje, aparata za inhalaciju, inhalatora sa skalom ili inhalatora suvog praška. Farmaceutski oblici za davanje jedinjenja sadašnjeg pronalaska kao aerosola mogu se pripremiti putem dobro poznatih postupaka stručnjaku iz ove oblasti nauke. Za njihovo pripremanje, na primer, rastvori ili disperzije jedinjenja sadašnjeg pronalaska u vodi, voda/alkohol smešama ili odgovarajućim slanim rastvorima mogu se uposliti upotrebom uobičajenih aditiva, na primer benzil alkohola ili drugih odgovarajućih prezervativa, pojačivača absorbcije za povećanje biodostupnosti, sredstava za rastvaranje, sredstava za dispergovanje i drugih, i, ukoliko je to odgovarajuće, uobičajenih reaktivnih sredstava, na pirmer uključujući karbon dioksid, CFC-ove, kao što su, dihlorodifluorometan, trihlorofluorometan, ilidihlorotetrafluoroetan; i slično. Aerosol može pogodno takođe da sadrži površinsko sredstvo kao što je lecitin. Doza leka može biti kontrolisana obezbeđivanjem mernog ventila.

U formulacijama koje služe za davanje u respiratorni trakt, uključujući intranazalne formulacije, jedinjenje će generalno imati malu veličinu čestice na primer reda veličine 10 mikrona ili manje. Takva veličina čestice može biti dobijena sredstvima poznatim u nauci, na primer putem mikronizacije. Kada se to želi, mogu se uposliti formulacije adaptirane da daju odloženo oslobađanje aktivnog sastojka.

Alternativno aktinvi sastojci mogu biti obezbeđeni u obliku suvog pudera, na primer, smeša pudera jedinjenja u odgovarajućoj puder bazi kao što su laktoza, škrob, derivati škroba kao što su hidroksiproppilmetilceluloza i polivinilpirolidon (PVP). Pogodno će puder nosač formirati gel u nazalnoj šupljini. Puder kompozicija može biti prezentovana u jediničnom obliko doze na primer u kapsulama ili trakama, n.pr., želatina, ili blister pakovanjima iz kojih puder može da se daje inhalatorom.

Farmaceutski preparati su pretpostavljeno u jediničnim oblicima doze. U takvom obliku, preparat pod podeljena u jedinične doze koje sadrže odgovarajuće količine aktivne komponente. Jedinični oblik doze može biti zapakovani preparat, paket koji sadrži odvojene količine preparata, kao što su pakovane tablete, kapsule i puderi u sudovima ili ampulama. Takođe, jedinični oblik doze može biti kapsula, tableta, bombona, ili pastila sami po sebi, ili mogu biti određeni broj bilo koje od njih u zapakovanom obliku.

Tablete ili kapsule za oralno davanje i tečnosti za intravenozno davanje su pretpostavljene kompozicije.

Jedinjenja prema pronalasku mogu opciono da postoje kao farmaceutski prihvatljive soli uključujući farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli pripremljene iz farmaceutski prihvatljivih netoksičnih kiselina uključujući neorganske i organske kiseline. Reprezentativne kiseline uključuju, ali nisu limitirane na, sirćetnu, benzensulfo, benzojevu, kamforsulfo, limunsku, etensulfo, dihlorosirćetnu, mravlju, fumarnu, glukonska, glutaminska, hipurna, bromovodonična, hlorovodonična, izetionska, mlečna, maleinska, jabučna, bademova, metansulfo, sluzna, azotna, oksalna, pantotenska, fosforna, ćilibarna, sumporna, vinska, oksalna, p-toluensulfokiselina i slično, kao što su one farmaceutski prihvatljive soli date u spisku u Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977).

Kisele adicione soli mogu biti dobijene kao direktan proizvod sinteze jedinjenja. Alternativno, slobodna baza se može rastvoriti u odgovarajućem rastvaraču koji sadrži odgovarajuću kiselinu, i so se izoluje isparavanjem rastvarača ili odvajanjem na neki drugi način soli i rastvarača. Jedinjenja ovog pronalaska mogu da formiraju solvate sa standardnim rastvaračim niske molekularne težine upotrebom postupaka poznatih stručnjaku iz ove oblasti nauke.

Dodatno tome, jedinjenja prema pronalasku mogu opciono da postoje kao farmaceutski prihvatljive bazne adicione soli. Na primer, ove soli mogu biti pripremljene in situ tokom konačnog izolovanja i prečišćavanje jedinjenja pronalaska, ili odvojeno reagovanjem sa kiselim ostatkom, kao što je karbonska kiselina, sa odgovarajućom bazom kao što je hidroksid, karbonat ili bikarbonat farmaceutski prihvatljivog metalnog katjona ili sa amonijakom, ili sa organskim primarnim, sekundarnim ili tercijarnim aminom. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju, ali nisu limitirane na, katjone bazirane na alkalnim ili alkalno zemnim metalima, kao što su natrijum, litijum, kalijum, kalcijum, magnezijum, aluminijum soli i slično, kao i netoksičnim amonimumom, kvaternamim amonijumom, i amin katjonima, uključujući, ali ne limitirajući na amonijum, tetrametilamonijum, tetraetilamonijum, metilamin, dimetilamin, trimetilamin, trietilamin, etilamin i slično. Drugi reprezentativni organski amini korisni za formiranje bazne adicione soli uključuje dietilamin, etilenediamin, etanolamin, dietanolamin, piperazin i slično.

Jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti konvertovana u "pro-lekove". Pojam "pro-lekovi" se odnosi na jedinjenja koja su modifikovana sa specifičnim hemijskim grupama poznatim u nauci i kada se daju pojedincu ove grupe prolaze biotrasformaciju da se dobije matično jedinjenje. Pro-lekovi tako mogu biti posmatrani kao jedinjenja pronalaska koja sadrže jednu ili više specijalizovanih netoksičnih zaštitnih grupa koje se upotrebljavaju na prolazni način da se izmeni ili da se eliminiše osobina jedinjenja. U jednom generalnom aspektu, "pro-lek" pristup se iskorištava da se obavi oralna absorbcija. Detaljna diskusija je data kod T. Higuchi and V. Stella, "Pro-drugs as Novel Deliverv Svstems," Vol. 14 of the A.C.S. Svmposium Series; and in Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edvvard B. Roche, American Pharmareutical Association and Pergamon Press, 1987.

Neke realizacije sadašnjeg pronalaska uključuju postupak proizvodnje farmaceutske kompozicije za "kombinacionu-terapiju" koja se sastoji od smešanja bar jednog jedinjenja u skladu sa bilo kojim od jeidnjenja realizacije koje su ovde otkrivene, zajedno sa bar jednim poznatim farmaceutskim sredstvom kao što je to ovde opisano i farmaceutski prihvatljivim nosačem.

U nekim realizacijama farmaceutska sredstva su odabrana od grupe koja se sastoji od: sulfonilurea, meglitinida, biguanida, inhibitora a-glukozidaze, lekova za smanjenje holesterola (na primer, fibrati koji uključuju: fenofibrat, bezafibrat, gemfiborzil, klofibrat i slično; inhibitori žučne kiseline koji uključuju: holestiramin, kolestipol i slično; i niacin), antiplatelet sredstva (na primer, aspirin i adenozin difosfat receptor antagonisti koji uključuju: klopidogrel, tiklopidin i slično), angiotenzin-konvertujući inhibitori enzima, antiogenzin II receptor antagonisti i adiponektin.

Zabeleženo je da kada su RUP3 receptor modulatori iskorišteni kao aktivni sastojci u farmaceutskoj kompoziciji, nema se namera da se upotrebljavaju samo kod ljudi, već i u drugim ne-humanim sisarima takođe. Naravno, skorašnji proboji u oblasti brige o zdravlju životinja traže da se da razmatranje za upotrebu aktivnih sredstava, kao što RUP3 receptor modulatori, za lečenje gojaznosti kod domaćih životinja (n.pr., mački i pasa), i RUP3 receptor modulatori u drugim domaćim životinjama gde nije evidentna bolest ili poremećaj (n.pr., na hranu orijentisane životinje kao što su krave, pilići, riba, itd.). Stručnjaci iz ove oblasti nauke su već poseduju znanje kako da se iskoriste takva jedinjenja u takvim okruženjima.

Kombinaciona terapija

U kontekstu sadašnjeg pronalaska jedinjenja kako je vode opisano ili njegova farmaceutska kompozicija može se iskoristiti za moduliranje aktivnosti sa RUP3 receptorom posredovanih bolesti, stanja i/ili poremećaja kako je to ovde opisano. Primeri moduliranja aktivnosti sa RUP3 receptorom posredovanih bolesti uključuje lečenje sa metabolizmom povezane poremećaje. Sa metabolizmom povezane bolesti uključuju, ali nisu limitirane na, hiperlipidemija, tip 1 dijabetis, tip 2 dijabetis melitus, o sva stanja povezana sa tim, kao što su, ali nisu limitirana na koronarna bolest srca, ishemični moždani udar, restenoza nakon angioplastike, periferno vaskularna bolest, hramanje na mahove, miokardijački infarkt (n.pr. nekroza i apoptoza), dislipidemija, lipemija nakon obroka, stanja pogoršane tolerancije glukoze (IGT), stanja pogoršane našte plazma glukoze, metabolitička acidoza, ketoza, artritis, gojaznost, osteoporoza, hipertenzija, kongestivni prestanak rada srca, leva ventrikularna hipertrofija, periferna arterijska bolest, dijabetička retinopatija, makularna degeneracija, katarakta, dijabetička nefropatija, glomeruloskleroza, hronični renalni pad, dijabetička neuropatija, metabolitički sindrom, sindrom X, predmenstrualni sindrom, koronarna srčana bolest, angina pektoris, tromboza, ateroskleroza, miokardijački infarkt, prolazni ishemični napadi, slog, vaskularna restenoza, hiperglikemija, hiperinsulinemija, hiperlipidemija, hipertrigliceridemija, otpornost na insulin, pogoršani metabolizam glukoze, stanja pogoršane tolerancije glukoze, stanja pogoršane našte plazma glukoze, gojaznost, erektivna disfunkcija, poremećaji na koži i vezivnom tkivu, razjedanja stopala i ulcerativni kolitis, endotelijalna disfunkcija i pogoršana vaskularna popustljivost. U nekim realizacijama, sa metabolizmom povezani poremećaji uključuju tip I dijabetis, tip II dijabetis, neadekvatnu tolreanciju glukoze, otpornost na insulin, hiperklikemiju, hiperlipidemiju, hipertrigliceridemiju, hiperholesterolemiju, dislipidemiju i sindrom X. Drugi primeri moduliranja aktivnosti sa RUP3 receptorom posredovanih bolesti uključuju lečenje gojaznosti i/ili prekomerne težine putem smanjenja unosa hrane, izazivanja zasićenosti (n.pr., osećaj sitosti), kontrolisanje dobijanja težine, smanjenj telesne težine i/ili uticanje na metabolizam tako da primalac gubi težinu i/ili održava težinu.

Dok jedinjenja pronalaska mogu biti davana kao jedino aktivno farmaceutsko sredstvo (odnosno, mono-terapija), ona takođe mogu biti upotrebljena u kombinaciji sa drugim farmaceutskim sredstvima (odnosno, kombinaciona terapija) za lečenje bolesti/stanja/poremećaja koji su ovde opisani. Ovde su opisani postupci profilakse i/ili lečenja sa metabolizmom povezanog poremećaja ili sa težinom povezanog poremećaja, kao što je gojaznost, koji se sastoje od davanje pojedincu kome je neophodna profilaksa i/ili lečenje terapeutski efektivne količine jedinjenja sadašnjeg pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih farmamaceutskih sredstava kao što to ovde opisano.

Pogodna farmaceutska sredstva koja se mogu upotrebiti u kombinaciji sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju sredstva protiv gojaznosti kao što su inhibitori apolipoprotein-B izlučenog/mikrosomalnog triglicerid transfer proteina (apo-B/MTP), MCR-4 agonisti, holescistokinin-A (CCK-A) agonisti, inhibitori resorbcije serotonina i norepinefrina (na primer sibutramin), simpatomimetička sredstva, [33 adrenergični receptor agonisti, dopamin agonisti (na primer bromokriptin), melanocit-stimulišući hormon receptor analozi, kanabinoid 1 receptor antagonisti [na primer SR141716: N-(piperidin-1 -il)-4-(4-hlorofenil)-1 -(2,4-dihlorofenil)4-metil-1 H-pirazol-3-karboksamidj, melanini koncentrišući hormon antagonisti, leptoni (OB protein), leptin analozi, leptin receptor agonisti, galanin antagonisti, inhibitori lipaze (kao što je tetrahidropilstatin, odnosno, Orlistat), anorektična sredstva (kao što je bombesin agonist), Neuropeptid-Y antagonisti, tiromimetička sredstva, dehidroepiandosteron ili njegov analog, glukokortikoid receptor agonisti ili antagonisti, orexin receptor antagonisti, urokortin vezujući protein antagonisti, glukagonu-slični peptid-1-receptor agonisti, trepljasti neutrotrofični faktori (kao što su Axokine™ dostupan od Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Tarrytown, NY i Procter & Gamble Companv, Cincinnati, OH), humani agouti-povezani proteini (AGRP), grelin receptor antagonisti, histamin 3 receptor antagonisti ili inverzni agonisti, neuromedin U receptor agonisti, noradrenergična anorektična sredstva (na primer, fentermin, mazindol i slično) i potiskivači apetita (na primer, bupropion).

Druga sredstva protiv gojaznosti, uključujući sredstva koja su prethodno navedenainfra,su dobro poznata, ili će biti očigledna u svetlu trenutnog otkrića, stručnjaku iz ove oblasti nauke. U nekim realizacijama, sredstva protiv gojaznosti su odabrana od grupe koja sadrži orilistat, sibutramin, bromokriptin, efedrin, leptin, i pseudoefedrin. U daljoj realizaciji, jedinjenja sadašnjeg pronalaska i kombinacione terapije se daju zajedno sa propisanim vežbanjem i/ili razumnom dijetom.

Podrazumeva se da obim kombinacione terapije jedinjenja sadašnjeg pronalaska sa drugim sredstvima protiv gojaznosti, anorektičnim sredstvima, potiskivačem apetita i drugim povezanim sredstvima nije limitiran na ona koja su u gornjem tekstu navedena, već uključuju u principu bilo koju kombinaciju sa bilo kojim farmaceutskim sredstvom ili farmaceutskom kompozicijom korisnim za lečenje pojedinaca sa prekomernom težinom i gojaznošću.

Druga odgovarajuća farmaceutska sredstva, dodatno sredstvima protiv gojaznosti, koja se mogu upotrebiti u kombinaciji sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju sredstva korisna u lečenju sa metabolizmom povezanih poremećaja i/ili njihovih bolesti koje se pojavljuju istovremeno. Na primer, ali ne i limitirano na, kongestivni prekid rada srca, tip I dijabetis, tip II dijabetis, neadekvatna tolerancija glukoze, otpornost na insulin, hiperglikemija, hiperlipidemija, hipertrigliceridemija, hiperholesterolemija, dislipidemija, sindrom X, retinopatija, nefropatija i neuropatija. Lečenje jedne ili više od bolesti koje su prethodno navedene uključuju upotrebu jednog ili više farmaceutskih sredstava poznatih u nauci koje pripadaju klasama lekova koje se pozivaju na, ali nisu i limitirane na, sledeće: sulfoniluree, meglitinidi, biguanidi, inhibitori a-glukozidaze, peroksisom proliferatori-aktivirani receptor-y (odnosno, PPAR-y) agonisti, insulin, insulin analozi, inhibitori HMG-CoA reduktaze, lekovi za sniženje holesterola (na primer, fibrati koji uključuju: fenofibrat, bezafibrat, gemfibrozil, klofibrat i slično; inhibitori žučne kiseline koji uključuju: holestiramin, kolestipol i slično; i niacin), antiplatelet sredstva (na primer, aspirin i adenozin difosfat receptor antagonisti koji uključuju: klopidogrel, tiklopidin i slično), angiotenzin-konvertujući inhibitori enzima, antiogenzin II receptor antagonisti i adiponektin i slično. U skladu sa jedinim aspektom sadašnjeg pronalaska, jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu biti upotrebljena u kombinaciji sa farmaceutskim sredstvom ili sredstvima koja pripadaju jednoj ili više klasa lekova koji su ovde navedeni.

Podrazumeva se da obim kombinacione terapije jedinjenja sadašnjeg pronalaska sa drugim farmaceutskim sredstvima nije limitirana na ona koja su ovde navedena,suprailiinfra,već uključuje u principu bilo koju kombinaciju sa bilo kojim farmaceutskim sredstvom ili farmaceutskom kompozicijom korisnom za lečenje bolesti, stanja i poremećaja koja se vezuju za sa metapobolizmom povezane poremećaje.

Ovde su opisani postupci lečenja bolesti, poremećaja, stanja ili njihovih komplikacija kao što je opisano, koji se sastoje od davanja pojedincu kome je neophodno takvo lečenje terapeutski efektivne količine ili doze jedinjenja sadašnjeg pronalaska u kombinaciji sa bar jednim farmaceutskim sredstvom iz grupe koja se sastoji od: sulfoniluree, meglitinidi, biguanidi, inhibitori o> glukozidaze, peroksizom proliferatore aktivirane receptorima-y (odnosno, PPAR-y) agonisti, insulin, insulin analozi, inhibitori HMG-CoA reduktaze, lekovi za sniženje holesterola (na primer, fibrati koji uključuju: fenofibrat, bezafibrat, gemfibrozil, klofibrat i slično; inhibitori žučne kiseline koji uključuju: holestiramin, kolestipol i slično; i niacin), antiplatelet sredstva (na primer, aspirin i adenozin difosfat receptor antagonisti koji uključuju: klopidogrel, tiklopidin i slično), angiotenzin-konvertujući inhibitori enzima, antiogenzin II receptor antagonisti i adiponektin. U nekim realizacijama, postupci sadašnjeg pronalaska uključuju da se jedinjenja sadašnjeg pronalaska i farmaceutska sredstva daju odvojeno. U daljim realizacijama, jedinjenja sadašnjeg pronalaska i farmaceutska sredstva se daju zajedno. Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju sulfoniluree. Sulfoniluree (SU) su lekovi koji promovišu lučenje insulina iz pankreatičnih (3 ćelija putem transmitovanja signala lučenja insulina putem SU receptora u ćelijskim membranama. Primeri sulfonilurea uključuju gliburid, glipizid, glimepirid i druge sulfoniluree poznate u nauci.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju meglitinide. Meglitinidi su derivati benzojeve kiseline i predstavljaju novu klasu insulin sekretagoga. Ova sredstva ciljaju hiperglikemiju posle obroka i prikazuju uporedivu efikasnost prema sulfonilureama u smanjenju HbA1c. Primeri meglitinida uključuju repaglinid, nateglinid i druge meglitinide poznate u nauci.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju biguanide. Biguanidi predstavljaju klasu lekova koji stimulišu anaerobičnu glikolizu, povećavaju osetljivost na insulin u perifernim tkivima, inhibiraju absorbciju glukoze iz creva, potiskuju hepatičnu glukoneogenezu, i inhibiraju oksidaciju masne kiseline. Primeri biguanida uključuju fenformin, metformin, buformin i biguanide poznate u nauci.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju inhibitore a-glukozidaze. Inhibitori a-glukozidaze kompetetivno inhibiraju digestivne enzime kao što su ct-amilaza, maltaza, a-dekstrinaza, saharaza, itd., u pankreasu ili malom crevu. Reverzibilna inhibicija putem inhibitora a-glukozidaze usporava, umanjuje ili na bilo koji drugi način redukuje nivoe glukoze u krvi putem odlaganja varenja škroba i šećera. Primeri inhibitora a-glukozidaze uključuju akarbozu, N-(1,3-dihidroksi-2-propil)valiolamin (generčno ima: vogliboza), miglitol, i inhibitore a-glukozidaze poznate u nauci.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju peroksizom proliferatore aktivirane receptorima-y (odnosno, PPAR-y) agoniste. Peroksizom proliferatore aktivirane receptorima -y agonisti predstavljaju klasu jedinjenja koja aktivira nuklearni receptor PPAR-y i tako reguliše transkripciju insulin-responzivnih gena uključenih u proizvodnju, transport i iskorištavanje glukoze. Sredstva u klasi takođe obavljaju regulaciju metabolizma masnih kiselina. Primeri PPAR-y agonista uključuje roziglitazone, pioglitazone, tesaglitazar, netoglitazon, GVV-409544, GVV-501516 i PPAR-y agoniste poznate u nauci.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju inhibitore HMG-CoA reduktaze. Inhibitori HMG-CoA reduktaze su sredstva koja se pominju kao Statin jedinjenja koja pripadaju klasi lekova koji snižavaju nivoe holesterola u krvi putem inhibicije hidroksimetilglutalil CoA (HMG-CoA) reduktaze. HMG-CoA reduktaza je enzim za limitiranje brzine u biosintezi holesterola. Statini snižavaju koncentracije seruma LDL putem ragulisanja naviše aktivnosti LDL receptora i odgovorni su za čišćenje LDL iz krvi. Neki reprezentativni primeri statin jedinjenja uključuju rosuvastatin, pravastatin i njihove natrijum soli, simvastatin, lovastatin, atorvastatin, fluvastatin, cerivastatin, rozuvastatin, pitavastatin, BMS-ov "superstatin", i inhibitori HMG-CoA reduktaze koji su poznati u nauci.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju fibrate. Fibrat jedinjenja pripadaju klasi lekova koji snižavaju nivoe holesterola u krvi putem inhibiranja sinteze i lučenja triglicerida u jetru i aktiviranjem lipoprotein lipaze. Za fibrate je poznato da aktiviraju peroksizom proliferatore aktivirane receptorima i izazivaju ekspresiju lipoprotein lipaze. Primeri fibrat jedinjenja ukljčuju bezafibrat, beklobrat, binifibrat, ciplofibrat, klinofibrat, klofibrat, klofibrična kiselina, etofibrat, fenofibrat, gemfibrozil, hikofibrat, pirifibrat, ronifibrat, simfibrat, teofibrat, i fibrate poznate u nauci.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju inhibitore angiotenzin konvertujućeg enzima (ACE). Inhibitori angiotenzin konvertujućeg enzima pripadaju klasi lekova koji delimično snižavaju nivoe glukoze u krvi kao i snižavaju krvni pritisak putem inhibidije angiotenzin konvertujućih enzima. Primeri inhibitora angiotenzin konvertujućih enzima uključuju kaptopril, enapril, alacepril, delapril; ramipril, lizinopril, imidapril, benazepril, ceronapril, cilazapril, enalaprilat, fosinopril, moveltopril, perindopril, hinapril, spirapril, temokapril, trandolapril, i inhibitore angiotenzin konvertujućeg enzima poznate u nauci.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju angiotenzin II receptor antagoniste. Angiotenzin II receptor antagonisti ciljaju angiotenzin II receptor podtip 1 (odnosno, AT1) i demonstriraju korisno dejstvo na hipertenziju. Primeri angiotenzin II receptor antagonista uključuju losartian (i oblik kalijum soli), i angiotenzin II receptor antagoniste poznate u nauci. Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju inhibitore skvalen sinteze. Inhibitori skvalen sinteze pripadaju klasi lekova koji snižavaju nivoe holesterola u krvi inhibiranjem sinteze skvalena. Primeri inhibitora skvalen sinteze uključuju (S)-a-[Bis[2,2-dimetil-1 -oksopropoksi)metoksi]fosfinil]-3-fenoksibenzenbutansulfo kiselina, mono kalijumova so (BMS-188494) i inhibitori skvalen sinteze koji su poznati u nauci.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju, ali nisu limitirani na, amilin agoniste (naprimer, pramlintid), insulin sekretagogoe (n primer, GLP-1 agonisti; exendin-4; insulinotropin (NN2211); inhibitore dipeptil peptidaze (na primer, NVP-DPP-728), inhibitori acil CoA holesterol acetiltransferaze (na primer, Ezetimib, eflucimib, i slična jedinjenja), inhibitoriabsorbcije holesterola (na primer, ezetimib, pemakesid i slična jedinjenja), inhibitori holesterol estar transfer proteina (na primer, CP-529414, JTT-705, CETi-1, i slična jedinjenja), inhibitori mikrosomalnog triglicerid trasfer proteina (na primer, implitapid, i slična jedinjenja), modulatori holesterola (na primer, NO-1886, i slična jedinjenja), modulatori žučne kiseline (na primer, GT103-279 i slična jedinjenja), modulatori insulin signalizirajuće putanje, kao inhibitori protein tirozin fosfataza (PTPaze), mimetička jedinjenja ne malog molekula i inhibitori glutamin-fruktoza-6-fosfat amido transferaze (GFAT), jedinjenja koja utiču na proizvodnju neregulisane hepatičke glukoze, kao inhibitori glukoza-6-fosfataze (G6Paza), inhibitori fruktoza-1,6-bisfosfataze (F-1,6-Bpaza), inhibitori glikogen fosforilaze (GP), glukagon receptor antagonisti i inhibitori fosfoenolpiravat karboksikinaze (PEPCK), inhibitori piruvat dehidrogenaza kinaze (PDHK), pojačivači senzitivnosti na insulin, pojačivači lučenja insulina, inhibitori gastričnog pražnjenja, a2-adrenergični antagonisti i retinoidni X receptor (RXR) agonisti.

Odgovarajuća farmaceutska sredstva koja mogu biti upotrebljena zajedno sa jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju inhibitore dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV). Primeri inhibitora DPP-IV uključuju valin-pirolidid, 3-(L-izoleucil)tiazolidin, 1-[2-[5-cijanopiridin-2-il)amino]etilamino]acetil-2-cijano-(S)-pirolidin (NVP-DPP728), 3-(R)-Amino-1-[3-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7-il]-4-(2,4,5-trifluorofenil)butan-1-on

(MK-0431), (1-[[3-hidroksi-1-adamantil)amino]acetil]-2-cijano-(S)-pirolidin (LAF237), (1S,3S,5S)-2-[2(S)-Amino-2-(3-hidroksiadamantan-1-il)acetil]-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karbonitril (BMS-477118), [1-[2(S)-Amino-3-metilbutiril]pirolidin-2(R)-il]boronska kiselina (PT-100), GSK-823093, PSN-9301, T-6666, SYR-322, SYR-619 i inhibitori DPP-IV poznati u nauci. Primerni inhibitori DPP-IV poznati u nauci uključuju ali nisu limitirani na one otkrivene u sledećim međunarodnim prijavama: WO 2005/075426, VVO 2005/072530, VVO 2005/063750, VVO 2005/058849, VVO 2005/047297, VVO 2005/042488, VVO 2005/040095, VVO 2005/033099, VVO 2005/030751, VVO 2005/030127, VVO 2005/026148, VVO 2005/025554, VVO 2005/023762, VVO 2005/020920, VVO 03/04498, VVO 00/34241, VVO 98/19998 i VVO 97/40832. U nekim realizacijama, inhibitor DPP-IV je selektivni inhibitor DPP-IV, koji ima selektivnostza DPP-IV preko blisko povezanih peptidaza, kao što su jedna ili više od post-prolin-cepajućeg enzima (PPCE), dipeptidil peptidaza II (DPP-II), dipeptidil peptidaza 8 (DPP-8) i dipeptidil peptidaza 9 (DPP-9).

U skladu sa sadašnjim pronalaskom, kombinacija se može upotrebiti smešanjem određenih aktivnih komponenata bilo svih zajedno ili nezavisno sa fiziološki prihvatljivim nosačem, inertnim puniocem, vezivnim sredstvom, razređivačem, itd., kao što je to u gornjem tekstu opisano, i davanjem smeše ili smeša bilo oralno ili ne-oralno kao farmaceutske kompozicije. Kada se jedinjenje ili smeša jedinjenja sadašnjeg pronalaska daju kao kombinaciona terapija sa drugim aktivnim jedinjenjam terapeutska sredstva mogu biti formulisana kao odvojene farmaceutske kompozicije koje se daju u isto vreme ili u različitim vremenima, ili terapeutska sredstva mogu biti data kao jedna kompozicija.

Druge koristi

Sledeći predmet sadašnjeg pronalaska se odnosi na radioaktivno označena jedinjenja kao što su ovde prikazana koja će biti korisna ne samo kod radioaktivnog snimanja već takođe i u ogledima, kako in vitro tako in vivo, za lokalizovanje i kvantifikaciju RUP3 receptora u uzorcima tkiva, uključujući humana, i za identifikovanje RUP3 receptor liganada putem inhibicije vezivanja radiaktivno označenog jeidnjenja. Dalji je predmet ovog pronalaska da razvije nove RUP3 receptor oglede koji obuhvataju takva radioaktivno označena jedinjenja.

Sadašnji pronalazak obuhvata izotopno označena jedinjenja formule (la) i bilo koju podvrstu koja se ovde nalazi, kao što su ali nisu limitirana na, Formula (la) do Formula (Ili). "Izotopno" ili "radioaktivno označena" jedinjenja su ona koja su identična sa jedinjenja koja su ovde otkrivena, osim po činjenici da je jedan ili više atoma zamenjeno ili supstituisano putem atoma koji ima atomsku masu ili maseni broj različiti od atomske mase i masenog broja koji se tipično pronalazi u prirodi (odnosno, prirodno nastajućeg). Odgovarajući radionukleotidi koji mogu biti inkorporisani u jedinjenjima sadašnjeg pronalaska uključuju ali nisu limitirani na<2>H (takođe se piše kao D za deuterijum),<3>H (takođe se piše kao T za tritijum),<11>C,13C,1<4>C, 1<3>N,1<5>N, 150, 170, 180,1<8>F, 3<5>S, 36CI,82Br,7<5>Br, 7<6>Br,77Br,123J,124J,125Ji<131>J. Koji je radionukleotid inkorporisan u trenutno radioaktivno označena jedinjenja će zavisiti od specifične primene tog radioaktivno označenog jedinjenja. Na primer, za in vitro označavanje RUP3 receptora i oglede kompeticije, jedinjenja koja inkorporišu<3>H,<14>C,<82>Br,<1>25J,131J,35Sili koja će generalno biti najkorisnija. Za radioaktivno snimanje<p>rimene11C,<18>F,125J, 123J,1<24>J,<1>31J,75Br,<76>Br ili<77>Br će generalno biti najkorisnija.

Podrazumeva se da je "radioaktivno označeno" ili "označeno jedinjenje" jedinjenje sadašnjeg pronalaska koji ima inkorporisan bar jedan radionukleotid; u nekim realizacijama radionukleotid je odabran od grupe koja se sastoji od<3>H,<14>C,125Ji 8<2>Br.

Određena izotopno označena jedinjenja sadašnjeg pronalaska su korisna u ogledima distribucije jedinjenja i/ili supstrata tkiva. U nekim realizacijama radionuklid<3>H i/ili<14>C izotopi su korisni u ovim studijama. Dalje, supstitucija sa težim izotopima kao što je deuterijum (odnosno,<2>H) mogu da daju odrežene terapeutske prednosti koje rezultiraju iz većem metabolitičke stabilnosti (n.pr., povećani in vivo polu-život ili smanjene potrebe doze) i prema tome može biti poželjna u nekim situacijama. Izotopno označena jedinjenja sadašnjeg pronalaska mogu generalno biti pripremljena praćenjem postupaka analognim onima kji su otkriveni u Šemama supra i Primerima infra, putem supstituisanja izotopno označenog reagensa sa ne-izotopno označenim reagensom. Drugi sintetički postupci koji su korisni se diskutujuinfra.Šta više, treba da se razume da svi atomi predstavljeni u jedinjenjima pronalaska mogu biti ili najčešći pojavni izotop takvog atoma ili redi radioaktivni izotop ili neradioaktivni izotop.

Sintetički postupci za inkorporisanje radioaktivnih izotopa u organska jedinjenja su primenjljivi na jedinjenja pronalaska i dobro su poznati u nauci. Ovi sintetički postupci, na primer, inkorporisanje nivoa aktivnosti tritijuma u ciljane molekule, su kako dalje sledi:

A. Katalitička redukcija sa tritijum gasom - ovaj postupak normalno daje prinos visoke specifične aktivnosti proivzoda i zahteva halogenizovane ili nezasićene prekursore. B. Redukcija sa Natrijumborhidridom [<3>H] - ovaj postupak je pre jeftin i zahteva prekursore koji sadrže funkcionalne grupe koje se mogu redukovati kao što su aldehidi, ketoni, laktoni, estri i slično. C. Redukcija sa Litijum aluminijum hidridom [<3>H] - Ovaj postupak nudi proizvode pri skoro teoretskim specifičnim aktivnostima. Takođe zahteva prekursore koji sadrže funkcionalne grupe koje se mogu redukovati kao što su aldehidi, ketoni, laktoni, estri i slično. D. Označavanje izlaganjem tritijum gasu - ovaj postupak uključuje izlaganje prekursora koji sadrže međusobno zamenjljive protone za tritijum gas u prisustvu odgovarajućeg katalizatora.

E. N-Metilovanje upotrebom Metiljodida [<3>H] - Ovaj postupak se uobičajeno upošljava da se pripreme O-metil ili N-metil (<3>H) proizvodi tretiranjem odgovarajućih prekursora sa metiljodidom visoke specifične aktivnosti (<3>H). Ovaj postupak generalno dopušta visoku specifičnu aktivnost, kao što je na primer, oko 70-90 Ci/mmol.

Sintetički postupci za inkorporisanje nivoa 125J u ciljane molekule uključuju: A. Sandmever i slične reakcije - Ovaj postupak transformiše arili ili heteroaril amin u diazonijum so, kao što je tetrafluoroborat so, i poto do<125>Joznačenog jedinjenja upotrebom Na125J. Reprezentativni postupak je dat od strane Zhu. D.-G. I ko-radnici u J. Org. Chem. 2002, 67, 943-948. B. Orto<125>Jodovanje<f>enola - Ovaj postupak dopušta inkorporaciju 125Jna orto poziciju fenola kao što je dato kod Collier, T.L. i ko-radnici u J. Labeled Compd Radioharm. 1999, 42, S264-S266. C. Razmena arili i heteroaril bromida sa12<5>J - ovaj postupak je generalno u dava koraka postupak. Prvi korak je konverzija arili i heteroaril bromida u korespondirajući tri-alkiltin intermedijarni proizvod upotrebom na primer, Pd katalizovane reakcije [odnosno, Pd(Ph3P)4] ili kroz arili ili heteroaril litijum, u prisustvu tri-alkiltinhalida ili heksa alkilditina [n.pr., (CH3)3SnSn(CH3)3]. Reprezentativni postupak je dat kod Bas, M.-D. i ko-radnika u J. Labeled Compd Radiopharm., 2001, 44, S280-S282.

Radioaktivno označeni RUP3 receptor jedinjenje sadašnjeg pronalaska može se upotrebiti u ogledu pretraživanja da se identifikuju/ocene jedinjenja. U opštim pojmovima, novije sintetizovano ili identifikovano jedinjenje (odnosno, test jedinjenje) može se oceniti na svoju sposobnost da redukuje vezivanje "radioaktivno označenog jedinjenja" sadašnjeg pronalaska za RUP3 receptor. U skladu sa tim, sposobnost test jedinejnja da se takmiči sa "radioaktivno označenim jedinjenjem" sadašnjeg pronalaska za vezivanje za RUP3 receptor direktno je u korelaciji sa njegovim afinitetom vezivanja.

Označena jedinjenja sadašnjeg pronalaska se vezuju za RUP3 receptor. U jednoj realizaciji označeno jedinjenje ima IC50manji od oko 500 ^M, u sledećoj realizaciji označeno jedinjenje ima IC50manji od oko 100 |iM, u još jednoj realizaciji označeno jedinjenje ima IC50manji od oko 10 uM, u još jednoj realizaciji označeno jedinjenje ima IC50manji od oko 1 |uM, i u još jednoj realizaciji označeno jedinjenje ima IC50manji od oko 0,1^M.

Druge upotrebe otkrivenih receptora i postupaka će postati očigledni stručnjacima iz ove oblasti nauke na osnovu, inter alia, pregleda ovog otkrića.

Kao što je biti prepoznato, koraci postupaka sadašnjeg pronalaska nema potrebe da budu obavljeni bilo koji određeni broj puta ili u bilo kojoj pojedinačnoj sekvenci. Dodatni predmeti, prednosti, i nove karakteristike ovoh pronalaska će postati očigledni stručnjacima iz ove oblasti nauke nakon ispitivanja njihovih primera koji slede, i koji imaju nameru samo da budu ilustrativni an da da budu limitirajući.

PRIMERI

Primeri su dati da dalje definišu pronalazak bez, ipak, limitiranja pronalaska na specifičnosti ovih primera.

Primer 1

Ogled sa 96-bazenčića ciklične AMP membrane na RUP3

Materijali:

1) Ogledni pribor flešpločice aktivacije adenlil ciklaze od Perkin Elmer - 96 bazenčića (SMP004B) i 125 J tragač (NEX130) koji dolazi kao

pribor. Držati u frižideru, u kutiji, i ne izlagati flešpločice svetlosti.

2) Fosfokreatin - Sigma P-7936

3) Creatin fosfokinaza — Sigma C-3755

4) GTP-Sigma G-8877

5) ATP-Sigma A-2383

6) IBMX-Sigma 1-7018

7) Hepes - 1M rastvor u destilovanoj vodi - Gibco #15630080

8) MgCI2 - Sigma M-1028-1M rastvor

9) NaCI - Sigma - S6546 - 5M rastvor

10) Bradford Protein ogledni pribor - Biorad # 5000001

11) Poclin 300-Sigma #4-8126

Pufer za vezivanje - filtrirati kroz 45-mikronski Nalgen filter i čuvati u frižideru. Svi puferi i membrane treba da se čuvaju hladni (u ledenoj posudi) dok se obavlja ogled.

20 mM Hepes, pH 7,4

1 mM MgCI2

100 mM NaCI

2x Regneracioni pufer (sačiniti u puferu vezivanja):

20 jedinica kreatin fosfokinaze (4mg/200 ml_)

20 uM GTP (sačiniti do 10,46 mg/mL u puferu vezivanja i dodati 200 ul/200mL)

0,2 mM ATPČ (22,04 mg/200 ml_)

100 mM IBMX (44,4 mg IMBX prvo rastvoren u 1 ml_ 100% DMSO a onda se doda cela količina u 200 ml_ pufera).

Regeneracioni pufer može biti alikvotiran u 40-45 mL delove (u 50 ml_ sterilnim epruvetama) i čuvan zamrznut do 2 meseca. Jednostavno staviti epruvetu u pećnicu sa sonom temperaturom vode da se odmrzne regeneracioni pufer na dan kada se vrši ogled.

A. Postupak ogleda

1) Pipetovati 50 uL regeneracionog pufera u svih 96 bazenčića upotrebom Matrix 1250 8-kanalnog pipetora.

2) Pipetovati 5 uL DMSO u kolone 1 i kolone 11 i 12.

3) Pipetovati 50 uL cAMP standarda u kolone 11 i 12 u ovom formatu: 50 pmola/bazenčić za red A, 25 pmola/bazenčić za red B, 12,5 pmola/bazenčič za red C, 5 pikomola/bazenčić za red D, 2,5 pmola/bazenćić za red E, 1,25 pmola/bazenćić za red F, 0,5 pmola/bazenčić za red G, i 0 pmola/bazenčić za red H. 4) 4 pipetovati 5 uL jedinjenja iz svakog bazenčića jedinjenja razblažene ploče, za IC50, upotrebom sledeće šeme razblažavanja: Bazenčić H:400uM jedinjenja (konačna koncentracija jedinjenja u reakcionom miksu = 5/100 x 400 uM = 20 uM)

Bazenčić G: 1:10 razblaživanje Bazenčića H (odnosno 5uL jedinjenja iz bazenčića H + 45 uL 100% DMSO)(konačna koncentracija = 2 uM) Bazenčić F: 1:10 razblaživanje bazenčića G (konačna koncentracija = 0,2 uM)

Bazenčić E:1:10 razblaživanje bazenčića F (konačna koncentracija = 0,02 uM)

Bazenčić D:1:10 razblaživanje bazenčića E (konačna koncentracija = 0,002 uM)

Bazenčić C: 1:10 razblaživanje bazenčića D (konačna koncentracija = 0,0002 uM)

Bazenčić B: 1:10 razblaživanje bazenčića C (konačna koncentracija = 0,00002 uM)

Bazenčić A: 1:10 razblaživanje bazenčića B (konačna koncentracija = 0,000002 uM)

IC50ili EC50su urađeni u triplikatu. Jedna flešploča prema tome može biti podešena da radi sa 3 jedinjenja. (odnosno, kolone 2, 3 i 4 su za jedinjenje #1, kolone 5, 6 i 7 su za jedinjenje #2, i kolone 8, 9 i 10 su za jedinjenje #3). 5) Dodati 50 uL RUP3 membrana svim bazenčićima u Kolonama 2 do 10. (Pre početka ogleda, zamrznute pelete membrana za obma RUP3 i CMV (ćelije transficirane sa ekspresijom plazmida koji ne sadrži RUP3 sekvence), se suspenduju u puferu vezivanja, uobičajeno sa 1 ml_ pufera vezivanja za 1 ploču membrana. Membrane se čuvaju na ledu sve vreme, i politron (Brinkmann polvtron, model #PT-3100) se upotrebljava (podešavanje 6-7, tokom 15-20 sekundi) da se dobiju homogena suspenzija membrane.) Koncentracija proteina se utvrđuje putem Bradfor oglednog protein pribora upotrebom instrukcija koje su date u priboru, upotebom standarda koji je dat sa priborom kao referenca. Koncentracija proteina membrana se podešava sa puferom vezivanja, tako da 50 uL membrana = 15 ug proteina (odnosno 0,3 mg/mL proteina). 6) U koloni 1, bazenčićima A, B, C i D dodati 50 uL RUP3 membrana. Bazenčićima E, F, G i H dodati 50 uL CMV membrana, (CMV membrane koje su iste koncentracije proteina kao RUP3 membrane). 7) Inkubirati 1 sat na sobnoj temperaturi sa agitacijom u šejkeru sa rotacionom platformom. Pokriti folijom tokom mućkanja. 8) Nakon 1 sata, dodati (u sva 96 bazenčića), 100 uL<125>J tragača u puferu detekcije koji je dat u priboru flešploče plus proklin, sačinjenom na sledeći način: Pipetovati po 10 mL po flešploči: 100 ml_ pufera detekcije + 1 ml_ 125J + 0,2 mL Proklina (proklin pomaže da se zaustavi proizvodnja cAMP). Sačiniti manju količinu miks pufera detekcije ukoliko se ima manje ploča. 9) Muškati ploče na šejkeru sa rotacionom platformom 2 sata, pokrivajući ploče sa olovnim pokrivačem. 10) Zapečatiti ploče sa zapećačivačima od plastičnog filma koji sa dati sa priborom flešploče. 11) Izbrojati ploče upotrebom TRILUX 1450 Mikrobeta brojača. Videti vrata brojača da se utvrdi koji se protokol brojanja upotrebljava. 12) Podaci se analiziraju na Arena Database (bazi podataka) u skladu sa RUP3 ne-fuzijom, IC50EC50za 96 bazenčića cAMP ogleda membrane, i brojevi jedinjenja i koncentracije jedinjenja moraju da budu unesene od strane korisnika.

B. Kriterijumi membrana ciklaze

1) Signal prema šumu:

Prihvatljivi signal prema šumu odnos RUP3 može da bude u rasponu od 4 do 6. Sirovi cpms su otprilike 1800 do 2500 za RUP3 i 3500-4500 za CMV. Cpm (ili krajnji pmolovi cAMP/ bazenčiću) ne mogu biti van standardne krivine, i i ne bi trebalo da priđu bazenčiću A standardne krivine (50 pmola/bazenčić) i bazenčiću H (ne cAMP). Generalno, pmolovi cAMP proizvedeni od strane RUP3 receptora su oko 11 do 13 pmola/bazenčić (za 15 ug/bazenčić protein), a za CMV su između 2 do 3 pmola/bazenčić (za 15 ug protein/bazenčić).

2) Standardna kriva:

Pad treba da bude linearni i barovi duplikata bi trebalo da budu vrlo mali. Receptor i CMV kontrole ne mogu biti van skale standardne krivine, kao što je gore opisano. Ukoliko su receptor kontrole van gornjeg kraja standardne krivine, odnosno, 50 pmola/bazenčić i veće, mora se ponoviti eksperiment upotrebom manje proteina. Pa ipak, takav slučaj nije primećen sa trenutno transficiranim RUP3 membranama (10 ug DNK/15 cm ploče, upotreba 60 uL Lipofektamina, i pripremanje membrana nako 24 sata od transfekcije.) 3) IC50ili EC50kriva treba da bude na 100% (+ ili - 20%) od kontrolnih RUP3 membrana na vrhu, i treba d?ide dole do 0 (ili na gore do 20%) na dnu. Standardna greška triplikat determinacija treba da budu + ili - 10%.

C. Stimulacija cAMP u HIT-T15 ćelijama

HIT-T15 (ATCC CRL#1777) je imortalizovana ćelijska linija koja proizvodi insulin kod hrčka. Ove ćelije ekspresuju RUP3 i prema tome mogu biti upotrebljene da se pristupi sposobnosti RUP3 liganada da stimuliše ili inhibira cAMP akumulaciju putem njihovog endogeno ekspresovanog receptora. U ovom ogledu, ćelije se uzgajaju do 80% konfluence i onda distribuiraju u flešploču sa 96 bazenčića (50.000 ćelije/bazenčić) za detekciju cAMP putem "cAMP ogleda flešploče" (NEN; Cat # SMP004). Ukratko, ćelije se postavljaju u anti-cAMP antitelom obložene bazenčiće koji sadrže bilo tečni nosač, test ligand(e) pri koncentraciji koja je od interesa, ili 1 uM forskolina. Potonje je direktni aktivator adenilil ciklaze i služi kao pozitivna kontrola za stimulisanje cAMP u HIT-T15 ćelijama. Svi uslovi su testirani u triplikatu. Nakon 1 sat inkubacije da se dopusti stimulisanje cAMP, detekcioni miks koji sadrži<125>J-cAMP se dodaje svakom bazenčiću i ploči se dopušta da se inkubira narednih 1 sat. Bazenčići se onda aspiriraju da se ukloni nevezani<125>J-cAMP. Vezani<125>J-cAMP se detektuje upotfebom VVallac Microbeta brojača. Količina cAMP u svakomm od uzoraka se utvrđuje putem upoređivanja sa standardnom krivinom, dobijenom putem postavljanja poznatih koncentracija cAMP u neke bazenčiće na ploči.

D. Stimulisanje lučenja insulina u HIT-T15 ćelije

Poznato je da stimulisanje cAMP u HIT-T15 ćelijama izaziva povećanje lučenja insulina kada se koncentracija glukoze u kulturi medijuma promeni od 3 mM do 15 mM. Tako, RUP3 ligandi mogu takođe biti testirani na njihovu sposobnost da stimulišu od glukoze zavisno lučenje insulina (GSIS) u HIT-T15 ćelije. U ovom ogledu, 30.000 ćelija/bazenčić na ploči sa 12 bazenčića se inkubira u kulturi medijuma koja sadrži 3 mM glukoze a ne serum tokom 2 sata. Medijum se odna menaj; bazenčići prime medijum koji sadrži bilo 3 mM ili 15 mM glukoze, i u oba slučaja medijum sadrži bilo tečni nosač (DMSO) ili RUP3 ligand pri koncentraciji koja je od interesa. Neki bazenčići prime medijum koji sadrži 1 uM foskolina kao pozitivna kontrola. Svi uslovi se testiraju u triplikatu. Ćelije se inkubiraju 30 minuta, i količina insulina izlučenog u medijum se utvrđuje putem ELISA-e, upotrebom pribora bilo od Peninsula Laboratories (Cat # ELIS-7536) ili Crvstal Chem Inc. (Cat # 90060).

E. Stimulisanje lučenje insulina u izolovanim insulama pacova

Kao i sa HIT-T15 ćelijama, poznato je da stimulisanje cAMP u izolovanim insulama pacova izaziva povećanje u lučenju insulina kada se koncentracija glukoze u kulturi medijuma menja od 60 mg/dL do 300 mg/dL RUP3 je endogeno ekspresovani GPCR u insulocitima pacova koje proizvode unsulin. Tako, RUP3 ligandi mogu takođe da budu testirani na njihovu sposobnost da stimulišu GSIS u kulturama insula pacova. Ovaj ogled se obavlja na sledeći način: A. Odabrati 75-150 insula ekvivalenta (IEQ) za svaki uslov ogleda upotrebom mikroskopa za disekciju. Inkubirati preko noćiu kulturi medijuma sa niskom vrednošću glukoze. (Opciono.)

B. Podeliti insule na jednake delove u uzorcima u triplikatu veličine od 25-40 insula ekvivalenta po uzorku. Transferisati na 40 (im sito sterilnih ćelijskih cediljki u bazenčiće ploče sa 6 bazenčića sa 5 mL (60 mg/dL) Krebs-Ringerovog pufera (KRB)sa niskom vrednošću glukoze oglednog medijuma. C. Inkubirati 30 minuta (1 at ukoliko se korak preko noći preskače) na 37°C i pri 5% C02. Sačuvati površinske slojeve ukoliko se želi pozitivna kontrola za RIA. D. Pomeriti cediljke sa insulama u nove bazenčiće sa 5 mL/bazenčić niske glukoze KRB. Ovo je druga pre-inkubacija i služi da se ukloni preostali ili prekomerni insulin iz medijuma kulture. Inkubirati 30 minuta.

E. Pomeriti cediljke u sledeće bazenčiće (Niski 11) sa 4 ili 5 mL niske glukoze KRB. Inkubirati na 37°C 30 minuta. Sakupiti površinske slojeve u polipropilen cevčice za nisko vezivanje koje su prethodno označene za identifikaciji u čuvati na hladnom.

F. Pomeriti cediljke u bazenčiće sa visokom vrednošću glukoze (300

mg/dL, što je ekvivalent za 16,7 mM). Inkubirati i sakupiti površinske slojeve kao u prethodnim slučajevima. Ispirati insule u njihovim cediljkama u niskoj glukozi da se ukloni preostali insulin. Ukoliko je spiranje ukoliko se ima sakkupiti za analizu, upotrebiti jedno spiranje bazenčiće za svako stanje (odnosno set triplikata).

G. Pomeriti cediljke do krajnjih bazenčića sa oglednim medijumom niske glukoze (Nisko 2). Inkubirati i sakupiti površinske slojeve kao u prethodnim slučajevima.

H. Čuvanje hladnim, centrifugirati površinske slojeve pri 1800 obrtaja u minuti tokom 5 minuta na 4-8°C da se uklone mali insule/insula parčići koji su izbegli 40 mm sito. Ukloniti sve osim nižih 0,5-1 mL i distribuirati u duplikatu u prethodno označene cevčice niskog vezivanja. Zamrznuti i skladištiti na <-20°C sve dok se ne utvrde koncentracije insulina. I. Utvrđivanja insulina se učini na gornji način, ili putem Linco Labs kao uobičajenog servisa, upotrebom njihovog insulina RIA (Cat. # RI-13K).

Primer 2

A. RT-PCR analiza RUP3 ekspresije u humanim tkivima (Slika 1 A).

RT-PCR se primenjuje da se utvrdi distribucija RUP3 u tkivu. Oligonukleotidi upotrebljeni za PCR imaju sledeće sekvence:

i humani višestruki cDNK paneli u tkivu (MTC, Clontech) se upotrebljavaju kao obrazci (1 ng cDNK po PCR amplifikaciji). Analizira se dvadeset i dva (22) humana tkiva. PCR se obavlja upotrebom Platinum PCR SuperMix (Life Technologies, Inc.; ispraćeno sa instrukcijama za proizvodnju) u 50 \ iL reakcije putem sledećih sekvenci: korak 1, 95°C tokom 4 minuta; korak 2, 95°C tokom 1 minuta; korak 3, 60°C tokom 30 sekundi; korak 4, 72°C tokom 1 minuta; i korak 5, 72°C tokom 7 minuta. Koraci 2 do 4 se ponavaljaju 35 puta.

Rezultirajuće PCR reakcije (15 uL) se pune na 1,5% agaroza gel da se analiziraju RT-PCR proizvodi, i specifičnih 466 baznih parova DNK fragmenta koji predstavljaju RUP3 se specifično pojačavaju iz cDNK pankreasnog porekla. Niska ekspresija je takođe evidentirana u subregionima mozga.

B.cDNK analiza tačka-mrlja RUP3 ekspresije u humanim tkivima (Slika 1B).

Rezultati sa RT-PCR analize se dalje potvrđuju u cDNK tačka-mrlja analizi. U ovom ogledu, tačka-mrlja membrana koja sadrži cDNKI sa 50 humanih tkiva (Clontech) se hibridizujesa<32>P-radioaktivno označenom DNK probom koja ima sekvence koje su izvedene iz humanog RUP3. Signali hibridizacije se vide u pankreasu i fetalnoj jetri, što sugeriše da ova tkiva ekspresuju RUP3. Nije primećena značajnija ekspresija u drugim tkivima koja se analiziraju. C. Analiza RUP3 putem RT-PCR sa izolovanim humanim pankreasnim insulama Langerhans-a (Slika 1C).

Dalja analiza RUP3 putem RT-PCR sa izolovanim humanim pankreasnim insulama Langerhans-a pokazuju robusnu ekspresiju RUP3 u insulocite ali ne u kontrolne uzorke. D. Analiza RUP3 ekspresije sa cDNK-ama pacovskog porekla putem RT-PCR (Slika 1D).

RUP3 ekspresija se dalje analizira sa cDNK-ama pacovskog porekla putem RT-PCR tehnike. Tkivo cDNK koje se upotrebljava za ovaj ogled se dobija od Clontech-a osim onih za hipotalamus i insule, koji se pripremaju u kući. Koncentracije svakog cDNK uzorka se normalizuju putem kontrolne RT-PCR analize gena GAPDH koji se čuva kod kuće pre sprovođenja ogleda na RUP3 ekspresiju. Oligonukleotidi koji se koriste za PCR imaju sledeće sekvence:

PCR se obavlja upotrebom Platinum PCR SuperMix (Life Technologies, Inc.; praćeno instrukcijama za proizvodnju) u 50 uL reakciji putem sledećih sekvenci: korak 1, 95°C tokom 4 minuta; korak 2, 95°C tokom 1 minuta; korak 3, 60°C tokomm 30 sekundi; korak 4, 72°C tokom 1 minuta; i korak 5, 72°C tokom 7 minuta. Koraci 2 do 4 se ponavljaju 35 puta.

Rezultirajuće PCR reakcije (15 uL) se pune na 1,5% agaroza gel da se analiziraju RT-PCR proizvodi, i specifičnih 547 baznih parova DNK fragmenta koji predstavljaju RUP3 se specifično pojačavaju iz cDNK pankreasnog porekla, otkrivajući sličan ekspresioni profil kao kod humanog tkiva. Posebno treba zabeležiti, robusna ekspresija se vidi u izolovanim insulama i hipotalamusu.

Primer 3

RUP3 ekspresija proteina je zabranjena ka p ćelijskog porekla pankreasnim insulama (Slika 2).

A. Pliklonalno anti-RUP3 antitelo se priprema kod zečeva (Slika 2A).

Zečevi se imuniziraju sa antigenskim peptidom sa sekvencom koja je izvedena iz pacovskog RUP3 ("rRUP3"). Sekvenca peptida je RGPERTRESAYHIVTISHPELDG (SEQ ID NO: 7) i deli 100% identitet sa mišjim RUP3 u korespondirajućem regionu. Cistein ostatak se inkorporiše na N-završnom kraju ovog antigenskog peptida da obezbedi KLH unakrsno vezivanje pre ubrizgavanja u zečeve. Rezultirajuća antisera ("anti-rRUP3") i korespondirajuća preimuna sera ("pre-rRUP3") se testiraju za imunu reaktivnost prema mišjem RUP3 u ogledu imunomrljanja (linije 1 do 4). U ovom ogledu, GST-RUP fuzioni protein se spremno prepoznaje od strane anti-rRUP3 antisera (linija 4), ali ne od strane preimune sere (linija 2). Imunoreaktivni signal može biti efikasno eliminisan kada se ogled imunomrljanja obavlja u prisustvu viša antigenskog peptida (linija 6).

B. RUP3 ekspresijau pćelijama koje proizvode insulin pankreasnih

insula (Slika 2B).

Pankreas pacova se pokvase sa 4% paraformaldehida (PFA) u PBS i utvrdi u OCT medijumu za utvrđivanje. Isečci od 10 mikrona se pripremaju, fiksiraju na staklene slides, i imunomrljaju bilo sa pre-rRUP3 (Slika 2B, panel a) ili sa anti-rRUP3 antisera (Slika 2B, paneli c i e) praćeno sekundarnim mrljanjem anti-zečjeg IgG konjugovanog do fluorohroma Cy-33. Svaki isečak se takođe ko-imunomrlja sa monoklonalnim anti-insulin antitelom (Santa Cruz, Slika 2B, paneli b i d) u primarnom mrljanju praćeno sa sekundarnim mrljanjem sa magarećim anti-mišjim IgG konjugovanim sa FITC, ili sa kozjim anti-glukagon antitelom (Santa Cruz, Slika 2B, panel f) i magarećim anti-kozjim IgG sparenim sa FITC. Imunofluorescentni signali se ispituju pod fluorescentnim mikroskopom. RUP3 se pronalazi ekspresovan u ćelijama koje proizvode insulin (paneli c i d), ali ne u ćelijama koje proizvode glukagone (paneli e i f). Ovi podaci demonstriraju da je RUP3 ekspresovan u S ćelije ali ne u B ćelije pankreasnih insula pacova. Analogni rezultati se dobijaju kada se mišji pankreasni isečci ispituju na RUP3 ekspresiju.

Primer4

Funkcionalne aktivnosti RUP3in vitro(Slika 3).

Utvrđeno je da RUP3 stimuliše proizvodnju cAMP utam kotransfekcije 293 ćelije sa: (1) CRE-Luciferaza reporterom, pri čemu sposobnost da stimuliše proizvodnju luciferaze svica zavisi od povećanog cAMP u ćelijama, i (2) ekspresionim plazmidom koji kodira humani oblik FUP3 (Slika 3A). Primetiti da ćelije ko-transficirane sa ekspresionim plazmidom koje ne sadrže RUP3 sekvence ("CMV" na Slici 3A) proizvode vrlo malo aktivnost luciferaze, dok ćelije transficirane sa ekspresionim plazmidom koji kodira RUP3 ("RUP3" na Slici 3A) imaju bar 10 puta povećanje u akt<:>vnosti luciferaze. Ovo ukazuje da RUP3 stimuliše proizvodnju cAMP kada se uvede u 293 ćelije. Ova osobina RUP3 se čuva kroz celu vrstu, pošto hrčkov RUP3 stimuliše aktivnost luciferaze kada se uvde u 293 ćelije na način analogan onom opisanom za humani RUP3 (Slika 3B).

Utvrđeno je da , kada se cAMP poveća u ćelijama pankreasa koje proizvode insulin, ove ćelije prikazuju povećanu sposobnost da luče insulin kada se povećavaju koncentracije glukoze. Da se testira da li RUP3 može da pruži pojačano od glukoze zavisno oslobađanje insulina, upotrebljava se retrovirus koji sadrži humani RUP3 da se generišu Tu6 ćelije koje ekspresuju visoke nivoe RUP3. Tu6 ćelije proizvode insulin, alin ne ekspresuju prihvatljive nivoe RUP3 i ne prikazuju normalno povećanje oslobađanja inuslina kada je prisutna povećana glukoza u medijumu kulture. Kao što je prikazano na Slici 3C, Tu6 ćelije transdukovane sa kontrolnim virusom koji ne sadrži receptor su i dalje sposobne da proizvedu insulin, ali ne prikazuju povećanje u lučenju insulina kada se koncentracija glukoze u medijumu kulture pomera od 1 mM ka 16 mL. Nasuprot tome, Tu6 ćelije transdukovane sa retrovirusom koji sadrži RUP3 pookazuju značajno lučenje insulina zavisno od glukoze (Slika 3C).

Primer 5

In vivodejstva RUP3 agonista na glukoza homeostazu kod miševa.

A. Oralni test tolerancije glukoze (oGTT)

Mužjaci C57bl/6J miševi otprilike 8 nedelja stari se ostavljaju bez hrane 18 sati i nasumice se grupišu (n=5) da prime RUP3 agonist (bilo Jedinjenje B3 ili B124) pri dozama od 1, 3 ili 10 mg/Kg. Jedinjenja se isporučuju oralno putem gavaža igle (p.o., zapremina 10 mL/Kg). U vremenskoj tački 0, utvrđuju se nivoi glukoze u krvi upotrebom glukometra (Elite XL, Bayer), i miševima se daju bilo tečni nosač (20% hidroksipropil-beta-ciklodekstrin) ili test jedinjenje. Trideset minuta nakon davanja test jedinjenja, ponovo se utvrđuju nivoi glukoze u krvi, i miševima se daje dekstroza oralno u dozi od 3 g/Kg. Merenja glukoze u krvi se obavljaju 20 minuta, 40 minuta, 60 minuta i 120 minuta nakon ovog vremena. Tabela 2 prikazuje srednju vrednost procenta inhibicije skretanja glukoze za svaku dozu test jedinjenja, datu kao srednja vrednost za 5 životinja u svakoj grupi koja se tretira. Ovi rezultati pokazuju da RUP3 agonisti, uključujući jedinjenje 75, smanjuju glukozu u krvi na način zavistan od doze kod miševa pošto im se da glukoza.

Primer 6

Generisanje Tu6/RUP3 stabilnih linija

Da se proizvedu Tu6 ćelije koje ekspresuju RUP3 u visokim nivoima, generiše se retrovirus koji nosi ekspresionu kasetu za RUP3. Ukratko, RUP3 koji kodira sekvencu se klonira u retroviralni vektor pLNCX2 (Clontech, Cat # 6102-1). Amfotropična ćelijska linija za pakovanje PT-67 (Clontech, K1060-D) se onda transfricira sa bilo matičnim vektorom pLNCX2 ili pLNCX2/RUP3 upotrebom lipofektamina i utvrđuju se stabilne linije upotrebom smernica obezbeđenih od strane prodavca PT-67. Površinski sloj koji sadrži retrovirus se dobija sakupljanjem medijuma iz rezultirajućih postojanosti prema proizvođačkim uputstvima. Tu6 ćelije, u 10 cm posudi, se onda inficiraju sa retrovirusom inkubacijom u rastvoru od 1 mL viralnog površinskog sloja/9 mL medijuma kulture koji sadrži 40 ug/mL polibrena tokom 24 sata. Medijum se onda promeni u medijum kulture koja sadrži 300 ug/mL G418. Konovi rezistentni na G418 se konačno kreiraju putem neomicin-otporne genske kasete prisutne u pLNCX2 vektoru, tako ukazujući na uspešnu integraciju retrovirusa u Tu6 genom. Ekspresija RUP3 u Tu6/RUP3 G418-rezistentne kolonije se potvrđuje putem Northern mrlje.

Primer 7

Lučenje insulina, Tu6 stabilnosti

Da se izmeri lučenje insulina iz ćelijskih linija glodara koje proizvode insulin, ćelije se prvo kultivišu preko noći u medijumu bez seruma, sa manjkom glukoze. Sledeće jutro, ćelije se postave u isti medijum u koji je dodato ili 1 mM ili 16 mM glukoze. Nakon inkubacije u trajanju od 4 sata, medijum se sakuplja i analizira na sadržaj insulina upotrebom Pacovsk insulin enzim-imunoogled (EIA) sistema (Amersham Pharmacia Biotech, Cat. # RPN 2567). Tipično, ogled se obavlja upotrebom višestrukih razblaživanja uzorka medijuma da bi se osiguralo da merenja uzorka potpadaju u okvire granica standardne krive (generisane upotrebom poznatih količina insulina), kao što je preporučeno od strane proizvođača.

Primer 8

Ogled vezivanja receptora

Dodatno postupcima koji su ovde opisani, sledeće sredstvo za procenjivanje test jedinjenja je putem utvrđivanja afiniteta vezivanja za RUP3 receptor. Ovaj tip ogleda generalno traži radioaktivno označeni ligand za RUP3 receptor. Bez upotrebe poznatih liganda za RUP3 receptor i njihovih radiaktivnih oznaka, jedinjenja formule (1a) mogu biti označena radiaktivnim izotopom i upotrebljena u ogledu za procenjivanje afiniteta test jedinjenja za RUP3 receptor.

Radiaktivno označeno RUP3 jedinjenje formule (la) može se upotrebiti u ogledu pretraživanja da se identifikuju/procene jedinjenja. Generalno govoreći, novije sintetizovano ili identifikovano jedinjenje (odnosno, test jedinjenje) može se proceniti na svoju sposobnost da smanji vezivanje "radioaktivno označnog jedinjenja formule (la)" za RUP3 receptor. U skladu sa tim, sposobnost da se takmiči sa "radioaktivno označenim jedinjenjem formule (la)" ili radioaktivno označenim RUP3 ligandom za vezivanje za RUP3 receptor je u direktnoj korelaciji sa njihovim afinitetom vezivanja test jedinejnaj za RUP3 receptor.

PROTOKOL OGLEDA ZA UTVRĐIVANJE VEZIVANJA RECEPTORA ZA

RUP3:

A. RUP3 RECEPTOR PREPARAT

293 ćelije (humani bubreg, ATCC), trenutno transficirane sa 10 ug humanog RUP3 receptora i 60 uL lipofektamina (po 15-cm posuda), se uzgajaju u posudi tokom 24 sata (75% konfluence) sa promenom medijumu i uklanjene sa 10 mL/posuda Hepes-EDTA puferom (20 mM Hepes + 10 mM EDTA, pH 7,4). Ćelije se onda centrifugiraju u Beckman Coulter centrifugi 20 minuta, pri 17.000 obrtaja u minuti (JA-25.50 rotor). Potom se peleta resuspenduje u 20 mM Hepes + 1 mM EDTA, pH 7,4 i homogenizuje sa 50-mL Dounce homogenizatorom i ponovo se cenrifugira. Nakon uklanjanja površinskog sloja, pelete se skladište na -80°C, sve dok se ne upotrebe u ogledu. Kada se upotrebljavaju u ogledu, membrane se odmrzavaju na ledu 20 minuta i onda se doda 10 mL inkubacionog pufera (20 mM Hepes, 1 mM MgCI2, 100 mM NaCI, pH 7,4).Membrane se onda vrtlože da bi se resuspendovala sirova peleta membrane i homogenizuju sa Brinkmannn PT-3100 Polvtron homogenizatorom tokom 15 sekundi pri pozciji 6. Koncentracija proteina membrane se utvrđuje upotrebom BRL Bradford protein ogleda.

B. OGLED VEZIVANJA

Za ukupno vezivanje, ukupna zapremina od 50 uL odgovarajuće razblaženih membrana (razblažene u oglednom puferu koji sadrži 50 mM Tris HCI (pH 7,4), 10 mM MgCI2, i 1 mM EDTA; 5-50 ug proteina) se doda na propilen mikrotitar ploče sa 96 bazenčića praćeno dodavanjem 100 uL oglednog pufera i 50 uL radioaktivno označenog RUP3 liganda. Za nespecifično vezivanje, 50^L ogldenog pufera se doda umesto 100 |iL i doda se dodatnih 50uL 10uM hladnog RUP3 pre nego što se doda 50 u.L radioaktivno označenog RUP3 liganda. Ploče se onda inkubiraju na sobnoj temperaturi 60-120 minuta. Reakcija vezivanja se prekida filtriranjem oglednih ploča kroz Microplat Devices GF/C Unifilter ploču za filtriranje sa Brandell-ovim sakupljačem ploče sa 96 bazenčića praćeno pranjem sa hladnim 50 mM Tris HCI, pH 7,4 koji sadrži 0,9% NaCI. Onda se zapečati dno ploče za filtriranje, doda se 50 uL Optihpase Supermix-a svakom bazenčiću, vrh ploča se zapečati, i ploče se broje u Trilux MicroBeta scintilacionom brojaču. Za studije kompeticije jedinjenja, umesto dodavanja 100\ xLoglednog pufera, doda se 100 uL odgovarajuće razblaženog test jedinjenja u odgovarajuće bazenčiće praćeno dodavanjem 50 uL radiaktivno označenog RUP3 liganda.

C. IZRAČUNAVANJA

Test jedinejnaj se inicijalno ogledaju pri 1 i 0,1 |iM i potom u rasponu koncentracija odabranim tako da srednja doza izaziva oko 50% inhibicije radioaktivnog-RUP3 ligand vezivanja (odnosno, IC50). Specifično vezivanje u odsustvu test jedinjenja (B0) je razlika ukupnog vezivanja (BT) minus ne-specifično vezivanje (NSB) i slično tome specifično vezivanje (u prisustvu test jedinjenja) (B) je razlika premeštanja vezivanja (BD) minus ne-specifično vezivanje (NSB). IC50se utvrđuje iz krivine odgovora inhibicije, logit-log razdeobe % B/B0spram koncentracije test jedinjenja.

Kjse izračunava putem Cheng i Prustoff transformacije:

gde je [L] koncentracija radioaktivnog-RUP3 liganda upotrebljenog u ogledu i KDje konstanta disocijacije radioaktivnog-RUP3 liganda utvrđena nezavisno pod istim uslovima vezivanja.

HEMIJSKI PRIMERI

SINTEZA JEDINJENJA SADAŠNJEG PRONALASKA

Jedinjenja pronalaska i njihova sinteza su dalje ilustrovani primerima koji slede. Sledeći primeri su dati da dalje definišu pronalazak bez, ipak, limitiranja pronalaska na detalje ovih primera. Jedinjenja koja su ovde ooisana, supra i infra, su naimenovana prema CS Chem Dravv Ultra Version 7.0.1. U određenim instancama uptrebljavaju se uobičajena imena i podrazumeva se da će ova uobičajena imena biti prepoznata od strane stručnjaka iz ove oblasti nauke.

Hernija: Proton nuklearna magnetna rezonanca (<1>H NMR) se beleži na Varian Mercurv Vx-400 opremljenom sa 4 nukleus auto uključive probe i z-gradijentom ili Bruker Avance-400 opremljenom sa QNP (Quad Nucleus Probe) ili BBI (Broad Band Inverse) i z-gradijentom. Hemijska pomeranja su data u česticama po milionu (ppm) sa preostalim signalom rastvarača upotrebljenom kao referenca. NMR skraćenice se upotrebljavaju na sledeći način: s = singlet, d = dublet, t = triplet, q = kvartet, m = multiplet, br = široko. Mikrotalasna zračenja se obavljaju upotrebom Eyrs Synthesizer-a (Personal Chemistry). Hromatografija tankog sloja (TLC) se obavlja na silika gelu 60 F254(Merck), preparatorna hromatografija tankog sloja (prep TLC) se obavlja na PK6F silika gelu 60 A 1 mm ploča (VVhatman), i hromatografija kolone se obavlja na silika gel koloni upotrebom Kiesegel 60, 0,063-0,200 mm (Merck). Isparavanje se obavlja in vacuo na Buchi rotacionom isparivaču. Celite 545 ® se upotrebljava tokom paladijum filtriranja.

LCMC specifikacije: 1) PC: HPLC-pumpe; LC-10AD VP, Shimadzu Inc.; HPLC sistem kontroler; SCL-10A VP, Shimadzu Ine; UV-Detektor: SPD-10A VP, Shimadzu Ine; Autosempler: CTC HTS, PAL, naučni skok; Maseni spektrometar: API 150EX sa Turbo Ion Spray izvorom, AB/MDS Sciex; Softver: Analyst 1.2.2) Mac: HPLC-pumpe: LC-8A VP, Shimadzu Ine; HPLC sisterm kontroler: SCL-10A VP, Shimadzu Inc. UV-Detektor: SPD-10A VP, Shimadzu Ind; Autosempler: 215 Liquid Handler, Gilson Ine; Maseni spektormetar; API 150EX sa Turbo Ion Spraz izvorom, AB/MDS Sciex Softver: Masschrom 1.5.2.

Primer 9

Primer 9.1: Pripremanje 4-[6-(2,5-difluoro-4-propoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-itoksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 74).

Korak A: Pripremanje 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra.

Rastvoru 4-hidroksi-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (3,15 g, 17 mmol) u 4,6-dihloro-4-metoksi-pirimidinu (3,00 mg, 17 mmol) u 15 mL THF, doda se ukapanjem 1M kalijum-t-butoksida u THF (18,4 mL, 18,4 mmol) pri temperaturi od 0°C. Nakon 45 minuta, sirova smeša se ekstrakuje sa CH2CI2i slanim rastvorom. Organska faza se osuši preko MgS04, filtrira i koncentriše. Ostatak se prečisti hromatografijom kolone na silika gelu sa heksan/etilacetatom (3:1->1:1 v/v) da se dobije 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksil)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar u čvrstom obliku (4,7g, 85%).<1>HNMR (CDCL3)400 MHz) 8 1,24-1,28 (d, 6H), 1,80-1,84 (m, 2H), 2,00-2,05 (m, 2H), 3,37-3,44 (m, 2H), 3,77-3,81 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 4,92-4,95 (m, 1H), 5,38-5,40 (m, 1H), 8,27 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C14H2oCIN304329,11, pronađeno 330,1 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje 2,5-difluoro-4-nitro-fenola.

Rastvor 2,5-difluorofenola (5 g, 38,4 mmol) u sirćetnoj kiselini (10 mL) se doda polako u smešu koncentrovane azotne kiseline (10 mL) i sirćetne kiseline (10 mL) ohlađenoj u acetonitril/suvom ledenom kupatilu na način da temperatura ne prelazi -18°C. Nakon što se sve doda, rastvor se čuva na - 30°C tokom 30 minuta, meša na -13°C tokom 30 minuta, i onda na 0°C tokom 1 sata. Rastvor se transferiše u separatorni levak, razblaži sa metilenhloridom, i ekstrakuje 3 puta sa vodom. Organska faza se osuši preko magnezijumsulfata, filtrira, i koncentriše. Ostatak se prečisti hromatografijom kolone na Si02(heksan/acetilacetat 1:1) da se dobije 2,5-difluoro-4-nitro-fenol u žutom čvrstom obliku (1,74g, 26%).<1>HNMR (MeOd, 400 MHz) 8 7,97-7,93 (m, 1H), 6,95-6,91 (m, 1H), 6,17 (s, 1H).

Korak C: Pripremanje 1,4-difluoro-2-nitro-5-propoksi-benzena.

Rastvoru 2,5-difluoro-4-nitro-fenola (1,71g, 9,77 mmol) u acetonitrilu (20 mL), dodaju se kalijumkarbonat (2,7 g, 19,5 mmol) i 1-jodopropana (1,14 mL, 11,7 mmol). Nakon mešanja na 60°C tokom 15 sati, smeša se koncentriše i ekstrakuje sa metilen hloridom i 2M NaOH rastvora. Organske faze se osuše preko magnezijumsulfata, filtriraju, i koncentrišu da daju 1,4-difluoro-2-nitro-4-propoksi-benzen u žutom čvrstom obliku (0,995 g, 47%)<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 8 7,92-7,88 (m, 1H), 6,83-6,78 (m, 1H), 4,08-4,05 (t, J=6,5Hz, 2H), 1,95-1,86 (m, 2H), 1,10-1,06 (t, J=7,4 Hz, 2H).

Korak D: Pripremanje 2,5-difluoro-4-propoksi-fenilamina.

Rastvoru 1,4-difluoro-2-nitro-5-propoksi-benzena (0,99 g, 4,59 mmol) u sirćetnoj kiselini (10 mL), doda se cink prah (1,5 g, 22,9 mmol). Nakon 30 minuta, doda se još više sirćetne kiseline (10 mL) i cink prah (1,5g, 22,9 mmol). Zink se odvaja filtriranjem, ostatak se koncentriše i prečisti putem HPLC da se dobije 2,5-difluoro-4-propoksi-fenilamin u ljubičastom čvrstom obliku (TFA so, 401 mg, 29%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 8 6,99-7,87 (m, 2H), 3,93-3,90 (t, J=6,4, 2H), 1,79-1,71 (m, 2h), 1,01-0,98 (t, J=7,4 Hz, 2H). Egzaktna masa se izračunava za CgH^NO 187,08, pronađeno 188,1

(MH<+>).

Korak E: Pripremanje 4-[6-(2,5-difluoro-4-propoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 74).

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (528 mg, 1,6 mmol), paladijumacetata (29,4 mg, 0,13 mmol), bifenil-2-il-di-terc-butil-fosfana (19,5 mg, 0,065 mmol), natrijum-terc-butoksida (315 mg, 3,28 mmol), i 2,5-difluoro-4-propoksi-fenilamina (TFA so, 395 mg, 1,31 mmol) u 15 mL dioksana se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C. Nakon 2 sata, doda se još paladijumacetata (29,4 mg, 0,13 mmol) i smeša se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C tokom 18 sati. Smeša se prečisti putem HPLC da se dobije 4-[6-(2,5-difluoro-4-propoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar kao štavljeni čvrsti oblik (TFA so, 217 mg, 32%).<1>HNMR (MeOH, 400 MHz) 5 8,06-8,05 (d,J=2,0Hz, 1H), 7,41-7,36 (m, 1H), 7,09-7,04 (m, 1H), 5,41-5,39 (m, 1H), 4,87-4,81 (m, 1H), 4,01-3,98 (t, J=6,4 Hz, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,74-3,71 (m, 2H), 3,55-3,52 (m, 2H), 2,00-1,97 (m, 2H), 1,81-1,77 (m, 4H), 1,21-1,19 (d, J=5,5 Hz, 6H), 1,04-1,00 (t, 5,5 Hz, 3H). Egzaktne masa izračunata za C23H30F2N4O5480,22, pronađeno 481,2 (MH+).

Primer 9.2:Pripremanje4-[6-(4-etoksi-2,5-difluoro-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje75).

Korak A:Pripremanje 1-etoksi-2,5-difluoro-4-nitro-benzena.

Rastvoru 2,5-difluoro-4-nitro-fenola (4,86 g, 28,2 mmol) u acetonitrilu (50 mL), dodaju se kalijumkarbonat (4,7 g, 34 mmol) i bromoetan (4,21 mL, 56,4 mmol). Nakon mešanja na 70°C tokom 3,5 sata, doda se jodoetan (2,73, 33,8 mmol) i smeša se meša na 80°C. Nakon 20 sati, smeša se koncentriše i ekstrakuje sa metilen hloridom i 2M NaOH rastvora. Organske faze se osuše preko magnezijumsulfata, filtiriraju i koncentrišu da se dobije 1-etoksi-2,5-difluoro-4-nitro-benzena u žutom čvrstom obliku (5,05 g, 88%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 7,92-7,88 (m, 1H), 6,82-6,78 (m, 1H), 4,21-4,16 (q, 1H), 4,13-4,07 (q, J=7,0 Hz, 2H), 1,54-1,51 (t, J=7,0 Hz, 3H).

Korak B: Pripremanje 4-etoksi-2,5-difluoro-fenilamina.

Smeša 1-etoksi-2,5-difIuoro-4-nitro-benzena (1,00 g, 4,92 mmol) i paladijuma na uglju (10%, 50% vode, 307 mg) u etanolu (20 mL) se muška u hidrogenatoru pod H2atmosferom pri 45 psi. Nakon 30 minuta čvrsti oblici se odvajaju filtriranjem, operu sa etanolom, i filtrat se koncentriše da se dobije 4-etoksi-2,5-difluoro-fenilamin kao crveni čvrsti oblik (835 mg, 98%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 6,72-6,67 (m, 1H), ,6,58-6,53 (m, 1H), 4,03-3,97 (q, J=7,0Hz, 2H), 3,50 (s br, 2H), 1,41-1,37 (t, J=7,0 Hz, 3H). Egzaktna masa izračunat za C8H9F2NO 173,07, pronađeno 174,2 (MH<+>).

Korak C: Pripremanje 4-[6-(4-etoksi-2,5-difluoro-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 75).

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (6,71 g, 20,3 mmol), paladijumacetata (460 mg, 2,05 mmol), bifenil-2-il-di-terc-butil-fosfana (77,0 mg, 0,26 mmol), natrijum-terc-butoksida (2,7 g, 28,1 mmol) i 4-etoksi-2,5-difluoro-fenilamina (3,26 g, 18,8 mmol) u 100 mL toluena se zagreva pod refluksom tokom 17 sati. Smeša se prečisti putem HPLC da se dobije 4-[6-(4-etoksi-2,5-difluoro-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar (Jedinjenje 75) kao štavljeni čvrsti oblik (TFA so, 1,36 g, 14%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 8,25 (s, 1H), 7,47-7,41 (m, 1H), 6,81-6,76 (m, 1H), 5,52-5,48 (m, 1H), 4,98-4,88 (m, 1H), 4,13-4,07 (q, J=7,0 Hz, 2H), 3,84-3,76 (m, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,40-3,33 (m, 2H), 2,09-2,04 (m, 2H), 1,85-1,77 (m, 2H), 1,49-1,46 (t, J=7,0 Hz, 3H), 1,10-1,09 (d, J=6,3 Hz, 6H). Egzaktna masa izračunata za C22H28F2N4O5466,48, pronađeno 467,5 (MH<+>).

Primer 9.3: Pripremanje 4-[2-(2,5-difluoro-4-propoksi-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra

(Jedinjenje 20)

Korak A: Pripremanje 2-hloro-4-nitro-piridin-3-ola.

Rastvor 2-hloro-3-piridinola (11,3g, 87,2 mmol) u koncentrovanoj sumpornoj kiselini (25 mL) se ohladi u ledenom kupatilu i doda se polako 1:1 smeša azotne kiseline i sumporne kiseline (25 mL). Nakon što se sve doda, rastvor se meša na 0°C 1 sat i onda na sobnoj temperaturi dodatni sat. Smeša se razblaži sa vodom i ekstrakuje sa metilen hloridom. Organske faze se osuše preko magnezijumsulfata, filtriraju, i koncentrišu. Ostatak se prečisti hromatografijom kolone na silika gelu (etilacetat/heksan 2:1->3:1) da se dobije 2-hloro-4-nitro-piridin-3-ol kao štavljeni čvrsti oblik (3,58 g, 24%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 8 10,5 (s, 2H), 8,14-8,13 (d, J=5,5 Hz, 1H), 7,88-7,87 (d, J=5,5Hz, 1H).

Korak B: Pripremanje 2-hloro-3-metoksi-4-nitro-piridina.

Rastvoru 2-hloro-4-nitro-piridin-3-ola (1,05 g, 6,02 mmol) u acetonitrilu (45 mL) i metanolu (5 mL), doda se polako trimetilsilildiazometan (2M u heksanu, 3,9 mL, 7,8 mmol). Nakon 30 minuta, smeša se koncentriše i ostatak se prečisti putem hromatografije kolone na silika gelu (heksan/etilacetat 5:1) da se dobije 2-hloro-3-medtoksi-4-nitro-piridin kao beli čvrsti oblik (0,77 g, 68%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 8 8,35-8,34 (d, J=5,1 Hz, 1H), 7,56 (d, J=5,2 Hz, 1H), 4,08 (s, 3H).

KorakC: Pripremanje 4-(2-hloro-3-metoksi-piridin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra.

Rastvoru 2-hloro-3-metoksi-4-nitro-piridina (102,3 mg, 0,543 mmol) i 4-hidroksi-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (110 mg, 0,587 mmol) u dioksanu (3 mL), doda se natrijum hidrid (60% disperzija, 32 mg, 0,8 mmol). Nakon mešanja na 100°C tokom 1 sata, smeša se prečisti putem HPLC da se dobije 4-(2-hloro-3-metoksi-piridin-4-iloski)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar kao beli čvrsti oblik (42,0 mg, 24%).<1>HNMR (CDCL3l400 MHz) 8 8,16-8,15 (d, J=5,4 Hz, 1H), 6,92-6,90 (d, J=5,8 Hz), 4,97-4,91 (m, 1H), 4,72-4,68 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,75-3,68 (m, 2H), 3,75-3,68 (m, ?H), 3,55 (m, 2H), 2,02-1,85 (m, 4H), 1,27-1,26 (d,J=6, 2Hz, 6H). Egzaktna masa izračunata za C15H2iCIN204328,12, pronađeno 329,2 (MH<+>).

Korak D: Pripremanje 4-[2-(2,5-difluoro-4-propoksi-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 20).

Smeša 4-(2-hloro-3-metoksi-piridin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (42 mg, 0,128 mmol), paladijumacetata (30 mg, 0,13 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciklo[3,3,3]undekana (4,4 u,L, 0,013mmol), natrijum terc-butoksida (31 mg, 0,32 mmol), i 2,5-difluoro-propoksi-fenilamina (30 mg, 0,13 mmol) u toluenu (0,5 mL) se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C 1 sat. Smeša se prečisti sa HPLC da se dobije 4-[2-(2,5-difluoro-4-propoksi-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar (Jedinjenje 20) kao štavljeni čvrsti oblik (TFA so, 35,4 mg, 47%).<1>HNMR (MeOD, 400 MHz) 8 7,52-7,50 (d, J=7,4Hz, 1H), 7,23-7,18 (m, 1H), 7,12-7,08 (m, 1H), 6,98-6,96 (m, 1H), 4,88-4,77 (m, 2H), 4,00-3,97 (m, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,72-3,67 (m, 2H), 3,41-3,37 (m, 2H), 2,00-1,96 (m, 2H), 1,82-1,75 (m, 4H), 1,19-1,17 (d, J=6,1 Hz, 6H), 1,01-0,98 (t, J=7,4Hz, 3H). Egzaktna masa izračunata za C24H31F2N305479,22, pronađeno 479,7 (MH<+>).

Primer 9.4: Pripremanje 4-[6-(4-bromo-2-metoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje10).

KorakA:Pripremanje 4-[6-(4-bromo-2-metoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra.

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kisleina izopropil estra (521 mg, 1,58 mmol), paladijumacetata (75 mg, 0,33 mmol), bifenil-2-il-di-terc-butil-fosfana (51 mg, 0,17 mmol), natirjum-terc-butoksida (380 mg, 3,95 mmol), i 4-bromo-2-metoksi-fenilamina (HCI so, 377 mg, 1,58 mmol) u 15 mL dioksana se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C. Nakon 3 sata, smeša se prečisti sa HPLC da se dobije 4-[6-(4-bromo-2-metoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar kao stavljeni čvrsti oblik (TFA so, 124 mg, 13%).<1>HNMR (MeOD, 400 MHz) 8 8,05-8,04 (d, J=2,2 Hz, 1H), 7,93-7,91 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,21-7,20 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,12-7,09 (m, 1H), 5,37-5,34 (m, 1H), 4,89-4,79 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,74-3,70 (m, 2H), 3,42-3,38 (m, 2H), 2,01-1,98 (m, 2H), 1,78-1,74 (m, 2H), 1,22-1,21 (d, J=6,2 Hz, 6H). Egzaktna masa izračunata za C2iH27BrN405494,12, pronađeno 495,1 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje 4-[6-(4-bromo-2-metoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 10).

Smeša 4-[6-(4-bromo-2-metoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (TFA so, 112 mg, 0,184 mmol), natrijum metansulfinata (51 mg, 0,425 mmol), bakar(l)trifluorometan sulfonat benzen kompleksa (92 mg, 0,16 mmol), i N,N-dimetiletilendiamina (60 uL, 0,56 mmol) u DMSO (4,5 mL) se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 160°C tokom 30 minuta. Smeša se prečisti putem HPLC da se dobije 4-[6-(4-bromo-2-metoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar (Jedinjenje 10) kao beli čvrsti oblik (TFA so, 45,7 mg, 41%).<1>HNMR (MeOD, 400 MHz) 5 8,75-8,73 (m, 1H), 8,13-8,12 (d, 2,2 Hz, 1H), 7,53-7,47 (m, 2H), 5,37-5,33 (m, 1H), 4,85-4,80 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 3,75-3,70 (m, 2H), 3,42-3,37 (m, 2H), 3,08 (s, 3H), 2,02-1,97 (m, 2H), 1,78-1,73 (m, 2H), 1,22-1,21 (d, J=6,2 Hz, 6H). Egzaktna masa izračunata za C22H30N4O7S 494,18, pronađeno 495,5 (MH<+>).

Primer 9.5: Pripremanje 4-[6-(2-fluoro-4-metansulfonil-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 24).

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (2,494 g, 7,56 mmol), 2-fluoro-4-(metilsulfonil)-anilina (1,4315g, 7,56 mmol), paladijumacetata (169,9 mg, 0,756 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciklo[3.3.3]undekana (26,8^L, 0,0756 mmol) i natrijum terc-butoksida (1,475 g, 15,3 mmol) u dioksanu (30 mL se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C tokom 2 sata. Sirova smeša se prečisti putem HPLC i rekristališe sa EtOH da se dobije jedinjenje 4-[6-(2-fluoro-4-metansulfonil-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar (Jedinjenje 24) u čvrstom obliku (TFA so, 513 mg, 11,3%).<1>HNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 5 1,19-1,20 (d, 6H), 1,65-1,70 (m, 2H), 1,94-1,99 (m, 2H), 3,26 (s, 3H), 3,31-3,35 (m, 2H), 3,63-3,69 (m, 2H), 3,85 (s, 3H), 4,77-4,80 (m, 1H), 5,29-5,31 (m, 1H), 7,73-7,75 (m, 1H), 7,80-7,83 (m, 1H), 8,06-8,11 (m, 2H), 8,79 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C21H27FN4O6S 482,16, pronađeno 483,3

(MH<+>).

Primer 9.6: Pripremanje 4-[6-(2-fluoro-4-metansulfonil-fenoksi)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje76).

Korak A: Pripremanje 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra.

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (2,19 g, 6,7 mmol), kalijumkarbonata (1,84 g, 13,3 mmol), i 4-bromo-2-fluorofenola (1,65 g, 8,65 mmol) u 32 mL DMA se zagreva na 160°C tokom 5 sata. Smeša se ekstrakuje sa AcOEt i slanim rastvorom. Organska faza se osuši preko MgS04, filtrira i koncentriše. Ostatak se prečisti sa HPLC da se dobije 4-[6-(4-bromo-2-fluoro-fenoksi)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar kao ulje (1,12 g, 35%). Egzaktna masa izračunata za C2oH23BrFN305483,08, pronađeno 484,4 (MH<+>).

KorakB: Pripremanje 4-[6-(2-fluoro-4-metansulfonil-fenoksi)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 76).

Smeša 4-[6-(4-bromo-2-fluoro-fenoksi)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (0,543 g, 1,21 mmol), natrijum metan sulfinata (774,2 mg, 7,58 mmol), i N,N'-dimetil-etilen diamina (50,31 uL, 0,44mmol) i bakar(l)trifluorometan sulfonat benzen kompleksa (384,9 mg, 0,759 mmol) u 20 mL DMSO se zagreva u mikrotalasnoj pećnici tokom 7 minuta na 120°C. Smeša se prečisti putem HPLC da se dobije jedinjenje 4-[6-(2-fluoro-4-metansulfonil-fenoksi)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar (Jedinjenje 76) kao ulje (242,7 mg, 42%).<1>HNMR (DMSO-ds, 400 MHz) 8 1,19-1,21 (d, 6H), 1,68-1,72 (m, 2H), 1,97-2,02 (m, 2H), 3,30-3,33 (m, 2H), 3,33 (s, 3H), 3,65-3,71 (m, 2H), 3,90 (s, 3H), 4,78-4,81 (m, 1H), 5,28-5,37 (m, 1H), 7,69-7,73 (m, 1H), 7,84-7,87 (m, 1H), 8,00-8,03 (m, 1H), 8,16 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C2iH26FN307S 483,15, pronađeno 484,2 (MH<+>).

Primer 9.7: Pripremanje 4-[2-(2-fluoro-4-metansulfonil-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 77).

Smeša jedinjenja 4-(2-hloro-3-metoksi-piridin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (TFA so, 57 mg, 0,13 mmol), 2-fluoro-4-(metilsuifonil)-anilina (49 mg, 0,26 mmol), paladijumacetata (29 mg, 0,13 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciko[3.3.3]undekana (11,5 fiL, 0,033 mmol), i natrijum terc-butoksida (24 mg, 0,25 mmol) u 2 mL dioksana se pročisti sa argonom i zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C tokom 2 sata. Sirova smeša se prečisti putem HPLC da se dobije 4-

[2-(2-fluoro-4-metansulfonil-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-pipen 1-karbonska kiselina izopropil estar (Jedinjenje 77) kao ulje (TFA so, 50 mg, 65%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 6 1,26-1,28 (d, 6H), 1,89-1,91 (m, 2H), 2,02-2,05 (m, 2H), 3,08 (s, 3H), 3,49-3,54 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,71-3,77 (m, 2H), 4,78-4,79 (m, 1H), 4,93-4,96 (m, 1H), 6,76-6,77 (m, 1H), 7,61-7,63 (m, 1H), 7,69-7,73 (m, 2H), 7,91-7,92 (m, 1H), 9,70 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H28FN306S 481,17, pronađeno 482,3 (MH<+>).

Primer 9.8: Pripremanje 4-{5-metoksi-6-[6-(2-metoksi-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 31).

Korak A: Pripremanje (2-metoksi-etil)-(6-metil-5-nitro-piridin-2-il)-amina.

Smeša 2-fluoro-5-nitro-6-pikolina (656 mg, 4,2 mmol) i 2-metoksietilamina (365 jiL, 4,2 mmol) se meša na 0°C. Nakon 10 minuta, sirovi (2-metoksietil)-(6-metil-5-nitro-piridin-2-il)-amin (957 mg) se dobija u čvrstom obliku.<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 2,77 (s, 3H), 2,85 (s, 2H), 3,40 (s, 3H), 3,57-3,60 (m, 2H), 5,51 (s br, 1H), 6,26-6,29 (m, 1H), 8,18-8,20 (m, 1H). Egzaktna masa izračunata za C9H13N303211,10, pronađeno 212,2 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje N<2->(2-metoksi-etil)-6-metil-piridin-2,5-diamina.

Suspenziji (2-metoksi-etil)-(6-metil-5-nitro-piridin-2-il)-amina (421 mg, 2 mmol) i 5 mL sirćetne kiseline, doda se Zn praha (781 mg, 12 mmol) pri 0°C. Smeša se meša na 60°C tokom 1 sata. Zn prah se filtrira kroz celit i ostatak se prečisti putem HPLC da se obezbedi N<2->(2-metoksi-etil)-6-metil-piridin-2,5-diamin kao ulje (140 mg, 39%). Egzaktna masa izračunata za C9H15N30 181,12, pronađeno 182,2 (MH<+>).

Korak C: Pripremanje 4-{5-metoksi-6-[6-(2-metoksi-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 31).

Jedinjenje 31 se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.5 kao ulje (HCI so, 170 mg, 88%).<1>HNMR (MeOD-d4, 400 MHz) 5 1,16-1,18 (d, 6H), 1,71-1,74 (m, 2H), 1,94-1,98 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 3,21-3,22 (m, 6H), 3,33 (s, 3H), 3,33-3,36 (m, 2H), 3,66-3,70 (m, 2H), 3,88 (s, 3H), 4,80-4,82 (m, 1H), 5,34-5,35 (m, 1H), 6,95-6,97 (m, 1H), 7,73-7,76 (m, 1H), 8,00 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C23H34N605474,26, pronađeno 475,2

(MH<+>).

Primer 9.9: Pripremanje 4-{6-[6-(2-hidroksi-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-rnetoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 78).

Rastvoru 4-{5-metoksi-6-[6-(2-metoksi-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (HCI so, 101 mg, 0,2 mmol) u 10 mL CH2CI2, doda se jodotrimetilsilan (142 |A, 1 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša se meša na istoj temperaturi. Nakon 2 sata, smeša se prečisti putem HPLC i konvertuje do HCI soli dodavanjem 2 mL 4M HCI u dioksan rastvoru i koncentriše se da se dobije 4-{6-[6-(2-hidroksi-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 78)(HCI so, 37 mg, 37%).<1>HNMR (CD3CN-d3, 400 MHz) 8 1,12-1,14 (d, 6H), 1,66-1,68 (m, 2H), 1,84-1,89 (m, 2H), 2,35 (s, 3H), 3,27-3,32 (m, 2H), 3,41 (s, 2H), 3,61 (s, 4H), 3,82

(s, 3H), 4,72-4,78 (m, 1H), 5,28 (m, 1H), 6,88-6,90 (m, 1H), 6,69-7,71 (m, 1H), 7,99 (s, 1H), 8,18 (s br, 1H), 8,42 (s br, 1H). Egzaktna maza izračunata za C22H32N605460,24, pronađeno 461,5 (MH<+>).

Primer 9.10: 4-{6-[6-(2-Hidroksi-etilsulfanil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar (Jedinjenje 79).

Korak A: Pripremanje 2-(6-metil-5-nitro-piridin-2-ilsulfanil)-etanola.

Rastvoru 2-fluoro-5-nitro-6-pikolina (5,0 g, 32 mmol) i 2-merkaptoetanola (4,5 mL, 64 mmol), doda se KOH (2 g, 36 mmol) na 0°C. Smeša se meša na istoj temperaturi 15 minuta. Sirova smeša se ekstrakuje sa AcOEt i slanim rastvorom. Organska faza se osuši preko MgS04, filtrira, i koncentriše da se obezbedi sirovi 2-(6-metil-5-nitro-piridin-2-ilsulfanil)-etanol kao ulje (7,238 g).<1>HNMR (DMSO-d4, 400 MHz) 5 2,75 (s, 3H), 3,30-3,33 (m, 2H), 3,63-3,67 (m, 2H), 4,65-4,68 (m, 1H), 7,40-7,43 (m, 1H), 8,24-8,26 (m, 1H). Egzaktna masa izračunata za C8H10N2O3S 214,04, pronađeno 215,1 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje 2-(5-amino-6-metil-piridin-2-ilsulfanil)-etanola.

Suspenzija 2-(6-metil-5-nitro-piridin-2-ilsulfanil)-etanola (323 mg, 1,5 mmol) i 7 mL sirćetne kiseline, doda se cink prah (220 mg, 3,4 mmol) na 0°C. Smeša se meša na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Zink prah se filtrira kroz celit i ostatak se prečisti putem HPLC da se dobije 2-(5-amino-6-metil-piridin-2-ilsulfanil)-etanol kao ulje (93 mg, 33%).<1>HNMR (DMSO-d4, 400 MHz) 5 1,91 (s, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,50-2,51 (m, 2H), 3,12, 3,15 (m, 2H), 3,57-3,61 (m, 2H), 7,26-7,28 (m, 1H), 7,34-7,36 (m, 1H). Egzaktna masa izračunata za C8H12N2OS 184,07, pronađeno 184,9 (MH<+>).

Korak C: Pripremanje 4-{6-[6-(2-Hidroksi-etilsulfanil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 79).

4-{6-[6-(2-Hidroksi-etilsulfanil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar (Jedinjenje 79) se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.5 u čvrstom obliku (TFA so, 30,6 mg, 10%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 1,25-1,27 (d, 6H), 1,75-1,83 (m, 2H), 1,97-2,02 (m, 2H), 2,57 (s, 3H), 3,34-3,39 (m, 2H), 3,41-3,46 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,78-3,82 (m, 2H), 4,57-4,60 (m, 2H), 4,90-4,96 (m, 1H), 5,29-5,33 (m, 1H), 7,40-7,42 (m, 1H), 7,55-7,57 (m, 1H), 8,07 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H31N505S 477,2, pronađeno 477,7

(MH<+>).

Primer 9.11: Pripremanje 4-{6-[6-(2-hidroksi-etilsulfanil)- piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 80).

Korak A: Pripremanje 2-(5-nitro-piridin-2-ilsulfanil)-etanola.

2-(5-Nitro-piridin-2-ilsulfanil)-etanol se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.9/Korak A kao sirovi proizvod (835 mg). Egzaktna maza izračunata za C7H8N203S 200,03, pronađeno 201,2 (MH<+>).

KorakB: Pripremanje 2-(5-amino-piridin-2-ilsulfanil)-etanola.

2-(5-Amino-piridin-2-ilsulfanil)-etanol se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.9/Korak B kao ulje (277 mg, 39%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 3,20-3,22 (m, 2H), 3,92-3,95 (m, 2H), 4,07 (s br, 3H), 6,91-6,93 (m, 1H), 7,13-7,1 (m, 1H), 7,92-7,93 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C7H10N2OS 170,05, pronađeno 171,1 (MH<+>).

Korak C: Pripremanje 4-{6-[6-(2-hidroksi-etilsulfanil)- piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 80).

4-{6-[6-(2-Hidroksi-etilsulfanil)- piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.5 u čvrstom obliku (HCI so, 25 mg, 15,5%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 6 1,26-1,27 (d, 6H), 1,83-1,84 (m, 2H), 2,03-2,04 (m, 2H), 3,40-3,45 (m, 2H), 3,46-3,51 (m, 2H), 3,64-3,644 (m, 1H), 3,75-3,79 (m, 2H), 4,00 (s, 3H), 4,08 (m, 2H), 4,92-4,96 (m, 1H), 5,39 (s br, 1H), 7,58-7,64 (m, 1H), 8,17-8,20 (m, 1H), 8,88 (s br, 1H), 9,49 (s br, 1H). Egzaktna masa izračunata za C21H29N5O5S 463,19, pronađeno je 464,4

(MH<+>).

Primer 9.12: Pripremanje 4-{6-[6-(2-metansulfonil-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 81).

Korak A: Pripremanje 2-(5-nitro-piridin-2-ilsulfanil)-etanola.

Rastvoru 2-fluoro-5-nitro-6-pikolina (300,3 mg, 1,92 mmol) i 2-aminoetilmetilsulfon hlorhidrata (HCI so, 309 mg, 1,93 mmol) u 5 mL THF, doda se K2C03(798 mg, 5,77 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša se meša na 60°C tokom 100 sati. Sirova smeša se prečisti putem HPLC da se dobije (2-metansulfonil-etil)-(6-metil-5-nitro-piridin-2-il)-amin kao ulje (TFA so, 562 mg, 78%). Egzaktna masa izračunata za C9H13N304S 259,06, pronađeno 259,8 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje N<2->(2-metansulfonil-etil)-6-metil-piridin-2J5-diamina.

N<2->(2-Metansulfonil-etil)-6-metil-piridin-2,5-diamin se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.9/Korak B kao ulje (184 mg, 56%). Egzaktna masa izračunata za C9H15N302S 229,09, pronađeno 230,3 (MH<+>).

Korak C: Pripremanje 4-{6-[6-(2-metansulfonil-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 81).

4-{6-[6-(2-metansulfonil-etilamino)-2-metil- piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.5 kao ulje (TFA so, 41 mg, 16%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 1,25-1,29 (d, 6H), 1,80-1,82 (m, 2H), 2,01-2,02 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 3,02 (s, 3H), 3,37-3,41 (m, 2H), 3,42-3,47 (m, 2H), 3,78-3,79 (m, 2H), 3,83-3,84 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,92-4,95 (m, 1H), 5,35-5,37 (m, 1H), 6,75-6,80 (m, 1H), 8,01 (s, 1H), 8,05-8,08 (m, 1H). Egzaktna masa izračunata za C23H34N606S 522,23, pronađeno 523,5

(MH").

Primer 9.13: Pripremanje 4-{2-[2-fluoro-4-(2-metoksi-etoksi)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 82).

KorakA:Pripremanje 2-fluoro-4-(2-metoksi-etoksi)-fenilamina.

Smeša 2-fluoro-4-jodo-fenilamina (2,3672 g, 10 mmol), 2-metoksietanola (13 mL, 164 mmol), bakar(l)jodida (190 mg, 1 mmol), 1,10-fenantridina (360 mg, 2 mmol), i cezijumkarbonata (4,55 mg, 14 mmol) se zapečati i zagreva na 110°C. Nakon 17 sati, sirova smeša se ekstrakuje sa CH2CI2i slanim rastvorom. Organska faza se osuši preko MgS04, filtrira i koncentriše. Ostatak se prečisti putem hromatografije kolone na silika gelu sa heksan/etilacetatom (1:1 v/v) dva puta da se dobije 2-fluoro-4-(2-metoksi-etoksi)-fenilamina kao ulje (761 mg, 41%). Egzaktna masa se izračunata za C9H12FN02 185,09, pronađeno 186,0 (MH<+>).

KorakB:Pripremanje 4-{2-[2-fluoro-4-(2-metoksi-etoksi)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselinaizopropilestra.

4-{2-[2-Fluoro-4-(2-metoksi-etoksi)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.7 kao ulje (TFA so, 173 mg, 84%).<1>HNMR (CDCL3, 500 MHz) 5 1,25-1,28 (d, 6H), 1,58-1,90 (m, 2H), 2,02 (s, 1H), 2,04-2,05 (m, 2H), 3,48 (s, 3H), 3,49-3,54 (m, 2H), 3,73-3,76 (m, 2H), 3,77-3,80 (s, 3H), 3,93 (s, 3H), 4,11-4,13 (m, 2H), 4,77-4,78 (m, 1H), 4,94-4,96 (m, 1H), 6,64-6,65 (m, 1H), 6,77-6,80 (m, 2H), 7,57 (s, 1H), 7,70-7,71 (m, 1H). Egzaktna masa izračunata za C24H32FN3O6477,23, pronađeno 478,3

(MH<+>).

Primer 9.14: Pripremanje 4-[6-(6-dimetilkarbamoilmetil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 47).

Korak A: Pripremanje 4-[6-(6-bromo-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (3,3 g, 10,0 mmol), 6-bromo-2-metil-piridin-3-ilamina (1,88g, 10,0 mmol), paladijumacetata (118 mg, 0,53 mmoi), 2-(di-t-butil-fosfino)bifenila (157 mg, 0,53 mmol) i LiN(TMS)2(1M u THF, 15 mL, 15 mmol) u 75 mL dioksana se meša pod refluksom. Nakon 4,5 sati, doda se još paladijumacetata (111 mg, 0,50 mmol) i smeša se meša pod refluksom još jedan sat i onda na sobnoj temperaturi 3 dana. Smeša se koncentriše i ostatak se ekstrakuje sa slanim rastvorom i AcOEt. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu. Ostatak se prečisti putem hromatografije kolone (heksan/AcOEt 2:1—>1:1) da se dobije 4-[6-(6-bromo-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar u čvrstom oblikuk (2,09 g, 44 %).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 1,27-1,28 (d, 6H), 1,84-1,87 (m, 2H), 2,02-2,08 (m, 2H), 2,58 (s, 3H), 3,40-3,47 (m, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,77-3,82 (m, 2H), 4,93-4,97 (m, 1H), 5,41-5,43 (m, 1H), 7,44-7,46 (m, 1%, 7,91-7,93 (m, 1H), 8,24 (s, 1%, 8,70 (s br, 1H). Egzaktna masa izračunata za C2oH26BrN504479,12, pronađeno 482,0 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje 4-{6-[(6-bromo-2-metil-piridin-3-il)- terc-

butoaikarbonil-amino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-

karbonska kiselina izopropil estra.

Rastvoru 4-[6-(6-bromo-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra u 2 mL THF, dodaju se Boe anhidrid (62 mg, 0,28 mmol) i N,N-dimetilpiridin-4-amin (27 mg, 0,22 mmol). Nakon mešanja od 30 minuta na sobnoj temperaturi, smeša se prečisti hromatografijom kolone (heksan/AcOEt 2:1) da se dobije 4-{6-[(6-bromo-2-metil-piridin-3-il)-terc-butoksikarbonil-amino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra kao beli čvrsti oblik (118 mg, 92%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 1,25-1,27 (d, J=6,2Hz, 6H), 1,42 (s, 9H), 1,79-1,84 (m, 2H), 1,99-2,05 (m, 2H), 2,52 (s, 3H), 3,39-3,47 (m, 2H), 3,71-3,77 (m, 2H), 3,90 (s, 3H), 4,90-4,97 (m, 1H), 5,37-5,42 (m, 1H), 7,30-7,32 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,41-7,43 (d, J=8,3 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C25H34BrN506579,17, pronađeno 580,1

(MH<+>).

Korak C: Pripremanje 4-[6-(6-karboksimetil-2-metil-2-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra.

Smeša 4-{6-[(6-bromo-2-metil-piridin-3-il)-terc-butoksikarbonil-amino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (1,5 g, 2,58 mmol), 2-terc-butoksi-2-oksoetilcink hlorida (O.S M u Et20, 20 mL, 10 mmol), i paladijum [tetrakis(trifenilfosfina)] (304 mg, 0,263 mmol) se meša pod refluksom. Nakon 22 sata, smeša s eohladi u ledenom vodenom kupatilu i doda se oko 5 mL 4M HCI u dioksanu. Nakon 1 sat, smeša se koncentriše i ostatak se ekstrakuje sa 2M HCI i metilen hloridom. Kombinovane organske faze se koncentrišu i ostatak se prečisti putem HPLC da se dobije 4-[6-(6-karboksimetil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar u belom čvrstom obliku (TFA so, 525 mg, 35%).<1>HNMR (MeOH-d4, 400 MHz) 5 1,06-1,07 (d, J=6,2Hz, 6H), 1,72-1,78 (m, 2H), 2,00-2,05 (m, 2H), 2,78 (s, 3H), 3,37-3,43 (m, 2H), 3,70-3,75 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,08 (s, 2H), 4,81-4,86 (m, 1H), 5,34-5,39 (m, 1H), 7,76-7,78 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 8,65-8,67 (d, J=8,5 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H29BrN506459,21, pronađeno 460,5 (MH<+>).

Korak D: Pripremanje 4-[6-(6-dimetilkarbamoilmetil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 47).

Rastvoru 4-[6-(6-karboksimetil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (74 mg, 0,129 mmol), trietilamina (89,9 uL, 0,645 mmol), i HATU (196 mg, 0,516 mmol) u 4 mL THF/DMF 1:1, doda se dietilamin (2M u THF, 323 uL, 0,645 mmol). Nakon mešanja od 10 minuta na sobnoj temperaturi, smeša se prečisti putem HPLC da se dobije 4-[6-(6-dimetilkarbamoilmetil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar u belom čvrstom obliku (TFA so, 45,6 mg, 68%).<1>HNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 8 1,19-1,21 (d, J=6,3 Hz, 6H), 1,65-1,70 (m, 2H), 1,92-1,97 (m, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,89 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 3,30-3,35 (m, 2H), 3,64-3,69 (m, 2H), 3,85 (s, 3H), 4,26 (s, 2H), 4,76-4,81 (m, 1H), 5,26-5,31 (m, 1H), 7,70-7,72 (d, J=8,5Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 8,44-8,46 (d, J=8,5 Hz, 1H), 9,09 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C24H34N6O5486,26, pronađeno 487,3

(MH<+>).

Primer 9.15: Pripremanje 4-{6-[6-(2-hidroksi-etil)-2-metil-piridin-3-iiamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 27).

Rastvor 4-[6-(6-karboksimetil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (TFA so, 582 mg, 1,01 mmol) u 4 mL THF se hladi uledenom vodenom kupatilu i dodaje se u malim porcijama aluminijum hidrid (oko 190 mg, 5 mmol). Nakon 2 sata, smeša se priguši sa ledenom vodom; čvrsti delovi se odvajaju filtriranjem, i operu sa THF. Filtrat se koncentriše i prečisti putem HPLC. Frakcije koje sadrže proizvod su delimično koncentrisane i ostatak se ekstrakuje sa 1M NaOH i metilen hloridom. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju, i koncentrišu da daju 4-{6-[6-(2-hidroksi-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar u belom čvrstom obliku (85,0 mg, 19%).<1>HNMR (CDCL3, 400 MHz) 5 1,25-1,27 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,50-1,S6 (m, 2H), 2,00-2,05 (m, 2H), 2,72 (s, 3H), 3,16-3,19 (t, J=5,6Hz, 2H), 3,38-3,44 (m, 2H), 3,76-3,82 (m, 2H), 3,96-3,99 (t, J=5,6 Hz, 2H), 4,00 (s, 3H), 4,91-4,97 (m, 1H), 5,37-5,41 (m, 1H), 5,30 (s, 1H), 5,37-5,41 (m, 1H), 7,03 (s, 1H), 7,36-7,38 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,85 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H31N5O5445,23, pronađeno 446,1 (MH<+>),

Primer 9.16: Pripremanje 4-{5-metoksi-6-[2-metil-6-(2-metilsulfanil-etil)-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra.

Ledeno hladnom rastvoru 4-{6-[6-(2-hidroksi-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (40,2 mg, 90,2 jimol) i trifenilfosfina (31 mg, 118^mol) u 2 mL metilen hlorida, doda se perbromometan (77,0 mg, 232^mol) i rastvor se meša na sobnoj temperaturi. Nakon 18 sati, smeša se koncentriše, ponovo rastvori u 1,5 mL MeOH, i doda u dobro izmešanu smešu natrijum hidroksid (120 mg, 3,0 mmol) i 2-metil-2-tiopseudourea sulfata (208 mg, 0,70 mmol) u 2 mL MeOH. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 17 sati, smeša se koncentriše i ekstrakuje sa vodom i metilen hloridom. Organske faze se koncentrišu i prečiste putem HPLC da se dobije 4-{5-metoksi-6-[2-metil-6-(2-metilsulfanil-etil)-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar (TFA so, 10,0 mg, 19%) kao beli čvrsti oblik.<1>HNMR (MeOH-đ4, 400 MHz) 5 1,21-1,23 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,72-1,78 (m, 2H), 1,94-2,01 (m, 2H), 2,12 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,90-2,93 (t, J=7,2 Hz, 2H), 3,24-3,27 (t, J=7,2 Hz, 2H), 3,39-3,46 (m, 2H), 3,69-3,76 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 4,80-4,86 (m, 2H), 5,32-5,38 (m, 1H), 7,75-7,77 (d, J=8,6 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,57-5,59 (d, J=8,6 Hz, 1 Hl). Egzaktna masa izračunata za C23H33N504S 475,23, pronađeno 476,2 (MH<+>).

Primer 9.17: Pripremanje 4-{6-[6-(2-metansulfonil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 30).

Rastvoru 4-{5-metoksi-6-[2-metil-6-(2-metilsulfanil-etil)-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (8,6 mg, 15 u.mol) u 2 mL metilen hlorida, doda se MCPBA (oko 77% čisto, 7,1 mg, oko 32fimol) i meša na sobnoj temperaturi. Nakon 3 sata, rastvor se koncentriše i ostatak se prečišćava putem HPLC da se dobije 4-{6-[6-(2-metansulfonil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar (TFA so, 9,1 mg, 47%).<1>HNMR (MeOH-oV 400 MHz) 5 1,24-1,25 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,73-1,79 (m, 2H), 1,99-2,06 (m, 2H), 2,64 (s, 3H), 3,15 (s, 3H), 3,40-3,46 (m, 2H), 3,48-3,51 (t, J=7,9 Hz, 2H), 3,64-3,67 (t, J=7,9 Hz, 2H), 3,74-3,80 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,82-4,88 (M, 1H), 3,35-3,40 (m, 1H), 7,78-7,80 (d, J=8,6, 1H), 7,99 (s, 1H), 8,59-8,60 (d, J=8,6, 1H). Egzaktna masa izračunata za C23H33N5G6S 507,22, pronađeno 508,5 (MH<+>).

Primer 9.18: Pripremanje 4-[6-(2,6-dimetil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 83).

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (1,52 g, 4,60 mmol), 2,6-dimetilpiridin-3-amina (0,562 g, 4,60 mmol), paladijumacetata (0,0584 g, 0,260 mmol), i natrijum 2-metilpropan-2-oleata (0,663 g, 6,90 mmol) u 50 mL dioksana se meša pod reflukso 18 sati. Smeša se koncentriše i ekstrakuje sa slanim rastvorom i CH2CI2. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu. Ostatak se prečisti putem hromatografije kolone (AcOEt/heksan 5:1->AcOEt-»AcOEt/MeOH 10:1). Frakcije koje sadrže sirovi proizvod se koncentrišu, ostatak se tretira sa 4M HCI u dioksanu, i koncentriše da se dobije 4-[6-(2,6-dimetil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar kao belo (0,285 g, 15%). Frakcije koje sadrže proizvod kontaminiran sa 2,6-dimetilpiridin-3-aminom se koncentrišu da se dobije 0,30 g 80% čistog proizvoda.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,24-1,25 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,78-1,84 (m, 2H), 2,00-2,05 (m, 2H), 2,52 (2s, 6H), 3,37-3,44 (m, 2H), 3,76-3,81 (m, 2H), 4,03 (s, 3H), 4,91-4,97 (m, 1H), 5,33-5,38 (m, 1H), 6,81 (s, 1H), 7,04-7,06 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,11-8,13 (d, J=8,2 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C21H29N5O4415,22, pronađeno 416,5 (MH<+>). Primer 9.19: Pripremanje 4-[6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 84).

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (611 mg, 1,85 mmol), 2-metil-6-(metilsulfonil)piridin-3-amina (345 mg, 1,85 mmol), paladijumacetata (37,2 mg, 0,166 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciklo[3.3.3]undekana (118 uL, 0,332 mmol), i natrijum 2-metilpropan-2-olata (267 mg, 2,78 mmol) u 15 mL dioksana se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C. Nakon 2 sata, smeša se prečisti putem HPLC; frakcije koje sadrže proizvod se sakupljaju i koncentrišu. Ostatak se ekstrakuje sa 1M NaOH i CH2CI2. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu. Ostatak se ponovo prečisti hromatografijom kolone (AcOEt/heksan 5:1). Frakcije koje sadrže proizvod se koncentrišu, tretiraju sa 4M HCI i koncentrišu da se dobije 4-[6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar kao beli čvrsti oblik (HCI so, 326 mg, 34%).<1>HNMR (MeOH-đ4, 400 MHz) 5 1,23-1,24 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,77-1,85 (m, 2H), 2,01-2,07 (m, 2H), 2,59 (s, 3H), 3,20 (s, 3H), 3,40-3,46 (m, 2H), 3,71-3,77 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 4,83-4,89 (m, 1H), 5,41-5,46 (m, 1H), 7,97-7,99 (d, J=8,3 Hz, 1H), 8,11 (s, 1H), 8,29-8,31 (d, J=8,3 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C21H29N506S 478,18, pronađeno 480,2

(MH<+>).

Primer 9.20: Pripremanje 4-[6-(6-metansulfonil-4-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 85).

Korak A: Pripremanje 6-metansulfonil-4-metil-piridin-3-ilamina.

Smeša 6-hloro-4-metil-piridin-3-ilamina (1,53 g, 11 mmol), natrijum metansulfinata (1,60 g, 16 mmol), bakar katalizatora (0,50 g, 0,99 mmol), i N<1>,N<2->dimetiletan-1,2-diamina (0,214 mL, 2,0 mmol) u 20 mL DMSO se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 150°C. Nakon 2 sata, smeša se sipa u oko 200 mL vode i ekstrakuje pet puta sa oko 200 mL AcOEt. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu. Ostatak se prečisti putem hromatografije kolone (AcOEt/heksan 5:1—>AcOEt) da se dobije 6-metansulfonil-4-metil-piridin-3-ilamin kao beli čvrsti oblik (0,534 g, 27%).<1>HNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 8 2,4 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 6,08 (s, 2H), 7,59 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C7H10N2O2S 186,05, pronađeno 187,0 (MH+).

Korak B: Pripremanje 4-[6-(6-metansulfonil-4-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 85).

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (570 mg, 1,73 mmol), 6-metansulfonil-4-metil-piridin-3-ilamina (2,72 mg, 1,46 mmol), paladijumacetata (27,3 mg, 0,122 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciklo[3.3.3]undekana (87^L, 0,245 mmol), i natrijum 2-metil-propan-2-olata (249 mg, 2,59 mmol) u 4,5 mL dioksana se zagreve pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C. Nakon 4 sata, smeša se prečisti putem HPLC; frakcije koje sadrže čist proizvod se sakupljaju i koncentrišu. Ostatak se tretira sa 4M HCI u dioksanu, koncentriše i osuši u visokomm vakuumu da se dobije 4-[6-(6-metansulfonil-4-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar kao beli čvrsti oblik (HCL so, 261 mg, 29%).<1>HNMR (MeOH-đ4, 400 MHz) 5 1,23-1,24 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,75-1,81 (m, 2H), 1,97-2,04 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 3,17 (s, 3H), 3,39-3,46 (m, 2H), 3,71-3,77 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,82-4,88 (m, 1H), 5,35-5,40 (m, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 8,96 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C2iH29N506S 479,18, pronađeno 480,4 (MH<+>).

Primer 9.21: Pripremanje 4-[5-metoksi-6-(2-metil-6-propilsulfanil-piridin-3-ilamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 86).

Korak A: Pripremanje 2-metil-6-propilsulfanil-piridin-3-ilamina.

Smeša 6-fluoro-2-metil-piridin-3-ilamina (2,01 g, 16 mmol), propan-1-tiola (3,0 mL, 33 mmol), i kalijum hidroksida (1,8 g, 32 mmol) u 3 mL EtOH se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 100°C 1 sat a onda na 150°C 2 sata. Smeša se ekstrakuje sa CH2CI2 i slanim rastvorom. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu. Ostatak se prečisti putem hromatografije kolone (heksan/AcOEt 2:1) da se dobije 2-metil-6-propilsulfanil-piridin-3-ilamin (2,18 g, 75% prinos) kao bezbojno ulje.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 0,99-1,03 (t, J=7,3 Hz, 3H), 1,64-1,73 (m, 2H), 2,39 (s, 3H), 3,02-3,05 (t, J=7,3 Hz, 2H), 3,48 (s, 2H), 6,82-6,84 (d, J=8,2 Hz, 1H), 6,93-6,95 (d, J=8,2 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C9H14N2S 182,09, pronađeno 183,0 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje 4-[5-metoksi-6-(2-metil-6-propilsulfanil-piridin-3-

ilamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil

estra (Jedinjenje86).

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (0,966 g, 2,93 mmol), 2-metil-6-propilsulfanil-piridin-3-ilamina (0,545 g, 2,99 mmol), paladijumacetata (0,0375 g, 0,167 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciklo[3.3.3]undekana (0,119 mL, 0,335 mmol), i natrijum 2-metilpropan-2-alata (0,422 g, 4,39 mmol) u 15 mL dioksana sa zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C. Nakon 2 sata, smeša se prečisi putem HPLC; frakcije koje sadrđe čisti proizvod se sakupe, delimično koncentrišu, i ostatak se ekstrakuje sa CH2CI2i 1M NaOH. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju, i koncentrišu da se dobije 4-[5-metoksi-6-(2-metil-6-propilsulfanil-piridin-3-ilamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar kao gusto ulje (0,509 g, 36%).<1>HNMR (MeOH-c/4, 400 MHz) 5 1,00-1,04 (t, J=7,3 Hz, 3H), 1,23-1,24 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,66-1,78 (m, 4H), 1,96-2,02 (m, 2H), 2,37 (s, 3H), 3,06-3,10 (t, J=7,3 Hz, 2H), 3,36-3,42 (m, 2H), 3,71-3,77 (m, 2H), 3,88 (s, 3H), 4,81-4,87 (m, 1H), 5,28-5,34 (m, 1H), 7,09-7,11 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,57-7,59 (d, J=8,3Hz, 1H), 7,84 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C23H33N5O4S 475,23, pronađeno 476,1 (MH<+>).

Primer 9.22: Pripremanje 4-{5-metoksi-6-[2-metil-6-(propan-1-sulfonil)-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina

izopropil estra (Jedinjenje 87).

Rastvor 4-[5-metoksi-6-(2-metil-6-propilsulfanil-piridin-3-ilamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (498 mg, 1,05 mmol) u 25 mL CH2CI2se ohladi u ledenom kupatilu i doda se mCPBA (maks. 77% čist, 364 mg, 2,10 mmol). Nakon mešanja pod ledenim hlađenjem tokom 1 sata, doda se još MCPBA (99 mg, 0,44 mmol). Nakon 3 sata, rastvor se transferiše na separatorni levak i ekstrakuje sa 1M NaOH i CH2CI2. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu. Ostatak se prečisti hromatografijom kolone (heksan/AcOEt 1:1); frakcije koje sadrže proizvod se sakupljaju, doda se 4M HCI, i koncentriše se da se dobije 4-{5-metoksi-6-[2-metil-6-(propan-1-sulfonil)- piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar u belom čvrstom obliku (HCI so, 489 mg, 86%).<1>HNMR (MeOH-d4l400 MHz) 5 0,98-1,00 (t, J=7,4 Hz, 3H), 1,23-1,25 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,66-1,80 (m, 4H), 1,99-2,05 (m, 2H), 2,58 (s, 3H), 3,28-3,34 (m, 2H), 3,40-3,45 (m, 2H), 3,69-3,75 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,82-4,86 (m, 1H), 5,35-5,40 (m, 1H), 7,90-7,92 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 8,48-8,50 (d, J=8,4 Hz, 1H). Egzaktna masa se izračunava za C23H33N5O4S 475,23, pronađeno 508,4 (MH<+>).

Primer 9.23: Pripremanje 4-[6-(6-etilsulfanil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-

metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil

estra (Jedinjenje 88).

Korak A: Pripremanje 6-etilsulfanil-2-metil-piridin-3-ilamina.

6-Etilsulfanil-2-metil-piridin-3-ilamin se priprema na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.21, Korak A, da se dobije žuto ulje (0,99 g, 37%).<1>HNMR (MeOH-đ4, 400 MHz) 8 1,30-1,34 (t, J=7,3 Hz, 3H), 2,39 (s, 3H), 3,04-3,10 (q, J=7,3 Hz, 2H), 3,49 (s, 2H), 6,83-6,85 (d, J=8,2 Hz, 1H), 6,94-6,96 (d, J=8,2 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C8H12N2S 168,07, pronađeno 169,2 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje 4-[6-(6-etilsulfanil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 88).

4- [6-(6-Etilsulfanil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar se priprema na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.21, Korak B, da se dobije bezbojno ulje (461 mg, 33%).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 1,24-1,25 (d, J=6,3 Hz, 6H), 1,35-1,39 (t, J=7,4 Hz, 3H), 1,78-1,85 (m, 2H), 2,00-2,05 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 3,11-3,17 (q,J=7, 4Hz, 2H), 3,37-3,44 (m, 2H), 3,75-3,81 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 4,91-4,97 (m, 1H), 5,33-5,38 (m, 1H), 6,79 (s, 1H), 7,06-7,09 (d, J=8,5Hz, 1H), 8,08-8,11 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,10 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H31N5O4S 461,21, pronađeno 462,5 (MH<+>).

Primer 9.24: Pripremanje 4-[6-(6-etansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5- metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 89).

4-[6-(6-EtansuIfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar se priprema na sličan način kako je opisano u Primeru 9.22 da se dobije beli čvrsti oblik (HCI so, 459 mg, 89%).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,26-1,32 (m, 9H), 1,80-1,87 (m, 2H), 2,02-2,07 (m, 2H), 2,66 (s, 3H), 3,34-3,45 (m, 4H), 3,75-3,81 (m, 2H), 4,00 (s, 3H), 4,91-4,97 (m, 1H), 5,37-5,43 (m, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,96-7,98 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,21 (s, 1H), 9,00-9,02 (d, J=8,6 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H3iN506S 493,2, pronađeno 494,5 (MH<+>).

Primer 9.25: Pripremanje 4-[6-(6-izopropilsulfanil-2-metil-piridin-3-

ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina

izopropil estra (Jedinjenje 90).

Korak A: Pripremanje 6-izopropilsulfanil-2-metil-piridin-3-ilamina.

6-lzopropilsulfanil-2-metil-piridin-3-ilamin se priprema na sličan način kao stoje opisano u Primeru 9.21, Korak A, da se dobije žuto ulje (1,76 g, 38%).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,31-1,33 (d, J=6,7 Hz, 6H), 2,40 (s, 3H), 3,52 (s, 2H), 3,66-3,73 (m, 1H), 6,81-6,83 (d, J=8,1 Hz, 1H), 6,99-7,01 (d, J=8,1 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za CgH14N2S 182,09, pronađeno 183,1

(MH<+>).

Korak B: Pripremanje 4-[6-(6-izopropilsulfanil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra.

4-[6-(6-lzopropilsulfanil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar se priprema na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.21, Korak B, da se dobije bezbojno ulje (445 mg, 29%).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,25-1,27 (d,J=6, 2Hz, 6H), 1,37-1,39 (d, J=6,8 Hz, 6H), 1,79-1,85 (m, 2H), 1,99-2,05 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 3,37-3,44 (m, 2H), 3,75-3,92 (m, 3H), 3,95 (s, 3H), 4,91-4,97 (m, 1H), 5,34-5,38 (m, 1H), 6,81 (s, 1H), 7,09 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,13-8,15 (d, J=8,5 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C23H33N5O4S 475,23, pronađeno 476,2 (MH<+>).

Primer 9.26: Pripremanje 4-{5-metoksi-6-[2-metil-6-(propan-2-sulfonil)-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 91).

4-{5-Metoksi-6-[2-metil-6-(propan-2-sulfonil)-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar se priprema na sličan

način kao što je opisano u Primeru 9.22 da se dobije beli čvrsti oblik (HCI so, 410 mg, 82%).<1>HNMR (MeOH-đ4, 400 MHz) 6 1,25-1,26 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,25-1,30 (d, J=6,8Hz, 6H), 1,76-1,82 (m, 2H), 2,01-2,07 (m, 2H), 2,61 (s, 3H), 3,29-3,36 (m, 2H), 3,65-3,81 (m, 3H), 3,97 (s, 3H), 4,83-4,89 (m, 1H), 4,90-4,95 (m, 1H), 7,92-7,94 (d,J=8, 4Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 8,51-8,53 (d, J=8,4 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C23H33BrN506S 507,22, pronađeno 508,5 (MH<+>).

Primer 9.27: Pripremanje 4-{6-[6-(2-hidroksi-etilsulfanil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina

izopropil estra (Jedinjenje 79).

Korak A: Pripremanje 2-(6-metil-5-nitro-piridin-2-ilsulfanil)-etanola.

Ledeno hladnom rastvoru 6-hloro-2-metil-3-nitropiridina (2,17 g, 13 mmol) u 2-merkaptoetanolu (5 mL, 71 mmol) se doda kalijum hidroksid (1,52 g, 27 mmol). Smeša se meša na sobnoj temperaturi 2 sata i onda ekstrakuje sa NaOH i CH2CI2. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu da se dobije 2-(6-metil-5-nitro-piridin-2-ilsulfanil)-etanol kao mrko ulje (60% čisto, 3,25 g, 72%).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 2,87-2,90 (m, 6H), 3,43-3,46 (t, J=5,6 Hz, 2H), 7,22-7,24 (d, J=8,7 Hz, 1H), 8,15-8,17 (d, J=8,7 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C8H10N2O3S 214,04, pronađeno 215,1 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje 6-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloksi)-etilsulfanil]-2-metil-3-nitro-piridina.

Smeša 2-(6-metil-5-nitro-piridin-ilsulfanil)-etanola (60% čist, 3,25 g, 9,1 mmol), 1/-/-imidazola (1,24g, 18,2 mmol), i terc-butilhlorodimetilsilana (2,75 g, 18,2 mmol) u 20 mL DMF se meša na sobnoj temperaturi 4 sata. Rastvor se koncentriše i ostatak se ekstrakuje sa vodom i CH2CI2. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu. Ostatak se prečisti putem hromatografije kolone (heksan/AcOEt 30:1) da se dobije 6-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloksi)-etilsulfanil]-2-metil-3-nitro-piridin kao žuto ulje (2,39 g, 48%).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 0,8 (s, 6H), 0,90 (s, 9H), 2,85 (s, 3H), 3,39-3,42 (t, J=6,7 Hz, 2H), 3,85-3,89 (t, J=6,7 Hz, 2H), 7,13-7,15 (d, J=8,7 Hz, 1H), 8,10-8,13 (d, 1H). Egzaktna masa izračunata za C14H24N203SSi 328,13, pronađeno 329,1 (MH<+>).

Korak C: Pripremanje 6-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloksi)-etilsulfanil]-2-metil-piridin-3-ilamina.

Rastvoru 6-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloksi)-etilsulfanil]-2-metil-3-nitropiridina (80, 2,67 g, 8,1 mmol) u 15 mL THF, dodda se cink prah (1,6 g, 24 mmol) praćeno sa 8,2 mL (8,2 mmol) 1M NH4CI rastvorom. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 3 sata, doda se još cink praha (0,77 g, 8,13 mmol) i NH4CI (0,43 g, 8,31 mmol). Nakon mešanja tokom 4 sata smeša se filtrira kroz celit i filtrat se ekstrakuje sa CH2CI2i 1M NaOH. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu. Ostatakl se prečisti putem hromatografije kolone (heksan/AcOEt 3:1-^2:1) da se dobije 6-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloksi)-etilsulfanil]-2-metil-piridin-3-ilamin kao žućkasto ulje (1,3 g, 54%). Egzaktna masa se izračunava za C25H34BrN505563,17, pronađeno 564,3 (MH<+>).

Korak C: Pripremanje 4-{6-[6-(2-hidroksi-etilsulfanil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonskakiselina izopropil estra (Jedinjenje79).

Smeša 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (1,00 g, 3,03 mmol), 6-[2-(terc-butil-dimetil-silaniloksi)-etilsulfanil]-2-metil-piridin-3-ilamina (0,85 g, 2,85 umol), paladijumacetata (0,0379 g, 0,169 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciklo[3.3.3]undekana (0,120 mL, 0,338 mmol), i natrijum 2-metilpropan-2-oleata (0,437 g, 4,55 mmol) u 20 mL dioksana se zagreva na 80°C tokom 14 sati. Smeša se transferiše na separatorni levak i ekstrakuje sa CH2CI2i slanim rastvorom. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu. Ostatku se doda 4M HCI u dioksanu (oko 10 mL) i meša se na sobnoj temperaturi 1 sat. Smeša se prečisti sa HPLC; frakcije koje sadrže čist proizvod se sakupljaju, doda se amonijum hidroksid (oko 5 mL) i delimično koncentriše. Ostatak se ekstrakuje sa 1M NaOH i CH2CI2. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu da se dobije 4-{6-[6-(2-hidroksi-etilsulfanil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar kao žućkasti čvrsti oblik (HCI so, 219 mg, 15%).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,25-1,27 (d, J=6,3 Hz, 6H), 1,76-1,83 (m, 2H), 1,99-2,05 (m, 2H), 2,50 (s, 3H), 3,27-3,29 (m, 2H), 3,37-3,44 (m, 2H), 3,76-3,82 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,95-4,01 (m, 2H), 4,91-4,97 (m, 1H), 5,33-5,38 (m, 1H), 5,66-5,68 (m, 1H), 6,82 (s, 1H), 5,33-5,38 (m, 1H), 5,66-5,68 (m, 1H), 6,82 (s, 1H), 7,21-7,23 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,08 (s, 1H), 8,17-8,19 (d, J=8,5Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H3iN505S 477,2, pronađeno 478,4 (MH<+>).

Primer 9.28: Pripremanje 4-{6-[6-(2-hidroksi-etansulfonil)-2-metil-

piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi>-piperidin-1 -karbonska

kiselina izopropil estra (Jedinjenje 92).

4-{6-[6-(2-Hidroksi-etansulfonil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar se priprema na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.22 da se dobije beli čvrsti oblik (HCI so, 250 mg, 92%).<1>HNMR (MeOH-d4, 400 MHz) 5 1,24-1,26 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,78-1,84 (m, 2H), 2,01-2,07 (m, 2H), 2,60 (s, 3H), 3,41-3,46 (m, 2H), 3,42-3,46 (t, J=8,8Hz, 2H), 3,58-3,64 (m, 2H), 2,74-3,77 (t, J=8,8Hz, 2H), 3,97 (s, 3H), 4,82-4,87 (m, 1H), 5,40-5,45 (m, 1H), 5,48 (s, 1H),

7,94-7,96 (d, J=8,4, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,42-8,44 (d, J=8,4 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H31N507S 509,19, pronađeno 510,4

(MH<+>).

Primer 9.29: Pripremanje 4-[5-hidroksi-6-(6-metansulfonil-2-metil-

piridin-3-iiamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina

izopropil estra (Jedinjenje 93).

Ledeno hladnom rastvoru 4-[6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (59 mg, 123 u.mol) u 2 mL CH2CI2, doda se BBr3(0,246 mL; 0,246 mmol). Nakon 1 sata, smeša se stiša sa NH4OH rastvorom, koncentriše i prečisti sa HPLC da se dobije 4-[5-hidroksi-6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar čvrstom obliku bele boje (TFA so, 17 mg, 24%).<1>HNMR (MeOH-d4, 400 MHz) 8 1,22-1,23 (d, J=6,3 Hz, 6H), 1,70-1,78 (m, 2H), 1,97-2,02 (m, 2H), 2,59 (s, 3H), 3,15 (s, 3H), 3,26-3,32 (m, 2H), 3,82-3,88 (m, 2H), 4,81-4,87 (m, 1H), 5,27-5,32 (m, 1H), 7,88-7,90 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 8,67-8,69 (d, J=8,5 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C2oH27N506S 465,17, pronađeno 466,2 (MH<+>).

Primer 9.30: Pripremanje 4-[5-etoksi-6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)- pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 94).

Smeša 4-[5-hidroksi-6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (40,4 mg, 87^mol) kalijumkarbonata (24 mg, 174 |imol), i jodoetana (7,7^L, 95^mol) u 1 mL CH3CN se meša na 60°C. Nakon 20 sati, smeša se prečisti sa HPLC; frakcije koje sadrže proizvod se delimično koncentrišu i ostatak se ekstrakuje sa CH2CI2i 1M NaOH. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju, doda se 4M HCI u dioksanu (oko 5 mL) i koncentrišu da se dobije 4-[5-etoksi-6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar kao beli čvrsti oblik (HCI so, 24,3 mg, 53%).<1>HNMR (MeOH-đ4, 400 MHz) 5 1,25-1,27 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,41-1,44 (t, J=5,5 Hz, 3H), 1,74-1,80 (m, 2H), 2,01-2,06 (m, 2H), 2,62 (s, 3H), 3,21 (s, 3H), 3,30-3,35 (m, 2H), 3,72-3,77 (m, 2H), 4,22-4,28 (q, J=5,5 Hz, 2H), 4,83-4,88 (m, 1H), 5,38-5,43 (m, 1H), 7,93-7,96 (d,J=8,4Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,57-8,59 (d, J=8,4 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H31N506S 493,2, pronađeno 494,5 (MH<+>).

Primer 9.31: Pripremanje 4-[5-izopropoksi-6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)- pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 95).

Smeši 4-[5-hidroksi-6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (41,1 mg, 88 umol), trifenilfosfina (34,7 mg, 132 umol), propan-2-ola (6,4 mg, 106 umol) u 1 mL THF, doda se DIAD (21 fiL, 106 |amol). Nakon mešanja 2 sata na sobnoj temperaturi, ista količina reagensa se ponovo doda. Nakom mešanja tokom 16 sati, smeša se prečisti putem HPLC; frakcije koje sadrže proizvod se sakupljaju, delimično koncentrišu, i ekstrakuju sa 1M NaOH i CH2CI2. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju, doda se 4M HCI u dioksanu (oko 5 mL) i koncentrišu da se dobije 4-[5-izopropoksi-6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar kao beli čvrsti oblik (HCI so, 9,7 mg, 20%).<1>HNMR (MeOH-d4,400 MHz) 5 1,25-1,27 (d, J=6,3 Hz, 6H), 1,37-1,39 (d, J=6,1 Hz, 6H), 1,75-1,81 (m, 2H), 2,01-2,07 (m, 2H), 2,62 (s, 3H), 3,20 (s, 3H), 3,42-3,47 (m, 2H), 3,70-3,76 (m, 2H), 4,68-4,74 (m, 1H), 4,83-4,89 (m, 1H), 5,37-5,42 (m, 1H), 7,91-7,94 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,70-8,71 (d, J=8,4 Hz, 1H)). Egzaktna masa izračunata za C23H33N506S 597,22, pronađeno 508,5

(NH<+>).

Primer 9.32: Pripremanje 4-[6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-propoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 96).

4-[6-(6-Metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-propoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 30 da se dobije beli čvrsti oblik (HCI so, 38,2 mg, 81%).<1>HNMR (MeOH-d4, 400 MHz) 5 1,02-1,06 (t, J=7,4 Hz, 3H), 1,22-1,24 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,75-1,84 (m, 4H), 2,00-2,05 (m, 2H), 2,59 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 3,40-3,45 (m, 2H), 3,71-3,76 (m, 2H), 4,10-4,13 (t, J=6,6 Hz, 2H), 4,82-4,88 (m, 1H), 4,36-4,41 (m, 1H), 7,92-7,95 (d, J=8,5Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,51-8,53 (d, J=8,5 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C23H33N5O6S 507,22, pronađeno 508,4 (MH<+>).

Primer 9.33: Pripremanje 4-[6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina 1 - etil-propil estra (Jedinjenje 97).

Korak A: Pripremanje 4-(6-hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kisleina terc-butil estra.

Rastvor 4,6-dihloro-5-metoksi-pirimidina (5,62 g, 27,9 mmol) i 4-hidroksipiperidin-1-karbonska kisleina terc-butil estra (5,02 g, 27,9 mmol) u 200 mL THF se rashladi do 0°C. Doda se ukapanjem 1,0 M rastvor kalijum r-butoksida (30,7 mL) sa mešanjem i rezuItirajućoj smeši se onda dopusti da se meša na 0°C jedan sat. Zasićeni amonijumhlorid (100 mL) se doda i rastvor se ekstrakuje sa etilacetatom. Organska faza se opere sa slanim rastvorom i osuši sa magnezijum sulfatom, rastvarač se ukloni da se dobije prinos od 9,10 g (94,8% prinos).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,48 (s, 2H), 1,79-1,83 (m, 2H), 1,99-2,04 (m, 2H), 3,33-3,39 (m, 2H), 3,72-3,77 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 5,30-5,38 (m, 1H), 8,26 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C15H22CIN304: 343,13, pronađeno: 344,3 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje 4-hloro-5-metoksi-6-(piperidin-4-iloksi)-pirimidina.

4-(6-Hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kiselina terc-butil estar (5,0 g, 14,5 mmol) se uvodi u 200 mL 4N HCI u dioksanu i u 200 mL MeOH, meša se na 60°C 3 sata. Rastvarač se uklanja da se dobije prinos hidrohlorida (3,9 g, 95,7% prinosa) kao bledo žuti čvrsti oblik, i materijal se upotrebljava direktno bez daljeg prečišćavanja.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 2,02-2,05 (m, 2H), 2,17-2,20 (m, 2H), 3,13-3,19 (m, 4H), 3,88 (s, 3H), 5,37-5,40 (m, 1H), 8,39 (s, 1H), 9,30 (bs, 2H). Egzaktna masa se izračunava za C10H14CIN3O2: 243,08, pronađeno: 244,2 (MH<+>).

Korak C: Pripremanje 4-(6-hloro-5-metoksi-pinmidin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina 1-etil-propil estra.

Pentan-3-ol (0,88 g, 9,99 mmol) i di-imidazol-1-il-metanon (1,39, 8,57 mmol) se doda u THF (10 mL) i meša na 50°C jedan sat. DIPEA (1,38 g, 10,7 mmol) i doda se 4-hloro-5metoksi-6-(piperidin-4-iloksi)-pirimidin HCI (2,00 g, 7,14 mmol), sud se zapečati i zagreva putem mikrotalasa na 150°C jedan sat. Nakon hlađenja reakciona smeša se deli između vode i etilacetata, organska faza se opere sa slanim rastvorom i osuši da se dobije prinos 1,0 grama (39%) željenog proizvoda, kao beli čvrsti oblik.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 0,9 (t, J=7,83Hz, 6H), 1,55-1,63 (m, 4H), 1,78-1,88 (m, 2H), 1,99-2,08 (m, 2H), 3,39-3,46 (m, 2H), 3,78-3,85 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,67 (m, 1H), 5,36-5,43 (m, 1H), 8,26 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C16H24CIN304: 357,15, pronađeno: 358,3 (MH<+>).

Korak D: Pripremanje 4-[6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina 1 -etil-propil estra.

4-(6-Hloro-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1 -karbonska kiselina 1 -etil-propil estar, (0,50 g, 1,40 mmol) i 6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamin (0,26 g, 1,40 mmol) i paladijumacetat (0,062 g, 0,28 mmol) i 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciklo[3.3.3]undekan (0,191 g, 0,559 mmol) se kombinuju u 50 mL dioksana, pročisti sa azotom i doda se ukapanjem 1 M rastvora kalijum f-butoksida u THF (2,79 mL, 2,79 mmol). Reakcija se zagreva do 100°C i meša se 2 sata, onda filtrira, koncentriše, zakiseli i prečisti putem preparativne HPLC, željene frakcije se dele između zasićenog natrijumhidrokarbonata i etilacetata, organska faza se opere sa slanim rastvorom i osuši sa magnezijum sufatom da se dobije prinos (15 mg, 0,029 mmol, 2,11% prinos) željenog proizvoda, kao beli čvrsti oblik.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 6 0,91 (t, J=7,33 Hz, 6H), 1,54-1,64 (m, 4H), 1,77-1,87 (m, 2H), 1,99-2,08 (m, 2H), 2,65 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 3,39-3,46 (m, 2H), 3,78-3,85 (m, 2H), 4,00 (s, 3H), 4,67 (pent, J=6,32 Hz, 1H), 5,36-5,43 (hept, J=3,79 Hz, 1H), 7,31 (bs, 1H), 7,96 (d, J=8,34 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 9,02 (d,J=8,59Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C23H33N506S: 507,22, pronađeno: 508,5 (MH<+>).

Primer9.34: Pripremanje (R)-4-[6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina sek-butil estra (Jedinjenje 98 kao ft-enantiomer)

Jedinjenje iz naslova se priprema na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.33 (55 mg, 0,11 mmol, 19,2% prinos).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 6 0,93 (t, J=7,07 Hz, 3H), (d, J=6,32 Hz, 3H), 1,52-1,63 (m, 2H), 1,77-1,87 (m, 2H), 1,99-2,08 (m, 2H), 2,65 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 3,39-3,46 (m, 2H), 3,76-3,85 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,73-4,81 (m, 1H), 5,37-5,43 (m, 1H), 7,33 (bs, 1H), 7,95 (d, J=8,59 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 9,00 (d, J=8,59 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H31N506S : 493,29, pronađeno: 494,4

(MH<+>).

Primer 9.36: Pripremanje 4-[6-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina ciklopentil estra (Jedinjenej 99).

Jedinjenje iz naslova se priprema na sličan način kao što je opisano u Primeru 9.33 (60 mg, 0,12 mmol, 21,1% prinos).<*>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,55-1,65 (m, 2H), 1,67-1,76 (m, 4H), 1,79-1,91 (m, 4H), 1,99-2,09 (m, 2H), 2,65 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 3,39-3,46 (m, 2H), 3,76-3,85 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 5,11-5,13 (m, 1H), 5,40 (m, 1H), 7,33 (bs, 1H), 7,95 (d, J=8,34 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H), 9,00 (d, J=8,59 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C23H31N506S: 505,20, pronađeno: 506,4 (MH<+>).

Primer 9.37: Pripremanje 4-[6-(6-hidroksimetil-4-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 100).

Korak A: Pripremanje (4-metil-5-nitropiridin-2-il)metanola.

Rastvoru smeše 2,4-dimetil-5-ntropiridina (3,0 g, 20 mmol) u 30 mL dioksana, dodda se selenijum oksid (2,8 g, 25 mmol) na ambijentalnoj temperaturi. Reakcije se refluksuje 10 sati. Reakcija se ohladi do sobne temperature i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se sipa u vodu i ekstrakuje sa etilacetatom. Organski sloj se osuši preko MgS04i koncentriše pod vakuumom. Sirova smeša aldehida se razblaži u metanolu (30 mL) i doda se u delovima natrijum borhidrid (0,74 g, 20 mmol) na 0°C. Nakon mešanja 1 sat, reakcija se priguši sa vodom (20 mL) i koncentriše pod vakuumom. Reakcija se ekstrakuje sa etilacetatom i osuši preko MgS04. Etilacetat se osuši pod vakuumom i prečisti pod Si02sa 50% etilacetatom u heksanu da se dobije (4-metil-5-nitropiridin-2-il)metanol u 83% (2,7 g).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 6 2,65 (s, 1H), 4,60 (d, J=8,1, 2H), 5,81 (t, J=8,1, 1H), 7,67 (s, 1H), 9,21 (s, 1H).

Korak B: Pripremanje 2-((ferc-butildifenilsililoksi)metil)-4-metil-5-nitropiridina.

Rastvoru (4-metil-5-nitropiridin-2-il)metanola (1,2 g, 7,1 mmol) u 5 mL CH2CI2, se doda terc-butilhlorodifenilsilan (2,0g, 7,1 mmol) i imidazol (0,049 g, 0,71 mmol) na ambijentalnoj temperaturi. Reakciona smeša se meša na 25°C 2 sata. Reakcija se sipa u H20, ekstrakuje sa etilacetatom, i osuši preko MgS04. Etilacetat se koncentriše pod vakuumom i prečisti preko Si02da se dobije željeno jedinjenje 2-((rerc-butildifenilsililoksi)metil)-4-metil-5-nitropiridin u 90% (2,6 g).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 1,12 (s, 9H), 2,78 (s, 3H), 4,85 (s, 2H), 7,21 (s, 1H), 7,24-7,89 (m, 10H), 9,15 (s, 1H).

Korak C: Pripremanje 6-((ferc-butildifenilsililoksi)metil)-4-metilpiridin-3-amina.

Rastvor 2-((rerc-butildifenilsililoksi)metil)-4-metil-5-nitropiridin (1,5 g, 3,7 mmol) u 20 mL zasićene NH4CI, doda se cink (1,7 g, 26 mmol) u delovima na 0°C tokom 10 minuta. Reakcija se meša na istoj temperaturi 1 sat. Reakcija se doda sa etilacetatom (20 mL) i meša se dodatnih 1 sat. Organski sloj se uvodi, opere sa H20, i osuši preko MgS04. Etilacetat se koncentriše pod vakuumom da se dobije 6-((terc-butildifenilsililoksi)metil)-4-metilpiridin-3-amin u 72% (1,0 g). Jedinjenej se upotrebljava za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,10 (s, 9H), 2,21 (s, 3H), 4,64 (s, 2H), 5,01-5,13 (b, 2H), 7,12 (s, 1H), 7,31-7,71 (m, 10H), 7,89 (s, 1H). Egzaktna masa se izračunava za C23H28N20Si 376,57, pronađeno 377,4 (MH<+>).

Korak D: Pripremanje 4-[6-(6-hidroksimetil-4-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 100).

Rastvoru izopropil-4-(6-hloro-5-metoksipirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karboksilata (1,5 g, 4,548 mmol) u 100 mL THF, dodaju se6-((ferc-butildifenilsililoksi)metil)-4-metilpiridin-3-amin (1,713 g, 4,5 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciklo[3.3.3]undekan (0,1558 g, 0,4548 mmol), Pd(OAc)2(0,05106 g, 0,2274 mmol) i9 Na-t-OBu (1,049 g, 10,92 mmol) na ambijentalnoj temperaturi. Reakcija se meša na 75°C 2 sata. Reakcija se ohladi do sobne temperature i sipa u H20. Organski delovi se ekstrakuju sa etilacetatom i osuše preko MgS04. Etilacetat se koncentriše pod vakuumom i rastvori u THF (10 mL). Rastvor se tretira sa 1,0 M TBAF na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja 2 sata, reakcija se koncentriše pod vakuumom i sipa u H20. Organsko jedinjenje se ekstrakuje sa etilacetatom i osuši preko MgS04. Organski sloj se koncentriše pod vakuumom i prečisti preko Si02da se dobije izopropil 4-(6-(6(hidroksimetil)-3-metilpiridin-2-ilamino)-4-metoksipirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karboksilat u 33,1% (650 mg).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,21 (d, 6H), 1,62-1,69 (m, 2H), 1,84-1,86 (m, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,52 (s, 3H), 3,21-3,65 (m, 2H), 3,64-3,72 (m, 2H), 3,82 (s, 2H), 4,80-4,91 (m, 1H), 5,31-5,43 (m, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 8,89 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C21H29N5O6431,49, pronađeno 432,4 (MH<+>).

Primer 9.37: Pripremanje 4-[6-(6-cijano-4-metil-piridin-3-ilamino)-5-

metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil

estra (Jedinjenje 99).

Korak A: Pripremanje 4-metil-5-nitropikolinonitril.

Rastvoru 2-bromo-4-metil-5-nitropiridina (5,0 g, 23 mmol) u 20 mL THF, se doda Zn(CN)2(6,8 g, 58 mmol), i Pd(PPh3)4(2,7 g, 2,3 mmol) na ambijentalnoj temperaturi. Reakcija se meša na 130°C tokom 2 sata. Reakcija se ohladi do sobne temperature i sipa u H20. Reakcija se ekstrakuje sa etilacetatom i osuši preko MgS04. Organski sloj se koncentriše pod vakuumom da se dobije 4-metil-5-nitropikolinonitril 82%

(3,2 g) koji se upotrebljava za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 8,90 (s, 1H), 7,12 (s, 1H), 2,54 (s, 3H).

Korak B: Pripremanje 5-amino-4-metilpikilinonitrila.

4-Metil-5-nitropikolinonitril (7,0 g, 43 mmol) se suspenduje u vod. NH4CI (200 mL) i ohladi se do 0°C. Cink se dodaje u delovima tokom 30 minuta i meša 1 sat. Reakcija se dodaje sa etilacetatom (200 mL) i meša 2 sata. Reakcija se filtrira i organski sloj se uvodi, osuši preko MgS04, i koncentriše preko vakuuma. Čvrsti oblik se pretvara u prašak sa 50% etilacetatom u heksanu da se dobije 5-amino-4-metilpikolinonitril u 67% (4,56 g).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 7,98 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 5,42-5,48 (b, 2H), 2,54 (s, 3H). Egzaktna masa izračunata za C7H7N3133,15, pronađeno 134,21

(MH<+>).

Korak C: Pripremanje 4-[6-(6-cijano-4-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 99).

Rastvor izopropil-4-(6-hloro-5-metoksipirimidin-4-iloksi)pipericlin-1-karboksilata (0,3 g, 0,91 mmol), u dioksanu (3 mL), se doda 5-amino-4-metilpikolinonitril (0,12 g, 0,91 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfabiciklo[3.3.3]undekan (0,031 g, 0,091 mmol), Pd(OAc)2(0,10 g, 0,45 mmol), i NaO-ć-Bu (0,21 g, 2,2 mmol) na ambijentalnoj temepraturi. Reakcija se zagreva do 75°C i meša se 2 sata. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija se siap u H20 i ekstrakuje sa etilacetatom. Organski sloj se osuši preko MgS04i koncentriše pod vakuumom. Ostatak se prečisti preko Si02da se dobije izopropil-4-(6-(6-cijano-4-metilpiridin-3-ilamino)-5-metoksipirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karboksilat u 31% (102 mg).<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 1,21 (d, J=4,71, 6H), 1,71-1,75 (m, 2H), 1,95-2,01 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,62 (s, 3H), 3,32-3,41 (m, 2H), 3,64-3,71 (m, 2H), 4,85-4,90 (m, 1H), 5,35-5,41 (m, 1H), 7,81 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,82 (d, J=4,71 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C21H26N604426,47, pronađeno 427,51 (MH<+>).

Primer 9.38: Pripremanje {6-[1-(3-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-piperidin-4-iloksi]-5-metoksi-pirimidin-4-il}-(6-metansulfonil-2-metil-

piridin-3-il)-amina (Jedinjenje 101).

Smeša 4-hloro-6-[1 -(3-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-piperidin-4-iloksi]-5-metoksi-pirimidina (1,78 g, 5,03 mmol), 6-metansulfonil-3-metil-piridin-3-ilamina (1,12 g, 6,04 mmol), paladijumacetata (102 mg, 0,45 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfa-biciklo[3.3.3]undekana (322 |iL, 0,91 mmol) i natrijum terc-butoksida (725 mg, 7,54 mmol) u 30 mL dioksana se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 150°C tokom 1 sata. Dodatnih 40 mL dioksana se doda i smeša se refluksuje pod 130°C. Nakon 65 sati, smeša se prečisti putem HPLC. Frakcije sa proizvodom se sakupe, koncentrišu, i rekristališu sa vrelim etanolom. 4N HCI u dioksanu (oko 1 mL) i acetonitril (oko 3 mL) se doda i koncentriše da se dobije {6-[1-(3-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-5-il)-piperidin-4-iloksi]-5-metoksi-pirimidin-4-il}-(6-metansulfonil-2-metil-piridin-3-il)-amin kao beli čvrsti oblik (HCI so, 360 mg, 13,3%). 1HNMR (DMSO-d6, 400 MHz) 8 1,19-1,21 (d, J=6,82 Hz, 6H), 1,83-1,85 (m, 2H), 2,06-2,08 (m, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,81-2,84 (sept, J=6,82 Hz, 1H), 3,57-3,59 (m, 2H), 3,75-3,77 (m, 2H), 3,87 (s, 1H), 5,31-3,39 (m, 1H), 7,89-7,91 (d, J=8,34 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 8,23-8,25 (d, J=8,34 Hz, 1H), 8,69 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H29N7O5S 503,2, pronađeno 504,2 (MH<+>).

Primer 9.39: Pripremanje izopropil 4-(6-(2,4-dimetil-6-(metilsulfonil)piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karboailat (Jedinjenje 102).

Korak A: Pripremanje 2,4-dimetilpiridin-3-amina.

2,4-Dimetilnikotinska kiselina (3,0 g, 20 mmol) se doda u SOCI2 (20 mL) na 0°C i zagreje do 60°C. Nakon mešanja 1 sat, reakcija se koncentriše pod vakuumom. Ostatak se rastvori u acetonu (20 mL) i NaN3(1,9 g, 30 mmol) praćeno sa H20 (20 mL). Reakcija se zagreje do 70°C i meša se 1 sat na istoj temperaturi. Reakcija se ohladi do sobne temperature i koncentriše pod vakuumom do pola zapremine i sipa u H20 (50 mL) i ekstrakuje sa etilacetatom (50 mL x 5) i osuši preko MgS04. Etilacetat se koncentriše pod vakuumom da se dobije sirovo jedinjenje. Jedinjenje se upotrebljava za sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 2,10 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 4,65-4,70 (b, 2H), 6,85 (d, J=4,78 Hz, 1H), 7,75 (d, J=4,78 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C7H10N2122,08, pronađeno 123,1 (MH<+>).

Korak B: Pripremanje 6-bromo-2,4-dimetilpiridin-3-amina.

Rastvoru 2,4-dimetilpiridin-3-amina (2,0 g, 16 mmol) u CH2CI2(20 mL), doda se rastvor broma (3,16 g; 20 mmol) u CH2CI2(5 mL) na 0°C tokom 5 minuta. Reakcija se koncentriše pod vakuumom. Reakcija se sipa u H20 (50 mL), ekstrakuje sa CH2CI2, opere sa Na2S03rastvorom, i osuši preko MgS04. CH2CI2se koncentriše pod vakuumom da se dobije sirovo jedinjenje. Sirovi proizvod se prečisti preko Si02da se dobije 6-bromo-2,4-dimetilpiridin-3-amin.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 2,10 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 4,55-5,10 (b, 2H), 7,05 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C7H9BrN2201,6, pronađeno 202,3 (MH<+>).

Korak C: Pripremanje izopropil 4-(6-(6-bromo-2,4-dimetilpiridin-3-ilamino)-3-metoksi-pirimidin-4-iloksi)piperidin-1 -karboksilata.

Rastvoru izopropil 4-(6-hloro-5-metoksipirimidin-4-iloksi)piperidin-1 - karboksilat (2,0 g, 6,1 mmol) u 10 mL dioksana, dodaju se 6-bromo-2,4-dimetilpiridin-3-amin (1,0 g, 5,1 mmol), 2,8,9-triizobutil-2,5,8,9-tetraaza-1-fosfabiciklo[3.3.3]undekan (0,35 g, 1,0 mmol), Pd(OAc)2(0,11 g, 0,51 mmol), i NaO-t-Bu (1,2 g, 12 mmol) na ambijentalnoj temperaturi. Reakcija se zagreva do 150°C tokom 3 sata. Reakcija se ohladi do sobne temperature i sipa u H20. Organski delovi se ekstrakuju sa etilacetatom i osuše preko MgS04. Etilacetat se koncentriše pod vakuumom i prečisti preko Si02da se dobije izopropil 4-(6-(6-bromo-2,4-dimetilpiridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karboksilat.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 1,24-1,25 (d, J=6,2 Hz, 6H), 1,72-1,77 (m, 2H), 1,95-2,01 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 2,52 (s, 3H), 3,37-3,44 (m, 2H), 3,73-3,79 (m, 2H), 4,91-4,97 (m, 1H), 5,30-5,35 (m, 1H), 6,01 (s, 1H), 7,34-7,36 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,14-8,16 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,37 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C2iH28BrN504494,31, pronađeno 495,2 (MH<+>).

Korak D: Pripremanje izopropil 4-(6-(2,4-dimetil-6-(metilsulfonil)piridin-3-ilamino)-5-metoksipirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karboksilata (Jedinjenje 102).

Rastvoru izopropil 4-(6-(6-bromo-2,4-dimetilpiridin-3-ilamino)-5-metoksipirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karboksilata (500 mg, 1,0) u 10 mL DMSO, dodaju se natrijum sulfinat (0,36 g, 3,5 mmol), (CuOTf)2PhH (0,051 g, 0,10 mmol), i N.N'-dimetiletilamin (0,018 g, 0,20 mmol) na ambijentalnoj temperaturi. Reakcija se zagreva do 150°C tokom 8 sati. Reakcija se ohladi do sobne temperature i sipa u H20. Organski delovi se ekstrakuju sa etilacetatom i osuše preko MgS04. Etilacetat se koncentriše pod vakuumom i prečisti preko Si02da se dobije izopropil 4-(6-(2,4-dimetil-6-(metilsulfonil)piridin-3-ilamino)-5-metoksipirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karboksilat.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 1,24 (d, J=1,6 Hz, 6H), 1,75-1,81 (m, 2H), 1,98-2,02 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 3,21 (s, 3H), 3,52-3,65 (m, 2H), 3,65-3,75 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 5,21-5,35 (m, 1H), 7,78 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 8,89 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C22H3iN506S 493,58, pronađeno 494,5 (MH<+>).

Primer 9.40: Pripremanje 4-{6-[6-(1-metansulfonil-1-metil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estra (Jedinjenje 103).

Korak A: Pripremanje 6-metil-5-ntiropikolinaldehida.

Rastvor 2,6-dimetil-3-nitropiridina (50 g, 329 mmol) i Se02(5,02 g, 27,9 mmol) u dioksanu (500 mL) se zagreva pri refluksu 16 sati. Rastvor se filtrira, rastvarač se uklanja i ostatak se prečisti direktno hromatografijom kolone (20% EtOAc/heksani). Materijal se rekristališe iz etilacetata da se dobije 4,1 g 6-metil-5-nitropikolinaldehid (41 g, 75%), bledo žutog čvrstog oblika;<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 2,94 (s, 3H), 7,98 (d, J=8,34, 1H), 8,41 (d, J=8,34, 1H), 10,09 (s, 1H). Egzaktna masa izračunata za C7H6N2O3: 166,04, pronađeno: 167,12 MS m/z (MH<+>).

Korak B: Pripremanje (6-metil-5-nitropiridin-2-il)metanola.

Rastvor 6-metil-5-nitropikolinaldehida (50 g, 329 mmol) u etanolu (200 mL) se ohladi do 10°C i doda se u porcijama natrijumborhidrid (5,9 g, 157 mmol). Rastvoru se dopusti da se meša pola sata, etanol se uklanja i ostatak se deli između etilacetata i vode, organska faza se opere sa slanim rastvorom, i osuši sa magnezijum sulfatom i skida. Ostatak se prečisti putem hromatografije kolone (10-40% etilacetat(heksani) da se dobije (6-metil-5-nitropiridin-2-il)metanol (12 g, 91%), bledo belog čvrstog oblika.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 2,89 (s, 3H), 3,55 (t, J=5,05, 1H), 4,83 (d, J=4,55, 2H), 7,31 (d, J=8,34, 1H), 8,31 (d, J=8,34, 1H); Egzaktna masa izračunata za C7H8N203: 168,05, pronađeno: 169,10 MS m/z (MH<+>).

Korak C: Pripremanje (6-metil-5-nitropiridin-2-il)metil metansulfonata.

(6-Metil-5-nitropiridin-2-il)metanol (12 g, 71 mmol), i trietilamin (9,4 g, 93 mmol) u THF (300 mL) se ohladi u ledenom kupatilu do 10°C i doda se ukapanjem metansulfonil hlorid (9,0 g, 79 mmol) i rastvor se meša jedan sat, onda filtrira da se ukloni trietilamin HCI, i rastvarač se uklanja pod redukovanim pritiskom na rotovap-u (sa temperaturom kupatila na 35°C) i dobija se (6-metil-5-nitropiridin-2-il)metil metansulfonat (17 g, 97%), mrko ulje koje se direktno upotrebljava kao takvo.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 8 2,87 (s, 3H), 3,16 (s, 3H), 5,83 (s, 2H), 7,55 (d, J=8,34, 1H), 8,38 (d, J=8,34, 1H); Egzaktna masa izračunata za C8HioN205: 246,03, pronađeno: 247,10 MSm/ z(MH<+>).

Korak D: Pripremanje 2-metil-6-(metilsulfonilmetil)-3-nitropiridina.

(6-Metil-5-nitropiridin-2-il)metil metansulfonat (17,48 g, 71 mmol) se uvodi u DMSO (100 mL), i dodaje se u porcijama NaS02Me (25,37 g, 248,5 mmol), rastvor se zagreje do 120°C i meša 15 minuta, ohladi i podeli između EtOAc i vode, organska faza se opere sa slanim rastvorom i osuši preko magnezijum sulfata i rastvarač se uklanja. Ostatak se opere sa 50 mL EtOAc i filtrira da se dobije prinos 2-metil-6-(metilsulfonil-metil)-3-nitropiridina (11,45 g, 70,04% prinos), koji je dovoljne čistoće za dalju upotrebu.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 6 2,87 (s, 3H), 2,99 (s, 3H), 4,48 (s, 2H), 7,53 (d, J=8,34, 1H), 8,4 (d, J=8,34, 1H); Egzaktna masa izračunata za C8H10N2O4S: 230,04, pronađeno: 231,12 MSm/ z(MH<+>).

Korak E: Pripremanje 2-metil-6-(2-(metilsulfonil)propan-2-il)-3-nitropiridina.

Rastvoru 2-metil-6-(metilsulfonilmetil)-3-nitropiridina (1,54 g, 6,689 mmol) u 200 mL THF, dodaju se jodometan (1,252 mL, 20,07 mmol) i natrijum hidrid (60% disperzija, 1,1 g, 27,6 mmol). Tamno crvena smeša se meša na sobnoj temperaturi 30 minuta i onda se priguši sa ledenom vodom, delimično koncentriše, i ekstrakuje sa CH2CI2i vodom. Organske faze se osupe preko MgS04, filtriraju, i koncentrišu. Ostatak se prečisti putem CC (heksan/AcOEt 2:1—da se dobije 2-metil-6-(2-(metilsulfonil)propan-2-il)-3-nitropiridin (1,374 g, 80%) kao beli čvrsti oblik.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,92 (s, 6H), 2,85 (s, 3H), 2,88 (s, 3H), 7,69-7,71 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,32-8,34 (d, J=8,6Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C10H14N2O4S 258,07, pronađena 259,2 (MH<+>).

Korak F: Pripremanje 2-metil-6-(2-(metilsulfonil)propan-2-il)piridin-3-amina.

Rastvoru 2-metil-6-(2-(metilsulfonil)propan-2-il)-3-nitropiridina (1,27 g, 4,92 mmol) u 50 mL sirćetne kiseline, doda se u malim porcijama cink prah (1,6 g, 24,5 mmol) pod ledenim-hlađenjem. Nakon 1 sat, doda se još cink praha (oko 2 g, 31 mmol) u malim procijama i smeša se meša na sobnoj temperaturi još sat vremena. Čvrsti oblici se izdvajaju filtriranjem, operu sa CH3CN, i filtrat se koncentriše. Ostatak se prečisti putem CC (CH2CI2/MeOH 20:1 + 1% NEt3). Frakcije koje sadrže proizvod se koncentrišu i ponovo pročiste putem HPLC. Frakcije koje sadrže proizvod se delimično koncentrišu i ostatak se ekstrakuje sa 1M HaHC03i CH2CI2. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju i koncentrišu da se dobije 2-metil-6-(1-(metilsulfonil)propan-2-il)piridin-3-amin (0,664 g, 59% prinos) kao u belom čvrstom obliku.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,84 (s, 6H), 2,39 (s, 3H), 2,76 (s, 3H), 3,68 (s, 2H), 6,92-6,94 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,29-7,31 (d, J=8,3 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C10H16N2O2S 228,09, pronađeno 229,2 (MH<+>).

Korak G: Pripremanje 4-{6-[6-(1-metansulfonil-1-metil-etil)-2-metil-

piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska

kiselina izopropil estra (Jedinjenje 103).

Smeša izopropil 4-(6-hloro-5-metoksipirimidin-4-iloksi)piperidin-1 - karboksilata (78,5 mg, 0,238 mmol), 2-metil-6-(2-(metilsulfonil)propan-2-il)piridin-3-amina (54,3 g, 0,238 mmol), Pd2(dba)3(20,0 mg, 0,0218 mmol), bifenil-2-il-di-terc-fosfana (3,0 mg, 0,0101 ^unol), i cezijum karbonata (160 mg, 0,491 mmol) u 4M dioksana se zagreva pod mikrotalasnim zračenjem na 100°C. Smeša se prečisti putem HPLC; frakcije koje sadrže proizvod se delimično koncentrišu, i ostatak se ekstrakuje sa CH2CI2i 1M NaHC03. Organske faze se osuše preko MgS04, filtriraju, i koncentrišu da se dobije 4-(5-metoksi-6-(2-metil-6-(2-(metilsulfonil)propan-2-il)piridin-3-ilamino)pirimidin-4-iloksi)piperidin-1-karboksilat (4,6 mg, 4%) u belom čvrstom obliku.<1>HNMR (CDCI3, 400 MHz) 5 1,16-1,17 (d, J=6,3 Hz, 6H), 1,80-1,86 (m, 2H), 1,87 (s, 6H), 2,01-2,06 (m, 2H), 2,56 (s, 3H), 2,81 (s, 3H), 3,38-3,44 (m, 2H), 3,77-3,82 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 4,91-4,97 (m, 1H), 5,35-5,39 (m, 1H), 6,98 (s, 1H), 7,51-7,53 (d, J=8,6 Hz, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,51-8,53 (d, J=8,6 Hz, 1H). Egzaktna masa izračunata za C^H^OeS 531,23, pronađeno 522,5 (MH<+>).

Primer10:Protokol za odgovore naRUP3doze u melanoforama

Melanofore se održavaju u kulturi kao što je dato kod Potenza, M.N. i Lemer, M.R., u Pigment Cell Research, Vol. 5, 372-378, 1992 i transficiraju sa RUP3 vektorom ekspresije (pCMV) upotrebom elektorporacije. Nakon elektorporacije, transficirane ćelije se postav na ploču sa 96 bazenčića radi ogleda. Ćelijama se onda dopušta da rastu 48 sati da bi se kako oporavile od postupka elektorporacije tako i da postignu maksimalne nivoe receptor ekspresije.

Na ovaj ogledni dan, medijum rast na ćelijama se zamenjuje sa puferom bez seruma koji sadrži 10 nM melatonina. Melatonin deluje putem endogenog Gi-sparenog GPCR u melanoforama da se snize intracelularni cAMP nivoi. U odgovoru na snižene cAMP nivoe, melanofore translociraju njihov pigment ka centru ćelije. Neto efekat ovog je značajno smanjenje u absorbanci čitanja ćelijskog monosloja u bazenčiću, mereno pri 600-650nM. Nakon 1 sata inkubacije u melatoninu, ćelije postaju potpuno pigment-sakupljenje. U ovoj tački sakuplja se osnovna linija čitanja absorbance. Serijska razblaživanja test jedinjenja se onda dodaju ploči i jedinjenja koja stimulišu RUP3 proizvode povećanja u intracelularnim cAMP nivoima. U odgovoru na ove povećane cAMP nivoe, melanofore translociraju njihov pigment nazad u ćelijsku periferiju. Nakon jednog sata, stimulisane ćelije su u potpunosti pigment-dispergovane. Ćelijski mono sloj u dispergovanom stanju absorbuje mnogo više svetlosti u opsegu 600-650 nM. Izmereno povećanje u absorbanci upoređeno sa osnovnom linijom čitanja dopušta da se kvantifikuje stepen stimulacije receptora i iscrta prema odgovoru na dozu kriva.

Jedinjenja gornjih primera se pretražuju upotrebom ogleda disperzije melanofore, kao što je u gornjem tekstu opisano. Reprezentativna jedinjenja sadašnjeg pronalaska i njihove primećene EC50vrednosti su prikazane u donjoj Tabeli 3. Određena druga jedinjenja ilustrovana u Primerima pokazuju EC50aktivnosti u ogledu disperzije melanofore manje od oko 10[ iL.

Jedinjenja sadašnjeg pronalaska imaju neočekivane vodene rastvorljivosti. Na primer, Jedinjenje 77 ima vodenu rastvorljivost od 0,19 mg/mL (pH=5) i 1,12 mg/mL (pH=2); a Jedinjenje 78 ima vodenu rastvorljivost od 0,38 mg/mL (pH=5) i 1,45 mg/mL (pH=2).

Svaka od realizacija sadašnjeg pronalaska može alternativno biti limitirana da se odnosi na ona jedinjenja koja demonstriraju oko 100 puta veće vezivanje za RUP3 upoređeno sa korikotrofin-oslobađajućim faktor-1 (CRF-1) receptorom; skorašnji pregled CRF-1 jedinjenja može biti pronađen u Expert Opin. Ther. Patents 2002, 12(11), 1619-1630.

Stručnjaci iz ove oblasti nauke će prepoznati da različite modifikacije, dodatci, supstitucije i varijacije u odnosu na ilustrativne primere koji su prethodno ovde dati mogu biti učinjeni bez napuštanja raspona pronalaska kako je definisan u pridodatim zahtevima.

Claims (62)

1. Kompozicija,naznačena time,što se sastoji od: (a) inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV); i (b) jedinjenja odabranog od jedinjenja formule (la) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvata i hidrata: pri čemu su: X je N ili CR8pri čemu je R8H ili halogen; Yje NH ili O; Zje CH ili N;Rije karbo-C^-alkoksi, oksadiazolil ili pirimidinil gde su navedeni karbo-Ci-6-alkoksi, oksadiazolil ili pirimidinil svaki opciono supstituisani sa 1 ili 2 supstituentima nezavisno odabranim od: Ci? alkil, C-malkoksi i C3.5cikloalkil; R2je H ili CM alkil; R3 je C1-4alkoksi, 0-C2-4-alkinil ili hidroksil; R4 je odabran od: H, Ci.4alkoksi, C,. 4 alkil, C2.4alkinil i halogen; bilo da: R5 je odabran od: d-4 acilsulfonamid, C^alkoksi, C^alkil, C^alkilamino, d-4alkilsulfonil, C^alkiltio, cijano, heterociklil, di-d.4-dialkilamino i silfonamid, pri čemu su navedeni C^alkoksi, C^alkil, d-4alkilamino, d.4alkilsulfonil, C^alkiltio, di-C^-dialkilamino i heterociklil svaki opciono supstituisani sa 1 ili 2 supstituenata nezavisno odabranih od: C2^a!kinil, C^alkoksi, C^alkilkarboksamid, CMalkilsulfonil, C2.5cikloalkil, C3.5cikloalkiloksi, di-d-4-alkilkaboksamid, hidroksil i fosfonooksi, pri čemu je navedeni C^alkilkarboksamid opciono supstituisan sa hidroksil; ili R5je grupa Formule (A): pri čemu su: "m", "n" i "q" svaki nezavisno 0, 1, 2 ili 3; "r"je 0, 1 ili 2; i T je 0 ili 1; R6 je H ili halogen; i R7 je H ili CMalkil.

2. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što X predstavlja N.

3. Kompozicija prema zahtevu 1 ili 2,naznačena time,što Y predstavlja NH.

4. Kompozicija prema zahtevu 1 ili 2,naznačena time,što Y predstavlja O.

5. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 4,naznačena time,što Z predstavlja CH.

6. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 4,naznačena time,što Z predstavlja N.

7. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 6,naznačena time,štoRipredstavalja karbo-C^-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkilom.

8. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 6,naznačena time,što je Rtodabran od: C(0)OCH2CH3, C(0)OCH(CH3)2, C(0)OCH(CH3)(CH2CH3), C(0)OCH2-ciklopropil i C(0)OCH(CH3)(ciklopropil).

9. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 6,naznačena time,što R, predstavlja oksadiazolil opciono supstituisan sa jednom C:, A alkil grupom.

10. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 6,naznačena time,što R, predstavlja pirimidinil opciono supstituisan sa jednom Ci_4alkoksi grupom.

11. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 10,naznačena time,što R2predstavlja H.

12. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 11,naznačena time,što R3predstavlja C14alkoksi.

13. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 11,naznačena time,što R3predstavlja OCH3ili OCH2CH3.

14. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 13,naznačena time,što je R4odabran od: H, OCH3, CH3, CH2CH3, F, Cl, i C=CH.

15. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 14,naznačena time,što je R5odabran od: OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3, N(CH3) CH2CH(CH3)S(0)2CH3, 3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1 -il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2.

16. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 14,naznačena time,što je R5odabran od: OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3) NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH2CH2OH, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, amino, NHCH2CH3, NHCH(CH3)2 i NHCH(CH3)CH2CH3.

17. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 16,naznačena time,što R6predstavlja H.

18. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 17,naznačena time,što R7predstavlja H.

19. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što je jedinjenje odabrano od jedinjenja koja imaju formulu (lla) i njihovih farmaceutskih prihvatljivih soli, solvata i hidrata: pri čemu: Yje NH ili O;Rije karbo-C^-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil; R2 je H ili CH3; R3 je Ci.4alkoksi; R4 je odabran od: H, OCH3) CH3, CH2CH3, F i Cl; R5 je odabran od: OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3l N(CH3)CH2CH(CH3)S(0)2CH3l3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CH2OP(0)(OH)2) S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2; R6 je H ili F; i R7 je H ili CH3-

20. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što je jedinjenje odabrano od jedinjenja koja imaju formulu (llc) i njihovih farmaceutskih prihvatljivih soli, solvata i hidrata: pri čemu: Rije karbo-C^-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil; R2je H ili CH3; R3 je Ci. 4 alkoksi; R4 je odabran od: H, OCH3, CH3, CH2CH3, F i Cl; R5 je odabran od: OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3lCH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3) NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3, N(CH3)CH2CH (CH3)S(0)2CH3, 3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2; R6 je H ili F; i R7jeHiliCH3.

21. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačeno time,što je jedinjenje odabrano od jedinjenja koja imaju formulu (Me) i njihovih farmaceutskih prihvatljivih soli, solvata i hidrata: pri čemu:Rije karbo-C^-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil; R2 je H ili CH3; R3 je C-m alkoksi; R4 je odabran od: H, OCH3lCH3, CH2CH3, F i Cl; R5je odabran od: OCH2CH2CH3, OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2, S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil, NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3lN(CH3)CH2CH(CH3)S(0)2CH3, 3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CHOP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3l NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2; R6je H ili F; i R7je H ili CH3.

22. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što je jedinjenje odabrano od jedinjenja koja imaju formulu (lle) i njihovih farmaceutskih prihvatljivih soli, solvata i hidrata: pri čemu: Rije karbo-C^-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil; R2 je H ili CH3; R3 je C^ alkoksi; R4 je odabran od: H, OCH3, CH3, CH2CH3, F i Cl; R5 je odabran od: OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2) S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH2CH2OH, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH i S(0)2NH2; R6 je H ili F; i R7 je H ili CH3.

23. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što je jedinjenje odabrano od jedinjenja koja imaju formulu (llg) i njihovih farmaceutskih prihvatljivih soli, solvata i hidrata: pri čemu: Rtje karbo-C^-alkoksi opciono supstituisan sa C3.5cikloalkil; R2je H ili CH3; R3 je Cw alkoksi; R4 je odabran od: H, OCH3, CH3lCH2CH3, F i Cl; R5 je odabran od: OCH2CH2CH3) OCH2CH2CH2OH, S(0)2CH3, CH2CH2S(0)2CH3) NHCH2CH2OH, cijano, CH2CH2OCH3, CH2CH2OH, CH2CH2CH(CH3)OH, CH2CH2OP(0)(OH)2) S(0)2NHC(0)CH2CH3, CH2CH20-ciklopropil. NHCH2CH2OCH3, OCH2CH2S(0)2CH3, NHCH2CH(CH3)OH, CH2CH2CH2OH, CH2CH2CH2OP(0)(OH)2, NHCH2CH(CH3)S(0)2CH3l N(CH3)CH2CH(CH3)S(0)2CH3>3-metansulfonil-pirolidin-1-il, 3-metansulfonil-piperidin-1-il, CH2C(0)N(CH3)2, 3-metansulfonil-azetidin-1-il, CH2C(0)NHCH2CH2OH, SCH2CH2OH, S(0)2CH2CHOP(0)(OH)2, S(0)2CH2CH3, NHCH2CH(OH)CH2OH, S(0)2CH2CH2OH, OCH2CH2OP(0)(OH)2, OCH2CH2CH2OP(0)(OH)2i S(0)2NH2; R6 je H ili F; i R7jeH iliCH3.

24. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što je jedinjenje odabrano od sledećih jedinjenja i njihovih farmaceutskih prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 4-[6-(4-Metansulfonil-2-metoksi-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{5-Metoksi-6-[6-(2-metoksi-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Metansulfonil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina 1-ciklopropil-etil estar; 4-[6-(2-Fluoro4-metansulfonil-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[6-(4-Cijano-2-fluoro-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Hidroksi-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Metansulfonil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-{5-Metoksi-6-[6-(2-metoksi-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Metansulfonil-etoksi)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Hidroksi-propilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(3-Hidroksi-propil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-{5-Metoksi-6-[2-metil-6-(3-fosfonooksi-propil)-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Metansulfonil-etilamino)-2-metoksi-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Metansulfonil-propilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-[6-(6-Dimetilkarbamoilmetil-2-metil-piridin-2-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-(6-{2-Fluoro-4-[(2-hidroksi-etilkarbamoil)-metil]-fenilamino}-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Metansulfonil-etilamino)-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[2-Fluoro-4-(2-hidroksi-etilsulfanil)-fenilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2)3-Dihidroksi-propilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Hidroksi-etoksi)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{5-Metoksi-6-[2-metil-6-(2-fosfonooksi-etoksi)-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(3-Hidroksi-propoksi)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; i 4-{5-Metoksi-6-[2-metil-6-(3-fosfonooksi-propoksi)-piridin-3-ilamino]-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar.

25. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što je jedinjenje odabrano od sledećih jedinjenja i njihovih farmaceutskih prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 4-[2-(2-Fluoro-4-propoksi-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[2-Fluoro-4-(2-hidroksi-etil)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[5-Fluoro-2-(2-fluoro-4-metansulfonil-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[2-Etil-4(2-metansulfoni-etil)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-2-metil-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-{5-Fluoro-2-[6-(2-hidroksi-etoksi)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[2-Fluoro-4-(2-metansulfonil-etil)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Hidroksi-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[2-(4-Cijano-2-fluoro-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[2-(2-Hloro-4-cijano-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Metansulfonil-etil)-2-metoksi-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Metansulfonil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Hidroksi-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(3-Hidroksi-butil)-2-metoksi-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-pi 4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[2-Fluoro-4-(2-hidroksi-etoksi)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-{3-Etoksi-2-[2-fluoro-4-(2-fosfonooksi-etil)-fenilamino]- piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[3-Metoksi-2-(2-metoksi-4-propionilsulfamoil-fenilamino)- piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[2-(2,5-Difluoro-4-propoksi-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; (2-Fluoro-4-metansulfonil-fenil)-{4-[1-(5-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-pioeridin-4-iloksi]-3-metoksi-piridin-2-il}-amin; (2-Fluoro-4-metansulfonil-fenil)-{3-metoksi-4-[1-(5-metoksi-pirimidin-2-il)-piperidin-4-iloksi]-piridin-2-il}-amin; 4-{2-[6-(2-Ciklopropoksi-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[2-(2-Hloro-4-metansulfonil-fenilamino)-5-fluoro-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[3-Etoksi-2-(4-metansulfonil-2-metoksi-fenilamino)- piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; ? 4-[2-(5-Fluoro-2-metil-4-propoksi-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Metansulfonil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[2-(2-Fluoro-4-metansulfonil-fenilamino)-3-hidroksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[2-(2-Hloro-4-propoksi-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{3-Metoksi-2-[2-metil-6-(2-fosfonooksi-etil)- piridin-3-ilamino]-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Metansulfonil-etilamino)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-(2-{6-[(2-Metansulfonil-etil)-metil-amino]-2-metil-piridin-3-ilamino}-3-metoksi-piridin-4-iloksi)-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(3-Metansulfonil-pirolidin-1-il)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[2-(3-Metansulfonil-6,-metil-3,4,5l6-tetrahidro-2H-[1,2,]bipiridinil-5'-ilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(3-Metansulfonil-azetidin-1-il)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[3-Etiniiloksi-2-(2-fluoro-4-metansulfonil-fenilamino)- piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[2-Fluoro-4-(2-fosfonooksi-etansulfonil)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[2-(4-Etansulfonil-2-fluoro-fenilamino)-3-metoksi-piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina sek-butil estar; 4-{2-[6-(2,3-Dihidroksi-prop!lamino)-4-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Hidroksi-etilsulfanil)-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[2-Fluoro-4-(2-hidroksi-etansulfonil)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Hidroksi-etoksi)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{3-Metoksi-2-[2-metil-6-(2-fosfonooksi-etoksi)-piridin-3-ilamino]-piridin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(3-Hidroksi-propoksi)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{3-Metoksi-2-[2-metil-6-(3-fosfonooksi-propoksi)- piridin-3-ilamino]-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[3-Metoksi-2-(2-metoksi-4-sulfamoil-fenilamino)- piridin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[2-Fluoro-4-(fosfonooksi-propil)-fenilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Hidroksi-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{3-Metoksi-2-[2-metil-6-(2-fosfonooksi-etil)-piridin-3-ilamino]-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(3-Hidroksi-propil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; i 4-{3-Metoksi-2-[2-metil-6-(3-fosfonooksi-propil)-piridin-3-ilamino]-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar.

26. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što je jedinjenje odabrano od sledećih jedinjenja i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata:. ( S)- 4-{6-[6-(2-Metansulfonil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1 -karbonska kiselina 1 -ciklopropil-etil estar; (2-Fluoro-4-metansulfonil-fenil)-{4-[1-(5-izopropil-[1,2,4]oksadiazol-3-il)-piperidin-4-iloksi]-3-metoksi-piridin-2-il}-amin; 4-[6-(2-Fluoro-4-metansulfonil-fenilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[6-(4-Cijano-2-fluoro-fenilamino)-5-metoksi-piYimidin-4-iloksi]-piperidin-1 -karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Hidroksi-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Metansulfonil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{2-[6-(2-Metansulfonil-etil)-2-metil-piridin-3-ilamino]-3-metoksi-piridin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-[6-(6-Dimetilkarbamoilmetil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi3-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; 4-{6-[6-(2-Hidroksi-etoksi)-2-metil-piridin-3-ilamino]-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi}-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar.

27. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što je jedinjenje odabrano od sledećeg jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 4-[6-(6-Metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar.

28. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 27,naznačena time,što je navedeni inhibitor dipeptidil peptidaze IV odabran iz sledeće grupe: valin-pirolidid, 3-(L-izoleucil)tiazolidin, 1-[2-[5-cijanopiridin-2-il)amino]etilaminojacetil-2-cijano-(S)-pirolidin (NVP-DPP728), 3(R)-Amino-1-[3-(trifluorometil)-5,6l7,8-tetrahidro[1,2)4]triazolo[4,3-a]pirazin-7-il]-4-(2,4,5-trifluorofenil)butan-1 -on (MK-0431), (1-[[3-hidroksi-1-adamantil)amino]acetil]-2-cijano-(S)-pirolidin (LAF237), (1S,3S,5S)-2-[2(S)-Amino-2-(3-hidroksiadamantan-1il)acetil]-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karbonitril (BMS-477118), i [1 -[2-(2)-Amino-3-metilbutiril]pirolidin-2(R)-il]boronska kiselina (PT-100).

29. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 26,naznačena time,što navedeni inhibitor dipeptidil peptidaze IV predstavlja 3(R)-Amino-1-[3-(trifluorometiO-S.ej.S-tetrahidrotl^^jtriazolo^.S-ajpirazin^-il]^-(2,4,5-trifluorofenil)butan-1-on (MK-0431).

30. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 26,naznačena time,što navedeni inhibitor dipeptidil peptidaze IV predstavlja (1-[[3-hidroksi-1-adamantil)amino]acetil]-2-cijano-(S)-pirolidin (LAF237).

31. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 26,naznačena time,što navedeni inhibitor dipeptidil peptidaze IV predstavlja (1S,3S,5S)-2-[2(S)-Amino-2-(3-hidroksiadamantan-1il)acetil]-2-azabiciklo[3.1.0)heksan-3-karbonitril (BMS-477118).

32. Postupak pripremanja kompozicije prema bilo kom od zahteva 1 do 31,naznačen time,što se postupak sastoji od smešanja navedenog inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV) i navedenog jedinjenja.

33. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 31,naznačena time,što se dalje sastoji od farmaceutski prihvatljivog nosača.

34. Postupak pripremanja kompozicije prema zahtevu 33,naznačen time,što se postupak sastoji od smešanja navedenog inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV), navedenog jedinjenja, i navedenog farmaceutski prihvatljivog nosača.

35. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što: je jedinjenje odabrano od sledećeg jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 4-[6-(6-Metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; i navedeni inhibitori dipeptidil peptidaze IV predstavlja 3(R)-Amino-1-[3-(trifluorometiO-S.ej.S-tetrahidrofl.a^ltriazolo^.S-ajpirazin-T-ilH-(2,4,5-trifluorofenil)butan-1-on (MK-0431).

36. Postupak pripremanja kompozicije prema zahtevu 35,naznačen time,što se postupak sastoji od smešanja navedenog inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV) i navedenog jedinjenja.

37. Kompozicija prema zahtevu 35,naznačena time,što se dalje sastoji od farmaceutski prihvatljivog nosača.

38. Postupak pripremanja kompozicije prema zahtevu 37,naznačen time,što se postupak sastoji od smešanja navedenog inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV), navedenog jedinjenja, i navedenog farmaceutski prihvatljivog nosača.

39. Postupak prema zahtevu 38,naznačen time,što se dalje sastoji od koraka pripremanja oblika jedinične doze iz kompozicije.

40. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što: je jedinjenje odabrano od sledećeg jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 4-[6-(6-Metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; i navedeni inhibitori dipeptidil peptidaze IV predstavlja (1-[[3-hidroksi-1-adamantil)amino]acetil]-2-cijano-(S)-pirolidin (LAF237).

41. Postupak pripremanja kompozicije prema zahtevu 40,naznačen time,što se postupak sastoji od smešanja navedenog inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV) i navedenog jedinjenja.

42. Kompozicija prema zahtevu 40,naznačena time,što se dalje sastoji od farmaceutski prihvatljivog nosača.

43. Postupak pripremanja kompozicije prema zahtevu 42,naznačen time,što se postupak sastoji od smešanja navedenog inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV), navedenog jedinjenja, i navedenog farmaceutski prihvatljivog nosača.

44. Postupak prema zahtevu 43,naznačen time,što se dalje sastoji od koraka pripremanja oblika jedinične doze iz kompozicije.

45. Kompozicija prema zahtevu 1,naznačena time,što: je jedinjenje odabrano od sledećeg jedinjenja i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i hidrata: 4-[6-(6-Metansulfonil-2-metil-piridin-3-ilamino)-5-metoksi-pirimidin-4-iloksi]-piperidin-1-karbonska kiselina izopropil estar; i navedeni inhibitori dipeptidil peptidaze IV predstavlja (1S,3S,5S)-2-[2(S)-Amino-2-(3-hidroksiadamantan-1il)acetil]-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karbonitril (BMS-477118).

46. Postupak pripremanja kompozicije prema zahtevu 45,naznačen time,što se postupak sastoji od smešanja navedenog inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV) i navedenog jedinjenja.

47. Kompozicija prema zahtevu 45,naznačena time,što se dalje sastoji od farmaceutski prihvatljivog nosača.

48. Postupak pripremanja kompozicije prema zahtevu 47,naznačen time,što se postupak sastoji od smešanja navedenog inhibitora dipeptidil peptidaze IV (DPP-IV), navedenog jedinjenja, i navedenog farmaceutski prihvatljivog nosača.

49. Postupak prema zahtevu 48,naznačen time,što se dalje sastoji od koraka pripremanja oblika jedinične doze iz kompozicije.

50. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40, 42, 45 i 47,naznačena time,što služi za upotrebuUpostupku lečenja humanog ili životinskog tela terapijom.

51. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40, 42, 45 i 47,naznačena time,što služi za upotrebu u postupku lečenja sa metabolizmom povezanog poremećaja humanog ili životinjskog tela terapijom.

52. Upotreba kompozicije prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40, 42, 45 i 47 za proizvodnju medikamenta za lečenje sa metabolizmom povezanog poremećaja.

53. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40, 42, 45 i 47,naznačena time,što služi za upotrebu u postupku lečenja tip I dijabetisa, tip II dijabetisa, neadekvatne tolerancije glukoze, otpornosti na insulin, hiperglikemije, hiperlipidemije, hipertrigliceridemije, hiperholesterolemije, dislipidemije ili sindroma X.

54. Upotreba kompozicije prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40, 42, 45 i 47 za proizvodnju medikamenta za lečenje tip I dijabetisa, tip II dijabetisa, neadekvatne tolerancije glukoze, otpornosti na insulin, hiperglikemije, hiperlipidemije, hipertrigliceridemije, hiperholesterolemije, dislipidemije ili sindroma X.

55. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40, 42, 45 i 47,naznačena time,što služi za upotrebu u postupku lečenja tip II dijabetisa u humanom ili životinjskom telu.

56. Upotreba kompozicije prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40, 42, 45 i 47 za proizvodnju medikamenta za lečenje tip II dijabetisa.

57. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40, 42, 45 i 47,naznačena time,što služi za upotrebu u postupku tretmana da se smanji unos hrane kod pojedinca.

58. Upotreba kompozicije prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40, 42, 45 i 47 za proizvodnju medikamenta za upotrebu u tretmanu radi smanjenja unosa hrane kod pojedinca.

59. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37,40,42, 45 i 47,naznačena time,što služi za upotrebu u postupku tretmna radi izazivanja zasićenosti kod pojedinca.

60. Upotreba kompozicije prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35,37, 40,42,45 i 47 za proizvodnju medikamenta za upotrebu u tretmanu izazivanja zasićenosti kod pojedinca.

61. Kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35, 37, 40,42, 45 i 47,naznačena time,što služi za upotrebu u postupku tretmana za kontolu dobijanja težine kod pojedinca.

62. Upotreba kompozicije prema bilo kom od zahteva 1 do 31, 33, 35,37, 40,42,45 i 47 za proizvodnju medikamenta za upotrebu u tretmanu za kontrolu dobijanja težine kod pojedinca.