PT94788A

PT94788A - Processo para a preparacao de nucleosidos e necleotidos e de composicoes farma ceuticas que os contem

Info

Publication number: PT94788A
Application number: PT94788A
Authority: PT
Inventors: Frank Seela; Werner Bourgeois; Rainer Gumbiowski; Angelika Roeling; Helmut Rosemeyer; Alfred Mertens; Harald Zilch; Bernhard Koenig; Edith Koch
Original assignee: Boehringer Mannheim Gmbh
Priority date: 1989-07-24
Filing date: 1990-07-23
Publication date: 1991-03-20
Also published as: IL95128A0; US5446139A; AU5439990A; ATE130306T1; JPH04507086A; EP0484333A1; IE902665A1; EP0484333B1; WO1991001325A1; ZA905760B; EP0666269A2; DE59009888D1; DD296687A5; EP0666269A3; CA2064024A1; DE3924424A1

Description

Descrição referente à patente de invenção de BOEHRINGER MANNHEIM GMBH, alemã, industrial e comercial, com sede em 6800 Mannheim 31, República Federal Alemã, (inventores: Prof. Frank Seela, Werner Bourgeois, Rainer Gum-biowski, Angelika Róling, Dr. Helmut Rosemeyer, Dr. Alfred Mertens, Dr. Harald Zilch, Dr. Bernhard Konig e Dr. Edith Koch, residentes na Alemanha Ocidental para "PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE NUCLEÓSIDOS E NECLEÓTIDOS E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM».

Descrição A presente invenção refere-se a um processo para a preparação de novos derivados de nucleósidos e nucleótidos, à utilização destes derivados de nucleósidos e nucleótidos na preparação de composições farmacêuticas, e refere ainda a sua utilização na sequenciação de ácidos nucleicos.

Os novos derivados de nucleósidos e nucleótidos de a-cordo com a presente invenção são compostos com a fórmula geral- E.I.“

na qual Ba é um radical indolilo (A), benzimidazolilo (B), pir-rolopiridinilo (C), imidazopiridinilo (D), triazolopirimidinilo (E), imidazotriazinilo (F) ou imidazopirimidinilo (GO,

(E) (F)

2

A -y Λ 12 3 nas quais R } R e R que podem ser iguais ou diferentes, significam átomos de hidrogénio ou de halogéneo, radicais alquilo (1-7C), alcenilo(2-7C), hidroxilo, mercapto, alquil(l-7C)tio, alcoxi(1-7C), alceniloxi(2-7C), ar-alquilo( 1-50 , ar-alcenilo--(2-50, ar-alcoxi(1 — 5C), ar-alceniloxi(2-5C), ariloxi, nitro, aminoalquilo(1-70, alquil( 1-70aminoalquilo( 1-70 > di-alquil(J_ -7C)aminoalquilo(1-7C), amino, amino substituído -NHR1* ou 4 4 4 -N(R )2 ou grupos imino -N=CH-R , em que R e alquilo(1-70, alcenilo(2-7C), cicloalquilo(3-7C), cicloalquil(3-7C)alquilo(1- -7C), cicloalcenilo(3-70, alcoxi(1-7C)alquilo(1-7C), halogeno- alquilo(1-7C), hidroxialquilo(1-7C), ar-alquilo(1-5C), ar-alce- nilo(2-5C), heteroarilalquilo(1-50 ou heteroarilalcenilo(2-5C) em que os radicais arilo e heteroarilo podem ser substituídos uma, duas ou três vezes com alquilo(1-60, alcenilo(2-6C), al- 4 coxi(1-6C), halogéneo ou hidroxilo, ou R é um radical aminoal- quilo(1-7C), alquil(1-7C)aminoalquilo(1-7C) ou di-alquil(1-7C) 4 4 aminoalquilo(1-70 e, no caso de um radical -NHR e -N=CH-R , 4 R pode adicionalmente ser um radical amino, alquil(1-7C)amino, dialquil(1-7C)amino ou alcoxi(1-7C) ou, no caso de um radical 4 4 -N(R )2, os dois substitumtes no azoto R podem formar em conjunto um radical alquilideno(1-70 que, por sua vez, pode ser substituído com um radical alcoxi(1-70, alquil(1-70amino ou dialquil(1-7C)amino, R^, R^, R^ e R® representam cada um um á-tomo de hidrogénio ou um ou dois dos símbolos R , R , R e R° representam hidroxilo, halogéneo, ciano, azido ou um grupo ami-no substituído -NHR ou -N(R ou R e R podem representar em conjunto uma ligação adicional entre C-2* e C-3* e Y é um átomo de hidrogénio ou um radical alquil(1-4C)carbonilo, monofosfato, difosfato ou trifosfato, em que "arilo” pretende significar um radical fenilo ou naftilo e "heteroarilo" pretende significar um radical furanilo, tienilo ou piridilo, com a condição de 6 8 a) quando R for um grupo hidroxilo, R não poder ser um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxilo, b) quando Ba for o grupo (B), Ru não poder ser um átomo de halo géneo ou um grupo azido, 2 c) quando Ba for o grupo (D) e R for um átomo de hidrogénio, - 3 -

J 1 6 R não poder ser um átomo de cloro ou um grupo amino e R° não poder ser um átomo de hidrogénio ou um átomo de cloro, e d) quando Ba for o grupo (E) e R um grupo amino, R"e R não poderem representar em conjunto uma ligação, bem como os seus possíveis ®(- e p-anómeros, N -, N - e N - re- gioisómeros (nomenclatura da purina), os seus tautómeros e sais e também ácidos nucleicos que contêm compostos com a fórmula geral I como unidades de construção.

Os compostos semelhantes aos de fórmula geral I são conhecidos da Especificação da Patente Europeia No. 0 286 028. Os compostos de acordo com a presente invenção diferem estruturalmente dos compostos conhecidos pelas bases dadas na definição de Ba. Além disso, eles apresentam propriedades surpreendentemente superiores em relação à sua utilização como medicamentos .

Os compostos com a fórmula geral I são predominantemente compostos novos.

Da técnica anterior, já se conheciam os derivados de 6 8 ribofuranosilo (Ru = R = OH), bera como os derivados correspon- 6 8 dentes de 2*-desoxirribofuranolilo (R = OH; R = h) que, contudo são excluídos do âmbito da presente invenção retirando a parte a).

Além disso, da literatura (Bioorg. Khim. , 1_3, 1375/ 1987) conhecem-se benzimidazóis não substituídos no radical de base (base de tipo B) que contêm, na posição 3’ do radical de açúcar, os substituintes halogéneo, azido, ou amino e que, como trifosfatos, foram investigados in vitro em relação à sua especificidade como substrato para a biossíntese de ADN. A síntese dos nucleósidos correspondentes foi também publicada (Z. Chem., 25, 180/1985 e Synthesis, 410/1985). Estes compostos são excluídos do âmbito dos compostos da presente invenção retirando a parte b). A síntese dos 3-deazapurino-nucleósidos (nomenclatura da purina; base de tipo D), é conhecida para os derivados que contenham um átomo de cloro ou um grupo amino na posição 6 e na posição 3' da ribose contêm um átomo de hidrogénio ou de cloro (Nucleic Acids Res., 1_5, 1121/1987 e Nucleó- - 4 -

sides Nucleotides, 3., 413/1984). Estes compostos são excluídos do âmbito dos compostos da presente invenção retirando a parte c). Não foi descrita uma acção farmacológica destes compostos. Na Especificação da Patente U.S. No. 3 817 982 é descrito um derivado de 8-aza-6-aminopurina (base de tipo E) com um radical 2’ ,3'-didesidro-2f,3'-didesoxirribose que pode ser utilizado como antibiótico ou viroestático ou que pode ser utilizado num estudo de replicação de ADN. Estes compostos são excluídos do âmbito dos compostos e composições farmacêuticas da presente invenção retirando a parte d).

Além disso, são também conhecidos da literatura os compostos com a fórmula geral I em que Y é um átomo de hidrogé- 6 8 nio (nucleósidos) ou um radical alquilcarbonilo e R e R re- g presentam simultaneamente hidroxilo (derivados da ribose) ou R é hidroxilo e R um átomo de hidrogénio (derivados da 2'-deso-xirribose). Estes compostos são excluidos dos compostos de a-cordo com a presente invenção retirando a parte a). 0 mesmo se aplica aos 2’-desoxirribofuranosilnucleósidos com a base de tipo (D) conhecidos da Especificação da Patente Europeia publicada com o No. 0 038 569 que possuem uma acção inibidora da inflamação .

Além disso, da Especificação de Patente Europeia publicada com 0 No. 0 043 722, conhecem-se os jp-D-arabinofurano- silnucleósidos com a base de tipo (D) como agentes antivirais. 5 6

Estes compostos são derivados de furanosilo em que R e R re- 8 , „ presentam cada um um grupo hidroxilo e R e um atomo de hidrogénio. Estes derivados são excluídos da presente invenção retirando a parte a).

Quando Ba representa a base de tipo (B) ou (D), então - 7 9 a presente invenção também inclui os N - e N - regioisomeros e quando Ba representa um radical de triazolopirimidina (base de tipo (E), também os correspondentes N -, N - e N - regioisóme-ros. A separação dos vários regioisomeros tem lugar por processos conhecidos, por exemplo por cromatografia de coluna.

Os radicais "alquilo" e "alcenilo" nas definições dos 12 3 4 substituintes R , R , RJ e R podem ser de cadeia linear ou ra- 5 mificada e contem até 7 e preferivelmente até 4 átomos de carbono < Os radicais metilo e etilo são os especialmente preferidos e para também os radicais propilo e isobutilo.

Por halogéneo nas definições dos substituintes R , 2 3 5 6 7 8 R , R , R , R , R e R deve entender-se flúor, cloro, bromo e iodo e especialmente flúor e cloro.

Os radicais aralquilo, heteroaralquilo e aralcoxi que 12 3 4 aparecem nas definições dos substituintes R , R , R , e R contêm preferivelmente uma cadeia de alcileno com até 5 ou até 3 átomos de carbono, respectivamente, que é substituída uma vez ou duas vezes com um radical aromático, como por exemplo um radical fenilo ou naftilo. Os radicais arilo dos radicais aralquilo, aralcoxi e heteroalquilo acima mencionados podem, por sua vez, ser substituídos uma, duas ou três vezes com hidroxilo halogéneo, alquilo ou alcoxi contendo até 6 e preferivelmente até 3 átomos de carbono. Os radicais benzilo e heteroarilmetilo são os especialmente preferidos como radicais aralquilo.

Como radicais ariloxi nas definições dos substituin-1 2 3 tes R , R e R , os radicais feniloxi são os especialmente preferidos e podem ser opcionalmente ser substituídos uma, duas ou três vezes com outros substituintes, como por exemplo nitro, alquilo e alcoxi, e nesse caso os radicais alquilo e alcoxi podem conter até 6 átomos de carbono.

Por "arilo" devem entender-se os radicais fenilo e na ftilo e os radicais "heteroarilo" são preferivelmente os radicais furanilo, tienilo e piridilo.

Os grupos amino que ocorrem nas definições dos subs- Ί 2 O C ^ 7 0 tituintes R , R , R , R , R , R , e R , que podem ser opcio- 4 nalmente substituídos uma ou duas vezes com R , contem, como substituintes possíveis, preferivelmente alquilo, alcenilo, ci-cloalquilo, alcoxialquilo, haloalquilo, aralquilo e dialquila-minoalquilo, e nesse caso os radicais alquilo e alcenilo dos referidos grupos contêm preferivelmente até 5 ou até 3 átomos de carbono, respectivamente. 4

Os dois substituintes de azoto em R podem também re- 6 presentar em conjunto um radical alquilideno e preferivelmente um radical metilideno que, por sua vez, pode ser substituído com radicais alcoxi ou substituído com grupos amino. Um substi-tuinte muito especialmente preferido deste tipo é o radical di-metilaminometilideno. 0 grupo monofosfato é o grupo -PCKOH^, o grupo di-fosfato é o grupo -Ρ203(0Η)3 e o grupo trifosfato é 0 grupo -p3o5(oh)1|.

Como sais possíveis, são especialmente preferidos os sais de metais alcalinos, metais alcalino-terrosos e de amónio dos grupos fosfato. Como sais de metais alcalinos, são preferidos os sais de lítio, sódio e de potássio. Como sais de metais alcalino-terrosos, são preferidos os sais de magnésio e de cálcio. Como sais de amónio, de acordo com a presente invenção, devem entender-se sais que podem ser substituídos com até quatro vezes com radicais alquilo contendo até 4 átomos de carbono e/ou radicais aralquilo, preferivelmente radicais benzilo. Os substituintes podem assim ser iguais ou diferentes. Os sais dos fosfatos podem ser convertidos de forma conhecida nos ácidos livres.

Os compostos com a fórmula geral I podem conter grupos básicos e especialmente grupos amino que podem ser convertidos com ácidos adequados em sais de adição de ácido. Como á-cidos que podem servir para este objectivo, podem utilizar-se, por exemplo, o ácido clorídrico, ácido bromidrico, ácido sulflírico, ácido fosfórico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido maleico ou ácido metano-sulfónico. São especialmente preferidos os compostos com a fórmula geral I que são referidos como gliceropentofuranósidos, especialmente os derivados de didesoxi, didesoxi-didesidro e didesoxi-3’-flúor. Neste sentido, devem ter-se em consideração r Q c as seguintes significações de R3 - R : R·3 é preferivelmente um átomo de hidrogénio ou de flúor, R^ é um átomo de hidrogénio ou 5 7 um grupo hidroxilo ou R e R' formam em conjunto uma ligação. 6 8 R e R significam especialmente um átomo de hidrogénio ou de - 7 -

flúor ou um grupo azido. Ί o 5 s

Para R - r e R - B , devem ter-se em consideração 1 especial os seguintes grupos : para R hidrogénio, amino, clo- 2 ro, alcoxi(1-6C), especialmente metoxi ou nitro; para R hidro- 3 58 génio ou amino; para R"5 hidrogénio; para R** - R hidrogénio ou 5 7 R e R formam em conjunto uma ligação (derivados 2', 3'-dide-soxi-2',3’-didesidroribofuranosilo).

Dependendo do tipo de base (A) - (G), para os radi-1 8 oais R - R , são especialmente preferidos os seguintes grupos: 1

Quando Ba é o grupo (A), R representa então preferi- 2 3 5 8 velmente um grupo amino ou nitro e R , r e R - R° são em cada * - 5 7 um dos casos um atomo de hidrogénio ou R e R representam em conjunto uma ligação.

t 1 o c Q

Quando Ba é o grupo (B), R - R*5 e R2 - R° representam então preferivelmente um átomo de hidrogénio.

Quando Ba é o grupo (C), R representa então preferivelmente um átomo de hidrogénio ou um grupo amino ou nitro e 2 3 5 8 R , e R - R° representam cada um um átomo de hidrogénio ou 5 7 R e R representam em conjunto uma ligação.

Quando Ba é o grupo (D), R representa então preferi- " 2 3 5 8

velmente um grupo amino ou um átomo de cloro e R , R*3 e R3 - R representam cada um um átomo de hidrogénio.

Quando Ba é o grupo (E), R representa então preferi- 2 5 8 velmente um grupo amino ou um radical alcoxi(1-6C) e R e R -R representam cada um um átomo de hidrogénio. 2

Quando Ba é o grupo (F), R representa então preferi-velmente um átomo de hidrogénio ou um grupo amino e e R -R° representam preferivelmente um átomo de hidrogénio.

Quando Ba é o grupo (G), R representa então preferivelmente um átomo de hidrogénio ou um átomo de cloro ou um gru- 3 5 8 po amino e R·5 e R3 - R representam um átomo de hidrogénio.

Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser preparados de forma análoga aos conhecidos e semelhantes. Para a preparação de compostos com a fórmula geral (I), reve- - 8 -

lou-se especialmente preferido um processo em que se faz reagir um composto com a fórmula II

Ba - X (II)

na qual Ba tem a significação anterior e X é um átomo de hidrogénio ou um metal alcalino, por exemplo lítio ou sódio, com um composto com a fórmula geral III

(III) 5 6 T 8

na qual R , R , R e R têm as mesmas significações anteriores, R' é um grupo protector de oxigénio e Z é um grupo reactivo, para se obter um composto com a fórmula geral IV

(IV)

1 o q cr CL π O na qual Ba, R , R , R , R , R , R , R e R' têm as mesmas significações anteriores, e em seguida se removem os grupos pro-tectores de oxigénio possivelmente presentes e em seguida, se desejado, se converte de modo conhecido, um composto assim ob-tido, em que R , R , R e R é um grupo hidroxilo, após prévia protecção selectiva do grupo 5’-hidroxilo, com um halogeneto, cianeto ou azida num composto com a fórmula geral I, em que R^ R , R ou R° é um átomo de halogéneo ou um grupo ciano ou azi-do, ou é desoxigenado de modo conhecido para se obter um com-posto com a fórmula geral I, em que R , R , R ou R é um átomo de hidrogénio, ou se reduz de modo conhecido um composto assim obtido com a fórmula geral I, em que R , R , R ou R° é um gru- - 9 -

* c ç. fj po azido, num composto com a fórmula geral I, em que R , R , R _8 , ou R e um grupo amino, e, se desejado, se converter posterior-mente de modo conhecido, um composto com a fórmula geral I, em que I é um átomo de hidrogénio, num mono-, di- ou trifosfato e, desejado, se converte uma base ou ácido livre num sal adequado ou se converte um sal obtido na base ou ácido livre correspondente .

Os compostos com a fórmula geral II são feitos reagir com os compostos com a fórmula geral III especialmente e com vantagem em condições de transferência de fase. Nas condições de catálise de transferência de fase, as bases com a fórmula II são convertidas num anião correspondente, por exemplo, por meio de uma solução aquosa a 50 Me hidróxido de sódio. 0 anião assim produzido é tornado hidrófobo por um: meio de um catalisador de transferência de fase, por exemplo tris-[2-(2-metoxietoxi)--etil]-amina, e transportado para uma fase orgânica em que ele é feito reagir com o composto reactivo com a fórmula geral III. 0 grupo reactivo Z nos compostos com a fórmula geral III é preferivelmente um átomo de halogéneo ou um radical ace-toxi ou alcoxi. No caso desta reacção, os grupos hidroxilo são protegidos de modo habitual com grupos protectores de oxigénio que são conhecidos dos especialistas, por exemplo radicais to-luilo, benzoilo, tetrahidropiranilo ou acetilo. Após se completar a reacção, os grupos protectores de oxigénio podem ser nova mente decompostos por meio de um processo conhecido em condições alcalinas, utilizando-se preferivelmente uma solução meta-nólica 1M de metanolato. " 12

Pode também ser adequado manter os radicais R , R e g R protegidos durante a reacção por meio de grupos protectores adequados. Um processo vantajoso adicional para a preparação dos compostos com a fórmula geral IV é um processo de transferência de fase sólido-liquido com a utilização de hidróxido de potássio sólido em pó e os "kryptands" acima mencionados, bem como os compostos com a fórmula geral II e III num solvente a-prótico.

Os compostos com a fórmula geral I, em que R^, R^, R^ 10

Κΐ

N e R são um átomo de halogéneo ou um grupo azido, são preferivelmente preparados partindo de um composto com a fórmula geral 56T 8 I, em que R , R , R' e R são um grupo hidroxilo. 0 grupo hi-droxilo na posição 5' é primeiramente protegido selectivamente. Para este objectivo, existem também processos conhecidos. Por exemplo, na química dos nucleótidos, o radical 4,4'-dimetoxi-trifenilmetilo provou ser útil. Após a reacção estar completa, este composto pode novamente ser facilmente decomposto por meio de hidrólise ácida moderada, em que também a ligação glicosídi-ca de ácido lábil não é hidrolisada nestas condições. A reacção do nucleósido a ser protegido com o reagente do grupo protector de oxigénio para o grupo 5’-hidroxilo é efectuado num solvente orgânico adequado, preferivelmente em piridina seca, com um pequeno excesso de reagente do grupo protector de oxigénio, bem como também possivelmente uma base adjuvante adequada, por exemplo N-etil-diisopropilamina, 0 composto assim protegido com a fórmula geral I é feito reagir com um halogeneto ou com uma azida, preferivelmente com uma azida de metal alcalino, por exemplo azida de lítio, por processos geralmente conhecidos. 0 grupo hidroxilo no átomo C-2* ou C-3* é assim substituído nucleofilicamente pelo halogeneto ou azida.

Os compostos com a fórmula geral I, em que R^, R^, R^ e R é um grupo hidroxilo, podem também, após protecção prévia do grupo 5’-hidroxilo no processo acima referido, ser desoxige-nados de acordo com processos conhecidos, sendo assim obtidos os compostos com a fórmula geral I, em que R , R , R e R° é um átomo de hidrogénio. Para este fim, o composto com a fórmula 567 8 geral I em que R , R , R e R e um grupo hidroxilo, em que o grupo 5*-hidroxilo foi protegido no processo acima referido e em que outros grupos funcionais também presentes contêm grupos protectores, é em primeiro lugar convertido num derivado de 2’-ou 3’-O-tiocarbonilo que é subsequentemente reduzido no radical com hidreto de tributil estanho. Estes processos para a desoxi-genação de 2’-desoxinucleósidos para 2’- e 3’-didesoxinucleósi-dos são bem conhecidos. 0 processo de desoxigenação de Barton 11 provou ser especialmente adequado (J. Chem. Soo., Perkin Trans. I. , 1574/1975). , 5 7

Os compostos com a formula geral I, em que R e R representam uma ligação adicional entre C-2’ e C-3', podem ser preparados analogamente aos compostos conhecidos (Robins e Hansske, Tetrahedron Letters, 25, 367/1984, e a literatura nela citada). Para a preparação destes compostos, provou ser especialmente adequado um processo em que as riboses adequadas são feitas reagir com o brometo de acetoxiisobutirilo e os isómeros resultantes são posteriormente reduzidos com um agente redutor, por exemplo um par zinco/cobre ou um agente redutor semelhante, e, após decomposição do grupo protector em condições alcalinas, o derivado 2’, 3’-didesoxi-2',3'-didesidro é obtido a partir do produto bruto.

Além deste processo, outros processos são descritos na liyeratura para a didesoxigenação e introdução simultânea da dupla ligação (conforme Jain e col., J. Org. Chem., 39., 30/1974 Robins e col. , J.A.C.S., 9j3, 8204 e 8213/1976; Adachi e col. , J. Org. Chem., 44, 1404/1979; mengel e col., Tetrah. Lett., 4203/1977; Classon e col., Acta Chem. Scand., B 36, 251/1982; Chu e col. , J. Org. Chem., 54., 2217/1989). Além disso, estes compostos podem ser preparados a partir das 2’-desoxirriboses correspondentes de acordo com processos conhecidos (conforme Horwitz e col., J.A.C.S., 86_, 1896/1964; McCarthy e col., J.A.C.S., 88_, 1549/1966; Samukov e col., Biorg. Khim., £, 52/ 1982) de mono-desoxigenação com a introdução simultânea da dupla ligação. Uma via adicional para a preparação destes compostos é a reacção de uma 2',3'-didesoxi-2’,3'-didesidrorribose com um derivado Ba de base adequadamente substituído, tal como é conhecido da literatura (cf. por exemplo Especificação da Patente Europeia publicada No. 0 286 028).

^ 5 6 T

Os compostos com a fórmula geral I, em que R , R , R 8 ou R é um grupo amino, são preferivelmente preparados reduzindo um composto com a fórmula geral I, em que este substitu-inte R , R , R ou R é um grupo azido. Esta redução do grupo azido para um grupo amino pode ser efectuada de acordo com vários processos geralmente conhecidos, e a redução com hidrogé- 12 ι '· -¾.. nio na presença de um catalisador de paládio-carbono provou ser especialmente vantajosa.

Os grupos fosfato são introduzidos por processos conhecidos em compostos com a fórmula geral I, em que Y é um átomo de hidrogénio. Os monofosfatos são obtidos, por exemplo, fosforilando um composto com a fórmula geral I, em que Y é um átomo de hidrogénio., com oxicloreto de fósforo em fosfato de trimetilo. Os sais de trietilamónio obtidos por este processo podem ser convertidos por processos conhecidos em outros sais por trans-salificação. Os di- e trifosfatos são obtidos de a-cordo com processos conhecidos, preferivelmente a partir de monofosfatos, por reacção com ortofosfatos ou pirofosfatos. Os seus vários sais podem também ser preparados de acordo com processos conhecidos.

Os compostos com a fórmula geral II são compostos conhecidos ou podem ser preparados analogamente a compostos conhecidos. Estes processos de preparação são descritos, por exemplo, em Chem. Ber., 110, 1462/1977; J. Chem. Soc., 1960, 131 e Tetrahedron Lett., 21_, 3135/1980.

Alguns dos compostos com a fórmula geral III são também compostos conhecidos. Os compostos que não foram até agora descritos podem ser preparados analogamente aos compostos conhecidos. A preparação desses compostos é descrita, por exemplo em Chem. Ber., 93., 2777/1960 e Synthesis, 1984, 961 .

Os compostos de acordo com a presente invenção possuem propriedades farmacológicas valiosas. Em particular, eles podem ser utilizados para o tratamento e profilaxia de infec-ções que são causadas pelos vírus de ADN, por exemplo vírus herpes simplex, citomegalovírus, Papovavírus, vírus da varicela zóster ou vírus de Epstein-Barr, ou vírus de ARN, por exemplo vírus Toga, ou especialmente retrovírus, como por exemplo os oncovírus HTLV-I e II, bem como os lentivírus visna e vírus da imuno deficiência humana HIV-1 ou -2.

Os compostos com a fórmula geral I parecem ser espe-• cialmente adequados para o tratamento de manifestações clinicas . da infecção retroviral HIV em seres humanos, como por a linfa- 13 -

IS denopatia persistente generalizada (PGL), os estados avançados do complexo relacionado com a SIDA (ARC) e o quadro clínico completo da SIDA.

Verificou-se com surpresa que os compostos com a fórmula geral I inibem a multiplicação dos vírus de ADN e ARN na fase de transcrição específica dos vírus de ADN e ARN. Os compostos podem especialmente influenciar a multiplicação de re-trovírus através da inibição da enzima transcriptase inversa ou através de uma rotura da cadeia da cadeia crescente de ADN (cf. proc. Natl. Acad. Sei., USA, 83., 1911/1986 e Nature, 325, 773/ 1987). Tem um interesse terapêutico especial a acção inibidora do vírus HIV, que é a causa da doença da imuno deficiência designada por SIDA. Para o tratamento da SIDA, apenas é permitida actualmente a 3’-azido-3',desoxitimidina (ver a Especificação da Patente da República Federal da Alemanha publicada com o No. 36 08 606) nos casos de pacientes com SIDA. Contudo, os efeitos tóxicos laterais da 3'-azido-3’-desoxitimidina na medula óssea de cerca de 50 % dos pacientes tratados tornam necessária a transfusão de sangue. Os compostos com a fórmula geral I não possuem esta desvantagem. Eles actuam antiviralmente sem serem citotóxicos nas doses farmacologicamente relevantes.

Os compostos com a fórmula geral I de acordo com a presente invenção podem também ser utilizados com vantagem na sequenciação de ADN de acordo com Sanger. Especialmente a sequ-enciação dos fragmentos de ADN ricos em d(G-C) é tornada difícil pela formação de estruturas secundárias que levam a uma compressão de bandas na região de agregados de d(G-C). Por meio da substituição de trifosfato de 2'-desoxiguanosina ou trifos-fato de 2*-desoxiadenosina pelos compostos de acordo com a pre-sente invenção, em que R é um grupo hidroxilo, a compressão de bandas é largamente ultrapassada.

Os compostos com a fórmula geral I de acordo com a 6 7 presente invenção, em que R e R são átomos de hidrogénio, são utilizados na sequenciação de ADN de acordo com Sanger como terminadores de cadeia em vez dos compostos conhecidos de 2',3.Í • -didesoxi. 14 -

I

Os ácidos nucleicos que, como unidades de construção, contêm um ou mais compostos com a fórmula geral I podem ser preparados de acordo com processos conhecidos (ver, por exemplo Nucleic Acids Research, 21 (5), 2319 et seq./1986). Contudo, eles também são obtidos, por exemplo, no caso da sequenciação de ADN. Se os compostos com a fórmula geral I forem utilizados como unidades de construção, em que R^ é um grupo hidroxilo, então um ácido nucleico pode ter várias unidades de construção; se, como unidade de construção, se utilizar um composto com a fórmula geral I, em que R é um átomo de hidrogénio, então essa unidade de construção pode apenas ser incorporada uma vez, nomeadamente no fim da cadeia. Os ácidos nucleicos de acordo com a presente invenção são constituídos a partir de 2 a 1000 e preferivelmente de 8 a 50 unidades de construção de nucleótidos sendo especialmente preferidos ácidos nucleicos com 15 a 30 unidades de construção de nucleótidos.

Esses ácidos nucleicos podem ser também utilizados como agentes antivirais. Os designados ácidos nucleicos anti--sentido, em que estes ácidos nucleicos se hibridisam com o ssADN/ANN dos vírus e tornam difícil a transcrição para o vírus de ADN. Esses ácidos nucleicos podem ser utilizados especialmente como agentes contra a SIDA dado que eles não se rompem mas são apenas rompidos com dificuldade pela enzimas de restrição das próprias células.

Para a composição de composições farmacêuticas, os compostos com a fórmula geral I, os seus sais farmacologica-mente aceitáveis ou os ácidos nucleicos que os contêm são misturados de forma conhecida com substâncias que actuam como veículos farmaceuticamente adequados, aromas, e corantes e são conformados, por exemplo, para comprimidos ou drageias ou, com a adição de adjuvantes apropriados, são suspensos ou dissolvidos em água, ou num óleo, por exemplo azeite.

Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser administrados entericamente ou parentericamente sob a forma líquida ou sólida. Como meio de injecção, prefere-se a água contendo os aditivos habituais no caso de soluções para injec- 15 -

ção, por exemplo agentes estabilisantes, agentes solubilisantes e/ou tampões.

Os aditivos deste tipo incluem, por exemplo, tampões de tartarato e de citrato, etanol, formadores de complexos (como por exemplo ácido etilenodiaminotetraacético e os seus sais não tóxicos) e polímeros de elevado peso molecular (como por exemplo polióxido de etileno líquido) para a regulação da viscosidade. As substâncias que actuam como veículos sólidos incluem, por exemplo, amido, lactose, manitol, metil celulose, talco, ácidos silícicos altamente dispersos, ácidos gordos de elevado peso molecular (como por exemplo o ácido esteárico), gelatina, ágar-ágar, fosfato de cálcio, estearato de magnésio, gorduras animais e vegetais e.polímeros sólidos de alto peso molecular (como por exemplo polietileno glicóis). As composições adequadas para administração oral podem, se desejado, conter agentes aromatisantes e/ou edulcorantes.

Os compostos de acordo com a presente invenção são habitualmente administrados em quantidades de cerca de 0,1 a cerca de 100 mg e preferivelmente de cerca de 0,2 a cerca de 80 mg por dia e por kg de peso corpóreo. Prefere-se dividir a dose diária em 2 a 5 administrações e nesse caso, para cada administração, são dados 1 a 2 comprimidos com um teor de material ac-tivo de 0,5 a 1000 mg. Os comprimidos podem também ser retardados , e nesse caso o número de administrações por dia é reduzido de 1 para 3. 0 teor de substância activa dos comprimidos retardados deve ser de 2 a 2000 mg. A substância activa pode também ser dada por injecção uma a oito vezes por dia ou por infusão contínua, e nesse caso são normalmente suficientes quantidades de 5 a 4000 mg/dia.

Para além dos compostos descritos nos Exemplos seguintes, os seguintes compostos são, por exemplo, também os preferidos da presente invenção. 1-(2,3-didesoxi-3-fluoro-j3-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-1H--indole 1-(2,3-didesoxi-3-azido-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-1H-indole

1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4,6-diamino-1H-indo-le 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-6-hidroxi-1H-indole 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-6-hidroxi--1H-indole 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-metilamino-1H-indole 1-(2, 3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4,6-dihidroxi-1H-in-dole 1 — (2, 3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-hidroxi-6-amino--1H-indole 1—(2, 3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-metil-1H-indole 1 - (2,3-didesoxi-2,3-didesidro-]3-D-gliceropentofuranosil )-4-ami-no-6-cloro-1H-indole 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-J3-D-gliceropentofuranosil)-4-mer-capto-1H-indole 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-me-tilmercapto-1H-indole 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-J3-D-gliceropentofuranosil)-4-me-toxi-1H-indole 1 -(2,3-didesoxi-2, 3-didesidro-]3-D-gliceropentofuranosil)-4-di-metilamino-1H-indole 1-(2,3-didesoxi-2,2-diflúor-J3-D-gliceropentofuranosil)-4-amino--1H-indole 1 — (2,3-didesoxi-2-flúor-p-D-arabinofuranosil)-4-amino-1H-indole 1-(2, 3-didesoxi-2-azido-j3-D-arabinofuranosil)-4-amino-1H-indole 1-(2,3-didesoxi-3-flúor-p-D-glioeropentofuranosil)-4-aminoben-zimidazol 1 — (2,3-didesoxi-3-flúor-p-D-gliceropentofuranosil)-4-aminoben-zimidazol 1-(2,3-didesoxi-3-azido-p-D-gliceropentofuranosil)-4-aminoben-zimidazol 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4,6-diamino-benzimi-dazol 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-6-hidroxibenzimida-zol 1 — (2,3-didesoxi-J3-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-6-hidroxi- 17 - benzimidazol 1-(2,3-didesoxi-]3-D-gliceropentofuranosil)-4-metilaminobenzimi-dazol 1-(2, 3-didesoxi-]3-D-gliceropentofuranosil)-4,6-disidroxibenzi-midazol 1-(2,3-didesoxi~p-D-gliceropenfcofuranosil)-4-hidrosi-6-amino-benzimidazol 1 -(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-metilbenzimidazol 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-ami-no-6-clorobenzimidazol 1 — (2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4--mercaptobenzimidazol 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-J3-D-gliceropentofuranosil)-4--me-tilmercaptobenzimidazol 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-me-toxibenzimidazol 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliGerOpentofuranosil)-4-di-metilarainobenzimidazol 1-(2,3-didesoxi-2,2-diflúor-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-benzimidazol 1-(2,3-didesoxi-2-flúor-^-D-arabinofuranosil)-4-aminobenzimida-zol 1 — (2, 3-didesoxi-2-azido-j3-D-arabinofuranosil)-4-aminobenzimida-zol 1-(2,3-didesoxi-3-flúor-]3-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-1H--pirrolo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-3-azido-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-1H--pirrolo[2,3-b]piridina 1 - (2 ,3-didesoxi-Ç-D-gliceropentofuranosil)-4,6-diamino-1H-pir-rolo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-6-hidroxi-1H-pirro-lo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-6-hidroxi--1H-pirrolo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-metilamino-1H--pirrolo[2,3-b]piridina 1 — (2,3-didesoxi-j3-D-gliceropentofuranosil)-4,6-disidroxi-1H- 18 -

-pirrolo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-fS-D-glioeropentof uranosil )-4-hidroxi-6-amino--1H-pirrolo[2, 3-b ]piridina 1-(2,3-didesoxi-j3-D-gliceropentof uranosil )-4-metil-1 H-pirrolo [2,3-b]piridina 1 - (2 ,3-didesoxi-2,3-didesidro-J3-D-gliceropentofuranosil)-4-ami-no-6-cloro-1H-pirrolo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-2, 3-didesidro-j3-D-gliceropentofuranosil)-4-mer-capto-1H-pirrolo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-2, 3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-me-tilmercapto-1H-pirrolo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-me-toxi-1H-pirrolo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-di-metilaraino-1H-pirrolo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-2,2-diflúor-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino--1H-pirrolo[2,3-b]piridina 1 -(2,3-didesoxi-2-flúor-J3-D-arabinofuranosil)-4-amino-1 H-pirro-lo[2,3-b]piridina 1-(2,3-didesoxi-2-azido-J3-D-arabinofuranosil)-4-amino-1H-pirro-lo[2,3-b]piridina 1 — (2,3-didesoxi-J3-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-1 H-imidazo-[4,5-c]piridina 1 - (2 ,3-didesoxi-3-flúor-^-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-1H--imidazo[4,5-c]piridina 1 — (2,3-didesoxi-3-azido-J3-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-1H--imidazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4,6-diamino-1H-imi-dazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-jB-D-gliceropentofuranosil)-6-hidroxi-1H-imidazo [4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-6-hidroxi--1H-imidazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-metilamino-1H-imi-dazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-p-D-glioeropentofuranosil)-4,6-disidroxi-1H-i-midazo[4,6-c]piridina 19 - h 1-(2,3-didesoxi-j3-D-gliceropentof uranosil)-4-hidroxi-6-amino--1H-imidazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-metil-1H-imidazo-[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-ami-no-6-cloro-1H-imidazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-|3-D-gliceropentofuranosil)-4-mer-capto-1H-imidazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-me-tilmercapto-1H-imidazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-me-toxi-1H-imidazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-di-metilamino-1H-imidazo[4,5-c]piridina 1 — (2,3-didesoxi-2,2-diflúor-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino--1H-imidazo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-2-flúor-p-D-arabinofuranosil)-4-amino-1H-imida-zo[4,5-c]piridina 1-(2,3-didesoxi-2-azido-f-D-arabinofuranosil)-4-amino-1H-imidazo [4 ,5-c] piridina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-1H-triazo-lo[4,5-d]pirimidina 1 — (2,3-didesoxi-3-flúor-J3-D-gliceropentofuranosil)-4-amino- 1H--triazolo[4,5-d]pirimidina 1-(2,3-didesoxi-3-azido-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-1H--triazolo[4,5-d]pirimidina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4,6-diamino-1H--triazolo[4,5-d]pirimidina 1-(2, 3-didesoxi-j3-D-gliceropentof uranosil )-6-hidroxi-1H-tria-zolo[4,5-d]pirimidina 1 — (2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino-6-hidroxi--1H-triazolo[4,5-d]pirimidina 1-(2,3-didesoxi-jB-D-gliceropentofuranosil)-4-metilamino-1 H--triazolo[4,5-d]pirimidina 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4,6-disidroxi-1H--triazolo[4,5-d]pirimidina ] 1-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-hidroxi-6-amino- l -1H-triazolo[4,5-d]pirimidina 20

1-(2, 3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-metil-1H-triazolo-[4,5-d]pirimidina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-j3-D-gliceropentof uranosil )-4-ami-no-6-cloro-1H-triazolo[4,5-d]pirimidina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-mer-capto-1H-triazolo[4,5-d]pirimidina 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-me-tilmercapto-1H-triazol[4,5-d]pirimidina 1 — (2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-4-me-toxi-1H-triazolo[4,5-d]pirimidina 1 — (2, 3-didesoxi-2,3-didesidr o-|3-D-glioeropentof uranosil)-4--dimetilamino-1H-triazolo.[4,5-d ]pir imidina 1-(2,3-didesoxi-2,2-diflúor-p-D-gliceropentofuranosil)-4-amino--1H-triazolo[4,5-d]pirimidina 1—(2, 3-didesoxi-2-flúor-p-D-arabinofuranosil)-4-amino-1H--triazolo[4,5-dJpirimidina 1-(2,3-didesoxi-2-azido-p-D-arabinofuranosil)-4-amino-1H--triazolo[4,5-d]pirimidina 8-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-ÔH-imidazo[1,2-a]--£-triazin-4-one 8-(2,3-didesoxi-3-flúor-p-D-gliceropentofuranosil)-8H-imidazo-[1 ,2-a]~s-triazin-4-one 8-(2,3-didesoxi-3-azido-p-D-gliceropentofuranosil)-8H-imidazo-[1 ,2-a]-s_-triazin-4-one 8-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-2-amino-imidazo-[1 ,2-a]-£-triazin-4-one 8-(2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-2-hidroxiimidazo-[1 ,2-a]-s-triazin-4-one 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-8H--imidazo[1,2-a]-s-triazin-4-one 1-(2,3-didesoxi-2,3-didesidro-p-D-gliceropentofuranosil)-2--cloro-8H-imidazo[1,2-a]-s_-triazin-4-one 1 — (2,3-didesoxi-2,2-fiflúor-p-D-gliceropentofuranosil)-8H--imidazo[1,2-a]-s-triazin-4-one 1-(2,3-didesoxi-2-flúor-p-D-arabinofuranosil)-8H-imidazo-[1 ,2-a]-;s-triazin-4-one 1-(2,3-didesoxi-2-azido-p-D-arabinofuranosil)-8H-imidazo-[1,2-a]-s-triazin-4-one. 21

yy

Os Exemplos seguintes ilustram os objectivos da presente invenção:

Exemplo 1. 1-(2,3-Didesidro-2,3-didesoxy-P-D-gliceropentofuranosil)-4-ami-no-1H-indole. a) 1-[2-Desoxi-3 , 5-di-0-(p-toluoil)-g-D-eritropentofuranosil]--4-nitro-1H-indole. São adicionados 838 mg (1,5,0 mmol) de hidróxido de potássio e 100 mg (0,31 mmol) de TDA-1 a uma solução de 972 mg (6,0 mmol) de 4-nitroindole em 50 ml de acetonitrilo seguido de agitação durante 15 minutos à temperatura ambiente numa atmosfera de azoto. Após a adição de 2,45 g (6,3 mmol) da halogeno-se, continua-se a agitação durante mais 15 minutos à temperatura ambiente. Filtra-se a mistura reaccional, evapora-se o filtrado à secura e cromatografa-se o resíduo numa pequena coluna 60H de gel de sílica. A evaporação da zona principal e a cristalização de benzeno/ciclohexano (1:2 v/v) produziu 2,70 g (85% do teórico) de agulhas amarelas (82$; N.D. Girgis, H.B. Cottam e R.K. Robins, J. Heterocycl. Chem., 25, 361/1988; RF (dicloro-metano/acetato de etilo, 99:1 v/v = 0,6; Rf (diclorometano) = 0,4. RMN ([Dg3 DMSO) sulfóxido de dimetilo): S = 2.37, 2.41 (2s, 6H, 2 CH3), 2.78 (m, 1H, Η-2'b), 3.03 (m, 1H, Η-2'a), 4.56 (m, 3H, H-4» e H-51), 5.74 (m; 1H, H-3‘), 6.75 (dd, J = 5.9 Hz e 7.8 Hz, 1H, Η—1 *), 7.13 (d, J = 3.1 Hz, H-3), 7.29 - 7.40 (m, 5H, aromat. H), 7.83 - 8.02 (m, 5H, aromat.H e H-6), 8.11 (d, J = 7.9 Hz, 1H, H-5), 8.25 (d, J = 8.2 Hz, 1H, H-7). b) 1-(2-Desoxi-P-D-eritro-pentofuranosil)-4-nitro-1H-indole.

Mistura-se o composto obtido em a) (3,86 g, 7,5 mmol) com 200 ml de metanol e, em seguida com 15,5 ml de uma solução de metilato de sódio/metanol 1M, e agita-se durante 48 horas à . temperatura ambiente. Após a adição de 5 g de gel de sílica 60, * evapora-se à secura a mistura reaccional e cromatografa-se o - 22 -

,3Í* ,/ resíduo em gel de sílica 60H (coluna 3 x 30 cm, agente de elui- ção clorofórmio/metanol, 8:1 v/v, Rf = 0,3). A eluição da zona principal produziu, após evaporação do solvente, Um sólido amarelo com 80$ de rendimento. (96$; N.S. Girgis, h.B. Cottam e R.K. Robins, J. Heterocycl. Chem., 25, 361/1988). 1H RMN ([Dg] DMSO): £ = 2.31 (m, 1H, Η-2'b), 2.51 (m, 1H, Η-2'a 3.55 (m, 2H, H-5'), 3.87 (m,1H, H-4'), 4.40 (m, m, H-3f), 4.97 (m, 1H, 5'-0H), 5.36 (m, 1H, 3’-0H), 6.51 (pt, j = 6.5 Hz, 1H, H-1»), 7.11 (d, J = 3.2 Hz, 1Η, H-3), 7.36 (t, j = 8.1 Hz, 1H, H-6), 8.03 (d, J = 3.2 Hz, 1H, H-2), 8.10 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H-5), 8.17 (d, J = 8.2 Hz, 1H, H-7). c) 4-Amino-1-(2-desoxy-B-D-eritro-pentofuranosii')-iH-indole (1 ,3>7-tridesaza-2t-desoxiadenosina)

Dissolvem-se 1,0 g do composto obtido em b) em 50 ml de etanol e hidrogena-se na presença de 100 mg de paládio/car-bono (10$ Pd) durante 6 horas à temperatura ambiente e pressão normal. Filtra-se a mistura reaccional, adsorve-se o filtrado em gel de sílica e cromatografa-se em gel de sílica 60 (coluna 15 x 3,5 cm), obtendo-se uma espuma incolor (rendimento 70$ do teórico); (74$, N.S. Girgis, H.B. Cottam e R.K. Robins, J. Heterocycl. Chem., 25, 361/1988). 1H RMN ([Dg] DMSO): £ = 2.17 (m, 1H, Η-2'b), 2.42 (m, 1H, H-2’a), 3.51 (m, 2H, H-5»), 3-79 (m, 1H, H-4’), 4.32 (m, 1H, H-3’), 4.89 (m, 1H, 5'-OH), 5.26 (m, NH2 e 3'-0H), 6.23 (m, 2H, H-5 e H-1'), 6.59 (d, J = 3.3 Hz, 1H, H-3), 6.71 (d, J = 8.2 Hz, 1H, H-7), 6.84 (pt, J = 8.2 Hz, 1H, H-6), 7.31 (d, J = 3-3 Hz, 1H, H-2). d) 4-([ (Dimetilamino)-metileno]-amino‘í'-1-(2-desoxi-p-D-eritro- pentofuranosil)-1H-indole♦

Dissolvem-se 1,54 g (6,21 mmol) do composto obtido em c) em 30 ml de dimetilformamida seca sem aminas e mistura-se com 12 ml (68,3 mmol) de Ν,Ν-dimetilformamida dietilacetal. A-gita-se a mistura reaccional durante 8 horas a 50°C numa atmos-• fera de árgon. Separa-se o solvente por evaporação numa câmara - 23 -

SiLíL de vazio e evapora-se o resíduo posteriormente várias vezes com tolueno. A cromatografia em gel de sílica 60H (coluna 13 x 5 cm agente de eluição diclorometano/metanol 5:1 v/v produziu 1,28 g (68$ do teórico) de um produto espumoso incolor; TLC (cromatografia de camada fina) em diclorometano/metanol, 5:1 v/v Rf = 0,4. 1H RMN ([Dg] DMSO): £ = 2.19 (m, 1H, Η-2'b), 2.46 (m, 1H, Η-2'a), 3.01 (s, 6H, 2 CHg), 3.51 (m, 2H, H-5’2), 3.81 (m, 1H, H-4»), 4.34 (m, 1H, H-3'), 4.89 (m, 1H, 5'-0H), 5.29 (d, J = 4.2 Hz, 1H, 3’-OH), 6.31 (dd, J = 6.2 e 7.6 Hz, 1H, H-1'), 7.00 (t, J = 7.8 Hz, 1H, H-6), 7.13 (d, J = 7.8 Hz, 1H, H- ), 7.43 (d, J = 3.4 Hz, 1H, H-2), 7.80 (s, 1H, CH). e) 4-^[(Dimetilamino)-metileno]-amino-1-[2-desoxi-5-0-(t-butil-dif enilsilil) -j3-D-eritro-pentof uranosil) -1 H-indole.

Evaporam-se 1,6 g (5,27 mmol) do composto obtido em d) duas vezes com piridina e em seguida dissolvem-se em 26 ml de piridina. São adicionados gota a gota a frio 1,63 ml (6,36 mmol) de TBDPSSiCl e agita-se a solução durante 30 minutos a 0°C. Deixa-se a mistura reaccional aquecer para a temperatura ambiente e agita-se durante mais 24 horas. Separa-se o solvente por evaporação e em seguida evapora-se o resíduo com tolueno. UV (Me0H):V (O = 220 (44200), 298 nm (13200). a ΓΠο,Χ H RMN ([Dg] DMSO): b = 0.87 (s, 9H, tBu), 2.12 (m, 1H, Η-2'b), 2.41 (m, 1H, H-2 ra), 2.86 (s, 6H, N(CH3)2), 3.64 (m, 2H, Η-5'a, b), 3.78 (m, 1H, H-4»), 4.33 (m, 1H, H-3'), 5.22 (d, J = 4.5 Hz, 1H, 3 f-0H), 6.20 (pt, J = 6.6 Hz, 1H, H-1»), 6.30 (d, J = 3.3 Hz, 1H, H-3), 6.36 (d, J = 7.4 Hz, 1H, H- ), 6.82 (t, J = 7.4 Hz, 1H, H-6), 7.01,(d, J = 7.4 Hz, 1H, H- ), 7.18 (d, J = 3.3 Hz, 1H, H-2), 7.20 - 7.50 (m, 10 fenil-H), 7-64 (s, 1H, N=CH).

Análise: C33H39N3°3SÍ calc. (P.M. C 71.57$; 553.78) H 7.10%; determ. 71.45$; 7.21$; N 7.59$ 7.72$ - 24 - Λ.

-·*ϋ—-J*

f) 4-& (DImetilamino)-metileno]-amino]-1-[2-desoxi-5-0-t-butil-difenilsilil)-3-0-metilsulfonil-g-D-eritro-pentofuranosil)--1H-indole.

Dissolvem-se 800 mg (1,44 mmol) do composto obtido em e) em 24 ml de diclorometano e mistura-se a solução com 5,5 ml de piridina. São adicionados gota a gota com arrefecimento com gelo 2,17 ml (28,5 mmol) de cloreto de metanossulfonilo e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 4 horas. Após a adição de 6,5 ml de metanol, dilui-se a mistura reaccional com 100 ml de clorofórmio e extrai-se com ácido clorídrico 0,1N e água (em cada caso 100 ml). Seca-se a fase orgânica em sulfato de sódio anidro, filtra-se e evapora-se o solvente numa câmara de vazio. Após processamento cromatográfico (gel de sílica 60H) obtêm-se 310 mg (34$ do teórico) de uma espuma incolor. 1H-RMN ([Dg] DMS0): £ = 1.02 (s, 9H, t-Bu), 2.62 (m, 1H, H-2*b) 2.87 (m, 1H, Η-2'a), 3.00 (s, 2 CH^, 3.32 (s, 3H, SCH^, 3.82 (m, 2H, H-5'), 4.26 (m, 1H, H-4»), 5.47 (m, 1H, H-3'), 6.40 (dd, J = 6.1 e 8.1 Hz, 1H, H-1»), 6.47 (d, J = 3-3 Hz, 1H, H-3) 6.51 (d, J = 7.5 Hz, 1H, ), 6.95 (pt, J = 7.5 Hz, 1H, H-6), 7.20 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H- ), 7.40 (m, aromat. H e H-2), 7.64 (m, aromat. H), 7.78 (s, N=CH). g) 4-[(Dimetilamino)-metileno]-amino]-1-(2,3-didesoxi-2,3-dide-sidro-g-D-gliceropentofuranosil)-1H-indole.

Dissolvem-se 420 g (0,84 mmol) do composto obtido em f) em 50 ml de tetrahidrofurano e mistura-se a solução com 10 ml de fluoreto de tetrabutilamónio (solução 1M em tetrahidrofurano). Agita-se a solução durante 4 horas a 50°C, evapora-se o solvente em vazio e adsorve-se o resíduo em gel de sílica 60. Após cromatografia de coluna (30 x 3 cm, clorofórmio/metanol, 8:2 v/v, Rf = 0,5), obtem-se um óleo incolor. 1H RMN ([Dg] DMS0): £ = 3.01 (s, 6H, 2 CH ), 3.46 (m, 2H, H2-51), 4.77 (m, 1H, H-4»), 4.91 (t, J = 5.5 Hz, 1H, 5»-0H), 6.12 (m, 1H, H-2»), 6.49 (m, 3H, H-3' e H-7/H-5 e H-3), 7.00 (m, 2H, H-6 e H-1»), 7.19 (d, J = 3.3 Hz, 1H, H-2), 7-23 (d, ! J = 8.4 Hz, 1Η, H-5/H-7), 7.81 (s, 1H, N=CH). 25 h) 4-Amino-(2,3-didesidro-2,3-didesoxi-p-D-gliceropentofurano-sil)-1H-indole.

Dissolvem-se 200 mg do composto obtido em g) em 5 ml de metanol. Após a adição de 20 ml de solução de amoníaco concentrada (2556), a solução é elevada a ebulição sob refluxo. Evapora-se o solvente em vazio e cromatografa-se o resíduo em gel de sílica (clorofórmio/metanol, 8:2 v/v, Rf = 0,84; diclo-rometano/metanol, 95:5 v/v, Rf = 0,40). 1 H-RMN ([Dg] DMSO): S = 5.21 (s, NH ), 6.91 (m, H-1»), 7.08 (d, J = 3.4 Hz, H-2 *).

Exemplo 2. 1 — (2,3-Didesidro-2, 3-didesoxy-g-D-gliceropentofuranosil)-4-ni-tro-IH-indole. a) 1-[2-Desoxi-5-0-(t-butildifenilsilil)-P-D-eritro-pentofura-nosil]-4-nitro-1H-indole.

Evaporam-se duas vezes com piridina 1,43 g (5,14 mmol) do composto obtido no Exemplo 1b, dissolve-se em 30 ml de piridina, mistura-se com 1,57 ml (6,11 mmol) de TBDPSiCl a frio, agita-se durante 30 minutos a 0°C, agita-se durante 24 horas à temperatura ambiente, separa-se a piridina por evaporação, em seguida evapora-se duas vezes o resíduo com tolueno e absorve--se o resíduo em 15 g de gel de sílica 60. A cromatografia (coluna 20 x 5 cm), Rf (diclorometano) = 0,2, produziu uma espuma amarela, rendimento: 1,73 g (teórico : 6556)· UV (Me0H):\ v (6) = 241 (sh. 11900), 338 (4600), 372 (6100).

mclX 1H-RMN ([Dg]DMS0): % = 0.96 (s, 9H, tBu), 2.30 - 264 (m, H-2'a,b), 3-79 (m, 2H, H-5’2), 3-97 (m, 1H, H-4»), 4.53 (m, 1H, H-3'), 5.45 (d, J = 4.5 Hz, 1H, .3'-0H), 6.55 (pt, J = 6.4 Hz, 1H, H-1’), 7.03 (d, J = 3.1 Hz, 1H, H-3), 7.28 - 7.59 (m, 11 aromat. H), 7.90 (d, J = 3.1 Hz, 1H, H-2), 8.10 (d, J = 8.0 Hz, 1H, H-5), 8.15 (d, J = 8.2 Hz, 1H, H-7). - 26 -

Análise: C29H32N2°3Si (Ρ,Μ· 516167^ calo. C 67.42?; determ. 67.56%; H 6.24%;6.23%; N 5.425¾5.39% b) 1-[2-Desoxi-5-0-(t-butildifenilsilil)-3-0-metilsulfonil-P“D--eritro-pentofuranosil]-4-nitro-1H-indole.

Dissolvem-se 800 mg (1,55 mmol) do composto obtido em a) em 26 ml de diclorometano/6 ml de piridina. Mistura-se a solução, com arrefecimento, com 2,36 ml (31 mmol) de cloreto de metanossulfonilo, deixa-se a mistura aquecer lentamente para a temperatura ambiente e agita-se durante um período de 4 horas. Mistura-se em seguida com 1,7 ml de metanol, agita-se durante um período de 15 minutos, dilui-se com 10 ml de clorofórmio e extrai-se com ácido clorídrico 0,1N e água (em cada caso 100 ml). Seca-se a fase orgânica em sulfato de sódio anidro e evapora-se o solvente em vazio. Após cromatografia (diclorometano, coluna 30 x 4 cm, Rf 0,5), obteve-se uma espuma amarela (840 mg teórico : 91$). UV (metanol):k (O = 235 (sh., 13300), 270 (sh., 1800), 338 (5300), 365 (6300), 388 (sh., 5100). 1H RMN ([DglDMSO): 9 = 1.01 (s, 9H, t-Bu), 2.83 (m, 1H, Η-2'b), 2.98 (m, 1H, H-2’a), 3136 (s, 3H, S-CH^, 3.86 (m, 2H, H-5’), 4.34 (m, 1H, H-4’), 5.53 (m, 1H, H-3’), 6.66 (pt, J = 6.2 Hz, 1H, H-1’), 7.08 (d, J = 3.3 Hz, 1H, H-3), 7-30 - 7.62 (aromat. H, bem como H-6), 7-94 (d, J = 3-3 Hz, 1H, H-2), 8.14 (d, J = 8 Hz, 1H, H-5), 8.23 (d, J = 8 Hz, 1H, H-7).

Análise: C3QH34N207SiS (P.M. 594.76) calc. C 60.58%5 H 5.76%; N 4.71%; S 5.395¾ determ. 60.45%; 5.76%; 4.74%; 5.54? c) 1-(2,3-Didesidro-2,3-didesoxi-j3-D-gliceropentofuranosil)-4--nitro-1H-indole. - 27 - 1

Dissolvem-se 800 mg (1,35 mmol) do composto obtido em • b) em 25 ml de tetrahidrofurano, mistura-se com 5 ml de fluore-

to de tetrabutilamónio (solução 1M em tetrahidrofurano) e agita-se a solução durante 2 horas a 50°C em atmosfera de azoto. Separa-se o solvente por evaporação em vazio e cromatografa-se o resíduo em gel de sílica (coluna 30 x 3,5 cm, agente de elui-ção diclorometano/metanol, 99:1 v/v, Rf 0,3). Após evaporação do solvente da zona principal, obtem-se um óleo amarelo que, após repouso, cristaliza totalmente. UV (MeOH):^max (£) = 237 (11700), 339 (sh., 4700), 370 (6100). 1H RMN ([Dg]DMS0): Ç = 3.51 (m, 2H, H-5*), 4.86 (m, 2H, H-4» e 5»-0H), 6.20 (pq, J = 6.0 Hz, e 1.7 Hz, 1H, H-2'), 6.54 (pq, J = 6.0 Hz e J = 1.6 Hz, 1H, H-3»), 7.11 (d, J = 3.3 Hz, 1H, H-3), 7.21 (m, 1H, H-1f), 7.40 (t, J = 8.1 Hz, 1H, H-6), 7.81 (d, J = 3.3 Hz, 1H, H-2), 8.12 (d, J = 8.1 Hz, 1H, H-5), 8.27 (d, J = 8.1 Hz, 1H, H-7).

Análise: C13H12N204 (P.M. 260.25) calc. C 60.00%; H 4.6555; N 10.7655 determ. 6 0.18 %; 4.7655 ; 10.69%

Exemplo 3. 4-Amino-1-(2,3-didesidro-P-D-gliceropentofuranosil)-1H-indole (1,3,7-tridesaza-2,3-didesoxiadenosina)

Dissolvem-se 150 mg (0,58 mmol) do composto obtido no Exemplo 2o) em 15 ml de etanol e hidrogenam-se na presença de 15 mg de paládio/carbono ( 1 055 de Pd) durante 12 horas à temperatura ambiente à pressão atmosférica. Filtra-se a mistura re-accional e evapora-se o filtrado à secura. Cromatografa-se o resíduo em gel de sílica (diclorometano/metanol, 97:3 v/v, Rf = 0,3). 1H RMN ([DglDMSO): S = 1.91 - 2.40 (m, 4H, H-2» e H-3»), 3.49 (m, 2H, H-5»), 4.04 (m, 1H, H-4»), 4.81 (t, J = 5.5 Hz, 1H, 5»-0H), 5.20 (s, 2H, NHg), 6.15 (dd, J = 4.8 Hz e J = 6.6 Hz, 1H, H-1'), 6.20 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H-5), 6.58 (d, J = 3-3 Hz, 1H, H-3), 6.71 (d, J = 7.5 Hz, 1H, H-7), 6.83 (t, 7-5 Hz, 1H, H-6), 7.32 (d, J = 3.3 Hz, 1H, H-2). - 28 -

Exemplo 4. 1-(2,3-Didesoxi-P-D-gliceropentofuranosil)-4-nitro-1H-indole. a) Cloreto de 5-0-[(1,1-dimetiletil)-dimetilsilil]-(2,3-dideso-xi- ç>(,p-D-glioeropentofuranosilo).

Dissolvem-se 1,51 g (6,5 mmol) de 5—0—[1,1-dimetile-til)-dimetilsilil]-2,3-didesoxi- 0( ,B-D-gliceropentofuranose (M. Okabe, R.-C. Sun, S.Y.-K. Tam, L.T. Todaro e D.L. Coffen, J. Org. Chem., 53., 4780/1988) em 26 ml de tetrahidrofurano e mistura-se com 1 ml de clorofórmio em atmosfera de azoto. Arrefe-ce-se para -80°C e mistura-se gota a gota, durante 15 minutos, com 1,56 ml de tris-(dimetilamino)-fosfina. Após cerca de duas horas, adiciona-se a outra quantidade igual de clorofórmio e de fosfina. Após 6 horas, a TLC (gel de sílica, acetato de etilo/ éter de petróleo, 2:8 V/V) revela cerca de 50% de reacção do lactol. Introduz-se directamente a solução reaccional fria de halogenose na reacção de glicosilação previamente preparada. b) 1-(2,3-Didesoxi-5-0-(t-butildimetilsilil)-D-gliceropentofu-ranosil)-4-nitro-1H-indole♦

Dissolvem-se 1,0 g (6,16 mmol) de 4-nitroindole em 200 mlde acetonitrilo e agita-se durante 20 minutos à temperatura ambiente, novamente com 690 mg (12,32 mmol) de hidróxido de potássio e TDA-1. Injecta-se em porções a solução arrefecida preparada localmente de halogenose obtida em a) (de 12,32 mmol de lactol) a uma suspensão da mistura reaccional seguida de a-gitação vigorosa durante mais 45 minutos. Separam-se os componentes insolúveis por filtração e evapora-se o filtrado à secura. Adsorve-se o resíduo em 10 g de gel de sílica 60 e croma-tografa-se em gel de sílica 60H (éter de petróleo/acetato de etilo, 8:2 v/v). A evaporação da zona principal fornece uma mistura anomérica com 60% de rendimento que consta de 30% de J3-anómeros e 30% de o(-anómeros. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = p-anómero: 4.16 (m, 1H, H-4'), 6.42 (dd, • J = 3.5 Hz, e J = 6.4 Hz, 1H, Η—1T); o(-anómero: 4.32 (m, 1H, ! H-4'), 6.47 (dd, H-1'). - 29 -

analise: C19H28N20i|Si (P.M. 376.53) calc. C 60.61%; H 7.50%; N 7.4455 determ. 60.7755 7.425¾} 7.3255 c) 1-(2,3-Didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-4-nitro-1H-indole

Dissolve-se o J3-anómero obtido em b) em tetrahidrofu-rano. Após a adição de uma solução 1M de fluoreto de tetrabu-tilamónio em tetrahidrofurano, agita-se a mistura reaccional durante 30 minutos à temperatura ambiente. Evapora-se o solvente em vazio e adsorve-se o resíduo em gel de sílica 60. após cromatografia de coluna (diclorometano/metanol, 97:3 v/v), ob-tem-se o composto do título sob a forma de um óleo amarelo. Rf (diclorometano/metanol, 97:3 v/v) = 0,4. 1H-RMN ([DglDMSO): S = 4.11 (m, 1H, H-4»), 4.89 (t, J = 5.4 Hz, 1H, 5 »-0H), 6.41 (dd, J = 4.0 e 6.7 Hz, 1H, H-1»), 7.09 (d, J = 3.2 Hz, 1Η, H-3), 7.37 (pt, J = 8.1 Hz, 1H, H-6), 8.04 (d, J = 3.2 Hz, 1Η, H-2).

Exemplo 4.1. 1 -(2,3-Didesoxi-of-D-gliceropentofuranosil)-4-nitro-1H-indole. É dessililado o ô(-anómero obtido no Exemplo 4b) da mesma maneira que no Exemplo^c). Após cromatografia de coluna (diclorometano/metanol, 97:3 v/v), obtem-se o composto do título sob a forma de um óleo amarelo, Rf = 0,4. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 4.27 (m, 1H, H-4»), 4.80 (t, J = 5.7 Hz, 1H, 5*-OH), 6.49 (dd, J = 4.2 Hz e 6.3 Hz, 1H, H-1'), 7.09 (d, J = 3.2 Hz, 1H, H-3), 7.38 (pt, J = 8.1 Hz, 1H, H-6), 7.93 (d, J = 3.2 Hz, 1H, H-2).

Exemplo 5. 1 -(2,3-Didesoxi-jB-D-gliceropentof uranosil )-benzimidazole, a) 1-[2-Desoxi-3,5-di-0-(4-metilbenzoil)-g-D-eritrofuranosil]--benzimidazole. - 30 -

C£;

J A glicolisação de benzimidazole com cloreto de 2-de-soxi-3,5-di-0-(p-toloil)-ç(-D-eritro-pentofuranosilo tem lugar nas mesmas condições descritas no Exemplo 4b). (ver dados de Z. Zazimierczuk, R. Stolarski e D. Shugar, Z. Naturforsch., 40c 715/1985). b) 1-(2-Desoxi-H-D-eritro-pentofuranosil)-benzimidazole. A preparação deste composto tem lugar a partir do composto obtido em a) por destoluoilação (literatura como em a)). c) 1-[2-Desoxi-5-0-(t-butildimetilsilil)-]3-D-eritro-pentofura-nosil]-benzimidazole.

Evaporam-se duas vezes com piridina 1,0 g (4,26 mmol) do composto obtido em b) e em seguida dissolvem-se em 20 ml de piridina. São adicionados a frio (0°C), 1,3 ml (1,391 g, 5,06 mmol) de TBDPSiCl e agita-se a solução durante 30 minutos a 0°C. Deixa-se aquecer suavemente para a temperatura ambiente e agita-se durante mais 24 horas. A cromatografia (coluna 25 x 4 xm/gel de sílica 60) produz um óleo incolor e o tratamento com éter dietílico produz cristais incolores; p.f. 144-145°C. Rf (clorofórmio/metanol, 9:1 v/v) = 0,45. Rendimento: 1,24 g (teórico : 61%). UV (MeOH):Smax <€> = 246 (7500), 252 (sh. 7200), 265 (4800), 273 (4900), 281 (4200). 1H RMN ([D61DMS0): £ = 0.94 (s, 9H, 3 CH3), 2.35 (m, 1H, Η-2'b) 2.65 (m, 1H, H-2‘a), 3-77 (m, 2H, H-5'), 3.94 (m, 1H, H-4»), 4.49 (m, 1H, H-3'), 5.44 (d, J = 4.1 Hz, 1H, 3f-0H), 6.37 (pt, J= 6.5 Hz, 1H, H-1’), 7.10 - 7.66 (m, 14 aromat. H), 8.36 (s, 1H, H-2).

Análise: C28H32N2°3SÍ (P,M* 472*66) cale. C 71.15*5 H 6.82*; N 5.93* determ. 71.23*} 6.85*; 5.94* - 31 d) 1-[2-Desoxi-5-0-(t-butildimetilsilil)-3-0-fenoxitiocarbonil-p-D-eritro-pentofuranosil]-benzimidazole.

Agitam-se durante 16 horas à temperatura ambiente 500 mg (1,06 mmol) do composto obtido em c) em 20 ml de aoetonitri-lo anidro com 768 mg (6,36 mmol) de 4-(dimetilamino-piridina (DMAP) e 320 γΐ (2,34 mmol) de cloreto de fenoxitiocarbonilo (PTC—Cl). Após separação do solvente por evaporação, cromato-grafa-se o resíduo em gel de sílica 60H e obtem-se da zona principal uma espuma incolor (480 mg, teórico : 74$). Rf (di-clorometano/acetona, 95:5 v/v) = 0,5. UV (Me0H):k Y (E) = 243 (12000), 264 (sh., 5100), 273 (4800), 280 (4100). 1H RMN ([Dg]DMS0): Ç = 1.03 (s, 9Hm 3 Ct^), 2.88 (m, 1H, Η-2'b), 3.06 (m, 1H, Η-2'a), 3.99 (m, 2H, H-5’), 4.48 (m, 1H, H-3’), 6.55 (dd, J = 5.4 e 9.0 Hz, 1H, H-1'), 7.09 - 7.84 (m, 19 aromat. H), 8.46 (s, 1H, H-2).

Análise: C35H36N2O4SS1 (P.M. 608.84) calc. 69.05$; H 5.96$; H 4.60$; S 5.27$ determ. 69.26$; 5.99$; 4.74$; 5.12$ e) 1-[2,3-Didesoxi-5-0-(t-butildimetilsilil)-g-D-gliceropento-furanosil)-benzimidazole.

Agita-se na presença de 35 mg de AIBN e 200 pl hidre-to de tributil estanho durante 3 horas a 80°c em atmosfera de árgon, uma solução de 350 mg (0,57 mmol) do composto obtido em d) em 20 ml de tolueno anidro. 0 processamento de cromatografia conduz a um rendimento teórico de 83$. Rf (diclorometano/aceto-na) = 0,4. UV (Me0H):^max (£) = 247 (7300), 251 (sh., 7100), 265 (4600), 273 (4700), 281 (4100). 1H RMN (CDglDMSO): S = 0.96 (s, 9H, 3 CH ), 2.13 (m, 2H, H-3’), 2.47 (m, 2H, H-2’), 3.74 (m, 2H, H-5’), 4.26 (m, 1H, H-4’), 6.32 (pt, J = 4.8 Hz, 1Hm H-1’), 7.22 - 7.71 (m> 14 aromat. H), 8.42 (s, 1H, H-2). - 32 - η

Análise: C28H32N2°2Si (P,M# 456·66) calc. C 73.655¾} Η 7.06/; N 6.13/ determ. 73.64/; 7.02/; 6.10/ f) 1-(2 , 3-Didesoxi-]3-D-gliceropentofuranosil)-benzimidazole.

Dissolve-se em tetrahidrofurano 0 composto (200 mg) obtido em a), mistura-se com uma solução 1M de fluoreto de te-trabutilamónio em tetrahidrofurano e agita-se durante 30 minutos à temperatura ambiente. A evaporação do solvente e processamento por cromatografia dá um óleo incolor (rendimento teórico de 69/)· 1H RMN ([Dg]DMS0): S = 2.06 (m, 2H, H-3'), 2.36 (m, 2H, H-2'), 3.55 (m, 2H, H-5’), 4.14 (m, 1H, H-4’), 4.93 (m, 1H, 5'-0H), 6.28 (dd, J = 4.1 e 6.5 Hz, 1H, H-1'), 7.27 (m, 2H, H-5 e H-6), 7.68 (m, 2H, H-4 e H-7), 8.51 (s, 1H, H-2).

Exemplo 6. 1-(2,3-Didesoxi-^-D-gliceropentofuranosil)-benzimidazole. a) Otem-se também o composto do título descrito no Exem plo 5 da mesma maneira como no Exemplo 2b pela dissolução de 1,0 g (8,48 mmol) de benzimidazole em 200 ml de acetonitrilo e agita-se com 1,9 g de hidróxido de potássio e 0,8 mmol de TDA-1 durante 15 minutos à temperatura ambiente. Injecta-se em por-çSes na mistura a solução arrefecida preparada localmente de halogenose (preparada a partir de 17 mmol de lactol). Agita-se a mistura reaccional durante mais 30 minutos à temperatura ambiente, filtra-se e evapora-se o solvente em vazio. Cromatogra-fa-se o resíduo em gel de sílica 60 para se obter o ©(-anómero com rendimento de 30/ e o p-anómero com rendimento de 30/. 1H RMN ([DglDMSO): p-anómero: S = 4.17 (m, 1H, H-4'), 6.26 (dd, 1H, H-1’), 8.42 (s, 1H, H-2); o(-anómero: 8 = 4.34 (m, 1H, H-4’) 6.33 (pt, 1H, H-1»), 8.38 (s, 1H, H-2). - 33 - 'η b) Após separação do grupo protector de sililo de forma idêntica à referida no Exemplo 2c), obtem-se o composto do título .

Exemplo 7. 1-(2,3-Didesoxi-P-D-gliceropentofuranosil)-1H-pirrQlo[2,3-b]pi-ridina. a) 1-[2,-Didesoxi-5-0-(trifenilmetil)-g-D-eritro-pentofurano-sil]-1H-pirrolo[2,3-bl-piridina.

Evaporam-se por duas vezes 1,48 g (6,3 mmol) de 1-(2--desoxi-J3-D-eritro-pentofuranosil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (F. Seela e R. Gumbiowski, Heterocycles, 29., 795/1989) em cada caso com 30 ml de piridina anidra e dissolve-se em 40 ml de pi-ridina. São adicionados em seguida, em atmosfera de árgon, 3.55 g (12,6 mmol) de cloreto de trifenilmetilo, bem como 3,3 ml (19 mmol) de base de Hunig e agita-se durante 4 horas à temperatura ambiente.

Introduz-se a mistura reaccional em 200 ml de uma solução aquosa a 5% de hidrogenocarbonato de sódio e extrai-se três vezes em cada caso com 150 ml de diclorometano. Seca-se a fase orgânica combinada em sulfato de sódio anidro, filtra-se e cromatografa-se em gel de sílica 60H (coluna 7 x 4,5 cm, diclo-rometano/acetona, 8:2 v/v). Após a evaporação da zona principal obtêm-se 1,75 g de uma espuma incolor (teórico : 5855), TLC (gel de sílica, diclorometano/acetona, 8:2 v/v) Rf. 0,8. UV (MeOH): = 288 nm (i = 7600).

lildA 1H RMN ([Dg]DMS0): S = 2.28 (m, 2*-Ha); 2.61 (m, 2»-Hb); 3.17 (d, J = 4.8 Hz, 5’-H2); 3.97 (m, 4’-H), 4.39 (m, 4»-H), 5.38 (d, J = 4.7 Hz, 3'-0H), 6.53 (d, J = 3.6 Hz, 3’-H), 6.76 (pt, J = 4.0 Hz, 1’-H), 7.13 (dd, J = 7.8 Hz, 5-H), 7.59 (d, J = 3.7

Hz, 2-H), 7.97 (dd, J = 7.8 Hz, 4-H), 8.24 (dd, J = 1.5 Hz, J = 4.7 Hz, 6-H).

Análise: C31H28N2°3 (P*M* 476·58) - 34 - ο*** calo. C 78.13565 H 5.92/o; N 5.88/ determ. 78.06/; 6.04/; 5.79/ b) 1-[2-Desoxi-5-0-trifenilmetil)-3-0-fenoxitiocarbonil-P-D--eritro-pentofuranosil]-1H-pirrolo[2,3-b]-piridina.

Mistura-se em atmosfera de árgon uma solução de 1,75 g (3,7 mmol) do composto obtido em a) em 5 ml de acetonitrilo anidro com 1,12 g (9,2 mmol) de 4-dimetilamino)-piridina e 1,0 ml (7,4 mmol) de cloreto de fenoxitiocarbonilo e agita-se durante 48 horas à temperatura ambiente. Após evaporação da mistura reaccional, cromatografa-se o resíduo em gel de sílica 60H (coluna 10 x 4 cm, diclorometano). Obtêm-se da zona principal 1,2 g (51/ do teórico) de uma espuma incolor. UV (MeOH): k „ =285 (£ = 8600).

IUclX 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 2.77 (m, 2’-Ha), 3.18 (m, 2*-Hb), 3.38 (m, 5'-H2), 4.42 (m, 4»-H), 5.93 (m, 3'-H), 6.62 (d, J = 3.7 Hz, 3-H), 6.81 (dd, J = 5.5 Hz, J = 9.1 Hz, 1'-H), 7.18 (dd, J = 4.7 Hz, J = 7.8 Hz, 5-H), 7.67 (d, J = 3.7 Hz, 2-H), 8.03 (dd, J = 1.4 Hz, J = 7.8 Hz, 4-H), 8.24 (dd, J = 1.4 Hz, J = 4.7 Hz, 6-H) e outros protões aromáticos.

Análise: C38H32N204S (P.M. 612.74) calc. C 74.49/; H 5.26/; N 4.57/ determ. 74.65/; 5.41/; 4.35/ c) 1-(2,3-Didesoxi-5-0-trifenilmetil)-p-D-gliceropentofurano-sil)-1H-pirrolo[2,3-b]-piridina.

Mistura-se em atmosfera de árgon uma solução de 1,2 g (1,86 mmol) do composto obtido em b) em 60 ml de tolueno anidro com 90 mg (0,6 mmol) de AIBN e 1,1 ml (4 mmol) de hidreto de tributil estanho e agita-se durante 5 horas a 80°C. Após evaporação da mistura reaccional cromatografa-se o resíduo em gel de sílica 60H (coluna 8x3 cm, diclorometano). Obtêm-se da zona principal 0,8 g (93/ do teórico) de produto amorfo. A recrista-lização de isopropanol produz cristais incolores; p.f. 115°C - 35 - TLC (gel de sílica, diclorometanc/acetona, 95:5 v/v), Rf: 0,83. UV (MeOH):k = 289 nm (£ = 8100).

' DlaX 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 2.08 (m, 3'-H2), 2.37 (m, 2'-H2), 3-12 (m, 5'-H), 4.24 (m, 4’-H), 6.48 (d, J = 3.7 Hz, 3-H), 6.63 (dd, J = 4.0 Hz, J = 6.9 Hz, 1’-H), 7.13 (dd, J = 4.7 Hz, J = 7.8 Hz, 5-H), 7.61 (d, J = 3.7 Hz, 2-H), 7.97 (dd, J = 1.5Hz, J = 7.8 Hz, 4-H), 7.26 (dd, J = 1.5 Hz, J = 4.7 Hz, 6-H) e outros protões aromáticos.

Análise: C31H28N2°2 (P,M* 46ο·5δ) calc. C 80.84$; H 6.13/»; N 6.08/ determ. 80.79/; 6.16/; 6.14/ d) 1-(2,3-Didesoxi-P-D-gliceropentofuranosil)-1H-pirrolo[2,3-b] piridina.

Misturam-se 240 mg (0,52 mmol) do composto obtido em c) com 30 ml de ácido acético a 80/ e agita-se durante 3 horas à temperatura ambiente. Separa-se o solvente em bomba de óleo de vazio e em seguida evapora-se o resíduo várias vezes com água. Cromatografa-se 0 resíduo em gel de sílica 60H (coluna 8x3 cm, diclorometano/acetato de etilo, 95:5 v/v). Recrista- liza-se de água a zona principal do resíduo para se obterem 102 mg (90/ do teórico) de cristais incolores; p.f. 124-125°C. UV (MeOH):í = 288 nm (£ = 7500). 0 max 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 2.08 (m, 3’-H2), 2.31 (m, 2’-H2), 3.56 (m, 5'-H2), 4.08 (m, 4'-H), 4.98 (tr, J = 5.5 Hz, 5’-0H), 6.54 (d, J = 3.2 Hz, 3-H), 6.59 (pt, J = 5.4 Hz, 1’-H), 7.13 (dd, J = 4.7 Hz, J = 7.7 Hz, 5-H), 7.77 (d, 1H, J = 3.2 Hz, 2-H), 7.98 (d, J = 7.7 Hz, 4-H), 8.25 (d, J = 4.8 Hz, 6-H).

Análise: C12H14N202 (P.M. 218.26) calc. C 66.04/; H 6.47/; N 12.83/ determ. 66. 09/; 6.57/; 12.84/ - 36 - Λ,

Exemplo 8. 1- (2,3-Didesoxi-|3-D-gliceropento-2-enofuranosil)-4-nitro-1H--pirrolo-[2,3-b]-piridlna. a) 1 — [5—0— ((1 , l-DimetiletiD-difenilsiliD-^t-desoxi-ff-P-eri-tro-pentofuranosil)]-4-nitro-1H-pirrolo[2,3-b]-piridina.

Evaporam-se por duas vezes 1,0 g (3,6 mmol) de 1 — (2— -desoxi-|3-D-eritro-pentofuranosil)-4-nitro-1H-pirrolo[2,3-b]pi-ridina (F. Seela e R. Gumbiowskl, Heterocycles, 29, 795/1989) em cada caso com 30 ml de piridina anidra, dissolve-se em 50 ml de piridina arrefecida em atmosfera de azoto a 0°C. São então injectados através de um septo, 1,18 ml (4,6 mmol) de cloreto de 1 ,1-dimetiletildifenilsililo. Em seguida remove-se o banho frio e a mistura reaccional é agitada durante 8 horas à temperatura ambiente. Evapora-se a mistura reaccional, retoma-se o resíduo em 200 ml de clorofórmio, lava-se duas vezes em cada caso com 40 ml de ácido clorídrico 0,1N e em seguida com um pouco de água e seca-se em sulfato de sódio anidro. Separa-se o solvente e cromatografa-se o óleo amarelo resultante em gel de sílica 60 (coluna 10 x 3 cm, diclorometano/acetona, 95:5 v/v). Após evaporação, obtêm-se da zona principal, 1,5 g (81% do teórico) de uma espuma amarela. UV (MeOH) :V, = 357, 338 nm (£ = 4400, 4400). * ma, λ 1H-RMN ([Dg]DMS0): & 0.99 (s, cH^, 2.38 (m, 2’-Hb), 2.63 (m, 2'-Ha), 3.75 (dd, J = 4.8 Hz, 10.9 Hz, 5'-H), 3.87 (dd, J = 4.8 Hz, 10.9 Hz, 5’-H), 3.96 (m, 4»-H), 4.53 (m, 3'-H), 5.46 (d, J = 4.4 Hz, 3'-0H), 6.79 (tr, J = 6.6 Hz, 1»-H), 6.98 (d, J = 3.6 Hz, 3-H), 7.97 (d, J = 5.3 Hz, 5-H), 8.07 (d, J = 3-6 Hz, 2- H), 8.53 (d, J = 5·3 Hz, 6-H) e outros protões aromáticos. Análise: C28H31N305Si (P.M. 517.66) calc. C 64.97%; H 6.04%; N 8.12% determ. C 65.00%; H 6.24%; N 8.01% • b) 1-[2-Desoxi-5-0-((1,1-dimetiletil)-difenilsilil)-3-0-metil- - 37 -

sulfonil-(p-D-eritro-pentofuranosil)]-4-nitro-1H-pirrolo[2,3-b] -piridina.

Adiciona-se a uma solução de 1,0 g (1,9 mmol) do composto obtido em a) em 50 ml de diclorometano, 1 ml (13 mmol) de cloreto de ácido metanossulfónico e 15 ml de piridina e agita--se durante 12 horas. Após terminar a reacção (controlada por TLC) , adicionam-se 20 ml de metanol e agita-se durante mais 15 minutos. Evapora-se a mistura reaceional, mistura-se o resíduo com 200 ml de clorofórmio, lava-se duas vezes em cada caso com 40 ml de ácido clorídrico 0,1N e em seguida com um pouco de á-gua e seca-se em sulfato de sódio anidro. Separa-se o solvente e cromatografa-se o óleo amarelo resultante em gel de sílica 60 (coluna 8x3 cm, diclorometano). Obtêm-se da evaporação da zona principal do resíduo uma substância incolor que se transforma em espuma no caso de evaporação. Rendimento 1,04 g (90# do teórico). UV (MeOH):Xov = 352, 338 nm (g = 4400, 4700). * max 1H-RMN ([DglDMSO): S = 0.99 (s, CH^, 2.80 (m, 2»-Ha), 3.11 (m, 2’-Hb), 3.90 (m, 5’-H2), 4.32 (m, 41 2-H), 5.54 (m, 3'-H), 6.28 (pt, J = 6.3 Hz, 1’-H), 7.02 (d, J = 4.9 Hz, 3-H), 7.98 (d, J = 6.5 Hz, 5-H), 8.09 (d, J = 4.9 Hz, 2-H), 8.52 (d, J = 5.3 Hz, 6-H), e outros protões aromáticos.

Análise: C29H33N307SSi (P.M. 595.74) calc. C 58.47#; H 5.58#; N 7.03# determ. C 58.69#; H 5.65#; N 7.03# c) 1-(2,3-Didesoxi-|3-D-gliceropent-2-enofuranosil)-4-nitro-1H--pirrolo[2,3-b]piridina. - 38 - 1

Adicionam-se a uma solução de 400 mg (0,67 mmol) do composto obtido em b) em 10 ml de tetrahidrofurano 5 ml de flu- oreto de tetrabutilamónio 1M em tetrahidrofurano e em seguida agita-se sob refluxo durante 4 horas. Sepára-se o solvente em vazio e cromatografa-se o produto bruto em gel de sílica 60 , (coluna 10 x 3 cm, diclorometano metanol, 95:5 v/v). Evapora-se 2

o resíduo e cristaliza-se de isopropanol para se obterem 120 mg (teórico: 6855) de cristais amarelos : p.f. 154°C. UV (MeOH):^max = 358, 338 nm (£ = 5000, 4700). 1H-RMN ([Dg]DMS0): S 3.57 (m, 5'-H2), 4.87 (m, 4»-H), 4.96 (tr, J = 5.4 Hz, 51-OH), 6.14 (m, 2»-H), 6.52 (m, 3’-H), 7.05 (d, J = 3.6 Hz, 3-H), 7.40 (m, 1'-H), 7.99 (d, J = 5.3 Hz, 5-H), 8.03 (d, J = 3.6 Hz, 2-H), 8.58 (d, J = 5.3 Hz, 6-H).

Análise: (P.M. 261 .24) calc. C 55.17$; H 4.24$; N 16.09$ determ. C 55.27$; H 4.38$; N 16.03$

Exemplo 9. 4-Amino- 1 - (2,3-didesoxi-P-D-gliceropentof uranosil) -1 H-pirrolo-[2,3-b]piridina.

Dissolvem-se 50 mg do composto obtido no Exemplo 8c) em 30 ml de metanol e mistura-se com 0,1 ml de piridina e 10 mg de paládio/carbono (10$ Pd). Hidrogena-se durante 2 horas à temperatura ambiente a uma pressão normal. A presença do produto final I indicada pela descoloração da solução. Separa-se o catalisador por filtração, lava-se várias vezes com metanol, evapora-se o filtrado e cromatografa-se o resíduo em gel de sílica 60 (coluna 8 x 1,5 cm, diclorometano/metanol, 9:1 v/v). Obtêm-se da zona principal 10 mg (teórico : 22$) do composto do título incolor. 1H-RMN ([D6]DMS0): S = 1.99 (m, 3'-H2), 2.27 (m, 2»-H2), 3-50 (m, 5’-H2), 4.03 (m, 4»-H), 6.16 (d, J = 5.4 Hz, 5-H), 6.25 (s, NH2), 6.34 (pt, J = 5.98 Hz, 1»-H), 6.52 (d, J = 3.6 Hz, 3-H), 7.28 (d, J = 3.6 Hz, 2-H), 7.69 (d, J = 5.4 Hz, 6-H). /

Exemplo 10. 39 - f'..

Dissolvem-se 21,8 mg (0,1 mmol) do composto obtido no Exemplo 7d) em 250 jil (2,14 mmol) de fosfato de trimetilo e misturam-se com 11,7 μΐ (0,13 mmol) de oxicloreto fosforoso destilado recentemente a 4°c. Após agitação durante 1,5 horas a 4°C, adiciona-se uma solução de o;5 mmol de pirofosfato de bis--(tri-n-butilamónio) em 1 ml de dimetilformamida e 100 pl (0,42 mmol) de tri-n-butilamina. Após 1 minuto, neutraliza-se com uma solução aquosa de bicarbonato de trietilamónio (TBK) e em seguida separa-se o solvente em vazio. Retoma-se o resíduo em 150 ml de água e adsorve-se em Fraktogel TSK (coluna: 30 x 2,6 cm). A eluição de gradiente (360 ml de água/360 ml de solução 0,5 M TBK) conduz, a 0,49 M de TBK, a uma zona principal da qual, se obtêm após evaporação do solvente, 370 unidades A2gg (49% do teórico) de trifosfato amorfo incolor sob a forma de sal de trietilamónio. TLC (P-propanol/NH^/HgO: 3:1:1 v/v/v), Rf = 0,12 HPLC (LiChrosorb RP-18; 0.1 M acetato de amónio/50% acetonitri-lo: 1 ml./min.); Rt = 1.95 min; UV (Me0H):k = 288 nm (£ = 7500). 31P-RMN (D20; 0.1M tris-HCl (1:1), pH 7.0, 100 mM EDTA): £ = -10.32 (d, J =19 Hz, PoO; -22.04 (t, J = 19 Hz, P{3), -7.46 (d, J = 19 Hz, P gama).

Exemplo 11.

Sal 1 - (2,3-didesoxi-j3-D-gliceropento-2-enof uranosil)-4-nitro--1H-pirrolo-[2,3-b]-piridina S^trifosfato de trietilamónio. São fosforilados 26 mg (0,1 mmol) do composto obtido no Exemplo 8c) da forma descrita no Exemplo 10 e depois são processados. A TLC (2-propanol/NHg/H20; 3:1:1 v/v/v): Rf = 0,12. HPLC (LiChrosorb RP-18; acetato de amónio 0,1M acetoni-trilo a 50% 1 ml/min) Rt = 1,91 min; produz 180 unidades A358 (teórico : 36%) do produto amorfo incolor. UV (MeOH): max = 358 nm (£ = 5000). 31P-RMN (D20, 0.1M tris-HCl (1:1), pH 7, 100 mM EDTA): £ = -10.52 (d, J = 20 Hz, P o(); -21.75 (t, J = 20 Hz, pp), -6.18 (d, J = 20 Hz, P gama). - 40 -

Exemplo 12. 8-(2,3-Didesoxi-p/(g)-D-gliceropentofuranosil)-8H-imidazo[1,2--a]-s-triazin-4-ona. a) 8- fe-0-[ (1,1-Dimetiletil)-dimetilsilil]-2,3-didesoxi- <a((P)--D-gliceropentofuranosi]l -2-[(-metil-propionil)-amino]-8H--imidazoÇ1,2-a]-s-triazina-4-ona.

Dissolvem-se 500 mg (2,26 mmol) de 2-[(2-metilpropio-nil)-amino]-8H-imidazo[1,2-a]-s-triazin-4-ona em 100 ml de ace-tonitrilo seco com aquecimento suave e mistura-se com 1 g de carbonato de potássio. Adicionam-se 5 pl de TDA-1 e agita-se a mistura reaccional durante 10 minutos à temperatura ambiente. Adiciona-se em seguida uma solução arrefecida de cloreto de 5—0—[(1,1-dimetiletil)-dimetilsilil]-2,3-didesoxi-D-gliceropen-tofuranosil preparado de acordo com o Exemplo 4a) em oito porções iguais com um intervalo de 2 a 3 minutos e em seguida agita-se a mistura reaccional durante mais 30 minutos à temperatura ambiente em atmosfera de azoto controlando a reacção por cromatografia de camada fina em gel de sílica, diclorometano/ metanol; 9:1 v/v) que revela uma reacção completa para se obterem dois produtos. Após filtração através de 1 cm de Celite, evapora-se o filtrado em vazio numa bomba de óleo de 20 a 25°C e cromatografa-se imediatamente o resíduo em gel de sílica 60H (coluna 6 x 25 cm, diclorometano/metanol, 95:5 v/v). Obtêm-se, a partir da zona rapidamente móvel principal, a mistura anomé-rica que se dissolve em diclorometano/metanol (99:1 v/v) e se cromatografa de novo em gel de sílica 60H (coluna: 6 x 15 cm, diclorometano/metanol (99:1 v/v) (1 litro) e diclorometano/metanol (97:3 v/v) (2 litros). Obtim-se a partir da zona mais rapidamente móvel (Rf (gel de sílica, diclorometano/metanol 9:1 v/v) 0,90), após evaporação, 250 mg (teórico : 25$) do p-anóme-ro como uma espuma incolor. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 10.33 (s, NH), 7.64 (d, J = 2.7 Hz, H-7) 7.58 (d, J = 2.7 Hz, H-6), 6.14 (pt, J = 3.8 Hz, H-1’), 4.14 (m, H-4’), 3.75 (m, H2-5'), 2.92 (m, CH), 2.40 (m, H2-2»), 2.06 (m, h2-3'), 1.07 e 1.05 (2 s, iBu-Me), 0.84 (s, t-Bu-Me), 0.01 (s, Si-Me). - 41 Ρ\ Ρ\

Obtêm-se a partir da zona mais lentamente móvel (Rf (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) 0,85), após evaporação, 270 mg (27% do teórico) do o(-anómero como uma espuma incolor. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 10.3 (s, NH), 7.66 (d, J = 2.7 Hz, H-7), 7.59 (d, J = 2.7 Hz, H-6), 6.19 (dd, J = 5.8 Hz, H-1'), 4.51 (m, H-4*), 3.62 (m, H2-5'), 2.94-(m, CH), 2.35 e 1.82 (m, H2-2' e H2-3M, 1.07 e 1.05 (2 s, iBu-Me), 0.88 (s, t-Bu-Me), 0.05 (s, Si-Me). b) 2-[(2-Metilpropionil)-amino]-8-(2,3-didesoxi-g-D-gliceropen-tofuranosil-8H-imidazo[1,2-a]-s-triazin-4-ona.

Dissolve-se o j3-anómero isolado de acordo com o Exemplo 12 a) em 5 ml de tetrahidrofurano seco e mistura-se com 5 ml de fluoreto de tetrabutilamónio 1M em tetrahidrofurano. Agita-se a mistura reaccional durante 10 minutos à temperatura ambiente, evapora-se para se obter um óleo incolor e cromatogra-fa-se em gel de sílica 60H (coluna : 10 x 6 cm, 1 litro diclorometano /metanol (97:3 v/v) e 1 litro de diclorometano/metanol (9:1 v/v). Obtêm-se da zona principal 110 mg (93% do teórico) do produto sob a forma de uma espuma incolor. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol 9:1 v/v): Rf = 0,3. 1H-RMN ([D6]DMS0): S = 10.32 (s, MH), 7.77 (d, J = 2.7 Hz, H-7) 7.58 (d, J = 2.7 Hz, H-6), 6.14 (dd, J = 6.4 Hz, 3.7 Hz, H-1·), 4.99 (t, J = 5.4 Hz, 5'-0H), 4.11 (m, H-4'), 3.58 (m, Hg-5'), 2.93 (m, J = 6.8 Hz), 2.38 (m, H2-2»), 2.03 (H2-3'), 1.07 e 1.05 (2 CH3). c) 2-[(2-Metilpropionil)-amino]-8-(2,3-didesoxi-s(-D-gliceropen-tofuranosil-8H-imidazo[1,2-a]-s-triazin-4-ona.

Faz-se reagir o ©(-anómero isolado de acordo com o Exemplo 12 a), conforme descrito no Exemplo 12 b) e processa--se. TLC (gel de sílica/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,3. 1H-RMN ([D63DMSO): ? = 10.34 (s, NH), 7.67 (d, J = 2.6 Hz, H-7), 7.59 (d, J = 2.6 Hz, H-6), 6.21 (dd, J = 6.5 Hz, 3-8 Hz, • H-1'), 4.83 (t, J = 5.4 Hz, 5'-0H), 4.12 (m, H-4'), 3.43 (m, • - 42 - H2-5’), 2.90 (ra, J = 6.9 Hz, CH), 2.3 (m, H2-2f), 1.85 e 1.58 (H2-3t), 1.07 e 1.05 (2 CHg). d) 8-(2,3-Didesoxi-P-D-glicepopentofuranosil)-8H-imidazo[1,2-a] -s-triazin-4-ona.

Dissolve-se o β-anómero isolado de acordo com o Exemplo 12 b) (75 mg, 0,23 mmol) em 5 ml de amoníaco metanólico e agita-se durante 2 horas à temperatura ambiente. Em seguida evapora-se e cromatografa-se o resíduo oleoso em gel de sílica 60H (coluna 6 x 6 cm; agente de eluição diclorometano/metanol 9:1 v/v). Após evaporação da zona principal, obtêm-se 40 mg (70$ do teórico) do produto sob a forma de cristais incolores; p.f. 157-158°C, após recristalização de metanol. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol 9:1 v/v) Rf = 0,2. 1H-RMN ([Dg]DMS0): ? = 7.50 (d, J = 2.7 Hz, H-7), 7.34 (d, J = 2.7, H-6), 6.03 (dd, J = 5.8 Hz, 3.4 Hz, H-1»), 4.99 (t, J = 5.8 Hz, 5’-0H), 4.06 (m, H-4*), 3.57 (m, H^-5·), 2.3 (m, ^-2») 1.97 (m, H2-3f). e) 8-(2,3-Didesoxi-o(-D-gliceropentofuranosil-8H-imidazo[ 1,2-a]--s-triazin-4-ona.

Faz-se reagir o e(-anómero isolado de acordo com o Exemplo 12 c) e trata-se conforme descrito no Exemplo 12 d). Cromatografa-se o resíduo oleoso em gel de sílica 60 (coluna 15 x 6 cm, agente de eluição : 1 litro de diclorometano/metanol 95:5 v/v, e 2 litros de diclorometano/metanol 9:1 v/v. Após evaporação da zona principal, obtêm-se 60 mg (74$ do teórico) do produto sob a forma de uma espuma incolor. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol 9:1 v/v) Rf = 0,2.

VrMN ([D6]DMS0)j S = 7.39 (d, J = 2.7 Hz, H-7), 7.35 (d, J = 2.7 Hz, H-6), 6.92 (s, br., NH ), 6.10 (dd, J = 3.6 Hz, 6.3 Hz, H-1'), 4.81 (t, J = 5.7 Hz, 5'-0H), 4.33 (m, H-4'), 3.40 (m, H2-5'), 2.40 e 2.20 (2 m, H -2»), 2.20 e 1.83 (2 m, ^-3')·

Exemplo 13. - 43 - 7-Metoxi-1 (2) ,(3)-(21 ^'-didesoxi-ç&gj-D-eritro-pentofuranosil) -3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina. a) Adicionam-se a uma suspensão de 750 mg (14,3 mmol) de hidróxido de potássio em pó em 50 ml de acetonitrilo anidro a intervalos de, em cada caso, 10 minutos, 40 jil (0,12 mmol) de TDA-1 e 900 mg (6 mmol) de 7-metoxi-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]-pirimidina. Passados mais 10 minutos, adiciona-se durante o período de 30 minutos, em porções de 5 ml, uma solução arrefecida de cloreto de t-butil-dimetilsilil-2’,3’-didesoxi-D-ribofurano-silo (12 mmol), preparada de acordo com o Exemplo 4a), em 30 ml de tetrahidrofurano. Agita-se a mistura reaccional durante mais 30 minutos, separa-se por filtração o material insolúvel e evapora-se o filtrado à secura a 40°C em vazio numa bomba de óleo. 0 resíduo xaroposo é imediatamente cromatografado (gel de sílica 60, coluna: 30 x 5 cm, éter do petróleo/acetato de eti-lo, 6:4 v/v). Obtêm-se tris fracções principais (I, II, III). A fracção I contêm 4 compostos que se separam por cromatografi-as múltiplas (gel de sílica 60, coluna: 25 x 3 cm, diclorometa-no/acetona, 95:5 v/v; e coluna: 30 x 3 cm, éter do petróleo/acetato de etilo 7:3 v/v). As fracções II e III contém cada uma um composto. A indicação do régio- e estereoisómero é feita por 13 comparação de C-RMN com o correspondente composto de desoxi (F. Seela e col., Heterocycles, 29., 2193/1989). b) 7-Metoxi-3- (5 * -t-butildimetilsilil-2 * , 31 -didesoxi-Q(-D-eritro -pentofuranosil)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina. A zona mais rápida da Fracção I (ver Exemplo 13 a)) produz 202 mg (9,2/¾ do teórico) de um produto sob a forma de um óleo incolor. TLC (gel de sílica, éter do petróleo/acetato de etilo, 7:3 v/v) Rf = 0,6. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 0.033 e 0.049 (2 s, 2 SiCH3), 0.86 (s, SiC(CH3)3), 1.97 (m, 3’-H), 2.66 (m, 2»-H), 3.66 (m, 5*-H), 4.21 (s, 0CH3), 4.40 (m, 4'-H), 6.72 (dd, J = 6.8 Hz e 3.3 Hz, 1'—H), 8.76 (s, 5-H). - 44 -

CV

ο) 7-Metoxi-3-(5 *-t-butildimetilsilil-2', 3 *-didesoxi-P-D-eritro -pentofuranosil)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina.

Da zona média da Fracção I (ver Exemplo 13 a)), ob-têm-se 195 mg (8,9¾ do teórico) do produto sob a forma de um óleo incolor. TLC (gel de sílica, diclorometano/acetona 95:5 v/v) Rf = 0,65. 1H-RMN ([Dg ]DMS0): £= -0.194 e -0.15 (2 s, 2 SiCH3), 0.72 (s, SiC(CH3)3), 2.21 (m, 3’-H), 2.59 e 2.81 (m, 2»-H), 3.55 (dd, J = 11.0 Hz e 5.9 Hz, 5'-H), 4.21 (s, 0CH3), 4.26 (m, 4'-H), 6.67 (dd, J = 7.1 Hz e 1.7 Hz, 1'-H), 8.79 (s, 5-H). d) 7-Metoxi-2-(5!-t-butildimetilsilil-21,3'-didesoxi-a(-D-eritro -pentofuranosil)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina.

Separa-se após cromatografia renovada, a zona mais lenta da Fracção I (ver Exemplo 13 a)) (referido para um agente de eluição diclorometano/acetona, 95:5 v/v) (agente de eluição éter do petréleo/acetato de etilo, 7:3 v/v) em duas sub-zonas. Obtêm-se da sub-zona rápida 172 mg (7,8¾ do teórico) do produto sob a forma de um óleo incolor. TLC (gel de sílica, éter do petróleo/acetato de etilo, 7:3 v/v) Rf = 0,5. 1H-RMN ([Dg]DMS0): Ç = 0.058 e 0.065 (2, s, 2 S1CH3), 0.86 (s, SiC(CH3)3), 1.96 (m, 3’-H), 2.5 (m, 2‘-H), 3.68(m, 5'-H), 4.18 (s, 0CH3), 4.50 (m. 4»-H), 6.67 (dd, J = 5.9 Hz e 2.7 Hz, 1'-H), 8.76 (s, 5-H). e) 7-Metoxi-2-(5'-t-butildimetilsilil-2',3'-didesoxi-p-D-eri-tro-pentofuranosil)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina.

Obtêm-se da sub-zona lenta (ver Exemplo 13 d)), 168 mg (7,7¾ do teórico) do produto sob a forma de um óleo incolor. TLC (gel de sílica, diclorometano/acetona, 95:5 v/v) Rf = 0,55. 1H-RMN ([Dg]DMS0): £ = -0.163 e 0.111 (2 s, 2 SiCH^; 0.72 (s, SiC(CH3)3), 2.17 (m, 3’-H), 2.65 e 2.56 (m, 2'-H), 3.66 (m, 5*-H), 4.31 (m, 1»-H), 6.59 (d, J = 5.6 Hz, 1»-H), 8.75 (s, ! 5-H). - 45 -

IS

f) 7-Metoxi-1-(51 -t-butildimetilsilil-2T, 3'-didesoxi-c(-D-eri- tro-pentofuranosil)-3H-1, 2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina. A Fracção II (ver Exemplo 13 a), agente de eluição éter do petróleo/acetato de etilo, 6:4 v/v) produz 118 mg (5,4$ do teórico) do produto sob a forma de um óleo incolor. TLC (gel de sílica, éter do petróleo/acetato de etilo, 6:4 v/v) Rf = 0,5. 1H-RMN ([D6]DMS0): S = 0.048 e 0.063 (2 s, 2 S1CH3), 0.87 (s, SiC(CH3)3), 1.98 (m, 3'-H), 2.75 e 2.60 (m, 2»-H), 3.66 (m, 5*-H), 4.20 (s, 0CH3), 4.33 (m, 4'-H), 6.77 (dd, J = 6.9 Hz e 2.9 Hz, 1’-H), 8.8 (s, 5-H). g) 7-Metoxi-1 -(5 *-t-butildimetilsilil-21,3 '-didesoxi-fB-D-eri-tro-pentofuranosil)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina. A Fracção III (ver Exemplo 13a) agente de eluição de éter do petróleo/acetato de etilo, 6:4 v/v) produz 175 mg (8,0$ do teórico) do produto sob a forma de um óleo incolor. TLC (gel de sílica, éter do petróleo/acetato de etilo 6:4 v/v) Rf = 0,35. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = -0.24 e -0.20 (2 s, 2 SiCH ), 0.67 (s, SiC(CH3)3), 2.15 (m, 3'-H), 2.87 e 2.60 (m, 2'-H), 3.40 (dd, J = 11.1 Hz e 3.9 Hz, 5’-H), 4.28 (m, 4*-H), 6.68 (d, J = 6.9 Hz, 1 >-H) , 8.75 (s,· 5-H). h) 7-Metoxi-3-(2 * , 3 * -didesoxi-p(-D-eritro-pentofuranosil)-3H--1,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina.

Dissolvem-se 500 mg (2,0 mmol) do composto preparado de acordo com o Exemplo 13 b) em 20 ml de tetrehidrofurano, mistura-se com 2 ml de uma solução 1,1N de fluoreto de tetrabu-tilamónio em tetrahidrofurano e agita-se durante 2 horas à temperatura ambiente. Separa-se 0 solvente por evaporação e o resíduo xaroposo é cromatografado em gel de sílica 60 (coluna 20 x 3 cm, diclorometano/metanol, 9:1 v/v). Obtêm-se da fracção principal 213 mg (62$ do teórico) de produto amorfo incolor. ! TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol 9:1 v/v) Rf = 0,55. 46 1H-RMN ([D^]DMSO): 9 = 1.97 (m, 3'-H), 2.63 (m, 2'-H), 3.47 (m, 5'-H), 4.21 (s, OCH3), 4.36 (m, 4f-H), 4.81 (t, J = 5.7 Hz, 5'-OH), 6.74 (dd, J = 7.0 Hz e 3.4 Hz, 1'-H), 8.75 (s, 5-H). i) 7-Metoxi-3-(2 *,3’-didesoxi-P-D-eritro-pentofuranosil)-3H--1,2,3-triazolo[4,5-djpirimicTina.

Procede-se à remoção da protecção do composto preparado no Exemplo 13 c) da maneira descrita no Exemplo 13 h), A-pós 1 hora evapora-se a mistura reaccional à secura e cromato-grafa-se em gel de sílica (coluna 20 x 3 cm, diclorometano/me-tanol 95:5 v/v). Obtêm-se da fracção principal 291 mg (85$ do teórico) de produto sob a forma de cristais incolores. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,65. 1H-RMN ([Dg]DMSO); S = 2.24 (m, 3«-H), 2.63 e 2.74 (m, 2’-H), 3.42 (m, 5 ’ -H), 4.22 (m, 4'-H e 0CH3), 4.70 (t, J = 5.7 Hz, 51 2-OH), 6.66 (dd, J = 7.2 Hz e 2.2 Hz, 1'-H), 8.80 (s, 5-H). j) 7-Metoxi-2-(2^32 -didesoxi-Cí(-D-eritro-pentof uranosil)-3H--1,2,3-triazolo[4,5-djpirimidina. - 47 - 1

Tratam-se 500 mg (2,0 mmol) do composto preparado no Exemplo 13 d) da maneira descrita no Exemplo 13 h). Após um tempo de reacção de 1,25 horas, separa-se o solvente por evaporação e cromatografa-se o resíduo oleoso em gel de sílica 60 (coluna 20 x 3 cm, diclorometano/metanol, 95:5 v/v). A evaporação da zona principal dá origem ao produto sob a forma de um composto cristalino. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,45. 2 H-RMN ([DglDMSO): £= 1.94 e 2.34 (2m, 3’-H), 2.56 (m, 2'-H), 3.48 (m, 5’-H), 4.18 (s, OCHg), 4.46 (4’-H), 4.85 (t, J = 5.8 Hz, 5’-OH), 6.67 (dd, J = 6.2 Hz e 2.5 Hz, 1'-H), 8.76 (s, 5-H) k) 7-Metoxi-2-(22,3'-didesoxi-P-D-eritro-pentofuranosil)-3H--1,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina.

Tratam-se 500 mg (2,0 mmol) do composto preparado de • acordo com o Exemplo 13 e) da maneira descrita no Exemplo 13 h) -

Após um tempo de reacção de 1 hora, evapora-se a mistura reac-cional à secura e cromatografa-se o resíduo em gel de sílica 60 (coluna 20 x 3 cm, diclorometano/metanol, 9:1 v/v). Obtêm-se assim 286 mg (84$ do teórico) do produto amorfo. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,7. 1H-RMN ([Dg]DMS0): &= 2.17 (2m, 3*-H), 2.57 (m, 2»-H), 3.50 (m, 5'-H), 4.16 (s, OCH^, 4.28 (m, 4f-H), 4.76 (t, J = 5.6 Hz, 5’-OH), 6.60 (dd, J = 4.8 Hz e 3.2 Hz, 1»-H), 8.75 (s, 5-H). 1) 7-Metoxi-1-(2*,S^didesoxi-g^-D-eritro-pentofuranosiD-SH--1 ,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina.

Tratam-se 500 mg (2,0 mmol) do composto preparado no Exemplo 13 f) da maneira descrita no Exemplo 13 h). Após um tempo de reacção de 1 hora, evapora-se a mistura reaccional à secura e cromatografa-se o resíduo em gel de sílica 60 (coluna 20 x 3 cm, diclorometano/metanol, 9:1 v/v). Obtêm-se da fracção principal 246 mg (72$ do teórico) do produto. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,6. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 1.97 (m, 3'-H), 2.71 e 2.60 (m, 2»-H), 3.47 (m, 5 ’ -H), 4.21 (s, OCH^, 4.29 (m, 4*-H), 4.81 (t, J = 5.7 Hz, 51-OH), 6.79 (dd, J = 7.4 Hz e 3-3 Hz, 1»-H), 8.75 (s, 5-H). m) 7-Metoxi-1-(21,3 t-didesoxi-P-D-eritro-pentofuranosil)-3H--1 ,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina.

Tratam-se 500 mg (2,0 mmol) do composto preparado de acordo com o Exemplo 13 g) da maneira descrita no Exemplo 13 h). Após um tempo de reacção de 0,5 horas, evapora-se a mistura reaccional à secura e cromatografa-se o resíduo em gel de sílica 60 (coluna 20 x 3 cm, diclorometano/metanol, 9:1 v/v). Obtêm-se assim 303 mg (89$ do teórico) do produto. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,5. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 2.19 (m, 3’-H), 2.60 e 2.79 (2 m, 2»-H), 3.33 (m, 5’-H), 4.20 (s, OCHg), 4.23 (m, 4'-H), 4.64 (t, J = 5.6 Hz, 5'-0H), 6.69 (d, J = 5.7 Hz, 1*-H), 8.75 (s, 5-H). - 48 -

Exemplo 14. 7-Amino-3-(2' ^-didesoxi-eyÇ-D-eritro-pentofuranosiD-SH-l ,2,3--triazolo[4,5-d]pirimidina.

Agitam-se durante 24 horas à temperatura ambiente em 10 ml de amoníaco metanólico, 100 mg (0,4 mmol) do composto preparado de acordo com o Exemplo 13 h). Após separação do solvente por evaporação, purifica-se o produto bruto por cromato-grafia (gel de sílica 60, coluna: 10 x 2 cm, diclorometano/me-tanol, 9:1 v/v). Obtêm-se da fracção principal 69 mg (74$ do teórico) do produto sob a forma de um sólido cristalino. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,3. 1H-RMN ([DgjDMSO): S = 1.91 e 2.36 (2 m, 3’-H), 2.7 - 2.5 (2'-H), 3.46 (m, 5'-H), 4.33 (m, 4'-H), 4.80 (t, J = 5.7 Hz, 5'-0H), 6.61 (dd, J = 7.0 e 3.5 Hz, 1’-H), 8.12 e 8.45 (2s, 2 NH), 8.32 (s, 5-H).

Exemplo 15. 7-Amino-3-(21,3l-didesoxi-P-D-eritro-pentofuranosil)-3H-1,2,3-triazolo[4,5-d]pirimidina.

Tratam-se 100 mg (o,4 mmol) do composto preparado no Exemplo 13 i) da maneira descrita no Exemplo 14. Após separação do solvente por evaporação purifica-se o produto bruto por cro-matografia (gel de sílica 60, coluna 10 x 2 cm, diclorometano/ metanol, 95:5 v/v). Obtêm-se, após evaporação da fracção principal, 83 mg (87$ do teórico) do produto que cristaliza de metanol sob a forma de cristais incolores; p.f. 182°C. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,54. 1H-RMN ([D6]DMS0)í S = 2.24 (m, 3 *-H), 2.59 e 2.70 (2 m, 2’-H), 3.46 (m, 5’-H), 4.81 (t, J = 5.7 Hz, 5’-0H), 6.55 (dd, J = 7.1 e 2.7 hz, 1»-H), 8.47 e 8.14 (2s, 2 NH), 8.33 (s, 5-H).

Exemplo 16. 7-Amino-2-(21,3 *-didesoxi-^-D-eritro-pentofuranosil)— 3 H— 1,2,3- - 49 -

/V

-triazolo[4,5-d]pirimidina.

Tratam-se 100 mg do composto preparado no Exemplo 13 j) da maneira descrita no Exemplo 14. A reacção leva 7 horas. Após evaporação do solvente e cromatografia do resíduo em gel de sílica (coluna 10 x 2 cm, diclorometano/metanol, 9:1 v/v), obtêm-se um produto cristalino. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,15. 1H-RMN ([DglDMSO): S = 1.94 e 2.35 (2m, 3'-H), 2.55 (m, 2'-H), 3.49 (m, 5' -H), 4.43 (m, 4»-H), 4.85 (t, J = 5.3 Hz, 5*-0H), 6.56 (pt, J = 4.5 Hz, 1'-H), 8.1 (s, NH2), 8.32 (s, 5-H).

Exemplo 17. 7-Amino-2-(2l^'-didesoxi-g-P-eritro-pentofuranosiD-SH-l,2,3--triazolo[4,5-d]pirimidina.

Tratam-se da maneira descrita no Exemplo 14, 100 mg do composto preparado de acordo com o Exemplo 13 k). Após 18 horas, evapora-se a mistura reaocional à secura e cromatografa--se o resíduo em gel de sílica (coluna 10x2 cm, diclorometano/metanol, 9:1 v/v). TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol 9:1 v/v) Rf = 0,35. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 2.17 (m, 3'-H), 2.54 (m, 2*-H), 3-48 (pt, J = 5.6 Hz, 51-H), 4.24 (m, 4*-H), 4.75 (t, J = 5.6 Hz, 5’-0H), 6.47 (d, J = 4.4 Hz, 1’-H), 8.10 (s, NH), 8.32 (s, NH e 5-H).

Exemplo 18. T-Amino-I-^',3,-didesoxi-s(-D-eritro-pentofuranosil)-3H-1,2,3--triazolo[4,5-d]pirimidina.

Tratam-se 100 mg do composto preparado de acordo com o Exemplo 13 1) da maneira descrita no Exemplo 14. Após 36 horas, separa-se o solvente por evaporação e purifica-se o produ-• to bruto por cromatografia (gel de sílica 60, coluna: 10 x 2 cm [ diclorometano/metanol, 9:1 v/v). Obtim-se, após evaporação da 50 -

fracçâo principal, 63 mg (67$ do teórico) de produto que cristaliza de acetona sob a forma de cristais finos. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,25. 1H-RMN ([Dg]DMS0): $ = 1.93 e 2.15 (2m, 3'-H), 3.51 (m, 5»-H), 4.17 (m, 4*-H), 4.91 (t, J = 5.7 Hz, 5’-0H), 6.76 (dd, J = 6.3 Hz e 1.7 Hz, 1*-H), 7.78 (s, NH2), 8.35 (s, 5-H).

Exemplo 19. 7-Amino-1-(2t,3,-didesoxi-g-D-eritro-pentofuranosil)-3H-1,2,3--triazoloÇ4,5-d]pirimidina.

Tratam-se 100 mg do composto preparado de acordo com o Exemplo 13 m) de maneira descrita no Exemplo 14. Após 36 horas, evapora-se a mistura reaccional à secura e cromatografa-se o resíduo em gel de sílica (coluna: 10 x 2 cm, diclorometano/ metanol, 9:1 v/v). Obtêm-se da zona principal, 58 mg (625¾ do teórico) de produto cristalino. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,25. 1H-RMN ([D61DMS0): 8 = 1.93 e 2.16 (2m, 3’-H), 2.49 (m, 2'-H), 3.15 (m, 5'-H), 4.36 (m, 4»-H), 4.77 (t, J = 5.2 Hz, 5'-0H), 6.64 (dd, J = 4.5 Hz, 1»-H), 7-76 (s, NH^), 8.33 (s, 5-H).

Exemplo 20. 4-Amino-1 - (2,3-didesoxi-c(-g) -D-gliceropentof uranosil-1 H-imida-zo[4,5-c]pirimidina. a) 4-Cloro-1-(5-0-[(1,1-dimetiletil)-dimetilsilil]-2,3-didesoxi -tj((g) -D-gliceropentofuranosil)-1 H-imidazo [4,5-c ]piridina.

Fazem-se reagir 809 mg (5,3 mmol) de 4-cloroimidazo-[4,5-c]piridina da maneira descrita no Exemplo 12 a) com cloreto de 5-0-[(1,1-dimetiletil)-dimetilsilil]-2,3-didesoxi-D-gli-ceropentofuranosilo (preparado a partir de 2,6 g, 11 mmol do lactol) e em seguida processa-se. [TLC (gel de sílica, dicloro-• metano/metanol, 95:5 v/v); Rf = 0,77]. Dissolve-se a mistura . anomérica obtida sob a forma de um óleo incolor em acetato de - 51 - etilo/éter do petróleo (3:7 v/v) e cromatografa-se em gel de sílica 60H (coluna 35 x 6 cm, 80 tcPa; acetato de etilo/éter do petróleo, 3:7 v/v). Obtêm-se após evaporação da zona mais rapidamente móvel, 390 mg (23% do teórico) do Sf-anómero sob a forma de cristais incolores; p.f. 65-68°C, após recristalização de acetato de etilo. 1H-RMN ([Dg]DMS0): 8 = 8.63 (s, H-1), 8.18 (d, J = 5.6 Hz, H-6) 7.73 (d, J = 5.6 Hz, H-7), 6.39 (dd, J = 6.4, 4.0 Hz, H-1»), 4.39 (m, H-4’), 3.65 (m, H2-5'), 2.4 (m, H2-2»), 2.20 (m, H^-3’) , 1.94 (m, Hp-3*), 0.87 (s, t-Bu-Me), 0.06 (s, Si-Me).

Obtêm-se a partir da zona mais lentamente móvel após evaporação 420 mg (25% do teórico) do p-anómero sob a forma de uma espuma incolor. ^H-RMN ([Dg]DMS0): 8 = 8.65 (s, H-2), 8.14 (d, J = 5.6 Hz, H-6) 7.75 (d, J = 5.6-Hz, H-7), 6.31 (pt, J = 4.3 Hz, H-1'), 4.20 (m, H-4»), 3.69 (m, H2-5'), 2.5 (m, H2-2·), 2.04 (m, ^-3»), 0.78 (s, T-Bu-Me), 0.05 - 0.07 (s, Si-Me). b) 4-Cloro-1-(2,3-didesoxi-P-D-gliceropentofuranosil)-1H-imida-zo[4,5-c]piridina.

Dissolve-se 0 p-anómero obtido no Exemplo 20 a) (300 mg, 0,9 mmol) em 5 ml de tetrahidrofurano e mistura-se com 5 ml de fluoreto de tetrabutilamónio 1M em tetrahidrofurano e agita--se durante 15 minutos à temperatura ambiente. Evapora-se a mistura reaccional para se obter um óleo incolor que cromato-grafa em gel de sílica 60H (coluna: 10 x 6 cm, 50 tcPa, diclo-rometano/metanol, 9:1 v/v). Obtêm-se, após evaporação da zona principal, 170 mg (86$do teórico) do produto sob a forma de um óleo incolor. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,45. 1H-RMN ([DgJDMSO): 8 = 8.73 (s, H-2), 8.15 (d, J = 5.6 Hz, H-6) 7.78 (d, J = 5.6 Hz, H-7), 6.32 (dd, J = 6.4 Hz, 3.4 Hz, H-1»), 4.98 (t, J = 5.3 Hz, 5’-0H), 4.13 (m, H-4»), 3.53 (m, H2-5’), 2.4 (m, H2-2 *) , 2.05 (m, ^-3') . ] c) 4-Cloro-1-(2,3-didesoxi-S>Ç-D-gliceropentofuranosil)-1H-imida- - 52 - h

zo[4,5-c]piridina.

Faz-se reagir da maneira descrita no Exemplo 12 b) o ctf-anómero obtido no Exemplo 20 a) (300 mg, 0,9 mmol) e proces-sa-se. Obtem-se 160 mg (81% do teórico) de cristais incolores. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,42. 1H-RMN ([DglDMSO): S = 8.64 (s, H-2), 8.17 (d, J = 5.6 Hz, H-6) 7.74 (d, J = 5.6 Hz, H-7), 6.39 (dd, J = 6.2 Hz, 4.1 Hz, H-11), 4.86 (t, J = 5.3 Hz, 5’-ΟΗ), 4.34 (m, H-4»), 3.46 (m, Hg-5'), 2.5 (m, H2-2'), 2.19 e 1.93 (2m, H -3'). d) 4-Amino-1-(2,3-didesoxi-P-D-gliceropentofuranosil)-1H-imida-zo[4,5-c]piridina.

Faz-se reagir o produto obtido no Exemplo 20 b) (100 mg, 0,46 mmol) com 10 ml de hidreto de hidrazina a 100$ e agita-se durante 90 minutos a 100°C em atmosfera de azoto. Após evaporação do excesso de hidreto de hidrazina, Evapora-se nova-mente o resíduo com etanol e em seguida dissolve-se o resíduo em 25 ml de etanol. São adicionados 2 g de níquel de Raney, seguido de ebulição sob refluxo durante 2 horas. Após separação do catalisador por filtração, evapora-se o filtrado e cromato-grafa-se o resíduo em gel de sílica 60H (coluna: 6x6 cm, 0,5 bar, diclorometano/metanol, 9:1 v/v). Obtêm-se após evaporação da zona principal, 40 mg (37% do teórico) do composto do título sob a forma de uma espuma incolor. TLC (gel de sílica, diclorometano/metanol, 9:1 v/v) Rf = 0,4. 1H-RMN ([DjDMSO): £ = 8.33 (s, H-2), 7.67 (d, J = 5.8 Hz, H-6) b 6.65 (d, J = 5.8 Hz, H-7), 6.25 (s, br., NH^), 6.14 (dd, J = 6.5 Hz, 3.8 Hz, H-1»), 4.12 (m, H-4»), 3-53 (m, H2-5'), 2.33 (m, H2-2»), 2.01 (2m, H2-3').

Exemplo 21. 1 — (2,3-Didesoxi-g-D-gliceropentofuranosil)-imidazoÇ1,2-a]piri-midin-2-ona. - 53 - 1 a) 7-C1opq-1-(2,3-didesoxi-5-0-(t-butildimetil'silil)-P-D-glioe-

(S

ropentofuranosil)-imidazo[1,2-a]-pirimidin-5-ona e o seu o(-an6-mero.

Dissolvem-se 10 g (5,9 mmol) de 7-cloroimidazo[1,2-a] -pirimidin-5-ona (R.G. Revankar e col. Anm. N.Y. Acad. Sei,, 255, 166/1975) uma mistura de 10 ml de dimetilformamida e 50 ml de tetrahidrofurano e agita-se com 3j0 g de hidróxido de potássio e 30 yil de TDA-1 durante 30 minutos à temperatura ambiente. Injectam-se nela em 4 porçSes 13 mmol de cloreto de 5—0—[(1 ,1 — -dimetiletil)-dimetilsilil]-2,3-didesoxi-D-gliceropentofurano-silo, preparado localmente de acordo com o Exemplo 4 a). Agita--se a mistura reaccional durante mais 45 minutos à temperatura ambiente, filtra-se, adicionam-se 300 ml de solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e extrai-se a fase aquosa com clorofórmio. Seca-se o extracto orgânico com sulfato de sódio anidro e evapora-se em vazio. Cromatografa-se em gel de sílica 60 para se obterem 450 mg (20% do teórico) do o<-anómero (zona móvel rápida) sob a forma de um óleo incolor e 590 mg (26% do teórico) do p-anómero (zona móvel mais lenta) sob a forma de cristais incolores; p.f. 63°C, após recristalização de éter dietílico. g-anómero: 1H-RMN ([D63DMSO)í S = 0.06 (s, 6H, CH ) , 0.87 (s, 9H, CH^, 1.68 (m, 2H, H-3’), 2.25 (m, 2H, H-2’), 3.62 (m, 2H, H-5'), 4.45 (m, 1H, H-4»), 5.99 (s, 1H, H-6), 6.27 (dd, J = 3-9 Hz, J = 6.8 Hz, 1H, H-1'), 7.73 (d, J = 2.7 Hz, 1H, H-3), 7.80 (d,· J = 2.7 Hz, 1H, H-2). qf-anómero: £ = 0.02 (s, 6H, CH3), 0.64 (s, 9H, CH^, 2.02 (m, 2H, H-3'), 2.38 (m, 2H, H-2'), 3.76 (m, 2H, H-5'), 4.14 (m, 1H, H-4'), 5.99 (s, 1H, H-6), 6.21 (m, 1H, H-1'), 7-72 (d, J = 2.4 Hz, 1H, H-3), 7.79 (d, J = 2.4 Hz, 1H, H-2). b) 7-Cloro-1-(2,3-didesoxi-P-D-gliceropentofuranosil)-imidazo-[1,2-a]-pirimidin-5-ona.

Dissolvem-se 250 mg (0,65 mmol) do p-anómero preparado de acordo com a) em tetrahidrofurano, mistura-se com 2 ml de - 54 - ι

•e& uma solução 1M de fluoreto de tetrabutilamónio em tetrahidrofu-rano e agita-se durante 60 minutos à temperatura ambiente. Após evaporação do solvente, cromatografa-se o resíduo numa coluna 20 x 2 cm de gel de sílica 60. A zona principal produziu o produto sob a forma de cristais incolores (74$ do teórico); p.f. 157°C, após recristalização de isopropanol. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 2.00 (m, 2H, H-3’), 2.37 (m, 2H, H-2'), 3.60 (m, 2H, H-5'), 4.10 (m, 1H, H-4'), 5.01 (t, J = 5.4 Hz, 1H, 0H), 5.99 (s, 1Η, H-6), 6.22 (dd, J = 217 Hz, J = 6.7 Hz, 1Η, H-1'), 7.73 (d, J = 2.6 Hz, 1H, H-3), 7.92 (d, J = 2.6 Hz, 1Η, H-2). c) 1-(2,3-Didesoxi-p-D-gliceropentofuranosil)-imidazo[1,2-a]-pirimidin-5-ona.

Dissolvem-se 60 mg (0,22 mmol) do composto preparado de acordo com b) em 50 ml de etanol, adicionam-se 4 ml de solução concentrada de amoníaco, seguida de hidrogenação na presença de 100 mg de paládio (Pd/C a 10$) durante 14 horas à temperatura ambiente. Separa-se o catalisador por filtração, lava-se com etanol HOT e evapora-se o filtrado. Obtêm-se, por cromato-grafia rápida em gel de sílica 60, 12 mg (23$ do teórico) do produto. 1H-RMN ([Dg]DMS0): S = 2.00 (m, 2H, H-3’), 2.30 (m, 2H, H-2»), 3.60 (m, 2H, H-5’), 4.10 (m, 1H, H-4’), 5.03 (t, J = 5.4 Hz, 1Η, 0H), 5.90 (d, J = 6.3 Hz, 1H, H-6), 6.28 (dd, J = 3.2 Hz, J = 6.8 Hz, 1Η, H-1'), 7.68 (d, J = 2.7 Hz, 1H, H-3), 7.86 (d, J = 2.7 Hz, 1H, H-2), 7.94 (d, J = 6.3 Hz, 1H, H-7).

Exemplo 22. 7-Amino-1-(2,3-didesoxi-i3-D-gliceropentofuranosil)-imidazoÇ 1 ,2--a]pirimidin-5-ona.

Obtêm-se o composto do título a partir de 60 mg (0,22 mmol) do composto preparado de acordo com o Exemplo 21 b) com * um procedimento semelhante para o correspondente composto de - 55 -

Claims

i ribo (R. TLC (gel G. Revankar e eol, Anm, N.Y. Sei. de sílica, diclorometano/metanol, 255, 166/1975). 9:1 v/v) Rf = 0,35. REIVINDICAÇÕES - 1S - Processo para a preparação de derivados de nucleósidos com a fórmula geral I:

na qual Ba é um radical idolilo (A), benzimidazolilo (B), pir-rolopiridinilo (C), imidazopiridinilo (D), triazolopirimidinilo (E), imidazotriazinilo (F) ou imidazopirimidinilo (G)

(A) (B) R

(D)

- 56 -

12 3 nas quais R , R e R podem ser iguais ou diferentes e significam átomos de hidrogénio ou de halogéneo, grupos alquilo(1-—7C), alcenilo(2-7C), hidroxi, mercapto, alquil(1-7C)tio, alco-xi(1-7C), alceniloxi(2-7C), ar-alquilo(1-5C), ar-alcenilo(2-5C) ar-alcoxi(1-5C), ar-alceniloxi(2-5C), ariloxi, nitro amino al-quilo(1-7C), alquil(.1-7C)aminoalquilo(1-7C), di-alquil( 1-7C)a- i\ i|. minoalquilo(1-7C), amino, amino substituído -NHR ou -N(R )0 ou imino -N=CH-R , em que R é um radical alquilo(1-7C), alcenilo (2-7C), cicloalquilo(3-7C), cicloalquil(3-7C)alquilo(1-7C), cicloalcenilo(3-7C), alcoxi(1-7C)alquilo(1-7C), halogenoalquilo (1-7C), hidroxialquilo(1-7C), ar-alquilo(1-5C), ar-alcenilo(2--5C), hetroarilalquilo(1-5C) ou heteroarilalcenilo(2-5C), em que os radicais arilo e heteroarilo podem ser substituídos uma, duas vezes ou três por alquilo(1-6C), alcenilo(2-6C), alcoxi(1--6C), halogéneo ou hidroxilo, ou R é um radical aminoalquilo-(1-7C), alquil(1-7C)aminoalquilo(1-7C) ou dialquiK1-7C)amino- ii li 4 alquilo(1-7C) e, no caso do radical -NHR e -N=CH-R , R pode adicionalmente ser um radical amino, alquil(1-7C)amino, dial-quil(1-7C)amino ou alcoxi(1-7C) ou, no caso do radical -N(R^)0, os dois substituintes R no azoto podem formar em conjunto um radical alquilideno(1-7C) que, por sua vez, pode ser substituído por um radical alcoxi(1-7C), alquil(1-7C)amino ou dialquil- (1-7C)amino, R5,R^, R^ e R^ representam cada um um átomo de hidrogénio ou um ou dois dos símbolos R"*, R^, R^ e R^ representam hidroxilo, halogéneo, ciano, azido ou um grupo amino substituí-4 4 5 7 do -NHR ou -N(R ou R e R podem representar em conjunto uma ligação adicional entre C-2’ e C-3* e Y é um átomo de hidro génio ou um radical alquil(1-7C)carbonilo, monofosfato, difos-fato ou trifosfato, em que "arilo" pretende significar um radical fenilo ou naftilo e "heteroarilo" pretende significar um radical tienilo ou piridilo, com a condição de 6 8 a) quando R é um grupo hidroxilo, R não pode ser um átomo de hidrogénio ou um grupo hidroxilo, ' 6 b) quando Ba é o grupo (B), R não pode ser um átomo de halogéneo ou um grupo azido, c) quando Ba é o grupo (D) e © um átomo de hidrogénio, r”' não pode ser um átomo de cloro ou um grupo amino e R° não 57 t pode ser um átomo de hidrogénio ou um átomo de cloro, e d) quando Ba e o grupo (E) e R um grupo amino, e R' não podem representar em conjunto uma ligação, bem como os seus possíveis o(- e ^-anómeros, N^-, N^-, e N^-re-gioisómeros (nomenclatura da purina), tautómeros e sais, e também ácidos necleicos que contem compostos com a fórmula geral I como unidades de construção, caracterizado por se fazer reagir um composto com a fórmula geral II: Ba- X (II) na qual Ba tem a significação anterior e X é um átomo de hidrogénio ou um metal alcalino, com um composto com a fórmula geral III

(III) 5 6 7 8 na qual R , R , R e R têm as mesmas significações anteriores, R' é um grupo protector de oxigénio e Z é um grupo reactivo, para se obter um composto com a fórmula geral IV

(IV) 1 2^5678 na qual Ba, R , R , R , R , R , R , R e R' têm as mesmas significações anteriores, e em seguida se removerem os grupos protectores de oxigénio possivelmente presentes e em seguida, se desejado, se converter de modo conhecido com um halogeneto, 5 6 7 cianeto ou azida um composto assim obtido, em que R , R , R ou 8 R é um grupo hidroxilo, após remoção prévia do grupo 5’-hidro- ' 5 6 7 xilo, num composto com a fórmula geral I, em que R , R , R ou R é -um átomo de halogéneo ou um grupo ciano ou azido, ou é | desoxigenado de modo conhecido para se obter um composto com a - 58 - k

)}

+ 5678 “ fórmula geral I, em que R , R , R' ou fr é um átomo de hidrogénio, ou converter-se de modo conhecido um composto assim obtido com a fórmula geral I, em que R^, R^, R^ ou R^ é um grupo azido num composto com a fórmula geral I, em que R , R , R' ou R° é um grupo amino, e, se desejado, converter-se de modo conhecido, um composto com a fórmula geral I, em que Y é um átomo de hidrogénio, num mono-, di- ou trifosfato e, se desejado, converter-se uma base ou ácido livre num sal adequado ou converter-se um sal obtido na base ou ácido livre correspondente. - 2§ - Processo de acordo com a reivindicação 1, ca-racterizado por se obterem nucleósidos em que R é um átomo de hidrogénio ou de halogéneo, um grupo amino ou nitro ou um radi- cal alcoxi(1-6C), R é um átomo de hidrogénio ou de halogéneo 3 5 8 ou um grupo amino, RJ é um átomo de hidrogénio e R - R° são 5 6 átomos de hidrogénio ou R e R formam em conjunto uma ligação. - 3a - Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obterem nucleósidos em que Ba é o grupo 1 2 3 5 8 (A) , R é um grupo amino ou nitro e R , RJ e R - R° são átomos „ 5 7 de hidrogénio ou R e R formam também em conjunto uma ligação. - 4a - Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obterem nucleósidos em que Ba é o grupo 12 5 8 (B) e R , ά e R3 - R são átomos de hidrogénio. _ _ Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obterem nucleósidos em que Ba é 0 grupo \ (C) e R é um átomo de hidrogénio ou um grupo amino ou nitro e - 59

ι\ R , R e R - R sg0 átomos de hidrogénio ou R5 e R' formam também em conjunto uma ligação. Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obterem nucleósidos em que Ba é o grupo Ί 2 5 8 (D) e R é um átomo de cloro ou um amino e R e R3 - R são á- tomos de hidrogénio. _ 7a _ Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obterem nucleósidos em que Ba é o grupo 1 2 5 (E) e R é um grupo amino ou um radical alcoxi(1-6C) e R e R3 Q - R são átomos de hidrogénio. - 8§ - Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obterem nucleósidos em que Ba é o grupo (F) , R é um átomo de hidrogénio ou um grupo amino e R·3 e R3 - g -R são átomos de hidrogénio. - 9ã - Processo de acordo com as reivindicações 1 ou 2, caracterizado por se obterem nucleósidos em que Ba é 0 grupo 2 (G) , R é um átomo de hidrogénio ou de cloro ou um grupo amino 3 5 8 e RJ e R - R são átomos de hidrogénio. - 10- - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica com acção antiviral, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo um composto quando preparado de a-cordo com as reivindicações 1 a 9 em associação com um veículo 60 - farmaceutieamente aceitável. - 11 a - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado por se incorporar como ingrediente activo um composto quando preparado de acordo com as reivindi-" cações 1 a 9 em associação com um veículo farmaceutieamente a- ceitável, com a condição de a) R poder também ser um átomo de halogéneo ou um grupo azido ou amino quando Ba for o grupo (B) e b) R poder também ser um átomo de cloro ou um grupo amino e 6 , R poder também ser um atomo de hidrogénio ou de cloro quando Ba for o grupo (D) e R ser um átomo de hidrogénio. A requerente reivindica a prioridade do pedido alemão apresentado em 24 de Julho de 1989, sob o ns P 39 24 424.5. Lisboa, 23 de Julho de 1990.

- 61