PT90741B - Processo para a preparacao de derivados de ciclopentano - Google Patents

Description

Descrição referente á patente de invenção de GLAXO GROUP LI LIITED, britânica, industrial e comercial, com sede em Clarges House, 6-12 Clarges Street, London W1Y 8DH, Inglaterra, (inventores: Alan David Borthwick e Keith Biggadike, residentes na Inglaterra), para PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE

DERIVADOS DE CICLOPENTANO.

Descrição

A presente invenção refere-se a novos compostos anti-virais, aos processos para a sua preparação, ás composic,Ôes farmacêuticas que os contêm e á sua utilização em medicina. Sn particular, a presente invenção refere-se a novos compostos carboxílicos análogos de nucle_ó sidos.

Os tratamentos existentes para as infecçoes virais englobam a administração de compostos químicos que são analogos de nucleósidos, por exemplo 2'-desoxi-5-iodo-uridina, 9-(2-hidroxi-etoxi-metil)guanina e 9-D-arabino-furanosil-adenina. Os compostos carbociclicos análogos de nucleósidos são também conhecidos por possuírem o efeito contra diversos virus, e nas patentes inglesas n%. 2129425A e 2179349 e em J. Med. Chem. 1984, 27, 1416-21 encontra-se a descrição de compostos carboxiclicos aná logos de nucleósidos que possuem actividade contra estirpes dos virus dos tipos I e II do herpes simplex. Todavia existe a nedessidade de encontrar compostos que possuem boa acti1 vidade anti-viral associada a baixos níveis de citotoxidade.

Descobriu-se agora que os novos compostos carbociclicos análogos de nucleósidos de fórmula (I) adiante indicada, possuem boa actividade contra virus, especialmente Herpetoviridae, ao mesmo tempo que apresentam um baixo nível de citotoxidade.

Assim, de acordo com um dos seus aspectos, a presente invenção proporciona compostos de fórmula (I)

e seus sais e solvatos, na qual

IC representa um átomo de hidrogénio ou de fluor ou um grupo hidroxilo;

R representa um átomo de fluor ou um grupo hidroxilo ou um grupo alcoxi (C^-C<) (por exemplo metoxi) ; e representa uma base de purina.

Faz-se observar que, para utilização farmacêutica, os sais anteriormente referidos serão sais fisiologicamènte aceitáveis, mas é possível encontrar utilização para outros sais, por exemplo na preparação de composto de fóimula (I) e dos seus sais fisiologicamente aceitá veis.

Os sais fisiologicamente aceitáveis adequados dos compostos de fóimula (I) englobem os sais de adição de ácido formados com ácidos orgânicos ou inêrgani2

cos (por exemplo cloridratos, bromidratos, sulfatos, fosfatos, benzoatos, naftoatos, hidroxi-naftoatos, p-tolueno-sulfonatos, metano-sulfonatos, sulfamatos, ascorbatos, tartratos, salicilatos, succinatos, lactatos, glutaratos, glutaconatos, acetatos, tricarbalilatos, citratos, fumaratos e maleatos) e sais con bases inorgânicas tais como os sais de metal alcalino (por exemplo os sais de sódio).

Deve subentender-se que a presente invenção engloba no seu âmbito os percursores biológicos dos compostos de fórmula (I) e os seus sais fisiologicamente aceitáveis com ácidos e com base. Os percursores biológicos englobam, por exemplo, esteres metabólicamente instáveis os quais se convertem in vivo nos compostos originais.

termo base de purina tal como a gora utilizado, refere-se a uma purina insubstituida ou substituída em que o ponte de ligação é a posição 9 do grupo purina. Assim, por exemplo, as bases de purina adequadas englobam adenin-9-ilo, ou mais particularmente guanin-9-ilo, 2,ó-diamino-purin-9-ilo e 2-amino-purin-9-ilo.

São geralmente preferidos os compostos de fórmula (I) na qual S representa guanin-9-ilo, θ um grupo preferido de compostos da presente invenção é constituido pelos compostos de fórmula (la).

BAD ORIGINAL ⁴

(Ia) e seus sais e solvatos, na qual

E¹ representa um átomo de hidrogénio ou de flúor e R² representa um átomo de'flúor ou um grupo hidroxilo

Os compostos da presente invenção podem exixtir em formas tautoméricas; por exemplo, os compos tos de fórmula (Ia) podem existir na forma

2 (em que R e R possuem as significações anteriormente definidas para a fórmula (Ia). Deve subentender-se que todas as formas tautoméricas dos compostos de fórmula (I) e (Ia) se encontram abrangidas no âmbito da presente invenção.

Deve subentender-se também que a presente invenção engloba os enantiómeros individuais dos compostos de fórmula (I) e (Ia) e os seus tautómeros e também as misturas total ou parcialmente racémicas de tais enantiómeros.

Sâo particulaimente preferidos os compostos de fórmula (I) na qual B representa guanin-9-ilo, R representa hidrogénio e R representa hidroxilo e os seus sais e solvatos fisiológicamente aceitáveis, especialmente o seu enantiómero l'S, 3'S, 4'S designadamente (1¹S,3'S,4'S)-2-amino-l,9-di-hidro-9-/~ 3,4-di-hidroxi-3-hidroxi-metil-l-ciclo-pentil_7-6H-purin-6-ona e seus sais e solvatos fisiológicamente aceitáveiq (por exemplo o seu cloridrato ou o seus sal de sódio).

Descobriu-se que os compostos da presente invenção sâo muito poderosos in vitro e in vivo contra estirpes dos virus tipo I e solvatos fisiológicamente aceitáveis (por exemplo o seu cloridrato ou o seu sal de sódio).

Descobriu-se que os compostos da presente invenção sâo muito poderosos in vitro e in vivo contra estirpes dos vírus tipo I e contra os vírus tipo II do herpes simplex, ao mesmo tempo que possuem um baixo nível de cotoxidade, leia-se citoxicidade_P 0 ensaio in vitro foi efectuado utilizando o teste normalizado de redução em placa ao passo que o ensaio in vivo foi efectuado nos ratos de acordo com o método descrito por Ericson et al. (1985) antimicrobial Agents-Chemotherapy 27, 753-759.

Faz-se notar que os compostos de fórmula (I) têm falta de uma ligação glicosídica a qual constitui um sitio para as clivagens química e biológica. A estabilidade contra a clivagem glicosídica constitui como é evidente, um aspecto valioso dos compostos para utilização in vivo.

Face à sua actividade antiviral, os compostos de acordo com a presente invenção e os seus sais e solvatos fisiológicamente aceitáveis são recomendados para o tratamento de uma diversidade dè doenças provocadas por vírus, particularmente infecções primárias e periódicas provocadas por Herpetoviridas nos seres humanos e em animais. Tais doenças englobam estomatites, erupções de pele, herpes Zóster, encefalites, infecções herpéticas oculares e genitais retinite e pneumonite.

Consequentemente a presente invenção proporciona composto de fórmula (I) e seus sais e solvatos fisiológicamente aceitáveis para utilização em medicina humana e veterinária, mais particularmente para utilização na terapia ou profilaxia de infecções virais, especialmente infecções provocadas por Herpetoviridae (por exemplo herpes simplex) em seres humanos ou em animais.

De acordo com outro dos seus aspectos a presente invenção proporciona a utilização de um composto de fÓnnula (i) ou de um seu sal ou solvato fisiológicamente aceitável para a preparação de um medicamento para terapia ou profilaxia de infecções virais especialmente de infecções p-r-i-méri as e periódicas provocadas por Herpetoviridae em seres humanos e em animais.

Le acordo com outro aspecto adicional a presente invenção proporciona um método para o tratamento de seres humanos ou de animais, visando o combate de virus,

especialmente de Herpetoviridae consistindo esse método na administração ao paciente de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I) ou de um seu sal ou solvato fisiológicamente aceitável.

Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser formulados por qualquer via conveniente para administração pelo que a invenção engloba no seu âmbito as composições farmacêuticas para utilização na terapia ou profilaxia de infecçÕes virais, especialmente infecçÕes provocadas por Herpetoviridae’¹ (por exemplo herpes simplex), num ser humano ou animal constituídas por um composto de fónnula (i) ou por um seu sal ou solvato fisiológicamente aceitável, em conjunto com um ou vários veículos excipiehtes fisiológicamente aceitáveis, se necessário.

Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser formulados, por exemplo, para administração oral, bocal, parenteral, tópica ou rectal.

As cápsulas e pastilhas para administração oral podem conter excipientes convencionais tais como os agentes ligantes, por exemplo, xarope, acácia, gelatina, sorbitol, goma alcântira, mucilagem de amido ou polivinil-pirrolidona; agentes de enchimento, por exemplo, lactose, açúcar, amido de milho, fosfato de cálcio ou sorbitol; lubrificantes, por exemplo estearato de magnésio, talco, polietileno-glicol ou silica; desintegradores, por exemplo, amido de batata ou glicolato de amido de sódio; ou agentes humectan. tes tais como lauril-sulfato de sódio. As pastilhas podem ser revestidas de acordo com métodos bem conhecidos na especialidade. As preparações líquidas orais podem encontrar-se na foima de, por exemplo, elixires, xaropes, emulsões, soluções ou suspensões oleosas ou aquosas, ou podem ser apresentadas na forma de um produto seco para constituição com água ou com outro veículo adequado antes de utilização. Tais prepa-

rações líquidas podem conter aditivos convencionais (como os agentes de suspensão), por exemplo, xarope de sorbitol, metil-celulose, xarope de sorbitol, xarope de açúcar/glicose, gelatina, hidroxi-metil-celulose, carboxi-metil-celulose, gel de estearato de alumínio ou gorduras comestíveis hidrogenadas; agentes emulsionantes, por exemplo, lecitina mono-oleato de sorbitano ou acácia; veículos não aquosos (os quais podem incluir óleos comestíveis), por exemplo óleo de amêndoas, óleo de coco fraccionado, ésteres oleosos propileno-glicol ou álcool etílico; ou conservantes, por exemplo £-hidroxi-benzoatos de metilo ou de propilo ou ácido sórbico. Também se pode formular os compostos na forma de supositórios, por exemplo contendo bases convencionais para supositórios tais como a manteiga de cacau e outros glicéridos.

Para administração bocal as composições podem assumir a forma de pastilhas ou de comprimidos formulados por um processo convencional.

Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser formulados para injecção e é possível apresentá-los na forma de dosagem unitária, por exemplo como ampolas, frascos, infusões de pequeno volume ou seringas previamente cheias, ou em recipientes de doses múltiplas com adição de um conservante. As composições podem assumir formas tais como soluções, suspensões ou emulsões em veículos aquosos ou não aquosos e podem conter agentes de formulação tais como anti-oxidantes, tampões, agentes antimicrobianos e/ou agentes para ajustar a toxicidade, em alternativa o ingrediente activo pode estar na forma de pó para constituição com um veículo adequado, por exemplo água esterilizada livre de pirogénio, antes de utilização. As composições sólidas secas apresentam-se em recipientes esterilizados individuais cheios com um pó aceticamente esterilizado, podendo ainda proceder-se ao enchimento dos recipientes com a solução aceticamente esterilizada e liofilizada depois.

Para administração tópica é possível formular os compostos de acordo com a presente invenção na forma de unguentos, cremes, loções, pós, pressários, aspersões, aerossois ou gotas (por exemplo gotas para os olhos ou para o nariz). Por exemplo, é possível formular unguentos e cremes com uma base aquosa ou oleosa com a adição de agentes espessantes e/ou gelificantes adequados. Essas bases podem englobar, por exemplo, água e/ou óleo tal como a parafina líquida ou um óleo vegetal, por exemplo óleo araqúidico ou óleo de ricino. Os agentes espessantes que é possível utilizar englobam a parafina macia, estearato de alumínio, álcool cetostearílico, polietileno-glicóis, cera microcristalina e cera de abelhas.

possível formular loções com uma base aquosa ou oleosa e èm geral, conterão também um ou vários agentes emulsionantes, agentes estabilizadores, agentes dispersantes, agentes de suspensão e agentes espessantes. 35 possível formular pós para aplicação externa com o auxílio' de qualquer base em pó adequada, por exemplo, talco, lactose ou amido. E possível formular gotas com uma base aquosa ou não aquosa contendo também um ou vários agentes dispersantes, agentes solubilizadores ou agentes de suspensão.

As aspersões para aerossois sâo convenientemente fornecidas em embalagens pressurizadas, com a utilização de um propulsor adequado por exemplo dicloro-difluoro-metano, tricloro-fluoro-metano, dicloro-tetrafluoro-etano, dióxido de carbono ou outro gáz adequado.

As composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção podem conter também outros ingredientes activos tais como os agentes anti-microbianos ou conservantes.

- 9 As composições podem conter entre 0,1$ e 99$ de ingredientes activo. Para administração tópica a composição conterá geralmente por exemplo, entre 0,01 e 20$, mais preferencialmente entre 0,5$ e 5$ de ingrediente activo.

Para administração tópica a dosagem diária utilizada para o tratamento de seres humanos adultos estará compreendida entre 0,1 mg e 1000 mg de preferência entre 0,5 mg e 10 mg. Todavia faz-se notar que as infecçÕes intensas da pele podem exigir a utilização de doses mais elevadas.

Para administração sistémica a dosagem diária utilizada para o tratamento de seres humanos adultos variará entre 5 mg e 5000 mg, de preferência entre 50mg e 2000 mg, podendo ser administrada em doses divididas 1 a 5 vezes por dia, por exemplo entre 50 mg e 500 mg. Nas infecçÕes mais graves é possivel administrar o composto por infusão intravenosa utilizando, por exemplo, entre 0,01 e 10 mg/Kg/hora de ingrediente activo.

Os compostos da presente invenção podem ser administrados em combinação com um ou vários agen tes terapêuticos adicionais, tais como um agente antiviral diferente.

Seguidamente faz-se a descrição dos métodos adequados para a preparação dos compostos de fórmula (I); os grupos Β, E e R possuem as significações anteriores, salvo quando especificado de outro modo. Paz-se notar que as reacções seguintes podem exigir a utilização de materiais iniciais, ou podem ser-lhes convenientemente apli cadas, que possuam grupos funcionais protegidos, sendo eventualmente necessária a desprotecção como passo intermédio ou final para proporcionar o composto desejado. A pro10 -

tecção e a desprotecção dos grupos funcionais podem ser efectaudas utilizando meios convencionais. Assim, por exemplo, é possível proteger grupos amino com um grupo seleccionado entre aralquilo (por exemplo benzilo), acilo ou arilo (por exemplo 2,4-dinitro-fenilo); a remoção subsequente do grupo de protecção pode efectuar-se, quando desejado, por hidrólise ou por hidrogenolise conforme for apropriado, utilizando condições normalizadas. E possível proteger os grupos hidroxilo utilizando qualquer grupo de protecção hidroxilo convencional por exemplo, conforme descrito em Protective Groups in Organic Chemistry, Ed. J.P. W. McOmie (Plenum Press, 1973) ou em Protective Groups in Organic Synthesis por Theodora W. Greene (John Wiley and Sons, 1981). Os exemplos de grupos de protecção hidroxilo adequados englobam grupos seleccionados entre alquilo (por exemplo metilo, t-butilo ou metoxi-metilo), aralquilo (por exemplo benzilo, difenil-metilo ou trifenil-metilo), grupos heterociclicos tais como tetra-hidropiranilo, acilo (por exemplo acetilo ou benzoilo) e grupos sililo tais como trialquil-sililo (por exemplo t-butil-dimetil-sililo).

Os grupos hidroxilo nas posições 3' θ 5' podem ser protegidos em conjunto com um único grupo de protecção, tal como um grupo di-siloxanilo (por exemplo um grupo tetra-alquil-di-siloxanilo, por exemplo, 1,1,3,3-tetra-isopropil-di-silox-1,3-di-ilo) ouum grupo benzilideno. Os grupos de protecção hidroxilo podem ser removidos utilizando técnicas convencionais. Assim, por exemplo, é possível remover os grupos alquilo, sililo, acilo e heterociclicos por salvolise, por exemplo,por hidrólise sob condições ácidas ou alcalinas. De modo idêntico é possível remover grupos aralquilo tais como trifenil-metilo por solvolise, por exemplo, por hidrólise sob condições ácidas. E possível clivar grupos aralquilo, tais como o benzilo, por hidrogenolise na presença de um catalisador de metal nobre tal como o paládio-em-carvão. Também é possível remover convenientementè os grupos sililo, incluindo os grupos di-siloxa11 -

nilo, utilizando uma fonte de iSes fluoreto tal como o fluoreto de tetra-n-butil-amónio.

De acordo com outro aspecto da presente invenção, proporciona-se processos para a preparação de compostos de fórmula (I). Assim, um dos processos (a) para a preparação de compostos de fórmula (I) na qual B representa guanin-9-ilo, consiste em fazer reagir um composto de fórmula (II)

(em que X representa um átomo ou um grupo convertivel num grupo hidroxilo) ou um seu sal, para converter o átomo ou o grupo X num grupo hidroxilo.

X pode representar, por exemplo, um átomo ou um grupo convertivel por hidrólise num grupo hidroxilo. As possibilidades' adequadas para X englobam halogéneo (por exemplo cloro), NH₂» alcoxi-amina (por exemplo metoxi).

Faz-se observar que os compostos resultantes em que X representa um grupo hidroxilo são apenas tautómeros dos compostos de fórmula (I) na qual B representa guanin-9-ilo.

Pode efectua:r-se a hidrólise convenientemente em água ou numa mistura de água e de um solvente adequado miscível com água tal como um álcool (por exemplo metanol ou etanol), num éter (por exemplo dioxano ou tetra-hidrofurano), numa cetòna (por exemplo acetona), numa amida (por exemplo dimetil-formamida) ou num sulfóxido (por exemplo dimetil-sulfóxido). A reacção ocorre convenientemente na presença de um' ácido ou de uma base. Os ácidos adequados englobam os ácidos orgânicos (por exemplo o ácido p-tolueno-sulfónico) e os ácidos inorgânicos (por exemplo o ácido clorídrico, o ácido nítrico ou o ácido sulfúrico). Bn alguns casos é possivel utilizar o ácido também como solven4 te de reacção, especialmente quando se utiliza o ácido clorídrico. As bases adequadas englobam as bases inorgânicas (por exemplo hidróxidos ou carbonatos de metal alcalino, tais como o hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, carbonato de sódio ou carbonato de potássio). A hidrólise efectua-se convenientemente a uma temperatura compreendida entre -10°C e +15°C, por exemplo entre + 50°C e +120°C.

Quando X na fórmula (II) representar alcoxi-amina (por exemplo CH^ONH-) pode efectuar-se também a conversão de x num grupo hidroxilo por reacção com adenosina desaminase, precedida opcionalmente pela reacção com um agente redutor adequado tal como a amálgama de alumínio.

Pode efectuar-se convenientemente a reacção num solvente etéreo (por exemplo tetra-hidrofurano) contendo também opcionalmente água e à temperatura ambiente.

Pode adicionara-se convenientemente a adenosina desanimase a uma solução de um composto de fórmula (II) na qual X representa alcòxi-amina ou o produto da reacção de redução (isto é, um composto de fónnula (II) na

- 13 qual X representa NI^) θ™ tampão fosfato (por exemplo tampão fosfato de pH 7,5).

Outro processo (B) para a preparação de compostos de fórmula (I) na qual R representa um grupo hidroxilo consiste em fazer reagir um composto de fSimula (II)

(em que R³ possui a significação indicada para na fórmula . 7 4 4 (I) ou R representa um grupo OR e R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo de protecção hidroxilo e B' representa um grupo B ou representa uma base de purina protegida) ou um seu sal, sob condições oxidantes, fazendo-se depois a remoção de qualquer grupos de protecção presentes.

Pode efectuar-se convenientemente a oxidação utilizando qualquer agente oxidante adequado tal como o tetróxido de ósmio num solvente apropriado (por exemplo piridina). Pode efectuar-se convenientemente a oxidação a qualquer temperatura conveniente, de preferência à temperatura ambiente.

A reacção de oxidação proporciona os compostos desejados de fórmula (I) e seus derivados protegidos em conjunto com compostos de fórmula (IV)

definidas), ou um seu sal. 32 possível separar os compostos de fórmula (IV) e os desejados compostos isoméricos de fórmula’ (I) e seus derivados protegidos utilizando técnicas de separação convencionais. Assim, por exemplo, é possível efectuar a separação utilizando cromatografia, por exemplo cromatografia sobre gel de sílica ou cromatografia de camada preliminar.

Outro processo (C) para a preparaçâo de compostos de fórmula (I) na qual R representa um átomo de fluor consiste em fazer reagir um composto de fórmula (V)

(em que R representa um átomo de hidrogénio ou um átomo

O / ΓΊ O de flúor ou um grupo OR e R , R' e R representam grupos de protecção hidroxilo adequados) ou um seu sal, com um agente de fluoraçâo seguindo-se a remoção dos grupos de protecção presentes.

- 15 Os agentes de fluoraçâo adequados en globam trifluoreto de dietril-amino-enxofre (DAST) ou dietil- (2-cloro-l,l, 2-t rifluoro- etil) amina. A reacção efectua -se convenientemente num solvente inerte tal como um hidro carboneto halogenado, por exemplo dicloro-metano ou clorofórmio ou um éter, por exemplo tetra-hidrofurano, e a uma temperatura compreendida entre, por exemplo, -70°C e 0°C. fin alternativa pode efectuar-se a reacção utilizando ácido fluorídrico em piridina ou trietil-amina.

Os compostos de fórmula (V) sâo preparados convenientemente a partir dos compostos de fórmula (IV) utilizando meios adequados de protecção de grupos hidroxilo.

Outro processo (D) para a preparação de compostos de fórmula (I) na qual R representa hidroxi, consiste em fazer reagir um composto de fórmula (VI)

6 7 (em que Iv , R e R possuem as significações anteriormente definidas e 1 representa um grupo ou átomo removível adequado) ou um seu sal, com um derivado de purina B'H (em que B' possui as significações anteriores) ou com um seu sal.

pode representar, por exemplo, um q grupo removível convencional tal como um grupo OSOgR em que R^ representa um grupo alquilo (por exemplo metilo), halo-alquilo (por exemplo trifluoro-metilo)ou arilo (por exemplo tolilo).

- 16 A reacção de deslocamento pode efectuar-se convenientemente num solvente adequado tal como um sulfóxido (por exemplo dimetil-sulfóxido) e preferencialmen te na presença de uma base tal como um carbonato de metal alcalino (por exemplo carbonato de potássio). A reacção pode efectuar-se, por exemplo, a uma temperatura compreendida entre 20°C e 150°C.

Outro processo (E) para a preparação de compostos de fóimula (I) consiste em fazer-se a remoção de um ou vários grupos de protecção amino e/ou hidroxilo a partir de um derivado adequadamente protegido de um composto de fórmula (i). Os grupos de protecção adequados e as condiçSes para a sua remoção sâo familiares a um especialis· ta quimico, considerando-se no entanto englobados os grupos e condiçSes anteriormente descritos.

possível preparar os compostos de fórmula (II) a partir dos compostos de fórmula (VII).

X ,10.

ção) fazendo a oxidação sob as mesmas condiçSes do processo

- 17 (C) (na preparação de compostos de fórmula (II) na qual R² representa fluor) e procedendo posteriormente à remoção de quaisquer grupos de protecção presentes.

Bm alternativa é possível preparar compostos de fórmula (II) na qual R representa hidroxi, a partir de compostos de fórmula (VII) por epoxidação da ligação dupla, utilizando por exemplo um peróxido tal como hidroperóxido de tert-butilo, seguindo-se a abertura do anel epóxido normalizada a partir do diol (isto è, um composto de fórmula (II) na qual R representa hidroxi) e seguindo-se depois a remoção de quaisquer grupos de protecção presentes. Quando se utilizar o hidroperóxido de terc-butilo para se efectuar a epoxidação, essa reacção efectua-se convenientemente na presença de um catalizador de vanádio (por exemplo acetil-acetonato de vanadilo).

Também é possível preparar compostos de fórmula (II) na qual X'representa alcoxi-amina (por exemplo CHy-ONH-) a partir de compostos de fórmula (VIII).

Ί A 7 (em que R , R e R possuem as significações anteriores e R representa um grupo alquilo (por exemplo metilo), aquecendo por exemplo ao refluxo num solvente adequado tal como um álcool (por exemplo etanol)e na presença de uma base adequada (por exemplo 1,8-diazabiciclo/^-5.4«0_7> seguindo- 18 -se a remoção de quaisquer grupos de protecção presentes.

I

E possível preparar compostos de !

fórmula (VIII) a partir'de compostos de fórmula (IX)

(ix) (em que R^, R^ e R possuem as significações anteriormente definidas) de acordo com as condiçoes gerais anteriormente descritas para a preparação de compostos de fórmuLa (II) a partir de compostos de fórmula (VII) e seguindo-se depois a protecção para introduzir o grupo R .

E possível preparar compostos de fórmula (III), (VII) e (IX) a partir de um composto apro-

(X) em que R^ e R^ possuem as significações anteriormente definidas e A representa um grupo

ou (iii)

NCN

em que ΐΡ'θ, X e R possuem as significações anteriormente definidas) por iodaçâo utilizando um agente de iodaçâo adequado para proporcionar o correspondente composto de iodo (XI)

(XI) e fazendo reagir seguidamente o referido composto de iodo (XI) para proporcionar o desejado intermediário (III), (VII) (ix).

Os agentes de iodaçâo adequados englobam os iodetos de fosfónio (por exemplo iodeto de metil-trifenoxi-fosfónio) e a reacção de iodaçâo pode efectuar-se convenientemente a uma temperatura compreendida entre -70°C e +20°, num solvente adequado tal como um éter (por exemplo dimetil-formamida).

Pode efectuar-se a conversão de (XI) no alqueno apropriado aquecendo (XI), por exemplo a uma temperatura compreendida entre 50°C e 80°C, num solvente adequado tal como a piridina e opcionalmente na presença de uma base (por exemplo 1,5-diazaviciclo/^_4.3.0_/non-5-eno).

Os compostos de fórmula (X) na qual R^ representa um grupo OR^4- e A representa um grupo (i) ou (ii) ou são compostos conhecidos ou podem ser preparados por métodos análogos aos utilizados para a preparação de compostos conhecidos de fórmula (X). De modo idêntico, os compostos de fórmula (X) na qual R^ representa fluor e A representa um grupo (i) ou (ii), ou são compostos conhecidos descritos no Pedido de Patente Inglesa No 2179349, ou podem ser preparados por métodos análogos para a preparação de compostos conhecidas.

£ possível preparar compostos de fórmula (X) na qual A representa um grupo (iii) a partir de compostos de fórmula (XII)

(XII) (em que R^ possui as significações anteriormente definidas, í R^{1 1}· representa R^ e R¹^ representa um átomo de hidrogénio ί 11 ]_2 i ou R representa um átomo de hidrogénio e R representa um grupo hidroxilo) adicionado uma base adequada tal como uma amina terciária (por exemplo trietil-amina) a uma solução de um composto (XII) num solvente tal como uma amida (por exemplo dimetil-formamida) e tratando depois a mistura com um álcool ROH (em que R possui as significações anteriormente definidas), seguindo-se quando necessário a conversão do grupo 2*-a-0H para proporcionar um átomo de hidrogénio, um átomo de 2'- β -fluor ou um grupo 2'- β-OH conforme adiante descrito.

R possível preparar compostos de fórmula (XII) a partir de compostos de fórmula (XIII)

te definidas) por reacção com um brometo de cianogénio num solvente tal como um álcool (por exemplo)metanol) a uma temperatura reduzida, por exemplo entre -50°C e 0°C, seguindo-se quando desejado a conversão do grupo 2'-a-0H (quando presente) num átomo de hidrogénio, num átomo 2'-^-fluor ou num grupo 2'-p-OH conforme adiante descrito.

R possível preparar compostos de fórmula (XIII) a partir de conhecido composto de aristomicina, por oxidação, utilizando por exemplo um perácido tal como o ácido m-cloro-perbenzóico. Se desejado é possível converter o grupo 2'-a-0H da aristeromicina num átomo de hidrogénio, num átomo 2'-(>-fláor ou num grupo 2'-/-0H, antes ou depois da oxidação, utilzando processos adiante descritos.

JS possível preparar compostos de fórmula (VI) (por exemplo, no caso em que L representa OSOgR^) a partir de compostos de fórmula (XIV)

(XIV)

6 7 (em que R , R e R possuem as significações anteriormente definidas), por exemplo, por sulfonaçâo com um halogeneto

Q Q de sulfonilo adequado R SC^Hal (em que R^ possui as significações anteriormente definidas e Hal representa um átomo de halogéneo, por exemplo cloro).

E possível preparar compostos de fórrnula (XIV) na qual R representa um átomo de flúor a partir de compostos de fórmula (XV)

γ em que R possui as significações anteriormente definidas) ou a partir de um seu derivado por um grupo hidroxilo, por fluoraçâo utilizando um agente de fluoraçâo adequado tal como o difluoreto ácido de potássio seguindo-se a protecção do grupo hidroxilo livre na posição 3'· E possivel preparar os compostos de fórmula (XIV) na qual R representa um gruO po 0R° a partir de compostos de fórmula (XV), por hidrólise seguindo-se quando necessário a inversão do grupo 2'-OH

utilizando o método adiante descrito e tratando depois o ι grupo 2'-p> -OH com um grupo de protecção.

possível preparar compostos de fórmula (XV) a partir de compostos de fórlula (XVI)

(XVI)

η (em que R possui as significações anteriormente definidas) por oxidação utilizando um agdnte oxidante peróxido adequado tal como o bidroperóxido de t-butilo na presença de um catalizador de vanádio (por exemplo acetil-acetonato de vanadilo).

fórmula (XVI) a partir possivel preparar compostos de de compostos de fórmula (XVII)

R⁷OCH_r

(XVII) sob condições de hidroxilação adequadas.

possivel preparar compostos de fórmula (XVII) a partir de ciclopentadieno por alquilação, uti7 7 lizando um reagente R CKXH^Hal (em que R e ffiL possuem as significações anteriormente definidas).

Faz-se notar que os compostos insubstituídos na posição 2' ou substituídos na posição 2' por um átomo 2'-/^-fluor ou por um grupo 2β -hidroxilo podem ser preparados em qualquer fase adequada na sequência da reacção global, a partir dos compostos correspondentes que contenham um substituinte 2'-a-hidroxi. A conversão de um composto 2'-a-hidroxi num composto 2'-^-fluor pode ser efectuada utilizando as condiçSes gerais descritas para o processo (C) anterior. A substituição de um substituinte 2’-a-hidroxi por um átomo de hidrogénio pode ser efectuada por conversão do grupo hidroxilo num grupo removível por redução homolitica) e reduzindo depois o composto anteriormente referido utilizando, por exemplo, um hidreto de alquil-estanho (por exemplo hidréto de tri-n-butil-estanho) na presença de um radical iniciador tal como um peróxido,

2,2’-azo-bis(2-metil-propionitrilo) ou luz. Os grupos removíveis adequados englobam - OC (=S) OR'¹'q_Ue ^13 _rep_re_ senta alquilo (C^-Cg), arilo tal como o fenilo, heteroarilo tal como imidazol ou alquil(C^-Cg)-arilo tal como p-tolilo). Pode efectuar-se a conversão do grupo hidroxilo em -OC(=S)OR^^ utilizando por exemplo, halo-tionoformatos de arilo tal como o cloro-tionocarbonato de fenilo na presença de uma base adequada tal como uma amina (por exemplo piridina ou 4-dimetil-amino-piridina) e num solvente como um hidrocarboneto halogenado (por exemplo dicloro-metano). Pode efectuar-se a conversão de um composto 2'-a-hidroxi num composto 2'-hidroxi por conversão de grupo hidroxilo num grupo 1 removíveladequado tal como anteriormente definido e deslocando depois o grupocom um nucleófilo de oxigénio com inversão de configuração. Esta substituição nucleofílica é uma reacção muito boa conhecida e as condiçSes adequadas' para efectuar a desejada conversão sâo familiares a um especialista químico.

Como é evidnete deve verificat-se se é necessário proteger outros grupos hidroxilo presentes no materiaL de partida antes de reacção na posição 2'. Os

grupos de protecção adequados e as condiçoes para a sua remoção são familiares a um especialista químico, mas englobam os grupos e condições anteriormente referidos.

Quando for necessário um composto ou um intermediário da presente invenção em que R representçúm grupo alcoxi (C^-Cg) (por exemplo metoxi), é possível preparar esses compostos a partir dos correspondentes com2 postos em que R representa um grupo hidroxilo utilizando condições áe esterificaçâo normalizadas. De novo se afirma que é necessário verificar-se no material de partida estão presentes outros grupos hidroxilo que seja necessário proteger antes da reacção de esterificaçâo.

Raz-se notar que os compostos preparados a partir do material de partida de aristeromicina possuem centros quiral. Quando se pretender um enantiómero especifico de fórmula (I), é possível prepará-lo a partir de um intermediário quiral adequado ou, em alternativa, por resolução do correspondente racemato de fórmula (I) utilizando processos convencionais.

E possível preparar sais inorgânicos de compostos da presente invenção fazendo reagir a correspondente base livre com uma base adequada (por exemplo um hidróxido tal como o hidróxido de sódio) num solvente adequado (por exemplo água).

E possível preparar sais de adição í de ácido de compostos da'presente invenção tratando a correspondentê base livre com um ácido adequado, utilizando processos convencionais. E possível preparar sais de adição de ácido fisiológicamente aceitáveis fazendo regair a base livre de um composto de fórmula'(I) com um ácido adequado na presença de um solvente tal como um éster (por exemplo acetato de etilo) ou de um álcool (por exemplo metanol, etanol ou isopropanol).

Também é possível preparar sais fisiológicamente aceitáveis a partir de outros sais, incluindo outros sais fisiológicamente aceitáveis, de compostos de fórmula (I), utilizando processos de permuta iónica convencionais.

Faz-se observar que muitos dos intermediários agora descritos são compostos novos (por exemplo os compostos de fórmula (II), (IV), (V), (VI), (VIII), (VX) e (XVI) e deve subentender-se que todos esses compostos novos constituem aspectos adicionais da presente invenção.

As preparações e Exemplos seguintes ilustram a presente invenção, mas faz-se notar que não pretendem impor qualquer limitação. Todas as temperaturas estão em °C.

Inteimediário 1 (-)(la,2 ρ ,3a,4a)-4-(2-amino-6-metoxi-9H-purin-9-il)-3-fluor-2-hidroxi-ciclopentano-metanoi

Adicionou-se (-)(la,2 ,3a,4a)-4-(2-ami no- 6-cloro-9H-purin-9-il)-3-fluor-2-hidroxi-ciclopentano-metanol¹ (2 g) a uma solução de sódio (457 mg) em metanol (25 ml) e agitou-se a mistura a 50°C durante 1,5 horas. Arrefeceu-se a solução e neutralizou-se com resina (DOWEX S0Wx8 (H⁺;6,25 g). Removeu-se a resina por filtração e evaporou-se o filtrado para proporcionar uma espuma. Purificou-se este material por cromatografia em gel de sílica (Merck Kieselgel 60) utilizando como solvente de eluição acetato de etilo/etanol 5í1 para proporcionar, após trituração com o metanol, o composto em epígrafe na forma de cristais brancos (1,37 g5· RMN (BíSO-dg) 5 7·9Ο(1Η) 6.47(2H), 5.43(1H), 4.7-5.O(3H), 4.o(lH), 3-95(3H), 3-52 (2H), 2c32(lH) e 1.95-2.15(2H) \ Intennediário 15 na Patente Inglesa No. 2179349· • '4 .

Intermediário 2 (-)(la,2^ ,3p ,5^ )-3-(2-amino-6-metoxi-9H-purin-9-il)-5((terc-butil-dimetil-silil)oxi)metil_7-3-fluoro-ciclopentanol

Adicionou-se o intermediário 1 (3,56g) a uma solução agitada de cloreto de terc-butil-dimetil-sililo (l,98g) e de imidazol (3,26 g) em N, N-dimetil-f ormamida seca (20 ml). Decorrida 1 hora repartiu-se a mistura entre água (100 ml) e acetato de etilo (100 ml). Separou-se a fase orgânica, combinou-se com um segundo extracto de acetato de etilo (25 ml), lavou-se com água (3 x 50 ml), secou-se e evaporou-se para proporcionàr um sólido cor de creme. A trituração deste material com éter proporcionou o composto em epígrafe na forma de cristais brancos (4,l8g), p.f. 87-9O°C. ^ΣΗ IO (MSO-dg) 7.79 (1H), 6.39(2H), 5.39 (1H), 4.6-4.9(2H), 3.92(1H), 3-88(3H), 3.63(2H), 2.24(1H) e 1.97(2H).

Intermediário 3 (-)(1·a,2'a,3’ ,4à)-9-/~4-/~( (terc-butil-dimetil-silil)oxi)metil_7~2-fluoro-3-trifenil-metoxi-l-ciclopentil_7-6-metoxi-2-trifenil-metil-amino-9H-purina

Durante 3 dias aqueceu-se ao refluxo em dicloro-metano (250 ml) uma mistura do Intermediário 2 (2.91 ê), de cloreto de trifrnil-metilo (5.91g) e de crivos moleculares pulverizados (4 A, 30 g). Depois adicionou-se mais cloreto de trifenil-metilo (1,77 g) e aqueceu-se a mistura ao refluxo durante mais 24 horas e a seguir filtrou-se. A evaporação do filtrado proporcionou uma espuma amarela que se purificou por cromatografia em gel de sílica (Merck Kieselgel 60) utilizando inicilmente como solvente de eluiçào éter/gasolina 2:1 e finalmente éter para proporcionar o composto em epígrafe na forma de uma espuma amarelo ténue (5.21 g). ή max( etanol) 258.4nm (E^144), 285nm (Έ^123) ¹H EbíN (UíSQ-dg, 60°) 7.6(1H), 7.1-7.5( 30H), 6.98(1H),

4.57(1H), 3.9(1H), 3.77(1H), 3.65(3H), 3.45-3.65(2H), 2.5 (1H), 2.15(1H), 1.86(1H), O.83(9H), -0,02(3H) e -O.O6(3H).

Intennediário 4 (-)(la,2 ρ ,3a,4a)-3-fluoro-4-(6-metoxi-2-trifenil-metil-amino-9H-purin-9-il)-2-trifenil-metoxi-ciclopentano-metanol

Adicionou-se fluoreto de tetra-n-butil-amónio em tetra-hidrofurano (0,2 ml) a uma solução do Intermediário 3 (175 mg) no mesmo solvente (2 ml). Decorridos 30 minutos evaporou-se o solvente e repartiu-se o residuo entre água (5 ml) e acetato de etilo (5 ml). Separou-se a fase orgânica, lavou-se com água (5 ml), secou-se e evaporou-se para proporcionar uma espuma amarela. A purificação por cromatografia em gel de sílica (Merck Kieselgel 60) utilizando como solvente de eluição acetato de etilo, seguida pela recristalizaçâo a partir de éter proporcionou o composto em epígrafe na forma de cristais incolores (84 mg), p.f. 220-222°C. ¹H EMN (DMS0-d₆, 60°C), 7.64 (lH),

7.1-7.5(3OH), 7.02(lH), 4.4-4.7(2H), 3.86(1H), 3.64(3H), 3.62(1H), 3.15-3.45(2H), 2.5(1H), 2.16(1H) e 1.82(1H).

Intermediário 5 (í)(l’a, 2'a, 3' j^!),4'a)-9-/^-2-fluoro-4-iodo-metil-3-trifenil-metoxi-l-ciclopentil_7-6-metoxi-2-trifenil-metil-amino-9H-purina

Adicionou-se iodeto de metil-trifenoxi-fosfónio (3.73 g) a uma solução agitada e arrefecida (-65°C)'de Intermediário 4 (4,3 g) em tetra-hidrofurano seco (100 ml). Deixou-se a mistura aquecer até 0°C durante 1,5 horas e depois adicionou-se metanol (0,25 ml) e evaporou-se a solução para proporcionar uma espuma cor de la- 29 -

ranja que se repartiu entre água (75 ml) e éter (125 ml). Separou-se a fase orgânica, lavou-se com água (40 ml), sej cou-de com água (40 ml), secou-se e evaporou-se e purificou-se o resíduo por cromatografia em gel de silica (Merck Kieselgel 60) utilizando como solvente de eluição acetato de etilo/hexano 1:1. Obteve-se o composto em epígrafe na forma de uma espuma cor de creme (4,8 g) da qual se procedeu à cristalização de uma amostra a partir de acetato de ί etilo para proporcionar cristais amarelo ténue, p.f. 230 5 - 233°C. ^ΣΗ RMN (UdSC^dg) £ 7.72(1H), 7.15-7.55(30H), 7.04 (1H), 4.64(1H), 4.32(1H), 3-78(lH), 3.66(3H), 2.9-3·15(2Η) e 1.78(1H).

Intermediário 6

1' , . .. —~ - 1 ‘

H :

ί (-)(1'a, 2'a, 3' , 4'a)-9-Z^_2-fluoro-4-iodo-metil-3-trifenil-metoxi-l-ciclopentil_7-6-metoxi-2-trifenil-metil-amino-9H-purina

Adicionou-se iodeto de metil-trifenoxi-fosfónio (3-73 g) a uma solução agitada e arrefecida i (-65°C) de Intermediário 4 (4.3 g) em tetra-hidrofurano seco (100 ml). Deixou-se a mistura aquecer até 0°C durante

1,5 horas e depois adicionou-se metanol (0,25 ml) e evaporou-se a solução para proporcionar uma espuma cor de laranja que se repartir entre água (75 ml) e éter (125 ml). Separou-se a fase orgânica, lavou-se com água (40 ml), secou-se e evaporou-se e purificou-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica (Merck Kieselgel 60) utilizando como ! solvente de eluição acetato de etilo/hexano 1:1. Obteve-se o composto em epígrafe na forma de uma espuma cor de creme 4.8g), da qual se procedeu à cristalização de uma amostra a partir de acetato de etilo para proporcionar cristais amarelo ténue, p.f. 23O-233°C. ¹H RMN (DMSO-dg) J 7.72(1H) 7.15-7.55(3OH), 7.04(lH), 4.64(1H), 4.32(1H), 3-78(lH), 3.66(3H), 2.9-3.15(2H), 2.15-2.55(2H) e 1.78(1H).

- 30 Intermediário 7 (-) (la, 2a, 3 β ,4 β ) e (la,2^,3a,4a)-3-fluoro-l-hidroxi-4-(6-metoxi-2-trifenil-metil-amino-9H-purin-9-il)-2-trifenil-metoxi-ciclopentano-metanol

Adicionou-se uma solução de tetróxido de ósmio (100 mg) em piridina (1 ml) auma solução do Intermediário 6 (300 mg) no mesmo solvente (2 ml). Decorridas

1,5 horas adicionou-se uma solução de meta-bissulfito de sódio (300 mg) em água (1 ml) e agitou-se a mistura durante mais 18 horas. Decantou-se o sohrenadante cor de laranja e repartiu-se entre água (5 ml) e acetato de etilo (5 ml) Separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se e evaporou-se para proporcionar uma mistura’ dos isómeros em epígrafe na forma de espuma branca (325 mg). A cromatografia em camada preliminar (sílica de Whatman) utilizando para o processamento clorofónhio/etanol 15:1 proporcionou o isómero la, 2a, 3ft , 4,de menor polaridade com aspecto de vidro incolor, ¹H M (UdSO-dg) 60°) 7.52(1H), 7.1-7.5(3OH), 6.94(1H), 4.88(1H), 4.4-4.75(2H), 4.13(1H), 3-97 (IH), 3.45(3H), 3.1-3.3(2H), 2.32(1H) e 1.93(1H); e o isómero la, 2 , 3a, 4a de maior polaridade na forma de cristais brancos, p.f. 201-203°C. EMN (DMSO-d_g) 60°) f 7.63 (IH), 7.1-7.5(3OH), 6.97(1H), 4.9(1H), 4.6l(lH), 4.15(1H) 3.87(1H), 3.8-3.9(2H), 3·45(3Η), 3·15(1Η), 2.4-2.5(1H) e 2.17(1H).

Inteiraediário 8 (-)(la,2a,3 f? ,4f) ) e (la, 2 tf 3a, 4a)-3-fInoro-4-/“6-metόχι- 2- trif enil-met il- amino- 9H-purin-9-il_/- 2- trif enil-me toxi- 1- trif enil-m et oxi-metil-ciclopentanol

Dina mistura na proporção aproximada de 6:4 dos isómeros do Intermediário 7 (622 mg) foi tratada com cloreto de trifenil-metilo (272 mg) em dicloro-metano (30 ml) contendo crivos moleculares pulverizados (4A, 3g) durante 3 dias. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtra do para proporcionar uma mistura dos isómeros em epígrafe na forma de uma espuma branca (830 mg). A separação por cromatografia em gel de silica (Merck Kieselgel) utilizando como solvente de eluição éter/hexano 4:1 proporcionou o isó mero la, 2 β , 3a, 4a de menor polaridade na forma de uma espuma branca À_max (etanol) 258.2nm (E^130), 286.4nm (E^118), ^XH RMN (EMSO-dg, 60°) 7.1-7.5(46H), 6.8l(lH),

4.8-5.05(1Η), 4.91(1H), 4.33(1H), 3.92(1H), 3.45(3H), 2.93, 3.08(2H) e 1.9-2.25(2H) ; e o isómero la, 2a, , 4,3,de maior polaridade também na foimà de uma espuma branca, > _max(etanol·) 259.2nm (E^113), 286.6nm (κ[ΐ07), RMN (mSO-dg, 60°) í 7.63(1H), 7.1-7.6(45H), 6.47(1H), 5.2(1H), 4.51(1H), 4.16(1H), 3.88(1H), 3.5,3.6l(2H), 3.39Í3H) e

2.2-2.5(2H).

Intermediário 9 (-)(la,2a,3,4,¹) )-4/^2-amino-6-met oxi-9H-purin-9-il_7-3-fluoro-l-hidroxi-metil-ciclopentano-1,2-diol

Adicionou-se água (1,5 ml) a uma solução do isómero la do Inteimediário 8 (473 mg) em ácido acético glacial (6 ml) e agitou-se' a mistura a 80°C durante 2 horas. A evaporação do solvente e a trituração do resíduo com éter proporcionaram o composto em epígrafe na forma de um sólido cristalino castanho-amarelado (131 mg), p.f. 238-242°C. RMN (WlSO-dg) 7.9(1H), 6.48(2H), 5.46(1H),

4.6-5.2(4H), 4.16(1H), 3·97(3Η), 3·3-3·5(2Η), 2.5(1H) e 2.O6(1H).

Intermediário 10

(-)(1¹a, 2'a, 3’ β , 4' (> )-9-/~2,4-difluoro-3-trif enil-meto) xi-4-trifenil-metoxi-metil-l-ciclopentil_/-6-metoxi-2-trifenil-metil-amino-9H-purina ij ji Durante 5 minutos adicionou-se gota [í a gota uma solução do isómero la, 2 3a, 4a do Intermedij ário 8 (156 mg) em dicloro-metano (2 ml) a uma solução agitada e arrefecida com gelo de trifluoreto de dietil-aminoί -enxofre (0,04 ml) no mesmo solvente (1,5 ml). Decorridos mais 15 minutos adicionou-se uma solução aquosa de bicarbonato de sódio (2 ml) arrefecida com gelo e agitou-se a mistura durante 30 minutos. Separou-se a fase orgânica, secou-se e evaporou-se a fase orgânica, secou-se e evaporou-se para proporcionar uma espuma. A purificação por cromatografia de camada preliminar (silica de Whatman) utilizando para o processamento acetato de etilo/gasolina 1:1 proporcionou o composto em epígrafe na forma de uma espuma branca (65 mg). ¹H RMN (IKSO-dg, 60°) $ 7.58(1H), 7.1-7.45(45H), 6.83(1H), 4.9(1H), 4.38(1H), 3.89(1H), 3.56(3H), 3·32(1Η), .

! 2.72(1H) e 2.25-2.55(2H), ¹⁹R RMN (UãSO-dg, 60°) -188 e

-164.5.

Inteiro ediário 11

ARISTEIOiICIK-1-OXIDO

Adicionou-se ácido m-cloro-perbenzóico (72,3 g) a uma solução de aristomicina (56 g) em água/ /dioxano 1:1 (3.36 litros) e agitou-se a mistura no escuro durante 20 horas. Depois filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para proporcionar um sólido branco que se

I lavou sucessivamente com éter e coip metanol para proporcionar o composto em epígrafe na foima de um sólido branco (49.4 g). A recristalização a partir de metanol proporcionou cristais brancos p.f. ' 145-149°C. ESíN (DTdSO-dg) 5 1.71, ,2.2.26(2H), 2.04(lH), 3.39-3.57(2H), 3·84(1Η), 4.62-4.8(3H) 5.0l(lH), 8.2(2H), 8.4(1H) e 8.6l(lH).

Intermediário 12 (IR,2R,3S,4R)-2,3-di-hidroxi-4-/~2-imino-l,2-di-hidro/~l,2,47 -oxadiazoIo-/~3,2-i 7purin-7-il 7ciclopentano-metanol

Durante 15 minutos adicionou-se uma solução de brometo de cianogéneo (2,02 g) em metanol (100 ml) a uma suspensão agitada e arrefecida (-20°C) do Intermediário 11 (5 g) no mesmo solvente (300 ml) mantendo-se a temperatura interna inferior a -10°C. Deixou-se a mistura aquecer até 10°C durante 3 horas e depois evaporou-se o solvente sob pressão reduzida a uma temperatura inferior a 30°C. Triturou-se com éter o resíduo sólido para proporcionar o composto em epígrafe na forma de'um sólido branco (6.39 g)· A recristalizaçâo a partir de metanol/acetato de etilo proporcionou cristais brancos, p.f. l8O-l84°C (decomposição). ^ΧΗ M (HúSO-d₆) i 1.74,2.33(2H), 2.1(1H), 3.4-3.6(2H), 3.87(1H), 4.36(1H), 4.5-6.3Í3H), 4.94(1H), 8.99 (1H) e 1O.O6(1H).

Intermediário 13 (6aR, 8R,9S,9aR)-hexa-hidro-8-/~6-ciano-imino-l,6-di-hidro-l-metoxi-9H-purin-9-il_7-2,2,4,4-tetraquis(l-metil-etil) ciclopenta/~f 7~1»3»9,2,4-trioxadissilocin-9-ol

Adicionou-se trietil-amina (1 ml) a uma solução agitada do Intermediário 12 (1 g) em N,N-dimetil-formamida (10 ml) e agitou-se a mistura durante 20 minutos. Depois adicionou-se iodeto de metilo (0,5 ml) e manteve-se a agitação durante mais 3 horas. A seguir arrefeceu-se com gelo a solução e introduziu-se imidazol (0,7 g) e

1,3-dicloro-l,l, 3, 3-tetra-isopropil-dissiloxano (0,9 ial) θ manteve-se a agitação durante mais 45 minutos. Depois repartiu-se a mistura entre água e acetato de etilo. Separou-se a fase orgânica, lavou-se com água, secou-se e evaporou-se

' e purificou-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica (Merck Kieselgel 60)' utilizando como solvente de eluição acetato de etilo, para proporcionar o composto em epígrafe na forma de uma espuma branca (0,76 g). A cristalização a partir de éter proporcionou cristais brancos, p.f. 206-210°C. ^XH RMN (DMSO-dg) £ l.O5(28H), 1.7(1H), 2.19(2H), 3.75,3.92 (2H), 4.1(3H), 4.3(2H), 4.68(1H), 4.90 (1H), 8.44(1H) e 8.80 (1H).

Intermediário 14

fenoxi-tiocarboxilato de (6aR, 8R, 9S,9aR)-hexa-hidro-8/”6-ciano-imino-l, 6-di-hidro-l-metoxi-9H-purin-9-H_7-2,2,

4,4-tetraquis(l-metil-etil)ciclopenta/-f_J7-l, 3, 5, 2,4-trioxadissilocin-9-ol

Gota a gota adicionou-se uma solução de cloro-tionocarbonato de fenilo (1,4 g) em dicloro-metano (10 ml) a uma solução agitada e arrefecida com gelo/água do Intermediário 13 (3 g) θ de 4-dimetil-amino-piridina (l,3g) em dicloro-metano (20 ml). Decorridas 2 horas dissolveu com dicloro-metano (10 ml) a solução resultante e lavou-se sucessivamente com ácido clorídrico 1M e com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. Secou-se a fase orgânica e evaporou-se para proporcionar uma espuma que se purificou por cromatografia sobre gel de sílica (Merck Kieselgel 60) num gradiente de misturas de acetato de etilo e de gasolina (1:2 a 1:0). A evaporação das fracções apropriadas proporcionou o composto em epígrafe na forma de uma espuma branca (2,9 g). etanol) 226.3nm (E^ 313), 286.6nm (E^296); ¹H B.IN (CDC1₃) 8.12 (1H), 8.02(lH), 7.48-7.36(2H),

7.34-7.26(1Η), 7.04-7.14(1H), 5.9Ο-5·98(1Η), 4.97(1H), 4.9-4.8(1H), 4.22(3H), 4.12-3.8θ(2H), 2.42-2.26(2H), 2.20-2.03 (1H), 1.20-0.96(28H).

- 35 Intermediário 15 ί

I (6aR,8R,9aS)-hexa-hidro-8-/~6-ciano-imino-l,6-di-hidro-l-metoxi-9H-purin-9-il_7-2,2,4,4-tetraquis(l-metil-etil) ciclopenta/^f 7-1,3,5,2,4-trioxadissilocina_

Fez-se passar azoto através de uma solução do Intermediário 14 (2,8 g) de 2,2'-azobis-(2-metil-propionitrilo) (132'mg) e de hidreto de tri-n-butil-estanho (2,2 g) em tolueno seco (30 ml). Decorrida 1 hora agitou-se a solução sob uma atmosfera de azoto e aqueceu-se em banho de óleo a 76°C. Nas 5 horas seguintes adicionou-se diversas porções de 2,2'-azobis-(2-metil-propionitrilo) (90 mg) e de hidreto de tri-n-butil-estanho (1,1 g). Após o arrefecimento diluiu-se com acetato de etilo (20 ml) a solução resultante e lavou-se sucessivamente com água, com ácido clorídrico IM, com água, com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e com uma solução salina. Secou-se a fase orgânica e evaporou-se para proporcionar um xarope. A purificação por cromatografia sobre gel de sílica (Merck Kieselgel 60) num gradiente de acetato de etilo e de gasolina (1:2 até 2:1) proporcionou o composto em epígrafe na forma de uma espuma branca (1,2 g). (etanol) 223.4nm (eHo5) η η HIQ^S -L

286nm (Ep50, ^XH RMN (CDCl^ £ 8.16(1H), 7.97(1H), 5.O2(1H), 5.02(1Η), 4.75(1H), 4.22(3H), 4.09-3·70(2Η), 2.44-1.9( 5H),

1.2-0.9(28H).

Intermediário 16 (IR,2S,4R)-4-/~6-ciano-amino-l,6-di-hidro-1-metoxi-9H-purin-9-il 7-2-hidroxi-ciclopentano-metanol

Adicionou-se ácido clorídrico 3M (50 ml) a uma solução agitada do Intermediário 15 (20 g) em 1,4-dioxano (150 ml). Decorridas 2,5 horas adicionou-se ácido clorídrico 3M (10 ml). Decorridas mais 2,5 horas adicionou-se bicarbonato de sódio sólido para aumentar o pH para 6-7.

Evaporou-se a mistura resultante para proporcionar uma massa a qual se secou azeotropicamente com etanol. A purificação por cromatografia sobre gel de sílica (Merck Kieselgel 60) num gradiente de clorofórmio e de metanol (10:1 até 1:1) proporcionou o composto'em epígrafe na forma de um'sólido branco (4.4 g). ^λmax (água) 223.8nm (E^571), 288.0 (E^679), ¹H (DMSQ-dg) δ 8.88(1H), 8.49(1H), 5.O3(1H), 4.87(1H), 4.1 (4H), 3.60-3.38(2H), 2.45-1.94(4H), 1.81-1.65(1H).

Intermediário 17 (IS, 2S, 4R)-4-/~~6-ciano-imino-l, 6-di-hidro-l-metoxi-9H-purin-9-il 7-2-iodo-metil-ciclopentanol_ ί Gota a gota adicionou-se uma solução de iodeto de metil-trifenoxi-fosfónio (205 mg) em N,N-dimetil-formamida (0,5 ml) a uma solução agitada e arrefecida com gelo/água do Intermediário 16 (92 mg) em Ν,Ν-dimetili -fomamida (1 ml). Decorridos 15 minutos removeu-se o banho de arrefecimento e agitou-se a solução à temperatura ambiente. Decorridas 3 horas evaporou-se a solução resultante para proporcionar um xarope. A purificação por cromatografia sobre gel de sílica (Merck Kieselgel 60) num gradiente de clorofórmio e de metanol (40:1 até 20:1) proporcionou o composto em epígrafe na forma de um sólido amarelo ténue (71 mg). X _max (etanol) 228.4nm (E^37l), 286.8nm E^466), ^ΤΗ RMN (DMSO-dg) <t) 8.9O(1H, 8.48(1H), 5.19(1H), 5.07(lH), 4.1O(3H), 4.04(lH), 3.6-3.3(2H), 2.5-2.04(4H), 1.84-1.66(1H).

; Inteimediário 18 (IS,4R)-4-/^_6-ciano-imino-l,6-di-hidro-l-metoxi-9H-purin-9-il 7-2-metileno-ciclopentanol_

Aqueceu-se em banho de óleo a 70°C uma solução agitada do Intermediário 17 (560 mg) em piridina (15 ml). Decorridas 1,5 horas evaporou-se a mistura àe reacção para proporcionar um xarope castanho. A purificação por í; cromatografia sobre gel de silica (Merck Kieselgel 60) num gradiente de clorofórmio e de metanol (20:1 atfe 2:1) propor^!! cionou o composto em epígrafe na forma de um sólido branco (200 mg). >_max (etanol) 228.4nm (E^526), 287.2ran (E^677) ( ¹H EMN (DMSO-dg) Ç 8.9O(1H), 8.48(1H), 5.2O-5.O3(4H), 4.57 ' (1H), 4.1O(3H), 3·08-2.70(2H), 2.43-2.07(2H).

Intermediário 19 í

! (l'R, 4’S)-6-ciano-imino-l, 6-di-hidro-l-metoxi-9-(3-inetileηο-4-trifenil-metoxi-l-ciclopentil)-9H-purina í

í

Aqueceu-se ao refluxo uma mistura i

i agitada do Intermediário 18 (50 mg), de cloreto de trifenili -metilo (97 mg) e de crivos moleculares de 4A (500 mg) em

1,2-dicloro-etano (5 ml). Decorridas 21 horas filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para proporcionar um xarope. A purificação por cromatografia sobre gel se sílica i (Merck Kieselgel 60) com eluição com urna mistura de cloroj fórmio e de metanol (40:1) proporcionou o composto em epígrafe na forma de uma espuma amarela (80 mg) \ _v (etanol) “- -, _η max

286.4nm (1/383), Η EMN (DMSO-dg) b 8.8l(lH), 8.23(1H), 7.56-7.2í(15H), 5.33(1H), 5.16(1H), 4.96(1H), 4.69(1H), 4.07(3H), 3.04-2.55(2H), 1.52-1.12(2H).

Intermediário 20 (IS,2S,4S)-e (IR,2S,4S)-4-(6-ciano-imino-l,6-di-hidro-l -metoxi-9H-purin-9-il)-2-trifenil-metoxi-l-trifenil-metoxiI -metil-ciciopentanol_ i

Adicionou-se uma solução de tetróxido de ósmio (550 mg) em piridina (4 ml) a uma solução agitada do Intermediário 19 (1,05 g) em piridina (10 ml). Decorridas 13/4 horas, adicionou-se uma solução de meta-bissulfito

de sódio (1.13 g) em água (2 ml). Decorridas mais 1 l/4 horas adicionou-se meta-bissulfito de sódio (1 g) e água (5 ml). Decorridas mais 1,5 horas decantòu-se a solução negra resultante e evaporou-se para proporcionar um depósito que se repartiu entre água e acetato de etilo. Extraiu-se a fase aquosa com acetato de etilo e lavou-se com água as fases orgânicas combinadas. A secagem e a evaporação proporcionaram uma espuma amarela ténue que se dissolveu em 1,2-dicloro-etano (30 ml). Adicionou-se cloreto de trifenil-metilo (1,1 g) e crivos moleculares de 4A pulverizados (11 g) e agitou-se a mistura e aqueceu-se ao refluxo. Decorridos 30 minutos adicionou-se trietil-amina (0,5 ml) e filtrou-se a mistura. Evaporou-se o filtrado para proporcionar um xarope que se purificou por cromatografia sobre gel de silica (Merck Kieselgel 60) fazendo-se a eluição com uma mistura de acetato de etilo e de éter do petróleo (1:2).

A evaporação das fracçSes apropriadas proporcionou o composto em epígrafe (1S,2S,4S) na forma de uma espuma (831 mg), ¹H B1N (DMSO-dg) 8.87(1H), 8.27(1H), 7.58-7.16(30H), 5.44(1H), 4.75(1H), 4.17-4.04(4H), 3«45(2H), 2.67-2.53(1H) 2.13-2.O1(1H), 1.35-1.11(2H); e o composto em epígrafe (1R,2S,4S) na foima de uma espuma (135 mg). .^H RMN (EMSO-dg) í 8.62(1H), 7.98(1H), 7.58-7.15(30H), 5.11-4.95(2H),

4.18-4.05 (4H), 3.22-3.O5(2H)2.O8-1.97(2H), 1.18-1.2(2H).

Intermediário 21 (13,2S,4S)-4-(2-amino-6-metoxi-amino-9H-purin-9-il)-2-trifenil-metoxi-l-trifenil-metoxi-metil-ciclopentanol

Aqueceu-se ao refluxo uma mistura agitada de l,8-diazabiciclo/^-5.4.0_7undec-7-eno (29 mg) e do isómero (1S,2S,4S) do Intermediário 20 (130 mg) em etanol. Decorridas 2,5 horas adicionou-se 1,8-diazabiciclo /~5.4.0_7undec-7-eno (5 mg). Decorrida mais 1 hora evaporou-se a mistura para proporcionar um xarope que se purificou por cromatografia sobre gel de sílica (Merck Kieselgel 60) fazendo-se a eluição con uma mistura de clorofórmio e de metanol (40:1). A evaporação das fracções apropriadas proporcionou o composto em titulo na forma de uma espuma (63mg) ¹H (DMSO-dg) £ 9.7Κ1Η), 7.57-7.15(3OH), 6.79(1H), 6.36(2H) 4.95(1H), 4.72-4.5δ(1Η), 3·97(1Η), 3.7Κ3Η), 3.3-3.25(lH), 3.0-2.93(1H), 2.0-1.64(4H)

Intermediário 22 (1'S, 3’S,4'S)-6-ciano-imino-l,ô-di-hidro-9-/^-3-fluoro-4-trifenil-metoxi-3-trifenil-metoxi-metil-l-ciclopentil-1-metoxi-9H-purina

Durante 9 minutos adicionou-se a uma solução arrefecida com gelo/água do isómero (1R,2S,4S) do Intermediário 20 (800 mg) em dicloro-metano (10 ml) a uma solução agitada e arrefecida com gelo/água de trifluoreto de dietil-amino-enxofre (320 mg) em dicloro-metano (10 ml). Decorridos 19 minutos adicionou-se trifluoreto de dietil-amino-enxofre (60 mg) e decorridos mais 3 minutos adicionou-se uma solução aquosa, arrefecida com gelo/água, saturada de bicarbonato de sódio (10 ml). Decorrida mais 1 hora fez-se a separação das fases aquosas e extraiu-se a fase aquosa eoip dicloro-metano. Fez-se a secagem das fases orgânicas combinadas e evaporou-se para proporcionar uma espuma que se purificou por cromatografia para proporcionar o composto em epígrafe na forma de uma espuma branca (l67mg) ¹H RMN (IMSO-dg) £> 8.62(1H), 8.15(1H), 7.45-7.15(30H), 5.23 -5.O7(1H), 4.34-4.l6(lH), 4.08(3H), 3.6O(1H), ca 3·35(1Η),

2.97-2.61(2H), 2.25-1.83(4H).

Intermediário 23 (DS,3¹S, 4'S)-9-/~3-fluoro-4-trifenil-metoxi-3-trifenilmetoxi-metil-l-ciclopentil 7-N^-metoxi-9H-purina-2,6-diamina

-40 Aqueceu-se ao refluxo uma solução agitada de 1,8-diazabiciclo //~5.4.0_7undec-7-eno (45 mg) e do Intermediário 22 (160 mg) em etanol (5 ml). Decorridas 2 l/4 evaporou-se a solução resultante para proporcionar um xarope. A purificação por cromatografia sobre gel de sílica (Merck Kieselgel 60) com eluição com uma mistura de clorofórmio e de metanol (80:1) proporcionou 0 composto em epígrafe na forma de uma espuma branca (I63 mg). HMN (HúSO-dg) S 9.73(1H), 7.45-7.15(3OH), 7.14(1H), 6.34(2H), 4.83-4.68(1Η), 4.23-4.Ο5(1Η), 3.7Κ3Η), 3.6l-3.48(lH), 3.O5-2.91(1H), 2.70-2.5(1H), 2.1-1.83(1H), 1.7-1.52(1H), 1.13-O.99(1H).

Intemediário 24 (3S,4S,62)-6-/^-6-ciano-amino-l,6-di-hidro-1-metoxi-9H-purina—9-il 7-4-l-oxaspiro/~2.4 7beptan-4-ol_

Adicionou-se uma solução aquosa de hidrpperóxido de t-butilo (70%) (4 ml) a dicloro-metano (6,8 ml). Secou-se sobre sulfato de magnésio a mistura resultante. Adicionou-se a solução seca (4.1 ml) a uma solução agitada do Intermediário 18 (2.5g) e de acetil-acetonato de vanadilo (23 mg) èm dicloro-metano (80 ml). Depois aqueceu-se a mistura ao refluxo. Nas 3,5 horas seguintes adicionou-se mais solução de hidroperóxido de t-butilo e de acetil-acetonato de vanadilo. Decorrida 1 hora filtrou-se a mistura e adicionou-se ao filtrado agitado uma pequena quantidade de sulfito de sódio. Filtrou-se a mistura e evaporou-se cuidadosamente o filtrado para proporcionar um xarope, o qual se adicionou a éter dietilico agitado (200 ml).

A filtração proporcionou 0 composto em epígrafe na forna de um sólido amarelo (2.59 g)· λ _maX (etanol) 228.Onm (1^436), 287.Onm (£^536) ; ^ΧΗ HvIN (LMSO-dg) £ 8.99(1H),

8.5O(1H), 5.29(1H), 5.0l(lH), 4.2-4.1(lH), 4.1(3H), 2.92 (2H), 2.5-2.17(4H).

Intermediário 25 éster (IS,2S,4S)-4-(6-ciano-imino-l,6-di-hidro-l-metoxi-9H-pu.rin-9-il)-l, 2-di-hidroxi-ciclopent-l-ilmetílico do ácido benzóico

Adicionou-se 1,4,7,10,13-penta-oxa-ciclopentadecano (2,9 g) a uma mistura agitada do Intermediário 24 (1,99 g) θ de benzoato de sódio 2,86 g) em dimetil-formamida (35 ml). Decorridas 15 horas adicionou-se dimetil-formaimda (25 ml). Decorridas mais 48 horas filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para proporcionar um xarope castanho o qual se combinou com material idêntico de outras experiências e purificou-se por cromatografia sobre gel de silica (Merck Kieselgel 60) fazendo-se a eluição com mistura de clorofórmuo e de metanol. A combinação das fracções apropriadas proporcionou o composto em epigrafe na forma de espuma (801 mg). _maX (etanol) 225.4nm (E^515), 286.Onm (E^409); ¹H EMN (IMSO-d ) b 8.84(1H), 8.80 (1H), 8.12(2H), 7.67 (1H), 7.60-7-52(2H), 5.24-5.10(lH), 4.9Κ1Η), 4.49(1H), 4.09(3H), 2.38-2.24(4H).

Intermediário 26 (IS, 2S, 4S)-4-(2-amino-6-metoxi-amino-9H-purin-9-11 )-l-hidroxi-metil-ciclopentan-1,2-diol

Adicionou-se 1,8-diazabiciclo/^-5.4.O_/ undec-7-eno (0,81 ml) a uma solução agitada do Intermediário 25 (1 g) em etanol (30 ml). Aqueceu-se ao refluxo a solução resultante. Decorridas 1 hora evaporou-se a solução para proporcionar um xarope castanho, o qual nâo proporcionou um sólido ao ser triturado com éter dietílico. Depois purificou-se o produto bruto por sucessivas cromatgrafias de fase inversa sobre gel de silica (Merck liChroprep RP-8) fazendo-se a eluição com misturas de acetonitrilo e de água

e sobre gel de sílica (Merck Kieselgel 60) fazendo-se a eluiçâo com misturas de clorofórmio/metanol. A combinação das fracções apropriadas proporcionou o composto em epigraΊ fe na forma de uma espuma branca (311 mg). Η RMN (HvíSO-dg) £ 9.74(1H), 7.58(1H), 6.50(2H), 4.9-4.7(3H), 4.3-4.1(2H)

3.5-3.3(2H), 2.15-1.95(4H).

Exemplo 1 (-)(1’a,2'a,3'^,4’^ )-2-amino-l,9-di-hidro-9-/~2-fluoro-3,4-di-hidroxi-4-(hidroxi-metil)ciclopentil 7-6H-purin-6-ona

Aqueceu-se o intermediário 9 (120 mg) a 85°C em ácido cloridrico 2N (4,5 ml) durante 1 hora. Evaporou-se a solução com o resíduo, fez-se uma suspensão em água (2 ml) e ajustou-se o pH para 7 com uma solução de hidróxido de sódio IN. Procedeu-se à recolha dos cristais cor de creme do composto em epígrafe resultantes, lavou-se com água e secou-se in vacuo (86 mg), p.f. 229-232°C. (DMSO-d₆) £ 1O.61(1H), 7.72(1H), 6.5(2H), 5.44(1H), 5.05 (IH), 4.98(1H), 4.85(1H), 4.62(1H), 4.15(1H), 3.4(2H), 3,5 (IH) e 2.04(lH).

Exemplo 2 (ί) (1' a, 2 ' a, 3¹ ,4’ )-2-amino-l,9-di-hidro-9-/^_2,4-difluoro-3-hidroxi-4-(hidroxi-metil)ciclopentil 7-6H-purin-6-ona

Adicionou-se água (0,75 ml) a uma solução do Intermediário 10 (174 mg)'em ácido acético glacial (3 ml) e agitou-se a mistura a 80°C durante 2 horas. A evaporação do solvente e a trituração do residuo com éter proporcionou um sólido cor de creme. Dissolveu-se este material em ávido cloridrico 2N (2 ml) e aqueceu-se a solução a 80°C durante 2 horas e depois evaporou-se. Dissolveu-se o resíduo em água (1 ml) e ajustou-se o pH para 6 com hidróxido de sódio IN e evaporou-se a solução para propor43 -

cionar um sólido cor de creme. A purificação por cromatografia líquida de pressão elevada preliminar proporcionou o composto em epígrafe na forma de um sólido cristalino branco (27 mg), p.f. 228-23O°C. R/IN (ffiSO-dg) 5 10.8(lH), 7.74(1H), 6.55(2H), 5.78(1H), 5.27(1H), 5.O5(1H), 4.95(1H), 4.32(1H), 3.55-3.75(2H) e 2.35-2.8(2H).

Exemplo 3 (1' S, 3' S, 4' S)-2-amino-l, g-di-hidro-S-/^-3,4-di-hidroxi-3-hidroxi-metil-l-ciclopentiol /-6H-purin-6-ona_

Aqueceu-se a 85°C em banho de óleo uma solução agitada do Intermediário 21 (90 mg) numa mistura de ácido acético glacial e de água (4:1; 2 ml). Decorridos 30 minutos evaporou-se a solução resultante e triturou-se o sólido residual com éter dietílico. Removeu-se por decantação a solução etérea. Dissolveu-se o sólido branco residual em ácido clorídrico 3M (3 ml) e aqueceu-se ao refluxo. Decorridas 3 horas evaporou-se a solução para proporcionar um xarope que se secou azeotropicamente com etanol. Dissolveu-se em água (1,5 ml) o sólido resultante e ajustou-se o pH para 6-7 com uma solução aquosa de hidroxido de sódio 31,1. A purificação por cromatografia líquida de elevado'rendimento preliminar proporcionou o composto em epígrafe na forma de um sólido branco (15 mg). *Ή RMN (DMSO-dg) 10.55 (1H), 7.79(1H), 6.42(2H), 4.91(1H), 4.82-4.73(2H), 4.25(1H) 4.2(1H), 3.43-3.25(2H), 2.15-1.9δ(4Η) λ (água) 252.4nm líl cUX· (EJ424).

!

i Exemplo 4 (1’S, 3¹S,4¹S)-2-smino-9-/~3-fluoro-4-hidroxi-3-hidroxi-metil-l-ciclopentil 7~4,9-di-hidro-6H-purin-6-ona

Aqueceu-se a 80°C em banho de óleo uma solução agitada do Intermediário 23 (160 mg) numa mistura

de ácido acético glacial e de água (4:1; 3 ml). Decorridas 4 horas evaporou-se a solução resultante para proporcionar um sólido o qual se secou azeotropicamente com etanol. Triturou-se com éter dietílico o sólido resultante proporcionando um sólido amarelo. Aqueceu-se este sólido ao refluxo em ácido clorídrico 3M. Decorridas 3 horas’ filtrou-se a mistura resultante e evaporou-se o filtrado para proporcionar uma goma que se secou azeotropicamente com etanol para proporcionar um sólido castanho. A trituração com éter dietílico proporcionou um sólido castanho. A trituração com éter dietílico proporcionou um sólido castanho claro. A trituração com éter dietílico proporcionou um sólido castanho claro que se dissolveu em água (2 ml) e ajustou o pH para 6-7 com uma solução aquosa de hidróxido de sódio IM. A purificação por cromatografia liquida de elevado'rendimento preliminar proporcionou o composto em epígrafe ha forma de um sólido hranco (11 mg). EMN (LMSO-dg) β 10.6l(H), 7.78(1H), 6.44(2H), 5.07(lH), 5.O2(1H), 4.94(1H), 4.46-4.26 (1H), 3.54-3.49(2H), 2.47-2.07(4H) ; ¹⁹P W (DSMO-d₆+D₂O) í> -166.6. \ _Y (água) 252.4nm (1^596).

m gLa -L

Exemplo 5 (1¹S,3¹S,4’S)-2-amino-l,9-di-hidrO-9-/^- 3,4-di-hidroxi-3-hidroxi-metil-l-ciclopentil 7-6H-purin-6-ona (a) Agitou-se e aqueceu-se ao refluxo uma solução do Intermediário 26 (330 mg) em ácido clorídrico 3D.T (10 ml). Decorridos 45 minutos adicionou-se mais'ácido clorídrico 3M (5ml) Decorridas 3,5 horas evaporou-se a solução resultante para proporcionar um sólido branco que se dissolveu em água (3,5 ml). Ajustou-se o pH para 6-7 com hidrogeno-carbonato de sódio. Filtrou-se a mistura resultante para proporcionar um resíduo o qual se lavou sucessivamente com água (1,5 ml) e com acetona aquosa. Procedeu-se à evaporação das soluçoes lavadas para proporcionar um sólido, o qual se purificou por cromatografia de fase inversa sobre gel de sílica (Merck EiChroprep RP-8). A evaporação das fracções apropriadas e a combinação com o resíduo anteriormente referido proporcionaram o composto em epígrafe na forma de um sólido branco (199 mg). > _max (água) 253.2nm (E^392) ; ^ΧΗ RMN (MSO-d₆) b 1O.6(1H), 7.79 (1H), 6.46(2H), 4.92(1H), 4.78-4.25 3H), 4.21(1H), 3.45-3.3(2H), 2.15-1.97(4H).

(b) Adicionou-se amalgama de alumínio £~preparada a partir de chapa de alumínio (50 mg)7/ a uma solução agitada do Intemediário 26 (30 mg) em tetra-hidrofurano (5 ml)e água (1 ml). Decorridas 16 horas filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para proporcionar uma película que se purificou por cromatografia sobre gel de silica (Merck Kieselgel 60). A uma solução agitada do produto (1,5 mg) em tampão fosfato de pH 6 (0,2 ml) adicionou-se uma solução de adenosina desaminase (a partir da mucosa de vitela). Aqueceu-se a 37°C a solução resultante. Decorrida 1 hora a cromatografia de camada fina indicou que se tinha foimado o composto em epígrafe.

(c) Adicionou-se uma solução de adenosina desaminase (a partir de mucosa intestinal de vitela) a uma solução agitada do Intermediário 26 (0,5 mg) em tampão fosfato de pH (0,1 ml) a 37°C. Decorridas 24 horas a cromatografia de camada fina demonstrou que se tinha formado o composto em epígrafe.

Exemplo 6

Composições Eaimacêuticas (l) Cremes Tópicos

a) Ingrediente activo

b) Butileno-glicol

c) Glicerol

d) Álcool cetostearilico

e) Bonostearina auto-emulsionante

f) Polioxietileno (2) éter oleílico

g) Cera de abelhas

h) Clorocresol

-0,25

15,0

2.5 10,0

1.5 5,0 3,0 0,1

Água destilada até

100,0

Aqueceu-se a água a 70°C e dissolveu-se o clorocresol (h). Fundou-se (d), (e), (f) e (g) em con junto, aquecendo-se tudo a 70°C. Adicionou-se o produto fundido à água com agitação. Fez-se a aspersão de (a) numa mistura de'(b) e de (c) e adicionou-se a dispersão (aquecida a 55°C) à mistura volumosa. Arrefeceu-se para 35°C com agitação.

(2) Unguento Ocular

Ingrediente activo Parafina liquida Parafina màcia branca

3,0

25,0 até 100,0

Fundiu-se a parafina macia branca aque

com agitação, à parafina macia branca fundida. Arrefeceu-se para 35°C com agitação.

(3) Gotas Oculares

Ingrediente activo Cloreto de benzalcónio Cloreto de sódio Água para injecções

0,5

0,01

0,85 até 100,0

Lissolveu-se em água o cloreto de benzalcónio, o cloreto de sódio e o ingrediente activo. Filtrou-se a solução, recolheu-se o filtrado aceticaraente e procedeu-se ao enchimento (aceticamente) de recipientes esterilizados adequados de gotas para os olhos.

(4a) Pastilha Oral

	mg/pastilha	ΔΔ
Sal cloridrato do equivalente a 100 mg ingrediente activo de ingrediente activo	40,4
Lactose	100 mg	37,0
Amido de milho	50	18,5
Polivinil-pirrolidona	2	0,75
Glicolato de amido de sódio	7	2,6
Estearato de magNésio	2	0,75

Crivou-se o ingrediente activo e o amido de milho atrvés de um crivo de malha 40. Misturou-se o amido de milho com o ingrediente activo num misturador adequado. Preparou-se uma solução aquosa de polivinil-pirrolidona numa proporção entre 5-100 p/v. Adicionou-se esta solução aos pós misturados e continuou a misturar-se até se obter um granulado. Utilizando equipamento adequado fez-se passar o granulado através de um crivo de malha 12. Procedeu-se à secagem dos grânulos numa estufa ou num secador de leite fluido. Crivou-se os grânulos secos através de um crivo de malha 16 e misturou-se com o glicolato de amido de sódio e com o estearato de magnésio previamente crivados através de um crivo de malha 60. Comprimiu-se em moldes apropriados com uma máquina automática de preparar pastilhas. As pastilhas podem ser cobertàs com revestimento

- 48 de película polimérica aplicado segundo as técnicas ususais de revestimento com películas. 2 possível englobar um pigmento na película de revestimento.

(4b) Pastilha Oral mg/pastilha %p/v

Sal cloridrato do ingrediente	equivalente a lOOmg de ingrediente activo 36,3
Celulose microcristalina	183 mg 61,0
Glicolato de amido de sódio	6 mg 2,2
Estarato de magnésio	2 mg 0,5
	Crivou-se o ingrediente activo i

lulose microcristalina através de um crivo de malha 40. Crivou-se o glicolato de amido de sódio e o estearato de magnésio através de um crivo de malha 60. Misturou-se conjuntamente os pós num misturador adequado até se obter homogeneidade. Comprimiu-se em moldes apropriados numa máquina automática de preparar pastilhas. 2 possível cobrir as pastilhas com o revestimento polimérico fino utilizando técnicas normais de revestimento com película. 2 possível incorporar um pigmento na película de revestimento (5) Cápsula Oral

	mg/cápsula
Sal cloridrato do ingrediente activo	equivalente a lOOmg de ingrediente activo	43,6
lactose anidra	126 mg	50,4
Estearato de magnésio	2 mg	0,8
Glicolato de amido de sódio	13 mg	5,2

Crivou-se os ingredientes e misturou-se num misturador adequado. Procedeu-se ao enchimento de

cápsulas de gelatina dura de dimensões adequadas utilizando uma máquina automática para encher cápsulas.

(6) Xarope Oral

£j?/y

Sal cloridrato do ingrediente activo	equivalente a 100 mg do ingrediente activo
Sacarose	60,0
Tampão citrato	o necessário p/ pH 4,0
Hidroxibenzoato de metilo	0,15
Hidroxibenzoato de propilo	0,02
Corante (opcional)	o necessário
Aromatizante (opcional)	o necessário
Agua destilada	até 100,0
Dissolveu-se	a sacarose e os hidroxi-

benzoatos em água com aquecimento. Arrefeceu-se e dissolveu-se o tampão,ó sal cloridrato do ingrediente activo e os outros componentes. Verificou-se o pH, ajustou-se o volume. Com a solução procedeu-se ao enchimento de recipientes pa-

ra xaropes adequado.
(7) Suspensão Oral		7° PA
Ingrediente activo		5,0
Mono-oleato de sorbitano		1,0
Sacarose		60,0
Carboximetil-celulose		3,0
Hidroxibenzoato de metilo		0,15
Hidroxibenzoato de propilo		0,02
Tampão citrato	0	necessário p/ pH 7,0
Corante (opcional)	o	necessário
Aromatizante (opcional)	0	necessário
Água destilada	até 100,0

Dissolveu-se a sacarose e os hidroxibenzoatos na maior parte de água com aquecimento. Arrefeceu-se e dispersou-se a carboximetil-celulose numa parte de água com agitação. Misturou-se o xarope e o gel de carboximetil-celulose. Dissolveu-se na dispersão o mono-oleato de sorbitano e o tampão de citrato com agitação. Dispersou-se na mistura resultante o ingrediente activo fihamente dividido. Adicionou-se o corante e o aromatizante conforme necessário. Verificou-se o pH e ajustou-se quando necessário. Ajustou-se o volume da mistura e procedeu-se ao enchimento de recipientes adequados para suspensões.

(8) Pó (para aplicação externa % p/p

Ingrediente activo 3,0

Dióxido de silício 2,0

Amido de milho até 100,0

Misturou-se o ingrediente activo crivado, o dióxido de siLício e o amido de milho num misturador mecânico adequado. Com a mistura em pó resultante procedeu-se ao enchimento de recipientes adequados para pó.

Nos exemplos farmacêuticos anteriores o ingrediente activo é (l'S, 3'S, 4'S)—2-amino-l,9-di-hidro— -9-/~ 3,4-di-hidroxi-3-hidroxi-metil-l-ciclopenteil_7~6H-purin-6-ona. E possível formular outros compostos da presente invenção' por processos idênticos.

Claims (5)

1. REIVINDICAÇÕES

   - lê Processo para a preparação de um composto de fórmula I e dos seus sais e solvatos, na qual

   R¹ representa um átomo de hidrogénio ou flúor ou um grupo hidroxilo;

   R representa um átomo de flúor ou um grupo hidroxilo ou alcoxi (C^-Cg); e

   B representa uma base de purina, caracterizado por se efectuar pelo menos um dos passos seguintes:

   (A) preparação de um composto de fórmula (I) na qual B representa guanin-9-ilo, convertendo'o átomo ou grupo X num composto de fórmula (li) (em que X representa um átomo ou um grupo convertivel num 1
2. 2 grupo hidroxilo e R e R sâo como anteriormente definido) ou um seu sal num grupo hidroxilo;

   (B) preparação de um composto de fórmula (I) na qual R^ representa um grupo hidroxilo, oxidando um composto de fórmula (III)

   B' (III) (em que R^ é como anteriomente definido para R na fóimu.
3. 3
4. 4 4 la (I) ou R representa um grupo OR , R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo de protecção hidroxilo e representa um grupo B como definido anteriormente ou representa uma base purina protegida) ou um seu sal e removendo depois quaisquer grupos protectores presentes;

   (C) preparação de um composto de fórmula (I) na qual R representa um átomo de flúor, fazendo reagir um composto de fórmula (V) (em que R⁹ representa um átomo de hidrogénio ou flúor ou q r χ-t Q um grupo 0R° e R° e R' e R° representam grupos protectores hidroxilo) ou um seu sal, com um agente de fluoraçao, removendo depois os grupos protectores presentes;

   53 (D) preparação de um composto de fóimula (I) na qual R² representa um grupo hidroxilo, fazendo reagir nm composto de fóimula (VI) a£o
5. 5 6 7 (em que R , R e R serem como anteriormente definido e L representa um átomo ou grupo removível) ou um seu sal com um derivado purina B'H(em que B’ é como anteriormente defi nido) ou um seu sal, removendo depois os grupos protectores presentes;

   (E) desprotecção de um grupo amino e/ou hidroxilo de um derivado de fórmula (I) protegido.

   - 2- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por no passo A) do processo, o átomo ou grupo X ser um átomo ou grupo convertlvel por hidrólise num grupo hidroxilo.

   - 3- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por no passo A) do processo, o átomo ou grupo X ser halogéneo, alcoxilamina ou alcoxi.

   54 4Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por no passo A) do processo, o átomo ou. ghhpo X ser alcoxilamina e a conversão de X num grupo hidroxilo ser efectuado por hidrólise ou por reacção com adenosona deaminase eventualmente por reacção do composto de fórmula (II) na qual X ser alcoxilamina com um agente redutor.

   - 5- Processo de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado por B representar adenin-9-ilo, guanin-9-ilo, 2,6-diamino-purin-9-ilo ou 2- am ino-p urin-9-ilo.

   - 6- Processo de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado por B representar guanin-9-ilo.

   I

   I _ a _

   Processo de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado por B representar guanin-9-ϋο, B' representar um átomo de hidrogénio ou flúor e R representar um átomo de flúor ou um grupo hidroxilo.

   - 8- I

   Processo de acordo com qualquer das reivindicações anteriores, caracterizado por se obter (1¹ S, 3¹ S, 4' S)-2-amino-l, 9-di-hidro-9-/~3,4-di-hidroxi-355 -hidroxi-sietil-l-ciclo-pentil_J7-6H-purin-ó-ona ou um seu sal ou solvato.

   A requerente reivindica a prioridade do pedido britânico apresentado em 3 de Junho de 1988, sob o n-, 8813148.7.