KR20230133466A

KR20230133466A - 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증의 예방 또는 치료용 조성물

Info

Publication number: KR20230133466A
Application number: KR1020220030501A
Authority: KR
Inventors: 조익현; 송견지
Original assignee: 경희대학교 산학협력단; 가톨릭관동대학교산학협력단
Priority date: 2022-03-11
Filing date: 2022-03-11
Publication date: 2023-09-19
Also published as: WO2023171969A1; US20250195600A1

Abstract

본 발명은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따르면, 본 발명의 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물은 신경세포에서 항염증 활성을 가져 신경 염증을 억제하는 효과를 가지고, 미세아교세포의 (과)활성화를 억제하며, 신경 손실을 방지하고 신경세포의 증식을 촉진함으로써 신경을 보호하므로, 이를 신경 염증 질환, 신경 퇴행성 질환 또는 미세아교세포 활성화 감소 용도로 이용할 수 있다.

Description

팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증의 예방 또는 치료용 조성물{COMPOSITION FOR TREATMENT OF NEUROINFLAMMATORY DISEASE COMPRISING DAPHNE GENKWA}

본 발명은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.

퇴행성 신경질환은 뉴런의 점진적인 구조적, 기능적인 손실이 원인이 되어 발생하는 정신 기능이 퇴화되는 질환이다. 퇴행성 신경질환은 신경계 특정부위의 신경세포 퇴화가 진행되어 치매, 추체외로 이상, 소뇌이상, 감각장애, 운동 장애 등의 증상을 동반하며, 동시에 여러 부위에 이상이 나타나 증상이 복합적으로 나타날 수도 있다. 이에 대해 환자가 보이는 임상 양상에 따라 질환을 진단하는데, 증상이 다양하게 나타나고 서로 다른 질환들이 공통적인 임상 증상을 보이는 경우가 많아 진단에 어려움이 있다는 특징이 있다. 이러한 퇴행성 신경질환은 질환 징후가 서서히 나타나며, 노화와 함께 발병되는 경우가 많다. 일단 발병하면 사망까지 수년 혹은 수십년에 걸쳐 지속적으로 병이 진행되고 근본적인 치료가 어려워 사회적 부담이 매우 크며, 발병원인으로 가족력에 따른 유전적 영향이 있으나, 후천적인 요인도 중요하게 작용하는 것으로 알려져 있다. 퇴행성 신경질환은 그 임상 증상에 따라 크게 진행성 치매(알츠하이머병 등), 및 신경학적 이상(픽병 등), 자세 및 운동 이상(파킨슨병 등), 진행성 실조증, 근위축 및 위약, 감각 및 운동 장애 등으로 구분되고, 이중에서도 65세 이상에서 6.54%로 유병률이 가장 높은 퇴행성 신경질환인 알츠하이머 치매는 전체 치매의 71.3%를 차지하고, 직접적인 발병 원인으로 베타아밀로이드반(βplaque)과 신경염증(neuroinflammation) 및 신경원섬유다발(neurofibrillary tangle)로 인한 세포독성이 주목받고 있다.

미세아교세포(microglia)는 중추신경계(Central Nervous System; CNS)에서 일차적인 면역 기능을 수행하는 세포로서, 가늘고 긴 가지와 얇은 세포체의 모양을 유지하고 있다가 외부에서 유입되거나 내부에서 발생하는 독소들이 존재하게 되면 이들 독소로부터 신경세포를 보호하기 위해 굵고 짧은 가지와 둥근 모양 형태의 세포체를 가지는 활성화된 모양으로 변화하게 된다. 활성화된 미세아교세포는 정상 상태의 미세아교세포와는 달리 포식작용을 활발히 하고, 세포증식을 하며, TNF-α, IL-1β및 IL-6 등과 같은 사이토카인, 케모카인, iNOS(inducible nitric oxide synthase), COX-2(cyclooxygenase-2) 등의 유전자를 발현시켜 염증매개물질들을 생성한다. 미세아교세포의 활성화는 손상된 세포를 제거하고 외부에서 침입하는 박테리아나 바이러스로부터 신경세포를 보호하는 일면이 있으나 과도하게 발현이 증가한 iNOS에 의해 생성되는 일산화질소와 COX-2에 의해 생성되는 프로스타글란딘들, TNF-α 등은 신경세포에도 독성을 나타내기 때문에 결과적으로 미세아교세포의 활성화는 신경세포의 손상을 악화시키게 된다. 또 사멸 중인 신경세포가 방출하는 물질들이 미세아교세포의 활성을 다시 유발하게 되므로, 신경퇴행은 지속적인 악순환에 빠지게 된다. 실제로 미세아교세포의 활성이 알츠하이머병, 파킨슨병, 헌팅턴병, 루게릭병, 크로이츠펠트야콥병(Creutzfelt-Jakob Disease, CJD), 다발성 경화증 등의 다양한 퇴행성 신경질환과 관계가 있음이 보고되었다. 미세아교세포의 활성화 물질로는 박테리아의 내독소인 리포폴리사카라이드(lipopolysaccharide, LPS), 인터페론-γ, 베타아밀로이드, 갱글리오사이드 등이 있다. 미세아교세포의 활성화에 관여하는 신호 전달 체계로는 MAPK. PKC, ROS, NF-kB 등이 있다. 마이토젠 활성화 단백질(mitogen-activatied protein, MAP) kinase family는 세포내의 신호 전달 매개체로서 핵심적인 단백질이며 인체에서의 다양한 염증반응, 사멸, 세포 분화, 성장 등의 세포외 신호에 반응하여 활성화되어 전사인자를 활성화시켜 필요한 유전자들의 전사를 조절한다. 활성화된 미세아교세포에서 발현되는 iNOS와 TNF-α, COX-2 유전자들의 프로모터에는 공통적으로 NF-kB가 결합하는 부분이 있으며, NF-kB의 활성화에 의해 이들 유전자의 발현이 조절된다. 베타아밀로이드와 LPS가 미세아교 세포에서 NF-kB를 활성화시킨다는 것이 알려져 있으며, 갱글리오사이드와 트롬빈 역시 미세아교세포에서 NF-kB를 활성화시킨다. 이들 활성화물질에 의한 NF-kB의 활성화는 15분 이내에 일어나 염증성 사이토카인의 생성을 촉진한다. 미세아교세포의 활성화와 퇴행성 신경질환의 관계에 대해서는 아직 완전히 밝혀지지 않았으나, 일반적으로 미세아교세포의 활성이 퇴행성 신경질환의 발병과 진행에 관련되어 있다고 받아들여지고 있다. 그러므로 미세아교세포의 활성화를 억제하는 것은 퇴행성 신경질환의 진행을 완화시킬 수 있는 효과적인 치료법이 될 것이다.

이에, 본 발명자들은 신경 염증을 일으키는 미세아교세포와 성상아교세포가 지나치게 활성화되면 신경 손상과 기억력 퇴화를 일으키기 때문에, 천연 추출물을 사용하여 뇌신경 염증을 억제하는 방법을 실험을 통하여 확인하여 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 목적은 신경 퇴행성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 목적은 신경 퇴행성 질환에서 미세아교세포의 활성을 감소시키기 위한 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

아울러, 본 발명의 목적은 신경 염증 질환의 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 퇴행성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 퇴행성 질환에서 미세아교세포의 활성을 감소시키기 위한 약학적 조성물을 제공한다.

아울러, 본 발명은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 염증 질환의 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명에 따르면, 본 발명의 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물은 신경세포에서 항염증 활성을 가져 신경 염증을 억제하는 효과를 가지고, 미세아교세포의 (과)활성화를 억제하며, 신경 손실을 방지하고 신경세포의 증식을 촉진함으로써 신경을 보호하므로, 이를 신경 염증 질환, 신경 퇴행성 질환 또는 미세아교세포 활성화 감소 용도로 이용할 수 있다.

도 1은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물 (GFE)의 미세아교세포에서의 항-염증 효과를 확인한 도이다:
A: LPS 및/또는 GFE 처리된 HAPI 세포의 NO 생성 및 IC₅₀;
B: LPS 및/또는 GFE로 자극 24시간 후 HAPI 세포의 생존율;
C: LPS 및/또는 GFE 처리된 BV-2 세포의 NO 생성;
D: LPS 및/또는 GFE로 자극 24시간 후 BV-2 세포의 생존율;
E: LPS 및/또는 GFE 처리된 MGCs의 NO 생성; 및
F: LPS 및/또는 GFE로 자극 48시간 후 MGCs의 세포 생존율.
도 2는 MGCs에서 GFE에 의한 전-염증 억제 효과를 확인한 도이다:
A: LPS (1 ug/ml) 및/또는 GFE (10 μg/mL)를 48시간 처리 후 TNF-α 및 iNOS의 mRNA의 발현 수준;
B: TNF-α의 mRNA에 대한 정량적 그래프;
C: iNOS의 mRNA에 대한 정량적 그래프; 및
D: LPS 및/또는 GFE를 18시간 처리한 후 MGC 세포 배양 배지에서의 TNF-α 단백질의 세포외 방출 수준.
도 3은 마우스 뇌에서 GFE의 미세아교세포 과활성화 억제 효과를 확인한 도이다:
A: LPS (4 mg/kg) 및 GFE (50, 100 및 200 mg/kg) 투여 스캐줄;
B: 대조군, LPS (4 mg/kg) 투여군 및 LPS (4 mg/kg)+GFE (200 mg/kg) 투여군 마우스의 뇌에서 Iba-1 면역염색 결과 (Iba-1⁺ 단일 미세아교세포);
C: 대조군, LPS (4 mg/kg) 투여군 및 LPS (4 mg/kg)+GFE (200 mg/kg) 투여군 마우스의 뇌에서 Iba-1에 대한 상대적 형광 강도;
D: 대조군, LPS (4 mg/kg) 투여군 및 LPS (4 mg/kg)+GFE (200 mg/kg) 투여군 마우스의 뇌에서 Iba-1⁺ 세포의 면적
E: 대조군, LPS (4 mg/kg) 투여군 및 LPS (4 mg/kg)+GFE (200 mg/kg) 투여군 마우스의 뇌에서 Iba-1⁺ 세포수; 및
F: 대조군, LPS (4 mg/kg) 투여군, GFE (200μg/ml) 투여군 및 LPS (4 mg/kg)+GFE (50, 100 및 200μg/ml) 투여군 마우스의 뇌에서 IL-1b의 mRNA 수준에 대한 정량적 그래프.
도 4는 GFE의 신경 보호 효과를 마우스의 뇌 조직 및 일차 피질 신경세포에서 확인한 도이다.
A: 비히클(대조군) 투여군, LPS (4 mg/kg) 투여군 및 LPS (4 mg/kg)+GFE (200mg/kg) 투여군 마우스의 뇌 피질 영역의 시상 절편에서 NeuN에 대한 면역 염색;
B: 필드 당 NeuN-양성 세포의 상대적 수에 대한 정량적 그래프; 및
C: LPS (100 ng/ml) 및/또는 GFE (10 μg/ml)로 48시간 동안 처리된 HAPI 세포 유래 조건 배지로 처리된 마우스 태아 피질 신경세포의 CCK8 분석에 기초한 일차 피질 신경세포의 증식에 대한 정량적 그래프.
도 5는 GFE의 신경보호적 미세아교세포 기능 촉진 효과를 확인한 도이다:
A: GFE (10 μg/ml)를 48h 동안 처리하거나 처리하지 않은 MGCs에서 Arg1의 mRNA 수준;
B: GFE (10 μg/ml)를 48h 동안 처리하거나 처리하지 않은 MGCs에서 BDNF의 mRNA 수준;
C: GFE (10 μg/ml) 또는 비히클 (0.1% DMSO)을 48h 동안 처리한 일차 미세아교세포의 면역 형광 염색; 및
D: 세포 당 자이모산(zymosan) 입자 수.
도 6은 GFE의 항-신경염증 효과와 관련된 신호전달 경로를 확인한 도이다.
도 7은 본 발명의 GFE의 효과를 요약한 도이다.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 구현예로 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 구현예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 당업자에게 주지 저명한 기술 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 수 있고, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않는다. 본 발명은 후술하는 특허청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다.

또한, 본 명세서에서 사용되는 용어(terminology)들은 본 발명의 바람직한 실시예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.

일 측면에서, 본 발명은 팥꽃나무(Daphne genkwa) 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는, 신경 염증(neuroinflammation) 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

일 구현예에서, 추출물은 물, 유기용매, 아임계 유체 및 초임계 유체로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매로 추출될 수 있으며, 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올, 헥산(n-헥산), 에테르, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 메틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸아세테이트, 아세톤, 메틸렌 클로라이드, 사이클로헥산, 석유에테르(petroleum ether), 벤젠 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있고, 메탄올인 것이 가장 바람직하다.

일 구현예에서, 상기 신경 염증은 뇌신경 염증일 수 있다.

일 구현예에서, 상기 신경 염증 질환은 미세아교세포(microglia) 또는 성상아교세포(Astrocytes)의 활성이 증가된 신경 염증 질환일 수 있다.

일 구현예에서, 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물은 미세아교세포 또는 성상아교세포의 활성으로 유도된 뇌 피질의 신경 염증을 억제할 수 있다.

본 발명에서 사용된 용어 "추출물(extract)"이란 천연물로부터 분리된 활성성분 즉, 목적하는 활성을 보이는 물질을 의미한다. 상기 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 이용하는 추출과정으로 획득할수 있으며, 추출물 이의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 포함한다. 또한, 상기 추출물에는 상기 추출과정을 거친 추출물을 분획한 것도 포함된다. 추출물의 추출 방법은 특별히 제한되지 않으며, 예컨대 교반 추출, 진탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법으로 추출될 수 있다. 추출 용매로는 물, C₁-C₄의 저급 알코올과 같은 극성 용매나 헥산, 클로로 포름, 디클로로메탄 또는 에틸아세테이트와 같은 비극성 용매, 또는 이들 중 2 이상의 혼합물을 사용할 수도 있다.

본 발명의 조성물은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물 뿐 아니라 이와 동일 또는 유사한 기능을 지닌 다른 유효성분을 추가로 함유하거나, 또는 상기 성분들과 상이한 기능을 지닌 다른 유효성분을 추가로 함유함으로써, 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로 제조될 수 있다.

뇌에서 대식세포의 역할을 하는 미세아교세포는 중추신경계 내 면역반응을 조절하는 중요한 세포이다. 이들의 활성화는 약물이나 독소에 의한 이물질을 제거하고 신경 성장 인자를 분비하여 CNS의 항상성을 유지하는데 중요한 역할을 한다. 그러나, 손상된 뉴런으로부터 발생하는 신호, 외부 자극에 의해 변형된 비정상적인 형태의 단백질의 축적, 병원체의 침투와 같은 유해한 스트레스에 노출되면 미세아교세포의 활성이 지나치게 증가되어 신경세포의 손상을 유발함으로써 퇴행성 신경질환들을 일으킬 수 있다. 즉, 과도하게 활성화된 미세아교세포는 정상 상태의 미세아교세포와는 달리 포식작용을 활발히 하고, 세포증식을 하며, pro-inflammatory 사이토카인 및 염증관련 유전자를 발현시켜 염증매개 물질들을 생성한다.

미세아교세포의 활성화는 손상된 세포를 제거하고 외부에서 침입하는 박테리아나 바이러스로부터 신경세포를 보호하는 순작용을 나타내나, 성상아교세포의 활성화, 일산화질소(NO) 생성, TNF-α의 사이토카인 증가 등은 신경세포에도 독성을 나타내고 신경세포의 사멸을 가져오기 때문에 결과적으로 미세아교세포의 활성화는 신경세포의 손상을 악화시키게 되며, 퇴행성 신경질환의 원인이 된다. 따라서, 미세아교세포의 과도한 활성 억제 방법은 퇴행성 신경질환의 치료 방법이 될 수 있다.

또한, 성상아교세포(Astrocyte) 역시 정상적인 뇌활동을 유지하는데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있는데, 특히 신경세포의 시냅스 형성, 시냅스 숫자 조절, 시냅스 기능, 신경줄기세포의 신경으로의 분화에 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 그러나, 이러한 성상아교세포가 과도하게 반응성을 가지게 되면, 즉 과도한 활성화 상태를 유지하게 되면 미세아교세포를 활성화하고, 신경세포의 사멸을 초래하고 이웃한 신경세포의 사멸도 유도하는 등 퇴행성 신경질환의 원인으로 작용하게 된다. 따라서, 활성 성상아교세포의 활성화 억제 역시 퇴행성 신경질환의 새로운 치료 방법이 될 수 있다.

일 측면에서, 본 발명은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는, 신경 퇴행성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.

일 구현예에서, 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물은 팥꽃나무 꽃봉오리 메탄올 추출물일 수 있다.

일 구현예에서, 신경 퇴행성 질환은 알츠하이머 질환, 파킨슨 질환, 크로이츠펠트-야콥 질환(CJD), 할러포르텐-스파츠 질환, 헌팅톤 질환, 다체계 위축증, 치매, 프론템포랄 치매, 근위축성 측삭경화증, 척수성 근위축증, 척수소뇌 위축증(SCA), 수막뇌염, 세균성 수막뇌염, 바이러스성 수막뇌염, CNS 자가면역 장애, 다발성 경화증(MS) 및 급성 허혈성 상해로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.

일 구현예에서, 상기 신경 퇴행성 질환은 성상아교세포 또는 미세아교세포의 활성이 증가된 신경 퇴행성 질환일 수 있다.

일 측면에서, 본 발명은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 퇴행성 질환에서 미세아교세포의 활성을 감소시키기 위한 약학적 조성물에 관한 것이다.

일 구현예에서, 본 발명의 조성물은 뇌 피질에서 미세아교세포의 과활성화(hyperactivation)를 억제할 수 있다.

일 구현예에서, 본 발명의 조성물은 활성화된 미세아교세포가 신경세포에 미치는 손상에 대하여 보호 효과를 나타낼 수 있다.

일 구현예에서, 본 발명의 조성물은 전염증성(proinflammatory) 사이토카인 및 iNOS(inducible nitric oxide synthase)의 발현을 억제할 수 있다.

일 구현예에서, 본 발명의 조성물은 일산화질소(NO; nitric oxide)의 생성을 억제할 수 있다.

일 구현예에서, 본 발명의 조성물은 뇌 피질에서 IL-1β의 발현 및 방출을 감소시킬 수 있다.

본 발명에서, 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 신경 염증 질환 또는 신경 퇴행성 질환의 발생, 확산 및 재발을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 본 발명의 조성물성물의 투여로 신경 염증 질환 또는 신경 퇴행성 질환의 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다. 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 본원의 조성물이 효과가 있는 질환의 정확한 기준을 알고, 개선, 향상 및 치료된 정도를 판단할 수 있을 것이다.

본 발명에서 유효성분과 결합하여 사용된 "치료학적으로 유효한 양"이란 용어는 신경 염증 질환 또는 신경 퇴행성 질환을 예방 또는 치료하는데 유효한 양을 의미하며, 본 발명의 조성물의 치료적으로 유효한 양은 여러 요소, 예를 들면 투여방법, 목적부위, 환자의 상태 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 인체에 사용 시 투여량은 안전성 및 효율성을 함께 고려하여 적정량으로 결정되어야 한다. 동물실험을 통해 결정한 유효량으로부터 인간에 사용되는 양을 추정하는 것도 가능하다. 유효한 양의 결정시 고려할 이러한 사항은, 예를 들면 Hardman and Limbird, eds., Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed.(2001), Pergamon Press; 및 E.W. Martin ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed.(1990), Mack Publishing Co.에 기술되어있다.

본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 건강상태, 신경 염증 질환 또는 신경 퇴행성 질환의 종류, 신경 염증 질환 또는 신경 퇴행성 질환의 발병 원인, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여, 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 생물학적 제제에 통상적으로 사용되는 담체, 희석제, 부형제 또는 둘 이상의 이들의 조합을 포함할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 조성물을 생체 내 전달에 적합한 것이면 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면, Merck Index, 13th ed., Merck & Co. Inc. 에 기재된 화합물, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 이용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주이용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.

일 구현예에서, 상기 약학적 조성물은 경구형 제형, 외용제, 좌제, 멸균 주사용액 및 분무제를 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 제형일 수 있으며, 경구형 또는 주사 제형이 더욱 바람직하다.

본 발명에서 사용되는 용어, "투여"란, 임의의 적절한 방법으로 개체 또는 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 목적하는 방법에 따라 비 경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 주사 제형으로 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명의 조성물의 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 통상적으로 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 다양한 부형제, 예컨대 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 함께 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제 등이 포함된다. 본 발명의 약학적 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수도 있다. 바람직한 투여방식 및 제제는 정맥 주사제, 피하 주사제, 피내주사제, 근육 주사제, 점적 주사제 등이다. 주사제는 생리식염액, 링겔액 등의 수성 용제, 식물유, 고급 지방산 에스테르(예, 올레인산에칠 등), 알코올 류(예, 에탄올, 벤질알코올, 프로필렌글리콜, 글리세린 등) 등의 비수성 용제 등을 이용하여 제조할 수 있고, 변질 방지를 위한 안정화제(예, 아스코르빈산, 아황산수소나트륨, 피로아황산나트륨, BHA, 토코페롤, EDTA 등), 유화제, pH 조절을 위한 완충제, 미생물 발육을 저지하기 위한 보존제 (예, 질산페닐수은, 치메로살, 염화벤잘코늄, 페놀, 크레솔, 벤질알코올 등) 등의 약학적 담체를 포함할 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어, "개체"란, 상기 신경 염증 질환 또는 신경 퇴행성 질환이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함한 모든 동물을 의미하고, 본 발명의 약학적 조성물을 개체에게 투여함으로써 상기 질환들을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 기존의 치료제와 병행하여 투여될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 이때 약제학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바 납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당, 덱스트로스, 소르비톨 및 탈크 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1 중량부 내지 90 중량부 포함되는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

일 측면에서, 본 발명은 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는, 신경 염증 질환의 개선 또는 예방용 식품 조성물에 관한 것이다.

일 구현예에서, 상기 추출물은 메탄올 추출물일 수 있다.

본 발명의 조성물을 식품 조성물로 사용하는 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상의 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있으며, 유효성분의 혼합량은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 식품 조성물에는 건강기능식품이 포함될 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어 "건강기능식품"이란 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환 등의 형태로 제조 및 가공한 식품을 말한다. 여기서 '기능성'이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 통상의 기술분야에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 통상의 기술분야에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 건강기능식품의 제형 또한 건강기능식품으로 인정되는 제형이면 제한없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품용 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 건강기능식품은 신경 염증 질환 또는 신경 퇴행성 질환의 예방 또는 치료제의 효과를 증진시키기 위한 보조제로 섭취가 가능하다.

또한, 본 발명의 조성물이 사용될 수 있는 건강식품의 종류에는 제한이 없다. 아울러 본 발명의 후박 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 당업자의 선택에 따라 건강기능식품에 함유될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림 류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다.

하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 팥꽃나무 추출물 제조

팥꽃나무(Daphne genkwa)의 꽃봉오리를 정제, 건조 및 분쇄하여 미세한 분말 형태로 제조한 뒤, 분말을 70% 메탄올 (3.5 L) (분말:메탄올은 1:7 (w/w)의 비율)를 이용하여 2회 환류하였다. 이 후 여과하고 동결건조 과정을 통해 감압 농축하고, DMSO(dimethyl sulfoxide)를 용매로 사용하여 100 mg/ml의 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물 (GFE)을 제조하였다.

실시예 2. 팥꽃나무 추출물의 세포독성 및 항-염증 활성

상기 실시예 1에서 제조한 팥꽃나무 꽃봉오리 추출물 (GFE)의 신경세포에서의 항염증 효과를 확인하기 위해, 10%의 FBS (Gibco) 및 100 U/mL 페니실린/스트렙토마이신 (Gibco)을 포함하는 DMEM(Dulbecco's modified eagle medium) (Gibco, Grand Island, NY, USA)에서 37℃ 및 5% CO₂의 조건으로 배양한 일차 MGCs(mixed glial cells) 및 HAPI(highly aggressively proliferating immortalized) 세포와, 5% FBS 및 50 μg/ml의 젠타마이신을 포함하는 배지에서 37℃ 및 5% CO₂의 조건으로 배양한 BV-2 세포를 각각 GFE (200~5 μg/mL)의 존재 또는 부재하에 LPS (HAPI 및 BV-2: 100 ng/mL로 24h, MGCs: 1 ug/ml로 48h)로 자극하여 염증 반응을 유도한 뒤 세포 생존율 및 NO 생성 정도를 확인하였다 (Gupta et al., 2020). 또한, HAPI 세포의 경우 GFE의 IC₅₀(half-maximal inhibitory concentration)도 평가하고 LPS에 의해 유도된 NO 생성에 대한 GFE의 농도에 따른 효과를 측정하였다.

그 결과, HAPI 세포 (미세아교세포주)에서 GFE는 세포독성을 나타내지 않았으며, LPS에 의해 유도된 NO 생성이 GFE에 의해 현저히 억제되는 것으로 나타났으며, LPS에 의한 NO 생성을 억제하는 GFE의 최소 농도는 10 μg/ml로 나타났다 (도 1A 및 B). 또한, 다른 미세아교세포주인 BV-2 세포에서도 GFE가 LPS로 유도된 NO 생성을 현저하게 억제하는 것으로 나타났다 (도 1C 및 D). 아울러, 신경 염증의 핵심 역할을 하는 미세아교세포 및 성상아교세포(astrocytes)를 포함하는 일차 MGCs에서도 GFE는 세포독성을 나타내지 않으면서 LPS-유도된 NO 방출을 현저히 억제하는 것으로 나타났다 (도 1E 및 F).

이를 통해, 본 발명의 GFE가 항염증 효과, 특히, 신경 염증(neuroinflammation) 억제 효과를 가지는 것을 확인하였다.

실시예 3. 팥꽃나무 추출물의 항염증 기전

상기와 같은 신경 염증 억제 효과를 분자적으로 확인하기 위해, 일차 MGCs를 48시간 동안 배양하고 GFE (10㎍/ml) 및 LPS(1㎍/ml)에 24시간 노출시킨 뒤, 전염증성(proinflammatory) 사이토카인인 TNF-α 및 iNOS(inducible nitric oxide synthase)의 mRNA 발현 정도를 RT-PCR로, TNF-α 단백질의 세포외 방출을 세포 배양 배지를 이용하여 ELISA로 확인하였다.

그 결과, LPS에 의해 대조군 (vehicle)에 비해 증가된 TNF-α mRNA 수준이 GFE 처리군에서 대조군과 비슷한 수준으로 감소하였으며 (도 2A 및 B), LPS에 의해 증가한 iNOS mRNA 수준도 GFE에 의해 현저히 억제되는 것으로 나타났다 (도 2A 및 C). 아울러, LPS에 의해 유도된 TNF-α 단백질 방출 증가도 GFE 처리에 의해 현저하게 억제되는 것으로 나타났다 (도 2D).

이를 통해, GFE가 미세아교세포에서 항염증 효과를 가지는 것을 확인하였다.

실시예 4. 팥꽃나무 추출물의 in vivo 미세아교세포 과활성화(hyperactivation) 억제 효과

팥꽃나무 추출물의 미세아교세포 활성화에 미치는 영향을 LPS-유도된 신경 염증 마우스 모델을 이용하여 확인하였다. 구체적으로, 8 내지 9주령의 C57BL/6J 암컷 마우스 (Narabiotec Co., Ltd., Seoul, Republic of Korea)에 GFE (50, 100 및 200 mg/kg)를 3일 동안 경구(oral gavage) 투여하고 1일차 및 3일차 경구투여 1시간 후에 LPS (4 mg/kg)를 복강내 주사하였다 (도 3A). LPS 주사 72h 후 마우스를 이소플루란 (1.5%-2.0%) 마취하에 안락사시키고, 0.9% 식염수에 이어 4% 파라포름알데하이드 (in 0.1 M PBS, pH 7.4)로 심장 내(intracardially) 관류시켰다. 뇌를 적출하고 4% 파라포름알데하이드로 24시간 동안 후고정한 뒤, 4℃에서 순차적으로 10%, 20% 및 30% 수크로스 (in PBS)에서 동결보존하였다. 그 뒤, CM3050S freezing microtome (Leica, Wetzlar, Germany)를 이용하여 20-μm 두께의 연속 시상 절편(Serial sagittal sections)를 수득하고, 절편에서 Iba1(Ionized calcium binding adaptor molecule 1)을 Gupta et al., 2020에 기재된 방법으로 면역형광염색하였다. 또한, LPS 처리 후 IL-1β 사이토카인 방출에서 GFE의 농도-의존적 효과를 평가하기 위해, 상기 마우스의 뇌에서 IL-1b mRNA 수준을 qRT-PCR로 확인하였다.

그 결과, 마우스 뇌의 피질 영역에서 미세아교세포의 분자적 마커인 Iba-1의 면역반응성 수준이 대조군에 비해 LPS 주사군에서 현저히 향상된 것으로 나타났다 (도 3B 및 C). 또한, 대조군에 비해 LPS 투여군에서 Iba-1 양성 미세아교세포의 수 및 Iba1⁺ 세포 영역이 증가된 것으로 나타났다 (도 3D 및 E). 이와 같은 뇌 피질 내 미세아교세포의 형태학적 특징 및 증가된 Iba-1 면역반응성이 GFE 투여된 마우스에서는 현저히 억제되는 것으로 나타났으며, GFE를 투여한 마우스의 뇌에서는 대조군 마우스의 뇌 조직에서와 같이 수많은 분지된 미세아교세포(ramified microglia)를 가진 작고 둥근 체세포(soma)가 나타났다 (도 3B 내지 E). 아울러, 뇌 피질 조직에서 LPS-유도된 IL-1β 방출이 GFE 처리에 의해 농도-의존적으로 현저히 감소하는 것으로 나타났다 (도 3F).

실시예 5. 팥꽃나무 추출물의 in vivo 신경 손실 방지 및 신경세포 증식 촉진 효과

상기 실시예에서, GFE가 마우스 뇌의 신경 염증을 개선하였기 때문에, GFE가 LPS-주사한 마우스 뇌 조직에서 신경을 보호하는지를 확인하기 위해, 상기 실시예 4의 마우스의 뇌 절편을 신경 마커인 NeuN를 이용하여 면역 염색 분석하여 전두엽 피질의 신경 수를 확인하였다. 또한, 이를 세포 수준에서도 확인하기 위해, 생후 2-3일차의 마우스 뇌를 적출하고 뇌의 피질 영역을 분리한 뒤 작은 조각으로 잘라 0.025% 트립신/에틸렌-디아민-테트라아세트산에서 30분 동안 분해하였다. 이 후 조직을 분쇄하여 단일 세포 (일차 피질 신경세포)를 얻었다. 일차 피질 신경세포를 폴리 D-라이신 코팅된 세포배양 접시에 분주한 뒤 글루타민 (2 mM) 및 1% 페니실린/스트렙토마이신이 포함된 뉴로베이잘 배양액으로 배양하고, GFE (10 μg/ml) 존재 또는 부재하에 LPS (100 ng/ml)를 48 h 동안 처리한 HAPI 세포의 배양액을 처리하였다. 이 후 세포 증식 분석을 위해, 세포 계수 키트-8 (cell counting kit-8, CCK8) (Dojindo Molecular Technologies, Inc., Rockvile, MD, USA)의 CCK-8 용액 10 μl을 96-웰 플레이트의 세포 현탁액 (100 μl/웰)에 첨가한 뒤 2시간 후에 마이크로플레이트 리더기를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다.

면역 염색 분석 결과, LPS 투여군에서 NeuN-양성 세포가 대조군에 비해 현저히 감소하였으나, 이와 같은 NeuN-양성 신경세포의 손실은 LPS 및 GFE 투여군에서 현저하게 억제되는 것으로 나타났다 (도 4A 및 B). 아울러, 일차 피질 신경세포의 증식 분석 결과, 대조군에 비해 GFE 처리군에서 일차 피질 신경세포의 수가 현저히 증가한 것으로 나타났다 (도 4C).

이를 통해, GFE가 신경 보호 효과를 촉진하는 것을 확인하였다.

실시예 6. 팥꽃나무 추출물의 신경 보호 효과

GFE의 미세아교세포 (대체 활성화된)의 신경 보호 기능 효과를 확인하기 위해, 48시간 동안 GFE (10μg/ml)를 처리하거나 처리하지 않은 MGCs에서 대체 활성화된(alternatively activated) 미세아교세포 마커인 Arg1과 뉴로트로핀 인자(neurotrophic factor)인 BDNF(brain-derived neurotrophic factor)의 mRNA의 수준을 qRT-PCR로 확인하였다. 또한, 미세아교세포의 식세포 활성을 확인하기 위해, GFE (10 μg/ml)를 48시간 동안 처리 또는 처리하지 않은 일차 미세아교세포에 Zymosan-Red 입자 (10 g/ml)를 처리하고 160개의 대조군 세포 (비히클, 0.1% DMSO)와 130개의 GFE 처리 세포에서 자이모산 입자 수/세포를 정량하였다.

그 결과, Arg1의 mRNA 수준이 GFE 처리된 MGCs에서 대조군에 비해 현저히 증가하였으며 (도 5A), BDNF의 mRNA 수준도 GFE 처리군에서 현저히 증가한 것으로 나타났다 (도 5B). 아울러, GFE를 처리한 일차 미세아교세포에서 표지된 자이모산 입자의 수가 대조군에 비해 현저히 증가된 것으로 나타났다 (도 5C 및 D).

이를 통해, GFE 처리 후의 미세아교세포 활성화는 신경보호적인 미세아교세포의 기능을 유도하는 것을 확인하였다.

실시예 7. 팥꽃나무 추출물의 항-신경염증 효과 기전

GFE의 미세아교세포 활성화 효과와 관련된 신호전달 경로를 확인하기 위해, MGCs를 MAPK 억제제인 PD98059 (10μM), ULK 억제제인 SBI-0206965 (5μM) 및 NF-κ 억제제인 Bay 11-7082 (2.5μM)로 1h 동안 전처리한 후 GFE (10 μg/ml)의 존재/부재하에 LPS (1 μg/mL)로 48시간 동안 자극하고 NO 생성을 확인하였다.

그 결과, PD98059 및 Bay 11-7082로 각각 전처리된 MGC에서 GFE에 의한 NO 생성 감소 (대조군 58.5%, PD 18% 및 Bay 30.3%)가 억제된 것으로 나타나, GFE의 항염증 효과가 억제되는 것으로 나타났다 (도 6).

이를 통해, GFE가 LPS-유도된 면역 매개체의 생성을 MAPK 및 NF-κ 경로의 비활성화를 통해 억제하는 것을 확인하였다.

Claims

팥꽃나무(Daphne genkwa) 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는, 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 추출물은 물, 유기용매, 아임계 유체 및 초임계 유체로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 용매로 추출된, 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 추출물은 메탄올 추출물인, 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 미세아교세포(microglia) 또는 성상아교세포(Astrocytes)의 활성이 증가된 신경 염증 질환인, 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서, 미세아교세포 또는 성상아교세포의 활성으로 유도된 뇌 피질의 신경 염증을 억제하는, 신경 염증 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는, 신경 퇴행성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 6항에 있어서, 신경 퇴행성 질환은 알츠하이머 질환, 파킨슨 질환, 크로이츠펠트-야콥 질환(CJD), 할러포르텐-스파츠 질환, 헌팅톤 질환, 다체계 위축증, 치매, 프론템포랄 치매, 근위축성 측삭경화증, 척수성 근위축증, 척수소뇌 위축증(SCA), 수막뇌염, 세균성 수막뇌염, 바이러스성 수막뇌염, CNS 자가면역 장애, 다발성 경화증(MS) 및 급성 허혈성 상해로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인, 신경 퇴행성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
제 6항에 있어서, 성상아교세포 또는 미세아교세포의 활성이 증가된 신경 퇴행성 질환인, 신경 퇴행성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는 신경 퇴행성 질환에서 미세아교세포의 활성을 감소시키기 위한 약학적 조성물.
제 9항에 있어서, 뇌 피질에서 미세아교세포의 과활성화(hyperactivation)를 억제하는, 약학적 조성물.
제 9항에 있어서, 활성화된 미세아교세포가 신경세포에 미치는 손상에 대하여 보호 효과를 나타내는, 약학적 조성물.
제 9항에 있어서, 전염증성(proinflammatory) 사이토카인 및 iNOS(inducible nitric oxide synthase)의 발현을 억제하는, 약학적 조성물.
제 9항에 있어서, 일산화질소(NO; nitric oxide)의 생성을 억제하는, 약학적 조성물.
제 9항에 있어서, 뇌 피질에서 IL-1β의 발현 및 방출을 감소시키는, 약학적 조성물.
팥꽃나무 꽃봉오리 추출물을 유효성분으로 함유하는, 신경 염증 질환의 개선 또는 예방용 식품 조성물.