KR20160078987A - 플리나불린 및 탁산의 조합에 의한 암 치료 - Google Patents

Abstract

본 발명은 플리나불린(t-부틸-데하이드로페닐아히스틴 또는 NPI-2358) 및 탁산 화합물 (예: 도세탁셀)을 조합하여 사용하는 새로운 암 치료 방법을 제공한다. 우리의 연구는 탁산 화합물 후에 플리나불린을 주사하는 최적의 조합이 탁산 화합물 단독 처리에 비해 동물 모델에서 및 NSCLC 암 환자들에서 대 종양 집단에서 예상외의 개선된 효능을 나타냄을 보여준다. 추가로, 이러한 최적 조합에 의해, 호중구 감소증의 발현율을 모든 등급에서 저하시키고 암 환자들에서 G-CSF를 감소시키는 것을 포함하여, 탁산 화합물의 견디기 힘든 부작용을 낮추는 예상외의 안전성 효과를 달성할 수 있다.

Description

플리나불린 및 탁산의 조합에 의한 암 치료{Cancer treatment with combination of plinabulin and taxane}

본 발명은 의료 분야에 관한 것이며, 특히 암 환자를 치료함에 있어 플리나불린 및 탁산의 조합을 사용하여 암을 치료하는 방법과, 극적으로 증가하는 탁산의 안전성과 극적으로 감소하는 탁산의 부작용이라는 이의 예상외의 효과, 및 동물 모델 및 암 환자의 대(large) 종양에 대한 예상외의 효능 효과에 관한 것이다.

암은 세계적으로 사망을 초래하는 주요 원인 질환으로 심혈관계 질환을 추월하였다. 미국에서, 매년마다 백만명 이상의 사람들이 암에 걸리며, 중국에서는 3백만명 이상의 사람들이 매년 암에 걸린다. 세계적으로 신규 암 케이스의 45%는 중국에서 발생한다. 가장 널리 사용되는 암의 치료는 탁산과 같은 화학요법제이다. 그러나, 탁산의 높은 호중구감소증 발현율(30-40%에서 제3등급-제4등급)을 포함한 심한 부작용으로 인해 그 양이 사용 도중 감소되어야 하거나 심지어는 사용을 중단해야 하며, 따라서 암 환자들에서 효능이 저하되고 치료 기간이 줄어든다.

폐암은 미국, 중국, 및 세계적으로 암 관련 사망률의 주요 원인이다. 비소세포폐암(NSCLC)은 모든 폐암 케이스의 대략 80%를 차지한다. 대부분 환자는 NSCLC로 진단되는 시점에 그 질환은 이미 진행되어 있다. 진행된 NSCLC에 대한 표준으로 승인된 치료법은 일반적으로 플라틴계, 탁산계, 빈카 알킬로이드류, 페메트렉세드 및/또는 표피 성장 인자 수용체 (EGFR) 억제제들을 포함한 연속적인 일련의 화학요법제들을 포함한다.

도세탁셀은 미국, 유럽 연합, 중국 및 다수의 기타 나라들에서 NSCLC의 2차 치료제(second line treatment)로 승인된 탁산 화합물이다. 도세탁셀은 세포에서 미세소관 네트워크를 방해함으로써 작용한다. 도세탁셀은, 과민감성 반응과 유체의 체류 가능성을 최소화하기 위해 덱사메타손을 사전 투여하여, 매 3주에 1회 1시간 동안 정맥 내 주입으로 75mg/m²의 용량으로 일반적으로 투여된다. 백금계 화학요법을 이전에 투여받은 NSCLC 환자들에게 도세탁셀을 투여하는 2개의 무작위 임상시험에서, 전체 중앙 생존값(Overall survival(OS))은 5.7 개월 내지 7.5 개월이었다.

도세탁셀의 가장 일반적인 부작용은 감염, 호중구감소증, 빈혈, 열병 호중구감소증, 과민증, 혈소판감소증 등을 포함한다. 몇몇의 추가적인 화학요법제가 IIIb/IV기 NSCLC의 2차 치료제로 승인되었으나(페메트렉세드, 에롤티닙 및 제피티닙), 임상적으로 균등한 OS 결과를 가진다. 야생형 NSCLC 환자(IIIb/IV기, 2차)에서, 도데탁셀 집단(75mg/m²)의 OS는 8.2 개월이었고, 이는 몇몇 다른 약물의 OS보다 훨씬 길다. 따라서, 도세탁셀은 여전히 NSCLC 치료에서 2차의 선택 치료제이다.

암 치료가 여전히 만족스럽지 않기 때문에, 진행된 NSCLC 환자들과 같은 암 환자들에서 추가적인 항암제에 대한 분명한 충족되지 않은 의료적 요구가 있다.

발명의 요약

본 발명의 목적은 암을 치료하는 최적의 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 암, 특히 폐암을 치료 및/또는 예방하기 위한 약물의 상응하는 조합물, 키트 및 이의 용도를 제공하는 것이다.

본 발명의 제1 측면에서, 활성 성분인 탁산 화합물(a) 및 활성 성분인 플리나불린(b)를 포함하는 약제학적 조합물이 제공된다.

바람직한 구현예에서, 상기 탁산 화합물은 파클리탁셀, 도세탁셀, 및 아브락산을 포함한다.

바람직한 구현예에서, 상기 조합물은 도세탁셀 및 플리나불린으로 이루어진다.

본 발명의 제2 측면에서, 암을 치료 및/또는 예방하는 약물 제조에 있어 상기 제1 측면의 약제학적 조성물의 사용을 제공한다.

바람직한 구현예에서, 상기 암은 폐암, 결장암, 간암, 유방암, 전립선암, 및 다발성 골수종으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

본 발명의 제3 측면에서, 암을 치료 및/또는 예방하는 데 있어서 활성 성분인 탁산 (a) 및 활성 성분인 플리나불린(b)를 포함하는 조성물, 키트 또는 혼합물의 사용을 제공한다.

한 바람직한 구현예에서, 상기 암은 > 3 cm, > 5 cm, 또는 > 7cm의 종양 크기를 갖는다.

본 발명의 제4 측면에서, (i) 활성 성분으로서 탁산 화합물(a) 및 임의의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제1 약제를 함유하는 제1 용기;

(ii) 활성 성분으로서 플리나불린(b) 및 임의의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제2 약제를 함유하는 제2 용기; 및

(iii) 암을 치료 및/또는 예방하는 데 있어 활성 성분 (a)와 활성 성분 (b)를 조합하여 투여하는 것을 기재한 임의의 설명서를 함유하는 키트가 제공된다.

바람직하게는, 상기 설명서는 플리나불린이 탁산 투여 후 1 내지 24시간에 주사되어야 함을 나타낸다.

바람직하게, 단일 키트에는 바이알 당 20mg인 8개의 제1 약제와, 바이알 당 80mg인 2개의 제2 약제가 있다.

본 발명의 제5 측면에서,

활성 성분인 탁산(a);

활성 성분인 플리나불린(b); 및

약제학적 허용가능한 담체(c)를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.

하나의 바람직한 구현예에서, 활성 성분(a)와 활성 성분(b)의 비(mg:mg)는 1:100 내지 50:1이고; 바람직하게는, 1.5:1 내지 4:1이다. 하나의 바람직한 구현예에서, 활성 성분(a)와 활성 성분(b)의 총량은 조성물 중 1-99 wt%이고, 더욱 바람직하게는 5-90 wt%이다.

본 발명의 제6 측면에서, 탁산의 부작용을 감소시키기 위해 사용되는 의약의 제조에 있어서 플리나불린의 사용이 제공된다.

하나의 바람직한 구현예에서, 상기 부작용은 호중구감소증, 빈혈, 열병 호중구감소증, 혈소판감소증을 포함한다.

본 발명의 제7 측면에서, 탁산의 부작용을 감소시키는 방법이 제공되며, 상기 방법은 탁산 화합물을 투여하기 전에, 투여할 때, 또는 투여한 후에, 투여가 필요한 대상체에게 플리나불린을 투여하는 단계를 포함한다.

본 발명의 제8 측면에서, 활성 성분인 탁산(a) 및 활성 성분인 플리나불린(b)을, 치료가 필요한 포유류에게 투여하는 것을 포함하는 암의 치료 및/또는 예방 방법이 제공된다.

바람직하게는, 활성 성분 (a)를 먼저 투여하고, 이후 활성 성분 (b)를 투여한다.

본 발명의 제9 측면에서, 대상체의 암을 치료하는 데 있어 플리나불린과 도세탁셀 조합의 사용 방법이 제공되며, 여기서 플리나불린은 암을 치료함에 있어 개선된 효능을 위해서 도세탁셀 투여 후 1-24 시간 범위 이후에 주사되어야 한다.

하나의 바람직한 구현예에서, 상기 대상체는 다양한 암 유형에서 대종양(large tumor) 환자이다.

하나의 바람직한 구현예에서, 상기 대상체는, > 3 cm, 바람직하게는 > 5 cm, 및 더 바람직하게는 > 7 cm의 적어도 하나의 폐 원발성 종양 크기를 갖는 IIIb/IV기 NSCLC 환자이다.

본 발명의 제10 측면에서, 탁산의 독성을 감소시키기 위해, 특히 제3 등급 및 제4 등급의 호중구감소증을 감소시키기 위해 플리나불린과 조합된 탁산의 사용 방법이 제공된다.

모든 등급의 도세탁셀의 호중구 감소증을 감소시키고 G-CSF 사용을 감소시키는 데 있어 NSCLC 환자 치료에서 플리나불린과 도세탁셀의 사용 방법이 제공된다.

본 발명에서, 상기 및 하기(실시예에서와 같이)에서 구체적으로 기재되어 있는 기술적 특징들은 서로 조합될 수 있으며, 따라서 새롭거나 바람직한 기술적 해결을 구성할 수 있는 것으로 이해되어야 하며, 이는 본원에 구체화될 필요가 없는 것으로 이해되어야 한다.

도 1은 플리나불린의 화학식을 도시한다.
도 2는 실시예 1(NSCLC MV522 종양 모델)에서 평균 중량 변화율(%)을 도시한다. 도세탁셀에 플리나불린(NPI-2358)을 추가시 각 약물 사용 순서와는 무관하게(2시간 분리) 도세탁셀 관련 동물 체중 감소를 저하시켰다.
도 3은 실시예 1(NSCLC MV522 종양 모델)에서 평균 종양 용적을 도시한다. 플리나불린(NPI-2358)을 추가시 도세탁셀의 항종양 효과가 향상되었다. 이러한 상승 효과는 도세탁셀을 먼저 투여하고 이후 2시간에 NPI-2358을 투여한 그룹에서 더 현저하였다.
도 4a, 도 4b 및 도 4c는 실시예 2(NSCLC MV522 종양 모델)에서 평균 종양 용적을 도시한다. 도세탁셀에 추가된 플리나불린(NPI-2358)의 항종양 활성의 개선 효과는 도세탁셀을 먼저 투여하고, 이후 플리나불린을 1시간 후, 4시간 후 또는 24시간 후 투여한 그룹에서 유사하였다.
도 5는 상이한 등급의 중증도를 갖는 호중구 감소증과 같은 부작용이 NSCLC 환자에서 도세탁셀에 플리나불린을 추가한 치료에 의해 감소되었음을 도시한다. 도세탁셀에 추가된 20mg/m² 또는 30mg/m²의 용량의 플리나불린 모두는 도세탁셀의 호중구 감소증 비율을 감소시켰다(D: 도세탁셀; DN: 플리나불린 및 도세탁셀).
도 6은 NSCLC 환자들(IIIb/IV기, 적어도 1개의 이전 화학요법)에서 총 생존율의 카플란-메이에르 선(Kaplan-Meier Curve)을 도시한다. 아암 DN :30mg/m² 플리나불린 및 75 mg/m² 도세탁셀, 아암 D: 75 mg/m² 도세탁셀. OS 이점은 종양 크기가 증가함에 따라 아암 DN 대 아암 D에서 증가한다.

포괄적이고 집중적인 조사와 스크리닝를 통해, 본 발명자는 예상외로 플리나불린과 도세탁셀을 조합하여 사용함으로써 암의 새로운 치료 방법을 개발하였다. 본 실험은 NSCLC MV522 동물 모델을 사용하여 최적의 효능상 이점을 나타내었다. 본 발명자는 또한, NSCLC MV522 동물 모델 실험을 사용하여 최적의 효능 및 안전성이점을 달성하기 위한 플리나불린과 도세탁셀을 사용하는 일련의 조합 방법을 개발하였다. 이에 기초하여, 본 발명은 완성되었다.

본 발명의 따른 일 구현예에서, 최적의 조합 방법은 NSCLC MV522 동물 모델과 NSCLC 환자 모두에서 탁산(예: 도세탁솔)의 부작용을 극적으로 감소시키고, NSCLC 환자에서 G-CSF 사용을 감소시켰으며, 이는 예상외의 발견이다. 다른 VDA 화합물 중 어떤 것도 암 환자 치료에 있어서 도세탁솔과의 조합에서 이러한 효과가 발견되지 않았다.

본 발명에 따른 다른 구현예에서, 최적의 조합 방법은 독특하게 정의된 대종양 NSCLC 환자들과 대종양의 NSCLC MV522 동물 모델에서 OS 연장 상 가장 큰 효능상 이점을 달성하였으며, 이는 새롭고 예상외의 발견이다. 다른 VDA나 항혈관신생제 중 어떤 것도 위와 같이 독특하게 정의된 대종양 NSCLC 환자 집단에서 더 나은 효능이 발견되지 않았다.

탁산 화합물 또는 이의 유도체

본 발명의 조합에서, 하나의 중요한 활성 성분은 탁산 화합물 또는 이의 유도체이다.

본 발명에서 용어 "탁산 화합물" 또는 "탁산"은 파클리탁셀과 동일하거나 유사한 메카니즘에 기반하여 파클리탁셀과 유사한 항암 활성을 갖는 다수의 탁산 패밀리를 의미한다. 예시적 탁산 화합물로는 파클리탁셀, 도세탁셀, 및 아브락산 등을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 발명에서, 상기 용어는 또한, 이의 유도체 및 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.

본 발명에서, 탁산 화합물의 양은 바람직하게는 통상의 방법으로 통상의 용량으로 투여된다. 예를 들어, 파클리탁셀은 일반적으로 정맥 내 주사를 통해 50-250 또는 100-175 mg/m²으로 투여된다.

플리나불린

본 발명의 조합에서, 다른 중요한 활성 성분은 플리나불린이다.

본원에 사용된 바와 같은, 용어 "플리나불린", "NPI-2358" 및 "t-부틸 데하이드로페닐아히스틴"은 호환가능하며, 각각은 도 1에 도시된 바와 같은 화학명이 2, 5-피페라진디온, 3-[[5-(1,1-디메틸에틸)-lH-이미다졸-4-일] 메틸렌]-6-(페닐메틸렌)-,(3Z,6Z)]인 합성의, 저분자량 화학적 엔터티(entity)를 의미한다. 본 발명에서, 상기 용어는 또한 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.

NPI-2358은 항암제로 개발되었다. WO 2004/054498는 NPI-2358의 구조, 합성 및 용도를 개시한다.

플리나불린은 튜불린 단량체의 이량체화를 억제한다. 이의 메카니즘은 종양의 맥관 구조에 영향을 미치며, 이로써 종양 성장에 필요한 혈액 공급을 차단하여 혈관 방해제(VDA)로 분류된다.

본 발명에서, 플리나불린의 양은 바람직하게 통상의 방법으로 통상으로 용량으로 투여된다. 일반적으로, 플리나불린은 정맥 주사로 10-50 또는 20-30 mg/m²으로 투여된다.

조합, 약제학적 조성물 및 키트

본 발명에서, 활성 성분인 탁산 화합물 (a) 및 활성 성분인 플리나불린 (b)를 포함하는 조합물이 제공된다.

더욱이, 활성 성분인 탁산 화합물 (a); 활성 성분인 플리나불린 (b); 및 약제학적으로 허용되는 담체 (c)를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.

본 발명의 약제학적 조성물의 복용 형태 및 제조 방법은 특별히 제한되지 않고, 상기 조성물은 당해 기술 분야에서 통상적인 공정을 통해 다양한 복용 형태, 예컨대 정제, 캡슐, 과립, 지연된-방출제, 주사 등으로 제조될 수 있다. 바람직한 복용 형태는 경구 복용 형태이다.

본 발명에서,

(i) 활성 성분으로서 탁산 화합물(a) 및 임의의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제1 약제를 함유하는 제1 용기;

(ii) 활성 성분으로서 플리나불린(b) 및 임의의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제2 약제를 함유하는 제2 용기; 및

(iii) 암을 치료 및/또는 예방하는 데 있어 활성 성분 (a)와 활성 성분 (b)를 조합하여 투여하는 것을 기재한 설명서를 포함하는 키트가 또한 제공된다.

본 발명의 조합, 제형 및 키트는 암을 예방 및/또는 치료하는 데 유용하다.

본 발명의 조합은 함께 투여되거나 순차적으로 투여될 수 있다.

바람직하게는 활성 성분인 탁산 (a)이 먼저 투여되고, 이후 활성 성분인 플리나불린 (b)이 0.5-72시간, 바람직하게는 0.5-24시간, 더 바람직하게는 1-24시간 내에 투여된다. 이로써 효능을 현저히 개선시키고, 환자의 순응도를 현저히 개선시키며, 호중구 감소증과 같은 탁산의 부작용을 유의미하게 감소시킬 수 있다.

물론, 활성성분들의 효과적인 투여량은 투여 방식에 따라 및 치료되어야 할 질환의 중증도에 따라 달라질 수 있다.

플리나불린 및 탁산의 조합으로의 치료

본 발명은 암 대상체를 치료하는 데 있어서 플리나불린과 도세탁셀의 최적 사용 방법을 제공한다.

본 발명에서, 2개의 활성 성분을 사용하여 암을 치료 및 예방하는 방법이 제공되며, 상기 방법은 활성 성분으로서 탁산 화합물(a)의 유효량과 활성 성분으로서 플리나불린(b)의 유효량을 포유류 대상체(예: 사람)에게 투여하거나, 상기 활성 성분 (a)를 포함하는 제1 약제 및 상기 활성 성분 (b)를 포함하는 제2 약제를 투여하는 것을 포함한다.

본 발명의 2개의 활성 성분들 또는 약제학적 조성물은, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하, 진피내, 경구, 또는 국소 투여를 포함하나 이에 제한되지 않는 통상적인 경로로 투여될 수 있다. 바람직한 투여 경로는 경구 투여를 포함한다.

본 발명의 약제는 투여에 편리한 고형 조성물일 수 있으며, 특히 정제, 고체 충전되거나 액체 충전된 캡슐일 수 있다. 바람직하게는, 약제 또는 약제학적 조성물은 액상 제형으로 또는 동결건조된 제형으로 또는 기타 적합한 주사 형태로 제형화된다.

더욱이, 본 발명의 2개의 활성 성분들 또는 약물들은 암을 치료하는 다른 약물들(예: 시스-플라틴, 파클리탁셀, 항종양 항체들)과 조합하여 사용될 수 있다.

본 발명의 구체예에서, 발명자는 MV522 폐암 이종이식 모델에서 플리나불린의 항종양 활성을 평가하였다. 플리나불린의 in vivo 효능은 단독으로 및 도세탁셀과 조합하여 평가되었다. MV522 종양 모델에서 플리나불린 (3.75 및 7.5 mg/kg), 도세탁셀 (15 및 25 mg/kg), 및 이의 조합의 종양 성장 억제 (TGI)를 측정하였다. 약물 조합의 스케줄링(scheduling) 또한 제1 약물을 제공한 후 2 시간에 약제들 중 다른 하나를 투여함으로써 실시하였다. 이 실험의 유의한 종점은 평균 종양 성장 억제 (TGI) 또는 후퇴, 동물의 체중 감소, 잠재적 독성, 및 종양 성장 지연 (TGD)를 포함하였다. TGI 연구의 1차 종점은 평균 NPI-2358 비히클 종양 용적이 1.2 cm³에 도달한 날이다. TGD 연구의 종점은 각 종양이 1.5 cm³의 용적에 도달한 때이다. 추가로, 대 종양에서(1.5 cm³) 도세탁셀, 및 NPI-2358 + 도세탁셀 조합의 효능을 비교하기 위해 보정을 실시하였다.

동물들에 조직 배양으로부터 수확된 암 세포를 이식하고 누드 마우스에서 종양이 확립되도록 하였다. 처리는 평균 종양 용적이 대략 105 mm³에 도달할 때 개시하였다. 플리나불린 단독 제제군 중 어디에서도 유의한 동물 체중 감소는 나타나지 않았으며, 이는 상기 약물이 제시된 용량 및 스케쥴에서 잘 용인되고 있음을 입증한다. 예상대로, 도세탁셀 투여 후에는 유의한 동물 체중 감소가 관찰되었다. 예상외로, 조합군에서 도세탁셀에 NPI -2358의 추가는 도세탁셀 관련 체중 감소를 저하시켰다(표 2).

단일 제제로 플리나불린으로 치료는 비히클 대조군에 비해 종양 용적을 약간 감소시켰으나, 도세탁셀 치료는 종양 부하(burden)에서 강한 감소를 야기하였다. 중요하게도, 플리나불린의 추가는 이 모델에서 도세탁셀의 항종양 활성을 개선시켰다.

이러한 효과는 도세탁셀을 먼저 투여하고 이후, 예를 들어 2시간 후 플리나불린을 투여한 군에서 가장 현저했다(표 3). 더욱이 이 약물조합은 대 종양(1.5 cm³)에서 종양 부하을 감소시키는 데 있어 도세탁셀의 단일 제제보다 더 효과적이었다(표 4).

플리나불린과 도세탁셀의 조합 투여 스케쥴을 더욱 조사하기 위해, 발명자는 마우스의 MV522 인간 폐암 제노그래프 모델에서 도세탁셀 처리 후 1시간, 4시간 및 24 시간에 투여된 플리나불린의 in vivo 효능을 조사하였다. 실험 계획은 상술한 동물 연구와 유사했다. 조합군에서 도세탁셀에 플리나불린의 추가는 도세탁셀 관련 동물 체중 감소를 저하시켰다. 이러한 체중 감소 경향은 도세탁셀 처리 후 1 시간 , 4 시간 또는 24 시간에 플리나불린을 투여한 상이한 군들에서 유사하였다(표 6). 추가로, 플리나불린의 추가는 도세탁셀의 항종양 활성을 개선시켰다.

플리나불린을 도세탁셀 처리 후 1 시간 , 4 시간 또는 24 시간에 투여하든 간에 종양 부하에 있어서 극적인 차이는 없었다(표 7). 15mg/kg의 도세탁셀 후 1시간에 플리나불린 투여군은 4시간-투여군 및 24시간-투여군보다 약간 종양 크기가 더 작았다(표 7).

상기 초기 연구 후에, 유사한 종양 부하를 갖는 동물들을 재처리하여 대 종양에서 플리나불린과 도세탁셀의 효과를 평가하였다. 플리나불린과 도세탁셀 조합은 도세탁셀 단독 처리에 비해 종양 부하에서 더욱 현저한 감소를 일으켰다. 예상 외로, 본 발명자는 플리나불린과 도세탁셀의 조합이 확립된 대 종양에 효과적임을 밝혀내었다(표 8).

본 발명자는 MV522 동물 연구에서 유도된 최적의 플리나불린 및 도세탁셀 조합 치료 계획을 NSCLC 환자들에게 적용하였다. 환자들은 3주 주기로 제1일 및 제8일에 치료를 받았다. 제1일의 치료는 1시간에 걸쳐 정맥 내 주입(IV)으로 도세탁셀 75 mg/m²을 투여하고, 이후 2시간 후(도세탁셀 주입이 시작된 시점부터)에 30분에 걸쳐 정맥 내 주입(IV)으로 30 mg/m²의 플리나불린을 투여하였다. 제8일 치료는 30분에 걸쳐 정맥 내 주입(IV)으로 20 mg/m² 또는 30 mg/m²의 플리나불린을 투여하는 것으로 구성된다.

도세탁셀에 플리나불린이 추가될 때의 내약성 프로파일은 도세탁셀 단독에 비해 더 낫다. 견딜 수 없는 도세탁셀 부작용으로 인해, 도세탁셀 75 mg/m² 의 초기 용량은 플리나불린 30 mg/m² + 도세탁셀 처리 아암(arm)의 환자의 10%에서 감소(50명 중 5명)된 반면, 이에 해당하는 도세탁셀 단독 아암(arm)에서는 환자들의 18.2%(55명 중 10명)로 훨씬 높았다.

특히 흥미로운 점은 플리나불린 30 mg/m² + 도세탁셀 아암에서의 환자들이 이에 해당하는 도세탁셀 단독 아암의 환자들에 비해 호중구 감소증이 통계학적으로 유의하게 더 낮은 발생율을 보였다(모든 사안에서 및 이들 사안에서 ≥제3 등급).

호중구감소증은 가장 심각한 도세탁셀의 부작용이다. 호중구 감소증은 이력 데이터와 일치하게, 상기 동일한 도세탁셀 단독 아암에서 환자들의 36.4%에서 관찰 되었다. 반면, 플리나불린 30 mg /m ² + 도세탁셀 처리된 아암에서는 호중구 감소증의 발현율은 8%로, 이에 상응하는 도세탁셀 단독 아암에 비해 유의하게 더 낮았다(p<0.01).

상기와 유사한 결과가 플리나불린 20 mg/m² + 도세탁셀 연구 아암과, 이에 상응하는 도세탁셀 처리 아암에서 관찰되었다. 더 적은 G-CSF가 도세탁셀 군에 비해 조합군에서 사용되었다.

플리나불린이 도세탁셀의 호중구감소증 발현 비율을 감소시킬 수 있다는 새로운 발견은 예기치 못한 것이다.

본 발명자는 또한 집중적인 분석을 실시하여 예상외로 플리불린과 도세탁셀 조합에 반응하는 하위그룹을 확인하였다. 하위그룹 분석에서 "적어도 하나의 종양이 3cm 초과의 직경 크기를 갖는" 것으로 정의되는 그룹이, 상응하는 도세탁셀 처리된 군(OS=7.8M)과 비교시 플리나불린 30 mg/m² + 도세탁셀(OS=11.5 M)이 가장 유의한 OS 이점을 나타낸 하위그룹이었다(도 6). 이러한 도세탁셀 군에 비한 조합군의 OS 이점은 다른 더 큰 종양군에서도 지속된다(1개 종양 > 5cm, 또는 > 7cm, 도 6). 본 발명자는 유리한 독특하게 정의된 대 종양군이 최적의 플리나불린 및 도세탁셀 조합으로 이점이 있음을 밝혀내었으며, 이는 이전 어떤 문헌에서도 보고된 바 없다. 승인된 종양 맥관구조 표적 치료제 중 그 어떤 것도 대 종양 NSCLC 집단에서 어떠한 유리한 효과를 나타내는 것으로 보고된 바가 없다.

요약하면, 본 발명에서야 비로소 최적의 플리나불린 및 도세탁셀 조합 계획이 독특하게 정의된 대 종양 환자 집단에서 개선된 효능을 나타내고, 모든 환자들에서 도세탁셀의 호중구 감소증의 발현율을 극적으로 감소시킨다는 것을 처음으로 밝혀내었다. 본 발명은 다수의 암 적응증에서 대 종양을 치료하는 데 있어 다른 화학요법제와 조합된 플리나불린의 새로운 용도를 제공한다. 본 발명은 추가로 탁산 화합물의 환자를 쇠약하게 하는 호중구 감소증의 부작용을 감소시키는 데 있어서 다른 탁산 화합물들과 조합된 플리나불린의 새로운 용도를 제공한다.

본 발명의 주요 이점은,

(a) 암(예: 폐암)을 예방함에 있어 플리나불린과 조합된 탁산의 효과를 개시하며, 탁산과 플리나불린의 최적 조합을 이용한 치료 방법을 제공하는 점,

(b) 탁산과 플리나불린의 조합이 비교적 안전하다는 점,

(c) 탁산과 플리나불린의 순차적 투여가 암의 억제에 있어 상승 효과를 나타내며, 의료적으로 관련된 통계적 유의성을 가지며, 이로써 탁산에 대한 내약성은 증가하고 부작용은 감소되는 점.

본 발명은 구체적인 실시예를 참조하여 아래에서 추가로 예시될 것이다. 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이지 본 발명의 범위를 제한하려는 것이 아님이 이해되어야 한다. 아래 실시예에서 기재된 구체적인 조건이 없는 실험 방법들은 통상적인 조건에서 또는 제조자의 지시에 따라 일반적으로 실시된다. 별도 다른 언급이 없다면, 중량부 및 백분율은 중량으로 계산된다.

실시예 1

무흉선 nu/nu 마우스의 MV522 인간 비-소세포 폐암 제노그래프 모델에서 단일 제제로서 플리나불린 (NPI-2358), 및 도세탁셀과의 조합의 생체내 평가

본 실시예의 목적은 MV522 모델에서 제1 약물이 제공된 후 약제들 중 하나를 2시간에 투여함으로써 탐구된 약물 조합 스케줄을 조사함으로써 도세탁셀과 조합된 플리나불린의 잠재적 부가적 혹은 상승 효과를 측정하는 것이었다. 이 실험의 유의한 종점들은 평균 종양 성장 억제(TGI) 또는 후퇴(regression), 대 종양에서 종양 성장 지연(TGD), 체중 감소 및 사망률을 포함하였다.

실험 디자인:

물질 및 방법

모델 정보 - 약 20g의 5 내지 6주령 암컷 누드 마우스 (Hsd: 무흉선 Nude-Foxnl ^nu )를 할란(주)(Harlan, Inc. (Madison, WI))로부터 얻었다. MV522는 종래의 인간 NSC 전이성 폐암 세포주 (US 7,700,615 또는 7,629,380)이다. 동물들에게 조직 배양으로부터 수확된 대략 1xlO⁷ MV522 세포들로 피하(SC) 주사하였다. 종양이 대략 105 입방 밀리미터(mm³)의 크기로 자랐을 때(이식 후 3일), 동물들을 처리 및 대조군으로 종양 사이즈별로 쌍으로 매칭시키고, 각 치료군은 8마리의 마우스를 포함하였다. 동물들의 귀에 태그를 달고, 개별적으로 실험 전체를 통해 이를 유지하였다.

연구 설계 및 투여 - 쌍으로 매칭한 후 제1 일에 초기 용량을 투여하였다. 상기 실험은 종양 성장 억제(TGI) 및 종양 성장 지연 (TGD) 연구로서 실시되었다. 그룹 1 종점은 종양 용적이 1.2 cm³ (TGI)에 도달한 때이고, 치료군 종점은 각 개별 동물들의 종양 용적이 1.5 cm³ (TGD)에 도달한 때였다. 비히클 중 NPI-2358 (8% 솔루톨^® HS15, 12% PG, 80% D5W)을 아래 나타낸 바와 같은 용량(표 1)으로 2주 동안 매주 3회-제1 일 스케줄(3xWKLYx2-1), 또는 3주 동안 매주 2회 스케줄(2xWKLYx3)로 복강내(IP) 주사하여 투여하였다. 음성 대조군으로 제공하기 위해 NPI-2358 비히클 및 도세탁셀 비히클을 각각 2xWKLYx3 스케줄로 IP 주사하고, Q2Dx3 스케줄로 IV 주사하였다. 도세탁셀을 총 3회의 치료를 위해 꼬리 정맥을 통해 2일에 1회씩 15mg/kg을 정맥내(IV) 주사(Q2Dx3)하여 투여하거나 Q7Dx3 스케줄(7일에 1회 총 3회)로 25mg/kg을 투여하였다. 도세탁셀과 도세탁셀 비히클을 그룹 7-9 및 12-14에서 각각 NPI-2358 비히클 및 NPI-2358 투여 전 2시간에 투여하였다. 그룹 10, 11, 15, 및 16에서는, NPI-2358을 도세탁셀 투여 전 2시간에 제공하였다.

[표 1] 연구 디자인

데이타 수집 및 통계적인 분석

동물 중량- 개별 및 그룹의 평균 중량 ±SD 및 중량의 변화율(%)은 제1일에 시작하여 연구 완료일까지 1주일에 2회 측정하였다. 제42일의 그룹 체중 및 체중 최저점 값을 기록한다.

빈사상태/사망률 - 동물들을 일반적인 빈사상태에 대해서 매주 2회 및 사망률은 매일 관찰하였다.

종양 부피 - 개별 및 그룹의 평균 종양 부피±SEM를 제1일에 시작하여 매주 2회 기록하였다( 연구 완료일까지 투여 후 24 시간에(평균 대조 종양 부피=1.2 cm³, 제25일). 종양 측정은 아래 식을 이용하여 입방 밀리미터의 종양 용적으로 전환되었다.

종양 부피 ( mm ³ ) = 폭 ² (mm) x 길이 (mm) x 0.52

종양 괴사 - 종양 괴사의 정도를 아래의 임의적 인덱스를 이용하여 각 종양에 대해 측정하여 평가하였다:

치료군과 대조군에서 종양 괴사에 있어서 주목할만한 차이가 보고되었다.

종양 성장 억제 - 상기 TGD 연구로부터는 분리된, 지정된 대조군(그룹 3, NPI-2358 비히클)의 평균 종양 용적이 대략 1.2 cm³에 도달하면, 제25일에 본 연구의 TGI 비율를 종료하였다. 마우스의 체중을 재고, 캘리퍼스로 종양을 측정하였다. 종양 성장 억제 (TGI) 값은 아래 식을 이용하여 처리된 동물을 함유하는 각 군에 대해 계산되었다:

완벽한 종양 반응을 경험한 동물들 또는 기술적 또는 약물-관련 사망을 경험한 동물들을 최종 TGI 계산에서 제외하였다; 그러나 부분적 종양 반응을 경험한 동물들은 최종 TGI 계산에 포함시켰다. 화합물 활성에 대한 국립 암 협회 (NCI) 기준은 TGI>58%이다. 각 치료군에서 TGI값은 연구 종료시 보고되며, 이들 계산은 이 마지막 연구 날짜를 근거로 한다.

종양 성장 지연 - 본 연구의 이 아암(arm)은 후원자의 요청에 의해 제74일에 종료되었다. TGI 연구 종료일(제25일)에, 대조군과 치료군으로부터 개별 종양 용적을 검토하고, 지정된 TGD 종양 용적 종점 (1.5 cm³) 보다 더 크거나 같은 것들은 본 연구로부터 제외시키고 각 동물은 상기 종점에 도달한 날을 기초로 하여 희생값 날에 배정하였다. TGD 연구 완료시, 희생의 중앙일(MDS)를 대조군(C)과 각 처리군(T)에 대해 계산하고, 다음 식을 사용해 종양 성장 지연(T-C)을 측정하는 데 사용하였다.

상기 식에서 IDS(희생의 개별 일수)는 각 동물이 이의 종양 용적 종점 (1.5 cm³)에 도달한 때의 일수이다; 이 종점에 도달한 동물들만이 TGD 계산에 포함되었다. 각 처리된 그룹에 대한 그로스 또는 네트 log₁₀ 세포 사멸이 다음 식을 사용해 측정되었다:

상기 식에서, (T)는 처리된 군의 사망 중앙값이고, (C)는 대조군(NPI-2358 비히클 군)의 사망 중앙값이고, (Td)는 대조군에서 시간 경과에 따른 log 기 증식 종양 성장 (100-800 mm³)의 log-선형 플롯으로부터 측정된 종양-용적 2배 시간이다; (3.32)는 하나의 log₁₀ 단위를 상승시키는 데 필요한 집단(population)의 배가 수이다. 기술적 또는 약물-관련 사망을 경험한 개별 동물들로부터의 체중 및 종양 데이터는 최종 그룹 계산 및 통계적 분석에서 제외되었다. 장기 생존 동물들(사전 설정 시간 기간(LTS)까지 종양 용적 종점에 도달하지 않은 동물들)은 상기 계산에 포함되지 않는다. 표준 약제(들)와의 활성 비교를 위해 아래와 같이 그로스 또는 네트 log₁₀ 세포-사멸값은 임시적인 활성 비로 전환되었다:

네트 log₁₀ 세포-사멸은 총 처리 일수가 5일 미만으로 투여된 테스트 약제에 대해 활용되고, 반면, 5일 이상으로 처리 일수를 갖는 약제의 활성은 그로스 log₁₀ 세포-사멸을 사용하여 계산되었다; (+++)에서 (++++)의 활성 순위는 부분적이거나 완전한 반응을 나타내는 데 필요하다.

부분/완료된 종양 반응 - 제1 일에 미만으로 측정되는 종양을 가진 개별적인 마우스는 부분적 반응(PR)을 갖는 것으로 분류되며, 종양 후퇴율(TR%) 값을 아래 식을 이용해 측정한다:

한 그룹 내 다수의 동물에서 부분적 종양 반응이 보고되는 경우, 평균 PR 값을 측정하였다. 뚜렷한 종양이 결여된 개별 마우스는 완전한 반응(CR)을 보이는 것으로 분류되었다. 부분적 및 완전한 반응의 수와, 종양 후퇴율(%)이 연구 종료시 각 처리 군에 대해 보고되고, 이들 계산은 최종 연구일에 기초한다.

TGD 통계 - 처리군과 대조군 간의 최종 종양 용적을 비교함에 있어 통계적 분석을 실시하였다. 2개 이상의 처리군들에 대해, ANOVA(two-tailed One-Way Analysis of Variance) 후, 둔넷트(Dunnett's) 다중 비교 테스트를 사용하였다. 한 처리군과 대조군을 비교하기 위해 짝이 없는, 양측성 스튜던트 t-테스트(two-tailed student t-test)를 사용하였다. 기술적 또는 약물-관련 사망을 경험한 개별 동물들로부터의 중량 및 종양 데이터는 분석에서 제외되었다. 그러나, 부분적이거나 완전한 반응을 보인 동물들로부터의 중량 및 종양 데이터는 이들 계산에 포함되었다.

TGD 통계 - Log-순위 테스트가 각 처리군과 대조군 간의 전체 생존 경험율에 있어 통계학적 유의한 차이를 결정하는 데 사용되었으며, 활용된 상기 테스트는 Mantel-Haenszel 테스트와 등가이다. 약물이 동일 경로 및 스케줄로 다중 농도로 평가되는 경우, 경향으로부터 Log-순위 테스트가 또한 실시된다. 기술적 또는 약물-관련 사망을 경험한 개별 동물들로부터의 중량 및 종양 데이터는 분석에서 제외되었다. 그러나, 부분적이거나 완전한 후퇴를 보이거나 장기 생존 동물들로부터의 중량 및 종양 데이터는 이들 계산에 포함되었다. 모든 분석은 GraphPad Prism^® 소프트웨어 (버전 5.0)을 사용하여 실시되었다.

결과

플리나불린 단일 제제 그룹 중 어느 그룹에서도 유의한 동물 체중 감소가 나타나지 않았고, 이는 상기 약물이 주어진 용량 및 스케줄에서 내약성이 양호함을 입증한다. 예상대로, 유의미한 동물 체중 감소가 도세탁셀로의 처리 후 관찰되었다.

예상외로, 조합 그룹에서 도세탁셀에 NPI-2358의 부가는 도세탁셀 관련 체중 감소를 저하시켰다(표 2).

표 2: 동물 중량 및 약물 독성 결과: 대조, 단일 제제, 및 조합 그룹

단일 제제로 플리나불린으로 처리시 비히클 대조군에 비해 종양 용적이 약간 감소하였으나, 도세탁셀로의 처리는 종양 부하를 강하게 감소시켰다. 중요하게도, NPI-2358의 부가는 이 모델에서 도세탁셀의 항종양 활성을 증대시켰다.

이러한 효과는 도세탁셀을 먼저 투여하고 이후 2 시간에 NPI-2358를 투여한 그룹에서 가장 현저하였다(표 3). 더욱이, 상기 약물 조합은 대 종양(1.5 cm³)에서 종양 부하를 감소시키는 데 있어 단일 제제 도세탁셀에 비해 더욱 효과적이었다(표 4).

표 3: 종양 부피 및 TGI 결과: 대조, 단일 제제, 및 조합 그룹

표 4: MDS 및 TGD 결과

실시예 2

무흉선 nu/nu 마우스의 MV522 인간 비-소세포 폐암 제노그래프 모델에서 도세탁셀과 조합된 플리나불린의 생체내 평가: 약물 투여의 스케줄

본 실시예의 목적은 MV522 모델에서 도세탁셀 투여 후 다양한 시점(1h, 4h 또는 24h)에 NPI-2358을 투여함으로써, 도세탁셀과 조합한 플리나불린(NPI-2358)의 잠재적인 부가 효과 혹은 상승 효과를 평가하는 것이다. 이 시험에서 유의한 종점은 평균 종양 성장 억제 (TGI) 또는 후퇴, 대 종양에서 종양 성장 지연 (TGD), 체중 감소, 및 사망률을 포함한다.

실험 디자인:

물질 및 방법

모델 정보 - 약 20g의 5 내지 6주령 암컷 누드 마우스 (Hsd: 무흉선 Nude-Foxnl ^nu )를 할란(주)(Harlan, Inc. (Madison, WI))로부터 획득하였다. 동물들에 조직 배양(1:1, matrigel:매질)으로부터 수확된 대략 1xlO⁷ MV522 세포들로 피하 주사하였다. 종양이 대략 100 입방 밀리미터(mm³)의 크기로 자랐을 때, 동물들을 치료 및 대조군으로 종양 사이즈별로 쌍으로 매칭시켰다. 동물들의 귀에 태그를 달고, 개별적으로 실험 전체를 통해 이를 유지하였다.

본래 연구 설계 및 투여 - 쌍으로 매칭한 후 제1 일에 초기 용량을 투여하였다. 상기 실험은 종양 성장 억제(TGI) 및 종양 성장 지연 (TGD) 연구로서 실시되었다. TGI에 대해서는 종점은 그룹 1의 평균 종양 용적이 1.2 cm³ 에 도달한 때이다. TGD에 대해서 종점은 각 개별 동물들의 종양 용적이 1.0 cm³에 도달한 때였다. 도세탁셀의 10mg/ml의 스톡(stock) 바이알을 투여하는 각 날에 0.9% 염수로 희석하고, 정맥내 투여하였다. 각 약제의 스케줄 및 용량은 표 5에 기재되어 있다. 도세탁셀 비히클 (0.9% 염수; IV; 제1일, 제3일, 제5일) + NPI-2358 비히클 (8% 솔루톨^® HS15, 12% PG, 80% D5W; IP; 제1일, 제3일, 제5일, 제8일, 제11일)을 음성 대조군으로 제공하기 위해 투여하였다.

표 5: 연구 디자인

데이타 수집 및 통계적인 분석

상기 실시예에서의 연구는 지정된 대조군이 대략 1.2 cm³의 평균 종양 부피에 도달하는 경우 제24일에 종료하였다.

동물 중량 - 개별적 및 그룹의 평균 중량 ±SD 및 중량 변화율(%)을 제1일에 시작하여 연구 완료일까지 매주 2회 기록하였다. 제24일 또는 제53일의 그룹 중량 및 중량 체저점 값을 기록하였다.

빈사상태/사망률 -실시예 1에서와 동일하다.

종양 용적 - 실시예 1에서와 동일하다.

종양 괴사 - 실시예 1에서와 동일하다.

부분/완료된 종양 반응 -실시예 1에서와 동일하다.

종양 성장 억제 - 실시예 1에서와 동일하다.

TGI 통계 -실시예 1에서와 동일하다.

종양 성장 지연 - 실시예 1에서와 동일하다. 상기 아암의 연구는 후원자의 요청에 따라 제80일 또는 제53일에 종료되었다. 장기 생존 동물들(사전 설정 시간 기간(LTS)까지 종양 용적의 종점에 도달하지 않은 동물들)은 상기 최종 연구일(제80일)의 IDS 값에 할당되었고, 이 계산에 포함되었다.

표준 약제(들)와의 활성 비교를 위해 아래와 같이 그로스 또는 네트 log₁₀ 세포-사멸값은 임시적인 활성 비로 전환되었다:

네트 log₁₀ 세포-사멸은 전체 처리가 5일 미만으로 투여된 테스트 악제에 대해 사용되고, 5일 이상의 처리 일수를 갖는 활성 약제에 대해서는 그로스 log 세포-사멸을 사용해 계산하였다. (+++) 내지 (++++)의 활성 순위는 부분적이거나 완전한 반응을 나타내는 데 필요하다.

TGD 통계 - 실시예 1에서와 동일하다.

결과

플리나불린 및 도세탁셀의 조합 투여 스케쥴을 추가 조사하기 위해, 본 발명자는 MV522 인간 폐암 제노그래프 모델 마우스에서 도세탁셀 처리 후 1시간, 4시간 및 24시간에 투여된 플리나불린의 생체내 효능을 조사하였다. 실험 디자인은 상술한 동물 연구와 유사했다. 조합 그룹에서 도세탁셀에 플리나불린의 추가는 도세탁셀 관련된 동물 체중 감소를 억제하였다. 이러한 체중 감소 경향은 도세탁셀 처리 후 플리나불린을 1시간, 4시간, 또는 24시간에 투여하는 모든 그룹에서 유사하였 다(표 6).

표 6: 동물 체중 및 약물 독성 결과 - 모든 그룹

또한, 플리나불린의 추가는 도세탁셀의 항종양 활성을 향상시키는 것으로 보였다. 도세탁셀 처리 후 플리나불린을 1시간, 4시간, 또는 24시간에 투여하는 모든 그룹에서 종양 부하에 있어 극적인 차이는 없었다(표 7). 15mg/kg의 도세탁셀 그룹 후 1시간에 플리나불린의 투여는 4시간 및 24시간 그룹에 비해 약간 종양 크기가 더 작았다(표 7).

표 7: 종양 용적 및 TGI 결과 - 모든 그룹

상기 초기 연구 후에, 유사한 종양 부하를 갖는 동물들을 재처리하여 대 종양에서 플리나불린과 도세탁셀 조합의 효과를 평가하였다. 상기 플리나불린 및 도세탁셀 조합은 도세탁셀 단독 처리에 비해 종양 부하에 있어 더욱 현저한 감소를 나타내었다. 예상외로, 본 발명자는 플리나불린 및 도세탁셀 조합이 확립된 대 종양에 효과적인 것을 밝혀냈다 (표 8).

표 8: MDS 및 TGD 결과 - 모든 그룹

실시예 3

진행된 소세포 폐암 환자들에서 최적의 플리나불린 및 도세탁셀 조합의 평가

목적

1차:

도세탁셀로 치료된 NSCLC 환자들과 도세탁셀 + 플리나불린으로 치료된 환자들의 전체 생존율을 비교하는 것.

2차:

1. 도세탁셀로 치료된 NSCLC 환자들과 도세탁셀 + 플리나불린으로 치료된 환자들의 반응 비율, 반응 지속시간, 6-개월 생존, 및 무진행 생존을 비교하는 것;

2. 도세탁셀, 대 도세탁셀 + 플리나불린의 안전성 및 부작용 프로파일을 비교하는 것.

연구 디자인

이는 적어도 하나의 화학요법 레지멘으로 치료 후 전진된 진행성 NSCLC 환자들을 대상으로 한 오픈-라벨 연구이다. 환자들은 무작위로 도세탁셀 + 플리나불린 (DN) 또는 도세탁셀 단독 (75 mg/m²) (D)을 투여받도록 하였다. 다음 2개의 투여 집단을 조사하였다:

1) 30 mg/m² 투여 집단: 대략 110명의 환자들을 1:1로 도세탁셀 + 30 mg/m²의 플리나불린 (DN 30 mg/m² 아암) 또는 도세탁셀 단독 (D 아암)을 투여받도록 무작위로 분배하였다;

2) 20 mg/m² 투여 집단: 대략 57 환자들을 2:1로 도세탁셀 + 20 mg/m²의 플리나불린 (DN 20 mg/m² 아암) 또는 도세탁셀 (D 아암) 단독을 투여받도록 무작위로 분배하였다.

투여 레지멘

환자들은 3주 주기로 제1일 및 제8일에 치료를 받았다.

제1일 요법은 1시간에 걸쳐 정맥 내 주입으로 75 mg/m² 도세탁셀을 투여하고 2시간 후 30분에 걸친 정맥 내 주입(IV)으로 플라세보 (아암 D) 또는 30 mg/m² 또는 20 mg/m² 플리나불린 (아암 DN)을 투여하는 것으로 이루어진다. 경구 덱사메타손 (16mg)을 도세탁셀 주입 전, 주입한 날, 주입한 후 다음날(제1일)에 제공하였다. 제8일 요법은 30분에 걸친 정맥내 주입(IV)으로 플라세보 (아암 D) 또는 30 mg/m² 또는 20 mg/m² 플리나불린 (아암 DN)을 투여하는 것으로 이루어진다.

CTCAE (v3.0) 치료에 따른, 약물 관련 2 등급 초과의 불시의 부작용(탈모증, 식욕부진, 및 피로 제외)을 경험한 환자들에서는 상기 부작용이 1 등급 미만으로 회복될 때까지 치료를 지연할 수 있다. 안전성 실험실 시험은 각 후속하는 주기의 개시시에 도세탁셀로 치료하기 전에 다음 기준을 만족하여야 한다: AST ≤ 2.5 x ULN, ALT ≤2.5 x ULN (알칼리성 포스파타제가 ≥2.5 x ULN인 경우, ≤1.5 x ULN ); 빌리루빈 ≤ULN; 헤모글로빈 ≥ 9 g/dL, 절대적인 중성구 계수 ≥ 1.5 x 10⁹ /L 및 혈소판 ≥ 100 x 10⁹ /L. 용량 감소는 재발을 경험하거나 특정 중증 독성을 경험한 환자들에 대해 시행될 수 있다.

표적 집단 하나 이상의 화학요법 레지멘으로 치료 후 IIIb/IV기 비-소세포 폐암이 진행된 환자들.

포함 기준

1. 18 세 이상의 남성 및 여성.

2. ≤1의 ECOG 성능 상태.

3. 적어도 하나의 화학요법 레지멘으로 치료 후 진행된, 병리적으로 또는 조직학적으로 확인된 진행성 비-소세포 폐암 (절제 불가능한 IIIb 또는 IV기). 측정가능한 질환은 이 시험에 등록을 요구하지 않는다.

4. 임의의 이전 화학요법, 수술 또는 방사선요법의 모든 부작용은 CTCAE (v. 3.0) 등급 ≤ 2으로 해결되어야 한다.

5. 14일 이내에 하기 실험실 결과: ·

· 헤모글로빈 > 9 g/dL

· 절대적인 중성구 수 ≥ 1.5 x 10⁹ /L

· 혈소판 수 ≥ 100 x 10⁹ /L

· 혈청 빌리루빈 ≤ ULN

· AST 및 ALT ≤ 2.5 x ULN (알칼리성 포스파타제가 ≥2.5 x ULN인 경우라면, ≤ 1.5 x ULN).

6. 사인되고 고지된 동의서.

배제 기준

1. 연구 약물 투여 전 21일 이내에 특정 화학요법, 생물학적, 면역요법, 방사선 요법 또는 조사 제제(치료 또는 진단을 위한)를 투여. 제1 연구 약물 투여 전 6주 이내에 진단 수술 이외의 주요 수술.

2. 유의미한 심장 이력:

· 심근경색증 또는 허혈성 심장병의 이력;

· 임상적으로 유의미한 부정맥; 조절되지 않는 부정맥 또는 항부정맥제의 필요의 이력;

· 선천성 QT 연장의 이력;

· 좌측 다발 분지 블록;

· 허혈성 심장병과 일치된 ECG 조사결과;

· 뉴욕 심장 협회 분류 III 또는 IV의 심장 질환;

· 조절되지 않는 고혈압: 혈압 강하 약물 치료에도 불구하고, 수축기 혈압이 일관되게 150 mm Hg보다 크고, 이완기 혈압은 100 mm Hg보다 큼.

3. 종양 혈관 파괴 약물로의 전 치료.

4. 이전 발작 장애.

5. 뇌 전이. 뇌 전이의 징후 또는 증상을 보인 환자들은 CT 또는 MRI로 이미지 확인되어야 한다. 치료 후 이전에 치료되었거나 재영상화되고 새로운 병변의 임시적 진행 없이 이의 병변이 안정화된 뇌 전이를 갖는 환자들은, 등록될 수 있다.

6. 유의미한 위장 질환, 예컨대 장폐색증, 창자 폐색, 출혈성 설사, 염증성 장 질환, 활성 조절되지 않는 위궤양 질환의 이력 (라니티딘 또는 이의 동등물 및/또는 오메프라졸 또는 이의 동등물로 수반되는 요법은 허용가능하다).

7. 수술 주위 골반 방사선 요법, 전체의 복부 방사선 요법, 또는 방사선 요법으로부터 ≥ 등급 2 의 잔류 위장 증상의 이력.

8. 전신 요법을 요하는 활성 조절되지 않는 박테리아, 바이러스, 또는 진균 감염.

9. 인간 면역결핍 바이러스 (HIV), 또는 활성 A형 간염, B형 간염, 또는 C형 간염의 공지된 감염.

10. 폴리소르베이트 80, 탁산, 솔루톨 및/또는 프로필렌 글리콜을 함유하는임의 제품에 대해 이전에 과민 반응을 나타낸 환자.

11. 임신하거나 수유 중인 여성. 여성 환자는 폐경 후이며 수술로 불임이어야 하거나, 본 연구 기간 및 연구 완료 후 1달의 기간 동안 출산 제한의 허용되는 방법 (즉, 배리어 법과 함께 호르몬 피임약, 자궁내 디바이스, 살정제와 함께 다이아프람 또는 살정제와 함께 콘돔, 금욕)을 사용하는 것에 동의해야 한다. 가임 가능성있는 여성 환자들은 제1 연구 약물 투여 전 10일 이내에 음성 혈청 임신 테스트 결과를 보여야 한다. 남성 환자들은 수술에 의해 불임이거나 피임의 허용되는 방법을 사용하는 데 동의해야 한다.

12. 피부의 기저 세포 암종 또는 자궁경부의 in situ 암종을 제외하고, 동시의 활성인 제2 악성 종양으로 치료를 받고 있는 환자.

13. 조사자의 의견으로, 환자에게 과도한 위험을 부과할 수 있는 임의의 의학적 상태. 이러한 상태의 예로는 비경구 항감염제 치료가 필요한 감염, 수신증, 간부전, 고지된 동의에 대한 이해를 방해할 수 있는 임의의 변경된 정신 상태 또는 임의의 정신 병태.

14. 이 프로토콜에서 요구하는 절차에 따르는 것을 꺼려하거나 따를 수 없는 환자.

연구 길이

허용될 수 없는 부작용 없이 임상적 이점(안정한 질환 또는 반응)의 증거가 있는 한 안정하게 반응하는 환자들을 본 연구에서 치료되었다. 연구 종료는 마지막 환자를 모집한 후 12개월로 계획하였다.

조사용 제품/ 용량/경로/ 레지멘

플리나불린 또는 플라세보:

플리나불린의 초기 용량은 30 mg/m² 또는 20 mg/m²이었다. 용량 조정은 관찰된 부작용에 의존하였다. 투여 용적은 배정된 용량과 환자 체표면적에 기초하여 다를 수 있다. 임상 제형은 20mL 중 약물 80mg(4 mg/mL)을 함유하는 앰버 바이알 중의 40% 솔루톨® HS-15/60 % 프로필렌 글리콜의 농축 용액으로 제공되었으며, 실온에서 보관되었다. 각 바이알을 단일 사용을 위해 지정하였다. 약물의 상기 정확한 용적을 1:20 희석에서 물 중 덱스트로오스 5%(D5W)로 희석하고, IV로 말초적으로 또는 중추적으로 투여하였다. 주입 시간은 후원자가 임상적으로 지시하는 바에 따라 증가될 수 있다. 플리나불린과 플라세보는 저장, 희석 및 투여를 포함한 모든 시간 동안 빛으로부터 보호되어야 한다. 플리나불린 및 플라세보는 희석 후 6시간 이내에 투여되어야 한다.

기관의 실무(institutional practice)에 따라 항구토제(유의미한 항-구토제 요법, 예컨대 성분 P 억제제, 코르티코스테로이드 및/또는 도파민 길항제 조합을 포함)로의 사전 투여는 플리나불린 또는 플라세보의 각 투여 전에 제공되어야 한다. 5-HT³ 길항제는 명확히 필요한 경우가 아니라면, 플리나불린 또는 플라세보의 투여 후 혹은 투여 사이에 일상적으로 투여되지 않아야 한다. 환자들은 항구토제 요법의 일부로서 메타클로프로마이드와 같은 운동 개선제를 투여받아야 한다.

명백히 지시된 오피에이트와 같은 운동성 감소제의 사용을 최소화하거나 오피에이트 유도된 변비를 지시된 바와 같이 메틸날트렉손과 같은 제제로 관리하는 것과 함께, 배변 연화제, 팽화제, 자극제 및/또는 도파민 길항제와 같은 제제의 사용을 포함한, 빈크리스틴과 같은 약물을 사용함으로써, 장 운동성은 기관의 실무에 따라 유지되어야 한다. 심각한 변비가 생기는 경우, 즉시 관리되어야 하며, 이것이 해소될 때까지 플리나불린 또는 플라세보 투여는 지연되어야 한다. 장폐색증의 징후에 대한 주의 깊은 관찰과 방사선 사진 및/또는 초음파 연구로의 초기 진단 평가가 권장된다.

플리나불린 또는 플라세보 투여 후 수축기 혈압의 >20% 증가가 관찰된다면, 경구 암로디핀 10mg 또는 균등물인 칼슘 채널 차단제가 각 후속 투여 전 1시간에 투여되어야 한다. 180 mmHg을 초과하는 수축기 혈압에 있어서의 증가는 니트로프루시드나 기관의 실무에 따른 유사한 요법으로 관리되어야 한다.

도세탁셀:

도세탁셀의 초기 용량은 75 mg/m²였다. 용량은 관찰된 부작용에 따라 조정될 수 있다.

투여 용적은 배정된 용량 및 환자 체표면적에 따라 결정될 수 있다.

표준의 승인되고 상업적으로 이용되는 화학요법제로, 본 조사자 및 연구 사이트의 스태프(staff)은 도세탁셀을 사용한 경험이 있어야 하며, 이 제형과 제조자에 의해 제공된 도세탁셀 처방 정보에 친숙해야 한다.

도세탁셀은 기관 조제실에서 수득되어야 하며, 기관 프로토콜에 따라 제조되어야 한다. 투여는 본 임상 시험 프로토콜에서 규정하는 용량으로 기관 프로토콜에 따라 1시간 IV 주입으로 실시되어야 한다.

경구 덱사메타손 (16 mg)을 도세탁셀 주입하기 전의 날, 주입한 날, 및 주입한 후의 날(제1일)에 제공하였다. 유사한 코르티코스테로이드로의 사전약물 요법이 지역 기관 실무에 따라 사용될 수 있다. 덱사메타손 또는 다른 코르티코스테로이드의 용량은 이미 코르티코스테로이드를 사용하고 있는 환자에 대해서는 적절히 감소되어야 한다.

절차

스크린 : (치료를 개시하기 28일 전 이내(즉, 제-28일 내지 제1일)), 고지에 대한 동의서, 의료적 이력, 및 수반되는 약물 치료; ECG, 방사선 사진의 종양 평가 및 적합한 경우 종양 마커.

기준선 평가 : (치료를 개시하기 14일 전 이내(즉, 제-14일 내지 제1일)) 신체 검사, 바이탈 사인, ECOG 성능 상태, 수반되는 약물치료 용법, 안전성 실험실 테스트. 가임 가능 여성은 치료 개시 10일 전 이내에 혈청 임신 테스트에서 음성을 확인해야 한다. 심각한 심장 질환의 이력이 있거나 이를 시사하는 조사결과가 있는 경우, 심장 진찰이 수반되어야 한다.

치료 단계 : 연구 약물 주입 전에 안전성 평가 (전체 신체 검사를 포함)를 수행하였다. 안전성 평가 (전체 신체 검사를 포함)를 각 후속 주기(2+) 전에 실시하였다. 추가로, 다음 사항을 평가하였다:

· 차별적인/혈소판 및 임상 화학과 함께 CBC는 각 주기의 제1일 전 72시간 이하의 시간에 실시하였다; 추가의 평가를 제1 주기/제 15일에 실시하였다.

· 바이탈 사인 (심박수, 호흡수, 혈압 및 온도)은 주입한 날, 각 연구 약물 주입 직전 및 후에, 및 제1 주기의 마지막 주입 후 60분에 측정되었다. 후속 주기 동안에 바이탈은 각 주입 전과 후, 신체 검사 중에 확인되었다.

치료에 대한 반응 평가는 제2 주기( 및 대략 이후 매 2 주기마다)의 나머지 기간 동안에 수행되었다.

치료는 진행성 질환의 증거, 허용될 수 없는 치료-관련 부작용이 있을 때까지, 연구가 종료될 때까지, 혹은 환자가 본 연구를 중단할 때까지 지속되었다(중단에 대한 동의 또는 조사자 판단에 의해 중단으로 인해).

연구의 최종 방문(Off Study visit) : 최종 연구 약물 투여 후 28일 이내에, 적어도 하나의 용량의 연구 약물을 투여받고 사망을 제외한 임의 이유로 치료를 중단한 모든 환자들에 대해 이 평가를 완료하였다. 환자들에 대해 신체 검사, 바이탈 사인, 체중, ECOG 성능 상태의 기록을 실시하였고, 임신 테스트를 포함한 일상적인 lab 테스트가 실시될 것이다.

후속 방문(Follow-up visits) : 후속 방문은 진행 중인 약물-관련된 부작용 및 생존율을 모니터하기 위해 필요하였다. 등급 ≥2의 약물 관련 부작용을 경험한 환자들에 대해 최종 연구 평가시에 관찰하였고, 이와 관련하여 부작용이 등급 ≤1로 해소되거나 부작용이 만성적이거나 다른 항암 요법을 받은 환자들인 것으로 여겨질 때까지, 매달 후속적으로 확인해야 한다.

다음 사항들의 평가:

효능: 아암 D 및 아암 DN 간에 효능 종점을 비교하였다. 일차 효능 종점은 전체 생존율이다. 2차 종점은 반응율, 반응 기간, 삶의 질, 호중구감소증 비율 및 G-CSF 사용을 포함한다.

안전성: 부작용은 자발적으로 환자들에 의해 보고되거나, 신체 검사, 바이탈 사인, ECOG 성능 상태 및 실험실 시험 중에 확인된다.

통계적인 분석

효능 : 전체 생존율 및 임의의 다른 시간에 따른 이벤트(time-to-event) 종점(endpoint)의 분포를 카플란-메이에르 법을 사용하여 요약하였다. log-순위 테스트를 사용하여 처리군들 간에 효능 종점들을 비교하였다. 모든 통계적 테스트는 5% 수준의 유의성으로 한-방향(one-sided) 테스트를 사용해 실시되었다. 이 시험의 일차 목표는 전체 생존율에 대한 플리나불린의 추가의 효과를 평가하는 것이다.

안전성 : 연구 약물을 적어도 하나의 용량으로 투여받았다면, 모든 환자들에 대해, 안전성 분석을 평가하였다. 안전성 데이터는, 부작용에 대한 빈도 표 및 실험실적 변수에 대한 빈도 및 이동 표들을 포함한, 개별 리스트, 요약 표들에서 연구 아암으로 제시되었다.

결과:

1) 호중구감소증은 플리나불린 및 도세탁셀의 조합 그룹에서 감소된다 .

도세탁셀에 플리나불린이 추가된 경우의 내약성 프로파일은 도세탁셀 단독에 비해 더 나았다. 허용될 수 없는 도세탁셀의 부작용으로 인해, 75 mg/m² 도세탁셀의 초기 용량은 플리나불린 30 mg/m² + 도세탁셀 처리 아암의 10%의 환자(50명 중 5명)에서 감소되었다. 반면에, 이에 대응되는 도세탁셀 단독 아암에서는 환자의 18.2%(55명 중 10명)로 훨씬 높은 백분율이었다. 플리나불린 20 mg/m² 집단에서, 동일한 결과가 관찰되었으며, 여기서 조합으로 치료시 이의 동반 D 아암(22.2%)에 비해 더 낮은 비율의 환자들(2.5%)이 도세탁셀 용량 감소가 요구되었다.

이의 동반 D 아암에 비해 DN 30 mg/m² 아암에서 환자들의 호중구감소증의 발현율이 더 낮았고(8.0% 대 36.4%, p<0.001), 이의 동반 D 아암에 비해 DN 20 mg/m² 아암에서 더 낮았다(7.5% 대 22.2%). DN 30 mg/m² 아암 (n=50)은 풀링된 D 아암 (n=73)에 비해 모든 등급의 호중구감소증, 특히 ≥ 제3 등급의 호중구감소증의 발현율이 각각 8.0% 대 27.4%로 유의하게 더 낮았다(p=0.010). 유사한 결과가 20 mg/m² 아암에서 관측되었다(5.0% 대 27.4%; p=0.050). 호중구감소증의 감소 효과는 도 5에 도시되어 있다. G-CSF을 필요로 하는 환자의 비율 및 도세탁셀 용량 감소 비율은 D 아암에 비해 DN 아암에서 또한 더 낮았다. 조합된 DN 아암 대 조합된 D 아암에서의 G-CSF 사용 감소 백분율은 0.0013%에서 통계적으로 유의미하다.

표 9: DN 아암 및 D 아암에서 도세탁셀 용량 감소, 호중구감소증 비율, 및 G-CSF 사용의 비교

약어: D = 도세탁셀; DN = 도세탁셀 + 플리나불린; G-CSF = 과립구 콜로니 자극 인자. 주석: G-CSF는 하기 수반되는 약물치료를 포함한다: 페그필그라스팀, 필그라스팀, 뉴포겐, 뉴라스타

2) 플리나불린 및 도세탁셀 조합으로부터의 대 종양 환자 집단의 전체 생존율 (OS) 이점

상기 연구에서, 적어도 하나의 이전 화학요법 레지멘에 실패한 경험이 있는 국소 진행성 또는 전이성 NSCLC 환자들에서, 플리나불린 (30 mg/m², 각 21일 주기의 제1일 및 제8일) + 도세탁셀 (75 mg/m², 각 주기의 제1일)을, 도세탁셀 단독과 비교하면 30 mg/m² 그룹에서는 OS, 무진행 생존[PFS], 및 반응율에서 플리나불린 + 도세탁셀 처리군(OS=8.7 M (개월))과 도세탁셀 대조 처리군(OS=7.5 M) 간에 유의한 차이는 없었다(표 11, 도 6). 본 발명자는 이후 상기 데이터를 집중적으로 분석하였고, 플리나불린 및 도세탁셀 조합에 반응하는 하위그룹을 확인하였다.

하위그룹 분석에서, 종양 크기가 3cm에서 OS에서 명백한 구분이 있었고: 적어도 하나의 종양이 >3cm, >5cm 또는 > 7 cm인 경우, D 아암에 비해 DN 아암에서 명백한 OS 이점이 있었으나, 모든 종양 크기가 ≤3 cm인 그룹에서는 OS에서 차이가 없었다(6.45 M 대 6.47 M, 표 11, 도 6). 종양 크기가 더 크면 클수록, 도세탁셀 단독 그룹에 비해 조합 그룹에서의 OS 이점, 위험 비, 및 반응율은 더 유의하였다(표 11, 도 6).

따라서, 본 발명자는 최적의 플리나불린 및 도세탁셀 조합이 이점이 있는 독특하게 정의된 대 종양 그룹을 밝혀내었으며, 이는 이전 어떤 문헌에서도 보고된 바 없다.

표 10: 다양한 크기의 가장 큰 원발성 종양에서 아암 DN ( 30 mg /m ² ) 및 아암 D의 OS 및 반응율 비교

본원에서 언급된 모든 문헌들은 참조에 의해 개별적으로 혼입된 것과 마찬가지로 참조에 의해 본원에 혼입된다. 추가로, 상기 교시를 숙지한 후, 당업자는 다양한 변형 및 개질을 실시할 수 있을 것이며, 이들 균등물들 또한 첨부된 특허청구범위에서 한정된 바와 같은 범위 내에 속하는 것으로 이해되어야 한다.

Claims (10)

1. 활성 성분인 탁산 화합물(a) 및 활성 성분인 플리나불린(b)을 포함하는 약제학적 조합물.
2. 제1항에 있어서, 상기 탁산 화합물이 파클리탁셀, 도세탁셀 및 아브락산을 포함하는, 조합물.
3. 제1항에 있어서, 상기 조합물이 도세탁셀 및 플리나불린으로 이루어진 조합물.
4. 암을 치료 및/또는 예방하는 약제의 제조에 있어서 제1항 내지 제3항 중 어느 하나의 항에 따른 약제학적 조합물의 용도.
5. 제4항에 있어서, 상기 암은 폐암, 결장암, 간암, 유방암, 전립선암, 및 다발성 골수종으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 용도.
6. 암을 치료 및/또는 예방하는 데 있어서 활성 성분인 탁산 화합물(a), 및 활성 성분인 플리나불린(b)을 포함하며, 여기서 특히 상기 암은 종양 크기가 > 3 cm, > 5 cm, 또는 > 7cm 인 암인, 조성물, 키트 또는 혼합물의 용도.
7. (i) 활성 성분으로서 탁산 화합물(a) 및 임의의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제1 약제를 함유하는 제1 용기;
   (ii) 활성 성분으로서 플리나불린(b) 및 임의의 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 제2 약제를 함유하는 제2 용기; 및
   (iii) 암을 치료 및/또는 예방하는 데 있어 활성 성분 (a)와 활성 성분 (b)를 조합하여 투여하는 것을 기재한 설명서를 포함하는, 키트.
8. 활성 성분인 탁산 화합물(a);
   활성 성분인 플리나불린(b); 및
   약제학적으로 허용되는 담체(c)를 포함하는 약제학적 조성물.
9. 탁산의 부작용을 감소시키는 데 사용하기 위한 약제의 제조에 있어서 플리나불린의 용도.
10. 활성 성분인 탁산(a) 및 활성 성분인 플리나불린(b)을, 치료가 필요한 포유류에게 투여하는 것을 포함하는 암의 치료 및/또는 예방 방법.

Images