KR20020082207A - Near Infrared Fluorescent Contrast Agent and Fluorescence Imaging - Google Patents
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Abstract
본 발명은 분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖는 화합물을 포함하는 근적외선 형광 조영제, 및 본 발명의 근적외선 형광 조영제를 생체에 도입하고, 상기 생체를 여기광에 노출시킨 후 조영제로부터의 근적외선 형광을 검측하는 것을 포함하는 형광 조영법에 관한 것이다. 본 발명의 근적외선 형광 조영제는 여기광에 의해 여기되어 근적외선 형광을 방출한다. 상기 근적외선 형광은 생체 조직을 통과하는 투과율이 탁월하다. 따라서, 드디어 생체 내의 깊숙한 부위의 병변의 검측이 가능하게 되었다. 또한, 본 발명의 조영제는 수용성이 탁월하고 독성이 적으므로 안전하게 사용할 수 있다.The present invention relates to a near infrared ray fluorescent contrast agent containing a compound having three or more sulfonic acid groups in a molecule and a near infrared ray fluorescent contrast agent of the present invention introduced into a living body and detecting near infrared fluorescence from the contrast agent after the living body is exposed to excitation light As well as to methods of using the same. The near-infrared fluorescence contrast agent of the present invention is excited by the excitation light to emit near-infrared fluorescence. The near-infrared fluorescence has an excellent transmittance through a living tissue. Therefore, it is finally possible to detect lesions deep within the living body. Further, the contrast agent of the present invention is excellent in water solubility and low in toxicity, so that it can be safely used.
Description
본 발명은 근적외선 형광 조영제 및 상기 조영제를 이용한 형광 조영법에 관한 것이다.The present invention relates to a near-infrared fluorescence contrast agent and a fluorescence contrast method using the contrast agent.
질병을 치료함에 있어서, 질병에 의해 유발되는 생체 내의 형태학적 및 기능적 변화를 질병의 초기 단계에서 검측하는 것은 매우 중요하다. 특히 암을 치료하는 경우, 종양의 위치 및 크기는 효과적인 치료 계획에 있어서 중요한 결정 요인이다. 이러한 목적으로 알려진 방법은 천자 (puncture) 등에 의한 생체 검사법, X선 조영과 같은 조영 진단, MRI, 초음파 조영법 등이 있다. 생체 검사법은 한정적인 진단에는 효과적이지만, 동시에 시험 대상자에게 큰 부담을 주며 병변의 시간 경과에 따른 변화를 관찰하는데 적합하지 않다. X선 조영 및 MRI는 불가피하게 시험 대상자를 방사선 및 자기파에 노출시킨다. 또한, 상기한 바와 같은 통상적인 조영 진단은 측정 및 진단을 위해 복잡한 작업 및 긴 시간을 필요로 한다. 또한, 이러한 목적에 사용되는 큰 장비는 작업 중 상기 방법을 적용하기가 어렵게 한다.In the treatment of disease, it is very important to detect morphological and functional changes in vivo induced by disease at an early stage of the disease. When treating cancer in particular, the location and size of the tumor are important determinants of effective treatment planning. Methods known for this purpose include biopsy by puncture, contrast imaging such as X-ray, MRI, and ultrasound imaging. The biopsy method is effective for definite diagnosis, but at the same time it puts a heavy burden on the subject and is not suitable for observing the change with time of the lesion. X-ray contrast and MRI inevitably expose the test subject to radiation and magnetic waves. In addition, the conventional imaging diagnosis as described above requires complicated operations and long time for measurement and diagnosis. Also, the large equipment used for this purpose makes it difficult to apply the method during operation.
조영 진단의 하나는 형광 조영법이다 (립스픈 (Lipspn R. L.) 등의 문헌 (J. Natl. Cancer Inst., 26, 1-11 (1961)) 참조). 이 방법은 조영제로서 특정 파장의 여기광에 노출되었을 때 형광을 방출하는 물질을 사용한다. 따라서, 신체의 외부로부터의 여기광에 신체가 노출되고, 신체 내의 형광 조영제로부터 방출된 형광이 검측된다.One of the imaging diagnoses is fluorescence imaging (see Lipspn R. L. et al., J. Natl. Cancer Inst., 26, 1-11 (1961)). This method uses a material that emits fluorescence when exposed to excitation light of a specific wavelength as a contrast agent. Accordingly, the body is exposed to the excitation light from the outside of the body, and the fluorescence emitted from the fluorescent contrast agent in the body is detected.
이러한 형광 조영제는 예를 들어 종양 내에 축적되는 포르피린 화합물일 수 있으며, 해마토포르피린과 같이 광역학적 요법 (PDT)에 사용된다. 다른 예로는 포토프린 및 벤조포르피린이 있다 (상기 립스픈 등의 문헌 및 멩 (Meng T. S.) 등의 문헌 (SPIE, 1641, 90-98 (1922)), WO 제 84/04665 호 등 참조). 이들 화합물은 PDT에 요구되는 것들이므로 초기에는 PDT에 사용되었으며 광독성을 갖는다. 따라서 이들은 진단 시약으로서는 바람직하지 않다.Such fluorescent contrast agents may be, for example, porphyrin compounds that accumulate in the tumor and are used in photodynamic therapy (PDT), such as horseradish porphyria. Other examples are photoprens and benzoporphyrins (see Lipsteen et al. And Meng T. S. et al. (SPIE, 1641, 90-98 (1922)), WO 84/04665, etc.). Since these compounds are required for PDT, they are used in PDT initially and have phototoxicity. Therefore, they are not preferable as diagnostic reagents.
한편, 플루오레세인, 플루오레스카민 및 리보플라빈과 같은 공지된 형광 염료를 사용한 망막 순환 미세 혈관 조영술이 공지되어 있다 (미국 특허 제 4945239호 참조). 상기 형광 염료는 400 내지 600 nm의 가시광 영역에서 형광을 방출한다. 이 영역에서 생체 조직을 통한 광투과율은 매우 낮으므로 신체의 깊숙한 부위의 병변을 검측하는 것은 거의 불가능하다.On the other hand, retinal circulation microangiography using a known fluorescent dye such as fluorescein, fluorescamine and riboflavin is known (see US-A-4945239). The fluorescent dye emits fluorescence in a visible light region of 400 to 600 nm. In this area, the light transmittance through living tissue is very low, so it is almost impossible to detect deep lesions in the body.
또한, 형광 조영제로서 간기능 및 심장 기능을 측정하는데 사용되는 인도시아닌 그린 (이하, ICG로 약칭함)을 포함하는 시아닌계 화합물을 사용하는 것이 공지되어 있다 (해그룬드 (Haglund M. M.) 등의 문헌 (Neurosurgery, 35, 930 (1994)), 리 (Li, X.) 등의 문헌 (SPIE, 2389, 789-797 (1995)) 참조). 시아닌계 화합물은 근적외광 영역 (700 내지 1300 nm)에서 흡수를 나타낸다.It is also known to use cyanine compounds, including indocyanine green (hereinafter abbreviated as ICG), which are used to measure liver function and cardiac function as fluorescent contrast agents (Haglund MM et al. (Neurosurgery, 35, 930 (1994)), Li, X., et al. (SPIE, 2389, 789-797 (1995)). The cyanine compound shows absorption in the near infrared region (700 to 1300 nm).
근적외광은 생체 조직을 통한 높은 투과율을 나타내며 약 10 cm 크기의 두개골을 통과할 수 있다. 이로 인해 임상 의학에 있어서의 관심이 갈수록 높아지고있다. 예를 들어 매체의 광학적 투과를 이용한 광학적 CT 기술은 신기술로서 임상 분야에서 관심을 끌고 있다. 이는 근적외광이 생체를 통과할 수 있으며 생체 내의 산소의 농도 및 순환을 모니터링하는데 사용될 수 있기 때문이다.Near infrared light has a high transmittance through living tissue and can pass through a skull about 10 cm in size. As a result, interest in clinical medicine is increasing. For example, optical CT technology using optical transmission of media has attracted attention in the clinical field as a new technology. This is because near infrared light can pass through the living body and can be used to monitor the concentration and circulation of oxygen in vivo.
시아닌계 화합물은 근적외선 영역에서 형광을 방출한다. 이 영역에서의 형광은 생체 조직을 통과할 수 있으며 형광 조영제로서의 잠재성을 제공한다. 다양한 시아닌계 화합물이 근년에 개발되었으며 형광 조영제로서 시도되었다 (WO 제96/17628호 및 동 제97/13490호 등). 그러나, 물에 대한 충분한 용해도 및 생체에 대한 안정성을 가질 뿐만 아니라 병에 걸린 조직으로부터 정상 조직을 구별할 수 있는 (표적 부위에 대한 조영 선택성을 갖는) 시약은 존재하지 않는다.The cyanine compound emits fluorescence in the near infrared region. Fluorescence in this region is able to pass through living tissue and provides the potential as a fluorescent contrast agent. A variety of cyanine compounds have been developed in recent years and have been tried as fluorescent contrast agents (WO 96/17628 and 97/13490). However, there is no reagent that has sufficient solubility in water and stability to the living body, as well as which can distinguish normal tissue from diseased tissue (with contrast selectivity for the target site).
발명의 요약SUMMARY OF THE INVENTION
따라서 본 발명의 목적은 형광 조영제를 제공하는 것이다. 본 발명에 따른 조영제는 독성이 적고 물에 대한 용해도가 탁월하며, 근적외선 영역에서 생체 조직을 통과할 수 있는 형광을 방출하며 종양 및(또는) 혈관의 특이적 조영을 가능하게 한다.It is therefore an object of the present invention to provide a fluorescent contrast agent. The contrast agent according to the present invention has low toxicity, is excellent in water solubility, emits fluorescence capable of passing through a living tissue in the near infrared region, and enables specific imaging of the tumor and / or blood vessel.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 근적외선 형광 조영제를 사용한 형광 조영법을 제공하는 것이다.It is still another object of the present invention to provide a fluorescence imaging method using the near-infrared fluorescence contrast agent.
본 발명은 시아닌계 염료 화합물에 3개 이상의 술폰산기를 도입하면 형광 조영제가 높은 수용성을 갖게된다는 발견에 기초한 것이다. 또한, 상기 조영제를 사용하여 형광 조영법을 확립할 수 있다는 것이 드디어 밝혀졌다.The present invention is based on the discovery that introduction of three or more sulfonic acid groups into a cyanine-based dye compound results in a fluorescent contrast agent having high water solubility. In addition, it has now been found that the contrast agent can be used to establish a fluorescence imaging method.
따라서, 본 발명은 하기를 제공한다.Accordingly, the present invention provides the following.
(1) 분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖는, 하기 화학식 I로 나타내어지는 화합물 또는 제약적으로 허용 가능한 그의 염을 포함하는 근적외선 형광 조영제.(1) A near-infrared fluorescent contrast agent comprising a compound represented by the following formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof, having at least three sulfonic acid groups in the molecule.
식중, R1및 R2는 동일 또는 상이하며, 각각 치환 또는 비치환의 알킬이고, Z1및 Z2는 각각 치환 또는 비치환의 축합된 벤조 고리 또는 축합된 나프토 고리를 형성하는데 필요한 비금속 원자이며, r은 0, 1 또는 2이고, L1내지 L7은 동일 또는 상이하며 각각 치환 또는 비치환의 메틴이되, 단 r이 2인 경우, 중복되는 L6및 L7은 동일 또는 상이하며, X 및 Y는 동일 또는 상이하고 각각 하기 화학식의 기이다.Wherein R 1 and R 2 are the same or different and each is a substituted or unsubstituted alkyl, Z 1 and Z 2 are each a non-metallic atom necessary for forming a substituted or unsubstituted condensed benzo ring or condensed naphtho ring, r is 0, 1 or 2, L 1 to L 7 are the same or different and each is a substituted or unsubstituted methine, provided that when r is 2, the overlapping L 6 and L 7 are the same or different and X and Y is the same or different and each is a group of the formula:
식중, R3및 R4는 동일 또는 상이하며, 각각 치환 또는 비치환의 알킬이다.Wherein R 3 and R 4 are the same or different and each is a substituted or unsubstituted alkyl.
(2) 상기 (1)에 있어서, 분자 내에 카르복실산기가 없는 근적외선 형광 조영제.(2) The near-infrared fluorescent contrast agent as described in (1) above, which has no carboxylic acid group in the molecule.
(3) 상기 (1) 또는 (2)에 있어서, 화학식 I에서 r이 1인 근적외선 형광 조영제.(3) The near-infrared fluorescent contrast agent according to (1) or (2), wherein r is 1 in formula (I).
(4) 상기 (1) 내지 (3) 중 어느 한 항에 있어서, 분자 내에 4개 이상의 술폰산기를 함유하는 근적외선 형광 조영제.(4) The near-infrared fluorescent contrast agent according to any one of (1) to (3) above, wherein the fluorescent agent contains at least four sulfonic acid groups in the molecule.
(5) 상기 (1) 내지 (4) 중 어느 한 항에 있어서, 분자 내에 10개 이하의 술폰산기를 함유하는 근적외선 형광 조영제.(5) The near-infrared fluorescent contrast agent according to any one of (1) to (4), wherein the fluorescent agent contains 10 or less sulfonic acid groups in the molecule.
(6) 상기 (1) 내지 (4) 중 어느 한 항에 있어서, 분자 내에 8개 이하의 술폰산기를 함유하는 근적외선 형광 조영제.(6) The near-infrared fluorescent contrast agent according to any one of (1) to (4) above, wherein the fluorescent agent contains 8 or less sulfonic acid groups in the molecule.
(7) 상기 (1) 내지 (6) 중 어느 한 항에 있어서, 제약적으로 허용 가능한 염이 나트륨염인 근적외선 형광 조영제.(7) The near-infrared fluorescent contrast agent according to any one of (1) to (6) above, wherein the pharmaceutically acceptable salt is a sodium salt.
(8) 상기 (1) 내지 (7) 중 어느 한 항에 있어서, 종양 조영법 및(또는) 혈관 조영술에 사용되는 근적외선 형광 조영제.(8) The near-infrared fluorescent contrast agent according to any one of (1) to (7) above, which is used for tumor imaging and / or angiography.
(9) 분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖는 하기 화학식 II의 화합물의 나트륨염.(9) A sodium salt of a compound of formula (II) having at least three sulfonic acid groups in a molecule.
식중, R1, R2, L1내지 L7, X 및 Y는 상기 정의한 바와 같고,Wherein R 1 , R 2 , L 1 to L 7 , X and Y are as defined above,
R5내지 R16은 동일 또는 상이하며 각각 수소 원자, 술폰산기, 카르복실기, 히드록실기, 알킬(술포알킬)아미노기, 비스(술포알킬)아미노기, 술포알콕시기, (술포알킬)술포닐기 또는 (술포알킬)아미노술포닐기이되,R 5 to R 16 are the same or different and each represents a hydrogen atom, a sulfonic acid group, a carboxyl group, a hydroxyl group, an alkyl (sulfoalkyl) amino group, a bis (sulfoalkyl) amino group, a sulfoalkoxy group, Alkyl) aminosulfonyl group,
단, 하기 화학식의 화합물들은 제외된다.However, the compounds of the following formulas are excluded.
및And
(10) 상기 (9)에 있어서, 화학식 II의 R1및 R2가 각각 술폰산기로 치환된 탄소수 1 내지 5의 저급 알킬이며, X 및 Y는 동일 또는 상이하고 각각 하기 화학식으로 나타내어지는 기인 나트륨염.(10) The process according to the above (9), wherein R 1 and R 2 in the formula (II) are each a lower alkyl having 1 to 5 carbon atoms substituted with a sulfonic acid group, X and Y are the same or different and each represents a sodium salt .
식중, R17및 R18은 탄소수 1 내지 5의 비치환의 저급 알킬이다.Wherein R 17 and R 18 are unsubstituted lower alkyl having 1 to 5 carbon atoms.
(11) 상기 (10)에 있어서, 하기 화학식을 갖는 나트륨염.(11) The sodium salt according to (10), which has the following formula:
(12) 분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖는 하기 화학식 III-1의 화합물의 나트륨염.(12) The sodium salt of the compound of the formula (III-1), which has at least three sulfonic acid groups in the molecule.
식중, L1내지 L7은 상기 정의한 바와 같고, R19및 R20은 술폰산기로 치환된 탄소수 1 내지 5의 저급 알킬이며, R21내지 R28은 동일 또는 상이하고 각각 수소 원자, 술폰산기, 카르복실기, 히드록실기, 알킬(술포알킬)아미노기, 비스(술포알킬)아미노기, 술포알콕시기, (술포알킬)술포닐기 또는 (술포알킬)아미노술포닐기이며, X' 및 Y' 는 동일 또는 상이하고 각각 하기 화학식의 기를 나타낸다.In the formulas, L 1 to L 7 are as defined above, R 19 and R 20 are lower alkyl having 1 to 5 carbon atoms substituted with a sulfonic acid group, and R 21 to R 28 are the same or different and each represents a hydrogen atom, a sulfonic acid group, (Sulfoalkyl) sulfonyl group or a (sulfoalkyl) aminosulfonyl group, and X 'and Y' are the same or different and each represents a hydrogen atom, a hydroxyl group, an alkyl (sulfoalkyl) amino group, a bis (sulfoalkyl) amino group, a sulfoalkoxy group, Lt; / RTI >
식중, R17및 R18은 상기 정의한 바와 같되,Wherein R < 17 > and R < 18 > are as defined above,
단, 하기 화학식의 화합물들은 제외된다.However, the compounds of the following formulas are excluded.
및And
(13) 상기 (12)에 있어서, 화학식 III-1의 L4가 탄소수 1 내지 4의 알킬로 치환된 메틴인 나트륨염.(13) The sodium salt according to (12), wherein L 4 in formula (III-1) is methine substituted with alkyl having 1 to 4 carbon atoms.
(14) 상기 (12)에 있어서, 분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖는 하기 화학식 III-2의 화합물의 나트륨염.(14) The sodium salt of the compound of the formula (III-2), which has at least three sulfonic acid groups in the molecule, in the above-mentioned (12).
식중, R19내지 R28, X' 및 Y'는 상기 정의한 바와 같고, Z3은 5원 또는 6원 고리를 형성하는데 필요한 비금속 원자단이며, A는 수소 원자 또는 1가의 기이다.In the formulas, R 19 to R 28 , X 'and Y' are as defined above, and Z 3 is a non-metallic atomic group necessary for forming a 5-membered or 6-membered ring, and A is a hydrogen atom or a monovalent group.
(15) 상기 (14)에 있어서, 하기 화학식을 갖는 나트륨염.(15) The sodium salt according to (14), which has the following formula:
(16) 상기 (12)에 있어서, 하기 화학식을 갖는 나트륨염.(16) The sodium salt according to (12), which has the following formula:
(17) 상기 (9), (10), (12), (13) 및 (14) 중 어느 한 항에 있어서, 분자 내에 4개 이상의 술폰산기를 갖는 나트륨염.(17) A sodium salt as described in any one of (9), (10), (12), (13) and (14) above, wherein the sodium salt has at least four sulfonic acid groups in the molecule.
(18) 상기 (9), (10), (12), (13), (14) 및 (17) 중 어느 한 항에 있어서, 분자 내에 10개 이하의 술폰산기를 갖는 나트륨염.(18) The sodium salt according to any one of (9), (10), (12), (13), (14) and (17) above, wherein the sodium salt has 10 or fewer sulfonic acid groups in the molecule.
(19) 상기 (9), (10), (12), (13), (14) 및 (17) 중 어느 한 항에 있어서, 분자 내에 8개 이하의 술폰산기를 갖는 나트륨염.(19) A sodium salt as described in any one of (9), (10), (12), (13), (14) and (17) above, wherein the sodium salt has 8 or less sulfonic acid groups in the molecule.
(20) 상기 (9) 내지 (19) 중 어느 한 항에 따른 나트륨염을 포함하는 근적외선 형광 조영제.(20) A near-infrared fluorescent contrast agent comprising a sodium salt according to any one of (9) to (19).
(21) 상기 (20)에 있어서, 종양 조영법 및(또는) 혈관 조영술에 사용되는 근적외선 형광 조영제.(21) The near-infrared fluorescent contrast agent according to (20), which is used for tumor imaging and / or angiography.
(22) 상기 (1)에 따른 근적외선 형광 조영제를 생체 내에 도입하고, 생체를 여기광에 노출시키며, 조영제로부터의 근적외 형광을 검측하는 것을 포함하는 형광 조영법.(22) A fluorescence imaging method comprising introducing the near-infrared fluorescence contrast agent according to (1) above into a living body, exposing the living body to excitation light, and detecting near-infrared fluorescence from the contrast agent.
(23) 상기 (9)에 있어서, 하기 화학식의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상인 나트륨염.(23) The sodium salt according to (9) above, which is at least one selected from the group consisting of compounds represented by the following formulas:
및And
(24) 상기 (12)에 있어서, 하기 화학식의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상인 나트륨염.(24) The sodium salt according to (12), which is at least one selected from the group consisting of compounds represented by the following formulas:
및And
(25) 상기 (1)에 있어서, 하기 화학식의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 화합물을 포함하는 근적외선 형광 조영제.(25) The near-infrared fluorescent contrast agent according to (1) above, which comprises at least one compound selected from the group consisting of compounds represented by the following formulas:
및And
(26) 상기 (14)에 있어서, A의 1가 기가 치환 또는 비치환의 알킬, 치환 또는 비치환의 아릴, 치환 또는 비치환의 아르알킬, 저급 알콕시, 임의로 치환된 치환된 아미노, 알킬카르보닐옥시, 치환 또는 비치환의 알킬티오, 치환 또는 비치환의 아릴티오, 시아노, 니트로 또는 할로겐 원자인 나트륨염.(26) The compound according to (14), wherein the monovalent group of A is a substituted or unsubstituted alkyl, a substituted or unsubstituted aryl, a substituted or unsubstituted aralkyl, a lower alkoxy, an optionally substituted substituted amino, an alkylcarbonyloxy, Or an unsubstituted alkylthio, substituted or unsubstituted arylthio, cyano, nitro, or halogen atom.
도 1 내지 4는 화합물의 투여 24 시간 후의 형광 조영을 나타내는 사진으로서, 투여 조건은 A: ICG (5 mg/kg), B: NK-1967 (5 mg/kg), C: 화합물 (29) (0.5 mg/kg) 및 D: 화합물 (6) K 염 (5 mg/kg) 이었다.1 to 4 are photographs showing the fluorescence contrast after 24 hours of administration of the compound, wherein the conditions of administration are A: ICG (5 mg / kg), B: NK-1967 0.5 mg / kg) and D: compound (6) K salt (5 mg / kg).
도 5는 화합물의 투여 24 시간 후의 형광 조영을 나타내는 사진으로서, 투여 조건은 E: 화합물 (31) (5 mg/kg) 이었다.Fig. 5 is a photograph showing the fluorescence contrast after 24 hours of administration of the compound. The administration condition was E: Compound (31) (5 mg / kg).
도 6 내지 9는 화합물의 투여 (5 mg/kg) 20 초 및 5 분 후의 형광 조영을 나타내는 사진으로서, 투여 조건은 A: ICG (20 초 후), B: ICG (5 분 후), C: 화합물 (29) (20 초 후) 및 D: 화합물 (29) (5 분 후) 이었다.6 to 9 are photographs showing fluorescence contrast after 20 seconds and 5 minutes after the administration of the compound (5 mg / kg), wherein A: ICG (after 20 seconds), B: ICG Compound (29) (after 20 seconds) and D: Compound (29) (after 5 minutes).
도 10은 화합물의 투여 0.5, 1, 4 및 24 시간 후의 혈장 중 화합물의 농도를 나타내는 그래프로서, 세로 좌표축은 각 시점에서의 혈장 중 화합물의 농도 (㎍/ml)이다.10 is a graph showing the concentrations of compounds in plasma after 0.5, 1, 4 and 24 hours after administration of the compound, wherein the ordinate is the concentration (쨉 g / ml) of the compound in plasma at each time point.
도 11은 화합물 (29)의 적외선 흡수 스펙트럼을 나타내는 그래프이다.11 is a graph showing the infrared absorption spectrum of the compound (29).
도 12는 화합물 (31)의 적외선 흡수 스펙트럼을 나타내는 그래프이다.12 is a graph showing the infrared absorption spectrum of the compound (31).
도 13은 화합물 (6)의 적외선 흡수 스펙트럼을 나타내는 그래프이다.13 is a graph showing the infrared absorption spectrum of the compound (6).
도 14는 화합물 (54)의 적외선 흡수 스펙트럼을 나타내는 그래프이다.14 is a graph showing the infrared absorption spectrum of the compound (54).
본 발명에 사용된 용어를 하기에 정의한다.The terms used in the present invention are defined below.
본 발명의 근적외선 형광 조영제는 근적외선 영역에서 형광을 방출하는 조영제를 의미한다.The near infrared fluorescent contrast agent of the present invention means a contrast agent that emits fluorescence in the near infrared region.
본 발명에 있어서, 술폰산기가 내염을 형성하는 데에 사용되는 경우, 술폰산기는 술포네이트 (-SO3 -)를 의미할 수 있다. 본 발명에 있어서, 바람직한 X 및 Y는 하기 화학식으로 나타내어진다.In the present invention, when a sulfonic acid group is used to form a salt, the sulfonic acid group may mean a sulfonate (-SO 3 - ). In the present invention, preferable X and Y are represented by the following formulas.
식중, R3및 R4는 동일 또는 상이하며, 각각 치환 또는 비치환의 알킬이다.Wherein R 3 and R 4 are the same or different and each is a substituted or unsubstituted alkyl.
R1, R2, R3및 R4의 "치환 또는 비치환의 알킬" 중 알킬은 바람직하게는 탄소수 1 내지 5의 직쇄 또는 분지쇄의 저급 알킬, 예컨대 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, sec-부틸, tert-부틸, 펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, tert-펜틸, 2-메틸프로필, 1,1-디메틸프로필 등이다. 치환체는 예를 들어 술폰산기, 카르복실, 히드록시 등일 수 있다. 치환된 알킬의 예로는 히드록시메틸, 1-히드록시에틸, 2-히드록시에틸, 2-히드록시프로필, 3-히드록시프로필, 4-히드록시부틸, 카르복시메틸, 카르복시에틸, 카르복시부틸, 술포메틸, 2-술포에틸, 3-술포프로필, 4-술포부틸 등이 있다. 바람직한 R1및 R2는 술폰산기로 치환된 탄소수 1 내지 5의 저급 알킬 (예를 들어 2-술포에틸, 3-술포프로필, 4-술포부틸 등)이며, R3및 R4는 탄소수 1 내지 5의 비치환의 저급 알킬 (예를 들어 메틸, 에틸 등)이다.The alkyl in " substituted or unsubstituted alkyl " of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 is preferably a straight or branched chain lower alkyl of 1 to 5 carbon atoms such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, Sec-butyl, tert-butyl, pentyl, isopentyl, neopentyl, tert-pentyl, 2-methylpropyl and 1,1-dimethylpropyl. The substituent may be, for example, a sulfonic acid group, carboxyl, hydroxy, and the like. Examples of substituted alkyl include, but are not limited to, hydroxymethyl, 1-hydroxyethyl, 2-hydroxyethyl, 2-hydroxypropyl, 3-hydroxypropyl, 4-hydroxybutyl, carboxymethyl, carboxyethyl, carboxybutyl, sulfo Methyl, 2-sulfoethyl, 3-sulfopropyl, 4-sulfobutyl and the like. Preferred R 1 and R 2 is a lower alkyl of 1 to 5 carbon atoms substituted with a sulfonic acid (e.g. 2-sulfoethyl, 3-sulfopropyl, 4-sulfo-butyl, etc.), R 3 and R 4 are C 1 -C 5 Unsubstituted lower alkyl (e.g., methyl, ethyl, etc.).
R17및 R18의 탄소수 1 내지 5의 비치환의 저급 알킬의 예로는 상기 R1, R2, R3및 R4의 "치환 또는 비치환의 알킬"에서 알킬에 대해 언급된 것들이 있다.Examples of unsubstituted lower alkyl having 1 to 5 carbon atoms represented by R 17 and R 18 include those mentioned for alkyl in " substituted or unsubstituted alkyl " of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 .
R19및 R20의 술폰산기로 치환된 탄소수 1 내지 5의 저급 알킬의 알킬기의 예로는 상기 R1, R2, R3및 R4의 "치환 또는 비치환의 알킬"에서 알킬에 대해 언급된 것들이 있으며, 탄소수 1 내지 5의 치환된 저급 알킬의 예로는 2-술포에틸, 3-술포프로필 및 4-술포부틸을 포함한다.Examples of the alkyl group of a lower alkyl having 1 to 5 carbon atoms substituted with a sulfonic acid group of R 19 and R 20 include those mentioned for the alkyl in " substituted or unsubstituted alkyl " of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 Examples of substituted lower alkyl having 1 to 5 carbon atoms include 2-sulfoethyl, 3-sulfopropyl and 4-sulfobutyl.
R21내지 R28의 알킬(술포알킬)아미노기, 비스(술포알킬)아미노기, 술포알콕시기, (술포알킬)술포닐기 및 (술포알킬)아미노술포닐기의 알킬 잔기는 바람직하게는 탄소수 1 내지 5의 직쇄 또는 분지쇄 저급 알킬이며, 이들의 예로는 상기 R1,R2, R3및 R4의 "치환 또는 비치환의 알킬"에서 알킬에 대해 언급된 것들이 있다.The alkyl residue of the alkyl (sulfoalkyl) amino group, the bis (sulfoalkyl) amino group, the sulfoalkoxy group, the (sulfoalkyl) sulfonyl group and the (sulfoalkyl) aminosulfonyl group of R 21 to R 28 preferably has 1 to 5 Straight chain or branched chain lower alkyl, examples of which are those mentioned for alkyl in " substituted or unsubstituted alkyl " of R 1 , R 2 , R 3 and R 4 .
본 발명에 있어서, "치환 또는 비치환의 축합된 벤조 고리 또는 축합된 나프토 고리를 형성하는데 필요한 비금속 원자"는 축합된 벤조 고리 또는 축합된 나프토 고리를 형성하는데 필요한 결합기를 의미하며, 하기 화학식의 기이다.In the present invention, "a nonmetal atom necessary for forming a substituted or unsubstituted condensed benzo ring or condensed naphtho ring" means a bonding group necessary for forming a condensed benzo ring or condensed naphtho ring, .
축합된 벤조 고리 또는 축합된 나프토 고리가 치환체를 갖는 경우, 상기 결합기는 치환체를 포함할 수 있다.When the condensed benzo ring or the condensed naphtho ring has a substituent, the bonding group may include a substituent.
이들의 구체적인 예로는 탄소 원자, 질소 원자, 산소 원자, 수소 원자, 황 원자, 할로겐 원자 (예를 들어 불소 원자, 염소 원자, 브롬 원자 및 요오드 원자) 등을 포함한다.Specific examples thereof include a carbon atom, a nitrogen atom, an oxygen atom, a hydrogen atom, a sulfur atom, a halogen atom (for example, a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom and an iodine atom).
Z1및 Z2의 비금속 원자로 형성된 축합된 벤조 고리 및 축합된 나프토 고리의 치환체의 예로는 술폰산기, 카르복실, 히드록시, 할로겐 원자 (예를 들어 불소 원자, 염소 원자, 브롬 원자 및 요오드 원자), 시아노, 치환된 아미노 (예를 들어 디메틸아미노, 디에틸아미노, 에틸 4-술포부틸아미노, 디-(3-술포프로필)아미노 등), 및 고리에 직접 결합하거나 2가의 결합기를 통해 결합된 상기한 바와 같은 치환 또는 비치환의 알킬이 있다. 바람직한 2가의 결합기는 예를 들어 -O-, -NHCO-, -NHSO2-, -NHCOO-, -NHCONH-, -COO-, -CO-, SO2- 등이 있다. 고리에 직접 결합하거나 2가 연결기를 통해 결합된 치환 또는 비치환의 알킬 중 알킬의 예로는 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필 및 부틸이 있으며, 치환체의 예로는 바람직하게는 술폰산기, 카르복실 및 히드록시가 있다.Examples of the substituents of the condensed benzo ring and the condensed naphtho ring formed by the nonmetal atoms of Z 1 and Z 2 include sulfonic acid group, carboxyl, hydroxy, halogen atom (e.g., fluorine atom, chlorine atom, bromine atom and iodine atom ), Cyano, substituted amino (e.g., dimethylamino, diethylamino, ethyl 4-sulfobutylamino, di- (3-sulfopropyl) amino and the like), and a group bonded directly to the ring or via a divalent linking group Substituted or unsubstituted alkyl as described above. Preferred divalent linking groups are, for example, -O-, -NHCO-, -NHSO 2 -, -NHCOO-, -NHCONH-, -COO-, -CO-, SO 2 - and the like. Examples of the alkyl in the substituted or unsubstituted alkyl bonded directly to the ring or bonded through a divalent linking group include preferably methyl, ethyl, propyl, and butyl. Examples of the substituent include a sulfonic acid group, a carboxyl group, and a hydroxy group .
L1내지 L7의 메틴의 치환체의 예로는 치환 또는 비치환의 알킬 (상기한 바와 동일함), 할로겐 원자 (상기한 바와 동일함), 치환 또는 비치환의 아릴, 저급 알콕시 등이 있다. "치환 또는 비치환의 아릴" 중 아릴의 예로는 페닐, 나프틸 등이 있고, 바람직하게는 페닐이다. 치환체의 예로는 할로겐 원자 (상기한 바와 동일하며, 염소 원자가 바람직함) 등이 포함된다. 치환된 아릴의 예로는 4-클로로페닐 등이 포함된다. 저급 알콕시는 바람직하게는 탄소수 1 내지 6의 직쇄 또는 분지쇄 알콕시이며, 특히 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, tert-부톡시, 펜틸옥시 등이고, 메톡시 및 에톡시가 바람직하다. 또한, L1내지 L7의 메틴의 치환체는 서로 결합되어 3 개의 메틴기를 함유하는 고리를 형성할 수 있고, 더 나아가 이 고리는 상이한 메틴기를 함유하는 고리와 축합 고리를 형성할 수 있다. L1내지 L7의 메틴의 치환체의 결합에 의해 형성된 3 개의 메틴기를 함유하는 고리의 예로는 4,4-디메틸시클로헥센 고리 등이 있다.Examples of the substituent of methine of L 1 to L 7 include substituted or unsubstituted alkyl (same as above), halogen atom (same as described above), substituted or unsubstituted aryl, lower alkoxy and the like. Examples of aryl in " substituted or unsubstituted aryl " include phenyl, naphthyl and the like, preferably phenyl. Examples of the substituent include a halogen atom (the same as described above, preferably a chlorine atom) and the like. Examples of substituted aryl include 4-chlorophenyl and the like. The lower alkoxy is preferably a straight or branched chain alkoxy having 1 to 6 carbon atoms, especially methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, tert-butoxy, pentyloxy and the like, with methoxy and ethoxy being preferred. Further, the substituents of methine of L 1 to L 7 may be bonded to each other to form a ring containing three methine groups, and further, the ring may form a condensed ring with a ring containing different methine groups. Examples of the ring containing three methine groups formed by the bond of the substituent of methine of L 1 to L 7 include 4,4-dimethylcyclohexene ring and the like.
L1내지 L7의 기로 이루어지며 고리를 갖는 공액 메틴 사슬은 바람직하게는 하기 화학식 a의 기이다.The conjugated methine chain consisting of the groups L 1 to L 7 and having a ring is preferably a group of the following formula a.
식중, Z3은 5원 또는 6원 고리를 형성하는데 필요한 비금속 원자를 나타내며, A는 수소 원자 또는 1가 기이다.Wherein Z 3 represents a nonmetal atom necessary for forming a 5-membered or 6-membered ring, and A is a hydrogen atom or a monovalent group.
"5원 또는 6원 고리를 형성하는데 필요한 비금속 원자"의 예로는 상기 언급한 것들이 있다.Examples of the " nonmetal atom necessary for forming a 5-membered or 6-membered ring " include those mentioned above.
상기 화학식 a 및 후술하는 화학식 III-2에서, Z3의 5원 또는 6원 고리의 예로는 시클로펜텐 고리, 시클로헥센 고리, 4,4-디메틸시클로헥센 고리 등이 있고, 시클로펜텐 고리가 특히 바람직하다.Examples of the 5-membered or 6-membered ring of Z 3 in the formula (a) and the formula (III-2) described later include a cyclopentene ring, a cyclohexene ring and a 4,4-dimethylcyclohexene ring, Do.
A로 나타내어지는 1가 기는 예를 들어 치환 또는 비치환의 알킬 (상기한 바와 동일함), 치환 또는 비치환의 아릴 (상기한 바와 동일함), 치환 또는 비치환의 아르알킬, 저급 알콕시 (상기한 바와 동일함), 임의로 치환된 치환된 아민, 알킬카르보닐옥시 (예를 들어 아세톡시), 치환 또는 비치환의 알킬티오, 치환 또는 비치환의 아릴티오, 시아노, 니트로, 할로겐 원자 (상기한 바와 동일함) 등을 포함한다. 본원에 사용된 "치환 또는 비치환의 아르알킬" 중 아르알킬의 예로는 벤질, 2-페닐에틸, 1-페닐에틸, 3-페닐프로필 등이 있고, 치환체는 술폰산기, 카르복실, 히드록시, 치환 또는 비치환의 알킬 (상기한 바와 동일함), 알콕시 (상기한 바와동일함), 할로겐 원자 (상기한 바와 동일함) 등일 수 있다. "임의로 치환된 치환된 아미노" 중 치환된 아미노는 예를 들어 알킬아미노 (예를 들어 메틸아미노, 에틸아미노 등), 디알킬아미노 (디메틸아미노, 디에틸아미노 등), 디페닐아미노, 메틸페닐아미노, 시클릭 아미노 (예를 들어 모르폴리노, 이미다졸리디노, 에톡시카르보닐피페라디노 등) 등을 포함한다. "임의로 치환된 치환된 아미노" 중 임의의 치환에 있어서의 치환체는 술폰산기, 카르복실 등을 포함한다. "치환 또는 비치환의 알킬티오" 중 알킬티오는 예를 들어 메틸티오, 에틸티오 등일 수 있다. 치환체의 예로는 술폰산기, 카르복실 등이 포함된다. "치환 또는 비치환의 아릴티오" 중 아릴티오의 예로는 페닐티오, 나프틸티오 등이 있다. 치환체의 예로는 술폰산기, 카르복실 등이 포함된다.The monovalent group represented by A includes, for example, a substituted or unsubstituted alkyl (the same as described above), a substituted or unsubstituted aryl (same as described above), a substituted or unsubstituted aralkyl, a lower alkoxy A substituted or unsubstituted alkylthio, a substituted or unsubstituted arylthio, a cyano, a nitro, a halogen atom (same as described above), an optionally substituted alkyleneoxy, And the like. Examples of the aralkyl in the "substituted or unsubstituted aralkyl" used in the present invention include benzyl, 2-phenylethyl, 1-phenylethyl, 3-phenylpropyl and the like. The substituent includes sulfonic acid group, carboxyl, Or an unsubstituted alkyl (same as described above), an alkoxy (same as described above), a halogen atom (same as described above), and the like. Substituted amino in "optionally substituted substituted amino" includes, for example, alkylamino (e.g., methylamino, ethylamino, etc.), dialkylamino (dimethylamino, diethylamino, etc.), diphenylamino, Cyclic amino (e.g., morpholino, imidazolidino, ethoxycarbonylpiperidino, etc.), and the like. Substituents for any substitution of " optionally substituted substituted amino " include sulfonic acid groups, carboxyl, and the like. The alkylthio in the "substituted or unsubstituted alkylthio" may be, for example, methylthio, ethylthio and the like. Examples of the substituent include sulfonic acid group, carboxyl and the like. Examples of arylthio in " substituted or unsubstituted arylthio " include phenylthio, naphthylthio and the like. Examples of the substituent include sulfonic acid group, carboxyl and the like.
A로 나타내어지는 1가 기는 바람직하게는 불소 원자, 염소 원자, 디알킬아미노 (바람직하게는 탄소수가 6개 이하이며, 임의로 고리를 형성함) 또는 모르폴리노이다. 상기 기는 특히 바람직하게는 술폰산기를 갖는다.The monovalent group represented by A is preferably a fluorine atom, a chlorine atom, a dialkylamino group (preferably having 6 or less carbon atoms, optionally forming a ring) or morpholino. This group particularly preferably has a sulfonic acid group.
화학식 I에서, r은 바람직하게는 1이다.In formula (I), r is preferably 1.
제약적으로 허용 가능한 염은 화학식 I의 화합물과 독성의 염을 형성하지 않는 것이라면 어느 것이나 가능하다. 이들의 예로는 알칼리 금속염, 예컨대 나트륨염, 칼륨염; 알칼리 토금속염, 예컨대 마그네슘염, 칼슘염 등; 유기 암모늄염, 예컨대 암모늄염, 트리에틸 암모늄염, 트리부틸 암모늄염, 피리디늄염 등; 아미노산의 염, 예컨대 리신염, 아르기닌염 등이 포함된다. 생체 내에서 독성을 덜 발생시키는 나트륨염이 특히 바람직하다.A pharmaceutically acceptable salt is any that does not form a salt of toxicity with the compound of formula (I). Examples thereof include alkali metal salts such as sodium salt, potassium salt; Alkaline earth metal salts such as magnesium salts, calcium salts and the like; Organic ammonium salts such as ammonium salts, triethylammonium salts, tributylammonium salts, pyridinium salts and the like; Salts of amino acids such as lysine salts, arginine salts and the like. Sodium salts which are less toxic in vivo are particularly preferred.
생체 내에서 사용될 형광 조영제는 특히 수용성이어야 한다. 본 발명에 있어서, 근적외선 형광 조영제는 상기 화합물에 3개 이상의 술폰산기를 도입하여 현저하게 개선된 수용성을 갖는다. 보다 나은 수용성을 위해, 술폰산기의 수는 바람직하게는 4개 이상이다. 용이한 합성을 위해, 술폰산기의 수는 10개 이하, 바람직하게는 8개 이하이다. 수용성의 개선은 각각의 화합물의 분배 계수를 측정하여 결정할 수 있으며, 분배 계수는 예를 들어 부탄올/물의 2상 시스템에서 측정할 수 있다. 더욱 구체적으로, 3개 이상의 술폰산기의 도입은 -1.00 이하의 n-부탄올/물의 log Po/w 분배 계수를 야기한다.Fluorescent contrast agents to be used in vivo should be particularly water-soluble. In the present invention, the near infrared fluorescent contrast agent has remarkably improved water solubility by introducing three or more sulfonic acid groups into the above compound. For better water solubility, the number of sulfonic acid groups is preferably 4 or more. For easy synthesis, the number of sulfonic acid groups is 10 or less, preferably 8 or less. The improvement in water solubility can be determined by measuring the partition coefficient of each compound, and the partition coefficient can be measured, for example, in a two-phase system of butanol / water. More specifically, the introduction of three or more sulfonic acid groups causes a log Po / w partition coefficient of n-butanol / water of less than or equal to -1.00.
술폰산기는 화학식 I의 R1, R2, Z1및(또는) Z2의 위치 및 화학식 II의 R1, R2, R5, R7, R11및(또는) R13의 위치로 도입되는 것이 특히 바람직하다.Sulfonic acid group is introduced to the position of the formula (I) of R 1, R 2, Z 1 and (or) Z 2 R 1, in position and of the formula II R 2, R 5, R 7, R 11 and (or) R 13 Is particularly preferable.
또한, 상기 술폰산기는 바람직하게는 알킬렌과 같은 2가 기를 통해 상기 화학식 a의 A 위치에서 공액 메틴 사슬의 L4로 도입되는 것이 바람직하다.Further, it is preferable that the sulfonic acid group is preferably introduced via a divalent group such as alkylene into L 4 of the conjugated methine chain at the A-position of the formula (a).
분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖는 화학식 II의 화합물의 나트륨염 가운데, R1및 R2가 술폰산기로 치환된 탄소수 1 내지 5의 저급 알킬이며, X 및 Y가 동일 또는 상이하며 각각 하기 화학식의 기인 화합물의 나트륨염이 바람직하다.Wherein R 1 and R 2 are each a lower alkyl having 1 to 5 carbon atoms substituted with a sulfonic acid group and X and Y are the same or different and each is a group represented by the following formula: Lt; / RTI > is preferred.
식중, R17및 R18은 동일 또는 상이하며 각각 탄소수 1 내지 5의 비치환의 저급 알킬이다. 상기 염은 분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖고, 하기 화학식의 화합물이 특히 바람직하다.Wherein R 17 and R 18 are the same or different and each is an unsubstituted lower alkyl having 1 to 5 carbon atoms. The salt has three or more sulfonic acid groups in the molecule, and particularly preferred is a compound of the following formula:
분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖는 화학식 I의 화합물 및 제약적으로 허용 가능한 그의 염 가운데, 하기 화학식 III-1의 화합물의 나트륨염이 바람직하다.Of the compounds of formula (I) having at least three sulfonic acid groups in the molecule and the pharmaceutically acceptable salts thereof, the sodium salt of the compound of formula (III-1) is preferred.
[화학식 III-1][Formula III-1]
식중, L1내지 L7은 상기 정의한 바와 같고, R19및 R20은 술폰산기로 치환된 탄소수 1 내지 5의 저급 알킬이며, R21내지 R28은 동일 또는 상이하고 각각 수소 원자, 술폰산기, 카르복실기, 히드록실기, 알킬(술포알킬)아미노기, 비스(술포알킬)아미노기, 술포알콕시기, (술포알킬)술포닐기 또는 (술포알킬)아미노술포닐기이며,X' 및 Y' 는 동일 또는 상이하고 각각 하기 화학식의 기를 나타낸다.In the formulas, L 1 to L 7 are as defined above, R 19 and R 20 are lower alkyl having 1 to 5 carbon atoms substituted with a sulfonic acid group, and R 21 to R 28 are the same or different and each represents a hydrogen atom, a sulfonic acid group, (Sulfoalkyl) sulfonyl group or a (sulfoalkyl) aminosulfonyl group, and X 'and Y' are the same or different and each represents a hydrogen atom, a hydroxyl group, an alkyl (sulfoalkyl) amino group, a bis (sulfoalkyl) amino group, a sulfoalkoxy group, Lt; / RTI >
식중, R17및 R18은 상기 정의한 바와 같다. 상기 염은 분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖고, 하기 화학식의 화합물이 특히 바람직하다.Wherein R 17 and R 18 are as defined above. The salt has three or more sulfonic acid groups in the molecule, and particularly preferred is a compound of the following formula:
분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖는 화학식 III-1의 화합물의 나트륨염 가운데, 하기 화학식 III-2의 화합물의 나트륨염이 바람직하다.Among the sodium salts of the compound of formula (III-1) having at least three sulfonic acid groups in the molecule, the sodium salt of the compound of formula (III-2)
[화학식 III-2][Formula III-2]
식중, R19내지 R28, X' 및 Y'는 상기 정의한 바와 같고, Z3은 5원 또는 6원 고리를 형성하는데 필요한 비금속 원자이며, A는 수소 원자 또는 1가의 기이다. 상기 염은 분자 내에 3개 이상의 술폰산기를 갖고, 하기 화학식의 화합물이 특히바람직하다.In the formulas, R 19 to R 28 , X 'and Y' are as defined above, and Z 3 is a nonmetal atom necessary for forming a 5-membered or 6-membered ring, and A is a hydrogen atom or a monovalent group. The salt has three or more sulfonic acid groups in the molecule, and particularly preferred is a compound of the following formula:
본 발명의 근적외선 형광 조영제에 함유된 화합물은 화학식 I 또는 II로 나타내어지며 분자 내에 3개 이상, 바람직하게는 4개 이상의 술폰산기를 갖는 것이라면 어느 것이나 가능하다. 상기 화합물은 문헌 (The Cyanine Dyes and Related Compounds, F.M. Hamer, John Wiley and Sons, New York, 1964, Cytometry, 10, 3-10 (1989), Cytometry, 11, 418-430 (1990), Cytometry, 12, 723-730 (1990), Bioconjugate Chem. 4, 105-111 (1993), Anal. Biochem., 217, 197-204 (1994), Tetrahedron, 45, 4845-4866 (1989), 유럽 특허 출원 제 0591820A1 호, 동 제 0580145A1 호 등)에 개시된 시아닌계 염료 화합물의 공지된 제조 방법에 따라 합성할 수 있다. 별법으로서, 이들은 구입 가능한 시아닌계 염료 화합물로부터 공지된 방법으로 반합성될 수 있다. 구체적으로, 이들은 디아닐 화합물과 헤테로시클릭 4급염을 반응시켜 합성할 수 있다.The compound contained in the near-infrared fluorescent contrast agent of the present invention is represented by the formula (I) or (II), and any compound can be used as long as it has three or more, preferably four or more, sulfonic acid groups in the molecule. These compounds can be prepared according to the methods described in The Cyanine Dyes and Related Compounds, FM Hamer, John Wiley and Sons, New York, 1964, Cytometry, 10, 3-10 (1989), Cytometry, 11, 418-430 , Tetrahedron, 45, 4845-4866 (1989), European Patent Application No. 0591820A1 (1990), Bioconjugate Chem. 4, 105-111 (1993), Anal. Biochem., 217, 197-204 No. 0580145A1), which are known in the art, can be synthesized according to a known production method of a cyanine dye compound. Alternatively, they may be semisynthetic from commercially available cyanine dye compounds in a known manner. Specifically, they can be synthesized by reacting a dianil compound with a heterocyclic quaternary salt.
본 발명의 화학식 I의 화합물은 예를 들어 하기 방법으로 합성할 수 있다.The compounds of formula (I) of the present invention can be synthesized, for example, by the following method.
(i) r이 0인 경우(i) when r is 0
(a) L1=L5, X=Y, R1=R2및 Z1=Z2 (a) L 1 = L 5 , X = Y, R 1 = R 2 and Z 1 = Z 2
하기 화학식 IV-1의 헤테로 고리 4급염 화합물 (2몰) 및 하기 화학식 V-1의디아닐 화합물 (1몰)을 염기 및 용매의 존재하에 반응시켜 하기 화학식 VI-1의 화합물을 수득하고, 수득한 화학식 VI-1의 화합물 (1 몰) 및 필요한 몰량의 하기 화학식 VII의 화합물을 반응시켜 상기 화학식 VI-1의 화합물의 나트륨염을 수득한다.Reacting a heterocyclic quaternary salt compound (2 moles) of the formula IV-1 and a dianil compound (1 mole) of the formula V-1 in the presence of a base and a solvent to obtain a compound of the formula VI-1, The compound of formula VI-1 (1 mole) and the required molar amount of a compound of formula VII are reacted to yield the sodium salt of the compound of formula VI-1.
식중, L1, L2, L3, L4, R1, X, Z1는 상기 정의한 바와 같고, T1은 유기산 잔기이다.L 1 , L 2 , L 3 , L 4 , R 1 , X and Z 1 are as defined above, and T 1 is an organic acid residue.
(b) L1≠L5또는 X≠Y 또는 R1≠R2또는 Z1≠Z2 (b) L 1 ≠ L 5 or X ≠ Y or R 1 ≠ R 2 or Z 1 ≠ Z 2
상기 화학식 IV-1의 헤테로 고리 4급염 화합물 (1 몰) 및 상기 화학식 V-1의 디아닐 화합물 (1 몰)을 염기 및 용매의 존재하에 반응시켜 하기 화학식 VIII-1의 화합물을 수득하고, 수득한 화학식 VIII-1의 화합물 (1 몰) 및 하기 화학식 XI-1의 헤테로 고리 4급염 화합물 (1 몰)을 반응시켜 하기 화학식 X-1의 화합물을 수득한 후, 수득한 화학식 X-1의 화합물 (1 몰) 및 필요한 몰량의 상기 화학식 VII의 화합물을 반응시켜 상기 화학식 X-1의 화합물의 나트륨염을 수득한다.(1 mole) of the heterocyclic quaternary salt compound (IV-1) and the dianyl compound (1 mole) of the above general formula V-1 are reacted in the presence of a base and a solvent to obtain a compound of the following formula VIII- (1 mol) of a compound of the formula (VIII-1) and a heterocyclic quaternary salt compound (1 mol) of the following formula (XI-1) to obtain a compound of the formula (X-1) (1 mole) and the required molar amount of the compound of formula VII to yield the sodium salt of the compound of formula X-1.
식중, L1, L2, L3, L4, L5, R1, R2, Z1, Z2, X 및 Y는 상기 정의한 바와 같다.L 1 , L 2 , L 3 , L 4 , L 5 , R 1 , R 2 , Z 1 , Z 2 , X and Y are as defined above.
(ii) r이 1인 경우(ii) when r is 1
(a) L1=L7, X=Y, R1=R2및 Z1=Z2 (a) L 1 = L 7 , X = Y, R 1 = R 2 and Z 1 = Z 2
하기 화학식 IV-1의 헤테로 고리 4급염 화합물 (2 몰) 및 하기 화학식 V-2의 디아닐 화합물 (1 몰)을 염기 및 용매의 존재하에 반응시켜 하기 화학식 VI-2의 화합물을 수득하고, 수득한 화학식 VI-2의 화합물 (1 몰)을 필요한 몰량의 하기 화학식 VII의 화합물과 반응시켜 상기 화학식 VI-2의 화합물의 나트륨염을 수득한다.Reacting a heterocyclic quaternary salt compound (2 moles) of the formula IV-1 and a dianil compound (1 mole) of the formula V-2 in the presence of a base and a solvent to obtain a compound of the formula VI-2: A compound of formula VI-2 (1 mole) is reacted with the required molar amount of a compound of formula VII to give the sodium salt of the compound of formula VI-2.
[화학식 IV-1][Formula IV-1]
[화학식 VI-2][Formula VI-2]
[화학식 VII](VII)
T1-NaT 1 -Na
식중, L1, L2, L3, L4, L5, L6, R1, Z1, X 및 T1은 상기 정의한 바와 같다.L 1 , L 2 , L 3 , L 4 , L 5 , L 6 , R 1 , Z 1 , X and T 1 are as defined above.
(b) L1≠L7또는 X≠Y 또는 R1≠R2또는 Z1≠Z2 (b) L 1 ≠ L 7 or X ≠ Y or R 1 ≠ R 2 or Z 1 ≠ Z 2
상기 화학식 IV-1의 헤테로 고리 4급염 화합물 (1 몰)을 염기 및 용매의 존재하에 상기 화학식 V-2의 디아닐 화합물 (1 몰)과 반응시켜 하기 화학식 VIII-2의 화합물을 수득하고, 수득한 화학식 VIII-2의 화합물 (1 몰)을 하기 화학식 IX-2의 헤테로 고리 4급염 화합물 (1 몰)과 반응시켜 하기 화학식 X-2의 화합물을 수득한 후, 수득한 화학식 X-2의 화합물 (1 몰)을 필요한 몰량의 상기 화학식 VII의 화합물과 반응시켜 상기 화학식 X-2의 화합물의 나트륨염을 수득한다.Reacting the heterocyclic quaternary salt compound (1 mol) of the formula IV-1 with a dianil compound (1 mol) of the formula V-2 in the presence of a base and a solvent to obtain a compound of the formula VIII-2, (1 mol) of a compound represented by the formula (VIII-2) is reacted with a heterocyclic quaternary salt compound (1 mol) of the following formula (IX-2) to obtain a compound represented by the formula (X-2) (1 mol) is reacted with the required molar amount of the compound of formula VII to give the sodium salt of the compound of formula X-2.
식중, L1, L2, L3, L4, L5, L6, L7, R1, R2, Z1, Z2, X 및 Y는 상기 정의한 바와 같다.L 1 , L 2 , L 3 , L 4 , L 5 , L 6 , L 7 , R 1 , R 2 , Z 1 , Z 2 , X and Y are as defined above.
(iii) r이 2인 경우(iii) when r is 2
r이 2인 경우, L6및 L7은 화학식 I과 중복된다. 이를 피하기 위해, 명료하게 하기 위하여 중복되는 L6및 L7을 L8및 L9로 지칭한다.When r is 2, L < 6 > and L < 7 > To avoid this, the overlapping L 6 and L 7 are referred to as L 8 and L 9 for clarity.
(a) L1=L9, X=Y, R1=R2및 Z1=Z2 (a) L 1 = L 9 , X = Y, R 1 = R 2 and Z 1 = Z 2
하기 화학식 IV-1의 헤테로 고리 4급염 화합물 (2 몰)과 하기 화학식 V-3의 디아닐 화합물 (1 몰)을 염기 및 용매의 존재하에 반응시켜 하기 화학식 VI-3의 화합물을 수득하고, 수득한 화학식 VI-3의 화합물 (1 몰)을 필요한 몰량의 하기 화학식 VII의 화합물과 반응시켜 상기 화학식 VI-3의 화합물의 나트륨염을 수득한다.Reacting a heterocyclic quaternary salt compound (2 moles) of the following formula IV-1 with a dianil compound (1 mole) of the formula V-3 in the presence of a base and a solvent to obtain a compound of the formula VI-3: A compound of formula VI-3 (1 mole) is reacted with the required molar amount of a compound of formula VII to give the sodium salt of the compound of formula VI-3.
[화학식 IV-1][Formula IV-1]
[화학식 VII](VII)
T1-NaT 1 -Na
식중, L1, L2, L3, L4, L5, L6, L7, R1, Z1, X 및 T1은 상기 정의한 바와 같고, L8은 임의 치환된 메틴기이다.L 1 , L 2 , L 3 , L 4 , L 5 , L 6 , L 7 , R 1 , Z 1 , X and T 1 are as defined above and L 8 is an optionally substituted methine group.
(b) L1≠L9또는 X≠Y 또는 R1≠R2또는 Z1≠Z2 (b) L 1 ≠ L 9 or X ≠ Y or R 1 ≠ R 2 or Z 1 ≠ Z 2
상기 화학식 IV-1의 헤테로 고리 4급염 화합물 (1 몰)과 상기 화학식 V-3의 디아닐 화합물 (1 몰)을 염기 및 용매의 존재하에 반응시켜 하기 화학식 VIII-3의 화합물을 수득하고, 수득된 화학식 VIII-3의 화합물 (1 몰) 및 하기 화학식 IX-3의 헤테로 고리 4급염 화합물 (1 몰)을 반응시켜 하기 화학식 X-3의 화합물을 수득하며, 수득한 화학식 X-3의 화합물 (1 몰) 및 필요한 몰량의 상기 화학식 VII의 화합물을 반응시켜 상기 화학식 X-3의 화합물의 나트륨염을 수득한다.Reacting a heterocyclic quaternary salt compound (1 mole) of the formula IV-1 with a dianil compound (1 mole) of the formula V-3 in the presence of a base and a solvent to obtain a compound of the formula VIII-3, (1 mole) of the formula VIII-3 and 1 mole of the heterocyclic quaternary salt compound of the formula (IX-3) to obtain the compound of the formula X-3, and the compound of the formula X-3 1 mol) and the required molar amount of the compound of formula VII is reacted to yield the sodium salt of the compound of formula X-3.
식중, L1, L2, L3, L4, L5, L6, L7, L8, R1, R2, Z1, Z2, X 및 Y는 상기 정의한 바와 같고, L9는 임의 치환된 메틴기이다. Wherein, L 1, L 2, L 3, L 4, L 5, L 6, L 7, L 8, R 1, R 2, Z 1, Z 2, X and Y are as defined above, L 9 is Optionally substituted methine group.
화학식 VII의 화합물의 필요한 몰량은 목적하는 화학식 I의 화합물의 나트륨염의 하나의 분자에 함유된 나트륨의 양에 대해 등량 이상이다.The required molar amount of the compound of formula (VII) is equal to or greater than the amount of sodium contained in one molecule of the sodium salt of the desired compound of formula (I).
L8및 L9의 치환된 메틴기의 치환체의 예로는 상기한 L1내지 L7의 메틴기의 치환체에 대해 언급한 것들이 있다.Examples of the substituent of the substituted methine group of L < 8 > and L < 9 > include those mentioned above for the substituent of the methine group of L 1 to L 7 .
상기 (i), (ii) 및 (iii)의 합성 방법에서, 화학식 IV-1 및 화학식 V-1의 화합물의 반응, 화학식 VIII-1 및 화학식 XI-1의 화합물의 반응, 화학식 IV-1 및 화학식 V-2의 화합물의 반응, 화학식 VIII-2 및 화학식 IX-2의 화합물의 반응, 화학식 IV-1 및 화학식 V-3의 화합물의 반응, 및 화학식 VIII-3 및 화학식 IX-3의 화합물의 반응은 바람직하게는 아세트산 무수물과 같은 아실화제의 존재하에 -20 내지80 ℃, 바람직하게는 -10 내지 40 ℃의 온도에서 수행된다.The reaction of the compound of the formula IV-1 and the compound of the formula V-1, the reaction of the compound of the formula VIII-1 and the compound of the formula XI-1, the reaction of the compound of the formula IV-1 and the compound of the formula XI- The reaction of the compound of the formula V-2, the reaction of the compounds of the formulas VIII-2 and IX-2, the reaction of the compounds of the formulas IV-1 and V-3 and the reaction of the compounds of the formulas VIII-3 and IX- The reaction is preferably carried out in the presence of an acylating agent such as acetic anhydride at a temperature of -20 to 80 ° C, preferably -10 to 40 ° C.
상기 (i), (ii) 및 (iii)의 합성 방법에서, 화학식 IV-1 및 화학식 VII의 화합물의 반응, 화학식 X-1 및 화학식 VII의 화합물의 반응, 화학식 VI-2 및 화학식 VII의 화합물의 반응, 화학식 X-2 및 화학식 VII의 화합물의 반응, 화학식 VI-3 및 화학식 VII의 화합물의 반응, 및 화학식 X-3 및 화학식 VII의 화합물의 반응은 바람직하게는 알콜 및 물과 같은 용매의 존재하에 바람직하게는 0 내지 40 ℃의 온도에서 수행된다.The reaction of the compound of the formula IV-1 and the compound of the formula VII, the reaction of the compound of the formula X-1 and the compound of the formula VII, the reaction of the compound of the formula VI-2 and the compound of the formula VII The reaction of compounds of formulas X-2 and VII, the reaction of compounds of formulas VI-3 and VII and the reaction of compounds of formulas X-3 and VII are preferably carried out in a solvent such as an alcohol and water Preferably at a temperature of 0 to 40 < 0 > C.
상기 (i), (ii) 및 (iii)의 합성 방법에서, 사용되는 염기는 예를 들어 트리에틸아민, 트리부틸아민, 피리딘, 디아자비시클로운데센, 소듐메톡사이드 등일 수 있으며, 사용되는 용매는 예를 들어 아미드 화합물, 예컨대 N,N-디메틸아세트아미드, N-메틸피롤리돈 및 N,N-디에틸포름아미드, 또는 알콜, 예컨대 메탄올일 수 있으며; 유기산 잔기는 예를 들어 CH3COO 등일 수 있다.In the synthesis method of (i), (ii) and (iii), the base to be used may be, for example, triethylamine, tributylamine, pyridine, diazabicyclo undecene, sodium methoxide, For example, an amide compound such as N, N-dimethylacetamide, N-methylpyrrolidone and N, N-diethylformamide, or an alcohol such as methanol; Organic acid residue may contain the like CH 3 COO, for example.
상기 화학식 I의 화합물의 다양한 제약적으로 허용 가능한 염의 제조에 있어서, 화학식 I의 화합물의 암모늄염 및 칼륨염은 예를 들어 상기 (i), (ii) 및 (iii)의 합성 방법에 사용된 화학식 VII의 화합물을 나트륨 원자가 암모늄기 또는 칼륨 원자로 바뀐 화학식 VII의 화합물로 대체하여 수득할 수 있으며; 상기 화학식 I의 화합물의 상이한 양이온염은 필요한 경우 이온 교환 수지를 사용하여 상기 암모늄염 및 칼륨염을 상이한 양이온염으로 전환시켜 수득할 수 있다.In preparing the various pharmaceutically acceptable salts of the compounds of formula (I), the ammonium and potassium salts of compounds of formula (I) may be prepared, for example, by reacting a compound of formula (VII) Can be obtained by replacing the compound with a compound of formula VII wherein the sodium atom is replaced by an ammonium group or a potassium atom; The different cation salts of the compounds of formula I above can be obtained, if desired, by converting the ammonium and potassium salts to different cation salts using ion exchange resins.
본 발명에 사용되는 화학식 II의 화합물을 포함하는 상기 화학식 I의 화합물을 하기에 구체적으로 예시하였으나 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.The compounds of formula (I) containing the compound of formula (II) used in the present invention are specifically illustrated below, but the present invention is not limited thereto.
본 발명의 근적외선 형광 조영제에 함유되는 상기 화합물은 700 내지 1300 nm, 특히 약 700 내지 900 nm의 근적외광 영역에서 흡수 및 형광을 나타내며, 100,000 이상의 몰 흡수 계수를 갖는다.The compound contained in the near-infrared fluorescent contrast agent of the present invention exhibits absorption and fluorescence in the near-infrared light region of 700 to 1300 nm, especially about 700 to 900 nm, and has a molar absorption coefficient of 100,000 or more.
본 발명의 근적외선 형광 조영제는 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물 및(또는) 제약적으로 허용 가능한 그의 염을 함유하고 분자 내에 3개 이상, 바람직하게는 4개 이상의 술폰산기를 갖는다면 특별한 제한이 없다. 상기 화합물 또는 그의 염은 단독으로 또는 조합하여 상기 조영제에 함유될 수 있다.The near infrared fluorescent contrast agent of the present invention has no particular limitation as long as it contains a compound of the formula (I) or (II) and / or a pharmaceutically acceptable salt thereof and has 3 or more, preferably 4 or more, sulfonic acid groups in the molecule. The compound or a salt thereof may be contained in the contrast agent singly or in combination.
구체적으로, 상기 조영제는 상기 화합물 또는 주사용 증류수, 생리 식염수, 링거액 등과 같은 용매에 용해되거나 현탁된 상기 화합물을 포함한다. 필요한 경우 약리적으로 허용 가능한 첨가제, 예컨대 담체, 부형제 등을 첨가할 수 있다. 상기 첨가제는 약리적으로 허용 가능한 전해질, 완충제, 세정제와 같은 물질 및 삼투압을 조절하고 안정성 및 용해도를 개선하기 위한 물질 (예를 들어 시클로덱스트린, 리포솜 등)을 함유한다. 관련 분야에서 일반적으로 사용되는 다양한 첨가제를사용할 수 있다. 본 발명의 근적외선 형광 조영제는 제약적인 용도를 의도하는 경우 멸균 공정을 통해 제조되는 것이 바람직하다.Specifically, the contrast agent includes the compound or the compound dissolved or suspended in a solvent such as distilled water for injection, physiological saline, Ringer's solution and the like. If necessary, pharmacologically acceptable additives such as carriers, excipients and the like may be added. Such additives include substances such as pharmacologically acceptable electrolytes, buffers, detergents, and substances to control osmotic pressure and improve stability and solubility (e.g., cyclodextrins, liposomes, etc.). Various additives commonly used in related fields can be used. The near-infrared fluorescence contrast agent of the present invention is preferably produced through a sterilization process when intended for pharmaceutical use.
상기 조영제는 혈관내 (정맥, 동맥), 구강내, 복막내, 경피내, 피하내, 담낭내 또는 기관지내에 주사, 분무 또는 피복에 의해 생체에 투여될 수 있다. 바람직하게는 조영제는 수성 제제, 에멀젼 또는 현탁액의 형태로 혈관내에 투여된다.The contrast agent may be administered to a living body by injection, spraying or coating into an intravascular (intravenous, arterial), intraoral, intraperitoneal, intradermal, subcutaneous, intragastric, or bronchial. Preferably, the contrast agent is administered into the blood vessel in the form of an aqueous formulation, emulsion or suspension.
본 발명의 근적외선 형광 조영제의 투여량은 궁극적으로 진단할 부위의 검측이 가능한 투여량이라면 특별히 한정되지 않으며, 근적외선 형광을 방출하는 사용되는 화합물의 종류, 투여 대상의 연령, 체중, 목적 기관 등에 따라 적절하게 조절된다. 통상적으로, 투여량은 체중 1 kg 당 상기 화합물의 양이 0.1 내지 100 mg, 바람직하게는 0.5 내지 20 mg이다.The dose of the near-infrared fluorescence contrast agent of the present invention is not particularly limited as long as it is a dose that can ultimately be used for the detection of the site to be diagnosed. The dose of the near-infrared fluorescence contrast agent is appropriately determined depending on the kind of the compound used for emitting near-infrared fluorescence, . Typically, the dose is 0.1 to 100 mg, preferably 0.5 to 20 mg, of the compound per kg body weight.
본 발명의 조영제는 인간이 아닌 다양한 동물에 적절하게 사용할 수 있다. 투여 형태, 경로 및 투여량은 대상 동물의 체중 및 증상에 따라 적절하게 결정된다.The contrast agent of the present invention can be suitably used in various non-human animals. The dosage form, route and dosage are appropriately determined depending on the weight and symptoms of the subject animal.
또한, 본 발명에서 분자 내에 3개 이상, 바람직하게는 4개 이상의 술폰산기를 갖는 상기 화학식 I의 화합물, 특히 바람직하게는 화학식 II의 화합물은 종양 조직 내에 현저하게 축적되는 경향이 있다. 이러한 특징을 이용하여 종양 조직은 본 발명의 형광 조영제를 이용하여 구체적으로 조영될 수 있다. 또한, 일련의 상기 화합물은 혈관내에 긴 시간 동안 존재하여 혈관 조영제로서 작용하는 것이 기대된다.Also, in the present invention, the compound of formula (I), particularly preferably the compound of formula (II) having 3 or more, preferably 4 or more, sulfonic acid groups in the molecule tends to accumulate significantly in tumor tissue. Using these features, tumor tissue can be specifically expressed using the fluorescent contrast agent of the present invention. In addition, a series of such compounds are expected to be present in the blood vessels for a long time to act as angiostatic agents.
본 발명의 형광 조영법은 본 발명의 근적외선 형광 조영제의 사용을 특징으로 한다. 상기 방법은 하기의 공지된 방법으로 수행되며, 각각의 변수, 예컨대 검측되는 여기 파장 및 형광 파장은 투여될 근적외 형광 조영제의 종류 및 투여 대상에 따라 적절하게 최적의 조영 및 평가를 달성하도록 결정된다. 본 발명의 근적외선 형광 조영제의 측정 대상으로의 투여로부터 본 발명의 형광 조영법에 의한 초기의 측정까지 소요되는 시간은 사용되는 근적외선 형광 조영제의 종류 및 투여 대상에 따라 달라진다. 예를 들어, 조영제가 종양 조영을 위해 화학식 I의 화합물을 함유하는 경우, 경과 시간은 투여 후 약 4 내지 120 시간이 될 것이다. 화학식 II의 화합물의 경우, 경과 시간은 투여 후 약 24 내지 120 시간이 될 것이다. 경과 시간이 너무 짧으면, 표적 부위 및 기타 부위가 명확하게 구분되지 않을 정도로 형광이 너무 집중된다. 경과 시간이 너무 길면 상기 조영제는 신체로부터 제거될 수 있다. 혈관의 조영을 희망하는 경우, 화학식 I의 화합물 또는 화학식 II의 화합물은 투여 직후 또는 약 30 분 후에 검측된다.The fluorescence imaging method of the present invention is characterized by the use of the near infrared fluorescent contrast agent of the present invention. The method is carried out by the following known method, and each of the parameters, for example, the excitation wavelength and the fluorescence wavelength to be detected, are determined so as to achieve an optimum imaging and evaluation depending on the kind of the near infrared fluorescent contrast agent to be administered and the subject to be administered . The time required from the administration of the near-infrared fluorescent contrast agent of the present invention to the measurement object to the initial measurement by the fluorescence imaging method of the present invention depends on the kind of the near-infrared fluorescent contrast agent to be used and the administration subject. For example, if the contrast agent contains a compound of formula I for tumor imaging, the elapsed time will be about 4 to 120 hours after administration. For compounds of formula II, the elapsed time will be about 24 to 120 hours after administration. If the elapsed time is too short, fluorescence is too concentrated so that the target site and other sites are not clearly distinguished. If the elapsed time is too long, the contrast agent can be removed from the body. When imaging of the blood vessels is desired, the compounds of formula (I) or (II) are tested immediately after administration or after about 30 minutes.
본 발명의 방법은 하기의 단계를 포함한다.The method of the present invention comprises the following steps.
즉, 본 발명의 근적외선 형광 조영제는 검측 대상에 투여되고, 검측 대상은 여기광원으로부터의 여기광에 노출된다. 이어서, 상기 여기광에 의해 발생한 근적외선 형광 조영제로부터의 형광이 형광 검출기로 검측된다.That is, the near-infrared fluorescent contrast agent of the present invention is administered to the object to be detected, and the object to be detected is exposed to the excitation light from the excitation light source. Fluorescence from the near-infrared fluorescent contrast agent generated by the excitation light is then detected by the fluorescence detector.
여기에 필요한 파장은 사용되는 근적외선 형광 조영제에 따라 달라지며, 근적외선 영역에서 상기 화합물이 효과적으로 형광을 방출하는 한 제한이 없다. 바람직하게는 월등한 생체 투과 성능을 갖는 근적외광이 사용된다.The wavelength required here depends on the near-infrared fluorescent contrast agent used and is not limited as long as the compound effectively emits fluorescence in the near-infrared region. Near infrared light having a superior biocompatibility is preferably used.
검출될 근적외선 형광의 파장 역시 사용되는 조영제에 따라 달라진다. 일반적으로 여기광은 600 내지 1000 nm, 바람직하게는 700 내지 850 nm의 파장을 갖는 여기광이 사용되며, 700 내지 1000 nm, 바람직하게는 750 내지 900 nm의 파장 영역에서 근적외선 형광이 검출된다. 이 경우, 여기광원은 통상적인 여기광원, 예컨대 다양한 레이저 (예를 들어 이온 레이저, 색소 레이저 및 반도체 레이저), 할로겐 광원, 크세논 광원 등일 수 있다. 필요한 경우 다양한 광학 필터를 사용하여 최적의 여기 파장을 얻을 수 있다. 유사하게, 다양한 광학 필터를 사용하여 형광을 검출하여 상기 근적외선 형광 조영제로부터 형광만을 선별할 수 있다.The wavelength of the near-infrared fluorescence to be detected also depends on the contrast agent used. In general, excitation light having a wavelength of 600 to 1000 nm, preferably 700 to 850 nm is used, and near-infrared fluorescence is detected in a wavelength range of 700 to 1000 nm, preferably 750 to 900 nm. In this case, the excitation light source may be a conventional excitation light source such as various lasers (for example, ion lasers, dye lasers and semiconductor lasers), a halogen light source, a xenon light source, and the like. Optimum excitation wavelength can be obtained by using various optical filters if necessary. Similarly, fluorescence can be detected using various optical filters to select only the fluorescence from the near-infrared fluorescence contrast agent.
검출된 형광은 형광 정보로서 데이터 처리되며, 기록될 수 있는 형광 화상을 생성하는데 사용된다. 형광 화상은 표적 조직을 포함하는 넓은 영역에 조사하여 CCD 카메라로 형광을 검출하고, 수득된 형광 정보를 영상 처리하여 생성된다. 별법으로서, 광학적 CT 장치, 내시경 또는 기부 측정 카메라를 사용할 수 있다.The detected fluorescence is data processed as fluorescence information and used to generate a fluorescent image that can be recorded. A fluorescent image is generated by irradiating a large area including a target tissue, detecting fluorescence with a CCD camera, and image-processing the obtained fluorescence information. Alternatively, an optical CT device, an endoscope, or a base measuring camera can be used.
본 발명의 형광 조영법은 생체에 손상을 가하지 않고 전신적 질병, 종양, 혈관 등을 시각화시킬 수 있다.The fluorescence imaging method of the present invention can visualize systemic diseases, tumors, blood vessels and the like without damaging the living body.
본 발명을 실시예 및 실험예로써 더욱 상세히 설명하지만 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니다. 하기의 실시예 및 실험예에서의 화합물 번호는 화학식으로 설명한 화합물의 번호에 상응한다.The present invention will be described in more detail by way of Examples and Experimental Examples, but the present invention is not limited thereto. In the following Examples and Experimental Examples, the compound numbers correspond to the numbers of the compounds described in the formulas.
"칼륨염", "칼슘염" 또는 "피리디늄염"을 나타내는 기호가 화합물 번호 후에 나타나있는 화합물 (예를 들어 화합물 (29) K 염)은 짝이온이 나트륨염 대신 칼륨염, 칼슘염 또는 피리디늄염인 것을 제외하고는 화합물 번호로 표시되는 화합물 (나트륨염)과 동일한 화합물을 의미한다. 예를 들어, "화합물 (31) K 염"은 화합물(31)과 동일하되 짝이온이 나트륨이 아닌 칼륨인 화합물을 의미하며, "화합물 (31) Ca 염"은 화합물 (31)과 동일하되 짝이온이 나트륨이 아닌 칼슘인 화합물을 의미하며; "화합물 (31) 피리디늄염"은 화합물 (31)과 동일하되 짝이온이 나트륨이 아닌 피리디늄인 화합물을 의미한다.The compound (e.g., the compound (29) K salt) in which the symbol representing the "potassium salt", the "calcium salt" or the "pyridinium salt" appears after the compound number is a potassium salt, a calcium salt, Refers to the same compound as the compound (sodium salt) represented by the compound number except that it is a dinium salt. For example, " K salt of compound (31) " means a compound which is the same as compound (31) but with opposite ion not potassium, Means that the ion is calcium rather than sodium; &Quot; Compound (31) pyridinium salt " means a compound that is the same as compound (31), but the counter ion is pyridinium, not sodium.
활성 성분으로서 본 발명의 근적외선 형광 조영제에 함유되는 화합물의 합성 방법이 실시예에 설명된다.A method of synthesizing a compound contained in the near-infrared fluorescent contrast agent of the present invention as an active ingredient is described in the examples.
하기의 합성 방법은 주로 표 1에 나타내어진 헤테로시클릭 4급염 화합물 및 표 2 및 3에 나타내어진 디아닐 화합물의 반응으로 구성된다.The following synthesis method mainly consists of the reaction of the heterocyclic quaternary salt compound shown in Table 1 and the dianil compound shown in Tables 2 and 3.
하기의 실시예에서, 편의를 위해 화합물을 표 1 내지 3에 사용된 기호로 나타내었다 (예를 들어 A1, Q1 등).In the following examples, the compounds are represented by the symbols used in Tables 1 to 3 (e.g., A1, Q1, etc.) for convenience.
실시예 1 : 화합물 (29)의 합성Example 1: Synthesis of Compound (29)
헤테로시클릭 4급염 화합물 Q1 (5 g)에 메탄올 (100 ml), N,N-디메틸포름아미드 (25 ml), 트리에틸아민 (5.6 ml), 디아닐 화합물 A1 (1.83 g) 및 아세트산 무수물 (3 ml)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 트리에틸아민 (2.2 ml) 및 아세트산 무수물 (2 ml)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고, 메탄올 (15 ml) 중 소듐아세테이트 (2 g)의 용액을 여과액에 첨가한 후 실온에서 한 시간 동안 교반하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척하였다. 수득한 조 결정 (3.5 g)에 물 (20 ml)을 첨가하여 용해시켰다. 소듐아세테이트 (1 g)을 첨가한 후 메탄올 (30 ml)을 첨가하고, 1 시간 동안 교반하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 3 g의 화합물 (29)를 수득하였다. 수득한 화합물 (29)는 불꽃 시험에서 황색을 나타내었다.To the heterocyclic quaternary compound Q1 (5 g) were added methanol (100 ml), N, N-dimethylformamide (25 ml), triethylamine (5.6 ml), dianil compound A1 (1.83 g) and acetic anhydride 3 ml) was added and the mixture was stirred at room temperature for 4 hours. Triethylamine (2.2 ml) and acetic anhydride (2 ml) were added, and the mixture was stirred at room temperature for 3 hours. Insoluble material was removed by filtration, and a solution of sodium acetate (2 g) in methanol (15 ml) was added to the filtrate and stirred at room temperature for one hour. The resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. To the obtained crude crystals (3.5 g) was added water (20 ml) and dissolved. Sodium acetate (1 g) was added, methanol (30 ml) was added, and the mixture was stirred for 1 hour. The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol and then dried to obtain 3 g of compound (29). The obtained compound (29) showed a yellow color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 780 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 780 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 243,000Molar absorption coefficient (H 2 O): 243,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 802 nmMaximum emission wavelength (H 2 O): 802 nm
FT-IR 분광계 (VALOR-III, 자스코사 (JASCO) 제조)를 사용하여 칼륨브로마이드 정제법으로 수득한 화합물 (29)의 적외선 흡수 스펙트럼을 측정하였다. 하기의 피이크가 검출되었다. 스펙트럼을 도 11에 나타내었다.The infrared absorption spectrum of the compound (29) obtained by the potassium bromide purification method was measured using an FT-IR spectrometer (VALOR-III, manufactured by JASCO). The following peaks were detected. The spectrum is shown in Fig.
IR (νmax(KBr)) : 1414, 1086, 1037, 995, 889 cm-1 IR (? Max (KBr)): 1414, 1086, 1037, 995, 889 cm -1
실시예 2 : 화합물 (34)의 합성Example 2: Synthesis of compound (34)
헤테로 4급염 화합물 Q2 (2.13 g)에 메탄올 (20 ml)을 첨가하고 혼합물을 10 ℃로 냉각시켰다. 여기에 디아닐 화합물 A2 (0.75 g), 트리에틸아민 (4 ml) 및 아세트산 무수물 (2 ml)을 첨가하고, 혼합물을 20 분 동안 교반하였다. 아세트산 무수물 (2 ml)을 첨가하고, 혼합물을 10 ℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고, 소량의 메탄올 중 소듐아세테이트 (2 g)의 용액을 여과액에 첨가하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고, 소량의 메탄올로 세척하였다. 수득한 조 결정에 물 (7 ml)을 첨가하여 용해시켰다. 메탄올 (7 ml)을 침전된 결정에 첨가하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 1.2 g의 화합물 (34)을 수득하였다. 수득된 화합물 (34)는 불꽃 시험에서 황색을 나타내었다.Methanol (20 ml) was added to the heterogeneous quaternary salt compound Q2 (2.13 g) and the mixture was cooled to 10 占 폚. To this was added dianil compound A2 (0.75 g), triethylamine (4 ml) and acetic anhydride (2 ml), and the mixture was stirred for 20 minutes. Acetic anhydride (2 ml) was added and the mixture was stirred at 10 < 0 > C for 4 hours. Insoluble material was removed by filtration, and a small amount of sodium acetate (2 g) in methanol was added to the filtrate. The resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. To the crude crystals obtained, water (7 ml) was added and dissolved. Methanol (7 ml) was added to the precipitated crystals. The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol and then dried to obtain 1.2 g of compound (34). The obtained compound (34) showed a yellow color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 794 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 794 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 176,000Molybdenum absorption coefficient (H 2 O): 176,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 812 nmMaximum emission wavelength (H 2 O): 812 nm
실시예 3 : 화합물 (6)의 합성Example 3: Synthesis of Compound (6)
헤테로시클릭 4급염 화합물 Q3 (9.5 g)에 메탄올 (50 ml), 트리에틸아민 (7 ml), 디아닐 화합물 A3 (3.1 g) 및 아세트산 무수물 (3.9 ml)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 7 시간 동안 건조시켰다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고, 소량의 메탄올 중 소듐아세테이트 (5 g)의 용액을 여과액에 첨가하였다. 혼합물을 하룻밤 동안 방치하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척하였다. 결정에 물 (30 ml)을 첨가하여 용해시켰다. 소듐아세테이트 (2 g)를 첨가한 후 메탄올 (30 ml)을 첨가하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 화합물 (6)을 수득하였다.Methanol (50 ml), triethylamine (7 ml), dianil compound A3 (3.1 g) and acetic anhydride (3.9 ml) were added to the heterocyclic quaternary compound Q3 (9.5 g) Lt; / RTI > Insoluble material was removed by filtration, and a solution of sodium acetate (5 g) in a small amount of methanol was added to the filtrate. The mixture was allowed to stand overnight. The resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. The crystals were dissolved by the addition of water (30 ml). Sodium acetate (2 g) was added followed by methanol (30 ml). The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol and then dried to give compound (6).
실시예 4 : 화합물 (45)의 합성Example 4: Synthesis of compound (45)
헤테로시클릭 4급염 화합물 Q3 (4.8 g)에 메탄올 (50 ml), 트리에틸아민 (4 ml), 디아닐 화합물 A4 (1.7 g) 및 아세트산 무수물 (2 ml)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고, 소량의 메탄올 중 소듐아세테이트 (4 g)의 용액을 여과액에 첨가하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척하였다. 결정에 물 (10 ml)을 첨가하여 용해시킨 후 메탄올 (10 ml)을 첨가하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 공기 건조시켜 화합물 (45)와 동일하되 메틴 사슬의 치환체가 -SCH2CH2SO3Na 대신 -Cl인 화합물 1.6 g을 수득하였다.Methanol (50 ml), triethylamine (4 ml), dianil compound A4 (1.7 g) and acetic anhydride (2 ml) were added to the heterocyclic quaternary compound Q3 (4.8 g) Lt; / RTI > Insoluble material was removed by filtration, and a small amount of sodium acetate (4 g) in methanol was added to the filtrate. The resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. Water (10 ml) was added to the crystals to dissolve and then methanol (10 ml) was added. The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol, and air dried to obtain 1.6 g of a compound which was the same as that of the compound (45), but whose substituent of the methine chain was -Cl instead of -SCH 2 CH 2 SO 3 Na.
상기 단계를 반복하여 상기 화합물 4.2 g을 수득하였다. 여기에 물 (30 ml), 트리에틸아민 (1.2 ml) 및 소듐 2-메르캅토에탄술포네이트 (0.8 g)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4 시간 동안 교반하였다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고, 소량의 물에 용해된 소듐아세테이트 (2 g)의 용액을 여과액에 첨가하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 메탄올 (20 ml)로 세척한 후 공기 건조시켜 2.3 g의 화합물 (45)를 수득하였다. 수득한 화합물 (45)는 불꽃 시험에서 황색을 나타내었다.This step was repeated to give 4.2 g of the compound. Water (30 ml), triethylamine (1.2 ml) and sodium 2-mercaptoethanesulfonate (0.8 g) were added thereto, and the mixture was stirred at room temperature for 4 hours. Insoluble matter was removed by filtration, and a solution of sodium acetate (2 g) dissolved in a small amount of water was added to the filtrate. The resulting crystals were collected by filtration, washed with methanol (20 ml) and air-dried to obtain 2.3 g of compound (45). The compound (45) obtained showed a yellow color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 815 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 815 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 196,000The molar absorption coefficient (H 2 O): 196,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 827 nmMaximum emission wavelength (H 2 O): 827 nm
실시예 5 : 화합물 (2)의 합성Example 5: Synthesis of compound (2)
헤테로시클릭 4급염 화합물 Q3 (4.7 g)에 메탄올 (25 ml), 트리에틸아민 (2.8 ml), 디아닐 화합물 A5 (1.5 g) 및 아세트산 무수물 (2.4 ml)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 여기에 추가로 트리에틸아민 (3.5 ml) 및 아세트산 무수물 (1.5 ml)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 3.5 시간 동안 교반하였다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고, 소량의 메탄올 중 소듐아세테이트 (3 g)의 용액을 여과액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척하였다. 결정에 물 (15 ml)을 첨가하여 용해시킨 후 메탄올 (15 ml)을 첨가하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 화합물 (2)를 수득하였다.Methanol (25 ml), triethylamine (2.8 ml), dianil compound A5 (1.5 g) and acetic anhydride (2.4 ml) were added to the heterocyclic quaternary compound Q3 (4.7 g) Lt; / RTI > To this was further added triethylamine (3.5 ml) and acetic anhydride (1.5 ml), and the mixture was stirred at room temperature for 3.5 hours. Insoluble matter was removed by filtration, and a solution of sodium acetate (3 g) in a small amount of methanol was added to the filtrate. The mixture was stirred at room temperature for 1 hour. The resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. Water (15 ml) was added to the crystals to dissolve and then methanol (15 ml) was added. The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol, and then dried to obtain a compound (2).
실시예 6 : 화합물 (43)의 합성Example 6: Synthesis of Compound (43)
헤테로시클릭 4급염 화합물 Q3 (3.75 g)에 메탄올 (25 ml), 트리에틸아민 (3.5 ml), 디아닐 화합물 A6 (1.95 g) 및 아세트산 무수물 (2.4 ml)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고 소량의 메탄올 중 소듐아세테이트 (3.9 g)의 용액을 여과액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척하였다. 결정에 물 (10 m)을 첨가하여 용해시켰다. 소듐아세테이트 (2 g)를 첨가한 후 메탄올 (10 ml)을 첨가하였다. 생성되는 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 1.8 g의 화합물 (43)을 수득하였다. 수득한 화합물 (43)은 불꽃 시험에서 황색을 나타내었다.Methanol (25 ml), triethylamine (3.5 ml), dianil compound A6 (1.95 g) and acetic anhydride (2.4 ml) were added to the heterocyclic quaternary compound Q3 (3.75 g) Lt; / RTI > Insoluble material was removed by filtration and a solution of sodium acetate (3.9 g) in a small amount of methanol was added to the filtrate. The mixture was stirred at room temperature for 1 hour. The resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. Water (10 m) was added to the crystal to dissolve it. Sodium acetate (2 g) was added followed by methanol (10 ml). The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol and then dried to obtain 1.8 g of compound (43). The obtained compound (43) showed a yellow color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 773 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 773 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 204,000Molar absorption coefficient (H 2 O): 204,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 789 nmMaximum fluorescence emission wavelength (H 2 O): 789 nm
실시예 7 : 화합물 (4)의 합성Example 7: Synthesis of compound (4)
헤테로시클릭 4급염 화합물 Q3 (3.5 g)에 메탄올 (20 ml), 트리에틸아민 (3.5 ml), 디아닐 화합물 A7 (1.2 g) 및 아세트산 무수물 (1.9 ml)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10 시간 동안 교반한 후 하룻밤 동안 방치하였다. 혼합물을 50 ℃로 가열하에 5 시간 동안 교반하였다. 물 (2 ml)을 첨가하고 불용성 물질을 여과하여 제거하였다. 소량의 물에 용해시킨 소듐아세테이트 (5 g)의 용액을 여과액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30 분 동안 교반하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 화합물 (4)를 수득하였다.Methanol (20 ml), triethylamine (3.5 ml), dianil compound A7 (1.2 g) and acetic anhydride (1.9 ml) were added to the heterocyclic quaternary compound Q3 (3.5 g) After stirring for a period of time, it was allowed to stand overnight. The mixture was stirred for 5 hours under heating to 50 < 0 > C. Water (2 ml) was added and the insoluble material was removed by filtration. A solution of sodium acetate (5 g) dissolved in a small amount of water was added to the filtrate. The mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol and then dried to obtain compound (4).
실시예 8 : 화합물 (31)의 합성Example 8: Synthesis of compound (31)
헤테로시클릭 4급염 화합물 Q4 (3.5 g)에 메탄올 (35 ml), 트리에틸아민 (3.5 ml) 및 아세트산 무수물 (2 ml)을 첨가하고, 디아닐 화합물 A2 (1.8 g)를 교반하에 나누어 첨가하였다. 혼합물을 1 시간 동안 추가로 교반하였다. 아세트산무수물 (2 ml)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고 소량의 메탄올 중 소듐아세테이트 (4 g)의 용액을 여과액에 첨가하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척하였다. 결정에 물 (10 ml)을 첨가하여 용해시킨 후, 메탄올 (10 ml)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 1.3 g의 화합물 (31)을 수득하였다. 수득한 화합물 (31)은 불꽃 시험에서 황색을 나타내었다.Methanol (35 ml), triethylamine (3.5 ml) and acetic anhydride (2 ml) were added to the heterocyclic quaternary compound Q4 (3.5 g), and the dianil compound A2 (1.8 g) was added in portions under stirring . The mixture was further stirred for 1 hour. Acetic anhydride (2 ml) was added and the mixture was stirred at room temperature for 5 hours. Insoluble material was removed by filtration and a solution of sodium acetate (4 g) in a small amount of methanol was added to the filtrate. The resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. Water (10 ml) was added to the crystals to dissolve the crystals, followed by addition of methanol (10 ml), and the mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol and then dried to obtain 1.3 g of compound (31). The obtained compound (31) showed a yellow color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 755 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 755 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 228,000Molybdenum absorption coefficient (H 2 O): 228,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 774 nmMaximum fluorescence emission wavelength (H 2 O): 774 nm
FT-IR 분광계 (VALOR-III, 자스코사 (JASCO) 제조)를 사용하여 칼륨브로마이드 정제법으로 수득한 화합물 (31)의 적외선 흡수 스펙트럼을 측정하였다. 하기의 피이크가 검출되었다. 스펙트럼을 도 12에 나타내었다.The infrared absorption spectrum of the compound (31) obtained by the potassium bromide purification method was measured using an FT-IR spectrometer (VALOR-III, manufactured by JASCO). The following peaks were detected. The spectrum is shown in Fig.
IR (νmax(KBr)) : 1518, 1183, 1149, 1111, 995 cm-1 IR (? Max (KBr)): 1518, 1183, 1149, 1111, 995 cm -1
실시예 9 : 화합물 (41)의 합성Example 9: Synthesis of compound (41)
헤테로시클릭 4급염 화합물 Q1 (12 g)에 메탄올 (120 ml), 트리에틸아민 (13.6 ml), 디아닐 화합물 A8 (4.4 g) 및 아세트산 무수물 (2.4 ml)을 첨가하고, 혼합물을 30 분 동안 교반하였다. 아세트산 무수물 (2.4 ml)을 첨가하고 혼합물을 1.5 시간 동안 교반한 후 아세트산 무수물 (2.4 ml)을 첨가하고 혼합물을 실온에서6 시간 동안 교반하였다. 헤테로시클릭 4급염 화합물 Q1 (1 g), 트리에틸아민 (3 ml) 및 아세트산 무수물 (3 ml)을 추가로 첨가하고 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 하룻밤 동안 방치하였다. 소듐아세테이트 (5 g)을 첨가하고 생성된 결정을 여과하여 회수한 후 소량의 메탄올로 세척하였다. 수득한 조 결정에 물 (200 ml)을 첨가하였다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고, 소듐아세테이트 (10 g)을 여과액에 첨가하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척하였다. 결정에 물 (200 ml) 및 트리에틸아민 (10 ml)을 첨가하고, 메탄올 (100 ml) 중 소듐아세테이트 (10 g)의 용액을 첨가하여 결정을 수득하였다. 상기 단계를 2회 반복하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 9.7 g의 화합물 (41)을 수득하였다. 수득된 화합물 (41)은 불꽃 시험에서 황색을 나타내었다.Methanol (120 ml), triethylamine (13.6 ml), dianil compound A8 (4.4 g) and acetic anhydride (2.4 ml) were added to the heterocyclic quaternary compound Q1 (12 g) Lt; / RTI > Acetic anhydride (2.4 ml) was added and the mixture was stirred for 1.5 hours, then acetic anhydride (2.4 ml) was added and the mixture was stirred at room temperature for 6 hours. Heterocyclic quaternary salt compound Q1 (1 g), triethylamine (3 ml) and acetic anhydride (3 ml) were further added and the mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The mixture was allowed to stand overnight. Sodium acetate (5 g) was added and the resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. Water (200 ml) was added to the crude crystals obtained. Insoluble material was removed by filtration, and sodium acetate (10 g) was added to the filtrate. The resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. Water (200 ml) and triethylamine (10 ml) were added to the crystals, and a solution of sodium acetate (10 g) in methanol (100 ml) was added to obtain crystals. This step was repeated twice. The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol and then dried to obtain 9.7 g of compound (41). The obtained compound (41) showed a yellow color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 811 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 811 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 230,000Molybdenum absorption coefficient (H 2 O): 230,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 822 nmMaximum emission wavelength (H 2 O): 822 nm
실시예 10 : 화합물 (3)의 합성Example 10: Synthesis of compound (3)
실시예 5에 따라, 헤테로시클릭 4급염 화합물 Q3 및 상응하는 디아닐 화합물을 사용하여 화합물 (3)을 수득하였다.According to Example 5, compound (3) was obtained using heterocyclic quaternary salt compound Q3 and the corresponding dianil compound.
실시예 11Example 11
소듐아세테이트 (2 g) 대신 칼륨아세테이트 (2 g)를 사용한 것을 제외하면실시예 1의 화합물 (29)의 합성과 동일한 방식으로, 짝이온이 나트륨이 아닌 칼륨인 것을 제외하면 화합물 (29)와 동일한 화합물을 수득하였다. 하기로부터 이 화합물을 화합물 (29) K 염으로 지칭한다. 수득한 화합물 (29) K 염은 불꽃 시험에서 자주색을 나타내었다.(29) was obtained in the same manner as in the synthesis of the compound (29) of Example 1, except that potassium acetate (2 g) was used in place of sodium acetate (2 g) Lt; / RTI > This compound is hereinafter referred to as Compound (29) K salt. The obtained compound (29) K salt exhibited purple in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 780 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 780 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 254,000Molybdenum absorption coefficient (H 2 O): 254,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 800 nmMaximum emission wavelength (H 2 O): 800 nm
상술한 다른 화합물도 본 실시예와 동일한 방식으로 처리하여 나트륨 대신 칼륨 짝이온을 갖는 화합물을 수득하였다.The above-mentioned other compounds were also treated in the same manner as in this Example to obtain a compound having a potassium equivalent ion instead of sodium.
칼륨 짝이온을 갖는 이들 화합물은 상응하는 화합물 번호에 "K 염"을 덧붙여 상기 화합물들로부터 구분하였다.These compounds with potassium counter ions are distinguished from the compounds by the addition of the " K salt " to the corresponding compound number.
실시예 12Example 12
실시예 11과 동일한 방식으로 화합물 (6) K 염을 수득하였다. 수득한 화합물 (6) K 염은 불꽃 시험에서 자주색을 나타내었다.Compound (6) K salt was obtained in the same manner as in Example 11. The compound (6) K salt obtained showed a purple color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 788 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 788 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 226,000Molybdenum absorption coefficient (H 2 O): 226,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 806 nmMaximum emission wavelength (H 2 O): 806 nm
실시예 13Example 13
실시예 11과 동일한 방식으로 화합물 (2) K 염을 수득하였다. 수득한 화합물 (2) K 염은 불꽃 시험에서 자주색을 나타내었다.Compound (2) K salt was obtained in the same manner as in Example 11. The compound (2) K salt obtained showed a purple color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 743 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 743 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 266,000Molybdenum absorption coefficient (H 2 O): 266,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 762 nmMaximum fluorescence emission wavelength (H 2 O): 762 nm
실시예 14Example 14
실시예 11과 동일한 방식으로 화합물 (4) K 염을 수득하였다. 수득한 화합물 (4) K 염은 불꽃 시험에서 자주색을 나타내었다.Compound (4) K salt was obtained in the same manner as in Example 11. The compound (4) K salt obtained showed a purple color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 753 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 753 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 212,000Molar absorption coefficient (H 2 O): 212,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 767 nmMaximum emission wavelength (H 2 O): 767 nm
실시예 15Example 15
실시예 11과 동일한 방식으로 화합물 (3) K 염을 수득하였다. 수득한 화합물 (3) K 염은 불꽃 시험에서 자주색을 나타내었다.Compound (3) K salt was obtained in the same manner as in Example 11. The compound (3) K salt obtained showed a purple color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 751 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 751 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 241,000Molybdenum absorption coefficient (H 2 O): 241,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 767 nmMaximum emission wavelength (H 2 O): 767 nm
실시예 16Example 16
화합물 (6) K 염 (50 mg)을 소량의 물에 용해시키고 이온 교환 수지로 통과시켜 화합물 (6) K 염의 칼륨 이온을 수소로 전환시켰다. 여기에 소듐아세테이트를 포화시킨 메탄올을 첨가하여 결정을 석출시켰다. 상기 공정을 2회 반복하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 32 mg의 화합물 (6)을 수득하였다. 수득한 화합물 (6)은 불꽃 시험에서 황색을 나타내었다.Compound (6) K salt (50 mg) was dissolved in a small amount of water and passed through an ion exchange resin to convert the potassium ion of Compound (6) salt to hydrogen. Methanol saturated with sodium acetate was added to precipitate crystals. This process was repeated twice. The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol and then dried to obtain 32 mg of compound (6). The obtained compound (6) showed a yellow color in the flame test.
FT-IR 분광계 (VALOR-III, 자스코사 (JASCO) 제조)를 사용하여 칼륨브로마이드 정제법으로 수득한 화합물 (6)의 적외선 흡수 스펙트럼을 측정하였다. 하기의 피이크가 검출되었다. 스펙트럼을 도 13에 나타내었다.The infrared absorption spectrum of the compound (6) obtained by the potassium bromide purification method was measured using an FT-IR spectrometer (VALOR-III, manufactured by JASCO). The following peaks were detected. The spectrum is shown in Fig.
IR (νmax(KBr)) : 1395, 1372, 1188, 1102, 1020 cm-1 IR (? Max (KBr)): 1395, 1372, 1188, 1102, 1020 cm -1
실시예 17 : 화합물 (54)의 합성Example 17: Synthesis of compound (54)
헤테로시클릭 4급염 화합물 Q4 (3.5 g)에 메탄올 (20 ml), 트리에틸아민 (3.5 ml) 및 아세트산 무수물 (2 ml)을 첨가하고, 디아닐 화합물 A1 (1.4 g)을 교반하에 나누어 첨가하였다. 혼합물을 추가로 20 분 동안 교반하였다. 아세트산 무수물 (1 ml)을 첨가하고 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 불용성 물질을 여과하여 제거하고 소량의 메탄올 중 소듐아세테이트 (4 g)의 용액을 여과액에 첨가하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척하였다. 결정을 소량의 물에 용해시켰다. 이어서 용액을 메탄올 (10 ml)로 희석시키고 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반하였다. 생성된 결정을 여과하여 회수하고 소량의 메탄올로 세척한 후 건조시켜 1.5 g의 화합물 (54)를 수득하였다. 수득된 화합물 (54)는 불꽃 시험에서 황색을 나타내었다.Methanol (20 ml), triethylamine (3.5 ml) and acetic anhydride (2 ml) were added to the heterocyclic quaternary compound Q4 (3.5 g), and the dianil compound A1 (1.4 g) was added in portions under stirring . The mixture was stirred for an additional 20 minutes. Acetic anhydride (1 ml) was added and the mixture was stirred at room temperature for 1.5 hours. Insoluble material was removed by filtration and a solution of sodium acetate (4 g) in a small amount of methanol was added to the filtrate. The resulting crystals were collected by filtration and washed with a small amount of methanol. The crystals were dissolved in a small amount of water. The solution was then diluted with methanol (10 ml) and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. The resulting crystals were collected by filtration, washed with a small amount of methanol and then dried to obtain 1.5 g of Compound (54). The compound (54) obtained showed a yellow color in the flame test.
최대 흡수 파장 (H2O) : 743 nmMaximum absorption wavelength (H 2 O): 743 nm
몰 흡수 계수 (H2O) : 244,000Molar absorption coefficient (H 2 O): 244,000
형광 방출 최대 파장 (H2O) : 766 nmMaximum fluorescence emission wavelength (H 2 O): 766 nm
FT-IR 분광계 (VALOR-III, 자스코사 (JASCO) 제조)를 사용하여 칼륨브로마이드 정제법으로 수득한 화합물 (54)의 적외선 흡수 스펙트럼을 측정하였다. 하기의 피이크가 검출되었다. 스펙트럼을 도 14에 나타내었다.The infrared absorption spectrum of the compound (54) obtained by the potassium bromide purification method was measured using an FT-IR spectrometer (VALOR-III, manufactured by JASCO). The following peaks were detected. The spectrum is shown in Fig.
IR (νmax(KBr)) : 1511, 1421, 1099, 1004, 926 cm-1 IR (? Max (KBr)): 1511, 1421, 1099, 1004, 926 cm -1
실험예 1Experimental Example 1
화합물 (29), 화합물 (43), 화합물 (45), 화합물 (31), 화합물 (3) K 염, 화합물 (11) [NK-3261의 상품명으로 니폰 간코-시키소 겡큐쇼사 (Nippon Kankoh-Shikiso Kenkyusho Co., Ltd.)로부터 구입 가능], 화합물 (6) K 염, 화합물 (2) K 염, 화합물 (4) K 염, 화합물 (34) 및 화합물 (54)에 대하여 n-부탄올/물의 분배 계수 (log Po/w)를 측정하였다.Compound (29), Compound (43), Compound (45), Compound (31), Compound (3) K salt, Compound (11) Distribution of n-butanol / water to K salt, Compound (2) K salt, Compound (4) K salt, Compound (34) and Compound (54) available from Kenkyusho Co., The coefficient (log Po / w) was measured.
대조 화합물로서 분자 내에 단지 2 개의 술폰산기를 갖는 NK-1967 (니폰 간코-시키소 겡큐쇼사 제조) 및 ICG (도쿄 가세이 고교사 (Tokyo Kasei Kogyo) 제조)를 사용하였다. 결과를 표 4에 나타내었다.As the control compound, NK-1967 (Nippon Gakko-Shikiso Engaku Co., Ltd.) and ICG (Tokyo Kasei Kogyo Co., Ltd.) each having only two sulfonic acid groups in the molecule were used. The results are shown in Table 4.
실험예 2 :형광 조영 시험 (1)Experimental Example 2: Fluorescence contrast test (1)
BALB/c 누드 마우스 (5주령, 클레아 저팬사 (Clea Japan, Inc.))의 좌측 흉부에 마우스 결장 암종 (결장 26 암종)의 종양 조직 표본을 피하내 접목시켰다. 10일 후에 종양이 직경 약 8 mm로 자라면 마우스를 시험하였다.A tumor tissue specimen of mouse colorectal carcinoma (colon 26 carcinoma) was subcutaneously grafted to the left chest of BALB / c nude mice (5 weeks old, Clea Japan, Inc.). After 10 days the mice were tested if the tumor grew to a diameter of about 8 mm.
형광 여기광원으로서, 티타늄 사파이어 레이저를 사용하였다. 시험 마우스를 고리형 광 가이드 (light guide; 수미타 옵티칼 글라스사 (Sumita Optical Glass Co.) 제조)를 사용하여 조사의 분산을 10 ％ 내로 하여 레이저광에 균일하게 노출시켰다. 조사 출력은 마우스의 피부 표면 부근에서 약 40 ㎼/cm2가 되도록 조절하였다. 형광은 각 화합물의 최대 여기 파장에서 여기하며 마우스로부터의 형광 방출이 검출되어 단파장 컷오프 필터 (IR84, IR86, IR88, 후지 포토 필름사 (Fuji Photo Film Co., Ltd) 제조)를 통해 CCD 카메라 (C4880, 하마마츠 포토닉스사 (Hamamatsu Photonics K. K.) 제조)로 촬영하였다. 컷오프 필터는 화합물의 여기 파장에 맞도록 선택되었다. 노출 시간은 각 화합물의 형광 강도에 따라 조절하였다.As a fluorescence excitation light source, a titanium sapphire laser was used. Test mice were uniformly exposed to laser light with a dispersion of irradiation of 10% using a light guide (Sumita Optical Glass Co.). The irradiation power was adjusted to about 40 ㎼ / cm 2 in the vicinity of the skin surface of the mouse. Fluorescence was excited at the maximum excitation wavelength of each compound and fluorescence emission from a mouse was detected and detected by a CCD camera (C4880) through a short wavelength cutoff filter (IR84, IR86, IR88, manufactured by Fuji Photo Film Co., , Manufactured by Hamamatsu Photonics KK). The cutoff filter was chosen to match the excitation wavelength of the compound. The exposure time was controlled by the fluorescence intensity of each compound.
사용된 시험 화합물은 본 발명의 화합물 (29), 화합물 (31) 및 화합물 (6) K 염, 및 대조 화합물로서 분자 내에 단지 2 개의 술폰산기를 갖는 NK-1967 및 ICG였다. 각각의 시험 화합물을 증류수에 용해시키고 (0.5 mg/ml) 꼬리 정맥을 통해 마우스에 투여하였다. 투여량은 화합물 (31), 화합물 (6) K 염, NK-1967 및 ICG의 경우 5.0 mg/kg이고, 화합물 (29)의 경우 0.5 mg/kg이었다. 화합물의 투여 24 시간 후, 마우스를 디에틸에테르로 마취시키고 마우스의 전신 형광 화상을 촬영하였다. 결과를 도 1 내지 5에 나타내었다.The test compounds used were NK-1967 and ICG of the present invention (29), the compound (31) and the compound (6) K salt and only two sulfonic acid groups in the molecule as a control compound. Each test compound was dissolved in distilled water (0.5 mg / ml) and administered to the mice via the tail vein. The dose was 5.0 mg / kg for compound (31), compound (6) K salt, NK-1967 and ICG, and 0.5 mg / kg for compound (29). Twenty-four hours after the administration of the compound, mice were anesthetized with diethyl ether and whole body fluorescence images of mice were taken. The results are shown in Figs.
벤조트리카르보시아닌 구조 및 6 개의 술폰산기를 갖는 화합물 (29) 뿐만 아니라 트리카르보시아닌 구조 및 4 개의 술폰산기를 갖는 화합물 (6) K 염 및 화합물 (31)은 2 개의 술폰산기를 갖는 대조 화합물 (벤조트리카르보시아닌 구조를 갖는 NK-1967 및 트리카르보시아닌 구조를 갖는 ICG)에 비하여 명백히 종양의 명확한 화상을 생성하였다. 특히 화합물 (29)는 적은 투여량으로도 명확히 종양을 나타내었으며 탁월하게 효과적이었다.(6) K salt and compound (31) having a tricarbocyclic structure and four sulfonic acid groups as well as a compound having a benzotricarbocyclic structure and six sulfonic acid groups as well as a compound having two sulfonic acid groups NK-1967 having a tricarbocyanine structure and ICG having a tricarbocyanine structure) clearly produced a clear image of the tumor. In particular, compound (29) clearly showed tumors at low doses and was remarkably effective.
실험예 3 : 형광 조영 시험 (2)Experimental Example 3: Fluorescence contrast test (2)
누드 마우스를 시험에 사용하였다. 본 발명의 화합물 (29) 및 대조 화합물 ICG를 세보플루란의 연속 흡입에 의한 마취하에 5.0 mg/kg의 투여량으로 꼬리 정맥으로 정맥내 주사하였다. 동시에, 형광 화상의 간헐적인 촬영을 개시하였다. 형광 화상을 촬영하기 위해 여기 레이저빔으로의 노출 및 필터를 통한 형광의 추출을 수행하였으며, 노출 시간은 1 초였다. 화합물의 투여 20 초 후에 혈관이 적절하게 조영되었다. 형광 이미지를 투여 후 5 분간 촬영하였다. 도 6 내지 9는 투여 20 초 및 5 분 후의 마우스의 전신 형광 화상을 나타낸다.Nude mice were used for the test. The compound (29) of the present invention and the control compound ICG were intravenously injected into the tail vein at a dose of 5.0 mg / kg under anesthesia by continuous inhalation of sevoflurane. At the same time, intermittent photographing of the fluorescent image was started. Exposure to the excitation laser beam and extraction of fluorescence through a filter were performed to take a fluorescence image and the exposure time was 1 second. The blood vessels were appropriately contrasted after 20 seconds of administration of the compound. Fluorescence images were taken for 5 minutes after administration. Figures 6 to 9 show systemic fluorescence images of mice at 20 and 5 minutes after administration.
ICG는 5분 후에 혈관을 조영하는데 실패했으나 화합물 (29)는 ICG 보다 더 긴 시간 동안 혈관을 조영하였다.ICG failed to visualize the blood vessels after 5 minutes, whereas compound (29) contrasted vessels for a longer time than ICG.
실험예 4 : 혈관내의 체류Experimental Example 4:
실험예 2와 동일한 방식으로 종양 조직 표본을 CDF1마우스 (암컷, 5주령, 저팬 에스엘씨사 (Japan SLC, Inc.))에 접목하고, 약 2 주 후에 종양의 직경이 1 cm로 자라면 마우스를 시험하였다.A tumor tissue sample was grafted to a CDF 1 mouse (female, 5 weeks old, Japan SLC, Inc.) in the same manner as in Experimental Example 2, and when the diameter of the tumor reached 1 cm after about two weeks, .
사용된 시험 화합물은 벤조트리카르보시아닌 구조 및 6 개의 술폰산기를 갖는 화합물 (29) K 염 및 화합물 (41) K 염; 트리카르보시아닌 구조 및 4 내지 5 개의 술폰산기를 갖는 화합물 (6) K 염, 화합물 (4) K 염, 화합물 (45) K 염, 화합물 (31), 화합물 (31) K 염, 화합물 (3) K 염, 화합물 (2) K 염, 화합물 (43) K 염 및 화합물 (11); 및 대조 화합물 NK-1967 및 ICG였다. 각각의 시험 화합물을 증류수에 용해시켜 사용하였다 (0.5 mg/ml). 수득한 각각의 화합물 용액을 꼬리 정맥을 통해 마우스에 투여하였다 (5.0 mg/kg). 화합물의 투여 0.5, 1, 4 및 24 시간 후 마우스로부터 혈액을 채취하고 원심분리하여 혈장을 수득하였다.The test compound used was a compound having a benzotricarbocyclic structure and 6 sulfonic acid groups (29) K salt and compound (41) K salt; (4) K salt, compound (45) K salt, compound (31), compound (31) K salt, compound (3) Compound having tricarbocyclic structure and 4-5 sulfonic acid groups K salts, compounds (2) K salts, compounds (43) K salts and compounds (11); And control compounds NK-1967 and ICG. Each test compound was dissolved in distilled water and used (0.5 mg / ml). Each compound solution obtained was administered to the mice via the tail vein (5.0 mg / kg). Blood was taken from the mice at 0.5, 1, 4 and 24 hours after administration of the compounds and centrifuged to obtain plasma.
혈장의 형광 강도는 형광 분광계 (RF 5300 PC, 시마즈사 (Shimadzu Corporation) 제조)를 사용하여 측정하였다. 각각의 화합물의 검정 곡선을 그리고 혈장 중 화합물의 농도를 계산하였다. 결과를 도 10에 나타내었다.The fluorescence intensity of the plasma was measured using a fluorescence spectrometer (RF 5300 PC, Shimadzu Corporation). The calibration curves of each compound and the concentrations of the compounds in the plasma were calculated. The results are shown in Fig.
본 발명의 화합물은 장시간 동안 혈장 내에 고농도로 잔류하였다.The compound of the present invention remained at a high concentration in the plasma for a long time.
실험예 5 : 급성 독성Experimental Example 5: Acute toxicity
술폰산기의 도입에 의한 독성의 감소 및 나트륨염으로의 전환에 의한 독성의 감소를 연구하였다.Reduction of toxicity by introduction of sulfonic acid group and reduction of toxicity by conversion to sodium salt were studied.
시험 화합물은 표 5에 열거된 것들이다.The test compounds are those listed in Table 5.
각각의 시험 화합물을 증류수에 용해시켜 화합물 용액을 수득하였다. 상기 용액을 꼬리 정맥으로부터 의식이 있는 마우스에 정맥내 주사하였다. 마우스를 투여 후 3 일간 모니터링하고 급성 독성 [LD50(mg/kg (체중))]을 측정하였다. 결과를 표 5에 나타내었다.Each test compound was dissolved in distilled water to obtain a solution of the compound. The solution was intravenously injected into the conscious mouse from the tail vein. The mice were monitored for 3 days after administration and acute toxicity [LD 50 (mg / kg body weight)] was measured. The results are shown in Table 5.
분자 내의 술폰산 기의 수의 증가 또는 나트륨염으로의 전환은 급성 독성의 현저한 감소를 야기하였다.Increasing the number of sulfonic acid groups in the molecule or conversion to a sodium salt has resulted in a significant reduction in acute toxicity.
본 발명에 따른 근적외선 형광 조영제는 여기광에 의해 여기되어 근적외선 형광을 방출한다. 상기 적외선 형광은 생체 조직을 통한 투과율이 탁월하다. 따라서, 생체 내의 깊숙한 부위의 병변의 검측이 가능하게 되었다. 또한, 본 발명의조영제는 수용성이 탁월하고 독성이 낮으므로 안전하게 사용할 수 있다.The near-infrared fluorescent contrast agent according to the present invention is excited by the excitation light to emit near-infrared fluorescence. The infrared fluorescence is excellent in transmittance through a living tissue. Therefore, it becomes possible to detect lesions deep within the living body. Further, the contrast agent of the present invention can be safely used because it has excellent water solubility and low toxicity.
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