KR102136623B1 - 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물 및 이를 포함하는 복합 방부제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물 및 이를 포함하는 복합방부제에 관한 것으로서, 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 유효성분으로 하는 본 발명에 따른 항균용 조성물 및 이를 포함하는 복합방부제는 다양한 균들에 대한 폭넓은 항균활성 스펙트럼을 나타내고, 항균 활성 또한 우수하였다. 뿐만 아니라, 본 발명의 복합방부제는 인체 안전성 시험에서 어떠한 독성이나 자극도 발생하지 않아 인체사용에 있어 안전한 물질인 것으로 판명되었다. 따라서, 본 발명의 복합방부제는 방부 목적으로 화장품이나 의약 등에 유용하게 사용할 수 있다.

Description

식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물 및 이를 포함하는 복합 방부제 {An anti bacterial composition comprising plant extracts and the complex antiseptic compositions comprising the same}

본 발명은 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물 및 이를 포함하는 복합방부제에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 유효성분으로 하는 항균용 조성물 및 이를 포함하는 복합방부제에 관한 것이다.

생활주변에서 널리 이용되는 식품, 의약품, 화장품 등의 많은 제품에는 내부 물성의 변화를 방지하고, 일정 기간 동안의 보존을 위해서 인체에 무익한 방부제가 첨가되어 있다. 기존의 방부제로서 가장 안전하며 화장품, 의약품에 범용적으로 사용되는 파라벤류의 방부제들은 피부 알러지 (Andrea Counti et al., Contact Dermatitis, 1997, 37; 35-36)와 환경호르몬으로서의 가능성 (Edwin et al., Toxicology and applied pharmacology, 1998, 153; 12-19) 및 내성균 유발이라는 문제점을 가지고 있다.

대부분의 화장품은 미생물의 성장에 적합한 상태이고 화학적 변화로 인해 제품의 부패가 쉬우므로 이를 방지하기 위해 인공방부제인 값싼 파라벤류, 이미다졸리디닐 우레아, 디아졸리디닐우레아, 페녹시에탄올 등이 사용되고 있다. 최근에는 단백질, 검, 비타민, 약용식물 등 새로운 첨가물이 추가되면서 미생물의 작용으로 생기는 변화도 다양해지고 있으므로, 이로 인한 방부기능의 약화로 인하여 첨가되는 방부제의 함량은 증가하고 있는 추세이다. 방부제의 사용량이 증가함에 따라, 피부에 대한 자극 및 알러지 증상이 유발될 위험성도 증가하고 있다.

또한, 천연활성 물질들의 경우, 대부분 색취, 안정성 저하, 좁은 항균스펙트럼, 제형상의 문제점 등으로 인하여 상용화되지 못하고 있으며, 편백 추출물인 히노키티올 (hinokitiol)과 목련 추출물인 마그놀롤 (magnolol), 자몽추출물인 DF-100 등 극히 일부만이 상용화되고 있는 실정이다.

따라서, 기존의 합성방부제의 부작용을 줄이고, 동시에 폭넓은 항균스펙트럼, 제형상의 안정성 등을 보유한 복합방부제에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다.

이에 본 발명자들은 우수한 항균활성을 가지면서 인체에 안전한 항균물질 및 이를 이용한 방부제를 개발하기 위해 계속 연구를 진행하던 중 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올 및 아니스 추출물 등 항균활성을 갖는 성분과 진정효과를 가진 식물추출물인 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 최적의 혼합비로 혼합한 복합물이 보다 우수한 항균활성을 나타내고, 항균스펙트럼에 있어서도 폭넓은 범위를 가지며, 인체에 안전하다는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명에서 해결하고자 하는 기술적 과제는 우수한 항균활성 및 폭넓은 항균스펙트럼을 가지면서 인체 안전성이 우수한 항균용 조성물을 제공하기 위한 것이다.

또한, 본 발명에서 해결하고자 하는 다른 기술적 과제는 상기 항균용 조성물을 포함하는 복합방부제를 제공하기 위한 것이다.

상기한 기술적 과제를 해결하기 위하여, 본 발명에서는 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항균용 조성물을 제공한다.

또한, 상기한 다른 기술적 과제를 해결하기 위하여, 본 발명에서는 상기 항균용 조성물을 포함하는 복합방부제를 제공한다.

본 발명에서 사용되는 용어 "항균"은 균에 저항하는 능력을 의미하며, 세균이나 곰팡이, 효모 등과 같은 미생물의 작용으로부터 방어하기 위해 이루어지는 모든 기작을 의미한다. 이러한 항균 효과는 미생물로 인한 부패를 방지하는 방부효과로 이어진다.

바람직하게, 본 발명에서 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 화장료 조성물 또는 약학적 조성물일 수 있다.

본 발명에 있어서, 상기 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.

본 발명의 항균용 조성물의 유효성분인 카프릴릭 글라이콜(Caprylyl Glycol)은 항균 원료로서, 계면활성과 보습력을 가지며, 상대적으로 자극이 약하다. 미생물 세포벽으로의 침투가 용이하여 세포벽 사이로 침투 후, 미생물의 세포벽을 파괴하여 항균효과를 나타낸다.

본 발명의 항균용 조성물의 유효성분인 1,2-헥산디올은 보습제 및 용매로 널리 사용되고 있으며, 보존제, 탈취제, 잉크 첨가제 등의 용도로도 알려져 있다. 폭넓은 균주에 대하여 항균을 나타내지만, 보존제로 충분한 효과를 나타내기 위해서는 고용량으로 사용되어야 하며 이로 인해 피부자극 등의 부작용이 야기될 가능성이 있다.

본 발명의 항균용 조성물의 유효성분인 아니스(Pimpinella Anisum)는 지중해 미나리과의 식물로서, p-아니식애씨드 (p-Anisic acid) 등을 함유하고 있으며, 항균효과 및 면역 자극 효능이 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명의 항균용 조성물의 유효성분인 마치현(Portulaca Oleracea)은 쇠비름과에 속하는 한해살이 식물로서, '본초강목'과 '동의보감' 등에는 쇠비름을 충독 및 사독 등의 해독제로 사용하였고, 아라비아 반도에서는 방부제, 항괴혈병제제, 진경제, 이뇨제, 구충제, 피부진정제로 사용하였다. 오메가-3 (omega-3), 비타민 등을 함유하고 있으며, 수렴 효과, 보습, 항균 효과, 항염증 효과, 항알러지 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다. 최근 연구 결과들에 의하면 마치현 추출물이 항위궤양 작용, 기관지 천식 완화, 창상 치유, 항균 활성 및 항진균 활성 등에도 효과가 있다고 보고되어 있다.

본 발명의 항균용 조성물의 유효성분인 병풀(Centella asiatica)은 한반도 남부 섬의 산이나 들에 자생하는 여러해살이풀로서, 아시아티코사이드(Asiaticoside), 아시아틱애씨드(Asiatic acid), 마데카식애씨드(Madecassic acid) 등을 함유하고 있으며, 항염증 작용과 상처치유 효과 및 주름 개선 효능이 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명에 있어서, "추출물"은 상기 아니스, 마치현 및 병풀을 각각 통상의 방법에 의하여 추출한 추출물로서, 아니스, 마치현 및 병풀로부터 추출한 추출액뿐만 아니라 이의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 포함한다.

본 발명의 추출물은 각각의 원재를 물, 유기 용매, 또는 이의 혼합 용매를 사용하여 추출할 수 있다. 이들 원재를 혼합하여 동시에 추출하거나 개개 성분들을 최적의 조건에서 추출한 후 혼합하여 사용할 수도 있다. 바람직하게는 개개 성분들을 최적의 조건에서 추출한 후 혼합한다.

본 발명에서는 아니스, 마치현 및 병풀의 잎, 줄기, 뿌리 중 어느 부위를 사용해도 무방하다.

상기 유기 용매를 사용하여 추출하는 경우, 메탄올, 에탄올, 이소프로탄올, 부탄올 등의 알콜, 에틸렌, 아세톤, 에테르, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, DMF (N,N-디메틸포름아미드), DMSO (디메틸설폭사이드), 이들의 혼합물 등을 이용하여 실온에서 또는 가온하여 유기 용매로 추출할 수 있다. 바람직하게는, 추출 용매로서 물 또는 에탄올이 사용된다. 보다 바람직하게는, 마치현, 아니스의 추출에는 에탄올이 사용되며, 병풀의 추출에는 물이 사용될 수 있다. 추출물은 건조 또는 비건조된 원재를 분쇄하고, 분쇄물에 용매를 10 내지 100배의 중량비로 가하여 침지한 후, 이를 여과 또는 원심분리하여 상등액을 수득하여 제조될 수 있다.

고온 추출하는 경우, 원재를 물/유기 용매에 가하여 70℃ 이상, 바람직하게는 80℃ 이상, 보다 바람직하게는 90℃ 이상의 온도에서 1 시간 이상, 바람직하게는 2 시간 이상, 보다 바람직하게는 4 시간 이상 가열하고 가열된 추출물을 여과하여 제조할 수 있다. 높은 온도에서 가열하는 경우 시간은 줄어들지만 유효성분이 파괴되어 손실될 수 있고, 상기 온도 보다 낮은 온도에서 가열하게 되면 혼합물의 유효성분이 완전하게 추출되지 않으므로 온도 조절과 시간을 적절하게 조절하는 것이 중요하다.

또한, 열 추출 또는 냉침 추출한 추출물은 부유하는 고체 입자를 제거하기 위해 여과, 예를 들어 나일론 등을 이용하여 입자를 걸러 내거나 냉동여과법 등을 이용하여 여과한 후, 그대로 사용하거나 이를 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등을 이용해 건조시켜 사용할 수 있다.

상기 추출 방법은 제한되지 않고, 예를 들어, 냉침추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출 등을 사용할 수도 있다.

본 발명의 추출물은 추출, 분획, 또는 정제(분리, 분획)의 각 단계에서 얻어지는 모든 추출액, 분획, 정제물, 그들의 희석액, 농축액, 또는 건조물일 수 있다.

본 발명의 항균용 조성물은 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 10~20 : 10~20 : 1~10 : 1 : 1의 중량비, 바람직하게는 15~20 : 15~20 : 5~10 : 1 : 1의 중량비, 보다 바람직하게는 20 : 20 : 5 : 1 : 1의 중량비로 포함한다.

본 발명의 항균용 조성물 중 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물의 총 함량은 조성물의 총 중량에 대해 1 내지 30 중량%, 바람직하게는 1 내지 20 중량%, 보다 바람직하게는 1 내지 5의 중량%의 양으로 포함될 수 있다.

본 발명의 하나의 실시양태에 따르면, 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 하나의 실시양태에 따른 화장료 조성물에는 유효성분으로서의 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물 이외에 화장품 조성물에 통상적으로 첨가되는 성분, 예컨대 항산화제, 안정화제, 가용화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 추가로 첨가할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 영양 크림, 수렴 화장수, 유연 화장수, 로션, 에센스, 영양젤 또는 마사지 크림의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트 검, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 가용화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 검등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 하나의 실시양태에 따르면, 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물이 약학적 조성물로 사용되는 경우, 유효성분으로서 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물 이외에 약학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물에 포함되는 약학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 탄수화물류 화합물(예: 락토스, 아밀로스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 셀룰로스 등), 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 염 용액, 알코올, 아라비아 고무, 식물성 기름(예: 옥수수 기름, 목화 종자유, 두유, 올리브유, 코코넛유), 폴리에틸렌 글리콜, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시 벤조에이트, 프로필히드록시 벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.

본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 성인 기준으로 0.001 내지 100 ㎎/kg 범위 내이다. 또한 외용제인 경우에는 성인 기준으로 1.0 내지 3.0 ml의 양으로 1일 1회 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속하는 것이 좋다. 상기 투여량은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.

본 발명의 약학적 조성물의 제형으로는 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 연고, 크림 등의 외용제 및 멸균 주사용액 등을 비롯하여 약학적 제제에 적합한 어떠한 형태로든 제형화하여 사용할 수 있다.

본 발명의 항균용 약학적 조성물이 피부 외용제로 제공될 경우, 이에 제한되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제 등의 제형일 수 있다.

본 발명에서는 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 포함하는 복합방부제를 제공한다.

본원에서 방부제란 보습제 및 용매로서 널리 사용되고 있는 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올과 천연 물질로부터 추출한 2개 이상의 물질을 혼합한 것으로 이러한 혼합물이 상승적으로 작용하여 방부효과뿐만 아니라 진정효과를 나타내는 물질을 의미한다. 달리, 믹스바이오틱스 (Mixbiotics)라 지칭하기도 한다.

본 발명에 따른 복합방부제는 단일 성분 물질로서 오메가-3 (omega-3), p-아니식애씨드 (p-Anisic acid), 아시아티코사이드(Asiaticoside), 아시아틱애씨드(Asiatic acid), 마데카식애씨드(Madecassic acid)를 추가로 포함할 수 있으나 이에 한정되지 않으며, 이들 성분을 복합방부제의 총 중량을 기준으로 하여 0.01 내지 5.0 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 1.0 중량%로 포함될 수 있다.

본 발명의 복합방부제는 다양한 미생물, 특히 세균, 진균 및 효모에 대해 광범위한 우수한 항균 활성을 나타내고, 세포 독성이 없이 인체 피부에 안전하다.

본 발명의 복합방부제는 상기한 추출물 이외에도 이의 방부 활성을 저해하지 않는 한 추가의 성분들을 포함할 수 있다.

상기한 바와 같이 광범위한 방부 스펙트럼을 갖는 본 발명에 따른 복합방부제는 의약품, 화장품, 섬유, 생활용품 등에서 방부 목적을 달성하기 위해 광범위하게 사용될 수 있으며, 이들 제품에 사용되어 제품의 품질의 안전성과 안정성을 높인다. 또한, 기존의 화학 합성방부제가 인체에 나타내는 부작용을 전혀 나타내지 않으면서 우수한 방부력을 갖는다.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 상기 복합방부제를 포함하는 제품을 제조할 수 있다. 이러한 제품에는 본 발명의 복합방부제를 포함하여 방부효과를 발휘할 수 있는 모든 제품, 예를 들어 화장품, 의약품, 섬유, 생활용품 등 다양한 제품이 포함된다. 특히, 화장품, 의약품 등에의 사용이 바람직하며, 더욱 특히 화장품에의 사용이 보다 바람직하다.

본 발명에 의한 복합방부제의 경우 보존제로서 카프릴릴 글리콜 또는 1,2-헥산디올을 각각 단독으로 사용한 경우보다 우수한 방부효과를 발휘하는데, 이는 각 성분과 식물추출물 내의 항균성분이 혼합하여 오염원에 대한 방부효과에 있어서 상호보완 및 상승 작용을 통해 가능하다. 또한 보존제로서 카프릴릴 글라이콜 또는 1,2-헥산디올을 단독으로 사용하였을 때보다 저자극적이므로 보존제로서 유용하게 사용될 수 있다.

상기한 제품에 본 발명의 복합방부제를 포함시키는 경우, 이의 사용량은 제품의 총 중량을 기준으로 하여 0.001 내지 30 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 20 중량 %, 보다 바람직하게는 0.001 내지 5 중량%의 범위이다.

본 발명의 복합방부제를 포함하는 제품을 제조하기 위해, 당업자에게 널리 공지된 바에 따라 적합한 제형 및 첨가제를 선택하여 이를 제조할 수 있을 것이다.

상기한 제품의 특정 양태로서, 본 발명에 따른 복합방부제를 각종 크림, 로션, 스킨 등과 같은 화장품류와 샴푸, 린스, 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등에 인공 방부제의 첨가 없이 첨가하여 방부효과를 제공하는 화장품을 제공할 수 있다.

상기한 바와 같이, 본 발명의 복합방부제가 포함되는 화장품은 수성 비타민, 유성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 등을 포함한다.

상기 수성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염(티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체(아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다.

상기 유성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E(d1-α-토코페롤, d-α-토코페롤, d-δ-토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 팔미틴산아스코르빈, 아세트산일-α-토코페롤, 니코틴산일-α-토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다.

상기 고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다.

상기 고분자 다당으로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유 동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

상기 스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피트스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다.

본 발명의 화장품에는 상기 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료 등을 들 수 있다.

상기 유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

상기 보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

상기 에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

상기 계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

상기 비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE(폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POE·POP (폴리옥시에틸렌·폴리옥시프로필렌) 공중합체, POE·POP 알킬에테르, 폴리에테르변성 실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.

상기 음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, α-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.

상기 양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.

상기 양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염 형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

상기 유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민, 카본블랙 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠·스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

상기 유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-β-알라닌칼슘, N-라우로일-β-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; Nε-라우로일-L-리진, Nε-팔미토일리진, Nα-파리토일올니틴, Nα-라우로일아르기닌, Nα-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; α-아미노카프릴산, α-아미노라우린산 등의 α-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠·스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

상기 자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리친산페닐, 살리친산옥틸, 살리친산벤질, 살리친산부틸페닐, 살리친산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산 2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필·디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4- tert -부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-ρ-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

상기 알콜로서는 세틸 알코올(Cetyl Alcohol) 등의 고급 알콜을 들 수 있다.

본 발명의 화장품의 구체예로서는 세안크림, 세안폼, 클렌징크림, 클렌징밀크, 클렌징로션, 마사지크림, 콜드크림, 모이스처크림, 유액, 화장수, 팩, 에프터세이빙크림, 썬텐방지크림, 썬텐용 오일, 비누, 보디샴푸, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 양모료, 육모료, 헤어크림, 헤어리퀴드, 세트로션, 헤어스프레이, 헤어브리지, 컬러린스, 컬러스프레이, 퍼머넌트웨이브액, 프레스파우더, 루스파우더, 아이섀도, 핸드크림, 립스틱 등을 들 수 있다.

한편, 본 발명의 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 포함하는 조성물은 피부자극 및 세포독성이 없고 인체 안정성이 우수하여 인체에 대한 부작용이 거의 없는 바, 장기간 사용 시에도 안심하고 사용할 수 있으므로, 화장품 또는 약품에 안전하게 사용할 수 있다.

본 발명에 따른 항균용 조성물 및 이를 포함하는 복합방부제는 다양한 균들에 대한 폭넓은 항균활성 스펙트럼을 나타내고, 항균 활성 또한 우수하였다. 뿐만 아니라, 본 발명의 복합방부제는 인체 안전성 시험에서 어떠한 독성이나 자극도 발생하지 않아 인체사용에 있어 안전한 물질인 것으로 판명되었다. 따라서, 본 발명의 복합방부제는 방부 목적으로 화장품이나 의약 등에 유용하게 사용할 수 있다.

도 1은 미생물에 대한 복합방부제의 항균활성을 나타낸 것이다.
도 2는 병풀 추출물의 PEG₂ 생성 억제 효과를 그래프로 나타낸 것이다.
도 3은 마치현 추출물의 NF-κB 활성 감소 효과를 그래프로 나타낸 것이다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.

<실시예 1> 추출물의 제조

(1) 아니스 추출물 제조

아니스 잎 1 kg을 마쇄기로 세절하고, 70% 에탄올 100 kg을 넣어 환류 장치가 부착된 장치를 이용해 100℃에서 4시간 동안 가열 추출하였다. 추출액을 여과 보조제를 사용하여 여과한 후, 냉소에 7 내지 10일간 방치하여 숙성시키고 나서 침전물을 여과한 다음 70% 에탄올을 추가로 넣어 100 kg 제품을 얻었다.

(2) 마치현 추출물 제조

마치현 잎 또는 뿌리 1 kg을 마쇄기로 세절하고, 70% 에탄올 100 kg을 넣어 환류 장치가 부착된 장치를 이용해 100℃에서 4시간 동안 가열 추출하였다. 추출액을 여과 보조제를 사용하여 여과한 후, 냉소에 7 내지 10일간 방치하여 숙성시키고 나서 침전물을 여과한 다음 70% 에탄올을 추가로 넣어 100 kg 제품을 얻었다.

(3) 병풀 추출물 제조

병풀의 잎 1 kg을 마쇄기로 세절하고, 70% 에탄올 100 kg을 넣어 환류 장치가 부착된 장치를 이용해 100℃에서 4시간 동안 가열 추출하였다. 추출액을 여과 보조제를 사용하여 여과한 후, 냉소에 7 내지 10일간 방치하여 숙성시키고 나서 침전물을 여과한 다음 70% 에탄올을 추가로 넣어 100 kg 제품을 얻었다.

<실시예 2> 항균 효능 측정

항균 효능을 가지고 있다고 보고된 성분을 대상으로 대장균(Escherichia coli), 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa), 스타필로코커스 아우레스(Staphylococcus aureus)와 캔디다 알비칸스(Candida albicans) 및 아스퍼질러스 니거(Aspergillus niger)에 대한 항균 효과를 측정하였다. 항균 활성 측정법으로는 한천 확산법을 이용하였다. 이 방법은 용액 중 항생물질 농도를 결정하는 방법으로서 여러 개의 원반에 기지농도의 항생물질 용액을 묻혀 시험균주가 도포된 고체 한천배지에 올려놓고 배양한 후 원반 주변의 투명대 (growth inhibition halo)의 크기를 측정한다. 한천 확산법의 하나로 현재 널리 사용되고 있는 방법은 Kirby-Bauer 방법이다. 이러한 방법을 통해 항균 실험을 수행한 결과 하기 추출물의 높은 항균 효능이 밝혀졌다. 항균시험 농도는 100 ppm으로 한정해서 수행을 하였다.

균주	카프릴릴 글라이콜	1,2-헥산디올	아니스
Escherichia coli	+++	+++	++
Pseudomonas aeruginosa	+++	+++	++
Staphylococcus aureus	+++	+++	++
Candida albicans	+++	+++	+++
Aspergillus niger	++	++	++++

+: 투명대의 크기가 3 mm 이하

++: 투명대의 크기가 4 내지 10 mm

+++: 투명대의 크기가 11 내지 13 mm

++++: 투명대의 크기가 14 내지 16 mm

+++++: 투며대의 크기가 17 mm 이상

상기 표 1에서 보듯이, 시험결과 카프릴릴 글라이콜과 1,2-헥산디올은 그람음성균, 그람양성균, 효모 등에서 모두 우수한 항균력을 지니지만 곰팡이에서는 보통의 항균력을 보였고, ρ-아니스산의 경우 상기 두 물질과 다르게 그람음성균, 그람양성균, 효모 등에 대해서는 보통의 사멸 효과를 가지나 곰팡이 등에 대해서는 우수한 사멸 효과를 보여주었다.

<실시예 3> 복합방부제 제조 및 항균 효능 측정

상기 실시예 2의 항균 효능 실험을 통해 검증된 성분인 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물을 하기 표 2에 나타낸 바와 같은 다양한 비율로 혼합하여 그람양성군, 그람음성균, 효모균, 곰팡이 항균효과를 나타낼 수 있는 복합물을 제조하였다. 항균물질의 피부자극을 잡아주기 위해, 각 각 전체 조성비의 2% 농도가 되도록 마치현 추출물과 병풀 추출물을 넣어주고, 항균용 조성물의 최종 농도는 100 ppm이 되게 하여 실험을 수행하였다. 항균시험 방법으로는 한천 확산법을 이용하였으며, 미생물 균주로는 스타필로코커스 아우레스(Staphylococcus aureus)와 아스퍼질러스 니거(Aspergillus niger)를 사용하였다. 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다.

시료 번호	카프릴릴글라이콜	1,2-헥산디올	아니스 추출물	병풀 추출물	마치현 추출물
1	1	1	1	0.06	0.06
2	1	5	1	0.15	0.15
3	1	10	1	0.26	0.26
4	1	20	1	0.49	0.49
5	1	1	5	0.15	0.15
6	1	5	5	0.24	0.24
7	1	10	5	0.35	0.35
8	1	20	5	0.57	0.57
9	5	1	1	0.15	0.15
10	5	5	1	0.24	0.24
11	5	10	1	0.35	0.35
12	5	20	1	0.57	0.57
13	5	1	5	0.24	0.24
14	5	5	5	0.33	0.33
15	5	10	5	0.44	0.44
16	5	20	5	0.66	0.66
17	10	1	1	0.26	0.26
18	10	5	1	0.35	0.35
19	10	10	1	0.46	0.46
20	10	20	1	0.69	0.69
21	10	1	5	0.35	0.35
22	10	5	5	0.44	0.44
23	10	10	5	0.55	0.55
24	10	20	5	0.77	0.77
25	15	1	1	0.37	0.37
26	15	5	1	0.46	0.46
27	15	10	1	0.57	0.57
28	15	20	1	0.8	0.8
29	15	1	5	0.46	0.46
30	15	5	5	0.55	0.55
31	15	10	5	0.66	0.66
32	15	20	5	0.89	0.89
33	20	1	1	0.49	0.49
34	20	5	1	0.57	0.57
35	20	10	1	0.69	0.69
36	20	20	1	0.91	0.91
37	20	1	5	0.57	0.57
38	20	5	5	0.66	0.66
39	20	10	5	0.77	0.77
40	20	20	5	1	1
41	20	1	10	0.69	0.69
42	20	5	10	0.77	0.77
43	20	10	10	0.89	0.89
44	20	20	10	1.11	1.11

시료 번호	항세균력	항진균력
1	+	+
2	+	+
3	++	++
4	++	+++
5	+++	++
6	++	++
7	++	++
8	+++	+++
9	++++	++++
10	++++	+++
11	+++	++
12	++++	+++
13	+++	+++
14	+++++	++
15	+	+
16	+	+++
17	++	+++
18	++	+
19	+	++
20	+	+++
21	++	++++
22	+++	++++
23	+	+++
24	+	++++
25	++	++
26	+++	+++
27	+	+++
28	++	++
29	++	+++
30	+++	++++
31	+++	++++
32	++++	++++
33	+++	++
34	+++	++
35	+++++	+++
36	++++	+++++
37	+++	+++
38	++++	+++
39	++++	++++
40	+++++	+++++
41	+++	++
42	++++	+++
43	++++	+++
44	+++	++++

+: 투명대의 크기가 3 mm 이하

++: 투명대의 크기가 4 내지 10 mm

+++: 투명대의 크기가 11 내지 13 mm

++++: 투명대의 크기가 14 내지 16 mm

+++++: 투명대의 크기가 17 내지 19 mm

++++++: 투명대의 크기가 20 mm 이상

상기 표 3의 복합방부제에 대한 항균 효능과 표 1의 단일추출물에 대한 항균 효능시험의 비교로부터 알 수 있듯이, 복합방부제는 단일 원료에 비해 항균효능이 모두 우수하였으며, 특히 추출물의 혼합에 의해 상승 효과가 나타났으며, 특히 40번의 조합비 20:20:5(카프릴릴 글라이콜:1,2-헥산디올:아니스)에서 가장 우수한 항균 효능을 나타냄을 알 수 있었다. 이러한 결과는, 각각의 성분이 항균 효과를 나타낸다고 해서, 이들의 배합물이 동일하게 항균 효과를 나타낸다거나 나아가 상승 작용적으로 우수한 효과를 나타내는 것은 아니며, 오히려 역으로 항균 활성이 감소할 수 있음을 나타낸다. 또한, 상승 효과를 나타내는 특정 조합의 복합물을 발견하기가 어렵다는 것을 고려할 때, 종래 기술로부터는 유추될 수 없음을 제시하고 있다.

<실시예 4> 복합방부제의 항균 활성

복합방부제의 항균 활성을 한천 확산법으로 조사하였다. 복합방부제의 농도를 0.5 %, 1.0 %, 2.0 %로 정해 시험하였다. 미생물 균주로는 그람 음성균인 대장균(Escherichia coli), 양성균인 스타필로코커스 아우레스(Staphylococcus aureus) 및 진균류인 캔디다 알비칸스(Candida albicans)을 이용하였다. 여러 개의 원반에 기지 농도의 항생물질 용액을 묻혀 시험균주가 도포된 고체 한천배지에 올려놓고 배양한 후 원반 주변의 투명대의 크기를 측정하였다. 시험 결과는 하기 표 4에 나타내었다.

	E. coli				S. aureus				C. albicans
농도 (%)	0.25	0.5	1.0	2.0	0.25	0.5	1.0	2.0	0.25	0.5	1.0	2.0
억제 존의 직경(mm)	11.5	12.5	14	18	14.5	16.5	18	20	13	15	17	19

상기 표 4에서 보듯이, 시험에 사용한 3가지 균주에 대해 높은 항균 활성을 보였다.

< 실시예 5> 복합방부제의 최소억제농도 ( MIC ) 결정

복합방부제의 미생물의 성장을 억제하는 최소 농도인 최소억제농도 (MIC)를 측정하였다. 24시간 동안 배양한 대장균(Escherichia coli), 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa), 스타필로코커스 아우레스(Staphylococcus aureus)와 캔디다 알비칸스(Candida albicans) 및 아스퍼질러스 니거(Aspergillus niger)를 배지 (brain heart infusion broth) 3 ml에 넣고, 동시에 복합방부제를 각각 농도별로 첨가한 후 37 ℃에서 24시간 동안 배양하였다. 2배 연속 희석법을 이용하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다.

균주	MIC (%)
E. coli	0.125
P. aeruginosa	1.000
S. aureus	0.003
C. albicans	0.026
A. niger	0.500

표 5에 나타나 있듯이, Escherichia coli에 대한 복합방부제의 MIC는 0.125 %이고, Staphylococcus aureus에 대한 MIC는 0.003 %, Candida albicans에 대해선 0.026 %, Pseudomonas aeruginosa에 대해선 1.0 %, Aspergillus niger에 대해선 0.5 %임을 확인하였다. 복합방부제의 항균활성은 그람 양성균인 Staphylococcus aureus에 대해 가장 높은 항균 활성을 보임을 알 수 있다. 도 1은 본 발명에 따른 복합방부제의 미생물에 대한 항균활성을 나타낸 것이다.

<실시예 6> 추출물의 진정 효능

진정 효능을 가지고 있다고 보고된 천연 추출물을 대상으로 PEG₂와 NF-κB 활성화 감소 효과에 의한 자극완화 효능을 측정하였다. NF-κB는 LPS 등 염증반응 유도인자에 의하여 세포가 자극되면 TNF-alpha, IL-8 등과 같은 프로-항염증 사이토카닌의 생산을 빠른 시간 내 증가시켜 세포에 홍반, 열, 부종과 같은 염증반응을 증상을 일으켜 피부를 민감하게 한다.

도 2는 병풀 추출물의 PEG₂ 생성 억제 효과를 그래프로 나타낸 것이다.

도 3은 마치현 추출물의 NF-κB 활성 감소 효과를 그래프로 나타낸 것이다.

도 2 및 도 3에서 제시된 바와 같이, LPS에 의해 유도된 PEG₂와 NF-κB 활성이 각각 병풀 추출물과 마치현 추출물에 의해 농도 의존적으로 억제되는 것을 관찰할 수 있다.

병풀 추출물을 2% 사용 시 대조군과 비교하여 LPS에 의해 유발된 PEG₂생성을 약 50% 감소시킴을 확인할 수 있었다.

또한, 병풀과 마치현 추출물의 혼합액에서 유효성분을 분석한 결과를 표 4에 요약하였다.

원료명	카프릴릴글라이콜	1,2-헥산디올	아니스 추출물	마치현 추출물	병풀 추출물	정제수/ 용매
주성분	-	-	ρ-아니식애씨드	오메가-3	아시아티코사이드	-
함량 (%)	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	to 100

상기 표 6에서 보듯이, 마치현은 오메가-3 (omega-3), 비타민이 주성분으로 함유되어 있었으며 0.2 %에서 가장 좋은 효과를 나타냈다. 병풀 추출물은 아시아티코사이드(Asiaticoside), 아시아틱애씨드(Asiatic acid), 마데카식애씨드(Madecassic acid) 등이 주요성분이었으며 그 중 아시아티코사이드(Asiaticoside)로서 약 0.2 % 였을 때 가장 좋은 효과를 나타내었다.

<실시예 7> 복합방부제의 세포독성 평가

복합방부제의 세포독성 효과에 대해 인간 각질세포주인 HaCaT과 인간 정상 섬유아세포 세포를 이용해 MTT 실험을 수행하였다. 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.

복합천연방부제 농도 (%)	0	0.1	0.5	1	3	5	7	10
세포생존율	100	102	99.8	99.7	99.5	99.5	97.2	85.6

상기 표 7에서 보듯이, 인간 정상 섬유아세포와 HaCaT의 경우, 복합방부제는 7% 이하 농도에서는 세포독성을 나타내지 않았다. 하지만, 7% 이상의 농도에서는 약간의 세포독성을 나타내었다. 실질적으로 항균 활성을 보이고 있는 7% 이하에서는 전혀 세포독성이 없는 것을 볼 때, 화장품, 의약용 등으로 안전하게 사용할 수 있는 가능성을 제시하였다.

<실시예 8> 복합방부제의 함유한 화장품의 방부효과

본 발명에 따른 복합방부제를 함유하는 화장품의 방부효과를 측정하기 위하여 하기 표 8에 나타낸 조성으로 복합방부제를 구성하였다.

복합방부제	카프릴릴글라이콜	1,2-헥산디올	아니스 추출물	마치현 추출물	병풀 추출물
함량 (%)	10-20	10-20	1-10	1-5	1-5

상기 제조된 복합방부제를 2%의 농도로 포함하는 로션과 토너를 제조하였다. 또한 비교를 위해 복합방부제 대신 정제수, 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올을 포함하는 로션과 토너를 각각 제조하였다.

A. 제조예 및 비교예 1~3 (로션류)

복합방부제를 2% 함유한 로션을 제조예로 준비하였고, 복합방부제 대신 정제수를 대체 사용(비교예 1), 카프릴릴 글라이콜만을 보존제로 사용(비교예 2), 1,2-헥산디올만을 보존제로 사용하여(비교예 3) 하기 표 9의 조성으로 통상적인 방법을 통해 제조하였다.

성분	제조예	비교예
	A(함량%)	1(함량%)	2(함량%)	3(함량%)
세테아레스-6올리베이트	2.00	2.00	2.00	2.00
아라키딜알코올/베헤닐알코올/아라키딜글루코사이드	0.90	0.90	0.90	0.90
토코페릴아세테이트	0.05	0.05	0.05	0.05
네오펜틸글라이콜디헵타노에이트	2.00	2.00	2.00	2.00
폴리데센	2.50	2.50	2.50	2.50
스테아릭애씨드	0.60	0.60	0.60	0.60
디메치콘	0.40	0.40	0.40	0.40
트리에탄올아민	0.10	0.10	0.10	0.10
디소듐이디티에이	0.30	0.30	0.30	0.30
카보머	0.40	0.40	0.40	0.40
산탄검	0.04	0.04	0.04	0.04
향료	미량	미량	미량	미량
복합방부제	2.00
카프릴릴글라이콜			2.00
1,2-헥산디올				2.00
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량
합계	100	100	100	100

B. 제조예 및 비교예 4~6 (토너류)

복합방부제를 함유한 토너를 하기 표 10의 조성으로 통상적인 방법을 통해 제조하였다. 복합방부제 대신 정제수를 대체 사용(비교예 4), 카프릴릴 글라이콜만을 보존제로 사용(비교예 5), 1,2-헥산디올만을 보존제로 사용하여(비교예 6) 하기 표 10의 조성으로 통상적인 방법을 통해 제조하였다.

성분	제조예	비교예
	B(함량%)	4(함량%)	5(함량%)	6(함량%)
글리세린	3.00	3.00	3.00	3.00
부틸렌글라이콜	2.00	2.00	2.00	2.00
프로필렌 글리콜	2.00	2.00	2.00	2.00
카복시비닐폴리머	0.10	0.10	0.10	0.10
에탄올	10.00	10.00	10.00	10.00
트리에탄올아민	0.10	0.10	0.10	0.10
향료	미량	미량	미량	미량
복합방부제	2.00
카프릴릴글라이콜			2.00
1,2-헥산디올				2.00
정제수	잔량	잔량	잔량	잔량
합계	100	100	100	100

C. 제조예 A 및 비교예 1~3의 방부시험 결과(로션류)

제조예 A (복합방부제를 2 % 함유한 로션), 비교예 1 (정제수를 함유한 로션), 비교예 2 (카프릴릴 글라이콜을 함유한 로션), 비교예 3 (1,2-헥산디올을 함유한 로션)에서 제조한 로션과 토너를 사용하여 복합방부제의 방부효과를 평가하였다. 방부효과 평가 방법은 국소 제제에 대해 1996년에 European Pharmacopoeia Commission (E.P.)에서 제시한 Microbial Challenge Test를 이용하였다 (Letters in Applied Microbiology 2002, 35, 385-389). 사용한 균주는 대장균(Escherichia coli), 슈도모나스 아에루기노사(Pseudomonas aeruginosa), 스타필로코커스 아우레스(Staphylococcus aureus)와 캔디다 알비칸스(Candida albicans) 및 아스퍼질러스 니거(Aspergillus niger)이다. 방부효과를 최대 20일까지 측정하였고, 약 3일 간격으로 4번씩 방부효능을 관찰하였다. 그 결과를 하기 표 11(Unit: cfu/ml)에 나타내었다. 하기 표 11에서 TNTC는 너무 많아서 셀 수가 없는 경우이고, ND는 측정되지 않는 경우이고, NT는 시험하지 않은 경우이다.

상기 표 11에서 보듯이, 20일 기간을 두고 2 %의 복합방부제를 함유한 로션의 방부 시험 결과, 처리 후 4일 이내에 균이 모두 사멸하였다. 비교예 2와 비교예 3은 20일 각각 2.0X10개, 2.5X10개 검출되었으므로 방부효능은 양호하다고 판단되나, 본 발명의 복합방부제가 보다 방부효능이 뛰어남을 확인할 수 있었다.

D. 제조예 B 및 비교예 4~6의 방부시험 결과(토너류)

제조예 B (복합방부제를 2 % 함유한 토너), 비교예 4 (정제수를 함유한 토너), 비교예 5(카프릴릴글라이콜을 함유한 토너), 비교예 6 (1,2-헥산디올을 함유한 토너)에서 제조한 로션과 토너를 사용하여 복합방부제의 방부효과를 평가하였다. 방부효과 평가 방법은 국소 제제에 대해 1996년에 European Pharmacopoeia Commission (E.P.)에서 제시한 Microbial Challenge Test를 이용하였다 (Letters in Applied Microbiology 2002, 35, 385-389). 로션류의 방부시험과 동일한 균주를 사용하였고, 방부효과를 최대 20일까지 측정하였고, 약 3일 간격으로 4번씩 방부효능을 관찰하였다.

상기 표 12에서 보듯이, 20일 기간을 두고 2 %의 복합방부제를 함유한 토너의 방부 시험 결과, 처리 후 4일 이내에 균이 모두 사멸하였다. 비교예 5와 비교예 6은 20일 각각 1.0X10개, 1.0X10개 검출되었으므로 방부효능은 양호하다고 판단되나, 본 발명의 복합방부제가 보다 방부효능이 뛰어남을 확인할 수 있다.

<실시예 9> 복합방부제의 인체 피부에 대한 안전성 측정

상기와 같이 항균 활성 및 방부효능이 우수하다고 판명된 복합방부제가 인체 피부에도 안전한지 확인하기 위하여, 피부 안전성 검증 실험을 수행하였다. 시험방법으로는 인체피부 일차자극시험(48 hr's Single Patch Test)을 실시하였다.

상기 표 10에 나타낸 제조예 A, 비교예 1~3의 로션에 대해서 건강한 30명의 성인을 대상으로 등 부위에 도포하여 48시간 후 제거하는 것에 의하여 복합방부제가 피부에 자극을 주는지의 여부를 측정하였다.

첩포 방법은 핀 챔버 (Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. 챔버에 상기 각 피부외용제를 15 ul씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. 매회 피부에 나타난 반응의 정도를 하기 수학식 1을 이용하여 점수화 하였으며, 그 결과를 하기 표 13에 나타내었다.

이 때, 반응도에서 ±는 1점, +는 2점, ++는 4점의 점수를 부여하며, 평균반응도가 3 미만일 때 안전한 조성물로 판정된다.

시험물질	반응이 나타난 피검자 수									평균 반응도
	1주			2주			3주
	1차	2차	3차	4차	5차	6차	7차	8차	9차
	± ＋ ＋＋	± ＋ ＋＋	± ＋ ＋＋	± ＋ ＋＋	± ＋ ＋＋	± ＋ ＋＋	± ＋ ＋＋	± ＋ ＋＋	± ＋ ＋＋
제조예 A	2 - -	0 - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	0.18
비교예 1	2 - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	0.18
비교예 2	3 - -	1 - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	0.37
비교예 3	3 - -	1 - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	- - -	0.37
피검인원	30	30	30	30	30	30	30	30	30

상기 표 13에서 보듯이, 제조예 A의 경우, ±, +, ++에 해당하는 사람의 수가 각각 2명, 0명, 0명이었고, 그 외 나머지는 반응이 나타나지 않았다. 상기 기재된 수학식 1에 따라 계산하면 제조예 A 내지 비교예 3의 평균 반응도가 각각 0.18, 0.18. 0.37, 0.37으로 모두 3 이하가 되어, 인체 피부에 안전한 물질로 판정되었다. 복합방부제가 2% 함유된 로션(제조예 A)은 뚜렷한 누적 자극 양상을 나타내지 않았으며, 카프릴릴 글리콜, 1,2-헥산디올을 함유한 비교예 2,3의 화장료보다 피부 자극이 훨씬 감소됨을 알 수 있다. 본 시험물질은 인체피부 일차자극 측면에서 저자극 범주의 물질로 판단된다.

Claims (6)

1. 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 유효성분으로 포함하고,
   상기 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물이 10~20 : 10~20 : 1~10 : 1 : 1의 중량비로 혼합된 것을 특징으로 하는 항균용 조성물.
2. 삭제
3. 제 1 항에 있어서,
   상기 카프릴릴 글라이콜, 1,2-헥산디올, 아니스 추출물, 마치현 추출물 및 병풀 추출물을 조성물의 총 중량에 대해 1 내지 30 중량%의 양으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항균용 조성물.
4. 제 1 항 또는 제 3 항에 따른 항균용 조성물을 포함하는 복합방부제.
5. 제 4 항에 있어서,
   상기 복합방부제가 오메가-3, 비타민, p-아니식애씨드, 아시아티코사이드, 아시아틱애씨드 및 마데카식애씨드로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 복합방부제의 총 중량에 대하여 0.01 내지 5.0 중량%의 양으로 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 복합방부제.
6. 제 4 항에 있어서,
   상기 복합방부제가 화장료로 사용되는 것을 특징으로 하는 복합방부제.

Images