[go: up one dir, main page]

KR102025848B1 - 항―ｎｇｆ 조성물 및 그의 용도 - Google Patents

항―ｎｇｆ 조성물 및 그의 용도 Download PDF

Info

Publication number
KR102025848B1
KR102025848B1 KR1020137017181A KR20137017181A KR102025848B1 KR 102025848 B1 KR102025848 B1 KR 102025848B1 KR 1020137017181 A KR1020137017181 A KR 1020137017181A KR 20137017181 A KR20137017181 A KR 20137017181A KR 102025848 B1 KR102025848 B1 KR 102025848B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
delete delete
seq
pain
chain polypeptide
ngf
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
KR1020137017181A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20140014102A (ko
Inventor
벤자민 에이치. 덧자르
브라이언 알. 코바체비치
다니엘레 엠. 미첼
에단 더블유. 오자라
페이 판
제프리 티.엘. 스미스
패트리샤 다이안 맥닐
젠스 빌그렌
에리카 에이. 스튜어트
코린 씨. 아카트슈카
베티 유-칭 창
존 에이. 래섬
레온 에프. 가르시아-마르티네즈
Original Assignee
앨더바이오 홀딩스 엘엘씨
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 앨더바이오 홀딩스 엘엘씨 filed Critical 앨더바이오 홀딩스 엘엘씨
Publication of KR20140014102A publication Critical patent/KR20140014102A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102025848B1 publication Critical patent/KR102025848B1/ko
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
    • A61K51/10—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody
    • A61K51/1021—Antibodies or immunoglobulins; Fragments thereof, the carrier being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. a camelised human single domain antibody or the Fc fragment of an antibody against cytokines, e.g. growth factors, VEGF, TNF, lymphokines or interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2875—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF/TNF superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)

Abstract

본 발명은 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 및 그의 단편, 특히 TrkA 및/또는 p75 또는 p75 및/또는 TrkA와 NGF의 상호작용을 억제하는 것에 관한 것이다. 본 발명의 다른 실시형태는 본 명세서에 기재된 VH, VL 및 CDR 폴리펩타이드 서열을 포함하는 본 명세서에 기재된 항체 및 그의 결합 단편, 및 이들을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 또한 하나 이상의 기능성 또는 검출가능한 모이어티에 컨쥬게이트된 항-NGF 항체 및 그의 결합 단편의 컨쥬게이트를 고려한다. 본 발명은 또한 상기 항-NGF 항체 및 그의 결합 단편의 제조방법을 고려한다. 본 발명의 실시형태는 또한 NGF와 관련된 질병 및 장애의 진단, 평가 및 치료를 위한 항-NGF 항체, 및 그의 결합 단편의 용도에 관한 것이다.

Description

항―ＮＧＦ 조성물 및 그의 용도{ANTI-NGF COMPOSITIONS AND USE THEREOF}
관련 출원
이 출원은 2010년 12월 1일 출원된 미국 가특허 출원 제61/418,832호에 대한 우선권의 이익을 주장하며, 이 기초출원은 그의 전문이 본 명세서에 참조로서 포함된다. 추가로, 이 출원은 명세서 제67858-740003호(지정된 일련번호)(발명의 명칭: "METHODS OF PREVENTING OR TREATING PAIN USING ANTI-NGF ANTIBODIES THAT SELECTIVELY INHIBIT THE ASSOCIATION OF NGF WITH TRKA, WITHOUT AFFECTING THE ASSOCIATION OF NGF WITH P75"); 명세서 제67858-740004호(지정된 일련번호)(발명의 명칭: "METHODS OF PREVENTING INFLAMMATION AND TREATING PAIN USING ANTI-NGF COMPOSITIONS"); 명세서 제67858-740005호(지정된 일련번호)(발명의 명칭: "METHODS OF PREVENTING OR TREATING PAIN USING ANTI-NGF ANTIBODIES") 및 명세서 제67858-740006호(지정된 일련번호)(발명의 명칭: "NGF ANTIBODIES AND USE THEREOF")에 관한 것이며, 이들 모두는 알더 바이오파마슈티컬스(Alder Biopharmaceuticals)에게 부여되었고, 모두 2011년 12월 1일에 출원되었으며, 모두 전문이 참조로서 포함된다.
본 발명의 기술분야
본 발명은 인간 신경성장인자(Nerve Growth Factor, 이후에 "NGF")에 결합 특이성을 지니는 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함)에 관한 것이다. 본 발명은 또한 NGF와 관련된 질병 및 장애를 스크리닝하기 위한 방법 및 상기 항체 또는 그의 단편을 투여함으로써 NGF와 관련된 질병 및 장애를 예방하거나 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 인간 신경 성장인자(이후에 "NGF")에 결합 특이성을 지니는 1가 작용제(agent)(이하에 확인되는 Fab 단편 및 다른 1가 NGF 결합제를 포함) 및 개체의 통증 치료 방법에서 상기 1가 작용제 중 하나 이상을 사용하는 방법에 관한 것이되, 하나 이상의 1가 작용제의 투여 후 개체의 염증 반응의 실질적인 증가는 없다. 이들 1가 작용제는 선택적으로 폴리에틸렌 글라이콜(polyethylenes glycol, PEG) 또는 다른 수용성 폴리머 등의 첨가에 의하는 것과 같이 그의 순환 반감기를 연장시키기 위해 변형될 수 있다.
본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 선택적으로 억제하는 적어도 하나의 NGF 길항물질(antagonist) 화합물을 포함하는 항-통증 의약, 및 상기 NGF 길항물질 화합물, 예를 들어 개체에서 통증을 치료하기 위한 항체 및 그의 단편 중 하나 이상을 사용하는 방법에 관한 것이되, 바람직하게는, 이들 NGF 길항물질 화합물은 인간 신경 성장 인자(이후에 "NGF")에 결합 특이성을 지니는 항체 또는 그의 단편(이하에 확인되는 Fab 단편 및 다른 1가 NGF 결합제를 포함)을 포함할 것이다. 항체 및 단편이 예시되지만, 유사한 길항물질의 특성을 소유하는 적절한 결합 및/또는 기능적 분석을 사용하여 다른 NGF 길항물질, 예를 들어 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 선택적으로 억제하는 NGF 또는 TrkA, 소분자, 안티센스 RNA 및 침묵 RNA 등의 폴리펩타이드 단편이 선택될 수 있다는 것이 예상된다. 이들 화합물, 예를 들어 항체 및 항체 단편은 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제와 함께 투여될 때 치료가 필요한 피험체에서 상이한 통증의 유형을 치료하거나 또는 방지하기 위한 단일용법(monotherapy)으로서 사용될 수 있다. 더 구체적으로는, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 1가 작용제를 포함하는 항-인간 NGF 항체 또는 그의 단편에 관한 것이다. 이들 항체 및 단편, 예를 들어 1가 작용제는 PEG 또는 다른 폴리머의 부착을 통해 또는 검출가능한 작용제 또는 기능성 작용제와 같은 다른 모이어티(moiety)의 부착에 의해 순환 반감기에 영향을 미치도록 변형될 수 있다. 이들 1가 작용제는, 예로서 Fab, Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(small molecule immunopharmaceuticals, 소분자 면역약제), 카멜바디(camelbody), 나노바디(nanobody), IgNAR, MetMab와 유사한 1가 항체 분자, 또는 이들의 하나 이상의 조합을 포함한다.
추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 선택적으로 억제하는 NGF 길항물질(antagonist) 화합물의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 개체에서 통증을 치료하거나 또는 진통제 효과를 유발하는 신규한 방법에 관한 것이되, 바람직하게는, 이들 NGF 길항물질 화합물은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 선택적으로 억제하는 항-인간 NGF 항체 또는 그의 단편을 포함할 것이다. 본 발명은 추가로 p75와 NGF의 결합을 억제하고, TrkA와 NGF의 결합을 추가로 억제할 수 있는 제2 항-NGF 항체 또는 단편의 투여를 추가로 포함하는 통증 치료 방법을 선택적으로 포함한다.
신경 성장 인자(NGF)(또한 베타 신경 성장 인자(베타-NGF)로서 알려짐)는 18개의 아미노산 신호 펩타이드의 절단 후 길이로 222개 아미노산의 성숙 단백질로서 생성된다. NGF를 암호화하는 유전자는 염색체 1p13.1 상에 위치된다. NGF의 생물학적으로 활성인 형태는 호모다이머화되고, 더 큰 복합체 내로 함입되는 분비된 단백질이다. NGF는 뉴로트로핀(neurotrophin: NT)의 구성원인데, 이는 뇌-유래 뉴로트로핀 인자(BDNF), NT-3 및 NT-4/5를 포함하는 구조적으로 관련된 단백질의 그룹이다(Wyman et al ., Gene Therapy (1999), 6:1648-1660). NT는 개입 뉴런에 의해 표적화되는 세포에 의해 생성되는 뉴런 및 신경 전달 물질 시스템의 구체적 유형의 생존을 지지한다. 상기와 동일. 기부 전뇌, 흑질(substantia nigra), 뇌줄기, 피질, 및 척수는 NGF에 증명된 반응성을 갖는 신경계 영역이다. 상기와 동일.
모든 NT는 p75로서 확인되는 저-친화성 수용체에 결합된다. (Sarchielli et al., Expert Rev. Neurotherapeutics (2004), 4(1):115-127). NGF는 고 친화성 뉴로트로핀 수용체 TrkA에 대해 선택적으로 결합하며, 고 친화성을 나타낸다. 상기와 동일. NGF는 근원성 분화 및 생체내 근육 회복에 필요한 발전적으로-조절된 신호처리 경로에서 저-친화성 수용체 p75를 통해 작용한다는 것이 최근에 입증되었다. (Deponti et al ., Mol. Biol. Cell (2009), 20:3620-3627).
NGF는 또한 성체 동물에서 통증-신호처리 시스템과 상호작용하는 것이 증명되었고, 국소적으로 또는 전신적으로 다수의 종에서 투여될 때 통각과민을 초래한다. (Sarchielli et al ., Expert Rev. Neurotherapeutics (2004), 4(1):115-127). NGF는 래트에서 CSF 내로 스며들 때 통증-유사 반응을 유발하는 것으로 나타났으며, 만성 통증을 유지하는 것으로 증명되었다. 더 나아가, NGF는 8시간 내지 12시간 후 발생되는 기계적 이질통의 발생 및 2차적 통증 반응에 기여한다는 것이 증명되었다. 상기와 동일.
통증은 종종 어떤 마취제 또는 비스테로이드성 항염증약물(non-steroidal anti-inflammatory drug: NSAID)의 투여를 통해 처리될 수 있다. 그러나, 이들 처치의 투여는 어떤 부정적 결과의 대가로 생길 수 있다. NSAID는 신부전, 장출혈 및 간 기능이상을 야기할 가능성이 있다. 마취제는 메스꺼움, 구토, 손상된 정신적 기능 및 중독을 야기할 가능성이 있다. 따라서, 어떤 이들 부정적 결과를 회피하기 위하여 통증에 대한 대안의 치료를 확인하는 것은 바람직하다.
NGF는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 암, 신경병증 통증 및 신경성 통증과 관련된 통증과 같은 넓은 범위의 질병 및 장애와 관련된 통증을 포함하는 다수의 질병 및 장애에서 어떤 역할을 하는 것으로 믿어진다. 넓은 범위의 통증-관련 질병 및 장애에서 NGF의 인지된 관여 때문에, NGF와 관련된 질병 및 장애, 및 특히 통증과 관련된 것을 예방하거나 또는 치료하는데 유용한 조성물 및 방법에 대해 당업계에서 필요가 남아있다. 특히 바람직한 항-NGF 조성물은 환자에게 투여될 때 최소의 또는 최소화하는 부작용, 예컨대 염증을 지니는 것이다. 통증과 같은 NGF와 관련된 질병 또는 장애를 감소시키거나 또는 억제하는 조성물 또는 방법은 치료가 필요한 환자에게 유리하다.
본 발명은 NGF에 대해 결합 특이성을 갖는 특이적 항체 및 그의 단편, 특히 원하는 에피토프 특이성, 고 친화성 또는 결합활성 및/또는 기능적 특성을 갖는 항체에 관한 것이다. 본 발명의 다른 실시형태는 본 명세서에 기재된 VH, VL 및 CDR 폴리펩타이드의 서열 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 본 명세서에 기재된 항체에 관한 것이다.
본 발명의 바람직한 실시형태는 NGF에 결합할 수 있고/있거나 p75와 TrkA 수용체 둘 다에 NGF의 결합에 의해 매개된 생물학적 활성을 억제할 수 있는 키메라 또는 인간화된 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함)에 관한 것이다. 본 발명의 다른 바람직한 실시형태는 NGF에 결합할 수 있고, TrkA 수용체에 NGF의 결합에 의해 매개되는 생물학적 활성을 선택적으로 억제할 수 있는 반면, p75 수용체에 NGF의 결합에 의해 매개되는 생물학적 활성을 상당하게 억제하지 않는 키메라 또는 인간화된 항체 및 그의 단편에 관한 것이다.
본 발명의 다른 바람직한 실시형태에서, 전장 항체 및 그의 Fab 단편은 보행 분석(Gait analysis)(본 명세서의 실시예에 기재됨)에 의해 측정되는 바와 같이 뮤린 모델에서 생체내 통증을 유의하게 감소시킬 수 있다. 본 발명의 특히 바람직한 실시형태는 통증을 완화하거나 또는 치료하는 방법에서 Fab 항체 단편의 사용에 관한 것이다. 본 발명의 다른 바람직한 실시형태에서, NGF에 대해 결합 특이성을 갖는 1가 작용제(예컨대 본 명세서에 기재된 저장 항체의 Fab 단편)은 개체에서 통증을 완화하거나 또는 치료하는데 유용한 한편, 보행 분석 후 생체내 뮤린 모델에서 증명되는 것과 동일한 농도로 투약된 전장 항체와 비교하여 염증을 실질적으로 증가시키지 않는다.
본 발명의 다른 실시형태에서, NGF에 결합할 수 있는 키메라 또는 인간화된 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함)은 TF1 세포 증식을 억제한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, NGF에 결합할 수 있는 키메라 또는 인간화된 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함)은 PC-12 축삭생성(neurite outgrowth)을 억제한다.
본 발명의 다른 실시형태에서 이들 항체 및 인간화된 버전은 토끼 면역 세포(B 림프구)로부터 유래될 수 있으며, 인간 생식계열 서열에 대한 그의 상동성(서열 동일성)을 기반으로 선택될 수 있다. 이들 항체는 서열 변형이 최소이거나 또는 전혀 필요하지 않을 수 있고, 이에 의해 인간화 후 기능적 특성의 보유를 용이하게 할 수 있다. 본 발명의 추가 실시형태는, 예를 들어 토끼 면역 세포로부터 유래된 VH, VL 및 CDR 폴리펩타이드를 포함하는 항-NGF 항체로부터의 단편 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드뿐만 아니라 NGF 및/또는 NGF/p75 및 NGF/TrkA 복합체에 결합할 수 있는 신규 항체 및 폴리펩타이드 조성물의 생성에서 이들 항체 단편 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드의 사용에 관한 것이다.
본 발명은 또한 하나 이상의 기능적 또는 검출가능한 모이어티에 컨쥬게이트된 항-NGF 항체 및 그의 결합 단편의 컨쥬게이트를 고려한다. 본 발명은 또한 상기 키메라 또는 인간화된 항-NGF, 항-NGF/p75 복합체 또는 항-NGF/TrkA 복합체 항체 및 그의 결합 단편의 제조방법을 고려한다. 일 실시형태에서, 결합 단편은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR을 포함한다.
본 발명의 실시형태는 NGF 또는 그의 비정상 발현과 관련된 질병 및 장애의 진단, 평가 및 치료를 위한 항-NGF 항체 및 그의 결합 단편의 사용에 관한 것이다. 본 발명은 또한 NGF 또는 그의 비정상 발현과 관련된 질병 및 장애의 진단, 평가 및 치료를 위한 항-NGF 항체의 단편의 사용을 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태는 재조합 숙주 세포에서 항-NGF 항체 또는 그의 단편의 생성에 관한 것이다. 예를 들어 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 식물 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아(Pichia)) 및 다른 효모 균주에 관한 것이다.
본 발명은 또한 개체의 염증 반응을 실질적으로 증가시키지 않고 통증을 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 다른 실시형태는 항체 및 그의 단편으로부터 유래되고, NGF에 결합 특이성을 지니는 항-인간 NGF 1가 작용제, 특히 원하는 에피토프 특이성, 고 친화성 또는 결합활성 및/또는 기능적 특성을 지니는 1가 작용제를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태는 본 명세서에 기재된 항체로부터 유래되고, NGF에 대해 결합 특이성을 지니며, 본 명세서에 기재된 VH, VL 및 CDR 폴리펩타이드의 서열을 포함하는 항-인간 NGF 1가 작용제, 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 이러한 1가 작용제는, 예를 들어 NGF에 결합하는, Fab, Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR, MetMab와 유사한 1가 항체 분자, 또는 이들의 하나 이상의 조합을 포함한다.
일부 실시형태에서, 이들 1가 작용제는 NGF와 TrkA 및/또는 p75의 상호작용을 차단하거나 또는 억제할 것이다. 다른 실시형태에서, 이들 1가 작용제는 페길화(PEGylation)에 의해 또는 다른 수용성 폴리머에 부착에 의하는 것과 같이 순환 반감기를 변형시키기 위해 화학적으로 변형될 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 항-인간 NGF 1가 작용제, 예컨대 본 명세서에 기재된 항체의 Fab 단편은 보행 분석(본 명세서의 실시예에서 기재됨)에 의해 측정되는 바와 같이 뮤린 모델에서 생체내 통증을 유의하게 감소시킬 수 있다. 본 발명의 특히 바람직한 실시형태는 통증을 완화하거나 또는 치료하는 방법에서 항-인간 NGF 1가 Fab, Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR, MetMab와 유사한 1가 항체 분자, 또는 이들의 하나 이상의 조합의 사용에 관한 것이다. 본 발명의 다른 바람직한 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 지니는 1가 작용제(예컨대 본 명세서에 기재된 전장 항체의 Fab 단편 또는 대안적으로 NGF에 결합 특이성을 지니는 Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR, MetMab와 유사한 1가 항체 분자, 또는 이들의 하나 이상의 조합)은 개체에서 통증을 완화하거나 또는 치료하는데 유용한 반면, 보행 분석 후 뮤린 모델에서 증명되는 바와 같이 동일 농도에서 투약된 전장 항체와 비교하여 염증을 실질적으로 증가시키지 않는다.
본 발명의 다른 실시형태에서, 이들 1가 작용제는 그 자체가 토끼 면역 세포(B 림프구)로부터 유래되고, 선택적으로 인간 생식계열 서열에 대한 그의 상동성(서열 동일성)을 기반으로 선택된 및 모 항체 및 인간화된 버전으로부터 유래될 수 있다. 이들 모 항체는 서열 변형이 최소이거나 또는 전혀 필요하지 않을 수 있고, 이에 의해 인간화 후, 1가 작용제 공급원으로서 그의 사용전 기능적 특성의 보유를 용이하게 할 수 있다. 본 발명의 추가 실시형태는 신규한 1가 작용제의 생성에서 VH, VL 및 CDR 폴리펩타이드를 포함하는 항-인간 NGF 항체로부터 유래된, 예를 들어 토끼 면역 세포 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드로부터 유래된 항-인간 NGF 1가 작용제뿐만 아니라 이들 항체 및 그의 단편의 사용 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 및 NGF에 결합할 수 있고 개체에서 통증을 감소시킬 수 있는 한편, 상기 개체의 면역 반응을 실질적으로 증가시키지 않는 상기 1가 작용제를 포함하는 조성물에 관한 것이다. 주목한 바와 같이, 일부 실시형태에서 이들 1가 작용제는 TrkA 및/또는 p75와 NGF의 상호작용을 차단하거나 또는 억제할 것이다. 이들 1가 작용제는, 예로서 NGF에 대해 결합 특이성을 지니는 Fab, Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR, MetMab와 유사한 1가 항체 분자, 또는 이들의 하나 이상의 조합, 바람직하게는 본 명세서에 예시된 항체의 CDR을 함유하고/하거나 동일한 에피토프 특이성을 지니는 것을 포함한다.
본 발명은 또한 하나 이상의 기능적 또는 검출가능한 모이어티, 예를 들어 1가 작용제의 다른 치료적 특성에 영향을 미치는 반감기 또는 작용제에 영향을 미치는 모이어티에 컨쥬게이트되는 1가 작용제의 컨쥬게이트를 고려한다. 본 발명은 또한 상기 키메라 또는 인간화된 항-NGF 1가 작용제의 제조 방법을 고려한다. 일 실시형태에서, 1가 작용제는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, Fab, Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), MetMab 유사 항체 분자, 카멜바디, 나노바디 및 IgNAR을 포함한다. 본 발명의 실시형태는 NGF 또는 그의 비정상 발현과 관련된 질병 및 장애의 진단, 평가 및 치료를 위한 항-NGF 1가 작용제의 사용에 관한 것이다. 주목한 바와 같이, 일부 실시형태에서 이들 1가 작용제는 TrkA 및/또는 p75와 NGF의 상호작용을 차단하거나 또는 억제할 것이다.
본 발명은 또한 NGF 또는 그의 비정상 발현과 관련된 질병 및 장애의 진단, 평가 및 치료를 위한 1가 작용제의 사용을 고려한다.
본 발명은 또한 통증 치료에서 NGF에 대해 결합 특이성을 지니는 항체 및 그의 단편, 특히 원하는 에피토프 특이성, 고 친화성 또는 결합활성 및/또는 기능적 특성을 지니는 항체를 포함하는, 통증 치료 방법 및 그 용도를 위한 조성물에 관한 것이다. 더 구체적으로는, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 NGF 길항물질, 예를 들어 소분자, 폴리펩타이드, 핵산, 및 바람직하게는 항-인간 NGF 항체 또는 1가 및 2가 항체 단편을 포함하는 그의 단편에 관한 것이다. 이들 항체 및 단편, 예를 들어 1가 작용제는 PEG 또는 다른 폴리머의 부착을 통해 또는 검출가능한 작용제 또는 기능성 작용제와 같은 다른 모이어티의 부착에 의해 순환 반감기에 영향을 미치도록 변형될 수 있다. 이들 1가 작용제는, 예로서 Fab, Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR, MetMab와 유사한 1가 항체 분자, 또는 이들의 하나 이상의 조합을 포함한다.
본 발명은 또한 통증 치료에서 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 및 그의 단편, 특히 원하는 에피토프 특이성, 고 친화성 또는 결합활성 및/또는 기능적 특성을 지니는 항체를 포함하는, 통증 치료 방법 및 그 용도를 위한 조성물에 관한 것이다. 더 구체적으로는, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 NGF 길항물질, 예를 들어 소분자, 폴리펩타이드, 핵산, 및 바람직하게는 항-인간 NGF 항체 또는 1가 및 2가 항체 단편을 포함하는 그의 단편에 관한 것이다. 추가로, 본 발명은 TrkA와 NGF의 결합 및 p75와 NGF의 결합을 억제하는 항-인간 NGF 항체 또는 그의 1가 및 2가 항체 단편을 포함하는 그의 단편을 포함하는, 통증 치료 방법 및 그 용도를 위한 조성물에 관한 것이다. 이들 항체 및 단편, 예를 들어 1가 작용제는 PEG 또는 다른 폴리머의 부착을 통해 또는 검출가능한 작용제 또는 기능성 작용제와 같은 다른 모이어티의 부착에 의해 순환 반감기에 영향을 미치도록 변형될 수 있다. 이들 1가 작용제는, 예로서 Fab, Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR, MetMab와 유사한 1가 항체 분자, 또는 이들의 하나 이상의 조합을 포함한다.
본 발명은 특히, MetMab 분자와 유사한 NGF에 결합되는 1가 항체 분자를 포함한다. MetMab는 Met에 특이적인 1가 항체이다. (Met는 문헌[Park et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 84, 7479--(1987)]에 제시된 뉴클레오타이드 서열 또는 그의 단편뿐만 아니라, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 대립형질 변이체, 스플라이스 변이체, 유도적 변이체, 치환 변이체, 결실 변이체 및/또는 삽입 변이체, 융합 폴리펩타이드 및 종간 상동성을 포함하는 관련된 폴리펩타이드에 의해 암호화된 단백질이다). MetMab 항체는 OA-5d5(Genentech)를 포함하는 상이한 명칭에 의해 공지된 1가 항체이며, 또한 특히 원 암드(One Armed) 5d5, 5d5, MetMab, PRO143966으로 불린다. 구조 및 특성을 포함하는 항체 OA-5d5 및 그의 제조 및 사용 방법은 미국특허 공개 제2007/0092520호에 기재된다. 일 실시형태에서, 본 발명에 따른 항-NGF 항체는 Fc 영역에 연결된 단일 Fab 영역을 포함할 수 있다. 이러한 실시형태에서, 본 발명의 항체는 본 명세서에 기재된 경쇄 및 중쇄 가변 도메인을 포함할 수 있다. 이러한 실시형태에서, 항체는 1가이며, 무결함 Fc 영역을 포함할 수 있다. 다른 이러한 실시형태에서, Fc 영역은 적어도 하나의 돌기(노브(knob)) 및 적어도 하나의 구멍(홀)을 포함할 수 있되, 예를 들어 WO 2005/063816호에 기재되는 바와 같이 돌기 및 구멍의 존재는 돌기를 포함하는 Fc 폴리펩타이드와 구멍을 포함하는 Fc 폴리펩타이드 사이의 복합체 형성을 향상시킨다. 일 실시형태에서, 본 발명 항체의 Fc 영역은 제1 및 제2 Fc 폴리펩타이드를 포함할 수 있되, 제1 및 제2 Fc 폴리펩타이드 각각은 야생형 인간 Fc에 대해 하나 이상의 돌연변이를 포함한다. 일 실시형태에서, 구멍 돌연변이는 T366S, L368A 및/또는 Y407V이다. 다른 실시형태에서, 돌기 돌연변이는 T366W이다. 구체적 실시형태에서, 대상 발명에 따른 1가 항체는 WO2005/063816에 기재된 바와 같이 합성된 원-암드 항체를 포함할 수 있다. 이러한 실시형태에서, 원-암드 항체는 WO2005/063816에 기재된 바와 같이 "노브" 및 "홀"을 구성하는 Fc 돌연변이를 포함할 수 있다. 예를 들어, 홀 돌연변이는 Fc 폴리펩타이드에서 T366A, L368A 및/또는 Y407V 중 하나 이상일 수 있고, 구멍 돌연변이는 T366W일 수 있다.
본 발명은 또한 이하로 제한되는 것은 아니지만, Ab1, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, Ab10, Ab11, Ab12, Ab13, Ab14, Ab15, Ab16, Ab17, Ab18, Ab19, Ab20 또는 Ab21로부터 선택된 항-NGF 항체를 포함하는, 본 명세서에 개시된 항체 또는 항체 단편으로서 NGF에 결합을 위한 항-NGF 항체와 경쟁하고/하거나 해당 NGF 에피토프와 결합하는 항-인간 NGF 1가 작용제에 관한 것이다.
추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 NGF 길항물질, 예를 들어 항-인간 NGF 항체 또는 그의 단편의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, 개체에서 통증을 치료하거나 또는 진통제 효과를 유발하는 신규한 방법에 관한 것이다. 대상 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 다수의 신규한 항-인간 NGF 항체 및 그의 단편을 제공한다. 이들 항체 및 단편은 단일용법으로서 사용될 수 있거나 또는 p75와 NGF의 상호작용을 억제하는 것을 포함하는 다른 진통제 및 다른 항-NGF 항체 및 항체 단편을 포함하는 다른 활성제와 함께 사용될 수 있다.
추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-인간 NGF 항체 또는 2가 및 1가 단편을 포함하는 그의 단편, 예컨대 Fab, Fab', F(ab')2, Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디 및 IgNAR을 생성하고, 확인하며 단리시키는 방법을 제공한다. 본 발명의 다른 실시형태는 p75와 결합하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 선택적으로 억제함으로써 통증을 치료하거나 또는 예방하는 본 명세서에 기재된 VH, VL 및 CDR 폴리펩타이드의 서열을 포함하는 본 명세서에 기재된 항체 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드의 사용 방법에 관한 것이다. 이 발명은 통증을 관리하기에 치료적으로 유용한 신규한 인간 단클론성 항체 및 그의 단편 및 컨쥬게이트를 제공한다.
본 발명은 특히 2가지 유형의 신규한 항체 및 항체 단편, p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 제1 유형; 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하며, p75와 NGF의 결합을 추가로 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 제2 유형을 제공한다. 항체와 항체 단편의 이들 유형은 둘 다, 예를 들어 암, 편두통, 수술 전 또는 후 관련 통증 및 다른 통증 관련 질환과 관련된 통증을 치료하거나 또는 예방하는데 유용하다. 바람직하게는, 단클론성 항체 또는 단편은 NGF의 생물학적 활성을 중화하는 인간 또는 인간화된 단클론성 항체 또는 그의 단편 또는 컨쥬게이트이며, NGF-매개 통증 반응, 즉 TrkA 경로를 수반하는 것의 효과를 호전시키기에 유용하다.
일 양태에서, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 항체 또는 항체 단편 또는 다른 NGF 길항물질을 투여함으로써 수술 후 통증(상호호환적으로 "절개 후" 또는 "외상 후 통증"으로 언급됨)을 예방하거나 또는 치료하기 위한 방법을 특징으로 하며, 다른 양태에서, TrkA와 NGF의 결합 및 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)와 결합하는 NGF 길항물질(본 발명에 따른 항-NGF 항체 또는 단편)을 사용하는 유사한 방법이 제공된다. 이는 수술로부터 또는 절개 또는 외상의 상처로부터의 통증을 포함하는 수술후 통증으로부터 초래되는 통증을 억제하거나 또는 차단하는 것을 포함한다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에서 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여가능할 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 수술후 통증의 발생정도를 감소시키고, 수술후 통증을 호전시키며, 수술후 통증을 완화시키며; 및/또는 개체에서 수술후 통증의 발생 또는 진행을 지연시키기 위한 방법을 제공하되, 상기 방법은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 항-NGF 항체 또는 항체 단편 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하며, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 투여하는 단계를 포함한다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 함유하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이들 항체 및 단편, 예를 들어 1가 작용제는 PEG 또는 다른 폴리머의 부착을 통해 또는 검출가능한 작용제 또는 기능성 작용제와 같은 다른 모이어티의 부착에 의해 순환 반감기에 영향을 미치도록 변형될 수 있다. 이들 1가 작용제는, 예로서 Fab, Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR, MetMab와 유사한 1가 항체 분자, 또는 이들의 하나 이상의 조합을 포함한다. 이하에 나타내는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여가능할 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 항-NGF 항체 또는 항체 단편 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 개체에서 통증 역치를 증가시키기 위한 방법을 제공한다. 추가로 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의되는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생, 바람직하게는 피하 또는 정맥내 또는 비강내 또는 경피에 의해 투여가능할 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 항-NGF 항체 또는 항체 단편 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 개체에서 수술 및/또는 손상-유발된 외상성 상처를 향상시키기 위한 방법이 제공된다. 일부 실시형태에서, 휴식중 통증은 억제되고, 호전되고/되거나 예방되며, 일부 실시형태에서, 기계적으로 유발된 통증(움직임으로부터 초래된 통증을 포함)이 억제되고, 호전되고/되거나 예방되며, 일부 실시형태에서, 열적으로-유발된 통증이 억제되고, 호전되고/되거나 예방된다. 일부 실시형태에서, 기계적으로 유발된 통증은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 항-NGF 항체 또는 단편 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편을 투여하는 단계에 의해 억제되고, 호전되고/되거나 예방된다. 일부 실시형태에서, 남아있는 통증은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 항-NGF 항체 또는 단편 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편을 투여하는 단계에 의해 억제되고, 호전되고/되거나 예방된다. 일부 실시형태에서, 열적으로-유발된 통증은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 항-NGF 항체 또는 단편 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편을 투여하는 단계에 의해 억제되고, 호전되고/되거나 예방된다. 일부 실시형태에서, 이질통(즉, 정상적으로 유해하지 않은 자극에 대해 증가된 반응(즉, 증가된 유해한 감각))은 억제되며, 호전되고/되거나 예방되고, 및/또는 통각과민(즉, 정상적으로 유해한 또는 불쾌한 자극에 대해 증가된 반응)은 억제되며, 호전되고/되거나 예방된다. 또한 추가 실시형태에서, 이질통 및/또는 통각과민은 천연 또는 남아있는 통증에서 열적 또는 기계적(촉각)이다. 일부 실시형태에서, 통증은 만성 통증이다. 다른 실시형태에서, 통증은 절개, 상처 또는 외상의 부위 및/또는 근위, 절개, 상처 및/또는 외상의 부위에서 또는 근처에 관련된다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 적어도 하나의 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 항체 또는 항체 단편 또는 TrkA와 NGF 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의되는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 다른 양태는 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 선택적으로 억제하여 만성 내장통에 걸린 환자에게 경감을 유발하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 항체 또는 항체 단편 또는 NGF 또는 TrkA 또는 핵산의 단편과 같은 다른 폴리펩타이드의 능력을 사용하는 것 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 사용에 의해 이루어진다. 본 발명에 따른 대상 NGF 길항물질, 예를 들어 항체 또는 항체 단편은 만성 통증의 경우에 내장 기능성 장애의 병태생리에서 제시되는 내장 과민증을 억제하거나 또는 차단할 수 있다. 본 명세서에서, 만성 내장 기능성 장애라는 표현은 예로서 명칭 장기통으로도 알려진 신경 기원을 갖는 내장의 민감도의 장애를 포함하는 것으로 이해된다. 내장은 소화, 호흡 및 비뇨 생식기 기관 및 내분비계뿐만 아니라 비장, 심장 및 대혈관을 포함한다. 의학적 관점으로부터, 만성 장기통은 외부의 기계적 자극에 반응되는 정상 역치와 비교하여 저하된 통증에 대한 민감도의 역치를 특징으로 한다. 만성 내장통은 추가로 기능성 장애에 부수적으로 따르는 염증 상황이 없는 것을 특징으로 한다. 더 구체적으로는, 만성 내장통은 다음의 만성 장애: 만성 소화불량, 검출가능한 기관의 병변의 부재 시 발생하고 다른 질병 또는 장애의 증상이 있을 수 있는 기능성 소화 장애; 월경과 관련된 통증을 특징으로 하는 만성 월경통; 급속한 체중 손실, 무력증, 췌장 지점의 통증을 특징으로 하는 만성 췌장염, 쓸개의 팽창에 의한 황달 및 유전적 만성 췌장염을 포함하는 췌장 부전증에 기인하는 소화 장애, 비정상 및 상습적 통증 공격에 의해 어린이로부터 그 자체가 나타나고, 성인에서 췌장의 부전뿐만 아니라 석회화의 징후를 특징으로 하는 우세한 상염색체로 전염된 질병; 산성의 위 내용물이 식도 내로 복귀를 특징으로 하고 일반적으로 식사 후 때때로 산성 역류를 수반하는 상승적인 흉부 작열감을 야기하는 만성 위식도 역류; 어떤 생화학적 및 조직학적 변형이 없는 복통 및 설사 및/또는 변비를 특징으로 하는 비염증성 만성 질병인 IBS(과민성 대장 증후군)을 포함한다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 적어도 하나의 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 항체 또는 항체 단편 또는 TrkA와 NGF 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
만성 내장통, 특히 위장통은 환자에서 또는 동물에서 다양한 외부 자극의 비정상적 인식을 특징으로 한다. 외부 자극의 이런 비정상적 인식은 대조 피험체와 비교하여, 이들 외부 자극에 대한 환자의 또는 동물의 민감성 역치의 감소로서 정의될 수 있다. 정상 조건 하에 통증이 없는 자극이 통증이 있는 것으로 인식되며, 민감성 역치의 감소에 대응하는 생리 병리학적 조건은 이질통으로 불린다. 만성 내장통에 걸린 피험체에 본 발명에 따른 항체 또는 항체 단편의 투여는 대조군의 건강한 피험체에서 관찰되는 것과 비슷한 민감성 역치로 복귀와 함께 외부 자극에 대해 이 피험체의 민감성 역치의 저하를 없앨 수 있다. 본 발명에 따른 대상 항체 또는 단편은 만성 내장통의 예방 또는 치료를 위해 의도되는 의약의 제조를 위해 사용될 수 있다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 적어도 하나의 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 항-NGF 항체 또는 항체 단편의 유효량과 함께 또는 TrkA와 NGF 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량과 함께 오피오이드 진통제의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, 오피오이드 진통제 통증 치료를 향상시키기 위한 방법을 제공한다. 본 명세서에서 사용되는 함께 투여는 동시 투여 및/또는 상이한 시간에 투여를 포함한다. 함께 투여는 또한 공동-조제물(즉, 본 발명에 따른 NGF 항체 또는 단편 및 오피오이드 진통제가 동일 조성물 내 존재함(조합됨))로서 투여 및/또는 별개의 조성물로서 투여를 포함한다.
본 명세서에 사용되는, "함께 투여"는 임의의 환경을 포함하는 것을 의미하되, p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF 항체 또는 단편 또는 TrkA와 NGF 결합을 억제하고, 또한 p75 및 다른 활성제, 예를 들어 다른 진통제 또는 생물제학적 작용제와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편이 개체에게 유효량으로 투여된다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편 또는 TrkA와 NGF 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 다른 실시형태에서, 키메라 또는 인간화된 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함)은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 NGF에 결합될 수 있고 또는 TrkA와 NGF 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하며, 또한 TF1 세포 증식을 추가로 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편이 제공된다.
본 발명의 다른 실시형태에서, p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하며, PC12 축삭생성을 억제하는 NGF에 결합될 수 있는 키메라 또는 인간화된 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함)이 제공된다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 NGF에 결합될 수 있는 상기 키메라 또는 인간화된 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함) 또는 TrkA와 NGF 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하며, TF1 세포 증식을 억제하는 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 다른 실시형태에서 이들 항체 및 인간화된 버전은 토끼 면역 세포(B 림프구)로부터 유래될 수 있고, 인간 생식계열 서열에 대한 그의 상동성(서열 동일성)을 기반으로 선택될 수 있다. 이들 항체는 서열 변형이 최소이거나 또는 전혀 필요하지 않을 수 있고, 이에 의해 인간화 후 기능적 특성의 보유를 용이하게 할 수 있다. 본 발명의 추가 실시형태는 VH, VL 및 CDR 폴리펩타이드를 포함하는, 예를 들어 토끼 면역 세포로부터 유래된 항-NGF 항체로부터의 단편 및 이를 암호화하는 폴리펩타이드뿐만 아니라 NGF 및/또는 NGF/p75 및 NGF/TrkA 복합체에 결합될 수 있는 신규 항체 및 폴리펩타이드 조성물의 생성에서 이들 항체 단편 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 사용하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 또한 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 하나 이상의 기능적 또는 검출가능한 모이어티에 컨쥬게이트되는 신경 성장 인자에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 항-NGF 항체 및 그의 결합 단편의 컨쥬게이트를 고려한다. 추가로, 이들 화합물은 생체내 반감기에 영향을 미치거나 또는 원하는 세포에 대한 표적화를 촉진하는 모이어티에 부착될 수 있다. 본 발명은 또한 상기 키메라 또는 인간화된 항-NGF, 항-NGF/p75 복합체 또는 항-NGF/TrkA 복합체 항체 및 그의 결합 단편의 제조방법을 고려한다. 일 실시형태에서, 결합 단편은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, MetMab 유사 1가 항체 단편 및 IgNAR을 포함한다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자에 결합되는 항-NGF 항체 및 그의 결합 단편의 상기 컨쥬게이트, 또는 TrkA와 NGF 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하며, 하나 이상의 기능적 또는 검출가능한 모이어티에 컨쥬게이트된 신경 성장 인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 실시형태는 NGF 또는 그의 비정상 발현와 관련된 질병 및 장애, 특히 통증 관련 장애의 진단, 평가 및 치료를 위한, p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 항-NGF 항체 및 그의 결합 단편의 사용에 관한 것이다. 본 발명은 또한 NGF 또는 그의 비정상 발현과 관련된 질병 및 장애의 진단, 평가 및 치료를 위해, p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체의 단편의 사용을 고려한다. 다른 본 발명의 실시형태는 항-NGF 항체 또는 그의 단편 및 상기 항체 또는 단편을 암호화하는 핵산의 생성에 관한 것이되, 항체 또는 단편은 재조합 숙주 세포, 예를 들어 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포 또는 숙주 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 숙주 균주에서 이들 세포의 발현에 의해 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제한다. 추가로, 본 발명은 상기 방법에서 사용을 위한 약제학적으로 허용가능한 조성물을 제공한다.
본 명세서에서 추가로 논의되는 바와 같이, 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 항-NGF 항체 또는 단편 및 다른 활성제, 예를 들어 오피오이드 진통제가 상이한 투약 빈도 및/또는 간격으로 투여될 수 있다는 것이 이해된다. 예를 들어, 본 발명에 따른 항-NGF 항체 또는 단편은 매주 투여될 수 있는 반면, 오피오이드 진통제는 더 빈번하게 투여될 수 있다. NGF 항체 또는 단편 및 오피오이드 진통제가 동일한 투여 경로 또는 상이한 투여 경로를 사용하여 투여될 수 있다는 것, 및 상이한 투약 섭생이 투여(들)의 과정에 걸쳐 변할 수 있다는 것이 이해된다. 투여는 통증의 개시 전일 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 개체에서 통증 발생을 감소시키고, 통증을 호전시키며, 통증을 완화하고; 및/또는 통증의 발생 또는 진행을 지연시키는 방법을 제공하되, 상기 방법은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF 항체 또는 단편 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량과 함께 오피오이드 진통제의 유효량을 투여하는 단계를 포함한다. 본 발명의 방법은 오피오이드 진통제의 사용이 일반적으로 처방되는 경우의 통증을 포함하는 임의의 병인, 예를 들어, 췌장염, 신장결석, 두통, 월경통, 근골격 통증(예를 들어, 등 아래 부분 통증), 염좌, 내장통, 난포낭종, 전립선염, 방광염, 화학적 또는 열적 화상 또는 암(예컨대 뼈에 전이된 전립선암, 뼈에 전이된 유방암, 뼈에 전이된 폐암, 췌장암)의 임의의 통증을 치료하거나 또는 예방하는데 적합하다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자에 결합되는 본 발명의 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 효과적인 통증 경감을 제공하기 위하여 다른 활성제, 예를 들어 NSAID와 함께 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 항-NGF 항체 또는 단편의 양을 투여하는 단계를 포함하는, 통증을 치료하기 위한(또는 다른 실시형태에서 예방하기 위한) 방법을 특징으로 한다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자에 결합되는 본 발명의 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 항-항-NGF 항체 또는 항체 단편, 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편, 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량과 함께 NSAID의 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 NSAID 통증 치료를 향상시키는 방법을 제공한다. 본 명세서에 사용되는 함께 투여는 동시 투여 및/또는 상이한 시간에 투여를 포함한다. 함께 투여는 또한 공동-조제물(즉, NGF 항체 및 NSAID가 동일 조성물 내 존재함(조합됨))로서 투여 및/또는 별개의 조성물로서 투여를 포함한다. 본 명세서에 사용되는, "함께 투여"는 임의의 상황을 포함하는 것을 의미하되, NSAID 및 항-NGF 항체는 개체에게 유효량으로 투여된다. 본 명세서에서 추가로 논의되는 바와 같이, NGF 항체 또는 단편 및 NSAID는 상이한 투약 빈도 및/또는 간격으로 투여될 수 있다는 것이 이해된다. 예를 들어, 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 항-NGF 항체는 매주 투여될 수 있는 반면, NSAID는 더 빈번하게 투여될 수 있다. NGF 항체 및 NSAID는 동일 투여 경로 또는 상이한 투여 경로를 사용하여 투여될 수 있다는 것 및 상이한 투약 섭생은 투여(들) 과정에 걸쳐 변화될 수 있다는 것이 이해된다. 투여는 통증의 개시 전일 수 있다. 추가로, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명의 NGF에 특이적인 항체 또는 항체 단편, 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료에 대해 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 개체에서 통증의 발생을 감소시키고, 통증을 호전시키며, 통증을 완화하고/하거나 통증의 발생 또는 진행을 지연시키는 방법을 제공하되, 상기 방법은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF 항체 또는 항체 단편, 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 투여하는 단계를 포함한다. 본 발명의 방법은 NSAID의 사용이 일반적으로 처방되는 경우 통증을 포함하는 임의의 병인의 임의의 통증을 치료하거나 또는 예방하는데 적합하다. 일부 실시형태에서, 통증은 수술후 통증이다. 일부 실시형태에서, 통증은 화상과 관련된 통증이다. 다른 실시형태에서, 통증은 류마티스 관절염과 관련된 통증이다. 다른 실시형태에서, 통증은 골관절염과 관련된 통증이다.
추가로 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 항체 또는 항체 단편, 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료를 위한 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 항체 또는 항체 단편, 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편을 투여함으로써 뼈 전이와 관련된 암 통증(또한 "뼈 전이 통증"으로 지칭됨)을 포함하는 뼈 암 통증을 예방하거나 또는 치료하기 위한 방법을 특징으로 한다. 일부 실시형태에서, 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 NGF 항체 또는 단편은 오피오이드 진통제와 공동투여된다. 일부 실시형태에서, 본 발명에 따른 NGF 항체 또는 항체 단편은 NSAID와 공동투여된다. 일부 실시형태에서, NGF 길항물질은 오피오이드 진통제 및 NSAID와 공동투여된다. 일부 실시형태에서, NGF 길항물질은 오피오이드 진통제와 공동투여되지 않는다. 일부 실시형태에서, NGF 길항물질은 NSAID와 공동투여되지 않는다. 추가로 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편, 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료를 위한 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
다른 양태에서, 본 발명은 개체에서 뼈 전이와 관련된 암 통증을 포함하는 뼈 암 통증의 발생을 감소시키고, 뼈 전이와 관련된 암 통증을 포함하는 뼈 암 통증을 호전시키며, 뼈 전이와 관련된 암 통증을 포함하는 뼈 암 통증을 완화하고; 및/또는 뼈 전이와 관련된 암 통증을 포함하는 뼈 암 통증의 발생 또는 진행을 지연시키기 위한 방법을 제공하되, 상기 방법은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF 항체 또는 단편, 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시형태에서, 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 NGF 항체 또는 단편은 오피오이드 진통제와 공동투여된다. 일부 실시형태에서, the NGF 항체 또는 단편은 NSAID와 공동투여된다. 일부 실시형태에서, 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 NGF 항체 또는 단편은 오피오이드 진통제 및 NSAID와 공동투여된다. 일부 실시형태에서, 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 NGF 항체 또는 단편은 오피오이드 진통제와 공동투여되지 않는다. 일부 실시형태에서, 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 NGF 항체 또는 단편은 NSAID와 공동투여되지 않는다. 추가로 본 발명은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 본 발명에 따른 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편의 유효량을 포함하는, 바람직하게는 인간 치료를 위한 상기 통증 적응증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 사용에 적합한 약제학적 조성물을 제공한다. 이하에 논의하는 바와 같이, 이들 조성물은 상이한 경로 및 투약량 섭생에 의해 투여될 수 있다.
또한 이러한 NGF 항체 및 단편을 암호화하는 핵산을 함유하는 벡터, 및 이들 핵산을 발현시키고, 본 발명의 단클론성 항체 및 단편을 배지 내로 분비시키는 예컨대 박테리아, 효모, 포유류, 곤충, 또는 조류 세포를 함유하는 세포가 제공된다. 통증을 치료하고 관리하기 위한 이들의 용도에 추가로, 본 발명의 항체 및 항체 단편 및 다른 NGF 길항물질은 p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고 TrkA와 NGF의 결합을 억제하며 NGF 길항물질, 예를 들어 신경성장인자(NGF)에 결합되는 항체 또는 항체 단편 또는 다른 화합물, 또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, p75와 NGF의 결합을 추가로 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 항체의 사용과 연루되는 신경병증성 및 염증성 통증-관련 반응을 치료하는데 유용하다.
본 출원은 TrkA와 NGF의 결합뿐만 아니라 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합된 단클론성 항체 및 단편, 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75에 NGF의 결합을 억제하는 NGF에 특이적인 항체 또는 항체 단편에 관한 것이되, 항체 및 단편은 또한 통증 장애뿐만 아니라 염증과 같은 다른 장애를 치료하거나 또는 예방하는 것에서 유용하다. 이들 항체 및 단편, 예를 들어 1가 또는 2가 작용제는 예컨대 PEG 또는 다른 폴리머의 부착을 통해 또는 검출가능한 작용제 또는 기능성 작용제와 같은 다른 모이어티의 부착에 의해 순환 반감기에 영향을 미치도록 변형될 수 있다. 이들 1가 작용제는, 예로서 Fab, Fab', Fv, scFv 단편, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR, MetMab와 유사한 1가 항체 분자, 또는 이들의 하나 이상의 조합을 포함한다.
도 1 전장 항체 Ab1에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 2 전장 항체 Ab2에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 3 전장 항체 Ab3에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 4는 전장 항체 Ab4에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 5는 전장 항체 Ab5에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 6 전장 항체 Ab6에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 7 전장 항체 Ab7에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 8 전장 항체 Ab8에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 9 전장 항체 Ab9에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 10 전장 항체 Ab10에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 11 전장 항체 Ab11에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 12 전장 항체 Ab12에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 13 전장 항체 Ab13에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 14 전장 항체 Ab14에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 15 전장 항체 Ab15에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 16 전장 항체 Ab16에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 17 전장 항체 Ab17에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 18 전장 항체 Ab18에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 19 전장 항체 Ab19에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 20 전장 항체 Ab20에 대응하는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 21은 피키아 파스토리스(Pichia pastoris)에서 발현에 의해 생성된 전장 항체 Ab21에 대응되는 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 22는 Fab1의 중쇄 및 경쇄 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 23은 Fab2의 중쇄 및 경쇄 폴리펩타이드 서열을 도시한 도면.
도 24는 항체 Ab1 및 Ab2에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 25는 항체 Ab3에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 26은 항체 Ab4에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 27은 항체 Ab5 및 Ab6에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 28은 Fab1에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 29는 Fab2에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 30은 항체 Ab7 및 Ab8에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 31은 항체 Ab9 및 Ab10에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 32는 항체 Ab11에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 33은 항체 Ab12에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 34는 항체 Ab13에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 35는 항체 Ab14에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 36은 항체 Ab15에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 37은 항체 Ab16에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 38은 항체 Ab17 및 Ab18에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 39는 항체 Ab19에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 40은 항체 Ab20에 대해 이하에 기재하는 프로토콜 후 얻은 NGF ELISA 결합 데이터를 도시한 도면.
도 41은 항체 Ab1 및 Ab2에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 42는 항체 Ab3 및 Ab4에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 43은 항체 Ab5 및 Ab6에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 44는 Fab1 및 Fab2 항체 단편에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 45는 항체 Ab7 및 Ab8에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 46은 항체 Ab9 및 Ab10에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 47은 항체 Ab11 및 Ab12에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 48은 항체 Ab13 및 Ab14에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 49는 항체 Ab15에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 50은 항체 Ab16에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 51은 항체 Ab17 및 Ab18에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 52는 항체 Ab19 및 Ab20에 대해 실시예 1 후에 얻은 TF1 세포 증식 데이터를 도시한 도면.
도 53은 항체 Ab3 및 Ab4에 대해 실시예 5 후에 얻은 NGF-p75 상호작용 데이터의 억제를 도시한 도면. 항체 Ab3 및 Ab4는 NGF과 p75의 상호작용을 억제하는 능력을 보여주지 않는다.
도 54는 항체 Ab15 및 Ab16에 대해 실시예 5 후에 얻은 NGF-p75 상호작용 데이터의 억제를 도시한 도면. 항체 Ab15 및 Ab16는 NGF과 p75의 상호작용을 억제하는 능력을 보여주지 않는다.
도 55는 항체 Ab5에 대해 실시예 5 후에 얻은 NGF-p75 상호작용 데이터의 억제를 도시한 도면. 항체 Ab5는 NGF과 p75의 상호작용을 억제하는 능력을 보여준다.
도 56은 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab1의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 57은 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab2의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 58은 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab3의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면. 결과는 또한 동일 농도의 항체에서 PC-12 축삭생성의 억제가 상이한 NGF 결합 선택성을 나타내는 항-NGF 항체(즉, TrkA와 p75 둘 다와 NGF의 상호작용을 억제하는 것)에 의해 보이는 것 미만이라는 것을 보여준다.
도 59는 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab5의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 60은 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab6의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 61은 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab7의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 62는 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab8의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 63은 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab9의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 64는 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab10의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 65는 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab11의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 66은 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab13의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 67은 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab17의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 68은 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab18의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 69는 실시예 6 후에 얻은 항체 Ab19의 농도를 증가시키는 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면.
도 70은 실시예 7 후의 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab2, Ab6 및 Ab8의 투여 후 보행 분석에 의해 평가되는 통증의 통계적으로 유의한 감소를 도시한 도면.
도 71은 실시예 7 후의 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab6 및 Fab1의 투여 후 보행 분석에 의해 평가되는 통증의 통계적으로 유의한 감소를 도시한 도면.
도 72는 실시예 7 후의 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab3의 투여 후 보행 분석에 의해 평가되는 통증의 통계적으로 유의한 감소를 도시한 도면.
도 73은 실시예 7 후의 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab6 및 항체 Ab21의 투여 후 보행 분석에 의해 평가되는 통증의 통계적으로 유의한 감소를 도시한 도면.
도 74는 실시예 8 후의 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab2, Ab6 및 Ab8 각각의 투여 후 염증 증가를 도시한 도면.
도 75는 대조군에 대한 염증 결과와 비교할 때, Fab1 항체 단편의 투여 후 염증의 유의한 증가가 없음을 도시한 도면. 대조적으로, 실시예 8 후 대조군에 대한 염증 결과와 비교할 때, 항체 Ab6의 투여는 증가된 염증을 초래한다.
도 76은 실시예 8 후 대조군에 대한 염증 결과와 비교할 때, 항체 Ab3의 투여 후 염증의 증가를 도시한 도면.
도 77은 또한 실시예 8 후 대조군에 대한 염증 결과와 비교할 때, 항체 Ab6 및 항체 Ab21의 투여 후 염증 증가를 도시한 도면.
도 78은 또한 실시예 6 후 얻은 항체 Ab16의 증가된 농도의 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면. 결과는 동일 농도의 항체에서 PC-12 축삭생성의 억제는 상이한 NGF 결합 선택성을 나타내는 항-NGF 항체(즉, TrkA와 p75 둘 다와 NGF 상호작용을 억제하는 것)에 의해 보이는 것 미만이라는 것을 보여준다.
도 79는 실시예 6 후 얻은 항체 Ab15의 증가된 농도의 존재에서 PC-12 축삭생성의 억제를 도시한 도면. 결과는 동일 농도의 항체에서 PC-12 축삭생성의 억제는 상이한 NGF 결합 선택성을 나타내는 항-NGF 항체(즉, TrkA와 p75 둘 다와 NGF 상호작용을 억제하는 것)에 의해 보이는 것 미만이라는 것을 보여준다.
정의
본 발명은 특정 방법, 프로토콜, 세포주, 동물종 또는 속 및 기재된 시약으로 제한되지 않고, 다를 수 있다는 것이 이해되어야 한다. 또한 본 명세서에 사용된 용어는 단지 특정 실시형태를 기재하는 목적을 위한 것이며, 특허청구범위에 의해서만 제한될 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는 다는 것이 이해되어야 한다. 본 명세서에 사용되는 단수의 형태는 달리 명확하게 표시되지 않는다면 복수의 대상을 포함한다. 따라서, 예를 들어 "세포"에 대한 언급은 복수의 이러한 세포를 포함하며, "단백질"에 대한 언급은 하나 이상의 단백질 및 당업자에게 공지된 동등물 등에 대한 언급을 포함한다. 본 명세서에 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 달리 명확하게 표시되지 않는다면 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에게 보통 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다.
신경성장인자(NGF): 본 명세서에 사용되는, NGF(또한 베타-NGF; HSAN5; 및 NGFB로서 언급됨)는 호모 사피엔스(Homo sapiens) 베타-신경성장인자(β-NGF)로서 알앤디 시스템즈(R&D Systems)(미네소타주 미네아폴리스에 소재)으로부터 입수가능한 다음의 성숙 아미노산 서열:
SSSHPIFHRGEFSVCDSVSVWVGDKTTATDIKGKEVMVLGEVNINNSVFKQYFFETKCRDPNPVDSGCRGIDSKHWNSYCTTTHTFVKALTMDGKQAAWRFIRIDTACVCVLSRKAVRRA(서열번호 411)뿐만 아니라 이 NGF 아미노산 서열의 임의의 프로-, 성숙, 가용성 및/또는 막-결합 형태 및 이 서열의 돌연변이체(뮤테인), 스플라이스 변이체, 아이소형(isoform), 상동유전자(orthologue), 상동체(homologue) 및 변이체를 포함한다.
"신경성장인자 길항물질"은 NGF에 의해 유발되는 적어도 하나의 생물학적 활성, 바람직하게는 TrkA 및/또는 p75와 NGF의 상호작용을 수반하는 활성을 길항하거나 또는 억제하는 분자이다. 이들 길항물질은 TrkA, p75, 또는 NGF의 단편, NGF, TrkA 또는 p75에 결합되는 핵산 또는 항체와 같은 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 예시적인 실시형태에서, NGF 길항물질은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 p75와 NGF의 결합을 억제하는 신경성장인자(NGF)에 결합되는 NGF에 특이적인 적어도 하나의 항체 또는 항체 단편이다.
본 명세서에서 "재조합 숙주" 또는 "숙주 세포"는 본 발명에 따른 NGF 길항물질, 예를 들어 본 발명에 따른 NGF 항체, NGF 항체 단편 또는 다른 NGF 길항물질을 생성하도록 유전적으로 유전자조작된 세포 또는 비-인간 유기체를 지칭한다. 이들 숙주 및 숙주 세포는 포유류 세포, 박테리아, 효모, 곤충 세포, 식물 세포 및 유전자이식 식물 또는 동물, 예컨대 설치류, 식물 및 소를 포함한다. 전형적으로 항체 또는 항체 단편은 포유류, 박테리아 및 효모 세포에서 발현된다. 바람직한 실시형태에서 대상 항체 또는 항체 단편은 항체 발현을 위한 이배체 피키아 효모 배양물을 사용하는 등록상표인 분비 발현 시스템에서 발현된다. 이 발현 시스템은 2011년 4월 19일 발행된 Cregg에 의한 미국특허 제7,927,863호에 개시되며, 그의 내용은 본 명세서에 참조로서 포함된다. 대표적인 실시형태에서, NGF 길항물질, 예를 들어, 항-인간 NGF 항체 및 항체 단편은 효모, 바람직하게는 교배(mating) 경쟁 효모에서 발현된다.
교배 경쟁 효모 종: 본 발명에서, 이는 배양물 중에서 성장할 수 있는 임의의 이배체 또는 4배체 효모를 광범위하게 포함하는 것으로 의도된다. 효모의 이러한 종은 반수체(haploid), 이배체 또는 다른 배수체(polyploid) 형태로 존재할 수 있다. 주어진 배수성(ploidy)의 세포는 적절한 조건 하에서 해당 형태의 다수의 정해지지 않은 생성을 위해 증식될 수 있다. 이배체 세포는 또한 반수체 세포를 형성하기 위해 포자를 형성할 수 있다. 순차적인 교배는 이배체 균주의 추가적인 교배 또는 융합을 통해 4배체 균주를 초래할 수 있다. 본 발명은, 예를 들어 교배 또는 스페로플라스트 융합에 의해 반수체 효모뿐만 아니라 이배체 또는 생성된 다른 배수체 효모 세포의 사용을 고려한다. 이러한 효모는 사카로마이세타시에(Saccharomycetaceae) 패밀리의 구성원인데, 이는 악시오지마속(Arxiozyma); 아스코보트리오지마속(Ascobotryozyma); 시테로마이세스속(Citeromyces); 데바리오마이세스속(Debaryomyces); 데카라속(Dekkera); 에레모테시움속(Eremothecium); 이사첸키아속(Issatchenkia); 카자흐스타니아속(Kazachstania); 클루이베로마이세스속(Kluyveromyces); 코다마에아속(Kodamaea); 로데로마이세스속(Lodderomyces); 파키솔렌속(Pachysolen); 피키아속(Pichia); 사카로마이세스속(Saccharomyces); 사투니스포라(Saturnispora); 테트라피시스포라(Tetrapisispora); 토룰라스포라(Torulaspora); 윌리옵시스(Williopsis); 및 자이고사카로마이세스(Zygosaccharomyces)를 포함한다. 본 발명에서 잠재적으로 유용한 효모의 다른 유형은 야로이야(Yarrowia); 로도스포리디움(Rhodosporidium); 칸디다(Candida); 한세뉼라속(Hansenula); 필로바시움(Filobasium); 스포리디오볼루스(Sporidiobolus); 불레라(Bullera); 류코스포리디움(Leucosporidium) 및 필로바시델라(Filobasidella)를 포함한다.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 교배 경쟁 효모는 피키아속의 구성원이다. 본 발명의 더 바람직한 실시형태에서 피키아속의 교배 경쟁 효모는 다음의 종: 피키아 파스토리스(Pichia pastoris), 피키아 메타놀리카(Pichia methanolica), 및 한세뉼라 폴리모파(Hansenula polymorpha)(피키아 앙구스타(Pichia angusta)) 중 하나이다. 본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 피키아 속의 교배 경쟁 효모는 피키아 파스토리스종이다.
선별가능한 마커: 선별가능한 마커는, 예를 들어 형질전환 사건을 통해 해당 유전자를 수용하는 세포 상에서 성장 표현형(신체성장 특징)을 부여하는 유전자 또는 유전자 단편이다. 선별가능한 마커는 선별가능한 마커 유전자를 수용하지 않은 세포가 성장할 수 없는 조건 하에서 세포가 선택적 성장 배지에서 생존하고 성장하도록 한다. 선별가능한 마커 유전자는 일반적으로 2개의 ts 돌연변이체가 교차되거나 또는 ts 돌연변이체가 형질전환될 때 온도에서 항생제 또는 다른 약물에 대해 세포 내성을 부여하는 유전자와 같은 양성의 선별가능한 마커 유전자; 생합성 유전자를 갖지 않는 모든 세포에 의해 필요한 구체적 영양소 없이 배지 내에서 성장하는 능력이 세포에 부여된 생합성 유전자, 또는 야생형 유전자를 갖지 않는 세포에 의한 성장에 대한 불능이 세포에 부여된 돌연변이된 생합성 유전자와 같은 음성의 선별가능한 마커 유전자 등을 포함하는 몇몇 유형에 속한다. 적합한 마커는, 이하로 제한되는 것은 아니지만: ZEO; G418; LYS3; MET1; MET3a; ADE1; ADE3; URA3을 포함한다.
발현 벡터: 이들 DNA 벡터는 표적 숙주 세포 내에서 외래 단백질의 발현을 위한 조작을 용이하게 하는 구성요소를 함유한다. 종종, 서열의 조작 및 형질전환을 위한 DNA의 생성은 박테리아 숙주, 예를 들어 이콜라이(E. coli)에서 우선 수행되고, 보통 벡터는 박테리아 복제원점 및 적절한 박테리아 선별마커를 포함하는 이러한 조작을 용이하게 하기 위한 서열을 포함할 것이다. 선별마커는 선택적 배양 배지에서 성장된 형질전환된 숙주 세포의 생존 또는 성장에 필요한 단백질을 암호화한다. 선별 유전자를 함유하는 벡터와 함께 형질전환되지 않은 숙주 세포는 배양 배지에서 생존하지 않을 것이다. 전형적인 선별 유전자는 (a) 항생제 또는 다른 독소에 대한 내성을 부여하고, (b) 영양 요구성 결핍증을 보충하거나 또는 (c) 복합 배지로부터 입수가능하지 않은 중요한 영양소를 공급하는 단백질을 암호화한다. 효모의 형질전환을 위한 대표적인 벡터 및 방법은, 예를 들어 문헌[Burke, D., Dawson, D., & Stearns, T. (2000). Methods in yeast genetics: a Cold Spring Harbor Laboratory course manual. Plainview, N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratory Press]에 기재된다.
본 발명의 방법에서 사용을 위한 발현 벡터는 형질전환된 숙주 세포 또는 숙주 균주를 확인하기 위해 선별가능한 영양 요구성 또는 약물 마커를 포함하는, 숙주 세포 특이적 서열을 추가로 포함할 것이다. 약물 마커는 숙주 세포 또는 유전자이식 동물에서 벡터의 복제 수를 증폭시키기 위해 추가로 사용될 수 있다.
관심의 폴리펩타이드 암호 서열은 숙주 세포 또는 유전자이식 동물에서 폴리펩타이드의 발현을 위해 제공되는 전사 및 번역 조절 서열에 작동가능하게 연결된다. 이들 벡터 성분은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 다음 중 하나 이상을 포함할 수 있다: 인핸서 구성요소, 프로모터 및 전사 종결 서열. 폴리펩타이드의 분비를 위한 서열, 예를 들어 신호 서열 등이 또한 포함될 수 있다. 발현 벡터가 숙주 세포 게놈 내로 종종 통합되기 때문에, 숙주세포 복제원점은 선택적이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 관심의 폴리펩타이드는 숙주 세포, 예를 들어 효모 이배체 세포로부터 폴리펩타이드의 최적화된 분비를 제공하는 서열에 작동가능하게 연결되거나 또는 융합된다.
핵산은 다른 핵산 서열과 기능적 관계로 위치될 때 "작동가능하게 연결된다". 예를 들어, 신호 서열에 대한 DNA는, 폴리펩타이드의 분비에 참여하는 프레단백질(preprotein)로서 발현된다면 폴리펩타이드에 대한 DNA에 작동가능하게 연결되며; 프로모터 또는 인핸서는, 서열의 전사에 영향을 미친다면, 암호 서열에 작동가능하게 연결된다. 일반적으로, "작동가능하게 연결된"은 연결된 DNA 서열이 분비 리더의 경우에 인접해 있고, 리딩 프레임에서 인접해 있다 것을 의미한다. 그러나, 인핸서는 인접하지 않는다. 링킹은 편리한 제한 부위에서 결찰에 의해 또는 대안적으로 당업자에게 익숙한 PCR/재조합 방법을 통해 수행된다(게이트웨이(Gateway(등록상표)) 기법; 캘리포니아주 칼스베드에 소재한 인비트로젠(인비트로젠(Invitrogen))). 이러한 부위가 존재하지 않는다면, 합성 올리고뉴클레오타이드 어댑터 또는 링커는 통상적인 실행에 따라 사용된다.
프로모터는 작동가능하게 연결되는 특정 핵산 서열의 전사 및 번역을 조절하는 구조적 유전자의 시작 코돈(일반적으로 100 내지 1000개 bp 내)에 대한 상류(5')에 위치된 미번역 서열이다. 이러한 프로모터는 몇몇 분류에 속한다: 유도성, 구조적 및 억제 프로모터(리프레서의 부재에 대한 반응에서 전사 수준을 증가시킴)). 유도성 프로모터는 그의 제어 하에 배양 조건에서 일부 변화, 예를 들어 영양소의 존재 또는 부재 또는 온도의 변화에 반응하여 DNA로부터 증가된 전사 수준을 개시할 수 있다.
프로모터 단편은 또한 효모 게놈 내 동일 부위 내로 발현 벡터의 상동적 재조합 및 통합을 위한 부위로서 작용할 수 있고; 대안적으로 선별가능한 마커는 상동성 재조합을 위한 부위로서 사용된다. 피키아 형질전환은 문헌[Cregg et al . (1985) Mol . Cell . Biol . 5:3376-3385]에 기재된다.
피키아로부터 적합한 프로모터의 예는 AOX1 및 프로모터(Cregg et al . (1989) Mol . Cell . Biol . 9:1316-1323); ICL1 프로모터(Menendez et al. (2003) Yeast 20(13):1097-108); 글라이세르알데하이드-3-포스페이트 탈수소효소 프로모터(GAP)(Waterham et al . (1997) Gene 186(1):37-44); 및 FLD1 프로모터(Shen et al. (1998) Gene 216(1):93-102)를 포함한다. GAP 프로모터는 강한 구성적 프로모터이고, AOX 및 FLD1 프로모터는 유도성이다.
다른 효모 프로모터는 ADH1, 알코올 탈수소효소 II, GAL4, PHO3, PHO5, Pyk 및 그로부터 유래된 키메라 프로모터를 포함한다. 추가적으로, 비-효모 프로모터, 예컨대 포유류, 곤충, 식물, 파충류, 식물, 양서류, 바이러스 및 조류 프로모터가 본 발명에서 사용될 수 있다. 가장 전형적으로 프로모터는 포유류 프로모터(발현된 유전자에 대해 잠재적으로 내인성)를 포함할 것이거나 또는 효모 시스템에서 효율적인 전사를 제공하는 효모 또는 바이러스 프로모터를 포함할 것이다.
관심의 폴리펩타이드는 직접적으로뿐만 아니라 이종성 폴리펩타이드, 예를 들어 성숙 단백질 또는 폴리펩타이드의 N-말단에서 특이적 절단 부위를 갖는 단일 서열 또는 다른 폴리펩타이드와 융합 폴리펩타이드로서 재조합적으로 생성될 수 있다. 일반적으로, 신호 서열은 벡터의 성분일 수 있거나, 또는 벡터 내로 삽입된 폴리펩타이드 암호 서열의 부분일 수 있다. 선택된 이종성 신호 서열은 바람직하게는 숙주 세포 내에서 이용가능한 표준 경로 중 하나를 통해 인식되고, 처리되는 것이다. 사카로마이세스 세레비시애(S. cerevisiae) 알파 이자 프레-프로 신호는 피키아 파스토리스로부터의 다양한 재조합 단백질의 분비에서 효과적인 것으로 입증되었다. 다른 효모 신호 서열은 알파 교배 인자 신호 서열, 인버타제 신호 서열, 및 다른 분비 효모 폴리펩타이드로부터 유래된 신호 서열을 포함한다. 추가적으로, 이들 신호 펩타이드 서열은 선택된 발현 시스템에서 향상된 분비를 제공하도록 유전자 조작될 수 있다. 관심의 다른 분비 신호는 또한 포유류 신호 서열을 포함하는데, 이는 분비되는 단백질에 대해 이종성일 수 있고, 또는 분비되는 단백질에 대한 천연 서열일 수 있다. 신호 서열은 프레-펩타이드 서열을 포함하며, 일부 예에서 프로펩타이드 서열을 포함할 수 있다. 다수의 이러한 신호 서열은 면역글로뷸린 쇄, 예를 들어 K28 프레프로톡신 서열, PHA-E, FACE, 인간 MCP-1, 인간 혈청 알부민 신호 서열, 인간 Ig 중쇄, 인간 Ig 경쇄 등에서 발견되는 신호 서열을 포함하여, 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[Hashimoto et . al. Protein Eng 11(2) 75 (1998); 및 Kobayashi et . al. Therapeutic Apheresis 2(4) 257 (1998)]을 참조한다.
전사는 벡터 내로 전사 활성자 서열을 삽입함으로써 증가될 수 있다. 이들 활성자는 보통 약 10 내지 300 bp인 DNA의 시스-작동 구성요소인데, 이것은 그의 전사를 증가시키는 프로모터 상에서 작용한다. 전사 인핸서는 인트론 내에서뿐만 아니라 암호 서열 그 자체 내에서 전사 단위에 대해 5' 및 3'에서 발견되는 상대적 배향 및 독립적 위치이다. 인핸서는 암호 서열에 대해 5 ' 또는 3' 위치에서 발현 벡터 내로 스플라이스될 수 있지만, 바람직하게는 프로모터로부터의 부위 5'에 위치된다.
진핵 숙주 세포에서 사용된 발현 벡터는 또한 전사 종결 및 mRNA의 안정화에 필요한 서열을 함유할 수 있다. 이러한 서열은 진핵 또는 바이러스 DNA 또는 cDNA의 미번역 영역에서 번역 종결 코돈에 대해 3'으로부터 보통 이용가능하다. 이들 영역은 mRNA의 미번역 부분에서 폴리아데닐화된 단편으로서 전사된 뉴클레오타이드 세그먼트를 함유한다.
상기-열거된 성분 중 하나 이상을 함유하는 적합한 벡터의 구성은 표준 결찰 기법 또는 PCR/재조합 방법을 사용한다. 분리된 플라스미드 또는 DNA 단편은 원하는 형태로 절단되고, 맞춰지며, 재결찰되어서 또는 재조합 방법을 통해 필요한 플라스미드를 만든다. 구성된 플라스미드 내 보정 서열을 확인하기 위한 분석을 위해, 결찰 혼합물이 사용되어 숙주 세포를 형질전환하며, 성공적인 형질전환체는 적절한 경우 항생제 내성(예를 들어, 암피실린 또는 제오신(Zeocin))에 의해 선택된다. 형질전환체로부터 플라스미드가 제조되고, 제한 엔도뉴클레아제에 의해 분석되며/되거나 서열화된다.
단편의 제한 및 결찰에 대한 대안으로서, att 부위 및 재조합 효소에 기반한 재조합 방법이 벡터 내로 DNA 서열을 삽입하기 위해 사용될 수 있다. 이러한 방법은, 예를 들어 문헌[Landy (1989) Ann.Rev.Biochem. 58:913-949]에 의해 기재되며; 당업자에게 공지되어 있다. 이러한 방법은 람다 및 이콜라이-암호화된 재조합 단백질의 혼합물에 의해 매개된 분자간 DNA 재조합을 이용한다. 재조합은 상호작용하는 DNA 분자 상의 특이적 부착(att) 부위 사이에 일어난다. att 부위의 기재를 위해, 문헌[Weisberg and Landy (1983) Site-Specific Recombination in Phage Lambda, in Lambda II, Weisberg, ed.(Cold Spring Harbor, NY:Cold Spring Harbor Press), pp.211-250]을 참조한다. 재조합 부위에 측접한 DNA 세그먼트는 스위칭되므로, 재조합 후 att 부위는 각각의 모 벡터에 의해 공여된 서열로 구성된 혼성 서열이다. 재조합은 임의의 토폴로지(topology)의 DNA 사이에 일어날 수 있다.
Att 부위는 적절한 벡터 내로 관심의 서열을 결찰하는 단계; 특이적 프라이머의 사용을 통해 att B 부위를 함유하는 PCR 생성물을 생성하는 단계; att 부위를 함유하는 적절한 벡터 내로 클로닝된 cDNA 라이브러리를 생성하는 단계 등에 의해 관심의 서열 내로 도입될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 폴딩은 아미노산 잔기 사이의 상호작용이 구조를 안정화시키도록 작용하는 경우 폴리펩타이드 및 단백질의 3차원 구조를 지칭한다. 비-공유 상호작용이 결정적 구조에서 중요하지만, 보통 관심의 단백질은 2개의 시스테인 잔기에 의해 형성되는 분자내 및/또는 분자간 공유적 이황화 결합을 가질 것이다. 자연적으로 발생하는 단백질 및 폴리펩타이드 또는 그의 유도체 및 변이체에 대해, 적절한 폴딩은 전형적으로 최적의 생물학적 활성을 초래하는 배열이며, 활성을 위한 분석, 예를 들어 리간드 결합, 효소적 활성 등에 의해 편리하게 모니터링될 수 있다.
일부 예에서, 예를 들어 원하는 생성물이 합성 기원인 경우, 생물학적 활성에 기반한 분석은 덜 의미있을 것이다. 이러한 분자의 적절한 폴딩은 생리적 특성, 힘이 드는 고려사항, 모델링 연구 등을 기준으로 결정될 수 있다.
발현 숙주는 폴딩 및 이황화 결합 형성을 향상시키는 하나 이상의 효소, 예를 들어 폴다제, 샤페로닌(chaperonin) 등를 암호화하는 서열의 도입에 의해 추가로 변형될 수 있다. 이러한 서열은 당업계에 공지된 바와 같은 벡터, 마커 등을 사용하여 호모 숙주 세포 내에서 구조적으로 또는 유도가능하게 발현될 수 있다. 바람직하게는 원하는 발현 패턴에 충분한 전사 조절 구성요소를 포함하는 서열이 표적화된 방법을 통해 숙주 세포 게놈에 안정하게 통합된다.
예를 들어, 진핵 PDI는 단백질 시스테인 산화 및 이황화 결합 이성질체화의 효율적인 촉매일 뿐만 아니라 샤페론 활성을 나타낸다. PDI의 공동 발현은 다수의 이황화 결합을 갖는 활성 단백질의 생성을 용이하게 할 수 있다. 또한 BIP(면역글로뷸린 중쇄 결합 단백질); 사이클로필린 등의 발현에 관심이 있다. 본 발명의 일 실시형태에서, 각각의 반수체 모 균주는 별개의 폴딩 효소를 발현시키며, 예를 들어 하나의 균주는 BIP를 발현시킬 수 있고, 다른 균주는 PDI 또는 이들의 조합을 발현시킬 수 있다.
용어 "원하는 단백질" 또는 "원하는 항체"는 상호호환적으로 사용되며, 일반적으로 표적, 즉 본 명세서에 기재된 바와 같은 NGF 또는 키메라 또는 인간화된 항체 또는 이들로부터 유래된 이들의 결합 부분에 특이적인 모 항체를 지칭한다. 용어 "항체"는 에피토프에 적합하고 에피토프를 인식하는 특이적 형상을 갖는 임의의 폴리펩타이드 쇄-함유 분자 구조를 포함하는 것으로 의도되며, 여기서 하나 이상의 비-공유 결합 상호작용은 분자와 에피토프 사이의 복합체를 안정화시킨다. 전형적인 항체 분자는 면역글로뷸린이며, 모든 공급원, 예를 들어 인간, 설치류, 토끼, 소, 양, 돼지, 개, 다른 포유류, 닭, 다른 조류 등으로부터의 모든 유형의 면역글로뷸린, IgG, IgM, IgA, IgE, IgD 등이 "항체"가 되는 것으로 고려된다. 본 발명에 따른 출발 물질로서 유용한 항체를 생성하기 위한 바람직한 공급원은 토끼이다. 수많은 항체 암호 서열이 기재되었고; 다른 것들은 당업계에 잘 공지된 방법에 의해 상승될 수 있다. 이들의 예는 키메라 항체, 인간 항체 및 다른 비-인간 포유류 항체, 인간화된 항체, 단일 쇄 항체(예컨대 scFv), 카멜바디, 나노바디, IgNAR(상어로부터 유래된 단일-쇄 항체), 소형 모듈 면역약제(SMIP), 및 항체 단편, 예컨대 Fabs, Fab', F(ab')2 등을 포함한다. 문헌[Streltsov VA, et al., Structure of a shark IgNAR antibody variable domain and modeling of an early-developmental isotype, Protein Sci. 2005 Nov;14(11):2901-9. Epub 2005 Sep 30; Greenberg AS, et al., A new antigen receptor gene family that undergoes rearrangement and extensive somatic diversification in sharks, Nature. 1995 Mar 9;374(6518):168-73; Nuttall SD, et al., Isolation of the new antigen receptor from wobbegong sharks, and use as a scaffold for the display of protein loop libraries, Mol Immunol. 2001 Aug;38(4):313-26; Hamers-Casterman C, et al., Naturally occurring antibodies devoid of light chains, Nature. 1993 Jun 3;363(6428):446-8; Gill DS, et al., Biopharmaceutical drug discovery using novel protein scaffolds, Curr Opin Biotechnol. 2006 Dec;17(6):653-8. Epub 2006 Oct 19]을 참조한다.
예를 들어, 항체 또는 항원 결합 단편은 유전자의 조작에 의해 생성될 수 있다. 이 기법에서, 다른 방법과 마찬가지로, 항체-생성 세포는 원하는 항원 또는 면역원에 대해 민감하게 된다. 항체 생성 세포로부터 분리된 전령 RNA는 PCR 증폭을 사용하여 cDNA를 만드는 주형으로서 사용된다. 초기 항원 특이성을 보유하는 하나의 중쇄 유전자 및 하나의 경쇄 유전자를 각각 함유하는 벡터의 라이브러리는 발현 벡터 내로 증폭된 면역글로뷸린 cDNA의 적절한 부문의 삽입에 의해 생성된다. 조합 라이브러리는 경쇄 유전자 라이브러리와 중쇄 유전자 라이브러리를 조합함으로써 구성된다. 이는 중쇄 및 경쇄(항체 분자의 Fab 단편 또는 항원 결합 단편과 유사)를 공동발현시키는 클론의 라이브러리를 초래한다. 이들 유전자를 운반하는 벡터는 숙주 세포 내로 공동-형질감염된다. 항체 유전자 합성이 형질감염된 숙주 내에서 유발될 때, 중쇄 및 경쇄 단백질은 자기조립되어(self-assemble) 항원 또는 면역원과 함께 스크리닝에 의해 검출될 수 있는 활성 항체를 생성한다.
관심의 항체 암호 서열은 천연 서열에 의해 암호화된 것뿐만 아니라 유전자 암호의 축퇴에 의해 개시된 핵산에 대해 서열 내에서 동일하지 않은 핵산, 및 이들의 변이체를 포함한다. 변이체 폴리펩타이드는 아미노산(aa) 치환, 첨가 또는 결실을 포함할 수 있다. 아미노산 치환은 보존적 아미노산 치환 또는 비-필수 아미노산을 제거하기 위한, 예컨대 글라이코실화 부위를 변경하거나 또는 기능에 필요하지 않은 하나 이상의 시스테인 잔기의 치환 또는 결실에 의해 미스폴팅을 최소화하는 치환일 수 있다. 변이체는 단백질의 특정 영역(예를 들어, 기능적 도메인, 촉매적 아미노산 잔기 등)의 향상된 생물학적 활성을 보유하거나 또는 가지도록 설계될 수 있다. 변이체는 또한 본 명세서에 개시된 폴리펩타이드의 단편, 특히 생물학적으로 활성인 단편 및/또는 기능적 도메인에 대응하는 단편을 포함한다. 클로닝된 유전자의 시험관내 돌연변이유발을 위한 기법은 공지되어 있다. 또한 단백질 분해에 대해 그의 내성을 개선하기 위하여 또는 용해도 특성을 최적화하기 위하여 또는 그들을 치료제로서 더 적합하게 제공하기 위하여 보통의 분자 생물학 기법을 사용하여 변형된 폴리펩타이드가 본 발명에 포함된다.
본 명세서의 키메라 항체는 적어도 2개의 상이한 항체 중 하나 이상의 부분을 조합함으로써 얻어진 임의의 항체를 포함하는데, 항체는 동일 또는 상이한 종의 항체일 수 있다. 일반적으로 키메라 항체는 인간 및 비-인간 항체로부터 유래된 부분을 함유한다. 본 명세서에서, 키메라 항체는 인간화된 항체를 포함하는데, 인간화된 항체는 인간 및 비-인간 항체 유래 부분을 함유할 수 있고, 즉, 전형적으로 그것은 인간 프레임워크 잔기 및 비-인간 항체 CDR을 포함하기 때문이다. 따라서, 본 출원에서 키메라 및 인간화된 항체는 상호호환적으로 지칭된다.
키메라 항체는 서로로부터 불변 경쇄 및 중쇄 영역을 갖는 하나의 종의 항체 생성 세포로부터 얻어진 가변 경쇄 및 중쇄 영역(VL 및 VH)을 조합하는 것에 의한 재조합 수단에 의해 만들어질 수 있다. 그러나 본 명세서에서 주목되는 "키메라 항체 또는 키메라 항체 단편"은 적어도 2개의 상이한 항체로부터 기원하거나 또는 유래된 아미노산 잔기를 포함하는 임의의 항체 또는 항체 단편을 광범위하게 포함하는 것으로 의도되는데, 항체는 동일 또는 상이한 종을 가질 수 있다. 전형적으로 본 명세서의 키메라 항체는 설치류 또는 토끼 가변 영역과 인간 불변 영역을 조합하여 대부분 인간 도메인을 갖는 항체를 생성한다. 이러한 키메라 항체의 생성은 당업계에 잘 공지되어 있으며, 표준 수단에 의해 달성될 수 있다(기재되는 바와 같이, 예를 들어 전문이 본 명세서에 참조로서 포함된 미국특허 제5,624,659호). 본 발명의 인간 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5, IgG6, IgG7, IgG8, IgG9, IgG10, IgG11, IgG12, IgG13, IgG14, IgG15, IgG16, IgG17, IgG18 또는 IgG19 불변 영역으로부터 선택될 수 있다는 것이 추가로 생각된다.
본 발명에 따른 인간화된 항체는 전형적으로 훨씬 더 인간-유사한 면역글로뷸린 도메인을 함유하도록 유전자조작되며, 유일한(모든 또는 대부분의) 동물-유래 항체의 상보성-결정 영역을 포함할 수 있지만, 그러나 동물-유래 항체로부터의 하나 이상의 프레임워크 잔기가 또한 존재할 수 있다. 바람직하게는, 이는 면역원성을 회피하기 위하여 최소화된다. 이는 단클론성 항체의 가변 영역의 초가변 루프의 서열을 주의하여 시험하고, 그것을 인간 항체 쇄의 구조에 맞추는 것에 의해 수행된다. 외관상으로는 복잡하지만, 실행 시 과정은 직접적이다. 예를 들어 본 명세서에 완전히 참조로서 포함되는 미국특허 제6,187,287호를 참조한다. 일부 예에서, 예를 들어 치환된 잔기가 인간 항체의 이 위치에서 매우 흔하다면, 및/또는 이 변경이 항원 결합에 부정적으로 영향을 미치지 않는다면, 동물-유래 항체의 CDR 잔기 중 하나 이상은 인간화된 항체에서 변경될 수 있다.
전체 면역글로뷸린(또는 그의 재조합 상대부분)에 추가로, 에피토프 결합 부위를 포함하는 면역글로뷸린 단편(예를 들어, Fab', F(ab')2, 또는 다른 단편)이 합성될 수 있다. "단편" 또는 최소 면역글로뷸린은 재조합 면역글로뷸린 기법을 이용하여 설계될 수 있다. 예를 들어 본 발명에서 사용을 위한 "Fv" 면역글로뷸린은 융합된 가변 경쇄 영역 및 가변 중쇄 영역을 합성함으로써 생성될 수 있다. 항체의 조합, 예를 들어 다이아바디에 또한 관심이 있으며, 이는 2개의 별개 Fv 특이성을 포함한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디 및 IgNAR은 면역글로뷸린 단편에 의해 포함된다.
면역글로뷸린 및 그의 단편은, 예를 들어 효과기(effector) 모이어티, 예컨대 화학적 링커, 검출가능한 모이어티, 예컨대 형광 염료, 효소, 독소, 기질, 생발광 물질, 방사성 물질, 화학 발광 모이어티 등, 또는 특이적 결합 모이어티, 예컨대 스트렙타비딘, 아비딘 또는 바이오틴 등을 첨가하기 위하여 번역후에 변형될 수 있고, 본 발명의 방법 및 조성물에 이용될 수 있다. 추가적인 효과기 분자의 예는 이하에 제공된다.
유전자 암호에 따른 폴리뉴클레오타이드 서열의 번역이 폴리펩타이드 서열을 수득한다면(즉, 폴리뉴클레오타이드 서열은 폴리펩타이드 서열을 "암호화함"), 폴리뉴클레오타이드 서열은 폴리펩타이드 서열에 "대응되며", 2개의 서열이 동일 폴리펩타이드 서열을 암호화한다면, 하나의 폴리뉴클레오타이드 서열은 다른 폴리뉴클레오타이드 서열에 "대응된다".
DNA 구성체의 "이종성" 영역 또는 도메인은 자연에서 더 큰 분자와 함께 발견되지 않는 더 큰 DNA 분자 내의 DNA의 확인가능한 세그먼트이다. 따라서, 이종성 영역이 포유류 유전자를 암호화할 때, 유전자는 보통 공급원 유기체의 게놈 내 포유류 게놈 DNA에 측접되지 않은 DNA에 의해 측접될 것이다. 이종성 영역의 다른 예는 암호 서열 그 자체가 자연에서 발견되지 않은 경우의 구성체이다(예를 들어 게놈 암호 서열이 인트론, 또는 천연 유전자와 상이한 코돈을 갖는 합성 서열을 함유하는 경우의 cDNA). 대립유전자 변형 또는 자연적으로-발생되는 돌연변이 사건은 본 명세서에 정의된 바와 같은 DNA의 이종성 영역에서 생기지 않는다.
"암호 서열"은 단백질 또는 펩타이드 서열을 암호화하거나 또는 대응되는 코돈의 프레임 내(유전자 암호의 관점에서) 서열이다. 두 암호 서열은 서열 또는 그의 상보적 서열이 동일 아미노산 서열을 암호화한다면 서로 대응된다. 적절한 조절 서열과 관련된 암호 서열은 폴리펩타이드로 전사되고 번역될 수 있다. 폴리아데닐화 신호 및 전사 종결 서열은 보통 암호 서열에 대해 3'에 위치될 것이다. "프로모터 서열"은 세포 내 RNA 폴리머라제와 결합할 수 있고, 암호 서열 하류(3' 방향)의 전사를 개시할 수 있는 DNA 조절 영역이다. 프로머터 서열은 전형적으로 암호 서열의 전사에 영향을 미치는 조절 분자(예를 들어 전사인자)의 결합을 위한 추가적인 부위를 함유한다. 암호 서열은 RNA 폴리머라제가 세포 내 프로모터 서열에 결합되고 암호 서열을 mRNA로 전사시킬 때, 프로모터 서열의 "제어 하에" 있고 프로모터에 "조작가능하게 연결되며", 그 다음에 차례로 암호 서열에 의해 단백질로 번역된다.
벡터는 DNA, RNA 또는 단백질과 같은 외래 물질을 유기체 또는 숙주 세포 내로 도입하기 위해 사용된다. 전형적인 벡터는 재조합 바이러스(폴리뉴클레오타이드에 대해) 및 리포좀(폴리펩타이드에 대해)을 포함한다. "DNA 벡터"는 레플리콘, 예컨대 플라스미드, 파지 또는 코스미드인데, 이는 다른 폴리뉴클레오타이드 세그먼트에 부착되어 부착된 세그먼트의 복제를 초래한다. "발현 벡터"는 적절한 숙주 세포에 의해 폴리펩타이드 합성을 지시하는 조절 서열을 함유하는 DNA 벡터이다. 이는 보통 RNA 폴리머라제에 결합되고, mRNA의 전사를 개시하는 프로모터뿐만 아니라 리보솜 결합 부위 및 폴리펩타이드(들)로 mRNA의 번역을 지시하는 개시 신호를 의미한다. 적절한 부위에서 및 정확한 리딩 프레임에서 발현 벡터 내로 폴리뉴클레오타이드 서열의 함입 다음에 벡터에 의한 적절한 숙주 세포의 형질전환은 상기 폴리뉴클레오타이드 서열에 의해 암호화된 폴리펩타이드의 생성을 가능하게 한다.
폴리뉴클레오타이드 서열의 "증폭"은 특정 핵산 서열의 다수의 복제물의 시험관내 생성이다. 증폭된 서열은 보통 DNA의 형태이다. 이러한 증폭을 수행하기 위한 다수의 기법은 Van Brunt에 의한 종설논문(1990, Bio/Technol., 8(4):291-294)에 기재된다. 폴리머라제 연쇄반응 또는 PCR은 핵산 증폭의 프로토타입이며, 본 명세서의 PCR의 사용은 다른 적합한 증폭 기법의 예시로 고려되어야 한다.
현재 척추동물에서 항체의 일반적 구조는 잘 이해된다(Edelman, G. M., Ann. N.Y. Acad. Sci., 190: 5 (1971)). 항체는 대략 23,000 달톤("경쇄") 분자량의 2개의 동일한 경쇄 폴리펩타이드 및 분자량 53,000 내지 70,000("중쇄")의 2개의 동일한 중쇄로 이루어진다. 4개의 쇄는 "Y" 배치 내 이황화 결합에 의해 결합되되, 경쇄는 "Y" 배치의 입구에서 시작되는 중쇄를 묶는다. "Y" 배치의 "분지" 부분은 Fab 영역으로 설계되며; "Y" 배치의 줄기 부분은 FC 영역으로 설계된다. 아미노산 서열 배향은 "Y" 배치의 상부에서 N-말단 단부로부터 각 쇄의 바닥에서 C-말단 단부로 이어진다. N-말단 단부는 그것이 유발된 항원에 대해 특이성을 갖는 가변 영역을 소유하며, 길이로 대략 100개의 아미노산인데, 경쇄와 중쇄 사이 및 항체와 항체 간에 약간의 변형이 있다.
가변 영역은 남아있는 쇄의 길이가 연장되고, 항체의 특정 부류가 항체의 특이성(즉, 이를 유발하는 항원)에 의해 다르지 않은, 불변 영역에 대해 각 쇄에서 연결된다. 면역글로뷸린 분자의 부류를 결정하는 불변 영역의 5가지 공지된 주요 부류가 있다(γ, μ, α, δ 및 ε(감마, 뮤, 알파, 델타 또는 엡실론) 중쇄 불변 영역에 대응되는 IgG, IgM, IgA, IgD 및 IgE). 불변 영역 또는 부류는 보체의 활성화(Kabat, E. A., Structural Concepts in Immunology and Immunochemistry, 2nd Ed., p. 413-436, Holt, Rinehart, Winston (1976)) 및 다른 세포 반응(Andrews, D. W., et al ., Clinical Immunobiology, pp 1-18, W. B. Sanders (1980); Kohl, S., et al ., Immunology, 48: 187 (1983))을 포함하는 항체의 이후의 효과기 기능을 결정하는 반면; 가변 영역은 그와 반응되는 항원을 결정한다. 경쇄는 κ(카파) 또는 λ(람다) 중 하나로서 분류된다. 각각의 중쇄 부류는 카파 또는 람다 경쇄 중 하나와 함께 제조될 수 있다. 경쇄 및 중쇄는 서로 공유적으로 결합되며, 면역글로뷸린이 하이브리도마에 의해 또는 B 세포에 의해 만들어질 때, 두 중쇄의 "꼬리" 부분은 공유적 이황화 결합에 의해 서로 결합된다.
발현 "가변 영역" 또는 "VR"은 항원에 항체의 결합에서 직접적으로 수반된 항체 내 경쇄 및 중쇄의 각각의 쌍 내의 도메인을 지칭한다. 각각의 중쇄는 한 단부에서 가변 도메인(VH) 다음에 다수의 불변 도메인을 가진다. 각각의 경쇄는 한 단부에서 가변 도메인(VL) 및 그의 다른 단부에서 불변 도메인을 가지며; 경쇄의 불변 도메인은 중쇄의 제1 불변 도메인과 함께 정렬되고, 경쇄 가변 도메인은 중쇄의 가변 도메인과 함께 정렬된다.
표현 "상보성 결정 영역", "초가변 영역" 또는 "CDR"은 항체의 경쇄 또는 중쇄의 가변 영역에서 발견되는 초가변 또는 상보성 결정 영역(CDR) 중 하나 이상을 지칭한다(문헌[Kabat, E. A. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda, Md., (1987)]을 참조). 이들 표현은 카바트(Kabat) 등에 의해 정의되는 초가변 영역("Sequences of Proteins of Immunological Interest," Kabat E., et al., US Dept. of Health and Human Services, 1983) 또는 항체의 3-차원 구조 내 초가변 루프(Chothia and Lesk, J Mol. Biol. 196 901-917 (1987))를 포함한다. 각 쇄의 CDR은 프레임워크 영역에 의해 근위에 보유되며, 다른 쇄로부터의 CDR에 의해 항원 결합 부위의 형성에 기여한다. CDR 내에서, 항체-항원 상호작용에서 CDR에 의해 사용되는 결정적 접촉 잔기를 나타내는 선택성 결정 영역(selectivity determining regions, SDR)으로서 기재된 선택 아미노산이 있다(Kashmiri, S., Methods, 36:25-34 (2005)).
표현 "프레임워크 영역" 또는 "FR"은 항체의 경쇄 및 중쇄의 가변 영역 내에서 프레임워크 영역 중 하나 이상을 지칭한다(문헌[Kabat, E. A. et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda, Md., (1987)]을 참조). 이들 표현은 항체의 경쇄와 중쇄의 가변 영역 내에서 CDR 사이에 끼어있는 해당 아미노산 서열을 포함한다.
NGF 에 대해 결합 활성을 갖는 항- NGF 항체 및 그의 결합 단편
항체 Ab1
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab1 또는 그의 단편, 또는 Ab1와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합 및 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00001
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00002
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00003
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00004
본 발명은 추가로 서열번호 1의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 2의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 5; 서열번호 6; 및 서열번호 7의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 3의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 4의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 8; 서열번호 9; 및 서열번호 10의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 1 또는 서열번호 2의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 3 또는 서열번호 4의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 1의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 2의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 5; 서열번호 6; 및 서열번호 7의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 3의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 4의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 8; 서열번호 9; 및 서열번호 10의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 1의 가변 경쇄 영역; 서열번호 3의 가변 중쇄 영역; 서열번호 1의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 5; 서열번호 6; 및 서열번호 7); 및 서열번호 3의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 8; 서열번호 9; 및 서열번호 10).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 키메라 항-NGF 항체는 서열번호 2 및 서열번호 4를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab1이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab1에 대해, Fab 단편은 서열번호 1의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 3의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 1 및/또는 서열번호 3의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab1의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab1 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab2
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab2 또는 그의 단편, 또는 Ab2와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00005
.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00006
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00007
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00008
본 발명은 추가로 서열번호 11의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 12의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 15; 서열번호 16; 및 서열번호 17의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 13의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 14의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 18; 서열번호 19; 및 서열번호 20의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 11 또는 서열번호 12의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 13 또는 서열번호 14의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 11의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 12의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 15; 서열번호 16; 및 서열번호 17의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 13의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 14의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 18; 서열번호 19; 및 서열번호 20의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 11의 가변 경쇄 영역; 서열번호 13의 가변 중쇄 영역; 서열번호 11의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 15; 서열번호 16; 및 서열번호 17); 및 서열번호 13의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 18; 서열번호 19; 및 서열번호 20).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 12 및 서열번호 14를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab2이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab2에 대해, Fab 단편은 서열번호 11의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 13의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 11 및/또는 서열번호 13의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab2 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab3
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab3 또는 그의 단편, 또는 Ab3와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00009
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00010
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00011
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00012
본 발명은 추가로 서열번호 21의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 22의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 25; 서열번호 26; 및 서열번호 27의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 23의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 24의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 28; 서열번호 29; 및 서열번호 30의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 21 또는 서열번호 22의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 23 또는 서열번호 24의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 21의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 22의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 25; 서열번호 26; 및 서열번호 27의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 23의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 24의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 28; 서열번호 29; 및 서열번호 30의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 21의 가변 경쇄 영역; 서열번호 23의 가변 중쇄 영역; 서열번호 21의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 25; 서열번호 26; 및 서열번호 27); 및 서열번호 23의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 28; 서열번호 29; 및 서열번호 30).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 22 및 서열번호 24를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab3이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab3에 대해, Fab 단편은 서열번호 21의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 23의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 21 및/또는 서열번호 23의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab3의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab3 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab4
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab4 또는 그의 단편, 또는 Ab4와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00013
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00014
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00015
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00016
본 발명은 추가로 서열번호 31의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 32의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 35; 서열번호 36; 및 서열번호 37의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 33의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 34의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 38; 서열번호 39; 및 서열번호 40의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 31 또는 서열번호 32의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 33 또는 서열번호 34의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 31의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 32의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 35; 서열번호 36; 및 서열번호 37의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 33의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 34의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 38; 서열번호 39; 및 서열번호 40의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 31의 가변 경쇄 영역; 서열번호 33의 가변 중쇄 영역; 서열번호 31의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 35; 서열번호 36; 및 서열번호 37); 및 서열번호 33의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 38; 서열번호 39; 및 서열번호 40).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 32 및 서열번호 34를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab4이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab4에 대해, Fab 단편은 서열번호 31의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 33의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 31 및/또는 서열번호 33의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab4의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab4 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab5
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab5 또는 그의 단편, 또는 Ab5와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00017
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00018
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00019
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00020
본 발명은 추가로 서열번호 41의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 42의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 45; 서열번호 46; 및 서열번호 47의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 43의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 44의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 48; 서열번호 49; 및 서열번호 50의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 41 또는 서열번호 42의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 43 또는 서열번호 44의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 41의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 42의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 45; 서열번호 46; 및 서열번호 47의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 43의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 44의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 48; 서열번호 49; 및 서열번호 50의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 41의 가변 경쇄 영역; 서열번호 43의 가변 중쇄 영역; 서열번호 41의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 45; 서열번호 46; 및 서열번호 47); 및 서열번호 43의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 48; 서열번호 49; 및 서열번호 50).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 42 및 서열번호 44를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab5이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab5에 대해, Fab 단편은 서열번호 41의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 43의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 41 및/또는 서열번호 43의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab5의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab5 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab6
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab6 또는 그의 단편, 또는 Ab6과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00021
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00022
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00023
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00024
본 발명은 추가로 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 52의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 53의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 54의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 51 또는 서열번호 52의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 53 또는 서열번호 54의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 52의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 53의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 54의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 51의 가변 경쇄 영역; 서열번호 53의 가변 중쇄 영역; 서열번호 51의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57); 및 서열번호 53의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 52 및 서열번호 54를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab6이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab6에 대해, Fab 단편은 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 53의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 51 및/또는 서열번호 53의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab6의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab6 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab7
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab7 또는 그의 단편, 또는 Ab7과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00025
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00026
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00027
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00028
본 발명은 추가로 서열번호 61의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 62의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 65; 서열번호 66; 및 서열번호 67의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 63의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 64의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 68; 서열번호 69; 및 서열번호 70의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 61 또는 서열번호 62의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 63 또는 서열번호 64의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 61의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 62의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 65; 서열번호 66; 및 서열번호 67의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 63의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 64의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 68; 서열번호 69; 및 서열번호 70의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 61의 가변 경쇄 영역; 서열번호 63의 가변 중쇄 영역; 서열번호 61의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 65; 서열번호 66; 및 서열번호 67); 및 서열번호 63의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 68; 서열번호 69; 및 서열번호 70).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 62 및 서열번호 64를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab7이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab7에 대해, Fab 단편은 서열번호 61의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 63의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 61 및/또는 서열번호 63의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab7의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab7 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab8
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab8 또는 그의 단편, 또는 Ab8과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00029
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00030
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00031
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00032
본 발명은 추가로 서열번호 71의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 72의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 75; 서열번호 76; 및 서열번호 77의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 73의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 74의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 78; 서열번호 79; 및 서열번호 80의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 71 또는 서열번호 72의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 73 또는 서열번호 74의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 71의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 72의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 75; 서열번호 76; 및 서열번호 77의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 73의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 74의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 78; 서열번호 79; 및 서열번호 80의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 71의 가변 경쇄 영역; 서열번호 73의 가변 중쇄 영역; 서열번호 71의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 75; 서열번호 76; 및 서열번호 77); 및 서열번호 73의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 78; 서열번호 79; 및 서열번호 80).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 72 및 서열번호 74를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab8이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab8에 대해, Fab 단편은 서열번호 71의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 73의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 71 및/또는 서열번호 73의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab8의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab8 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab9
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab9 또는 그의 단편, 또는 Ab9와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00033
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00034
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00035
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00036
본 발명은 추가로 서열번호 81의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 82의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 85; 서열번호 86; 및 서열번호 87의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 83의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 84의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 88; 서열번호 89; 및 서열번호 90의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 81 또는 서열번호 82의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 83 또는 서열번호 84의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 81의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 82의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 85; 서열번호 86; 및 서열번호 87의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 83의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 84의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 88; 서열번호 89; 및 서열번호 90의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 81의 가변 경쇄 영역; 서열번호 83의 가변 중쇄 영역; 서열번호 81의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 85; 서열번호 86; 및 서열번호 87); 및 서열번호 83의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 88; 서열번호 89; 및 서열번호 90).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 82 및 서열번호 84를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab9이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab9에 대해, Fab 단편은 서열번호 81의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 83의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 81 및/또는 서열번호 83의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab9의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab9 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab10
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab10 또는 그의 단편, 또는 Ab10와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00037
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00038
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00039
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00040
본 발명은 추가로 서열번호 91의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 92의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 95; 서열번호 96; 및 서열번호 97의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 93의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 94의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 98; 서열번호 99; 및 서열번호 100의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 91 또는 서열번호 92의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 93 또는 서열번호 94의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 91의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 92의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 95; 서열번호 96; 및 서열번호 97의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 93의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 94의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 98; 서열번호 99; 및 서열번호 100의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 91의 가변 경쇄 영역; 서열번호 93의 가변 중쇄 영역; 서열번호 91의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 95; 서열번호 96; 및 서열번호 97); 및 서열번호 93의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 98; 서열번호 99; 및 서열번호 100).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 92 및 서열번호 94를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab10이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab10에 대해, Fab 단편은 서열번호 91의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 93의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 91 및/또는 서열번호 93의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab10의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab10 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab11
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab11 또는 그의 단편, 또는 Ab11과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00041
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00042
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00043
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00044
본 발명은 추가로 서열번호 101의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 102의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 105; 서열번호 106; 및 서열번호 107의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 103의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 104의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 108; 서열번호 109; 및 서열번호 110의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 101 또는 서열번호 102의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 103 또는 서열번호 104의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 101의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 102의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 105; 서열번호 106; 및 서열번호 107의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 103의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 104의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 108; 서열번호 109; 및 서열번호 110의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 101의 가변 경쇄 영역; 서열번호 103의 가변 중쇄 영역; 서열번호 101의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 105; 서열번호 106; 및 서열번호 107); 및 서열번호 103의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 108; 서열번호 109; 및 서열번호 110).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 102 및 서열번호 104를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab11이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab11에 대해, Fab 단편은 서열번호 101의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 103의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 101 및/또는 서열번호 103의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab11의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab11 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab12
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab12 또는 그의 단편, 또는 Ab12와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00045
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00046
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00047
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00048
본 발명은 추가로 서열번호 111의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 112의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 115; 서열번호 116; 및 서열번호 117의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 113의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 114의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 118; 서열번호 119; 및 서열번호 120의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 111 또는 서열번호 112의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 113 또는 서열번호 114의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 111의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 112의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 115; 서열번호 116; 및 서열번호 117의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 113의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 114의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 118; 서열번호 119; 및 서열번호 120의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 111의 가변 경쇄 영역; 서열번호 113의 가변 중쇄 영역; 서열번호 111의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 115; 서열번호 116; 및 서열번호 117); 및 서열번호 113의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 118; 서열번호 119; 및 서열번호 120).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 112 및 서열번호 114를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab12이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab12에 대해, Fab 단편은 서열번호 111의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 113의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 111 및/또는 서열번호 113의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab12의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab12 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab13
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab13 또는 그의 단편, 또는 Ab13과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00049
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00050
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00051
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00052
본 발명은 추가로 서열번호 121의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 122의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 125; 서열번호 126; 및 서열번호 127의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 123의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 124의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 128; 서열번호 129; 및 서열번호 130의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 121 또는 서열번호 122의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 123 또는 서열번호 124의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 121의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 122의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 125; 서열번호 126; 및 서열번호 127의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 123의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 124의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 128; 서열번호 129; 및 서열번호 130의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 121의 가변 경쇄 영역; 서열번호 123의 가변 중쇄 영역; 서열번호 121의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 125; 서열번호 126; 및 서열번호 127); 및 서열번호 123의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 128; 서열번호 129; 및 서열번호 130).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 122 및 서열번호 124를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab13이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab13에 대해, Fab 단편은 서열번호 121의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 123의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 121 및/또는 서열번호 123의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab13의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab13 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab14
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab14 또는 그의 단편, 또는 Ab14와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00053
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00054
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00055
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00056
본 발명은 추가로 서열번호 131의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 132의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 135; 서열번호 136; 및 서열번호 137의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 133의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 134의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 138; 서열번호 139; 및 서열번호 140의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 131 또는 서열번호 132의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 133 또는 서열번호 134의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 131의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 132의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 135; 서열번호 136; 및 서열번호 137의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 133의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 134의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 138; 서열번호 139; 및 서열번호 140의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 131의 가변 경쇄 영역; 서열번호 133의 가변 중쇄 영역; 서열번호 131의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 135; 서열번호 136; 및 서열번호 137); 및 서열번호 133의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 138; 서열번호 139; 및 서열번호 140).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 132 및 서열번호 134를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab14이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab14에 대해, Fab 단편은 서열번호 131의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 133의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 131 및/또는 서열번호 133의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab14의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab14 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab15
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab15 또는 그의 단편, 또는 Ab15와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00057
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00058
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00059
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00060
본 발명은 추가로 서열번호 141의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 142의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 145; 서열번호 146; 및 서열번호 147의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 143의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 144의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 148; 서열번호 149; 및 서열번호 150의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 141 또는 서열번호 142의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 143 또는 서열번호 144의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 141의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 142의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 145; 서열번호 146; 및 서열번호 147의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 143의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 144의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 148; 서열번호 149; 및 서열번호 150의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 141의 가변 경쇄 영역; 서열번호 143의 가변 중쇄 영역; 서열번호 141의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 145; 서열번호 146; 및 서열번호 147); 및 서열번호 143의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 148; 서열번호 149; 및 서열번호 150).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 142 및 서열번호 144를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab15이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab15에 대해, Fab 단편은 서열번호 141의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 143의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 141 및/또는 서열번호 143의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab15의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab15 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab16
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab16 또는 그의 단편, 또는 Ab16과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00061
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00062
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00063
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00064
본 발명은 추가로 서열번호 151의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 152의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 155; 서열번호 156; 및 서열번호 157의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 153의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 154의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 158; 서열번호 159; 및 서열번호 160의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 151 또는 서열번호 152의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 153 또는 서열번호 154의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 151의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 152의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 155; 서열번호 156; 및 서열번호 157의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 153의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 154의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 158; 서열번호 159; 및 서열번호 160의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 151의 가변 경쇄 영역; 서열번호 153의 가변 중쇄 영역; 서열번호 151의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 155; 서열번호 156; 및 서열번호 157); 및 서열번호 153의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 158; 서열번호 159; 및 서열번호 160).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 152 및 서열번호 154를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab16이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab16에 대해, Fab 단편은 서열번호 151의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 153의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 151 및/또는 서열번호 153의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab16의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab16 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab17
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab17 또는 그의 단편, 또는 Ab17과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00065
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00066
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00067
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00068
본 발명은 추가로 서열번호 161의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 162의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 165; 서열번호 166; 및 서열번호 167의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 163의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 164의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 168; 서열번호 169; 및 서열번호 170의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 161 또는 서열번호 162의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 163 또는 서열번호 164의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 161의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 162의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 165; 서열번호 166; 및 서열번호 167의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 163의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 164의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 168; 서열번호 169; 및 서열번호 170의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 161의 가변 경쇄 영역; 서열번호 163의 가변 중쇄 영역; 서열번호 161의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 165; 서열번호 166; 및 서열번호 167); 및 서열번호 163의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 168; 서열번호 169; 및 서열번호 170).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 162 및 서열번호 164를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab17이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab17에 대해, Fab 단편은 서열번호 161의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 163의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 161 및/또는 서열번호 163의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab17의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab17 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab18
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab18 또는 그의 단편, 또는 Ab18과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00069
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00070
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00071
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00072
본 발명은 추가로 서열번호 171의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 172의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 175; 서열번호 176; 및 서열번호 177의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 173의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 174의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 178; 서열번호 179; 및 서열번호 180의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 171 또는 서열번호 172의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 173 또는 서열번호 174의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 171의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 172의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 175; 서열번호 176; 및 서열번호 177의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 173의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 174의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 178; 서열번호 179; 및 서열번호 180의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 171의 가변 경쇄 영역; 서열번호 173의 가변 중쇄 영역; 서열번호 171의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 175; 서열번호 176; 및 서열번호 177); 및 서열번호 173의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 178; 서열번호 179; 및 서열번호 180).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 172 및 서열번호 174를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab18이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab18에 대해, Fab 단편은 서열번호 171의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 173의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 171 및/또는 서열번호 173의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab18의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab18 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab19
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab19 또는 그의 단편, 또는 Ab19와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00073
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00074
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00075
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00076
본 발명은 추가로 서열번호 181의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 182의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 185; 서열번호 186; 및 서열번호 187의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 183의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 184의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 188; 서열번호 189; 및 서열번호 190의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 181 또는 서열번호 182의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 183 또는 서열번호 184의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 181의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 182의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 185; 서열번호 186; 및 서열번호 187의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 183의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 184의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 188; 서열번호 189; 및 서열번호 190의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 181의 가변 경쇄 영역; 서열번호 183의 가변 중쇄 영역; 서열번호 181의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 185; 서열번호 186; 및 서열번호 187); 및 서열번호 183의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 188; 서열번호 189; 및 서열번호 190).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 182 및 서열번호 184를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab19이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab19에 대해, Fab 단편은 서열번호 181의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 183의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 181 및/또는 서열번호 183의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab19의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab19 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab20
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab20 또는 그의 단편, 또는 Ab20과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00077
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00078
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00079
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00080
본 발명은 추가로 서열번호 191의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 192의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 195; 서열번호 196; 및 서열번호 197의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 193의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 194의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 198; 서열번호 199; 및 서열번호 200의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 191 또는 서열번호 192의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 193 또는 서열번호 194의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 191의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 192의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 195; 서열번호 196; 및 서열번호 197의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 193의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 194의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 198; 서열번호 199; 및 서열번호 200의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 191의 가변 경쇄 영역; 서열번호 193의 가변 중쇄 영역; 서열번호 191의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 195; 서열번호 196; 및 서열번호 197); 및 서열번호 193의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 198; 서열번호 199; 및 서열번호 200).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 192 및 서열번호 194를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab20이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF 또는 MetMab 유사 1가 작용제에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab20에 대해, Fab 단편은 서열번호 191의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 193의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 191 및/또는 서열번호 193의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab20의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab20 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab21
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 항체 Ab21 또는 그의 단편, 또는 Ab21과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 항체 또는 항체 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 항체 또는 항체 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00081
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00082
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 가변 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00083
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 키메라 또는 인간화된 항체를 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00084
본 발명은 추가로 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 401의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 53의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 402의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 51 또는 서열번호 401의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 53 또는 서열번호 402의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 401의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 53의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 402의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 51의 가변 경쇄 영역; 서열번호 53의 가변 중쇄 영역; 서열번호 51의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57); 및 서열번호 53의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 인간화된 항-NGF 항체는 서열번호 401 및 서열번호 402를 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Ab21이다.
본 발명의 더욱 특히 바람직한 실시형태에서, 항체 단편은 본 명세서에 기재된 NGF에 대해 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab21에 대해, Fab 단편은 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 및 서열번호 53의 가변 중쇄 서열을 포함한다. 본 발명의 이 실시형태는 NGF에 대한 결합 특이성을 보유하는 동안 상기 Fab 내에서 서열번호 51 및/또는 서열번호 53의 첨가, 결실 및 변이체를 추가로 생각한다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 Ab21의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab21 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 단편 Fab1
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 Fab1과 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 Fab 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 Fab 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 Fab 항체 단편을 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00085
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 Fab 항체 단편을 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00086
본 발명은 추가로 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 405의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 53의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 406의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 51 또는 서열번호 405의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 53 또는 서열번호 406의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 405의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 53의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 406의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 51의 가변 경쇄 영역; 서열번호 53의 가변 중쇄 영역; 서열번호 51의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57); 및 서열번호 53의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 항-NGF 항체 단편은 서열번호 405 및 서열번호 406을 포함하고, 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 하나를 갖는 Fab1이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 항체 단편 Fab1은 Ab21의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다.
항체 단편 Fab2
한 가지 대표적인 실시형태에서, 본 발명은 Fab2와 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 Fab 단편, 및 단독으로 또는 다른 활성제, 예를 들어 NSAID 또는 오피오이드 진통제 또는 다른 생물학적 작용제와 함께 통증 또는 무통증을 치료하거나 또는 예방하는 것에서 이들의 용도를 제공하되, 상기 Fab 단편은 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, 또한 p75와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 통증을 억제하거나 방지한다. 일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 경쇄 서열을 소유하는 Fab 항체 단편을 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00087
본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 가지며, 이하에 제시되는 서열을 포함하는 중쇄 서열을 소유하는 Fab 항체 단편을 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00088
본 발명은 추가로 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 407의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상 및/또는 서열번호 53의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 408의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상, 또는 이들 폴리펩타이드 서열의 조합을 포함하는 항체를 고려한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 또는 그의 단편은 다음 모두를 포함하여, CDR 중 하나 이상의 조합, 가변 중쇄 및 가변 경쇄 서열, 및 상기 제시한 중쇄 및 경쇄 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 51 또는 서열번호 407의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 항체 단편은 서열번호 53 또는 서열번호 408의 폴리펩타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 51의 가변 경쇄 서열 또는 서열번호 407의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 이들로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 서열번호 53의 가변 중쇄 서열 또는 서열번호 408의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)에 대응되는 서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60의 폴리펩타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편 중 하나 이상을 포함하는 항체 단편을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체의 단편은 다음의 항체 단편 모두를 포함하여 1, 2, 3 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어진다: 서열번호 51의 가변 경쇄 영역; 서열번호 53의 가변 중쇄 영역; 서열번호 51의 가변 경쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 55; 서열번호 56; 및 서열번호 57); 및 서열번호 53의 가변 중쇄 영역의 상보성-결정 영역(서열번호 58; 서열번호 59; 및 서열번호 60).
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 항-NGF 항체 단편은 서열번호 407 및 서열번호 408을 포함하거나 또는 대안적으로 이들로 이루어지고 본 명세서에 제시된 생물학적 활성 중 적어도 하나를 갖는 Fab1이다.
본 명세서에 기재된 본 발명의 다른 실시형태에서(이하참조), Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 박테리아 또는 효모 세포(예를 들어 이배체 피키아와 같은 이배체 효모) 및 다른 효모 균주 내 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 항체 단편 Fab2는 본 명세서의 실시예에 기재된 프로토콜을 사용하여 피키아 파스토리스에서 발현에 의해 생성될 수 있다.
다른 실시형태에서, 항체 단편은 다음의 비제한적 형태 중 하나 이상으로 존재할 수 있다: Fab, Fab', F(ab')2, Fv 및 단일 쇄 Fv 항체 형태. 바람직한 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체는 이하에 제시되는 서열을 포함하는 카파 불변 경쇄 서열을 추가로 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00089
다른 바람직한 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체는 이하에 제시되는 서열을 포함하는 감마-1 불변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 추가로 포함한다:
Figure 112013058887633-pct00090
다른 실시형태에서, 본 발명은 서열번호 3, 13, 23, 33, 43, 53, 63, 73, 83, 93, 103, 113, 123, 133, 143, 153, 163, 173, 183, 193 또는 402, 또는 이들의 변이체로부터 선택된 VH 폴리펩타이드 서열을 포함하고; 서열번호 1, 11, 21, 31, 41, 51, 61, 71, 81, 91, 101, 111, 121, 131, 141, 151, 161, 171, 181, 191 또는 401, 또는 이들의 변이체로부터 선택된 VL 폴리펩타이드 서열을 추가로 포함하는 단리된 항-NGF 항체를 고려하되, 상기 VH 또는 VL 폴리펩타드에서 프레임워크 잔기(FR 잔기) 중 하나 이상은 NGF에 특이적으로 결합되는 항-NGF 항체를 야기하는 다른 아미노산 잔기로 치환되었다. 이들 변이체는 바람직하게는 앞서 언급한 가변 폴리펩타이드와 적어도 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일할 것이고, NGF에 결합되는 항체 또는 항체 단편을 야기한다. 본 발명은 이들 항체의 인간화된 형태 및 키메라 형태를 고려한다. 키메라 항체는 IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgG5, IgG6, IgG7, IgG8, IgG9, IgG10, IgG11, IgG12, IgG13, IgG14, IgG15, IgG16, IgG17, IgG18 또는 IgG19 불변 영역으로부터 유래된 Fc를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 실시형태에서, 항체 또는 VH 또는 VL 폴리펩타이드는 본 명세서에 언급된 인간화 과정의 개시 전 하나 이상의 토끼 B 세포 집단으로부터 유래되거나 또는 선택될 수 있다.
본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체 및 그의 단편은 p75 또는 TrkA에 대한 결합 특이성을 갖지 않는다. 본 발명의 추가 실시형태에서, 항-NGF 항체 및 그의 단편은 p75 및/또는 TrkA와 NGF의 결합을 억제한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체 및 그의 단편은 TrkA 및/또는 그의 멀티머(multimer)와 NGF의 결합을 억제하고/하거나 이들의 생물학적 효과를 길항한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체 및 그의 단편은 p75 및/또는 그의 멀티머와 NGF의 결합 및 TrkA 및/또는 그의 멀티머와 NGF의 결합을 억제하고, p75 및 TrkA의 생물학적 효과를 길항한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체 및 그의 단편은 TrkA 및/또는 그의 멀티머와 NGF의 결합을 억제하고, p75와 NGF의 상호작용을 상당하게 억제하지 않는다. 본 발명의 항체 및 항체 단편은 그의 결합 선택성에 의존하며, 바람직하게는 p75 및 TrkA의 생물학적 효과 중 하나 이상을 길항한다.
본 명세서에 언급한 바와 같이, 항체 및 그의 단편은 효과기 모이어티, 예컨대 화학적 링커, 검출가능한 모이어티, 예컨대 형광 염료, 효소, 기질, 생발광 물질, 방사성 물질, 화학 발광 모이어티, 또는 기능성 모이어티, 예컨대 스트렙타비딘, 아비딘 또는 바이오틴, 사이토톡신, 세포독성제 및 방사성 물질을 첨가하기 위하여 번역 후에 변형될 수 있다. 추가로, 대상 항체 및 항체 단편은 폴리에틸렌 글라이콜(PEG)과 같은 수용성 폴리머의 직접적 또는 간접적 부착에 의하는 것과 같이 순환 시간 또는 반감기에 영향을 미치도록 변형될 수 있다.
검출가능한 모이어티에 대해, 추가적인 대표적인 효소는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 호스래디쉬 퍼옥시다제, 아세틸콜린에스터라제, 알칼린 포스파타제, 베타-갈락토시다제 및 루시퍼라제를 포함한다. 추가적인 대표적 형광 물질은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 로다민, 플루오레세인, 플루오레세인 아이소티오시아네이트, 움벨리페론, 다이클로로트라이아지닐아민, 피코에리트린 및 단실 클로라이드를 포함한다. 추가적인 대표적 화학발광 모이어티는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 루미놀을 포함한다. 추가적인 대표적 생발광 물질은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 루시페린 및 에쿼린을 포함한다. 추가적인 대표적 방사성 물질은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 요오드 125(125I), 탄소 14(14C), 황 35(35S), 트리튬(3H) 및 인 32(32P)을 포함한다.
기능성 모이어티에 대해, 대표적인 세포독성제는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 메토트렉세이트, 아미노프테린, 6-머캅토퓨린, 6-티오구아닌, 사이타라빈, 5-플루오로유라실 데카바진; 알킬화제, 예컨대 메클로르에타민, 티오에파 클로람뷰실, 멜팔란, 카무스틴(BSNU), 미토마이신 C, 로무스틴(CCNU), 1-메틸나이트로소유레아, 사이클로소스파마이드, 메클로르에타민, 부설판, 다이브로모만니톨, 스트렙토조토신, 마이토마이신 C, 시스-다이클로로다이아민 플래티늄(II)(DDP) 시스플라틴 및 카보플라틴(파라플라틴); 안트라사이클린은 다우노루비신(예전에 다우노마이신), 독소루비신(아드리아마이신), 데토루비신, 카미노마이신, 이다루비신, 에피루비신, 미톡산트론 및 비산트렌을 포함하고; 항생제는 닥티노마이신(악티노마이신 D), 블레오마이신, 칼리키아미신, 미트라마이신, 및 안트라마이신(AMC)을 포함하며; 및 항유사분열제, 예컨대 빈카 알칼로이드, 빈크리스틴 및 빈블라스틴을 포함한다. 다른 세포독성제는 파클리탁셀(탁솔), 리신, 슈도모나스 엑소톡신, 젬시타빈, 사이토칼라신 B, 그라미시딘 D, 에티듐 브로마이드, 에메틴, 에토포사이드, 테노포사이드, 콜키신, 다이하이드록시 안트라신 다이온, 1-데하이드로테스토스테론, 글루코콜티코이드, 프로카인, 테트라카인, 리도카인, 프로프라놀롤, 퓨로마이신, 프로카바진, 하이드록시유레아, 아스파라기나제, 콜티코스테로이드, 마이토탄(O,P'-(DDD)), 인터페론 및 이들 세포독성제의 혼합물을 포함한다.
추가 세포독성제는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 화학치료제, 예컨대 카보플라틴, 시스플라틴, 파클리탁셀, 젬시타빈, 칼리키아미신, 독소루비신, 5-플루오로유라실, 미토마이신 C, 악티노마이신 D, 사이클로포스파마이드, 빈크리스틴 및 블레오마이신을 포함한다. 식물 및 박테리아로부터의 독성 효소, 예컨대 리신, 디프테리아 독소 및 슈도모나스 독소는 인간화된 또는 키메라 항체 또는 이들의 결합 단편에 컨쥬게이트되어 세포-유형-특이적-사멸 시약을 만들 수 있다(Youle, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 77:5483 (1980); Gilliland, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 77:4539 (1980); Krolick, et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 77:5419 (1980)).
다른 세포독성제는 미국특허 제6,653,104호에서 골든버그(Goldenberg)에 의해 기재된 세포독성 리보뉴클레아제를 포함한다. 본 발명의 실시형태는 또한 복합체 형성제의 사용과 함께 또는 복합체 형성제를 사용하지 않고, 알파 또는 베타 입자를 방출하는 방사성핵종이 항체 또는 그의 결합 단편에 결합되는 방사성 면역 컨쥬게이트에 관한 것이다. 이러한 방사성핵종은 베타-방사체(emitter), 예컨대 인-32(32P), 스칸듐-47(47Sc), 구리-67(67Cu), 갈륨-67(67Ga), 이트륨-88(88Y), 이트륨-90(90Y), 요오드-125(125I), 요오드-131(131I), 사마륨-153(153Sm), 루테튬-177(177Lu), 레늄-186 (186Re) 또는 레늄-188(188Re), 및 알파-방사체, 예컨대 아스타틴-211(211At), 납-212(212Pb), 비스무트-212(212Bi) 또는 -213(213Bi) 또는 악티늄-225(225Ac)을 포함한다.
예를 들어 문헌[Hunter et al, Nature 144:945 (1962); David et al, Biochemistry 13:1014 (1974); Pain et al, J. Immunol. Meth. 40:219 (1981); 및 Nygren, J., Histochem. and Cytochem. 30:407 (1982)]에 의해 기재되는 것과 같은 검출가능한 모이어티 등에 항체 또는 그의 결합 단편을 컨쥬게이트하기 위한 방법은 당업계에 공지되어 있다.
또한, 항체 또는 항체 단편은 페킬화에 의하는 것과 같이 반감기 또는 순환 시간에 영향을 미치도록 변형될 수 있다. 항체 또는 그의 단편은 또한 폴리펩타이드의 증가된 용해도, 안정성 및 순환 시간(생체내 반감기) 또는 감소된 면역원성과 같은 추가적인 이점을 제공하도록 화학적으로 변형될 수 있다(미국특허 제4,179,337호를 참조). 유도체화를 위한 화학적 모이어티는 수용성 폴리머, 예컨대 폴리에틸렌 글라이콜, 에틸렌 글라이콜/프로필렌 글라이콜 공중합체, 카복시메틸셀룰로스, 덱스트란, 폴리비닐 알코올 등으로부터 선택될 수 있다. 항체 및 그의 단편은 분자 내 무작위 위치에서, 또는 분자 내 사전결정된 위치에서 변형될 수 있고, 1, 2, 3 이상의 부착된 모이어티를 포함할 수 있다.
폴리머는 임의의 분자량을 가질 수 있고, 분지되거나 또는 미분지일 수 있다. 폴리에틸렌 글라이콜에 대해, 바람직한 분자량은 조작 및 제조에서 용이함을 위해 약 1 kDa 내지 약 100 kDa(용어 "약"은 폴리에틸렌 글라이콜 제조에서, 일부 분자가 언급한 분자량 초과, 일부 미만의 무게일 것이라는 것을 표시함)이다. 원하는 치료 프로파일에 따라서 다른 크기가 사용될 수 있다(예를 들어, 원하는 서방출의 지속기간, 효과, 생물학적 활성 여부, 조작의 용이함, 항원성의 정도 또는 결여 및 치료 단백질 또는 유사체에 대한 폴리에틸렌 글라이콜의 다른 공지된 효과). 예를 들어, 폴리에틸렌 글라이콜은 약 200, 500, 1000, 1500, 2000, 2500, 3000, 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000, 6500, 7000, 7500, 8000, 8500, 9000, 9500, 10,000, 10,500, 11,000, 11,500, 12,000, 12,500, 13,000, 13,500, 14,000, 14,500, 15,000, 15,500, 16,000, 16,500, 17,000, 17,500, 18,000, 18,500, 19,000, 19,500, 20,000, 25,000, 30,000, 35,000, 40,000, 50,000, 55,000, 60,000, 65,000, 70,000, 75,000, 80,000, 85,000, 90,000, 95,000 또는 100,000 kDa의 평균 분자량을 가질 수 있다. 분지된 폴리에틸렌 글라이콜은, 예를 들어 미국특허 제5,643,575호; 문헌[Morpurgo et al ., Appl. Biochem. Biotechnol. 56:59-72 (1996); Vorobjev et al ., Nucleosides Nucleotides 18:2745-2750 (1999); 및 Caliceti et al ., Bioconjug. Chem. 10:638-646 (1999)]에 기재되며, 그의 각각의 개시내용은 본 명세서에 참조로서 포함된다.
당업자에게 입수가능한 다수의 부착 방법이 있으며, 예를 들어 본 명세서에 참조로서 포함된 EP 0 401 384호(G-CSF에 PEG를 결합)를 참조하고, 또한 문헌[Malik et al ., Exp. Hematol. 20:1028-1035 (1992)](트레실 클로라이드를 사용하는 GM-CSF의 페길화를 보고)을 참조한다. 예를 들어, 폴리에틸렌 글라이콜은 아미노산 잔기를 통해 유리 아미노 또는 카복실기와 같은 반응기를 통해 공유적으로 결합될 수 있다. 반응기는 활성화된 폴리에틸렌 글라이콜 분자가 결합되는 것이다. 유리 아미노기를 갖는 아미노산 잔기는 리신 잔기 및 N-말단 아미노산 잔기를 포함할 수 있으며; 유리 카복실기를 갖는 것은 아스팔트산 잔기 글루탐산 잔기 및 C-말단의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 설프하이드릴기는 또한 폴리에틸렌 글라이콜 분자를 부착하기 위한 반응기로서 사용될 수 있다. 치료적 목적을 위해 아미노기에서 부착, 예컨대 N-말단 또는 리신기에서 부착이 바람직하다.
상기 시사된 바와 같이, 폴리에틸렌 글라이콜은 다수의 아미노산 잔기 중 어떤 것에 결합을 통해 단백질에 부착될 수 있다. 예를 들어, 폴리에틸렌 글라이콜은 리신, 히스티딘, 아스팔트산, 글루탐산 또는 시스테인 잔기에 공유 결합을 통해 폴리펩타이드에 연결될 수 있다. 하나 이상의 반응 화학은 특정 아미노산 잔기(예를 들어, 리신, 히스티딘, 아스팔트산, 글루탐산 또는 시스테인)에 또는 아미노산 잔기 중 하나 이상의 유형에(예를 들어, 리신, 히스티딘, 아스팔트산, 글루탐산, 시스테인 및 이들의 조합) 폴리에틸렌 글라이콜을 부착하기 위해 사용될 수 있다.
대안적으로, 항체 또는 그의 단편은 알부민(이하로 제한되는 것은 아니지만, 재조합 인간 혈청 알부민 또는 그의 단편 또는 변이체를 포함(예를 들어 본 명세서에 전문이 참조로서 포함되는 1999년 3월 2일 발행된 미국특허 제5,876,969호, 1998년 6월 16일 발행된 유럽특허 제 0 413 622호 및 미국특허 제5,766,883호를 참조)) 또는 트랜스페린 또는 페리틴과 같은 다른 순환 혈액 단백질과 융합을 통해 증가된 생체내 반감기를 가질 수 있다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리펩타이드 및/또는 항체(이들의 단편 또는 변이체를 포함)는 인간 혈청 알부민의 성숙 형태와 융합되며(즉, 유럽특허 제0 322 094호의 도 1 및 도 2에 나타내는 바와 같은 인간 혈청 알부민의 아미노산 1 내지 585), 이는 본 명세서에 전문이 참조로서 포함된다. 본 발명의 융합 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 또한 본 발명에 포함된다.
본 명세서에 기재된 실시형태는 본 명세서에 제시된 항체, 항체 단편, 다이아바디, SMIP, 카멜바디, 나노바디, IgNAR, 폴리펩타이드, 가변 영역 및 CDR에 실질적으로 상동성인 변이체 및 동등물을 추가로 포함한다. 이들은, 예를 들어 보존적 치환 돌연변이(즉, 유사한 아미노산에 의한 하나 이상의 아미노산의 치환)을 함유할 수 있다. 예를 들어, 보존적 치환은 아미노산을 동일한 일반적 부류 내의 다른 아미노산으로 치환하는 것, 예를 들어 하나의 산성 아미노산을 다른 산성 아미노산으로, 하나의 염기성 아미노산을 다른 염기성 아미노산으로 또는 하나의 중성 아미노산을 다른 중성 아미노산으로 치환하는 것을 지칭한다. 보존적 아미노산 치환에 의해 의도되는 것은 당업계에 잘 공지되어 있다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 본 명세서에 제시된 항체 단편, 가변 영역 및 CDR 중 하나 이상에 적어도 90% 이상의 서열 동일성을 갖는 폴리펩타이드 서열을 생각한다. 더 바람직하게는, 본 발명은 본 명세서에 제시된 항체 단편, 가변 영역 및 CDR의 폴리펩타이드 서열 중 어떤 하나 이상에 대해 적어도 95% 이상의 서열 동일성, 훨씬 더 바람직하게는 적어도 96%, 97% 또는 98% 이상의 서열 동일성, 더욱더 바람직하게는 적어도 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 폴리펩타이드 서열을 고려한다. 핵산과 아미노산 서열 사이의 상동성을 결정하기 위한 방법은 당업자에게 잘 공지되어 있다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 추가로 항-NGF 활성을 추가로 갖는 본 명세서에 제시된 항체 단편, 가변 영역 및 CDR의 상기 인용된 폴리펩타이드 상동성을 고려한다. 항-NGF 활성의 비제한적 예는 본 명세서에 제시된다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 추가로 앞서 언급한 서열 중 어떤 것에 결합되는 항-유전자형(anti-idiotypic) 항체의 생성 및 사용을 고려한다. 대표적인 실시형태에서, 이러한 항-유전자형 항체는 항-NGF 항체의 효과를 조절하고, 감소시키거나 또는 중화하기 위해 항-NGF 항체를 받는 피험체에게 투여될 수 있었다. 이러한 항-유전자형 항체는 또한 항-NGF 항체의 존재를 특징으로 하는 자가면역 질병의 치료에 유용할 수 있었다. 이러한 항-유전자형 항체의 추가적인 대표적 사용은 본 발명의 항-NGF 항체의 검출을 위한 것, 예를 들어 피험체의 혈액 또는 다른 체액에 존재하는 항-NGF 항체의 수준을 모니터링하는 것이다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 다른 폴리뉴클레오타이드 서열 중 어떤 것으로 치환된 본 명세서에 기재된 폴리펩타이드 또는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 어떤 것을 포함하는 항-NGF 항체를 고려한다. 예를 들어, 제한 없이, 본 발명은 본 명세서에 기재된 가변 경쇄 및 가변 중쇄 서열 중 어떤 것의 조합을 포함하는 항체를 고려하며, 추가로 본 명세서에 기재된 다른 CDR 중 어떤 것에 대해 본 명세서에 기재된 CDR 서열 중 어떤 것의 치환으로부터 초래된 항체를 고려한다.
추가적인 본 발명의 대표적 실시형태
다른 실시형태에서, 본 발명은 무결함 인간 NGF 폴리펩타이드 또는 단편 상에서 Ab1, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, Ab10, Ab11, Ab12, Ab13, Ab14, Ab15, Ab16, Ab17, Ab18, Ab19, Ab20 또는 Ab21로부터 선택된 항-인간 NGF 항체와 동일한 또는 중첩되는 선형 또는 입체형태적 에피토프(들)에 특이적으로 결합되고/되거나 동일한 또는 중첩되는 선형 또는 입체형태적 에피토프(들)에 결합을 위해 경쟁하는 하나 이상의 항-인간 NGF 항체 또는 항체 단편을 고려한다. 바람직한 실시형태에서, 항-인간 NGF 항체 또는 그의 단편은 무결함 인간 NGF 폴리펩타이드 또는 그의 단편 상에서 Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab15 또는 Ab16와 동일한 선형 또는 입체형태적 에피토프(들)에 특이적으로 결합되고/되거나 동일한 선형 또는 입체형태적 에피토프(들)에 결합을 위해 경쟁한다.
본 발명의 바람직한 실시형태는 NGF에 대해 결합 특이성을 가지고, p75 및 TrkA 수용체에 NGF의 결합에 의해 매개되는 생물학적 활성을 억제하는 키메라 또는 인간화된 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함)에 관한 것이다. 본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 키메라 또는 인간화된 항-NGF 항체는 Ab1, Ab2, Ab5-Ab14 또는 Ab17-Ab21로부터 선택된다.
본 발명의 다른 바람직한 실시형태는 NGF에 결합될 수 있고, TrkA 수용체에 NGF의 결합에 의해 매개되는 생물학적 활성을 선택적으로 억제할 수 있는 반면, p75 수용체에 NGF의 결합에 의해 매개되는 생물학적 활성을 상당하게 억제하지 않는 키메라 또는 인간화된 항체 및 그의 단편에 관한 것이다. 본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 키메라 또는 인간화된 항-NGF 항체는 앞서 언급한 항체 중 어떤 것과 경쟁하거나 또는 동일 또는 중첩되는 에피토프에 결합되는 Ab3, Ab4, Ab15 또는 Ab16 또는 항체 및 항체 단편으로부터 선택된다. 본 발명의 추가 실시형태에서 단지 TrkA를 통해 매개되는 해당 생물학적 활성에 영향을 미치는 단계, 이에 의해 p75에 NGF의 결합을 통해 매개되는 생물학적 활성을 회피하는 단계에 의해 NGF에 관련된 질병 또는 장애를 치료하는 방법이 고려된다. 일 실시형태에서, NGF와 관련된 질병 또는 장애는 통증이다. NGF와 관련된 질병 또는 장애의 추가적인 열거는 본 명세서에서 제공된다.
본 발명의 다른 실시형태에서, 키메라 또는 인간화된 항-NGF 항체 Ab3, Ab4, Ab15 또는 Ab16 또는 그의 단편(Fab 단편을 포함) 중 하나 이상은 수술 전 및 후와 관련된 통증, 및 근골격계에 대한 외상 또는 손상과 관련된 통증의 치료 방법에서 이용된다. 키메라 또는 인간화된 항-NGF 항체 Ab3, Ab4, Ab15 또는 Ab16가 NGF/p75 신호처리 경로를 방해하는 것으로 믿어지지 않기 때문에, 이들 항체(및 그의 단편)는 근원성 분화 및 근육 회복에 필요한 개체의 통증을 처리하는데 특히 유용하다.
본 발명의 다른 바람직한 실시형태에서, 전장 항체 및 그의 Fab 단편은 대조군에 의해 얻은 결과와 비교하여 보행 분석(본 명세서의 실시예 7에 기재된 바와 같음)을 사용하여 평가되는 생체내 뮤린 모델의 통증을 유의하게 감소시킬 수 있다.
본 발명의 특히 바람직한 실시형태는 환자의 통증 치료를 위해 본 명세서에 개시된 Fab 폴리펩타이드 서열 및 다른 1가 작용체의 사용을 고려한다. Fab 폴리펩타이드 서열을 사용하여 치료될 수 있는 통증의 비-제한적 유형은 본 명세서의 다른 곳에서 제공된다.
다른 바람직한 실시형태에서, 본 발명은 전장 항체와 비교하여 환자에서 염증을 실질적으로 증가시키지 않는 본 명세서에 기재된 전장 항체의 Fab 단편을 고려한다. 본 발명은 또한 동일 농도에서 전장 항체와 비교하여 환자에서 염증을 실질적으로 상승시키지 않는 본 명세서에 기재된 전장 항체의 Fab 단편을 투여하는 것에 의한 통증을 겪고 있는 환자의 치료 방법을 고려한다. 본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, Fab 단편(들)은 서열번호 405 또는 서열번호 407의 경쇄 폴리펩타이드 서열 및 서열번호 406 또는 서열번호 408의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 포함한다.
본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 1가 작용제는 상기 환자에서 염증을 실질적으로 증가시키지 않고 환자에서 통증을 치료하는 방법에 이용된다. 대표적인 1가 작용제는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, Fab, Fab', Fv, scFv 단편, MetMab 유사 1가 작용제, SMIP(소분자 면역약제), 카멜바디, 나노바디, IgNAR, 또는 이들의 하나 이상의 조합을 포함한다.
본 발명의 다른 실시형태에서, NGF에 대해 결합 특이성을 갖는 키메라 또는 인간화된 항-NGF 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함)은 TF1 세포 증식을 억제한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, NGF에 대해 결합 특이성을 갖는 키메라 또는 인간화된 항-NGF 항체 및 그의 단편(Fab 단편을 포함)은 PC-12 축삭생성을 억제한다.
본 발명의 다른 실시형태에서, 항-인간 NGF 항체는 천연 인간 NGF 폴리펩타이드의 전장에 걸친 중첩 선형 펩타이드 단편을 사용하는 에피토프 맵핑에 의해 확인되는 바와 같이 Ab3, Ab4, Ab15 또는 Ab16에 의해 특이적으로 결합된 무결함 NGF 폴리펩타이드 또는 단편 상의 동일 또는 중첩되는 선형 또는 입체형태 에피토프에 특이적으로 결합되는 항체이다.
본 발명은 또한, 이하로 제한되는 것은 아니지만, Ab1, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, Ab10, Ab11, Ab12, Ab13, Ab14, Ab15, Ab16, Ab17, Ab18, Ab19, Ab20 또는 Ab21로부터 선택되는 항-NGF 항체를 포함하는 본 명세서에 개시된 항체 또는 항체 단편으로서 동일 또는 중첩되는 NGF 에피토프와 결합되고/되거나 NGF에 결합을 위해 항-NGF 항체와 경쟁하는 항-NGF 항체에 관한 것이다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 또한 3, 13, 23, 33, 43, 53, 63, 73, 83, 93, 103, 113, 123, 133, 143, 153, 163, 173, 183, 193 또는 402, 또는 이들의 변이체로부터 선택된 VH 폴리펩타이드 서열에 함유된 CDR 중 하나 이상 및/또는 1, 11, 21, 31, 41, 51, 61, 71, 81, 91, 101, 111, 121, 131, 141, 151, 161, 171, 181, 191 또는 401 또는 이들의 변이체로부터 선택된 VL 폴리펩타이드 서열에 함유된 CDR 중 하나 이상을 포함하는 단리된 항-NGF 항체 또는 항체 단편에 관한 것이다.
본 발명의 일 실시형태에서, 상기 논의한 항-인간 NGF 항체는 Ab1, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, Ab10, Ab11, Ab12, Ab13, Ab14, Ab15, Ab16, Ab17, Ab18, Ab19, Ab20 또는 Ab21로 이루어진 군으로부터 선택된 항-인간 NGF 항체에 함유된 것과 동일한 각각의 가변 경 및 가변 중 영역에서 적어도 2개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다.
바람직한 실시형태에서, 상기 논의한 항-인간 NGF 항체는 Ab3, Ab4, Ab5 또는 Ab6에 함유된 것과 동일한 각각의 가변 경 및 가변 중 영역에서 적어도 2개의 상보성 결정 영역(CDR)을 포함한다. 다른 실시형태에서, 상기 논의한 항-인간 NGF 항체의 모든 CDR은 Ab1, Ab2, Ab3, Ab4, Ab5, Ab6, Ab7, Ab8, Ab9, Ab10, Ab11, Ab12, Ab13, Ab14, Ab15, Ab16, Ab17, Ab18, Ab19, Ab20 또는 Ab21로부터 선택된 항-인간 NGF 항체에 함유된 CDR과 동일하다. 본 발명의 바람직한 실시형태에서, 상기 논의한 항-인간 NGF 항체의 모든 CDR은 Ab3, Ab4, Ab5 또는 Ab6으로부터 선택된 항-인간 NGF 항체에 함유된 CDR과 동일하다.
본 발명은 추가로 상기 논의한 하나 이상의 항-인간 NGF 항체가 비글라이코실화되며(aglycosylated); 효과기 기능, 반감기, 단백질 분해 및/또는 글라이코실화를 변경하도록 변형된 Fc 영역을 함유하고; 인간, 인간화된, 단일쇄 또는 키메라이며; 토끼(모) 항-인간 NGF 항체로부터 유래된 인간화된 항체라는 것을 고려한다.
본 발명은 추가로 하나 이상의 항-인간 NGF 항체를 고려하되, 상기 항체의 가변 경 영역 및 가변 중 영역 각각의 프레임워크 영역은 모 토끼 항체의 대응되는 FR 잔기를 갖는 가변 경쇄 또는 중쇄 영역에서 2 또는 3 이하의 인간 FR 잔기의 치환에 의해 변형된 또는 미변형된 인간 FR이고, 상기 인간 FR은 라이브러리에 함유된 다른 인간 생식계열 항체 서열에 대해 대응되는 토끼 가변 중쇄 또는 경쇄 영역에 대해 높은 상동성에 기반한 인간 생식계열 항체 서열의 라이브러리로부터 선택된 인간 가변 중쇄 및 경쇄 항체 서열로부터 유래되었다.
본 발명의 일 실시형태에서, 항-인간 NGF 항체 또는 단편은 NGF를 발현시키는 세포와 관련된 질병이 있는 환자에서 발현된 NGF를 포함하거나 또는 인간 세포에 의해 NGF 발현 인간 세포에 및/또는 생체내 순환 가용성 NGF 분자에 특이적으로 결합한다.
다른 실시형태에서, 질병은 염증 통증, 수술후 절개 통증, 복합 부위 통증 증후군, 암 통증, 원발성 또는 전이성 뼈암 통증, 골절 통증, 골다공성 골절 통증, 화상으로부터 초래되는 통증, 골다공증, 통풍 관절 통증, 겸상 적혈구 발증과 관련된 통증 및 다른 침해수용성(nociceptic) 통증뿐만 아니라 간세포 암종, 유방암, 간경변증, 신경인성 통증, 신경병증성 통증, 침해수용성 통증, 삼차 신경통, 대상포진후 신경통, 환상지통, 섬유근육통, 월경통, 난소통, 반사성 교감신경성 이영양증, 신경인성 통증, 골관절염 또는 류마티스 관절염 통증, 등 아래 부분 통증, 당뇨병성 말초신경병증, 좌골신경통 또는 편두통으로부터 선택된다.
본 발명은 추가로 검출가능한 표지 또는 치료제에 직접적으로 또는 간접적으로 부착된 항-인간 NGF 항체 또는 단편을 고려한다.
본 발명은 또한 효모 또는 인간 최우선 코돈을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진 것을 포함하는, 상기 제시한 바와 같은 항-인간 NGF 항체 또는 항체 단편의 발현을 초래하는 하나 이상의 핵산 서열을 고려한다. 본 발명은 또한 상기 핵산 서열(들)을 포함하는 벡터(플라스미드 또는 재조합 바이러스 벡터를 포함)를 고려한다. 본 발명은 또한 포유류, 효모, 박테리아, 식물 및 곤충 세포를 포함하는, 상기 제시한 항체 중 적어도 하나를 발현시키는 숙주 세포 또는 재조합 숙주 세포를 고려한다. 바람직한 실시형태에서, 숙주 세포는 효모 세포이다. 추가 바람직한 실시형태에서, 효모 세포는 이배체 효모 세포이다. 더 바람직한 실시형태에서, 효모 세포는 피키아 효모이다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 적어도 하나의 항-인간 NGF 항체 또는 단편의 치료적 유효량을 NGF 발현 세포와 관련된 질병 또는 질환이 있는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 치료 방법을 고려한다. 본 발명은 또한 본 명세서에 개시된 2 이상의 항-NGF 항체 또는 그의 단편의 투여를 수반할 수 있다. 하나 이상의 항체가 환자에게 투여된다면, 다수의 항체는 일제히 또는 동시에 투여될 수 있고, 또는 그의 투여에 의해 촉발될 수 있다. 치료될 수 있는 질병은 상기 및 본 명세서의 다른 곳에 제시된 비제한적 열거에 제공된다. 바람직한 실시형태에서, 질병은 암 통증 또는 신경병증성 통증으로부터 선택된다. 특히 바람직한 실시형태에서, 질병은 암 통증이다. 다른 실시형태에서 치료는 추가로 화학치료, 방사선치료, 사이토카인 투여 또는 유전자 치료로부터 선택된 다른 치료제 또는 섭생의 투여를 포함한다.
본 발명의 비-제한적 실시형태에서, 다른 치료제 또는 섭생은 탁솔(파클리탁셀) 또는 그의 유도체, 백금 화합물, 예컨대 카보플라틴 또는 시스플라틴, 아트로사이클린, 예컨대 독소루비신, 알킬화제, 예컨대 사이클로포스파마이드, 항-대사물질, 예컨대 5-플루오로유라실 또는 에토포사이드를 포함한다.
본 발명은 추가로 적어도 하나의 항-인간 NGF 항체의 진단적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는, NGF를 발현시키는 세포의 존재를 검출하는 생체내 이미징 방법을 고려한다. 일 실시형태에서, 상기 투여는 NGF 발현 질병 부위의 검출을 용이하게 하는 방사성핵종 또는 형광단의 투여를 추가로 포함한다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 생체내 이미징 방법은 NGF 발현 종양 또는 전이, 또는 NGF에 결합할 수 있는 TrkA 및/또는 p75를 발현시키는 종양 또는 전이를 검출하기 위해 사용된다. 추가 실시형태에서, 상기 생체내 이미징 방법의 결과는 방사선치료, 화학치료 또는 이들의 조합을 포함하는 치료적 섭생을 포함하는 적절한 치료적 섭생의 설계를 용이하게 하기 위해 사용된다.
항- NGF 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드
항체 Ab1
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 NGF에 특이적으로 결합되는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 1의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00091
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 2의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00092
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 3의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00093
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 4의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00094
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 1의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 2의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 205; 서열번호 206; 및 서열번호 207의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 3의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 4의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 208; 서열번호 209; 및 서열번호 210의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 1의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 201; 서열번호 2의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 202; 서열번호 3의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 203; 서열번호 4의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 204; 서열번호 1의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 2의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 205; 서열번호 206; 및 서열번호 207)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 3의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 4의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 208; 서열번호 209; 및 서열번호 210)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab1에 대해서, 전장 Ab1 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 2의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 202 및 서열번호 4의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 204를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab1의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab1 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab1 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab2
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 11의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00095
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 12의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00096
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 13의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00097
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 14의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00098
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 11의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 12의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 215; 서열번호 216; 및 서열번호 217의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 13의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 14의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 218; 서열번호 219; 및 서열번호 220의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 11의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 211; 서열번호 12의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 212; 서열번호 13의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 213; 서열번호 14의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 214; 서열번호 11의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 12의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 215; 서열번호 216; 및 서열번호 217)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 13의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 14의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 218; 서열번호 219; 및 서열번호 220)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab2에 대해서, 전장 Ab2 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 12의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 212 및 서열번호 14의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 214를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab2의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab2 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab2 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab3
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, TrkA와 NGF의 결합에 상당하게 영향을 미치지 않는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 21의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00099
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 22의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00100
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 23의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00101
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 24의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00102
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 21의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 22의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 225; 서열번호 226; 및 서열번호 227의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 23의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 24의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 228; 서열번호 229; 및 서열번호 230의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 21의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 221; 서열번호 22의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 222; 서열번호 23의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 223; 서열번호 24의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 224; 서열번호 21의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 22의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 225; 서열번호 226; 및 서열번호 227)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 23의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 24의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 228; 서열번호 229; 및 서열번호 230)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab3에 대해서, 전장 Ab3 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 22의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 222 및 서열번호 24의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 224를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab3의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab3 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab3 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab4
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, TrkA와 NGF의 결합에 상당하게 영향을 미치지 않는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 31의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00103
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 32의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00104
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 33의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00105
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 34의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00106
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 31의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 32의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 235; 서열번호 236; 및 서열번호 237의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 33의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 34의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 238; 서열번호 239; 및 서열번호 240의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 31의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 231; 서열번호 32의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 232; 서열번호 33의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 233; 서열번호 34의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 234; 서열번호 31의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 32의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 235; 서열번호 236; 및 서열번호 237)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 33의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 34의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 238; 서열번호 239; 및 서열번호 240)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab4에 대해서, 전장 Ab4 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 32의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 232 및 서열번호 34의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 234를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab4의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab4 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab4 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab5
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 41의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00107
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 42의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00108
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 43의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00109
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 44의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00110
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 41의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 42의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 245; 서열번호 246; 및 서열번호 247의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 43의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 44의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 248; 서열번호 249; 및 서열번호 250의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 41의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 241; 서열번호 42의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 242; 서열번호 43의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 243; 서열번호 44의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 244; 서열번호 41의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 42의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 245; 서열번호 246; 및 서열번호 247)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 43의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 44의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 248; 서열번호 249; 및 서열번호 250)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab5에 대해서, 전장 Ab5 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 42의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 242 및 서열번호 44의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 244를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab5의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab5 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab5 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab6
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 51의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00111
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 52의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00112
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 53의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00113
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 54의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00114
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 51의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 52의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 255; 서열번호 256; 및 서열번호 257의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 53의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 54의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 258; 서열번호 259; 및 서열번호 260의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 51의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 251; 서열번호 52의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 252; 서열번호 53의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 253; 서열번호 54의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 254; 서열번호 51의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 52의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 255; 서열번호 256; 및 서열번호 257)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 53의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 54의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 258; 서열번호 259; 및 서열번호 260)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab6에 대해서, 전장 Ab6 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 52의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 252 및 서열번호 54의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 254를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab6의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab6 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab6 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab7
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 61의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00115
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 62의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00116
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 63의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00117
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 64의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00118
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 61의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 62의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 265; 서열번호 266; 및 서열번호 267의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 63의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 64의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 268; 서열번호 269; 및 서열번호 270의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 61의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 261; 서열번호 62의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 262; 서열번호 63의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 263; 서열번호 64의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 264; 서열번호 61의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 62의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 265; 서열번호 266; 및 서열번호 267)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 63의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 64의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 268; 서열번호 269; 및 서열번호 270)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab7에 대해서, 전장 Ab7 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 62의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 262 및 서열번호 64의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 264를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab7의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab7 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab7 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab8
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 71의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00119
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 72의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00120
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 73의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00121
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 74의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00122
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 71의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 72의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 275; 서열번호 276; 및 서열번호 277의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 73의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 74의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 278; 서열번호 279; 및 서열번호 280의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 71의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 271; 서열번호 72의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 272; 서열번호 73의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 273; 서열번호 74의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 274; 서열번호 71의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 72의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 275; 서열번호 276; 및 서열번호 277)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 73의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 74의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 278; 서열번호 279; 및 서열번호 280)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab8에 대해서, 전장 Ab8 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 72의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 272 및 서열번호 74의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 274를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab8의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab8 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab8 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab9
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 81의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00123
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 82의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00124
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 83의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00125
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 84의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00126
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 81의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 82의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 285; 서열번호 286; 및 서열번호 287의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 83의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 84의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 288; 서열번호 289; 및 서열번호 290의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 81의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 281; 서열번호 82의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 282; 서열번호 83의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 283; 서열번호 84의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 284; 서열번호 81의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 82의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 285; 서열번호 286; 및 서열번호 287)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 83의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 84의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 288; 서열번호 289; 및 서열번호 290)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab9에 대해서, 전장 Ab9 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 82의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 282 및 서열번호 84의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 284를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab9의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab9 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab9 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab10
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 91의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00127
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 92의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00128
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 93의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00129
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 94의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00130
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 91의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 92의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 295; 서열번호 296; 및 서열번호 297의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 93의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 94의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 298; 서열번호 299; 및 서열번호 300의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 91의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 291; 서열번호 92의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 292; 서열번호 93의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 293; 서열번호 94의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 294; 서열번호 91의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 92의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 295; 서열번호 296; 및 서열번호 297)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 93의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 94의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 298; 서열번호 299; 및 서열번호 300)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab10에 대해서, 전장 Ab10 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 92의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 292 및 서열번호 94의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 294를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab10의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab10 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab10 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab11
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 101의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00131
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 102의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00132
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 103의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00133
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 104의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00134
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 101의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 102의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 305; 서열번호 306; 및 서열번호 307의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 103의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 104의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 308; 서열번호 309; 및 서열번호 310의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 101의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 301; 서열번호 102의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 302; 서열번호 103의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 303; 서열번호 104의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 304; 서열번호 101의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 102의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 305; 서열번호 306; 및 서열번호 307)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 103의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 104의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 308; 서열번호 309; 및 서열번호 310)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab11에 대해서, 전장 Ab11 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 102의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 302 및 서열번호 104의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 304를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab11의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab11 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab11 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab12
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 111의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00135
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 112의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00136
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 113의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00137
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 114의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00138
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 111의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 112의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 315; 서열번호 316; 및 서열번호 317의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 113의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 114의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 318; 서열번호 319; 및 서열번호 320의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 111의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 311; 서열번호 112의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 312; 서열번호 113의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 313; 서열번호 114의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 314; 서열번호 111의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 112의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 315; 서열번호 316; 및 서열번호 317)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 113의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 114의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 318; 서열번호 319; 및 서열번호 320)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab12에 대해서, 전장 Ab12 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 112의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 312 및 서열번호 114의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 314를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab12의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab12 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab12 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab13
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 121의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00139
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 122의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00140
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 123의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00141
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 124의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00142
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 121의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 122의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 325; 서열번호 326; 및 서열번호 327의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 123의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 124의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 328; 서열번호 329; 및 서열번호 330의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 121의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 321; 서열번호 122의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 322; 서열번호 123의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 323; 서열번호 124의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 324; 서열번호 121의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 122의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 325; 서열번호 326; 및 서열번호 327)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 123의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 124의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 328; 서열번호 329; 및 서열번호 330)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab13에 대해서, 전장 Ab13 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 122의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 322 및 서열번호 124의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 324를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab13의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab13 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab13 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab14
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 131의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00143
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 132의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00144
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 133의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00145
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 134의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00146
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 131의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 132의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 335; 서열번호 336; 및 서열번호 337의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 133의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 134의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 338; 서열번호 339; 및 서열번호 340의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 131의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 331; 서열번호 132의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 332; 서열번호 133의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 333; 서열번호 134의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 334; 서열번호 131의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 132의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 335; 서열번호 336; 및 서열번호 337)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 133의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 134의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 338; 서열번호 339; 및 서열번호 340)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab14에 대해서, 전장 Ab14 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 132의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 332 및 서열번호 134의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 334를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab14의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab14 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab14 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab15
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, TrkA와 NGF의 결합에 상당하게 영향을 미치지 않는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 141의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00147
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 142의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00148
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 143의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00149
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 144의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00150
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 141의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 142의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 345; 서열번호 346; 및 서열번호 347의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 143의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 144의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 348; 서열번호 349; 및 서열번호 350의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 141의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 341; 서열번호 142의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 342; 서열번호 143의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 343; 서열번호 144의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 344; 서열번호 141의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 142의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 345; 서열번호 346; 및 서열번호 347)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 143의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 144의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 348; 서열번호 349; 및 서열번호 350)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab15에 대해서, 전장 Ab15 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 142의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 342 및 서열번호 144의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 344를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab15의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab15 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab15 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab16
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합을 억제하고, TrkA와 NGF의 결합에 상당하게 영향을 미치지 않는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 151의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00151
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 152의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00152
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 153의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00153
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 154의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00154
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 151의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 152의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 355; 서열번호 356; 및 서열번호 357의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 153의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 154의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 358; 서열번호 359; 및 서열번호 360의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 151의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 351; 서열번호 152의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 352; 서열번호 153의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 353; 서열번호 154의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 354; 서열번호 151의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 152의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 355; 서열번호 356; 및 서열번호 357)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 153의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 154의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 358; 서열번호 359; 및 서열번호 360)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab16에 대해서, 전장 Ab16 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 152의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 352 및 서열번호 154의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 354를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab16의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab16 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab16 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab17
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 161의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00155
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 162의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00156
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 163의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00157
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 164의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00158
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 161의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 162의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 365; 서열번호 366; 및 서열번호 367의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 163의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 164의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 368; 서열번호 369; 및 서열번호 370의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 161의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 361; 서열번호 162의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 362; 서열번호 163의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 363; 서열번호 164의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 364; 서열번호 161의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 162의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 365; 서열번호 366; 및 서열번호 367)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 163의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 164의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 368; 서열번호 369; 및 서열번호 370)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab17에 대해서, 전장 Ab17 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 162의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 362 및 서열번호 164의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 364를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab17의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab17 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab17 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab18
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 171의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00159
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 172의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00160
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 173의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00161
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 174의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00162
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 171의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 172의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 375; 서열번호 376; 및 서열번호 377의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 173의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 174의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 378; 서열번호 379; 및 서열번호 380의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 171의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 371; 서열번호 172의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 372; 서열번호 173의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 373; 서열번호 174의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 374; 서열번호 171의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 172의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 375; 서열번호 376; 및 서열번호 377)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 173의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 174의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 378; 서열번호 379; 및 서열번호 380)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab18에 대해서, 전장 Ab18 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 172의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 372 및 서열번호 174의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 374를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab18의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab18 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab18 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab19
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 181의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00163
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 182의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00164
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 183의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00165
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 184의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00166
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 181의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 182의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 385; 서열번호 386; 및 서열번호 387의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 183의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 184의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 388; 서열번호 389; 및 서열번호 390의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 181의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 381; 서열번호 182의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 382; 서열번호 183의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 383; 서열번호 184의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 384; 서열번호 181의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 182의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 385; 서열번호 386; 및 서열번호 387)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 183의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 184의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 388; 서열번호 389; 및 서열번호 390)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab19에 대해서, 전장 Ab19 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 182의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 382 및 서열번호 184의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 384를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab19의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab19 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab19 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab20
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 191의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00167
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 192의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00168
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 193의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00169
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 194의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00170
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 191의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 192의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 395; 서열번호 396; 및 서열번호 397의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 193의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 194의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 398; 서열번호 399; 및 서열번호 400의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 191의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 391; 서열번호 192의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 392; 서열번호 193의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 393; 서열번호 194의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 394; 서열번호 191의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 192의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 395; 서열번호 396; 및 서열번호 397)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 193의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 194의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 398; 서열번호 399; 및 서열번호 400)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab20에 대해서, 전장 Ab20 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 192의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 392 및 서열번호 194의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 394를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab20의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab20 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab20 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 Ab21
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 51의 가변 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00171
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 401의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00172
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 53의 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00173
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 402 가변 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00174
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 51의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 401의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 255; 서열번호 256; 및 서열번호 257의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 53의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 402의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 258; 서열번호 259; 및 서열번호 260의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 51의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 251; 서열번호 401의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 403; 서열번호 53의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 253; 서열번호 402의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 404; 서열번호 401의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 51의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 255; 서열번호 256; 및 서열번호 257)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 53의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 402의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 258; 서열번호 259; 및 서열번호 260)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 Ab21에 대해서, 전장 Ab21 항체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 401의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 403 및 서열번호 402의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 404를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 적합한 숙주에서 전장 폴리뉴클레오타이드의 발현 후 Ab21의 효소적 분해(예를 들어, 파파인)에 의해 생성될 수 있다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 항-NGF 항체, 예컨대 Ab21 또는 그의 Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Ab21 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
항체 단편 Fab2
다른 실시형태에서 본 발명은 추가로 TrkA와 NGF의 결합 및 TrkA와 NGF의 결합을 억제하는 항-NGF 항체 및 그의 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 폴리펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 407의 경쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00175
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 408의 중쇄 폴리펩타이드 서열을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다:
Figure 112013058887633-pct00176
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 51의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 409의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 255; 서열번호 256; 및 서열번호 257의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 53의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 410의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드에 대응하는 서열번호 258; 서열번호 259; 및 서열번호 260의 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명은 또한 본 명세서에 기재된 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열 중 하나 이상을 포함하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 항체 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 항체 단편을 암호화하는 다음의 폴리뉴클레오타이드 중 모두를 포함하여, 1, 2, 3 이상을 포함하거나, 또는 대안적으로 이루어진다: 서열번호 51의 경쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 251; 서열번호 407의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 409; 서열번호 53의 중쇄 가변 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 253; 서열번호 408의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 410; 서열번호 51의 경쇄 가변 서열 또는 서열번호 407의 경쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 255; 서열번호 256; 및 서열번호 257)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드; 및 서열번호 53의 중쇄 가변 서열 또는 서열번호 408의 중쇄 서열의 상보성-결정 영역(서열번호 258; 서열번호 259; 및 서열번호 260)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 폴리뉴클레오타이드는 NGF에 결합 특이성을 갖는 Fab(단편 항원 결합) 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다. 항체 단편 Fab2에 대해서, Fab 단편을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 407의 경쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 409 및 서열번호 408의 중쇄 서열을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열번호 410을 포함하거나 또는 대안적으로 이루어진다.
본 발명의 다른 실시형태는 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 피키아에서 발현을 위해 발현 벡터 내로 포함된다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다. 본 명세서에 기재된 본 발명의 일 실시형태에서(이하 참조), Fab 단편은 포유류 세포, 예컨대 CHO, NSO 또는 HEK 293 세포, 진균, 곤충, 식물, 동물 또는 미생물계, 예컨대 효모 세포(예를 들어 이배체 효모, 예컨대 이배체 피키아) 및 다른 효모 균주에서 Fab2 폴리뉴클레오타이드의 발현을 통해 생성될 수 있다. 적합한 피키아 종은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 피키아 파스토리스를 포함한다.
일 실시형태에서, 본 발명은 서열번호 3, 13, 23, 33, 43, 53, 63, 73, 83, 93, 103, 113, 123, 133, 143, 153, 163, 173, 183, 193 또는 402로부터 선택된 항-NGF VH 항체 아미노산 서열을 암호화하거나, 또는 그의 변이체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 단리된 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이되, 적어도 하나의 프레임워크 잔기(FR 잔기)는 토끼 항-NGF 항체 VH 폴리펩타이드 또는 보존적 아미노산 치환에서 대응하는 위치에 존재하는 아미노산으로 치환되었다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 1, 11, 21, 31, 41, 51, 61, 71, 81, 91, 101, 111, 121, 131, 141, 151, 161, 171, 181, 191 또는 401의 항-NGF VL 항체 아미노산 서열을 암호화하거나, 또는 그의 변이체를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 단리된 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이되, 적어도 하나의 프레임워크 잔기(FR 잔기)는 토끼 항-NGF 항체 VL 폴리펩타이드 또는 보존적 아미노산 치환에서 대응하는 위치에 존재하는 아미노산으로 치환되었다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명은 서열번호 1 및 서열번호 3; 서열번호 11 및 서열번호 13; 서열번호 21 및 서열번호 23; 서열번호 31 및 서열번호 33; 서열번호 41 및 서열번호 43; 서열번호 51 및 서열번호 53, 서열번호 61 및 서열번호 63; 서열번호 71 및 서열번호 73; 서열번호 81 및 서열번호 83; 서열번호 91 및 서열번호 93; 서열번호 101 및 서열번호 103; 서열번호 111 및 서열번호 113; 서열번호 121 및 서열번호 123; 서열번호 131 및 서열번호 133; 서열번호 141 및 서열번호 143; 서열번호 151 및 서열번호 153; 서열번호 161 및 서열번호 163; 서열번호 171 및 서열번호 173; 서열번호 181 및 서열번호 183; 서열번호 191 및 서열번호 193; 또는 서열번호 401 및 서열번호 403에 함유된 폴리펩타이드를 암호화하는 서열을 포함하는 하나 이상의 이종성 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이다.
다른 실시형태에서, 본 발명은 항-NGF 항체로부터 유래된 적어도 하나의 CDR 폴리펩타이드를 함유하는 폴리펩타이드를 발현시키는 분리된 폴리뉴클레오타이드에 관한 것이되, 상기 발현된 폴리펩타이드는 단독으로 NGF와 특이적으로 결합되거나 또는 항-NGF 항체로부터 유래된 적어도 하나의 CDR 폴리펩타이드를 함유하는 폴리펩타이드를 발현시키는 다른 폴리뉴클레오타이드 서열과 함께 발현될 때 NGF와 특이적으로 결합되고, 상기 적어도 하나의 CDR은 서열번호 1, 3, 11, 13, 21, 23, 31, 33, 41, 43, 51, 53, 61, 63, 71, 73, 81, 83, 91, 93, 101, 103, 111, 113, 121, 123, 131, 133, 141, 143, 151, 153, 161, 163, 171, 173, 181, 183, 191, 193, 401 또는 서열번호 403의 VL 또는 VH 폴리펩타이드에 함유된 것으로부터 선택된다.
상기 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 숙주 세포 및 벡터가 또한 고려된다.
본 발명은 추가로 가변 중쇄 및 경쇄 폴리펩타이드 서열뿐만 아니라 본 명세서에 제시된 개개의 상보성-결정 영역(CDR 또는 초가변 영역)을 암호화하는 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 벡터 및 상기 벡터 서열을 포함하는 숙주 세포를 고려한다. 본 발명의 일 실시형태에서, 숙주 세포는 효모 세포이다. 본 발명의 다른 실시형태에서, 효모 숙주 세포는 피키아 속에 속한다.
항- NGF 활성
NGF에 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-NGF 항체 및 그의 단편의 항-NGF 활성은 또한 NGF에 대한 그의 결합 강도 또는 그의 친화성에 의해 기재될 수 있다. 본 발명의 일 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-NGF 항체 및 그의 단편은 5×10-7M, 10-7M, 5×10-8 M, 10-8M, 5×10-9M, 10-9M, 5×10-10M, 10-10M, 5×10-11M, 10-11M, 5×10-12M, 10-12M, 5×10-13M 또는 10-13M 이하의 해리 상수(KD)로 NGF에 결합된다. 바람직하게는, 항-NGF 항체 및 그의 단편은 5×10-10M 이하의 해리 상수로 NGF에 결합된다. 본 발명의 다른 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-NGF 항체, 및 그의 단편은 선형 또는 입체형태 NGF 에피토프에 결합된다.
본 발명의 다른 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-NGF 항체 및 그의 단편의 항-NGF 활성은 10-4 S-1, 5×10-5 S-1, 10-5 S-1, 5×10-6 S-1, 10-6 S-1, 5×10-7 S-1, 또는 10-7 S-1 이하의 오프율(off-rate)로 NGF에 결합한다.
본 발명의 추가 실시형태에서, NGF에 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항-NGF 항체 및 그의 단편의 항-NGF 활성은 NGF와 관련된 질병 및 장애의 증상을 예방하거나, 호전시키거나 또는 감소시킴으로써, 또는 대안적으로 치료함으로써 항-NGF 활성을 나타낸다.
B-세포 스크리닝 및 분리
일 실시형태에서, 본 발명은 NGF에 대해 단클론성 항체를 생성하기 위해 사용될 수 있고, 원하는 NGF 항원 또는 이러한 항체에 대응하는 핵산 서열에 특이적인, 적어도 하나의 NGF 항원-특이적 세포를 단리시키기 위해 사용될 수 있는 항원-특이적 B 세포의 클론 집단의 제조 및 단리를 고려한다. 항원 특이적 B 세포의 상기 클론 집단의 제조 및 단리 방법은, 예를 들어 Carvalho-Jensen 등의 미국특허 공개 제2007/0269868호에 교시되고, 그의 개시내용은 본 명세서에 전문이 참조로서 포함된다. 항원-특이적 B 세포의 상기 클론 집단의 제조 및 단리 방법은 본 명세서의 실시예에서 교시된다. 크기 또는 밀도에 의한 세포 집단의 "풍부화(enriching)" 방법은 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어 미국특허 제5,627,052호를 참조한다. 이들 단계는 항원-특이성에 의해 세포 집단을 풍부화하는 단계에 추가로 사용될 수 있다.
항체의 인간화 방법
다른 실시형태에서, 본 발명은 항체 중쇄 및 경쇄를 인간화하기 위한 방법을 고려한다. 항-NGF 항체에 적용될 수 있는 항체 중쇄 및 경쇄의 인간화 방법은, 예를 들어 Olson 등의 미국특허 공개 제2009/0022659호, 및 Garcia-Martinez 등의 미국특허 공개 제2009/0028784호에 교시되고, 이들 각각의 개시내용은 전문이 참조로서 포함된다.
항체 및 그의 단편 의 생성 방법
다른 실시형태에서, 본 발명은 항-NGF 항체 및 그의 단편의 생성 방법을 고려한다. 배수체, 바람직하게는 교배 경쟁 효모의 이배체 또는 4배체 균주로부터 선택된 항-NGF 항체 및 그의 단편의 생성 방법이, 예를 들어 Olson 등의 미국특허 공개 제2009/0022659호 및 Garcia-Martinez 등의 미국특허 공개 제2009/0028784호에 교시되고, 그의 각각의 개시내용은 본 명세서에 전문이 참조로서 포함된다.
다른 항체 생성방법은 당업자에게 잘 공지되어 있다. 예를 들어, 키메라 항체의 생성 방법은 현재 당업계에 잘 공지되어 있다(예를 들어, Cabilly 등의 미국특허 제4,816,567호; 문헌[Morrison et al., P.N.A.S. USA, 81:8651-55 (1984); Neuberger, M.S. et al., Nature, 314:268-270 (1985); Boulianne, G.L. et al., Nature, 312:643-46 (1984)]을 참조하며, 이들 각각의 개시내용은 본 명세서에 그의 전문이 참조로서 포함된다).
마찬가지로, 다른 인간화된 항체 생성 방법은 당업계에 잘 공지되어 있다(예를 들어, Queen 등의 미국특허 제5,530,101호, 제5,585,089호, 제5,693,762호 및 제6,180,370호; Winter 등의 미국특허 제5,225,539호 및 제6,548,640호; Carter 등의 미국특허 제6,054,297호, 제6,407,213호 및 제6,639,055호; Adair 등의 미국특허 제6,632,927호; 문헌[Jones, P.T. et al, Nature, 321:522-525 (1986); Reichmann, L., et al, Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeyen, M, et al, Science, 239:1534-36 (1988)]을 참조하며, 이들 각각의 개시내용은 본 명세서에 그의 전문이 참조로서 포함된다).
NGF 결합 특이성을 갖는 본 발명의 항체 폴리펩타이드는 당업자에게 잘 공지된 통상적인 기법을 사용하여, 오페론 및 항체 중쇄를 암호화하는 DNA 서열을 함유하는 발현 벡터를 구성함으로써 생성될 수 있으며, 이때 항체 특이성이 필요한 CDR을 암호화하는 DNA 서열은 비-인간 세포 공급원, 바람직하게는 토끼 B-세포 공급원으로부터 유래되는 한편, 항체 쇄의 나머지 부분을 암호화하는 DNA 서열은 인간 세포 공급원으로부터 유래된다.
제2 발현 벡터는 당업자에 의해 잘 공지된 동일한 통상적인 수단을 사용하여 생성되며, 상기 발현 벡터는 오페론 및 항체 경쇄를 암호화하는 DNA 서열을 함유하고, 이때 항체 특이성이 필요한 CDR을 암호화하는 DNA 서열은 비-인간 세포 공급원, 바람직하게는 토끼 B-세포 공급원으로부터 유래된 한편, 항체 쇄의 나머지 부분을 암호화하는 DNA 서열은 인간 세포 공급원으로부터 유래된다.
발현 벡터는 당업자에게 잘 공지된 통상적인 기법에 의해 숙주 세포에 형질감염되어 형질감염된 숙주 세포를 생성하고, 상기 형질감염된 숙주 세포는 당업자에게 잘 공지된 통상적인 기법에 의해 배양되어 상기 항체 폴리펩타이드를 생성한다.
숙주 세포는 상기 기재된 2개의 발현 벡터와 함께 공동 형질감염될 수 있는데, 제1 발현 벡터는 오페론을 암호화하는 DNA 및 경쇄-유래 폴리펩타이드를 함유하고, 제2 벡터는 오페론을 암호화하는 DNA 및 중쇄-유래 폴리펩타이드를 함유한다. 2개의 벡터는 상이한 선별가능한 마커를 함유하지만, 바람직하게는 중쇄 및 경쇄 폴리펩타이드의 실질적으로 동일한 발현을 달성한다. 대안적으로, 단일 벡터가 사용되며, 벡터는 중쇄와 경쇄 폴리펩타이드를 둘 다 암호화하는 DNA를 포함한다. 중쇄 및 경쇄에 대한 암호 서열은 cDNA, 게놈 DNA 또는 둘 다를 포함할 수 있다.
항체 폴리펩타이드를 발현시키기 위해 사용되는 숙주 세포는 이콜라이와 같은 박테리아 세포 또는 진핵 세포 중 하나 일 수 있다. 본 발명의 특히 바람직한 실시형태에서, 이 목적을 위해 잘 정해진 유형의 포유류 세포, 예컨대 골수종 세포, 중국 햄스터 난소(Chinese hamster ovary, CHO) 세포주, NSO 세포주 또는 HEK293 세포주가 사용될 수 있다.
벡터에 의해 구성될 수 있는 일반적 방법, 숙주 세포를 생성하기 위해 필요한 형질감염 방법 및 상기 숙주 세포 모두로부터 항체 폴리펩타이드를 생성하기 위해 필요한 배양 방법은 통상적인 기법을 포함한다. 바람직하게는 항체를 생성하기 위해 사용되는 세포주가 포유류 세포주, 임의의 다른 적합한 세포주, 예컨대 이콜라이-유래 박테리아 균주와 같은 박테리아 세포주 또는 효모 세포주가 대안적으로 사용될 수 있다.
유사하게는, 일단 생성되면, 항체 폴리펩타이드는, 예를 들어 크로스-플로(cross-flow) 여과, 황산암모늄 침전, 친화성 컬럼 크로마토그래피 등과 같은 당업계의 표준 절차에 따라 정제될 수 있다.
본 명세서에 기재된 항체 폴리펩타이드는 또한 본 발명의 항체 폴리펩타이드와 동일한 치료적 용도에 대해 유용한 펩타이드 또는 비-펩타이드 모방체 중 하나의 설계 및 합성을 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 문헌[Saragobi et al, Science, 253:792-795 (1991)]을 참조하며, 그의 내용은 본 명세서에 그의 전문이 참조로서 포함된다.
스크리닝 분석
본 발명은 또한 NGF 관련 질병 또는 장애의 증상을 나타내는 환자에서 NGF와 관련된 질병 및 장애의 확인을 보조하도록 설계된 스크리닝 분석을 포함한다.
본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항-NGF 항체 또는 그의 NGF 결합 단편은 NGF와 관련된 질병 또는 장애의 증상을 나타내는 환자로부터 얻은 생물학적 샘플에서 NGF의 존재를 검출하기 위해 사용된다. NGF의 존재 또는 그의 상승된 수준은 비교가능한 생물학적 샘플 내 NGF의 질병 전 수준과 비교할 때, NGF와 관련된 질병 또는 장애를 진단하는데 유리할 수 있다.
본 발명의 다른 실시형태는 번역 후 변형된 항-NGF 항체 또는 그의 결합 단편을 사용하여 상기 환자로부터 생물학적 샘플 내 NGF 발현 수준을 분석하는 단계를 포함하는, 본 명세서에서 확인된 NGF 관련 질병 또는 장애의 증상을 나타내는 환자에서 NGF와 관련된 질병 또는 장애의 진단에서 보조하기 위한 진단적 또는 스크리닝 분석을 제공한다. 항-NGF 항체 또는 그의 결합 단편은 본 개시내용에서 앞서 제시된 것과 같은 검출가능한 모이어티를 포함하도록 번역후 변형될 수 있다.
생물학적 샘플 내 NGF 수준은 본 명세서에 제시된 것과 같은 변형된 항-NGF 항체 또는 그의 결합 단편을 사용하고, NGF의 표준 수준(예를 들어, 정상 생물학적 샘플 내 수준)에 대해 생물학적 샘플 내 NGF의 수준을 비교하여 결정된다. 당업자는 정상 생물학적 샘플 간에 일부 가변성이 존재할 수 있다는 것을 이해할 것이며, 결과를 평가할 때 이를 고려할 것이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 본 발명의 항-NGF 항체는 특정 암 발생 단계와 NGF 발현 수준을 상호관련시키기 위해 사용될 수 있다. 당업자는 임상적으로 정해진 암 발생 단계에 대응하는 NGF 발현의 범위를 확립하기 위하여 다수 피험체에서 NGF를 측정할 수 있을 것이다. 이들 범위는 당업자가 암으로 진단된 피험체에서 NGF를 측정하고, 상기 암 단계에 대응하는 범위와 각 피험체의 수준을 상호관련시키도록 할 것이다. 당업자는 상이한 간격으로 환자에서 NGF를 측정함으로써, 암의 진행이 결정될 수 있다는 것을 이해할 것이다.
상기 인용된 분석은 또한 질병 또는 장애를 모니터링하는데 유용할 수 있으며, NGF 관련 질병 또는 장애를 갖는 것으로 믿어지는 환자로부터의 생물학적 샘플에서 얻은 NGF의 수준을 동일 환자로부터의 이전의 생물학적 샘플에서 NGF 수준과 비교하여, 상기 환자의 NGF 수준이 예를 들어 치료 섭생에 의해 변화되었는지 여부를 확인한다.
본 발명은 또한 진단적 조성물의 진단적 유효량을 투여하는 단계를 포함하는 NGF를 발현시키는 세포의 존재를 검출하는 생체내 이미징 방법에 관한 것이다. 상기 생체내 이미징은 종양 또는 전이를 발현시키는 NGF의 검출 또는 이미징을 위해 유용하며, 예를 들어 효과적인 암 치료 프로토콜의 설계를 위한 계획 섭생의 부분으로서 유용할 수 있다. 치료 프로토콜은, 예를 들어 방사선, 화학치료, 사이토카인 치료, 유전자 치료 및 항체 치료 중 하나 이상뿐만 아니라 항-NGF 항체 또는 그의 단편을 포함할 수 있다.
본 발명은 NGF에 본 발명의 항-NGF 항체의 결합을 검출하기 위한 키트를 추가로 제공한다. 특히, 키트는 본 발명의 항-NGF 항체 또는 그의 면역반응성 단편과 특이적으로 반응성인 NGF의 존재를 검출하기 위해 사용될 수 있다. 키트는 또한 기질에 결합된 항체, 항원과 반응성인 2차 항체 및 항원과 2차 항체의 반응을 검출하기 위한 시약을 포함한다. 이러한 키트는 ELISA 키트일 수 있고, 기질, 1차 및 2차 항체, 적절하다면, 예를 들어 본 명세서에 기재된 것과 같은 임의의 다른 필요한 시약, 예컨대 검출가능한 모이어티, 효소 기질 및 착색 시약을 포함할 수 있다. 진단 키트는 또한 면역블롯 키트의 형태일 수 있다.
당업자는 생물학적 샘플이, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 혈청, 혈장, 소변, 타액, 점액, 흉수, 윤활액 및 척수액을 포함한다는 것을 이해할 것이다.
NGF 와 관련된 질병 및 장애의 증상을 호전시키거나 또는 감소시키거나, 또는 질병 또는 장애를 치료하거나 또는 예방하는 방법
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체 또는 그의 단편은 NGF와 관련된 질병 및 장애의 증상을 호전시키거나 감소시키거나, 또는 질병 및 장애를 치료하거나 또는 예방하는데 유용하다. 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체 또는 그의 단편뿐만 아니라 조합은 또한 이하에 더욱 상세하게 기재되는 약제학적 조성물의 형태에서 NGF와 관련된 질병 및 장애의 치료가 필요한 환자에게 치료적 유효량으로 투여될 수 있다.
본 발명의 바람직한 실시형태에서, Fab 단편은 환자에서 통증 치료를 위해 이용된다.
본 발명의 다른 실시형태에서, 하나 이상의 항-NGF 1가 작용제는 상기 개체에서 염증을 실질적으로 상승시키기 않고 개체에서 통증의 증상을 호전시키거나 또는 감소시키거나, 또는 통증을 치료하거나 또는 예방하는데 유용하다. 대표적인 통증은 이하에 제시된다.
본 발명의 일 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체 또는 그의 단편은 및/또는 제2 작용제와 함께 다음의 비제한적으로 열거되는 질병 및 장애의 증상을 호전시키거나 또는 감소시키거나, 또는 질병 또는 장애를 치료하거나 예방하는데 유용하다: 염증성 통증, 수술 후 절개 통증, 복합부위 통증 증후군, 암 통증(원발성 또는 전이성 뼈암 통증), 골절 통증, 골다공증성 골절 통증, 화상으로부터 초래된 통증, 골다공증, 통풍 관절 통증, 겸상 적혈구 발증과 관련된 통증 및 다른 침해수용성 통증뿐만 아니라 간세포 암종, 유방암, 간경변증.
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체 또는 그의 단편은 및/또는 제2 작용제와 함께 다음의 비제한적으로 열거되는 질병 및 장애의 증상을 호전시키거나 또는 감소시키거나, 또는 질병 또는 장애를 치료하거나 예방하는데 유용하다: 신경성, 신경병증성 또는 침해수용성 통증. 신경병증성 통증은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 삼차 신경통, 대상포진후 신경통, 환상지통, 섬유근육통, 월경통, 난소통, 반사성 교감신경성 이영양증 및 신경인성 통증을 포함할 수 있다. 다른 바람직한 실시형태에서, 골관절염 또는 류마티스 관절염 통증, 등 아래 부분 통증, 당뇨병성 말초신경병증, 좌골신경통, 편두통, 및 다른 신경병증성 통증.
본 발명의 다른 실시형태에서, 항체 및 단편, 특히 염증을 야기하지 않는 것을 포함하는 1가 단편을 포함하는 대상 NGF 길항물질은 개체에서 통증의 증상을 호전시키거나 또는 감소시키거나, 또는 통증을 치료하거나 예방하는데 유용하다. 치료가능한 대표적인 통증 질환은 이하에 제시된다.
본 발명의 일 실시형태에서, 개시된 NGF 항체 및 단편, 특히 염증을 야기하지 않는 것을 포함하는 2가 및 1가 단편을 포함하는 대상 NGF 길항물질은 단독으로 및/또는 2차 작용제와 함께 유용하고, 다음의 비제한적으로 열거되는 질병 및 장애의 증상을 호전시키거나 또는 감소시키거나, 또는 질병 및 장애를 치료하거나 예방하는데 유용하다: 염증성 통증, 수술 후 절개 통증, 복합부위 통증 증후군, 암 통증(특히 원발성 또는 전이성 뼈암 통증), 골절 통증, 골다공증성 골절 통증, 화상으로부터 초래된 통증, 골다공증, 통풍뿐만 아니라 간세포 암종, 유방암, 간경변증.
본 발명의 다른 실시형태에서, 개시된 NGF 항체 및 단편, 특히 염증을 야기하지 않는 것을 포함하는 2가 및 1가 단편을 포함하는 대상 NGF 길항물질은 단독으로 또는 다른 활성제와 함께 다음의 비제한적으로 열거되는 질병 및 장애의 증상을 호전시키거나 또는 감소시키거나, 또는 질병 및 장애를 치료하거나 예방하는데 유용하다: 신경성, 신경병증성 또는 침해수용성 통증. 신경병증성 통증은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 삼차 신경통, 대상포진후 신경통, 환상지통, 섬유근육통, 월경통, 난소통, 반사성 교감신경성 이영양증 및 신경인성 통증을 포함할 수 있다. 다른 바람직한 실시형태에서, 골관절염 또는 류마티스 관절염 통증, 등 아래 부분 통증, 당뇨병성 말초신경병증, 좌골신경통, 편두통, 및 다른 신경병증성 통증.
일반적으로, 개시된 NGF 항체 및 단편, 특히 염증을 야기하지 않는 것을 포함하는 2가 및 1가 단편을 포함하는 대상 NGF 길항물질은 단독으로 및/또는 제2 작용제와 함께 다음의 비제한적으로 열거되는 NGF-관련 질병 및 장애의 증상을 호전시키거나 또는 감소시키거나, 또는 질병 및 장애를 치료하거나 예방하는데 유용하되, 질환은 급성 통증, 치통, 외상으로부터의 통증, 수술 통증, 절단 또는 농양으로부터 초래되는 통증, 작열통, 탈수질환, 삼차 신경통, 암, 만성 알코올 중독, 뇌졸중, 시상통증증후군, 당뇨병, 후천성 면역 결핍증(acquired immune deficiency syndrome: "AIDS"), 독소, 화학치료, 일반적 두통, 편두통, 군발두통, 혼합된-혈관성 또는 비-혈관성 증후군, 긴장성 두통, 일반적 염증, 관절염, 류머티즘성 질병, 루푸스, 골관절염, 섬유근육통, 염증성 장 질환, 과민성 대장 증후군,염증성 눈 질환, 염증성 또는 불안정 방광 장애, 건선, 염증성 성분에 의한 피부 질환, 일광화상, 심장염, 피부염, 근염, 신경염, 교원성 혈관 질환, 만성 염증성 질환, 염증성 통증 및 관련된 통각과민 및 이질통, 신경병증성 통증 및 관련된 통각과민 또는 이질통, 당뇨병성 말초신경병증 통증, 작열통, 교감신경 유지통, 구심로 차단 증후군, 천식, 상피조직 손상 또는 기능 장애, 단순 포진, 호흡 시 내장 운동성의 장애, 비뇨 생식기, 위장 또는 혈관 영역, 상처, 화상, 알레르기성 피부 반응, 소양증, 백반증, 일반적 위장 장애, 대장염, 위 궤양, 십이지장 궤양, 혈관운동성 또는 알레르기성 비염, 또는 기관지 장애, 월경통, 소화불량, 위식도 역류, 췌장염 또는 장기통이다.
NGF 항체 및 단편, 특히 염증을 야기하지 않는 것을 포함하는 2가 및 1가 단편을 포함하는 대상 NGF 길항물질이 단독으로 및/또는 제2 작용제와 함께 치료가능하거나 또는 예방가능한 "NGF-매개 질병" 및 "NGF-매개 질환"이라는 용어는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 급성 통증, 치통, 외상으로부터의 통증, 수술 통증, 절단 또는 농양으로부터 초래되는 통증, 작열통, 탈수질환, 삼차 신경통, 암, 만성 알코올 중독, 뇌졸중, 시상통증증후군, 당뇨병, 후천성 면역 결핍증("AIDS"), 독소 및 화학치료, 일반적 두통, 편두통, 군발두통, 혼합된-혈관성 및 비-혈관성증후군, 긴장성 두통, 일반적 염증, 관절염, 류머티즘성 질병, 루푸스, 골관절염, 염증성 장 질환, 과민성 대장 증후군,염증성 눈 질환, 염증성 또는 불안정 방광 장애, 건선, 염증성 성분에 의한 피부 질환, 일광화상, 심장염, 피부염, 근염, 신경염, 교원성 혈관 질환, 만성 염증성 질환, 염증성 통증 및 관련된 통각과민 및 이질통, 신경병증성 통증 및 관련된 통각과민 및 이질통, 당뇨병성 말초신경병증 통증, 작열통, 교감신경 유지통, 구심로 차단 증후군, 천식, 상피조직 손상 또는 기능 장애, 단순 포진, 호흡 시 내장 운동성의 장애, 비뇨 생식기, 위장 또는 혈관 영역, 상처, 화상, 알레르기성 피부 반응, 소양증, 백반증, 일반적 위장 장애, 대장염, 위 궤양, 십이지장 궤양, 혈관운동성 또는 알레르기성 비염, 또는 기관지 장애, 월경통, 소화불량, 위식도 역류, 췌장염, 및 장기통을 포함하는 증가된 NGF 수준 또는 NGF에 대해 증가된 민감성과 관련된 임의의 의학적 질환 또는 장애를 광범위하게 포함한다.
투여
본 발명의 일 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체 또는 그의 NGF 결합 단편뿐만 아니라 상기 항체 또는 항체 단편의 조합은 수용 피험체 체중의 약 0.1 내지 100.0 ㎎/㎏의 농도로 피험체에게 투여된다. 본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체 또는 그의 NGF 결합 단편뿐만 아니라 상기 항체 또는 항체 단편의 조합은 수용 피험체 체중의 약 0.4 ㎎/㎏의 농도로 피험체에게 투여된다. 본 발명의 바람직한 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체 또는 그의 NGF 결합 단편뿐만 아니라 상기 항체 또는 항체 단편의 조합은 26주 이하마다 1회, 예컨대 16주 이하마다 1회, 8주 이하마다 1회, 4주 이하마다 1회, 2주 이하마다 1회, 1주 이하마다 1회 또는 1일 이하마다 1회로 수용 피험체에게 투여된다.
Fab 단편은 2주 이하마다, 1주 이하마다, 1일 이하마다, 1일에 다수 회 및/또는 몇 시간마다 투여될 수 있다. 본 발명의 일 실시형태에서, 환자는 원하는 결과를 얻기 위하여 1일 1 내지 6회로 나누어서 또는 서방출 형태로 주어지는 1일 당 0.01 ㎎/㎏ 내지 40 ㎎/㎏의 Fab 단편을 투여받는다.
주어진 환자에 투여된 항체 또는 Fab의 농도는 상기 제시된 대표적인 투여 농도 초과 또는 미만일 수 있다는 것이 이해되어야 한다.
당업자는, 예를 들어 본 명세서의 개시 및 문헌[Goodman, L. S., Gilman, A., Brunton, L. L., Lazo, J. S., & Parker, K. L. (2006). Goodman & Gilman's the pharmacological basis of therapeutics. New York: McGraw-Hill; Howland, R. D., Mycek, M. J., Harvey, R. A., Champe, P. C., & Mycek, M. J. (2006). Pharmacology. Lippincott's illustrated reviews. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins; and Golan, D. E. (2008). Principles of pharmacology: the pathophysiologic basis of drug therapy. Philadelphia, Pa., [etc.]: Lippincott Williams & Wilkins]의 교시에 의해 설명되는 일상적인 실험을 통해 효과적인 투약량 및 투여빈도를 결정할 수 있을 것이다.
본 발명의 다른 실시형태에서, 본 명세서에 기재된 항-NGF 항체 또는 그의 NGF 결합 단편뿐만 아니라 상기 항체 또는 항체 단편의 조합은 약제학적 조제물은 약제학적 조제물로 피험체에게 투여된다.
"약제학적 조성물"은 포유류에게 투여에 적합한 화학적 또는 생물학적 조성물을 지칭한다. 이러한 조성물은, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 구강, 피부, 경막, 흡입, 동맥내, 심장내, 뇌실내, 피내, 근육내, 비강내, 안내, 복막내, 수강내, 척추강내, 정맥내, 경구, 비경구, 관장 또는 좌약을 통해 직장내, 피하, 피부밑, 혀밑, 경피 및 경점막을 포함하는 다수의 경로 중 하나 이상을 통한 투여를 위해 특이적으로 조제될 수 있다. 추가로, 투여는 주사, 분말, 액체, 겔, 점적약 또는 다른 투여 수단에 의해 일어날 수 있다.
본 발명의 일 실시형태에서, 본 명세서에 기재되는 항-NGF 항체 또는 이들의 NGF 결합 단편뿐만 아니라 상기 항체 또는 항체 단편의 조합은 하나 이상의 활성제와 조합되어 선택적으로 투여될 수 있다. 이러한 활성제는 진통제, 항-히스타민제, 해열제, 항-염증제, 항생제, 항바이러스제 및 항-사이토카인제를 포함한다. 활성제는 앞서 언급한 것 중 어떤 것에 대해 반응성인 항체 및 그의 수용체 중 어떤 것에 대해 반응성인 항체를 포함하여, 작용물질(agonist), 길항물질 및 TNF-α, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IL-13, IL-18, IFN-α, IFN-γ, BAFF, CXCL13, IP-10, VEGF, EPO, EGF, HRG, 간세포 성장인자(Hepatocyte Growth Factor, HGF), 헵시딘의 조절인자를 포함한다. 활성제는 또한, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 2-아릴프로피온산, 아세클로페낙, 아세메타신, 아세틸살리실산(아스피린), 아클로페낙, 알미노프로펜, 아목시프린, 암피론, 아릴알칸산, 아자프로파존, 베노릴레이트(Benorylate)/베노릴레이트(Benorilate), 베녹사프로펜, 브롬페낙, 카프로펜, 셀레콕십, 콜린 마그네슘 살리실레이트, 클로페존, COX-2 억제제, 덱시뷰프로펜, 덱스케토프로펜, 다이클로페낙, 다이플루니살, 드록시캄, 에텐자마이드, 에토돌락, 에토리콕십, 파이슬라민, 페남산, 펜뷰펜, 페노프로펜, 플루페남산, 플루녹사프로펜, 플루르바이프로펜, 이뷰프로펜, 이뷰프록삼, 인도메타신, 인도프로펜, 케뷰존, 케토프로펜, 케토롤락, 로녹시캄, 록소프로펜, 루미라콕십, 마그네슘 살리실레이트, 메클로페남산, 메페남산, 멜록시캄, 메타미졸, 메틸 살리실레이트, 모페뷰타존, 나부메톤, 나프록센, N-아릴안트라닐산, 신경성장인자(NGF), 옥사메타신, 옥사프로진, 옥시캄, 옥시펜뷰타존, 파레콕십, 페나존, 페닐뷰타존, 페닐뷰타존, 피록시캄, 피프로펜, 프로펜, 프로글루메타신, 피라졸리딘 유도체, 로페콕십, 살리실 살리실레이트, 살리실레이트, 설핀피라존, 설린닥, 수프로펜, 테녹시캄, 티아프로펜산, 톨페남산, 톨메틴 및 발데콕십을 포함한다.
항-히스타민은 히스타민의 작용 또는 세포(예를 들어, 비만세포)로부터 그의 방출을 저지하는 임의의 화합물일 수 있다. 항-히스타민제는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 아크리바스틴, 아스테미졸, 아자타딘, 아젤라스틴, 베타타스틴, 브로모페니라민, 뷰클리진, 세티리진, 세티리진 유사체, 클로르페니라민, 클레마스틴, CS 560, 사이프로헵타딘, 데스로라타딘, 덱스클로르페니라민, 에바스틴, 에피나스틴, 펙소페나딘, HSR 609, 하이드록시진, 레보카바스틴, 로라티딘, 메트스코폴라민, 미졸라스틴, 노라스테미졸, 페닌다민, 프로메타진, 피릴아민, 터페나딘 및 트라닐라스트를 포함한다.
항생제는, 이하로 제한되는 것은 아니지만, 아미카신, 아미노글라이코사이드, 아목시실린, 암피실린, 안사마이신, 아스페나민, 아지트로마이신, 아즐로실린, 아즈트레오남, 박시트라신, 카바세펨, 카바페넴, 카베니실린, 세파클러, 세파드록실, 세팔렉신, 세팔로친, 세팔로틴, 세파만돌, 세파졸린, 세프디닐, 세프디토렌, 세페핌, 세픽심, 세포페라존, 세포탁심, 세폭시틴, 세프포독심, 세프프로질, 세프타지딤, 세프티뷰텐, 세프티족심, 세프토비프롤, 세프트리악손, 세푸록심, 세팔로스포린, 클로람페니콜, 실라스타틴, 시프로플록사신, 클라리트로마이신, 클린다마이신, 클록사실린, 콜리스틴, 코-트리목사졸, 달포프리스틴, 데메클로사이클린, 다이클록사실린, 다이리트로마이신, 도리페넴, 독시사이클린, 에녹사신, 엘타페넴, 에리트로마이신, 에탐뷰톨, 플루클록사실린, 포스포마이신, 푸라졸리돈, 푸시딘산, 가티플록사신, 겔다나마이신, 젠타미신, 글라이코펩타이드, 허비마이신, 이미페넴, 아이소나이아지드, 카나마이신, 레보플록사신, 린코마이신, 리네졸리드, 로메플록사신, 로라카베프, 마크롤라이드, 마페나이드, 메로페넴, 메티실린, 메트로니다졸, 메즐로실린, 미노사이클린, 모노박탐, 목시플록사신, 뮤피로신, 나프실린, 네오마이신, 네틸마이신, 나이트로푸란토인, 놀플록사신, 오플록사신, 옥사실린, 옥시테트라사이클린, 파로모마이신, 페니실린, 페네실린, 피페라실린, 플라텐시마이신, 폴리믹신 B, 폴리펩타이드, 프론토실, 파이라진아마이드, 퀴놀론, 퀴뉴프리스틴, 리팜피신, 리팜핀, 록시트로마이신, 스펙티노마이신, 스트렙토마이신, 설파세타마이드, 설파메티졸, 설파닐리마이드, 설파살라진, 설피속사졸, 설폰아마이드, 테이코플라닌, 텔리트로마이신, 테트라사이클린, 테트라사이클린, 티카실린, 티니다졸, 토브라마이신, 트라이메토프림, 트라이메토프림-설파메톡사졸, 트롤레안도마이신, 트로바플록사신 및 반코마이신을 포함한다.
활성제는 또한 알도스테론, 베클로메타손, 베타메타손, 코티코스테로이드, 코티솔, 코티손 아세테이트, 데옥시코티코스테론 아세테이트, 덱사메타손, 플루드로코티손 아세테이트, 글루코코티코이드, 하이드로코티손, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 프레드니손, 스테로이드 및 트라이암시놀론을 포함한다. 이들 활성제의 임의의 적합한 조합이 또한 고려된다.
"약제학적 부형제" 또는 "약제학적으로 허용가능한 부형제"는 활성 치료제가 조제는 보통 액체인 담체이다. 본 발명의 일 실시형태에서, 활성 치료제는 본 명세서에 기재된 인간화된 항체 또는 그의 하나 이상의 단편이다. 부형제는 화학적 및/또는 생물학적 안정성 및 방출 특징을 제공할 수 있지만, 일반적으로 조제물에 임의의 약리학적 활성을 제공하지 않는다. 대표적인 조제물은, 예를 들어 참조로서 포함되는 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th Ed., Grennaro, A., Ed., 1995]에서 찾을 수 있다.
본 명세서에 사용되는 "약제학적으로 허용가능한 담체" 또는 "부형제"는 생리적으로 양립가능한 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 코팅제, 항박테리아제 및 항진균제, 등장제 및 흡수 지연제를 포함한다. 일 실시형태에서, 담체는 비경구 투여에 적합하다. 대안적으로, 담체는 정맥내, 복막내, 근육내 또는 혀밑 투여에 적합할 수 있다. 약제학적으로 허용가능한 담체는 멸균 수용액 또는 분산제 및 멸균 주사 용액 또는 분산제의 즉석 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 약제학적으로 활성인 물질에 대해 이러한 매질 및 작용제의 사용은 당업계에 잘 공지되어 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 작용제로서 활성 화합물과 양립불가능한 경우를 제외하고, 본 발명의 약제학적 조성물에서 그의 사용이 고려된다. 보충의 활성 화합물이 또한 조성물에 포함될 수 있다.
약제학적 조성물은 전형적으로 멸균이며, 제조 및 저장 조건하에서 안정하여야 한다. 본 발명은 약제학적 조성물이 동결건조 형태로 존재한다는 것을 고려한다. 조성물은 용액, 마이크로에멀젼, 리포좀 또는 높은 약물 농도에 적합한 다른 규칙적 구조로 조제될 수 있다. 담체는, 예를 들어 물, 에탄올 폴리올(예를 들어, 글라이세롤, 프로필렌 글라이콜 및 액체 폴리에틸렌 글라이콜) 및 이들의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 본 발명은 추가로 약제학적 조성물에서 안정제의 포함을 고려한다. 적절한 유동성은, 예를 들어 레시틴과 같은 코팅제의 사용에 의해, 분산제의 경우에 필요한 입자 크기의 유지에 의해 및 계면활성제의 사용에 의해 유지될 수 있다.
다수의 경우에 등장제, 예를 들어 당, 폴리알코올, 예컨대 조성물 내 만니톨, 솔비톨 또는 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 주사가능한 조성물의 장기적인 흡수는 조성물에서 흡수를 지연시키는 작용제, 예를 들어 모노스테아레이트 염 및 젤라틴을 포함함으로써 초래될 수 있다. 게다가, 알칼린 폴리펩타이드는, 예를 들어 서방성 폴리머를 포함하는 조성물에서 시간 방출 조제물 중에서 조제될 수 있다. 활성 화합물은 이식물 및 마이크로캡슐화된 전달 시스템을 포함하여 제어방출 조제물과 같이 빠른 방출에 대해 화합물을 보호하는 담체와 함께 제조될 수 있다. 생분해성, 생체양립가능한 폴리머, 예컨대 에틸렌비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글라이콜산, 콜라겐, 폴리오쏘에스터, 폴리락트산 및 폴리락트, 폴리글라이콜 공중합체(PLG)가 사용될 수 있다. 이러한 조제물의 제조를 위한 다수의 방법은 당업자에게 공지되어 있다.
인용된 실시형태 각각에 대해, 화합물은 다양한 제형에 의해 투여될 수 있다. 당업자에게 공지된 임의의 생물학적으로 허용가능한 제형 및 그의 조합이 고려된다. 이러한 제형의 예는, 제한 없이, 재구성가능한 분말, 엘릭시르, 액체, 용액, 현탁액, 에멀젼, 분말, 과립, 입자, 마이크로입자, 분산가능한 과립, 사쉐, 흡입제, 에어로졸 흡입제, 패치, 입자 흡입제, 이식물, 데포 이식물, 주사가능물질(피하, 근육내, 정맥내 및 피내를 포함), 주입물 및 이들의 조합을 포함한다.
다양한 예시된 본 발명의 실시형태의 상기 기재는 철저한 것으로 또는 개시된 정확한 형태로 본 발명을 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 본 발명에 대한 구체적 실시형태 및 실시예가 예시적 목적을 위해 본 명세서에 기재되지만, 당업자가 인식하는 것과 같이 다양한 동등한 변형이 본 발명의 범주 내에서 가능하다. 본 발명의 본 명세서에 제공된 교시는 상기 기재된 실시예 이외에 다른 목적을 위해 적용될 수 있다.
이들 및 다른 변화는 상기 기재한 설명에 비추어 본 발명에 의해 만들어질 수 있다. 일반적으로, 다음의 특허청구범위에서, 사용된 용어는 본 명세서 및 특허청구범위에 개시된 구체적 실시형태로 본 발명을 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 따라서, 본 발명은 개시내용에 의해 제한되지 않지만, 대신에 본 발명의 범주는 다음의 특허청구범위에 의해 완전하게 결정될 것이다.
본 발명은 앞서 언급한 설명 및 실시예에서 구체적으로 기재된 것 이외의 방법으로 실행될 수 있다. 본 발명의 수많은 변형 및 변화가 상기 교시에 비추어 가능하며, 따라서 첨부하는 특허청구범위의 범주 내에 있다.
항원-특이적 B 세포의 클론 집단을 얻기 위한 방법에 관한 특정 교시는 2006년 5월 19일 출원된 미국 가특허출원 제60/801,412호에 개시되며, 그의 개시내용은 본 명세서에 전문이 참조로서 포함된다.
토끼-유래 단클론성 항체의 인간화 및 항원 결합 친화성을 유지하기 위한 바람직한 서열 변형에 관한 특정 교시는 2008년 5월 21일 출원된 국제특허출원 공개 WO/2008/144757호에 대응하는 국제특허출원 PCT/US2008/064421호(발명의 명칭: Novel Rabbit Antibody Humanization Methods and Humanized Rabbit Antibodies)에 개시되며, 그의 개시내용은 본 명세서에 전문이 참조로서 포함된다.
교배 경쟁 효모를 사용하여 항체 또는 그의 단편을 생성하는 것에 관한 특정 교시 및 대응하는 방법은 2006년 5월 8일 출원된 미국 특허출원 제11/429,053호에 개시되며(미국특허출원 공개 US2006/0270045호), 그의 개시내용은 본 명세서에 전문이 참조로서 포함된다.
특정 NGF 항체 폴리뉴클레오타이드 및 폴리펩타이드는 이 특허 출원에 수반되는 서열목록에 개시되며, 상기 서열목록의 개시내용은 본 명세서에 전문이 참조로서 포함된다.
본 발명의 배경기술, 발명의 내용 및 실시예에 인용된 각각의 문헌(특허, 특허 출원, 논문, 초록, 매뉴얼, 서적 또는 다른 개시내용을 포함)의 전체 개시내용은 본 명세서에 그의 전문이 참조로서 포함된다.
다음의 실시예는 대상 발명의 제조 및 사용방법의 완전한 개시 및 기재와 함께 당업자에게 제공을 위해서 제시되며, 본 발명에 관한 것의 범주를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 사용한 숫자(예를 들어, 양, 온도, 농도 등)에 대한 정확성을 보장하기 위한 노력이 있었지만, 일부 실험적 오류 및 편차가 허용되어야 한다. 달리 표시되지 않는다면, 부분은 중량부이며, 분자량은 평균 분자량이고, 온도는 섭씨이며; 압력은 대기압 또는 대기압 근처이다.
실시예
실시예 1 NGF 에 결합되는 항체의 제조
본 명세서에 기재된 항체 선택 프로토콜을 사용함으로써, 대규모 항체 패널을 만들 수 있다.
면역화 전략
토끼를 huNGF(미네소타주 미네아폴리스에 소재한 알앤디 시스템즈(R&D Systems))로 면역화시켰다. 면역화는 완전 프로인트 애주번트(complete Freund's adjuvant, CFA)(시그마(Sigma)) 중의 100㎍의 제1 피하 주사 다음 2주 후 불완전 프로인트 애주번트(IFA)(시그마(Sigma))에서 각각 50 ㎍의 2회 부스트로 이루어진다. 동물을 제55일에 출혈시켰고, ELISA(항원 인식)에 의해 및 T1165 세포주를 사용하는 비방사성 증식 분석(프로메가(Promega))에 의해 혈청 역가를 결정하였다.
항체 선별 역가 평가
인간 NGF에 결합되는 항체를 확인하고 특성규명하기 위하여, 항체 함유 용액을 ELISA에 의해 시험하였다. 간략하게, 뉴트라비딘 코팅된 플레이트(서모 사이언티픽(Thermo Scientific))를 실온에서 1시간 동안 ELISA 완충제(0.1㎎/㎖ BSA, 1×PBS pH 7.4, 0.002% 트윈(Tween) 20 및 0.005% 아자이드나트륨)으로 차단시켰다. 그 다음에 플레이트를 실온에서 1시간 동안 ELISA 완충제 중에서 1㎍/㎖ 비오틴화된 B-NGF 용액으로 코팅시켰다. 이 다음에 세척 단계(3x, PBS + 0.05% 트윈(Tween) 20을 사용) 및 ELISA 완충제에 의한 제2 차단이 있었다. 그 다음에 재조합 항체를 플레이트 상에 첨가하였고, 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시킨 다음, PBS/트윈(Tween) 용액으로 3x 세척하였다. 개발을 위해, 항-토끼 Fc-HRP(ELISA 완충제 중에서 1:5000 희석)를 웰 상에 첨가하였고, RT에서 45분 동안 인큐베이션시켰다. PBS/트윈(Tween) 용액으로 3x 세척 단계 후, 플레이트를 3분 동안 TMB 기질을 사용하여 진행하였고, 0.5M HCl을 사용하여 중단시켰으며 450㎚에서 판독하였다.
기능성 역가 평가
NGF-의존적 세포 증식을 차단하는 NGF 항체의 능력에 대한 시험을 위하여, 본 발명자들은 TF-1 세포를 사용하였다(Chevalier et al. Expression and functionality of the trkA proto-oncogene product/NGF receptor in undifferentiated hematopoietic cells. Blood (1994) vol. 83 (6) pp. 1479-85). 간략하게, TF-1 세포를 rhuGM-CSF로 보충한 10% FBS cRPMI 배지("경쟁 배지")에서 유지하였다. 분석일에, 항체를 둥근 바닥 96웰 플레이트 내 경쟁 배지에서 단계 희석시켰다. B-NGF(알앤디 시스템즈(R&D systems))를 동시에 첨가하였고, 얻어진 항체/B-NGF 혼합물을 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. Ab와 B-NGF 혼합물을 인큐베이션시키는 동안, TF-1 세포를 완전 배지로 3x 세척시켰고, 계측하였으며, 50㎕ 부피로 웰 당 25,000개 세포를 사용하여 편평 바닥 96웰 플레이트에서 플레이팅하였다. 1시간 인큐베이션 후, NGF-항체 혼합물을 세포 상에 첨가하였고, 플레이트를 습한 5% CO2 인큐베이터 내 37℃에서 48시간 동안 인큐베이션시켰다. 제조업자의 설명서에 따라 "셀타이터(CellTiter)" 수용액 세포증식 분석(프로메가(Promega))을 사용하여 세포 증식을 측정하였다. 항체 농도에서 신호의 의존도를 분석하였고, IC50 값을 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 프로그램을 사용하여 계산하였다.
조직 채취
일단 허용가능한 역가가 확립되면, 토끼(들)를 희생시켰다. 비장, 림프절, 및 전혈을 채취하였고, 다음과 같이 처리하였다:
조직을 해리시키고, 20 cc 주사기의 플런저로 70 ㎛(피셔(Fisher))에서 멸균 와이어 메쉬를 통해 밀어냄으로써 비장 및 림프절을 단일 세포 현탁액 내로 처리하였다. 세포를 PBS 중에서 수집하였다. 세포를 원심분리에 의해 2회 세척하였다. 최종 세척 후, 세포 밀도를 트립판 블루에 의해 결정하였다. 세포를 1500 rpm에서 10분 동안 원심분리시켰고; 상청액을 폐기하였다. 세포를 FBS(Hyclone) 중의 10% 다이메틸 설폭사이드(DMSO, 시그마(Sigma))의 적절한 부피에서 재현탁시켰고, 1 ㎖/바이알로 제공하였다. 바이알을 24시간 동안 완만동결실 내 -70℃에 저장하였고, 액체 질소 중에서 저장하였다.
말초 혈액 단핵 세포(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC)를 FBS가 없는 상기 기재한 저글루코스 배지의 동일 부분과 전혈을 혼합함으로써 단리시켰다. 35㎖의 전혈 혼합물로 45㎖ 원뿔형 관(코닝(Corning)) 내 8㎖의 림폴라이트 래빗(Lympholyte Rabbit)(씨더레인(Cedarlane)) 상에 조심스럽게 층을 만들었고, 진탕하지 않고 실온의 2500 rpm에서 30분 동안 원심분리시켰다. 원심분리 후, 유리 파스퇴르 피펫(VWR)을 사용하여 PBMC 층을 조심스럽게 제거하였고, 합하였으며, 깨끗한 50㎖ 바이알에 넣었다. 실온에서 10분 동안 1500 rpm에서 원심분리에 의해 상기 기재한 변형 배지로 세포를 2회 세척하였고, 트립판 블루 염색에 의해 세포 밀도를 결정하였다. 최종 세척 후, 세포를 적절한 부피의 10% DMSO/FBS 배지 중에서 재현탁시켰으며 상기 기재한 바와 같이 냉동시켰다.
B 세포 배양물
B 세포 배양물의 셋팅일에, PBMC, 비장세포, 또는 림프절 바이알을 사용을 위해 해동시켰다. 바이알을 LN2 탱크로부터 제거하였고, 해동까지 37℃ 수욕에 두었다. 바이알의 내용물을 15㎖ 원뿔형 원심분리 튜브(코닝(Corning))에 옮겼고, 상기 기재한 10㎖의 변형 RPMI를 튜브에 서서히 첨가하였다. 세포를 1.5K rpm에서 5분 동안 원심분리시켰고, 상청액을 버렸다. 세포를 10㎖의 신선한 배지에서 재현탁시켰다. 세포 밀도 및 생존력을 트립판 블루에 의해 결정하였다. 세포를 다시 세척하였고, 1E07 세포/80㎕ 배지에 재현탁시켰다. 비오틴화된 huNGF(B huNGF)를 3 ㎍/㎖의 최종 농도로 세포 현탁액에 첨가하였고, 4℃에서 30분 동안 인큐베이션시켰다. 포스페이트-완충제(PBF): Ca/Mg이 없는 PBS(하이클론(Hyclone)), 2mM 에틸렌다이아민 테트라아세트산(EDTA), 0.5% 소 혈청 알부민(BSA)(시그마(Sigma)-바이오틴 없음)의 2회의 10㎖ 세척으로 미결합 B huNGF를 제거하였다. 제2 세척 후, 세포를 1E07 세포/80㎕ PBF에서 재현탁시켰다. 20㎕의 MACS(등록상표) 스트렙타비딘 비드(밀테니(Milteni))/10E7 세포를 세포 현탁액에 첨가하였다. 세포를 4℃에서 15분 동안 인큐베이션시켰다. 세포를 2㎖의 PBF/10E7 세포로 1회 세척하였다. 세척 후, 세포를 1E08 세포/500㎕의 PBF에서 재현탁시켰고, 따로 챙겨두었다. MACS(등록상표) MS 컬럼(밀테니(Milteni))을 마그네틱 스탠드(밀테니(Milteni)) 상에서 500㎖의 PBF로 사전 세정하였다. 세포 현탁액을 프레-필터를 통해 컬럼에 적용하였고, 미결합 분획을 수집하였다. 컬럼을 1.5㎖의 PBF 완충제로 세척하였다. 마그네틱 스탠드로부터 컬럼을 제거하였고, 깨끗한 멸균 5㎖ 폴리프로필렌 팔콘(Falcon) 튜브에 넣었다. 1㎖의 PBF 완충제를 컬럼 상단에 첨가하였고, 양성의 선별 세포를 수집하였다. 양성 및 음성 세포 분획의 수율 및 생존률을 트립판 블루 염색에 의해 결정하였다. 포지티브 선별로 출발 세포 농도의 평균 1%를 수득하였다.
파일럿 세포 스크린을 확립하여 배양물에 대한 씨딩 수준(seeding level)의 정보를 제공하였다. 10, 25, 50, 100 또는 200 풍부화된 B 세포/웰에서 플레이트를 씨딩하였다. 추가로, 각 웰은 방사선 조사된 EL-4.B5 세포(5,000 Rad)의 50K 세포/웰 및 적절한 수준의 활성화된 토끼 T 세포 상청액을(미국특허 공개 제20070269868호를 참조)(제제에 따라서 1 내지 5% 범위) 250㎕/웰의 최종 부피로 고글루코스 변형 RPMI 배지에서 함유하였다. 배양물을 4% CO2 중의 37℃에서 5 내지 7일 동안 인큐베이션시켰다.
선별적 항체 스크리닝 B 세포의 확인
5 내지 7일 사이에 항원 인식 및 기능적 활성에 대해 배양물을 시험하였다.
항원 인식 스크리닝
B 세포 배양물(BCC) 웰로부터의 상청액의 50㎕가 항체 공급원으로서 사용되는 것을 제외하고, 사용한 ELISA 포맷은 상기 기재한 바와 같다. 조건화된 배지를 항원-코팅 플레이트에 옮겼다. 포지티브 웰을 확인한 후, 상청액을 제거하였고, 96-웰 마스터 플레이트(들)에 옮겼다. 본래의 배양 플레이트를 그 다음에 40 ㎕/웰을 제외한 모든 상청액을 제거하고, FBS 중의 16% DMSO의 60 ㎕/웰을 첨가함으로써 냉동시켰다. 플레이트를 페이퍼 타월로 싸서 -70℃에서 10% DMSO의 첨가 후 동결 및 냉동시켰다.
기능성 활성 스크리닝
NGF-의존적 세포 증식을 차단하는 NGF 항체의 능력에 대한 시험을 위해, 본 발명자들은 TF-1 세포를 사용하였다(Chevalier et al. Expression and functionality of the trkA proto-oncogene product/NGF receptor in undifferentiated hematopoietic cells. Blood (1994) vol. 83 (6) pp. 1479-85). 간략하게, TF-1 세포를 rhuGM-CSF로 보충한 10%FBS cRPMI 배지("완전 배지")에서 유지하였다. 분석일에, 항체를 둥근 바닥 96웰 플레이트 내 경쟁 배지에서 단계 희석시켰다. B-NGF(알앤디 시스템즈(R&D systems))를 동시에 첨가하였고, 얻어진 항체/B-NGF 혼합물을 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. Ab와 B-NGF 혼합물을 인큐베이션시키는 동안, TF-1 세포를 완전 배지로 3x 세척시켰고, 계측하였으며, 50㎕ 부피로 웰 당 25,000개 세포를 사용하여 편평 바닥 96웰 플레이트에서 플레이팅하였다. 1시간 인큐베이션 후, NGF-항체 혼합물을 세포 상에 첨가하였고, 플레이트를 습한 5% CO2 인큐베이터 내 37℃에서 48시간 동안 인큐베이션시켰다. 제조업자의 설명서에 따라 "셀타이터(CellTiter)" 수용액 세포증식 분석(프로메가(Promega))을 사용하여 세포 증식을 측정하였다. 항체 농도에서 신호의 의존도를 분석하였고, IC50 값을 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 프로그램을 사용하여 계산하였다.
B 세포 회수
관심의 웰을 함유하는 플레이트는 -70℃로부터 제거하였고, 각 웰로부터 세포를 배지/웰의 5 내지 200㎕ 세척으로 회수하였다. 세척물을 1.5㎖ 멸균 원심분리 튜브에 풀링시켰고, 세포를 1500rpm에서 2분 동안 펠렛화하였다.
튜브를 뒤집었고, 회전을 반복하였으며, 상청액을 조심스럽게 제거하였다. 세포를 100 ㎕/튜브 배지 내에서 재현탁시켰다. 배지 내에서 1:100으로 희석된 100㎕ 비오틴화된 NGF 코팅 스트렙타비딘 M280 다이나비드(dynabead)(인비트로젠(Invitrogen)) 및 16㎕의 염소 항-토끼 H&L IgG-FITC를 세포 현탁액에 첨가하였다.
20㎕의 세포/비드/FITC 현탁액을 제거하였고, 5㎕ 점적(droplet)을 35 내지 40 점적/슬라이드의 시그마코트(Sigmacote)(시그마(Sigma))로 사전 처리한 유리 슬라이드(코닝(Corning)) 상에서 제조하였다. 점적을 잠기게 하기 위해 파라핀 오일(JT 베이커(JT Baker))의 불침투성 장벽을 첨가하였고, 슬라이드를 37℃로 90분 동안 암실 내 4% CO2에서 인큐베이션시켰다.
항체를 생성하는 특이적 B 세포는 항체 분비에 기인하는 그 주위의 형광 고리, 비드-결합 비오틴화된 항원의 인식 및 형광-IgG 검출 시약에 의한 이후의 검출에 의해 확인할 수 있다. 일단 관심의 세포가 확인되면, 형광 고리 중심의 세포를 미세조작기(에펜도르프(Eppendorf))를 통해 회수하였다. 항체를 합성하고 노출시키는 단일 세포를 250㎕ 마이크로원심분리기 튜브에 옮겼고, 드라이아이스에 두었다. 관심의 모든 세포를 회수한 후, 장기간 저장을 위해 이들을 -70℃로 옮겼다.
항원-특이적 B 세포로부터 항체 서열의 단리
항체 서열을 단일 단리시킨 B-세포 또는 클론의 B 세포 집단으로부터 단리시킨 항원 특이적 B-세포로부터 조합 RT-PCR 기반 방법을 사용하여 회수하였다. 토끼 면역글로뷸린 서열과 같은 면역글로뷸린 유전자(중 및 경)의 보존 및 불변 영역에서 어닐링을 위해 프라이머를 설계하고, 2-단계 내포(nested) PCR 회수 단계를 사용하여 항체 서열을 얻는다. 각 웰로부터의 앰플리콘을 회수 및 크기의 완전함에 대해 분석한다. 그 다음에 얻어진 단편을 서열 클론성을 지문 채취하기 위해 AluI로 분해시킨다. 동일한 서열은 그의 전기 이동 분석에서 보통의 분열 패턴을 나타낸다. 본래 중쇄 및 경쇄 앰플리콘 단편은 그 다음에 HindIII와 XhoI 또는 HindIII와 BsiwI로 제한 효소 분해되어 클로닝을 위한 DNA의 각 조각을 제조한다. 그 다음에 얻어진 분해물을 발현 벡터에 결찰시키고, 플라스미드 전파 및 생성을 위해 박테리아 내로 형질전환시킨다. 서열 특성규명을 위해 콜로니를 선택한다.
원하는 항원 특이성 및/또는 기능성 특성의 단클론성 항체의 재조합체 생성
단일 단클론성 항체를 함유하는 각 웰에 대해 정확한 전장 항체 서열을 확립하였고, 퀴아젠(Qiagen) 고체상 방법을 사용하여 미니프렙 DNA를 제조한다. 그 다음에 이 DNA를 포유류 세포를 형질감염시키기 위해 사용하여 재조합 전장 항체를 생성한다. 항체 함유 상청액 또는 단백질-A 친화성 정제 항체 중 하나를 항원 인식에 대해 시험하고, 본래의 특징을 확인하기 위한 기능성 특성을 재조합 항체 단백질에서 발견한다.
항원 특이적 ELISA
인간 NGF, 항체- 및 Fab-함유 용액에 결합된 항체 및 Fab 단편을 확인하고, 특성규명하기 위하여 ELISA에 의해 시험하였다. 간략하게, 뉴트라비딘 코팅 플레이트(서모 사이언티픽(Thermo Scientific))를 ELISA 완충제(0.1㎎/㎖ BSA, 1xPBS pH 7.4, 0.002% 트윈(Tween) 20 및 0.005% 아자이드화나트륨)로 실온에서 1시간 동안 차단시켰다. 그 다음에 플레이트를 ELISA 완충제 중의 1 ㎎/㎖ 비오틴화된 B-NGF 용액으로 실온에서 1시간 동안 코팅시켰다. 이 다음에 세척 단계(3x, PBS + 0.05% 트윈(Tween) 20을 사용)가 있으며, ELISA 완충제로 두 번째 차단을 하였다. 재조합 항체 또는 Fab를 그 다음에 플레이트 상에 첨가하였고, 실온에서 1시간 동안 인큐베이션시킨 다음, PBS/트윈(Tween) 용액으로 3x 세척하였다. 진행을 위해, 항-인간 Fc-HRP 또는 항-인간 Fab-단편 HRP(ELISA 완충제 중의 1:5000 희석)을 웰에 첨가하였고, 실온에서 45분 동안 인큐베이션시켰다. PBS/트윈(Tween) 용액으로 3x 세척 단계 후, 3분 동안 TMB 기질을 사용하여 플레이트를 진행시켰고, 0.5M HCl을 사용하여 중단시켰으며, 450㎚에서 판독하였다.
결과: 도 24 내지 도 40은 항-NGF 항체 Ab1 내지 Ab21가 NGF에 결합된다는 것을 보여준다. 더 나아가, 도 28 및 도 29는 Fab 항체 단편 Fab1 및 Fab2가 NGF에 결합된다는 것을 보여준다.
기능성 활성 스크리닝
NGF-의존적 및 TrkA 수용체-매개 세포 증식 활성을 차단하는 NGF 항체의 능력을 시험하기 위하여, 본 발명자들은 TF-1 세포를 사용하였다(Chevalier et al. Expression and functionality of the trkA proto-oncogene product/NGF receptor in undifferentiated hematopoietic cells. Blood (1994) vol. 83 (6) pp. 1479-85). 간략하게, TF-1 세포를 rhuGM-CSF로 보충한 10%FBS cRPMI 배지("완전 배지") 내에서 유지하였다. 분석일에, 항체를 둥근 바닥 96웰 플레이트 내 완전 배지에서 단계 희석시켰다. B-NGF(알앤디 시스템즈(R&D systems))를 동시에 첨가하였고, 얻어진 항체/B-NGF 혼합물을 37℃에서 1시간 동안 인큐베이션시켰다. Ab와 B-NGF 혼합물을 인큐베이션시키는 동안, TF-1 세포를 완전 배지와 함께 3x 세척하였고, 계측하였으며, 50㎕ 부피로 웰 당 25,000개 세포를 사용하여 편평 바닥 96웰 플레이트에서 플레이팅시켰다. 1시간 인큐베이션 후, NGF-항체 혼합물을 세포에 첨가하였고, 플레이트를 습한 5% CO2 인큐베이터 내 37℃에서 48시간 동안 인큐베이션시켰다. 제조업자의 설명서에 따라 "셀타이터(CellTiter)" 수성 용액 세포 증식 분석(프로메가(Promega))를 사용하여 세포 증식을 측정하였다. 항체 농도 상에서 신호의 의존도를 분석하였고, 그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 프로그램을 사용하여 IC50 값을 계산하였다.
결과: 도 41-52는 항-NGF 항체 Ab1 내지 Ab20이 TF-1 세포 증식을 억제한다는 것을 보여준다. 더 나아가, 도 44는 Fab 항체 단편이 또한 TF-1 세포의 증식을 억제한다는 것을 입증한다. 이들 Fab 항체 단편은 1) Fab2의 피키아 파스토리스 발현; 및 2) 피키아 파스토리스에서 생성된 Ab21의 효소적 분해(Fab1)에 의해 생성되었다.
실시예 2: Fab 단편의 효소적 생성
제조업자 설명사에 따라 고정 파파인을 사용하여 파파인(Thermo/Pierce) 분해를 수행하였다. 간략하게, 정제된 항체를 고정 파파인과 함께 시스테인/HCl-함유 완충제 중에서 가벼운 로킹(rocking)에 의해 37℃에서 인큐베이션시켰다. 알리쿼트를 취하고, 중쇄 절단을 위해 SDS-PAGE를 사용하여 분석함으로써 분해를 모니터링하였다. 반응을 중단시키기 위해, 고정 파파인을 최대한 오래 가게 하였고, 50mM 트리스(Tris) pH 7.5를 사용하여 세척시켰으며, 여과시켰다. 미분해 전장 항체 및 Fc 단편을 맵실렉트슈어(MabSelectSure)(GE) 컬럼을 사용하여 제거하였다.
실시예 3 효모 세포 발현
항체 유전자: 키메라 인간화된 토끼 단클론성 항체의 합성과 관련된 유전자를 클로닝하고 구성하였다.
방법
중쇄 및 경쇄 항체에 대한 피키아 파스토리스 발현 벡터의 구성
경쇄 및 중쇄 단편(키메라 또는 인간화됨)을 상업적으로 합성하였고, pGAP 발현 벡터 내로 서브클로닝시켰다. pGAP 발현 벡터는 노출을 위한 면역글로뷸린 쇄 및 인간 혈청 알부민(HAS) 리더 서열의 발현을 구동시키는 GAP 프로모터를 사용한다. 추가로, 이 벡터는 보통의 구성요소, 예컨대 박테리아의 복제원점과 같은 보통의 구성요소 및 항생제 제오신(Zeocin)(상표명)(플레오마이신)에 저항성을 부여하는 Sh ble 유전자의 복제물을 함유한다. 제오신(Zeocin)(상표명)은 그의 게놈 내로 원하는 발현 벡터를 함유하는 균주의 선별 수단을 제공한다.
피키아 파스토리스의 반수체 met1 및 lys3 숙주 균주로 발현 벡터의 형질전환
반수체 피키아 파스토리스 균주의 형질전환 및 피키아 파스토리스 성주기의 조작에 사용되는 모든 방법을 피키아 프로토콜에 기재된 바와 같이 행하였다(Methods in Molecular Biology Higgings, DR, and Cregg, JM, Eds. 1998. Humana Press, Totowa, NJ). 각 벡터의 형질전환 전에 GAP 프로모터 서열 내에서 선형화시켜 피키아 파스토리스 게놈의 GAP 프로모터 좌위 내로 벡터의 통합을 지시하였다. 전기천공법을 사용하여 반수체 균주를 형질감염시켰고, 성공적인 형질전환체를 YPD 제오신(Zeocin)(상표명) 플레이트 상에서 선별한 다음, 2일 동안 96-웰 플레이트에서 배양시켰다. 반수체 균주를 교배시키고, 영양요구체 마커(즉, Lys 및 Met)가 없을 때 그의 성장 능력에 대해 선별하였다. 그 다음에 발현을 모니터링하는 단백질 A 바이오센서에 적합한 포트바이오 옥텟 시스템(ForteBio Octet system)을 사용하여 이배체 균주를 전장 또는 Fab 항체 단편 중 하나를 발현시키는 그의 능력에 대해 선별하였다
실시예 4 피키아 파스토리스 내 Ab21 및 Fab2 의 발현
전장 Ab21 또는 Fab2 항체 단편 중 하나의 발현을 위한 2가지 피키아 균주를 만들었다. 전장 또는 Fab 발현 균주 둘 다에 대해, 반수체 균주를 만들었고, 이후에 교배시켰다. 하나의 반수체 균주는 Ab21에 대해 전장 경 서열을 발현시켰고, 다른 반수체 균주는 전장 Ab21 또는 절단된 형태의 중쇄 중 하나를 발현시켜 Fab 단편(예를 들어, Fab2)을 발현시켰다. 각각의 이배체 균주를 사용하여 연구 세포 은행을 만들었고, 바이오리액터에서 발현을 위해 사용하였다.
우선, 접종물을 다음의 영양소(%w/v)를 포함하는 배지를 사용하는 연구 세포 은행을 사용하여 확장시켰다: 효모 추출물 3%, 무수 덱스트로스 4%, YNB 1.34%, 0.004% 바이오틴과 함께 100mM 인산칼륨. 배양물을 30℃ 및 300rpm으로 진탕 인큐베이터에서 대략 24시간 동안 확장시켜 발효기에 대한 접종물을 만들었다. 그 다음에 10% 접종물을 멸균 성장 배지를 함유하는 랩포스(Labfors) 2.5ℓ 작업 부피 용기에 첨가하였다. 전장 Ab21에 대한 성장 배지는 다음의 영양소로 구성되었다: 황산칼륨 18.2 g/ℓ, 인산암모늄 1염기성 36.4 g/ℓ, 인산칼륨 2염기성 12.8 g/ℓ, 황산마그네슘 7수화물 3.72 g/ℓ, 시트르산나트륨 2수화물 10 g/ℓ, 글라이세롤 40 g/ℓ, 효모 추출물 30 g/ℓ, PTM1 미량 금속 4.35 ㎖/ℓ 및 거품억제제(antiform) 204 1.67 ㎖/ℓ. PTM1 미량 금속 용액은 다음의 성분으로 구성되었다: 황산구리 5수화물 6 g/ℓ, 요오드화나트륨 0.08 g/ℓ, 황산망간 수화물 3 g/ℓ, 몰리브덴산나트륨 2수화물 0.2 g/ℓ, 붕산 0.02 g/ℓ, 염화코발트 0.5 g/ℓ, 염화아연 20 g/ℓ, 황산제일철 7수화물 65 g/ℓ, 바이오틴 0.2 g/ℓ, 및 황산 5 ㎖/ℓ.
Fab2 단편을 위한 성장 배지는 다음의 영양소로 구성된다: 황산칼륨 10.92 g/ℓ, 암모늄 포스페이트 1염기성 21.84 g/ℓ, 인산칼륨 2염기성 7.68 g/ℓ, 황산마그네슘 7수화물 3.72 g/ℓ, 시트르산나트륨 2수화물 10 g/ℓ, 글라이세롤 40 g/ℓ, 효모 추출물 30 g/ℓ, PTM1 미량 금속 용액 2.61 ㎖/ℓ 및 거품억제제 204 1.67 ㎖/ℓ. PTM1 미량 금속 용액은 다음의 구성성분으로 구성된다: 황산구리 5수화물 6 g/ℓ, 요오드화나트륨 0.08 g/ℓ, 황산망간 수화물 3 g/ℓ, 몰리브덴산나트륨 2수화물 0.2 g/ℓ, 붕산 0.02 g/ℓ, 염화 코발트 0.5 g/ℓ, 염화아연 20 g/ℓ, 황산제일철 7수화물 65 g/ℓ, 바이오틴 0.2 g/ℓ 및 황산 5 ㎖/ℓ. 단백질은 둘 다 유사한 조건하에서 발현시켰다. 간략하게, 바이오리액터 처리 제어 변수를 다음과 같이 설정하였고: 교반 1000 rpm, 분 당 기류 1.35 표준 리터, 온도 28℃, pH를 수산화암모늄을 사용하여 6으로 조절하였다. 산소 보충은 제공하지 않았다.
초기 글라이세롤이 용해된 산소 스파이크에 의해 나타나는 바와 같이 소모될 때까지 발효 배양물을 대략 12 내지 16시간 동안 성장시켰다. 산소 스파이크를 용해시킨 후 대략 3시간 동안 배양물을 단식시켰다. 이 단식 기간 후, 에탄올의 볼루스 첨가를 반응기에 첨가하여 1% 에탄올에 도달시켰다(w/v). 발효 배양물을 15 내지 30분 동안 평형상태로 유지시켰다. 에탄올 볼루스 후 30분에 공급물 첨가를 개시하였고, 40분 동안 1 ㎖/분의 일정한 속도로 설정한 다음, 나머지 실행에 대해 에탄올 농도를 1%로 유지하면서 공급 펌프를 에탄올 센서에 의해 제어하였다. 공급물은 다음의 구성성분으로 구성되었다: 효모 추출물 50 g/ℓ, 덱스트로스 500 g/ℓ, 황산마그네슘 7수화물 3 g/ℓ, 및 PTM1 미량 금속 12 ㎖/ℓ. 전장 Ab21의 발효를 위해, 시트르산 나트륨 2수화물(0.5g/ℓ)을 또한 공급물에 첨가하였다. 전체 발효 시간은 대략 90시간이었다.
실시예 5 NGF - p75 상호작용의 억제
NGF는 세포 표면 상에서 2개의 수용체: TrkA 및 p75와 상호작용하는 것으로 보고한다. "옥텟(Octet)"을 통한 생물층 간섭법(biolayer interferometry) 분석을 사용하여 NGF-p75 상호작용을 억제하는 항-NGF 항체의 능력을 특성규명하였다. 간략하게, 스트렙타비딘(SA) 센서를 1x 운동역학적 완충제(1xPBS ph7.4, 0.002% 트윈(Tween) 20, 0.005% 아자이드화나트륨 및 0.1㎎/㎖ BSA)에서 사전침윤시켰다. 다시 1x 운동역학적 완충제를 사용하여 기준을 얻은 후, 시험하는 바이오틴화되는 항체의 결합 및 1x 운동역학적 완충제에서 다른 짧은 기준을 얻었다. NGF(1㎎/㎖)를 다음에 로딩한 다음, 센서를 1x 운동역학적 완충제에 옮겼다. 센서 상의 항체에 NGF의 로딩 후, 5 ㎎/㎖로 바이오틴화된 항체의 미표지 용액을 사용하여 NGF의 모든 가능한 부위를 차단시켰다. 대조군으로서, 평행 센서를 이 제2 차단 단계 동안 1x 운동역학적 완충제에 침지시켰다. 그 다음에 센서를 p75(1.2 ㎎/㎖)를 함유하는 용액에 노출시켰다. 그 다음에 항체-고정 NGF가 가용성 p75에 노출되었을 때, 신호 증가를 모니터링함으로써 NGF - p75 상호작용을 차단하는 항체의 능력을 특성규명하였다.
결과: 도 53 및 54는 항-NGF 항체 Ab3, Ab4, Ab15 및 Ab16이 p75에 NGF의 결합을 억제한다는 것을 보여주는 한편, 도 55는 항체 Ab5가 p75에 NGF의 결합을 억제한다는 것을 보여준다.
실시예 6 신경 돌기 PC12 분석
p75 및 TrkA 수용체를 통해 매개된 NGF 신호처리를 차단하는 항-NGF 항체의 능력을 래트 부신수질 세포주, PC12를 사용하여 시험관내에서 측정하였다. PC12 세포는 그 표면 상에서 p75와 TrkA 수용체를 둘 다 발현시킨다(Urdiales et al. Cell cycle phase-specific surface expression of nerve growth factor receptors TrkA and p75(NTR). J Neurosci (1998) vol. 18 (17) pp. 6767-75); (Greene and Tischler. Establishment of a noradrenergic clonal line of rat adrenal pheochromocytoma cells which respond to nerve growth factor. Proc Natl Acad Sci USA (1976) vol. 73 (7) pp. 2424-8). 간략하게, 15% FBS RPMI를 사용하여 배양물 내에서 PC12 세포를 유지하였고, 프라이밍 전 48시간 동안 콜라겐 I-코팅된 플라스크 상에서 성장시켰다. 그 다음에 분화 배지(1% 말 혈청 RPMI) 내 100ng/㎖ NGF에 그들을 노출시킴으로써 72시간 동안 세포를 '프라이밍'시켰다. 분석일에, 세포를 세포 스크레이퍼로 채취하였고, 재현탁시켰으며, 분화 배지 내에서 세정하였고(NGF 없이), 콜라겐 I-코팅한 24-웰 플레이트 상에 플레이팅하였다. 분석에서 NGF의 최종 농도는 100ng/㎖이었다. 시험되는 항체를 PC-12 세포 상에 그것을 첨가하기 전 분화 배지에서 1시간 동안 상이한 몰비(10x 내지 0.1x)로 NGF와 함께 사전 인큐베이션시켰다. 제3일에, 배지를 조심스럽게 제거하였고, 항체-NGF 혼합물로 대체하였다. 제10일에, 현미경 하에 웰을 관찰하였고, 10X 배율 렌즈를 사용하여 대표적인 필드를 수치화하였다.
결과: 도 56-69 및 도 78 및 79는 항-NGF 항체 Ab1-Ab3, Ab5-Ab11, Ab13, Ab15, Ab16 및Ab17-Ab19가 증가된 농도에서 PC-12 신경 돌기 세포의 결과물을 억제한다는 것을 보여준다. 다른 시험 항-NGF 항체와 동일한 항체 농도에서 분석할 때 항체 Ab3, Ab15 및 Ab16은 PC-12 신경 돌기 세포의 결과물의 억제가 유의하게 더 적다는 것을 나타낸다는 것을 알 수 있다. 이 분화는 Ab3, Ab15 및 Ab16, 모두가 TrkA/NGF 상호작용을 억제하며, NGF/p75 상호작용을 억제하지 않는 반면, 남아있는 시험 항체가 TrkA와 p75 둘 다와 NGF의 상호작용을 억제한다는 사실에 기인할 수 있는 것으로 믿어진다.
실시예 7 보행 분석에 의해 평가한 통증의 조절
통증을 조절하는 능력에서 항-NGF 작용제(전장 및 Fab 단편)의 효과를 평가하기 위하여, PGPS(펩티도글라이칸 다당류)-유도 관절염 모델을 사용하였다. 간략하게, 수컷 루이스 래트는 제-17일에 그의 오른쪽 발목에 PGPS 용액으로 주사하였다. 1일 후, 발목을 PGPS 주사에 대한 염증 반응에 대해 평가하였고, 미반응자를 제거하였다. PGPS에 의한 IV 꼬리 정맥 재활성화 전 17일 동안 반응자를 회복시켰다.
재활성화 전 2시간 또는 밤에 전장 항체를 1회 투약하였다. 재활성화 전 2시간에 투여한 제1 용량으로 1일 1회 Fab 단편을 투여하였다. 발의 복측면에 잉크를 적용하고, 종이를 가로지르는 움직임(발자국) 동안 체중 부하를 기록함으로써 보행분석을 수행하였다. 래트의 뒷발을 파란색 잉크에 넣고, 검정색 잉크를 통증이 의심되는 다리의 발 배면에 적용하였다. 래트를 종이에 위치시키고 걷게 하였다. 보행을 다음과 같이 스코어링하였다: 0=정상, 양 발에서 동일한 잉크 염색; 1=약간의 절뚝거림, 분명한 발가락 염색 및 일부 뒤꿈치 염색; 2= 절뚝거림, 발가락에만 염색; 3= 드래깅(dragging)/다리를 들어 나름, 존재하는 발의 배면으로부터 검정색 드래그 마크; 4= 다리를 들어 나름, 통증이 있는 다리로부터 염색 없음.
결과: 도 70은 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab2, Ab6 및 Ab8의 투여 후 보행 분석에 의해 평가한 바와 같이 통계적으로 유의한 통증의 감소를 보여준다.
도 71은 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab6 및 Fab1의 투여 후 보행 분석에 의해 평가한 바와 같이 통계적으로 유의한 통증의 감소를 보여준다.
도 72는 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab3의 투여 후 보행 분석에 의해 평가한 바와 같이 통계적으로 유의한 통증의 감소를 보여준다.
도 73은 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab6 및 항체 Ab21의 투여 후 보행 분석에 의해 평가한 바와 같이 통계적으로 유의한 통증의 감소를 보여준다.
실시예 8 PGPS -유발 관절염의 염증
통증을 평가하기 위해 사용한 PGPS(펩티도글라이칸 다당류) 유발 관절염 모델(실시예 7)은 관련된 염증 반응을 가진다. 염증을 평가하기 위해, 모든 동물은 제0일에 재활성화전 그의 발목에서 캘리퍼 측정을 취하였고, 그 다음에 제1일, 제2일, 제3일 및 제4일에 처치 래트에서 존재하는 항-염증 또는 염증전 효과를 결정하였다.
결과: 도 74는 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab2, Ab6 및 Ab8 각각의 투여 후 염증의 증가를 보여준다.
도 75는 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, Fab1 항체 단편의 투여 후 염증의 유의한 증가가 없음을 보여준다. 대조적으로, 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab6의 투여는 증가된 염증을 야기하였다.
도 76은 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab3의 투여 후 염증의 유의한 증가를 보여준다.
도 77은 또한 대조군에 의해 얻은 결과와 비교할 때, 항체 Ab6 및 항체 Ab21의 투여 후 염증의 증가를 보여준다.
<110> Latham, John A <120> ANTI-NGF COMPOSITIONS AND USE THEREOF <130> 67858.740002 <150> 61/418,832 <151> 2010-12-01 <160> 413 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 111 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 1 Ala Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Arg Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Asp Ala Gly Val Pro Ser Arg Phe Arg Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys 65 70 75 80 Asp Asp Val Gly Thr Tyr Tyr Cys Gln Ser Ala Phe Asp Ser Asp Ser 85 90 95 Thr Glu Asn Thr Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 2 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 2 Ala Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Arg Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Asp Ala Gly Val Pro Ser Arg Phe Arg Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys 65 70 75 80 Asp Asp Val Gly Thr Tyr Tyr Cys Gln Ser Ala Phe Asp Ser Asp Ser 85 90 95 Thr Glu Asn Thr Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 3 <211> 118 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 3 Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Ala 20 25 30 Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Val Ile Thr Ser Ile Gly Ser Thr Val Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Tyr 85 90 95 Asp Asp Tyr Asp Glu Met Thr Tyr Phe Asn Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 4 <211> 448 <212> PRT <213> Synthetic <400> 4 Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Ala 20 25 30 Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Val Ile Thr Ser Ile Gly Ser Thr Val Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Tyr 85 90 95 Asp Asp Tyr Asp Glu Met Thr Tyr Phe Asn Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 5 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 5 Gln Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Ser Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 6 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 6 Gly Ala Ser Asn Leu Asp Ala 1 5 <210> 7 <211> 12 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 7 Gln Ser Ala Phe Asp Ser Asp Ser Thr Glu Asn Thr 1 5 10 <210> 8 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 8 Ser Tyr Ala Met Ser 1 5 <210> 9 <211> 16 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 9 Val Ile Thr Ser Ile Gly Ser Thr Val Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 10 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 10 Gly Tyr Asp Asp Tyr Asp Glu Met Thr Tyr Phe Asn Ile 1 5 10 <210> 11 <211> 111 <212> PRT <213> Synthetic <400> 11 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Asp Ala Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Ser Ala Phe Asp Ser Asp Ser 85 90 95 Thr Glu Asn Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 12 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 12 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Asp Ala Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Ser Ala Phe Asp Ser Asp Ser 85 90 95 Thr Glu Asn Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 13 <211> 121 <212> PRT <213> Synthetic <400> 13 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Val Ile Thr Ser Ile Gly Ser Thr Val Tyr Ala Ser Ser Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Tyr Asp Asp Tyr Asp Glu Met Thr Tyr Phe Asn Ile Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 14 <211> 451 <212> PRT <213> Synthetic <400> 14 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Val Ile Thr Ser Ile Gly Ser Thr Val Tyr Ala Ser Ser Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Tyr Asp Asp Tyr Asp Glu Met Thr Tyr Phe Asn Ile Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 195 200 205 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 225 230 235 240 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 245 250 255 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 260 265 270 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 275 280 285 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr 290 295 300 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 305 310 315 320 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 325 330 335 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 340 345 350 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 355 360 365 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 370 375 380 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 385 390 395 400 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 405 410 415 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 420 425 430 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 435 440 445 Pro Gly Lys 450 <210> 15 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 15 Gln Ala Ser Gln Asn Ile Tyr Ser Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 16 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 16 Gly Ala Ser Asn Leu Asp Ala 1 5 <210> 17 <211> 12 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 17 Gln Ser Ala Phe Asp Ser Asp Ser Thr Glu Asn Thr 1 5 10 <210> 18 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 18 Ser Tyr Ala Met Ser 1 5 <210> 19 <211> 16 <212> PRT <213> Synthetic <400> 19 Val Ile Thr Ser Ile Gly Ser Thr Val Tyr Ala Ser Ser Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 20 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 20 Gly Tyr Asp Asp Tyr Asp Glu Met Thr Tyr Phe Asn Ile 1 5 10 <210> 21 <211> 111 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 21 Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Met Gly Asp 1 5 10 15 Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn Asn 20 25 30 Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Gln 65 70 75 80 Cys Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Asp Tyr Asp Asp Asp 85 90 95 Ala Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 22 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 22 Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Met Gly Asp 1 5 10 15 Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn Asn 20 25 30 Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Arg Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Gln 65 70 75 80 Cys Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Asp Tyr Asp Asp Asp 85 90 95 Ala Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 23 <211> 113 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 23 Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Val 20 25 30 Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly 35 40 45 Ile Thr Trp Ser Ala Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg 50 55 60 Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Gly Gly Gly 85 90 95 Gly Ser Ile Tyr Asp Ile Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 24 <211> 443 <212> PRT <213> Synthetic <400> 24 Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr Val 20 25 30 Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly 35 40 45 Ile Thr Trp Ser Ala Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly Arg 50 55 60 Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Gly Gly Gly 85 90 95 Gly Ser Ile Tyr Asp Ile Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser 115 120 125 Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp 130 135 140 Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr 145 150 155 160 Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln 180 185 190 Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp 195 200 205 Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 210 215 220 Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 225 230 235 240 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 245 250 255 Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 260 265 270 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 275 280 285 Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 290 295 300 Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 305 310 315 320 Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys 325 330 335 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu 340 345 350 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 355 360 365 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 370 375 380 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 385 390 395 400 Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 405 410 415 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 420 425 430 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 <210> 25 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 25 Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn Asn Tyr Leu Ser 1 5 10 <210> 26 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 26 Asp Ala Ser Asn Leu Pro Ser 1 5 <210> 27 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 27 Leu Gly Asp Tyr Asp Asp Asp Ala Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 28 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 28 Ser Tyr Val Met Ile 1 5 <210> 29 <211> 15 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 29 Ile Thr Trp Ser Ala Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 30 <211> 8 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 30 Gly Gly Gly Ser Ile Tyr Asp Ile 1 5 <210> 31 <211> 112 <212> PRT <213> Synthetic <400> 31 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu 65 70 75 80 Gln Pro Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Asp Tyr Asp Asp 85 90 95 Asp Ala Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 32 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 32 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu 65 70 75 80 Gln Pro Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Asp Tyr Asp Asp 85 90 95 Asp Ala Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 33 <211> 115 <212> PRT <213> Synthetic <400> 33 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Val Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile 35 40 45 Gly Ile Thr Trp Ser Ala Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln 65 70 75 80 Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Gly 85 90 95 Gly Gly Gly Ser Ile Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 34 <211> 445 <212> PRT <213> Synthetic <400> 34 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Ser Tyr 20 25 30 Val Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile 35 40 45 Gly Ile Thr Trp Ser Ala Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln 65 70 75 80 Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Gly 85 90 95 Gly Gly Gly Ser Ile Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys 210 215 220 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 225 230 235 240 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 245 250 255 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 260 265 270 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 275 280 285 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 290 295 300 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 305 310 315 320 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 325 330 335 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 340 345 350 Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 355 360 365 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 370 375 380 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 385 390 395 400 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 405 410 415 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 420 425 430 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 35 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 35 Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn Asn Tyr Leu Ser 1 5 10 <210> 36 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 36 Asp Ala Ser Asn Leu Pro Ser 1 5 <210> 37 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 37 Leu Gly Asp Tyr Asp Asp Asp Ala Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 38 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 38 Ser Tyr Val Met Ile 1 5 <210> 39 <211> 15 <212> PRT <213> Synthetic <400> 39 Ile Thr Trp Ser Ala Gly Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 40 <211> 8 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 40 Gly Gly Gly Ser Ile Tyr Asp Ile 1 5 <210> 41 <211> 111 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 41 Ala Tyr Asp Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Glu Val Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Glu Cys 65 70 75 80 Ala Asp Ala Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Phe Thr Val Ser Asp 85 90 95 Ile Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 42 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 42 Ala Tyr Asp Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Glu Val Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Glu Cys 65 70 75 80 Ala Asp Ala Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Phe Thr Val Ser Asp 85 90 95 Ile Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 43 <211> 118 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 43 Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asn Tyr Ala 20 25 30 Val Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Ile Ile Gly Arg Asn Gly Asn Thr Trp Tyr Ala Ser Trp Ala Arg Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Tyr 85 90 95 Gly Arg Ser Val Ala Tyr Tyr Val Phe Asn Ile Trp Gly Pro Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 44 <211> 448 <212> PRT <213> Synthetic <400> 44 Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Asn Tyr Ala 20 25 30 Val Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Ile Ile Gly Arg Asn Gly Asn Thr Trp Tyr Ala Ser Trp Ala Arg Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly Tyr 85 90 95 Gly Arg Ser Val Ala Tyr Tyr Val Phe Asn Ile Trp Gly Pro Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 45 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 45 Gln Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Ser Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 46 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 46 Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser 1 5 <210> 47 <211> 12 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 47 Gln Gln Gly Phe Thr Val Ser Asp Ile Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 48 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 48 Asn Tyr Ala Val Gly 1 5 <210> 49 <211> 16 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 49 Ile Ile Gly Arg Asn Gly Asn Thr Trp Tyr Ala Ser Trp Ala Arg Gly 1 5 10 15 <210> 50 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 50 Gly Tyr Gly Arg Ser Val Ala Tyr Tyr Val Phe Asn Ile 1 5 10 <210> 51 <211> 111 <212> PRT <213> Synthetic <400> 51 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Phe Thr Val Ser Asp 85 90 95 Ile Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 52 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 52 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Phe Thr Val Ser Asp 85 90 95 Ile Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 53 <211> 121 <212> PRT <213> Synthetic <400> 53 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Val Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Ile Ile Gly Arg Asn Gly Asn Thr Trp Tyr Ala Ser Ser Ala Arg 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Tyr Gly Arg Ser Val Ala Tyr Tyr Val Phe Asn Ile Trp Gly 100 105 110 Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 54 <211> 451 <212> PRT <213> Synthetic <400> 54 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Val Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Ile Ile Gly Arg Asn Gly Asn Thr Trp Tyr Ala Ser Ser Ala Arg 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Tyr Gly Arg Ser Val Ala Tyr Tyr Val Phe Asn Ile Trp Gly 100 105 110 Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 195 200 205 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 225 230 235 240 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 245 250 255 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 260 265 270 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 275 280 285 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr 290 295 300 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 305 310 315 320 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 325 330 335 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 340 345 350 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 355 360 365 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 370 375 380 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 385 390 395 400 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 405 410 415 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 420 425 430 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 435 440 445 Pro Gly Lys 450 <210> 55 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 55 Gln Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Ser Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 56 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 56 Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser 1 5 <210> 57 <211> 12 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 57 Gln Gln Gly Phe Thr Val Ser Asp Ile Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 58 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 58 Asn Tyr Ala Val Gly 1 5 <210> 59 <211> 16 <212> PRT <213> Synthetic <400> 59 Ile Ile Gly Arg Asn Gly Asn Thr Trp Tyr Ala Ser Ser Ala Arg Gly 1 5 10 15 <210> 60 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 60 Gly Tyr Gly Arg Ser Val Ala Tyr Tyr Val Phe Asn Ile 1 5 10 <210> 61 <211> 112 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 61 Ala Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Ser Gln Pro Val 1 5 10 15 Gly Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Asn 20 25 30 Leu Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Gly Leu Glu 65 70 75 80 Cys Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Asn Tyr Leu Val Thr 85 90 95 Thr Tyr Gly Val Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 62 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 62 Ala Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Ser Gln Pro Val 1 5 10 15 Gly Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Asn 20 25 30 Leu Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu 35 40 45 Ile Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Gly Leu Glu 65 70 75 80 Cys Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Asn Tyr Leu Val Thr 85 90 95 Thr Tyr Gly Val Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 63 <211> 120 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 63 Gln Glu Gln Leu Lys Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr 1 5 10 15 Pro Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asp Thr Asp Thr Ser Ala Tyr Tyr Ala Ser Trp Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile 65 70 75 80 Thr Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Ser 85 90 95 Tyr Ala Ala Tyr Gly Gly Tyr Pro Ala Thr Phe Asp Pro Trp Gly Pro 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 64 <211> 450 <212> PRT <213> Synthetic <400> 64 Gln Glu Gln Leu Lys Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr 1 5 10 15 Pro Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asp Thr Asp Thr Ser Ala Tyr Tyr Ala Ser Trp Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile 65 70 75 80 Thr Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Ser 85 90 95 Tyr Ala Ala Tyr Gly Gly Tyr Pro Ala Thr Phe Asp Pro Trp Gly Pro 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 65 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 65 Gln Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Asn Leu Leu Ala 1 5 10 <210> 66 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 66 Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 67 <211> 12 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 67 Gln Asn Asn Tyr Leu Val Thr Thr Tyr Gly Val Ala 1 5 10 <210> 68 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 68 Ser Tyr Ala Met Ile 1 5 <210> 69 <211> 16 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 69 Tyr Ile Asp Thr Asp Thr Ser Ala Tyr Tyr Ala Ser Trp Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 70 <211> 14 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 70 Ser Tyr Ala Ala Tyr Gly Gly Tyr Pro Ala Thr Phe Asp Pro 1 5 10 <210> 71 <211> 111 <212> PRT <213> Synthetic <400> 71 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Asn Leu 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Asn Tyr Leu Val Thr Thr 85 90 95 Tyr Gly Val Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 72 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 72 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Asn Leu 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Asn Asn Tyr Leu Val Thr Thr 85 90 95 Tyr Gly Val Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 73 <211> 122 <212> PRT <213> Synthetic <400> 73 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asp Thr Asp Thr Ser Ala Tyr Tyr Ala Ser Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ser Tyr Ala Ala Tyr Gly Gly Tyr Pro Ala Thr Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 74 <211> 452 <212> PRT <213> Synthetic <400> 74 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asp Thr Asp Thr Ser Ala Tyr Tyr Ala Ser Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ser Tyr Ala Ala Tyr Gly Gly Tyr Pro Ala Thr Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 130 135 140 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 145 150 155 160 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn 195 200 205 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser 210 215 220 Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 225 230 235 240 Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 245 250 255 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 260 265 270 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 275 280 285 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr 290 295 300 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 305 310 315 320 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 325 330 335 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 340 345 350 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val 355 360 365 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 370 375 380 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 385 390 395 400 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 405 410 415 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 420 425 430 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 435 440 445 Ser Pro Gly Lys 450 <210> 75 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 75 Gln Ala Ser Glu Asp Ile Tyr Asn Leu Leu Ala 1 5 10 <210> 76 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 76 Ser Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 77 <211> 12 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 77 Gln Asn Asn Tyr Leu Val Thr Thr Tyr Gly Val Ala 1 5 10 <210> 78 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 78 Ser Tyr Ala Met Ile 1 5 <210> 79 <211> 16 <212> PRT <213> Synthetic <400> 79 Tyr Ile Asp Thr Asp Thr Ser Ala Tyr Tyr Ala Ser Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 80 <211> 14 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 80 Ser Tyr Ala Ala Tyr Gly Gly Tyr Pro Ala Thr Phe Asp Pro 1 5 10 <210> 81 <211> 111 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 81 Ala Tyr Asp Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Glu Asn Ile Gly Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Glu Cys 65 70 75 80 Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Asn Ser Glu Asn 85 90 95 Leu Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 82 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 82 Ala Tyr Asp Met Thr Gln Thr Pro Ala Ser Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Glu Asn Ile Gly Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Glu Cys 65 70 75 80 Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Asn Ser Glu Asn 85 90 95 Leu Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 83 <211> 115 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 83 Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Ile Asp Leu Ser Met Tyr Ser 20 25 30 Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly 35 40 45 Trp Ile Ser Tyr Gly Gly Thr Ala Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Glu Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Ile Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Glu Thr 85 90 95 Pro Val Asn Tyr Tyr Leu Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 84 <211> 445 <212> PRT <213> Synthetic <400> 84 Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Ile Asp Leu Ser Met Tyr Ser 20 25 30 Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly 35 40 45 Trp Ile Ser Tyr Gly Gly Thr Ala Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Glu Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Ile Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Glu Thr 85 90 95 Pro Val Asn Tyr Tyr Leu Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys 210 215 220 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 225 230 235 240 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 245 250 255 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 260 265 270 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 275 280 285 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 290 295 300 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 305 310 315 320 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 325 330 335 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 340 345 350 Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 355 360 365 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 370 375 380 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 385 390 395 400 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 405 410 415 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 420 425 430 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 85 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 85 Gln Ala Ser Glu Asn Ile Gly Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 86 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 86 Arg Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 87 <211> 12 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 87 Gln Gln Gly Tyr Asn Ser Glu Asn Leu Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 88 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 88 Met Tyr Ser Met Gly 1 5 <210> 89 <211> 16 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 89 Trp Ile Ser Tyr Gly Gly Thr Ala Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 90 <211> 10 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 90 Glu Thr Pro Val Asn Tyr Tyr Leu Asp Ile 1 5 10 <210> 91 <211> 111 <212> PRT <213> Synthetic <400> 91 Ala Tyr Asp Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Glu Asn Ile Gly Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Asn Ser Glu Asn 85 90 95 Leu Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 92 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 92 Ala Tyr Asp Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Glu Asn Ile Gly Ser Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Asn Ser Glu Asn 85 90 95 Leu Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 93 <211> 118 <212> PRT <213> Synthetic <400> 93 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Met Tyr 20 25 30 Ser Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Tyr Gly Gly Thr Ala Tyr Tyr Ala Ser Ser Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Glu Thr Pro Val Asn Tyr Tyr Leu Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 94 <211> 448 <212> PRT <213> Synthetic <400> 94 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Met Tyr 20 25 30 Ser Met Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile 35 40 45 Gly Trp Ile Ser Tyr Gly Gly Thr Ala Tyr Tyr Ala Ser Ser Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Glu Thr Pro Val Asn Tyr Tyr Leu Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 95 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 95 Gln Ala Ser Glu Asn Ile Gly Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 96 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 96 Arg Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 97 <211> 12 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 97 Gln Gln Gly Tyr Asn Ser Glu Asn Leu Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 98 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 98 Met Tyr Ser Met Gly 1 5 <210> 99 <211> 16 <212> PRT <213> Synthetic <400> 99 Trp Ile Ser Tyr Gly Gly Thr Ala Tyr Tyr Ala Ser Ser Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 100 <211> 10 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 100 Glu Thr Pro Val Asn Tyr Tyr Leu Asp Ile 1 5 10 <210> 101 <211> 109 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 101 Ala Phe Glu Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Glu Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Val Thr Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Ser Ser Arg Phe Lys Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys 65 70 75 80 Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Phe Asn Ser 85 90 95 Ala Gly Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 <210> 102 <211> 215 <212> PRT <213> Synthetic <400> 102 Ala Phe Glu Leu Thr Gln Thr Pro Ser Ser Val Glu Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Val Thr Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Ser Ser Arg Phe Lys Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys 65 70 75 80 Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Phe Asn Ser 85 90 95 Ala Gly Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 103 <211> 120 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 103 Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Gly Tyr Asp 20 25 30 Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly 35 40 45 Leu Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Thr Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Ser Leu 85 90 95 Tyr Ala Gly Pro Asn Ala Gly Ile Gly Pro Phe Asn Ile Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 104 <211> 450 <212> PRT <213> Synthetic <400> 104 Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Gly Tyr Asp 20 25 30 Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly 35 40 45 Leu Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Thr Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Thr 65 70 75 80 Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Ser Leu 85 90 95 Tyr Ala Gly Pro Asn Ala Gly Ile Gly Pro Phe Asn Ile Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 105 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 105 Gln Ala Ser Gln Asn Ile Val Thr Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 106 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 106 Gly Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 107 <211> 10 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 107 Gln Ser Tyr Asp Gly Phe Asn Ser Ala Gly 1 5 10 <210> 108 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 108 Gly Tyr Asp Met Ser 1 5 <210> 109 <211> 16 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 109 Leu Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Thr Trp Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 110 <211> 15 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 110 Ser Leu Tyr Ala Gly Pro Asn Ala Gly Ile Gly Pro Phe Asn Ile 1 5 10 15 <210> 111 <211> 109 <212> PRT <213> Synthetic <400> 111 Ala Phe Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Val Thr Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Phe Asn Ser 85 90 95 Ala Gly Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 112 <211> 215 <212> PRT <213> Synthetic <400> 112 Ala Phe Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Val Thr Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Phe Asn Ser 85 90 95 Ala Gly Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala 100 105 110 Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser 115 120 125 Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu 130 135 140 Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser 145 150 155 160 Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu 165 170 175 Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val 180 185 190 Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys 195 200 205 Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 113 <211> 123 <212> PRT <213> Synthetic <400> 113 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Gly Tyr 20 25 30 Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Leu Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Thr Ser Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ser Leu Tyr Ala Gly Pro Asn Ala Gly Ile Gly Pro Phe Asn Ile 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 114 <211> 453 <212> PRT <213> Synthetic <400> 114 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Gly Tyr 20 25 30 Asp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Leu Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Thr Ser Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Ser Leu Tyr Ala Gly Pro Asn Ala Gly Ile Gly Pro Phe Asn Ile 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 115 120 125 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly 130 135 140 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 145 150 155 160 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 165 170 175 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 180 185 190 Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val 195 200 205 Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys 210 215 220 Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu 225 230 235 240 Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 245 250 255 Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 260 265 270 Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 275 280 285 Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser 290 295 300 Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu 305 310 315 320 Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala 325 330 335 Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 340 345 350 Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln 355 360 365 Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 370 375 380 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 385 390 395 400 Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu 405 410 415 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 420 425 430 Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 435 440 445 Leu Ser Pro Gly Lys 450 <210> 115 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 115 Gln Ala Ser Gln Asn Ile Val Thr Asn Leu Ala 1 5 10 <210> 116 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 116 Gly Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 117 <211> 10 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 117 Gln Ser Tyr Asp Gly Phe Asn Ser Ala Gly 1 5 10 <210> 118 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 118 Gly Tyr Asp Met Ser 1 5 <210> 119 <211> 16 <212> PRT <213> Synthetic <400> 119 Leu Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Thr Tyr Tyr Ala Thr Ser Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 120 <211> 15 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 120 Ser Leu Tyr Ala Gly Pro Asn Ala Gly Ile Gly Pro Phe Asn Ile 1 5 10 15 <210> 121 <211> 112 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 121 Ala Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Ser Ile Ser Cys Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Lys Gly Gly Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val 65 70 75 80 Gln Cys Asp Ala Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Thr Ser 85 90 95 Ser Ser Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 122 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 122 Ala Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Ser Ile Ser Cys Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Lys Gly Gly Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val 65 70 75 80 Gln Cys Asp Ala Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Thr Ser 85 90 95 Ser Ser Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 123 <211> 117 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 123 Gln Ser Val Glu Ala Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Trp 20 25 30 Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Ser Trp Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Asn Val 65 70 75 80 Ile Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly 85 90 95 Ser Pro Asp Val Asp Ile Gly Ile Asp Met Trp Gly Pro Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 124 <211> 447 <212> PRT <213> Synthetic <400> 124 Gln Ser Val Glu Ala Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Trp 20 25 30 Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Ser Trp Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Asn Val 65 70 75 80 Ile Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly 85 90 95 Ser Pro Asp Val Asp Ile Gly Ile Asp Met Trp Gly Pro Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 125 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 125 Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn Asn Tyr Leu Ser 1 5 10 <210> 126 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 126 Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 127 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 127 Ala Gly Gly Tyr Thr Ser Ser Ser Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 128 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 128 Thr Tyr Trp Met Ser 1 5 <210> 129 <211> 17 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 129 Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Ser Trp Ala Lys 1 5 10 15 Gly <210> 130 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 130 Gly Ser Pro Asp Val Asp Ile Gly Ile Asp Met 1 5 10 <210> 131 <211> 112 <212> PRT <213> Synthetic <400> 131 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu 65 70 75 80 Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Thr Ser 85 90 95 Ser Ser Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 132 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 132 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu 65 70 75 80 Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Thr Ser 85 90 95 Ser Ser Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 133 <211> 120 <212> PRT <213> Synthetic <400> 133 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Thr Tyr 20 25 30 Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Ser Ser Ala 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ser Pro Asp Val Asp Ile Gly Ile Asp Met Trp Gly Pro 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 134 <211> 450 <212> PRT <213> Synthetic <400> 134 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Thr Tyr 20 25 30 Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Ser Ser Ala 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ser Pro Asp Val Asp Ile Gly Ile Asp Met Trp Gly Pro 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 135 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 135 Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn Asn Tyr Leu Ser 1 5 10 <210> 136 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 136 Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 137 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 137 Ala Gly Gly Tyr Thr Ser Ser Ser Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 138 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 138 Thr Tyr Trp Met Ser 1 5 <210> 139 <211> 17 <212> PRT <213> Synthetic <400> 139 Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Ser Ser Ala Lys 1 5 10 15 Gly <210> 140 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 140 Gly Ser Pro Asp Val Asp Ile Gly Ile Asp Met 1 5 10 <210> 141 <211> 112 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 141 Ala Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Asp Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val 65 70 75 80 Gln Cys Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Asp Tyr Asp Asp 85 90 95 Asp Thr Asp Asn Gly Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 142 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 142 Ala Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Asp Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Pro Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val 65 70 75 80 Gln Cys Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Asp Tyr Asp Asp 85 90 95 Asp Thr Asp Asn Gly Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 143 <211> 112 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 143 Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Ile Asp Leu Ser Ser Tyr Ala 20 25 30 Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly 35 40 45 Ile Ile Trp Ser Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Thr Trp Ala Lys Gly Arg 50 55 60 Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Gln Ile Thr Ser 65 70 75 80 Pro Thr Thr Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Ala Gly Gly Gly 85 90 95 Ser Ile Tyr Asp Val Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 100 105 110 <210> 144 <211> 442 <212> PRT <213> Synthetic <400> 144 Gln Ser Val Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Ile Asp Leu Ser Ser Tyr Ala 20 25 30 Met Ile Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Gly 35 40 45 Ile Ile Trp Ser Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Thr Trp Ala Lys Gly Arg 50 55 60 Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Gln Ile Thr Ser 65 70 75 80 Pro Thr Thr Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Ala Gly Gly Gly 85 90 95 Ser Ile Tyr Asp Val Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 100 105 110 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 115 120 125 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 130 135 140 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 145 150 155 160 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 165 170 175 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 180 185 190 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 195 200 205 Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 210 215 220 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 225 230 235 240 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 245 250 255 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 260 265 270 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 275 280 285 Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 290 295 300 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 305 310 315 320 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 325 330 335 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 340 345 350 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 355 360 365 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 370 375 380 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 385 390 395 400 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 405 410 415 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 420 425 430 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 <210> 145 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 145 Gln Ser Ser Gln Ser Val Tyr Lys Asn Asn Tyr Leu Ser 1 5 10 <210> 146 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 146 Asp Ala Ser Asn Leu Pro Ser 1 5 <210> 147 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 147 Leu Gly Asp Tyr Asp Asp Asp Thr Asp Asn Gly 1 5 10 <210> 148 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 148 Ser Tyr Ala Met Ile 1 5 <210> 149 <211> 15 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 149 Ile Ile Trp Ser Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Thr Trp Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 150 <211> 8 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 150 Gly Gly Gly Ser Ile Tyr Asp Val 1 5 <210> 151 <211> 112 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 151 Ala Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Thr Ser Glu Pro Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Gly Asn Asp 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Thr Ser Lys Leu Ala Thr Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys 65 70 75 80 Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Val Tyr Ser Tyr Ile Ser 85 90 95 Asp Asp Gly Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 152 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 152 Ala Leu Val Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Thr Ser Glu Pro Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Asn Cys Gln Ala Ser Gln Asn Ile Gly Asn Asp 20 25 30 Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Glu Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ser Thr Ser Lys Leu Ala Thr Gly Val Pro Lys Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Arg Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys 65 70 75 80 Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gly Val Tyr Ser Tyr Ile Ser 85 90 95 Asp Asp Gly Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 153 <211> 120 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 153 Gln Ser Val Glu Glu Phe Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Asn Asn Tyr Ala 20 25 30 Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Ile Ile Gly Ser Ile Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Phe Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Ile 65 70 75 80 Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Ala 85 90 95 Gly Val Thr Val Asp Gly Tyr Gly Tyr Tyr Phe Asn Ile Trp Gly Pro 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 154 <211> 450 <212> PRT <213> Synthetic <400> 154 Gln Ser Val Glu Glu Phe Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Asn Asn Tyr Ala 20 25 30 Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Ile Ile Gly Ser Ile Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Phe Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Lys Ile Ile 65 70 75 80 Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Ala 85 90 95 Gly Val Thr Val Asp Gly Tyr Gly Tyr Tyr Phe Asn Ile Trp Gly Pro 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 155 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 155 Gln Ala Ser Gln Asn Ile Gly Asn Asp Leu Ser 1 5 10 <210> 156 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 156 Ser Thr Ser Lys Leu Ala Thr 1 5 <210> 157 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 157 Leu Gly Val Tyr Ser Tyr Ile Ser Asp Asp Gly Asn Ala 1 5 10 <210> 158 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 158 Asn Tyr Ala Met Thr 1 5 <210> 159 <211> 16 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 159 Ile Ile Gly Ser Ile Gly Thr Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 160 <211> 15 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 160 Asp Ala Gly Val Thr Val Asp Gly Tyr Gly Tyr Tyr Phe Asn Ile 1 5 10 15 <210> 161 <211> 112 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 161 Ala Ile Glu Met Thr Gln Thr Pro Phe Ser Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys 65 70 75 80 Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Thr Ile Ser Asn 85 90 95 Val Asp Asn Asn Val Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 162 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 162 Ala Ile Glu Met Thr Gln Thr Pro Phe Ser Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gln Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Lys Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Leu Glu Cys 65 70 75 80 Asp Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Thr Ile Ser Asn 85 90 95 Val Asp Asn Asn Val Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 163 <211> 115 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 163 Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Gly Ser 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Gly Tyr Asn 20 25 30 Leu Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Phe Ile Ser Tyr Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Thr Leu Thr Ile Thr 65 70 75 80 Asp Leu Gln Pro Ser Asp Thr Gly Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Glu Thr 85 90 95 Ala Asn Thr Tyr Asp Tyr Gly Ile Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser 115 <210> 164 <211> 445 <212> PRT <213> Synthetic <400> 164 Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Gly Ser 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ser Leu Thr Gly Tyr Asn 20 25 30 Leu Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Phe Ile Ser Tyr Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 50 55 60 Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Thr Leu Thr Ile Thr 65 70 75 80 Asp Leu Gln Pro Ser Asp Thr Gly Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Glu Thr 85 90 95 Ala Asn Thr Tyr Asp Tyr Gly Ile Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 115 120 125 Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 130 135 140 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 145 150 155 160 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 165 170 175 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly 180 185 190 Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 195 200 205 Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys 210 215 220 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 225 230 235 240 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 245 250 255 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 260 265 270 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 275 280 285 Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 290 295 300 Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 305 310 315 320 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 325 330 335 Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 340 345 350 Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 355 360 365 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 370 375 380 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 385 390 395 400 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 405 410 415 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 420 425 430 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 165 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 165 Gln Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asn Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 166 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 166 Gly Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 167 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 167 Gln Gln Gly Tyr Thr Ile Ser Asn Val Asp Asn Asn Val 1 5 10 <210> 168 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 168 Gly Tyr Asn Leu Val 1 5 <210> 169 <211> 16 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 169 Phe Ile Ser Tyr Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Ser Trp Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 170 <211> 10 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 170 Glu Thr Ala Asn Thr Tyr Asp Tyr Gly Ile 1 5 10 <210> 171 <211> 112 <212> PRT <213> Synthetic <400> 171 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Thr Ile Ser Asn 85 90 95 Val Asp Asn Asn Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 172 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 172 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Tyr Thr Ile Ser Asn 85 90 95 Val Asp Asn Asn Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 173 <211> 118 <212> PRT <213> Synthetic <400> 173 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Gly Tyr 20 25 30 Asn Leu Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Phe Ile Ser Tyr Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Glu Thr Ala Asn Thr Tyr Asp Tyr Gly Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 174 <211> 448 <212> PRT <213> Synthetic <400> 174 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Gly Tyr 20 25 30 Asn Leu Val Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Phe Ile Ser Tyr Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Glu Thr Ala Asn Thr Tyr Asp Tyr Gly Ile Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 115 120 125 Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly 130 135 140 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 145 150 155 160 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 165 170 175 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 180 185 190 Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser 195 200 205 Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr 210 215 220 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 225 230 235 240 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 245 250 255 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 260 265 270 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 275 280 285 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val 290 295 300 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 305 310 315 320 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 325 330 335 Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 340 345 350 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 355 360 365 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 370 375 380 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 385 390 395 400 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 405 410 415 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 420 425 430 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 175 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 175 Gln Ala Ser Gln Thr Ile Ser Asn Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 176 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 176 Gly Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 177 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 177 Gln Gln Gly Tyr Thr Ile Ser Asn Val Asp Asn Asn Val 1 5 10 <210> 178 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 178 Gly Tyr Asn Leu Val 1 5 <210> 179 <211> 16 <212> PRT <213> Synthetic <400> 179 Phe Ile Ser Tyr Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Ala Ser Ser Ala Lys Gly 1 5 10 15 <210> 180 <211> 10 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 180 Glu Thr Ala Asn Thr Tyr Asp Tyr Gly Ile 1 5 10 <210> 181 <211> 112 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 181 Ala Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Ser Ile Ser Cys Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Lys Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val 65 70 75 80 Gln Cys Asp Ala Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Ser Ser 85 90 95 Ser Ser Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 <210> 182 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 182 Ala Ala Val Leu Thr Gln Thr Pro Ser Pro Val Ser Ala Ala Val Gly 1 5 10 15 Gly Thr Val Ser Ile Ser Cys Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Lys Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Asp Val 65 70 75 80 Gln Cys Asp Ala Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Ser Ser 85 90 95 Ser Ser Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 183 <211> 117 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 183 Gln Ser Val Glu Ala Ser Gly Gly Arg Leu Val Met Pro Gly Gly Ser 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Trp 20 25 30 Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Thr Trp Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Asn Val 65 70 75 80 Ile Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly 85 90 95 Ser Pro Asp Val Glu Ile Ala Ile Asp Met Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 184 <211> 447 <212> PRT <213> Synthetic <400> 184 Gln Ser Val Glu Ala Ser Gly Gly Arg Leu Val Met Pro Gly Gly Ser 1 5 10 15 Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Trp 20 25 30 Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly 35 40 45 Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Thr Trp Ala Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Ser Thr Thr Val Asp Leu Asn Val 65 70 75 80 Ile Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys Ala Arg Gly 85 90 95 Ser Pro Asp Val Glu Ile Ala Ile Asp Met Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190 Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn 195 200 205 Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His 210 215 220 Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 245 250 255 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320 Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 325 330 335 Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 435 440 445 <210> 185 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 185 Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn Asn Tyr Leu Ser 1 5 10 <210> 186 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 186 Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 187 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 187 Ala Gly Gly Tyr Ser Ser Ser Ser Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 188 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 188 Thr Tyr Trp Met Ser 1 5 <210> 189 <211> 17 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 189 Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Thr Trp Ala Lys 1 5 10 15 Gly <210> 190 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 190 Gly Ser Pro Asp Val Glu Ile Ala Ile Asp Met 1 5 10 <210> 191 <211> 112 <212> PRT <213> Synthetic <400> 191 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu 65 70 75 80 Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Thr Ser 85 90 95 Ser Ser Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 192 <211> 218 <212> PRT <213> Synthetic <400> 192 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn 20 25 30 Asn Tyr Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu 35 40 45 Leu Ile Tyr Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu 65 70 75 80 Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Gly Gly Tyr Thr Ser 85 90 95 Ser Ser Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 115 120 125 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 130 135 140 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 145 150 155 160 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 165 170 175 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 180 185 190 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 195 200 205 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 193 <211> 120 <212> PRT <213> Synthetic <400> 193 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Thr Tyr 20 25 30 Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Thr Ser Ala 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ser Pro Asp Val Glu Ile Ala Ile Asp Met Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 194 <211> 450 <212> PRT <213> Synthetic <400> 194 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Thr Tyr 20 25 30 Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Thr Ser Ala 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gly Ser Pro Asp Val Glu Ile Ala Ile Asp Met Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 115 120 125 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 130 135 140 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 145 150 155 160 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 165 170 175 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 180 185 190 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 195 200 205 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 210 215 220 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 225 230 235 240 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 245 250 255 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 260 265 270 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 275 280 285 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg 290 295 300 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 305 310 315 320 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 325 330 335 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 340 345 350 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 355 360 365 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 370 375 380 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 385 390 395 400 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 405 410 415 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 420 425 430 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 435 440 445 Gly Lys 450 <210> 195 <211> 13 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 195 Gln Ser Ser Gln Asn Val Tyr Lys Asn Asn Tyr Leu Ser 1 5 10 <210> 196 <211> 7 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 196 Lys Ala Ser Thr Leu Ala Ser 1 5 <210> 197 <211> 11 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 197 Ala Gly Gly Tyr Thr Ser Ser Ser Asp Asn Ala 1 5 10 <210> 198 <211> 5 <212> PRT <213> Oryctolagus cuniculus <400> 198 Thr Tyr Trp Met Ser 1 5 <210> 199 <211> 17 <212> PRT <213> Synthetic <400> 199 Asp Ile Tyr Phe Ser Asn Glu Glu Thr Asn Tyr Ala Thr Ser Ala Lys 1 5 10 15 Gly <210> 200 <211> 11 <212> PRT <213> Synthetic <400> 200 Gly Ser Pro Asp Val Glu Ile Ala Ile Asp Met 1 5 10 <210> 201 <211> 333 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 201 gcccttgtga tgacccagac tccatcctcc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaattgcc aggccagtca gaacatttac agcaatttag cctggtatca acagagacca 120 gggcagcgtc ccaagctcct gatctatggt gcatccaatc tggatgctgg ggtcccatcg 180 cggttcagag gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcga cctggagtgt 240 gacgatgttg gcacttacta ctgtcaaagt gcttttgata gtgatagtac tgaaaatact 300 ttcggcggag ggaccgaggt ggtggtcaaa cgt 333 <210> 202 <211> 654 <212> DNA <213> Synthetic <400> 202 gcccttgtga tgacccagac tccatcctcc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaattgcc aggccagtca gaacatttac agcaatttag cctggtatca acagagacca 120 gggcagcgtc ccaagctcct gatctatggt gcatccaatc tggatgctgg ggtcccatcg 180 cggttcagag gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcga cctggagtgt 240 gacgatgttg gcacttacta ctgtcaaagt gcttttgata gtgatagtac tgaaaatact 300 ttcggcggag ggaccgaggt ggtggtcaaa cgtacggtag cggccccatc tgtcttcatc 360 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttag 654 <210> 203 <211> 354 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 203 cagtcgctgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggcttctc cctcagtagc tatgcaatga gctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatggat cggagtcatt actagtattg gtagcacagt ctacgcgagc 180 tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240 agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gaggctacga tgactatgat 300 gagatgacct actttaacat ctggggccag gggaccctcg tcaccgtctc gagc 354 <210> 204 <211> 1347 <212> DNA <213> Synthetic <400> 204 cagtcgctgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggcttctc cctcagtagc tatgcaatga gctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatggat cggagtcatt actagtattg gtagcacagt ctacgcgagc 180 tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240 agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gaggctacga tgactatgat 300 gagatgacct actttaacat ctggggccag gggaccctcg tcaccgtctc gagcgcctcc 360 accaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 420 gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 480 tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 540 tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 600 tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agagagttga gcccaaatct 660 tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca 720 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 780 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 840 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta cgccagcacg 900 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 960 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1020 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga ggagatgacc 1080 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1140 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1200 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 1260 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 1320 agcctctccc tgtctccggg taaatga 1347 <210> 205 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 205 caggccagtc agaacattta cagcaattta gcc 33 <210> 206 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 206 ggtgcatcca atctggatgc t 21 <210> 207 <211> 36 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 207 caaagtgctt ttgatagtga tagtactgaa aatact 36 <210> 208 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 208 agctatgcaa tgagc 15 <210> 209 <211> 48 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 209 gtcattacta gtattggtag cacagtctac gcgagctggg cgaaaggc 48 <210> 210 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 210 ggctacgatg actatgatga gatgacctac tttaacatc 39 <210> 211 <211> 333 <212> DNA <213> Synthetic <400> 211 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtca gaacatttac agcaacttag cctggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaagctcct gatctatggt gcatccaatc tggatgctgg agtcccatca 180 aggttctctg gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttacta ctgccaaagt gcttttgata gtgatagtac tgaaaacact 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgt 333 <210> 212 <211> 654 <212> DNA <213> Synthetic <400> 212 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtca gaacatttac agcaacttag cctggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaagctcct gatctatggt gcatccaatc tggatgctgg agtcccatca 180 aggttctctg gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttacta ctgccaaagt gcttttgata gtgatagtac tgaaaacact 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgtacggtag cggccccatc tgtcttcatc 360 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttag 654 <210> 213 <211> 363 <212> DNA <213> Synthetic <400> 213 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt agctatgcaa tgagctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggagtc attactagta ttggtagcac agtctacgcg 180 agcagcgcga aaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac cctgtatctt 240 caaatgaaca gcctgagagc tgaggacact gctgtgtatt actgtgctag aggctacgat 300 gactatgatg agatgaccta ctttaacatc tggggccaag ggaccctcgt caccgtctcg 360 agc 363 <210> 214 <211> 1356 <212> DNA <213> Synthetic <400> 214 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt agctatgcaa tgagctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggagtc attactagta ttggtagcac agtctacgcg 180 agcagcgcga aaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac cctgtatctt 240 caaatgaaca gcctgagagc tgaggacact gctgtgtatt actgtgctag aggctacgat 300 gactatgatg agatgaccta ctttaacatc tggggccaag ggaccctcgt caccgtctcg 360 agcgcctcca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct 420 gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 480 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 540 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggacaa gagagttgag 660 cccaaatctt gtgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagcacctga actcctgggg 720 ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc 780 cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac 900 gccagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc 1020 tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc 1200 gtgctggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg 1260 tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac 1320 acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaatga 1356 <210> 215 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 215 caggccagtc agaacattta cagcaactta gcc 33 <210> 216 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 216 ggtgcatcca atctggatgc t 21 <210> 217 <211> 36 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 217 caaagtgctt ttgatagtga tagtactgaa aacact 36 <210> 218 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 218 agctatgcaa tgagc 15 <210> 219 <211> 48 <212> DNA <213> Synthetic <400> 219 gtcattacta gtattggtag cacagtctac gcgagcagcg cgaaaggc 48 <210> 220 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 220 ggctacgatg actatgatga gatgacctac tttaacatc 39 <210> 221 <211> 336 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 221 gcagccgtgc tgacccagac accatcgccc gtgtctgcag ctatgggaga cacagtcacc 60 atcaagtgcc agtccagtca gagtgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccagggc agcctcccag gctcctgatc tatgatgcat ccaatctgcc atctggggtc 180 ccatcacggt tcagcggcag tggatctggg acacagttca ctctcaccat cagcggcgtg 240 cagtgtgacg atgctgccac ttactactgt ctaggcgatt atgatgatga tgctgataat 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgt 336 <210> 222 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 222 gcagccgtgc tgacccagac accatcgccc gtgtctgcag ctatgggaga cacagtcacc 60 atcaagtgcc agtccagtca gagtgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccagggc agcctcccag gctcctgatc tatgatgcat ccaatctgcc atctggggtc 180 ccatcacggt tcagcggcag tggatctggg acacagttca ctctcaccat cagcggcgtg 240 cagtgtgacg atgctgccac ttactactgt ctaggcgatt atgatgatga tgctgataat 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 223 <211> 339 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 223 cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggattctc cctcagtagc tatgtaatga tctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatacat cggaatcact tggagtgctg gtacatacta cgcgagctgg 180 gcgaaaggcc gattcaccat ctccaaaacc tcgtcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240 agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgccg gaggtggtgg tagtatttat 300 gatatttggg gcccgggcac cctggtcacc gtctcgagc 339 <210> 224 <211> 1332 <212> DNA <213> Synthetic <400> 224 cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggattctc cctcagtagc tatgtaatga tctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatacat cggaatcact tggagtgctg gtacatacta cgcgagctgg 180 gcgaaaggcc gattcaccat ctccaaaacc tcgtcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240 agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgccg gaggtggtgg tagtatttat 300 gatatttggg gcccgggcac cctggtcacc gtctcgagcg cctccaccaa gggcccatcg 360 gtcttccccc tggcaccctc ctccaagagc acctctgggg gcacagcggc cctgggctgc 420 ctggtcaagg actacttccc cgaaccggtg acggtgtcgt ggaactcagg cgccctgacc 480 agcggcgtgc acaccttccc ggctgtccta cagtcctcag gactctactc cctcagcagc 540 gtggtgaccg tgccctccag cagcttgggc acccagacct acatctgcaa cgtgaatcac 600 aagcccagca acaccaaggt ggacaagaga gttgagccca aatcttgtga caaaactcac 660 acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc ctggggggac cgtcagtctt cctcttcccc 720 ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg 780 gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg 840 cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag cagtacgcca gcacgtaccg tgtggtcagc 900 gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc 960 aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg gcagccccga 1020 gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc cgggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc 1080 ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat 1140 gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgc tggactccga cggctccttc 1200 ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca 1260 tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacgc agaagagcct ctccctgtct 1320 ccgggtaaat ga 1332 <210> 225 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 225 cagtccagtc agagtgttta taagaacaac tacttatcc 39 <210> 226 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 226 gatgcatcca atctgccatc t 21 <210> 227 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 227 ctaggcgatt atgatgatga tgctgataat gct 33 <210> 228 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 228 agctatgtaa tgatc 15 <210> 229 <211> 45 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 229 atcacttgga gtgctggtac atactacgcg agctgggcga aaggc 45 <210> 230 <211> 24 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 230 ggtggtggta gtatttatga tatt 24 <210> 231 <211> 336 <212> DNA <213> Synthetic <400> 231 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc agtccagtca gagtgtctat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccaggaa aagcccctaa gctcctgatc tatgatgcat ccaatctgcc atctggagtc 180 ccatcaaggt tcagcggcag tggatctgga acagaattca ctctcaccat cagcagcctg 240 cagcctgatg attttgcaac ttattactgc ctaggcgatt atgatgatga tgctgataat 300 gctttcggcg gaggaaccaa ggtggaaatc aaacgt 336 <210> 232 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 232 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc agtccagtca gagtgtctat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccaggaa aagcccctaa gctcctgatc tatgatgcat ccaatctgcc atctggagtc 180 ccatcaaggt tcagcggcag tggatctgga acagaattca ctctcaccat cagcagcctg 240 cagcctgatg attttgcaac ttattactgc ctaggcgatt atgatgatga tgctgataat 300 gctttcggcg gaggaaccaa ggtggaaatc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 233 <211> 345 <212> DNA <213> Synthetic <400> 233 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt agctatgtaa tgatctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagta catcggaatc acttggagtg ctggtacata ctacgcgagc 180 agtgcgaaag gccgattcac catctccaga gacaattcca agaacaccct gtatcttcaa 240 atgaacagcc tgagagctga ggacactgct gtgtattact gtgctggagg tggtggtagt 300 atctatgata tttggggcca agggaccctc gtcaccgtct cgagc 345 <210> 234 <211> 1338 <212> DNA <213> Synthetic <400> 234 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt agctatgtaa tgatctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagta catcggaatc acttggagtg ctggtacata ctacgcgagc 180 agtgcgaaag gccgattcac catctccaga gacaattcca agaacaccct gtatcttcaa 240 atgaacagcc tgagagctga ggacactgct gtgtattact gtgctggagg tggtggtagt 300 atctatgata tttggggcca agggaccctc gtcaccgtct cgagcgcctc caccaagggc 360 ccatcggtct tccccctggc accctcctcc aagagcacct ctgggggcac agcggccctg 420 ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc 480 ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct gtcctacagt cctcaggact ctactccctc 540 agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc ttgggcaccc agacctacat ctgcaacgtg 600 aatcacaagc ccagcaacac caaggtggac aagagagttg agcccaaatc ttgtgacaaa 660 actcacacat gcccaccgtg cccagcacct gaactcctgg ggggaccgtc agtcttcctc 720 ttccccccaa aacccaagga caccctcatg atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg 780 gtggtggacg tgagccacga agaccctgag gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg 840 gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg gaggagcagt acgccagcac gtaccgtgtg 900 gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag 960 gtctccaaca aagccctccc agcccccatc gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag 1020 ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc ccatcccggg aggagatgac caagaaccag 1080 gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag 1140 agcaatgggc agccggagaa caactacaag accacgcctc ccgtgctgga ctccgacggc 1200 tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc 1260 ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc 1320 ctgtctccgg gtaaatga 1338 <210> 235 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 235 cagtccagtc agaatgttta taagaacaac tacttatcc 39 <210> 236 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 236 aaggcatcca ctctggcatc t 21 <210> 237 <211> 32 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 237 gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat gc 32 <210> 238 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 238 agctatgtaa tgatc 15 <210> 239 <211> 45 <212> DNA <213> Synthetic <400> 239 atcacttgga gtgctggtac atactacgcg agcagtgcga aaggc 45 <210> 240 <211> 24 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 240 ggtggtggta gtatctatga tatt 24 <210> 241 <211> 333 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 241 gcctatgata tgacccagac tccagcctct gtggaggtag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaagtgcc aggccagtca gagcatttac agcaatttag cctggtatca gcagagacca 120 gggcagcctc ccaagctcct gatctatgat gcatccactc tggaatctgg ggtcccatcg 180 cggttcaaag gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcgg cgtggagtgt 240 gccgatgctg cctcttacta ctgtcaacag ggttttactg ttagtgatat tgataatgct 300 ttcggcggag ggaccgaggt ggtggtcaaa cgt 333 <210> 242 <211> 654 <212> DNA <213> Synthetic <400> 242 gcctatgata tgacccagac tccagcctct gtggaggtag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaagtgcc aggccagtca gagcatttac agcaatttag cctggtatca gcagagacca 120 gggcagcctc ccaagctcct gatctatgat gcatccactc tggaatctgg ggtcccatcg 180 cggttcaaag gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcgg cgtggagtgt 240 gccgatgctg cctcttacta ctgtcaacag ggttttactg ttagtgatat tgataatgct 300 ttcggcggag ggaccgaggt ggtggtcaaa cgtacggtag cggccccatc tgtcttcatc 360 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttag 654 <210> 243 <211> 354 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 243 cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggattctc cctcagtaac tatgcagtgg gctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatggat cggaatcatt ggtcgtaatg gtaacacatg gtacgcgagc 180 tgggcaagag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240 agtccgacaa gcgaggacac ggccacatat ttctgtgcca gaggatatgg ccgtagtgtt 300 gcttattacg tctttaacat ctggggccca ggcaccctcg tcaccgtctc gagc 354 <210> 244 <211> 1347 <212> DNA <213> Synthetic <400> 244 cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggattctc cctcagtaac tatgcagtgg gctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatggat cggaatcatt ggtcgtaatg gtaacacatg gtacgcgagc 180 tgggcaagag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240 agtccgacaa gcgaggacac ggccacatat ttctgtgcca gaggatatgg ccgtagtgtt 300 gcttattacg tctttaacat ctggggccca ggcaccctcg tcaccgtctc gagcgcctcc 360 accaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 420 gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 480 tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 540 tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 600 tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agagagttga gcccaaatct 660 tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca 720 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 780 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 840 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta cgccagcacg 900 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 960 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1020 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga ggagatgacc 1080 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1140 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1200 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 1260 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 1320 agcctctccc tgtctccggg taaatga 1347 <210> 245 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 245 caggccagtc agagcattta cagcaattta gcc 33 <210> 246 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 246 gatgcatcca ctctggaatc t 21 <210> 247 <211> 36 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 247 caacagggtt ttactgttag tgatattgat aatgct 36 <210> 248 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 248 aactatgcag tgggc 15 <210> 249 <211> 48 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 249 atcattggtc gtaatggtaa cacatggtac gcgagctggg caagaggc 48 <210> 250 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 250 ggatatggcc gtagtgttgc ttattacgtc tttaacatc 39 <210> 251 <211> 333 <212> DNA <213> Synthetic <400> 251 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtca gagcatttac agcaatcttg cctggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaagctcct gatctatgat gcatccactc tggaatctgg agtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttacta ctgccaacag ggttttactg ttagtgatat tgataatgct 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgt 333 <210> 252 <211> 654 <212> DNA <213> Synthetic <400> 252 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtca gagcatttac agcaatcttg cctggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaagctcct gatctatgat gcatccactc tggaatctgg agtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttacta ctgccaacag ggttttactg ttagtgatat tgataatgct 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgtacggtag cggccccatc tgtcttcatc 360 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttag 654 <210> 253 <211> 363 <212> DNA <213> Synthetic <400> 253 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt aactatgcag tgggctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggaatc attggtcgta atggtaacac atggtacgcg 180 agctctgcaa gaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac cctgtatctt 240 caaatgaaca gcctgagagc tgaggacact gctgtgtatt actgtgctag aggatatggc 300 cgtagtgttg cttattacgt ctttaacatc tggggcccag ggaccctcgt caccgtctcg 360 agc 363 <210> 254 <211> 1356 <212> DNA <213> Synthetic <400> 254 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt aactatgcag tgggctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggaatc attggtcgta atggtaacac atggtacgcg 180 agctctgcaa gaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac cctgtatctt 240 caaatgaaca gcctgagagc tgaggacact gctgtgtatt actgtgctag aggatatggc 300 cgtagtgttg cttattacgt ctttaacatc tggggcccag ggaccctcgt caccgtctcg 360 agcgcctcca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct 420 gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 480 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 540 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggacaa gagagttgag 660 cccaaatctt gtgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagcacctga actcctgggg 720 ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc 780 cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac 900 gccagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc 1020 tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc 1200 gtgctggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg 1260 tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac 1320 acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaatga 1356 <210> 255 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 255 caggccagtc agagcattta cagcaatctt gcc 33 <210> 256 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 256 gatgcatcca ctctggaatc t 21 <210> 257 <211> 36 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 257 caacagggtt ttactgttag tgatattgat aatgct 36 <210> 258 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 258 aactatgcag tgggc 15 <210> 259 <211> 48 <212> DNA <213> Synthetic <400> 259 atcattggtc gtaatggtaa cacatggtac gcgagctctg caagaggc 48 <210> 260 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 260 ggatatggcc gtagtgttgc ttattacgtc tttaacatc 39 <210> 261 <211> 336 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 261 gccgatgttg tgatgaccca gactccagcc tccgtgtctc aacctgtggg aggcacagtc 60 accatcaagt gccaggccag tgaggacatt tataacttat tggcctggta tcagcagaaa 120 ccagggcagc ctcccaagct cctgatctat tctgcatcca ctctggcatc tggggtccca 180 tcgcggttca aaggcagtgg atctgggaca gagtacactc tcaccatcag cggcctggag 240 tgtgccgatg ctgccactta ctactgtcaa aacaattatc ttgttactac ttatggtgtt 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgt 336 <210> 262 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 262 gccgatgttg tgatgaccca gactccagcc tccgtgtctc aacctgtggg aggcacagtc 60 accatcaagt gccaggccag tgaggacatt tataacttat tggcctggta tcagcagaaa 120 ccagggcagc ctcccaagct cctgatctat tctgcatcca ctctggcatc tggggtccca 180 tcgcggttca aaggcagtgg atctgggaca gagtacactc tcaccatcag cggcctggag 240 tgtgccgatg ctgccactta ctactgtcaa aacaattatc ttgttactac ttatggtgtt 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 263 <211> 360 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 263 caggagcagc tgaaggagtc cgggggtcgc ctggtcacgc ctgggacacc cctgacactc 60 acctgtacag tctctggatt ctccctcagt agctatgcaa tgatctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggaata catcggatac attgatactg atactagcgc atactacgcg 180 agctgggtga aaggccgatt caccatctcc agaacctcga ccacggtgga tctcaaaatc 240 actagtccga caaccgagga cacggccacc tatttctgtg ccagatctta tgctgcttat 300 ggtggttatc ctgctacttt tgatccctgg ggcccaggca ccctggtcac cgtctcgagc 360 <210> 264 <211> 1353 <212> DNA <213> Synthetic <400> 264 caggagcagc tgaaggagtc cgggggtcgc ctggtcacgc ctgggacacc cctgacactc 60 acctgtacag tctctggatt ctccctcagt agctatgcaa tgatctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggaata catcggatac attgatactg atactagcgc atactacgcg 180 agctgggtga aaggccgatt caccatctcc agaacctcga ccacggtgga tctcaaaatc 240 actagtccga caaccgagga cacggccacc tatttctgtg ccagatctta tgctgcttat 300 ggtggttatc ctgctacttt tgatccctgg ggcccaggca ccctggtcac cgtctcgagc 360 gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 420 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagccc 660 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 720 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 780 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacgcc 900 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1020 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1320 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 1353 <210> 265 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 265 caggccagtg aggacattta taacttattg gcc 33 <210> 266 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 266 tctgcatcca ctctggcatc t 21 <210> 267 <211> 36 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 267 caaaacaatt atcttgttac tacttatggt gttgct 36 <210> 268 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 268 agctatgcaa tgatc 15 <210> 269 <211> 48 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 269 tacattgata ctgatactag cgcatactac gcgagctggg tgaaaggc 48 <210> 270 <211> 36 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 270 tcttatgctg cttatggtgg ttatcctgct actttt 36 <210> 271 <211> 333 <212> DNA <213> Synthetic <400> 271 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtga ggacatttac aacttattgg cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagtcc ctaagctcct gatctattct gcatccactc tggcatctgg ggtcccatct 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat tacactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaac aactatcttg ttactactta tggtgttgct 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgt 333 <210> 272 <211> 654 <212> DNA <213> Synthetic <400> 272 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtga ggacatttac aacttattgg cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagtcc ctaagctcct gatctattct gcatccactc tggcatctgg ggtcccatct 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat tacactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaac aactatcttg ttactactta tggtgttgct 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgtacggtag cggccccatc tgtcttcatc 360 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttag 654 <210> 273 <211> 366 <212> DNA <213> Synthetic <400> 273 caggtacagc tggtggagtc tggtggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cttctggatt caccttcagt agctatgcaa tgatctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggaata catcggatac attgatactg atactagcgc atactacgca 180 agcagtgtga aaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtacctg 240 caaatgtcta gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgctag atcttatgct 300 gcttatggtg gttatcctgc tacttttgat ccctggggcc aaggtaccct cgtcaccgtc 360 tcgagc 366 <210> 274 <211> 1359 <212> DNA <213> Synthetic <400> 274 caggtacagc tggtggagtc tggtggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cttctggatt caccttcagt agctatgcaa tgatctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggaata catcggatac attgatactg atactagcgc atactacgca 180 agcagtgtga aaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtacctg 240 caaatgtcta gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgctag atcttatgct 300 gcttatggtg gttatcctgc tacttttgat ccctggggcc aaggtaccct cgtcaccgtc 360 tcgagcgcct ccaccaaggg cccatcggtc ttccccctgg caccctcctc caagagcacc 420 tctgggggca cagcggccct gggctgcctg gtcaaggact acttccccga accggtgacg 480 gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag 540 tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc 600 cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt 660 gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg 720 gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg 780 acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 840 aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 900 tacgccagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 960 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 1020 atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg 1080 gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 1140 gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 1200 cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc 1260 aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 1320 tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 1359 <210> 275 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 275 caggccagtg aggacattta caacttattg gcc 33 <210> 276 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 276 tctgcatcca ctctggcatc t 21 <210> 277 <211> 36 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 277 caaaacaact atcttgttac tacttatggt gttgct 36 <210> 278 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 278 agctatgcaa tgatc 15 <210> 279 <211> 48 <212> DNA <213> Synthetic <400> 279 tacattgata ctgatactag cgcatactac gcaagcagtg tgaaaggc 48 <210> 280 <211> 42 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 280 tcttatgctg cttatggtgg ttatcctgct acttttgatc cc 42 <210> 281 <211> 333 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 281 gcctatgata tgacccagac tccagcctcc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaagtgcc aggccagtga gaacattggt agctacttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggcagcctc ccgaactcct gatctacagg gcgtccactc tggcatctgg ggtcccatcg 180 cggttcaaag gcagtggatc tgggacacag ttcactctca ccatcagcgg cgtggagtgt 240 gccgatgctg ccacttacta ctgtcaacag ggttataata gtgagaatct tgataatgct 300 ttcggcggag ggaccgaggt ggtggtcaaa cgt 333 <210> 282 <211> 654 <212> DNA <213> Synthetic <400> 282 gcctatgata tgacccagac tccagcctcc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaagtgcc aggccagtga gaacattggt agctacttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggcagcctc ccgaactcct gatctacagg gcgtccactc tggcatctgg ggtcccatcg 180 cggttcaaag gcagtggatc tgggacacag ttcactctca ccatcagcgg cgtggagtgt 240 gccgatgctg ccacttacta ctgtcaacag ggttataata gtgagaatct tgataatgct 300 ttcggcggag ggaccgaggt ggtggtcaaa cgtacggtag cggccccatc tgtcttcatc 360 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttag 654 <210> 283 <211> 345 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 283 cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggaatcga cctcagtatg tattcaatgg gctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatacat cggatggatt agttatggtg gtactgcata ttacgcgagc 180 tgggcgaagg gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggagct gaagatcacc 240 agtccgacaa tcgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gagagactcc tgttaattat 300 tatttggaca tttggggcca ggggaccctc gtcaccgtct cgagc 345 <210> 284 <211> 1338 <212> DNA <213> Synthetic <400> 284 cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggaatcga cctcagtatg tattcaatgg gctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatacat cggatggatt agttatggtg gtactgcata ttacgcgagc 180 tgggcgaagg gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggagct gaagatcacc 240 agtccgacaa tcgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gagagactcc tgttaattat 300 tatttggaca tttggggcca ggggaccctc gtcaccgtct cgagcgcctc caccaagggc 360 ccatcggtct tccccctggc accctcctcc aagagcacct ctgggggcac agcggccctg 420 ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc 480 ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct gtcctacagt cctcaggact ctactccctc 540 agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc ttgggcaccc agacctacat ctgcaacgtg 600 aatcacaagc ccagcaacac caaggtggac aagagagttg agcccaaatc ttgtgacaaa 660 actcacacat gcccaccgtg cccagcacct gaactcctgg ggggaccgtc agtcttcctc 720 ttccccccaa aacccaagga caccctcatg atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg 780 gtggtggacg tgagccacga agaccctgag gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg 840 gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg gaggagcagt acgccagcac gtaccgtgtg 900 gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag 960 gtctccaaca aagccctccc agcccccatc gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag 1020 ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc ccatcccggg aggagatgac caagaaccag 1080 gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag 1140 agcaatgggc agccggagaa caactacaag accacgcctc ccgtgctgga ctccgacggc 1200 tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc 1260 ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc 1320 ctgtctccgg gtaaatga 1338 <210> 285 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 285 caggccagtg agaacattgg tagctactta gcc 33 <210> 286 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 286 agggcgtcca ctctggcatc t 21 <210> 287 <211> 36 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 287 caacagggtt ataatagtga gaatcttgat aatgct 36 <210> 288 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 288 atgtattcaa tgggc 15 <210> 289 <211> 48 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 289 tggattagtt atggtggtac tgcatattac gcgagctggg cgaagggc 48 <210> 290 <211> 30 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 290 gagactcctg ttaattatta tttggacatt 30 <210> 291 <211> 333 <212> DNA <213> Synthetic <400> 291 gcctatgata tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtga gaacattggt agctacttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagtcc ctaagctcct gatctatagg gcttccactc tggcatctgg ggtcccatct 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaacag ggttacaata gtgagaatct tgataatgct 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgt 333 <210> 292 <211> 654 <212> DNA <213> Synthetic <400> 292 gcctatgata tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtga gaacattggt agctacttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagtcc ctaagctcct gatctatagg gcttccactc tggcatctgg ggtcccatct 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaacag ggttacaata gtgagaatct tgataatgct 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgtacggtag cggccccatc tgtcttcatc 360 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttag 654 <210> 293 <211> 354 <212> DNA <213> Synthetic <400> 293 caggtacagc tggtggagtc tggtggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cttctggatt caccttcagt atgtattcaa tgggctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggaata catcggatgg attagttatg gtggtactgc atactacgct 180 agcagcgcta agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtacctg 240 caaatgtcta gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgctag agagactcct 300 gttaattact acttggacat ttggggccaa ggtaccctcg tcaccgtctc gagc 354 <210> 294 <211> 1347 <212> DNA <213> Synthetic <400> 294 caggtacagc tggtggagtc tggtggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cttctggatt caccttcagt atgtattcaa tgggctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggaata catcggatgg attagttatg gtggtactgc atactacgct 180 agcagcgcta agggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtacctg 240 caaatgtcta gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgctag agagactcct 300 gttaattact acttggacat ttggggccaa ggtaccctcg tcaccgtctc gagcgcctcc 360 accaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 420 gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 480 tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 540 tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 600 tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agagagttga gcccaaatct 660 tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca 720 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 780 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 840 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta cgccagcacg 900 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 960 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1020 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga ggagatgacc 1080 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1140 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1200 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 1260 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 1320 agcctctccc tgtctccggg taaatga 1347 <210> 295 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 295 caggccagtg agaacattgg tagctactta gcc 33 <210> 296 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 296 agggcttcca ctctggcatc t 21 <210> 297 <211> 36 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 297 caacagggtt acaatagtga gaatcttgat aatgct 36 <210> 298 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 298 atgtattcaa tgggc 15 <210> 299 <211> 48 <212> DNA <213> Synthetic <400> 299 tggattagtt atggtggtac tgcatactac gctagcagcg ctaagggc 48 <210> 300 <211> 30 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 300 gagactcctg ttaattacta cttggacatt 30 <210> 301 <211> 327 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 301 gcattcgaat tgacccagac tccatcctcc gtggaggcag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaagtgcc aggccagtca gaacattgtt accaatttag cctggtatca acagaaacca 120 gggcagcctc ccaagctcct gatctatggt gcatccactc tggcatctgg ggtctcatcg 180 cggttcaaag gcagtggatc tgggacacag ttcactctca ccatcagcga cctggagtgt 240 gccgatgctg ccacttattt ctgtcagagc tatgatggtt ttaatagtgc tgggttcggc 300 ggagggaccg aggtggtggt caaacgt 327 <210> 302 <211> 648 <212> DNA <213> Synthetic <400> 302 gcattcgaat tgacccagac tccatcctcc gtggaggcag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaagtgcc aggccagtca gaacattgtt accaatttag cctggtatca acagaaacca 120 gggcagcctc ccaagctcct gatctatggt gcatccactc tggcatctgg ggtctcatcg 180 cggttcaaag gcagtggatc tgggacacag ttcactctca ccatcagcga cctggagtgt 240 gccgatgctg ccacttattt ctgtcagagc tatgatggtt ttaatagtgc tgggttcggc 300 ggagggaccg aggtggtggt caaacgtacg gtagcggccc catctgtctt catcttcccg 360 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 648 <210> 303 <211> 360 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 303 cagtcgctgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagcct ctggattctc cctcagtggc tacgacatga gctgggtccg ccaggctcca 120 ggaaaggggc tggaatacat cggactcatt agttatgatg gtaacacata ctacgcgacc 180 tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240 agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gaagtcttta tgctggtcct 300 aatgctggta tcggaccgtt taacatctgg ggccagggga ccctcgtcac cgtctcgagc 360 <210> 304 <211> 1353 <212> DNA <213> Synthetic <400> 304 cagtcgctgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagcct ctggattctc cctcagtggc tacgacatga gctgggtccg ccaggctcca 120 ggaaaggggc tggaatacat cggactcatt agttatgatg gtaacacata ctacgcgacc 180 tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtggatct gaaaatcacc 240 agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gaagtcttta tgctggtcct 300 aatgctggta tcggaccgtt taacatctgg ggccagggga ccctcgtcac cgtctcgagc 360 gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 420 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagccc 660 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 720 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 780 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacgcc 900 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1020 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1320 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 1353 <210> 305 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 305 caggccagtc agaacattgt taccaattta gcc 33 <210> 306 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 306 ggtgcatcca ctctggcatc t 21 <210> 307 <211> 30 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 307 cagagctatg atggttttaa tagtgctggg 30 <210> 308 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 308 ggctacgaca tgagc 15 <210> 309 <211> 48 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 309 ctcattagtt atgatggtaa cacatactac gcgacctggg cgaaaggc 48 <210> 310 <211> 45 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 310 agtctttatg ctggtcctaa tgctggtatc ggaccgttta acatc 45 <210> 311 <211> 327 <212> DNA <213> Synthetic <400> 311 gcattccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtca gaacattgtt accaacttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagtcc ctaagctcct gatctatggt gcatccactc tggcatctgg ggtcccatct 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcagagc tatgatggtt tcaatagtgc tggtttcggc 300 ggaggaacca aggtggaaat caaacgt 327 <210> 312 <211> 648 <212> DNA <213> Synthetic <400> 312 gcattccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtca gaacattgtt accaacttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagtcc ctaagctcct gatctatggt gcatccactc tggcatctgg ggtcccatct 180 cgtttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcagagc tatgatggtt tcaatagtgc tggtttcggc 300 ggaggaacca aggtggaaat caaacgtacg gtagcggccc catctgtctt catcttcccg 360 ccatctgatg agcagttgaa atctggaact gcctctgttg tgtgcctgct gaataacttc 420 tatcccagag aggccaaagt acagtggaag gtggataacg ccctccaatc gggtaactcc 480 caggagagtg tcacagagca ggacagcaag gacagcacct acagcctcag cagcaccctg 540 acgctgagca aagcagacta cgagaaacac aaagtctacg cctgcgaagt cacccatcag 600 ggcctgagct cgcccgtcac aaagagcttc aacaggggag agtgttag 648 <210> 313 <211> 369 <212> DNA <213> Synthetic <400> 313 caggtacagc tggtggagtc tggtggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cttctggatt ctccctcagt ggctacgaca tgagctgggt ccgtcaggct 120 ccaggcaagg gactggagtg ggtgggactc attagttatg atggtaacac atactacgcg 180 acctccgcga aaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtacctg 240 caaatgtcta gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgctag aagtctttat 300 gctggtccta atgctggtat cggaccgttt aacatctggg gccaaggtac cctcgtcacc 360 gtctcgagc 369 <210> 314 <211> 1362 <212> DNA <213> Synthetic <400> 314 caggtacagc tggtggagtc tggtggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cttctggatt ctccctcagt ggctacgaca tgagctgggt ccgtcaggct 120 ccaggcaagg gactggagtg ggtgggactc attagttatg atggtaacac atactacgcg 180 acctccgcga aaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtacctg 240 caaatgtcta gcctgagagc cgaggacacg gctgtgtatt actgtgctag aagtctttat 300 gctggtccta atgctggtat cggaccgttt aacatctggg gccaaggtac cctcgtcacc 360 gtctcgagcg cctccaccaa gggcccatcg gtcttccccc tggcaccctc ctccaagagc 420 acctctgggg gcacagcggc cctgggctgc ctggtcaagg actacttccc cgaaccggtg 480 acggtgtcgt ggaactcagg cgccctgacc agcggcgtgc acaccttccc ggctgtccta 540 cagtcctcag gactctactc cctcagcagc gtggtgaccg tgccctccag cagcttgggc 600 acccagacct acatctgcaa cgtgaatcac aagcccagca acaccaaggt ggacaagaga 660 gttgagccca aatcttgtga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc 720 ctggggggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc 780 cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag 840 ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 900 cagtacgcca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 960 aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa 1020 accatctcca aagccaaagg gcagccccga gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc 1080 cgggaggaga tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc 1140 agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg 1200 cctcccgtgc tggactccga cggctccttc ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag 1260 agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac 1320 cactacacgc agaagagcct ctccctgtct ccgggtaaat ga 1362 <210> 315 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 315 caggccagtc agaacattgt taccaactta gcc 33 <210> 316 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 316 ggtgcatcca ctctggcatc t 21 <210> 317 <211> 29 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 317 cagagctatg atggtttcaa tagtgctgg 29 <210> 318 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 318 ggctacgaca tgagc 15 <210> 319 <211> 48 <212> DNA <213> Synthetic <400> 319 ctcattagtt atgatggtaa cacatactac gcgacctccg cgaaaggc 48 <210> 320 <211> 45 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 320 agtctttatg ctggtcctaa tgctggtatc ggaccgttta acatc 45 <210> 321 <211> 336 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 321 gccgccgtgc tgacccagac tccatctccc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcagc 60 atcagttgcc agtccagtca gaatgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccagggc agcctcccaa gctcctgatc tacaaggcat ccactctggc atctggggtc 180 ccatcgcggt tcaaaggcgg tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcgacgtg 240 cagtgtgacg ctgctgccac ttactactgt gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgt 336 <210> 322 <211> 656 <212> DNA <213> Synthetic <400> 322 gccgccgtgc tgacccagac tccatctccc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcagc 60 atcagttgcc agtccagtca gaatgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccagggc agcctcccaa gctcctgatc tacaaggcat ccactctggc atctggggtc 180 ccatcgcggt tcaaaggcgg tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcgacgtg 240 cagtgtgacg ctgctgccac ttactactgt gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgtta 656 <210> 323 <211> 351 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 323 cagtcggtgg aggcgtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagcct ctggattctc cctcagtacc tactggatga gctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatggat cggagacatt tattttagta atgaagaaac aaactacgcg 180 agctgggcga aaggccgatt taccatctcc aaaacctcga ccacggtgga tctgaatgtc 240 atcagtccga caaccgagga cacggccacc tatttctgtg ccagaggttc tcctgatgtt 300 gatattggta tagatatgtg gggcccgggc accctcgtca ccgtctcgag c 351 <210> 324 <211> 1344 <212> DNA <213> Synthetic <400> 324 cagtcggtgg aggcgtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagcct ctggattctc cctcagtacc tactggatga gctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatggat cggagacatt tattttagta atgaagaaac aaactacgcg 180 agctgggcga aaggccgatt taccatctcc aaaacctcga ccacggtgga tctgaatgtc 240 atcagtccga caaccgagga cacggccacc tatttctgtg ccagaggttc tcctgatgtt 300 gatattggta tagatatgtg gggcccgggc accctcgtca ccgtctcgag cgcctccacc 360 aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420 gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480 ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540 tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600 aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga gagttgagcc caaatcttgt 660 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc 720 ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 780 tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 840 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacgc cagcacgtac 900 cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 960 tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020 gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggagga gatgaccaag 1080 aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1140 tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200 gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg 1260 aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 1320 ctctccctgt ctccgggtaa atga 1344 <210> 325 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 325 cagtccagtc agaatgttta taagaacaac tacttatcc 39 <210> 326 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 326 aaggcatcca ctctggcatc t 21 <210> 327 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 327 gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat gct 33 <210> 328 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 328 acctactgga tgagc 15 <210> 329 <211> 51 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 329 gacatttatt ttagtaatga agaaacaaac tacgcgagct gggcgaaagg c 51 <210> 330 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 330 ggttctcctg atgttgatat tggtatagat atg 33 <210> 331 <211> 336 <212> DNA <213> Synthetic <400> 331 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc agtccagtca gaatgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccaggga aagtccctaa gctcctgatc tataaggcat ccactctggc atctggggtc 180 ccatctcgtt tcagtggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcagcctg 240 cagcctgaag atgttgcaac ttattactgt gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat 300 gctttcggcg gaggaaccaa ggtggaaatc aaacgt 336 <210> 332 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 332 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc agtccagtca gaatgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccaggga aagtccctaa gctcctgatc tataaggcat ccactctggc atctggggtc 180 ccatctcgtt tcagtggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcagcctg 240 cagcctgaag atgttgcaac ttattactgt gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat 300 gctttcggcg gaggaaccaa ggtggaaatc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 333 <211> 360 <212> DNA <213> Synthetic <400> 333 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt acctactgga tgagctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggagac atttacttta gtaatgaaga aacaaactac 180 gcgagcagcg cgaaaggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa caccctgtat 240 cttcaaatga acagcctgag agctgaggac actgctgtgt attactgtgc tagaggttct 300 cctgatgttg atattggtat agatatgtgg ggcccaggga ccctcgtcac cgtctcgagc 360 <210> 334 <211> 1353 <212> DNA <213> Synthetic <400> 334 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt acctactgga tgagctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggagac atttacttta gtaatgaaga aacaaactac 180 gcgagcagcg cgaaaggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa caccctgtat 240 cttcaaatga acagcctgag agctgaggac actgctgtgt attactgtgc tagaggttct 300 cctgatgttg atattggtat agatatgtgg ggcccaggga ccctcgtcac cgtctcgagc 360 gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 420 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagccc 660 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 720 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 780 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacgcc 900 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1020 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1320 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 1353 <210> 335 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 335 cagtccagtc agaatgttta taagaacaac tacttatcc 39 <210> 336 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 336 aaggcatcca ctctggcatc t 21 <210> 337 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 337 gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat gct 33 <210> 338 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 338 acctactgga tgagc 15 <210> 339 <211> 51 <212> DNA <213> Synthetic <400> 339 gacatttact ttagtaatga agaaacaaac tacgcgagca gcgcgaaagg c 51 <210> 340 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 340 ggttctcctg atgttgatat tggtatagat atg 33 <210> 341 <211> 336 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 341 gcagccgtgc tgacccagac accatcgccc gtgtctgcag ctgtgggaga cacagtcacc 60 atcaagtgcc agtccagtca gagtgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccagggc agcctcccaa gctcctgatc tatgatgcat ccaatctgcc atctggggtc 180 ccatcacggt tcagcggcag tggatctggg acacagttca ctctcaccat cagcggcgtg 240 cagtgtgacg atgctgccac ttactactgt ctaggcgatt atgatgatga tactgataat 300 ggtttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgt 336 <210> 342 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 342 gcagccgtgc tgacccagac accatcgccc gtgtctgcag ctgtgggaga cacagtcacc 60 atcaagtgcc agtccagtca gagtgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccagggc agcctcccaa gctcctgatc tatgatgcat ccaatctgcc atctggggtc 180 ccatcacggt tcagcggcag tggatctggg acacagttca ctctcaccat cagcggcgtg 240 cagtgtgacg atgctgccac ttactactgt ctaggcgatt atgatgatga tactgataat 300 ggtttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 343 <211> 336 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 343 cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggaatcga cctcagtagc tatgcaatga tctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatacat cggaatcatt tggagtggtg gcacctacta cgcgacctgg 180 gcgaaaggcc gattcaccat ctccaaaacc tcgaccacgg tggatctgca aatcaccagt 240 ccgacaaccg aggacgcggc cacctatttc tgtgccgcag gtggtggtag tatttatgat 300 gtttggggcc cgggcaccct ggtcaccgtc tcgagc 336 <210> 344 <211> 1329 <212> DNA <213> Synthetic <400> 344 cagtcggtgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcacagtct ctggaatcga cctcagtagc tatgcaatga tctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatacat cggaatcatt tggagtggtg gcacctacta cgcgacctgg 180 gcgaaaggcc gattcaccat ctccaaaacc tcgaccacgg tggatctgca aatcaccagt 240 ccgacaaccg aggacgcggc cacctatttc tgtgccgcag gtggtggtag tatttatgat 300 gtttggggcc cgggcaccct ggtcaccgtc tcgagcgcct ccaccaaggg cccatcggtc 360 ttccccctgg caccctcctc caagagcacc tctgggggca cagcggccct gggctgcctg 420 gtcaaggact acttccccga accggtgacg gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc 480 ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg 540 gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag 600 cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca 660 tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca 720 aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac 780 gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat 840 aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag tacgccagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc 900 ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac 960 aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa 1020 ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg 1080 acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg 1140 cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc 1200 ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc 1260 tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg 1320 ggtaaatga 1329 <210> 345 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 345 cagtccagtc agagtgttta taagaacaac tacttatcc 39 <210> 346 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 346 gatgcatcca atctgccatc t 21 <210> 347 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 347 ctaggcgatt atgatgatga tactgataat ggt 33 <210> 348 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 348 agctatgcaa tgatc 15 <210> 349 <211> 45 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 349 atcatttgga gtggtggcac ctactacgcg acctgggcga aaggc 45 <210> 350 <211> 24 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 350 ggtggtggta gtatttatga tgtt 24 <210> 351 <211> 336 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 351 gccctggtga tgacccagac tccatcctcc acgtctgaac cagtgggagg cacagtcacc 60 atcaattgcc aggctagtca gaatattggt aacgacctat cctggtatca gcagaaacca 120 gggcagcctc ccgagctcct aatctattct acatccaaac tggcaactgg ggtcccaaag 180 cggttcagtg gcagcagatc tgggacacag ttcactctca ccatcagcga cctggagtgt 240 gacgatgctg ccacttacta ctgtctaggt gtttatagtt atattagtga tgatggtaat 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgt 336 <210> 352 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 352 gccctggtga tgacccagac tccatcctcc acgtctgaac cagtgggagg cacagtcacc 60 atcaattgcc aggctagtca gaatattggt aacgacctat cctggtatca gcagaaacca 120 gggcagcctc ccgagctcct aatctattct acatccaaac tggcaactgg ggtcccaaag 180 cggttcagtg gcagcagatc tgggacacag ttcactctca ccatcagcga cctggagtgt 240 gacgatgctg ccacttacta ctgtctaggt gtttatagtt atattagtga tgatggtaat 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 353 <211> 360 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 353 cagtcggtgg aggagttcgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcaccgtct ctggattctc cctcaataac tatgcaatga cctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggagtggat cgggatcatt ggtagtattg gtaccacata ctacgcgagc 180 tgggcgaaag gccgattctt catctccaaa acctcgacca ctgtggatct gaaaatcatt 240 agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gagatgctgg cgttactgtt 300 gatggttatg gctactactt taacatctgg ggcccaggca ccctcgtcac cgtctcgagc 360 <210> 354 <211> 1353 <212> DNA <213> Synthetic <400> 354 cagtcggtgg aggagttcgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggacacccct gacactcacc 60 tgcaccgtct ctggattctc cctcaataac tatgcaatga cctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggagtggat cgggatcatt ggtagtattg gtaccacata ctacgcgagc 180 tgggcgaaag gccgattctt catctccaaa acctcgacca ctgtggatct gaaaatcatt 240 agtccgacaa ccgaggacac ggccacctat ttctgtgcca gagatgctgg cgttactgtt 300 gatggttatg gctactactt taacatctgg ggcccaggca ccctcgtcac cgtctcgagc 360 gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 420 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagccc 660 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 720 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 780 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacgcc 900 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1020 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1320 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 1353 <210> 355 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 355 caggctagtc agaatattgg taacgaccta tcc 33 <210> 356 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 356 tctacatcca aactggcaac t 21 <210> 357 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 357 ctaggtgttt atagttatat tagtgatgat ggtaatgct 39 <210> 358 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 358 aactatgcaa tgacc 15 <210> 359 <211> 48 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 359 atcattggta gtattggtac cacatactac gcgagctggg cgaaaggc 48 <210> 360 <211> 45 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 360 gatgctggcg ttactgttga tggttatggc tactacttta acatc 45 <210> 361 <211> 336 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 361 gccatcgaaa tgacccagac tccattctcc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaagtgcc aggccagtca gaccattagc aactacttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggcagcctc ccaagctcct gatctatggt gcatccaatc tggaatctgg ggtcccatcg 180 cggttcaaag gcagtggatc tgggacacag ttcactctca ccatcagcga cctggagtgt 240 gacgatgctg ccacttacta ctgtcaacag ggttatacta tcagtaatgt tgataacaat 300 gttttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgt 336 <210> 362 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 362 gccatcgaaa tgacccagac tccattctcc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcacc 60 atcaagtgcc aggccagtca gaccattagc aactacttag cctggtatca gcagaaacca 120 gggcagcctc ccaagctcct gatctatggt gcatccaatc tggaatctgg ggtcccatcg 180 cggttcaaag gcagtggatc tgggacacag ttcactctca ccatcagcga cctggagtgt 240 gacgatgctg ccacttacta ctgtcaacag ggttatacta tcagtaatgt tgataacaat 300 gttttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 363 <211> 345 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 363 cagtcgctgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggggatccct gacactcacc 60 tgcgcagcct ctggattctc cctcactggc tacaacttgg tctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggagtggat cggattcatt agttatggtg ataccacata ctacgcgagc 180 tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtgactct gacgatcacc 240 gatctgcaac cttcagacac gggcacctat ttctgtgcca gagagactgc taatacttat 300 gattatggca tctggggccc aggcaccctc gtcaccgtct cgagc 345 <210> 364 <211> 1338 <212> DNA <213> Synthetic <400> 364 cagtcgctgg aggagtccgg gggtcgcctg gtcacgcctg ggggatccct gacactcacc 60 tgcgcagcct ctggattctc cctcactggc tacaacttgg tctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggagtggat cggattcatt agttatggtg ataccacata ctacgcgagc 180 tgggcgaaag gccgattcac catctccaaa acctcgacca cggtgactct gacgatcacc 240 gatctgcaac cttcagacac gggcacctat ttctgtgcca gagagactgc taatacttat 300 gattatggca tctggggccc aggcaccctc gtcaccgtct cgagcgcctc caccaagggc 360 ccatcggtct tccccctggc accctcctcc aagagcacct ctgggggcac agcggccctg 420 ggctgcctgg tcaaggacta cttccccgaa ccggtgacgg tgtcgtggaa ctcaggcgcc 480 ctgaccagcg gcgtgcacac cttcccggct gtcctacagt cctcaggact ctactccctc 540 agcagcgtgg tgaccgtgcc ctccagcagc ttgggcaccc agacctacat ctgcaacgtg 600 aatcacaagc ccagcaacac caaggtggac aagagagttg agcccaaatc ttgtgacaaa 660 actcacacat gcccaccgtg cccagcacct gaactcctgg ggggaccgtc agtcttcctc 720 ttccccccaa aacccaagga caccctcatg atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg 780 gtggtggacg tgagccacga agaccctgag gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg 840 gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg gaggagcagt acgccagcac gtaccgtgtg 900 gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag 960 gtctccaaca aagccctccc agcccccatc gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag 1020 ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc ccatcccggg aggagatgac caagaaccag 1080 gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag 1140 agcaatgggc agccggagaa caactacaag accacgcctc ccgtgctgga ctccgacggc 1200 tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc 1260 ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc 1320 ctgtctccgg gtaaatga 1338 <210> 365 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 365 caggccagtc agaccattag caactactta gcc 33 <210> 366 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 366 ggtgcatcca atctggaatc t 21 <210> 367 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 367 caacagggtt atactatcag taatgttgat aacaatgtt 39 <210> 368 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 368 ggctacaact tggtc 15 <210> 369 <211> 48 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 369 ttcattagtt atggtgatac cacatactac gcgagctggg cgaaaggc 48 <210> 370 <211> 30 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 370 gagactgcta atacttatga ttatggcatc 30 <210> 371 <211> 336 <212> DNA <213> Synthetic <400> 371 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc aggctagtca gaccattagc aactacttag cctggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaagctcct gatctatggt gcatccaatc tggaatctgg agtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tggaacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttacta ctgtcaacag ggttatacta tcagtaatgt tgataacaat 300 gttttcggcg gaggaaccaa ggtggaaatc aaacgt 336 <210> 372 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 372 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgtc aggctagtca gaccattagc aactacttag cctggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaagctcct gatctatggt gcatccaatc tggaatctgg agtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tggaacagaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttacta ctgtcaacag ggttatacta tcagtaatgt tgataacaat 300 gttttcggcg gaggaaccaa ggtggaaatc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 373 <211> 354 <212> DNA <213> Synthetic <400> 373 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt ggctacaact tggtctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggattc attagttatg gtgataccac atactacgct 180 agctctgcta aaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac cctgtatctt 240 caaatgaaca gcctgagagc tgaggacact gctgtgtatt actgtgctag agagactgct 300 aatacttatg attatggcat ctggggccaa gggaccctcg tcaccgtctc gagc 354 <210> 374 <211> 1347 <212> DNA <213> Synthetic <400> 374 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt ggctacaact tggtctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggattc attagttatg gtgataccac atactacgct 180 agctctgcta aaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac cctgtatctt 240 caaatgaaca gcctgagagc tgaggacact gctgtgtatt actgtgctag agagactgct 300 aatacttatg attatggcat ctggggccaa gggaccctcg tcaccgtctc gagcgcctcc 360 accaagggcc catcggtctt ccccctggca ccctcctcca agagcacctc tgggggcaca 420 gcggccctgg gctgcctggt caaggactac ttccccgaac cggtgacggt gtcgtggaac 480 tcaggcgccc tgaccagcgg cgtgcacacc ttcccggctg tcctacagtc ctcaggactc 540 tactccctca gcagcgtggt gaccgtgccc tccagcagct tgggcaccca gacctacatc 600 tgcaacgtga atcacaagcc cagcaacacc aaggtggaca agagagttga gcccaaatct 660 tgtgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca 720 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 780 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 840 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta cgccagcacg 900 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 960 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1020 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga ggagatgacc 1080 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1140 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac 1200 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 1260 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 1320 agcctctccc tgtctccggg taaatga 1347 <210> 375 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 375 caggctagtc agaccattag caactactta gcc 33 <210> 376 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 376 ggtgcatcca atctggaatc t 21 <210> 377 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 377 caacagggtt atactatcag taatgttgat aacaatgtt 39 <210> 378 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 378 ggctacaact tggtc 15 <210> 379 <211> 48 <212> DNA <213> Synthetic <400> 379 ttcattagtt atggtgatac cacatactac gctagctctg ctaaaggc 48 <210> 380 <211> 30 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 380 gagactgcta atacttatga ttatggcatc 30 <210> 381 <211> 336 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 381 gccgccgtgc tgacccagac tccatctccc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcagc 60 atcagttgcc agtccagtca gaatgtttat aagaacaact atttatcctg gtatcagcag 120 aaaccagggc agcctcccaa gctcctgatc tacaaggctt ccactctggc atctggggtc 180 ccatcgcggt tcaaaggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcgacgtg 240 cagtgtgacg ctgctgccac ttactactgt gcaggcggtt atagtagtag tagtgataat 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgt 336 <210> 382 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 382 gccgccgtgc tgacccagac tccatctccc gtgtctgcag ctgtgggagg cacagtcagc 60 atcagttgcc agtccagtca gaatgtttat aagaacaact atttatcctg gtatcagcag 120 aaaccagggc agcctcccaa gctcctgatc tacaaggctt ccactctggc atctggggtc 180 ccatcgcggt tcaaaggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcgacgtg 240 cagtgtgacg ctgctgccac ttactactgt gcaggcggtt atagtagtag tagtgataat 300 gctttcggcg gagggaccga ggtggtggtc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 383 <211> 351 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 383 cagtcggtgg aggcgtccgg gggtcgtctg gtcatgcctg gaggatccct gacactcacc 60 tgcacagcct ctggattctc cctcagtacc tactggatgt cctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatggat cggagacatt tattttagta atgaggaaac aaactacgcg 180 acctgggcga aaggccgatt taccatctcc aaaacctcga ccacggtgga tctgaatgtc 240 atcagtccga caaccgagga cacggccacc tatttctgtg caagaggttc tcctgatgtt 300 gagattgcta tagatatgtg gggccagggc accctcgtca ccgtctcgag c 351 <210> 384 <211> 1344 <212> DNA <213> Synthetic <400> 384 cagtcggtgg aggcgtccgg gggtcgtctg gtcatgcctg gaggatccct gacactcacc 60 tgcacagcct ctggattctc cctcagtacc tactggatgt cctgggtccg ccaggctcca 120 gggaaggggc tggaatggat cggagacatt tattttagta atgaggaaac aaactacgcg 180 acctgggcga aaggccgatt taccatctcc aaaacctcga ccacggtgga tctgaatgtc 240 atcagtccga caaccgagga cacggccacc tatttctgtg caagaggttc tcctgatgtt 300 gagattgcta tagatatgtg gggccagggc accctcgtca ccgtctcgag cgcctccacc 360 aagggcccat cggtcttccc cctggcaccc tcctccaaga gcacctctgg gggcacagcg 420 gccctgggct gcctggtcaa ggactacttc cccgaaccgg tgacggtgtc gtggaactca 480 ggcgccctga ccagcggcgt gcacaccttc ccggctgtcc tacagtcctc aggactctac 540 tccctcagca gcgtggtgac cgtgccctcc agcagcttgg gcacccagac ctacatctgc 600 aacgtgaatc acaagcccag caacaccaag gtggacaaga gagttgagcc caaatcttgt 660 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gcacctgaac tcctgggggg accgtcagtc 720 ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 780 tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 840 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacgc cagcacgtac 900 cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 960 tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020 gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggagga gatgaccaag 1080 aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1140 tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gctggactcc 1200 gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg 1260 aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 1320 ctctccctgt ctccgggtaa atga 1344 <210> 385 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 385 cagtccagtc agaatgttta taagaacaac tatttatcc 39 <210> 386 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 386 aaggcttcca ctctggcatc t 21 <210> 387 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 387 gcaggcggtt atagtagtag tagtgataat gct 33 <210> 388 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 388 acctactgga tgtcc 15 <210> 389 <211> 51 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 389 gacatttatt ttagtaatga ggaaacaaac tacgcgacct gggcgaaagg c 51 <210> 390 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 390 ggttctcctg atgttgagat tgctatagat atg 33 <210> 391 <211> 336 <212> DNA <213> Synthetic <400> 391 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc agtccagtca gaatgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccaggga aagtccctaa gctcctgatc tataaggcat ccactctggc atctggggtc 180 ccatctcgtt tcagtggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcagcctg 240 cagcctgaag atgttgcaac ttattactgt gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat 300 gctttcggcg gaggaaccaa ggtggaaatc aaacgt 336 <210> 392 <211> 657 <212> DNA <213> Synthetic <400> 392 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc agtccagtca gaatgtttat aagaacaact acttatcctg gtatcagcag 120 aaaccaggga aagtccctaa gctcctgatc tataaggcat ccactctggc atctggggtc 180 ccatctcgtt tcagtggcag tggatctggg acagatttca ctctcaccat cagcagcctg 240 cagcctgaag atgttgcaac ttattactgt gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat 300 gctttcggcg gaggaaccaa ggtggaaatc aaacgtacgg tagcggcccc atctgtcttc 360 atcttcccgc catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctctgttgt gtgcctgctg 420 aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgc cctccaatcg 480 ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcagc 540 agcaccctga cgctgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 600 acccatcagg gcctgagctc gcccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgttag 657 <210> 393 <211> 360 <212> DNA <213> Synthetic <400> 393 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt acctactgga tgagctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggagac atttacttta gtaatgaaga aacaaactac 180 gcgaccagcg cgaaaggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa caccctgtat 240 cttcaaatga acagcctgag agctgaggac actgctgtgt attactgtgc tagaggttct 300 cctgatgttg agattgctat agatatgtgg ggccaaggga ccctcgtcac cgtctcgagc 360 <210> 394 <211> 1353 <212> DNA <213> Synthetic <400> 394 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt acctactgga tgagctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggagac atttacttta gtaatgaaga aacaaactac 180 gcgaccagcg cgaaaggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa caccctgtat 240 cttcaaatga acagcctgag agctgaggac actgctgtgt attactgtgc tagaggttct 300 cctgatgttg agattgctat agatatgtgg ggccaaggga ccctcgtcac cgtctcgagc 360 gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcaccct cctccaagag cacctctggg 420 ggcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 480 tggaactcag gcgccctgac cagcggcgtg cacaccttcc cggctgtcct acagtcctca 540 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcagcttggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagag agttgagccc 660 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggggga 720 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 780 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacgcc 900 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 1020 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1200 ctggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1260 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1320 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 1353 <210> 395 <211> 39 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 395 cagtccagtc agaatgttta taagaacaac tacttatcc 39 <210> 396 <211> 21 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 396 aaggcatcca ctctggcatc t 21 <210> 397 <211> 33 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 397 gcaggcggtt ataccagtag tagtgataat gct 33 <210> 398 <211> 15 <212> DNA <213> Oryctolagus cuniculus <400> 398 acctactgga tgagc 15 <210> 399 <211> 51 <212> DNA <213> Synthetic <400> 399 gacatttact ttagtaatga agaaacaaac tacgcgacca gcgcgaaagg c 51 <210> 400 <211> 33 <212> DNA <213> Synthetic <400> 400 ggttctcctg atgttgagat tgctatagat atg 33 <210> 401 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 401 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Phe Thr Val Ser Asp 85 90 95 Ile Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 402 <211> 451 <212> PRT <213> Synthetic <400> 402 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Val Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Ile Ile Gly Arg Asn Gly Asn Thr Trp Tyr Ala Ser Ser Ala Arg 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Tyr Gly Arg Ser Val Ala Tyr Tyr Val Phe Asn Ile Trp Gly 100 105 110 Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 195 200 205 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Ala Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 225 230 235 240 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 245 250 255 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 260 265 270 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 275 280 285 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr 290 295 300 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 305 310 315 320 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 325 330 335 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 340 345 350 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 355 360 365 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 370 375 380 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 385 390 395 400 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 405 410 415 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 420 425 430 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 435 440 445 Pro Gly Lys 450 <210> 403 <211> 654 <212> DNA <213> Synthetic <400> 403 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtca gagcatttac agcaatcttg cctggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaagctcct gatctatgat gcatccactc tggaatctgg agtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttacta ctgccaacag ggttttactg ttagtgatat tgataatgct 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgtacggtag cggccccatc tgtcttcatc 360 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttag 654 <210> 404 <211> 1356 <212> DNA <213> Synthetic <400> 404 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt aactatgcag tgggctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggaatc attggtcgta atggtaacac atggtacgcg 180 agctctgcaa gaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac cctgtatctt 240 caaatgaaca gcctgagagc tgaggacact gctgtgtatt actgtgctag aggatatggc 300 cgtagtgttg cttactacgt ctttaacatc tggggcccag ggaccctcgt caccgtctcg 360 agcgcctcca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct 420 gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 480 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 540 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggacgc gagagttgag 660 cccaaatctt gtgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagcacctga actcctgggg 720 ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc 780 cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac 900 gccagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc 1020 tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc 1200 gtgctggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg 1260 tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac 1320 acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaatga 1356 <210> 405 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 405 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Phe Thr Val Ser Asp 85 90 95 Ile Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 406 <211> 228 <212> PRT <213> Synthetic <400> 406 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Val Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Ile Ile Gly Arg Asn Gly Asn Thr Trp Tyr Ala Ser Ser Ala Arg 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Tyr Gly Arg Ser Val Ala Tyr Tyr Val Phe Asn Ile Trp Gly 100 105 110 Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 195 200 205 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Ala Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220 Asp Lys Thr His 225 <210> 407 <211> 217 <212> PRT <213> Synthetic <400> 407 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Thr Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Ser Ile Tyr Ser Asn 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Asp Ala Ser Thr Leu Glu Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Asp Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly Phe Thr Val Ser Asp 85 90 95 Ile Asp Asn Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 100 105 110 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 115 120 125 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 130 135 140 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 145 150 155 160 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 180 185 190 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 195 200 205 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 210 215 <210> 408 <211> 228 <212> PRT <213> Synthetic <400> 408 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Ser Asn Tyr 20 25 30 Ala Val Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gly Ile Ile Gly Arg Asn Gly Asn Thr Trp Tyr Ala Ser Ser Ala Arg 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Gly Tyr Gly Arg Ser Val Ala Tyr Tyr Val Phe Asn Ile Trp Gly 100 105 110 Pro Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 115 120 125 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 130 135 140 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 145 150 155 160 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 165 170 175 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 180 185 190 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 195 200 205 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Ala Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys 210 215 220 Asp Lys Thr His 225 <210> 409 <211> 654 <212> DNA <213> Synthetic <400> 409 gacatccaga tgacccagtc tccttccacc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc aggccagtca gagcatttac agcaatcttg cctggtatca gcagaaacca 120 ggaaaagccc ctaagctcct gatctatgat gcatccactc tggaatctgg agtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagag tacactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gatgattttg caacttacta ctgccaacag ggttttactg ttagtgatat tgataatgct 300 ttcggcggag gaaccaaggt ggaaatcaaa cgtacggtag cggccccatc tgtcttcatc 360 ttcccgccat ctgatgagca gttgaaatct ggaactgcct ctgttgtgtg cctgctgaat 420 aacttctatc ccagagaggc caaagtacag tggaaggtgg ataacgccct ccaatcgggt 480 aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca gcacctacag cctcagcagc 540 accctgacgc tgagcaaagc agactacgag aaacacaaag tctacgcctg cgaagtcacc 600 catcagggcc tgagctcgcc cgtcacaaag agcttcaaca ggggagagtg ttag 654 <210> 410 <211> 687 <212> DNA <213> Synthetic <400> 410 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccgtcagt aactatgcag tgggctgggt ccgtcaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtcggaatc attggtcgta atggtaacac atggtacgcg 180 agctctgcaa gaggccgatt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac cctgtatctt 240 caaatgaaca gcctgagagc tgaggacact gctgtgtatt actgtgctag aggatatggc 300 cgtagtgttg cttactacgt ctttaacatc tggggcccag ggaccctcgt caccgtctcg 360 agcgcctcca ccaagggccc atcggtcttc cccctggcac cctcctccaa gagcacctct 420 gggggcacag cggccctggg ctgcctggtc aaggactact tccccgaacc ggtgacggtg 480 tcgtggaact caggcgccct gaccagcggc gtgcacacct tcccggctgt cctacagtcc 540 tcaggactct actccctcag cagcgtggtg accgtgccct ccagcagctt gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa tcacaagccc agcaacacca aggtggacgc gagagttgag 660 cccaaatctt gtgacaaaac tcactag 687 <210> 411 <211> 120 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 411 Ser Ser Ser His Pro Ile Phe His Arg Gly Glu Phe Ser Val Cys Asp 1 5 10 15 Ser Val Ser Val Trp Val Gly Asp Lys Thr Thr Ala Thr Asp Ile Lys 20 25 30 Gly Lys Glu Val Met Val Leu Gly Glu Val Asn Ile Asn Asn Ser Val 35 40 45 Phe Lys Gln Tyr Phe Phe Glu Thr Lys Cys Arg Asp Pro Asn Pro Val 50 55 60 Asp Ser Gly Cys Arg Gly Ile Asp Ser Lys His Trp Asn Ser Tyr Cys 65 70 75 80 Thr Thr Thr His Thr Phe Val Lys Ala Leu Thr Met Asp Gly Lys Gln 85 90 95 Ala Ala Trp Arg Phe Ile Arg Ile Asp Thr Ala Cys Val Cys Val Leu 100 105 110 Ser Arg Lys Ala Val Arg Arg Ala 115 120 <210> 412 <211> 105 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 412 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 1 5 10 15 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 20 25 30 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 35 40 45 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 50 55 60 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 65 70 75 80 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 85 90 95 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105 <210> 413 <211> 330 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 413 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 1 5 10 15 Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95 Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 100 105 110 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 115 120 125 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 130 135 140 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 145 150 155 160 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 165 170 175 Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 180 185 190 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 195 200 205 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 210 215 220 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 225 230 235 240 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 245 250 255 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 260 265 270 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 275 280 285 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 290 295 300 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 305 310 315 320 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 330

Claims (599)

  1. 하기를 포함하는 항-인간 NGF 항체 또는 항체 단편:
    (a) 서열번호 1의 가변 경 (VL) 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 3의 가변 중 (VH) 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 11의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 13의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 21의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 23의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 31의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 33의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 41의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 43의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 51의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 53의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 61의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 63의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 71의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 73의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 81의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 83의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 91의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 93의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 101의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 103의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 111의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 113의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 121의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 123의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 131의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 133의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 141의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 143의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 151의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 153의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 161의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 163의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 171의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 173의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 181의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 183의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 191의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 193의 VH 사슬 폴리펩타이드; 또는 서열번호 401의 경쇄 폴리펩타이드 및 서열번호 402의 중쇄 폴리펩타이드; 또는
    (b) 서열번호 1의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 3의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 11의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 13의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 21의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 23의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 51의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 53의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 61의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 63의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 71의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 73의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 81의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 83의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 91의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 93의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 101의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 103의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 111의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 113의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 121의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 123의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 131의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 133의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 141의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 143의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 151의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 153의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 161의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 163의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 171의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 173의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 181의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 183의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 191의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 193의 VH 사슬 폴리펩타이드; 또는 서열번호 401의 경쇄 폴리펩타이드 및 서열번호 402의 중쇄 폴리펩타이드를 함유하는 항-인간 NGF 항체 또는 항체 단편과 동일한 상보성 결정 영역 (CDRs)을 포함하는 항체 또는 항체 단편.
  2. 제1항에 있어서, 하기를 포함하는 항-인간 NGF 항체 또는 항체 단편:
    (i) 서열번호 21의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 23의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 31의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 33의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 141의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 143의 VH 사슬 폴리펩타이드; 또는 서열번호 151의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 153의 VH 사슬 폴리펩타이드;
    (ii) 서열번호 1의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 3의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 11의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 13의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 41의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 43의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 51의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 53의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 61의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 63의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 71의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 73의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 81의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 83의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 91의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 93의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 101의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 103의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 111의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 113의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 121의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 123의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 131의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 133의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 161의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 163의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 171의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 173의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 181의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 183의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 191의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 193의 VH 사슬 폴리펩타이드; 또는 서열번호 401의 경쇄 폴리펩타이드 및 서열번호 402의 중쇄 폴리펩타이드;
    (iii) scFv, 카멜바디(camelbody), 나노바디(nanobody), MetMab 유사 1가 작용제, IgNAR (상어로부터 유래된 단일-쇄 항체), Fab, Fab', 또는 F(ab')2 단편으로부터 선택된 항체 단편;
    (iv) 서열번호 55의 CDR1 서열, 서열번호 56의 CDR2 서열 및 서열번호 57의 CDR3서열을 포함하는 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 58의 CDR1 서열, 서열번호 59의 CDR2 서열, 및 서열번호 60의 CDR3 서열을 포함하는 VH 사슬 폴리펩타이드;
    (v) 비글라이코실화된 항체 또는 항체 단편;
    (vi) 효과기 기능, 반감기, 단백질 분해 및 글라이코실화를 변경하도록 변형된 Fc 영역;
    (vii) 인간, 인간화된, 단일쇄 또는 키메라 항체;
    (viii) NGF 발현 인간 세포에 또는 생체내 순환 가용성 NGF 분자에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편;
    (ix) NGF에 결합된 세포와 관련된 질병이 있는 환자에서 인간 세포 상에서 또는 인간 세포에 의해 발현된 NGF에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편으로서, 상기 질병은 염증성 통증, 수술 후 절개 통증, 복합부위 통증 증후군, 암 통증, 원발성 또는 전이성 뼈암 통증, 골절 통증, 골다공증성 골절 통증, 화상으로부터 초래된 통증, 골다공증, 통풍 관절 통증, 겸상 적혈구 발증과 관련된 통증, 간세포 암종 통증, 유방암 통증, 간경변증 통증, 신경인성 통증, 신경병증성 통증, 침해수용성 통증, 삼차 신경통, 대상포진후 신경통, 환상지통, 섬유근육통, 월경통, 난소통, 반사성 교감신경성 이영양증, 신경인성 통증, 골관절염 또는 류마티스 관절염 통증, 등 아래 부분 통증, 당뇨병성 신경병증 통증, 좌골신경통 또는 편두통인, 항체 또는 항체 단편;
    (x) 검출가능한 표지 또는 치료제에 직접적으로 또는 간접적으로 부착되는 항체 또는 항체 단편;
    (xi) 서열번호 1의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 3의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 11의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 13의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 21의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 23의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 31의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 33의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 41의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 43의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 51의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 53의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 61의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 63의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 71의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 73의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 81의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 83의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 91의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 93의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 101의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 103의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 111의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 113의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 121의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 123의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 131의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 133의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 141의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 143의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 151의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 153의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 161의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 163의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 171의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 173의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 181의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 183의 VH 사슬 폴리펩타이드; 서열번호 191의 VL 사슬 폴리펩타이드 및 서열번호 193의 VH 사슬 폴리펩타이드; 또는 서열번호 401의 전장 경쇄 폴리펩타이드 및 서열번호 402의 전장 중쇄 폴리펩타이드; 여기서
    (a) 항체 또는 항체 단편에 함유된 VH 사슬 폴리펩타이드 및 VL 사슬 폴리펩타이드가 인간화되거나;
    (b) 항체 또는 항체 단편에 함유된 VH 사슬 폴리펩타이드 및 VL 사슬 폴리펩타이드가 키메라임;
    (xii) 단일 쇄 항체;
    (xiii) p75 또는 TrkA 또는 이들의 멀티머(multimer)와 NGF의 결합을 차단 또는 억제하는 항체 또는 항체 단편;
    (xiv) 10-4 S-1, 5×10-5 S-1, 10-5 S-1, 5×10-6 S-1, 10-6 S-1, 5×10-7 S-1, 또는 10-7 S-1 이하의 오프율(off-rate)(Koff)로 NGF에 결합하는 항체 또는 항체 단편;
    (xv) TrkA 또는 이들의 멀티머(multimer)와 NGF의 결합을 차단 또는 억제하는 항체 또는 항체 단편;
    (xvi) TrkA 또는 p75와 NGF의 상호작용을 상당하게 차단 또는 억제하지 않는 항체 또는 항체 단편;
    (xvii) 검출가능한 모이어티 또는 기능성 모이어티로부터 선택된 효과기 모이어티(moiety)를 더 포함하는 항체 또는 항체 단편으로서, 상기 검출가능한 모이어티는 형광 염료, 효소, 기질, 생발광 물질, 방사성 물질 또는 화학발광 물질이고, 상기 기능성 모이어티는 스트렙타비딘, 아비딘, 바이오틴, 사이토톡신, 세포독성제 또는 방사성 물질인, 항체 또는 항체 단편;
    (xviii) 10-4 S-1, 5×10-5 S-1, 10-5 S-1, 5×10-6 S-1, 10-6 S-1, 5×10-7 S-1, 또는 10-7 S-1 이하의 오프율(off-rate)(Koff)로 NGF에 결합하는 항체 또는 항체 단편;
    (xix) 글라이코실화를 변경하거나 또는 제거하는 돌연변이를 갖는 Fc 영역;
    (xx) IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 항체;
    (xxi) 하기로부터 선택되는 VL 사슬 폴리펩타이드 CDR1, CDR2, 및 CDR3 폴리펩타이드 서열:
    (a) 각각 서열번호 5, 6 및 7;
    (b) 각각 서열번호 15, 16 및 17;
    (c) 각각 서열번호 25, 26 및 27;
    (d) 각각 서열번호 35, 36 및 37;
    (e) 각각 서열번호 45, 46 및 47;
    (f) 각각 서열번호 55, 56 및 57;
    (g) 각각 서열번호 65, 66 및 67;
    (h) 각각 서열번호 75, 76 및 77;
    (i) 각각 서열번호 85, 86 및 87;
    (j) 각각 서열번호 95, 96 및 97;
    (k) 각각 서열번호 105, 106 및 107;
    (l) 각각 서열번호 115, 116 및 117;
    (m) 각각 서열번호 125, 126 및 127;
    (n) 각각 서열번호 135, 136 및 137;
    (o) 각각 서열번호 145, 146 및 147;
    (p) 각각 서열번호 155, 156 및 157;
    (q) 각각 서열번호 165, 166 및 167;
    (r) 각각 서열번호 175, 176 및 177;
    (s) 각각 서열번호 185, 186 및 187;
    (t) 각각 서열번호 195, 196 및 197; 및
    하기로부터 선택되는 VH 사슬 폴리펩타이드 CDR1, CDR2, 및 CDR3 폴리펩타이드 서열:
    (a) 각각 서열번호 8, 9 및 10;
    (b) 각각 서열번호 18, 19 및 20;
    (c) 각각 서열번호 28, 29 및 30;
    (d) 각각 서열번호 38, 39 및 40;
    (e) 각각 서열번호 48, 49 및 50;
    (f) 각각 서열번호 58, 59 및 60;
    (g) 각각 서열번호 68, 69 및 70;
    (h) 각각 서열번호 78, 79 및 80;
    (i) 각각 서열번호 88, 89 및 90;
    (j) 각각 서열번호 98, 99 및 100;
    (k) 각각 서열번호 108, 109 및 110;
    (l) 각각 서열번호 118, 119 및 120;
    (m) 각각 서열번호 128, 129 및 130;
    (n) 각각 서열번호 138, 139 및 140;
    (o) 각각 서열번호 148, 149 및 150;
    (p) 각각 서열번호 158, 159 및 160;
    (q) 각각 서열번호 168, 169 및 170;
    (r) 각각 서열번호 178, 179 및 180;
    (s) 각각 서열번호 188, 189 및 190;
    (t) 각각 서열번호 198, 199 및 200;
    (xxii) 각각 서열번호 1 및 서열번호 3; 서열번호 11 및 서열번호 13; 서열번호 21 및 서열번호 23; 서열번호 31 및 서열번호 33; 서열번호 41 및 서열번호 43; 서열번호 51 및 서열번호 53, 서열번호 61 및 서열번호 63; 서열번호 71 및 서열번호 73; 서열번호 81 및 서열번호 83; 서열번호 91 및 서열번호 93; 서열번호 101 및 서열번호 103; 서열번호 111 및 서열번호 113; 서열번호 121 및 서열번호 123; 서열번호 131 및 서열번호 133; 서열번호 141 및 서열번호 143; 서열번호 151 및 서열번호 153; 서열번호 161 및 서열번호 163; 서열번호 171 및 서열번호 173; 서열번호 181 및 서열번호 183; 서열번호 191 및 서열번호 193; 또는 서열번호 401 및 서열번호 402로부터 선택되는 VL 사슬 폴리펩타이드 서열 및 VH 사슬 폴리펩타이드 서열;
    (xxiii) 수용성 폴리머를 더 포함하는 항체 또는 항체 단편; 또는
    (xxiv) 하나 이상의 폴리에틸렌 글라이콜을 더 포함하는 항체 또는 항체 단편.
  3. 제1항에 따른 항-NGF 항체 또는 항체 단편을 암호화하는, 폴리뉴클레오타이드.
  4. 하기를 포함하는 단리된 폴리뉴클레오타이드:
    (i) 각각 서열번호 1 및 서열번호 3; 서열번호 11 및 서열번호 13; 서열번호 21 및 서열번호 23; 서열번호 31 및 서열번호 33; 서열번호 41 및 서열번호 43; 서열번호 51 및 서열번호 53; 서열번호 61 및 서열번호 63; 서열번호 71 및 서열번호 73; 서열번호 81 및 서열번호 83; 서열번호 91 및 서열번호 93; 서열번호 101 및 서열번호 103; 서열번호 111 및 서열번호 113; 서열번호 121 및 서열번호 123; 서열번호 131 및 서열번호 133; 서열번호 141 및 서열번호 143; 서열번호 151 및 서열번호 153; 서열번호 161 및 서열번호 163; 서열번호 171 및 서열번호 173; 서열번호 181 및 서열번호 183; 또는 서열번호 191 및 서열번호 193으로부터 선택된 항-NGF VL 항체 아미노산 서열 및 항-NGF VH 항체 아미노산 서열을 암호화하거나; 또는 서열번호 401에 함유된 무결함 경쇄 폴리펩타이드 및 서열번호 402에 함유된 무결함 중쇄 폴리펩타이드를 암호화하는, 폴리뉴클레오타이드.
  5. 제3항에 따른 폴리뉴클레오타이드 또는 제4항에 따른 단리된 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 벡터로서, 상기 벡터는 플라스미드 또는 재조합 바이러스 벡터인, 벡터.
  6. 제3항에 따른 폴리뉴클레오타이드 또는 제4항에 따른 단리된 폴리뉴클레오타이드를 포함하는 재조합 세포로서, 상기 재조합 세포는 포유류, 효모, 박테리아, 진균, 식물 또는 곤충 세포로부터 선택되는, 재조합 세포.
  7. 제1항에 있어서,
    (i) NGF 발현 세포와 관련된 질병 또는 장애를 치료하거나;
    (ii) NGF와 관련된 질병 또는 장애의 증상을 호전 또는 감소시키거나;
    (iii) p75와 NGF의 결합을 상당하게 억제하지 않고, TrkA와 NGF의 결합을 억제함으로써 개체에서 통증을 치료하거나 진통제 효과를 유발하는 데에 사용하기 위한, 항-인간 NGF 항체 또는 항체 단편으로서, 상기 NGF와 관련된 질병 또는 장애는 염증성 통증, 수술 후 절개 통증, 복합부위 통증 증후군, 암 통증, 원발성 또는 전이성 뼈암 통증, 골절 통증, 골다공증성 골절 통증, 화상으로부터 초래된 통증, 골다공증, 통풍 관절 통증, 겸상 적혈구 발증과 관련된 통증, 간세포 암종 통증, 유방암 통증, 간경변증 통증, 신경인성 통증, 신경병증성 통증, 침해수용성 통증, 삼차 신경통, 대상포진후 신경통, 환상지통, 섬유근육통, 월경통, 난소통, 반사성 교감신경성 이영양증, 신경인성 통증, 골관절염 또는 류마티스 관절염 통증, 등 아래 부분 통증, 당뇨병성 신경병증 통증, 좌골신경통 또는 편두통으로부터 선택되는, 항-인간 NGF 항체 또는 항체 단편.
  8. 제7항에 있어서,
    (i) 진통제, 항-히스타민제, 항-염증제 또는 항생제로부터 선택된 다른 치료제 또는 섭생의 사용을 더 포함하거나;
    (ii) 상기 통증은 수술 전 또는 수술 후와 관련되거나 근골격계에 대한 외상 또는 손상과 관련된 통증이거나, 만성 내장통의 예방 또는 치료와 관련된 통증이고, 상기 만성 내장통은 월경통, 소화불량, 위식도 역류, 췌장염, 장기통 및 과민성 대장 증후군으로부터 선택된 생리적 장애에 기인하고; 상기 수술 후 통증은 휴식중 통증, 기계적으로-유발된 통증 또는 열적으로-유발된 통증을 포함하고, 상기 휴식중 통증, 기계적으로-유발된 통증 또는 열적으로-유발된 통증은 호전된 것이고, 상처 치유가 유의하게 억제되지 않거나;
    (iii) 상기 통증은 암, 신경병증성 통증 및 신경인성 통증과 관련된 통증으로부터 선택되거나;
    (iv) 상기 통증은 두개안면 통증 또는 두통이거나;
    (v) 상기 통증은 급성 통증, 만성 통증, 치통, 외상으로부터의 통증, 수술 통증, 절단 또는 농양으로부터 초래되는 통증, 작열통, 탈수질환, 삼차 신경통, 암, 만성 알코올 중독, 뇌졸중, 시상통증증후군, 당뇨병, 후천성 면역 결핍증("AIDS"), 독소, 화학치료, 일반적 두통, 편두통, 군발두통, 혼합된-혈관성 또는 비-혈관성증후군, 긴장성 두통, 일반적 염증, 관절염, 류머티즘성 질병, 루푸스, 골관절염, 섬유근육통, 염증성 장 질환, 과민성 대장 증후군, 염증성 눈 질환, 염증성 또는 불안정 방광 장애, 건선, 염증성 성분에 의한 피부 질환, 일광화상, 심장염, 피부염, 근염, 신경염, 교원성 혈관 질환, 만성 염증성 질환, 염증성 통증 및 관련된 통각과민 및 이질통, 신경병증성 통증 및 관련된 통각과민 또는 이질통, 당뇨병성 신경병증 통증, 작열통, 교감신경 유지통, 구심로 차단 증후군, 천식, 상피조직 손상 또는 기능 장애, 단순 포진, 호흡부, 비뇨 생식기, 위장 또는 혈관 영역에서 내장 운동성의 장애, 상처, 화상, 알레르기성 피부 반응, 소양증, 백반증, 일반적 위장 장애, 대장염, 위 궤양, 십이지장 궤양, 혈관운동성 또는 알레르기성 비염 또는 기관지 장애, 월경통, 소화불량, 위식도 역류, 췌장염 또는 장기통과 관련된 통증이거나;
    (vi) 항체 또는 항체 단편은 두개안면 점막 투여, 비강내 투여, 경구 투여, 혀밑 투여 또는 결막 투여를 통해 사용되거나;
    (vii) 상기 통증은 뼈암 통증이고, 상기 뼈암 통증은 뼈에서 유래된 암, 골육종, 뼈에 전이된 암, 뼈에 전이된 전립선 암, 뼈에 전이된 유방암, 뼈에 전이된 폐암, 뼈에 전이된 육종, 뼈에 전이된 신장 암, 또는 미결정 조직으로부터 뼈에 전이된 암으로부터 유래되거나;
    (viii) 항체 또는 항체 단편은 추간판을 포함하는 추간판 영역에 상기 항체 또는 단편의 유효량을 제공하는 단계를 포함하는 신경근병증이 있거나 신경근병증이 없는 등 또는 목 통증을 치료하기 위해 사용되고, 상기 추간판은 퇴행성 추간판이거나;
    (ix) 항체 또는 항체 단편은 피험체에서 만성 전립선염 또는 만성 골반 통증 증후군과 관련된 통증 또는 성선 기능 저하증을 치료하거나 예방하기 위해 사용되고, 상기 만성 전립선염 또는 만성 골반 통증 증후군과 관련된 통증은 하복부(골반) 통증; 하부 위장 통증; 방광통; 치골상 통증; 음경, 고환, 음낭 및 회음의 통증; 요도 통증; 성교통; 방광이 채워짐에 따라 증가될 수 있는 통증, 압박 또는 불편함; 배뇨 곤란 및 사정 통증을 포함하는 군으로부터 선택되는, 항체 또는 항체 단편.
  9. 제1항에 따른 적어도 하나의 항-인간 NGF 항체 또는 항체 단편의 진단적 유효량을 포함하는, NGF를 발현하는 세포의 존재를 검출하는 생체내 이미징에 사용하기 위한 조성물.
  10. 제9항에 있어서,
    (i) NGF 발현 질병 부위에서 항체의 검출을 용이하게 하는 방사성핵종 또는 형광단의 사용을 더 포함하거나;
    (ii) 적절한 치료 섭생의 설계를 용이하게 하기 위해 사용되거나;
    (iii) 염증성 통증, 수술 후 절개 통증, 복합부위 통증 증후군, 암 통증, 원발성 또는 전이성 뼈암 통증, 골절 통증, 골다공증성 골절 통증, 화상으로부터 초래된 통증, 골다공증, 통풍 관절 통증, 겸상 적혈구 발증과 관련된 통증, 간세포 암종 통증, 유방암 통증, 간경변증 통증, 신경인성 통증, 신경병증성 통증, 침해수용성 통증, 삼차 신경통, 대상포진후 신경통, 환상지통, 섬유근육통, 월경통, 난소통, 반사성 교감신경성 이영양증, 신경인성 통증, 골관절염 또는 류마티스 관절염 통증, 등 아래 부분 통증, 당뇨병성 신경병증 통증, 좌골신경통 또는 편두통에 대해 효과적인 치료 프로토콜의 설계를 위한 계획 섭생의 부분으로서 사용되는, 조성물.
  11. 제1항에 따른 항체를 암호화하는 하나 이상의 이종성 폴리뉴클레오타이드를 함유하는 재조합 숙주 세포 또는 비인간 유전자 이식 동물 또는 식물에서 제1항에 따른 항체를 제조하는 방법.
  12. 제11항에 있어서,
    (i) 상기 숙주 세포는 박테리아, 진균, 효모, 포유류, 조류 또는 곤충 세포이거나;
    (ii) 상기 숙주 세포는 적어도 10 내지 25 ㎎/리터의 상기 항체를 배양 배지 내로 안정하게 발현시키고 분비시키는 다배체 효모 배양물이며, 상기 방법은
    (a) 프로모터 및 신호 서열에 작동가능하게 연결된 상기 항체를 암호화하는 하나 이상의 이종성 폴리뉴클레오타이드를 함유하는 적어도 하나의 발현 벡터를 반수체 효모 세포 내로 도입하는 단계;
    (b) 제1 및 제2 반수체 효모 세포로부터 다배체 효모를 교배 또는 스페로플라스트 융합함으로써 생성하는 단계;
    (c) 상기 항체를 안정하게 발현시키는 다배체 효모 세포를 선별하는 단계; 및
    (d) 적어도 10 내지 25 ㎎/리터의 상기 항체를 상기 배양 배지 내로 안정하게 발현시키는 상기 다배체 효모 세포로부터 안정한 다배체 효모 배양물을 생성하는 단계를 포함하거나;
    (iii) 상기 숙주 세포는 악시오지마(Arxiozyma); 아스코보트리오지마(Ascobotryozyma); 시테로마이세스(Citeromyces); 데바리오마이세스(Debaryomyces); 데카라(Dekkera); 에레모테시움(Eremothecium); 이사첸키아(Issatchenkia); 카자흐스타니아(Kazachstania); 클루이베로마이세스(Kluyveromyces); 코다마에아(Kodamaea); 로데로마이세스(Lodderomyces); 파키솔렌(Pachysolen); 피키아(Pichia); 사카로마이세스(Saccharomyces); 사투니스포라(Saturnispora); 테트라피시스포라(Tetrapisispora); 토룰라스포라(Torulaspora); 윌리옵시스(Williopsis); 및 자이고사카로마이세스(Zygosaccharomyces)의 속으로부터 선택되는 효모 세포이거나;
    (iv) 숙주 세포는 이배체 피키아 파스토리스 (Pichia pastoris) 효모 세포이거나;
    (v) 상기 이종성 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 1 및 서열번호 3; 서열번호 11 및 서열번호 13; 서열번호 21 및 서열번호 23; 서열번호 31 및 서열번호 33; 서열번호 41 및 서열번호 43; 서열번호 51 및 서열번호 53, 서열번호 61 및 서열번호 63; 서열번호 71 및 서열번호 73; 서열번호 81 및 서열번호 83; 서열번호 91 및 서열번호 93; 서열번호 101 및 서열번호 103; 서열번호 111 및 서열번호 113; 서열번호 121 및 서열번호 123; 서열번호 131 및 서열번호 133; 서열번호 141 및 서열번호 143; 서열번호 151 및 서열번호 153; 서열번호 161 및 서열번호 163; 서열번호 171 및 서열번호 173; 서열번호 181 및 서열번호 183; 서열번호 191 및 서열번호 193; 또는 서열번호 401 및 서열번호 402에 함유된 폴리펩타이드를 암호화하는 서열을 포함하거나;
    (vi) 상기 이종성 폴리뉴클레오타이드는 서열번호 1, 3, 11, 13, 21, 23, 31, 33, 41, 43, 51, 53, 61, 63, 71, 73, 81, 83, 91, 93, 101, 103, 111, 113, 121, 123, 131, 133, 141, 143, 151, 153, 161, 163, 171, 173, 181, 183, 191, 193으로부터 선택된 VL 또는 VH 폴리펩타이드, 또는 서열번호 402 및 서열번호 401 내의 무결함 중쇄 및 경쇄 폴리펩타이드를 암호화하는, 방법.
  13. 제1항에 따른 적어도 하나의 NGF 항체 또는 항체 단편 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 함유하는, 염증성 통증, 수술 후 절개 통증, 복합부위 통증 증후군, 암 통증, 원발성 또는 전이성 뼈암 통증, 골절 통증, 골다공증성 골절 통증, 화상으로부터 초래된 통증, 골다공증, 통풍 관절 통증, 겸상 적혈구 발증과 관련된 통증, 간세포 암종 통증, 유방암 통증, 간경변증 통증, 신경인성 통증, 신경병증성 통증, 침해수용성 통증, 삼차 신경통, 대상포진후 신경통, 환상지통, 섬유근육통, 월경통, 난소통, 반사성 교감신경성 이영양증, 신경인성 통증, 골관절염 또는 류마티스 관절염 통증, 등 아래 부분 통증, 당뇨병성 신경병증 통증, 좌골신경통 또는 편두통을 치료하기 위한 약제학적 조성물.
  14. 제1항에 따른 항-NGF 항체 또는 항체 단편을 함유하는 조성물로서, 정맥내 또는 피하 투여에 적합한, 염증성 통증, 수술 후 절개 통증, 복합부위 통증 증후군, 암 통증, 원발성 또는 전이성 뼈암 통증, 골절 통증, 골다공증성 골절 통증, 화상으로부터 초래된 통증, 골다공증, 통풍 관절 통증, 겸상 적혈구 발증과 관련된 통증, 간세포 암종 통증, 유방암 통증, 간경변증 통증, 신경인성 통증, 신경병증성 통증, 침해수용성 통증, 삼차 신경통, 대상포진후 신경통, 환상지통, 섬유근육통, 월경통, 난소통, 반사성 교감신경성 이영양증, 신경인성 통증, 골관절염 또는 류마티스 관절염 통증, 등 아래 부분 통증, 당뇨병성 신경병증 통증, 좌골신경통 또는 편두통을 치료하기 위한 약제학적 조성물.
  15. 삭제
  16. 삭제
  17. 삭제
  18. 삭제
  19. 삭제
  20. 삭제
  21. 삭제
  22. 삭제
  23. 삭제
  24. 삭제
  25. 삭제
  26. 삭제
  27. 삭제
  28. 삭제
  29. 삭제
  30. 삭제
  31. 삭제
  32. 삭제
  33. 삭제
  34. 삭제
  35. 삭제
  36. 삭제
  37. 삭제
  38. 삭제
  39. 삭제
  40. 삭제
  41. 삭제
  42. 삭제
  43. 삭제
  44. 삭제
  45. 삭제
  46. 삭제
  47. 삭제
  48. 삭제
  49. 삭제
  50. 삭제
  51. 삭제
  52. 삭제
  53. 삭제
  54. 삭제
  55. 삭제
  56. 삭제
  57. 삭제
  58. 삭제
  59. 삭제
  60. 삭제
  61. 삭제
  62. 삭제
  63. 삭제
  64. 삭제
  65. 삭제
  66. 삭제
  67. 삭제
  68. 삭제
  69. 삭제
  70. 삭제
  71. 삭제
  72. 삭제
  73. 삭제
  74. 삭제
  75. 삭제
  76. 삭제
  77. 삭제
  78. 삭제
  79. 삭제
  80. 삭제
  81. 삭제
  82. 삭제
  83. 삭제
  84. 삭제
  85. 삭제
  86. 삭제
  87. 삭제
  88. 삭제
  89. 삭제
  90. 삭제
  91. 삭제
  92. 삭제
  93. 삭제
  94. 삭제
  95. 삭제
  96. 삭제
  97. 삭제
  98. 삭제
  99. 삭제
  100. 삭제
  101. 삭제
  102. 삭제
  103. 삭제
  104. 삭제
  105. 삭제
  106. 삭제
  107. 삭제
  108. 삭제
  109. 삭제
  110. 삭제
  111. 삭제
  112. 삭제
  113. 삭제
  114. 삭제
  115. 삭제
  116. 삭제
  117. 삭제
  118. 삭제
  119. 삭제
  120. 삭제
  121. 삭제
  122. 삭제
  123. 삭제
  124. 삭제
  125. 삭제
  126. 삭제
  127. 삭제
  128. 삭제
  129. 삭제
  130. 삭제
  131. 삭제
  132. 삭제
  133. 삭제
  134. 삭제
  135. 삭제
  136. 삭제
  137. 삭제
  138. 삭제
  139. 삭제
  140. 삭제
  141. 삭제
  142. 삭제
  143. 삭제
  144. 삭제
  145. 삭제
  146. 삭제
  147. 삭제
  148. 삭제
  149. 삭제
  150. 삭제
  151. 삭제
  152. 삭제
  153. 삭제
  154. 삭제
  155. 삭제
  156. 삭제
  157. 삭제
  158. 삭제
  159. 삭제
  160. 삭제
  161. 삭제
  162. 삭제
  163. 삭제
  164. 삭제
  165. 삭제
  166. 삭제
  167. 삭제
  168. 삭제
  169. 삭제
  170. 삭제
  171. 삭제
  172. 삭제
  173. 삭제
  174. 삭제
  175. 삭제
  176. 삭제
  177. 삭제
  178. 삭제
  179. 삭제
  180. 삭제
  181. 삭제
  182. 삭제
  183. 삭제
  184. 삭제
  185. 삭제
  186. 삭제
  187. 삭제
  188. 삭제
  189. 삭제
  190. 삭제
  191. 삭제
  192. 삭제
  193. 삭제
  194. 삭제
  195. 삭제
  196. 삭제
  197. 삭제
  198. 삭제
  199. 삭제
  200. 삭제
  201. 삭제
  202. 삭제
  203. 삭제
  204. 삭제
  205. 삭제
  206. 삭제
  207. 삭제
  208. 삭제
  209. 삭제
  210. 삭제
  211. 삭제
  212. 삭제
  213. 삭제
  214. 삭제
  215. 삭제
  216. 삭제
  217. 삭제
  218. 삭제
  219. 삭제
  220. 삭제
  221. 삭제
  222. 삭제
  223. 삭제
  224. 삭제
  225. 삭제
  226. 삭제
  227. 삭제
  228. 삭제
  229. 삭제
  230. 삭제
  231. 삭제
  232. 삭제
  233. 삭제
  234. 삭제
  235. 삭제
  236. 삭제
  237. 삭제
  238. 삭제
  239. 삭제
  240. 삭제
  241. 삭제
  242. 삭제
  243. 삭제
  244. 삭제
  245. 삭제
  246. 삭제
  247. 삭제
  248. 삭제
  249. 삭제
  250. 삭제
  251. 삭제
  252. 삭제
  253. 삭제
  254. 삭제
  255. 삭제
  256. 삭제
  257. 삭제
  258. 삭제
  259. 삭제
  260. 삭제
  261. 삭제
  262. 삭제
  263. 삭제
  264. 삭제
  265. 삭제
  266. 삭제
  267. 삭제
  268. 삭제
  269. 삭제
  270. 삭제
  271. 삭제
  272. 삭제
  273. 삭제
  274. 삭제
  275. 삭제
  276. 삭제
  277. 삭제
  278. 삭제
  279. 삭제
  280. 삭제
  281. 삭제
  282. 삭제
  283. 삭제
  284. 삭제
  285. 삭제
  286. 삭제
  287. 삭제
  288. 삭제
  289. 삭제
  290. 삭제
  291. 삭제
  292. 삭제
  293. 삭제
  294. 삭제
  295. 삭제
  296. 삭제
  297. 삭제
  298. 삭제
  299. 삭제
  300. 삭제
  301. 삭제
  302. 삭제
  303. 삭제
  304. 삭제
  305. 삭제
  306. 삭제
  307. 삭제
  308. 삭제
  309. 삭제
  310. 삭제
  311. 삭제
  312. 삭제
  313. 삭제
  314. 삭제
  315. 삭제
  316. 삭제
  317. 삭제
  318. 삭제
  319. 삭제
  320. 삭제
  321. 삭제
  322. 삭제
  323. 삭제
  324. 삭제
  325. 삭제
  326. 삭제
  327. 삭제
  328. 삭제
  329. 삭제
  330. 삭제
  331. 삭제
  332. 삭제
  333. 삭제
  334. 삭제
  335. 삭제
  336. 삭제
  337. 삭제
  338. 삭제
  339. 삭제
  340. 삭제
  341. 삭제
  342. 삭제
  343. 삭제
  344. 삭제
  345. 삭제
  346. 삭제
  347. 삭제
  348. 삭제
  349. 삭제
  350. 삭제
  351. 삭제
  352. 삭제
  353. 삭제
  354. 삭제
  355. 삭제
  356. 삭제
  357. 삭제
  358. 삭제
  359. 삭제
  360. 삭제
  361. 삭제
  362. 삭제
  363. 삭제
  364. 삭제
  365. 삭제
  366. 삭제
  367. 삭제
  368. 삭제
  369. 삭제
  370. 삭제
  371. 삭제
  372. 삭제
  373. 삭제
  374. 삭제
  375. 삭제
  376. 삭제
  377. 삭제
  378. 삭제
  379. 삭제
  380. 삭제
  381. 삭제
  382. 삭제
  383. 삭제
  384. 삭제
  385. 삭제
  386. 삭제
  387. 삭제
  388. 삭제
  389. 삭제
  390. 삭제
  391. 삭제
  392. 삭제
  393. 삭제
  394. 삭제
  395. 삭제
  396. 삭제
  397. 삭제
  398. 삭제
  399. 삭제
  400. 삭제
  401. 삭제
  402. 삭제
  403. 삭제
  404. 삭제
  405. 삭제
  406. 삭제
  407. 삭제
  408. 삭제
  409. 삭제
  410. 삭제
  411. 삭제
  412. 삭제
  413. 삭제
  414. 삭제
  415. 삭제
  416. 삭제
  417. 삭제
  418. 삭제
  419. 삭제
  420. 삭제
  421. 삭제
  422. 삭제
  423. 삭제
  424. 삭제
  425. 삭제
  426. 삭제
  427. 삭제
  428. 삭제
  429. 삭제
  430. 삭제
  431. 삭제
  432. 삭제
  433. 삭제
  434. 삭제
  435. 삭제
  436. 삭제
  437. 삭제
  438. 삭제
  439. 삭제
  440. 삭제
  441. 삭제
  442. 삭제
  443. 삭제
  444. 삭제
  445. 삭제
  446. 삭제
  447. 삭제
  448. 삭제
  449. 삭제
  450. 삭제
  451. 삭제
  452. 삭제
  453. 삭제
  454. 삭제
  455. 삭제
  456. 삭제
  457. 삭제
  458. 삭제
  459. 삭제
  460. 삭제
  461. 삭제
  462. 삭제
  463. 삭제
  464. 삭제
  465. 삭제
  466. 삭제
  467. 삭제
  468. 삭제
  469. 삭제
  470. 삭제
  471. 삭제
  472. 삭제
  473. 삭제
  474. 삭제
  475. 삭제
  476. 삭제
  477. 삭제
  478. 삭제
  479. 삭제
  480. 삭제
  481. 삭제
  482. 삭제
  483. 삭제
  484. 삭제
  485. 삭제
  486. 삭제
  487. 삭제
  488. 삭제
  489. 삭제
  490. 삭제
  491. 삭제
  492. 삭제
  493. 삭제
  494. 삭제
  495. 삭제
  496. 삭제
  497. 삭제
  498. 삭제
  499. 삭제
  500. 삭제
  501. 삭제
  502. 삭제
  503. 삭제
  504. 삭제
  505. 삭제
  506. 삭제
  507. 삭제
  508. 삭제
  509. 삭제
  510. 삭제
  511. 삭제
  512. 삭제
  513. 삭제
  514. 삭제
  515. 삭제
  516. 삭제
  517. 삭제
  518. 삭제
  519. 삭제
  520. 삭제
  521. 삭제
  522. 삭제
  523. 삭제
  524. 삭제
  525. 삭제
  526. 삭제
  527. 삭제
  528. 삭제
  529. 삭제
  530. 삭제
  531. 삭제
  532. 삭제
  533. 삭제
  534. 삭제
  535. 삭제
  536. 삭제
  537. 삭제
  538. 삭제
  539. 삭제
  540. 삭제
  541. 삭제
  542. 삭제
  543. 삭제
  544. 삭제
  545. 삭제
  546. 삭제
  547. 삭제
  548. 삭제
  549. 삭제
  550. 삭제
  551. 삭제
  552. 삭제
  553. 삭제
  554. 삭제
  555. 삭제
  556. 삭제
  557. 삭제
  558. 삭제
  559. 삭제
  560. 삭제
  561. 삭제
  562. 삭제
  563. 삭제
  564. 삭제
  565. 삭제
  566. 삭제
  567. 삭제
  568. 삭제
  569. 삭제
  570. 삭제
  571. 삭제
  572. 삭제
  573. 삭제
  574. 삭제
  575. 삭제
  576. 삭제
  577. 삭제
  578. 삭제
  579. 삭제
  580. 삭제
  581. 삭제
  582. 삭제
  583. 삭제
  584. 삭제
  585. 삭제
  586. 삭제
  587. 삭제
  588. 삭제
  589. 삭제
  590. 삭제
  591. 삭제
  592. 삭제
  593. 삭제
  594. 삭제
  595. 삭제
  596. 삭제
  597. 삭제
  598. 삭제
  599. 삭제
KR1020137017181A 2010-12-01 2011-12-01 항―ｎｇｆ 조성물 및 그의 용도 Expired - Fee Related KR102025848B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US41883210P 2010-12-01 2010-12-01
US61/418,832 2010-12-01
PCT/US2011/062963 WO2012075340A2 (en) 2010-12-01 2011-12-01 Anti-ngf compositions and use thereof

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197027515A Division KR20190112175A (ko) 2010-12-01 2011-12-01 항―ｎｇｆ 조성물 및 그의 용도

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20140014102A KR20140014102A (ko) 2014-02-05
KR102025848B1 true KR102025848B1 (ko) 2019-11-05

Family

ID=46162451

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197027515A Ceased KR20190112175A (ko) 2010-12-01 2011-12-01 항―ｎｇｆ 조성물 및 그의 용도
KR1020137017181A Expired - Fee Related KR102025848B1 (ko) 2010-12-01 2011-12-01 항―ｎｇｆ 조성물 및 그의 용도

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020197027515A Ceased KR20190112175A (ko) 2010-12-01 2011-12-01 항―ｎｇｆ 조성물 및 그의 용도

Country Status (10)

Country Link
US (7) US8911734B2 (ko)
EP (2) EP2646468B1 (ko)
JP (2) JP6190723B2 (ko)
KR (2) KR20190112175A (ko)
CN (1) CN103619879A (ko)
AU (2) AU2011336470B8 (ko)
CA (1) CA2821515A1 (ko)
MX (1) MX359070B (ko)
NZ (1) NZ611076A (ko)
WO (1) WO2012075340A2 (ko)

Families Citing this family (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9498530B2 (en) * 2002-12-24 2016-11-22 Rinat Neuroscience Corp. Methods for treating osteoarthritis pain by administering a nerve growth factor antagonist and compositions containing the same
SI2270048T1 (sl) * 2002-12-24 2016-01-29 Rinat Neuroscience Corp. Protitelesa proti NGF-ju in postopki uporabe le-teh
PT2350075E (pt) 2008-09-22 2014-06-09 Array Biopharma Inc Compostos imidazo[1,2b]piridazina substituídos como inibidores da trk cinase
ME03010B (me) 2008-10-22 2018-10-20 Array Biopharma Inc Jedinjenja supstituisanog pirazol0[1,5-]pirimidina као inhibitori trk kinaze
AR077468A1 (es) 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
PL2918588T3 (pl) 2010-05-20 2017-10-31 Array Biopharma Inc Związki makrocykliczne jako inhibitory kinazy TRK
US11214610B2 (en) 2010-12-01 2022-01-04 H. Lundbeck A/S High-purity production of multi-subunit proteins such as antibodies in transformed microbes such as Pichia pastoris
US9539324B2 (en) 2010-12-01 2017-01-10 Alderbio Holdings, Llc Methods of preventing inflammation and treating pain using anti-NGF compositions
US9067988B2 (en) 2010-12-01 2015-06-30 Alderbio Holdings Llc Methods of preventing or treating pain using anti-NGF antibodies
US9078878B2 (en) 2010-12-01 2015-07-14 Alderbio Holdings Llc Anti-NGF antibodies that selectively inhibit the association of NGF with TrkA, without affecting the association of NGF with p75
CN103619879A (zh) 2010-12-01 2014-03-05 奥尔德生物控股有限责任公司 抗ngf组合物及其用途
US9884909B2 (en) 2010-12-01 2018-02-06 Alderbio Holdings Llc Anti-NGF compositions and use thereof
HRP20211873T1 (hr) 2011-05-20 2022-03-04 H. Lundbeck A/S Proizvodnja visoke čistoće proteina s više podjedinica kao što su protutijela u transformiranim mikrobima kao što je pichia pastoris
US10150968B2 (en) 2011-08-19 2018-12-11 Alderbio Holdings Llc Multi-copy strategy for high-titer and high-purity production of multi-subunit proteins such as antibodies in transformed microbes such as Pichia pastoris
US9062104B2 (en) 2013-03-14 2015-06-23 Alderbio Holdings Llc Therapeutic use of antibodies to HGF
US9732150B2 (en) * 2013-03-14 2017-08-15 Alderbio Holdings Llc Therapeutic use of antibodies to HGF
EP3092251B1 (en) * 2014-01-06 2021-01-20 F. Hoffmann-La Roche AG Monovalent blood brain barrier shuttle modules
TWI767858B (zh) 2014-11-16 2022-06-11 美商亞雷生物製藥股份有限公司 (S)-N-(5-((R)-2-(2,5-二氟苯基)-吡咯啶-1-基)-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-3-羥基吡咯啶-1-甲醯胺硫酸氫鹽結晶型
MA41097A (fr) * 2014-12-05 2017-10-10 Glenmark Pharmaceuticals Sa Anticorps anti-trka à propriétés inhibitrices améliorées et dérivés desdits anticorps destinés à être utilisés pour traiter les douleurs osseuses
WO2016168768A2 (en) 2015-04-16 2016-10-20 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Anti-pacap antibodies and uses thereof
WO2016207240A1 (en) 2015-06-24 2016-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-transferrin receptor antibodies with tailored affinity
NZ741067A (en) 2015-10-02 2023-07-28 Hoffmann La Roche Bispecific anti-human cd20/human transferrin receptor antibodies and methods of use
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
CA3003153A1 (en) 2015-10-26 2017-05-04 Loxo Oncology, Inc. Point mutations in trk inhibitor-resistant cancer and methods relating to the same
EP4292649A3 (en) * 2016-03-18 2024-02-21 Staidson(Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Fusion protein comprising nerve growth factor and preparation method and use thereof
US10045991B2 (en) 2016-04-04 2018-08-14 Loxo Oncology, Inc. Methods of treating pediatric cancers
DK3439662T3 (da) 2016-04-04 2024-09-02 Loxo Oncology Inc Væskeformige formuleringer af (s)-n-(5-((r)-2-(2,5-difluorphenyl)-pyrrolidin-1-yl)-pyrazol[1,5-a]pyrimidin-3-yl)-3-hydroxypyrrolidin-1-carboxamid
CA3020990A1 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Humanized anti-pacap antibodies and uses thereof
EP3458456B1 (en) 2016-05-18 2020-11-25 Loxo Oncology Inc. Preparation of (s)-n-(5-((r)-2-(2,5-difluorophenyl)pyrrolidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl)-3-hydroxypyrrolidine-1-carboxamide
JOP20190092A1 (ar) 2016-10-26 2019-04-25 Array Biopharma Inc عملية لتحضير مركبات بيرازولو[1، 5-a]بيريميدين وأملاح منها
JOP20190213A1 (ar) 2017-03-16 2019-09-16 Array Biopharma Inc مركبات حلقية ضخمة كمثبطات لكيناز ros1
CN110959013A (zh) * 2017-06-22 2020-04-03 埃派斯进有限公司 抗vista抗体和使用方法
WO2019005637A2 (en) * 2017-06-25 2019-01-03 Systimmune, Inc. MULTIPECIFIC ANTIBODIES AND METHODS OF PRODUCTION AND USE THEREOF
TWI902089B (zh) 2017-06-25 2025-10-21 美商西雅圖免疫公司 引導及導航控制蛋白質以及彼之製造及使用方法
WO2019060869A1 (en) 2017-09-25 2019-03-28 Discitisdx, Inc. METHODS FOR TREATING DEGENERATIVE DISC DISEASE AND CHRONIC LOMBALGIA
CN109929035B (zh) * 2017-12-15 2022-06-28 安源医药科技（上海）有限公司 抗人ngf抗体及其制备方法和用途
AR114110A1 (es) 2018-02-28 2020-07-22 Lilly Co Eli Anticuerpo anti-trka
US10765630B2 (en) 2018-03-16 2020-09-08 SEN-JAM Pharmaceutical LLC Methods and compositions to treat enteropathic arthritis
CN111527108A (zh) 2018-03-27 2020-08-11 西雅图免疫公司 制导和导航控制蛋白的制造和使用方法
CN108623687A (zh) * 2018-04-17 2018-10-09 中山康方生物医药有限公司 神经生长因子的单克隆抗体及其编码基因和应用
WO2020248942A1 (zh) * 2019-06-10 2020-12-17 山东博安生物技术有限公司 抗β-NGF纳米抗体及其应用
CN117003868B (zh) * 2020-04-17 2024-04-16 珠海泰诺麦博制药股份有限公司 抗人神经生长因子的抗体
CN112625128B (zh) * 2020-08-06 2022-11-08 熙源安健医药（上海）有限公司 抗ngf抗体及其抗原结合片段、其制备方法和应用
US20230398232A1 (en) * 2020-09-28 2023-12-14 Navrogen, Inc. Composition and Use of Alternatively Formatted Anti-Mesothelin Antibodies for the Treatment of Cancer
CN115433278A (zh) * 2021-06-05 2022-12-06 苏州缔码生物科技有限公司 结合cs1蛋白兔重组单克隆抗体及应用
US20240132589A1 (en) * 2022-10-18 2024-04-25 Oncoresponse, Inc. Lilrb2 antibody products and methods
TW202509071A (zh) * 2023-05-12 2025-03-01 丹麥商珍美寶股份有限公司 能夠與ｏｘ４０結合之抗體、其變異體及其用途
AU2024275319A1 (en) * 2023-05-19 2025-12-18 Ltz Therapeutics Inc. Antibodies and uses thereof
CN118440185B (zh) * 2024-05-22 2024-11-19 宁夏大学 抗bhv-1的重组兔单克隆抗体及双抗体夹心elisa试剂和应用
CN118465261B (zh) * 2024-07-09 2024-10-15 浙江康佰裕生物科技有限公司 一种检测逆转录病毒载体物理滴度的elisa试剂盒
CN118702814A (zh) * 2024-07-12 2024-09-27 麦里生物科技(上海)有限公司 一种抗ngf单克隆抗体及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005019266A2 (en) 2003-07-15 2005-03-03 Amgen Inc. Human anti-ngf neutralizing antibodies as selective ngf pathway inhibitors
US20090041717A1 (en) 2007-08-10 2009-02-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. High affinity human antibodies to human nerve growth factor

Family Cites Families (351)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4230691A (en) 1978-05-23 1980-10-28 The Massachusetts General Hospital Nerve growth factor antibody and process
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
GB8725529D0 (en) 1987-10-30 1987-12-02 Delta Biotechnology Ltd Polypeptides
US5683894A (en) 1988-04-29 1997-11-04 University Of California Recombinant nerve growth factor
US6440928B1 (en) 1988-12-06 2002-08-27 Colorado State University Research Foundation Method for treating diabetic neuropathy with NGF
JP2989002B2 (ja) 1988-12-22 1999-12-13 キリン―アムジエン・インコーポレーテツド 化学修飾顆粒球コロニー刺激因子
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5766883A (en) 1989-04-29 1998-06-16 Delta Biotechnology Limited Polypeptides
US6262239B1 (en) 1989-05-18 2001-07-17 Yeda Research And Development Co., Ltd. TNF receptor-specific antibodies
FR2650598B1 (fr) 1989-08-03 1994-06-03 Rhone Poulenc Sante Derives de l'albumine a fonction therapeutique
US5656435A (en) 1989-08-28 1997-08-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibodies to peptides having NGF-like activity, said antibodies having no substantial cross-reactivity with NGF, and use thereof
US5180820A (en) 1989-08-30 1993-01-19 Barde Yves Alain Brain-derived neurotrophic factor
US5977307A (en) 1989-09-07 1999-11-02 Alkermes, Inc. Transferrin receptor specific ligand-neuropharmaceutical agent fusion proteins
US5672683A (en) 1989-09-07 1997-09-30 Alkermes, Inc. Transferrin neuropharmaceutical agent fusion protein
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
EP0542810A1 (en) 1990-08-02 1993-05-26 B.R. Centre Limited Methods for the production of proteins with a desired function
US5702906A (en) 1990-09-25 1997-12-30 Genentech, Inc. Antibodies to neurotrophic factor-4 (NT-4)
US6566091B1 (en) 1990-09-25 2003-05-20 Genentech, Inc. Neurotrophic factor
US5604202A (en) 1990-11-13 1997-02-18 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University, A Division Of Yeshiva University Use of NGF growth factors to treat drug-induced neuropathy
EP0564531B1 (en) 1990-12-03 1998-03-25 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins with altered binding properties
AU675916B2 (en) 1991-06-14 1997-02-27 Genentech Inc. Method for making humanized antibodies
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
FR2686899B1 (fr) 1992-01-31 1995-09-01 Rhone Poulenc Rorer Sa Nouveaux polypeptides biologiquement actifs, leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant.
US5830462A (en) 1993-02-12 1998-11-03 President & Fellows Of Harvard College Regulated transcription of targeted genes and other biological events
US6063625A (en) 1993-02-12 2000-05-16 Board Of Trustees Of Leland S, Stanford, Jr. University Regulated transcription of targeted genes and other biological events
US5869337A (en) 1993-02-12 1999-02-09 President And Fellows Of Harvard College Regulated transcription of targeted genes and other biological events
WO1994021293A1 (en) 1993-03-19 1994-09-29 Duke University Method of treatment of tumors with an antibody binding to tenascin
DK0802800T3 (da) 1993-08-12 2002-10-07 Neurotech Sa Biokompatible immunoisolatoriske kapsler indeholdende genetisk ændrede celler for levering af biologisk aktive molekyler
US5908623A (en) 1993-08-12 1999-06-01 Cytotherapeutics, Inc. Compositions and methods for the delivery of biologically active molecules using genetically altered cells contained in biocompatible immunoisolatory capsules
US6562596B1 (en) 1993-10-06 2003-05-13 Amgen Inc. Tissue inhibitor of metalloproteinase type three (TIMP-3) composition and methods
US5643575A (en) 1993-10-27 1997-07-01 Enzon, Inc. Non-antigenic branched polymer conjugates
US5753225A (en) 1993-12-03 1998-05-19 The Regents Of The University Of California Antibodies that mimic actions of neurotrophins
AU1552995A (en) 1993-12-17 1995-07-03 Spinal Cord Society Method for inducing dna synthesis in neurons
GB9402331D0 (en) 1994-02-07 1994-03-30 Univ Mcgill Nerve growth factor structural analogs and their uses
US6551618B2 (en) 1994-03-15 2003-04-22 University Of Birmingham Compositions and methods for delivery of agents for neuronal regeneration and survival
US5877016A (en) 1994-03-18 1999-03-02 Genentech, Inc. Human trk receptors and neurotrophic factor inhibitors
US5844092A (en) 1994-03-18 1998-12-01 Genentech, Inc. Human TRK receptors and neurotrophic factor inhibitors
US6024734A (en) 1994-03-31 2000-02-15 Brewitt; Barbara A. Treatment methods using homeopathic preparations of growth factors
US6291247B1 (en) 1994-05-11 2001-09-18 Queen's University At Kingston Methods of screening for factors that disrupt neurotrophin conformation and reduce neurotrophin biological activity
US7144983B1 (en) 1997-02-03 2006-12-05 Genentech, Inc. Pantropic neurotrophic factors
US5728803A (en) 1994-06-03 1998-03-17 Genentech, Inc. Pantropic neurotrophic factors
US5833979A (en) 1994-07-20 1998-11-10 Cytotherapeutics, Inc. Methods and compositions of growth control for cells encapsulated within bioartificial organs
AU3272695A (en) 1994-08-12 1996-03-07 Immunomedics Inc. Immunoconjugates and humanized antibodies specific for b-cell lymphoma and leukemia cells
US6271205B1 (en) 1994-09-21 2001-08-07 University Of Massachusetts Medical Center Cancer treatment by expression of differentiation factor receptor
US5759775A (en) 1994-10-27 1998-06-02 Genetech, Inc. Methods for detecting nucleic acids encoding AL--1 neurotrophic factor
US6096716A (en) 1994-12-12 2000-08-01 The Board Of Regents, The University Of Texas System Liposome-mediated transfection of central nervous system cells
US6211142B1 (en) 1995-03-10 2001-04-03 Genentech, Inc. Compositions comprising gas6 polypeptides and articles of manufacture comprising the same
US5688911A (en) 1995-05-03 1997-11-18 Schneider; Rainer Trk neurotrophin binding motifs
US6717031B2 (en) 1995-06-07 2004-04-06 Kate Dora Games Method for selecting a transgenic mouse model of alzheimer's disease
US5731284A (en) 1995-09-28 1998-03-24 Amgen Inc. Method for treating Alzheimer's disease using glial line-derived neurotrophic factor (GDNF) protein product
US20020090682A1 (en) 1995-10-23 2002-07-11 Tracy Willson Novel haemopoietin receptor and genetic sequences encoding same
US6610296B2 (en) 1995-10-26 2003-08-26 Genentech, Inc. Methods of enhancing cognitive function using an AL-1 neurotrophic factor immunoadhesin
GB9525180D0 (en) 1995-12-08 1996-02-07 Univ Mcgill Design of hormone-like antibodies with agonistic and antagonistic fuctions
JP2000507210A (ja) 1996-01-16 2000-06-13 パナヨタトス，ニコス 小分子送達のためのタンパク質吸蔵
US6406710B1 (en) 1996-01-16 2002-06-18 Nikos Panayotatos Protein occlusion for delivery of small molecules
US6299895B1 (en) 1997-03-24 2001-10-09 Neurotech S.A. Device and method for treating ophthalmic diseases
GB9608335D0 (en) 1996-04-23 1996-06-26 Univ Kingston Method of enhancing ngf-mediated neurite growth with low molecular weight analoues of p.75 ngfr 367-379
US6653104B2 (en) 1996-10-17 2003-11-25 Immunomedics, Inc. Immunotoxins, comprising an internalizing antibody, directed against malignant and normal cells
KR20000070357A (ko) 1997-01-23 2000-11-25 다께우찌 마사야쓰 당뇨병 치료제
US6777196B2 (en) 1997-02-18 2004-08-17 Genentech, Inc. Neurturin receptor
US6365373B2 (en) 1997-04-25 2002-04-02 Genentech, Inc. Nucleic acids encoding NGF variants
US7452863B1 (en) 1997-04-29 2008-11-18 Genentech, Inc. NGF variants
BR9810369A (pt) 1997-06-30 2000-09-05 Rhone Poulenc Rorer Sa Processo de transferência de ácido nucleico para o interior de um ou mais músculos estriados, in vivo, composição, ácido mucleico e campo elétrico, e, produto de combinação
AU8444698A (en) 1997-06-30 1999-01-25 Centre National De La Recherche Scientifique Improved method for transferring nucleic acid into multicelled eukaryo tic organism cells and combination therefor
US6063768A (en) 1997-09-04 2000-05-16 First; Eric R. Application of botulinum toxin to the management of neurogenic inflammatory disorders
US5990129A (en) 1997-09-23 1999-11-23 Eli Lilly And Company Methods for regulating trkA expression
US5968921A (en) 1997-10-24 1999-10-19 Orgegon Health Sciences University Compositions and methods for promoting nerve regeneration
US5928174A (en) 1997-11-14 1999-07-27 Acrymed Wound dressing device
US7282482B2 (en) 1998-04-08 2007-10-16 The Regents Of The University Of California NGF for the prevention of demyelination in the nervous system
US20030096753A1 (en) 1998-04-09 2003-05-22 Robertson Alan George Simpson Therapeutic agent
GB9807781D0 (en) 1998-04-09 1998-06-10 Univ Bristol Therapeutic agent
US6866842B1 (en) 1998-05-01 2005-03-15 University Of Pittsburgh Muscle-derived cells (MDCs) for treating muscle-or bone-related injury or dysfunction
US6428579B1 (en) 1998-07-01 2002-08-06 Brown University Research Foundation Implantable prosthetic devices coated with bioactive molecules
AU6151899A (en) 1998-09-23 2000-04-10 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The Methods of treating chronic pain
US6506599B1 (en) 1999-10-15 2003-01-14 Tai-Wook Yoon Method for culturing langerhans islets and islet autotransplantation islet regeneration
US6680292B1 (en) 1998-11-20 2004-01-20 The Salk Institute For Biological Studies Pharmaceutical composition comprising ribavirin and growth factors and methods of use
US6927024B2 (en) 1998-11-30 2005-08-09 Genentech, Inc. PCR assay
US6652864B1 (en) 1998-12-21 2003-11-25 Asilomar Pharmaceuticals, Inc. Compounds for intracellular delivery of therapeutic moieties to nerve cells
HU229520B1 (en) 1999-02-12 2014-01-28 Scripps Research Inst Methods for treatment of tumors and metastases using a combination of anti-angiogenic and immuno therapies
US6943153B1 (en) 1999-03-15 2005-09-13 The Regents Of The University Of California Use of recombinant gene delivery vectors for treating or preventing diseases of the eye
US7534866B2 (en) 2005-10-19 2009-05-19 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for generating bioactive assemblies of increased complexity and uses
US8119101B2 (en) 1999-05-10 2012-02-21 The Ohio State University Anti-CD74 immunoconjugates and methods of use
US7527787B2 (en) 2005-10-19 2009-05-05 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Multivalent immunoglobulin-based bioactive assemblies
US8383081B2 (en) 1999-05-10 2013-02-26 Immunomedics, Inc. Anti-CD74 immunoconjugates and methods of use
US7550143B2 (en) 2005-04-06 2009-06-23 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Methods for generating stably linked complexes composed of homodimers, homotetramers or dimers of dimers and uses
IT1306704B1 (it) 1999-05-26 2001-10-02 Sirs Societa Italiana Per La R Anticorpi monoclonali e suoi derivati sintetici o biotecnologici ingrado di agire come molecole antagoniste per il ngf.
US20020177120A1 (en) 1999-06-04 2002-11-28 Kathryn J. Elliott Assays for apotosis modulators
US20030152562A1 (en) 2001-10-23 2003-08-14 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Vitro micro-organs, and uses related thereto
US8106098B2 (en) 1999-08-09 2012-01-31 The General Hospital Corporation Protein conjugates with a water-soluble biocompatible, biodegradable polymer
US7160924B2 (en) 2002-07-19 2007-01-09 The General Hospital Corporation Protein conjugates with a water-soluble biocompatible, biodegradable polymer
DE60042338D1 (de) 1999-10-04 2009-07-16 Univ New Jersey Med TAR RNA bindende Peptide
KR100416242B1 (ko) 1999-12-22 2004-01-31 주식회사 삼양사 약물전달체용 생분해성 블록 공중합체의 액체 조성물 및이의 제조방법
US6548062B2 (en) 2000-02-29 2003-04-15 Cephalon, Inc. Method of treating cancer with anti-neurotrophin agents
MXPA02010011A (es) 2000-04-11 2003-04-25 Genentech Inc Anticuerpos multivalentes y usos para los mismos.
FR2807660A1 (fr) 2000-04-13 2001-10-19 Warner Lambert Co Utilisation d'antagonistes du ngf pour la prevention ou le traitement de douleurs viscerales chroniques
US20040058393A1 (en) 2000-04-17 2004-03-25 Naoshi Fukishima Agonist antibodies
US7473555B2 (en) 2000-04-27 2009-01-06 Geron Corporation Protocols for making hepatocytes from embryonic stem cells
AU2001257532A1 (en) 2000-05-03 2001-11-12 University Of Washington Adenoviral vectors for tumor specific gene expression and uses thereof
DK1292680T3 (da) 2000-06-22 2010-03-08 Genentech Inc Agonist-anti-TrkC monoklonale antistoffer
DK1334103T3 (da) 2000-07-07 2011-04-04 Spectrum Pharmaceuticals Inc Fremgangsmåde til behandling af sygdomsfremkaldt perifer neuropati og beslægtede tilstande
US20020164333A1 (en) 2000-07-10 2002-11-07 The Scripps Research Institute Bifunctional molecules and vectors complexed therewith for targeted gene delivery
US6719970B1 (en) 2000-07-10 2004-04-13 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Method of generating cartilage
DE60124915T2 (de) 2000-07-11 2007-11-29 Binie V. Belaire Lipps Synthetische peptide gegen neurologische krankheiten
US20070122904A1 (en) 2000-09-29 2007-05-31 Unisearch Limited Method and apparatus for culturing cells
US20040242847A1 (en) 2000-10-20 2004-12-02 Naoshi Fukushima Degraded agonist antibody
US20020128179A1 (en) 2000-12-01 2002-09-12 Tacon William C. Shaped microparticles for pulmonary drug delivery
US20020115173A1 (en) 2000-12-11 2002-08-22 Children's Medical Center Corporation Short peptides from the 'A-region' of protein kinases which selectively modulate protein kinase activity
US7169568B2 (en) 2000-12-18 2007-01-30 New York University Method for screening molecules that exert a neurotrophic effect through activation of neurotrophin receptors
DE10101546B4 (de) 2001-01-15 2005-04-28 Man Technologie Gmbh Verfahren zur Herstellung einer hochtemperaturfesten Faserverbundkeramik und so hergestellte Bauteile
US6602241B2 (en) 2001-01-17 2003-08-05 Transvascular, Inc. Methods and apparatus for acute or chronic delivery of substances or apparatus to extravascular treatment sites
WO2002057496A2 (en) 2001-01-18 2002-07-25 Socratech L.L.C. Gene expression profiling of endothelium in alzheimer's disease
US6596262B2 (en) 2001-02-15 2003-07-22 Aeropharm Technology Incorporated Modulated release particles for aerosol delivery
US6551578B2 (en) 2001-02-15 2003-04-22 Aeropharm Technology Incorporated Modulated release particles for aerosol delivery
US6485707B2 (en) 2001-02-15 2002-11-26 Aeropharm Technology Incorporated Modulated release particles for aerosol delivery
US6749845B2 (en) 2001-02-15 2004-06-15 Aeropharm Technology, Inc. Modulated release particles for lung delivery
US6544497B2 (en) 2001-02-15 2003-04-08 Aeropharm Technology Incorporated Modulated release particles for aerosol delivery
US6475468B2 (en) 2001-02-15 2002-11-05 Aeropharm Technology Incorporated Modulated release particles for aerosol delivery
US7029916B2 (en) 2001-02-21 2006-04-18 Maxcyte, Inc. Apparatus and method for flow electroporation of biological samples
AU2002257703A1 (en) 2001-03-23 2002-10-08 Biopharm Gesellschaft Zur Biotechnologischen Entwicklung Von Pharmaka Mbh Use of cytokines of the tgf-beta superfamily for the treatment and diagnosis of skin related disorders
EP1373905A2 (de) 2001-04-06 2004-01-02 BioVisioN AG Verfahren zum nachweis chronisch-demenzieller erkrankungen, zugehörige peptide und nachweisreagenzien
CA2447986A1 (en) 2001-05-25 2002-12-05 Cornell Research Foundation, Inc. High affinity ligand for p75 neurotrophin receptor
JP2002348234A (ja) 2001-05-28 2002-12-04 Purotekku:Kk 薬物封入無機物微粒子、その製造法及び薬物封入無機物微粒子製剤
AU2002308722B2 (en) 2001-05-30 2007-05-17 Genentech, Inc. Anti-NGF antibodies for the treatment of various disorders
WO2002102232A2 (en) 2001-06-14 2002-12-27 The Regents Of The University Of California A novel signaling pathway for the production of inflammatory pain and neuropathy
WO2004003019A2 (en) 2002-06-28 2004-01-08 Domantis Limited Immunoglobin single variant antigen-binding domains and dual-specific constructs
US7063860B2 (en) 2001-08-13 2006-06-20 University Of Pittsburgh Application of lipid vehicles and use for drug delivery
EP1456345B1 (en) 2001-08-22 2016-07-20 Maxcyte, Inc. Apparatus and method for electroporation of biological samples
WO2003055989A2 (en) 2001-12-21 2003-07-10 Mount Sinai Hospital Cellular compositions and methods of making and using them
US20050069549A1 (en) 2002-01-14 2005-03-31 William Herman Targeted ligands
US20050142539A1 (en) 2002-01-14 2005-06-30 William Herman Targeted ligands
IL152904A0 (en) 2002-01-24 2003-06-24 Gamida Cell Ltd Utilization of retinoid and vitamin d receptor antagonists for expansion of renewable stem cell populations
CA2369810C (en) 2002-01-30 2007-08-07 1474791 Ontario Limited Method of treating pain
WO2003066821A2 (en) 2002-02-04 2003-08-14 The Johns Hopkins University Molecules interacting with casl (mical) polynucleotides, polypeptides, and methods of using the same
US8491896B2 (en) 2002-06-14 2013-07-23 Immunomedics, Inc. Anti-pancreatic cancer antibodies
WO2003072753A2 (en) 2002-02-27 2003-09-04 Emory University Multimeric binding complexes
AU2003214614B2 (en) 2002-03-18 2008-11-20 Gamida-Cell Ltd. Methods of inducing differentiation in ex vivo expanded stem cells
US20040009589A1 (en) 2002-03-26 2004-01-15 Shulamit Levenberg Endothelial cells derived from human embryonic stem cells
US20060093589A1 (en) 2004-02-19 2006-05-04 Warrington Kenneth H Vp2-modified raav vector compositions and uses therefor
SI1496944T1 (sl) 2002-05-01 2009-02-28 Univ Florida Izboljšani sistemi ekspresije RAAV za genetsko modifikacijo specifičnih kapsidnih proteinov
WO2004000164A2 (en) 2002-06-24 2003-12-31 Amniotech, Inc. Amniotic membrane mediated delivery of bioactive molecules
AU2003279750A1 (en) 2002-06-28 2004-01-19 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for modulating physiology of epithelial junctional adhesion molecules for enhanced mucosal delivery of therapeutic compounds
US8263375B2 (en) 2002-12-20 2012-09-11 Acea Biosciences Dynamic monitoring of activation of G-protein coupled receptor (GPCR) and receptor tyrosine kinase (RTK) in living cells using real-time microelectronic cell sensing technology
US7745151B2 (en) 2002-08-02 2010-06-29 Children's Medical Center Corporation Methods of determining binding between Nogo receptor and p75 neurotrophin receptor
US20050074865A1 (en) 2002-08-27 2005-04-07 Compound Therapeutics, Inc. Adzymes and uses thereof
US6919426B2 (en) 2002-09-19 2005-07-19 Amgen Inc. Peptides and related molecules that modulate nerve growth factor activity
WO2004031385A1 (ja) 2002-10-04 2004-04-15 Kirin Beer Kabushiki Kaisha ヒト人工染色体（ｈａｃ）ベクター
EP1545615A4 (en) 2002-10-04 2006-03-01 Rinat Neuroscience Corp METHODS OF TREATING CARDIAC ARRHYTHMIA AND PREVENTING DEATH OF CARDIAC ARRHYTHMIA USING NGF ANTAGONISTS
UA80447C2 (en) 2002-10-08 2007-09-25 Methods for treating pain by administering nerve growth factor antagonist and opioid analgesic
WO2004032870A2 (en) * 2002-10-08 2004-04-22 Rinat Neuroscience Corp. Methods for treating post-surgical pain by admisnistering a nerve growth factor antagonist and compositions containing the same
US7255860B2 (en) 2002-10-08 2007-08-14 Rinat Neuroscience Corp. Methods for treating post-surgical pain by administering an anti-nerve growth factor antagonist antibody
PL376473A1 (en) 2002-10-22 2005-12-27 Waratah Pharmaceuticals, Inc. Treatment of diabetes
FR2846426B1 (fr) 2002-10-28 2004-12-10 Bio Merieux Procede de dosage du ngf pour le diagnostic in vitro du cancer du sein et utilisation en therapie
US20050054097A1 (en) 2002-11-17 2005-03-10 Tony Peled EX-VIVO expansion of hematopoietic system cell populations in mononuclear cell cultures
ATE545429T1 (de) 2002-12-20 2012-03-15 Lundbeck & Co As H Modulation der neurotrophinaktivität;screeningsverfahren
SI2270048T1 (sl) 2002-12-24 2016-01-29 Rinat Neuroscience Corp. Protitelesa proti NGF-ju in postopki uporabe le-teh
US9498530B2 (en) 2002-12-24 2016-11-22 Rinat Neuroscience Corp. Methods for treating osteoarthritis pain by administering a nerve growth factor antagonist and compositions containing the same
US7569364B2 (en) 2002-12-24 2009-08-04 Pfizer Inc. Anti-NGF antibodies and methods using same
WO2004065560A2 (en) 2003-01-18 2004-08-05 Rinat Neuroscience Corp. Methods of screening for modulators of nerve growth factor
EP1585768A2 (en) 2003-01-23 2005-10-19 Genentech, Inc. Methods for producing humanized antibodies and improving yield of antibodies or antigen binding fragments in cell culture
US7655231B2 (en) 2003-02-19 2010-02-02 Pfizer Inc. Methods for treating pain by administering a nerve growth factor antagonist and an NSAID
WO2004085712A2 (en) 2003-03-24 2004-10-07 Penn State Research Foundation Multi-functional polymeric materials and their uses
US20060193825A1 (en) 2003-04-29 2006-08-31 Praecis Phamaceuticals, Inc. Pharmaceutical formulations for sustained drug delivery
DE202004009060U1 (de) 2003-05-16 2004-08-12 Blue Membranes Gmbh Biokompatibel beschichtete medizinische Implantate
AU2004257142A1 (en) 2003-05-30 2005-01-27 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Antibodies and fusion proteins that include engineered constant regions
US20070020696A1 (en) 2003-07-10 2007-01-25 Marino Zerial Appl proteins as rab5 effectors
EP1500399A1 (en) 2003-07-24 2005-01-26 Institut Pasteur Active or passive immunization against proapoptotic neurotrophins for the treatment or prevention of neurodegenerative deseases
US20050027110A1 (en) 2003-07-24 2005-02-03 Michael Russell Drug delivery in the nervous system
US7205387B2 (en) 2003-08-28 2007-04-17 Agency For Science, Technology And Research Recombinant polypeptide useful for neurotrophin receptor mediated gene delivery and as neurotrophin agonist
US20050085417A1 (en) 2003-10-16 2005-04-21 Thomas Jefferson University Compounds and methods for diagnostic imaging and therapy
US7846891B2 (en) 2003-10-17 2010-12-07 Massachusetts Institute Of Technology Self-assembling peptides for regeneration and repair of neural tissue
NZ547279A (en) 2003-10-22 2008-04-30 Keck Graduate Inst Methods of synthesizing heteromultimeric polypeptides in yeast using a haploid mating strategy
US8133733B2 (en) 2003-10-24 2012-03-13 Gencia Corporation Nonviral vectors for delivering polynucleotides to target tissues
US20090123468A1 (en) 2003-10-24 2009-05-14 Gencia Corporation Transducible polypeptides for modifying metabolism
EP1689786B1 (en) 2003-11-30 2014-05-14 Yeda Research And Development Co., Ltd. Methods and agents for immune modulation and methods for identifying immune modulators
US20050123526A1 (en) 2003-12-01 2005-06-09 Medtronic Inc. Administration of growth factors for neurogenesis and gliagenesis
US8093205B2 (en) 2003-12-01 2012-01-10 Medtronic, Inc. Method for treating a stroke by implanting a first therapy delivery element in the CNS and a second therapy delivery element in a damaged tissue of the CNS to promote neurogenesis
EP1695061A4 (en) 2003-12-16 2008-02-20 Childrens Medical Center METHOD OF TREATING NEUROLOGICAL DISORDERS
BRPI0417107A (pt) 2003-12-19 2007-02-06 Genentech Inc fragmento de anticorpo, métodos de preparação do fragmento de anticorpo, ácido nucléico isolado, composições, célula hospedeira e métodos de fabricação e de geração de fragmento de anticorpo
DE10360483B4 (de) 2003-12-22 2007-11-15 Scil Proteins Gmbh Expressionsvektor und dessen Verwendung
ITRM20030601A1 (it) 2003-12-24 2005-06-25 Lay Line Genomics Spa Metodo per l'umanizzazione di anticorpi e anticorpi umanizzati con esso ottenuti.
WO2005065721A2 (en) 2003-12-30 2005-07-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Use of an anti-inflammatory compound for the reduction of inflammation secondary to the administration of a lipid-nucleic acid complex
US8883160B2 (en) 2004-02-13 2014-11-11 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Dock-and-lock (DNL) complexes for therapeutic and diagnostic use
US8562988B2 (en) 2005-10-19 2013-10-22 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Strategies for improved cancer vaccines
US20050260711A1 (en) 2004-03-30 2005-11-24 Deepshikha Datta Modulating pH-sensitive binding using non-natural amino acids
SG152226A1 (en) 2004-04-07 2009-05-29 Rinat Neuroscience Corp Methods for treating bone cancer pain by administering a nerve growth factor antagonist
US20050233309A1 (en) 2004-04-19 2005-10-20 Hankins William D Kinetic process for the detection, diagnosis, processing, and monitoring of clonal cell populations
ITRM20040212A1 (it) 2004-04-30 2004-07-30 Lay Line Genomics Spa Animale transgenico non umano come modello per malattie neurodegenerative e per la loro diagnosi precoce.
BRPI0510716A (pt) 2004-05-05 2007-11-20 Merrimack Pharmaceuticals Inc uso de um agente de ligação bi-especìfico, agente de ligação bi-especìfico, composição de um agente de ligação bi-especìfico, e, kit
CA2569240A1 (en) 2004-06-01 2005-12-15 Domantis Limited Drug fusion comprising a polypeptide drug and an immunoglobulin heavy chain variable domain specific for serum albumin
EP1778253A4 (en) 2004-06-10 2009-04-22 Inst Medical W & E Hall GLYCOSYL PHOSPHATIDYLINOSITOL-GLYCAN SIGNALING OVER INTEGRINS AS GLYCAN-SPECIFIC RECEPTORS
US7740861B2 (en) 2004-06-16 2010-06-22 University Of Massachusetts Drug delivery product and methods
AU2005257064B2 (en) 2004-06-28 2012-05-10 Yeda Research And Development Co. Ltd. Chimeric proteins and uses thereof
US7514088B2 (en) 2005-03-15 2009-04-07 Allergan, Inc. Multivalent Clostridial toxin derivatives and methods of their use
ME00226B (me) 2004-07-15 2011-02-10 Medarex Llc Humana anti-ngf neutrališuća antitijela kao selektivni inhibitori ngf signalne kaskade
EP1778856A4 (en) 2004-08-02 2008-05-28 Childrens Medical Center BLOOD BIOMARKER FOR CANCER
RU2398777C2 (ru) 2004-08-05 2010-09-10 Дженентек, Инк. ГУМАНИЗИРОВАННЫЕ АНТАГОНИСТЫ, НАПРАВЛЕННЫЕ ПРОТИВ c-met
US20060068469A1 (en) 2004-08-17 2006-03-30 Research Development Foundation Bacterial vector systems
KR100876771B1 (ko) 2004-08-17 2009-01-07 삼성전자주식회사 무선 통신 시스템에서 제어 정보 압축 방법과 스캐닝 정보 송수신 방법 및 장치
US7892565B2 (en) 2004-09-01 2011-02-22 Allergan, Inc. Degradable clostridial toxins
JP4769810B2 (ja) 2004-09-14 2011-09-07 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス， インコーポレイテッド イミダゾキノリン化合物
BRPI0516011A (pt) 2004-09-24 2008-08-19 Amgen Inc moléculas fc modificadas
US7629325B2 (en) 2004-10-11 2009-12-08 Technion Research & Development Foundation Ltd. Human Sef isoforms and methods of using same for cancer diagnosis and gene therapy
US20060159666A1 (en) 2004-10-22 2006-07-20 Willing Alison E Method of potentiating inflammatory and immune modulation for cell and drug therapy
EP1815865A4 (en) 2004-11-08 2010-08-25 Ono Pharmaceutical Co THERAPEUTIC AGENT AGAINST DIABETES WITH A PROTEASE-INHIBITING COMPOUND
WO2006055841A2 (en) 2004-11-19 2006-05-26 University Of Florida Research Foundation, Inc. Indefinite culture of human adult glia without immortalization and therapeutic uses thereof
WO2006074399A2 (en) 2005-01-05 2006-07-13 Biogen Idec Ma Inc. Multispecific binding molecules comprising connecting peptides
AU2006206848B2 (en) 2005-01-24 2012-05-31 Pepscan Systems B.V. Binding compounds, immunogenic compounds and peptidomimetics
CN101107268B (zh) * 2005-01-24 2012-06-27 剑桥抗体技术有限公司 针对ngf的特异性结合成员
CA2595695A1 (en) 2005-01-25 2006-08-03 Cell Therapeutics, Inc. Biologically active protein conjugates comprising (nn[s/t]) peptide repeats and having increased plasma half-life
WO2006084173A1 (en) 2005-02-04 2006-08-10 The Johns Hopkins University Electroporation gene therapy gun system
WO2006088867A2 (en) 2005-02-15 2006-08-24 Medistem Laboratories, Incorporated Method for expansion of stem cells
WO2006101634A1 (en) 2005-02-17 2006-09-28 The Regents Of The University Of California Müller cell specific gene therapy
US20090136505A1 (en) 2005-02-23 2009-05-28 Johanna Bentz Intranasal Administration of Active Agents to the Central Nervous System
ES2829566T3 (es) 2005-03-03 2021-06-01 Immunomedics Inc Anticuerpos L243 humanizados
JP2008532521A (ja) 2005-03-09 2008-08-21 ボード オブ リージェンツ， ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム 癌治療遺伝子の腫瘍選択的および高効率の発現のための、新規なｈＴＭＣプロモーターおよびベクター
US7754861B2 (en) 2005-03-23 2010-07-13 Bio-Rad Laboratories, Inc. Method for purifying proteins
US8349332B2 (en) 2005-04-06 2013-01-08 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Multiple signaling pathways induced by hexavalent, monospecific and bispecific antibodies for enhanced toxicity to B-cell lymphomas and other diseases
CA2607475A1 (en) 2005-04-22 2006-11-02 Genentech, Inc. Method for treating dementia or alzheimer's disease with a cd20 antibody
KR20080026562A (ko) 2005-06-02 2008-03-25 갤럭시 바이오테크, 엘엘씨 항체를 이용한 뇌종양 치료 방법
PA8678401A1 (es) 2005-06-06 2009-05-15 Wyeth Corp Anticuerpos monoclonales anti-trkb y sus usos
ITRM20050290A1 (it) 2005-06-07 2006-12-08 Lay Line Genomics Spa Uso di molecole in grado di inibire il legame tra ngf e il suo recettore trka come analgesici ad effetto prolungato.
ATE423135T1 (de) 2005-06-13 2009-03-15 Primm Srl Heterodimere peptide mit ngf aktivität und deren verwendung zur behandlung von neurodegenerativen krankheiten
EP3673919A1 (en) 2005-06-14 2020-07-01 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
WO2006138343A2 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Raptor Pharmaceutical Inc. Compositions comprising receptor - associated protein (rap) variants specific for lrp2 and uses thereof
ITRM20050332A1 (it) 2005-06-24 2006-12-25 Lay Line Genomics Spa Uso di molecole in grado di bloccare l'attivita' di trka per potenziare gli effetti di analgesici oppiacei sul dolore.
US8008453B2 (en) 2005-08-12 2011-08-30 Amgen Inc. Modified Fc molecules
CA2619244A1 (en) 2005-08-15 2007-02-22 Arana Therapeutics Limited Engineered antibodies with new world primate framework regions
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EP1924606A4 (en) 2005-08-25 2010-01-13 Repair Technologies Inc DEVICES, COMPOSITIONS AND METHODS FOR PROTECTING AND REPAIRING CELLS AND TISSUE
WO2007035906A2 (en) 2005-09-21 2007-03-29 The Regents Of The University Of California Systems and methods for imaging-treatment of pain
US8142781B2 (en) 2005-10-07 2012-03-27 Armagen Technologies, Inc. Fusion proteins for blood-brain barrier delivery
US8008259B2 (en) 2005-11-07 2011-08-30 Copenhagen University, Techtrans Unit Neurotrophin-derived peptide sequences
EP2535403B1 (en) 2005-12-08 2019-06-19 University Of Louisville Research Foundation, Inc. Very small embryonic-like (VSEL) stem cells and methods of isolating and using the same
WO2007070983A1 (en) 2005-12-22 2007-06-28 Apollo Life Sciences Limited Transdermal delivery of pharmaceutical agents
WO2007078922A2 (en) 2005-12-30 2007-07-12 Neurotech Usa Inc. Micronized device for the delivery of biologically active molecules and methods of use thereof
US7342146B2 (en) 2006-01-11 2008-03-11 Industrial Technology Research Institute Neurodegenerative non-human transgenic mammal expressing TrkA fusion protein
KR100784485B1 (ko) 2006-01-18 2007-12-11 한국과학기술연구원 생분해성 온도 감응성 폴리포스파젠계 하이드로젤, 그의제조방법 및 그의 용도
US7520888B2 (en) 2006-02-14 2009-04-21 Warsaw Orthopedic, Inc. Treatment of the vertebral column
LT1988910T (lt) 2006-02-28 2018-01-10 Kodiak Sciences Inc. Akriloiloksietilfosforilcholiną turintys polimero konjugatai ir jų gavimo būdas
CA2647632C (en) 2006-03-27 2017-06-27 University Of Maryland Biotechnology Institute Glycoprotein synthesis and remodeling by enzymatic transglycosylation
KR100746962B1 (ko) 2006-04-04 2007-08-07 한국과학기술연구원 온도 감응성 포스파젠계 고분자-생리 활성 물질 복합체,그의 제조방법 및 그의 용도
HUE030903T2 (en) 2006-04-25 2017-06-28 Univ California Administration of growth factors for the treatment of CNS disorders
CA2651285C (en) 2006-05-15 2014-08-19 Immunomedics, Inc. Methods and compositions for treatment of human immunodeficiency virus infection with conjugated antibodies or antibody fragments
CN101600793B (zh) 2006-05-19 2013-06-26 奥尔德生物制药公司 用于获得抗原特异性b细胞的克隆群体的培养方法
US8623610B2 (en) 2006-05-22 2014-01-07 California Institute Of Technology Chondroitin sulfate binding proteins and modulators thereof
WO2007146811A2 (en) 2006-06-09 2007-12-21 University Of Miami Assessment of cellular composition and fractional viability and uses thereof
US8475788B2 (en) 2006-06-14 2013-07-02 Stemnion, Inc. Methods of treating spinal cord injury and minimizing scarring
TW200817512A (en) 2006-07-07 2008-04-16 Kirin Pharma Kk Human artificial chromosome (hac) vector, and human cell pharmaceutical comprising human artificial chromosome (hac) vector
US20080132427A1 (en) 2006-07-21 2008-06-05 Yao Zhuang Cell systems and methods for detecting proliferation acitvity
DE602006013809D1 (de) 2006-07-24 2010-06-02 Facultad De Medicina Universid Antikörper, Antikörperfragmente und scFv die an posttranslational modifizierte Neurotrophine binden
US8642040B2 (en) 2006-07-24 2014-02-04 Biogen Idec Ma Inc. Methods for promoting myelination, neuronal survival and oligodendrocyte differentiation via administration of Sp35 or TrkA antagonists
WO2008021196A2 (en) 2006-08-09 2008-02-21 The Mclean Hospital Corporation Methods and compositions for the treatment of medical disorders
WO2008024499A2 (en) 2006-08-25 2008-02-28 Duke University Methods for in vivo identification of endogenous mrna targets of micrornas
US20090004742A1 (en) 2006-11-01 2009-01-01 Duke University Selection of antigen-specific t cells
GB0622688D0 (en) 2006-11-14 2006-12-27 Diosamine Dev Corp Novel compounds
JP5576659B2 (ja) 2006-12-05 2014-08-20 ザ ロイヤル インスティテューション フォー ジ アドバンスメント オブ ラーニング／ マギル ユニバーシティ Ｔｒｋレセプター調節因子の使用方法
US20080139790A1 (en) 2006-12-08 2008-06-12 Jennings Philip A Chimeric antibodies
DK2120997T3 (en) 2006-12-21 2017-05-08 H Lundbeck As MODULATION OF PRO-NEUROTROPHIN ACTIVITY
CA2671903A1 (en) 2006-12-22 2008-07-03 Genentech, Inc. Dr6 antagonists and uses thereof in treating neurological disorders
WO2008086079A2 (en) 2007-01-03 2008-07-17 Medtronic, Inc. Compositions comprising rnai and a neurotrophic factor and uses thereof
WO2008089148A1 (en) 2007-01-12 2008-07-24 Biomarin Pharmaceutical Inc. Method of treating a metabolic or neuropsychiatry disorder with a bh4 derivative prodrug
KR20090114430A (ko) 2007-02-02 2009-11-03 베일러 리서치 인스티튜트 항원-제시 세포 상에서 발현된 ｄｃｉｒ에 대한 항원 표적화에 기초한 백신
KR20090114425A (ko) 2007-02-02 2009-11-03 베일러 리서치 인스티튜트 표적화 사람화된 모노클로날 항체와 복합체화된 다가변성 항원
WO2008101215A1 (en) 2007-02-16 2008-08-21 Varian Medical Systems Technologies, Inc. Preparative regimen for engraftment, growth and differentiation of non-hematopoeitic cells in vivo
NZ579010A (en) 2007-02-20 2012-03-30 Anaptysbio Inc Somatic hypermutation systems
CA2717659C (en) 2007-02-23 2017-08-22 Baylor Research Institute Therapeutic applications of activation of human antigen-presenting cells through dectin-1
TW200900078A (en) 2007-02-23 2009-01-01 Baylor Res Inst Activation of human antigen-presenting cells through CLEC-6
US20110268776A1 (en) 2007-04-25 2011-11-03 Schapira Jay N Programmed-release, nanostructured biological construct for stimulating cellular engraftment for tissue regeneration
TR201905366T4 (tr) 2007-05-21 2019-05-21 Alderbio Holdings Llc IL-6 antikorları ve bunların kullanımı.
US9056905B2 (en) 2007-05-21 2015-06-16 Alderbio Holdings Llc Antibodies to TNF-α and use thereof
TWI501976B (zh) 2007-05-21 2015-10-01 Alder Biopharmaceuticals Inc 抗ＴＮＦ－α之抗體及其用途
AU2008262490B2 (en) 2007-05-22 2011-11-17 Amgen Inc. Compositions and methods for producing bioactive fusion proteins
US20090232801A1 (en) 2007-05-30 2009-09-17 Abbot Laboratories Humanized Antibodies Which Bind To AB (1-42) Globulomer And Uses Thereof
US20090175847A1 (en) 2007-05-30 2009-07-09 Abbott Laboratories Humanized antibodies to ab (20-42) globulomer and uses thereof
WO2008145142A1 (en) 2007-05-31 2008-12-04 Genmab A/S Stable igg4 antibodies
KR100968591B1 (ko) 2007-06-14 2010-07-08 한국과학기술연구원 약물전달용 폴리포스파젠계 하이드로젤, 그의 제조방법 및그의 용도
US20080318314A1 (en) 2007-06-20 2008-12-25 Valentin Fulga Production from blood of cells of neural lineage
WO2009003145A1 (en) 2007-06-26 2008-12-31 University Of Miami Antibody-endostatin fusion protein and its variants
FI3597659T3 (fi) 2007-07-09 2023-05-03 Genentech Inc Disulfidisidoksen pelkistymisen estäminen polypeptidien rekombinantin valmistuksen aikana
US8309088B2 (en) 2007-08-10 2012-11-13 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Method of treating osteoarthritis with an antibody to NGF
EP2195001A4 (en) 2007-08-29 2012-10-24 Univ Tufts METHODS OF MAKING AND USING CELL PENETRATING PEPTIDE TO ENHANCE ADMINISTRATION OF NUCLEIC ACIDS, PROTEINS, MEDICINES, AND ADENOVIRUS TO TISSUES AND CELLS, AND COMPOSITIONS AND KITS
CN101874042B9 (zh) 2007-09-26 2019-01-01 中外制药株式会社 利用cdr的氨基酸取代来改变抗体等电点的方法
US20110034383A1 (en) 2007-10-15 2011-02-10 Institut Pasteur Cxcl12 gamma a chemokine and uses thereof
EP2219458B1 (en) 2007-11-08 2015-07-15 Cytimmune Sciences, Inc. Compositions and methods for generating antibodies
CA2705542A1 (en) 2007-11-13 2009-05-22 Sapphire Energy, Inc. Production of fc-fusion polypeptides in eukaryotic algae
EP2220115A2 (en) 2007-12-13 2010-08-25 Glaxo Group Limited Polypeptides, antibody variable domains & antagonists
CN102216329A (zh) 2007-12-17 2011-10-12 辉瑞有限公司 间质性膀胱炎的治疗
EA201500156A3 (ru) 2008-01-03 2017-09-29 Дзе Скриппс Рисерч Инститьют Доставка антител посредством модульного домена распознавания
EP2292089A1 (en) 2008-01-11 2011-03-09 Astellas Pharma Inc. Model animal having both pain in testis or testis-related discomfort actions and frequent urination
EP2249856B1 (en) 2008-01-30 2013-11-06 Baylor College Of Medicine Peptides that target dorsal root ganglion neurons
MX2010008571A (es) 2008-02-04 2010-12-02 Lay Line Genomics Spa Anticuerpos anti-trka, y derivados de los mismos.
AU2009223115B2 (en) 2008-03-14 2015-09-24 Humanzyme, Inc. Recombinant production of authentic human proteins using human cell expression systems
US8207165B2 (en) 2008-03-28 2012-06-26 Nerviano Medical Sciences S.R.L. 3,4-dihydro-2H-pyrazino[1,2-A]indol-1-one derivatives active as kinase inhibitors, process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
KR101614558B1 (ko) 2008-04-27 2016-04-22 하. 룬드벡 아크티에셀스카브 인간 소르틸린의 결정 구조 및 소르틸린에 대한 리간드를 확인하기 위한 이의 용도
SG191625A1 (en) 2008-06-03 2013-07-31 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
AU2009256250B2 (en) 2008-06-03 2013-05-30 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
WO2009150623A1 (en) 2008-06-13 2009-12-17 Pfizer Inc Treatment of chronic prostatitis
EP2307042B1 (en) 2008-06-25 2014-03-26 H. Lundbeck A/S Modulation of the trpv : vps10p-domain receptor system for the treatment of pain
SG192489A1 (en) 2008-07-08 2013-08-30 Abbott Lab Prostaglandin e2 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
CN101633694B (zh) * 2008-07-24 2012-08-29 厦门北大之路生物工程有限公司 抗鼠神经生长因子(ngf)的多克隆抗体的制备方法及其应用
WO2010022225A1 (en) 2008-08-20 2010-02-25 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Dock-and-lock (dnl) vaccines for cancer therapy
RU2518278C2 (ru) 2008-09-19 2014-06-10 Пфайзер Инк. Стабильный жидкий препарат антитела
US20100081172A1 (en) 2008-09-26 2010-04-01 Eureka Therapeutics, Inc. N-Glycans and Uses Thereof
JP5879126B2 (ja) 2008-10-07 2016-03-08 ジン・トゥオＪＩＮ Ｔｕｏ 相転移ポリマーマイクロニードル
EP2340040B1 (en) 2008-10-22 2019-01-16 F.Hoffmann-La Roche Ag Modulation of axon degeneration
US20100104652A1 (en) 2008-10-27 2010-04-29 University Of Arkansas Use of advanced nanomaterials for increasing sepecific cell functions
JP5701765B2 (ja) 2008-10-31 2015-04-15 シンセス ゲーエムベーハー 幹細胞を活性化するための方法およびデバイス
WO2010063785A2 (en) 2008-12-03 2010-06-10 Genmab A/S Antibody variants having modifications in the constant region
FR2944448B1 (fr) 2008-12-23 2012-01-13 Adocia Composition pharmaceutique stable comprenant au moins un anticorps monodonal et au moins un polysacharide amphiphile comprenant des substituants derives d'alcools hydrofobes ou d'amines hydrophobes.
AU2009335121B2 (en) 2008-12-31 2015-03-26 3M Innovative Properties Company Tissue roll scaffolds
CA2750027C (en) 2009-01-23 2020-11-10 Nsgene A/S Improved cell lines and their use in encapsulated cell biodelivery
MX2011011728A (es) * 2009-05-04 2012-04-19 Abbott Res Bv Anticuerpos contra el factor de crecimiento nervioso (ngf) con estabilidad in vivo mejorada.
EP2449127A4 (en) 2009-07-02 2013-01-16 Glaxo Group Ltd POLYPEPTIDES AND METHOD OF TREATMENT
US20110033463A1 (en) 2009-08-06 2011-02-10 Medtronic, Inc. Apheresis, administration of agent, or combination thereof
MX2012001742A (es) 2009-08-11 2012-03-21 Genentech Inc Produccion de proteinas en medios de cultivo de celulas libres de glutamina.
JO3246B1 (ar) 2009-09-09 2018-03-08 Regeneron Pharma اجسام مضادة بشرية ذات ألفة تفاعل عالية مع مستقبل 2 المفعل بالبروتين البشري
CN102482701B (zh) 2009-09-16 2015-05-13 免疫医疗公司 I类抗-cea抗体及其使用
US8753621B2 (en) 2009-09-18 2014-06-17 Protherics Salt Lake City, Inc. BAB triblock polymers having improved release characteristics
US9155722B2 (en) 2009-09-18 2015-10-13 Protherics Salt Lake City, Inc. Reconstitutable reverse thermal gelling polymers
PH12012500691A1 (en) 2009-10-15 2012-11-12 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
UY32979A (es) 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
WO2011085354A1 (en) 2010-01-11 2011-07-14 Center For Molecular Medicine And Immunology Enhanced cytotoxicity of anti-cd74 and anti-hla-dr antibodies with interferon-gamma
EP3246035A1 (en) 2010-01-26 2017-11-22 Michael A. Evans Devices and agents for denervation
US8828668B2 (en) 2010-02-11 2014-09-09 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Markers for determination of patient responsiveness
EP2547365A1 (en) 2010-03-17 2013-01-23 Abbott Research B.V. Anti-nerve growth factor (ngf) antibody compositions
WO2011123428A1 (en) 2010-04-01 2011-10-06 Immunomedics, Inc. Antibody-based depletion of antigen-presenting cells and dendritic cells
EP2555797A4 (en) 2010-04-07 2014-02-12 Abbvie Inc TNF-ALPHA-BINDING PROTEINS
BR112012025872B8 (pt) 2010-04-12 2021-05-25 Somalogic Inc primidinas modificadas na posição-5
UY33492A (es) 2010-07-09 2012-01-31 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
JOP20190250A1 (ar) 2010-07-14 2017-06-16 Regeneron Pharma صيغ مستقرة تحتوي على الأجسام المضادة لمضاد عامل نمو الأعصاب
EP3333188B1 (en) 2010-08-19 2022-02-09 Zoetis Belgium S.A. Anti-ngf antibodies and their use
TW201211252A (en) 2010-08-26 2012-03-16 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US9884909B2 (en) 2010-12-01 2018-02-06 Alderbio Holdings Llc Anti-NGF compositions and use thereof
US9078878B2 (en) 2010-12-01 2015-07-14 Alderbio Holdings Llc Anti-NGF antibodies that selectively inhibit the association of NGF with TrkA, without affecting the association of NGF with p75
US9067988B2 (en) 2010-12-01 2015-06-30 Alderbio Holdings Llc Methods of preventing or treating pain using anti-NGF antibodies
US9539324B2 (en) 2010-12-01 2017-01-10 Alderbio Holdings, Llc Methods of preventing inflammation and treating pain using anti-NGF compositions
CN103619879A (zh) 2010-12-01 2014-03-05 奥尔德生物控股有限责任公司 抗ngf组合物及其用途
WO2012088302A2 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Abbott Laboratories Half immunoglobulin binding proteins and uses thereof
EP2655415A4 (en) 2010-12-22 2016-03-09 Abbvie Inc THREE VARIABLE DOMAIN LINK PROTEINS AND USES THEREOF
US8668886B2 (en) 2011-04-24 2014-03-11 Therapeutic Proteins International, LLC Separative bioreactor
EP2705056B1 (en) 2011-05-06 2018-11-14 Nexvet Australia Pty Ltd Anti-nerve growth factor antibodies and methods of preparing and using the same
MY161394A (en) 2011-05-06 2017-04-14 Nexvet Australia Pty Ltd Anti-nerve growth factor antibodies and methods of preparing and using the same
PL2739649T3 (pl) 2011-08-05 2018-03-30 Bioasis Technologies Inc. Fragmenty p97 o aktywności transferowej
HRP20180155T1 (hr) 2011-08-11 2018-03-23 Astellas Pharma Inc. Novo protutijelo protiv ljudskog ngf
US8926978B2 (en) 2011-10-25 2015-01-06 Anaptysbio, Inc. Antibodies directed against nerve growth factor (NGF)
UA113879C2 (xx) 2012-06-08 2017-03-27 ГУМАНІЗОВАНЕ АНТИТІЛО ПРОТИ ТrkА З АМІНОКИСЛОТНИМИ ЗАМІЩЕННЯМИ
EP2674439B1 (en) 2012-06-13 2017-02-01 Rottapharm Biotech S.r.l. Anti-TrkA antibodies, derivatives and uses thereof
US9682143B2 (en) 2012-08-14 2017-06-20 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for inducing immune response to disease

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005019266A2 (en) 2003-07-15 2005-03-03 Amgen Inc. Human anti-ngf neutralizing antibodies as selective ngf pathway inhibitors
US20090041717A1 (en) 2007-08-10 2009-02-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. High affinity human antibodies to human nerve growth factor

Also Published As

Publication number Publication date
WO2012075340A3 (en) 2012-11-01
AU2017208339A1 (en) 2017-08-17
AU2011336470B8 (en) 2017-09-14
CN103619879A (zh) 2014-03-05
EP3434691A1 (en) 2019-01-30
WO2012075340A2 (en) 2012-06-07
JP2014507116A (ja) 2014-03-27
US20120148490A1 (en) 2012-06-14
KR20140014102A (ko) 2014-02-05
NZ611076A (en) 2015-09-25
AU2011336470A1 (en) 2013-06-20
US8728473B2 (en) 2014-05-20
US20120164067A1 (en) 2012-06-28
EP2646468B1 (en) 2018-07-25
CA2821515A1 (en) 2012-06-07
AU2011336470B2 (en) 2017-08-17
EP2646468A2 (en) 2013-10-09
EP2646468A4 (en) 2014-12-03
JP2017079779A (ja) 2017-05-18
MX359070B (es) 2018-09-13
US8911734B2 (en) 2014-12-16
US9359432B2 (en) 2016-06-07
US20170327568A1 (en) 2017-11-16
US9783602B2 (en) 2017-10-10
US9783601B2 (en) 2017-10-10
JP6190723B2 (ja) 2017-08-30
MX2013006125A (es) 2014-08-22
KR20190112175A (ko) 2019-10-02
US20120141484A1 (en) 2012-06-07
US20200062837A1 (en) 2020-02-27
AU2011336470A8 (en) 2017-09-14
US20120141485A1 (en) 2012-06-07
US20150132304A1 (en) 2015-05-14
US10344083B2 (en) 2019-07-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102025848B1 (ko) 항―ｎｇｆ 조성물 및 그의 용도
KR102831970B1 (ko) 항-sars-cov-2 스파이크 당단백질 항체 및 항원-결합 단편
CN110869389B (zh) 抗ror1抗体及其制备和使用方法
KR102137291B1 (ko) 항-pcsk9 항체 및 그의 용도
CN108055848B (zh) 抗pacap抗体及其用途
KR20220167273A (ko) 항-코로나바이러스 항체 및 사용 방법
TW201738272A (zh) 抗ｐａｃａｐ抗體及其用途
KR20180099723A (ko) 항-tl1a/항-tnf-알파 이중특이적 항원 결합 단백질 및 그의 용도
KR20240017912A (ko) 항-ccr8 항체 및 이의 용도
KR20200014414A (ko) Pd-1과 특이적으로 결합하는 항체 및 사용 방법
KR20230017841A (ko) Cd3 항원 결합 도메인을 포함하는 단백질 및 이의 용도
KR20220040483A (ko) 칼리크레인 관련 펩티다제 2 항원 결합 도메인을 포함하는 단백질 및 이의 용도
KR20150122761A (ko) Ｔ 세포 활성화 항원 결합 분자
KR20160032041A (ko) 단백질 약물의 불활성화를 위한 항체 로커
KR20230041819A (ko) Hla-g 항원-결합 도메인을 포함하는 단백질 및 이의 용도
CN110799537B (zh) 抗pd-1抗体及其制备和使用方法
KR102718129B1 (ko) cys80 접합된 면역글로불린
KR20150140685A (ko) Hgf에 대한 항체 및 이를 포함하는 조성물
KR20230027300A (ko) Il-10 뮤테인 및 이의 융합 단백질
KR101981662B1 (ko) 형질전환된 미생물 예컨대 피치아 패스토리스에서 다중-서브유닛 단백질 예컨대 항체의 고순도 생산
AU2016273912B2 (en) High-purity production of multi-subunit proteins such as antibodies in transformed microbes such as Pichia pastoris
RU2838544C1 (ru) МИНИАТЮРНЫЕ АНТИТЕЛОПОДОБНЫЕ БЕЛКИ УПРАВЛЕНИЯ И НАВИГАЦИОННОГО КОНТРОЛЯ (miniGNC) И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ
EA044746B1 (ru) АНТИТЕЛА И АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ ФРАГМЕНТЫ ПРОТИВ ГЛИКОПРОТЕИНА ШИПОВ SARS-CoV-2
HK40020170A (en) Bispecific t cell activating antigen binding molecules

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

St.27 status event code: A-0-1-A10-A15-nap-PA0105

N231 Notification of change of applicant
PN2301 Change of applicant

St.27 status event code: A-3-3-R10-R13-asn-PN2301

St.27 status event code: A-3-3-R10-R11-asn-PN2301

P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

PG1501 Laying open of application

St.27 status event code: A-1-1-Q10-Q12-nap-PG1501

A201 Request for examination
AMND Amendment
E13-X000 Pre-grant limitation requested

St.27 status event code: A-2-3-E10-E13-lim-X000

P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

PA0201 Request for examination

St.27 status event code: A-1-2-D10-D11-exm-PA0201

AMND Amendment
P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

St.27 status event code: A-1-2-D10-D21-exm-PE0902

T11-X000 Administrative time limit extension requested

St.27 status event code: U-3-3-T10-T11-oth-X000

AMND Amendment
P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

E601 Decision to refuse application
PE0601 Decision on rejection of patent

St.27 status event code: N-2-6-B10-B15-exm-PE0601

AMND Amendment
P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

PX0901 Re-examination

St.27 status event code: A-2-3-E10-E12-rex-PX0901

E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

St.27 status event code: A-1-2-D10-D21-exm-PE0902

AMND Amendment
P11-X000 Amendment of application requested

St.27 status event code: A-2-2-P10-P11-nap-X000

P13-X000 Application amended

St.27 status event code: A-2-2-P10-P13-nap-X000

PX0701 Decision of registration after re-examination

St.27 status event code: A-3-4-F10-F13-rex-PX0701

X701 Decision to grant (after re-examination)
A107 Divisional application of patent
PA0104 Divisional application for international application

St.27 status event code: A-0-1-A10-A18-div-PA0104

St.27 status event code: A-0-1-A10-A16-div-PA0104

PR0701 Registration of establishment

St.27 status event code: A-2-4-F10-F11-exm-PR0701

PR1002 Payment of registration fee

St.27 status event code: A-2-2-U10-U12-oth-PR1002

Fee payment year number: 1

PG1601 Publication of registration

St.27 status event code: A-4-4-Q10-Q13-nap-PG1601

PC1903 Unpaid annual fee

St.27 status event code: A-4-4-U10-U13-oth-PC1903

Not in force date: 20220921

Payment event data comment text: Termination Category : DEFAULT_OF_REGISTRATION_FEE

PC1903 Unpaid annual fee

St.27 status event code: N-4-6-H10-H13-oth-PC1903

Ip right cessation event data comment text: Termination Category : DEFAULT_OF_REGISTRATION_FEE

Not in force date: 20220921