JP6804975B2 - 乳がんの検出キット又はデバイス及び検出方法 - Google Patents
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Description
すなわち、本発明は、以下の特徴を有する。
(1)乳がんマーカーである、miR−4783−3p、miR−4730、miR−1307−3p、miR−4634、miR−663a、miR−4532、miR−7704、miR−3178、miR−6729−5p、miR−6090、miR−4732−5p、miR−3184−5p、miR−6727−5p、miR−6088、miR−4674、miR−8073、miR−4787−5p、miR−1469、miR−125a−3p、miR−1233−5p、miR−885−3p、miR−6802−5p、miR−328−5p、miR−6787−5p、miR−8069、miR−6875−5p、miR−1246、miR−4734、miR−6757−5p、miR−6756−5p、miR−3665、miR−6836−3p、miR−6821−5p、miR−6805−5p、miR−4728−5p、miR−6726−5p、miR−197−5p、miR−149−3p、miR−6850−5p、miR−4476、miR−6858−5p、miR−564、miR−4763−3p、miR−575、miR−6771−5p、miR−1231、miR−1908−3p、miR−150−3p、miR−3937、miR−887−3p、miR−3940−5p、miR−4741、miR−6808−5p、miR−6869−5p、miR−5090、miR−615−5p、miR−8072、miR−128−1−5p、miR−1238−5p、miR−365a−5p、miR−204−3p、miR−4492、miR−6785−5p、miR−6511a−5p、miR−4525、miR−1915−5p、miR−3180、miR−6879−5p、miR−1199−5p、miR−6746−5p、miR−711、miR−663b、miR−4707−3p、miR−6893−5p、miR−4675、miR−4638−5p、miR−4651、miR−6087、miR−4665−5p、miR−4758−5p、miR−6887−5p、miR−3620−5p、miR−1909−3p、miR−7641、miR−6724−5p、miR−1343−3p、miR−6780b−5p、miR−4484、miR−4690−5p、miR−4429、miR−1227−5p、miR−4725−3p、miR−6861−5p、miR−6812−5p、miR−3197、miR−8059、miR−3185、miR−4706、miR−4497、miR−3131、miR−6806−5p、miR−187−5p、miR−3180−3p、miR−6848−5p、miR−6820−5p、miR−6800−5p、miR−6717−5p、miR−6795−5p、miR−4632−5p、miR−665、miR−6778−5p、miR−3663−3p、miR−4689、miR−211−3p、miR−6511b−5p、miR−4750−5p、miR−6126、miR−614、miR−7110−5p、miR−744−5p、miR−6769a−5p、miR−4792、miR−5787、miR−6798−5p、miR−6781−5p、miR−4419b、miR−4446−3p、miR−4259、miR−5572、miR−6075、miR−296−3p、miR−6891−5p、miR−4745−5p、miR−6775−5p、miR−6870−5p、miR−920、miR−4530、miR−6819−5p、miR−6825−5p、miR−7847−3p、miR−6131、miR−4433−3p、miR−1228−5p、miR−6743−5p、miR−1268a、miR−3917、miR−6786−5p、miR−3154、miR−638、miR−6741−5p、miR−6889−5p、miR−6840−3p、miR−6510−5p、miR−3188、miR−551b−5p、miR−5001−5p、miR−1268b、miR−7107−5p、miR−6824−5p、miR−6732−5p、miR−371a−5p、miR−6794−5p、miR−6779−5p、miR−4271、miR−5195−3p、miR−6762−5p、miR−939−5p、miR−1247−3p、miR−6777−5p、miR−6722−3p、miR−3656、miR−4688、miR−3195、miR−6766−5p、miR−4447、miR−4656、miR−7108−5p、miR−3191−3p、miR−1273g−3p、miR−4463、miR−2861、miR−3196、miR−6877−5p、miR−3679−5p、miR−4442、miR−6789−5p、miR−6782−5p、miR−486−3p、miR−6085、miR−4746−3p、miR−619−5p、miR−937−5p、miR−6803−5p、miR−4298、miR−4454、miR−4459、miR−7150、miR−6880−5p、miR−4449、miR−8063、miR−4695−5p、miR−6132、miR−6829−5p、miR−4486、miR−6805−3p、miR−6826−5p、miR−4508、miR−1343−5p、miR−7114−5p、miR−3622a−5p、miR−6765−5p、miR−7845−5p、miR−3960、miR−6749−5p、miR−1260b、miR−6799−5p、miR−4723−5p、miR−6784−5p、miR−5100、miR−6769b−5p、miR−1207−5p、miR−642a−3p、miR−4505、miR−4270、miR−6721−5p、miR−7111−5p、miR−6791−5p、miR−7109−5p、miR−4258、miR−6515−3p、miR−6851−5p、miR−6125、miR−4749−5p、miR−4726−5p、miR−4513、miR−6089、miR−6816−5p、miR−4466、miR−4488、miR−6752−5p及びmiR−4739からなる群から選択される少なくとも1つのポリヌクレオチドと特異的に結合可能な核酸を含む、乳がんの検出用キット。
sa−miR−1273g−3pであり、miR−4463がhsa−miR−4463であり、miR−2861がhsa−miR−2861であり、miR−3196がhsa−miR−3196であり、miR−6877−5pがhsa−miR−6877−5pであり、miR−3679−5pがhsa−miR−3679−5pであり、miR−4442がhsa−miR−4442であり、miR−6789−5pがhsa−miR−6789−5pであり、miR−6782−5pがhsa−miR−6782−5pであり、miR−486−3pがhsa−miR−486−3pであり、miR−6085がhsa−miR−6085であり、miR−4746−3pがhsa−miR−4746−3pであり、miR−619−5pがhsa−miR−619−5pであり、miR−937−5pがhsa−miR−937−5pであり、miR−6803−5pがhsa−miR−6803−5pであり、miR−4298がhsa−miR−4298であり、miR−4454がhsa−miR−4454であり、miR−4459がhsa−miR−4459であり、miR−7150がhsa−miR−7150であり、miR−6880−5pがhsa−miR−6880−5pであり、miR−4449がhsa−miR−4449であり、miR−8063がhsa−miR−8063であり、miR−4695−5pがhsa−miR−4695−5pであり、miR−6132がhsa−miR−6132であり、miR−6829−5pがhsa−miR−6829−5pであり、miR−4486がhsa−miR−4486であり、miR−6805−3pがhsa−miR−6805−3pであり、miR−6826−5pがhsa−miR−6826−5pであり、miR−4508がhsa−miR−4508であり、miR−1343−5pがhsa−miR−1343−5pであり、miR−7114−5pがhsa−miR−7114−5pであり、miR−3622a−5pがhsa−miR−3622a−5pであり、miR−6765−5pがhsa−miR−6765−5pであり、miR−7845−5pがhsa−miR−7845−5pであり、miR−3960がhsa−miR−3960であり、miR−6749−5pがhsa−miR−6749−5pであり、miR−1260bがhsa−miR−1260bであり、miR−6799−5pがhsa−miR−6799−5pであり、miR−4723−5pがhsa−miR−4723−5pであり、miR−6784−5pがhsa−miR−6784−5pであり、miR−5100がhsa−miR−5100であり、miR−6769b−5pがhsa−miR−6769b−5pであり、miR−1207−5pがhsa−miR−1207−5pであり、miR−642a−3pがhsa−miR−642a−3pであり、miR−4505がhsa−miR−4505であり、miR−4270がhsa−miR−4270であり、miR−6721−5pがhsa−miR−6721−5pであり、miR−7111−5pがhsa−miR−7111−5pであり、miR−6791−5pがhsa−miR−6791−5pであり、miR−7109−5pがhsa−miR−7109−5pであり、miR−4258がhsa−miR−4258であり、miR−6515−3pがhsa−miR−6515−3pであり、miR−6851−5pがhsa−miR−6851−5pであり、miR−6125がhsa−miR−6125であり、miR−4749−5pがhsa−miR−4749−5pであり、miR−4726−5pがhsa−miR−4726−5pであり、miR−4513がhsa−miR−4513であり、miR−6089がhsa−miR−6089であり、miR−6816−5pがhsa−miR−6816−5pであり、miR−4466がhsa−miR−4466であり、miR−4488がhsa−miR−4488であり、miR−6752−5pがhsa−miR−6752−5pであり、及び、miR−4739がhsa−miR−4739である、(1)に記載のキット。
(a)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(b)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(c)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(d)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び
(e)前記(a)〜(d)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
からなる群から選択されるポリヌクレオチドである、(1)又は(2)に記載のキット。
(f)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(g)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(h)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(i)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び
(j)前記(f)〜(i)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
からなる群から選択されるポリヌクレオチドである、(4)又は(5)に記載のキット。
(k)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(l)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(m)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(n)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び
(o)前記(k)〜(n)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
からなる群から選択されるポリヌクレオチドである、(7)又は(8)に記載のキット。
hsa−miR−1273g−3pであり、miR−4463がhsa−miR−4463であり、miR−2861がhsa−miR−2861であり、miR−3196がhsa−miR−3196であり、miR−6877−5pがhsa−miR−6877−5pであり、miR−3679−5pがhsa−miR−3679−5pであり、miR−4442がhsa−miR−4442であり、miR−6789−5pがhsa−miR−6789−5pであり、miR−6782−5pがhsa−miR−6782−5pであり、miR−486−3pがhsa−miR−486−3pであり、miR−6085がhsa−miR−6085であり、miR−4746−3pがhsa−miR−4746−3pであり、miR−619−5pがhsa−miR−619−5pであり、miR−937−5pがhsa−miR−937−5pであり、miR−6803−5pがhsa−miR−6803−5pであり、miR−4298がhsa−miR−4298であり、miR−4454がhsa−miR−4454であり、miR−4459がhsa−miR−4459であり、miR−7150がhsa−miR−7150であり、miR−6880−5pがhsa−miR−6880−5pであり、miR−4449がhsa−miR−4449であり、miR−8063がhsa−miR−8063であり、miR−4695−5pがhsa−miR−4695−5pであり、miR−6132がhsa−miR−6132であり、miR−6829−5pがhsa−miR−6829−5pであり、miR−4486がhsa−miR−4486であり、miR−6805−3pがhsa−miR−6805−3pであり、miR−6826−5pがhsa−miR−6826−5pであり、miR−4508がhsa−miR−4508であり、miR−1343−5pがhsa−miR−1343−5pであり、miR−7114−5pがhsa−miR−7114−5pであり、miR−3622a−5pがhsa−miR−3622a−5pであり、miR−6765−5pがhsa−miR−6765−5pであり、miR−7845−5pがhsa−miR−7845−5pであり、miR−3960がhsa−miR−3960であり、miR−6749−5pがhsa−miR−6749−5pであり、miR−1260bがhsa−miR−1260bであり、miR−6799−5pがhsa−miR−6799−5pであり、miR−4723−5pがhsa−miR−4723−5pであり、miR−6784−5pがhsa−miR−6784−5pであり、miR−5100がhsa−miR−5100であり、miR−6769b−5pがhsa−miR−6769b−5pであり、miR−1207−5pがhsa−miR−1207−5pであり、miR−642a−3pがhsa−miR−642a−3pであり、miR−4505がhsa−miR−4505であり、miR−4270がhsa−miR−4270であり、miR−6721−5pがhsa−miR−6721−5pであり、miR−7111−5pがhsa−miR−7111−5pであり、miR−6791−5pがhsa−miR−6791−5pであり、miR−7109−5pがhsa−miR−7109−5pであり、miR−4258がhsa−miR−4258であり、miR−6515−3pがhsa−miR−6515−3pであり、miR−6851−5pがhsa−miR−6851−5pであり、miR−6125がhsa−miR−6125であり、miR−4749−5pがhsa−miR−4749−5pであり、miR−4726−5pがhsa−miR−4726−5pであり、miR−4513がhsa−miR−4513であり、miR−6089がhsa−miR−6089であり、miR−6816−5pがhsa−miR−6816−5pであり、miR−4466がhsa−miR−4466であり、miR−4488がhsa−miR−4488であり、miR−6752−5pがhsa−miR−6752−5pであり、及び、miR−4739がhsa−miR−4739である、(11)に記載のデバイス。
(a)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(b)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(c)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(d)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び
(e)前記(a)〜(d)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
からなる群から選択されるポリヌクレオチドである、(11)又は(12)に記載のデバイス。
(f)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(g)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(h)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(i)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び
(j)前記(f)〜(i)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
からなる群から選択されるポリヌクレオチドである、(14)又は(15)に記載のデバイス。
(k)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(l)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(m)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(n)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び
(o)前記(k)〜(n)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
からなる群から選択されるポリヌクレオチドである、(17)又は(18)に記載のデバイス。
本明細書中で使用する用語は、以下の定義を有する。
ヌクレオチド、ポリヌクレオチド、DNA、RNAなどの略号による表示は、「塩基配列又はアミノ酸配列を含む明細書等の作成のためのガイドライン」(日本国特許庁編)及び当技術分野における慣用に従うものとする。
1.乳がんの標的核酸
本発明の上記定義の乳がん検出用の核酸プローブ又はプライマーを使用して、乳がん又は乳がん細胞の存在及び/又は不存在を検出するための、乳がんマーカーとしての主要な標的核酸には、hsa−miR−4783−3p、hsa−miR−4730、hsa−miR−1307−3p、hsa−miR−4634、hsa−miR−663a、hsa−miR−4532、hsa−miR−7704、hsa−miR−3178、hsa−miR−6729−5p、hsa−miR−6090、hsa−miR−4732−5p、hsa−miR−3184−5p、hsa−miR−6727−5p、hsa−miR−6088、hsa−miR−4674、hsa−miR−8073、hsa−miR−4787−5p、hsa−miR−1469、hsa−miR−125a−3p、hsa−miR−1233−5p、hsa−miR−885−3p、hsa−miR−6802−5p、hsa−miR−328−5p、hsa−miR−6787−5p、hsa−miR−8069、hsa−miR−6875−5p、hsa−miR−1246、hsa−miR−4734、hsa−miR−6757−5p、hsa−miR−6756−5p、hsa−miR−3665、hsa−miR−6836−3p、hsa−miR−6821−5p、hsa−miR−6805−5p、hsa−miR−4728−5p、hsa−miR−6726−5p、hsa−miR−197−5p、hsa−miR−149−3p、hsa−miR−6850−5p、hsa−miR−4476、hsa−miR−6858−5p、hsa−miR−564、hsa−miR−4763−3p、hsa−miR−575、hsa−miR−6771−5p、hsa−miR−1231、hsa−miR−1908−3p、hsa−miR−150−3p、hsa−miR−3937、hsa−miR−887−3p、hsa−miR−3940−5p、hsa−miR−4741、hsa−miR−6808−5p、hsa−miR−6869−5p、hsa−miR−5090、hsa−miR−615−5p、hsa−miR−8072、hsa−miR−128−1−5p、hsa−miR−1238−5p、hsa−miR−365a−5p、hsa−miR−204−3p、hsa−miR−4492、hsa−miR−6785−5p、hsa−miR−6511a−5p、hsa−miR−4525、hsa−miR−1915−5p、hsa−miR−3180、hsa−miR−6879−5p、hsa−miR−1199−5p、hsa−miR−6746−5p、hsa−miR−711、hsa−miR−663b、hsa−miR−4707−3p、hsa−miR−6893−5p、hsa−miR−4675、hsa−miR−4638−5p、hsa−miR−4651、hsa−miR−6087、hsa−miR−4665−5p、hsa−miR−4758−5p、hsa−miR−6887−5p、hsa−miR−3620−5p、hsa−miR−1909−3p、hsa−miR−7641、hsa−miR−6724−5p、hsa−miR−1343−3p、hsa−miR−6780b−5p、hsa−miR−4484、hsa−miR−4690−5p、hsa−miR−4429、hsa−miR−1227−5p、hsa−miR−4725−3p、hsa−miR−6861−5p、hsa−miR−6812−5p、hsa−miR−3197、hsa−miR−8059、hsa−miR−3185、hsa−miR−4706、hsa−miR−4497、hsa−miR−3131、hsa−miR−6806−5p、hsa−miR−187−5p、hsa−miR−3180−3p、hsa−miR−6848−5p、hsa−miR−6820−5p、hsa−miR−6800−5p、hsa−miR−6717−5p、hsa−miR−6795−5p、hsa−miR−4632−5p、hsa−miR−665、hsa−miR−6778−5p、hsa−miR−3663−3p、hsa−miR−4689、hsa−miR−211−3p、hsa−miR−6511b−5p、hsa−miR−4750−5p、hsa−miR−6126、hsa−miR−614、hsa−miR−7110−5p、hsa−miR−744−5p、hsa−miR−6769a−5p、hsa−miR−4792、hsa−miR−5787、hsa−miR−6798−5p、hsa−miR−6781−5p、hsa−miR−4419b、hsa−miR−4446−3p、hsa−miR−4259、hsa−miR−5572、hsa−miR−6075、hsa−miR−296−3p、hsa−miR−6891−5p、hsa−miR−4745−5p、hsa−miR−6775−5p、hsa−miR−6870−5p、hsa−miR−920、hsa−miR−4530、hsa−miR−6819−5p、hsa−miR−6825−5p、hsa−miR−7847−3p、hsa−miR−6131、hsa−miR−4433−3p、hsa−miR−1228−5p、hsa−miR−6743−5p、hsa−miR−1268a、hsa−miR−3917、hsa−miR−6786−5p、hsa−miR−3154、hsa−miR−638、hsa−miR−6741−5p、hsa−miR−6889−5p、hsa−miR−6840−3p、hsa−miR−6510−5p、hsa−miR−3188、hsa−miR−551b−5p、hsa−miR−5001−5p、hsa−miR−1268b、hsa−miR−7107−5p、hsa−miR−6824−5p、hsa−miR−6732−5p、hsa−miR−371a−5p、hsa−miR−6794−5p、hsa−miR−6779−5p、hsa−miR−4271、hsa−miR−5195−3p、hsa−miR−6762−5p、hsa−miR−939−5p、hsa−miR−1247−3p、hsa−miR−6777−5p、hsa−miR−6722−3p、hsa−miR−3656、hsa−miR−4688、hsa−miR−3195、hsa−miR−6766−5p、hsa−miR−4447、hsa−miR−4656、hsa−miR−7108−5p、hsa−miR−3191−3p、hsa−miR−1273g−3p、hsa−miR−4463、hsa−miR−2861、hsa−miR−3196、hsa−miR−6877−5p、hsa−miR−3679−5p、hsa−miR−4442、hsa−miR−6789−5p、hsa−miR−6782−5p、hsa−miR−486−3p、hsa−miR−6085、hsa−miR−4746−3p、hsa−miR−619−5p、hsa−miR−937−5p、hsa−miR−6803−5p、hsa−miR−4298、hsa−miR−4454、hsa−miR−4459、hsa−miR−7150、hsa−miR−6880−5p、hsa−miR−4449、hsa−miR−8063、hsa−miR−4695−5p、hsa−miR−6132、hsa−miR−6829−5p、hsa−miR−4486、hsa−miR−6805−3p、hsa−miR−6826−5p、hsa−miR−4508、hsa−miR−1343−5p、hsa−miR−7114−5p、hsa−miR−3622a−5p、hsa−miR−6765−5p、hsa−miR−7845−5p、hsa−miR−3960、hsa−miR−6749−5p、hsa−miR−1260b、hsa−miR−6799−5p、hsa−miR−4723−5p、hsa−miR−6784−5p、hsa−miR−5100、hsa−miR−6769b−5p、hsa−miR−1207−5p、hsa−miR−642a−3p、hsa−miR−4505、hsa−miR−4270、hsa−miR−6721−5p、hsa−miR−7111−5p、hsa−miR−6791−5p、hsa−miR−7109−5p、hsa−miR−4258、hsa−miR−6515−3p、hsa−miR−6851−5p、hsa−miR−6125、hsa−miR−4749−5p、hsa−miR−4726−5p、hsa−miR−4513、hsa−miR−6089、hsa−miR−6816−5p、hsa−miR−4466、hsa−miR−4488、hsa−miR−6752−5p及びhsa−miR−4739からなる群から選択される少なくとも1つのmiRNAを用いることができる。さらにこれらのmiRNAと組み合わせることができる他の乳がんマーカー、すなわち、hsa−miR−760、hsa−miR−602、hsa−miR−423−5p、hsa−miR−92a−2−5p、hsa−miR−16−5p、hsa−miR−451a、hsa−miR−135a−3p、hsa−miR−486−5p、hsa−miR−4257、hsa−miR−92b−5p、hsa−miR−1915−3p、hsa−miR−718、hsa−miR−940、hsa−miR−296−5p、hsa−miR−23b−3p及びhsa−miR−92a−3pからなる群から選択される少なくとも1つのmiRNAも標的核酸として好ましく用いることができる。さらにこれらのmiRNAと組み合わせることができる他の乳がんマーカー、すなわち、hsa−miR−658、hsa−miR−6842−5p、hsa−miR−6124、hsa−miR−6765−3p、hsa−miR−7106−5p、hsa−miR−4534、hsa−miR−92b−3p、hsa−miR−3135b、hsa−miR−4687−3p、hsa−miR−762、hsa−miR−3619−3p、hsa−miR−4467、hsa−miR−557、hsa−miR−1237−5p、hsa−miR−1908−5p、hsa−miR−4286、hsa−miR−6885−5p及びhsa−miR−6763−5pからなる群から選択される少なくとも1つのmiRNAも標的核酸として好ましく用いることができる。
本発明においては、上記の乳がんマーカーとしての標的核酸に特異的に結合可能な核酸を、乳がんを検出又は診断するための核酸、例えば核酸プローブ又はプライマーとして用いることができる。
(a)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(b)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(c)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(d)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、
(e)前記(a)〜(d)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド。
(f)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(g)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(h)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(i)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、
(j)前記(f)〜(i)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド。
(k)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(l)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(m)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(n)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、
(o)前記(k)〜(n)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド。
本発明はまた、乳がんマーカーである標的核酸を測定するための、本発明において核酸プローブ又はプライマーとして使用可能なポリヌクレオチド(これには、変異体、断片、又は誘導体を含みうる。;以下、検出用ポリヌクレオチドと称することがある)の1つ又は複数を含む乳がん検出用キット又はデバイスを提供する。
miR−4783−3p、miR−4730、miR−1307−3p、miR−4634、miR−663a、miR−4532、miR−7704、miR−3178、miR−6729−5p、miR−6090、miR−4732−5p、miR−3184−5p、miR−6727−5p、miR−6088、miR−4674、miR−8073、miR−4787−5p、miR−1469、miR−125a−3p、miR−1233−5p、miR−885−3p、miR−6802−5p、miR−328−5p、miR−6787−5p、miR−8069、miR−6875−5p、miR−1246、miR−4734、miR−6757−5p、miR−6756−5p、miR−3665、miR−6836−3p、miR−6821−5p、miR−6805−5p、miR−4728−5p、miR−6726−5p、miR−197−5p、miR−149−3p、miR−6850−5p、miR−4476、miR−6858−5p、miR−564、miR−4763−3p、miR−575、miR−6771−5p、miR−1231、miR−1908−3p、miR−150−3p、miR−3937、miR−887−3p、miR−3940−5p、miR−4741、miR−6808−5p、miR−6869−5p、miR−5090、miR−615−5p、miR−8072、miR−128−1−5p、miR−1238−5p、miR−365a−5p、miR−204−3p、miR−4492、miR−6785−5p、miR−6511a−5p、miR−4525、miR−1915−5p、miR−3180、miR−6879−5p、miR−1199−5p、miR−6746−5p、miR−711、miR−663b、miR−4707−3p、miR−6893−5p、miR−4675、miR−4638−5p、miR−4651、miR−6087、miR−4665−5p、miR−4758−5p、miR−6887−5p、miR−3620−5p、miR−1909−3p、miR−7641、miR−6724−5p、miR−1343−3p、miR−6780b−5p、miR−4484、miR−4690−5p、miR−4429、miR−1227−5p、miR−4725−3p、miR−6861−5p、miR−6812−5p、miR−3197、miR−8059、miR−3185、miR−4706、miR−4497、miR−3131、miR−6806−5p、miR−187−5p、miR−3180−3p、miR−6848−5p、miR−6820−5p、miR−6800−5p、miR−6717−5p、miR−6795−5p、miR−4632−5p、miR−665、miR−6778−5p、miR−3663−3p、miR−4689、miR−211−3p、miR−6511b−5p、miR−4750−5p、miR−6126、miR−614、miR−7110−5p、miR−744−5p、miR−6769a−5p、miR−4792、miR−5787、miR−6798−5p、miR−6781−5p、miR−4419b、miR−4446−3p、miR−4259、miR−5572、miR−6075、miR−296−3p、miR−6891−5p、miR−4745−5p、miR−6775−5p、miR−6870−5p、miR−920、miR−4530、miR−6819−5p、miR−6825−5p、miR−7847−3p、miR−6131、miR−4433−3p、miR−1228−5p、miR−6743−5p、miR−1268a、miR−3917、miR−6786−5p、miR−3154、miR−638、miR−6741−5p、miR−6889−5p、miR−6840−3p、miR−6510−5p、miR−3188、miR−551b−5p、miR−5001−5p、miR−1268b、miR−7107−5p、miR−6824−5p、miR−6732−5p、miR−371a−5p、miR−6794−5p、miR−6779−5p、miR−4271、miR−5195−3p、miR−6762−5p、miR−939−5p、miR−1247−3p、miR−6777−5p、miR−6722−3p、miR−3656、miR−4688、miR−3195、miR−6766−5p、miR−4447、miR−4656、miR−7108−5p、miR−3191−3p、miR−1273g−3p、miR−4463、miR−2861、miR−3196、miR−6877−5p、miR−3679−5p、miR−4442、miR−6789−5p、miR−6782−5p、miR−486−3p、miR−6085、miR−4746−3p、miR−619−5p、miR−937−5p、miR−6803−5p、miR−4298、miR−4454、miR−4459、miR−7150、miR−6880−5p、miR−4449、miR−8063、miR−4695−5p、miR−6132、miR−6829−5p、miR−4486、miR−6805−3p、miR−6826−5p、miR−4508、miR−1343−5p、miR−7114−5p、miR−3622a−5p、miR−6765−5p、miR−7845−5p、miR−3960、miR−6749−5p、miR−1260b、miR−6799−5p、miR−4723−5p、miR−6784−5p、miR−5100、miR−6769b−5p、miR−1207−5p、miR−642a−3p、miR−4505、miR−4270、miR−6721−5p、miR−7111−5p、miR−6791−5p、miR−7109−5p、miR−4258、miR−6515−3p、miR−6851−5p、miR−6125、miR−4749−5p、miR−4726−5p、miR−4513、miR−6089、miR−6816−5p、miR−4466、miR−4488、miR−6752−5p及びmiR−4739である。
(1)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列においてuがtである塩基配列又はその相補的配列において、15以上の連続した塩基を含むポリヌクレオチド。
(2)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列においてuがtである塩基配列又はその相補的配列において、15以上の連続した塩基を含むポリヌクレオチド。
(3)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列においてuがtである塩基配列又はその相補的配列において、15以上の連続した塩基を含むポリヌクレオチド。
本発明において、ポリヌクレオチドの断片のサイズは、各ポリヌクレオチドの塩基配列において、例えば、連続する15から配列の全塩基数未満、17から配列の全塩基数未満、19から配列の全塩基数未満などの範囲の塩基数である。
(1−2)配列番号2及び237(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−602)の組み合わせ
(1−3)配列番号2及び4(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4634)の組み合わせ
(1−4)配列番号2及び3(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1307−3p)の組み合わせ
(1−5)配列番号2及び51(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3940−5p)の組み合わせ
(2−1)配列番号1及び237(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−602)の組み合わせ
(2−2)配列番号1及び4(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4634)の組み合わせ
(2−3)配列番号1及び3(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1307−3p)の組み合わせ
(2−4)配列番号1及び51(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3940−5p)の組み合わせ
(2−5)配列番号1及び6(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4532)の組み合わせ
(3−1)配列番号4及び237(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−602)の組み合わせ
(3−2)配列番号3及び237(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−602)の組み合わせ
(3−3)配列番号51及び237(マーカー:hsa−miR−3940−5p及びhsa−miR−602)の組み合わせ
(3−4)配列番号237及び6(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4532)の組み合わせ
(3−5)配列番号237及び12(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−3184−5p)の組み合わせ
(4−1)配列番号3及び4(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4634)の組み合わせ
(4−2)配列番号4及び51(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3940−5p)の組み合わせ
(4−3)配列番号4及び6(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4532)の組み合わせ
(4−4)配列番号4及び12(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3184−5p)の組み合わせ
(4−5)配列番号4及び15(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4674)の組み合わせ
(5−1)配列番号3及び51(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3940−5p)の組み合わせ
(5−2)配列番号3及び6(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4532)の組み合わせ
(5−3)配列番号3及び12(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3184−5p)の組み合わせ
(5−4)配列番号3及び15(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4674)の組み合わせ
(5−5)配列番号3及び8(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3178)の組み合わせ
(6−1)配列番号51及び6(マーカー:hsa−miR−3940−5p及びhsa−miR−4532)の組み合わせ
(6−2)配列番号51及び12(マーカー:hsa−miR−3940−5p及びhsa−miR−3184−5p)の組み合わせ
(6−3)配列番号51及び15(マーカー:hsa−miR−3940−5p及びhsa−miR−4674)の組み合わせ
(6−4)配列番号51及び8(マーカー:hsa−miR−3940−5p及びhsa−miR−3178)の組み合わせ
(6−5)配列番号51及び34(マーカー:hsa−miR−3940−5p及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(7−1)配列番号2及び6(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4532)の組み合わせ
(7−2)配列番号12及び6(マーカー:hsa−miR−3184−5p及びhsa−miR−4532)の組み合わせ
(7−3)配列番号15及び6(マーカー:hsa−miR−4674及びhsa−miR−4532)の組み合わせ
(7−4)配列番号8及び6(マーカー:hsa−miR−3178及びhsa−miR−4532)の組み合わせ
(7−5)配列番号6及び34(マーカー:hsa−miR−4532及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(8−1)配列番号2及び12(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3184−5p)の組み合わせ
(8−2)配列番号1及び12(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3184−5p)の組み合わせ
(8−3)配列番号12及び15(マーカー:hsa−miR−3184−5p及びhsa−miR−4674)の組み合わせ
(8−4)配列番号8及び12(マーカー:hsa−miR−3178及びhsa−miR−3184−5p)の組み合わせ
(8−5)配列番号12及び34(マーカー:hsa−miR−3184−5p及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(9−1)配列番号2及び15(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4674)の組み合わせ
(9−2)配列番号1及び15(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4674)の組み合わせ
(9−3)配列番号237及び15(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4674)の組み合わせ
(9−4)配列番号8及び15(マーカー:hsa−miR−3178及びhsa−miR−4674)の組み合わせ
(9−5)配列番号15及び34(マーカー:hsa−miR−4674及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(10−1)配列番号2及び8(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3178)の組み合わせ
(10−2)配列番号1及び8(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3178)の組み合わせ
(10−3)配列番号237及び8(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−3178)の組み合わせ
(10−4)配列番号4及び8(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3178)の組み合わせ
(10−5)配列番号8及び34(マーカー:hsa−miR−3178及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(11−1)配列番号2及び34(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(11−2)配列番号1及び34(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(11−3)配列番号237及び34(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(11−4)配列番号4及び34(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(11−5)配列番号3及び34(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6805−5p)の組み合わせ
(12−1)配列番号2及び9(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6729−5p)の組み合わせ
(12−2)配列番号1及び9(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6729−5p)の組み合わせ
(12−3)配列番号9及び237(マーカー:hsa−miR−6729−5p及びhsa−miR−602)の組み合わせ
(12−4)配列番号4及び9(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6729−5p)の組み合わせ
(12−5)配列番号3及び9(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6729−5p)の組み合わせ
(13−1)配列番号2及び143(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1228−5p)の組み合わせ
(13−2)配列番号1及び143(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1228−5p)の組み合わせ
(13−3)配列番号237及び143(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1228−5p)の組み合わせ
(13−4)配列番号4及び143(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1228−5p)の組み合わせ
(13−5)配列番号3及び143(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1228−5p)の組み合わせ
(14−1)配列番号2及び13(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6727−5p)の組み合わせ
(14−2)配列番号1及び13(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6727−5p)の組み合わせ
(14−3)配列番号237及び13(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6727−5p)の組み合わせ
(14−4)配列番号4及び13(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6727−5p)の組み合わせ
(14−5)配列番号3及び13(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6727−5p)の組み合わせ
(15−1)配列番号2及び125(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6781−5p)の組み合わせ
(15−2)配列番号1及び125(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6781−5p)の組み合わせ
(15−3)配列番号237及び125(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6781−5p)の組み合わせ
(15−4)配列番号4及び125(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6781−5p)の組み合わせ
(15−5)配列番号3及び125(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6781−5p)の組み合わせ
(16−1)配列番号2及び236(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−760)の組み合わせ
(16−2)配列番号1及び236(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−760)の組み合わせ
(16−3)配列番号237及び236(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−760)の組み合わせ
(16−4)配列番号4及び236(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−760)の組み合わせ
(16−5)配列番号3及び236(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−760)の組み合わせ
(17−1)配列番号2及び46(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1231)の組み合わせ
(17−2)配列番号1及び46(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1231)の組み合わせ
(17−3)配列番号237及び46(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1231)の組み合わせ
(17−4)配列番号4及び46(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1231)の組み合わせ
(17−5)配列番号3及び46(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1231)の組み合わせ
(18−1)配列番号2及び32(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6836−3p)の組み合わせ
(18−2)配列番号1及び32(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6836−3p)の組み合わせ
(18−3)配列番号237及び32(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6836−3p)の組み合わせ
(18−4)配列番号4及び32(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6836−3p)の組み合わせ
(18−5)配列番号3及び32(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6836−3p)の組み合わせ
(19−1)配列番号2及び62(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4492)の組み合わせ
(19−2)配列番号1及び62(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4492)の組み合わせ
(19−3)配列番号237及び62(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4492)の組み合わせ
(19−4)配列番号4及び62(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4492)の組み合わせ
(19−5)配列番号3及び62(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4492)の組み合わせ
(20−1)配列番号2及び88(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4484)の組み合わせ
(20−2)配列番号1及び88(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4484)の組み合わせ
(20−3)配列番号237及び88(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4484)の組み合わせ
(20−4)配列番号4及び88(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4484)の組み合わせ
(20−5)配列番号3及び88(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4484)の組み合わせ
(21−1)配列番号2及び52(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4741)の組み合わせ
(21−2)配列番号1及び52(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4741)の組み合わせ
(21−3)配列番号237及び52(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4741)の組み合わせ
(21−4)配列番号4及び52(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4741)の組み合わせ
(21−5)配列番号3及び52(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4741)の組み合わせ
(22−1)配列番号2及び7(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−7704)の組み合わせ
(22−2)配列番号1及び7(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−7704)の組み合わせ
(22−3)配列番号237及び7(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−7704)の組み合わせ
(22−4)配列番号4及び7(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−7704)の組み合わせ
(22−5)配列番号3及び7(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−7704)の組み合わせ
(23−1)配列番号2及び26(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6875−5p)の組み合わせ
(23−2)配列番号1及び26(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6875−5p)の組み合わせ
(23−3)配列番号237及び26(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6875−5p)の組み合わせ
(23−4)配列番号4及び26(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6875−5p)の組み合わせ
(23−5)配列番号3及び26(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6875−5p)の組み合わせ
(24−1)配列番号2及び25(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−8069)の組み合わせ
(24−2)配列番号1及び25(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−8069)の組み合わせ
(24−3)配列番号237及び25(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−8069)の組み合わせ
(24−4)配列番号4及び25(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−8069)の組み合わせ
(24−5)配列番号3及び25(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−8069)の組み合わせ
(25−1)配列番号2及び54(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6869−5p)の組み合わせ
(25−2)配列番号1及び54(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6869−5p)の組み合わせ
(25−3)配列番号237及び54(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6869−5p)の組み合わせ
(25−4)配列番号4及び54(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6869−5p)の組み合わせ
(25−5)配列番号3及び54(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6869−5p)の組み合わせ
(26−1)配列番号2及び92(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4725−3p)の組み合わせ
(26−2)配列番号1及び92(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4725−3p)の組み合わせ
(26−3)配列番号237及び92(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4725−3p)の組み合わせ
(26−4)配列番号4及び92(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4725−3p)の組み合わせ
(26−5)配列番号3及び92(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4725−3p)の組み合わせ
(27−1)配列番号2及び14(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6088)の組み合わせ
(27−2)配列番号1及び14(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6088)の組み合わせ
(27−3)配列番号237及び14(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6088)の組み合わせ
(27−4)配列番号4及び14(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6088)の組み合わせ
(27−5)配列番号3及び14(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6088)の組み合わせ
(28−1)配列番号2及び242(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−135a−3p)の組み合わせ
(28−2)配列番号1及び242(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−135a−3p)の組み合わせ
(28−3)配列番号237及び242(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−135a−3p)の組み合わせ
(28−4)配列番号4及び242(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−135a−3p)の組み合わせ
(28−5)配列番号3及び242(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−135a−3p)の組み合わせ
(29−1)配列番号2及び47(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1908−3p)の組み合わせ
(29−2)配列番号1及び47(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1908−3p)の組み合わせ
(29−3)配列番号237及び47(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1908−3p)の組み合わせ
(29−4)配列番号4及び47(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1908−3p)の組み合わせ
(29−5)配列番号3及び47(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1908−3p)の組み合わせ
(30−1)配列番号2及び45(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6771−5p)の組み合わせ
(30−2)配列番号1及び45(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6771−5p)の組み合わせ
(30−3)配列番号237及び45(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6771−5p)の組み合わせ
(30−4)配列番号4及び45(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6771−5p)の組み合わせ
(30−5)配列番号3及び45(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6771−5p)の組み合わせ
(31−1)配列番号2及び39(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6850−5p)の組み合わせ
(31−2)配列番号1及び39(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6850−5p)の組み合わせ
(31−3)配列番号237及び39(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6850−5p)の組み合わせ
(31−4)配列番号4及び39(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6850−5p)の組み合わせ
(31−5)配列番号3及び39(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6850−5p)の組み合わせ
(32−1)配列番号2及び21(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−885−3p)の組み合わせ
(32−2)配列番号1及び21(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−885−3p)の組み合わせ
(32−3)配列番号237及び21(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−885−3p)の組み合わせ
(32−4)配列番号4及び21(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−885−3p)の組み合わせ
(32−5)配列番号3及び21(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−885−3p)の組み合わせ
(33−1)配列番号2及び17(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4787−5p)の組み合わせ
(33−2)配列番号1及び17(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4787−5p)の組み合わせ
(33−3)配列番号237及び17(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4787−5p)の組み合わせ
(33−4)配列番号4及び17(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4787−5p)の組み合わせ
(33−5)配列番号3及び17(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4787−5p)の組み合わせ
(34−1)配列番号2及び83(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1909−3p)の組み合わせ
(34−2)配列番号1及び83(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1909−3p)の組み合わせ
(34−3)配列番号237及び83(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1909−3p)の組み合わせ
(34−4)配列番号4及び83(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1909−3p)の組み合わせ
(34−5)配列番号3及び83(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1909−3p)の組み合わせ
(35−1)配列番号2及び149(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−638)の組み合わせ
(35−2)配列番号1及び149(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−638)の組み合わせ
(35−3)配列番号237及び149(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−638)の組み合わせ
(35−4)配列番号4及び149(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−638)の組み合わせ
(35−5)配列番号3及び149(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−638)の組み合わせ
(36−1)配列番号2及び246(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1915−3p)の組み合わせ
(36−2)配列番号1及び246(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1915−3p)の組み合わせ
(36−3)配列番号237及び246(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1915−3p)の組み合わせ
(36−4)配列番号4及び246(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1915−3p)の組み合わせ
(36−5)配列番号3及び246(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1915−3p)の組み合わせ
(37−1)配列番号2及び22(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6802−5p)の組み合わせ
(37−2)配列番号1及び22(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6802−5p)の組み合わせ
(37−3)配列番号237及び22(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6802−5p)の組み合わせ
(37−4)配列番号4及び22(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6802−5p)の組み合わせ
(37−5)配列番号3及び22(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6802−5p)の組み合わせ
(38−1)配列番号2及び55(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−5090)の組み合わせ
(38−2)配列番号1及び55(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−5090)の組み合わせ
(38−3)配列番号237及び55(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−5090)の組み合わせ
(38−4)配列番号4及び55(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−5090)の組み合わせ
(38−5)配列番号3及び55(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−5090)の組み合わせ
(39−1)配列番号2及び182(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3196)の組み合わせ
(39−2)配列番号1及び182(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3196)の組み合わせ
(39−3)配列番号237及び182(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−3196)の組み合わせ
(39−4)配列番号4及び182(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3196)の組み合わせ
(39−5)配列番号3及び182(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3196)の組み合わせ
(40−1)配列番号2及び73(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4707−3p)の組み合わせ
(40−2)配列番号1及び73(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4707−3p)の組み合わせ
(40−3)配列番号237及び73(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4707−3p)の組み合わせ
(40−4)配列番号4及び73(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4707−3p)の組み合わせ
(40−5)配列番号3及び73(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4707−3p)の組み合わせ
(41−1)配列番号2及び77(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4651)の組み合わせ
(41−2)配列番号1及び77(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4651)の組み合わせ
(41−3)配列番号237及び77(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4651)の組み合わせ
(41−4)配列番号4及び77(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4651)の組み合わせ
(41−5)配列番号3及び77(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4651)の組み合わせ
(42−1)配列番号2及び24(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6787−5p)の組み合わせ
(42−2)配列番号1及び24(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6787−5p)の組み合わせ
(42−3)配列番号237及び24(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6787−5p)の組み合わせ
(42−4)配列番号4及び24(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6787−5p)の組み合わせ
(42−5)配列番号3及び24(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6787−5p)の組み合わせ
(43−1)配列番号2及び103(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3180−3p)の組み合わせ
(43−2)配列番号1及び103(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3180−3p)の組み合わせ
(43−3)配列番号237及び103(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−3180−3p)の組み合わせ
(43−4)配列番号4及び103(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3180−3p)の組み合わせ
(43−5)配列番号3及び103(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3180−3p)の組み合わせ
(44−1)配列番号2及び49(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3937)の組み合わせ
(44−2)配列番号1及び49(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3937)の組み合わせ
(44−3)配列番号237及び49(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−3937)の組み合わせ
(44−4)配列番号4及び49(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3937)の組み合わせ
(44−5)配列番号3及び49(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3937)の組み合わせ
(45−1)配列番号2及び239(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−92a−2−5p)の組み合わせ
(45−2)配列番号1及び239(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−92a−2−5p)の組み合わせ
(45−3)配列番号237及び239(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−92a−2−5p)の組み合わせ
(45−4)配列番号4及び239(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−92a−2−5p)の組み合わせ
(45−5)配列番号3及び239(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−92a−2−5p)の組み合わせ
(46−1)配列番号2及び23(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−328−5p)の組み合わせ
(46−2)配列番号1及び23(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−328−5p)の組み合わせ
(46−3)配列番号237及び23(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−328−5p)の組み合わせ
(46−4)配列番号4及び23(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−328−5p)の組み合わせ
(46−5)配列番号3及び23(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−328−5p)の組み合わせ
(47−1)配列番号2及び58(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−128−1−5p)の組み合わせ
(47−2)配列番号1及び58(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−128−1−5p)の組み合わせ
(47−3)配列番号237及び58(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−128−1−5p)の組み合わせ
(47−4)配列番号4及び58(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−128−1−5p)の組み合わせ
(47−5)配列番号3及び58(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−128−1−5p)の組み合わせ
(48−1)配列番号2及び211(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6765−5p)の組み合わせ
(48−2)配列番号1及び211(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6765−5p)の組み合わせ
(48−3)配列番号237及び211(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6765−5p)の組み合わせ
(48−4)配列番号4及び211(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6765−5p)の組み合わせ
(48−5)配列番号3及び211(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6765−5p)の組み合わせ
(49−1)配列番号2及び147(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6786−5p)の組み合わせ
(49−2)配列番号1及び147(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6786−5p)の組み合わせ
(49−3)配列番号237及び147(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6786−5p)の組み合わせ
(49−4)配列番号4及び147(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6786−5p)の組み合わせ
(49−5)配列番号3及び147(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6786−5p)の組み合わせ
(50−1)配列番号2及び65(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4525)の組み合わせ
(50−2)配列番号1及び65(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4525)の組み合わせ
(50−3)配列番号237及び65(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4525)の組み合わせ
(50−4)配列番号4及び65(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4525)の組み合わせ
(50−5)配列番号3及び65(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4525)の組み合わせ
(51−1)配列番号2及び31(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3665)の組み合わせ
(51−2)配列番号1及び31(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3665)の組み合わせ
(51−3)配列番号237及び31(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−3665)の組み合わせ
(51−4)配列番号4及び31(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3665)の組み合わせ
(51−5)配列番号3及び31(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3665)の組み合わせ
(52−1)配列番号2及び72(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−663b)の組み合わせ
(52−2)配列番号1及び72(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−663b)の組み合わせ
(52−3)配列番号237及び72(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−663b)の組み合わせ
(52−4)配列番号4及び72(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−663b)の組み合わせ
(52−5)配列番号3及び72(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−663b)の組み合わせ
(53−1)配列番号2及び63(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6785−5p)の組み合わせ
(53−2)配列番号1及び63(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6785−5p)の組み合わせ
(53−3)配列番号237及び63(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6785−5p)の組み合わせ
(53−4)配列番号4及び63(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6785−5p)の組み合わせ
(53−5)配列番号3及び63(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6785−5p)の組み合わせ
(54−1)配列番号2及び80(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4758−5p)の組み合わせ
(54−2)配列番号1及び80(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4758−5p)の組み合わせ
(54−3)配列番号237及び80(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4758−5p)の組み合わせ
(54−4)配列番号4及び80(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4758−5p)の組み合わせ
(54−5)配列番号3及び80(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4758−5p)の組み合わせ
(55−1)配列番号2及び37(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−197−5p)の組み合わせ
(55−2)配列番号1及び37(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−197−5p)の組み合わせ
(55−3)配列番号237及び37(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−197−5p)の組み合わせ
(55−4)配列番号4及び37(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−197−5p)の組み合わせ
(55−5)配列番号3及び37(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−197−5p)の組み合わせ
(56−1)配列番号2及び67(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3180)の組み合わせ
(56−2)配列番号1及び67(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3180)の組み合わせ
(56−3)配列番号237及び67(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−3180)の組み合わせ
(56−4)配列番号4及び67(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3180)の組み合わせ
(56−5)配列番号3及び67(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3180)の組み合わせ
(57−1)配列番号2及び232(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6125)の組み合わせ
(57−2)配列番号1及び232(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6125)の組み合わせ
(57−3)配列番号237及び232(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6125)の組み合わせ
(57−4)配列番号4及び232(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6125)の組み合わせ
(57−5)配列番号3及び232(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6125)の組み合わせ
(58−1)配列番号2及び127(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4446−3p)の組み合わせ
(58−2)配列番号1及び127(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4446−3p)の組み合わせ
(58−3)配列番号237及び127(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4446−3p)の組み合わせ
(58−4)配列番号4及び127(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4446−3p)の組み合わせ
(58−5)配列番号3及び127(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4446−3p)の組み合わせ
(59−1)配列番号2及び145(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1268a)の組み合わせ
(59−2)配列番号1及び145(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1268a)の組み合わせ
(59−3)配列番号237及び145(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1268a)の組み合わせ
(59−4)配列番号4及び145(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1268a)の組み合わせ
(59−5)配列番号3及び145(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1268a)の組み合わせ
(60−1)配列番号2及び16(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−8073)の組み合わせ
(60−2)配列番号1及び16(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−8073)の組み合わせ
(60−3)配列番号237及び16(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−8073)の組み合わせ
(60−4)配列番号4及び16(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−8073)の組み合わせ
(60−5)配列番号3及び16(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−8073)の組み合わせ
(61−1)配列番号2及び11(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4732−5p)の組み合わせ
(61−2)配列番号1及び11(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4732−5p)の組み合わせ
(61−3)配列番号237及び11(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4732−5p)の組み合わせ
(61−4)配列番号4及び11(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4732−5p)の組み合わせ
(61−5)配列番号3及び11(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4732−5p)の組み合わせ
(62−1)配列番号2及び186(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6789−5p)の組み合わせ
(62−2)配列番号1及び186(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6789−5p)の組み合わせ
(62−3)配列番号237及び186(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6789−5p)の組み合わせ
(62−4)配列番号4及び186(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6789−5p)の組み合わせ
(62−5)配列番号3及び186(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6789−5p)の組み合わせ
(63−1)配列番号2及び50(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−887−3p)の組み合わせ
(63−2)配列番号1及び50(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−887−3p)の組み合わせ
(63−3)配列番号237及び50(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−887−3p)の組み合わせ
(63−4)配列番号4及び50(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−887−3p)の組み合わせ
(63−5)配列番号3及び50(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−887−3p)の組み合わせ
(64−1)配列番号2及び69(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1199−5p)の組み合わせ
(64−2)配列番号1及び69(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1199−5p)の組み合わせ
(64−3)配列番号237及び69(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1199−5p)の組み合わせ
(64−4)配列番号4及び69(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1199−5p)の組み合わせ
(64−5)配列番号3及び69(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1199−5p)の組み合わせ
(65−1)配列番号2及び33(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6821−5p)の組み合わせ
(65−2)配列番号1及び33(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6821−5p)の組み合わせ
(65−3)配列番号237及び33(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6821−5p)の組み合わせ
(65−4)配列番号4及び33(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6821−5p)の組み合わせ
(65−5)配列番号3及び33(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6821−5p)の組み合わせ
(66−1)配列番号2及び247(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−718)の組み合わせ
(66−2)配列番号1及び247(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−718)の組み合わせ
(66−3)配列番号237及び247(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−718)の組み合わせ
(66−4)配列番号4及び247(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−718)の組み合わせ
(66−5)配列番号3及び247(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−718)の組み合わせ
(67−1)配列番号2及び36(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6726−5p)の組み合わせ
(67−2)配列番号1及び36(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6726−5p)の組み合わせ
(67−3)配列番号237及び36(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6726−5p)の組み合わせ
(67−4)配列番号4及び36(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6726−5p)の組み合わせ
(67−5)配列番号3及び36(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6726−5p)の組み合わせ
(68−1)配列番号2及び218(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6784−5p)の組み合わせ
(68−2)配列番号1及び218(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6784−5p)の組み合わせ
(68−3)配列番号237及び218(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6784−5p)の組み合わせ
(68−4)配列番号4及び218(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6784−5p)の組み合わせ
(68−5)配列番号3及び218(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6784−5p)の組み合わせ
(69−1)配列番号2及び43(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4763−3p)の組み合わせ
(69−2)配列番号1及び43(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4763−3p)の組み合わせ
(69−3)配列番号237及び43(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4763−3p)の組み合わせ
(69−4)配列番号4及び43(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4763−3p)の組み合わせ
(69−5)配列番号3及び43(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4763−3p)の組み合わせ
(70−1)配列番号2及び29(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6757−5p)の組み合わせ
(70−2)配列番号1及び29(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6757−5p)の組み合わせ
(70−3)配列番号237及び29(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6757−5p)の組み合わせ
(70−4)配列番号4及び29(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6757−5p)の組み合わせ
(70−5)配列番号3及び29(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6757−5p)の組み合わせ
(71−1)配列番号2及び110(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−665)の組み合わせ
(71−2)配列番号1及び110(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−665)の組み合わせ
(71−3)配列番号237及び110(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−665)の組み合わせ
(71−4)配列番号4及び110(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−665)の組み合わせ
(71−5)配列番号3及び110(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−665)の組み合わせ
(72−1)配列番号2及び20(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1233−5p)の組み合わせ
(72−2)配列番号1及び20(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1233−5p)の組み合わせ
(72−3)配列番号237及び20(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1233−5p)の組み合わせ
(72−4)配列番号4及び20(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1233−5p)の組み合わせ
(72−5)配列番号3及び20(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1233−5p)の組み合わせ
(73−1)配列番号2及び157(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1268b)の組み合わせ
(73−2)配列番号1及び157(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1268b)の組み合わせ
(73−3)配列番号237及び157(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1268b)の組み合わせ
(73−4)配列番号4及び157(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1268b)の組み合わせ
(73−5)配列番号3及び157(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1268b)の組み合わせ
(74−1)配列番号2及び75(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4675)の組み合わせ
(74−2)配列番号1及び75(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4675)の組み合わせ
(74−3)配列番号237及び75(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4675)の組み合わせ
(74−4)配列番号4及び75(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4675)の組み合わせ
(74−5)配列番号3及び75(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4675)の組み合わせ
(75−1)配列番号2及び82(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3620−5p)の組み合わせ
(75−2)配列番号1及び82(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3620−5p)の組み合わせ
(75−3)配列番号237及び82(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−3620−5p)の組み合わせ
(75−4)配列番号4及び82(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3620−5p)の組み合わせ
(75−5)配列番号3及び82(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3620−5p)の組み合わせ
(76−1)配列番号2及び106(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6800−5p)の組み合わせ
(76−2)配列番号1及び106(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6800−5p)の組み合わせ
(76−3)配列番号237及び106(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6800−5p)の組み合わせ
(76−4)配列番号4及び106(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6800−5p)の組み合わせ
(76−5)配列番号3及び106(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6800−5p)の組み合わせ
(77−1)配列番号2及び111(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6778−5p)の組み合わせ
(77−2)配列番号1及び111(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6778−5p)の組み合わせ
(77−3)配列番号237及び111(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6778−5p)の組み合わせ
(77−4)配列番号4及び111(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6778−5p)の組み合わせ
(77−5)配列番号3及び111(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6778−5p)の組み合わせ
(78−1)配列番号2及び96(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−8059)の組み合わせ
(78−2)配列番号1及び96(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−8059)の組み合わせ
(78−3)配列番号237及び96(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−8059)の組み合わせ
(78−4)配列番号4及び96(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−8059)の組み合わせ
(78−5)配列番号3及び96(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−8059)の組み合わせ
(79−1)配列番号2及び266(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1908−5p)の組み合わせ
(79−2)配列番号1及び266(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1908−5p)の組み合わせ
(79−3)配列番号237及び266(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1908−5p)の組み合わせ
(79−4)配列番号4及び266(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1908−5p)の組み合わせ
(79−5)配列番号3及び266(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1908−5p)の組み合わせ
(80−1)配列番号2及び124(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6798−5p)の組み合わせ
(80−2)配列番号1及び124(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6798−5p)の組み合わせ
(80−3)配列番号237及び124(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6798−5p)の組み合わせ
(80−4)配列番号4及び124(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6798−5p)の組み合わせ
(80−5)配列番号3及び124(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6798−5p)の組み合わせ
(81−1)配列番号2及び68(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6879−5p)の組み合わせ
(81−2)配列番号1及び68(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6879−5p)の組み合わせ
(81−3)配列番号237及び68(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6879−5p)の組み合わせ
(81−4)配列番号4及び68(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6879−5p)の組み合わせ
(81−5)配列番号3及び68(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6879−5p)の組み合わせ
(82−1)配列番号2及び71(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−711)の組み合わせ
(82−2)配列番号1及び71(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−711)の組み合わせ
(82−3)配列番号237及び71(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−711)の組み合わせ
(82−4)配列番号4及び71(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−711)の組み合わせ
(82−5)配列番号3及び71(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−711)の組み合わせ
(83−1)配列番号2及び35(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4728−5p)の組み合わせ
(83−2)配列番号1及び35(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4728−5p)の組み合わせ
(83−3)配列番号237及び35(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4728−5p)の組み合わせ
(83−4)配列番号4及び35(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4728−5p)の組み合わせ
(83−5)配列番号3及び35(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4728−5p)の組み合わせ
(84−1)配列番号2及び173(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−3195)の組み合わせ
(84−2)配列番号1及び173(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−3195)の組み合わせ
(84−3)配列番号237及び173(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−3195)の組み合わせ
(84−4)配列番号4及び173(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−3195)の組み合わせ
(84−5)配列番号3及び173(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−3195)の組み合わせ
(85−1)配列番号2及び5(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−663a)の組み合わせ
(85−2)配列番号1及び5(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−663a)の組み合わせ
(85−3)配列番号237及び5(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−663a)の組み合わせ
(85−4)配列番号4及び5(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−663a)の組み合わせ
(85−5)配列番号3及び5(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−663a)の組み合わせ
(86−1)配列番号2及び851(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6089)の組み合わせ
(86−2)配列番号1及び851(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6089)の組み合わせ
(86−3)配列番号237及び851(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6089)の組み合わせ
(86−4)配列番号4及び851(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6089)の組み合わせ
(86−5)配列番号3及び851(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6089)の組み合わせ
(87−1)配列番号2及び852(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6816−5p)の組み合わせ
(87−2)配列番号1及び852(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6816−5p)の組み合わせ
(87−3)配列番号237及び852(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6816−5p)の組み合わせ
(87−4)配列番号4及び852(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6816−5p)の組み合わせ
(87−5)配列番号3及び852(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6816−5p)の組み合わせ
(88−1)配列番号2及び30(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6756−5p)の組み合わせ
(88−2)配列番号1及び30(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6756−5p)の組み合わせ
(88−3)配列番号237及び30(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6756−5p)の組み合わせ
(88−4)配列番号4及び30(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6756−5p)の組み合わせ
(88−5)配列番号3及び30(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6756−5p)の組み合わせ
(89−1)配列番号2及び93(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6861−5p)の組み合わせ
(89−2)配列番号1及び93(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6861−5p)の組み合わせ
(89−3)配列番号237及び93(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6861−5p)の組み合わせ
(89−4)配列番号4及び93(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6861−5p)の組み合わせ
(89−5)配列番号3及び93(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6861−5p)の組み合わせ
(90−1)配列番号2及び27(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1246)の組み合わせ
(90−2)配列番号1及び27(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1246)の組み合わせ
(90−3)配列番号237及び27(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1246)の組み合わせ
(90−4)配列番号4及び27(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1246)の組み合わせ
(90−5)配列番号27及び208(マーカー:hsa−miR−1246及びhsa−miR−1343−5p)の組み合わせ
(91−1)配列番号2及び853(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4466)の組み合わせ
(91−2)配列番号1及び853(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4466)の組み合わせ
(91−3)配列番号237及び853(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4466)の組み合わせ
(91−4)配列番号4及び853(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4466)の組み合わせ
(91−5)配列番号3及び853(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4466)の組み合わせ
(92−1)配列番号2及び238(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−423−5p)の組み合わせ
(92−2)配列番号1及び238(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−423−5p)の組み合わせ
(92−3)配列番号237及び238(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−423−5p)の組み合わせ
(92−4)配列番号4及び238(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−423−5p)の組み合わせ
(92−5)配列番号3及び238(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−423−5p)の組み合わせ
(93−1)配列番号2及び130(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6075)の組み合わせ
(93−2)配列番号1及び130(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6075)の組み合わせ
(93−3)配列番号237及び130(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6075)の組み合わせ
(93−4)配列番号4及び130(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6075)の組み合わせ
(93−5)配列番号3及び130(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6075)の組み合わせ
(94−1)配列番号2及び177(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−7108−5p)の組み合わせ
(94−2)配列番号1及び177(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−7108−5p)の組み合わせ
(94−3)配列番号237及び177(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−7108−5p)の組み合わせ
(94−4)配列番号4及び177(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−7108−5p)の組み合わせ
(94−5)配列番号3及び177(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−7108−5p)の組み合わせ
(95−1)配列番号2及び64(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6511a−5p)の組み合わせ
(95−2)配列番号1及び64(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6511a−5p)の組み合わせ
(95−3)配列番号237及び64(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6511a−5p)の組み合わせ
(95−4)配列番号4及び64(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6511a−5p)の組み合わせ
(95−5)配列番号3及び64(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6511a−5p)の組み合わせ
(96−1)配列番号2及び114(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−211−3p)の組み合わせ
(96−2)配列番号1及び114(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−211−3p)の組み合わせ
(96−3)配列番号237及び114(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−211−3p)の組み合わせ
(96−4)配列番号4及び114(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−211−3p)の組み合わせ
(96−5)配列番号3及び114(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−211−3p)の組み合わせ
(97−1)配列番号2及び119(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−7110−5p)の組み合わせ
(97−2)配列番号1及び119(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−7110−5p)の組み合わせ
(97−3)配列番号237及び119(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−7110−5p)の組み合わせ
(97−4)配列番号4及び119(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−7110−5p)の組み合わせ
(97−5)配列番号3及び119(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−7110−5p)の組み合わせ
(98−1)配列番号2及び135(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6870−5p)の組み合わせ
(98−2)配列番号1及び135(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6870−5p)の組み合わせ
(98−3)配列番号237及び135(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6870−5p)の組み合わせ
(98−4)配列番号4及び135(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6870−5p)の組み合わせ
(98−5)配列番号3及び135(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6870−5p)の組み合わせ
(99−1)配列番号2及び243(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−486−5p)の組み合わせ
(99−2)配列番号1及び243(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−486−5p)の組み合わせ
(99−3)配列番号237及び243(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−486−5p)の組み合わせ
(99−4)配列番号4及び243(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−486−5p)の組み合わせ
(99−5)配列番号3及び243(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−486−5p)の組み合わせ
(100−1)配列番号2及び122(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4792)の組み合わせ
(100−2)配列番号1及び122(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4792)の組み合わせ
(100−3)配列番号237及び122(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4792)の組み合わせ
(100−4)配列番号4及び122(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4792)の組み合わせ
(100−5)配列番号3及び122(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4792)の組み合わせ
(101−1)配列番号2及び260(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4687−3p)の組み合わせ
(101−2)配列番号1及び260(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4687−3p)の組み合わせ
(101−3)配列番号237及び260(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4687−3p)の組み合わせ
(101−4)配列番号4及び260(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4687−3p)の組み合わせ
(101−5)配列番号3及び260(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4687−3p)の組み合わせ
(102−1)配列番号2及び59(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1238−5p)の組み合わせ
(102−2)配列番号1及び59(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1238−5p)の組み合わせ
(102−3)配列番号237及び59(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1238−5p)の組み合わせ
(102−4)配列番号4及び59(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1238−5p)の組み合わせ
(102−5)配列番号3及び59(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1238−5p)の組み合わせ
(103−1)配列番号2及び854(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4488)の組み合わせ
(103−2)配列番号1及び854(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4488)の組み合わせ
(103−3)配列番号237及び854(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4488)の組み合わせ
(103−4)配列番号4及び854(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4488)の組み合わせ
(103−5)配列番号3及び854(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4488)の組み合わせ
(104−1)配列番号2及び132(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6891−5p)の組み合わせ
(104−2)配列番号1及び132(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6891−5p)の組み合わせ
(104−3)配列番号237及び132(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6891−5p)の組み合わせ
(104−4)配列番号4及び132(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6891−5p)の組み合わせ
(104−5)配列番号3及び132(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6891−5p)の組み合わせ
(105−1)配列番号2及び181(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−2861)の組み合わせ
(105−2)配列番号1及び181(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−2861)の組み合わせ
(105−3)配列番号237及び181(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−2861)の組み合わせ
(105−4)配列番号4及び181(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−2861)の組み合わせ
(105−5)配列番号3及び181(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−2861)の組み合わせ
(106−1)配列番号2及び79(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4665−5p)の組み合わせ
(106−2)配列番号1及び79(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4665−5p)の組み合わせ
(106−3)配列番号237及び79(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4665−5p)の組み合わせ
(106−4)配列番号4及び79(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4665−5p)の組み合わせ
(106−5)配列番号3及び79(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4665−5p)の組み合わせ
(107−1)配列番号2及び133(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4745−5p)の組み合わせ
(107−2)配列番号1及び133(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4745−5p)の組み合わせ
(107−3)配列番号237及び133(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4745−5p)の組み合わせ
(107−4)配列番号4及び133(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4745−5p)の組み合わせ
(107−5)配列番号3及び133(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4745−5p)の組み合わせ
(108−1)配列番号2及び41(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6858−5p)の組み合わせ
(108−2)配列番号1及び41(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6858−5p)の組み合わせ
(108−3)配列番号237及び41(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6858−5p)の組み合わせ
(108−4)配列番号4及び41(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6858−5p)の組み合わせ
(108−5)配列番号3及び41(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6858−5p)の組み合わせ
(109−1)配列番号2及び139(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6825−5p)の組み合わせ
(109−2)配列番号1及び139(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6825−5p)の組み合わせ
(109−3)配列番号237及び139(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6825−5p)の組み合わせ
(109−4)配列番号4及び139(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6825−5p)の組み合わせ
(109−5)配列番号3及び139(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6825−5p)の組み合わせ
(110−1)配列番号2及び118(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−614)の組み合わせ
(110−2)配列番号1及び118(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−614)の組み合わせ
(110−3)配列番号237及び118(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−614)の組み合わせ
(110−4)配列番号4及び118(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−614)の組み合わせ
(110−5)配列番号3及び118(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−614)の組み合わせ
(111−1)配列番号2及び86(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−1343−3p)の組み合わせ
(111−2)配列番号1及び86(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−1343−3p)の組み合わせ
(111−3)配列番号237及び86(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−1343−3p)の組み合わせ
(111−4)配列番号4及び86(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−1343−3p)の組み合わせ
(111−5)配列番号3及び86(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−1343−3p)の組み合わせ
(112−1)配列番号2及び60(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−365a−5p)の組み合わせ
(112−2)配列番号1及び60(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−365a−5p)の組み合わせ
(112−3)配列番号237及び60(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−365a−5p)の組み合わせ
(112−4)配列番号4及び60(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−365a−5p)の組み合わせ
(112−5)配列番号3及び60(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−365a−5p)の組み合わせ
(113−1)配列番号2及び116(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4750−5p)の組み合わせ
(113−2)配列番号1及び116(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4750−5p)の組み合わせ
(113−3)配列番号237及び116(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4750−5p)の組み合わせ
(113−4)配列番号4及び116(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4750−5p)の組み合わせ
(113−5)配列番号3及び116(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4750−5p)の組み合わせ
(114−1)配列番号2及び160(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6732−5p)の組み合わせ
(114−2)配列番号1及び160(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6732−5p)の組み合わせ
(114−3)配列番号237及び160(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6732−5p)の組み合わせ
(114−4)配列番号4及び160(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6732−5p)の組み合わせ
(114−5)配列番号3及び160(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6732−5p)の組み合わせ
(115−1)配列番号2及び38(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−149−3p)の組み合わせ
(115−2)配列番号1及び38(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−149−3p)の組み合わせ
(115−3)配列番号237及び38(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−149−3p)の組み合わせ
(115−4)配列番号4及び38(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−149−3p)の組み合わせ
(115−5)配列番号3及び38(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−149−3p)の組み合わせ
(116−1)配列番号2及び99(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−4497)の組み合わせ
(116−2)配列番号1及び99(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−4497)の組み合わせ
(116−3)配列番号237及び99(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−4497)の組み合わせ
(116−4)配列番号4及び99(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−4497)の組み合わせ
(116−5)配列番号3及び99(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−4497)の組み合わせ
(117−1)配列番号2及び104(マーカー:hsa−miR−4730及びhsa−miR−6848−5p)の組み合わせ
(117−2)配列番号1及び104(マーカー:hsa−miR−4783−3p及びhsa−miR−6848−5p)の組み合わせ
(117−3)配列番号237及び104(マーカー:hsa−miR−602及びhsa−miR−6848−5p)の組み合わせ
(117−4)配列番号4及び104(マーカー:hsa−miR−4634及びhsa−miR−6848−5p)の組み合わせ
(117−5)配列番号3及び104(マーカー:hsa−miR−1307−3p及びhsa−miR−6848−5p)の組み合わせ
本発明のキット又はデバイスは、下記4の乳がんの検出のために使用することができる。
本発明はさらに、上記「3.乳がん検出用キット又はデバイス」で説明した本発明のキット又はデバイス(本発明で使用可能な上記の核酸を含む。)を用いて、検体中の以下の群から選択される、miR−4783−3p、miR−4730、miR−1307−3p、miR−4634、miR−663a、miR−4532、miR−7704、miR−3178、miR−6729−5p、miR−6090、miR−4732−5p、miR−3184−5p、miR−6727−5p、miR−6088、miR−4674、miR−8073、miR−4787−5p、miR−1469、miR−125a−3p、miR−1233−5p、miR−885−3p、miR−6802−5p、miR−328−5p、miR−6787−5p、miR−8069、miR−6875−5p、miR−1246、miR−4734、miR−6757−5p、miR−6756−5p、miR−3665、miR−6836−3p、miR−6821−5p、miR−6805−5p、miR−4728−5p、miR−6726−5p、miR−197−5p、miR−149−3p、miR−6850−5p、miR−4476、miR−6858−5p、miR−564、miR−4763−3p、miR−575、miR−6771−5p、miR−1231、miR−1908−3p、miR−150−3p、miR−3937、miR−887−3p、miR−3940−5p、miR−4741、miR−6808−5p、miR−6869−5p、miR−5090、miR−615−5p、miR−8072、miR−128−1−5p、miR−1238−5p、miR−365a−5p、miR−204−3p、miR−4492、miR−6785−5p、miR−6511a−5p、miR−4525、miR−1915−5p、miR−3180、miR−6879−5p、miR−1199−5p、miR−6746−5p、miR−711、miR−663b、miR−4707−3p、miR−6893−5p、miR−4675、miR−4638−5p、miR−4651、miR−6087、miR−4665−5p、miR−4758−5p、miR−6887−5p、miR−3620−5p、miR−1909−3p、miR−7641、miR−6724−5p、miR−1343−3p、miR−6780b−5p、miR−4484、miR−4690−5p、miR−4429、miR−1227−5p、miR−4725−3p、miR−6861−5p、miR−6812−5p、miR−3197、miR−8059、miR−3185、miR−4706、miR−4497、miR−3131、miR−6806−5p、miR−187−5p、miR−3180−3p、miR−6848−5p、miR−6820−5p、miR−6800−5p、miR−6717−5p、miR−6795−5p、miR−4632−5p、miR−665、miR−6778−5p、miR−3663−3p、miR−4689、miR−211−3p、miR−6511b−5p、miR−4750−5p、miR−6126、miR−614、miR−7110−5p、miR−744−5p、miR−6769a−5p、miR−4792、miR−5787、miR−6798−5p、miR−6781−5p、miR−4419b、miR−4446−3p、miR−4259、miR−5572、miR−6075、miR−296−3p、miR−6891−5p、miR−4745−5p、miR−6775−5p、miR−6870−5p、miR−920、miR−4530、miR−6819−5p、miR−6825−5p、miR−7847−3p、miR−6131、miR−4433−3p、miR−1228−5p、miR−6743−5p、miR−1268a、miR−3917、miR−6786−5p、miR−3154、miR−638、miR−6741−5p、miR−6889−5p、miR−6840−3p、miR−6510−5p、miR−3188、miR−551b−5p、miR−5001−5p、miR−1268b、miR−7107−5p、miR−6824−5p、miR−6732−5p、miR−371a−5p、miR−6794−5p、miR−6779−5p、miR−4271、miR−5195−3p、miR−6762−5p、miR−939−5p、miR−1247−3p、miR−6777−5p、miR−6722−3p、miR−3656、miR−4688、miR−3195、miR−6766−5p、miR−4447、miR−4656、miR−7108−5p、miR−3191−3p、miR−1273g−3p、miR−4463、miR−2861、miR−3196、miR−6877−5p、miR−3679−5p、miR−4442、miR−6789−5p、miR−6782−5p、miR−486−3p、miR−6085、miR−4746−3p、miR−619−5p、miR−937−5p、miR−6803−5p、miR−4298、miR−4454、miR−4459、miR−7150、miR−6880−5p、miR−4449、miR−8063、miR−4695−5p、miR−6132、miR−6829−5p、miR−4486、miR−6805−3p、miR−6826−5p、miR−4508、miR−1343−5p、miR−7114−5p、miR−3622a−5p、miR−6765−5p、miR−7845−5p、miR−3960、miR−6749−5p、miR−1260b、miR−6799−5p、miR−4723−5p、miR−6784−5p、miR−5100、miR−6769b−5p、miR−1207−5p、miR−642a−3p、miR−4505、miR−4270、miR−6721−5p、miR−7111−5p、miR−6791−5p、miR−7109−5p、miR−4258、miR−6515−3p、miR−6851−5p、miR−6125、miR−4749−5p、miR−4726−5p、miR−4513、miR−6089、miR−6816−5p、miR−4466、miR−4488、miR−6752−5p及びmiR−4739で表される乳がん由来の遺伝子の発現量、並びに場合により、以下の群から選択される、miR−760、miR−602、miR−423−5p、miR−92a−2−5p、miR−16−5p、miR−451a、miR−135a−3p、miR−486−5p、miR−4257、miR−92b−5p、miR−1915−3p、miR−718、miR−940、miR−296−5p、miR−23b−3p及びmiR−92a−3pで表される乳がん由来の遺伝子の発現量、並びに場合により、以下の群から選択される、miR−658、miR−6842−5p、miR−6124、miR−6765−3p、miR−7106−5p、miR−4534、miR−92b−3p、miR−3135b、miR−4687−3p、miR−762、miR−3619−3p、miR−4467、miR−557、miR−1237−5p、miR−1908−5p、miR−4286、miR−6885−5p及びmiR−6763−5pで表される乳がん由来の遺伝子の発現量、の1つ以上で表される乳がん由来の遺伝子の発現量、をin vitroで測定し、さらに、乳がんの罹患が疑われる被験体と、健常体(非乳がん患者を含む)とから採取した血液、血清、血漿等の検体について、検体中の上記遺伝子の発現量と、健常体の対照発現量とを用いて、例えば両発現量を比較して、当該検体中の標的核酸の発現量に差がある場合、被験体が、乳がんに罹患していると評価することを含む、乳がんの検出方法を提供する。
(a)被験体由来の検体を、in vitroで、本発明のキット又はデバイスのポリヌクレオチドと接触させるステップ、
(b)検体中の標的核酸の発現量を、上記ポリヌクレオチドを核酸プローブ又はプライマーとして用いて測定するステップ、
(c)(b)の結果をもとに、当該被験体中の乳がん(細胞)の存在又は不存在を評価するステップ、
を含むことができる。
a−miR−3191−3pであり、miR−1273g−3pがhsa−miR−1273g−3pであり、miR−4463がhsa−miR−4463であり、miR−2861がhsa−miR−2861であり、miR−3196がhsa−miR−3196であり、miR−6877−5pがhsa−miR−6877−5pであり、miR−3679−5pがhsa−miR−3679−5pであり、miR−4442がhsa−miR−4442であり、miR−6789−5pがhsa−miR−6789−5pであり、miR−6782−5pがhsa−miR−6782−5pであり、miR−486−3pがhsa−miR−486−3pであり、miR−6085がhsa−miR−6085であり、miR−4746−3pがhsa−miR−4746−3pであり、miR−619−5pがhsa−miR−619−5pであり、miR−937−5pがhsa−miR−937−5pであり、miR−6803−5pがhsa−miR−6803−5pであり、miR−4298がhsa−miR−4298であり、miR−4454がhsa−miR−4454であり、miR−4459がhsa−miR−4459であり、miR−7150がhsa−miR−7150であり、miR−6880−5pがhsa−miR−6880−5pであり、miR−4449がhsa−miR−4449であり、miR−8063がhsa−miR−8063であり、miR−4695−5pがhsa−miR−4695−5pであり、miR−6132がhsa−miR−6132であり、miR−6829−5pがhsa−miR−6829−5pであり、miR−4486がhsa−miR−4486であり、miR−6805−3pがhsa−miR−6805−3pであり、miR−6826−5pがhsa−miR−6826−5pであり、miR−4508がhsa−miR−4508であり、miR−1343−5pがhsa−miR−1343−5pであり、miR−7114−5pがhsa−miR−7114−5pであり、miR−3622a−5pがhsa−miR−3622a−5pであり、miR−6765−5pがhsa−miR−6765−5pであり、miR−7845−5pがhsa−miR−7845−5pであり、miR−3960がhsa−miR−3960であり、miR−6749−5pがhsa−miR−6749−5pであり、miR−1260bがhsa−miR−1260bであり、miR−6799−5pがhsa−miR−6799−5pであり、miR−4723−5pがhsa−miR−4723−5pであり、miR−6784−5pがhsa−miR−6784−5pであり、miR−5100がhsa−miR−5100であり、miR−6769b−5pがhsa−miR−6769b−5pであり、miR−1207−5pがhsa−miR−1207−5pであり、miR−642a−3pがhsa−miR−642a−3pであり、miR−4505がhsa−miR−4505であり、miR−4270がhsa−miR−4270であり、miR−6721−5pがhsa−miR−6721−5pであり、miR−7111−5pがhsa−miR−7111−5pであり、miR−6791−5pがhsa−miR−6791−5pであり、miR−7109−5pがhsa−miR−7109−5pであり、miR−4258がhsa−miR−4258であり、miR−6515−3pがhsa−miR−6515−3pであり、miR−6851−5pがhsa−miR−6851−5pであり、miR−6125がhsa−miR−6125であり、miR−4749−5pがhsa−miR−4749−5pであり、miR−4726−5pがhsa−miR−4726−5pであり、miR−4513がhsa−miR−4513であり、miR−6089がhsa−miR−6089であり、miR−6816−5pがhsa−miR−6816−5pであり、miR−4466がhsa−miR−4466であり、miR−4488がhsa−miR−4488であり、miR−6752−5pがhsa−miR−6752−5pであり、及び、miR−4739がhsa−miR−4739である。
(a)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(b)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(c)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(d)配列番号1〜235及び851〜856のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び
(e)前記(a)〜(d)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
からなる群から選択される。
(f)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(g)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(h)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(i)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び
(j)前記(f)〜(i)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
からなる群から選択される。
(k)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(l)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド、
(m)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(n)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列、もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列、に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び
(o)前記(k)〜(n)のいずれかのポリヌクレオチドとストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド、
からなる群から選択されるポリヌクレオチドである。
(a)被験体の検体から調製されたRNA又はそれから転写された相補的ポリヌクレオチド(cDNA)を、本発明のキット又はデバイスのポリヌクレオチドと結合させるステップ、
(b)当該ポリヌクレオチドに結合した検体由来のRNA又は当該RNAから合成されたcDNAを、上記ポリヌクレオチドを核酸プローブとして用いるハイブリダイゼーションによって、あるいは、上記ポリヌクレオチドをプライマーとして用いる定量RT−PCRによって測定するステップ、
(c)上記(b)の測定結果に基づいて、乳がん(由来の遺伝子の発現)の存在又は不存在を評価するステップ、
を含むことができる。
(a)乳がん患者由来の乳がん由来遺伝子を含む組織及び/又は健常体由来の乳がん由来遺伝子を含まない組織であることが既に知られている検体中の標的遺伝子の発現量を、本発明による検出用ポリヌクレオチド、キット又はデバイス(例えば、DNAチップ)を用いて測定するステップ、
(b)(a)で測定された発現量の測定値から、上記の式1〜3、5及び6の判別式を作成するステップ、
(c)被験体由来の検体中の当該標的遺伝子の発現量を、本発明による診断(検出)用ポリヌクレオチド、キット又はデバイス(例えば、DNAチップ)を用いて測定し、(b)で作成した判別式にその測定値を代入して、得られた結果に基づいて検体が乳がん由来の標的遺伝子を含むこと及び/又は含まないことを決定又は評価する、あるいはその発現量を健常体由来の対照と比較し評価するステップ、
を含むことができる。ここで、式1〜3、5及び6の式中のxは説明変数であり、上記2節に記載したポリヌクレオチド類から選択されるポリヌクレオチド又はその断片を測定することによって得られる値を含み、具体的には本発明の乳がん患者と健常体を判別するための説明変数は、例えば下記の(1)〜(3)のいずれかより選択される遺伝子発現量である。
(2)配列番号236〜251のいずれかで表される塩基配列又はその相補的配列において、15以上の連続した塩基を含むDNAのいずれかによって測定される乳がん患者もしくは健常体の血清における遺伝子発現量。
(3)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列又はその相補的配列において、15以上の連続した塩基を含むDNAのいずれかによって測定される乳がん患者もしくは健常体の血清における遺伝子発現量。
<乳がん患者と健常体の検体の採取>
インフォームドコンセントを得た健常体100人(男性92人、女性8人)と乳がん以外の原発がんが認められていない乳がん患者62人(ステージIが20例、ステージIIAが24例、ステージIIBが7例、ステージIIIAが2例、ステージIIIBが3例、ステージIIICが1例、ステージIVが5例)からベノジェクトII真空採血管VP−AS109K60(テルモ株式会社)を用いてそれぞれ血清を採取し、学習検体群とした。同様に、インフォームドコンセントを得た健常体50人(男性44人、女性6人)と乳がん以外の原発がんが認められていない乳がん患者31人(ステージIが9例、ステージIIAが13例、ステージIIBが5例、ステージIIIAが1例、ステージIIIBが1例、ステージIIICが1例、ステージIVが1例)からベノジェクトII真空採血管VP−AS109K60(テルモ株式会社)を用いてそれぞれ血清を採取し、テスト検体群とした。
検体として上記学習検体群、テスト検体群合わせて健常体150人と乳がん患者93人の合計243人からそれぞれ得られた血清300μLから、3D−Gene(登録商標)RNA extraction reagent from liquid sample kit(東レ株式会社)中のRNA抽出用試薬を用いて、同社の定めるプロトコールに従ってtotal RNAを得た。
検体として上記学習検体群、テスト検体群合わせて健常体150人と乳がん患者93人の合計243人の血清から得たtotal RNAに対して、3D−Gene(登録商標) miRNA Labeling kit(東レ株式会社)を用いて同社が定めるプロトコール(ver2.20)に基づいてmiRNAを蛍光標識した。オリゴDNAチップとして、miRBase release 20に登録されているmiRNAの中で、2,555種のmiRNAと相補的な配列を有するプローブを搭載した3D−Gene(登録商標) Human miRNA Oligo chip(東レ株式会社)を用い、同社が定めるプロトコールに基づいてストリンジェントな条件で、total RNA中のmiRNAとDNAチップ上のプローブとのハイブリダイゼーション及びハイブリダイゼーション後の洗浄を行った。DNAチップを3D−Gene(登録商標)スキャナー(東レ株式会社)を用いてスキャンし、画像を取得して3D−Gene(登録商標)Extraction(東レ株式会社)にて蛍光強度を数値化した。数値化された蛍光強度を、底が2の対数値に変換して遺伝子発現量とし、ブランク値の減算を行い、欠損値は各DNAチップにおける遺伝子発現量の最小値の対数値から0.1を減算した値で置換した。その結果、乳がん患者93人の血清及び健常体150人の血清に対する、網羅的なmiRNAの遺伝子発現量を得た。数値化されたmiRNAの遺伝子発現量を用いた計算及び統計解析は、R言語3.0.2(R Development Core Team (2013).R:A language and environment for statistical computing.R Foundation for Statistical Computing,URL http://www.R−project.org/)及びMASSパッケージ7.3−30(Venables,W.N.&Ripley,B.D.(2002)Modern Applied Statistics with S.Fourth Edition.Springer,New York.ISBN 0−387−95457−0)を用いて実施した。
<乳がん以外のがん患者の検体の採取>
他の臓器にがんが認められていない、インフォームドコンセントを得た前立腺がん患者33人からベノジェクトII真空採血管VP−AS109K60(テルモ株式会社)を用いて血清を採取し、参考例1の乳がん患者62人と健常体102人と合わせて学習検体群とした。同様に、他の臓器にがんが認められていない、インフォームドコンセントを得た前立腺がん患者19人からベノジェクトII真空採血管VP−AS109K60(テルモ株式会社)を用いて血清を採取し、参考例1の乳以外の臓器にがんが認められていない乳がん患者31人、健常体48人と合わせてテスト検体群とした。以降の操作は参考例1と同様に行った。
<学習検体群の検体を用いた遺伝子マーカーの選定とテスト検体群の検体を用いた単独の遺伝子マーカーの乳がん判別性能の評価方法>
本実施例では、学習検体群から乳がんを健常体と判別するための遺伝子マーカーを選定し、学習検体群とは独立したテスト検体群の検体において選定した遺伝子マーカーについてそれぞれ単独での乳がん判別性能を評価する方法を検討した。
<テスト検体群検体を用いた複数の遺伝子マーカーの組合せによる乳がん判別性能の評価方法>
本実施例では、実施例1で選定された遺伝子マーカーを組合せて乳がん判別性能を評価する方法を検討した。具体的には、実施例1において選択された配列番号1〜251で表される塩基配列からなるポリヌクレオチドのいずれのうち、新規に見出された配列番号1〜235で表される塩基配列からなるポリヌクレオチドを少なくとも1つ含むポリヌクレオチドの組み合わせ31,255通りについてフィッシャーの判別分析を行い、乳がんの存在の有無を判別する判別式を構築した。次に、上記で作成した判別式を用いてテスト検体群における精度・感度・特異度を算出し、選定されたポリヌクレオチドの判別性能を独立した検体で検証した。
<全検体を用いた場合の遺伝子マーカーの選定と獲られた遺伝子マーカーの乳がん判別性能の評価方法>
本実施例では、上記実施例1及び実施例2で用いた学習検体群及びテスト検体群の検体を統合し全検体を用いて、遺伝子マーカーの選定、及びその乳がん判別性能評価を行った。
<テスト検体群の検体を用いた複数の遺伝子マーカーの組み合わせによる乳がん特異的な判別性能の評価方法>
本実施例では、実施例1で選定された遺伝子マーカーを使用して、参考例2に記載した学習検体群を対象とし、実施例1に記載の方法と同様の方法で、乳がん患者と、健康体及び前立腺がん患者からなる対照群との血清中のmiRNAの遺伝子発現量の比較を行い、診断用遺伝子を選択した。その結果新たに選択された配列番号851〜856で表される塩基配列からなるポリヌクレオチドを配列番号1〜269で表される塩基配列からなるポリヌクレオチドとさらに組合せて、乳がん特異的な判別性能を評価する方法を検討した。
<既存血中腫瘍マーカーの乳がん判別性能>
上記の参考例で得た学習検体群とテスト検体群について、既存の腫瘍マーカーCEAの血中濃度を測定した。これらの腫瘍マーカーは、原則、非特許文献3に記載される基準値(CEAは5ng/mL)よりも血中濃度が高いとがんの疑いがあるとされる。したがって、各検体毎にCEAの血中濃度が基準値を超えているか否かを確認し、その結果が乳がん患者をがんと判定しているか見定め、学習検体群及びテスト検体群における各既存マーカーの感度を算出した。この結果を表5に示した。CEAの感度は学習検体群において11.3%、テスト検体群においては19.4%しかなく、いずれのマーカーも乳がんの検出には有用でないことが分かった(表5)。
本明細書で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。
Claims (24)
- 乳がんマーカーであるmiR−615−5pと特異的に結合可能な核酸を含む、乳がんの検出用キット。
- miR−615−5pがhsa−miR−615−5pである、請求項1に記載のキット。
- 前記核酸が、下記の(a)〜(c)のいずれかに示すポリヌクレオチド又はその断片からなる群から選択される、請求項1又は2に記載のキット:
(a)
(1)配列番号56で表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(2)(1)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(3)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(1)又は(2)のポリヌクレオチド又はその断片、
(b)配列番号56で表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、及び
(c)以下の(4)〜(7)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片とハイストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド
(4)配列番号56で表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(5)(4)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(6)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(4)又は(5)のポリヌクレオチド又はその断片、
(7)配列番号56で表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片。 - 前記キットが、別の乳がんマーカーである、miR−4732−5p、miR−4734、miR−4728−5p、miR−1268a、miR−760、miR−602、miR−423−5p、miR−92a−2−5p、miR−16−5p、miR−451a、miR−135a−3p、miR−486−5p、miR−4257、miR−92b−5p、miR−1915−3p、miR−718、miR−940、miR−296−5p、miR−23b−3p及びmiR−92a−3pからなる群から選択される少なくとも1つのポリヌクレオチドと特異的に結合可能な核酸をさらに含む、請求項1〜3のいずれか1項に記載のキット。
- miR−4732−5pがhsa−miR−4732−5pであり、miR−4734がhsa−miR−4734であり、miR−4728−5pがhsa−miR−4728−5pであり、miR−1268aがhsa−miR−1268aであり、miR−760がhsa−miR−760であり、miR−602がhsa−miR−602であり、miR−423−5pがhsa−miR−423−5pであり、miR−92a−2−5pがhsa−miR−92a−2−5pであり、miR−16−5pがhsa−miR−16−5pであり、miR−451aがhsa−miR−451aであり、miR−135a−3pがhsa−miR−135a−3pであり、miR−486−5pがhsa−miR−486−5pであり、miR−4257がhsa−miR−4257であり、miR−92b−5pがhsa−miR−92b−5pであり、miR−1915−3pがhsa−miR−1915−3pであり、miR−718がhsa−miR−718であり、miR−940がhsa−miR−940であり、miR−296−5pがhsa−miR−296−5pであり、miR−23b−3pがhsa−miR−23b−3pであり、及び、miR−92a−3pがhsa−miR−92a−3pである、請求項4に記載のキット。
- 前記核酸が、下記の(d)〜(f)のいずれかに示すポリヌクレオチド又はその断片からなる群から選択される、請求項4又は5に記載のキット:
(d)
(8)配列番号11、28、35、145、236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(9)(8)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(10)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(8)又は(9)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片、
(e)配列番号11、28、35、145、236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、及び
(f)以下の(11)〜(14)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片とハイストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド
(11)配列番号11、28、35、145、236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(12)(11)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(13)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(11)又は(12)のポリヌクレオチド又はその断片、
(14)配列番号11、28、35、145、236〜251のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片。 - 前記キットが、別の乳がんマーカーである、miR−658、miR−6842−5p、miR−6124、miR−6765−3p、miR−7106−5p、miR−4534、miR−92b−3p、miR−3135b、miR−4687−3p、miR−762、miR−3619−3p、miR−4467、miR−557、miR−1237−5p、miR−1908−5p、miR−4286、miR−6885−5p及びmiR−6763−5pからなる群から選択される少なくとも1つのポリヌクレオチドと特異的に結合可能な核酸をさらに含む、請求項1〜6のいずれか1項に記載のキット。
- miR−658がhsa−miR−658であり、miR−6842−5pがhsa−miR−6842−5pであり、miR−6124がhsa−miR−6124であり、miR−6765−3pがhsa−miR−6765−3pであり、miR−7106−5pがhsa−miR−7106−5pであり、miR−4534がhsa−miR−4534であり、miR−92b−3pがhsa−miR−92b−3pであり、miR−3135bがhsa−miR−3135bであり、miR−4687−3pがhsa−miR−4687−3pであり、miR−762がhsa−miR−762であり、miR−3619−3pがhsa−miR−3619−3pであり、miR−4467がhsa−miR−4467であり、miR−557がhsa−miR−557であり、miR−1237−5pがhsa−miR−1237−5pであり、miR−1908−5pがhsa−miR−1908−5pであり、miR−4286がhsa−miR−4286であり、miR−6885−5pがhsa−miR−6885−5pであり、及び、miR−6763−5pがhsa−miR−6763−5pである、請求項7に記載のキット。
- 前記核酸が、下記の(g)〜(i)のいずれかに示すポリヌクレオチド又はその断片からなる群から選択される、請求項7又は8に記載のキット:
(g)
(15)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(16)(15)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(17)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(15)又は(16)のポリヌクレオチド又はその断片、
(h)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、及び
(i)以下の(18)〜(21)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片とハイストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド
(18)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(19)(18)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(20)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(18)又は(19)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片、
(21)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片。 - 前記キットが、請求項1又は2に記載のすべての乳がんマーカーから選択される少なくとも2つのポリヌクレオチドのそれぞれと特異的に結合可能な少なくとも2つの核酸を含む、請求項1から9のいずれか1項に記載のキット。
- 乳がんマーカーであるmiR−615−5pと特異的に結合可能な核酸を含む、乳がんの検出用デバイス。
- miR−615−5pがhsa−miR−615−5pである、請求項11に記載のデバイス。
- 前記核酸が、下記の(a)〜(c)のいずれかに示すポリヌクレオチド又はその断片からなる群から選択される、請求項11又は12に記載のデバイス:
(a)
(1)配列番号56で表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(2)(1)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(3)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(1)又は(2)のポリヌクレオチド又はその断片、
(b)配列番号56のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、及び
(c)以下の(4)〜(7)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片とハイストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド
(4)配列番号56で表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(5)(4)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(6)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(4)又は(5)のポリヌクレオチド又はその断片、
(7)配列番号56で表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片。 - 前記デバイスが、別の乳がんマーカーである、miR−4732−5p、miR−4734、miR−4728−5p、miR−1268a、miR−760、miR−602、miR−423−5p、miR−92a−2−5p、miR−16−5p、miR−451a、miR−135a−3p、miR−486−5p、miR−4257、miR−92b−5p、miR−1915−3p、miR−718、miR−940、miR−296−5p、miR−23b−3p及びmiR−92a−3pからなる群から選択される少なくとも1つのポリヌクレオチドと特異的に結合可能な核酸をさらに含む、請求項11〜13のいずれか1項に記載のデバイス。
- miR−4732−5pがhsa−miR−4732−5pであり、miR−4734がhsa−miR−4734であり、miR−4728−5pがhsa−miR−4728−5pであり、miR−1268aがhsa−miR−1268aであり、miR−760がhsa−miR−760であり、miR−602がhsa−miR−602であり、miR−423−5pがhsa−miR−423−5pであり、miR−92a−2−5pがhsa−miR−92a−2−5pであり、miR−16−5pがhsa−miR−16−5pであり、miR−451aがhsa−miR−451aであり、miR−135a−3pがhsa−miR−135a−3pであり、miR−486−5pがhsa−miR−486−5pであり、miR−4257がhsa−miR−4257であり、miR−92b−5pがhsa−miR−92b−5pであり、miR−1915−3pがhsa−miR−1915−3pであり、miR−718がhsa−miR−718であり、miR−940がhsa−miR−940であり、miR−296−5pがhsa−miR−296−5pであり、miR−23b−3pがhsa−miR−23b−3pであり、及び、miR−92a−3pがhsa−miR−92a−3pである、請求項14に記載のデバイス。
- 前記核酸が、下記の(d)〜(f)のいずれかに示すポリヌクレオチド又はその断片からなる群から選択される、請求項14又は15に記載のデバイス:
(d)
(8)配列番号11、28、35、145、236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(9)(8)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(10)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(8)又は(9)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片、
(e)配列番号11、28、35、145、236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、及び
(f)以下の(11)〜(14)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片とハイストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド
(11)配列番号11、28、35、145、236〜251のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド、その変異体、その誘導体、又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(12)(11)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(13)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(11)又は(12)のポリヌクレオチド又はその断片、
(14)配列番号11、28、35、145、236〜251のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片。 - 前記デバイスが、別の乳がんマーカーである、miR−658、miR−6842−5p、miR−6124、miR−6765−3p、miR−7106−5p、miR−4534、miR−92b−3p、miR−3135b、miR−4687−3p、miR−762、miR−3619−3p、miR−4467、miR−557、miR−1237−5p、miR−1908−5p、miR−4286、miR−6885−5p及びmiR−6763−5pからなる群から選択される少なくとも1つのポリヌクレオチドと特異的に結合可能な核酸をさらに含む、請求項11〜16のいずれか1項に記載のデバイス。
- miR−658がhsa−miR−658であり、miR−6842−5pがhsa−miR−6842−5pであり、miR−6124がhsa−miR−6124であり、miR−6765−3pがhsa−miR−6765−3pであり、miR−7106−5pがhsa−miR−7106−5pであり、miR−4534がhsa−miR−4534であり、miR−92b−3pがhsa−miR−92b−3pであり、miR−3135bがhsa−miR−3135bであり、miR−4687−3pがhsa−miR−4687−3pであり、miR−762がhsa−miR−762であり、miR−3619−3pがhsa−miR−3619−3pであり、miR−4467がhsa−miR−4467であり、miR−557がhsa−miR−557であり、miR−1237−5pがhsa−miR−1237−5pであり、miR−1908−5pがhsa−miR−1908−5pであり、miR−4286がhsa−miR−4286であり、miR−6885−5pがhsa−miR−6885−5pであり、及び、miR−6763−5pがhsa−miR−6763−5pである、請求項17に記載のデバイス。
- 前記核酸が、下記の(g)〜(i)のいずれかに示すポリヌクレオチド又はその断片からなる群から選択される、請求項17又は18に記載のデバイス:
(g)
(15)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(16)(15)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(17)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(15)又は(16)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片、
(h)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列に相補的な塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、及び
(i)以下の(18)〜(21)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片とハイストリンジェントな条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド
(18)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列もしくは当該塩基配列においてuがtである塩基配列からなるポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片、
(19)(18)のポリヌクレオチド又はその断片の塩基配列において1又は2の塩基の欠失、置換、付加又は挿入を含むポリヌクレオチド又はその断片、
(20)修飾核酸及び/又は修飾ヌクレオチドを含む(18)又は(19)のいずれかのポリヌクレオチド又はその断片、
(21)配列番号252〜269のいずれかで表される塩基配列を含むポリヌクレオチド又は15以上の連続した塩基を含むその断片。 - 前記デバイスが、ハイブリダイゼーション技術による測定のためのデバイスである、請求項11〜19のいずれか1項に記載のデバイス。
- 前記ハイブリダイゼーション技術が、核酸アレイ技術である、請求項20に記載のデバイス。
- 請求項1〜10のいずれか1項に記載のキット又は請求項11〜21のいずれか1項に記載のデバイスを用いて、被験体の検体における標的核酸の発現量を測定し、該測定された被験体の発現量と、同様に測定された健常体の対照発現量とを比較して、被験体の発現量が健常体の発現量よりも低いときに、その被験体が乳がんに罹患していることをin vitroで評価する、乳がんの検出を補助する方法。
- 前記被験体が、ヒトである、請求項22に記載の方法。
- 前記検体が、血液、血清又は血漿である、請求項22又は23に記載の方法。
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