JP5667737B2

JP5667737B2 - イヌ変形性関節症食餌製剤

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Publication number: JP5667737B2
Application number: JP2007518556A
Authority: JP
Inventors: マーク，ケー．ウォールドロン，; スティーヴン，エス．ハンナ，
Original assignee: Nestec SA
Current assignee: Nestec SA
Priority date: 2004-07-01
Filing date: 2005-07-01
Publication date: 2015-02-12
Anticipated expiration: 2025-07-01
Also published as: BRPI0512926A; US20060024356A1; US20140107063A1; CN1997425A; CN1997425B; AU2005259386B2; WO2006002976A3; ZA200700917B; US8637495B2; EP1771091A2; MXPA06015203A; EP1771091B1; WO2006002976A2; RU2351153C2; CA2571742A1; AU2005259386A1; CA2571742C; JP2008504336A; ES2653528T3; RU2007103820A

Description

関連出願の相互参照

[0001]本願は、参照によりその全文が本明細書に組み込まれる２００４年７月１日に出願された米国仮出願第６０／５８４，７０３号の利益を主張する。

発明の分野

[0002]本発明は、変形性関節症のイヌおよびその他の動物を治療する方法、ならびにイヌおよびその他の動物において変形性関節症の発症を治療、予防し、または遅延させるために、および動物において健全な関節を維持するために特別に処方された食品、サプリメントおよび薬剤に関する。

発明の背景

[0003]変形性関節疾患とも呼ばれる変形性関節症（ＯＡ）は、ヒトおよび動物において最もよく見られる関節障害である（Ｒｏｍｉｃｈ，Ｊ．Ａ．（１９９４）Ｔｏｐ．Ｖｅｔ．Ｍｅｄ．５、１６〜２３頁；Ｂｒｏｏｋｓ，Ｐ．（２００３）ＢｕｌｌＷｏｒｌｄＨｅａｌｔｈＯｒｇ．８１、６８９〜６９０頁）。成犬の２０％もがＯＡに罹患しており、結果として疼痛および身体障害に苦しんでいる（Ｒｏｕｓｈら、（２００２）Ｖｅｔ．Ｍｅｄ．９７、１０８〜１１２頁）。ＯＡは、関節軟骨の関連変質、骨棘形成および骨のリモデリングならびに関節周囲組織における変化を伴う、可動関節の障害と定義できる。この状態は非炎症性関節障害に分類されているが、軽度の非化膿性炎症はよく起こり、数種の炎症成分がＯＡと強く関連している（Ｊｏｈｎｓｔｏｎら（１９９７）Ｖｅｔ．Ｃｌｉｎ．Ｎ．Ａｍ．Ｓｍ．Ａｎｉｍ．Ｐｒａｃｔ．２７、６９９〜７２３頁；Ａｍｉｎら、（１９９７）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９９、１２３１〜１２３７頁；Ｂｒｏｏｋｓら、（２００３）Ｂｕｌｌ．ＷｏｒｌｄＨｅａｌｔｈＯｒｇ．８１、６８９〜６９０頁；Ｈａｙｎｅｓら、（２００２）Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０５、３１５〜３２５頁）。細胞および生化学レベルでは、ＯＡは、炎症性サイトカインに応じて軟骨細胞から放出される分解酵素（特に、マトリックスメタロプロテイナーゼ）の増加を伴う。ＯＡ患者の滑液では、インターロイキン−１β（ＩＬ−１）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）などの炎症性サイトカインならびにその他の炎症性メディエーターが増加している。

[0004]軟骨細胞、白血球および繊維芽細胞から不定に産生されるマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）には、コラゲナーゼ、ストロメライシン、ゼラチナーゼ、エラスターゼなどが含まれる。これらの酵素はすべて、何らかの方法で軟骨マトリックスを分解し、軟骨およびその他の結合組織の生理的リモデリングにおいて重要な役割を果たしている。ＯＡでは、ＭＭＰはマトリックス糖タンパク質をはじめとするグリコサミノグリカンおよびコラーゲンを分解する。ＭＭＰはまた、滑液中のヒアルロン酸濃度を低下させ、それによって粘性が減少した滑液となり、関節が潤滑であることが損なわれる。正常な状態では、ＭＭＰの分解プロセスは、組織性メタロプロテイナーゼ阻害因子（ＴＩＭＰ）の阻害機能によって適当に平衡が保たれている。しかし、ＯＡでは、この平衡に混乱が生じ、ＭＭＰが不均衡に増加する。さらに、炎症性サイトカイン、特に、ＩＬ−１およびＴＮＦαが、ＭＭＰの活性化および放出を刺激する。

[0005]イヌおよびその他の種における多数の研究により、ＯＡにおける活性ＭＭＰの増加、ＴＩＭＰの減少またはその双方が証明されている。例えば、膝ＯＡにおける軟骨分解の程度は、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−１３の活性、ならびにＴＩＭＰ−２のＭＭＰ−２に対する阻害作用の低下と強く関連していたことが関節鏡検査によって調べられ、実証されている。ＯＡが自然に発生したイヌから得た滑液は、健常な対照と比較して、ＭＭＰ−２活性がより高く、ＭＭＰ−９活性が劇的に増加していることがわかっている（ＶｏｌｋＳ．Ｗ．ら、（２００３）Ａｍ．Ｊ．Ｖｅｔ．Ｒｅｓ．６４（１０）、１２２５〜１２３３頁）。ＭＭＰ−９は、人工股関節全置換術を受けている女性の股関節の急速破壊性ＯＡと相関性があるとされてきた。同様に、ＭＭＰ−３およびＭＭＰ−９は、血中で増加していることがわかり、ＭＭＰ−１、ＭＭＰ−３、ＭＭＰ−９およびＴＩＭＰ−１はすべて、この重症型ＯＡの患者から得た組織サンプルにおいて増加していることがわかった。

[0006]ＯＡにおけるＭＭＰの重要な役割をかんがみて、ＭＭＰは、軟骨破壊の寛解を目的とする薬剤の治療標的として役立ち得るだけでなく、ＯＡの進行の診断およびモニタリングにとっての有用なマーカーとしても役立つ可能性があるということが示唆されてきた。ＭＭＰ活性の増加は、プロスタグランジンＥ_２（ＰＧＥ_２）をはじめとするプロスタグランジンによって刺激され、ＰＧＥ_２産生を減少させる非ステロイド系抗炎症薬またはその他の化合物によって阻害され得る。

[0007]ＯＡにおいて最も重要であると考えられるサイトカインとして、ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＴＮＦαが挙げられる。ＯＡでは、サイトカインおよびその他の炎症性メディエーターは、マクロファージ、リンパ球、繊維芽細胞、滑膜細胞および軟骨細胞から生じる。ＩＬ−１およびＴＮＦαの濃度の上昇は、ＭＭＰの活性化を通じて、滑膜性炎症ならびに軟骨およびプロテオグリカンの分解を引き起こす。ＩＬ−１は、繊維芽細胞からのＰＧＥ_２の放出を刺激し、これが続いて疼痛受容体を刺激する。さらに、これらのサイトカインは、炎症性フリーラジカル、特に、一酸化窒素（ＮＯ）の生成を刺激する。

[0008]ＯＡを患っているイヌおよびヒトの双方において、滑液中のＩＬ−６の活性は大幅に高まっている。ＩＬ−６は、ＯＡにおいて、ＭＭＰ活性化の阻害およびマトリックス合成の促進を通じてタンパク同化活性を促進できる。他方、ＩＬ−６はＭＭＰ−２、ＭＭＰ−９およびＭＭＰ−１３を刺激できる。したがって、この多面的サイトカインは、ＯＡの急性期にはプロテオグリカン喪失を低減するのに役立つが、慢性期には骨棘形成を促進する。ＩＬ−６^−／−ノックアウトマウスモデルを用いたいくつかの研究によって、ＩＬ−６は関節炎の病変の進行に重要であることが示されている。

[0009]ＯＡの発症機序に関与しているその他の炎症性物質として、アラキドン酸からシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）または５−リポオキシゲナーゼ（ｌｉｐｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ）（ＬＯＸ）酵素を経由して生じる、エイコサノイドＰＧＥ_２、トロンボキサンＡ_２（ＴＸＡ_２）およびロイコトリエンＢ_４（ＬＴＢ_４）が挙げられる。ＯＡでは、これらの酵素の活性および結果として生じるエイコサノイドが高まっている。骨関節炎軟骨は、正常な軟骨と比較して５０倍より多いＰＧＥ２を自発的に放出する。ＬＴＢ４は、ＩＬ−１およびＴＮＦαの合成および放出を促進する。さらに、ＬＴＢ４は強力な走化性物質であり、局部組織の好中球誘発性損傷を増大し得る。ＴＸＡ２は、単球がＴＮＦαおよびＩＬ−１を放出するのを刺激し、これが続いてＭＭＰ産生および関節破壊を促進する。ＰＣＥ２は、局部炎症および疼痛を促進する。ＰＧＥ２は骨破壊性骨再吸収を促進でき、ＩＩ型コラーゲンの破壊およびプロテオグリカンの喪失を増大させる。ＰＧＥ２は、繊維芽細胞からのＩＬ−６放出を刺激し、また、軟骨細胞をフリーラジカルＮＯの作用に対して感作させる。ＣＯＸ−２酵素を阻害すると、ＰＧＥ２が減少し、ならびにＩＬ−６が低減されることとなる。

[0010]ＯＡの治療法はわかっていないので、治療は疼痛を制御すること、関節機能を改善することおよび関節内での変性プロセスを遅延させることに的を絞っている。治療には、通常、体重管理、管理された運動ならびに抗炎症薬および鎮痛剤の投薬が含まれる。また、炎症性メディエーターを減少させ、軟骨細胞の健康および修復を促進し、酸化的損傷を減少させるのに役立つ栄養補給剤を治療に含める場合もある。

[0011]ＰＧＥ２産生に関与するＣＯＸ−２酵素を阻害することは、ＯＡ患者に軽減をもたらす１つの手段である。ＰＧＥ２産生を減少させる別の手段として、ＣＯＸおよびＬＯＸ酵素の基質としてアラキドン酸と競合する食餌性長鎖ω−３（ｎ−３）ポリ不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）の使用によるものがある。食餌性長鎖ｎ−３ＰＵＦＡはまた、軟骨組織において炎症誘発性メディエーターＩＬ−１、ＩＬ−２およびＴＮＦを抑制する（Ｃｕｒｔｉｓ，Ｃ．Ｌ．ら、（２０００）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７５（２）、７２１〜７２４頁）。

[0012]ｎ−６およびｎ−３両ファミリー中のポリ不飽和脂肪酸は、免疫調節作用を有し得る。イヌ細胞膜中の主なｎ−６脂肪酸は、アラキドン酸（ＡＡ；２０：４ｎ−６）であり、これはＰＧＥ２、ＴＸＡ２およびＬＴＢ４、すなわち、ＯＡにおける強力な炎症性メディエーターの生成の前駆体として働く。

[0013]ω−３（ｎ−３）またはω−６（ｎ−６種）ポリ不飽和脂肪酸は、動物組織では新規合成されないが、正常な細胞機能にとって必要なものである。したがって、それらは必須であると考えられる。必須ポリ不飽和脂肪酸としては、リノール酸（ＬＡ：１８：２ｎ−６）およびα−リノレン酸（ＡＬＡ；１８：３ｎ−３）がある。動物に、１８：２ｎ−６、１８：３ｎ−３、２０：５ｎ−３、２２：５ｎ−３および２２：６ｎ−６をはじめとするｎ−３またはｎ−６ポリ不飽和脂肪酸の供給源を与えると、対応して、ｎ−３およびｎ−６高度不飽和脂肪酸（ＨＵＦＡ）、具体的には２０：４ｎ−６、２０：５ｎ−３、２２：５ｎ−３、２２：６ｎ−３が循環へ濃縮され、組織に濃縮される。ｎ−３およびｎ−６ＨＵＦＡの前駆体は食餌性供給源からしか得ることができないので、組織中の相対存在量は、食餌中のこれらの前駆体の利用可能性によって制限される。

[0014]食餌が、長鎖ｎ−３ＰＵＦＡ、具体的には、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ；２０：５ｎ−３）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ；２２：６ｎ−３）に富んでいれば、細胞膜中のＡＡの一部は、これらの長鎖ｎ−３脂肪酸で置き換えられる。ＥＰＡは、ＣＯＸ−２および５−ＬＯＸ酵素の代替基質として働くことができ、その結果、異なる、あまり炎症性でない化合物のセット、例えば、ＰＧＥ_２、ＴＸＡ_２およびＬＴＢ_４の代わりにＰＧＥ_３、ＴＸＡ_３およびＬＴＢ_５が生じる。

[0015]関節炎において長鎖ｎ−３ＰＵＦＡを評価する臨床研究の大部分は、関節リウマチのヒト患者におけるものであった。それらの研究のほとんどは、長鎖ｎ−３ＰＵＦＡ補給からの明確な利益を示した。患者は、疼痛や関節の硬直を経験することなく非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）の使用を減らすか中止することができた。有益な応答は、長鎖ｎ−３ＰＵＦＡ補給を受ける投与量および期間と直接結び付いていると思われた。ＯＡのイヌにおいて同様の効果が示されている。股関節のＯＡのイヌ２２匹に、炎症性皮膚状態のイヌ用に販売されている脂肪酸サプリメントを与えた（ＤＶＭＤｅｒｍＣａｐｓ、ＤＶＭＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ、Ｍｉａｍｉ、ＦＬ）（Ｍｉｌｌｅｒら、（１９９２）ＣａｎｉｎｅＰｒａｃｔ．１７、６〜８頁）。製造業者の推奨にしたがって投薬すると、２２匹のイヌのうち１３匹が、２週間以内に関節炎の症状に目覚ましい改善を示した（Ｍｉｌｌｅｒら、１９９２、前掲）。

[0016]グルコサミン、アミノ糖は、結合組織においてマトリックスを形成するＯ−結合型およびＮ−結合型グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）の主成分である。ヒアルロン酸およびケラタン硫酸は、一部は、アセチルグルコサミンの反復単位からなっている。軟骨細胞によるグルコサミン合成の減少は、ＯＡにおいて見られるマトリックスＧＡＧの減少に関与しているとされてきた。ＯＡの管理ではグルコサミンを用いる経口補給が評価されている。原則的に、グルコサミンを評価するすべての試験は、硫酸グルコサミンまたは塩酸グルコサミンなどの精製塩を用いて行われてきた。天然供給源（動物または家禽軟骨）から得たグルコサミンへのこれらのデータの適用性は記載されていない。

[0017]経口投与されたグルコサミンの５０％より多くは、小腸の生理学的ｐＨで非イオン化のものであり、小分子として容易に吸収される。ほとんどの経口投与されたグルコサミンは酸化され、結合している放射標識の７０％が呼気ＣＯ_２中に検出される。しかし、約１０％は組織中に保持される。グルコサミンは、軟骨細胞に対して刺激作用を有し、細胞外マトリックスのプロテオグリカンおよびコラーゲンに組み込まれる。

[0018]膝のＯＡを患うヒト患者におけるグルコサミン補給を評価するいくつかの短期および長期、二重盲検ランダム化試験が、最近、メタ分析によって再検討された。これらの研究から、１日あたり１５００ｍｇのグルコサミンを用いてＯＡの臨床的徴候の有意な改善が実証された。２つの研究では患者を３年間追跡し、経口グルコサミンがＯＡの長期進行を効率的に阻害することを実証した。イヌにおけるグルコサミン単独に関する同様の研究は不足している。しかし、いくつかのｉｎｖｉｔｒｏおよびｉｎｖｉｖｏイヌ研究によりグルコサミンとコンドロイチン硫酸の組合せの利益が示された。

[0019]酸化的ストレスは、関節炎において炎症および組織破壊の双方で重要な役割を果たしている。関節炎患者は、血清ビタミンＡ、ＥおよびＣならびにその他の抗酸化物質の濃度が低下しており、ならびに酸化的損傷のマーカーが上昇している。これらの異常を抗酸化物質補給で逆転することができた。いくつかの研究が、ＯＡにおいて酸化的損傷を制御するための抗酸化物質の補給の利益を支持している。

[0020]イヌには、ＯＡと関連している変化に対応するのに直接役立ち得る栄養改善に加え、正常な維持および再生を支持するために適当にバランスのとれた栄養分が必要である。抗酸化栄養素、ビタミンＢ、亜鉛、カルシウム、マグネシウムおよびセレンの食餌性欠乏が報告されている。これらの栄養素はそれぞれ、軟骨およびその他の組織の正常な維持において役割を果たす。したがって、ＯＡのイヌは、完全で、バランスのとれた栄養分を提供する食餌を与えられることが重要である。

[0021]食餌性タンパク質は、プロテオグリカンおよびコラーゲン合成のためのアミノ酸の供給源を提供することに加え、最適な身体状態の維持を補助する役割のために重要である。タンパク質は、体重管理にとって有益であり得るいくつかの生理学的作用を有する。タンパク質は代謝およびタンパク質ターンオーバーを刺激し、熱産生を誘導し、満腹を促す。体重減少およびその後の体重維持の間、タンパク質摂取量を増加することによって、除脂肪体重を保持しながらの体脂肪の低下が促進される。タンパク質のこれらの特徴は、ＯＡのイヌにおいて過剰な体重に対応するのに役立ち有益であり得る。

[0022]関節炎のイヌのための標準的な医療には、体重管理、管理された運動ならびに抗炎症薬および鎮痛剤の投薬が含まれる。当技術分野には、変形性関節症のイヌおよびその他の動物のためのさらなる治療方法ならびに変形性関節症の作用を低減するためのヒトのための治療方法が必要である。

発明の概要

[0023]本発明は変形性関節症のイヌおよびその他の動物を治療するための食餌製剤および方法を提供する。本発明の一態様は、製剤重量の少なくとも約０．１〜１．５％の量の、長鎖ｎ−３脂肪酸、例えばα−リノレン酸（ＡＬＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）またはドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む食餌製剤を特徴とする。特定の実施形態では、長鎖ｎ−３脂肪酸は食餌製剤の少なくとも約０．２％〜０．６％または食餌製剤の少なくとも約０．３％〜０．４％の量で存在する。特定の実施形態では、本食餌製剤は約０．２〜０．６％のＥＰＡまたはＤＨＡを含む。

[0024]いくつかの実施形態では、食餌製剤は、食餌製剤の約３％未満の量のｎ−６脂肪酸を含む。特定の実施形態では、本製剤は約０．１２５％未満のアラキドン酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は約１〜２％未満のリノール酸を含む。

[0025]いくつかの実施形態では、本食餌製剤は少なくとも約１：２の比のｎ−３およびｎ−６脂肪酸を含む。特定の実施形態では、ｎ−３対ｎ−６脂肪酸の比は少なくとも約１：１または少なくとも約２：１である。

[0026]本食餌製剤には、グルコサミン、コンドロイチン、抗酸化物質および非ステロイド系抗炎症薬から独立に選択されるさらなる成分を含めてもよい。

[0027]特定の実施形態では、本食餌製剤は、イヌもしくはネコ用のペットフードまたはペットトリート製品である。このようなペットフード製品はドライフード（キブル）、セミモイストフードまたはモイストフード（缶フード）製品であり得る。その他の実施形態では、本食餌製剤は栄養補給剤であり得る。

[0028]本発明のもう１つの態様は、哺乳類に上記の種類の食餌製剤を投与することを含む、哺乳類において関節炎の発症を治療、予防し、または遅延させる方法を特徴とする。種々の実施形態において、関節炎は、変形性関節症または関節リウマチである。本方法の特定の実施形態では、哺乳類はコンパニオンアニマル、例えば、イヌまたはネコである。その他の実施形態では、哺乳類はヒトであり得る。

[0029]特定の実施形態では、本方法は、哺乳類において体重減少を促進する成分をさらに含む食餌製剤を利用する。本方法はまた、哺乳類をカロリー制限に付して体重減少を促進することまたは哺乳類に、管理された運動を提供することをさらに含み得る。

[0030]本発明のもう１つの態様は、哺乳類に、本明細書に記載される、製剤重量の少なくとも約０．１％〜１．５％の量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む食餌製剤を投与することを含む、哺乳類の滑液において少なくとも１種のマトリックスメタロプロテイナーゼの産生を減少させる方法を特徴とする。特定の実施形態では、マトリックスメタロプロテイナーゼはＭＭＰ−２またはＭＭＰ−９である。

[0031]本発明のもう１つの態様は、哺乳類に、本明細に記載される、製剤重量の少なくとも約０．１％〜１．５％の量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む食餌製剤を投与することを含む、哺乳類において炎症性サイトカインの産生を減少させる方法を特徴とする。特定の実施形態では、炎症性サイトカインはインターロイキン−１、インターロイキン−６または腫瘍壊死因子αである。

[0032]本発明のもう１つの態様は、哺乳類に、本明細書に記載される、食餌製剤重量の少なくとも約０．１％〜１．５％の量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む食餌製剤を投与することを含む、ｉｎｖｉｖｏで哺乳類の膜中のアラキドン酸を低減する方法を特徴とする。

[0033]本発明のその他の特徴および利点は、添付の図面を併せて考慮し、以下の説明および添付の特許請求の範囲から明らかとなろう。

例示的実施形態の詳細な説明

[0044]本明細書において参照される参考資料、特許、特許出願および科学文献は、参照によりその全文が、各々が参照により組み込まれるよう具体的に、個別に示されている場合には同程度に、本明細書に組み込まれる。本明細書に引用されたいずれかの参照文献と、本明細書の具体的な教示との間の何らかの対立は、後者を支持して解決されなければならない。

[0045]種々の定義は本明細書全体にわたってなされる。ほとんどの単語は、当業者によってそれらの単語に帰属させられる意味を有する。本明細書において以下または他の箇所のいずれかで具体的に定義される単語は、総じて本発明との関連で提供され、通常、当業者に理解される意味を有する。単語または語句の当技術分野で理解されている定義と、本明細書において具体的に教示される単語または語句の定義の間の何らかの対立は、後者を支持して解決されなければならない。本明細書に用いられる見出しは便宜のためであって、制限と解釈されるべきではない。

[0046]本発明は、いずれかの動物、好ましくは哺乳類、特に、ネコおよびイヌに関する。当業者には明らかであろうが、いくつかの実施形態では、本明細書に示される方法および食餌製剤は、ヒトに適用可能である。

[0047]本明細書において、関節炎などの炎症状態に関連して、「発症を治療、予防し、または遅延させること」とは、状態または状態と関連している１つまたは複数の症状を部分的または完全に寛解させること、状態の発生を完全に阻害すること、または状態の提示もしくは進行を遅延させることを指す。

[0048]本発明はｎ−３脂肪酸が豊富な、イヌおよびその他の動物用の食餌製剤を提供する。ω−３脂肪酸とも呼ばれるこの種類の脂肪酸は、通常、１つまたは複数の炭素−炭素二重結合を含む、１２〜２６個の炭素原子を含む。本発明において用いるのに好ましいものとして、長鎖（１８個以上の炭素原子）ポリ不飽和ｎ−３脂肪酸（ＬＰＵＦＡ）がある。このようなｎ−３脂肪酸の例として、それだけには限らないが、必須ｎ−３脂肪酸、α−リノレン酸（ＬＮＡまたはＡＬＡ）、およびその他のｎ−３脂肪酸、例えば、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）が挙げられる。ｎ−３脂肪酸の食餌性供給源としては、それだけには限らないが、亜麻仁、亜麻油、クルミ、コールドプレスカノーラ油、コムギ胚芽、緑黄色の葉もの野菜および脂肪分の多い冷水魚が挙げられる。

[0049]以下により詳細に論じるように、本製剤は、製剤中に存在するあらゆる長鎖ｎ−６脂肪酸量の約半分より多い長鎖ｎ−３脂肪酸量を含むことが好ましい。ｎ−６脂肪酸の例としては、必須ｎ−６脂肪酸リノール酸（ＬＡ）およびその他のｎ−６脂肪酸、例えば、アラキドン酸（ＡＡ）およびγ−リノール酸（ＧＬＡ）が挙げられる。ｎ−６脂肪酸の食餌性供給源としては、それだけには限らないが、ダイズ油、ヒマワリ種子、ベニバナ種子、カボチャ種子、ゴマ種子、練りゴマ、トウモロコシ油、ピーナッツおよびほとんどのナッツが挙げられる。通常、ｎ−６脂肪酸の量は制限される。例えば、本製剤中のアラキドン酸量は約０．１２５重量％未満である。さらに、本製剤のリノール酸含量は約１〜２重量％の範囲である。

[0050]本発明の製剤は、有効量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。本明細書において、「有効量」とは、それだけには限らないが、疼痛、跛行、軟骨喪失、関節腫脹、捻髪音、排便または排尿する姿勢をとることが困難なこと、こわばり、歩行異常、関節弛緩、関節滲出液、滑液量の増加などをはじめとする変形性関節症の徴候または症状のうち少なくとも１つを寛解させる長鎖ｎ−３脂肪酸量を指す。

[0051]いくつかの実施形態では、本製剤はおよそ少なくとも約２０ｍｇ／体重１ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約４０ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約６０ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約７０ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約８０ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約９０ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約１００ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約１１０ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。その他の実施形態では、本製剤は、少なくとも約１２０ｍｇ／ｋｇ／日を動物に送達する量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む。本発明のいくつかの実施形態では、長鎖ｎ−３脂肪酸は、α−リノレン酸（ＡＬＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）から選択される１種または複数のｎ−３脂肪酸である。

[0052]食餌処方のパーセンテージとしての長鎖ｎ−３脂肪酸量は、乾物ベースで食餌製剤の約０．１〜１．５％の範囲であるが、より多くのパーセンテージも提供され得る。種々の実施形態では、量は、乾物ベースで食餌製剤の約０．２％、０．３％、０．４％、０．５％、０．６％、０．７％、０．８％、０．９％、１．０％、１．１％、１．２％、１．３％、１．４％または１．５％である。本発明のいくつかの実施形態では、長鎖ｎ−３脂肪酸はエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）である。いくつかの実施形態では、長鎖ｎ−３脂肪酸はドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）である。その他の実施形態では、長鎖ｎ−３脂肪酸はドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）である。さらにその他の実施形態では、長鎖ｎ−３脂肪酸はα−リノレン酸（ＡＬＡ）である。その他の実施形態では、本食餌製剤は、これらのｎ−３脂肪酸のうち２種以上の混合物を含む。

[0053]平均的な食餌には、約１：１０の比のｎ−３：ｎ−６脂肪酸が含まれ得る。本製剤では、平均的食餌よりもより高い割合のｎ−３脂肪酸に有利に働くｎ−３：ｎ−６の比を達成するよう、ｎ−６脂肪酸（特に、ＡＡおよびＬＡ）が制限されている。いくつかの実施形態では、ｎ−３：ｎ−６の比は、約１：９、１：８、１：７または１：６よりも高い。その他の実施形態では、ｎ−３：ｎ−６の比は、約１：５、１．４または１：３よりも高い。もう１つの実施形態では、ｎ−３：ｎ−６の比は、約１：２よりも高い。その他の実施形態では、脂肪酸の比はｎ−３脂肪酸の割合がｎ−６脂肪酸と等しいか、ｎ−６脂肪酸よりも大きいようなものである。例えば、ｎ−３：ｎ−６の比は約１：１〜約１５：１であり得る。いくつかの実施形態では、この比は約２：１〜約３：１であるが、より大きなもの、例えば、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１１：１、１２：１、１３：１または１４：１である場合もある。

[0054]実現性についていずれか特定の理論に拘束されることを望むものではないが、処方中の長鎖ｎ−３脂肪酸は、動物によって消費されると、細胞膜中のアラキドン酸の代わりとなり、抗炎症性エイコサノイドの産生に用いられ、ＰＧＥ_２、ＴＸＡ_２およびＬＴＢ_４ではなくプロスタグランジンＥ_３（ＰＧＥ_３）、トロンボキサンＡ_３（ＴＸＡ_３）およびロイコトリエンＢ_５（ＬＴＢ_５）のような化合物を産生させると考えられる。ＰＧＥ_２の低減は、プロＭＭＰ−２およびプロＭＭＰ−９の減少をもたらし、それによって、これらのメタロプロテイナーゼのタンパク質分解活性が低下し、その結果、関節の炎症および疼痛が減少することとなる。さらに、長鎖ｎ−３脂肪酸の増加は、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９の第１の活性化ステップに必須であると考えられているその他のＭＭＰ（例えば、膜１型マトリックスメタロプロテイナーゼ）の結合部位を飽和することによってＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９の活性化を妨げる、組織性メタロプロテイナーゼ−２阻害因子（ＴＩＭＰ−２）の増加の一因となると考えられる。図１０は、これらの機構の一部を図によって説明するものである。

[0055]実際、本発明により、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌製剤は、ＴＩＭＰ−１の増加およびゼラチナーゼの分解に関与している２種のマトリックスメタロプロテイナーゼ：ＭＭＰ−２（ゼラチナーゼ−Ａ）およびＭＭＰ−９（ゼラチナーゼＢ）の減少を促進することが実証されている（図７、８および９を参照しながら実施例２を参照のこと）。本発明の製剤は、それだけには限らないが、（１）間質性コラゲナーゼ（ＭＭＰ−１）、好中球コラゲナーゼ（ＭＭＰ−８）およびコラゲナーゼ３（ＭＭＰ−１３）などのコラゲナーゼ、（２）ストロメライシン−１（ＭＭＰ−３）、ストロメライシン−２（ＭＭＰ−１０）およびマトリライシン（ＭＭＰ−７）などのストロメライシンならびに（３）ＭＭＰ−１４およびＭＴ１−ＭＭＰなどの膜型ＭＭＰをはじめとする、これらおよびその他のマトリックスメタロプロテイナーゼレベルを低下させることに実用性を見い出すことが期待される。

[0056]また、本発明の処方には、それだけに限らないが、グルコサミンおよびコンドロイチン硫酸などの関節の健康を支持するさらなる因子を含めることができる。

[0057]いくつかの実施形態では、グルコサミンは食品の５００〜１０００ｐｐｍの量で提供される。その他の実施形態では、グルコサミンは少なくとも約１０００〜１５００ｐｐｍの量で提供される。その他の実施形態では、グルコサミンは、グルコサミンの投与に起因する有害作用がないならば、少なくとも約１５００〜２０００ｐｐｍまたはそれ以上の量で提供される。

[0058]いくつかの実施形態では、コンドロイチン硫酸は約１００〜３００ｍｇ／日を送達する量で提供される。その他の実施形態では、コンドロイチン硫酸は少なくとも約３００〜５００ｍｇ／日を送達する量で提供される。その他の実施形態では、コンドロイチン硫酸は、コンドロイチン硫酸の投与に起因する有害作用がないならば、少なくとも約５００〜７００ｍｇ／日またはそれ以上を送達する量で提供される。

[0059]また、本製剤には、抗酸化物質、例えば、それだけには限らないが、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、リボフラビン、セレンおよびピリドキシンを含めてもよい。

[0060]いくつかの実施形態では、セレンは０．５〜０．７ｍｇ／食品１ｋｇの量で提供される。その他の実施形態では、セレンは少なくとも約０．７〜０．９ｍｇ／ｋｇの量で提供される。その他の実施形態では、セレンはセレンの投与に起因する有害作用がないならば、少なくとも約０．９〜１．１ｍｇ／ｋｇまたはそれ以上の量で提供される。

[0061]いくつかの実施形態では、ビタミンＡは少なくとも約２０〜３０ＩＵ／食品１ｇの量で提供される。その他の実施形態では、ビタミンＡは少なくとも約３０〜４０ＩＵ／食品１ｇの量で提供される。その他の実施形態では、ビタミンＡは、ビタミンＡの投与に起因する有害作用がないならば、少なくとも約４０〜５０ＩＵ／食品１ｇまたはそれ以上の量で提供される。

[0062]いくつかの実施形態では、ビタミンＥは少なくとも約０．５〜１ＩＵ／食品１ｇの量で提供される。その他の実施形態では、ビタミンＥは少なくとも約１〜１．５ＩＵ／食品１ｇの量で提供される。その他の実施形態では、ビタミンＥは、ビタミンＥの投与に起因する有害作用がないならば、少なくとも約１．５〜２．５ＩＵ／食品１ｇまたはそれ以上の量で提供される。

[0063]いくつかの実施形態では、ビタミンＣは食品の少なくとも約５０〜１５０ｐｐｍの量で提供される。その他の実施形態では、ビタミンＣは少なくとも約１５０〜２５０ｐｐｍの量で提供される。その他の実施形態では、ビタミンＣは、ビタミンＣの投与に起因する有害作用がないならば、少なくとも約２５０〜３５０ｐｐｍまたはそれ以上の量で提供される。

[0064]いくつかの実施形態では、リボフラビンは少なくとも約５〜１５ｍｇ／食品１ｋｇの量で提供される。その他の実施形態では、リボフラビンは少なくとも約１５〜２５ｍｇ／ｋｇの量で提供される。その他の実施形態では、リボフラビンは、リボフラビンの投与に起因する有害作用がないならば、少なくとも約２５〜３５ｍｇ／ｋｇまたはそれ以上の量で提供される。

[0065]いくつかの実施形態では、ピリドキシンは少なくとも約５〜１５ｍｇ／食品１ｋｇの量で提供される。その他の実施形態では、ピリドキシンは少なくとも約１５〜２５ｍｇ／ｋｇの量で提供される。その他の実施形態では、ピリドキシンは、ピリドキシンの投与に起因する有害作用がないならば、少なくとも約２５〜３５ｍｇ／ｋｇまたはそれ以上の量で提供される。

[0066]本製剤は、変形性関節症に対する有益な効果を提供することに加え、動物が減量するのを可能にする食事療法のための製剤に適応させることができる。動物を適切に体重管理することによって関節に対する直接の治療効果に加え、緩和効果の増大を促進することができる。

[0067]それだけに限らないが、品種、年齢、大きさ、体重および全身の健康状態、例えば、変形性関節症、関節リウマチまたは動物において炎症反応を引き起こすその他の疾患の程度または病期などのパラメータを考慮して、動物の特定の要求のために製剤を調整することが望ましい場合がある。膜および組織におけるｎ−３およびｎ−６脂肪酸の濃縮を算出する方法は、当技術分野では周知であり、この方法を用いて食餌中のｎ−３およびｎ−６脂肪酸レベルを調整することができる。例えば、このような算出は、Ｂａｕｅｒ，Ｊ．Ｅ．ら（２００２）Ｊ．Ｎｕｔｒ．１３２、１６４２Ｓ〜１６４５Ｓ頁およびＰＣＴ公開番号国際公開第０３／０９２４０５号パンフレットに記載されている。

[0068]本発明の食餌製剤は、ドライフード、ソフト／モイストフードまたは缶フードの形であり得る。一般に、乾燥食品のタンパク質含量は、約１５〜３０重量％の範囲である。一般に、乾燥食品の全脂肪含量は、約５〜２０重量％の範囲である。乾燥食品の炭水化物含量は、約３０〜６０重量％の範囲である。一般に、乾燥食品の含水量は、約１５重量％未満である。タンパク質、炭水化物および脂肪の含量は、当技術分野では周知である、種々の品種のイヌの特定の要求に合うよう調整することができる。

[0069]一般に、ソフト／モイストフードのタンパク質含量は、約１０〜３０重量％の範囲である。ソフト／モイストフードの全脂肪含量は、一般に、約２〜１５重量％の範囲である。ソフト／モイストフードの炭水化物含量は、約２０〜４０重量％の範囲である。一般に、乾燥食品の含水量は、約２０〜５０重量％未満である。タンパク質、炭水化物および脂肪の含量は、当技術分野では周知である、種々の品種のイヌの特定の要求に合うよう調整することができる。

[0070]一般に、缶フードのタンパク質含量は、約５〜２０重量％の範囲である。缶フードの全脂肪含量は、一般に、約１〜２０重量％の範囲である。缶フードの炭水化物含量は約１５〜４０重量％の範囲である。缶フードの含水量は、一般に、約８０重量％未満である。タンパク質、炭水化物および脂肪の含量は、当技術分野では周知である、種々の品種のイヌの特定の要求に合うよう調整することができる。

[0071]本発明の食餌製剤はまた、食品もしくは水と混合して投与できるか、または薬剤投与形として別個に提供される、栄養補給剤の形でもあり得る。サプリメントおよび投与形としては、それだけには限らないが、錠剤（丸剤、チュアブル錠、即溶錠、多層錠、二層錠などを含む）、散剤、エリキシル剤、液剤、溶液剤、懸濁剤、エマルション、カプセル剤、カプレット、トローチ剤、チュアブルトローチ剤、ビーズ、散剤、顆粒剤、粒子剤、ゲル剤、ペースト剤、溶けるフィルム、微粒子剤、分散性顆粒剤、ヘルスバー、アニマルトリートおよびそれらの組合せが挙げられる。上記の投与形の製造は当業者には周知である。

[0072]本発明はまた、イヌに本発明の食餌製剤を与えて変形性関節症の症状を軽減することによって、イヌにおいて変形性関節症を治療する方法を提供する。食餌製剤中の栄養素量は、イヌの品種の特定の要求および動物が起こしている変形性関節症の程度または病期にしたがって調整できる。獣医ならば、動物に投与されるべき食餌製剤について、ならびに食餌のその他のパラメータの調整について（例えば、体重管理を提供するために）の指導を行うことができ、また、その他の治療（例えば、疼痛管理、運動など）の種類および期間についての指導を行うことができる。

[0073]一般に、体重管理ならびに変形性関節症の治療が必要なイヌには、変形性関節症の症状のうち少なくとも１つの軽減を促進するために、増加させた長鎖ｎ−３脂肪酸量を維持しながら、カロリーが減らされ、体重減少を促進する食餌が与えられる。また、食餌製剤には、上記で詳細に説明したその他の成分、例えば、抗酸化物質、非ステロイド系抗炎症薬、グルコサミンおよびコンドロイチン硫酸も含めてよい。

[0074]本発明はまた、関節の健康を支持するためにＯＡの発症が遅延できるか予防できるような健康な動物に対応する方法を提供する。したがって、本発明の食餌製剤および／または栄養補給剤は、イヌなどの動物に、ＯＡの発症を予防するか遅延させるための、および健康な関節を維持するための予防対策として提供できる。本製剤、サプリメントまたは薬剤は、乾物ベースで、製剤の少なくとも約０．１〜１．５％の量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含み、本製剤はまた、本明細書に記載される量のｎ−６脂肪酸、ならびに、抗酸化物質、グルコサミン、コンドロイチンおよび／またはＮＳＡＩＤを含み得る。食餌製剤中の栄養素量は、イヌの品種の特定の要求、および例えば、動物の年齢により、標準手順にしたがって調整できる。

また、変形性関節症を治療および予防するための本明細書に提供される方法および食餌製剤を使用してその他の炎症状態を治療または予防できる。詳しくは、本製剤および方法は、同様に関節リウマチの治療にとって、その状態の炎症の性質を考慮して有利であると予想される。

[0075]本発明はまた、哺乳類に本発明の食餌製剤を投与することを含む、哺乳類、特にイヌの細胞膜中のアラキドン酸を低減する方法を提供する。食餌製剤中の長鎖ｎ−３脂肪酸量は、イヌの細胞膜中のアラキドン酸を置換するのに十分なものとする。一般に、長鎖ｎ−３脂肪酸量は、乾物ベースで、食餌製剤の約０．１〜１．５％である。

[0076]本発明はまた、増加した量の長鎖ｎ−３脂肪酸を含む食餌製剤を投与することを含む、哺乳類において変形性関節症の作用を低減する方法を提供する。いくつかの実施形態では、長鎖ｎ−３脂肪酸は、乾物ベースで、食餌製剤の少なくとも約０．１〜１．５％の量である。いくつかの実施形態では、その量は、乾物ベースで、食餌製剤の約０．３％である。いくつかの実施形態では、その量は、乾物ベースで、食餌製剤の約０．４％である。いくつかの実施形態では、その量は、乾物ベースで、食餌製剤の約０．５％である。いくつかの実施形態では、食餌製剤は哺乳類、特にイヌ用である。その他の実施形態では、食餌製剤はヒト用である。

[0077]いくつかの実施形態では、ヒト用食餌製剤は、当技術分野で周知のように栄養補強品の形である。

[0078]本発明はさらに、本発明の食餌製剤を投与することによって、イヌおよびその他の哺乳類においてマトリックスメタロプロテイナーゼの産生を減少させる方法を提供する。マトリックスメタロプロテイナーゼとしては、それだけには限らないが、ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９が挙げられる。一般に、長鎖ｎ−３脂肪酸量は、乾物ベースで製剤の約０．１〜１．５％の範囲である。いくつかの実施形態では、製剤中のアラキドン酸量は、０．１２５％未満であるよう制限されている。その他の実施形態では、リノール酸量が、食餌製剤のわずか１〜２％に制限されている。本製剤にはまた、抗酸化物質、グルコサミンおよび少なくとも１種のＮＳＡＩＤを追加してもよい。

[0079]本発明はまた、本発明の食餌製剤を投与することによって、イヌおよびその他の哺乳類において炎症性サイトカインの産生を減少させる方法を提供する。炎症性サイトカインとしては、それだけには限らないが、ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＴＮＦαが挙げられる。一般に、長鎖ｎ−３脂肪酸量は、製剤の約０．１〜１．５％の範囲である。いくつかの実施形態では、製剤中のアラキドン酸量は０．１２５％未満であるよう制限されている。その他の実施形態では、リノール酸量が、食餌製剤のわずか１〜２％に制限されている。本製剤にはまた、抗酸化物質、グルコサミンおよび少なくとも１種のＮＳＡＩＤを追加してもよい。本食餌製剤はまた、マトリックスメタロプロテイナーゼの産生を減少させるおよび／または炎症性サイトカインの産生を減少させるために使用できる。

[0080]以下の実施例は、本発明をより詳細に説明するために提供する。それらは本発明を例示しようとするものであって、制限しようとするものではない。

実施例１
実験計画
[0081]この実施例は、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌の、イヌにおいてＯＡと関連している生化学的パラメータに対する効果を調べるためのプロトコールを示す。二重盲検ランダム化およびプラセボ対照計画を用いた。

[0082]この研究には、２４匹の、変形性骨関節炎の結果、急性前十字靭帯（ＡＣＬ）損傷（前十字靭帯の断裂）が臨床上確認されたイヌを用い、治療食餌か対照食餌のいずれかに無作為に割り当てた（ｎ＝１２）。イヌをＯＡおよび靭帯損傷の程度によって層別化した。研究に先立って、イヌに、外科医によって通常の身体診察を行い、Ｘ線写真を撮影した。

[0083]イヌを無作為に各１２匹のイヌからなる２群にわけた。
群１：ｎ−３ＬＣＰＵＦＡサプリメント（魚油３．５％添加）
群２（対照）：長鎖ｎ−３脂肪酸は含まないが、添加脂肪供給源として獣脂を含めた。

[0084]イヌには６３日間サプリメントを与えた（矯正外科手術の前７日間および矯正外科手術後５６日間）。

[0085]ＴＩＭＰ−２、ＰＧＥ２およびＭＭＰ分析のための滑液および血清は、以下の時点で、それぞれ無菌関節穿刺および静脈穿刺によってニードルおよびシリンジにより採取した：−７日目、０日目、７日目、１４日目、２８日目および５６日目。滑液は、すべてのイヌの罹患（ＡＣＬが断裂した）関節および反対側の関節から採取した。

[0086]ＨＰ５８９０ガスクロマトグラフを用いるガスクロマトグラフィーを実施して被験体の血清脂肪酸を評価し、血清中のＮ−３ＬＣＰＵＦＡを測定した。

[0087]血清および滑液サンプル中のプロ型および活性型ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９の分析は、ゼラチンを埋め込んだゲルを用いる電気泳動によって実施した。ゲル分析には、ノベックスザイモグラム（ＮＯＶＥＸＺｙｍｏｇｒａｍ）（ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ）ゲル、バッファー、染色液および装置を用いた。ザイモグラフィー（Ｚｙｍｏｇｒａｐｈｙ）は、標準ノベックス（ＮＯＶＥＸ）使用説明書の指示通りに流した。ゲルはデンシトメーター（ＭｏｌｅｃｕｌａｒＤｙｎａｍｉｃｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ）でスキャンした。各サンプルバンドを比較し、各ゲルに流した標準に対して定量化した。

[0088]Ｃａｙｍｅｎ（ＡｎｎＡｒｂｏｒ、ＭＩ）から入手できる市販の酵素結合免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）キットを用いて血清ビシクロ−ＰＧＥ２、ＰＧＥ２の安定な代謝産物、の分析を実施した。

実施例２
イヌ変形性関節症に関連する生化学的パラメータに対するｎ−３脂肪酸が豊富な食餌の効果
[0089]以下の結果は、先の実施例に示されるプロトコールおよび評価手順を用いて得た。まず、血漿中のＡＡ、ＥＰＡおよびＤＨＡの量を測定した。ここで、図について記載すると、図１は、対照食餌を与えられた動物と比較して、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌を提供された動物において血漿ＡＡが減少したことを示す。図２および３はそれぞれ、対照食餌を与えられた動物と比較して、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌を与えられた動物において血漿ＥＰＡおよびＤＨＡが増加したことを示す。さらに、図６に示されるように、血漿ビシクロＰＧＥ２は、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌を与えられた動物において約１０％減少した（プロトコールの完了に入ってから）が、対照食餌を与えられた動物では２０％よりも多く増加した。

[0090]滑液の脂肪酸組成も調べた。図４および５にそれぞれ示されるように、手術の前後にｎ−３脂肪酸が豊富な食餌を与えられた動物は、対照食餌を与えられた動物と比較して、滑液ｎ−６脂肪酸の減少および滑液ｎ−３脂肪酸の増加を示した。さらに、図７および８に示されるように、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌を与えられた動物の滑液において、対照食餌を与えられた動物のものと比較して、プロおよび活性ＭＭＰ−２およびＭＭＰ−９が減少した。図９に示されるように、ＴＩＭＰ−２は、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌を与えられた動物の滑液において、対照食餌を与えられた動物のものと比較して増加した。

[0091]以上に記載された結果から、ｎ−３脂肪酸を食餌に豊富にすることによって、イヌ変形性関節症と関連しているいくつかの生理学的および生化学的パラメータが改善されることが実証される。

実施例３
例示的食餌製剤
[0092]本発明の例示的であるが、それだけには限らない食餌製剤として、以下の通りのものがある。

[0093]本発明は、記載された実施形態および上記で例示される実施形態に制限されるものではなく、添付の特許請求の範囲内の変法および改変が可能である。

断裂した十字靭帯を修復するための矯正外科手術の前後に、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌（ＴＲＴ）を提供された動物または対照食餌（ＣＴＬ）を提供された動物における、血漿アラキドン酸の濃度（ｍｇ／ｄｌ）を示すヒストグラムである。^＊ｐ＜０．０５。白抜きバー（ＴＲＴ）；点描バー（ＣＴＬ）。断裂した十字靭帯を修復するための矯正外科手術の前後に、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌（ＴＲＴ）を提供された動物または対照食餌（ＣＴＬ）を提供された動物における、血漿エイコサペンタエン酸（ｅｉｃｏｓｏｐｅｎｔａｅｎｏｉｃａｃｉｄ）の濃度（ｍｇ／ｄｌ）を示すヒストグラムである。^＊−７日目を除くすべての日数でｐ＜０．０５。白抜きバー（ＴＲＴ）；点描バー（ＣＴＬ）。断裂した十字靭帯を修復するための矯正外科手術の前後に、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌（ＴＲＴ）を提供された動物または対照食餌（ＣＴＬ）を提供された動物における、血漿ドコサヘキサエン酸の濃度（ｍｇ／ｄｌ）を示すヒストグラムである。^＊−７日目を除くすべての日数でｐ＜０．０５。白抜きバー（ＴＲＴ）；点描バー（ＣＴＬ）。断裂した十字靭帯を修復するための矯正外科手術の前後に、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌（ＴＲＴ）を提供された動物または対照食餌（ＣＴＬ）を提供された動物における、滑液ｎ−６脂肪酸（ＡＡ−アラキドン酸、ＬＡ−リノレン酸）（ｇ／サンプル１００ｇ）の量を示すヒストグラムである。サンプルは術後２８日目に採取した。^＊ｐ＜０．００５。白抜きバー（ＴＲＴ）；点描バー（ＣＴＬ）。断裂した十字靭帯を修復するための矯正外科手術の前後に、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌（ＴＲＴ）を提供された動物または対照食餌（ＣＴＬ）を提供された動物における、滑液ｎ−３脂肪酸（ＥＰＡ−エイコサペンタエン酸（ｅｉｃｏｓｏｐｅｎｔａｅｎｏｉｃａｃｉｄ）、ＤＨＡ−ドコサヘキサエン酸）（ｇ／サンプル１００ｇ）の量を示すヒストグラムである。サンプルは術後２８日目に採取した。^＊ｐ＜０．００５。白抜きバー（ＴＲＴ）；点描バー（ＣＴＬ）。断裂した十字靭帯を修復するための矯正外科手術の前後に、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌（ＴＲＴ）を提供された動物または対照食餌（ＣＴＬ）を提供された動物における、血漿ビシクロＰＧＥ２レベルのパーセント変化を示すヒストグラムである。パーセント変化は、研究の開始から終了までの変化として測定した。^＊ｐ＜０．０５。斜線バー（ＴＲＴ）、点描バー（ＣＴＬ）。断裂した十字靭帯を修復するための矯正外科手術の前後に、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌（ＴＲＴ）を提供された動物または対照食餌（ＣＴＬ）を提供された動物の、手術をしていない関節の滑液中のプロＭＭＰ−２および活性ＭＭＰ−２の濃度（ｎｇ／１０μｌ）を示すヒストグラムである。^＊食事によってｐ＜０．０５。白抜きバー（ＴＲＴ）、点描バー（ＣＴＬ）。断裂した十字靭帯を修復するための矯正外科手術の前後に、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌（ＴＲＴ）を提供された動物または対照食餌（ＣＴＬ）を提供された動物の、手術をしていない関節の滑液中のプロＭＭＰ−９および活性ＭＭＰ−９の濃度（ｎｇ／１０μｌ）を示すヒストグラムである。^＊食事によってｐ＜０．０５。白抜きバー（ＴＲＴ）、点描バー（ＣＴＬ）。断裂した十字靭帯を修復するための矯正外科手術の前後に、ｎ−３脂肪酸が豊富な食餌（ＴＲＴ、黒四角）を提供された動物または対照食餌（ＣＴＬ、黒ダイヤモンド）を提供された動物の、滑液中のＴＩＭＰ−２濃度（ｎｇ／１０μｌ）の経時変化を示すグラフである。^＊ｐ＜０．０５。ｎ−３脂肪酸が関節破壊に影響を及ぼしている可能性がある機構を例示する図である。

Claims

哺乳類の滑液において少なくとも１種のマトリックスメタロプロテイナーゼの産生を減少させるための、長鎖ｎ−３脂肪酸および長鎖ｎ−６脂肪酸を含む医薬組成物であって、前記長鎖ｎ−３脂肪酸が、医薬組成物重量の０．１〜１．５％の量で存在し、前記長鎖ｎ−６脂肪酸が、医薬組成物重量の３％未満の量で存在し、前記医薬組成物が、少なくとも１：２の比のｎ−３およびｎ−６脂肪酸を含み、かつ、前記医薬組成物が、医薬組成物重量の０．１２５％未満の量のアラキドン酸または医薬組成物重量の２％未満の量のリノール酸を含む、医薬組成物。
マトリックスメタロプロテイナーゼがＭＭＰ−２またはＭＭＰ−９である、請求項１に記載の医薬組成物。
哺乳類において炎症性サイトカインの産生を減少させるための、長鎖ｎ−３脂肪酸および長鎖ｎ−６脂肪酸を含む医薬組成物であって、前記長鎖ｎ−３脂肪酸が、医薬組成物重量の０．１〜１．５％の量で存在し、前記長鎖ｎ−６脂肪酸が、医薬組成物重量の３％未満の量で存在し、前記医薬組成物が、少なくとも１：２の比のｎ−３およびｎ−６脂肪酸を含み、かつ、前記医薬組成物が、医薬組成物重量の０．１２５％未満の量のアラキドン酸または医薬組成物重量の２％未満の量のリノール酸を含む、医薬組成物。
炎症性サイトカインがインターロイキン−１、インターロイキン−６または腫瘍壊死因子αである、請求項３に記載の医薬組成物。
哺乳類の膜中のアラキドン酸を低減するための、長鎖ｎ−３脂肪酸および長鎖ｎ−６脂肪酸を含む医薬組成物であって、前記長鎖ｎ−３脂肪酸が、医薬組成物重量の０．１〜１．５％の量で存在し、前記長鎖ｎ−６脂肪酸が、医薬組成物重量の３％未満の量で存在し、前記医薬組成物が、少なくとも１：２の比のｎ−３およびｎ−６脂肪酸を含み、かつ、前記医薬組成物が、医薬組成物重量の０．１２５％未満の量のアラキドン酸または医薬組成物重量の２％未満の量のリノール酸を含む、医薬組成物。
長鎖ｎ−３脂肪酸が、α−リノレン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸またはドコサヘキサエン酸のうち少なくとも１種を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
長鎖ｎ−３脂肪酸が、医薬組成物重量の０．２％〜０．６％の量で存在する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
長鎖ｎ−３脂肪酸が、医薬組成物重量の０．３％〜０．４％の量で存在する、請求項７に記載の医薬組成物。
長鎖ｎ−３脂肪酸がエイコサペンタエン酸を含み、エイコサペンタエン酸が、医薬組成物重量の０．２〜０．６％存在する、請求項６に記載の医薬組成物。
長鎖ｎ−３脂肪酸がドコサヘキサエン酸を含み、ドコサヘキサエン酸が、医薬組成物重量の０．２〜０．６％存在する、請求項６に記載の医薬組成物。
ｎ−３対ｎ−６脂肪酸の比が少なくとも１：１である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
ｎ−３対ｎ−６脂肪酸の比が少なくとも２：１である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
グルコサミンまたはコンドロイチンのうち少なくとも一方をさらに含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
少なくとも１種の抗酸化物質をさらに含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
少なくとも１種の抗酸化物質が、ビタミンＣ、ビタミンＡ、ビタミンＥ、セレン、リボフラビン、ピリドキシンおよびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１４に記載の医薬組成物。
非ステロイド系抗炎症薬をさらに含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組成物。