JP2018008992A - 結晶性ｐｉ３キナーゼ阻害剤 - Google Patents

Abstract

【課題】ＣＯＰＤ（慢性気管支炎及び肺気腫を包む）、小児喘息を包む喘息、嚢胞性線維症、サルコイドーシス、特発性肺線維症、悪液質から選択される状態の処置若しくは予防、並びに非小細胞肺癌を包含する肺腫瘍の増殖および転移を阻害する為の結晶性ＰＩ３キナーゼ阻害剤の提供。
【解決手段】数個の特定ピークを含有するＸ線粉末回折パターンを有する、６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミドの固体の結晶性の無水の形態、又は固体の結晶性の水和物形態の吸入用微粉末、及びこれを含んでなる吸入装置。
【選択図】なし

Description

本発明は、ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３キナーゼ）を阻害する新規の結晶の形態の化合物、ならびに治療、とりわけＣＯＰＤおよび喘息のような炎症性疾患の処置におけるそれらの使用を提供する。該新規の結晶の形態は吸入のためのドライパウダー製剤での使用に適する。

脂質キナーゼは、細胞の移動および接着を包含する広範な生理学的過程の調節に関与する種を産生するように脂質のリン酸化を触媒する。ＰＩ３キナーゼは膜会合タンパク質であり、そしてそれら自身が細胞膜と会合している脂質のリン酸化を触媒する酵素の分類に属する。ＰＩ３キナーゼδイソ酵素（ＰＩ３キナーゼδ）は多様な３’−リン酸化ホスホイノシチドの生成を司るＩ型ＰＩ３キナーゼの４種のアイソフォームの１種であり、それは、細胞シグナル伝達を媒介しかつ炎症、成長因子シグナル伝達、悪性形質転換および免疫性に関与している（非特許文献１による総説を参照されたい）。

炎症の制御におけるＰＩ３キナーゼの関与は、ＬＹ−２９４００２およびウォルトマンニンのような汎ＰＩ３キナーゼ阻害剤を使用するいくつかのモデルで確認されている（非特許文献２）。最近の研究は、選択的ＰＩ３キナーゼ阻害剤を使用して若しくは特定の酵素アイソフォームを欠くノックアウトマウスにおいてのいずれかで実施されている。これらの研究は炎症でＰＩ３キナーゼ酵素により制御される経路の役割を示した。ＰＩ３キナーゼδ選択的阻害剤ＩＣ−８７１１４が、卵アルブミンで感作され卵アルブミンで攻撃されたマウスで、気道応答性亢進、ＩｇＥ放出、炎症前サイトカイン発現、肺への炎症細胞蓄積および血管透過性を阻害することが見出された（非特許文献３および非特許文献４）。加えて、ＩＣ−８７１１４はＴＮＦαにより刺激されたマウスの肺における好中球蓄積および好中球機能を低下した（非特許文献５）。ＰＩ３キナーゼδアイソフォームは、インスリンおよび他の成長因子ならびにＧタンパク質共役型タンパク質シグナル伝達、ならびに炎症性サイトカインにより活性化される。最近、ＰＩ３キナーゼデュアルδ／γ阻害剤ＴＧ１００−１１５が、エアロゾル化により投与される場合にマウスモデルにおいて肺好酸球増加およびインターロイキン−１３ならびにムチン蓄積ならびに気道応答性亢進を阻害することが報告された。同一の著者は、該化合物が、ＬＰＳ若しくはタバコ煙いずれかにより導き出される肺好中球増加を阻害することが可能であったこともまた報告した（非特許文献６）。

それは酸化的ストレスによってもまた活性化されるため、ＰＩ３キナーゼδアイソフォームは、高レベルの酸化的ストレスが関与する疾患における治療的介入の標的として適切であることがありそうである。ＰＩ３キナーゼシグナル伝達経路の下流メディエーターは、Ａｋｔ（セリン／トレオニンタンパク質キナーゼ）、およびラマパイシンの哺乳動物標的、すなわち酵素ｍＴＯＲを包含する。最近の研究は、Ａｋｔのリン酸化につながるＰＩ３キナーゼδの活性化が、そうでなければコルチコステロイド感受性細胞においてコルチコステロイド耐性の状態を誘導することが可能であることを示唆している（非特許文献７）。これらの観察結果は、このシグナル伝達カスケードがＣＯＰＤに苦しめられる患者ならびに喫煙する喘息患者の肺で観察される炎症のコルチコステロイド非感受性の原因である１つの機序であり得、それによりそれらの肺を増大された酸化的ストレスにさらしているという仮説に至った。事実、ＣＯＰＤおよび喘息の双方の処置で使用される化合物テオフィリンは、ＰＩ３キナーゼδにより制御される経路との相互作用を必要とする機序によりステロイド非感受性を逆転させることが示唆されている（非特許文献７）。

特許文献１は、実施例８３としてその中に開示されている、遊離塩基の形態の６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミドを包含するＰＩ３キナーゼとりわけＰＩ３キナーゼδの阻害剤である多数の化合物を開示している。この化合物は特許文献２にもまた開示されている。

上で挙げられた化合物は「式（Ｉ）の化合物」若しくは「式（Ｉ）の化合物の遊離塩基」と本明細書で称される。

該発明者のより以前の開示（特許文献１）の前は、今日までに記述されたＰＩ３キナーゼ阻害剤は典型的に経口投与を意図していた。しかしながら、このアプローチの望ましくない一結果は、標的とされない身体組織、具体的には肝および腸管が、薬理学的有効濃度の該薬物に曝露されることがありそうであることである。一代替戦略は、炎症を起こした器官に該薬物が局所治療を介して直接投与される治療計画を設計することである。肺における炎症を制御する（若しくは別の治療効果を提供する）場合、これは該薬物の吸入により達成することができ、それは該薬物を主に肺に保持してそれにより全身毒性の危険性を最小限とするという利益を有する。持続的作用持続期間を達成するために、有効成分の「貯蔵所」を生成する適切な製剤を使用することができる。

式（Ｉ）の化合物は、従って、肺への局所投与に有用であると記述されている（特許文献１を参照されたい）。

標的器官に対する親和性および持続的有効性を提供することだけでなく、吸入を介する肺への局所投与のための薬物は、予測可能な用量の該薬物を提供するようにもまた処方されなければならず、それは順に予測可能かつ再現可能な特性を有しなければならない。製剤中での該薬物の許容できかつ再現可能な化学的および物理的安定性を達成することは、全部の種類の製薬学的剤形について製薬学的製品の製品開発における重要な最終目標である。微粉化が容易にできる形態であるような結晶の形態が好ましい。

吸入使用のため、３種の主要な剤形、すなわちドライパウダー吸入器（ＤＰＩ）、定量噴霧式吸入器（ＭＤＩ）および水性に基づくネブライザー（携帯式若しくは卓上式）が存在する。しかしながら、吸入製品の世界の売上の大部分はＤＰＩであり、そして従って吸入による十分に許容される薬物送達方法を提供する。Ｆｌｉｘｏｔｉｄｅ（フルチカゾン
プロピオン酸エステル）、Ａｄｖａｉｒ（フルチカゾンプロピオン酸エステル／サルメテロール）、Ｓｙｍｂｉｃｏｒｔ（ブデソニド／ホルモテロール）、Ｐｕｌｍｉｃｏｒｔ（ブデソニド）、Ｓｅｒｅｖｅｎｔ（サルメテロール）、Ｆｏｒａｄｉｌ（ホルモテロール）のような多数の商品化されたＤＰＩ製品が存在する。

ドライパウダー吸入製剤は、典型的に、希釈剤、典型的には乳糖との薬物粒子（１０ミクロンより下かつ通常は５ミクロンより下の大きさ）のブレンドよりなる。吸入治療に必要とされる通常用量はマイクログラム範囲にあるため、希釈剤は、製薬学的加工、および患者へのその後の投与のための個別の用量の例えばカプセル若しくはブリスター中への分注またはバルクリザーバからの用量の計量を助長する。従って、典型的に、希釈剤（最も一般的には乳糖である）の質量は薬物のものより大きいことができる。この環境において、数種の製品の許容できる製剤は該薬物製品（ｄｒｕｇ ｐｒｏｄｕｃｔ）を乳糖と単純に混和することにより達成し得る。他の製品は、該製品が規制当局の要件を満たすために他の付加的な賦形剤若しくは他の加工段階を必要としうる。例えば、特許文献３は、吸入のためのドライパウダー製剤へのステアリン酸マグネシウムの添加が該製剤の耐湿性を改良しかつ高い微粒子投薬量若しくは微粒子画分が湿潤条件下で維持されることを可能にすることを開示している。特許文献４は、ある種の薬物の微粒子用量を増大させる場合に可能である吸入のためのドライパウダー製剤で使用されるべき滑沢剤としてステアリン酸マグネシウムを記述している。特許文献５は、乳糖との化学的相互作用に感受性のある種の有効成分物質、乳糖およびステアリン酸マグネシウムを含んでなる吸入可能な固体の製薬学的製剤を開示している。ステアリン酸マグネシウムが、おそらく、有効成分上のアミン基の乳糖との反応を伴うメイラード反応を介する有効成分の乳糖誘発性の分解を阻害することが開示されている。特許文献６は、（乳糖粒子のような）担体粒子を含んでなる吸入のための粉末製剤中の炭酸基、カルバメート基およびエステル基よりなる群から選択される加水分解に感受性の基を担持する有効成分の化学的分解の阻害若しくは低下方法を開示し、前記方法は、前記担体粒子の表面の少なくとも一部分をステアリン酸マグネシウムで被覆することを含んでなる。

従って、喘息、ＣＯＰＤおよび肺の他の炎症性疾患において治療的有効性を提供する可能性を有する、吸入治療における使用のための選択的ＰＩ３キナーゼ阻害剤の形態を提供する必要性が存続する。具体的には、適切な物理および化学的安定性を有し、好ましくは微粉化が容易であり、ならびに吸入治療のための製薬学的賦形剤、具体的には乳糖と適合性の結晶の形態の式（Ｉ）の化合物を提供することが、一目的のままである。

国際特許出願第ＷＯ２０１１／０４８１１１号明細書 第ＷＯ２０１２／０５２７５３号明細書 第ＵＳ７１８６４０１ Ｂ２号明細書（Ｊａｇｏｔｅｃ ＡＧら） 第ＷＯ００／５３１５７号明細書（Ｃｈｉｅｓｉ） 第ＵＳ２００６／０２３９９３２号明細書（Ｍｏｎｔｅｉｔｈ） 第ＵＳ２０１２／００８２７２７号明細書（Ｃｈｉｅｓｉ）

Ｒａｍｅｈ，Ｌ．Ｅ．とＣａｎｔｌｅｙ，Ｌ．Ｃ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、１９９９、２７４：８３４７−８３５０ Ｉｔｏ，Ｋ．ら、Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．、２００７、３２１：１−８ Ｌｅｅ，Ｋ．Ｓ．ら、Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２００６、１１８：４０３−４０９ Ｌｅｅ，Ｋ．Ｓ．ら、ＦＡＳＥＢ Ｊ．、２００６、２０：４５５−６５ Ｓａｄｈｕ，Ｃ．ら、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．、２００３、３０８：７６４−９ Ｄｏｕｋａｓ，Ｊ．ら、Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．、２００９、３２８：７５８−７６５ Ｔｏ，Ｙ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．、２０１０、１８２：８９７−９０４

［発明の要約］
第一の局面において、本発明は、固体の結晶性水和物の形態の６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミドである式（Ｉ）の化合物

を提供する。

第二の局面において、本発明は、固体の結晶性の無水の形態の６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミドである式（Ｉ）の化合物

を提供する。

こうした物質は下で「本発明の固体の結晶の形態」と称される。本発明の固体の結晶の形態（場合によっては微粉）を含有する製薬学的製剤は、下で「本発明の製剤」と称される。

実施例で説明されるとおり、本発明の固体の結晶の形態は高い融点（約１８３℃若しくはより上）を有し、良好な物理的安定性（ＸＲＰＤ、ＴＧＡ、ＤＳＣ、ＤＶＳおよびＩＲ分析により確認されるところの）を有しかつ良好な化学的安定性（ＨＰＬＣ分析により確認されるところの）を有するようである。本発明の固体の結晶の形態は乳糖と組合せられる場合に良好な物理的安定性を有する。該固体の結晶性水和物は乳糖と組合せられる場合に良好な化学的安定性を有する。該固体の結晶性の無水の形態は、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩の存在下で乳糖と組合せられる場合に良好な化学的安定性を有する。

該固体の結晶性水和物の形態および固体の結晶性の無水の形態は関連した（しかし異なる）結晶構造を有するようである。

固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルで取得されたＸＲＰＤパターンを示す。 固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルで取得されたＸＲＰＤパターンを示す。 固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルのＤＶＳ等温線プロットを示す。 固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルのＤＶＳ質量変化プロットを示す。 固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルのＤＶＳ等温線プロットを示す。 固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルのＤＶＳ質量変化プロットを示す。 固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルのＩＲスペクトルを示す。 固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルのＩＲスペクトルを示す。 ＤＳＣによる固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルの熱分析を示す。 ＤＳＣによる固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルの熱分析を示す。 ＴＧＡによる固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルの熱分析を示す。 ＴＧＡによる固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルの熱分析を示す。 固体の結晶性の無水の形態の微粉の式（Ｉ）の化合物のサンプルのＤＶＳ等温プロットを示す。 固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物およびＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)のブレンドのサンプルのＩＲスペクトルを示す。 固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物およびＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)のブレンドのサンプルで取得されたＸＲＰＤパターンを示す。 固体の結晶性の無水の（微粉）形態の式（Ｉ）の化合物およびＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)のブレンドのサンプルのＩＲスペクトルを示す。 固体の結晶性の無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物およびＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)のブレンドのサンプルで取得されたＸＲＰＤパターンを示す。 固体の結晶性の無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物、Ｌａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)およびステアリン酸マグネシウムのブレンドのサンプルのＩＲスペクトルを示す。 固体の結晶性の無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物、Ｌａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)およびステアリン酸マグネシウムのブレンドのサンプルで取得されたＸＲＰＤパターンを示す。

［発明の詳細な記述］
有効成分としての式（Ｉ）の化合物
式（Ｉ）の化合物はデュアルＰＩ３ＫδＰＩ３Ｋγ阻害剤であり、本明細書で使用されるところの阻害剤という用語は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ酵素アッセイで標的タンパク質例えばＰＩ３Ｋδイソ酵素の生物学的活性を低下（例えば最低５０％だけ）若しくは排除する化合物を指すことを意図している。本明細書で使用されるところのδ／γ阻害剤という用語は、該化合物が、必ずしも同一の程度まででないとは言え双方の酵素アイソフォームをある程度まで阻害するという事実を指すことを意図している。式（Ｉ）の化合物は細胞に基づくスクリーニング系で活性であり、そしてそれにより、それが細胞に浸透するために適する特性を所有しかつそれにより細胞内の薬理学的効果を発揮することを示している。

式（Ｉ）の化合物の一般的合成方法は第ＷＯ２０１１／０４８１１１号明細書に開示され（その内容はそっくりそのまま引用することにより組み込まれる）、そして実施例１のものに類似の方法を使用し得る。式（Ｉ）の化合物の特定の一合成方法が実施例に提供されている第ＷＯ２０１２／０５２７５３号明細書（その内容はそっくりそのまま引用することにより組み込まれる）もまた参照されたい。

適しては、式（Ｉ）の化合物は、例えば褐色ガラス器具若しくは光不浸透性包装（例えばホイル包装）の使用により合成の間および後に光から保護される。

本発明の製薬学的製剤は、有効成分としての式（Ｉ）の化合物を治療上有効な量で含んでなる。式（Ｉ）の化合物の治療上有効な量は、ある治療計画で一被験体に投与される場合に前記被験体で治療上意味のある効果を達成するための所定の一用量若しくは複数の分
割用量に十分な量と定義する。

本発明の製薬学的製剤は、適しては吸入のためのドライパウダー製薬学的製剤である。

一態様において、該ドライパウダー製薬学的製剤は、該ドライパウダー製薬学的製剤の重量に基づきかつ遊離塩基としての式（Ｉ）の化合物の重量に基づき約０．００４ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％まで；例えば約０．０２ｗｔ．％から約５０ｗｔ．％まで、約０．０２ｗｔ．％から約２５ｗｔ．％まで、若しくは約０．０２ｗｔ．％から約１５ｗｔ．％まで、または約０．０２ｗｔ．％から約２０ｗｔ．％までの式（Ｉ）の化合物を含んでなる。好ましくは、該ドライパウダー製薬学的製剤は、該ドライパウダー製薬学的製剤の重量に基づき約０．１ｗｔ．％から約２０ｗｔ．％まで、例えば約０．１ｗｔ．％から約５ｗｔ．％までの式（Ｉ）の化合物を含んでなる。

本発明の製薬学的製剤は単一有効成分として式（Ｉ）の化合物を含有しうる。しかしながら該製薬学的製剤はさらなる有効成分を含有しうる。該製薬学的製剤は、１種若しくはそれ以上の他の有効成分（または１種若しくはそれ以上の有効成分を含有する１種若しくはそれ以上の製薬学的製剤）と一緒に共投与してもまたよい。例示的なさらなる有効成分を下に挙げる。

式（Ｉ）の化合物は、適しては、それがドライパウダー吸入に適するような微粒子の形態で製造される。本発明の製薬学的製剤は、典型的に、約０．５μｍから約１０μｍまで、とりわけ約１μｍから約５μｍまでの体積メジアン径（Ｄ５０）を有する薬物粒子を含有しうる。

粒子径の適する一測定方法は、例えばＭａｌｖｅｒｎ ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓからのＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ ２０００Ｓ機器を使用するレーザー回折である。機器はＳｙｍｐａｔｅｃからもまた入手可能である。粒子径分布について、中央値Ｄ５０は半分がより上かつ半分がより下で粒子径分布を分割するミクロンの大きさである。レーザー回折から得られる主要な結果は体積分布であり、従って、Ｄ５０は実際にはＤｖ５０（体積分布の中央値）であり、そして本明細書で使用されるとおり、レーザー回折を使用して得られる粒子径分布を指す。Ｄ１０およびＤ９０値（レーザー回折の文脈で使用される場合、平均Ｄｖ１０およびＤｖ９０値を意味するように解釈される）は、それぞれ、分布の１０％がＤ１０値より下にありかつ分布の９０％がＤ９０値より下にある粒子径を指す。

ドライパウダー吸入製剤での使用のための適する大きさの粒子は、当業者に既知のいずれの適する方法により製造してもよい。吸入のための適する大きさの薬物粒子は、粉砕すること、若しくはより好ましくは例えば（例えば細川アルパインにより製造されるところの）ジェットミル微粉化装置を使用する微粉化を包含する粒子径低下方法により製造しうる。あるいは、適する大きさの微粒子は、最初の例で、噴霧乾燥、噴霧凍結、制御結晶化アプローチ例えば制御沈殿、超臨界流体結晶化、超音波結晶化（ｓｏｎｏｃｒｙｓｔａｌｌｉｓａｔｉｏｎ）若しくは例えば連続結晶化装置中での他の適する結晶化手順により製造しうる。従って、本発明の一局面は微粉の形態の式（Ｉ）の化合物を提供する。

溶媒和物−水和物の形態の式（Ｉ）の化合物
一態様において、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物が提供される。具体的には、周囲温度例えば約２２℃で、場合によってはメタノールとの混合物（例えば２０％まで、例えば１０％まで、例えば４．８％ｖ／ｖのメタノールを含有する）中でジクロロメタンから式（Ｉ）の化合物を結晶化することにより得られる固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物が提供される。水和物の形成は反応混合物への水の添加を必要としない（すなわち、溶媒中の若しくは前の反応段階から生成物中で持ち越されるいかなる残余の水および／
または雰囲気中の水分が十分である）ことが見出された。しかしながら水を溶媒に添加してもよい。例えば０．１ないし５％の水を添加してもよい。式（Ｉ）の化合物のこうした固体の結晶性水和物の詳細な製造法を実施例１に提供する。

一態様において、実質的に図１に示されるところのＸＲＰＤパターンを有する固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物が提供される。ＸＲＰＤデータを得る方法は一般的手順に記述され、そしてデータを実施例３で論考する。

従って、５．６、７．６、９．６、１１．１、１２．２、１２．６、１３．３、１３．９、１５．９、１７．０、１８．９、２０．３、２１．８、２３．１（±０．２°、２θ値）に最低１個（例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３個若しくは１４個全部）のピークをもつＸ線粉末回折パターンを有する結晶の形態の水和物の形態の式（Ｉ）の化合物が提供され、これらのピークは結晶性水和物の形態に特徴的である。９．６、１３．３、１３．９、１７．０、１８．９、２０．３および２３．１のピークは水和物の形態にとりわけ特徴的であり、そして従ってこれらのピークの最低１個（例えば１、２、３、４、５、６個若しくは７個全部）を見ることが好ましい。

理論により制限されずに、固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物はチャネル水和物（ｃｈａｎｎｅｌ ｈｙｄｒａｔｅ）の形態であってもよい。あるいは、水が結晶中の孔若しくは結晶の表面に存してもよい。いずれにしても、実施例に示されるとおり、水は結晶格子の不可欠の部分を形成せず、そして結晶の形態は水の除去若しくは付加に対し安定である。

本明細書に開示される固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物の物理的および化学的安定性を検討した。

物理的安定性を評価するために、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルを、多様な温度および相対湿度で周囲雰囲気に開放した容器中に保存した。サンプルの物理的安定性は、熱重量測定分析（ＴＧＡ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、動的水蒸気吸着（ＤＶＳ）、赤外分光法（ＩＲ）およびＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）を使用して検討した。完全な実験手順は一般的手順の節に提供し、そして結果を実施例４（表３）に要約する。実施例４で論考されるとおり、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物は良好な全体的物理的安定性を有することが見出された。しかしなら、ＤＶＳ分析で２．２％の質量減少が登録され、そして得られた乾燥生成物は吸湿性であることが見出された。ＩＲおよびＸＲＰＤデータの小さい差違がより乾燥した条件下のサンプルについて観察されたが、しかしながら、これらの差違はＤＶＳ研究で観察された水の喪失に帰され、そして、結晶構造の完全性は水分喪失およびその後の再水和後に保持された。

化学的安定性を評価するため、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルをメタノール中で調製しかつＨＰＬＣにより分析した。結果を実施例５（表６）に要約し、ここで、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物が化学的に安定であることが見出されたとは言え光に対する若干の感受性が検出されたことが示される。

ドライパウダー製薬学的製剤は、典型的に、有効成分の適する担体として乳糖を含んでなる。従って、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物の乳糖適合性を検討した。

乳糖を伴う固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物の物理的および化学的双方の適合性を検討した。

物理的適合性を評価するため、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物および乳糖の高濃度組
成物を調製し、その後実施例６に要約されるところの多様な温度および湿度で分析した。試験された混合物は全部の検討された条件下で物理的に適合性であったことが明らかである。

化学的適合性を評価するため、乳糖を伴う水和物の形態の式（Ｉ）の化合物のより低濃度（物理的適合性試験で使用されたものに関して）の組成物をメタノール中で調製し、そしてＨＰＬＣにより分析した。結果を実施例７（表９）に要約し、ここで、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物および乳糖が化学的に適合性であることが示される。

発明者の研究の結果として、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物は良好な物理的および化学的安定性を有すると結論づけることができる。水和物の形態の式（Ｉ）の化合物の乳糖との組合せは化学的および物理的双方の安定性を有し、製薬学的製剤中での使用への適合性を示す。

無水の形態の式（Ｉ）の化合物
一態様において、無水の形態の式（Ｉ）の化合物が提供される。具体的には、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物を１−プロパノールから結晶化することにより得られる固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物が提供される。適しては、１−プロパノールは乾燥、例えば最大約０．９％ｗ／ｗの水を含有する。一態様において、１−プロパノールは最大０．８％、０．７％、０．６％、０．５％、０．４％、０．３％、０．２％若しくは０．０５％ｗ／ｗの水を有する。適しては、１−プロパノールは最大０．２％ｗ／ｗの水を有する。適しては、結晶化は金属スカベンジャーの存在下で実施する。適する金属スカベンジャーは、目的の化合物（すなわち式（Ｉ）の化合物）から容易に分離可能である一方で金属を吸着する物質である。例えば、官能化シリカは、金属が一旦吸着されれば金属−シリカ錯体をその後濾過により目的の化合物から容易に分離することができるため、金属スカベンジャーとしてとりわけ有用である。金属イオンと安定な錯体を形成する官能基は、１個若しくはそれ以上の窒素および／若しくはイオウ中心を含有する基を包含し、そして当業者に公知である。

適する商業的に入手可能な金属スカベンジャーの一例はＳｉｌｉａＭｅｔＳ^(R)チオール（Ｐｄ、Ｐｔ、Ｃｕ、ＡｇおよびＰｂを包含する多様な金属を除去するのに適するチオール誘導体化シリカゲル）である。適しては、金属スカベンジャーは、生じる金属イオン濃度が２０ｐｐｍより下、好ましくは１０ｐｐｍより下であることを確実にするのに十分な量で存在する。一態様において、金属スカベンジャーは、式（Ｉ）の化合物の重量に基づき１〜１０％ｗ／ｗ、例えば２〜８％ｗ／ｗ若しくは５％ｗ／ｗで存在する。適しては、結晶化は、式（Ｉ）の化合物および溶媒の溶液を、上昇された温度から連続して（すなわち連続冷却）若しくは段階的に（すなわち冷却することおよび特定の一温度で該溶液を保持することの間を交替して）冷却することにより実施する。冷却のための適する温度勾配（連続若しくは別個の）は、９５〜１５℃、９５〜２０℃、９０〜２０℃、８０〜２０℃ ９５〜９０℃、９５〜８５℃、９５〜８０℃ ９０〜８５℃、８０〜２０℃を包含する。一態様において、溶液は約８０〜９５℃から周囲温度（例えば約２０〜２２℃）まで冷却する。こうした固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物の詳細な製造法を実施例２に提供する。

一態様において、実質的に図２に示されるところのＸ線粉末回折パターンを有する固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物が提供される。ＸＲＰＤデータを得る方法は一般的手順に記述され、そして該データを実施例３で論考する。

従って、５．６、７．９、１１．２、１２．３、１５．６、１７．６、１８．４、２１．４、２２．５、２４．２（±０．２°、２θ値）に最低１個（例えば１、２、３、４、
５、６、７、８、９個若しくは１０個全部）のピークをもつＸＲＰＤパターンを有する結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物が提供され、これらのピークは結晶性の無水の形態に特徴的である。１７．６、１８．４、２２．５および２４．２のピークは無水の形態にとりわけ特徴的であり、そして従ってこれらのピークの最低１個（例えば１、２、３個若しくは４個全部）を見ることが好ましい。

固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物の物理的および化学的安定性を検討した。

物理的安定性を評価するため、微粉化されないおよび微粉の形態の無水の形態の式（Ｉ）の化合物のサンプルを、多様な温度および湿度の周囲雰囲気に開放した容器中に保存した。物理的安定性は、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物について上述されたとおりＴＧＡ、ＤＳＣ、ＤＶＳ、ＩＲおよびＸＲＰＤを使用して検討した。結果を実施例４に要約する。

実施例４で論考されるとおり、無水の形態の式（Ｉ）の化合物（微粉化されないおよび微粉の双方）は全部の検討された条件で物理的に安定であることが見出された。

化学的安定性を評価するため、無水の形態の式（Ｉ）の化合物（微粉化されないおよび微粉）のサンプルをメタノール中で調製し、そしてＨＰＬＣにより分析した。結果を実施例５（表７および８）に要約し、ここで、無水の形態の式（Ｉ）の化合物（微粉化されないおよび微粉の双方）は化学的に安定であることが見出されたとは言え光に対する若干の感受性が検出されたことが示される。無水の形態の式（Ｉ）の化合物の化学的安定性は、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物の化学的安定性に匹敵することが明らかである。

固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物の乳糖適合性を検討した。

無水の形態の化合物（Ｉ）の乳糖との物理的および化学的双方の適合性を検討した。

物理的適合性を評価するため、無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物および乳糖の高濃度組成物を調製し、その後実施例６に要約されるところの多様な温度および湿度で分析した。試験された混合物は全部の検討された条件下で物理的に適合性であったことが明らかである。

化学的適合性を評価するため、乳糖を伴う無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物のより低濃度（物理的適合性試験で使用されたものに関して）の組成物をＨＰＬＣにより分析した。結果を実施例７（表１０）に要約し、ここで、ある種の条件下で無水の形態および乳糖の組成物が分解を受けたことが示される。分解生成物を検討し、そして主分解物を、質量分析により、Ｄ０１９３２８として示される２種の物質の一方若しくは双方であると同定した。すなわち、

この分解生成物は、アルキン三重結合全体への水の付加の結果であることがありそうであり、そして、該三重結合全体への水の付加の方向に依存して２形態の一方として存在しうる（若しくは双方の形態で存在しうる）。同一の分解物が、無水の形態の式（Ｉ）の化合物の金属イオンでの強制分解の間に観察された。さらなる研究の結果として、無水の形態の式（Ｉ）の化合物の分解が金属イオンおよび水を必要としかつ上昇された温度により加速されるようである。

加速安定性試験（すなわち閉鎖されたバイアル中で８０℃への薬物の曝露、実施例１０を参照されたい）を伴うさらなる検討が、少なくともスキーム１（下）でＤ０１９４９２として示される分解生成物が生成されることを確認することに発明者を導いた。さらに、発明者は、さらなる分解生成物（Ｄ０１９４９３）が、ピリミジノン環の加水分解的切断およびアルキン基とのその後の分子内反応から生じ得ることもまた結論づけた。Ｄ０１９３４９は、安定性試験にて温度およびＲＨのある種の環境で観察された推定される中間分解生成物である（データは示されない）。

無水の形態の式（Ｉ）の化合物および乳糖の組合せへのステアリン酸マグネシウムの添加を検討した。乳糖およびステアリン酸マグネシウムを含む無水の形態の式（Ｉ）の化合物の組合せは物理的に安定であることが見出された（実施例８）。しかしながら、驚くことに、ステアリン酸マグネシウムの添加は、無水の形態の式（Ｉ）の化合物および乳糖の組合せの化学的安定性の増大を引き起こしたことが見出された（実施例９）。同様の安定化効果が、ステアリン酸の他の金属塩、具体的にはステアリン酸ナトリウムおよびステアリン酸カルシウムを使用して見出された（実施例１０）。

理論により束縛されることを願わず、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩が、式（Ｉ）の化合物中のアルキン基の化学的分解、および、無水の形態の式（Ｉ）の化合物が乳糖との混合物中にある場合に観察される式（Ｉ）の化合物中のピリミジノン環の化学的分解に対する保護剤として作用し得るようである。

要約すれば、発明者は、固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物が、孤立して固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物より大きい物理的安定性を有することを発見したが、しかし、無水の形態が乳糖を伴いより小さく安定であったことを見出した。しかしながら、発明者は、この問題が、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩の添加により克服され得ることを発見した。発明者は、ステアリン酸の金属塩でのこれらの知見をフマル酸ステアリルの金属塩に外挿する。

吸入のための製薬学的製剤
本発明は、１種若しくはそれ以上の希釈剤若しくは担体との混合状態の本発明の固体の結晶の形態を含んでなる製薬学的組成物を提供する。適しては、該組成物は希釈剤若しくは担体として乳糖を含有する。

本明細書で使用されるところの「乳糖」という用語は、α−乳糖一水和物、β−乳糖一水和物、α−乳糖無水物、β−乳糖無水物および無定形乳糖を包含する乳糖含有成分を指す。乳糖成分は、微粉化、篩過、粉砕、圧縮、集塊形成若しくは噴霧乾燥により加工しうる。多様な形態の商業的に入手可能な形態の乳糖、例えばＬａｃｔｏｈａｌｅ^(R)（吸入等級乳糖；Ｆｒｉｅｓｌａｎｄｆｏｏｄｓ）、ＩｎｈａＬａｃ^(R)７０（ドライパウダー吸入器用の篩過乳糖；Ｍｅｇｇｌｅ）およびＲｅｓｐｉｔｏｓｅ^(R)製品もまた包含される。一態様において、乳糖成分はα−乳糖一水和物、α−乳糖無水物および無定形乳糖よりなる群から選択される。好ましくは乳糖はα−乳糖一水和物である。

肺にまで十分に浸透させるため、微粒子有効成分（この場合は式（Ｉ）の化合物）は上述されたところの適する大きさでなければならない。これらの小粒子は集塊形成する傾向を有することができる。乳糖のような担体の使用はこの集塊形成を予防しかつ流動性を改良し得る。さらに、担体の使用は、正しいかつ一貫した投薬量が肺に達することを確実にする。有効成分は通常、より大きな乳糖粒子上で単層を形成することができ、その後吸入の間に有効成分および担体が分離されかつ有効成分が吸入される一方、担体の大部分はされない。であるから、有効成分のための担体としての微粒子乳糖の使用は、該ドライパウダー製薬学的製剤の各用量が同一量の有効成分を放出することを確実にする。

一般に、小さい活性粒子の集塊形成を予防するため、有効成分のもののおよそ若しくは最低１０倍の粒子径をもつ乳糖のような担体を使用する（例えば、有効成分のもののおよそ若しくは最低１０倍のＤ５０を有する乳糖を使用する）。

一態様において、本発明のドライパウダー製剤は範囲４０〜１５０μｍのＤ５０を有する微粒子乳糖を含んでなる。

本発明のドライパウダー製薬学的製剤は、有効成分の正しいかつ一貫した投薬量が肺に達することを確実にするのに十分な量の担体としての微粒子乳糖を含んでなる。一態様において、該ドライパウダー製薬学的製剤は、ドライパウダー製薬学的製剤の重量に基づき約４０ｗｔ．％から約９９．８８若しくは９９．９８ｗｔ．％まで、例えば約５０ｗｔ．％から約９９．８８若しくは９９．９８ｗｔ％まで、約６５ｗｔ．％から約９９．８８若しくは９９．９８ｗｔ．％まで、または約７５ｗｔ．％から約９９．８８若しくは９９．９８ｗｔ．％までの微粒子乳糖を含んでなる。好ましくは、該ドライパウダー製薬学的製剤は、ドライパウダー製薬学的組成物の重量に基づき約８０ｗｔ．％から約９９．９８ｗｔ．％まで、または例えば約８０ｗｔ％から約９９．９ｗｔ％まで、例えば約８５ｗｔ．％から約９９．８８若しくは９９．９８ｗｔ．％まで、例えば約９５ｗｔ．％から約９９ｗｔ．％までの微粒子乳糖を含んでなる。

場合によっては（および具体的には固体の結晶性の無水の形態を使用する場合）、該組成物はステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩およびフマル酸ステアリルの金属塩から選択される安定化剤を含有する。

ステアリン酸の一例の金属塩はステアリン酸マグネシウムである。使用しうるステアリン酸の代替の金属塩は、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸カルシウムおよびステアリン酸リチウムのような第Ｉ族および他の第ＩＩ族の金属と形成されるステアリン酸の塩を包含する。挙げることができるステアリン酸の他の金属塩はステアリン酸亜鉛およびステアリン酸アルミニウムを包含する。

フマル酸ステアリルの金属塩（例えばフマル酸ステアリルナトリウム）はステアリン酸の金属塩のものに類似の特性を有するようである（Ｓｈａｈら、Ｄｒｕｇ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ ｐｈａｒｍａｃｙ １９８６、Ｖｏｌ．１２ Ｎｏ．８−９、１３２９−１３４６を参照されたい）。発明者の意見では、それらは本発明でステアリン酸の金属塩に対する代替物として使用し得る。

本明細書で使用されるところの「ステアリン酸マグネシウム」という用語は、ステアリン酸マグネシウム三水和物、ステアリン酸マグネシウム二水和物、ステアリン酸マグネシウム一水和物および無定形ステアリン酸マグネシウムを包含する。本明細書で定義されるところのステアリン酸マグネシウムは、「ステアリン酸マグネシウム」と定義されるいかなる物質も２５％まで（例えば１０％まで、例えば５％まで、例えば１％まで）のパルミチン酸塩を含有しうる許容範囲を包含する。

より一般的には、ステアリン酸の金属塩若しくはフマル酸ステアリルの金属塩は、無水の形態で若しくは水和物として使用することができ、および２５％まで（例えば１０％まで、例えば５％まで、例えば１％まで）のパルミチン酸塩を含有しうる。

本明細書で使用されるところの「ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩およびフマル酸ステアリルの金属塩から選択される安定化剤」という表現は、ステアリン酸および／若しくはフマル酸ステアリルの金属塩の混合物を包含し得るとは言え、単一塩の使用が好ましいことができる。

ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩若しくはフマル酸ステアリルの金属塩は、典型的に、微粉化される必要がない微粉末として得られる。適しては、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩若しくはフマル酸ステアリルの金属塩のＤ５０は、５μｍ以上、例えば約１０μｍ若しくは１０μｍ以上、例えば５ないし１００μｍの範囲、例えば５ないし５０μｍ、例えば５ないし２０μｍ、例えば１０ないし２０μｍである。ステアリン酸マグネシウムは例えばＡｖａｎｔｏｒ（Ｈｙｑｕａｌ ２２５７ブランド）若しくはＰｅｔｅｒ Ｇｒｅｖｅｎから得ることができる。ステアリン酸ナトリウムおよびステアリン酸カルシウムは例えばＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから得ることができる。フマル酸ステアリルナトリウムは例えばＳｃｉｅｎｃｅＬａｂから得ることができる。

本発明のドライパウダー製薬学的製剤は、場合によっては、製剤の化学的安定性を確実にするのに十分な量（「安定化量」）のステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩およびフマル酸ステアリルの金属塩から選択される微粒子安定化剤を含んでなる。化学的安定性は、例えば、分解物Ｄ０１９３２８（一方若しくは双方の物質）の生成が式（Ｉ）の化合物を含有する組成物の５０℃で４週間の保存後に０．２％ｗｔ．％未満のレベルである場合に示される。あるいは、若しくは加えて、化学的安定性は、例えば、分解物Ｄ０１９４９３の生成が式（Ｉ）の化合物を含有する組成物の８０℃で２週間の保存後に０．５％ｗｔ．％未満のレベルである場合に示される。あるいは、若しくは加えて、化学的安定性は、例えば、分解物Ｄ０１９４９２の生成が式（Ｉ）の化合物を含有する組成物の８０℃で２週間の保存後に０．４％ｗｔ．％未満のレベルである場合に示される。一態様において、該ドライパウダー製薬学的製剤は、ドライパウダー製薬学的製剤の重量に基づき約０．０１ｗｔ．％から約１５ｗｔ．％まで、例えば０．１ｗｔ．％ないし約１０ｗｔ．％、１０ｗｔ．％、５ｗｔ．％、２ｗｔ．％若しくは１ｗｔ．％の微粒子のステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩若しくはフマル酸ステアリルの金属塩を含んでなる。好ましくは、該ドライパウダー製薬学的製剤は、ドライパウダー製薬学的組成物の重量に基づき約０．５ｗｔ．％から約５ｗｔ．％まで、例えば１〜２%ｗ／ｗの微粒子のステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩若しくはフマル酸ステアリルの金属塩を含んでなる。適しては、ステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩若しくはフマル酸ステアリルの金属塩は、該製剤の物理的安定性を確実にするのに十分な量で存在する。物理的安定性は、例えば、組成物のＩＲスペクトルおよびＸＲＰＤパターン（具体的には式（Ｉ）の化合物の特徴的なピークに関して）が、式（Ｉ）の化合物を含有する組成物の５０℃で４週間の保存後に実質的に不変である場合に示される。

一態様において、本発明の吸入のためのドライパウダー製薬学的製剤は、
（ｉ）有効成分としての微粒子の形態の固体の結晶性の無水の形態の約０．０２から５０ｗｔ％までの６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチ
ル）ヘキス−５−インアミド；
（ｉｉ）約４０から約９９．８８ｗｔ．％までの微粒子乳糖；ならびに
（ｉｉｉ）約０．１から約１０ｗｔ．％までのステアリン酸の金属塩（ステアリン酸マグネシウムのような）およびフマル酸ステアリルの金属塩から選択される微粒子安定化剤
を含んでなる。

さらなる一態様において、本発明の吸入のためのドライパウダー製薬学的製剤は、
（ｉ）有効成分としての微粒子の形態の固体の結晶性水和物の形態の約０．０２から５０ｗｔ％までの６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミド
（ｉｉ）約４０ｗｔ．％から約９９．９８ｗｔ．％までの微粒子乳糖；ならびに
（ｉｉｉ）場合によっては、約０．１ｗｔ．％から約１０ｗｔ．％までのステアリン酸の金属塩（ステアリン酸マグネシウムのような）およびフマル酸ステアリルの金属塩から選択される微粒子安定化剤
を含んでなる。

製薬学的用途および投与方法
本発明の一局面により、医薬品としての使用のための本発明の固体の結晶の形態の使用が提供される。

一態様において、吸入によるすなわち肺への局所投与によるＣＯＰＤおよび／若しくは喘息、具体的にはＣＯＰＤ若しくは重度喘息の処置のための本発明の製薬学的製剤の使用が提供される。有利には、肺への投与は該化合物の有益な効果が患者に対する副作用を最低限にしつつ実現されることを可能にする。

一態様において、本発明の製薬学的製剤はコルチコステロイドでの処置に対し患者を感作するのに適する。

該製薬学的製剤は単位剤形で便宜的に投与することができ、そして例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１７版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、ペンシルバニア州イーストン、（１９８５）に記述されるところの製薬学的技術分野で公知の方法のいずれかにより製造しうる。

肺への局所投与は吸入装置の使用により達成される。

従って、本発明の一局面は本発明の製薬学的製剤の１若しくはそれ以上の用量を含んでなる吸入装置を包含する。ドライパウダー製剤のための吸入装置は、典型的に、用量が装置から引き出されかつマウスピースから吸入することにより被験体の肺の力を使用して該被験体に投与されるような、呼吸で操作される。しかしながら、場合によっては外部エネルギーを用量の投与を補助するために提供しうる。典型的に、吸入装置は複数の用量の本発明の製薬学的製剤、例えば２若しくは４若しくは８若しくは２８若しくは３０若しくは６０またはそれ以上の用量を含んでなることができる。従って、吸入装置は用量の１か月の供給を含みうる。一態様において、１用量が、吸入に際して被験体にカプセルの内容物を送達するよう適合された吸入装置での１回ごとの使用のためにカプセル中に計量される。場合によっては、例えば１用量が吸入装置からの２（若しくはそれ以上の）吸入を使用して投与されるような用量が分割される。本発明の一態様により、製剤の用量は吸入装置中で事前計量される。例えば、事前計量された用量がブリスターストリップ若しくはディスクのパウチ中またはカプセル内に含有されることができる。本発明の別の態様によれば
用量は使用時に計量される。かように、吸入装置はドライパウダーのリザーバを含有し、そして装置が投与の前若しくは投与時点で（典型的には固定された容量に基づいて）１用量のパウダーを計量する。

例のドライパウダー吸入装置は、ＳＰＩＮＨＡＬＥＲ、ＥＣＬＩＰＳＥ、ＲＯＴＡＨＡＬＥＲ、ＨＡＮＤＩＨＡＬＥＲ、ＡＥＲＯＬＩＳＥＲ、ＣＹＣＬＯＨＡＬＥＲ、ＢＲＥＥＺＨＡＬＥＲ／ＮＥＯＨＡＬＥＲ、ＦＬＯＷＣＡＰＳ、ＴＷＩＮＣＡＰＳ、Ｘ−ＣＡＰＳ、ＴＵＲＢＯＳＰＩＮ、ＥＬＰＥＮＨＡＬＥＲ、ＤＩＳＫＨＡＬＥＲ、ＴＵＲＢＵＨＡＬＥＲ、ＭＩＡＴＨＡＬＥＲ、ＴＷＩＳＴＨＡＬＥＲ、ＮＯＶＯＬＩＺＥＲ、ＤＩＳＫＵＳ、ＳＫＹＥＨＡＬＥＲ、ＯＲＩＥＬドライパウダー吸入器、ＭＩＣＲＯＤＯＳＥ、ＡＣＣＵＨＡＬＥＲ、ＰＵＬＶＩＮＡＬ、ＥＡＳＹＨＡＬＥＲ、ＵＬＴＲＡＨＡＬＥＲ、ＴＡＩＦＵＮ、ＰＵＬＭＯＪＥＴ、ＯＭＮＩＨＡＬＥＲ、ＧＹＲＯＨＡＬＥＲ、ＴＡＰＥＲ、ＣＯＮＩＸ、ＸＣＥＬＯＶＡＩＲ、ＰＲＯＨＡＬＥＲおよびＣＬＩＣＫＨＡＬＥＲを包含する。別の例はＭＯＮＯＤＯＳＥ吸入器である。

場合によっては、吸入装置は水分の侵入に対し保護するために保存のため上包装されうる。乾燥剤を場合によっては上包内若しくは装置内で使用しうる。適しては、吸入装置中の本発明の製薬学的製剤は光から保護される。

本発明の製薬学的製剤は、ＣＯＰＤ、慢性気管支炎、肺気腫）、喘息、小児喘息、嚢胞性線維症、サルコイドーシスおよび特発性肺線維症を包含する呼吸障害、ならびにとりわけ喘息、慢性気管支炎およびＣＯＰＤの処置でもまた有用でありうる。

本発明の製薬学的製剤は、単独の有効成分として式（Ｉ）の化合物を含みうるか、若しくは、付加的な有効成分、例えば上で挙げられた状態を処置するのに適する有効成分を含みうる。例えば、呼吸障害の処置のための可能な組合せは、ステロイド（例えばブデソニド、ベクロメタゾンプロピオン酸エステル、フルチカゾンプロピオン酸エステル、モメタゾンフロ酸エステル、フルチカゾンフロ酸エステル、フルニソリド、シクレソニド、トリアムシノロン）、β刺激薬（例えばテルブタリン、バンブテロール、サルブタモール、レバルブテロール、サルメテロール、ホルモテロール、クレンブテロール、フェノテロール、ブロキサテロール、インダカテロール、レプロテロール、プロカテロール、ビランテロール）および／若しくはキサンチン（例えばテオフィリン）、ムスカリン受容体拮抗薬（例えばイプラトロピウム、チオトロピウム、オキシトロピウム、グリコピロニウム、グリコピロレート、アクリジニウム、トロスピウム）、ロイコトリエン拮抗薬（例えばザフィルルカスト、プランルカスト、ジロートン、モンテルカスト）ならびに／またはｐ３８ ＭＡＰキナーゼ阻害剤との組合せを包含する。前述の有効成分のいずれも製薬学的に許容できる塩の形態で使用しうることが理解されるであろう。

一態様において、本発明の製薬学的製剤は抗ウイルス薬、例えばアシクロビル、オセルタミビル（Ｔａｍｉｆｌｕ^(R)）、ザナミビル（Ｒｅｌｅｎｚａ^(R)）若しくはインターフェロンと組合せで投与される。

一態様において、式（Ｉ）の化合物および他の有効成分（１種若しくは複数）の組合せが本発明の製薬学的製剤中で共処方される。別の態様において、該他の有効成分（１種若しくは複数）は１種若しくはそれ以上の別個の製薬学的製剤中で投与される。

一態様において、式（Ｉ）の化合物は、例えば後者の予防を包含する喘息、ＣＯＰＤ若しくは肺癌の維持療法での使用のため、コルチコステロイドと本発明の製薬学的製剤中に共処方されるか若しくは別個の製剤中で共投与される。

一態様において、本発明の製薬学的製剤は吸入により投与され、かつ、コルチコステロイドは組合せで若しくは別個にのいずれかで経口で若しくは吸入により投与される。

本発明の製薬学的製剤は、以前に該患者の状態があるコルチコステロイドに対し抵抗性となったことがあった場合は、該患者の状態をそれでの処置に対し再感作することもまたできる。

本発明の一態様において、使用される製薬学的製剤の用量は、単剤療法としての使用に適するものと等しいが、しかしコルチコステロイドと組合せで投与される。

一態様において、単一の剤として治療的以下であるとみられる製薬学的製剤の用量を使用し、そして、該患者があるコルチコステロイドに対し以前に抵抗性となったことがあった場合は、それと組合せで投与して、それにより後者に対する患者の応答性を復帰させる。

加えて、本発明の製薬学的製剤は抗ウイルス活性を表すことがあり、そして喘息および／若しくはＣＯＰＤのような炎症状態のウイルス性の悪化の処置で有用と判明している。

本発明の製薬学的製剤は、インフルエンザウイルス、ライノウイルスおよび／若しくはＲＳウイルスの予防、処置若しくは軽減でもまた有用でありうる。

一態様において、現在開示される製薬学的製剤は、癌、具体的には肺癌のとりわけ肺への局所投与による処置若しくは予防で有用である。

従って、さらなる一局面において、本発明は、上で挙げられた状態の１種若しくはそれ以上の処置での使用のための本明細書に記述されるところの製薬学的製剤を提供する。

さらなる一局面において、本発明は、上で挙げられた状態の１種若しくはそれ以上の処置のための医薬品の製造のための本明細書に記述されるところの製薬学的製剤を提供する。

さらなる一局面において、本発明は、有効量のその本発明の製薬学的製剤を被験体に投与することを含んでなる、上で挙げられた状態の処置方法を提供する。

本明細書に記述される製薬学的製剤は、上で同定された疾患の１種若しくはそれ以上の処置のための医薬品の製造でもまた使用しうる。

「処置」という語は予防ならびに治療的処置を包含することを意図している。

別の方法で明記されない限り、本明細書で使用されるところの％値は重量％値（ｗｔ．％）である。

本発明の固体の結晶の形態、およびそれらを含有する製薬学的製剤は、それらが、従来技術の固体の形態の式（Ｉ）の化合物と比較して、改良された結晶性（例えばＸＲＰＤにより測定されるところの）、改良された物理的安定性（例えばＸＲＰＤ、ＩＲ、ＤＶＳ、ＤＳＣ若しくはＴＧＡ分析により測定されるところの）、改良された化学的安定性（例えばＨＰＬＣにより測定されるところの）、乳糖との改良された物理的適合性（場合によっては他の賦形剤と組合せられる場合）、乳糖との改良された化学的適合性（場合によっては他の賦形剤と組合せられる場合）、投与に際しての改良された粒子径分布（改良された微細粒子質量により明示されるような）を有するという利点を有しうるか、または他の好
都合な特性を有しうる。

略語
ａｑ 水性
ＣＯＰＤ 慢性閉塞性肺疾患
ｄ 二重項
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＭＡＰ ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＤＰＩ ドライパウダー吸入器
ＤＳＣ 示差走査熱量測定
ＤＶＳ 動的水蒸気吸着
ＥＤＣ．ＨＣｌ １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジ
イミド塩酸塩
（ＥＳ⁺） エレクトロスプレーイオン化、正イオンモード
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
ＨＰＬＣ−ＭＳ 高速液体クロマトグラフィー質量分析
ｈｒ 時間（１若しくは複数）
ＩＲ 赤外
ＬＰＳ リポ多糖
（Ｍ＋Ｈ）⁺ プロトン化分子イオン
ＭＤＩ 定量噴霧式吸入器
ＭｅＯＨ メタノール
ＭＥＫ メチルエチルケトン
ＭＨｚ メガヘルツ
ｍｉｎ 分（１若しくは複数）
ｍｍ ミリメートル（１若しくは複数）
ｍｓ 質量分析
ｍＴＯＲ 哺乳類ラパマイシン標的タンパク質
ｍ／ｚ 質量電荷比
ＮＨ₄ＯＡｃ 酢酸アンモニウム
ＮＭＲ 核磁気共鳴（分光法）
Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ₂ １，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジク
ロロパラジウム（ＩＩ）
ｐｐｍ 百万分率
ｑ 四重項
ｑｕｉｎ 五重項
ＲＨ 相対湿度
ＲＲＴ 相対保持時間
Ｒ^t 保持時間
ＲＴ 室温
ｓ 一重項
ｔ 三重項
ＴＢＤＭＳＣｌ 塩化ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＧＡ 熱重量測定分析
ＴＮＦα 腫瘍壊死因子α
ＸＲＰＤ Ｘ線粉末回折

一般的手順
ＨＰＬＣ−ＭＳ
４ｍｉｎにわたる０．１％ｖ／ｖギ酸を含有するＨ₂Ｏ−ＭｅＣＮ勾配で溶出する４０℃のＡｇｉｌｅｎｔ Ｅｘｔｅｎｄ Ｃ１８カラム、（１．８μｍ、４．６×３０ｍｍ）および２．５〜４．５ｍＬ ｍｉｎ^-1の流速を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＰ１２００装置で実施される。勾配情報：０−３．００ｍｉｎ、９５％Ｈ₂Ｏ−５％ＭｅＣＮから５％Ｈ₂Ｏ−９５％ＭｅＣＮまで傾斜される；３．００−３．０１ｍｉｎ、５％Ｈ₂Ｏ−９５％ＭｅＣＮで保持される、流速４．５ｍＬ ｍｉｎ^-1に増大される；３．０１−３．５０ｍｉｎ、５％Ｈ₂Ｏ−９５％ＭｅＣＮで保持される；３．５０−３．６０ｍｉｎ、９５％Ｈ₂Ｏ−５％ＭｅＣＮに戻される；流速３．５０ｍＬ ｍｉｎ^-1に低下される；３．６０−３．９０ｍｉｎ、９５％Ｈ₂Ｏ−５％ＭｅＣＮで保持される；３．９０−４．００ｍｉｎ、９５％Ｈ₂Ｏ−５％ＭｅＣＮで保持される、流速２．５ｍＬ ｍｉｎ^-1に低下される。ＵＶ検出はＡｇｉｌｅｎｔ Ｇ１３１４Ｂ可変波長検出器を使用して２５４ｎｍで実施した。

質量スペクトル（ＭＳ）
Ａｇｉｌｅｎｔ Ｇ１９５６Ｂを使用して１．６秒／サイクルのサンプリング速度で範囲ｍ／ｚ ６０ないし２０００にわたり、Ｗａｔｅｒｓ ＺＭＤを使用して２Ｈｚのサンプリング速度でｍ／ｚ １５０ないし８５０にわたり、若しくはＳｈｉｍａｄｚｕ ２０１０ ＬＣ−ＭＳ装置を使用して２Ｈｚのサンプリング速度でｍ／ｚ １００ないし１０００にわたり、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）を使用して得られた。

ＮＭＲスペクトル
¹Ｈ ＮＭＲスペクトル（実施例１０のものを除く）は、参照として残留非重水素化溶媒を使用して４００ＭＨｚでＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＩＩＩ分光計で取得した。

実施例１０の¹Ｈ ＮＭＲスペクトルは、参照として残留非重水素化溶媒を使用して６００ＭＨｚでＢｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ分光計で取得した。

動的水蒸気吸着（ＤＶＳ）
表面測定装置、動的水蒸気吸着型式ＤＶＳ−１を使用して得られた。約１９ｍｇのサンプルを使用して、２５℃での雰囲気湿度に関して記録される重量変化を、以下のパラメータすなわち
乾燥： 乾燥窒素下６０ｍｉｎ．
平衡： 最低：１５ｍｉｎおよび最高６０ｍｉｎについて０．０１％／ｍｉｎ。
データ間隔： ０．０５％若しくは２．０ｍｉｎ。
ＲＨ（％）測定点：
第一の組： ５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５、９
０、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、１０、５
第二の組： １０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９５、９０、
８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、１０、５、０
を使用して測定した。

Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
ＸＲＰＤパターンは、Ｃｕ ＬＦＦ Ｘ線管（４５ｋＶ；４０ｍＡ；Ｂｒａｇｇ−Ｂｒｅｎｔａｎｏ；スピナーステージ）を装備されたＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ（Ｐｈｉｌｉｐｓ）Ｘ’ＰｅｒｔＰＲＯ ＭＰＤ回折計で取得されたは、Ｃｕ Ｋα放射および以下の測定条件すなわち
走査モード： 連続
走査範囲： ３ないし５０°２θ
ステップサイズ： ０．０２°／ステップ
計数時間： ３０秒／ステップ
スピナー回転時間： １秒
放射タイプ：ＣｕＫα
入射ビーム路
プログラム。分岐スリット： １５ｍｍ
ソーラースリット： ０．０４ｒａｄ
ビームマスク： １５ｍｍ
抗散乱スリット： １°
ビームナイフ： ＋
回折ビーム路
長抗散乱シールド： ＋
ソーラースリット： ０．０４ｒａｄ
Ｎｉフィルター： ＋
検出器： Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ
を使用して取得した。

サンプルはゼロバックグラウンドサンプルホルダー上に広げることにより調製した。

赤外分光法（ＩＲ）
微小減衰全反射（ｍｉｃｒｏＡＴＲ）を使用し、また、サンプルは適するｍｉｃｒｏＡＴＲ付属品および以下の測定条件すなわち
装置：Ｔｈｅｒｍｏ Ｎｅｘｕｓ ６７０ ＦＴＩＲ分光計
走査数： ３２
分解能： １ｃｍ^-1
波長範囲： ４０００ないし４００ｃｍ^-1
検出器： ＫＢｒ窓を伴うＤＴＧＳ
ビームスプリッター： ＫＢｒ上Ｇｅ
ｍｉｃｒｏＡＴＲ付属品： Ｓｉ結晶を伴うＨａｒｒｉｃｋスプリットピア
を使用して分析した。

示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
ＤＳＣデータは、ＲＣＳ冷却装置を装備されたＴＡ−Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｑ２０００ ＭＴＤＳＣで収集した。典型的には、標準的アルミニウム製ＴＡ−Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔサンプルパン中の３ｍｇの各化合物を１０℃／ｍｉｎで２５℃から２５０／３００℃まで加熱した。５０ｍｌ／ｍｉｎの窒素パージをサンプル上で維持した。

熱重量測定分析（ＴＧＡ）
ＴＧＡデータは、ＴＡ−Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｑ５００熱重量計で収集した。典型的には、１０ｍｇの各サンプルを予め秤量されたアルミニウム製パンに移し、そして、別の方法で述べられない限り２０℃／ｍｉｎで周囲温度から３００℃若しくは＜８０［（ｗ／ｗ）％］まで加熱した。

化学的安定性−ＨＰＬＣ
ＨＰＬＣ分析は以下の稼働条件すなわち
カラム Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８（１５０×３．０×３．５ｍｍ）
若しくは同等物（カラムは、ＳＳＴで指定されるところの性能が適合され
かつ全部の関連化合物の匹敵する分離が示される場合に同等と見なされる
）
カラム温度 ３５℃
サンプル温度 １０℃
流速 ０．４５ｍｌ／ｍｉｎ
注入量 注入量は、装置の適格性限界が超えられず（検出器および注入装置）なら
びに主化合物のピーク形状が許容できる限り調節し得る。指標として３０
μｌが適すると見なされる。
検出 ２５５ｎｍでのＵＶ検出
移動相 調製および組成：
Ａ １０ｍＭ酢酸アンモニウム（０．７７１ｇ／ｌ）＋水中０．１％、ｖ／ｖ
トリフルオロ酢酸
Ｂ アセトニトリル
勾配 分析運転時間は４１分である

を使用して実施した。

このＨＰＬＣ法を用いて、分解物Ｄ０１９４９２はＲＲＴ０．８６に溶出する。

化学的安定性−超高速液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）
ＵＰＣＬ分析は以下の稼働条件すなわち
カラム Ａｑｕｉｔｙ ＢＥＨ Ｃ₁₈；２．１×１５０ｍｍ；１．７μｍ、若しく
は同等物（カラムは、ＳＳＴで指定されるところの性能が適合されかつ全
部の関連化合物の匹敵する分離が示される場合に同等と見なされる）
カラム温度 ３５℃
サンプル温度 １０℃
流速 ０．４０ｍｌ／ｍｉｎ
注入量 注入量は、装置の適格性限界が超えられず（検出器および注入装置）なら
びに主化合物のピーク形状が許容できる限り調節し得る。指標として４μ
ｌが適すると見なされる。
検出 ２５５ｎｍでのＵＶ検出
移動相 調製および組成：
Ａ １０ｍＭ酢酸アンモニウム（０．７７１ｇ／ｌ）＋水中０．１％、ｖ／ｖ
トリフルオロ酢酸
Ｂ アセトニトリル
勾配 分析運転時間は２３分である

を使用して実施した。

このＵＰＬＣ法を用いて、分解物Ｄ０１９４９２はＲＲＴ０．９２〜０．９３に溶出し、また、分解物Ｄ０１９４９３はＲＲＴ０．８６〜０．８７に溶出する。

試薬および供給元
Ｌａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)：粒子径（Ｓｙｍｐａｔｅｃ）：Ｄ１０：５〜１５μｍ；Ｄ５０：５０〜１００μｍ；Ｄ９０：１２０〜１６０μｍ。

ステアリン酸マグネシウム：等級Ｈｙｑｕａｌ^(R) ２２５７；Ａｖａｎｔｏｒにより供給される。粒子径：Ｄ１０：典型的に３μｍ；Ｄ５０：典型的に１１．５μｍ（１０．５〜１６．５μｍ）；Ｄ９０：典型的に２４μｍ（１８〜２８μｍ）。微粉末として供給される。

固体の結晶性水和物の形態の６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミド（式（Ｉ）の化合物）の製造

５−ブロモ−３−（２−クロロベンジル）−２−（クロロメチル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン（２）。

氷浴中で０℃に冷却されたトルエン（７５ｍＬ）中の２−アミノ−６−ブロモ安息香酸（３．０６ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）の攪拌された溶液に、ピリジン（０．６０ｍＬ、７．１０ｍｍｏｌ）次いでトルエン（７５ｍＬ）中の塩化クロロアセチル（２．２６ｍＬ、２８．４ｍｍｏｌ）の溶液を１ｈｒにわたり１滴ずつ添加した。該反応混合物をＲＴに温まらせ、そして１１５℃で３ｈｒ加熱し、そしてその後ＲＴに冷まさせた。溶媒容量を真空中での蒸発により半分だけ低下させた。一夜静置することに際して、生成物が沈殿し、そして濾過により収集して、２−ブロモ−６−（２−クロロアセトアミド）安息香酸（１ａ、Ｘ＝Ｃｌ）（１．４４ｇ）を白色固形物：ｍ／ｚ ２９０／２９２（Ｍ＋Ｈ）⁺（ＥＳ⁺）として提供した。濾液を真空中で濃縮し、そして残渣をエタノール／ヘプタンとともに摩砕して、２−ブロモ−６−（２−ヒドロキシアセトアミド）安息香酸（１ｂ Ｘ＝ＯＨ）（１．０２ｇ、合わせられた収率、５９％）：ｍ／ｚ ２７４／２７６（Ｍ＋Ｈ）⁺（ＥＳ⁺）を提供した。１ａおよび１ｂ双方はさらなる精製なしに次の段階で使用し得る。

トルエン（２５０ｍＬ）中の化合物（１ａ）（７．５０ｇ、２７．４ｍｍｏｌ）、２−クロロベンジルアミン（５．００ｍＬ、４１．０５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５．７０ｍＬ、４１．１ｍｍｏｌ）の攪拌された混合物にトルエン（２５０ｍＬ）中の三塩化リン（２．６０ｍＬ、３０．１ｍｍｏｌ）の溶液を１ｈｒにわたり１滴ずつ添加した
。該反応混合物を１１０℃に２４ｈｒ加熱し、それに際して熱溶液を傾斜しかつ真空中で濃縮した。残渣をプロパン−２−オール（５０ｍＬ）とともに摩砕して、表題化合物（２）（６．４１ｇ、５９％）を黄色固形物：Ｒ^t ２．６７ｍｉｎ；ｍ／ｚ ３９７／３９９（Ｍ＋Ｈ）⁺（ＥＳ⁺）として提供した。

３−（３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−アミン（６）。

脱気されたＤＭＦ／水（３：２、１４０ｍＬ）中の３−ヨード−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−アミン（３）（８．２２ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）、３−フェノールボロン酸（１３．０ｇ、９４．５ｍｍｏｌ）およびリン酸カリウム（１０．０ｇ、４７．３ｍｍｏｌ）の攪拌された懸濁液にＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ₂（１３．０ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）を添加した。該反応混合物を窒素で洗い流し、１２０℃で２ｈｒ加熱し、そしてその後ＲＴに冷まさせた。該反応混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）および塩酸（２Ｍ、５００ｍＬ）で希釈し、そして生じる懸濁液を濾過した。濾液を塩酸（２Ｍ、２×５００ｍＬ）で抽出した。合わせられた水性抽出液を炭酸ナトリウムの飽和水性溶液でｐＨ１０に塩基性化した。形成された沈殿物を濾過し、そして濾液をＥｔＯＡｃ（３×１Ｌ）で抽出した。合わせられた有機抽出液を乾燥し、濾過しかつ溶媒を真空中で除去して灰色固形物を提供した。作業処置の間に生成された全部の固形物質を合わせ、そしてＤＣＭとともに摩砕して、３−（４−アミノ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−３−イル）フェノール（５）（６．０４ｇ、８４％）を灰色固形物：ｍ／ｚ ２２８（Ｍ＋Ｈ）⁺（ＥＳ⁺）として提供した。

無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のフェノール（５）（４．６９ｇ、２０．６６ｍｍｏｌ）およびイミダゾ−ル（２．１０ｇ、３０．９９ｍｍｏｌ）の攪拌された溶液にＴＢＤＭＳＣｌ（４．７０ｇ、３０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。１６ｈｒ後にイミダゾ−ル（２．１０ｇ、３０．９９ｍｍｏｌ）およびＴＢＤＭＳＣｌ（４．７０ｇ、３０．９９ｍｍｏｌ）のさらなるアリコートを添加し、そして該混合物を４８ｈｒ攪拌した。該反応混合物を水（１２０ｍＬ）で希釈しかつＤＣＭ（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせられた有機抽出液を水（２×２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、濾過しかつ容量を真空中での蒸発によりおよそ１００ｍＬに低下させた。生じるスラリーを濾過しかつ固形物をヘプタン（５０ｍＬ）で洗浄して、表題化合物（６）（６．０５ｇ、８５％）を灰白色固形物：ｍ／ｚ ３４３（Ｍ＋Ｈ）⁺（ＥＳ⁺）として提供した。

中間体Ａ：２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−５−ブロモ−３−（２−クロロベンジル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン。

ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の５−ブロモ−３−（２−クロロベンジル）−２−（クロロメチル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン（２）（１００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（４２ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）の攪拌された混合物にＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の３−（３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）フェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−アミン（６）（９４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、そして該反応混合物をＲＴで１８ｈｒ攪拌した。炭酸カリウム（３×３５ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を３０ｈｒ．にわたり３部分で添加し、その後溶媒を真空中で除去し、そして粗物質をＤＣＭ中４．５％メタノールで溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物、中間体Ａ、（９４ｍｇ、６４％）を灰白色固形物：Ｒ^t ２．０１ｍｉｎ；ｍ／ｚ ５８８／５９０（Ｍ＋Ｈ）⁺、（ＥＳ⁺）として提供した。

中間体Ｂ：Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミド。

０℃のＤＣＭ（６００ｍＬ）中のヘキス−５−イン酸（７．１１ｇ、６３．４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ．ＨＣｌ（１４．０ｇ、７２．９ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（３８７ｍｇ、３．１７ｍｍｏｌ）の溶液にビス（２−メトキシエチル）アミン（９．３ｍＬ、６３ｍｍｏｌ）を添加した。生じる混合物をＲＴに２０ｈｒ加温し、そしてその後塩酸（１Ｍ、２×５００ｍＬ）および水（５００ｍＬ）で洗浄した。有機層を乾燥しかつ真空中で蒸発させて、表題化合物、中間体Ｂを黄色油状物（１６ｇ、９７％）：¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ：１．８８（３Ｈ、ｍ）、２．２６（２Ｈ、ｍ）、２．４９（２Ｈ、ｍ）、３．３２（６Ｈ、ｓ）、３．５１（４Ｈ、ｍ）、３．５５（４Ｈ、ｍ）として提供した。

６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミド（Ｉ）

中間体Ａ（（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−５−ブロモ−３−（２−クロロベンジル）キナゾリン−４（３Ｈ）−オン（６５．７ｇ、１．０ｅｑ．））、ヨウ化銅（Ｉ）（１．０６ｇ、０．０５モル／ｍｏｌ）、塩化ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（３．９２ｇ、０．０５モル／ｍｏｌ）、中間体Ｂ（Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミド（６３．４２ｇ、２．５モル／ｍｏｌ）およびジエチルアミン（８３７．０５ｍＬ；５９１．２１ｇ、７．５Ｌ／ｍｏｌ）を２Ｌ反応槽に添加し、そして該混合物をアルゴンパージで脱気した。該反応混合物を３０ｍｉｎにわたり５５℃（還流温度）に加温し、そしてその後５５℃で攪拌した。２時間後、該混合物を、真空中で濃縮される前に２２℃に冷却して、暗褐色半固形物残渣（２０１．０ｇ）を生じた。残渣をその後ＭＥＫ（７８１ｍＬ）に溶解しかつ水を添加した（２２３ｍＬ）。５分間強く攪拌した後に層を分離しそして水層を廃棄した。有機層を、ＭＥＫ中の不均質混合物（２３０ｇ）まで真空中で部分的に濃縮される前に、１０％ｗ／ｖ水性ＮＨ₄ＯＡｃ（３００ｍＬ）および２％ｗ／ｖ水性ＮａＣｌ（１１２ｍＬ）で洗浄した。該混合物を１６時間攪拌し、その後濾過し、そして沈殿物をＭＥＫ（３×２５ｍＬ）で洗浄した。生じる固形物を真空中５０℃で１８時間乾燥して、「粗」６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミド（式（Ｉ）の化合物）（５４．１３ｇ；０．６６等量；６５．９７％収率）を生じた。

式（Ｉ）の粗化合物（５３．５ｇ；１．００等量）、メタノール（７．２８ｍＬ、０．１Ｌ／ｍｏｌ）およびジクロロメタン（１４５．５３ｍＬ、２Ｌ／ｍｏｌ）を２５０ｍＬ反応槽中２２℃で攪拌した。４時間後に固形物を濾過し、そして真空中４０℃で１８時間乾燥される前にジクロロメタン（２９ｍＬ）で洗浄して、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物（表題化合物）（４５．３ｇ；０．８５等量；８４．６７％結晶化収率）を灰白色固形物として得た。

固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物の製造
本実施例内に記述される全反応は窒素ガス流下で実施した。実施例１で製造されたところの水和物の形態の式（Ｉ）の化合物（１４．０ｇ）および１−プロパノール（２１０ｍＬ、１５Ｌ／ｋｇ）を４００ｍｌ結晶化容器に添加した。生じる不均質な混合物を攪拌し
かつ９０℃に加温した（混合物は８５℃で均質になった）。溶液が９０℃に一旦達したら金属スカベンジャー（ＳｉｌｉａＭｅｔＳ^(R)チオール０．７ｇ（５％ｗ／ｗ））を添加し、そして該混合物を９５℃に加温した。９５℃で１５分間攪拌した後に該混合物を９０℃に冷却し、そして９０℃でさらなる２時間攪拌した。金属スカベンジャーをその後濾過し、そして均質な濾液を再度攪拌し、そして８５℃に冷却されかつ８時間攪拌される前に９５℃に加温した。濾液をその後８時間にわたり２０℃に冷却しそして２０℃で追加の６時間攪拌した。生成物をその後濾過し、そして真空中５０℃で１８時間乾燥される前に１−プロパノール（６ｍｌ）で洗浄して、無水の形態の式（Ｉ）の化合物（１２．６ｇ、９０％）を白色固形物として提供した。

上の方法は、場合によってはシーディングを用いて結晶化を助長するように適合させてよい。

固体の結晶性水和物および無水の形態の式（Ｉ）の化合物のＸＲＰＤ分析
水和物および無水の形態の式（Ｉ）の化合物のＸＲＰＤ分析を、一般的手順に記述された方法を使用して着手した。生じる回折パターンを図１および２に示す。双方のＸＲＰＤパターンはハロの存在を伴わない回折ピークを示し、これにより双方の物質が結晶性であることを示す。該２形態のピークおよび強度を下に表１および２に示す。すなわち、

該２種の固体の結晶の形態は共通のいくつかのピークを有し、それらが関連する（しかし異なる）結晶構造を有するようであることを示す。

水和物および無水の形態（微粉化を伴うおよび伴わない無水の形態）の式（Ｉ）の化合物の熱分析
水和物の形態および無水の形態（微粉化されないおよび微粉の無水の形態）の式（Ｉ）の化合物の熱分析を、一般的手順に記述されたとおり、ＴＧＡ、ＤＶＳ、ＸＲＰＤ、ＩＲおよびＤＳＣを使用して着手した。適切な場合は、周囲温度および相対湿度のサンプル（参照サンプル／「０日」）を、多様な温度および相対湿度で保存されたサンプル（比較サンプル）と比較した。

微粉の無水の形態の式（Ｉ）の化合物は、ジェットミル微粉化装置（１．５ｂａｒ）（細川アルパインにより製造された）を使用して調製した。粒子径分布はレーザー回折（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ機器）を使用して測定した。微粉の無水の形態の式（Ｉ）の化合物は、以下の粒子径分布すなわち１．４０μｍのＤ１０；２．７７μｍのＤ５０および５．２９μｍのＤ９０を有した。

試験された保存条件は、ＲＴ ＜５％ＲＨ、ＲＴ ５６％ＲＨ、ＲＴ ７５％ＲＨ、５０℃および４０℃ ７５％ＲＨで４週であった。ＸＲＰＤおよびＩＲデータは８０℃で１週後にもまた取得した。

固体の結晶性水和物の形態
ＴＧＡ：参照サンプル（ｔ＝０）および比較サンプル（多様な保存条件に曝露された）を２０℃／ｍｉｎでＲＴから３００℃まで加熱した。参照サンプル（ｔ＝０）のＴＧＡ曲線を図１１に具体的に説明し、また、全サンプルの結果を表３に具体的に説明する。図１１から、１．１％の重量減少が、（２９．３９℃と４４．８２℃の間の第一のピークにより明示されるとおり）遊離溶媒若しくは吸湿水分の蒸発によりＲＴから４５℃までの温度領域で観察されたことが明らかである。１．５％の重量減少が、結合された溶媒の蒸発により４５℃と１９０℃の間で観察され、また、１９０℃より上での重量減少は蒸発および生成物の分解によった。この重量減少プロファイルを表３の比較サンプルのものと比較して、有意の差違は観察されなかった。

ＤＶＳ：参照サンプルのＤＶＳ等温線プロットを図３に具体的に説明し、また、ＤＶＳ質量変化プロットを図４に具体的に説明する。初期乾燥段階の間に、２．２％の重量減少
が登録され、また、得られた乾燥された生成物は吸湿性であることが見出された。該吸湿性生成物は雰囲気湿度に依存して２．１％までの水分を吸着し、そして脱着サイクルの間に完全に乾燥した。吸着／脱着後の得られた生成物をＸＲＰＤおよびＩＲで検討し、そして参照サンプルに匹敵することが見出された。これらのデータは水和物の形態が吸湿性であることを示す。

ＸＲＰＤおよびＩＲ：参照サンプル（ｔ＝０）のＸＰＲＤ回折パターンを図１に具体的に説明し、また、ＩＲトレースを図７に具体的に説明する。この回折パターンおよびＩＲトレースを比較サンプル（多様な保存条件に曝露された）のものと比較し、そして該結果を表３に具体的に説明する。該回折パターンおよびＩＲトレースは大部分のサンプルについて同一若しくは非常に類似したが、しかしながらＸＲＰＤ回折パターンおよびＩＲトレースのいくつかの小さい差違が、５０℃および８０℃の上昇された温度かつ乾燥条件（ＲＴ／＜５％ＲＨ）下で保存後に、参照サンプル（表３で「±Ｒｅｆ」エントリにより明示されるところの）と比較した場合に観察された。これらの同一の小さい差違はＤＶＳ後の参照サンプルのＸＲＰＤパターンおよびＩＲトレースでもまた観察され、５０℃、８０℃およびＲＴ ＜５％ＲＨサンプルで観察された差違が生成物の乾燥によったことを示唆している。

ＤＳＣ：参照サンプル（ｔ＝０）および比較サンプル（多様な保存条件に曝露された）を１０℃／ｍｉｎで２５℃から３００℃まで加熱した。参照サンプルのＤＳＣ曲線を図９に具体的に説明し、また、全サンプルの結果を表３に具体的に説明する。図９から、参照サンプルが、溶媒蒸発による６４．５℃の吸熱シグナルを伴い約１８３．５℃で分解を伴って融解したことが明らかである。

要約すると、該水和物が良好な物理的安定性を有することが明らかである。該生成物は吸湿性であるようであり、そして乾燥条件下で若干の水分喪失を経験する。しかしながら該結晶の形態は水分喪失および水分獲得に対し安定であるようである。

固体の結晶性の無水の形態（微粉化されない）
ＴＧＡ（表４および図１２）：参照サンプルおよび比較サンプルを２０℃／ｍｉｎで室温から３００℃まで加熱した。参照サンプル（ｔ＝０）のＴＧＡ曲線を図１２に具体的に説明し、また、全サンプルの結果を表４に具体的に説明する。図１２から、参照サンプル
について、０．２％の重量減少が、遊離溶媒および／若しくは吸湿水分の蒸発により室温から１００℃までの温度領域で観察されたことが明らかである。０．４％の重量減少が、おそらく蒸発および生成物の分解により１００℃と２００℃の間で観察された。この重量減少プロファイルを比較サンプルのものと比較して、０．７％および０．９％というより低い重量減少％が発生したＲＴ／＜５％ＲＨという乾燥条件下で差違が観察された。

ＤＶＳ：参照サンプルのＤＶＳ等温線プロットを図５に具体的に説明し、また、ＤＶＳ質量変化プロットを図６に具体的に説明する。初期乾燥段階の間に０．１％の重量減少が登録された。得られた乾燥された生成物は吸湿性の挙動を表さず、そして試験の間同一の固体状態の形態に留まった。

ＸＲＰＤおよびＩＲ：参照サンプルのＸＰＲＤ回折パターンを図２に具体的に説明し、また、ＩＲトレースを図８に具体的に説明する。この回折パターンおよびＩＲトレースを比較サンプルのものと比較し、そして該結果を表４に具体的に説明する。該回折パターンおよびＩＲトレースは全サンプルについて同一であることが見出され、多様な条件下での保存後に固体状態の変化が発生しなかったことを示す。

ＤＳＣ：参照サンプルおよび比較サンプルを１０℃／ｍｉｎで２５℃から２５０℃まで加熱した。参照サンプルのＤＳＣ曲線を図１０に具体的に説明し、また、全サンプルの結果を表４に具体的に説明する。図１０から、参照サンプルが約１８７．０℃で（可能な分解を伴い）融解したことが明らかである。参照サンプルのＤＳＣデータを比較サンプルのデータと比較して、該保存条件が該物質の融点を変えていないことが明らかである。

要約すると、固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物が全部の検討された条件下で物理的に安定であったことが明らかである。

固体の結晶性の無水の形態（微粉）
ＴＧＡ：参照サンプルおよび比較サンプルを２０℃／ｍｉｎで室温から３００℃まで加熱し、そして全サンプルの結果を表５に具体的に説明する。

ＤＶＳ：参照サンプルのＤＶＳ等温線プロットを図１３に具体的に説明する。初期乾燥段階の間に０．１％の重量減少が登録された。生成物はわずかに吸湿性であることが観察され、雰囲気条件に依存して０．９％までの水分を吸着した。脱着サイクルの間に該生成物は完全に乾燥したことが見出された。

ＸＲＰＤおよびＩＲ：参照サンプルの回折パターンおよびＩＲトレースを比較サンプルのものと比較し、そして結果を表５に具体的に説明する。該回折パターンおよびＩＲトレ
ースは全サンプルについて同一であることが見出され、多様な条件下での保存後に固体状態の変化が発生しなかったことを示す。

ＤＳＣ：参照サンプルおよび比較サンプルを１０℃／ｍｉｎで２５℃から２５０℃まで加熱した。全サンプルの結果を表５に具体的に説明する。参照サンプルのＤＳＣ曲線は約１８６℃で生成物の融解（可能な分解を伴う）を示した。追加の（ｅｘｔｒａ）発熱シグナルが、おそらく無定形物質の再結晶化若しくは粉砕の間に生成されたサンプル中に存在する結晶アーチファクトにより、約１２４℃で観察された。

要約すると、微粉の形態の固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物は、全部の検討された条件下で物理的に安定であったことが明らかであるとは言え、それはわずかに吸湿性である。

固体の結晶性水和物および固体の結晶性の無水の形態（無水の形態−微粉化されないおよび微粉）の式（Ｉ）の化合物のＨＰＬＣ分析
固体の結晶性水和物の形態および固体の結晶性の無水の形態（微粉化されないおよび微粉の双方の無水の形態）の式（Ｉ）の化合物の化学的安定性を、周囲温度および相対湿度のサンプル（参照サンプル）を多様な温度および相対湿度で保存されたサンプル（比較サンプル）と比較することにより確認した。サンプルは表６、７および８に示されるとおり１、４若しくは８週間多様な条件下で保存した。サンプルをその後、一般的手順の方法を使用するＨＰＬＣによりおよび目視検査により分析した。

水和物の形態
表６に提供されるデータから、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物は化学的に安定であるとは言え、光に対する若干の感受性が観察されたことが明らかである。

無水の形態（微粉化されない）
表７に提供されるデータから、無水の形態の式（Ｉ）の化合物は光に感受性であることが明らかである。ＩＣＨ光中で０．３日間保存後、分解生成物がＲＲＴ １．１２およびＲＲＴ １．２４に観察された。

無水の形態（微粉）
表８から、微粉の形態の無水の形態の式（Ｉ）の化合物は光に感受性であることが明らかである。ＩＣＨ光中で０．３日間保存後、分解生成物がＲＲＴ １．１２に観察された。

ＨＰＬＣ研究は、水和物および無水の形態（微粉化されないおよび微粉の双方）の式（Ｉ）の化合物の化学的安定性が比較可能であるとは言え、全部の形態が光に対し若干の感受性を示すことを示している。

乳糖を伴う水和物の形態および乳糖を伴う無水の形態の式（Ｉ）の化合物のＸＲＰＤ／ＩＲ分析
乳糖を伴う水和物の形態の式（Ｉ）の化合物および乳糖を伴う無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物の混合物（各場合で５０％／５０％）を、乳糖源としてＬａｃｔｏＨａｌｅ^(R)（ＤＯＭＯ^(R)／Ｆｒｉｅｓｌａｎｄｆｏｏｄｓにより供給される）を使用して調製した。該混合物を多様な温度および湿度下で保存し、そして時間０ならびに１週および４週保存後にＸＲＰＤおよびＩＲにより分析した。１および４週安定性サンプルのＩＲスペクトルおよびＸＲＰＤパターンを、時間０で生成されたＩＲスペクトルおよびＸＲＰＤパターンと比較した。

固体の結晶性水和物
ブレンド調製法：約２５０ｍｇの水和物の形態の式（Ｉ）の化合物および２５０ｍｇのＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)を、乳棒およびプラスチック製ブレード（Ｆｅｔｏｎ）を使用して５分間混合される前にメノウ製乳鉢に添加した。物理的ブレンドをねじ蓋付き（閉鎖）および蓋なし（開放）１０ｍＬ褐色ガラス製フラスコに充填した。以下の保存条件を使用した。すなわち
８０℃：１週閉鎖；
５０℃：１および４週閉鎖；
４０℃／７５％ＲＨ：１および４週開放。

固体の結晶性水和物の形態の乳糖とのブレンドのサンプルの参照ＩＲスペクトルを図１４に示す。ＩＲスペクトルは多様な保存条件後に取得した。１および４週安定性サンプルのＩＲスペクトルと時間０のＩＲスペクトルの間に差違は観察されなかった。水和物の形態と乳糖の間の相互作用は観察されず、また、水和物の形態は全部の保存条件下で安定のままであった。

固体の結晶性水和物の形態の乳糖とのブレンドのサンプルの参照ＸＲＰＤパターンを図１５に示す。ＸＲＰＤパターンは多様な保存条件後に取得した。１および４週安定性サンプルの生成されたＸＲＰＤパターンは時間０の回折パターンと同様であった。水和物の形
態の典型的な回折ピークがＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)の存在下で変わらなかったことが明白に見ることができ、水和物の形態が乳糖の存在下で物理的に安定であることを示す。

ＩＲスペクトルは水和物の形態と乳糖の間の相互作用を示さず、また、ＸＲＰＤの結果は、水和物の形態の固体状態の転化が存在しなかったことを示した。であるから、水和物の形態は乳糖と物理的に適合性であると結論づけうる。

固体の結晶性の無水の形態
ブレンド調製法：約５００ｍｇの無水の式（Ｉ）の化合物（微粉）および５００ｍｇのＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)を、乳棒およびプラスチック製ブレード（Ｆｅｔｏｎ）を使用して５分間混合される前にメノウ製乳鉢に添加した。物理的ブレンドをねじ蓋付き（閉鎖）および蓋なし（開放）１０ｍＬ褐色ガラス製フラスコに充填した。以下の保存条件を使用した。すなわち
８０℃：１週閉鎖；
５０℃：１および４週閉鎖；
４０℃／７５％ＲＨ：１および４週開放。

固体の結晶性の無水の形態（微粉）の乳糖とのブレンドのサンプルの参照ＩＲスペクトルを図１６に示す。ＩＲスペクトルは多様な保存条件後に取得した。１および４週安定性サンプルのＩＲスペクトルと時間０のＩＲスペクトルの間に差違は観察されなかった。無水の形態と乳糖の間の相互作用は観察されず、また、無水の形態は全部の保存条件下で安定のままであった。

固体の結晶性の無水の形態（微粉）の乳糖とのブレンドのサンプルの参照ＸＲＰＤパターンを図１７に示す。ＸＲＰＤパターンは多様な保存条件後に取得した。１および４週安定性サンプルの生成されたＸＲＰＤパターンは時間０の回折パターンと同様である。無水の形態の典型的な回折ピークがＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)の存在下で変わらなかったことが明白に見ることができ、無水の形態が乳糖の存在下で物理的に安定であることを示す。

ＩＲスペクトルは無水の形態と乳糖の間の相互作用を示さず、また、ＸＲＰＤの結果は、無水の形態の固体状態の転化が存在しなかったことを示した。であるから、無水の形態は乳糖と物理的に適合性であると結論づけうる。

乳糖を伴う固体の結晶性水和物の形態および乳糖を伴う固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物のＨＰＬＣ分析
乳糖と組合せの水和物の形態および無水の形態の式（Ｉ）の化合物の化学的適合性をＨＰＬＣ分析により確認した。

水和物
ブレンド調製法：２ｍｇの水和物の形態および２ｍｇのＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)を、乳棒およびプラスチック製ブレード（Ｆｅｔｏｎ）を使用して５分間混合される前にメノウ製乳鉢に添加した。Ｌａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)のさらなるアリコート（４ｍｇで開始する）を該ブレンドに混合して、該混合物が合計６０００ｍｇのＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)を含有するまで該混合物の容量を毎回倍加した。

該混合物を時間０および多様な保存条件後にＨＰＬＣにより分析した。サンプルは以下の条件すなわち（ｉ）５０℃で１、２および３週（ｉｉ）８０℃で１週（ｉｉｉ）４０℃
／７５％ＲＨで１、２および３週下で保存した。表９から、水和物の形態の式（Ｉ）の化合物が乳糖と組合せで３週間まで安定であることが明らかであり、それらの化学的適合性を示す。

無水（微粉）
微粉の無水の形態の式（Ｉ）の化合物を実施例４に記述されるとおり製造した。

試験バッチを、３．５１９ｍｇの無水の形態の式（Ｉ）の化合物（微粉）および６００６．６４ｍｇのＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)を含有するストックから採取した。

該混合物を時間０および多様な保存条件後にＨＰＬＣにより分析した。サンプルは以下の条件すなわち（ｉ）５０℃で１、２、３および４週（ｉｉ）８０℃で１週（ｉｉｉ）４０℃／７５％ＲＨで１、２、３および４週下で保存した。

表１０は、有意の分解が８０℃で１週間保存後に観察され、また、分解が５０℃という上昇された温度で保存後にもまた観察されたことを示す。これらの結果は、無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物が乳糖と組合せで化学的に安定でないことを示唆し、従って該２成分は製薬学的製剤中で適合性でないとみられる。

ＲＲＴ ０．８６のピークは上で示された水和された誘導体（１種若しくは複数）Ｄ０１９３２８に帰された。

乳糖およびステアリン酸マグネシウムを伴う固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物のＸＲＰＤ／ＩＲ分析
固体の結晶性の無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物の乳糖との混合物を、１％ステアリン酸マグネシウムの添加を伴い調製した。該混合物を多様な温度および湿度下で保存し、そして時間０ならびに１週および４週保存後にＸＲＰＤおよびＩＲにより分析した。

ブレンド調製法：約５００ｍｇのＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)および約１０ｍｇのステアリン酸マグネシウムを、乳棒およびプラスチック製ブレード（Ｆｅｔｏｎ）を使用して５分間混合される前にメノウ製乳鉢に添加した。約５００ｍｇの無水の式（Ｉ）の化合物（微粉）を該混合物に添加し、そしてブレンドをさらなる５分間混合した。ブレンドのサンプルをその後、実施例６に記述される多様な条件下で保存した。

乳糖およびステアリン酸マグネシウムとの固体の結晶性の無水の形態（微粉）のブレンドサンプルの参照ＩＲスペクトルを図１８に示す。ＩＲスペクトルは多様な保存条件後に取得した。１および４週安定性サンプルのＩＲスペクトルと時間０でのＩＲスペクトルの間に差違は観察されなかった。無水の形態；乳糖およびステアリン酸マグネシウムの間の相互作用は観察されず、また、無水の形態は全部の保存条件下で安定のままであった。

乳糖およびステアリン酸マグネシウムとの固体の結晶性の無水の形態（微粉）のブレンドのサンプルの参照ＸＲＰＤパターンを図１９に示す。ＸＲＰＤパターンは多様な保存条件後に取得した。１および４週安定性サンプルの生成されたＸＲＰＤパターンは時間０での回折パターンと同様であった。無水の形態の典型的な回折ピークはＬａｃｔｏｈａｌｅ２００^(R)およびステアリン酸マグネシウムの存在下で変わらなかったことが明らかに見ることができ、無水の形態が乳糖およびステアリン酸マグネシウムの存在下で物理的に安定であることを示した。

ＩＲスペクトルは無水の形態、乳糖およびステアリン酸マグネシウムの間の相互作用を示さず、また、ＸＲＰＤの結果は無水の形態の固体状態の転化が存在しなかったことを示した。であるから、該無水の形態は乳糖およびステアリン酸マグネシウムと物理的に適合性であると結論しうる。

乳糖およびステアリン酸マグネシウムを伴う無水の形態の式（Ｉ）の化合物のＨＰＬＣ分
析
乳糖および１％ステアリン酸マグネシウムと組合せの固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物の化学的適合性をＨＰＬＣ分析により確認した。

試験バッチは、３．７０４ｍｇの無水の形態の式（Ｉ）の化合物（微粉）、６０１７．９０ｍｇのＬａｃｔｏｈａｌｅ２００および６７．３３ｍｇのステアリン酸マグネシウムを含有するストックから採取した。

表１１に示されるデータは、８０℃で１週間保存後に観察された少量の分解のみにより明示されるところのステアリン酸マグネシウムの非存在下での同一組成物（表２を参照されたい）と比較された化学的安定性の有意の増大を示す（例えばＲＲＴ ０．８６、０．２８％を参照されたい）。これらの結果は、乳糖を伴う無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物の化学的安定性が、該組成物へのステアリン酸マグネシウムの添加により大きく改良されることを示唆する。であるから、ステアリン酸マグネシウムの添加は、それらが製薬学的製剤中で適合性であり得るような、乳糖と組合せの無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物の化学的適合性を改良する。

乳糖およびステアリン酸の金属塩を伴う無水の形態の式（Ｉ）の化合物のＵＰＬＣ分析
乳糖および１％のステアリン酸の金属塩（ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウムおよびステアリン酸カルシウム）と組合せの固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物（微粉）の化学的適合性を、ＵＰＬＣ分析により確認した（実施例４に記述されるところの式（Ｉ）の化合物の微粉化）。

試験サンプルは下の表１２に記述されるとおり調製した。すなわち

サンプルをバイアルに分注し、蓋で封止しかつ８０℃で１若しくは２週間保管した。

サンプル１は１週試験に使用し、また、サンプル２は２週試験に使用した。

結果を下の表１３に示す。すなわち

質量分析の分析は、ＲＲＴ ０．８７をもつ物質がＤ０１９４９３でありかつＲＲＴ ０．９２をもつ物質がＤ０１９４９２であることを示す（ＮＭＲにより確認される）（スキーム１を参照されたい）。Ｄ０１９４９２のＮＭＲ共鳴帰属を表１４に示す。すなわち

表１３に示されるデータは、８０℃で１若しくは２週間保存後に観察される比較的少量の分解により明示されるところの、ステアリン酸の金属塩の非存在下での同一組成物と比較されたステアリン酸の金属塩を含有する製剤の化学的安定性の有意の増大を示す。これらの結果は、乳糖を伴う無水の形態の式（Ｉ）の化合物の化学的安定性が該組成物へのステアリン酸の金属塩の添加により大きく改良されることを示唆する。従って、ステアリン酸の金属塩の添加は、それらが製薬学的製剤中で適合性であり得るような、乳糖と組合せの無水の形態の式（Ｉ）の化合物の化学的適合性を改良する。

本発明の製薬学的製剤の製造
本発明の例示的一製薬学的製剤は、０．５ｗｔ．％の式（Ｉ）の化合物（固体の結晶性の無水の形態、微粉）、９８．５ｗｔ．％の乳糖一水和物（吸入等級）および１．０ｗｔ．％のステアリン酸マグネシウムよりなり、ここで全成分のｗｔ．％は乾燥製薬学的製剤の重量に基づく。

実施例に開示される結果の要約
固体の結晶性の無水および水和物の形態の式（Ｉ）の化合物が同定された。

ＴＧＡ、ＤＶＳ、ＸＲＰＤ、ＩＲおよびＤＳＣ研究から、固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物（微粉化されないおよび微粉の双方の形態の）ならびに固体の結晶性水和物の形態が双方とも安定であることが明らかであるとは言え、水和物の形態は、見たところその結晶構造への影響を伴わず乾燥条件下で若干の水を喪失する傾向を有する。水和物および無水の形態の式（Ｉ）の化合物の化学的安定性は比較可能である。

固体の結晶性水和物および無水の形態を乳糖とのそれらの化学的適合性について試験した場合、双方の形態は物理的に適合性であることが見出されたとは言え、化学的分解が乳糖の存在下で固体の結晶性の無水の形態について観察された。

しかしながら、固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物および乳糖の組合せへのステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム若しくはステアリン酸ナトリウム（ステアリン酸の金属塩の例）の添加は、驚くことに、化学的分解を有意に低下させることが見出された。であるから、固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物、乳糖およびステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩を含んでなる製薬学的製剤は、良好な物理的および化学的安定性を有する。

特許および特許出願を包含する本出願で言及される全部の参考文献は、可能な完全な程
度まで引用することにより本明細書に組み込まれる。

本明細および後に続く請求の範囲を通じ、文脈が別の方法で要求しない限り、「含んでなる（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という語、ならびに「含んでなる（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでなること（ｃｏｍｐｉｒｉｓｉｎｇ）」のような変形は、述べられる整数、段階、整数の群若しくは段階の群の包含を意味しているがしかしいかなる他の整数、段階、整数の群若しくは段階の群の除外も意味していないことが理解されるであろう。

表１１に示されるデータは、８０℃で１週間保存後に観察された少量の分解のみにより明示されるところのステアリン酸マグネシウムの非存在下での同一組成物（表１０を参照されたい）と比較された化学的安定性の有意の増大を示す（例えばＲＲＴ ０．８６、０．２８％を参照されたい）。これらの結果は、乳糖を伴う無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物の化学的安定性が、該組成物へのステアリン酸マグネシウムの添加により大きく改良されることを示唆する。であるから、ステアリン酸マグネシウムの添加は、それらが製薬学的製剤中で適合性であり得るような、乳糖と組合せの無水の形態（微粉）の式（Ｉ）の化合物の化学的適合性を改良する。

本明細および後に続く請求の範囲を通じ、文脈が別の方法で要求しない限り、「含んでなる（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という語、ならびに「含んでなる（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含んでなること（ｃｏｍｐｉｒｉｓｉｎｇ）」のような変形は、述べられる整数、段階、整数の群若しくは段階の群の包含を意味しているがしかしいかなる他の整数、段階、整数の群若しくは段階の群の除外も意味していないことが理解されるであろう。
以下に、本発明の主な特徴と態様を列挙する。
１． 固体の結晶性の無水の形態の６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミドである、式（Ｉ）の化合物
２． 固体の結晶性の水和物の形態の６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミドである、式（Ｉ）の化合物
３． 式（Ｉ）の化合物が、実質的に図２に示されるところのＸ線粉末回折パターンを有する固体の結晶の形態にある、１項に記載の化合物。
４． 式（Ｉ）の化合物が、（±０．２）１７．６、１８．４、２２．５および２４．２°２θから選択される１、２、３若しくは４個のピークを含有するＸ線粉末回折パターンを有する固体の結晶の形態にある、１項に記載の化合物。
５． 式（Ｉ）の化合物が、実質的に図１に示されるところのＸ線粉末回折パターンを有する固体の結晶の形態にある、２項に記載の化合物。
６． 式（Ｉ）の化合物が、（±０．２）９．６、１３．３、１３．９、１７．０、１８．９、２０．３および２３．１°２θから選択される１、２、３、４、５、６若しくは７個のピークを含有するＸ線粉末回折パターンを有する固体の結晶の形態にある、２項に記載の化合物。
７． 医薬品としての使用のための１ないし６項のいずれか１つに記載の化合物。
８． １種若しくはそれ以上の製薬学的に許容できる希釈剤若しくは担体と混合状態の、１ないし７項のいずれか１つに記載の化合物を含んでなる製薬学的組成物。
９． 希釈剤若しくは担体として乳糖（例えば ]−乳糖一水和物）を含有する、８項に記載の製薬学的組成物。
１０． ステアリン酸の金属塩およびフマル酸ステアリルの金属塩から選択される安定化剤を含有する、８若しくは９項に記載の製薬学的組成物。
１１． 安定化剤がステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩である、１０項に記載の製薬学的組成物。
１２． 微粉の形態の式（Ｉ）の化合物を含んでなる、８ないし１１項のいずれか１つに記載の製薬学的組成物。
１３． ＣＯＰＤ（慢性気管支炎および肺気腫を包含する）、小児喘息を包含する喘息、嚢胞性線維症、サルコイドーシス、特発性肺線維症、悪液質
から選択される状態の処置若しくは予防、ならびに非小細胞肺癌を包含する肺腫瘍の増殖および転移の阻害での使用のための１ないし７項のいずれか１つに記載の化合物若しくは８ないし１２項のいずれか１つに記載の製薬学的製剤。
１４． ＣＯＰＤ（慢性気管支炎および肺気腫を包含する）、小児喘息を包含する喘息、嚢胞性線維症、サルコイドーシス、特発性肺線維症、悪液質
から選択される状態の処置若しくは予防、ならびに非小細胞肺癌を包含する肺腫瘍の増殖および転移の阻害のための医薬品の製造における１ないし７項のいずれか１つに記載の化合物若しくは８ないし１２項のいずれか１つに記載の製薬学的製剤の使用。
１５． １ないし７項のいずれか１つに記載の化合物若しくは８ないし１２項のいずれか１つに記載の製薬学的製剤の有効量を被験体に投与することを含んでなる、ＣＯＰＤ（慢性気管支炎および肺気腫を包含する）、小児喘息を包含する喘息、嚢胞性線維症、サルコイドーシス、特発性肺線維症、悪液質
から選択される状態の処置、ならびに非小細胞肺癌を包含する肺腫瘍の増殖および転移の阻害の方法。
１６． 式（Ｉ）の化合物を無水１−プロパノールから結晶化する段階を含んでなる、１、３若しくは４項のいずれか１つに記載の固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物の製造方法。
１７． 結晶化段階が上昇された温度から冷却することを必要とする、１６項に記載の方法。
１８． 式（Ｉ）の化合物を場合によってはメタノールとの混合物中でジクロロメタンから結晶化する段階を含んでなる、２、５若しくは６項のいずれか１つに記載の固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物の製造方法。
１９． １若しくはそれ以上の用量の８ないし１２項のいずれか１つに記載の製薬学的製剤を含んでなる吸入装置。

Claims (19)

1. 固体の結晶性の無水の形態の６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミドである、式（Ｉ）の化合物
   
2. 固体の結晶性の水和物の形態の６−（２−（（４−アミノ−３−（３−ヒドロキシフェニル）−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−１−イル）メチル）−３−（２−クロロベンジル）−４−オキソ−３，４−ジヒドロキナゾリン−５−イル）−Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）ヘキス−５−インアミドである、式（Ｉ）の化合物
   
3. 式（Ｉ）の化合物が、実質的に図２に示されるところのＸ線粉末回折パターンを有する固体の結晶の形態にある、請求項１に記載の化合物。
4. 式（Ｉ）の化合物が、（±０．２）１７．６、１８．４、２２．５および２４．２°２θから選択される１、２、３若しくは４個のピークを含有するＸ線粉末回折パターンを有する固体の結晶の形態にある、請求項１に記載の化合物。
5. 式（Ｉ）の化合物が、実質的に図１に示されるところのＸ線粉末回折パターンを有する
   固体の結晶の形態にある、請求項２に記載の化合物。
6. 式（Ｉ）の化合物が、（±０．２）９．６、１３．３、１３．９、１７．０、１８．９、２０．３および２３．１°２θから選択される１、２、３、４、５、６若しくは７個のピークを含有するＸ線粉末回折パターンを有する固体の結晶の形態にある、請求項２に記載の化合物。
7. 医薬品としての使用のための請求項１ないし６のいずれか１つに記載の化合物。
8. １種若しくはそれ以上の製薬学的に許容できる希釈剤若しくは担体と混合状態の、請求項１ないし７のいずれか１つに記載の化合物を含んでなる製薬学的組成物。
9. 希釈剤若しくは担体として乳糖（例えば ]−乳糖一水和物）を含有する、請求項８に記載の製薬学的組成物。
10. ステアリン酸の金属塩およびフマル酸ステアリルの金属塩から選択される安定化剤を含有する、請求項８若しくは９に記載の製薬学的組成物。
11. 安定化剤がステアリン酸マグネシウムのようなステアリン酸の金属塩である、請求項１０に記載の製薬学的組成物。
12. 微粉の形態の式（Ｉ）の化合物を含んでなる、請求項８ないし１１のいずれか１つに記載の製薬学的組成物。
13. ＣＯＰＤ（慢性気管支炎および肺気腫を包含する）、小児喘息を包含する喘息、嚢胞性線維症、サルコイドーシス、特発性肺線維症、悪液質
    から選択される状態の処置若しくは予防、ならびに非小細胞肺癌を包含する肺腫瘍の増殖および転移の阻害での使用のための請求項１ないし７のいずれか１つに記載の化合物若しくは請求項８ないし１２のいずれか１つに記載の製薬学的製剤。
14. ＣＯＰＤ（慢性気管支炎および肺気腫を包含する）、小児喘息を包含する喘息、嚢胞性線維症、サルコイドーシス、特発性肺線維症、悪液質
    から選択される状態の処置若しくは予防、ならびに非小細胞肺癌を包含する肺腫瘍の増殖および転移の阻害のための医薬品の製造における請求項１ないし７のいずれか１つに記載の化合物若しくは請求項８ないし１２のいずれか１つに記載の製薬学的製剤の使用。
15. 請求項１ないし７のいずれか１つに記載の化合物若しくは請求項８ないし１２のいずれか１つに記載の製薬学的製剤の有効量を被験体に投与することを含んでなる、ＣＯＰＤ（慢性気管支炎および肺気腫を包含する）、小児喘息を包含する喘息、嚢胞性線維症、サルコイドーシス、特発性肺線維症、悪液質
    から選択される状態の処置、ならびに非小細胞肺癌を包含する肺腫瘍の増殖および転移の阻害の方法。
16. 式（Ｉ）の化合物を無水１−プロパノールから結晶化する段階を含んでなる、請求項１、３若しくは４のいずれか１つに記載の固体の結晶性の無水の形態の式（Ｉ）の化合物の製造方法。
17. 結晶化段階が上昇された温度から冷却することを必要とする、請求項１６に記載の方法。
18. 式（Ｉ）の化合物を場合によってはメタノールとの混合物中でジクロロメタンから結晶化する段階を含んでなる、請求項２、５若しくは６のいずれか１つに記載の固体の結晶性水和物の形態の式（Ｉ）の化合物の製造方法。
19. １若しくはそれ以上の用量の請求項８ないし１２のいずれか１つに記載の製薬学的製剤を含んでなる吸入装置。