JP2007039397A - ビール酵母で発酵させたアルコール飲料からコラーゲン産生促進作用を有する組成物を製造する方法及びその組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 炭酸ガスを除去する第1の工程と、アルコールを除去する第2の工程と、多糖及びタンパク質を除去する第3の工程と、イオン交換樹脂により精製する第4の工程とを備える、ビール酵母で発酵させたアルコール飲料からコラーゲン産生促進作用を有する組成物を製造する方法。
【選択図】 なし
Description
原料として20Lの市販ビールを使用した。まずビールを撹拌し炭酸ガスを発生させ除去した。次に、減圧濃縮機(柴田科学、R−250など)を用い、アルコールを除去するとともにビールを濃縮した。濃縮により可溶化できなくなって澱となった高分子の多糖及びタンパク質を除去した後、1.8Lの濃縮液を得た。濃縮液を5Lに希釈するとともに、pHを5.0に調整した後、陰イオン交換樹脂(三菱化学ダイヤイオン(登録商標)WA21J)を用いて、空間速度10L/hrで処理した後、陽イオン交換樹脂(三菱化学ダイヤイオン(登録商標)WK40)で処理した。得られた処理液を固形物が5%になるように濃度を調整し、同時にpHを6.5に調整した。フェノキシエタノールなどの防腐剤を所定量添加し、0.2μmのろ過膜により無菌ろ過を行い、最終的に7Lの無色透明の液体を得た。以下、この液体をビール抽出物と称する。
直径35mmの細胞培養用プラスチックシャーレに、10%FBSを含むDMEM培地2mL、ヒト由来正常線維芽細胞を4×105個/シャーレで添加し、5%CO2濃度、37℃で24時間培養した。細胞がコンフルエントになったのを確認後、細胞をリン酸緩衝液で十分に洗浄し、所定濃度(v/v)のビール抽出物を含む無血清DMEM培地を添加して72時間培養した。細胞の産生するコラーゲン量は、タカラバイオメディカル製PIP EIA Kitを用いて、培養上清中のコラーゲン量を測定することにより測定した。ビール抽出物を加えないものをコントロールとした。測定の結果を表2に示す。
直径35mmの細胞培養用プラスチックシャーレに、10%FBSを含むDMEM培地2mL、ヒト由来正常線維芽細胞を1.5×105個/シャーレで添加し、5%CO2濃度、37℃で24時間培養した。細胞の伸展と定着を確認した後、培地を捨て、細胞をリン酸緩衝液で3回洗浄し、所定濃度(v/v)のビール抽出物を含む10%FBS入りDMEM培地を添加してさらに48時間培養した。トリプシン−EDTA処理により細胞を剥離し、細胞数を血球計算盤により計測した。結果を表3に示す。
直径35mmの細胞培養用プラスチックシャーレに、10%FBSを含むDMEM培地2mL、ヒト由来正常線維芽細胞を1.5×105個/シャーレで添加し、5%CO2濃度、37℃で7日間培養した。細胞がコンフルエントになったのを確認後、細胞をリン酸緩衝液又はビール抽出物を1%含むリン酸緩衝液で2mL×3回で洗浄した。細胞に乾燥負荷を与えるために、シャーレの蓋を取り、5%CO2濃度、37℃で、95%以上の湿度で一定時間乾燥処理した。乾燥処理後、生細胞数をMTTアッセイ法により測定した。生細胞数比を(生細胞数比=ビール抽出物含有リン酸緩衝液処理の生細胞数/リン酸緩衝液処理の生細胞数)の式により計算した。結果を表4に示す。
表面積25cm2の細胞培養用ボトルに10%FBSを含むDMEM培地10mL、メラニン生産細胞であるB16細胞の懸濁液(2.5×104個/mL、10%FBSを含むDMEM培地)1mLを添加し、CO2濃度5%、37℃で24時間培養した。所定濃度(v/v)のビール抽出物を含む10%FBS入りDMEM培地を添加して、3日間培養した後、同量の培地及び試料を取り換え、更に3日間培養した。トリプシン−EDTA処理により細胞を剥離し、得られた細胞を1000ppmで1分間遠心分離して、上澄みを取り除いた後、細胞の色相を観察した。コウジ酸を0.01%(v/v)添加したものをポジティブコントロールとし、試料を加えないものをコントロールとした。結果を表5に示す。
表6の処方に従い、(1)〜(10)の原料を80℃で混合撹拌し、溶解後室温に冷却し、化粧水を得た。得られた化粧水はいずれも清澄であり、かつ40℃、RH75%の条件下に3か月間保存しても白濁を生じることなく安定であった。
1.かさつく
2.ややかさつく
3.普通
4.ややしっとりする
5.しっとりする
(2) 肌の滑らかさ
1 ざらつく
2 ややざらつく
3 普通
4 やや滑らか
5 滑らか
(3) 肌のべたつき
1 べたつく
2 ややべたつく
3 普通
4 ややさっぱり
5 さっぱり
表8の処方に従い、(1)〜(8)の原料を70℃で混合撹拌し、室温まで冷却させてシャンプー剤を得た。
表9に示す処方に従い、(1)〜(7)の原料を80℃で混合撹拌したものに、別途(8)〜(12)の原料を80℃で混合攪拌したものを加え、ホモジナイズし、攪拌しながら室温まで冷却し、クリーム剤を得た。
表10の処方に従い、(1)〜(8)の原料を混合撹拌し、溶解する。
表11に示す処方に従い、(1)及び(2)の原料を80℃混合撹拌したものに、別途(3)〜(13)の原料を80℃で混合撹拌したものを加え、80℃で混合攪拌しながら(14)及び(15)の原料をさらに添加し混合攪拌し、室温まで冷却し、ヘアパック剤を得た。
Claims (8)
- ビール酵母で発酵させたアルコール飲料からコラーゲン産生促進作用を有する組成物を製造する方法であって、
炭酸ガスを除去する第1の工程と、
アルコールを除去する第2の工程と、
多糖及びタンパク質を除去する第3の工程と、
イオン交換樹脂により精製する第4の工程と
を備えることを特徴とする製造方法。 - 前記ビール酵母で発酵させたアルコール飲料が、ビール、発泡酒及びビール様アルコール飲料からなる群より選択される少なくとも1つのアルコール飲料であることを特徴とする請求項1に記載の製造方法。
- 前記第1の工程が、アルコール飲料の撹拌により行われることを特徴とする請求項1又は2に記載の製造方法。
- 前記第2の工程及び第3の工程が、減圧濃縮により同時に行われることを特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載の製造方法。
- 前記第4の工程が、陰イオン交換樹脂及び陽イオン交換樹脂による精製であることを特徴とする請求項1〜4のいずれか1項に記載の製造方法。
- 請求項1〜5のいずれか1項に記載の方法により得られる組成物。
- 請求項6に記載の組成物を含む化粧品。
- 請求項6に記載の組成物を含む育毛剤。
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