FR3156325A1

FR3156325A1 - Indole et ses utilisations en cosmétique

Info

Publication number: FR3156325A1
Application number: FR2313650A
Authority: FR
Inventors: Sylvie Bun; Cécile CLAVAUD; Roger Rozot; Gabriel Ahmad KHODR
Original assignee: LOreal SA
Current assignee: LOreal SA
Priority date: 2023-12-06
Filing date: 2023-12-06
Publication date: 2025-06-13
Also published as: WO2025120089A1

Abstract

Indole et ses utilisations en cosmétique La présente invention concerne l’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates et/ou isomères pour le soin des matières kératiniques, en particulier de la peau, de préférence pour améliorer les signes cutanés du vieillissement. La présente invention concerne l’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates et/ou isomères comme actif anti-âge. Elle concerne également une composition cosmétique qui comprend au moins un tel composé ou d’un de ses sels, et/ou solvates et/ou isomères. Figure pour l'abrégé : néant

Description

Indole et ses utilisations en cosmétique

La présente invention concerne l’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates et/ou isomères pour le soin des matières kératiniques, en particulier de la peau, de préférence pour améliorer les signes cutanés du vieillissement.

La présente invention concerne l’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates et/ou isomères comme actif anti-âge.

Elle concerne également une composition cosmétique qui comprend au moins un tel composé ou d’un de ses sels, et/ou solvates et/ou isomères.

La couche externe de la peau, l'épiderme, est stratifiée et composée principalement de trois types de cellules qui sont les kératinocytes, très majoritaires, les mélanocytes et les cellules de Langerhans. Chacun de ces types cellulaires contribue par ses fonctions propres au rôle essentiel joué dans l'organisme par la peau, notamment le rôle de protection de l'organisme vis-à-vis des agressions extérieures (climat, rayons ultraviolets, tabac, pollution...).

Les altérations associées au vieillissement cutané peuvent se manifester de différentes manières, parmi lesquelles on peut citer :

- un microrelief caractérisé notamment par l'apparition de fines rides ou ridules, ou encore par la présence de pores visibles en densité importante, par une rugosité altérant l’aspect de surface de la peau ;

- la perte d'éclat, ce qui entraîne une hétérogénéité du teint ;

- une perte d'élasticité, de souplesse, de fermeté, de densité, de tonicité de la peau, un affaissement et/ou un flétrissement de la peau ;

- un ralentissement du renouvellement épidermique entrainant un amincissement de la couche cornée de la peau et un aspect papyracé de la peau ; et

- la sécheresse cutanée résultant d'une diminution de la fonction barrière de la couche cornée de la peau.

Parmi les actifs antiâges disponibles, le rétinol est unanimement connu pour être efficace sur les signes du vieillissement cutané, et ainsi, utilisé pour traiter un large éventail de problèmes de peau, notamment les rides et ridules, et plus généralement pour améliorer l’éclat.

Cependant l’utilisation du rétinol peut être limitée par son instabilité, sa sensibilité à l’oxydation, à la lumière, à la chaleur, mais aussi sa dégradation spontanée dans le temps. L’instabilité du rétinol requiert ainsi des précautions particulières pour une bonne formulation et une bonne utilisation.

Il existe donc un besoin de fournir de nouveaux actifs efficaces sur les signes du vieillissement cutané, stables et plus faciles à formuler.

La présente invention répond à ce besoin. En effet, comme démontré notamment en exemple, la Demanderesse a identifié que le composé de formule (I) est efficace pour stimuler la prolifération cellulaire et le renouvellement cellulaire épidermique.

La présente invention concerne ainsi l’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères :

(I)

dans laquelle

R1, R2, R3, R4, désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical alkyle C1-C4, de préférence R1 à R4 sont identiques et de préférence désignent un atome d’hydrogène ;
R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8, ledit radical monovalent hydrocarboné étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi -OH et/ou -NH₂;
R7 et R8 désignent indépendamment un atome d’hydrogène; un radical alkyle C1-C4 éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy tel que méthyle, ou R7 et R8 forment ensemble avec l’atome de carbone qui les porte un hétérocycle de 3 à 8 chainons, de préférence de 5 ou 6 chainons, ledit hétérocycle étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy;

pour le soin des matières kératiniques, en particulier de la peau.

La présente invention concerne également à l’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères comme actif anti-âge.

La présente invention se rapporte également à un procédé de traitement cosmétique de soin des matières kératiniques, de préférence la peau, comprenant l’application sur les matières kératiniques, de préférence la peau, plus préférentiellement la peau présentant des signes cutanés du vieillissement, d’une composition cosmétique comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un composé de formule (I) ou l’un de leurs sels, et/ou solvates, et/ou isomères.

La présente invention se rapporte également à une composition cosmétique comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable au moins un composé de formule (I) ou l’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères.

Définitions

On entend par «matières kératiniques» la peau du corps ou du visage, les lèvres, les muqueuses, les cils, les ongles, et les cheveux, d’un être humain.

Par «la peau», on entend l’ensemble de la peau du corps et le cuir chevelu d’un être humain et de manière préférée, la peau du visage, du décolleté, du cou, des bras et avant-bras, des mains voire de manière plus préférée encore, la peau du visage (en particulier du front, nez, joues, lèvres, menton), du décolleté et du cou.

Par « solvate », on entend, le mélange d’un composé de formule (I) avec une ou plusieurs molécules d'eau ou de solvant organique.

Par « isomère », on entend notamment les isomères optiques ou tout isomère de position, ou tout isomère géométrique d’un composé de formule (I).

On entend par « radical monovalent hydrocarboné insaturé » radical monovalent hydrocarboné insaturé comprenant au moins une insaturation de préférence éthylénique conjuguée ou non de préférence comprenant une insaturation éthylénique.

On entend par «sel» d’un composé de formule (I) selon l’invention un sel formé par un acide inorganique ou organique.

Comme exemples de sels d’acide, on peut citer les sels sulfate, citrate, acétate, oxalate, chlorure, bromure, iodure, nitrate, bisulfate, phosphate, isonicotinate, lactate, salicylate, citrate, tartrate, l’oléate, tannate, pantothenate, bitartrate, ascorbate, succinate, maléate, gentisinate, fumarate, gluconate, glucuronate, saccharate, formate, benzoate, glutamate, méthanesulfonate, éthanesulfonate, benzènesulfonate, p-toluènesulfonate et pamoate (i.e. 1,1’-methylene-bis-(2-hydroxy-3-naphthoate).

Description détaillée

(I)

dans laquelle

pour le soin des matières kératiniques, en particulier de la peau.

De préférence R1, R2, R3, R4, sont identiques et désignent un atome d’hydrogène.

De préférence R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8, ledit radical monovalent hydrocarboné étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi -OH. Plus préférentiellement, R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8. Encore plus préférentiellement, R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C6, mieux C1-C4, linéaire ou ramifié, saturé, substitué par un radical -CO-NR7R8.

De préférence R5 et/ou R6 désigne un atome d’hydrogène.

De préférence, R7 et R8 désignent indépendamment un atome d’hydrogène; un radical alkyle C1-C4 éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy tel que méthyle; plus préférentiellement R7 et R8 désignent un atome d’hydrogène.

De préférence, R7 et R8 forment ensemble avec l’atome de carbone qui les porte un hétérocycle de 3 à 8 chainons de préférence de 5 ou 6 chainons, ledit hétérocycle étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy.

Selon un mode de réalisation particulier, R5 désigne un atome d’hydrogène et R6 désigne un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8, ledit radical monovalent hydrocarboné étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi -OH et/ou -NH₂.

Selon un autre mode de réalisation R6 désigne un atome d’hydrogène et R5 désigne un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8, ledit radical monovalent hydrocarboné étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi -OH et/ou -NH₂.

Selon un mode de réalisation préféré,

R1, R2, R3, R4, sont identiques et désignent un atome d’hydrogène ;
R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C6, mieux C1-C4, linéaire ou ramifié, saturé, substitué par un radical -CO-NR7R8 ; de préférence R6 désigne un atome d’hydrogène ; et
R7 et R8 désignent indépendamment un atome d’hydrogène; un radical alkyle C1-C4 éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy tel que méthyle ; plus préférentiellement R7 et R8 désignent un atome d’hydrogène.

Selon un mode de réalisation particulièrement préféré, le ou les composés de formule (I) sont choisis parmi les composés de formule (IA) et (IB) ainsi que sels, et/ou solvates, et/ou isomères:

(IA)

ou

(IB).

La présente invention concerne en particulier l’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères, pour améliorer les signes cutanés du vieillissement.

La présente invention concerne également l’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères, comme actif antiâge.

Tel que susmentionné le composé de formule (I) est en particulier choisi parmi les composés de structure (IA) ou (IB) ainsi que leurs sels, et/ou solvates, et/ou isomères:

(IA)

ou

(IB).

Le composé (IA) est également connu sous le nom d’indole et peut être identifié par le numéro CAS suivant : CAS 120-72-9.

Le composé (IB) est également connu sous le nom d’indole-3-acétamide et peut être identifié par le numéro CAS suivant : CAS 879-37-8.

Ces composés (IA) et/ou (IB) sont disponibles commercialement.

Au sens de la présente invention et sauf indication contraire on entend par composé de formule (I) un composé de formule (I) ainsi que l’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères.

L’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) vise le soin des matières kératiniques et en particulier de la peau.

Plus particulièrement, l’utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères selon l’invention vise à améliorer les signes cutanés du vieillissement. De préférence, le composé de formule (I) selon l’invention, est utilisé comme actif antiâge.

Toutes les utilisations selon l’invention sont cosmétiques, i.e. non-thérapeutiques.

Tel que susmentionné, la présente invention vise à améliorer les signes cutanés du vieillissement.

Par « améliorer les signes cutanés du vieillissement », on entend notamment prévenir et/ou réduire les signes cutanés du vieillissement.

Par « signes cutanés du vieillissement », on entend toutes les modifications de l'aspect extérieur de la peau dues au vieillissement.

Les signes cutanés du vieillissement visés par l’invention peuvent être choisis parmi une apparition d’un microrelief de la peau, une formation et/ou une présence de fines rides ou ridules, une apparition de rugosité, une altération de l’aspect de surface de la peau, une altération de l’éclat du teint de la peau, une hétérogénéité du teint, une perte d'élasticité, une perte de souplesse, une perte de fermeté, une perte de densité, ou une perte de tonicité de la peau, un affaissement et/ou un flétrissement de la peau, un amincissement de la couche cornée de la peau et un aspect papyracé de la peau, une sécheresse cutanée. De manière préférée, les signes cutanés du vieillissement visés par l’invention sont choisis parmi l’apparition d’un microrelief de la peau, la formation et/ou la présence de fines rides ou ridules, l’apparition de rugosité, l’altération de l’aspect de surface de la peau, l’amincissement de la couche cornée de la peau et l’aspect papyracé de la peau, une sécheresse cutanée.

De manière préférée encore, les signes cutanés du vieillissement visés par l’invention sont choisis parmi l’apparition d’un microrelief de la peau, la formation et/ou la présence de fines rides, ridules, l’apparition de rugosité, l’altération de l’aspect de surface de la peau, l’amincissement de la couche cornée de la peau, une sécheresse cutanée.

La peau est notamment la peau d’un mammifère, de préférence humain. De préférence, la peau est âgée. Par « peau âgée », on entend un état esthétique général de la peau résultant du vieillissement.

De préférence, le ou les composés de formule (I) selon l’invention, est(sont) utilisé(s) en une quantité comprise entre 0,0001 et 10%de préférence entre 0,001% et 5%, plus préférentiellement entre 0,002% et 1%.

La présente invention a également pour objet un procédé de traitement cosmétique (non-thérapeutique) comprenant l’application sur la peau, d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères selon l’invention. En particulier, ledit procédé est un procédé cosmétique de soin des matières kératiniques, en particulier de la peau. Ledit procédé comprend donc au moins une étape d’application topique sur la peau dudit ou desdits composés.

La présente invention a également pour objet une composition cosmétique comprenant au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères, dans un milieu physiologiquement acceptable.

Par "milieu physiologiquement acceptable", on entend désigner un milieu compatible avec les matières kératiniques, en particulier la peau. Le milieu physiologiquement acceptable est généralement adapté à la nature du support sur lequel doit être appliquée la composition, ainsi qu'à la forme sous laquelle la composition doit être conditionnée.

Le milieu physiologiquement acceptable de la composition mise en œuvre est avantageusement un milieu aqueux.

Il peut par exemple être constitué par de l'eau ou par un mélange d'eau et d'au moins un solvant organique physiologiquement acceptable.

Selon un mode de réalisation préféré, les compositions de l’invention comprennent au moins 20% en poids d’eau, en particulier au moins 40% en poids d’eau par rapport au poids total de ladite composition.

Préférentiellement, la composition selon l’invention présente une teneur en eau allant de 20% à 95% en poids, encore mieux de 40% à 90% en poids par rapport au poids total de la composition.

Comme solvants organiques utilisables dans la composition de l’invention on peut citer les solvants organiques miscibles dans l’eau.

Par « solvant miscible dans l’eau » selon la présente invention, on entend désigner un composé liquide à température ambiante et miscible à l’eau ayant notamment une miscibilité dans l’eau supérieure à 50 % en poids à 25 °C et pression atmosphérique.

A titre de solvant organique, on peut par exemple citer les alcools en (C2-C4) tels que l'éthanol et l'isopropanol ; les polyols, notamment ceux ayant de 2 à 6 atomes de carbones comme la glycérine, le propylène glycol, le butylène glycol, le pentylène glycol, l'hexylène glycol, le dipropylène glycol, le diéthylène glycol; les éthers de polyols comme le 2-butoxyéthanol, le monométhyléther de propylèneglycol, le monoéthyléther et le monométhyléther du diéthylèneglycol; et leurs mélanges.

Le(s) solvant(s) organique(s) miscible(s) à l'eau peu(ven)t être présent(s) en une concentration de 0,01 % à 30 % en poids, de préférence de 0,1 % à 20 % en poids et plus préférablement, de 1 % à 10 % en poids, par rapport au poids total de la composition.

En particulier, la composition cosmétique selon l’invention comprend en outre au moins un adjuvant cosmétique.

Ainsi, de préférence, la composition selon l'invention comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un composé de formule (I), peut en outre comprendre un ou plusieurs adjuvants cosmétiques usuels, notamment choisis parmi les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les actifs cosmétiques tels que les actifs anti-âge différents du composé de formule (I), les corps gras tels que les huiles, les émulsionnants, les antioxydants, les vitamines, les parfums, les charges, les filtres solaires, les absorbeurs d’odeur, les actifs desquamants, les actifs hydratants, les émollients, et les matières colorantes, et leurs mélanges.

Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés, et par exemple de 0,01 à 80 % du poids total de la composition. Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse ou dans la phase aqueuse. Ces adjuvants, ainsi que leurs concentrations, doivent être tels qu’ils ne nuisent pas aux propriétés avantageuses du composé de formule (I).

Dans le cadre de la présente invention, lesdits actifs cosmétiques sont préférentiellement choisis parmi les actifs cosmétiques anti-âge différents du composé de formule (I).

De préférence, la composition cosmétique présente un pH compris entre 6 et 8, préférentiellement entre 6,5 et 7,5, encore plus préférentiellement aux environs de 7.

De préférence, la composition selon l’invention comprend le ou les composés de formule (I) selon l’invention, en une quantité comprise entre 0,0001 et 10%, de préférence entre 0,001% et 5%, plus préférentiellement entre 0,002% et 1%.

Comme huiles utilisables dans la composition de l’invention, on peut citer par exemple :

- les huiles hydrocarbonées d'origine animale ;

- les huiles hydrocarbonées d’origine végétale ;

- les esters et les éthers de synthèse, notamment d'acides gras, comme les huiles de formules R1COOR2 et R1OR2 dans laquelle R1 représente le reste d’un acide gras comportant de 8 à 29 atomes de carbone, et R2 représente une chaîne hydrocarbonée, ramifiée ou non, contenant de 3 à 30 atomes de carbone ;

- les hydrocarbures linéaires ou ramifiés, d’origine minérale ou synthétique ;

- les alcools gras ayant de 8 à 26 atomes de carbone ;

- les huiles fluorées partiellement hydrocarbonées et/ou siliconées ;

- les huiles de silicone ;

- leurs mélanges.

On entend par huile, tout corps gras sous forme liquide à température ambiante (20-25°C) et à pression atmosphérique. Ces huiles peuvent être d’origine végétale, minérale ou synthétique.

On entend par huile hydrocarbonée dans la liste des huiles citées ci-dessus, toute huile comportant majoritairement des atomes de carbone et d'hydrogène, et éventuellement des groupements ester, éther, fluoré, acide carboxylique et/ou alcool.

Les autres corps gras pouvant être présents dans la phase huileuse sont par exemple les acides gras comportant de 8 à 30 atomes de carbone ; les cires ; les résines de silicone ; et les élastomères de silicone.

Ces corps gras peuvent être choisis de manière variée par l'homme du métier afin de préparer une composition ayant les propriétés, par exemple de consistance ou de texture, souhaitées.

Selon un mode particulier de réalisation de l'invention, la composition utilisée dans le cadre de l’invention est une émulsion eau-dans-huile (E/H) ou huile-dans-eau (H/E). La proportion de la phase huileuse de l'émulsion peut aller de 5 à 90 % en poids, et de préférence de 5 à 60 % en poids par rapport au poids total de la composition.

La composition peut comprendre au moins un émulsionnant. Les émulsions contiennent généralement au moins un émulsionnant choisi parmi les émulsionnants amphotères, anioniques, cationiques ou non ioniques, utilisés seuls ou en mélange, et éventuellement un coémulsionnant. Les émulsionnants sont choisis de manière appropriée suivant l'émulsion à obtenir (E/H ou H/E). L'émulsionnant et le co-émulsionnant sont généralement présents dans la composition, en une proportion allant de 0,3 à 30 % en poids, et de préférence de 0,5 à 20 % en poids par rapport au poids total de la composition.

Comme matière colorante, on peut citer les pigments et/ou les nacres.

Une composition utilisée selon l'invention comprend notamment au moins un composé de formule (I) décrit ci-dessus ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères et peut se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées dans le domaine cosmétique.

Elle peut être notamment sous forme d’une composition anhydre, d'une solution aqueuse, hydroalcoolique, éventuellement gélifiée, d'une dispersion du type lotion éventuellement biphasée, d'une émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple, d'un gel aqueux, d'une dispersion d’huiles dans une phase aqueuse, notamment à l’aide de sphérules, ces sphérules pouvant être des particules polymériques ou mieux, des vésicules lipidiques de type ionique et/ou non-ionique, ou bien encore sous la forme d’une poudre, d’un sérum, d’une pâte ou d’un bâtonnet souple ou encore d’un stick. Elle peut être de consistance solide, pâteuse, ou liquide plus ou moins fluide. Elle peut être éventuellement appliquée sur la peau sous forme d'aérosol. Elle peut aussi se présenter sous forme solide, et par exemple sous forme de stick.

Ainsi, la composition peut comprendre tous les constituants usuellement employés dans l'application et l’administration par voie topique envisagées.

Une composition selon l’invention peut avantageusement se présenter sous forme d’une émulsion, notamment obtenue par dispersion d'une phase aqueuse dans une phase grasse (E/H) ou d'une phase grasse dans une phase aqueuse (H/E), de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, ou de consistance molle, semi-solide ou solide du type crème ou gel, ou encore d’émulsion multiple (E/H/E ou H/E/H). Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles.

Ledit ou lesdits composés de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères, ou ladite composition les contenant sont mis en œuvre, dans le cadre d’une utilisation ou d’un procédé selon l’invention, par voie topique.

Les compositions selon l'invention pourront être appliquées directement sur la peau ou, de façon alternative, sur des supports cosmétiques de type occlusif ou non occlusif, destinés à être appliqués de façon localisée sur la peau. A titre d'exemples de supports cosmétiques, non limitatifs, on peut notamment citer un patch, une lingette, un roll-on et un stylo.

La composition peut être rincée ou non après avoir été appliquée sur la peau.

L’invention est maintenant illustrée par les exemples suivants.

Exemples

L’indole utilisé est fourni par Sigma-Aldrich, réf. I3408, CAS 120-72-9, pureté supérieure ou égale à 99%, et correspond à la formule (IA) mentionnée dans le cadre de la présente invention.

L’indole-3-acétamide utilisé est fourni par Sigma-Aldrich, réf. 286281, CAS 879-37-8, pureté 98%, et correspond à la formule (IB) mentionnée dans le cadre de la présente invention.

Exemple 1 : Test de prolifération épidermique Principe :

Le but de cette étude est d’évaluer le potentiel de l’indole et de l’indole-3-acétamide à moduler l’expression d’un gène impliqué dans la physiologie des kératinocytes épidermique normaux humains en particulier le renouvellement épidermique tel que la prolifération épidermique, par RT-PCR quantitative.

L’indole est évalué à 0.1 g/L (soit 0,01 %) dans le DMSO.

L’indole-3-acétamide est évalué à 0,17 g/L (soit 0,017 %) dans le DMSO.

L’indole et l’indole-3-acétamide sont comparés à l’acide rétinoïque à 10-7 M (soit 3.10-5 g/L) dans le DMSO.

Le marqueur le plus significatif étudié est le gène de renouvellement épidermique HBEGF (Heparin-binding EGF-like growth factor, Gene ID n° 1839). HBEGF est un facteur de croissance qui se lie au récepteur EGF et stimule la croissance des cellules épithéliales. Il a été montré que les effets de l'acide rétinoïque sur l'hyperplasie (in vitro et in vivo) sont médiés par une augmentation de l'expression de ce facteur (Retinoid-Induced Epidermal Hyperplasia Is Mediated by Epidermal Growth Factor Receptor Activation Via Specific Induction of its Ligands Heparin-Binding EGF and Amphiregulin in Human Skin In Vivo. Rittié L.et al.2006. Journal of Investigative Dermatology, Vol 126, Issue 4, 732-739). Le gène de ménage GAPDH sert de gènes de normalisation des résultats.

Protocole (conditions expérimentales) : Cytotoxicité

Des kératinocytes humains normaux ont été ensemencés dans des plaques à 96 puits et cultivés pendant 24 heures en dosage moyen. Le milieu de culture a ensuite été remplacé par du milieu de culture contenant ou non (témoin) les composés testés. Après 72 heures d'incubation, la viabilité cellulaire était mesurée selon une mesure standard de l'activité mitochondriale à l'aide du MTT.

Expression des transcrits dans les kératinocytes humains

Des kératinocytes épidermiques humains ont été ensemencés en plaque de culture à 24 puits et cultivés pendant 72 heures à 37°C et 5% de CO2 en milieu de culture avec renouvellement du milieu de culture après les premières 24 heures. A la fin de l'incubation, le milieu de culture a été remplacé par du milieu de dosage (complété de 1,5 mM de CaCl2) contenant ou non (témoin) de la matière première ou de référence (acide rétinoïque) et des cellules ont été incubés pendant 24 autres.

Toutes les conditions expérimentales ont été réalisées en n=2. A la fin du traitement, les cellules ont été lavées deux fois dans du PBS (sans CaCl2, sans MgCl2) et l'extraction de l'ARN a été réalisée à l'aide de TriPure Isolation Reagent® selon les recommandations du fabricant. L'expression relative des marqueurs sélectionnés a été mesurée par deux étapes RT-qPCR.

Dans un premier temps, une transcription inverse a été réalisée à l'aide du Transcriptor Reverse Transcriptase (ROCHE) selon la recommandation du fabricant. Ensuite, des expériences de PCR ont été effectuées à l'aide d'un système PCR en temps réel LightCycler® 480 par un système de mesure SYBR®Green incorporation (Roche).

Résultats et conclusions :

Les résultats sont exprimés en facteur de modulation (Fc, fold change) par rapport au témoin non traité après normalisation des expressions relatives par rapport à l’expression d’un gène de ménage (GAPDH). La valeur Fc du gène ménage GAPDH est donc égale à 1. L’expression d’un gène est considérée comme stimulée lorsqu’elle est multipliée au minimum par 1,5.

Effets de l’indole et de l’indole-3-acétamide sur l’expression du gène HBEGF impliqué dans la physiologie des kératinocytes épidermique normaux humains. Le gène constitutif GAPDH sert de gène de normalisation.

		Acide rétinoïque (ref R2625, Sigma, CAS 302-79-4)	Indole (ref I3408, Sigma, CAS 120-72-9)	Indole-3-acetamide (ref 286281, Sigma, CAS 879-37-8)
GENE


	1,00E-07	1,00E-01 g/L	0,17 g/L soit 0,017%
	M	soit 0,01%
Appartenance du gène	symbole du gène	DMSO	DMSO	DMSO
Renouvellement épidermique	HBEGF	2,64	3,59	3,57
Gène de ménage	GAPDH	1,01	0,97	1,00

L’acide rétinoïque, testé à 10^-7M (soit 3.10-5 g/L), augmente significativement (Fc = 2,64) l’expression du marqueur HBEGF impliqué dans le renouvellement épidermique (Rittiéet al.2006). Ce résultat était attendu et valide le dosage.

L’indole, testé à 0.1 g/L, augmente aussi significativement (Fc = 3,59) l’expression du marqueur HBEGF impliqué dans le renouvellement épidermique.

L’indole-3-acétamide, testé à 0.17 g/L, augmente aussi significativement (Fc = 3,57) l’expression du marqueur HBEGF impliqué dans le renouvellement épidermique.

Ce s résultat s montre nt que l’indole et l’indole-3-acétamide sont efficace s pour améliorer le renouvellement épidermique.

Exemple 2 : Test fonctionnel de renouvellement épidermique en modèle reconstruit

Principe :

Le but de cette étude est d’évaluer l’efficacité de l’indole, en condition systémique, à stimuler le renouvellement épidermique en modulant l’épaisseur et/ou la qualité histologique d’un modèle reconstruit 3D de tissu épidermique entre 10 et 14, ou 10 et 17 jours de maturation.

L’indole est évalué à 30 et 100 µg/mL (soit 0.03 et 0.10 g/L) dans le DMSO.

L’indole est comparé au Rétinol à 3 µM (soit 8.6.10-4 g/L) dans le DMSO.

Protocoles (conditions expérimentales):

Le test d'évaluation de l'épaisseur épidermique est réalisé pour évaluer l'efficacité des matières premières, en application systémique, sur la reconstruction de l'épiderme dans le modèle 3D in vitro SkinEthic RHE® pendant 4 ou 7 jours. Les effets des actifs sont déterminés par une évaluation de la qualité de l'épiderme reconstruit basée sur son épaisseur et sa morphologie.

Matériels

Matériel classique pour tests biologiques (pipettes, tubes, …)
Plaques 6 puits
Matériel de Tomographie en cohérence optique avec le logiciel Newtone® (acquisition EPISKIN et traitement EpiSkin RHEV2)
Matériel classique pour étude histologique (fixation d'échantillons…)
Plaques Depp à 96 puits de 2 ml (si tests de biochimie analytique)

Réactifs

Milieu de culture RHE (SGM)
Rétinol
DMSO
Formaldéhyde
Réactif de coloration pour HE

Modèle biologique

Les expériences sont réalisées sur le modèle épidermique reconstruit SkinEthic RHE®.

Les tissus sont reçus sur milieu à J10 et conservés à 37°C (95% d'humidité et 5% de dioxyde de carbone) jusqu'à la fin des traitements à J14 ou J17.

MÉTHODE D'ESSAI RH3E Solubilisation

Pour les composés solubilisés dans le DMSO, les solutions 1000X sont d'abord vortexées pendant 1 minute et conservées à température ambiante.

Pour les composés solubilisés dans l’eau, les solutions 10X sont préparées de la même manière dans les milieux.

L'aspect solubilité est évalué visuellement.

Les solutions sont ensuite diluées dans un milieu pour obtenir la solution 1X finale etconservées à 4°C.

Traitement

Les traitements systémiques sont réalisés à J10, J12 et la récolte à J14 (Protocole Court terme).

Les tissus sont cultivés avec 2 ml de solution de traitement (matière première (MP) dans un milieu SGM) dans une plaque à 6 puits et conservés à 37°C (95 % d'humidité et 5 % de dioxyde de carbone) entre les traitements.

Pour toutes les conditions, les MP (Matières Premières) sont testées en triple (n = 3).

Pour les MP d'intérêt, si aucune toxicité et bonne qualité histologique ne sont observées à J14, il est possible de traiter les tissus à J14 avec 3mL de solution de traitement et de récolter à J17 en protocole long terme.

Viabilité

Aucune étude de viabilité spécifique n’est réalisée dans ce test. La viabilité cellulaire est suivie lors du premier traitement par une analyse histologique qui permet de vérifier la capacité du tissu à générer un épiderme de bonne qualité.

Acquisition et analyse OCT

L'OCT (Optical Coherence Tomography) est une technique d'imagerie non invasive, basée sur l'analyse de la lumière infrarouge réfléchie par les tissus et sur la création d'un signal d’interférence.

L'OCT permet de visualiser les aspects de surface, les structures 2D du modèle RHE® sont suivies lors de la reconstruction épidermique.

Cela permet également de déterminer, par acquisition et segmentation avec les algorithmes Newtone®, l'épaisseur épidermique du tissu après reconstruction.

L'acquisition et l'analyse des images sont effectuées à J10, J12, et J14 dans toutes les conditions testées.

Une variation d'épaisseur au premier jour de traitement est réalisée pour observer l'évolution d'épaisseur pour tous les tissus.

Dans un deuxième temps, les variations d'épaisseur sont rationalisées avec le véhicule (témoin non traité ou DMSO).

Histologie

Une analyse histologique est réalisée sur toutes les conditions testées et sur tous les tissus pour évaluer l'impact du traitement sur la qualité de la reconstruction.

Le processus histologique et la coloration à l’hématoxyline et à l’éosine sont effectués conformément au protocole de la plateforme d'histologie Episkin.

L'analyse de la cytotoxicité du traitement et des qualités histologiques est réalisée et comparée aux conditions non traitées ou du véhicule.

CRITÈRES D'INTERPRÉTATION

Claims

Utilisation cosmétique d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères :

(I)
dans laquelle
R1, R2, R3, R4, désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical alkyle C1-C4, de préférence R1 à R4 sont identiques et de préférence désignent un atome d’hydrogène ;

R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8, ledit radical monovalent hydrocarboné étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi -OH et/ou -NH₂;

R7 et R8 désignent indépendamment un atome d’hydrogène; un radical alkyle C1-C4 éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy tel que méthyle, ou R7 et R8 forment ensemble avec l’atome de carbone qui les porte un hétérocycle de 3 à 8 chainons, de préférence de 5 ou 6 chainons, ledit hétérocycle étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy ;
pour le soin des matières kératiniques, en particulier de la peau.
Utilisation selon la revendication 1 dans laquelle le ou les composés de formule (I) sont caractérisés en ce que:
R1, R2, R3, R4, sont identiques et désignent un atome d’hydrogène ; et/ou

R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8, ledit radical monovalent hydrocarboné étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi –OH, de préférence, R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8, plus préférentiellement, R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C6, mieux C1-C4, linéaire ou ramifié, saturé, substitué par un radical -CO-NR7R8, encore plus préférentiellement R5 et/ou R6 désigne un atome d’hydrogène ; et/ou

R7 et R8 désignent indépendamment un atome d’hydrogène; un radical alkyle C1-C4 éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy tel que méthyle ; de préférence R7 et R8 désignent un atome d’hydrogène ; ou R7 et R8 forment ensemble avec l’atome de carbone qui les porte un hétérocycle de 3 à 8 chainons de préférence de 5 ou 6 chainons, ledit hétérocycle étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy.
Utilisation selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle le ou les composés de formule (I) sont caractérisés en ce que :
R5 désigne un atome d’hydrogène et R6 désigne un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8, ledit radical monovalent hydrocarboné étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi -OH et/ou -NH₂; ou

R6 désigne un atome d’hydrogène et R5 désigne un radical monovalent hydrocarboné C1-C10, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, substitué par au moins un radical -CO-NR7R8, ledit radical monovalent hydrocarboné étant éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux choisis parmi -OH et/ou -NH₂.
Utilisation selon l’une quelconques des revendications précédentes, dans laquelle le ou les composés de formule (I) sont caractérisés en ce que :
R1, R2, R3, R4, sont identiques et désignent un atome d’hydrogène ;

R5 et R6 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ou un radical monovalent hydrocarboné C1-C6, mieux C1-C4, linéaire ou ramifié, saturé, substitué par un radical -CO-NR7R8 ; de préférence R6 désigne un atome d’hydrogène ; et

R7 et R8 désignent indépendamment un atome d’hydrogène ; un radical alkyle C1-C4 éventuellement substitué par un ou plusieurs radicaux hydroxy tel que méthyle ; plus préférentiellement R7 et R8 désignent un atome d’hydrogène.
Utilisation selon l’une quelconques des revendications précédentes, dans laquelle le ou les composés de formule (I) sont choisis parmi les composés de formule (IA) et (IB) ainsi que leurs ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères:
(IA)
ou
(IB).
Utilisation selon l’une quelconques des revendications précédentes, pour améliorer les signes cutanés du vieillissement.
Utilisation selon l’une quelconques des revendications précédentes, comme actif anti-âge.
Utilisation selon l’une quelconques des revendications précédentes, pour prévenir et/ou réduire au moins un signe cutané du vieillissement choisi parmi une apparition d’un microrelief de la peau, une formation et/ou une présence de fines rides ou ridules, une apparition de rugosité, une altération de l’aspect de surface de la peau, une altération de l’éclat du teint de la peau, une hétérogénéité du teint, une perte d'élasticité, une perte de souplesse, une perte de fermeté, une perte de densité, ou une perte de tonicité de la peau, un affaissement et/ou un flétrissement de la peau, un amincissement de la couche cornée de la peau et un aspect papyracé de la peau, une sécheresse cutanée.
Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle le ou les composés de formule (I) est(sont) utilisé(s) en une quantité comprise entre 0,0001 et 10%, de préférence entre 0,001% et 5%, plus préférentiellement entre 0,002% et 1%.
Composition cosmétique comprenant au moins un composé de formule (I) tel que défini dans l’une quelconque des revendications 1 à 5 dans un milieu physiologiquement acceptable.
Composition cosmétique selon la revendication 10, comprenant en outre au moins un adjuvant cosmétique.
Composition cosmétique selon la revendication 11, dans laquelle ledit au moins un adjuvant cosmétique est choisi parmi gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les actifs cosmétiques tels que les actifs anti-âge différents du composé de formule (I), les corps gras tels que les huiles, les émulsionnants, les antioxydants, les vitamines, les parfums, les charges, les filtres solaires, les absorbeurs d’odeur, les actifs desquamants, les actifs hydratants, les émollients, et les matières colorantes, et leurs mélanges.
Composition cosmétique selon la revendication 12, dans laquelle ledit les actifs cosmétiques sont choisis parmi les actifs cosmétiques actif anti-âge.
Composition selon l’une quelconque des revendications 10 à 13, qui présente un pH compris entre 6 et 8, de préférence entre 6,5 et 7,5, plus préférentiellement aux environs de 7.
Procédé de traitement cosmétique, en particulier de soin des matières kératiniques, en particulier de la peau, comprenant l’application sur la peau, d’au moins un composé de formule (I) ou d’un de ses sels, et/ou solvates, et/ou isomères tels que définis selon l’une quelconque des revendications 1 à 5.