FR3034780A1 - Procede d'obtention de culture de cellules de l'algue rouge acrochaetium moniliforme, methode d'obtention d'un extrait de sa biomasse et son utilisation en cosmetique - Google Patents

Abstract

Procédé d'obtention d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille, comprenant les étapes successives suivantes : - Une étape A) de préparation d'un échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires, à partir d'un échantillon de macroalgues prélevé dans le milieu naturel ; - Une étape B) de mise en culture dudit échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires obtenu à l'étape A) dans l'eau de mer additionnée d'au moins une source d'azote, pour obtenir une suspension aqueuse de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille; - Une étape C) de récolte de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille à partir de ladite suspension aqueuse obtenue à l'issue de l'étape B). Extrait glycolique de ladite biomasse, procédé pour sa préparation, son utilisation en cométique et en pharmacie et compositions le renfermant.

Description

1 La présente invention a pour objet un nouvel extrait de biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille, le procédé pour sa préparation ainsi que son utilisation comme actif cosmétique, et les compositions cosmétiques, pharmaceutiques, dermo-pharmaceutiques à usage topique en comprenant. La peau humaine constituant la première image offerte au regard d'autrui, l'amélioration de son aspect est souvent un sujet de préoccupation pour l'être humain. La peau est le reflet soit d'un état de bien-être, souvent associé à une peau nette/éclatante, soit, a contrario, à un état de fatigue et/ou de négligence, souvent associé à une peau grasse/reluisante. La peau grasse est liée à un phénomène biologique appelé hyper-seborrhée ou hyper-sécrétion sébacée, définie comme étant une production anormalement élevée de sébum par la glande sébacée de la peau. Ce sébum, s'écoulant à la surface de la peau, lui confère ainsi cette caractéristique disgracieuse « luisante ». Cette hyperseborrhée est généralement liée à une présence en excès de l'hormone testostérone qui, une fois dans la glande sébacée, est transformée par la 5-alpha réductase en dihydrotestostérone (DHT), qui se lie aux récepteurs présents dans les cellules sébacées et active la synthèse de sébum. L'hyperseborrhée s'accompagne d'une hyperkératinisation folliculaire, caractérisée par une augmentation du nombre de kératinocytes au niveau de l'infundibulum folliculaire, qui provoque une obstruction du canal folliculaire et rend difficile l'écoulement du sébum. Ceci entraine une accumulation du sébum qui est profitable au développement de la bactérie anaérobie Propionibacterium acnes. Cette dernière va entrainer l'apparition d'un phénomène inflammatoire. L'ensemble de ces phénomènes conduit à l'apparition de signes cliniques caractéristiques, tels que des comédons, caractérisant les peaux acnéiques. La peau grasse est ainsi un état précurseur du phénomène de l'acné vulgaris, appelé communément acné, qui est une dermatose inflammatoire chronique du follicule pilo-sébacé exclusivement humaine. Evoluant généralement par poussées, cette pathologie débute le plus souvent à la puberté et cesse à la fin de l'adolescence.

Cependant, même si 85% des jeunes de 12 à 24 ans sont touchés, nécessitant un traitement spécifique et adapté, 12% des femmes et 3% des hommes jusqu'à 44 ans présentent également de l'acné, ou tout du moins une peau grasse à tendance acnéique. La glande sébacée étant annexée au poil (on parle de follicule pilo-sébacé), les phénomènes décrits précédemment peuvent conduire à l'état de cuir chevelu gras et à la formation de signes cliniques visibles caractérisés comme étant des pellicules grasses. Les principes actifs « dermo-purifiants » peuvent ainsi agir sur différents phénomènes : L'hyper-seborrhée via des agents intervenant, entre autre, sur la quantité de DHT Si 0176 3034780 2 L'hyperkératinisation folliculaire via des agents limitant, entre autre, la différenciation kératinocytaire La prolifération de P. acnes via des agents, entre autre, de nature antibactérienne/bactériostatique.

5 La demande internationale publiée sous le numéro VVO 2008/046791 Al divulgue l'utilisation du decanedio1-1,2 comme agent permettant de diminuer la concentration de sébum sur la peau et l'avantage de cette utilisation par rapport à celle d'antibiotiques tels que la tétracycline ou de rétinoïdes tels que le rétinal ou l'acide rétindique, pour obtenir une action dermo-purifiante ou anti-acnéique satisfaisante.

10 Ces différents agents présentent les inconvénients d'être assez stressants pour la peau, induisant des réactions cutanées telles que des sécheresses, ou encore de ne pas être assez efficaces. Les algues sont des organismes photosynthétiques chlorophylliens vivants dans l'eau ou des milieux très humides. Elles peuvent se développer dans l'eau de mer, l'eau 15 douce, l'eau saumâtre, dans des milieux stagnants, battus ou turbulents. Les algues peuvent être unicellulaires ou pluricellulaires, elles peuvent être brunes, vertes ou rouges et sont classées en fonction de caractéristiques d'ordre cytologique et biochimique. Ces organismes jouent un rôle important à l'échelle globale car ils constituent la base des réseaux trophiques et ils sont impliqués dans la production de l'oxygène de l'atmosphère 20 et dans la fixation du dioxyde de carbone. Les macro-algues sont des algues pluricellulaires eucaryotes, le plus souvent visibles à l'oail nu et souvent qualifiées de macrophytes. Elles peuvent se reproduire de manière sexuée ou asexuée ; chez certaines espèces ces deux modes de reproduction se succèdent au cours du cycle de vie. Le cycle de vie peut comprendre une génération, 25 une alternance de deux générations ou de trois générations. On parlera respectivement de cycles monogénétique, digénétique ou trigénétique. En fonction du type de cycle de vie, l'espèce peut se présenter sous forme de gamétophytes, de sporophytes, de carposporophyte ou de tétrasporophyte. Au cours d'un cycle, ces différentes formes de vie peuvent être de mêmes morphologies donc 30 isomorphes, soit de morphologies différentes donc hétéromorphes. La différence de morphologie peut être très significative, rendant impossible le rattachement de deux formes de vie à la même espèce pour une personne non avertie. Cette différence peut également être marquée par la taille de l'algue, une forme de vie peut être macroscopique et une autre forme de vie peut être microscopique. Par exemple 35 le sporophyte d'Undaria pinnatifida mesure près d'un mètre alors que le gamétophyte de cette algue mesure quelques dizaines de micromètres. Si 0176 3034780 3 Il existe environ deux mille espèces d'algues brunes, sept mille espèces algues rouges et mille sept cents espèces d'algues vertes. Les macroalgues mesurent de quelques dizaines de micromètres dans le cas des algues du genre Acrochaetium à une centaine de mètres pour l'espèce Macrocystis 5 pyrifera. La classe des algues rouges, encore appelée Floridéophycée fait partie de l'embranchement des Rhodophytes. La classe des algues rouges Floridéophycée comprend les ordres Acrochaetiales, Acrosymphytales, Ahnfeltiales, Balbianiales, Balliales, Batrachospermales, Bonnemaisoniales, Ceramiales, Colaconematales, 10 Corallinales, Entwisleiales, Florideophyceae incertae sedis, Gelidiales, Gigartinales, Gracilariales, Halymeniales, Hildenbrandiales, Nemaliales, Nemastomatales, Palmariales, Peyssonneliales, Pihiellales, Plocamiales, Rhodachlyales, Rhodogorgonales, Rhodymeniales, Sebdeniales, Sporolithales, et Thoreales. Les algues rouges contiennent des pigments rencontrés chez les autres végétaux, 15 tels de la chlorophylle a et des caroténoïdes, mais leur originalité consiste dans la présence de phycobiliprotéines : l'allophycocyanine (bleu),la phycocyanine (bleu) et la phycoérythrine qui donne la couleur rouge. L'organisation des chloroplastes différencie les algues rouges des Glaucophytes et des Cyanobactéries. La pigmentation de l'algue rouge dépend en partie de la longueur d'onde de la 20 lumière qui atteint l'algue. En profondeur, les algues rouges accumulent une grande quantité de phycoérythrine, pigment qui peut absorber la lumière à cette profondeur. En surface, le ratio du pigment rouge diminue, par rapport à la chlorophylle et aux autre phycobiliprotéines, elles deviennent plus vertes malgré leur appellation ; on parle d'adaptation chromatique.

25 La demande brevet chinois publiée sous le numéro ON 102475664 A divulgue une composition cosmétique contenant des fibres d'algues pour le réglage de sébum ou de contraction des pores. Les algues rouges Gelidium et Palmaria sont les plus décrites pour une utilisation en tant qu'agent régulateur de la condition de peau grasse. C'est ainsi que la demande de 30 brevet japonais publiée sous le numéro P2005-47910 A, divulgue l'utilisation de différentes algues rouges, par exemple Gelidium amansii, Gelidium japonica et Palmaria palmata, pour leur propriété inhibitrice de la sécrétion de sébum, en cosmétique, en alimentaire ou comme médicament. La demande de brevet chinois publiée sous le numéro ON 102525864 A divulgue quant à elle l'utilisation d'un peptide provenant de 35 fruits de mer, couplé à des polysaccharides algaux issus de Gelidium amansii, ainsi qu'a une poudre de perle en tant qu'agent actif anti-acné. La demande de brevet coréen publiée sous le numéro 2007 089309 divulgue une méthode de préparation d'un Si 0176 3034780 4 concentré de Gedium amansfi, afin d'obtenir un oligosaccharide d'une taille moléculaire particulière, ayant des propriétés antimicrobiennes, anti-oxydantes et anti-cancer. Cependant, les algues rouges des ordres Gelidiales et Palmariales, ne sont pas connues uniquement pour leurs propriétés dermo-purifiantes. La demande de brevet 5 coréen publiée sous le numéro 10 1409764 A divulgue l'utilisation d'un extrait de Gedium amansfi ayant subi un processus de fermentation lactique comme ingrédients antirides, utilisable en cosmétique et en nutrition. La demande de brevet français publiée sous le numéro 2 911 278, divulgue l'utilisation d'un extrait de Palmaria palmata riche en sucre comme actif cosmétique dépigmentant.

10 Parmi les dix mille espèces différentes de macroalgues, une centaine d'entre elles seulement présentent aujourd'hui un intérêt économique. C'est ainsi que certaines macroalgues alimentaires, algues productrices d'hydrocolloïdes et algues productrices de molécules à activité biologique ont fait l'objet de recherche extensive pour mieux comprendre leur physiologie, leur métabolisme et leur reproduction.

15 Les algues utilisées en alimentation humaine comme Undaria pinnatifida plus connue sous le nom de VVakame, Laminaria japonica également dénommée Kombu, Porphyra yezoensis aussi dénommée Non i et Enteromorpha intestines aussi dénommée Ao Non i ont été étudiées pour maitriser leur culture. Les hydrocolloïdes produits par les algues comme Chondrus crispus, 20 Kappaphycus spp. et Eucheuma denticulatum sont principalement utilisés comme épaississants et gélifiants dans les produits alimentaires et cosmétiques. Les biomasses produisant ces polymères présentent un intérêt économique certain [Ronelie C. et al. Non-enzymatic isolation of somatic cells from Kappaphycus spp. and Eucheuma denticulatum (Solieriaceae, Rhodophyta). Eur. J. Phycol. (2014), 49(4): 486-492].

25 La culture en bioréacteur de l'algue verte Acrosiphonia coalita, l'algue brune Laminaria saccharina et des algues rouges Agardhiella subulata, Ochtodes secundiramea, Portieria homemannfi a été étudiée dans le but de synthétiser des molécules à activité biologique [Gregory L. Rorrer et al. Production of bioactive metabolites by cell and tissue cultures of marine macroalgae in bioreactor systems. Plant 30 Cell and Tissue Culture for the Production of Food lngredients, edited by Fu et al. Kluwer Academic / Plenum Publishers, New York, 1999]. Certaines d'entre elles sont fondées sur la connaissance et sur la maîtrise du cycle de reproduction de la macroalgue. Par exemple, chez les laminariales on peut observer l'alternance entre un sporophyte diploïde développé en thalle macroscopique et des 35 gamétophytes mâles et femelles haploïdes microscopiques. Les sporophytes matures fertiles produisent des spores nageantes qui se déposent sur un substrat solide et qui donnent naissance à des gamétophytes. L'étude de leur cycle de vie comme celui Si 0176 3034780 5 d'Undaria pinnatifida plus connue sous le nom de VVakame ou de Laminaria japonica appelé Kombu a permis de développer la culture de gamétophytes, forme de vie microscopique de ces algues pour ensemencer des supports sur lesquels se développeront des sporophytes macroscopiques valorisables en alimentation humaine. La 5 culture de ces algues se fait d'abord en laboratoire pour la culture de la forme de vie microscopique et puis dans le milieu naturel pour produire la forme de vie macroscopique qui pourra être consommée. Le développement de la culture du sporophyte des algues brunes de l'ordre des laminariales telles qu'Undaria pinnatifida dans les années 1980 a conduit au 10 développement d'une technique de culture de gamétophyte dite en « free living », qui consisite à récolter des sporophytes matures, provoquer la sporulation, capter les spores, former des gamétophytes puis les cultiver dans le but de créer des gamètes qui, après fécondation, donneront naissance à de nouveaux sporophytes (R. Perez et al., 1984). Le développement de la culture du sporophyte de Laminaria saccharine a aussi 15 nécessité le développement d'une méthode de culture de son gamétophyte, de manière semblable aux cultures d'Undaria pinnatifida [C. Zhi, G. L. Rorrer. Photolithotrophic cultivation of Laminaria saccharina gametophyte cells in a bubble-column bioreactor. Enzyme and Microbial Technology. Volume 18, Issue 4, March 1996, Pages 291-299]. La demande de brevet chinois publiée sous le numéro ON 103858745 A, divulgue 20 le développement de cultures artificielles de Sytosiphon lomentaria en maîtrisant les étapes de différenciation du plasma germinatif de l'algue, pour produire un sporange uniloculaire mature, puis provoquer sa sporulation dans le but d'ensemencer des supports de culture en vue de produire en mer, de la biomasse de Sytosiphon lomentaria macroscopique.

25 La demande brevet chinois publiée sous le numéro ON 103931482 A, divulgue une méthode d'obtention de thalle du gamétophyte de l'algue rouge Porphyra yezoensis, qui est utilisé en alimentation humaine, notamment pour la confection de makis, impliquant d'abord la culture « in vitro » de la phase conchocelis de l'algue afin de produire des conchospores qui se fixeront sur un support de culture pour permettre la 30 croissance de thalles en mer. D'autres méthodes impliquent l'induction de cals à partir d'explants d'algues rouges, lesdits cals entraînant le développement de plantules qui sont ensuite cultivées en bioréacteur. On peut citer dans ce cadre, les travaux de Ronélie et al. [Ronelie C. et al. Non-enzymatic isolation of somatic cells from Kappaphycus spp. and Eucheuma 35 denticulatum (Solieriaceae, Rhodophyta), Eur. J. Phycol. (2014), 49(4): 486-492] ; ceux de J. Munoz [J. Munoz. Use of plant growth regulators in micropropagation of Kappaphycus alvarezii (Doty) in airlift bioreactors. J Appl Phycol (2006) 18:209-218], ou Si 0176 3034780 6 ceux de Maliakal et al. [S. Maliakal, D. Cheney. Halogenated monoterpenes production in regenerated plantlet cultures of Ochtodes secundiramea. J. Phycol. 37, 1010-1019 (2001)]. D'autres méthodes passent par la production de protoplastes à partir d'un thalle 5 dans le but de reformer de nouveaux thalles, en utilisant, comme proposé par Rusig et al. dans le cas d'Enteromorpha intestinalis, algue utilisée en alimentation humaine et animale, un mélange enzymatique contenant de la cellulase et des enzymes d'aplysie permet de digérer la paroi des cellules du thalle de l'algue. Les cellules dont la paroi est digérée s'appelant protoplastes [A Rusig & J. Cosson, Plant regeneration from protoplasts 10 of Enteromorpha intestinalis (Chlorophyta, Ulvophyceae) as seedstock for macroagal culture. Journal of Applied Phycology 13: 103-108, 2001]. Comme les algues pluricellulaires de petites tailles ne sont pas suffisamment abondantes dans la nature pour permettre une récolte dans l'environnement et que leur petite taille rend difficile l'identification des espèces recherchées ainsi que la récolte 15 spécifique d'une espèce donnée, les inventeurs se sont attachés à développer un nouveau procédé permettant l'obtention d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues de pluricellulaires de petite taille, afin de pourvoir en extraire un principe actif utilisable en cosmétique. Ils ont développé un procédé utilisable en bioréacteur, ne nécessitant pas d'avoir 20 des explants axéniques et ne faisant pas intervenir de phytohormones ou d'enzymes. Selon un premier aspect, l'invention a pour objet un procédé d'obtention d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille, comprenant les étapes successives suivantes : - Une étape A) de préparation d'un échantillon unialgal de cellules de macroalgues 25 pluricellulaires, à partir d'un échantillon de macroalgues prélevé dans le milieu naturel ; - Une étape B) de mise en culture dudit échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires obtenu à l'étape A) dans l'eau de mer additionnée d'au moins une source d'azote, pour obtenir une suspension aqueuse de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille; 30 - Une étape C) de récolte de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille à partir de ladite suspension aqueuse obtenue à l'issue de l'étape B). Par macroalgue pluricellulaire de petite taille, on désigne dans le procédé tel que défini ci-dessus, une macroalgue pluricellulaire, mesurant entre 30pm et 3cm et organisée 35 en amas cellulaires. Cette macroalgue pluricellulaire de petite taille se différencie d'une macroalgue pluricellulaire de grande taille car cette dernière mesure entre 5 cm et 20 cm et est organisée de façon tissulaire. Si 0176 3034780 7 Comme échantillon d'une macroalgue prélevé dans le milieu naturel, mis en oeuvre à l'étape A) du procédé tel que défini ci-dessus, on désigne notamment un échantillon prélevé de l'eau de mer, qu'il s'agisse d'un prélèvement d'eau de mer, d'un prélèvement à la surface de substrats solides comme les rochers, le sable, les coquilles, 5 les sédiments ou encore des supports artificiels tels qu'une coque de bateau, un ponton ou une digue ; il peut aussi s'agir d'un prélèvement à la surface ou à l'intérieur d'autres végétaux (épiphyte ou endophyte) comme les algues ou les plantes marines, à la surface ou à l'intérieur d'animaux (épiphyte ou endophyte) comme les éponges, les cnidaires, les procordés, les échinodermes, les mollusques, les arthropodes, les annélides, ou les 10 vertébrés marins. L'échantillon de macroalgues prélevé dans le milieu naturel, mis en oeuvre à l'étape A) du procédé tel que défini ci-dessus, est généralement très riche en biodiversité et contient une vaste sélection d'organismes vivants tels que des petits animaux, des protozoaires, des microalgues procaryotes, des microalgues eucaryotes et des 15 macroalgues pluricellulaires. Par échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires, on entend dans le procédé tel que défini ci-dessus, une culture ne contenant qu'une seule espèce d'algues pluricellulaires. Selon l'étape A) du procédé tel que défini ci-dessus, l'échantillon unialgal de 20 cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille est obtenu en isolant les macroalgues visées des autres organismes l'algue visée. A cet effet, on peut mettre en oeuvre des moyens de séparation physiques et/ou des moyens de séparation chimiques. Comme moyen de séparation physique, il y a par exemple la séparation effectuée à l'aide d'une pipette en verre en utilisant l'extrémité du capillaire pour découper quelques 25 cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille visées, en contrôlant l'opération visuellement, sous microscope ou sous loupe binoculaire. Il y a aussi la séparation par dilution successive des cellules de l'espèce visée de l'échantillon naturel. Comme moyen de séparation chimique, il y a par exemple l'utilisation, d'antibiotiques pour éliminer des microalgues du type cyanobactéries, ou celle du dioxyde 30 de germanium pour éliminer des microalgues du type diatomée. Les différents moyens d'isolement sont combinés pour obtenir le meilleur résultat d'isolement possible. Toutes les méthodes d'isolement, physiques et chimiques, sont réalisées dans des réceptacles translucides laissant passer la lumière, contenant de l'eau de mer stérile, contenant au moins une source d'azote telle que le nitrate de sodium 35 (NaNO3) à une concentration comprise entre 50mg/dm3 et 250mg/dm3 avec une préférence pour 150mg/dm3 et une source de phosphore telle que le dihydrogénophosphate de sodium (NaH2PO4) à une concentration comprise entre Si 0176 3034780 8 5mg/dm3 et 75mg/dm3 avec une préférence pour 50mg/dm3. Il est également possible d'ajouter à l'eau de mer d'autres éléments minéraux, par addition par exemple d'un milieu nutritif dans les proportions souhaitées comme le milieu de Provasoli de composition suivante : Milieu de Provasoli NaNO3 350mg glycérophosphate de sodium 50mg Fe(N1-14)2(SO4)2, 6H20 18mg Na2 EDTA 15mg H3B03 28,5mg FeCI3, 6H20 1,225mg MnSO4, H20 4,1mg ZnSO4, 7H20 0,55mg CoSO4, 7H20 0,12mg Vitamine B12 10pg Thiamine 0,5mg Biotine 5pg Tampon Tris 500mg eau distillée 100m1 5 La mise oeuvre de l'étape B) du procédé tel que défini ci-dessus est effectuée dans un photobioréacteur contenant de l'eau de mer contenant au moins une source d'azote telle que le nitrate de sodium (NaNO3) à une concentration comprise entre 50mg/dm3 et 250mg/dm3 avec une préférence pour 150mg/dm3 et une source de 10 phosphore telle que le dihydrogénophosphate de sodium (NaH2PO4) à une concentration comprise entre 5mg/dm3 et 75mg/dm3 avec une préférence pour 50mg/dm3. Il est également possible d'ajouter à l'eau de mer d'autres éléments minéraux, par addition par exemple dans les proportions souhaitées du milieu de Provasoli. Les cultures sont conduites dans des cuves de culture translucides sous 15 bouillonnement d'air optionnellement enrichi en dioxyde de carbone. Les cultures sont généralement conduites entre 10°C et 25°C avec une préférence pour 17°C, sous une illumination constante. Les cultures sont conduites sur des périodes de quinze jours dans des volumes allant de 500cm3 pour les premières étapes de culture jusqu'à 20m3 pour les étapes de 20 production de biomasse industrielle. Cependant, lorsque des observations à la loupe binoculaire et/ou au microscope faites à l'issue de la première période de quinze jours mettent en évidence la croissance d'autres algues que celle visée à l'issue de l'étape A), Si 0176 3034780 9 cela constitue le signe que le résultat de l'étape A) n'est pas satisfaisant. Cette étape A) du procédé tel que défini précédemment, est donc être réitérée jusqu'à l'obtention d'un échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille de qualité satisfaisante. 5 - L'étape C) du procédé tel que défini ci-dessus, est généralement réalisée en utilisant une toile filtrante au seuil de coupure compris entre 25pm et 100pm en fonction de la taille des macroalgues pluricellulaires de petite taille mises en culture. La culture de biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille est filtrée, l'eau de mer passant à travers la toile et la biomasse restant à sa surface. Le retentât 10 constitué par la biomasse est ensuite pressé pour éliminer l'eau libre encore présente. Selon un aspect particulier du procédé tel que défini ci-dessus, celui-ci à pour objet un procédé d'obtention d'une biomasse unialgale de cellules d'algues rougesissues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce Acrochaetium moniliforme.

15 Selon un autre aspect particulier du procédé tel que défini ci-dessus, celui-ci comprend en outre une étape D) de préparation d'une poudre de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C). L'étape D) du procédé tel que défini ci-dessus est effectuée par des méthodes connue de l'homme du métier. On peut par exemple sécher ladite biomasse unialgale de 20 cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C) du procédé tel que défini précédemment, puis la broyer et la tamiser pour obtenir une poudre du diamètre moyen souhaité. Selon un aspect particulier, lors de l'étape D) du procédé tel que défini précédemment, ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de 25 petite taille obtenue à l'étape C) est congelée, lyophilisée puis broyée pour obtenir la poudre souhaitée. L'invention a aussi pour objet un procédé de préparation d'un extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue par le procédé tel que défini précédemment, caractérisé en ce qu'il comprend les 30 étapes successives suivantes : - Une étape E) au cours de laquelle ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C) ou à l'étape D), est dispersée sous agitation dans un mélange eau-glycol à raison de 1% massique à 20% massique de biomasse pour 100% massique de dispersion ; 35 - Une étape F) au cours de laquelle la dispersion obtenue à l'étape E) précédente, est séparée en ses phases non miscibles, pour obtenir l'extrait glycolique attendu. Si 0176 3034780 10 Comme glycol mis en oeuvre dans le procédé tel que défini ci-dessus, il y a notamment le butylèneglycol ou 1,4-butanediol, le 1,3-butanediol, le 1,2-butanediol, le 1.2- pentanediol, le 1.5-pentanediol, le 1,2-hexanediol ou le 1,6-hexanediol. Selon un aspect particulier du procédé tel que défini ci-dessus le glycol utilisé est 5 le butylèneglycol. Le ratio volumique eau sur glycol du mélange eau glycol mis en oeuvre dans le procédé tel que défini ci-dessus, est généralement inférieur ou égal à 1/1 et supérieur ou égal à 1/9 et plus particulièrement inférieur ou égal à 1/2 et supérieur ou égal à 1/6. Si nécessaire ou si désiré ce ratio volumique est ajusté dans l'intervalle susmentionné en fin 10 de l'étape E). Selon un aspect particulier du procédé tel que défini ci-dessus, celui-ci a pour objet un procédé de préparation d'un extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules d'algues rougesissues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce 15 Acrochaetium moniliforme, obtenue par le procédé tel que défini précédemment, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes successives suivantes : - Une étape E) au cours de laquelle la poudre de ladite biomasse unialgale de cellules d'algues rouges issues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de 20 l'espèce Acrochaetium moniliforme obtenue à l'étape D), est dispersée sous agitation dans un mélange eau-butylèneglycol dont la teneur massique en butylèneglycol (ratio masse butylèneglycol sur masse totale butylèneglycol et eau) est comprise entre 50% et 75% , à raison de 2% massique à 10% massique de biomasse pour 100% massique de dispersion ; l'agitation maintenue pendant une à deux heures, puis si nécessaire ou si 25 désiré, la teneur massique en butylèneglycol est ajustée à 40% par ajout d'eau ; - Une étape F) au cours de laquelle la dispersion obtenue à l'étape E) précédente, est séparée en ses phases non miscibles, pour obtenir l'extrait glycolique attendu. Lors de l'étape F) du procédé tel que défini ci-dessus, la séparation des phases non miscibles est réalisée, par décantation par gravité ou par centrifugation.

30 Si nécessaire ou si désiré l'extrait hyroglycolique obtenu est filtré à travers un filtre de seuil de coupure 0.2pm pour éliminer toute particule en suspension et permettre d'obtenir une solution limpide. L'invention a aussi pour objet un extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenu par le procédé comprenant 35 les étapes successives suivantes : Si 0176 3034780 11 - Une étape A) de préparation d'un échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille, à partir d'un échantillon de macroalgues prélevé dans le milieu naturel ; - Une étape B) de mise en culture dudit échantillon unialgal de cellules de 5 macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenu à l'étape A) dans l'eau de mer additionnée d'au moins une source d'azote, pour obtenir une suspension aqueuse de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille ; - Une étape C) de récolte de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille à partir de ladite suspension aqueuse obtenue à l'issue de 10 l'étape B) ; - Optionnellement une étape D) de préparation d'une poudre de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C) ; - Une étape E) au cours de laquelle ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C) ou à l'étape D) est 15 dispersée sous agitation dans un mélange eau-glycol à raison de 1% massique à 20% massique de biomasse pour 100% massique de dispersion ; - Une étape F) au cours de laquelle la dispersion obtenue à l'étape E) précédente, est séparée en ses phases non miscibles. Selon un aspect particulier de la présente invention, celle-ci a pour objet l'extrait 20 glycolique tel que défini ci-dessus, dans lequel le glycol utilisé est le butylèneglycol. Selon un autre aspect particulier de la présente invention, celle-ci a pour objet l'extrait glycolique tel que défini ci-dessus, caractérisé en ce que la poudre de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille mise en oeuvre à l'étape E) du procédé pour sa préparation, est une poudre de ladite biomasse 25 unialgale de cellules d'algues rougesissues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce Acrochaetium moniliforme. Selon un aspect plus particulier de la présente invention, celle-ci a pour objet l'extrait glycolique tel que défini ci-dessus, caractérisée en ce que lors de l'étape E) du 30 procédé pour sa préparation : - le mélange eau-glycol mis en oeuvre est un mélange eau-butylèneglycol dont la teneur massique en butylène glycol (ratio masse butylèneglycol sur masse totale butylèneglycol et eau) est comprise entre 50% et 75%, - la dispersion dans ledit mélange eau-glycol, est effectuée à raison de 2% 35 massique à 10% massique de biomasse pour 100% massique de dispersion ; et - l'agitation est maintenue pendant une à deux heures, puis si nécessaire ou si désiré, Si 0176 3034780 12 - la teneur massique en butylèneglycol est ajustée à 40% par ajout d'eau. L'invention a aussi pour objet, l'utilisation de l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille tel que défini ci-dessus, dans le but de diminuer la quantité de sébum produite par la peau humaine 5 et/ou par le cuir chevelu, ladite utilisation étant dans une composition cosmétique, et plus particulièrement l'utilisation telle que définie ci-dessus dans laquelle l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille est l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules d'algues rougesissues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des 10 Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce Acrochaetium moniliforme, tel que défini précédemment. L'invention a aussi pour objet un procédé dans le but de diminuer la quantité de sébum produite par la peau humaine et/ou par le cuir chevelu, comprenant au moins une étape d'application sur ladite peau humaine et/ou sur ledit cuir chevelu, d'une composition 15 cosmétique (Cl) à usage topique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable et une quantité efficace de l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille tel que défini ci-dessus ; et plus particulièrement un procédé tel que défini ci-dessus, dans lequel l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille compris 20 dans ladite composition (Cl), est l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules d'algues rougesissues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce Acrochaetium moniliforme, tel que défini précédemment. Grâce à cette aptitude à diminuer la quantité de sébum produite par la peau 25 humain et/ou par le cuir chevelu, les compositions cosmétiques comportant ledit extrait glycolique d'algues rouge tel que défini ci-dessus permettent de traiter les modifications cutanées liées à l'état, dit de peau grasse, ou du cheveu liées à l'état, dit de cuir chevelu gras et en améliorer ainsi l'esthétique. L'invention aussi pour objet une composition cosmétique (Cl), à usage topique 30 comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable et une quantité efficace de l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille tel que défini ci-dessus ; et plus particulièrement une composition (Cl) telle que définie ci-dessus dans laquelle l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille, est l'extrait glycolique d'une 35 biomasse unialgale de cellules d'algues rougesissues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce Acrochaetium moniliforme, tel que défini précédemment. Si 0176 3034780 13 Dans le procédé tel que défini ci-dessus, ladite composition (Cl) est généralement étalée sur la surface de la peau à traiter, puis la peau est massée quelques instants. L'expression "à usage topique" utilisée dans la définition de la composition (Cl) objet de la présente invention, signifie que ladite composition (Cl) est mise en oeuvre par 5 application sur la peau, qu'il s'agisse d'une application directe ou d'une application indirecte lorsque ladite composition (Cl) selon l'invention est imprégnée sur un support destiné à être mis en contact avec la peau (papier, lingette, textile, dispositif transdermique, etc...). L'expression « cosmétiquement acceptable » utilisée dans la définition de la 10 composition (Cl) objet de la présente invention, signifie selon la directive du Conseil de la Communauté Economique Européenne N°76/768/CEE du 27 juillet 1976 modifiée par la directive N°93/35/CEE du 14 juin 1993, qu'elle comprend toute substance ou préparation destinée à être mise en contact avec les diverses parties du corps humain (épiderme, système pileux et capillaire, ongles, lèvres et organes génitaux) ou avec les dents et les 15 muqueuses buccales en vue, exclusivement et principalement, de les nettoyer, de les parfumer, d'en modifier l'aspect et/ou d'en corriger les odeurs corporelles et/ou de les protéger ou de les maintenir en bon état. Par quantité efficace de l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille tel que défini précédemment, on entend 20 pour 100% de la masse de ladite composition (Cl), la quantité comprise entre 0,1% et 5% massique, plus particulièrement entre 0,1% et 3% massique, et encore plus particulièrement entre 0,5% et 2 % massique dudit extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille. La composition (Cl) objet de la présente invention, se présente généralement 25 sous forme d'une solution aqueuse ou hydro-alcoolique ou hydro-glycolique, sous forme d'une suspension, d'une émulsion, d'une microémulsion ou d'une nano-émulsion, qu'elles soient de type eau-dans-huile, huile-dans-eau, eau-dans-huile-dans-eau ou huile-danseau-dans-huile, ou sous forme d'une poudre. La composition (Cl) objet de la présente invention, peut être conditionnée dans un 30 flacon, dans un dispositif de type "flacon" pompe, sous forme pressurisées dans un dispositif aérosol, dans un dispositif muni d'une paroi ajourée comme une grille ou dans un dispositif muni d'un applicateur à billes (dit "roll-on"). De façon générale, l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille objet de la présente invention, est associé à 35 des additifs chimiques habituellement mis en oeuvre dans le domaine des formulations à usage topique, comme les tensioactifs moussants et/ou détergents, les tensioactifs épaississants et/ou gélifiants, les agents épaississants et/ou gélifiants, les agents Si 0176 3034780 14 stabilisants, les composés filmogènes, les solvants et co-solvants, les agents hydrotropes, les eaux thermales ou minérales les agents plastifiants, les agents émulsionnants et coémulsionnants, les agents opacificants, les agents nacrants, les agents surgraissants, les séquestrants, les agents chélatants, les huiles, les cires, les agents antioxydants, les 5 parfums, les huiles essentielles, les agents conservateurs, les agents conditionneurs, les agents déodorants, les agents blanchissants destinés à la décoloration des poils et de la peau, les principes actifs destinés à apporter une action traitante et/ou protectrice vis à vis de la peau ou des cheveux, les filtres solaires, les charges minérales ou les pigments, les particules procurant un effet visuel ou destinées à l'encapsulation d'actifs, les particules 10 exfoliantes, les agents de texture, les azurants optiques, les répulsifs pour les insectes. Comme exemples de tensioactifs moussants et/ou détergents que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les tensioactifs moussants et/ou détergents anioniques, cationiques, amphotères ou non ioniques.

15 Parmi les tensioactifs anioniques moussants et/ou détergents, on peut citer les sels de métaux alcalins, de métaux alcalino-terreux, d'ammonium, d'amines, ou d'aminoalcools d'alkylether sulfates, d'alkyl sulfates, d'alkylamidoéther sulfates, d'alkylaryl polyéthersulfates, de monoglycérides sulfates, d'alpha-oléfinesulfonates, de paraffines sulfonates, d'alkyl phosphates, d'alkyléther phosphates, d'alkyl sulfonates, d'alkylamide 20 sulfonates, d'alkylaryl sulfonates, d'alkyl carboxylates, d'alkyl sulfosuccinates, d'alkyléther sulfosuccinates, d'alkylamide sulfosuccinates, d'alkyl sulfoacétates, d'alkyl sarcosinates, d'acyl iséthionates, de N-acyl taurates, d'acyl lactylates, de dérivés N-acylés d'acides aminés, de dérivés N-acylés de peptides, de dérivés N-acylés de protéines, de dérivés N-acyles d'acides gras.

25 Parmi les tensioactifs amphotères moussants et/ou détergents, on peut citer les alkylbétaines, les alkylamidobétaïnes, les sultaines, les alkylamidoalkylsulfobétaïnes, les dérivés d'imidazolines, les phosphobétaines, les amphopolyacétates et les amphopropionates. Parmi les tensioactifs cationiques moussants et/ou détergents, on peut citer 30 particulièrement les dérivés d'ammoniums quaternaires. Parmi les tensioactifs non ioniques moussants et/ou détergents, on peut citer plus particulièrement les alkylpolyglycosides comportant un radical aliphatique, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, et comportant de 8 à 16 atomes de carbone, comme l'octyl polyglucoside, le décyl polyglucoside, l'undécylényl polyglucoside, le dodécyl 35 polyglucoside, le tétradécyl polyglucoside, l'hexadécyl polyglucoside, le 1-12 dodécanediyl polyglucoside ; les dérivés d'huile de ricin hydrogénée éthoxylés comme le produit commercialisé sous le nom INCI « Peg-40 hydrogenated castor oil » ; les Si 0176 3034780 15 polysorbates comme le Polysorbate 20, le Polysorbate 40, le Polysorbate 60, le Polysorbate 70, le Polysorbate 80, le Polysorbate 85; les amides de coprah ; les N-al kylam ines. Comme exemples de tensioactifs épaississants et/ou gélifiants que l'on peut 5 associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les esters gras d'alkylpolyglycosides éventuellement alcoxylés, comme les esters de méthylpolyglucoside éthoxylés tels que le PEG 120 méthyl glucose trioléate et le PEG 120 méthyl glucose dioléate commercialisés respectivement sous les appellations GLUCAMATETm LT et 10 GLUMATETm DOE120 ; les esters gras alcoxylés tels que le PEG 150 pentaérythrytyl tétrastéarate commercialisé sous l'appellation CROTHIXTm DS53, le PEG 55 propylène glycol oléate commercialisé sous l'appellation ANTILTm 141 ; les carbamates de polyalkylène glycols à chaînes grasses comme le PPG-14 laureth isophoryl dicarbamate commercialisé sous l'appellation ELFACOSTM T211, le PPG-14 palmeth-60 hexyl 15 dicarbamate commercialisé sous l'appellation ELFACOSTM GT2125. Comme exemples d'agents épaississants et/ou gélifiants que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les polymères de type polyélectrolytes, linéaires ou branchés ou réticulés, comme l'homopolymère de l'acide 20 acrylique partiellement ou totalement salifié, l'homopolymère de l'acide méthacrylique partiellement ou totalement salifié, l'homopolymère de l'acide 2-méthyl-[(1-oxo-2- propényl)amino]-1-propanesulfonique (AMPS) partiellement ou totalement salifié, les copolymères de l'acide acrylique et de l'AMPS, les copolymères de l'acrylamide et de l'AMPS, les copolymères de la vinylpyrolidone et de l'AMPS, les copolymères de l'AMPS 25 et de l'acrylate de (2-hydroxyéthyle), les copolymères de l'AMPS et du méthacrylate de (2-hydroxyéthyle), les copolymères de l'AMPS et de l'hydroxyéthylacrylamide, les copolymères de l'AMPS et du N,N-diméthyl acrylamide, les copolymères de l'AMPS et du tris(hydroxy- methyl)acrylamido methane (THAM), les copolymères de l'acide acrylique ou méthacrylique et de l'acrylate de (2-hydroxy éthyle), les copolymères de l'acide acrylique 30 ou méthacrylique et du méthacrylate de (2-hydroxy éthyle), les copolymères de l'acide acrylique ou méthacrylique et de l'hydroxyéthylacrylamide, les copolymères de l'acide acrylique ou méthacrylique et du THAM, les copolymères de l'acide acrylique ou méthacrylique et du N,N-diméthyl acrylamide, les terpolymères de l'acide acrylique ou méthacrylique, de l'AMPS et de l'acrylate de (2-hydroxy éthyle), les terpolymères de 35 l'acide acrylique ou méthacrylique, de l'AMPS et du méthacrylate de (2-hydroxy éthyle), les terpolymères de l'acide acrylique ou méthacrylique, de l'AMPS et du THAM, les terpolymères de l'acide acrylique ou méthacrylique, de l'AMPS et du N,N-diméthyl Si 0176 3034780 16 acrylamide, les terpolymères de l'acide acrylique ou méthacrylique, de l'AMPS et de l'acrylamide, les copolymères de l'acide acrylique ou de l'acide méthacrylique et d'acrylates d'alkyle dont la chaîne carbonée comprend entre quatre et trente atomes de carbone et plus particulièrement entre dix et trente atomes de carbone, les copolymères 5 de l'AMPS et d'acrylates d'alkyle dont la chaîne carbonée comprend entre quatre et trente atomes de carbone et plus particulièrement entre dix et trente atomes de carbone, les terpolymère linéaire, branché ou réticulé d'au moins un monomère possédant une fonction acide fort, libre, partiellement salifiée ou totalement salifiée, avec au moins un monomère neutre, et au moins un monomère de formule (VIII) : 10 C1-12=C(R'3)-C(=0)-[C1-12-C1-12-0]-R'4 (VIII) dans laquelle R'3 représente un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, R'4 représente un radical alkyle linéaire ou ramifié comportant de huit à trente atomes de carbone et n représente un nombre supérieur ou égal à un et inférieur ou égal à cinquante. Les polymères de type polyélectrolytes, linéaires ou branchés ou réticulés que l'on 15 peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), peuvent se présenter sous la forme d'une solution, d'une suspension aqueuse, d'une émulsion eaudans-huile, d'une émulsion huile-dans-eau, d'une poudre. Les polymères de type polyélectrolytes, linéaires ou branchés ou réticulés que l'on peut associer à l'extrait 20 glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), peuvent être sélectionnés parmi les produits commercialisés sous les appellations SIMULGELTm EG, SIMULGELTmEPG, SEPIGELTM 305, SIMULGELTm 600, SIMULGELTm NS, SIMULGELTm INS 100, SIMULGELTm FL, SIMULGELTm A, SIMULGELTm SMS 88, SEPINOVTmEMT 10, SEPIPLUSTm400, 25 SEPIPLUSTm265, SEPIPLUSTmS, SEPIMAXTmZen, ARISTOFLEXTmAVC, ARISTOFLEXTmAVS, NOVEMERTmEC-1, NOVEMERTmEC 2, ARISTOFLEXTmHMB, COSMEDIATmSP, FLOCARETmET 25, FLOCARETmET 75, FLOCARETm ET 26, FLOCARETmET 30, FLOCARETmET 58, FLOCARETmPSD 30, VISCOLAM n'AT 64, VISCOLAM n'AT 100.

30 Comme exemples d'agents épaississants et/ou gélifiants que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les polysaccharides constitués uniquement d'oses, comme les glucanes ou homopolymères du glucose, les glucomannoglucanes, les xyloglycanes, les galactomannanes dont le degré de 35 substitution (DS) des unités de D-galactose sur la chaîne principale de D-mannose est compris entre 0 et 1, et plus particulièrement entre 1 et 0,25, comme les galactomannanes provenant de la gomme de cassia (DS = 1/5), de la gomme de caroube Si 0176 3034780 17 (DS = 1/4), de la gomme de tara (DS = 1/3), de la gomme de guar (DS = 1/2), de la gomme de fenugrec (DS = 1). Comme exemples d'agents épaississants et/ou gélifiants que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires 5 de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les polysaccharides constitués de dérivés d'oses, comme les galactanes sulfatés et plus particulièrement les carraghénanes et l'agar, les uronanes et plus particulièrement les algines, les alginates et les pectines, les hétéropolymères d'oses et d'acides uroniques et plus particulièrement la gomme xanthane, la gomme gellane, les exsudats de gomme de arabique et de gomme de 10 karaya, les glucosaminoglycanes. Comme exemples d'agents épaississants et/ou gélifiants que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer la cellulose, les dérivés de cellulose comme la méthyl-cellulose, l'éthyl-cellulose, l'hydroxypropyl cellulose, les silicates, 15 l'amidon, les dérivés hydrophiles de l'amidon, les polyuréthanes. Comme exemples d'agents stabilisants que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les cires microcristallines, et plus particulièrement l'ozokérite, les sels minéraux tels que le chlorure de sodium ou le chlorure de magnésium, 20 les polymères silicones tels que les copolymères polysiloxane polyalkyl polyether. Comme exemples de solvants que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer l'eau, les solvants organiques comme le glycérol, le diglycérol, les oligomères du glycérol, l'éthylène glycol, le propylène glycol, le butylène 25 glycol, le 1,3-propanediol, le 1,2-propanediol, l'hexylène glycol, le diéthylène glycol, le xylitol, l'érythritol, le sorbitol, les alcools hydrosolubles tels que l'éthanol, l'isopropanol ou le butanol, les mélanges d'eau et desdits solvants organiques. Comme exemples d'eaux thermales ou minérales que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de 30 petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les eaux thermales ou minérales ayant une minéralisation d'au moins 300 mg/I, en particulier l'eau d'Avene, l'eau de Vittel, les eaux du bassin de Vichy, l'eau d'Uriage, l'eau de la Roche Posay, l'eau de la Bourboule, l'eau d'Enghien-les-bains, l'eau de Saint-Gervais-les bains, l'eau de Néris-les-bains, l'eau d'Allevard-les-bains, l'eau de Digne, l'eau des Maizieres, l'eau de Neyrac-les-bains, l'eau 35 de Lons le Saunier, l'eau de Rochefort, l'eau de Saint Christau, l'eau des Fumades et l'eau de Tercis-les-bains. Si 0176 3034780 18 Comme exemples d'agents hydrotropes que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les xylènes sulfonates, les cumènes sulfonates, l'hexyl polyglucoside, le (2-éthyl hexyl) polyglucoside ou le n-heptyl polyglucoside.

5 Comme exemples d'agents tensioactifs émulsionnants que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les tensioactifs non ioniques, des tensioactifs anioniques, des tensioactifs cationiques. Comme exemples de tensioactifs non-ioniques émulsionnants que l'on peut 10 associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les esters d'acides gras et de sorbitol, comme les produits commercialisés sous les appellations MONTANETm40, MONTANETm60, MONTANETm70, MONTANETm80 et MONTANETm85 ; les compositions comprenant du stéarate de glycérol et l'acide stéarique éthoxylé entre 15 cinq moles et cent cinquante moles d'oxyde d'éthylène, comme la composition comprenant de l'acide stéarique éthoxylé à cent trente-cinq moles d'oxyde d'éthylène et du stéarate de glycérol commercialisée sous l'appellation SIMULSOLTm 165 ; les esters de mannitan ; les esters de mannitan éthoxylés ; les esters de sucrose ; les esters de méthyl glucoside ; les alkyl polyglycosides comportant un radical aliphatique, linéaire ou 20 ramifié, saturé ou insaturé, et comportant de quatorze à trente-six atomes de carbone, comme le tétradécyl polyglucoside, l'hexadécyl polyglucoside, l'octadécyl polyglucoside, l'hexadécyl polyxyloside, l'octadécyl polyxyloside, l'eicosyl polyglucoside, le dodécosyl polyglucoside, le (2-octyl dodécyl) polyxyloside, le (12-hydroxy stéaryl) polyglucoside ; les compositions d'alcools gras linéaires ou ramifiés, saturés ou insaturés, et comportant de 25 quatorze à trente-six atomes de carbone, et d'alkyl polyglycosides tels que décrits précédemment, par exemple les compositions commercialisées sous les noms de marque MONTANOVTm68, MONTANOVTm 14, MONTANOVTm82, MONTANOVTm202, MONTANOVTmS, MONTANOVTmVV018, MONTANOVTmL, FLUIDANOVTm2OX et EASY N OV TM .

30 Comme exemples de tensioactifs anioniques que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer le glycéryl stéarate citrate, le cétéarylsulfate, les savons comme le stéarate de sodium ou le stéarate de triéthanolammonium, les dérivés N-acylés d'acides aminés salifiés comme par exemple 35 le stéaroyl glutamate. Comme exemples de tensioactifs cationiques émulsionnants que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues Si 0176 3034780 19 pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les aminoxydes, le quaternium-82 et les tensioactifs décrits dans la demande de brevet VVO 96/00719 et principalement ceux dont la chaîne grasse comprend au moins seize atomes de carbone. Comme exemples d'agents opacifiants et/ou nacrants que l'on peut associer à 5 l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer le palmitate de sodium, le stéarate de sodium, l'hydroxystéarate de sodium, le palmitate de magnésium, le stéarate de magnésium, l'hydroxystéarate de magnésium, le monostéarate d'éthylène glycol, le distéarate d'éthylène glycol, le monostéarate de polyéthylène glycol, le distéarate de 10 polyéthylène glycol, les alcools gras comportant de douze à vingt-deux atomes de carbone. Comme exemples d'agents de texture que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer des dérivés N-acylés d'acides aminés, comme la 15 lauroyl lysine commercialisée sous l'appellation AMINOHOPETmLL, l'octenyl starch succinate commercialisé sous l'appellation DRYFLOTM, le myristyl polyglucoside commercialisé sous l'appellation MONTANOVTm 14, les fibres de cellulose, les fibres de coton, les fibres de chitosane, le talc, la séricite, le mica. Comme exemples d'agents déodorants que l'on peut associer à l'extrait glycolique 20 de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les silicates alcalins, les sels de zinc comme le sulfate de zinc, le gluconate de zinc, le chlorure de zinc, le lactate de zinc ; les sels d'ammonium quaternaires comme les sels de cétyltriméthylammonium, les sels de cétylpyridinium ; les dérivés du glycérol comme le caprate de glycérol , le caprylate de 25 glycérol, le caprate de polyglycérol ; le 1,2-décanediol ; le 1,3-propanediol ; l'acide salicylique ; le bicarbonate de sodium ; les cyclodextrines ; les zéolithes métalliques ; le TRICLOSAN Tm ; le bromohydrate d'aluminium, les chlorhydrates d'aluminium, le chlorure d'aluminium, le sulfate d'aluminium, les chlorhydrates d'aluminium et de zirconium, le trichlorhydrate d'aluminium et de zirconium, le tétrachlorhydrate d'aluminium et de 30 zirconium, le pentachlorhydrate d'aluminium et de zirconium, l'octochlorhydrate d'aluminium et de zirconium, le sulfate d'aluminium, le lactate de sodium et d'aluminium, les complexes de chlorhydrate d'aluminium et de glycol, comme le complexe de chlorhydrate d'aluminium et de propylène glycol, le complexe de dichlorhydrate d'aluminium et de propylène glycol, le complexe de sesquichlorhydrate d'aluminium et de 35 propylène glycol, le complexe de chlorhydrate d'aluminium et de polyéthylène glycol, le complexe de dichlorhydrate d'aluminium et de polyéthylène glycol, le complexe de sesquichlorhydrate d'aluminium et de polyéthylène glycol. Si 0176 3034780 20 Comme exemples d'huiles que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les huiles minérales telles que l'huile de paraffine, l'huile de vaseline, les isoparaffines ou les huiles blanches minérales ; les huiles d'origine 5 animale, telles que le squalène ou le squalane ;les huiles végétales, telles que le phytosqualane, l'huile d'amandes douces, l'huile de coprah, l'huile de ricin, l'huile de jojoba, l'huile d'olive, l'huile de colza, l'huile d'arachide, l'huile de tournesol, l'huile de germes de blé, l'huile de germes de maïs, l'huile de soja, l'huile de coton, l'huile de luzerne, l'huile de pavot, l'huile de potiron, l'huile d'onagre, l'huile de millet, l'huile d'orge, 10 l'huile de seigle, l'huile de carthame, l'huile de bancoulier, l'huile de passiflore, l'huile de noisette, l'huile de palme, le beurre de karité, l'huile de noyau d'abricot, l'huile de calophyllum, l'huile de sysymbrium, l'huile d'avocat, l'huile de calendula, les huiles issues de fleurs ou de légumes les huiles végétales éthoxylées ; les huiles synthétiques comme les esters d'acides gras tels que le myristate de butyle, le myristate de propyle, le 15 myristate d'isopropyle, le myristate de cétyle, le palmitate d'isopropyle, le palmitate d'octyle, le stéarate de butyle, le stéarate d'hexadécyle, le stéarate d'isopropyle, le stéarate d'octyle, le stéarate d'isocétyle, l'oléate dodécyle, le laurate d'hexyle, le dicaprylate de propylèneglycol, les esters dérivés d'acide lanolique, tels que le lanolate d'isopropyle, le lanolate d'isocétyle, les monoglycérides, diglycérides et triglycérides 20 d'acides gras comme le triheptanoate de glycérol, les alkylbenzoates, les huiles hydrogénées, les poly(alpha-oléfine), les polyoléfines comme le poly(isobutane), les isoalcanes de synthèse comme l'isohexadécane, l'isododécane, les huiles perfluorées ; les huiles de silicone comme les diméthylpolysiloxanes, les méthylphényl - polysiloxanes, les silicones modifiées par des amines, les silicones modifiés par des acides gras, les 25 silicones modifiés par des alcools, les silicones modifiés par des alcools et des acides gras, des silicones modifiés par des groupements polyether, des silicones époxy modifiés, des silicones modifiées par des groupements fluorés, des silicones cycliques et des silicones modifiées par des groupements alkyles. Par « huiles », on entend dans la présente demande les composés et/ou les mélanges de composés insolubles dans l'eau, 30 se présentant sous un aspect liquide à une température de 25°C. Comme exemples de cires que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer la cire d'abeille, la cire de carnauba, la cire de candelilla, la cire d'ouricoury, la cire du Japon, la cire de fibre de liège, la cire de canne à sucre, les 35 cires de paraffines, les cires de lignite, les cires microcristallines, la cire de lanoline ; l'ozokérite ; la cire de polyéthylène ; les cires de silicone ; les cires végétales ; les alcools gras et les acides gras solides à température ambiante ; les glycérides solides à Si 0176 3034780 21 température ambiante. Par « cires », on entend dans la présente demande les composés et/ou les mélanges de composés insolubles dans l'eau, se présentant sous un aspect solide à une température supérieure ou égale à 45°C. Comme exemples de principes actifs que l'on peut associer à l'extrait glycolique 5 de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les vitamines et leurs dérivés, notamment leurs esters, tels que le rétinol (vitamine A) et ses esters (palmitate de rétinyle par exemple), l'acide ascorbique (vitamine C) et ses esters, les dérives de sucre de l'acide ascorbique (comme l'ascorbyl glucoside), le tocophérol (vitamine E) et ses esters (comme l'acétate 10 de tocophérol), les vitamines B3 ou B10 (niacinamide et ses dérivés) ; les composés montrant une action éclaircissante ou dépigmentante de la peau comme le wundecylènoyl phénylalanine commercialisé sous l'appellation SEPIVVHITETmMSH, le SEPICALM TmVG, le mono ester et/ou le diester de glycérol du w-undecelynoyl phénylalanine, les w-undecylènoyl dipeptides, l'arbutine, l'acide kojique, l'hydroquinone ; 15 les composés montrant une action apaisante notamment le SEPICALM TM S, l'allantoïne et le bisabolol ; les agents anti-inflammatoires ; les composés montrant une action hydratante comme l'urée, les hydroxyurées, le glycérol, les polyglycérols, le glycérolglucoside, le diglycérolglucoside, les polyglycérylglucosides, le xylitylglucoside, la composition commercialisée sous le nom de marque AQUAXYLTM, la composition 20 commercialisés sous le nom de marque PRO-XYLAN ETM, les dérivés de C-glycosides et plus particulièrement les dérivés de C-glucosides, de C-xylosides ; les extraits végétaux riches en polyphénols comme les extraits de raisin, les extraits de pin, les extraits de vin, les extraits d'olives ; les composés montrant une action amincissante ou lipolytique comme la caféine ou ses dérivés, l'ADIPOSLIM Tm, I'ADIPOLESSTM, la fucoxanthine ; les 25 protéines N-acylées ; les peptides N-acylés comme le MATRIXILTm ; les acides aminés N-acylés ; les hydrolysâts partiels de protéines N-acylés ; les acides aminés ; les peptides ; les hydrolysâts totaux de protéines ; les extraits de soja, par exemple la RaffermineTM ; les extraits de blé par exemple la TENSINETm ou la GLIADINETM ; les extraits végétaux, tels que les extraits végétaux riches en tanins, les extraits végétaux 30 riches en isoflavones ou les extraits végétaux riches en terpènes ; les extraits d'algues d'eau douce ou marines ; les extraits de plantes marines ; les extraits marins en général comme les coraux ; les cires essentielles ; les extraits bactériens ; les céramides ; les phospholipides ; les composés montrant une action antimicrobienne ou une action purifiante, comme le LIPACIDETM C8G, le LIPACIDETM UG, le SEPICONTROLTm A5, le 35 FLUIDIPURETm8G ; l'OCTOPIROXTm ou le SENSIVATM SC50 ; les composés montrant une propriété énergisante ou stimulante comme le PHYSIOGENYLTM, le panthénol et ses dérivés comme le SEPICAPTM MP ; les actifs anti-âge comme le SEPILIFTTm DPHP, le Si 0176 3034780 22 LIPACIDETM PVB, le SEPIVINOLTM, le SEPIVITALTm, le MANOLIVATM, le PHYTOAGETm, le TIMECODETm ; le SURVICODETM ; les actifs anti-photo vieillissement ; les actifs protecteurs de l'intégrité de la jonction dermo-épidermique ; les actifs augmentant la synthèse des composants de la matrice extracellulaire comme le collagène, les élastines, 5 les glycosaminoglycanes ; les actifs agissant favorablement sur la communication cellulaire chimique comme les cytokines ou physiques comme les intégrines ; les actifs créant une sensation de « chauffe » sur la peau comme les activateurs de la microcirculation cutanée (comme les dérivés de l'acide nicotinique) ou des produits créant une sensation de « fraîcheur » sur la peau (comme le menthol et des dérivés) ; les actifs 10 améliorant la microcirculation cutanée, par exemple les veinotoniques ; les actifs drainants ; les actifs à visée décongestionnante comme les extraits de ginko biloba, de lierre, de marron d'inde, de bambou, de ruscus, de petit houx, de centalla asiatica, de fucus, de romarin, de saule ; les agents de bronzage ou de brunissement de la peau, par exemple la dihydroxyacétone (DHA), l'érythrulose, l'aldéhyde mésotartrique, le 15 glutaraldéhyde, le glycéraldéhyde, l'alloxane, la ninhydrine, les extraits végétaux par exemple les extraits de bois rouges du genre Pterocarpus et du genre Baphia comme le Pteropcarpus santalinus, le Pterocarpus osun, le Pterocarpus soyauxii, le Pterocarpus erinaceus, le Pterocarpus indicus ou le Baphia nitida comme ceux décrits dans la demande de brevet Européen EP 0 971 683; les agents connus pour leur action de 20 facilitation et/ou d'accélération du bronzage et/ou du brunissement de la peau humaine, et/ou pour leur action de coloration de la peau humaine, par exemple les caraténoïdes ( et plus particulièrement le beta carotène et le gamma carotène), le produit commercialisé sous le nom de marque « Carrot oil » (Nom INCI : Daucus Carota, helianthus annuus Sunflower oil) par la société Provital, qui contient des caroténoïdes, de la vitamine E et de 25 la vitamine K; la tyrosine et/ou ses dérivés, connus pour leur effet sur l'accélération du bronzage de la peau humaine en association avec une exposition aux rayonnements ultra-violets, par exemple le produit commercialisé sous le nom de marque « SunTan AcceleratorTM » par la société Provital qui contient de la tyrosine et des riboflavines (vitamine B), le complexe de tyrosine et de tyrosinase commercialisé sous le nom de 30 marque « Zymo Tan Complex » par la société Zymo Line, le produit commercialisé sous le nom de marque MelanoBronzeTM (nom INCI : Acetyl Tyrosine, Monk's pepper extract (Vitex Agnus-castus)) par la société Mibelle qui contient de l'acétyl tyrosine, produit commercialisé sous le nom de marque Unipertan VEG-24/242/2002 (nom INCI : butylene glycol and Acetyl Tyrosine and hydrolyzed vegetable protein and Adenosine triphosphate) 35 par la société UNIPEX, le produit commercialisé sous le nom de marque « Try-ExcellTm » (nom INCI : Oleoyl Tyrosine and Luffa Cylindrica (Seed) Oil and Oleic acid) par la société Sederma qui contient des extraits de pépins de courge (ou huile de Loofah), le produit Si 0176 3034780 23 commercialisé sous le nom de marque «ActibronzeTM » (nom INCI : hydrolyzed wheat protein and acetyl tyrosine and copper gluconate) par la société Alban Muller, le produit commercialisé sous le nom de marque TyrostanTm (nom INCI : potassium caproyl tyrosine) par la société Synerga, le produit commercialisé sous le nom de marque 5 Tyrosinol (nom INCI : Sorbitan lsostearate, glyceryl oleate, caproyl Tyrosine) par la société Synerga, le produit commercialisé sous le nom de marque lnstaBronzeTM (nom INCI : Dihydroxyacetone and acetyl tyrosine and copper gluconate) commercialisé par la société Alban Muller, le produit commercialisé sous le nom de marque Tyrosilane (nom INCI : méthylsilanol and acétyl tyrosine) par la société Exymol ; les peptides connus pour 10 leur effet d'activation de la mélanogénèse par exemple le produit commercialisé sous le nom de marque Bronzing SF Peptide powder (nom INCI : Dextran and Octapeptide-5) par la société lnfinitec Activos, le produit commercialisé sous le nom de marque Melitane (nom INCI : Glycerin and Aqua and Dextran and Acetyl hexapeptide-1) comprenant l'acétyl hexapeptide-1 connu pour son action agoniste de l'alpha-MSH, le produit 15 commercialisé sous le nom de marque Melatimes Solutions TM (nom INCI : Butylene glycol , Palmitoyl Tripeptide-40) par la société LIPOTEC, les sucres et les dérivés de sucres par exemple le produit commercialisé sous le nom de marque Tanositoln" (nom INCI : inositol) par la société Provital, le produit commercialisé sous le nom de marque Thalitann" (ou PhycosaccharideTM AG) par la société CODIF international (nom INCI : 20 Aqua and hydrolyzed algin (Laminaria Digitata) and magnesium sulfate and manganese sulfate) contenant un oligosaccharide d'origine marine (acide guluronique et acide mannuronique chélates avec les ions magnésium et manganèse), le produit commercialisé sous le nom de marque MelactivaTM (nom INCI : Maltodextrin, Mucuna Pruriens Seed extract) par la société Alban Muller, les composés riches en flavonoïdes 25 par exemple le produit commercialisé sous le nom de marque « Biotanning » (nom INCI : Hydrolyzed citrus Aurantium dulcis fruit extract) par la société Silab et connu pour être riche en flavonoides de citron (de type hespéridines) ; les agents destinés au traitement des cheveux et/ou des poils, par exemple des agents protecteurs des mélanocytes du follicule pileux, destinés à protéger lesdits mélanocytes contre les agents cytotoxiques 30 responsables de la sénescence et/ou de l'apoptose desdits mélanocytes, tels que les agents mimétiques de l'activité de la DOPAchrome tautomérase choisis parmi ceux décrits dans la demande de brevet européen publiée sous le numéro EP 1 515 688 A2, les molécules synthétiques mimétiques de la SOD par exemples les complexes de manganèse, des composés antioxydants par exemple les dérivés de cyclodextrine, des 35 composés silices dérivés d'acide ascorbique, de la pyrrolidone carboxylate de lysine ou d'arginine' des associations de mono- et diester d'acide cinnamique et de vitamine C, et Si 0176 3034780 24 plus généralement ceux cités dans la demande de brevet européen publiée sous le numéro EP 1 515 688 A2. Comme exemples d'agents antioxydants que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de 5 petite taille dans la composition (Cl), on peut citer l'EDTA et ses sels, l'acide citrique, l'acide tartarique, l'acide oxalique, le BHA (butylhydroxyanisol), le BHT (butylhydroxytoluène), les dérivés de tocophérol tels que l'acétate de tocophérol, des mélanges de composés antioxydants tels que la DISSOLVINETM GL 47S commercialisé par la société Akzo Nobel sous le nom INCI : Tetrasodium Glutamate Diacetate.

10 Comme exemples de filtres solaires que l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer tous ceux figurant dans la directive cosmétique 76/768/CEE modifiée annexe VII. Parmi les filtres organiques solaires que l'on peut associer à l'extrait glycolique de 15 ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer la famille des dérivés de l'acide benzoïque comme les acides para-aminobenzoïques (PABA), notamment les esters de monoglycérol de PABA, les esters éthyliques de N,N-propoxy PABA, les esters éthyliques de N,N-diéthoxy PABA, les esters éthyliques de N,N-diméthyl PABA, les esters méthyliques de N,N-diméthyl 20 PABA, les esters butyliques de N,N-diméthyl PABA; la famille des dérivés de l'acide anthranilique comme l'homomenthyl-N-acétyl anthranilate ; la famille des dérivés de l'acide salicylique comme le salicylate d'amyle, le salicylate d'homomenthyle, le salicylate d'éthylhexyle, le salicylate de phényle, le salicylate de benzyle, le salicylate de (pisopropanol phényle) ; la famille des dérivés de l'acide cinnamique comme le cinnamate 25 d'éthylhexyle, le cinnamate d'éthy1-4-isopropyle, le cinnamate de méthy1-2,5-diisopropyle, le cinnamate de p-méthoxypropyle, le cinnamate de p-méthoxyisopropyle, le cinnamate de p-méthoxyisoamyle, le cinnamate de p-méthoxyoctyle, le cinnamate de (p-méthoxy 2- éthylhexyle), le cinnamate de (p-méthoxy 2-éthoxy éthyle), le cinnamate de (p-méthoxy cyclohexyle), le cinnamate d'éthyl-a-cyano-p-phényle, le cinnamate de (2-éthyl hexyl)-a- 30 cyano-p-phényle, le cinnamate de diparaméthoxy mono-2-éthylhexanoyl de glycéryle ; la famille des dérivés de la benzophénone comme la 2,4-dihydroxy benzophénone, la 2,2'- dihydroxy 4-méthoxy benzophénone, la 2,2',4,4'-tétrahydroxy benzophénone, la 2-hydroxy 4-méthoxy benzophénone, la 2-hydroxy 4-méthoxy 4'-méthyl benzophénone, la 2-hydroxy 4-méthoxy benzophénone-5-sulfonate, la 4-phényl benzophénone, le (2-éthyl hexyl) 4'- 35 phényl benzophénone-2-carboxylate, la 2-hydroxy 4-(n-octyloxy) benzophénone, la 4- hydroxy 3-carboxy benzophénone ; le 3-(4'-méthyl benzylidène) dl-camphre, le 3- (benzylidène) Si 0176 3034780 25 dl-camphre, le benzalkonium méthosulfate camphre ; l'acide urocanique, l'urocanate d'éthyle ; la famille des dérivés de l'acide sulfonique comme l'acide sulfonique 2-phényl benzimidazole-5 et ses sels ; la famille des dérivés de la triazine comme l'hydroxyphényl triazine, l'(éthylhexyloxy) (hydroxyphényl) (4-méthoxy phényl) triazine, le 2,4,6-trianillino- 5 (p-carbo-2'-éthylhexyl-l'-oxy)-1,3,5-triazine, le 4,4-((6-(((1,1-diméthyl éthyl) amino) carbonyl) phenyl) amino)-1,3,5-triazine-2,4-diy1 diimino) bis(2-éthyl hexyl) ester de l'acide benzoïque, le 2-phényl-5-méthyl benzoxazole, le 2-(2'-hydroxy 5'-méthyl phényl) benzotriazole, le 2-(2'-hydroxy 5'-t-octyl phényl) benzotriazole, le 2-(2'-hydroxy 5'-méthy phényl) benzotriazole; la dibenzazine; le dianisoylméthane, le 4-méthoxy 4"-t-butyl 10 benzoyl méthane ; la 5-(3,3-diméthyl 2-norbornylidène)-3-pentan-2-one ; la famille des dérivés du diphénylacrylate comme le (2-éthyl hexyl) 2-cyano 3,3-diphényl 2-propènoate, l'éthy1-2-cyano 3,3-diphényl 2-propènoate ; la famille des polysiloxanes comme le malonate de benzylidène siloxane. Parmi les filtres inorganiques solaires, également appelés "écrans minéraux", que 15 l'on peut associer à l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille dans la composition (Cl), on peut citer les oxydes de titane, les oxydes de zinc, l'oxyde de cérium, l'oxyde de zirconium, les oxydes de fer jaune, rouge ou noir, les oxydes de chrome. Ces écrans minéraux peuvent être micronisés ou non, avoir subi ou non des traitements de surface et être éventuellement 20 présentés sous formes de pré-dispersions aqueuses ou huileuses. L'invention a aussi pour objet l'extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille tel que défini précédemment, pour son utilisation dans une méthode de traitement thérapeutique visant à diminuer la quantité de sébum produite par la peau humaine et/ou par le cuir chevelu, et plus 25 particulièrement l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules d'algues rougesissues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce Acrochaetium moniliforme, tel que défini précédemment, pour son utilisation dans une méthode de traitement thérapeutique visant à diminuer la quantité de sébum produite par 30 la peau humaine et/ou par le cuir chevelu. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter. Echantillons testés pour montrer l'effet technique 35 Extrait A: Extrait glycolique (dans le butylène glycol) d'une culture de l'algue Acrochaetium moniliforme obtenu par le procédé selon l'invention Si 0176 3034780 26 Extrait B : Extrait glycolique (dans le butylène glycol) de l'algue Delesseria obtenu à partir d'un lyophilisat de biomasse de ladite algue ; Extrait C : Extrait glycolique (dans le butylène glycol) de l'algue Palmaria obtenu à partir d'un lyophilisat de biomasse de ladite algue ; 5 Extrait D: Extrait glycolique (dans le butylène glycol) de l'algue Gelidium obtenu à partir d'un lyophilisat de biomasse de ladite algue. Efficacité biologique 10 Choix du modèle et pertinence : Le modèle choisi pour mettre en évidence l'effet technique de nos produits est un modèle d'étude de la production de dihydrotestostérone (DHT), révélant l'activité de l'enzyme 5-a-réductase, enzyme très ciblée pour déterminer les propriétés dermopurifiantes d'ingrédients cosmétique. Ce modèle est un modèle cellulaire, plus 15 robuste que des modèles sur enzyme purifiée. Protocole : Des fibroblastes humains de la papille folliculaire dermique (homme, 22 ans) ont été ensemencés en plaques de culture recouvertes de collagène en présence d'un milieu 20 de croissance spécifique. Au bout de trois jours, elles ont été prétraitées pendant 24 heures avec la référence positive (Finastéride à 2pM et 1pM) et chacun des extraits d'algues à tester (Tableau 2). Les fibroblastes ont ensuite été stimulés avec de la testostérone à 0,5 pM avant de subir un post-traitement de 24 heures. Chaque essai a été réalisé en sextuplicate.

25 Produit Concentrations testées Extrait A 0,5% et 0,1% Extrait B 0,5% et 0,1% Extrait C 0,5% et 0,1% Extrait D 0,5% et 0,1% Tableau 2 : Produits testés et concentrations appliquées Evaluation des effets : La viabilité a été mesurée par un réactif VVST-8 et la transformation de la 30 testostérone a alors été évaluée en mesurant la concentration en (DHT) en intracellulaire. Si 0176 3034780 27 La viabilité a été exprimée relativement à celle du témoin sans testostérone (témoin TO). La quantité de (DHT) a été normalisée par les résultats de viabilité puis rapportée à la condition témoin avec testostérone (0,5pM) témoin (Ti) pour calculer un pourcentage 5 d'effet et également rapportée aux conditions témoin avec et sans testostérone pour calculer un pourcentage de protection. Résultats : Les résultats de production de DHT sont présentés dans le tableau n°3 ci-10 dessous. Si 0176 3034780 28 WST-8 DHT Produit DO (UA) % Concentration (pg/mL) Concentration % d'effet % de viabilité normalisée restauration (pg/mL/UA) Témoin 2,26+/-0,15(a) 100% 6,97+/-1,32(a) 3,09+/-0,54(a) -61%* (a) 100% (TO) 2,18+/-0,09(b) 11,74+/-2,29(b) 5,30+1-0,80(1') -30%* (b) 72%* (c) 2,01+/-0,19(c) 5,75+/-0,73(c) 2,86+/-0,40(c) Témoin 2,14+/-0,19(a) 95%(a) 16,85+/-2,28(a) 7,85+/-0,67(a) 0% 0% (T1) 2,21+/-0,25(b) 110`)/0(b) 94%(C) 16,54+/-1,68(b) 7,53+/-0,93(b) 1,89+/-0,09(c) 15,38+/-6,14(c) 10,12+/-4,82(c) Finastéride 2,19+/-0,27(a) 93%(a) 12,38+/-2,35(a) 5,68+/-0,91 (a) -28%* 46%* (2pM) Extrait A 2,24+/-0,1 0(a) 100% 11,18+/-3,5(a) 5,03+/-1,71 (a) -36%* 59%* (0,5%) Extrait A 2,14+/-0,14(a) 95% 8,89+/-3,01 (a) 4,1 7+/-1 ,28(a) -47%* 77%* (0,1%) Extrait B 2,05+/-0,33(c) 102% 9,64+/-1,33(c) 4,59+/-0,29(c) -55%LS 760/0LS (0,5%) Extrait B 2,10+/-0,17(c) 105% 19,89+/-10,38(c) 9,21+/-5,01(c) -9% 13% (0,1%) Extrait C 2,33+/-0,26(b) 116%* 16,26+1-6,22(1') 7,02+1-2,67(1') -7% 23% (0,5%) Extrait C 2,34+/-0,17(b) 116%* 15,79+/-3,81 (b) 6,82+/-1,94(b) -9% 32% (0,1%) Extrait D 2,24+1-0,17(1') 111%* 14,93+/-1,92(b) 6,89+/-0,92(b) -8% 28% (0,5%) Extrait D 2,20+/-0,16(b) 109%* 13,01+1-4(1') 6,01+/-2,10(b) -20% 68% (0,1%) Tableau 3: Résultats sur la production de DHT (a), (b) et (c) : ensemble d'expérimentations * : résultats statistiquement significatif (test de Student, p<0,05) 5 LS : résultats proches de la significativité statistique (test de Student, 0,05<p<0,1) Les extraits A (extraits d'une biomasse d'Acrochaetium moniliforme, obtenus selon le procédé de l'invention) ont présenté un effet limitant de la production de DHT, se rapprochant d'un niveau basal. Ces effets témoignent une activité de régulation de la s1 0176 3034780 29 production de sébum et ainsi une activité cosmétique caractérisée en tant que « dermopurifiante ». Les composés B (extrait classique de Delesseria), C (extrait classique de Palmaria) et D (extrait classique de Gelidium) n'ont pas présenté d'effet significatif sur la 5 production de DHT (excepté un léger effet du composé B à la plus forte concentration). Le procédé de l'invention permet d'obtenir un extrait ayant un effet dermopurifiant plus intéressant/différenciant que les autres algues rouges dont les propriétés dermopurifiantes ont déjà été décrites.

10 Formulations Dans les exemples suivants les proportions sont exprimées en pourcentages massiques. Emulsion Huile-dans-eau dermo-purifiante qsp 100% Eau Glycérine 3% Solagum TmAX 0,3% Montanovn"202 2% Lanol TM 99 7% Cétiol TM OE 3% Lanol Tm P 0,25% Sepipl us Tm 400 0,8% Euxyl TM PE9010 1% Sensiva TM PA40 0,5% Extrait A 1% Acide lactique à 20% qs pH = 5,5 Emulsion Huile-dans-eau anti-sébum Eau qsp 100% MontanovnA202 3% Montanov TM 14 1,5% Pelemol Tm BB 2% Beurre de Karité 1,5% Phytosqualane 3% Huile de jojoba 3% Triglycéride 08-010 3% 15 20 25 30 35 Si 0176 3034780 30 DUB ISIP 3% D,L a-tocophérol 0,1% SolagumTmTara 0,6% Extrait A 2% Acide sorbique 0,3% Soude 48% 0,07% Sérum apaisant SepimaxTmZen 0,5% Eau qsp 100% Butylène glycol 2% Aquaxyl TM 2% Extrait A 1% Montanox 20 1% Phenoxyethanol & Ethylhexyl Glycerin 0,80% SOLAGUMTmAX est un mélange de gomme d'acacia et de gomme de xanthane utilisé 20 comme agent émulsionnant et commercialisé par la société SEPPIC ; MONTANOVnA202 (nom INCI : Arachidyl Alcohol & Behenyl Alcohol & Arachidyl Glucoside) est un agent émulsionnant commercialisé par la société SEPPIC ; LANOLTM 99 est de l'isononanoate d'isononyle commercialisé par la société SEPPIC ; CétiolnA0E (nom INCI : Dicaprylyl ether) est une phase grasse commercialisée par la 25 société BASF ; LANOLTM P est du glycol palmitate commercialisé par la société SEPPIC ; SepiplusTm400 (nom INCI: Polyacrylate-13 & Polyisobutene & Polysorbate 20) est un agent épaississant polymérique commercialisé par la société SEPPIC ; EuxylnAPE9010 (noim INCI : phenoxyethanol and ethylhexylglycerin) est un agent 30 conservateur commercialisé par la société Schülcke & Mayr SensivanAPA40 (nom INCI : Phenethyl Alcohol (and) Ethylhexylglycerin) est un agent antimicrobien commercialisé par la société Schülcke & Mayr MontanovnA14 (nom INCI : Myristyl Alcohol & Myristyl Glucoside) est un agent émulsionnant commercialisé par la société SEPPIC ; 5 10 15 Si 0176 3034780 31 PelemolTmBB est du Behenyl Behenate commercialisé par la société PHOENIX Chemical ; SolagumTmTara est une gomme de Tara utilisée comme agent émulsionnant et 5 commercialisé par la société SEPPIC ; SEPIMAXTmZen (nom INCI : polyacrylate crosspolymer-6) est un agent épaississant, émulsionnant et stabilisant AQUAXYLTM (nom INCI : Xylitylglucoside and Anhydroxylitol and Xylitol) : Composition 10 hydratante commercialisée par la société SEPPIC ; MontanoxTM 20 (nom INCI : Polysorbate 20) est un agent émulsionnant de type huiledans-eau commercialisé par la société SEPPIC ; Si 0176

Claims (14)

1. REVENDICATIONS1. Procédé d'obtention d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille, comprenant les étapes successives suivantes : - Une étape A) de préparation d'un échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires, à partir d'un échantillon de macroalgues prélevé dans le milieu naturel ; - Une étape B) de mise en culture dudit échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires obtenu à l'étape A) dans l'eau de mer additionnée d'au moins une source d'azote, pour obtenir une suspension aqueuse de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille; - Une étape C) de récolte de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille à partir de ladite suspension aqueuse obtenue à l'issue de l'étape B).
2. 2. Procédé tel que défini à la revendication 1, caractérisé en ce que les macroalgues pluricellulaires de petite taille sont des algues rouges issues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce Acrochaetium moniliforme.
3. 3. Procédé tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il comprend en outre une étape D) de préparation d'une poudre de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C).
4. 4. Procédé tel que défini à la revendication 3, caractérisé en ce que, lors de l'étape 12), ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C) est congelée, lyophilisée puis broyée pour obtenir la poudre souhaitée.
5. 5. Procédé de préparation d'un extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes successives suivantes : - Une étape E) au cours de laquelle la poudre de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C) ou à l'étape D) du procédé tel que défini à l'une des revendications 3 ou 4, est dispersée sous agitation dans un mélange eau-glycol à raison de 1% massique à 20% massique de biomasse pour 100% massique de dispersion ; Si 0176 3034780 33 - Une étape F) au cours de laquelle la dispersion obtenue à l'étape E) précédente, est séparée en ses phases non miscibles, pour obtenir l'extrait glycolique attendu.
6. 6. Procédé tel que défini à la revendication 5, dans lequel le glycol utilisé est le 5 butylèneglycol.
7. 7. Procédé tel que défini à l'un des revendications 5 ou 6, caractérisé en ce que la poudre de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille mise en oeuvre à l'étape E), est une poudre de ladite biomasse unialgale de cellules 10 d'algues rougesissues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce Acrochaetium monitiforme.
8. 8. Procédé tel que défini à la revendication 7, caractérisée en ce que lors de l'étape 15 E) : - le mélange eau-glycol mis en oeuvre est un mélange eau-butylèneglycol dont la teneur massique en butylène glycol (ratio masse butylèneglycol sur masse totale butylèneglycol et eau) est comprise entre 50% et 75%, - la dispersion dans ledit mélange eau-glycol, est effectuée à raison de 2% 20 massique à 10% massique de biomasse pour 100% massique de dispersion ; et - l'agitation est maintenue pendant une à deux heures, puis si nécessaire ou si désiré, - la teneur massique en butylèneglycol est ajustée à 40% par ajout d'eau ; 25
9. 9. Extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenu par le procédé comprenant les étapes successives suivantes : - Une étape A) de préparation d'un échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires, à partir d'un échantillon de macroalgues prélevé dans le milieu naturel ; 30 - Une étape B) de mise en culture dudit échantillon unialgal de cellules de macroalgues pluricellulaires obtenu à l'étape A) dans l'eau de mer additionnée d'au moins une source d'azote, pour obtenir une suspension aqueuse de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille; - Une étape C) de récolte de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues 35 pluricellulaires de petite taille à partir de ladite suspension aqueuse obtenue à l'issue de l'étape B) ; Si 0176 3034780 34 - Optionnellement une étape D) de préparation d'une poudre de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C) ; - Une étape E) au cours de laquelle ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille obtenue à l'étape C) ou à l'étape D) est 5 dispersée sous agitation dans un mélange eau-glycol à raison de 1% massique à 20% massique de biomasse pour 100% massique de dispersion ; - Une étape F) au cours de laquelle la dispersion obtenue à l'étape E) précédente, est séparée en ses phases non miscibles. 10
10. 10. Extrait glycolique tel que défini à la revendication 9, dans lequel le glycol utilisé est le butylèneglycol.
11. 11. Extrait glycolique tel que défini à l'un des revendications 9 ou 10, caractérisé en ce que la poudre de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de 15 petite taille mise en oeuvre à l'étape E) du procédé pour sa préparation, est une poudre de ladite biomasse unialgale de cellules d'algues rougesissues de la classe des Floridéophycées, dans la sous-classe des Nemaliophycidae, de l'ordre des Acrochaetiales, du genre Acrochaetium et de l'espèce Acrochaetium moniliforme. 20
12. 12. Extrait glycolique tel que défini à la revendication 11, caractérisée en ce que lors de l'étape E) du procédé pour sa préparation : - le mélange eau-glycol mis en oeuvre est un mélange eau-butylèneglycol dont la teneur massique en butylène glycol (ratio masse butylèneglycol sur masse totale butylèneglycol et eau) est comprise entre 50% et 75%, 25 - la dispersion dans ledit mélange eau-glycol, est effectuée à raison de 2% massique à 10% massique de biomasse pour 100% massique de dispersion ; et - l'agitation est maintenue pendant une à deux heures, puis si nécessaire ou si désiré, - la teneur massique en butylèneglycol ajustée à 40%.
13. 13. Composition cosmétique (Cl), à usage topique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable et une quantité efficace de l'extrait glycolique d'une biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille tel que défini à l'une quelconque des revendications 9 à 12. 30 35 Si 0176 3034780 35
14. 14. Extrait glycolique de ladite biomasse unialgale de cellules de macroalgues pluricellulaires de petite taille tel que défini à l'une quelconque des revendications 9 à 12, pour son utilisation dans une méthode de traitement thérapeutique visant à diminuer la 5 quantité de sébum produite par la peau humaine et/ou par le cuir chevelu. Si 0176