FR3094225A1 - Extrait d’Alteromonadaceae et son utilisation cosmétique - Google Patents
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Abstract
Titre Extrait d’ Alteromonadaceae et son utilisation cosmétique La présente invention concerne un extrait particulier d’Alteromonada ceae et un procédé de traitement cosmétique de la peau utilisant cet extrait. En particulier la présente invention concerne un exopolysaccharide. Figure pour l'abrégé : néant
Description
La présente invention concerne un extrait particulier d’Alteromonada ceaeet un procédé de traitement cosmétique de la peau utilisant cet extrait. En particulier la présente invention concerne un exopolysaccharide compris dans cet extrait.
Les exopolysaccharides sont des polymères de haut poids moléculaire composés d’oses et sécrétés par un microorganisme dans son environnement proche. En raison de la grande diversité de composition, les exopolysaccharides ont trouvé de nombreuses applications dans diverses industries.
En termes d’exploitation biotechnologique, les exopolysaccharides bactériens sont avantageux car leur production et leur qualité ne dépend pas des aléas climatiques, écologiques et politiques contrairement aux équivalents extraits d’algues ou de plantes. Ces polymères présentent enfin un degré de régularité de structure plus important et peuvent être extraits et purifiés plus facilement.
Par ailleurs, il y a toujours un besoin de nouveaux actifs cosmétiques performants. Les hommes et les femmes, quel que soit leur âge, sont concernés par l’apparence de leur peau, et en particulier celle de leur visage. La peau peut être sèche et être marquée par la présence de rides et ridules, de taches, d'hyperpigmentations, perdre de l'élasticité, mais aussi perdre de la luminosité, ou de l’éclat. En particulier de nouveaux actifs permettant d’hydrater la peau, d’augmenter la luminosité de la peau, d’améliorer la texture de la peau d’améliorer la couleur de la peau ou encore d’améliorer l’éclat du teint de la peau sont recherchés.
De manière inattendue, les inventeurs ont découvert un nouvel exopolysaccharide d’une taille particulièrement importante, et très riche en acide uronique. L’utilisation de ce nouvel exopolysaccharide permet d’améliorer la luminosité de la peau, d’uniformiser le teint et la texture de la peau, améliorant ainsi l’éclat du teint, et de favoriser l’hydratation, générant une sensation de bien-être. En outre cet exopolysaccharide, de par son haut poids moléculaire, confère des propriétés sensorielles à la composition cosmétique, renforçant cette sensation de bien-être. En plus la concentration efficace est plus faible que celles décrites classiquement pour d’autres exopolysaccharides, ce qui présente un intérêt économique pour le formulateur. Cet exopolysaccharides peut notamment être obtenu à partir d’Alteromonadaceae.
La présente invention concerne donc un extrait d’Alteromonadaceaecomprenant un exopolysaccharide de poids moléculaire compris entre 3.106et 5.106Da qui comprend les oses suivants: glucose, galactose, acide glucuronique et acide galacturonique.
L’invention a également pour objet une composition cosmétique comprenant un extrait selon l’invention.
Enfin l’invention a pour objet une utilisation cosmétique et un procédé de traitement cosmétique de la peau mettant en œuvre un extrait selon l’invention ou une composition selon l’invention.
Extrait d’Alteromonadaceae
L’extrait d’Alteromonadaceaeselon l‘invention comprend un exopolysaccharide de poids moléculaire compris entre 3.106et 5.106Da, de préférence entre 3,5 et 4,5.106Da. Le poids moléculaire peut être déterminé par des techniques bien connus de l’homme du métier et en particulier par chromatographie d'exclusion stérique à haute performance (HPSEC).
L’exopolysaccharide présent dans l’extrait selon l’invention comprend les oses suivants: glucose, galactose, acide glucuronique et acide galacturonique.
Selon une forme particulière de l’invention, l’exopolysaccharide compris dans l’extrait comprend par masses présentes décroissantes du galactose, puis de l’acide glucuronique, puis de l’acide galacturonique dans une quantité du même ordre que le glucose.
Les acides uroniques sont des composés chimiques obtenus par oxydation du dernier carbone des oses simples. En particulier l’exopolysaccharide présent dans l’extrait comprend plus de 20% en poids d’acide uronique, de préférence plus de 30% et plus particulièrement plus de 35 % d’acide uronique. Dans un mode de réalisation préféré l’exopolysaccharide comprend entre 35 et 45% en poids d’acide uronique.
Certains oses de l’exopolysaccharide présent dans l’extrait de l’invention peuvent porter des substituants, notamment des substituants lactate ou acétate. En particulier l’exopolysaccharide présent dans l’extrait selon l’invention ne comprend pas d’autres substituants que les substituants lactate et acétate. De manière préférée l’exopolysaccharide selon l’invention ne comprend pas de groupe sulfate.
Dans un mode de réalisation la composition osidique de l’exopolysaccharide présent dans l’extrait de l’invention a été déterminée par chromatographie gazeuse.
L’exopolysaccharide présent dans l’extrait selon l’invention est de préférence très hygroscopique.
De préférence l’extrait selon l’invention comprend entre 0,1 et 10% de cet exopolysaccharide en poids.
De préférence l’extrait selon l’invention a un indice de polydispersité inférieur à 2 et plus particulièrement compris entre 1 et 1,5. Dans un mode de réalisation l’indice de polydispersité a été déterminé par chromatographie d'exclusion stérique.
Par «Alteromonadaceae», on entend les protéobactéries gamma de cette famille. En particulier l’extrait selon l’invention est issu d’Alteromonas sp. De manière préférée l’extrait est obtenu à partir du microorganisme d’Alteromonas sp. déposée selon le Traité de Budapest, le 6 novembre 2018, auprès de la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes ((CNCM), Paris, France) sous le numéro CNCM I-5375). Ce microorganisme normalement associé à l’anémone de mer a été récolté dans le lagon de Moorea.
L’invention concerne également un extrait d’Alteromonadaceaesusceptible d’être obtenu par le procédé de production comprenant les étapes suivantes :
(i) fermentation d’Alteromonadaceaedans de l’eau de mer à une température comprise entre 25 et 40°C, pendant au moins 12 heures sous agitation,
(ii) centrifugation de la culture obtenu à l’étape (i) entre 15000 et 20000 g,
(iii) ultrafiltration du surnageant de l’étape (ii),
(v) dilution du rétentat obtenu à l’étape (iii) dans de l’eau,
(vi) filtration stérilisante, et
(vii) ultrafiltration.
De préférence le procédé peut comprendre en outre une étape (viii) de concentration et lyophilisation ou atomisation.
Par « eau de mer », on entend de l’eau salée comprenant 5 à 40 g de sels par litre d’eau et ayant un pH compris entre 7,5 et 8,4. Dans un mode de réalisation préféré l’eau de mer utilisée dans le procédé est une eau de mer reconstituée par dilution de sel synthétique. De préférence l’eau de mer utilisée dans le procédé est une eau de mer reconstituée par dilution de sel synthétique « Instant Ocean ®» à une concentration de 12 g/L.
Par « agitation » on entend une vitesse d’agitation comprise entre 50 à 300 rpm (rotation par minute), de préférence entre 100 et 200 rpm.
Par « ultrafiltration » on entend une filtration à travers un filtre ayant des pores de diamètre compris entre 1 et 20 nm, de préférence entre 5 et 15 nm.
Les étapes de filtration stérilisante, atomisation et lyophilisation sont des étapes bien connues de l’homme du métier.
De préférence l’extrait selon l’invention est conservé sous vide, ou au sec et au froid, de préférence entre 0 et 25°C, plus préférentiellement entre 2 et 8°C et en particulier à environ 4°C.
Composition
L’invention a également pour objet une composition, notamment cosmétique, comprenant un extrait selon l’invention.
L’invention concerne en outre une composition, notamment cosmétique, comprenant un extrait susceptible d’être obtenu par le procédé de production selon l’invention.
De préférence la composition selon l’invention comprend 0,001% et 5% d’exopolysaccharide tel que définis ci-dessus en poids par rapport au poids de la composition. Dans un mode de réalisation préféré la composition selon l’invention comprend entre 0,002 et 0,1% d’exopolysaccharide tel que définis ci-dessus en poids par rapport au poids de la composition, plus particulièrement entre 0,004 et 0,01% en poids par rapport au poids de la composition. En effet même à de très faibles concentrations l’exopolysaccharide garde son efficacité.
La taille importante de l’exopolysaccharide présent dans la composition confère à celle-ci des propriétés sensorielles intéressantes. Notamment une sensation de douceur au toucher.
L’invention concerne aussi une utilisation cosmétique non-thérapeutique d’un extrait selon l’invention ou d’une composition selon l’invention pour hydrater la peau et/ou améliorer l’éclat du teint. Dans un mode de réalisation préféré la concentration dudit exopolysaccharide dans la composition ou dans l’extrait est comprise entre 0,001% et 5% en poids par rapport au poids de la composition ou de l’extrait respectivement.
Par « améliorer l’éclat du teint », on entend augmenter la luminosité de la peau et/ou améliorer la texture de la peau et/ou homogéneiser la couleur de la peau.
Par « peau », on entend la peau humaine et/ou le cuir chevelu humain. On entend en particulier la peau du corps, en particulier des jambes, des bras, des mains, du cou et la peau du visage. De préférence par « peau » on entend la peau du visage.
L’invention concerne également une utilisation cosmétique non-thérapeutique d’un extrait selon l’invention ou d’une composition selon l’invention pour favoriser une sensation de bien-être.
Selon un mode de réalisation, la composition selon l'invention ou l’extrait selon l'invention peut être utilisé(e) chez un sujet ayant une peau sensible et en particulier une peau sèche et/ou âgée.
Selon un mode de réalisation, la composition selon l'invention ou l’extrait selon l'invention peut être utilisé(e) chez un sujet ayant une peau terne et/ou avec une texture insatisfaisante et/ou un teint irrégulier et/ou des taches de couleur.
Selon un mode de réalisation, la composition selon l'invention ou l’extrait selon l'invention peut être utilisé(e) chez un sujet ayant un cuir chevelu sec.
De préférence la composition utilisée selon l'invention ou l’extrait utilisé selon l'invention est destiné à une application topique.
Les compositions utilisées selon l'invention contiennent préférentiellement un milieu physiologiquement acceptable, c'est-à-dire compatible avec la peau. Ce milieu physiologiquement acceptable peut être plus particulièrement constitué d'eau et éventuellement d'un solvant organique physiologiquement acceptable comme par exemple le propanediol.
Ladite composition peut notamment se présenter sous forme d'une crème ou de lotion. La composition peut être pour une application régulière et en particulier pour une application journalière ou bi journalière.
Les quantités des différents constituants du milieu physiologique de la composition selon l'invention sont celles généralement utilisées dans les domaines considérés. En outre, ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles.
De préférence, la composition est utilisée selon l’invention comme agent actif à une quantité efficace, c’est-à-dire à une quantité lui permettant d’avoir l’effet désiré.
La composition peut comprendre en outre au moins un adjuvant, notamment des adjuvants usuellement employés dans le domaine cosmétique, tels que les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les additifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les antioxydants, les solvants, les parfums, les charges, les filtres, les absorbeurs d'odeurs et les matières colorantes. Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans le domaine cosmétique, et par exemple varient d'environ 0,01 % à 10 % du poids total de la composition. Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse, dans la phase aqueuse et/ou dans les sphérules lipidiques.
L’invention se rapporte également à un procédé cosmétique d’hydratation et/ou d’amélioration de l’éclat du teint de la peau comprenant une étape d’application topique, d’une quantité efficace d’une composition l’invention ou d’un extrait selon l’invention.
L’invention concerne un procédé cosmétique de favorisation d’une sensation de bien-être comprenant une étape d’application topique, d’une quantité efficace d’une composition l’invention ou d’un extrait selon l’invention.
Dans la description et dans les exemples suivants, sauf indication contraire, les pourcentages sont des pourcentages en poids et les plages de valeurs libellées sous la forme "entre … et …", « allant de ... à ... », ou « supérieur à ... » incluent les bornes précisées.
Dans toute la demande, le libellé "comprenant un" ou "comportant un" signifie "comprenant au moins un" ou "comportant au moins un" sauf si le contraire est spécifié.
Figures
Les exemples ci-après sont présentés à titre illustratif et non limitatif du domaine de l’invention.
Exemple 1 : préparation d’un extra
it d’
Alteromonadaceae
La souche d’Alteromonas sp. déposée selon le Traité de Budapest, le 6 novembre 2018, auprès de la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes ((CNCM), Paris, France) sous le numéro CNCM I-5375 est mise à fermenter pendant 12 heures sous agitation dans de l’eau de mer à 30°C. Puis le moult de culture a été récupéré et centrifugé. Le surnageant a ensuite été filtré sur membrane en polyéthersulfone (PES) de 100 kDa puis le rétentat a été dilué dans de l’eau distillé et filtré sur une membrane de 0,22 µm, puis à nouveau filtré sur membrane PES de 100 kDa contre de l’eau distillée, concentré au volume minimal et lyophilisé. Enfin l’extrait obtenu a été stocké sous vide.
Exemple 2 : Analyse de l’extra
it d’
Alteromonadaceae
L’extrait obtenu à l’exemple 1 a été analysé par chromatographie d'exclusion stérique à haute performance (HPSEC), voir figure 1. Cette figure montre que l’extrait obtenu est d’une grande pureté. L’analyse des résultats a permis de déterminer l’indice de polydispersité et le poids de la molécule détectée. L’indice de polydispersité est de 1,4, ce qui confirme la pureté de l’extrait. Le poids de la molécule détectée est de 4,16.106Da.
Cet extrait a aussi été analysé par chromatographie gazeuse (GC), voir figure 2. L’extrait est composé de multiples oses, la molécule comprise dans l’extrait est donc un polysaccharide, nommé EPS par la suite. Elle comprend du glucose, du galactose, de l’acide glucuronique et de l’acide galacturonique dans les proportions suivantes : 1/2/1,5/1. L’EPS est donc particulièrement riche en acide uronique (environ 45%). Or l’acide uronique est connu pour ses effets sur la régénération cellulaire, la modulation de l’inflammation et l’hydratation.
Les inventeurs ont également déterminé par résonance magnétique nucléaire (RMN) que l’EPS comprend des substituants lactate et acétate. Enfin aucun groupement sulfate n’a été détecté par spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier (IRTF).
Exemple 3 :
D
étermination du profil d’interaction de l’extrait
Le profil d’interaction de l’extrait a été obtenu en testant la capacité de cet extrait à inhiber les interactions entre une lectine et l’ose s’y liant. 20 couples lectine/ose (voir tableau 1) ont été testés à 3 concentrations différentes.
Récapitulatif des lectines testées
| Nom abrégé | Nom complet de l’organisme dont est tiré la lectine |
| Con A | Canavalia ensiformis |
| LcH | Lens culinaris |
| FimH | Escherichia coli adhesin FimH |
| BC2L-A | Burkholderia cenocepacia lectin A |
| BPA | Bauhinia purpurea |
| HPA | Helix pomatia |
| WFA | Wisteria floribunda |
| AIA / Jacalin | Artocarpus intergrifolia |
| PA-IL | Pseudomonas aeruginosa lectin A (Lec A) |
| PNA | Arachis hypogaea |
| GSL II | Griffonia simplicifolia |
| WGA | Triticum vulgare |
| UEA I | Ulex europeus |
| BC2L-C Nter | Burkholderia cenocepacia lectin C (N terminal domain) |
| RSL | Ralstonia solanacearum |
| PAII-L | Pseudomonas aeruginosa lectin B (Lec B) |
| SNA | Sambucus nigra |
| CorM | Coregonus lavaretus marenae |
| Langerin | Langerin ECD (Extra Cellular Domain) |
| DC-SIGN | DC-SIGN ECD (Extra Cellular Domain) |
Chaque analyse a été répétée deux fois. Cette technique innovante permet d’obtenir la fonction glycobiologique de l’extrait en dressant son profil d’interaction. En plus de confirmer les résidus présents dans l’exopolysaccharide, cette technique permet de vérifier leur biodisponibilité ainsi que de déceler des motifs qui se comportent comme des résidus (comme les motifs dits « Rhamnose like » qui interagissent de manière similaire à un résidu rhamnose).
L’exopolysaccharide de l’extrait de l’exemple 1 a eu un effet sur les lectines suivantes ConA LCH, DC-Sign, BC2L-A, AIA, PNA, PA-IL, GSL-II, WGA, HPA et COR-M. Ceci montre que l’exopolysaccharide comprend des résidus glucose, galactose, acide glucuronique et de acide galacturonique et des motifs rhamnose-like biodisponibles. Ces résultats confirment la séquence osidique décryptée en GC, et révèle un motif nouveau, le rhamnose-like.
En particulier DC-Sign est impliqué dans les inflammations chroniques cutanées. En outre son inhibition par l’exopolysaccharide indique que celui-ci pourrait avoir un rôle dans la modulation des aspects inflammatoires de la peau. La fixation sur COR-M indique la présence d’un motif « rhamnose-like » biodisponible et indique que l’exopolysaccharide pourrait favoriser la régénération dermo-épidermique en activant la matrice extracellulaire et en favorisant la production de gène médiateur de l’inflammation.
Exemple 4 : Test clinique
- paramètres biométriques
40 volontaires âgés de 46 à 60 ans considérant avoir une peau avec un manque de luminosité et un teint inhomogène ont participé à ce test clinique. Ils ont été séparés en deux groupes qui ont appliqué soit une solution placébo soit une solution comprenant l’EPS. Ces solutions sont appliquées par les volontaires deux fois par jour tous les jours, pendant 28 jours, sur leur visage. La solution placébo comprend un mélange eau, propanediol et pentylène glycol. La solution comprenant l’EPS comprend le même mélange et 0,005% en poids d’EPS. Cette solution a été obtenue en diluant à 1% l’extrait de l’exemple 1.
La luminosité, l’homogénéité de la couleur et la texture de la peau ont été évalués le premier jour et le dernier jour du test (voir figure 3) par la méthode CLBT (Visual evaluationin vivoof ‘complexion radiance’ using the C.L.B.T.™ sensory methodology. Skin Research and Technology 10(1):50-6 March 2004) : évaluation par un expert sur une échelle de 1 à 10.
De même l’hydratation a été évaluée à partir de la pénétration de champs électromagnétiques dans la peau (Mesure de GreyIndex) (voir figure 4).
Les inventeurs ont observé que l’extrait permet d’obtenir un gain important en luminosité, en homogénéité de couleur et de texture. L’extrait permet d’obtenir un résultat nettement plus satisfaisant que le placébo. De même l’hydratation de la peau est améliorée en présence de l’extrait par rapport à la solution placébo. L’extrait permet donc d’hydrater la peau. L’extrait permet également d’augmenter la luminosité de la peau, d’améliorer la texture de la peau et d’homogénéiser la couleur de la peau, donc d’améliorer l’éclat du teint.
Exemple 5 : Test clinique- paramètres émotionnels
Le test Emospin a été utilisé pour évaluer l’impact émotionnel de l’utilisation de l’extrait.
D’une part, la prosodie des volontaires de l’exemple 4 a été étudiée avant le test et à la fin de celui-ci. En particulier la fréquence (mesurée en Hertz (Hz)) et le volume (mesuré en décibels (dB)) de la voix des volontaires de l’exemple 4 ont été évalués (voir figures 5 et 6). Les inventeurs ont observé que la fréquence et le volume de la voix des volontaires ayant utilisé l’extrait ont baissés de manière significative par rapport au volontaires ayant utilisé le placébo. Cette diminution est un signe de détente et donc d’amélioration de la sensation de bien-être de la personne.
D’autre part, les mots utilisés par les volontaires de l’exemple 4 pour répondre aux questions « Comment vous décririez vous physiquement ? » (figure 7) et « Quel serait la première impression de quelqu’un qui vous rencontrerez pour la première fois ?» (figure 8) ont été étudiés avant le test et à la fin de celui-ci. Les mots suivants sont considérés comme positifs « gaie », « moins », « aime », « à l’écoute », « honnête », « être copine », « sympa », « sociable », « rigolote », « bien dans sa peau », « avenante », « souriante », et les mots suivants comme négatifs « rien », « agé », « moche », « fade », « tombant », « difficile », « ridée », « poche sous les yeux », « encore », « moyenne », « mal peignée » et « simple » .
Les inventeurs ont observé que la fréquence des mots positifs était augmentée concomitamment à la diminution de la fréquence des mots négatifs chez les volontaires ayant utilisé l’extrait. Cette modification des mots utilisés est un signe de l’amélioration de la sensation de bien-être des volontaires ayant utilisé l’extrait. Au contraire les volontaires ayant utilisé le placébo ont continué à utiliser majoritairement des mots négatifs.
Claims (9)
- Extrait d’Alteromonadaceaecomprenant un exopolysaccharide de poids moléculaire compris entre 3.106et 5.106Da qui comprend les oses suivants: glucose, galactose, acide glucuronique et acide galacturonique.
- Extrait selon la revendication 1, dans lequel l’AlteromonadaceaeestAlteromonas sp.
- Extrait selon la revendication 1 ou 2, dans lequel l’exopolysaccharide comprend entre 35 et 45% en poids d’acide uronique.
- Extrait selon l‘une quelconque des revendications 1 à 3, ayant un indice de polydispersité inférieur à 2.
- Extrait d’Alteromonadaceaesusceptible d’être obtenu par le procédé de production suivant : Procédé de production d’un extrait tel que défini dans l’une quelconque des revendications 1 à 4, comprenant les étapes suivantes :
(i) fermentation d’Alteromonadaceaedans de l’eau de mer à une température comprise entre 25 et 40°C, pendant au moins 12 heures sous agitation,
(ii) centrifugation de la culture obtenu à l’étape (i) entre 15000 et 20000 g,
(iii) ultrafiltration du surnageant de l’étape (ii),
(v) dilution du rétentat obtenu à l’étape (iii) dans de l’eau,
(vi) filtration stérilisante et
(vii) ultrafiltration. - Composition cosmétique comprenant un extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 5.
- Utilisation cosmétique non-thérapeutique d’un extrait tel que défini dans l’une quelconque des revendications 1 à 5 ou d’une composition selon la revendication 6 pour hydrater la peau et/ou améliorer l’éclat du teint de la peau, et/ou favoriser une sensation de bien-être.
- Utilisation cosmétique non-thérapeutique selon la revendication 7, dans laquelle la concentration dudit exopolysaccharide dans la composition ou dans l’extrait est comprise entre 0,001% et 5% en poids par rapport au poids de la composition ou de l’extrait respectivement.
- Procédé cosmétique d’hydratation et/ou d’amélioration de l’éclat du teint de la peau, et/ou de favorisation d’une sensation de bien-être comprenant une étape d’application topique, d’une quantité efficace d’une composition selon la revendication 6 ou d’un extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 5.
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Also Published As
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| WO2020201343A1 (fr) | 2020-10-08 |
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