FI93953B - Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten sykloalkyylitiatsolijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

93953

Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten sykloal-kyylitiätsolijohdannaisten valmistamiseksi

Keksintö koskee uusien sykloalkyylitiatsolijohdan-5 naisten valmistamiseksi, joiden kaava on

10 1 J I

X ^ NH

u .

15 jossa R on vety tai alempi alkyyli, R3, R2, R3 ja R4 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyä, alempaa alkyyliä, alempaa alkenyyliä, C3_6-sykloalkyyliä tai fenyyliryhmää, joka on substituoimaton tai substituoitu enintään kolmella substituentilla, jotka on valittu toisistaan riippumatta 20 ryhmästä alempi alkyyli, alempi alkoksi ja halogeeni, tai R3 ja R2 muodostavat yhdessä hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, C2_5-alkyleeniryhmän, joka on substituoimaton tai substituoitu alemmalla alkyylillä, ja n on kokonaisluku 0-3; ja, kun R1 on muu kuin R2 ja/tai R3 on muu . 25 kuin R«, kaavan I mukaisten yhdisteiden enentiomeerien, diastereomeerien ja rasemaattien valmistamiseksi, ja, kun R on vety, kaavan I mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien emästen kanssa muodostamien suolojen valmistamiseksi.

30 Kaavan 1 yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hy- ·. väksyttävät suolat ovat käyttökelpoisia bronkopulmonaari- sina lääkeaineina esimerkiksi helpottamassa astmaa ja allergisia reaktioita.

Tässä käytettynä termillä "alempi alkyyli" tarkoi- 35 tetaan edullisesti suoraa tai haaroittunutta tyydytettyä 2 93953 k hiilivetyryhmää, joka sisältää 1-7 hiiliatomia esimerkiksi metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, t-butyy-li, neopentyyli, pentyyli, heptyyli ja vastaavat. Termi "alempi alkenyyli" tarkoittaa suoran tai haaroittuneen 5 ketjun omaavaa hiilivetyryhmää, joka sisältää 3-7 hiili-atomia esimerkiksi propenyyli, butenyyli, pentenyyli, hek-senyyli ja vastaavat. Esimerkkejä "C2_5-alkyleenistä" ovat etyleeni, propyleeni, butyleeni ja pentyleeni. Termi "C3_6-sykloalkyyli" tarkoittaa syklistä alkyyliryhmää, jossa 10 on 3-6 hiiliatomia esimerkiksi syklopropyyli, syklopen-tyyli, sykloheksyyli ja vastaavat. Termi "halogeeni" tarkoittaa klooria, bromia, jodia ja fluoria.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden suolat esiintyvät (E) tai trans geometrisina isomeereinä. Tässä käy-15 tettynä termillä "kaavan I mukaiset yhdisteet" tarkoitetaan enantiomeereja, diastereomeereja ja niiden raseemisia seoksia, kun Rx on muu kuin R2 ja/tai R3 on muu kuin R4.

Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat ne, joissa R on vety, R: ja R2 ovat riippumattomasti alempi 20 alkyyli, R3 ja R4 ovat vety ja n on 0-3.

Vielä edullisempi kaavan I mukaisten yhdisteiden ryhmä koostuu niistä, joissa R on vety, Rx ja R2 ovat riippumattomasti alempi alkyyli, R3 ja R4 ovat vety ja n on 1.

Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat: 25 (E)-4-[ [3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli )etenyyli] fenyy- li]amino]-2,2-dietyyli-4-oksovoihappo, (E) -4 - [ [3 - [ 2-( 4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli )etenyyli] fe-nyyli]amino]-2,2-dietyyli-4-oksovoihappo ja (E)-4-[[3-[2—(4-syklopentyyli-2-tiatsolyyli)etyyli]fenyy-30 li]amino-2,2-dietyyli-4-oksovoihappo.

•f Muita kaavan I mukaisten yhdisteiden esimerkkejä ovat: (E) -4- [ [3- [ 2- ( 4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli )etenyy-li]fenyyli]amino]-2,2-dipropyyli-4-oksovoihappo; 35 (E)-4- [ [3- [2-( 4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli )etenyy- li]fenyyli]amino]-2,2-diheksyyli-4-oksovoihappo;

II

93953 3 (E)-4-[[3-[2-(4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2-metyyli-2-propyyli-4-oksovoihappo; ( E )-4- [ [3-[2-( 4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2-etyyli-2-propyyli-4-oksovoihappo; 5 ( E ) -4- [ [3- [ 2- ( 4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli )etenyy- li]fenyyli]amino]-2-butyyli-4-oksovoihappo; ( E)-4- [ [3-[2-(4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2-(2-butyyli)-4-oksovoihappo; (E)-2-butyyli-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyy-10 li)etenyyli]fenyyli]amino]-2-etyyli-4-oksovoihappo; (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2-etyyli-2-metyyli-4-oksovoihappo; (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2-(1,1-dimetyylietyyli)-4-oksovoihappo; 15 (E)-4-[[3-[2-(4-sykloheksyyli-2-tiatsolyyli)etenyy- li]fenyyli]amino]-2-heksyyli-2-metyyli-4-oksovoihappo; (E)—4—[[3—[2—(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2-(2-propenyyli)-4-oksovoihappo; (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-taitsolyyli)etenyy-20 li]fenyyli]amino]-2-syklopentyyli-4-oksovoihappo; (E )-4- [ [3-[2-(4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-3,3-dipropyyli-4-oksovoihappo; ( E )-4- [ [3-[2-(4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-3,3-dietyyli-4-oksovoihappo; 25 ( E )-4- [ [ 3- [ 2- ( 4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy- li]fenyyli]amino]-2,2-dipropyyli-4-oksovoihappo; (E )-4- [ [3-[2-(4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2,2-diheksyyli-4-oksovoihappo; (E)-4-[[3-[2-(4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-30 li]fenyyli]amino]-2-metyyli-2-propyyli-4-oksovoihappo; / ( E )-4- [ [3-[2-(4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy- li]fenyyli]amino]-2-etyyli-2-propyyli-4-oksovoihappo; ( E )-4- [ [3- [2-( 4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli )etenyy-li]fenyyli]amino]-2-butyyli-4-oksovoihappo; 35 (E)-4-[[3-2-(4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)etenyy- li]fenyyli]amino]-2-(2-butyyli)-4-oksovoihappo; 4 93953 (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2-etyyli-4-oksovoihappo; (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2-etyyli-2-metyyli-4-oksovoihappo; 5 (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyy- li]fenyyli]amino]-2-(1,1-dimetyylietyyli )-4-oksovoihappo; ( E ) -4- [ [3- [ 2- (4-sykloheksyyl:i-2-tiatsolyyli )etenyy-li] fenyyli]amino] -2-heksyyli-2-metyyli-4-oksovoihappoetyy-liesteri; 10 (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyy- li]fenyyli]amino]-2-(2-propenyyli)-4-oksovoihappo; (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyy-li]fenyyli]amino]-2-syklopentyyli-4-oksovoihappo; (E )-4- [ [3- [2-( 4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli )etenyy- 15 li]fenyyli]amino]-3,3-dipropyyli-4-oksovoihappo; ( E )-4- [ [3- [2-[4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli )etenyy-li] fenyyli] amino] -3,3-dietyyli-4-oksovoihappometyyliesteri ja vastaavat.

Kaavan I mukaisia sykloalkyylitiatsolijohdannaisia 20 ja niiden suoloja voidaan valmistaa siten, että a) yhdiste, jonka kaava on fj-s m, )—(l )>—,

· 25 N I

'k nh, . u 30 jossa n tarkoittaa samaa kuin edellä, asyloidaan yhdisteellä, jonka kaava on 35 Λ tai «Accv

XI XII

II

93953 5 joissa Rj, R2, R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä, R" on alempi alkyyli ja Y on hydroksi tai poistuva ryhmä, tai b) yhdiste, jonka kaava on 5 ίο U o ^

XIII

jossa R3, R4 ja n tarkoittavat samaa kuin edellä, sillä edellytyksellä, että ainakin toinen symboleista R3 ja R4 15 on muu kuin vety, hydrolysoidaan emäksellä, ja c) haluttaessa saatu kaavan I yhdiste, jossa R on vety, muutetaan suolaksi farmaseuttisesti hyväksyttävän emäksen kanssa.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden ja lähtöaineiden 20 valmistusta voidaan kuvata reaktiokaavioilla I, II, III, IV ja V.

6 93953

Reaktiokaavio I 5 CHi 11 NO2 11 (E)

10 T I

I halogeeni ^

, IV

1 .1 ^ ra 11 20 v O-Q / CHj N \ * 25 ff) u

VI

30 35 jossa n on kuten edellä esitetään ja HAL on halogeeni.

93*53 7

Reaktiokaaviossa I kaavan II yhdiste, joka on tunnettu yhdiste tai joka voidaan valmistaa tunnettujen menetelmien muksisesti, halogenoidaan vastaavaksi kaavan III yhdisteeksi alkanolin länäollessa esimerkiksi metanolin ja 5 halogenointiaineen kuten esimerkiksi bromin läsnäollessa lämpötilassa, joka on 10°C:sta huoneenlämpötilaan. Kaavan III yhdiste voidaan käyttää paikan päällä seuraavassa reaktiovaiheessa.

Kaavan IV yhdiste, joka on tunnettu yhdiste, muu-10 tetaan kaavan V yhdisteeksi käsittelemällä tiolointiai-neella esimerkiksi fosforipentasulfidilla tai Lawessonin reagenssilla inertin liuottimen esimerkiksi hiilivedyn kuten tolueenin tai vastaavan läsnäollessa reaktioseoksen palautusjäähdytys lämpötilassa.

15 Tämän jälkeen kaavan VI yhdiste valmistetaan anta malla kaavan III yhdisteen reagoida kaavan V yhdisteen kanssa edullisesti liuottimen esimerkiksi alkanolin kuten etanolin tai vastaavan läsnäollessa lämpötilassa noin ΟΙ 00°C. 1

Reaktiokaavio II

8 93953 5

/—CHK 1 HAL H

<φ. V^C4 1 ΟΗ,-Ο-ΚΗ, V- a/ / vn

in X

10 0

4 V4X 1 T I

V X N CHi W

15 ^-CHT

lb ^ IX

viii X

^—CHz Π-S

(cL. /-\ —π

20 V X X

S—CH{ II NOj (E)

VI

25 30 35 jossa n on kuten edellä esitetään ja HAL on halogeeni.

93953 9

Reaktiokaaviossa II kaavan III yhdiste saa reagoida kaavan VII yhdisteen kanssa, joka on tunnettu yhdiste, jolloin saadaan vastaava kaavan VIII yhdiste. Reaktio suoritetaan edullisesti inertin liuottimen esimerkiksi alka-5 nolin kuten etanolin läsnäollessa lämpötilassa noin 0-100°C.

Kaavan VIII yhdiste saa reagoida kaavan IX yhdisteen kanssa, joka on tunnettu yhdiste, dehydratoivan aineen esimerkiksi etikka-anhydridin tai vastaavan läsnäol-10 lessa lämpötilassa 0-150°C, jolloin saadaan vastaava kaavan VI yhdiste.

Reaktiokaavio III

10 93953 5 r^\jrsv 5 t / —CH* (E) / ^TVO-i ")Λ» _ I 11 Rj No • u / 20 B, CO2R· rc\jr\ φ. / \N^ij 1

25 V / NH

^-CHf

(E) l T

Ia 30 jossa R' on vety ja R^, &2r R3' R4 Ja n ovat kuten edellä 35 esitetään.

Il 93953 11

Reaktiokaaviossa III kaavan VI yhdiste pelkistetään vastaavaksi kaavan X yhdisteeksi käyttämällä pelkistintä, esimerkiksi tinakloridia, Raney-nikkeliä vedyn kanssa ja vastaavia pelkistimiä inertin liuottimen esimerkiksi alka-5 nolin kuten etanolin läsnäollessa lämpötilassa noin 0 -100°C.

Kaavan X yhdiste saa reagoida kaavan XI yhdisteen kanssa, joka on tunnettu yhdiste tai joka voidaan valmistaa tunnetuilla menetelmillä, inertissä liuottimessa esi-10 merkiksi halogenoidussa hiilivedyssä kuten metyleeniklo-ridissa, eetterissä kuten 1,2-dimetoksietaanissa tai vastaavassa valinnaisesti emäksen esimerkiksi natriumasetaa-tin läsnäollessa lämpötilassa -10°C-100°C, jolloin saadaan vastaavaa kaavan Ia yhdistettä.

v

Reaktiokaavio IV

12 93953 5 Γ s R^COjR· <φ. y—x ^—I o/ n V / N + /4

10 CH/ k ^ X

X^ X/ Rf XC0Y

(B)

X XII

X

r°\jr\ //° (C&). )-\ ^---jl

20 X-Ch/ II NH

vv u lb 25 30 jossa R" on alempi alkyyli, Y on hydroksi tai poistuva ryhmä kuten halogeeni tai vastaava ja R^, R2, Rg, R4 Ja n ovat kuten edellä määritellään.

Il 13 Q 7 Q C 7 s vj y u u

Reaktiokaaviossa IV kaavan X yhdiste asyloidaan kaavan XII yhdisteellä, jossa Y on poistuvaryhmä kuten halogeeni ja joka on tunnettu yhdiste tai joka voidaan valmistaa tunnettujen menetelmien mukaisesti, inertissä 5 liuottimessa esimerkiksi halogenoidussa hiilivedyssä kuten metyleenikloridissa tai vastaavassa lämpötilassa -10°C -50°C, jolloin saadaan vastaava kaavan Ib yhdiste.

Vaihtoehtoisesti kaavan Ib yhdiste voidaan valmistaa asyloimalla kaavan X yhdiste kaavan VII yhdisteellä, 10 jossa Y on hydroksi ja joka on tunnettu yhdiste tai joka voidaan valmistaa tunnetuilla menetelmillä, inertissä liuottimessa esimerkiksi halogenoidussa hiilivedyssä kuten metyleenikloridissa tai vastaavassa lämpötilassa -10°C -50°C aktivointiaineen esimerkiksi disykloheksyylikarbodi-15 imidin tai vastaavan läsnä ollessa.

Reaktiokaavio V

14 93953 ^ R.COjR* <Xx vL·

\ ^ NH

U - 10

V

/®H2v \a

XIII

20 + £V-r? p f°2*'

NH

25 x^f

Id 30 jossa R', R1, R2, R3, R^ ja n ovat kuten aikaisemmin on määritelty sillä edellytyksellä että vähintään toinen R^-35 :sta ja R2:sta sekä Riista ja R^:sta on muu kuin vety.

Il 93953 15

Reaktiokaaviossa V kaavan Ie yhdiste voidaan trans-aminoida vastaavaksi kaavan Id yhdisteeksi ensin syklisoi-malla kaavan Ie yhdiste dehydratointiaineella esimerkiksi happokloridilla kuten esimerkiksi asetyylikloridilla tai 5 vastaavalla joko liuottimen kanssa tai ilman liuotinta kuten tolueenin tai metylweenikloridin kanssa palautus-j äähdytyslämpötilassa.

Saatava kaavan XIII yhdiste voidaan käyttää ilman puhdistusta tai se voidaan eristää standardimenetelmillä 10 kuten kiteyttämällä tai vastaavasti ja sitten pilkkoa emäksen kuten alkalimetallin tai maa-alkalimetallihyhdok-sidin kuten litiumhydroksidin tai vastaavan kanssa siten että läsnä on vesipitoinen/orgaaninen liuotin kuten vesi/-metanoli tai vastaava lämpötilassa 25°C-100°C.

15 Tämän jälkeen kaavan Id yhdiste, kun se ensin on tehty happamaksi hapolla kuten vetykloridihapolla tai vastaavalla, voidaan eristää standardimenetelmillä kuten kiteyttämällä tai vastaavilla menetelmillä.

Kaavan I mukainen yhdisteryhmä käsittää myös yhdis-20 teiden suoloja, niiden enantiomeereja, diastereomeereja ja rasemaatteja, joissa R on vety, ja nämä suolat voidaan valmistaa kyseisten yhdisteiden reaktiolla emästen kanssa, jotka ovat myrkyttömiä ja joissa on farmaseuttisesti hyväksyttävä kationi. Yleisesti mikä tahansa emäs, joka muo-: 25 dostaa suolan karboksyylihapon kanssa ja jonka farmakolo giset ominaisuudet eivät aiheuta haitallisia fysiologisia vaikutuksia nautittaessa, sopii tämän keksinnön alueeseen. Sopivia emäksiä ovat siten esimerkiksi alkalimetalli- ja maa-alkalimetallihydroksidit ja -karbonaatit, ammoniakki, 30 primaariset, sekundaariset ja tertiaariset aminit kuten esimerkiksi monoalkyyliamiinit, dialkyyliamiinit, trial-kyyliamiinit, typpeä sisältävät heterosykliset amiinit esimerkiksi piperidiini ja vastaavat.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja R:n ollessa vety 35 niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ovat aktiivi- i 16 93953 siä keuhkoputkenkuristumassa ja ovat siten käyttökelpoisia aineita esimerkiksi hoidettaessa astmaa ja allergisia reaktiota. Keksinnön kaavan I yhdisteiden käyttökelpoinen aktiivisuus voidaan tuoda ilmi kuten seuraavana esitetään.

5 Leukotrieeni reseptori sitomisanalyysi (marsun keuhko-homogenaatti) 1) Menetelmät a) Membraanihomogenaatin valmistaminen Koiraspuolisia albiino marsuja (Hartley laji, paino 10 400-500 g) tapettiin avaamista varten. Keuhkot poistet tiin, jäädytettiin nestetypessä ja säilytettiin -70°C:ssa käyttöön asti. Pakastettu kudos sulatettiin, pienennettiin pieniksi palasiksi ja huuhdeltiin fosfaattipuskuroidussa suolaliuoksessa. Kudos sijoitettiin 40 ml:aan homogenoin-15 tipuskuria, jossa oli 0,25 M sukroosia, 10 mM Tris-HCl, (pH 7,5) ja seuraavia proteaasi-inhibiittoreita: soijapapu trypsiini-inhibiittori ( 5pg/ml) bacitrasiinia (100 pg/ml), betsamidia (10'3M) ja fenyylimetyylisulfonyyli-fluoridia (104 M). Proteaasi-inhibiittorit lisättiin mu-20 kaan estämään proteolyysiä homogenointi- ja sentrifu-gointiprosessien aikana. Kudos homogenoitiin sitten 0-4°C:ssa Brinkman PT-20 polytronilla kaikkiaan 1 minuutti (10 sekunttia pulsseja asetuksella 6). Homogenaatti sent-rifugoitiin (1000 x g 10 minuuttia), kudoskappaleiden, . 25 rikkoutumattomien solujen ja ydinten poistamiseksi. Super- r nantti sentrifugoitiin 30 000 x g 30 minuuttia, jolloin

saatiin pellettejä, joihin viitataan raakamembraanifrak-tioina. Tämä fraktio suspendoitiin sitten uudelleen inku-bointipuskurissa (10 mM Pipes puskuri, pH 7,5, 50 mM

30 NaCL), homogenisoitiin Teflon-homogenisoijassa ja sentri- . fugoitiin uudelleen 30 000 x g 30 minuuttia. Pelletit sus- pendoitiin uudelleen inkubointipuskuriin Teflon-homogeni-soijalla suspension proteiinipitoisuuden ollessa 10 - 20 mg/ml. Proteiinien konsentraatiot määritettiin käyttäen 35 Biorad reaktiokittiä.

Il 93953 17 b) Reseptori-ligandi sitomisanalyysi Optimaaliset analyysiolosuhteet määritettiin ana-lyysiseoksella, jossa oli Tyrode liuosta; 0,1% nautasee-rumiaalbumiinia (BSA); 1 mM glysiiniä; 1 mM kysteiiniä; 5 3,5 nM 3H-LTD4 ja membraanivalmistetta (100-200 pg prote iinia) lopullisen tilavuuden ollessa 250 pl. Inkubointi suoritettiin 20°C:ssa 30 minuuttia. 20°C;ssa sitoutuminen kasvoi lineaarisesti proteiinikonsentraation mukana, saavutti tasapainon 20 minuutissa, oli kyllästyvä ja rever-10 siibeli lisättäessä merkitsemätöntä LTD4:a. Sitoutuneen erottaminen vapaasta 3H-LTD4:sta suoritettiin nopeasti suodattamalla CF/C lasikuitusuodattimilla ja pesemällä kahdella 4 ml:n annoksella Tyrode-liuosta, jossa oli 0,1 % BSA:ta. Suodattimiin jäävä radioaktiivisuus mitattiin 10 15 ml:ssa Aquasolia. Spesifinen sitoutumiseksi määritettiin se, joka korvautui 10.6 M merkitsemättömällä LTD4:lla ja se oli 95 % kokonaissitoutumisesta.

Leukotrieeni-indusoitu keuhkoputkikurouma marsuilla- elävässä elimistössä leukotrieeni PA (LTD) antagonistikokees-20 sa

Lakimonsisäinen ja suun kautta tapahtuva testaus Koiraspuolisia marsuja (Hartley laji Charles River), paino 300 - 500 g, nukutettiin uretaanilla ( noin 2 g/kg) vatsakalvon sisäisesti ja polyetyleenikatetri ase- 25 tettiin kaulavaltimoon laskimonsisäistä lääkkeen annoste lua varten. Henkitorven paine (cm H20) taltioitiin Statham paineanturista (P 32 AA). Propranololia annosteltiin 5 minuuttia ennen LTD:n lisäämistä. Kaksi minuuttia myöhemmin spontaani hengittäminen estettiin sukkinyylikoliinik-30 loridilla (1,2 mg/kg) annosteltuna laskimonsisäisesti ja eläimet yhdistettiin Harvard (Model 680) pienten eläinten hengityskoneeseen, 40 henkäystä minuutissa ja 4,0 cm3:n tilavuus. Kontrolliaine tai koelääke annosteltiin katetrin kautta kaulavaltimoon 1 minuutti ennen kuin eläimille an-35 nettiin laskimonsisäisesti maksimi kuristumisannos LTD:ta 18 93953 (25 pg/kg) laskimonsisäisesti. Muutos henkitorven paineessa arvioitiin vertailulle ja lääkeaineella käsitellyille eläimille ja laskettiin prosentuaalinen inhibiitio. Suun kautta annettavan aktiivisuuden määrittämistä varten an-5 nettiin eläimille annokset koeyhdistettä tai vertailuainetta kaksi tuntia ennen LTD:n annostelua (25pg/kg, laskimonsisäisesti ).

Koeyhdisteiden suhteellinen potentiaali (ID50 arvot) suun kautta ja laskimonsisäisesti annostelluille yh-10 disteille määritettiin kasvattamalla koeyhdisteen annoksia. Eri yhdisteiden aikavaikutuksen määrittämiseksi vaihdeltiin aikaa, joka oli yhdisteen annostelun ja LTD:n annostelun välissä. Aktiivisuuden riippuvuus ajasta laskettiin aikana, jolloin inhibiitio pieneni 40 %:iin.

Il 93953 19

(O

μ

μ jC νθ Cv ^ I

3 +1 +1 + 1

(0 CO H I O CO I I

id M VO I Cv CO I

i I

3 H Cv Ή

3 »H + +1 +1 I

O m £ +i i co >H co i μ m i civ co σ> i co co o> i Q) O) « X ™ _

\ r-l I rH rH O

Oi +1 I + +1 +1 I

H ον I σν σ> ο ι η σν σ» νο ο ι Ο ’-ι <—ι

(0 C

3 ε c μ 3 (0 C "V "V ""

μ -Ρ Ο 3 Ο "v νθ CN

Ο Μ Ή 3 w rH CO VO rH

Dl rl μ Β Q - - - r 3 Ό μ Μ μ Ο Ο Ο Ό £ + Οι— w —' ν— w ι C <0 Λ Ä I ! •Ηθ·Η"ν<ο μ · μ νο μ ι ι χ λ σ» +> +ι ι +ι +ι +ι ^ c c ε μ co cv tv en ο ο μ 3 σ> ον co ον E" Ih o (0 j a <#> μ x o · '-r ^ co μ O μ > co co μ μ vo

id μ (0 « μ O CO

3 μ μ μ »· » * O O

^ μ μ o +f O o μ Λ Φ Oi V- in — r-r

3 -H dl ϋ r, μ O

(ÖÄ^i^O N μ (N +1

Eh C O O) m +1 +1 +1 00 μ C E Q Oi vo Oi CM Oi Oi Oi # m μ - 3 o o o m o 0 r-v es vo co μ μ μ 2 οοοοομ μ C 3- - - - ·- · co a) — o ^ o o o o

1 c I I I I I

• τ*μ o ι f—ι »—ι i—i '—ι : q ε m *-> ι μ μι μι μ

Ei 3 Ο μ es ι μ ι ι μ μ μμ μι J μ Η μ » Ο >ι <Ν Jd >1 μ I >ιΗ Ι^ι^

NCS ΡΝΙ >· α>>ι>» 3 >ι >η 3 I

>ί I aCH I I (S £3C>i Λ G >ι Λ3μ μ r-ι ο ο φ ο ο-'ΐοοφμ o φ μ ο φ μ οοαμμ> μ μ ο α μ μ φ μ μ φ μ μ >ι W C Λ Αί © 0 ÄH β ttJi ®μ Λφμ Αί Φ >ι μμιο^'-νφ >< ι^μ ιο >ι^3 >ι·^τ3 >ι ^ν +» <ο ε .C to μ a: co >ι ε jc, co μ ι co μ ι co μ φ ι μ (0 μ ι μ Ο ι μ ιΰ μ ι μ (Ν ι μ d ι μ ε ^ μ η Ο ^ >1 I >1 * I μ > S ^ w Μ μ > — s IN '-'Soj w >,Μ ι <ν μ ο ι μ ι ι μ μ ο ι η ι imi imi (N I >H <0 CS O r-ι CM (0 >1 CD CS O r-ι O <S On CSOr-i

ι—ι μ >h Ji i—1 W 0 υμ >,j< lj a o fti-J M O ^ m O

imcoi+jc ιμαοι-μααι-ρβοι-ρεο CO >H 0) ι co (0 μ co ι Φ ιαθ(θμ«3οο<θμ0<Ρ}<θμθι ι—ι >< μ ^ ι—ι μ ε >—'ΝΉ^^μΕί^μ ε >μ ε a i_j Qj ι—ι ι ι—ι μ φ ι—ι ι ι—ι ι ι—ι μ (0 μ 1—1 μ Λ (0 1—1 μ (0 (0

ι ο μ μ I ι ι~ι ι μ μ μ ι ι γ—ι Ο ι ι —ι £ ι ι 1—1> .C

φ τ* μ η Μ ν| Ν μ ^μμμ^Νμ>ν»ΝμμνίΝμμ

μ I Οι >ι >ι I I Η I >ι >ι >ι I ΙΜΟΙ I M O I IHO

CD Λ>(^μ >ιΟ^>ι>ι>ι^μ ίπίΟ^μ >ι>^-Η >ι> μ ΒΗβΡΙι1Η>ιΟιΒμβμΜμ^ΜΗ>ιΟί3Η^ιΟ

Ό ^^©©w^ca^CaJlD'-'^COw^CCD'-'^iCM

jC >i μ μ >ιφφ Φ μ μ >η Φ ι >ι © Αί >ι Φ Αί >< co © ό a φ ό ιο μ ^ +> μ ο μ μ ο 20 93953

Seuraavassa taulukossa II kaavan I mukaisen yhdisteen (yhdiste A, R = syklobutyyli) vaikutuksen kestoa on verrattu EP-patenttijulkaisusta 219 436 tunnetun yhdisteen (yhdiste B, R = isopropyyli) vastaavaan.

Taulukko II

R °W^/C02H

A:R = syklobutyyli B:R = isopropyyli

Koe Yhdiste A Yhdiste B

In vitro 3 [ H]LTD^-sitoutuminen (g.p. keuhko, IC5QnM)a 13 7

In vivo a LTD^ bronkoahdistuma (g.p.) IV ID50 (mg/kg 0,13 0,04 PO ID50 (mg/kg) 0,12 0,15 • Vaikutuksen kesto (tuntia)*3 IV (1 mg/kg) 27 11 PO (10 mg/kg) 28 15 a

Antigeenibronkoahdistuma (g.p.) IV ID50 (mg/kg) 0,02 0,02 PO ID50 (mg/kg) 0,02 0,03

Vaikutuksen kesto (tuntia)*3 PO (10 mg/kg) 33 22 a g.p. = marsu ^Vaikutuksen kesto on määritelty ajanjaksoksi, jonka aikana LTD.-indusoidun bronkoahdistuman inhibointi laskee 50 4 %:iin määrätyllä annoksella.

• I

93953 21

Taulukosta II ilmenee, että kaavan I mukaisen yhdisteen vaikutuksen kesto on huomattavasti pitempi kuin tunnetun yhdisteen.

Kaavan I mukainen yhdiste, sen enantiomeeri, 5 diastereomeeri tai rasemaatti tai koostumus, joka sisältää terapeuttisesti aktiivisen määrän kaavan I yhdistettä tai sen enentiomeeria, diastereomeeria tai rasemaattia tai sen suolaa, voidaan annostella alalla hyvin tunnetuilla menetelmillä. Siten kaavan I mukainen yhdiste, sen 10 enantiomeeri, diastereomeeri tai rasemaatti tai sen suola voidaan annostella yksin tai yhdessä muiden faramaseuttisten aineiden kanssa esimerkiksi antihistamiinien, välittäjän vapauttajien inhibiittoreiden, metyyliksantiinien, beta-agonistien tai antiastmaattisten 15 steroidien kuten prednisonin ja prednisoliinin kanssa, suun kautta, parenteraalisesti, peräsuolen kautta tai inhalaatiolla esimerkiksi aerosolina, mikrojauheisena jauheena tai sumutettavana liuoksena. Suun kautta tapahtuvaa annostelua varten ne voidaan annostella tabletteina, 20 kapseleina esimerkiksi seoksena talkin, tärkkelyksen, maitosokerin tai muiden inerttien aineosien kanssa siis farmaseuttisesti hyväksyttävien kantajien kanssa tai vesi-liuoksina, suspensioina, eliksiireinä tai vesipitoisina alkoholiliuoksina esimerkiksi siten, että mukana on lisäk-< 25 si sokeria tai muita makeuttimia, makuaineita, väriainei ta, paksuntimia tai muita konventionaalisia farmaseuttisia lisäaineita. Parenteraalista annostelua varten ne voidaan annostella liuoksina tai suspensioina esimerkiksi vesi-liuoksina tai maapähkinäöljyliuoksina tai suspensioina 30 käyttäen lisäaineita ja kantajia, jotka ovat konventionaalisia tässä annostelutavassa. Aerosoleina annostelemista varten ne voidaan liuottaa sopivaan farmaseuttisesti hyväksyttävään liuottimeen esimerkiksi etyylialkoholiin tai sekoittuvien liuottimien yhdistelmiin ja sekoittaa 35 farmaseuttisesti hyväksyttävän ponneaineen kanssa. Tällai- 22 93953 t set pakataan käytettäviksi paineistetuissa säiliöissä, joissa on aerosoliventtiili paineistettujen koostumuksien vapauttamiseksi. Edullisesti aerosoliventtiili on mitta-venttiili, joka siten vapauttaa aktivoitaessa etukäteen määrätyn tehokkaan määrän aerosolikoostumusta.

Käytännössä kaavan I mukaisen yhdisteen tai sen suolan annos ja annosten välinen aika, riippuvat kaavan I mukaisen yhdisteen tai sen suolan tehokkuudesta ja aktiivisuuden kestosta ja annostelutavasta kuten myös hoidettavan tilan vaikeudesta, hoidettavan nisäkkään iästä ja vastaavista seikoista. Kaavan I mukaisen yhdisteen tai sen suolan suun kautta annettavat annokset ovat 5 -1000 mg päivässä, edullisesti noin 5-250 mg joko yksittäisenä annoksena tai jaettuina annoksina.

Kaavan I mukaiset yhdisteet, kun Rj ja R2 ja /tai R3 ja R, ovat erilaisia, sisältävät yhden tai kaksi asymmetristä hiiliatomia, ne voidaan siten saada enantiomeereina, diastereomeereina tai raseemisina seoksina. Diastereomee-riset seokset voidaan erottaa konventionaalisilla menetelmillä. Rasemaattien resoluutio optisesti aktiivisiksi isomeereiksi voidaan suorittaa tunnetuilla menetelmillä. Osa raseemisista seoksista voidaan saostaa eutekteina ja erottaa sen jälkeen. Kemiallinen resoluutio on kuitenkin edullinen. Tällä menetelmällä muodostetaan diastereomeerisia . suoloja kaavan I mukaisen yhdisteen raseemisesta seoksesta yhdessä optisesti aktiivisen liuottimen kanssa esimerkiksi optisesti aktiivisen emäksen kanssa kuten D-(+)-a-metyyli-bentsyyliamiinin kanssa, jonka voidaan antaa reagoida kar-boksyyliryhmän kanssa. Muodostetut diastereomeerit erotetaan selektiivisesti kiteyttämällä ja muutetaan vastaa-; vaksi optiseksi isomeeriksi.

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä. Kaikki lämpötilat ovat celsiusasteita ellei toisin ole esitetty.

« li 23 93953

Esimerkki 1

Liuokseen, jossa on 25 g (92 mmol) esimerkin 8 yhdistettä 100 mlrssa etanolia, lisättiin liuos, jossa oli 75 g (0,33 mol) tinaklorididihydraattia 100 mlrssa etano-5 lia. Tätä seosta sekoitettiin ja kuumennettiin palautus-jäähdyttäen 1,5 tuntia. Se jäähdytettiin huoneenlämpötilaan, tehtiin voimakkaasti emäksiseksi (pH 13) lisäämällä 3 N natriumhydroksidia ja uutettiin metyleenikloridilla kolmena annoksena. Orgaaniset uutokset kuivattiin magne-10 siumsulfaatilla ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös kroma-tografioitiin alumiinioksidilla käyttäen etyyliasetaattia eluointiaineena, jolloin saatiin 12,6 g (53 %) (E)-3-[2-[4-syklopropyyli)-2-tiatsolyyli]etenyyli]bentseeniamiinia öljynä.

15 Seosta, jossa oli 3,5 g (20 mmol) 2,2-dietyylisuk- kinihappoa ja 10 ml asetyylikloridia, kuumennettiin palautus jäähdyttimen alla 2 tuntia, jäähdytettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös konsentroitiin uudelleen kolme kertaa tolueenilla ja liuotettiin sitten 50 ml taan 20 1,2-dimetoksietaania. Tämä liuos lisättiin sitten seok seen, jossa oli 2,5 g (10 mmol) edellä esitettyä raaka amiinia 50 mlrssa 1,2-dimetoksietaania ja 4,1 g (50 mmol) vedetöntä natriumasetaattia. Tätä seosta kuumennettiin höyryhauteessa kaksi tuntia ja sitten suodatettiin kuuma-25 na. Jäännös kuumennettiin 500 mlrn kanssa vettä höyryhauteessa 0,25 tuntia. Kiinteä aine otettiin talteen ja uu-delleenkiteytettiin 50 mlrsta etanolin vesiliuosta, jolloin saatiin 2,5 g (E)-4-[[3-[-(4-syklopropyyli-2-tiatso-lyylietenyyli]fenyyli]amino]-2,2-dietyyli-4-oksovoihappoa 30 vaaleanharmaina neulasina. Kiteyttämällä kaksi kertaa uu-: delleen etanolin vesiliuoksesta antoi 0,25 g, sp 153- 157°C.

Anal, laskettu C22H26N203S: C, 66,31; H, 6,58; N, 7,03.

havaittu C, 66,47; H, 6,60; N, 7,00.

35 24 93953

Esimerkki 2

Seosta, jossa oli 2,5 g (10 mmol) (E)-3-[2-[4-(syk-lopropyyli)-2-tiatsolyyli]etenyyli]bentseeniamiinia valmistettuna kuten esitetään esimerkissä 1, 1,5 g (15 mmol) 5 sukkinianhydridia, 1,64 g (20 mmol) vedetöntä natriumase-taattia ja 200 ml 1,2-dimetoksietaania, sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen kaksi tuntia. Reaktio-seos jäähdytettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös kuumennettiin höyryhauteessa 200 ml:n kanssa vettä 0,5 10 tuntia. Kiinteä aine otettiin talteen ja uudelleenkitey-tettiin etanolista, jolloin saatiin 1,4 g (E)-4-[[3-[2-( 4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli )-etenyyli] fenyyli] amino] -4-oksovoihappoa, sp 177-179 oC, valkoisen harmaina neulasina.

15 Analyysi laskettu C18H18N203S: C, 63,14; H, 5,30; N, 8,18 havaittu C, 63,10; H, 5,01; N, 8,23

Esimerkki 3

Seosta, jossa oli 5,23 g (30 mmol) 2,2-dietyylisuk-kinihappoa ja 15 ml asetyylikloridia, kuumennettiin palau-20 tusjäähdyttäen kolme tuntia, jäähdytettiin ja konsentroi tiin tyhjössä. Jäännös konsentroitiin uudelleen kahdesti tolueenista ja liuotettiin sitten 75 ml:aan 1,2-dimetok-simetaania. Tämä liuos lisättiin seokseen, jossa oli 4,06 g (15 mmol) (E)-3-[2-[4-syklopentyyli)-2-tiatsolyyli]ete-25 nyyli]bentseeniamiinia 75 ml:ssa 1,2-dimetoksietaania ja 6,0 g (73 mmol) vedetöntä natriumasetaattia. Tätä seosta kuumennettiin höyryhauteella kaksi tuntia ja sitten suodatettiin kuumana. Suodos konsentroitiin tyhjössä. Jäännöstä kuumennettiin 100 ml:n kanssa vettä höyryhauteella 1/4 30 tuntia. Kiinteä aine otettiin talteen ja huuhdottiin ve-; dellä, jolloin saatiin 9,6 g kosteaa kiinteää ainetta.

Tämä kiinteä aine uudelleenkiteytettiin 700 ml:sta aseto-nitriilia, jolloin saatiin 3,42 g (53 %) ( E)-4-[[3-[2-(4-syklopentyyli-2-tiatsolyyli )etenyyli] fenyyli] amino] -2,2-35 dietyyli-4-oksovoihappoa, sp 172-174°C.

II

93953 25

Anal, laskettu C21H30N2O3S C, 67,58; H, 7,09; N ,6,57.

Havaittu : C, 67,27; H, 7,20; N, 6,70.

Esimerkki 4

Seosta, jossa oli 9,26 g (53 mmol) 2,2-dietyylisuk-5 kinihappoa ja 30 ml asetyylikloridia, kuumennettiin palautus jäähdyttimen alla 1,5 tuntia, jäähdytettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös konsentroitiin uudelleen kahdesti tolueenilla ja liuotettiin 150 ml:aan 1,2-dimetok-sietaania. Tähän liuokseen lisättiin 7,56 g (26,4 mmol) 10 (E)-3-[2-[4-( sykloheksyyli )- 2-tiatsolyyli]etenyyli]bent- seeniamiinia ja 10,9 g natriumasetaattia liuotettuna 150 ml:aan 1,2-dimetoksimetaania. Tämä reaktioseos kuumennettiin höyryhauteella 3,5 tuntia ja konsentroitiin sitten tyhjössä. Jäännöstä kuumennettiin 600 ml:n kanssa vettä 15 höyryhauteella 20 minuuttia. Kiinteä aine otettiin talteen, jolloin saatiin 3,5 g tuotetta, sp 180-185°C. Edelleen uudelleenkiteyttämällä metanolista saatiin (E)-4-[[3-[2— (4-sykloheksyyli-2-tiatsolyyli )etenyyli] fenyyli] amino] -2-metyleeni-4-oksovoihappoa valkoisen harmaina neulasina, 20 sp 187-189°C.

Anal, laskettu C25H32N203S C, 68,15; H, 7,32; N, 6,36.

havaittu C, 67,87; H, 7,15; N, 6,36.

Esimerkki 5

Seosta, jossa oli 8,4 g (48 mmol) 2,2-dietyylisuk-25 kinihappoa ja 30 ml asetyylikloridia, kuumennettiin palautus jäähdyttimen alla kaksi tuntia, jäähdytettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös konsentroitiin uudelleen kahdesti tolueenilla ja liuotettiin sitten 125 ml:aan 1,2-dimetoksietaania. Liuos lisättiin seokseen, jossa oli 30 6,1 g (24 mmol) (E)-3-[2-[4—(syklobutyyli]-2-tiatsolyyli]- . etenyyli]bentseeniamiinia, 9,72 g (118 mmol) natriumase taattia ja 125 ml 1,2-dimetoksietaania ja seosta sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen kaksi tuntia. Se suodatettiin kuumana. Suodos konsentroitiin tyhjössä, jol-35 loin saatiin 15,47 g öljyä. Tämä öljy jauhettiin 350 i 26 93953 ml:n kanssa kuumaa vettä ja otettiin kiintoaine talteen. Uudelleenkiteyttämällä metanolista saatiin 1,4 g (E)-4-[ [3 - [2 - ( 4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli )etenyyli] fenyyli] amino] -2,2-dietyyli-4-oksovoihappoa valkoisen harmaina neula-5 sinä.

Anal, laskettu C23H28N203S C, 66,96; H, 6,84; N, 6,79; havaittu C, 66,72; H, 6,79; N, 6,67.

Esimerkki 6

Seosta, jossa oli 6,34 g (48 mmol) metyylisukkini-10 happoa ja 30 ml asetyylikloridia, kuumennettiin palautus-jäähdyttimen alla kaksi tuntia, jäähdytettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös konsentroitiin uudelleen kahdesti tolueenista ja liuotettiin sitten 125 ml:aan 1,2-dimetoksimetaania. Liuos lisättiin seokseen, jossa oli 6,1 15 g (24 mmol) (E)-3-[2-[4-(syklobutyyli)-2-tiatsolyyli]ete- nyyli]bentseeniamiinia, 9,72 g (118 mmol) natriumasetaat-tia ja 125 ml 1,2-dimetoksietaania ja seosta sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen kaksi tuntia. Tämä suodatettiin kuumana. Suodos konsentroitiin tyhjössä, jol-20 loin jäljelle jäi 14,2 g öljyä. Tämä öljy hierrettiin 400 ml:n kanssa kuumaa vettä 20 minuuttia ja annettiin sitten seisoa viikonlopun yli. Kiinteä aine otettiin talteen. Uudelleenkiteyttämällä asetonitriilista saatiin (E)—4—([3— [2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyyli]fenyyli]amino]-_ 25 2-metyyli-4-oksovoihappoa valkoisen harmaina prismoina, sp 165-167°C.

Anal, laskettu C20H22N2O3S C, 64,84; H, 5,99; N, 7,56.

havaittu C, 64,79; H, 5,92; N, 7,61.

Esimerkki 7 30 Seosta, jossa oli 80 g (0,49 mol) bromimetyylisyk- lopropyyliketonia, 40,5 g (0,54 mol) tioasetamidia ja 600 ml etanolia, sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen neljä tuntia ja annettiin seisoa yön yli huoneenlämpötilassa. Tämä konsentroitiin kuiviin tyhjössä ja sit-35 ten uudelleen konsentroitiin tolueenin lisäämisen jälkeen.

II

93953 27 Jäännös lietettiin eetterillä. Eetteri dekantoitiin. Eetteri lisättiin jäännökseen ja käsiteltiin varovaisesti kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella. Vesifaasi erotettiin ja uutettiin uudelleen eetterillä. Orgaaniset 5 faasit yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin jäljelle jäi 60 g meripihkanväristä öljyä. Tämän öljyn liuos metyleenikloridissa suodatettiin Florisil kerroksen läpi käyttäen metyleenikloridia kerroksen pesemiseen. Elu-10 aatit konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin 44,1 g (65 %) 4-syklopropyyli-2-metyylitiatsolia keltaisena öljynä.

Esimerkki 8 (E) -4-syklopropyyli-2- [ - (3-nitrofenyyli )etenyyli] tiatsolin 15 valmistaminen a) 4-Syklopropyyli-2-metyylitiatsolista ja m-nitro-bentsaldehydista

Seosta, jossa oli 41,7 g (0,3 mol) 4-syklopropyyli-2-metyylitiatsolia, 45,3 g (0,3 mol) m-nitrobentsaldehydiä 20 ja 15 ml etikkanahydridia, sekoitettiin ja kuumennettiin 145-165°C:ssa typessä 17 tuntia. Tämä reaktioseos jäähdytettiin ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös ositettiin veden ja metyleenikloridin kesken. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin natriumsulfaatilla ja konsetroitiin : 25 tyhjössä, jolloin saatiin musta öljy. Tämä öljy liuotet tiin etyyliasetaattiin ja liuos käytettiin 1 kg:aan Flo-risilia, joka eluoitiin etyyliasetaatilla. Eluaatit konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin 30 g (37 %) raaka tuotetta, sp 90-95°C. Uudelleenkiteyttämällä etyyliasetaa-30 tista saatiin keltaisia neulasia, sp 92-94°C.

Anal, laskettu C14H12N202S C, 61,75; H, 4,44; N, 10,29.

havaittu C, 61,71; H, 4,49; M, 10,19.

b) m-nitrotiokinnamidista ja bromiasetyylisyklopro-paanista 35 Seosta, jossa oli 16 g (0,098 mol) bromiasetyyli- syklopropaania, 100 ml etanolia ja 11,2 (0,054 mol) m-nit- 28 93953 rotiokinnamidia, kuumennettiin palautusjäähdyttäen 20 minuuttia, jonka jälkeen TLCrlla (25 % etyyliasetaatti/hek-saani silikalevyillä) ei havaittu jäljellä olevan tioami-dia. Reaktioseosta sekoitettiin 0,5 tuntia ja konsentroi-5 tiin sitten tyhjössä. Jäännöskiintoaine otettiin talteen etterillä. Kiinteä aine ositettiin veden, ammoniakin ja eetterin kesken. Vesifaasi uutettiin 100 ml :11a eetteriä.

Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja 10 konsentroitiin tyhjössä. Jäännös kiteytettiin heksaanista, jolloin saatiin 10,55 g (71 %) (E)-4-syklopropyyli-2-[2-(3-nitrofenyyli)etenyyli]tiatsolia raakatuotteena.

Esimerkki 9

Seosta, jossa oli 11 g (62 mmol) bromiasetyylisyk-15 lobutaania, 12,9 g (62 mmol) m-nitrotiokinnamidia ja 110 ml etanolia sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen 0,5 tuntia. Rektioseos otettiin talteen ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös lietettiin eetterillä ja kiinteä aine otettiin talteen. Tämä kiinteä aine ravistettiin 20 veden ja eetterin kanssa. Vesifaasi tehtiin emäksiseksi lisäämällä konsentroitua ammoniumhydroksidia. Orgaaninen faasi erotettiin ja vesifaasi uutettiin eetterillä. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestiin vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja konsen-25 troitiin tyhjössä, jolloin saatiin 14,67 g (82 %) raaka-“ tuotetta. Uudellenkiteyttämällä pieni näyte asetonitrii- lista saatiin (E)-4-syklobutyyli-2-[2-(-nitrofenyyli)ete-nyyli]tiatsolia vaalean keltaisina neulasina, sp 78 - 80°C.

30 Anal, laskettu C15H14N202S C, 62,92; H, 4,93; N, 9,78 havaittu C, 62,74; H, 4,88; N,9,71

Esimerkki 10

Seosta, jossa oli 11 g (57 mmol) raakaa bromiase-tyylisyklopentaania, 10 g (48 mmol) m-nitrotiokinnamidia 35 ja 75 ml etanolia, kuumennettiin höyryhauteella noin 5

II

Q 7 o c: 7 29 minuuttia, jona aikana tiokinnamidi oli suureksi osaksi liuoksessa. Kun kiinteä aine oli liuennut, reaktioseos sai seisoa huoneenlämpötilassa kaksi päivää. Kiinteä aine otettiin talteen ja huuhdeltiin etanolilla, jolloin saa-5 tiin 14 g raakaa kosteaa hydrobromidia. Suola jaettiin 100 ml:n kanssa metyleenikloridia ja 50 ml:n kanssa kyllästettyä natriumbikarbonaattiliuosta, johon oli lisätty muutama millilitra konsentroitua ammoniumhydroksidia. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin natriumsulfaatilla ja kon-10 setroitiin tyhjössä. Jäännös kiteytettiin heksaanista, jolloin saatiin 10,6 g (73 %) raakatuotetta, sp 65 - 70°C. Uudelleenkiteyttämällä asetonitriilista saatiin (E)-4-syk-lopentyyli-2-[2-(3-nitrofenyyli)etenyyli]tiatsoliakeltai-sina tankoina, sp 68 - 70°C.

15 Anal, laskettu C16H16N202S C, 63,98; H, 5,37; N, 9,33.

havaittu C, 63,94; H, 5,25; N, 9,28.

Esimerkki 11

Seosta, jossa oli 5,02 g (24,5 mmol) m-nitrotiokin-namidia, 5,6 g (27 mmol) raakaa bromimetyylisykloheksyy-20 liketonia ja 40 ml etanolia , sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen 5,3 tuntia. TLC:n mukaan (25 % etyyliasetaatti/heksaani silikaageelillä) oli tioamidia vielä läsnä. Lisättiin vielä 5 ml raaka bromiketonia reak-tioseokseen, puolen tunnin kuluttua TLC:n mukaan tioamidia 25 ei enää esiintynyt. Reaktioseos jäähdytettiin, konsentroitiin tyhjössä ja uudelleen konsentroitiin tolueenin lisäämisen jälkeen. Saatu keltainen kiinteä aine lietettiin eetterillä ja otettiin talteen. Tämän jälkeen se ositettiin eetterin ja konsentroitua ammoniumhydroksidia lisää-30 mällä alkalisesksi tehdyn veden kesken. Orgaaninen kerros erotettiin, kuivattiin natriumsulfaatilla ja konsentroitiin tyhjössä. Jäännös otettiin talteen heksaanilla, jolloin saatiin 5,6 g (73 %) tuotetta keltaisena kiinteänä aineena. Uudelleenkiteyttämällä heksaanista saatiin (E)-35 4-sykloheksyyli-2-[2-(3-nitrofenyyli)etenyyli]tiätsoiia keltaisina neulasina, sp 102-104°C.

30 93953

Anal, laskettu C17H18N202S C, 64,94; H, 5,77; N, 8,91; havaittu C, 65,01; H, 5,68; N, 8,81.

Esimerkki 12

Seosta, jossa oli 19,3 g (0,1 mol) m-nitrokaneli-5 happoa, 80 ml tionyylikloridia ja 0,5 ml dimetyyliform-amidia, kuumennettiin palautusjäähdyttimen alla viisi tuntia ja annettiin sitten seisoa yön yli huoneenlämpötilassa. Reaktioseos konsentroitiin kuiviin ja uudelleen konsentroitiin tolueenin lisäämisen jälkeen. Kiinteä tähde 10 lietettiin eetterillä ja otettiin talteen, jolloin saatiin 20,4 g raakaa happokloridia. Tämä kiinteä aine lisättiin hitaasti sekoittaen 200 ml:aan konsentroitua ammoniurnhyd-roksidia. Seosta sekoitettiin 0,5 tuntia, jonka jälkeen kiiteä aine otettiin talteen ja ilmakuivattiin, jolloin 15 saatiin 18,13 g (94 %) m-nitrokinnamidia, sp 189-191°C.

Esimerkki 13 a) Seosta, jossa oli 40,38 g (0,21 mol) m-nitrokinnamidia, 42,5 g (0,105 mol) Lawessonin reagenssia (2,4-bis( 4-metoksifenyyli )-l, 3-ditia-2,4-difosf etaani-2,4-di-20 sulfidia) ja 500 ml 1,2-dimetoksietaania, sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttimen alla kaksi tuntia, jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja konsentroitiin kuiviin tyhjössä. Jäännös lietettiin 300 ml:11a metyleenikloridia ja otettiin talteen, jolloin saatiin 24,61 g (56 %) m-nit-25 rotiokinnamidia, sp 196-197°C. Uudelleenkiteyttämällä ase-tonitriilista saatiin analyyttinen näyte oransseina neulasina, sp 200-202°C.

Anal. laskettu C9H8N202S C, 51,91; H, 3,87; N, 13,45.

havaittu C, 51,85; H, 3,82; N, 13,52.

30 b) Seosta, jossa oli 3,4 g (17,7 mmol) m-nitro- : kinnamidia, 1,96 g (8,8 mmol) fosforipentasulfidia, 1,5 g 4 (17,7 mmol) natriumbikarbonaattia ja 100 ml asetonitriilia (sisältäen viisi tippaa pyridiinia), sekoitettiin ja kuumennettiin palautusjäähdyttäen kolme tuntia ja kaadettiin 35 jääveteen. Tunnin sekoittamisen jälkeen kiinteä aine otet-

II

93953 31 tiin talteen, jolloin saatiin 2,75 g (75 %) raakaa m-nit-rotiokinnamidia, sp 187-189°C.

Esimerkki 14

Seosta, jossa oli 3,5 g (20 ml) 2,2-dietyylisukki-5 nihappoa ja 10 ml asetyylikloridia, kuumennettiin palautus jäähdyttäen kaksi tuntia, jäähdytettiin, konsentroitiin tyhjössä ja uudelleen konsentroitiin kolme kertaa toluee-nin lisäämisen jälkeen. 2,2-dietyylisukkinianhydridi käytettiin ilman lisäpuhdistusta.

10 Esimerkki 15

Sekoitettavaan seokseen, jossa oli 186 g ( 1 mol) etyyli-2-syano-3,3-dietyyliakrylaattia ja 800 ml 50 % etanolin vesiliuosta, lisättiin 98 g (2 mol) natriumsya-nidia. Natriumsyanidi liukeni hitaasti (eksoterminen).

15 Sekoitettiin huoneenlämpötilassa 0,5 tuntia, jonka jälkeen liuos kuumennettiin höyryhauteella 5 minuuttia, jäähdytettiin, laimennettiin 2 litralla vettä ja tehtiin happamaksi lisäämällä konsentroitua kloorivetyhappoa. Seos uutettiin 3x1 litralla metyleenikloridia. Orgaaniset uutokset yh-20 distettiin, kuivattiin natriumsulfaatilla ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin 200 g öljyä. Öljyä kuumennettiin yön yli palautus jäähdyttäen 800 ml: n kanssa konsentroitua kloorivetyhappoa. Reaktioseos jäähdytettiin ja uutettiin kolme kertaa käyttäen 1/3 osan tilavuudesta eet-25 teriä. Eetteriuutokset yhdistettiin, kuivattiin magnesium- sulfaatilla ja konsetroitiin tyhjössä. Jäännös kiteytettiin eetteri/heksaanista, jolloin saatiin 86 g (49 %) raaka tuotetta. Tämä aine lietettiin 500 ml:11a heksaania, jolloin saatiin 76 g (44 %) 2,2-dietyleenisukkinihappoa, 30 sp 106-109°C.

: Esimerkki 16

Seosta, jossa oli 473 g (5,5 mol) 3-pentanonia, 565 g (5 mol) etyylisyanoasetaattia, 60 g (1 mol) etikkahap-poa, 38,5 g (0,5 mol) ammoniumasetaattia ja 500 ml tolu-35 eenia, sekoitettiin ja kuumennettiin Dean-Stark trapissa i 32 93953 7 tuntia ja annettiin sitten seisoa kaksi päivää huoneenlämpötilassa. Reaktioseos pestiin kolme kertaa 1 1:11a vettä ja konsetroitiin pyöröhaihduttimessa matalassa lämpötilassa. Jäännös tislattiin tyhjössä, jolloin saatiin 5 460 g etyyli-2-syano-3,3-dietyyliakrylaattia, kp 118- 120°C/8 mm.

Esimerkki 17

Liuokseen, jossa oli 35 g (0,35 mol) kromitrioksi-dia 50 ml:ssa vettä, jäähdytettiin jäähauteella ja lisät-10 tiin 30,5 ml konsentroitua rikkihappoa samalla hitaasti sekoittaen. Jäännös liuotettiin lisäämällä 100 ml vettä, jolloin saatiin noin 200 ml liuosta, joka säähdytettiin 5°C:een jäähauteessa.

Seos, jossa oli 25 g (0,22 mol) 1-syklopentyyli-15 etanolia ja 120 ml asetonia, jäähdytettiin 5°C:een ja käsiteltiin sitten 90 ml:11a edellä olevaa kromiliuosta, joka lisättiin sellaisella nopeudella, että lämpötila ei ylittänyt 20°C:sta ja tämä kesti noin 10 minuuttia. Reak-tioseosta sekoitettiin 20-25°C:ssa yksi tunti ja käsitel-20 tiin sitten natriumbisulfiitilla ylimääräisen kromihapon neutraloimiseksi. Reaktioseoksen yläkerros erotettiin.

Alakerros uutettiin 50 ml:11a pentaania. Tämä uutos lisättiin alkuperäiseen yläkerrokseen. Näin muodostunut pohjakerros lisättiin alkuperäiseen pohjakerrokseen ja tämä 25 faasu uutettiin 150 ml:11a pentaania kolmessa osassa. Yhdistetyt orgaaniset (pinta)kerrokset pestiin 100 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta kahdessa annoksessa, 100 ml:11a natriumbikarbonaattia kahdssa annoksessa ja jälleen 100 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta kahtena annoksena. Tämä 30 liuos kuivattiin natriumsulfaatilla ja pentaani tislattiin pois Vigreux pylvään läpi ilmakehän paineessa. Jäännös tislattiin vesipumpulla, jolloin saatiin 16,1 g asetyyli-syklopentaania, kp 90-93°C.

Esimerkki 18 35 Liuokseen, jossa oli 42 g (0,5 mol) syklopropyyli- metyyliketonia 625 ml:ssa metanolia jäähdytettynä 0 -

II

33 9 ό 9 5 3 5°C:een jäähauteessa, lisättiin hitaasti 29 ml (0,6 mol) bromia. Kun lisääminen oli suoritettu kokonaan, poistettiin jäähdytyshaude ja väri hävisi lämpötilan asteittain kohotessa 40°C:een. Liuos laimennettiin 3 kertaisena an-5 noksella vettä, kerrostettiin eetterin kanssa ja neutraloitiin lisäämällä kyllästettyä natriumbikarbonaattiliuos-ta. Vesifaasi erotettiin ja uutettiin eetterillä kahdella annoksella. Orgaaniset faasit yhdistettiin, pestiin suolaliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatilla ja konsentroi-10 tiin tyhjössä, jolloin saatiin 80 g raakaa bromimetyyli-syklopropyyliketöniä öljynä.

Esimerkki 19

Liuokseen, jossa oli 16,1 g (0,143 mol) asetyyli-syklopentaania 175 ml:ssa metanolia jäähdytettynä jää-15 hauteella lisättiin 7,7 ml (0,15 mol) bromia 5 minuutin aikana. Reaktioseos sai sitten lämmetä 10-15°C:een ja pidettiin siinä käyttäen tilapäisesti jäähaudetta 45 minuuttia kunnes reaktioseos muuttui värittömäksi. Tämän jälkeen lisättiin 100 ml vettä ja annettiin sekoittua huo-20 neenlämpötilassa 0,5 tuntia. Tämä osittain neutraloitiin lisäämällä varovasti 10 g (72 mmol) kiinteää kaliumkarbonaattia, laimennettiin 200 ml:11a vettä ja uutettiin 4 x 150 ml:lla eetteriä. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin 2 x 100 ml:11a kyllästettyä natriumbikarbonaattiliuosta ja 25 3 x 100 ml:11a vettä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja konsentroitiin tyhjössä huoneenlämpötilassa, jolloin saatiin 30 g ainetta öljynä, jonka nmr-spektri osoitti, että se oli pääasiassa haluttua bromiasetyylisyklopentaania.

Esimerkki 20 30 Liuokseen, jossa oli 63,1 g (0,5 mol) asetyylisyk- . loheksaania 625 ml:ssa metanolia jäähdytettynä 5°C:een jää- hauteessa lisättiin 29 ml (0,6 mol) bromia noin 5 minuut-tin aikana. Jäähdytyshaude poistettiin ja lämpötila nousi 37°C:een. Reaktioseos muodosti hitaasti kirkkaan liuoksen.

35 Tämä liuos kaadettiin hitaasti 1 litraan vettä, tehtiin 34 93953 emäksiseksi lisäämällä kyllästettyä natriumbikarbonaatti-liuosta ja uutettiin 500 ml:11a eetteriä kahtena annoksena. Orgaaniset faasit yhdistettiin, pestiin 200 ml:11a vettä ja 200 ml:11a kyllästettyä suolaliuosta, kuivattiin 5 natriumsulfaatilla ja konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin 108,4 g vaalean keltaista öljyä, jonka nmr-spektri osoitti sen sisältävät hieman enemmän kuin 50 % bromi-asetyylisykloheksaania.

Esimerkki 21 10 Kuumaan liuokseen, jossa oli 8,6 g (28,6 mmol) (E)- 4-syklopentyyli-2-[2-(3-nitrofenyyli)etenyyli]tiatsolia50 ml:ssa etanolia, lisättiin kuuma liuos, jossa oli 21 g (93,1 mmol) tinaklorididihydraattia 50 ml:ssa etanolia.

Tapahtui eksoterminen reaktio. Tämän jälkeen reaktioseosta 15 kuumennettiin höyryhauteella 45 minuuttia. Kun se oli hieman jäähtynyt, siihen lisättiin 150 ml 3 N natriumhydrok-sidia, 50 ml vettä ja 100 ml metyleenikloridia. Muodostui ruskea kumi. Vesifaasi erotettiin ja uutettiin 200 ml:11a metyleenikloridia kahtena annoksena. Orgaaniset faasit 20 yhdistettiin, pestiin 200 ml:11a vettä kahtena annoksena, kuivattiin kaliumkarbonaatilla ja konsentroitiin tyhjössä.

Jäännös kiteytettiin heksaanista, jolloin saatiin 7,3 g (94 %) (E)-3-[2-[4-(syklopentyyli)-2-tiatsolyyli]etenyy li] bentseeniamiinia, sp 59-61°C.

25 Käyttäen edellä esitettyä menetelmää valmistettiin seuraavat yhdisteet: a) (E)-4-syklobutyyli-2-[2-(3-nitrofenyyli)etenyy-litiatsolista, (E)-3-[-[4-(syklobutyyli)-2-tiatsolyyli]-etenyyli]-bentseeniamiini; ja 30 b) (E)-4-sykloheksyyli-2-[2-(3-nitrofenyyli)ete- nyyli]tiatsolista, (E)-3-[2-[4-(sykloheksyyli)-2-tiatso- » lyyli]etenyyli]bentseeniamiini.

Il 93953 35

Esimerkki 22

Seosta, jossa oli 0,756 g 1-karboksi-l-syklopentaa-nietikkahappoa ja 5 ml asetyylikloridia, kuumennettiin palautusjäähdyttäen kaksi tuntia. Seos konsentroitiin pyö-5 röhaihduttamalla, jonka jälkeen huuhdeltiin tolueenilla (2 x), jonka jälkeen jäljellä olevat aineet otettiin talteen 25 ml:aan tolueenia. Tämä liuos yhdistettiin liuokseen, jossa oli 1,0 g (E)-3-[2-(4-(syklobutyyli)-2-tiatsolyyli]-etenyyli]bentseeniamiinia 25 ml:ssa tolueenia ja saatua 10 liuosta lämmitettiin höyryhauteella 30 minuuttia.

Jäähdytettäessä havaittin kiteitä, jotka eristettiin suodattamalla ja eetteripesulla, jolloin saatiin 1,1 g (E)-[-2- [ [3- [2— ( 4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli )etenyyli] fenyy-li]amino]-2-oksoetyyli]-1-syklopentaani-l-karboksyylihap-15 po. Uudelleenkiteyttämällä etanolista saatiin ainetta, jonka sp on 188-190°C.

Esimerkki 23

Seosta, jossa oli 5,0 g (E)-4-[[3-[2-(4-syklobu- tyyli-2-tiatsolyyli)etenyyli]fenyyli]amino]-2,2-dietyyli- 20 4-oksovoihappoa ja 100 ml asetyylikloridia, kuumennettiin varovasti palautusjäähdyttäen 1,5 tuntia. Tämän jälkeen reaktioseos kondensoitiin pyöröhaihduttamalla ja jäännös aineet otettiin talteen metyleenikloridiin. Tämä liuos pestiin 5 % natriumbikarbonaattiliuoksella neutraaliksi ja 25 sitten kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin (natrium- sulfaatti) ja konsentroitiin pyöröhaihduttamalla, jolloin saatiin 4,3 g jäännösaineita. Tätä ainetta liuotettiin yhdessä 0,357 g:n kanssa litiumhydroksidimonohydraattia 50 mlrssa 1:4 (til/til) vesi/metanolissa. Tätä liuosta kuu- 30 mennettiin palautusjäähdyttäen yksi tunti ja kondensoi- . tiin sitten kuiviin pyöröhaihduttimella. Jäännösaineet « yhdistettiin 50 ml:aan vettä, suodatettiin ja suodos tehtiin happamaksi laimealla kloorivetyhapolla, jolloin saatiin 1,7 g (E)—3—[[[3—[2—(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)-35 etenyyli]fenyyli]amino]karbonyyli]-3-etyylipentaanihappo; 36 93953 sp 129-131°C asetonitriilista uudelleenkiteyttämisen jälkeen.

Esimerkki 24

Etyylisykklinyylikloridia (0,56 ml) lisättiin jää-5 hauteessa jäähdytettyyn liuokseen, jossa oli 1,0 g (E)-3-12—[4 — (syklobutyyli)-2-tiatsolyyli]etenyyli]bentseeni-amiinia, 0,6 ml trietyyliamiinia ja 10 ml metyleeniklori-dia. Tunnin kuluttua reaktioseos laimennettiin metyleenik-loridilla ja pestiin laimealla kloorivetyhapolla, vedellä 10 ja kyllästetyllä suolaliuoksella. Orgaaninen faasi erotettiin ja kuivattiin (Na2S04). Konsentroimalla pyöröhaih-duttimella saatiin 1,5 g (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyyli]fenyyli]amino]-4-oksovoihappoetyyli-esteriä; sp. 98 - 100°C etyyliasetaatista uudelleenkiteyt-15 tämisen jälkeen.

Esimerkki 25

Trihydroksimetyyliaminometaania (121,4 mg) ja 412,5 mg (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyyli]-fenyyli] amino]-2,2-dietyyli-4-oksovoihappoa liuotettiin 10 20 ml:aan etanolia. Tämä liuos konsentroitiin pyöröhaihdutti-mella, jolloin saatiin (E)—4—[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-ti-atsolyyli)etenyyli]fenyyli]amino]-2,2-dietyyli-4-oksovoi-happo trihydroksimetyyliaminometaanisuolaa vapaasti vir-taavana kiinteänä aineena kylmän asetonitriilin kanssa 25 hiertämisen jälkeen, sp 80 - 87°C.

Esimerkki 26

Seosta, jossa oli 1,0 g 2-sykloheksyylisukkinihap-poa ja 10 ml asetyylikloridia, lämmitettiin palautusjääh-dyttäen kaksi tuntia. Tämän jälkeen reaktioseos konsen-30 troitiin pyöröhaihduttamalla tolueenin kanssa (2 x). Jään-nösaineet ja 1,28 g (E)-3-[2-[4-(syklobutyyli)-2-tiatso-lyyli)etenyyli)bentsamiinia liuotettiin 50 ml:aan toluee-nia ja saatua liuosta lämmitettiin höyryhauteella 0,5 tuntia. Jäähdytettäessä huoneenlämpötilaan muodostui kiinteää 35 ainetta. Tämä aine eritettiin suodattamalla ja uudellenki-

II

93*53 37 teyttämällä asetonitriilista saatiin 1,65 g (E)-4-[[3-[2-( syklobutyyli-2-tiatsolyyli )etenyyli] fenyyli]amino] -2-syk-loheksyyli-4-oksovoihappoa; sp 205 - 207°C.

Esimerkki 27 5 Seosta, jossa oli 1,0 g 2-fenyylisukkinihappoa ja 10 ml asetyylikloridia kuumennettiin palautusjäähdyttäen kaksi tuntia. Tämän jälkeen reaktioseos kondensoitiin pyö-röhaihduttimessa lisäten tolueenia (2 x). Jäännösaineet ja (E)-3-[2- [4-( syklobutyyli )-2-tiatsolyyli]etenyyli]bentsee-10 niamiinia liuotettiin 50 ml:aan tolueenia ja saatua liuosta lämmitettiin höyryhauteella 0,5 tuntia. Jäähdytettäessä huoneenlämpötilaan muodostui kiinteää ainetta, joka esitettiin suodattamalla. Uudelleenkiteyttämällä asetonitriilista saatiin 1,65 g (E)-4-[[3-[2-(4-syklobutyyli-2-15 tiatsolyyli )etenyyli] fenyyli] amino] -2-fenyyli-4-oksovoi- happoa, sp 202 - 203°C.

Esimerkki A

TABLETTIEN VALMISTAMINEN (märkärakeistus) 20 numero aineosa mg/tabletti 100 mg 500 mg 1. (E)-4-[[3-[2—(4-syklo-propyyli-2- 100 500 tiatsolyyli-)etenyyli]fenyyli]amino-2, 2-dietyyli-4-oksovoihappo 25 2. laktoosi 30 150 3. esigelatinoitu tärkkelys 6 30 4. mikrokiteinen selluloosa 30 150 5. magnesiumstearaatti 1 6 yhteensä 167 836 30

Tablettien valmistaminen: 1) Sekoita osat 1, 2, 3 ja 4 ja rakeista veden kanssa.

2) Kuivaa rakeet 50°C:ssa.

3) Laske granulaatti sopivan jauhamislaitteiston läpi.

35 4) Lisää aineosa 5 ja sekoita 3 minuuttia; purista sopi valla puristimella.

38 93953

Esimerkki B

KAPSELIEN VALMISTAMINEN

Numero aineosa mg/kapseli 5 lOOmg 500mg 1. (E)—4—[[3-[2-(4-syklopropyyli-2- 100 500 tiatsolyyli)etenyyli]fenyyli]amino]- 2,2-dietyyli-4-oksovoihappo 2. maissitärkkelys (esigelatinoitu) 8 40 10 3. modifioitu tärkkelys 4 20 4. talkki 4 20 5. magnesiumstearaatti 1 2 yhteensä 117 582 15 Kapseleiden valmistaminen 1) Sekoita aineosat 1, 2 ja 3 ja märkärakeista veden kanssa. Kuivaa yön yli 45°C:ssa yön yli.

2) Jauha sopivan seulan läpi käyttäen jauhamislait-teistoa.

20 3) Lisää aineosat 4 ja 5 ja sekoita viisi minuuttia.

4) Täytä sopiviin kapseleihin.

Esimerkki c

KAPSELIEN VALMISTAMINEN

• 25 Aineosat mg/kapseli 1. (E)-4-[[3-[2-(4-syklo- 0,01 0,5 5,0 25,0 propyyli-2-tiatsolyyli)etenyyli]-fenyyli]amino]-2,2-dietyyli-4-oksovoihappo 30 2. Laktose Hydrous 168,99 168,5 159,0 123,0 3. Maissitärkkelys 20,0 20,0 25,0 35,0 4. Tärkkelys 10,0 10,0 10,0 15,0 5. Magnesiumstearaatti 1,0 1,0 1,0 2,0

Yhteensä 200,0 200,0 200,0 200,0

II

35 39 9 3 y 5 3

Kapseleiden valmistaminen 1) Sekoita aineosat 1, 2 ja 3 sopivaan liuottimeen 30 minuutiksi.

2) Lisää aineosat 4 ja 5 ja sekoita 3 minuuttia.

5 3) Täytä sopiviin kapseleihin.

Esimerkki D

TABLETTIEN VALMISTAMINEN (Märkärakeistaminen)

Aineosat mg/tabletti 10 1. (E)-4-[[3-[2-(4-syklo- 0,01 0,5 5,0 25,0 propyyli-2-tiatsolyyli)etenyyli]-fenyyli]amino]-2,2-dietyyli-4-oksovoihappo 2. Laktoosi vedetön 106,99 106,5 102,0 118,0 15 3. Avicel PH 102 15,0 15,0 15,0 25,0 4. Modifioitu tärkkelys 7,0 7,0 7,0 10,0 5. Magnesiustearaatti 1,0 1,0 1,0 2,0 yhteensä 130,0 130,0 130,0 130,0 20 Tablettien valmistaminen 1) Liuota aineosa 1 sopivaan liuottimeen kuten alkoholiin.

2) Levitä liuos vaiheesta 1 aineosan 2 yli, kuivaa.

3) Lisää aineosat 3 ja 4 ja sekoita 10 minuuttia.

j 25 4) Lisää magnesiumtearaattia ja sekoita 3 minuuttia ja purista sopivassa puristimessa.

40 93953

Esimerkki E

VOIDE 0,5 %

Aineosat g/kg mahdolliset muunnelmat 5 1. (E )-4-[[3-[2 —(4-syklopropyyli- 5,5150* ------ -2-tiatsolyyli)etenyyli]fenyyli]-amino]-2,2-dietyyli-4-oksovoihappo 2. Glyseryylimonostearaatti S.E. 100,00 80-120 3. Polysorbaatti 60 20,00 15-25 10 4. Setyylialkoholi 50,00 40-60 5. vaseliini 70,00 50-90 6. metyyliparaben 1,50 1,25-1,75 7. propyyliparaben 0,50 0,4-0,6 8. propyleeniglykoli 200,00 150-250 15 9. puhdistettu vesi 568,05 475-575 YHTEENSÄ 1 015,20 * 3 %:n ylimäärä Voiteen valmistaminen 1) Liuota (E)-4-[[3-[2-(4-syklopropyyli-2-tiatsolyy- 20 li )-etenyyli] fenyyli]amino] -2, 2-dietyyli-4-oksovoi- happo propyleeniglykoliin, lisää metyyliparaben, propyyliparaben ja vesi ja lämmitä 70 oC.een.

2) Sulata veseliini, glyseryylimonostearaatti S.E., ja setyylialkoholi. Kuumenna 70°C:een. Lisää polysor- ·. 25 baattia 80 ja sekoita.

3) Lisää vaiheen 2 liuos vaiheen 1 liuokseen 70°C:ssa, jäähdytä huoneemlämpötilaan samalla sekoittaen.

li 95953 41

Esimerkki F

INHALAATIO AEROSOLIVALMISTE (LIUOS)

Aineosa % p/p 5 1. (E)-4-[[3-[2-(4-syklopropyyli-2- 1,0 tiatsolyyli)etenyyli]fenyyli]amino-2, 2-dietyyli-4-oksovoihappo 2. Etyylialkoholi 30,0 3. Askorbiinihappo 0,5 10 4. Freon 12 54,8 5. Freon 114 13,7 yhteensä 100 %

Aerosolin valmistaminen 15 1) Liuota aineosat 1 ja 3 aineosaan 2.

2) Täytä vaiheen 1 liuos sopivaan lasipulloon, aseta venttiili ja laita suljettavaan säiliöön.

3) Täytä paineella 80:20 suhteinen aineosien 4 ja 5 seos säiliöön.

20

Huom. Sopivaa venttiliä voidaan käyttää vapauttamaan tilavuudeltaan 25-100 mikrolitran suuruisia annoksia. Esimerkki g INHALAATIO AEROSOLIVALMISTE (SUSPENSIO) 25 Aineosa % p/p 1. (E)-4-[[3 —[2 —(4-syklopropyyli-2-tiatsolyyli)- 1,0 etenyyli]fenyyli]amino]-2,2-dietyyli-4-okso-voihappo (mikronoitu) 2. Sorbitan Trioleaatti 0,5 30 3. Freon 12 64,0 4. Freon 11 18,5 5. Freon 114 16,0 yhteensä 100 % 42 93953

Aerosolin valmistaminen 1) Sekoita aineosat 1 ja 2 aineosaan 4 ja homogenisoi.

2) Täytä konsentraattisuspensio vaiheesta 1 sopivaan astiaan ja aseta venttiili ja aseta suljettavaan 5 säiliöön.

3) Painetäytä suhteessa 80:20 aineosia 3 ja 5 säiliöön.

Huom. Sopivaa venttiiliä voidaan käyttää vapautta-10 maan 25-100 mikrolitran annoksia.

Il

Claims (8)

93953 43

1. Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten sykloalkyylitiatsolijohdannaisten valmistamiseksi, 5 joiden kaava on o-o.

10. I l NH u ' 15 jossa R on vety tai alempi alkyyli, Rlf R2, R3 ja R4 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyä, alempaa alkyyliä, alempaa alkenyyliä, C3_6-sykloalkyyliä tai fenyyliryhmää, joka on substituoimaton tai substituoitu enintään kolmella substituentilla, jotka on valittu toisistaan riippumatta 20 ryhmästä alempi alkyyli, alempi alkoksi ja halogeeni, tai R3 ja R2 muodostavat yhdessä hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, C2_5-alkyleeniryhmän, joka on substituoimaton tai substituoitu alemmalla alkyylillä, ja n on kokonaisluku 0-3; ja, kun Rx on muu kuin R2 ja/tai R3 on muu . 25 kuin R4, kaavan I mukaisten yhdisteiden enentiomeerien, diastereomeerien ja rasemaattien valmistamiseksi, ja, kun R on vety, kaavan I mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttävien emästen kanssa muodostamien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 30 a) yhdiste, jonka kaava on (cL· y——

35. NHj ® p I X 44 93953 jossa n tarkoittaa samaa kuin edellä, asyloidaan yhdisteellä, jonka kaava on o Τι/»,* Ä - ά. XI XII 10 joissa Rlf R2, R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edellä, R" on alempi alkyyli ja Y on hydroksi tai poistuva ryhmä, tai b) yhdiste, jonka kaava on 15 a SoVf XIII jossa R3, R4 ja n tarkoittavat samaa kuin edellä, sillä « 25 edellytyksellä, että ainakin toinen symboleista R3 ja R4 on muu kuin vety, hydrolysoidaan emäksellä, ja c) haluttaessa saatu kaavan I yhdiste, jossa R on vety, muutetaan suolaksi farmaseuttisesti hyväksyttävän emäksen kanssa.

2. Patenttivaatimuksen 1 kohtien a) ja c) mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R on vety tai alempi alkyyli, Rx, R2, R3 ja R4 tarkoittavat toisistaan riippumatta vetyä, alempaa alkyyliä, alempaa alkenyyliä tai C3_6-sykloalkyyliä ja n on kokonaisluku 0-3.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että R on vety, Rx ja R2 tarkoittavat « II 93953 45 toisistaan riippumatta alempaa alkyyliä, R3 ja R4 tarkoittavat vetyä ja n on 0-3.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R on vety, R: ja R2 tarkoittavat 5 toisistaan riippumatta alempaa alkyyliä, R3 ja R4 tarkoit tavat vetyä ja n on 1.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (E)-4-[[3-[2-(4-syklo-butyyli-2-tiatsolyyli)etenyyli]fenyyli]amino]-2,2-dietyy- 10 li-4-oksovoihappo.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan (E)-4-[[3-[2-(4-syk-lopropyyli-2-tiatsolyyli )etenyyli] fenyyli] amino] -2,2-di-etyyli-4-oksovoihappo.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan (E)-4-[[3-[2-(4-syk-lopentyyli-2-tiatsolyyli )etenyyli] fenyyli] amino] -2,2-di-etyyli-4-oksovoihappo.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n- 20. e t t u siitä, että valmistetaan (E)-[2-[[3-[2-(4-syk-lobutyyli-2-tiatsolyyli)etenyyli]fenyyli]amino]-2-okso-etyyli]-1-syklopentaani-1-karboksyylihappo. « « 46 O 2. Γ. 2 7 Ο 7 sj yj