FI90532C - Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten oktahydroindolijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

MenetelmS uusien terapeuttisesti kåyttOkelpoisten ok- tahydroindolijohdannaisten valmistamiseksi 1 90532

Jakamalla erotettu hakemuksesta 812652 5

Keksinttt koskee uusien kaavan I mukaisten oktahyd-roindolijohdannaisten ja niiden fysiologisesti hyvhksyt-tckvien suolojen valmistusta, 10

-COOH

kJ—% nC0-CH-NH-CH-C00R-,

I i J

Ri R2 15 jossa kaavassa Rx on CH3 tai CH2F, R2 on alkyyli, jossa on enintåån 6 hiiliatomia ja joka voi olla substituoitu ami-nolla tai hydroksilla, ja R3 on vety tai alkyyli, jossa on 1 - 6 hiiliatomia, sillå edellytyksellS, etta Rx ja R2 20 eiv&t samanaikaisesti tarkoita metyyliå. Nåilia yhdis-teilia on verenpainetta alentava vaikutus.

Kaavan I mukaisia yhdisteita ja niiden fysiologisesti hyvaksyttaviS suoloja voidaan valmistaa siten, etta a) kaavan II mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan 25 kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa, I Q-CH-C00R~ k^J-N\ r2

CO-CH-Q

.30 i : . Ri (11) (III) joissa kaavoissa Rlf R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edelia, toinen symboleista Q on nukleofuginen ryhmå ja 35 toinen on NH2 ja R4 on H, metyyli, etyyli, bentsyyli tai 2 90532 tert.-butyyli, ja haluttaessa saatu esteri muutetaan kar-boksyylihapoksi (R2 ja/tai R4 = vety), tai b) yhdiste, jonka kaava on 5 POOC-(j:H-NH-CH-COOP (IV) R1 R2 jossa Ri ja R2 tarkoittavat saraaa kuin edellå, P on vety tai toinen symboleista P voi myOs tarkoittaa samaa kuin 10 edelia mSSritelty R3, kuten tert.-butyyliå, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on ^C00R4 3.5 II ΊΓ jossa R4 tarkoittaa samaa kuin edellå, kondensointiaineen 20 lasna ollessa, ja haluttaessa toinen tai kumpikin esteri-ryhmS muutetaan karboksyylihapoksi, tai c) kaavan VI mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan kaavan VII mukaisen yhdisteen kanssa, 25 I^^Y^\r-'C00R4 T=C-C00Ro I I 3 L J-N r9 \ λ

:. C0-C=T

(VI) Rx (VII) 30 joissa kaavoissa n, Rx, R2, R3 ja R4 tarkoittavat samaa kuin edelia ja toinen symboleista T on vety ja NH2 ja toinen on happiatomi, ja saatu Schiff'in emas pelkiste-taan, ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muu-35 tetaan suolaksi.

li 3 90532

Valmistettaessa yhdisteita I voidaan lahtea esi-merkiksi 2-halogeenikarboksyylihappojohdannaisista II tai III, jotka reagoivat nukleofiilisten yhdisteiden kanssa. Tama reaktio suoritetaan ensisijaisesti veden kanssa se-5 koittuvissa orgaanisissa liuottimissa, mahdollisesti veden lasnaollessa, jolloin lisataan epaorgaanista tai ter-tiaarista tai kvartaarista orgaanista emasta. Jos reak-tio-osapuolet liukenevat aproottisiin orgaanisiin liuot-timiin, sellaista liuotinta on pidettava parempana, jol-10 loin emakseksi on edullista lisata trialkyyliamiinia, tetra-alkyyliammoniumhydroksida tai tetrametyyliguanidii-nia tai alkali- tai maa-alkalikarbonaatin suspensiota.

LahtOaine

Co.

1 COOH H

X

20 valmistetaan hydraamalla katalyyttisesti, lahinna ro-dium-katalyyteilia, yhdiste, jonka kaava on ζΧλ

- · COOH

:.: 25 H

VIII

Tasta saadaan tunnetulla tavalla estereita, joissa on R4, ja ne kondensoidaan halogeenikarboksyylihapoilla . . 30 yhdisteiksi II (Q = halogeeni) joko happokloridien, seka-anhydridien, aktiivisten esterien kautta tai muin mene-telmin, joita on perusteellisesti selostettu teoksessa Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Band 15.

Kun Rx = CH3, voidaan lahtea esim. L-maitohaposta hel-35 posti saatavasta D-2-klooripropionihaposta.

4 90532

Kaavan II mukaisia vaiituotteita (Q = NH2) saadaan yleiskaavan V mukaisista karbonihappoestereista konden-soimalla N-suojatun 2-aminokarboksyylihapon kanssa. Suo-jaryhma lohkaistaan kondensoinnin paatyttya jaileen pois.

5 Suojaryhmana tulee kysymykseen esim. bensyylioksikarbon- yyli.

Kondensointia ei voida suorittaa pelkastaan DCC/HOBt-yhdistelmaiia (disykloheksyylikarbodi-imidi/1-hydroksibensotriatsoli) vaan myiis muulla sopivalla kon-10 densointiaineella, esim. teoksessa Houben-Weyl, Band 15 selostetulla kondensointiaineella.

Menetelmatavassa (b) lahdetaan kaavan IV mukaisista yhdisteista.

Jos Rj ja R2 ovat identtiset, niin P voi olla ve-15 ty. Kondensointi suoritetaan silloin esim. disykloheksyy-likarbodi-imidin lasnaollessa ekvivalenttimaaran kanssa kaavan V mukaista yhdistetta ja R4 lohkaistaan tunnetulla tavalla. Reaktio tapahtuu mahdollisesti eristettavissa olevan anhydridin XII kautta, joka avataan sen jaikeen 20 kaavan V mukaisella yhdisteelia.

H

/ N\ ' ' 25 R.-HC CH-FL , 1 I I 2 + o=c c=o

XLI

30 R4OOCv^CH2^/^ ^\/CH2\/COOR4

HN-l J k J-N-CO-CH-N-CHt-COOH

. 35 I

H

V

5 90532

Jos Rj ja R2 yhdisteessa IV ovat erilaiset, ensi-sijaisesti ainoastaan toinen tahteista P on vety, toisen tulisi merkita lahinna R3:a tai tert.-butyylia. Konden-sointi suoritetaan silloin selostetulla tavalla kaavan V 5 mukaisten yhdisteiden kanssa ja toinen tai kummatkin es-teriryhmat muutetaan mahdollisesti karboksyylihapoksi.

Kun kaavoissa VI tai VII T = NH2 ja H, merkittava kondensointi 2-ketokarboksyylihappojen tai niiden este-rien kanssa menetelman (c) mukaisesti johtaa tunnetulla 10 tavalla Schiff’in emaksien kautta esim. natriumboorihyd-ridilia tai natriumsyaaniboorihydridilia pelkistamisen jaikeen, hydraamalla katalyyttisesti tai pelkistamaiia elektrolyyttisesti, vastaavien kaavan I mukaisten yhdisteiden muodostumiseen hyvin puhtaina.

15 Uusissa yhdisteissa on muun muassa 3 kiertokeskus- ta α-C-atomien kohdalla. Ligandien jdrjestys vastaa lå-hinna L-konfiguraatiota. Kiteyttamaiia voidaan yleensa saada steerisesti suurin piirtein yhtenaisia kaavan I mu-kaisia yhdisteita. Steerisesti yhtenåisempien muotojen 20 rikastamiseksi ensisijaisia ovat vastavirtajakautus- tai preparatiivinen HPLC-menetelmat.

vaiituotevaiheessa kaavan X mukaiset diastereomee-rit voidaan mahdollisesti erottaa kiteyttamaiia tai pre-paratiivisella HPLC-menetelmaiia siten, ettå edelia se-25 lostetun menetelman mukaisesti voidaan saada kaavan I mu-kaisia tuotteita, joissa kaikissa kiertokeskuksissa on yhtenainen steerinen jarjestys.

Kaavan I mukaisilla uusilla yhdisteilia on pitka-aikainen, intensiivinen verenpainetta alentava vaikutus.

... 30 Niita voidaan kåyttaå erilaisista syista aiheutu- neen korkean verenpaineen torjuntaan ja niita voidaan kSyttaa sellaisinaan tai yhdistelmana muiden verenpainetta alentavien, verisuonia laajentavien tai virtsaneritys-ta lisaavien yhdisteiden kanssa. Tyypillisia naiden vai-35 kutusluokkien edustajia on selostettu esim. artikkelissa Erhart-Rusching, Arzneimittel, 2. Auflage, Weinheim 1972.

6 90532

Niita voidaan kayttaa laskimonsisaisesti, ihonalaisesti tax suun kautta.

Suun kautta annettaessa annostus on 20 - 200 mg yksityista annosta kohden. Vaikeammissa tapauksissa sita 5 voidaan myds suurentaa, koska toistaiseksi ei ole todettu toksisia ominaisuuksia. Myds annoksen pienentaminen on mahdollista ja sita sovelletaan ensisijaisesti silloin, kun samanaikaisesti annetaan virtsaneritysta lisaavia ai-neita. Laskimonsisaisesti tai ihonalaisesti annettaessa 10 yksittaisen annoksen pitaisi olla vaiilia 0,01 - 10 mg.

Kaavan I mukaiset yhdisteet esiintyvMt sisåisina suoloinaan. Mikali molemmat karboksyyliryhmat ovat vapai-ta, lisaksi voidaan muodostaa alkali- ja maa-alkalisuolo-ja ja suoloja fysiologisesti vaarattomien amiinien kans-15 sa. Edelleen lasnaolevan vapaan aminoryhman voidaan antaa reagoida suolaksi epdorgaanisen hapon tai orgaanisen ha-pon kanssa. Myds muita kaavan I mukaisia yhdisteita voidaan kayttaa vapaassa muodossa tai mainitun kaltaisina suoloina.

20 Yhdisteiden farmakologinen aktiivisuus on maari- tetty ACE-analyysin avulla. ACE vastaa ensisijaisesti an-giotensiini I:n hydrolyysista vasopressoriaktapeptidiksi angiotensiini II. Sen aktiivisuus voidaan maarittaa kayt-taen substraattina hippuryyli-1-histidyyli-l-leusiinia 25 (HHL) tai hippuryyliglysidyyliglysiinia.

Entsyymi valmistetaan seuraaavalla tavalla: 10 g kaniinin keuhkojauhetta uutetaan 10 min 100 ml:11a ka-liumfosfaattipuskuria (50 mol, pH 8,3) ja sentrifugoidaan sitten 40 min 40 000 g. Supernatantti sailytetaan 30 5°C:ssa. Entsyymianalyysi on muunnelma julkaisusta

Biochem. Pharmacol. 20 (1971), s. 1673 tunnetusta mene-telmasta. Yhdisteiden inhiboiva vaikutus tutkitaan siten, etta 10 ml inhibiittoria tislatussa vedessa tai DMS0:ssa lisataan 40 plraan puskuria (750 nM, 115 mol kaliumfos-35 faattia, pH 8,3) ja 40 pl:aan (3-H)-HHL (500 pmol) 115 mol kaliumfosfaattipuskurissa, pH 8,3. DMSO-pitoisuus 7 90532 pidetåån alle 1 %:n. Reaktio saatetaan tapahtumaan lisåå-maiia 20 μΐ em. entsyymiliuosta. Inkuboidaan 60 min 37°C:ssa, jonka jaikeen reaktio pysåytetaan lisaamålia 1 ml 0,1 HC1. (3-H)hippuurihappo uutetaan sitten 1 ml:11a 5 etikkaesteria. 10 min sentrifugoinnin jaikeen påailå olevasta etikkahappouutteesta otetaan 150 - 200 μΐ ja li-sataan se lO mlraan tuikenestetta. Radioaktiivisuus mita-taan tuikelaskimella ja tuloksesta lasketaan IC50-arvo.

KeksinniJn mukaisesti valmistetuilla yhdisteilia on 10 pitkaaikainen intensiivinen verenpainetta alentava vai- kutus.

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintoå.

Esimerkeissa kaytetaan seuraavia lyhenteita:

Tic 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 15 Die dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo

Ide indoliini-2-karbonihappo

Oic oktahydroindoli-2-karbonihappo Z bentsyylioksikarbonyyli

Boc tert.-butyylioksikarbonyyli 20 tBu, Bu", tert-C^Hg tert.-butyyli Nb 4-nitrobentsyyli DCC disykloheksyylikarbodi-imidi DMF dimetyyliformamidi 25 DMA dimetyyliasetamidi NEM N-etyylimorfoliini CA sykloheksyyliamiini DCA disykliheksyyliamiini

Mikali mitaan muuta menetelmåa ei ole mainittu, . 30 seuraavissa esimerkeissa selostetut yhdisteet puhdiste- taan analyysia ja biologista maaritystå vårten HPLC-puh-distusmenetelmålia.

Esimerkeissa 1-23 kuvatut yhdisteet eivat ole kaavan I mukaisia, mutta mainituista esimerkeista ilmene-. 35 vat kaavan I mukaisten yhdisteiden valmistuksessa kayte-tyt menetelmat.

8 '90532

Esimerkki 1 N-(l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli- 1,2,3, 4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo a) 2-karbobentsoksi-3-karboksi-l,2,3, 4-tetra- 5 hydroisokinoliini (Z-Tic) 188 g (1,05 moolia) 3-karboksi-l,2,3,4-tetra-hydroisokinoliinia lisåtåån 0°:ssa 1050 ml:aan 1-norm. NaOH:a, ja sitten lisåtåån tiputtamalla tassa lampo-tilassa sekoittaen samanaikaisesti 160 ml kloorihiili-10 happobentsyyliesteria ja viela 1050 ml 1-norm. Na0H:a. Sen jålkeen sekoitetaan 2 tuntia huoneen lampotilassa. Uutetaan kolme kertaa eetterillå ja alkalinen vesifaa-si tehdaan happameksi vak. HCl:lla pH-arvoon 1. Erot-tunut oljy uutetaan etikkaesteriin. Etikkaesteriliuos 15 peståån vedella kunnes vesifaasin pH on 3,0. Natrium-sulfaatilla kuivaamisen jålkeen tuote kiteytyy etik-kaesteriliuoksesta konsentroinnin ja hiertamisen jålkeen. Kidesuspensioon lisåtåån 1,5 litraa di-isopro-pyylieetteriå ja sekoitetaan tunnin ajan huoneen låmpo-20 tilassa/ suodatetaan imussa, ja tuote kuivataan suur-.:· tyhjSsså fosforipentoksidin påållå.

Saanto: 256,7 g Sp. 138-139°C.' b) 2-karbobentsoksi-3-karboksi-l,2,3,4-tetra-hydroisokinoliini-tert.-butyyliesteri 25 Liuokseen, jossa on 248,8 g (0,8 moolia) 2- karbobentsoksi-3-karboksi-1,2,3,4-tetrahydroisokinolii-nia 1600 ml.-ssa metyleenikloridia, lisåtåån 312 ml tert.-butanolia ja 8 g 4-dimetyyliaminopyridiiniå. Jååhdytetåån -5°C:seen ja sitten lisåtåån annoksittain : 30 liuos, jossa on 176 g disykloheksyylikarbodi-imi- diå 350 ml:ssa metyleenikloridia. Sekoitetaan 5 tun-tia 0°:ssa ja seoksen annetaan sitten olla paikoil- l· 9 90532 laan 16 tuntia huoneen lampotilassa. Kun disykloheksyy-liurea on imetty pois, reaktioliuos uutetaan kolme kertaa kyllastetylla natriumvetykarbonaattiliuoksella. Kuivataan magnesiumsulfaatilla, konsentroidaan vakuu-5 missa huoneen lampotilassa oljymaiseksi. Jalelle jaa 286 g tuotetta kellertåvånå oljyna (97 % teoreet-tisesta).

NMR: 7,30 s (5H) ; 7,20 s (4H); 5,l-4,3m (3H); 5 , Os· (2H); 1,46 (9H).

10 c) 3-karboksi-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini- tert-butyyliesterihydrokloridi 284 g 2-karbobentsokisi-3-karboksi-l,2,3,4-tetra-hydroisokinoliini-tert.-butyyliesteria (0,775 moolia) liuotetaan 3 litraan metanolia, lisataan 15 g 10 %:ista 15 Pd-bariumsulfaatti-katalyyttiå ja hydrataan vedyllå normaalipaineessa. Liuoksen pH-arvo pidetåån 1-norm.

HCl:n metanoliliuosta tiputtaen lisaamalla 4,0:ssa (lasielektrodi). Katalyytti suodatetaan pois ja liuos haihdutetaan kuiviin vakuumissa huoneen lampotilassa.

20 Kiteista tuotetta hierretaan vedettoman eetterin kanssa, suodatetaan imussa ja kuivataan vakuumissa fosfori-··· pentoksidin påålla.

: Saanto: 156 g sp. 180° (hajoten) .

·.; : Tosylaattia voidaan saada joko lisSamalla hyd- 25 rauksen aikana suolahapon metanoliuoksen asemesta :··: tolueenisulfonihapon metanoliuosta, tai hydrokloridi liuotetaan veteen, lisataan laskettu maara natrivim-tosylaattia ja jååhdytetaan lisåamallå siemenkiteita ja sekoittamalla noin 4°C:seen. Talloin tosylaatti ’..1 30 saostuu erilleen kiteisessa muodossa. Kiteet suodate taan erilleen, peståån vedella ja kuivataan.

Sp. 139-140° (hajoten).

d) Karbobentsoksi-L-alanyyli-3-karboksyyli-12,3,4-tetrahydroisokinoliini-tert.-butyyliesteri 35 27 g (0,15 moolia) 3-karboksi-l,2,3,4-tetra- hydroisokinoliini-tert.-butyyliesterihydrokloridia 10 90532 suspendoidaan 200 ml:aan dimetyyliformamidia, jaåhdyte-taån sekoittaen ja kosteudelta suojattuna -5°C:seen, ja lisataan 19 ml (0,15 moolia) N-etyylimorfoliinia seka liuos, jossa on 33,4 g karbobentsoksialaniinia, 5 20 g N-hydroksibentsotriatsolia ja 33g disykloheksyyli- karbodi-imidia 100 ml:ssa dimetyyliformamidia. Sekoi-tetaan tunnin ajan 0°C:ssa, annetaan olla paikoillaan yon ajan +4°C:ssa ja jatkokasitellaan sitten tunnin ajan huoneen lampotilassa sekoittamisen jalkeen. Eroit-10 tunut disykloheksyyliurea suodatetaan erilleen ja reaktioliuos haihdutetaan suurvakuumissa huoneen låm-pdtilassa kuiviin. Jalelle jåanyt oljy liuotetaan 1 litraan etikkaesteria ja peståån kolme kertaa 150 ml:n erilIS kyllastettyå natriumkarbonaattiliuosta, 5 %:isella 15 kaliumvetysulfaattiliuoksella ja kerran vedellå. Ve- dettomallå natriumsulfaatilla kuivaamisen jalkeen liuo-tin tislataan pois vakuumissa huoneen lampotilassa. Saanto: 59 g dljyM.

e) L-alanyyli-3-karboksi-l,2,3,4-tetrahydroiso-20 kinoliini-tert.-butyyliesteri-hydrokloridi (Ala-Tic-0-But) 15 g karbobentsoksi-alanyyli-3-karboksi-l, 2,3,4- : tetrahydroisokinoliini-tert.-butyyliesteria hydra- taan 400 ml:ssa metanolia 8 grammalla 10 %:ista Pd/ba-25 riumsulfaatti-katalyyttiå. Liuoksen nåennainen pH : pidetaan (lasielektrodi) 1-norm. suolahapon metanoli- liuosta lisaamållå arvossa 4,0. 8 tunnin kuluttua katalyytti suodatetaan pois ja liuos haihdutetaan vakuumissa huoneen lampotilassa kuiviin. KiinteMtå jcicln- • 30 nostå digeroidaan sitten di-isopropyylieetterin kanssa ja kuivataan vakuumissa.

Sulamispiste 110° (hajoten).

Samalla tavalla kuin yhdistettå Ala-Tic-OBut * . valmistetaan yhdisteita: i: n 90532 rv-i XOO-t-C.Hn I 4 9 c=o K3C-CH-NH2 5 7,3-6,5m (4H); 4,4t (IH); 3,8-3,0 m+d (3H); 1,4s (9H); 1,2d (3H) 10 æ COO-t-C;H9 ^C-CK-NH, II I 2

O R

15 seuraavat signaalit ovat yhteisia seuraaville yhdisteille: 7 ,2s (4H); 5,1-3,3m (3H); 3,9-3,Om (4H); 1,4s (9H) kun R:H ,2s (4H); 3,9-3,Om (5H) 20 j:h2

Mi

H

13,ls (IH); 7,5s (IH); 6,8s (IH); 2,8m (2H) 25 CH-, 3\ CH-CH-- 1,5m (3H); 0,9d (6H) • : X 2 • ; CH^ ’· CH2F_ 5,1-4,3m (5H) 12 90532 /~Vs-CH2-C32 7,2-7,0m (9H1 i 2,7-2,0m(4E> CH,-CH,-CH- 1,5-1,On (9H)

3 * I

CH3 5 fyCK2- 7,1S (5H)f 2,7d (2-H) 10 -^CK2 I J) 7,8-6,4^ (9H)

H

HO-CH2- 3,7d (2H) 15 / N^-CH^-0-C-NH-CH2-CH2-CH2-CH2- 7,Is (5H); 5,Os O {2H) ; 2,4m (2H) ; 1,8-1,3m (6H) 20 O 7,Is (5H); 5,Os -ch2-o-c-kh-ch2-ck2-ch2-ch2-ch2- (2h); 2i4m ;·; 0 (2H) ; 1,8-1,3m (8H) 25 / ^-CK^-O-C-NH-CH-j-CHp-CIi^- 7'ls <5Η) · 5 '0s (2H) ; \=/ ^ 2,4m (2H); l,8-l,3m (4H) I, 13 90532

Cy-CH2_0-C-KH-CH2~ 1' ls (5H) ; 5, Os (2H) ; 2,3m J O (2H)

5 H2N

·> C-NCH,CH,CH,_ 8,3-7,6m (2H); 2,9-l,6m (6H) IIN ^ ' “ - 10 / ^>-CHo-0-C-NH-CH7CH2- 7,1s (5H); 5,Os <2H); 2,4m O (2H) ; 1,7-1,4m (2H) f) N-(l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli- 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo-tert.-bu-15 tyyliesteri 305 mg alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini- 3-karbonihappobutyyliesteriå (Ala-Tic-OBut) ja 445 mg 4-fenyyli-2-okso-voihappoa liuotetaan 4 ml:aan meta-nolia ja pH såadetaan 1-norm. NaOH:n vesiliuoksella 20 arvoon 7,5. Lisataan 200 mg natriumsyaaniboorihydridia ja annetaan reagoida 36 tuntia. Haihdutetaan kuiviin ja aine otetaan talteen kromatografioimalla kolonnis-sa silikageelilla (eluointiseos: kloroformi/metanoli/ vesi/jåaetikka 20 + 15+-2 + 1) .

25 Saanto: 382 mg; sp. 120°:sta alkaen, hajoten.

g) N-(l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli- 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 350 mg yhdistettå N-(l-karboksi-3-fenyylipro-pyyli)-Ala-Tic-OBut liuotetaan 3 ml:aan vedetonta 30 trifluorietikkahappoa ja annetaan olla 30 minuuttia huoneen lampStilassa. Haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja jålelle jåånytta oljya hierretaan kylman di-isopro-pyylieetterin ja petrolieetterin kanssa.

14 90532

Saanto: 276 mg amorfista ainetta.

NMR: 7,20 u. 7,10 (s); 4,3 (s, leveå); 3,0-3,9 (m, levea); 1,23 u. 1,15 (d).

Esimerkki 2 5 N-(l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli- 1.2.3.4- tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 4,8 g yhdistettå H-Ala-Tic-0But. Tos-OH liuote- taan 40 ml:aan absoluuttista etanolia, pH saadetaan K0H:n etanoliliuoksella. arvoon 7 ja lisåtaån 6,2 g 10 2-okso-4-fenyylivoihappo-etyyliesteriå ja sekoitetaan siten, ettå lasnå on 9 g jauhettua molekyyliseulaa 4 Å, lisååmållå hitaasti liuos, jossa on 2 g natriumsyaani-boorihydridiå 15 ml:ssa absoluuttista etanolia.

Noin 20 tunnin kuluttua suodatetaan ja liuotin tisla-15 taan pois vakuumissa. Jåånnos jaetaan etikkaesteriin ja veteen liukeneviin osiin, etikkaesterifaasi eroite-taan ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jåånnos kroma-tografioidaan silikageelillå kåyttåmållå eluointiai-neena seosta etikkaesteri/sykloheksaani (1:2 1:4).

20 Tuote liuotetaan 20 ml:aan trifluorietikkahappoa ja sekoitetaan 30 min. huoneen låmpotilassa. Trifluori-etikkahappo tislataan pois vakuumissa, sitten tisla-taan tolueenin kanssa ja kromatografioidaan silikageelillå kåyttåmållå seosta metyleenikloridi/metano--- 25 li (10:1) .

Saanto: 2,2 g.

Esimerkki 3 N- (l-karboksi-5-aminopentyyli)-L-alanyyli- 1.2.3.4- tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 30 1,2 gramman påålle N-(l-karboksi-5-Boc-amino- pentyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappoa kaadetaan 10 ml jååkylmåå trifluori-etikkahappoa ja sekoitetaan tunnin ajan huoneen lam-pStilassa. Tåmån jålkeen haihdutetaan kuiviin vakuu-35 missa. Jåånnos liuotetaan veteen ja kuivataan jååhdy- 15 90532 tyskuivausta kåyttåen.

Saanto: 0,95 g.

Esimerkki 4 N-(l-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli-5 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 880 mg N-(l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappoa liuotetaan 20 ml:aan dioksaani/vesi-seosta (9:1) ja saippuoidaan huoneen lampotilassa 4,5 ml :11a 1-norm.

10 natriumhydroksidiliuosta. Tunnin kuluttua liuos teh- daan happameksi ekvivalenttimaaralla 1-norm, suola-happoa ja pååosa dioksaanista haihdutetaan pois. Jåan-nos uutetaan useaan kertaan etikkaesterilla, ja liuot-timen poistamisen jalkeen, orgaaninen faasi kromato-15 grafioidaan kationinvaihtajalia (DOWEX 50).

Saanto: 630 mg.

Esimerkki 5 N-(l-karbetoksi-3-amino-propyyli)-L-alanyyli- 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 20 1,1 g N-(l-karbetoksi-3-bentsoksikarbonyyliamino- propyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappoa liuotetaan 150 ml:aan metanolia ja hyd-I ; ; rataan 40°C:ssa normaalipaineessa siten, etta låsna on : 100 mg palladium-aktiivihiili-katalyyttia (10 %:ista).

25 Reaktion paatyttyå katalyytti suodatetaan pois ja liuotin imetåån pois vakuumissa.

Saanto: 0,79 g.

Esimerkki 6 N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-alanyyli-30 1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo a.) 2-(2-okso-propionyyli)-1,2,3,4-tetrahydro-: “· isokinoliini-3-karbonihappotert-butyyliesteri -50°C:seen jaahdytettyyn liuokseen, jossa on 700 mg yhdistetta Tic-OBut ja 630 mg disyklohek-35 syylikarbodi-imidia 15 ml:ssa vedetonta kloroformia, 16 90532 sekoitetaan nopeasti vasta tislattu liuos, jossa on 270 mg palorypålehappoa 5 mlrssa kloroformia. Seoksen annetaan olla 16 tuntia syvSjå&hdytyskaapissa (~20°C) ja erilleen laskehtinut DC-urea suodatetaan pois.

5 Liuos pestaan KHS04~liuoksella ja sen jålkeen KHC0'3~ liuoksella, kuivataan Na2S04:lla ja konsentroidaan vakuumissa. Yhdiste (dljya) sisåltåå hiukan disyklo-heksyyliureaa; sita kromatografioitiin analyysiS vårten silikageeli11a seoksella CHCl^/CH^OH 15:1.

10 Samalla tavalla kuin kondensoitaessa palorypale- happoa yhdisteen Tic-OBut kanssa, yhdisteestå Tic, Ide ja vastaavasta «tketokarbonihaposta valmistetaan seuraavia kondensaatiotuotteita.

Il I ·7,3-6,5m (4H); 2,4s (3H) ; l,4s i 4 9 (9H) CO-CO-CH3 20 seuraavien yhdisteiden osalta I T T j havaitaan yhdenmukaisesti seuraa- 25 vat perusrungolle ominaiset signaalit 7 ,2s (4H); 5,1-4,3m (3H); 3,9-3,Om (2H); 1,4s (9H) : 30 13,Is (IH); 7,5s (IH) ; 6,8s C 2~L_Jh (IH); 3,9-3, Om (4H) li 17 90532 -CH2-CH(CH3) 2 2,4-1,0 m+d (9H) -CH2-S-^> 7,2-7,Om (9H) ; 2,5m (2H) -CH2F 4,4s (2H) 10 -C»2-Q 7,15s {5H) ; 3,Os (2H) -CHy-CH-ClU-CH.* 2,4-1,9m (3H); 1,5-1,Om (8H) / I Δ 3

CiU

15 3 " CH2"Tj {^] 7-, 8-6,4m (9H) ; 3,9-2,9m (4H)

H

20 b.) N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-ala- nyyli-1,2,3,4-tetrahydro-isokinoliini-3-; karbonihappo-tert.-butyyliesteri : 1,52 g yhdistettH pyruvyyli-Tic-OBut ja 394 mg S-fenyyli-kysteiiniå liuotetaan 5 ml:aan metanolia 25 ja pH såådetåan 1-norm. NaOHrlla (vesiliuos) arvoon 7,0. Lisåtåån 400 mg natriumsyaaniboorihydridiå ja seoksen annetaan olla 24 tuntia huoneen låmpQtilassa. Haihdu-tetaan kuiviin vakuumissa, liuotetaan kloroformiin, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin.

30 Tuote saadaan puhtaana kromatografioimalla silikagee-lilla (seos CHC13/CH30H/CH3C00H/H20 50/20/5/1).

NMR: 7,3-7,0m (9H) ; 5,l-4,3m (3H); 3,9-3,0m <4H); 2 ,5m (2H) .

is 90532 c.) N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli) -ala-nyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 1 g esimerkin 6b butyyliesteria liuotetaan 5 ml: 5 aan trifluorietikkahappoa. Haihdutetaan 30 minuutin kuluttua kuiviin vakuumissa, jåånndstå digeroidaan di-isopropyylieetterin kanssa ja kuivataan kaliumhydrok-sidilla.

Saanto 0,95 g trifluoriasetaattia (hygroskooppista). 10 NMR: 7,4-7,lm (9H); 5,2-4,4m (3H); 3,9-3,Om (4H); 2,5m (2H);l,25m (3H).

Esimerkki 7 N-(l-karbetoksi-2-bentsyylisulfinyylietyyli)-L-alanyyli-L-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 15 Jåillå jååhdytettyna sekoitettuun seokseen, jos- sa on 0,64 g natriumperjodaattia ja 20 ml vettå, liså-taan 1,3 g N- (l-karbetoksi-2-bentsyylitio-etyyli)-L-alanyyli-L-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karboni-happoa liuotettuna 20 ml:aan metanolia. Reaktioseosta 20 sekoitetaan 24 tuntia 0°C:ssa ja sen jålkeen natrium- ·· jodaatti suodatetaan pois . Suodos uutetaan useaan ker- : .·. taan metyleenikloridilla. Liuottimen poistamisen jål- . , : .·. keen saadaan 1,1 g sulfoksidia. NMR-spektrisscl on havait- tavissa seuraavat signaalit: 7,3-7,0m (9H); 5,l-4,3m 25 (3H) ; 4,Is (2H) ; 3,9-3,0m (4H);.:2,6m (2H) ; l,2d (3H) .

Esimerkki 8 N- (l-karbetoksi-3-fenyylisulfonyyli-propyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 260 mg N-(l-karbetoksi-3-fenyylitio-propyyli)-L-30 alanyyli-1,2 ,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbonihap-poa ja 20 mg natriumvolframaatti-dihydraattia lis£-. taan 50 ml:aan vettå ja tiputtamalla lisåtåån 1 ml per- hydrolia (30 %:sta). Seosta låmmitetåån 30 minuut-tia 80°C:ssa ja sen jålkeen sekoitetaan tunnin ajan 35 huoneen låmpotilassa. Sen jålkeen ylimååråinen peroksidi li 19 90 532 tuhotaan bariumsulfaatilla olevalla palladium 11a ja hapen kehittymisen pååtyttyå palladium-katalyytti suo-datetaan pois liuoksesta, joka haihdutetaan kuiviin. Raakatuote puhdistetaan ioninvaihtokromatograafises-5 ti DOWEX 50 H+-muodolla.

Saanto: 220 mg NMR: 7,7m (9H); 5,l-4,3m (3H); 3,9-3,Om (4H); 2,8m (2H); 1,5m (2H); l,2d (3H).

Esimerkki 9 10 N- (2-amino-l-karboksipropyyli)-L-alanyyli-1,2,3,4- tetrahydroisokinoliini-3-karbonihappo 2,2 g N/» -Boc-o^/^ -diaminovoihappoa, valmistettu artikkelin Coll. czech. chem. Commun. 31, 2955 (1966) mukaisesti samalla tavalla kuin -Boc-yhdistettå, 15 annetaan reagoida 2,4 gramman kanssa yhdistetta pyru-vyyli-Tic-OBut, valmistettu esimerkin 6a) mukaisesti, esimerkissa 6b) selostetulla tavalla. Boc-suojaryhmå lohkaistaan sen jålkeen pois esimerkissa 3 selostetulla tavalla.

20 Saanto: 2,6 g.

Esimerkki 10 N-(l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli-dekahydroisokino1iini-3-karbonihappo a. L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo (Die) 25 250 g L-l,2,3,4-tetrahydroisokinoliini-3-karbo- nihappoa suspendoidaan 2 litraan 90 %:ista etikkahappoa. Lisåtaan 10 g hiilella olevaa rodium-katalyyttiå ja hydrataan 24 tuntia 60-80°C:ssa ja 120 baarin painees-sa. Suodatettu liuos haihdutetaan kuiviin, jåånnos liuo-30 tetaan 200 ml:aan etikkaesteria ja lisåtaan tiputtamal-la voimakkaasti sekoitettuun 2 litraan di-isopropyyli-• eetteriå. Liuos dekantoidaan hartsimaisen jåånnoksen pååltå, haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja sama kåsit-: tely toistetaan noin 1/3 :11a edellå kåytetystå liuotin- ·;· ;· 35 mååråstå. Hartsimaiset sakat yhdistetåån ja niitå kåsi- 20 90532 tellaån kuumalla etikkaesterillå, jolloin ainoastaan osa liukenee. LisåtSan juoksuttamalla voimakkaasti se-koittaen 3 litraan dietyylieetteri-di-isopropyylieet-teri-seosta 1:1, jolloin muodostuu hoytymMista sakkaa, 5 joka suodatetaan erilleen, peståan eetterillS ja kui-vataan. Saanto: 234 g; ohutkerroskromatograafisesti se ei ole yhtenSista (diastereoisomeeriseosta). UV-spektrin ja NMR:n perusteella aromaattista ainetta ei enaa ole lasnå, alkuaineanalyysi on moitteeton.

10 Ainetta kaytetaån enempåå puhdistamatta seuraa- vassa vaiheessa.

b. N-bentsyylioksikarbonyyli-L-dekahydroisokino- liini-3-karbonihappo (Z-Dic-OH) 58 g L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappoa 15 liuotetaan 315 ml:aan 1-norm. NaOH:a. Voimakkaasti se-koittaen 0-5°C:ssa lisataan tunnin kuluessa tiputta-malla saraanaikaisesti 48 ml bentsyylioksikarbonyyli-kloridia ja 370 ml 1-norm. NaOH:a. Talloin saostuu paksu sakka. Lisayksen paåtyttyå sekoitetaan viela 2 20 tuntia, sitten uutetaan eetterilla ja sakka suodatetaan erilleen (=diastereoisomeerin "A" natriumsuolaa; saanto 43 g). Suodoksen pH saadetåan våkevållå HClrlla arvoon 1,5-2, jolloin laskehtii erilleen oljya. Se liuotetaan etikkaesteriin. Vesifaasi uutetaan etikka-25 esterillå, yhdistetyt etikkaesteriliuokset pestaSn vedellå, kuivataan natriumsulfaatilla ja konsentroi-daan pienitilavuiseksi (noin 200 mlrksi). LisSttaes-sa 15-18 ml sykloheksyyliamiinia (CA) saostuu sakka, joka jaavedellM jaåhdyttamisen jalkeen suodatetaan 30 erilleen ja pestaån pienella maaralla kylmSa etikka-esteria ja kuivataan sen jalkeen. Saanto: 48 g (iso-meeriseoksen B CA-suolaa).

"A":n natriumsuola muutetaan CA-suolaksi seuraa-vasti: yhdiste suspendoidaan 500 ml:aan vettS, paalle 35 kaadetaan kerrokseksi 200 ml etikkaesteriå ja tehdaån 21 90532 ha-pameksi våkevållå HCl:lla kunnes pH on 1,5-2. Ravis-telun jålkeen etikkaesteri-faasi eroitetaan, peståån pienella måårållå vetta ja kuivataan natriumsulfaati11a. Konsentroidaan kuten edellå ja lisåtåan 16 ml syklohek-5 syyliamiinia. CA-suola eristetåån kuten edellå.

Puhdistusta vårten "A":n CA-suola kiteytetaan uudelleen kahdeksankertaisesta etikkaesterimååråstå. Sulamispiste 197-198°C, = 7,5° (c = 1, metanolis- sa). Alkuaineanalyysi on moitteeton.

10 "B":n Ca-suola kiteytetåån uudelleen nelinker- taisesta etikkaesterimååråstå. Sp.: 190° (sintrau-tuu 187°:sta alkaen) 1 = +14,6° (c = 1, metano- lissa). Alkuaineanalyysi on moitteeton.

Vapaita happoja saadaan tunnetulla tavalla 15 suspendoimalla CA-suolat vesi/etikkaesteri-seokseen ja tekemalla happameksi sitruunahapolla. Etikkaesterifaa-sit peståån pienella maaralla vetta ja haihdutetaan kuiviin. Saadaan yhdistettå Z-Dic-OH oljymåisena jåån-ndksena.

20 c. Ben.tsyylioksikarbonyyli-L-dekahydroisokinolii- ni-3-karbonihappo-tert.-butyyliesteri (Z-Dic-OBu^) .

41 g yhdistettå Z-Dic-OH ("A") liuotetaan 350 ml: aan metyleenikloridia. Lisåtåan 52 ml t-butanolia ja 25 1,3 g 4-dimetyyliaminopyridiiniå, jååhdytetåån 0°C:seen ja sekoittaen lisåtåån tiputtamalla liuos, jossa on 29 g disykloheksyylikarbodi-imidiå (DCC) 60 ml:ssa metyleenikloridia. Sen jålkeen sekoitetaan vielå 20 min. 0°C:ssa ja 5 tuntia huoneen låmpotilassa ja erilleen laskehti-30 nut disykloheksyyliurea suodatetaan pois. Suodos haihdutetaan vakuumissa kuiviin, jåånnos liuotetaan etikka-esteriin, liuos peståån peråkkåin KHSO^/i^SO^-liuoksel-la, natriumvetykarbonaatilla (Z-Dic-OH:n reagoimaton Na-suola saostuu ja suodatetaan pois) ja vedellå, kui-35 vataan ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jåånnds oljy-måistå. Saanto: 38,5 g = -17,3° (c = 1, metano- 22 90532 lissa). Analogisen yhdisteen saamiseksi yhdisteesta "B" menetellaari samalla tavalla. Saanto 38,1 g, = +6,7° (c = 1, metanolissa).

d. L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo-tert- - 5 butyyliesteri-tosylaatti (H-Dic-OBu*" .TosOH) .

27 g esiinerkin 10c mukaisesti valmistettu "A" :n yhdistetta hydrataan katalyyttisesti 250 mlrssa metano-lia lisååmallå tiputtaen 4-norm. TosOH:n metanoliliuos-ta, Pd/hiili-katalyyttiå, kåyttåen pH:n ollessa 4,5 10 (pH-Stat) . Suodatettu liuos haihdutetaan sitten kuiviin vakuumissa, kiteista jaånnosta digeroidaan eetterin kanssa ja kuivataan. Saanto: 22,6 g. Analyysia vårten kiteytetaan uudelleen nayte etikkaesterista. Sp. : 15 9-160°C; = -6,5° (C = 1, metanolissa). Alkuaineana- 15 lyysi on moitteeton. Yhdiste on ohutkerroskromatograafi-sesti yhtenaista.

Isomeeriseoksen "B":n esimerkin 10c mukaisesti valmistetun yhdisteen osalta menetellaan samalla tavalla. Etikkaesterista uudelleenkiteytyksen jSlkeen saadaan 20 tålldin ainetta, jonka sulamispiste on 162-164°C, -Q = -4,4° (c = 1, metanolissa). Alkuaineanalyysi on moitteeton.

e. N-bentsyylioksikarbonyyli-L-alanyyli-L-deka-hydroisokinoliini-3-karbonihappo-tert.-butyy- 25 liesteri (Z-Ala-Dic-OBu^) 12,4 g yhdistetta H-Dic-0But.TosOH, valmistettu esimerkin lOd mukaisesti yhdistetta "A" kayttaen, liuotetaan 250 ml:aan metyleenikloridia. LisataMn 6,7 g yhdistetta Z-Ala-0H ja 4,05 ml 1-hydroksibentsotriatso-: 30 lia (HOBt), lisåtaan 4,2 ml N-etyylimorfoliinia ja 0-4°C: ssa sekoittaen lisataan tiputtamalla liuos, jossa on 6,6 g disykloheksyylikarbodi-imidia (DCC) 30 mlrssa metyleenikloridia. 5 tunnin kuluttua suodatetaan, suo-” dos haihdutetaan kuiviin, jaannos liuotetaan etikka- 35 esteriin ja pestaan lampotilan ollessa 5°C:n alapuo- li 23 90532 lella 10 %:sella KHSO^/I^SO^-seoksella (1:2), 1-mo-laarisella natriumvetykarbonaatilla ja vedellå, kui-vataan natriumsulfaatilla ja liuotin tislataan pois . Jaånnos hartsia, liukenee helposti kaikkiin orgaanisiin 5 liuottimiin. Saanto: 15,2 g. Samalla tavalla menetel- laan isomeeriseoksen "B" yhteydesså, joka voidaan tåsså vaiheessa eriståå kåyttåmållå preparatiivista HPLC-kS-sittelyå silikageelillM eluoimalla seoksella klorofor-mi/sykloheksaani (9:1).

10 f. L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karboni- happo-tert.-butyyliesteri-tosylaatti (H-Ala-Dic-OBu*1 .TosOH) 8,5 g Z-yhdistettå hydrataan katalyyttisesti esimerkin lOd mukaisesti. Liuottimen tislaamisen jål- 15 keen aluksi hartsimainen jaannos kiteytyy jonkin ajan kuluttua tai hierrettaesså etikkaesterin kanssa ja kitey- tetaan analyysia vårten uudelleen etikkaesteristå.

Sp.: 151-153°C (haj.), få = -28,8° (c = 1, metanolis- sa). Alkuaineanalyysi on moitteeton. Samalla tavalla 2o menetellaan isomeeriseoksen "B" osalta. Saadaan kiteyty- mStonta hartsia; alkuaineanalyysi on moitteeton.

Samalla tavalla kuin yhdistettS H-Ala-Dic-OBu valmistetaan yhdistetta alanyyli-oktahydroindoli-2- t karbonihappo-t-butyyliesteriå (H-Ala-0ic-0Bu ) ja 25 seuraavia yhdisteita ja eristetaan ensisijaisesti tosy-laatteina (NMR-arvot perusrungon osalta): 4,9 t (IH); 4,5-3,0 m (2H); 1,4 s (9H); 1,2 d(3H); 2,0-1,0 m (11H), (H-Ala-0ic-0Bufc).

:i'" CXk , ^C00-t-C.Hq c=o H3C-CH-NH2 24 90532

Aminokarbonihappo-lahtdainetta oktahydroindoli-2-karbonihappoa valmistetaan seuraavasti: 45 g indoli-2-karbonihappoa liuotetaan 500 mlraan 4-prosenttista natronlipeåa. LisatSan 20 g Raney-nik-5 kelia ja hydrataan 24 tuntia 40°C:ssa. Suodatetaan, tehdaSn happameksi vak. HCl:lla, liukenematon aines suodatetaan pois ja vesifaasi uutetaan useaan kertaan butanoli 11a. Orgaaninen faasi konsentroidaan ja kroma-tografioidaan. (CHCl^/metanoli/jaåetikka 50:20:5).

10 Saanto: 22 g. Sp.: 260°C.

Samalla tavalla valmistetaan, eeuraavia yhdistei-ta. Yhdisteiden NMR-signaalit ovat seuraavat: ^\^\^COO-t-C4Hg 5,1-4,3 m (2H); 3,9-3,0 m 15 L i L (2H); 1'4 s OH); 2,0-1, Om II I 2 (12H)

0 R

kun R : H 3,9-3,0 m (4H) 20 .;· _s CH2 13,1 s (1H ) ; 7,5 s (IH) ; jf Π 6,8 s (1H) ; 2,8 m (2H)

: H

.,: - 25 CH. 1,0-2,0 m . (15H) ; 0,9 d (6H) XCH'CH2- ·· / CH3 . ; ,n 5,1-4,3 m (4H)

: : 30 -CH2F

/—^ 7,2 s (5H) ; 2,7-2,0 m (4H) // V_s-ch2-ch- 1 25 90532 CH3-CH2-CH- 1,0-2,0 m (21H) CH3

QcH2- 7,1 s (5H) ; 2,7 d (2H) CH — ί I \j 7,8-6,4 m (5H) ; 2,8 m (2H)

H

HO-CH2- 3,7 d (2H) 15 —CH2-0-<:-NH-CH2-CH2-CH2-CH2- 7,1 s (BH); 5,0 s (2H); O 2,4 m (2H); 2,0-1,0 m {1 8 H) 20 ^—CH2-CKj:-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2- 7,1 s (5H); 5,0 s O (2H); 2,4 m (2H); 2,0-1,0 m (20H) 25 (/ \—ί:Η2-Ό-<:-ΝΗ-αΗ2-αΗ2-€Η2- 7,1 s (5H) ; 5,Os (2H); O 2,4 m (2H) ; 2,0-1,0 m (16H) 26 90 532 _CH0-0-C-NH-CH— 7,1 s (5H); 5,0 s (2H); \==/ O 2,3 m (2H) H2N\ . C-NCH9CH CH^- 8,3-7,6 m (2H); 2,9-l»0 m 5 (18H)

H

C-NH-CHr- 8,3-7,6 m (2H); 2,-9-2,5 m H” .- (2H) 10 /-CH2-0-C-NH-CH2CH2- 7,1 s (5H); 5,0 s (2H); O 2,4 m (2H) ; 2,0-1,0 m(14H)

H C 3 "S—N

15 Γ\ /)—NH-CH2-CH2-CH- 7,4 s (IH); 2,5 m (2H); 2.3 s (6H); 2,0-1,0 in (16H) 3

CH

20 /T”N\ (/ \— NH_CH_ 7,4 s (IH) ; 2,5 ir, (2H); 2.3 s (6H) H 3 25 - 4,9 m (IH); 4,5-3,0 m (2H); COO-t-C4H9 1,4 s (9H) ; 2,0-1,0 m (11H)

C-CH-NH-W l 2 OR

30 kun H:H 3,9—3,0rn(4H)

Qjj — «-2 · 13,1 s (IH); 7,5 s (IH); 35 6,8 s (IH) ; 2,8 m (2H)

H

CH3V

.CH-CH2~ 1,0-2,0 m (14H); 0,9 d (6H) 27 90532 cv c -CH-F 5,1-4,3 m (4H) D l -S-CH0-CH2- 7,2-7,0 m (5H); 2,7-2,0 m(4H) 10 CH--CH.,-CH- 1,0-2,0 m (20H) 3 2 | ch3 —CH,- 7,1 s (5H) ; 2,7 d (2H) 15 _X· CH,~ - 7,8-6,4 m (5H); 2,8 m (2H)

H

20 HO-CH2- 3,7 d (2H) tf ''Vo^-C^C-NH-C^-C^-C^-C^ 7,1 s (5H); 5,0 s (2H); 25 NC=l/ 0 2,4 m (2H); 2,0-1,0 m (1 7 H) 012-0-C-NH-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2~ 7,1 s 5,0 s '< 2H) ; 0 2,4 m (2H); 2,0-1,0 m ' 30 (19H) (/ Vy_CH.-0-C-NH-CHo-CH_-CH-- 7,1 s (5H); 5,0 s (2H); ^==7 O 2,4 m (2H); 2,0-1,0 m (1 5 H) 28 90532 CH^O-C-NH-CH^- 7,1 s (5H); 5,0 s (2H); O 2,3 m (2H)

H2N\ H

5 ^C-N-CH2CH2CH— 8,3-7,6 m (2H); 2,9-1,0 ni m (17H)

Η Νχ H

/^C-N-CH- 8,3-7,6 m (2H); 2,9-2,5 m HN'' z <2H) 10 (/ n__ 0Η7-0-0-ΝΗ-0Η20Η2- 7,1 s (5H) ; 5,0 s (2H); N'==/ O 2,4 m (2H) ; 2,0-1,0 m (13H)

HA

15 7,4 s(IH); 2,5 m(2H); 2,3 s NH~CH2CH2CH2~ (6H); 2,0-1,0 m (15H)

H3C

h3c7«* L \—NH-CH,— 7,4 s (IH); 2,5 m (2 H) ; 20 y* - 2,3 s (6H, g. N-(l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo- 25 tert.-butyyliesteri 305 mg alanyyli-dekahydroisokinoliini-3-karboni-happo-t-butyyliesteriå (Ala-Dic-OBut) ja 445 mg 4-fe-nyyli-2-okso-voihappoa liuotetaan 4 ml:aan metanolia ja pH såådetaån 1-norm. NaOHrn vesiliuoksella arvoon 7,5.

.30 Lisåtaan 200 mg natriumsyaaniboorihydridiå ja seoksen annetaan reagoida 36 tuntia. Haihdutetaan kuiviin ja aine saadaan talteen kromatografioimalla silikageeliko-lonnissa (eluointiseos: kloroformi/metanoli/vesi/jaa-etikka 20+15+2+1).

i 29 90 532

Saanto: 376 mg; sp.: 123°:sta alkaen, hajoten.

h. N-(l-karboksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 350 mg yhdistetta N-(l-karboksi-3-fenyylipro-5 pyyli)-Ala-Dic-OBut liuotetaan 3 ml:aan vedetonta trifluorietikkahappoa ja annetaan olla 30 minuuttia huoneen lampotilassa. Haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja jålelle jåånyttM Sljya hierretaSn kylman di-iso-propyylieetterin ja petrolieetterin kanssa.

10 Saanto: 226 mg amorfista ainetta.

NMR: 7,10 (s); 3,0-3,9 (m, leveS); 1,23 ja 1,15 (d)? 2,0-1,0 (m, levea) .

Esimerkki 11 N-(l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli-15 L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 4,83 g yhdistetta H-Ala-Dic-OBut.TosOH liuotetaan 40 ml:aan absoluuttista etanolia, pH saadetaan K0H:n etanoliliuoksella arvoon 7 ja lisataån 6,2 g 2-ok-so-4-fenyylivoihappoetyyliesteria ja sekoitetaan, siten, 20 ettå låsnå on 9 g jauhettua molekyyliseulaa 4 Å, lisaa-mallå hitaasti liuos, jossa on 2 g natriumsyaaniboori-hydridia 15 mlrssa absoluuttista etanolia. Noin 20 tun-nin kuluttua suodatetaan ja liuotin tislataan pois vakuumissa. Jaannds jaetaan etikkaesteriin ja veteen liuke-25 neviin osiin, etikkaesterifaasi eroitetaan ja haihdu tetaan kuiviin vakuumissa. Jaannos kromatografioidaan silikageelillM kayttcimålla eluointiin etikkaesteri syk-loheksaani-seosta (1:2—*1:4).

Tuotetta liuotetaan 30 minuutin.>ajan 20 ml:aan 30 trifluorietikkahappoa. Trifluorietikkahappo tislataan pois vakuumissa, sitten tislataan tolueenin kanssa kro-matografioidaan silikageelilla seoksella metyleeni-kloridi/metanoli (10:1).

Saanto: 1,8 g.

30 90 532

Esimerkki 12 N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo a .) 2 -(2-okso-propionyyli)-L-dekahydroisokino-5 liini-3-karbonihappo-tert.-butyyliesteri -50°C:seen jaahdytettyyn liuokseen, jossa on 700 mg yhdistettå Dic-OBut ja 630 mg disykloheksyyli-karbodi-imidia 15 ml:ssa vedetonta kloroformia, sekoi-tetaan nopeasti jaahdytetty ja vastatislattu liuos, 10 jossa on 270 mg palorypalehappoa 5 ml:ssa kloroformia. Seos jatetaån 16 tunniksi syvajaahdytyskaappiin (-20°C) ja erilleen laskehtinut DC-urea suodatetaan pois. Liuos pestaan KHSO^- ja sitten KHCO^-liuoksella, kuivataan Na2S0^:lla ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Yhdiste 15 (oljya) sisaltaa hiukan disykloheksyyliureaa; analyysia vårten sita kromatografioitiin silikageelilla seoksel-la CHC13/CH30H (15:1).

Samalla tavalla kuin kondensoitaessa palorypalehappoa yhdisteen Dic-OBut kanssa vastaavien o<-keto-20 karbonihappojen kanssa valmistetaan seuraavia konden-saatiotuotteita.

··* 4,9 m (1H) ; 4,2-3,5 m -1 (1H); 3,0-1,2 m (11H); ΝΛ 2,4 s (3H) ; 1,4 s (9H) ·. 25 I COO-t-C4H9 CO-CO-CH3 seuraavien yhdisteiden yh-—^^-'COO-t-C^Hg teydessa havaitaan perusrun- 1 ] iff gon osalta yhtenaisesti 30 ^^ . ...

11^ seuraavat signaalit: 0 5,1-4,8m (IH); 3,9-3,0m (2H); 1,4 s (9H) ; 2,0-1,0m (12H) I: 31 90532 _ØH —f^ 13,1 s (IH) ; 7,5 s (IH) ; 6,8s 2 I-Ah (IH) ; 3,9-3,0 m (4H) — 2,4-1,0 m (21H) CH^-S-(^ 7,2-7,0 m (5 H) ; 2,5 m ( 2 H) 10 -CH2F 4,4 s (2H) -ch2~^3 7,15 (5h); 3,0 s (2h) 15 - CH2-p-CK2-CH3 2,4-1,0 m (23H) CH3 CH2ll-7,8-6,4 m (5H); 3,9-2,9 m(4H) 20 : :H · · b.) N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-ala-nyy li -L -dekahydroisoki no 1 i i ni - 3 -karboni -25 happo-tert.-butyyliesteri 1,52 g yhdistettå pyruvyyli-Dic-OBut ja 394 mg fenyyli-kysteiinia liuotetaan 5 ml:aan metanolia ja:; pH saadetåån 1-norm. NaOHrlla (vesiliuos) arvoon 7,0. Lisatåan 400 mg natriumsyaaniboorihydridiå ja seoksen . . 30 annetaan olla 24 tuntia huoneen låmpotilassa. Haihdu- tetaan kuiviin vakuumissa, liuotetaan kloroformiin, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin. Tuote saadaan puhtaana kromatografioimalla silikagee-lilla (seos CHCl3/CH3OH/CH3CO0H/H2O 50/20/5/1).

32 90532 NMR: 7,3 m (5H); 5,1-4,8 m (IH); 3,9-3,0 m (4H); 2,5 m (Η H2H).

c.) N-(l-karboksi-3-fenyyli-3-tiapropyyli)-ala-nyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 5 1 g esimerkisså 12b saatua butyyliesteria liuo- tetaan 5 ml:aan trifluorietikkahappoa. 30 minuutin ku-luttua haihdutetaan kuiviin vakuumissa, jaånnosta di-geroidaan di-isopropyylieetterin kanssa ja kuivataan kaliumhydroksidin påålla.

10 Saanto: 0,95 g trifluoriasetaattia (hygroskooppista) .

NMR: 7,3 m (5H); 5,2-4,8 ro (IH); 3,9-3,0 m (4H); 2,5 m (2H) ; 1,25 m (3H) .

Esimerkki 13 N-(1-karboksi-3-fenyyli-propyyli)-L-alanyyli-L-15 dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 880 mg N-(1-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappoa liuotetaan 20 ml: aan dioksaani/vesi-seosta (9:1) ja saippuoidaan huoneen lampotilassa 4,5 ml :11a 1-norm. natriumhydroksidiliuos-20 ta. Tunnin kuluttua liuos tehdåan happameksi ekvivalent-timaåralla 1-norm. suolahappoa ja påaosa dioksaanista haihdutetaan pois. Jaannos uutetaan useaan kertaan etikkaesterilla, ja liuottimen poistamisen jalkeen, orgaaninen faasi kromatografioidaan kationinvaihtajalla 25 (DOWEX 50) .

Saanto: 630 mg.

Esimerkki 14 N-(l-karboksi-5-aminopentyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 30 1,2 gramman paålle N-(l-karboksi-5-Boc-amino- pentyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karboni-happoa kaadetaan 10 ml jaakylmaa trifluorietikkahappoa ja sekoitetaan tunnin ajan huoneen lampotilassa. Sen jalkeen haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jaannos liuo-35 tetaan veteen ja kuivataan jaahdytyskuivausta" jayttåén. Saanto: 0,90 g.

33 90532

Esimerkki 15 N-(l-karbetoksi-3-amino-propyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 1,1 g N-(l-karbetoksi-3-ben tsoksikarbonyyliamino-5 propyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karboni- happoa liuotetaan 150 ml:aan metanolia ja hvdra-taan 100 mg:n palladium/aktiivihiili-erån (10 %:ista) låsnaollessa 40°C:ssa norraaalipaineessa. Reaktion påå-tyttyå katalyytti suodatetaan pois ja liuotin imetaån 10 pois vakuumissa. Saanto: 0,79 g.

NMR: 5,1-4,8 m (1H); 3,9-2,5 m (6H); 2,0-1,0 m (14H); 1,2 d (3H) .

Esimerkki 16 N- (l-karbetoksi-2-bentsyylisulfinyylietyyli)-L-15 alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo

Jaissa jååhdyttaen sekoitettuun seokseen, jossa on 0,64 g natriumperjodaattia ja 20 ml vetta, lisa- taan 1,3 g N-(l-karbetoksi-2-benstsyyli-tioetyyli)-L-ala-nyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappoa liuotettu-20 na 20 ml:aan metanolia. Reaktioseosta sekoitetaan se-koitetaan 24 tuntia 0°C:ssa ja suodatetaan sen jålkeen erilleen natriumjodaatista. Suodos uutetaan useaan kertaan metyleenikloridilla. Liuottimen poistamisen jalkeen saadaån 1,1 g sulfoksidia. NMR-spektrissa havai-25 taan seuraavat signaalit: 7,3 m (5H); 5,1-4,8 m (1H); 4,1 s (1H); 3,9-3,0 m (4H); 2,6 m (2H) ; 1,2 d (3H) .

Esimerkki 17 N-(l-karbetoksi-3-fenyylisulfonyyli-propyyli)-L-30 alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 260 mg N-(l-karbetoksi-3-fenyylitio-propyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappoa ja 20 mg natriumvolframaatti-dihydraattia liså-tåan 50 ml:aan vetta ja tiputtamalla lisåtåån 1 ml per-35 hydrolia (30 %:ista). Seosta lammitetaan 30 min. 80°C:ssa 34 90532 ja sen jalkeen sekoitetaan tunnin ajan huoneen låmpoti-lassa. Ylimåarainen peroksidi tuhotaan sitten barium-sulfaatilla olevalla palladiumilla ja hapen kehittymi-sen pååtyttyå liuos suodatetaan erilleen palladium-5 katalyytistå ja haihdutetaan kuiviin. Raakatuote puh-distetaan suorittamalla ioninvaihtokromatografiointi DOWEX 50 H+-muodolla. Saanto: 220 mg.

NMR: 7,7 m (5H); 5,1-4,8 m (IH); 3,9-3,0 m (4H); 2,8 m (2H); 1,5 m (2H); 1,2 d (3H) .

10 Esimerkki 18 N-(2-amino-l-karboksipropyyli)-L-alanyyli-L-deka-hydroisokinoliini-3-karbonihappo 2,2 g N/5 -Boc- /i -diaminovoihappoa, valmistet-tu artikkelin Coll. Czech, chem. Cornmun. 31, 2955 (1966) 15 mukaisesti, annetaan reagoida 2,4 gramman kanssa yhdis-tettå pyruvyyli-Dic-OBut, valmistettu esimerkin 12a mukaisesti, esimerkisså 12b selostetulla tavalla. Boc-suojaryhmå lohkaistaan tamån jalkeen esimerkisså 14 selostetulla tavalla. Saanto: 2,6 g.

20 NMR: 5,1-4,8 m (IH); 3,9-3,0 m (5H); 2,0-1,0 m (15H) ; 1,2 d (3H).

Esimerkki 19 L-N-(l-karbetoksi-5-aminopentyyli)-L-alanyyli-L-dekahydroisokinoliini-3-karbonihappo 25 a) 35 g N,£ -bentsyylioksikarbonyyli-L-lysiini-etyy- liesteri-hydrokloridia ja 30,6 g ^-bromipropionihappoa liuotetaan seokseen, jossa on 350 ml dioksaania, 50 ml etanolia ja 75 ml 4-norm. Na0H:a. Sekoitetaan yon ajan huoneen låmpotilassa pitamålla pH vakiona arvossa 8,8-9 30 autotitraattoria kSyttaen, minka jalkeen pH saådetåån pienella mSaralla HCl:a arvoon 7-8 ja liuotin tislataan pois vakuumissa. Jaannos liuotetaan mahdollisimman pie-neen maaraån vetta ja liuoksen-pH'saadetaan suolahapol-la arvoon 5-6. Jaahdytetaan jailla ja sakka suodate-35 taan erilleen lyhyen paikoillaan olon jalkeen, peståån I.

35 90 532 pienellå måårallå jååkylmåå vettå ja eetterillå ja kui-vataan vakuumissa. Vesiliuos voidaan muuttaa myos hei-kosti emåksisen ioninvaihtajan avulla kahtaisioniksi ja puhdistaa. Sen jalkeen suodos yksinkertaisesti lyofi-5 loidaan. Saanto: 12,9 g (52 %).

b) Yhdiste liuotetaan 100 ml:aan dimetyyliform-amidia ja lisåtåån peråkkåin huoneen låmpotilassa 23 g yhdistetta H-Dic-OBzl. TosOH (valmistettu tavalliseen tapaan aminohaposta kiehuttamalla bensyylialkoholi- 10 tolueenisulfonihapossa vetta eroittaen), 6,5 ml N-etyylimorfoliinia, 6,8 g l-hydroksibensotriatsolia ja 11 g disykloheksyylikarbodi-imidiå. 4 tunnin sekoit-tamisen jalkeen urea suodatetaan erilleen, liuotin tis-lataan pois vakuumissa ja jaånnos kromatografioidaan 15 silikageelilla seoksella sykloheksaani-etikkaesteri (4:1).

Talloin diastereoisomeerit eroittuvat. Otsikon yhdistetta sisaltavat yhtenaiset fraktiot yhdistetåån, liuotin tislataan pois vakuumissa.

c) Jaannos liuotetaan metanoliin, hydrataan 20 katalyyttisesti Pd/hiilikatalyytillå, ja mahdollisen katalyytin erilleen suodattamisen jalkeen, suoritetaan muuttaminen hydrokloridiksi sSatåmalla liuoksen pH ar-, voon 3. Liuotin tislataan pois ja jaannos kuivataan vakuumissa.

25 Esimerkki 20 L-N-(l-karbetoksi-3-fenyylipropyyli)-L-alanyyli-L-oktahydroindoli-2-karboksyylihappo a) Seosta, jossa on 55 g 2-bromi-4-fenyyli-n-voihappoetyyliesteria, 14,5 g L-alaniini-t-butyylies-30 teriå ja 45 ml trietyyliamiinia, pidetaan 24 tuntia tetrahydrofuraanissa. Liuotin tislataan pois vakuumissa, jaånnos jatetaan veteen ja etikkaesteriin liukene-viin osiin, etikkaesterifaasi eroitetaan, kuivataan nat-— riumsulfaati11a ja liuotin tislataan pois vakuumissa.

36 90 532

Jaannos kromatografioidaan silikageelillå seoksella syk-loheksaani-etikkaesteri (4:1), jolloin puhdistumisen lisåksi ta-pahtuu myos diastereoisomeerien eroittuminen. Vastaavien fraktioiden konsentroinnin jålkeen pidettåesså yhdistettå 5 trifluorietikkahapossa 20 minuutin ajan t-butyyliesteri lohkeaa. Trifluorietikkahappo tislataan pois vakuumissa ja sen jalkeen tislataan vakuumissa tolueenin kanssa.

b) 7 g N-(l-L-karbetoksi-3-fenyylipropyyli)-L-alaniinia, 11 g oktahydroindoli-2-karbonihappo-bentsyyli-10 esteri-tosylaattia, 3,2 ml N-etyylimorfoliinia, 3,3 g 1-hydroksibentsotriatsolia ja 5,5 g disykloheksyylikarbo-di-imidiå annetaan sitten reagoida esimerkin 19b mu-kaisesti dimetvyliformamidissa, kasittelya jatketaan siinå selostetulla tavalla ja diastereomeerit erote-15 taan kromatografioimalla silikageelillå seoksella syk- loheksaani-etikkaesteri (4:1). Bentsyyliesteri lohkais-taan kromatograafisesti yhtenåisestå yhdisteestå hydraamalla katalyyttisesti.

Esimerkki 21 20 L-N-/_l-karbetoksi-4- (4,6-dimetyyli-pyrimidyyli- 2-amino)-butyylf7“L-alanyyli-L-dekahydroisokino-liini-3-karbonihappo a) 15,3 g oi-bromipropionihappoa ja 41,1 g yhdistetta H-Dic-OBut.TosOH kondensoidaan 300 ml:ssa 25 tetrahydrofuraania, jolloin låsnå on 12,8 ml N-etyyli- morfoliinia ja 1,35 g 1-hydroksibensotriatsolia, kåyt-tåmållå 22 g disykloheksyylikarbodi-imidiå. 4 tunnin kuluttua urea suodatetaan pois ja liuotin tislataan pois vakuumissa. Jåånnos liuotetaan etikkaesteriin, liuos pes-: 30 tåån natriumvetykarbonaatti- ja sitruunahappoliuoksella ja vedellå, etikkaesteriliuos kuivataan natriumsulfaa-tilla ja liuotin tislataan pois vakuumissa.

b) 3,75 g yhdistettå o^-bromipropionyyli-Dic-0But annetaan reagoida huoneen låmpotilassa 20 ml:ssa tetra- ·· " 35 hydrof uraania 2,5 gramman kanssa - (4,6-dimetyyli- pyrimidin-2-yyli-L-ornitiini-etyyliesteriå lisååmållå 1 ml i: 37 90532 di-isopropyylietyyliamiinia. 24 tunnin kuluttua liuotin tislataan pois vakuumissa, jaånnSs liuotetaan etikka-esteriin, liuos peståån vedellå, kuivataan natriumsul-faatilla ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jaannos kro-5 matografioidaan esimerkin (20 b) mukaisesti diastereo-isomeerien eroittuessa. t-butyyliesteri lohkaistaan liuottamalla yhdiste dioksaani/HCl-seokseen. 10-15 minuutin kuluttua liuotin tislataan pois ja jaannos kuivataan tarkasti vakuumissa K0H:n paalla. Yhdiste on 10 hydrokloridina.

Esimerkki 22 N- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyyli-cis-oktahydroindoli-2-S-karbonihappo a) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-alaniini 15 bentsyyliesteri

Uuttamalla etikkaesterilla natriumkarbonaatin ve-siliuoksesta, jossa on 70 g alaniini-bentsyyliesteri-tolueenisulfonaattia, saadaan vapaata emasta. Vedetto-malla natriumsulfaatilla kuivattuun orgaaniseen faasiin 20 lisåtåån 200 ml dimetyyliasetamidia (DMA) ja haihdute taan huoneen låmpotilassa kuiviin vesisuihkuvakuumia kåyttåen. Kun on lisatty 90 g »d-bromi-fenyyli-voihappo-etyyliesteria ja 40 ml N-etyylimorfoliinia, liuoksen annetaan olla 4 paivaå huoneen låmpotilassa. Reaktion 25 kulkua seurataan ohutkerroskromatograafisesti silikagee- lilevyillå (seos: sykloheksaani/etikkaesteri 2:1). Haihdutetaan låhes kuiviin vakuumissa, pH saådetåån 2-norm. suolahapon metanoliliuoksella airvoon 3 ja lisåtaan 10 ml - - vettå. Ylimååråinen bromiesteri ja lipofiilinen tuote 30 uutetaan petrolieetteriin, metanolifaasi haihdutetaan kuiviin, lisåtåån 3 %:sta soodaliuosta (250 ml) ja reak-tiotuotteet uutetaan etikkaesteri/eetteri-seokseen (1:1). Kiinteållå natriumsulfaatilla kuivaamisen jålkeen haih-’ : dutetaan kuiviin ja puhdistus ja diastereomeerien eroit- 38 90532 taminen suoritetaan kromatografioimalla silikageelil-la (seos sykloheksaani/etikkaesteri 4:1). S,S-yhdisteen R^-arvo on alhaisempi ja laskehtii paaosiltaan raskaam-pana erilleen (48 %). (jljymåistå ainetta kåsitellaan 5 vålittomasti edelleen.

b) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alaniini 37 g bentsyyliesteriå liuotetaan 250 ml:aan eta- nolia ja bensyyli lohkaistaan hydraamalla katalyyttises-ti 2 tuntia normaalipaineessa kayttamålla 1 g Pd/hiili-10 katalyyttia (10 % Pd). Katalyytti suodatetaan pois, liuos haihdutetaan vakuumissa lahes kuiviin ja saostami-nen suoritetaan lisåamållå petrolieetteriå.

Saanto: 33 g; amorfista ainetta; NMR: 1,18 (d, 3H) ; 1,18 (t, 3H) ; 1,5-2,1 (m, 2H) ; 15 2,4-2,8 (m, 2H); 3,0-3,4 (2 m, kumpikin IH); 4,07 (q, 2H) ; 4,3-5,5 (b, 2H) ; 7,17 (s, 5H) . DMSO-dg.

c) N-(l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-ala-nyyli-cis-oktahydroindoli-2-R,S-karbonihappo-bentsyyliesteri 20 5 g N- (l-S-karbetoksi-3-fenyylipropyyli)-S-ala niini a liuotetaan 20 ml:aan DMF:a. Lisataan 2,45 g 1-hydroksibentsotriatsolia, 5,1 g cis-oktahydroindoli-2-karboksyylihappo-bentsyyliesteri-hydrokloridia, 1,5 ml N-etyylimorfoliinia seka 4 g disykloheksyylikarbodi-25 imidia ja sekoitetaan 3 tuntia huoneen låmpotilassa.

Laimennetaan 30 ml :11a etikkaesteriM ja urea suodatetaan pois. Vakuumissa suoritetun kuiviin haihduttamisen jal-keen jåannos liuotetaan 100 ml:aan eetteria ja uute-taan 2 kertaa vetykarbonaatin vesiliuoksella. Natrium-30 sulfaatilla kuivattu ja kuiviin haihdutettu orgaaninen faasi kromatografoidaan silikageelilla. Eluoidaan etikka-ester/petrolieetteri-seoksella 4:3 ja saadaan 2 frak-tiota, joista haihduttamalla kuiviin vakuumissa saadaan varittomia oljyja.

39 90 532

Alkuaineanalyysit: C Η N

laskettu yhdisteelle C31H40N2°5 71,5 7,7 5,4 Saant°:

Fraktio 1 71,3 7,8 5,3 3,3 g 5 Fraktio 2 71,6 7,6 5,6 3,9g d) N- (l-S-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-S-alanyy-' li-cis-ktahydroindoli-2-S-karbonihappo 3 g bentsyyliesteria (fraktio 2) liuotetaan eta- noliin ja bentsyyli lohkaistaan hydraamalla katalyytti- 10 sesti normaalipaineessa 200 mg:lla Pd/hiilikatalyyttia (10 %). Vedyn sitoutumisen paatyttya (noin tunnin ku- luttua) katalyytti suodatetaan pois ja liuos haihdute- taan kuiviin vakuumissa. Lisataån hiukan pentaania, låmmitetåån noin 45°C:seen ja kåsitellaan tehokkaassa 15 vakuumissa. Muodostuu amorfista, kiinteata vaahtoa .

Saanto: 2,4 g.

NMR (CDC13): 1,20 (d, 3H); 1,23 (t, 3H); multiplet-ti 1,0-2,9 (11H); 3,0-4,5 (m, 3H); 4,12 (q, 2H); 4,65 (b, 2H); 7,13 (s, 5H) .

20 Esimerkki 23 N-(l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-alanyyli-oktahydroindoli-2-karbonihappobentsyyliesteri a) N-tert,-butyylioksikarbonyyli-alanyyli-okta-hydroindoli-2-karbonihappo-bentsyyliesteri (Boc-Ala-Oic - 25 OBzl) 19 g yhdistettå Boc-Ala-0H liuotetaan 100 ml: aan DMF:a ja lisatåan 13 ml N-etyylimorfoliinia, 13,5 g yhdistettå HOBt sekå 29,6 g oktahydroindoli-2-karboni-happobentsyyliesteri-hydrokloridia. Jaåhdytetåan jaåhau-30 teessa, lisataån 21 g disykloheksyylikarbodi-imidiå ja sekoitetaan 15 tuntia huoneen låmpotilassa. Erilleen laskehtinut urea suodatetaan pois imussa, suodos haihdu-tetaan kuiviin vakuumissa ja jåånnos liuotetaan etikka-esteriin. Uutetaan 3 kertaa KHSO^- ja KHCO^-vesiliuok-35 sella ja kyllåstetyillå NaCl-liuoksilla ja orgaaninen 40 90532 faasi haihdutetaan kuiviin vakuumissa.

Saanto: 38,5 g.

NMR: 1,26 (d, 3H); 1,40 (s, 9H); 1,1-2,4 (m, 12H); 3,2-3,9 (m, 2H) ; 5,28 (s, 2H) ; 7,31 (s, 5H) .

5 b) Alanyyli-oktahydroindoli-2-karbonihappobent- syyliesteri-trifluoriasetaatti 21,5 g yhdistettå Boc-Ala-Oic-OBz1 liuotetaan 50 ral:aan trifluorietikkahappoa. Haihdutetaan kuiviin vakuumissa, jaannosta digeroidaan useaan kertaan di-iso-10 propyylieetterin kanssa ja kuivataan vakuumissa.

Saanto: 21 g.

NMR:sså tert.-butyyliryhman protonisignaali puuttuu tåydellisesti.

c) N-(l-karbetoksi-3-fenyyli-propyyli)-alanyyli-15 oktahydroindoli-2-karbonihappoben.tsyyliesteri

Seosta, jossa on 11,1 g yhdistettå Ala-Oic-OBzl. TFA, 7 g o£-bromi-fenyylihappoetyyliesteriå ja 3,3 ml N-etyylimorfoliinia, sekoitetaan 4 påivåå huoneen låm-potilassa 20 ml:ssa dimetyyliasetamidia. Haihdutetaan 20 låhes kuiviin vakuumissa, jåånnos liuotetaan metanoliin, pH såådetåån 2-norm. HCl:n vesiliuoksella arvoon 2 ja lipofiiliset yhdisteet uutetaan petrolieetterillå. Metanolifaasi haihdutetaan kuiviin, lisåtåån 5 %:ista soodaliuosta ja reaktiotuote uutetaan etikkaesteriin.

25 Kromatografoimalla silikageelillå (seos, etikkaes- teri petrolieetteri 5:3) saadaan otsikon yhdistettå vårittomånå oljynå.

Seuraavassa esitetyt esimerkkiyhdisteet on val-mistettu jollakin seuraavista menetelmistå A-C, jolloin 30 osoitetut menetelmåt ovat luonnehdittavissa seuraavasti: 90532

Menetelma A;

Kondensaatiotuotteen, joka on valmistettu esi-merkin (6a tai 12a) mukaisesti yhdisteesta Tic tai Dic-OtC^Hg-esteri tai -bentsyyliesteri tai yhdistees-5 ta Oic-OtC^Hg-esteri tai -bensyyliesteri ja vastaavasta «»^-ketokarbonihaposta, pelkistysaminointi vastaavalla aminohappojohdannaisella esimerkin (6b) mukaisesti, suojaryhmien lohkaiseminen esimerkin (6c tai 12c tai 22d) mukaisesti ja mahdollinen saippuointi esimer-10 kin (13) mukaisesti.

Menetelma B;

Dipeptidi-t-butyyliesterin, joka on valmistettu esimerkin (le tai lOe, f) mukaisesti, pelkistysaminointi vastaavalla ckketokarbonihappojohdannaisella esi-15 merkin (If, lOg, 11) mukaisesti ja mahdollisesti suo-jaryhmien lohkaiseminen esimerkin (lOh tai 11) mukaisesti ja/tai mahdollisesti esimerkin (13) mukaisesti.

Menetelma C:

Menetelman A mukainen pelkistysaminointi ja 20 W-suojattua bifunktionaalista aminohappoa kaytettåes- sa, suojaryhman lohkaisu kåytetysta aminohappojohdan-

Ellei toisin ole ilmoitettu, alempana esitetty-jen yhdisteiden osalta pStevåt seuraavat NMR-arvot (cT -arvot, ppm; TMS standardina): 25 4,9m (2H) ; 4,5-3,Om (3H); 2,0-1,Om (11H) .

Kun kyseessa on etyyliesteri, esiintyvSt lisaksi seuraavat signaalit: 4,2 q u HZ (2H) 30 1,2 t 7 Hz (3H) .

42 ; π ς · ' k .» •ο·«. «-««.

σ\ m C -ο ε tN ° ε ε · ^

« ° °. ^ I

s ϊ I S s ~ i . . — m CN CN '— '' _ T3 — T!

.. S E

~ · o ™ · = ==- · “ ° IN n IN m “ ~ i zz 5 Ό E = in £ = *^r cn rr · . T-.

• * · *- ^ ^ c CN T- ΓΜ '—

:trS

-η < m 0) ® υ u

rn C

= « o s 0 u 1 ΙΟ =

ITJ SC CN

O—= fv, CN U

xi * U

I = — O L'— = — — O I ” ~ u u=o yx.c

CN

cn = x a °\ / a x

\_/ CN CN O U

/ \ cn xx cn — \ / II x ^

\_/ -in t U X

u CN CN —

X X

u u

CN

X

u m m m Pk tc tc

& u υ D

o o o o c

-..- C\J

c\j n cn 00 ^ co ο v N- ^

Claims (2)

1. Menetelma uusien terapeuttisesti kayttOkelpois-ten kaavan I mukaisten oktahydroindolijohdannaiten ja nii-5 den fysiologisesti hyvåksyttavien suolojen valmistamisek-si, —cooh 10 1 (i) NCO-CH-NH-CH-COORt I i 3 R1 R2 15 jossa kaavassa R2 on CH3 tai CH2F, R2 on alkyyli, jossa on enintaan 6 hiiliatomia ja joka voi olla substituoitu ami-nolla tai hydroksilla, ja R3 on vety tai alkyyli, jossa on 1-6 hiiliatomia, silia edellytyksellå, etta R3 ja R2 ei-vat samanaikaisesti tarkoita metyylia, tunnettu 20 siita, etta a) kaavan II mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa,

25. I Q-CH-COOR^ kAA *2 CO-CH-Q R1 (]J) (III) 30 joissa kaavoissa Rlf R2 ja R3 tarkoittavat samaa kuin edel-la, toinen symboleista Q on nukleofuginen ryhma ja toinen on NH2 ja R4 on H, metyyli, etyyli, bentsyyli tai tert.-butyyli, ja haluttaessa saatu esteri muutetaan karboksyy-lihapoksi (R2 ja/tai R4 = vety), tai 35 b) yhdiste, jonka kaava on 44 90 532 POOC-CH-NH-CH-COOP (IV) I I R1 R2 5 jossa Rx ja R2 tarkoittavat samaa kuin edelia, P on vety tai toinen symboleista P voi myds tarkoittaa samaa kuin edelia maaritelty R3/ kuten tert.-butyylia, saatetaan rea-goimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on 10 u_t, 15 jossa R4 tarkoittaa samaa kuin edelia, kondensointiaineen lasna ollessa, ja haluttaessa toinen tai kumpikin esteri-ryhma muutetaan karboksyylihapoksi, tai c) kaavan VI mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan 20 kaavan VII mukaisen yhdisteen kanssa, —COOR4 T=C-COOR3 -N R2

25 NvC0-C=T <VI) RX (VII) joissa kaavoissa n, Rx, R2, R3 ja R( tarkoittavat samaa kuin edelia ja toinen symboleista T on vety ja NH2 ja toinen on 30 happiatomi, ja saatu Schiff'in emas pelkistetaan, ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan suo-laksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelma, t unnet t u siita, etta valmistetaan kaavan I mukainen yh-35 diste, jossa a - C-atomien kahdella tai kolmella kiraali-sella keskuksella on L-konfiguraatio. 45 9 0 532