ES3037038T3 - Compositions comprising sulforaphane or a sulforaphane precursor and a mushroom extract or powder - Google Patents

Abstract

La invención se refiere a la combinación de un precursor de sulforafano, una enzima capaz de convertir dicho precursor en sulforafano, un potenciador enzimático y un extracto o polvo de hongo (preferiblemente maitake, shiitake o reishi). La invención también se refiere a la combinación de sulforafano o un derivado del mismo con un extracto o polvo de hongo (preferiblemente maitake, shiitake o reishi). La presente invención también se refiere a la combinación de un extracto o polvo de brócoli con un extracto o polvo de hongo (preferiblemente maitake, shiitake o reishi). La presente invención proporciona composiciones y métodos relacionados con estas combinaciones. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones que comprenden sulforafano o un precursor de sulforafano y un extracto o polvo de hongos

Campo de la invención

La presente invención se refiere a la combinación de sulforafano o un derivado del mismo y un extracto o polvo de hongos (hongos maitake o shiitake). La presente invención proporciona composiciones y usos relacionados con estas combinaciones. La presente invención también se refiere a una composición como la descrita anteriormente para utilizarse como medicamento, para utilizarse en el tratamiento, la prevención, la reducción de la aparición, la disminución de los síntomas asociados y la reducción de las recurrencias secundarias del cáncer.

Antecedentes de la invención

La utilización de productos naturales es cada vez más popular entre los seres humanos y los animales de compañía. Algunos de estos productos naturales pueden incorporarse en suplementos dietéticos y alimentos médicos. Existe una necesidad en la técnica de suplementos que sean útiles como agentes quimioprotectores y/o antioxidantes. Además, existe una necesidad en la técnica de composiciones farmacéuticas y suplementos dietéticos que sean útiles para las afecciones y trastornos asociados con la mama.

La quimioprotección mediante la utilización de productos naturales está evolucionando como un medio seguro, efectivo, económico, de fácil acceso y práctico para prevenir o reducir la aparición de muchas afecciones que afectan a los seres humanos y a los animales domésticos. Se sabe que los carcinógenos que pueden dañar las células a nivel molecular a menudo se ingieren e inhalan como precursores no tóxicos. Estos precursores no tóxicos pueden convertirse luego en sustancias cancerígenas en el cuerpo. Los agentes quimioprotectores, tales como las sustancias naturales que pueden activar las enzimas desintoxicantes o sus cofactores, pueden contrarrestar y permitir la eliminación o potenciar las otras defensas naturales existentes, tal como el sistema inmunitario.

Algunos productos naturales tienen actividad antioxidante. El estrés oxidativo desempeña un papel importante en el envejecimiento, la progresión de enfermedades neurodegenerativas así como los traumatismos fisiológicos, tal como la isquemia. Los agentes antioxidantes pueden reducir o inhibir la oxidación de biomoléculas vitales y pueden desempeñar un papel en el tratamiento, la prevención o la reducción de la aparición del cáncer, las enfermedades coronarias, los accidentes cerebrovasculares y las enfermedades neurodegenerativas, la enfermedad de Alzheimer, la demencia y los accidentes cerebrovasculares son ejemplos de afecciones afectadas por el estrés oxidativo.

Se cree en gran medida que los cánceres son consecuencia de la exposición a factores ambientales, ya sean internos (es decir, hormonas como el estrógeno y la progesterona) o externos (es decir, el bisfenol A (BPA) del plástico), y de la inflamación crónica. Afortunadamente, el daño causado por factores ambientales se puede contrarrestar mediante una compleja red de enzimas quimioprotectoras de fase II que se encuentran en muchos tipos de células de nuestro cuerpo. Es bien sabido que los estrógenos y sus metabolitos pueden provocar la proliferación de tejido mamario y tumores. Peor aún, los metabolitos del estrógeno quinónico tienen la capacidad de entrar en el tejido mamario y migrar al núcleo de las células epiteliales ductales y glandulares. Allí, se unen al ADN formando aductos de ADN de estrógenos quinónicos que conducen a mutaciones posteriores. Se cree que estas mutaciones son responsables de la base misma de un tumor: el inicio del cáncer. Afortunadamente, una enzima de fase II en particular, la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa (NQO1), puede tomar estrógenos quinónicos peligrosos y altamente reactivos y metabolizarlos para convertirlos en sustancias químicas inertes que se pueden eliminar fácilmente del cuerpo. Por lo tanto, un mecanismo importante para disminuir la incidencia del cáncer es inducir enzimas protectoras de fase II, que incluye la NQO1. Los niveles elevados de la NQO1 pueden ser eficaces para tratar, prevenir, reparar, reducir la aparición y disminuir los síntomas asociados con cualquier afección que resulte de niveles elevados de estrógenos quinónicos. Los ejemplos de estrógenos quinónicos incluyen, aunque no de forma limitativa, catecol quinonas de estrógeno. Los estrógenos quinónicos se describen en las siguientes referencias: Nutter y col., Chem Res Toxicol, 1994, 7:23-28; Cavalieri y col., Ann N Y Acad Sci, 2006; 1089:286-301; Bolton y col. Chem Res Toxicol, 2008, 21(1):93-101; y Cavalieri y col., Biochimica et Biophysica Acta, 2006, 1766:63-78.

Un ejemplo de un producto natural que se cree que tiene propiedades quimioprotectoras y antioxidantes es el sulforafano. El sulforafano es un compuesto organosulfurado que también se conoce como 1-isotiocianato-4-metilsulfinilbutano. El precursor del sulforafano, la glucorafanina, se puede obtener de vegetales de la familiaBrassicaceae,tales como el brócoli, las coles de Bruselas y el repollo. Sin embargo, se deben consumir grandes cantidades de verduras para obtener niveles adecuados para la quimioprevención. La glucorafanina se convierte en sulforafano mediante una enzima tioglucosidasa llamada mirosinasa, que se encuentra en una variedad de fuentes exógenas, tales como las verduras deBrassicaceae,y de forma endógena en la microflora intestinal. Sin embargo, tras la ingestión de glucorafanina, no todos los animales son capaces de lograr su conversión en sulforafano, muy probablemente debido a las variaciones en las poblaciones de microflora y en la salud general. Además, en ambientes ácidos tal como el estómago, la glucorafanina se puede convertir en metabolitos inertes. El metabolito activo, el sulforafano, induce el factor nuclear relacionado con el eritroide 2 (Nrf2) que, a su vez, regula positivamente la producción de enzimas de desintoxicación de fase II y enzimas citoprotectoras, tales como las glutatión S-transferasas, la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa (NQO1) y la hemoxigenasa-1 (HO-1). Se cree que el sulforafano induce la producción de estas enzimas sin cambiar significativamente la síntesis de las enzimas del citocromo P-450. Se cree que la regulación positiva de las enzimas de fase II desempeña un papel en una variedad de actividades biológicas, que incluye la protección del cerebro contra la citotoxicidad, la protección del hígado contra los efectos tóxicos de la acumulación de grasa y la desintoxicación de una variedad de otros tejidos.

El sulforafano y su precursor, la glucorafanina, se han estudiado ampliamente. Shapiro y col. (Nutrition and Cancer, (2006), vol. 55(1), págs. 53-62) analizan un estudio clínico de fase I que determina la seguridad, la tolerabilidad y el metabolismo de los glucosinolatos e isotiocianatos de los brotes de brócoli. Shapiroy col.analizan un estudio clínico aleatorizado, doble ciego y controlado con placebo de extractos de brotes que contienen glucosinolatos, tales como la glucorafanina o isotiocianatos, tales como el sulforafano, en sujetos humanos sanos. El estudio encontró que la administración de estas sustancias no produjo efectos adversos sistemáticos y clínicamente significativos. Ye y col., (Clinica Chimica Acta, 200, 316:43-53) analizan la farmacocinética de los isiotiocianatos de los brotes de brócoli en humanos.

Se han utilizado o estudiado varios hongos por sus efectos medicinales. Se cree que estos “ hongos medicinales” tienen propiedades beneficiosas, tales como actividad antiviral, antimicrobiana, anticancerosa, antihiperglucémica y/o antiinflamatoria. Los ejemplos de hongos medicinales incluyen maitake, shiitake, reishi, cremini, almendra, castaño, oreja de madera, oreja de nube, porcini, sombrero de tinta, yarta gunbu, enokitake, shemeji, leche de tigre, colmenilla, bambú, ostra dorada, ostra rosada, ostra real, hiratake, coliflor, jalea blanca, jalea dorada, matsutake, trufa mexicana y hongos de paja.

Los hongos maitake(Grifóla frondosa)son hongos comestibles que se consumen ampliamente como alimento y se utilizan en la medicina tradicional para mejorar la función inmunitaria y tratar el cáncer. Se cree que los hongos maitake, que contienen glucanos, tienen propiedades beneficiosas, tales como efectos antitumorales e inmunomoduladores. Existen extractos estandarizados del hongo maitake que contienen como ingredientes activos glucanos, tales como los beta-glucanos unidos a proteínas. El beta 1,6-glucano, un polisacárido unido a proteínas, se ha identificado como un componente activo de los hongos maitake. Se ha demostrado que los hongos maitake tienen efectos antitumorales, ya que inhiben la metástasis tumoral in vitro. En un estudio, se observó regresión tumoral o mejoras significativas en los síntomas en la mitad de los sujetos que utilizaron extracto de maitake. En un estudio de pacientes posmenopáusicas con cáncer de mama, se demostró que la administración oral de extracto de maitake tiene efectos inmunomoduladores.

Los hongos shiitake(Lentinula edodes)son hongos comestibles originarios del este de Asia. Los hongos shiitake contienen micoquímicos, que se postula que tienen efectos antivirales, antibióticos, antiinflamatorios, antihipertensivos y anticancerígenos. Se cree que esto se debe en gran medida a los glucanos, tanto alfa como beta glucanos. Algunos extractos de hongos shiitake tienen un contenido de alfa-glucano mayor que 40 %. Adicionalmente, el lentinano (1,3 beta-D-glucano), un polisacárido aislado del shiitake, ha sido bien estudiado y se cree que desempeña un papel en los efectos beneficiosos del shiitake. Se ha demostrado que tiene efectos anticancerígenos en las células del cáncer de colon, lo que puede deberse a su capacidad para suprimir las enzimas del citocromo P450 1A, que se sabe que metabolizan los procarcinógenos en formas activas. La lentina, el componente proteico, tiene fuertes propiedades antifúngicas y se ha descubierto que inhibe la proliferación de células leucémicas y suprime la actividad de la transcriptasa inversa del virus de la inmunodeficiencia humana-1.

Los hongos reishi(Ganoderma lucidum),también conocidos como hongos lingzki, son hongos comestibles que se encuentran en el este de Asia. Se cree que los hongos reishi tienen efectos antitumorales, anticancerosos, inmunomoduladores e inmunoterapéuticos. Los hongos reishi tienen varios componentes que se cree que contribuyen a su actividad, que incluye el glucano, tal como el beta-glucano, la cantaxantina, los esteroles, la cumarina, el ácido ganodérico y el manitol.

La levadura de panadería(Saccaromyces cerevisiae)puede ser una fuente de glucanos, en particular de betaglucanos. Los componentes activos de la levadura de panadería se pueden extraer de varias maneras, tales como los métodos descritos en Bacon y col. Biochem J, 1969, 114(3): 557-567, patente US-7.803.605; patente US-5.702.719; y la patente US-8.323.644.

Los glucanos se describen en las siguientes referencias: Vetvicka y col. Endocr Metab Immun Disord Drug Targets, 2009, 9(1):67-75, y Vetvicka y col. J Med Food, 2008: 11(4): 615-622.

Zhang y col. (Proc. Natl. Acad. Sci., (1994), vol. 91, págs. 3147-3150) analiza un estudio en ratas Sprague-Dawley para determinar las actividades anticancerígenas del sulforafano y de los isiotiocianatos de norbornilo sintéticos relacionados estructuralmente. El estudio determinó que la administración de sulforafano era efectiva para bloquear la formación de tumores mamarios.

Cornblatt y col. (Carcinogenesis, (2007), vol. 38(7): págs. 1485-1490) analiza un estudio en ratas Sprague-Dawley para determinar el efecto del sulforafano en la quimioprevención en la mama. El estudio determinó que la administración oral de cualquiera de los sulforafanos resultó en un aumento de 3 veces en la actividad enzimática de la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa (NQO1) y en una inmunotinción 4 veces mayor de la enzima hemoxigenasa-1 (HO-1) en el epitelio mamario.

Munday y col. (Cancer Res, (2008), vol. 68(5): págs. 1593-1600) analiza un estudio sobre los efectos de un extracto acuoso liofilizado de brotes de brócoli en el desarrollo de cáncer de vejiga en ratas. El estudio encontró que la administración del extracto de brotes de brócoli resultó en una inducción significativa de la glutatión S-transferasa y la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 en la vejiga, que son enzimas que tienen actividad protectora contra los oxidantes y carcinógenos.

Fang y col. (J Altern Complem Med, (2006), vol. 12(2): págs. 125-132) describe un estudio que determina el efecto antiproliferativo de una fracción de acetato de etilo de hongos shiitake sobre líneas celulares de carcinoma de mama humano (MDA-MB-453 y MCF-7), una línea celular epitelial mamaria no maligna humana (MCF-10F) y dos líneas celulares de mieloma (RPMI08226 e IM-9). El estudio encontró que la inhibición del crecimiento de las células tumorales por los componentes de los hongos shiitake puede resultar de la inducción de la apoptosis.

Kim y col. (J Med Food, (2007), vol. 10(1): págs. 25-31) describe un estudio que investiga la activación de las células destructoras naturales (NK) y los efectos anticancerosos de un exobiopolímero de salvado de arroz cultivado a partir deLentinus edodes.El estudio encontró que el exobiopolímero puede ser efectivo para prevenir y/o tratar el cáncer mediante la activación de las células destructoras naturales.

Louie y col. (BJUI, (2009), vol. 153(9): págs. 1215-1221) analiza el efecto sinérgico de la combinación del interferón-a y la fracción D del hongo maitake (PDF), un extracto bioactivo de hongos sobre la actividad anticancerosa del interferón-a en las células T24 del cáncer de vejiga in vitro.

Masuda y col. (Biol. Pharm. Bull. (2008), vol. 31(6): págs. 1104-1108) analiza un estudio que evalúa la actividad antimetastásica de una fracción de hongos maitake en un modelo murino de metástasis pulmonar. El estudio encontró que la fracción inhibía la metástasis tumoral mediante la activación de células destructoras naturales y células presentadoras de antígenos (APC) y la supresión de moléculas de adhesión tal como ICAM-1, lo que conduce a la inhibición de la adhesión de las células tumorales a las células endoteliales vasculares.

La solicitud de patente europea n.° 2 213 280 describe formulaciones que comprenden glucosinolatos tales como glucorafanina y mirosinasa, en donde la formulación está encapsulada o recubierta. La patente US-7.923.044 B2 describe una composición de suplemento dietético que tiene un valor ORAC superior a al menos aproximadamente 2500 y que se puede consumir fácilmente en una pequeña cantidad. La composición comprende brócoli y una especie de hongo seleccionada del grupo que consiste en agaricus, cordyceps, maitake, reishi, shiitake y combinaciones de los mismos.

Resumen de la invención

Según la invención, se proporcionan composiciones como se describe en las reivindicaciones adjuntas. La presente invención proporciona una composición que comprende una combinación sinérgica de: (i) sulforafano o un derivado del mismo seleccionado entre análogos de sulfoxitiocarbamato de sulforafano, isotiocianato de 6-metilsulfinilhexilo (6-HITC), y compuestos que comprenden la estructura de sulforafano con diferentes cadenas laterales y/o diversas longitudes de espaciadores entre los grupos isotiocianato y sulfóxido, y (ii) un extracto o polvo de hongo (hongos maitake o shiitake) que comprende uno o más glucanos; en donde la combinación sinérgica aumenta la expresión génica de la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 (NQO-1) en un sujeto. La presente invención también proporciona una composición que comprende una combinación sinérgica de: (i) sulforafano o un derivado del mismo seleccionado entre análogos de sulfoxitiocarbamato de sulforafano, isotiocianato de 6-metilsulfinilhexilo (6-HITC) y compuestos que comprenden la estructura de sulforafano con diferentes cadenas laterales y/o diversas longitudes de espaciadores entre los grupos isotiocianato y sulfóxido, y (ii) un extracto o polvo de hongo (hongos maitake o shiitake) que comprende uno o más glucanos, en donde la combinación sinérgica aumenta la expresión génica de la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 (NQO-1) en un sujeto para utilizarse en el tratamiento, prevención, reducción de la aparición, disminución de los síntomas asociados con, y/o reducción de recurrencias secundarias de cáncer, en particular cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón y cáncer de vejiga en un sujeto. Aumentar los niveles o aumentar la expresión génica de la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 (NQO-1) en un sujeto, administrando al sujeto: (i) se describe el sulforafano o un derivado del mismo, y (ii) un hongo (extracto de hongos maitake o shiitake) o polvo. También se describe una composición que comprende: (i) sulforafano o un derivado del mismo, y (ii) un extracto o polvo de hongos (hongos maitake o shiitake) para tratar, prevenir, reducir la aparición, disminuir los síntomas asociados y/o reducir las recurrencias secundarias de una enfermedad o afección asociada con niveles elevados de estrógenos quinónicos. La presente invención también proporciona una composición que comprende una combinación sinérgica de: (i) sulforafano o un derivado del mismo seleccionado entre análogos de sulfoxitiocarbamatos de sulforafano, isotiocianato de 6-metilsulfinilhexilo (6-HITC) y compuestos que comprenden la estructura del sulforafano con diferentes cadenas laterales y/o diversas longitudes de espaciadores entre los grupos isotiocianato y sulfóxido, y (ii) uno o más glucanos; en donde la combinación sinérgica aumenta la expresión génica de la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 (NQO-1) en un sujeto. La presente invención también proporciona una composición que comprende una combinación sinérgica de: (i) sulforafano o un derivado del mismo seleccionado entre análogos de sulfoxitiocarbamato del sulforafano, isotiocianato de 6-metilsulfinilhexilo (6-HITC) y compuestos que comprenden la estructura del sulforafano con diferentes cadenas laterales y/o diversas longitudes de espaciadores entre los grupos isotiocianato y sulfóxido, y (ii) uno o más glucanos, en donde la combinación sinérgica aumenta la expresión génica de la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 (NQO-1) en un sujeto para utilizarse en el tratamiento, prevención, reducción de la aparición, disminución de los síntomas asociados con y/o reducción de recurrencias secundarias de cáncer, en particular cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón y cáncer de vejiga en un sujeto.

La presente descripción proporciona una composición que comprende una combinación sinérgica de: (i) un extracto o polvo de brócoli que comprende un sulforafano o un derivado del mismo seleccionado entre análogos de sulfoxitiocarbamato de sulforafano, isotiocianato de 6-metilsulfinilhexilo (6-HITC) y compuestos que comprenden la estructura del sulforafano con diferentes cadenas laterales y/o diversas longitudes de espaciadores entre los grupos isotiocianato y sulfóxido, y (ii) un extracto o polvo de hongos (hongos maitake o shiitake) que comprende uno o más glucanos. La presente invención también proporciona una composición que comprende una combinación sinérgica de: (i) un extracto o polvo de brócoli que comprende un sulforafano o un derivado del mismo seleccionado entre análogos de sulfoxitiocarbamato del sulforafano, isotiocianato de 6-metilsulfinilhexilo (6-HITC) y compuestos que comprenden la estructura del sulforafano con diferentes cadenas laterales y/o diversas longitudes de espaciadores entre los grupos isotiocianato y sulfóxido, y (ii) un extracto o polvo de hongo (hongos maitake o shiitake) que comprende uno o más glucanos para utilizarse en el tratamiento, prevención, reducción de la aparición, disminución de los síntomas asociados con, y/o reducción de recurrencias secundarias de cáncer, en particular cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón y cáncer de vejiga en un sujeto. Aumentar los niveles o aumentar la expresión génica de la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 (NQO-1) en un sujeto, administrando al sujeto: (i) se describe un extracto o polvo de brócoli, y (ii) un extracto o polvo de hongo (hongos maitake o shiitake). Una composición que comprende: (i) un extracto o polvo de brócoli, y (ii) un extracto o polvo de hongo (hongos maitake o shiitake) para utilizarse en el tratamiento, prevención, reducción de la aparición, disminución de los síntomas asociados con, y/o reducción de recurrencias secundarias de una enfermedad o afección asociada con niveles elevados de estrógenos quinónicos también se describen.

Breve descripción de las figuras

La figura 1 es un gráfico que muestra la conversión de glucorafanina a 38 °C sin ácido ascórbico, como se describe en el ejemplo 4.

La figura 2 es un gráfico que muestra la conversión en aproximadamente 10 minutos a 38 °C en función de la concentración de ácido ascórbico, como se describe en el ejemplo 4.

La figura 3 es un gráfico que muestra la conversión en sulforafano en 30 minutos a 38 °C y 1 mM de ácido ascórbico, como se describe en el ejemplo 4.

La figura 4 es un gráfico que muestra la conversión de glucorafanina en sulforafano en un líquido intestinal simulado, como se describe en el ejemplo 5.

La figura 5 es un gráfico que muestra los resultados del experimento descrito en el ejemplo 6.

La figura 6 es un gráfico que muestra los resultados del experimento descrito en el ejemplo 7.

Descripción detallada de la invención

La presente invención se refiere a la combinación de sulforafano o un derivado del mismo y un hongo (maitake, extracto o polvo de hongo shiitake) que comprende uno o más glucanos. La presente invención también se refiere a la combinación de un extracto o polvo de brócoli que comprende sulforafano o un derivado del mismo y un extracto o polvo de hongos maitake o shiitake que comprende uno o más glucanos. La presente invención también se refiere a la utilización de un extracto o polvo de hongos que comprende uno o más glucanos, con sulforafano o un derivado del mismo, o un extracto de brócoli que comprende sulforafano o un derivado del mismo. La presente invención proporciona composiciones relacionadas con estas combinaciones.

Se describen métodos que comprenden administrar estas combinaciones. En algunas realizaciones, la combinación puede administrarse para tratar, prevenir, reducir la aparición, disminuir los síntomas asociados con, y/o reducir las recurrencias secundarias de cáncer, en particular cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón y cáncer de vejiga en un sujeto, que comprende la administración al sujeto. En algunas realizaciones, la combinación puede administrarse para aumentar los niveles o aumentar la expresión génica de la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 (NQO-1) en un sujeto. En algunas realizaciones, la combinación puede administrarse para tratar, prevenir, reducir la aparición, disminuir los síntomas asociados, y/o reducir las recurrencias secundarias de una enfermedad o afección asociada con niveles elevados de estrógenos quinónicos.

El sulforafano también se conoce como 1-isotiocianato-4-metilsulfinilbutano. Los derivados del sulforafano incluyen análogos de sulfoxitiocarbamato de sulforafano, isotiocianato de 6-metilsulfinilhexilo (6-HITC) y compuestos que comprenden la estructura del sulforafano con diferentes cadenas laterales y/o diversas longitudes de espaciadores entre los grupos isotiocianato y sulfóxido. Los ejemplos de derivados del sulforafano incluyen los descritos en las siguientes referencias: Hu y col., Eur J Med Chem, 2013, 64:529-539; Ahn y col., Proc Natl Acad Sci USA, 2010, 107(21):9590-9595; y Morimistu y col., J. Biol. Chem. 2002, 277:3456-3463, y Baird y col., Arch Toxicol, 2011, 85(4):241-272.

En algunas realizaciones, la composición comprende sulforafano o un derivado del mismo, preferiblemente sulforafano, en una cantidad de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg. En algunas realizaciones, las composiciones adecuadas para uso humano comprenden de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg.

La descripción proporciona métodos que comprenden la administración de sulforafano o un derivado del mismo a un sujeto, preferiblemente sulforafano, en una cantidad de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg. En algunas realizaciones en donde el sujeto es un ser humano, el método comprende la administración de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg. Se describen métodos que comprenden la administración de sulforafano o un derivado del mismo a un sujeto, preferiblemente sulforafano, en una cantidad de aproximadamente 0,01 |jg/kg a aproximadamente 0,2 g/kg, preferiblemente de aproximadamente 0,05 jg/kg a aproximadamente 0,07 g/kg, más preferiblemente de aproximadamente 0,07 jg/kg a aproximadamente 15 mg/kg, más preferiblemente de aproximadamente 0,1 jg/kg a aproximadamente 11 mg/kg, y con la máxima preferencia de aproximadamente 0,2 jg/kg a aproximadamente 7 mg/kg. El método adecuado para uso humano comprende la administración de aproximadamente 2 jg/kg a aproximadamente 2 mg/kg, y más preferiblemente de aproximadamente 0,01 mg/kg a aproximadamente 0,3 mg/kg. Las cantidades anteriores pueden referirse a cada administración de dosificación o a una dosificación diaria total, también se describe. La dosificación diaria total se refiere a la cantidad total de un compuesto o ingrediente que se administra a un sujeto en un período de veinticuatro horas.

Se describe un método que comprende la administración de más de un sulforafano o un derivado del mismo. En algunas realizaciones, las composiciones comprenden más de un sulforafano o un derivado del mismo. Por ejemplo, los métodos o la composición pueden comprender tanto sulforafano como uno o más derivados del mismo, o dos o más derivados. En algunas realizaciones en donde el método o la composición comprenden más de un sulforafano o un derivado del mismo, las cantidades anteriores pueden referirse a la cantidad de cada sulforafano o un derivado del mismo, o a la cantidad total de más de un sulforafano o derivado del mismo.

La presente descripción también proporciona la utilización de un extracto y/o polvo de brócoli, que incluye, por ejemplo, extractos y polvos de semillas y brotes de brócoli. Se describen métodos de administración de extracto y/o polvo de brócoli, y la presente invención proporciona composiciones que comprenden extracto y/o polvo de brócoli. Los ejemplos de extractos y polvos de brócoli incluyen, por ejemplo, los descritos en la patente US-5.411.986; 5.725.895; 5.968.505; 5.968.567; 6.177.122; 6.242.018; 6.521.818; US-7.303.770 y US-8.124.135. Los polvos de brócoli pueden obtenerse, por ejemplo, mediante secado al aire, secado por liofilización, secado en tambor, secado por aspersión, secado por calor y/o secado al vacío parcial de brócoli, preferiblemente los brotes de brócoli. En algunas realizaciones, las composiciones comprenden la utilización de aproximadamente 1 jg a aproximadamente 10 g, más preferiblemente de aproximadamente 250 jg a aproximadamente 5 g, aún más preferiblemente de aproximadamente 500 jg a aproximadamente 1 g, preferiblemente de aproximadamente 600 jg a aproximadamente 500 mg, más preferiblemente de aproximadamente 750 jg a aproximadamente 400 mg, y con la máxima preferencia de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 300 mg del extracto de brócoli. En algunas realizaciones, el extracto o polvo de brócoli está presente en una composición o se administra a un sujeto en cantidades suficientes para proporcionar sulforafano en las cantidades descritas anteriormente.

El sulforafano o un derivado del mismo puede obtenerse de cualquier fuente, que incluye, por ejemplo, una o más plantas de la familiaBrassicaceae(también conocidas comoCruciferae).Los ejemplos de plantas de la familiaBrassicaceaeincluyen los siguientes: brócoli, coles de Bruselas, coliflor, repollo, rábano picante, nabo, rábano, wasabi, berros y mostaza blanca.

La presente invención proporciona la utilización de un extracto o polvo de hongos. En algunas realizaciones, los hongos pueden comprender “ hongos medicinales” , que incluyen, por ejemplo, maitake, shiitake, reishi, cremini, almendra, castaño, oreja de madera, oreja de nube, porcini, sombrero de tinta, yarta gunbu, enokitake, shemeji, leche de tigre, colmenilla, bambú, ostra dorada, ostra rosada, ostra real, hiratake, coliflor, jalea blanca, jalea dorada, matsutake, trufa mexicana y hongos de paja. En realizaciones preferidas, el hongo comprende el hongo maitake, el hongo shiitake y/o una mezcla de uno o más de estos.

El hongo maitake pertenece a la especieGrifóla frondosa.El hongo maitake puede contener varias fracciones que tienen actividad biológica. Ejemplos de componentes encontrados en el hongo maitake incluyen: los glucanos (tales como los alfa-glucanos y los beta-glucanos); lípidos (tales como los ácidos octadecanoico y octadecadienoico); fosfolípidos (tales como fosfatidiletanolamina, fosfatidilcolina, fosfatidilinositol, fosfatidilserina y ácido fosfatídico).

El hongo shiitake pertenece a la especieLentinula edodes.El hongo shiitake puede contener varias fracciones que tienen actividad biológica. Ejemplos de componentes encontrados en los hongos shiitake incluyen los glucanos (tales como los alfa-glucanos y los beta-glucanos), las proteínas (tal como la lentina); lípidos (tal como el ácido linoleico); y ligninas.

Los hongos Reishi pertenecen a la especieGanoderma lucidum.Los hongos Reishi pueden contener varias fracciones que tienen actividad biológica. Ejemplos de componentes encontrados en el hongo Reishi incluyen: glucano (tales como alfa-glucanos y beta-glucanos), cantaxantina, esteroles, cumarina, ácido ganodérico y manitol.

En algunas realizaciones preferidas, el extracto o polvo de hongos comprende uno o más glucanos. Un glucano es un polisacárido de un monómero de D-glucosa unido por enlaces glucosídicos y puede estar en forma alfa o beta. En algunas realizaciones, el glucano comprende uno o más alfa-glucanos y/o beta-glucanos. Los alfa-glucanos incluyen 1,4-a-glucanos y 1,6-a -glucanos y los betaglucanos incluyen 1,3-p-glucanos, 1,4-p-glucanos y 1,6-p-glucanos. Los glucanos se pueden expresar en una variedad de configuraciones poliméricas. En realizaciones preferidas, el extracto o polvo del hongo maitake comprende 1,3-p-glucanos y/o 1,6-p-glucanos. En realizaciones preferidas, el extracto o polvo del hongo shiitake comprende 1,4-a-glucanos.

En algunas realizaciones, puede utilizarse un extracto o polvo de hongo maitake. En algunas realizaciones, el extracto o polvo de hongo maitake está estandarizado para contener de aproximadamente 1 % a aproximadamente 75 %, más preferiblemente de aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 %, aún más preferiblemente de aproximadamente 10 % a aproximadamente 30 %, y con la máxima preferencia de aproximadamente 15 % a aproximadamente 20 % de uno o más glucanos, preferiblemente beta-glucanos, y más preferiblemente 1,3-beta glucano y/o 1,6-beta-glucano. Los ejemplos de extractos y polvos de hongos maitake incluyen los descritos en la patente US-5.854.404; WO 2007142130, EP 0893449; WO2009063885; WO2006107208; WO2007024496; y WO2001054673. Los polvos de hongos maitake pueden obtenerse, por ejemplo, mediante secado al aire, secado por liofilización, secado en tambor, secado por aspersión, secado por calor y/o secado al vacío parcial de hongos maitake. En algunas realizaciones, la composición comprende de aproximadamente 250 pg a aproximadamente 100 mg, preferiblemente de aproximadamente 500 pg a aproximadamente 75 mg, y con la máxima preferencia de aproximadamente 750 pg a aproximadamente 50 mg. En algunas realizaciones, las composiciones adecuadas para humanos comprenden de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg de extracto de hongos maitake. En algunas realizaciones, el método comprende la administración de aproximadamente 250 pg a aproximadamente 100 mg, preferiblemente de aproximadamente 500 pg a aproximadamente 75 mg, y con la máxima preferencia de aproximadamente 750 pg a aproximadamente 50 mg. En algunas realizaciones en donde el sujeto es un ser humano, el método comprende la administración de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg de extracto de hongos maitake. Las cantidades anteriores pueden referirse a cada administración de dosis o a una dosis diaria total.

En algunas realizaciones, puede utilizarse un extracto o polvo de hongo shiitake. En algunas realizaciones, el extracto o polvo de hongo shiitake está estandarizado para contener de aproximadamente 1 % a aproximadamente 75 %, preferiblemente de aproximadamente 10 % a aproximadamente 60 %, aun más preferiblemente de aproximadamente 25 % a aproximadamente 50 %, y con la máxima preferencia de aproximadamente 30 % a aproximadamente 40 % de uno o más glucanos, preferiblemente alfa-glucanos y más preferiblemente 1,4-alfa-glucano. Los ejemplos de extractos de hongos shiitake incluyen los descritos en la patente US-5.780.097; patente US-6.582.723; WO2005107496, WO2007024496 y W02000033069. Los polvos de hongos maitake pueden obtenerse, por ejemplo, mediante secado al aire, secado por liofilización, secado en tambor, secado por aspersión, secado por calor y/o secado al vacío parcial de hongos maitake. En algunas realizaciones, la composición comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1 g, preferiblemente de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 500 mg, y con la máxima preferencia de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 300 mg. En algunas realizaciones, las composiciones adecuadas para humanos comprenden de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 250 mg de extracto o polvo de hongo shiitake. En algunas realizaciones, el método comprende la administración de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1 g, preferiblemente de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 500 mg, y con la máxima preferencia de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 300 mg. En algunas realizaciones preferidas en donde el sujeto es un ser humano, el método comprende la administración de aproximadamente 50 mg a aproximadamente 250 mg de extracto o polvo de hongo shiitake a un sujeto. Las cantidades anteriores pueden referirse a cada administración de dosis o a una dosis diaria total. Las cantidades anteriores pueden referirse a cada administración de dosis o a una dosis diaria total.

En algunas realizaciones, la composición comprende la utilización de un tipo de extracto o polvo de hongos, que es extracto o polvo de hongos maitake, o extracto o polvo de hongos shiitake. En algunas realizaciones, la composición comprende el uso de una mezcla de uno o más tipos de extracto o polvo de hongos. En algunas realizaciones, comprende la utilización de una mezcla de uno o más de los siguientes: extracto o polvo de hongos maitake, extracto o polvo de hongos shiitake y extracto o polvo de hongos reishi, con la condición de que al menos uno del extracto o polvo de hongos maitake y shiitake esté presente. La composición y el método pueden comprender el uso de un extracto o un polvo, o una mezcla de extractos y polvos.

Se describen métodos que comprenden además la administración de uno o más componentes adicionales a las composiciones de la presente invención. Las composiciones de la presente invención pueden comprender además uno o más componentes adicionales. Los componentes adicionales pueden incluir ingredientes farmacéuticos activos, suplementos nutricionales y extractos nutricionales. Los ejemplos de componentes adicionales incluyen el ácido ursólico, la quercetina o un derivado del mismo, un aminoazúcar tales como la glucosamina, un glucosaminoglicano como la condroitina, los insaponificables de aguacate/soja, vitaminas como la vitamina K2, el café, el magnesio, el ácido ursólico, las proantocianidinas, los alfa y beta-glucanos, la curcumina, los fitoesteroles, los fitoestanoles y los S-adenosilmetionina (SAMe). Estos componentes adicionales pueden estar presentes en el extracto de cardo mariano(Silybum marianum)(silimarina), el extracto de arándano(Vaccinium macrocarpon)(proantocianidinas, quercetina y ácido ursólico), la cúrcuma(Curcuma longa).En algunas realizaciones, la relación entre beta-glucano y sulforafano o un derivado de (beta-glucano:sulforafano o un derivado de) es de aproximadamente 50:1 a aproximadamente 1:50, preferiblemente de aproximadamente 25:1 a aproximadamente 1:25, más preferiblemente de aproximadamente 10:1 a aproximadamente 1:20, más preferiblemente de aproximadamente 5:1 a aproximadamente 1:10, aún más preferiblemente aproximadamente 1:1 a aproximadamente 1:8, y con la máxima preferencia de aproximadamente 1:3 a aproximadamente 1:5. En algunas realizaciones, la relación de alfa-glucano a sulforafano o un derivado de (alfaglucano:sulforafano o un derivado de) es de aproximadamente 1:50 a aproximadamente 50:1, preferiblemente de aproximadamente 1:10 a aproximadamente 25:1, más preferiblemente de aproximadamente 1:5 a aproximadamente 20:1, más preferiblemente de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 15:1, aún más preferiblemente de aproximadamente 2:1 a aproximadamente 10:1, y con la máxima preferencia de aproximadamente 3:1 a aproximadamente 8:1.

En algunas realizaciones, la composición comprende una forma de dosificación unitaria, que incluye formas de dosificación farmacéutica adecuadas para administración oral, rectal, intravenosa, subcutánea, intramuscular, transdérmica, transmucosa y tópica. En algunas realizaciones preferidas, la composición comprende una forma de dosificación administrable por vía oral o una forma de dosificación administrable por vía rectal. Los ejemplos de formas de dosificación administrables por vía oral incluyen un comprimido, una cápsula, un polvo que se puede dispersar en una bebida, un líquido tal como una solución, suspensión o emulsión, una cápsula de gel blando/masticable, una barra masticable u otra forma de dosificación conveniente conocida en la técnica. En realizaciones preferidas, la composición comprende un comprimido, una cápsula o una golosina blanda masticable. Las formas de dosificación administrables por vía oral pueden formularse para la liberación inmediata, la liberación prolongada o la liberación retardada.

En algunas realizaciones, al menos el sulforafano o derivado del mismo y/o el extracto o polvo de brócoli se proporcionan en una forma de dosificación que permite la liberación en un área del tracto gastrointestinal que tiene un pH de al menos 4 y preferiblemente al menos 5, tal como el intestino delgado, preferiblemente el duodeno. En algunas realizaciones, el extracto o polvo de hongos y/o cualquier componente adicional opcional también se liberan en un área del tracto gastrointestinal que tiene un pH de al menos 4 y preferiblemente al menos 5, tal como el intestino delgado, preferiblemente el duodeno. El intestino delgado incluye el duodeno, el yeyuno y el íleon.

En algunas realizaciones, cada uno de estos componentes (es decir, sulforafano o un derivado del mismo, extracto o polvo de brócoli, extracto o polvo de hongos y/o componentes adicionales) se libera de manera simultánea o concomitante (es decir, dentro de un corto período de tiempo entre sí).

En algunas realizaciones, las composiciones pueden comprender composiciones administrables por vía oral que comprenden formas de dosificación con recubrimiento entérico o cualquier forma de dosificación que sea resistente a la degradación en un área del tracto gastrointestinal que tenga un pH inferior a 4, tal como el estómago. Por ejemplo, la composición administrable por vía oral puede comprender un comprimido o cápsula que comprende un recubrimiento entérico. El recubrimiento entérico puede comprender materiales que incluyen, por ejemplo, acetato ftalato de celulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, ftalato de acetato de polivinilo, copolímero de ácido metacrílico, copolímero de ácido metacrílico:éster acrílico, acetato succinato de hidroxipropilmetilcelulosa, trimelitato de hidroxipropilmetilcelulosa, goma laca, acetato trimelitato de celulosa, carboximetiletilcelulosa y mezclas de los mismos. El recubrimiento entérico puede comprender cualquier polímero entérico adecuado conocido en la técnica. En algunas realizaciones, uno o más de los componentes de la composición pueden estar embebidos en una matriz de polímeros entéricos. En algunas realizaciones, las composiciones administrables por vía oral comprenden una cápsula que se disuelve lentamente en el ácido gástrico y se desplaza al intestino delgado, tales como las cápsulas resistentes a los ácidos DRCAPS™, comercializadas por CAPSUGEL® o cualquier otra cápsula resistente a los ácidos.

En la forma más preferida, la composición administrable por vía oral está rodeada por un recubrimiento que no se disuelve a menos que el medio circundante tenga un pH de al menos 4, y más preferiblemente de al menos 5. Alternativamente, puede emplearse un recubrimiento que controla la liberación por tiempo, en oposición al pH, con la tasa ajustada para que los componentes no se liberen hasta después de que el pH del tracto gastrointestinal haya aumentado a al menos 4, y más preferiblemente a al menos 5. Por lo tanto, puede utilizarse una formulación de liberación prolongada para evitar la presencia gástrica del sulforafano. La(s) capa(s) de recubrimiento puede(n) aplicarse sobre una composición administrable por vía oral usando técnicas de recubrimiento estándar. Los materiales de recubrimiento entérico pueden disolverse o dispersarse en disolventes orgánicos o acuosos. El pH al que se disolverá el recubrimiento entérico se puede controlar mediante un polímero, o una combinación de polímeros, seleccionados y/o una relación de grupos colgantes. Por ejemplo, las características de disolución de la película polimérica se pueden alterar mediante la relación entre los grupos carboxilo libres y los grupos éster. Las capas de recubrimiento entérico también contienen plastificantes farmacéuticamente aceptables tales como citrato de trietilo, ftalato de dibutilo, triacetina, polietilenglicoles, polisorbatos u otros plastificantes. También pueden incluirse aditivos tales como dispersantes, colorantes, agentes antiadherentes y antiespumantes.

Las composiciones pueden contener uno o más ingredientes farmacéuticos no activos (también conocidos generalmente como “ excipientes” ). Los ingredientes no activos, por ejemplo, sirven para solubilizar, suspender, espesar, diluir, emulsionar, estabilizar, conservar, proteger, colorear, dar sabor y convertir los ingredientes activos en una preparación aplicable y efectiva que sea segura, conveniente y aceptable de cualquier otro modo para su utilización. Los excipientes son preferentemente excipientes farmacéuticamente aceptables. Los ejemplos de clases de excipientes farmacéuticamente aceptables incluyen lubricantes, agentes tamponadores, estabilizantes, agentes expansores, pigmentos, agentes colorantes, agentes saborizantes, rellenos, agentes de carga, fragancias, modificadores de la liberación, adyuvantes, plastificantes, aceleradores de flujo, agentes desmoldantes, polioles, agentes granulantes, diluyentes, aglutinantes, tampones, absorbentes, agentes deslizantes, adhesivos, antiadherentes, acidulantes, suavizantes, resinas, demulcentes, solventes, surfactantes, emulsionantes, elastómeros y mezclas de los mismos.

En algunas realizaciones, la combinación de sulforafano (o un derivado del mismo) y un extracto o polvo de hongos (que contiene glucanos) demuestra un efecto sinérgico. La sinergia se refiere al efecto en donde una combinación de dos o más componentes proporciona un resultado que es mayor que la suma de los efectos producidos por los agentes cuando se utilizan solos. En realizaciones preferidas, el efecto sinérgico es mayor que un efecto aditivo.

En algunas realizaciones, la combinación de un sulforafano (o un derivado del mismo) y un extracto o polvo de hongos tiene un efecto estadísticamente significativo y/o mayor que el efecto aditivo que: (i) sulforafano (o un derivado del mismo) solo, y/o (ii) un extracto o polvo de hongos solo. En algunas realizaciones, la combinación de sulforafano y glucano tiene un efecto sinérgico en comparación con el sulforafano solo y el glucano solo.

Se describen métodos de utilización, que incluyen métodos de administración a un sujeto que lo necesita. En algunas realizaciones, el método comprende la administración de la combinación de un sulforafano o un derivado del mismo y un extracto o polvo de hongos. En algunas realizaciones, el método comprende la administración de la combinación de un extracto o polvo de brócoli y un extracto o polvo de hongos.

En algunas realizaciones, la presente invención se refiere a composiciones de la presente invención para utilizarse en el tratamiento, prevención, reducción de la aparición, disminución de los síntomas asociados con, y/o reducción de las recurrencias secundarias del cáncer, en particular el cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón, cáncer de hígado y cáncer de vejiga en un sujeto. La utilización puede ser útil para reducir o retrasar el daño a los tejidos y órganos, tales como la mama, la próstata, el colon, los pulmones, el hígado y la vejiga. La presente invención proporciona composiciones para utilizarse en el tratamiento, prevención, disminución de los síntomas asociados, y/o reducción de las recurrencias secundarias de enfermedades y afecciones asociadas con el sistema reproductivo (que incluyen, por ejemplo, la mama y la próstata), el colon, el hígado, la vejiga, los riñones, el sistema nervioso central, el sistema cardiovascular, el sistema pulmonar, el sistema genitourinario, el sistema hematopoyético y las articulaciones. La presente invención también proporciona composiciones para utilizarse en el tratamiento, prevención, disminución de los síntomas asociados y/o reducción de las recurrencias secundarias de quistes, tales como los quistes benignos.

Se describe en la presente descripción el aumento de los niveles o el aumento de la expresión génica de NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 (NQO-1) en un sujeto. Esto también puede ser útil para tratar, prevenir, disminuir los síntomas asociados y/o reducir las recurrencias secundarias de enfermedades y afecciones que se beneficiarían de un aumento en la expresión génica o los niveles de NQO-1. Los ejemplos de tales enfermedades y afecciones incluyen el cáncer, el síndrome mielodisplásico, las enfermedades cardiovasculares y la discinesia tardía.

En algunas realizaciones, la presente invención se refiere a composiciones para utilizarse en el tratamiento, prevención, reducción de la aparición, disminución de los síntomas asociados, y/o reducción de las recurrencias secundarias de una enfermedad o afección asociada con niveles elevados de estrógenos quinónicos. Los ejemplos de tales enfermedades o afecciones incluyen cáncer, síndrome mielodisplásico, enfermedad cardiovascular y discinesia tardía.

Se describen métodos relacionados con la provisión de un efecto beneficioso sobre los biomarcadores y el tratamiento, prevención, reducción de la aparición y disminución de los síntomas asociados con los niveles anormales de estos biomarcadores. Ejemplos de tales biomarcadores incluyen enzimas dependientes de NADPH, tiorredoxina (TXN), tiorredoxina reductasa-1 (Txnrd-1), subunidad glutamato-cisteína ligasa (GCLC), sulfotransferasa 1A1 (SULT1A1), hemo oxigenasa-1 (HMOX1), glutatión peroxidasa-3 (gPX-3), glutatión S-transfersa theta 2 (GSTT2), glutatión S-transferasa 1 microsomal (MGST1), aldehído oxidasa (AOX1), aldo-ceto reductasa 1B8 (Akr1b8), monooxigenasa 2 que contiene flavina (FMO2), receptor III de la región receptora Fc (Fcgr3), triptasa beta 1 (TPSB1), proteasa de mastocitos-6 (Mcpt6), neurexin-1-alfa (NRXN-1), factor de transcripción asociado a la microftalmia (MITF), yodotirosina desyodasa tipo II (DIO2), angiopoyetina-14 (Angpt14), grupo de diferenciación (CD36) y Ntel. Las enfermedades o afecciones asociadas con niveles elevados o anormales de estos biomarcadores incluyen, por ejemplo, cáncer, tuberculosis pulmonar y del sistema nervioso central, esclerosis múltiple, enfermedad de Crohn, aterosclerosis, osteoartritis, asma, accidente cerebrovascular, enfisema, nefropatía diabética, intervillositis histiocítica crónica de la placenta, hipertensión, aneurisma aórtico abdominal, enfermedad inflamatoria intestinal, rinosinusitis crónica, enfermedad arterial coronaria y enfermedad renal.

Se describe un método que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una combinación de sulforafano y un extracto o polvo de hongos que contiene glucano. En realizaciones preferidas, las combinaciones demuestran un efecto sinérgico.

En realizaciones preferidas, uno o más componentes de las combinaciones (por ejemplo, el extracto o polvo de hongos; o el sulforafano o derivado del mismo y el extracto o polvo de hongos) se administran juntos en una composición o forma de dosificación, o por separado, preferiblemente dentro de un período en el que sus propiedades terapéuticas se superponen. En algunas realizaciones, los componentes de las combinaciones pueden administrarse en dos o más composiciones o formas de dosificación administrables por vía oral. Por ejemplo, en algunas realizaciones, el sulforafano o un derivado del mismo se administra en una forma de dosificación administrable por vía oral, mientras que el extracto o polvo de hongos se administra en una o más formas de dosificación administrables por vía oral separadas o adicionales. En realizaciones preferidas, los componentes de la combinación se administran en una forma de dosificación.

En algunas realizaciones, la combinación puede administrarse con una frecuencia de 1 a 10 veces al día, preferiblemente de 1 a 5 veces al día, más preferiblemente de 1 a 3 veces al día y con la máxima preferencia 1 vez al día.

Las dosis descritas en esta solicitud se refieren preferentemente a dosis adecuadas para seres humanos. Los expertos en la técnica pueden determinar los cálculos de dosificación evaluando el peso corporal, el área de superficie, la tasa metabólica y las diferencias entre especies.

El término “ sujeto” se refiere a cualquier mamífero. En realizaciones preferidas, los sujetos son seres humanos.Ejemplos

Ejemplo 1 (Formulaciones)

Los siguientes son ejemplos de formulación de la presente invención:

Formulación A

Extracto de semillas de brócoli que contiene glucorafanina (aproximadamente 12 % p/p), de 50 mg a 5 gramos Polvo de brotes de brócoli liofilizados que contiene mirosinasa, de 25 mg a 500 mg

Ácido ascórbico, 1 mg a 50 mg

Extracto de hongos shiitake que contiene alfa-glucano (aproximadamente 40 % p/p), de 1 mg a 250 mg Formulación B

Extracto de semillas de brócoli que contiene glucorafanina (aproximadamente 12 % p/p), de 50 mg a 5 gramos Polvo de brotes de brócoli liofilizados que contiene mirosinasa, de 25 mg a 500 mg

Ácido ascórbico, 1 mg a 50 mg

Extracto de hongos maitake que contiene beta-glucano (aproximadamente 20 % p/p), de 1 a 100 mg Formulación C Una composición administrable por vía oral que comprende:

Extracto de semillas de brócoli

Extracto de brotes de brócoli

Extracto de hongos maitake

Ácido ascórbico

Hidroxipropilmetilcelulosa

Celulosa microcristalina

Almidón de maíz

Etilcelulosa

Croscarmelosa sódica

Almidón glicolato de sodio

Crospovidona

Dióxido de silicio

Alginato de sodio

Triglicéridos de cadena media

Maltodextrina

Ácido oleico

Estearato de magnesio

Ácido esteárico

Ejemplo 2

Se desarrolló un método de cromatografía de interacción hidrofóbica (HILIC), que comprende las siguientes condiciones:

Columna: de amida BEH de Waters, tamaño de partícula de 1,7 pm; 2,1 mm x 100 mm

Fase móvil: 20 % 10 mM de acetato de amonio, pH 5,0; 80 % de acetonitrilo;

Modo de separación: isocrático

Temperatura de la columna: 70°C

Caudal: 0,7 ml/min

Las condiciones anteriores permiten la separación de cinco glucosinolatos típicos deBrassicaceae,que incluye el precursor del sulforafano, la glucorafanina.

Ejemplo 3.

Consumo de glucorafanina en función de la concentración de ácido ascórbico.

Aproximadamente 250 mg de extracto de semillas de brócoli que contenía aproximadamente 12% (p/p) de glucorafanina se sometieron a hidrólisis mediante una concentración fija de mirosinasa derivada de los brotes de brócoli en presencia de una concentración variable de ácido ascórbico, que oscilaba entre 0 y 600 pmoles/litro. Las mezclas de reacción se termoestatizaron a 38 °C; se extrajeron alícuotas cada 15 minutos durante 60 minutos y la concentración de glucorafanina se determinó cromatográficamente. La tasa de consumo de glucorafanina se interpretó como la tasa de su conversión en sulforafano. La representación gráfica de la reducción del contenido de glucorafanina en función del aumento de la concentración de ácido ascórbico da como resultado una serie de gráficos lineales; las pendientes de las líneas de regresión lineal reflejan la tasa de consumo de glucorafanina, en pmoles/minuto. Es evidente que en presencia de una concentración de 600 pmoles/litro de ácido ascórbico, la tasa de reacción aumentó 13 veces con relación a la que se produjo en ausencia de los efectos moduladores del ácido ascórbico.

Ejemplo 4

Conversión equimolar de glucorafanina en sulforafano.

Se realizó un experimento en dos partes para dilucidar además el papel del ácido ascórbico en la modulación de la actividad de la mirosinasa. Todas las soluciones se prepararon en solución salina regulada con Tris 20 mM, a pH 7,5, previamente identificada como óptima para la actividad de la mirosinasa; cada tubo de muestra tenía 100 mg de polvo de brócoli liofilizado, que se pesaron con precisión como fuente de mirosinasa. El experimento se realizó a 38 °C durante 2 horas, se extrajeron alícuotas de la muestra en incrementos de 30 minutos y se evaluó el contenido de glucorafanina y sulforafano mediante la HPLC. Se utilizó una solución “ de parada” fuertemente ácida para inhibir instantáneamente la actividad adicional de la mirosinasa en las alícuotas eliminadas. Una muestra de control no contenía ácido ascórbico y la conversión enzimática se llevó a cabo sin la ayuda de un cofactor.

Parte 1. En presencia de la concentración fija de ácido ascórbico, 1 mmol/litro, se añadió una cantidad creciente de extracto de semillas de brócoli (aproximadamente 12 % de glucorafanina, p/p), que variaba entre 250 mg y 500 mg.

Parte 2. Manteniendo la cantidad de extracto de semillas de brócoli fija en 250 mg, la concentración de ácido ascórbico se varió de 0,4 mmol/litro a 3,8 mmol/litro.

La tabla a continuación presenta la glucorafanina y el sulforafano expresados en jmoles. Es evidente que en los primeros 30 minutos, en casi todas las mezclas de reacción, la conversión de glucorafanina en sulforafano fue completa. Sin embargo, un examen cuidadoso de la conversión enzimática que se produce en la muestra de control, sin los efectos estimulantes del ácido ascórbico, revela una conversión equimolar de glucorafanina en sulforafano, es decir, la cantidad de glucorafanina consumida da como resultado la cantidad equivalente de sulforafano producido.

En la parte 2 del experimento, se evaluó el efecto modulador de la concentración creciente de ácido ascórbico sobre la actividad de la mirosinasa. Se observa un aumento inicial, aparentemente lineal, en la conversión de glucorafanina en sulforafano promovida por la mirosinasa hasta aproximadamente 2 mmol/l de concentración de ácido ascórbico, seguido posteriormente de una nivelación considerable.

Finalmente, el examen del rendimiento de sulforafano después de 30 minutos dentro de la parte 1 del experimento revela que, en presencia de 1 mmol/litro de ácido ascórbico, la cantidad fija de mirosinasa contenida en 100 mg de polvo de brotes de brócoli liofilizados es capaz de generar al menos 200 jmoles de sulforafano, de una manera predeciblemente lineal. Las figuras 1, 2, 3 y 4 demuestran los resultados de este estudio.

Ejemplo 5

Conversión de glucorafanina en sulforafano en presencia de líquido intestinal simulado.

Se utilizó polvo de líquido intestinal simulado (SIF), un concentrado suministrado comercialmente que se aproxima mucho al contenido intestinal humano en términos de composición, pH y fuerza iónica. El experimento utilizó un aparato de disolución USP 2 (paletas), donde se dispensaron 500 ml de líquido intestinal simulado en seis recipientes de disolución, junto con 150 mg de polvo de brotes de brócoli liofilizados como fuente de mirosinasa. En los recipientes 1-4, la concentración de ácido ascórbico varió de 0,25 a 1,00 mmol/litro; en el recipiente 5, además de 1 mmol/litro de ácido ascórbico, se suspendieron 3,125 g de pancreatina (8x USP); en el recipiente 6, además de 1 mmol/litro de ácido ascórbico y 3,125 g de pancreatina (8x USP), se añadió una cantidad doble de polvo de brotes de brócoli liofilizados (300 mg). Después de llevar los recipientes a 38 °C, se añadieron 250 mg de extracto de semillas de brócoli rico en glucorafanina (12%, p/p) a cada uno, y las suspensiones resultantes se agitaron a 75 RPM durante 2 horas. Se extrajeron alícuotas cada 15 minutos y se analizaron para detectar sulforafano. La figura 4 muestra la correlación directa entre un mayor rendimiento de sulforafano y concentraciones más altas de ácido ascórbico, especialmente en las primeras etapas del experimento.

Ejemplo 6

El siguiente estudio se realizó para determinar el efecto de la combinación de sulforafano y un extracto de hongos maitake que contiene un 20 % de b-glucanos sobre la expresión génica de la NAD(P)H:quinona oxidorreductasa 1 (NQO-1). La NQO-1 codifica una proteína que es capaz de metabolizar las quinonas de los estrógenos, evitando que formen aductos de ADN que provocan mutaciones y, en última instancia, carcinogénesis. Un aumento en la expresión de la NQO-1 es favorable para la salud de las mamas, el colon, el hígado, los pulmones, la piel y la próstata.

En el estudio, la línea celular de macrófagos RAW 264,7 se trató con DMSO (control del vehículo), sulforafano (SFN), extracto de hongos maitake con aproximadamente 20 % de contenido de beta-glucano (Maitake), o la combinación de sulforafano y extracto de hongos maitake, durante 24 horas. En particular, las células se trataron con uno de los siguientes: (i) DMSO (control del vehículo), (ii) 0,5 pM de SFN, (iii) 250 pg/ml de maitake, (iv) 500 pg/ml de maitake, (v) 750 pg/ml de maitake, (vi) 0,5 pg/ml de SFN y 250 pg/ml de maitake, (vii) 0,5 pg/ml de SFN y 500 pg/ml de maitake, y (viii) 0,5 pg/ml de SFN y 750 pg/ml de maitake. La expresión génica de la expresión génica de la NQO-1 se analizó mediante RT-PCR cuantitativa. Los resultados, que se ilustran en la figura 5, muestran lo siguiente:

Los resultados demuestran que la combinación de sulforafano y extracto de hongos maitake tuvo un efecto sinérgico en comparación con cada componente solo. Se descubrió que este efecto era más que un simple aditivo.

Ejemplo 7

El siguiente estudio se realizó para determinar el efecto de la combinación de sulforafano y un extracto de hongos shiitake que contiene 40% de alfa-glucanos sobre la expresión génica de la NAD(P)H:quinonequinona oxidorreductasa 1 (NQO-1).

En el estudio, la línea celular de macrófagos RAW 264,7 se trató con DMSO (control del vehículo), sulforafano (SFN), extracto de hongos shiitake con al menos 20 % de contenido de alfa-glucano (Shiitake), o la combinación de sulforafano y extracto de hongos shiitake, durante 24 horas. En particular, las células se trataron con uno de los siguientes: (i) DMSO (control del vehículo), (ii) 0,5 pM de SFN, (iii) 100 pg/ml de shiitake, (iv) 250 pg/ml de shiitake, (v) 500 pg/ml de shiitake, (vi) 0,5 pM de Sf N y 100 pg/ml de shiitake, (vii) 0,5 pM de SFN y 250 pg/ml de shiitake, y (viii) 0,5 pM de SFN y 500 pg/ml de shiitake. La expresión génica de la expresión génica de la NQO-1 se analizó mediante RT-PCR cuantitativa. Los resultados, que se ilustran en la figura 6, muestran lo siguiente:

Los resultados demuestran que la combinación de sulforafano y extracto de hongos shiitake tuvo un efecto sinérgico en comparación con cada componente solo. Se descubrió que este efecto era más que un simple aditivo.

Ejemplo 8

Un sujeto presenta cáncer de mama y sufre síntomas que incluyen tejido mamario dañado y dolor en las mamas. Se le administra un comprimido que contiene glucorafanina, mirosinasa, ácido ascórbico y un extracto de hongos maitake. El comprimido es una formulación con recubrimiento entérico que libera el contenido en el intestino delgado. Después de un mes de administración diaria del comprimido, el sujeto experimenta una modulación de los biomarcadores sustitutos, que incluye la NQO-1, que se correlacionan con una mejora de los síntomas.

Ejemplo 9

Un sujeto presenta cáncer de mama y sufre síntomas que incluyen tejido mamario dañado y dolor en las mamas. Se le administra un comprimido que contiene glucorafanina, mirosinasa, ácido ascórbico y un extracto de hongos shiitake. El comprimido es una formulación con recubrimiento entérico que libera el contenido en el intestino delgado. Después de un mes de administración diaria del comprimido, el sujeto experimenta una modulación de los biomarcadores sustitutos, que incluye la NQO-1, que se correlacionan con una mejora de los síntomas.

Claims (6)

REIVINDICACIONES

1. Una composición administrare por vía oral que comprende una combinación sinérgica de:

un sulforafano o un derivado del mismo seleccionado entre análogos de sulfoxitiocarbamato del sulforafano, isotiocianato de 6-metilsulfinilhexilo (6-HITC), y compuestos que comprenden la estructura del sulforafano con diferentes cadenas laterales y/o diversas longitudes de espaciadores entre los grupos isotiocianato y sulfóxido en una cantidad de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 20 mg; y

un extracto o polvo de hongos maitake o shiitake que comprende uno o más glucanos.

2. La composición administrable por vía oral de la reivindicación, en donde el uno o más glucanos son alfaglucanos y/o beta-glucanos.

3. La composición administrable por vía oral de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde la composición comprende además uno o más componentes adicionales seleccionados del grupo que consiste en quercetina, un aminoazúcar, un glicosaminoglicano, insaponificables de aguacate/soja, una vitamina, un fruto del café, magnesio, silimarina, proantocianidinas, ácido ursólico, curcumina, fitoesteroles y fitoestanoles.

4. La composición administrable por vía oral de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde la composición comprende una forma de dosificación con recubrimiento entérico.

5. Una composición administrable por vía oral de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para utilizar en el tratamiento, prevención, reducción de la aparición, disminución de los síntomas asociados y/o la reducción de las recurrencias secundarias del cáncer.

6. Una composición administrable por vía oral para utilizar de la reivindicación 5, en donde el cáncer se elige del grupo que consiste en cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, cáncer de pulmón, cáncer de hígado y cáncer de vejiga.