ES3018757T3

ES3018757T3 - Branched macrocyclic 4-(pyrazol-5-yl)-indole derivatives as inhibitors of mcl-1

Info

Publication number: ES3018757T3
Application number: ES21830696T
Authority: ES
Inventors: Frederik Rombouts; Adriana-Ingrid Velter; Petrus Buijnsters; Cabrera Sofia Ferrer
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2020-12-17
Filing date: 2021-12-16
Publication date: 2025-05-19
Anticipated expiration: 2041-12-16
Also published as: EP4263556A1; AU2021403616A1; MX2023007291A; AU2021403616A9; EP4263556C0; EP4263556B1; US20240124487A1; JP2023553719A; WO2022129333A1; KR20230121807A; CN116710458A; CA3200758A1

Abstract

La presente invención se refiere a agentes farmacéuticos de fórmula (I) útiles para terapia y/o profilaxis en un sujeto, composición farmacéutica que comprende dichos compuestos, y su uso como inhibidores de MCL-1, útiles para tratar enfermedades como el cáncer. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados macrocíclicos de 4-(pirazol-5-il)-indol ramificados como inhibidores de MCL-1

Campo de la invención

La presente invención se refiere a agentes farmacéuticos útiles para la terapia y/o profilaxis en un sujeto, una composición farmacéutica que comprende tales compuestos, y su uso como inhibidores de MCL-1, útiles para tratar o prevenir enfermedades tales como el cáncer.

Antecedentes de la invención

La apoptosis celular, o la muerte celular programada, es fundamental para el desarrollo y la homeostasis de muchos órganos, que incluyen el sistema hematopoyético. La apoptosis puede iniciarse a través de la vía extrínseca, que está mediada por los receptores de muerte, o por la vía intrínseca, utilizando la familia de proteínas del linfoma de células B (BCL-2). La leucemia-1 de célula mieloide (MCL-1) es un miembro de la familia BCL-2 de reguladores de supervivencia celular, y es un mediador crítico de la vía de apoptosis intrínseca. MCL-1 es una de cinco proteínas BCL-2 antiapoptóticas principales (MCL-1, BCL-2, BCL-XL, BCL-w y BFL1/A1) responsable de mantener la supervivencia celular.<m>CL-1 reprime de manera continua y directa la actividad de las proteínas proapoptóticas Bak y Bax de la familia BCL-2, y bloquea indirectamente la apoptosis secuestrando proteínas sensibilizadoras apoptóticas sólo BH3, tales como Bim y Noxa. La activación de Bak/Bax después de varios tipos de estrés celular conduce a la agregación en la membrana externa mitocondrial, y esta agregación facilita la formación de poros, la pérdida del potencial de membrana externa mitocondrial y la posterior liberación del citocromo C en el citosol. El citocromo C citosólico aglutina Apaf-1 e inicia el reclutamiento de procaspasa 9 para formar estructuras de apoptosoma (Cheng y col., eLife 2016; 5: e17755). El ensamblaje de los apoptosomas activa las cisteína proteasas ejecutoras 3/7 y, entonces, estas caspasas efectoras escinden una variedad de proteínas citoplasmáticas y nucleares para inducir la muerte celular (Julian y col. Cell Death and Differentiation 2017; 24, 1380-1389).

Evitar la apoptosis es un sello distintivo establecido del desarrollo del cáncer, y facilita la supervivencia de las células tumorales que, de lo contrario, se eliminarían debido a tensiones oncogénicas, privación de factores de crecimiento o daños en el ADN (Hanahan y Weinberg. Cell 2011; 1 -44). Por lo tanto, no sorprendentemente, MCL-1 está altamente sobrerregulada en muchos cánceres sólidos y hematológicos, en relación con las contrapartes normales no transformadas de tejido. La sobreexpresión de MCL-1 se ha implicado en la patogénesis de varios cánceres donde se correlaciona con un mal resultado, una recaída y una enfermedad agresiva. Además, la sobreexpresión de MCL-1 se ha implicado en la patogénesis de los siguientes cánceres: próstata, pulmón, páncreas, mama, ovario, cuello uterino, melanoma, leucemia linfocítica crónica (LCL) de células B, leucemia mieloide aguda (LMA) y leucemia linfoblástica aguda (LLA). El locus genético MCL-1 humano (1q21) se amplifica con frecuencia en tumores, y aumenta cuantitativamente los niveles totales de proteína Mc L-1 (Beroukhim y col., Nature 2010;463 [7283] 899-905). MCL-1 también media la resistencia a las terapias convencionales contra el cáncer, y se sobrerregula transcripcionalmente en respuesta a la inhibición de la función BCL-2 (Yecies y col., Blood 2010;115 [16] 3304-3313).

Un inhibidor de BH3 de molécula pequeña de BCL-2 ha demostrado eficacia clínica en pacientes con leucemia linfocítica crónica, y está aprobado por la FDA para pacientes con CLL o AML (Roberts y col., NEJM 2016;374:311-322). El éxito clínico del antagonismo de BCL-2 condujo al desarrollo de varios miméticos de MCL-1 BH3 que muestran eficacia en modelos preclínicos de tumores malignos hematológicos y tumores sólidos (Kotschy y col., Nature 2016;538477-486, Merino y col., Sci. Transl. Med;2017 (9)).

MCL-1 regula varios procesos celulares, además de su papel canónico en la mediación de la supervivencia celular, que incluye la integridad mitocondrial y la unión del extremo no homólogo después de daños en el ADN (Chen y col., JCI 2018;128(1):500-516). La pérdida genética de MCL-1 muestra una serie de fenotipos dependiendo del momento del desarrollo y de la deleción tisular. Los modelos knockout de MCL-1 revelan que existen múltiples papeles para MCL-1 y que la pérdida de función afecta a una amplia gama de fenotipos. Los ratones con deficiencia global de MCL-1 muestran letalidad embrionaria, y los estudios que utilizan la deleción genética condicional han informado de disfunción mitocondrial, alteración de la activación de la autofagia, reducción de linfocitos B y T, aumento de la apoptosis de células B y T, y desarrollo de insuficiencia cardiaca/cardiomiopatía (Wang y col., Genes and Dev 2013;27 1351-1364, Steimer y col., Blood 2009;[113] 2805-2815).

WO2018178226 describe inhibidores de MCL-1 y métodos de uso de los mismos.

WO2017182625 describe inhibidores macrocíclicos de MCL-1 para tratar el cáncer.

WO2018178227 describe la síntesis de inhibidores de MCL-1.

WO2020063792 y WO2020221272 describen derivados macrocíclicos de indol.

WO2020103864 describe indoles macrocíclicos como inhibidores de MCL-1.

Sigue habiendo necesidad de inhibidores de MCL-1, útiles para el tratamiento o la prevención de cánceres, tales como próstata, pulmón, páncreas, mama, ovario, cuello uterino, melanoma, leucemia linfocítica crónica (LCL) de células B, leucemia mieloide aguda (LMA) y leucemia linfoblástica aguda (LLA).

Los compuestos de la presente invención podrían tener una potencia mejorada, una lipofilicidad mejorada (ChromlogD), una mejor inhibición del CYP y propiedades cardiotóxicas mejoradas (CTMC) en comparación con los compuestos de la técnica anterior.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a nuevos compuestos de Fórmula (I):

y los tautómeros y las formas estereoisoméricas de los mismos, en donde

X1 representa (a-1) o (a-2):

en donde 'a' y 'b' indican cómo la variable X<1>está unida al resto de la molécula;

R<1>representa hidrógeno; metilo; o alquilo C<2-6>opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en Het<1>, -OR<3>y -NR<4a>R<4b>;

X representa -O- o -CH<2>-;

en caso de que X represente -CH<2>-:

R<z>representa -O-alquilo C<1-4>opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>, Ar<1>y Het<2>; o

Rz se toma junto con R1 de (a-2), de modo que Rz junto con los átomos a los que está unido y (a-2) forma un anillo bicíclico de fórmula (b-1) o (b-2):

en caso de que X represente -O-:

R<z>representa alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>, en donde dicho alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>se sustituye opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>, Ar<1>y Het<2>;

Het<1>representa morfolinilo, N-metilpiperazinilo o tetrahidropiranilo;

R<3>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

R<4a>y R<4b>se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y

alquilo C<1-4>;

X<2>representa

que se puede unir al resto de la molécula en ambas direcciones;

R<2>representa hidrógeno; metilo; o alquilo C<2-6>opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en Het<1>, -OR<3>y -NR<4a>R<4b>;

Het<2>representa morfolinilo o N-metilpiperazinilo;

Ar<1>representa fenilo opcionalmente sustituido con un -O-alquilo C<1-4>;

R<y>representa hidrógeno o halo;

R<5>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>, o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

R<6a>and R<6b>se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C<1-4>;

R<7>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

n es 1 o 2;

m es 2;

y las sales farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, y un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable.

De manera adicional, la invención se refiere a un compuesto de Fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable, o un solvato del mismo, para utilizar como medicamento, y a un compuesto de Fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable, o un solvato del mismo, para utilizar en el tratamiento o en la prevención del cáncer.

En una realización particular, la invención se refiere a un compuesto de Fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable, o un solvato del mismo, para utilizar en el tratamiento o en la prevención del cáncer.

En la presente memoria también se describe el uso de un compuesto de Fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable, o un solvato del mismo, en combinación con un agente farmacéutico adicional para utilizar en el tratamiento o prevención del cáncer.

Además, la invención se refiere a un proceso para preparar una composición farmacéutica según la invención, caracterizado porque un vehículo farmacéuticamente aceptable se mezcla íntimamente con una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo.

En la presente memoria también se describe un producto que comprende un compuesto de Fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable, o un solvato del mismo, y un agente farmacéutico adicional, como preparación combinada para uso simultáneo, separado o secuencial, en el tratamiento o prevención del cáncer.

Descripción detallada de la invención

El término 'halo' o 'halógeno', tal como se utiliza en esta memoria, representa fluoro, cloro, bromo y yodo.

El sufijo “ C<x-y>” (en que x e y son números enteros), tal como se utiliza en esta memoria, se refiere al número de átomos de carbono en un grupo dado.

El término “ alquilo C<1-4>” , tal como se utiliza en la presente memoria como un grupo o parte de un grupo, representa un radical hidrocarbonado totalmente saturado de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 4 átomos de carbono, tal como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo y similares.

El término “ alquilo C<2-4>” , como se utiliza en la presente memoria como un grupo o parte de un grupo, representa un radical hidrocarbonado totalmente saturado de cadena lineal o ramificada que tiene de 2 a 4 átomos de carbono, tal como etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo y similares.

El término “ alquilo C<2-6>” , como se utiliza en la presente memoria como grupo o parte de un grupo, representa un radical hidrocarbonado saturado de cadena lineal o ramificada que tiene desde 2 hasta 6 átomos de carbono, tal como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, n-pentil, n-hexilo y similares.

Generalmente, siempre que se utilice el término “ sustituido” en la presente invención, se entenderá, salvo que se indique lo contrario, o quede claro en el contexto, que indica que uno o más hidrógenos, en particular desde 1 hasta 4 hidrógenos, más en particular desde 1 hasta 3 hidrógenos, preferiblemente 1 o 2 hidrógenos, más preferiblemente 1 hidrógeno, en el átomo o radical indicado en la expresión que utiliza “ sustituido” , se reemplazan por una selección del grupo indicado, siempre que no se supere la valencia normal, y que la sustitución dé lugar a un compuesto químicamente estable, es decir, un compuesto suficientemente robusto para sobrevivir al aislamiento hasta un grado de pureza útil a partir de la mezcla de reacción, es decir, un compuesto lo suficientemente robusto como para sobrevivir al aislamiento con un grado útil de pureza a partir de una mezcla de reacción.

Las combinaciones de sustituyentes y/o variables solo se permiten si tales combinaciones dan como resultado compuestos químicamente estables. 'Compuesto estable' pretende indicar un compuesto que sea lo suficientemente robusto como para sobrevivir al aislamiento a un grado útil de pureza de una mezcla de reacción.

El experto en la técnica entenderá que el término “ opcionalmente sustituido” significa que el átomo o radical indicado en la expresión que utiliza “ opcionalmente sustituido” , puede o no sustituirse (esto significa sustituido o no sustituido, respectivamente).

Cuando dos o más sustituyentes están presentes en un resto, cuando sea posible y salvo que se indique lo contrario o quede claro en el contexto, pueden reemplazar los hidrógenos en el mismo átomo o pueden reemplazar átomos de hidrógeno en diferentes átomos en el resto.

Het<1>puede unirse al resto de la molécula de Fórmula (I) a través de cualquier átomo de carbono o nitrógeno del anillo disponible, según sea apropiado, si no se especifica lo contrario.

Het<2>puede unirse al resto de la molécula de Fórmula (I) a través de cualquier átomo de carbono o nitrógeno del anillo disponible, según sea apropiado, si no se especifica lo contrario.

Quedará claro para el experto en la técnica que

es una representación alternativa para

Quedará claro para el experto en la técnica que

es una representación alternativa para

Estará claro que un compuesto de Fórmula (I) incluye compuestos de Fórmula (I-x) y (I-y) (ambas direcciones de X2 siendo

Quedará claro que un compuesto de Fórmula (I) en donde X representa -CH<2>-; y Rz se toma junto con R1 de (a-2), de modo que Rz junto con los átomos a los que está unido y (a-2) forma un anillo bicíclico de fórmula (b-1), corresponde a un compuesto de Fórmula (I-z):

Cuando cualquier variable aparece más de una vez en cualquier constituyente, cada definición es independiente.

Cuando cualquier variable aparece más de una vez en cualquier fórmula (p. ej., Fórmula (I)), cada definición es independiente.

El término “ sujeto” , como se utiliza en la presente memoria, se refiere a un animal, preferiblemente un mamífero (p. ej., gato, perro, primate o humano), más preferiblemente un ser humano, que es o ha sido objeto de tratamiento, observación o experimento.

La expresión “ cantidad terapéuticamente efectiva” , como se utiliza en la presente memoria, significa la cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que provoca la respuesta biológica o medicinal en un sistema tisular o sujeto (p. ej., humano) que busca un investigador, veterinario, médico u otro clínico, lo que incluye el alivio o reversión de los síntomas de la enfermedad o trastorno que se esté tratando.

Se pretende que el término “ composición” abarque un producto que comprende los ingredientes especificados en las cantidades especificadas, así como cualquier producto que resulte, directa o indirectamente, de combinaciones de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas.

Como se utiliza en la presente memoria, el término “ tratamiento” se refiere a todos los procesos en donde puede haber una ralentización, interrupción, paro o detención de la evolución de una enfermedad, pero no indica necesariamente una eliminación total de todos los síntomas.

El término “ compuesto(s) de la (presente) invención” o “ compuesto(s) según la (presente) invención” , como se utiliza en la presente memoria, incluye los compuestos de la Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, así como los solvatos de los mismos.

Como se utiliza en la presente memoria, cualquier fórmula química con enlaces mostrados solo como líneas sólidas y no como enlaces sólidos en cuña o en cuña discontinua, o que de otro modo se indica que tenga una configuración particular (p. ej.,R, S)alrededor de uno o más átomos, contempla cada posible estereoisómero, o mezcla de dos o más estereoisómeros.

De aquí en adelante, el término “ compuesto(s) de la Fórmula (I)” incluye los tautómeros y las formas estereoisoméricas de los mismos.

Los términos “ estereoisómeros” o la expresión “ formas estereoquímicamente isoméricas” indicados anteriormente o en lo sucesivo en la presente memoria se utilizan indistintamente.

La invención incluye todos los estereoisómeros de la invención, ya sea como un estereoisómero puro, o como una mezcla de dos o más estereoisómeros.

Los enantiómeros son estereoisómeros que son imágenes especulares no superponibles entre sí. Una mezcla 1:1 de un par de enantiómeros es un racemato o mezcla racémica.

Los atropisómeros (o atropoisómeros) son estereoisómeros que tienen una configuración espacial particular, lo que resulta de una rotación restringida alrededor de un enlace único, debido al gran impedimento estérico. Todas las formas atropisoméricas de los compuestos de la Fórmula (I) están incluidas en el alcance de la presente invención.

En particular, los compuestos descritos en la presente memoria poseen quiralidad axial, en virtud de la rotación restringida alrededor de un enlace biarilo, y como tales pueden existir como mezclas de atropisómeros. Cuando un compuesto es un atropisómero puro, la estereoquímica en cada centro quiral puede especificarse mediante R<a>o bien S<a>. Dichas designaciones también pueden utilizarse para mezclas enriquecidas en un atropisómero. Se puede encontrar una descripción adicional del atropisomerismo y la quiralidad axial y las reglas para la asignación de configuración, en Eliel, E.L. & Wilen, S. H. 'Stereochemistry of Organic Compounds' John Wiley and Sons, Inc. 1994.

Los diaestereómeros (o diaestereoisómeros) son estereoisómeros que no son enantiómeros, es decir, no están relacionados como imágenes especulares. Si un compuesto contiene un enlace doble, los sustituyentes pueden estar en la configuración E o Z.

Los sustituyentes en radicales cíclicos o parcialmente saturados bivalentes pueden tener ya sea la configuración cis o trans; por ejemplo, si un compuesto contiene un grupo cicloalquilo disustituido, los sustituyentes pueden estar en la configuración cis o trans.

Por lo tanto, la invención incluye enantiómeros, atropisómeros, diastereómeros, racematos, isómeros E, isómeros Z, isómeros cis, isómeros trans, y mezclas de los mismos, siempre que sea químicamente posible.

El significado de todos esos términos, es decir, enantiómeros, atropisómeros, diastereómeros, racematos, isómeros E, isómeros Z, isómeros cis, isómeros trans, y mezclas de los mismos, son conocidos por el experto en la técnica.

La configuración absoluta se especifica según el sistema Cahn-Ingold-Prelog. La configuración en un átomo asimétrico se especifica por R o S. Los estereoisómeros resueltos cuya configuración absoluta no se conoce pueden designarse por (+) o (-), dependiendo de la dirección en la que giran la luz polarizada plana. Por ejemplo, los enantiómeros resueltos cuya configuración absoluta no se conoce pueden designarse por (+) o (-), dependiendo de la dirección en la que giran la luz polarizada plana. Los atropisómeros (R<a>)- y (S<a>)- ópticamente activos pueden prepararse utilizando sintrones quirales, reactivos quirales o catalizadores quirales, o resolverse mediante técnicas convencionales bien conocidas en la técnica, tal como la HPLC quiral.

Cuando se identifica un estereoisómero específico, esto significa que dicho estereoisómero está sustancialmente libre, es decir, asociado con menos del 50 %, preferiblemente menos del 20 %, más preferiblemente menos del 10 %, aún más preferiblemente menos del 5 %, en particular menos del 2 %, y lo más preferiblemente menos del 1 % que los otros esteroisómeros. Por lo tanto, cuando un compuesto de la Fórmula (I) se especifica, por ejemplo, como (R), esto significa que el compuesto está sustancialmente libre del isómero (S); cuando un compuesto de Fórmula (I) se especifica, por ejemplo, como E, esto significa que el compuesto está sustancialmente libre del isómero Z; cuando un compuesto de Fórmula (I) se especifica, por ejemplo, como cis, esto significa que el compuesto está sustancialmente libre del isómero trans; cuando un compuesto de Fórmula (I) se especifica, por ejemplo, como R<a>, esto significa que el compuesto está sustancialmente libre del atropisómero S<a>.

Las sales farmacéuticamente aceptables, en particular las sales de adición farmacéuticamente aceptables, incluyen sales de adición de ácidos y sales de adición de bases. Dichas sales pueden formarse por medios convencionales, por ejemplo, por reacción de un ácido libre o una forma de base libre con uno o más equivalentes de una base o un ácido apropiados, opcionalmente, en un disolvente, o en un medio en el que la sal sea insoluble, seguida de la eliminación de dicho disolvente, o dicho medio, mediante técnicas estándar (p. ej.,in vacuo,por liofilización o por filtración). Las sales también pueden prepararse intercambiando un contraión de un compuesto de la invención en forma de una sal con otro contraión, por ejemplo utilizando una resina de intercambio iónico adecuada.

Las sales farmacéuticamente aceptables mencionadas anteriormente o en lo sucesivo, comprenden las formas de sales ácidas y básicas no tóxicas terapéuticamente activas que pueden formar los compuestos de Fórmula (I) y los solvatos de los mismos.

Los ácidos apropiados comprenden, por ejemplo, ácidos inorgánicos tales como ácidos hidrohalales, por ejemplo, ácido clorhídrico o bromhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico y similares ácidos; o ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico (p. ej., etanodioico), malónico, succínico (p. ej., ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanosulfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclámico, salicílico, p-aminosalicílico, pamoico y similares. Por el contrario, dichas formas salinas se pueden convertir mediante tratamiento con una base apropiada en la forma de base libre.

Los compuestos de Fórmula (I) y solvatos de los mismos que contienen un protón ácido también pueden convertirse en sus formas de sal de metal o amina no tóxicas mediante el tratamiento con bases orgánicas e inorgánicas apropiadas.

Las formas de sal base apropiadas comprenden, por ejemplo, las sales de amonio, las sales de metales alcalinos y alcalinotérreos, p. ej., las sales de litio, sodio, potasio, cesio, magnesio, calcio y similares, sales con bases orgánicas, p. ej., aminas alifáticas y aromáticas primarias, secundarias y terciarias, tales como metilamina, etilamina, propilamina, isopropilamina, los cuatro isómeros de butilamina, dimetilamina, dietilamina, dietanolamina, dipropilamina, diisopropilamina, di-n-butilamina, pirrolidina, piperidina, morfolina, trimetilamina, trietilamina, tripropilamina, quinuclidina, piridina, quinolina e isoquinolina; las sales de benzatina, N-metil-D-glucamina, hidrabamina y sales con aminoácidos como, por ejemplo, arginina, lisina y similares. Por el contrario, la forma salina puede convertirse mediante tratamiento con ácido en la forma ácida libre.

El término solvato comprende las formas de adición de disolvente, así como las sales de las mismas, que los compuestos de Fórmula (I) pueden formar. Los ejemplos de tales formas de adición de disolventes son, p. ej., hidratos, alcoholatos y similares.

Los compuestos de la invención según se prepararon en los procesos descritos en la presente memoria se pueden sintetizar en forma de mezclas de enantiómeros, en particular mezclas racémicas de enantiómeros, que se pueden separar entre sí siguiendo procedimientos de resolución conocidos en la técnica. Una manera de separar las formas enantioméricas de los compuestos de la Fórmula (I), y las sales farmacéuticamente aceptables y solvatos de las mismas, implica cromatografía líquida usando una fase estacionaria quiral. Dichas formas estereoquímicamente isoméricas puras también pueden derivar de las formas estereoquímicamente isoméricas puras correspondientes de los materiales de partida adecuados, siempre que la reacción se produzca estereoespecíficamente. Preferentemente, si se desea un estereoisómero específico, dicho compuesto se sintetizaría mediante métodos estereoespecíficos de preparación. Estos métodos emplearán de forma ventajosa materiales de partida enantioméricamente puros.

El término “ enantioméricamente puro” , tal como se utiliza en la presente memoria, significa que el producto contiene al menos el 80 % en peso de un enantiómero y el 20 % en peso o menos del otro enantiómero. Preferiblemente, el producto contiene al menos el 90 % en peso de un enantiómero y el 10 % en peso o menos del otro enantiómero. En la realización más preferida, el término “ enantioméricamente puro” significa que la composición contiene al menos el

99 % en peso de un enantiómero y el 1 % o menos del otro enantiómero.

La presente invención también abarca compuestos isotópicamente marcados de la presente invención que son idénticos a los citados en la presente memoria, pero por el hecho de que uno o más átomos están reemplazados por un átomo que tiene una masa atómica o un número de masa diferente de la masa atómica o número de masa que se encuentra usualmente la naturaleza (o la más abundante que se encuentra en la naturaleza).

Todos los isótopos y mezclas isotópicas de cualquier átomo o elemento particular como se especifica en la presente memoria se contemplan dentro del alcance de los compuestos de la invención, ya sea producidos de forma natural o sintéticamente producidos, ya sea con abundancia natural o en una forma enriquecida isotópicamente. Los isótopos ilustrativos que se pueden incorporar en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre, fluoro, cloro y yodo, tales como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 13N, 15O, 17O, 18O, 35S, 18F, 36Cl, 122I, 123I, 125I, 131I, 75Br, 76Br, 77Br y 82Br. Preferiblemente, el isótopo se selecciona del gru 11C y 18F. Más preferiblemente, el isótopo es 2H. En particular, se pretende que los compuestos deuterados se incluyan dentro del alcance de la presente invención.

Ciertos compuestos isotópicamente marcados de la presente invención (p. ej., los etiquetados con 3H y 14C) pueden ser útiles, por ejemplo, en ensayos de distribución de tejido de sustrato. Los isótopos tritiados (3H) y carbono-14 (14C) son útiles por su facilidad de preparación y detectabilidad. Además, la sustitución con isótopos más pesados, tales como el deuterio (es decir, 2H), puede ofrecer ciertas ventajas terapéuticas derivadas de una mayor estabilidad metabólica (p. ej., una mayor semividain vivo,o menores requisitos de dosificación) y, por lo tanto, puede ser preferible en algunas circunstancias. Los isótopos emisores de positrones, tales como 15O, 13N, 11C y 18F, son útiles para estudios de tomografía por emisión de positrones (PET, por sus siglas en inglés). La imagen PET en el cáncer resulta útil para localizar e identificar tumores, estadificar la enfermedad y determinar el tratamiento adecuado. Las células cancerosas humanas sobreexpresan muchos receptores o proteínas que son posibles dianas moleculares específicas de la enfermedad. Los trazadores radiomarcados que se unen con alta afinidad y especificidad a dichos receptores o proteínas en células tumorales tienen un gran potencial para la formación de imágenes de diagnóstico y la terapia dirigida de radionúclidos (Charron, Carlie L. y col. Tetrahedron Lett. 2016, 57(37), 4119-4127). Además, los radiotrazadores de PET específicos de diana pueden utilizarse como biomarcadores para examinar y evaluar la patología, por ejemplo, midiendo la expresión de la diana y la respuesta al tratamiento (Austin R. y col. Cancer Letters (2016), doi: 10.1016/j.canlet.2016.05.008).

La presente invención se refiere en particular a compuestos de Fórmula (I) a los que se hace referencia en la presente memoria, y los tautómeros y las formas estereoisoméricas de los mismos, en donde

X1 representa (a-1) o (a-2):

(a-1) (a-2)

X representa -O- o -CH<2>-;

en caso de que X represente -CH<2>-:

Rz se toma junto con R1 de (a-2), de modo que Rz junto con los átomos a los que está unido y (a-2) forma un anillo bicíclico de fórmula (b-1):

en caso de que X represente -O-:

Het<1>representa morfolinilo, N-metilpiperazinilo o tetrahidropiranilo;

R<3>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

R<4a>and R<4b>se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C<1-4>;

X<2>representa

que se puede unir al resto de la molécula en ambas direcciones;

Het<2>representa morfolinilo o N-metilpiperazinilo;

Ar<1>representa fenilo opcionalmente sustituido con un -O-alquilo C<1-4>;

R<y>representa hidrógeno o halo;

R<5>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>, o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

R<7>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

n es 1 o 2;

m es 2;

y las sales farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

X<1>representa (a-1) o (a-2):

X representa -O- o -CH<2>-;

en caso de que X represente -CH<2>-:

R<z>se toma junto con R<1>de (a-2), de modo que R<z>junto con los átomos a los que está unido y (a-2) forma un anillo bicíclico de fórmula (b-1):

en caso de que X represente -O-:

R<z>representa alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>, en donde dicho alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>se sustituye opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>, y Het<2>;

Het<1>representa morfolinilo, N-metilpiperazinilo o tetrahidropiranilo;

R<3>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

R<4a>and R<4b>se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C<1-4>; X<2>representa

que se puede unir al resto de la molécula en ambas direcciones;

Het<2>representa morfolinilo o N-metilpiperazinilo;

Ar<1>representa fenilo opcionalmente sustituido con un -O-alquilo C<1-4>;

R<y>representa hidrógeno o halo;

R<5>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>, o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

R<6a>and R<6b>se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C<1-4>; n es 1 o 2;

m es 2;

y las sales farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

X<1>representa (a-1) o (a-2):

X representa -CH<2>-;

(b - i)

Het<1>representa morfolinilo, N-metilpiperazinilo o tetrahidropiranilo;

R<3>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

que se puede unir al resto de la molécula en ambas direcciones;

Het<2>representa morfolinilo o N-metilpiperazinilo;

Ar<1>representa fenilo opcionalmente sustituido con un -O-alquilo C<1-4>;

R<y>representa hidrógeno o halo;

R<5>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>, o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

m es 2;

y las sales farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

X<1>representa (a-1) o (a-2):

(a-1) (a-2)

en donde 'a' y 'b' indican cómo la variable X1 está unida al resto de la molécula;

X representa -O- o -CH<2>-;

en caso de que X represente -CH<2>-:

R<z>representa -O-alquilo C<1-4>opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>, Ar<1>y Het<2>;

en caso de que X represente -O-:

Het<1>representa morfolinilo, N-metilpiperazinilo o tetrahidropiranilo;

R<3>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

X<2>representa

que se puede unir al resto de la molécula en ambas direcciones;

Het<2>representa morfolinilo o N-metilpiperazinilo;

Ar<1>representa fenilo opcionalmente sustituido con un -O-alquilo C<1-4>;

R<y>representa hidrógeno o halo;

R<5>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>, o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

m es 2;

y las sales farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

X<1>representa (a-1) o (a-2):

R<1>representa hidrógeno; metilo; o alquilo C<2-6>opcionalmente sustituido con un -OR<3>;

X representa -O- o -CH<2>-;

en caso de que X represente -CH<2>-:

R<z>representa -O-alquilo C<1-4>opcionalmente sustituido con un sustituyente de Ar<1>; o

en caso de que X represente -O-:

R<z>representa alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>, en donde dicho alquilo C<1-4>se sustituye opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>y Het<2>;

R<3>representa alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

X<2>representa

que se puede unir al resto de la molécula en ambas direcciones;

R<2>representa alquilo C<2-6>opcionalmente sustituido con un -OR<3>;

Het<2>representa morfolinilo o N-metilpiperazinilo;

Ar<1>representa fenilo opcionalmente sustituido con un -O-alquilo C<1-4>;

R<y>representa halo;

R<5>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>, o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>;

R<6a>and R<6b>se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C<1-4>; n es 1;

m es 2;

y las sales farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde R<y>representa flúor.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde

n representa 1; y

R<y>representa flúor.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde R<1>representa metilo.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde n representa 1.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde n representa 2.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales por adición farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde Het<1>está unido al resto de la molécula de Fórmula (I) a través de un átomo de nitrógeno.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales por adición farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde Het<2>está unido al resto de la molécula de Fórmula (I) a través de un átomo de nitrógeno.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos tal como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde X representa -O-.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos tal como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde X representa -CH<2>-.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos tal como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde X representa -CH<2>-; y R<z>se toma junto con R<1>de (a-2), de modo que R<z>junto con los átomos a los que está unido y (a-2) forman un anillo bicíclico de fórmula (b-1).

en caso de que X represente -CH<2>-:

en caso de que X represente -O-:

R<z>representa alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>, en donde dicho alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>se sustituye opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>, Ar<1>, y Het<2>.

X representa -CH<2>-; y

R<z>representa -O-alquilo C<1-4>opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>, Ar<1>y Het<2>.

X representa -O-; y

en caso de que X represente -CH<2>-:

R<z>se toma junto con R<1>de (a-2), de modo que R<z>junto con los átomos a los que está unido y (a-2) forma un anillo bicíclico de fórmula (b-1) o (b-2):

X representa -CH<2>-; y

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde n es 1 y en donde Ry está en la posición 3, como se indica a continuación:

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde n es 1 y en donde Ry está en la posición 3, como se indica a continuación; y en donde Ry representa flúor:

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde los compuestos de Fórmula (I) están restringidos a los compuestos de Fórmula (I-x):

Será evidente que todas las variables en la estructura de Fórmula (I-x) se definen como se define para los compuestos de Fórmula (I), o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde los compuestos de Fórmula (I) están restringidos a los compuestos de Fórmula (I-y):

Será claro que todas las variables en la estructura de Fórmula (I-y) se definen como se define para los compuestos de Fórmula (I), o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones.

En una realización, la presente invención se refiere a aquellos compuestos de Fórmula (I) y las sales farmacéuticamente aceptables, y los solvatos de los mismos, o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones, en donde los compuestos de Fórmula (I) se restringen a los compuestos de Fórmula (I-z):

Será evidente que todas las variables en la estructura de Fórmula (I-z) se definen como se define para los compuestos de Fórmula (I), o cualquier subgrupo de los mismos como se menciona en cualquiera de las otras realizaciones. En una realización, la presente invención se refiere a un subgrupo de Fórmula (I) tal como se define en los esquemas de reacción generales.

En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) se selecciona del grupo que consiste en cualquiera de los compuestos ilustrativos,

tautómeros y formas estereoisoméricas del mismo,

cualquiera de las sales farmacéuticamente aceptables y los solvatos de los mismos.

Todas las combinaciones posibles de las realizaciones indicadas anteriormente se consideran incluidas dentro del alcance de la invención.

Métodos para la preparación de compuestos

En esta sección, al igual que en todas las demás secciones, salvo que el contexto indique lo contrario, las referencias a la Fórmula (I) también incluyen todos los demás subgrupos y ejemplos de la misma como se ha definido en el presente documento.

La preparación general de algunos ejemplos típicos de los compuestos de Fórmula (I) se describe a continuación y en los ejemplos específicos, y generalmente se preparan a partir de materiales de partida que están disponibles en el mercado, o se preparan mediante procesos sintéticos convencionales utilizados comúnmente por los expertos en la técnica de la química orgánica. Los siguientes esquemas solo pretenden representar ejemplos de la invención y de ninguna manera pretenden ser un límite de la invención.

Alternativamente, los compuestos de la presente invención también pueden prepararse mediante protocolos de reacción análogos como se describe en los esquemas generales que figuran a continuación, combinados con procesos sintéticos estándar comúnmente utilizados por los expertos en la técnica.

El experto apreciará que, en las reacciones descritas en los esquemas, aunque esto no siempre se muestre explícitamente, puede ser necesario proteger grupos funcionales reactivos (por ejemplo, grupos hidroxi, amino o carboxi) cuando se desee que estos estén presentes en el producto final, para evitar su participación no deseada en las reacciones. En general, se pueden utilizar grupos protectores convencionales según la práctica convencional. Los grupos protectores se pueden eliminar en una etapa posterior conveniente utilizando métodos conocidos en la técnica. El experto comprenderá que, en las reacciones descritas en los esquemas, puede ser aconsejable o necesario realizar la reacción en una atmósfera inerte, tal como, tal como, por ejemplo, en una atmósfera de N<2>gaseoso.

Será evidente para el experto que puede que sea necesario enfriar la mezcla de reacción antes del tratamiento final de la reacción (esto se refiere a la serie de manipulaciones requeridas para aislar y purificar el (los) producto(s) de una reacción química tal como, por ejemplo, inactivación, cromatografía en columna, extracción).

El experto apreciará que calentar la mezcla de reacción con agitación puede mejorar el resultado de la reacción. En algunas reacciones, se puede utilizar un calentamiento con microondas en lugar del calentamiento convencional para acortar el tiempo de reacción global.

El experto apreciará que otra secuencia de las reacciones químicas mostradas en los siguientes esquemas también puede dar como resultado el compuesto deseado de Fórmula (I).

El experto apreciará que los productos intermedios y compuestos finales que se muestran en los siguientes esquemas pueden funcionalizarse adicionalmente según métodos muy conocidos por el experto en la técnica. Los productos intermedios y compuestos descritos en el presente documento se pueden aislar en forma libre o como una sal o un solvato de los mismos. Los productos intermedios y compuestos descritos en el presente documento se pueden sintetizar en forma de mezclas de tautómeros y formas estereoisoméricas que se pueden separar entre sí siguiendo procedimientos de resolución conocidos en la técnica.

Todas las variables son como se definen para el compuesto de la Fórmula (I) salvo que se indique lo contrario o si queda claro por el contexto. El significado de las abreviaturas químicas utilizadas en los esquemas es como se define a continuación o como se define en la Tabla con abreviaturas en los Ejemplos.

Los compuestos de Fórmula (I) pueden prepararse según el Esquema 1,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (II), donde X, R<z>, R<1>, R<2>y (R<y>)<n>se definen como en la Fórmula (I), con una base adecuada, tal como, por ejemplo, LiOH o NaOH, en un disolvente adecuado, tal como agua o una mezcla de agua, y un disolvente orgánico adecuado, tal como dioxano o THF, o una mezcla de MeOH y THF, a una temperatura adecuada, tal como temperatura ambiente o 50-60 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (II) pueden prepararse al hacer reaccionar un producto intermedio de Fórmula (III) donde X, R<z>, R<1>, y (R<y>)<n>se definen como en la Fórmula (I), y R<2>es un grupo protector adecuado, tal como, por ejemplo, parametoxibencilo (PMB), dietoxilbencilo (DMB) o tetrahidropiranilo (THP), o R<2>es un sustituyente alquilo adecuado, tal como, por ejemplo, metilo, con un reactivo adecuado, tal como, por ejemplo, azodicarboxilato de dietilo (DEAD) o azodicarboxilato de di-terc-butilo (DTBAD), en presencia de una fosfina adecuada, tal como, por ejemplo, PPh<3>, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, tolueno o una mezcla de los mismos, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente o 70 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (III) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (IV) donde X, R<z>, R<1>, R<2>, y (R<y>)<n>son como se definen en la Fórmula (III), y P<1>así como P<2>son grupos protectores adecuados, tales como, por ejemplo, terc-butildimetilsililo (TBDMS) o terc-butildifenilsililo (TBDPS), con un reactivo desprotector adecuado tal como, por ejemplo, fluoruro de tetrabutilamonio (TBAF), en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, THF, en un temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente o 60 °C; o mediante reacción secuencial con reactivos desprotectores adecuados tales como, por ejemplo, K<2>CO<3>, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, MeOH, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente, seguida de reacción con reactivos desprotectores adecuados tales como, por ejemplo, PPTS (ptoluenosulfonato de piridinio), en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, MeOH, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente o 50 °C.

- Alternativamente, cuando el P<2>en los productos intermedios de Fórmula (IV) es un grupo PMB, puede ser necesario un paso de desprotección adicional, utilizando un reactivo de desprotección adecuado tal como, por ejemplo, TFA o 2,3-dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona (DDQ), en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, DCM, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

Un producto intermedio de Fórmula (II) puede tener un grupo protector en la posición R<1>tal como, por ejemplo, tetrahidropiranilo. En tal caso, el producto intermedio de la Fórmula (II) se hace reaccionar con un reactivo de desprotección adecuado, tal como, por ejemplo, pTsOH (ácido p-toluenosulfónico) o HCl, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, iPrOH (2-propanol), a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente. En un paso siguiente, el intermedio desprotegido obtenido puede hacerse reaccionar con un agente alquilante adecuado R<1>L (donde L es un grupo saliente adecuado) tal como, por ejemplo, un haluro de alquilo, en presencia de una base adecuada tal como, por ejemplo, Cs<2>CO<3>, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, DMF (N,N-dimetilformamida), a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente o 60 °C.

Para un experto en la técnica quedará claro que en este caso habrá que considerar la ortogonalidad de los grupos protectores, por ejemplo, cuando R<1>es un tetrahidropiranilo, P<1>y P<2>deberían ser preferiblemente grupos TBDMS o TBDPS.

Alternativamente, los productos intermedios de Fórmula (II-a), en donde R<4a>y R<4b>se definen como en la Fórmula (I), y p se define como 0-2, pueden prepararse según el Esquema 2,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (II-b), en donde L<2>es un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, mesilato, con una amina adecuada tal como, por ejemplo, morfolina o N-metilpiperazina, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF o DCM, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (II-b) pueden prepararse haciendo reaccionar un productos intermedio de Fórmula (II-c) con un agente activador adecuado, tal como, por ejemplo, MsCl, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, trietilamina, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF o DCM, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, a temperatura ambiente.

Alternativamente, los productos intermedios de Fórmula (II-a) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (II-f), con una amina adecuada, tal como, por ejemplo, metilamina, en presencia de un agente reductor adecuado, tal como, por ejemplo, cianoborohidruro de sodio, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, MeOH, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

Alternativamente, los productos intermedios de Fórmula (II-d), en donde R<3>se define como en la Fórmula (I), y p se define como 0-2, pueden prepararse según el Esquema 2,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (II-c) con un agente alquilante adecuado, tal como, por ejemplo, yoduro de metilo, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, NaH, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 0 °C o temperatura ambiente.

Alternativamente, los productos intermedios de Fórmula (II-e), donde p se define como 0-1, se pueden preparar según el Esquema 2,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (II-f), con un nucleófilo de alquilo adecuado, tal como, por ejemplo, bromuro de metilmagnesio, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, -78 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (II-f) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (II-c) en donde p se define como 0-1, con un agente oxidante adecuado tal como, por ejemplo, peryodinano de Dess-Martin, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, DCM, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

Los productos intermedios de Fórmula (II-c) se pueden preparar según el Esquema 2, haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (II-g) en donde Rz se define como (CH<2>)pCH=CH<2>y p se define como 0-2, con un reactivo hidroxilante adecuado tal como, por ejemplo, dímero de 9-borabiciclo[3.3.1]nonano (9-BBN) seguido de perborato de sodio tetrahidratado, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 40 °C.

Alternativamente, ambos productos intermedios de la Fórmula (II-h) y (II-i), en donde X, R<z>, R<1>y (R<y>)<n>, y R<2>se definen como en la Fórmula (I), se pueden preparar en dos pasos según el Esquema 3.

- Primero, haciendo reaccionar los productos intermedios de Fórmula (II-h) o (II-i), respectivamente, en donde R<2>se define entonces como un grupo protector adecuado, tal como, por ejemplo, THP, con un agente de desprotección adecuado, tal como, por ejemplo, HCl, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, dioxano o isopropanol, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Después, haciendo reaccionar el producto intermedio obtenido de Fórmula (II-j) con un agente alquilante adecuado R<2>L, tal como, por ejemplo, un haluro de alquilo, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DMF, o acetonitrilo, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, trietilamina (Et<3>N), N,N-diisopropiletilamina (iPr<2>EtN), Cs<2>CO<3>, o 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU), a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente o 60 °C, seguido de una separación adecuada de los isómeros (II-h) y (II-i), tal como, por ejemplo, una separación cromatográfica.

Los productos intermedios de Fórmula (IV), en donde R<z>, R<1>, R<2>y (R<y>)<n>se definen como en la Fórmula (I), P<1>y P<2>son grupos protectores adecuados tales como, por ejemplo, TBDMS o TBDPS, y X se define como -O-, se pueden preparar según el Esquema 4,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (V) con un producto intermedio de Fórmula (VI), en donde L2 es un grupo saliente adecuado tal como, por ejemplo, yoduro, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, hidruro de sodio, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

Los productos intermedios de Fórmula (IV), en donde R1, R2 y (Ry)n se definen como en la Fórmula (I), P1 y P2 son grupos protectores adecuados tales como, por ejemplo, TBDMS o TBDPS, y X se define como -CH<2>- y Rz se define como OR5, se pueden preparar según el Esquema 4,

- haciendo reaccionar primero un producto intermedio de Fórmula (VII) con un agente de hidroboración adecuado, tal como, por ejemplo, 9-BBN, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 75 °C. Después, haciendo reaccionar el producto intermedio formado con un producto intermedio de Fórmula (VIII), en donde Hal es un haluro adecuado tal como, por ejemplo, bromuro, en presencia de un catalizador adecuado, tal como, por ejemplo, [1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II), en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, K<3>PO<4>, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, una mezcla de THF y agua, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 80 °C.

- Los intermedios de Fórmula (VII) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (V), en donde Rz se define como vinilo, con un agente alquilante adecuado tal como, por ejemplo, cloruro de pmetoxibencilo, en presencia de una base adecuada tal como, por ejemplo, hidruro de sodio, en presencia de una sal de yoduro adecuada tal como, por ejemplo, KI, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, DMF, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 0 °C o temperatura ambiente.

Los productos intermedios de Fórmula (V), en donde Rz y R1 se definen como en la Fórmula (I), y P1 es un grupo protector adecuado, tal como el TBDMS, pueden prepararse según el Esquema 5,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XLIX) con un nucleófilo de alquenilo o alquilo adecuado, tal como, por ejemplo, haluro de alquilmagnesio o un haluro de alquenilmagnesio, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, -78 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XLIX) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (IX) con un agente oxidante adecuado, tal como, por ejemplo, peryodinano de Dess-Martin, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DCM, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 0 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (IX) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (X) con un haluro de propilo o alquilsulfonato O-protegido adecuado, tal como, por ejemplo, (3-bromopropoxi)(terc-butil)dimetilsilano, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, Cs2CO3, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DMF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (X) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XI), con un agente de desprotección adecuado, tal como, por ejemplo, ácido trifluorometanosulfónico, TFA o DDQ, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, CH<2>Ch, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XI) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XII), con un derivado de pirazol sustituido adecuado, tal como, por ejemplo, 3-(((4-metoxibencil)oxi)metil)-1,5-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol, en presencia de un catalizador adecuado, tal como, por ejemplo, Pd2(dba)3 en presencia de un ligando de fosfina adecuado, tal como, por ejemplo, S-Phos, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, bicarbonato sódico, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, dioxano, agua o una mezcla de los mismos, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 100 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XII) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XIII) con un ácido adecuado tal como, por ejemplo, ácido sulfúrico, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, ácido acético, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 70 °C.

- Un producto intermedio de Fórmula (XIII) se puede preparar haciendo reaccionar (3-bromo-4-clorofenil) hidrazina con 2-oxobutanoato de metilo, en presencia de un ácido adecuado, tal como, por ejemplo, ácido clorhídrico, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, metanol, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 65 °C.

Esquema 6

Alternativamente, los productos intermedios de Fórmula (V-a) en donde R<z>se define como CH<2>OP<3>, siendo P<3>un grupo protector adecuado tal como, por ejemplo, TIPS (triisopropilsililo), se pueden preparar según el Esquema 5, - haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XIV) con un precursor de grupo protector adecuado, tal como, por ejemplo, TIPSCl, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, imidazol, DMAP, o una mezcla del mismo, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DCM, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 0 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XIV) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XV) con un agente dihidroxilante adecuado, tal como, por ejemplo, ADmix alfa, en presencia de un aditivo adecuado, tal como, por ejemplo, metilsulfonamida en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, tBuOH, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XV) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XLIX), con un ilido de fósforo adecuado, formado por ejemplo, a partir de una sal de fosfonio adecuada, tal como, por ejemplo, bromuro de metiltrifenilfosfonio, y una base adecuada, tal como, por ejemplo, butillitio, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, -78 °C o temperatura ambiente.

Alternativamente, los productos intermedios de Fórmula (IX) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XII) con un producto intermedio de Fórmula (XVI), en presencia de un catalizador adecuado, tal como, por ejemplo, bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfina)dicloropaladio(II), en presencia de una base adecuada tal como, por ejemplo, carbonato de potasio, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, dioxano, agua, o una mezcla de la misma, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 65 °C.

Los productos intermedios de Fórmula (III), en donde R<2>y (R<y>)<n>se definen como en la Fórmula (I), y X se define como -CH<2>-, y R<z>, junto con R<1>forma un anillo (b-1), con m como se define en la Fórmula (I-z), se pueden preparar según el Esquema 6,

Esquema 6

- haciendo reaccionar primero un producto intermedio de Fórmula (XVII) con un agente de hidroboración adecuado, tal como, por ejemplo, 9-BBN, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 75 °C. Después, haciendo reaccionar el producto intermedio formado con un producto intermedio de Fórmula (XVIII), en donde Hal es un haluro adecuado tal como, por ejemplo, bromuro, en presencia de un catalizador adecuado, tal como, por ejemplo, [1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II), en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, K<3>PO<4>, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, una mezcla de THF y agua, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 80 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XVII) puede prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XIX) con un agente protector adecuado, tal como, por ejemplo, TBDMSCl, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, imidazol, o una mezcla de imidazol y<d>M<a>P, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DCM, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XIX) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XX) con un catalizador adecuado tal como, por ejemplo, p-toluenosulfonato de piridinio, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, tolueno, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 115 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XX) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (V-b), en donde R<z>se define como vinilo y R<1>se define como -(CH<2>)<m>OP<4>, en donde P<4>se define como un grupo protector adecuado tal como, por ejemplo, THP, con un agente de desprotección adecuado tal como, por ejemplo, PTSA, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, MeOH, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

Alternativamente, los productos intermedios de Fórmula (II), en donde R<2>y (R<y>)<n>se definen como en la Fórmula (I), y X se define como -CH<2>-, y R<z>, junto con R<1>forma un anillo (b-2), con m como se define en la Fórmula (I), se pueden preparar según el Esquema 7,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXI) con un agente alquilante adecuado, tal como, por ejemplo, yoduro de metilo, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, Cs<2>CO<3>, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DMF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo o temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXI) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXII) con un ácido adecuado tal como, por ejemplo, HCl, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, iPrOH, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXII) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXIII) con un reactivo adecuado, tal como, por ejemplo, azodicarboxilato de dietilo (DEAD) o azodicarboxilato de di-terc-butilo (DTBAD), en presencia de una fosfina adecuada, tal como, por ejemplo, PPh<3>, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, tolueno, o una mezcla de los mismos, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente o 70 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXIII) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXIV) con un agente de desprotección adecuado tal como, por ejemplo, TBAF, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXIV) se pueden preparar primero haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXV), con un agente de hidroboración adecuado, tal como, por ejemplo, 9-BBN, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 75 °C. Después, haciendo reaccionar el producto intermedio formado con un producto intermedio de Fórmula (XVIII), en donde Hal es un haluro adecuado tal como, por ejemplo, bromuro, en presencia de un catalizador adecuado, tal como, por ejemplo, [1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(II), en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, K<3>PO<4>, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, una mezcla de THF y agua, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 80 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXV) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXVI) con un reactivo de acoplamiento adecuado tal como, por ejemplo, cianometilenotributilfosforano, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, THF o tolueno, o una mezcla de los mismos, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 80 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXVI) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXVII), donde P<4>se define como un grupo protector adecuado, tal como, por ejemplo, THP, con un reactivo desprotector adecuado, tal como, por ejemplo, PTSA, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, MeOH, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXVII) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXVIII) con un nucleófilo de vinilo adecuado, tal como, por ejemplo, bromuro de vinilmagnesio, en presencia de un catalizador adecuado, tal como, por ejemplo, dimetilzinc, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, -78 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXVIII) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XLIX) con una sulfonamida adecuada, tal como, por ejemplo, tercbutilsulfinamida, en presencia de un catalizador adecuado, tal como, por ejemplo, Ti(OPr)4, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

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- haciendo reaccionar primero un producto intermedio de Fórmula (XXIX) con un agente activador adecuado, tal como, por ejemplo, cloruro de mesilo, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, DIPEA, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 0 °C o temperatura ambiente; después haciendo reaccionar el producto intermedio activado con un precursor de grupo saliente adecuado, tal como, por ejemplo, yoduro de sodio, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXIX) puede prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXX) con un reactivo hidrogenante adecuado, tal como, por ejemplo, gas de hidrógeno, en presencia de un catalizador adecuado, tal como, por ejemplo, Pd/C, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, MeOH, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXX) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXXI) con un agente reductor adecuado, tal como, por ejemplo, LiAlH4, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 0 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXXI) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXXII) con un producto intermedio de Fórmula (XXXIII) en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, NaH, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, -10 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXXII) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXXIV) con un agente oxidante adecuado, tal como, por ejemplo, MnO<2>, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, acetonitrilo, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 60 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXXIV) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXXV) con un agente reductor adecuado, tal como, por ejemplo, LiAlH4, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 0 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXXV) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXXVI) con un reactivo protector adecuado tal como, por ejemplo, terc-butil(cloro)difenilsilano (TBDPSCl, por sus siglas en inglés) o cloruro de 4-metoxibencilo (PMBCl, por sus siglas en inglés), en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, imidazol o NaH, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DMF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXXIII) y los productos intermedios de Fórmula (XXXVI) están disponibles en el mercado o pueden prepararse según los procedimientos descritos en la literatura.

Los productos intermedios de Fórmula (XVI) en donde R1 se define como en la Fórmula (I) y B(OR<)2>es un éster de boronato adecuado, tal como, por ejemplo, el borato de pinacol, se pueden preparar según el Esquema 9,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXXVII), en donde P5 es un grupo protector adecuado, tal como, por ejemplo, TBDMS, con un agente de desprotección adecuado, tal como, por ejemplo, TBAF, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, metil-THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXXVII), donde P5 es un grupo protector adecuado tal como, por ejemplo, TBDMS, pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXXVIII) con un agente de borilación adecuado, tal como, por ejemplo, 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, butillitio, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, -78 °C o temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXXVIII) puede prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXXIX) con un agente protector adecuado, tal como, por ejemplo, TBDMSCl, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, imidazol, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DCM, una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XXXIX) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XL) con un agente reductor adecuado tal como, por ejemplo, borohidruro de sodio, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, una mezcla de THF y MeOH, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los intermedios de Fórmula (XL) se pueden preparar haciendo reaccionar el éster etílico del ácido 1 H-pirazol-3-carboxílico, 4-bromo-5-metil-, con un alcohol adecuado, tal como, por ejemplo, 2- (tetrahidro-2H-piran-2-iloxi) etanol, en presencia de un reactivo de acoplamiento adecuado tal como, por ejemplo, cianometilentributilfosforano, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, la temperatura ambiente.

- Alternativamente, los productos intermedios de Fórmula (XVI) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XXXIX) con un agente borilante adecuado tal como, por ejemplo, pinacolborano, en presencia de una base adecuada tal como, por ejemplo, Et3N, en presencia de un catalizador adecuado tal como, por ejemplo, bis (acetonitrilo) dicloropaladio (II), en presencia de un fosfato adecuado. una tal como, por ejemplo, el 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, el 1,4-dioxano, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 80 °C.

Los productos intermedios de Fórmula (XVIII), en donde X2, Ry y n se definen como en la Fórmula (I), P2 es un grupo protector adecuado, tal como, por ejemplo, TBDMS, y Hal es un haluro adecuado, tal como, por ejemplo, bromuro, pueden prepararse según el Esquema 10,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XLI) con un agente hidrogenante adecuado, tal como, por ejemplo, hidrógeno, en presencia de un catalizador adecuado, tal como, por ejemplo, PtO<2>, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, acetato de etilo (EtOAc), a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XLI) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XLII) con un producto intermedio de Fórmula (xXxil) en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, NaH, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, t Hf , a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, -30 °C o 0 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XLII) pueden prepararse haciendo reaccionar un haloheterociclo adecuado de Fórmula (XLIII), tal como, por ejemplo, 3-bromo-5-(clorometil)-1-metil-1H-pirazol (CAS [2109428-60-4]), con una fosfina adecuada, tal como, por ejemplo, PPh3, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, acetonitrilo (ACN), a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 85 °C.

Alternativamente, los productos intermedios de Fórmula (I) pueden prepararse según el Esquema 10,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XLIV) con un producto intermedio de Fórmula (XLV) en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, NaH, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, -30 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XLIV) se pueden preparar haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XLVI) con una fosfina adecuada tal como, por ejemplo, trifenilfosfina, en un disolvente adecuado tal como, por ejemplo, ACN, a una temperatura adecuada tal como, por ejemplo, 85 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XLVI), en donde L es un grupo saliente tal como, por ejemplo, cloruro, pueden prepararse haciendo reaccionar primero un producto intermedio de Fórmula (XXXIV) con un reactivo activador adecuado, tal como, por ejemplo, anhídrido metanosulfónico, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente; después haciendo reaccionar el producto intermedio activado formado con una fuente de cloruro adecuada, tal como, por ejemplo, LiCl, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

Los productos intermedios de Fórmula (XLIII), en donde X2 se define como en la Fórmula (I), L es un grupo saliente adecuado, tal como, por ejemplo, cloruro, y Hal es un haluro adecuado, tal como, por ejemplo, bromuro, pueden prepararse según el Esquema 11,

- haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XLVII) con un agente activador adecuado, tal como, por ejemplo, cloruro de tionilo, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DCM, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, temperatura ambiente.

- Los productos intermedios de Fórmula (XLVII) pueden prepararse haciendo reaccionar un producto intermedio de Fórmula (XLV) con un agente reductor adecuado, tal como, por ejemplo, NaBH4, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, metanol (MeOH), a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, 15 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XLV) pueden prepararse haciendo reaccionar un dihaloheterociclo, tal como, por ejemplo, un producto intermedio de Fórmula (XLVIII) con un agente acilante adecuado, tal como, por ejemplo, DMF, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, BuLi, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, THF, a una temperatura adecuada, tal como, por ejemplo, -78 °C.

- Los productos intermedios de Fórmula (XLVIII) están disponibles en el mercado o pueden prepararse según los procedimientos descritos en la literatura.

Se apreciará que en los casos en los que existan grupos funcionales apropiados, los compuestos de diversas fórmulas o cualquier producto intermedio utilizado en su preparación, se pueden derivatizar adicionalmente mediante uno o más métodos sintéticos convencionales empleando reacciones de condensación, sustitución, oxidación, reducción o escisión. Algunas estrategias de sustitución particulares incluyen los procedimientos de alquilación, arilación, heteroarilación, acilación, sulfonación, halogenación, nitración, formilación y acoplamiento convencionales.

Los compuestos de Fórmula (I) se pueden sintetizar en forma de mezclas racémicas de enantiómeros que se pueden separar entre sí siguiendo procedimientos de resolución conocidos en la técnica. Los compuestos racémicos de Fórmula (I) que contienen un átomo de nitrógeno básico pueden convertirse en las formas salinas diaestereoméricas correspondientes mediante reacción con un ácido quiral adecuado. Dichas formas de sal diaestereomérica se separan posteriormente, por ejemplo, mediante cristalización selectiva o fraccionada y los enantiómeros se liberan de esta mediante el uso de álcali. Una manera alternativa de separar las formas enantioméricas de los compuestos de Fórmula (I) pasa por el uso de cromatografía líquida usando una fase estacionaria quiral. Dichas formas estereoquímicamente isoméricas puras también pueden derivar de las formas estereoquímicamente isoméricas puras correspondientes de los materiales de partida adecuados, siempre que la reacción se produzca estereoespecíficamente.

En la preparación de los compuestos de la presente invención, puede ser necesaria la protección de una funcionalidad remota (por ejemplo, amina primaria o secundaria) de los productos intermedios. La necesidad de dicha protección variará según la naturaleza de la funcionalidad remota y las condiciones de los métodos de preparación. Los grupos protectores de amino adecuados (NH-Pg) incluyen acetilo, trifluoroacetilo, t-butoxicarbonilo (Boc), benciloxicarbonilo (CBz) y 9-fluorenilmetilenoxicarbonilo (Fmoc). El experto en la técnica puede determinar fácilmente la necesidad de una protección de este tipo. Para consultar una descripción general de los grupos protectores y su uso, véase T. W. Greene y P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 4.a ed., Wiley, Hoboken, New Jersey, 2007.

Farmacología de compuestos

Se ha descubierto que los compuestos de la presente invención inhiben una de más actividades de MCL-1, tales como la actividad antiapoptótica MCL-1.

Un inhibidor de MCL-1 es un compuesto que bloquea una o más funciones MCL-1, tales como la capacidad de unirse y reprimir los efectores proapoptóticos Bak y Bax o BH3 solo sensibilizantes, tales como Bim, Noxa o Puma.

Los compuestos de la presente invención pueden inhibir las funciones de la prosupervivencia MCL-1. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención pueden ser útiles en el tratamiento y/o prevención, en particular, de enfermedades que sean susceptibles a los efectos del sistema inmunitario, tales como el cáncer.

En otra realización de la presente invención, los compuestos de la presente invención presentan propiedades antitumorales, por ejemplo, mediante modulación inmunitaria.

En una realización, la presente invención se dirige a un compuesto de fórmula (I) para uso en métodos para tratar y/o prevenir un cáncer, en donde el cáncer se selecciona de los descritos en la presente memoria, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita (preferiblemente un ser humano), una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo.

En una realización, la presente invención se dirige a un compuesto de Fórmula (I) para uso en el tratamiento y/o prevención del cáncer, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita, preferiblemente un ser humano, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, en donde el cáncer se selecciona del grupo que consiste en leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfoblástica aguda de células B, leucemia linfocítica crónica (LCL) de células B, cáncer de vejiga, cáncer de mama, leucemia linfocítica crónica, leucemia mieloide crónica, adenocarcinoma de colon, linfoma difuso de células B grandes, cáncer de esófago, linfoma folicular, cáncer gástrico, cáncer de cabeza y cuello (que incluye, aunque no de manera limitante, el carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello), cáncer hematopoyético, carcinoma hepatocelular, linfoma de Hodgkin, cáncer de hígado, cáncer de pulmón (que incluye, aunque no de manera limitante, adenocarcinoma de pulmón), linfoma, meduloblastoma, melanoma, gammapatía monoclonal de significado indeterminado, mieloma múltiple, síndromes mielodisplásicos, mielofibrosis, neoplasias mieloproliferativas, cáncer de ovario, carcinoma de ovario de células claras, cistoadenoma seroso de ovario, cáncer de páncreas, policitemia vera, cáncer de próstata, adenocarcinoma de recto, carcinoma de células renales, mieloma múltiple latente, leucemia linfoblástica aguda de células T, linfoma de células T y macroglobulinemia de Waldenstrom.

En otra realización, la presente invención se dirige a una cantidad de Fórmula (I) para usar en un método para tratar y/o prevenir el cáncer que comprende administrar a un sujeto que lo necesita, preferiblemente un ser humano, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable, o un solvato del mismo, en donde el cáncer se selecciona preferiblemente del grupo que consiste en leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfoblástica aguda de células B, leucemia linfocítica crónica (LCL) de células B, cáncer de mama, leucemia linfocítica crónica, leucemia mieloide crónica, linfoma difuso de células B grandes, linfoma folicular, cáncer hematopoyético, linfoma de Hodgkin, cáncer de pulmón (que incluye, aunque no de manera limitante, adenocarcinoma de pulmón), linfoma, gammapatía monoclonal de significado indeterminado, mieloma múltiple, síndromes mielodisplásicos, mielofibrosis, neoplasias mieloproliferativas, mieloma múltiple latente, leucemia linfoblástica aguda de células T, linfoma de células T y macroglobulinemia de Waldenstrom.

En otra realización, la presente invención se dirige a un compuesto de Fórmula (I) para uso en un método para tratar y/o prevenir el cáncer que comprende administrar a un sujeto que lo necesita, preferiblemente un ser humano, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable, o un solvato del mismo, en donde el cáncer se selecciona del grupo que consiste en adenocarcinoma, gammopatía monoclonal benigna, cáncer biliar (que incluye, aunque no de manera limitante, colangiocarcinoma), cáncer de vejiga, cáncer de mama (que incluye, aunque no de manera limitante, adenocarcinoma de mama, carcinoma papilar de mama, cáncer de mama, carcinoma medular de mama), cáncer de cerebro (que incluye, aunque no de manera limitante, meningioma), glioma (que incluye, aunque no de manera limitante, astrocitoma, oligodendroglioma; meduloblastoma), cáncer de bronquios, cáncer de cuello uterino (que incluye, pero no se limita a, adenocarcinoma de cuello uterino), cordoma, coriocarcinoma, cáncer colorrectal (que incluye, pero no se limita a, cáncer de colon, cáncer de recto, adenocarcinoma colorrectal), carcinoma epitelial, sarcoma endotelial (que incluye, pero no se limita a, sarcoma de Kaposi, sarcoma hemorrágico idiopático múltiple), cáncer de endometrio (que incluye, pero no se limita a, cáncer uterino, sarcoma uterino), cáncer de esófago (que incluye, pero no se limita a, adenocarcinoma de esófago, adenocarcinoma de Barrett), sarcoma de Ewing, cáncer gástrico (que incluye, pero no se limita a, adenocarcinoma de estómago), tumor del estroma gastrointestinal (TEGI), cáncer de cabeza y cuello (que incluye, pero no se limita a, el carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello), cánceres hematopoyéticos (que incluyen, pero no se limita a, leucemias, tales como la leucemia linfocítica aguda (LLA) (que incluye, la LLA de células B, la<l>L<a>de células T), la leucemia mielocítica aguda (LMA) (p. ej., la LMA de células B, la LMA de células T), la leucemia mielocítica crónica (LMC) (p. ej., LMC de células B, LMC de células T), y leucemia linfocítica crónica (LCL) (p. ej., LCL de células B, LCL de células T), linfomas como el linfoma de Hodgkin (LH) (que incluye, pero no se limita a, el LH de células B y el LH de células T) y el linfoma no hodgkiniano (LNH) (p. ej., LNH de células B, tales como el linfoma difuso de células grandes (LDCG) (p. ej., linfoma difuso de células B grandes (LDCBG)), linfoma folicular, leucemia linfocítica crónica/linfoma linfocítico pequeño (LLC/LLP), linfoma de células del manto (MCL, por sus siglas en inglés), linfomas de células B de la zona marginal (que incluye, pero no se limita a, los linfomas del tejido linfoide asociado a mucosas (TLAM), linfoma de células B de la zona marginal ganglionar, linfoma esplénico de células B de zona marginal), linfoma mediastínico primario de células B, linfoma de Burkitt, linfoma linfoplasmocítico (que incluye, pero no se limita a, la macroglobulinemia de Waldenstrom), linfoma inmunoblástico de células grandes, leucemia de células pilosas (HCL, por sus siglas en inglés), linfoma linfoblástico B precursor y linfoma primario del sistema nervioso central (SNC), LNH de células T, tal como el linfoma/leucemia linfoblástica T precursora, linfoma periférico de células T (LPCT) (p. ej., linfoma cutáneo de células T (CTCL, por sus siglas en inglés), que incluye, pero no se limita a, micosis fungoides, síndrome de Sezary), linfoma angioinmunoblástico de células T, linfoma extranodal de células T asesinas naturales, linfoma de células T tipo enteropatía, linfoma subcutáneo de células T tipo paniculitis, linfoma anaplásico de células grandes, una mezcla de una o más leucemias/linfomas como se ha descrito anteriormente, mieloma múltiple (MM), enfermedad de cadenas pesadas (que incluye, pero no se limita a, enfermedad de cadenas alfa, enfermedad de cadenas gamma, enfermedad de cadenas mu), amiloidosis inmunocítica, cáncer de riñón (que incluye, pero no se limita a, nefroblastoma, también conocido como tumor de Wilms, carcinoma de células renales), cáncer de hígado (que incluye, pero no se limita a, cáncer hepatocelular (CHC), hepatoma maligno), cáncer de pulmón (que incluye, pero no se limita a, carcinoma broncogénico, cáncer de pulmón de células no pequeñas (CPCNP), cáncer escamoso de pulmón (SLC, por sus siglas en inglés), adenocarcinoma de pulmón,carcinoma de pulmón de Lewis,tumores neuroendocrinos de pulmón, carcinoide típico, carcinoide atípico, cáncer de pulmón de células pequeñas (CPCP) y carcinoma neuroendocrino de células grandes), síndromes mielodisplásicos (SMD), síndrome mieloproliferativo (SMP), policitemia vera (PCV), trombocitosis esencial (TE), metaplasia mieloide agnogénica (MMA), también conocida como mielofibrosis (MF), mielofibrosis idiopática crónica, leucemia mielocítica crónica (LMC), leucemia neutrofílica crónica (LNC), síndrome hipereosinofílico (SHE), cáncer de ovario (que incluye, pero no se limita a, cistadenocarcinoma, carcinoma embrionario de ovario, adenocarcinoma de ovario), cáncer de páncreas (que incluye, pero no se limita a, adenocarcinoma pancreático, neoplasia mucinosa papilar intraductal (IPMN, por sus siglas en inglés), tumores de células de los islotes), cáncer de próstata (que incluye, pero no se limita a, el adenocarcinoma de próstata), cáncer de piel (que incluye, pero no se limita a, carcinoma de células escamosas (CCE), queratoacantoma (QA), melanoma, carcinoma basocelular (CBC)) y sarcoma de tejidos blandos (p. ej., histiocitoma fibroso maligno (HFM), liposarcoma, tumor maligno de la vaina nerviosa periférica (TMVNP), condrosarcoma, fibrosarcoma, mixosarcoma).

En otra realización, la presente invención se dirige a un compuesto de Fórmula (I) para utilizar en un método para tratar y/o prevenir el cáncer, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita, preferiblemente, un ser humano, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el cáncer se selecciona del grupo que consiste en gammapatía monoclonal benigna, cáncer de mama (que incluye, pero no se limita a, adenocarcinoma de mama, carcinoma papilar de mama, cáncer de mama, carcinoma medular de mama), cánceres hematopoyéticos (que incluyen, pero no se limita a, leucemias, tales como la leucemia linfocítica aguda (LLA) (que incluye, pero no se limita a, la LLA de células B, la LLA de células T), la leucemia mielocítica aguda (LMA) (p. ej., LMA de células B, LMA de células T), leucemia mielocítica crónica (LMC) (p. ej., LMC de células B, LMC de células T) y leucemia mielocítica crónica (LMC) (p. ej., LMC de células B, LMC de células T), linfomas, tales como el linfoma de Hodgkin (LH) (que incluye, pero no se limita a, el LH de células B y el LH de células T) y el linfoma no hodgkiniano (LNH) (p. ej., el LNH de células B, tales como el linfoma difuso de células grandes (LDCG) (p. ej., linfoma difuso de células B grandes (LDCBG)), linfoma folicular, leucemia linfocítica crónica/linfoma linfocítico pequeño (LLC/LLP), linfoma de células del manto (MCL, por sus siglas en inglés), linfomas de células B de zona marginal (que incluye, pero no se limita a, los linfomas de tejido linfoide asociado a mucosas (TLAM), linfoma ganglionar de células B de zona marginal, linfoma esplénico de células B de zona marginal), linfoma mediastínico primario de células B, linfoma de Burkitt, linfoma linfoplasmocítico (que incluye, pero no se limita a, la macroglobulinemia de Waldenstrom), linfoma inmunoblástico de células grandes, leucemia de células pilosas (HCL, por sus siglas en inglés), linfoma linfoblástico B precursor y linfoma primario del sistema nervioso central (SNC), LNH de células T, tales como linfoma/leucemia linfoblástica T precursora, linfoma periférico de células T (LPCT) (p. ej., linfoma cutáneo de células T (CTCL, por sus siglas en inglés), que incluye, pero no se limita a, la micosis fungoide y el síndrome de Sezary), linfoma angioinmunoblástico de células T, linfoma extraganglionar de células T asesinas naturales, linfoma de células T tipo enteropatía, linfoma subcutáneo de células T tipo paniculitis, linfoma anaplásico de células grandes, una mezcla de una o más leucemias/linfomas como se ha descrito anteriormente, mieloma múltiple (MM), enfermedad de cadena pesada (que incluye, pero no se limita a, enfermedad de cadena alfa, enfermedad de cadena gamma, enfermedad de cadena mu), amiloidosis inmunocítica, cáncer de hígado (que incluye, pero no se limita a, cáncer hepatocelular (CHC), hepatoma maligno), cáncer de pulmón (que incluye, pero no se limita a, carcinoma broncogénico, cáncer de pulmón de células no pequeñas (CPCNP), cáncer escamoso de pulmón (SLC, por sus siglas en inglés), adenocarcinoma de pulmón, carcinoma de pulmón de Lewis, tumores neuroendocrinos de pulmón, carcinoide típico, carcinoide atípico, cáncer de pulmón de células pequeñas (CPCP) y carcinoma neuroendocrino de células grandes), síndromes mielodisplásicos (SMD), síndrome mieloproliferativo (SMP) y cáncer de próstata (que incluye, pero no se limita a, el adenocarcinoma de próstata).

En otra realización, la presente invención se dirige a un compuesto de Fórmula (I) para uso en un método para tratar y/o prevenir el cáncer que comprende administrar a un sujeto que lo necesita, preferiblemente un ser humano, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, en donde el cáncer se selecciona del grupo que consiste en cáncer de próstata, cáncer de pulmón, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de cuello uterino, melanoma, leucemia linfocítica crónica (LLC) de células B, leucemia mieloide aguda (LMA) y leucemia linfoblástica aguda (LLA).

En otra realización, la presente invención se dirige a un compuesto de Fórmula (I) para uso en un método para tratar y/o prevenir el cáncer que comprende administrar a un sujeto que lo necesita, preferiblemente un ser humano, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo, en donde el cáncer es mieloma múltiple.

Los compuestos según la presente invención o composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos, también pueden tener aplicaciones terapéuticas en combinación con agentes inmunomoduladores, tales como inhibidores del eje de punto de control inmunitario PD1/PDL1, por ejemplo, anticuerpos (o péptidos) que se unen y/o inhiben la actividad de PD-1 o la actividad de PD-L1 y o CTLA-4 o de células T del receptor de antígeno quimérico (CART), diseñado por ingeniería genética, dirigidos a antígenos asociados a tumores.

Los compuestos según la presente invención o composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos, también pueden combinarse con radioterapia o agentes quimioterapéuticos (que incluyen, pero no se limitan a, agentes anticancerígenos) o cualquier otro agente farmacéutico que se administra a un sujeto que tiene cáncer, para el tratamiento del cáncer de dicho sujeto, o para el tratamiento o prevención de efectos secundarios asociados con el tratamiento del cáncer de dicho sujeto.

Los compuestos según la presente invención o composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos, también pueden combinarse con otros agentes que estimulan o potencian la respuesta inmunitaria, tales como vacunas.

Por lo tanto, en la presente memoria también se describen compuestos para tratar y/o prevenir un cáncer (en donde el cáncer se selecciona de los descritos en la presente memoria), que comprende administrar a un sujeto que lo necesita (preferiblemente, un ser humano) una cantidad terapéuticamente eficaz de terapia conjunta o terapia de combinación; en donde la terapia conjunta o terapia de combinación comprende un compuesto de Fórmula (I) de la presente invención y uno o más agentes anticancerígenos seleccionados del grupo que consiste en (a) agente inmunomodulador (tal como inhibidores del eje de punto de control inmunitario PD1/PDL1, por ejemplo, anticuerpos [o péptidos] que se unen y/o inhiben la actividad de PD-1 o la actividad de PD-L1 y o CTLA-4); (b) células T receptoras de antígeno quiméricas (CART) modificadas dirigidas a antígenos asociados a tumores; (c) radioterapia; (d) quimioterapia; y (e) agentes que estimulan o potencian la respuesta inmunitaria, tales como vacunas.

La presente invención se dirige a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para utilizar como medicamento.

La presente invención se dirige a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para utilizar en la inhibición de la actividad de MCL-1.

Como se utiliza en la presente memoria, salvo que se indique lo contrario, el término “ agentes anticancerígenos” abarcará “ agentes de crecimiento de células antitumorales” y “ agentes antineoplásicos” .

La presente invención se dirige a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para utilizar en el tratamiento y/o prevención de enfermedades (preferiblemente, cánceres) mencionadas anteriormente.

La presente invención se refiere a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para utilizar en el tratamiento y/o prevención, en particular para tratar, una enfermedad, preferiblemente, un cáncer, como se describe en la presente memoria (por ejemplo, mieloma múltiple).

La presente invención se refiere a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para utilizar en el tratamiento y/o prevención, en particular para tratar enfermedades o afecciones mediadas por MCL-1, preferiblemente, cáncer, más preferiblemente un cáncer como se describe en la presente memoria (por ejemplo, mieloma múltiple).

La presente invención se refiere a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para utilizar en el tratamiento y/o prevención, en particular para utilizar en el tratamiento de enfermedades o afecciones mediadas por MCL-1, preferiblemente, cáncer, más preferiblemente un cáncer como se describe en la presente memoria (por ejemplo, mieloma múltiple).

La presente invención se refiere a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para la fabricación de un medicamento.

La presente invención se refiere a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para la fabricación de un medicamento para la inhibición de MCL-1.

La presente invención se refiere a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para la fabricación de un medicamento para tratar y/o prevenir, en particular para tratar, un cáncer, preferiblemente un cáncer como se describe en la presente memoria. Más particularmente, el cáncer es un cáncer que responde a la inhibición de MCL-1 (por ejemplo, mieloma múltiple).

La presente invención se refiere a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para la fabricación de un medicamento para tratar y/o prevenir, en particular para tratar, cualquiera de las afecciones de enfermedad mencionadas anteriormente en el presente documento.

La presente invención se dirige a compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, para la fabricación de un medicamento para tratar y/o prevenir cualquiera de las afecciones de enfermedad mencionadas anteriormente en la presente memoria.

Los compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, pueden administrarse a sujetos, preferiblemente seres humanos, para tratar y/o prevenir una cualquiera de las enfermedades mencionadas anteriormente en la presente memoria.

En vista de la utilidad de los compuestos de Fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables, y solvatos de los mismos, se proporciona un compuesto de Fórmula (I) para uso en un método para tratar sujetos, preferiblemente mamíferos tales como seres humanos, que padecen cualquiera de las enfermedades mencionadas anteriormente en la presente memoria; o un método para ralentizar la progresión de cualquiera de las enfermedades mencionadas anteriormente en la presente memoria en sujetos humanos; o un método de prevención en sujetos, preferiblemente mamíferos, tales como seres humanos, que padecen una cualquiera de las enfermedades mencionadas anteriormente en la presente memoria.

Dichos métodos comprenden la administración, es decir, la administración sistémica o tópica, preferiblemente la administración oral o intravenosa, más preferiblemente la administración oral, de una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo a sujetos tales como seres humanos.

Un experto en la técnica reconocerá que una cantidad terapéuticamente efectiva de los compuestos de la presente invención es la cantidad suficiente para tener actividad terapéutica, y que esta cantidad varía, entre otros, dependiendo del tipo de enfermedad, la concentración del compuesto en la formulación terapéutica y el estado del paciente. En una realización, una cantidad diaria terapéuticamente efectiva puede ser de aproximadamente 0,005 mg/kg a 100 mg/kg.

La cantidad de un compuesto según la presente invención, también denominada en la presente memoria como ingrediente activo, que se requiere para lograr un efecto terapéutico, puede variar caso a caso, por ejemplo, con el compuesto particular, la vía de administración, la edad y el estado del receptor, y el trastorno particular o enfermedad que se esté tratando. Los métodos de la presente invención también pueden incluir la administración del ingrediente activo en una pauta posológica de entre una y cuatro tomas al día. En estos métodos de la presente invención, los compuestos según la invención se formulan preferiblemente antes de la administración.

La presente invención también proporciona composiciones para uso en el tratamiento y/o prevención de trastornos (preferiblemente, un cáncer como se describe en la presente memoria) a los que se hace referencia en la presente memoria. Dichas composiciones comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable, o un solvato del mismo, y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

Aunque es posible que el principio activo (p. ej., un compuesto de la presente invención) se administre solo, es preferible administrarlo como composición farmacéutica. Por consiguiente, la presente invención proporciona además una composición farmacéutica que comprende un compuesto según la presente invención, junto con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. El portador o diluyente debe ser “ aceptable” en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la composición y no perjudicial para los receptores de la misma.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención se pueden preparar mediante cualquier método bien conocido en la técnica de farmacia, por ejemplo, utilizando el uso de métodos tales como los descritos en Gennaro y col., Remington's Pharmaceutical Sciences (18a ed., Mack Publishing Company, 1990, véase especialmente la parte 8: Pharmaceutical preparations and their Manufacture).

Los compuestos de la presente invención pueden administrarse solos o en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales. La terapia combinada incluye la administración de una única formulación farmacéutica que contiene un compuesto según la presente invención y uno o más agentes terapéuticos adicionales, así como la administración del compuesto según la presente invención y cada agente terapéutico adicional en su propia formulación farmacéutica separada.

Por lo tanto, en la presente memoria también se describe un producto que comprende, como primer ingrediente activo, un compuesto según la invención y, además, como ingrediente activo adicional, uno o más agente(s) anticanceroso(s), como preparación combinada para uso simultáneo, separado o secuencial en el tratamiento de pacientes que padecen cáncer.

El uno u otros más agentes medicinales y el compuesto según la presente invención, pueden administrarse simultáneamente (p. ej., en composiciones separadas o unitarias) o secuencialmente en cualquier orden. En una realización, los dos o más compuestos se administran en un periodo y/o en una cantidad y/o de una manera que sea suficiente para asegurar que se consigue un efecto ventajoso o sinérgico. Se apreciará que el método y orden de administración preferidos, y las cantidades y pautas de dosificación respectivos para cada componente de la combinación, dependerán del otro agente anticáncer y el compuesto concretos de la presente invención que se administren, su vía de administración, la afección concreta, en particular el tumor que se trate, y el huésped concreto que se trate.

Los siguientes ejemplos ilustran mejor la presente invención.

Ejemplos

Varios métodos para preparar los compuestos de esta invención se ilustran en los siguientes ejemplos. Todos los materiales de partida se obtuvieron de proveedores comerciales y se utilizaron sin purificación adicional o, alternativamente, pueden prepararse fácilmente por un experto según métodos muy conocidos.

Como comprenderá un experto en la técnica, los compuestos sintetizados mediante los protocolos indicados pueden contener disolvente residual o impurezas menores.

Un experto en la técnica se dará cuenta de que, incluso cuando no se menciona explícitamente en los protocolos experimentales a continuación, típicamente después de una purificación en cromatografía en columna, se recogieron las fracciones deseadas y se evaporó el disolvente.

En caso de que no se indique ninguna estereoquímica, esto significa que es una mezcla de estereoisómeros, salvo que se indique lo contrario o esté claro a partir del contexto.

Preparación de productos intermedios

Para los productos intermedios que se utilizaron en una siguiente etapa de reacción como producto intermedio en bruto o parcialmente purificado, en algunos casos no se mencionan cantidades en mol para dicho producto intermedio en la siguiente etapa de reacción o, alternativamente, se indican cantidades en mol estimadas o cantidades en mol teóricas para dicho producto intermedio en la siguiente etapa de reacción en los protocolos de reacción descritos a continuación.

Una solución de (3-bromo-4-clorofenil)hidracina (4,655 g, 18,047 mmol) y 2-oxobutanoato de metilo (1,02 eq) en HCl (93 ml, 1,25 M en MeOH), se sometió a reflujo durante 90 min. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 5,768 g del Producto intermedio 1 como un residuo aceitoso marrón, que se solidificó en unos minutos, y se usó sin purificación adicional en el siguiente paso.

Producto intermedio 2

Una suspensión del Producto intermedio 1 (5,77 g, 18 mmol) en ácido acético (37 ml) se calentó a 70 °C. Se añadió ácido sulfúrico (4,81 ml, 5 eq.) gota a gota durante 10 min (se desarrolló exotermia, y se formó un precipitado). Después de 15 minutos adicionales, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y después a 0 °C mediante la adición de hielo. El precipitado sólido se filtró y se lavó con agua hasta que el filtrado alcanzó pH neutro. El sólido se trituró con heptano frío/éter diisopropílico (8/2, 50 ml), para dar un sólido de color blanquecino. Este sólido se purificó mediante SFC preparatoria (fase estacionaria: Chiralpak Daicel IG 20 * 250 mm, fase móvil: CO<2>, EtOH 0,4 % iPrNH<2>), para dar el Producto intermedio 2 (1,745 g, 32 %).

El Producto intermedio 2 (500 mg, 1,65 mmol), 3-(((4-metoxibencil)oxi)metil)-1,5-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (CAS [2143010-90-4]) (800 mg, 1,3 eq.), Pd2(dba)3 (76 mg, 0.05 eq.) y S-Phos (68 mg, 0,1 eq.), se pesaron en un tubo de presión en N<2>. Se añadieron dioxano (10,5 ml) y una solución acuosa saturada de NaHCO3 (4,5 ml), y la mezcla se calentó a 100 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc (40 ml) y agua (40 ml). La capa orgánica se separó, y la acuosa se extrajo con EtOAc (40 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. La mezcla en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (40 g, gradiente: desde heptano 100 % hasta heptano/EtOAc 4/6). El Producto intermedio 3 (790 mg, 89 %) se obtuvo como un aceite amarillento que se solidificó en reposo. El Producto intermedio 3 se utilizó sin purificación adicional en el siguiente paso de la reacción.

Se añadió ácido trifluorometanosulfónico (0,888 ml, 5 eq.) a una solución del Producto intermedio 3 (1080 mg, 2 mmol) en DCM (25 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (100 ml) y se trató con NaHCO3 acuoso saturado (30 ml). La capa orgánica se separó, y la acuosa se extrajo con DCM (50 ml x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El Producto intermedio 4 (625 mg, 89 %) se obtuvo como un sólido amarillento, se utilizó sin purificación adicional en el siguiente paso.

Producto intermedio 5 - mezcla de atropisómeros

Producto intermedio 5a - S<a>o R<a>; un atropisómero, pero estereoquímica absoluta no determinada

Producto intermedio 5b - R<a>o S<a>; un atropisómero, pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió carbonato de cesio (732 mg, 1,25 eq.) a una solución del Producto intermedio 4 (625 mg, 1,79 mmol) en DMF (10 ml) en atmósfera de nitrógeno. Se añadió (3-bromopropoxi)(terc-butil)dimetilsilano (0,458 ml, 1,1 eq.) gota a gota, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 ml) y agua (50 ml). La capa orgánica se separó, y se lavó con salmuera (2 x 30 ml). La capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (50 ml). La capa orgánica combinada se separó, se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó. La mezcla en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (40 g, gradiente: desde heptano 100 % hasta EtOAc 100 %), para proporcionar el Producto intermedio 5 (360 mg, 38 %) como un sólido blanco.

Una muestra del Producto intermedio 5 (25 g, 48,4 mmol) se separó en sus atropoisómeros mediante SFC preparativa (columna Chiralpak Diacel, AD 20 x 250 mm, fase móvil: CO<2>, EtOH iPrNH<2>al 0,4 %) para proporcionar los dos atropoisómeros:

Producto intermedio 5a (11 g, 43,7 %)

OR: -29,3° (589 nm, 20 °C, 0,29 % p/v, DMF).

Producto intermedio 5b (10,7 g, 42,5 %)

OR: 19,4° (589 nm, 20 °C, c 0,32 p/v, DMF).

S<a>o R<a>; un atropisómero, pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió peryodinano de Dess-Martin (CAS [87413-09-0], 10,2 g, 24,03 mmol) a 0 °C a una solución agitada del Producto intermedio 5a (10 g; 19,23 mmol) en DCM (25 ml). El baño de agua helada se retiró y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, después se diluyó con DCM (200 ml) y se trató con 500 ml de una mezcla 1:1 de solución acuosa saturada de NaHCO<3>(250 ml) y Na<2>S<2>O<3>(10 %, 250 ml). La mezcla bifásica se agitó durante 30 minutos, hasta que se hizo transparente, y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó dos veces con NaHCO<3>acuoso saturado, después con salmuera, se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó para dar el Producto intermedio 6 (10,4 g, rendimiento: 92 %), utilizado sin purificación adicional.

Para ambos compuestos, se añadió gota a gota estereoisómeros puros pero estereoquímica absoluta no determinada bromuro de vinilmagnesio (CAS [1826-67-1], 17 ml, 1 M en 2-Me-THF, 17 mmol) a una solución agitada y fría (-78 °C) del Producto intermedio 6 (5,85 g, 11,06 mmol) en THF anhidro (64,5 ml). La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 1 h, después se inactivó con solución de NH4Cl acuosa saturada, y se dejó llegar a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con EtOAc y agua, las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con agua seguida de salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante SFC preparativa (columna Chiralpak Daicel, IG 20 x 250 mm, fase móvil: CO<2>, iPrOH 0,4 %, iPrNH<2>), para proporcionar:

Producto intermedio 7a (2,64 g, rendimiento del 44 %); O.R.: 18,43° (589 nm, 20 °C, c 0,23 % p/v, DMF)

Producto intermedio 7b (1,54 g, rendimiento del 26 %); O.R.: ND

Se añadió nBuLi (2,78 ml, 2,5 M, 6,95 mmol) a -78 °C a una suspensión de bromuro de metiltrifenilfosfonio (3,2 g, 8,94 mmol) en THF anhidro (52 ml) en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. A continuación, se añadió gota a gota una solución del Producto intermedio 6 (3,1 g, 4,97 mmol) en THF anhidro (24 ml) a la mezcla de reacción durante 30 minutos mediante una bomba de jeringa. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h, después se diluyó con EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, después se lavó con salmuera y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (heptano/EtOAc 100/0 hasta 0/100), para proporcionar el Producto intermedio 8 (2,52 g, rendimiento: 76 %) como un aceite amarillo pálido.

Producto intermedio 9 - Sa o Ra; un atropoisómero, pero estereoquímica absoluta no determinada, se suspendieron Ad-Mix-alfa (9 g) y metanosulfonamida (580 mg, 6,1 mmol, 1,25 eq.) en agua (57 ml) y se añadió una solución del Producto intermedio 8 (2,52 g, 4,88 mmol) en tBuOH (56 ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 15 h. Se añadió más cantidad de Ad-Mix-alpha (1 g) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h, después se inactivó al añadir una mezcla de Na2S2O3 acuoso al 10 % y NaHCO3 acuoso saturado. La mezcla resultante se agitó durante 5 minutos y después se diluyó con salmuera. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 4). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (DCM/MeOH, 100/0 hasta 90/10), para proporcionar el Producto intermedio 9 (1,92 g, rendimiento: 72 %) como una espuma amarilla pálida.

Para ambos compuestos, estereoisómeros puros pero estereoquímica absoluta no determinada se añadió cloruro de triisopropilsililo (0,92 ml, 4,19 mmol, 1,2 eq.) gota a gota a 0 °C a una solución del Producto intermedio 9 (1,92 g, 3,49 mmol), imidazol (713 mg, 10,5 mmol, 3 eq.) y DMAP (128 mg, 1,05 mmol, 0,3 eq.) en anhidro DCM (22 ml) en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 5 h, después se inactivó al añadir salmuera. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (hept/EtOAc, 100/0 a 0/100), seguida de HPLC preparativa (fase estacionaria: RP XBridge Prep C18 OBD - 10 pm, 30 x 150 mm, fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN) para proporcionar el Producto intermedio 10a (1,03 g, rendimiento: 42 %) y el Producto intermedio 10b (695 mg, rendimiento: 28 %), ambos como aceites incoloros.

Se añadió bromuro de metilmagnesio (3,4 M en MeTHF, 6,52 ml, 22,16 mmol, 3 eq.) gota a gota durante 10 minutos a una solución del Producto intermedio 6 (4,3 g, 7,39 mmol) en THF anhidro (66 ml) en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 h. La reacción se inactivó al añadir NH4Cl acuoso saturado. La mezcla de reacción se diluyó con agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera (x 1). La capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 120 g RediSep, DCM/MeOH 100/0 hasta 90/10), para proporcionar el Producto intermedio 11 (6,75 g, rendimiento: 90 %) como un aceite amarillo pálido.

Una solución de éster metílico del ácido 5-(clorometil)-1-metil-1H-pirazol-3-carboxílico (CAS [2245938-86-5], 24 g, 0,127 mol) y PPh3 (37 g, 1 eq.) en ACN (250 ml) se agitó a reflujo durante 16 h. La suspensión blanca se concentró al vacío y se trituró con EtOAc (100 ml). El sólido resultante se recogió mediante filtración y se secó para proporcionar el Producto intermedio 12 (54,8 g, rendimiento: 96 %) como un sólido blanco.

Se añadió TBDPSCl (14,66 g, 1,5 eq.) a una solución de 7-fluoro-4-hidroxi-2-naftoato de metilo (CAS [2092726-85-5], 8 g, 35,555 mmol) e imidazol (7,26, 3 eq.) en DCM (500 ml), enfriado a 0 °C en una atmósfera de nitrógeno. Una vez completada la adición, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción se inactivó mediante la adición de agua (100 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 200 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró, y se concentró hasta proporcionar un aceite amarillo. Este aceite se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo:EtOAc - 1:0 hasta 1:1), para proporcionar el Producto intermedio 13 (14 g, rendimiento: 86 %) como un aceite amarillo.

Se añadió lentamente LÍAIH<4>(1,39 g, 1,2 eq.) a una solución del Producto intermedio 13 (14 g, 30,528 mmol) en THF (200 ml), se enfrió a 0 °C en una atmósfera de nitrógeno. Una vez que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 2 h. La reacción se inactivó mediante la adición lenta de agua (2 ml) seguida de una solución acuosa de NaOH al 10 % (2 ml) a 0 °C. La mezcla heterogénea se filtró, y la torta del filtro se lavó con DCM (200 ml). El filtrado se evaporó, y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo:EtOAc - 1:0 hasta 1:1), para proporcionar el Producto intermedio 14 (12 g, rendimiento: 90 %) como un sólido amarillo.

Se añadió MnO<2>(29,074 g, 12 eq.) a una solución del Producto intermedio 14 (12 g, 27,869 mmol) en DCM (200 ml) a temperatura ambiente. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla de reacción se filtró, y el filtrado se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo/EtOAc, 100/0 hasta 50/50), para proporcionar el Producto intermedio 15 (12 g, rendimiento: 99 %) como un aceite amarillo.

Se añadió NaH (60 % en aceite mineral, 1,448 g, 1,3 equivalentes) a una suspensión del Producto intermedio 12 (13,812 g, 1,1 equivalentes) en THF (200 ml) a 0 °C. La solución resultante se agitó a esta temperatura durante 1 h antes de enfriarla hasta - 30 °C. El Producto intermedio 15 (12 g, 27,847 mmol) se añadió lentamente a la solución mientras se mantenía la temperatura entre -20 °C y -30 °C. Una vez que se completó la adición, la reacción se agitó a -30 °C durante 2 h. La reacción se inactivó mediante la adición lenta de agua (100 ml). La mezcla se extrajo con DCM (3 x 300 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (éter de petróleo/EtOAc 1:0 hasta 1:1), para proporcionar el Producto intermedio 16 (13 g, rendimiento: 82 %) como un sólido blanco.

Una solución del Producto intermedio 16 (13 g, 23,02 mmol) en MeOH (75 ml) y THF (75 ml) se hidrogenó a 25 °C (15 psi de H<2>) en presencia de Pd/C (2 g); 10 %). La mezcla de reacción se agitó durante 16 h. Tras la absorción de H<2>(1 eq.), el catalizador se retiró por filtración y el filtrado se evaporó para proporcionar el Producto intermedio 17 (13 g, rendimiento: 100 %) como un aceite incoloro.

Se añadió de forma fraccionada LiAlH4 (1,045 g, 1,2 eq.) a una solución del Producto intermedio 17 (13 g, 22,94 mmol) en THF (200 ml) a 0 °C, en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 2 h. A continuación, se añadió agua (1 ml) gota a gota, seguida de una solución acuosa de NaOH al 10 % (1 ml), a 0 °C. La mezcla de reacción se filtró, y la torta del filtro se lavó con DCM (200 ml) y el filtrado se evaporó. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (eluyente:: éter de petróleo/EtOAc 100/0 hasta 0/100), para proporcionar el Producto intermedio 18 (10,4 g, rendimiento: 84 %) como un sólido blanco.

Se añadieron DIPEA (7 ml, 0,75 g/ml, 40,62 mmol), seguida de MsCI (2,5 ml, 1,48 g/ml, 32,3 mmol) a 0 °C a una solución del Producto intermedio 18 (10 g, 18,5 mmol) en THF (200 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h. Se añadió NaI (10 g, 66,7 mmol) a la mezcla de reacción, que después se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con agua. La capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc (* 1), la capa orgánica combinada se lavó con salmuera (x 1), se secó sobre MgSO4, y se concentró a presión reducida. El residuo resultante, (11,55 g, rendimiento: 96 %) se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice, utilizando como eluyente un gradiente de nheptano/EtOAc, 100/0 hasta 80/20, para proporcionar el Producto intermedio 19 (9,5 g, rendimiento: 79 %).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió una solución del Producto intermedio 7a (220 mg, 0,4 mmol) y del Producto intermedio 19 (483 mg, 0,75 mmol, 1,85 eq.) en THF (3 ml) a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno a una suspensión previamente desgasificada con nitrógeno de NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 32 mg, 0,81 mmol, 2 eq.) en THF (0,5 ml). La mezcla de reacción se agitó temperatura ambiente durante 1,5 h, después se enfrió hasta 0 °C y la reacción se inactivó al añadir NH4Cl acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (*3). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (DCM/MeOH 100/0 hasta 95/5), para proporcionar el Producto intermedio 20 (290 mg, rendimiento: 67 %).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 21 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 20, a partir del Producto intermedio 7b en lugar del Producto intermedio 7a.

Se añadió TBAF (0,68 ml, 1 M en THF, 0,68 mmol, 2,5 eq.) a una solución del Producto intermedio 20 (290 mg, 0,27 mmol) en THF (2 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó después a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se trató con NH4Cl acuoso saturado (5 ml), se agitó durante 15 min y después se extrajo con EtOAc (3 x). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (DCM/MeOH 100/0 hasta 95/5), para proporcionar el Producto intermedio 22 (190 mg, rendimiento: 98 %) como un sólido blanco esponjoso, que contiene un 3 % de diastereómero (Producto intermedio 23), como se observa mediante el análisis SFC.

El Producto intermedio 23 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 22, a partir del Producto intermedio 21 en lugar del Producto intermedio 20.

Se añadió una solución completamente desgasificada con nitrógeno del Producto intermedio 22 (100 mg, 0,14 mmol) y azodicarboxilato de di-terc-butilo (129 mg, 0,56 mmol, 4 eq.) en THF (0,8 ml) y tolueno (5 ml) mediante una bomba de jeringa (0,1 ml/min) a una solución de trifenilfosfina completamente desgasificada con nitrógeno (148 mg, 0,56 mmol, 4 eq.) en tolueno (5 ml) agitando a 70 °C en una atmósfera de nitrógeno. Una vez que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos a 70 °C, después se enfrió a temperatura ambiente y los disolventes se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (heptano/EtOAc, 0/100 hasta 100/0, después DCM/MeOH 100/0 a 95/5), para proporcionar el Producto intermedio 24 (64 mg, rendimiento: 66 %) como un sólido blanquecino.

El Producto intermedio 25 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 24, a partir del Producto intermedio 23 en lugar del Producto intermedio 22.

Se añadió gota a gota el dímero de 9-borabiciclo[3.3.1]nonano (9-BBN) (0,43 ml, 0,5 M en THF, 0,215 mmol, 5 eq.) a 0 °C a una solución del Producto intermedio 24 (30 mg, 0,043 mmol) en THF (1,5 ml). La mezcla de reacción se agitó a 40 °C durante 2 h, después se enfrió a 0 °C y se trató con agua (0,75 ml) y perborato de sodio tetrahidratado (0,034 g, 0,215 mmol, 5 eq.). La mezcla resultante se agitó a 35 °C durante la noche. Se añadió otra porción de perborato de sodio tetrahidratado (0,034 g, 0,215 mmol, 5 eq.) y la mezcla de reacción se agitó durante otras 5 h a 35 °C. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se filtró. El filtrado bifásico se separó y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (DCM/MeOH 100/0 hasta 95/5), para proporcionar el Producto intermedio 26 (15 mg, rendimiento: 49 %).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 27 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 26, a partir del Producto intermedio 25 en lugar del Producto intermedio 24.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 1 mg, 0,027 mmol, 1,3 eq.) a una solución previamente desgasificada con nitrógeno del Producto intermedio 26 (15 mg, 0,021 mmol) y Mel (2 pl, 0,032 mmol, 1,5 eq.) en THF (0,5 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 h, después se enfrió a 0 °C, se inactivó con NH4Cl acuoso saturado (2 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se evaporaron a presión reducida, para proporcionar el Producto intermedio 28 en bruto (17 mg, rendimiento cuantitativo), utilizado sin purificación adicional.

El Producto intermedio 29 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 28, a partir del Producto intermedio 27 en lugar del Producto intermedio 26. El Producto intermedio 28 en bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/MeOH, 100/0 a 97/3), para proporcionar el Producto intermedio 29 como una espuma blanca.

Mezcla de Producto intermedio 30 y Producto intermedio 27

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 3 mg, 0,08 mmol, 1,3 eq.) a una solución previamente desgasificada del Producto intermedio 27 (44 mg, 0,062 mmol) y éter metílico de 2-bromoetilo (9 pl, 0,092 mmol, 1,5 eq.) en THF (0,5 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, después se añadió más éter 2-bromoetilmetílico (150 ml, 1,6 mmol, 26 eq.) a la mezcla de reacción, que después se agitó a 50 °C durante 2 días. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y la reacción se inactivó al añadir NH4Cl acuoso saturado (2 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se evaporaron para proporcionar una mezcla del Producto intermedio 30 y el Producto intermedio 27 (30 mg de la mezcla), utilizada como tal en el siguiente paso.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió cloruro de metanosulfonilo (0,051 ml, 0,66 mmol, 20 eq.) gota a gota a una solución del Producto intermedio 27 (25 mg, 0,033 mmol) y trietilamina (114 pl, 0,82 mmol, 25 eq.) en THF (1 ml), a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La morfolina (86 pl, 0,99 mmol, 30 eq.) se puso después en la mezcla de reacción a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a 45 °C durante 12 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se trató con NaHCO<3>acuoso saturado y se extrajo con EtOAc (3x). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (DCM/MeOH 100/0 hasta 95/5, después DCM/NH<3>(7M en MeOH) 97/3 a 95/5) para proporcionar el Producto intermedio 31 (15 mg, rendimiento: 58 %).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 32 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 31, a partir de N-metilpiperazina en lugar de morfolina.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 33 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 28, a partir del Producto intermedio 27 en lugar del Producto intermedio 26 y yodoetano en lugar de yodometano.

Producto intermedio 34, Producto intermedio 34a, Producto intermedio 34b

El Producto intermedio 34a y el Producto intermedio 34b son estereoisómeros puros, pero estereoquímica absoluta no determinada.

Se añadió bromuro de alilmagnesio (1 M en Et<2>O, 4 ml, 4 mmol, 1,25 eq.) gota a gota a una solución del Producto intermedio 6 (1,65 g, 3,2 mmol) en THF anhidro (25 ml) a -78 °C. La solución se agitó a esta temperatura durante 1 h, después se añadió otra porción de bromuro de alilmagnesio (1 M en Et<2>O, 1 ml, 1 mmol, 0,3 eq.) a -78 °C, y la mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 1 h. La mezcla de reacción se dejó entonces alcanzar la temperatura ambiente y se añadió NH4Cl acuoso saturado (4 ml). La mezcla se diluyó con EtOAc (15 ml) y agua (5 ml). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x). La capa orgánica combinada se lavó con agua, salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (heptano/EtOAc 100/0 hasta 75/25 hasta 65/35), para dar el Producto intermedio 34b (539 mg, rendimiento: 30 %), Producto intermedio 34 (579 mg, 32 %) y Producto intermedio 34a (170 mg, rendimiento: 9 %).

Se añadió una solución del Producto intermedio 34 (539 mg, 0,96 mmol) y el Producto intermedio 19 (1,073 g, 1,654 mmol, 1,6 eq.) en THF (10 ml) a una suspensión previamente desgasificada de NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 62 mg, 1,55 mmol) en THF (0,5 ml) a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h, después se enfrió hasta 0 °C y la reacción se inactivó al añadir NH4Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (DCM/MeOH, 100/0 hasta 95/5), para proporcionar el Producto intermedio 35 (104 mg, rendimiento: 12 %).

Se añadió TBAF (1 M en THF, 0,68 ml, 0,68 mmol, 2,5 eq.) a una solución del Producto intermedio 35 (290 mg, 0,27 mmol) en THF (2 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se trató con NH4Cl acuoso saturado (5 ml), se agitó durante 15 min y después se extrajo con EtOAc (3 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (DCM/MeOH, 100/0 hasta 95/5), para proporcionar el Producto intermedio 36 (190 mg, rendimiento: 97 %).

Se añadió una solución desgasificada con nitrógeno del Producto intermedio 36 (100 mg, 0,14 mmol) y azodicarboxilato de di-terc-butilo (129 mg, 0,56 mmol, 4 eq.) en THF (1 ml) y tolueno (5 ml) mediante una bomba de jeringa (0,1 ml/min) a una solución de trifenilfosfina (148 mg, 0,56 mmol) en tolueno (5 ml), previamente desgasificado con nitrógeno, a 70 °C en una atmósfera de nitrógeno. Una vez que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos a 70 °C, después se enfrió a temperatura ambiente, y los disolventes se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (heptano/gradiente de EtOAc, 0/100 hasta 100/0, después DCM/MeOH 100/0 a 95/5), para proporcionar el Producto intermedio 37 (311 mg, rendimiento: 66 %).

Producto intermedio 38 y Producto intermedio 39

Ambos compuestos son estereoisómeros puros, pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió dímero de 9-borabiciclo [3.3.1] nonano (0,5 M en THF, 4,38 ml, 2,19 mmol, 5 eq.) a una solución del Producto intermedio 37 (311 mg, 0,44 mmol) en THF (4 ml) a 0 °C y la mezcla se agitó a 40 °C durante 2 h. T ras enfriar a 0 °C, una mezcla de perborato de sodio tetrahidratado (1,01 g, 9,57) se añadió (mmol, 15 eq.) en agua (9 ml) y la mezcla se agitó a 27 °C durante 2 días. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se filtró. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (DCM/MeOH, 100/0 hasta 95/5), seguida de SFC preparativa (fase estacionaria: Chiralpak Daicel ID 20 x 250 mm, fase móvil: CO<2>, iPrOH iPrNH<2>al 0,4 %), para dar el Producto intermedio 38 (62 mg, 19 %) y el Producto intermedio 39 (148 mg, 46 %).

Alternativamente, el Producto intermedio 38 y el Producto intermedio 39 se pueden preparar por separado siguiendo la misma secuencia, a partir del Producto intermedio 34b y el Producto intermedio 34a puros, respectivamente.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 1,6 mg, 0,041 mmol, 1,2 eq.) a una solución del Producto intermedio 39 (25 mg, 0,034 mmol) y Mel (3 pl, 0,051 mmol, 1,5 eq.) en THF (1 ml), a temperatura ambiente. Después de 1 h, se añadió Mel adicional (50 pl, 0,8 mmol, 23,5 eq.) y la mezcla de reacción se agitó a 45 °C durante la noche. La reacción se inactivó al añadir NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (DCM/MeOH, 100/0 hasta 95/5), para proporcionar el Producto intermedio 40 (9 mg, rendimiento: 35 %).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió gota a gota una solución del Producto intermedio 19 (1002 mg, 1,44 mmol, 1,2 eq.) y del Producto intermedio 10b (863 mg, 1,2 mmol) en THF anhidro (12 ml) durante 5 min a una suspensión de NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 72 mg, 1,8 mmol, 1,5 eq.) en THF anhidro (12 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 5 min y después a temperatura ambiente durante 1 h. La reacción se inactivó con una gota de MeOH seguida de una gota de NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se diluyó con EtOAc, y se añadió salmuera. Las capas se separaron, la capa orgánica se lavó con salmuera y las capas acuosas combinadas se extrajeron con EtOAc (x 3). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 40 g RediSep, EtOAc/heptano, 100/0 hasta 0/100), para proporcionar el Producto intermedio 41 (744 mg, rendimiento: 51 %) como una espuma blanca.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 42 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 41, a partir del Producto intermedio 10a en lugar del Producto intermedio 10b.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió K<2>CO<3>(335 mg, 2,42 mmol, 4 eq.) a una solución del Producto intermedio 41 (744 mg, 0,61 mmol) en MeOH (12 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se añadió NH<4>Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 3), los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO<4>, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar el Producto intermedio 43 (666 mg, rendimiento: 100 %) como un aceite espeso incoloro.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 44 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 43, a partir del Producto intermedio 42 en lugar del Producto intermedio 41.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió p-toluenosulfonato de piridinio (305 mg, 1,21 mmol, 2 eq.) a una solución del Producto intermedio 43 (666 mg, 0,61 mmol) en MeOH (13 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 5 h. La reacción se inactivó mediante adición NaHCO3 saturado acuoso, la mezcla se diluyó con DCM. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 40 g RediSep, DCM/MeOH 100/0 hasta 90/10), para dar el Producto intermedio 45 (459 mg, rendimiento: 62 %) como una espuma blanca.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 46 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 45, a partir del Producto intermedio 44 en lugar del Producto intermedio 43.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió una solución desgasificada con nitrógeno del Producto intermedio 45 (459 mg, 0.38 mmol) y azodicarboxilato de di-terc-butilo (348 mg, 1,51 mmol, 4 eq.) en tolueno (12 ml) y THF (2 ml), con una bomba de jeringa (0,1 ml/min), a una solución de trifenilfospina (397 mg, 1,51 mmol, 4 eq.) en tolueno (12 ml), a 70 °C bajo atmósfera de nitrógeno. Una vez que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó a 70 °C durante 15 min, después se enfrió a temperatura ambiente y el disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (SiO<2>, 40 g RediSep, heptano/EtOAc, 100/0 a 100/0) para dar el Producto intermedio 47 (1,03 g, contaminado con óxido de trifenilfosfina) como un sólido amarillo pálido, utilizado sin purificación adicional.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 48 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 47, a partir del Producto intermedio 46 en lugar del Producto intermedio 45.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió TBAF (solución de 1 M en THF, 1,14 ml, 1,14 mmol, 2,5 eq.) a una solución del Producto intermedio 47 (1,03 g, 0,46 mmol) en THF anhidro (9 ml) a 0 °C bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La reacción se inactivó con NH4Cl acuoso saturado y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera y las capas acuosas combinadas se extrajeron con EtOAc (x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO2, 40 g RediSep, heptano/EtOAc, 100/0 hasta 0/100 después DCM/MeOH 96/4 hasta 90/10), para proporcionar el Producto intermedio 49 (299 mg, rendimiento: 77 %) como una espuma naranja pálida.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 50 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 49, a partir del Producto intermedio 48 en lugar del Producto intermedio 47.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió gota a gota una solución del Producto intermedio 49 (80 mg, 0,11 mmol) en THF anhidro (1 ml) a una suspensión de NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 7 mg, 0,17 mmol, 1,5 eq.) en THF anhidro (1 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno. Una vez que se completó la adición, se añadió Mel (12 pl, 0,19 mmol, 1,7 eq.). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 5 min y después a temperatura ambiente durante 1 h. La reacción se inactivó con una gota de MeOH seguida de una gota de NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se diluyó con EtOAc, y se añadió salmuera. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera. La capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (x 5). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 40 g RediSep, DCM/MeOH, 100/0 hasta 90/10), para proporcionar el Producto intermedio 51 (73 mg, rendimiento: 82 %) como un sólido amarillo pálido.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Producto intermedio 52 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Producto intermedio 51, a partir del Producto intermedio 50 en lugar del Producto intermedio 49.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadieron gota a gota (13 pl, 0,094 mmol, 2 eq.) seguido de MsCl (5 pl, 0,07 mmol, 1,4 eq.) a una solución del Producto intermedio 49 (40 mg, 0,047 mmol) en DCM anhidro (0,5 ml) a 0 °C, en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se agitó a 0 °C durante 5 min y después a temperatura ambiente durante 1 h. Tras volver a enfriar a 0 °C, se añadieron más (13 pl, 0,094 mmol, 2 eq.) y MsCl (5 pl, 0,07 mmol, 1,4 eq.). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. A continuación, se añadió morfolina (0,12 ml, 1,41 mmol, 30 eq.) a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó a 60 °C durante 4 h. Se añadió más morfolina (0,12 ml, 1,41 mmol, 30 eq.) y la mezcla de reacción se agitó a 65 °C durante 24 h. Para completar la reacción, se añadió más morfolina (82 pl, 0,94 mmol, 20 eq.) se añadió y la reacción se agitó a 60 °C durante 17 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y agua, y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera y la capa acuosa combinada se extrajo con DCM (x3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 12 g RediSep, DCM/MeOH, 100/0 hasta 90/10), para proporcionar el Producto intermedio 53 (30 mg, rendimiento: 79 %) como un sólido amarillo pálido.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió gota a gota una solución del Producto intermedio 49 (70 mg, 0,1 mmol) en THF anhidro (1 ml) a una suspensión de NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 6 mg, 0,15 mmol, 1,5 eq.) en THF anhidro (1 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno. Se añadió éter 2-bromoetílico (3 x 16 pl, 3 x 0,17 mmol, 3 x 1,7 eq.) en tres porciones y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. Para completar la reacción, se añadió NaH adicional (dispersión al 60 % en aceite mineral, 4 mg, 0,1 mmol, 1 eq.), seguido de éter 2-bromoetilmetílico (16 pl, 0,17 mmol, 1,7 eq.).) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La reacción se inactivó con una gota de MeOH seguida de una gota de NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se diluyó con EtOAc, y se añadió salmuera. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera. La capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (x 5). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 12 g RediSep, DCM/MeOH, 100/0 hasta 90/10), para proporcionar el Producto intermedio 54 (40 mg, rendimiento: 50 %) como un sólido amarillo pálido.

Se añadió gota a gota una solución del Producto intermedio 19 (580 mg, 0,83 mmol, 1,2 eq.) y del Producto intermedio 11 (500 mg, 0,69 mmol) en THF anhidro (7 ml) durante 5 min a una suspensión de NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 42 mg, 1,04 mmol, 1,5 eq.) en THF anhidro (7 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 5 min y después a temperatura ambiente durante 3 h. Para completar la reacción, se añadieron más NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 14 mg, 0,35 mmol, 0,5 eq.) y el Producto intermedio 19 (338 mg, 0,48 mmol, 0,7 eq.) a la mezcla en una atmósfera de nitrógeno, y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La reacción se inactivó con una gota de MeOH seguido de una gota de NH4Cl acuoso saturado. La mezcla se diluyó con EtOAc, y se añadió salmuera. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera. La capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo en bruto se disolvió en THF anhidro (8 ml) y la solución se enfrió a 0 °C en una atmósfera de nitrógeno. Se añadió TBAF (solución 1 M en THF, 2,77 ml, 1 M, 2,77 mmol, 4 eq.) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3,5 h. La reacción se inactivó con NH<4>Cl acuoso saturado y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera y la capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSÜ<4>, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 40 g RediSep, DCM/MeOH, 100/0 hasta 90/10), para proporcionar el Producto intermedio 55 (282 mg, rendimiento: 40 %) como un aceite amarillo pálido.

Producto intermedio 56 y Producto intermedio 57

Se añadió una solución desgasificada con nitrógeno del Producto intermedio 55 (282 mg, 0.4 mmol) y azodicarboxilato de di-terc-butilo (370 mg, 1,61 mmol, 4 eq.) en tolueno (12 ml) y THF (2 ml), con una bomba de jeringa (0,1 ml/min), a una solución desgasificada con nitrógeno de trifenilfospina (421 mg, 1,61 mmol, 4 eq.) en tolueno (12 ml), agitando a 70 °C bajo atmósfera de nitrógeno. Una vez que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó a 70 °C durante 15 min, después se enfrió a temperatura ambiente y los disolventes se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (SiO<2>, 40 g RediSep, nHept/EtOAc, 100/0 a 100/0, después DCM/MeOH 98/2 a 90/10) seguido de HPLC preparativa (fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18 OBD-5 |jm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, MeOH) para dar Producto intermedio 56 (51 mg, rendimiento: 17 %) y el Producto intermedio 57 (22 mg, rendimiento: 8 %).

Se añadió peryodinano de Dess-Martin (CAS [87413-09-0], 57 g, 0,13 mmol, 1,2 eq.) a una solución del Producto intermedio 27 (80 mg, 0,11 mmol) en DCM (2 ml) a temperatura ambiente. Después de 2 h, se añadió más peryodinano de Dess-Martin (57,01 mg, 0,13 mmol, 1,2 eq.) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente hasta que se completó la reacción. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 ml), se trató con una mezcla 1:1 de NaHCO3 acuoso saturado y Na2S2O3 acuoso al 10 % (10 ml) y se agitó hasta que la capa bifásica se volvió transparente. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo de nuevo con DCM (x 2). La capa orgánica combinada se lavó con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 10 ml), agua (10 ml) y salmuera (10 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y el disolvente se evaporó para proporcionar el Producto intermedio 58 (72 mg, rendimiento: 90 %), utilizado sin purificación adicional.

Ambos son estereoisómeros puros, pero estereoquímica absoluta no determinada.

Se añadió bromuro de metilmagnesio (0,14 ml, solución 3,4 M en 2-MeTHF, 0,47 mmol, 4,7 eq.) a una solución del Producto intermedio 58 (72 mg, 0,1 mmol) en THF (1 ml) a -78 °C. Después de 2 h, se añadió bromuro de metilmagnesio (0,089 ml, 3,4 M en 2-MeTHF, 0,3 mmol, 3 eq.) a -78 °C y la mezcla resultante se agitó durante otras 3 h a -78 °C. La reacción se inactivó al añadir NH<4>Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc (x2). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante SFC preparatoria (fase estacionaria: Chiralpak Daicel ID 20 x 250 mm, fase móvil: CO<2>, iPrOH iPrNH<2>al 0,4 %), para proporcionar el Producto intermedio 59 (7 mg, rendimiento: 9 %) y el Producto intermedio 60 (36 mg, rendimiento: 48 %)

Una mezcla del Producto intermedio 2 (37,4 g, 123,6 mmol), (3-bromopropoxi)-terc-butildimetilsilano (37,567 g, 1,2 eq.) y K<2>CO<3>(51,25 g, 3 eq.) en ACN (300 ml) se agitó a 80 °C durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. La tarta del filtro se lavó con EtOAc (100 ml). El filtrado se concentró y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc desde 100/0 hasta 10/90), para proporcionar el Producto intermedio 61 (42 g, rendimiento: 71 %) como una goma roja.

Se añadió cianometributilfosforano (CAS [157141-27-0], 45,02 ml, 1 eq.) gota a gota a una solución de ácido 1H-pirazol-3-carboxílico, 4-bromo-5-metil-, éster etílico (CAS [6076-14-8], 20 g, 85,81 mmol) y 2- (2-metoxietoxi) etanol (CAS [111-77-3], 14,15 ml, 1,4 eq.) en THF (1,9 L) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se inactivó con agua (100 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (heptano: EtOAc, 100/0 hasta 50/50), para dar el Producto intermedio 62 (24 g, rendimiento: 83 %).

Se añadió borohidruro de sodio (4,26 g, 5 eq.) a una solución del Producto intermedio 62 (7,45 g, 22,23 mmol) en una mezcla de THF (130 ml) y MeOH (34 ml) a 0 °C. Después de 5 min, se dejó que la mezcla resultante alcanzara la temperatura ambiente y se agitó durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó mediante la adición muy lenta de acetona (80 ml) y agua (80 ml), seguida de EtOAc (100 ml). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml) seguido de una mezcla 1:1 de EtOAc/THF (2 x 50 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó, para proporcionar el Producto intermedio 63 (7,24 g, cuantitativo) como un aceite color tostado, utilizado sin purificación adicional.

Se añadió TBDMSCl (617 mg, 1,2 eq.) de forma fraccionada a 0 °C a una solución agitada y previamente desgasificada (nitrógeno) del Producto intermedio 63 (1 g, 3,41 mmol) e imidazol (325 mg, 1,4 eq.) en DCM seco (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 2 h. Para completar la reacción, se añadió más TBDMSCI (150 mg, 0,3 eq.) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante otras 1,5 h. Se añadió NH4Cl acuoso saturado y las capas se separaron. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El aceite color tostado resultante se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (EtOAc/heptano 0/100 hasta 30/70), para dar el Producto intermedio 64 (1,09 g, rendimiento: 78 %) como un aceite transparente de color tostado claro.

Una solución del Producto intermedio 64 (1,06 g, 2,60 mmol) en THF seco (11 ml) se enfrió a -78 °C en una atmósfera de nitrógeno. n-BuLi (2,5 M en hexanos; 1,3 ml, 1,25 eq.) se añadió gota a gota. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 1 h. Se añadió gota a gota 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (CAS [61676-62-8], 0,64 ml, 1,2 eq.). Después de la adición, la mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente, y se agitó durante 1 h. La reacción se inactivó mediante la adición lenta de EtOAc (25 ml), seguido de NH4Cl acuoso saturado (20 ml). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (EtOAc/heptano 0/100 hasta 50/50), para proporcionar el Producto intermedio 65 (934 mg, rendimiento: 79 %) como un aceite amarillo claro.

Se añadió TBAF (1,0 M en THF, 1,2 eq.) a una solución agitada del Producto intermedio 65 (930 mg, 2,05 mmol) en Me-THF anhidro (12 ml) en atmósfera de nitrógeno a 0 °C. El baño de hielo se retiró y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se añadió NH4Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (MeOH en DCM 0/100 hasta 5/95), para proporcionar el Producto intermedio 66 (580 mg, rendimiento: 83 %) como un aceite amarillo claro.

Producto intermedio 67yProducto intermedio 68

Producto intermedio 67 Producto intermedio 68

Ambos productos intermedios: un atropisómero pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió Pd(Amphos)<2>Cl<2>(CAS [887919-35-9], 51 mg, 0,05 eq.) a una mezcla agitada y previamente desgasificada con nitrógeno del Producto intermedio 61 (706 mg, 1,44 mmol), el Producto intermedio 66 (580 mg, 1,2 eq.) y K<2>CO<3>(400 mg, 2 eq.) en agua (2 ml) y 1,4-dioxano (8 ml) en un tubo de microondas a temperatura ambiente y bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se desgasificó haciendo burbujear nitrógeno a través de ella. El vial se selló y la mezcla de reacción se agitó a 65 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y agua y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (sílice; EtOAc en n-heptano (0/100 a 100/0), seguido de SFC preparativo (fase estacionaria: Chiralpak Diacel AD 20 x 250 mm, fase móvil: CO<2>, EtOH iPrNH<2>al 0,4), para proporcionar el Producto intermedio 67 (7,32 g, rendimiento: 27 %) y el Producto intermedio 68 (7,74 g, rendimiento: 29 %) como aceites amarillos.

Se añadió PPh3 (19,53 g, 1,2 eq.) a una solución de 3-bromo-5-(clorometil)-1-metil-1H-pirazol (CAS [2109428-60-4], 13 g, 62 mmol) en ACN (150 ml) y la mezcla de reacción se agitó a 85 °C durante 16 h. El disolvente se evaporó. El residuo se añadió a éter de petróleo (100 ml) y esta mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El sólido se filtró y se secó al vacío para dar el Producto intermedio 69 (25 g, rendimiento: 84 %) como un sólido blanco.

Se añadió NaH (60%en aceite mineral, 975 mg, 1,3 eq.) a una solución del Producto intermedio 69 (9 g, 18,76 mmol) en THF (100 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 h. A continuación, se añadió el Producto intermedio 15 (9,79 g, 1,1 eq.) a -30 °C y la mezcla de reacción se agitó a -30 °C durante 2 h. La reacción se inactivó mediante la adición de NH4Cl acuoso (50 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (100 ml * 3). Se secó la capa orgánica combinada con Na2SO4, y el disolvente se evaporó para dar el producto en bruto como un aceite amarillo. Este aceite se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc 100/0 hasta 85/15), para proporcionar el Producto intermedio 70 (9 g, rendimiento: 81 %) como un sólido blanco.

Se añadió PtO<2>(1,04 g, 0,3 eq.) a una solución del Producto intermedio 70 (9 g, 15,25 mmol) en EtOAc (100 ml), bajo una atmósfera de hidrógeno. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. La mezcla de reacción se filtró, y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc 100/0 hasta 85/15), para proporcionar el Producto intermedio 71 (7,4 g, rendimiento: 83 %) como un sólido blanco.

Se añadió DIPEA (1,115 ml, 6,835 mmol, 3 eq.) a una solución del Producto intermedio 14 (1 g, 2,278 mmol) y anhídrido metanosulfónico (0,794 g, 4,556 mmol, 2 eq.) en THF (200 ml), a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0 °C, y se añadió LiCl (0,386 g, 9,113 mmol, 4 eq.). Se continuó el agitado a temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se inactivó mediante adición agua (20 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAc (20 ml * 3). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc = 100/0 hasta 5/1), para proporcionar el Producto intermedio 72 (450 mg, rendimiento: 44 %) como un sólido blanco y su mesilato correspondiente (450 mg, rendimiento: 39 %) como un sólido blanco.

Se añadió PPh3 (680 mg, 2,592 mmol, 1,2 eq.) a una solución del Producto intermedio 72 (970 mg, 2,16 mmol) en ACN (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a 85 °C durante 16 h. El disolvente se evaporó y el residuo se trituró en éter de petróleo (20 ml) a temperatura ambiente. El sólido se filtró y se secó en vacío para dar Producto intermedio 73 (1,1 g, rendimiento: 70 %) como un sólido blanco.

Se añadió K<2>CO<3>(22,03 g, 159 mmol, 3 eq.) a temperatura ambiente a una mezcla de 3,5-dibromo-1H-pirazol (CAS [67460-86-0], 12 g, 53,13 mmol) en DMF (200 ml). La mezcla de reacción se agitó a 60 °C y se añadió 2-(2-bromoetoxi)tetrahidro-2H-pirano (CAS # [17739-45-6], 16,66 g, 1,5 eq.). La mezcla de reacción se agitó a 100 °C durante 4 h. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se lavó con salmuera (200 ml x 3). La capa orgánica se secó con Na<2>SO<4>, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc de 100/0 hasta 90/10), para proporcionar el Producto intermedio 74 (16 g, rendimiento: 85 %) como un aceite incoloro.

Se añadió BuLi (2,5 M en THF, 25,4 ml, 63,55 mmol, 1,5 eq.) gota a gota a una solución del Producto intermedio 74 (15 g, 42,37 mmol) en THF anhidro (150 ml) a -78 °C. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 1 h antes de la adición de DMF (9,29 g, 127,10 mmol, 3 eq.). Después, la mezcla de reacción se agitó durante 1 h adicional a -78 °C. La reacción se inactivó mediante la adición de NH4Cl acuoso (100 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAc (200 ml x 3). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc = 100/0 hasta 80/20), para proporcionar el Producto intermedio 75 (6 g, rendimiento: 47 %) como un aceite claro.

Se añadió NaH (60%en aceite mineral, 887 mg, 22,17 mmol, 1,2 eq.) a una solución del Producto intermedio 73 (15,04 g, 20,32 mmol, 1,1 eq.) en THF (150 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 h. A continuación, se añadió el Producto intermedio 75 (5,6 g, 18,47 mmol) a -30 °C y la mezcla de reacción se agitó a -30 °C durante 2 h. La reacción se inactivó mediante la adición de NH4Cl acuoso (50 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAc (100 ml x 3). La capa orgánica combinada se separó, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc = 100/0 hasta 80/20), para proporcionar el Producto intermedio 76 (12 g, rendimiento: 93 %) como un sólido blanco.

Se añadió NaHCO3 (2,345 g, 28,58 mmol, 2 eq.) a una solución del Producto intermedio 76 (10 g, 14,29 mmol) y ptoluenosulfonil hidrazida (9,315 g, 50,01 mmol, 3,5 eq.) en una mezcla de THF y agua (4/1, 70 ml). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 7 h. El disolvente se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/EtOAc = 100/0 hasta 80/20), para proporcionar el Producto intermedio 77 (6,905 g, rendimiento: 69 %) como un sólido blanco.

Se añadió PTSA (68 mg, 0,356 mmol, 0,25 eq.) a una suspensión del Producto intermedio 77 (1 g, 1,425 mmol) en MeOH (20 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. El disolvente se evaporó y el residuo se disolvió en DCM (50 ml), y esta solución se lavó con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 10 ml). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró, y se evaporó, para dar el Producto intermedio 78 (cuantitativo asumido), que se utilizó directamente en el paso siguiente.

Atropisómero puro, pero

Se añadió peryodinano de Dess-Martin (1,34 g, 3,15 mmol, 1,05 eq.) en una parte a una solución del Producto intermedio 67 (1,82 g, 3 mmol) en DCM (75 ml). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla se trató después con NaHCO3 acuoso saturado y Na2S2O3 acuoso al 10 % hasta que se obtuvieron dos capas homogéneas. Las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó, para proporcionar el Producto intermedio 79 (1,81 g, rendimiento: 100 %) como un aceite, utilizado sin purificación adicional.

Se añadió bromuro de metilmagnesio (100 pl, 3,4 M en Me-THF, 0,34 mmol, 2 eq.) gota a gota a una solución del Producto intermedio 79 (100 mg, 0,16 mmol) en THF (5 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La reacción se inactivó mediante adición EtOAc y NH4Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se evaporó, para proporcionar el Producto intermedio 80 (1,88 g, rendimiento: 98 %) como un aceite.

El Producto intermedio 19 (1,06 g, 1,64 mmol, 1,7 eq.) y el terc-butóxido de potasio (1,38 ml, 1 M en THF, 1,31 mmol, 1,4 eq.) se añadieron a una solución del Producto intermedio 80 (0,60 g, 0,96 mmol) en THF (5 ml). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 3 h. La solución se trató con EtOAc y NH4Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (columna ultrarrápida de 40 g Redisep, eluyendo con MeOH al 0-5 % en DCM) para proporcionar un aceite (1,2 g). Este aceite se disolvió en THF (10 ml) y se trató con fluoruro de tetrabutilamonio (2,3 ml, 1 M en THF, 2,3 mmol, 2,4 eq.). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La mezcla se diluyó con EtOAc y NH4Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (40 g Redisep columna ultrarrápida, se eluyó con 0-5 % de MeOH en DCM) para proporcionar el Producto intermedio 81 (0,45 g, rendimiento: 59 %) como un aceite naranja pálido.

Producto intermedio 82 y Producto intermedio 83

Producto intermedio 82 Producto intermedio 83

Estereoisómeros puros pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió gota a gota una solución desgasificada del Producto intermedio 81 (450 mg, 0.57 mmol) y azodicarboxilato de di-terc-butilo (525 mg, 2,28 mmol, 4 eq.) en tolueno (20 ml) y THF (5 ml) mediante una bomba de jeringa (velocidad 0,1 ml/minuto), a una solución desgasificada de trifenilfospina (600 mg, 2,29 mmol, 4 eq.) en tolueno (20 ml), agitando a 70 °C. Una vez que se completó la adición, la solución naranja resultante se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La solución se concentró a presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (40 g, columna ultrarrápida Redisep, eluyendo con MeOH al 0-2 % en DCM) seguida de SFC preparativa (fase estacionaria: Chiralpak Diacel AD 20 x 250 mm, fase móvil: CO<2>, EtOH iPrNH<2>al 0,4 %), para proporcionar el Producto intermedio 82 (impuro) y Producto intermedio 83 (23 mg, rendimiento: 5 %). El Producto intermedio 82 impuro se purificó adicionalmente mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (4 g, columna ultrarrápida Redisep, eluyendo con MeOH al 0-5 % en DCM) para proporcionar el Producto intermedio 82 puro (63 mg, rendimiento: 14 %).

Se añadió NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 251 mg, 6,27 mmol, 1,4 eq.), seguido de yoduro de potasio (132 mg, 0,79 mmol, 0,2 eq.) a una solución de la mezcla racémica del Producto intermedio 7a y el Producto intermedio 7b (2,46 g, 4,5 mmol) en DMF anhidra (117 ml) en una atmósfera de nitrógeno a 0 °C. Después de 10-15 minutos a 0 °C, se añadió gota a gota cloruro de 4-metoxibencilo (0,95 ml, 7,03 mmol, 1,6 eq.). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3,5 h. La reacción se inactivó mediante la adición lenta de MeOH y NH4Cl acuoso saturado, y después se diluyó con EtOAc y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 2). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (Redisep CombiFlash, EtOAc en n-heptano del 0 % al 50 %) para proporcionar el Producto intermedio 84 (3,3 g) como un aceite amarillo, utilizado sin purificación adicional.

Se añadió gota a gota 9-BBN (0,5 M en THF, 28 ml, 14 mmol, 5 eq.) a una solución del Producto intermedio 84 (1,87 g, 2,81 mmol) en THF anhidro (32 ml) en un tubo a presión bajo atmósfera de nitrógeno, a temperatura ambiente. El tubo se cerró herméticamente y la mezcla se agitó a 75 °C durante 45 min. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadieron el Producto intermedio 71 (2,8 g, 4,77 mmol, 1,7 eq.), el fosfato potásico tribásico (1,77 g, 8,36 mmol, 3 eq.) y [1,1 '-bis (di-terc-butilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) (384 mg, 0,59 mmol, 0,2 eq.) en una porción bajo un flujo continuo de nitrógeno. A continuación, se añadió agua (3 ml) lentamente. La mezcla de reacción se desgasificó haciendo burbujear nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 4 h. Tras enfriar, la mezcla se diluyó con EtOAc y agua y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera y la capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se disolvió en THF (45 ml) y se enfrió a 0 °C antes de añadir gota a gota TBAF (14 ml, 1,0 M en THF, 14 mmol, 5 eq.). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h, después se añadió una parte adicional de TBA<f>(7 ml, 1,0 M en THF, 7 mmol, 2,5 eq.) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La reacción se inactivó mediante adición NH4Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (Redisep CombiFlash 120 g, EtOAc en n-heptano del 0 % al 100 %, después MeOH en DCM del 0 al 5 %) para proporcionar una espuma marrón oscuro. La espuma se suspendió en agua y se añadió una gota de ácido acético. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche, después los sólidos se filtraron y estos se volvieron a disolver en DCM. Se añadió NaHCO3 acuoso saturado y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM y la capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. La espuma resultante se trituró y se coevaporó varias veces con n-heptano, para proporcionar el Producto intermedio 85 (920 mg, rendimiento: 31 %) como una espuma marrón.

Se desgasificó una solución de trifenilfosfina (1,02 g, 3,88 mmol, 4 eq.) en tolueno (30 ml) y se rellenó con nitrógeno tres veces. Después se agitó a 70 °C en una atmósfera de nitrógeno. Una segunda solución del Producto intermedio 85 (797 mg, 0,97 mmol) y azodicarboxilato de di-terc-butilo (893 mg, 3,88 mmol, 4 equivalentes) en tolueno (30 ml) y THF (6 ml) se desgasificó y se rellenó con nitrógeno tres veces. Después se añadió a la primera solución mediante una bomba de jeringa (0,1 ml/minuto) mientras se agitaba a 70 °C. Una vez que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó a 70 °C durante 10 minutos, después se enfrió a temperatura ambiente y el disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (SiO<2>), 80 g RediSep, nheptano/EtOAc, 100/0 a 0/100; después DCM/MeOH 100/0 a 95/5), seguido de HPLC preparativa (fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18 OBD-5 pm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN) para proporcionar el Producto intermedio 86 (34 mg, rendimiento: 4 %) y el Producto intermedio 87 (49 mg, rendimiento: 6 %), ambos como aceites incoloros.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 3 mg, 0,082 mmol, 2 eq.) a una solución del Producto intermedio 38 (30 mg, 0,041 mmol) y MeI (25 pl, 0,041 mmol, 10 eq.) en DMF (1,5 ml), a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó a 45 °C durante la noche. La reacción se inactivó al añadir NH4Cl acuoso saturado y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y se evaporaron, para proporcionar el Producto intermedio 88 (15 mg, rendimiento: 49 %), utilizado sin purificación adicional.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió MsCl (22 pl, 0,28 mmol, 6 eq) gota a gota a una solución fría (0 °C) del Producto intermedio 39 (34 mg, 0,047 mmol) y Et<3>N (52 pl, 0,73 g/ml, 0,37 mmol, 8 eq) en THF (2 ml). La mezcla de reacción se agitó después a temperatura ambiente durante 1 h. Tras enfriar a 0 °C, se añadió morfolina (0,12 ml, 1,4 mmol, 30 eq.) y la mezcla de reacción se agitó a 45 °C durante la noche. Tras enfriar, se añadió NaHCO<3>acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (*3). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante HPLC preparatoria (fase estacionaria: columna de fase inversa xBridge Prep C18-OBD-10 pm, 30 x 150 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, MeCN) para proporcionar el Producto intermedio 89 (7 mg, rendimiento: 19 %).

Se añadió una solución de metilamina en THF (0,26 ml, 2 M, 0,52 mmol, 2,5 eq) a temperatura ambiente a una solución del Producto intermedio 58 (150 mg, 0,21 mmol) en MeOH (1,8 ml) y ácido acético (261 pl). Se añadió cianoborohidruro de sodio (66 mg, 1,05 mmol, 5 eq.) después de 30 minutos y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. Los disolventes se evaporaron y el residuo se diluyó con EtOAc y se lavó con NaHCO<3>acuoso saturado. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante HPLC preparatoria (fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18-OBD-10 |jm, 30 x 150 mm; fase móvil: Solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, MeOH), seguida de cromatografía en columna ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/NH<3>(MeOH), 100/0 a 95/5), para proporcionar el Producto intermedio 90 (15 mg, rendimiento: 10 %).

Se añadió 2-(tributilfosforaniliden) acetonitrilo (37,1 ml, 141,592 mmol, 1,5 eq.) gota a gota mediante un embudo de adición a una solución de ácido 1H-pirazol-3-carboxílico, 4-bromo-5-metil-, éster etílico (CAS [6076-14-8], 22 g, 94,39 mmol) y 2-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)etanol (15,7 ml, 113,273 mmol, 1,2 eq.) en THF (100 ml) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporó y el residuo se recogió con EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó dos veces mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (n-heptano/EtOAc,100/0 hasta 20/80), para dar Producto intermedio 91 (17,21 g, rendimiento: 50 %).

Se añadió borohidruro de sodio (21,99 g, 581,34 mmol, 10 eq.) a una solución agitada del Producto intermedio 91 (21 g, 58,13 mmol) en THF (340 ml) y MeOH (75 ml) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla se enfrió a 0 °C, se trató con NH4Cl acuoso saturado y EtOAc, y la mezcla resultante se agitó durante 15 min a temperatura ambiente. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (MeOH/DCM 0/100 hasta 10/90), para proporcionar el Producto intermedio 92 (15,4 g, rendimiento: 83 %) como un aceite transparente que se solidificó hasta un sólido blanco al reposar.

Se añadieron gota a gota Et3N (7,7 ml, 55,451 mmol, 3 eq.) seguido de pinacolborano (CAS [25015-63-8], 5,9 ml, 39,441 mmol, 2 eq.) a una solución desgasificada con nitrógeno del Producto intermedio 92 (5,9 g, 18,484 mmol), bis(acetonitrilo)dicloropaladio (II) (CAS [14592-56-4)], 240 mg, 0,924 mmol, 0,05 eq.) y 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo (CAS [657408-07-6], 1,518 g, 3,697 mmol, 0,2 eq.) en 1,4-dioxano (65 ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó a 80 °C durante 1 h. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con agua (20 ml). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 3). La capa orgánica combinada se lavó con agua, después salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna en gel de sílice (n-heptano/EtOAc,100/0 hasta 50/50), para dar Producto intermedio 93 (4,7 g, rendimiento: 69 %) como un sólido marrón pálido.

mezcla de atropisómeros

Se cargó un tubo de presión de reacción con el Producto intermedio 61 (5 g, 10,17 mmol), K<2>CO<3>(2,81 g, 20,33 mmol, 2 eq.), el Producto intermedio 93 (4,43 g, 12,1 mmol, 1,2 eq.) y bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfina)dicloropaladio (II) (569 mg, 0,8 mmol, 0,08 eq.) y se pone en una atmósfera de nitrógeno. Después se añadió una mezcla de agua (16,5 ml) y 1,4-dioxano (82,5 ml), previamente desgasificada mediante burbujeo de nitrógeno durante 30 minutos. La mezcla resultante se desgasificó haciendo burbujear nitrógeno durante 5 min. La mezcla de reacción se agitó a 65 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 220 g RediSep, heptano/EtOAc, 100/0 hasta 0/100), para dar el Producto intermedio 94 (4,61 g, rendimiento: 71 %) como un aceite amarillo.

mezcla de atropisómeros

Se añadió peryodinano sólido de Dess-Martin (9,16 g, 21,59 mmol, 3 eq.) a una solución agitada y enfriada con hielo del Producto intermedio 94 (4,61 g, 7,2 mmol) en DCM anhidro (92 ml) en una atmósfera de nitrógeno. La suspensión se agitó a 0 °C durante 5 min y después a temperatura ambiente durante 2 h. Se añadió más peryodinano de Dess-Martin (1,07 g, 2,52 mmol, 0,35 eq.) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. De nuevo, se añadió más peryodinano de Dess-Martin (1,07 g, 2,52 mmol, 0,35 eq.) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La reacción se inactivó después mediante la adición de NaHCO3 acuoso saturado y Na<2>S<2>O<3>acuoso al 10 %. La mezcla se agitó hasta que se obtuvieron dos fases homogéneas. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (x 3). La capa orgánica combinada se lavó con NaHCO<3>saturado acuoso (x3). La capa orgánica se secó sobre MgSO<4>, se filtró, y se concentró a presión reducida, para proporcionar el Producto intermedio 95 (3,5 g, rendimiento: 72 %) como un aceite amarillo espeso, utilizado sin purificación adicional.

mezcla de atropisómeros

Se añadió bromuro de alilmagnesio (1 M en MeTHF, 13,04 ml, 13,04 mmol, 2,2 eq.) gota a gota durante 10 min a una solución agitada del Producto intermedio 95 (4,03 g, 5,93 mmol) en THF anhidro (34 ml) bajo atmósfera de nitrógeno a -78 °C. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 2 h. La reacción se inactivó mediante adición NH<4>Cl acuoso saturado. La mezcla se diluyó con EtOAc, y se añadió salmuera. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera (x 1). La capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 120 g RediSep, heptano/EtOAc, 100/0 hasta 0/100), para dar el Producto intermedio 96 (3,49 g, rendimiento: 89 %) como un aceite amarillo pálido espeso.

mezcla de atropisómeros

Se añadió ácido p-toluenosulfónico, monohidrato (1,51 g, 7,93 mmol, 1,59 eq.) a una solución del Producto intermedio 96 (3,49 g, 5,29 mmol) en MeOH (116 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. El disolvente se retiró a presión reducida y el residuo se diluyó con DCM y se añadió NaHCO<3>acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera. La capa acuosa combinada se extrajo con DCM (x5). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró bajo presión reducida para proporcionar el Producto intermedio 97 como una espuma amarilla pálida, utilizada sin purificación adicional.

mezcla de atropisómeros

Se añadió p-toluenosulfonato de piridinio (391,7 mg, 1,56 mmol, 1,5 eq.) a una solución del Producto intermedio 97 (500 mg, 1,04 mmol) en tolueno (51 ml) en un tubo a presión. El tubo se tapó y la mezcla de reacción se agitó a 115 °C durante 2 h. Tras enfriar, el disolvente se retiró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 40 g RediSep, DCM/MeOH 100/0 hasta 90/10), para dar el Producto intermedio 98 (283,3 mg, rendimiento: 61 %) como un aceite incoloro espeso.

mezcla de atropisómeros

Se añadió TBDMSCl (173 mg, 1,15 mmol, 1,8 eq.) a una solución agitada del Producto intermedio 98 (283 mg, 0,64 mmol), imidazol<( 87>mg, 1,28 mmol, 2 eq.) y DMAP (5 mg, 0,045 mmol, 0,07 eq.) en DCM anhidro (2,49 ml) a 0 °C en atmósfera de nitrógeno. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se añadió NH<4>Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera. La capa acuosa combinada se extrajo con DCM (x3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 24 g RediSep, EtOAc/heptano, 100/0 hasta 0/100), para proporcionar el Producto intermedio 99 (326 mg, rendimiento: 92 %) como un aceite amarillo pálido.

Se añadió gota a gota una solución del Producto intermedio 78 (3 g, 4,86 mmol) en THF anhidro (24 ml) a una suspensión de NaH (dispersión al 60 % en aceite mineral, 583 mg, 14,57 mmol, 3 eq.) en THF anhidro (12 ml) en una atmósfera de nitrógeno a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos antes de añadir sulfato de dimetilo (1,98 ml, 20,89 mmol, 4,3 eq.). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 19 h. La reacción se inactivó mediante adición NH<4>Cl acuoso saturado. La mezcla se diluyó con EtOAc, y se añadió salmuera. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera. La capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 80 g RediSep, EtOAc/heptano, 100/0 hasta 0/100), para proporcionar el Producto intermedio 100 (2,38 g, rendimiento: 71 %) como un aceite incoloro que se solidificó en reposo.

mezcla d

Se añadió gota a gota 9-BBN (0,5 M en THF, 8,96 ml, 4,48 mmol, 5 eq.) a una solución del Producto intermedio 99 (500 mg, 0,9 mmol) en THF anhidro (10 ml) bajo atmósfera de nitrógeno, a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a 75 °C durante 30 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, el Producto intermedio 100 sólido (1057 mg, 1,52 mmol, 1,7 eq.), el fosfato de potasio tribásico (570,4 mg, 2,69 mmol, 3 eq.) y el [1,1 '-bis (di-tercbutilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) (CAS [95408-45-0], 116,7 mg, 0,18 mmol, 0,2 eq.) se añade en una porción a la mezcla. El vial de reacción se tapó, después se desgasificó y se volvió a llenar con nitrógeno tres veces. A continuación, se añadió agua (0,97 ml) y la mezcla se desgasificó haciendo burbujear nitrógeno durante aproximadamente 1 min. La mezcla de reacción resultante se agitó a 80 °C durante<6>h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se añadió agua. Las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró a presión reducida, para dar un aceite naranja. El aceite en bruto se disolvió en THF (14 ml) y se enfrió a 0 °C. Se añadió TBAF (1 M en THF, 5,37 ml, 5,37 mmol,<6>eq.) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Se añadió más TBAF (1 M en THF, 1,79 ml, 1,79 mmol, 2 eq.) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La reacción se inactivó mediante la adición de NH<4>Cl acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera. La capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (3x) y d Cm (x2) y la capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 120 g RediSep, DCM/MeOH 100/0 hasta 90/10), para dar el Producto intermedio 101 (854 mg, rendimiento: 73 %) como una espuma amarronada.

Una solución de trifenilfosfina (1,3 g, 4,96 mmol, 4 eq.) en tolueno (38 ml) se desgasificó y se rellenó con nitrógeno tres veces, seguido de hacer burbujear nitrógeno durante 5 min. Esta solución se agitó a 70 °C en una atmósfera de nitrógeno. Una solución del Producto intermedio 101 (940 mg, 1,24 mmol) y azodicarboxilato de di-terc-butilo (1,14 g, 4,96 mmol, 4 eq.) en tolueno (38 ml) y THF (7 ml) se desgasificó y se volvió a llenar con nitrógeno tres veces, seguido de burbujear nitrógeno durante 5 min. Esta solución se añadió a la primera solución mediante una bomba de jeringa (0,1 ml/minuto) mientras se agitaba a 70 °C. Una vez que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó a 70 °C durante 15 min, antes de enfriarse a temperatura ambiente. Los disolventes se evaporaron y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (SiO<2>, 120 g RediSep, heptano/EtOAc 100/0 a 0/100); después DCM/MeOH 100/0 a 90/10), seguido de otra cromatografía en columna ultrarrápida (SiO<2>, 80 g RediSep, DCM/MeOH 100/0 a 90/10), y finalmente mediante HPLC preparativa (fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18 OBD-5 pm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN) para dar dos fracciones. La primera fracción se separó en sus estereoisómeros mediante SFC preparatoria (fase estacionaria: Chiralpak Daicel iD 20 * 250 mm, fase móvil: CO<2>, iPrOH iPrNH<2>al 0,4 %), para dar el Producto intermedio 102 (98,5 mg, rendimiento: 11 %) y el Producto intermedio 105 (117,5 mg, rendimiento: 12 %) ambos como espumas amarillas pálidas. La segunda fracción se separó en sus estereoisómeros mediante SFC preparatoria (fase estacionaria: Chiralpak Daicel IC 20 * 250 mm, fase móvil: CO<2>, EtOH 0,4 % de iPrNH<2>), seguido de otro SFC preparativo (fase estacionaria: Chiralpak Daicel AD 20 * 250 mm, fase móvil: CO<2>, iPrOH iPrNH<2>al 0,4 %), para dar el Producto intermedio 104 (55,4 mg, rendimiento:<6>%) y el Producto intermedio 103 (64,5 mg, rendimiento: 7 %) ambas como espumas amarillas pálidas.

mezcla de atropisómeros

Se añadió gota a gota 9-BBN (0,5 M en THF, 5,85 ml, 2,92 mmol, 5 eq.) a una solución del Producto intermedio 99 (326,5 mg, 0,58 mmol) en THF anhidro (7 ml) bajo atmósfera de nitrógeno, a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a 75 °C durante 30 min. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se añadieron el Producto intermedio 71 sólido (584,3 mg, 0,99 mmol, 1,7 eq.), el fosfato potásico tribásico (372,5 mg, 1,75 mmol, 3 eq.) y [1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) (76,2 mg, 0,12 mmol, 0,2) en una porción a la mezcla. El vial se tapó, después se desgasificó y se volvió a llenar con nitrógeno tres veces. Se añadió agua (0,6 ml) y la mezcla se desgasificó haciendo burbujear nitrógeno durante un breve período de tiempo. La mezcla resultante se agitó a 80 °C durante 7 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se añadió agua. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (*3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en THF (9,5 ml) y esta solución se enfrió a 0 °C. Se añadió fluoruro de tetrabutilamonio (1 M en THF, 5,85 ml, 5,85 mmol, 10 eq.) y la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 3 h. La reacción se inactivó mediante la adición de NH<4>Cl acuoso saturado y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó dos veces con salmuera. La capa acuosa combinada se extrajo con EtOAc (3x) y la capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna (SiO<2>, 120 g RediSep, DCM/MeOH 100/03 hasta 90/10), para dar el Producto intermedio 106 (354 mg, rendimiento: 81 %) como una espuma marrón.

Se desgasificó una solución de trifenilfosfina (499 mg, 1,9 mmol, 4 equivalentes) en tolueno (15 ml) y se rellenó con nitrógeno tres veces, y después se hizo burbujear nitrógeno durante 5 min. A continuación, esta solución se calentó a 70 °C en una atmósfera de nitrógeno. Una solución del Producto intermedio 106 (354 mg, 0,48 mmol) y azodicarboxilato de di-terc-butilo (438 mg, 1,9 mmol, 4 eq.) en tolueno (15 ml) y THF (3 ml) se desgasificó y se rellenó con nitrógeno tres veces y, a continuación, se hizo burbujear nitrógeno durante 5 min. Esta solución se añadió después a la primera solución mediante una bomba de jeringa (0,1 ml/minuto) mientras se agitaba a 70 °C. Una vez que se completó la adición, la mezcla de reacción se agitó a 70 °C durante 15 min. Después de enfriar, los disolventes se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida (SO<2>), 40 g RediSep, heptano/EtOAc, 100/0 a 0/100; después DCM/MeOH 97/3 a 90/10), seguido de HPLC preparativa (fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18 OBD-5 pm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN). La mezcla obtenida de estereoisómeros se separó mediante SFC preparatoria (fase estacionaria: Chiralpak Diacel AD 20 x 250 mm, fase móvil: CO<2>, EtOH-iProH (50-50) iPrNH<2>al 0,4 %), para dar el Producto intermedio 107 (31,2 mg, rendimiento: 5 %), el Producto intermedio 108 (44,4 mg, rendimiento:<8>%), el Producto intermedio 109 (46,6 mg, rendimiento:<8>%) y el Producto intermedio 110 (28,1 mg, rendimiento: 5 %).

Compuestos

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (15 mg, 0,63 mmol, 17 eq.) a una solución del Producto intermedio 24 (40 mg, 0,057 mmol) en MeOH (1 ml), THF (1 ml) y agua (0,5 ml) y la mezcla resultante se agitó a 46 °C durante 4,5 h. Los disolventes se evaporaron, y el residuo se disolvió en agua (10 ml). La capa acuosa se extrajo con DCM. La capa acuosa se trató con HCl (1 M, 0,92 ml, 0,92 mmol, 16 eq.) hasta un pH = 2. La capa acuosa turbia se extrajo después con CHCb (3 x). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó para dar el Compuesto 1 (25 mg, rendimiento: 64 %).

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d)<6>ppm 2,12 (s, 3 H) 2,16 (s, 3 H) 2,20 - 2,28 (m, 1 H) 2,31 - 2,41 (m, 1 H) 2,84 - 3,02 (m, 4 H) 3,40 (s, 3 H) 3,50 (td, J= 9,09, 3,34 Hz, 1 H) 3,62 - 3,71 (m, 1H) 3,75 (d, J=11,08 Hz, 1 H) 3,88 (s, 3 H) 4,21 (d, J=11,08 Hz, 1 H) 4,50 - 4,59 (m, 1 H) 4,68 (d, J= 7,11 Hz, 1 H) 5,04 - 5,13 (m, 2 H) 5,14 - 5,22 (m, 1 H) 5,52 (s, 1 H) 5,91 (s, 1 H) 5,99 (ddd, J=17,17, 10,22, 7,11 Hz, 1 H) 6,99 (d, J= 8,99 Hz, 1 H) 7,18 (d, J= 9,09 Hz, 1 H) 7,21 (s, 1 H) 7,22 - 7,25 (m, 1 H) 7,32 - 7,38 (m, 1 H) 8,35 (dd, J= 9,15, 5,70 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 2 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 1, a partir del Producto intermedio 25 en lugar del Producto intermedio 24. El Compuesto 2 en bruto se purificó mediante HPLC preparatoria (fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18 OBD-5 pm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN).

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 2,06 (d, J= 9,93 Hz, 6 H) 2,13 - 2,17 (m, 1 H) 2,29 (br s, 2 H) 2,73 - 2,97 (m, 4 H) 3,19 (s, 3 H) 3,35 (br d, J= 6,69 Hz, 1 H) 3,46 (br d, J= 5,02 Hz, 1 H) 3,61 - 3,78 (m, 1 H) 3,83 (s, 3 H) 3,96 (br d, J=11,39 Hz, 1 H) 4,42 (br d, J= 6,17 Hz, 2 H) 4,46 (br d, J= 4,70 Hz, 1 H) 5,16 (br d, J=10,97 Hz, 2 H) 5,22 - 5,37 (m, 1 H) 5,53 (s, 1 H) 5,68 (br s, 1 H) 6,08 - 6,20 (m, 1 H) 7,11 (s, 1 H) 7,19 (td, J= 8,78, 2,40 Hz, 1 H) 7,24 - 7,26 (m, 1 H) 7,28 (br s, 1 H) 7,30 - 7,37 (m, 1 H) 8,24 (dd, J= 9,14, 5,80 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (15 mg, 0,63 mmol, 27 eq.) a una solución del Producto intermedio 28 (17 mg, 0,023 mmol) en THF (1 ml), MeOH (1 ml) y agua (0,5 ml). La mezcla resultante se agitó a 45 °C durante la noche. Los solventes se evaporaron y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa (fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18<o>B<d>-5 pm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN), para proporcionar el Compuesto 3 (3 mg, 19 % de rendimiento).

<1>H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,82 - 1,90 (m, 1 H) 1,97 (m, J= 8,20 Hz, 1 H) 2,08 (br d, J=15,15 Hz, 8 H) 2,19 - 2,32 (m, 2 H) 2,81 - 2,92 (m, 2 H) 2,98 (br d, J=11,29 Hz, 2 H) 3,23 (br s, 7 H) 3,40 (m, J= 5,10 Hz, 2 H) 3,45 - 3,52 (m, 2 H) 3,87 (s, 3 H) 4,03 - 4,11 (m, 2 H) 4,37 - 4,45 (m, 1 H) 4,45 - 4,56 (m, 1 H) 5,16 - 5,28 (m, 1 H) 5,59 (br s, 1 H) 5,86 (s, 1 H) 7,04 (br d, J= 9,09 Hz, 1 H) 7,18 - 7,25 (m, 3 H) 7,31 - 7,38 (m, 1 H) 8,34 (br dd, J= 8,20, 6,64 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (16,44 mg, 0,69 mmol, 20 eq.) a una solución del Producto intermedio 29 (25 mg, 0,034 mmol) en THF (1 ml), MeOH (1 ml) y agua (0,5 ml). La mezcla se agitó a 50 °C durante 3 horas. Los disolventes se evaporaron hasta secarse. El residuo se disolvió en agua (2 ml), se enfrió a 0 °C y se trató con HCl (1 M, 0,69 ml, 0,69 mmol, 20 eq.). La fase acuosa se extrajo con CHCb (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó para dar el Compuesto 4 (20 mg, rendimiento: 81 %).

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,87 - 1,92 (m, 1 H) 2,09 (s, 3 H) 2,12 (s, 3 H) 2,21 - 2,33 (m, 4 H) 2,67 - 2,82 (m, 2 H) 2,92 (s, 3 H) 2,94 - 3,07 (m, 2 H) 3,00 - 3,07 (m, 1 H) 3,27 (s, 3 H) 3,30 - 3,37 (m, 1 H) 3,40 (dt, J= 9,30, 4,55 Hz, 1 H) 3,48 - 3,57 (m, 2 H) 3,78 (d, J=10,35 Hz, 1 H) 3,87 (s, 3 H) 4,05 (t, J= 7,32 Hz, 1 H) 4,47 (dt, J=15,10, 3,74 Hz, 1 H) 5,23 (s, 1 H) 5,24 - 5,34 (m, 1 H) 5,83 (s, 1 H) 7,19 (s, 1 H) 7,21 - 7,26 (m, 1 H) 7,31 (dd, J=10,03, 2,51 Hz, 1 H) 7,33 - 7,36 (m, 1 H) 7,36 - 7,39 (m, 1 H) 8,30 (dd, J= 9,20, 5,85 Hz, 1 H).

Se añadió LiOH (25 mg, 1,04 mmol, 51 eq.) a una solución de la mezcla del Producto intermedio 30 y el Producto intermedio 27 (30 mg, 0,02 mmol) en THF (1 ml), MeOH (1 ml) y agua (0,5 ml). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 3,5 h. Los disolventes se evaporaron y el residuo se purificó mediante HPLC preparatoria (Fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18 OBD-5 pm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN), para proporcionar el Compuesto 5 (4 mg, rendimiento: 25 %) y el Compuesto 6 (9 mg, rendimiento: 62 %), ambas como sales de amonio.

Compuesto 5

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO d) 6 ppm 1,85 (br s, 2 H); 1,91 - 2,10 (m, 7 H); 2,21 (br s, 2 H); 2,30 (br s, 2 H); 2,42 - 2,53 (m, 1 H); 2,79 (br s, 3 H); 3,15 (br s, 3 H); ; 3,26 - 3,42 (m, 5 H); 3,44 - 3,54 (m, 4 H); 3,69 - 3,91 (m, 4 H); 4,13 (br s, 1 H); 4,31 - 4,49 (m, 1 H); 5,30 (s, 1 H); 5,23 - 6,01 (m, 1 H); 7,09 (br s, 1 H); 7,17 (br s, 2 H); 7,26 - 7,36 (m, 3 H); 7,95 - 8,48 (m, 1 H).

Compuesto 6

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 2,02 (br d, J= 6,27 Hz, 4 H) 2,06 (br s, 3 H) 2,29 (br s, 3 H) 2,77 - 2,92 (m, 4 H) 3,17 (br s, 3 H) 3,25 (br s, 1 H) 3,34 (br s, 1 H) 3,67 (br s, 2 H) 3,74 (br d, J=11,39 Hz, 1 H) 3,83 (br s, 4 H) 4,20 - 4,27 (m, 1 H) 4,46 (m, J=15,20 Hz, 1 H) 5,26 (br d, J=14,21 Hz, 1 H) 5,50 (br s, 1 H) 5,55 (br s, 1 H) 7,14 (s, 1 H) 7,17 - 7,24 (m, 2 H) 7,27 - 7,35 (m, 2 H) 8,27 (br s, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (10 mg, 0,43 mmol, 25 eq.) a una solución del Producto intermedio 31 (13 mg, 0,017 mmol) en THF (1 ml), MeOH (1 ml) y agua (0,5 ml) y la solución resultante se agitó a 50 °C durante la noche. Los volátiles se evaporaron hasta sequedad y el residuo se disolvió en agua (1 ml) y se trató con HCl acuoso (1 M, 0,2 ml, 0,2 mmol, 12 eq.) hasta pH = 6. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CHCb (x 3). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó para proporcionar el Compuesto 7 (8 mg, rendimiento: 60 %).

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 2,06 (s, 3 H); 2,07 (s, 3 H); 2,15 - 2,34 (m, 5 H); 2,51 (br s, 6 H); 2,44 -2,50 (m, 2 H); 2,77 - 2,97 (m, 4 H); 3,13 (s, 3 H); 3,20 (m, J=6,20 Hz, 1 H); 3,32 - 3,40 (m, 1 H); 3,66 - 3,79 (m, 6 H); 3,83 (s, 3 H); 4,06 (br t, J=6,82 Hz, 1 H); 4,42 - 4,52 (m, 2 H); 5,19 - 5,30 (m, 1 H); 5,48 (s, 1 H); 5,56 (s, 1 H); 7,16 (s, 1 H); 7,18 - 7,25 (m, 2 H); 7,27 - 7,36 (m, 2 H); 8,29 (dd, J=9,24, 5,72 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 8 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 7, a partir del Producto intermedio 32 en lugar del Producto intermedio 31.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 2,01 (s, 3 H); 2,07 (s, 3 H); 2,13 - 2,16 (m, 2 H); 2,30 - 2,32 (m, 2 H); 2,41 (s, 3 H); 2,60 - 2,77 (m, 8 H); 2,81 - 2,94 (m, 4 H); 3,32 (s, 3 H); 3,34 - 3,44 (m, 2 H); 3,49 (s, 1 H); 3,81 (s, 3 H); 3,93 (br d, J = 11,18 Hz, 1 H); 4,15 (br t, J=6,58 Hz, 1 H); 4,41 - 4,50 (m, 1 H); 5,19 - 5,28 (m, 1 H); 5,39 (s, 1 H); 5,73 (s, 1 H); 7,04 (d, J=8,88 Hz, 1 H); 7,14 (s, 1 H); 7,17 - 7,25 (m, 3 H); 7,32 (dd, J=9,98, 2,46 Hz, 1 H); 8,29 (dd, J=9,15, 5,70 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 9 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 3, a partir del Producto intermedio 33 en lugar del Producto intermedio 28.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 0,08 (s, 1 H); 1,13 (t, J = 7,04 Hz, 3 H); 2,07 (s, 6 H); 2,27 (br s, 4 H); 2,77 (br d, J = 10,12 Hz, 2 H); 2,88 - 2,99 (m, 2 H); 3,04 (br s, 3 H); 3,13 (br s, 1 H); 3,31 - 3,44 (m, 4 H); 3,45 - 3,53 (m, 1 H); 3,67 (br d, J = 10,12 Hz, 1 H); 3,78 (br d, J = 10,78 Hz, 1 H); 3,85 (s, 3 H); 4,11 (br t, J=7,04 Hz, 1 H); 4,45 (br d, J = 15,19 Hz, 1 H); 5,22 - 5,30 (m, 1 H); 5,41 (br s, 1 H); 5,65 (br s, 1 H); 7,15 (s, 1 H); 7,23 (br t, J = 8,80 Hz, 1 H); 7,28 - 7,36 (m, 3 H); 8,27 (br dd, J=8,91, 5,83 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (15 mg, 0,63 mmol, 14 eq.) a una solución del Producto intermedio 38 (32 mg, 0,044 mmol) en MeOH (1 ml), THF (1 ml) y agua (0,5 ml) y la mezcla resultante se agitó a 40 °C durante 16 h. El disolvente se evaporó, y el residuo se disolvió en agua (10 ml). Esta solución se lavó con DCM y se trató con HCl (1 M, 0,92 ml, 0,92 mmol, 14 eq.) hasta pH = 2. La fase acuosa opaca se extrajo con CHCI<3>(3 x). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó para dar el Compuesto 10 (30 mg, rendimiento: 96 %).

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,62 (br s, 3 H), 1,83 - 1,95 (m, 1 H), 2,10 (s, 3 H), 2,12 (s, 3 H), 2,23 (br s, 1 H), 2,27 - 2,35 (m, 1 H), 2,80 - 3,00 (m, 4 H), 3,28 (s, 3 H), 3,37 (dt, J=11,00, 5,50 Hz, 1 H), 3,47 - 3,56 (m, 4 H), 3,87 (s, 3 H), 3,89 - 4,05 (m, 3 H), 4,12 (d, J= 11,00 Hz, 1 H), 4,29 (t, J= 5,72 Hz, 1 H), 4,52 (ddd, J=14,47, 7,76, 3,08 Hz, 1 H), 5,22 (ddd, J=14,58, 7,10, 3,19 Hz, 1 H), 5,58 (s, 1 H), 5,90 (s, 1 H), 7,03 (d, J= 8,80 Hz, 1 H), 7,18 - 7,25 (m, 2 H), 7,19 - 7,21 (m, 1 H), 7,29 - 7,37 (m, 1 H), 8,35 (dd, J= 9,24, 5,72 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 11 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 10, a partir del Producto intermedio 39 en lugar del Producto intermedio 38.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,45 - 1,58 (m, 2 H), 1,58 - 1,70 (m, 1 H), 1,91 - 2,05 (m, 2 H), 2,09 (s, 3 H), 2,10 (s, 3 H), 2,12 - 2,23 (m, 1 H), 2,23 - 2,33 (m, 2 H), 2,72 - 2,85 (m, 2 H), 2,92 - 3,03 (m, 3 H), 3,05 (s, 3 H), 3,07 - 3,12 (m, 1 H), 3,34 - 3,43 (m, 1 H), 3,43 - 3,50 (m, 1 H), 3,50 - 3,57 (m, 1 H), 3,64 - 3,72 (m, 1 H), 3,72 - 3,78 (m, 1 H), 3,86 (s, 3 H), 3,90 (t, J= 7,04 Hz, 1 H), 4,48 (dt, J=14,91, 4,21 Hz, 1 H), 5,20 - 5,23 (m, 1 H), 5,22 - 5,36 (m, 1 H), 5,40 (s, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 5,85 - 5,97 (m, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 7,22 (td, J= 8,80, 2,64 Hz, 1 H), 7,26 - 7,30 (m, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,33 - 7,36 (m, 1 H), 8,29 (dd, J= 9,24, 5,72 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (6 mg, 0,25 mmol, 25 eq.) a una solución del Producto intermedio 40 (7 mg, 0,01 mmol) en MeOH (1 ml), THF (1 ml) y agua (0,5 ml) y la mezcla resultante se agitó a 50 °C durante 16 h. Los disolventes se evaporaron, y el residuo se disolvió en agua (10 ml). La capa acuosa se lavó con DCM y se trató con HCl (1 M, 0,25 ml, 0,25 mmol, 25 eq.) hasta pH = 2. La fase acuosa opaca se extrajo con CHCb (3 x). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó para dar el Compuesto 12 (6 mg, rendimiento: 79 %).

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,49 - 1,68 (m, 5 H), 2,00 - 2,10 (m, 6 H), 2,11 (s, 2 H), 2,26 (br dd, J= 8,47, 4,51 Hz, 2 H), 2,69 - 2,81 (m, 2 H) 2,94 (s, 3 H), 2,96 - 3,04 (m, 3 H), 3,28 (s, 3 H), 3,34 (t, J= 6,82 Hz, 2 H), 3,39 (dt, J= 9,35, 4,79 Hz, 1 H), 3,56 (d, J=10,34 Hz, 1 H), 3,72 (d, J=10,34 Hz, 1 H), 3,81 (t, J= 7,26 Hz, 1 H), 3,86 (s, 3 H), 4,46 (dt, J=15,02, 3,82 Hz, 1 H), 5,26 (s, 1 H), 5,27 - 5,34 (m, 1 H), 5,79 (s, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,21 - 7,25 (m, 1 H), 7,30 (dd, J=10,01, 2,53 Hz, 1 H), 7,32 - 7,38 (m, 2 H), 8,28 (dd, J= 9,24, 5,72 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (13 mg, 0,55 mmol, 15 eq.) a una solución del Producto intermedio 53 (30 mg, 0,037 mmol) en una mezcla de MeOH (1 ml), THF (1 ml) y agua (0,5 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a 50 °C. Los disolventes se evaporaron y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa (fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18 Ob D-5 pm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN) para dar el Compuesto 13 (11 mg, rendimiento: 41 %) como un sólido amarillo pálido.

1H NMR: (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 2,05 (s, 3 H), 2,08 (s, 3 H), 2,29 (br d, J=5,3 Hz, 2 H), 2,41 (br s, 2 H), 2,54 (br s, 2 H), 2,71 - 2,95 (m, 5 H), 3,17 (br s, 3 H), 3,31 (br d, J=12,8 Hz, 3 H), 3,51 - 3,67 (m, 4 H), 3,84 (s, 3 H), 3,92 (br s, 2 H), 4,37 (br d, J=8,8 Hz, 1 H), 4,41 - 4,54 (m, 1 H), 5,19 - 5,29 (m, 1 H), 5,55 (br d, J=18,5 Hz, 2 H), 7,13 (br s, 1 H), 7,17 - 7,25 (m, 2 H), 7,28 - 7,35 (m, 2 H), 8,23 - 8,33 (m, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (18 mg, 0,75 mmol, 15 eq.) a una solución del Producto intermedio 54 (40 mg, 0,05 mmol) en una mezcla de MeOH (1,2 ml), THF (1,2 ml) y agua (0,6 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a 50 °C. Los disolventes se evaporaron y el residuo se disolvió en agua y DCM. La mezcla se acidificó con HCl acuoso 1 M a pH 4-5. La capa acuosa opaca se extrajo con DCM (x4). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante HPLC preparatoria (fase estacionaria: columna de fase inversa XBridge Prep C18 OBD-5 |jm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN) para dar el Compuesto 14 (17 mg, rendimiento: 45 %) como un sólido amarillo pálido.

<1>H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,98 - 2,05 (m, 3 H), 2,06 (br s, 3 H), 2,27 (br s, 2 H), 2,68 - 2,98 (m, 5 H), 3,06 (br s, 3 H), 3,30 (s, 3 H), 3,43 (br s, 4 H), 3,56 (br s, 3 H), 3,81 (s, 3 H), 3,98 (br s, 1 H), 4,04 - 4,12 (m, 1 H), 4,20 (br s, 1 H), 4,41 (br d, J=14,1 Hz, 1 H), 5,20 - 5,34 (m, 1 H), 5,56 (br d, J=66,2 Hz, 2 H), 7,11 (br s, 1 H), 7,14 -7,25 (m, 2 H), 7,27 - 7,34 (m, 2 H), 8,23 (br s, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 15 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 14, a partir del Producto intermedio 51 en lugar del Producto intermedio 54.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMOd) 6 ppm 2,09 (s, 3 H), 2,11 (s, 3 H), 2,21 - 2,35 (m, 2 H), 2,76 (br d, J= 9,6 Hz, 2 H), 2,99 (br d, J= 8,3 Hz, 2 H), 3,04 (br s, 3 H), 3,13 (br s, 1 H), 3,36 (s, 3 H), 3,37 - 3,43 (m, 1 H), 3,71 (br d, J= 9,6 Hz, 1 H), 3,79 (br d, J= 9,6 Hz, 1 H), 3,87 (s, 3 H), 3,98 (br d, J=11,1 Hz, 1 H), 3,99 - 4,06 (m, 1 H), 4,18 (br s, 1 H), 4,43 4,52 (m, 1 H), 5,22 - 5,30 (m, 1 H), 5,36 (br s, 1 H), 5,85 (br s, 1 H), 7,13 - 7,19 (m, 1 H), 7,20 - 7,26 (m, 1 H), 7,28 -7,33 (m, 2 H), 7,33 - 7,37 (m, 1 H), 8,28 (dd, J= 9,1, 5,8 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 16 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 14, a partir del Producto intermedio 52 en lugar del Producto intermedio 54.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 2,07 (s, 3 H), 2,13 (s, 3 H), 2,31 (br d, J=16,3 Hz, 2 H), 2,84 - 2,99 (m, 4 H), 3,27 (s, 3 H), 3,40 (br s, 3 H), 3,43 - 3,50 (m, 1 H), 3,64 (br d, J= 5,3 Hz, 2 H), 3,70 - 3,77 (m, 1 H), 3,86 (s, 3 H), 4,01 (br d, J=11,4 Hz, 1 H), 4,21 (br d, J=10,7 Hz, 1 H), 4,47 - 4,58 (m, 2 H), 5,20 (br d, J=15,0 Hz, 1 H), 5,45 - 5,55 (m, 1 H), 5,93 (br s, 1 H), 6,94 (br d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,19 - 7,25 (m, 2 H), 7,30 - 7,37 (m, 1 H), 8,34 (dd, J= 9,2, 5,7 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (27 mg, 1,13 mmol, 15 eq.) a una solución del Producto intermedio 56 (51 mg, 0,075 mmol) en una mezcla de MeOH (2 ml), THF (2 ml) y agua (1 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 6 h a 50 °C. Los disolventes se evaporaron y el residuo se disolvió en agua y DCM y se acidificó con HCl acuoso 1 M a pH 4-5. La capa acuosa opaca se extrajo con DCM (x4). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante SFC preparatoria (fase estacionaria: Torus Diol 130A 30 x 150 mm, fase móvil: CO<2>, MeOH NH<3>al 0,25 %) para dar el Compuesto 17 (22 mg, rendimiento: 44 %) como un sólido amarillo pálido.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>) 6 ppm 1,10 (d, J= 6,4 Hz, 3 H), 1,92 (s, 3 H), 1,94 (s, 3 H), 2,27 - 2,39 (m, 2 H), 2,86 -2,94 (m, 2 H), 2,94 - 3,04 (m, 1 H), 3,04 - 3,13 (m, 1 H), 3,61 (s, 3 H), 3,64 - 3,73 (m, 2 H), 3,78 (s, 3 H), 3,79 - 3,85 (m, 1 H), 3,95 - 4,07 (m, 2 H), 4,58 - 4,70 (m, 1 H), 4,89 (s, 1 H), 4,97 - 5,07 (m, 1 H), 6,48 (s, 1 H), 6,94 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,30 (td, J= 8,9, 2,6 Hz, 1 H), 7,45 - 7,52 (m, 2 H), 8,24 (dd, J= 9,2, 5,9 Hz, 1 H), 13,03 - 13,52 (m, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (12 mg, 0,49 mmol, 15 eq.) a una solución del Producto intermedio 57 (22 mg, 0,033 mmol) en una mezcla de MeOH (0,8 ml), THF (0,8 ml) y agua (0,4 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 6 h a 50 °C. Los disolventes se evaporaron y el residuo se disolvió en agua y DCM y se acidificó con HCl acuoso 1 M a pH 4-5. La capa acuosa opaca se extrajo con DCM (x4). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO<4>, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó mediante SFC preparatoria (fase estacionaria: Chiralcel Diacel IH 20 x 250 mm, fase móvil: CO<2>, EtOH iPrNH<2>al 0,4 %) para dar el Compuesto 18 (8 mg, rendimiento: 39 %) como un sólido amarillo pálido.

<1>H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,55 (d, J= 6,6 Hz, 3 H), 2,10 (s, 6 H), 2,28 (br s, 2 H), 2,80 (d, J=10,3 Hz, 2 H), 2,98 (br d, J=13,6 Hz, 2 H), 3,08 (s, 3 H), 3,12 - 3,19 (m, 1 H), 3,38 - 3,47 (m, 1 H), 3,64 (br d, J=10,8 Hz, 1 H), 3,79 (d, J=10,8 Hz, 1 H), 3,87 (s, 3 H), 4,07 (q, J= 6,4 Hz, 1 H), 4,42 - 4,51 (m, 1 H), 5,31 - 5,37 (m, 1 H), 5,44 (s, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 7,16 - 7,19 (m, 1 H), 7,20 - 7,26 (m, 1 H), 7,30 (br d, J= 2,4 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 2,0 Hz, 2 H), 8,29 (dd, J= 9,1, 5,8 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 19 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 1, a partir del Producto intermedio 59 en lugar del Producto intermedio 24.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,14 - 1,18 (m, 3 H); 1,89 (ddd, J=14,36, 8,97, 5,28 Hz, 1 H); 2,09 (s, 3 H); 2,10 (s, 3 H); 2,22 - 2,35 (m, 3 H); 2,73 - 2,85 (m, 2 H); 2,96 - 3,03 (m, 1 H); 3,00 (s, 3 H); 3,02 - 3,09 (m, 1 H); 3,36 - 3,41 (m, 1 H); 3,73 - 3,76 (m, 1 H); 3,80 - 3,85 (m, 1 H); 3,87 (s, 3 H); 3,94 - 4,01 (m, 1 H); 4,22 (dd, J=9,02, 5,28 Hz, 1 H); 4,48 (dt, J=14,85, 4,24 Hz, 1 H); 5,26 - 5,34 (m, 1 H); 5,37 (s, 1 H); 5,73 (s, 1 H); 7,18 (s, 1 H); 7,20 - 7,25 (m, 1 H); 7,29 - 7,32 (m, 1 H); 7,33 (m, 1 H); 7,33 - 7,36 (m, 1 H); (dd, J = 9,24, 5,72 Hz, 1 Hz).

MS (ESI)m/z714 [M+H]+ TA 1,66 min, Método: B12007B12007

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 20 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 1, a partir del Producto intermedio 60 en lugar del Producto intermedio 24.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,15 (d, J= 6,16 Hz, 3 H); 1,96 (ddd, J=14,58, 4,79, 1,76 Hz, 1 H); 2,10 (s, 3 H); 2,11 (s, 3 H); 2,22 (dt, J=14,74, 8,91 Hz, 1 H); 2,27 - 2,35 (m, 2 H); 2,81-2,83 (m, 2 H); 2,84 - 2,91 (m, 1 H); 2,91 - 3,01 (m, 2 H); 3,10 - 3,20 (m, 4 H); 3,29 - 3,39 (m, 1 H); 3,74 (d, J=11,22 Hz, 1 H); 3,89 (s, 3 H); 3,89 - 3,96 (m, 2 H); 4,28 (dd, J=8,36, 4,84 Hz, 1 H); 4,52 (dt, J=14,85, 4,79 Hz, 1 H); 5,21 - 5,31 (m, 1 H); 5,47 (s, 1 H); 5,64 (s, 1 H); 7,18 (s, 1 H); 7,20 - 7,26 (m, 2 H); 7,31 (dd, J=10,01, 2,53 Hz, 1 H); 7,35 (d, J = 8,80 Hz, 1 H); 8,31 (dd, J=9,24, 5,72 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Una solución acuosa de LiOH (1M, 1,25 ml, 1,25 mmol, 15 eq.) se añadió a una solución de Producto intermedio 82 (63 mg, 0,082 mmol) en THF (1 ml) y MeOH (1 ml). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 16 h. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se diluyó con DCM y agua. Se añadió HCl acuoso (1 M) hasta un pH de aproximadamente 1. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM. La capa orgánica combinada se secó con Na2SO4, se filtró y el disolvente se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en columna sobre gel de sílice (4 g, columna ultrarrápida Redisep, MeOH/DCM 0/100 hasta 5/95), para proporcionar el Compuesto 21 (41 mg, rendimiento: 66 %) como un sólido blanco.

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (15 mg, 0,64 mmol, 15 eq.) a una solución agitada del Producto intermedio 86 (34 mg, 0,042 mmol) en agua (0,5 ml), THF (1 ml) y MeOH (1 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 16 h. Los disolventes se evaporaron y el residuo se recogió con agua y se acidificó con HCl acuoso 1 M hasta alcanzar un pH ácido. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (*2). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró y el disolvente se retiró a presión reducida para producir el Compuesto 22 (32 mg, rendimiento: 96 %) como un sólido blanquecino.

1H NMR (CLOROFORMO-d) 6 ppm: 8,28 (dd, J=9,2, 5,9 Hz, 1H), 7,30 (d, J=1,8 Hz, 2H), 7,11-7,26 (m, 5H), 6,81 (d, J=8,8 Hz, 2H), 5,72 (s, 1H), 5,63 (s, 1H), 5,32 (ddd, J=14,6, 10,9, 3,1 Hz, 1H), 4,60 (d, J=11,7 Hz, 1H), 4,37-4,51 (m, 2H), 4,24 (d, J=11,7 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,52 (dt, J=9,3, 4,7 Hz, 1H), 3,26 (td, J=9,2, 3,6 Hz, 1H), 2,91 3,05 (m, 5H), 2,71-2,79 (m, 2H), 2,45-2,58 (m, 1H), 2,30-2,44 (m, 2H), 2,18-2,29 (m, 1H), 2,10 (d, J=4,4 Hz, 6H), 1,66 1,82 (m, 3H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 23 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 22, a partir del Producto intermedio 87 en lugar del Producto intermedio 86.

1H NMR (CLOROFORMO-d) 6 ppm: 8,29 (dd, J=9,1, 5,8 Hz, 1H), 7,27-7,35 (m, 4H; superpuesto con la señal CDCl3), 7,14-7,26 (m, 3H; superpuesto con la señal CDCl3), 6,82 (d, J=8,8 Hz, 2H), 5,57 (s, 1H), 5,55 (s, 1H), 5,24 (ddd, J=14,9, 10,0, 3,3 Hz, 1H), 4,65 (d, J=11,7 Hz, 1H), 4,47 (dt, J=15,1, 4,3 Hz, 1H), 4,34 (d, J=11,7 Hz, 1H), 4,13 (d, J=6,8 Hz, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,47 (dt, J=9,4, 4,8 Hz, 1H), 3,20 (td, J=9,0, 4,2 Hz, 1H), 2,92-3,08 (m, 5H), 2,71-2,85 (m, 2H), 2,18-2,41 (m, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,98-2,08 (m, 5H), 1,76-1,94 (m, 3H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (19 mg, 0,79 mmol, 39 eq.) a una solución del Producto intermedio 88 (15 mg, 0,02 mmol) en THF (1 ml), MeOH (1 ml) y agua (0,5 ml). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 3,5 h. Los disolventes se evaporaron y el residuo se disolvió en agua (1 ml). Esta solución se trató con HCl acuoso (1 M, 0,81 ml, 0,81 mmol, 40 eq.) hasta un pH = 2. La fase acuosa opaca se extrajo con CHCI<3>(3 x). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSÜ<4>, se filtró y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó mediante HPLC preparatoria (fase estacionaria: RP XBridge Prep C18 OBD -5 |jm, 50 * 250 mm, fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN), para proporcionar el Compuesto 24 (1 mg, rendimiento: 7 %).

<1>H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,23 - 1,33 (m, 2 H); 1,50 - 1,56 (m, 1 H); 1,82 - 1,84 (m, 3 H); 2,00 -2,03 (m, 3 H); 2,33 (br s, 2 H); 2,88 - 2,95 (m, 1 H); 2,99 - 3,11 (m, 3 H); 3,17 (br s, 1 H); 3,43 (m, 1 H); 3,58 (m, 1 H); 3,83 - 3,88 (m, 3 H); 4,00 (m, 2 H); 4,10 (s, 3 H); 4,18 (br d, J = 14,28 Hz, 1 H); 4,23 (s, 3 H); 4,31 (m, 1 H); 4,39 (m, 1 H); 5,10 (m, 1 H); 5,68 (s, 1 H); 6,43 (s, 1 H); 6,66 (d, J = 8,98 Hz, 1 H); 7,07 (s, 1 H); 7,11 (d, J = 8,98 Hz, 1 H); 7,19 (td, J=8,77, 2,45 Hz, 1 H); 7,27 - 7,32 (m, 2 H); 8,26 (dd, J=9,38, 5,71 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 25 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 24, a partir del Producto intermedio 89 en lugar del Producto intermedio 88.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,40 (m, J=22,90 Hz, 1 H); 1,84 (br s, 4 H); 1,93 (br s, 3 H); 2,14 a 2,35 (m, 10 H); 2,76 (m, 4 H); 3,15 (br s, 1 H); 3,29 (br s, 3 H); 3,42 - 3,52 (m, 1 H); 3,57 - 3,74 (m, 8 H); 3,96 a 4,14 (m, 2 H); 4,24 - 4,39 (m, 1 H); 5,15 (m, 2 H); 5,70 (br s, 1 H); 6,93 - 7,03 (m, 1 H); 7,06 - 7,17 (m, 3 H); 7,28 a 7,34 (m, 1 H); 8,09 - 8,25 (m, 1 H).

El Compuesto 26 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 7, a partir del Producto intermedio 90 en lugar del Producto intermedio 31.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d, 47 °C) 6 ppm 1,91 (s, 3 H); 2,00 (s, 3 H); 2,24 (m, 6 H); 2,80 - 3,06 (m, 5 H); 3,25 (br s, 2 H); 3,36 (s, 3 H); 3,82 (s, 4 H); 3,91 (br t, J=5,50 Hz, 3 H); 4,47 (s, 2 H); 4,51 - 4,62 (m, 2 H); 5,94 (s, 1 H); 6,20 (s, 1 H); 7,07 (s, 1 H); 7,08 - 7,12 (m, 1 H); 7,12 - 7,19 (m, 2 H); 7,25 - 7,30 (m, 5 H); 8,18 (dd, J=9,02, 5,72 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (22 mg, 0,94 mmol, 15 eq.) a una solución del Producto intermedio 108 (44 mg, 0,062 mmol) en una mezcla de MeOH (1,6 ml), THF (1,6 ml) y agua (0,8 ml). La mezcla de reacción resultante se agitó durante 4 h a 50 °C. Los disolventes se evaporaron y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (fase estacionaria: RP XBridge Prep C18 OBD - 5 pm, 50 * 250 mm; fase móvil: solución de NH<4>HCO<3>al 0,25 % en agua, CH<3>CN) para proporcionar el Compuesto 27 (31 mg, rendimiento: 72 %) como un sólido amarillo pálido.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>) 6 ppm 1,27 - 1,37 (m, 1 H), 1,55 - 1,64 (m, 1 H), 1,78 (s, 3 H), 2,03 (s, 3 H), 2,14 (dt, J=15,2, 5,7 Hz, 1 H), 2,24 - 2,37 (m, 3 H), 2,93 (br t, J= 8,8 Hz, 2 H), 3,03 - 3,07 (m, 2 H), 3,48 - 3,49 (m, 3 H), 3,68 -3,75 (m, 1 H), 3,77 - 3,88 (m, 2 H), 4,04 - 4,13 (m, 2 H), 4,13 - 4,20 (m, 1 H), 4,33 - 4,57 (m, 1 H), 4,59 (br d, J=10,3 Hz, 1 H), 4,63 (s, 1 H), 5,01 - 5,08 (m, 1 H), 6,43 (s, 1 H), 7,12 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,31 (td, J= 8,9, 2,6 Hz, 1 H), 7,49 (dd, J=10,5, 2,5 Hz, 1 H), 7,64 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 8,23 (dd, J= 9,2, 5,9 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 28 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 27, a partir del Producto intermedio 110 en lugar del Producto intermedio 108.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>) 6 ppm 1,24 (br s, 2 H), 1,90 (s, 3 H), 1,97 (s, 3 H), 1,99 - 2,06 (m, 1 H), 2,33 (br d, J= 1,8 Hz, 3 H), 2,96 - 3,06 (m, 4 H), 3,51 (s, 3 H), 3,83 (br s, 3 H), 4,08 (br s, 2 H), 4,21 - 4,30 (m, 1 H), 4,48 - 4,62 (m, 2 H), 4,98 - 5,03 (m, 1 H), 5,04 (s, 1 H), 6,47 - 6,59 (m, 1 H), 6,85 - 6,97 (m, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,34 (br d, J= 2,4 Hz, 1 H), 7,52 (d, J= 9,6 Hz, 2 H), 8,30 (s, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 29 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 27, a partir del Producto intermedio 109 en lugar del Producto intermedio 108.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>) 8 ppm 1,34 (br s, 1 H), 1,60 (br s, 1 H), 1,78 (s, 3 H), 2,02 (s, 3 H), 2,09 - 2,19 (m, 1 H), 2,25 - 2,40 (m, 3 H), 2,90 - 2,99 (m, 2 H), 3,02 - 3,11 (m, 2 H), 3,50 (s, 3 H), 3,71 (br d, J= 3,8 Hz, 1 H), 3,80 - 3,86 (m, 2 H), 4,04 - 4,12 (m, 2 H), 4,14 - 4,21 (m, 1 H), 4,39 (br s, 1 H), 4,57 (br s, 1 H), 4,60 (s, 1 H), 5,04 (br d, J=15,0 Hz, 1 H), 6,45 (s, 1 H), 7,12 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,31 (td, J= 8,9, 2,6 Hz, 1 H), 7,49 (dd, J=10,5, 2,6 Hz, 1 H), 7,66 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 8,23 (dd, J= 9,1, 5,9 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 30 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 27, a partir del Producto intermedio 107 en lugar del Producto intermedio 108.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>) 8 ppm 1,21 (br dd, J=11,9, 5,3 Hz, 2 H), 1,90 (s, 3 H), 1,99 (s, 3 H), 2,00 - 2,06 (m, 1 H), 2,24 - 2,40 (m, 3 H), 2,95 - 3,05 (m, 4 H), 3,49 - 3,50 (m, 3 H), 3,78 - 3,91 (m, 3 H), 4,05 - 4,12 (m, 2 H), 4,21 - 4,28 (m, 1 H), 4,49 - 4,54 (m, 1 H), 4,59 (br t, J=11,7 Hz, 1 H), 5,00 (br s, 1 H), 5,04 (s, 1 H), 6,51 (s, 1 H), 6,94 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,32 - 7,36 (m, 1 H), 7,49 - 7,56 (m, 2 H), 8,30 (dd, J= 9,1, 5,8 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

Se añadió LiOH (47 mg, 1,98 mmol, 15 eq.) solución del Producto intermedio 102 (98 mg, 0,13 mmol) en MeOH (3,3 ml), THF (3,3 ml) y agua (1,6 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a 50 °C. Los disolventes se evaporaron y el residuo se suspendió en agua y DCM y se acidificó con HCl acuoso 1 M a pH 4-5. La fase acuosa se extrajo con DCM (x 5). La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró a presión reducida, para dar el Compuesto 31 (59,9 mg, rendimiento: 63 %) como un sólido amarillo pálido.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 1,49 - 1,59 (m, 1 H), 1,64 - 1,76 (m, 1 H), 1,97 (s, 3 H), 2,14 - 2,20 (m, 3 H), 2,32 - 2,46 (m, 2 H), 2,46 - 2,59 (m, 2 H), 2,88 - 2,99 (m, 2 H), 2,99 - 3,09 (m, 2 H), 3,18 (s, 3 H), 3,36 - 3,46 (m, 1 H), 3,49 - 3,65 (m, 3 H), 3,75 - 3,91 (m, 2 H), 3,91 - 4,01 (m, 1 H), 4,16 - 4,34 (m, 3 H), 4,51 - 4,60 (m, 1 H), 4,80 (dd, J= 9,7, 2,5 Hz, 1 H), 5,11 - 5,20 (m, 1 H), 5,25 (s, 1 H), 6,03 (s, 1 H), 6,98 (d, J= 8,5 Hz, 1 H), 7,15 (s, 1 H), 7,22 (td, J= 8,8, 2,5 Hz, 1 H), 7,27 - 7,33 (m, 2 H), 8,34 (dd, J= 9,2, 5,7 Hz, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 32 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 31, a partir del Producto intermedio 103 en lugar del Producto intermedio 102.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d<6>) 6 ppm 1,17 - 1,22 (m, 1 H), 1,91 (s, 3 H), 2,00 (s, 3 H), 2,04 (br d, J= 5,7 Hz, 1 H), 2,26 - 2,41 (m, 3 H), 2,92 - 3,08 (m, 4 H), 3,10 (s, 3 H), 3,17 (d, J= 5,2 Hz, 1 H), 3,41 - 3,51 (m, 2 H), 3,72 - 3,90 (m, 3 H), 3,93 (t, J= 5,6 Hz, 2 H), 4,10 (br d, J= 5,3 Hz, 2 H), 4,25 (br d, J=11,1 Hz, 1 H), 4,49 - 4,55 (m, 1 H), 4,62 (br s, 1 H), 5,01 (br d, J=15,0 Hz, 1 H), 5,07 (s, 1 H), 6,48 (s, 1 H), 6,94 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,32 - 7,37 (m, 1 H), 7,54 (td, J= 6,6, 2,8 Hz, 2 H), 8,31 (dd, J= 9,4, 5,9 Hz, 1 H), 13,36 (br s, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 33 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 31, a partir del Producto intermedio 104 en lugar del Producto intermedio 102.

1H NMR (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,15 - 1,21 (m, 1 H), 1,91 (s, 3 H), 2,00 (s, 3 H), 2,02 - 2,09 (m, 1 H), 2,26 - 2,41 (m, 3 H), 2,92 - 3,08 (m, 4 H), 3,10 (s, 3 H), 3,17 (d, J= 5,2 Hz, 1 H), 3,40 - 3,51 (m, 2 H), 3,72 - 3,90 (m, 3 H), 3,90 -3,95 (m, 2 H), 4,10 (br d, J= 5,2 Hz, 2 H), 4,25 (br d, J=11,7 Hz, 1 H), 4,52 (br d, J= 3,9 Hz, 1 H), 4,62 (br s, 1 H), 5,01 (br d, J=1$2,6 Hz, 1 H), 5,07 (s, 1 H), 6,48 (s, 1 H), 6,94 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,32 - 7,37 (m, 1 H), 7,51 -7,57 (m, 2 H), 8,31 (dd, J= 9,3, 6,1 Hz, 1 H), 11,36 (br s, 1 H).

Estereoisómero puro pero estereoquímica absoluta no determinada

El Compuesto 34 se preparó mediante un protocolo de reacción análogo al del Compuesto 31, a partir del Producto intermedio 105 en lugar del Producto intermedio 102.

1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,51 - 1,58 (m, 1 H), 1,66 - 1,73 (m, 1 H), 1,97 (s, 3 H), 2,16 (s, 3 H), 2,32 - 2,45 (m, 2 H), 2,45 - 2,59 (m, 2 H), 2,87 - 2,99 (m, 2 H), 2,99 - 3,09 (m, 2 H), 3,18 (s, 3 H), 3,39 - 3,46 (m, 1 H), 3,49 - 3,64 (m, 3 H), 3,71 - 3,88 (m, 2 H), 3,92 - 4,01 (m, 1 H), 4,16 - 4,34 (m, 3 H), 4,50 - 4,61 (m, 1 H), 4,80 (dd, J= 9.8, 2,7 Hz, 1 H), 5,10 - 5,22 (m, 1 H), 5,25 (s, 1 H), 6,02 (s, 1 H), 6,98 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 7,22 (td, J= 8.8, 2,6 Hz, 1 H), 7,27 - 7,34 (m, 2 H), 8,33 (dd, J= 9,1, 5,8 Hz, 1 H).

Resultados de LCMS (RT significa tiempo de retención, en min.)

Tabla: Datos analíticos de SFC - Rt significa tiempo de retención (en minutos), [M+H]+ significa la masa protonada del compuesto, método se refiere al método utilizado para el análisis mediante (SFC)MS de compuestos enantioméricamente puros. Núm. significa número.

Análisis analítico

La medición de cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) se realizó utilizando una bomba de LC, una matriz de diodos (DAD) o un detector UV y una columna como se especifica en los métodos respectivos. Cuando fue necesario, se incluyeron detectores adicionales (consultar la tabla de métodos a continuación).

El flujo de la columna se llevó al espectrómetro de masas (MS) que se configuró con una fuente de iones de presión atmosférica. Forma parte del conocimiento del experto establecer los parámetros de ajuste (por ejemplo, rango de barrido, tiempo de permanencia...) para obtener iones que permitan la identificación del peso molecular (PM) monoisotópico nominal del compuesto. La adquisición de datos se realizó con el software adecuado.

Los compuestos se describen por sus tiempos de retención (Rt) experimentales e iones. Si no se especifica de manera diferente en la tabla de datos, el ion molecular reseñado corresponde a [M+H]+ (molécula protonada) y/o [M-H]-(molécula desprotonada). En caso de que el compuesto no fuera directamente ionizable, se especifica el tipo de aducto (es decir, [M+NH4]+, [M+HCOO]-, etc.). Para moléculas con múltiples patrones isotópicos (Br, Cl), el valor indicado es el obtenido para la masa isotópica más baja. Todos los resultados se obtuvieron con las incertidumbres experimentales que se asocian comúnmente con el método utilizado.

En lo sucesivo, “ SQD” significa detector cuádruple simple, “ MSD” detector selectivo de masas, “ TA” temperatura ambiente, “ BEH” híbrido de etilsiloxano/sílice unido por puente, “ DAD” detector de matriz de diodos, “ HSS” sílice de alta resistencia.

Códigos del método LCMS (flujo expresado en ml/min; temperatura de la columna (T) en °C; Tiempo de ejecución en minutos)

Métodos LC-MS:

Métodos SFC-MS:

La medición de SFC se llevó a cabo utilizando un sistema de cromatografía analítica de fluidos supercríticos (SFC) compuesto por una bomba binaria, para suministrar dióxido de carbono (CO2) y un modificador, un dispositivo automático de toma de muestra, un horno para la columna, un detector de haz de diodos dotado de una celda de flujo de alta presión que resiste una presión de hasta 400 bar. Si se configura con un espectrómetro de masas (MS), el flujo de la columna se llevó a la (MS). Forma parte del conocimiento del experto establecer los parámetros de ajuste (por ejemplo, rango de barrido, tiempo de permanencia...) para obtener iones que permitan la identificación del peso molecular (PM) monoisotópico nominal del compuesto. La adquisición de datos se realizó con el software adecuado. Métodos analíticos SFC-MS (flujo expresado en ml/min; temperatura de la columna (T Col) en °C; Tiempo de ejecución en minutos, contrapresión (BPR) en bares. “ iPrNH<2>” significa isopropilamina, “ iPrOH” significa 2-propanol, “ EtOH” significa etanol, “ min” significa minutos.

Métodos de SFC:

NMR

Los espectros de<1>H NMR se registraron en espectrómetros Bruker Avance III de 400 Mhz y Avance NEO de 400 MHz. CDCI<3>se utilizó como disolvente, salvo que se mencione lo contrario. Los desplazamientos químicos se expresan en ppm con respecto al tetrametilsilano.

Análisis farmacológico

Ejemplo biológico 1

Ensayo de unión con fluorescencia homogénea resuelta en el tiempo (HTRF, por sus siglas en inglés) para leucemia 1 de células mieloides marcada con terbio utilizando el péptido B<i>M BH3 (H2N-(C/Cy5Mal) WIAQEL<r>R<i>GDEFN-OH) como compañero de unión para Mcl-1.

La apoptosis, o muerte celular programada, garantiza la homeostasis tisular normal, y su desregulación puede conducir a varias patologías humanas, incluido el cáncer. La vía apoptótica extrínseca se inicia a través de la activación de los receptores de la superficie celular, mientras que la vía apoptótica intrínseca se produce en la membrana externa mitocondrial y está regulada por las interacciones de unión entre las proteínas de la familia Bcl-2 proapoptóticas y antiapoptóticas, incluida la Mcl-1. En muchos cánceres, la(s) proteína(s) de Bcl-2 antiapoptótica(s), tales como la Mcl-1, se sobrerregulan, y de este modo las células cancerosas pueden evadir la apoptosis. Por lo tanto, la inhibición de la(s) proteína(s) de Bcl-2, tales como Mcl-1, puede conducir a la apoptosis en células cancerosas, proporcionando así un método para el tratamiento de dichos cánceres.

Este ensayo evaluó la inhibición del dominio BH3: interacción Mcl-1 mediante la medición del desplazamiento del péptido BIM BH3 marcado con Cy5 (H<2>N-(C/Cy5Mal) WIAQELRRIGDEFN-OH) en el formato de ensayo HTRF. Procedimiento de ensayo

Los siguientes ensayos y tampones de solución madre se prepararon para uso en el ensayo: (a) tampón de solución madre: Tris-HCl 10 mM, pH = 7,5 NaCl 150 mM, filtrado, esterilizado y almacenado a 4 °C; y (b) tampón de ensayo 1 x, donde se añadieron los siguientes ingredientes al tampón de solución madre: ditiotreitol (DTT) 2 mM, Tween-20 al 0,0025 %, albúmina de suero bovino (BSA) 0,1 mg/ml. La solución de Tb-Mcl-1 1 x Bim Cy5 se preparó diluyendo la solución madre de proteína usando el tampón de ensayo 1 x (b) en Tb-Mcl-1 25 pM y el péptido Bim Cy58 nM. Utilizando el dispensador Acoustic ECHO, se dispensaron 100 nl del(de los) compuesto(s) de prueba 100 x en pocillos individuales de una placa Perkin Elmer Proxiplate de 384 pocillos de color blanco, para una concentración final del compuesto de 1 x, y una concentración final de DMSO del 1 %. El control inhibidor y el control neutro (NC, 100 nl de DMSO al 100 %) se estamparon en las columnas 23 y 24 de la placa de ensayo, respectivamente. A continuación, en cada pocillo de la placa se dispensó 10 pl de la solución de Tb-Mcl-1 1 x péptido Bim Cy5. La placa se centrifugó con una placa de cubierta a 1000 rpm durante 1 minuto, a continuación, se incubó durante 60 minutos a temperatura ambiente con placas cubiertas. La señal de TR-FRET se leyó en un lector de microplacas BMG PHERAStar FSX a temperatura ambiente usando el módulo óptico de HTRF (HTRF: excitación: 337 nm, fuente de luz; láser, emisión A: 665 nm, emisión B: 620 nm, inicio de integración: 60 ps, tiempo de integración: 400 ps).

Análisis de datos

Se utilizó el lector de microplacas PHERAStar FSX de BMG para medir la intensidad de fluorescencia en dos longitudes de onda de emisión: 665 nm y 620 nm, e informar de las unidades de fluorescencia relativa (RFU, por sus siglas en inglés) para ambas emisiones, así como de una relación de las emisiones (665 nm/620 nm) x 10.000. Los valores de RFU se normalizaron con respecto al porcentaje de inhibición de la siguiente manera:

% de inhibición = (((NC - ¡C) - (compuesto - IC))/(NC - IC)) x 10&100

donde IC (control inhibidor, señal baja) = señal media de Tb-MCl-1 péptido Bim Cy5 control inhibidor o 100%de inhibición de Mcl-1; NC (control neutro, señal alta) = señal media de Tb-MCl-1 péptido Bim Cy5 con DMSO solo o 0 % de inhibición. Se generó una curva de respuesta a la dosis de 11 puntos, para determinar los valores de IC<50>(utilizando GenData) basado en la siguiente ecuación:

Y= Inferior (Superior-lnferior)/(1+10,'((loglC50-X) *Pendiente))

donde Y = % de inhibición en presencia de concentración de inhibidor de X; Superior = 100 % de inhibición derivada del IC (señal media de Mcl-1 control inhibidor); Inferior = 0 % de inhibición derivada del NC (señal media de Mcl-1 DMSO); Pendiente = coeficiente de Hill; eIC50= concentración del compuesto con una inhibición del 50 % en relación con el control superior/control neutro (NC).

Ki - ICso / (1 [L]/Kd)

En este ensayo [L] = 8 nM y Kd = 10 nM

Los compuestos representativos de la presente invención se analizaron según el procedimiento descrito anteriormente, con resultados como se enumeran en la Tabla a continuación (n.d. significa no determinado).

Ejemplo biológico 2

MCL-1 es un regulador de la apoptosis, y está altamente sobreexpresado en células tumorales que escapan a la muerte celular. El ensayo evalúa la potencia celular de los compuestos de molécula pequeña que se dirigen a reguladores de la vía de apoptosis, principalmente MCL-1, Bfl-1, Bcl-2 y otras proteínas de la familia Bcl-2. Los inhibidores de proteína-proteína que alteran la interacción de reguladores antiapoptóticos con proteínas del dominio BH3 inician la apoptosis.

El ensayo Caspasa-Glo® 3/7 es un ensayo luminiscente que mide las actividades de las caspasas 3 y 7 en preparaciones enzimáticas purificadas o cultivos de células adherentes o en suspensión. El ensayo proporciona un sustrato proluminiscente caspasa-3/7, que contiene la secuencia de tetrapéptidos DEVD. Este sustrato se escinde para liberar aminoluciferina, un sustrato de luciferasa utilizado en la producción de luz. La adición del reactivo único Caspase-Glo® 3/7 en un formato de “ añadir-mezclar-medir” produce la lisis celular, seguida de la escisión del sustrato por la caspasa y la generación de una señal luminiscente “ tipo resplandor” .

Este ensayo utiliza la línea celular de mieloma múltiple humano MOLP-8, que es sensible a la inhibición de MCL-1. Materiales:

Perkin Elmer Envision

Multigotas 384 y casetes de dispensación de pequeño volumen

Centrífuga

Contador de células automatizado Countess

Portaobjetos con cámara de recuento Countess

Placa de ensayo: ProxiPlate-384 Plus, Microplaca blanca de 384 pocillos poco profundos

Cinta selladora: Topseal A plus

Frasco de cultivo T175

Medios de cultivo celular:

Cultivo celular:

Los cultivos celulares se mantuvieron entre 0,2 y 2,0 x 106 células/ml. Las células se cosecharon mediante recolección en tubos cónicos de 50 ml. A continuación, las células se precipitaron a 500 g durante 5 minutos, antes de eliminar el sobrenadante y resuspenderlas en medio de cultivo fresco precalentado. Las células se contaron y se diluyeron según fue necesario.

Reactivo Caspasa-Glo:

El reactivo de ensayo se preparó transfiriendo la solución tamponadora al vial de sustrato y mezclado. La solución puede almacenarse durante hasta 1 semana a 4 °C, con una pérdida de señal insignificante.

Procedimiento de ensayo:

Los compuestos se suministraron en placas listas para ensayo (Proxiplate) y se almacenaron a -20 °C. Los ensayos siempre incluyen 1 placa de referencia que contiene compuestos de referencia. Las placas se aplicaron con 40 nl de compuestos (0,5 % de DMSO final en células; dilución seriada; 30 pm concentrados máxima dilución 1/3, 10 dosis, duplicados). Los compuestos se utilizaron a temperatura ambiente y se añadieron 4 pl de medio precalentado a todos los pocillos, excepto las columnas 2 y 23. El control negativo se preparó añadiendo un 1 % de DMSO en el medio. El control positivo se preparó al añadir el compuesto de control positivo apropiado en una concentración final de 60 pm en el medio. La placa se preparó añadiendo 4 pl de control negativo a la columna 23, 4 pl de control positivo a la columna 2, y 4 pl de suspensión celular a todos los pocillos de la placa. La placa con células se incubó después a 37 °C durante 2 horas. El reactivo de señal de ensayo es la solución Caspasa-Glo descrita anteriormente y se añadieron 8 pl a todos los pocillos. A continuación, las placas se sellaron y se midieron después de 30 minutos. La actividad de un compuesto experimental se calculó como el cambio porcentual en la inducción de apoptosis, de la siguiente manera:

LC

= Mediana de los valores del control bajo

= Referencia central en Screener

= DMSO

= 0 %

HC

= Mediana de los valores del control alto

= Referencia de escala en Screener

= 30 |jm de control positivo

= 100 % de inducción de apoptosis

% de electo (AC50) = 100 - ((muestra-LC) / (HC-LC)) * 100

% de control = (muestra / HC) x 100

% de control mín. = ((muestra-LC) / (HC-LC)) * 100

Tabla: AC<50>medida para compuestos representativos de Fórmula (I). Los valores medios se refieren a todos los ciclos de todos los lotes de un compuesto determinado.

Claims

R E I V I N D I C A C I O N E S 1. Un compuesto de fórmula (I)

o un tautómero o una forma estereoisomérica del mismo, en donde X1 representa (a-1) o (a-2):

(a-1) (a-2) en donde 'a' y 'b' indican cómo la variable X<1>está unida al resto de la molécula; R<1>representa hidrógeno; metilo; o alquilo C<2-6>opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en Het<1>, -OR<3>y -NR<4a>R<4b>; X representa -O- o -CH<2>-; en caso de que X represente -CH<2>-: R<z>representa -O-alquilo C<1-4>opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>, Ar<1>y Het<2>; o R<z>se toma junto con R<1>de (a-2), de modo que R<z>junto con los átomos a los que está unido y (a-2) forma un anillo bicíclico de fórmula (b-1) o (b-2):

en caso de que X represente -O-: R<z>representa alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>, en donde dicho alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>se sustituye opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>, Ar<1>y Het<2> Het<1>representa morfolinilo, N-metilpiperazinilo o tetrahidropiranilo; R<3>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>; R<4a>and R<4b>se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C<1-4>; X<2>representa

que se puede unir al resto de la molécula en ambas direcciones; R<2>representa hidrógeno; metilo; o alquilo C<2-6>opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en Het<1>, -OR<3>y -NR<4a>R<4b>; Het<2>representa morfolinilo o N-metilpiperazinilo; Ar<1>representa fenilo opcionalmente sustituido con un -O-alquilo C<1-4>; R<y>representa hidrógeno o halo; R<5>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>, o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>; R<6a>and R<6b>se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C<1-4>; R<7>representa hidrógeno, alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>; n es 1 o 2; m es 2; o una sal farmacéuticamente aceptable o un solvato del mismo. El compuesto según la reivindicación 1, en donde R<1>representa hidrógeno; metilo; o alquilo C<2-6>opcionalmente sustituido con un -OR<3>; X representa -O- o -CH<2>-; en caso de que X represente -CH<2>-: R<z>representa -O-alquilo C<1-4>opcionalmente sustituido con un sustituyente de Ar<1>; o R<z>se toma junto con R<1>de (a-2), de modo que R<z>junto con los átomos a los que está unido y (a-2) forma un anillo bicíclico de fórmula (b-1):

en caso de que X represente -O-: R<z>representa alquenilo C<2-4>o alquilo C<1-4>, en donde dicho alquilo C<1-4>se sustituye opcionalmente con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>y Het<2>; R<3>representa alquilo C<1-4>o -alquilo C<2-4>-O-alquilo C<1-4>; R<2>representa alquilo C<2-6>opcionalmente sustituido con un -OR<3>; Het<2>representa morfolinilo o N-metilpiperazinilo; R<y>representa halo; n es 1. El compuesto según la reivindicación 1 o 2, en donde X representa -O-. 4. El compuesto según la reivindicación 1 o 2, en donde X representa -CH<2>-. 5. El compuesto según la reivindicación 4, en donde R<z>se toma junto con R<1>de (a-2), de modo que R<z>junto con los átomos a los que está unido y (a-2) forma un anillo bicíclico de fórmula (b-1) o (b-2):

6. El compuesto según la reivindicación 4, en donde R<z>representa -O-alquilo C<1-4>opcionalmente sustituido con un sustituyente seleccionado del grupo que consiste en -OR<5>, -NR<6a>R<6b>, Ar<1>y Het<2>. 7. El compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde R<y>representa fluoro. 8. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. 9. Un proceso para preparar una composición farmacéutica como se define en la reivindicación 8, que comprende mezclar un portador farmacéuticamente aceptable con una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7. 10. Un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 o una composición farmacéutica según la reivindicación 8 para utilizar como medicamento. 11. Un compuesto como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 o una composición farmacéutica según la reivindicación 8 para utilizar en la prevención o el tratamiento del cáncer. 12. El compuesto o una composición farmacéutica para utilizar según la reivindicación 11, en donde el cáncer se selecciona de próstata, pulmón, páncreas, mama, ovario, cuello uterino, melanoma, leucemia linfocítica crónica (LLC) de células B, leucemia mieloide aguda (LMA) y leucemia linfoblástica aguda (LLA).