ES2908838T3 - Antagonista del receptor de GLP-1 para usar en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito - Google Patents

Abstract

Exendina(9-39) o un fragmento de esta para uso en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito y/o neonatal, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por vía intravenosa, subcutánea, parenteral, transmucosa, transdérmica, intramuscular, intradérmica, intraperitoneal, intraventricular, o una combinación de estas, y en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta es un antagonista del receptor del péptido similar al glucagón-1 (GLP-1).

Description

DESCRIPCIÓN

Antagonista del receptor de GLP-1 para usar en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito

Campo de la invención

Esta invención se refiere a antagonistas del receptor del péptido 1 similar al glucagón (GLP-1) para usar en el tratamiento y la mejora del hiperinsulinismo congénito y neonatal.

Antecedentes de la invención

El hiperinsulinismo congénito (HI) es un trastorno genético de la función de las células p del páncreas que se caracteriza por la incapacidad de suprimir la secreción de insulina en presencia de hipoglucemia, lo que provoca daño cerebral o la muerte si no se trata adecuadamente. Las mutaciones de la línea germinal en cinco genes se asocian con el HI: el receptor de sulfonilurea (SUR-1, codificado por ABCC8), un canal de potasio rectificador hacia adentro (Kir6.2, codificado por KCNJ11), glucocinasa (GCK), glutamato deshidrogenasa (GLUD-1), y L-3-hidroxiacil-CoA de cadena corta (SCHAD, codificado por HADSC). Las mutaciones de pérdida de función en el canal Katp (compuesto por dos subunidades: Kir6.2 y SUR-1) son responsables de la forma más común y grave de HI (Katp HI), y muchos pacientes requieren una pancreatectomía casi total para controlar la hipoglucemia, lo que conduce a largas estancias en el hospital y complicaciones potencialmente mortales.

Se necesitan con urgencia tratamientos eficaces para la HI congénita.

Resumen de la invención

Esta invención proporciona antagonistas del receptor del péptido 1 similar al glucagón (GLP-1) para usar en el tratamiento y mejora del hiperinsulinismo congénito y neonatal.

Específicamente, la invención proporciona exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito y/o neonatal, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por vía parenteral, transmucosa, transdérmica, intramuscular, intravenosa, intradérmica, subcutánea, intraperitoneal, intraventricular, o una combinación de estas, y en donde la exendina(9-39) o fragmento de esta es un antagonista del receptor del péptido similar al glucagón-1 (GLP-1).

En una modalidad específica, la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por vía subcutánea.

En otra modalidad, la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por vía intravenosa.

En otra modalidad, la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por infusión.

En otra modalidad, la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra mediante el uso de una bomba.

En una modalidad, la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra a una dosis de 20-2000 nmol/kg/día. En una modalidad, la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra a un sujeto menor de 10 años.

En otra modalidad, la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra a un sujeto mayor de 10 años.

En una modalidad, la exendina(9-39) o un fragmento de esta se administra a un sujeto mayor de 30 años.

En una modalidad, la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra a un sujeto que tiene hiperinsulinismo congénito asociado con una anomalía o mutación genética, o con una mutación en un gen que codifica un receptor de sulfonilurea (SUR-1), o con una mutación en un gen que codifica una proteína Kir6.2, o con una mutación en un gen que codifica una proteína seleccionada de glucocinasa (GCK), glutamato deshidrogenasa (GLUD-1), y la enzima mitocondrial de cadena corta 3-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa (HADHSC).

La presente invención también proporciona un péptido homólogo a la exendina(9-39) o un fragmento del mismo para usar en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito y/o neonatal, en donde el péptido o fragmento de este muestra identidad con la SEQ ID NO: 1 de más de 70 %, y en donde el péptido o fragmento de este es un antagonista del receptor del péptido similar a glucagón-1 (GLP-1).

En una modalidad, el péptido o el fragmento de este muestra una identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 85 %. En una modalidad, el péptido o fragmento se administra por infusión, por vía parenteral, transmucosa, transdérmica, intramuscular, intravenosa, intradérmica, subcutánea, intraperitoneal, intraventricular, intracraneal, intravaginal, intratumoral, u oral. En ciertas modalidades, el péptido o fragmento se administra por vía subcutánea y/o intravenosa.

En una modalidad, el péptido o fragmento se administra como una formulación líquida tal como una solución acuosa, una solución no acuosa, una suspensión, una emulsión, o un aceite.

Breve descripción de las figuras

La invención se comprenderá mejor a partir de la lectura de la siguiente descripción detallada tomada junto con las figuras en las que se usan designadores de referencia similares para designar elementos similares, y en las que:

La Figura 1 muestra hipoglucemia en ayunas y tolerancia alterada a la glucosa en ratones SUR-1-/-. (A) Niveles de glucosa en sangre en ayunas (en mg/dL) en ratones SUR-1-1- (n = 27) y controles de compañeros de camada de tipo salvaje (n = 30), p = 0,00000003. (B) Peso corporal (en g) en ratones SUR-1-/- (n = 27) y controles de compañeros de camada de tipo salvaje (n = 30). (C) Tolerancia oral a la glucosa (2 g/kg) en ratones SUR-1-/- (n = 23) (línea continua y círculos) y controles de compañeros de camada de tipo salvaje (n = 25) (línea discontinua y cuadrados abiertos), p <0,0001, ANOVA de mediciones repetidas. (D) Secreción de insulina en respuesta a una carga de glucosa oral (2 g/kg) en ratones SUR-1-/- (n = 8) (línea continua y círculos) en comparación con controles de compañeros de camada de tipo salvaje (n = 9) (línea discontinua y cuadrados abiertos), p=0,02, ANOVA de mediciones repetidas;

La Figura 2 muestra los niveles de glucosa en sangre en ayunas normalizados con exendina-(9-39) en ratones SUR-1-/-. Los niveles de glucosa en sangre se determinaron después de un ayuno de 12-16 horas el día 7. Compañeros de camada de tipo salvaje tratados con vehículo (n = 13) (barra blanca); compañeros de camada de tipo salvaje tratados con exendina-(9-39) (n = 10) (barra rayada); ratones SUR-1-/- tratados con vehículo (n = 11) (barra negra); ratones SUR-1-/- tratados con exendina-(9-39) (n = 11) (barra gris);

La Figura 3 muestra el perfil hormonal en ayunas. (A) Niveles de glucagón e insulina en ayunas en tipo salvaje tratados con vehículo (n = 15) (barra blanca), tipo salvaje tratados con exendina-(9-39) (n = 14) (barra sombreada), SUR-1-/- tratados con vehículo (n = 13) (barra negra), y SUR-1-/- (n = 14) (barra gris) tratado con exendina-(9-39). (B) Proporción de insulina respecto a glucosa en tipo salvaje tratados con vehículo (n = 9) (barra blanca), tipo salvaje tratados con exendina-(9-39) (n = 10) (barra sombreada), SUR-1-1- tratados con vehículo (n = 9) (barra negra), y SUR-1-1- tratados con exendina-(9-39) (n = 10) (barra gris);

Figura 4. que la exendina-(9-39) no influyó en la tolerancia a la glucosa ni en la sensibilidad a la insulina. (A) Tolerancia oral a la glucosa en compañeros de camada de tipo salvaje tratados con vehículo (n = 10) (línea discontinua/cuadrados abiertos), tipo salvaje tratados con exendina-(9-39) (n = 8) (línea continua/cuadrados), ratones SUR-1-1- tratados con vehículo (n = 9) (línea discontinua/círculos abiertos), y ratones SUR-1-1- tratados con exendina-(9-39) (n = 9) (línea continua/círculos sólidos). Tipo salvaje tratados con vehículo vs. SUR-1-1-tratados con vehículo, p = 0,001, ANOVA de mediciones repetidas; SUR-1-1- tratados con vehículo vs. SUR-1' /- tratados con exendina-(9-39), p = 0,02 en el tiempo 120 min. (B) Sensibilidad a la insulina en ratones de tipo salvaje tratados con vehículo (n = 15) (línea discontinua/cuadrados abiertos), ratones de tipo salvaje tratados con exendina-(9-39) (n = 14) (línea continua/cuadrados sólidos), ratones SUR-1-1- tratados con vehículo (n = 13) (línea discontinua/círculos abiertos), y ratones SUR-1-1- tratados con exendina-(9-39) (n = 14) (línea continua/círculos sólidos);

La Figura 5 muestra el efecto de la exendina-(9-39) sobre la capacidad de respuesta al alimento de los islotes SUR-1-1-. Se cultivaron islotes aislados de ratones SUR-1-1- durante 3 días en medio RPMI 1640 que contenía glucosa 10 mM. Se perfundieron lotes de 100 islotes cultivados con un aumento gradual de una mezcla fisiológica de aminoácidos (0-12 mM) en presencia (círculos abiertos) o ausencia (círculos negros) de exendina-(9-39) a una concentración de 100 nM. Los resultados se presentan como medias ± S.E. para 100 islotes a partir de 3 perfusiones separadas para cada condición;

La Figura 6 muestra que la exendina-(9-39) no impactó [Ca2+]¡ en los islotes SUR-1-1-. Se cultivaron islotes de ratón SUR-1-1- aislados con glucosa 10 mM durante 3 días en cubreobjetos. [Ca2+]i se midió continuamente mediante fluorescencia con Fura-2 en respuesta a aminoácidos (4 mM) en presencia (línea gris) o ausencia de exendina-(9-39) (línea negra). Se muestran experimentos representativos. Todos los estudios se repitieron al menos 3 veces y mostraron resultados comparables; y

La Figura 7 muestra un esquema que describe el mecanismo de acción propuesto de la exendina-(9-39) en los islotes SUR-1-1-. En los islotes de ratón SUR-1-1-, la despolarización de la membrana plasmática da como resultado un Ca2+ citosólico elevado y una secreción desregulada de insulina. La exendina-(9-39) se une al receptor de GLP-1 y reduce los niveles iniciales de AMPc, lo que provoca una disminución de la secreción de insulina a pesar de los niveles elevados de calcio. De manera similar, al disminuir la acumulación de AMPc estimulada por aminoácidos, la exendina-(9-39) inhibe la secreción de insulina estimulada por aminoácidos.

Descripción detallada de la invención

Esta invención se refiere en general al tratamiento y mejora del hiperinsulinismo congénito y neonatal mediante el uso de un antagonista del receptor del péptido-1 similar al glucagón (GLP-1).

En una modalidad, la presente invención proporciona exendina(9-39) o un fragmento de este para usar en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito y/o neonatal, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por vía parenteral, transmucosa, transdérmica, intramuscular, intravenosa, intradérmica, subcutánea, intraperitoneal, intraventricular, o una combinación de estas, y en donde la exendina(9-39) o un fragmento de esta es un antagonista del receptor del péptido similar a glucagón-1 (GLP-1).

La presente invención también proporciona una composición que comprende un péptido homólogo a la exendina(9-39) o un fragmento de este para usar en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito y/o neonatal, en donde el péptido o fragmento de este muestra identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 70 %, y en donde el péptido o fragmento de este es un antagonista del receptor del péptido similar a glucagón-1 (GLP-1).

En una modalidad, el antagonista del receptor de GLP-1 puede actuar mediante el aumento de los niveles de glucosa en sangre en ayunas y la mejora de la tolerancia al ayuno en un sujeto con hiperinsulinismo congénito. En una modalidad, una infusión continua de exendina-(9-39) elevó los niveles de glucosa en sangre en ayunas en ratones normales, un efecto que se observó en babuinos y sujetos humanos sanos. Cuando se administra como una infusión continua, en otra modalidad, la exendina-(9-39) aumenta significativamente los niveles de glucosa en sangre en ayunas en ratones que albergan una mutación nula en SUR-1, sin afectar significativamente el aumento de peso, la tolerancia a la glucosa o la sensibilidad a la insulina. En otra modalidad, la exendina-(9-39) disminuye la relación insulina/glucosa elevada, lo que indica que en una modalidad, el efecto de la exendina-(9-39) se media por el receptor de GLP-1 de los islotes sin un impacto significativo en otras acciones mediadas por el receptor de GLP-1 periférico o central.

En otra modalidad, la presente invención puede actuar mediante la disminución del requerimiento de glucosa para mantener la normoglicemia de un sujeto con hiperinsulinismo congénito, lo que disminuye de esta manera el requerimiento de glucosa para mantener la euglicemia de un sujeto con hiperinsulinismo congénito.

En una modalidad, la exendina-(9-39) o sus homólogos y fragmentos descritos en la presente descripción, suprimen la secreción de insulina estimulada por aminoácidos. En otra modalidad la exendina-(9-39) o sus homólogos y fragmentos descritos en la presente descripción, bloquean la estimulación anormal por nutrientes de la secreción de insulina en ausencia de canales K+ATP funcionales. En una modalidad, la exendina-(9-39) o sus homólogos y fragmentos descritos en la presente descripción, disminuyen la secreción de insulina basal y estimulada por aminoácidos y la acumulación de AMPc intracelular. En consecuencia y en una modalidad, la exendina-(9-39) corrige el patrón anormal de secreción de insulina responsable de la hipoglucemia: secreción de insulina basal elevada en ausencia de glucosa y secreción de insulina estimulada por aminoácidos.

En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R actúa mediante la supresión de la secreción de insulina por parte del sujeto.

Como se proporciona en la presente descripción, los pacientes con hiperinsulinismo HI K^atp muestran hipoglucemia en respuesta a la proteína oral. Además, la exendina-(9-39) aumenta los niveles de glucosa en sangre en ayunas en ratones SUR1-/-. Así, la presente invención muestra que la exendina-(9-39) es eficaz en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito.

En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R puede administrarse después del diagnóstico de hiperinsulinismo congénito. En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R puede administrarse después de la identificación de una anomalía genética que predispone al hiperinsulinismo congénito. En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R puede administrarse a un sujeto con antecedentes familiares de hiperinsulinismo congénito.

En una modalidad, el AMP cíclico estimula la exocitosis por vías dependientes de PKA, a través de la fosforilación de objetivos aguas abajo que incluyen el canal KATP, y por mecanismos independientes de PKA, a través de la activación de factores de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) tal como cAMP-GEFII (también conocido como Epac). La ruta independiente de PKA es crítica en otra modalidad en la potenciación de la secreción de insulina por las hormonas incretinas GLP-1 y GIP y en una modalidad, ejerce su efecto sobre los gránulos secretores que contienen insulina ubicados en la reserva fácilmente liberable. En los islotes pancreáticos, el efecto de cAMPGEFII sobre la secreción de insulina depende en una modalidad del calcio citosólico así como también del cAMP, y cAMP sensibiliza en otra modalidad la maquinaria exocitótica al calcio. En una modalidad, la inhibición de la secreción de insulina en los islotes SUR-1'1' por la exendina-(9-39) o sus homólogos y fragmentos descritos en la presente descripción, se media por el efecto del AMPc en una etapa tardía dependiente del calcio en la vía exocitótica que implica a la reserva de gránulos de insulina fácilmente liberables (Figura 7).

La Figura 7 muestra un esquema que describe el mecanismo de acción propuesto de la exendina-(9-39) en los islotes SUR-1'1'. En los islotes de ratón SUR-1'1', la despolarización de la membrana plasmática da como resultado un Ca2+ citosólico elevado y una secreción desregulada de insulina. La exendina-(9-39) se une al receptor de GLP-1 y reduce los niveles iniciales de AMPc, lo que provoca en una disminución de la secreción de insulina a pesar de los niveles elevados de calcio. De manera similar, al disminuir la acumulación de AMPc estimulada por aminoácidos, la exendina-(9-39) inhibe la secreción de insulina estimulada por aminoácidos.

El hiperinsulinismo congénito tratado o mejorado por la presente invención se asocia, en otra modalidad, con una mayor secreción de insulina por parte del sujeto. En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito se asocia con una anomalía genética. En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito se asocia con una mutación genética. En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito es el resultado de una anomalía genética. En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito es el resultado de una mutación genética.

En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito se asocia con una disfunción del canal KATP. En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito es un hiperinsulinismo K^atp.

En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito se asocia con una mutación en un gen que codifica un receptor de sulfonilurea (ABCC8). En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito se asocia con una mutación en un gen que codifica un canal de potasio rectificador hacia el interior, la proteína Kir6.2 (KCNJ11). En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito se asocia con una mutación en un gen que codifica una glucocinasa (GCK). En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito se asocia con una mutación en un gen que codifica una glutamato deshidrogenasa (GLUD-1). En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito se asocia con una mutación en un gen que codifica una enzima mitocondrial de cadena corta 3-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa (HADHSC). En otra modalidad, el hiperinsulinismo congénito se asocia con cualquier otra mutación conocida en la técnica por asociarse con un hiperinsulinismo congénito.

En otra modalidad, la presente invención proporciona el antagonista del receptor de GLP-1 para usar en el tratamiento de un sujeto con HI neonatal, o para reducir la incidencia de hipoglucemia en un sujeto con HI neonatal. El hiperinsulinismo neonatal (HI) tratado o mejorado por la presente invención es, en otra modalidad, HI no genético. En otra modalidad, el HI neonatal es un HI neonatal prolongado. En otra modalidad, e1HI neonatal es un HI neonatal prolongado no genético. En otra modalidad, el HI neonatal dura varios meses después del nacimiento. En otra modalidad, el HI neonatal es el resultado del estrés perinatal. En otra modalidad, el estrés perinatal es el resultado de un peso al nacer pequeño para la edad gestacional. En otra modalidad, el estrés perinatal es el resultado de la asfixia al nacer. En otra modalidad, el estrés perinatal es el resultado de cualquier otro estrés perinatal conocido en la técnica.

En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R utilizado en los tratamientos de la presente invención muestra una mejora en una propiedad biológica deseable en relación con GLP-1. En otra modalidad, la propiedad biológica es una vida media biológica mejorada. En otra modalidad, la propiedad biológica es una afinidad mejorada por GLP-1R. En otra modalidad, la propiedad biológica es una potencia mejorada para el antagonismo de GLP-1R.

En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R comprende un grupo amida en su extremo C (por ejemplo, el extremo de un péptido que usualmente contiene un grupo carboxi). En otra modalidad, el grupo amida confiere al antagonista una mejora en una propiedad biológica deseable. En otra modalidad, la propiedad es la resistencia a la proteólisis. En otra modalidad, la propiedad biológica es una vida media biológica mejorada. En otra modalidad, la propiedad biológica es una afinidad mejorada por GLP-1R. En otra modalidad, la propiedad biológica es una potencia mejorada para el antagonismo de GLP-1R.

En esta modalidad, el antagonista es un péptido de exendina (9-39) (Ex9-39) (también conocido como "exendina-3), cuyo péptido tiene la secuencia establecida en SEQ ID NO: 1, o el antagonista es un fragmento del péptido expuesto en s Eq ID NO. 1 y cuyo fragmento es un antagonista de un GLP-1R. En otra modalidad, el fragmento muestra una vida media biológica prolongada en relación con GLP-1. En otra modalidad, el fragmento es resistente a la escisión por DPPIV. En otra modalidad, el fragmento es resistente a la degradación por DPPIV.

El péptido exendina 9-39 tiene la secuencia: DLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-amida (SEQ ID NO: 1). En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R es un homólogo de la SEQ ID NO: 1 o un fragmento de este, en donde el homólogo o fragmento de este muestra una identidad con SEQ ID NO: 1 de más del 70 %, y es un antagonista del receptor de GLP-1.

En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R es precursor de los antagonistas de GLP-1R anteriores. En otra modalidad, el precursor se metaboliza en el cuerpo del sujeto para generar el compuesto activo. En otra modalidad, el compuesto activo se genera mediante cualquier otro proceso conocido en la técnica.

En otra modalidad, un antagonista de GLP-1R para usar en los tratamientos de la presente invención es un mimético de Ex9-39, que es un antagonista de GLP-1R. En otra modalidad, el mimético es resistente a la degradación por DPPIV. En otra modalidad, un compuesto mimético se deriva de un péptido de exendina mediante la incorporación de 1 o más residuos de AA modificados. En otra modalidad, uno o más de los extremos se derivatizan para incluir un grupo bloqueador, es decir, un sustituyente químico adecuado para proteger y/o estabilizar los extremos N y C de una degradación no deseada. En otra modalidad, "degradación no deseada" se refiere a cualquier tipo de descomposición enzimática, química o bioquímica del compuesto en su extremo que probablemente afecte la función del compuesto, es decir, degradación secuencial del compuesto en un extremo terminal de este.

En otra modalidad, los grupos bloqueadores incluyen grupos protectores usados convencionalmente en la técnica de la química de péptidos que no afectarán adversamente las actividades in vivo del péptido. Por ejemplo, pueden introducirse grupos bloqueadores N-terminales adecuados mediante alquilación o acilación del N-terminal. Los ejemplos de grupos bloqueadores N-terminales adecuados incluyen grupos alquilo C1-C5 ramificados o no ramificados, grupos acilo tales como grupos formilo y acetilo, así como también formas sustituidas de estos, tales como el grupo acetamidometilo (Acm). Los análogos de desamino AA también son grupos bloqueadores N-terminales útiles, y pueden acoplarse al extremo N-terminal del péptido o usarse en lugar del residuo N-terminal. Los grupos bloqueadores C-terminales adecuados, en los que el grupo carboxilo del C-terminal se incorpora o no, incluyen ésteres, cetonas o amidas. Los grupos alquilo formadores de ésteres o cetonas, en particular grupos alquilo inferiores tales como metilo, etilo y propilo, y grupos amino formadores de amidas tales como aminas primarias (--NH2) y grupos mono- y dialquilaminos tales como metilamino, etilamino, dimetilamino, dietilamino, metiletilamino y similares son ejemplos de grupos bloqueadores C-terminales. Los análogos de AA descarboxilados, tales como agmatina, también son grupos bloqueadores C-terminales útiles y pueden acoplarse al residuo C-terminal del péptido o usarse en su lugar. En otra modalidad, los grupos amino y carboxilo libres en los extremos se eliminan por completo del péptido para producir formas desamino y descarboxiladas de este sin afectar la actividad del péptido. En otra modalidad, un compuesto mimético se deriva de un péptido de exendina mediante modificaciones tales como la sustitución de 1 o más de los AA en la forma L-isomérica natural con AA D-isoméricos. En otra modalidad, el péptido incluye uno o más restos de D-aminoácidos, o comprende AA que están todos en forma D. También se contemplan formas retroinversas de péptidos, por ejemplo, péptidos invertidos en los que todos los AA se sustituyen con formas de D-aminoácidos.

En otra modalidad, los compuestos miméticos son sales de adición de ácido de un péptido de exendina. En otra modalidad, un péptido de exendina se trata con un ácido inorgánico tal como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico y similares, o un ácido orgánico tal como acético, propiónico, glicólico, pirúvico, oxálico, málico, malónico, succínico, maleico, fumárico, tártaro, cítrico, benzoico, cinámico, mandélico, metanosulfónico, etanosulfónico, p-toluenosulfónico, salicílico y similares, para proporcionar una sal soluble en agua del péptido adecuado para usar en la invención.

En otra modalidad, se produce un compuesto mimético mediante un proceso que comprende la etapa de derivatización química in vivo o in vitro de un péptido de exendina, por ejemplo, acetilación o carboxilación. También se incluyen modificaciones de la glicosilación, por ejemplo, las realizadas mediante la modificación de los patrones de glicosilación de un polipéptido durante su síntesis y procesamiento o en etapas de procesamiento posteriores; por ejemplo, mediante la exposición del polipéptido a enzimas que afectan a la glicosilación, por ejemplo, enzimas glicosilantes o desglicosilantes de mamíferos. En otra modalidad, un compuesto mimético comprende un residuo de AA fosforilado, por ejemplo, fosfotirosina, fosfoserina, o fosfotreonina.

En otra modalidad, se produce un compuesto mimético mediante la modificación de un péptido de exendina mediante el uso de técnicas biológicas moleculares ordinarias para mejorar su resistencia a la degradación proteolítica u optimizar las propiedades de solubilidad. En otra modalidad, se modifica un péptido de exendina para hacerlo más adecuado como un agente terapéutico. Los análogos de tales polipéptidos incluyen aquellos que contienen residuos distintos de los L-aminoácidos de origen natural, por ejemplo, D-aminoácidos o aminoácidos sintéticos de origen no natural.

Los métodos para identificar compuestos miméticos se conocen bien en la técnica y se describen, por ejemplo, en Song J y otros, Biochem Cell Biol 76(2-3): 177-188, 1998; Vogt A y otros, J Biol Chem. 270(2): 660-4, 1995; Alexopoulos K y otros, J Med Chem 47(13): 3338-52, 2004; Andronati Sa y otros, Curr Med Chem 11(9): 1183-211, 2004; Breslin MJ y otros, Bioorg Med Chem Lett 13(10): 1809-12, 2003; y documento núm. WO 02/081649 ("ErbB interface peptidomimetics and methods of use thereof) a nombre de Greene y otros. En otra modalidad, se usa la construcción de modelos para diseñar los compuestos miméticos como se describe en una de las referencias anteriores. En otra modalidad, la solubilidad de los compuestos miméticos se optimiza como se describe en una de las referencias anteriores.

En otra modalidad, el sujeto tratado de acuerdo con la presente invención es un sujeto humano. En otra modalidad, el sujeto es un sujeto pediátrico. En otra modalidad, el sujeto es un niño. En otra modalidad, el sujeto es un menor. En otra modalidad, el sujeto es un bebé. En otra modalidad, el sujeto es un infante. En otra modalidad, el sujeto es un adolescente. En otra modalidad, el sujeto es un adulto.

En otra modalidad, el sujeto tiene menos de 10 años. En otra modalidad, la edad es inferior a 9 años. En otra modalidad, la edad es inferior a 8 años. En otra modalidad, la edad es inferior a 7 años. En otra modalidad, la edad es inferior a 6 años. En otra modalidad, la edad es inferior a 5 años. En otra modalidad, la edad es inferior a 4 años. En otra modalidad, la edad es inferior a 3 años. En otra modalidad, la edad es inferior a 2 años. En otra modalidad, la edad es inferior a 18 meses. En otra modalidad, la edad es inferior a 1 año. En otra modalidad, la edad es inferior a 10 meses. En otra modalidad, la edad es inferior a 8 meses. En otra modalidad, la edad es inferior a 6 meses. En otra modalidad, la edad es inferior a 4 meses. En otra modalidad, la edad es inferior a 3 meses. En otra modalidad, la edad es inferior a 2 meses. En otra modalidad, la edad es inferior a 1 mes.

En otra modalidad, la edad es superior a 6 meses. En otra modalidad, la edad es superior a 1 año. En otra modalidad, la edad es superior a 2 años. En otra modalidad, la edad es superior a 3 años. En otra modalidad, la edad es superior a 5 años. En otra modalidad, la edad es superior a 7 años. En otra modalidad, la edad es superior a 10 años. En otra modalidad, la edad es superior a 15 años. En otra modalidad, la edad es superior a 20 años. En otra modalidad, la edad es superior a 30 años. En otra modalidad, la edad es superior a 40 años. En otra modalidad, la edad es superior a 50 años. En otra modalidad, la edad es superior a 60 años. En otra modalidad, la edad es superior a 65 años. En otra modalidad, la edad es superior a 70 años.

En otra modalidad, la edad es de 1 mes-5 años. En otra modalidad, la edad es de 2 meses-5 años. En otra modalidad, la edad es de 3 meses-5 años. En otra modalidad, la edad es de 4 meses-5 años. En otra modalidad, la edad es de 6 meses-5 años. En otra modalidad, la edad es de 9 meses-5 años. En otra modalidad, la edad es de 1-5 años. En otra modalidad, la edad es de 2-5 años. En otra modalidad, la edad es de 3-5 años. En otra modalidad, la edad es de 1-10 años. En otra modalidad, la edad es de 1-5 años. En otra modalidad, la edad es de 2-10 años. En otra modalidad, la edad es de 3-10 años. En otra modalidad, la edad es de 5-10 años. En otra modalidad, la edad es de 1-6 meses. En otra modalidad, la edad es de 2-6 meses. En otra modalidad, la edad es de 3-12 meses. En otra modalidad, la edad es de 6-12 meses.

En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R para usar en la presente invención se administra por infusión. En otra modalidad, la vía de administración comprende una bomba.

Las composiciones farmacéuticas que contienen el antagonista de GLP-1R pueden administrarse, en otra modalidad, por vía parenteral, transmucosa, transdérmica, intramuscular, intravenosa, intradérmica, subcutánea, intraperitoneal, intraventricular, intracraneal, intravaginal o intratumoral.

En otra modalidad, las composiciones farmacéuticas se administran por vía oral y, por lo tanto, se formulan en una forma adecuada para la administración oral, es decir, como una preparación sólida o líquida. Las formulaciones orales sólidas adecuadas incluyen tabletas, cápsulas, píldoras, gránulos, bolillas y similares. Las formulaciones orales líquidas adecuadas incluyen soluciones, suspensiones, dispersiones, emulsiones, aceites y similares. En otra modalidad, el ingrediente activo se formula en una cápsula. De acuerdo con esta modalidad, las composiciones comprenden, en adición al compuesto activo y el portador inerte o diluyente, una cápsula de gelatina dura.

En otra modalidad, las composiciones farmacéuticas se administran mediante inyección intravenosa, intraarterial, o intramuscular de una preparación líquida. Las formulaciones líquidas adecuadas incluyen soluciones, suspensiones, dispersiones, emulsiones, aceites y similares. En otra modalidad, las composiciones farmacéuticas se administran por vía intravenosa y, por lo tanto, se formulan en una forma adecuada para la administración intravenosa. En otra modalidad, las composiciones farmacéuticas se administran por vía intraarterial y, por lo tanto, se formulan en una forma adecuada para la administración intraarterial. En otra modalidad, las composiciones farmacéuticas se administran por vía intramuscular y, por lo tanto, se formulan en una forma adecuada para la administración intramuscular.

En otra modalidad, las composiciones farmacéuticas se administran por vía tópica a las superficies corporales y, por lo tanto, se formulan en una forma adecuada para la administración tópica. Las formulaciones tópicas adecuadas incluyen geles, ungüentos, cremas, lociones, gotas y similares. Para la administración tópica, el antagonista de GLP-1R o sus derivados tolerados fisiológicamente, tales como sales, ésteres, N-óxidos, y similares, se preparan y aplican como soluciones, suspensiones, o emulsiones en un diluyente fisiológicamente aceptable con o sin un portador farmacéutico.

En otra modalidad, la composición farmacéutica se administra como un supositorio, por ejemplo, un supositorio rectal o un supositorio uretral. En otra modalidad, la composición farmacéutica se administra mediante implantación subcutánea de una bolilla. En otra modalidad, la bolilla proporciona la liberación controlada del antagonista de GLP-1R durante un período de tiempo.

En otra modalidad, el compuesto activo se administra en una vesícula, por ejemplo, un liposoma.

En otras modalidades, los portadores o diluyentes incluyen una goma, un almidón (por ejemplo, almidón de maíz, almidón pregelatinizado), un azúcar (por ejemplo, lactosa, manitol, sacarosa, dextrosa), un material celulósico (por ejemplo, celulosa microcristalina), un acrilato (por ejemplo, polimetilacrilato), carbonato de calcio, óxido de magnesio, talco, o mezclas de estos.

En otras modalidades, los portadores farmacéuticamente aceptables para formulaciones líquidas son soluciones, suspensiones, emulsiones o aceites acuosos o no acuosos. Ejemplos de disolventes no acuosos son el propilenglicol, el polietilenglicol y los ésteres orgánicos inyectables, tal como el oleato de etilo. Los portadores acuosos incluyen agua, soluciones alcohólicas/acuosas, emulsiones o suspensiones, que incluyen medios salinos y tamponados. Ejemplos de aceites son aquellos de origen animal, vegetal, o sintético, por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite de oliva, aceite de girasol, aceite de hígado de pescado, otro aceite marino, o un lípido procedente de la leche o de los huevos.

En otra modalidad, los vehículos parenterales (para inyección subcutánea, intravenosa, intraarterial, o intramuscular) incluyen solución de cloruro de sodio, dextrosa de Ringer, dextrosa y cloruro de sodio, Ringer lactato y aceites fijos. Los vehículos intravenosos incluyen reponedores de fluidos y nutrientes, reponedores de electrolitos tales como los basados en dextrosa de Ringer, y similares. Los ejemplos son líquidos estériles tales como agua y aceites, con o sin la adición de un surfactante y otros adyuvantes farmacéuticamente aceptables. En general, los portadores líquidos preferidos son agua, solución salina, dextrosa acuosa y soluciones de azúcar relacionadas, y glicoles tales como propilenglicoles o polietilenglicol, particularmente para soluciones inyectables. Ejemplos de aceites son aquellos de origen animal, vegetal, o sintético, por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite de oliva, aceite de girasol, aceite de hígado de pescado, otro aceite marino, o un lípido procedente de la leche o de los huevos.

En otras modalidades, las composiciones comprenden, además, aglutinantes (por ejemplo, goma arábiga, almidón de maíz, gelatina, carbómero, etilcelulosa, goma guar, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, povidona), agentes desintegrantes (por ejemplo, almidón de maíz, almidón de patata, ácido algínico, dióxido de silicio, croscarmelosa sódica, crospovidona, goma guar, glicolato sódico de almidón), tampones (por ejemplo, Tris-HCl, acetato, fosfato) de varios pH y fuerza iónica, aditivos tales como albúmina o gelatina para evitar la absorción en las superficies, detergentes (por ejemplo, Tween 20, Tween 80, Pluronic F68, sales de ácidos biliares), inhibidores de proteasa, surfactantes (por ejemplo, laurilsulfato de sodio), potenciadores de la permeación, agentes solubilizantes (por ejemplo, glicerol, polietilenglicerol), antioxidantes (por ejemplo, ácido ascórbico, metabisulfito de sodio, hidroxianisol butilado), estabilizantes (por ejemplo, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa), agentes que aumentan la viscosidad (por ejemplo, carbómero, dióxido de silicio coloidal, etilcelulosa, goma guar), edulcorantes (por ejemplo, aspartamo, ácido cítrico), conservantes (por ejemplo, timerosal, alcohol bencílico, parabenos), lubricantes (por ejemplo, ácido esteárico, estearato de magnesio, polietilenglicol, laurilsulfato de sodio), auxiliadores de fluidez (por ejemplo, dióxido de silicio coloidal), plastificantes (por ejemplo, ftalato de dietilo, trietilo citrato), emulsionantes (por ejemplo, carbómero, hidroxipropilcelulosa, laurilsulfato de sodio), recubrimientos poliméricos (por ejemplo, poloxámeros o poloxaminas), agentes formadores de películas y recubrimientos (por ejemplo, etilcelulosa, acrilatos, polimetacrilatos) y/o adyuvantes.

En otra modalidad, las composiciones farmacéuticas proporcionadas en la presente descripción son composiciones de liberación controlada, es decir, composiciones en las que el antagonista de GLP-1R se libera durante un período de tiempo después de la administración. Las composiciones de liberación controlada o sostenida incluyen la formulación en depósitos lipofílicos (por ejemplo, ácidos grasos, ceras, aceites). En otra modalidad, la composición es una composición de liberación inmediata, es decir, una composición en la que todo el antagonista de GLP-1R se libera inmediatamente después de la administración.

En otra modalidad, la composición farmacéutica se administra en un sistema de liberación controlada. En otra modalidad, el agente se administra mediante infusión intravenosa, una bomba osmótica implantable, un parche transdérmico, liposomas, u otros modos de administración. En otra modalidad, se usa una bomba (ver Langer, supra; Sefton, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:201 (1987); Buchwald y otros, Surgery 88:507 (1980); Saudek y otros, N. Engl. J. Med. 321:574 (1989). En otra modalidad, se usan materiales poliméricos; por ejemplo, en el interior de microesferas o un implante. Aún en otra modalidad, un sistema de liberación controlada se coloca cerca del objetivo terapéutico, por lo que requiere solo una fracción de la dosis sistémica (ver, por ejemplo, Goodson, en Medical Applications of Controlled Release, supra, vol. 2, pág. 115-138 (1984); y Langer R, Science 249: 1527-1533 (1990).

Las composiciones también incluyen, en otra modalidad, la incorporación del material activo en o sobre preparaciones particuladas de compuestos poliméricos tales como ácido poliláctico, ácido poliglicólico, hidrogeles, etc., o sobre liposomas, microemulsiones, micelas, vesículas unilamelares o multilamelares, fantasmas de eritrocitos, o esferoplastos). Tales composiciones influirán en el estado físico, solubilidad, estabilidad, velocidad de liberación in vivo y velocidad de eliminación in vivo.

También se incluyen composiciones en partículas recubiertas con polímeros (por ejemplo, poloxámeros o poloxaminas) y el compuesto acoplado a anticuerpos dirigidos contra receptores, ligandos o antígenos específicos de tejido o acoplado a ligandos de receptores específicos de tejido.

También se incluyen compuestos modificados por la unión covalente de polímeros solubles en agua tales como polietilenglicol, copolímeros de polietilenglicol y polipropilenglicol, carboximetilcelulosa, dextrano, alcohol polivinílico, polivinilpirrolidona o poliprolina. Se sabe que los compuestos modificados muestran semividas en sangre sustancialmente más largas después de la inyección intravenosa que los compuestos no modificados correspondientes (Abuchowski y otros, 1981; Newmark y otros, 1982; y Katre y otros, 1987). Tales modificaciones también aumentan, en otra modalidad, la solubilidad del compuesto en solución acuosa, eliminan la agregación, mejoran la estabilidad física y química del compuesto y reducen en gran medida la inmunogenicidad y la reactividad del compuesto. En otra modalidad, la actividad biológica in vivo deseada se logra mediante la administración de tales abductores de compuestos poliméricos con menos frecuencia o en dosis más bajas que con el compuesto no modificado.

La preparación de composiciones farmacéuticas que contienen un componente activo, por ejemplo mediante procesos de mezcla, granulación, o formación de tabletas, se conoce bien en la técnica. El ingrediente terapéutico activo a menudo se mezcla con excipientes que son farmacéuticamente aceptables y compatibles con el ingrediente activo. Para la administración oral, el antagonista de GLP-1R o sus derivados fisiológicamente tolerados, tales como sales, ésteres, N-óxidos, y similares, se mezclan con aditivos habituales para este fin, tales como vehículos, estabilizantes, o diluyentes inertes, y se convierten por métodos habituales en formas adecuadas para la administración, tales como comprimidos, comprimidos recubiertos, cápsulas de gelatina dura o blanda, soluciones acuosas, alcohólicas u oleosas. Para la administración parenteral, el antagonista de GLP-1R o sus derivados fisiológicamente tolerados tales como sales, ésteres, N-óxidos, y similares se convierte en una solución, suspensión o emulsión, si se desea con las sustancias habituales y adecuadas para este fin, por ejemplo, solubilizantes u otras sustancias.

Un componente activo se formula, en otra modalidad, en la composición como formas de sal neutralizadas farmacéuticamente aceptables. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales de adición de ácido (formadas con los grupos amino libres del polipéptido o molécula de anticuerpo), que se forman con ácidos inorgánicos tales como, por ejemplo, ácido clorhídrico o fosfórico, o ácidos orgánicos como acético, oxálico, tartárico, mandélico, y similares. Las sales formadas a partir de los grupos carboxilo libres también pueden derivarse de bases inorgánicas tales como, por ejemplo, hidróxidos de sodio, potasio, amonio, calcio, o férrico, y bases orgánicas tales como isopropilamina, trimetilamina, 2-etilamino etanol, histidina, procaína, y similares.

En otra modalidad, la dosis del antagonista de GLP-1R es de 1 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 2 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 3 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 5 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 7 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 10 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 12 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 15 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 20 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 25 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 30 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 50 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 70 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 100 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 120 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 150 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 250 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 300 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 400 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 500 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 700 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1000 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1500 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es superior a 1500 pmol/kg/min.

En otra modalidad, la dosis es de 30-500 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-2 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-3 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-5 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-10 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-20 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-40 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-60 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-100 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 1-300 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 2-5 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 2-10 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 2-20 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 2-40 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 2-70 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 2-100 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 2-200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 2-300 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 5-10 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 5-20 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 5-40 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 5-70 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 5-100 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 5-200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 5-300 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 10-20 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de■ 10-40 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 10-70 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 10-100 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 10-150 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 10-200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 10-300 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 10-500 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 20-40 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 20-70 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 20-100 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 20-150 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 20-200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 20-300 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 20-500 pmol/kg/min . En otra modalidad , la dosis es de 30-40 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 30-70 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 30-100 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 30-150 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 30-200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 30-300 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 30-500 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 50-100 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 50-150 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 50-200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 50-300 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 50-500 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 100-150 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 100-200 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 100-300 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 100-500 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 100-1000 pmol/kg/min. En otra modalidad, la dosis es de 100-1500 pmol/kg/min.

En otra modalidad, la dosis es 20 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 25 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 30 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 40 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 60 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 80 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 100 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 150 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 200 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 300 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 400 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 600 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 800 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 1000 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 1200 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 1500 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 2000 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosificación es superior a 2000 nmol/kg/día.

En otra modalidad, la dosis es 20-2000 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 20-700 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 20-100 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 20-200 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 20-300 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 20-500 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 20­ 1000 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 40-100 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 40-200 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 40-300 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 40-500 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 40-1000 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 60-100 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 60-150 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 60-200 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 60-300 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 60-500 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 60­ 1000 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 100-150 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 100-200 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 100-300 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 100-500 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 100-1000 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 100-1500 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 200-300 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 200-500 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 200-1000 nmol/kg/día. En otra modalidad, la dosis es 200-1500 nmol/kg/día.

En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R para usar en la presente invención es homólogo a un péptido de exendina de SEQ ID NO: 1 o un fragmento de este, como se describe en la presente descripción, en donde el homólogo o fragmento de este muestra identidad con la SEQ ID NO: 1 de más del 70 %, y es un antagonista del receptor de GLP-1. Los términos "homología", "homólogo", etc., cuando se refieren a cualquier proteína o péptido, se refieren, en una modalidad, a un porcentaje de residuos de aminoácidos (AA) en la secuencia candidata que son idénticos a los residuos de un correspondiente polipéptido nativo, después de alinear las secuencias e introducir interrupciones, si es necesario, para lograr el máximo porcentaje de homología, y no considerar ninguna sustitución conservadora como parte de la identidad de la secuencia. Los métodos y programas informáticos para el alineamiento se conocen bien en la técnica.

La homología se determina, en otra modalidad, mediante un algoritmo informático para el alineamiento de secuencias, mediante métodos bien descritos en la técnica. Por ejemplo, el análisis de algoritmos informáticos de homología de secuencias de ácidos nucleicos puede incluir la utilización de cualquier número de paquetes de software disponibles, tales como, por ejemplo, los paquetes BLAST, DOMAIN, BEAUTY (BLAST Enhanced Alignment Utility), GENPEPT y TREMBL.

En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 72 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 75 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 78 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 80 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 82 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 83 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 85 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 87 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 88 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 90 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 92 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 93 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 95 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 96 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 97 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 98 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 99 %. En otra modalidad, "homología" se refiere a la identidad con la SEQ ID NO: 1 del 100 %.

La homología de proteínas y/o péptidos para cualquier secuencia de AA enumerada en la presente descripción se determina, en otra modalidad, mediante métodos bien descritos en la técnica, que incluyen el análisis de algoritmos informáticos de secuencias de AA, mediante la utilización de cualquiera de varios paquetes de software disponibles, a través de métodos establecidos. Algunos de estos paquetes incluyen los paquetes FASTA, BLAST, MPsrch o Scanps y, en otra modalidad, emplean el uso de los algoritmos de Smith y Waterman, y/o alineamientos globales/locales o BLOCKS para análisis, por ejemplo.

Como se usa en la presente descripción, "ácidos nucleicos" o "nucleótido" se refiere a una cadena de al menos dos combinaciones de base-azúcar-fosfato. El término incluye, en una modalidad, ADN y ARN. "Nucleótidos" se refiere, en una modalidad, a las unidades monoméricas de polímeros de ácido nucleico. El ARN está, en una modalidad, en forma de ARNt (ARN de transferencia), ARNnp (ARN nuclear pequeño), ARNr (ARN ribosomal), ARNm (ARN mensajero), ARN antisentido, ARN inhibidor pequeño (ARNip), micro ARN (miARN) y ribozimas. Se describió el uso de ARNpi y miARN (Caudy AA y otros, Genes & Devel 16: 2491-96 y referencias allí citadas). El ADN puede estar, en otras modalidades, en forma de ADN plasmídico, ADN vírico, ^a Dⁿ lineal, o ADN cromosómico o derivados de estos grupos. En adición, estas formas de ADN y ARN pueden ser de cadena simple, doble, triple, o cuádruple. El término también incluye, en otra modalidad, ácidos nucleicos artificiales que contienen otros tipos de cadenas principales pero las mismas bases. En una modalidad, el ácido nucleico artificial es un PNA (ácido nucleico peptídico). Los PNA contienen cadenas principales de péptidos y bases de nucleótidos y pueden unirse, en una modalidad, a moléculas tanto de ADN como de ARN. En otra modalidad, el nucleótido se modificó con oxetano. En otra modalidad, el nucleótido se modifica mediante el reemplazamiento de uno o más enlaces fosfodiéster con un enlace fosforotioato. En otra modalidad, el ácido nucleico artificial contiene cualquier otra variante de la secuencia principal de fosfato de los ácidos nucleicos nativos conocidos en la técnica. El uso de ácidos nucleicos de fosfotiorato y PNA se conoce por los expertos en la técnica y se describe, por ejemplo, en Neilsen PE, Curr Opin Struct Biol 9: 353-57; y Raz Nk y otros. Biochem Biophys Res Commun. 297:1075-84. La producción y uso de ácidos nucleicos es conocida por los expertos en la técnica y se describe, por ejemplo, en Molecular Cloning, (2001), Sambrook y Russell, eds. y Métodos en Enzimología: Métodos para la clonación molecular en células eucariotas (2003) Purchio y GC Fareed.

En otra modalidad, la presente invención utiliza una molécula quimérica, que comprende una fusión del péptido de exendina, o el fragmento u homólogo de este, con un polipéptido etiqueta que proporciona un epítopo al que puede unirse selectivamente un anticuerpo antietiqueta. La etiqueta del epítopo se coloca, en otras modalidades, en el extremo amino o carboxilo de la proteína o en una ubicación interna de esta. La presencia de tales formas de péptidos de exendina etiquetadas en el epítopo se detecta, en otra modalidad, mediante el uso de un anticuerpo contra el polipéptido etiqueta. En otra modalidad, la inclusión de la etiqueta de epítopo permite que el péptido de exendina se purifique fácilmente mediante purificación por afinidad mediante el uso de un anticuerpo antietiqueta u otro tipo de matriz de afinidad que una a la etiqueta de epítopo. En la técnica se conocen varios polipéptidos etiquetas y sus respectivos anticuerpos. Los ejemplos incluyen etiquetas de polihistidina (poli-his) o polihistidinaglicina (poli-his-gly); el polipéptido etiqueta flu ^hA y su anticuerpo 12CA5 (Field y otros, Mol. Cell. Biol., 8: 2159-2165 (1988)); la etiqueta c-myc y los anticuerpos 8F9, 3C7, 6E10, G4, B7 y 9E10 (Evan y otros, Molecular and Cellular Biology, 5: 3610-3616 (1985)); y la etiqueta de glicoproteína D (gD) del virus de1Herpes Simplex y su anticuerpo (Paborsky y otros, Protein Engineering, 3(6): 547-553 (1990)). Otros polipéptidos etiqueta incluyen el péptido Flag (Hopp y otros, BioTechnology, 6: 1204-1210 (1988)); el péptido del epítopo KT3 (Martín y otros, Science, 255: 192­ 194 (1992)); un péptido epítopo de tubulina (Skinner y otros, J. Biol. Chem., 266:15163-15166 (1991)); y la etiqueta peptídica de la proteína del gen 10 T7 (Lutz-Freyermuth y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87: 6393-6397 (1990)). En otra modalidad, la molécula quimérica comprende una fusión del péptido de exendina con una inmunoglobulina o una región particular de una inmunoglobulina. Los métodos para construir proteínas de fusión se conocen bien en la técnica y se describen, por ejemplo, en LaRochelle y otros, J. Cell Biol., 139(2): 357-66 (1995); Heidaran y otros, FASEB J., 9(1): 140-5 (1995); Ashkenazi y otros, Int. Rev. Inmunol., 10(2-3): 219-27 (1993) y Cheon y otros, PNAS USA, 91(3): 989-93 (1994).

En una modalidad, el término "administrar" se refiere a la exposición, que puede ser directa o indirecta. En una modalidad, tal contacto comprende la inyección directa de la célula diana por cualquier medio bien conocido en la técnica, tal como la microinyección. En otra modalidad, el suministro a la célula es indirecto, tal como a través del suministro en un medio de cultivo que rodea la célula, o través de la administración a un sujeto, o a través de cualquier vía bien conocida en la técnica. En otra modalidad, el término significa que el antagonista de GLP-1R se introduce en un sujeto que recibe tratamiento y se permite que el compuesto entre en contacto con el antagonista de GLP-1R in vivo.

"Administrar", en una modalidad, se refiere a poner en contacto directamente la célula diana con una composición para usar en la presente invención. En otra modalidad, "poner en contacto" se refiere al contacto indirecto de la célula diana con la composición. En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R se pone en contacto con la célula diana mediante difusión o cualquier otro proceso de transporte activo o transporte pasivo conocido en la técnica mediante el cual los compuestos circulan dentro del cuerpo.

En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R se transporta en el torrente sanguíneo de los sujetos a la célula diana del sujeto. En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R se transporta por difusión a la célula diana del sujeto. En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R se transporta por transporte activo a la célula diana del sujeto. En otra modalidad, el antagonista de GLP-1R se administra al sujeto de tal forma que contacta directamente con la célula diana del sujeto.

El tejido diana de los tratamientos de la presente invención es, en otra modalidad, el islote pancreático. En otra modalidad, el tejido diana es el hipotálamo. En otra modalidad, el tejido diana es el hipocampo. En otra modalidad, el tejido diana es la corteza cerebral. En otra modalidad, el tejido diana es el riñón. En otra modalidad, el tejido diana es el corazón. En otra modalidad, el tejido diana es el tracto gastrointestinal. En otra modalidad, el tejido diana es cualquier otro tejido diana conocido en la técnica que exprese un GLP-1R.

En otra modalidad de los tratamientos de la presente invención, el antagonista de GLP-1R se administra en combinación con un fármaco usado para tratar uno de los trastornos anteriores. En otra modalidad, el fármaco es diazóxido. En otra modalidad, el fármaco es octreotida. En otra modalidad, el fármaco es cualquier otro fármaco conocido en la técnica que pueda usarse para tratar un hiperinsulinismo.

Sección de detalles experimentales

Materiales y métodos

Animales

Dr. Mark A. Magnuson proporcionó amablemente los ratones SUR-1'1'. La generación y el genotipado de ratones SUR-1'1' se describió previamente (8). Los ratones se mantienen en un fondo genético C57Bl/6. En todos los experimentos se usaron ratones de control compañeros de camada de tipo salvaje y SUR-1'1' de doce a dieciocho semanas de edad. Los ratones se mantuvieron en un ciclo de luz-oscuridad de 12:12-h y se alimentaron con una dieta estándar para roedores. Todos los procedimientos se aprobaron y llevaron a cabo de acuerdo con las pautas del Institutional Animal Care and Use Committee de la Universidad de Pensilvania.

Administración de exendina-(9-39)

Se implantaron por vía subcutánea minibombas osmóticas Alzet (modelo 2002; Alza, Palo Alto, CA) para administrar exendina-(9-39) (Bachem Bioscience, King of Prussia, PA) a una velocidad de 150 pmol/kg/min o vehículo (NaCl al 0,9 %/BSA al 1 %) durante 2 semanas.

Homeostasis de la glucosa

Para la determinación de los niveles de glucosa en sangre en ayunas, los ratones se mantuvieron en ayunas durante 12-16 horas. La prueba de tolerancia a la glucosa oral se realizó después de un ayuno de 12-16 horas mediante la administración de 2 g/kg de dextrosa por sonda oral (agujas de alimentación; Popper and Sons, Inc., Hyde Park, NY). Para la prueba de tolerancia a la insulina, los ratones recibieron 0,5 unidades/kg de insulina por vía intraperitoneal después de un ayuno de 4 horas. Los niveles de glucosa en sangre se midieron mediante el uso de un medidor de glucosa portátil (FreeStyle; TheraSense, Alameda, CA). La insulina y el glucagón se midieron mediante ELISA (panel de inmunoensayo endocrino de ratón; Linco Research, Inc., St. Charles, MO).

Estudios de islotes

Los islotes se aislaron mediante digestión con colagenasa y se cultivaron durante 3 días en medio RPMI 1640 que contenía glucosa 10 mM. El medio de cultivo se complementó con suero fetal bovino al 10 %, glutamina 2 mM, penicilina 100 unidades/mL y estreptomicina 50 pg/mL. Los islotes se incubaron a 37 °C en una incubadora con 5 % de CO2, 95 % de aire humidificado. Se cargaron lotes de 100 islotes de ratón cultivados en un filtro de nailon en una cámara y se perfundieron con tampón de bicarbonato de Krebs-Ringer (NaCl 115 mM, NaHCO324 mM, KCl 5 mM, MgCl2 1 mM, CaCl2 2,5 mM, He PeS 10 mM, pH 7,4) con albúmina de suero bovino al 0,25 % a un caudal de 2 mL/min. Las soluciones de perfundido se gasificaron con 95 % O2, 5 % CO2 y se mantuvieron a 37 °C. Los islotes se estimularon con un aumento gradual de aminoácidos. La mezcla fisiológica de 19 aminoácidos cuando se usó a una concentración máxima de 12 mM (unas 3 veces la concentración fisiológica) tenía la siguiente composición (en mM): glutamina 2, alanina 1,25, arginina 0,53, aspartato 0,11, citrulina 0,27, glutamato 0,35, glicina 0,85, histidina 0,22, isoleucina 0,27, leucina 0,46, lisina 1,06, metionina 0,14, ornitina 0,20, fenilalanina 0,23, prolina 1, serina 1,62, treonina 0,77, triptófano 0,21, valina 0,57. Se recolectaron muestras cada minuto para los ensayos de insulina. La insulina se midió mediante radioinmunoensayo (Linco Research Inc., St. Charles, MO).

Determinación del contenido de AMPc

Los islotes se aislaron como se indicó anteriormente, se recolectaron a mano y se cultivaron durante tres días. Los islotes cultivados se preincubaron en tampón de bicarbonato de Krebs-Ringer sin glucosa durante 60 minutos, se adicionó exendina-(9-39) 100 nM 30 minutos después del período de preincubación. Después los islotes se expusieron a diferentes tratamientos durante 30 minutos adicionales en presencia de isobutilmetilzantina (IBMX) 0,1 mM. Después de la incubación, los islotes se lavaron 2 veces con tampón de Hank sin glucosa frío. El AMPc se midió en lisados de islotes mediante ELISA (GE/Amersham Biosciences, Piscataway, NJ).

Mediciones de Ca2+ libre citosólico

Los islotes de ratón se aislaron y cultivaron en cubreobjetos de vidrio revestidos con poli-L-lisina en las mismas condiciones que se describen anteriormente. El procedimiento de perfusión y la medición de Ca2+ libre citosólico ([Ca2+]i) se describieron previamente (24). En resumen, el cubreobjetos con los islotes adjuntos se incubó con acetoximetiléster de Fura-215 pM (Molecular Probes, Eugene, OR) en tampón de bicarbonato de Krebs-Ringer con glucosa 5 mM durante 35 min a 37 °C. Después los islotes se perfundieron con tampón de bicarbonato de Krebs-Ringer con albúmina de suero bovino al 0,25 % a 37 °C a un caudal de 2 mL/min, mientras se aplicaban varios agentes. Se midió [Ca2+]i con un microscopio de fluorescencia de doble longitud de onda como se describió anteriormente.

Evaluación estadística

Los datos presentados son la media ± SEM y se comparan mediante la prueba t de Student. Para las pruebas de tolerancia a la glucosa e insulina, los valores se compararon mediante ANOVA de medidas repetidas. Las diferencias se consideraron significativas a p<0,05.

Ejemplo 1: la exendina-(9-39) aumenta significativamente los niveles de glucosa en sangre en ayunas en ratones SUR-1 x-/-Los machos SUR-1'/_ de 12 a 18 semanas de edad y los compañeros de camada de tipo salvaje se sometieron a una evaluación inicial que incluyó mediciones de glucosa en sangre en ayunas y pruebas de tolerancia a la glucosa oral, seguida de aleatorización para recibir tratamiento con exendina-(9-39) (150 pmol/kg/min) o vehículo (0,9 % de NaCl, 1 % de BSA). Los niveles de glucosa en sangre en ayunas se determinaron después de un ayuno nocturno en los días 3 y 7 de la infusión. En adición, se evaluaron la tolerancia a la glucosa oral y la sensibilidad a la insulina durante el tratamiento. Los niveles de glucosa en sangre en ayunas fueron significativamente más bajos en los ratones SUR-1-/' en comparación con sus compañeros de camada de tipo salvaje (59,4 ± 1,5 mg/dL vs. 75 ± 1,8 mg/dL, p=0,00000003) (Figura 1A), mientras que el peso corporal no fue diferente (Figura 1B). Después de una carga oral de glucosa, los ratones SUR-1'/_ eran intolerantes a la glucosa en comparación con los controles de compañeros de camada de tipo salvaje (p <0,0001, ANOVA de medidas repetidas) (Figura 1C). Los ratones SUR-1'/_ tienen un deterioro significativo de la secreción de insulina en respuesta a una carga de glucosa oral (tipo salvaje frente a SUR-1'/_: p = 0,02, ANOVA de mediciones repetidas) (Figura ID). Se administró exendina-(9-39) a través de una bomba subcutánea miniosmótica Azlet a una tasa de infusión continua de 150 pmol/kg/min durante 2 semanas. Esta dosis se eligió en base a los resultados de un estudio piloto que evaluó diferentes dosis que previamente demostraron tener un efecto en humanos y ratones normales.

En el día 7, la glucosa en sangre en ayunas fue significativamente menor en los ratones SUR-1'/_ tratados con vehículo en comparación con los compañeros de camada de tipo salvaje tratados con vehículo (p = 0,000002) (Figura 2). El tratamiento con exendina-(9-39) elevó significativamente los niveles de glucosa en sangre en ayunas en ratones SUR-1'/_ en comparación con los ratones SUR-1'A tratados con vehículo (82,2 ± 6,3 mg/dl vs. 63,2 ± 4,9 mg/dL, p = 0,03, en el día 3; 82 ± 4,7 mg/dL vs. 56,4 ± 4,3 mg/dL, p = 0,0006, el día 7). Los niveles de glucosa en sangre en ayunas no fueron diferentes en los ratones de tipo salvaje tratados con exendina-(9-39) en comparación con los controles de tipo salvaje tratados con vehículo, en contraste con nuestras observaciones anteriores en ratones BALB/c de tipo salvaje, lo que sugiere una función específica de la cepa del receptor GLP-1 en la glucemia en ayunas. La exendina-(9-39) no afectó la ganancia de peso en SUR-1'/_ ni en los controles de compañeros de camada de tipo salvaje.

Ejemplo 2: La exendina-(9-39) afecta directamente la secreción de insulina de los islotes

Durante el tratamiento, los niveles de insulina y glucagón en ayunas no fueron diferentes entre los grupos de tratamiento (Figura 3A); sin embargo, en el contexto de niveles más bajos de glucosa en sangre en ayunas, los niveles de insulina se elevaron inapropiadamente en ratones SUR-1'1' tratados con vehículo y los niveles de glucagón no aumentaron como se esperaba en respuesta a la hipoglucemia. La relación insulina/glucosa aumenta en los ratones SUR-1'1' en comparación con los ratones de control compañeros de camada de tipo salvaje Figura 3B) (WT vs. SUR-1'1': p = 0,04) y se normaliza por el tratamiento con exendina-(9-39) (WT vs SUR-1'1' Ex-(9-39): p= 0,32), lo que sugiere un efecto directo en los islotes de la exendina-(9-39) sobre la secreción de insulina.

Dados los efectos in vivo observados sobre la secreción de insulina, pero no sobre la sensibilidad a la insulina, se determinó a continuación si la exendina-(9-39) ejerce un efecto directo sobre la función de los islotes SUR-1'/_. Se examinó el efecto de la exendina-(9-39) sobre la respuesta anormal de los islotes de SUR-1'/_ a la secreción de insulina inducida por el combustible (específicamente, la hipersensibilidad a los aminoácidos). Los islotes aislados se perfundieron con una mezcla de aminoácidos. Los islotes SUR-1'1' liberaron insulina de forma anormal en respuesta a la estimulación por aumento gradual por una mezcla fisiológica de 19 aminoácidos (mediante el uso de un aumento de 0,04 mM/min para la glutamina y 0,2 mM/min para los otros aminoácidos). Esta respuesta a los aminoácidos se bloqueó por exendina-(9-39) (Figura 5). La respuesta de la insulina a KCl fue similar en presencia y ausencia de exendina-(9-39).

Ejemplo 3: la exendina-(9-39) no altera la tolerancia a la glucosa ni la sensibilidad a la insulina en ratones SUR-1 -/-

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para uso en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito y/o neonatal, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por vía intravenosa, subcutánea, parenteral, transmucosa, transdérmica, intramuscular, intradérmica, intraperitoneal, intraventricular, o una combinación de estas, y en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta es un antagonista del receptor del péptido similar al glucagón-1 (GLP-1).

2. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por vía subcutánea.

3. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por vía intravenosa.

4. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra por infusión.

5. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar de acuerdo con la reivindicación 4, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra mediante el uso de una bomba.

6. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra a una dosis de 20-2000 nmol/kg/día.

7. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra a un sujeto menor de 10 años.

8. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra a un sujeto mayor de 10 años.

9. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar de acuerdo con la reivindicación 8, en donde el sujeto tiene más de 30 años.

10. Exendina(9-39) o un fragmento de esta para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta se administra a un sujeto que tiene hiperinsulinismo congénito asociado con una anomalía o mutación genética, o con una mutación en un gen que codifica un receptor de sulfonilurea (SUR-1), o con una mutación en un gen que codifica una proteína Kir6.2, o con una mutación en un gen que codifica una proteína seleccionada de glucocinasa (GCK), glutamato deshidrogenasa (GLUD-1), y la enzima mitocondrial de cadena corta 3-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa (HADHSC).

11. Un péptido homólogo a la exendina(9-39) o un fragmento de este para usar en el tratamiento del hiperinsulinismo congénito y/o neonatal, en donde el péptido o fragmento de este muestra una identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 70 %, y en donde la exendina(9-39) o el fragmento de esta es un antagonista del receptor del péptido similar al glucagón-1 (GLP-1).

12. El péptido para usar de acuerdo con la reivindicación 11, en donde el péptido o el fragmento de este muestra una identidad con la SEQ ID NO: 1 superior al 85 %.

13. El péptido para usar de acuerdo con la reivindicación 11 o 12, en donde el péptido o fragmento se administra por infusión, por vía intravenosa, subcutánea, parenteral, transmucosa, transdérmica, intramuscular, intradérmica, intraperitoneal, intraventricular, intracraneal, intravaginal, intratumoral, u oral.

14. El péptido para usar de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11-13, en donde el péptido o fragmento se administra por vía subcutánea y/o intravenosa.

15. El péptido para usar de acuerdo con la reivindicación 11 o 12, en donde el péptido o fragmento se administra como una formulación líquida tal como una solución acuosa, una solución no acuosa, una suspensión, una emulsión o un aceite.