ES2613663T3

ES2613663T3 - Compuestos de 1,3-oxazolidina o 1,3-oxazinano como antagonistas del receptor de orexina

Info

Publication number: ES2613663T3
Application number: ES13804876.4T
Authority: ES
Inventors: Aya Futamura; Yuko Araki; Masahito Abe; Hiroshi Ohta; Ryo Suzuki; Dai Nozawa
Original assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2012-06-15
Filing date: 2013-06-13
Publication date: 2017-05-25
Anticipated expiration: 2033-06-13
Also published as: JP5896319B2; IL236140A0; EP2862860B1; BR112014031360B1; KR20150023391A; WO2013187467A1; MX2014015077A; RU2015101102A; CA2876253C; CN104350053B; EP2862860A4; RU2639869C2; BR112014031360A2; MY171464A; NZ702647A; KR102098977B1; HUE031538T2; TWI583683B; AU2013275210B2; PH12014502750B1

Abstract

Un compuesto representado por la fórmula (IA)**Fórmula** en donde, X1 y X2 son iguales o diferentes y representan un átomo de nitrógeno o fórmula CH; Y representa cualquiera de las estructuras en el siguiente grupo de fórmula (a):**Fórmula** n representa 1 o 2; R1 representa un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno o un grupo alquilo C1-6; R2 representa un grupo triazolilo, un grupo piridilo o un grupo pirimidinilo; R3 representa un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno o un grupo alquilo C1-6, en donde el grupo alquilo C1-6 opcionalmente puede estar sustituido con 1 a 3 átomos de halógeno; y R4 representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo C1-6; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

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es necesario, un activador tal como 1-hidroxibenzotriazol o hidroxisuccinimida. Ejemplos del disolvente a usar en la presente reacción incluyen disolventes de éter tales como tetrahidrofurano y 1,4-dioxano, disolventes polares apróticos tales como N,N-dimetilformamida y acetonitrilo, disolventes de halógeno tales como diclorometano y cloroformo, disolventes de hidrocarburo aromático tales como tolueno, acetato de etilo o disolventes mezclados de

5 los mismos. Ejemplos de la base a usar en la presente reacción incluyen aminas orgánicas tales como piridina, trietilamina y diisopropiletilamina y bases inorgánicas tales como carbonato de potasio, carbonato de sodio y hidrogenocarbonato de sodio. La presente reacción se puede llevar a cabo normalmente a 0 ºC a 150 ºC, preferiblemente 0 ºC a 80 ºC.

10 Etapa A-3: El compuesto (6) se puede obtener mediante la reacción de reducción del éster del compuesto (5). La reacción en la Etapa A-3 se puede llevar a cabo bajo las condiciones en las que el compuesto (5) se hace reaccionar con un agente reductor tal como hidruro de litio y aluminio, hidruro de diisobutil aluminio, borohidruro de sodio o borohidruro de litio en un disolvente de alcohol tal como metanol o etanol, un disolvente de éter tal como tetrahidrofurano o 1,4-dioxano, un disolvente de hidrocarburo aromático tal como tolueno o un disolvente mezclado

15 de los mismos. La presente reacción se puede llevar a cabo a -80 ºC a 150 ºC, preferiblemente 0 ºC a 25 ºC.

Etapa A-4: El compuesto (7) se puede obtener convirtiendo el grupo hidroxi del compuesto (6) en un grupo saliente general. Ejemplos de la reacción en la Etapa A-4 incluyen cloración, bromación, yodación, metanosulfoniloxilación y p-toluenosulfoniloxilación. Un ejemplo de la reacción de cloración incluye un método en donde se obtiene un grupo 20 saliente que usa, por ejemplo, cloruro de metanosulfonilo, o similares, seguido de sustitución con un átomo de cloro. Se incluye además un método que usa tetracloruro de carbono y trifenilfosfina y un método que usa cloruro de tionilo u oxicloruro de fósforo. Durante estos procedimientos, se puede añadir un cloruro tal como cloruro de sodio o cloruro de potasio. Un ejemplo de la reacción de bromación incluye un método en donde, por ejemplo, se usan tetrabromuro de carbono y trifenilfosfina. Un ejemplo de la reacción de yodación incluye un método en donde, por ejemplo, se 25 usan yodo, trifenilfosfina e imidazol. La metanosulfoniloxilación y la p-toluenosulfoniloxilación se pueden conseguir usando, por ejemplo, cloruro de metanosulfonilo, cloruro de p-toluenosulfonilo, o similares, respectivamente. Durante estas reacciones, se puede añadir una base adecuada. Ejemplos de la base a añadir incluyen bases orgánicas tales como trietilamina y diisopropiletilamina o bases inorgánicas tales como carbonato de potasio. Ejemplos del disolvente de reacción incluyen disolventes de éter tales como tetrahidrofurano y 1,4-dioxano, disolventes polares

30 apróticos tales como N,N-dimetilformamida y acetonitrilo, disolventes de halógeno tales como diclorometano y cloroformo, acetonitrilo o disolventes mezclados de los mismos, y en eso las reacciones se pueden llevar a cabo bajo la condición de temperatura de aproximadamente -80 ºC a aproximadamente el punto de ebullición de dicho disolvente.

35 Etapa A-5: El compuesto (9) se puede obtener mediante la reacción del compuesto (7) y el compuesto (8). La reacción en la Etapa A-5 procede en un disolvente de alcohol tal como metanol y etanol, un disolvente de éter tal como tetrahidrofurano y 1,4-dioxano, un disolvente polar aprótico tal como N,N-dimetilformamida y acetonitrilo, un disolvente de halógeno tal como diclorometano y cloroformo, dimetil sulfóxido, acetonitrilo, agua o un disolvente mezclado de los mismos, en presencia de una base inorgánica tal como hidruro de sodio, hidróxido de sodio,

40 carbonato de sodio, carbonato de potasio o carbonato de cesio, un metal alcalino tal como etóxido de sodio o tercbutóxido de potasio, o una base orgánica tal como un alcóxido inferior del metal alcalinotérreo, bajo la condición de temperatura de aproximadamente -80 ºC a aproximadamente el punto de ebullición de dicho disolvente.

Esquema B

45 [Fórmula 5]

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3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida-clorhidrato (EDC-HCl), diciclohexilcarbodiimida (DDC), carbonildiiimidazol (CDI) en un disolvente de éter tal como tetrahidrofurano o 1,4-dioxano, un disolvente polar aprótico tal como N,Ndimetilformamida, un disolvente de halógeno tal como diclorometano o cloroformo, un disolvente de hidrocarburo aromático tal como tolueno, acetato de etilo, acetonitrilo o una mezcla de los mismos. La presente reacción

5 normalmente se lleva a cabo a 0 ºC a 150 ºC, preferiblemente 0 ºC a 90 ºC.

Etapa C-3: El compuesto (22) se puede obtener mediante la hidrólisis ácida del compuesto (21). La reacción en la Etapa C-3 se puede llevar a cabo de acuerdo con las mismas condiciones de reacción que en la Etapa B-2.

10 Etapa C-4: El compuesto (23) se puede obtener mediante la reacción de condensación del compuesto (14) y el compuesto (22). La reacción en la Etapa C-4 se puede llevar a cabo de acuerdo con las mismas condiciones de reacción que en la Etapa A-1.

Etapa C-5: El compuesto (24) se puede llevar a cabo mediante la reacción de condensación del compuesto (4) y el

15 compuesto (23). La reacción en la Etapa C-5 se puede llevar a cabo de acuerdo con las mismas condiciones de reacción que en la Etapa A-2.

Esquema D

20 [Fórmula 7]

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en donde X1, X2, R1, R3 y R4 son como se definieron anteriormente. R8 representa un grupo triazolilo, un grupo 25 piridilo o un átomo de halógeno y A3 representa un átomo de halógeno.

Etapa D-1: El compuesto (27) se puede obtener mediante la reacción nucleofílica o la reacción de acoplamiento del

compuesto (25) y el compuesto (26). La reacción en la Etapa D-1 se puede llevar a cabo de acuerdo con las mismas

condiciones de reacción nucleofílica que en la Etapa A-5. La reacción de acoplamiento se puede llevar a cabo 30 mediante un método general en el que el átomo de nitrógeno del compuesto azol se sustituye con un anillo

aromático usando un catalizador y un ligando en presencia de una base. Ejemplos incluyen el método descrito en

Synlett, 2003, 15, 2.428-2.439 o un método de acuerdo con el mismo. Ejemplos del catalizador a usar en la presente

reacción incluyen catalizador de cobre tal como cobre (O), yoduro de cobre (I), cloruro de cobre (I) y óxido de cobre

(I). Ejemplos del ligando a usar en la presente reacción incluyen N,N’-dimetiletilenodiamina, N,N’-dimetilciclohexano35 1,2-diamina, 2-aminopiridina, 1,10-fenantrolina y oxima de 2-hidroxibenzaldehido. Ejemplos de la base a usar en la

presente reacción incluyen carbonato de potasio, fosfato de potasio, hidróxido de potasio, terc-butóxido de potasio,

carbonato de cesio, carbonato de sodio, bicarbonato de sodio, acetato de sodio, metóxido de sodio e hidróxido de

tetrabutil amonio. Ejemplos del disolvente a usar en la presente reacción incluyen disolventes de alcohol tales como

metanol y etanol, disolventes de éter tales como tetrahidrofurano y 1,4-dioxano, disolventes polares apróticos tales 40 como N,N-dimetilformamida, dimetil sulfóxido y acetonitrilo, disolventes de halógeno tales como diclorometano y

cloroformo, disolventes de hidrocarburo aromático tales como tolueno, agua o disolventes mezclados de los mismos.

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Esquema G [Fórmula 10]

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en donde X1, X2, Y1, Y2, R1, R3 y R4 son como se definieron anteriormente. A4 representa un átomo de halógeno.

Etapa G-1: El compuesto (42) se puede obtener mediante la reacción de condensación del compuesto (15) y el 10 compuesto (41). La reacción en la Etapa G-1 se puede llevar a cabo de acuerdo con las mismas condiciones de reacción que en la Etapa A-2.

Etapa G-2: El compuesto (43) se puede obtener mediante la reacción de acoplamiento del compuesto (32) y el compuesto (42). La reacción en la Etapa G-2 se puede llevar a cabo de acuerdo con las mismas condiciones de 15 reacción que en la Etapa D-5.

Esquema H

[Fórmula 11] 20

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en donde X1, R1, y R4 son como se definieron anteriormente.

25 Etapa H-1: El compuesto (45) se puede obtener separando un isómero óptico del compuesto (44). Un isómero óptico, en la Etapa H-1, se puede separar directamente por HPLC equipada con una columna quiral de derivado de polisacárido, una columna quiral basada en proteína o similares. Además, los ejemplos incluyen métodos que usan un método de enzima o un método de quimiosíntesis y un método en el que se hace reaccionar un agente de resolución óptica para separar un diastereómero y se convierte en alcohol. Con el método que usa un método de

30 enzima, se puede preparar una sustancia ópticamente activa disolviendo un compuesto en un disolvente y sometiendo a acilación alcohol con la adición de lipasa en presencia de alquenil éster de ácido. La lipasa a usar puede ser aquella derivada de microorganismos o aquella derivada de animales, y ejemplos incluyen lipasas de páncreas de cerdo, y aquellas derivadas del género Candida, el género Pseudomonas y el género Aspergillus. Ejemplos del alquenilo éster de ácido incluyen éster de acetato de vinilo, éster de propionato de vinilo y éster de

35 hexanoato de vinilo. Ejemplos del disolvente de reacción incluyen disolventes de éter tales como tetrahidrofurano y 1,4-dioxano, disolventes polares apróticos tales como acetonitrilo, disolventes de halógeno tales como diclorometano y cloroformo, disolventes de hidrocarburo aromáticos tales como tolueno, agua y disolventes mezclados de los mismos. La presente reacción se puede llevar a cabo a 20 ºC a 50 ºC, preferiblemente 25 ºC a 35 ºC.

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Instrumento de medición: LCMS-2010EV de SHIMADZU. Columna: Shim-pack XR-ODS 2,2 µm 2,0 mml.D. x 30 mm de SHIMADZU. Disolvente: Líquido A; ácido fórmico al 0,1% que contiene agua, Líquido B; ácido fórmico al 0,1 % que contiene acetonitrilo.

5 Gradiente: 0 min. (Líquido A/Líquido B = 90/10), 1 min. (Líquido A/Líquido B = 60/40), 2 min. (Líquido A/Líquido B = 0/100), 2,5 min (Líquido A/Líquido B = 0/100). Caudal: 0,6 ml/min. Método de detección: UV 254 nm. Método de ionización: Método de ionización por electro impacto (ESI: Ionización por electrospray) e Ionización Química por Presión Atmosférica (APCI: Atmospheric Pressure Chemical Ionization).

En los ejemplos de Referencia y Ejemplos de más adelante, el espectro de masas (MS) se midió bajo las siguientes condiciones.

15 Instrumento de medición de MS: LCMS-2010EV de SHIMADZU o Platform LC de Micromass.

En los ejemplos de más adelante, el análisis de los compuestos racémicos se puede llevar a cabo mediante una cualquiera de las siguientes 13 condiciones.

Condición 1

Instrumento de medición: Agilent 1100 de Agilent. Columna: CHIRALPAK AD-3 (Daicel Corporation, 4,6 mm x 250 mm). Caudal: 1,0 ml/min.

25 Fase móvil: Hexano/etanol = 30/70.

Condición 2

Instrumento de medición: Waters 2695 y 2998 de Waters. Columna: CHIRALPAK IB (Daicel Corporation, 4,6 mm x 250 mm). Caudal: 1,0 ml/min. Fase móvil: Hexano/etanol = 90/10.

Condición 3

35 Instrumento de medición: Waters 2695 y 2998 de Waters. Columna: CHIRALPAK IB (Daicel Corporation, 4,6 mm x 250 mm). Caudal: 1,0 ml/min. Fase móvil: Hexano/2-propanol = 30/70.

Condición 4

Instrumento de medición: Agilent 1100 de Agilent. Columna: CHIRALPAK AD-3 (Daicel Corporation, 4,6 mm x 150 mm). 45 Caudal: 1,0 ml/min Fase móvil: Hexano/etanol = 20/80.

Condición 5

Instrumento de medición: Agilent 1100 de Agilent. Columna: CHIRALPAK IB-3 (Daicel Corporation, 4,6 mm x 150 mm). Caudal: 1,0 ml/min. Fase móvil: Hexano/etanol = 50/50.

55 Condición 6

Instrumento de medición: Waters 996 y 2795 de Waters. Columna: CHIRALPAK AD-3 (Daicel Corporation, 4,6 mm x 150 mm). Caudal: 1,0 ml/min. Fase móvil: Hexano/2-propanol = 0/100.

Condición 7

Instrumento de medición: Agilent 1100 de Agilent. 65 Columna: CHIRALPAK IB-3 (Daicel Corporation, 4,6 mm x 150 mm). Caudal: 1,0 ml/min.

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Ejemplo de Referencia 1: (±)-3-[5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]-1,3-oxazolidina-2-carboxilato de etilo [Fórmula 12]

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5

Se añadieron tamiz molecular 4A activado (200 g) y 2-aminoetanol (4,0 ml, 66,1 mmol) a una solución de glioxilato

de etilo (tipo polímero, una solución de tolueno al 47 %) (13,4 ml, 63,5 ml) en CHCl3 (260 ml) y la mezcla resultante

se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. El tamiz molecular 4A se separó por filtración a través de Celite® 10 y, a continuación, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida para obtener un aceite amarillo claro.

Se añadió gota a gota cloruro de tionilo (1,4 ml, 19,8 mmol) a una solución de ácido 5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2

il)benzoico (2,7 g, 13,2 mmol) en CHCl3 (130 ml) y se agitó a 75 ºC durante 5 horas. La mezcla de reacción se dejó

enfriar a temperatura ambiente y, a continuación, el disolvente y el cloruro de tionilo en exceso se separaron por

destilación bajo presión reducida. Se añadió una solución de TEA (3,7 ml, 26,4 mmol) y el aceite amarillo claro 15 obtenido en la reacción anterior en CHCl3 (30 ml) a una solución del residuo obtenido en CHCl3 (100 ml) bajo

enfriamiento con agua con hielo, y la mezcla resultante se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 3

horas. Se añadió agua a la mezcla de reacción, seguido de extracción con CHCl3. La capa orgánica se lavó con una

solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó con Na2SO4, a continuación, el agente desecante se separó

por filtración y, después, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó 20 por cromatografía en columna (HP-Sil 150 g, hexano/EtOAc = 88/12 a 0/100) para obtener el compuesto del título

(3,6 g) (aceite amarillo claro).

MS (ESI/APCI Dual pos.) m/z: 331 [M+H]+.

Ejemplo de Referencia 2: (±)-[2-(Hidroximetil)-1,3-oxazolidin-3-il][5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil]metanona 25 [Fórmula 13]

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30 Se añadió gradualmente NaBH4 (4,6 g, 121 mmol) a una solución de (±)-3-[5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]1,3-oxazolidina-2-carboxilato de etilo obtenido en el Ejemplo de Referencia 1 (4,0 g, 12,1 mmol) en MeOH (60 ml) bajo enfriamiento con agua con hielo y se agitó durante 1 hora. La mezcla resultante se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. El disolvente se separó por destilación bajo presión reducida, se añadió una solución acuosa saturada de cloruro de amonio a la mezcla de reacción, que se extrajo con CHCl3. La capa orgánica

35 se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó con Na2SO4, a continuación, el agente desecante se separó por filtración y, después, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó por cromatografía en columna (HP-Sil 100 g, hexano/EtOAc = 88/12 a 0/100) para obtener el compuesto del título (3,6 g) (aceite incoloro). MS (ESI/APCI Dual pos.) m/z: 289 [M+H]+.

40 Ejemplo de Referencia 3: (±)-3-[5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]-1,3-oxazinano-2-carboxilato de etilo

[Fórmula 14]

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Usando glioxilato de etilo (tipo polímero, una solución de tolueno al 47 %) (4,3 ml, 20,4 mol), 3-aminopropan-1-ol (1,6 ml, 20,4 mmol) y ácido 5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoico (1,0 g, 4,9 mmol), se llevó a cabo el mismo procedimiento que en el Ejemplo de Referencia 1 para obtener el compuesto del título (1,3 g) (sólido incoloro). MS (ESI pos.) m/z: 367 [M+Na]+.

Ejemplo de Referencia 4: (±)-[2-(Hidroximetil)-1,3-oxazinan-3-il][5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil]metanona

[Fórmula 15]

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Se añadió una solución de LiBH4 en THF (0,97 ml, 2,9 mmol) a una solución de (±)-3-[5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2il)benzoil]-1,3-oxazinano-2-carboxilato de etilo obtenido en el Ejemplo de Referencia 3 (0,50 g, 1,5 mmol) en THF (5 ml) y se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Se añadió agua a la mezcla de reacción, seguido de

15 extracción con CHCl3. La capa de orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó con Na2SO4, a continuación, el agente desecante se separó por filtración y, después, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó por cromatografía en columna (HP-Sil 25 g, hexano/EtOAc = 88/12 a 0/100) para obtener el compuesto del título (0,34 g) (aceite incoloro). MS (ESI pos.) m/z: 303 [M+H]+.

20 Ejemplo de Referencia 5: (2RS,5S)-5-metil-3-[5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]-1,3-oxazolidina-2-carboxilato de etilo

[Fórmula 16] 25

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Usando glioxilato de etilo (tipo polímero, una solución de tolueno al 47 %) (0,5 ml, 2,4 mmol), (2S)-1-aminopropan-2ol (0,18 ml, 2,4 mmol) y ácido 5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoico (0,20 g, 0,98 mmol), se llevó a cabo el mismo 30 procedimiento que en el Ejemplo de Referencia 1 para obtener el compuesto del título (0,1 g) (aceite incoloro). MS (ESI/APCI Dual pos.) m/z: 345 [M+H]+.

Ejemplo de Referencia 6: (2RS,5R)-5-metil-3-[5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]-1,3-oxazolidina-2-carboxilato de etilo 35 [Fórmula 17]

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40 Usando glioxilato de etilo (tipo polímero, una solución de tolueno al 47 %) (0,50 ml, 2,4 mmol), (2R)-1-aminopropan2-ol (0,18 ml, 2,4 mmol) y ácido 5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoico (0,20 g, 0,98 mmol), se llevó a cabo el mismo procedimiento que en el Ejemplo de Referencia 1 para obtener el compuesto del título (0,14 g) (aceite

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incoloro). MS (ESI/APCI Dual pos.) m/z: 345 [M+H]+.

Ejemplo de Referencia 7: [(2S,4R)-2-(hidroximetil)-4-metil-1,3-oxazolidin-3-il][5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2il)fenil]metanona

[Fórmula 18]

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10 Usando glioxilato de etilo (tipo polímero, una solución de tolueno al 47 %) (2,0 ml, 9,5 mmol), (2R)-2-aminopropan-1ol (0,73 ml, 9,5 mmol) y ácido 5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoico (1.0 g, 4.9 mmol), se llevó a cabo el mismo procedimiento que en el Ejemplo de Referencia 1 para obtener una mezcla de diastereómero de (2RS,4R)-4-metil-3[5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]-1,3-oxazolidina-2-carboxilato de etilo. La mezcla de diastereómero obtenida

15 se purificó por cromatografía en capa fina (1 mm, hexano/EtOAc = 66/34) para obtener (2S,4R)-4-metil-3-[5-metil-2(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]-1,3-oxazolidina-2-carboxilato de etilo (aceite incoloro). Usando el aceite incoloro obtenido como materia prima, se lleva a cabo el mismo procedimiento que en el Ejemplo de Referencia 4 para obtener el compuesto del título (0,041 g) (aceite incoloro). MS (ESI pos.) m/z: 303 [M+H]+.

20 Ejemplo de Referencia 8: [(2S,4S)-2-(Hidroximetil)-4-metil-1,3-oxazolidin-3-il][5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2il)fenil]metanona

[Fórmula 19] 25

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Usando glioxilato de etilo (tipo polímero, una solución de tolueno al 47 %) (2,0 ml, 9,5 mmol), (2S)-2-aminopropan-1

ol (0,73 ml, 9.5 mmol) y ácido 5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoico (1,0 g, 4.9 mmol), se llevó a cabo el mismo 30 procedimiento que en el Ejemplo de Referencia 1 para obtener una mezcla de diastereómero de (2RS,4S)-4-metil-3

[5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]-1,3-oxazolidina-2-carboxilato de etilo. La mezcla de diastereómero obtenida

se purificó por cromatografía en capa fina (1 mm, hexano/EtOAc = 66/34) para obtener (2S,4S)-4-metil-3-[5-metil-2

(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]-1,3-oxazolidina-2-carboxilato de etilo (aceite incoloro). Usando el aceite incoloro

obtenido como materia prima, se llevó a cabo el mismo procedimiento que en el Ejemplo de Referencia 4 para 35 obtener el compuesto del título (0,19 g) (sólido incoloro). MS (ESI pos.) m/z: 303 [M+H]+.

Ejemplo de Referencia 9: 5-Fluoro-2-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]piridina

[Fórmula 20] 40

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Se añadió una solución acuosa 2M de Na2CO3 (0,49 l, 0,99 mol) a una solución mezclada de 1-(tetrahidro-2H-piran2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (100,5 g, 0,36 mol), 2-bromo-5-fluoropiridina (56,5 g, 0,33 mol), y Pd(PPh3)4 (38,0 g, 32,6 mmol) en etanol (300 ml) y tolueno (300 ml), y la mezcla resultante se calentó a reflujo durante 2 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, a continuación, se añadieron

5 a la misma agua y EtOAc, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, seguido de extracción con EtOAc. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó con MgSO4, a continuación, el agente desecante se separó por filtración, después, se añadió gel de sílice NH (400 g) al mismo, y la mezcla resultante se agitó durante 15 horas. La mezcla se filtró a través de gel de sílice ácido (eluido con n-hexano:AcOEt = 1:1 → AcOEt) y el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida para obtener el compuesto del título (100 g) (aceite amarillo claro). MS (ESI pos.) m/z: 248 [M+H]+.

Ejemplo de Referencia 10: 5-Fluoro-2-(1H-pirazol-3-il)piridina

15 [Fórmula 21]

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Se añadió una solución 4M de HCl-EtOAc (0,25 l, 0,96 mol) a una solución de 5-fluoro-2-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)1H-pirazol-5-il]piridina obtenida en el Ejemplo de Referencia 9 (81,2 g, 0,33 mol) en metanol (250 ml), y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El disolvente se separó por destilación bajo presión reducida, a continuación, se añadió EtOAc (500 ml) al residuo, y la mezcla resultante se calentó a reflujo durante 1 hora. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, a continuación, se enfrió con hielo y, después, el precipitado se filtró y se secó para obtener un clorhidrato (sólido incoloro) del compuesto del título. Se añadieron

25 agua (700 ml) y EtOAc (350 ml) al clorhidrato obtenido, y la mezcla resultante se agitó durante 30 minutos y, a continuación, se separó. La capa orgánica obtenida se extrajo con ácido clorhídrico 1,2 M (100 ml) tres veces. Las capas acuosas se combinaron y el pH se ajustó a 12 con una solución acuosa 8 M de NaOH y, a continuación, la capa orgánica se extrajo con CHCl3. La capa orgánica extraída se pasó a través de un ISOLUTE Phase Separator, y el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida. Se añadió diisopropil éter (300 ml) al residuo obtenido, y la mezcla resultante se calentó a reflujo durante 2 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, a continuación, se enfrió con hielo y, después, el precipitado se filtró y se secó para obtener el compuesto del título (44,9 g) (sólido rosa claro).

MS (ESI pos.) m/z: 164 [M+H]+.

35 Ejemplo de Referencia 11: 5-Fluoro-2-(1H-pirazol-4-il)piridina

[Fórmula 22]

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Se añadieron Pd(PPh3)4 (5,5 g, 4,77 mmol) y una solución acuosa 2 M de Na2CO3 (71,6 ml, 0,14 mol) a una solución de 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-carboxilato de terc-butilo (15,4 g, 52,5 mmol) y 2-bromo5-fluoropiridina (8,4 g, 47,7 mmol) en 1,4-dioxano (100 ml), a continuación, la mezcla resultante se agitó a 100 ºC

45 durante 3 horas y, después, a temperatura ambiente durante 72 horas. Se añadió agua a la mezcla de reacción, seguido de extracción con EtOAc. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó con MgSO4, a continuación, el agente desecante se separó por filtración y, después, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida. Se añadió una cantidad pequeña de EtOAc al residuo obtenido y la mezcla resultante se filtró y se secó para obtener el compuesto del título (4,9 g) (sólido incoloro). MS (ESI pos.) m/z: 164 [M+H]+.

Ejemplo de Referencia 12: 2-[1-(2,2-Dietoxietil)-1H-pirazol-3-il]-5-fluoropiridina

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Ejemplo 5: (-)-[(2S,5S)-2-{[4-(5-Fluoropiridin-2-il)-1H-pirazol-1-il]metil}-5-metil-1,3-oxazolidin-3-il][5-metil-2-(2H-1,2,3triazol-2-il)fenil]metanona

[Fórmula 45]

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Usando (2RS,5S)-5-metil-3-[5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)benzoil]-1,3-oxazolidina-2-carboxilato de etilo obtenido en el Ejemplo de Referencia 5 (0,11 g, 0,33 mmol) como materia prima, se llevó a cabo el mismo procedimiento que en 10 el Ejemplo de Referencia 2 para obtener la mezcla de diastereómero de [2-(hidroximetil)-5-metil-1,3-oxazolidin-3il][5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil]metanona (aceite incoloro). La mezcla de diastereómero obtenida se purificó por cromatografía en capa fina (1 mm, hexano/EtOAc = 50/50) para obtener [(2S,5S)-2-(hidroximetil)-5-metil-1,3oxazolidin-3-il][5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil]metanona (aceite incoloro). Se añadió MsCl (0,011 ml, 0,15 mmol) a una solución de [(2S,5S)-2-(hidroximetil)-5-metil-1,3-oxazolidin-3-il][5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil]metanona 15 obtenida (30,2 mg, 0,10 mmol) y TEA (0,021 ml, 0,15 mmol) en CHCl3 (0,8 ml) bajo enfriamiento con agua con hielo y la mezcla resultante se agitó durante 1 hora. Se añadió agua a la mezcla de reacción bajo enfriamiento con agua con hielo, seguido de extracción con CHCl3. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó con Na2SO4, a continuación, el agente desecante se separó por filtración y, después, el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida. Se añadieron 5-fluoro-2-(1H-pirazol-4-il)piridina (0,033 g, 0,20

20 mmol) y Cs2CO3 (0,065 g, 0,20 mmol) a una solución del residuo obtenido (0,5 ml). La mezcla resultante se hizo reaccionar durante 1 hora a 120 ºC bajo irradiación de microondas. La mezcla de reacción se dejó enfriar, se añadió agua a la misma, seguido de extracción con CHCl3, el extracto se pasó a través de un ISOLUTE Phase Separator, y el disolvente se separó por destilación bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó por HPLC para obtener el compuesto del título (0,020 g) (aceite incoloro).

25 Tiempo de retención de LCMS: 0,92 min. MS (ESI pos.) m/z: 448 [M+H]+. [α]D25 = -80,4 (c = 0,0828, CHCl3).

Los Ejemplos 6 a 10 se obtuvieron por el mismo procedimiento que en el Ejemplo 5. La fórmula estructural, los 30 nombres, datos de LCMS y rotación óptica específica de los compuestos obtenidos se muestran en la Tabla 3.

Tabla 3

Nº Ejemplo: Fórmula estructural Nombre compuesto MS (ESI pos.) m/z Tiempo retención LCMS (min) Rotación óptica específica

Ejemplo 6: imagen39 (-)-[(2S,5R)-2-{[4-(5fluoropiridin-2-il)-1Hpirazol-1-il]metil}-5-metil1,3-oxazolidin-3-il][5-metil2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil] metanona 448 (M+H)+ 0,94 [α]D 25= -130 (c = 0,074, CHCl3)

Ejemplo 7: [(2S,4R)-2-{[3-(5fluoropiridin-2-il)-1Hpirazol-1-il]metil}-4-metil1,3-oxazolidin-3-il][5-metil2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil] metanona 448 (M+H)+ 0,95 -

Ejemplo 8: [(2S,4R)-2-{[4-(5fluoropiridin-2-il)-1Hpirazol-1-il]metil}-4-metil1,3-oxazolidin-3-il][5-metil2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil] metanona 448 (M+H)+ 0,91 -

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Tabla 4-1

Nº Ejemplo: Fórmula estructural Nombre compuesto MS (ESI pos.) m/z Tiempo de retención LCMS (min)

Ejemplo 12: (±)-(2-{[3-(5-fluoropiridin-2-il)-1Hpirazol-1-il]metil}-1,3-oxazolidin-3il)[5-fluoro-2-(2H-1,2,3-triazol-2il)fenil]metanona 438 (M+H)+ 0,87

Ejemplo 13: (±)-(2-{[3-(5-fluoropiridin-2-il)-1Hpirazol-1-il]metil}-1,3-oxazolidin-3il)[6-metil-3-(2H-1,2,3-triazol-2il)piridin-2-il]metanona 435 (M+H)+ 0,78

Ejemplo 14: (±)-2-{[3-(5-fluoropiridin-2-il)-1Hpirazol-1-il]metil}-1,3-oxazolidin-3il][5-metil-2-(pirimidin-2il)fenil]metanona 445 (M+H)+ 0,88

Ejemplo 15: (±)-(2-{[3-(5-fluoropiridin-2-il)-1Hpirazol-1-il]metil}-1,3-oxazolidin-3il)[2-(pirimidin-2-il)fenil]metanona 431 (M+H)+ 0,81

Ejemplo 16: (±)-(2-{[3-(5-fluoropiridin-2-il)-1Hpirazol-1-il]metil}-1,3-oxazolidin-3il)[5-fluoro-2-(pirimidin-2il)fenil]metanona 449 (M+H)+ 0,85

Ejemplo 17: (±)-(2-{[3-(4-fluorofenil)-1H-pirazol1-il]metil}-1,3-oxazolidin-3-il)[5metil-2-2H-1,2,3-triazol-2il)fenil]metanona 443 (M+H)+ 1,04

Ejemplo 18: (±)-(2-{[3-(4-fluorofenil)-1H-pirazol1-il]metil}-1,3-oxazolidin-3-il)[2(2H-1,2,3-triazol-2il)fenil]metanona 419 (M+H)+ 0,98

Tabla 4-2

Ejemplo 19: (±)-(2-[[3-(4-fluorofenil)-1H-pirazol-1il]metil}-1,3-oxazolidin-3-il)[5-fluoro-2(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil]metanona 437 (M+H)+ 1,01

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Ejemplo 20: (±)-(2-{[3-(4-fluorofenil)-1H-pirazol-1il]metil}-1,3-oxazolidin-3-il)[5-metil-2(pirimidin-2-il)fenil]metanona 444 (M+H)+ 1,01

Ejemplo 21: (±)-(2-{[3-(4-fluorofenil)-1H-pirazol-1il]metil}-1,3-oxazolidin-3-il)[5-metil-2(pirimidin-2-il)fenil]metanona 448 (M+H)+ 0,99

Ejemplo 22: imagen41 (±)-(2-{[4-(4-fluorofenil)-1H-pirazol-1il]metil}-1,3-oxazolidin-3-il)[5-metil-2(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil]metanona 433 (M+H)+ 1,00

Ejemplo 23: (±)-(2-{[4-(4-fluorofenil)-1H-pirazol-1il]metil}-1,3-oxazolidin-3-il)[6-metil-3(2H-1,2,3-triazol-2-il)piridin-2il]metanona 434 (M+H)+ 0,90

Ejemplo 24: (±)-(2-{[4-(4-fluorofenil)-1H-pirazol-1il]metil}-1,3-oxazolidin-3-il)[5-metil-2(pirimidin-2-il)fenil]metanona 444 (M+H)+ 0,97

Ejemplo 25: (±)-(2-{[4-(4-fluorofenil)-1H-pirazol-1il]metil}-1,3-oxazolidin-3-il)[5-fluoro-2(pirimidin-2-il)fenil]metanona 448 (M+H)+ 0,96

Ejemplo 33: (±)-(2-{[5-(5-fluoropiridin-2-il)-1,2.4oxadiazol-3-il]metil}-1,3-oxazinan-3il)[5-metil-2-(pirimidin-2il)fenil]metanona 461 (M+H)+ 0,79

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Tabla 4-4

Nº Ejemplo: Fórmula estructural Nombre compuesto MS (ESI pos.) m/z Tiempo de retención LCMS (min) Condición análisis compuesto racémico Tiempo de retención (min) Rotación óptica específica

Ejemplo 34: imagen44 (-)-[2-{[3-{5fluoropiridin-2-il)-1Hpirazol-1-il]metil}-1,3oxazinan-3-il][5-fluoro2-(pirimidin-2il)fenil]metanona 463 (M+H)+ 0,85 Condición 4 Rt1 = 3,7 [α]D 23 = 36.6 (c = 0,0898, CHCl3)

Ejemplo 35: (-)-[2-([4-(4-fluorofenil)1H-pirazol-1-il]metil}1,3-oxazinan-3-il][5metil-2-(2H-1,2,3triazol-2il)fenil]metanona 447 (M+H)+ 0,99 Condición 5 Rt1 = 5,9 [α]D 23 = 30,6 (c =0,0968, CHCl3) (c = 0,0968, CHCl3)

Ejemplo 36: (-)-[2-{[5-{5fluoropiridin-2-il)-1,2,4oxadiazol-3-il]metil}1,3-oxazinan-3-il][5metil-2-(2H-1,2,3triazol-2il)fenil]metanona 450 (M+H)+ 0,89 Condición 6 Rt1 = 11,8 [α]D 23 = 31,4 (c = 0,0786, CHCl3)

Ejemplo 37: (-)-[2-{[5-(4-fluorofenil)1,2,4-oxadiazol-3il]metil}-1,3-oxazinan-3-il][5-metil-2-(2H1,2,3-triazol-2il)fenil]metanona 449 (M+H)+ 1,0 Condición 6 Rt2 = 13,7 [α]D 23 = 35,8 (c = 0,193, CHCl3)

Ejemplo 38: (-)-[2-[[5-(4-fluorofenil)1,2,4-oxadiazol-3il]metil}-1,3-oxazinan-3-il][6-metil-3-(2H1,2,3-triazol-2-il)piridin2-il]metanona 450 (M+H)+ 0,93 Condición 6 Rt2 = 12,8 [α]D 23 = 4,91 (c = 0,101, CHCl3)

Ejemplo 39: [(2S,4S)-2-{[4-(5-Fluoropiridin-2-il)-1H-pirazol-1-il]metil}-4-metil-1,3-oxazinan-3-il}[5-metil-2-(2H-1,2,3triazol-2-il)fenil]metanona

[Fórmula 47]

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10 Se añadieron 5-fluoro-2-(1H-pirazol-4-il)piridina obtenida en el Ejemplo de Referencia 11 (0,040 g, 0,24 mmol) y cianometileno tributilfosforano (0,087 ml, 0,33 mmol) a una solución de [(2S,4S)-2-(hidroximetil)-4-metil-1,3oxazinan-3-il][5-metil-2-(2H-1,2,3-triazol-2-il)fenil]metanona obtenida en el Ejemplo de Referencia 17 (0,070 g, 0,22 mmol) en tolueno (1 ml), y la mezcla resultante se agitó con calentamiento durante 3 horas a 100 ºC. El disolvente se separó por destilación bajo presión reducida, y el residuo obtenido se purificó por cromatografía en columna (KP-NH

15 12 g, hexano/EtOAc = 80/20 a 0/100) (HP-Sil 10 g, hexano/EtOAc = 80/20 a 0/100) para obtener el compuesto del título (0,11 g) (aceite incoloro).

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de hámster chino (CHO) que a la fuerza expresan el hOX1R y hOX2R en una placa de fondo claro Black de 96 pocillos (Nunc) a 20.000 células por pocillo, que se cultivaron en medio F-12 de Ham que contenía aminoácidos no esenciales MEM 0,1 M, 0,5 mg/ml de G418, suero bovino fetal al 10 % (todo de Invitrogen) durante 16 horas bajo las condiciones de 37 ºC, CO2 al 5 %. Después de retirar el medio, se añadió 100 µl de 0,5 µM Fluo-4AM éster (Dojin)

5 en un tampón de ensayo (HEPES 25 mM (Dojin), solución de sal equilibrada de Hank (Invitrogen), albúmina de suero bovino al 0,1 %, probenecid 2.5 mM, 200 µg/ml de Amaranth (todo de Sigma-Aldrich), pH 7,4) y las células se incubaron durante 60 minutos a 37 ºC, CO2 al 5 %. Después de retirar el tampón de ensayo que contenía fluo-3AM éster, el compuesto de ensayo se dividió en dimetil sulfóxido hasta ser 10 mM y se diluyó con el tampón de ensayo, 150 µl de los cuales se añadieron e incubaron durante 30 minutos.

10 El péptido ligando, en el cual 2 aminoácidos de la orexina-A humana están sustituidos (Pyr-Pro-Leu-Pro-Asp-Ala-Cys-Arg-Gln-Lys-Thr-Ala-Ser-Cys-Arg-Leu-Tyr-Glu-Leu-Leu-His-Gly-Ala-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Leu-NH2; Peptide Institute, Inc.), se diluyó con un tampón de ensayo para dar la concentración final de 300 pM para hOX1R y 3 nM para hOX2R, y se añadió 50 µl de la solución ligando para comenzar la reacción. Se midió la

15 intensidad de fluorescencia en cada pocillo en la reacción cada segundo durante 3 minutos usando el Functional Drug Screening System (FDSS; Hamamatsu Photonics K.K.), y la actividad antagonista se determinó usando la intensidad de fluorescencia máxima como indicador de la concentración de Ca2+ intracelular. La actividad antagonista del compuesto de ensayo se calculó cuando la intensidad de fluorescencia de los pocillos a los que solamente se añadía el tampón de dilución era del 100 % y la intensidad de fluorescencia de los pocillos a los que se

20 añadía el tampón que contenía no ligando o compuesto era del 0 %, y la concentración de inhibición al 50 % (valor de IC50) se determinó a partir de las intensidades de fluorescencia cuando se añadían las diversas concentraciones de los compuestos.

Los valores de IC50 de los compuestos de la presente invención se muestran en la Tabla 6. 25 Tabla 6

Nº Ejemplo: Valor IC50 Nº Ejemplo Valor IC50

OX1 (nM): OX2 (nM) OX1 (nM) OX2 (nM)

1: 4,9 18,5 25 98,6 107,0

2: 14,3 18,6 26 21,7 59,1

3: 0,7 1,2 27 0,9 3,0

4: 9,6 3,2 28 2,4 4,0

5: 86,0 11,5 29 3,2 1,2

6: 27,5 9,8 30 2,6 3,0

7: 7,2 54,9 31 10,9 7,3

8: 60,9 460,1 32 34,4 22,6

9: 23,4 41,5 33 3593,0 4544,3

10: 200,6 273,4 34 2,2 6,2

11: 17,5 252,0 35 0,8 1,0

12: 19,5 170,9 36 3,8 6,9

13: 121,0 251,4 37 1,1 1,7

14: 9,7 9,5 38 2,1 7,3

15: 16,9 224,8 39 81,2 46,6

16: 28,9 71,7 40 8,3 1,4

17: 5,1 46,7 41 1,0 1,0

18: 26,4 192,2 42 17,2 20,4

19: 76,8 232,7 43 2,6 3,2

20: 12,3 100,8 44 60,4 51,8

21: 30,2 234,1 45 2,7 12,1

22: 2,4 2,4 46 31,9 38,7

23: 96,3 112,4 47 3,4 3,6

24: 34,6 26,7 49 0,8 7,7

Aplicabilidad industrial

30 Se verificó que los compuestos de la presente invención tienen las actividades antagonistas del receptor de OX. Por tanto, los compuestos de la presente invención o sus sales farmacéuticamente aceptables se pueden usar como

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Claims

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