ES2523810T1 - Método para la producción de inmunoglobulinas humanizadas - Google Patents

Abstract

Un proceso para hacer una línea celular transfectada que comprende transfectar una célula con polinucleótidos y cultivar dicha célula transfectada, dichos polinucleótidos codifican las cadenas pesada y ligera de una inmunoglobulina humanizada, en donde dicha inmunoglobulina humanizada tiene una región marco aceptora y regiones determinantes de complementariedad (CDR) de Kabat de una inmunoglobulina donante y se une a un antígeno, y además en donde dicha inmunoglobulina humanizada comprende al menos un aminoácido no de la CDR del marco de la cadena ligera de la inmunoglobulina donante que sustituye al aminoácido correspondiente en el marco aceptor, en una posición donde: (a) el aminoácido en el marco aceptor es raro para dicha posición y el aminoácido correspondiente en el marco donante es común para dicha posición en secuencias de inmunoglobulinas humanas; o (b) el aminoácido es adyacente a una de las CDR; o (c) se predice que el aminoácido tenga un átomo de la cadena lateral capaz de interaccionar con las CDR de la inmunoglobulina humanizada.

Claims (4)

1. E04076439

   07-11-2014

   REIVINDICACIONES

   1. Un proceso para hacer una línea celular transfectada que comprende transfectar una célula con polinucleótidos y cultivar dicha célula transfectada, dichos polinucleótidos codifican las cadenas pesada y

   5 ligera de una inmunoglobulina humanizada, en donde dicha inmunoglobulina humanizada tiene una región marco aceptora y regiones determinantes de complementariedad (CDR) de Kabat de una inmunoglobulina donante y se une a un antígeno, y además en donde dicha inmunoglobulina humanizada comprende al menos un aminoácido no de la CDR del marco de la cadena ligera de la inmunoglobulina donante que sustituye al aminoácido correspondiente en el marco aceptor, en una posición donde:

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   (a)

   el aminoácido en el marco aceptor es raro para dicha posición y el aminoácido correspondiente en el marco donante es común para dicha posición en secuencias de inmunoglobulinas humanas; o

   (b)

   el aminoácido es adyacente a una de las CDR; o

   (c)

   se predice que el aminoácido tenga un átomo de la cadena lateral capaz de interaccionar con las CDR 15 de la inmunoglobulina humanizada.

2. 2. Un proceso de la reivindicación 1 en donde dicha inmunoglobulina humanizada tiene una afinidad de unión por el antígeno de 108 M-1 o mayor.

   20 3. Un proceso de la reivindicación 1 en donde dicha inmunoglobulina humanizada es un tetrámero de anticuerpo.

3. 4. Un proceso según cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 o 3 que comprende además cultivar dicha línea celular y purificar dicha inmunoglobulina humanizada a partir de la misma.

   25 5. Una inmunoglobulina humanizada que tiene una región marco aceptora humana y regiones determinantes de complementariedad (CDR) de Kabat de una inmunoglobulina donante, inmunoglobulina humanizada que se une a un antígeno y comprende al menos un aminoácido no de la CDR del marco de la cadena ligera de la inmunoglobulina donante que sustituye al aminoácido correspondiente en el marco aceptor, en una posición donde:

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   (a)

   el aminoácido en el marco aceptor es raro para dicha posición y el aminoácido correspondiente en el marco donante es común para dicha posición en secuencias de inmunoglobulinas humanas; o

   (b)

   el aminoácido es adyacente a una de las CDR; o

   (c) se predice que el aminoácido tenga un átomo de la cadena lateral capaz de interaccionar con las CDR 35 de la inmunoglobulina humanizada.
4. 6. Una inmunoglobulina humanizada de la reivindicación 5 que tiene una afinidad de unión por el antígeno de 108

   M-1

   o mayor.

   40 7. Una inmunoglobulina humanizada de la reivindicación 5 o la reivindicación 6 que es un tetrámero de anticuerpo.

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