ES2541684T3 - Crioconservación de material biocompatible - Google Patents
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Abstract
Un material implantable crioconservado que comprende: (a) una matriz biocompatible injertada con células que tienen un fenotipo inhibidor de tal manera que son capaces de inhibir o interferir con la proliferación de células de la musculatura lisa vascular y en el que dichas células son casi confluentes, confluentes o postconfluentes y (b) un volumen de una composición de medio de crioconservación suficiente para mantener la viabilidad de las células, la integridad de dicho fenotipo inhibidor y de dicha matriz mientras que están crioconservadas, en el que dicha composición de medio de crioconservación comprende un crioconservante, un polisacárido y suero.
Description
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65 E06772165
06-07-2015
Los recuentos celulares se realizan mediante digestión completa de la alícuota del material implantable con una solución de colagenasa 0,8 mg/ml en una solución de tripsina-EDTA. Después de medir el volumen del material implantable digerido, se diluye un volumen conocido de la suspensión celular con azul de tripano al 0,4 % (células
4:1 con respecto a azul de tripano) y se evalúa la viabilidad por exclusión con azul de tripano. Las células viables, no viables y totales se enumeran usando un hemocitómetro. Las curvas de crecimiento se construyen representando un número de células viables frente al número de días de cultivo. Las células se envían y se implantan después de alcanzar la confluencia.
Para los fines de la presente invención, la confluencia se define como la presencia de al menos 4 x 105 células/cm3 cuando en una forma plana flexible del material implantable (1,0 x 4,0 x 0,3 cm), y preferentemente 7 x 105 a 1 x 106 células totales por alícuota (50-70 mg) cuando está en la composición flexible. Para ambas, la viabilidad celular es al menos 90 % preferentemente pero no menor que el 80 %. Si las células no están en confluencia los días 12 o 13, los medios se cambian y la incubación continúa durante un día más. Este proceso continua hasta conseguir la confluencia o hasta 14 días después de la siembra. El día 14, si las células no han alcanzado la confluencia, el lote se desecha. Si se determina que las células están en confluencia después de realizar comprobaciones en proceso, se realiza un cambio de medio final. El cambio de medio final realizado usando rojo fenol sin EGM-2 y sin antibióticos. Inmediatamente después el medio se cambia, los tubos se ajustan con tapas herméticas de tapón estéril para su envío.
Evaluación de Funcionalidad. Para los fines de la invención descritos en el presente documento, el material implantable se ensaya adicionalmente para con respecto a los indicios de funcionalidad antes del implante. Por ejemplo, se recoge medio condicionado durante el período de cultivo para determinar niveles heparán sulfato, factorβ1 de crecimiento transformante (TGF-β1), factor de crecimiento de fibroblastos básico (b-FGF), y óxido nítrico que producen las células endoteliales cultivadas. En determinadas realizaciones preferidas, el material implantable puede usarse para los fines descritos en el presente documento cuando el número de células totales es de al menos aproximadamente 2, preferentemente al menos 4 x 105 células/cm3 de la forma plana flexible; el porcentaje de células viables es al menos el 80-90 %, preferentemente ≥ 90 %, más preferentemente al menos 90 %; el heparán sulfato en medio condicionado es al menos 0,5-1,0, preferentemente al menos 1,0 microg/106 células/día. El TGF-β1 en medio condicionado es al menos 200-300, preferentemente al menos 300 picog/ml/día; el b-FGF en medio condicionado está por debajo de 200 picog/ml, preferentemente no más de 400 picog/ml.
Los niveles de heparán sulfato pueden cuantificarse usando un ensayo espectrofotométrico de digestión con ABC de crondroitinasa de azul de dimetilmetileno rutinario. Los niveles de glucosaminoglucano (GAG) sulfatado se determinan usando un ensayo de unión al colorante de azul de dimetilmetileno (DMB) en el cual muestras desconocidas se comparan con una curva patrón generada usando cantidades conocidas de condroitín sulfato purificado diluido en medios de recogida. Muestras adicionales de medio condicionado se mezclan con ABC crondroitinasa para digerir la condroitina y los dermatán sulfatos antes de la adición del reactivo de color DMB. Todas las absorbancias se determinan a la absorbancia de longitud de onda máxima del colorante DMB mezclado con el parón de GAG, generalmente de aproximadamente 515-525 nm. La concentración del heparán sulfato por 106 células por día se calcula restando la concentración de condroitín y dermatán sulfato a la concentración de glucosaminoglucano sulfatado total en las muestras de medio condicionado. La actividad de ABC crondroitinasa se confirma digiriendo una muestra de condroitín sulfato purificado. Las muestras de medio condicionado se corrigen apropiadamente si se digiere menos del 100 % del condroitín sulfato purificado. Los niveles de heparán sulfato también pueden cuantificarse usando un ensayo ELISA que emplea anticuerpos monoclonales.
Los niveles de TGF-β1 y b-FGF pueden cuantificarse usando un ensayo de ELISA que emplea anticuerpos monoclonales o policlonales, preferentemente policlonales. Los medios de recogida de control también pueden cuantificarse usando un ensayo ELISA y las muestras corregirse apropiadamente para los niveles de TGF-β1y b-FGF presentes en los medios de control.
Los niveles de óxido nítrico (NO) se pueden cuantificarse usando un ensayo de Reacción de Griess convencional. La naturaleza transitoria y volátil del óxido nítrico lo hace inadecuado para la mayoría de los métodos de detección. Sin embargo, pueden detectarse dos productos de degradación estable de óxido nítrico, nitrato (NO3) y nitrito (NO2), usando métodos fotométricos rutinarios. El ensayo de Reacción de Griess convierte enzimáticamente el nitrato en nitrito en presencia de nitrato reductasa. El nitrito se detecta colorimétricamente como un producto colorante azo de color, que absorbe luz visible en el intervalo de aproximadamente 540 nm. El nivel de óxido nítrico presente en el sistema se determina convirtiendo todo el nitrato en nitrito, determinando la concentración total de nitrito en las muestras desconocidas, y después comparando la concentración resultante de nitrito con una curva patrón generada usando cantidades conocidas de nitrato convertido a nitrito.
El fenotipo inhibidor preferido descrito anteriormente se evalúa usando ensayos cuantitativos de heparán sulfato, TGF-β1, NO y/o b-FGF descritos anteriormente, así como ensayos cuantitativos in vitro de células de la musculatura lisa que crecen y la inhibición de trombosis de la siguiente manera. Para los fines de la presente invención, el material implantable estará listo para su implante cuando uno o más de estos ensayos in vitro alternativos confirmen que el material implantable presenta el fenotipo inhibidor preferido.
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En otra realización, la composición fluida se aplica localmente a un sitio extraluminal expuesto quirúrgicamente adyacente a o en la proximidad de un sitio que necesita el tratamiento. En este caso la aplicación está guiada y dirigida por observación directa del sitio que necesite el tratamiento; también en este caso, la aplicación puede estar ayudada por el uso coincidente de otros métodos de guía como se ha descrito anteriormente.
Sellador anastomótico. En determinadas otras realizaciones, la composición fluida de la presente invención puede servir adicionalmente como un sellador anastomótico específicamente o generalmente un sellador quirúrgico. En dicha realización de doble propósito, la composición es también eficaz para sellar la unión de dos o más estructuras tubulares o sellar un espacio en una estructura tubular cuando se pone en contacto con una superficie exterior de la(s) estructura(s), o aplicarse en un arco sobre una superficie exterior o aplicarse en una circunferencia. Dicho sellador puede eliminar una necesidad de suturas que pueden dañar adicionalmente el tejido vascular, por ejemplo, y contribuir a un traumatismo endotelial luminal. Dicho sellador también puede proporcionar estabilidad adicional en la proximidad de una anastomosis reforzando de este modo cualquier reparación de la sutura. Todo lo que se requiere es que las propiedades de tipo sellador de esta composición de doble finalidad no interfieran con u otorguen una expresión coincidente del fenotipo deseado de las células y la funcionalidad basada en células de la composición.
Para los fines de determinadas realizaciones selladoras, la composición fluida comprende una matriz biocompatible en sí misma, comprende un componente que tiene propiedades selladoras, tales como, pero sin limitación, una red de fibrina, aunque también tiene las propiedades necesarias para soportar poblaciones de células endotelial o de tipo endotelial. Además, por sí misma la matriz biocompatible puede tener propiedades selladoras así como las necesarias para soportar una población de células. En el caso de otras realizaciones, las células pueden contribuir al menos en parte a las propiedades selladoras. Por ejemplo, se contempla que las células asociadas con la composición produzcan una sustancia que pueda modificar un sustrato, de tal manera que el sustrato adquiere propiedades selladoras, al mismo tiempo que presenta/mantiene su requisito de funcionalidad celular. Determinadas células pueden producir esta sustancia naturalmente mientras que otras células pueden modificarse por ingeniería genética para que lo hagan.
Método de Preparación, Conservación y Transporte de Material Implantable
Métodos para Obtener y Preparar Células. El material implantable comprende células endoteliales o de tipo endotelial alogénicas, xenogénicas o autólogas. Las células endoteliales se obtienen de un paciente, un cadáver o un banco de células. Las células endoteliales proceden de tejido vascular, más preferentemente de tejido aórtico, más preferentemente de tejido de arteria coronaria, tejido de arteria pulmonar o tejido de arteria iliaca. Como alternativa, las células endoteliales o de tipo endotelial proceden de un tejido u órgano no vascular, células progenitoras endoteliales u otras células progenitoras o de células madre. De acuerdo con realizaciones adicionales, las células se alteran, modifican o diseñan por ingeniería genética.
Cada lote de células procedente de un donante se ensaya exhaustivamente con respecto a la pureza de las células endoteliales, función biológica, la presencia de micoplasma, bacterias, hongos, levaduras, agentes patógenos humanos conocidos u otros agentes accidentales. De acuerdo con una realización preferida, las células se obtienen de un donante con sangre de tipo O. Adicionalmente las células se expanden al pase 2 o 4, se caracterizan y se crioconservan a -140 ºC para formar un banco de células maestro usando técnicas bien conocidas para preparación posterior de un banco celular de trabajo, expansión en cultivos y posterior formulación en el material implantable.
Después, un banco de células maestro seleccionado se expande para formar un banco de células de trabajo en un matraz T-75 que contiene 15 ml de medio de crecimiento de células endoteliales. Los matraces se colocan en una incubadora mantenida a una temperatura de aproximadamente 37 ºC y 5 % deCO2 / 95 % de aire, 90 % de humedad durante un mínimo de 30 minutos. Uno o dos viales de células se sacan del congelador a -160 ºC-140 ºC y se descongelan a aproximadamente 37 ºC. Cada vial de células descongeladas se siembra en dos matraces T-75 a una densidad de 3,0x103 células por cm3, preferentemente, pero no menos de 1,0x103 y no más de 7,0x103. Los matraces que contienen las células vuelven a llevarse a la incubadora. Después de 8-24 horas, el medio consumido se retira y se reemplaza por medio reciente. Los medios se cambian cada dos o tres días, posteriormente, hasta que las células alcanzan una confluencia del 85-100 % preferentemente, pero no menor del 60 % y no mayor del 100 %. Cuando el material implantable está destinado a aplicación clínica, solamente se usa medio sin antibióticos en el cultivo postdescongelado de células y la fabricación de material implantable de la invención.
El medio de crecimiento endotelial se retira después y la monocapa de células se aclara con 10 ml de solución salina tamponada con HEPES (HEPES). El HEPES se retira, y se añaden 2 ml de tripsina (aproximadamente 0,25 mg/ml) para separar las células de la superficie de los matraces T-75. Una vez producida la separación, se añaden 3 ml de solución neutralizante de tripsina (TNS) para detener la reacción enzimática. Se añaden 5 ml más de HEPES y las células se enumeran usando un hemocitómetro. La suspensión celular se centrifuga y se ajusta a una densidad de 1,75 x 106 células/ml usando EGM-2 sin antibióticos.
Si las células van a congelarse para formar un banco de células de trabajo, el medio se complementa con un FBS al 10 % adicional (FBS al 12 % final) y dimetilsulfóxido (DMSO) al 10 %. Volúmenes de un mililitro de la suspensión
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CA2605080A1 (en) | 2005-04-21 | 2006-11-02 | Massachusetts Institute Of Technology | Materials and methods for altering an immune response to exogenous and endogenous immunogens, including syngeneic and non-syngeneic cells, tissues or organs |
| SG161258A1 (en) | 2005-06-21 | 2010-05-27 | Pervasis Therapeutics Inc | Methods and compositions for enhancing vascular access |
| WO2008057590A2 (en) * | 2006-11-07 | 2008-05-15 | Pervasis Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for modulating tissue modeling |
| SG176460A1 (en) * | 2006-11-07 | 2011-12-29 | Pervasis Therapeutics Inc | Materials and methods for treating and managing angiogenesis-mediated diseases |
| WO2009097218A1 (en) | 2008-01-28 | 2009-08-06 | Biomet 3I, Llc | Implant surface with increased hydrophilicity |
| KR101970342B1 (ko) | 2011-04-28 | 2019-04-18 | 아브락시스 바이오사이언스, 엘엘씨 | 나노입자 조성물의 혈관내 전달 및 그의 용도 |
| CN102763642B (zh) * | 2012-08-14 | 2014-04-02 | 郑州赛英科干细胞技术有限公司 | 一种冷冻保护液以及冷冻保存人胎盘羊膜和绒毛膜的方法 |
| AU2015265954A1 (en) * | 2014-05-27 | 2017-01-12 | Novahep Ab | Bioengineered allogeneic valve |
| CA3222892A1 (en) * | 2015-03-10 | 2016-09-15 | Stent Tek Limited | Surgical system, device and methods of use thereof for the percutaneous creation of an arteriovenous fistula (avf) |
| US11389622B1 (en) * | 2017-11-13 | 2022-07-19 | Simon B. Rayhanabad | Patch for providing dialysis |
| US12017032B1 (en) | 2017-11-13 | 2024-06-25 | Sbr Innovations, Llc | Arteriovenous graft and method of using thereof |
| WO2019152799A1 (en) | 2018-02-02 | 2019-08-08 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Sutureless graft anastomotic quick connect system |
| WO2020047380A1 (en) * | 2018-08-31 | 2020-03-05 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generating arterial endothelial cell-seeded vascular grafts |
| US12310836B2 (en) | 2020-03-03 | 2025-05-27 | Akeo Hagiwara | Vein cover |
| CN115376392B (zh) * | 2022-08-18 | 2024-04-26 | 昆明理工大学 | 主动脉老化对血管生物力学影响的模拟装置及方法 |
| EP4439070B1 (de) * | 2023-03-27 | 2025-12-03 | Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH | Automatisches analysesystem |
| CN120227529B (zh) * | 2025-05-29 | 2025-08-12 | 鼎科医疗技术（苏州）有限公司 | 一种血管外支架 |
Family Cites Families (88)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4418691A (en) * | 1981-10-26 | 1983-12-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Method of promoting the regeneration of tissue at a wound |
| US4787900A (en) * | 1982-04-19 | 1988-11-29 | Massachusetts Institute Of Technology | Process for forming multilayer bioreplaceable blood vessel prosthesis |
| IL78950A (en) | 1985-06-06 | 1991-12-15 | Univ Jefferson | Coating for prosthetic devices |
| US4820626A (en) * | 1985-06-06 | 1989-04-11 | Thomas Jefferson University | Method of treating a synthetic or naturally occuring surface with microvascular endothelial cells, and the treated surface itself |
| US4732155A (en) * | 1985-08-27 | 1988-03-22 | The Children's Medical Center Corporation | Implantable chemoattractant system |
| US5863531A (en) * | 1986-04-18 | 1999-01-26 | Advanced Tissue Sciences, Inc. | In vitro preparation of tubular tissue structures by stromal cell culture on a three-dimensional framework |
| US6309635B1 (en) * | 1986-11-20 | 2001-10-30 | Children's Medical Center Corp. | Seeding parenchymal cells into compression resistant porous scaffold after vascularizing in vivo |
| US5804178A (en) * | 1986-11-20 | 1998-09-08 | Massachusetts Institute Of Technology | Implantation of cell-matrix structure adjacent mesentery, omentum or peritoneum tissue |
| US5736372A (en) * | 1986-11-20 | 1998-04-07 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable synthetic polymeric fibrous matrix containing chondrocyte for in vivo production of a cartilaginous structure |
| US5567612A (en) * | 1986-11-20 | 1996-10-22 | Massachusetts Institute Of Technology | Genitourinary cell-matrix structure for implantation into a human and a method of making |
| CA1340581C (en) * | 1986-11-20 | 1999-06-08 | Joseph P. Vacanti | Chimeric neomorphogenesis of organs by controlled cellular implantation using artificial matrices |
| US5073492A (en) * | 1987-01-09 | 1991-12-17 | The Johns Hopkins University | Synergistic composition for endothelial cell growth |
| US5145769A (en) * | 1987-08-21 | 1992-09-08 | Cryolife Inc. | Method for cryopreserving blood vessels |
| US5202120A (en) * | 1987-09-11 | 1993-04-13 | Case Western Reserve University | Methods of reducing glial scar formation and promoting axon and blood vessel growth and/or regeneration through the use of activated immature astrocytes |
| US4945086A (en) | 1988-05-03 | 1990-07-31 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Smooth muscle cell growth inhibitor |
| US5575815A (en) * | 1988-08-24 | 1996-11-19 | Endoluminal Therapeutics, Inc. | Local polymeric gel therapy |
| US5843156A (en) * | 1988-08-24 | 1998-12-01 | Endoluminal Therapeutics, Inc. | Local polymeric gel cellular therapy |
| CH676195A5 (es) * | 1988-10-07 | 1990-12-28 | Sulzer Ag | |
| JPH03133901A (ja) * | 1989-10-19 | 1991-06-07 | Osaka Gas Co Ltd | 生体細胞の凍結保存方法 |
| US5527532A (en) * | 1989-11-13 | 1996-06-18 | President And Fellows Of Harvard College | Extraluminal regulation of the growth and repair of tubular structures in vivo |
| WO1991007154A1 (en) * | 1989-11-13 | 1991-05-30 | President And Fellows Of Harvard College | EXTRALUMINAL REGULATION OF THE GROWTH AND REPAIR OF TUBULAR STRUCTURES ιIN VIVO |
| US5540928A (en) * | 1991-02-27 | 1996-07-30 | President And Fellows Of Harvard College | Extraluminal regulation of the growth and repair of tubular structures in vivo |
| CA2071137A1 (en) * | 1991-07-10 | 1993-01-11 | Clarence C. Lee | Composition and method for revitalizing scar tissue |
| EP0591462B1 (en) | 1991-07-15 | 2003-04-16 | Oklahoma Medical Research Foundation | Universal donor cells |
| US5336615A (en) | 1992-01-06 | 1994-08-09 | Yale University | Genetically engineered endothelial cells exhibiting enhanced migration and plasminogen activator activity |
| JPH0646840A (ja) * | 1992-08-04 | 1994-02-22 | Nippon Zenyaku Kogyo Kk | 細胞凍結保存液 |
| US5399665A (en) * | 1992-11-05 | 1995-03-21 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable polymers for cell transplantation |
| US6491938B2 (en) * | 1993-05-13 | 2002-12-10 | Neorx Corporation | Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells |
| US5981568A (en) * | 1993-01-28 | 1999-11-09 | Neorx Corporation | Therapeutic inhibitor of vascular smooth muscle cells |
| GB9306449D0 (en) * | 1993-03-29 | 1993-05-19 | Nat Heart Research Fund | Tissue equivalents |
| US5709854A (en) * | 1993-04-30 | 1998-01-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Tissue formation by injecting a cell-polymeric solution that gels in vivo |
| US5645829A (en) * | 1993-06-18 | 1997-07-08 | Beth Israel Hospital Association | Mesothelial cell gene therapy |
| US6176874B1 (en) * | 1993-10-18 | 2001-01-23 | Masschusetts Institute Of Technology | Vascularized tissue regeneration matrices formed by solid free form fabrication techniques |
| US6608182B1 (en) * | 1994-03-08 | 2003-08-19 | Human Genome Sciences, Inc. | Human vascular endothelial growth factor 2 |
| CA2186375A1 (en) | 1994-04-29 | 1995-11-09 | William Carl Bruchman | Improved blood contact surfaces using endothelium on a subendothelial extracellular matrix |
| US5834029A (en) * | 1994-07-20 | 1998-11-10 | Cytotherapeutics, Inc. | Nerve guidance channel containing bioartificial three-dimensional hydrogel extracellular matrix derivatized with cell adhesive peptide fragment |
| US6911216B1 (en) * | 1994-10-12 | 2005-06-28 | Genzyme Corporation | Targeted delivery via biodegradable polymers |
| WO1996011671A1 (en) * | 1994-10-12 | 1996-04-25 | Focal, Inc. | Targeted delivery via biodegradable polymers |
| US5914268A (en) * | 1994-11-21 | 1999-06-22 | National Jewish Center For Immunology & Respiratory Medicine | Embryonic cell populations and methods to isolate such populations |
| US6281015B1 (en) * | 1994-12-16 | 2001-08-28 | Children's Medical Center Corp. | Localized delivery of factors enhancing survival of transplanted cells |
| US5716404A (en) * | 1994-12-16 | 1998-02-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Breast tissue engineering |
| US5855610A (en) * | 1995-05-19 | 1999-01-05 | Children's Medical Center Corporation | Engineering of strong, pliable tissues |
| US5766584A (en) * | 1995-06-02 | 1998-06-16 | Massachusetts Institute Of Technology | Inhibition of vascular smooth muscle cell proliferation with implanted matrix containing vascular endothelial cells |
| US6615071B1 (en) * | 1995-09-20 | 2003-09-02 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Method and apparatus for detecting vulnerable atherosclerotic plaque |
| US5897987A (en) * | 1996-03-25 | 1999-04-27 | Advanced Reproduction Technologies, Inc. | Use of arabinogalactan in cell cryopreservation media |
| US6886568B2 (en) * | 1998-04-08 | 2005-05-03 | The Johns Hopkins University | Method for fabricating cell-containing implants |
| CA2351671A1 (en) * | 1998-11-24 | 2000-06-08 | Regents Of The University Of Minnesota | Transgenic circulating endothelial cells |
| US6328762B1 (en) * | 1999-04-27 | 2001-12-11 | Sulzer Biologics, Inc. | Prosthetic grafts |
| US6387116B1 (en) * | 1999-06-30 | 2002-05-14 | Pharmasonics, Inc. | Methods and kits for the inhibition of hyperplasia in vascular fistulas and grafts |
| US6461631B1 (en) * | 1999-11-16 | 2002-10-08 | Atrix Laboratories, Inc. | Biodegradable polymer composition |
| AU2001243248A1 (en) * | 2000-02-23 | 2001-09-03 | Smith Kline Beecham Corporation | Method for the prevention or reduction of vascular access dysfunction |
| AU2001245660B2 (en) * | 2000-03-13 | 2006-06-15 | Biocompatibles Uk Limited | Embolic compositions |
| KR100860860B1 (ko) * | 2000-03-15 | 2008-09-29 | 오르버스네이치 메디칼 인코포레이티드 | 내피 세포 부착을 촉진하는 코팅 |
| KR20020086678A (ko) | 2000-03-24 | 2002-11-18 | 가부시끼가이샤 메니콘 | 조직 등가물의 동결 보존 방법 및 동결 보존된 조직 등가물 |
| US6506398B1 (en) * | 2000-04-28 | 2003-01-14 | Hosheng Tu | Device for treating diabetes and methods thereof |
| US20020042131A1 (en) * | 2000-06-09 | 2002-04-11 | Organ Recovery Systems | Cryopreservation method using cryoprotective composition of propanediol and a vehicle solution |
| WO2002007749A2 (en) | 2000-07-21 | 2002-01-31 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Device providing regulated growth factor delivery for the regeneration of peripheral nerves |
| WO2002028387A1 (en) * | 2000-10-03 | 2002-04-11 | Oncopharmaceutical, Inc. | Inhibitors of angiogenesis and tumor growth for local and systemic administration |
| JP2002200161A (ja) * | 2000-10-24 | 2002-07-16 | Menicon Co Ltd | 培養皮膚代替物の製造方法およびそれにより得られる培養皮膚代替物 |
| US6565601B2 (en) * | 2000-11-15 | 2003-05-20 | Micro Therapeutics, Inc. | Methods for vascular reconstruction of diseased arteries |
| IL157532A0 (en) * | 2000-12-27 | 2004-03-28 | Ortec International Inc | Processes for making cryopreserved composite living constructs and products resulting therefrom |
| EP2314293B1 (en) * | 2001-01-16 | 2017-01-04 | Vascular Therapies, LLC | Implantable device containing resorbable matrix material and rapamycin for preventing or treating vasuloproliferative diseases |
| US6723131B2 (en) * | 2001-02-28 | 2004-04-20 | The Cleveland Clinic Foundation | Composite bone marrow graft material with method and kit |
| AU2002330131A1 (en) | 2001-09-28 | 2003-04-07 | Goldberg, Eugene, P. | Biopolymer and biopolymer-cell compositions for nerve tissue repair |
| US7297540B2 (en) * | 2002-01-15 | 2007-11-20 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Methods of generating tissue using devitalized, acellular scaffold matrices derived from micro-organs |
| US20040047843A1 (en) * | 2002-02-12 | 2004-03-11 | Uab Research Foundation | Method for spinal cord reconnection |
| AU2003223416A1 (en) * | 2002-03-25 | 2003-10-13 | Condros, Inc. | Tissue analogs for in vitro testing and method of use therefor |
| US20050008629A1 (en) * | 2002-05-08 | 2005-01-13 | Interpore Orthopaedics, A Delaware Corporation | Encapsulated AGF cells |
| JP2005537822A (ja) * | 2002-06-28 | 2005-12-15 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | 有機化合物の使用 |
| FR2845691B1 (fr) * | 2002-10-10 | 2004-12-10 | Centre Nat Rech Scient | Nouvelles cellules endotheliales, anticorps diriges contre ces cellules et leur utilisation, notamment pour le criblage de substances inhibant l'angiogenese |
| US20040156878A1 (en) * | 2003-02-11 | 2004-08-12 | Alireza Rezania | Implantable medical device seeded with mammalian cells and methods of treatment |
| WO2004111207A1 (en) * | 2003-06-09 | 2004-12-23 | Centelion | Multicellular in vitro model of angiogenesis and methods for using the same |
| WO2005003317A2 (en) * | 2003-07-01 | 2005-01-13 | Regents Of The University Of Minnesota | Engineered blood vessels |
| GB0322789D0 (en) * | 2003-09-30 | 2003-10-29 | Lifeforce Group Plc | Blood pack for leukocyte banking |
| WO2005052138A1 (en) * | 2003-11-19 | 2005-06-09 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Cryopreservation of pluripotent stem cells |
| WO2005072417A2 (en) * | 2004-01-27 | 2005-08-11 | The Ohio State University Research Foundation | Vascular endothelial growth factors and methods of their use |
| ATE506431T1 (de) * | 2004-04-23 | 2011-05-15 | Bioe Llc | Mehrfachlinien-vorläuferzellen |
| FR2869533B1 (fr) | 2004-05-03 | 2006-07-28 | Sedat Sa | Seringue pour interventions medicales et necessaire de reconstitution de substances extemporanees comportant une telle seringue |
| US7842304B2 (en) | 2004-10-29 | 2010-11-30 | Nexeon Medsystems, Inc. | Methods and apparatus for treating an injured nerve pathway |
| WO2006062909A2 (en) * | 2004-12-08 | 2006-06-15 | Pervasis Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for enhancing vascular access |
| WO2006062871A2 (en) | 2004-12-08 | 2006-06-15 | Pervasis Therapeutics, Inc. | Materials and methods for minimally-invasive administration of a cell-containing flowable composition |
| ATE450276T1 (de) | 2004-12-08 | 2009-12-15 | Pervasis Therapeutics Inc | Materialien und verfahren zur minimal invasiven abgabe einer zellhaltigen fliessfähigen zusammensetzung |
| CA2605080A1 (en) | 2005-04-21 | 2006-11-02 | Massachusetts Institute Of Technology | Materials and methods for altering an immune response to exogenous and endogenous immunogens, including syngeneic and non-syngeneic cells, tissues or organs |
| GB0509845D0 (en) | 2005-05-13 | 2005-06-22 | Btg Int Ltd | Preparation of therapeutic foam |
| SG161258A1 (en) | 2005-06-21 | 2010-05-27 | Pervasis Therapeutics Inc | Methods and compositions for enhancing vascular access |
| WO2007047425A1 (en) | 2005-10-12 | 2007-04-26 | Cellular Bioengineering, Inc. | Resorbable cornea button |
| WO2007053799A2 (en) * | 2005-10-19 | 2007-05-10 | Cd Solutions, Llc | Apparatus and method for mixing and transferring medications |
| US7743799B2 (en) * | 2005-11-07 | 2010-06-29 | Industrie Borta S.p.A. | Vented safe handling vial adapter |
-
2006
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