ES2312968T3

ES2312968T3 - Compuestos novedosos.

Info

Publication number: ES2312968T3
Application number: ES04714652T
Authority: ES
Inventors: Jun Tang
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 2003-02-27
Filing date: 2004-02-25
Publication date: 2009-03-01
Anticipated expiration: 2024-02-25
Also published as: US7507834B2; ATE410415T1; US20060142284A1; EP1597234B1; DE602004016964D1; WO2004076414A3; EP1597234A4; WO2004076414A2; EP1597234A2; JP2006519234A

Abstract

Un compuesto de la fórmula I o su sal o solvato (Ver fórmula) en la que R1 es hidrógeno, halógeno, -OMe, -OH, -NH2, o -NHSO2CH3, o R1 es un radical de la fórmula (Ver fórmula) y R2 es hidrógeno, cloro, -OMe, -OH, -NO2, o -NH2.

Description

Compuestos novedosos.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a derivados de anilinopirazol, procedimientos para la preparación anilinopirazoles, y uso de anilinopirazoles en la fabricación de medicamentos para el tratamiento de ciertas enfermedades o afecciones. En particular la presente invención se refiere a derivados de anilinopirazoles útiles como inhibidores de CDK2 y uso de los anilinopirazoles en la fabricación de medicamentos para el tratamiento de trastornos mediados por una actividad inapropiada de CDK2.

Antecedentes de la invención

La quimioterapia, así como radioterapia eficaz, para tratamiento de cáncer que tiene una toxicidad aceptable para las células normales, es un continuo objetivo en el campo de oncología. Se usan numerosos agentes citotóxicos en el tratamiento de cáncer, incluyendo agentes citotóxicos que afectan de manera adversa dividiendo rápidamente las células, incluyendo las células normales, que están en el proceso de la división de las células. Típicamente tales agentes pueden tener efecto sobre el ciclo de células en G1 - el período entre la mitosis y la síntesis de ADN; S- el período de la síntesis de ADN; G2 - el intervalo premitótico; y/o M - el período de la mitosis y se denominan agentes específicos de fases. Tales agentes no son eficaces en Go, la fase celular de latencia o de descanso. Por lo tanto, tales agentes anti-neoplásicos son activos contra las células en el proceso de la división celular y son más eficaces contra cánceres que tienen una gran fracción de crecimiento, esto es, tumores que tienen un alto porcentaje de células en división.

Las proteínas quinasas catalizan la fosforilación de diversos residuos en proteínas que incluyen las proteínas implicadas en la regulación de crecimiento y diferenciación celular. Las proteínas quinasas implicadas en la regulación de crecimiento y diferenciación celular. Las proteínas quinasas juegan un papel crítico en el control del crecimiento y diferenciación celular y son mediadores claves de señales celulares que conducen a la producción de factores de crecimiento y citoquinas. Véase, por ejemplo, Schlessinger y Ullrich, Neuron 1992, 9, 383. Las señales mediadas por las proteínas quinasas se ha mostrado que controlan, el crecimiento, muerte y diferenciación en la célula regulando los procesos del ciclo celular.

La progresión a través del ciclo celular eucariótico está controlada por un familia de una familia de proteínas quinasas llamadas quinasas dependientes de ciclina (CDK) y su interacción con una familia de proteínas denominadas ciclinas (Myerson y col., EMBO Journal 1992, 11, 2909-17). La activación e inactivación coordinada de los diferentes complejos ciclina/CDk es necesaria para la progresión normal a través del ciclo celular (Pines, Trends in Biochemical Sciences 1993, 18, 195-7; Sherr, Cell, 1993, 73, 1059-1065). Tanto las transiciones G1-S como G2-M están controladas por la activación de diferentes actividades ciclina/CDK. En G1, tanto la ciclina D/CDK4 como ciclina E/CDK2 se cree que median la aparición de la fase S. La progresión a lo largo de la fase S requiere la actividad de la ciclina A/CDK2 mientras que la activación de la ciclina A/cdc2 (CDK1) y ciclina B/cdc2 se requieren para el comienzo de la metafase. Por lo tanto no es sorprendente, que la pérdida de control de la regulación de CDK es un caso frecuente en las enfermedades hiperproliferativas y cáncer. (Pines, Current Opinion in Cell Biology 1992, 4, 144-8; Lees, Current Opinion in Cell Biology 1995, 7, 773-80; Hunter y Pines, Cell 1994, 79, 573-82).

La presente invención se refiere a compuestos novedosos que son eficaces en la inhibición de CDK2. La inhibición de CDK2 debe detener las células en la fase G1 y evita que entren en el ciclo celular. De este modo los compuestos de la invención tienen utilidad en el tratamiento o prevención de cáncer y otras enfermedades hiperproliferativas tal como psoriasis.

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Sumario de la invención

En un primer aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula I, o una sal o solvato, del mismo

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1

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en la que

R1 es hidrógeno, halógeno, -OMe, -OH, -NH_{2}, o -NHSO_{2}Cl_{3}, o

R1 es un radical de la fórmula

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2

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y

R2 es hidrógeno, cloro, -OMe, -OH, -NO_{2}, o -NH_{2}.

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En un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula I, o una sal o solvato del mismo y uno o más de los vehículos, diluyentes y excipientes farmacéuticamente aceptables.

En un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de un compuesto de fórmula I, o una sal o solvato del mismo en la preparación de un medicamento para uso en el tratamiento o prevención de una enfermedad provocada por el ciclo celular apropiado que se produce por el desequilibrio o actividad inapropiada de la proteína CDK2, que incluye pero no se limita a a cáncer y enfermedades hiperproliferativas, tal como psoriasis.

En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a intermedios químicos para preparar un compuesto de fórmula I.

En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a procedimientos para preparar un compuesto de fórmula L.

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Descripción detallada

Los siguientes términos pueden aparecer en el presente documento. Si aparecen, se aplicarán las siguientes definiciones.

Como se usa en el presente documento, la frase "cantidad eficaz" significa la cantidad de un fármaco o agente farmacéutico que provocará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o ser humano que se está pretendiendo, por ejemplo, por un investigador o facultativo. Además, el término "cantidad terapéuticamente eficaz" significa cualquier cantidad que, cuando se compara con un sujeto correspondiente que no ha recibido tal cantidad, da como resultado tratamiento mejorado, curación, prevención, o mejora de una enfermedad, trastorno, o efecto secundario, o una disminución en la velocidad de avance de una enfermedad o trastorno. El término también incluye dentro de su alcance cantidades eficaces para potenciar la función fisiológica normal.

Como se usan en el presente documento, el término "halógeno" se refiere a fluoro (F), cloro (Cl), bromo (Br), o yodo (I).

Como se usa en el presente documento el término "opcionalmente" significa que el (los) episodio(s) descrito(s) posteriormente se puede(n) o no puede(n) producir, y episodios que no se producen.

Como se usa en el presente documento el término "solvato" se refiere a un complejo de estereoquímica variable formado por un soluto (en esta invención, un compuesto de fórmula I o una sal del mismo) y un disolvente. Tales disolventes para el propósito de la invención pueden no interferir con la actividad biológica del soluto. Los ejemplos de disolventes adecuados incluyen, pero no se limitan a, agua, metanol, etanol y ácido acético. Preferiblemente el disolvente usado es un disolvente farmacéuticamente aceptable. Los ejemplos de disolventes farmacéuticamente aceptables incluyen, sin limitación, agua, etanol y ácido acético. Lo más preferiblemente el disolvente usado es agua.

Como se usa en el presente documento, el término "sustituido" se refiere a sustitución con el sustituyente o sustituyentes nombrados, estando permitidos múltiples grados de sustitución salvo que se establezca otra cosa.

Ciertos compuestos descritos en el presente documento pueden contener uno o más átomos quirales, o de otra manera pueden ser capaces de existir como dos enantiómeros. De acuerdo con lo anterior, los compuestos de la invención incluyen mezclas de enantiómeros así como enantiómeros purificados o mezclas enriquecidas de manera enantiomérica. También incluidos dentro del alcance de la invención están los isómeros individuales de los compuestos representados por la fórmula I anterior así como cualquier mezcla total o parcialmente equilibrada de los mismos. La presente invención también cubre los isómeros individuales de los compuestos representados por las fórmulas anteriores como mezclas con isómeros de los mismos en los que uno o más centros quirales están invertidos. También, se entiende que todos los tautómeros y mezclas de tautómeras se incluyen dentro del alcance de los compuestos de fórmula I.

Típicamente, las sales de la presente invención son sales farmacéuticamente aceptables. Las sales abarcadas dentro del término "sales farmacéuticamente aceptables" se refieren a sales no tóxicas de los compuestos de esta invención. Las sales de los compuestos de la presente invención pueden comprender sales de adición de ácidos derivadas de un nitrógeno sobre un sustituyente en el compuesto de fórmula I. Las sales representativas incluyen las sales siguientes: acetato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, calcio, edetato, camsilato, carbonato, cloruro, clavulanato, citrato, diclorhidrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsalinato, hxilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, hidroxinaftoato, yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, lameato, mandelato, mesilato, metilbromuro, metilnitrato, metilsulfato, maleato monopotásico, mucato, napsilato, nitrato, N-metilglucamina, oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, potasio, salicilato, sodio, estearato, subacetato, succinato, tannato, tartrato, teoclato, tosilato, trietiyoduro, trimetilamonio y valerato. Otras sales, que no son farmacéuticamente aceptables, pue-
den ser útiles en la preparación de compuestos de esta invención y éstas forman un aspecto adicional de la invención.

Aunque es posible que, para uso en terapia, las cantidades terapéuticamente eficaces de un compuesto de fórmula I, así como las sales y solvatos y de los mismos, se puedan administrar como el compuesto químico bruto, es posible presentar el ingrediente activo como una composición farmacéutica. De acuerdo con lo anterior, la invención además proporciona composiciones farmacéuticas, que incluyen cantidades terapéuticamente eficaces de los compuestos de fórmula I y las sales y solvatos de los mismos, y uno o más vehículos, diluyentes, o excipientes farmacéuticamente aceptables. Los compuestos de fórmula I y las sales y solvatos de los mismos, como se ha descrito anteriormente. El (los) vehículo(s), diluyente(s) o excipiente(s) debe(n) ser aceptable(s) en el sentido de ser compatible(s) con los otros ingredientes de la formulación y no perjudicial(es) para el receptor del (de los) mismo(s). De acuerdo con otro aspecto de la invención se proporciona un procedimiento para la preparación de una formulación farmacéutica que incluye el mezclado de un compuesto de fórmula I, o las sales o solvatos de los mismos, con uno o más vehículos, diluyentes o excipientes.

Las formulaciones farmacéuticas se pueden presentar en formas de dosificación unitaria que contienen una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria. Tal unidad puede contener, por ejemplo, 0,5 mg a 1 g, de preferencia 1 mg a 700 mg, aunque preferiblemente 5 g a 100 mg de un compuesto de la fórmula I, dependiendo de la afección que se está tratando, la vía de administración y la edad, peso y afección del paciente, o formulaciones farmacéuticas se pueden presentar en formas de dosificación unitaria que contienen una cantidad predeterminada del ingrediente activo por dosis unitaria. Las formulaciones de dosificación unitaria preferidas son aquellas que contienen una dosis diaria o dosis inferior, como se indica en esta memoria descriptiva, o una fracción apropiada de la misma, de un ingrediente activo. Adicionalmente, tales formulaciones farmacéuticas se pueden preparar mediante cualquiera de los procedimientos bien conocidos en la técnica de farmacia.

Las formulaciones farmacéuticas se puede adaptar para administración mediante cualquier vía apropiada, por ejemplo, mediante la vía oral (incluyendo bucal o sublingual), rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual o transdérmica), vaginal o parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa o intradérmica). Tales formulaciones se pueden preparar mediante cualquier procedimiento conocido en la técnica de farmacia, por ejemplo, mediante la puesta en asociación del ingrediente activo con el (los) vehículo(s) o excipiente(s).

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración oral se pueden presentar en forma de unidades discretas tales como cápsulas o comprimidos; en forma de polvos o gránulos; en forma de soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; o en forma de espumas o batidos comestibles; o en forma de emulsiones líquidas de aceite en agua o forma de emulsiones líquidas de agua en aceite.

Por ejemplo, para la administración oral, en la forma de un comprimido o cápsula, el componente fármaco activo se puede combinar con un vehículo inerte oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable tal como etanol, glicerol, agua y similares. Los polvos se preparan desmenuzando el compuesto hasta un tamaño fino adecuado y mezclando con un vehículo farmacéutico desmenuzado adecuadamente tal como carbohidrato comestible, como, por ejemplo, almidón o manitol. También pueden estar presente agentes aromatizantes, conservantes, dispersantes y colorantes.

Las cápsulas se hacen preparando una mezcla de polvo como se ha descrito anteriormente, y llenando las envolturas de gelatina formadas. Se pueden añadir deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio o polietilenglicol sólido a la mezcla de polvo antes de la operación de llenado. También se puede añadir un agente disgregante o solubilizante tal como agar-agar, carbonato de calcio o carbonato sódico para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiere la cápsula.

Además, cuando se desea o es necesario, también se pueden incorporar en la mezcla aglutinantes, lubricantes, agentes disgregantes y agentes colorantes adecuados. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como goma arábiga, tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras y similares. Los lubricantes usados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares. Los disgregantes incluyen, sin limitación, almidón, metil celulosa, agar, bentonita, goma de xantano y similares. Los comprimidos se formulan, por ejemplo, mediante preparación de una mezcla en polvo, granulando o formando bloques, añadiendo un lubricante y disgregante y formando comprimidos. Se prepara una mezcla en polvo mezclando el compuesto, adecuadamente mezclado, con un diluyente o base como se ha descrito anteriormente, y opcionalmente, con un aglutinante tal como carboximetilcelulosa, un alginato, gelatina, o polivinil pirrolidona, una solución retardadora tal como parafina, un acelerador tal como una sal cuaternaria y/o un agente de absorción tal como bentonita, coolí o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo se puede granular humedeciendo con un aglutinante tal como jarabe, pasta de almidón, mucílago de goma arábiga o soluciones de materiales celulósicos o poliméricos y constriñendo a través de un tamiz. Como alternativa a la granulación, la mezcla en polvo se puede después pasar a través de la máquina de comprimidos y el resultado es bloques formados de manera imperfecta rotos en gránulos. Los gránulos se pueden lubricar para prevenir que se adhiera al comprimido formando moldes mediante la adición de ácido esteárico, una sal estearato, talco o mineral. La mezcla lubricada se comprime después en comprimidos. Los compuestos de la presente invención también se pueden combinar con el vehículo inerte de flujo libre y se comprime en comprimidos directamente sin ir a través de etapas de granulación o formación de bloques. Se puede proporcionar un revestimiento protector transparente u opaco constituido por un revestimiento de sello de goma laca, un revestimiento de azúcar de material polimérico y revestimiento de pulido de cera. Las materias colorantes se pueden añadir a estos revestimientos para distinguir diferentes dosificaciones unitarias.

Los fluidos orales tales como solución, jarabes y elixires se pueden preparar en forma de dosificación unitaria de manera que una cantidad dada contiene una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes se pueden preparar disolviendo el compuesto en una solución acuosa aromatizada adecuadamente, mientras que los elixires se preparan mediante el uso de un vehículo alcohólico no tóxico. Las suspensiones se pueden formular dispersando el compuesto en un vehículo no tóxico. También se pueden añadir solubilizantes y emulsionantes tales como alcoholes isoestearílicos etoxilados y polioxi etilen sorbitol éteres, conservantes, aditivos de aroma tales como aceite de pipermín o sacarina, u otros edulcorantes artificiales, y similares.

Cuando sea apropiado, las formulaciones de unidades de dosificación para la administración oral se pueden microencapsular. La formulación también se puede preparar para prolongar o sostener la liberación como por ejemplo revistiendo o embebiendo material particulado en polímeros, cera o similares.

Los compuestos de fórmula I, y las sales, solvatos también se puede administrar en la forma de sistemas de distribución de liposomas, tales como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes y vesículas multilamelares. Se pueden formar liposomas a partir de una diversidad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.

Los compuestos de fórmula I, y las sales y solvatos de los mismos también se puede distribuir mediante el uso de anticuerpos monoclonales como vehículos individuales a los que se acoplan moléculas del compuesto. Los compuestos también se puede acoplar con polímeros solubles como vehículos de fármaco dirigibles. Tales polímeros pueden incluir polivinil pirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamida-fenol, polihidroxietilaspartamidafenol, o polietilenóxidopolilisina sustituida con restos de palmitoílo. Además, los compuestos se pueden acoplar a una clase de polímeros biodegradables útiles en el logro de liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, poliepsilon caprolactona, ácido polihidroxi butírico, poliortoésteres, poliacetales, polihidroxipiranos, policianoacrilatos y copolímeros de bloque reticulados o anfipáticos de hidrogeles.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración transdérmica se pueden presentar como parches discretos la composición farmacéutica se puede proporcionar en la forma de un parche transdérmico, tal como parche iontoforético transdérmico propuestos para permanecer en contacto íntimo con la epidermis del receptor durante un tiempo prolongado de tiempo. Por ejemplo, el ingrediente activo se puede distribuir a partir del parche mediante iontoforesis como se describe generalmente el Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración tópica se pueden formular en forma de pomadas, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, pulverizaciones, aerosoles o aceites.

Para los tratamientos del ojo u otros tejidos externos, por ejemplo boca y piel, las formulaciones se aplican preferiblemente en forma de pomada o crema tópica. Cuando se formula en una pomada, el ingrediente activo se puede emplear con bien una base parafínica o de pomada miscible en agua. Como alternativa, el ingrediente activo se puede formular en una crema con una base de crema de aceite en agua o una base de agua en aceite.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración tópica al ojo incluyen gotas de ojos en las que el ingrediente activo se disuelve o se suspende en un vehículo adecuado, especialmente un disolvente acuoso.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica en la boca incluyen grageas, pastillas y composiciones de enjuague bucal.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración rectal se pueden presentar en forma de supositorios o enemas.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración nasal en las que el vehículo es un sólido incluyen un polvo grueso que tiene un tamaño de partícula por ejemplo en el intervalo entre 20 y 500 micrómetros que se administra de la manera en la que se inhala, es decir, mediante inhalación rápida a través del paso nasal desde un recipiente en el que se mantiene el polvo cerrado hasta la nariz. Las formulaciones adecuadas en las que el vehículo es un líquido, para la administración en forma de una pulverización nasal o en forma de gotas nasales, incluyen soluciones acuosas u oleosas del ingrediente activo.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración mediante inhalación incluyen polvos en partículas finas o nieblas que se pueden que se pueden generar por medio de diversos tipos de aerosoles, nebulizadores o insufladores presurizados de dosis medida.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración vaginal se pueden presentar en forma de formulaciones de pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o pulverizaciones.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración parenteral incluyen solución acuosa y no acuosa estéril que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos que hacen la formulación sustancialmente isotónica con la sangre del receptor propuesto; y las suspensiones acusas y no acuosas estériles que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las formulaciones se pueden presentar en recipientes de dosis unitaria o multi-dosis, por ejemplo, ampollas y viales cerradas, y se pueden almacenar en una condición secada por congelación (liofilizada) que requiere solamente la adición del líquido estéril llevado, por ejemplo, agua para inyecciones, inmediatamente antes de usar. Las soluciones y suspensiones para inyección extemporáneas se pueden preparar a partir de polvos, gránulos y comprimidos estériles.

Se debe entender que además de los ingredientes particularmente mencionados anteriormente, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica que tienen relación con el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo las adecuadas para la administración oral pueden incluir agentes aromatizantes.

Una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención dependerá de un número de factores que incluye, por ejemplo, la edad y peso del animal, la afección precisa que requiere tratamiento y su gravedad, la naturaleza de la formulación, y la vía de administración, y por último estará a la discreción del medico o veterinario asistente. Sin embargo, una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I para el tratamiento o prevención de una afección provocada por el ciclo celular apropiado que se produce por el desequilibrio o actividad inapropiada de la proteína CDK2, que incluye, pero no se limita a, cáncer y enfermedades hiperproliferativas, tal como psoriasis, estará generalmente en el intervalo de 0,1 a 100 mg/kg de peso corporal del receptor (mamífero) al día y más usualmente en el intervalo de 1 a 10 mg/kg de peso corporal al día. De este modo, para un mamífero adulto de 70 kg, la cantidad real al día usualmente estaría entre 70 y 700 mg y esta cantidad se pueden proporcionar en una sola dosis al día o más usualmente en un número (tal como dos, tres, cuatro, cinco o seis) de dosis inferior al día de manera que la dosis total sea la misma. Una cantidad eficaz de una sal o solvato, o derivado fisiológicamente funcional del mismo, se podrá determinar como una cantidad de la cantidad eficaz del compuesto de la fórmula I per se. Se contempla que dosificaciones similares serían apropiadas para el tratamiento de otras afecciones mencionadas anteriormente.

Procedimiento de preparación

Los compuestos de la fórmula general I se pueden preparar mediante procedimientos conocidos en la técnica de la síntesis orgánica como se ha expuesto en parte de los siguientes esquemas de síntesis, o sus variantes. También se reconoce que en todos los esquemas descritos más adelante, se entenderá que los grupos protectores para grupos sensibles o reactivos se emplean cuando sean necesarios de acuerdo con los principios generales de química. Los grupos protectores se manipulan de acuerdo con procedimientos convencionales de la síntesis orgánica (T. W. Green and P. G. M. Wuts (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley y Sons). Estos grupos se retiran en una fase conveniente de la síntesis del compuesto usando procedimientos que son fácilmente evidentes para los expertos en la técnica. La selección de procedimientos así como las condiciones de reacción y orden de su ejecución serán consistentes con la preparación de los compuestos de fórmula I. Los expertos en la técnica reconocerán si existe un estereocentro en los compuestos de fórmula I. De acuerdo con lo anterior, la presente invención incluye ambos estereoisómeros posibles e incluye no solamente los compuestos racémicos sino los enantiómeros individuales también. Cuando se desea un compuesto en forma de un enantiómero individual, se puede obtener mediante síntesis estereoespecífica o mediante resolución del producto final o cualquier intermedio conveniente. La resolución del producto final, un intermedio, o material de partida se puede efectuar mediante cualquier procedimiento adecuado en al técnica. Véase, por ejemplo, Stereochemistry of Organic Compounds por E. L. Eliel, S. H. Wilen, and L. N. Mander (Wiley- Interscience,
1994).

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Esquema A

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Esquema B

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Esquema C

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En resumen en el Esquema A, un compuesto de fórmula II se hace reaccionar con carbonato de dimetilo con una base adecuada, tal como hidruro de sodio, produciendo un compuesto de fórmula III. Un compuesto de fórmula III se hace reaccionar posteriormente con sulfanilamida produciendo un compuesto de fórmula IV. Un compuesto de fórmula IV se hace reaccionar con el reactivo de Lawesson produciendo la tioamida de fórmula V que se hace reaccionar posteriormente con hidrazina produciendo un compuesto de fórmula I'.

En el esquema B, un compuesto de fórmula VI se hace reaccionar con sulfanilamida produciendo un compuesto de fórmula VII. Un compuesto de fórmula VII se hace reaccionar con hidrazina produciendo un compuesto de fórmula I''.

En el esquema C, un compuesto de fórmula VIII se hace reaccionar con isocianato de sulfamoilfenilo con una base, tal como LiN (TMS)2, produciendo un compuesto de fórmula IX. Un compuesto de fórmula IX se hace reaccionar con hidracina produciendo un compuesto de of formula I'''.

En los esquemas A-B, R3 y R4 son R1 y R2, respectivamente, que se han definido previamente, o son grupos que se pueden convertir en R1 y R2, respectivamente. La conversión de R3 y R4 en R1 y R2 respectivos se ejemplifican en los ejemplos reales más adelante:

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Realizaciones - Ejemplos específicos

Como se usa en el presente documento los símbolos y convenciones usados en estos procedimientos, esquemas y ejemplos son consistentes con los usados en la bibliografía científica contemporánea, por ejemplo el Journal of the American Chemical Society o el Journal of Biological Chemistry. Las abreviaturas de una sola letra o de tres letras convencionales se usan generalmente para designar restos de aminoácidos, que se asumen que están en la configuración L salvo que se indique otra cosa. Salvo que se indique otra cosa, todos los materiales de partida se obtuvieron de proveedores comerciales y se usaron sin purificación adicional. Específicamente, las abreviaturas siguientes se pueden usar en los ejemplos y a lo largo del presente documento:

g (gramos);: mg (miligramos);

l (litros);: ml (mililitros);

\mul (microlitros),: psi (libras por pulgada cuadrada);

M (molar);: mM (milimolar);

i. v. (intravenoso);: Hz (Hercio);

MHz (megahercio);: mol (moles);

mmol (milimoles);: T A (temperatura ambiente);

min (minutos);: h (horas);

p. de f. (punto de fusión);: TLC (cromatografía en capa fina);

Tr (tiempo de retención);: RP (fase inversa);

MeOH(Metanol);: I-PrOH (isopropanol);

TEA (trietanolamina);: TFA (ácido trifluoroacétoco);

TFAA (anhídrido trifluoroacético);: THF (tetrahidrofurano);

DMSO (diemtilsulfóxido);: AcOEt (acetato de etilo);

DME (1,2-dimetoxietano);: DCM (diclorometano);

DCE (dicloroetano),: DMF (N,N-dimetilformamida);

DMPU (N,N-dimetilpropilenurea);: CDI (1,1-carbonildiimidazol);

IBCF (cloroformiato de isobutilo);: HOAc (ácido acético);

HOSu (N-Hidroxisuccinimida);: HOBT (1-hidroxibenzotriazol);

mCPBA (ácido meta-cloroperbenzoico);

EDC (clorhidrato de etilcarbodiimida);

BOC (terc-butiloxicarbonilo);: FMOC (9-fluorenilmetoxicarbonil);

DCC (diciclohexilcarbodiimida);: CBZ (benciloxicarbonilo);

Ac (acetilo);: atm (atmósfera);

TMSE (2-(trimetilsilil)etilo);: TMS (trimetilsililo);

TIPS (Triisopropilsililo);: TBS (t-butildimetilsililo);

DMAP (4-dimetilaminopiridina);: BSA (albúmina sérica bovina)

ATP (trifosfato de adenosina): HRP (peroxidasa de rábano picante)

DMEM (medio de Eagle modificado de Dulbecco)

HPLC (cromatografía líquida de alta presión);

BOP (cloruro de bis(2-oxo-3-oxazolidinil)fosfínico);

TBAF (fluoruro de tetra-n-butilamonio);

HBTU (hexafluorofosfato de O-Benzotriazol-1-il-N,N,N',N'-tetrametiluronio).

HEPES (ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazina etanosulfónico);

DPPA (difenilfosforil azida);

fHNO3 (HNO3 de pirólisis); y

EDTA (ácido etilendiaminatetraacético).

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Todas las referencias a éter son a dietil éter, salmuera se refiere a solución acuosa saturada de NaCl. Salvo que se indique otra cosa, todas las temperaturas se expresan en ºC (grados centígrados). Todas las reacciones se llevaron a cabo en una atmósfera inerte a temperatura ambiente salvo que se indique otra cosa.

Los espectros de ^{1}H RMN se registraron en un Brucker AVANCE-400. Los desplazamientos químicos se expresan en partes por millón (ppm, unidades \delta). Las constantes de acoplamiento están en unidades de hercios (Hz). Los patrones de desdoblamiento describen multiplicidades aparentes y se designan como s (singlete), d (doblete), t (triplete), c (cuartete), quint (quintete), m (mulltiplete), a (ancho).

EM-CL se registraron mediante sobre un espectrómetro Micromass ZMD y Waters 2690. Todos los espectros de masas se tomaron en procedimientos de ionización por electropulperización (IEP). La mayoría de las reacciones se controlaron mediante cromatografía en capa fina sobre placas de gel de sílice de E. Merck de 0,25 mm (60F-254), se visualizaron con luz UV, ácido fosfomolíbdico etanólico al 5% o solución de p-anisaldehído. La cromatografía en columna ultrarrápida se realizó sobre gel de sílice (malla 230-400, Merck).

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Ejemplo 1

7

4-[5-(3-Bromo-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Ia)

8

A una suspensión de carbonato de dimetilo (72 g) y 60% de hidruro de sodio oleoso 6.4 g a 75ºC se añadió 3-bromoacetofenona IIa (80 mmol, 15,9 g) gota a gota. La reacción se mantuvo en estado moderado mediante ajuste de la velocidad de adición (exotérmica). Después de que se complete la adición, la reacción se calentó a 75ºC durante 20 min, después se enfrió hasta T A. Se añadió una pequeña cantidad de agua para inactivar el exceso de base y después se evaporó el carbonato de dimetilo. Después de adicificar el resto con HCl acuoso al 10%, se extrajo con éter (2X) y las fases de éter combinadas se lavaron con agua y se secaron. La purificación mediante cromatografía sobre gel de sílice (AcOEt/Hexano = 1/10) proporcionando 17,48 g (85%) del compuesto IIIa.

Una mezcla de IIIa (10 mmol, 2,57 g) y sulfanilamida (11 mmol, 1,89 g) en tolueno (30 ml) y DMF (10 ml) se calentó a 130ºC durante 12 h. Después de enfriar hasta T A , se filtró la precipitación resultante y se secó a vacío proporcionando 2.18 g (55%) de IVa.

Una suspensión de IVa (0,49 mmol, 194 mg) y reactivo de Lawesson (0,51 mmol, 208 mg) en tolueno (12 ml) se calentó hasta 140ºC durante 1 h, y después se concentró a vacío. El residuo se disolvió directamente en etanol (5 ml) sin ninguna purificación. Se añadieron hidrato de hidrazina (0,25 ml) y HOAc (unas pocas gotas), y se dejó que la reacción se agitara a 85ºC durante 12 h antes de que se concentrara a vacío. El residuo se extrajo con AcOEt, y la fase de AcOEt se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}. La purificación mediante HPLC (Gilson) proporcionó 14 mg (7.3%) del compuesto Ia. ^{1}HNMR: (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 6,44 (s, 1H), 7,06 (s, 2H), 7,42 (m, 3H), 7,55 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,64 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,76 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 8,00 (t, 1H, J = 1,8 Hz), 9,10 (s, 1H), 12,76 (s, 1H). CL/EM: m/z 393 (M-1^{-}, 395 (M + 1)^{+}.

Ejemplo 2

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9

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4-[5-(4-Fluoro-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Ib)

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10

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Una mezcla de VIa (3 mmol, 642,8 mg) y sulfonilamida (3 mmol, 516,6 mg) en tolueno (20 ml) y DMF (2 ml) se calentó a 140ºC durante 3 h, y después se concentró a vacío. El residuo se disolvió directamente en etanol (20 ml) sin ninguna purificación. Se añadieron hidrato de hirazina (1 ml) y HOAc (una pocas gotas), y la mezcla de reacción se dejó en agitación a 85ºC durante 12 h antes de que se concentrara a vacío. El residuo se extrajo con AcOEt, y la fase de AcOEt se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}. La evaporación parcial del disolvente supuso precipitación. Se recogió el sólido mediante filtración, después se volvió a cristalizar en MeOH/AcOEt, y se secó a vacío proporcionando 111 mg (0,33 mmol, 11,1%) del compuesto Ib. ^{1}HNMR: (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 6,33 (s, 1H), 7,04 (sa, 2H), 7,31 (m, 2H), 7,43 (m, 2H), 7,63 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,79 (dd, 2H, J = 3,3, 8,6 Hz), 9,04 (s, 1H), 12,64 (s, 1H). CL/EM: m/z 331 (M - 1), 333 (M + 1)^{+}.

Ejemplo 3

11

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4-[5-(4-Bromo-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Ic)

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12

Bis(trimetilsilil)amiduro de litio (2,2 ml, 1,0 M en THF, 2,2 mmol) se añadió lentamente a una mezcla de la acetofenona correspondiente (1,0 mmol) e isocianato de 4-sulfamoilfenilo (1,0 mmol, 214 mg) en THF seco (7,5 ml) a -78ºC en argón. La reacción de agitó durante 30 min y después se calentó a T A durante otras 12 h. Se inactivó con MeOH y se concentró a vacío. La tioamida bruta resultante se disolvió directamente en etanol (10 ml) sin ninguna purificación. Se añadieron hidrato de hidrazina (0,5 ml) y HOAc (una pocas gotas) y la mezcla de reacción se dejó en agitación a 85ºC durante 12 h antes de que se concentrara a vacío. El residuo se extrajo con AcOEt, y la fase de AcOEt se lavó con salmuera, y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. La evaporación parcial del disolvente supuso precipitación. Se recogió el sólido mediante filtración, y se secó proporcionando 121 mg (0,307 mmol, 30,7%) del compuesto Ic en forma de un sólido de color amarillo. ^{1}HNMR: (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 6,38 (s, 1H), 7,06 (sa, 2H), 7,43 (sa, 2H), 7,62-7,73 (m, 6H), 9,08 (s, 1H), 12,73 (s, 1H). CL/EM: m/z 391 (M - 1), 393 (M - 1)^{-}, 393 (M + 1)^{+}, 395 (M + 1)^{+}.

Los compuestos del ejemplo 4-6 se realizaron mediante un procedimiento como se ha descrito en el Ejemplo 3 (Esquema C).

Ejemplo 4

13

4-[5-(3-Fluoro-4-metoxi-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Id)

El compuesto Id se obtuvo con un 10% de rendimiento con el procedimiento descrito en el Ejemplo 3. ^{1}HNMR: (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 3,88 (s, 3H), 6,32 (s, 1H), 7,05 (sa, 2H), 7,25 (t, 1H, J = 8,8 Hz), 7,43 (m, 2H), 7,55 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,61-7,66 (m, 3H), 9,05 (s, 1H), 12,58 (s, 1H). CL/EM: m/z 361 (M - 1)^{-}, 363 (M + 1)^{+},

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Ejemplo 5

14

4-[5-(4-Nitro-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Ie)

El compuesto Ie se obtuvo con un 19% de rendimiento con el procedimiento descrito en el Ejemplo 3. ^{1}HNMR: (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 6.61 (s, 1H), 7,08 (sa, 2H), 7,40 (m, 2H), 7,66 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 8,05 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 8,32 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 9,16 (s, 1H), 13,06 (s, 1H). CL/EM: m/z 358 (M - 1)^{-}, 360 (M + 1)^{+}.

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Ejemplo 6

15

4-[5-(3-Metoxi-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (If)

El compuesto se obtuvo con un 37,7% de rendimiento con el procedimiento descrito en el Ejemplo 3. ^{1}HNMR: (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 3.82 (s, 3H), 6.36 (s, 1H), 6.92 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 7.05 (sa, 2H), 7.32-7.43 (m, 5H), 7.63 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 9.05 (s, 1H), 12.67 (s, 1H). CL/EM: m/z 343 (M - 1)^{-}, 345 (M + 1)^{+}.

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Ejemplo 7

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16

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4-[5-(3-Fluoro-4-hidroxi-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Ig)

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17

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El compuesto Id (0,334 mmol, 121 mg) se agitó en CH_{2}Cl_{2} (9 ml) a -78ºC. Se añadió lentamente tribromuro de boro (1,67 ml, 1,0 M en CHCl_{2}, 1,67 mmol), y la reacción se agitó durante 12 h mientras se mantenía a T A. Se inactivó con MeOH, se concentró a vacío. El residuo se disolvió en 1N NaOH acuoso y se filtró para retirar la precipitación no disuelta. El filtrado se neutralizó con 0,1 N HCl acuoso y se extrajo con AcOEt. Los compuestos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentraron a vacío proporcionando 58 mg (50%) del compuesto Ig en forma de un sólido de color blanco.

^{1}HNMR: (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 6,25 (s, 1H), 6,98-7,05 (m, 3H), 7,37-7,42 (m, 3H), 7,56 (dd, 1H, J = 2,0, 12,3 Hz), 7,62 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 9,03 (s, 1H), 10,14 (s, 1H), 12,38 (s, 1H). CL/EM: m/z 347 (M - 1)^{-}, 349 (M + 1)^{+}.

Ejemplo 8

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18

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4-[5-(4-Amino-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Ih)

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19

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Una mezcla del compuesto Ie (0,57 mmol, 205 mg) y sulfuro de sodio nonahidrato (2,85 mmol, 684.5 mg) en EtOH (20 ml) y THF (10 ml) se calentó a reflujo durante 5 h, y después e concentró a vacío. El residuo se extrajo con AcOEt, se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se trató mediante BondElut SCX proporcionando 173 mg (92%) del compuesto Ih. ^{1}H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 5,34 (s, 2H), 6,05 (s, 1H), 6,59 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,03 (s, 2H), 7,38 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,61 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 8,96 (s, 1H), 12,23 (s, 1H). CL/EM: m/z 328 (M - 1)^{-}, 330 (M + 1)^{+}.

Ejemplo 9

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20

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4-[5-(3-Hidroxi-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Ii)

El compuesto Ij se obtuvo con un 42% de rendimiento con el procedimiento similar como se describe en el Ejemplo 7 a partir del compuesto If. ^{1}H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 6,24 (s, 1H), 6,76 (dd, 1H, J = 1,8, 8,1 Hz), 7,05 (sa, 2H), 7,10-7,26 (m, 3H), 7,42 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,63 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 9,04 (s, 1H). CL/EM: m/z 329 (M - 1)^{-}, 331 (M + 1)^{+}.

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Ejemplo 10

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21

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4-[5-(3-Amino-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Ij)

El compuesto Ij se obtuvo con un 85% de rendimiento con el procedimiento similar como se describe en el Ejemplo 8 a partir de 4-[5-(3-nitro-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida, que se preparó con el procedimiento similar como se ha descrito en el Ejemplo 3. ^{1}H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 5,19 (s, 2H), 6,12 (s, 1H), 6,55 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 6,86 (m, 2H), 7,05 (s, 2H), 7,08 (t, 1H, J = 7,6 Hz), 7,44 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,63 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 9,02 (s, 1H), 12,48 (s, 1H). CL/EM: m/z 328 (M - 1)^{-}, 330 (M + 1)^{+}.

Ejemplo 11

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22

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4-[5-(3-Metanosulfonilamino-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Ik)

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23

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Se añadió cloruro de metanosulfonilo (9,2 uL, 1,05 equiv.) a una solución del compuesto Ij (0,1 mmol, 33 mg) en piridina (1 ml) a 0ºC. La reacción se calentó hasta T A y se agitó durante otras 4 h antes de que se concentrara a vacío. Se añadieron una pequeña cantidad de AcOEt, MeOH y CH_{2}Cl_{2} al residuo y el resultante se sometió a sonicación proporcionando 21 mg (0,052 mmol, 51,5%) del compuesto Ik. ^{1}H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 3,06 (s, 3H), 6,23 (s, 1H), 7,06 (s, 2H), 7,18 (d, 1H, J = 7,1 Hz), 7,40-7,50 (m, 5H), 7,64 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 9,07 (s, 1H), 9,88 (s, 1H), 12,72 (s, 1H). CL/EM: m/z 406 (M - 1)^{-}, 408 (M + 1)^{+}.

Los compuestos del ejemplo 12-13 se prepararon de una manera similar al procedimiento como se describe en el Ejemplo 11.

Ejemplo 12

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24

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4-(5-{3-[3-(2-Fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-2H-pirazol-3-ilamino)-bencenosulfonamida (II)

El compuesto Il se obtuvo con un 24,3% de rendimiento a partir del compuesto Ij y 1-fluoro-2-isocianato-4-trifluorometill-benceno.

^{1}H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 6,27 (s, 1H), 7,06 (s, 2H), 7,39-7,54 (m, 7H), 7,64 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,79 (s, 1H), 8,64 (d, 1H, J = 7,3 Hz), 9,00 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 9,29 (s, 1H), 12,69 (s, 1H). CL/EM: m/z 533 (M - 1)^{-}, 535 (M + 1)^{+}.

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Ejemplo 13

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25

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4-[5-(3-Bencenosulfonilamino-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (Im)

El compuesto Im se obtuvo con un 44,7% de rendimiento a partir del compuesto Ij y cloruro de benceno sulfonilo. ^{1}H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 6,15 (s, 1H), 7,03 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 7,04 (sa, 2H), 7,30 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 7,39-7,43 (m, 4H), 7,54-7,65 (m, 5H), 7,80 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 9,06 (s, 1H), 10,45 (s, 1H). CL/EM: m/z 468
(M - 1)^{-}, 470 (M + 1)^{+}.

Ejemplo 14

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26

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4-[5-(3-Morfolin-4-il-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida (In)

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27

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El compuesto Ia (0,13 mmol, 51 mg), t-BuONa (1,69 mmol, 162 mg), Pd2(dba)3 (0,026 mmol, 23,8 mg), y [(t-Bu)3PH]BF4 (0,01 mmol, 30 mg) se añadieron mediante dioxano (1 ml) en argón seguido de morfolina (1,3 mmol, 113 uL) y la reacción se agitó a 80ºC durante 24 h. Después de enfriar hasta T A, se extrajo la reacción con AcOEt, y se trató con columna de BondElut SCX. La evaporación del disolvente proporcionó un residuo y se purificó el producto mediante BondElut NH2 (9% MeOH en AcOEt), que produjo el compuesto In (17 mg, 42,5%). ^{1}H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) ppm 3,18 (m, 4H), 3,76 (m, 4H), 6,35 (s, 1H), 6,93 (dd, 1H, J = 1,8, 8,4 Hz), 7,05 (sa, 2H), 7,17 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,27-7,31 (m, 2H), 7,41 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,63 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 9,03 (s, 1H), 12,61 (s, 1H). CL/EM: m/z 398 (M - 1)^{-}, 400 (M + 1)^{+}.

Los compuestos de la presente invención tienen valiosas propiedades farmacológicas. Los diferentes compuestos de esta clase son particularmente eficaces en la inhibición de CDK2. Los datos representativos se muestran en la Tabla 1 a continuación. Los ensayos de fosforilación de sustrato se llevaron a cabo como sigue:

Los ensayos de la proteína quinasa 2 dependiente de ciclina utilizaron el péptido Biotin-aminohexil-ARRPMSPKKKA-NH2 (SEQ ID NO: 1) como aceptor del grupo fosforilo. CDK2 se expresó utilizando un sistema de expresión de baculovirus y se purificó parcialmente para comprender 20-80% de la proteína total, sin ninguna reacción detectable competente. De manera típica, los ensayos se realizaron mediante incubación de la enzima (0,2-10 nM), con y sin inhibidor, sustrato de péptido (1-10 nM), [g-32P]ATP (1-20 nM), y 10-20 mM Mg2+ durante períodos de tiempo en general dentro del intervalo de 10-120 minutos. Se terminaron las reacciones con 0,2-2 volúmenes de o bien ácido acético al 20% o 50-100 mM EDTA tamponado con pH 7 (consumo de sustrato < 20%). El tampón empleado en el ensayo de enzima fue 100 mM HEPES pH 7,5 que contiene 0,1 mg/ml de BSA y 5% DMSO. Se diluyeron los inhibidores en 100% de DMSO antes de la adición al ensayo. La detección de la fosforilación del péptido se consiguió mediante conteo de centelleo después de o bien la recogida del péptido sobre filtros de fosfocelulosa (para las reacciones detenidas con ácido acético), recogida del péptido en pocillos de placas de 96 pocillos revestidas con Streptavidin (Pierce) (se detuvieron las reacciones con EDTA), o adición de perlas impregnadas con centelleante revestido con Avidina (Ensayos de proximidad de Centelleo de Amersham, las reacciones se detuvieron con EDTA). Las cuentas detectadas mediante cualquiera de estas metodologías menos el fondo apropiado (ensayos con 40 mM EDTA adicional o sin sustrato de péptido) se asumieron que eran proporcionales a las velocidades de reacción iniciales, y los valores de CI_{50} se determinaron mediante un ajuste de mínimos cuadrados a la ecuación CPM = Vmax* (1-([I]/(K+[I])))+nsb, o los valores de -pCI50 se determinaron mediante un ajuste a la ecuación CPM = nsb+(Vmax-nsb)/(1+(x/10x-pCI50)), donde nsb son las cuentas de fondo. Se filtró y se lavó cuatro veces con 75 mM de ácido fosfórico. Se determinó la radiactividad mediante conteo de centelleo líquido.

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TABLA 1

28

Claims

1. Un compuesto de la fórmula I o su sal o solvato

29

en la que

R1 es hidrógeno, halógeno, -OMe, -OH, -NH_{2}, o -NHSO_{2}CH_{3}, o

R1 es un radical de la fórmula

30

y

R2 es hidrógeno, cloro, -OMe, -OH, -NO_{2}, o -NH_{2}.

2. Un compuesto de fórmula I de la reivindicación 1 en el que halógeno es bromo o fluoro.

3. Un compuesto de la reivindicación 1 que es

4-[5-(3-bromo-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(4-fluoro-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(4-bromo-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(3-fluoro-4-metoxi-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(4-nitro-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(3-metoxi-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(3-fluoro-4-hidroxi-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(4-amino-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(3-hidroxi-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(3-amino-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(3-metanosulfonilamino-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-(5-{3-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-2H-pirazol-3-ilamino)-bencenosulfonamida;

4-[5-(3-bencenosulfonilamino-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida;

4-[5-(3-morfolin-4-il-fenil)-2H-pirazol-3-ilamino]-bencenosulfonamida

4. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I de las reivindicaciones 1-3, o su sal o solvato y uno o más de los vehículos, diluyentes y excipientes farmacéuticamente aceptables.

5. Uso de un compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1-3, o su sal o solvato en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir una enfermedad provocada por un ciclo celular inapropiado a partir de la actividad desequilibrada o inapropiada de la proteína CDK2.

6. Uso de un compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1-3 o su sal o solvato en la preparación de un medicamento para tratar o prevenir enfermedades hiperproliferativas.

7. Uso de acuerdo con la reivindicación 6 en el que la enfermedad hiperproliferativa de la reivindicación 5 es cáncer o psoriasis.