ES2354978T3

ES2354978T3 - SYNCHRONIZATION METHOD OF OVULATION IN COWS.

Info

Publication number: ES2354978T3
Application number: ES04106364T
Authority: ES
Inventors: Marc-Antoine Driancourt
Original assignee: Intervet International BV
Current assignee: Intervet International BV
Priority date: 2003-12-09
Filing date: 2004-12-07
Publication date: 2011-03-21
Anticipated expiration: 2024-12-07

Abstract

Un método no terapéutico de sincronización de la ovulación en vacas, caracterizado por que el método incluye las siguientes etapas posteriores: a) administrar a una vaca hembra una dosis de una hormona liberadora de gonadotropina y un dispositivo de suministro de progesterona, b) administrar a dicho animal una dosis de una prostaglandina F2 y c) retirar el dispositivo de suministro de progesterona y administrar a dicho animal una dosis de una gonadotropina sérica de yegua preñada.A non-therapeutic method of synchronization of ovulation in cows, characterized in that the method includes the following subsequent steps: a) administer to a female cow a dose of a gonadotropin-releasing hormone and a progesterone delivery device, b) administer said animal a dose of a prostaglandin F2 and c) withdrawing the progesterone delivery device and administering to said animal a dose of a serum gonadotropin of pregnant mare.

Description

Esta invención se refiere a un método para sincronizar la ovulación en vacas y a un kit de partes para el uso en la sincronización de la ovulación en vacas. 5 This invention relates to a method for synchronizing ovulation in cows and a kit of parts for use in the synchronization of ovulation in cows. 5

El control farmacológico del ciclo reproductor de la vaca hembra usa generalmente hormonas para controlar el estro y la ovulación para el beneficio y la conveniencia del criador. La administración de tales hormonas para controlar el proceso reproductor en animales domésticos tales como caballos, ovejas, cerdos, vacas y cabras se conoce bien en la técnica. Pharmacological control of the female cow's reproductive cycle generally uses hormones to control estrus and ovulation for the benefit and convenience of the breeder. The administration of such hormones to control the reproductive process in domestic animals such as horses, sheep, pigs, cows and goats is well known in the art.

Tales programas para el control farmacológico del ciclo reproductor se pueden usar para tratar 10 afecciones patológicas en animales individuales o para sincronizar la ovulación en grupos de animales. Se han buscado sistemas fiables para el control del ciclo reproductor por fisiólogos y veterinarios durante muchos años, ya que tales técnicas ofrecen varias ventajas de tratamiento. Such programs for the pharmacological control of the reproductive cycle can be used to treat pathological conditions in individual animals or to synchronize ovulation in groups of animals. Reliable systems have been sought for the control of the reproductive cycle by physiologists and veterinarians for many years, since such techniques offer several treatment advantages.

Sus beneficios principales son la sincronización de un estro predecible y ovulación, permitiendo el uso de la inseminación artificial (IA) de tiempo fijo o recogida y transferencia de embriones sin gastar 15 tiempo en una detección tediosa del estro. Algunos de estos programas adicionalmente son capaces de inducir la ovulación en hembras que no están ciclando, una condición que es muy común durante el periodo de posparto de vacas de carne o para acelerar la aparición de los ciclos en novillas vírgenes. Esto es muy útil ya que reduce el intervalo entre parto y concepción. Its main benefits are the synchronization of a predictable estrus and ovulation, allowing the use of fixed-time artificial insemination (AI) and embryo transfer and transfer without spending time in a tedious detection of estrus. Some of these programs are also capable of inducing ovulation in females that are not cycling, a condition that is very common during the postpartum period of beef cows or to accelerate the appearance of cycles in virgin heifers. This is very useful since it reduces the interval between childbirth and conception.

Por tanto, la sincronización de un estro predecible y ovulación permite la gestión por lotes de 20 inseminaciones y da como resultado un momento predecible de los nacimientos. Esto mejora la eficacia de la gestión. Therefore, the synchronization of a predictable estrus and ovulation allows the batch management of 20 inseminations and results in a predictable birth moment. This improves the effectiveness of management.

El control del ciclo de estro se consigue imitando los acontecimientos hormonales que tienen lugar durante el ciclo ovárico/estral normal. El desarrollo de un folículo ovárico hasta la ovulación en la vaca hembra que cicla se permite por la regresión del cuerpo lúteo (luteólisis) dando como resultado una 25 disminución en las concentraciones de progesterona. Esto tiene lugar de forma natural entre el día 17 y 18 del ciclo normal. Este acontecimiento se puede manipular artificialmente y, por lo tanto, la sincronización sigue generalmente dos enfoques principales: el primer enfoque es la inducción artificial de la luteólisis prematura usando agentes luteolíticos. El segundo enfoque de la sincronización es imitar la presencia de un cuerpo lúteo mediante la administración de una progesterona durante varios días seguido de la retirada 30 brusca. The estrous cycle control is achieved by mimicking the hormonal events that take place during the normal ovarian / estrous cycle. The development of an ovarian follicle until ovulation in the female cow that cycles is allowed by the regression of the corpus luteum (luteolysis) resulting in a decrease in progesterone concentrations. This occurs naturally between day 17 and 18 of the normal cycle. This event can be artificially manipulated and, therefore, synchronization generally follows two main approaches: the first approach is the artificial induction of premature luteolysis using luteolytic agents. The second approach to synchronization is to mimic the presence of a corpus luteum by administering a progesterone for several days followed by abrupt withdrawal.

En la técnica anterior se han descrito diversos tipos de esquemas para sincronizar la ovulación usando cualquiera de estos dos anteriores enfoques. Various types of schemes for synchronizing ovulation using either of these two previous approaches have been described in the prior art.

Siguiendo el primer enfoque, un modo es administrar una prostaglandina para iniciar la regresión del cuerpo lúteo (luteólisis). La prostaglandina F2 (PGF2) se ha usado durante mucho tiempo en varios 35 protocolos de sincronización de la ovulación diferentes. Un programa de sincronización de la ovulación que se usa ampliamente, especialmente en novillas lecheras, usa la administración de dos inyecciones secuenciales de PGF2 separadas 11 ó 14 días. Following the first approach, one way is to administer a prostaglandin to initiate the regression of the corpus luteum (luteolysis). Prostaglandin F2 (PGF2) has long been used in several different ovulation synchronization protocols. An ovulation synchronization program that is widely used, especially in dairy heifers, uses the administration of two sequential injections of PGF2 separated 11 or 14 days.

La ovulación no está sincronizada de forma muy precisa con PGF2 en solitario y, por tanto, la inseminación artificial de tiempo fijo no da como resultado una alta fertilidad. Por lo tanto, se han realizado 40 diversos intentos de controlar esta variabilidad sugiriendo programas que combinan el uso de prostaglandina con la administración de otras hormonas, tales como hCG, una GnRH o un estradiol. Por ejemplo, la Patente de EE.UU. Nº US 5.589.457 describe un programa de sincronización de la ovulación en vacas que usa una inyección secuencial de una GnRH, una prostaglandina y una segunda inyección de una GnRH. 45 Ovulation is not very precisely synchronized with PGF2 alone and, therefore, artificial fixed-time insemination does not result in high fertility. Therefore, 40 different attempts have been made to control this variability by suggesting programs that combine the use of prostaglandin with the administration of other hormones, such as hCG, a GnRH or an estradiol. For example, US Pat. No. 5,589,457 describes an ovulation synchronization program in cows that uses a sequential injection of a GnRH, a prostaglandin and a second injection of a GnRH. Four. Five

Siguiendo el segundo enfoque, varios programas de sincronización de la ovulación diferentes están disponibles en el mercado en los que se administra una progesterona mediante un dispositivo de liberación controlada por la vía intravaginal, por ejemplo, PRID (Dispositivo intravaginal liberador de progesterona) y CIDR (liberación de fármaco interna controlada) o mediante la vía subcutánea (Crestar o Synchromate B). Se requieren tratamientos adicionales para iniciar la regresión del cuerpo 50 lúteo, por ejemplo, la progesterona se combina con, por ejemplo, un estrógeno, tal como un estradiol en el momento de la administración de la progesterona para conseguir una sincronización exitosa del estro y la ovulación. El estrógeno tiene por objeto actuar como un agente luteolítico y como un sincronizador de la renovación folicular. Los estradioles útiles para este fin son, por ejemplo, estradiol-17, benzoato de estradiol y cipronato de estradiol o valerato de estradiol. 55 Following the second approach, several different ovulation synchronization programs are commercially available in which a progesterone is administered by an intravaginally controlled release device, for example, PRID (intravaginal progesterone releasing device) and CIDR  (controlled internal drug release) or through the subcutaneous route (Crestar or Synchromate B). Additional treatments are required to initiate the regression of the corpus luteum, for example, progesterone is combined with, for example, an estrogen, such as an estradiol at the time of administration of progesterone to achieve a successful synchronization of estrus and ovulation. Estrogen is intended to act as a luteolytic agent and as a synchronizer of follicular renewal. The estradiols useful for this purpose are, for example, estradiol-17, estradiol benzoate and estradiol cypronate or estradiol valerate. 55

Se han usado comercialmente diversos programas de sincronización de la ovulación que comprenden un dispositivo de suministro controlado de progesterona en combinación con un estradiol, por ejemplo, el programa Crestar (Intervet International), el programa Synchromate B (Merial Ltd), el programa CIDR (Inter AG) o programa PRID (Ceva Sante Animale). Tales programas generalmente permiten la inseminación artificial (IA) de tiempo fijo y dan como resultado una buena fertilidad tanto en 5 vacas lecheras como en vacas de carne. Various ovulation synchronization programs have been commercially used comprising a controlled progesterone delivery device in combination with an estradiol, for example, the Crestar program (Intervet International), the Synchromate B program (Merial Ltd), the program CIDR (Inter AG) or PRID program (Ceva Sante Animale). Such programs generally allow fixed-time artificial insemination (AI) and result in good fertility in both dairy cows and meat cows.

Xu Z. et al (2000); Journal of Dairy Science 83, 464-470, describieron programas de sincronización que emplean un estradiol mediante a) una administración posterior de progesterona y, en el momento de la inseminación artificial, de benzoato de estradiol; o b) una administración posterior de progesterona, GnRH, PGF2 y, en el momento de la inseminación artificial, benzoato de estradiol. 10 Xu Z. et al (2000); Journal of Dairy Science 83, 464-470, described synchronization programs that employ estradiol by a) a subsequent administration of progesterone and, at the time of artificial insemination, estradiol benzoate; or b) a subsequent administration of progesterone, GnRH, PGF2 and, at the time of artificial insemination, estradiol benzoate. 10

Sin embargo, se sospecha que la hormona estradiol provoca y favorece el cáncer de mama y de postrata y que tiene efectos potenciales inmunológicos, neurobiológicos y genotóxicos con consecuencias potencialmente dañinas para la salud humana. Se desea sustituir el estradiol con otro compuesto y conservar los buenos resultados de fertilidad y de inseminación artificial de tiempo fijo sin emplear un estradiol. 15 However, it is suspected that the hormone estradiol causes and favors breast and post-treatment cancer and that it has potential immunological, neurobiological and genotoxic effects with potentially harmful consequences for human health. It is desired to substitute estradiol with another compound and maintain good fertility and artificial insemination results in a fixed time without using estradiol. fifteen

Al implicar los programas anteriores la administración secuencial de una GnRH, una progesterona y PGF2 sin administración de un estradiol, se tenía que realizar la inseminación en el estro detectado para conseguir una fertilidad aceptable (Stevenson J. S. et al (2000); Journal of Animal Science 78, 1747-1758). Como alternativa se realizó una inyección adicional de GnRH alrededor del estro para sincronizar la ovulación para la inseminación artificial de tiempo fijo (Stevenson J. S. et al (1997); Journal 20 of Animal Science 75, 1343-1350, y Thompson K. E. et al (1999); Journal of Animal Science 77, 1823-1832). When the previous programs involved the sequential administration of a GnRH, a progesterone and PGF2 without administration of estradiol, insemination had to be carried out in the detected estrus to achieve acceptable fertility (Stevenson JS et al (2000); Journal of Animal Science 78, 1747-1758). As an alternative, an additional injection of GnRH around the estrus was performed to synchronize ovulation for artificial fixed-time insemination (Stevenson JS et al (1997); Journal 20 of Animal Science 75, 1343-1350, and Thompson KE et al (1999 ); Journal of Animal Science 77, 1823-1832).

Además, en otros programas sin estradiol que implican una progesterona, combinada con una GnRH y PGF2, la sincronía del estro inducida por tratamiento era inadecuada para fertilizar hembras usando la inseminación artificial de tiempo fijo. Por lo tanto, se tenía que realizar la inseminación artificial 25 después de la detección del estro con consumo de tiempo para conseguir una fertilidad aceptable (Ryan D. P. et al (1999); Animal Reproduction Science 56, 153-168). In addition, in other non-estradiol programs involving a progesterone, combined with a GnRH and PGF2, treatment-induced estrus synchrony was inadequate to fertilize females using artificial fixed-time insemination. Therefore, artificial insemination had to be performed 25 after detection of estrus with time consumption to achieve acceptable fertility (Ryan D. P. et al (1999); Animal Reproduction Science 56, 153-168).

En la presente invención se desarrolló un nuevo método para sincronizar la ovulación en vacas, que permite no solamente la inseminación artificial (IA) de tiempo fijo, sino también da como resultado una buena fertilidad sin la implicación de estradiol en el programa de sincronización de la ovulación. 30 In the present invention a new method was developed to synchronize ovulation in cows, which allows not only artificial insemination (AI) of fixed time, but also results in good fertility without the involvement of estradiol in the synchronization program of the ovulation. 30

Por lo tanto, la presente invención proporciona un método no terapéutico de sincronizar la ovulación en vacas, caracterizado por que el método incluye las siguientes etapas posteriores: Therefore, the present invention provides a non-therapeutic method of synchronizing ovulation in cows, characterized in that the method includes the following subsequent steps:

a) administrar a una vaca hembra una dosis de una GnRH y un dispositivo de suministro de progesterona, a) administer to a female cow a dose of a GnRH and a progesterone delivery device,

b) administrar a dicho animal una dosis de una prostaglandina F2 y 35 b) administer to said animal a dose of a prostaglandin F2 and 35

c) retirar el dispositivo de suministro de progesterona y administrar una dosis de una PMSG a dicho animal. c) remove the progesterone delivery device and administer a dose of a PMSG to said animal.

Como se muestra en los experimentos, la fertilidad de vacas de carne o lecheras hembra después de la inseminación artificial de tiempo fijo es similar en los grupos sincronizados mediante el método de acuerdo con la invención (sin la administración de un estradiol) en comparación con el grupo 40 en el que se usó un sistema comercial convencional con un estradiol. As shown in the experiments, the fertility of female beef or dairy cows after artificial fixed-time insemination is similar in the synchronized groups by the method according to the invention (without the administration of estradiol) compared to the group 40 in which a conventional commercial system with an estradiol was used.

El método de acuerdo con la invención es un programa de sincronización de la ovulación adecuado para vacas hembra. Las vacas son animales del género Bos, familia Bovidae incluyendo especies silvestres tales como el yak, gaur, gayal, banteng y kouprey, así como razas domésticas que incluyen búbalos asiáticos Bubalus, búfalos africanos Syncerus y bisonte americano Bison. Las vacas se 45 crían para carne (vacas de carne) o leche (vacas lecheras). El método de acuerdo con la invención generalmente es adecuado para todas las vacas hembra de diferentes razas, es decir, para novillas lecheras o de carne y para vacas lecheras o de carne primíparas o multíparas que no están preñadas en ninguna fase del ciclo. The method according to the invention is an ovulation synchronization program suitable for female cows. The cows are animals of the genus Bos, Bovidae family including wild species such as yak, gaur, gay, banteng and kouprey, as well as domestic breeds that include Bubalus Asian buffalo, Syncerus African buffalo and Bison American bison. Cows are raised for meat (meat cows) or milk (dairy cows). The method according to the invention is generally suitable for all female cows of different breeds, that is, for dairy or meat heifers and for primiparous or multiparous dairy or beef cows that are not pregnant at any stage of the cycle.

Al realizar la invención, en la primera etapa del método se administra una dosis inicial de una 50 hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) a una vaca hembra abierta (no preñada) en cualquier fase de un ciclo de estro para controlar la renovación folicular. La administración de una GnRH provoca el crecimiento de una nueva ola de folículos y garantiza la presencia de un cuerpo lúteo y sincroniza el crecimiento de una nueva ola folicular. In carrying out the invention, in the first stage of the method an initial dose of a gonadotropin-releasing hormone (GnRH) is administered to an open female cow (not pregnant) at any stage of an estrus cycle to control follicular renewal. The administration of a GnRH causes the growth of a new wave of follicles and guarantees the presence of a corpus luteum and synchronizes the growth of a new follicular wave.

Con una GnRH se quiere decir la GnRH nativa o un análogo sintético de la GnRH nativa. La 55 With a GnRH it is meant the native GnRH or a synthetic analogue of the native GnRH. The 55

hormona liberadora de Gonadotropina (GnRH) nativa es un decapéptido (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2), que se produce a partir de un polipéptido precursor en la neurona hipotalámica. Native Gonadotropin-releasing hormone (GnRH) is a decapeptide (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2), which is produced from a precursor polypeptide in the hypothalamic neuron.

En un método preferido se usa un análogo sintético de GnRH. Existen varios análogos sintéticos de GnRH disponibles, por ejemplo, burserelina, azagly nafarelina, deslorelina, gonadorelina y fertirelina. Se prefiere especialmente la burserelina, un análogo sintético de GnRH compuesto de 9 aminoácidos 5 (Pro-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser-Leu-Arg-Pro-NH-CH2-CH3) o azaglynafarelina, compuesta de 10 aminoácidos (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-[D-Na(2)]-Leu-Arg-Pro-[aza-Gly]). In a preferred method a synthetic analogue of GnRH is used. There are several synthetic GnRH analogues available, for example, burserelin, azagly napharelin, deslorelin, gonadorelin and fertireline. Especially preferred is burserelin, a synthetic analogue of GnRH composed of 9 amino acids 5 (Pro-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser-Leu-Arg-Pro-NH-CH2-CH3) or azaglynafarelin, composed of 10 amino acids (pGlu-His-Trp-Ser-Tyr- [D-Na (2)] - Leu-Arg-Pro- [aza-Gly]).

La GnRH se administra en una cantidad suficiente para controlar la función del folículo ovárico, por ejemplo, dependiendo del tipo de GnRH empleada, entre 1 y 250 g por animal, preferiblemente entre 5 y 50 g. 10 GnRH is administered in an amount sufficient to control the function of the ovarian follicle, for example, depending on the type of GnRH used, between 1 and 250 porg per animal, preferably between 5 and 50 g. 10

La GnRH se puede aplicar en general mediante todas las formas de aplicación que se conocen en la técnica para este fin. La GnRH se administra preferiblemente por vía parenteral, por ejemplo, mediante inyección intramuscular o subcutánea, típicamente en forma de depósitos que actúan a largo plazo. GnRH can be applied in general by all forms of application that are known in the art for this purpose. GnRH is preferably administered parenterally, for example, by intramuscular or subcutaneous injection, typically in the form of long-acting deposits.

Además de la GnRH se administra un dispositivo de suministro de progesterona al animal. El 15 dispositivo de suministro de progesterona se administra por motivos prácticos simultáneamente o en sucesión rápida a la administración de GnRH o en orden inverso debido a que en este caso el animal se tiene que manipular solamente una vez y el veterinario puede administrar el dispositivo de suministro de progesterona y la inyección de GnRH dentro de un breve intervalo de tiempo. En general, el intervalo de tiempo entre las administraciones puede ser para la consecución de los efectos positivos de la presente 20 invención prolongados hasta 24 horas. Preferiblemente, el dispositivo de suministro de progesterona se administra en sucesión rápida después de la administración de GnRH o en orden inverso. In addition to GnRH, a progesterone delivery device is administered to the animal. The progesterone delivery device is administered for practical reasons simultaneously or in rapid succession to the administration of GnRH or in reverse order because in this case the animal has to be handled only once and the veterinarian can administer the delivery device of progesterone and GnRH injection within a short time. In general, the time interval between administrations may be for the attainment of the positive effects of the present invention prolonged up to 24 hours. Preferably, the progesterone delivery device is administered in rapid succession after administration of GnRH or in reverse order.

La administración de una progesterona imita la función del cuerpo lúteo para la duración en la que se inserta el dispositivo de suministro de progesterona. La liberación de gonadotropina y, por tanto, la maduración folicular se suprime hasta la retirada de progesterona. 25 The administration of a progesterone mimics the function of the corpus luteum for the duration in which the progesterone delivery device is inserted. Gonadotropin release and, therefore, follicular maturation is suppressed until progesterone withdrawal. 25

El dispositivo de suministro de progesterona comprende progesterona o un análogo sintético de progesterona. En un método preferido de acuerdo con la invención se usa un análogo sintético de progesterona, (progestágeno) tal como, por ejemplo, norgestomet, medroxiprogesterona, norgestrel, levonorgestrel, noretindrona o acetato de mesgesterol. The progesterone delivery device comprises progesterone or a synthetic progesterone analog. In a preferred method according to the invention a synthetic analog of progesterone, (progestogen) such as, for example, norgestomet, medroxyprogesterone, norgestrel, levonorgestrel, norethindrone or mesgesterol acetate is used.

Se prefiere especialmente el análogo sintético de progesterona norgestomet. Norgestomet es la 30 DCI (denominación común internacional) de 17-acetoxi-11-metil-19-norpreg-4-eno, 20-diona. Especially preferred is the synthetic analog of progesterone norgestomet. Norgestomet is the 30 DCI (international common denomination) of 17-acetoxy-11-methyl-19-norpreg-4-eno, 20-diona.

El dispositivo de suministro de progesterona es preferiblemente un dispositivo de liberación controlada. Un dispositivo de suministro de liberación controlada es capaz de administrar un fármaco a lo largo de un periodo de tiempo prologado o extendido. Por lo tanto, no es necesario administrar de forma repetida, por ejemplo, diariamente, una progesterona al animal. 35 The progesterone delivery device is preferably a controlled release device. A controlled release delivery device is capable of administering a drug over an extended or extended period of time. Therefore, it is not necessary to repeatedly administer, for example, daily, a progesterone to the animal. 35

Los dispositivos de liberación controlada son el método de administración más adecuado de progesterona ya que la retirada se puede controlar entonces de forma precisa por la retirada del dispositivo. Los ejemplos de dispositivos de liberación controlada adecuados son los implantes intramusculares o subcutáneos o insertos intravaginales bien conocidos. Controlled release devices are the most appropriate method of administration of progesterone since withdrawal can then be precisely controlled by removal of the device. Examples of suitable controlled release devices are well known intramuscular or subcutaneous implants or intravaginal inserts.

Los implantes son objetos o materiales, tales como un material o tejido aloplástico que se puede 40 insertar o injertar parcial o totalmente en el cuerpo con fines prostéticos, terapéuticos, de diagnostico o experimentales. Implants are objects or materials, such as an alloplastic material or tissue that can be partially or totally inserted or grafted into the body for prosthetic, therapeutic, diagnostic or experimental purposes.

En la técnica se conocen dispositivos de suministro de progesterona para el uso en el método de acuerdo con la presente invención. Por ejemplo, el producto comercial PRID (dispositivo intravaginal de liberación de progesterona) o inserto de CIDR (liberación de fármaco interna controlada) se usan 45 actualmente para suministrar una progesterona por la vía intravaginal. Para la vía de administración subcutánea se usa actualmente el implante de los productos comerciales Crestar o Synchromate B. Progesterone delivery devices are known in the art for use in the method according to the present invention. For example, the commercial product PRID (intravaginal progesterone release device) or CIDR insert (controlled internal drug release) is currently used to deliver a progesterone intravaginally. The implant of Crestar or Synchromate B commercial products is currently used for subcutaneous administration.

PRID (Ceva Sante Animale) es una forma especializada de dispositivo de liberación controlada que se inserta y sujeta dentro de la vagina de la vaca hembra. PRID consiste en una bobina de acero inoxidable cubierta por una capa de silástico inerte en la que se impregna la progesterona. La 50 progesterona se libera del elastómero hasta la retirada del dispositivo tirando de la cuerda, que se deja sobresaliendo de la vulva después de la inserción de la bobina. PRID (Ceva Sante Animale) is a specialized form of controlled release device that is inserted and held inside the vagina of the female cow. PRID consists of a stainless steel coil covered by a layer of inert silastic in which progesterone is impregnated. The progesterone is released from the elastomer until the device is pulled by pulling on the cord, which is left protruding from the vulva after insertion of the coil.

El inserto para vaca CIDR (Inter AG, Hamilton) también es un dispositivo de liberación controlada que se inserta y sujeta dentro de la vagina de la vaca hembra. Es un inserto con forma de T y se coloca en el interior de la vagina de vacas hembra usando un aplicador lubricado. El aplicador pliega 55 The CIDR cow insert (Inter AG, Hamilton) is also a controlled release device that is inserted and held inside the vagina of the female cow. It is a T-shaped insert and is placed inside the vagina of female cows using a lubricated applicator. The applicator folds 55

las alas para la inserción en la vagina. La expulsión de CIDR dentro de la vagina provoca la relajación de las alas y la retención de CIDR dentro de la vagina debido a la presión sobre la pared vaginal. La progesterona se libera desde el dispositivo hasta la retirada del dispositivo tirando de la cuerda, que se deja sobresaliendo de la vulva después de la inserción del dispositivo. the wings for insertion into the vagina. The expulsion of CIDR inside the vagina causes relaxation of the wings and retention of CIDR inside the vagina due to pressure on the vaginal wall. Progesterone is released from the device until the device is removed by pulling on the cord, which is left protruding from the vulva after insertion of the device.

Crestar (Intervet) y Synchromate B (Merial) son implantes subcutáneos que contienen 5 norgestomet. El implante se inserta por vía subcutánea detrás de la oreja, tiempo durante el cual se absorbe la progesterona en el torrente sanguíneo. El implante se retira realizando una pequeña incisión con bisturí en la piel de la oreja sobre el implante. Crestar (Intervet) and Synchromate B (Merial) are subcutaneous implants containing 5 norgestomet. The implant is inserted subcutaneously behind the ear, during which time progesterone is absorbed into the bloodstream. The implant is removed by making a small scalpel incision in the skin of the ear over the implant.

El dispositivo de liberación de progesterona puede liberar típicamente una progesterona que conduce a una concentración en sangre de progesterona de 1 a 6 ng/ml, preferiblemente de 2 a 5 ng/ml. 10 The progesterone release device can typically release a progesterone that leads to a blood concentration of progesterone of 1 to 6 ng / ml, preferably 2 to 5 ng / ml. 10

Posteriormente en la etapa b) del método de acuerdo con la presente invención se administra una prostaglandina F2 para iniciar la regresión del cuerpo lúteo. Subsequently in step b) of the method according to the present invention, a prostaglandin F2land is administered to initiate the regression of the corpus luteum.

La prostaglandina F2 se administra después de un periodo de tiempo adecuado que es suficiente para que los cuerpos lúteos se conviertan en sensibles a la acción luteolítica de las prostaglandinas. Tal periodo de tiempo es normalmente aproximadamente 6-9 días después de la 15 administración inicial de un dispositivo de suministro de progesterona. Un intervalo convencional satisfactorio y preferido para la administración de la PGF2 es siete días después de la administración inicial de un dispositivo de suministro de progesterona. Prostaglandin F2 is administered after an adequate period of time that is sufficient for the luteal bodies to become sensitive to the luteolytic action of prostaglandins. Such a period of time is normally approximately 6-9 days after the initial administration of a progesterone delivery device. A satisfactory and preferred conventional interval for the administration of PGF2 is seven days after the initial administration of a progesterone delivery device.

Los compuestos adecuados son prostaglandina F2 (PGF2) nativa y análogos sintéticos de prostaglandina F2. Se prefieren los análogos sintéticos de prostaglandina F2. El análogo sintético de 20 prostaglandina F2 se selecciona preferiblemente entre el grupo de cloprostenol, tiaprost, dinoprost, luprostiol, alfaprostol y fenprostaleno. Los análogos sintéticos preferidos de prostaglandina F2 son luprostiol y cropostenol. Suitable compounds are native prostaglandin F2 (PGF2) and synthetic analogs of prostaglandin F2. Synthetic prostaglandin F2ina analogs are preferred. The synthetic analogue of prostaglandin F2 is preferably selected from the group of cloprostenol, thiaprost, dinoprost, luprostiol, alfaprostol and fenprostalene. The preferred synthetic analogs of prostaglandin F2 are luprostiol and cropostenol.

La PGF2 se aplicará normalmente a un nivel de dosis de 25 mg, que es coherente con el uso normal de esa hormona para terminar la fase lútea del ciclo de estro. Aunque esto puede variar 25 ligeramente, la practica normal debe mantener la PGF2 dentro de un intervalo de aproximadamente 20-35 mg. Las dosificaciones que se han descrito anteriormente son con respecto a hormonas nativas. Se pueden usar análogos sintéticos y, tal como se reconocerá por los expertos en la materia, tales análogos se pueden usar en menores cantidades debido a sus mayores actividades. La PGF2 se puede aplicar a un animal en general por todas las formas de aplicación conocidas en la técnica. Aunque la PGF2 se 30 administra preferiblemente por vía parenteral, por ejemplo, mediante una inyección intramuscular o subcutánea, también es posible la administración por vías alternativas. PGF2 will normally be applied at a dose level of 25 mg, which is consistent with the normal use of that hormone to terminate the luteal phase of the estrus cycle. Although this may vary slightly, normal practice should keep PGF2 within a range of approximately 20-35 mg. The dosages described above are with respect to native hormones. Synthetic analogs can be used and, as will be recognized by those skilled in the art, such analogs can be used in smaller amounts due to their greater activities. PGF2 can be applied to an animal in general by all forms of application known in the art. Although PGF2 is preferably administered parenterally, for example, by intramuscular or subcutaneous injection, administration by alternative routes is also possible.

En la etapa c) del método de acuerdo con la presente invención se retira el dispositivo de suministro de progesterona y se administra una gonadotropina sérica de yegua preñada (PMSG). Habitualmente de aproximadamente 1 a 2 días después de la administración de PGF2, preferiblemente 35 después de 2 días se retira el dispositivo de suministro de progesterona. Esta retirada da como resultado una retirada brusca de progesterona. La retirada del dispositivo de suministro de progesterona del cuerpo se puede realizar, por ejemplo, mediante retirada del inserto intravaginal a través de la abertura vaginal o mediante retirada del implante de la oreja mediante incisión con bisturí. In step c) of the method according to the present invention, the progesterone delivery device is removed and a pregnant gonadotropin from pregnant mare (PMSG) is administered. Usually about 1 to 2 days after administration of PGF2, preferably after 2 days the progesterone delivery device is removed. This withdrawal results in an abrupt withdrawal of progesterone. The removal of the progesterone delivery device from the body can be performed, for example, by removal of the intravaginal insert through the vaginal opening or by removal of the implant from the ear by means of a scalpel incision.

Además de la retirada del dispositivo de suministro de progesterona se administra una 40 gonadotropina sérica de yegua (PMSG) al animal. Por motivos prácticos se retira el dispositivo de suministro de progesterona y se administra una PMSG simultáneamente o en sucesión rápida o los actos se realizan en orden inverso debido a que en este caso el animal se tiene que manipular solamente una vez y el veterinario puede realizar ambos actos dentro de un breve intervalo de tiempo. En general, el intervalo de tiempo entre ambos actos puede ser más largo. Para la consecución de los efectos positivos 45 de la presente invención de forma general se puede decir que el intervalo de tiempo no debe superar las 24 horas entre ambos actos. Preferiblemente, la PMSG se administra en sucesión rápida después de la retirada del dispositivo de suministro de progesterona o en orden inverso. In addition to the removal of the progesterone delivery device, a serum horse gonadotropin (PMSG) is administered to the animal. For practical reasons the progesterone delivery device is removed and a PMSG is administered simultaneously or in rapid succession or the acts are performed in reverse order because in this case the animal has to be handled only once and the veterinarian can perform both acts within a short time interval. In general, the time interval between both acts may be longer. In order to achieve the positive effects of the present invention in general, it can be said that the time interval must not exceed 24 hours between both acts. Preferably, the PMSG is administered in rapid succession after removal of the progesterone delivery device or in reverse order.

La administración de PMSG ayudará a conseguir la inducción de la ovulación en vacas hembra que no estaban ciclando al comienzo del tratamiento y sostener la maduración folicular en todas las vacas 50 hembra. The administration of PMSG will help achieve ovulation induction in female cows that were not cycling at the beginning of treatment and sustain follicular maturation in all female cows.

La gonadotropina sérica de yegua preñada (PMSG) nativa es una glucoproteína natural que consiste en dos subunidades (alfa y beta). Para el uso en medicina veterinaria se extrae PMSG nativa del suero de yeguas preñadas. Como alternativa se puede usar PMSG recombinante. La PMSG tiene actividades estimuladoras del folículo (de tipo FSH) y luteinizantes (de tipo LH). En medicina veterinaria, la 55 PMSG se recomienda para la estimulación de la función y actividad ovárica, mejora de la fertilidad en The native pregnant mare gonadotropin (PMSG) is a natural glycoprotein consisting of two subunits (alpha and beta). For use in veterinary medicine, native PMSG is extracted from the serum of pregnant mares. Alternatively, recombinant PMSG can be used. PMSG has follicle stimulating (FSH type) and luteinizing (LH type) activities. In veterinary medicine, 55 PMSG is recommended for the stimulation of ovarian function and activity, improvement of fertility in

animales con sincronización de estro y la inducción de superovulación. animals with estrous synchronization and induction of superovulation.

Las formulaciones de PMSG comerciales están disponibles como preparaciones liofilizadas en combinación con un disolvente para uso intramuscular y subcutáneo. La PMSG se puede aplicar a un animal en general mediante todas las formas de aplicación conocidas en la técnica. Aunque la PMSG se administra preferiblemente por vía parenteral, por ejemplo, mediante inyección intramuscular o 5 subcutánea, también es posible la administración por vías alternativas. Commercial PMSG formulations are available as lyophilized preparations in combination with a solvent for intramuscular and subcutaneous use. PMSG can be applied to an animal in general by all forms of application known in the art. Although PMSG is preferably administered parenterally, for example, by intramuscular or subcutaneous injection, administration by alternative routes is also possible.

Preferiblemente se administran de 400 a 600 U.I. de PMSG en el método de acuerdo con la invención. Preferably they are administered from 400 to 600 IU. of PMSG in the method according to the invention.

Como entenderán los expertos en la materia, los factores significativos del proceso reproductor en vacas se pueden resumir del siguiente modo. Para que tenga lugar la gestación tienen que estar 10 presentes espermatozoides vivos en el tracto reproductor en el momento de la ovulación. La ovulación tiene lugar aproximadamente un día después de los primeros signos del estro. Durante el servicio natural, el toro introduce el esperma durante el tiempo en el que el animal está mostrando estro. As those skilled in the art will understand, the significant factors of the reproductive process in cows can be summarized as follows. For pregnancy to take place, live sperm must be present in the reproductive tract at the time of ovulation. Ovulation takes place approximately one day after the first signs of estrus. During natural service, the bull introduces sperm during the time in which the animal is showing estrus.

El uso exitoso de la inseminación artificial requiere que se coloque el semen en el tracto reproductor próximo al momento de la ovulación. Por tanto, los productores esperan signos de estro 15 debido a que esto es la mejor indicación de que el animal está próximo a la ovulación. Sin embargo, solamente aproximadamente el 50% de los periodos de estro se detectan en una granja lechera promedio. The successful use of artificial insemination requires that semen be placed in the reproductive tract near the time of ovulation. Therefore, producers expect signs of estrus 15 because this is the best indication that the animal is close to ovulation. However, only about 50% of estrus periods are detected in an average dairy farm.

La presente invención se puede aplicar de un modo que elimina completamente la detección del estro en vacas hembra tratadas. 20 The present invention can be applied in a manner that completely eliminates the detection of estrus in treated female cows. twenty

Después de aplicar el método de acuerdo con la invención se puede realizar la reproducción del animal una vez entre 36 y 60 horas después de que se haya retirado el dispositivo de suministro de progesterona y se haya administrado PMSG. Como alternativa, la reproducción puede tener lugar dos veces entre 36 y 60 y de 70 a 90 horas después de que se haya retirado el dispositivo de suministro de progesterona. 25 After applying the method according to the invention, the animal can be reproduced once between 36 and 60 hours after the progesterone delivery device has been removed and PMSG has been administered. Alternatively, reproduction can take place twice between 36 and 60 and 70 to 90 hours after the progesterone delivery device has been removed. 25

El procedimiento de sincronización de la presente invención también se puede combinar con métodos de detección el estro convencionales. En este caso, las vacas hembra se someten a reproducción una vez que presentan estro. The synchronization process of the present invention can also be combined with conventional estrus detection methods. In this case, female cows undergo reproduction once they have estrus.

Un protocolo adecuado, que ilustra el método de acuerdo con la invención, se muestra en el diagrama en la figura 1. 30 A suitable protocol, illustrating the method according to the invention, is shown in the diagram in Figure 1. 30

Otro aspecto de la invención es un kit de partes para el uso en la sincronización de la ovulación en vacas caracterizado por que comprende una forma de dosificación de una GnRH y un dispositivo de suministro de progesterona para el suministro inicial a la vaca hembra y medios de información en forma de una etiqueta o un prospecto adecuado para instruir al usuario del kit de que se tienen que administrar una forma de dosificación de una prostaglandina F2 y una forma de dosificación de una PMSG 35 posteriormente a dicho animal. Another aspect of the invention is a kit of parts for use in ovulation synchronization in cows characterized in that it comprises a dosage form of a GnRH and a progesterone delivery device for initial supply to the female cow and means of information in the form of a label or a suitable leaflet to instruct the kit user that a dosage form of a prostaglandin F2 and a dosage form of a PMSG 35 must be administered subsequently to said animal.

Preferiblemente, el kit de partes comprende adicionalmente una forma de dosificación de una prostaglandina F2 y una forma de dosificación de una PMSG para su suministro posterior a dicho animal. Preferably, the kit of parts additionally comprises a dosage form of an F2land prostaglandin and a dosage form of a PMSG for later delivery to said animal.

El kit de partes comprende un medio de información en forma de una etiqueta o prospecto adecuado para instruir a los usuarios del producto de que 40 The parts kit comprises an information medium in the form of a label or leaflet suitable for instructing users of the product that

- la GnRH y el dispositivo de suministro de progesterona se tienen que administrar dentro de 24 horas y que - GnRH and the progesterone delivery device must be administered within 24 hours and that

- la prostaglandina F2 tiene que administrarse de 6 a 9 días después de la administración de la GnRH y que - prostaglandin F2 must be administered 6 to 9 days after administration of GnRH and that

- el dispositivo de suministro de la progesterona se tiene que retirar de 1 a 2 días después de la 45 administración de la prostaglandina F2 y dentro de 24 horas de que se haya administrado una PMSG. - the progesterone delivery device must be removed 1 to 2 days after the administration of prostaglandin F2 and within 24 hours after a PMSG has been administered.

Ejemplo 1 Example 1

Comparación de programas de sincronización de la ovulación en vacas de carne multíparas Comparison of ovulation synchronization programs in multiparous meat cows

El objetivo de este experimento clínico abierto aleatorizado era comparar, en condiciones de 50 campo, la seguridad y eficacia de tres soluciones inyectables asociadas a un implante de norgestomet sobre la fertilidad y la sincronización del estro de vacas de carne. The objective of this randomized open clinical experiment was to compare, under 50 field conditions, the safety and efficacy of three injectable solutions associated with a norgestomet implant on fertility and estrus synchronization of beef cows.

Material y Métodos: a vacas charolesas multíparas (n=290) al menos 60 días posparto se Material and Methods: at multiparous charolesas cows (n = 290) at least 60 days after delivery

administró un implante de norgestomet. En la inserción del implante (Día 0) adicionalmente se inyectó una de las siguientes tres soluciones por vía intramuscular (i.m.): Grupo A implante de norgestomet + inyección i.m. de 3 mg de norgestomet y 3,8 mg de valerato de estradiol, administered a norgestomet implant. In addition to implant insertion (Day 0), one of the following three solutions was injected intramuscularly (i.m.): Group A norgestomet implant + i.m. injection 3 mg norgestomet and 3.8 mg estradiol valerate,

Grupo B implante de norgestomet + inyección i.m. de 3 mg de norgestomet, Group B norgestomet implant + i.m. injection 3 mg norgestomet,

Grupo C implante de norgestomet + inyección i.m. de 10,5 g de buserelina. 5 Group C norgestomet implant + i.m. injection 10.5 bg of buserelin. 5

Las vacas hembra en los Grupos B y C recibieron una inyección de prostaglandina (PGF2) i.m. el día 8 ó 9. Female cows in Groups B and C received an injection of prostaglandin (PGF2) i.m. on day 8 or 9.

El implante de norgestomet se retiró el día 10 u 11 y simultáneamente se administró una inyección de PMSG (i.m. 500 ó 600 UI). Se usó la inseminación artificial de tiempo fijo (48 y 72 horas después de la retirada del implante) para someter las vacas a reproducción. 10 The norgestomet implant was removed on day 10 or 11 and simultaneously an injection of PMSG (i.m. 500 or 600 IU) was administered. Artificial fixed-time insemination (48 and 72 hours after implant removal) was used to subject the cows to reproduction. 10

Resultados: el porcentaje de vacas preñadas en la inseminación artificial de tiempo fijo era similar (59% y 60%) en el Grupo A y C respectivamente mientras que era del 45% en el Grupo B (Figura 2). Results: the percentage of cows pregnant in artificial insemination of fixed time was similar (59% and 60%) in Group A and C respectively while it was 45% in Group B (Figure 2).

El porcentaje de partos fue similar (54% y 52%) en el Grupo A y C respectivamente mientras que fue del 40% en el Grupo B (Figura 3). 15 The percentage of births was similar (54% and 52%) in Group A and C respectively while it was 40% in Group B (Figure 3). fifteen

El tratamiento era el único parámetro que afectaba a la fertilidad cuando se usó la regresión logística. La fertilidad en el Grupo A y C era equivalente y numéricamente superior al Grupo B. The treatment was the only parameter that affected fertility when logistic regression was used. Fertility in Group A and C was equivalent and numerically superior to Group B.

A partir de este estudio se concluye que después de la sincronización de la ovulación con un implante de norgestomet combinado con dos soluciones inyectables diferentes la fertilidad fue similar a los Grupos A, empleando una solución inyectable de norgestomet y estradiol y en el Grupo C empleando una 20 solución inyectable de buserelina. From this study it is concluded that after synchronization of ovulation with a norgestomet implant combined with two different injectable solutions, fertility was similar to Groups A, using an injectable solution of norgestomet and estradiol and in Group C using a 20 injectable solution of buserelin.

Ejemplo 2 Example 2

Comparación de los programas de sincronización de la ovulación en novillas, vacas de carne primíparas y multíparas Comparison of ovulation synchronization programs in heifers, primiparous and multiparous meat cows

El objetivo de este experimento clínico abierto aleatorizado es comparar, en condiciones de 25 campo, la eficacia de dos soluciones inyectables asociadas a un implante de norgestomet sobre la sincronización del estro y la fertilidad de vacas de carne. The objective of this randomized open clinical experiment is to compare, under field conditions, the efficacy of two injectable solutions associated with a norgestomet implant on estrus synchronization and the fertility of beef cows.

Material y Métodos: se administró a novillas, vacas primíparas (al menos 60 días posparto) y multíparas (al menos 55 días posparto) un implante de norgestomet. Material and Methods: a norgestomet implant was administered to heifers, primiparous cows (at least 60 days postpartum) and multiparous (at least 55 days postpartum).

En la inserción del implante (Día 0) se inyectó una de dos soluciones inyectables por vía 30 intramuscular (i.m.). One of two injectable solutions was injected intramuscularly (i.m.) at the implant insertion (Day 0).

Grupo A implante de norgestomet + inyección i.m. de una solución que contenía 3 mg de norgestomet y 3,8 mg de valerato de estradiol, Group A norgestomet implant + i.m. injection of a solution containing 3 mg norgestomet and 3.8 mg estradiol valerate,

Grupo B implante de norgestomet + inyección i.m. de una solución que contenía 10,5 g de buserelina. 35 Group B norgestomet implant + i.m. injection of a solution containing 10.5 g of buserelin. 35

Además, las hembras del grupo B recibieron una inyección de prostaglandina (PGF2) i.m. el día 8 ó 7. El implante se retiró el día 10 ó 9 y simultáneamente se administró una inyección de PMSG (i.m. de 400 a 600 UI de acuerdo con la paridad y los hábitos del granjero). Se usó la inseminación artificial de tiempo fijo (56 horas después de la retirada del implante para el Grupo A y 48 horas después de la retirada del implante para el Grupo B) para someter las vacas a reproducción. 40 In addition, females in group B received an injection of prostaglandin (PGF2) i.m. on day 8 or 7. The implant was removed on day 10 or 9 and simultaneously an injection of PMSG was administered (i.m. from 400 to 600 IU according to the parity and habits of the farmer). Artificial fixed-time insemination (56 hours after implant removal for Group A and 48 hours after implant removal for Group B) was used to subject the cows to reproduction. 40

Resultados: el porcentaje de vacas preñadas en la inseminación artificial de tiempo fijo fue similar (54% y 56%) en el Grupo A y B (Figura 4). Los porcentajes de novillas y vacas primíparas preñadas en la inseminación artificial de tiempo fijo fue del 47% en el Grupo B mientras que fue del 58% en el Grupo B para las vacas multíparas. Results: the percentage of cows pregnant in artificial insemination of fixed time was similar (54% and 56%) in Group A and B (Figure 4). The percentages of heifers and primiparous cows pregnant in artificial insemination of fixed time was 47% in Group B while it was 58% in Group B for multiparous cows.

A partir de este estudio se concluye que después de la sincronización del estro con implante de 45 norgestomet combinado con dos soluciones inyectables diferentes que contienen norgestomet y valerato de estradiol (Grupo A) o buserelina (Grupo B), la fertilidad fue similar en el Grupo A con inseminación artificial de tiempo fijo a las 56 horas después de la retirada del implante y el Grupo B con inseminación artificial de tiempo fijo a las 48 horas de la retirada del implante. From this study it is concluded that after synchronization of estrus with a norgestomet implant combined with two different injectable solutions containing norgestomet and estradiol valerate (Group A) or buserelin (Group B), fertility was similar in Group A with fixed time artificial insemination at 56 hours after implant removal and Group B with fixed time artificial insemination at 48 hours after implant removal.

Claims

1. A non-therapeutic method of synchronizing ovulation in cows, characterized in that the method includes the following subsequent stages:

a) administer to a female cow a dose of a gonadotropin-releasing hormone and a progesterone delivery device, 5

b) administer to said animal a dose of a prostaglandin F2 and

c) remove the progesterone delivery device and administer to said animal a dose of a serum gonadotropin of pregnant mare.

2. The method according to claim 1, characterized in that in step b) the dose of prostaglandin F2 is administered 6 to 9 days after administration of the progesterone delivery device 10 and in step c) The progesterone delivery device is removed 1 to 2 days after the administration of prostaglandin F2.

3. The method according to claim 1 or 2, characterized in that in step b) the dose of prostaglandin F2 is administered 7 days after administration of the progesterone delivery device and in step c) the device Progesterone supply is withdrawn 2 days after the administration of prostaglandin F2.

4. The method according to claims 1 to 3, characterized in that the gonadotropin releasing hormone is selected from the group of buserelin, azagly napharelin, deslorelin, gonadorelin and fertirelin.

5. The method according to claims 1 to 4, characterized in that the progesterone delivery device comprises a synthetic progesterone analog.

6. The method according to claims 1 to 5, characterized in that the progesterone delivery device is in the form of a subcutaneous implant.

7. The method according to claims 1 to 6, characterized in that the prostaglandin F2 is selected from the group of cloprostenol, dinoprost, luprostiol and fenprostalene. 25

8. A kit of parts for use in the synchronization of ovulation in cows, characterized in that it comprises a dosage form of a gonadotropin-releasing hormone and a progesterone delivery device for initial delivery to a female cow and a form of dosage of a prostaglandin F2 and a dosage form of a serum gonadotropin of pregnant mare for subsequent administration to said animal. 30

9. The parts kit according to claim 8, characterized in that it comprises information means in the form of a label or leaflet suitable for instructing users of the product that

- GnRH and the progesterone delivery device must be administered within 24 hours and that 35

- Prostaglandin F2 must be administered 6 to 9 days after administration of GnRH and that

- The progesterone delivery device must be removed 1 to 2 days after the administration of prostaglandin F2 and within 24 hours after a PMSG has been administered. 40

10. Use of the parts kit according to claims 8 to 9 to synchronize ovulation in cows for fixed time artificial insemination.