ES2277361T3 - 17alfa-dehidroequilenio para la prevencion de la neurodegeneracion y la disfuncion cognoscitiva. - Google Patents

Abstract

LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A UN PROCEDIMIENTO DE USO DE UN COMPUESTO ESTEROIDAL, LA 17 AL - DIHIDROEQUILENINA, PARA PREVENIR Y TRATAR LA NEURODEGENERACION Y LA DISFUNCION COGNITIVA EN LAS HEMBRAS QUE PADECEN DE CARENCIA ESTROGENICA, Y EN REDUCIR EL RIESGO DE DEMENCIA RELACIONADO CON LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER, ASI COMO OTROS ESTADOS RELACIONADOS CON LA DEMENCIA SENIL EN LOS SUJETOS MACHO Y HEMBRA. ESTE PROCEDIMIENTO COMPRENDE LA ADMINISTRACION DE 17 AL - DIHIDROEQUILENINA EN UNA C ANTIDAD TERAPEUTICAMENTE EFICAZ A UN MAMIFERO QUE NECESITA UNA FUNCION COGNOSCITIVA INCREMENTADA O A UN MAMIFERO SUSCEPTIBLE DE NEURODEGENERACION VINCULADA CON UNA CARENCIA ESTROGENICA O DE DEMENCIA SENIL TIPO ALZHEIMER.

Description

17 \alpha-dehidroequilenio para la prevención de la neurodegeneración y la disfunción cognoscitiva.

Antecedentes de la invención

La presente invención relaciona el uso de un compuesto esteroide, 17\alpha-dehidroquilenio, para prevenir la degeneración de las neuronas asociadas a funciones cognoscitivas como la memoria y la atención en los mamíferos. Particularmente, la presente invención relaciona el uso del 17\alpha-dehidroquilenio en el tratamiento y la prevención de la deficiencia de estrógeno relacionada con la neurodegeneración y la disfunción cognoscitiva en las hembras deficientes de estrógeno y reducir el riesgo de la demencia relacionada con el Alzheimer en ambos, hembras y
varones.

El cese de la producción de estrógeno por los ovarios en la mujer, comúnmente conocido como menopausia, es frecuentemente acompañada por numerosos cambios físicos y psicológicos. Entre los síntomas menopáusicos sobresalen los cambios de humor y del funcionamiento sexual así como el decremento notable de las funciones cognoscitivas, particularmente la memoria y la atención. Estos cambios son también aparentes en mujeres que presentan deficiencias ováricas que no son atribuidas a la menopausia. Cambios en el entorno hormonal durante la menopausia son también responsables la osteoporosis posmenopáusica, una condición caracterizada por una rápida y considerable pérdida ósea, la cual afecta a la mayoría de las mujeres sobre los 60 años de edad en los Estados Unidos. Además, las mujeres posmenopáusicas son un grupo de personas en edades de riesgo incrementado en el desarrollo de enfermedades coronarias.

Decrementos en la función cognoscitiva, particularmente la memoria y la atención, han sido grandemente asociados con la menopausia. El hipocampo en los mamíferos ha sido muestreado para ser envuelto en un número importante de funciones, INTER ALIA, procesos cognoscitivos. Además, neuronas en la formación del hipocampo en adultos parecen ser especialmente sensibles a las alteraciones en los niveles hormonales en el sexo femenino.

Varias terapias de reemplazo de estrógeno (ERTs) han sido estudiadas en un esfuerzo por entender los cambios psicológicos que ocurren en la mujer menopáusica; sin embrago, estas ERTs tienen serios inconvenientes los cuales serán discutidos en mayor detalle mas adelante. Phillips et al. expone que el tratamiento con estradiol parece mejorar los cambios nocivos en la función cognoscitiva en mujeres quirúrgicamente menopáusicas, pero el mecanismo no es todavía entendido [Psiconeuroendocrinologia 17:485 (1992)].

En estudios del hipocampo, una región critica del cerebro para la memoria, Gould et al., descubrió que las características morfológicas de las neuronas del hipocampo eran realmente afectadas por los cambios en los niveles circulatorios de las hormonas sexuales femeninas, y observo que el retiro de los esteroides gonadales circulantes mediante ovariectomía en ratas hembras adultas resulto en una profunda disminución de la densidad en la espina dendrítica en las celdas piramidales CA1 del hipocampo [J. Neurosci. 10:1286 (1990)]. Gould et al., además reporto que un estradiol subcutáneo de corto plazo incremento la densidad de la espina de dendritas apicales de las celdas piramidales en la región CA1 del hipocampo. Ya que las espinas dendríticas están pensadas para representar sitios post sinápticos el incremento observado por Gould et al., en la densidad de la espina puede indicar un incremento en la sinapsis, sugiriendo un posible mecanismo mediante el cual el estradiol puede afectar positivamente el efecto de la función cognoscitiva en esta región neurálgica. Ni las referencias de Phillips ni las de Gould sugirieron el uso de 17\alpha-dehidroquilenio como un agente terapéutico hormonal causante de cambios en los efectos positivos de la función cognoscitiva.

La neurodegeneración, así como el deterioro cognoscitivo severo esta también asociado con la enfermedad de Alzheimer y otras condiciones relacionadas con la demencia. Sin embargo, el mecanismo de perdida neuronal en Alzheimer es todavía desconocido, ha sido reportado que los cambios asociados con la edad, como los cambios hormonales pueden contribuir a la expresión de esta enfermedad. Con respecto a esto, Simpkins et al., reportó que los factores ováricos son de tremenda importancia en el mantenimiento normal de las funciones del cerebro, y que la pérdida de los esteroides ováricos en la menopausia puede jugar un rol importante en el decline cognoscitivo y la neurodegeneración que están asociados con la enfermedad de Alzheimer [Neurobiology of Aging 12 (Supp.2):s195(1994)]. Simpkins et al. Más adelante encontró que cuando la terapia de reemplazo de estrógenos era administrada a ratas ovariectomizadas, en particular 17\beta-estradiol, las ratas exhibieron una retención superior del comportamiento previamente aprendido. La fijación de la Acetilcolina fue también medida para comparar los efectos de la ERT y la ausencia de ERT en las neuronas colinérgicas. Los resultados indicaron que la pérdida de estrógenos fue el evento hormonal crítico llevado a cabo por la actividad neuronal colinérgica.

Estrógenos equinos conjugados como el Premarin® (Laboratorios Wyeth-Ayerst, Princeton, NJ) son usados comúnmente en un régimen ERT como tratamiento primario para la menopausia, posmenopausia y los síntomas relacionados con la deficiencia de estrógenos en la mujer. Extracto de la orina de la yegua preñada, Premarin® contiene una mezcla de diez estrógenos conjugados diferentes como sales de sodio, sulfatos de estrógenos solubles en agua mezclados para representar la composición media del material derivado de la orina de la yegua preñada. Premarin® contiene ESTRONE, EQUILIN y 17\alpha-dehidroquilenio, junto con sumas de 17\alpha-estradiol, equilenio, y 17\alpha-dehidroquilenio como sales de sulfatos de ésteres. El sulfato 17\alpha-dehidroquilenio comprende aproximadamente el 1-2% del contenido total de esteroide del Premarin®, y es en realidad clasificado como una impureza en el Premarin® en la farmacopea de los estados Unidos. Es también reconocido en la técnica que los efectos biológicos del Premarin® son la suma de los efectos de sus varios componentes [ver ejemplos, Bhavnani, V. R. Análisis Endocrinos, 9(4):396-416, 406(1988)].

Es bien conocido para aquellos especialistas en la técnica de las ERTs que las especificidades de tejido difieren con cada estrógeno, para que los efectos psicológicos que un estrógeno tiene en un tejido en particular no predigan los efectos para otros estrógenos. Mientras el estradiol y los estrógenos equinos conjugados exhiben ciertos efectos beneficiosos y aparentan reducir la enfermedad cardiovascular e incrementan la densidad ósea en la mujer menopáusica [Grad., D. et. Al., Han. Intern. Med 117:1016(1992)], un número de efectos secundarios uterinos asociados con ambos tratamientos hace estos estrógenos significativamente menos atractivos para usos a largo plazo. De hecho, como resultado de los siguientes efectos secundarios de estos tratamientos hormonales, pocas mujeres menopáusicas que pueden elegir toman un tratamiento de terapia de hormonas de largo-plazo [Nabulsi, A.A. et. Al. N. Engl. J. Med. 328:1069(1993); Derby, C.A. et. Al. Am. J. Epidemiol. 137:1125(1993)]. Más específicamente, un riesgo creciente de carcinoma endometrial ha sido demostrado con el uso de estos tratamientos a menos que sean administrados concomitantemente con una dosis suficiente de progestina. Desafortunadamente, la protección endometrial contra el carcinoma no previene efectos secundarios no deseados como sangramiento vaginal, y la mayoría de las mujeres experimentaran un preocupante e inesperado sangramiento vaginal durante el primer año de terapia de reemplazamiento de estrógenos a pesar de los siguientes métodos destinados a inducir amenorrea. La progestina ha sido también implicada en el incremento del riesgo de cáncer de mama en las mujeres comparando a ambas, las que han tomado estrógenos y las que no los han usado. [Archer, D. M. et. Al., Am. J. Obstet. Gynecol. 173:471 (1995); Stampfer, M. J. et al., N. Engl. J Med 332:1589 (1995); Ettinger, B. et al., Obstet. Gynecol., 87:6 (1996)].

Es también aceptado que la estrona (un metabolito metabólicamente activo del 17\beta-estradiol) causa un estrechamiento de la pared uterina así como también incrementa el peso uterino en 8-10 pliegues [Washburn, S. A. et al., Am. J. Obstet. Gynecol. 169:251 (1993)]. Aunque grandes dosis (10 \mug administrados mediante inyección subcutánea diariamente que es equivalente a aproximadamente 3.25 g de estradiol en las mujeres) de estradiol han demostrado la influencia de la morfología de las neuronas del hipocampo en ratas adultas reportado por Gould et al., estas dosis son mucho mayores que las dosis estándares de la terapia hormonal de la menopausia (1.0 mg de estradiol administrado diariamente de forma oral o 0.625 mg de Premarin® administrado diariamente y de forma oral) que son usados actualmente por las mujeres, y conllevaría a un fuerte e intolerable sangramiento uterino y un incremento considerable de riesgo de cáncer endometrial.

Kauffman R F et al, Drug News and Perspectives, vol 8, no. 9, 1 Noviembre 1995, paginas 531-539 describe los moduladores selectivos del receptor de estrógeno.

Paganini-Hill A et al, American Journal of Epidemiology, vol 140, no. 3, 1994, paginas 256-261 relaciona la deficiencia de estrógeno y el riesgo de la enfermedad de Alzheimer en las mujeres.

Paganini-Hill A et al, Arch Intern Med, vol 156, 28 Octubre 1996, paginas 2213-2217, discute la terapia de reemplazamiento de estrógeno y el riesgo de la enfermedad de Alzheimer.

Ohkura et al, Dementia, vol 6, 1995 paginas 99-107, describe la terapia de reemplazamiento de estrógenos de largo plazo en pacientes femeninas con demencia característica del Alzheimer.

Ohkura et al, Endocrine Journal, 1994, 41 (4), 361-371 expone la evolución del tratamiento con estrógeno en pacientes del sexo femenino con demencia típica del Alzheimer.

Kimura D, Hormones and Behaivour, 29, 316-321, (1995) relaciona la terapia de reemplazamiento de estrógeno con el decline intelectual en las mujeres.

Kimura D, Hormones and Behavior, 29, 312-321, (1995) relaciona la terapia de reemplazamiento de estrógeno con el decline intelectual en las mujeres.

Katou M, Nipón Sanka Funjinka Gakkai Zasshi, vol 48. no. 7, Julio 1996, paginas 481-487 describe el efecto de los esteroides en los niveles del componente P en el suero aminoide las mujeres menopáusicas.

Sherwin et al, Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, New York, NY, US, vol 81, no., 7 Julio 1996, paginas 2545-2549 relacionado con la reversión de los defectos cognoscitivos inducidos por una afección GnRH por adición posterior de estrógeno.

Actualmente no hay terapias de estrógenos con efectos beneficiosos en el sistema nervioso central así como en los sistemas cardiovasculares y esqueléticos sin efectos tróficos en el endometrio. Allí, en consecuencia, permanece la necesidad de una terapia alternativa de estrógeno con efecto beneficioso en el sistema nervioso central sin efectos uterotróficos.

Sumario de la invención

La presente invención esta dirigida al uso del 17\alpha-dehidroquilenio, un componente esteroideo, como único agente terapéutico hormonal en la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir la deficiencia de estrógeno y la disfunción cognoscitiva en mamíferos susceptibles a la deficiencia de estrógeno relacionada con la neurodegeneración. La presente invención, adicionalmente, propone el uso del 17\alpha-dehidroquilenio como único agente terapéutico en la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir la neurodegeneración y la disfunción cognoscitiva asociada a la enfermedad de Alzheimer y a otras condiciones relacionadas con la demencia en mamíferos susceptibles a la deficiencia de estrógeno relacionada a la neurodegeneración. La presente invención, además, propone el uso del 17\alpha-dehidroquilenio como único agente hormonal terapéutico en la fabricación de un medicamento en el tratamiento de las condiciones anteriores y/o enfermedades producto de la administración de 17\alpha-dehidroquilenio o un conjugado metabólico mamífero de esos que son mono, di-sulfato o glucósido y un portador farmacéutico apropiado.

En el tratamiento o prevención de la degeneración de neuronas asociadas a las funciones cognoscitivas, como la memoria y la atención, 17\alpha-dehidroquilenio es administrado a los mamíferos susceptibles a las condiciones de deficiencia de estrógeno y/o enfermedades incluyendo aquellos mamíferos con castración química por quimioterapia, anorexia/bulimia, hipogonadismo. Similarmente, los mamíferos susceptibles a la demencia senil típica de Alzheimer u otro tipo de demencia senil y/o enfermedades son administrados con 17\alpha-dehidroquilenio como tratamiento o profilaxis. Otros grupos de mamíferos que son susceptibles al riesgo de desarrollar deficiencia de estrógeno relacionada con neurodegeneración y disfunción cognoscitiva serán los más evidentes para aquellos especialistas en el
tema.

El término "Valor terapéuticamente efectivo" usado en la presente invención esta definido como la dosis la cual provee el tratamiento o la prevención efectivos de las condiciones anteriormente descritas y/o enfermedades en mamíferos, en particular, humanos.

El uso de 17\alpha-dehidroquilenio para prevenir y/o tratar deficiencia de estrógeno relacionada a la neurodegeneración y a la disfunción cognoscitiva en mamíferos deficientes de estrógeno y reducir el riesgo de demencia senil típica del Alzheimer en mamíferos susceptibles a la deficiencia de estrógeno relacionado a la neurodegeneración proporciona diferentes ventajas sobre las terapias convencionales de reemplazamientos de estrógeno. 17\alpha-dehidroquilenio ha demostrado efectos beneficiosos en la función del sistema nervioso central sin efectos uterotroficos asociados al estradiol. En contraste con otros estrógenos como el estradiol que son conocidos por causar un engrosamiento de la pared uterina y un incremento del peso uterino, estudios han demostrado que el 17\alpha-dehidroquilenio tiene de mínima a ninguna actividad estrogena en el útero o en la porción pituitaria del hipotálamo del eje gonadal como se ha demostrado con las siguientes mediciones tradicionales de la potencia de estrógeno: 1) por la relativa relación de afinidad con el endometrio humano del citosol uterino de la rata y los receptores nucleares del estradiol; 2) la prueba Allen-Doisy (la cantidad de la necesidad particular de estrógeno para doblar el peso del útero de la rata); 3) por la potencia uterotrófica; y 4) su imposibilidad de suprimir los niveles de gonadotropina urinaria en mujeres ovariectomizadas. [Stem, Michael, Maturitas, 4:333(1982); Howard et al., Arch. Int. Med, 128:229 (1971)].

Adicionalmente, uno de los co-inventores de la presente invención ha demostrado que el 17\alpha-dehidroquilenio reduce el colesterol del plasma en ratas y mejora la función vasomotora de la arteria coronaria en macacos en dosis que no aparentan efectos uterotróficos [ver U.S. Patent No. 5,510,342 and Washburn, S.A. et al, Am. J. Obstet. Gynecol. 175:341 (1996)]. A diferencia de otras ERTs como el estradiol que requieren de una administración conjunta con una dosis suficiente de progestina para evitar el sangramiento vaginal y reducir el riesgo de carcinoma endometrial, 17\alpha-dehidroquilenio puede ser administrado por si solo como único agente terapéutico hormonal sin el riesgo de cáncer endometrial.

En la presente invención, 17\alpha-dehidroquilenio puede ser utilizado para prevenir la atrofia de la célula piramidal CA-1 de las espinas dendríticas del hipocampo en mamíferos susceptibles a deficiencias de estrógeno relacionadas con neurodegeneración, una región critica del cerebro para la memoria y la atención. Mientras que el estradiol ha sido presentado para ejercer un efecto similar en ratas, las dosis para el estradiol fueron mucho mas altas que aquellas usadas por la terapia hormonal estándar para la menopausia, y resultaría en un fuerte e intolerable sangramiento uterino e incrementaría grandemente el riesgo de cáncer endometrial.

Los conjugados del metabolismo mamífero usados en la presente invención son sulfatos y glucósidos de 17\alpha-dehidroquilenio. 17\alpha-dehidroquilenio puede ser utilizado mono o di-conjugado.

En un aspecto de la presente invención, esta expuesto el uso del 17\alpha-dehidroquilenio o conjugados metabólicos mamíferos como los usados como únicos agentes terapéuticos de la terapia hormonal para la fabricación de un medicamento para prevenir o tratar la deficiencia de estrógeno relacionada a la neurodegeneración y asociada a la disfunción cognoscitiva en mamíferos susceptibles a la deficiencia de estrógeno relacionada a la neurodegeneración.

En otro aspecto de la presente invención, los mamíferos susceptibles a la deficiencia de estrógeno relacionada a la neurodegeneración es una hembra posmenopáusica. Sin embargo, otras condiciones medicas donde la deficiencia de estrógeno puede ocurrir incluye, pero no esta limitada a, menopausia quirúrgica o natural, castración química (por quimioterapia), anorexia/bulimia, hipogonadismo por sobre ejercitación, estrés mental, ausencia genética de tejido ovárico, etc.

En otro aspecto de la presente invención, es expuesto el uso del 17\alpha-dehidroquilenio o conjugado metabólico mamífero como un solo agente terapéutico hormonal para la fabricación de un medicamento para prevenir o tratar la deficiencia de estrógeno relacionada a la neurodegeneración y a la disfunción cognoscitiva asociada a la enfermedad de Alzheimer y de otros desordenes relacionados con la demencia en mamíferos susceptibles a la deficiencia de estrógeno relacionada con la neurodegeneración.

Los anteriores y siguientes objetivos de la invención serán apreciados por aquellos especialistas en la materia cuando lean la descripción detallada de la realización preferente que sigue a continuación, con tales descripciones que serán ilustrativas de la presente invención.

Breve descripción de las ilustraciones

La invención será comprendida mejor después de leer la siguiente descripción de las realizaciones preferentes consideradas en las ilustraciones.

Fig. 1 Ilustra la densidad de la espina dendrítica apical (\pmSEM) desde la región CA-1 de las celdas piramidales del hipocampo expresada como el numero de espinas por 10 \mum de dendrita en ratas ovariectomizadas(n=4 cerebros/grupo). EST=estradiol; SQ=subcutáneo; \alphaDHEN=17\alpha-dehidroquilenio.

Descripción de la realización preferente

En los estudios de la presente invención utilizando ratas ovariectomizadas, los efectos a corto plazo (2 a 3 días) del 17\beta-estradiol oral, el benzoato de estradiol subcutáneo, y el tratamiento con 17\alpha-dehidroquilenio oral fueron comparados contra controles no tratados en la densidad de la espina apical dendrítica de las celdas piramidales de la región CA-1 del hipocampo (n=4 cerebro/grupo). Los tres tratamientos resultaron en u incremento de la densidad de la espina relativa a los controles no tratados, y no hubo diferencias aparentes entre los tratamientos. Estos resultados sugieren que el 17\alpha-dehidroquilenio es el candidato primario para agente simple en la terapia de reemplazamiento de hormonas en el tratamiento de mamíferos con condición de deficiencia de estrógeno como ocurre con la menopausia así como también para reducir el riesgo de enfermedad crónica en la demencia del Alzheimer u otras condiciones relacionadas con la demencia en ambos sexos, masculino y femenino.

Ejemplo 1 Materiales

17\alpha-dehidroquilenio esta disponible comercialmente y los conjugados están comercialmente disponibles o pueden ser preparados usando metodología química estándar.

Se expusieron a la prueba 51 ratas hembras Sprague-Dawley retiradas de criadero (10 meses de edad, en un rango de 220 hasta 270 g de peso corporal) iguales en el mes de nacimiento. Las ratas fueron albergadas en casas individuales y expuestas a ciclos de 12 horas de luz/oscuridad en una habitación a temperatura y humedad controladas. Los animales fueron adaptados a una dieta semi-purificada (ver mas adelante para detalles) por dos semanas. Fueron entonces anestesiadas (hydrocloruro de ketamina 50 mg/kg y xylaxina 10 mg/Kg. intraperitonial) y ovariectomizadas. Las ratas comenzaron el tratamiento 72 horas después de la ovariectomia. Todos los procedimientos en los que se incluyen animales fueron aprobados por la Escuela Bowman Gray de Medicina y Cuidado Animal y el Comité para su Uso.

Ejemplo 2 Procedimientos experimentales

Las ratas ovariectomizadas fueron asignadas a uno de los 4 grupos de tratamientos agrupadas por su peso corporal: 1) un grupo control (n=13) inyectadas subcutáneamente con 0.1 ml de aceite de maíz una vez por DIA durante dos días; 3) el grupo de estradiol micronizado (n=12), administrado con 0.05 mg de17\beta-estradiol por DIA a cada rata en la dieta (ver detalles mas adelante) durante 3 días; y 4) el grupo del sulfato de 17\alpha-dehidroquilenio (n=13), administrado con 0.15 mg por DIA a cada rata en la dieta (ver detalles mas adelante) por 3 días.

El 17\beta-estradiol micronizado y el sulfato de 17\alpha-dehidroquilenio fueron adicionados a una dieta semi-sintética conteniendo aproximadamente el 40% de calorías en forma de grasa y 0.08 mg/cal de colesterol. Una dieta conteniendo las hormonas fue suministrada en bolos de 15 gramos cada mañana. Después que esa porción fuera consumida, se les permitía a las ratas disfrutar libremente de una dieta sin tratamiento de hormonas incluido durante un DIA. Las hormonas subcutáneas y las inyecciones de placebo fueron administradas al mismo tiempo que el tratamiento de hormonas administrado oralmente en el DIA. A todos los animales se les dio agua y libitum.

Ejemplo 3 Necropsia y preparación del tejido

En la necropsia, las ratas fueron profundamente anestesiadas con pentobarbital sódico (100 mg/kg inyectado intraperitonealmente), la aorta abdominal fue sujetada y la mitad de los animales de cada grupo de tratamiento fue perfundido transcardialmente con 120 ml de parafolmadeido al 4% mas 1.5% de ácido pícrico (v/v) en un portador de 0.1 M de sodio fosfato, con pH 7.4. (Los cerebros del resto de los animales en cada grupo fueron procesados de manera diferente para otros ensayos.) Los cerebros fueron entonces diseccionados de las cavidades craneales, y puestos a 4ºC en la perfusión durante toda la noche.

Después de esta exposición, los cerebros fueron procesados por una impregnación Golgi utilizando métodos que se adaptaron a cada sección coloreada en particular [Woolley, C et al., J. Comp. Neurol. 326:293 (1993)]. Brevemente, los cerebros fueron bloqueados para incluir el hipocampo rostal, y se usaron unas secciones finas de 100 \mum como vibra tonos. Las secciones se sumergieron en una solución de agua destilada con 3% de bicromato de potasio y se mantuvieron durante toda la noche a temperatura ambiente. Al DIA siguiente las secciones fueron enjuagadas en agua destilada, montadas en diapositivas no gelatinizadas y cubiertas con goma en las esquinas. Las diapositivas ensambladas fueron incubadas en la oscuridad en agua destilada con nitrato de plata al 1.5% por dos días a temperatura ambiente. Estas fueron desmontadas, las secciones fueron enjuagadas en agua destilada, deshidratadas en etanol graduado, limpiadas en Americlear (Baxto Scientific, McGaw Park, IL), y cubiertas con Permount. Las diapositivas fueron codificadas para asegurar el anonimato del grupo de tratamiento durante el análisis de la densidad de la espina dendrítica.

Las neuronas piramidales en la región CA1 del hipocampo fueron seleccionadas para su conteo si fueron relativamente aisladas para su fácil identificación dendrítica, suficientemente impregnadas y claramente visibles. Las ramas de dendritas a ser contadas fueron de al menos 2 mm de longitud y de 20 mm o más del cuerpo de la célula. Un total de 713 segmentos fueron medidos, y el número promedio de segmentos por rata medidos fue 44. Los segmentos fueron rastreados (x1250) con un tubo cámara; todas las espinas visibles en el segmento fueron contadas, y el segmento fue medido utilizando un sistema de análisis interactivo digitalizador de Zeiss.

Los datos fueron expresados como el numero de espinas por 10 \mum. el número mínimo de longitud de espinas/dendrita (10 \mum) fue calculado para cada rata. El significado estadístico fue determinado usando un análisis 1 x 4 de variación, y la prueba de Tukey fue utilizada para posteriores comparaciones en parejas. El nivel significativo fue establecido en p=0.05.

Un ligero examen microscópico de las muestras impregnadas en Golgi reveló una coloración consistente y confiable en todo el hipocampo en los 4 cerebros de cada grupo de tratamiento. Las celdas piramidales CA1 fueron siempre bien representadas y fácilmente identificables en el hipocampo de estos cerebros. Las menores densidades (\pmSEM) de la espina dendrítica apical de las celdas piramidales en la región CA1 del hipocampo están descritas en la Figura 1.

El análisis cuantitativo de las celdas piramidales CA1 reveló diferencias significativas entre los grupos de tratamiento en la densidad de las espinas apicales dendríticas (F[3,12]=10.65, p=0.001). Los animales de control tuvieron significativamente menos espinas dendríticas apicales en la región CA1 que los animales tratados (todos p's \leq 0.05) no hubo diferencias en la densidad de la espina dendrítica entre los grupos de tratamiento (todos p's > 0.10).

Los resultados obtenidos a partir de estos estudios demuestran que el 17\alpha-dehidroquilenio tiene efectos protectores en las espinas dendríticas de la región CA1 del hipocampo, un área del cerebro conocida por estar involucrada con las funciones cognoscitivas como la memoria. Ya que la región CA1 del hipocampo ha sigo relacionada con la memoria primaria en los humanos, y las espinas dendríticas de la celda piramidal CA1 ha sido mostrada como alterada en la demencia senil típica del Alzheimer [revisar Woolley, Catherin et al., J. Comp. Neurol. 336:293 (1993)], 17\alpha-dehidroquilenio de hecho podría ejercer efectos beneficiosos en las funciones cognoscitivas del sistema nervioso central.

Adicionalmente, otros efectos psicológicos del 17\alpha-dehidroquilenio pudieran convertirlo en un agente farmacéutico potencial superior con respecto a otras ERTs y terapias de reemplazamiento de estrógenos y utilizarlo en la prevención y el tratamiento de la deficiencia de estrógeno relacionada con la neurodegeneración y la disfunción cognoscitiva. Con respecto a esto, el 17\alpha-dehidroquilenio no causa hiperplasia ni en las glándulas mamarias ni uterinas en las ratas ovariectomizadas ni en los primates no humanos como ha sido demostrado por uno de los co-inventores de la presente invención [ver Washburn et al., supra, (1993) y Washburn et al., supra (1996), respectivamente]. Desde el momento en que no hay efectos uterotroficos, las progestinas opuesta son innecesarias, disminuyendo, de esta manera, la posibilidad de sangramiento vaginal iatrogénico o el incremento de neoplacia de mama o endometrial, lo cual preocupa en el caso del 17\beta-estradiol.

El 17\alpha-dehidroquilenio también parece tener efectos beneficiosos en el sistema cardiovascular, incluyendo el mejoramiento en los niveles de concentración de colesterol en las ratas ovariectomizadas [ver Washburn et al., supra, (1996)]. Además, los primates no humanos respondieron al 17\alpha-dehidroquilenio con reducción en los niveles de acumulación arterial de lipoproteínas de baja densidad y no se vieron efectos prostáticos ni de peso testicular [ver Washburn et al., supra, (1996)]. 17\alpha-dehidroquilenio pudiera incluso tener efectos beneficiosos en los huesos (ver Patente U.S. No. 5,545,635).

Ejemplo 4

Cuando el 17\alpha-dehidroquilenio es usado de acuerdo con la presente invención, este puede ser formulado en forma de dosis normales, en cápsulas, tabletas, jarabes, aerosoles, cápsulas suaves y duras de gelatina, supositorios, soluciones inyectables o como se desee. 17\alpha-dehidroquilenio puede ser administrado por si solo o en una combinación con portadores farmacéuticamente aprobados, diluentes, estabilizadores, disolventes, lubricantes, recubiertos a gusto o de otra forma, expuestos. Sin tener en cuenta la formulación farmacéutica, el 17\alpha-dehidroquilenio se encontrara en una proporción que cumplimentará la actividad deseada en los mamíferos.

El 17\alpha-dehidroquilenio puede ser inyectado parenteralmente también en el organismo, en dicho caso será administrado en forma de una solución salina estéril pudiendo contener otros componentes como la glucosa. Es además contemplada la posibilidad de que el 17\alpha-dehidroquilenio puede ser administrado transdérmicamente con el uso de un parche transdérmico que contiene el ingrediente activo, 17\alpha-dehidroquilenio, y un portador farmacéutico. El parche transdérmico permite la distribución del 17\alpha-dehidroquilenio a la piel para su absorción sistémica dentro del torrente sanguíneo.

Las dosis requeridas del 17\alpha-dehidroquilenio para administrarlo en pacientes estarán establecidas una vez que se establezcan las dosis que satisfacen los requerimientos de beneficios al sistema nervioso central, protección cardiovascular y ósea. Dodge et al., [Abstract of presentation at the 10th Internacional Congreso of Endocrinology and The Endocrine Society, Junio 12-15, 1996, San Francisco, CA] ha demostrado la amplia ventana terapéutica la cual habilita la protección cardiovascular y ósea (aproximadamente 0.1 a casi 1.0 mg/kg/día en ratas). La dosis protectora del sistema nervioso central, en la presente invención, fue de casi 0.625 mg/kg/día, y los fallos estuvieron dentro de las ventanas terapéuticas expuestas por Dodge et al.

En concordancia es creído, que en hombres y mujeres, las dosis metabólicamente equivalentes probadas en ratas y en primates no humanos alcanzan similares efectos beneficiosos sin ningún efecto secundario adverso en útero, mamas, próstata y testículos. La individualización de dosis para lograr un beneficio máximo será fácilmente lograda dentro de la ventana (diferencial 5 veces flexible) terapéutica separando efectos beneficiosos y adversos.

Por supuesto, las dosis precisas para cada forma de administración estarán determinadas por la experiencia del medico en su tratamiento al paciente. Generalmente, 17\alpha-dehidroquilenio seria administrado en una concentración que logre los resultados deseados sin causar ningún daño o nocivo efecto secundario.

Visto lo anterior, el 17\alpha-dehidroquilenio parece prevenir los nocivos efectos hiperestrógenos en los nervios centrales, sistema cardiovascular y esquelético sin efectos tróficos en el útero, endometrio o mamas. La especificidad del objetivo sugiere que el 17\alpha-dehidroquilenio tiene un excelente potencial para lidiar en un régimen de único agente terapéutico para la terapia de reemplazamiento de hormonas en mujeres que sufren de condiciones de deficiencia de estrógeno y/o enfermedades como la menopausia. Adicionalmente, ambos individuos, masculinos y femeninos, en riesgo de padecer disfunción cognoscitiva estarían muy a gusto de recibir beneficios de una administración profiláctica del 17\alpha-dehidroquilenio de acuerdo con la presente invención.

Deberá entenderse que cambios y modificaciones en la presente realización preferente descrita aquí serán presentados por aquellos especialistas en la materia. A manera de ejemplo, la protección del sistema nervioso central mediante 17\alpha-dehidroquilenio puede reforzar el balance en las personas mayores, reduciendo de esa manera las caídas y previniendo fracturas de caderas y de otros tipos.

Claims (11)

1. El uso de 17\alpha-dehidroquilenio, o un conjugado metabólico mamífero ya sea mono- o di-sulfato o glucósido, como único agente terapéutico hormonal en la fabricación de un medicamento para el tratamiento y la prevención de la deficiencia de estrógeno asociada a la neurodegeneración y asociada a la disfunción cognoscitiva en mamíferos susceptibles a la deficiencia de estrógeno asociada a la neurodegeneración.

2. El uso acorde a la Reivindicación 1, en la que la ruta de administración del medicamento es seleccionada de un grupo consistente en oral, intravenosa, parental, transdérmica, rectal, intravaginal, intranasal o administración ínter bronquial.

3. El uso acorde a la Reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la que el 17\alpha-dehidroquilenio esta en forma de sulfato de 17\alpha-dehidroquilenio.

4. El uso acorde a una cualquiera de las Reivindicaciones de la 1 a la 3, en donde el mamífero es una hembra humana posmenopáusica.

5. El uso acorde a una cualquiera de las Reivindicaciones de la 1 a la 4, donde la deficiencia de estrógeno esta asociada con la menopausia.

6. El uso acorde con la Reivindicación 1, en donde la deficiencia de estrógeno está asociada a una condición de las siguientes: fallo ovárico prematuro, anorexia/bulimia, amenorrea resultante de estrés físico (entrenamiento para maratón, bailar ballet) o mental, ausencia genética de los ovarios (i.e., síndrome de Turner), y castración quirúrgica o química (terapia para el cáncer).

7. El uso acorde a una cualquiera de las Reivindicaciones de la 1 a la 3, en donde la neurodegeneración y la disfunción cognoscitiva asociada esta relacionada con la enfermedad de Alzheimer u otros desordenes relacionados con la demencia.

8. El uso acorde a la Reivindicación 7, en donde el medicamento es para hembras y machos humanos.

9. El uso acorde a la Reivindicación 8, en donde las hembras son posmenopáusicas.

10. El uso acorde a una cualquiera de las Reivindicaciones de la 7 a la 9, en donde al enfermedad de Alzheimer u otra demencia relacionada es tratada o prevenida reduciendo la atrofia de la densidad de la espina dendrítica del hipocampo.

11. El uso acorde a la Reivindicación 1, en donde el medicamento previene la atrofia de las espinas dendríticas apicales de la celda piramidal CA1 del hipocampo.