[go: up one dir, main page]

ES2253208T3 - Analogos de vaniloide que contienen farmacoforos de resiniferatoxina como ponentes agonistas del receptor de vaniloide y analgesicos, composiciones y utilizaciones de los mismos. - Google Patents

Analogos de vaniloide que contienen farmacoforos de resiniferatoxina como ponentes agonistas del receptor de vaniloide y analgesicos, composiciones y utilizaciones de los mismos.

Info

Publication number
ES2253208T3
ES2253208T3 ES00905438T ES00905438T ES2253208T3 ES 2253208 T3 ES2253208 T3 ES 2253208T3 ES 00905438 T ES00905438 T ES 00905438T ES 00905438 T ES00905438 T ES 00905438T ES 2253208 T3 ES2253208 T3 ES 2253208T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
group
nmr
cdcl
propyl
yield
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES00905438T
Other languages
English (en)
Inventor
Jeewoo Lee
Uhtaek College of Pharmacy OH
Young-Ho Park
Young-Ger College of Pharmacy SUH
Hyeung-Geun College of Pharmacy PARK
Hee-Doo College of Pharmacy KIM
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Digital Biotech Co Ltd
Pacific Corp
Original Assignee
Digital Biotech Co Ltd
Pacific Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Digital Biotech Co Ltd, Pacific Corp filed Critical Digital Biotech Co Ltd
Application granted granted Critical
Publication of ES2253208T3 publication Critical patent/ES2253208T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07CACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C335/00Thioureas, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C335/04Derivatives of thiourea
    • C07C335/06Derivatives of thiourea having nitrogen atoms of thiourea groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C335/10Derivatives of thiourea having nitrogen atoms of thiourea groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton
    • C07C335/12Derivatives of thiourea having nitrogen atoms of thiourea groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07CACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/02Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/32Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C07C235/34Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: en la que, X es oxígeno o azufre; A es ¿NHCH2- o ¿CH2-; R1 es alquilarilo C1-4 o R4CO-, en el que R4 es alquilo C1-18, alquenilo C2-18, o arilo C6-10; R2 es alquilo C1-6, alcóxido C1-6, haloalquilo o halógeno; R3 es hidrógeno, alquilo C1-4, aminoalquilo, monoéster de diácido o ácido -alquílico y el asterisco indica un átomo de carbono quiral.

Description

Análogos de vaniloide que contienen farmacóforos de resiniferatoxina como potentes agonistas del receptor de vaniloide y analgésicos, composiciones y utilizaciones de los mismos.
Antecedentes de la invención 1. Sector técnico de la invención
La presente invención se refiere a análogos de vaniloide que contienen farmacóforos de resiniferatoxina, composiciones farmacéuticas que comprenden dichos análogos, y métodos de utilización de dichos análogos como agonistas del receptor de vaniloide y potentes analgésicos.
2. Técnicas relacionadas de la invención
La capsaicina (CAP), que tiene la estructura mostrada posteriormente, estimula y a continuación desensibiliza las fibras C aferentes sensoriales. La desensibilización inducida puede tener aplicación en la artritis, asma, respuestas alérgicas que incluye la rinitis, fiebre, dolor, hipersensibilidad de la vejiga y similares.
Además, el receptor de vaniloide (VR) (o receptor de capsaicina) es un sitio específico de reconocimiento de membrana neuronal para la CAP y compuestos irritantes relacionados. Se expresa casi exclusivamente mediante neuronas sensoriales primarias implicadas en la nocicepción y la inflamación neurogénica. Recientemente se ha clonado el receptor que actúa como canal de iones selectivo de cationes con preferencia por calcio, y su subtipo funcional, VR1, activado por la CAP y calor nocivo. Su desensibilización provocada por ligandos específicos ha sido reconocida como una aproximación terapéutica prometedora para mitigar el dolor neuropático y otras condiciones patológicas en las que los neuropéptidos liberados de las neuronas sensoriales primarias juegan un papel fundamental.
La mayoría de agonistas de VR exógenas que se están desarrollando o se utilizan como analgésicos están estructuralmente relacionadas con la CAP (es decir, Zostrix^{TM}, Olvanil^{TM}, SDZ-249482^{TM}, y DA-5018^{TM}) y resiniferatoxina. Sus estructuras incluyen un anillo de vaniloide habitual que parece que es importante para la actividad de agonista. Sin embargo, en un informe reciente, se demostró que compuestos en los que falta una parte de vaniloide, tales como dialdehídos o triprenil fenol de sesquiterpenoides insaturados, también pueden activar el receptor. Aunque los antagonistas del receptor son escasos, se han descrito varios compuestos tales como la capsazepina, que actúa de forma competitiva en el punto de unión de la CAP, el bloqueador de canales rojo de rutenio y la capsazocaína.
La resiniferatoxina (RTX), un diterpeno tricíclico aislado de Euphorbia resinifera, ha sido considerada como un análogo de la CAP ultrapotente. De hecho, se ha probado la unión específica de RTX al sitio de unión de la CAP en los ganglios de la espina dorsal con [^{3}H]RTX marcado. La RTZ se está desarrollando como un agente desensiblizador de neuronas sensoriales ultrapotente para el tratamiento de la incontinencia urinaria de urgencia y el dolor asociado con la neuropatía diabética. Recientemente, se han descrito un análisis totalmente enantiocontrolado y un análisis conformacional de RTX. Sin embargo, los grupos farmacofóricos de RTX aún no están claramente definidos, aunque los estudios de estructura-actividad sugieren que la parte homovanílica C_{20}, el grupo ceto C_{3}, y el grupo orto-éster fenílico en el anillo C son elementos estructurales fundamentales responsables para la potencia extremadamente elevada de RTX. La potencia inferior de la CAP con respecto a RTX, por otro lado, se puede racionalizar por la falta de algunos de estos grupos farmacofóricos críticos, especialmente en grupo ceto C_{3}. En Chemical Abstracts, vol. 132, no. 7, 2000, abstract no. 78346f & Bioorg. Med. Chem. Lett., vol. 9, no. 20, 1999, páginas 2909-2914 se da a conocer el éster 2-{2-[84-hidroxi-3-metoxi-fenil)acetilamino]metil}-3-fenil-propílico del ácido 2,2-dimetil propiónico para su utilización como un agonista del receptor de vaniloide.
La Patente de Estados Unidos No. 4.939.149 da a conocer un método para desensibilizar un sujeto animal mediante la administración de una cantidad desensibilizante terapéuticamente efectiva de RTX para desensibilizar el animal de la inflamación neurogénica, el dolor inducido química y térmicamente y de respuestas que implican mecanismos aferentes sensoriales sensibles a CAP.
A pesar de que se han descrito un conjunto de agonistas de vaniloide basados en las estructuras de CAP y RTX como analgésicos potenciales (por ejemplo, la Patente de Estados Unidos No. 5.021.450 da a conocer derivados del homovanilil diterpeno, tales como 12-desoxiforbol 13-fenilacetato 20-homovanilato y mecerein 20-homovanilato como miméticos de RTX), estos análogos similares de CAP están limitados por su menor potencia intrínseca y su estrecho índice terapéutico. La RTX, por otro lado, tiene una disponibilidad limitada de fuentes naturales y es difícil de obtener de forma sintética debido a su complejidad estructural.
Los presentes inventores han realizado extensas investigaciones para descubrir agentes analgésicos novedosos basados en el receptor de vaniloide, que tengan una estructura más simple que la RTX o análogos conocidos similares a RTX o CAP. Como resultado de las mismas, se descubrió que los nuevos compuestos que tenían modificaciones en la parte homovanílica C_{20}, el carbonil C_{3}, y la parte de orto-éster fenilo como grupos esenciales para el reconocimiento y la unión mostraron una actividad agonista de vaniloide potente en términos de ensayo de unión del receptor y el ensayo de canal único activado por CAP.
Características de la invención
Por lo tanto, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
1
en la que,
X es oxígeno o azufre;
A es -NHCH_{2}- o -CH_{2}-;
R_{1} es un alquilarilo C_{1-4} o R_{4}CO-, en el que R_{4} es un alquilo C_{1-18}, alquenilo C_{2-18}, o arilo C_{6-10};
R_{2} es un alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-6}, haloalquilo C_{1-6} o halógeno;
R_{3} es hidrógeno, alquilo C_{1-4}, aminoalquilo, monoéster de diácido o ácido \alpha-alquílico y
el asterisco indica un átomo de carbono quiral.
La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto (I) como ingrediente activo en una cantidad eficaz para aliviar el dolor, junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también proporciona una utilización de los compuestos como ingrediente activo en fármacos para el tratamiento del dolor o la incontinencia urinaria.
Descripción detallada de la invención
Los compuestos de la presente invención se representan por la siguiente fórmula (I):
2
en la que,
X es oxígeno o azufre;
A es -NHCH_{2}- o -CH_{2}-;
R_{1} es un alquilarilo C_{1-4} o R_{4}CO-, en el que R_{4} es un alquilo C_{1-18}, alquenilo C_{2-18}, o arilo C_{6-10};
R_{2} es un alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-6}, haloalquilo C_{1-6} o halógeno;
R_{3} es hidrógeno, alquilo C_{1-4}, aminialquilo, monoéster de diácido o ácido \alpha-alquílico y
el asterisco indica un átomo de carbono quiral.
3
en la que,
X es oxígeno o azufre;
A es -NHCH_{2}- o -CH_{2}-;
R_{1} es un alquilarilo C_{1-4} o R_{4}CO-, en la que R_{4} es un alquilo C_{1-18}, alquenilo C_{2-18}, o arilo C_{6-10};
R_{3} es hidrógeno, alquilo C_{1-4}, aminialquilo, monoéster de diácido o ácido \alpha-alquílico, y
el asterisco indica un átomo de carbono quiral.
Los compuestos preferidos se pueden representar mediante las siguientes fórmulas (I-a) y (I-b):
\vskip1.000000\baselineskip
4
\vskip1.000000\baselineskip
5
en las que R_{1}, R_{2} y R_{3} tienen el mismo significado tal como se ha definido anteriormente.
En una realización preferida, los compuestos tienen la fórmula general (I-a) o (I-b) en la que R_{1} es el grupo de fórmula R_{4}CO- en la que R_{4} es un grupo alquilo que tiene de 1 a 18 átomos de carbono; R_{2} es un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; y R_{3} es -(CH_{2})_{n}NH_{2}, -CO(-CH_{2})_{n}COOH o -(CH_{2})_{n}COOH, en la que n es un número entero de 1 a 4. Cuando R_{1} o R_{4} son un grupo arilo sustituido, los sustituyentes pueden ser uno o más alquilos inferiores que tienen de 1 a 4 átomos de carbono o átomos de halógeno.
En una realización más preferida, los compuestos tienen la fórmula general (I-a) o (I-b) en la que R_{1} es el grupo de fórmula R_{4}CO- en la que R_{4} es un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; R_{2} es un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; y R_{3} es -CH_{2}CH_{2}NH_{2}, -COCH_{2}CH_{2}COOH o -CH_{2}COOH.
En todos los casos, el compuesto (I) puede ser una mezcla racémica, o un estereoisómero R o S. Y, la presente invención comprende el compuesto (I) en forma de sus sales farmacéuticamente aceptables.
Los compuestos de la presente invención se pueden sintetizar químicamente mediante los métodos en los esquemas de reacción mostrados posteriormente, que simplemente sirven de ejemplo y de ningún modo limitan la invención. Los esquemas de reacción muestran las etapas para la preparación de los compuestos representativos de la presente invención, y también se pueden producir otros compuestos mediante las siguientes etapas con modificaciones apropiadas de reactivos y materiales de partida, que son previsibles por los técnicos en la materia.
Procedimientos sintéticos generales
Las síntesis de derivados de la 3-aciloxi-2-bencilpropil tiourea (7a-d) se representan en los Esquemas 1 y 2. La monoalquilación de malonato de dietilo con varios haluros de bencilo, seguido por una reducción con LiAlH_{4}, produjo los correspondientes dioles (2a-d). La monoacetilación de 2, conversión de la función alcohol permanente en una azida, y la desprotección del grupo acetilo permitió los 3-azido-2-bencil-1-propanoles (5a-d) intermedios. La acilación de 5a-d con varios haluros de acilo produjo los ésteres correspondientes 6a-d, que después de la reducción del grupo azida se condensaron con 4-metoximetiloxi-3-metoxibencilisotiocianato y se hidrolizaron hasta obtener los productos finales deseados 7a-d. Los análogos de éter alternativos, representados por los derivados de 3-aciloxi-2-bencilpropil tiourea, 9a,c, se sintetizaron a partir de 5a,c tal como se muestra en el Esquema 2. Dos análogos quirales de 7a-I se sintetizaron a partir del (R)-3-acetoxi-2-bencil-1-propanol ((R)-3a) obtenido a partir de la acetilación enzimática enantioselectiva del 2-bencil-1,3-propanodiol racémico (Esquema 3) siguiendo el mismo procedimiento para la síntesis de 7a-I.
La síntesis de análogos de ácido O-acético (19a, b) de los derivados de tiourea anterior se representa en el esquema 4. El 4-hidroxi-3-metoxi-benzonitrilo (11) se protegió mediante el grupo MOM (metilmetil éter) para obtener 12, cuyo grupo ciano se redujo a amina mediante LiAlH_{4} y, a continuación, se protegió mediante el grupo CBZ (clorobencilo) a 13. El grupo MOM de 13 se desprotegió y, a continuación, el correspondiente grupo hidroxilo se alquiló mediante bromoacetato de metilo para obtener 15. El éster metílico de 15 se hidrolizó y, a continuación, el grupo CBZ se desprotegió para obtener 17. La amina de 17 se condensó con isotiocianato 18a,b para obtener productos finales deseados 19a,b, respectivamente.
La síntesis de análogos de ésteres de ácido O-succínico (23a,b) de los derivados de tiourea anteriores se representa en el esquema 5. El éster monobencílico del ácido succínico 20 se acetiló con vaniloide 14 para obtener 21 cuyos grupos bencilos se desprotegen por hidrogenación para obtener 22. La amina de 22 se condensó con isotiocianato 18a,b para obtener los productos finales deseados 23a,b, respectivamente.
La síntesis de análogos de O-aminoetilo (28a,b) de derivados de amida se representa en el esquema 6. El grupo azida de 24 se redujo a amina, el cual "in situ" se condensó con pentafluoro éster del ácido homovanílico para obtener 25. El grupo hidroxilo de 25 se alquiló mediante dibromoetano para obtener 26 cuyo grupo bromo, a continuación, se sustituyó por el grupo azida para obtener 27. La reducción de 27a,b permitió obtener los productos finales deseados 28a,b respectivamente.
La síntesis de análogos de O-aminoetilo (36a,b) de los derivados de tiourea anteriores se representa en el esquema 7. La amina de la 4-hidroxi-3-metoxibencilamina 29 se protegió mediente el grupo Boc y, a continuación, el hidroxilo se alquiló mediante dibromoetano para obtener 31. El grupo bromo de 31 se sustituyó por el grupo azida y, a continuación, el N-Boc se desprotegió para obtener 33. La amina de 33 se convirtió en el correspondiente isotiocianato que se condensó con azida 6 para obtener la tiourea 35. El grupo azida de 35a,b se redujo para permitir la obtención de los productos finales deseados 36a,b, respectivamente.
\newpage
Esquema 1
6
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 2
7
\newpage
Esquema 3
8
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 4
9
\newpage
Esquema 5
10
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 6
11
\newpage
Esquema 7
12
Estructura de Capsaicina (CAP)
13
Estructura de RTX
14
Los compuestos de la presente invención se pueden transformar en composiciones farmacéuticas por combinación con vehículos o diluyentes médicos apropiados. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención se pueden disolver en aceites, propilenglicol u otros disolventes utilizados habitualmente para preparar soluciones inyectables. Entre los vehículos habituales se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, solución salina fisiológica, polietilenglicol, etanol, aceites vegetales y miristato de isopropilo, Para aplicación tópica, los compuestos de la presente invención se pueden formular como una pomada o crema.
Las composiciones farmacéuticas que comprenden el compuesto de la presente invención se pueden aplicar en las siguientes ocasiones:
\bullet
aliviar el dolor causado por neuralgia postherpética, neuropatía diabética, síndrome de dolor postmastectomía, dolor de muñón, distrofia refleja simpatética, neuralgia trigeminal, dolor neuropático oral, osteoartritis, artritis reumatoide, fibromialgia, síndrome de Guillain-Barre, meralgia paraesthetica, síndrome de boca ardiente
\bullet
mejorar el dolor tal como el dolor intratable debido a una neuropatía periférica bilateral.
\bullet
aliviar el picor debido a la psoriasis, hemodiálisis, prurito acuagénico, vestibulitos vulvar, notalgia paraesthetica, prurito braquioradial, Lichen simplex chronicus
\bullet
tratar el dolor de cabeza arracimado, la rinitis vasomotor o la rinitis perenial alérgica en forma de goteo intranasal
\bullet
tratar la hipersensibilidad de la vejiga o la hiperreflexia del detrusor espinal en forma de solución intravesical.
El compuesto de la presente invención tiene una potente actividad analgésica y antiinflamatoria, y de este modo, la composición farmacéutica de la presente invención se puede utilizar para aliviar o mitigar los dolores agudos, crónicos o inflamatorios, suprimir la inflamación o tratar la incontinencia urgente.
Los siguientes métodos de formulación y excipientes se muestran simplemente a modo de ejemplo y de ningún modo limitan la invención.
Los compuestos de la presente invención en formas de dosis farmacéuticas se pueden utilizar en forma de sus sales farmacéuticamente aceptables, y también se pueden utilizar solos o en asociación apropiada, así como en combinación con otros compuestos farmacéuticamente activos.
Los compuestos de la presente invención se pueden formular en preparaciones para inyecciones mediante su disolución, suspensión, o emulsificación en disolventes acuosos, tales como una solución salina normal, Dextrosa al 5%, o un disolvente no acuoso, tal como aceite vegetal, glicéridos sintéticos de ácidos alifáticos, ésteres de ácidos alifáticos más elevados o propilenglicol. La formulación puede incluir aditivos convencionales, tales como solubilizantes, agentes isotónicos, agentes de suspensión, agentes emulsificantes, estabilizantes y conservantes.
La dosis deseable de los compuestos de la presente invención varía dependiendo de la condición y el peso del sujeto, severidad, forma del fármaco, vía y periodo de administración, y se puede escoger por un técnico en la materia. Sin embargo, para obtener efectos deseables, generalmente se recomienda administrar 0,0001-100 mg/kg, preferiblemente 0,001-100 mg/kg por peso/día de los compuestos de la presente invención. La dosis se puede administrar de una vez o dividida en diversos momentos del día. En términos de composición, los compuestos deberían estar presentes entre un 0,0001 y un 10% en peso, preferiblemente de un 0,0001 a un 1% en peso basándose en el peso total de la composición.
La composición farmacéutica de la presente invención se puede administrar a un sujeto animal, tal como mamíferos (rata, ratón, animales domésticos o humanos) a través de varias vías. Se contemplan todas las formas de administración, por ejemplo, la administración se puede realizar de forma oral, rectal o por inyección intravenosa, intramuscular, subcutánea, intratecal, epidural o intracerebroventricular.
Ejemplos Procedimiento general para la síntesis de 1a-d
Se trató una solución enfriada a 0ºC de dietilmalonato (6,4 g, 40 mmol) en DMF (20 ml) con hidruro sódico (60%, 1,92 g, 48 mmol) añadiéndolo poco a poco y se agitó durante 40 minutos a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se trató con los correspondientes cloruros de bencilo sustituidos (48 mmol) y se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con H_{2}O y se extrajo varias veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O y una solución saturada de cloruro sódico, se secó sobre MgSO_{4}, y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:10) como eluente para obtener 1.
Ejemplo 1 3,4-dimetilbenzilmalonato de dietilo (1b)
70% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,9-7,05 (m, 3 H), 4,14 (m, 4 H, 2 x CO_{2}CH_{2}), 3,61 (t, 1 H, CH), 3,25 (d, 1 H, CH_{2}Ar), 3,14 (d, 1 H, CH_{2}Ar), 2,2-2,25 (m, 6 H, 2 x CH_{3}), 1,21 (m, 6 H, 2 x CO_{2}CH_{2}CH_{3}).
Ejemplo 2 4-clorobenzilmalonato de dietilo (1c)
74% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,25 (d, 2 H), 7,16 (d, 2 H), 4,14 (m, 4 H, 2 x CO_{2}CH_{2}), 3,60 (t, 1 H, CH), 3,18 (d, 2 H, CH_{2}Ar), 1,21 (t, 6 H, 2 x CO_{2}CH_{2}CH_{3}).
Ejemplo 3 4-butilbenzilmalonato de dietilo (1d)
74% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,29 (d, 2 H), 7,13 (d, 2 H), 4,16 (q, 4 H, 2 x CO_{2}CH_{2}), 3,63 (t, 1 H, CH), 3,18 (d, 2 H, CH_{2}Ar), 1,30 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}), 1,20 (t, 6 H, 2 x CO_{2}CH_{2}CH_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 2a-d
Se trató gota a gota una solución enfriada a 0ºC de hidruro de aluminio y litio (3,64 g, 96 mmol) en dietil éter (80 ml) con una solución de 1 (24 mmol) en dietil éter (20 ml). Después de agitar durante 3 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se enfrió sobre un baño de hielo y se trató mediante la adición sucesiva gota a gota de 3,5 ml de H_{2}O, 7 ml de una solución de NaOH al 15%, y 10,5 ml de H_{2}O. La mezcla se filtró mediante lavado con EtOAc y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (3:1) como eluente para obtener 2.
Ejemplo 4 2-Bencil-1,3-propanodiol (2a)
98% de rendimiento, sólido blanco; pf = 67ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,15-7,30 (m, 5 H, fenilo), 3,74 (dd, 2 H, CH_{2}OH), 3,62 (dd, 2 H, CH_{2}OH), 2,9-3,0 (bs, 2 H, OH), 2,58 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,03 (m, 1 H, CH).
Ejemplo 5 2-(3,4-Dimetilbencil)-1,3-propanodiol (2b)
92% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,88-7,06 (m, 3 H, fenilo), 3,6-3,8 (m, 4 H, 2 x CH_{2}OH), 2,5-2,7 (bs, 2 H, CH_{2}OH), 2,60 (d, 1 H, CH_{2}Ph), 2,52 (d, 1 H, CH_{2}Ph), 2,2-2,28 (m, 6 H, 2 x CH_{3}), 2,02 (m, 1 H, CH).
Ejemplo 6 2-(4-Clorobencil)-1,3-propanodiol (2c)
75% de rendimiento, sólido blanco; pf = 64ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,24 (d, 2 H), 7,10 (d, 2 H), 3,75 (dd, 2 H, CH_{2}OH), 3,61 (dd, 2 H, CH_{2}OH), 2,85 (bs, 2 H, OH), 2,58 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 1,97 (m, 1 H, CH).
Ejemplo 7 2-(4-t-Butilbencil)-1,3-propanodiol (2d)
80% de rendimiento, sólido blanco; pf = 67ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,31 (d, 2 H), 7,11 (d, 2 H), 3,81 (dd, 2 H, CH_{2}OH), 3,68 (dd, 2 H, CH_{2}OH), 2,58 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,23 (bs, 2 H, OH), 2,05 (m, 1 H, CH), 1,30 (s, 9H, C(CH_{3})_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 3a-d
Se agitó una mezcla de 2 (20 mmol), trimetilortoacetato (3,6 g, 30 mmol) y una cantidad catalítica de ácido p-toluenosulfónico en CH_{2}Cl_{2} (40 ml) durante 2 horas a temperatura ambiente, y a continuación, se trató con H_{2}O (0,54 g, 30 mmmol). Después de agitar durante toda la noche a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:2) como eluente para obtener 3.
Ejemplo 8 Acetato de 2-bencil-3-hidroxipropilo (3a)
97% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,1-7,25 (m, 5 H, fenilo), 4,06 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OAc), 3,48 (m, 2 H, CH_{2}OH), 2,58 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}Ph), 2,10 (m, 1 H, CH), 2,01 (s, 3 H, COCH_{3}).
Ejemplo 9 (R)-2-Bencil-1,3-propanodiol ((R)-3a)
Este compuesto se obtuvo a partir de 2a mediante un procedimiento publicado en la literatura (Tetrahedron Letters 30, 6189-6192 (1989)).
Ejemplo 10 Acetato de 2-(3,4-dimetilbencil)-3-hidroxipropilo (3b)
90% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,88-7,06 (m, 5 H, fenilo), 4,13 (m, 2 H, CH_{2}OAc), 3,54 (m, 2 H, CH_{2}OH), 2,62 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,2-2,3 (m, 6 H, 2 x CH_{3}), 2,10 (m, 1 H, CH), 2,07 (s, 3 H, COCH_{3}).
Ejemplo 11 Acetato de 2-(4-clorobencil)-3-hidroxipropilo (3c)
86% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,25 (d, 2 H), 7,12 (d, 2 H), 4,12 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OAc), 3,53 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OH), 2,63 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}Ph), 2,10 (m, 1 H, CH), 2,06 (s, 3 H, COCH_{3}).
Ejemplo 12 Acetato de 2-(4-t-butilbencil)-3-hidroxipropilo (3d)
84% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,30 (d, 2 H), 7,11 (d, 2 H), 4,13 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OAc), 3,56 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OH), 2,62 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}Ph), 2,28 (s, 1 H, OH), 2,10 (m, 1 H, CH), 2,01 (s, 3 H, COCH_{3}), 1,30 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3})).
Procedimiento general para la síntesis de 4a-d
Se trató gota a gota una solución enfriada a 0ºC de 3 (12 mmol) y trietilamina (3,64 g, 36 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (20 ml) con metanosulfonilcloruro (2,06 g, 18 mmol). Después de agitar durante 6 horas a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se lavó con HCl 1 N, H_{2}O y una solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:3) como eluente para obtener el correspondiente mesilato como un aceite. El mesilato se disolvió en DMF (10 ml) y se trató con azida sódica (2,2 g, 34 mmol). Después de 8 h de agitación a 80ºC, la mezcla de reacción se diluyó con H_{2}O y se extrajo varias veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:15) como eluente para obtener 4.
Ejemplo 13 Acetato de 3-zido-2-bencilpropilo (4a)
92% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,15-7,35 (m, 5 H, fenilo), 4,05 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OAc), 3,34 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,68 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,22 (m, 1 H, CH), 2,08 (s, 3 H, COCH_{3}).
Ejemplo 14 Acetato de 3-azido-2-(3,4-dimetilbencil)propilo (4b)
85% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,87-7,07 (m, 3 H), 4,04 (m, 2 H, CH_{2}OAc), 3,33 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,69 (d, 1 H, CH_{2}Ph), 2,60 (d, 1 H, CH_{2}Ph), 2,1-2,3 (m, 7 H, 2 x CH_{3} y CH), 2,07 (s, 3 H, COCH_{3}).
Ejemplo 15 Acetato de 3-azido-2-(4-clorobencil)propilo (4c)
88% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,26 (d, 2 H), 7,12 (d, 2 H), 4,03 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OAc), 3,34 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,65 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,17 (m, 1 H, CH), 2,07 (s, 3 H, COCH_{3}).
Ejemplo 16 Acetato de 3-azido-2-(4-t-butilbencil)propilo (4d)
92% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,32 (d, 2 H), 7,08 (d, 2 H), 4,05 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OAc), 3,35 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,64 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,20 (m, 1 H, CH), 2,07 (s, 3 H, COCH_{3}), 1,30 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 5a-d
Se trató una solución de 4 (8 mmol) y una cantidad catalítica de K_{2}CO_{3} en MeOH (10 ml) con un par de gotas de H_{2}O. Después de agitar durante 2 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se detuvo con varias gotas de ácido acético y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:3) como eluente para obtener 5.
Ejemplo 17 3-Azido-2-bencil-1-propanol (5a)
98% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,15-7,35 (m, 5 H, fenilo), 3,65 (m, 2 H, CH_{2}OH), 3,40 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,67 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}Ph), 2,04 (m, 1 H, CH).
Ejemplo 18 3-Azido-2-(3,4-dimetilbencil)-1-propanol (5b)
92% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,88-7,08 (m, 5 H, fenilo), 3,65 (m, 2 H, CH_{2}OH), 3,42 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,68 (dd, 1 H, CH_{2}Ph), 2,60 (dd, 1 H, CH_{2}Ph), 2,2-2,3 (m, 6 H, 2 x CH_{3}), 2,03 (m, 1 H, CH).
Ejemplo 19 3-Azido-2-(4-clorobencil)-1-propanol (5c)
88% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,25 (d, 2 H), 7,10 (d, 2 H), 3,58 (m, 2 H, CH_{2}OH), 3,36 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,63 (dd, 2 H, CH_{2}Ph), 2,1 (bs, 1 H, OH), 1,98 (m, 1 H, CH).
Ejemplo 20 3-Azido-2-(4-t-butilbencil)-1-propanol (5d)
98% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,32 (d, 2 H), 7,10 (d, 2 H), 3,63 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OH), 3,39 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,62 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,02 (m, 1 H, CH), 1,78 (bs, 1 H, OH), 1,30 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 6a-d
Se trató una solución enfriada a 0ºC de 5 (1 mmol), trietilamina (4 mmol) y una cantidad catalítica de 4-dimetilaminopiridina en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) con el correspondiente cloruro de acilo (2 mmol). Después de agitar durante 2-12 horas a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se lavó con HCl 1 N, H_{2}O y una solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:10-20) como eluente para obtener 6.
Ejemplo 21 Pivalato de 3-azido-2-bencilpropilo (6a-I)
92% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,15-7,35 (m, 5 H, fenilo), 4,04 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OCO), 3,34 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,68 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,21 (m, 1 H, CH), 1,23 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 22 2-Metilpropanoato de 3-azido-2-bencilpropilo (6a-II)
93% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,15-7,35 (m, 5 H, fenilo), 4,05 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OCO), 3,34 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,68 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,58 (m, 1 H, CHMe_{2}), 2,21 (m, 1 H, CH), 1,18 (dd, 6 H, 2 x CH_{3}).
Ejemplo 23 Hexanoato de 3-azido-2-bencilpropilo (6a-III)
90% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,14-7,35 (m, 5 H, fenilo), 4,05 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OCO), 3,34 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,68 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,32 (t, 2 H, OOCCH_{2}), 2,20 (m, 1 H, CH), 1,64 (m, 2 H), 1,2-1,4 (m, 4 H), 0,88 (t distorsionado, 3 H).
\newpage
Ejemplo 24 Estearato de 3-azido-2-bencilpropilo (6a-IV)
78% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,14-7,35 (m, 5 H, fenilo), 4,05 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OCO), 3,33 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,68 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,32 (t, 2 H, OOCCH_{2}), 2,20 (m, 1 H, CH), 1,2-1,7 (m, 30 H), 0,88 (t distorsionado, 3 H).
Ejemplo 25 Benzoato de 3-azido-2-bencilpropilo (6a-V)
90% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 8,04 (m, 2 H), 7,15-7,60 (m, 8 H), 4,35 (dd, 1 H, J = 5,1 y 11,2 Hz, BzOCH_{2}), 4,26 (dd, 1 H, BzOCH_{2}), 3,43 (ddd de AB, 2 H, J = 5,61, 5,85 y 12,42 Hz, CH_{2}N_{3}), 2,78 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,35 (m, 1 H, CH).
Ejemplo 26 Pivalato de 3-azido-2-(3,4-dimetilbencil)propilo (6b-I)
94% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,86-7,07 (m, 3 H), 4,04 (m, 2 H, CH_{2}OCO), 3,36 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,70 (d, 1 H, CH_{2}Ph), 2,1-2,3 (m, 7 H, 2 x CH_{3} y CH), 1,23 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 27 Benzoato de 3-azido-2-(3,4-dimetilbencil)propilo (6b-V)
95% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 8,02 (m, 2 H), 7,57 (m, 1 H), 7,46 (m, 2 H), 6,8-7,07 (m, 3 H), 4,32 (m, 2 H, CH_{2}OCO), 3,45 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,80 (d, 1 H, CH_{2}Ph), 2,71 (d, 1 H, CH_{2}Ph), 2,2-2,4 (m, 7 H, 2 x CH_{3} y CH).
Ejemplo 28 3,4-Dimetilbenzoato de 3-azido-2-(3,4-dimetilbencil)propilo (6b-VI)
84% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,77 (m, 2 H), 7,21 (m, 1 H), 6,9-7,07 (m, 3 H), 4,30 (m, 2 H, CH_{2}OCO), 3,44 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,79 (d, 1 H, CH_{2}Ph), 2,70 (d, 1 H, CH_{2}Ph), 2,2-2,4 (m, 13 H, 4 x CH_{3} y CH).
Ejemplo 29 Pivalato de 3-azido-2-(4-clorobencil)propilo (6c-I)
86% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,27 (d, 2 H), 7,09 (d, 2 H), 4,02 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OCO), 3,33 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,66 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,18 (m, 1 H, CH), 1,23 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 30 Benzoato de 3-azido-2-(4-clorobencil)propilo (6c-V)
92% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 8,01 (m, 2 H), 7,58 (m, 1 H), 7,46 (m, 2 H), 7,28 (d, 2 H), 7,13 (d, 2 H), 4,29 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OCO), 3,43 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,75 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,33 (m, 1 H, CH).
Ejemplo 31 Pivalato de 3-azido-2-(4-t-butilbencil)propilo (6d-I)
99% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,31 (d, 2 H), 7,08 (d, 2 H), 4,04 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OCO), 3,35 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,65 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,20 (m, 1 H, CH), 1,30 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}), 1,23 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 32 Benzoato de 3-azido-2-(4-t-butilbencil)propilo (6d-V)
88% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 8,04 (m, 2 H), 7,57 (m, 1 H), 7,45 (m, 2 H), 7,32 (d, 2 H), 7,12 (d, 2 H), 4,31 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}OCO), 3,44 (m, 2 H, CH_{2}N_{3}), 2,75 (d, 2 H, CH_{2}Ph), 2,35 (m, 1 H, CH), 1,30 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 7a-d
Se hidrogenó una solución de 6 (0,5 mmol) y catalizador de Lindlar (50 mg) en EtOH (5 ml) en un balón de hidrógeno durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se trató con isotiocianato de 4-[(metoxilmetil)oxi)]-3-metoxibencilo (0,5 mmol). Después de agitar durante toda la noche a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:1) como eluente para obtener la correspondiente tiourea. La tiourea se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (2 ml) y se trató con ácido trifluoroacético (1 ml). Después de 1 hora de agitación a temperatura ambiente, la mezcla se detuvo con NaHCO_{3} sólido, se filtró, y el filtrado se concentró. El residuo se diluyó con EtOAc, se lavó con NaHCO_{3}, H_{2}O y una solución saturada de cloruro sódico, y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:1) como eluente para obtener 7.
Ejemplo 33 Pivalato de 2-bencil-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7a-I)
40% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,1-7,32 (m, 5 H, fenilo), 6,75-6,9 (m, 3 H, Ar), 6,27 (bt, 1 H, NH), 6,05 (bs, 1 H, NH), 5,63 (s, 1 H, OH), 4,40 (bd, 2 H, J = 4,38 Hz, NHCH_{2}Ar), 4,17 (dd, 1 H, J = 3,9 y 11,46 Hz, CH_{2}OCO), 3,87 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,7-3,85 (m, 2 H, 1 H de CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S), 3,24 (ddd, 1 H, J = 5,37, 8,07 y 13,89 Hz, CHCH_{2}NHC=S), 2,61 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}Ph), 2,33 (m, 1 H, CH), 1,23 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}); IR (líquido): 3362, 1715, 1278, 1157; MS m/e 445 (M^{+} +1). Anal. (C_{24}H_{32}N_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 34 Pivalato de (R)-2-bencil-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo ((R)-7a-I)
(R)-enantiómero de 7a-I; este compuesto se obtuvo a partir de (R)-3a siguiendo el mismo procedimiento para 7a-I; [\alpha]_{D} = -714 (c, 0,22, CHCl_{3}).
Ejemplo 35 Pivalato de (S)-2-Bencil-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo ((S)-7a-I)
(S)-enantiómero de 7a-I; este compuesto se obtuvo a partir de (R)-3a siguiendo el mismo procedimiento para 7a-I; [\alpha]_{D} = +695 (c, 0,08, CHCl_{3}).
Ejemplo 36 2-Metil propanoato de 2-bencil-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7a-II)
35% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,13-7,30 (m, 5 H, fenilo), 6,75-6,87 (m, 3 H, Ar), 6,34 (bt, 1 H, NH), 6,30 (bs, 1 H, NH), 5,75 (s, 1 H, OH), 4,40 (bs, 2 H, NHCH_{2}Ar), 4,17 (dd, 1 H, J = 3,9 y 10,95 Hz, CH_{2}OCO), 3,84 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,65-3,85 (m, 2 H, CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S), 3,28 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,60 (m, 3 H, CH_{2}Ph y CHMe_{2}), 2,30 (m, 1 H, CHCH_{2}Ph), 1,18 (dd, 6 H, 2 x CH_{3}); IR (líquido): 3361, 1715, 1273, 1157; MS m/e 430 (M^{+}). Anal. (C_{23}H_{30}N_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 37 Hexanoato de 2-bencil-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7a-III)
34% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,1-7,3 (m, 5 H, fenilo), 6,75-6,9 (m, 3 H, Ar), 6,23 (bt, 1 H, NH), 6,11 (bs, 1 H, NH), 5,66 (s, 1 H, OH), 4,40 (bs, 2 H, NHCH_{2}Ar), 4,15 (dd, 1 H, J = 3,9 y 11,43 Hz, CH_{2}OCO), 3,86 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,65-3,85 (m, 2 H, CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S), 3,29 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,61 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,30 (m, 3 H, CH_{2}COO y CH), 1,65 (m, 2 H), 1,2-1,4 (m, 4 H), 0,88 (t distorsionado, 3 H); IR (líquido): 3360, 1715, 1274, 1122; MS m/e 458 (M^{+}). Anal. (C_{25}H_{34}N_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 38 Estearato de 2-bencil-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7a-IV)
30% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,1-7,3 (m, 5 H, fenilo), 6,75-6,9 (m, 3 H, Ar), 6,28 (bt, 1 H, NH), 6,17 (bs, 1 H, NH), 5,69 (s, 1 H, OH), 4,39 (bs, 2 H, NHCH_{2}Ar), 4,14 (dd, 1 H, J = 3,9 y 11,67 Hz, CH_{2}OCO), 3,87 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,65-3,85 (m, 2 H, CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S), 3,30 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,60 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,30 (m, 3 H, CH_{2}COO y CH), 1,2-1,7 (m, 30 H), 0,88 (t distorsionado, 3 H); IR (líquido): 3363, 1731, 1274, 1031; MS m/e 626 (M^{+}). Anal. (C_{37}H_{58}N_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 39 Benzoato de 2-bencil-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7a-V)
50% de rendimiento, sólido blanco, pf = 90ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,98-8,02 (m, 2 H), 7,58 (m, 1 H), 7,4-7,5 (m, 2 H), 7,1-7,32 (m, 5 H, fenilo), 6,72-6,85 (m, 3 H, Ar), 6,42 (bt, 1 H, NH), 6,31 (bs, 1 H, NH), 5,73 (s, 1 H, OH), 4,34-4,42 (m, 3 H, NHCH_{2}Ar y CH_{2}OCO), 4,05 (dd, 1 H, CH_{2}OCO), 3,7-3,85 (m, 4 H, OCH_{3} y CHCH_{2}NHC=S), 3,38 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,6-2,78 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,46 (m, 1 H, CH); IR (líquido): 3360, 1714, 1274, 1121; MS m/e 464 (M^{+}). Anal. (C_{26}H_{28}N_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 40 Pivalato de 2-(3,4-dimetilbencil)-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7b-I)
40% de rendimiento, sólido blanco, pf = 47ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,93-7,05 (m, 3 H), 6,77-6,9 (m, 3 H, Ar), 6,22 (m, 1 H, NH), 5,98 (bs, 1 H, NH), 5,61 (s, 1 H, OH), 4,37 (bs, 2 H, NHCH_{2}Ar), 4,17 (ddd de AB, 1 H, CH_{2}OCO), 3,87 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,7-3,85 (m, 2 H, CH_{2}OCO y CH_{2}CH_{2}NHC=S), 3,27 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,60 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,2-2,32 (m, 7 H, 2 x CH_{3} y CH), 1,22 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}); IR (líquido): 3360, 1714, 1279, 1159; MS m/e 474 (M^{+}+2). Anal. (C_{26}H_{36}N_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 41 Benzoato de 2-(3,4-dimetilbencil)-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7b-V)
45% de rendimiento, sólido blanco, pf = 44ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 8,02 (m, 2 H), 7,59 (m, 1 H), 7,46 (m, 2 H), 6,9-7,06 (m, 3 H), 6,72-6,85 (m, 3 H, Ar), 6,33 (m, 1 H, NH), 6,13 (bs, 1 H, NH), 5,65 (s, 1 H, OH), 4,35-4,44 (m, 3 H, NHCH_{2}Ar y CH_{2}OCO), 4,05 (m, 1 H, CH_{2}OCO), 3,7-3,85 (m, 4 H, OCH_{3} y CHCH_{2}NHC=S), 3,40 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,6-2,78 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,44 (m, 1 H, CH), 2,2-2,3 (m, 6 H, 2 x CH_{3}); IR (líquido): 3360, 1713, 1274, 1121; MS m/e 492 (M^{+}). Anal. (C_{28}H_{32}N_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 42 3,4-Dimetilbenzoato de 2-(3,4-dimetilbencil)-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7b-VI)
55% de rendimiento, sólido blanco, pf = 58ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,75 (m, 2 H), 7,20 (m, 1 H), 6,9-7,06 (m, 3 H), 6,74-6,85 (m, 3 H, Ar), 6,39 (m, 1 H, NH), 6,07 (bs, 1 H, NH), 5,63 (s, 1 H, OH), 4,35-4,43 (m, 3 H, NHCH_{2}Ar y CH_{2}OCO), 4,05 (m, 1 H, CH_{2}OCO), 3,7-3,85 (m, 4 H, OCH_{3} y CHCH_{2}NHC=S), 3,37 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,6-2,74 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,41 (m, 1 H, CH), 2,2-2,35 (m, 12 H, 4 x CH_{3}); IR (líquido): 3373, 1711, 1266, 1124; MS m/e 520 (M^{+}). Anal. (C_{30}H_{36}N_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 43 Pivalato de 2-(4-clorobencil)-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7c-I)
40% de rendimiento, sólido blanco, pf = 62ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,25 (d, 2 H), 7,10 (d, 2 H), 6,77-6,90 (m, 3 H, Ar), 6,38 (t, 1 H, NH), 6,25 (bs, 1 H, NH), 5,72 (s, 1 H, OH), 4,42 (bs, 2 H, NHCH_{2}Ar), 4,16 (dd de AB, 1 H, CH_{2}OCO), 3,86 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,7-3,85 (m, 2 H, CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S), 3,19 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,59 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}Ph), 2,32 (m, 1 H, CH), 1,22 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}); IR (líquido): 3360, 1714, 1279, 1159; MS m/e 479 (M^{+}). Anal. (C_{24}H_{31}ClN_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 44 Benzoato de 2-(4-clorobencil)-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7c-V)
55% de rendimiento, sólido blanco, pf = 57ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 8,00 (m, 2 H), 7,60 (m, 1 H), 7,47 (m, 2 H), 7,27 (d, 2 H), 7,15 (d, 2 H), 6,76-6,90 (m, 3 H, Ar), 6,36 (t, 1 H, NH), 6,15 (bs, 1 H, NH), 5,61 (s, 1 H, OH), 4,40 (m, 3 H, NHCH_{2}Ar y CH_{2}OCO), 4,00 (dd de AB, 1 H, CH_{2}OCO), 3,86 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,85 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 3,31 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,67 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}Ph), 2,46 (m, 1 H, CH); IR (líquido): 3373, 1711, 1266, 1124; MS m/e 499 (M^{+}). Anal. (C_{26}H_{27}ClN_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 45 Pivalato de 2-(4-t-butilbencil)-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7d-I)
40% de rendimiento, sólido amarillo, pf = 52ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,30 (d, 2 H), 7,09 (d, 2 H), 6,75-6,90 (m, 3 H, Ar), 6,27 (t, 1 H, NH), 6,10 (bs, 1 H, NH), 5,66 (s, 1 H, OH), 4,40 (bs, 2 H, NHCH_{2}Ar), 4,15 (dd de AB, 1 H, CH_{2}OCO), 3,86 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,7-3,85 (m, 2 H, CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S), 3,27 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,58 (ddd de AB, 2 H, CH_{2}Ph), 2,30 (m, 1 H, CH), 1,29 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}), 1,22 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}); IR (líquido): 3360, 1714, 1277, 1158; MS m/e 500 (M^{+}). Anal. (C_{28}H_{40}N_{2}O_{4}S), C, H, N, S.
Ejemplo 46 Benzoato de 2-(4-t-butilbencil)-3-{[(4-hidroxi-3-metoxibencil)tioureido propilo (7d-V)
50% de rendimiento, sólido blanco, pf = 54ºC; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 8,02 (m, 2 H), 7,60 (m, 1 H), 7,46 (m, 2 H), 7,32 (d, 2 H), 7,14 (d, 2 H), 6,75-6,90 (m, 3 H, Ar), 6,28 (t, 1 H, NH), 6,06 (bs, 1 H, NH), 5,61 (s, 1 H, OH), 4,40 (m, 3 H, NHCH_{2}Ar y CH_{2}OCO), 4,08 (dd de AB, 1 H, CH_{2}OCO), 3,86 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,80 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 3,40 (m, 1 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,68 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,46 (m, 1 H, CH), 1,29 (s, 9 H, C(CH_{3})_{3}); IR (líquido): 3360, 1714, 1272, 1124; MS m/e 520 (M^{+}). Anal. (C_{30}H_{36}N_{2}O_{4}S) C, H, N, S.
Ejemplo 47 N-[2-bencil-3-(benciloxi)propil]-N’-(4-hidroxi-3-metoxibencil)tiourea (9a)
60% de rendimiento, aceite incoloro; RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,10-7,30 (m, 10 H, 2 x Ph), 6,81 (d, 1 H, Ar), 6,60 (bs, 1 H, Ar), 6,56 (d, 1 H, Ar), 6,54 (bs, 1 H, NH), 5,64 (s, 1 H, OH), 4,35 (m, 4 H, NHCH_{2}Ar y PhCH_{2}O), 3,82 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,50 (m, 2 H, BnOCH_{2}), 3,37 (bt, 2 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,64 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,20 (m, 1 H, CH); IR (líquido): 3388, 1274, 1123; MS m/e 450 (M^{+}). Anal. (C_{26}H_{30}N_{2}O_{3}S) C, H, N, S.
Ejemplo 48 N-[3-benciloxi-2-(4-clorobencil)propil]-N’-(4-hidroxi-3-metoxibencil)tiourea (9c)
Sólido blanco; pf = 37,5ºC RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,0-7,3 (m, 9 H), 6,5-6,84 (m, 3 H, Ar), 6,54 (bs, 1 H, NH), 6,30 (bs, 1 H, NH), 5,68 (s, 1 H, OH), 4,32 (m, 4 H, NHCH_{2}Ar y PhCH_{2}O), 3,82 (s, 3 H, OCH_{3}), 3,48 (m, 2 H, BnOCH_{2}), 3,34 (m, 2 H, CHCH_{2}NHC=S), 2,58 (m, 2 H, CH_{2}Ph), 2,16 (m, 1 H, CH); IR (líquido): 3340, 1273, 1153; MS m/e 484 (M^{+}). Anal. (C_{26}H_{29}ClN_{2}O_{3}S) C, H, N, S.
Ejemplo 49 3-Metoxi-4-metoximetoxi-benzonitrilo (12)
Se trató una solución de 4-hidroxi-3-metoxi-benzonitrilo (11, 1,5 g, 10 mmol) y diisopropiletilamina (2,7 ml, 15 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (50 ml) con clorometilmetiléter (0,92 ml, 12 mmol) y se agitó durante 3 horas. Después de diluirse con CH_{2}Cl_{2}, la mezcla se lavó con H_{2}O, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando EtOAc/hexano (1:2) como eluente para obtener 12 como un sólido blanco (1,54 g, 80%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,27 (s, 1H, Ar), 7,24 (s, 1H, Ar), 7,11 (s, 1 H, Ar), 5,29 (s, 2H, ArOCH_{2}), 3,99 (s, 3H, ArOCH_{3}), 3,51 (s, 3H, CH_{2}OCH_{3}).
Ejemplo 50 Éster bencílico del ácido (3-metoxi-4-metoximetoxi bencil)carbámico (13)
Se añadió gota a gota una solución de 12 (1,54 g, 8 mmol) en THF (20 ml) a una suspensión agitada de hidruro de litio y aluminio (1,2 g, 32 mmol) en THF (30 ml). Después de ponerla a reflujo durante 4 horas, la mezcla de reacción se enfrió hasta 0ºC y se detuvo con NaOH 5 N para destruir el exceso de LiAlH_{4}. Se separaron las sales de aluminio precipitadas por filtración y se evaporó el THF. El residuo se distribuyó con éter y H_{2}O. La capa de éter se lavó con una solución saturada de NaCl, se secó sobre K_{2}CO_{3}, se filtró y se concentró al vacío para producir amina. La amina se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (15 ml) y la solución se trató con NEt_{3} (1,16 ml, 8,3 mmol) y formiato de clorobencilo (1,18 ml, 8,3 mmol). Después de agitar durante 2 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se lavó con H_{2}O y una solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando EtOAc/hexano (1:2) como eluente para obtener 13 como un sólido blanco (0,795 g, 30%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,34 (m, 5H, fenilo), 7,08 (d, 1H, Ar), 6,81 (m, 2H, Ar), 5,21 (s, 2H, ArOCH_{2}), 5,14 (s, 2H, OCH_{2}Ph), 4,32 (d, 2H, NH_{2}COO), 3,85 (s, 3H, ArOCH_{3}), 3,50 (s, 3H, ArOCH_{2}OCH_{3}).
Ejemplo 51 Éster bencílico del ácido (4-hidroxi-3-metoxibencil)carbámico (14)
Se trató lentamente una solución de 13 (0,795 g, 2,4 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) con ácido trifluoroacético (2,5 ml) y se agitó durante 5 minutos a temperatura ambiente. Después de enfriarse hasta 0ºC, la mezcla de reacción se neutralizó con una solución saturada de NaHCO_{3}, se diluyó con H_{2}O y se extrajo varias veces con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O y una solución saturada de cloruro sódico se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando EtOAc:hexano (2:1) como eluente para obtener 14 como un sólido blanco (680 mg, 99%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,34 (m, 5H, fenilo), 6,83 (m, 3H, Ar), 5,14 (s, 2H, OCH_{2}Ph), 4,30 (d, 2H, NH_{2}COO), 3,86 (s, 3H, ArOCH_{3})
Ejemplo 52 Éster metílico del ácido [4-(benciloxi carbonilamino metil)-2-metoxi-fenoxi]-acético (15)
Se trató una solución de 14 (0,287 g, 1 mmol) en acetona (20 ml) con K_{2}CO_{3} (0,552 g, 4 mmol) y bromoacetato de metilo (0,14 ml, 1,5 mmol) y se puso a reflujo durante 3 horas. Después de enfriarse, la mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando EtOAc:hexano (3:2) como eluente para obtener 15 como un sólido blanco (0,323 g,
90%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,28-7,33 (m, 5H, fenilo), 6,78 (m, 3H, Ar), 5,11 (s, 2H, COCH_{2}Ph), 4,76 (s, 2H, CH_{2}Ph), 4,28 (d, 2H, CH_{2}NHCO), 3,81 (s, 3H, ArOCH_{3}), 3,76 (s, 3H, COOCH_{3}).
Ejemplo 53 Ácido [4-(benciloxicarbonilamino-metil)-2-metoxi-fenoxi]-acético (16)
Se trató una solución de 5 (0,323 g, 0,9 mmol) en THF (1 ml) una solución de NaOH al 15% (1 ml) y se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con ácido acético, se diluyó con H_{2}O y se extrajo varias veces con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna para obtener 16 como un sólido blanco (0,276 g, 89%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,72 (s, 1H, COOH), 7,17-7,33 (m, 5H, fenilo), 6,81 (s, 1H, Ar), 6,67 (2, 2H, Ar), 5,02 (s, 2H, COCH_{2}Ph), 4,16 (s, 2H, CH_{2}Ph), 4,09 (d, 2H, CH_{2}NHCO), 3,70 (s, 3H, ArOCH_{3}).
Ejemplo 54 Ácido (4-aminometil-2-metoxi-fenoxi)-acético (17)
Se trató una solución de 16 (0,276 g, 0,8 mmol) en MeOH (5 ml) con paladio sobre carbono al 10% (30 mg) y se hidrogenó en un balón de hidrógeno durante 30 minutos. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró para obtener 17 como un sólido blanco (0,093 g, 55%), el cual se utilizó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Procedimiento General para la síntesis de 19
Se trató una solución de 17 (0,5 mmol) en DMF (1 ml) con NEt_{3} (1,0 mmol), se agitó durante 30 minutos y se trató con una solución de isotiocianato 18 (0,5 mmol) en DMF. Después de agitarse durante 24 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con H_{2}O y se extrajo varias veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O y una solución saturada de cloruro sódico, se secó sobre MgSO_{4}, y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando CH_{2}Cl_{2}:MeOH:AcOH (100:10:0,5) como eluente para obtener 19.
Ejemplo 55 Éster 2-[3-(4-carboximetoxi-3-metoxi-bencil)-tioureidometil]-3-(3,4-dimetil-fenil)-propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (19a)
Rendimiento 27%, sólido blanco
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,15-7,26 (m, 4H, Ar), 6,76 (m, 3H, Ar), 6,54 (m, 1H, NH), 4,53 (s, 2H, CH_{2}COOH), 4,45 (bs, 2H, NHCH_{2}Ar), 4,15 (ddd de AB, 1H, CH_{2}OC=O), 3,82 (s, 3H, OCH_{3}), 3,6-3,85 (m, 2H, CH_{2}OC=O y CHCH_{2}NHC=S), 3,26 (m, 1H, CHCH_{2}NHC=S), 2,60 (m, 2H, CH_{2}Ph), 2,20-2,28 (m, 7H, 2 x CH_{3} y CHCH_{2}Ph), 1,23 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
\newpage
Ejemplo 56 Éster 3-(4-t-butil-fenil)-2-[3-(4-carboximetoxi-3-metoxi-bencil)-tioureidometil]-propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (19b)
Rendimiento 52%, sólido blanco
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,09-7,28 (m, 4H, Ar), 6,85 (m, 3H, Ar), 6,54 (m, 1H, NH), 4,58 (s, 2H, CH_{2}COOH), 4,46 (bs, 2H, NHCH_{2}Ar), 4,12 (ddd de AB, 1H, CH_{2}OC=O), 3,78 (s, 3H, OCH_{3}), 3,7-3,85 (m, 2H, CH_{2}OC=O y CHCH_{2}NHC=S), 3,26 (m, 1H, CHCH_{2}NHC=S), 2,58 (m, 2H, CH_{2}Ph), 2,32 (m, 1H, CHCH_{2}Ph), 1,28 (s, 9H, ArC(CH_{3})_{3}), 1,22 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 57 Éster monobencílico del ácido succínico (20)
Se trató una solución de alcohol bencílico (0,52 ml, 5 mmol) en THF (20 ml) con NaH (60%, 0,2 g, 5 mmol) y anhídrido succínico (0,502 g, 5 mmol) y se puso a reflujo durante 4 horas. Después de enfriarse hasta temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con H_{2}O y se extrajo varias veces con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O y una solución saturada de cloruro sódico, se secó sobre MgSO_{4}, y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando EtOAc:hexano (1:1) como eluente para obtener 20 como un sólido blanco (0,866 g, 57%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,38 (s, 5H, fenilo), 5,15 (s, 2H, PhCH_{2}), 2,71 (m, 4H, COCH_{2}CH_{2}CO)
Ejemplo 58 Éster 4-(benciloxicarbonilamino-metil)-2-metoxi-fenílico del éster bencílico del ácido succínico (21)
Se trató una solución de 10 (0,866 g, 2,85 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) con 14 (2,85 mmol), diciclohexilcarbodiimida (4,2 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (0,42 mmmol) sucesivamente y se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con dietil éter, el sólido precipitado se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando EtOAc:hexano (2:1) como eluente para obtener 21 como un sólido blanco (1,15 g, 85%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,30-7,36 (m, 10H, 2 x fenilo), 6,86 (m, 3H, Ar), 5,14 (d, 4H, PhCH_{2}), 4,34 (d, 2H, CH_{2}NH), 3,75 (s, 3H, ArOCH_{3}), 2,93 (t, 2H, COCH_{2}CH_{2}CO), 2,79 (t, 2H, COCH_{2}CH_{2}CO).
Ejemplo 59 Éster mono-(4-aminometil-2-metoxi-fenílico) del ácido succínico (22)
Este compuesto se preparó a partir de 11 siguiendo el procedimiento para la síntesis de 17.
Rendimiento 99%, sólido amarillo.
RMN ^{1}H (DMSO) \delta 8,24 (t, 1H, COOH), 6,75 (m, 3H, Ar), 4,17 (d, 2H, CH_{2}NH), 3,73 (s, 3H, ArOCH_{3}), 2,44 (t, 2H, COCH_{2}CH_{2}CO), 2,34 (t, 2H, COCH_{2}CH_{2}CO).
Síntesis general para la síntesis de 23
Estos compuestos se prepararon a partir de 18 y 22 siguiendo el procedimiento para la síntesis de 19.
Ejemplo 60 Éster mono-(4-{3-[3-(3,4-dimetil-fenil)-2-(2,2-dimetil-propioniloximetil)-propil]-tioureidometil}-2-metoxi-fenílico) del ácido succínico (23a)
Rendimiento 17%, sólido blanco
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,9-7,2 (m, 4H, Ar), 6,8 (m, 3H, Ar), 6,34 (m, 1H, NH), 4,56 (d, 2H, NHCH_{2}Ar), 4,04 (m, 1H, CH_{2}OC=O), 3,84 (s, 3H, OCH_{3}), 3,6-3,85 (m, 2H, CH_{2}OC=O y CHCH_{2}NHC=S), 3,27 (m, 1H, CHCH_{2}NHC=S), 2,65 (m, 2H, CH_{2}Ph), 2,50 (s, 4H, COCH_{2}CH_{2}CO), 2,18-2,29 (m, 7H, 2 x CH_{3} y CHCH_{2}Ph), 1,24 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 61 Éster mono-(4-{3-[3-(4-t-butil-fenil)-2-(2,2-dimetil-propioniloximetil)-propil]-tioureidometil}-2-metoxi-fenílico) del ácido succínico (23b)
Rendimiento 9%, sólido blanco
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,07-7,32 (m, 4H, Ar), 6,82 (m, 3H, Ar), 6,59 (m, 1H, NH), 4,87 (m, 3H, NHCH_{2}Ar y CH_{2}OC=O), 4,12 (ddd de AB, 1H, CH_{2}OC=O), 3,85 (s, 3H, OCH_{3}), 3,7-3,89 (m, 2H, CH_{2}OC=O y CHCH_{2}NHC=S), 3,41 (m, 1H, CHCH_{2}NHC=S), 2,58 (m, 2H, CH_{2}Ph), 2,39 (t, 4H, COCH_{2}CH_{2}CO), 2,32 (m, 1H, CHCH_{2}Ph), 1,28 (s, 9H, ArC(CH_{3})_{3}), 1,21 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 25
Se trató una mezcla de 24 (1,15 mmol) y éster pentafluorofenílico del ácido homovanílico (0,4 g, 1,15 mmol) en EtOAc (5 ml) con un catalizador de Lindlar y se hidrogenó en un balón de hidrógeno durante 7 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:2) como eluente para obtener 25.
Ejemplo 62 Éster 3-(3,4-dimetil-fenil)-2-{[2-(4-hidroxi-3-metoxi-fenil)-acetilamino]-metil}-propílico) del ácido 2,2-dimetil-propiónico (25a)
Rendimiento 37%, aceite
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,68-7,02 (m, 6H), 5,96 (bs, 1H, NH), 4,00 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,87 (s, 3H, OCH_{3}), 3,80 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,46 (s, 2H, COCH_{2}Ar), 3,32 (m, 1H, CH_{2}NH), 3,13 (m, 1H, CH_{2}NH), 2,50 (d, 2H, CH_{2}Ph), 2,20 (m, 7H, 2 x CH_{3} y CH), 1,20 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 63 Éster 3-(4-t-butil-fenil)-2-{[2-(4-hidroxi-3-metoxi-fenil)-acetilamino]-metil}-propílico) del ácido 2,2-dimetil-propiónico (25b)
Rendimiento 70%, aceite
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,28-7,31 (d, 2H), 7,03-7,05 (d, 2H), 6,89 (d, 1H, Ar), 6,80 (d, 1H, Ar), 6,72 (d, 1H, Ar), 5,8 (bs, 1H, NH), 4,02 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,89 (s, 3H, OCH_{3}), 3,83 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,49 (s, 2H, COCH_{2}Ar), 3,34 (m, 1H, CH_{2}NH), 3,12 (m, 1H, CH_{2}NH), 2,56 (d, 2H, CH_{2}PH), 2,13 (m, 1H, CH), 1,31 (s, 9H, C(CH_{3})_{3}), 1,22 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 26
Se trató una mezcla de 25 (0,33 mmol), KOH al 40% (0,24 ml), hidróxido de tetrabutilamonio al 40% (0,02 ml, 0,03 mmol) y 1,2-dibromoetano (0,96 ml) se calentó a 50ºC durante 12 horas. La mezcla de reacción se diluyó con CH_{2}Cl_{2}, se lavó con H_{2}O y una solución saturada de cloruro sódico, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:2) como eluente para obtener 26.
Ejemplo 64 Éster 2-({2-[4-(2-bromoetoxi)-3-metoxifenil]-acetilamino}metil)-3-(3,4-dimetilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (26a)
Rendimiento 68%
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,74-7,03 (m, 6H), 5,75 (bs, 1H, NH), 4,32 (t, 2H, OCH_{2}), 4,01 (m, 1H, CH_{2}OCO), 6,72 (d, 1H, Ar), 5,8 (bs, 1H, NH), 4,02 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,86 (s, 3H, OCH_{3}), 3,82 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,64 (t, 2H, CH_{2}Br), 3,47 (s, 2H, COCH_{2}Ar), 3,31 (m, 1H, CH_{2}NH), 3,10 (m, 1H, CH_{2}NH), 2,50 (d, 2H, CH_{2}Ph), 2,20 (m, 7H, 2 x CH_{3} y CH), 1,21 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
\newpage
Ejemplo 65 Éster 2-({2-[4-(2-bromoetoxi)-3-metoxifenil]-acetilamino}metil)-3-(4-t-butilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (26b)
Rendimiento 92%
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,26-7,30 (d, 2H), 7,01-7,04 (d, 2H), 6,74-6,89 (m, 3H, Ar), 5,8 (bs, 1H, NH), 4,3 (t, 2H, OCH_{2}), 4,01 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,86 (s, 3H, OCH_{3}), 3,82 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,64 (t, 2H, CH_{2}Br), 3,47 (s, 2H, COCH_{2}Ar), 3,31 (m, 1H, CH_{2}NH), 3,10 (m, 1H, CH_{2}NH), 2,5 (d, 2H, CH_{2}Ph), 2,12 (m, 1H, CH), 1,30 (s, 9H,
C(CH_{3})_{3}), 1,22 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 27
Se trató una solución de 26 (0,22 mmol) en DMF (2 ml) con azida sódica (0,044 g, 0,67 mmol) y se calentó a 100ºC durante 8 horas. La mezcla de reacción se diluyó con H_{2}O y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O y una solución saturada de cloruro sódico, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:1) como eluente para obtener 27.
Ejemplo 66 Éster 2-({2-[4-(2-azidoetoxi)-3-metoxifenil]-acetilamino}metil)-3-(3,4-dimetilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (27a)
Rendimiento 98%
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,74-7,03 (m, 6H), 5,74 (bs, 1H, NH), 4,19 (t, 2H, OCH_{2}), 4,01 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,85 (s, 3H, OCH_{3}), 3,82 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,62 (t, 2H, CH_{2}N_{3}), 3,48 (s, 2H, COCH_{2}Ar), 3,29 (m, 1H, CH_{2}NH), 3,10 (m, 1H, CH_{2}NH), 2,50 (d, 2H, CH_{2}Ph), 2,04-2,26 (m, 7H, 2 x CH_{3} y CH), 1,21 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 67 Éster 2-({2-[4-(2-azidoetoxi)-3-metoxifenil]-acetilamino}metil)-3-(4-t-butilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (27b)
Rendimiento 81%
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,26-7,30 (d, 2H), 7,01-7,04 (d, 2H), 6,75-6,91 (m, 3H, Ar), 5,76 (bs, 1H, NH), 4,17 (t, 2H, OCH_{2}), 4,00 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,85 (s, 3H, OCH_{3}), 3,82 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,63 (t, 2H, CH_{2}N_{3}), 3,48 (s, 2H, COCH_{2}Ar), 3,31 (m, 1H, CH_{2}NH), 3,06 (m, 1H, CH_{2}NH), 2,54 (d, 2H, CH_{2}Ph), 2,12 (m, 1H, CH), 1,29 (s, 9H, C(CH_{3})_{3}), 1,20 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 28
Se trató una solución de 27 (0,05 mmol) en MeOH (5 ml) con un 10% de paladio sobre carbono (0,02 g) y se hidrogenó en un balón de hidrógeno durante 3 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando CHCl_{3}:MeOH:NH_{4}OH (9:1:0,1) como eluente para obtener 28.
Ejemplo 68 Éster 2-({2-[4-(2-aminoetoxi)-3-metoxifenil]-acetilamino}metil)-3-(3,4-dimetilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (28a)
Rendimiento 83%, sólido blanco
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,73-7,23 (m, 6H), 5,73 (bs, 1H, NH), 4,13 (m, 3H, OCH_{2} y CH_{2}OCO), 3,85 (s, 3H, OCH_{3}), 3,82 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,5 (m, 2H, COCH_{2}Ar), 3,23 (m, 2H, CH_{2}NH y CH_{2}NH_{2}), 3,09 (m, 2H, CH_{2}NH y CH_{2}NH_{2}), 2,50 (d, 2H, CH_{2}Ph), 2,04-2,26 (m, 7H, 2 x CH_{3} y CH), 1,20 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
\newpage
Ejemplo 69 Éster 2-({2-[4-(2-aminoetoxi)-3-metoxifenil]-acetilamino}metil)-3-(4-t-butilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (28b)
Rendimiento 99%, sólido blanco
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,26-7,29 (m, 2H), 7,01-7,04 (d, 2H), 6,76-6,89 (m, 3H, Ar), 5,84 (bs, 1H, NH), 4,05 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,85 (m, 3H, OCH_{3}), 3,72 (m, 3H, CH_{2}OCO y OCH_{2}), 3,47 (s, 2H, COCH_{2}Ar), 3,30 (m, 1H, CH_{2}NH), 3,10 (m, 1H, CH_{2}NH), 2,75 (bs, 2H, CH_{2}NH_{2}), 2,52 (d, 2H, CH_{2}Ph), 2,12 (m, 1H, CH), 1,29 (s, 9H, C(CH_{3})_{3}), 1,20 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 70 Éster t-butílico del ácido (4-hidroxi-3-metoxibencil)carbámico (30)
Se trató gota a gota una mezcla de 4-hidroxi-3-metoxi bencilamina (29, 0,5 g, 2,64 mmol) y NEt_{3} (0,054 g, 5,29 mmol) en H_{2}O (10 ml) con una solución de dicarbonato di-t-butílico (1,15 g, 5,29 mmol) en dioxano (1,5 ml) durante 20 minutos. Después de agitarse durante 24 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se extrajo varias veces con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica combinada se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:1) como eluente para obtener 30 como un aceite (0,663 g, 99%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,74-7,00 (m, 3H, Ar), 5,65 (s, 1H, OH), 4,79 (bs, 1H, NH), 4,23 (d, 2H, NHCH_{2}), 3,87 (s, 3H, OCH_{3}), 1,43 (s, 9H, O(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 71 Éster t-butílico del ácido [4-(2-bromo-etoxi)-3-metoxibencil]carbámico (31)
Este compuesto se preparó a partir de 30 siguiendo el mismo procedimiento para la síntesis de 26. (EtOAc:hexano = 1:3), rendimiento 84%.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,78-6,89 (m, 3H, Ar), 4,81 (bs, 1H, NH), 4,29-4,33 (t, 2H, OCH_{2}), 4,24 (d, 2H, NHCH_{2}), 3,90 (s, 3H, OCH_{3}), 3,65 (t, 2H, CH_{2}Br), 1,46 (s, 9H, O(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 72 Éster t-butílico del ácido [4-(2-azido-etoxi)-3-metoxibencil]carbámico (32)
Este compuesto se preparó a partir de 21 siguiendo el mismo procedimiento para la síntesis de 27. (EtOAc:hexano = 1:3), rendimiento 98%, sólido amarillo.
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,78-6,87 (m, 3H, Ar), 4,83 (bs, 1H, NH), 4,24 (d, 2H, OCH_{2}), 4,15 (t, 2H, NHCH_{2}), 3,80 (s, 3H, OCH_{3}), 3,62 (t, 2H, CH_{2}N_{3}), 1,46 (s, 9H, (CH_{3})_{3}).
Ejemplo 73 Trifluoroacetato de [4-(2-azidoetoxi)-3-metoxi-bencilamina (33)
Se trató una solución de 32 (0,103 g, 0,32 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (1 ml) con ácido trifluoroacético y se calentó a 100ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se diluyó con tolueno y se concentró al vacío varias veces para obtener 33 como un sólido marrón (0,115 g, 100%).
RMN ^{1}H (DMSO-d_{6}) \delta 6,99-7,10 (m, 3H, Ar), 4,12 (t, 2H, OCH_{2}), 3,93 (s, 2H, ArCH_{2}), 3,76 (s, 3H, OCH_{3}), 3,62 (m, 2H, CH_{2}N_{3}).
Ejemplo 74 1-(2-azidoetoxi)-4-isotiocianatometil-2-metoxi benceno (34)
Se trató una solución de 33 (0,115 g, 0,33 mmol) en DMF (1,5 ml) con NEt_{3} (0,037 g, 0,36 mmol) y se agitó durante 1 hora. La mezcla se trató con 1,1-tiocarbonil di-2(1H)-piridona (0,084 g, 0,33 mmol) y se agitó durante 2,5 horas a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con H_{2}O y se extrajo varias veces con dietil éter. La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O y una solución saturada de cloruro sódico, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando EtOAc/hexano (1:2) como eluente para obtener 34 como un aceite (0,065 g, 74%).
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,75-6,91 (m, 3H, Ar), 4,65 (s, 2H, CH_{2}N=C=S), 4,20 (t, 2H, OCH_{2}), 3,90 (s, 3H, OCH_{3}), 3,62 (t, 2H, CH_{2}N_{3}).
Procedimiento general para la síntesis de 35
Se trató una solución de 6 (0,27 mmol) en EtOH (5 ml) con un catalizador de Lindlar (0,042 mg) y se hidrogenó en un balón de hidrógeno durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 ml) y se trató con 34 (0,27 mmol). Después de agitarse durante 15 horas a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice con EtOAc/hexano (1:10) como eluente para obtener 35.
Ejemplo 75 Éster 2-{3-[4-(2-azidoetoxi)-3-metoxibencil]-tioureidometil}-3-(3,4-dimetilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (35a)
Rendimiento 39%
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,81-7,04 (m, 6H), 6,25 (m, 1H, NH), 6,02 (bs, 1H, NH), 4,41 (bs, 2H, NHCH_{2}Ar), 4,14-4,17 (m, 3H, CH_{2}OCO y OCH_{2}), 3,85 (s, 3H, OCH_{3}), 3,76-3,85 (m, 2H, CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S), 3,60-3,63 (t, 2H, CH_{2}N_{3}), 3,21-3,28 (m, 1H, CHCH_{2}NHC=S), 2,47-2,66 (m, 2H, CH_{2}Ph), 2,20-2,26 (m, 7H, 2 x CH_{3} y CH), 1,22 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 76 Éster 2-{3-[4-(2-azidoetoxi)-3-metoxibencil]-tioureidometil}-3-(4-t-butilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil-propiónico (35b)
Rendimiento 60%
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,3 (d, 2H), 7,08 (d, 2H), 6,9 (m, 3H, Ar), 6,28 (m, 1H, NH), 6,10 (bs, 1H, NH), 4,43 (bs, 2H, NHCH_{2}Ar), 4,2 (m, 3H, CH_{2}OCO y OCH_{2}), 3,85 (s, 3H, OCH_{3}), 3,74-3,95 (m, 2H, CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S), 3,60-3,63 (t, 2H, CH_{2}N_{3}), 3,26 (m, 1H, CHCH_{2}NHC=S), 2,6 (m, 2H, CH_{2}Ph), 2,30 (m, 1H, CH), 1,29 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3})
Procedimiento general para la síntesis de 36
Se trató una solución de 35 (0,068 g, 0,13 mmol) en THF (2 ml) con trifenilfosfina (0,067 g, 0,25 mmol) y H_{2}O (4,5 mg, 0,25 mmol) y se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna por desorción súbita sobre gel de sílice utilizando CHCl_{3}:MeOH:NH_{4}OH (9:1:0,1) como eluente para obtener 36.
Ejemplo 77 Éster 2-{3-[4-(2-aminoetoxi)-3-metoxibencil]-tioureido metil}-3-(3,4-dimetilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil propiónico (36a)
Rendimiento 49%
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 6,77-7,04 (m, 6H), 6,47 (bs, 2H, NH), 4,43 (bs, 2H, NHCH_{2}Ar), 4,18 (ddd de AB, 1H, CH_{2}OCO), 3,98 (t, 2H, OCH_{2}), 3,81 (s, 3H, OCH_{3}), 3,71-3,77 (m, 2H, CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S) 3,06 (t, 2H, CH_{2}NH_{2}), 2,48-2,68 (m, 2H, CH_{2}Ph), 2,20 (m, 7H, 2 x CH_{3} y CH), 1,23 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
Ejemplo 78 Éster 2-{3-[4-(2-aminoetoxi)-3-metoxibencil] tioureido metil}-3-(4-t-butilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil propiónico (36b)
Rendimiento 99%
RMN ^{1}H (CDCl_{3}) \delta 7,28-7,47 (m, 2H), 7,2 (d, 2H), 6,8-7,0 (m, 3H, Ar), 6,4 (bs, 1H, NH), 4,44 (bs, 2H, NHCH_{2}Ar), 4,18 (m, 1H, CH_{2}OCO), 3,82 (t, 2H, OCH_{2}), 3,78 (s, 3H, OCH_{3}), 3,66-3,82 (m, 2H, CH_{2}OCO y CHCH_{2}NHC=S), 3,09 (t, 2H, CH_{2}NH_{2}), 2,48-2,68 (m, 2H, CH_{2}Ph), 2,20 (m, 1H, CH), 1,28 (s, 9H, C(CH_{3})_{3}), 1,22 (s, 9H, CO(CH_{3})_{3}).
\newpage
Ejemplo experimental 1
Afinidad de unión al receptor y ensayo del canal activado por CAP
La actividad similar de la CAP de los compuestos diana se midieron mediante un ensayo in vitro de unión al receptor y un ensayo de activación del único canal activado por CAP. En el ensayo de unión al receptor, los compuestos se evaluaron por su capacidad para desplazar la unión de [^{3}H]RTX del receptor. Los resultados se expresaron en términos de valores K_{i} (media \pm SEM, 3 experimentos) que representan la concentración del ligando no radioactivo que desplaza la mitad de la RTX marcada unida. En el ensayo de activación del canal único activado por CAP, el incremento de la corriente interna resultante del influjo de catión no selectivo se midió siguiendo la aplicación extracelular de los compuestos a las neuronas de los ganglios de la raíz dorsal de ratas (DRG) neonatales dorsal cultivadas. Las actividades de los compuestos se expresaron en términos de la diferencia relativa en la conductancia de iones en comparación a la CAP como control.
Métodos 1. Ensayo de unión de la [^{3}H]Resiniferatoxina
La [^{3}H]RTX (37 Ci/mmol) fue sintetizado por el Laboratorio de Síntesis y Análisis Química, NCI-FCRDC. La RTX no radioactiva y la capsacepina se adquirieron en los Laboratorios LC (Woburn, MA).
La inhibición de la unión de la [^{3}H]RTX en presencia de ligandos competitivos se determinó en preparaciones de membrana de medula espinal de rata. Las preparaciones de membrana se prepararon tal como se describe (Métodos en Neurociencia Vol 8, pp 368-380). Brevemente, los animales se sacrificaron bajo anestesia general y se extrajo toda la médula espinal de forma aséptica. Las muestras se mezclaron con la ayuda de un homogeneizador de tejido Omni 2000 en HEPES 10 mM en hielo, pH 7,4, que contenía KCl 5 mM, NaCl 5,8 mM, MgCl_{2} 2 mM, CaCl_{2} 0,75 mM, D-glucosa 12 mM, y sacarosa 137 mM ("Tampón A"). Los homogenatos se centrifugaron a 1000 x g durante 10 minutos a 4ºC; los pélets se resuspendieron en el Tampón A y se recentrifugaron a 35000 x g durante 40 minutos a 4ºC. Los pélets de la segunda centrifugación se resuspendieron en el mismo tampón en una concentración aproximada de proteína de 2 mg/ml, se congelaron rápidamente sobre hielo seco en forma de pequeñas alícuotas, y se guardaron a -70ºC hasta el momento del ensayo.
Los experimentos se diseñaron para evaluar la inhibición de la unión específica de [^{3}H]RTX a las membranas por compuestos no radioactivos. La [^{3}H]RTX (100 pM) se incubó en presencia de ligandos competitivos en un volumen total de 300:1 con 100 g de proteína de membrana durante 60 minutos a 37ºC en el Tampón A complementado con albúmina de suero bovino 0,25 mg/ml (tipo V, Sigma). La albúmina de suero bovino se incluyó para reducir la absorción no específica de RTX a las superficies. Al final de la incubación, los tubos se enfriaron en hielo y se añadieron 100 \mug de "glicoproteína \alpha_{1}-ácida" (Sigma) en un volumen 50:1 a cada tubo para reducir la unión no específica. A continuación, la [^{3}H]RTX unida y libre se separó formando pélets con las membranas mediante la centrifugación a 10000 x g durante 15 minutos a 4ºC. Las puntas de los tubos que contenían los pélets se eliminaron, y la radiactividad unida se determinó por recuento por centelleo. La unión no específica se determinó en presencia de RTX no radiactiva 1 mM. Las mediciones de la unión se determinaron por triplicado en cada experimento, y cada experimento se repitió, como mínimo, dos veces. En cada experimento, se determinaron las curvas de competición utilizando habitualmente 5-6 concentraciones de ligando competititivo.
La unión se expresó como fmol/mg de proteína. La concentración de proteína se midió utilizando el ensayo de proteína Bio-Rad según el protocolo del fabricante (Laboratorios Bio-Rad, CA). Las muestras se equilibraron en un fluido de centelleo durante 10 horas antes de iniciar el recuento por centelleo y cada muestra se contó durante 5 minutos. Los datos de la unión se analizaron ajustándose a la siguiente ecuación:
B = ((L_{H}+L_{c}\text{*}K_{d}/K_{I})^{(n-1)}/(K_{d}{}^{n}+(L_{H}+L_{C}\text{*}K_{d}/K_{I})^{n}))/(L_{H}{}^{n-1}/(K_{d}{}^{n}+L_{H}{}^{n}))
en la que L_{C} es la concentración del ligando no radioactivo y K_{I} es la concentración del ligando no radiactivo libre a la que se ocupa la mitad de los sitios de unión. B representa específicamente [^{3}H]RTX unida, B_{máx} es la densidad del receptor, L_{H} es la concentración de [^{3}H]RTX libre, K_{d} es la concentración de [^{3}H]RTX a la que la mitad de los receptores están ocupados y n es el índice de cooperatividad referido como el coeficiente de Hill.
2. Ensayo del canal único activado por capsaicina
Preparación celular. Se prepararon neuronas de DRG cultivadas tal como se ha descrito previamente (J. Neuroscience 16, 1659-1667, (1996)). Brevemente, sediseccionaron DRGs de todos los niveles de la médula espinal cervical inferior, torácica y lumbar de ratas neonatales de 1 ó 2 días. Los DRGs se recogieron en un medio de cultivo frío (4ºC) que contenía una mezcla de DMEM/F-12 (Gibco, Grand Island, NY), suero bovino fetal (10%, Gibco), piruvato sódico 1 mM, factor de crecimiento nervioso 25 ng/ml (Sigma, St. Louis, MO), y 100 unidades/ml de penicilina/estreptomicina (Sigma). Los ganglios se lavaron 3 veces con medio DMEM/F-12 y se incubaron durante 30 minutos en el medio DMEM/F-12 que contenía colagenasa 1 mg/ml (Tipo II, Worthington Biomedical, Freehold, NJ). A continuación, los ganglios se lavaron tres veces con una solución de Hank sin Mg^{2+} ni Ca^{2+} y se incubaron con agitación suave en la solución de Hank en caliente (37ºC) que contenía tripsina 2,5 mg/ml (Gibco). La solución se centrifugó a 1000 rpm durante 10 minutos, y el pélet se lavó 2 ó 3 veces con el medio de cultivo para inhibir la enzima. El pélet se suspendió en el medio de cultivo y se trituró suavemente con una pipeta Pasteur. La suspensión se colocó sobre cubreobjetos redondos de vidrio (Fisher, Pittsburg, PA) situados en platos de Petri pequeños. Los cubreobjetos de vidrio se trataron durante toda la noche con poli-L-lisina (Sigma) y se secaron antes de su utilización. Las células se incubaron a 37ºC en una mezcla gaseosa de aire 95%/CO_{2} 5%. Las células se utilizaron 2-4 días después de colocarlas en los platos.
Registro de corriente. Se estiraron pipetas de vidrio de borosilicato (Narishige Scientific Instrument Lab., Tokio) y se recubrieron con Sylgard (Dow Corning Co., Midland, MI). Las resistencias en las puntas eran de, aproximadamente, 2 y 5 Mohms para las corrientes de toda la célula y de canal único, respectivamente. Después de formarse gigasellados con las pipetas de vidrio, se utilizaron configuraciones de parcelas de entrada-salida adjuntas a la célula para estudiar las corrientes de canal único, tal como se ha descrito por Hamill y otros. Se utilizó un puente salino (1% agar en KCl 300 mM) sumergido en un baño y un electrodo de referencia de Ag/AgCl en la solución de la pipeta para minimizar los cambios en los potenciales de unión. Los potenciales de unión se anularon antes de que se formaran los gigasellados. Para el registro de toda la célula, la membrana celular en la pipeta de vidrio se rompió mediante una succión suave. Después de formar toda la célula, se anuló la transición capacitativa. Las corrientes de canal único se registraron utilizando un amplificador de Patch-Clamp (Axopatch 200A, Axon Instruments, Foster City, CA) y se filtraron a 5 KHz con un filtro Bessel de paso bajo con 8 polos. Los datos se digitalizaron a 37 KHz con un registrador de datos digitales (VR-10B, Instrutech, Great Neck, NY) y se guardaron en cintas para su posterior análisis. Para su registro gráfico, la señal de salida del amplificador se filtró a 500 Hz (Frequency Device, Havenhill, MA) y se alimentó a un registrador gráfico de disposición térmica (TA-240, Gould Instrument System, Valley View, OH). Los datos digitalizados almacenados en cintas se importaron a un ordenador personal (IBM pentium compatible) para el análisis por ordenador de las corrientes del canal único.
La probabilidad de abertura del canal (P_{o}), la amplitud y el tiempo de abertura promedio de las corrientes de canal único se obtuvieron utilizando el software pCLAMP (Versión 6.02, Axon Instruments). La P_{o} de los canales únicos se obtuvo a partir de la proporción de las áreas bajo las curvas que representan sucesos abiertos dividido por la suma de las áreas bajo las curvas que representan sucesos abiertos y cerrados. El algoritmo a media amplitud en FETCHAN (Axon Instruments) se utilizó para la amplitud umbral para detectar los sucesos abiertos. La actividad del canal (NP_{o}) se calculó como el producto del número de canales (N) en la parcela y P_{o}. NP_{o} y P_{o} se recogieron sólo de los bolsillos que contenían menos de 5 canales funcionales activador por CAP.
Soluciones. Las soluciones en baño y pipeta para los registros de canales únicos contenían (en mM) 140 Na^{+}, 2 Mg^{2+}, 144 Cl^{-}, 5 EGTA, y 10 HEPES a pH 7,2. Para la célula completa, la solución de pipeta contenía (en mM) 140 K^{+}, 2 Mg^{2+}, 144 Cl^{-}, 5 EGTA, 10 HEPES, y 4 ATP a pH 7,2. La solución de percusión de control para el registro de toda la célula contenía (en mM) 140 Na^{+}, 5 K^{+}, 2 Mg^{+}, 1 Ca^{+}, 151 Cl^{-}, y 10 HEPES. Los compuestos sintetizados se disolvieron y guardaron en etanol al 100% para obtener soluciones de stock 10 mM. Todos los otros reactivos utilizados en el cultivo celular o en los experimentos electrofisiológicos se adquirieron en Sigma. Todos los valores se expresaron como media \pm S.E.
Resultados
Los resultados se presentan en la Tabla 1 y se pueden resumir tal como se indica a continuación: (1) todos los compuestos probados, excepto 7b-Ia, mostraron una actividad agonista y una afinidad de unión del receptor más fuerte que la CAP; (2) el análogo de tiourea 7a-I (K_{i} = 65,6 nM) mostró una actividad agonista más potente que el análogo amida relativo a la CAP (K_{i} = 404 nM) descrito en el estudio anterior; (3) el grupo éster en R_{1}, que se diseñó para imitar el carbonilo C_{3} de la RTX, parece ser importante para la actividad agonista potente relativa a los análogos de éter bencílico en R_{1} [comparar 7a-V (K_{i} = 31,2 nM) y 7c-V (K_{i} = 148,7 nM) con 9a (K_{i} = 148 nM) y 9c (K_{i} = 659 nM)] que sugiere un papel importante para la parte carbonilo en la unión del hidrógeno al receptor; (4) el grupo pivaloílo en R_{1} y el grupo 4-t-butilbencilo en R_{2} mostraron que eran grupos hidrofóbicos efectivos que dan lugar a una actividad agonista óptima para los compuestos 7b-I y 7d-I (K_{i} = 19 nM y 10,8 nM, respectivamente), que son, aproximadamente,280 y 490 veces más potente que la CAP; y (5) la unión de tiourea al receptor parece ser bastante estereoespecífica ya que los dos enantiómeros óptimamente activos de 7a-I mostraron diferencias sustanciales en la afinidad de unión del receptor relativa al racemato [comparar 7a-I (K_{i} = 65,6 nM) con (R)-7a-I (K_{i} = 18,43 nM) y (S)-7a-I (K_{i} = 74 nM).
TABLA 1 Afinidades de unión y actividades de los canales
15
R_{1} R_{2} R_{3} Afinidades (nM) Activaciones^{a}
CAP 5310 (\pm370)
RTX 0,023
Amida (CH_{3})_{3}CCO H H 404 (\pm37) ++
7a-I (CH_{3})_{3}CCO H H 65,6 (\pm30,5) +++
(R)-7a-I (CH_{3})_{3}CCO H H 18,43 (\pm5,1) +++
(S)-7a-I (CH_{3})_{3}CCO H H 74 (\pm16) ++
7a-II (CH_{3})_{2}CHCO H H 132,9 (\pm75) +++
7a-III CH_{3}(CH_{2})_{4}CO H H 632,3 (\pm48) ++
7a-IV CH_{3}(CH_{2})_{16}CO H H 1873 (\pm351) +
7a-V PhCO H H 31,2 (\pm9) ++
9a PhCH_{2} H H 148 (\pm11) ++
7b-I (CH_{3})_{3}CCO 3,4-diMe H 19 (\pm4,3) ++
7b-V PhCO 3,4-diMe H 409 (\pm178) ++
7b-VI (3,4-Me)PhCO 3,4-diMe H 183,5 (\pm69) +++
7c-I (CH_{3})_{3}CCO 4-Cl H 54,4 (\pm16) ++
7c-V PhCO 4-Cl H 148,7 (\pm11) ++
9c PhCH_{2} 4-Cl H 659 (\pm286) ++
7d-I (CH_{3})_{3}CCO 4-t-Bu H 10,8 (\pm4) ++
7d-V PhCO 4-t-Bu H 60,2 (\pm10) ++
+ = CAP, ++ = 10 CAP, +++ = 100 CAP
Ejemplo experimental 2
Actividad analgésica y antitinflamatoria
La actividad analgésica de algunos de los agonistas de capsaicina más potentes, seleccionados de los ensayos de unión del receptor y canal único, se evaluó en el ensayo de torsión inducido por PBQ y los resultados se muestran en la Tabla 2. Tal como se esperaba, dos de los compuestos más potentes en base al ensayo in vitro, 7d-I y 7b-I, mostraron actividades analgésicas excelentes con ED_{50} de 0,5 y 1 \mug/kg, respectivamente. Dichos valores hacen que estos compuestos sean de 300 a 600 veces más potentes que la CAP. Ambos compuestos fueron igualmente más potentes que olvanil o DA-5018, que están disponibles actualmente en el mercado o están en pruebas clínicas como analgésicos tópicos.
En el ensayo de edema de oreja inducido por TPA, incluso los agonistas más potentes de los compuestos de la invención mostraron una actividad antiinflamatoria débil en comparación con la actividad anti-edema importante de la CAP (Tabla 2). Originalmente se especuló que los análogos de tiourea, con su mayor potencia intrínseca, podrían reducir de forma importante el edema de oreja inducido por TPA. En este aspecto, su actividad es similar a la del olvanil o DA-5018, los cuales muestran una actividad tópica débil en el ensayo de edema de oreja inducido por TPA. La escasa biodisponibilidad a través de la penetración transcutánea puede explicar en parte las propiedades antiinflamatorias tópicas débiles observadas con estos compuestos.
Las actividades in vitro y analgésicas de los compuestos de la invención se evaluaron mediante el ensayo de influjo de calcio y la prueba de torsión inducida por ácido acético, respectivamente. Tal como se muestra en la Tabla 3, todos mostraron actividades agonísticas del receptor comparables con la capsaicina. Entre ellos, los análogos de aminoetilo mostraron relativamente actividades analgésicas potentes. Especialmente, se observó que el compuesto 28a era el más potente y más potente que DA-5018 que se está utilizando en pruebas clínicas como analgésico en Corea.
Métodos 1. Ensayo antinociceptivo de torsión inducido por PBQ en ratones
Se mantuvieron ratones ICR machos (peso de 25 g) en un ambiente controlado de luz (12 horas encendida/12 horas apagada). Los animales recibieron una inyección intraperitoneal de 0,3 ml del producto químico irritante fenil-p-quinona (4,5 mg/kg disuelto en solución salina que contenía un 5% de etanol), y 6 minutos después, se contó el número de constricciones abdominales en el periodo siguiente de 6 minutos. Los animales (10 animales/grupo) recibieron los compuestos sintetizados en 0,2 ml de un vehículo de etanol/Tween-80/solución salina (10/10/80) de forma intraperitoneal 30 minutos antes de la inyección de fenil-p-quinona. Se consideró que una reducción en el números de torsiones que responden a la fenil-p-quinona en relación al número que responde en el grupo de soluciones salina de control era indicativo de un efecto antinociceptivo. Los datos se expresan como el valor ED_{50} para designar una reducción del 50% en el número de torsiones.
2. Prueba de torsión inducido por ácido acético
Los ratones (peso de 20 g) se mantuvieron en un ambiente controlado de luz (12 horas encendida/12 horas apagada) y se mantuvieron en ayuno durante toda la noche antes de la prueba. Los animales recibieron una inyección intraperitoneal de 0,2 ml de una solución de ácido acético (1,2%), y 6 minutos después, se contó el número de constricciones abdominales durante un periodo de 6 minutos. Los ratones (10 animales/grupo) se pretrataron con fármacos o un vehículo (10 ml/kg intraperitoneal) 1 hora antes de la inyección de ácido acético. Los compuestos de prueba se disolvieron en etanol/Tween-80/solución salina (10/10/80). La actividad antinociceptiva se expresó como la reducción en el número de constricciones abdominales, es decir, las diferencias entre los animales de control (ratones pretratados con el vehículo) y animales pretratados con compuestos de prueba.
3. Ensayo de edema de oreja inducido por TPA en ratones
Se trataron ratones ICR machos (25-30 g), 10 animales/grupo, de forma tópica en la oreja derecha con 25 ml de acetona o de compuesto sintetizado en acetona. Aproximadamente 17 horas después, se aplicó un tratamiento idéntico. Una hora más tarde, se aplicaron 25 \mul de TPA 0,5 nmol en acetona a la misma oreja. Cinco (5) horas después de la aplicación de TPA, se sacrificaron los animales y los trocitos de oreja (6 mm de diámetro) se pesaron ajustando lo máximo a 0,1 mg en una balanza electrónica. El aumento de peso de cada trocito de oreja es una medida de la inflamación (edema de oreja). Los efectos antiinflamatorios se expresaron como el porcentaje de inhibición de hinchamiento en el grupo tratado con el compuesto frente al grupo de control. El porcentaje de inhibición se define mediante la siguiente ecuación.
% \ Inhibición = (C-T)/C \ x \ 100
en la que C y T se refieren a los incrementos en el peso de la oreja en grupos tratados con TPA y tratados con TPA + fármaco, respectivamente.
4. Experimentos de absorción de ^{45}Ca 1) Cultivo de neuronas de DRG
Se prepararon neuronas de DRG a partir de ratas neonatales de Sprague-Dawley mediante el método descrito anteriormente (Word y otros, 1988) con modificación. En breve, los DRGs de todos los niveles espinales se diseccionaron asépticamente y se recogieron. Los ganglios se incubaron de forma secuencial durante 30 minutos a 37ºC en 200 U/ml de colagenasa y 2,5 mg/ml de tripsina. La digestión se detuvo mediante la adición de un volumen igual de medio DME/F12 complementado con un 10% de suero de caballo. A continuación, los ganglios se trituraron a través de una pipeta Pasteur pulida al fuego, se filtró a través de una membrana de nylon, y se enrollaron. Las células disociadas se colocaron sobre placas Terasaki recubiertos previamente con poli-D-ornitina 10 mg/ml a una densidad de 1500/1700 neuronas/pocillo. A continuación, las células se cultivaron durante 3-4 días en medio DME/F12 que contenían bicarbonato sódico 1,2 g/l, HEPES 15 mM, gentamicina 50 mg/l y 10% de suero de caballo, diluido 1:1 con medio idéntico acondicionado por células de glioma C6 (2 días es una monocapa confluente), en una atmósfera humidificada a 37ºC que contenía un 5% de CO_{2}. El medio se complementó con factor de crecimiento nervioso 200 ng/ml. Se añadió citosina arabinósida (100 \muM) durante los primeros dos días para matar células divisorias no
neuronales.
2) Experimento de absorción
Las placas Terasaki que contenían neuronas de DRG desarrolladas durante 3-4 días se equilibraron con 4 lavados de solución salina equilibrada de Hank sin calcio ni magnesio tamponada con HEPES (10 mM, pH 7,4). La solución de cada pocillo se extrajo de los pocillos individuales. Se añadió a cada pocillo medio (10 \mul) que contenía la concentración de prueba de compuesto más 10 \muCi/ml de Ca^{2+}. Las neuronas se incubaron a temperatura ambiente durante 10 minutos, a continuación las placas Terasaki se lavaron seis veces en solución salina equilibrada de Hank sin calcio ni magnesio tamponada con HEPES (10 mM, pH 7,4) y se secaron en un horno. A continuación, se añadió dodecil sulfato sódico al 0,3% (10 \mul) para disolver las células y extraer el ^{45}Ca^{2+}. El contenido de cada pocillo se transfirió a viales de centelleo y se contaron en 3 ml de centellador Aquasol-2. Las actividades agonísticas de los compuestos de prueba se calcularon como el porcentaje de la respuesta máxima de capsaicina en una concentración de 3 \muM y los resultados se expresan como EC_{50} \pm SEM.
Resultados
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 2 Prueba de torsión inducida por PBQ y Ensayo de edema de oreja
Prueba de torsión Potencia relativa Ensayo de edema de oreja Potencia relativa
ED_{50} (\mug/kg) ID_{50} (\mug/oreja)
Capsaicina 300 1 3 1
RTX 0,01 30000 0,002 1500
Olvanil 30 10 30 0,1
DA-5018 3 100 200 0,015
Indometacina 400 0,75
Aspirina 3500 0,086
Morfina 1000 0,3
7a-I 2 150 25 0,12
(R)-7a-I 8 38
(S)-7a-I 9 33
7a-II 15 20
7a-III 5 60
7a-IV 20 15
7a-V 20 15 20 0,15
7b-I 0,5 600 18 0,17
7b-V 7 43 50 0,06
7b-VI 2 150 50 0,06
TABLA 2 (continuación)
Prueba de torsión Potencia relativa Ensayo de edema de oreja Potencia relativa
ED_{50} (\mug/kg) ID_{50} (\mug/oreja)
7c-I 5 60 22 0,14
7c-V 12 25 17 0,18
7d-I 1 300 5 0,6
7d-V 1,5 200 30 0,1
16
2-[4-(2-aminoetoxi)-3-metoxifenil]-N-[3-(3,4-dimetilfenil)propil]acetamida
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 3 Ensayo de influjo de calcio y Ensayo de torsión inducido por ácido acético
\vskip1.000000\baselineskip
17
\vskip1.000000\baselineskip
R_{1} R_{2} R_{3} Influjo de ^{45}Ca Ensayo de torsión
(EC_{50} = \muM) (ED_{50} = \mug/kg)
I-a
19a COC(CH_{3})_{3} 3,4-(CH_{3})_{2} CH_{2}CO_{2}H 7,77\pm0,80 431
19b COC(CH_{3})_{3} 4-C(CH_{3})_{3} CH_{2}CO_{2}H 12,3\pm1,58 365
23a COC(CH_{3})_{3} 3,4-(CH_{3})_{2} COCH_{2}CH_{2}CO_{2}H 7,04\pm1,3 53,1
23b COC(CH_{3})_{3} 4-C(CH_{3})_{3} COCH_{2}CH_{2}CO_{2}H 7,00\pm1,2 60
36a COC(CH_{3})_{3} 3,4-(CH_{3})_{2} CH_{2}CH_{2}NH_{2} 0,083\pm0,012 14,0
36b COC(CH_{3})_{3} 4-C(CH_{3})_{3} CH_{2}CH_{2}NH_{2} 0,377\pm0,067 48,2
TABLA 3 (continuación)
R_{1} R_{2} R_{3} Influjo de ^{45}Ca Ensayo de torsión
(EC_{50} = \muM) (ED_{50} = \mug/kg)
I-b
28a COC(CH_{3})_{3} 3,4-(CH_{3})_{2} CH_{2}CH_{2}NH_{2} 1,57\pm0,23 0,960
28b COC(CH_{3})_{3} 4-C(CH_{3})_{3} CH_{2}CH_{2}NH_{2} 0,878\pm0,17 8,12
Olvanil 17,4
DA-5018 0,234 2,27
Capsaicina 0,435
Ejemplo experimental 3
Pungencia y taquifilaxis
La base de la química medicinal para desarrollar productos terapéuticos derivados de vaniloide ha sido la mejora de la biodisponibilidad y la reducción de las propiedades excitatorias. En relación con estos objetivos, se utilizó la prueba de protección de ojos (wiping-eye) en ratas como una prueba de pungencia in vivo para calcular los efectos productores de dolor de los compuestos. Tal como se muestra en la Tabla 4, los perfiles de pungencia de agonistas potentes seleccionados, 7a-V, 7b-I y 7d-I, no seguían la tendencia de la actividad agonística intrínseca medida mediante dos ensayos in vitro. En este ensayo, la RTX, un análogo ultrapotente de la capsaicina, sólo era 3 veces más potente que la CAP y los compuestos seleccionados de las series eran mucho menos potentes para provocar dolor agudo. Una posible explicación para la reducción de las propiedades excitatorias de estos compuestos sintéticos (7b-I y 7d-I) podría yacer en su velocidad de excitación de la neurona sensorial.
Para comprobar el desarrollo de la taquifilaxis o la taquifilaxis cruzada, un grupo de ratas tratadas con los compuestos sintéticos seleccionados se sometieron a un tratamiento posterior de 6 horas con CAP al 0,001%. La CAP, RTX y los análogos sintéticos mostraron una respuesta a la protección del ojo atenuada en la prueba equivalente a 0,001% de CAP, un resultado que es indicativo de taquifilaxis cruzada entre estas clases de compuestos. Sin embargo, debe indicarse que para los análogos de la CAP una respuesta previa a la protección del ojo es un prerrequisito para el desarrollo de una posterior desensibilización. En otras palabras, dosis no irritantes de análogos de la CAP no tuvieron efectos en la protección del movimiento de protección del ojo mediante un tratamiento de prueba con 0,001%
de CAP.
Métodos Pungencia y taquifilaxis en la prueba de protección del ojo en ratas
La potencia inductora de dolor de los compuestos se determinó en el ensayo de protección del ojo, tal como se ha descrito anteriormente, y se expresó cuantitativamente tal como se indica a continuación. Se pusieron gotas de soluciones de concentraciones incrementadas diez veces en solución salina fisiológica, que contienen, como máximo, un 5% de etanol, en el ojo de ratas que pesaban 150-180 g, y se contó el número de movimientos protectores (protección del ojo con la pata delantera). Cada concentración se aplicó a 6 ratas y se obtuvieron las curvas dosis-respuesta a partir de los valores promedio. A partir de las curvas dosis-respuesta se calcularon para cada compuesto las concentraciones que tenían una potencia de producción de dolor moderada (MPP), es decir, que inducían una respuesta igual a 10 arañazos. En base a estas concentraciones, se determinó la potencia de producción de dolor relativa (RPP) en comparación con la de la capsaicina, que se tomó como 100. Para comprobar el desarrollo de la taquifilaxis o taquifilaxis cruzada, 6 horas después de la aplicación del compuesto de prueba, se aplicó una solución prueba al 0,001% de capsaicina al mismo ojo. El % de reducción de la respuesta a una concentración de 0,001% de capsaicina en ratas tratadas con los compuestos de prueba, comparadas con las ratas tratadas con vehículo, se estimó como el índice de
desensibilización.
Resultados TABLA 4 Prueba de protección de ojo
MPP (%)^{a} RPP^{b} % de reducción
Capsaicina 0,0003 100 55 (0,1)
35 (0,01)
RTX 0,0001 300 85 (0,01)
20 (0,001)
Olvanil WP^{c} - 0,1
DA-5018 0,003 10 90 (0,1)
35 (0,01)
7a-V WP - 0 (0,1)
7b-I 0,002 15 90 (0,1)
30 (0,01)
5 (0,001)
7d-I 0,003 10 0 (0,1)
a: MPP: potencia productora de dolor moderada
b: RPP: potencia productora de dolor relativa
c: WP: débilmente pungente (menos pungente que un 0,001% de capsaicina en una concentración de 0,01%)
Para la invención descrita de esta manera será obvio que la misma se puede variar de muchas maneras. Dichas variaciones no se deben considerar como una salida del espíritu y alcance de la presente invención, y todas estas modificaciones tal como serían obvias para un técnico en la materia pretenden incluirse dentro del alcance de las siguientes reivindicaciones.

Claims (11)

1. Compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
18
en la que,
X es oxígeno o azufre;
A es -NHCH_{2}- o -CH_{2}-;
R_{1} es alquilarilo C_{1-4} o R_{4}CO-, en el que R_{4} es alquilo C_{1-18}, alquenilo C_{2-18}, o arilo C_{6-10};
R_{2} es alquilo C_{1-6}, alcóxido C_{1-6}, haloalquilo o halógeno;
R_{3} es hidrógeno, alquilo C_{1-4}, aminoalquilo, monoéster de diácido o ácido \alpha-alquílico y
el asterisco indica un átomo de carbono quiral.
2. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que
R_{1} es un grupo bencilo o el grupo de fórmula R_{4}CO-, en el que R_{4} es un grupo alquilo que tiene de 1 a 18 átomos de carbono, grupo fenilo,
R_{2} es un grupo alquilo que tiene de 1 a 4 átomos de carbono, un grupo alcóxido que tiene de 1 a 4 átomos de carbono, un grupo haloalquilo que tiene de 1 a 4 átomos de carbono o un átomo de halógeno; y
R_{3} es un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo que tiene de 1 a 4 átomos de carbono, -(CH_{2})_{n}NH_{2}-, -CO(CH_{2})_{n}
CO_{2}H o -(CH_{2})_{n}CO_{2}H (en el que n es 1 ó 2).
3. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que X es un átomo de oxígeno y A es -CH_{2}-.
4. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que X es un átomo de azufre y A es -NHCH_{2}-.
5. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que R_{3} es un átomo de hidrógeno, -CH_{2}CHNH_{2}, -COCH_{2}CH_{2}CO_{2}H o -CH_{2}COH.
6. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que R_{2} se selecciona del grupo que consiste en t-butil y un átomo de cloro.
7. Compuesto, según la reivindicación 1, en el que R_{4} se selecciona del grupo que consiste en t-butil, i-propil, pentil, heptadecil, fenil.
8. Compuesto, según la reivindicación 1, que es uno seleccionado del grupo que consiste en el éster 2-({2-[4-(2-aminoetoxi)-3-metoxifenil]acetilamino}-metil)-3-(4-tert-butilfenil)propílico del ácido 2,2-dimetil propiónico, éster 2-(4-tert-butilbencil)-3-[3-(4-hidroxi-3-metoxibencil)-tioureido]propílico del ácido 2,2-dimetil propiónico.
9. Composición farmacéutica que comprende el compuesto (I) como ingrediente activo junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.
10. Composición farmacéutica, según la reivindicación 9, que comprende el compuesto (I) como ingrediente activo en una cantidad eficaz para disminuir o aliviar dolores agudos, crónicos, inflamatorios o neuropáticos, suprimir la inflamación, o tratar la incontinencia urgente junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.
11. Utilización del compuesto (I) para la fabricación de fármacos utilizados para disminuir o aliviar dolores agudos, crónicos, inflamatorios o neuropáticos, suprimir la inflamación, o tratar la incontinencia urgente.
ES00905438T 1999-02-22 2000-02-21 Analogos de vaniloide que contienen farmacoforos de resiniferatoxina como ponentes agonistas del receptor de vaniloide y analgesicos, composiciones y utilizaciones de los mismos. Expired - Lifetime ES2253208T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR99-005751 1999-02-22
KR19990005751 1999-02-22

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2253208T3 true ES2253208T3 (es) 2006-06-01

Family

ID=36578904

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES00905438T Expired - Lifetime ES2253208T3 (es) 1999-02-22 2000-02-21 Analogos de vaniloide que contienen farmacoforos de resiniferatoxina como ponentes agonistas del receptor de vaniloide y analgesicos, composiciones y utilizaciones de los mismos.

Country Status (12)

Country Link
US (1) US6476076B1 (es)
EP (1) EP1154989B1 (es)
JP (1) JP3727851B2 (es)
CN (1) CN1210254C (es)
AT (1) ATE312812T1 (es)
AU (1) AU763824B2 (es)
CA (1) CA2363531C (es)
DE (1) DE60024785T2 (es)
ES (1) ES2253208T3 (es)
HK (1) HK1042472B (es)
MX (1) MXPA01008403A (es)
WO (1) WO2000050387A1 (es)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100348819B1 (ko) * 1999-02-22 2002-08-17 주식회사 태평양 레시니페라톡신 약리기를 함유하여 강력한 바닐로이드수용체의 효현제 및 진통제로서 사용하는 바닐로이드동족체 및 이를 함유하는 약학적 조성물
JP3501775B2 (ja) * 2000-05-31 2004-03-02 ファイザー株式会社 ヒトバニロイド受容体様タンパク質
EP1301484A2 (en) * 2000-07-20 2003-04-16 Neurogen Corporation Capsaicin receptor ligands
JP2004506714A (ja) * 2000-08-21 2004-03-04 パシフィック コーポレーション 新規チオ尿素化合物及びこれを含有する薬学的組成物
AU8022901A (en) 2000-08-21 2002-03-04 Pacific Corp Novel thiourea derivatives and the pharmaceutical compositions containing the same
US20040146590A1 (en) 2001-03-22 2004-07-29 Iadarola Michael J Molecular neurochirurgie for pain control administering locally capsaicin or resinferatoxin
WO2002076444A1 (en) * 2001-03-22 2002-10-03 The Government Of The United States, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Molecular neurochirurgerie for pain control administering locally capsaicin or resiniferatoxin
AU2002325381A1 (en) * 2001-07-31 2003-02-24 Bayer Healthcare Ag Naphthylurea and naphthylacetamide derivatives as vanilloid receptor 1 (vr1) antagonists
TWI283665B (en) 2001-09-13 2007-07-11 Smithkline Beecham Plc Novel urea compound, pharmaceutical composition containing the same and its use
US6872748B2 (en) * 2001-09-27 2005-03-29 Digital Biotech Co., Ltd. Simplified resiniferatoxin analogues as vanilloid receptor agonist showing excellent analgesic activity and the pharmaceutical compositions containing the same
WO2003029199A1 (en) * 2001-09-28 2003-04-10 Takeda Chemical Industries, Ltd. Benzene derivatives, process for preparing the same and use thereof
EP1461311A2 (en) * 2001-12-26 2004-09-29 Bayer HealthCare AG Urea derivatives as vr1-antagonists
PL371587A1 (en) * 2002-01-17 2005-06-27 Neurogen Corporation Substituted quinazolin-4-ylamine analogues as modulators of capsaicin receptors
CA2476936A1 (en) * 2002-02-20 2003-08-28 Chih-Hung Lee Fused azabicyclic compounds that inhibit vanilloid receptor subtype 1 (vr1) receptor
US7074805B2 (en) 2002-02-20 2006-07-11 Abbott Laboratories Fused azabicyclic compounds that inhibit vanilloid receptor subtype 1 (VR1) receptor
PL210288B1 (pl) 2002-05-08 2011-12-30 Bayer Healthcare Ag Pochodne hydroksytetrahydro-naftalenylomocznika, leki je zawierające i ich zastosowanie do wytwarzania leków
DE10224107A1 (de) * 2002-05-29 2003-12-11 Gruenenthal Gmbh Kombination ausgewählter Opioide mit anderen Wirkstoffen zur Therapie der Harninkontinenz
PT1569896E (pt) 2002-12-06 2007-11-15 Xention Ltd Derivados de tetra-hidronaftaleno
DK1572632T3 (da) * 2002-12-09 2008-10-27 Xention Ltd Tetrahydro-naphthalenderivater som vanilloidreceptorantagonister
EP1438942A1 (en) * 2003-01-17 2004-07-21 Schering Oy An otorhinological drug delivery device
US6933311B2 (en) * 2003-02-11 2005-08-23 Abbott Laboratories Fused azabicyclic compounds that inhibit vanilloid receptor subtype 1 (VR1) receptor
JP4621654B2 (ja) 2003-02-12 2011-01-26 バイエル・シェーリング・ファルマ・アクチェンゲゼルシャフト ヒドロキシ−テトラヒドロ−ナフタレニル尿素誘導体
US20040202735A1 (en) * 2003-04-08 2004-10-14 Moore Bob M. Method and kit for controlling bleeding
EA012599B1 (ru) 2003-04-10 2009-10-30 Ньюроджескс, Инк. Способы и композиции для введения агонистов trpv1
KR100707123B1 (ko) * 2003-07-02 2007-04-16 그뤼넨탈 게엠베하 바닐로이드 수용체의 길항제로서 강력한 진통효과를나타내는 4-(메틸설포닐아미노)페닐 동족체 및 이를함유하는 약학적 조성물
WO2005040119A1 (en) 2003-10-01 2005-05-06 Bayer Healthcare Ag Tetrahydro-naphthalene and urea derivatives
JP4935073B2 (ja) 2003-10-14 2012-05-23 味の素株式会社 エーテル誘導体
DE602004017892D1 (de) * 2003-11-08 2009-01-02 Bayer Healthcare Ag Bicyclische amid-, carbamat- oder harnstoffderivate als modulatoren des vanilloidrezeptors
US7683076B2 (en) 2003-11-08 2010-03-23 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Tetrahydro-quinolinylurea derivatives
US20060047171A1 (en) * 2003-12-22 2006-03-02 Harold Meckler Catalytic hydrogenation of nitriles to produce capsaicinoid derivatives and amine compounds, and methods for purifying and obtaining the polymorphs thereof
GB0412769D0 (en) 2004-06-08 2004-07-07 Novartis Ag Organic compounds
WO2006098554A1 (en) * 2005-03-16 2006-09-21 Amorepacific Corporation Novel compounds, isomer thereof or pharmaceutically acceptable salts thereof as vanilloid receptor antagonist; and a pharmaceutical composition containing the same
JP5159604B2 (ja) * 2005-03-19 2013-03-06 アモーレパシフィック コーポレイション バニロイド受容体拮抗薬としての新規な化合物、その異性体又はその薬剤学的に許容される塩、及びこれを含む医薬組成物
ATE464571T1 (de) * 2005-11-04 2010-04-15 Nxp Bv Verfahren und testvorrichtung zur prüfung integrierter schaltungen
ATE553093T1 (de) 2006-08-25 2012-04-15 Abbott Lab Indazolderivate zur hemmung von trpv1 und verwendungen davon
CN101563318A (zh) 2006-12-20 2009-10-21 艾博特公司 作为trpv1香草素受体拮抗剂用于治疗疼痛的n-(5,6,7,8-四氢萘-1-基)脲衍生物以及相关化合物
CA2719018A1 (en) 2008-03-20 2009-09-24 Abbott Laboratories Methods for making central nervous system agents that are trpv1 antagonists
WO2010119877A1 (ja) * 2009-04-13 2010-10-21 味の素株式会社 アミジン誘導体の製造方法
US20120027693A1 (en) 2010-07-27 2012-02-02 Bean Bruce P Methods and compositions for preventing and relieving muscle cramps and for recovery from neuromuscular irritability and fatigue following exercise
CA2819635A1 (en) 2010-12-01 2012-06-07 Spinal Modulation, Inc. Directed delivery of agents to neural anatomy
US9956166B2 (en) 2013-09-18 2018-05-01 Sorrento Therapeutics, Inc. Methods for administration and methods for treating cardiovascular diseases with resiniferatoxin
WO2018136943A1 (en) 2017-01-23 2018-07-26 Flex Pharma, Inc. Compositions and methods affecting exercise performance

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5021450A (en) * 1989-05-30 1991-06-04 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services New class of compounds having a variable spectrum of activities for capsaicin-like responses, compositions and uses thereof
US5431914A (en) * 1992-04-17 1995-07-11 Adekunle; Michael Method of treating an internal condition by external application of capsaicin without the need for systemic absorption

Also Published As

Publication number Publication date
EP1154989B1 (en) 2005-12-14
HK1042472B (zh) 2005-12-09
US6476076B1 (en) 2002-11-05
CA2363531C (en) 2007-07-31
JP2002537373A (ja) 2002-11-05
CA2363531A1 (en) 2000-08-31
ATE312812T1 (de) 2005-12-15
EP1154989A1 (en) 2001-11-21
HK1042472A1 (en) 2002-08-16
MXPA01008403A (es) 2003-06-06
AU763824B2 (en) 2003-07-31
CN1342138A (zh) 2002-03-27
DE60024785D1 (de) 2006-01-19
AU2697600A (en) 2000-09-14
WO2000050387A1 (en) 2000-08-31
DE60024785T2 (de) 2006-09-14
JP3727851B2 (ja) 2005-12-21
CN1210254C (zh) 2005-07-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2253208T3 (es) Analogos de vaniloide que contienen farmacoforos de resiniferatoxina como ponentes agonistas del receptor de vaniloide y analgesicos, composiciones y utilizaciones de los mismos.
ES2266227T3 (es) Nuevos compuestos de (tio)urea y composiciones farmaceuticas que los contienen.
ES2613355T3 (es) Nuevos derivados de ciclohexilamina con actividad agonista de beta2-adrenérgicos y antagonista de m3 muscarínico
RS49981B (sr) Upotreba derivata hidroksilamina za dobijanje farmaceutskih kompozicija korisnih za povećanje ekspresije i aktivnosti molekulskih šaperona
CN110621678A (zh) 抗肿瘤化合物
ES2444550T3 (es) Arilpropenamidas y heteroarilpropenamidas, derivados de las mismas y usos terapéuticos de las mismas
KR20010072593A (ko) 기침 치료용 조성물 및 기침 치료방법
JP2005533013A (ja) 一酸化窒素供与基および反応性酸素種捕捉基を含有するβ作用薬化合物、ならびに呼吸障害の治療における該化合物の使用
EP4054336A1 (en) Phosphonium ion channel blockers and methods for use
JP3213327B2 (ja) ベンゾチアゾロン誘導体
US20040214867A1 (en) Quaternary salts of n-substituted cyclic or acyclic amines as pharmaceuticals
PT99184A (pt) Processo de preparacao de derivados de acido tiol-carboxilico e de composicao farmaceuticas que os contem
US8933065B2 (en) N-benzylamide substituted derivatives of 2-(acylamido)acetic acid and 2-(acylamido)propionic acids: potent neurological agents
ES2315716T3 (es) Derivados de amida, carbamato o urea biciclica como moduladores del receptor vanilloide.
JP4570463B2 (ja) 慢性疼痛のための医薬
US9345791B2 (en) Ligands for targeting of S1P receptors for in vivo imaging and treatment of diseases
UEDA et al. Synthesis and Pharmacological Properties of N-[3-{3-(1-Piperidinylmethyl) phenoxy} propyl]-2-(2-hydroxyethylthio) acetamide and Related Compounds as Antiulcer Agents. I
KR100348819B1 (ko) 레시니페라톡신 약리기를 함유하여 강력한 바닐로이드수용체의 효현제 및 진통제로서 사용하는 바닐로이드동족체 및 이를 함유하는 약학적 조성물
KR100556157B1 (ko) 바닐로이드 수용체의 효현제로서 강력한 진통효과를나타내는 단순구조의 레시니페라톡신 동족체 및 이를함유하는 약학적 조성물
US6872748B2 (en) Simplified resiniferatoxin analogues as vanilloid receptor agonist showing excellent analgesic activity and the pharmaceutical compositions containing the same
ES2366396T3 (es) Inhibidores de péptido-desformilasa.
KR100306652B1 (ko) 옥사졸리딘,이를포함하는약제학적조성물및이의제조방법
CN1145608C (zh) 作为镇咳剂的季铵化合物
PT90759B (pt) Processo para a preparacao de derivados de acidos hidroxamicos carbamoilados
ES2199707T3 (es) Derivados de alquitetraminas sustituidos.