[go: up one dir, main page]

EP3897566A1 - Extrait de bois de rosier - Google Patents

Extrait de bois de rosier

Info

Publication number
EP3897566A1
EP3897566A1 EP19816335.4A EP19816335A EP3897566A1 EP 3897566 A1 EP3897566 A1 EP 3897566A1 EP 19816335 A EP19816335 A EP 19816335A EP 3897566 A1 EP3897566 A1 EP 3897566A1
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
rosewood
skin
extract
agents
aqueous
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP19816335.4A
Other languages
German (de)
English (en)
Inventor
Jocelyne Franchi
Virginie Pecher
Milène JUAN
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
LVMH Recherche GIE
Original Assignee
LVMH Recherche GIE
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by LVMH Recherche GIE filed Critical LVMH Recherche GIE
Publication of EP3897566A1 publication Critical patent/EP3897566A1/fr
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
    • A61K36/738—Rosa (rose)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/18—Antioxidants, e.g. antiradicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/001—Preparations for care of the lips
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/007—Preparations for dry skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers
    • A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/805—Corresponding aspects not provided for by any of codes A61K2800/81 - A61K2800/95

Definitions

  • the present invention relates to an aqueous extract of rosewood, in particular of the Evanrat or Rose Jardin de Granville® variety, and its uses as an agent intended to prevent and / or treat the signs of skin aging, in particular of the skin. of the face and / or body.
  • the skin is the body's first protective barrier against the environment. It is therefore subject to factors of exogenous origin (ex: UV radiation, temperature variations, atmospheric pollution, cigarette smoke ...) or endogenous (ex: hormones %) capable of inducing signs of skin aging , which will respectively be called extrinsic aging or intrinsic (or physiological) aging.
  • Extrinsic aging leads to clinical alterations such as deep wrinkles and the formation of skin which has lost its firmness, flexibility and elasticity, the alteration of the barrier function of the skin, the alteration of the innate immunity of the skin, and the appearance of skin pigment spots, otherwise known as age spots, brown spots, solar lentigo, actinic lentigo or senile lentigo, in particular on the back of the hands, on the face, cleavage, or even the skull of the men. Dry skin is also known to be skin without radiance and more sensitive to pigmentary disorders.
  • intrinsic or physiological aging notably causes a slowing down of the renewal of skin cells, keratinocytes, which essentially results in the appearance of clinical alterations such as reduction of subcutaneous adipose tissue and appearance of fine lines or wrinkles.
  • the skin's immune system defends itself and triggers the release, among others and in excess, of free radicals, neuropeptides and pro-inflammatory mediators, the cytokines, which lead to the breakdown of collagen and elastin fibers, slows the cell renewal capacity, accelerates skin aging, thus leading to a loss of tone, elasticity and firmness with an impairment of the barrier function.
  • the Applicant has highlighted the in vitro effects of an aqueous extract of rosewood, in particular rose from Jardin de Granville®, making it possible to envisage its use as an active agent for preventing and / or treating skin aging. in particular induced by oxidative stress, preventing and / or reducing an alteration of the barrier function of the skin, preventing and / or reducing the appearance of skin pigment spots, preventing and / or reducing an impairment of the innate immunity of the skin or else prevent and / or reduce the signs of skin aging linked to chronic micro-inflammation of the skin also known as 'inflammaging'.
  • a first subject of the invention relates to an aqueous extract of rosewood, preferably of summer rosewood, obtained by enzymatic extraction using a cosmetically acceptable polar solvent.
  • Another subject of the invention relates to a process for the preparation of an extract of rosewood according to the invention comprising the steps: a) addition of water to plant material having an appropriate particle size, b) addition of an enzymatic mixture containing at least one cellulase, at least one hemicellulase and at least one pectinase, and advantageously also at least one protease,
  • the invention also relates to a cosmetic composition for topical application to the skin and / or the lips, in particular the skin of the face and / or the body, comprising in a physiologically acceptable medium, at least one effective amount of at least one aqueous extract of rosewood according to the invention.
  • Another object of the invention is the non-therapeutic cosmetic use of at least one aqueous extract of rosewood according to the invention, in particular of the variety Evanrat or rose Jardin de Granville®, as an agent intended for prevent and / or reduce the signs of skin aging, in particular loss of tone, loss of elasticity and / or loss of firmness in the skin, deterioration of the barrier function, appearance of wrinkles and / or fine lines, the appearance of skin pigment spots, in particular senile lentigo (age spots) or solar lentigo, dry skin, and / or a dull and inhomogeneous complexion.
  • It also relates to a non-therapeutic cosmetic process intended to prevent and / or reduce the signs of skin aging, in particular the loss of tone, the loss of elasticity and / or the loss of firmness of the skin, the alteration of the barrier function, the appearance of wrinkles and / or fine lines, the appearance of skin pigment spots, in particular senile lentigo (age spots) or solar lentigo, dry skin, and / or a dull and inhomogeneous complexion, characterized in that it comprises the application to the skin of the face and / or of the body, of a cosmetic composition comprising an aqueous extract of rosewood as defined in the invention.
  • dull and inhomogeneous complexion is meant in particular a complexion which lacks light and radiance, an altered, blurred complexion, presenting surface and / or color irregularities, generally associated with a perception of discomfort and manifestations felt like skin imperfections or aesthetic disorders.
  • Another object of the invention is an aqueous extract of rosewood according to the invention or a composition comprising it according to the invention for use for soothing the skin and / or for use in the prevention and / or treatment of skin disorders linked to chronic micro-inflammation of the skin, in particular preventing and / or reducing the signs of skin aging induced by chronic micro-inflammation of the skin.
  • chronic micro-inflammation of the skin is understood to mean, according to the invention, invisible (silent) micro-inflammatory processes taking place locally in the skin and which, if they degenerate or are poorly resolved, become chronic.
  • Chronic micro-inflammation of the skin can in particular be linked to the accumulation of tissue damage, the failure of the immune system or even to the accumulation of senescent cells secreting pro-inflammatory cytokines. Over time, these repeated micro-inflammatory events contribute to skin aging.
  • a first object of the invention relates to an aqueous extract of rosewood, preferably of summer rosewood, obtained by enzymatic extraction using a cosmetically acceptable polar solvent.
  • aqueous extract of rosewood is advantageously obtained by means of a cosmetically acceptable polar solvent.
  • polar solvent means that the solvent has a value of Polarity index which is equal to or greater than a value of 4.
  • the polarity index is a quantity calculated on the basis of thermodynamic quantities (of solubility and change of state) which highlights the more or less polar nature of a molecule.
  • the preferred polar solvents are those consisting of a compound comprising at least one polar covalent bond of OH type.
  • a solvent or a mixture of solvents chosen is chosen from water, CrC 4 alcohols, such as ethanol, glycols, such as ethylene glycol, glycerol. , butylene glycol and propylene glycol, and mixtures thereof.
  • water is used.
  • said extract is characterized in that it comprises water in a content ranging from 94 to 96%, a dry extract content ranging from 3 to 5% and preservatives in a content ranging from 0.5 to 1% by weight relative to the total weight of the extract.
  • the extracts of the invention are extracts of rosewood. We will talk indifferently according to the invention of a rose extract, a rosewood extract, a rose extract, a rosewood extract or an extract in particular of the Evanrat variety or rose Jardin de Granville®.
  • Those skilled in the art will preferably choose selected roses whose properties are preserved by an environment and a method of organic farming.
  • an extract of rose petals of the Evanrat or rose variety 'Jardin de Granville®' will be used.
  • the 'Jardin de Granville®' rose or rose is a hybrid variety offered exclusively by "Old Roses André Eve SA S" and protected by Plant Breeders' Certificate under N ° 20110345 with the name Rosa L. and the variety the name EVANRAT.
  • This bush rose belongs to the group of modern hybrids, which, from May to October, is permanently covered with roses, thus showing an excellent uplifting character.
  • the aqueous extract of rosewood otherwise called rosewood extract is an extract of rosewood of the variety Evanrat or rose Jardin de Granville®. There are two types of rosewood depending on the time of year when they are harvested:
  • summer woods will be used. We will talk indifferently in the description of rosewood or summer rosewood.
  • the rosewoods according to the invention are obtained from freshly cut whole roses and are isolated from the rest of the plant by manual or mechanical separation.
  • rosewood is used directly for extraction.
  • the rosewoods are dried beforehand before extraction.
  • the rosewood is crushed before the extraction step.
  • Rosewood includes monosaccharide sugars (fructose, glucose), and polysaccharides in particular disaccharides, polyphenols (catechin), amino acids (mainly aspartic acid tyrosine and arginine), minerals (ash, sodium, potassium, calcium), flavonoids (mostly glycosylated) and tannins.
  • monosaccharide sugars fructtose, glucose
  • polysaccharides in particular disaccharides
  • polyphenols catechin
  • amino acids mainly aspartic acid tyrosine and arginine
  • minerals ash, sodium, potassium, calcium
  • flavonoids mostly glycosylated
  • calcium improves epidermal differentiation and strengthens the structure of the skin
  • potassium boosts skin hydration and boosts energy absorption
  • Phytosugars fructtose, glucose are intended to fill the skin cells with energy.
  • the aqueous extract of rosewood according to the invention is an extract concentrated in polar natural compounds.
  • the aqueous extract of rosewood according to the invention is distinct from rose water. This is an extract of rosewood using the extraction of natural rosewood compounds in the presence of aqueous (polar) solvents with or without the addition of a pH modifier, and an implementation in the formulation, in the form of an aqueous solution or concentrate, the solvent for the concentrate possibly being the extraction solvent and / or an additional solvent.
  • the aqueous extract of rosewood according to the invention further comprises in small proportion an extract of rose flowers representing from 0.01 to 1%, preferably from 0.05 to 0.5%, preferably 0.1 to 0.2% of the total aqueous extract of rose according to the invention.
  • the original plant material includes rosewood and rose flowers in a proportion of 0.01% flowers for 99.99% of wood to 1% flowers for 99% of wood.
  • the aqueous extract of rosewood according to the invention can be obtained according to various eco-extraction processes known to a person skilled in the art and in particular that described below.
  • rosewood of the Evanrat variety preferably Jardin de Granville rose, preferably wood
  • Jardin de Granville rose preferably wood
  • Eco extraction we mean an extraction process which reduces energy consumption, but also the use of alternative solvents and renewable plant resources, while guaranteeing a safe and high-quality product / extract.
  • Eco extraction favors 6 main principles (Farid Chemat, Dunod, 2010, Eco-Extraction of plants):
  • solid / liquid extraction is meant a type of extraction bringing a solid (bio-sourced material) into contact with a liquid (said solvent) in order to let diffuse / impregnate one or more said soluble compound (s). (s) solute (s) in the liquid. This is generally done through more or less rapid physical and physico-chemical actions.
  • the woods can be used fresh, frozen or previously dried using conventional drying tools known to those skilled in the art, such as, for example, drying in the open air, in ovens, by lyophilization or zeodratation.
  • the woods may have been dried and / or ground. According to another embodiment, the woods are used wet and then ground.
  • the woods are crushed before extraction, for example by means of a mortar, a cryogenic grinding, a mixer, a traditional grinder or a centrifuge according to the methods known to the person skilled in job.
  • the aqueous extract of rosewood according to the invention can be obtained in particular by enzymatic extraction processes.
  • the chosen enzymes hydrolyze some or all of the compounds in plant material in order to damage the cell wall and therefore favorably release the molecules contained.
  • cell wall or "plant wall” or “pectocellulosic wall” means the element of cellular structure which protects each plant cell. It consists in particular of three parts:
  • the middle coverslip rich in pectin and devoid of cellulose
  • the primary wall composed mainly of cellulose (9 to 25%), hemicellulose (25 to 58%), pectins (10 to 35%), and proteins (10%),
  • the secondary wall cellulose, hemicellulose.
  • the enzymes will be adapted to the walls to be hydrolyzed to access these said molecules.
  • Cellulase means an enzyme which can break down cellulose, a biopolymer consisting of a linear chain of D-glucose and the main constituent of the plant cell wall.
  • the end product of the breakdown of cellulose by cellulase is glucose.
  • cellulases such as beta-glucosidase, endo-cellulase, exo-cellulase, oxidative cellulase or even cellulose phosphorylase.
  • hemicellulase is intended to mean an enzyme which can break down hemicellulose, a biopolymer constituting the plant cell wall allowing in particular the bridging between the cellulose fibers, as well as with other matrix compounds.
  • hemicellulases such as arabinase, xylanase, or galactanase.
  • Pectinase is understood to mean an enzyme capable of degrading pectin, a polysaccharide present in plant cell walls. There are several types of pectinases like endopolygalacturanase, or pectin methylesterase.
  • proteas is intended to mean an enzyme capable of defeating peptide bonds. Proteases are used in the process of the invention to hydrolyze structural proteins and improve lysis of the raw material, not to produce peptides.
  • a cellulase to release the glucose and the cellulose; a hemicellulase to release the mono and oligomers of reduced sugars; a pectinase to release uronic acids; and advantageously a protease for hydrolyzing structural proteins and improving the lysis of the raw material.
  • eco-extraction is carried out using the protocol described in patent application WO2011045387 (corresponding to patent application FR2351461) in the name of the National Polytechnic Institute of Lorraine INPL. It is an alternative technology that meets regulatory and environmental constraints while remaining economically competitive.
  • This innovative process makes it possible to extract from the plant material, in a single step, three types of products, namely an oil (rich in polyphenol, sterol, vitamin E nutrients, etc.), an aqueous extract and a cake ( solid phase).
  • This process notably includes the following steps:
  • Another object of the invention therefore relates to a process for the preparation of a rosewood extract according to the invention comprising the steps:
  • Said rosewood extract according to the invention being obtained after the separation step (e).
  • this extraction process does not involve organic solvents, such as hexane, which could lead to numerous problems of safety of installations and personnel, human health and preservation of the environment.
  • This technology thus reduces emissions of volatile organic compounds (VOCs). It is thus a clean process allowing the extraction in the form of oil and / or aqueous extract of proteins, sugars and other co-products of high quality and directly usable in cosmetics.
  • the grinding step requires adjusting the duration and the speed depending on the instrument used and the dry or wet nature of the material to be ground.
  • the step of adding water requires adjusting the speed, the duration, the water / solid ratio depending in particular on the instrument to be used.
  • the enzymatic hydrolysis step requires determining the enzymes to be used and adjusting various parameters such as the enzyme / substrate ratio, the hydrolysis time, the stirring speed, the pH and the temperature.
  • the endogenous or exogenous enzyme inactivation step requires adjusting parameters such as inactivation temperature, temperature, duration, as well as pH.
  • the centrifugation step requires adjusting parameters such as speed, temperature, duration and pH.
  • the appropriate particle size of the plant material is advantageously obtained by grinding said plant material.
  • the grinding must be as fine as possible to promote the action of enzymes.
  • all of the particles should have a size close to 50 ⁇ m, preferably close to 10 ⁇ m.
  • the mass of water added to the plant material is equal to 1 to 2 times the mass of said plant material and does not exceed this amount.
  • step b) the ratio between the activity of pectinase and the activity of cellulase being at least 0.14, preferably between 0.3 and 2.5, and more preferably between 0.35 and 0.45, and the ratio between the activity of pectinase and the activity of hemicellulase being at least 7.10 3 ; preferably between 1.10 2 and 0.5, and more preferably between 1.10 2 and 2.10 2 .
  • the enzyme mixture used contains at least one cellulase, at least one hemicellulase, at least one pectinase, and advantageously also at least one protease.
  • the cellulase (s), hemicellulase (s) and pectinase (s) represent 75% of the enzymatic mixture and the protease (s) represent 25% of said enzymatic mixture.
  • the cellulases are present in a content ranging from 1 to 50%, preferably from 20 to 30% by weight of the enzymatic mixture
  • the hemicellulases are present in a content ranging from 1 to 50%, preferably from 20 to 30% by weight of the enzyme mixture
  • the pectinases are present in a content ranging from 1 to 50%, preferably from 20 to 30% by weight of the enzyme mixture.
  • the proteases are present in a content ranging from 1 to 50%, preferably from 20 to 30% by weight of the enzymatic mixture.
  • the enzyme mixture used contains 25% cellulases, 25% hemicellulases, 25% pectinases and 25% proteases.
  • the quantity used of the enzymatic mixture as defined above is between 0.25% and 10%, preferably between 1% and 6%, by volume of the water / plant material mixture.
  • the incubation according to step c) is carried out for 2 to 20 hours, preferably between 4 and 12 hours, at a temperature between 25 ° C and 75 ° C, preferably between 40 ° C and 60 ° C , and preferably around 50 ° C.
  • the hydrolysis reaction is then stopped by deactivation of the enzymes by heating preferably between 80 ° C and 105 ° C for for example 5 to 20 minutes
  • reaction medium is separated, according to step d), using all the suitable known separation techniques, such as centrifugation or decantation.
  • the mixture is prefiltered on a 0.8mm then 0.5mm sieve in order to remove the most important part of the solid phase, then a sterilizing filtration is advantageously carried out on clarifying plates with a pore size of 0.2 ⁇ m, at a pressure of 2 Bars.
  • the aqueous phase obtained after sterilizing filtration is stabilized with the preservatives (citric acid, potassium sorbate, sodium benzoate).
  • said aqueous extract of rosewood is obtained by an extraction process comprising the steps: a) addition of water to the previously ground rosewood having an appropriate particle size,
  • the aqueous extract of rosewood according to the invention is characterized in particular by the presence of amino acids (aspartic acid, tyrosine, arginine) and total sugars (glucose, fructose).
  • the aqueous extract of rosewood according to the invention is also characterized by the fact that it is not a fermented extract.
  • the aqueous extract of rosewood obtained according to the invention comprises water in a content ranging from 94 to 96%, a dry extract content ranging from 1 to 6% and preferably from 3 to 5 % and preservatives in a content ranging from 0.5 to 1% by weight relative to the total weight of the extract.
  • This rosewood extract according to the invention is called INCI name water (and) rose extract (and) citric acid (and) potassium sorbate (and) sodium benzoate.
  • the invention also relates to a cosmetic composition for topical application to the skin and / or the lips, in particular the skin of the face and / or the body, comprising in a physiologically acceptable medium, at least one effective amount of at least one aqueous extract of rosewood according to the invention.
  • topical application is meant a composition intended for application to keratin materials.
  • an oral composition is not intended for topical application to the skin.
  • the aqueous extract of rosewood is present in the cosmetic composition of the invention in an amount effective to obtain the desired effect.
  • a content ranging from 0.1% to 80%, in particular from 0.5% to 60% by weight of raw material relative to the total weight of the composition is present in a content ranging from 50% to 80%, in particular from 60% to 75% by weight of raw material relative to the total weight of the composition.
  • it is present in a content ranging from 0.1% to 20%, preferably from 0.5% to 10%, and more preferably from 1% to 5% by weight of raw material relative to the total weight of the composition.
  • the cosmetic composition of the invention may be in any dosage form suitable for topical application to keratin materials and in particular the skin, for example a serum, an oil-in-water emulsion, a water-in-oil emulsion, a multiple emulsion, a microemulsion, a lotion, suspension, aqueous gel, stick, powder.
  • the composition according to the invention can be a composition for caring for and / or making up keratin materials.
  • keratinous material is meant the skin and / or its integuments, and the lips, in particular the skin of the face and / or of the body and the lips.
  • the composition is preferably intended to be applied to the skin of the face and / or the body or on the lips and is for example in the form of a lotion, a care cream, a serum, a fluid for the face, a care gel for the face and / or the body, a lip care composition, a lip balm, a lipstick, or a gloss.
  • the cosmetic composition according to the invention is in the form of a care and / or make-up cream for the face.
  • the cosmetic composition according to the invention is in the form of an aqueous gel for the eye area.
  • the cosmetic composition according to the invention is in the form of a care and / or makeup composition for the lips.
  • the aqueous phase generally represents from 1 to 99% by weight, relative to the total weight of said composition.
  • the aqueous phase of the composition according to the invention comprises water and optionally a water-soluble solvent.
  • water-soluble solvent a compound liquid at room temperature and miscible with water (miscibility in water greater than 50% by weight at 25 ° C and atmospheric pressure).
  • C1-C5 lower mono-alcohols such as ethanol, isopropanol and mixtures thereof;
  • C2-C8 glycols such as ethylene glycol, propylene glycol, 1,3-butylene glycol, dipropylene glycol, and mixtures thereof;
  • C2-C32 polyols such as polyglycerols, polyethylene glycols, and mixtures thereof,
  • hydrophilic gelling agents antioxidants, preservatives and mixtures thereof.
  • hydrophilic gelling agents As hydrophilic gelling agents, mention may in particular be made of acrylic acid polymers such as those of INCI Carbomer name or of Carbopol® commercial reference, copolymers of acrylic and methacrylic acids, carboxyvinyl polymers, associative thickeners of acrylic type or polyurethane, polysaccharide gelling agents such as alginates, natural or modified gums such as xanthan gums, carrageenan gums, agar gums, guar gums, gellan gums, chitosans, mannans, pullulans, cellulose derivatives, gelatin, pectins, mineral gelling agents such as bentones or modified silicas, and mixtures thereof.
  • acrylic acid polymers such as those of INCI Carbomer name or of Carbopol® commercial reference, copolymers of acrylic and methacrylic acids, carboxyvinyl polymers, associative thickeners of acrylic type or polyurethane, polysaccharide gelling agents such
  • Natural or modified gum is meant an optionally modified polysaccharide which hydrates in an aqueous medium to form a viscous solution or a dispersion.
  • Natural gums include algae extracts, plant exudates and gums extracted from vegetable seeds or roots and those obtained by microbiological fermentation.
  • Modified or semi-synthetic gums include derivatives of cellulose and starch and, in general, derivatives of all natural gums.
  • the cosmetic composition of the invention comprises a gelled aqueous phase, in particular by the presence of at least one acrylic polymer, in particular a polymer of acrylic acid or copolymer of acrylic and methacrylic acid.
  • the content of hydrophilic gelling agent (s) in the cosmetic composition of the invention will generally range from 0.5 to 5%, in particular from 0.7 to 4%, preferably from 0.9 to 3% and preferably still from 1 to 2% by weight relative to the total weight of said composition.
  • the cosmetic composition of the invention may also comprise an oily phase (solid fatty substances) or an oily phase.
  • oily phase is understood to mean an oil or a mixture of oils which are miscible with one another.
  • oil is meant, within the meaning of the invention, a fatty substance, not soluble in water, liquid at 25 ° C and atmospheric pressure.
  • An oily phase according to the invention can comprise hydrocarbon oils, silicone oils, fluorinated or not, and mixtures thereof.
  • oils can be volatile or non-volatile, vegetable, mineral or synthetic.
  • hydrocarbon oil '' is meant according to the invention an oil containing mainly hydrogen and carbon atoms.
  • silicon oil is understood to mean, according to the invention, an oil comprising at least one silicon atom, and in particular at least one Si-O group.
  • fluorinated oil is meant according to the invention an oil comprising at least one fluorine atom.
  • non-volatile hydrocarbon oils mention may in particular be made of hydrocarbon oils, hydrocarbon oils of vegetable origin, synthetic ethers of C10-C40, synthetic esters of C10-C40, fatty alcohols of C12-C26, acids higher C12-C22 fats, and mixtures thereof.
  • non-volatile silicone oils mention may in particular be made of phenylated silicone oils, non-phenylated silicone oils, and mixtures thereof.
  • the oils may be present in the composition of the invention in a content ranging from 0.01 to 95% by weight relative to the total weight of the composition.
  • the fatty or oily phase can also include lipophilic gelling agents, film-forming polymers, surfactants, antioxidants and mixtures thereof.
  • the cosmetic composition is in the form of a solution, an emulsion, a serum or a gel.
  • the cosmetic composition of the invention does not include any rose extract other than rose extracts of the Evanrat or Rose Jardin de Granville® variety.
  • composition of the invention can also comprise any additive usually used in cosmetics such as UV filters, antioxidants, perfumes, cosmetic active agents, such as, for example, emollients, hydrating agents, vitamins, anti-aging agents. age, lifting agents, tensing agents, agents plumping agents, soothing agents, antipollution agents, lightening or depigmenting agents, fillers, nacres and their mixtures.
  • cosmetic active agents such as, for example, emollients, hydrating agents, vitamins, anti-aging agents. age, lifting agents, tensing agents, agents plumping agents, soothing agents, antipollution agents, lightening or depigmenting agents, fillers, nacres and their mixtures.
  • the invention relates to a cosmetic composition for topical application to the skin and / or the lips, in particular the skin of the face and / or of the body, comprising in a physiologically acceptable medium, at least one effective amount of at least one aqueous extract of rosewood according to the invention and at least one cosmetic adjuvant chosen from the group consisting of UV filters, antioxidants, perfumes, emollient agents, hydrating agents, vitamins, anti-aging agents, lifting agents, tensing agents, plumping agents, soothing agents, antipollution agents, lightening or depigmenting agents, fillers, nacres and their mixtures.
  • a cosmetic composition for topical application to the skin and / or the lips, in particular the skin of the face and / or of the body, comprising in a physiologically acceptable medium, at least one effective amount of at least one aqueous extract of rosewood according to the invention and at least one cosmetic adjuvant chosen from the group consisting of UV filters, antioxidants, perfumes, emollient agents,
  • the composition also comprises at least one cosmetic active agent chosen from an antioxidant agent, a lifting agent, a tightening agent, a plumping agent, a soothing agent, an anti-pollution agent and / or a depigmenting agent. . It can also include fillers and / or nacres, in particular white nacres, intended to mask color imperfections (dark circles) and illuminate the eyes.
  • Cosmetic and other uses also relates to the non-therapeutic cosmetic use of at least one aqueous extract of rosewood according to the invention, in particular of the variety Evanrat or rose Jardin de Granville®, as agent intended to prevent and / or reduce the signs of skin aging, in particular the loss of tone, loss of elasticity and / or loss of firmness of the skin, deterioration of the barrier function, appearance of wrinkles and / or fine lines, dry skin, and / or a dull and inhomogeneous complexion.
  • a non-therapeutic cosmetic process intended to prevent and / or reduce the signs of skin aging, in particular the loss of tone, loss of elasticity and / or loss of firmness of the skin, alteration of the barrier function, the appearance of wrinkles and / or fine lines, dry skin, and / or a dull and inhomogeneous complexion, characterized in that it comprises the application to the skin of the face and / or of the body and / or lips, of a cosmetic composition comprising an aqueous extract of rosewood as defined in the invention.
  • skin and / or lips means in particular healthy skin and / or lips, that is to say that does not present any disorders or disorders which would arise from a pathological condition (subjects' not healthy ', suffering from a pathology).
  • the composition is applied to dry, fragile, sensitive, stressed skin, and in particular tired skin which has lost its firmness, its flexibility and its elasticity.
  • the composition is applied to dry, fragile, sensitive and / or stressed lips. According to a particular mode, the composition is applied to dry and / or fragile lips. In another mode, on stressed lips. According to another mode, on sensitive lips.
  • Another subject of the invention is an aqueous extract of rosewood according to the invention or a composition comprising according to the invention for use for soothing the skin, and / or preventing and / or treating skin disorders linked to a Chronic micro-inflammation of the skin, in particular preventing and / or reducing the signs of skin aging induced by chronic micro-inflammation of the skin.
  • the aqueous extract of rosewood is used on skin presenting disorders linked to chronic micro-inflammation, in particular inflammation due to endogenous and / or exogenous stresses having inflammatory effects.
  • the present invention also relates to an aqueous extract of rosewood according to the invention or a composition comprising it for use for reducing solar lentigo.
  • the aqueous extract of rosewood is used on skins having alterations linked to the sun.
  • the composition can be applied to the skin of the face and / or of the body or to the lips. According to a particular mode, the composition is applied to the face and / or the body.
  • the present invention relates to a rosewood extract according to the invention, or a composition containing it to soothe the skin, and / or prevent and / or treat skin disorders linked to micro-inflammation. chronic skin.
  • the present invention also relates to a rosewood extract according to the invention, or a composition containing it to reduce solar lentigo.
  • the present invention relates to a method for treating keratin materials, preferably the skin and / or the lips, to soothe the skin, and / or prevent and / or treat skin disorders linked to a micro- chronic inflammation of the skin, comprising the administration to a person who needs it, of an extract of rosewood according to the invention, or a composition containing it.
  • the invention also relates to a method for treating keratinous materials, preferably the skin and / or the lips, for reducing solar lentigo, comprising the administration to a person in need thereof of a wood extract. rose according to the invention, or a composition containing it.
  • the raw materials here rosewood, possibly supplemented with rose flowers, were reduced to powder in three stages.
  • Stage 1 passage through a garden shredder in order to obtain two-centimeter sections
  • Step 2 passage through an industrial mill
  • the enzymatic extraction was carried out in a reactor with a maximum capacity of 70 l.
  • the reactor is agitated by a propeller and is thermostatically controlled by a double jacket.
  • the mixture was raised to a temperature of 85 ° C for 1 min and then stabilized at 50 ° C.
  • 0.8 Kg of a HEL1 PR1 Enzymatic cocktail comprising a mixture of cellulases, hemicellulases and pectinases at 75% and proteases at 25%, were added to the corresponding reaction mixture (5% w / w). The reaction is continued for 4 hours, the temperature is maintained at 50 ° C.
  • the mixture was brought to 85 ° C for 1 min in order to inactivate the enzymes, then brought back to 35 ° C.
  • the mixture is prefiltered on a 0.8mm then 0.5mm sieve in order to remove the most important part of the solid phase, then on a sheet.
  • Sterilizing filtration Filtration was carried out on clarifying plates (PALL corporation) with a pore size of 0.2 ⁇ m, at a pressure of 2 bars.
  • the aqueous phase obtained after sterilizing filtration is stabilized with the following preservatives:
  • an aqueous extract of rosewood is obtained at 3.7% by weight of dry matter relative to the total weight of the extract.
  • This extract is used in the following examples aiming to highlight its effects on the skin; the following examples use cultures of keratinocytes and / or melanocytes.
  • TLDA Taqman Low Density Array
  • the aqueous extract of rosewood is tested at 0.1% or 0.25% by weight of raw material (excipient water).
  • Normal human keratinocytes come from a skin sample from plastic surgery.
  • the cells are grown in a complete Epilife medium with a seeding density of 50,000 cells per well, in 12-well plates. At sub confluence, the cells are treated for 24 hours with the doses of rose extracts described above.
  • RNAs are extracted according to defined protocols.
  • RNA solutions obtained are assayed, and their quality verified, using a microplate reader, spectrostarNANO (BMG Labtech) coupled to MicrolabSTAR.
  • This device is connected to the computer controlling the Robotics platform and has specific software for analyzing the results (MARS software).
  • the technique requires a 384-well micro plate (LoBase), a positive control (RNA 250, AM7155, Thermofisher) to validate the pipetting performed by the robot as well as the values generated by the spectrostarNANO reader.
  • RT reverse transcription kit
  • Thermo Fisher The reverse transcription kit used is the High Capacity Reverse Transcription Kit (Thermo Fisher). It was used according to the protocol provided. 500 ng of total RNA are diluted in water for a final volume of 25 pL. They are then incubated for 10 minutes at 25 ° C and then 2 hours at 37 ° C in the presence of 25 ⁇ L of reaction mixture of High Capacity Reverse Transcription Kit 2X previously prepared as indicated below. The different incubations are carried out within TRobot (Biométra).
  • PCR-TagMan Low Density Array 15 pl_ of each RT is mixed with 60 mI of water then 75 mI_ of TaqMan Gene
  • Expression master mix (ThermoFisher), containing DNA polymerase, are added. After homogenization, 100 ml are deposited on the microfluidic cards containing the probes corresponding to the genes tested (table 2 below), the latter are centrifuged and then sealed. The CD Rom corresponding to the profile of the genes deposited on the plates is loaded into the SDS 2.3 software, specifying the location of each gene on the map. The control gene (or “endogeneous” gene) to be used for the normalization of the results is to be indicated before the launch of the PCR. The latter is carried out according to the protocol provided by Applied Biosystems in the ABI Prism 7900HT Sequence detection System device.
  • the qPCR steps are 2 min at 50 ° C, 10 min at 94.5 ° C then 30 s at 97 ° C and 1 min at 59.7 ° C for 40 cycles.
  • the skilled person determines which are the relevant genes to be included in the study; it is his general knowledge to determine and optimize for each gene the nucleotide sequences of the PCR primers to be used.
  • the relative quantification values (RQ) obtained correspond to the amplitude level (x times more or less than the control) of the expression compared to our control here the non-irradiated.
  • the RQ is obtained by the following calculation where the control is equal to 1:
  • ACt treated Ct target gene treated - Ct household gene treated
  • Table 3 Modulation of the expression of the genes of interest after treatment with the rosewood extract according to the invention
  • aqueous extract of rosewood stimulates genes involved in the response to oxidative stress, and thus makes it possible to limit the accumulation of free radicals.
  • the aqueous extract of rosewood is therefore advantageous for a use intended to prevent and / or reduce skin reactions in particular caused by the environment, pollution, tobacco and thus to fight against cellular aging of the skin.
  • Table 5 Modulation of the expression of the genes of interest after treatment with the rosewood extract according to the invention
  • aqueous extract of rosewood according to the invention stimulates numerous mediators of epidermal differentiation and of cellular cohesion.
  • the aqueous extract of rosewood according to the invention is therefore advantageous for promoting and / or stimulating the skin barrier function and in particular for promoting the firmness, suppleness and elasticity of the skin.
  • Example 5 Effect of the aqueous extract of rosewood on the transfer of melanin
  • the objective of this study is to study the supposed depigmenting effect of the rosewood extract according to the invention. This evaluation is carried out by measuring the rate of melanin transfer in a keratinocyte / melanocyte co-culture model. KHN / MHN co-culture model
  • KHNs are seeded at the rate of 50,000 cells / well in 1 ml of a mixture of Epilife medium and M254 (Invitrogen), 25% and 75% respectively, in 24-well culture supports.
  • the MHNs are added at the rate of 4000 cells / well in 400 ⁇ L / well in the same renewed medium.
  • the coculture is treated or not with active ingredients (the rosewood extract according to the invention or a positive control).
  • active ingredients the rosewood extract according to the invention or a positive control.
  • An untreated control and a positive control, niacinamide (Sigma) at a concentration of 10 mMoI / L are included in the study.
  • the cells are treated for 48 hours without renewal with the rosewood extract according to the invention at 0.1% or with niacinamide for the positive control condition.
  • the culture wells are filled with a 0.1% PBS / Triton solution (Sigma) for 10 minutes in order to permeabilize the membranes of the fixed cells, then rinsed twice with PBS.
  • the cells are covered with a 1% PBS / BSA solution (Sigma). After 30 minutes at room temperature, the PBS / BSA solution is removed.
  • the cells are then covered with a solution of primary anti-melanoma marker HMB45 antibody (Dako,, Mouse) diluted 1 / 150th in the 1% PBS-BSA solution, for 2 hours at room temperature. The cells are then rinsed 3 times in a PBS solution.
  • the cells are then covered with a solution of secondary anti-mouse antibodies (Alexa fluor 568, goat anti-mouse, Invitrogen) diluted 1 / 300th in a solution of PBS-BSA 1%.
  • Cell nuclei are stained with DAPI diluted 1 / 100th (Invitrogen) as well as labeling of actin with phalloidin Alexa Fluor 488 diluted 1 / 100th in the secondary antibody solution.
  • the cells are incubated for 60 minutes at room temperature, protected from light.
  • the culture wells are rinsed 3 times in PBS and then a few drops of mounting medium (DAKO) are deposited on the cells.
  • DAKO mounting medium
  • Image Analysis Images are analyzed using Cell Profiler analysis software. A program is created to quantify the number of melanosomes transferred per keratinocyte surface. The results are transferred directly to a Microsoft Excel file.
  • the positive control as well as the different doses of ingredients tested are compared to the untreated control.
  • a decrease in melanosome transfer of -30% is observed for the positive control (niacinamide) compared to the untreated control.
  • the extract of rosewood at a dose of 0.1% there is a significant decrease of -30% in the number of melanosomes transferred by keratinocyte compared to the untreated control, ie a level equivalent to the positive niacinamide control.
  • This study therefore highlights the depigmenting effect of rosewood extract.
  • the use of this extract is therefore particularly advantageous for preventing and / or treating the inhomogeneous appearance of the complexion, the appearance of skin pigment spots, or age spots, in particular on the back of the hands, on the face, the cleavage , or the skull of men.
  • Table 7 Modulation of the expression of the genes of interest after treatment with the rosewood extract according to the invention
  • aqueous extract of rosewood according to the invention inhibits numerous mediators of inflammation, in particular of cytokines, of cytokine receptors.
  • the aqueous extract of rosewood according to the invention is therefore advantageous for a use intended to prevent and / or reduce the effects of chronic micro-inflammation of the skin and thus fight against aging of the skin or inflammaging.
  • Aqueous phase Aqueous phase :
  • Demineralized water qs 100.0%
  • Carbomer (Carbopol® 981) 0.3%
  • Aqueous extract of rosewood according to the invention * 3.0%
  • composition is prepared according to the following procedure:
  • the gelling agents are dispersed in the aqueous phase (excluding aqueous extract of rosewood and sodium hydroxide) which is brought to 70 ° C;
  • the fatty phase (excluding perfume concentrate, antioxidant) is heated to 70 ° C; the emulsion is produced by introducing the fatty phase into the aqueous phase with vigorous stirring;
  • the gelling agents are neutralized by adding sodium hydroxide and the emulsion is cooled with moderate stirring with the introduction of the perfume concentrate, the antioxidant and the aqueous extract of rosewood at low temperature.
  • this composition imparts tone, elasticity and firmness, the features are enhanced, the face is reshaped.
  • composition in the form of a solid dispersion of fatty substances, of spherical or spheroid form Aqueous phase
  • Aqueous extract of rosewood according to the invention * 3.00%
  • the molten fatty phase is poured with stirring into water previously heated to the same temperature as the fatty phase;
  • the dispersion obtained is rapidly cooled by adding pre-cooled glycol water (approximately -4 ° C) to solidify the lipid spheroids;
  • agitation is stopped when the spheroids are solidified and are then recovered from the surface or filtered;
  • the aqueous phase is prepared by mixing the water, xanthan gum, the preservative, and the aqueous extract of rosewood according to the invention;
  • the spheroids are recovered on the surface and incorporated into the xanthan gel containing the aqueous extract of rosewood according to the invention.
  • this composition makes it possible to reduce the visible signs of aging, in particular by imparting tone and firmness to the skin; the oval of the face is as redrawn.
  • Aqueous extract of rosewood according to the invention * 80.00%
  • the rosewood extract according to the invention and the preservatives are mixed and homogenized at room temperature with stirring.
  • the sugars are added with stirring, then the carbomer, then the water and the EDTA with stirring.
  • the aqueous gel is then neutralized with the addition of sodium hydroxide with stirring until a homogeneous gel is obtained.
  • this aqueous gel corrects cutaneous dryness, and dull or inhomogeneous complexion, and contributes to the youth of the skin.
  • Aqueous extract of rosewood according to the invention * 3.0%
  • the ingredients of the aqueous phase (water, glycols and carbomer) are mixed at 80 ° C with stirring.
  • the preservatives are then added, then the gelling agents at 80 ° C. with stirring, then the temperature is lowered to 75 ° C.
  • the surfactants are emulsified in the aqueous phase with stirring.
  • the fillers and nacres, previously pasted and homogenized, are added at 40 ° C.
  • the cryo extract, the aqueous rosewood extract according to the invention is then added at 40 ° C., with stirring up to 30 ° C.
  • Aqueous extract of rosewood according to the invention * 3.0%
  • This composition is prepared by mixing the ingredients according to conventional methods of formulation of balms.
  • This lip balm after application on dry and / or fragile lips, allows to hydrate and smooth them.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

La présente invention concerne un extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d'été, obtenu par extraction enzymatique au moyen d'un solvant polaire cosmétiquement acceptable, son procédé de préparation et ses utilisations notamment comme agent pour prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané.

Description

EXTRAIT DE BOIS DE ROSIER
DOMAINE DE L'INVENTION
La présente invention concerne un extrait aqueux de bois de rose, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, et ses utilisations en tant qu’agent destiné à prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement cutané en particulier de la peau du visage et/ou du corps.
ETAT DE LA TECHNIQUE
La peau est la première barrière de protection de l'organisme vis-à-vis de l'environnement. Elle est donc soumise à des facteurs d’origine exogène (ex : rayonnements UV, variations de température, pollution atmosphérique, fumée de cigarette...) ou endogène (ex : hormones...) susceptibles d’induire des signes du vieillissement cutané, que l’on appellera respectivement vieillissement extrinsèque ou vieillissement intrinsèque (ou physiologique). Le vieillissement extrinsèque entraîne des altérations cliniques telles que des rides profondes et la formation d'une peau ayant perdu sa fermeté, sa souplesse et son élasticité, l’altération de la fonction barrière de la peau, l’altération de l’immunité innée de la peau, et l’apparition de tâches pigmentaires cutanées, autrement nommées tâches de vieillesse, taches brunes, lentigo solaire, lentigo actinique ou lentigo sénile, en particulier sur le dos des mains, sur le visage, le décolleté, ou encore le crâne des hommes. Les peaux sèches sont également connues pour être des peaux sans éclat et plus sensibles aux désordres pigmentaires. De façon concomitante, le vieillissement intrinsèque ou physiologique provoque notamment un ralentissement du renouvellement des cellules de la peau, les kératinocytes, ce qui se traduit essentiellement par l'apparition d'altérations cliniques telles que la réduction du tissu adipeux sous-cutané et l'apparition de fines rides ou ridules.
Les stress endogènes et/ou exogènes peuvent aussi être une cause majeure de l’inflammaging (ou inflamma’ging ou inflamm’age), issu de la contraction des termes "inflammation" et "aging". Ce process chronique et silencieux d’inflammation, décrypté par Franceschi C et al. en 2000 (Inflamm-aging. An evolutionary perspective on immunosenescence. Annals of the New York Academy of Sciences. 2000;908:244-254) est décrit comme une réaction naturelle de défense du système immunitaire face à un stress qui dégénère en un processus micro-inflammatoire chronique et silencieux, responsable notamment du vieillissement des matières kératiniques et en particulier de la peau. Avec l’âge, des micro-inflammations répétitives se propagent dans le tissu cutané et affaiblissent les systèmes de défense des cellules, ayant pour conséquence l’apparition de rides, un relâchement de la peau, une sécheresse cutanée, et/ou un teint terne et inhomogène. Ce phénomène s’accentue avec le temps et concerne toutes les peaux, en particulier les peaux sensibles, plus fragilisées par le stress et les agressions extérieures. Avec l’âge, l’épiderme, plus fin et plus fragile, est également plus perméable face à ces agresseurs qui génèrent un stress de ses cellules et déséquilibrent son état naturel d’homéostasie. Le système immunitaire de la peau se défend et déclenche la libération, entre autres et en excès, de radicaux libres, de neuropeptides et de médiateurs pro inflammatoires, les cytokines, qui aboutissent à la dégradation des fibres de collagène et d’élastine, ralentit la capacité de renouvellement cellulaire, accélère le vieillissement cutané, menant ainsi à une perte de tonicité, d’élasticité et de fermeté avec une altération de la fonction barrière. On recherche donc de nouveaux ingrédients anti-âge capables de prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané sus-décrits.
De manière inattendue, la Demanderesse a mis en évidence les effets in vitro d’un extrait aqueux de bois de rose, en particulier de rose Jardin de Granville®, permettant d’envisager son utilisation comme actif pour prévenir et/ou traiter le vieillissement cutané notamment induit par le stress oxydant, prévenir et/ou diminuer une altération de la fonction barrière de la peau, prévenir et/ou diminuer l’apparition de taches pigmentaires cutanées, prévenir et/ou diminuer une altération de l’immunité innée de la peau ou encore prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutanés liés à une micro-inflammation chronique de la peau aussi connue sous le terme‘inflammaging’. RESUME DE L’INVENTION
Un premier objet de l’invention concerne un extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, obtenu par extraction enzymatique au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable.
Un autre objet de l’invention concerne un procédé de préparation d’un extrait de bois de rose selon l’invention comprenant les étapes : a) addition d'eau à de la matière végétale présentant une taille de particule appropriée, b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase,
c) incubation sous agitation de la matière végétale et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide, et
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs.
L’invention porte encore sur une composition cosmétique pour application topique sur la peau et/ou les lèvres, en particulier la peau du visage et/ou du corps, comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins une quantité efficace d’au moins un extrait aqueux de bois de rose selon l’invention.
Un autre objet de l’invention est l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’au moins un extrait aqueux de bois de rose selon l’invention, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, en tant qu'agent destiné à prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané, en particulier la perte de tonicité, la perte d’élasticité et/ou la perte de fermeté de la peau, l’altération de la fonction barrière, l’apparition de rides et/ou ridules, l’apparition de tâches pigmentaires cutanées, en particulier le lentigo sénile (tâches de vieillesse) ou le lentigo solaire, une sécheresse cutanée, et/ou un teint terne et inhomogène.
Elle porte également sur un procédé cosmétique non thérapeutique destiné à prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané, en particulier la perte de tonicité, la perte d’élasticité et/ou la perte de fermeté de la peau, l’altération de la fonction barrière, l’apparition de rides et/ou ridules, l’apparition de tâches pigmentaires cutanées, en particulier le lentigo sénile (tâches de vieillesse) ou le lentigo solaire, une sécheresse cutanée, et/ou un teint terne et inhomogène, caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur la peau du visage et/ou du corps, d'une composition cosmétique comprenant un extrait aqueux de bois de rose telle que définie dans l’invention.
Par « teint terne et inhomogène », on entend notamment un teint qui manque de lumière et d’éclat, un teint altéré, brouillé, présentant des irrégularités de surface et/ou de couleur, généralement associé à une perception d’inconfort et des manifestations ressenties comme des imperfections cutanées ou désordres esthétiques.
Un autre objet de l’invention est un extrait aqueux de bois de rose selon l’invention ou une composition en comprenant selon l’invention pour une utilisation pour apaiser la peau et/ou pour une utilisation dans la prévention et/ou le traitement de désordres cutanés liés à une micro-inflammation chronique de la peau, en particulier prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané induits par une micro-inflammation chronique de la peau.
Par‘micro-inflammation chronique de la peau’, on entend selon l’invention des processus micro-inflammatoires invisibles (silencieux) se mettant en place de façon localisée au niveau de la peau et qui, s’ils dégénèrent ou sont mal résolus, deviennent chroniques. La micro-inflammation chronique de la peau peut notamment être liée à l’accumulation de dommages tissulaires, la défaillance du système immunitaire ou bien encore à l’accumulation de cellules sénescentes et sécrétant des cytokines pro-inflammatoires. Avec le temps, ces événements micro-inflammatoires à répétition contribuent au vieillissement cutané.
DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION
Extrait de bois de rose et procédé de préparation
Un premier objet de l’invention concerne un extrait aqueux de bois de rose de préférence de bois de rose d’été, obtenu par extraction enzymatique au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable.
On parlera indifféremment d’extrait aqueux ou d’extrait polaire ou d’extrait hydrophile de rose ou d’éco-extrait dans la description. L’extrait aqueux de bois de rose est obtenu avantageusement au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable. Par « extrait de bois de rose » ou « extrait aqueux de bois de rose » selon l’invention, on comprend notamment que les composés polaires (hydrophiles) des bois de rose se sont solubilisés et/ou ont été extraits dans un solvant polaire. Avantageusement, cet extrait de bois de rose est obtenu par un procédé d’éco-extraction. On parlera ainsi d’éco-extrait de bois de rose. L’expression « solvant polaire » signifie que le solvant a une valeur d’indice de Polarité qui est égale ou supérieure à une valeur de 4. L’indice de polarité est une grandeur calculée sur la base de grandeurs thermodynamiques (de solubilité et de changement d’état) qui met en évidence le caractère plus ou moins polaire d’une molécule. On se reportera, pour les indices de polarité des solvants, à l'article de L.R. SNYDER : Classification of the solvent properties of common liquids ; Journal of Chromatography, 92 (1974), 223-230. Les solvants polaires préférés sont ceux constitués d’un composé comprenant au moins une liaison covalente polaire de type O-H.
A titre de solvant polaire cosmétiquement acceptable, on choisit un solvant ou un mélange de solvants choisi(s) parmi l’eau, les alcools en CrC4, tel que l’éthanol, les glycols, tels que l’éthylène glycol, le glycérol, le butylèneglycol et le propylèneglycol, et leurs mélanges. De préférence, on utilise l’eau.
Selon un mode particulier, ledit extrait est caractérisé en ce qu’il comprend de l’eau en une teneur allant de 94 à 96%, une teneur en extrait sec allant de 3 à 5% et des conservateurs en une teneur allant de 0.5 à 1% en poids par rapport au poids total de l’extrait.
Matériel végétal
Les extraits de l’invention sont des extraits de bois de rose. On parlera indifféremment selon l’invention d’un extrait de rose, d’un extrait de bois de rose, d’un extrait de rosier, d’un extrait de bois de rosier ou d’un extrait en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®.
L’homme du métier choisira de préférence des roses sélectionnées dont les propriétés sont préservées par un environnement et un mode d’agriculture biologique. Selon un mode particulier et préféré, on utilisera un extrait de pétales de rose de la variété Evanrat ou rose‘Jardin de Granville®’. Le rosier ou rose‘Jardin de Granville®’ est une variété hybride proposée exclusivement par « Roses anciennes André Eve S. A. S » et protégée par Certificat d’Obtention Végétale sous le N°20110345 avec pour espèce la dénomination Rosa L. et pour la variété la dénomination EVANRAT. Ce rosier buisson appartient au groupe des hybrides modernes, qui, de mai à octobre, se couvre de roses en permanence, montrant ainsi un excellent caractère remontant. Ainsi, selon un mode particulier et préféré de l’invention, l’extrait aqueux de bois de rose autrement nommé extrait de bois de rosier est un extrait de bois de rose de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®. On distingue deux types de bois de rose selon le moment de l’année où ils sont récoltés :
- Les bois d’hiver, généralement récoltés entre les mois de novembre et d’avril
- Les bois d’été, généralement récoltés entre les mois de mai et d’octobre.
Selon un mode particulier et préféré, on utilisera des bois d’été. On parlera indifféremment dans la description de bois de rose ou bois de rose d’été. Les bois de rose selon l’invention sont obtenus à partir de roses entières fraîchement coupées et sont isolés du reste de la plante par séparation manuelle ou mécanique.
Dans un mode de réalisation particulier, les bois de rose sont directement utilisés en vue de l’extraction.
Dans un autre mode de réalisation, les bois de rose sont préalablement séchés avant extraction.
Selon un mode particulier et préféré, le bois de rose est broyé préalablement à l’étape d’extraction.
Les bois de rose comprennent des sucres monosaccharides (fructose, glucose), et polysaccharides en particulier disaccharides, des polyphénols (catéchine), des acides aminés (majoritairement acide aspartique tyrosine et arginine), des minéraux (cendres, sodium, potassium, calcium), des flavonoïdes (pour la plupart glycosylés) et des tanins.
En particulier, le calcium améliore la différenciation épidermique et renforce la structure de la peau, tandis que le potassium amplifie l’hydratation cutanée et booste l’assimilation de l’énergie. Les phytosucres (fructose, glucose) sont destinés à gorger les cellules cutanées d’énergie.
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est un extrait concentré en composés naturels polaires. L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est distinct d’une eau de rose. Il s’agit ici d’un extrait de bois de rose mettant en œuvre l’extraction de composés naturels de bois de rose en présence de solvants aqueux (polaire) avec ou sans ajout de modificateur de pH, et une mise en œuvre, dans la formulation, sous la forme d’une solution ou concentré aqueux, le solvant du concentré pouvant être le solvant d’extraction et/ou un solvant additionnel. Selon un mode particulier, l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention comprend en outre en faible proportion un extrait de fleurs de rose représentant de 0,01 à 1%, de préférence de 0,05 à 0,5%, de préférence 0,1 à 0,2% de l’extrait aqueux total de rose selon l’invention. Dans ce mode de réalisation, le matériel végétal d’origine comprend des bois de rose et des fleurs de rose dans une proportion 0,01 % fleurs pour 99,99% de bois à 1 % fleurs pour 99% de bois.
Procédé d’extraction
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention peut être obtenu selon différents procédés d’éco-extraction connus de l’homme du métier et notamment celui décrit ci- après.
Selon un mode particulier et préféré, on utilisera comme matériel végétal dans les procédés d’extraction adaptés à l’invention décrits ci-après, des bois de rose de la variété Evanrat, de préférence la rose Jardin de Granville®, de préférence des bois de rose préalablement séchés.
Par « éco-extraction » on entend un procédé d’extraction permettant de réduire la consommation énergétique, mais aussi l’utilisation de solvants alternatifs et des ressources végétales renouvelables, tout en garantissant un produit/extrait sûr et de qualité. L’Eco extraction privilégie 6 grands principes (Farid Chemat, Dunod, 2010, Eco- Extraction du végétal) :
- Favoriser l’innovation par la sélection variétale et l’utilisation de ressources végétales renouvelables,
- Privilégier les solvants alternatifs dits solvants verts et principalement ceux issus des agro-ressources,
- Réduire la consommation énergétique par l’assistance des technologies innovantes et favoriser la récupération d’énergie,
- Favoriser la création de coproduits au lieu de déchets pour intégrer la voie de la bio ou agro-raffinerie,
- Réduire les opérations unitaires grâce à l’innovation technologique et favoriser les procédés surs, robustes et contrôlés, et
- Privilégier un produit non dénaturé, biodégradable, sans contaminants et surtout porteur de valeurs « extrait ». On utilisera donc avantageusement comme solvant vert polaire : l’eau. Par « extraction solide/liquide » on entend un type d’extraction mettant en contact un solide (matériel bio-sourcé) et un liquide (dit solvant) afin de laisser diffuser/imprégner un ou plusieurs composé(s) soluble(s) dit(s) soluté(s) dans le liquide. Ceci se fait en général grâce à des actions physiques et physico-chimiques plus ou moins rapides. Les bois peuvent être utilisés frais, congelés ou préalablement séchés à l’aide d’outils de séchage conventionnels et connus de l’homme du métier, comme par exemple le séchage à l’air libre, en étuves, par lyophilisation ou zéodratation. Ainsi, selon un mode de réalisation, et préalablement à l’étape d’extraction elle-même, les bois peuvent avoir été séchés et/ou broyés. Selon un autre mode de réalisation, les bois sont utilisés humides puis broyés.
Selon un mode particulier, les bois sont broyés avant extraction, par exemple au moyen d’un mortier, d’un cryobroyage, d’un mixeur, d’un broyeur traditionnel ou d’un centrifugeur selon les méthodes connues de l’homme du métier.
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention peut être obtenu en particulier selon des procédés d’extraction enzymatique.
Les enzymes choisies hydrolysent certains ou tous les composés du matériel végétal afin de détériorer la paroi cellulaire et donc libérer favorablement les molécules contenues.
On entend par « paroi cellulaire » ou « paroi végétale » ou « paroi pectocellulosique » l’élément de structure cellulaire qui protège chaque cellule végétale. Elle se compose notamment de trois parties :
- la lamelle moyenne : riche en pectine et dépourvue de cellulose,
- la paroi primaire : composée majoritairement de cellulose (9 à 25%), d’hémicellulose (25 à 58%), de pectines (10 à 35%), et de protéines (10%),
- la paroi secondaire : cellulose, hémicellulose. Selon les molécules que l’on cherche à extraire, les enzymes seront adaptées aux parois à hydrolyser pour accéder à ces dites molécules. Avantageusement, on pourra notamment utiliser des enzymes de type cellulase, hémicellulase, pectinase ou protéase, seules ou en combinaison.
On entend par « cellulase » une enzyme qui peut décomposer la cellulose, biopolymère constitué d'une chaîne linéaire de D-glucose et principal constituant de la paroi cellulaire végétale. Le produit final de la dégradation de la cellulose par la cellulase le glucose. Il existe plusieurs types de cellulases comme la béta-glucosidase, l’endo-cellulase, l’exo- cellulase, l’oxydative cellulase ou encore la cellulose phosphorylase. On entend par « hémicellulase » une enzyme qui peut décomposer l’hémicellulose, biopolymère constitutif de la paroi cellulaire végétale permettant notamment le pontage entre les fibres de cellulose, ainsi qu’avec d'autres composés matriciels. Il existe plusieurs types d’hémicellulases comme l’arabinase, la xylanase, ou la galactanase.
On entend par « pectinase » une enzyme capable de dégrader la pectine, polysaccharide présent dans les parois cellulaires végétales. Il existe plusieurs types de pectinases comme l’endopolygalacturanase, ou la pectine méthylestérase.
On entend par « protéase » une enzyme capable de défaire les liaisons peptidiques. Les protéases sont utilisées dans le procédé de l’invention pour hydrolyser les protéines de structure et améliorer la lyse de la matière première, non pour produire des peptides.
On pourra ainsi utiliser une cellulase pour libérer le glucose et la cellulose ; une hemicellulase pour libérer les mono et oligomères de sucres réduits ; une pectinase pour libérer les acides uroniques ; et avantageusement une protéase pour hydrolyser les protéines de structure et améliorer la lyse de la matière première.
Dans un mode de réalisation préféré, l’éco-extraction est réalisée au moyen du protocole décrit dans la demande de brevet WO2011045387 (correspondant à la demande de brevet FR2351461) au nom de l’Institut National Polytechnique de Lorraine INPL. Il s’agit d’une technologie alternative répondant aux contraintes réglementaires et environnementales tout en restant compétitif économiquement. Ce procédé innovant, permet d’extraire de la matière végétale, en une seule étape, trois types de produits à savoir une huile (riche en nutriments polyphénols, stérols, vitamine E...), un extrait aqueux ainsi qu’un tourteau (phase solide).
Ce procédé comprend notamment les étapes suivantes :
a) addition d'eau à de la matière végétale présentant une taille de particule appropriée,
b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase,
c) incubation sous agitation de la matière végétale et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés, d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide, et e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs. Ainsi, on obtient à l’issue de l’étape de séparation (e) une phase aqueuse correspondant à l’extrait de bois de rose selon l’invention. Ainsi, un autre objet de l’invention concerne un procédé de préparation d’un extrait de bois de rose selon l’invention comprenant les étapes :
a) addition d'eau au bois de rose préalablement broyé présentant une taille de particule appropriée,
b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase,
c) incubation sous agitation du bois de rose préalablement broyé et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide, et
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs.
Ledit extrait de bois de rose selon l’invention étant obtenu après l’étape de séparation (e).
Avantageusement, ce procédé d’extraction ne fait pas intervenir de solvants organiques, comme l'hexane ce qui pourrait entraîner de nombreux problèmes de sécurité des installations et des personnels, de santé humaine et de préservation de l'environnement. Cette technologie permet ainsi de réduire les émissions de composés organiques volatiles (COV). Il s’agit ainsi d’un procédé propre permettant d'extraire sous forme d’huile et/ou d’extrait aqueux des protéines, sucres et autres co-produits de hautes qualités et directement utilisables en cosmétique.
L’étape de broyage nécessite d’ajuster la durée, et la vitesse en fonction de l’instrument employé et de la nature sèche ou humide du matériau à broyer.
L’étape de d’addition d’eau nécessite d’ajuster la vitesse, la durée, le ratio eau/solide en fonction notamment de l’instrument à employer. L’étape d’hydrolyse enzymatique nécessite de déterminer les enzymes à utiliser et d’ajuster divers paramètres tels que le ratio enzyme/substrat, le temps d’hydrolyse, la vitesse d’agitation, le pH et la température.
L’étape d’inactivation des enzymes endogènes ou exogènes nécessite d’ajuster des paramètres tels que la température d’inactivation, la température, la durée, de même que le pH.
L’étape de centrifugation, nécessite d’ajuster des paramètres tels que la vitesse, la température, la durée et le pH.
Selon un mode particulier, à l’étape a), la taille de particule appropriée de la matière végétale est avantageusement obtenue par broyage de ladite matière végétale. Le broyage doit être le plus fin possible pour favoriser l'action des enzymes. Idéalement, toutes les particules doivent avoir une taille proche de 50 pm, de préférence proche de 10 pm.
De préférence, la masse d'eau ajoutée à la matière végétale est égale à 1 à 2 fois la masse de ladite matière végétale et ne dépasse pas cette quantité.
En particulier à l’étape b), le rapport entre l'activité de la pectinase et l'activité de la cellulase étant d'au moins 0.14, de préférence compris entre 0.3 et 2.5, et plus préférentiellement entre 0.35 et 0.45, et le rapport entre l'activité de la pectinase et l'activité de l'hémicellulase étant d'au moins 7.103 ; de préférence compris entre 1.102 et 0.5, et plus préférentiellement entre 1.102 et 2.102.
Plus particulièrement, le mélange enzymatique utilisé contient au moins une cellulase, au moins une hemicellulase, au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase. Selon un mode particulier, la ou les cellulase(s), hemicellulase(s) et pectinase(s) représentent 75% du mélange enzymatique et la ou les protéase(s) représentent 25% dudit mélange enzymatique. Selon un mode particulier, les cellulases sont présentes en une teneur allant de 1 à 50%, de préférence de 20 à 30% en poids du mélange enzymatique, les hémicellulases sont présentes en une teneur allant de 1 à 50%, de préférence de 20 à 30% en poids du mélange enzymatique et les pectinases sont présentes en une teneur allant de 1 à 50%, de préférence de 20 à 30% en poids du mélange enzymatique. Et avantageusement les protéases sont présentes en une teneur allant de 1 à 50%, de préférence de 20 à 30% en poids du mélange enzymatique.
Dans un mode de réalisation préféré le mélange enzymatique utilisé contient 25% de cellulases, 25% d’hémicellulases, 25% de pectinases et 25% de protéases. De préférence, la quantité utilisée du mélange enzymatique tel que défini ci-dessus est comprise entre 0.25% et 10%, de préférence entre 1 % et 6%, en volume du mélange eau/matière végétale.
Avantageusement, l'incubation selon l'étape c) est réalisée pendant 2 à 20 heures, de préférence entre 4 et 12 heures, à une température comprise entre 25°C et 75°C, de préférence entre 40°C et 60°C, et de préférence autour de 50°C.
La réaction d'hydrolyse est ensuite stoppée par désactivation des enzymes par chauffage de préférence entre 80°C et 105°C pendant par exemple 5 à 20 minutes
Puis le milieu réactionnel est séparé, selon l'étape d), en utilisant toutes les techniques de séparation connues adaptées, telle que la centrifugation ou la décantation.
Selon un mode particulier, le mélange est préfiltré sur tamis de 0.8mm puis 0.5mm afin de retirer la partie le plus importante de la phase solide, puis une filtration stérilisante est avantageusement réalisée sur plaques clarifiantes d’une taille de pores de 0.2pm, à une pression de 2 Bars. La phase aqueuse obtenue après filtration stérilisante est stabilisée avec les conservateurs (acide citrique, sorbate de potassium, benzoate de sodium).
Ainsi selon un mode de réalisation préféré, ledit extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, est obtenu par un procédé d’extraction comprenant les étapes : a) addition d'eau au bois de rose préalablement broyé présentant une taille de particule appropriée,
b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement au moins une protéase,
c) incubation sous agitation du bois de rose préalablement broyé et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles si présentes, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide, et
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs. L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est caractérisé notamment par la présence d’acides aminés (acide aspartique, tyrosine, arginine) et de sucres totaux (glucose, fructose).
L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention se caractérise également par le fait qu’il ne s’agit pas d’un extrait fermenté.
Selon un mode particulier, l’extrait aqueux de bois de rose obtenu selon l’invention comprend de l’eau en une teneur allant de 94 à 96%, une teneur en extrait sec allant de 1 à 6% et préférentiellement de 3 à 5% et des conservateurs en une teneur allant de 0.5 à 1 % en poids par rapport au poids total de l’extrait. Cet extrait de bois de rose selon l’invention est dénommé en nom INCI water (and) rose extract (and) citric acid (and) potassium sorbate (and) sodium benzoate.
Composition et galénique
L’invention porte encore sur une composition cosmétique pour application topique sur la peau et/ou les lèvres, en particulier la peau du visage et/ou du corps, comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins une quantité efficace d’au moins un extrait aqueux de bois de rose selon l’invention.
Par‘application topique’, on entend une composition destinée à une application sur les matières kératiniques. De fait, une composition orale n’est pas destinée à une application topique sur la peau.
L’extrait aqueux de bois de rose est présent dans la composition cosmétique de l’invention dans une quantité efficace pour obtenir l’effet recherché.
En particulier, il est présent en une teneur allant de 0,1 % à 80%, notamment de 0,5% à 60% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition. Selon un premier mode de réalisation, il est présent en une teneur allant de 50% à 80%, en particulier de 60% à 75% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition. Selon un autre mode particulier de réalisation, il est présent en une teneur allant de 0,1 % à 20%, de préférence de 0,5% à 10%, et de préférence encore de 1 % à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de la composition. Des exemples illustratifs sont donnés ci-après. La composition cosmétique de l’invention peut se présenter sous toute forme galénique adaptée à une application topique sur les matières kératiniques et en particulier la peau, par exemple un sérum, une émulsion huile- dans-eau, une émulsion eau-dans-huile, une émulsion multiple, une microémulsion, une lotion, une suspension, un gel aqueux, un stick, une poudre. La composition selon l’invention peut être une composition de soin et/ou de maquillage des matières kératiniques.
Par « matière kératinique » on entend la peau et/ou ses phanères, et les lèvres, en particulier la peau du visage et/ou du corps et les lèvres.
La composition est préférentiellement destinée à être appliquée sur la peau du visage et/ou du corps ou sur les lèvres et se présente par exemple sous la forme d’une lotion, d'une crème de soin, d’un sérum, d'un fluide pour le visage, d’un gel de soin pour le visage et/ou le corps, d’une composition de soin des lèvres, d’un baume à lèvres, d’un rouge à lèvre, ou d’un gloss.
Selon un mode particulier, la composition cosmétique selon l’invention est sous la forme d’une crème de soin et/ou de maquillage pour le visage.
Selon un autre mode particulier, la composition cosmétique selon l’invention est sous la forme d’un gel aqueux pour le contour des yeux.
Selon un autre mode particulier, la composition cosmétique selon l’invention est sous la forme d’une composition de soin et/ou de maquillage pour les lèvres.
La phase aqueuse représente généralement de 1 à 99% en poids, par rapport au poids total de ladite composition.
Phase aqueuse
La phase aqueuse de la composition selon l'invention comprend de l'eau et éventuellement un solvant hydrosoluble.
On entend par‘solvant hydrosoluble’ selon l’invention, un composé liquide à température ambiante et miscible à l'eau (miscibilité dans l'eau supérieure à 50 % en poids à 25 °C et pression atmosphérique). On peut citer notamment :
les mono-alcools inférieurs en C1-C5 tels que l'éthanol, l'isopropanol et leurs mélanges ;
les glycols en C2-C8 tels que l'éthylène glycol, le propylène glycol, le 1 ,3- butylène glycol, le dipropylène glycol, et leurs mélanges ;
les polyols en C2-C32 tels que les polyglycérols, les polyéthylènes glycols, et leurs mélanges,
et leurs mélanges. Elle peut comprendre également des gélifiants hydrophiles, des antioxydants, des conservateurs et leurs mélanges.
A titre de gélifiants hydrophiles, on peut citer notamment les polymères d’acide acrylique tels que ceux de Nom INCI Carbomer ou de référence commerciale Carbopol®, les copolymères d’acides acrylique et méthacrylique, les polymères carboxyvinyliques, les épaississants associatifs de type acrylique ou polyuréthane, les gélifiants polysaccharidiques tels que les alginates, les gommes naturelles ou modifiées telles que les gommes de xanthane, les gommes de carraghénanes, les gommes d’agar, les gommes de guar, les gommes de gellane, les chitosans, les mannanes, les pullulanes, les dérivés de la cellulose, la gélatine, les pectines, les gélifiants minéraux tels que les bentones ou les silices modifiées, et leurs mélanges.
Par gomme naturelle ou modifiée on entend un polysaccharide éventuellement modifié qui s'hydrate en milieu aqueux pour former une solution visqueuse ou une dispersion. Parmi les gommes naturelles on inclut les extraits d'algues, les exsudais de plantes et les gommes extraites de graines ou de racines végétales et celles obtenues par fermentation microbiologique. Les gommes modifiées ou semi-synthétiques comprennent les dérivés de la cellulose et de l'amidon et, de façon générale, les dérivés de toutes les gommes naturelles.
Selon un mode particulier, la composition cosmétique de l’invention comprend une phase aqueuse gélifiée, notamment par la présence d’au moins un polymère acrylique, en particulier un polymère d’acide acrylique ou copolymère d’acide acrylique et méthacrylique.
La teneur en gélifiant(s) hydrophile(s) dans la composition cosmétique de l’invention ira généralement de 0,5 à 5%, notamment de 0,7 à 4%, de préférence de 0,9 à 3% et de préférence encore de 1 à 2% en poids par rapport au poids total de ladite composition.
Phase grasse ou huileuse
La composition cosmétique de l’invention peut comprendre en outre une phase grasse (corps gras solides) ou huileuse. On entend par « phase huileuse » une huile ou un mélange d'huiles miscibles entre elles. Par « huile », on entend, au sens de l'invention, un corps gras, non soluble dans l'eau, liquide à 25°C et pression atmosphérique. Une phase huileuse selon l’invention peut comprendre des huiles hydrocarbonées, siliconées, fluorées ou non, et leurs mélanges.
Ces huiles peuvent être volatiles ou non volatiles, végétale, minérale ou synthétique.
Par‘huile hydrocarbonée’, on entend selon l’invention une huile contenant principalement des atomes d’hydrogène et de carbone.
Par‘huile siliconée’, on entend selon l’invention une huile comprenant au moins un atome de silicium, et notamment au moins un groupe Si-O.
Par‘huile fluorée’, on entend selon l’invention une huile comprenant au moins un atome de fluor.
Comme huiles non volatiles hydrocarbonées, on peut citer notamment les huiles hydrocarbonées, les huiles hydrocarbonées d’origine végétale, les éthers de synthèse en C10-C40, les esters de synthèse en C10-C40, les alcools gras en C12-C26, les acides gras supérieurs en C12-C22, et leurs mélanges.
Comme huiles non volatiles siliconées, on peut citer notamment les huiles siliconées phénylées, les huiles siliconées non phénylées, et leurs mélanges.
Les huiles pourront être présentes dans la composition de l’invention en une teneur allant de 0,01 à 95 % en poids par rapport au poids total de la composition.
La phase grasse ou huileuse peut comprendre également des gélifiants lipophiles, des polymères filmogènes, des tensioactifs, des antioxydants et leurs mélanges.
Selon un mode particulier de l’invention, la composition cosmétique est sous la forme d’une solution, d’une émulsion, d’un sérum ou d’un gel.
Selon un mode particulier, la composition cosmétique de l’invention ne comprend pas d’autre extrait de rose que des extraits de rose de la variété Evanrat ou Rose Jardin de Granville®.
Ingrédients additionnels
La composition de l'invention peut également comprendre tout additif usuellement utilisé en cosmétique tels que des filtres UV, des antioxydants, des parfums, des agents actifs cosmétiques, comme par exemple des agents émollients, des agents hydratants, des vitamines, des agents anti-âge, des agents liftants, des agents tenseurs, des agents repulpants, des agents apaisants, des agents antipollution, des agents éclaircissants ou dépigmentants, des charges, des nacres et leurs mélanges.
Ainsi selon un mode de réalisation particulier, l’invention porte sur une composition cosmétique pour application topique sur la peau et/ou les lèvres, en particulier la peau du visage et/ou du corps, comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins une quantité efficace d’au moins un extrait aqueux de bois de rose selon l’invention et au moins un adjuvant cosmétique choisi dans le groupe constitué par les filtres UV, les antioxydants, les parfums, les agents émollients, les agents hydratants, les vitamines, les agents anti-âge, les agents liftants, les agents tenseurs, les agents repulpants, les agents apaisants, les agents antipollution, les agents éclaircissants ou dépigmentants, les charges, les nacres et leurs mélanges.
Selon un mode particulier et préféré, la composition comprend en outre au moins un actif cosmétique choisi parmi un agent antioxydant, un agent liftant, un agent tenseur, un agent repulpant, un agent apaisant, un agent anti-pollution et/ou un agent dépigmentant. Elle peut également comprendre des charges et/ou des nacres, en particulier des nacres blanches, destinées à masquer les imperfections de couleur (cernes) et illuminer le regard.
Utilisations cosmétiques et autres utilisations L’invention porte également sur l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’au moins un extrait aqueux de bois de rose selon l’invention, en particulier de la variété Evanrat ou rose Jardin de Granville®, en tant qu'agent destiné à prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané, en particulier la perte de tonicité, la perte d’élasticité et/ou la perte de fermeté de la peau, l’altération de la fonction barrière, l’apparition de rides et/ou ridules, une sécheresse cutanée, et/ou un teint terne et inhomogène.
Elle porte également sur un procédé cosmétique non thérapeutique destiné à prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané, en particulier la perte de tonicité, la perte d’élasticité et/ou la perte de fermeté de la peau, l’altération de la fonction barrière, l’apparition de rides et/ou ridules, une sécheresse cutanée, et/ou un teint terne et inhomogène, caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur la peau du visage et/ou du corps et/ou des lèvres, d'une composition cosmétique comprenant un extrait aqueux de bois de rose telle que définie dans l’invention. Par‘peau et/ou lèvres’ selon l’invention, on entend notamment une peau et/ou des lèvres saines, c’est-à-dire ne présentant pas de troubles ou de désordres qui relèveraient d’un état pathologique (sujets‘non sains’, atteints d’une pathologie).
Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur une peau sèche, fragile, sensible, stressée, et notamment une peau fatiguée ayant perdu sa fermeté, sa souplesse et son élasticité.
Selon un autre mode particulier, la composition est appliquée sur des lèvres sèches, fragiles, sensibles et/ou stressées, Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur des lèvres sèches et/ou fragiles. Selon un autre mode, sur des lèvres stressées. Selon un autre mode, sur des lèvres sensibles.
Un autre objet de l’invention est un extrait aqueux de bois de rose selon l’invention ou une composition en comprenant selon l’invention pour une utilisation pour apaiser la peau, et/ou prévenir et/ou traiter les désordres cutanés liés à une micro-inflammation chronique de la peau, en particulier prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané induits par une micro-inflammation chronique de la peau.
Selon cet aspect de l’invention, l’extrait aqueux de bois de rose est utilisé sur des peaux présentant des troubles liés à une micro-inflammation chronique, notamment une inflammation due aux stress endogènes et/ou exogènes ayant des effets d’inflammaging.
La présente invention porte encore sur un extrait aqueux de bois de rose selon l’invention ou une composition en comprenant pour une utilisation pour diminuer le lentigo solaire.
Selon cet aspect de l’invention, l’extrait aqueux de bois de rose est utilisé sur des peaux présentant des altérations liées au soleil.
La composition peut être appliquée sur la peau du visage et/ou du corps ou sur les lèvres. Selon un mode particulier, la composition est appliquée sur le visage et/ou le corps.
Selon un autre aspect, la présente invention porte sur un extrait de bois de rose selon l’invention, ou d’une composition en contenant pour apaiser la peau, et/ou prévenir et/ou traiter les désordres cutanés liés à une micro-inflammation chronique de la peau.
La présente invention porte encore sur un extrait de bois de rose selon l’invention, ou une composition en contenant pour diminuer le lentigo solaire.
Selon un autre aspect, la présente invention porte sur une méthode de traitement des matières kératiniques, de préférence de la peau et/ou des lèvres, pour apaiser la peau, et/ou prévenir et/ou traiter les désordres cutanés liés à une micro-inflammation chronique de la peau, comprenant l’administration à une personne qui en a besoin, d’un extrait de bois de rose selon l’invention, ou une composition en contenant.
L’invention porte également sur une méthode de traitement des matières kératiniques, de préférence de la peau et/ou des lèvres, pour diminuer le lentigo solaire, comprenant l’administration à une personne qui en a besoin, d’un extrait de bois de rose selon l’invention, ou une composition en contenant.
L’invention va désormais être illustrée dans les exemples non limitatifs suivants. Sauf indication contraire, les % sont exprimés en % en poids par rapport au poids total de la composition.
EXEMPLES :
Exemple 1 : Extraction à partir de bois de rose et analyse de ces extraits Préparation du végétal
On utilise des bois de rose et fleurs de rose de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville®.
Les matières premières, ici le bois de rose, éventuellement additionné de fleurs de rose, ont été réduites en poudre en trois étapes.
Etape 1 : passage dans un broyeur de jardin afin d’obtenir des tronçons de deux centimètres
Etape 2 : passage dans un broyeur industriel
Mise en solution
L’extraction enzymatique a été réalisée dans un réacteur d'une contenance maximale de 70I. Le réacteur est agité par hélice et est thermostaté par double enveloppe.
16Kg de poudre de bois de rose à 0.1 % de fleurs de rose sont dispersés et mis en suspension dans 47,5Kg d'eau.
Afin de désactiver les enzymes endogènes, le mélange a été élevé à une température de 85°C pendant 1 min puis stabilisé à 50°C.
Lyse des parois végétales
0.8 Kg d’un cocktail Enzymatique HEL1 PR1 comprenant un mélange de cellulases, d’hémicellulases et de pectinases à 75% et des protéases à 25%, ont été ajoutés au mélange réactionnel correspondant (5% w/w). La réaction est poursuivie pendant 4 heures, la température est maintenue à 50°C.
Inactivation des enzymes
Le mélange a été porté à 85°C pendant 1 min afin d'inactiver les enzymes, puis ramené à 35°C.
Pré filtration
Le mélange est préfiltré sur tamis de 0.8mm puis 0.5mm afin de retirer la partie le plus importante de la phase solide, puis sur un drap.
Filtration stérilisante Une filtration a été réalisée sur plaques clarifiantes (PALL corporation) d’une taille de pores de 0.2pm, à une pression de 2 Bars.
Formulation
La phase aqueuse obtenue après filtration stérilisante est stabilisée avec les conservateurs suivants :
- Acide citrique
- Sorbate de potassium et
- Benzoate de sodium
On obtient, après filtration, un extrait aqueux de bois de rose à 3.7% en poids de matière sèche par rapport au poids total de l’extrait. Cet extrait est utilisé dans les exemples suivants visant à mettre en évidence ses effets sur la peau ; les exemples suivants utilisent des cultures de kératinocytes et/ou mélanocytes.
Des dosages réalisés sur cet extrait aqueux non stabilisé par des conservateurs donnent les résultats suivants :
Polyphénols totaux (g/L) : 2.5
Sucres réducteurs (g/L) : 16.2
Azote protéique (g/L) : 0.64
Protéines totales (g/L) : < 6
Glucose (g/100g) : 1.4 (±0.8)
Fructose (g/100g) : 0.3 (±0.3) Exemple 2 : Protocole d’étude de l’expression des gènes d’intérêt en culture de kératinocytes
Des kératinocytes humains normaux (KH N) sont mis en culture puis traités avec l’extrait aqueux de bois de Rose tel que préparé à l’exemple 1.
Après traitement des KH N, une étude par Taqman Low Density Array (TLDA) sur les gènes étudiés est effectuée à partir des ADNc obtenus après transcription inverse des ARN totaux extraits.
L’extrait aqueux de bois de rose est testé à 0.1 % ou 0.25% en poids de matière première (excipient eau).
Culture des KHN
Les kératinocytes humains normaux sont issus d’un prélèvement cutané issu de chirurgie plastique. Les cellules sont cultivées dans un milieu Epilife complet avec une densité d’ensemencement de 50.000 cellules par puits, dans des plaques 12 puits. A sub confluence, les cellules sont traitées 24 heures avec les doses d’extraits de rose décrites ci-dessus.
Technologie TLDA (TagMan Low Density Array)
Obtention des ARN totaux
Le milieu de culture des cellules est éliminé, et 250 pL de tampon de lyse RLT (fourni dans le kit Nucleospin RNA trace, Macherey-Nagel) sont ajoutés. Les cellules sont raclées à l’aide d’un Cell Scraper puis, le lysat cellulaire est récupéré dans une deepwell 1 ,2 mL (fourni_dans le kit Nucleospin RNA). Les ARN totaux sont extraits selon les protocoles définis.
Les solutions d’ARN totaux obtenues sont dosées, et leur qualité vérifiée, à l'aide d'un lecteur de microplaques, le spectrostarNANO (BMG Labtech) couplé au MicrolabSTAR. Cet appareil est relié à l'ordinateur pilotant la plateforme Robotique et possède le logiciel spécifique d'analyse des résultats (logiciel MARS). La technique nécessite une micro plaque de 384 puits (LoBase), un contrôle positif (RNA 250, AM7155, Thermofisher) permettant de valider les pipetages réalisés par le robot ainsi que les valeurs générées par le lecteur spectrostarNANO.
Synthèse des ADN complémentaires
Le kit de reverse transcription (RT) utilisé est le High Capacity Reverse Transcription Kit (Thermo Fisher). Il a été utilisé selon le protocole fourni. 500 ng d’ARN totaux sont dilués dans de l’eau pour un volume final de 25 pL. Ils sont ensuite incubés pendant 10 minutes à 25°C puis 2 heures à 37°C en présence de 25 pL de mélange réactionnel de High Capacity Reverse Transcription Kit 2X préalablement préparé comme indiqué ci-dessous. Les différentes incubations sont faites au sein du TRobot (Biométra).
Tableau 1 : Mélange réactionnel High Capacity Reverse Transcription Kit 2X pour 1 réaction
PCR-TagMan Low Density Array 15 pl_ de chaque RT sont mélangés à 60 mI d’eau puis 75 mI_ de TaqMan Gene
Expression master mix (ThermoFisher), contenant l’ADN polymerase, sont ajoutés. Après homogénéisation, 100 mI_ sont déposés sur les cartes microfluidiques contenant les sondes correspondant aux gènes testés (tableau 2 ci-dessous), ces dernières sont centrifugées puis scellées. Le CD Rom correspondant au profil des gènes déposés sur les plaques est chargé dans le logiciel SDS 2.3, précisant l’emplacement de chaque gène sur la carte. Le gène contrôle (ou « endogeneous » gene) à utiliser pour la normalisation des résultats est à indiquer avant le lancement de la PCR. Cette dernière est réalisée selon le protocole fourni par Applied Biosystems dans l’appareil ABI Prism 7900HT Sequence détection System. Les étapes de la qPCR sont 2 min à 50°C, 10 min à 94,5°C puis 30s à 97°C et 1 min à 59,7°C pour 40 cycles. En fonction des effets recherchés, l’Homme du métier détermine quels sont les gènes pertinents à inclure dans l’étude ; il relève de ses connaissances générales de déterminer et d’optimiser pour chaque gène les séquences nucléotidiques des amorces PCR à utiliser.
Analyses statistiques La PCR quantitative en temps réel peut être exploitée si son efficacité est comprise entre 90% et 110%. Pour chaque échantillon, le nombre de cycles auquel apparaît le signal est déterminé par le logiciel SDS 2.3. Pour un même essai, les niveaux d’expression des transcrits d’intérêt obtenus sont normalisés par rapport à la valeur obtenue pour le gène de ménage Beta-2-microglobuline. Ce gène dont l’expression est constitutive et invariante permet de s’affranchir toutes variations induites au cours de l’expérience (dosage des ARNs totaux, pipetages, étape de réverse transcription, PCR dans l’appareillage).
Dans la méthode de RT-PCR TLDA, la quantification est effectuée en utilisant la méthode comparative de AACt. Les valeurs de quantification relative (RQ) obtenues correspondent au niveau d’amplitude (x fois plus ou moins que le contrôle) de l’expression par rapport à notre contrôle ici le non irradié. Le RQ est obtenu par le calcul suivant où le contrôle est égal à 1 :
ACt traité = Ct gène cible traité - Ct gène de ménage traité
ACt non traité Ct gène cible non traité - Ct gène de ménage non traité
Afin d’évaluer des variations d’activité transcriptionnelle statistiquement significative, nous utiliserons le test t de Student. Chaque condition est réalisée en triplicate (3 non traités et 3 traités dans les mêmes conditions). Le test-F de Fischer est tout d’abord appliqué en comparant les deux matrices de données. Lorsque la valeur est supérieure à a = 0,05 alors la variance pour le test t de Student est de 2, lorsque le test-F de Fischer est inférieur à a = 0,05 alors la variance sera égale à 3. Les variations transcriptionnelles retenues seront celles qui ont un test t de Student inférieur à a = 0,05. Les résultats sont présentés en moyenne sur n=3. Le test t de Student a été utilisé pour comparer l’effet entre les cellules traitées et non traitées.
Les résultats sont considérés comme significatifs pour p<0,05(*) ou p<0,01(**).
Les résultats sont présentés dans le tableau 3 suivant :
Exemple 3 : Effet de l’extrait aqueux de bois de rose sur le stress oxydant
Nous avons étudié l’effet de l’extrait de bois de rose selon l’invention sur la stimulation de l’expression génique d’enzymes anti-oxydantes endogènes, qui participent à neutraliser les radicaux libres et ainsi à protéger les cellules de la peau notamment contre le vieillissement. Cette étude a été réalisée sur culture de kératinocytes en suivant le protocole détaillé dans l’exemple 2.
Tableau 2 : référence des gènes étudiés
Tableau 3 : Modulation de l’expression des gènes d’intérêt après traitement par l’extrait de bois de rose selon l’invention
Ces résultats montrent que l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention stimule des gènes impliqués dans la réponse au stress oxydant, et permet ainsi de limiter l’accumulation de radicaux libres. L’extrait aqueux de bois de rose est donc avantageux pour une utilisation destinée à prévenir et/ou diminuer les réactions cutanées notamment causées par l’environnement, la pollution, le tabac et ainsi à lutter contre le vieillissement cellulaire de la peau.
Exemple 4 : Effet de l’extrait aqueux de bois de rose sur la fonction barrière
Nous avons étudié l’effet de l’extrait de bois de rose selon l’invention sur l’expression de gènes impliqués dans la cohésion cellulaire, la différentiation épidermique, ou l’homéostasie de l’épiderme et ainsi participant à la régulation de la fonction barrière cutanée. Cette étude a été réalisée sur culture de kératinocytes en suivant le protocole détaillé dans l’exemple 2.
Tableau 4 : référence des gènes étudiés
Tableau 5 : Modulation de l’expression des gènes d’intérêt après traitement par l’extrait de bois de rose selon l’invention
Ces résultats montrent que l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention stimule de nombreux médiateurs de la différenciation épidermique et de la cohésion cellulaire. L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est donc avantageux pour favoriser et/ou stimuler la fonction barrière cutanée et notamment pour promouvoir la fermeté, la souplesse et l’élasticité de la peau. Exemple 5 : Effet de l’extrait aqueux de bois de rose sur le transfert de mélanine
L’objectif de cette étude est d’étudier l’effet supposé dépigmentant de l’extrait de bois de rose selon l’invention. Cette évaluation est réalisée par mesure du taux de transfert de mélanine dans un modèle de co-culture kératinocyte/mélanocyte. Modèle de co-culture KHN/MHN
Les KHN sont ensemencés à raison de 50000 cellules/puits dans 1 ml d’un mélange de milieu Epilife et M254 (Invitrogen), respectivement 25% et 75%, dans des supports de culture 24 puits.
Après 24 heures de culture, les MHN sont ajoutés à raison de 4000 cellules/puits dans 400 pL/puits dans le même milieu renouvelé.
Traitement des cellules
Après 24 heures de culture à 37°C, la co-culture est traitée ou non par des actifs (l’extrait de bois de rose selon l’invention ou un témoin positif). Un témoin non traité et un témoin positif, le niacinamide (Sigma) à une concentration de 10 mMoI/L sont inclus dans l’étude.
Les cellules sont traitées pendant 48 heures sans renouvellement avec l’extrait de bois de rose selon l’invention à 0.1 % ou avec le niacinamide pour la condition contrôle positif.
Immunomarguage Après 48 heures de traitement, le milieu de culture est éliminé. Les cellules sont rincées au PBS (Invitrogen), puis fixées à la formaline (Sigma) pendant 10 minutes.
Après rinçage au PBS, les puits de culture sont remplis avec une solution de PBS/Triton 0,1 % (Sigma) pendant 10 minutes afin de perméabiliser les membranes des cellules fixées, puis rincées 2 fois au PBS. Les cellules sont recouvertes d’une solution de PBS/BSA 1% (Sigma). Après 30 minutes à température ambiante, la solution de PBS/BSA est éliminée. Les cellules sont alors recouvertes d’une solution d’anticorps primaires anti-melanoma marker HMB45 (Dako, , Mouse) dilué au 1/150ème dans la solution de PBS-BSA 1%, pendant 2 heures à température ambiante. Les cellules sont ensuite rincées 3 fois dans une solution de PBS. Les cellules sont ensuite recouvertes d’une solution d’anticorps secondaires anti-mouse (Alexa fluor 568, goat anti-mouse, Invitrogen) dilué au 1/300ème dans une solution de PBS-BSA 1%. Une coloration des noyaux cellulaires est réalisée au DAPI dilué au 1/100ème (Invitrogen) ainsi qu’un marquage de l’actine avec la phalloïdine Alexa Fluor 488 diluée au 1/100ème dans la solution d’anticorps secondaire. Les cellules sont incubées pendant 60 minutes à température ambiante à l’abri de la lumière. Les puits de culture sont rincés 3 fois dans du PBS puis quelques gouttes de milieu de montage (DAKO) sont déposées sur les cellules.
Les plaques sont conservées à 4°C et à l’obscurité jusqu’à l’acquisition des images. Acquisition des images par HCS
Les plaques sont scannées à l’ArrayScan XTi de Thermo Cellomics selon les recommandations du fournisseur.
Analyse d’images Les images sont analysées à l’aide du logiciel d'analyse Cell Profiler. Un programme est créé afin de quantifier le nombre de mélanosomes transférés par surface de kératinocytes. Les résultats sont transférés directement dans un fichier Microsoft Excel.
Analyse statistique
L’analyse statistique des résultats est faite à l’aide du logiciel Microsoft Excel. Cette analyse consiste en un calcul de la moyenne, de l’écart type et de l’intervalle de confiance (a = 0,05) du nombre de mélanosomes transférés par surface de kératinocytes. Afin d’évaluer des variations statistiquement significatives, le test-T de Student est utilisé. Le test-F de Fischer est tout d’abord appliqué en comparant les deux matrices de données. Lorsque la valeur est supérieure à a = 0,05 alors la variance pour le test t de Student est de 2, lorsque le test-F de Fischer est inférieur à a = 0,05 alors la variance sera égale à 3. Les variations retenues seront celles qui ont un test t de Student inférieur à a = 0,05.
Résultats
Le témoin positif ainsi que les différentes doses d’ingrédients testés sont comparés au témoin non traité. On observe une diminution du transfert de mélanosomes de -30 % pour le témoin positif (niacinamide) par rapport au témoin non traité. Concernant l’extrait de bois de rose à la dose de 0.1%, on observe une diminution significative de -30% du nombre de mélanosomes transférés par kératinocyte par rapport au témoin non traité, soit un niveau équivalent au témoin positif niacinamide.
Cette étude met donc en évidence l’effet dépigmentant de l’extrait de bois de rose. L’utilisation de cet extrait est donc particulièrement avantageuse pour prévenir et/ou traiter l’aspect inhomogène du teint, l’apparition de tâches pigmentaires cutanées, ou tâches de vieillesse, en particulier sur le dos des mains, sur le visage, le décolleté, ou encore le crâne des hommes.
Exemple 6 : Effet de l’extrait aqueux de bois de rose sur l’immunité innée
Nous avons étudié l’effet de l’extrait de bois de rose selon l’invention sur l’expression des gènes codant pour des peptides antibactériens et donc impliqués dans l’immunité innée. Cette étude a été réalisée sur culture de kératinocytes en suivant le protocole détaillé dans l’exemple 2.
Tableau 6 : référence des gènes étudiés
Tableau 7 : Modulation de l’expression des gènes d’intérêt après traitement par l’extrait de bois de rose selon l’invention
On observe dans cette étude une forte stimulation de l’expression de gènes codant pour des peptides antibactériens, ce qui met en avant l’effet bénéfique de l’extrait de bois de rose selon l’invention sur sa capacité à promouvoir l’immunité innée de la peau.
Exemple 7 : Effet de l’extrait aqueux de bois de rose sur la micro-inflammation
Nous avons étudié l’effet de l’extrait de bois de rose selon l’invention sur l’expression des cytokines ou de récepteurs aux cytokines, qui sont des gènes impliqués dans les processus de micro-inflammation au niveau de la peau susceptibles de favoriser les phénomènes de vieillissement cutanés ou inflammaging. Cette étude a été réalisée sur culture de kératinocytes en suivant le protocole détaillé dans l’exemple 2.
Tableau 8 : référence des gènes étudiés
bois de rose selon l’invention
Ces résultats montrent que l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention inhibe de nombreux médiateurs de l’inflammation notamment de cytokines, de récepteurs de cytokines. L’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention est donc avantageux pour une utilisation destinée à prévenir et/ou diminuer les effets de la micro-inflammation chronique de la peau et ainsi lutter contre le vieillissement de la peau ou inflammaging. Conclusion
L’ensemble des effets observés sur le stress oxydant, la fonction barrière, la pigmentation, l’immunité ou encore la micro-inflammation montre que l’extrait de bois de rose selon l’invention est d’intérêt pour prévenir et/ou traiter les principaux facteurs responsables du vieillissement cutané et ainsi permettre l’amélioration de l’aspect des peaux âgées.
Exemple 8 : Formulations
8.1 Composition sous la forme d’une émulsion
Phase aqueuse :
Eau déminéralisée qsp 100,0%
Glycols 20,0%
Conservateurs 0,6% Chélatant 0,04%
Carbomer (Carbopol® 981) 0,3%
Sodium polyacrylate (Covacryl® MV60) 0,2%
Sodium Hydroxide 0,15%
Extrait aqueux de bois de rose selon l’invention* 3,0%
Phase grasse :
Huile végétale, esters, silicones 16%
Anti-oxydant 0,2%
Concentré de parfum 0,4%
Steareth-2 0,8%
Steareth-21 1 ,5%
* tel que décrit dans l’exemple 1
La composition est préparée selon le mode opératoire suivant :
les gélifiants sont dispersés dans la phase aqueuse (hors extrait aqueux de bois de rose et hydroxyde de sodium) qui est portée à 70°C ;
la phase grasse (hors concentré de parfum, antioxydant) est chauffée à 70°C ; l’émulsion est réalisée par introduction de la phase grasse dans la phase aqueuse sous forte agitation ;
les gélifiants sont neutralisés par ajout d’hydroxyde de sodium et l’émulsion est refroidie sous agitation modérée avec introduction du concentré de parfum, de l’antioxydant et de l’extrait aqueux de bois de rose à basse température.
Appliquée sur la peau, en particulier la peau du visage, cette composition confère tonicité, élasticité et fermeté, les traits sont réhaussés, le visage est regalbé.
8.2 Composition sous la forme d’une dispersion solide de corps gras, de forme sphérique ou sphéroïde Phase aqueuse
Eau déminéralisée qsp100%
Extrait aqueux de bois de rose selon l’invention* 3.00%
Phenoxyethanol 0.42%
Gomme de xanthane 0.36%
Phase grasse
C10-18 triglycérides 38.84%
Anti Oxydant 0.1 % *tel que décrit dans l’exemple 1
La composition est préparée selon le mode opératoire suivant : on chauffe la cire (C10-18 triglycérides = Lipocire de Gatefossé) au-dessus de son point de fusion (quelques degrés) avec l’antioxydant;
- la phase grasse fondue est versée sous agitation dans de l’eau préalablement chauffée à la même température que la phase grasse ;
l’ensemble est maintenu sous agitation par un système rotatif pendant quelques minutes jusqu’à obtenir la taille de gouttelettes souhaitée ;
la dispersion obtenue est rapidement refroidie par addition d’eau glycolée préalablement refroidie (environ -4°C) pour solidifier les sphéroïdes lipidiques ;
l’agitation est arrêtée lorsque les sphéroïdes sont solidifiés puis sont récupérés à la surface ou filtrés ;
on prépare la phase aqueuse en mélangeant l’eau, la gomme de xanthane, le conservateur, et l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention ;
- on récupère les sphéroïdes à la surface et on les incorpore dans le gel de xanthane contenant l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention.
Appliquée sur la peau, cette composition permet de diminuer les signes visibles du vieillissement, notamment en conférant tonicité et fermeté à la peau ; l’ovale du visage est comme redessiné.
8.3 : Composition sous la forme d’un gel aqueux pour le visage
Extrait aqueux de bois de rose selon l’invention * 80.00%
Conservateurs 0,50%
Sucre 0,20% Carbomer 0,70%
Eau purifiée Qsp
100%
EDTA tetrasodique poudre 0,20%
Sodium hydroxide 0,17% * tel que décrit dans l’exemple 1
L’extrait de bois de rose selon l’invention et les conservateurs sont mélangés et homogénéisés à température ambiante sous agitation. Les sucres sont ajoutés sous agitation, puis le carbomer, puis l’eau et l’EDTA sous agitation. Le gel aqueux est ensuite neutralisé avec l’ajout d’hydroxyde de sodium sous agitation jusqu’à l’obtention d’un gel homogène.
Appliqué sur la peau du visage, ce gel aqueux corrige les sécheresses cutanées, et le teint terne ou inhomogène, et contribue à la jeunesse de la peau.
8.4 : Composition sous la forme d’un gel-sérum micronutritif pour le contour des veux
Eau purifiée Qsp 100.00%
Glycols 13,0%
Conservateurs 0,60%
Carbomer 0,80%
Glyceryl stéarate citrate 0,70%
Lécithine et sodium acrylates copolymer (Lecigel PCR négatif) 1 ,20%
Isostearate isostearyle 9,0%
Bis-diglyceryl polyacyladipate-2 (Softisan 649 MB) 1 ,0%
Silice 2,0%
Nacres 1 ,0%
Extrait de Centella asiatica 0,5%
Extrait de marron d’inde 0,1 %
Extrait aqueux de bois de rose selon l’invention * 3,0%
Tocopheryl acetate 0,10%
Parfum de rose 0,20%
* tels que décrits dans l’exemple 1
Les ingrédients de la phase aqueuse (l’eau, les glycols et le carbomer) sont mélangés à 80°C sous agitation. On ajoute ensuite les conservateurs, puis les gélifiants à 80°C sous agitation puis la température est abaissée à 75°C. Puis les tensioactifs sont émulsionnés dans la phase aqueuse sous agitation. Les charges et nacres, préalablement empâtées et homogénéisées, sont ajoutées à 40°C. Sont ensuite ajoutés à 40°C le cryoextrait, l’extrait aqueux de bois de rose selon l’invention, sous agitation jusqu’à 30°C.
Après application sur le contour des yeux de ce gel-sérum contribue à défroisser rides et ridules, la zone du regard est raffermie, l’apparence des cernes et des poches atténuée. La jeunesse du regard se reconstitue au fil des applications. 8.5 Baume à lèyres
Silice 10%
Poudre de nylon 7%
Cire de polyéthylène 17%
Glycérine 14%
Extrait aqueux de bois de rose selon l’invention * 3,0%
Myristate d’isopropyle qs100%
Cette composition est préparée par mélange des ingrédients selon les méthodes classiques de formulation des baumes. Ce baume à lèvres, après application sur des lèvres sèches et/ou fragiles, permet de les hydrater et les lisser.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composition cosmétique pour application topique sur la peau et/ou les lèvres, en particulier la peau du visage et/ou du corps, comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins une quantité efficace d’au moins un extrait aqueux de bois de rose et en particulier au moins un adjuvant cosmétique choisi dans le groupe constitué par les filtres UV, les antioxydants, les parfums, les agents émollients, les agents hydratants, les vitamines, les agents anti-âge, les agents liftants, les agents tenseurs, les agents repulpants, les agents apaisants, les agents antipollution, les agents éclaircissants ou dépigmentants, les charges, les nacres et leurs mélanges.
2. Composition cosmétique selon la revendication 1 , caractérisée en ce que l’extrait aqueux de bois de rose est présent dans la composition en une teneur allant de 0.1 à 80%, en particulier de 0,1 à 20%, de préférence de 0,5 à 10% et de préférence encore de 1 à 5% en poids de matière première par rapport au poids total de ladite composition.
3. Composition cosmétique selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en ce qu’elle comprend en outre au moins un actif cosmétique choisi parmi un agent antioxydant, un agent liftant, un agent tenseur, un agent repulpant, un agent apaisant, un agent anti-pollution et/ou un agent dépigmentant.
4. Procédé cosmétique non thérapeutique destiné à prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané, en particulier la perte de tonicité, la perte d’élasticité et/ou la perte de fermeté de la peau, l’altération de la fonction barrière, l’apparition de rides et/ou ridules, une sécheresse cutanée, et/ou un teint terne et inhomogène, caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur une peau saine, en particulier sur la peau du visage et/ou du corps, d'une composition cosmétique comprenant un extrait aqueux de bois de rose telle que définie dans l’une quelconque des revendications 1 à 3.
5. Extrait aqueux de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, obtenu par extraction enzymatique au moyen d’un solvant polaire cosmétiquement acceptable, caractérisé en ce que les roses sont de la variété Evanrat, en particulier de la variété rose Jardin de Granville®.
6. Extrait selon la revendication 5, caractérisé en ce qu’il est obtenu par un procédé d’extraction enzymatique comprenant les étapes :
a) addition d'eau au bois de rose préalablement broyé présentant une taille de particule appropriée, b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase,
c) incubation sous agitation du bois de rose préalablement broyé et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide,
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs.
7. Procédé de préparation d’un extrait de bois de rose, de préférence de bois de rose d’été, tel que défini dans la revendication 5 ou la revendication 6comprenant les étapes : a) addition d'eau au bois de rose préalablement broyé présentant une taille de particule appropriée,
b) addition d'un mélange enzymatique contenant au moins une cellulase, au moins une hémicellulase et au moins une pectinase, et avantageusement en outre au moins une protéase,
c) incubation sous agitation au bois de rose préalablement broyé et du mélange enzymatique pour libérer dans le milieu réactionnel des huiles, des protéines et des sucres fermentescibles, pendant une durée dépendant des rendements recherchés,
d) séparation du milieu réactionnel pour obtenir de l'huile libre, une phase aqueuse contenant des protéines et des sucres fermentescibles, et une phase solide,
e) séparation de la phase aqueuse et ajout éventuel de conservateurs.
8. Utilisation cosmétique non thérapeutique d’au moins un extrait aqueux de bois de rose tel que défini dans la revendication 5 ou la revendication 6, en tant qu'agent destiné à prévenir et/ou diminuer les signes du vieillissement cutané, en particulier la perte de tonicité, la perte d’élasticité et/ou la perte de fermeté de la peau, l’altération de la fonction barrière, l’apparition de rides et/ou ridules, une sécheresse cutanée, et/ou un teint terne et inhomogène.
9. Extrait aqueux de bois de rose tel que défini dans la revendication 5 ou la revendication 6 ou composition en comprenant telle que définie dans l’une quelconque des revendications 1 à 3 pour une utilisation pour apaiser la peau, et/ou prévenir et/ou le traiter les désordres cutanés liés à une micro-inflammation chronique de la peau.
10. Extrait aqueux de bois de rose tel que défini dans la revendication 5 ou la revendication 6 ou composition en comprenant telle que définie dans l’une quelconque des revendications 1 à 3 pour une utilisation pour diminuer le lentigo solaire.
EP19816335.4A 2018-12-20 2019-12-10 Extrait de bois de rosier Withdrawn EP3897566A1 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1873706A FR3090380B1 (fr) 2018-12-20 2018-12-20 Extrait de bois de rose
PCT/EP2019/084365 WO2020126653A1 (fr) 2018-12-20 2019-12-10 Extrait de bois de rosier

Publications (1)

Publication Number Publication Date
EP3897566A1 true EP3897566A1 (fr) 2021-10-27

Family

ID=67185140

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EP19816335.4A Withdrawn EP3897566A1 (fr) 2018-12-20 2019-12-10 Extrait de bois de rosier

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20220047495A1 (fr)
EP (1) EP3897566A1 (fr)
JP (1) JP7387741B2 (fr)
KR (1) KR20210107724A (fr)
CN (2) CN113316448A (fr)
FR (1) FR3090380B1 (fr)
WO (1) WO2020126653A1 (fr)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3111543B1 (fr) * 2020-06-22 2023-11-03 Lvmh Rech Nouvelles utilisations d’un extrait de bois de rose
FR3136172B1 (fr) 2022-06-07 2025-07-11 Lvmh Rech Composition anti-âge avec extraits de rose et peptides
FR3143369A1 (fr) * 2022-12-15 2024-06-21 Lvmh Recherche Composition cosmétique comprenant un extrait de levure Metschnikowia rubicola
NL2035477B1 (en) * 2023-02-20 2024-09-03 Coty Inc Eye cream formulation
FR3152404B1 (fr) 2023-09-01 2025-09-12 Lvmh Rech Composition cosmetique comprenant un extrait de rose et de l’acide madecassique
FR3155714A1 (fr) 2023-11-24 2025-05-30 L V M H Recherche Association d’extraits de rose et peptide pour la nutrition de la peau

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011045387A1 (fr) * 2009-10-16 2011-04-21 Institut National Polytechnique De Lorraine Inpl Procede d'extraction enzymatique en milieu aqueux d'huiles et de protéines a partir de matière végétale

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2351461A1 (fr) 1976-05-12 1977-12-09 Holzer Walter Dispositif d'avertissement
FR2613622B1 (fr) * 1987-04-09 1990-05-25 Cariel Leon Composition pharmaceutique et/ou cosmetique a activite regulatrice de la pigmentation cutanee
KR20040038243A (ko) * 2002-10-31 2004-05-08 (주)마이코스메틱 생열귀나무 추출물을 함유하는 항산화 또는 항노화용 피부화장료 조성물
KR101134716B1 (ko) * 2005-02-03 2012-05-24 (주)아모레퍼시픽 Ｅｇｃｇ와 장미 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물
US20090143714A1 (en) * 2007-11-29 2009-06-04 Cheri Lynn Millikin Regulation of Mammalian Keratinous Tissue Using Skin and/or Hair Care Actives
US20110217252A1 (en) * 2008-11-11 2011-09-08 Sigma-Tau Industrie Farmaceutiche Riunite S.P.A. Compound useful for treating cellulite
WO2011108821A2 (fr) * 2010-03-02 2011-09-09 Paek Kyung Shin Composition pour la suppression du vieillissement de la peau ou la réduction des rides de la peau, contenant un extrait de dalbergia odorifera, une fraction de celui-ci ou un composé extrait de celui-ci en tant que principe actif
CN102579273A (zh) * 2012-01-19 2012-07-18 浙江万里学院 芸香苷作为酪氨酸酶抑制剂的应用
CN104547989B (zh) * 2014-12-10 2018-03-06 天祝藏族自治县藏医院 一种用于治疗脊椎病的藏药膏剂及其使用方法
CN105456086B (zh) * 2015-11-02 2018-02-02 澳宝化妆品（惠州）有限公司 一种狗牙蔷薇果提取物的制备方法及其应用
FR3051369B1 (fr) * 2016-05-23 2019-06-14 Biolie Extraits de faine de hetre, compositions et utilisations
CN106520452A (zh) * 2016-12-27 2017-03-22 苏州祥林生物科技有限公司 一种含罗汉果刺梨养生露酒及其制备方法
FR3066388B1 (fr) 2017-05-16 2020-05-15 L V M H Recherche Composition cosmetique comprenant des extraits de rose

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011045387A1 (fr) * 2009-10-16 2011-04-21 Institut National Polytechnique De Lorraine Inpl Procede d'extraction enzymatique en milieu aqueux d'huiles et de protéines a partir de matière végétale

Also Published As

Publication number Publication date
CN113316448A (zh) 2021-08-27
FR3090380B1 (fr) 2021-09-17
KR20210107724A (ko) 2021-09-01
JP7387741B2 (ja) 2023-11-28
WO2020126653A1 (fr) 2020-06-25
FR3090380A1 (fr) 2020-06-26
CN118059011A (zh) 2024-05-24
JP2022515409A (ja) 2022-02-18
US20220047495A1 (en) 2022-02-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3781266B1 (fr) Composition cosmétique comprenant un extrait aqueux de fruits de rose
EP3897566A1 (fr) Extrait de bois de rosier
EP3370833B1 (fr) Extrait synergique de palmaria palmata
WO2013072322A1 (fr) Utilisation d&#39;une association de trois principes actifs pour la reconstruction du tissu adipeux et la lutte contre les signes du vieillissement cutané
EP3280497A1 (fr) Extrait hydro-alcoolique de schinus molle, compositions cosmetiques le comprenant et leurs utilisations cosmetiques
FR3043329A1 (fr) Composition cosmetique ou dermatologique et son utilisation
WO2023237833A1 (fr) Composition anti-âge avec extraits de rose et peptides
WO2023111458A2 (fr) Fraction bioactive isolée de roses de la variété evanrat
EP2727579B1 (fr) Principe actif à application cutanée obtenu à partir de Metschnikowia agaves et utilisations pour améliorer l&#39;état de la peau
FR3111543A1 (fr) Nouvelles utilisations d’un extrait de bois de rose
FR3071742A1 (fr) Procede d&#39;utilisation d&#39;un inhibiteur de let-7b en cosmetique et/ou en nutraceutique
EP4072514A1 (fr) Composition cosmétique comprenant des extraits de grenadier et de pivoine
FR3104416A1 (fr) Extraits de bourgeons de roses
FR3090376A1 (fr) Extrait aqueux de fruits de Rose comme agent neuro-protecteur cutané
EP4043005B1 (fr) Composition cosmétique comprenant un hydrolysat de levure
FR3072289A1 (fr) Composition cosmetique de prevention active des signes de l&#39;age
FR3152404A1 (fr) Composition cosmetique comprenant un extrait de rose et de l’acide madecassique
FR3155714A1 (fr) Association d’extraits de rose et peptide pour la nutrition de la peau
FR3036286A1 (fr) Procede d&#39;obtention d&#39;un extrait d&#39;un materiau vegetal et extrait obtenu a capacite d&#39;assimilation optimisee
FR3141349A1 (fr) Principe actif comprenant des cyclitols obtenu d’un extrait de Ginkgo biloba et ses utilisations cosmétiques
FR3143369A1 (fr) Composition cosmétique comprenant un extrait de levure Metschnikowia rubicola
FR3137836A1 (fr) Fraction bioactive isolée de roses de la variété Evanrat pour une utilisation cosmétique apaisante de la peau et/ou des lèvres
FR3052666A1 (fr) Composition cosmetique comprenant un extrait d&#39;amande douce et procede de soin
WO2024074633A1 (fr) Extrait alcoolique de fleurs lys blanc, lilium candidum l., son procédé d&#39;obtention, et composition cosmétique le contenant
FR3116731A1 (fr) Extrait fermenté de miel d’Ikaria

Legal Events

Date Code Title Description
STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: UNKNOWN

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: THE INTERNATIONAL PUBLICATION HAS BEEN MADE

PUAI Public reference made under article 153(3) epc to a published international application that has entered the european phase

Free format text: ORIGINAL CODE: 0009012

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: REQUEST FOR EXAMINATION WAS MADE

17P Request for examination filed

Effective date: 20210713

AK Designated contracting states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AL AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HR HU IE IS IT LI LT LU LV MC MK MT NL NO PL PT RO RS SE SI SK SM TR

DAV Request for validation of the european patent (deleted)
DAX Request for extension of the european patent (deleted)
STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: EXAMINATION IS IN PROGRESS

17Q First examination report despatched

Effective date: 20241028

STAA Information on the status of an ep patent application or granted ep patent

Free format text: STATUS: THE APPLICATION IS DEEMED TO BE WITHDRAWN

18D Application deemed to be withdrawn

Effective date: 20250301