DE2030685A1 - Inhibitoren der Biosynthese von Androgenen - Google Patents

Description

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22. Juni 1970 Gase 10798

MERCK & CO., INC.
Bahway, Eew Jersey, USA

Inhibitoren der Biosynthese von Androgenen

Die Erfindung "betrifft neue Steroidverbindungen und ihre Herstellungsverfahren. Sie "betrifft insbesondere 3-oxygenierte 17-Ureidosteroide der Androstanreihe, die als Inhibitoren der Biosynthese von Androgenen wirksam sind. Diese 17-Ureidoandrostane mit einer Sauerstoffunktion in der 3-Stellung werden ausgehend von einer 5-Pregnen-20-onverbindung mit einer Sauerstoffunktion in der 3-Stellung, wie beispielsweise Pregnenolonacetat, auf folgende Weise hergestellt: (3-oxygeniert bedeutet Sauerstoffunktion in der 3-Stellung) Die 3-oxygenierte 5-Pregnen-20-onverbindung wird mit Hydroxylamin unter Bildung des 20-Oxims umgesetzt, welches anschließend mit Phosphoroxychlorid umgesetzt wird, wodurch die entsprechende 3-oxygenierte 17-Acetamidoandrost-5-enverbindung gebildet wird} letztere Verbindung wird dann unter Bildung der entsprechenden 17-Aminoverbindung hydrolysiert, die nach der Umsetzung mit Kaliumcyanat in die entsprechende 3-oxygenierte 17-Ureidoandrost-5-eaverbindung überführt wird. Wird Pregnenolonacetat per se als Ausgangs-. ; ■■.■·■ . ■■■■- ι -.■■'. . .

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material verwendet, so ist die erhaltene Verbindung das J-Hydroxy-lT-ureido-androst-S-en, das dann unter Bildung von 17-Ureidoandrost-4-en-3-on oxydiert wird.

Diese 3-oxygenierten 17-Ureidoandrostane und ihre ungesättigten Derivate, welche Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind, sind durch die folgende Struktur in Ring D gekennzeichnet:

NHR
C = O
NH

R₁

darin bedeuten R Wasserstoff, Alkyl oder Acyl, und R^ Wasserstoff, α-Methyl, ß-Methyl oder Methylen,

In den Rahmen der vorliegenden Erfindung fallen die Verbindungen der folgenden Pormel:

R₂

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und A⁴-Dehydro- j A⁵-Dehydro-_} Δ¹*⁴-Bis-dehydro-_} Δ⁴' ⁶-Bisdehydro- und A^¹ ' -Tris-dehydroderivateι

darin besitzen R und R, die oben genannten Bedeutungen;

X bedeutet Wasserstoff-oder Halogen; Y bedeutet-Wasserstoff, Keto, Hydroxy oder Niedrigalkanoyloxy;

2 bedeutet Wasserstoff, ß-Hydroxy oder Keto; und Hpι R, und R. bedeuten Wasserstoff, Methyl, Halogen oder Formyl; wie z.B. 17-Ureidoandrost-4-en-3-on, 17-Ureidoan- . drost-1,4-dien-3-on, ^-Ureidoandrost^^-dien^-on, 17-Urei'doandro8t-1,4,6-trien-3-on, 9a-Fluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-4-en-3-on, Sa-Üuor-llß-hydroxy-l?- ureidoandrost~l,4-dien-3-on, 9a-Pluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-4,6-dien-3-on, 9^a-Fluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-l,4,6-trieTi-3-on und 2-Methyl-, 2-Pormyl-, 2-Halo-, 6-Kethyl-, 6-Halo-, vorzugsweise 6-Fluor- oder 6-Chlor- und 7-Kethylderivate davon, einbezogen sind auch 16-(α und ß)-Kethyl-17-ureido-androst-4-en-3-on, l6-(a und ß)-Kethyl-17-ureidoandrost-l,4-dien-3-on, 16-(a und ß)-Kethyl-17-ureidoandrost-4,6-dien-3-on, 16-(α und ß)-Methyl-17-ureidoandrostl,4,6-trien-3-on, 16-(a und ß)-Methyl-9a-fluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-4-en-3-on, 16-(a und ß)-Kethyl-9a-fluorllß-hydroxy-17-ureidoandrost-l,4-dien-3-on, 16-(a und ß)-Methyl-9a-fluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-4,6-dien-3-on, 16-(α und ß)-Kethyl-9a-fluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-1,4,6-trien-3-on j 6,16-Dimethyl-17-ureidoandrost-4-en-3-on, 6,16-Dimethyl-17-ureidoandrost-l,4-dien-3-on, 6,16-Dimethyl-17-ureido-androst-4,6-dien-3-on, 6,16-Dimethyl-17-ureido-androst-l,4,6-trien-3-on, 6,16-Dimethyl-9a-fluor-llßhydroxy-17-ureidoandrost-4-en-3-on, 6,16-Dimethyl-9a-fluorllß-hydroxy-17-ureidoandrost-l,4-dien-3-on, 6,16-Dimethyl-9«-fluor-llß-hydroxy-androst-4,6-dien-3-on und 6,16-Dime-, thyl-9«-fluor-llß-hydrqxy-17-ureidoandrost-l,4,6-trien-3-on und dergleichen.

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Diese neuen 3-oxygenierten 17-Ureidoandrostanverbindungen, diese Bezeichnung soll auch die entsprechenden ungesättigten Derivate einschließen, werden zweckdienlich hergestellt, indem man eine 3-oxygenierte ^-Aminoandrost-S-enverbindung, vrie 3-Hydroxy-17-aminoandrost-5-en, 3-Äthylendioxy-17-aminoandrost-5-en, 3-Äthylendioxy-9^a-fluor-llß-hydroxy-17-aminoarcdrost-5-en und dergleichen mit Kaliumcyanat umsetzt. Die Umsetzung wird vorzugsweise durchgeführt, indem man die Reakiioristeilnehmer zusaninen in wässerig-alkoholischer Lösung erhitzt und dann wässerige Mineralsäurelösung, z.B. wässerige Chlorwasserstoffsäure zur heißen Reaktionslösung hinzufügt, die gewöhnlich für eine kurze, zusätzliche Zeit unter Rückfluß gehalten wird. Die sich dabei ergebende Mischung wird abgekühlt, Wasser v/ird zugefügt und das ausgefallene Material v;ird zweckdienlich durch Abfiltrieren gewonnen. Das so erhaltene Material kann aus einem organischen Lösungsmittel,, wie Methanol, umkristallisiert werden, so daß man in praktisch reiner Form das entsprechende 3-oxygenierte 17-Ureidoar.drost-5-en, wie beispielsweise 3-Hydroxy-17-ureidoandrost~ . 5-en, 3--Äthylendioxy-17-ureido-androst-5-en, 3-Äthylendioxy-9j-fluor-llß-h.ydroxy-17-ureidoandrost-5-en und dergleichen erhält. Ist die 3-oxygenierte 17-Ureidoandrost—5-enverbindung ein 3-Hydroxy-17-ureidoandrost-5-en, so kann diese Verbindung Hit einem OxyöaTionsniittel, v,^rie Gyclohexanon-aluminiuraisopropylat, umgesetzt v;eräer., um das entsprechende 17-Ureidoancrost-4-en-3-cr. herzustellen, ein 3-Äthylendioxy-17-ureidoandrost-5-eri wird nach der Umsetzung mit einem wässerigen, saurer hydrolysierenden Mittel, wie p-Toluolsulfonsäure in wässerigem Methanol, direkt in die entsprechende 17-Ij^Treidoancrost-4-en-3-onverbir.durig überführt, wie das 17-Ureidoandrost-4-en-3-on, 9ct-?luor-llß-hydroxy-17~ureidoandrost-4-en-3-on und dergleichen.

üiese 17-Ureiäoanärost-4-en-3-orie können (nachdem man den 17-Ureido-Substituenten durch. Acylierung geschützt hat) mit

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Dichlordicyanobenzoehinon umgesetzt werden undanschließend mit wässeriger Mineralsäurelösung hydrolysiert werden, wodurch die entsprechende 17-Ureidoandrost-l,4-dien-3-onverbindung gebildet wird, wie 17-Ureidoandrost-l,4-dien-3-on, 9a-Fluor-llßhydroxy-l7-ureidoandrost-l,4-dien-3-on und dergleichen. Falls gewünscht kann die 17-Ureidoandrost-4-en-(oder l,4-dien)-3-onverbindung (nachdem man den 17-Ureido-Substituenten durch Acylierung geschützt hat) mit Chloranil, vorzugsweise in t-Butylalkohol umgesetzt werden, wodurch das entsprechende 17-Ureido. androst-4,6-dien-3-on, 17-Ureidoandrost-l,4,6-trien-3-on, 9a-i^lluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-4,6-dien-3-on, 9a-Pluorllß-hydroxy-17-ureidoandrost-l,4,6-trien-3-on und dergleichen gebildet wird.

Die 3-oxygenierten 17-Ureidoandrostane der vorliegenden Erfindung sind extrem aktiv bezüglich der Verringerung der Biosynthese von testikularen Androgenen, welche die Überentwicklung von Talgdrüsen mit daraus resultierender Akne stimulieren können und die oft eine Prostatavergrößerung erzeugen. Diese 3-oxygenierten 17-Ureidoandrostanverbindungen werden gewöhnlich im Gemisch mit einem pharmakologisch verträglichen festen oder flüssigen Träger verwendet und für die Verabreichung in passenden Dosisformen zubereitet, wie Pillen, Tabletten, Kapseln, Sirups für den oralen Gebrauch, oder in einer flüssigen Porin, die der Verabreichung von Steroidhormonprodukten durch Injektion angepaßt ist; mikrokristalline wässerige Suspensionen oder ölin-Wasser-Suspensionen können für die parenterale Dosierung hergestellt werden; oder die Verbindungen können Cremes, Lotionen und dergleichen für die topische Anwendung einverleibt werden»

Außerdem sind diese 3-oxygenierten 17-öreidoandrostanverbindungen potente Sa-Reduktase-Hemmer. Die 5a-Reduktase isx ein Enzym, das 3-Keto- Δ -steroide in das entsprechende 3-Keto-5adihydrosteroid umwandeln kann (z.B. Testosteron zu 5a-Dihydrotestosteron). Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind daher für die Kontrolle von Stoffwechselstörungen wertvoll, die von der

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Anwesenheit des 5tt-Dihydrosteroidrestes abhängen.

Die folgenden Beispiele erläutern Verfahren zur Herstellung der neuen 3-oxygenierten 17-Ureidoandrostanverbindungen der vorliegenden Erfindung, diese Beispiele dienen jedoch, nur der Erläuterung und sollen die Erfindung nicht einschränken.

Beispiel 1

Eine Lösung von 45 g Natriumhydroxyd in 150 ml V/asser gibt man zu einer Lösung von ungefähr 5 g 3-Acetoxy-17-acetaciicLoandrost-5-en in 350 ml Äthanol. Die resultierende Mischung wird unter Rühren und unter Druck in einer Stickstoffatmosphäre etwa 8 Stunden lang bei einer Temperatur von ungefähr 180⁰C erhitzt. Die Reaktionslösung wird durch Diatomeenkieselerde filtriert und die erhaltene Lösung wird im Vakuum bis zur Bildung eines Sirups eingedampft, man gibt V/asser zu diesem rückständigen Sirup, extrahiert die resultierende Mischung mit Chloroform und wäscht den Chloroformextrakt mit V/asser. Zu der sich ergebenden Chloroformlösung gibt man dann eine wässerige Chlorwasserstoffsäurelösung (2,5n) und filtriert den sich bildenden Niederschlag ab, wäscht mit Chloroform, dann mit Aceton und trocknet, v/obei man ungefähr 4 g 3-Hydroxy-17-aminoandrost-5-en-hydrochlorid erhält.

Ungefähr 5 g 3-Hydroxy-17-aminoandrost-5-en-hydrochlorid v/erden in etwa 50 ml Äthanol suspendiert, zu dieser Suspension gibt man eine Lösung, die etwa 7,5 g Kaliumcyanat in 10 ml Wasser enthält. Die Mischung wird auf einem Dampfbad ungefähr 2 bis 3 Minuten lang erhitzt, man gibt etwa 7,5 ml einer wässerigen 2,5n Chlorwasserstoffsäurelösung hinzu und erhitzt die resultierende Mischung dann etwa 15 Minuten lang unter Rückfluß. Die Reaktionsmischung wird noch heiß filtriert, die filtrierte Lösung wird gekühlt und man gibt Wasser hinzu, bis die Kristallisation vollständig ist. Der kristalline Niederschlag wird

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durch A"b;filtrieren gewonnen, mit Wasser gewaschen und getrocknet, wobei man ungefähr 5 g 3-Hydroxy-17-ureiäoandrost-5-en erhält.

Zu einer »rockenen Lösung, die etwa 5 g 3-Kydroxy-17-ureidoandrost-5-en, 150 =1 Benzol und 25 ml Cyclohexan enthält, gibt ■■man ungefähr 6 g Aluminiunisopropylat. Die resultierende Mischung wird unter Rückfluß ungefähr 3 Stunden lang erhitzt, die Keaktionslösung wird gekühlt und zur abgekühlten Lösung gibt man etwa 1 Ltr. gesättigte Rochelle-Salz-Lösung. Die resultierende Mischung wird dann einer Wasserdampfdestillation unterworfen bis kein Cyclohexanon mehr in der Reakxionsmischung zurückgeblieben ist. Die erhaltene wässerige Mischung wird a b gekühl τ-, mit Chloroform extrahiert, der Chloroformextrakt wird nit vrasser gewaschen, über wasserfreien Natriumsulfat gexrocknet und das Chloroform wird im Vakuum abgedampft. Man kristallisiert das rückständige Material aus Chloroform/-Äthylaeexat und trocknet das kristalline Material, wobei man ungefähr 5 g 17-Ureidoandrost-4--en-3-on erhält.

Bas hier als Ausgangsmaterial verwendete 3-Acetcxy-17-acetamidoandrost-5-en wird zweckdienlich ausgehend von Pregnenolonacetat wie folgt hergestellt:

Eine Lösung, die etwa 54 g Hydroxylasinhydrochlorid und 120 g Natriumaeetat-trihydrat ,gelöst in 200 ml "Wasser enthält, gibt man unter Rühren über einen Zeitraum von ungefähr 5 Minuten zu einer Lösung von.110 g 3-Acetoxy-pregn-5-en-20-on in 2600 ml Methanol. Kurz nach der Zugabe bildet sich ein 17iederschlag. Die resultierende Mischung wird unter Rückfluß ungefähr 2 Stunden lang erhitzt, danach kühlt man die Reaktionsmischung ab. Man gibt 600 ml Wasser hinzu und isoliert das ausgefallene Material durch Abfiltrieren, wäscht mit "Wasser und trocknet und erhält etwa 119 g 3-Acetoxy-20-oximino-pregn-5-en, Pp = 195⁰C.

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Diese 119 g S-Acetoxy^O-oximino-pregn-S—en werden teilweise in 200 ml Pyridin gelöst und die resultierende Mischung wird auf etwa -10- C abgekühlt. Dann gibt man eine Lösung von 100 ml Phosphoroxychlorid in 200 ml Pyridin mit einer solchen Geschwindigkeit zu dieser Mischung, daß die Temperatur zwischen .-15⁰C und -10⁰C gehalten wird. Die resultierende Mischung wird während einer weiteren Periode von ungefähr 3 Stunden bei einer Temperatur von etwa 0 C gerührt und die cremige Reaktionsmi— schung wird langsam auf Eis gegossen. Das ausfallende Material wird durch Abfiltrieren isoliert und in Chloroform gelöst. Die Chloroformlösung wird wiederholt mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck bis zu einem Öl eingedampft, welches nach der Zugabe von Methanol kristallisiert und ungefähr 100 g 3-Acetoxy-17-acetamidoandrost-5-en ergibt.

Beispiel 2

Eine Lösung, die etwa 3 g 17-Ureidoandrost-4-en-3-on in 100 cm⁵ Acetanhydrid enthält, rührt man ungefähr 24 Stunden lang bei etwa 35⁰C. Zu dieser Zeit wird Jegliches aus der Reaktionsmischung abgeschiedene kristalline Material durch Abfiltrieren gewonnen, mit Äther gewaschen und getrocknet. Man erhitzt dann die filtrierte Reaktionsmischung weitere 24 Stunden

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lang auf eine Temperatur von 35 C und das sich abscheidende kristalline Material wird durch Abfiltrieren gewonnen, mit Äther gewaschen, getrocknet und mit dem zuvor isolierten vereinigt, so daß man ungefähr 3 g 17-(N^l-Acetyl)-ureidoandrost-4-en-3-on erhält«,

Man gibt ungefähr 4,5 g 17-(N'-Acetyl)-ureidoandrost-4-en-3-on und 4,5 g Dichlordicyanobenzochinon zu 90 ml Dioxan und erhitzt die resultierende Mischung unter Rückfluß in einer Stickstoffatmosphäre ungefähr 3 Stunden lang, während dieser Zeit findet unter einem Farbwechsel nach tiefrot die Auflösung statt. Man kühlt die Reaktionsmischung ab, fügt Äthylace-

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tat hinzu, damit die Lösung des Produktes gewährleistet ist und filtriert das unlösliche Material ab und wäscht mit Äthylacetat. Die filtrierte Äthylacetat-dioxanlösung wird mit wässeriger In Natriumhydroxydlösung gewaschen, wodurch die tiefrote Farbein der organischen Schicht entfernt wird. Dann wäscht man die organische Schicht_mit Wasser, trocknet über wasserfreiem Natriumsulfat und verdampft die Lösungsmittel unter Vakuum,, wobei man. die !Temperatur unter etwa 40⁰C hält. Das zurückbleibende Material wird getrocknet und ergibt etwa 4,2 g 17-(N'-Acetyl.)-ureidoandrost-l^-dien-^-on. Dieses Material wird chromatographisch an Aluminiumoxyd gereinigt, wohei man Chloroform-Äther-Gemische als eluierendes Lösungs-» mittel verwendet und ungefähr 4 g praktisch reines 17-(N'-Acetyl )~ureidoandrost-l,4-dien-3-on erhält; Pp = 270 bis 272⁰G.

Man löst ungefähr 100 mg 17-(N'-Acetyl)-ureidoandrost-l,4-dien-3-on in etwa 10 cm siedendem Äthanol, gibt 2,5 ml wässerige 2,5n Chlorwasserstoffsäurelösung hinzu und erhitzt die resultierende. Mischung.ungefähr 1 Stunde lang bei Eückflußtemperatur. Man gibt etwa 5 ml Wasser zur Beaktionsmischung hinzu und dampft die sich ergebende wässerige Mischung unter vermindertem Druck auf ein Volumen von ungefähr 3 ml ein. Die resultierende ölige. Mischung wird mit Chloroform extrahiert, der Chloroformextrakt wird mehrmals mit Wasser gewaschen und der gewaschene Chloroformextrakt wird eingedampft, wobei man ein Ql erhält, welches aus Aceton kristallisiert und praktisch reines 17-TJreidoandrost-l,4-dien-3-on ergibt. ■.-■ . ' .

Beispiel 3

.Zu einer Lösung, die· 50 g Testosteron in-900 ml Benzol enthält, gibt man 80 ml:Äthylenglykol und 1,25 g p-Toluolsulfon säure. Die resultierende Mischung wird unter Rückfluß etwa 15 Stunden lang,itt·.einer Vorrichtung erhitzt, die für: die Ab

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trennung von Wasser aus dem Rückfluß-Benzol-Wasser-Kondensat sorgt. Man kühlt die Reaktionalösung ab, gibt 5 ml Pyridin hinzu, um den Katalysator zu zerstören und gießt die Reaktionsmischung in eine gesättigte wässerige Natriumbicarbonatlösung. Dann gibt man ungefähr 200 ml Benzol hinzu, trennt die organische Schicht ab, wäscht sie zweimal mit gesättigter wässeriger Natriumbicarbonatlösung, zweimal mit Wasser und trocknet dann über wasserfreiem Natriumsulfat. Der getrocknete Benzolextrakt wird unter Vakuum eingedampft und das zurückbleibende Material wird aus Methanol kristallisiert, wobei man ungefähr 42 g 3-Äthylendioxy-17S-hydroxyandrost~5-en erhält.

Man löst ungefähr 42 g Chromtrioxyd in 32 ml Wasser und gibt ■ die entstandene wässerige Lösung zu 320 ml Pyridin. Zu dieser Lösung gibt man eine Lösung von 42 g 3-Äthylendioxy-17ß-hydroxyandrost-S'-en in 320 ml Pyridin. Das Vermischen der beiden Lösungen ist von Wärmeentwicklung begleitet und die Mischung wird schwarz, die entstandene Mischung wird etwa 15 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Dann gibt man Wasser zur dunklen Reaktionsmischung (Gesamtvolumen ungefähr 5 Ltr.) und extrahiert die entstandene Mischung mit Äthylacetat, es werden fünf getrennte Extraktionen durchgeführt, wobei man darauf achten muß, daß nicht zu heftig geschüttelt wird, da sich sonst eine Emulsion bildet. Die vereinigten Äthylacetatextrakte werden mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und das Äthylacetat wird unter vermindertem Druck abgedampft. Das zurückbleibende Material wird aus Äther umkristallisiert, wobei man etwa 26 g praktisch reines 3-Äthylendioxyandrost-5-en-17-on erhält, Fp = 191 Ms 194⁰C.■ -

Ungefähr 20 g 3-Äthylendioxy-androst-5-en-17-Qn werden in etwa 720 ml Pyridin gelöst und zu dieser Lösung gibt man eine Lösung,

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die 42 g Hydroxylaminhydrochlorid gelöst in 90 ml Wasser enthält. Die entstandene Lösung wird unter Rückfluß etwa 3 Stunden lang erhitzt. Man kühlt die Reaktionsmischung ab, gibt Wasser hinzu, um das Steroid auszufüllen und isoliert es durch Abfiltrieren, wäscht mit Wasser und trocknet an der Luft, wobei man etwa 17 g 3-Äthylendioxy-17-oximinoandrost-5-en erhält.

Etwa 7.g 3-Äthylendioxy-17-oximinoandrost-5-en werden teilweise in 1,5 Ltr. Äthanol gelöst und man gibt anteilweise etwa 150 g Natriummetall (in kleine Stücke geschnitten) im Verlauf von etwa 5 bis 6 Stunden zu dieser Lösung. Nach etwa 3 Stunden nach Beginn der Zugabe wird die Reaktionsmischung auf eine Temperatur von 110 bis 120⁰C erhitzt und bei dieser Temperatur gehalten, bis das restliche Natrium zugegeben worden ist und sich umgesetzt hat. Dann wird das Erhitzen unterbrochen, 150 ml Wasser werden langsam zur Reaktionslösung hinzugegeben, das Äthanol wird dann im Vakuum verdampft und das weiß gefärbte rückständige Material wird etwa 15 Stunden lang unter Vakuum gesetzt. Man kühlt die entstandene Mischung ab und gibt Wasser hinzu, bis sich ein Niederschlag zu bilden beginnt. Die wässerige Mischung wird dann viermal mit Chloroform extrahiert, die vereinigten Chloroformextrakte werden zweimal mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, im Vakuum eingedampft und das rückständige Material wird aus Äthylacetat umkristallisiert, wobei man etwa 7 g praktisch reines 3-Äthylendioxy-17-aminoandrost-5-en erhält, Fp = 180 bis 182°C.

Etwa 6,7 g 3-Äthylendioxy-17-aminoandrost-5-en werden in 65 ml heißem Äthanol gelöst, zu dieser Äthanollösung gibt man eine wässerige Lösung, die 9,5 g Kaliumcyanat in 13 ml Wasser enthält. Der sich zuerst bildende Niederschlag löst ,sich wieder bei fortgesetztem Erwärmen. Dann gibt man unge-

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fähr 40 ml 2,5n wässerige Chlorwasserstoffsäurelösung in gleichmäßigem Strom zur heißen Reaktionslösung, wobei man den pH oberhalb ungefähr 7 hält., Die entstandene Lösung wird unter Rückfluß etwa 15 Minuten lang erhitzt, während dieser Zeit wird dann abgekühlt, man gibt Wasser hinzu und isoliert das ausgefallene Material durch Filtrieren, wäscht mit Wasser, trocknet an der luft und kristallisiert aus Methanol um, wobei man etwa 7 g praktisch reines 3-Äthylendioxy-17-ureidoandrost-5-en erhält, Pp = 320 C unter Zersetzung.

Eine Mischung, die etwa 7 g 3~lthylendioxy-17-ureidoandrost-5-en, 7 g p-Ioluolsulfonsäure., 700 ml Methanol und 140 ml Wasser enthält, wird bei Raumtemperatur etwa 15 Stunden lang gerührt. Die wässerig-methanolische Reaktionslösung wird dann im Vakuum eingedampft, bis die zurückbleibende Lösung trübe wird; dann gibt man Wasser hinzu und extrahiert die entstandene wässerige Mischung viermal mit Chloroform„ Die vereinigten Chloroformextrakte werden mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und das Chloroform wird im Vakuum abgedampft, wobei man etwa 7,0 g rohes 17™Ureidoandrost-4-en-3-on erhält. Dieses Material wird durch Chromatographie unter Verwendung einer Aluminiumoxydkolonne und unter Verwendung von Chloroform als Entwicklungs- und Eluierungslösungsmittel gereinigt, das teilweise gereinigte Material wird aus Methanol kristallisiert, wobei man etwa 4 g praktisch reines 17-Ureidoandrost-4~en-3-on in Form seines Dihydrates erhält, Fp = 2o8 bis 209⁰C.

B eispiel 4

Kan löst ungefähr 13 g 3-Äthylendioxy-llß, 17a-20,21-tetrahydroxy-9^a-fluor-pregn~5-en in 100 ml Pyridin, die Lösung wird filtriert, wodurch unlösliches Material entfernt wird und die entstandene lösung wird mit 100 ml Methanol verdünnt.

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Die entstandene Lösung wird bei einer Temperatur von ungefähr 25°C gehalten, während man eine Lösung hinzufügt, die etwa 24,5 g Perjodsäure in 100 ml Wasser enthält, die Mischung wird etwa 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Dann gibt man ungefähr 100 ml 10 $ige wässerige Natriumbicarbonatlösung zur Reaktionsmischung, gibt nochmals Wasser hinzu und extrahiert die wässerige Mischung mit Chloroform. Der Chloroformextrakt wird mit gesättigter wässeriger NatriumchloridlösuBg gewaschen, getrocknet und im Vakuum eingedampft, die zurückbleibende Mischung wird mit Äther verrieben, wobei ein kristallines Material gebildet wird, welches durch Abfiltrieren isoliert wird, getrocknet wird und etwa 4 g 3-Äthylencü.oxy-9afluor-llß-hydroxyandrost-5-en-17-on ergibt.

Eine Lösung von etwa 5_S4 g Hydroxylaminhydrochlorid und 12 g Natriumacetat-trihydrat in 20 ml Wasser gi'Lt man Hinter Rühren im Verlaufe von ungefähr 5 Minuten zu einer Lösung, die etwa 11 g 3-Äthylendioxy-9a-fluor-llß~hydroxyandrost-5-en-17-on gelöst in 260 ml Methanol enthält. Kurz nach der Zugabe bildet sich ein Niederschlag. Die entstandene Mischung wird ungefähr 2 Stunden lang am Rückfluß erhitzt, danach wird die Seaktionsmischung abgekühlt. Man gibt etwa 60 ml Wasser hinzu und isoliert das ausgefallene Material durch Abfiltrieren, wäscht mit Wasser und trocknet und erhält etwa 11 g 3-Äthylendioxy-9afluor-llß-hydroxy-17-oximinoandrost-5~en.

Zu einer Lösung, die etwa 5,4 g 3-lthylendioxy-9a-fluor-llßhydroxy-17-oximinöandrost-5-en gelöst in 200 ml Dioxan enthält, gibt man etwa 3 ml Raney-Nickel-Katalysator und/ schüttelt die Mischung etwa 17 Stunden lang bei einem Druck von ungefähr 2,95 kg/cm (42 lbs/in. ). Am Ende dieses Zeitraumes gibt man nochmals 1,5 ml Raney-Nickel-Katalysator hinzu und setzt das Schütteln nochmals 26 Stunden lang in Berührung mit Wasserstoff fort, dann gibt man nochmals 1,5 nü. Raney-Nickel-KataXysator hinzu und das Schütteln in Berührung mit Wasserstoff wird iioch-

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mais 30 Stunden lang fortgesetzt, nach Ablauf dieser Zeit ist die theoretische Wasserstoff menge absorMert v/orden. ; Der Katalysator wird dann durch Filtration über Diatomeenkieselerde entfernt, der Filterkuchen wird mit Äthanol gewaschen und die filtrierte lösung wird unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft, wobei man ungefähr 5 g 3-Äthylendioxy-9«-fluor-llS-hydroxy-17-amiBoandrost-5-en erhält.

Etwa 6,7 g 3-lthylendioxy-9ffi-fluor-llß-hydroxy-17-aiHinoandrost-5-en werden in 65 ml heißem Äthanol gelöst, zu dieser Äthanollösung gibt man eine wässerige Lösung, die 9»5 g Kaliumcyanat in 13 ml Wasser enthält. Der sich zuerst bildende Niederschlag löst sich wieder bei fortgesetztem Erhitzen. Dann gibt man ungefähr 40 ml einer wässerigen 2,5n Chlorwasserstoffsäurelösung in gleichmäßigem Strom zur heißen Reaktionslösung, wobei man den pH oberhalb etwa 7 hält. Die resultierende Lösung wird etwa 15 Minuten lang unter Rückfluß erhitzt,dabei erscheint ein Miederschlag. Dann wird die Reaktionsmiseliusg abgekühlt, Wasser zugefügt und das ausgefallene Material durch Abfiltrieren gewonnen, mit Wasser gewaschen, "an der luft getrocknet und aus Methanol umkristallisiert, wobei man etwa 7 g praktisch reines 3-Äthylendioxy-9^a-flBor-llß-hydroxy-17-^>iireidoaiidrost»- 5-en erhält.

Eine Mischung, die etwa 7 g 3-Äthylendioxy-9K-fluor-llß«ⁱ hydroxy-17-ureidoandrost-5-eBs, 7 g p-Ioluolsulfonsäure, 700 ml Methanol und 140 ml Wasser enthält, wird bei -Raumtemperatur etwa 15 Stunden laag gerührt«, Die wässerige methanolische ReaktionslösnBg wird dann im Vakuum eingedampft, bis die RestlösuBg trübe wird« Dana gibt mau Wasser hinzu und extrahiert die entstandeae wässerige Mischung 4-mal mit Chloroform,, Die vereinigten Gl .■werden mit Wasser gewasclieBj, über was fat getrocknet und das CMorofem wlrä, la ¥a&&nm abgedampft

BAD ORlCaINAL

wobei nan etwa 7,8 g rohes 9a-Fluor~llB-hydroxy-17-u.reidoandrost-4-en-3-on erhält. Dieses Material wird chroiaatographisch unter Verwendung einer Aluminiumoxydkolonne und ChIoroforx als Sntwicklungs- und Eluierungslösungsmittel gereinigt. Bas teilweise gereinigte Material wird aus Methanol kristallisiert, wobei man etwa 4 g praktisch reines 9a-Fluor-113-hydroxy-17-ureidoandrost-4-en-3-on erhält.

Bas als Ausgangssaterial in diesem Beispiel verwendete 3-Äthylendioxy-lia,17a,20,21-tetrahydroxy-9a-fluor-pregn-5-en wird zweckdienlich hergestellt, indem man 9a-Fluorcortisonacetat sit Äthylenglykol in Anwesenheit von p-Toluolsulfonsäure umsetzt, dadurch 3-Äthylendioxy-9α-fluor-17«-hydroxy-21-acetoxy-pregn-5-en-ll,20-dion bildet, das dann mit LithiuEaluainiuEihydrid umgesetzt wird, wodurch die Keto— gruppierungen in den 3- und 20-Stellungen reduziert werden und gleichzeitig der 21-Acetoxysubstituent unter Bildung von 3-Äthylendioxy-llß,l7a-20_!)21-tetra3iydroxy~9ö''-flTaorpregn-5-en verseift wird.

B ei s ρ i e 1 5

Eine Lösung, die etwa 3 g 9a-Fluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-4-en-3-on in 100 cm Acetanhydrid enthält, wird bei etwa 35 °C ungefähr 24 Stunden lang gerührt. Zu dieser Zeit wird jegliches aus der Reaktionsmischung abgeschiedenes kristallines Material durch Filiration gewonnen, mit Äther gewaschen und getrocknet. Die filtrierte Reaktionsmischung wird dann bei einer Temperatur von 35⁰C nochmals 24 Stunden lang erhitzt und das sich abscheidende kristalline Material wird durch Abfiltrieren isoliert, mit Äther gewaschen, getrocknet und mit dem zuvor gewonnenen Material vereinigt, wobei man ungefähr 3 g 9a-Fluor-llß-hydroxy-17-(^'-acetyl)-ureidoandrost-4-en-3-on erhält.

- 15 -.

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10798 ^G

Man gibt etwa 4,5 g 9a-Fluor-llß-hydroxy-17-(N'-acetyl)-ureidoandrost-4-en-3-on und 4,5 g Dichlordicyano-benzochinon zu 90 ml Dioxan und erhitzt die entstandene Mischung unter Rückfluß in einer Stickstoffatmosphäre ungefähr 3 Stunden lang, während dieser Zeit findet eine Auflösung unter Farbwechsel nach tiefrot statt. Die Reaktionslösung wird abgekühlt, man gibt Äthylacetat hinzu, um zu gewährleisten, daß das Produkt gelöst ist und filtriert das unlösliche Material ab und wäscht mit Äthylacetat. Die filtrierte Äthylacetat-Dioxanlösung wird mit wässeriger In Natriumhydroxydlösung gewaschen, dabei wird die tiefrote Farbe der organischen Schicht entfernt. Die organische Schicht wird dann mit V/asser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und die Lösungsmittel werden im Vakuum abgedampft, wobei die Temperatur unter etwa 40⁰C gehalten wird« Man trocknet das rückständige Material und erhält etwa 4,2 g 9a-Fluor-llß-hydroxy-17-(N'-acetyl)-ureidoandrost-l,4-dien-3-on.

Man löst ungefähr 100 mg 9^a-I'luor-llß-hydroxy-17-(N^t~acetyl)-ureidoandrost-l,4-dien-3-on in etwa 10 cnr siedendem Äthanol, gibt 2,5 ml einer wässerigen 2,5n Chlorwasserstoffsäurelösung hinzu und erhitzt die entstandene Mischung ungefähr eine Stunde lang bei Rückflußtemperatür. Man gibt etwa 5 ml Wasser zur Reaktionsmischung hinzu und dampft die entstandene wässerige Mischung unter vermindertem Druck auf ein Volumen von ungefähr 3 ml ein. Die entstandene ölige Mischung wird mit Chloroform extrahiert, der Chloroformextrakt wird mehrmals mit Wasser gewaschen und der gewaschene Chloroformextrakt wird eingedampft und ergibt ein Öl, welches aus Aceton kristallisiert und praktisch reines 9^a~I'luor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-l,4-dien-3-on ergibt.

B e i s ρ i e 1 6

Zu einer Suspension von 0,5 g 9a-Fluor-llß-hydroxy-17~(N^racetyl)-ureidoandrost-4-en«-3-on in 2 ml trockenem Tetrahydrofuran gibt man etwa 0,75 ml Triäthylorthoformiat, - 16 -

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BAD ORIQINAL

10798 ^^

0,27 ml Äthanol und 0,1 g p-Toluolsulfonsäure. Die entstandene Mischung wird "bei Raumtemperatur etwa 1 Stunde lang ge-* rührt, am Ende dieses Zeitraums dunkelt die entstandene Lösung ein wenig. Dann gibt man eine geringe Menge Pyridin hinzu, wodurch der p-Toluolsulfonsäurekatalysator neutralisiert wird, man gibt Wasser hinzu und isoliert den gebildeten niederschlag durch Filtration, wäscht mit Wasser und löst dann in Chloroform. Die ChIoroformlösung wird zweimal mit Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, unter vermindertem Druck eingedampft und das rückständige Material wird aus Äthylacetat kristallisiert, wobei man etwa 0,4 g 3-Äthoxy-9a-fluor-llß-hydroxy-17-(M'^l-ace-^.)-ureidoandro'st-3,5-dien erhält. ■

Ungefähr 0,7 g 3-Äthoxy-9a-fluor-llß-hydroxy-17--(3i'-aeetyl)-ureidoandrost-3,5-dien gibt man zu etwa 5,25 ml t-Butylalkohol und anschließend etwa 1,6 g Chloranil. Die entstandene Mischung wird in einem Ölbad unter Stickstoff auf Rückflußtemperatur erhitzt. Beim Erhitzen findet vollständige Auflösung und anschließend ein Dunkelwerden der Reaktionsmischung statt. Nachdem man die entstandene Lösung etwa 1/2 Stunde lang bei Rückflußtemperatur erhitzt hat, wird die Reaktionsmischung auf etwa JO⁰C abgekühlt und das überschüssige Chloranil durch Filtration abgetrennt. Die filtrierte Lösung wird im Vakuum eingedampft, das zurückbleibende Material wird mit Chloroform extrahiert und die organische Lösung wird mit 10 folgern wässerigem Natriumbisulfit gewaschen, dann mit einer wässerigen 0,5n Natriumhydroxydlösung und schließlich mit Wasser. Der gewaschene Chloroformextrakt wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und das Chloroform wird unter vermindertem Druck abgedampft. Das rückständige Material "wird durch Chromatographie an einer Aluminiumoxydkolonne unter Verwendung von Benzol als Entwicklungslösungsmittel und Äther-Chloroform-Gemischen als Eluierungsmittel gereinigt. Das chromatographierte Material wird aus Benzol umkristallisiert, wo-

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bei man praktisch reines ga ureidoandrost-4,6-dien-3-on erhält.

Man löst ungefähr 100 mg 9a-Fluor-llß-hydroxy-17--(N'--acetyl)-ureidoandrost-4 >6-dien-3-on in etwa 10 cm siedendem Äthanol, gibt 2,5 ml einer wässerigen 2,5n Chlorwasserstoffsäurelösung hinzu und erhitzt die entstandene Mischung während ungefähr 1 Stunde "bei Rückfluß temperatur. Man gibt etwa 5 ml Wasser zur Eeaktionsmischung und dampft die entstandene wässerige Mischung unter vermindertem Druck bis zu einem Volumen von ungefähr 3 ml ein. Die entstandene ölige Mischung wird mit Chloroform extrahiert, der Chloroformextrakt wird mehrmals mit V/asser gewaschen und der gewaschene Chloroformextrakt wird bis zu einem Öl eingedampft, welches aus Aceton kristallisiert und praktisch reines 9a-Fluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-4_t6-dien-3-on ergibt.

Beispiel 7

Ungefähr 0,7 g 9a-Pluor-llß-hydroxy-17-(li-acetyl)-ureidoandrost-l,4-dien-3-on, hergestellt wie in Beispiel 5 oben beschrieben, gibt man zx ungefähr 5,25 ml t-Butylalkohol, anschließend werden 1,6 g Chloranil zugefügt. Die entstandene Mischung wird in einem Ölbad unter Stickstoff bei RüekfluS-temperatur erhitzt. Beim Erhitzen findet völlige Auflösung statt, anschließend dunkelt die Reaktionsmischung,. Nachdem man die entstandene lösung etwa 1/2 Stunde lang bei Rüekflußtemperatur erhitzt hat, wird die Reaktionsmischung auf etwa 30⁰C abgekühlt und das überschüssige Chloranil durch Filtration abgetrennt. Man dampft die filtrierte Lösung im Vakuum ein, extrahiert das rückständige Material mit Chloroform und wäscht die organische Lösung mit 10 %igem wässerigem Natriumbisulfit, dann mit einer wässerigen 0,5n iTatriumhyaroxydlösung und schließlich mit Wasser. Der gewaschene Chloroformextrakt wird über wasserfeiem Natriumsulfat getrocknet und

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BAD ORIGINAL

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das Chloroform wird unter vermindertem Druck abgedampft. Das zurückbleibende Material wird durch Chromatographie an einer AluEiniumoxydkolonne gereinigt, wobei man Benzol als Entwicklungslösungsmittel und Äther-Chloroform-Gemische als Eluierungsmittel verwendet. Das chromatographierte Material wird aus Benzol umkristallisiert, wobei man praktisch reines 9a-Fiuor-llß-hydroxy-17-(N'-acetyl)-ureidoandrost-l,4t6-trien-3-on erhält*

Man löst ungefähr 100 mg 9a-Fluor-llß-hydroxy-17-(N'-acetyl)-ureidoandrost-l,4,6-trien-3-on in etwa 10 cm siedendem Äthanol, gibt 2,5 ml einer wässerigen 2,5n Chlorwasserstoffsäurelösung hinzu und erhitzt die entstandene Mischung ungefähr 1 Stunde lang bei Rückflußtemperatur. Man gibt etwa 5 ml Wasser zur Reaktionsmischung und dampft die entstandene wässerige Mischung unter vermindertem Druck auf ein Volumen von ungefähr 3 ml ein. Die entstandene ölige Mischung wird mit Chloroform extrahiert, der Chlorofonaextrakt wird mehrmals mit Wasser gewaschen und der gewaschene Chloroformextrakt wird eingedampft, wobei man ein Öl erhält, welches aus Aceton kristallisiert und praktisch reines 9a-Fiuor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-1,4,6-trien-3-on ergibt.

Bei der Durchführung der vorliegenden Erfindung können verschiedene Veränderungen und Modifikationen vorgenommen werden, ohne daß dadurch der Rahmen der vorliegenden Erfindung verlassen wird.

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Claims (1)

1. 22. Juni I97O Case 10798

   MERCK & CO., INC.
   Rahway, New Jersey, USA

   PATENTANSPRÜCHE

   1·/ Verfahren zur Herstellung von 3-oxygenierten 17-Ureidoandrostanverbindungen, dadurch gekennzeichnet, daß die entsprechende 3-oxygenierte 17-AminoandrostanverlDindung mit Kaliumcyanat umgesetzt wird.

   2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß eine 3-oxygenierte 17-Amino-androst-5-enverbindung mit Kaliumcyanat umgesetzt wird, um die entsprechende 3-oxygenierte lT-Ureidoandrost-S-enverbindung herzustellen.

   3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, · daß die als Ausgangsmaterial verwendete 3-oxygenierte 17-Aminoandrostanverbindung das 3-Hydroxy-17-aminoandrost-5-en ist und die erhaltene 3-oxygenierte 17-Ureidoandrostanver-Mn dung das 3-Hydroxy-17-ureidoandrost-5-en ist.

   4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet,

   daß das 3-Hydroxy-17-aminoandrost-5-enausgangsmaterial durch Umsetzung von 3-Acetoxy-20-oximino-pregna-5-en mit Phosphoroxychlorid in Pyridin und anschließende alkalische Hydrolyse des intermeöären 3-Acetoxy-17-acetamidoandrost-5-en hergestellt wird.

   5. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß das entstandene 5-Hydroxy-17-ureidoandrost-5-en mit einem

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   BAD ORIGINAL.

   Oxydationsmittel unter Bildung von 17-Ureidoandrost-4-en 3-on umgesetzt wird. .

   3-Oxygenierte 17-Ureido-androstanverbindungen.

   7. 3-Oxygenierte 17-Ureidoandrostanverbindungen nach spruch 6, gekennzeichnet durch die folgende Struktur in Ring D:

   NHR

   C = 0

   NH

   in der R Wasserstoff, Alkyl oder Acyl bedeutet und R-, Wasserstoff, α-Methyl, ß-Methyl oder Methylen bedeutet.

   8. 3-Oxygenierte 17-Ureidoandrostanverbindungen nach Anspruch 6, gekennzeichnet durch die folgende allgemeine Formel:

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   ORIGINAL INSPECTED

   10798 W-

   sowle die ΔΛ-Dehydro-? A5-])_ehydro-i Αν -Bis-dehydro-f
   A^4>6-Bis-dehydro und A^1>4>6-Tris-dehydroderivate,
   worin R Wasserstoff, Alkyl oder Acyl,
   R- Wasserstoff, α-Methyl, ß-Methyl oder Methylen,
   X Wasserstoff oder Halogen, ;

   Y Wasserstoff, Keto, Hydroxy oder Niedrigalkanoyloxy,
   Z Wasserstoff, ß-Hydroxy oder Keto, und

   R₂, R₅ und R- Wasserstoff, Methyl, Halogen oder Formyl bedeuten. !

   9. lT-Ureidoandrost-A-en-^-on. {

   10. 17-Ureidoandrost-l,4-dien-3-on. j

   11. 17-Ureidoandrost-4,6-dien-3-on. ,

   12. 9a-Fluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-4-en-3-OB. ;

   13. 9a-Pluor-llß-hydroxy-17-ureidoandrost-l,4-dien-3-on. j

   14. 16α-Methyl-17-ureidoandrost-4-en-3-on. i

   15. 16a-Methyl-17-ureidoandrost-l,4-dien-3-on. j

   16. lea-Methyl^a-fluor-llfl-hydroxy-^-ureidoandrost- \ 4-en-3-on. j

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