DD200799A5

DD200799A5 - Verfahren zur herstellung von peptiden

Info

Publication number: DD200799A5
Application number: DD81234210A
Authority: DD
Inventors: Paul D Gesellchen; Robert T Shuman
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1980-10-20
Filing date: 1981-10-19
Publication date: 1983-06-15
Also published as: NZ198626A; EP0050503A1; PT73840B; FI813199L; KR830007517A; DE3164594D1; PL131156B1; ZA817062B; US4322339A; IL64084A0; ES8301203A1; GB2085892B; DK461581A; CA1187872A; GB2085892A; ATE8252T1; PL233499A1; RO83297B; EP0050503B1; AU7657581A

Abstract

Verfahren zur Herstellung neuer Peptide der Formel und ihrer pharmazeutisch unbedenklichen Salze, mit folgenden Bedeutungen der darin enthaltenen Symbole: R = Wasserstoff, Methyl oder Ethyl, A = Aminosaeurerest von Ala, Abu, Nva, Val, Leu, Ile, Gly(Al), Gly(Cp), Met, Cys(Me), Met(O),Ser, Thr oder Hse,R tief 1 = Wasserstoff, C tief 1-C tief 3- Alkyl, Cyclopylmethyl, Allyl oder Propargyl, X= Brom, lod, Chlor, C tief 1 C tief 3-Alkyl, Trifluormethyl oder C tief 1- C tief 2- Alkoxy, B = Brueckenrest einer D- oderL- Aminosaeure ohne Carboxylgruppe von Gly, Ala, Abu, Nva, Val, Nle,Leu, Ile, Pgl, Cys(Me), Cys(Me)(O tief 2), Cys(Et)(O) Cys(Et)(O tief 2), Eth, Eth(O), Eth(O) tief 2, Ser(Me)Ser(Et), Hse(Me) oder Hse Et oder ein am Aminostickstoff durch C tief 1-C tief 3-Alkyl substituierter Rest dieser Art, mitR tief 2 = Wasserstoff oder C tief 1 C tief 3-Alkyl, durch Abspaltung der Schutzgruppen von einer entsprechend geschuetzten Verbindung der allgemeinen Formel I mit einem Deblockierungsmittel. Die hiernach erhaeltlichen neuen Peptide zeichnen sich durch eine besondere interesante analgetische Wirksamkeit aus.

Description

Aktenzeichen: X-5567

Anmelder; Eli Lilly and Company, Indianapolis, Indiana, V.St.A.

Vertreter: Patentanwaltsburo Berlin

Titel der Erfindung: Verfahren zur Herstellung von Peptiden

Anwendungsgeblet, der ,-Erf i,nduaigr:;;;ν "ΐούοΐ-·.^- ::?ΐΘ.?ίπ-;^ε>πί:νϊ :riOB&e-l rnu^ed^sv nsrnrisrUi^M ίίβοπβοχοΐ 'isb si Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer neueni-Kiasse. .^on: P,eptdjden> rd<ie/jszich'durch reine! /Besondere analgetische Wirksamkejit,rausjZjeißhnen.iOBo -CI

Charakteristik der bekannten;

)j άΟΎίίΟ Ir P ill: Ii ':i ?t' " i Θ Λ ^c< HOV Pil U IbHBWdA (O)

,,kur^z^r .Zeit .wurden ^endogene, igvtbjstanz^ehümit morphinähnlichen Eigenschaften „aus: Säugefcteirtoirniiodenc: Cerebralspinal flüssigkeit extrahiert. Diese Substanzen werden als Enkephaline, bözeÄchnefeio :)ΐ^η4; ;hdve;rbei-_; ^andeli^es/^sabchivgertSriß Nature ,_:

ior;i.ciiaO

H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-OH oder

Im,,einzelnen.; bezeichnet;;ΐΜη; ^diiöseii^eirbindungen;i^liSi ..ninenkephali.!!, töder; _;rli_;eue inenkepih^ldjt .i s j c, λ i. η ßm m ^ b

Methxoninenkephalin und Leucinenkephalin haben sich bei intracerebroventrikularer Verabreichung an Mäuse als analgetisch wirksam erwiesen (Nature 261, 423 (1976), sie verfügen nach parenteraler Verabfolgung jedoch über keinerlei brauchbare analgetische Wirksamkeit.

Seit der Auffindung der Enkephaline wurden große Anstrengungen zur Herstellung von zu den Enkephalinen analogen Verbindungen in der Hoffnung unternommen, hierdurch zu Verbindungen mit verbesserter Wirksamkeit und praktischer Anwendbarkeit infolge einer Bioverfügbarkeit durch parentera-Ie oder orale Verabreichung zu gelangen. In Life Sciences 21, Seiten 559 bis 562 (1977) wird über bestimmte Strukturmodifikationen berichtet, die zu einer Verbesserung der Wirkungsstärke führen sollen. Demnach soll sich die Wirksamkeit solcher Verbindungen durch irgendeine oder alle der folgenden Maßnahmen verbessern lassen:

(a) Ersatz von GLy in Stellung 2 durch bestimmte D- oder ^-Azaaminosäuren;

(b) Umwandlung der endständigen Carboxylgruppe zum Methylester oder Amid;

(c) Abwandlung von Phe in Stellung 4 durch oc-Azasubstitution, N-Methylierung oder Hydrierung des aromatischen Rings.

Als weitere brauchbare Modifikationen werden in Nature 268, Seiten 547 bis 549 (1977) ferner eine Abwandlung von Met zum entsprechenden Carbinol und eine Oxidation des Schwefels von Met zum SuIfoxid vorgeschlagen.

Andere interessante Strukturabwandlungen gehen aus BE-PS 859 026 hervor. Hiernach sollen sich Wirksamkeit und Bioverfügbarkeit von Enkephalinanalogen verbessern lassen, indem man in Stellung 2 einen D-Aminosäurerest einführt,

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die endständige Carboxylgruppe in ein Amid überführt und den in Stellung 5 vorhandenen Aminosäurerest N-alkyliert.,

Aufgabe der Erfindung;

Bei den Enkephalinen handelt es sich an sich um sehr interessante Verbindungen, die allerdings in ihrer Wirksamkeit und ihrem Wirkungsspektrum noch sehr verbesserungsbedürftig sind. Aufgabe der Erfindung ist daher die Schaffung einer neuen Klasse von Analogen von Enkephalin, die sich durch eine besonders hohe analgetische Wirksamkeit und ein verbreitertes interessantes Wirkungsspektrum auszeichnen.

Darlegung des Wesens der Erfindung:

Die obige Aufgabe wird nun durch eine neue Klasse von Verbindungen gelöst, die zu Enkephalin analog sind und über ein hohes Ausmaß an analgetischer Wirksamkeit verfügen. Neben ihrer besonderen analgetischen Wirksamkeit verfügen diese neuen Enkephalinanalogen über ein hohes Ausmaß an Bindung am Enkephaling-(6)-Rezeptor im Vergleich zu ihrem Bindungsverhalten am Morphin-^)-Rezeptor· Infolgedessen verfügt diese neue Verbindungsklasse auch über nur geringere morphinähnliche Nebenwirkungen.Infolge der erhöhten Enkephalinrezeptoraktivität eignen sich diese neuen Analogen auch besonders zur Behandlung von Schizophrenie. Sie stellen Enkephaline mit einem ringsubstituierten Phenylalanin dar. Sie verhalten sich äußerst spezifisch sowohl bezüglich der Identität als auch der Stellung der Substitution. Sie sind insbesondere Pentapeptide mit dem Rest eines metasubstituierten L-Phenylalanins in Stellung 4 des Peptids.

Aus der Literatur sind bereits andere ringsubstituierte

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4-Phenylalanylenkephalinanaloge bekannt, bei denen es sich jedoch um keine metasubstituierten 4-Phenylalanylenkephalinanalogen handelt. Aus Res. Conun. in Chem. Path, and Pharmacol. 14 (4), 597 bis 603 (1976) ist beispielsweise das H-Tyr-Gly-Gly-pClPhe-Nle-OH bekannt. In Vitamins and Hormones 36, 297 bis 382, Academic Press (1978) werden H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe-D-Leu-OH, H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe-D-Leu-OMe und H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe-D-Leu-NHEt erwähnt. Im Referat mit dem Titel "Opioid Activity of Enkephalin Analogues" am 15. Europäischen Peptid-Symposium vom 04. bis 09. September 1978 in Gdansk, Polen, wird über H-Tyr-D-Ala-Gly-pClPhe-Met(0)-ol berichtet. In BBRC 83 (3), 977 bis 983 (1978) wird H-Tyr-D-Ala-Gly-F^he-Met-Nl·^ erwähnt. In ZA-PS 77/0579 werden allgemein Pentapeptidenkephalinanaloge beschrieben, die am Ring des Phenylalanylrests verschiedenartig substituiert sind. Aus BE-PS 886 677 sind Pentapeptidenkephalinanaloge bekannt, die ein p-fluorsubstituiertes Phenylalanin enthalten. In einem Vortrag mit dem Titel "Structural Pharmacology and Neurobiology of the Enkephalins and Endorphins am 176. Amer. Chem. Soc. Nat'l. Mtg., vom 11. bis 14. September 1978 in Miami Beach, Florida wird auf bestimmte Enkephalinanaloge hingewiesen,, die in Stellung 4 ein p-substituiertes Phenylalanin aufweisen, und zwar insbesondere auf p-chlor- und p-bromsubstituierte Phenylalaninverbindungen. In Life Sciences 22, 1931 bis 1938 (1978) werden mehrere Enkephalinanaloge beschrieben, und zwar insbesondere zwei p-chlorsubstituierte Phenylalaninanaloge und ein p-methoxysubstituiertes Phenylalaninanaloges.

In keiner der oben erwähnten Literaturstellen werden jedoch die erfindungsgemäßen Verbindungen der im folgenden angegebenen allgemeinen Formel I erwähnt, und es wird darin auch nirgends davon berichtet, daß sowohl die Identität

als auch die Stellung des Substituenten am L-Phenylalanin eine wichtige Rolle im Zusammenhang mit dem Ausmaß an analgetischer Wirksamkeit und damit verbundenen Eigenschaften des jeweiligen Enkephalinanalogen spielt.

Im einzelnen wird die obige Aufgabe nun erfindungsgemäß gelöst durch ein Verfahren zur Herstellung von Peptiden der allgemeinen Formel I

(I)

und den pharmazeutisch' unbedenklichen, nichttoxischen Säureadditionssalzen hiervon, worin R Wasserstoff, Methyl oder Ethyl ist, A für den Rest einer D-Aminosäure aus der Gruppe

AIa, Abu, Nva, VaI, Nie, Leu, He, GIy(Al), GIy(Cp), Met, Cys(Me), Met(O), Cys(Me)(O), Ser, Thr oder Hse steht, R, Wasserstoff, primäres C,-C^-Alkyl, Cyclopropylme-

thyl, Allyl oder Propargyl bedeutet, X Brom, Iod, Chlor, C,-C₃-Alkyl, Trifluormethyl oder C,-C₂-Alkoxy ist,

B für den Rest einer D- oder L-Aminosäure ohne dessen Carboxylgruppe steht und ausgewählt ist aus der Gruppe GIy, Ala, Abu, Nva, VaI, Nie, Leu, He, PgI, Cys(Me), Cys(Me)(O), Cys(Me)(O₂), Cys(Et), Cys(Et)-(O), CyS(Et)(O₂), Met, Met(O), Met(O₃), Eth, Eth(O), Eth(O₂), Ser(Me), Ser(Et), Hse(Me) oder Hse(Et) oder

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irgendeinem Rest dieser Art, der am Aminostickstoffatom durch primäres C,-Cj-Alkyl substituiert ist, und O O

It

Z für -CH₂OR₂, -C-NHR₂ oder -C-OR₂ steht, worin

R₂ Wasserstoff oder C,-C₃-AlKyI ist,

mit der Maßgabe, daß, falls R, eine andere Bedeutung als Wasserstoff hat, dann B für den Rest einer Aminosäure steht, die am Aminostickstoffatom keinen Subs^ituenfcen aufweist,. das dadurch gekennzeichnet ist, daß man von dem entsprechend geschützten Peptid der allgemeinen Formel I die Schutzgruppen mit einem geeigneten Deblockierüngsmittel abspaltet.

Diese Schutz- oder Blockierungsgruppen können an irgendeiner der Aminosäuren oder am Harzträger vorhanden sein, der bei der Festphasensynthese verwendet wird. Bei den im geschützten Peptid vorhandenen Schutzgruppen handelt es sich daher um herkömmliche Schutzgruppe?!, wie sie bei Peptidsynthesen zum Schutz von Aminosäuren beim Kupplungsverfahren verwendet werden und ferner auch beim Harzträger vorhanden sind, der bei entsprechenden Synthesen in fester Phase eingesetzt wird.

Zur Erfindung gehört ferner auch ein pharmazeutisches Mittel aus einem üblichen Hilfsstoff und einem Wirkstoff, das dadurch gekennzeichnet ist, daß es als Wirkstoff ein Peptid der oben angegebenen allgemeinen Formel I enthält.

Weiter gehören zur Erfindung auch die pharmazeutisch unbedenklichen nichttoxischen Säureadditionssalze der Peptide der oben erwähnten allgemeinen Formel I. Zu solchen pharmazeutisch unbedenklichen nichttoxischen Säureadditionssalzen gehören sowohl die organischen als auch die anorganischen Säureadditionssalze, wie sie sich beispielsweise unter Verwendung von Säuren herstellen lassen, wie Chlor-

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wasserstoffsäure, Schwefelsäure, Sulfonsäuren Weinsäure, Fumarsäure, Bromwasserstoffsäure, Glykolsäure> Citronensäure, Maleinsäure, Phosphorsäure, Bernsteinsäure, Ameisensäure, Essigsäure, Salpetersäure, Benzoesäure, Ascorbinsäure, p-Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure_f Naphthalinsulf onsäure oder Propionsäure. Bevorzugt sind die Säureadditionssalze von Chlorwasserstoffsäure, Essigsäure oder Bernsteinsäure. Die Herstellung der oben erwähnten Salze wird in üblicher Weise durchgeführt.

Wie sich aus der Definition der verschiedenen Substituenten, die in der allgemeinen Formel I vorkommen, ergibt, handelt es sich bei den durch diese Struktur definierten Verbindungen um Pentapeptide, an deren endständigem Kohlenstoffatom sich eine Säure, ein primärer Alkohol oder ein Niederalkyletherderivat hiervon befindet oder ein primäres oder sekundäres Amid oder ein Niederalkylester vorhanden ist.

Die stereochemische Konfiguration der Verbindungen der allgemeinen Formel I stellt eines ihrer wesentlichen Merkmale dar. Der Einfachheit halber werden die Aminosäurereste der Pentapeptide der allgemeinen Formel I sequentiell numeriert und zwar beginnend mit dem Rest an der endständigen Aminofunktion. Die Chiralität der Aminosäurereste, und zwar von Stellung 1 bis zu Stellung 4, beträgt L, D, Null und L. Der in Stellung 3 vorhandene Rest ist ein Glycinrest, und dieser Rest verfügt daher über keine Chiralität. Die Chiralität in Stellung 5 (nämlich der Stellung am endständigen Kohlenstoffatom) ist so festgelegt, daß sie mit dem entsprechenden vermeintlichen L-Aminosäurerest oder dem entsprechenden vermeintlichen D-Aminosäurerest übereinstimmt und diesem entspricht und natürlich auch dem ra~ cemischen Gemisch aus beiden derartigen Resten.

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Der Rest R, und der Aminosubstituent von B können unter anderem primäres C-,-C,-Alkyl bedeuten, nämlich Methyl, Ethyl oder n-Propyl.

Die Substituenten R„ und X können unter anderem für C₁-C₃-Alkyl stehen, nämlich für Methyl, Ethyl, n-Propyl oder Isopropyl.

Der Substituent X kann unter anderem auch C, -Crj-Alkoxy sein, nämlich Methoxy oder Ethoxy.

In bezug auf die besonderen Stellungsreste der Pentapeptide der allgemeinen Formel I gelten im wesentlichen folgende Betrachtungen:

(A) Stellung 1

Diese Stellung stellt den aminoendständigen Anteil des Peptids dar. Der entsprechende Rest ergibt sich aus L-Tyrosin, Der Rest kann N-unsubstituiert sein, und in einem solchen Fall steht R für Wasserstoff. Ferner kann dieser Rest auch N-monosubstituiert sein, wodurch sich ein N-Methylrest oder ein N-Ethylrest für den Substituenten R ergibt. Bei Verbindungen mit außergewöhnlich hoher analgetischer Wirksamkeit nach parenteraler Verabreichung ist der in Stellung 1 vorhandene Tyrosylrest vorzugsweise N-unsubstituiert. Bei Verbindungen mit außergewöhnlich hoher analgetischer Wirksamkeit nach oraler Verabfolgung ist der in Stellung 1 vorhandene Tyrosylrest vorzugsweise N-substituiert. Ist der Tyrosylrest N-substituiert, dann bedeutet der N-Substituent vorzugsweise Methyl.

(B) Stellung 2

Der Aminosäurerest (A), der in der zweiten Stellung der Peptide der allgemeinen Formel I vorhanden ist, muß das

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D-Stereoisomer sein und ist irgendeiner von mehreren Aminosäureresten, und zwar in Abhängigkeit vom Substituenten (Ro) am a-Kohlenstoffatom. Hierzu gehören Reste, die abgeleitet sind von D-Alanin (Ala) (R₃= Methyl), D-a-Aminobuttersäure (Abu.) (R₃ = Ethyl) „ D-Norvalin (Nva) (R. = n-Propy! ), D-Valin (VaI) (R₃ = Isopropyl), D-Norleucin (Nie) (R₃ = n-Butyl), D-Leucin (Leu) (R₃ = Isobutyl), D-Isoleucin (lie) (R₃ = sec-Butyl), D-Allylglycin /GIy(Al.)/ (R₃ = Allyl), D-Cyclopropylmethylglycin /GIy(Cp]/ (R3 = Cyclopropylmethyl), D-Methionin (Met) (R₃ = 2-Methylthioethyl), D-(S-Methyl)cystein /Cys(Me]/ (R₃ = Methylthiomethyl), D-Methioninsulfoxid /Met(0]/ (R₃ = Methylsulfinylethyl), D-(S-Methyl)-cysteinsulfoxid /GyS(Me)(Oi? (^R3 ⁼ Methylsulfinylmethyl), D-Serin (Ser) (R₃ = Hydroxymethyl), D-Threonin (Thr) (R₃-1-Hydroxyethyl) oder D-Homoserin (Hse) (R₃ = 2-Hydroxyethyl). Vorzugsweise steht A für AIa, Abu, Nva, VaI, Nie, Leu, He, Ser, Thr oder Hse,und insbesondere für Ala, Abu, Nva, VaI, Nie, Leu oder He. Besonders bevorzugt für A ist AIa.

(C) Stellung 3

Der in dieser Stellung vorhandene Aminosäurerest ist von Glycin (GIy) abgeleitet.

(D) Stellung 4

Der in dieser Stellung befindliche Aminosäurerest ist abgeleitet von metasubstituiertem L-Phenylalanin /Phe(X)/. Der Rest X steht für den meta-Substituenten und kann Brom, Iod, Chlor, C,-C₃-Alkyl, Trifluormethyl oder C₁-C₃ sein. Vorzugsweise bedeutet der Rest X Brom, Iod oder Chlor und insbesondere Brom oder Chlor.

Dieser Rest kann am Aminostickstoffatom (R,) entweder unsubstituiert oder substituiert sein. Ist dieser Rest N-sub-

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- ίο -

stituiert, dann steht er für N-Methyl, N-Ethyl, N-n-Propyl, N-Propargyl, N-Cyclopropylinethyl oder N-Allyl. Hat der Rest R, eine andere Bedeutung als Wasserstoff,dann bedeutet dieser Rest vorzugsweise primäres C,-C,-Alkyl, und insbesondere Methyl oder Ethyl.

(E) Stellung 5

Bei dem am endständigen Kohlenstoffatom der Verbindungen der allgemeinen Formel I vorhandenen Rest (-B-Z) handelt es sich um eine Aminosäure, die strukturell derivatisiert ist zum entsprechenden Amid „ , zum primären

(Z = -C-NHR₂)

Alkohol oder zum entsprechenden C^-C-^-Alkylether (Z = -CH-OR-), oder zur Säure oder zum C,-C^-Alkylester O

Il

(Z = -C-OR-). Der Aminosäurerest in Stellung 5 des Pentapeptids hat die Chiralität L, D oder D,L. Vorzugsweise hat der Aminosäurerest die Chiralität L. Die Gruppe -B-Z bedeutet irgendeinen von mehreren Aminosäureresten, und zwar je nach dem Substituenten (R₄) am &-Kohlenstoffatom» Hierzu gehören Reste, die abgeleitet sind von Glycin (GIy) (R₄= Wasserstoff), Alanin (Ala) (R₄ = Methyl), Λ-Aminobuttersäure (Abu) (R. = Ethyl), Norvalin (Nva) (R₄ = n-Propyl), Valin (VaI) (R₄ = Isopropyl), Norleucin (Nie) (R₄ = n-Butyl), Leucin (Leu) (R₄ =.Isobutyl), Isoleucin (lie) (R₄ = sec-Butyl), Phenylglycin (PgI) (R₄ = Phenyl), (S-Methyl)cystein /Cys(Me]/ (R₄ = Methylthiomethyl), (S-Methyl )cysteinsulf oxid /Cys(Me)(0)/ (R₄ - Methylsulfinylmethyl), (S-Methyl)cysteinsulfon /Cys(Me)(O₂2? (R₄ = Methylsulf önylmethyl ), (S-Ethyl)cystein /CyS(Et]/ (R₄ = Ethylthiomethyl), (S-Ethyl)cysteinsulfoxid /Cys(Et) (O]/ (R₄ ~ Ethylsulfinylmethyl),(S-EthylJcysteinsulfon /Cys(Et) (O₂I/ (R₄ = Ethylsulfönylmethyl), Methionin (Met) (R₄ = Methylthioethyl) Methioninsulfoxid </Met(0]/ (R₄ = Methylsulf inylethyl), Me-

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- ii -

thioninsulfon _j/Met(O₂l/ (R₄ = Methylsulf onylethyl), Ethionin (Eth) (R₄ = Ethylthioethyl), Ethioninsulfoxid /Eth(Ol7 (R₄ = Ethylsulfinylethyl), Ethioninsulfon /EtMO₂]/ (R₄ -Ethylsulfonylethyl), (O-Methyl)serin /Ser(Me]/ (R₄ = Methoxymethyl), (O-Ethyl)serin /Ser(Et]/ (R₄ = Ethoxymethyl), (O-Methyl)homoserin /Hse(Me27 (R₄ = Methoxyethyl) oder (O-Ethyl) homoserin ,/HSe(Et]/ (R₄ = Ethoxyethyl) .

Zu einer bevorzugten Unterklasse an Verbindungen gehören diejenigen Verbindungen, bei denen der endständige Aminosäurerest für AIa, Abu, Nva, VaI, Nie, Leu oder He steht= Von diesen Verbindungen sind wiederum diejenigen besonders bevorzugt, bei denen der endständige Aminosäurerest Leu ist

Zu einer weiteren bevorzugten Unterklasse von Verbindungen gehören diejenigen, bei denen der endständige Aminosäurerest für Cys(Me), Cys(Me)(O), CyS(Me)(O₃), Cys(Et), Cys(Et) (O), CyS(Et)(O₂), Met, Met(0), Met(O₃) Eth, Eth(O), Eth(O₃) Ser(Me), Ser(Et), Hse(Me) oder Hse(Et) steht. Von diesen Verbindungen sind wiederum diejenigen besonders bevorzugt, bei denen der endständige Aminosäurerest Met bedeutet.

Zu einer weiteren bevorzugten Unterklasse von Verbindungen gehören die Verbindungen, bei denen der endständige Ami nosäurerest für PgI steht, das am Aminostickstoffatom un~ substituiert ist..

Der endständige Aminosäurerest ist an seinem Aminostickstof fatom entweder unsubstituiert oder substituiert. Falls ein Substituent vorhanden ist, dann steht dieser Substituent für primäres Cj-C^-Alkyl. Solche Substituenten sind daher N-Methyl, N-Ethyl oder N-n-Propyl. Das Aminostickstoffatom ist vorzugsweise substituiert, wobei dieser Substituent insbesondere Methyl bedeutet. Ist der endständige Aminosäurerest an seinem. Aminostickstoffatom substituiert.

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dann muß R, ferner auch Wasserstoff sein, wobei, falls R, eine andere Bedeutung als Wasserstoff hat, der endständige Aminosäurerest an seinem Aminostickstoffatom unsubstituiert sein muß.

Zusätzlich dazu ist, wie bereits erwähnt, der in Stellung befindliche Rest ein Amid, ein primärer Alkohol, ein Ether, eine Säure oder ein Ester. Vorzugsweise bedeutet dieser Rest ein Amid, einen Alkohol oder einen Ester, und zwar insbesondere ein Amid. Im letztgenannten Fall ist dieser Rest vorzugsweise ein primäres Amid, so daß Z beispielsweise für

0 ·

-C-NHR₂ steht, wobei R₂ Wasserstoff ist. Ist das Amid ein sekundäres Amid, dann steht R₂ für eine C,-C^-Alkylgruppe. In diesen Fällen ist die endständige Amidgruppe N-Methyl, N-Ethyl, N-n-Propyl oder N-Isopropyl, und vorzugsweise N-Methyl.

Die in der vorliegenden Beschreibung enthaltenen Abkürzungen, von denen der Großteil wohl bekannt und üblich ist, haben die angegebenen Bedeutungen:

Abu = tx-Aminobuttersäure

AIa = Alanin

Cys(Et) = (S-Ethyl)cystein

Cys(Et)(O) = (S-Ethyl)cysteinsulfoxid

Cys{Et)(O₂) = (S-Ethyl)cysteinsulfon

Cys(Me) = (S-Methyl)cystein

Cys(Me)(0) = (S-Methyl)cysteinsulfoxid

CyS(Me)(O)₂) = (S-Methyl)cysteinsulfon

Eth = Ethionin

Eth(O) = Ethioninsulfoxid

Eth(O₂) = Ethioninsulfon

GIy = Glycin

GIy(Al) = Allylglycin

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GIy(Cp)	= Cyclopropylmethylglycin
Hse	= Homoserin
Hse(Me)	= (O-Methyl)homoserin
Hse(Et)	= (O-Ethy1)homoserin
He	= Isoleucin
Leu	= Leucin
Met	= Methionin
Met(O)	= Methioninsulfoxid
Met(O₂)	= Methioninsulfon
Nie	= Norleucin .
Nva	= Norvalin
PgI	= Phenylglycin
Phe	= Phenylalanin
Ser	= Serin
Ser(Me)	= (O-Methyl)serin
Ser(Et)	= (O-Ethy1)serin
Thr	= Threonin
Tyr	= Tyrosin
VaI	= Valin
Ac	= Acetyl
Al	= Allyl
Cp	= Cyclopropylmethyl
Me	= Methyl
Et	= Ethyl
IP	= Isopropyl
Pr	= n-Propyl
Ppg	= Propargyl
MeO	= Methoxy
Eto	= Ethoxy
Boc	= t-Butyloxycarbonyl
BzI	= Benzyl
DCC	= Ν,Ν'-Dicyclohexylcarbodiimid
HBT	= 1-Hydroxybenzotriazol
DMF	= N,N-Dimethylformamid
TFA	= Trifluoressigsäure

2 3 Λ 2 1 O 2

THF DEAE IBCFNMM18-Krone-6

= Tetrahydrofuran

= Diethylaminoethyl

= Isobutylchlorformxat

= N-Methylmorpholin

= 1,4,7,10,13,16-Hexaoxacyclooctadecan.

Zu Beispielen für Peptide aus der allgemeinen Formel I gehören folgende Verbindungen, von denen jede in meta-Stellung des Phenylalanins einen Substituenten aufweist und von denen irgendeine oder alle in Form eines pharmazeutisch unbedenklichen, nichttoxischen Säureadditionssalzes vorliegen können:

H-L-Tyr-H-L-Tyr-H-L-Tyr-H-L-Tyr-

H-L-Tyr-H-L-Tyr-H-L-Tyr-H-L-Tyr- H-L-Tyr-H-L-Tyr- H-L-Tyr-H-L-Tyr-H-L-Tyr-H-L-Tyr- H-L-Tyr-H-L-Tyr- H-L-Tyr-H-L-Tyr-H-L-Tyr-H-L-Tyr- H-L-Tyr-H-L-Tyr-H-L-Tyr-

D-Ala-D-AIa-D-Abu-D-Abu-

D-Nva-D-Nva-D-VaI-D-VaI-D-Nle· D-NIe-•D-Leu· •D-Leu D-Ile D-Ile D-Ala D-Ala •D-Ala -D-Ala •D-Ala -D-Ala D-Ala -D-Ala -D-Ala -GIy-L-(N-Me)Phe(Br)-L-Met-NH^, -Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)Met-NH₂, -Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Et)Met-NH-, -Gly-L-Phe(Br)-D-(N-Me)Met-NH₂, -Gly-L-Phe(MeO)-L-(N-Me)Met-NH₂, -GIy-L-(N-Et)Phe(Me)-L-Met-NH₂, -Gly-L-Phe(Et)-D-(N-Et)Met-NH₂, -GIy-L-(N-Pr)Phe(Pr)-L-Met-NH₂, -Gly-L-Phe(Ip)-L-(N-Me)Met-NH₂, -Gly-L-Phe(CF₃)-D-(N-Et)GIy-NH₂, -GIy-L-(N-Ppg)Phe(MeO)-L-Met-NH₂, -Gly-L-Phe(EtO)-L-(N-Pr)Met-NK₂, -Gly-L-Phe (B-r) -L- (N-Me) Met-NH₂, -Gly-L-Phe(I)-D-(N-Pr)Met-NH₂, -Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Et)Met-NH₂, -Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Pr)Met-NH₂, -Gly-L-Pha(Cl)-D-(N-Pr)Met-NH₂, -GIy-L-(N-Ppg)Phe(Br)-L-Met-NH₂, -Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Met-NH₂, -GIy-L-(N-Ppg)Phe(I)-D-Met-NH₂, -Gly-L-Phe(Me)-L-(N-Me)AIa-NH,, -GIy-L-PlIa(Fr)-L-(N-Me)AbU-NH₀, -Gly-L-Phe(Ciy-L-(N-Et)NVa-NH₃,

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H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(CF,)-D-(N-Et)VaI-NH ₀, H-L-Tyr-D~Val-Gly-L-?he ''EtO) -L- (M-Me)NIe-NH.,, H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(MeO)-L-(N-Me)LeU-NH₂, H-L-Tyr-D-Val-GIy-L-Phe(Br)-L-(N-Et)He-NH₂, H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-(N-Me)Phe(Et)-D-PgI-NH₂, H~L-Tyr~D-Ala~Gly-L-* (N-Cp)Phe (Br) -L-NIe-NH₂, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Et)Hse(Me)-NH₉ , H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(I)-L-PgI-NH₂, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-D-(N-Me)Hse(Me)-NH₂, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(I)-L-Met-NH₂, H-L-Tyr-D-Gly(Al)-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Met-NH₂„ H-L-Tyr-D-Gly(Cp)-Gly-L-Phe(Br)-L-PgI-NH₂, H-L-Tyr-D- Met -Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)Met-NH₂ H-L-Tyr-D-Cys(Me)-Gly-L-Phe(I)-D-(N-Et)Met-NH₂, H-L-Tyr-D-Met(O)-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Et)Met-NH₂,

H-L-Tyr-D-Cys(Me)(O)-Gly-L-Phe(Cl)-L-PgI-NH₂, H-L-Tyr-D-Ser-Gly-L-Phe(CP^-L-(N-Me)Hse(Me)-NH₂ ,

H-L-Tyr-D-Äla-Gly-L-(N-Et)-Phe(EtO)-L-PgI-NH₂, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(MeO)-L-(N-Me)PgI-NH₂,

H-L-Tyr-D-Thr-Gly-L-(N-Et)Phe(Br)-L-Met-NH₂, H-L-Tyr-D-Hse-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)Met-NH₂,

(N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me) -

CyS(Me)-NH₂,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe (I) -L- (N-Me) Cys (Me) (-O)-NH₉

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-D-(N-Me)Cys(Et)-NH₂, (N-Et)-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Et)-NIe-NH₂ H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-(N-Et>Phe(Cl)-L-Hse(Me)-

(N-Me)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)-Cys(Et) (O₂)-NH₂, H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Pr) Met(0)-NH₂,

234210 2

H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(CF₃)-L-(N-Me)Eth-NH₂ H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(MeO)-D-(N-Pr)Eth(O)

(N-Me)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(Me)-L-(N-Et)-NIe-NH₂,

(N-Me)-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Hse(Et)-NH₂,

(N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Cl)-D-Ser (Me) -

NH₂',

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(I)-L-Ser(Et)-NH₂,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(I)-D-LeU-NH₂, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Br)-L-PgI-NH₃, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L- (N-Al) Phe (.Br) -L-LeU-NH₂, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Pr)Phe(I)-L-PgI-NH₂, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(I)-L-Met-NH₂, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Cl)-L-Met(O₂)

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Ip)-L-Met~NH(Me), H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Pr)-L-(N-Me)Met-NH(Me), H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Et)Met-NH(Me), H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)Met-NH(Et}, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Et)-L-Met-NH(Et), H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(EtO)-L-(N-Me)Nle-NH (Me),

2342

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Et)PgI-NH(Pr), H-L-Tyr-D-Ala-Giy-L-Phe(I)-L-(N-Pr)Leu-NH(Me), H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(Br)-L-Met-NH(Ip), H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(Br)-L-Met-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)MSt-CH₃OH, H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-St)MQt-CH₃OH, H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(StO)-D-(N-Me)Met-CH^OH, H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(CF₃)-L-(N-Me)Met-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-(N-Et)Phe(Br)-L-Met-CH_?OHv H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(I)-D-(N-Et)Met-CH₂OH_r H-L-Tyr-D^Val-Gly-L- (N-Pr) Phe (Cl) -L-Met-C^OH, H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe (MeV-L-(N-Me) Met-CH₂OH V H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe (MeO)-D- (N-Et) GIy-CH₀OH, H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-(N-Ppg)Phe(Br)-L-Met-CH^OH/ H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Pr)

234210 2

-13-

H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe (Cl) -L- (N-Me) Met-C^OH, H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(Br)-D-(N-Pr)Met-CH₂OH_r H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Et)-L-(N-Et)Met-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(EtO)-L-(N-Pr)Met-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(CF₃)-D-(N-Pr)Met-CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Ppg)Phe(Br)-L-Met-(O₂)-CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)Met*-CH₂OH>./ H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L- (N-Ppg.) Phe (I) -D-Met-GHjOH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)AIa-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Äbu-CH„0H_p H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Et)NVa-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-D-(N^Et)VaI-CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(Br)-L-fN-Me)NIe-CH₃OH, H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(Me)-L-(N-Me)Leu-CH ₂ OH, H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(Et)-L-(N-Et)

234210 2

H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(MeO)-D-PgI-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Cp)Phe(CF₃)-L-NIe-CH₂OH

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Et)Hse(Me)

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-L-PgI-CE₃OH?

H~L-Tyr~D-Ala-Gly-L-Phe(I)-D-(N-Me)Hse-(Me)-

CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(Br)-L-Met-CH₂0H, H-L-Tyr-D-Gly(Al)-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)Met-

CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Gly(Cp)-Gly-L-Phe(Br)-L-PgI-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Met-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)Met-CH OH, H-L-Tyr-D-Cys(Me)-Gly-L-Phe(Pr)-D-(N-Et)Met-

CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Met(0)-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Et)MeI-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Cys(Me)(0)-Gly-L-Phe(I)-L-N-Me)Met-

CH₂OH, 1

H-L-Tyr-D-Ser-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)HSe-(Me)-

CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Me)-L-PgI-CH₃OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Pheι

H-L-Tyr-D-Thr-Gly-L-(N-Et)Phe(MeO=-L-M-' /)H,

H-L-Tyr-D-Hse-Gly-L-Phe(EtO)-L-ί^{ν ;}'

2342 10 2

(N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Ip)-L-(N-Me)Cys(Me) -

CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L~Phe(Pr)-L-(N-Me)-Cys(Me)(O)-

CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-D-(N-Me)Cys(Et)-(O₂)-

CH₂OH,

(N-Et)-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Et)-NIe-

CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-(N-Et)Phe(I)-L-Hse(Me)-CH₂OH,

(N-Me)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)Cys(Et)-(O)-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(Ip)-L-(N-Pr) Met(O)-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Eth-CH₂0H, H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(I)-D-(N-Pr)Eth(O₂ (N-Me)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Et J-NIe-

CH₂OH,

(N-Me)-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)Hse(Et) -

CH₂OH,

(N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Br)-D-Ser(Me) -

CH₂OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(Me)-L-Ser(Et)-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(Et)-D-LeU-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Pr)-L-PgI-CH₂OH,

234210 2

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(Ip)-L-Leu-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L- (N-Pr) Phe (CF₃) -L-PgI-CH₂OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(MeO)-L-Met-ci^OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L- (N-Et) Phe (EtO) -L-Met ( 0) -CPI₂ H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Cl)-L-Met-CH₂0Me, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Met-€H₂0Me_f H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe (Cl) -L- (N-Et) Met-CH₂OMe, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)Met~CH₉OEt,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Br)-L-MSt-CH₃OEt H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)NIe-CH OMe, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Et)PgI-CH₃OPr , H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Pr)LeU-CH₃OMe,

-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(I)-L-Met-CH₂0Ip,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(Br)-L-Met-QMe, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)Met-OEt, H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(Me)-L-(N-Et)MSt-OMe, H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(Et)-D-(N-Me)Met-OMe,

234210 2

H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe(EtO)-L-(N-Me)Met-OPr, H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-(N-Et)Phe(CF₃)-L-Met-OH, H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(3r)-D-(N-Et)Met-OMe, H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-(N-Pr)Phe(Br)-L-Met-OH, H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)Met-OEt, H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(Cl)-D-(N-Et)GIy-OMe, H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-(N-Ppg)Phe(3r)-L-Met-OH, H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(Pr)-L-(N-Pr)Met-OPr, H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-?he(Ip)-L-(N-Me)Met-OMe, H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(Br)-D-(N-Pr)Met-OMe, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Et)Met-OMe, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Pr)Met-OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-D-(N-Pr)Met(O₃)-OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Ppg)Phe(Br)-L-Met-OMe,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)Met-OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Ppg)Phe(Cl)-D-Met-OEt_f

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)Ala-OPr, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)AbU-OIp, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Et)Nva-OMe, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-D-(N-Et)VaI-OMe, H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)NIe-OMe, H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)Leu-OEt, H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-Phe(Et)-L-(N-Et)Ile-OH, H-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(EtO)-D-(N-Me)Met-OEt,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Cp)Phe(Me)-L-Nle-OPr, H-L-TVr-D-AIa-GIy-L-PhC(MeO)-L-(N-Et)HSa-(Me)-OIp,

234210 2

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)PgI-OMe, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Ip)-D-(N-Me)Hse(Me)-OH,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(Pr)-L-Met-OEt, H-L-Tyr-D-Gly(Al)-Gly-L-Phe(Me)-L-(N-Me)Met-OEt,

H-L-Tyr-D-Gly(Cp)-Gly-L-Phe(Et)-L-(N-Me)-PgI-OPr,

H-L-Tyr-D-Met-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)Met-OMe, H-L-Tyr-D-Cys(Me)-Gly-L-Phe(Cl)-D-(N-Et)Met-OH, H-L-Tyr-D-Met(O)-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Et)Met-OIp, H-L-Tyr-D-Cys(Me)(O)-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Met-OH, H-L-Tyr-D-Ser-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Hse(Me)-OEt, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Cl)-L-PgI-OEt, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)PgI-OEt,

H-L-Tyr-D-Thr-Gly-L- (N-Et) Phe (Cl) -L-Met-OMe,-H-L-Tyr-D-Hse-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Met-OH, (N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Cl)-L-(N-Me)Cys(Me)-OMe,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(I)-L-(N-Me)-Cys(Me)(O)-OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe(Br)-D-(N-Me)Cys(Et) -OMe, (N-Et)-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Et)NIe-OEt,

234210 2

H-L-Tyr-D-Val-Gly-L-(N-Et)Phe(Me)-L-Hse(Me)-OMe,

(N-Me)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(Et)-L-(N-Me)-cys(Et) -

(O)-OH,

H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe(CF₃)-L-(N-Pr) Met(0) -OMe _f

H-L-Tyr-D-Nle-Gly-L-Phe(Br)-L-(N-Me)Eth-OEt, H-L-Tyr-D-Ile-Gly-L-Phe(Pr)-D-(N-Pr)Eth(O)~op_r,

(N-Me)-L-Tyr-D-Leu-Gly-L-Phe(Ip)-L-(N-Et) -NIe-OIp,

(N-Me) -L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe (MeO) -L-( N-Me ) Hse (Et) OH,

(N-Me)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(EtO)-D-Ser(Me)-OPr, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(Br)-L-Ser(Et)-OMe,

H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(I)-D-Leu-OEt, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Et)Phe(Cl)-L-PgI-OH, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Al)Phe(Cl)-L-Leu-OMe, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Pr)Phe(Br)-L-PgI-OMe, H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Me)Phe(I)-L-Met-OMe,. H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(M-Et)Phe(Br)-L-Met(O₂)-OH.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I lassen sich nach für Peptidsynthesen üblichen Methoden herstellen. Während der Synthese bestimmter Verbindungen aus der allgemeinen Formel kann es zu einer Teilracemisierung kommen. Das Ausmaß einer solchen eventuell auftretenden Racemisierung ist jedoch nicht so stark, daß hierdurch die analgetische Wirksamkeit der Verbindungen der allgemeinen Formel I entscheidend ver-

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ändert wird.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I lassen sich durch Festphasenpeptidsynthese oder durch klassische Lösungsphasensynthese herstellen. Beim Festphasenverfahren wird die Peptidkette unter Verwendung eines Harzträgers sequentiell aufgebaut, beispielsweise eines Benzhydrylaminharzes oder eines chlormethylierten Polystyrolharzes. Das erhaltene Produkt wird vom Harz mittels Fluorwasserstoff bei O⁰C oder mittels Essigsäure abgespalten und dann gereinigt, was im allgemeinen chromatographisch erfolgt. Beim Lösungsphasenverfahren wird die Peptidkette gebildet, indem man die verschiedenen aktivierten und blockierten Aminosäuren in nahezu irgendeiner Sequenz miteinander umsetzt und dann die Blockiergruppen mit einem Deblockierungsmittel abspaltet, beispielsweise einer Säure, wie Trifluoressigsäure (TFA), p-Toluolsulfonsäure (TSA), Benzolsulfonsäure (BSA), Methansulfonsäure (MSA), Naphthalinsulfonsäure, Eisessig mit Chlorwasserstoffgas oder Ameisensäure. Gewöhnlich ist ferner auch ein Mittel vorhanden, das als Carboniumionenfänger geeignet ist. Beispiele für solche Mittel sind Anisol, Thioanisol oder Triethylsilan, wobei Anisol bevorzugt ist. Sämtliche Reaktionsbedingungen sind herkömmlich und dem mit der Peptidchemie vertrauten Fachmann geläufig. Die Temperatur bei der Umsetzung mit Trifluoressigsäure liegt beispielsweise zwischen etwa -10⁰C und +3O⁰C.

Unabhängig vom jeweils angewandten Verfahren erfordert die Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I eine Kupplung von Aminosäuren oder Peptidbruchstücken durch Umsetzung der CarboxyIfunktion eines Bauteils mit der Aminofunktion eines anderen Bauteils unter Bildung einer Amidbrücke. Zur Erzielung einer sauberen Kupplung ist es wünschenswert, daß erstens alle reaktionsfähigen Funktionen, die nicht direkt an der Reaktion teilnehmen, mittels geeig-

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neter Blockierungsgruppen inaktiviert werden und daß zweitens die Carboxylfunktion, die gekuppelt werden soll, so aktiviert ist, daß die Kupplungsreaktion ablaufen kann. All dies erfordert eine sorgfältige Auswahl von sowohl der Reak tionssequenz als auch den Reaktionsbedingungen und ferner auch den Einsatz spezieller Blockierungsgruppen, so daß sich das gewünschte Peptidprodukt ergibt. Jede Aminosäure, die zur Bildung der Verbindungen der allgemeinen Formel I verwendet wird und die über die jeweils ausgewählten Schutzgruppen und/oder aktivierenden Funktionen verfügt, wird nach in der Peptidchemie üblichen Methoden hergestellt.

An jedem Punkt der Totalsynthese der Verbindungen der allgemeinen Formel I wird mit ausgewählten Kombinationen an Blockierungsgruppen gearbeitet. Diese besonderen Kombinationen haben sich als am saubersten wirksam erwiesen. Die Synthese der Verbindungen der allgemeinen Formel I funktioniert allerdings auch mit anderen Kombinationen, wenn auch möglicherweise mit einem geringeren Ausmaß an Erfolg. Bei der Synthese der Verbindungen der allgemeinen Formel I können als Aminoblockxerungsgruppen abwechselnd beispielsweise Benzyloxycarbonyl, t-Butyloxycarbonyl, t-Amyloxycarbonyl, p-Methoxybenzyloxycarbonyl, Adamantyloxycarbonyl oder Isobornyloxycarbonyl verwendet werden. Ferner wird im allgemeinen Benzyl (BzI) als Hydroxylschutzgruppe für den Tyrosylrest verwendet, obgleich auch mit anderen Schutzgruppen gearbeitet werden kann, wie p-Nitrobenzyl (PNB) oder p-Methoxybenzyl (PMB).

Als Carboxylschutzgruppen bei der Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I lassen sich alle üblichen esterbildenden Gruppen verwenden, und hierzu gehören beispielsweise Methyl, Ethyl, Benzyl, p-Nitrobenzyl, p-Meth- -oxybenzyl oder 2,2,2-Trichlorethyl.

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Die Kupplung der geeignet geschützten N-blockierten Aminosäure oder des entsprechenden Peptidbruchstücks mit einer geeignet geschützten carboxylblockierten Aminosäure oder einem entsprechenden Peptidbruchstück zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I besteht darin, daß man die freie Carboxylfunktion der Aminosäure oder des Peptidbruchstücks gegenüber der Kupplungsreaktion aktiv macht. Dies läßt sich unter Einsatz der verschiedensten hierzu bekannten Techniken erreichen. Eine solche Aktivierungstechnik besteht in einer Umwandlung der Carboxylfunktion in ein gemischtes Anhydrid. Hierzu aktiviert man die freie Carboxylfunktion durch Reaktion mit einer weiteren Säure, beispielsweise einem Derivat einer Carbonsäure, wie einem Säurechlorid. Beispiele für zur Bildung gemischter Anhydride geeignete Säurechloride sind Ethylchlorformiat, Phenylchlorformiat, sec-Butylchlorformiat, Isobutylchlorformiat oder Pivaloylchlorid. Bevorzugt wird hierzu Isobutylchlorformiat verwendet.

Ein anderes Verfahren zur Aktivierung der Carboxyl funktion zum Zwecke der Durchführung der Kupplungsreaktion besteht in einer Umwandlung in ein entsprechendes aktives Esterderivat. Zu solchen aktiven Estern gehören beispielsweise die 2,4,5-Trichlorphenylester, Pentachlorphenylester oder p-Nitrophenylester. Eine andere anwendbare Kupplungsmethode besteht in der wohlbekannten Azidkupplung.

Das bevorzugte Kupplungsverfahren bei der Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I besteht im Einsatz von N,N¹-Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) zur Aktivierung der freien Carboxylfunktion, um hierdurch die Kupplung entsprechend ablaufen zu lassen. Diese Aktivierung und Kupplungstechnik wird durchgeführt unter Anwendung einer äquimolaren Menge an DCC im Verhältnis zur Aminosäure oder zum Peptidbruchstück, wobei ferner auch in Gegenwart einer

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äquimolaren Menge an 1-Hydroxybenzotriazol (HBT) gearbeitet wird. Die Anwesenheit von HBT führt zu einer Unterdrückung unerwünschter Nebenreaktionen unter Einschluß der Möglichkeit einer Racemisierung.

An bestimmten Punkten bei der zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I verwendeten Synthesefolge ist eine Abspaltung ausgewählter Blockierungsgruppen erforderlich. Diese Abspaltung der jeweiligen Blockierungsgruppen wird unter Einsatz herkömmlicher Deblockierungsmittel durchgeführt. Der mit der Technik der Peptidsynthese vertraute Fachmann kann aus den verschiedenen Schutzgruppen ohne weiteres diejenigen Gruppen auswählen, die in dem Sinn verträglich sind, daß sich eine selektive Spaltung des Produkts unter Entfernung ein oder mehrerer, jedoch weniger als aller Schutzgruppen, die an der Aminosäure oder dem Peptidbruchstück vorhanden sind, erreichen läßt. Die hierzu anzuwendenden Techniken sind dem mit der Peptidchemie vertrauten Fachmann bekannt. Bezüglich einer ausführlichen Diskussion der für eine selektive Spaltung geeigneten Techniken wird auf The Peptides, Band I, Academic Press, New York (1965), insbesondere die auf den Seiten 72 bis 75 befindliche Tabelle, von Schröder und Lübke, hingewiesen.

Die Abspaltung von Carboxylschutzgruppen läßt sich beispielsweise durch alkalische Verseifung erreichen. Zur Abspaltung der Schutzgruppe von der geschützten Carboxylfunktion wird im allgemeinen unter verhältnismäßig starken alkalischen Bedingungen gearbeitet, beispielsweise unter Verwendung eines Alkalihydroxids, wie Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid oder Lithiumhydroxid. Die Reaktionsbedingungen, . unter denen eine solche Verseifung durchgeführt wird, sind dem Fachmann bekannt. Manche Carboxylschutzgruppen lassen sich auch durch katalytische Hydrogenolyse

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abspalten, beispielsweise durch Hydrogenolyse in Gegenwart eines Katalysators, wie Palladium auf Kohle. In denjenigen Fällen, bei denen die Carboxylblockierungsgruppe für p-Nitrobenzyl oder 2,2,2-Trichlorethyl steht, läßt sich eine entsprechende Abspaltung auch durch Reduktion in Gegenwart von Zink und Chlorwasserstoffsäure erreichen.

Manche Aminoblockierungsgruppen werden auch gespalten, indem man die geschützte Aminosäure oder das geschützte Peptid mit einer Säure behandelt, wie Ameisensäure, Trifluoressigsäure (TFA), p-Toluolsulfonsäure (TSA), Benzolsulfonsäure (BSA) oder Naphthalinsulfonsäure, und hierdurch das entsprechende Säureadditionssalz bildet. Andere Schutzgruppen, wie beispielsweise die Benzyloxycarbonylgruppe, können abgespalten werden, indem man die blockierte Aminosäure oder das blockierte Peptid mit einem Gemisch aus Bromwasserstoff und Essigsäure behandelt, wodurch man zum entsprechenden Hydrobromid als Säureadditionssalz gelangt. Das jeweils angewandte Verfahren oder Reagens ist abhängig von den chemischen oder physikalischen Eigenschaften der Materialien der jeweiligen Deblockierungsreaktion. Das erhaltene Säureadditionssalz kann durch¹Behandlung mit einem geeigneten Ionenaustauscherharz, wie DEAE Sephadex A25 oder Amberlyst A27 in eine pharmazeutisch besser geeignete Form überführt werden.

Die Hydroxylschutzgruppe kann am Peptid während der gesamten Herstellungsfolge vorhanden bleiben, so daß sie erst während der letzten Synthesestufe in Verbindung mit der Abspaltung der Aminoschutzgruppe entfernt wird. Je nach den zur Entfernung der Carboxylblockierungsgruppe angewandten Bedingungen kann die Hydroxylschutzgruppe jedoch auch zu einem früheren Zeitpunkt bei der Herstellungsfolge abgetrennt werden. Spaltet man die Carboxylgruppe durch alkalische Verseifung ab, dann bleibt hierbei die Hydroxyl-

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schutzgruppe erhalten. Bedient man sich zur Entfernung der Carboxylschutzgruppe jedoch einer katalytischen Hydrogenolyse, dann wird hierbei auch die Hydroxylschutzgruppe abgespalten. Letzteres stellt kein ernsthaftes Problem dar, da die Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I in Gegenwart eines Tyrosylrests mit einer freien Hydroxylgruppe durchgeführt werden kann, beispielsweise direkt eines Tyrosylrests.

Von den klassichen Lösungsverfahren besteht eine bevorzugte Methode zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I in einer Kupplung eines getrennt hergestellten N-endständigen Tripeptide mit einem getrennt hergestellten C-endständigen Dipeptid unter anschließender Abspaltung eventuell noch vorhandener Blockierungsgruppen-Das getrennt hergestellte C-endständige Dipeptid, welches mit dem N-endständigen Tripeptid umgesetzt wird, kann so aufgebaut sein, daß es einen Amid-, Alkohol-, Ether- oder Esterrest enthält. Wahlweise kann es auch eine Gruppe enthalten, die ein Vorläufer für den gewünschten C-endständigen Rest ist. Die allgemeine Reaktionsfolge für die Herstellung von beispielsweise einem Pentapeptid aus der allgemeinen Formel I geht aus folgendem Reaktionsschema hervor. Darin bedeutet der Buchstabe Z den C-endständigen Rest, und zwar entweder in der endgültigen Form oder in Form eines Vorläufers, während das Symbol AA für einen Aminosäurerest steht, und die am Symbol AA angefügte Ziffer die Stellung der Aminosäure im jeweils als Produkt erhaltenen Peptid angibt.

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Reaktionsschema

BOC-CKAA) 2-OH + H-GIy-OBzI

IBCF

NMM

-15⁰C

BOC-D-(AA)₂-GIy-OBzI

HCI/HOAc

Cl Ha⁺-O-(AA)₃-GIy-OBzI

neutrali ze B0C-L-Phe(X)-OH + H-(AA)s-Z

DCC HBT

B0C-L-Phe(X)-(AA)5-Z

HCI/HOAc

BOC-L-Ty r(OBz I )-0H + H-O-( AA) a-G I y-OBz I

IBCF

NMM

-15°C

BOC-L-Ty r(OBz I )-0-( AA) a-G I y-OBz I Cl Ha⁺-L-Phe(X)-(AA)₅-Z

Neutralisation

Ha PD/C

BOC-L-Ty r-D-( AA) s-G I y-OH

HH_-Phe(X)-(AA)5~Z

DCC HBT

BOC-L-Ty MHAA) a-G I y-L-Phe(X)-( AA) s-Z

Ο TFA

a) ümkehrphasenflüssigkeitschromatographie über G, Q-Siliciundioxid

3) Sephaclex G—10

AcOH «H-L-Ty r-D-( AA) 2-GI y-L-Phe(X)-( AA) s-Z

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Das obige Reaktionsschema zeigt lediglich eine Reaktionsfolge zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I. Es können daher auch andere Reaktionsfolgen angewandt werden. Ein weiteres geeignetes Lösungsverfahren besteht in der stufenweisen sequentiellen Addition einzel ner Aminosäuren beim Aufbau der Peptidkette, beginnend mit dem C-endständigen Aminosäurerest. Dieses Verfahren kann ebenfalls unter Anwendung der oben beschriebenen Reaktionstechniken oder auch unter Einsatz einer anderen Reaktionsfolge durchgeführt werden.

Bei bestimmten Verbindungen der allgemeinen Formel I sind ein oder mehr der Aminosäurereste am Aminostickstoffatom verschiedentlich durch Alkyl, Allyl, propargyl oder Cyclopropylmethyl substituiert. In diesen Fällen verwendet man bei der Herstellungsfolge die entsprechend N-substitui.erte Aminosäure. Die hierzu benötigten N-monosubstituierten Aminosäuren lassen sich ausgehend von einer N-geschützten Aminosäure wie folgt herstellen:

H KH K⁺ BOC-N-(AA)-COOH > B0C-N~-(AA)-COO~K⁺

18-Krone-6-THF DMF

Al IyI - ,Cyclopropy lmethyl-, Propargyl- oder Alkylhalogenide, nämlich Bromid oder Iodid (R X)

BOC-N-(AA)-COOH

Obigem Reaktionsschema zufolge wird die Aminosäure zuerst mit Kaliumhydrid in Gegenwart eines geeigneten Kronenethers unter Bildung des Dianions umgesetzt. Dieses Zwischenprodukt wird dann zur Bildung der gewünschten N-substituierten Aminosäure mit dem jeweiligen Allyl-, Cyclopropylmethyl-, Propargyl- oder Alkyliodid umgesetzt.

Unter den stark alkalischen Bedingungen, wie sie beim obigen

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Alkylierungsverfahren zur Anwendung gelangen, kann es zu einer Racemisierung am ot-Kohlenstoffatom kommen. Das Ausmaß einer solchen Racemisierung ist abhängig von der jeweils verwendeten Aminosäure. Durch Einsatz eines Überschusses an Alkylierungsmittel und Arbeiten bei einer möglichst kurzen Reaktionszeit läßt sich eine solche Racemisierung ganz gering halten. Sollte jedoch eine übermäßige Racemisierung auftreten, dann kann das Produkt durch Umkristallisation des Salzes aus einem geeigneten chiralen Amin, beispielsweise dem Salz von d(+)-a-phenylethylamin, gereinigt werden.

Der C-endständige Teil der Peptide der allgemeinen Formel I kann eine freie Carboxylgruppe sein. Ferner kann dieser Teil zum entsprechenden primären oder sekundären Amid, Ester, Alkohol oder Ether derivatisiert sein. Bei den Amidpentapeptiden der allgemeinen Formel I ist das Amid unsubstituiert oder N-monosubstituiert. Eine Derivatisierung zum Amid läßt sich erreichen, indem man die Carboxylgruppe der Aminosäure mit N,N¹-Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) in Gegenwart von 1-Hydroxybenzotriazol (HBT) aktiviert und so zum HBT-Ester gelangt. Durch anschließendes Umsetzen dieses Esters mit wasserfreiem Ammoniak oder dem entsprechenden primären Amin gelangt man zum unsubstituierten oder N-monosubstituierten Amid. Beispiele für primäre Amine, die sich zur Herstellung der Pentapeptide der allgemeinen Formel I verwenden lassen, sind Methylamin, Ethylamin, n-Propylamin oder Isopropylamin.

Die C-endständigen Ester sind ausgehend von den entsprechenden Säuren durch an sich bekannte Methoden zugänglich. Eine Derivatisierung zum primären Alkohol läßt sich erreichen, indem man den Methylester der C-endständigen Aminosäure oder des entsprechenden Peptids bildet. Durch anschließende Reduktion dieses Esters mit Natriumborhydrid

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und Lithiurachlorid gelangt man zum entsprechenden primären Alkoholderivat.

Die Ether lassen sich nach den verschiedensten hierzu bekannten Methoden herstellen. Ein hierzu geeignetes Verfahren besteht in einer Behandlung des entsprechenden Al-•kohols in einem Medium aus wäßrigem Natriumhydroxid mit einem Alkylbromid, dessen Alkylgruppe dem beabsichtigten Alkylrest des Etherprodukts entspricht.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I sind wertvolle pharmazeutische Mittel. Sie sind analgetisch wirksam und weisen ferner auch eine neuroleptische Wirksamkeit auf. Sie eignen sich insbesondere zur Linderung von Schmerzen und zur Verbesserung emotionaler Störungen, wenn man sie Säugetieren unter Einschluß von Menschen parenteral oder oral verabreicht. Die Verbindungen der Formel I lassen sich allein oder in Kombination mit pharmazeutisch unbedenklichen Hilfsstoffen verabreichen, deren Anteil bestimmt wird von der Löslichkeit und dem chemischen Aufbau der Verbindung, der jeweiligen Verabfolgungsart und üblicher pharmazeutischer Praxis.

Bevorzugt sind diejenigen Mittel, die sich parenteral verabreichen lassen, nämlich intramuskulär, subkutan oder intravenös. Hierzu gehören sterile injizierbare Lösungen oder Suspensionen sowie sterile injizierbare Depotformulierungen oder Formulierungen mit langsamer Wirkstofffreigäbe. Besonders geeignete sterile injizierbare Lösungen sind in isotonischer Kochsalzlösung oder isotonischer Dextrose zubereitet. Die sterilen injizierbaren Mittel lassen sich herstellen und als solche aufbewahren, oder sie können auch unmittelbar vor ihrer Anwendung zubereitet werden, indem man ein steriles Medium, wie Wasser, zu einer bekannten Gewichtsmenge einer sterilen Wirkstoffzubereitung gibt, die in einem Träger eingeschlossen ist, wie einer Phiole oder einer Ampulle, welche die Wirkstoffzubereitung steril hält. Die vorgegebene Gewichtsmenge an steriler Wirkstoffzubereitung kann ferner auch eine solche Menge an steriler Dextrose oder sterilem Natriumchlorid enthalten, daß sich

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nach Zugabe des sterilen Mediums eine i,sotonische Lösung oder Suspension ergibt. ·

Bevorzugt werden solche Zubereitungen, die sich für eine orale Verabreichung eignen. Diese können in Form diskreter Einheiten hergestellt werden, wie Kapseln oder Tabletten, die jeweils eine vorbestimmte Wirkstoffmenge enthalten. Sie lassen sich ferner beispielsweise auch zubereiten in Form eines Pulvers oder Granulats, einer Lösung oder einer Suspension in einem wäßrigen oder einem nichtwäßrigen Medium oder einer Emulsion.

Entsprechende Tabletten lassen sich einfach unter Anwendung von Druck herstellen, und zwar im allgemeinen unter Verwendung von einem oder mehreren Hilfsstoffen. Die Herstellung von Tabletten erfolgt durch Verpressen des Wirkstoffs in einer freifließenden Form, beispielsweise in Form eines Pulvers oder Granulats, und im allgemeinen im Gemisch mit ein oder mehr anderen Hilfsstoffen, wie Bindemitteln, Gleitmitteln, inerten Verdünnungsmitteln, Schmiermitteln, oberflächenaktiven Mitteln, Puffern, Aromastoffen, Verdickungsmitteln, Konservierungsmitteln oder Dispergierungsmitteln.

Die Bestimmung der jeweiligen Dosis der Verbindungen der allgemeinen Formel I, die sich am besten eignet, liegt im Rahmen des ärztlichen Könnens. Die jeweils anzuwendenden Dosen sind abhängig von der Art der Verabfolgung, der jeweils verabreichten Verbindung, dem zu behandelnden Patienten und der Behandlungsart. Im allgemeinen beträgt die Wirkstoffdosis jedoch etwa 10 ^g bis 2 mg/kg Körpergewicht des Empfängers, und vorzugsweise etwa 100 μg bis 500 μΐη/kg Körpergewicht des Empfängers, bei intramuskulärer oder subkutaner Verabreichung. Bei intravenöser Verabfolgung liegt die Wirkstoffdosis im allgemeinen zwischen

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etwa 1 pg und 200 pg/kg Körpergewicht des Empfängers, und vorzugsweise bei etwa 3 μg bis 50 pg/kg Körpergewicht des Empfängers. Bei oraler Verabfolgung macht die Wirkstoffdosis im allgemeinen etwa 1 mg bis 500 mg/kg Körpergewicht des Empfängers, vorzugsweise etwa 50 bis 200 mg/kg Körpergewicht, und insbesondere etwa 50 bis 100 mg/kg Körpergewicht, des Empfängers.aus.

Ausführungsbeispiele

Die Erfindung wird anhand der folgenden Beispiele weiter erläutert. Diese Beispiele zeigen die Herstellung und Wirksamkeit der Verbindungen der allgemeinen Formel I. Sie sind keineswegs als beschränkend aufzufassen. Alle in diesen Beispielen enthaltenen Abkürzungen haben die bereits oben angegebenen Bedeutungen.

Beispiel 1

Herstellung von L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-L-m-bromphenylalanyl-L-iN^-methyl)methioninamid-Acetat

A. Trifluoressigsäuresalz von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-DjL-m-bromphenylalanyl-L-(N -methyl)methionyl-Benzhydrylamin-Harz

Die Synthese dieses Peptid-Harzes erfolgt durch automatische Festphasensynthese in einem Beckman-990-Peptid-Synthesegerät unter Verwendung von 3,5 g Benzhydrylaminharz (Beckman, 0,47 mMol-N/g). Man neutralisiert das Harz mit 4 % Diisopropylethylamin (DIEA) in Methylenchlorid und läßt es dann mit Boc-(N-Me)Met-OH und DCC in Methylenchlorid kuppeln, wodurch man zum Boc-(N-Me)-Met-substituierten Harz gelangt. Anschließend baut man in das Peptid-Harz der Reihe nach Boc-D,L-(m-Br)-Phe-OH, Boc-Gly-OH, Boc-D-Ala-OH und

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Boc-Tyr-OH ein, indem man'die Kupplung gemäß Programm Nr. 1 beginnt und dann eine Rekupplung der gleichen Aminosäure nach Programm Nr. 2 durchführt. Das Programm Nr. 2 wird einmal für jede der Aminosäuren durchgeführt, mit Ausnahme von D,L-(m-Br)Phe-OH, womit das Programm dreimal durchgeführt wird. Das erhaltene Boc-Pentapeptid-Harz wird gemäß der Stufen 1 bis 8 des Programms Nr. 1 von Schutzgruppen befreit, wodurch man zu 4,04 g der Titelverbindung gelangt Die Waschvorgänge bei den Programmen Nr. 1 und 2 werden unter Verwendung von 8 ml/g Harz durchgeführt.

Programm Nr. 1

1. Dreimaliges Waschen mit CH^Cl₉.

2. 5 Minuten lange Behandlung mit einem 30:5:65 Volumengemisch von TFA:Et₃SiH:CH₂CL₂.

3. 30 Minuten lange Behandlung wie in Stufe 2.

4. Zweimaliges Waschen mit CH₉Cl₉.

5. Waschen mit Methanol:CH₃Cl₂ (1:1).

6. Zweimaliges Waschen mit Methanol.

7. Waschen mit Methanol1CH₃Cl₃ (1:1).

8. Zweimaliges Waschen mit CH₂Cl₃. <

9. Viermalige Behandlung über eine Zeitdauer von jeweils 2 Minuten mit 4 % DIEA in CH₉Cl₉.

10. Wiederholung der Stufen 4 bis 8.

11. Behandlung mit 2,5 Äquivalent des gewünschten Amino-' säurederivate in CH₃Cl₂ und 1,25 Äquivalent DCC in CH₃Cl₃ über eine Zeitdauer von 120 Minuten.

12. Viermaliges Waschen mit CH₉Cl₃.

13. Wiederholung der Stufen 5 bis 7.

14. Dreimaliges Waschen mit CH₃Cl-.

Programm Nr. 2

1. Viermalige Behandlung über eine Zeitdauer von jeweils

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2 Minuten mit 4-% DIEA in CH₂Cl₂-

2. Zweimaliges Waschen mit CH₂Cl₂-

3. Waschen mit Methanol:CH₂C1₂ (1:1).

4. Zweimaliges Waschen mit Methanol.

5. Waschen mit Methanol:CH₂C1₂ (1:1).

6. Zweimaliges Waschen mit CH₂Cl₃.

7. Dreimaliges Waschen mit DMFrCH₂Cl₂ (1:1).

8. Behandlung mit 2,5 Äquivalent des gewünschten Aminosäurederivats in DMFrCH₃Cl₂ (IrI) und 1,25 Äquivalent DCC in CH₃Cl₂ über eine Zeitdauer von 120 Minuten.

9. Viermaliges Waschen mit DMFrCH₃Cl₂ (1:1). 10. Wiederholung der Stufen 4 bis 6.

B. Hydrogenfluoridsalz von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-D,L-m-bromphenylalanyl-L-(N^a-methyl)-methioninamid

Das gemäß obigem Teil A. hergestellte Peptid-Harz wird mit flüssigem wasserfreiem Fluorwasserstoff unter Vakuum über eine Zeitdauer von 60 Minuten bei O⁰C mit Anisol als Akzeptor umgesetzt. Die flüchtigen Bestandteile werden vom Reaktionsgemisch unter Vakuum entfernt, und das zurückbleibende Peptid-Harz wird mit Ether behandelt. Sodann filtriert man das Ganze zur Entfernung von restlichen HF und Anisol. Das Peptid wird vom Harz durch Behandlung mit 10 %-iger Essigsäure extrahiert. Der 10 %-ige Essigsäureextrakt wird lyophilisiert, wodurch man zu 533 mg der rohen Titelverbindung gelangt.

C. Chromatographische Reinigung unter Bildung des Endprodukts

Das rohe Gemisch der Peptiddiastereomeren wird über eine Säule (5 χ 72 cm) aus Umkehrphasensilicagel (C,_g) bei niedrigem Druck (6,3 bar) mit 28 %-igem Acetonitril in 0,1 η Ammoniumacetat chromatographiert. Nach Sammeln von 2000 ml Eluat fängt man alle 1,5 Minuten Fraktionen von 17,1 ml auf.

23Λ 21O 2

Die Fraktionen 78 bis 115 werden vereinigt und lyophilisiert, Das lyophilisierte Produkt wird über eine mit Sephadex G-IO gefüllte Säule (2,5 χ 100 cm) in 0,2n Essigsäure chromatographiert, um auf diese Weise restliches Ammoniumacetat zu entfernen. Die Fraktionen werden lyophilisiert, wodurch man zu 198,7 mg der Titelverbindung in Form eines amorphen weißen Feststoffs gelangt.

Öf^ _s +20,4° (c = 0,5 In HCl) ^{= +75}'⁴° ^{(c =} °'^{5 ln HC1)}

Analyse für C₃₁H₄₃BrN₆OgS (739,697)

berechnet: C 50,34 H 5,86 N 11,36 Br 10,80 gefunden: C 50,11 H 5,56 N 11,07 Br 11,03

Aminosaureanalyse:	AIa	GIy	M-BrPhe	NH₃	% Peptid
Tyr	0,99	0,99	1,01	0,91	103
(1) 1,00	0,99	1,00	1,01	0,93	99
(2) 1,00

Beispiel2

Herstellung von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-methoxyphenyl-

Oc

alanyl-L-(N -methyl)methioninamid-Acetat

ty A. N -t-Butyloxycarbonyl-DjL-m-methoxyphenylalanyl-L-

(N -methyl)methioninamid

Eine Suspension des Hydrochlorids von lSH-Methylmethioninamid (1,29 g, 6,47 mMol) in 7,0 ml kaltem (0⁰C) Dimethylformamid wird mit DIEA (1,11 ml, 6,47 mMol) versetzt. Eine Lösung von Boc-D,L-(m-MeO)Phe-OH (1,91 g, 6,47 mMol) in Dimethylformamid (5,0 ml) wird zu dem Gemisch zugegeben, gefolgt von HBT (1,75 g, 12,9 mMol) und einer Lösung von DCC (1,33 g, 6,47 mMol) in Dimethylformamid (13 ml). Hierauf rührt man

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das Gemisch unter einem mit Calciumsulfat gefüllten Trockenröhrchen 4 Stunden bei O⁰C und dann 16 Stunden bei Raumtemperatur. Das Gemisch wird dann zur Entfernung von Dicyclohexylharnstoff (DCU) filtriert und das Filtrat unter Vakuum zu einem orangen Rückstand eingedampft. Der Rückstand wird in Ethylacetat (100 ml) gelöst. Die Ethylacetatschicht wird mit Wasser (3 χ 100 ml) mit pH 10 Puffer (3 χ 100 ml), 0,1η HCl (3 χ 100 ml) und wieder mit Wasser (3 χ 100 ml) gewaschen. Das Ethylacetat wird über Magnesiumsulfat getrocknet, worauf man das Ganze filtriert und zur Entfernung des Lösungsmittels unter Vakuum eindampft. Auf diese Weise gelangt man zu 2,23 g (81 %) der Titelverbindung. Eine entsprechende dünnschichtchromatographische Analyse des Materials ergibt, daß es Dicyclohexylharnstoff enthält.

B. DfL-m-Methoxyphenylalanyl-L-(N^-methyl )rnethioninamid-Hydrochlorid.

Eine Lösung der gemäß obigem Teil A. erhaltenen Verbindung (2,23 g, 5,24 mMol) in Essigsäure (10 ml) gibt man zu Anisol (1,6 ml) und 1,62 η HCl in Essigsäure (16,2 ml). Die Lösung wird unter einem mit Calciumchlorid gefüllten Röhrchen bei Raumtemperatur (1 Stunde) gerührt und dann mit Ether (470 ml) verdünnt..Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert, mit Ether gewaschen (3 χ 15 ml) und unter Vakuum bei 25°C getrocknet, wodurch man zu 1,53 g (81 %) der Titelverbindung gelangt.

C. N^a-t-Butyloxycarbonyl-L-tyrosyl-D-alanylglycyl-D,L-m-methoxyphenylalanyl-L-(N -methyl)methioninamid

Man versetzt 7,0 ml Dimethylformamid (DMF) mit 2,48 g (4,2 mMol) Boc-L-Tyr-D-Ala-Gly-OH-Dicyclohexylamin. Das Gemisch wird in einem Aceton-Eis-Bad auf -10⁰C gekühlt. Dann versetzt man das Gemisch mit 0,09 ml (0,84 mMol) N-Methylmor-

2 3 4 2 10 2

pholin und 0,55 ml {4,2 mMol) Isobutylchlorformiat. Das Gemisch wird 2 Minuten gerührt. Sodann versetzt man das Gemisch mit einem gekühlten Gemisch (-1O⁰C) des Produkts von Teil B. (1,51 g, 4,2 mMol) und N-Methylmorpholin (0,47 ml, 4,2 mMol) in Dimethylformamid (16,5 ml). Das erhaltene Gemisch wird unter einem mit Calciumchlorid gefüllten Trockenröhrchen im schmelzenden Eis-Aceton-Bad (16 Stunden) gerührt.

Das Reaktionsgemisch wird zur Entfernung unlöslicher Bestandteile filtriert und das Filtrat unter Vakuum zu einem gelben Rückstand eingedampft. Der Rückstand wird zwischen Ethylacetat (50 ml) und Wasser (50 ml) verteilt, worauf man die Schichten voneinander trennt. Die Wasserschicht wird mit Ethylacetat (3 χ 50 ml) gewaschen und die Ethylacetatschichten werden vereinigt. Sie werden anschließend mit 5 % NaHCO₃ (3 χ 50 ml),l,5n Citronensäure (3 χ 50 ml) und Wasser (3 χ 50 ml) gewaschen. Anschließend trocknet man die Ethylacetatschicht über Magnesiumsulfat, filtriert das Ganze und dampft hierauf zur Entfernung des Lösungsmittels unter Vakuum ein. Auf diese Weise gelangt man zu 2,84 g (93 %) der Titelverbindung.

D. L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-DfL-m-methoxyphenylalanyl-L-(N -methyl)methioninamid-Trifluoracetatsalz

Das nach Teil C. erhaltene Produkt (2,84 g, 3,89 mMol) wird mit Anisol (3,5 ml) und Trifluoressigsäure (35 ml) versetzt. Die erhaltene Lösung wird unter einem mit Calciumsulfat gefüllten Trockenröhrchen 1,25 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, worauf man das Reaktionsgemisch unter Vakuum zu einem gelben Öl konzentriert,Das gelbe öl wird mit Ether (900 ml) versetzt, und der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert und unter Vakuum bei 25⁰C getrocknet, wodurch man zu 2,61 g (90 %) der rohen Titelverbindung gelangt.

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E. Chromatographische Reinigung unter Bildung des Endprodukts

Das Produkt von Teil D. wird zur Auftrennung der beiden Diastereomeren genau so behandelt wie bei Teil C. von Beispiel 1, wodurch man zu 758 mg der Titelverbindung ge langt.

^s +25,6° (c = 0,5 In HCl) = +92,9° (c = 0,5 In HCl)

Analyse für C₃₂H₄₆NgO₉S (690,822) berechnet: C 55,64 H 6,71 N 12,17 gefunden: C 55,50 H 6,60 N 12,32

Aminosäureanalyse:

Tyr Ala GIy m-MeOPhe NH₃ % Peptid 1,00 1,00 1,01 1,12 1,02 96

Unter Anwendung des in Beispiel 1 beschriebenen Verfahrens werden folgende weitere Verbindungen hergestellt.

Beispiel 3

L-Tyrosyl-D-alanyl-gylcyl-L-m-trifluormethylphenylalanyl-L-fN^-methylJmethioninamid-Acetatsalz.

p⁵ = +15,29° (c = 0,5 In HCl) /PCJ ₃g₅ = +56,47° (c = 0,5 In HCl)

Analyse für C₃₂H₄₃F₃NgOgS (728,794)

berechnet: C 52,74 H 5,95 N 11,53 F 7,82 gefunden: C 53,03 H 5,70 N 11,72 F 7,61

m-CF^Phe	NH₃	% Peptid
0,99	1,01	98,5
1,00	0.95	97,1

234210 2 -"-

Aminosäureanalyse:

Tyr Ala GIy

(1) 0,99 1,00 1,02

(2) 0,99 1,00 1,01

Beispiel 4

L-Tyrosy1-D-a1any1-glycyl-L-m-chlorphenyIaIany1-L-(N methyl)methioninamid-Acetatsalz

= +19,67° (c =0,5 In HCl) = +69,64° (c = 0,5 In HCl)

Analyse für C₃₁H₄₃ClN₆OgS (695,241) berechnet: C 53,56 H 6,23 N 12,09 gefunden: C 53,84 H 6,17 N 12,31

Aminosäureanalyse:

Tyr Ala GIy m-ClPhe NH₃ % Peptid

(1) 1,01 1,00 0,96 1,04 1,01 97,4

(2) 1,00 1,01 0,99 1,01 1,02 98,1

Beispiel 5

L-Tyrosy1-D-a1any1-g1ycyl-L-m-methyIphenylalany1-L-(N methyl)methioninamid-Acetatsalz

25 _{= +15>01}o _{{c =} _0f5 _{ln HC1)} = +53,35° (c = 0,5 In HCl)

Analyse für ^C ₃2^H46^N6°8^S <⁶⁷⁴'⁸²³) berechnet: C 56,96 H 6,87 N 12,45 gefunden: C 57,18 H 6,58 N 12,36

NH₃	% Peptid
1,01	95
0,91	94

Aminosäureanalyse:

Tyr Ala GIy m-MePhe

(1) 0,99 0,98 , 0,97 1,03

(2) 0,99 0,99 0,99 1,01

Unter Anwendung des in Beispiel 2 beschriebenen Verfahrens werden folgende weitere Verbindungen hergestellt:

Beispiel

L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-rn-iodphenylalanyl-L- (N -methyl) methioninamid-Acetatsa1ζ

_{= +12},6° (c = 0,5 In HCl) ^{= +50}'⁶° ^{(c =} °'^{5 ln HC1)}

Analyse für C₃₁H₄₃IN₆OgS (786,692)

berechnet: C 47,33 H 5,51 N 10,68 I 16,13 gefunden: C 47,14 H 5,53 N 10,57 I 16,31

Aminosäureanalyse:

Tyr Ala GIy m-IPhe NH₃ % Peptid 1,01 1,00 1,01 0,92 1,08

Beispiel 7

L-Tyrosy1-D-alany1-glycyl-L-m-bromphenylalanyl-L-phenyl glycinamid-Acetatsalz

= +78,90° (c = 0,5 In HCl) = +299,2° (c = 0,5, In HCl)

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Analyse für C₃₃H₃₉BrNgOg (727,618)

berechnet: C 54,47 H 5,40 N 11,55 Br 10,98 gefunden: C 54,29 H 5,12 N 11,32 Br 11,18

Aminosäureanalyse:

Tyr	Ala	GIy	m-BrPhe	Pg 1	NH₃	% Peptid
1,00	1,01	1,00	0,99	0,94	1,02	91

Die analgetische Wirksamkeit der Verbindungen der allgemeinen Formel I wird nach dem sogenannten Heizplattenversuch unter Verwendung von Mäusen als Versuchstiere ermittelt. Bei diesem Versuch verwendet man einen senkrecht stehenden Zylinder aus Acrylglas, der sich auf einer Heizplatte befindet, die man auf einer Temperatur von 52°C hält. Sodann verabfolgt man einer Maus (Cox Standard) durch subkutane Injektion eine vorbestimmte Menge der jeweils zu untersuchenden Verbindung in Form einer Lösung oder Suspension in einem geeigneten Träger und gibt die Maus 15 Minuten nach erfolgter Verabreichung des Wirkstoffs auf die Oberfläche der geheizten Platte. Es wird dann die Zeitdauer in Sekunden gemessen, die vergeht, bis die Maus von der geheizten Platte hochspringt. Ein Mittel, das über eine analgetische Wirksamkeit verfügt, ergibt eine Erhöhung dieser Zeitdauer gegenüber der entsprechenden Zeitdauer einer Kontrollmaus, der man lediglich den Träger gegeben hat. Dies muß in einem Dosisbereich erfolgen, der zu keiner motorischen Inkoordination oder Untauglichkeit führt. Die bei diesen Untersuchungen erhaltenen Ergebnisse gehen aus der folgenden Tabelle als

ED_cn-Werte hervor. Unter einem solchen ED_cn-Wert wird diebu du

jenige Wirkstoffdosis verstanden, die bei 50 % der untersuchten Mäuse zu einer Analgesie führt. Unter einer solchen Analgesie wird definitionsgemäß die Wirkungslatenzperiode in Gegenwart des Wirkstoffs verstanden, die gleich oder größer ist als die Wirkungslatenzperiode der Kontrolle plus zwei Standardabweichungen. Die Werte für die prozen-

tuale Analgesie werden in korrigierte und entsprechend tatsächliche Werte überführt, und die EDc^-Werte werden aus den Dosis-Wirkungs-Daten durch Regressionsanalyse berechnet. Jede Dosis-Wirkungs-Kurve muß wenigstens 4 Punkte aufweisen, und jeder Punkt ist unter Verwendung von Daten aus einem Minimum von 10 behandelten Mäusen und 10 Kontroll mausen bestimmt.

In Verbindung mit der analgetischen Wirksamkeit zeigen die Verbindungen der allgemeinen Formel I auch überraschend hohe Aktivitätswerte am Enkephalin-(5)-Rezeptor im Unterschie zum Morphin-(μ)-Rezeptor im Vergleich zu den bekannten Verbindungen. Die Enkephalin-(5)-Rezeptor-Aktivität wird durch den sogenannten Vas-deferens-Versuch an der Maus gezeigt.

Für diesen Vas-deferens-Versuch an der Maus suspendiert man ein einzelnes Vas-deferens (Samenleiter") (Cox, 30 bis 40 g) in 3 ml einer modifizierten Krebs-Lösung, die man mit einem Gemisch aus 95 % O_? und 5 % CO- belüftet und auf 37°C hält. Die durch Feldstimulierung (0,15 FIz, 1 msec, 40 V) induzierte Zuckung wird über einen isometrischen Umwandler auf einem Polygraph aufgezeichnet. Die zu untersuchende Verbindung wird dem Bad in Teilmengen von 20 bis 30 μΐ zugesetzt. Durch kumulative Zugabe entsprechender Mengen der jeweiligen Verbindung zum Bad ergibt sich eine Dosis-Wirkungs-Kurve. Auf Basis der entsprechenden IC_r«-Werte (nämlich der Werte für die Konzentration, die mit einer 50 %-igen Abnahme der elektrisch hervorgerufenen Kontraktion verbunden ist) wird ein Vergleich der relativen Agonistenstärke des δ-Rezeptors gemacht.

Die bei der Untersuchung von Verbindungen der allgemeinen Formel I nach dem sogenannten Vas-deferens-Versuch an der Maus erhaltenen Ergebnisse gehen ebenfalls aus der folgenden Tabelle hervor. Die erhöhte Bindung der Verbindungen der

allgemeinen Formel I am Enkephalin-(δ)-Rezeptor im Vergleich zu den Verbindungen, die über keine Ringsubstitution verfügen (R = H) geht daraus deutlich hervor und ist äußerst überraschend.

	(N-Me) Met	TABELLE	0.49
	(N-Me) Met	H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(m-R):	0.71
	(N-Me)Met		2.10
	(N-Me) Met	Ph₆-L-R₁-NH₂	1.78
Verbindung Tj Ty Xv Σ\·%	(N-Me) Met	Heizplattenversuch an Vas-Deferens-Versuch an der Maus der Maus (3> -Rezeptor) ED-^-Wert mgAg IC^-Wert, nM	2.73
Br	(N-Me) Met	0.36	2.92
Cl	(N-Me) Met	0.11	2.10
I	PgI	--^a	0.35
CF₃	(N-Me) Met	0.33	12.2
CH₃	0.33
OMe	0.15^b
I	a
Br	a
* H	0.36

Nicht untersucht

Versuch unter Verwendung von Harlan-ND.-Mäusen * Stand der Technik

Claims

Erfindungsansprüche

und den pharmazeutisch unbedenklichen, nichttoxischen Säureadditionssalzen hiervon,
worin R Wasserstoff, Methyl oder Ethyl ist, A für den Rest einer D-Aminosäure aus der Gruppe

AIa, Abu, Nva, VaI, Nie, Leu, lie, GIy(Al), GIy(Cp), Met, Cys(Me), Met(O), Cys,(Me)(O), Ser, Thr oder Hse steht,
R, Wasserstoff, primäres C,-C-^Alkyl, Cyclopj?ppy|.me-

thyl| Allyl oder Propargyl bedeutet, X Brom, Iod, Chlor, C,-C₃~Alkyl, Trifluormethyi oder C-, ^Cg-Alkoxy ist, '

B für äen Res| einer B^" oder L-Aminosäure ohne dessen Carboxylgruppe steht und ausgewählt ist aus c|er Gruppe Glyf;Ala, Abu, ψζ&, VaI, Nie, Leu,j|t_f PgI_? Cys(Me), Cys(Me)(O), Cy^(Me)(O₂), Cys(Et), Cys(Et)-(0), CyS(Et)(O₂), Met, Met(O), Met(0₂), Eth, Eth(O), Eth{0₂), Ser(Me), Ser(Et), Hse(Me) oder Hse(Et) oder irgendeinem Rest,dieser Art, der am Aminostickstoffatom durch primäres C,-C₃~Alkyl substituiert ist, und 0 0

Z für -CH₂OR₂, -C-NHR₂ oder -C-OR₂ steht, worin R₂

~ 50 -

Wasserstoff oder C,-C,-Alkyl ist,

mit der Maßgabe, daß, falls R, eine andere Bedeutung als Wasserstoff hat, dann B für den Rest einer Aminosäure steht, die am Aminostickstoffatom keinen Substituenten aufweist, dadurch gekennzeichnet, daß man von dem entsprechend geschützten Peptid der allgemeinen Formel I die Schutzgruppen mit einem geeigneten Deblockierungsmittel abspaltet.
2. Verfahren nach Punkt 1 zur Herstellung von L-Tyrosyl~ D-alanyl-glycyl-L-m-bromphenylalanyl-L-(N^a-methyl)methioninamid, dadurch gekennzeichnet, daß man das Trifluoressigsäuresalz von L-Tyrsoyl-D-alanyl-glycyl-L-m-bromphenylalanyl-L-(N^a-methyl)methionyl-Benzhydrylamin-Harz mit flüssigem wasserfreiem Fluorwasserstoff und dann mit Essigsäure umsetzt.
3. Verfahren nach Punkt 1 .zur Herstellung von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-methoxyphenylalanyl-L-(Ν^α—methyl)me- · thioninamid, dadurch gekennzeichnet, daß man N^a-t~Butyloxycarbonyl-L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-methoxyphenyIaIanyI-L-(N -methylJmethioninamid mit Trifluoressigsäure umsetzt.
4. Verfahren nach Punkt 1 zur Herstellung von L-Tyrosyl-

cc D-alanyl-glycyl-L-m-trifluormethylphenylalanyl-L-(N -methyl) methioninamid, dadurch gekennzeichnet, daß man das Trifluoressigsäuresalz von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-trifluormethylphenylalanyl-L-(N^-methyl )methionyl-Benzhydrylarnin-Harz mit flüssigem wasserfreiem Fluorwasserstoff und dann mit Essigsäure umsetzt.
5. Verfahren nach Punkt 1 zur Herstellung von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-chlorphenylalanyl-L-tN^-methyl)methioninamid, dadurch gekennzeichnet, daß man das Trifluoressigsäuresalz von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-chlorphenylalanyl-L-

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(N^-methyl)methionyl-Benzhydrylamin-Harz mit flüssigem wasserfreiem Fluorwasserstoff und dann mit Essigsäure umsetzt.
6. Verfahren nach Punkt 1 zur Herstellung von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-methylphenylalanyl-L-tN^-methyl)methioninamid, dadurch gekennzeichnet, daß man das Trifluoressigsäuresalz von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-methylphenylalanyl-L-(N^a-methyl)methionyl-Benzhydrylamin-Harz mit flüssigem wasserfreiem Fluorwasserstoff und dann mit Essigsäure umsetzt.
7. Verfahren nach Punkt 1 zur Herstellung von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-iodphenylalanyl-L-(N^a-methyl)methioninamid, dadurch gekennzeichnet/ daß man N^a-t-Butyloxycarbonyl-L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-iodphenylalanyl-L-(N -methyl)-methioninamid mit Trifluoressigsäure umsetzt.
8. Verfahren nach Punkt 1 zur Herstellung von L-Tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-bromphenylalanyl-L-phenylglycinamid, dadurch gekennzeichnet, daß man N -t-Butyloxycarbonyl-L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-m-bromphenylalanyl-L-phenylglycinamid mit Trifluoressigsäure umsetzt.