CZ20011707A3

CZ20011707A3 - Substituované koprolaktamové sloučeniny, způsob jejich výroby, farmaceutické prostředky, obsahující tyto sloučeniny a jejich použití k léčbě nádorových chorob

Info

Publication number: CZ20011707A3
Application number: CZ20011707A
Authority: CZ
Inventors: Frederick Ray Kinder Jr.; Kenneth Walter Bair; Christopher Turchik Jagoe; Richard William Versace; Sompong Wattanasin
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1998-11-17
Filing date: 1999-11-15
Publication date: 2001-08-15
Also published as: CN1326445A; EP1131297B1; WO2000029382A1; NO20012428D0; AU1506000A; HUP0104224A2; JP3550545B2; BR9915436A; HUP0104224A3; CA2347773C; ID28343A; UY25807A1; CA2347773A1; AU748016B2; PT1131297E; CO5140099A1; PL347633A1; CN1187333C; TR200101366T2; ZA200103419B

Description

Substituované kaprolaktamové sloučeniny, způsob jejich výroby, farmaceutické prostředky, obsahující tyto sloučeniny a jejich použiti k léčbě nádorových chorob

Oblast techniky

Předložený vynález se týká oblasti chemoterapeutických účinných látek, zvláště určitých substituovaných kaprolaktamů, farmaceutických prostředků, obsahujících zmíněné kaprolaktamy, způsobu léčby nádorů, použiti zmíněných kaprolaktamů v chemoterapii nádorů, a způsobu výroby těchto sloučenin.

Dosavadní stav techniky

Rakovina představuje vážný zdravotní problém na celém světě.

V důsledku toho bylo podniknuto ohromné množství výzkumů s cílem najít vhodné způsoby léčby a zmírnění rakoviny u člověka.

V oblasti chemoterapeutik se výzkum zaměřuje na vývoj protinádorových látek, účinných proti různým typům rakoviny.

Často však vyvinuté protinádorové látky, u nichž byla nalezena účinnost proti nádorovým buňkám, jsou bohužel toxické i pro zdravé buňky. Po podání protinádorové sloučeniny pacientovi, vyžadujícímu protirakovinnou terapii, se tato toxicita projevuje příznaky jako je úbytek váhy, nausea, zvracení, ztráta vlasů, únava, svědění, halucinace, nechutenství atd·

Nadto běžně používané chemoterapeutické látky nevykazují požadovanou účinnost nebo spektrum jejich účinnosti proti různým typům rakoviny není tak široké, jak by bylo žádoucí.

V důsledku toho je velká poptávka po chemoterapeutických činidlech, které nejsou jen účinnější proti všem typům rakoviny, ale které mají i vyšší stupeň selektivity pro likvidaci rakovinných buněk, přičemž by neměly žádný (nebo jen • · ·· » ··· · · ··· · • · · · ··· · minimální) vliv na normální zdravé buňky. Jsou hledána vysoce účinná a selektivní protinádorová činidla, zvláště proti rakovině tlustého střeva, močového měchýře, prostaty, žaludku, pankreatu, prsu, plic, jater, mozku, varlat, vaječníků, děložního čípku, kůže, vulvy a tenkého střeva. Nadto účinné látky proti rakovině tlustého střeva, prsu, plic a prostaty, právě tak jako proti melanomům, jsou zvláště žádány, protože proti těmto typům rakoviny neexistuje v současné době žádná zvláště účinná terapie.

Podstata vynálezu

Předložený vynález popisuje nové protinádorové sloučeniny, které jsou účinné proti různým rakovinným buňkám. Vynález se týká zvláště určitých substituovaných kaprolaktamů, které vykazují vysoký stupeň selektivity v likvidaci rakovinných buněk. Podstatou předloženého vynálezu je zjištění, že určité substituované kaprolaktamy jsou užitečné při léčbě nádorů. Vynález se týká kaprolaktamů vzorce I

kde

Ri je (Ci-₆) alkylová skupina nebo (C₃-_e) cykloalkylová skupina;

R₂ je atom vodíku nebo (Ci_₆) alkylová skupina;

X je (C1-12) alkylenová skupina; (C2-12) alkenylenová skupina; nebo (C2-12) alkinylenová skupina;

m je 0 nebo 1; a • · · · • φ φφφφ ^3 je (C₃_₃) cykloalkylová skupina; nebo aromatický cyklický systém, zvolený ze II, III, IV a V:

II

kde

R₄ je atom vodíku, atom chloru nebo methoxylová skupina;

R₅ je atom vodíku, atom chloru, (Ci-is) alkylová skupina nebo (Ci-ig) alkoxylová skupina; a

Z je atom kyslíku, atom síry,, skupina N-H, nebo skupina N-CH₃;

nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí s kyselinami, pokud přicházejí v úvahu.

Preferovány jsou sloučeniny vzorce I, kde

Ri	je	(Ci-e) alkylová skupina;
r₂	je	atom vodíku nebo (Ci-₄) alkylová skupina;
X	je	(C1-6) alkylenová skupina nebo (C2-6) alkenylenová skupina;
m.	je	0 nebo 1; a
R3	je	(C₃-g) cykloalkylová skupina; nebo aromatický cyklický·

systém, zvolený ze II, III, IV a V, kde

R₄ je atom vodíku, atom chloru nebo methoxylová skupina;

R₅ je atom vodíku, atom chloru, (Ci_i₈) alkylová skupina nebo (Ci-ig) alkoxylová skupina; a

Z je atom kyslíku, atom síry, skupina N-H, nebo skupina N-CH₃;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli s kyselinami, pokud přicházejí v úvahu.

·· ··· · φφφ

Ještě více jsou preferovány sloučeniny vzorce I, kde

Ri je isopropylová skupina nebo terc-butylová skupina;

R2 je atom vodíku nebo methylová skupina;

m je 0 nebo 1;

X je (Ci-g) alkylenová skupina; a

R3 je (C5-7) cykloalkýlová skupina; nebo aromatický cyklický systém zvolený z Ha a V:

lla

Ν' kde

R₄' je v meta-poloze a je atom vodíku nebo atom chloru; a

R₅' je v para-poloze a je atom vodíku, atom chloru, (Ci-ia) alkylová skupina nebo (Ci_₁₈) alkoxylová skupina; nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli s kyselinami, pokud přicházejí v úvahu.

Zvláště preferovány jsou sloučeniny vzorce I, kde

Ri je isopropylová skupina nebo terc-butylová skupina;

R₂ je atom vodíku nebo methylová skupina;

m je 0 nebo 1;

X je methylenová skupina nebo ethylenová skupina; a

R₃ je (C5-7) cykloalkylová. skupina, fenylová skupina,

3,4-dichlorfenylová skupina, 4-methoxyfenylová skupina, 4-n-decylfenylová skupina, 4-n-decyloxyfenylová skupina nebo 3-pyridylová skupina;

za podmínky, že když m je rovno 0, R₃ je (C5-7) cykloalkylová skupina, 4-n-decylfenylová skupina nebo 4-n-decyloxyfenylová skupina;

• ···· ·· ···· ·· · ♦ · · · · · · · ·· • ··· · ···· · · · _ c _ · ···· ···· ·

-> ········ ··· ··· ·· «·· ·· ··· nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli s kyselinami, pokud přicházejí v úvahu.

Další aspekt předloženého vynálezu se týká) farmaceutických prostředků, zvláště pro léčbu nádorů u teplokrevných živočichů, které obsahují farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo a protinádorově účinnou dávku výšeuvedené sloučeniny.vzorce I, s výhodou 3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8, 8-dimethyl-N-[hexahydro-2-ΟΧΟ-6- (cyklohexylkarbónyl) oxy-2V-azepin-3-yl]non-6-enamidu nebo 3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8, 8-dimethyl-N-[hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3-fenylpropoxy) -2H-azepin-3-yl]non-6-enamidu, nebo farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou, pokud tato sůl může vzniknout.

Další aspekt předloženého vynálezu se týká metody léčby nádorů, vyznačující se tím, že se savci, vyžadujícímu takovou léčbu, podá terapeuticky účinné množství výšeuvedené sloučeniny vzorce I, nebo její farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou, pokud tato sůl může vzniknout.

Ještě další aspekt předloženého vynálezu se týká použití sloučeniny vzorce I, nebo farmaceuticky přijatelné soli takové sloučeniny, pro přípravu farmaceutického prostředku pro použití v chemoterapii nádorů.

Dále se předložený vynález týká použití sloučeniny vzorce I, nebo farmaceuticky.přijatelné soli takové sloučeniny, pro chemoterapii nádorů.

Ve výšeuvedených definicích:

1) alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku mají buď přímý nebo rozvětvený řetězec, přičemž příklady posledně jmenovaných zahrnují isopropylovou skupinu, isóbutylovou skupinu, terc-butylovou skupinu, isopentylovou skupinu, neopentýlovou skupinu, isohexylovou skupinu, 3-methylpentylovou skupinu, 2,2-dimethylbutylovou skupinu,

2,3-dimethylbutylovou skupinu a 1,1,2,2-tetramethylethylovou skupinu; a » ···· φ · · · · · · · φ φ φ · φ φ · · · _r · φ φ · · φ φ φ « φ φ — O — φ φ φ · φ · · · · • φ φ φ φ · · φφφφφφ φφ φ φ · · · ·

2) alkylové skupiny a alkoxylové skupiny, obsahující 1 až 18 atomů uhlíku, mají buď přímý nebo rozvětvený řetězec.

Výraz „ (C1-12) alkylenová skupina znamená v tomto textu dvojvaznou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem, která se skládá výhradně z atomů uhlíku a atomů vodíku a která obsahuje 1 až 12 atomů uhlíku. Příklady „alkylenových skupin zahrnují methylenovou skupinu, ethylenovou skupinu, propylenovou skupinu, butylenovou skupinu, pentylenovou skupinu, 3-methylpentylenovou skupinu atd.

Výraz „ (C2-12) alkenylenová skupina znamená v tomto textu dvojvaznou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem, která se skládá výhradně z atomů uhlíku a atomů vodíku, která obsahuje přinejmenším jednu dvojnou vazbu uhlík-uhlík, a která má 2 až 12 atomů uhlíku. Příklady „alkenylenových skupin zahrnují ethenylenovou skupinu, propenylenovou skupinu, butenylenovou skupinu, pentenylenovou skupinu, 3-methylpentenylenovou skupinu atd.

Výraz „ (C₂_i₂) alkinylenová skupina znamená v tomto textu dvojvaznou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem, která se skládá výhradně z atomů uhlíku a atomů vodíku, která obsahuje přinejmenším jednu trojnou vazbu uhlík-uhlík, a která má 2 až 12 atomů uhlíku. Příklady „alkinylenových skupin zahrnují aceťylenovou skupinu, propinylenovou skupinu, butinylenovou skupinu, pentinylenovou skupinu, 3-methylpentinylenovou skupinu atd.

Adiční soli sloučenin vzorce I s kyselinami mohou být soli s farmaceuticky přijatelnými organickými nebo anorganickými kyselinami. Ačkoliv preferované adiční soli s kyelinami jsou soli s kyselinou chlorovodíkovou a kyselinou methansulfonovou, mohou být použity i soli s kyselinou sírovou, kyselinou fosforečnou, kyselinou citrónovou, kyselinou fumarovou, kyselinou maleinovou, kyselinou benzoovou, kyselinou benzensulfonovou, kyselinou jantarovou, kyselinou vinnou, kyselinou mléčnou a s kyselinou octovou.

♦ · · · · ·

Kaprolaktamy vzorce I se mohou připravit následujícím způsobem:

Stupeň A

kde Ri,

R₂, X, m a R3 jsou definovány výše.

Co se týče jednotlivých stupňů, stupeň A zahrnuje acylaci aminokaprolaktamu vzorce VI laktonovým derivátem vzorce VII, čímž se získá diamidová sloučenina vzorce VIII. Acylace se provádí v polárním organickém rozpouštědle, s výhodou v protickém polárním rozpouštědle jako je isopropanol, při teplotě mírně pod bodem varu použitého rozpouštědla nebo při teplotě bodu varu rozpouštědla, po dobu .4 až 48 hodin.

Stupeň B se týká hydrolýzy 1,3-dioxanové skupiny, společné diamidovým sloučeninám vzorce VIII, čímž se získá substituovaná kaprolaktamová sloučenina vzorce I. Hydrolýza se typicky provádí rozpuštěním amidu ve směsi rozpouštědel, sestávající • · · · z 1) protické kyseliny, s výhodou organické kyseliny jako je kyselina trifluoroctová, 2) z protického rozpouštědla, s výhodou vody, a 3) z inertního organického rozpouštědla, s výhodou cyklického etheru jako je tetrahydrofuran, při teplotě 0 °C až 25 °C po dobu 5 minut až 2 hodiny.

Alternativně se diamidové sloučeniny vzorce VIII mohou připravit podle následujícího třístupňového reakčního schématu:

Stupeň 1

acylace

VII!

0 ·* 0000 kde X, m a R₃ a Ri a R₂ jsou definovány výše, a R₆ je skupina, chránící alkoholy. Skupina R6 je s výhodou silylová skupina jako je terc-butyldimethylsilylová skupina.

Co se týče jednotlivých stupňů, stupeň 1 zahrnuje acylaci aminokaprolaktamu vzorce IX laktonovým derivátem vzorce VII, čímž se získá diamidová sloučenina vzorce X. Acylace se provádí za přítomnosti báze, s výhodou alkylaminové báze jako je diisopropylethylamin, a polárního organického rozpouštědla, s výhodou protického polárního rozpouštědla jako je isopropanol, při při teplotě varu teplotě o použitého něco nižší než teplota varu, nebo rozpouštědla, po dobu 4 až 48 hodin.

Stupeň 2 se sloučeninám týká vzorce X, sloučenina vzorce XI.

hydrolýzy čímž přítomnosti fluoridu, skupiny R₆, společné diamidovým se získá hydroxykaprolaktamová

Hydrolýza se typicky provádí za s výhodou fluoridové soli jako je tetrabutylamonium-fluorid, a v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v cyklickém etheru jako je tetrahydrofuran, při teplotě 0 °C až 25 °C, po dobu 5 minut až 2 hodiny.

Stupeň 3 se týká acylace hydroxykaprolaktamové sloučeniny vzorce XI reakcí s acylchloridem vzorce R₃(X)_mCOCl, kde R₃, X a m jsou definovány výše, kterou se získá diamidová sloučenina vzorce VIII. Acylace se provádí za přítomnosti báze, s výhodou alkylaminové báze jako je triethylamin, a v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při teplotě -78 °C až 25 °C po dobu 1 až 24 hodiny.

Alternativně se acylace hydroxykaprolaktamové sloučeniny vzorce XI ve stupni 3 může provést reakcí s karboxylovou kyselinou vzorce R₃(X)_mCO₂H, kde R₃, X a m jsou definovány výše, za přítomnosti činidla pro kondenzaci karboxylových kyselin, s výhodou diimidu jako je hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu, a vhodného aktivačního činidla, běžného pro diimidové kondenzační reakce, s výhocjou • φφφφ φφ φφφφ φφ φ φφφ φ φφ φ φ φ φ •φφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φφφ φ φφφ φ.φ • · φ · φ φφ φ • ΦΦ φφ· φφ ·ΦΦ φφ ·ΦΦ substituovaného pyridinu jako je 4-dimethylaminopyridin, v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při teplotě -78 °C až 25 °C po dobu 1 až 24 hodin.

Aminokaprolaktamové sloučeniny vzorce VI se mohou připravit podle následujícího schématu:

cyklizace

Stupeň 1a

XIII

Stupen 3a

silylace

Stupeň 6a acylace

kde R₆, R₂, X, m a R₃ jsou definovány výše, a kde R₇ je skupina, obsahující karbonyl. S výhodou R₇ je alkoxykarbonylová skupina jako je terc-butyloxykarbonylová skupina.

Co se týče jednotlivých stupňů, stupeň la zahrnuje cyklizaci hydroxylysinu XII (nebo jakékoliv jeho soli nebo hydrátu) na hydroxycyklolysin XIII. Cyklizace se typicky provádí za přítomnosti kondenzačního činidla, s výhodou diimidu jako je hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl).-3-ethylkarbodiimidu, a vhodného aktivačního činidla, běžného pro diimidové kondenzační reakce, s výhodou N-hydroxysloučeniny jako je hydrát 1-hydroxy« ·

benztriazolu, za přítomnosti báze jako je triethylamin, v polárním organickém rozpouštědle, s výhodou v amidu jako je N,.N-dimethylformamid, při teplotě 0 °C až 40 °C, po dobu 12 až 72 hodiny.

Stupeň 2a zahrnuje N-acylaci hydroxycyklolysinové sloučeniny XIII za vzniku V-acylhydroxycyklolysinové sloučeniny vzorce XIV. Acylační činidlo je typicky chlorid kyseliny nebo anhydrid kyseliny. V případě, že R₇ je terc-butyloxykarbonylová skupina, acylační činidlo je di-terc-butyldikarbonát. Reakce se provádí za přítomnosti báze, s výhodou alkylaminové báze jako je triethylamin, v polárním organickém rozpouštědle, s výhodou v amidu jako je Ν,Ν-dimethylformamid,. při teplotě 0 °C až 40 °C, po dobu 1 až 24 hodiny.

Stupeň 3a zahrnuje O-silylaci N-acylhydroxycyklolysinové sloučeniny vzorce XIV, čímž še získá, siíyletherová sloučenina vzorce XV. Silylační činidlo je typicky silylchlorid nebo silyltrifluormethansulfonát. V případě, že Rg je terc-butyldimethylsilylová skupina, silylační činidlo je terc-butyldimethylsilylchlorid. Reakce se provádí.za přítomnosti báze, s výhodou slabé báze jako je imidazol, v polárním organickém rozpouštědle, s výhodou v amidu jako je Ν,Ν-dimethylformamid, při teplotě 0 °C až 40 °C, po dobu 1 až 24 hodiny.

Stupeň 4a zahrnuje N-alkylaci silyletherové sloučeniny vzorce XV alkylhalogenidem nebo alkylsulfonátem (přičemž alkyl je definován výše jako R₂) , čímž se získá N-alkylkaprolaktamová sloučenina vzorce XVI. Alkylace se provádí za přítomnosti silné báze, s výhodou amidu alkalického kovu jako je natrium bis(trimethylsilyl)amid, v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v cyklickém etheru jako je tetrahydrofuran, při teplotě -100 °C až 25 °C, po dobu 5 minut až 2 hodiny.

Stupeň 5a se týká hydrolýzy skupiny R₆, která je společná N-alkylkaprolaktamovým sloučeninám vzorce XVI, čímž se získá hydroxykaprolaktamová sloučenina vzorce XVII.

φφφφ • Φ φφφφ * φ · φφφ φφφφ • φφφ φ φ φφφ φφφ ο · ΦΦΦΦ φφφφφ ^— -L Ζ ^— φ φφφ φ φ φφ φφφ φφφ φφ φφφ φφ φφφ

Hydrolýza se typicky provádí za přítomnosti fluoridu, s výhodou fluoridové soli jako je tetrabutylamoniumfluorid, v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v cyklickém etheru jako je tetrahydrofuran, při teplotě 0 °C až 25 °C, po dobu 5 minut až 2 hodiny.

Stupeň 6a se týká acylace hydroxykaprolaktamové sloučeniny vzorce XVII za vzniku esterové sloučeniny vzorce XVIII, a to reakcí s chloridem kyseliny vzorce R₃(X)_mCOCl, kde R₃, X a. m jsou definovány výše, za přítomnosti báze, s výhodou alkylaminové báze jako je triethylamin, v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při teplotě -78 °Č až 25 °C, po dobu 1 až 24 hodiny.

Alternativně se acylace. hydroxykaprolaktamové sloučeniny vzorce XVII ve stupni 6a může provádět reakcí s karboxylovou kyselinou vzorce R₃(X)_mCO2H, kde R₃, X á m jsou definovány výše, za přítomnosti činidla pro kondenzaci karboxylových kyselin, s výhodou diimidu jako je hydrochlorid l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu, a vhodného aktivačního činidla,’ běžného pro diimidové kondenzační reakce, s výhodou substituovaného pyridinu jako je 4-dimethylaminopyridin, v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při teplotě -78 °C až 25 °C po dobu 1 až 24 hodiny.

Stupeň 7a se týká hydrolýzy skupiny R₇ v esterové sloučenině vzorce XVIII, čímž se získá aminokaprolaktamová sloučenina vzorce VI. Hydrolýza se typicky provádí za přítomnosti protické kyseliny, s výhodou organické kyseliny jako je kyselina trifluoroctová, ha.logenovodík nebo silylhalogenid, s výhodou silyljodid jako je. trimethylsilyljodid, a v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při teplotě -100 °C až 25 °C po dobu 1 minuta až 2 hodiny.

• 0··· ·· 0000 «0φ

0· · 0 0 · 9 9··

Β 0·· 0 0 000 0 00

0 0 0 0 000 0 0 • 000 0000 000 000 0· ·0· 00 000

Aminokaprolaktamové sloučeniny vzorce Via se mohou připravit podle níže uvedeného schématu:

kde R7, X, m a R₃ jsou definovány výše.

Co se týče jednotlivých stupňů, stupeň lb se týká acylace hydroxykaprolaktamové sloučeniny vzorce XIV za vzniku esterové sloučeniny vzorce XVIIIa, a to reakcí s chloridem kyseliny vzorce R₃(X)_mCOCl, kde R₃, X a m jsou definovány výše, za přítomnosti báze, s výhodou alkylaminové báze jako je triethylamin, v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při teplotě -78 °C až 25 °C, po dobu 1 až 24 hodiny.

Alternativně se acylace hydroxykaprolaktamové sloučeniny vzorce XIV ve stupni lb může provést reakcí s karboxylovou kyselinou vzorce R₃(X)_mCC>2H, kde R₃, X a m jsou definovány výše, za přítomnosti činidla pro kondenzaci karboxylových kyselin, s výhodou diimidu jako je hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu, a vhodného aktivačního činidla, běžného pro diimidové kondenzační.reakce, s výhodou substituovaného pyridinu jako je 4-dimethylaminopyridin, v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při -78 °C až 25 °C, po dobu 1 až 24 hodiny.

Stupeň 2b se týká hydrolýzy skupiny R₇ v esterové sloučenině vzorce XVIIIa, čímž se získá aminokaprolaktamová sloučenina vzorce Via. Hydrolýza se typicky provádí za. přítomnosti protické kyseliny, s výhodou organické kyseliny jako je kyselina trifluoroctová, halogenovodík nebo silylhalogenid, s výhodou silyljodid jako je trimethylsilyljodid,.a v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při teplotě -100 °C až 25 °C, po dobu 1 minuta až 12 hodin.

Aminokaprolaktamové sloučeniny vzorce IXa se mohou připravit následovně:

kde R7 a Rg jsou definovány výše. Reakce se týká hydrolýzy skupiny R₇ v esterové sloučenině vzorce XV, čímž se získá aminokaprolaktamová sloučenina vzorce IXa. Hydrolýza .se typicky provádí za přítomnosti protické kyseliny, s výhodou organické kyseliny jako je kyselina trifluoroctová, halogenovodík nebo silylhalogenid, s výhodou silyljodid jako je trimethylsilyljodid, a v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v'chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při teplotě -100 °C až 25 °C po dobu 1 minuta až 2 hodiny.

Laktonové sloučeniny vzorce následujícího schématu:

VII se mohou připravit

XXIII

Stupeň

3c hydrolýza

XXII kde Rí je definováno výše.

• · • · · ·

• · · « · · • · · · ♦ ♦ · « · ♦ · · ♦ · • · · · · ·· ··· «· ·

Co se týče jednotlivých stupňů, stupeň 1c zahrnuje diketalizaci polyhydroxylaktonu vzorce XIX reakcí s acetonem, čímž se získá bis (acetonid) XX. Diketalizace se provádí v acetonu jako rozpouštědle, za použití katalyzátoru jako je jod, při teplotě mezi 0 °C a teplotou varu, po dobu 2 až 48 hodin.

Stupeň 2c zahrnuje methylaci bis(acetonidu) XX působením methylačního činidla jako je methyljodid, čímž se získá methylether XXI. Methylace se provádí za přítomnosti vody a báze, s výhodou oxidu kovu jako je kysličník stříbrný, a v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v chlorovaném alkanu jako je dichlormethan, při teplotě mezi 0 °C a teplotou varu, po dobu 12 hodin až 7 dnů.

Stupeň 3c zahrnuje hydrolýzu methyletheru XXI, vedoucí k dihydroxysloučenině vzorce XXII. Hydrolýza se provádí za přítomnosti vody a protické kyseliny, s výhodou karboxylové kyseliny jako je kyselina octová, při teplotě 5 °C až 35 °C po dobu 1 až 24 hodiny.

Stupeň 4c zahrnuje oxidativní štěpení dihydroxysloučeniny XXII, kterým se získá aldehyd XXIII. Reakce se provádí za přítomnosti oxidačního činidla, s výhodou jodistanové soli jako je jodistan sodný, v protickém rozpouštědle, s výhodou v alkanolu jako je methanol, při teplotě .0 °C až 25 °C, po dobu 10 minut až 4 hodiny.

Stupeň 5c zahrnuje olefinaci aldehydu XXIII, vedoucí k laktonové sloučenině vzorce VII. Olefinace se provádí za přítomnosti organokovové sloučeniny, s výhodou organochromové sloučeniny jako je nestálý meziprodukt, vzniklý z chloridu chromnatého a dijodalkanu (definovaný jako RiCHI₂,' kde Ri je definováno výše), v přítomnosti směsi rozpouštědel, sestávající z 1) polárního organického rozpouštědla, s výhodou amidového rozpouštědla jako je Ν,Ν-dimethylformamid, a 2) inertního organického rozpouštědla, s výhodou cyklického etheru jako je tetrahydrofuran, při teplotě -80 °C až 25 °C, po dobu 5 minut až 4 hodiny.

• » • ··· • · reakce může, pokud je je chromatografie nebo tuhá látka), je surový • · · '· • ··· ·· · · • · • ··· • ·

- 16 I když se produkt kterékoliv výšepopsané to třeba, čistit obvyklými metodami jako rekrystalizace (v případě, že produkt je produkt jedné reakce s výhodou použit bez čištění v další reakci.

Jak je odborníku zřejmé, substituované kaprolaktamové sloučeniny vzorce I obsahují asymetrické atomy uhlíku. Rozumí se tedy, že individuální stereoizomery jsou zahrnuty v rozsahu předloženého vynálezu.

Jak je naznačeno výše, některé sloučeniny vzorce I tvoří farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami. Tak například volná báze sloučeniny vzorce I může reakcí s kyselinou chlorovodíkovou tvořit odpovídající hydrochloridovou sůl, zatímco reakce volné báze sloučeniny vzorce I s kyselinou methans.ulfonovou poskytne odpovídající mesylátovou sůl. Všechny farmaceuticky přijatelné adiční soli sloučenin vzorce I jsou zahrnuty v rozsahu vynálezu.

Další aspekt předloženého vynálezu se týká způsobu přípravy kaprolaktamové sloučeniny vzorce I, která v prvním stupni zahrnuje acylaci aminokaprolaktamové sloučeniny vzorce VI

(VI) reakcí s laktonem vzorce VII

(VII) za přítomnosti polárního organického rozpouštědla, čímž se získá diamidová sloučenina vzorce VIII • · • » · · · · » · φ φ · · · · 9 Φ

Rs

OH OH O kde Ri, R₂, X, m a R₃ jsou definovány výše, a v druhém stupni se diamidová sloučenina, získaná v prvním stupni, hydrolýzuje tak, že se rozpustí ve směsi rozpouštědel, čímž se získá žádaná kaprolaktamová sloučenina vzorce I. Acylace v prvním stupni se s výhodou provádí v isopropanolu při teplotě o něco nižší než je teplota varu isopropanolu, zatímco hydrolýza v druhém stupni se provádí ve směsi, složené z protické organické kyseliny, protického rozpouštědla a inertního organického rozpouštědla, s výhodou ve směsi kyseliny trifluoroctové, vody a tetrahydrofuranu.

Jak bylo uvedeno výše, všechny sloučeniny vzorce I a jejich odpovídající farmaceuticky vhodné kyselé soli jsou protinádorové látky, které účinně inhibují růst různých lymfomů, sarkomů, karcinomů, myelomů a leukemických buněčných linií. Protinádorovou účinnost sloučenin vzorce I lze prokázat pomoci růstového testu ADGMA („Anchorage Dependent Growth Monolayer Assay), ve kterém se měří schopnost testovaných látek inhibovat proliferaci adherujicich buněk, rostoucích v jednoduché vrstvě. Tento postup byl převzat z testu National Cancer Institute (NCI), který využívá 60 buněčných linií s následující modifikací: 1) jako představitel důležitého tumoru, byla zvolena jedna buněčná linie prsního karcinomu, t.j. MDA-MB-435, a 2) pro stanovení buněčné hustoty byl použit tetrazoliový derivát MTS.

Pomocí testu ADGMA lze zjistit počet živých buněk po třídenním působení testovaných sloučenin, vzhledem k množství buněk

• 9 9 9 9 9 ·· ·

9 9 · 9 · · • · ··· · · · * · 9 999 9 9 . 9 9 9 9 9 ·

999 «9 ··» v okamžiku přidání látky. Buněčná viabilita se měří pomocí tetrazoliového derivátu, t.j. vnitřní soli 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl) -5-(3-karboxymethoxyfenyl)-2-(4-sulfofenyl)-277-tetrazolia (MTS) , který se působením viabilní buňky a v přítomnosti elektronakceptujícího agens (PMS, fenazin methosulfát) metabolický redukuje na ve vodě rozpustný formazanový derivát. Absorbance při 490 nm (A₄₉₀ ) formazanového derivátu je přímo úměrná počtu životaschopných buněk. Hodnota IC₅Q potom představuje koncentraci testované látky, při které je celkový počet buněk snížen na 50 % konečného počtu buněk vzhledem k celkovému, počtu kontrolních buněk. Dojde-lí k inhibici buněčné proliferace, pak test definuje látky jako cytostatické (počet buněk po třídenním působení látky > počet buněk v okamžiku přídavku látky) nebo cytotoxické (počet buněk po třídenním působení látky. < počet buněk v okamžiku přídavku látky).

Buněčná linie prsního karcinomu MDA-MB-435 byla získána z Američan Type Culture Collection (ATCC) a byla po rozmražení použita v rozmezí 4. až 20. pasáže. Prsní karcinom MDA-MB-435 byl kultivován v mediu DME/F12 s přídavkem 10% hovězího fetálního séra, dále obsahujícím 15 mM HEPES (pH 7,4), 100 U/ml penicilinu a 100 mg/ml streptomycínu.

Kultivované buňky se uvolní působením trypsinu, suspendují se a buněčná hustota se stanoví na počítači Coulter. Buňky se dále inokulují (3000/jamka) do kultivačního media (100 μΐ/jamka) na 96-jamkové misky. Inokulované množství představuje, jak bylo zjištěno v předběžných experimentech, 75 - 90 % konfluence odpovídající čtyřdenní kultivaci. Počáteční buněčná hustota, stanovená po jednodenní kultivaci, je zhruba o 0,15 - 0,20 absorbančních jednotek větší než absorbance media. 96-Jamkové misky se vysejí v den 0 atestované sloučeniny se přidávají v den 1. Kontrolní misky, které obsahují pouze medium, jsou řada A, a misky inokulované jsou řada B. Jeden den po inokulaci se do misek přidají testované látky ve výsledném objemu 100 μΐ. Do kontrolních misek se přidá 10 μΐ směsi MTS [připraví se čerstvá v den přidání do misek v poměru 10 μΐ roztoku PMS (0,92 mg/ml) ku 190 μΐ roztoku MTS (2 mg/ml)] a 100 μΐ media. Počáteční buněčná hustota každé linie se stanoví měřením absorbance A₄₉₀za 4 hod po přídavku MTS. Za tři dny po přidání testovaných sloučenin se do každé jamky pipetuje 10 μΐ směsi MTS a A₄₉₀ se změří opět po 4 hod. Hodnoty A₄₉o, naměřené pro misky s buňkami, se korigují na absorbanci media a na počáteční hustotu buněk, aby se získaly hodnoty čistého nárůstu. Hodnoty IC₅₀ se stanoví z grafického vynesení procent čistého nárůstu jako funkce koncentrace sloučeniny. Procenta čistého nárůstu se kalkuluji jako (buňka + látka A₄₉o ~ počáteční A₄go/buňka + látkové vehikulum A₄₉q - počáteční A₄₉q) .

Nalezené hodnoty IC₅₀ (průměr ± směrodatná odchylka) v μΜ jsou uvedeny v tabulce 1

Tabulka 1

Sloučenina	MDA-MB-435
Příklad 1	0.068±0.04
Příklad 2	0.115± 0.04
Příklad 3	0.032± 0.014
Příklad 4	0.01±0.01
Příklad 5	0.465± 0.204
Příklad 6	0.065± 0.001
Příklad 7	0.262± 0.07
Příklad 8	0.175± 0.007
Příklad 9	0 335± 0.141

• * • · φφφφ

Příklad Í0	0.008± 0.004
Příklad 11	0.019 ±0.005
Příklad 12	0.034 ± 0.046
Příklad 13	0.30 ±0.00
Příklad 14	1.24 ±0.20
Doxorubicin (známá antineoplastická sloučenina)	0.137±0.105

Protinádorovou účinnost látek vzorce I lze dále stanovit využitím modelu athymických (deficientních na T buňky) „nahých myší, který je standardem pro nalezení a vývoj léčiv v preklinické onkologii. Tento model umožňuje stanovit schopnost testovaných sloučenin inhibovat růst lidských nádorových štěpů (mezidruhových 'transplantátů), které subkutánně rostou v nahé athymické myši. Použije se při něm histologicky získaný nádor prsního karcinomu MDA-MB-435.

Buňky (3 miliony) se s.c. implantují do pravé slabiny athymické myši (nu/nu) a nádor se nechá růst až do objemu 30 mm³. Testované sloučeniny se aplikují (v prostředí 5% dextrosy a vodného 10% DMSO) intravenózně třikrát týdně, po dobu tří týdnů. Sloučeniny se aplikují v dávkovém režimu, aby bylo možno vyhodnotit rozsah aktivity (účinnosti a toxicity) pro danou sloučeninu. Jako pozitivní kontrola slouží doxorubicin, aplikovaný i.v. třikrát týdně.

Toxicita se hodnotí sledováním průměrné skupinové tělesné váhy dvakrát týdně, a jednou denně celkovou prohlídkou. Účinnost terapie se jednou týdně monitoruje měřením délky, šířky a hloubky nádoru za použití digitálního hmatadla, připojeného k automatickému sběrači dat. Skutečný růst nádoru (ÁMTV) během terapie se zjistí po odečtení průměrného objemu nádoru (MTV) na počátku terapie od konečné hodnoty MTV. Protinádorová aktivita se vyjádří jako % T/C (ÁMTV léčené.skupiny: AMTV kontrolní β ···· ·· ···· ·· · «··. · · · · · · · • ··9 · ♦ ··· · · φ.

• · · · · ♦ · · · · ······ ·· ··· ·· ··· skupiny χ 100). Statistická významnost byla hodnocena jednoduchým t-testem dle Studenta (p<0,05).

Výsledky pro sloučeniny v příkladech 1 až 10, které byly testovány proti MDA-MB-435 nádorovým štěpům 3x/týden po dobu 3 týdnů, jsou uvedeny v tabulce 2.

Tabulka 2

Sloučenina	Dávka (gmol/kg)	ÁMTV (mm³)	%T/C	Mrtvé/celkem
Příklad 1	10	107	61*	0/8
Příklad 1	33	43	24*	0/8
Příklad 1	100	-11	-6*	0/8
Příklad 2	1°	94	67	0/8
Příklad 2	33	19	13*	0/8
Příklad 3	10	69	39*	0/8
Příklad 3	33	49	28*	0/8
Příklad 4	¹⁰	93	53*	0/8
Příklad 4	33	21	12*	0/8
Příklad 4	100	-23	-13*	0/8
Příklad 5	10	130	92	0/8
Příklad 5	33	62	44*	0/8
Příklad 6	10	66	47*	. 0/8
Příklad 6	33	48	34*	0/8
Příklad 7	10 .	101	72	0/8
Příklad 7	33	61	43*	0/8
Příklad 8	10	⁸⁷	62	0/8
Příklad 8	33	94	67	0/8
Příklad 9	¹⁰	107	76	0/8
Příklad 9	33	68	48*	0/8
Příklad 10	10	115	64*	0/8

Příklad 10	33	4	2*	0/8
Příklad 11	10	135	76	0/8
Příklad 11	³³	76	43*	0/8 í
Příklad 12	10	78	52	0/8
Příklad 12	33	11	7*	0/8
doxorubicin	2 mg/kg	74	42*	0/8

Hodnoty % T/C jsou statisticky signifikantní (p < 0,05; Studentův test).

Přesné dávkování sloučenin vzorce I při použití pro inhibici nádorů závisí na několika faktorech, zahrnujících charakter pacienta, charakter a závažnost léčeného stavu, způsob podání a podanou sloučeninu. Obecně se docílí vyhovující inhibice nádorů, když se sloučenina vzorce I aplikuje parenterálně, například intraperitoneálně, intravenosně, intramuskulárně, subkutánně, intratumorálně nebo rektálně, nebo enterálně, například orálně, s výhodou intravenosně nebo orálně, obzvláště intravenosně při denní dávce 1 - 300 mg/kg tělesné hmotnosti, nebo pro většinu větších primátů při denní dávce 50 - 5000 mg, s výhodou 500 - 3000 mg. Preferovaná intravenosní denní dávka je 1 - 75 mg/kg tělesné hmotnosti nebo, pro většinu větších primátů, 50 - 1500 mg. Typické intravenosní dávkování je 20 mg/kg třikrát až pětkrát týdně.

Obvykle se podá zpočátku menší dávka a dávkování se postupně zvyšuje, až se určí optimální dávka pro pacienta. Horní hranice dávkování je určena vedlejšími účinky a může být stanovena pro pacienta pokusně.

Sloučeniny vzorce I se mohou kombinovat s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči a popřípadě s jedním nebo více dalšími obvyklými farmaceutickými adjuvanty a mohou se aplikovat enterálně, například orálně, ve formě tablet, tobolek, atd., nebo parenterálně, například intraperitoneálně nebo intravenosně, ve formě sterilních injektabilních roztoků nebo suspenzi. Enterální i parenterální kompozice se mohou připravit obvyklými způsoby.

Infuzní roztoky podle předloženého vynálezu jsou s výhodou sterilní. Sterilizaci je možno snadno provést například filtraci přes sterilní filtrační membrány. Aseptická příprava jakékoliv kompozice v kapalné formě, aseptické plnění lékovek a/nebo kombinace farmaceutické kompozice podle předloženého vynálezu s vhodným ředidlem za aseptických podmínek jsou odborníkovi dobře známy.

Sloučeniny vzorce I mohou být formulovány do enterálních a parenterálnich farmaceutických prostředků, obsahujících nádor inhibujici množství aktivní sloučeniny, a to ve formě jednotlivých dávek, přičemž takové prostředky obsahují farmaceuticky přijatelný nosič.

Následující příklady provedení popisuji reprezentativní sloučeniny, které zahrnuje předložený vynález, a jejich syntézu. Je jasné, že uvedené příklady jsou zamýšleny pouze pro ilustraci a rozsah vynálezu nijak neomezuji.

Příklady provedeni vynálezu

Příklad 1 z

(2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylkarbonyl)oxy-2#-azepin -3-yl]non-6-enamid

a) Příprava γ-laktonu kyseliny 3,5:6, 7-bis-O-(1-methylethyliden)-a-D-glukoheptonové

Gama-lakton kyseliny a-D-glukoheptonové , (500 g, 2,4 mol) se přidá do 9 litrů acetonu v 5tigalonovém plastovém válci. Směs se mechanicky míchá tak dlouho, až se většina pevné látky rozpustí (15 - 20 minut). Do roztoku laktonu se přidá po

4 • 4 · · · • 4 « • 4 44 částech jod (60 g, 0,236 mol) během 5 - 10 minut. Výsledná směs se míchá přes noc. Směs se rozloží přídavkem nasyceného roztoku Na₂S2O3 (1,3 litru). Získaný roztok se zahustí ve vakuu na přibližně polovinu původního objemu a přidá se roztok chloridu sodného (5 litrů). Výsledná směs se extrahuje ethylacetátem (3 x 1,2 litru). Organické vrstvy se spoji a odpaří se k suchu. Pevná látka se rozmíchá se směsí etheru a hexanu (3:7) a zfiltruje se. Filtrační koláč se promyje diethyletherem (50 ml) a vysuší se na vzduchu. Získá se 599 g (86,5 %) žádané sloučeniny ve formě bílého prášku.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 4,62 (m, 1H) , 4,50 (m, 1H) , 4,35 (m, 2H) , 4,07 (m, 1H), 3,93 (m, 1H), 3,82 (dd, 1H), 3,08 (d, 1H) , 1,51 (s, 3H) , 1,44 (s, 3H) , 1,39 (s, 3H) , 1,35 (s, 3H) ; ¹³C NMR (CDCI3) δ 174,4,. 109, 4, 98,6, 72,8, 71,4, 69, 3, 68,4, 67,8, 66, 7, 28,6, 26, 7, 24,6, 19,3.

b) Příprava γ-laktonu kyseliny 2-O-methyl~3,5:6,7-bis- — 0—(1-methylethyliden)-a-D-glukoheptonové

Gama-lakton kyseliny 3,5:6,7-bis-O-(1-methylethyliden)-a-D-glukoheptonové (719 g, 2,49 mol) se přidá ke 4,5 litrům CH2CI2 v 5tigalonovém plastovém válci a směs se míchá pod dusíkem. Přidá se methyljodid (2500 g, 17,6 mol) a ihned po něm kysličník stříbrný (1750 g, 7,58 mol). K reakčni směsi se přidá voda (30 ml) a teplota se udržuje při 15 - 30 °C ledovou lázní. Reakčni směs se míchá ve tmě po dobu 18 hodin, pak se zředí 1,5 litrem CH2CI2, pevná látka se odfiltruje, promyje se dalšími

2,2 litry CH2CI2, a vyhodí se. Fitrát se odpaří k suchu, odparek se suspenduje v etheru (1,5 litru), filtruje se a vysuší. Výtěžek 618 g (82 %) produktu.

¹H NMR (CDCI3) : δ 4,75 (m, 1H) , 4,33 (m, 1H) , 4,29 (m, 1H) 4,15 (m, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,96 (dd, 1H), 3,83 (dd, 1H), 3,65 (s, 3H), 1,57 (s, 3H) , 1,42 (s, 6H) , 1,35 (S, 3H) ; ¹³C NMR (CDC1₃) : δ 172,5, 109,6, 98,5, 79,0, 73,1, 69,5, 68,6, 67,5, 66,9, 59,1, 28,9, 26, 9, 24,9, 19,4.

• φ φφφφ

c) Příprava γ-laktonu kyseliny 2-O-methyl-3,5-0-(T-methylethyliden)-a-D-glukoheptonové

Gama-lakton kyseliny 2-O-methyl-3,5:6,7-bis-O-(1-methylethyliden)-a-D-glukoheptonové (618 g, 2,05 mol) se rozpustí v 8 litrech směsi kyseliny octové a vody (1:1) během 30 minut a roztok se míchá při teplotě místnosti přes noc. Pak se roztok odpaří ve vakuu k suchu. Tuhý zbytek se suspenduje ve .3-5 litrech horkého acetonu a zfiltruje se. Po vysušení v sušárně při 20 - 30 °C se získá 363 g (67,6 %) žádané sloučeniny.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 4,92 (d, 1H) , 4,80 (m, 1H) , 4,47 (d, 1H) , 4,42 (t, 1H), 4,39 (m, 1H) , 3,95 (dd, 1H) 3,75 (m, 2H), 3,4 (s, 3H), 2,5 (m, 1H), 1,42 (s, 3H), 1,22 . (s, 3H) .

d) Příprava γ-Iaktonu kyseliny 2,4-0-(1-methylethyliden)-5-0-methyl-L-glukuronové

Gama-lakton kyseliny 2-0-methy.1.-3,5-0-(1-methylethyliden) -a-D-glukoheptonové (200 g, 0,76 mol) se rozpustí ve směsi methanolu a vody (1:1, 3,6 litrů). Směs se míchá za chlazení v ledové lázni při teplotě přibližně 8 °C. Přidá se po částech pevný NalCq (213 g, 0,98 mol). Reakce je podle TLC (silikagel, 5 % methanolu, 15 % ethylacetátu v CH₂C1₂) hotová během minut. K reakční směsi se přidá pevný chlorid sodný, aby se nasytil methanolický roztok. Pevné podíly se odfiltrují a promyjí 2 litry CH₂C1₂. Filtrát se promyje CH₂C1₂ (7.x 500 ml). Spojené organické vrstvy se vysuší nad síranem sodným, zfiltrují se a zahustí na syrup, který po přidání hexanu tvoří sraženinu. Sraženina se odfiltruje a promyje etherem. Část surového produktu (50 g) se rozpustí ve 3 litrech chloroformu a zahřeje se k varu. Pak se na rotační odparce odpaří 2,1 litru chloroformu za atmosférického tlaku (methanol je stržen koevaporací s chloroformem) a zbytek se odpaří k suchu. Po vysušení ve vakuu přes noc se získá 44 g žádaného produktu ve formě pevné látky.

• · ·· φ φφ φφφφ φφ φ φφ φ φφφ φφφφ φφφφ φ φ φφφ φ · φ φ φφφ φ φφφ φ φ φ φφφ φφφφ φφφ φφφ φφ φφφ φφ φφφ ^ΧΗ NMR (CDC13) : δ 9,60 (s, 1Η) , 4,78 (m, 1Η) , 4,42 (s, 2Η) , 4,15 (dd, 1Η), 3,65 (s, 3Η), 1,58 (s, 3Η), 1,55 (s, 3Η); ¹³C NMR (CDC13) : δ 198,8, 171,9, 99,0, 78,4, 74,4, 72,9, 68,4, 67,4, 59,2, -28,7, 19, 0.

e) Příprava laktonu kyseliny (6E)-6,7,8,9-tetradeoxy-8,8-dimethyl-2-O-methyl-3,5-0-(1-methylethyliden)-gulo-non-6-enonové

Do 21itrové baňky s kulatým dnem se předloží CrCl₂ (50 g, mmol), bezvodý THF (750 ml) a DMF (32 ml). Směs se míchá pod dusíkem jednu hodinu a pak se pomalu přidá roztok γ-laktonu kyseliny 2,4-0-(1-methylethyliden)-5-O-methyl-L-glukuronové (12 g, 50 mmol) a 1,l-dijod-2,2-dimethylpropanu (15 ml) v 500 ml bezvodého THF. Po přidání se reakční směs míchá 1,5 hodiny při teplotě místnosti a pak se rozloží přidáním nasyceného vodného roztoku NH4CI. Zbytek se roztřepe mezi ethylacetát a vodu a podrobí se chromatografií v soustavě 5 % ethylacetátu v CH2CI2. Získá se 9 g (63 %) žádaného produktu ve formě bílé krystalické látky.

^XH NMR (CDCI3) : δ 5,82 (d, 1H) , 5,58 (q, 1H) , 4,71 (m, 1H) , 4,46 (m, 1H), 4,10 (dd, 1H), 4,0 (m, 1H), 3,66 (s, 3H),1,58 (s,.3H), 1,53 (s, 3H) , 1,07 (s, 9H) ; ¹³C NMR (CDC1₃) : δ 172,5, 147,0, 120,2, 98,7, 79,1, 71,9, 70,3, 67,6, 59,2, 33,2, 29,3, 19,3.

f) Příprava (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-hydroxy-2H-azepin-2-onu

Do 1 litrové baňky se k 500 ml DMF přidá za míchání (5R)-5-hydroxy-L~lysin (10 g, 0,040 mol), hydrát 1-hydroxybenzotriazolu (8,2 g, 0,060 mol) a hydrochlorid 1—[3—(dimethylamino) propyl]-3-ethylkarbodiimidu (11,6 g, 0,060 mol). Po půl hodině se přidá triethylamin (16,8 ml, 0,120 mol) a reakční směs se míchá 48 hodin při teplotě místnosti. Pak se přidá di-terc-butyldikarbonát (17,6 g, 0,080 mol) a triethylamin (16,8 ml, 0,120 mol) a v mícháni se pokračuje po dobu 16 hodin.

• · 0 0·· 0 0.

000

Reakční směs se zfiltruje, aby se odstranil hydrochlorid triethylaminu, a rozpouštědlo se odpaří na rotační odparce ve vysokém vakuu. Zbylý hustý olej se rozpustí ve 150 ml CH₂C1₂ a aplikuje se na kolonu silikagelu (150 g, 40 x 250 mm). Elucí CH₂C1₂ se 3 % methanolu se získá surový produkt jako tuhá látka. Ta se rozpustí ve 120 ml horkého CH₂C1₂ a chladí se na -20 °C po dobu jedné hodiny. Vypadlá pevná látka se odfiltruje a promyje se 50 ml CH₂C1₂. Spojené filtráty se odpaří k suchu. K tomuto odparku se přidá CH₂C1₂ (40 ml) a vzniklá suspenze se míchá 0,5 hodiny při teplotě místnosti. Suspenze se zfiltruje a pevná látka se promyje 25 ml CH₂C1₂. Pevné látky se spojí, čímž se získá 5,57 g (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-hydroxy-2H-azepin-2-onu.

300 MHz ^XH NMR.(DMSO):’ δ 7,42 (t, 1H, J = 5,1 Hz), 6,38 (d, 1H, J = 6, 6 Hz) , 4,60 (d, 1H, J = 4,2 Hz)., 4,07 (m, 1H) , 3,74 (m, 1H), 3,32 (m, 1H), 3,03 (m, 1H), 1,8 - 1,5 (m, 4H), 1,39 (s, 9H) .

g) Příprava (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(cyklohexankarbonyl)oxy-2H-azepin-2-onu

Triethylamin (8,4 ml, 60 mmol) se přidá při teplotě 5 °C k roztoku cyklohexankarbonylchloridu (6,3 g, 43,0 mmol) a (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-hydroxy-2H-azepin-2-onu (7,0 g, 28,7 mmol) v 100 ml CH₂C1₂. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc, pak se protřepe s vodou a organická vrstva se vysuší nad síranem sodným a zahustí se na rotační odparce. Odparek se chromatografuje v soustavě 5 % ethylacetát-CH₂Cl₂, čímž se získá 10,1 g (99,5 %) (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(cyklohexankarbonyl ) oxy-2H-azepin-2-onu ve formě bílé pevné látky.

*H NMR (CDC1₃) : δ 5,89 (d, J = 5,27 Hz, 1H) , 5,65 (t, J = 4,90 Hz, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,30 (q, J = 4,14 Hz, 1H), 3,49 (m, 2H), 2,31 (tt, J = 10,92 Hz a 3,39 Hz, 1H), 2,13 (d, J = 14,32 Hz, 1H), 1,98 (d, J = 13,56 Hz, 2H), 1,88 (d,.J = 14,31 Hz, 2H), ♦ · ··· ·

1,75 (d, J= 11,30 Hz, 2H), 1,66 (s, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,30 (m, 5H) .

h) · Příprava (3S, 6R).-3-aminohexahydro-6-(cyklohexankarbonyl)oxy-2 íf-azepin-2-onu

K roztoku (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(cyklohexankarbonyl)oxy-2H-azepin-2-onu (10 g, 28,2 mmol) ve 40 ml CH₂C1₂ se při teplotě místnosti přidá,TFA (25 ml).

Reakční roztok se míchá při teplotě místnosti 1 hodinu a pak se zahustí na rotační odparce při teplotě lázně < 20 °C. Odparek se zředí CH2CI2 (100 ml) a promyje se NH₄OH (10 ml) a potom vodou (2 x 20 ml). Po vysušení nad síranem sodným se směs adsorbuje na silikagelu a chromatografuje se v CH₂C1₂, obsahujícím 5 % methanolu. Získá se tak 6,0 g (85,0 %) (3S,6R)-3-aminohexahydro-6-(cyklohexankarbonyl)oxy-2H-azepin-2-onu ve formě bílé tuhé látky.

^XH NMR (CDCI3) : δ 6,91 (s, 1H) , 4,91 (s, 1H) , 4,39 (s, 2H) ,

3,87 (d, J = 9,80 Hz, 1H), 3,48 (z, J = 6,02 Hz, 1H), 3,43 (dd, J = 15,45 Hz a 4,90 Hz, 1H.) , 2,30 (tt, J = 10,92 Hz a 3,39 Hz, 1H), 2,13 (m, 1H), 1,91 (m,. 4H) , 1,73 (m, 2H) , 1,65 (m, 1H) , 1,40 (q, J= 11,68 Hz, 4H), 1,24 (m, 2H) .

i) Příprava (2R, 3R, 4S,5R,6E)-3,5-(methylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[(3S, 6R)-hexahydro-2-oxo-

-6- (cyklohexylkarbonyl) oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamidu

Roztok laktonu kyseliny (6E)-6,7,8,9-tetradeoxy-8,8-dimethyl-2-O-methyl-3, 5-0-(1-methylethyliden)-gulo-non-6-enonové (1,0 g, 3,5 mmol) a (3S,6R)-3-aminohexahydro-6-cyklohexankarboxy-2H-azepin-2-onu (2,5 g, 9,8 mmol) ve 4 ml isopropanolu se míchá 24 hodin za refluxu. Reakční směs se adsorbuje na silikagelu a podrobí se chromatografií (eluent 2% methanolCH₂C1₂) . Získá se tak 1,85 g (97 %) žádaného produktu ve formě bílé tuhé látky.

^ΤΗ NMR (CDCI3) : δ 7,58 (d, J = 6,341 Hz, 1H) , 5,80 (t,

J = 7,68 Hz, 1H), 5,78 (d, J= 15,83 Hz, 1H), 5,53 (dd, ····

J = 15/83 Hz a 6,78 Hz, 1H), 4,92 (sd, J = 3,39 Hz, 1H) , 4,60

(dd, J = 0,42	Hz	a 7,4 Hz, 1H), 4,28	(d, J = 6,79 Hz,	1H) ,	4,07
(dd, J = 7,54	Hz	a 1,13 Hz, 1H), 3,90	(d, J = 7,15 Hz,	1H)	r
3,52 (dd, J =	12	,05 Hz a 7,91 Hz, 2H)	, 3,48 (s, 3H), 2	,82	(d,
J = 9,04 Hz,	1H)	, 2,32 (m, 1H) , 2,12	(m, 1H), 2,00 (m,	2H)	f
1,89 (d, J =	13,	06 Hz, 2H), 1,75 (m,	4H), 1,66 (m,.1H)	, 1,	46
(d, J = 4,90	Hz·,	6H), 1,38 (m, 2H), 1	,26 (m, 3H), 1,03	(s,	9H) .

j) Příprava titulní sloučeniny (2R, 3R,4S_r 5R, 6E) -3,5-(Methylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[(3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid (3,8 g, 7,1 mmol) se při teplotě 0 °C přidá v jedné dávce k míchané směsi TFA (10 ml), THF (10 ml) a vody (5 ml). Reakčni směs se míchá při této teplotě 30 minut a zahustí se na rotační odparce při teplotě lázně < 20 °C. K odparku se přidá nasycený roztok NH4HCO3 (5 ml) a směs se míchá 15 minut. Pak se zahustí ve vaku a odparek se chromatografuje (eluent 2% methanol-CH₂Cl₂) - Získá se tak produkt jako bílá tuhá látka, jejíž rozpustnost ve vodě je 3,7 mg/ml. Tento materiál se dále čistí za použití preparativní HPLC (reverzní fáze, eluent 90 %' CH₃CN - voda). Získá se tak 2,9 g (82,4 %) titulní sloučeniny ve formě bílé tuhé látky, t.t. 79 - 80 °C.

^XH NMR (CDCI3) : δ 8,00 (d, J = 6,30 Hz, 1H) , 5,98 (t,

J =	5,52 Hz,	1H) ,	5,83	(d,	J = 15,77 Hz,	1H) , 5	,42 (dd,
J =	15,76 Hz	a 7,	25 Hz,	1H)	, 4,93. (m, 1H)	,' 5,56	(m, 1H), 4,22
(m,	2H), 3,82	(m,	2H) ,	3,81	(t, J = 5,99	Hz, 1H	) , 3,55 (s, 3H) ,
3,49	(dd, J =	15,	77 Hz	a 5,	36 Hz, 1H), 3,	30 (d,	J = 7,25 Hz,
1H) ,	3,10 (s,	1H)	, 2,31	(m,	1H), 2,16 (d,	J = 1	1,19 Hz, 1H) ,
2,00	(m, 2H),	1,8	θ (m,	3H) ,	1,76 (s, 2H),	1, 65	(d, J = 0,87 Hz,
1H) ,	1,42 (m,	2H)	, 1,25	(m,	4H), 1,02 (s,	9H) ;	¹³C NMR (CDCI3) :

δ 175,19, 174, 11, 172,12, 145,74, 123,20., 81,10, 74,50, 72,75,

72,45, 66,74, 59,93, 51,66, 43;31, 43,22, 33,03, 31,96, 29,43, 29,07, 29,00, 25,70, 25,65, 25,39, 25,36.

·· ····

Přiklad 2 (2R,3R, 4S, 5R, 6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimeťhyl-N-[ (3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(cyklopentylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se provede v podstatě způsobem, popsaným v příkladu lg, s tím rozdílem, že místo cyklohexankarbonylchloridu se použije přibližně ekvivalentní množství cyklopentankarbonylchloridu. Získá se tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(cyklopentankarbonyl)oxy-2H-azepin-2-on. Ten se místo produktu z příkladu lg podrobí postupům popsaným v příkladech lh, li a v posledním stupni příkladu 1, čímž se získá titulní sloučenina. Rozpustnost ve vodě je 18 mg/ml, t.t. 75 - 76 °C. ^XH NMR (DMSO) : δ 7,81 (d, J = 6,47 Hz, 1H), 7,7 6 (t,

J =	6,07	Hz,	1H) , 5	,64	(d, J = 15	,77	Hz, 1H) , .5	,34 (dd,
J =	15,76	Hz	a 2,84	Hz,	1H), 4,80	(s,	1H), 4,57	(d, J =	4,	73
Hz,	1H) ,	4,48	(d, J	= 6	,94 Hz, 1H	) , 4	,45 (m, 1H	), 4,36	(d,
J =	5, 83	Hz,	1H) , 3	, 98	(m, 1H), 3	,7r	(d, J = 6,	94 Hz, L	H) ,	3
(td,	' J =	6,78	Hz a	2,68	Hz, 1H),	3,52	(dd, J =	15,61 Hz	a
4,57	Hz,	1H) ,	3,34	(td,	J = 6,15	Hz a	2,84 Hz,	1H) , 3,3.	2 (	s,
3H) ,	3,23	(m,	1H) ,	2,72	(m, 1H) ,	2,50	(m, 1H),	1,93 (m,	2H	) ,
1,80	(m,	2H) ,	1,73	(m,	3H) , 1,61	(m,	2H) , 1,53	(m, 2H),	o,	98

(s, 9H) ; ¹³C NMR (DMSO): δ 174,75, 173,56, 169,73, 141,69,

125,32, .81,60, 72,82, 72,54, 70,80, 67,20, 57,31, 50,95, 43,21,

32,44, 31,31, 29,45, 29,38, 25,30, 25,23.

Příklad 3 (2R,3R, 4S, 5R,6£j-3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(cykloheptylkarbony1)oxy-2ff-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se provede v podstatě způsobem, popsaným v příkladu 1'g, s tím rozdílem, že místo cyklohexankarbonylchloridu se použije přibližně ekvivalentní množství směsi, obsahující kyselinu «94· ·· 4444 ·· 4 • 4 · 4 4 4 4 · 44

444 4 · ···»44

4444 444 *4

4 44 44*4 >44 444 ·· 444 ♦·444 cykloheptankarboxylovou, hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl) -3-ethylkarbodiimidu a 4-dimethylaminopyridin. Získá se tak (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)amínohexahydro-6-(cykloheptankarbonyl)oxy-2#-azepin-2-on. Ten se místo produktu z příkladu lg podrobí postupům, popsaným v příkladech lh, li a v posledním stupni příkladu 1, čímž se získá titulní sloučenina, t.t. 84 - 86.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 8,00 (d, J = 6,30 Hz, 1H-) , 5,93 (t,

J = 5,52 Hz, 1H), 5,83 (d, J = 15,77 Hz,	1H) ,	5,42	(dd,
J = 15,7 Hz a 7,26 Hz, 1H), 4,93 (m,.	1H) ,	4,55	(dd,	J =	9,46
a 6,31 Hz, 1H), 4,23 (m, 2H), 3,82 (m	., 2H	), 3,	61 (t	r
J = 6,14 Hz, 1H), 3,57 (m, 1H) , 3,55	(s,	3H) ,	3,49	(dd,
J = 15,60 Hz a 5,20 Hz, 1H), 3,29 (d,	J =	7,25	Hz,	1H) ,	3, 10
(s, 1H), 2,50 (m, 1H), 2,17 (m, 1H),	1,95	(m,	4H) ,	1,70	(m/
1H), 1,65 (m, 2H), 1,55 (m, 4H) , 1,47	(m,	4H) ,	1,02	(s,	9H) ;

¹³C NMR (CDCI3) : δ 176, 17, 174,07, 172,14, 145,75, 123,20,

81,08, 74,51, 72,76, 72,44, 66, 79, 59., 95, 51, 67, 45,07, 43,36,

33,03, 31,95, 30,91, 30,84, 29,43, 28,24, 28,21, 26,26, 25,73.

Příklad 4 (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[(3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3-fenylpropoxy) -2JT-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se provede v podstatě způsobem, popsaným v-příkladu lg, s tím rozdílem, že místo cyklohexankarbonylchloridu se použije přibližně ekvivalentní množství 3-fenylpropionylchloridu. Získá se tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(l-oxo-3-fenylpropoxy)-2fí-azepin-2-on. Ten se místo produktu z příkladu lg podrobí postupům, popsaným v příkladech lh, li a v posledním stupni příkladu 1, čímž se získá titulní sloučenina. Rozpustnost ve vodě je 0,8 mg/ml, t.t. ·75 - 77 °C.

^XH NMR (CDCI3) : δ 7,96 (d, J = 6,15 Hz, 1H) , 7,31 (t, J = 7,25 Hz, 2H), 7,23 (t, J = 7,57 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 7,41 Hz, 2H) , . «·.« ·» .·♦· ·« · ·· * « ♦ · · « ·· • ··« « · «·· » ♦ · • ···< ···» » • · · · ···· *····· ·· *·· ·· ··'

5,82	(d,	J =	15,76	Hz	, 1H),	5, 62	(s, 1H), 5,41 (dd, J - 15,76
Hz a	7,09	Hz,	1H) ,	4,	92 (s,	1H) ,	4,49 (dd, J = 9,46 Hz a
6, 31	Hz,	1H) ,	4,22	(m	, 2H) ,	3,80	(m, 2H), 3,60 (s, 1H), 3,52
(s,	3H) ,	3,37	(m,	3H)	, 3,17	(s, 1H), 2,95 (t, J = 7,57 Hz, 2H)
2,67	(t,	J =	7,72	Hz,	2H) ,	2,06	(d, J = 11,98 Hz, 1H), 1,96 (t
J =	12,77	Hz,	1H) ,	1,	88 (s,	1H) ,	1,70 (m, 1H), 1,02 (s, 9H) ;

¹³C NMR (CDC1₃) : δ 173,96, 172,05, 172,00, 145,68, 140,08,

128,61, 128,42, 126,52, 123,21,' 81, 18, 74,46, 72,69, 72,50,

67,14, 59,83, 51,49, 43,22, 35,78, 33,02, 31,79, 31,07, 29,43, 25,58.

Přiklad 5 (2R,3R,4S,5R, 6E)-3, 4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3-[3-pyridyl]propoxy) -2E-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se provede v podstatě způsobem, popsaným v příkladu lg,. s tím rozdílem, že místo cyklohexankarbonylchloridu se použije přibližně ekvivalentní množství směsi kyseliny 3-(pyridyl)propionové, hydrochloridu 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu a 4-dimethylaminopyridinu. Získá se tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(1-oxo-3-[3-pyridyl]propoxy) -2H-azepin-2-on. Ten se místo produktu z příkladu lg podrobí postupům, popsaným v příkladech lh, li a v posledním stupni příkladu 1, čímž se získá titulní sloučenina. ^XH NMR (CDCI3) : δ 8,46 (s, 2H) , 7,97 (d, J = 6,2 Hz, 1H) , 7,53 (m, 1H), 7,23 (m, 1H), 5,88 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 5,81 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 5,4 (dd, J = 15,6 Hz a 7,3 Hz, 1H), 4,93 (m, 1H), 4,27 (s, 1H), 4,23 - 4,19 (m, 1H), 3,8 (m, 2H), 3,59 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 3,52 (s, 3H), 3,48 (m, 2H), 3,28 (s, 1H), 3,19 (s, 1H), 2,95 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,67 (t, J = 7,3 Hz, 2H),

2,1 - 1,67 (m, 6H), 1,0 (s, 9H) ; ¹³C NMR (CDC1₃) : δ 174,0, 172,0, 171,5, 149,7, 148,0, 145,7, 136,0, 135,5, 123,6, 123,2,

81,2, 74,5, 72,7, 72,5, 67,6, 59,8, 51,6, 43,3, 35,2, 33,0, ·4·· ·· ··«· ·· · ··· · · ♦ · · ·· • ··· ♦ · ♦·· · · ·

- ~ · · · · ♦ ·*·♦· —33— · ··· ···· ΐ^···· ·· ··· ♦· ··♦

31,8, 29,4, 28,0, 25,5. HPLC: C-18 Novapac, 4,6 χ 250 mm,

1,5 ml/min; soustava: 25 % MeCN/75 % H₂0 (isokraticky); retenční čas: 13,7 min.

I

Příklad 6 (2Ή, 3R, 4S, 5R, 6£) -3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S,6R}-hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylmethylkarbonyl)oxy-2tt-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se ppovede v podstatě způsobem, popsaným v příkladu lg, s tím rozdílem, že místo cyklohexankarbonylchloridu se použije přibližně ekvivalentní množství směsi kyseliny cyklohexyloctové, hydrochloridu 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiímidu a 4-dimethylaminopyridinu. Získá se tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-G-(cyklohexylmethylkarbonyl) oxy-2íf-azepin-2-on. Ten se .místo produktu z příkladu lg podrobí postupům, popsaným v příkladech lh, li a v posledním stupni příkladu 1, čímž se získá titulní sloučenina. ^rH NMR (CDC13) : δ 7,98 (d, J = 6,2 Hz, 1H) , 5,83 - 5,7 (m, 1H) , 5,80 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,52 (m, 1H), 4,2 (m, 2H), 3,78 (m, 2H), 3,6 - 3,48 (m, 3H), 3,52 (s, 3H), 3,23 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 3,06 (m, 1H), 2,80 (d, J = 1 Hz, 2H) , 2,13 1,63 (m, 12H) , 1,30 - 0,85 (m, 5H) , 1, 0 (s, 9H) ; ¹³C NMR (CDC13) : δ 174,0, 172,3, 172,2, 145,7, 123,3, .81,1, 74,5, 72,8, 72,5, 67,0, 60,0, 51,7, 43,5, 4.2,1, 35, 0,- 33,0, 32,0, 29, 5, .26,1, 26,0, 25,7. HPLC: C-18 Novapac, 4,6 x 250 mm, 1,5 ml/min;

% MeCN/60 % H₂O (isokraticky); retenční čas: 11,5 min.

Příklad 7 .

(2R,3R, 4S, 5R, 6E) -3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(l-oxo-2-fenylethoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se provede v podstatě způsobem, popsaným v příkladu lg, s tím rozdílem, že místo cyklohexankarbonylchloridu se použije přibližně, ekvivalentní množství směsi kyseliny fenyloctové, hydrochloridu 1-(3-diméthylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu a

4-dimethylaminopyridinu. Získá se tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(l-oxo-2-fenylethoxy)-2H-azepin-2-on. Ten se místo produktu z příkladu lg podrobí postupům, popsaným v příkladech lh, li a v posledním stupni příkladu 1, čímž se získá titulní sloučenina.

¹H NMR (CDC1₃) : δ 7,96 (d,

J = 6,2 Hz, 1Ή),

7,28 (m, (d, J = 15,8 Hz, 1H), 5,68

4,22

3,48

2,15 (dd,

172,1,

J = 15, (t, J = 6,4 Hz,

8 Hz	a 7,	3 Hz,	1H)	, 4,93 (m, 1H),	4,53 - 4,47 (m, 1H) ,
4,18	(m,	2H) ,	3,60	- 3,56 (m, 2H),	3,52 (s, 3H),
3,38	(m,	2H) ,	3,27	(d, J = 6, 6 Hz,	1H), 3,08 (s, 1Ή),
1, 67	(m,	5H) ,	1,0	(s, 9H) ; ¹³C NMR	(CDCI3) : δ 173,9,
170,8	, 14	5,8,	133,	6, 129,2, 128,8,	127,4, 123,2, 81,1,

72,7, 72,4, 67,6, 59, 9, 51, 6, 43,2,

74,5,

29,4,

25,5. HPLC: C-18 Novapac, 4,6 x 250

41,5, 33,0, 31,8, mm, 1,5 ml/min;

soustava 10 - 100% MeCN/voda [>20 min gradient]; retenční čas: 12,2 min.

Příklad 8 (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[(3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-2-[3,4-dichlorfenyl]ethoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se provede v podstatě způsobem, popsaným v příkladu lg, s tím rozdílem, že místo cyklohexankarbonylchloridu se použije přibližně ekvivalentní množství směsi kyseliny 3,4-dichlorfenyloctové, hydrochloridu 1-(3-dimethylaminopropýl)-3-ethylkarbodiimidu a 4-dimethylaminopyridinu. Získá se tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(1-oxo—2—[3,4-dichlorfenyl]ethoxy) -2/í-azepin-2-on. Ten se místo produktu z příkladu lg podrobí postupům, popsaným v příkladech lh, li a v posledním stupni příkladu 1, čímž se získá titulní sloučenina, t.t. 132 - 136 °C.

NMR (CDC1₃) : δ 8,00 (d, J = 6 Hz,

•	• · · ·	• ·	• · · ·	• ·	*
• ·	•	• ·	•	• ·	• ·
•	···	• ·	• · ·	• ·	•
•	•	• · ·	•	• · ·	•
•	•	• ·	•	• ·	•
		• ·	• · ·	• ·	• · ·

1H), 7,51 (s, 1H)

7,41 (m,. 2H) , 7,16 (dd, J = 3 Hz a 9 Hz, 1H) , 5,77 (d, J = 16 Hz, 1H), 5,42 (dd, J = 8 Hz a 16 Hz, 1H), 4,93 (d, J = 3 Hz, 1H) ,

4,55' (q, J = 6 Hz, 1H) , 4,19 (m, 1H) , 3,83 (m, 3H) , 3,63 (d,

J = 6 Hz, 3H), 3,48 (m, 6H), 3,39 (s, 1H), 2,13 (d, J = 16 Hz,

1H), 2,00 (m, 2H), 1,77 (q, J = 12 Hz, 1H), 1,03 (s, 9H);

¹³C NMR (CDCI3) : δ 169, 1, 144,2, 133,5, 131,5, 130,9, 130,8,

129,8, .128,5, 123,4, 81,3, 73, 6, 72,2, 71,7, 67,6, 58,4, 50,8,

49,3, 42,0, 32,3, 31,1, 30,7, 28,8, 24,8.

Přiklad 9 (2R, 3R, 4S, 5R, 6E) -3, 4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-2-[4-methoxyfenylje.thoxy) -2H-azepin-3-yl]non-6-enamid

a) Příprava (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-

6-terc-butyldimethylsilyloxy-2H-azepin-2·onu (3S,6R)-3-(terc-Butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-hydroxý-2.H-azepin-2-on (25 g, 102 mmol) , terc-butyldimethylsilylchlorid. (23,16 g, 153 mmol) a imidazol (10,45 g, 153 mmol) se smíchají s 60 ml DMF. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti přes noc, pak se zředí 1 litrem vody a vzniklá směs se extrahuje směsí ethylacetátu a hexanu (1:1; 2 x 200 ml). Organické vrstvy se spojí, promyjí se roztokem chloridu sodného, vysuší se nad síranem sodným a zahustí se. Přečištění odparku krystalizací (ethylacetát-hexan) poskytne 28,5 g (78 %) (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-terc-butyl-

dimethylsilyloxy-2#-azepin-2-onu 65 - 66 °C.	ve	f 0	rmě bílé	tuhé	látky, t.t
^XH NMR (CDCI3) :	: δ	5,86 (d, J = 6	Hz,	1H	), 5,58	(t, J	= 6 Hz,
1H), 4,18	(m,	1H)	, 3, 91 (s, 1H) ,	3,	35	(dd, J =	6 Hz	a 16 Hz,
1H), 3,07	(m,	1H)	, 1,80 (m, 4H),	1,	40	(s, 9H),	.0,83	(s, 9H),
0,004 (s,	6H) .

φφφφ • · · φφφ · · • φ φ · · φφφ» · · φ • φφφ · · · φ φ φ • φ φφ φ φφφ φφφ φφφ φφ φφφ φφ φφφ

b) Příprava (3S,6R)-3-aminohexahydro-6-terc-butylďimethylsilyloxy-2H-azepin-2-onu (3S,6R)-3-(terc-Butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-terc-butyldimethylsilyloxy-2H-azepin-2-on (8,0 g, 22 mmol) se rozpustí ve 40 ml CH₂C1₂ a roztok se ochladí na -78 °C. Přidá se pomalu trimethylsilyljodid (3,5 ml, 24,5 mmol) a směs se nechá reagovat při teplotě -78 °C po dobu 30 minut. Pak se reakční směs ohřeje na 0 °C a míchá se 15 minut. Roztok se zbarví žlutě. Směs se rozloží přídavkem roztoku·· NH₄HCO₃ (3,43 g, 44 mmol) ve 30 ml methanolu a 15 ml vody. Po zahuštěni se směs podrobí chromatografií ve směsi CH₂Cl₂-methanol (95:5), čímž se získá 5,45 g (96 %) (3S,6R)-3-aminohexahydro-6-terc-butyldimethylsilyloxy-2H-azepin-2-onu ve formě bílé tuhé látky.

¹H NMR (CDC1₃) : δ 5,61 (s, 1H) , 3,88 (s, 1H) , 3,42 (d,

J = 8 Hz, 1H), 3,32 (dd, J = 6 Hz a 16 Hz, 1H), 3,06 (m, 1H), 1,87 (m, 2H), 1,76 (m, 1H), 1,65 (s, 3H), 0,83 (s, 9H), 0,001 (S, 6H) .

c) Příprava (2R, 3R,4S,5R,6E)-3,5-(methylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[(3S, 6R)-hexahydro-2-oxo-6-terc-butyldimethylsilyloxy-277-azepin-3-yl]non-6-enamidu (3S,6R)-3-Aminohexahydro-6-terc-butyldimethylsilyloxy-2H-azepin-2-on (5,45 g, 21 mmol), lakton kyseliny (6E)-6,7,8,9-tetradeoxy-8,8-dimethyl-2-O-methyl-3,5-0-(1-methyl ethyliden)-gulo-non-6-enonové (3,0 g, 11 mmol) a diisopropylethylamin (4,6 ml, 26 mmol) se při teplotě místnosti smíchají s 30 ml isopropanolu. Směs se zahřívá k varu pod zpětným chladičem přes noc, pak se ochladí na teplotu místnosti a zahustí se. Zbytek se podrobí chromatografií ve směsi CH₂Cl₂-methanol (98:2), čímž se získá 2,53 g (42 %) (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(methylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[(3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6-terc-butyldimethylsilyloxy-27f-azepin-3-yl]non-6-enamidu ve formě bílé tuhé látky.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,53 (d, J = 6 Hz, 1H) , 5,72 (d, J = 16 Hz,

1H), 5,47	(dd,	J	=	6 Hz	a 16 Hz,	1H), 4,47 (m,	1H) ,	4,2	2 (d,.
J = 6 Hz,	1H) ,	4,	03	(d,	J = 8 Hz,	1H), 3,91 (m,	1H) ,	3,	82 (d,
J = 7 Hz,	1H) ,	3,	48	(d,	J = 9 Hz,	1H), 3,43 (s,	3H) ,	3,	35 (d,
J = 6 Hz,	1H) ,	3,	09	(m,	1H), 2,77	(d, J = 9 Hz,	1H) ,	i,	83 (m,
2H), 1,77	(m,	2H)	/	1,41	(d, J = 6	Hz, 6H), 0,97	(s,	9H)	, 0,83
(s, 9H),	0,005	(s	/	6H) ;	¹³C NMR (C	:DC13) : δ 172,2	, 169	Z 6,	148,3

145,3, 121,5, 108,8, 99,6, 81,4, 80,5, 79,2, 78,2, 74,4, 73,1,

69,1, 67,9, 65,8, 59,2, 56,4, 51,7, 36,8, 36,5, 33,1, 29,6,

29,4, 19,1.

d) Příprava (2R,3R,4S,5R,6E')-3,5-(rnethylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[(3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-hydroxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamidu (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(Methylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[(3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- terc-butyldimethylsilyloxy-2íř-azepin-3-yl]non-6-enamid (2,5 g, 4,6 mmol) se rozpustí ve 30 ml THF. Přidá se 1,0 M roztok tetrabutylamoniumfluoridu v THF (13,8 ml, 14 mmol) při teplotě místnosti a směs se míchá 3 hodiny. Pak se směs zahustí a podrobí se chromatografii ve směsi CH₂C12-methanol (95:5), čímž se získá 1,8 g (91 %) (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(methylethyliden) -3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-hydroxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamidu ve formě bílé tuhé látky.

^XH NM	R (CDCI3) :	: δ 7	,61 (	d, J = 6 Hz, 1H), 6,45 (t, J	= 6	Hz,
1H) ,	5,77 (d,	J =	6 Hz,	1H), 5,52 (dd, J = 6 Hz a 16	Hz,	1H) , '
4,56	(m, 1H),	4,28	(d,	J = 6 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 8	Hz,	1H) ,
4,00	(m, 1H),	3, 91	(d,	J = 8 Hz, 1H), 3,54 (m, 1H),	3,47	(s,
3H) ,	3,35 (m,	2H) ,	3,08	(d, J = 8 Hz, 1H), 2,76 (d,	J =	6 Hz,
1H) ,	2,02 (m,	2H) ,	1,83	(m, 2H), 1,45 (s, 6H), 1,03	(s,	9H) ;
¹³C NMR (CDCI3)	: δ	175,1	, 169,7, 145,3, 121,5,· 99,7,	83,1	z 80,6,
74,5,	73,2, 65	,8,	64,6,	59,1, 51,8, 45,9, 34,5, 33,1	z 29	,5,
29,3,	25,1, 19	,lz	13,7.

e) Příprava (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(methylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-

-6- (l-oxo-2[4-methoxyf enyljethoxy) -2H-azepin-3-yl]non-6-enamidu Kyselina 4-methoxyfenyloctová (0,35 g, 2,1 mmol), hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (0,42 g,

2,1 mmol) a DMAP (0,17 g, 1,4 mmol) se smíchají se 30 ml CH₂C1₂a směs se míchá při teplotě místnosti 30 minut. Přidá se (2R, 3R, 4S, 5R,6E)-3,5-(methylethyliden)-3,4,5-trihydroxý-2-methoxy-8,8-dimethyl-2V-[ (35, 6R) -hexahydro-2-oxo-6-hydroxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid (0,6 'g, 1,4 mmol) a směs se míchá při teplotě.místnosti přes noc. Po zahuštění se odparek podrobí chromatografií ve směsi CH₂Cl₂-methanol (98:2), čímž se získá 0,644 g (80 %) (2R,3R,4S,5R,65)-3,5-(methylethyliden)-

-3,4., 5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-. -2-OXO-6- (l-oxo-2[4-methoxyfenyl]ethoxy) -2H-azepin-3-yl]non-6-enamidu ve formě bílé tuhé látky.

^XH NMR (CDC13) : δ 7,56 (d, J = 6 Hz, 1H) , 7,18 (d, J = 8 Hz, 2H), 6,86 (d, J = 8 Hz, 2H), 5,78 (d, J= 16 Hz, 1H), 5,62 (t, J = 6 Hz, 1H), 5,52 (dd, J = 6 Hz a 16 Hz, 1H) , 4,93 (s, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,28 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,06 (d, J = 8 Hz, 1H), 3,88 (d, J = 7 Hz, 1H) , 3,80 (s, 3H)., 3,56 (s, 2H) , 3,48 (s, 5H), 2,82 (d, J = 11.Hz, 1H), 2,05 (m, 3Ή), 1,71 (s, 2H), 1,42 (d, ,J = 6 Hz, 6H) , 1,03 (s, 9H) ; ¹³C NMR (CDC13) : δ 174,3,

171.1, 169,7, 158,9, 145,3, 130,2, 125,7, 121, 6, 114,2, .99,7, 80,6, 74,5, 73,3, 67,7, 65,8, 59, 3, 55,3, 51,7, 43,3, 40, 6,

33.1, 31,8, 31,4, 29,4, 25,8, 19,1.

f) Příprava titulní sloučeniny

Směs TEA, THF a vody (3:3:2; 30 ml) se přidá při teplotě 0 °C do baňky, obsahující (25,3R,4S,55,65)-3,5-(methylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S, 65) -hexahydro-2-OXO-6- (l-oxo-2[4-methoxyfenyl]ethoxy) -2H-azepin-3-yl]~ non-6-enamid (0,64 g, 1,1 mmol). Směs se nechá reagovat (

• 0 to · minut při teplotě 0 °C a pak se odpaří ve vysokém vakuu k suchu. Zbytek se neutralizuje roztokem NH4HCO3 (1,2 g ve ml vody). Směs se odpaří k suchu ve vysokém vakuu a odparek se podrobí chromatografií ve směsi CH₂Cl₂-methanol (95:5), čímž se získá 0,35 g (60 %) titulní sloučeniny ve formě bílé tuhé látky.

''H NMR (Cl	DCI3)	: δ	7,98 (d, J = 6 Hz, 1H), 7,18 (d, J	= 9	Hz,
2H), 6,87	(d,	J =	9 Hz, 2H), 5,83	(d,	J = 16 Hz, 1H)	, 5,	72 (t
J = 6 Hz,	1.H)	, 5,	42 (dd, J = 8 Hz	a 16	Hz, 1H), 4,93	(d,
J = 3 Hz,	1H)	, 4,	53 (m, 1H), 4,23	(t,	J = 6 Hz, 2H),	3,8	1 (m,
2H), 3,80	(s,	3H)	, 3,61 (t, J = 5	Hz,	1H), 3,57 (s,	2H) ,	3,54
(s, 3H),	3,47	(m,	1H), 3,30 (d, J	= 7	Hz, 1H), 3,12	(s,	1H) ,
2,16 (d,	J =	16 H	z, 1H) , 1,99 (m,	2H) ,	1,82 (m, 1H),	1,7	2 (s,

1H), 1,04 (s, 9H) ; ¹³C NMR (CDC1₃) : δ 173,8, 172,2, 171,1,

158,9, 145,8, 130,2, 125,6, 123,2, 114,2, 81,0, 74,5, 72,8,

72.4, 67,5, 60,0, 55,3, 51,6, 43,2, 40,6, 33,0, 31,8, 31,3,

29.4, 25,6.

Příklad 10 (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- ([4-n-décyloxyfenyl]karbonyl) oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid . ...

Reakce se provede v podstatě způsobem, popsaným v příkladu 9e, s tím rozdílem, že místo kyseliny 4-methoxyfenyloctové se použije přibližně ekvivalentní množství kyseliny 4-decyloxybenzoové. Získá se tak (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(methylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8, 8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-OXO-6- ([4-n-decyloxyfenyl]karbonyl) oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid. Ten se místo produktu z příkladu 9e v podstatě podrobí postupu, popsanému v posledním stupni příkladu 9, čímž se získá titulní sloučenina jako tuhá látka, t.t. 70 - 74 °C. ^XH NMR (CDCI3) : δ 8,06 (d, J = 6 Hz, 1H) , 7,96 (d, J = 9 Hz, 2H), 6,90 (d, J = 9 Hz,. 2H) , 6,05 (t, J = 6 Hz, 1H) , 5,80 (d, • · · · • · • · · ·

J = 15 Hz, 1H) ,· 5,44 (dd, J = 7 Hz a 15 Hz, 1H) , 5,20	(m, 1H) ,
4,63 (m, 1H), 4,25	(t, J	' = 6 Hz, 1H),	4,02	(t,	J = 6	Hz, 2H),
3,84 (dd, J = 7 Hz	a 13	Hz, 2H) , 3,69	(m,	1H) ,	3, 62 (	m, 2H),
3,38 (d, J = 5 Hz,	1H) ,	3,56 (s, 3H),	3,33	(s,	1H), 3	,15 (s,
1H), 2,32 (d, J =	12 Hz,	1H), 2,13 (t,	J =	12 Hz, 1H)	, 2,01 (m,
2H), 1,82 (m, 2H),	1,48	(m, 2H) , 1,30	(m,	12H) ,	1,05	(s, 9H),
0,94 (t, J = 6 Hz,	3H) ;	¹³C NMR (CDC1₃)	: δ	174,1	,172,	1, 165,2,
163,4, 145,7, 131,	7, 123	,2, 121,6, 114	,2,	81,1,	74,5,	72,7,
72,4, 68,3, 67,2,	59,9,	51,7, 43,6, 33	,0,	32,1,	31,9,	29,5,
29,4, 29,3, 29,2,	29,0,	25,9, 25, 9, 22	,6,	14,1.

Přiklad 11 (2R, 3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3-fenyl-2-propenoxy) -2Jf-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se provede v podstatě způsobem, popsaným v příkladu Ig, s tím rozdílem, že místo cyklohexankarbonylchloridu se použije přibližně ekvivalentní množství cinnamoylchloridu. Získá se tak (3S,6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(l-oxo-3-fenyl-2-propenoxy)-2H-azepin-2-on. Ten se místo produktu z příkladu lg v podstatě podrobí postupům, popsaným v příkladech lh, li a v posledním stupni příkladu 1, čímž se získá titulní sloučenina ve formě tuhé látky, t.t. 83 - 85 °C.

^XH NMR (DMSO): δ 8,03. (m, 1H) , 7,71 (d, J = 16 Hz, 1H) , 7,54 (m, ,2H) , 7,41 (m, -2H), 6,45 (d, J = 16 Hz, 1H) , 5,97 (m, 1H) , 5,81 (d, J = 16 Hz, 1H), 5,45 (dd, J = 16 Hz a 8 Hz, 1H), 5,09 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,22 (m, 2H), 3,81 (m, 2H), 3,62 (m, 4H), 3,54 (s, 3H), 3,30 (d, J = 8 Hz, 1H), 3,10 (s, 1H), 2,25 (m, 1H), 2,00 (m, 3H) , 1,02 (s, 9H) ; ¹³C NMR (DMSO): δ 174,10, 172,15, 166,01, 145,91, 145,75, 134,03, 130,70, 129,00, 128,22, 123,20, 117,34, 81,10, 74,50, 72,76, 72,46, 67,29, 59,93, 51,67, 43,51, 33,03, 32,00, 29,43, 25,75.

Příklad 12 (2R, 3R, 4S, 5R_r6E) -3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- ([4-n-decylfenyl]karbonyl) oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se provede v podstatě způsobem, popsaným v přikladu 9e, s tím rozdílem, že místo kyseliny 4-methoxyfenyloctové se použije přibližně ekvivalentní množství kyseliny 4-decylbenzoové. Získá se tak (2R,3R,4S,5R,6E)-3,5-(methylethyliden)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8, 8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-OXO-6- ([4-n-decylfenyl]karbonyl) oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid. Ten se místo produktu z příkladu 9e v podstatě podrobí postupu, popsanému v posledním stupni příkladu 9, čímž se získá titulní sloučenina, t.t. 60 - 64 °C.

¹H NMR (CDC1₃) : δ 8,06 (d, J = 6 Hz, 1H) , 7,94 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,26 (d, J = 8 Hz, 2H), 6,10 (t, J = 7 Hz, 1H), 5,85 (d, J = 16 Hz, 1H) , 5,45 (dd, J = 8 Hz a 16 Hz, 1H), 5,22 (d,

J = 3	Hz, 1H),	4,	64	(dd, J =	6	Hz a	8 Hz,	1H) ,	4,25 (	t,
J = 6	Hz, 2H),	3,	84	(dd, J =	6	Hz a	11.Hz,	2H) ,	3, 69	(t,
J = 7	Hz, 1H),	3,	63	(dd, J =	5	Hz a	8 Hz,	2H) ,	3,56 (	s, 3H),
2,68	(t, J = 8	Hz		2H) , 2,34	(d	J =	13 Hz	, 1H)	, 2,14	(t,

J = 12 Hz, 1H), 2,04 (t, J =11 Hz, 1H), 1,96 (t, J = 3 Hz,

1H), 1,63 (m, 2H) ,	1, 32	(m,	18H), 1,82 (m,	2H) ,	1,05 (s, 9H),
0,90 (t, J = 7 Hz,	3H	.) ;	¹³C	NMR (CDCI3) : δ	174,1,	172,1, 165,5,
149,3, 145,7, 129,	7,	128	, 6/	127,0, 123,2,	81,1,	74,5, 72,7,
72,4, 67,4, 59,9,	51,	7,	43,	5, 36,0, 33,0,	32,1,	31,9, 31,1,
29,6, 29,5, 29,4,	29,	3,	29,	2, 25, 9, 22,6,	14,1.

Příklad 13 (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-2V-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3-[3-thiof enyljethoxy) -2H-azepin-3-yl]non-6-enamid

Reakce se provede v podstatě podle postupu v přikladu lg, s tím rozdílem, že se místo cyklohexankarbonylchloridu použije ···· · · ···· ·· • · · · · · • · · · 0 · · · · · ·«· 0 * · · · přibližně ekvivalentní množství směsi, složené z následujících, sloučenin: 3-thiofenoctová kyselina, hydrochlorid

1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu a 4-dimethylaminopyridin. Získá se (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6- (l-oxo-3-[3-thiofenyl]ethoxy) -2H-azepin-2-on, který se použije místo produktu z příkladu lg a nechá se reagovat jak je v podstatě popsáno v příkladech lh, li a v posledním stupni příkladu 1. Získá se tak titulní sloučenina. HPLC (C-18 Novapac, 4,6 x 250 mm, 1,5 ml/min), soustava: 35% MeCN/65% H₂O (isokraticky), retenční čas: 7,89 minut.

^XH NMR (CDC1₃) : δ 7,97 (d, J - 6 Hz, 1H), 7,30 (m, 1H) , 7,14 (m, 1H) , 7,00 (m, 1H) , 5,83 (m, 1H) , 5,81 (d, J = 16 Hz, 1H·) ,

5,40· (dd, J = 7 Hz a 16 Hz, 1H), 4,90 (m, 1H), 4,45 (m, 1H),

4,15 (m, 1H) , 3,75 (m, 2Ή), 3,66 (s, 2H), 3,57 (s, 3H) , 3,40 (m, 2H), 3,32 (d, J = 7 Hz, 1H), 3,12 (s, 1H), 1,7 (m, 4H),

1,01 (s, 9H) ; ¹³C NMR (CDC1₃) : δ 174,0, 172,1, 170,3,. 145,7,

133,1, 126,2, 123,3, 123,1, 81.,2, 74,5, 72,8, 72,5, 67,8, 59, 9, 51,6, 43,2, 36,0, 33,0, 31,8, 29,5, 25,6.

Příklad 14 (2R,3R,4S, 5R, 6Ej-3,4,5-Trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethylN-[ ( 3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3-[3-indolyl]ethoxy) -2H-azepin-3-yl]non-6-enamid . ·

Reakce se provede v podstatě podle postupu v příkladu -lg, s tím rozdílem, že místo cyklohexankarbonylčhloridu se použije přibližně ekvivalentní množství směsi, složené z následujících sloučenin: 3-indoloctová kyselina, hydrochlorid 1-(3-dimethylaminopropyl) -3-ethylkarbodiimidu a 4-dimethylaminopyridin.

Získá se (3S, 6R)-3-(terc-butoxykarbonyl)aminohexahydro-6-(l-oxo-3-[3-indolyl]ethoxy)-2H-azepin-2-on, který se použije místo produktu z příkladu lg a nechá se reagovat jak je v podstatě popsáno v příkladech lh a li a v posledním stupni příkladu·!, čímž se získá titulní sloučenina.

. · • ♦

HPLC (C-18 Novapac, 4,6 x 250 mm, 1,5 ml/min), soustava:

35% MeCN/65% H₂O (isokraticky), retenční čas: 9,2 minut.

^XH NMR	(CDC1₃) : δ	• 8,47 (	s, 1H),	7,	90 (d, J = 6 Hz, 1H), 7,55
(d, J	= 8 Hz, 1H	), 7,36	(d, J	= 8	Hz, 1H), 7,20 - 7,05 (m, 3H
5,81 (	d, J = 16.	Hz, 1H)	, 5,75	(m,	1H), 5,37 (dd, J = 8 Hz a
16 Hz,	1H), 4,8	(m, 1H)	, 4,45	- 4	,30 (m, 2H), 4,25 - 4,15 (m,
1H), 3	,9 - 3,7 (	m, 4H),	3, 65 -	3,	55 (m, 1H), 3,50 (s, 3H),
3,45 -	3,30 (m,	1H), 3,	25 - 3,	10	(m, 2H), 2,15 - 2,00 (m, 1H)
2,00 -	1, 60 (m,	4H), 0,	99 (s,	9H)	; ¹³C NMR (CDCI3) : δ 173,9,
171,9,	145,7, 13	6,2, 12	7,1, 12	3,3	, 123,3, 122,3, 119,8, 118,6
111,5,	108,0, 81	,6, 74,	4, 72,7	, 7	2,6, 67,5, 59,7, 51,5, 43,1,
33,0,	31,8, 31,6	, 29,5,	25,6.

Příklad 15

Infuzní roztok

Sloučenina z příkladu 1 (15 mg) se rozpustí v 98 - 100% propylenglykolu (1,0 ml). Roztok se sterilně filtruje přes, filtr o pórech velikosti 0,22 μ a naplní se do 1 ml ampulí, které se skladují a expedují. Naplněné ampule jsou stálé přinejmenším 12 měsíců při teplotě 2 až 8 °C. Před intravenosní aplikací se obsah ampule přidá ke 250 až 1000 ml 5% roztoku glukosy ve vodě pro injekce. Takto připravený intravenosní roztok je stálý 8 hodin při teplotě místnosti.

V dalším jsou uvedeny odpovídající struktury sloučenin, připravených v příkladech 1 až 14:

• φ φ · φ • · φ • φφφ •· φ •φ • Φ φφφφ • φφ φφφφφ φ φφ φ φφ φφ φφφ φ φφ φ φ φ φ φφφ φφφ φ φφφ φ φ φφ

Příklad 1

Příklad 2

Příklad 3

Příklad 4

Příklad 5

Příklad >H ;h₃₁

IH •H OH O ···· φφ φφφφ • φ • φφφ

Příklad 7

Příklad 8

Příklad 9

Příklad 10

Příklad 11

IH ♦· ····

Příklad 12

Příklad 13

Příklad 14 • · · ·

• ··♦· ♦· ···· ·· · ·· · · · · «·«· • ··· · · ··· · · · • · 9 9 · · 9 9 9· • * · · 9 9 99

999 999 99- 999 99999

Claims

NÁROKY

1. Sloučenina vzorce I kde

Ri je (Ci_e) alkylová skupina nebo (C₃_₆) cykloalkylová skupina;

R₂' je atom vodíku nebo (Ci_₆) alkylová skupina;

X je (C1-12) alkylenová skupina; (C2-12) alkenylenová skupina; nebo (C2-12) alkinylenová skupina·;

m je 0 nebo 1; a.

R3 je (C3-8) cykloalkylová skupina; nebo aromatický cyklický systém, zvolený ze II, III, IV a V:

II lil IV v kde

R₄ je atom vodíku, atom chloru nebo methoxylová skupina;

R₅ je atom vodíku, atom chloru, (Ci-ig) alkylová skupina nebo (Ci-ig) alkoxylové skupina; a

Z je atom kyslíku, atom síry, skupina N-H, nebo skupina N-CH₃;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami, pokud přicházejí v úvahu.

• ···· 44 ···· ··· ··· · · · · · ·· • ··· · · ··· 4 · ♦ __ /1 Q _ · · · · · · · · ··

40 4 4 · · · · 44

44444· ·· 444 44444
2. Sloučenina vzorce I podle nároku 1, vyznačuj ící.

s e t i m, že

Ri je (Ci-6) alkylová skupina;

R₂ je atom vodíku nebo (C1-4) alkylová skupina;

X je (C1-6) a 1 kylenová skupina nebo (C₂_₆·) alkenylenová skupina;

m j e O nebo 1; a

R3 je (C₃_gj cykloalkylová skupina; nebo aromatický cyklický systém, zvolený, ze II, III, IV a V, kde

R₄ je atom vodíku, atom chlorů nebo methoxylová skupina;

R₅ je atom vodíku, atom chloru, (Ci-ig) alkylová skupina nebo (Ci-ig) alkoxylová skupina; a

Z je atom kyslíku, atom síry, skupina N-H, nebo skupina

N-CH₃;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami, pokud přicházejí v úvahu.
3. Sloučenina vzorce I podle nároku 1 nebo 2, vyznaču- jícísetím, že

Ri je isopropylová skupina nebo terc-butylová skupina; r₂ je atom vodíku nebo methylová skupina; m je 0 nebo 1; X je (C1-6) a 1 kylénová skupina; a r₃ je (C5-7) cykloalkylová skupina; systém zvolený z Ha a V: nebo aromatický cyklický

♦

11a v kde φ

♦ · ·

• ··· • · 00 0 0 00 • • · 0 • 0 • · · • 0 000 0 0 • * • 0 0 • 0 0 • • 0 • 0 0 000 0 - 0 0 Φ

R₄' je v meta-poloze a je atom vodíku nebo atom chloru; a

R₅' je v para-poloze a je atom vodíku, atom chloru, (Ci-is) alkylová skupina nebo (Ci_ig) alkoxylová skupina; nebo jejich farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami, pokud přicházejí v úvahu.
4. Sloučenina vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 a.ž 3, vyznačující se tím, že

Ri je isopropylová skupina nebo terc-butylová skupina;

R₂ je atom vodíku nebo methylová skupina;

m je 0 nebo 1;

X je methylenová skupina nebo ethylenová skupina; a

R₃ je (C5-7) cykloalkylové skupina, fenylová skupina,

3,4-dichlorfenylová skupina, 4-methoxyfenylová skupina, 4-n-decylfenylová skupina, 4-n-decyloxyfenylová skupina nebo 3-pyridylová skupina;

za podmínky, že když m je rovno 0, R₃ je (C5-7) cykloalkylové skupina, 4-n-decylfenylová skupina nebo 4-n-decyloxyfenylová skupina;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami, pokud přicházejí v úvahu.
5. Sloučenina vzorce I podle nároku 1, zvolená ze sloučenin:

3.4.5- trihydroxy-2-methoxy-8, 8-dimethyl-N-[hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylkarbonyl) oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid a

3.4.5- trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-W-[hexahydro-2-oxo-

-6- (l-oxo-3-fenylpropoxy) -2H-azepin-3-yl]non-6-enamid, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

φφ . φφφφ.

• φ φ φφφ φφφ φ φ φφφ φ φ φ φ φφφ φφ φ
6. Sloučenina vzorce I podle nároku 1, zvolená ze sloučenin: (2J?, 3R, 4S, 5R, 6E) -3, 4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S,6R)-hexahydro-2-oxo-6-(cyklohexylkarbonyl)oxy-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid a (2R,3R,4S,5R,6E)-3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[ (3S, 6R) -hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3-fenylpropoxy) -2H-azepin-3-yl]non-6-enamid, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
7. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1-6, nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, pokud přichází v úvahu, spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
8. Farmaceutický prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I, která je 3,4,5-trihydroxy2-methoxy-8, 8-dimethyl-N-[hexahydro-2-oxo-6- (cyklohexylkarbonyl) oxy-2H-azepin-3-yl]-non-6-enamid.
9. Farmaceutický prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I, která je 3,4,5-trihydroxy-2-methoxy-8,8-dimethyl-N-[hexahydro-2-oxo-6- (l-oxo-3-fenylpropoxy)-2H-azepin-3-yl]non-6-enamid.
10. Způsob léčby nádorů, vyznačující se tím, že se savci, který takovou léčbu potřebuje, podá terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1-6, nebo její farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinou, pokud přicházejí v úvahu.

·· ····
11. Farmaceutický prostředek pro léčbu nádorů u teplokrevných živočichů včetně člověka, vyznačující se t 1 m, že obsahuje protinádorově účinnou dávku sloučeniny vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1-6 nebo farmaceuticky přijatelnou sůl takové sloučeniny, spolu s farmaceutickým nosičem.
12. Použití, .sloučeniny vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1-6, nebo farmaceuticky přijatelné soli takové sloučeniny, pro přípravu farmaceutického prostředku pro použití v chemoterapii nádorů.
13. Použití sloučeniny vzorce I podle kteréhokoliv z nároků

1 - 6, nebo farmaceuticky přijatelné soli takové sloučeniny, pro chemoterapii nádorů.
14. Způsob přípravy kaprolaktamové sloučeniny vzorce I kde

R_x je (Ci-6) alkylová skupina nebo (C₃_₆) alkylová skupina;

R₂ je atom vodíku nebo (Ci_₆) alkylová skupina;

X je (C1-12) alkylenová skupina; (C2-12) alkenylenová skupina; nebo (C2-12) alkinylenová skupina;

m j e 0 nebo 1; a

• ··♦· ···♦ • •9 9 • · • • · « 9 9 • · • • ·* • • • · · 9 · • • • · • • • · • · • • • • ♦ • • · • • · • · · • · ·· ·

R₃ je (C₃_₃) cykloalkylová skupina; nebo aromatický cyklický systém, zvolený ze II, III, IV a V:

II kde

R₄ je atom vodíku, atom chloru nebo methoxylová skupina;

Rs vodíku, atom je atom nebo (Ci-ig) alkoxylová skupina; a chloru, (Ci__i3) alkylová skupina je atom kyslíku, atom síry, skupina N-H, nebo skupina N-CH₃;

nebo jejích farmaceuticky přijatelných adičních solí kyselinami, pokud přicházejí v úvahu, y z n a č u j prvním stupni se acyluje vzorce VI lei se tím, že aminokaprolaktamová sloučenina reakcí s laktonovou sloučeninou vzorce VII (VII) • 4 · ··»· ··· · · ··# · • · v · · · · » · * · · v přítomnosti polárního, organického rozpouštědla, za vzniku diamidové sloučeniny vzorce VIII

Vlil kde symboly Ri, R₂, X, m, a R3 jsou definovány v nároku 1, a ve druhém stupni.se diamidová sloučenina, získaná v prvním stupni, hydrolýzuje rozpuštěním ve směsi rozpouštědel, čímž se získá žádaná kaprolaktamová sloučenina vzorce I.
15. Způsob podle nároku 14, vyznačující se tím, že acylační stupeň se provede za přítomnosti isopropanolu při teplotě poněkud nižší než je teplota varu isopropanolu.