[go: up one dir, main page]

CN111936490A - 激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法 - Google Patents

激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111936490A
CN111936490A CN201880087073.5A CN201880087073A CN111936490A CN 111936490 A CN111936490 A CN 111936490A CN 201880087073 A CN201880087073 A CN 201880087073A CN 111936490 A CN111936490 A CN 111936490A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
subject
diabetes
tgf
inhibitor
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201880087073.5A
Other languages
English (en)
Inventor
R·戴维塔
A·斯图尔特
A·施莱辛格
K·库玛
P·万-恩雄
H·王
H·李
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Icahn School of Medicine at Mount Sinai
Original Assignee
Icahn School of Medicine at Mount Sinai
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Icahn School of Medicine at Mount Sinai filed Critical Icahn School of Medicine at Mount Sinai
Publication of CN111936490A publication Critical patent/CN111936490A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/549—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame having two or more nitrogen atoms in the same ring, e.g. hydrochlorothiazide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/16—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two nitrogen atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及具有以下结构的激酶抑制剂化合物：
Figure DDA0002591742440000011
或其立体异构体、药学上可接受的盐、氧化物或溶剂化物，其中R1、R2、X、n、R3、Y、Z、R4、R5、R6和

Description

激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法
本申请要求2017年11月20日提交的美国临时专利申请序列号62/588,792的优先权，所述申请以全文引用的方式并入本文中。
本发明是在美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的资助号DK015015和DK116904的政府支持下完成的。政府拥有本发明的某些权利。
发明领域
本发明涉及激酶抑制剂化合物和组合物及其使用方法。
发明背景
双特异性酪氨酸调节激酶(“DYRK”)属于真核蛋白激酶CMCG家族，所述家族包括CDK样激酶(CLK)、糖原合酶激酶3(GSK3)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)。DYRK家族蛋白通过激活环中保守酪氨酸残基的自磷酸化而自我激活，然后仅在丝氨酸和苏氨酸残基上磷酸化底物(Lochhead等人,“Activation-LoopAutophosphorylation is Mediated by a Novel Transitional Intermediate Form ofDYRKs,”Cell 121(6):925-936(2005)；Walte等人,“Mechanism of Dual SpecificityKinase Activity of DYRK1A,”FEBS J.280(18):4495-4511(2013)；和Becker等人,“Activation,Regulation,and Inhibition of DYRK1A,”FEBS J.278(2):246-256(2011))。DYRK家族由五个亚型组成，包括1A、1B、2、3和4。其中，DYRK1A是研究最广泛的亚型。它广泛地表达，并已显示在以下各者中起重要作用：脑发育和功能(Becker等人,“DYRK1A:A Potential Drug Target for Multiple Down Syndrome Neuropathologies,”CNS Neurol.Disord.:Drug Targets 13(1):26-33(2014))、神经退行性疾病(Wegiel等人,“The Role of DYRK1A in Neurodegenerative Diseases,”FEBS J.278(2):236-245(2011)和Smith等人,“Recent Advances in the Design,Synthesis,and BiologicalEvaluation of Selective DYRK1A Inhibitors:A New Avenue for a DiseaseModifying Treatment of Alzheimer’s？,”ACS Chem.Neurosci.3(11):857-872(2012))、肿瘤发生、细胞凋亡(Ionescu等人,“DYRK1A Kinase Inhibitors With Emphasis onCancer,”Mini-Rev.Med.Chem.12(13):1315-1329(2012)和Fernandez-Martinez等人,“DYRK1A:The Double-Edged Kinase as a Protagonist in Cell Growth andTumorigenesis,”Mol.Cell.Oncol.2(1):e970048(2015))和人胰腺β细胞增殖(Wang等人,“A High-Throughput Chemical Screen Reveals That Harmine-Mediated Inhibitionof DYRK1A Increases Human Pancreatic Beta Cell Replication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015)；Shen等人,“Inhibition of DYRK1A and GSK3B Induces Humanβ-cellProliferation,”Nat.Commun.6:8372(2015)；Rachdi等人,“Dyrk1A Induces PancreaticβCell Mass Expansion and Improves Glucose Tolerance,”Cell Cycle 13(14):2221-2229(2014)；and Dirice等人,“Inhibition of DYRK1A Stimulates Human Beta-CellProliferation,”Diabetes 65:(6):1660-1671(2016))。
DYRK1A在胎儿、产后以及成人中的表达调节对于正常的神经元发育和脑功能至关重要。DYRK1A位于人21号染色体上的唐氏综合症关键区域(“DSCR”)，所述区域是在唐氏综合症(“DS”)的发病机理中具有重要作用的基因组区域，唐氏综合症是最常见和频繁的人遗传病症之一(Becker等人,“Activation,Regulation,and Inhibition of DYRK1A,”FEBSJ.278(2):246-256(2011)and Becker等人,“Structural and FunctionalCharacteristics of Dyrk,a Novel Subfamily of Protein Kinases With DualSpecificity,”Prog.Nucleic Acid Res.Mol.Biol.62:1-17(1999))。DYRK1A在小鼠和果蝇模型中的过表达模拟了与DS相关的神经发育异常(Becker等人,“DYRK1A:A PotentialDrug Target for Multiple Down Syndrome Neuropathologies,”CNS Neurol.Disord.:Drug Targets 13(1):26-33(2014)；Wegiel等人,“The Role of DYRK1A inNeurodegenerative Diseases,”FEBS J.278(2):236-245(2011)；Park等人,“Functionand Regulation of Dyrk1A:Towards Understanding Down Syndrome,”Cell.Mol.LifeSci.66(20):3235-3240(2009)；and Ogawa等人,“Development of a Novel SelectiveInhibitor of the Down Syndrome-Related Kinase Dyrk1A,”Nat.Commun.1:ArticleNumber 86(2010))。最近的证据还表明DYRK1A与阿尔茨海默氏病(“AD”)、路易氏体痴呆(dementia with Lewy bodies)和帕金森氏病(Parkinson's disease)的tau功能障碍和tau病理有关(Wegiel等人,“The Role of DYRK1A in Neurodegenerative Diseases,”FEBS J.278(2):236-245(2011)；Smith等人,“Recent Advances in the Design,Synthesis,and Biological Evaluation of Selective DYRK1A Inhibitors:A NewAvenue for a Disease Modifying Treatment of Alzheimer's？,”ACS Chem.Neurosci.3(11):857-872(2012)；和Stotani等人,“DYRK1A Inhibition as Potential Treatmentfor Alzheimer's Disease,”Future Med.Chem.8(6):681-696(2016))。据报道，DYRK1A在各种肿瘤(如卵巢癌、结肠癌、肺癌和胰腺癌)中过表达，表明其在肿瘤发生和不受控制的细胞增殖中的作用(Ionescu等人,“DYRK1A Kinase Inhibitors With Emphasis onCancer,”Mini-Rev.Med.Chem.12(13):1315-1329(2012)和Fernandez-Martinez等人,“DYRK1A:The Double-Edged Kinase as a Protagonist in Cell Growth andTumorigenesis,”Mol.Cell.Oncol.2(1):e970048(2015))。抑制DYRK1A会导致胶质母细胞瘤中的EGFR不稳定并降低EGFR依赖性肿瘤的生长(Pozo等人,“Inhibition of DYRK1ADestabilizes EGFR and Reduces EGFR-Dependent Glioblastoma Growth,”J.Clin.Invest.123(6):2475-2487(2013))。同样，DYRK1A抑制诱导了半胱氨酸蛋白酶-9的激活，这导致特定癌细胞类型中的大量凋亡(Seifert等人,“DYRK1A PhosphorylatesCaspase 9at an Inhibitory Site and is Potently Inhibited in Human Cells byHarmine,”FEBS J.275(24):6268-6280(2008))。最近，DYRK1A已显示参与与人β细胞增殖相关的分子通路，使其成为1型和2型糖尿病中β细胞再生的潜在治疗靶标(Wang等人,“AHigh-throughput Chemical Screen Reveals That Harmine-Mediated Inhibition ofDYRK1A Increases Human Pancreatic Beta Cell Replication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015)；Shen等人,“Inhibition of DYRK1A and GSK3B Induces Humanβ-cellProliferation,”Nat.Commun.6:8372(2015)；Rachdi等人,“Dyrk1A Induces PancreaticβCell Mass Expansion and Improves Glucose Tolerance,”Cell Cycle 13(14):2221-2229(2014)；和Dirice等人,“Inhibition of DYRK1A Stimulates Human Beta-cellProliferation,”Diabetes 65:(6):1660-1671(2016))。已提出DYRK1A抑制会通过诱导转录因子的活化T细胞核因子(“NFAT”)家族向核易位，允许接近随后会激活人β细胞增殖的基因的启动子来驱动β细胞增殖(Wang等人,“A High-throughput Chemical Screen RevealsThat Harmine-Mediated Inhibition of DYRK1A Increases Human Pancreatic BetaCell Replication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015)和Rachdi等人,“Dyrk1A InducesPancreaticβCell Mass Expansion and Improves Glucose Tolerance,”Cell Cycle 13(14):2221-2229(2014))。
由于其涉及神经退行性疾病、癌症和糖尿病，DYRK1A作为潜在的治疗靶点已引起越来越多的关注。已经进行了大量的工作，不仅要了解其在疾病中的潜在作用，而且要鉴别新的DYRK1A抑制剂(Becker等人,“Activation,Regulation,and Inhibition of DYRK1A,”FEBS J.278(2):246-256(2011)；Becker等人,“DYRK1A:A Potential Drug Target forMultiple Down Syndrome Neuropathologies,”CNS Neurol.Disord.:Drug Targets 13(1):26-33(2014)；Wegiel等人,“The Role of DYRK1A in NeurodegenerativeDiseases,”FEBS J.278(2):236-245(2011)；Smith等人,“Recent Advances in theDesign,Synthesis,and Biological Evaluation of Selective DYRK1A Inhibitors:ANew Avenue for a Disease Modifying Treatment of Alzheimer’s？,”ACSChem.Neurosci.3(11):857-872(2012)；Ionescu等人,“DYRK1A Kinase Inhibitors withEmphasis on Cancer,”Mini-Rev.Med.Chem.12(13):1315-1329(2012)；Fernandez-Martinez等人,“DYRK1A:The Double-Edged Kinase as a Protagonist in Cell Growthand Tumorigenesis,”Mol.Cell.Oncol.2(1):e970048(2015)；Wang等人,“A High-throughput Chemical Screen Reveals That Harmine-Mediated Inhibition of DYRK1AIncreases Human Pancreatic Beta Cell Replication,”Nat.Med.21(4):383-388(2015)；Shen等人,“Inhibition of DYRK1A and GSK3B Induces Humanβ-cellProliferation,”Nat.Commun.6:8372(2015)；和Dirice等人,“Inhibition of DYRK1AStimulates Human Beta-cell Proliferation,”Diabetes 65:(6):1660-1671(2016))。
已经鉴别并表征了几种天然来源的DYRK1A抑制剂以及小分子药物发现程序。在所有DYRK1A抑制剂中，骆驼蓬碱和其类似物(β-咔啉)是最常被研究的，并且仍是迄今为止涵盖的最有效和口服生物利用度最高的抑制剂类别(Becker等人,“Activation,Regulation,and Inhibition of DYRK1A,”FEBS J.278(2):246-256(2011)和Smith等人,“RecentAdvances in the Design,Synthesis,and Biological Evaluation of SelectiveDYRK1A Inhibitors:A New Avenue for a Disease Modifying Treatment ofAlzheimer’s？,”ACS Chem.Neurosci.3(11):857-872(2012))。
除了骆驼蓬碱以外，EGCg和其它黄烷-3-醇(Guedj等人,“Green Tea PolyphenolsRescue of Brain Defects Induced by Overexpression of DYRK1A,”PLoS One 4(2):e4606(2009)和Bain等人,“The Specificities of Protein Kinase Inhibitors:AnUpdate,”Biochem.J.371(1):199-204(2003))、路赛汀(leucettine)(Tahtouh等人,“Selectivity,Cocrystal Structures,and Neuroprotective Properties ofLeucettines,a Family of Protein Kinase Inhibitors Derived from the MarineSponge Alkaloid Leucettamine B,”J.Med.Chem.55(21):9312-9330(2012)和Naert等人,“Leucettine L41,a DYRK1A-preferential DYRKs/CLKs Inhibitor,Prevents MemoryImpairments and Neurotoxicity Induced by Oligomeric Aβ25-35PeptideAdministration in Mice,”Eur.Neuropsychopharmacol.25(11):2170-2182(2015))、奎纳阿宁(quinalizarine)(Cozza等人,“Quinalizarin as a Potent,Selective and Cell-permeable Inhibitor of Protein Kinase CK2,”Biochem.J.421(3):387-395(2009))、盾木酮(Peltogynoid)阿克尼醇(Acanilol)A和B(Ahmadu等人,“Two New Peltogynoids fromAcacia nilotica Delile with Kinase Inhibitory Activity,”Planta Med.76(5):458-460(2010))、苯并香豆素(dNBC)(Sarno等人,“Structural Features Underlying theSelectivity of the Kinase Inhibitors NBC and dNBC:Role of a Nitro Group thatDiscriminates Between CK2 and DYRK1A,”Cell.Mol.Life Sci.69(3):449-460(2012))和吲哚并咔唑(星形孢菌素(Starosporine)、蝴蝶霉素(rebeccamycin)和其类似物)(Sanchez等人,“Generation of Potent and Selective Kinase Inhibitors byCombinatorial Biosynthesis of Glycosylated Indolocarbazoles,”Chem.Commun.27:4118-4120(2009))是已显示出可抑制DYRK1A和其它激酶的其它天然产物。
在从小分子药物发现尝试中鉴定出的其它骨架中，INDY(Ogawa等人,“Development of a Novel Selective Inhibitor of the Down Syndrome-RelatedKinase Dyrk1A,”Nat.Commun.1:Article Number 86(2010))、DANDY(Gourdain等人,“Development of DANDYs,New 3,5-Diaryl-7-Azaindoles Demonstrating PotentDYRK1A Kinase Inhibitory Activity,”J.Med.Chem.56(23):9569-9585(2013))和FINDY(Kii等人,“Selective Inhibition of the Kinase DYRK1A by Targeting its FoldingProcess,”Nat.Commun.7:11391(2016))、吡唑烷二酮(Koo等人,“QSAR Analysis ofPyrazolidine-3,5-Diones Derivatives as Dyrk1A Inhibitors,”Bioorg.Med.Chem.Lett.19(8):2324-2328(2009)；Kim等人,“Putative TherapeuticAgents for the Learning and Memory Deficits of People with Down Syndrome,”Bioorg.Med.Chem.Lett.16(14):3772-3776(2006))、氨基喹唑啉(Rosenthal等人,“Potentand Selective Small Molecule Inhibitors of Specific Isoforms of Cdc2-LikeKinases(Clk)and Dual Specificity Tyrosine-Phosphorylation-Regulated Kinases(Dyrk),”Bioorg.Med.Chem.Lett.21(10):3152-3158(2011))、迈若林(meriolin)(Giraud等人,“Synthesis,Protein Kinase Inhibitory Potencies,and In VitroAntiproliferative Activities of Meridianin Derivatives,”J.Med.Chem.54(13):4474-4489(2011)；Echalier等人,“Meriolins(3-(Pyrimidin-4-yl)-7-Azaindoles):Synthesis,Kinase Inhibitory Activity,Cellular Effects,and Structure of aCDK2/Cyclin A/Meriolin Complex,”J.Med.Chem.51(4):737-751(2008)；and Akue-Gedu等人,“Synthesis and Biological Activities of Aminopyrimidyl-IndolesStructurally Related to Meridianins,”Bioorg.Med.Chem.17(13):4420-4424(2009))、吡啶和吡嗪(Kassis等人,“Synthesis and Biological Evaluation of New 3-(6-hydroxyindol-2-yl)-5-(Phenyl)Pyridine or Pyrazine V-Shaped Molecules asKinase Inhibitors and Cytotoxic Agents,”Eur.J.Med.Chem.46(11):5416-5434(2011))、色烯并吲哚(chromenoidole)(Neagoie等人,“Synthesis of Chromeno[3,4-b]indoles as Lamellarin D Analogues:A Novel DYRK1A Inhibitor Class,”Eur.J.Med.Chem.49:379-396(2012))、11H-吲哚并[3,2-c]喹啉-6-甲酸,37噻唑并[5,4-f]喹唑啉(EHT 5372)(Foucourt等人,“Design and Synthesis of Thiazolo[5,4-f]quinazolines as DYRK1A Inhibitors,Part I.,”Molecules 19(10):15546-15571(2014)and Coutadeur等人,“A Novel DYRK1A(Dual Specificity Tyrosine Phosphorylation-Regulated Kinase 1A)Inhibitor for the Treatment of Alzheimer’s Disease:Effecton Tau and Amyloid Pathologies In Vitro,”J.Neurochem.133(3):440-451(2015))、和5-碘代杀结核菌素(Dirice等人,“Inhibition of DYRK1A Stimulates Human Beta-cellProliferation,”Diabetes 65:(6):1660-1671(2016)and Annes等人,“Adenosine KinaseInhibition Selectively Promotes Rodent and Porcine Isletβ-cell Replication,”Proc.Natl.Acad.Sci.109(10):3915-3920(2012))显示出有效的DYRK1A活性以及不同程度的激酶选择性。
这些化合物大多数是DYRK1A的非选择性抑制剂，并表现出药理学副作用，如CNS活性或细胞凋亡，从而限制了其治疗用途和药物开发潜力。这种非选择性可能归因于所有这些DYRK1A抑制剂都是I型激酶抑制剂，它们会与高度保守的ATP结合袋结合。
本发明旨在克服本领域中的缺陷。
发明内容
本发明的一个方面涉及一种具有以下结构的式(I)的化合物：
Figure BDA0002591742420000061
或其立体异构体、药学上可接受的盐、氧化物或溶剂化物，其中
R1任选地存在；
R1(当存在时)和R2在其每次出现时独立地选自H、CH3、CF3、卤素和氰基；
X选自S、SO和SO2；
n是选自1和2的整数；
R3选自H、D、卤素和C1-C6被取代或未被取代的烷基；
Y选自键和支链的或直链的C1-C6被取代或未被取代的烷基；
Z选自被取代或未被取代的芳基、杂芳基、环烷基、烷基和杂环、醚、胺和磺酰基；
R4在其每次出现时独立地选自H、C1-C6烷基、卤素和-OR5；
R5选自H和C1-C6烷基；
R6任选地存在，并且当存在时是羰基或C1-C1烷基；且
是单键或双键，但是当R1和R2均是H，n是1，R3是H，X是S，且Y是CH2时，Z不能是苯基。
本发明的另一方面涉及一种抑制细胞中激酶活性的方法。这种方法涉及在有效抑制细胞中激酶活性的条件下，使细胞与本发明的式(I)的化合物接触。
本发明的另一方面涉及一种增加胰腺β细胞群中细胞增殖的方法。这种方法涉及在有效增加胰腺β细胞群中细胞增殖的条件下，使胰腺β细胞群与根据本发明的式(I)的化合物接触。
本发明的另一方面涉及一种组合物，其包含根据本发明的式(I)的化合物和载剂。
本发明的另一方面涉及一种治疗受试者胰岛素分泌不足相关病状的方法。这种方法涉及向需要治疗胰岛素分泌水平不足相关病状的受试者施用本发明的化合物或组合物。
本发明的另一方面涉及一种治疗受试者神经系统病症的方法。这种方法涉及向需要治疗神经系统病症的受试者在有效治疗所述受试者病状的条件下施用根据本发明的式(I)的化合物。
尽管已经为发现有效的和选择性的DYRK1A抑制剂做出了努力，但大多数仍处于先导鉴别的早期阶段。
下文描述了高效和新型的噻二嗪类似物抑制剂的鉴别和评估。
附图简要说明
图1是显示1,3,4-噻二嗪化合物的合成的示意图。在AlCl3存在下用氯乙酰氯酰化可商购的2-羟基苯并咪唑，以95％产率得到化合物2。随后，使α-氯代酮2与购买或合成的含有各种R基团的硫代氨基脲进行流畅的环缩合反应，以在23-90％范围内的产率得到所需的噻二嗪类似物。
图2是显示1,3,4-噻二嗪化合物4-1和化合物4-2的合成的示意图。化合物4-1和4-2通过使用碱性过氧化氢溶液将相应的氰基衍生物部分水解来制备，如图2所示。
图3是显示5-或6-(2-溴乙酰基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮的合成的示意图。通过按照图3中的程序合成中间化合物9-1和9-2。可商购的化合物5的CDI介导的环化反应得到1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物6)。在碱性条件下水解甲酯，得到游离甲酸，所述甲酸接着与N,O-二甲基羟胺偶合，得到化合物7。化合物7的温勒布-纳姆(Weinreb-Nahm)酮合成产生了甲基酮(化合物8)。化合物8的溴化得到中间化合物9。
图4是显示α-溴代酮化合物13的合成的示意图。通过按照图4所示的流程，由可商购的甲基酮(化合物12)或合成的甲基酮的溴化来合成各种α-溴代酮13。
图5是显示1,3,4-噻二嗪化合物14的合成的示意图。按照合成化合物3的一般程序，通过中间化合物9或13与硫代氨基脲的环缩合，对噻二嗪类似物的苯并咪唑酮基进行了修饰，得到化合物14。
发明详述
本发明涉及激酶抑制剂化合物和组合物及其使用方法。
本发明的一个方面涉及一种具有以下结构的式(I)的化合物：
Figure BDA0002591742420000081
或其立体异构体、药学上可接受的盐、氧化物或溶剂化物，其中
R1任选地存在；
R1(当存在时)和R2在其每次出现时独立地选自H、CH3、CF3、卤素和氰基；
X选自S、SO和SO2；
n是选自1和2的整数；
R3选自H、D、卤素和C1-C6被取代或未被取代的烷基；
Y选自键和支链的或直链的C1-C6被取代或未被取代的烷基；
Z选自被取代或未被取代的芳基、杂芳基、环烷基、烷基和杂环、醚、胺和磺酰基；
R4在其每次出现时独立地选自H、C1-C6烷基、卤素和-OR5；
R5选自H和C1-C6烷基；
R6任选地存在，并且当存在时是羰基或C1-C1烷基；且
Figure BDA0002591742420000092
是单键或双键，但是当R1和R2均是H，n是1，R3是H，X是S，且Y是CH2时，Z不能是苯基。
如上文以及整个本说明书中所使用，除非另有说明，否则以下术语应理解为具有以下含义。如果本文中没有另外定义，则本文使用的所有技术和科学术语具有与此技术所属领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。
如本文所用，术语“卤素”意指氟、氯、溴或碘。
术语“烷基”意指可以在链中具有约1到约6个碳原子(或由“Cn-Cn”表示的碳数，其中n是碳原子的数值范围)的可以是直链或支链的脂肪族烃基。支链意指一个或多个低碳烷基，如甲基、乙基或丙基连接到直链烷基链。示例性烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、正戊基和3-戊基。
术语“环烷基”意指具有约3到约7个碳原子或约5到约7个碳原子的非芳香族的饱和或不饱和的单环或多环系统，且其可包括至少一个双键。示例性环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环苯基、反式二环丙烷(anti-bicyclopropane)和顺式三环丙烷(syn-tricyclopropane)。
术语“芳基”意指具有6到约19个碳原子或6到约10个碳原子的芳香族单环或多环(聚环)环系统，并且包括芳基烷基。芳基的环系统可以任选地被取代。本发明的代表性芳基包括但不限于如苯基、萘基、薁基、菲基、蒽基、芴基、芘基、三亚苯基、
Figure BDA0002591742420000091
基和并四苯基的基团。
术语“杂芳基”意指约5到约19个环原子或约5到约10个环原子的芳香族单环或多环系统，其中环系统中的一个或多个原子是除碳以外的元素，例如氮、氧或硫。在多环系统的情况下，仅一个环需要是芳香族的，以将环系统定义为“杂芳基”。优选的杂芳基含有约5到6个环原子。杂芳基之前的前缀氮杂、氧杂、硫杂或硫代分别意指至少一个氮、氧或硫原子作为环原子存在。杂芳基环中的氮、碳或硫原子可任选被氧化；氮可任选被季铵化。代表性的杂芳基包括吡啶基、2-氧代-吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吲哚基、异吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚啉基、2-氧代吲哚基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并三唑基、苯并[1,3]二噁茂基(benzo[1,3]dioxolyl)、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、肉桂基(cinnolinyl)、酞嗪基(pthalazinyl)、喹喔啉基、2,3-二氢-苯并[1,4]二噁英基、苯并[1,2,3]三嗪基、苯并[1,2,4]三嗪基、4H-色烯基、吲哚嗪基、喹啉嗪基、6aH-噻吩并[2,3-d]咪唑基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、吡唑并[1,5-a]吡啶基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶基、[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶基、噻吩并[2,3-b]呋喃基、噻吩并[2,3-b]吡啶基、噻吩并[3,2-b]吡啶基、呋喃并[2,3-b]吡啶基、呋喃并[3,2-b]吡啶基、噻吩并[3,2-d]嘧啶基、呋喃并[3,2-d]嘧啶基、噻吩并[2,3-b]吡嗪基、咪唑并[1,2-a]吡嗪基、5,6,7,8-四氢咪唑并[1,2-a]吡嗪基、6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪基、2-氧代-2,3-二氢苯并[d]噁唑基、3,3-二甲基-2-氧代吲哚基、2-氧代-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基、苯并[c][1,2,5]噁二唑基、苯并[c][1,2,5]噻二唑基、3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪基、5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基、[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基、3-氧代-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶-2(3H)-基等。
如本文所用，“杂环”意指由碳原子和一到五个选自氮、氧和硫的杂原子构成的稳定的3到18元环(基团)。杂环可以是单环或多环系统，其可以包括稠环、桥环或螺环系统；且杂环中的氮、碳或硫原子可任选被氧化；氮原子可任选被季铵化；且环可能会部分或完全饱和。此类杂环的实例包括但不限于氮杂环庚三烯基(azepinyl)、氮杂环辛烷基(azocanyl)、吡喃基、二噁烷基、二噻吩基、1,3-二噁戊烷基、四氢呋喃基、二氢吡咯烷基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂环庚三烯、噁唑烷基、环氧乙烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、噻唑烷基、四氢吡喃基、噻吗啉基、噻吗啉基亚砜和噻吗啉基砜。
其它的杂环和杂芳基描述于Katritzky等人,eds.,Comprehensive HeterocyclicChemistry:The Structure,Reactions,Synthesis and Use of HeterocyclicCompounds,Vol.1-8,Pergamon Press,N.Y.(1984)中，所述文献以全文引用的方式并入本文中。
短语“被取代或未被取代”和“任选地被取代”意指基团在基团的每个可取代原子上可以(但不一定)具有取代基(在单个原子上包括超过一个的取代基)，以及每个取代基的身份彼此独立。
术语“被取代的”意指指定原子上的一个或多个氢被指定基团中的选择所置换，只要不超过指定原子的正常价数即可。“未被取代的”原子带有所有由其化合价决定的氢原子。当取代基是氧代(即，＝O)时，则原子上的2个氢被置换。仅当取代基和/或变量的组合产生稳定的化合物时，才允许此类组合。“稳定的化合物”意指足够稳固以经受住从反应混合物中分离出来并达到有用纯度且配制成有效的治疗剂的化合物。
“本发明的化合物”和等同表述意指本文所述的化合物，在上下文允许的情况下，所述表述包括前药、药学上可接受的盐、氧化物和溶剂化物，例如水合物。
本文所述的化合物可含有一个或多个不对称中心，且因此可产生对映异构体、非对映异构体和其它立体异构形式。就绝对立体化学来说，每个手性中心可以定义为(R)-或(S)-。本发明意欲包括所有这些可能的异构体以及其混合物，包括外消旋和光学纯的形式。光活性(R)-和(S)-、(-)-和(+)-或(D)-和(L)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术拆分。还意欲包括所有互变异构形式。
如本领域普通技术人员将理解的，“化合物”的叙述旨在包括所述化合物的盐、溶剂化物、氧化物和包合络合物以及任何立体异构形式，或所述化合物的任何此类形式呈任何比率的混合物。因此，根据本发明的一些实施方案，以盐形式提供本文所述的化合物，包括药物组合物、治疗方法和化合物本身的情形。
术语“溶剂化物”是指固态的化合物，其中合适的溶剂的分子掺入晶格中。用于治疗性施用的合适溶剂在所施用的剂量下是生理耐受的。用于治疗性施用的合适溶剂的实例是乙醇和水。当水是溶剂时，溶剂化物称为水合物。通常，通过将化合物溶解在适当的溶剂中并通过冷却或使用抗溶剂分离溶剂化物来形成溶剂化物。溶剂化物通常在环境条件下干燥或共沸。
包合络合物描述于Remington,The Science and Practice of Pharmacy,19thEd.1:176-177(1995)中，所述文献以全文引用的方式并入本文中。最常用的包合络合物是具有环糊精的那些，并且所有天然和合成的环糊精络合物均被本发明明确涵盖。
术语“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒酸或碱，包括无机酸和碱以及有机酸和碱制备的盐。
术语“药学上可接受的”意指在合理的医学判断范围内，适合用于与人和低等动物的细胞接触而没有过度的毒性、刺激性、过敏性反应等，并且与合理的利益/风险比相称。
在式(I)的化合物的一个实施方案中，
R1和R2是H；
X是S；
N是1；
R3是H；且
R4是H。
根据这个实施方案，Z可以是未被取代的苯环或被卤素、-CF3、腈或-CONH2取代的苯环。Z可以选自吡啶基、环己烷、萘和吗啉。Y可以选自键、-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)和-CH(CH3)CH2-。
在另一个实施方案中，式(I)的化合物具有以下式(II)的结构：
Figure BDA0002591742420000121
根据这个实施方案，Z可以选自
Figure BDA0002591742420000122
Figure BDA0002591742420000131
Figure BDA0002591742420000141
在一个实施方案中，Z选自未被取代的苯环；被卤素、-CF3、腈或-CONH2取代的苯环；吡啶基；环己烷；萘；和吗啉。
本发明的另一方面涉及一种抑制细胞中激酶活性的方法。这种方法涉及在有效抑制细胞中激酶活性的条件下，使细胞与本发明的式(I)的化合物接触。
在一个实施方案中，所述激酶是双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶(“DYRK”)。所述激酶可以是双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(“DYRK1A”)。
所述细胞可以是哺乳动物细胞。哺乳动物细胞包括来自例如小鼠、仓鼠、大鼠、牛、绵羊、猪、山羊、和马、猴子、狗(例如、家犬(Canis familiaris))、猫、兔子、豚鼠和灵长类动物(包括人)的细胞。举例来说，细胞可以是人细胞。
在一个实施方案中，所述细胞是胰腺β细胞。如果需要，用于确定细胞是否具有胰腺β细胞表型的方法是本领域已知的，并且包括但不限于将细胞与葡萄糖一起孵育并测试细胞中胰岛素表达是否得以增加或诱导。其它方法包括测试是否表达β细胞特异性转录因子，借助RNA定量PCR检测β细胞特异性基因产物，在糖尿病小鼠中移植候选细胞，以及随后在所述移植后测试生理反应，以及用电子显微镜分析所述细胞。
在另一个实施方案中，所述细胞是癌细胞。
在又另一个实施方案中，所述细胞是神经细胞。
本发明的方法可以离体或在体内进行。当离体进行时，根据一个实施方案，可以通过从胰腺获得细胞并在适合于哺乳动物细胞(特别是人细胞)的体外或离体培养的液体培养基中培养细胞来提供细胞群。例如但不限于，合适的且非限制性的培养基可以基于可商购的培养基，如来自英杰公司(Invitrogen)的RPMI1640。
本发明的另一方面涉及一种增加胰腺β细胞群中细胞增殖的方法。这种方法涉及在有效增加胰腺β细胞群中细胞增殖的条件下，使胰腺β细胞群与本发明的化合物(即，式(I)的化合物)接触。
在一个实施方案中，与包含所述化合物的组合物(即，单一组合物)进行接触。
所述方法可以进一步涉及使胰腺β细胞群与转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导通路抑制剂接触。根据这个实施方案，所述方法可以用包含所述化合物和TGFβ超家族信号传导通路抑制剂的组合物进行。在另一个实施方案中，式(I)的化合物和TGFβ超家族信号传导通路抑制剂分别同时或依次接触胰腺β细胞群。
TGFβ超家族信号传导通路抑制剂包括BMP家族受体、激活和抑制素受体、GDF11受体和相关受体的小分子和其它(例如中和单克隆抗体、合成/重组肽抑制剂和siRNA)抑制剂。
TGFβ超家族信号传导通路抑制剂在本领域中也是已知的，且包括但不限于SB431542、SB505124、A-83-01、核心蛋白聚糖(Decorin)、可溶性TGF-β受体、艾迪木单抗(Ierdelimumab)、美替木单抗(metelimumab)、AP-12009、卵泡抑素(Follistatin)、FLRG、GAST-1、GDF8前肽、MYO-029、头蛋白(Noggin)、腱蛋白(chordin)、Cer/Dan、依托丁(ectodin)和硬化蛋白(Sclerostin)(参见Tsuchida等人,“Inhibitors of the TGF-betaSuperfamily and their Clinical Applications,”Mini Rev.Med.Chem.6(11):1255-61(2006)，所述文献以全文引用的方式并入本文中。
TGF-β信号传导的其它抑制剂包括但不限于2-(3-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)-1,5萘啶；[3-(吡啶-2-基)-4-(4-喹啉基)]-1H-吡唑；3-(6-甲基吡啶-2-基)-4-(4-喹啉基)-1-苯基硫代氨基甲酰基-1H-吡唑；SB-431542；SM16；SB-505124；和2-(3-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)-1,5萘啶(ALK5抑制剂II)(参加美国专利号8,298,825，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。
TGF-β信号传导的抑制剂描述于Callahan等人,J.Med.Chem.45:999-1001(2002)；Sawyer等人,J.Med.Chem.46:3953-3956(2003)；Gellibert等人,J.Med.Chem.47:4494-4506(2004)；Tojo等人,Cancer Sci.96:791-800(2005)；Valdimarsdottir等人,APMIS113:773-389(2005)；Petersen等人,Kidney International 73:705-715(2008)；Yingling等人,Nature Rev.Drug Disc.3:1011-1022(2004)；Byfield等人,Mol.Pharmacol.65:744-752(2004)；Dumont等人,Cancer Cell 3:531-536(2003)；PCT公开号WO 2002/094833；PCT公开号WO 2004/026865；PCT公开号WO 2004/067530；PCT公开号WO 2009/032667；PCT公开号WO 2004/013135；PCT公开号WO 2003/097639；PCT公开号WO 2007/048857；PCT公开号WO2007/018818；PCT公开号WO 2006/018967；PCT公开号WO 2005/039570；PCT公开号WO 2000/031135；PCT公开号WO 1999/058128；美国专利号6,509,318；美国专利号6,090,383；美国专利号6,419,928；美国专利号9,927,738；美国专利号7,223,766；美国专利号6,476,031；美国专利号6,419,928；美国专利号7,030,125；美国专利号6,943,191；美国专利申请公开号2005/0245520；美国专利申请公开号2004/0147574；美国专利申请公开号2007/0066632；美国专利申请公开号2003/0028905；美国专利申请公开号2005/0032835；美国专利申请公开号2008/0108656；美国专利申请公开号2004/015781；美国专利申请公开号2004/0204431；美国专利申请公开号2006/0003929；美国专利申请公开号2007/0155722；美国专利申请公开号2004/0138188和美国专利申请公开号2009/0036382，所述文献以全文引用的方式并入本文中。
TGF-β信号传导的示例性抑制剂包括但不限于AP-12009(TGF-β受体II型反义寡核苷酸)、来德单抗(Lerdelimumab)(CAT 152，抗TGF-β受体II型抗体)GC-1008(人TGF-β所有同工型的抗体)、ID11(鼠类TGF-β所有同工型的抗体)、可溶性TGF-β、可溶性TGF-β受体II型、二氢吡咯并咪唑类似物(例如SKF-104365)、三芳基咪唑类似物(例如SB-202620(4-(4-(4-氟苯基)-5-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-2-基)苯甲酸)和SB-203580(4-(4-氟苯基)-2-(4-甲基亚磺酰基苯基)-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑))、RL-0061425、1,5-萘啶氨基噻唑和吡唑衍生物(例如4-(6-甲基-吡啶-2-基)-5-(1,5-萘啶-2-基)-1,3-噻唑-2-胺和2-[3-(6-甲基-吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基]-1,5-萘啶)、SB-431542(4-(5-苯并[1,3]二噁茂-5-基-4-吡啶-2-基-1H-咪唑-2-基)-苯甲酰胺)、GW788388(4-(4-(3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯甲酰胺)、A-83-01(3-(6-甲基-2-吡啶基)-N-苯基-4-(4-喹啉基)-1H-吡唑-1-碳硫代酰胺)、核心蛋白聚糖、Lefty 1、Lefty 2、卵泡抑素、头蛋白、腱蛋白、Cerberus、Gremlin、抑制素、BIO(6-溴-靛玉红-3’-肟)、Smad蛋白(例如Smad6、Smad7)和胱抑素C(Cystatin C)。
TGF-β信号传导的抑制剂还包括抑制TGF-β受体I型的分子。TGF-β受体I型抑制剂包括但不限于可溶性TGF-β受体I型；AP-11014(TGF-β受体I型反义寡核苷酸)；美替木单抗(CAT 152，TGF-β受体I型抗体)；LY550410；LY580276(3-(4-氟苯基)-5,6-二氢-2-(6-甲基吡啶-2-基)-4H-吡咯并[1,2-b]吡唑)；LY364947(4-[3-(2-吡啶基)-1H-吡唑-4-基]-喹啉)；LY2109761；LY573636(N-((5-溴-2-噻吩基)磺酰基)-2,4-二氯苯甲酰胺)；SB-505124(2-(5-苯并[1,3]二噁茂-5-基-2-叔丁基-3H-咪唑-4-基)-6-甲基吡啶)；SD-208(2-(5-氯-2-氟苯基)-4-[(4-吡啶基)氨基]蝶啶)；SD-093；KI2689；SM16；FKBP12蛋白；和3-(4-(2-(6-甲基吡啶-2-基)H-咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)喹啉-7-基氧基)-N,N-二甲基丙-1-胺。
TGF-β受体I型的抑制剂描述于Byfield和Roberts,Trends Cell Biol.14:107-111(2004)；Sawyer等人,Bioorg.Med.Chem.Lett.14:3581-3584(2004)；Sawyer等人,J.Med.Chem.46:3953-3956(2003)；Byfield等人,Mol.Pharmacol.65:744-752(2004)；Gellibert等人,J.Med.Chem.47:4494-4506(2004)；Yingling等人,Nature Rev.DrugDisc.3:1011-1022(2004)；Dumont等人,Cancer Cell 3:531-536(2003)；Tojo等人,CancerSci.96:791-800(2005)；PCT公开号WO 2004/026871；PCT公开号WO 2004/021989；PCT公开号WO 2004/026307；PCT公开号WO 2000/012497；美国专利号5,731,424；美国专利号5,731,144；美国专利号7,151,169；美国专利申请公开号2004/00038856和美国专利申请公开号2005/0245508，所述文献均以全文引用的方式并入本文中。
在一个实施方案中，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂包括干扰TGFβ超家族配体、受体和/或下游信号传导分子(例如SMAD)或核靶标(例如染色质修饰复合物和转录因子)的化合物。
在一个实施方案中，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂可以是中和例如TGFβ配体的抗血清。
在另一个实施方案中，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂选自下组：TGFβ/TGFβ受体结合、激活素或抑制素/激活素受体结合和骨形态发生蛋白(BMP)/BMP受体结合的抑制剂。
在一个具体的实施方案中，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂是选自由LY364947和GW788388组成的组的TGFβ/TGFβ受体结合的抑制剂。
在另一个具体的实施方案中，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂是选自由SB431542和Alk5抑制剂II组成的组的激活素或抑制素/激活素受体结合的抑制剂。激活素或抑制素/激活素受体结合的其它示例性抑制剂可以选自下组：SB-505124、BYM388、卵泡抑素、卵泡抑素相关蛋白(FSRP)、卵泡抑素结构域(即，Fs2、Fs12、Fs123)、A-83-01、Cripto、GW788388、BAMBI和索特西普(Sotatercept)(参见Byfield等人,“SB-505124is a SelectiveInhibitor of Transforming Growth Factor-Beta Type I Receptors ALK4,ALK5,andALK7,”Mol.Pharmacol.65(3):744-52(2004)；Lach-Trifilieffa等人,“An AntibodyBlocking Activin Type II Receptors Induces Strong Skeletal Muscle Hypertrophyand Protects from Atrophy,”Mol.Cell.Biol.34(4):606-18(2014)；Zhang等人,“Inhibition of Activin Signaling Induces Pancreatic Epithelial Cell Expansionand Diminishes Terminal Differentiation of Pancreaticβ-Cells,”Diabetes 53(8):2024-33(2004)；Harrington等人,“Structural Basis for the Inhibition of ActivinSignalling by Follistatin,”EMBO J.25(5):1035–45(2006)；Tojo等人,“The ALK-5Inhibitor A-83-01Inhibits Smad Signaling and Epithelial-to-MesenchymalTransition by Transforming Growth Factor-Beta,”Cancer Sci.96(11):790-800(2005)；Yan等人,“Human BAMBI Cooperates with Smad7 to Inhibit TransformingGrowth Factor-Beta Signaling,”J.Biol.Chem.284(44):30097-104(2009)；Tan等人,“Targeted Inhibition of Activin Receptor-Like Kinase 5Signaling AttenuatesCardiac Dysfunction Following Myocardial Infarction,”Am.J.Physiol.HeartCirc.Physiol.298(5):H1415-25(2010)；和Gokoffski等人,“Activin and GDF11Collaborate in Feedback Control of Neuroepithelial Stem Cell Proliferationand Fate,”Develop.138(19):4131-42(2011)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。
在另一个具体的实施方案中，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂是BMP/BMP受体结合的抑制剂。BMP/BMP受体结合的示例性抑制剂是LDN193189。其它示例性BMP抑制剂可以选自下组：头蛋白、硬化蛋白、腱蛋白、CTGF、卵泡抑素、gremlin、抑制素、DMH1、DMH2、背形素(Dorsomorphin)、K02288、LDN212854、DM 3189、BMP-3和BAMBI(参见WO 2014018691A1和Mohedas等人,“Development of an ALK2-Biased BMP Type I Receptor KinaseInhibitor,”ACS Chem.Biol.8(6):1291-302(2013)；Yan等人,“Human BAMBI Cooperateswith Smad7 to Inhibit Transforming Growth Factor-Beta Signaling,”J.Biol.Chem.284(44):30097-104(2009)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。
根据另一个实施方案，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂是SMAD信号传导通路抑制剂。示例性的SMAD信号传导通路抑制剂可以选自包括但不限于以下的组：SMAD3siRNA、SMAD2/3siRNA、PD169316、SB203580、SB202474、特异性Smad3抑制剂(SIS3)、HSc025和SB525334(参见Qureshi等人,“Smad Signaling Pathway is a Pivotal Component of TissueInhibitor of Metalloproteinases-3Regulation by Transforming Growth FactorBeta in Human Chondrocytes,”BBA Mol.Cell Res.1783(9):1605-12(2008)；Hasegawa等人,“A Novel Inhibitor of Smad-Dependent Transcriptional Activation SuppressesTissue Fibrosis in Mouse Models of Systemic Sclerosis,Arthritis Rheum.60(11):3465-75(2009)；和Ramdas等人,“Canonical Transforming Growth Factor-βSignalingRegulates Disintegrin Metalloprotease Expression in Experimental RenalFibrosis via miR-29,”Am.J.Pathol.183(6):1885-96(2013)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。
另外的示例性SMAD信号传导通路抑制剂包括但不限于miR-100、LDN 193189、SMAD结合肽适配体(例如Trx-FoxH1、Trx-Le1、Trx-CBP、Trx-SARA)、吡非尼酮(pirfenidone)和LDN193189(参见Fu等人,“MicroRNA-100Inhibits Bone Morphogenetic Protein-InducedOsteoblast Differentiation by Targeting Smad,”Eur.Rev.Med.Pharmacol.Sci.20(18):3911-19(2016)；Boergermann等人,“Dorsomorphin and LDN-193189Inhibit BMP-Mediated Smad,p38 and Akt signalling in C2C12 Cells,”Int.J.Biochem.CellBiol.42(11):1802-7(2010)；Cui等人,“Selective Inhibition of TGF-ResponsiveGenes by Smad-Interacting Peptide Aptamers from FoxH1,Lef1 and CBP,”Oncogene24:3864-74(2005)；Zhao等人,“Inhibition of Transforming Growth Factor-Beta1-Induced Signaling and Epithelial-to-Mesenchymal Transition by the Smad-Binding Peptide Aptamer Trx-SARA,”Mol.Biol.Cell 17:3819-31(2006)；Li等人,“OralPirfenidone Protects Against Fibrosis by Inhibiting Fibroblast Proliferationand TGF-βSignaling in a Murine Colitis Model,”Biochem.Pharmacol.117:57-67(2016)；和Cook等人,“BMP Signaling Balances Murine Myeloid Potential ThroughSMAD-Independent p38MAPK and NOTCH Pathways,”Blood 124(3):393-402(2014)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。
在另一个具体的实施方案中，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂是三胸复合物(trithorax complex)的抑制剂。示例性的三胸复合物抑制剂包括但不限于WDR5-0103、MI-1、MI-2、MI-2-2、MLS001171971-01、ML227、MCP-1、RBB5 siRNA和MLL1 siRNA(参见Senisterra等人,“Small-Molecule Inhibition of MLL Activity by Disruption ofits Interaction with WDR5,”Biochem.J.449(1):151-9(2013)；Cierpicki等人,“Challenges and Opportunities in Targeting the Menin-MLL Interaction,”FutureMed.Chem.6(4):447-62(2014)；Lee等人,“Roles of DPY30 in the Proliferation andMotility of Gastric Cancer Cells,”PLOS One 10(7):e0131863(2015)；和Zhou等人,“Combined Modulation of Polycomb and Trithorax Genes RejuvenatesβCellReplication,”J.Clin.Invest.123(11):4849-4858(2013)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。
在另一个实施方案中，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂是多梳抑制复合物2(“PRC2”)的抑制剂。示例性的PRC2抑制剂包括GSK926、EPZ005687、GSK126、GSK343、E11、UNC1999、EPZ6438、星座化合物(Constellation Compound)3、EZH2 siRNA和3-脱氮亚胺素A(3-deazaneplanocin A)(参见Verma等人,“Identification of Potent,Selective,Cell-Active Inhibitors of the Histone Lysine Methyltransferase EZH2,”ACSMed.Chem.Lett.3:1091-6(2012)；Xu等人,“Targeting EZH2 and PRC2 Dependence asNovel Anticancer Therapy,”Exp.Hematol.43:698-712(2015)；Knutson等人,“ASelective Inhibitor of EZH2 Blocks H3K27 Methylation and Kills MutantLymphoma Cells,”Nat.Chem.Biol.8:890-6(2012)；Qi等人,“Selective Inhibition ofEzh2 by a Small Molecule Inhibitor Blocks Tumor Cells Proliferation,”Proc.Natl Acad.Sci.USA109:21360-65(2012)；McCabe等人,“EZH2 Inhibition as aTherapeutic Strategy for Lymphoma with EZH2-Activating Mutations,”Nature 492:108-12(2012)；Nasveschuk等人,“Discovery and Optimization ofTetramethylpiperidinyl Benzamides as Inhibitors of EZH2,”ACS Med.Chem.Lett.5:378-83(2014)；Brooun等人,“Polycomb Repressive Complex 2Structure withInhibitor Reveals a Mechanism of Activation and Drug Resistance,”NatureComm.7:11384(2016)；Fiskus等人,“Histone Deacetylase Inhibitors DepleteEnhancer of Zeste 2and Associated Polycomb Repressive Complex 2Proteins inHuman Acute Leukemia Cells,”Mol.Cancer Ther.5(12):3096-104(2006)；和Fiskus等人,“Combined Epigenetic Therapy with the Histone Methyltransferase EZH2Inhibitor3-Deazaneplanocin A and the Histone Deacetylase InhibitorPanobinostat Against Human AML Cells,”Blood 114(13):2733-43(2009)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。
根据一个实施方案，“胰腺β细胞”是原代人胰腺β细胞。
在实施本发明的这种方法和其它方法的一个实施方案中，接触不诱导β细胞死亡或DNA损伤。此外，接触可能会诱导β细胞分化并增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
在另一个实施方案中，进行所述方法以增强细胞存活。举例来说，可以进行所述方法以相对于未处理的细胞群增强处理过的细胞群的细胞存活。或者，可以进行所述方法以相对于未处理的细胞群减少处理过的细胞群的细胞死亡或凋亡。
本发明的另一方面涉及一种组合物，其包含根据本发明的第一方面的化合物和载剂。
在一个实施方案中，所述组合物可进一步包含转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导通路抑制剂。
载剂可以是药学上可接受的载剂。
尽管本发明的化合物(即式(I)的化合物)有可能作为原料化学品施用，但是可能优选将其作为药物组合物呈现。根据本发明的一个实施方案，提供了一种药物组合物，其包含式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及其一种或多种药学上的载剂以及任选地一种或多种其它治疗成分。
在与处方的其它成分相容并且对其接受者无害的意义上，载剂必须是“可接受的”。此外，尽管本文中关于术语“化合物”的陈述也包括其盐，所以如果在独立权利要求中提及化合物或其药学上可接受的盐，则引述“化合物”的独立权利要求应理解为还指其盐，因此，应当理解，即使没有在从属权利要求中明确提及所述盐，但引用所述独立权利要求且提及化合物的的权利要求也包括所述化合物的药学上可接受的盐。
制剂包括适合于口服、肠胃外(包括皮下、皮内、肌内、静脉内和关节内)、直肠和局部(包括皮肤、经颊、舌下和眼内)施用的那些制剂。最合适的途径可能取决于接受者的病状和病症。所述制剂可以方便地以单位剂型存在，并且可以通过药学领域熟知的任何方法制备。这样的方法包括使式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物(“活性成分”)与构成一种或多种辅助成分的载剂结合的步骤。通常，制剂通过以下方式制备：将活性成分与液体载剂或细碎固体载剂或两者均匀且紧密地结合在一起，且然后必要时将产品成型为所需的制剂。
适用于口服施用的制剂可以呈现为：离散单位，如胶囊、扁囊剂(cachets)或片剂，各自含有预定量的活性成分；粉末或颗粒；呈水性液体或非水性液体形式的溶液或悬浮液；或水包油型液体乳液或油包水型液体乳液。活性成分也可以呈现为大丸剂(bolus)、舐剂(electuary)或糊剂。
片剂可以通过压制或模制制成，任选地与一种或多种辅助成分一起制成。可以通过在合适的机器中将自由流动形式(例如粉末或颗粒)的活性成分(任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、润滑剂、表面活性剂或分散剂混合)压缩来制备压制片剂。模制片剂可以通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物来制备。片剂可以任选地被包衣或刻痕，并且可以被配制以使其中的活性成分持续、延迟或控制释放。
药物组合物可以包括“药学上可接受的惰性载剂”，并且这个表述意图包括一种或多种惰性赋形剂，其包括例如但不限于淀粉、多元醇、制粒剂、微晶纤维素、稀释剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。必要时，可以通过标准的水性或非水性技术将所公开的组合物的片剂包衣。“药学上可接受的载剂”也涵盖控释手段。
药物组合物还可任选地包括其它治疗成分、抗结块剂、防腐剂、甜味剂、着色剂、调味剂、干燥剂、增塑剂、染料等。任何这样的任选成分必须与式(I)的化合物相容以确保制剂的稳定性。所述组合物可根据需要含有其它添加剂，包括例如乳糖、葡萄糖、果糖、半乳糖、海藻糖、蔗糖、麦芽糖、棉子糖、麦芽糖醇、松三糖、水苏糖、乳糖醇、方辉玄质岩(palatinite)、淀粉、木糖醇、甘露糖醇、肌醇等及其水合物；以及氨基酸，例如丙氨酸、甘氨酸和甜菜碱；以及肽和蛋白质，例如白蛋白。
用作药学上可接受的载剂和药学上可接受的惰性载剂以及上述其它成分的赋形剂的实例包括但不限于粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、抗微生物剂和包衣剂。
成人的剂量范围各不相同，但口服的剂量范围通常可以为约0.005mg至10g/天。以离散单位提供的片剂或其它呈现形式可以方便地含有一定量的式(I)化合物，所述化合物以所述剂量或其倍数有效，例如，含有5mg到500mg或约10mg到200mg的单位。施用给患者的化合物的精确量将由主治医师负责。然而，所采用的剂量将取决于许多因素，包括患者的年龄和性别，所治疗的确切病症和其严重程度。
剂量单位(例如口服剂量单位)可以包括例如1到30mg、1到40mg、1到100mg、1到300mg、1到500mg、2到500mg、3到100mg、5到20mg、5到100mg(例如1mg、2mg、3mg、4mg、5mg、6mg、7mg、8mg、9mg、10mg、11mg、12mg、13mg、14mg、15mg、16mg、17mg、18mg、19mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、55mg、60mg、65mg、70mg、75mg、80mg、85mg、90mg、95mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg、500mg)的本文所述化合物。
关于药物组合物和其制剂的其它信息在Remington:The Science and Practiceof Pharmacy,第20版,2000中有所描述，所述文献以全文引用的方式并入本文中。
药剂可以例如通过静脉内注射、肌内注射、皮下注射、腹膜内注射、局部、舌下、关节内(在关节内)、皮内、经颊、经眼(包括眼内)、鼻内(包括使用套管)或通过其它途径施用。这些药剂可以口服施用，例如作为含有预定量的活性成分的片剂或扁囊剂、凝胶剂、丸剂、糊剂、糖浆剂、大丸剂、舐剂、浆剂、胶囊、散剂、颗粒，作为呈水性液体或非水性液体形式的溶液或悬浮液，作为水包油型液体乳液或油包水型液体乳液，经由胶束制剂(参见，例如PCT公开号WO 97/11682，所述文献以全文引用的方式并入本文中)，经由脂质体制剂(参见，例如欧洲专利号736299、PCT公开号WO 99/59550和PCT公开号WO 97/13500，所述文献以全文引用的方式并入本文中)，经由PCT公开号WO 03/094886中所述的制剂(所述文献以全文引用的方式并入本文中)或呈某些其它形式。所述试剂也可以透皮(即，通过储库型或基质型贴剂、微针、热致孔、皮下注射针、离子导入法、电穿孔、超声或其它形式的超声波导入术、射流注射或前述任何方法的组合)施用(Prausnitz等人，Nature Reviews Drug Discovery3:115(2004)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。所述药剂也可以局部施用。
所述药剂可以栓剂形式或通过其它阴道或直肠方式施用。所述药剂可以如PCT公开号WO 90/07923中所述的跨膜制剂的形式来施用，所述文献以全文引用的方式并入本文中。可以通过美国专利号6,485,706中描述的脱水颗粒以非侵入性的方式施用所述药剂，所述文献以全文引用的方式并入本文中。所述药剂可以如在PCT公开号WO 02/49621中描述的肠溶衣药物制剂的形式施用，所述文献以全文引用的方式并入本文中。所述药剂可以使用在美国专利号5,179,079中描述的制剂进行鼻内施用，所述文献以全文引用的方式并入本文中。在PCT公开号WO 00/62759中描述了适合于肠胃外注射的制剂，所述文献以全文引用的方式并入本文中。可以使用在美国专利申请公开号2003/0206939和PCT公开号WO 00/06108中描述的酪蛋白制剂来施用药剂，所述文献以全文引用的方式并入本文中。所述药剂可以使用在美国专利申请公开号20020034536中描述的颗粒制剂来施用，所述文献以全文引用的方式并入本文中。
可以单独地或与其它合适的组分组合地将所述药剂通过肺部途径使用几种技术来施用，所述技术包括但不限于气管内滴注(通过注射器将溶液递送到肺中)、气管内脂质体的递送、吹入(通过注射器或任何其它类似装置将粉末制剂施用到肺部)以及气雾剂吸入。气雾剂(例如，喷射或超声雾化器、定量吸入器(“MDI”)和干粉吸入器(“DPI”))也可用于鼻内应用。气雾剂是固体材料和液滴在气态介质中的稳定分散体或混悬剂，且可以放入加压的可接受推进剂中，如氢氟烷烃(HFA，即HFA-134a和HFA-227，或其混合物)、二氯二氟甲烷(或其它氯氟烃推进剂，如推进剂11、12和/或114的混合物)、丙烷、氮气等。肺部制剂可包括渗透促进剂(如脂肪酸和糖类)、螯合剂、酶抑制剂(例如，蛋白酶抑制剂)、佐剂(例如，甘醇酸盐(glycocholate)、表面活性素、span 85和萘莫司他(nafamostat))、防腐剂(例如，苯扎氯铵或氯代丁醇)以及乙醇(通常最多为5％，但最多可能为20％，以重量计)。乙醇通常包括在气雾剂组合物中，因为其可以改进计量阀的功能，且在某些情况下还可以改进分散体的稳定性。
肺部制剂还可以包括表面活性剂，所述表面活性剂包括但不限于胆汁盐和美国专利号6,524,557和其参考文献中描述的那些，所述专利以全文引用的方式并入本文中。美国专利号6,524,557中描述的表面活性剂，例如C8-C16脂肪酸盐、胆汁盐、磷脂或烷基糖是有利的，因为据报道其中一些还增强了制剂中化合物的吸收。
同样适合于本发明的是干粉制剂，其包含与适当的载剂掺合并适于与干粉吸入器结合使用的治疗有效量的活性化合物。可以添加到干粉制剂中的吸收促进剂包括美国专利号6,632,456中描述的那些，所述文献以全文引用的方式并入本文中。PCT公开号WO 02/080884(所述文献以全文引用的方式并入本文中)描述了粉末表面改性的新方法。气雾剂可以包括以下中描述的那些：美国专利号5,230,884和5,292,499；PCT公开号WO 017/8694和01/78696；和美国专利申请公开号2003/019437、2003/0165436；和PCT公开号WO 96/40089(其包括植物油)，所述文献以全文引用的方式并入本文中。适合吸入的缓释制剂描述于美国专利申请公开号2001/0036481、2003/0232019和2004/0018243以及PCT公开号WO 01/13891、02/067902、03/072080和03/079885中，所述文献以全文引用的方式并入本文中。
含有微粒的肺部制剂描述于PCT公开号WO 03/015750、美国专利申请公开号2003/0008013和PCT公开号WO 00/00176，所述文献以全文引用的方式并入本文中。含有稳定玻璃态粉末的肺部制剂描述于美国专利申请公开号2002/0141945和美国专利号6,309,671，所述文献以全文引用的方式并入本文中。其它气雾剂描述于欧洲专利号1338272、PCT公开号WO 90/09781、美国专利号5,348,730和6,436,367、PCT公开号WO 91/04011、以及美国专利号6,294,153和6,290,987，所述文献以全文引用的方式并入本文中，其描述了可以通过雾化或其它方式施用的基于脂质体的制剂。
用于吸入的粉末制剂描述于美国专利申请公开号2003/0053960和PCT公开号WO01/60341，所述文献以全文引用的方式并入本文中。所述药剂可如美国专利申请公开号2001/0038824中所述经鼻内施用，所述文献以全文引用的方式并入本文中。
药物于缓冲盐水和类似媒介物中的溶液通常用于在雾化器中生成气雾剂。简单的雾化器按照伯努利原理(Bernoulli's principle)操作，并使用空气或氧气流产生喷雾颗粒。更复杂的雾化器采用超声波来产生喷雾颗粒。两种类型都是本领域中众所周知的，并描述于药学标准教科书中，例如Sprowls的《美国药学(American Pharmacy)》和Remington的《药学的科学与实践(The Science and Practice of Pharmacy)》。
用于产生气雾剂的其它装置使用压缩气体，通常是氢氟碳化合物和氯氟碳化合物，其在加压容器中与药物和任何必要的赋形剂混合。在标准教科书(例如Sprowls和Remington)中同样描述了这些装置。
可以将药剂掺入脂质体中以改良半衰期。药剂也可以与聚乙二醇(“PEG”)链缀合。PEG化的方法和其它含有PEG缀合物的制剂(例如，PEG基水凝胶、PEG修饰的脂质体)可以见于Harris和Chess,Nature Reviews Drug Discovery 2:214-221(所述文献以全文引用的方式并入本文中)以及其中的参考文献。所述药剂可以经由纳米耳蜗或耳蜗递送媒介(生物递送科学国际公司(BioDelivery Sciences International))施用。药剂可以使用诸如美国专利号5,204,108中所述的制剂经粘膜地(即，跨粘膜表面，如阴道、眼睛或鼻子)递送，所述文献以全文引用的方式并入本文中。可以将药剂配制成微胶囊，如PCT公开号WO 88/01165中所述，所述文献以全文引用的方式并入本文中。药剂可以使用美国专利申请公开号2002/0055496、PCT公开号WO 00/47203和美国专利号6,495,120中所述的制剂口内施用，所述文献以全文引用的方式并入本文中。药剂可以使用PCT公开号WO 01/91728中所述的纳米乳液制剂递送，所述文献以全文引用的方式并入本文中。
本发明的另一方面涉及一种治疗受试者胰岛素分泌水平不足相关病状的方法。所述方法涉及向需要治疗胰岛素分泌水平不足相关病状的受试者施用本发明的化合物或组合物。
在一个实施方案中，本发明的治疗方法在有效增加受试者中胰腺β细胞量的条件下进行以治疗受试者胰岛素分泌水平不足。
在一个实施方案中，化合物或组合物可以与TGFβ超家族信号传导通路抑制剂一起施用或同时施用。
如本文所用，胰岛素分泌水平不足相关病状意指这样的病状：受试者产生的胰岛素血浆水平低于维持血液中正常葡萄糖水平所需的胰岛素水平，从而使具有胰岛素分泌不足相关病状的受试者血糖过高。在此类病状中，患病受试者的胰腺β细胞分泌的胰岛素水平不足以维持血液中存在正常浓度的葡萄糖(即正常血糖)。
根据一个实施方案，胰岛素分泌水平不足相关病状之一是胰岛素抵抗。胰岛素抵抗是这样的病状：受试者的细胞对胰岛素的降糖作用变得不那么敏感。肌肉和脂肪细胞中的胰岛素抵抗减少了葡萄糖的摄取(且因此减少了葡萄糖作为糖原和甘油三酯的局部储存)，而肝细胞中的胰岛素抵抗导致糖原的合成和储存减少，并且无法抑制葡萄糖的产生和释放到血液中。胰岛素抵抗通常指胰岛素的降糖作用降低。但是，胰岛素的其它功能也会受到影响。举例来说，脂肪细胞中的胰岛素抵抗会降低胰岛素对脂质的正常作用，并导致循环脂质的摄取减少和储存的甘油三酯的水解增加。这些细胞中储存的脂质的动员能力增强，使得血浆中的游离脂肪酸升高。血液中脂肪酸浓度的升高、肌肉葡萄糖摄取的减少以及肝葡萄糖生成的增加，均导致血糖水平升高。如果存在胰岛素抵抗，则胰腺需要分泌更多的胰岛素。如果没有出现这种代偿性增加，则血糖浓度会增加并且会发生II型糖尿病。
根据另一个实施方案，胰岛素分泌水平不足相关病状之一是糖尿病。糖尿病可分为两大类疾病：I型(T1D)和II型(T2D)。术语“糖尿病”在本文中还指其中患者具有高血糖水平的一组代谢疾病，包括I型糖尿病(T1D)、II型糖尿病(T2D)、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、成年发病型糖尿病(MODY)、囊性纤维化相关糖尿病、血色素沉着症相关糖尿病、药物诱发的糖尿病(例如，类固醇糖尿病)或几种形式的单基因糖尿病。
因此，在一个实施方案中，已经诊断出受试者患有I型糖尿病(T1D)、II型糖尿病(T2D)、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、成年发病型糖尿病(MODY)、囊性纤维化相关糖尿病、血色素沉着症相关糖尿病、药物诱发的糖尿病或单基因糖尿病中的一种或多种。
根据另一个实施方案，胰岛素分泌水平不足相关病状是代谢综合症。代谢综合症通常用于定义与II型糖尿病和动脉粥样硬化性血管疾病发展风险增加相关的一系列异常。相关的病状和症状包括但不限于空腹高血糖(II型糖尿病或空腹血糖受损、葡萄糖耐量受损或胰岛素抵抗)、高血压；中心型肥胖(也称为内脏肥胖、男性肥胖或苹果形肥胖)，意味着超重，主要在腰部周围有脂肪沉积；HDL胆固醇降低；和甘油三酸酯升高。
在一个实施方案中，已经诊断出受试者患有代谢综合症或胰岛素抵抗。
可能与胰岛素分泌水平不足有关的其它病状包括但不限于高尿酸血症、脂肪肝(特别是并发肥胖)发展为非酒精性脂肪肝、多囊卵巢综合症(女性)和黑棘皮病。
相关病症也可以根据本发明的治疗方法进行治疗，包括但不限于与正常范围之外的血液或血浆葡萄糖水平有关的任何疾病，优选为高血糖症。因此，术语“相关病症”包括葡萄糖耐量受损(IGT)、空腹葡萄糖(IFG)受损、胰岛素抵抗、代谢综合症、餐后高血糖和超重/肥胖。此类相关病症的特征还可以在于血液和/或血浆胰岛素水平异常。
根据另一个实施方案，实施本发明的方法以治疗患有β细胞衰竭或缺乏相关病状的受试者。此类病状包括但不限于I型糖尿病(T1D)、II型糖尿病(T2D)、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、成年发病型糖尿病(MODY)、囊性纤维化相关糖尿病、血色素沉着症相关糖尿病、药物诱发的糖尿病或单基因糖尿病。药物诱发的糖尿病涉及通过使用对β细胞有毒的药物(例如，类固醇、抗抑郁药、第二代抗精神病药和免疫抑制剂)引起的病状。示例性的免疫抑制药物包括但不限于可的松家族的成员(例如强的松和地塞米松)、雷帕霉素(rapamycin)/西罗莫司(sirolimus)、依维莫司(everolimus)和钙调神经磷酸酶抑制剂(例如FK-506/他克莫司(tacrolimus))。
与β细胞缺乏症相关的其它病状包括胰腺切除术、部分胰腺切除术、胰腺移植和胰岛移植。
在另一个实施方案中，实施本发明的方法以治疗处于发生II型糖尿病风险下的受试者。在一个实施方案中，处于发生II型糖尿病风险下的患者患有糖尿病前期/代谢综合症。在另一个实施方案中，处于发生II型糖尿病风险下的患者已经用精神活性药物进行治疗，包括但不限于用于抑郁症、强迫症(OCD)等的选择性血清素再摄取抑制剂(“SSRI”)。
在实施本发明的治疗方法中，本发明的化合物或组合物和TGFβ超家族信号传导通路抑制剂在有效增加所述受试者中胰腺β细胞量的条件下施用，以治疗受试者胰岛素分泌水平不足相关病状。
根据一个实施方案，施用本发明的化合物或组合物和/或TGFβ超家族信号传导通路抑制剂以增加受试者中的胰腺β细胞量，这将引起受试者的胰岛素分泌水平增加。
根据一个实施方案，将本发明的化合物和/或组合物以及TGFβ超家族信号传导通路抑制剂配制为单独的药物组合物或包含式(I)的化合物和TGFβ超家族信号传导通路抑制剂两者的单一药物组合物。根据一个实施方案，此类药物组合物包含治疗有效量的式(I)的化合物和/或TGFβ超家族信号传导通路抑制剂。
因此，根据一个实施方案，施用本发明化合物和TGFβ超家族信号传导通路抑制剂的组合或组合疗法或治疗。术语“组合”或“组合疗法”或“组合治疗”是指将至少两种化合物共同施用给受试者以引起生物学效应，在这种情况下为协同效应的疗法。在组合疗法中，至少两种药物可以一起或分开地同时或依次施用。只要药物对受试者产生协同作用以改善受试者的病状，就不需要同时施用。同样，可以通过不同的途径和方案施用至少两种药物。结果，尽管至少两种药物可以一起配制，但是组合药物也可以单独配制。
本发明的另一方面涉及治疗受试者神经系统病症的方法。这种方法涉及向需要治疗神经系统病症的受试者在有效治疗所述受试者病状的条件下施用本发明的化合物。
在一个实施方案中，受试者患有糖尿病和/或已被诊断患有唐氏综合症和神经退行性疾病中的一种或多种。
在实施本发明的治疗方法中，向受试者施用化合物可以涉及以治疗有效量施用含有所述化合物(即，式(I)的DYRK1A抑制剂和TGFβ超家族信号传导通路抑制剂)的药物组合物，治疗有效量是指可有效治疗受试者所述病状和/或病症的化合物的量。这样的量通常根据完全在普通技术人员的能力范围内的许多因素而变化。这些因素包括但不限于：特定的受试者以及其年龄、体重、身高、一般身体状况和病史，所用的特定化合物、以及配制所述化合物的载剂和选择施用所述化合物的途径；治疗的时长或持续时间；以及所治疗病状的性质和严重程度。
施用通常涉及施用药学上可接受的剂型，这意指本文所述化合物的剂型，且包括例如片剂、糖衣丸、散剂、酏剂、糖浆剂、液体制剂(包括悬浮液)、喷雾剂、吸入剂、片剂、锭剂、乳液、溶液、颗粒、胶囊和栓剂，以及用于注射的液体制剂(包括脂质体制剂)。技术和制剂通常可以见于Remington’s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.,Easton,Pa.，最新版本，所述文献以全文引用的方式并入本文中。
在实施本发明的治疗方法中，可以以任何合适的量，以任何合适的载剂物质含有药物(即，式(I)的化合物，以及任选地，TGFβ超家族信号传导通路抑制剂)。药物可以以组合物总重量的至多99重量％的量存在。可以以适合于口服、肠胃外(例如，静脉内、肌内)、经直肠、经皮肤、经鼻、经阴道、吸入、经皮肤(贴剂)或眼内施用途径的剂型提供组合物。因此，组合物可以是呈例如片剂、胶囊、丸剂、散剂、颗粒、悬浮液、乳液、溶液、凝胶剂(包括水凝胶)、糊剂、软膏、乳膏、膏药、灌剂(drenches)、渗透递送装置、栓剂、灌肠剂、注射剂、植入物、喷雾剂或气雾剂的形式。
可以配制根据本发明的药物组合物，以基本上在施用后立即或在施用后的任何预定时间或时间段释放活性药物。
控释制剂包括(i)在延长的时间段内在体内产生基本恒定浓度的药物的制剂；(ii)在预定的滞后时间后，在延长的时间段内在体内产生基本恒定浓度的药物的制剂；(iii)通过在体内保持相对恒定有效的药物水平，并同时将与活性药物的血浆水平波动相关的不良副作用最小化，从而在预定的时间段内维持药物作用的制剂；(iv)通过例如在患病的组织或器官附近或之内空间放置控释组合物来使药物作用局部化的制剂；(v)通过使用载剂或化学衍生物将药物递送到特定靶细胞类型来靶向药物作用的制剂。
在药物具有(i)狭窄的治疗指数(即，导致有害副作用或毒性反应的血浆浓度与导致治疗效果的血浆浓度之间的差异很小；通常，治疗指数(“TI”)定义为半数致死量(LD50)与半数有效量(ED50)之比))；(ii)胃肠道的吸收窗口狭窄；(iii)生物半衰期非常短，因此需要在一天中频繁给药，以将血浆水平维持在治疗水平的情况下，特别优选以控释制剂形式施用药物。
可以采用多种策略中的任何一种来获得控释，其中释放速率大于所讨论药物的代谢速率。可以通过适当选择各种制剂参数和成分来获得控释，包括例如各种类型的控释组合物和包衣。因此，将药物与适当的赋形剂一起配制为药物组合物，所述药物组合物在施用后会以受控方式释放药物(单个或多个单位的片剂或胶囊组合物、油溶液、悬浮液、乳液、微胶囊、微球、纳米颗粒、贴剂和脂质体)。
因此，根据本发明的这个方面的施用可以口服、局部、透皮、肠胃外、皮下、静脉内、肌内、腹膜内、通过鼻内滴注、通过腔内或膀胱内滴注、眼内、动脉内、病灶内、或通过向粘膜施用进行。化合物可以单独施用或与合适的药物载剂一起施用，并且可以固体或液体形式施用，如片剂、胶囊、散剂、溶液、悬浮液或乳液。
受试者可以是哺乳动物受试者。在一个实施方案中，受试者是人受试者。合适的人受试者包括但不限于患有β细胞和/或胰岛素缺乏的儿童、成人和老年受试者。
在其它实施方案中，受试者可以是牛、羊、猪、猫、马、鼠、犬、兔(lapine)等。
在一个实施方案中，施用步骤可以使受试者中增殖的胰腺β细胞的数目增加至少约5％、6％、7％或更多。
在一些实施方案中，施用增加了受试者的胰腺β细胞中葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
在本发明这一方面和其它方面的一个实施方案中，化合物的名称意欲指所述化合物本身以及其任何药学上可接受的盐、水合物、异构体、外消旋体、酯或醚。化合物的名称意欲指具体指定的化合物本身以及其任何药学上可接受的盐。
在本发明的上下文中，“治疗”意指预防性或治疗性疗法。
在一个实施方案中，术语治疗特别是指葡萄糖稳态受损的校正、变化速率降低或减少。血液中的葡萄糖水平全天波动。葡萄糖水平通常在早晨，一天的第一餐之前较低，而在餐后升高持续几个小时。因此，术语治疗包括根据受试者的状况和白天的状况通过增加或减少血糖水平来控制血糖水平，以便达到正常的血糖水平。术语治疗更具体地包括患有糖尿病或相关病症的受试者的血糖水平的暂时或持续降低。术语“治疗(treatment/treating)”也表示胰岛素释放的改善(例如，通过胰腺β细胞)。
如本文所用，短语“血糖水平的控制”是指具有异常水平(即，低于或高于葡萄糖稳态正常的相应受试者的已知参考值、中位值或平均值的水平)的受试者的血液或血浆葡萄糖水平的正常化或调节。
实施例
实施例1-2的材料和方法
实施例1-X的材料和方法.1H和13C NMR光谱是在Bruker DRX-600光谱仪上以600MHz(用于1H)和150MHz(用于13C)采集的。在由吸附剂技术(Sorbent Technologies)提供的涂有二氧化硅的铝片(厚度为200μm)或涂有氧化铝的铝片(厚度为200μm)上进行TLC，并在配备了可变波长检测器和洗脱份收集器的Teledyne ISCO combiflash上使用Teledyne ISCO的RediSep Rf高效二氧化硅闪蒸柱进行柱色谱分离。LCMS分析是在连接到安捷伦科技(Agilent Technologies)1200HPLC系统的安捷伦科技G1969A高分辨率API-TOF质谱仪上进行的。通过电喷雾电离(ESI)以正模式将样品电离。在2.1×150mm Zorbax300SB-C18 5μm柱上进行色谱分离，其中含有0.1％甲酸的水作为溶剂A，且含有0.1％甲酸的乙腈作为溶剂B，流速为0.4mL/min。梯度程序如下：1％B(0-1分钟)，1-99％B(1-4分钟)和99％B(4-8分钟)。在整个分析中，柱温保持在50℃。化学药品和试剂购自Aldrich Co.、AlfaAesar和Enamine、TCI USA。所有溶剂均以无水形式购自Acros Organics，且不经进一步纯化即使用。
所有活性化合物均以分析纯形式独立合成。这些活性化合物化学性质稳定，并显示出剂量依赖性的DYRK1A结合，而没有由于任何聚集和分解而出现任何错误/误导性的读数，这在已知种类的泛筛选干扰化合物(PAINS)中普遍存在。
DYRK1A结合分析法.在两个不同的商业激酶分析服务，即Life Technologies和DiscoverX，测试了化合物的DYRK1A结合活性。Life Technologies使用基于FRET的
Figure BDA0002591742420000312
Eu激酶结合分析法，而DiscoverX使用专有
Figure BDA0002591742420000313
分析法(Fabian等人,“A Small Molecule-kinase Interaction Map for Clinical Kinase Inhibitors,”Nat.Biotechnol.23(3):329-336(2005)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。以30μM的单一浓度筛选化合物的DYRK1A活性，一式两份。类似地，在DiscoverX使用DiscoverX专有
Figure BDA0002591742420000314
分析法测定了来自初始筛选的命中化合物的解离常数Kd。使用十一种连续三倍稀释液(最高浓度为60μM)测定Kd值。
合成5-(2-氯乙酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物2).Kornberg等人,“Preparation of Piperidine Derivatives as Subtype Selective n-methyl-d-aspartate Antagonists Useful in the Treatment of Cerebral Vascular Disorders”和PCT公开号WO2002/050070，所述文献以全文引用的方式并入本文中：
Figure BDA0002591742420000311
在氩气气氛下于0℃下向氯化铝(5.16g，38.76mmol)于DCE(20mL)中的悬浮液中逐滴加入2-氯乙酰氯(2.34mL，29.8mmol)，并搅拌30分钟。将2-羟基苯并咪唑1(2g，14.9mmol)于DCE(5mL)中的溶液缓慢加入上述溶液中，并在50℃下搅拌2小时，然后在室温下过夜。通过LC/MS监测反应完成后，将混合物倒在冰上以获得呈白色沉淀状的产物，将所述产物过滤并用水和EtOAc洗涤。因此，将化合物在高真空下干燥，得到呈白色固体状的所需产物5-(2-氯乙酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物2)(3.1g，99％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.13(s,1H),10.98(s,1H),7.69-7.67(d,1H),7.49(s,1H),7.05-7.04(d,1H),5.13(s,2H)；LCMS(TOF-ESI)，对于C9H7ClN2O2[M]210.0196；计算值：211.0266；实验值[M+H]+211.0261。
合成N-苄基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺盐酸盐(化合物1).Pfeiffer等人,“Unexpected Ring Enlargement of 2-Hydrazono-2,3-dihydro-1,3-thiazoles to 1,3,4-Thiadiazines,”Helv.Chim.Acta.97(1):76-87(2014)，所述文献以全文引用的方式并入本文中：
Figure BDA0002591742420000321
将5-(2-氯乙酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物2)(0.15g，0.714mmol，1当量)和N-苄基肼甲硫酰胺(0.15g，1.1当量)于DMF/HOAc(2mL/0.2mL)中的溶液在室温下搅拌12小时。通过LC/MS监测反应完成后，将混合物在高真空下浓缩以除去溶剂，残余物用CH2Cl2湿磨，将沉淀物用CH2Cl2洗涤并在高真空下干燥，得到呈白色固体状的所需产物1(0.22g，90％)。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.01(s,1H),10.94(s,1H),.54-7.53(d,1H),7.48(s,1H),7.44-7.39(m,4H),7.37-7.35(m,1H),7.07-7.05(d,1H),4.71(s,H),4.22(s,2H)；13C-NMR(150MHz,d6-DMSO):δ158.87,155.41,152.13,135.79,132.82,30.31,128.73,127.94,125.19,120.73,108.53,106.60,47.31,22.21；HRMS(ESI):m/z[M+H]+C17H16N5OS+的计算值：338.1070，实验值：338.1070；纯度>95％。
合成化合物3的一般程序.Pfeiffer等人,“Unexpected Ring Enlargement of -Hydrazono-2,3-dihydro-1,3-thiazoles to 1,3,4-Thiadiazines,”Helv.Chim.Acta.7(1):76-87(2014)，所述文献以全文引用的方式并入本文中：
Figure BDA0002591742420000322
将5-(2-氯乙酰基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物2)(0.47mmol，1当量)和N-烷基肼甲硫酰胺(1.1当量)于DMF/HOAc(2mL/0.2mL)中的溶液在室温下搅拌12小时。通过LC/MS监测反应完成后，将混合物在高真空下浓缩以除去溶剂，并将氨水溶液加入其中。将所得的沉淀物过滤，用水洗涤并在高真空下干燥，得到所需1,3,4-噻二嗪(化合物3)。
N-苄基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-1)
Figure BDA0002591742420000323
黄色固体。产率90％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.76(s,1H),10.75(s,1H),7.51(s,1H),7.45(m,2H),7.34(m,3H),7.24(m,1H),6.95(d,1H,J＝7.8Hz),4.56(s,2H),3.65(s,2H)；MS(ESI)m/z 338.16(M+H)+。
N-甲基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-2)
Figure BDA0002591742420000331
黄色固体。产率88％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.79(s,1H),10.78(s,1H),7.48(s,1H),7.46(m,2H),6.97(d,1H,J＝7.8Hz),3.70(s,2H),2.90(s,3H)；MS(ESI)m/z 262.34(M+H)+。
N-乙基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-3)
Figure BDA0002591742420000332
黄色固体。产率62％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.47(s,1H),7.46(m,2H),6.97(d,1H,J＝8.4Hz),3.65(s,2H),3.36(m,2H),1.15(t,3H,J＝7.2Hz)；MS(ESI)m/z 276.32(M+H)+。
N-丙基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-4)
Figure BDA0002591742420000333
黄色固体。产率52％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.47(s,1H),7.46(m,2H),6.97(d,1H,J＝8.4Hz),3.65(s,2H),3.28(m,2H),1.57(m,2H),0.90(t,3H,J＝7.2Hz)；MS(ESI)m/z 290.46(M+H)+。
N-丁基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-5)
Figure BDA0002591742420000334
黄色固体。产率43％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.75(s,2H),7.47(s,1H),7.45(m,2H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),3.64(s,2H),1.54(m,2H),1.34(m,2H),0.90(t,3H,J＝7.2Hz)；MS(ESI)m/z 304.71(M+H)+。
N-异丙基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-6)
Figure BDA0002591742420000341
黄色固体。产率73％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.47(s,1H),7.46(m,2H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),4.11(s,1H),3.67(s,2H),1.16(t,3H,J＝6.6Hz)；MS(ESI)m/z 290.35(M+H)+。
N-叔丁基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-7)
Figure BDA0002591742420000342
黄色固体。产率79％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,2H),7.48(s,1H),7.46(m,2H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),6.48(s,1H),3.61(s,2H),1.40(s,9H)；MS(ESI)m/z 304.21(M+H)+。
N-(3-甲基丁基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-8)
Figure BDA0002591742420000343
黄色固体。产率68％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.76(s,2H),7.47(s,1H),7.45(m,2H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),3.65(s,2H),3.36(m,1H),1.63(m,2H),1.46(m,2H),1.34(m,2H),0.90(d,6H,J＝6.6Hz)；MS(ESI)m/z 318.73(M+H)+。
N-环己基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-9)
Figure BDA0002591742420000344
黄色固体。产率80％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.75(s,2H),7.47(s,1H),7.45(d,1H,J＝7.8Hz),6.95(d,1H,J＝8.4Hz),6.86(s,1H),3.81(s,1H),3.62(s,2H),1.93(m,2H),1.72(m,2H),1.59(m,1H),1.28(m,4H),1.14(m,1H)；MS(ESI)m/z 331.12(M+H)+。
N-(2-环己基甲基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-10)
Figure BDA0002591742420000351
黄色固体。产率45％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.45(m,2H),6.96(d,1H,J＝7.8Hz),3.66(s,2H),3.18(m,2H),1.67(m,6H),1.20(m,3H),0.92(m,2H)；MS(ESI)m/z 344.95(M+H)+。
N-(2-(N-吗啉基)乙基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-11)
Figure BDA0002591742420000352
黄色固体。产率44％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.47(s,1H),7.46(m,1H),6.96(d,1H,J＝7.8Hz),3.65(m,2H),3.58(m,4H),3.46(m,2H),2.52(m,2H),2.42(m,4H)；MS(ESI)m/z 361.15(M+H)+。
N-(4-氯苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-12)
Figure BDA0002591742420000353
黄色固体。产率53％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.51(s,1H),7.45(m,2H),7.38(m,3H),6.95(d,1H,J＝8.4Hz),4.53(s,2H),3.65(s,1H)；MS(ESI)m/z 374.22(M+H)+。
N-(3-氯苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-13)
Figure BDA0002591742420000361
黄色固体。产率49％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.79(s,1H),10.77(s,1H),7.46(d,2H,J＝7.2Hz),7.41(s,1H),7.36(d,1H,J＝7.8Hz),7.33(d,2H,J＝6.6Hz),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),4.56(s,2H),3.72(s,2H)；MS(ESI)m/z 372.54(M+H)+。
N-(2-氯苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-14)
Figure BDA0002591742420000362
黄色固体。产率57％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.79(s,1H),10.77(s,1H),7.46(m,3H),7.32(m,3H),6.96(d,1H,J＝9Hz),4.61(s,2H),3.73(s,2H)；MS(ESI)m/z 372.38(M+H)+。
N-(4-氟苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-15)
Figure BDA0002591742420000363
黄色固体。产率36％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.45(m,2H),7.39(m,2H),7.15(t,3H,J＝9Hz),6.94(d,1H,J＝8.4Hz),4.53(s,2H),3.67(s,2H)；MS(ESI)m/z 356.83(M+H)+。
N-(3-氟苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-16)
Figure BDA0002591742420000364
黄色固体。产率62％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.78(s,1H),10.77(s,1H),7.46(d,2H,J＝7.2Hz),7.38(m,1H),7.17(m,2H),7.08(m,1H),6.96(d,1H,J＝7.8Hz),4.56(s,2H),3.70(s,2H)；MS(ESI)m/z 356.09(M+H)+。
N-(2-氟苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-17)
Figure BDA0002591742420000371
黄色固体。产率44％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.81(s,1H),10.79(s,1H),7.46(m,3H),7.33(m,1H),7.20(m,2H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),4.61(s,2H),3.76(s,2H)；MS(ESI)m/z 356.79(M+H)+。
N-(4-三氟甲基苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-18)
Figure BDA0002591742420000372
黄色固体。产率33％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.71(d,2H,J＝7.8Hz),7.56(d,2H,J＝7.8Hz),7.46(d,2H,J＝7.8Hz),6.95(d,1H,J＝9Hz),4.63(s,2H),3.66(s,2H)；MS(ESI)m/z 406.92(M+H)+。
N-(3-三氟甲基苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-19)
Figure BDA0002591742420000373
黄色固体。产率54％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.78(s,1H),10.77(s,1H),7.70(m,1H),7.68(d,2H,J＝7.2Hz),7.61(m,2H),7.46(m 2H),6.95(d,1H,J＝8.4Hz),4.64(s,2H),3.68(s,2H)；MS(ESI)m/z 406.92(M+H)+。
N-(2-三氟甲基苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-20)
Figure BDA0002591742420000381
黄色固体。产率23％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.78(s,1H),10.77(s,1H),7.73(d,1H,J＝7.8Hz),7.67(d,2H,J＝7.2Hz),7.61(m,1H),7.48(m 2H),6.95(d,1H,J＝8.4Hz),4.75(s,2H),3.72(s,2H)；MS(ESI)m/z 406.71(M+H)+。
N-(4-氰基苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-21)
Figure BDA0002591742420000382
黄色固体。产率45％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.81(d,2H,J＝8.4Hz),7.65(s,1H),7.54(d,2H,J＝7.8Hz),7.46(m,2H),6.94(d,1H,J＝8.4Hz),4.62(s,2H),3.67(s,2H)；MS(ESI)m/z 363.77(M+H)+。
N-(3-氰基苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-22)
Figure BDA0002591742420000383
黄色固体。产率45％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.74(s,1H),7.79(s,1H),7.72(m,2H),7.56(t,1H,J＝7.8Hz),7.46(m,2H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),4.59(s,2H),3.71(s,2H)；MS(ESI)m/z 363.81(M+H)+。
N-(吡啶-3基)甲基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-23)
Figure BDA0002591742420000384
黄色固体。产率43％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),8.57(s,1H),8.45(s,1H),7.76(d,1H,J＝6.6Hz),7.57(s,1H),7.46(m,1H),7.36(m,1H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),4.57(s,2H),3.66(s,2H)；MS(ESI)m/z 339.16(M+H)+。
N-(吡啶-4基)甲基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-24)
Figure BDA0002591742420000391
黄色固体。产率34％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),8.51(m,2H),7.46(m,2H),7.34(m,2H),6.96(d,1H,J＝9Hz),4.56(s,2H),3.70(s,2H)；MS(ESI)m/z 339.11(M+H)+。
合成化合物4的一般程序.在0℃下，向3-24或3-25(0.091mmol)于DMSO(1mL)中的溶液中加入50％过氧化氢溶液(0.013mL)，然后加入碳酸钾(0.015当量)。使反应混合物升温到室温，并搅拌过夜。反应完成后，将反应混合物真空干燥并以MeOH/DCM/NH3(10:89:1)的混合物作为洗脱剂使用快速色谱法纯化，得到呈黄色固体状的最终产物。
N-(4-羧氨基苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物4-1)
Figure BDA0002591742420000392
黄色固体。产率14％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.92(m,2H),7.84(m,2H),7.46(m,2H),7.40(m,2H),7.30(m,1H),6.94(d,1H,J＝7.8Hz),4.59(s,2H),3.68(s,2H)；MS(ESI)m/z 381.11(M+H)+。
N-(3-羧氨基苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物4-2)
Figure BDA0002591742420000393
黄色固体。产率42％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),7.95(m,2H),7.86(m,1H),7.75(m,1H),7.51(m,1H),7.47(m,2H),7.40(m,1H),7.34(m,1H),6.96(d,1H,J＝7.8Hz),4.59(s,2H),3.68(s,2H)；MS(ESI)m/z 381.11(M+H)+。
N-(1-苯乙基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-25)
Figure BDA0002591742420000401
黄色固体。产率41％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.76(s,1H),10.75(s,1H),7.42(m,2H),7.36(d,2H,J＝7.2Hz),7.32(m,2H),7.21(m,1H),6.94(d,1H,J＝7.8Hz),5.20(s,1H),3.72(s,1H),3.52(s,1H),1.43(d,3H,J＝7.2Hz)；MS(ESI)m/z 352.79(M+H)+。
N-(1-(4-氟苯基)乙基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-26)
Figure BDA0002591742420000402
黄色固体。产率41％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.82(s,1H),10.80(s,1H),7.43(m,4H),7.17(m,2Hz),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),5.15(s,1H),3.81(m,1H),3.67(m,1H),1.44(d,3H,J＝6.6Hz)；MS(ESI)m/z 370.72(M+H)+。
N-(3-氰基-4-氟-苄基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-27)
Figure BDA0002591742420000403
黄色固体。产率48％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.78(s,1H),10.77(s,1H),7.88(m,1H),7.77(m,1H),7.51(t,1H,J＝9Hz),7.46(m,2H),6.95(d,1H,J＝9Hz),4.56(s,2H),3.70(s,2H)；MS(ESI)m/z 381.30(M+H)+。
N-苯基-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-28)
Figure BDA0002591742420000404
黄色固体。产率66％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.82(s,1H),10.80(s,1H),7.39(m,2H),7.30(m,2H),7.02(m,2H),6.96(m,1H),6.83(m,2H),3.89(s,2H)；MS(ESI)m/z324.67(M+H)+。
N-(3-氟苯基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-29)
Figure BDA0002591742420000411
黄色固体。产率69％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.83(s,1H),10.81(s,1H),7.49(m,2H),7.30(m,2H),7.36(m,2H),7.05(m,1H),6.98(d,1H,J＝7.2Hz),6.66(m,1H),3.91(s,2H)；MS(ESI)m/z 342.41(M+H)+。
N-(3-三氟甲基苯基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-30)
Figure BDA0002591742420000412
黄色固体。产率74％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.84(s,1H),10.82(s,1H),7.54(m,2H),7.36(m,2H),7.15(m,2H),6.98(d,1H,J＝7.8Hz),3.92(s,2H)；MS(ESI)m/z392.36(M+H)+。
N-(3-氰基苯基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-31)
Figure BDA0002591742420000413
黄色固体。产率68％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.84(s,1H),10.81(s,1H),7.51(m,3H),7.41(m,2H),7.17(m,2H),6.98(d,1H,J＝7.2Hz),3.94(s,2H)；MS(ESI)m/z349.12(M+H)+。
N-(4-氟苯基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-32)
Figure BDA0002591742420000414
黄色固体。产率74％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.82(s,1H),10.79(s,1H),7.41(m,3H),7.13(t,2H,J＝9Hz),6.98(d,1H,J＝7.8Hz),6.84(m,1H),3.89(s,2H)；MS(ESI)m/z342.43(M+H)+。
N-(4-氟苯基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-33)
Figure BDA0002591742420000421
黄色固体。产率67％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.82(s,1H),10.80(s,1H),7.82(m,1H),7.58(m,1H),7.38(m,3H),6.98(d,1H,J＝7.8Hz),6.84(m,1H),3.89(s,2H)；MS(ESI)m/z 358.44(M+H)+。
N-(2-苯乙基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-34)
Figure BDA0002591742420000422
黄色固体。产率60％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.78(s,1H),10.77(s,1H),7.48(m,2H),7.30(m,2H),7.26(m,2H),7.21(m,1H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),3.69(s,2H),3.56(m,2H),2.89(m,2H)；MS(ESI)m/z 352.71(M+H)+。
N-(2-(4-氟苯基)乙基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-35)
Figure BDA0002591742420000423
黄色固体。产率43％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.78(s,1H),10.77(s,1H),7.48(m,2H),7.29(m,2H),7.13(t,2H,J＝8.4Hz),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),3.68(s,2H),3.54(m,2H),2.88(t,2H,J＝7.2Hz)；MS(ESI)m/z 370.21(M+H)+。
N-(2-(4-氯苯基)乙基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-36)
Figure BDA0002591742420000431
黄色固体。产率60％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.78(s,1H),10.77(s,1H),7.48(m,2H),7.36(d,2H,J＝8.4Hz),7.29(d,2H,J＝8.4Hz),6.96(d,1H,J＝7.8Hz),3.69(s,2H),3.55(m,2H),2.90(t,2H,J＝7.2Hz)；MS(ESI)m/z 386.30(M+H)+。
N-(3-苯丙基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-37)
Figure BDA0002591742420000432
黄色固体。产率41％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.03(s,1H),10.98(s,1H),7.51(d,1H,J＝8.4Hz),7.46(s,1H),7.32(m,3H),7.24(m,1H),7.05(d,1H,J＝8.4Hz),4.15(s,2H),3.68(s,2H),3.16(m,1H),1.28(d,3H,J＝6.6Hz)；MS(ESI)m/z 366.99(M+H)+。
N-(2-(吡啶-1-基)乙基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-38)
Figure BDA0002591742420000433
黄色固体。产率44％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,1H),10.76(s,1H),8.51(d,1H,J＝4.8Hz),7.71(m,1H),7.47(m,2H),7.22(t,1H,J＝4.8Hz),6.94(d,1H,J＝8.4Hz),3.65(m,2H),3.04(t,2H,J＝7.2Hz)；MS(ESI)m/z 353.45(M+H)+。
N-(2-(吡啶-3-基)乙基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-39)
Figure BDA0002591742420000434
黄色固体。产率25％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.75(s,2H),8.46(s,1H),8.42(m,1H),7.68(d,1H,J＝7.2Hz),7.46(m,2H),7.33(m,1H),6.94(d,1H,J＝8.4Hz),3.65(m,2H),3.58(m,2H),2.91(t,2H,J＝7.2Hz)；MS(ESI)m/z 353.14(M+H)+。
N-(2-萘甲基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-40)
Figure BDA0002591742420000441
黄色固体。产率39％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.78(s,1H),10.76(s,1H),7.88(m,3H),7.84(m,1H),7.49(m,3H),7.48(m,5H),6.96(d,1H,J＝8.4Hz),4.73(s,2H),3.70(s,2H)；MS(ESI)m/z 388.77(M+H)+。
N-(1-萘甲基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-41)
Figure BDA0002591742420000442
黄色固体。产率75％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.78(s,1H),10.76(s,1H),8.11(d,1H,J＝8.4Hz),7.95(m,1H),7.86(d,1H,J＝7.8Hz),7.56(m,3H),7.48(m,3H),6.96(d,1H,J＝7.8Hz),5.03(s,2H),3.70(s,2H)；MS(ESI)m/z 388.76(M+H)+。
N-(1-萘基)-5-(苯并[d]咪唑-2(3H)-酮)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物3-42)
Figure BDA0002591742420000443
黄色固体。产率56％。1H-NMR(600MHz,d4-甲醇):δ11.52(s,1H),10.82(s,1H),10.79(s,1H),8.00(d,1H,J＝7.8Hz),7.89(d,1H,J＝7.8Hz),7.61(d,1H,J＝7.8Hz),7.49(m,2H),7.42(m,3H),6.96(d,1H,J＝7.8Hz),6.82(s,1H),3.91(s,2H)；MS(ESI)m/z 374.84(M+H)+。
5-(2-(环丙基氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-43)
Figure BDA0002591742420000444
黄色固体。产率86％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.76(m,2H),7.42(m,2H),6.94(d,1H,J＝7.3Hz),3.70(s,2H),2.76(s,1H),0.67(m,2H),0.47(m,2H)；MS(ESI)m/z288.0997(M+H)+。
5-(2-(环戊基氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-44)
Figure BDA0002591742420000451
黄色固体。产率83％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.74(m,2H),7.45(m,2H),6.94(m,2H),4.23(m,1H),3.62(s,2H),1.87(s,2H),1.65(m,2H),1.50(m,4H)；MS(ESI)m/z316.1362(M+H)+。
5-(2-(环丁基氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-45)
Figure BDA0002591742420000452
黄色固体。产率81％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.75(m,2H),7.44(m,2H),7.25(br,1H),6.94(d,1H,J＝8.5Hz),4.38(br,1H),3.62(s,2H),2.22(m,2H),1.95(m,2H),1.64(m,2H)；MS(ESI)m/z 302.1182(M+H)+。
5-(2-((环丁基甲基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-46)
Figure BDA0002591742420000453
黄色固体。产率75％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.75(s,2H),7.45(m,2H),6.96(m,2H),3.62(s,2H),3.36(s,2H),2.56(s,1H),2.00(m,2H),1.82(m,2H),1.69(m,2H)；MS(ESI)m/z 316.1139(M+H)+。
5-(2-((环丙基甲基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-47)
Figure BDA0002591742420000461
黄色固体。产率41％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.74(s,2H),7.45(m,2H),7.09(br,1H),6.94(d,1H,J＝8.5Hz),3.63(s,2H),3.19(s,2H),1.08(s,1H),0.43(m,2H),0.20(m,2H),1.69(m,2H)；MS(ESI)m/z 302.1102(M+H)+。
5-(2-((环戊基甲基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-48)
Figure BDA0002591742420000462
黄色固体。产率59％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.75(s,2H),7.45(m,2H),7.05(br,1H),6.94(d,1H,J＝8.5Hz),3.64(s,2H),3.24(s,2H),2.18(m,1H),1.69(m,2H),1.57(m,2H),1.49(m,2H),1.22(m,2H)；MS(ESI)m/z 330.1456(M+H)+。
5-(2-((2-环戊基乙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-49)
Figure BDA0002591742420000463
黄色固体。产率65％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.75(s,2H),7.45(m,2H),6.70(m,2H),3.64(s,2H),3.34(s,2H),1.75(m,3H),1.56(m,4H),1.48(m,2H),1.09(m,2H)；MS(ESI)m/z 344.1815(M+H)+。
5-(2-((3-吗啉基丙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-50)
Figure BDA0002591742420000464
棕色固体。产率21％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.75(m,2H),7.45(m,2H),7.00(br,1H),6.70(m,2H),6.95(d,1H,J＝8.5Hz),3.60(m,6H),3.35(s,2H),2.34(m,6H),1.72(m,2H)；MS(ESI)m/z 375.1600(M+H)+。
5-(2-((3-(二甲氨基)丙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-51)
Figure BDA0002591742420000471
棕色固体。产率57％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.76(m,2H),7.45(m,2H),7.00(m,2H),3.65(s,2H),3.35(m,6H),2.28(m,6H),1.74(m,2H)；MS(ESI)m/z 375.1600(M+H)+。
5-(2-(((四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-52)
Figure BDA0002591742420000472
黄色固体。产率60％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.76(m,2H),7.45(m,2H),6.95(d,1H,J＝7.3Hz),4.03(m,1H),3.64(m,3H),3.38(s,2H),1.91(m,1H),1.82(m,2H),1.57(m,1H)；MS(ESI)m/z 332.1184(M+H)+。
5-(2-((2-(二甲氨基)乙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-53)
Figure BDA0002591742420000473
黄色固体。产率34％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(m,2H),7.48(m,2H),6.96(d,1H,J＝8.5Hz),6.89(br,1H),3.65(m,2H),3.45(s,2H),3.31(s,2H),2.21(s,6H)；MS(ESI)m/z 319.1354(M+H)+。
5-(2-((2-(二甲氨基)乙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-54)
Figure BDA0002591742420000481
黄色固体。产率64％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(s,2H),7.47(m,2H),7.23(br,1H),6.95(d,1H,J＝7.3Hz),3.69(m,4H),3.43(m,2H),3.03(s,3H)；MS(ESI)m/z354.0693(M+H)+。
5-(2-((2-(二甲氨基)乙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-55)
Figure BDA0002591742420000482
黄色固体。产率52％。1H-NMR(600MHz,d4-甲醇):δ7.53(s,1H),7.46(d,1H,J＝8.5Hz),7.09(d,1H,J＝8.5Hz),3.63(s,2H),3.55(t,1H,J＝6.1Hz),2.49(m,10),2.23(s,3H)；MS(ESI)m/z 374.1752(M+H)+。
5-(2-((2-(二甲氨基)乙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-56)
Figure BDA0002591742420000483
黄色固体。产率47％。1H-NMR(600MHz,d4-甲醇):δ7.54(s,1H),7.48(d,1H,J＝8.5Hz),7.04(d,1H,J＝8.5Hz),3.66(s,2H),3.46(t,1H,J＝7.3Hz),2.61(m,10H),2.33(s,3H),1.83(m,2H)；MS(ESI)m/z 388.1905(M+H)+。
5-(2-((2-(哌啶-1-基)乙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-57)
Figure BDA0002591742420000491
黄色固体。产率57％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.77(m,2H),7.47(s,1H),7.45(d,1H,J＝7.3Hz),6.95(d,1H,J＝8.5Hz),3.65(s,2H),3.45(s,2H),3.33(s,3H),1.45(m,8H)；MS(ESI)m/z 359.1669(M+H)+。
5-(2-((2-甲氧基乙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-58)
Figure BDA0002591742420000492
黄色固体。产率56％。1H-NMR(600MHz,d4-甲醇):δ7.61(s,1H),7.56(d,1H,J＝8.5Hz),7.12(d,1H,J＝8.5Hz),3.74(s,2H),3.64(m,4H),3.40(s,3H)；MS(ESI)m/z306.1024(M+H)+。
5-(2-((3-甲氧基丙基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物3-59)
Figure BDA0002591742420000493
黄色固体。产率59％。1H-NMR(600MHz,d4-甲醇):δ7.56(m,2H),7.10(s,1H),3.69(s,2H),3.50(m,4H),3.34(s,3H),1.90(s,2H)；MS(ESI)m/z 320.1195(M+H)+。
合成化合物6的一般程序
Figure BDA0002591742420000494
向化合物5-1或5-2(2.78mmol，1当量)于THF(20mL)中的溶液中添加1,1’-羰基二咪唑(4.16mmol，1.5当量)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。用水淬灭后，将水层用EtOAc(2×40mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残余物以EtOAc/己烷(30:70)的混合物作为洗脱剂使用快速色谱法进行纯化，得到化合物6。
1-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酸甲酯(化合物6-1)
Figure BDA0002591742420000501
灰色固体。产率83％。1H-NMR(600MHz,d4-甲醇):δ7.84(d,1H,J＝8.5Hz),7.69(d,1H,J＝2.4Hz),7.17(d,1H,J＝8.5Hz),3.89(s,3H),3.41(s,3H)；MS(ESI)m/z 207.0753(M+H)+。
3-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酸甲酯(化合物6-2)
Figure BDA0002591742420000502
浅黄色固体。产率92％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ9.36(s,1H),7.88(d,1H,J＝8.5Hz),7.72(s,1H),7.15(d,1H,J＝7.3Hz),3.96(s,3H),3.50(s,3H)；MS(ESI)m/z207.0768(M+H)+。
合成化合物7的一般程序
Figure BDA0002591742420000503
向化合物6-1或6-2(1.46mmol，1当量)于THF/H2O(5/1.5mL)中的溶液中加入氢氧化锂(4.36mmol，3当量)。将反应物在60℃下搅拌16小时。冷却后，将反应混合物通过1N HCl调节到pH 2。除去溶剂，且粗产物无需进一步纯化即用于下一步骤。将粗产物溶解在DMF(15mL)中，然后加入N,O-二甲基羟胺盐酸盐(2.18mmol，1.5当量)、HATU(1.75mmol，1.2当量)和Et3N(0.61mL，3当量)。将反应物在室温下搅拌16小时。用水淬灭后，将水层用EtOAc(2×40mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残余物以DCM/MeOH(95:5)的混合物作为洗脱剂使用快速色谱法进行纯化，得到化合物7。
N-甲氧基-N,1-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物7-1)
Figure BDA0002591742420000511
黑色固体。经两个步骤，产率73％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ9.99(s,1H),7.54(m,2H),6.98(d,1H,J＝7.3Hz),3.55(s,3H),3.45(s,3H),3.37(s,3H)；MS(ESI)m/z 236.1030(M+H)+。
N-甲氧基-N,3-二甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(化合物7-2)
Figure BDA0002591742420000512
黄色固体。经两个步骤，产率27％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ11.02(s,1H),7.50(d,1H,J＝6.1Hz),7.40(s,1H),7.11(d,1H,J＝8.5Hz),3.56(s,3H),3.42(s,3H),3.37(s,3H)；MS(ESI)m/z 236.1035(M+H)+。
合成化合物8的一般程序
Figure BDA0002591742420000513
在0℃下，向化合物7(0.15mmol，1当量)于THF(1.5mL)中的溶液中加入3M MeMgCl(0.44mmol，3当量)。将温度缓慢升高到室温。将反应物搅拌2小时。用NH4Cl水溶液淬灭后，水层用EtOAc(2×10mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残余物以EtOAc/己烷(80:20)的混合物作为洗脱剂使用快速色谱法进行纯化，得到化合物8。
5-乙酰基-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物8-1)
Figure BDA0002591742420000514
黄色固体。产率55％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ7.76(d,1H,J＝8.5Hz),7.69(s,1H),6.99(d,1H,J＝8.5Hz),3.44(s,3H),2.60(s,3H)；MS(ESI)m/z 191.0804(M+H)+。
6-乙酰基-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物8-2)
Figure BDA0002591742420000521
黄色固体。产率95％。1H-NMR(600MHz,CDCl3):δ8.80(s,1H),7.78(d,1H,J＝7.3Hz),7.68(s,1H),7.13(d,1H,J＝8.5Hz),3.50(s,3H),2.66(s,3H)；MS(ESI)m/z191.0820(M+H)+。
合成化合物9的一般程序
Figure BDA0002591742420000522
将化合物8(0.35mmol，1当量)和CuBr2(0.70mmol，2当量)于DCM/EtOAc/EtOH(1/1/1mL)中的溶液回流16小时。真空除去溶剂，且粗产物以EtOAc/己烷(80:20)的混合物作为洗脱剂使用快速色谱法进行纯化，得到化合物9。
5-(2-溴乙酰基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物9-1)
Figure BDA0002591742420000523
棕色固体。产率32％。1H-NMR(600MHz,d4-甲醇):δ7.87(d,1H,J＝9.8Hz),7.70(s,1H),7.21(d,1H,J＝8.5Hz),4.62(s,2H),3.43(s,3H)；MS(ESI)m/z 268.9970,270.9885(M+H)+。
6-(2-溴乙酰基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物9-2)
Figure BDA0002591742420000524
白色固体。产率58％。1H-NMR(600MHz,d4-甲醇):δ7.77(d,1H,J＝8.5Hz),7.66(s,1H),7.11(d,1H,J＝8.5Hz),4.46(s,2H),3.47(s,3H)；MS(ESI)m/z 268.9923,270.9896(M+H)+。
N-甲氧基-N,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-甲酰胺(化合物11)
Figure BDA0002591742420000531
将化合物10(0.57mmol，1当量)悬浮于SOCl2(2mL)中。反应物用氮气吹扫，然后回流18小时。真空除去SOCl2。将粗产物溶解在DCM(4mL)中，然后加入N,O-二甲基羟胺盐酸盐(0.74mmol，1.3当量)和Et3N(2.27mmol，4当量)。将反应混合物在55℃下搅拌5小时。用水淬灭后，将水层用DCM(2×10mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残余物以DCM/MeOH(95:5到90:10)的混合物作为洗脱剂使用快速色谱法进行纯化，得到呈黄色油状物的化合物11(29.5mg，24％)。1H-NMR(600MHz,CD3Cl):δ10.75(br,1H),7.87(s,1H),7.52(d,1H,J＝7.3Hz),7.43(d,1H,J＝7.3Hz),3.56(s,3H),3.38(s,3H),2.54(s,3H)；MS(ESI)m/z 220.1085(M+H)+。
1-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙酮(化合物12)
Figure BDA0002591742420000532
在0℃下，向化合物11(0.27mmol，1当量)于THF(3mL)中的溶液中加入3M MeMgCl(0.82mmol，3当量)。将温度缓慢升高到室温。将反应物搅拌3小时。用NH4Cl水溶液淬灭后，水层用EtOAc(2×15mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残余物以DCM/MeOH(95:5到90:10)的混合物作为洗脱剂使用快速色谱法进行纯化，得到呈白色固体状的化合物12(23.6mg，49％)。1H-NMR(600MHz,CD3Cl):δ8.16(s,1H),7.85(d,1H,J＝8.5Hz),7.53(d,1H,J＝8.5Hz),6.15(br,1H),2.64(s,3H),2.63(s,3H)；MS(ESI)m/z175.0872(M+H)+。
合成化合物13的一般程序
Figure BDA0002591742420000533
向HBr(0.15mmol，1.07当量)于AcOH(1mL)中的溶液中添加化合物12(0.14mmol，1当量)。加入Br2(0.14mmol，1.01当量)于AcOH(0.18mL)中的溶液。将反应物在40℃下搅拌30分钟，然后将反应物在冰浴中冷却。用EtOAc(3mL)湿磨，得到化合物13。
2-溴-1-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)乙酮氢溴酸盐(化合物13-1)
Figure BDA0002591742420000541
白色固体。产率88％。MS(ESI)m/z 252.9970,254.9955(M+H)+。
1-(1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-溴乙酮氢溴酸盐(化合物13-2)
Figure BDA0002591742420000542
棕色固体。定量产率。MS(ESI)m/z 238.9814,240.9796(M+H)+。
按照化合物3的程序合成化合物14-1至14-8。
5-(2-((4-氟苄基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物14-1)
Figure BDA0002591742420000543
黄色固体。产率37％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ10.99(s,1H),7.54(m,3H),7.38(m,1H),7.14(m,3H),4.53(d,2H,J＝4.9Hz),3.67(s,2H),3.29(s,3H)；MS(ESI)m/z370.1137(M+H)+。
5-(2-(苄氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物14-2)
Figure BDA0002591742420000544
浅黄色固体。产率99％。1H-NMR(600MHz,d4-甲醇):δ7.62(m,2H),7.37(m,4H),7.29(m,1H),7.18(d,1H,J＝8.5Hz),4.67(s,2H),3.90(s,2H),3.41(s,3H)；MS(ESI)m/z352.1235(M+H)+。
6-(2-((4-氟苄基)氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物14-3)
Figure BDA0002591742420000551
浅黄色固体。产率93％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.23(s,1H),7.62(s,1H),7.59(d,1H,J＝8.5Hz),7.45(m,2H),7.24(m,2H),7.01(d,1H,J＝7.3Hz),4.68(s,2H),4.25(s,2H),3.32(s,3H)；MS(ESI)m/z 370.1566(M+H)+。
6-(2-(苄氨基)-6H-1,3,4-噻二嗪-5-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(化合物14-4)
Figure BDA0002591742420000552
黄色固体。产率34％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ11.26(s,1H),7.63(s,1H),7.59(d,1H,J＝8.5Hz),7.41(m,5H),7.12(d,1H,J＝7.3Hz),4.73(s,2H),4.31(s,2H),3.32(s,3H)；MS(ESI)m/z 352.1239(M+H)+。
N-(4-氟苄基)-5-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物14-5)
Figure BDA0002591742420000553
黄色固体。产率79％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.13(m,1H),7.95(m,1H),7.80(m,1H),7.43(m,2H),7.22(m,2H),4.68(s,2H),4.29(s,2H),2.71(s,3H)；MS(ESI)m/z354.1186(M+H)+。
N-苄基-5-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物14-6)
Figure BDA0002591742420000554
黄色固体。产率51％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ7.93(s,1H),7.72(d,1H,J＝7.3Hz),7.47(d,1H,J＝8.5Hz),7.34(m,4H),7.24(t,1H,J＝7.3Hz),4.56(s,2H),3.76(s,2H),3.32(s,3H)；MS(ESI)m/z 336.1273(M+H)+。
5-(1H-苯并[d]咪唑-6-基)-N-(4-氟苄基)-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物14-7)
Figure BDA0002591742420000561
黄色固体。产率66％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.26(s,1H),8.01(s,1H),7.89(s,1H),7.49(s,2H),7.28(m,2H),7.17(s,1H),4.75(s,2H),4.39(s,2H)；MS(ESI)m/z340.1031(M+H)+。
5-(1H-苯并[d]咪唑-6-基)-N-苄基-6H-1,3,4-噻二嗪-2-胺(化合物14-8)
Figure BDA0002591742420000562
黄色固体。产率99％。1H-NMR(600MHz,d6-DMSO):δ8.28(s,1H),8.07(s,1H),7.83(s,1H),7.62(s,1H),7.34(m,4H),7.25(s,1H),4.58(s,2H),3.83(s,2H)；MS(ESI)m/z322.1127(M+H)+。
实施例1-体外DYRK1A活性的评估
使用基于FRET的
Figure BDA0002591742420000563
Eu激酶结合分析法，在Life Technologies评估筛选试验中确定的化合物1，即1,3,4-噻二嗪化合物，以便测试30μM浓度的体外DYRK1A活性。化合物1对DYRK1A的IC50为9.41μM(对DYRK1A的Kd为7.5μM)。这个数据通过第二种分析法，即
Figure BDA0002591742420000564
证实(Fabian等人,“A Small Molecule-kinase Interaction Map forClinical Kinase Inhibitors,”Nat.Biotechnol.23(3):329-336(2005)，所述文献以全文引用的方式并入)，所述分析法测量DYRK1A结合。获得的结果与Life Technologies抑制分析法的结果一致，其中化合物1在DiscoverX分析法中的Kd为7.3μM。
实施例2-先导物(Hit-to-Lead)优化和结构活性关系研究(SAR)
1,3,4-噻二嗪(化合物1)(盐酸盐)的结构通过独立合成(图1)并与市售样品进行比较得到证实。NMR、LC-MS和生物学数据证实了化合物1在所有方面的属性。发现化合物1的中性类似物(化合物3-1，非盐)具有可比的DYRK1A活性，Kd为4.5μM(IC50＝4.32μM)(表1)。在拥有了新型骨架之后，进行先导物SAR研究，以改善化合物1的DYRK1A结合效力，并进行了研究以进一步探索其预测的结合模式。在2-氨基位置引入了系统结构修饰，保持分子其余部分完好无损。
表1.噻二嗪DYRK1A抑制剂在30μM下的结合亲和力和Kd
Figure BDA0002591742420000571
Figure BDA0002591742420000572
n.d.＝未确定
a＝30μM的DYRK1A抑制％
b＝化合物以30μM筛选(n＝2)，且初步筛选结合相互作用的结果报道为‘DMSO对照％’，
其中较低的值表示较强的亲和力
c＝Kd值是使用十一个连续三倍稀释液确定的(一式两份)
d＝括号中的值是在Life Technologies确定的IC50
化合物1和其相关的中性类似物(非盐)是按照图1-2中概述的合成方案合成的(Pfeiffer等人,“Unexpected Ring Enlargement of 2-Hydrazono-2,3-dihydro-1,3-thiazoles to 1,3,4-Thiadiazines,”Helv.Chim.Acta 97(1):76-87(2014)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。在AlCl3存在下用氯乙酰氯将可商购的2-苯并咪唑酰化，以99％的产率得到化合物2(Kornberg等人的PCT公开号WO 2002/050070，所述文献以全文引用的方式并入本文中)。随后，使α-氯酮2与购买或合成的含有各种R-基团的硫代氨基脲进行环缩合反应(Pfeiffer等人,“Unexpected Ring Enlargement of 2-Hydrazono-2,3-dihydro-1,3-thiazoles to 1,3,4-Thiadiazines,”Helv.Chim.Acta 97(1):76-87(2014)，所述文献以全文引用的方式并入本文中)，以在23-90％范围内的产率得到所需的噻二嗪类似物。
如表1所示，发现DYRK1A结合活性对2-苄基氨基部分的取代形式敏感。值得注意的是，观察到在噻二嗪的2-位上引入氟苄氨基(化合物3-12到3-14)和氯苄氨基(化合物3-15到3-17)取代基使化合物3-1的DYRK1A结合亲和力提高了25倍到60倍。在这些类似物中，与各自的邻位取代和间位取代的苄氨基类似物相比，对位取代的苄氨基噻二嗪显示出更好的DYRK1A结合。具体地，与原始化合物1(Kd＝7300nM)和化合物3-1(Kd＝4500nm)相比，带有对氯和对氟苄氨基的化合物3-12和3-15的Kd分别为185nm和71nm，提高了24到60倍。然而，在三氟甲基苄基氨基(化合物3-18到3-20)和氰基取代的苄基氨基噻二嗪类似物(化合物3-21到3-22)的情况下，结合活性的提高不是那么显著。两个例外是间三氟苄基氨基噻二嗪(化合物3-19)和间氰基苄基氨基噻二嗪类似物(化合物3-22)，其Kd分别为660和320nM，与原始命中化合物3-1相比，DYRK1A结合提高了7-15倍。对于三氟甲基取代的(化合物3-18到3-20)和氰基取代基，间位取代的苄基噻二嗪比相应的邻位和对位取代的类似物的效力明显更高。此SAR与卤素取代基的SAR不同，这展示出对位取代的苄基与其邻位和间位类似物相比，DYRK1A结合有所提高。
图3-5显示了各种噻二嗪化合物和其中间体的合成。表2和3显示了所选的噻二嗪DYRK1抑制剂的结合亲和力。
表2.噻二嗪DYRK1A抑制剂在10μM下的结合亲和力和Kd
Figure BDA0002591742420000591
Figure BDA0002591742420000592
表3.噻二嗪DYRK1A抑制剂在10μM下的结合亲和力和Kd
Figure BDA0002591742420000601
Figure BDA0002591742420000602
尽管在此已经详细描绘和描述了优选的实施方案，但是对于相关领域的技术人员来说显而易见的是，各种修改、增加、替换等可以在不脱离本发明的精神的情况下进行，且因此这些修改、增加、替换等被视为在随附权利要求书所限定的本发明的范围内。

Claims (41)

1.一种具有以下结构的式(I)的化合物：
Figure FDA0002591742410000011
或其立体异构体、药学上可接受的盐、氧化物或溶剂化物，其中
R1任选地存在；
R1(当存在时)和R2在其每次出现时独立地选自H、CH3、CF3、卤素和氰基；
X选自S、SO和SO2；
n是选自1和2的整数；
R3选自H、D、卤素和C1-C6被取代或未被取代的烷基；
Y选自键和支链的或直链的C1-C6被取代或未被取代的烷基；
Z选自被取代或未被取代的芳基、杂芳基、环烷基、烷基和杂环、醚、胺和磺酰基；
R4在其每次出现时独立地选自H、C1-C6烷基、卤素和-OR5；
R5选自H和C1-C6烷基；
R6任选地存在，并且当存在时是羰基或C1-C1烷基；且
Figure FDA0002591742410000012
是单键或双键，
但是当R1和R2均是H，n是1，R3是H，X是S，且Y是CH2时，Z不能是苯基。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中
R1和R2是H；
X是S；
n是1；
R3是H；且
R4是H。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中Z是未被取代的苯环或被卤素、-CF3、腈或-CONH2取代的苯环。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中Z选自吡啶基、环己烷、萘和吗啉。
5.根据权利要求1所述的化合物，其中Y选自键、-CH2-、-CH(CH3)-、-CH2CH2-、-CH2CH(CH3)-和-CH(CH3)CH2-。
6.根据权利要求1所述的化合物，其具有以下结构：
Figure FDA0002591742410000021
7.根据权利要求6所述的化合物，其中Z选自
Figure FDA0002591742410000022
Figure FDA0002591742410000031
8.一种抑制细胞中激酶活性的方法，所述方法包括：
在有效抑制细胞中激酶活性的条件下，使所述细胞与根据权利要求1所述的化合物接触。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述激酶是双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶(DYRK)。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述激酶是双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(DYRK1A)。
11.根据权利要求8所述的方法，其中所述方法是离体进行的。
12.根据权利要求8所述的方法，其中所述方法是体内进行的。
13.一种增加胰腺β细胞群中细胞增殖的方法，所述方法包括：
在有效增加胰腺β细胞群中细胞增殖的条件下，使所述胰腺β细胞群与根据权利要求1所述的化合物接触。
14.根据权利要求13所述的方法，其还包括：
使所述胰腺β细胞群与转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导通路抑制剂接触。
15.根据权利要求13或权利要求14所述的方法，其中所述方法是离体进行的。
16.根据权利要求13或14所述的方法，其中所述方法是体内进行的。
17.根据权利要求14所述的方法，其中所述方法是用包含所述化合物和所述TGFβ超家族信号传导通路抑制剂的组合物进行的。
18.根据权利要求14所述的方法，其中所述TGFβ超家族信号传导通路抑制剂选自下组：TGFβ/TGFβ受体结合抑制剂、激活素或抑制素/激活素受体结合抑制剂以及骨形态发生蛋白(BMP)/BMP受体结合抑制剂。
19.根据权利要求14所述的方法，其中所述TGFβ超家族信号传导通路抑制剂是选自由SB431542和Alk5抑制剂II组成的组的活化素或抑制素/活化素受体结合抑制剂。
20.根据权利要求14所述的方法，其中所述TGFβ超家族信号传导通路抑制剂是SMAD信号传导通路抑制剂。
21.根据权利要求13或权利要求14所述的方法，其中所述胰腺β细胞是原代人胰腺β细胞。
22.根据权利要求13或权利要求14所述的方法，其中所述接触不诱导β细胞死亡或DNA损伤。
23.根据权利要求13或权利要求14所述的方法，其中所述接触诱导β细胞分化。
24.根据权利要求13或权利要求14所述的方法，其中所述接触增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
25.一种组合物，其包含：
根据权利要求1所述的化合物，和
载剂。
26.根据权利要求25所述的组合物，其还包含：
转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导通路抑制剂。
27.根据权利要求25所述的组合物，其中所述载剂是药学上可接受的载剂。
28.一种治疗受试者胰岛素分泌不足相关病状的方法，所述方法包括：
向需要治疗胰岛素分泌水平不足相关病状的受试者在有效治疗所述受试者病状的条件下施用权利要求1所述的化合物。
29.根据权利要求28所述的方法，其还包括：
施用转化生长因子β(TGFβ)超家族信号传导通路抑制剂。
30.根据权利要求28或29所述的方法，其中所述施用是在有效增加所述受试者中胰腺β细胞量的条件下进行的。
31.根据权利要求28所述的方法，其中所述受试者已被诊断为患有I型糖尿病(T1D)、II型糖尿病(T2D)、妊娠糖尿病、先天性糖尿病、成年发病型糖尿病(MODY)、囊性纤维化相关糖尿病、血色素沉着症相关糖尿病、药物诱发的糖尿病或单基因糖尿病中的一种或多种。
32.根据权利要求28所述的方法，其中所述受试者已被诊断为患有代谢综合症或胰岛素抵抗。
33.根据权利要求28所述的方法，其中所述受试者曾进行过胰腺切除术、胰腺移植或胰岛移植。
34.根据权利要求28所述的方法，其中所述施用是口服、透皮、肠胃外、皮下、静脉内、肌内或腹膜内进行的。
35.根据权利要求28所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物受试者。
36.根据权利要求28所述的方法，其中所述受试者是人受试者。
37.一种治疗受试者神经系统病症的方法，所述方法包括：
向需要治疗神经系统病症的受试者在有效治疗所述受试者病状的条件下施用权利要求1所述的化合物。
38.根据权利要求37所述的方法，其中所述受试者已被诊断为患有糖尿病、唐氏综合症或神经退行性疾病中的一种或多种。
39.根据权利要求37所述的方法，其中所述施用是口服、透皮、肠胃外、皮下、静脉内、肌内或腹膜内进行的。
40.根据权利要求37所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物受试者。
41.根据权利要求37所述的方法，其中所述受试者是人受试者。
CN201880087073.5A 2017-11-20 2018-11-20 激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法 Pending CN111936490A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762588792P 2017-11-20 2017-11-20
US62/588,792 2017-11-20
PCT/US2018/062023 WO2019100062A1 (en) 2017-11-20 2018-11-20 Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111936490A true CN111936490A (zh) 2020-11-13

Family

ID=66539149

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201880087073.5A Pending CN111936490A (zh) 2017-11-20 2018-11-20 激酶抑制剂化合物和组合物及使用方法

Country Status (7)

Country Link
US (1) US11547712B2 (zh)
EP (1) EP3717475B1 (zh)
JP (1) JP2021503486A (zh)
CN (1) CN111936490A (zh)
AU (1) AU2018368790A1 (zh)
CA (1) CA3084581A1 (zh)
WO (1) WO2019100062A1 (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3735419A4 (en) 2018-01-05 2021-09-15 Icahn School of Medicine at Mount Sinai PROCESS FOR INCREASING THE PROLIFERATION OF PANCREATIC BETA CELLS, PROCESS OF TREATMENT AND COMPOSITION
AU2019240065A1 (en) 2018-03-20 2020-09-24 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
US20250340575A1 (en) * 2024-05-03 2025-11-06 Biosplice Therapeutics, Inc. 4-aminopyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazines and preparation and uses thereof

Family Cites Families (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW200301123A (en) 2001-12-21 2003-07-01 Astrazeneca Uk Ltd New use
EA200500377A1 (ru) 2002-09-18 2005-08-25 Пфайзер Продактс Инк. Пиразольные производные как ингибиторы трансформирующего фактора роста (tgf)
SI1569907T1 (sl) 2002-12-13 2016-06-30 Ym Biosciences Australia Pty Ltd Na nikotinamidu osnovani kinazni inhibitorji
WO2004056352A1 (en) 2002-12-19 2004-07-08 Scios, Inc. TREATMENT OF OBESITY AND ASSOCIATED CONDITIONS WITH TGF-β INHIBITORS
US20050032869A1 (en) 2003-07-08 2005-02-10 Pharmacia Italia S.P.A. Pyrazolyl-indole derivatives active as kinase inhibitors, process for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
WO2006010637A2 (en) 2004-07-30 2006-02-02 Gpc Biotech Ag Pyridinylamines
WO2006027348A1 (en) 2004-09-06 2006-03-16 Basilea Pharmaceutica Ag Phenylaminopyridines
CA2635899A1 (en) 2006-01-19 2007-07-26 Osi Pharmaceuticals, Inc. Fused heterobicyclic kinase inhibitors
CN101702905A (zh) 2007-02-13 2010-05-05 先灵公司 功能选择性α2C肾上腺素能受体激动剂
GB0705566D0 (en) 2007-03-23 2007-05-02 Univ Dundee Method of treating learning impairment in down's syndrome subjects
WO2009011836A1 (en) 2007-07-19 2009-01-22 Merck & Co., Inc. Beta carboline derivatives as antidiabetic compounds
JP5638961B2 (ja) 2008-03-13 2014-12-10 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション Ｂｍｐシグナル伝達経路のインヒビター
WO2010080756A2 (en) 2009-01-06 2010-07-15 Osteogenex, Inc. Harmine derivatives for reducing body weight
US8329723B2 (en) 2009-04-24 2012-12-11 John K Buolamwini 1-aryl- or 1-heteroaryl-pyrido[B]indoles and uses thereof in treating cancers
US8778972B2 (en) 2009-05-15 2014-07-15 Novartis Ag 5-pyridin-3-yl-1, 3-dihydro-indol-2-on derivatives and their use as modulators of aldosterone synthase and/or CYP11B1
WO2010135589A2 (en) 2009-05-20 2010-11-25 Sakura Properties, Llc Dietary supplement drink for delivery of resveratrol and other polyphenols
JP2011006408A (ja) * 2009-05-29 2011-01-13 Sumitomo Chemical Co Ltd 神経栄養因子の活性が関与する疾患の治療または予防剤
CN102791134B (zh) 2009-12-04 2015-04-22 魄金莱默有限公司 用多巴胺再摄取抑制剂及类似物治疗糖尿病症状和延迟或预防糖尿病相关病理学病况的方法
SG181703A1 (en) 2009-12-18 2012-07-30 Harvard College Beta-cell replication promoting compounds and methods of their use
WO2011127406A2 (en) 2010-04-09 2011-10-13 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Acridines as inhibitors of haspin and dyrk kinases
WO2011133795A2 (en) 2010-04-22 2011-10-27 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Beta-carbolines as inhibitors of haspin and dyrk kinases
AR081331A1 (es) 2010-04-23 2012-08-08 Cytokinetics Inc Amino- pirimidinas composiciones de las mismas y metodos para el uso de los mismos
AR081626A1 (es) 2010-04-23 2012-10-10 Cytokinetics Inc Compuestos amino-piridazinicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar trastornos musculares cardiacos y esqueleticos
AU2011249722B2 (en) 2010-05-05 2015-09-17 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy
US9168247B2 (en) 2010-06-25 2015-10-27 Facultes Universitaires Notre Dame De La Paix Beta carboline derivatives useful in the treatment of proliferative disorders
EP2604685B1 (en) 2010-08-09 2017-03-15 Takeda Pharmaceutical Company Limited Method of producing pancreatic hormone-producing cells
WO2012024433A2 (en) 2010-08-17 2012-02-23 Translational Genomics Research Institute Compounds that inhibit tau phosphorylation
AU2012298510B2 (en) 2011-08-19 2016-10-27 Diaxonhit DYRK1 inhibitors and uses thereof
CN103070862A (zh) 2011-10-25 2013-05-01 新疆华世丹药物研究有限责任公司 去氢骆驼蓬碱衍生物在制备抗菌药物中的应用
WO2013119518A1 (en) 2012-02-06 2013-08-15 The Regents Of The University Of California Small molecules for islet expansion
AU2013284460A1 (en) 2012-06-27 2015-01-29 Dmnomore CTLA4 fusion proteins for the treatment of diabetes
CN105142621A (zh) 2012-10-24 2015-12-09 国家健康科学研究所 用于预防或治疗糖尿病和促进β-细胞存活的TPL2激酶抑制剂
US10011614B2 (en) 2012-11-26 2018-07-03 Xinjiang Huashidan Pharmaceutical Research Co., Ltd Bis-β-carboline compound and preparation method, pharmaceutical composition and use thereof
WO2014058080A1 (ja) 2012-11-30 2014-04-17 独立行政法人理化学研究所 体細胞のリプログラミングを亢進させる方法、及び細胞作製キット
CN102977096B (zh) 2012-12-07 2014-12-17 中国药科大学 具有靶向特性的去氢骆驼蓬碱衍生物的抗肿瘤前药
KR20150092279A (ko) 2012-12-10 2015-08-12 에프. 호프만-라 로슈 아게 암의 치료를 위한 신규한 2-고리 페닐-피리딘/피라진
US20150174034A1 (en) 2013-03-13 2015-06-25 Avon Products, Inc. Tyrosinase inhibitors
CN105120863B (zh) 2013-03-14 2021-06-04 奥斯特克有限公司 促进骨生长的烷基胺骆驼蓬碱衍生物
EP2968331B1 (en) 2013-03-14 2020-07-01 Icahn School of Medicine at Mount Sinai Pyrimidine compounds as kinase inhibitors
CA2915566C (en) * 2013-06-18 2021-12-21 4Sc Discovery Gmbh 2,3-dihydrobenzofuran-5-yl compounds as dyrk kinase inhibitors
CA2854542A1 (en) 2013-06-18 2014-12-18 4Sc Discovery Gmbh Method of inhibiting dyrk1b
WO2014203217A1 (en) 2013-06-21 2014-12-24 Lupin Limited Substituted heterocyclic compounds as crac modulators
ES2529865B8 (es) 2013-07-25 2016-01-22 Fundación Para La Investigación Biomédica Del Hospital Universitario La Paz (Fibhulp) USO DE COMPUESTOS DERIVADOS DE SALES DE PIRIDAZINO[1',6':1,2]PIRIDO[3,4-b]INDOLINIO COMO AGENTES ANTIINFLAMATORIOS
CN105636958B (zh) 2013-10-17 2018-01-05 沃泰克斯药物股份有限公司 Dna‑pk抑制剂
ES2759240T3 (es) 2014-04-08 2020-05-08 Rigel Pharmaceuticals Inc Compuestos de piridina 2,3-disustituidos como inhibidores de TGF-beta
US20170280720A1 (en) 2014-09-17 2017-10-05 Epizyme, Inc. Arginine methyltransferase inhibitors and uses thereof
ES2985135T3 (es) 2014-12-18 2024-11-04 Harvard College Procedimientos para generar células ß derivadas de células madre y usos de las mismas
EP3277716B1 (en) 2015-04-03 2020-06-24 XOMA Technology Ltd. Treatment of cancer using inhibitors of tgf-beta and pd-1
US11332716B2 (en) 2015-07-27 2022-05-17 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for producing pancreatic beta cells
AU2016315881B2 (en) 2015-09-03 2019-09-19 The Arizona Board Of Regents On Behalf Of The University Of Arizona Small molecule inhibitors of DYRK1A and uses thereof
CR20180323A (es) 2015-11-20 2018-08-06 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Derivados de indol n-sustituídos como moduladores de los receptores de pge2
CN105884767B (zh) 2015-11-24 2018-01-19 西华大学 9‑位取代的吡啶并[3,4‑b]吲哚衍生物及其制备方法和作为SIRT蛋白抑制剂的用途
EP3389720A1 (en) 2015-12-18 2018-10-24 The General Hospital Corporation Polyacetal polymers, conjugates, particles and uses thereof
US10487087B2 (en) 2015-12-30 2019-11-26 Vanderbilt University Positive allosteric modulators of the GLP-1 receptor
WO2017168245A1 (en) 2016-04-01 2017-10-05 University Of Limerick Pharmaceutical compositions and methods for the treatment of diabetes
EP3454852A4 (en) 2016-05-11 2020-02-26 Emory University PHOSPHOTIDYLINOSITOL 3-KINASES INHIBITORS
US11266647B2 (en) 2016-10-26 2022-03-08 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Method for increasing cell proliferation in pancreatic beta cells, treatment method, and composition
EP3318563A1 (en) 2016-11-07 2018-05-09 Sanofi Substituted pyrido[3,4-b]indoles for the treatment of cartilage disorders
US11279703B2 (en) 2016-12-01 2022-03-22 Aptose Biosciences Inc. Fused pyrimidine compounds as BRD4 and JAK2 dual inhibitors and methods for use thereof
EP3735419A4 (en) 2018-01-05 2021-09-15 Icahn School of Medicine at Mount Sinai PROCESS FOR INCREASING THE PROLIFERATION OF PANCREATIC BETA CELLS, PROCESS OF TREATMENT AND COMPOSITION
AU2019240065A1 (en) 2018-03-20 2020-09-24 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
WO2020142485A1 (en) 2018-12-31 2020-07-09 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
US20220064146A1 (en) 2018-12-31 2022-03-03 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use

Also Published As

Publication number Publication date
AU2018368790A1 (en) 2020-06-25
JP2021503486A (ja) 2021-02-12
US11547712B2 (en) 2023-01-10
EP3717475A4 (en) 2021-03-24
US20200306257A1 (en) 2020-10-01
EP3717475B1 (en) 2023-06-07
CA3084581A1 (en) 2019-05-23
WO2019100062A1 (en) 2019-05-23
EP3717475A1 (en) 2020-10-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12421232B2 (en) Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
KR102011770B1 (ko) 치환된 피리도피리미딘 화합물 및 flt3 억제제로서의 이의 용도
AU2011217561B2 (en) Hetarylaminonaphthyridines
US8822494B2 (en) Heteroaromatic compounds and their use as dopamine D1 ligands
JP2011530511A (ja) 治療用化合物
US20230234935A1 (en) Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
JP2022515650A (ja) キナーゼ阻害剤化合物及び組成物ならびに使用方法
AU2014324873A1 (en) A selective inhibitor of phosphatidylinositol 3-kinase-gamma
US10744128B2 (en) 6-(5-membered heteroaryl)isoquinolin-3-yl-(5-membered heteroaryl) carboxamides and preparation and use thereof
EP3906233B1 (en) Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
US11547712B2 (en) Kinase inhibitor compounds and compositions and methods of use
HK40063467A (zh) 激酶抑制劑化合物和組合物及使用方法
HK40062251A (zh) 激酶抑制劑化合物和組合物及使用方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20201113

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication