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CN111909133A - 作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1-氨基-1h-咪唑-5-甲酰胺 - Google Patents

作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1-氨基-1h-咪唑-5-甲酰胺 Download PDF

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CN111909133A
CN111909133A CN202010388187.2A CN202010388187A CN111909133A CN 111909133 A CN111909133 A CN 111909133A CN 202010388187 A CN202010388187 A CN 202010388187A CN 111909133 A CN111909133 A CN 111909133A
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李青云
张丹丹
范国杰
李阳
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Abstract

本申请涉及式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药：

Description

作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1-氨基-1H-咪唑-5- 甲酰胺
技术领域
本发明涉及一系列的式I所示的1-氨基-1H-咪唑-5-甲酰胺类化合物作为BTK(布鲁诺酪氨酸激酶(Bruton’s Tyrosine Kinase))抑制剂及其制备方法以及使用其治疗自身免疫性疾病、炎症性疾病、癌症和潜在的过敏等。
背景技术
BTK(布鲁诺酪氨酸激酶)是属于Tec家族的非受体酪氨酸激酶(Bradshaw et al,Cell Signal,2010,22,1175-184)。它在B细胞成熟和肥大细胞活化中发挥重要的作用。它主要在B细胞、肥大细胞和巨噬细胞等造血细胞中表达，存在于包括骨髓、淋巴结和脾脏等组织中。它们参与响应于生长因子受体、细胞因子受体、G-蛋白偶联受体、抗原-受体和整合素传递的几乎所有类型的细胞外刺激引起的信号转导(Qiu et al,Oncogene,2000,19,5651–5661)。在结构上它的特征在于具有普列克底物蛋白同源(pleckstrin homology，PH)结构域、Src同源3结构域、Src同源2结构域和Src同源1结构域(激酶结构域)。PH结构域结合磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸(PIP3),诱导BTK磷酸化磷脂酶Cγ，其然后将磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(PIP2)水解为两个第二信使肌醇三磷酸(IP3)和二酰基甘油(DAG),其进而调节下游B细胞信号传导。BTK异常活化是类风湿性关节炎、骨质疏松症、狼疮等自身免疫性疾病的主要原因，并与许多癌症相关。BTK基因突变与免疫缺陷疾病X连锁无丙种球蛋白血症(XLA)直接相关。具有这类疾病的患者的骨髓中具有未成熟的B细胞，但是它们不会进一步成熟并进入循环系统。
依鲁替尼(结构A，Pan et al,Chem Med Chem 2007,2:58–61；Lee A.Honigberget al,PNAS July 20,2010,107(29),13075-13080)和阿卡替尼(结构B，Barf et al,JPharmacol Exp Ther 2017,363:240–252；Robert B.Kargbo,ACS Med Chem Lett.,2017Sep 14；8(9):911–913)等BTK抑制剂在治疗多种癌症方面显示了很好的疗效。
Figure BDA0002484555310000021
其他一些候选化合物(Bradshaw et al.Nat Chem Biol,2015,11(7),525–531；US9447106 B2；CN103848810 A1)正处于对包括癌症和自身免疫性疾病等多种疾病进行测试的临床实验的不同阶段中。所有这些均指向BTK抑制在治疗癌症、过敏和自身免疫性疾病领域中的多种疾病的潜在应用。
发明内容
本发明涉及作为蛋白质激酶BTK(布鲁诺酪氨酸激酶)抑制剂的化合物，其可以用于治疗自身免疫性疾病、炎症性疾病、癌症和潜在的过敏。在一个方面，本发明提供了式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药：
Figure BDA0002484555310000022
其中
R1独立地选自H、C1-6烷基和R5C(O)-，其中R5独立地选自C1-6烷基和C1-6烷氧基；
Ar选自杂芳基和被以下基团取代的杂芳基：卤素；氰基；C1-6烷基；C1-6烷氧基；被卤素、羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基；C6或C10芳基；或被卤素取代的C6或C10芳基；
n选自0和1；
X是4-8元含氮的杂环基，其中所述杂环基在该氮上被Y取代；或含氮的螺杂环基，其中所述氮被Y取代；例如，所述螺杂环基可以具有两个4-8元环；
Y选自-CN、-C(＝O)P、-S(＝O)P和-S(＝O)2P；其中
P选自
Figure BDA0002484555310000031
和
Rx选自H、卤素、氰基、C1-6烷基、被卤素取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、苯基、-(CH2)mNR6R7；
R2选自氢,卤素,氰基,C1-6烷基,被选自F、羟基和C1-6烷氧基取代的C1-6烷基，C3-6环烷基,被F取代的C3-6环烷基；
R3和R4独立地选自氢；卤素；氰基；C6或C10芳基；杂芳基；C1-6烷基；被C1-6烷氧基、NR6R7、卤素、羟基、C6或C10芳基和杂芳基取代的C1-6烷基；C3-6环烷基；被卤素取代的C3-6环烷基；C2-6烯基；被C1-6烷氧基、NR6R7、卤素、羟基、C6或C10芳基和杂芳基取代的C2-6烯基；
R6和R7各自独立地选自氢、C1-6烷基或与它们所取代的氮一起形成4-6元杂环基；
m是1至3的整数。
在一些实施方式中，X是仅有一个环原子氮的杂环基或螺杂环基。
在一些实施方式中，在式I中，R1是H或C1-6烷基。具体地，R1是H或甲基。
在一些实施方式中，在式I中，Ar选自：
Figure BDA0002484555310000032
其中
R8、R8a、R8b、R8c和R8d独立地选自H；C1-6烷基；被卤素取代的C1-6烷基，具体地，被F取代的C1-6烷基，更具体地为CF3；C1-6烷氧基；卤素；C6或C10芳基；被卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基取代(例如对位取代)的C6或C10芳基；杂芳基，具体地，五元或六元杂芳基，或其中五元或六元彼此稠合的双环，其可以具有至少一个选自O、S或N的杂原子。
例如，Ar选自下述之一：
Figure BDA0002484555310000041
在一些实施方式中，在式I中，Ar选自：
Figure BDA0002484555310000042
其中，R8是氢。
在一些实施方式中，在式I中，Ar选自：
Figure BDA0002484555310000043
其中，
R8a是氢；
R8b是氢、C1-6烷基或卤素；
R8c选自H、C1-6烷基、被卤素取代的C1-6烷基、卤素、C1-6烷氧基、C6或C10芳基、被卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基或三氟甲基取代(取代基例如在对位)的C6或C10芳基、和氰基；
R8d是氢。
在一些实施方式中，在式I中，Ar选自：
Figure BDA0002484555310000044
其中，
R8a是H；R8b独立地选自H、Cl或CH3；R8c选自H、CH3、CH2CH3、OCH3、F、Cl、Br、I和CN、CF3、异丙基、苯基、被卤素或氰基取代(例如对位取代)的苯基；且R8d是H。
在一些实施方式中，在式I中，X选自：
Figure BDA0002484555310000051
其中R9独立地选自H、F、C1-6烷基、被卤素取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基和NR6R7；并且R9取代的位置至少为一个；或者
R9可以在环中形成双键，或形成与R9取代的环稠合的4-6元环。
在一些实施方式中，在式I的P中，R2选自H、卤素、氰基、C1-6烷基和被F取代的C1-6烷基；R3选自氢或C1-6烷基；且R4选自H、C6或C10芳基、C3-6环烷基、C1-6烷基和被F取代的C1-6烷基。具体地，R2独立地选自H、F、氰基、CH3和CF3；R3选自H或甲基；R4选自H、苯基、环丙基、C1-6烷基(例如甲基、乙基、异丙基、叔丁基)和被F取代的C1-6烷基(例如三氟甲基)。
在一些实施方式中，Rx选自H、C3-6环烷基、C1-6烷基和被F取代的C1-6烷基。具体地，Rx选自H、甲基和环丙基。
在另一些实施方式中，式I中的X选自
Figure BDA0002484555310000052
其中，Y选自–C(＝O)P,且P选自
Figure BDA0002484555310000053
其中,R2独立选自氢、氟、氰基和三氟甲基；
R3选自氢；
R4选自氢、环丙基、甲基和三氟甲基；
Rx选自氢、甲基、和环丙基；
n是0。
在另一些实施方式中，式I中，
Ar由
Figure BDA0002484555310000061
表示，其中，R8a,R8b和R8d都是氢；R8c独立地选自Cl,I,CF3或被F取代的苯基(例如，对位被F取代的苯基)；
X由
Figure BDA0002484555310000062
表示；
Y为–C(＝O)P,且P是
Figure BDA0002484555310000063
其中，R2是氢；R3是氢；R4选自氢和三氟甲基；或者，Rx选自氢和甲基；
n是0；且
R1是氢。
所有前述杂芳基可以是五元或六元杂芳基，或者可以具有其中五元或六元彼此稠合的双环，其具有至少一个选自O、S或N的杂原子。
在一些实施方式中，本发明提供以下具体化合物：
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4,4-二甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-肉桂酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4,4-三氟丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4,4-三氟丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(R)-2-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
2-(1-丙烯酰基氮杂环庚烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
2-(2-丙烯酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
2-((1-丙烯酰基哌啶-4-基)甲基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
1-氨基-2-((1-(丁-2-炔酰基)哌啶-4-基)甲基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(噻唑-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
在另一方面，本发明提供了一种药物组合物，其包括有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药以及药学上可接受的载体。
在一些实施方式中，所述药物组合物为适合于给药的形式，包括但不限于口服给药、胃肠外给药、局部给药和直肠给药。在进一步的或其他实施方式中，所述药物组合物为以下形式：片剂、胶囊、丸剂、粉剂、缓释制剂、溶液和悬浮液，用于胃肠外注射的无菌溶液、悬浮液或乳液，用于局部给药的软膏或乳膏，或者用于直肠给药的栓剂。在进一步的或其他实施方式中，所述药物组合物为适合单次施予精确剂量的单位剂型。在进一步的或其他实施方式中，式I化合物的量在约0.001mg/kg体重/天至约1000mg/kg体重/天的范围内。在进一步的或其他实施方式中，式I化合物的量的范围为约0.001g/天至约7g/天。在进一步的或其他实施方式中，低于上述范围下限的剂量水平可能已经是足够的。在进一步的或其他实施方式中，可能需要高于上述范围上限的剂量水平。在进一步的或其他实施方式中，以单剂量施用式I化合物，每天一次。在进一步的或其他实施方式中，以多剂量施用式I化合物，每天不只一次。在进一步的或其他实施方式中，所述药物组合物还包含至少一种治疗剂。
在又一方面，本发明提供了一种预防或治疗患有BTK介导的疾病或状况或处于BTK介导的疾病或状况的风险中的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药或者本发明的药物组合物。
在另一方面，本发明提供了一种预防或治疗患有以下疾病或病症或处于以下疾病或病症的风险中的受试者的方法，所述疾病或病症选自自身免疫性疾病、炎症性疾病、癌症、过敏、弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、大B细胞淋巴瘤、红斑狼疮、类风湿性关节炎、克罗恩病、牛皮癣、多发性硬化症、哮喘等，所述方法包括向所述受试者施用有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药或者本发明的药物组合物。
在又一方面，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药在制备用于抑制BTK(布鲁诺酪氨酸激酶)活性的药物中的用途。
在另一方面，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药在制备用于治疗可以从抑制BTK受益的疾病或病症的药物中的用途。
在另一方面，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药在制备用于治疗以下疾病或病症的药物中的用途，所述疾病或病症选自自身免疫性疾病、炎症性疾病、癌症、过敏、弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、大B细胞淋巴瘤、红斑狼疮、类风湿性关节炎、克罗恩病、牛皮癣、多发性硬化症、哮喘等。
在另一方面，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药，用于抑制BTK。
在另一方面，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药，用于治疗可以从抑制BTK受益的疾病或病症。
在另一方面，本发明提供了本发明化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药，用于治疗选自以下的疾病或病症：自身免疫性疾病、炎症性疾病、癌症、过敏、弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、大B细胞淋巴瘤、红斑狼疮、类风湿性关节炎、克罗恩病、牛皮癣、多发性硬化症、哮喘等。
在一些实施方式中，所述受试者为哺乳动物，如人。
在一些实施方式中，前述的治疗可以从抑制BTK受益的疾病或病症包括但不限于癌症、自身免疫性疾病,炎症性疾病和过敏。这样的疾病包括但不限于弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、套细胞淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、大B细胞淋巴瘤、红斑狼疮、类风湿性关节炎、克罗恩病、牛皮癣、多发性硬化症、哮喘等。
发明详述
本文所用的章节标题仅用于组织文章的目的，而不应被解释为对所述主题的限制。本申请中引用的所有文献或文献部分包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍、操作手册和论文，不论出于任何目的均通过引用方式整体并入本文。
某些化学术语
除非另有定义，否则本文所用的所有科技术语具有的涵义与权利要求主题所属领域技术人员通常理解的涵义相同。除非另有说明，本文全文引用的所有专利、专利申请、公开材料通过引用方式整体并入本文。如果本文对术语有多个定义，以本章的定义为准。
应理解，上述概述和下文的详述均为示例性且仅用于解释，而不对本发明主题作任何限制。在本申请中，除非另有具体说明，否则使用单数时也包括复数。还应注意，除非上下文另有明确规定，如在说明书和权利要求书中所使用的，单数形式“一”和“该”或“所述”包括复数指代物。还应注意，除非另有说明，否则所用“或”、“或者”表示“和/或”。此外，所用术语“包括”以及其他形式并非限制性。同样地，所用术语“包含”以及其他形式并非限制性。
可以在参考文献(包括Carey和Sundberg"ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4TH ED."Vols.A(2000)and B(2001),Plenum Press,New York)中找到对标准化学术语的定义。除非另有说明，否则采用本领域技术范围内的常规方法，如质谱、NMR、HPLC、IR和UV/Vis光谱法和药理学方法。除非提供具体定义，否则关于本文描述的分析化学、有机合成化学以及药物和药物化学所采用的命名以及其实验程序和技术是本领域已知的。可在化学合成、化学分析、药物制备、制剂和递送，以及对患者的治疗中使用标准技术。例如，可利用厂商对试剂盒的使用说明，或者按照本领域公知的方式或本发明的说明来实施反应和纯化技术。通常可根据本说明书中引用和讨论的多个概要性和较具体的文献中的描述，按照本领域熟知的常规方法实施上述技术和方法。
当通过从左向右书写的常规化学式描述取代基时，该取代基也同样包括从右向左书写结构时所得到的在化学上等同的取代基。举例而言，CH2O等同于OCH2。
除非另有说明，否则所用的通用化学术语，例如但不限于，“烷基”、“芳基”等同于其任选取代的形式。例如，本文所用的“烷基”包括任选取代的烷基。
本文所述化合物可意具有一个或多个立体异构中心，且每个中心可以以R或S构型或其组合的形式存在。类似地，本文所述化合物可以具有一个或多个双键，且各双键可以以E(反式)或Z(顺式)构型或其组合的形式存在。描述的一个特定的立体异构体应被理解为包括所有可能的立体异构体，包括位置异构体、非对映异构体、对映异构体或差向异构体及其混合物。因此，本文所述化合物包括所有构型上不同的立体异构体、位置异构体、非对映异构体、对映异构体和差向异构体形式以及其相应的混合物。可存在外消旋体(S和R型的混合物)、非对映异构体和单个S或R型异构体。本发明旨在说明本文所要求保护的化合物可以是非对映异构体的混合物、外消旋体或单个S或R型异构体。
术语“任选/任意”或“任选地/任意地”是指随后描述的事件或情况可能发生或可能不发生，并且该描述包括发生所述事件或情况的情形以及不发生所述事件或情况的情形。例如，根据下文的定义，“任选被……取代的烷基”是指“烷基”或“被……取代的烷基”。
本文所用的称为“C1-C6”的基团是指该部分中具有1至6个碳原子，即含有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子、4个碳原子、5个碳原子和6个碳原子的基团。因此，仅举例而言“C1-C6烷基”是指在该烷基中有1至6个碳原子，即所述烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基及其异构体。
本文单独或组合使用的术语“环”、“环状”以及“……元环”是指如本文所述的任意共价闭合的结构，其包括脂环、杂环、芳环、杂芳环和多环稠合环系或多环非稠合环系。环可被任选取代。环可形成稠合环系的一部分。术语“元”是指组成环的骨架原子的数目。因此，仅举例而言，环己烷、吡啶、吡喃和嘧啶为六元环。
本文单独或组合使用的术语“稠合”是指其两个或多个环共同具有一个或多个键的环结构。
本文单独或组合使用的术语“杂环基”是指脂肪杂环基团。本文中指出杂环中的碳原子数目时(例如C3-C6杂环)，所述环中必然存在至少一个非碳原子(杂原子)。例如“C3-C6杂环”的命名仅涉及环中碳原子的数目，而不涉及环中原子的总数。如“4-8元杂环”的命名是指环中所含的原子总数(即四、五、六、七或八元环，其中至少一个原子为碳原子，至少一个原子为杂原子，且剩余的2至6个原子为碳原子或杂原子)。对于具有两个或更多个杂原子的杂环而言，所述两个或更多个杂原子可以彼此相同或不同。杂环可被任选取代。可经由杂原子或碳原子与杂环结合(即与母体分子连接或进一步取代)。“杂环”包括杂环烷基。
本文单独或组合使用的术语“螺杂环基”是指其中两个环共同具有一个碳原子并且至少一个成环原子是杂原子的多元环基。螺杂环基可以具有两个或更多个环，每个环可以为4-8元环。螺杂环基可被任选取代。可经由杂原子或碳原子与螺杂环结合(即与母体分子连接或进一步取代)。“螺杂环”包括杂环烷基。
本文单独或组合使用的术语“环烷基”是指任选取代的一价饱和烃环，其可以包括作为取代基的其他非成环碳原子(例如，甲基环丙基)。环烷基可以具有3至约10个或3至约8个或3至约6个或3至5个成环原子。实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
本文单独或组合使用的术语“芳基”是指任选取代的芳香烃基，其具有6至约20个成环碳原子，并包括稠合芳环和非稠合芳环。稠合芳环基团含有2至4个稠合环，其中连接的环为芳环，并且其他独立环可以为脂环、杂环、芳环、杂芳环或其任意组合。此外，术语芳基还包括稠合环和非稠合环。而且，术语芳基包括单环、双环、三环或更多环。芳基(例如单环芳基)含有例如6至约12个、或6至约10个或6至约8个成环碳原子。单环芳基的非限制性实例包括苯基；稠合环芳基包括萘基、菲基、蒽基、薁基；非稠合的联芳基包括联苯基。
本文单独或组合使用的术语“杂芳基”是指任选取代的一价芳基，其含有约5至约20个骨架成环原子，其中一个或多个成环原子为杂原子，所述杂原子独立地选自氧、氮、硫、磷、硅、硒和锡的杂原子，但不限于这些原子；其前提是所述基团的环不包含两个相邻的O或S原子。在环中出现两个或更多个杂原子的实施方式中，所述两个或更多个杂原子可彼此相同，或者所述两个或更多个杂原子中的一些或全部彼此不同。术语杂芳基包括任选取代的具有至少一个杂原子的稠合的和非稠合的杂芳基。此外，术语杂芳基还包括含5至约12个骨架成环原子的稠合的和非稠合的杂芳基，以及含5至约10个骨架成环原子的稠合的和非稠合的杂芳基，其可以含有上述杂原子中的至少一个。可通过碳原子或杂原子与杂芳基结合。其可以具有一个环，例如五元或六元杂芳基；或双环，例如九元或十元杂芳基。杂芳基可以进一步经由其碳原子中的任何一个或全部和/或其杂原子中的任何一个或全部被取代。
本文单独或组合使用的术语“烷基”是指任选取代的直链或任选取代的支链的一价饱和烃，其具有1至约18个碳原子，或1至约10个碳原子，或1至约6个碳原子。本文单独或组合使用的“低级烷基”是指碳原子数相对较少的烷基，例如其具有1至约8个碳原子，优选1至约6个碳原子，或1至约4个碳原子。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、2-甲基-l-丙基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、3-甲基-l-丁基、2-甲基-3-丁基、2,2-二甲基-1-丙基、2-甲基-1-戊基、3-甲基-1-戊基、4-甲基-l-戊基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、2,2-二甲基-l-丁基、3,3-二甲基-1-丁基、2-乙基-1-丁基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、叔戊基和己基等。
组合使用的“烷基”包括但不限于“烷氧基”中包括的“烷基”。
本文单独或组合使用的术语“烷氧基”是指烷基醚基(O-烷基)。烷氧基的非限制性实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基等。
本文单独或组合使用的术语“烯基”是指任选取代的直链或任选取代的支链的一价烃基，其具有一个或多个C＝C双键，并且具有例如2至约18个碳原子、或2至约10个碳原子、或2至约6个碳原子。该基团中的双键可以为顺式或反式构象，并应被理解为包括所述两种异构体。实例包括但不限于乙烯基(-CH＝CH2)、1-丙烯基(-CH2CH＝CH2)、异丙烯基[-C(CH3)＝CH2]、丁烯基和1,3-丁二烯基等。本定义也涵盖未指定数字范围的术语“烯基”。
本文单独或组合使用的术语“卤素”、“卤代”或“卤化物”是指氟代、氯代、溴代和碘代。
羟基是指–OH基团。
氰基是指–CN基团。
本文中的取代基是指一个取代基或多个取代基。
在本发明所示的分子结构中，当出现不对称中心时，实楔线是指指向纸顶部的键而虚楔线是指指向纸背部的键。实键线通常是指所有可能的异构体。
本发明还包括同位素标记的化合物。常见的同位素原子包括但不限于2H、3H、13C、14C、17O、18O、15N等。这些原子与它们的自然界最丰富的原子相同但具有不同的质量数。已报道了同位素标记在药物发现中的应用(Elmore,Charles S.,Annual Report of MedicinalChemistry,2009,44,515-534)。
某些药物术语
本文关于患有疾病、病症、状况等的个体所用的术语“受试者”、“患者”或“个体”包括哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物的实例包括但不限于哺乳动物纲的任何成员：人，非人的灵长类动物(例如黑猩猩和其他猿和猴种类)；农场动物，例如牛、马、绵羊、山羊、猪；家养动物，例如兔、狗和猫；实验室动物，包括啮齿类动物，例如大鼠、小鼠和豚鼠等。非哺乳动物的实例包括但不限于鸟类和鱼类等。在本文提供的方法和组合物的一个实施方式中，所述哺乳动物为人。
本文所用的术语“治疗”和其他类似的同义词包括缓解、减轻或改善疾病或状况的症状，预防其他症状，改善或预防导致症状的潜在代谢原因，抑制疾病或状况，例如阻止疾病或状况的发展，缓解疾病或状况，使疾病或状况消退，缓解由该疾病或状况导致的状况，或者中止该疾病或状况的症状，并且旨在包括预防。该术语还包括获得治疗益处和/或预防益处。所述治疗益处是指治愈或改善所治疗的潜在病症。而且，治疗益处通过治愈或改善与潜在病症相关的一种或多种生理症状而实现，从而使得尽管患者可能仍然受到潜在病症的影响，但观察到患者情况改善。就预防益处而言，可以向处于患特定疾病风险的患者施用所述组合物，或者即便尚未做出疾病诊断，但向报告出现该疾病的一个或多个生理症状的患者施用所述组合物。
本文所用的术语“有效量”、“治疗有效量”或“药学有效量”是指施用后足以在某种程度上缓解所治疗的疾病或状况的一个或多个症状的至少一种药剂或化合物的量。其结果可以为迹象、症状或病因的消减和/或缓解，或生物系统的任何其他所需变化。例如，用于治疗用途的“有效量”是在临床上提供显著的疾病缓解效果所需的包含本文公开化合物的组合物的量。可以使用诸如剂量递增研究的技术测定任何个体病例中的适当“有效”量。
本文所用术语“施用”、“给药”等是指能够将化合物或组合物递送到所需生物作用位点的方法。这些方法包括但不限于口服途径、经十二指肠途径、胃肠外注射(包括静脉内、皮下、腹膜内、肌内、血管内注射或输注)、局部和经直肠给药。本领域技术人员熟知可用于本文所述化合物和方法的给药技术，例如在Goodman和Gilman,The PharmacologicalBasis of Therapeutics,current ed.；Pergamon；和Remington's,PharmaceuticalSciences(current edition),Mack Publishing Co.,Easton,Pa中讨论的那些。在优选的实施方式中，本文所述的化合物和组合物通过口服给药。
本文针对制剂、组合物或成分所用的术语“可接受的”是指对接受治疗的受试者的一般健康情况没有长期的有害影响。
本文所用的术语“药学上可接受的”是指不影响本文所述化合物的生物活性或性质的物质(如载体或稀释剂)，并且相对无毒，即该物质可以施用于个体而不造成不良的生物作用或以有害方式与组合物中包含的任意组分相互作用。
本文所用的术语“药物组合物”是指任选地混合有至少一种药学上可接受的化学组分的生物活性化合物，所述药学上可接受的化学组分包括但不限于载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂和/或赋形剂。
本文所用的术语“载体”是指相对无毒的化学化合物或试剂，其有助于将化合物引入到细胞或组织中。
本文所用的术语“药学上可接受的盐”是指保留了指定化合物的游离酸和游离碱的生物效力，并且在生物学或其他方面上没有不良作用的盐。本文所述的化合物可以具有酸性或碱性基团，因此可以与任意的多种无机碱或有机碱以及无机酸和有机酸反应，从而形成药学上可接受的盐。这些盐可以通过以下方法制备：在本发明化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或者通过使纯化的化合物以其游离碱形式与适合的有机酸或无机酸单独反应，并分离由此形成的盐。药学上可接受的盐的实例包括通过本文所述化合物与无机酸或有机酸或无机碱或有机碱之间的反应而制备的那些盐。
本文所用的术语“互变异构体”是指通过例如氢原子迁移或质子迁移而易于由本发明化合物相互转化得到的异构体。
本文所用的术语“前药”是指本发明化合物的任何药学上可接受的盐、酯、酯的盐或其他衍生物，其在向接受者施用后能够直接或间接地提供本发明的化合物或其具有药学活性的代谢物或残基。特别优选的衍生物或前药是在施用于患者时可以提高本发明化合物生物利用度的那些化合物(例如，可以使口服给药的化合物更易于被吸收到血液中)，或者促进母体化合物向生物区划(例如脑部或淋巴系统)递送的那些化合物。
本文所用的术语“活性代谢物”是指在化合物代谢时形成的该化合物的具有生物活性的衍生物。
本文所用的术语“代谢的”是指生物体改变特定物质的所有过程(包括但不限于水解反应和酶催化反应)。
IC50是指具体化合物将特定测量活性抑制50％的浓度。
具体实施方式
本发明的权利要求书特别陈述了本发明的新特征。在下文的发明详述中陈述了利用本发明原理的示例性实施方式，通过参考该发明详述可更好地理解本发明的特征和优点。
本文已经显示和描述了本发明的一些实施方式，但是这些实施方式仅作为示例提供。应理解本文所述的本发明实施方式的变体也可用于实施本发明。本领域普通技术人员应理解，可出现多种变体、变化和替换而不脱离本发明的范围。应理解本发明各个方面的保护范围由权利要求书决定，并且这些权利要求范围内的方法和结构以及其等价的方法和结构均在本发明权利要求书涵盖的范围之内。
本发明化合物的通用合成
本发明的化合物通常能通过如方案-1所示的化学方案进行合成。所有相关的化合物能按照方案-1所示的通用方法类似地进行制备，而特定化合物的合成将在下文描述的化合物实施例部分中予以提供。
浓硫酸催化的4-乙酰基苯甲酸与乙醇的标准酯化反应能以较高的收率得到所需乙基酯2。4-乙酰基苯甲酸乙酯2与碳酸二乙酯缩合得到β-酮酯3。用氯化铵作为催化剂，使用N-溴代琥珀酰亚胺将β-酮酯3在乙醚中溴代得到溴代化合物4，其紧接着和酸5缩合得到化合物6。化合物6与过量的氯化铵在二甲苯中回流2-3小时，得到所需的咪唑二酯7。室温下，化合物7在四氢呋喃/水混合溶液中选择性水解得到苯甲酸类似物8。化合物8与2-氨基吡啶衍生物缩合得到吡啶基苯甲酰胺9。接下来，使用O-二苯基氧膦基羟胺(Aldrich)对咪唑上的N进行选择性N胺化以较高的收率得到1-氨基-1H-咪唑10。值得注意的是，没有观察到其他的位置异构体。然后使用氢氧化锂将化合物10水解为酸11。室温下，酸11和氯化铵、HATU、DIPEA在DMF中搅拌过夜被转化为酰胺12。最终化合物14通过以下步骤得到：在二氯甲烷中，酰胺12用30％TFA处理后生成中间体13，其在二氯甲烷中与巴豆酰氯(或相应的酸与其他试剂)和DIPEA反应得到最终产物14。
方案-1
Figure BDA0002484555310000221
方案-1续
Figure BDA0002484555310000231
在方案-1中，n选自0、1、2和3。
实施例
实施例1：(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基-氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000232
步骤A：制备4-乙酰基苯甲酸乙酯
Figure BDA0002484555310000233
在0°C下，向4-乙酰基苯甲酸(1000g，6.1mol)在乙醇(2L)中的溶液缓慢加入H2SO4(10mL)，并将混合物在80℃下回流3h。真空下除去溶剂，并将残余物用乙酸乙酯萃取，用饱和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)后得到白色固体4-乙酰基苯甲酸乙酯(1077g，92％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.11(d,J＝7.6Hz,2H),7.99(d,J＝7.7Hz,2H),4.39(q,J＝7.0Hz,2H),2.63(s,3H),1.40(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):193.1[M+H]+。
步骤B：制备4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)苯甲酸乙酯
Figure BDA0002484555310000241
向在N2气氛下的碳酸二乙酯(423g，3.49mol)在无水四氢呋喃(1L)中的溶液，加入60％NaH(195g，4.88mol)和335g(1.74mol)步骤A的产物，将混合物回流3h。反应完成后，将混合物冷却至室温，逐滴加入1mol/L冷却的冰醋酸直至pH 6-7。蒸去溶剂四氢呋喃，将残余物用饱和盐水稀释，并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。有机相合并后用饱和盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝12:1)后得到黄色油状4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)苯甲酸乙酯(399g，87％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:12.54(s,0.7H),8.13(d,J＝8.6Hz,0.5H),8.07(d,J＝8.6Hz,1.4H),7.98(d,J＝8.6Hz,0.5H),7.82(d,J＝8.6Hz,1.4H),5.72(s,0.7H),4.43–4.36(m,2H),4.27(q,J＝7.1Hz,1.4H),4.20(q,J＝7.1Hz,0.5H),4.00(s,0.5H),1.42–1.38(m,3H),1.33(t,J＝7.1Hz,2.1H),1.24(t,J＝7.1Hz,0.8H)。MS(ESI,m/z):265.1[M+H]+。
步骤C：制备4-(2-溴-3-乙氧基-3-氧代丙酰基)苯甲酸乙酯
Figure BDA0002484555310000242
将步骤B的产物(180g，680mmol)、NBS(129g，727mmol)和NH4OAc(5.3g，68mmol)在乙醚(1000mL)中的溶液在室温下搅拌。通过TLC监测反应。反应完成后，蒸去乙醚，将粗混合物用水(1500mL)稀释。产物用乙酸乙酯(2×1500mL)萃取，有机萃取物合并后，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物使用快速柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)，得到黄色油状物4-(2-溴-3-乙氧基-3-氧代丙酰基)苯甲酸乙酯(200g，86％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.13(d,J＝8.6Hz,2H),8.02(d,J＝8.6Hz,2H),5.66(s,1H),4.39(q,J＝7.1Hz,2H),4.26(q,J＝7.1Hz,2H),1.39(t,J＝7.1Hz,3H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):343.1[M+H]+。
步骤D：制备1-(叔丁基)2-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1,3-二氧代丙 烷-2-基)(2S)-吡咯烷-1,2-二羧酸酯
Figure BDA0002484555310000251
将步骤C的产物(256g，746mmol)溶于乙腈(2L)，加入(叔丁氧基羰基)-L-脯氨酸(168g，781mmol)和二异丙基乙胺(141mL，746mmol)。将混合物在室温下搅拌反应3h，反应完成后蒸去所有的挥发物。将残余物用水(1000mL)稀释，并用乙酸乙酯(3000mL)萃取。分离有机相，经无水硫酸钠干燥，并浓缩。残余物通过快速柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝7:1)，得到浅黄色油状物1-(叔丁基)2-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1,3-二氧代丙烷-2-基)(2S)-吡咯烷-1,2-二羧酸酯(330g，93％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.12–8.09(m,2H),8.03–7.98(m,2H),6.33–6.27(m,1H),4.48–4.34(m,3H),4.23–4.18(m,2H),3.56–3.28(m,2H),2.29–2.07(m,2H),1.98–1.83(m,2H),1.42–1.29(m,12H),1.20–1.14(m,3H)。MS(ESI,m/z):478.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)- 1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000252
在1L压力瓶中，将步骤D的产物(202g，423mmol)溶于二甲苯(1250mL)，加入NH4OAc(390g，5059mmol)。在140℃下加热反应2.5h。冷却后，将溶液在乙酸乙酯(3000mL)和水(1000mL)之间分配。浓缩有机层。残余物使用色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)，得到浅黄色油状物(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(77g，40％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:11.17(s,1H),8.13–7.89(m,4H),5.03–4.85(m,1H),4.33(q,J＝6.6Hz,2H),4.26–4.21(m,2H),3.49–3.38(m,2H),2.85–2.11(m,3H),1.92–1.82(m,1H),1.45–1.39(m,9H),1.35(t,J＝6.8Hz,3H),1.23–1.21(m,3H)。MS(ESI,m/z):458.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-4-(2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪 唑-4-基)苯甲酸
Figure BDA0002484555310000261
将步骤E的产物(4.57g，10mmol)溶于1,4-二氧六环(50mL)，加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，50mL)，室温搅拌反应2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用盐酸水溶液酸化至pH3。通过过滤分离白色沉淀物，干燥得到(S)-4-(2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-4-基)苯甲酸(3.86g，90％)。
步骤G：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000262
在氮气气氛下，将步骤F的产物(29.0g，67mmol)溶于干燥的N,N-二甲基甲酰胺(250mL)，加入HATU(30.8g，81mmol)、二异丙基乙胺(58mL，337mmol)和吡啶-2-胺(9.5g，101mmol)。反应混合物在80℃下搅拌。在反应完成后(通过TLC监测)，将混合物用盐水淬灭，乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，在减压下浓缩，并通过快速柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到白色固体(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(29.5g，87％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:11.12(s,1H),8.80(s,1H),8.40(d,J＝8.4Hz,1H),8.27–8.26(m,1H),8.15(d,J＝7.7Hz,2H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.77–7.72(m,1H),7.06–7.03(m,1H),4.98–4.97(m,1H),4.35–4.28(m,2H),3.52–3.42(m,2H),2.21–1.94(m,4H),1.50(s,9H),1.33–1.29(m,3H)。MS(ESI,m/z):506.1[M+H]+。
步骤H：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000271
在-10℃下，在氮气气氛下，将步骤G的产物(2.6g，5.1mmol)溶于干燥的N,N-二甲基甲酰胺(25mL)，搅拌并缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(6.1mL，1M四氢呋喃溶液)。在混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.2g，5.1mmol)，将得到的悬浮液在室温下搅拌2h(当反应混合物变得太粘稠时，另外加入适量N,N-二甲基甲酰胺)。反应完全后，用盐水淬灭反应，并在真空下浓缩至干。将残余物用乙酸乙酯(3×100mL)洗涤三次。有机部分合并后经无水硫酸钠干燥，在减压下除去溶剂得到粗残余物。该粗残余物通过柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(1.9g，71％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.93(s,1H),8.39(d,J＝8.3Hz,1H),8.22(d,J＝4.2Hz,1H),7.92(d,J＝7.6Hz,2H),7.78(d,J＝7.6Hz,2H),7.73(t,J＝7.7Hz,1H),7.02(t,J＝5.6Hz,1H),6.64(s,2H),5.22–5.13(m,1H),4.25–4.22(m,2H),3.56–3.55(m,1H),3.46–3.43(m,1H),2.39–2.36(m,2H),2.23–2.18(m,1H),1.92–1.91(m,1H),1.39(s,7H),1.24(s,2H),1.20(t,J＝6.6Hz,3H)。MS(ESI,m/z):521.1[M+H]+。
步骤I：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310000281
将步骤H的产物(1.36g，2.6mmol)溶于甲醇(15mL)，搅拌并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，14mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，用水(100mL)稀释，并用盐酸水溶液酸化至pH 3。将混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，在减压下浓缩，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.15g，90％)。
步骤J：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310000282
在氮气气氛下，将步骤I的产物(0.97g，2.0mmol)溶于干燥的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)，搅拌并加入HATU(1.1g，2.9mmol)、二异丙基乙胺(1mL，5.9mmol)和氯化铵(1.1g，20mmol)。在室温下搅拌反应混合物2h。反应完全后，用盐水淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后在减压下浓缩得，并通过快速柱层析色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.8g，83％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.72(s,1H),8.40–8.38(m,1H),8.21(d,J＝8.4Hz,1H),8.12(s,1H),8.02(d,J＝8.2Hz,2H),7.86–7.81(m,3H),7.69(s,1H),7.18–7.15(m,1H),6.22(s,1H),5.97(s,1H),5.11–5.06(m,1H),3.57–3.47(m,1H),3.44–3.38(m,1H),2.28–1.82(m,4H),1.39(s,5H),1.15(s,4H)。MS(ESI,m/z):492.2[M+H]+。
步骤K：制备(S)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷-2-基)- 1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000291
在氮气保护下，将步骤J的产物(190mg，0.39mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(2.5mL)。将混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):392.1[M+H]+。
步骤L：制备(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000292
在氮气气氛下，将步骤K的产物(160mg，0.41mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(32.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入水和乙酸乙酯。分层，然后将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过柱层析色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基-吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(99mg，62％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.91(s,1H),8.37(d,J＝8.4Hz,1H),8.29(dd,J1＝4.8Hz,J2＝1.0Hz,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.78–7.72(m,3H),7.06(ddd,J1＝7.3Hz,J2＝5.0Hz,J3＝0.8Hz,1H),6.77(s,2H),6.69(s,1H),6.46(dd,J1＝16.8Hz,J2＝10.2Hz,1H),6.32(dd,J1＝16.8Hz,J2＝2.0Hz,1H),5.94(s,1H),5.71(dd,J1＝10.2Hz,J2＝2.0Hz,1H),5.33(dd,J1＝8.1Hz,J2＝5.0Hz,1H),3.88–3.82(m,1H),3.73–3.67(m,1H),2.65–2.55(m,1H),2.51–2.43(m,1H),2.31–2.22(m,1H),2.11–2.02(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.7,165.1,162.8,151.8,148.4,148.0,141.6,138.6,138.5,133.8,129.8,128.6,127.5,120.1,119.1,114.5,51.4,47.7,30.8,25.6。MS(ESI,m/z):446.1[M+H]+。
实施例2：(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000301
制备(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000302
在氮气气氛下，将实施例1中步骤K的产物(160mg，0.41mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入甲基丙烯酰氯(37.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱层析色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)后得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(110mg，59％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.26(s,1H),8.31(d,J＝8.3Hz,1H),8.23(d,J＝4.4Hz,1H),7.85(d,J＝8.0Hz,2H),7.70(t,J＝7.8Hz,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,2H),7.02–7.00(m,1H),6.87(s,1H),6.66(s,2H),6.45(s,1H),5.27(s,1H),5.26–5.23(m,1H),5.20(s,1H),3.75–3.68(m,2H),2.53–2.48(m,2H),2.32–2.27(m,2H),1.90(s,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:171.2,165.9,162.9,151.8,148.6,147.8,141.5,140.7,138.5,138.3,133.7,129.6,127.5,119.9,119.5,118.0,114.6,51.2,50.0,30.9,25.8,19.7。MS(ESI,m/z):460.2[M+H]+。
实施例3：(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2- 基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000311
制备(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000312
在氮气气氛下，将实施例1中步骤K的产物(160mg，0.41mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入3-甲基丁-2-烯酰氯(42.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过柱层析色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(131mg，67％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.93(s,1H),8.38–8.30(m,2H),7.98–7.87(m,2H),7.78–7.75(m,3H),7.10–7.04(m,1H),6.89–6.81(m,3H),5.89(s,1H),5.79(s,1H),5.30–5.23(m,1H),3.75–3.72(m,1H),3.62–3.58(m,1H),2.55–2.46(m,2H),2.27–2.23(m,1H),2.03–1.99(m,4H),1.85(s,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.0,165.7,162.7,151.7,151.0,148.9,147.9,141.8,138.7,138.6,133.7,129.9,127.5,120.1,119.1,117.7,114.6,50.8,48.0,30.9,27.2,25.6,20.4。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例4：(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000321
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000322
在氮气气氛下，将实施例1中步骤K的产物(160mg，0.41mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入(E)-丁-2-烯酰氯(37.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱层析色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(102mg，54％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.35(s,1H),8.30(d,J＝8.3Hz,1H),8.22(d,J＝4.3Hz,1H),7.82(d,J＝7.9Hz,2H),7.69–7.66(m,3H),7.15(s,1H),7.01–6.99(m,1H),6.85–6.79(m,1H),6.70(s,2H),6.56(s,1H),6.08(d,J＝15.1Hz,1H),5.23–5.21(m,1H),3.78–3.74(m,1H),3.64–3.60(m,1H),2.56–2.49(m,1H),2.39–2.35(m,1H),2.20–2.14(m,1H),2.02–1.95(m,1H),1.81(d,J＝6.8Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.0,165.4,162.9,151.9,148.7,147.8,142.4,141.5,138.4,138.3,133.5,129.6,127.4,122.8,119.9,119.5,114.6,51.2,47.5,30.7,25.4,18.2。MS(ESI,m/z):460.2[M+H]+。
实施例5：(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4- (吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000331
步骤A：制备(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000332
在氮气保护下，将实施例1中步骤K的产物(160mg，0.41mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入2-氰基乙酸(30.6mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。将反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过柱层析色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(95mg，50％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.80(s,1H),8.39(d,J＝8.3Hz,1H),8.31(d,J＝4.7Hz,1H),7.97(d,J＝7.8Hz,2H),7.78–7.76(m,3H),7.10–7.08(m,1H),6.48(s,2H),6.25(s,1H),5.74(s,1H),5.36–5.33(m,1H),3.79–3.75(m,1H),3.62–3.58(m,1H),3.48(dd,J1＝26.3Hz,J2＝18.2Hz,2H),2.63–2.56(m,1H),2.48–2.43(m,1H),2.34–2.28(m,1H),2.14–2.08(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.4,162.6,160.9,151.7,148.0,147.9,141.4,138.7,138.2,134.2,129.9,127.7,120.2,119.2,114.5,113.7,52.2,48.2,31.0,26.3,25.5。MS(ESI,m/z):459.1[M+H]+。
步骤B：制备(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4- (吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000341
在氮气保护下，在0℃下将环丙烷甲醛(7.7mg，0.11mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入吡咯烷(45μL，0.55mmol)、三甲基氯硅烷(70μL，0.55mmol)。移除冰浴，并将反应混合物搅拌10min，然后加入步骤A的产物(50mg，0.11mmol)。将反应溶液搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝27:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(38mg,67％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.16(s,1H),8.36(d,J＝8.3Hz,1H),8.27(d,J＝3.8Hz,1H),7.91(d,J＝8.1Hz,2H),7.76–7.62(m,3H),7.07–7.05(m,1H),6.79(d,J＝11.3Hz,1H),6.56–6.41(m,3H),6.28(s,1H),5.31–5.29(m,1H),4.05–4.01(m,1H),3.93–3.89(m,1H),2.49–2.45(m,2H),2.31–2.27(m,1H),2.10–1.99(m,2H),1.24–1.23(m,2H),0.89–0.85(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.8,165.7,162.9,161.4,151.7,148.0,147.8,141.5,138.7,138.2,133.9,129.7,127.7,120.1,119.1,115.5,114.6,107.4,53.0,49.5,30.7,26.1,15.8,11.2,11.1。MS(ESI,m/z):511.2[M+H]+。
实施例6：
(S,E)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000351
制备(SE)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000352
将实施例1中步骤K的产物(160mg，0.41mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入(E)-戊-2-烯酸(36mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，给出灰白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(124mg，64％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.21(s,1H),8.32(d,J＝8.3Hz,1H),8.25(d,J＝4.1Hz,1H),7.86(d,J＝7.8Hz,2H),7.72–7.70(m,3H),7.09(s,1H),7.03–7.01(m,1H),6.91–6.87(m,1H),6.75(s,2H),6.35(s,1H),6.07(d,J＝15.1Hz,1H),5.25(d,J1＝7.6Hz,J2＝5.0Hz,1H),3.81–3.78(m,1H),3.67–3.63(m,1H),2.60–2.53(m,1H),2.44–2.39(m,1H),2.24–2.17(m,3H),2.05–1.99(m,1H),1.02(t,J＝7.4Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.9,165.7,162.8,151.8,148.8,148.7,147.8,141.7,138.5,138.4,133.6,129.7,127.4,120.4,119.9,119.3,114.6,51.2,47.5,30.8,25.6,25.5,12.6。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例7：(S)-1-氨基-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000361
制备(S)-1-氨基-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000362
将实施例1中步骤K的产物(160mg，0.41mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入丙炔酸(25.2mg,0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，给出黄色固体(S)-1-氨基-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(102mg，56％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.82(s,1H),8.40(d,J＝8.3Hz,1H),8.31(d,J＝3.8Hz,1H),7.99–7.96(m,2H),7.79–7.75(m,3H),7.10–7.08(m,1H),6.65–6.63(m,2H),6.30(s,1H),5.62(s,1H),5.30(dd,J1＝8.0Hz,J2＝5.4Hz,1H),3.92–3.90(m,2H),3.10(s,1H),2.59–2.47(m,2H),2.38–2.32(m,1H),2.07–2.02(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.4,162.6,152.2,151.6,147.9,147.5,141.5,138.8,138.4,134.1,129.9,127.7,120.2,119.0,114.5,78.6,76.4,50.9,49.3,31.2,25.0。MS(ESI,m/z):444.1[M+H]+。
实施例8：(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000371
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000372
将实施例1中步骤K的产物(160mg，0.41mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入2-丁炔酸(30.2mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(88mg，47％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.66(s,1H),8.40(d,J＝8.8Hz,1H),8.32(d,J＝3.9Hz,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,2H),7.86–7.75(m,3H),7.10–7.08(m,1H),6.70(s,2H),6.43(s,1H),5.51(s,1H),5.28–5.25(m,1H),3.88–3.85(m,2H),2.59–2.47(m,2H),2.37–2.30(m,1H),2.05–2.00(m,4H)；13C NMR(DMSO,100MHz)δ:165.7,162.2,152.3,151.9,148.3,147.9,138.1,138.0,136.3,132.0,127.7,127.1,124.7,119.8,114.7,88.6,74.3,50.9,48.5,31.0,23.8,3.3。MS(ESI,m/z):458.1[M+H]+。
实施例9：(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000381
制备(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000382
将实施例1中步骤K的产物(160mg，0.41mmol)溶于干燥乙腈(5mL)，加入K2CO3(170mg，1.23mmol)。5min后，加入BrCN(43.4mg，0.41mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌6h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到黄色固体(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(74mg，43％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.05(s,1H),8.35(d,J＝8.4Hz,1H),8.28(d,J＝4.2Hz,1H),7.96(d,J＝8.2Hz,2H),7.78–7.72(m,3H),7.07(dd,J1＝7.2Hz,J2＝5.0Hz,1H),6.19(s,1H),5.93(s,1H),5.71(s,2H),5.20(t,J＝6.7Hz,1H),3.69–3.64(m,1H),3.56–3.51(m,1H),2.54–2.46(m,1H),2.32–2.22(m,2H),2.07–1.99(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.4,162.6,151.7,148.3,148.0,140.8,138.7,137.6,134.4,129.6,128.0,121.5,120.2,117.1,114.5,56.0,51.3,30.6,25.5。MS(ESI,m/z):417.1[M+H]+。
实施例10：(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000391
步骤A：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000392
将实施例1中步骤F的产物(29.0g，67mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(250mL)，搅拌并加入HATU(30.8g，81mmol)、二异丙基乙胺(58mL，337mmol)和4-甲基吡啶-2-胺(10.9g，101mmol)。在80℃下搅拌反应混合物。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到白色固体(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(25.0g，71％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:11.06(s,1H),8.56(s,1H),8.26(s,1H),8.17–8.14(m,3H),7.96(d,J＝8.3Hz,2H),6.91(d,J＝4.9Hz,1H),4.99–4.97(m,1H),4.37–4.31(m,2H),3.52–3.42(m,2H),3.01–2.92(m,1H),2.41(s,3H),2.24–1.96(m,3H),1.51(s,9H),1.33(t,J＝7.0Hz,3H)。MS(ESI,m/z):520.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000401
在-10℃下，将步骤A的产物(2.6g，5.1mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(25mL)，搅拌并缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(6.1mL，1M四氢呋喃溶液)。混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.2g，5.1mmol)，并将得到的混悬液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将反应用盐水淬灭，并在真空中浓缩至干。残余物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机部分合并后，用无水硫酸钠干燥，并减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，给出期望的产物(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(1.5g,55％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.69(s,1H),8.27(s,1H),8.16(d,J＝5.1Hz,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,2H),7.81(d,J＝8.4Hz,2H),6.91(d,J＝4.8Hz,1H),6.66(s,2H),5.21–5.18(m,1H),4.32–4.25(m,2H),3.61–3.55(m,1H),3.50–3.44(m,1H),2.45–2.37(m,4H),2.27–2.20(m,1H),1.97–1.91(m,1H),1.73–1.68(m,1H),1.42(s,7H),1.27–1.21(m,5H)。MS(ESI,m/z):535.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310000402
将步骤B的产物(1.38g，2.6mmol)溶于甲醇(15mL)，搅拌并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，14mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.02g,78％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310000411
将步骤C的产物(1.01g，2.0mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(15mL)，搅拌并加入HATU(1.1g，2.9mmol)、二异丙基乙胺(1mL，5.9mmol)和氯化铵(1.1g，20mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.91g,90％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.76(s,1H),8.24(s,1H),8.15(d,J＝5.0Hz,1H),7.95(d,J＝8.2Hz,2H),7.82(d,J＝8.1Hz,2H),6.91(d,J＝4.8Hz,1H),6.78(s,1H),6.63(s,2H),5.70(s,1H),5.12–5.09(m,1H),3.59–3.44(m,2H),2.50–2.40(m,5H),2.28–2.19(m,1H),1.99–1.92(m,1H),1.43(s,7H),1.28(s,2H)。MS(ESI,m/z):506.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯 烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000421
将步骤D的产物(197mg，0.39mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(2.5mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):406.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000422
将步骤E的产物(180mg，0.44mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(344mg,2.67mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(36.2mg,0.40mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，给出灰白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(104mg，51％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.39(s,1H),8.28(s,1H),8.12(d,J＝4.8Hz,1H),7.95(d,J＝8.3Hz,2H),7.76(d,J＝8.3Hz,2H),6.92(d,J＝4.8Hz,1H),6.70(s,2H),6.45(dd,J1＝16.8Hz,J2＝10.2Hz,1H),6.31(dd,J1＝16.8Hz,J2＝1.9Hz,1H),6.02(s,1H),5.70(dd,J1＝10.2Hz,J2＝1.9Hz,1H),5.32(dd,J1＝8.0Hz,J2＝5.0Hz,1H),3.87–3.82(m,1H),3.72–3.66(m,1H),2.64–2.54(m,1H),2.50–2.44(m,1H),2.41(s,3H),2.30–2.22(m,1H),2.10–2.01(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.8,165.1,162.8,151.5,151.2,148.4,146.3,141.6,138.5,133.7,129.8,128.6,128.6,127.7,121.2,119.1,115.4,51.3,47.7,30.8,25.6,21.7。MS(ESI,m/z):460.2[M+H]+。
实施例11：(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000431
制备(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000432
将实施例10中步骤E的产物(180mg，0.44mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(344mg，2.67mmol)。5min后，在0℃下加入甲基丙烯酰氯(41.8mg，0.40mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(110mg，52％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.09(s,1H),8.21(s,1H),8.11(d,J＝4.9Hz,1H),7.91(d,J＝8.3Hz,2H),7.71(d,J＝8.3Hz,2H),6.88(d,J＝4.8Hz,1H),6.72(s,2H),6.67(s,1H),6.24(s,1H),5.29(s,1H),5.26(t,J＝7.2Hz,1H),5.21(s,1H),3.77–3.69(m,2H),2.57–2.51(m,1H),2.38(s,3H),2.34–2.27(m,2H),1.95–1.87(m,4H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:171.2,165.7,162.8,151.8,150.1,148.4,147.4,141.6,140.7,138.4,133.9,129.8,127.6,121.2,119.2,118.0,115.1,51.2,50.0,30.9,25.9,21.6,19.8。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例12：(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲 基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000441
制备(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000442
将实施例10中步骤E的产物(180mg，0.44mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(344mg，2.67mmol)。5min后，在0℃下加入3-甲基丁-2-烯酰氯(47.4mg，0.40mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(130mg，61％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.15(s,1H),8.22(s,1H),8.11(d,J＝5.1Hz,1H),7.90(d,J＝8.3Hz,2H),7.74(d,J＝8.3Hz,2H),6.93(s,1H),6.88(d,J＝4.9Hz,1H),6.79(s,2H),6.21(s,1H),5.77(s,1H),5.25(dd,J1＝8.0Hz,J2＝5.2Hz,1H),3.74–3.70(m,1H),3.61–3.57(m,1H),2.54–2.42(m,2H),2.38(s,3H),2.26–2.20(m,1H),2.03–1.98(m,4H),1.83(s,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.9,165.8,162.8,151.8,150.9,150.3,148.8,147.2,141.7,138.5,133.7,129.8,127.5,121.2,119.1,117.6,115.1,50.8,48.0,30.8,27.2,25.6,21.6,20.3。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例13：(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基-吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000451
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基-吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000452
将实施例10中步骤E的产物(180mg，0.44mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(344mg，2.67mmol)。5min后，在0℃下加入(E)-丁-2-烯酰氯(41.8mg，0.40mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(120mg，57％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.26(s,1H),8.20(s,1H),8.09(d,J＝5.0Hz,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,2H),7.71(d,J＝8.3Hz,2H),6.97(s,1H),6.88–6.82(m,2H),6.76(s,2H),6.43(s,1H),6.10(dd,J1＝15.0Hz,J2＝1.6Hz,1H),5.25(dd,J1＝8.0Hz,J2＝4.7Hz,1H),3.80–3.76(m,1H),3.66–3.62(m,1H),2.60–2.53(m,1H),2.44–2.39(m,1H),2.36(s,3H),2.23–2.17(m,1H),2.05–1.97(m,1H),1.84(dd,J1＝6.9Hz,J2＝1.4Hz,3H)；13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:165.9,165.4,162.9,151.8,150.2,148.6,147.2,142.4,141.6,138.4,133.7,129.7,127.5,122.8,121.1,119.2,115.1,51.1,47.5,30.7,25.5,21.5,18.3。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例14：(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4- (4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000461
步骤A：制备(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基-吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000462
将实施例10中步骤E的产物(180mg，0.44mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(267mg，2.64mmol)。5min后，加入2-氰基乙酸(33.6mg，0.40mmol)和HATU(250mg，0.66mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(80mg，38％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.38(s,1H),8.14(s,1H),8.06(d,J＝4.9Hz,1H),7.81(d,J＝7.5Hz,2H),7.62(d,J＝7.6Hz,2H),6.99(s,1H),6.84(d,J＝5.0Hz,1H),6.74(s,1H),6.29(s,2H),5.24–5.19(m,1H),3.67–3.65(m,1H),3.49–3.41(m,3H),2.44–2.42(m,1H),2.33(s,3H),2.30–2.27(m,1H),2.19–2.17(m,1H),1.99–1.97(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.0,162.9,161.3,151.8,150.14,148.5,147.3,141.1,137.9,133.7,129.4,127.5,121.2,120.3,115.2,114.2,52.3,48.0,30.9,26.3,25.2,21.5。MS(ESI,m/z):473.1[M+H]+。
步骤B:制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4- (4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000471
在0℃下将环丙烷甲醛(7.7mg，0.11mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入吡咯烷(45μL，0.55mmol)，然后加入TMS-Cl(70μL，0.55mmol)。除去冰浴，并将反应混合物搅拌10min，然后加入步骤A的产物(50mg，0.11mmol)。将反应溶液搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝27:1)，得到白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(31mg，54％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.01(s,1H),8.22(s,1H),8.12(d,J＝5.0Hz,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,2H),7.73(d,J＝8.2Hz,2H),6.89(d,J＝4.9Hz,1H),6.79(d,J＝11.3Hz,1H),6.58(s,2H),6.38(s,1H),6.13(s,1H),5.32–5.30(m,1H),4.06–4.02(m,1H),3.94–3.90(m,1H),2.50–2.44(m,2H),2.39(s,3H),2.32–2.28(m,1H),2.11–2.05(m,1H),2.04–1.99(m,1H)1.26–1.22(m,2H),0.89–0.87(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.8,165.6,162.9,161.4,151.7,150.2,147.9,147.5,141.5,138.2,134.1,129.8,127.7,121.3,118.9,115.5,115.0,107.4,53.0,49.5,30.7,26.1,21.6,15.8,11.1,11.1。MS(ESI,m/z):525.2[M+H]+。
实施例15：(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4- (4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000481
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4- ((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000482
在0℃下将异丁醛(7.9mg，0.11mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入吡咯烷(45μL，0.55mmol)，然后加入TMS-Cl(70μL，0.55mmol)。移除冰浴，并将反应混合物搅拌10min，然后加入实施例14中步骤A的产物(50mg，0.11mmol)。将反应溶液搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝27:1)，得到白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(28mg，48％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.04(s,1H),8.25(s,1H),8.13(d,J＝4.8Hz,1H),7.96(d,J＝7.9Hz,2H),7.75(d,J＝7.9Hz,2H),7.12(d,J＝10.4Hz,1H),6.91(d,J＝4.6Hz,1H),6.60(s,2H),6.32(s,1H),5.96(s,1H),5.34–5.31(m,1H),4.02–3.98(m,1H),3.87–3.83(m,1H),3.00–2.94(m,1H),2.54–2.43(m,2H),2.41(s,3H),2.35–2.31(m,1H),2.05–1.99(m,1H),1.12(t,J＝7.0Hz,6H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.2,165.5,162.8,161.4,151.6,150.6,147.7,147.2,141.5,138.2,134.1,129.9,127.8,121.4,118.9,115.1,114.2,109.5,52.9,49.6,31.6,30.8,26.1,21.7,21.6,21.5。MS(ESI,m/z):527.2[M+H]+。
实施例16：(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1- (戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000491
制备(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2- 烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000492
将实施例10中步骤E的产物(180mg，0.44mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(267mg，2.64mmol)。5min后，加入(E)-2-戊烯酸(40.1mg，0.40mmol)和HATU(250mg，0.66mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(95mg，44％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.24(s,1H),8.17(s,1H),8.08(d,J＝5.0Hz,1H),7.85(d,J＝8.2Hz,2H),7.71(d,J＝8.2Hz,2H),7.07(s,1H),6.91–6.85(m,2H),6.76(s,2H),6.47(s,1H),6.06(d,J＝15.2Hz,1H),5.24(dd,J1＝7.9Hz,J2＝4.8Hz,1H),3.81–3.77(m,1H),3.67–3.63(m,1H),2.60–2.53(m,1H),2.44–2.39(m,1H),2.35(s,3H),2.23–2.16(m,3H),2.05–1.99(m,1H)1.02(t,J＝7.4Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.9,165.6,162.9,151.8,150.1,148.7,148.6,147.3,141.7,138.4,133.7,129.7,127.4,121.1,120.4,119.2,115.1,51.2,47.5,30.7,25.6,25.5,21.5,12.6。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例17：(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔 酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000501
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基 吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000502
将实施例10中步骤E的产物(180mg，0.44mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(267mg，2.64mmol)。5min后，加入丙炔酸(28.2mg，0.40mmol)和HATU(250mg，0.66mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到黄色固体(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(112mg，55％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.30(s,1H),8.18(s,1H),8.09(d,J＝5.0Hz,1H),7.88(d,J＝8.2Hz,2H),7.68(d,J＝8.1Hz,2H),6.86(d,J＝5.0Hz,1H),6.64(s,1H),6.46(s,2H),6.33(s,1H),5.24–5.22(m,1H),3.89–3.83(m,2H),3.07(s,1H),2.47–2.39(m,2H),2.37(s,3H),2.33–2.28(m,1H),2.01–1.96(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.8,163.0,152.0,151.8,150.1,147.9,147.4,141.3,138.1,133.9,129.6,127.7,121.2,119.7,115.1,78.8,76.4,51.2,49.3,31.3,24.9,21.6。MS(ESI,m/z):458.1[M+H]+。
实施例18：(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000511
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000512
将实施例10中步骤E的产物(180mg，0.44mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(267mg,2.64mmol)。5min后，加入2-丁炔酸(33.6mg，0.40mmol)和HATU(250mg，0.66mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(102mg，49％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.79(s,1H),8.24(s,1H),8.15(d,J＝3.7Hz,1H),7.95(d,J＝7.6Hz,2H),7.77(d,J＝7.5Hz,2H),6.91(d,J＝4.1Hz,1H),6.66(s,2H),6.48(s,1H),5.70(s,1H),5.27–5.25(m,1H),3.86(t,J＝6.4Hz,2H),2.56–2.46(m,2H),2.40(s,3H),2.34–2.29(m,1H),2.04–1.99(m,4H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.5,162.7,153.5,151.7,150.3,147.8,147.6,141.5,138.4,134.1,129.9,127.6,121.3,119.1,114.9,89.2,74.1,50.7,49.1,31.2,25.0,21.6,4.1。MS(ESI,m/z):472.2[M+H]+。
实施例19：(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000521
步骤A：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000522
将实施例1中步骤F的产物(30g，70mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(250mL)，加入HATU(32g，84mmol)、二异丙基乙胺(60mL，350mmol)和5-甲基吡啶-2-胺(11.3g，105mmol)。在80℃下搅拌反应混合物。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭,并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到白色固体(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(28g，77％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.98(m,1H),8.80(s,1H),8.28(d,J＝8.5Hz,1H),8.15(s,1H),7.97(d,J＝8.3Hz,2H),7.83(d,J＝8.4Hz,2H),7.59–7.56(m,1H),5.34–5.31(m,1H),4.25(q,J＝7.0Hz,2H),3.54–3.35(m,2H),2.76–2.63(m,2H),2.35(s,3H),2.22–2.18(m,1H),1.99–1.84(m,1H),1.48(s,7H),1.25–1.20(m,5H)。MS(ESI,m/z):520.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000531
在-10℃下，将步骤A的产物(2.6g，5.1mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(25mL)，搅拌并缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(6.1mL，1M四氢呋喃溶液)。混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.2g，5.1mmol)，并将得到的混悬液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将反应用盐水淬灭，并在真空中浓缩至干。残余物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。有机部分合并后，经无水Na2SO4干燥，并减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到所需产物(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(1.7g，62％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.74(s,1H),8.29(d,J＝8.5Hz,1H),8.08(s,1H),7.91(d,J＝8.3Hz,2H),7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.57(dd,J1＝8.5Hz,J2＝2.0Hz,1H),6.66(s,2H),5.20–5.17(m,1H),4.26(q,J＝7.0Hz,2H),3.60–3.43(m,2H),2.46–2.34(m,2H),2.30(s,3H),2.25–2.17(m,1H),1.95–1.90(m,1H),1.41(s,7H),1.26–1.20(m,5H)。MS(ESI,m/z):535.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310000532
将步骤B的产物(1.38g，2.6mmol)溶于甲醇(15mL)，搅拌并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，14mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸除部分溶剂，用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。有机层合并后，减压浓缩，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.18g，90％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310000541
将步骤C的产物(1.01g，2.0mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(15mL)，搅拌并加入HATU(1.1g，2.9mmol)、二异丙基乙胺(1mL，5.9mmol)和NH4Cl(1.1g，20mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.76g，75％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.71(s,1H),8.26–8.25(m,1H),8.13(s,1H),7.97–7.92(m,2H),7.82–7.72(m,2H),7.62–7.60(m,1H),6.85(s,1H),6.65(s,2H),5.52(s,1H),5.17–5.09(m,1H),3.57–3.46(m,2H),2.47–2.41(m,2H),2.33(s,3H),2.26–2.20(m,1H),1.98–1.94(m,1H),1.43(s,8H),1.29(s,1H)。MS(ESI,m/z):506.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯 烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000551
将步骤D的产物(197mg，0.39mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(2.5mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):406.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000552
将步骤E的产物(145mg，0.35mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(275mg，2.13mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(28.9mg，0.32mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基-吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(70mg，44％)。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:9.22(s,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),8.04(d,J＝1.6Hz,1H),7.82(d,J＝8.3Hz,2H),7.66(d,J＝8.3Hz,2H),7.51(dd,J1＝8.5Hz,J2＝2.0Hz,1H),6.95(s,1H),6.70(s,2H),6.52(s,1H),6.42(dd,J1＝16.7Hz,J2＝10.3Hz,1H),6.29(dd,J1＝16.7Hz,J2＝1.7Hz,1H),5.67(dd,J1＝10.3Hz,J2＝1.7Hz,1H),5.29–5.27(m,1H),3.83–3.79(m,1H),3.68–3.64(m,1H),2.56–2.50(m,1H),2.42–2.37(m,1H),2.25–2.19(m,4H),2.05–1.98(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.7,165.0,162.9,149.6,148.5,147.7,141.5,139.0,138.1,133.7,129.6,129.3,128.6,128.5,127.4,119.4,114.1,51.4,47.6,30.8,25.5,17.9。MS(ESI,m/z):460.2[M+H]+。
实施例20：(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000561
制备(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000562
将实施例19中步骤E的产物(145mg，0.35mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(275mg，2.13mmol)。5min后，在0℃下加入甲基丙烯酰氯(33.4mg，0.32mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(102mg，61％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.28(s,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,1H),8.03(s,1H),7.83(d,J＝8.2Hz,2H),7.64(d,J＝8.2Hz,2H),7.51(dd,J1＝8.4Hz,J2＝1.9Hz,1H),6.87(s,1H),6.67(s,2H),6.53(s,1H),5.27(s,1H),5.25–5.23(m,1H),5.20(s,1H),3.75–3.67(m,2H),2.52–2.45(m,1H),2.31–2.25(m,5H),1.92–1.85(m,4H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:171.1,165.7,162.9,149.6,148.6,147.6,141.5,140.6,139.1,138.1,133.7,129.5,129.3,127.5,119.5,118.0,114.1,51.2,50.0,30.9,25.8,19.7,17.9。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例21：(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲 基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000571
制备(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000572
将实施例19中步骤E的产物(145mg，0.35mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(275mg，2.13mmol)。5min后，在0℃下加入3-甲基丁-2-烯酰氯(37.9mg，0.32mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(98mg，57％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.24(s,1H),8.19(d,J＝8.5Hz,1H),8.03(s,1H),7.80(d,J＝8.3Hz,2H),7.65(d,J＝8.3Hz,2H),7.50(dd,J1＝8.6Hz,J2＝2.1Hz,1H),7.11(s,1H),6.73(s,2H),6.51(s,1H),5.75(s,1H),5.22(dd,J1＝8.0Hz,J2＝5.2Hz,1H),3.72–3.68(m,1H),3.58–3.54(m,1H),2.48–2.42(m,1H),2.41–2.35(m,1H),2.24–2.17(m,4H),1.99–1.94(m,4H),1.80(s,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.9,165.8,162.9,150.9,149.6,149.0,147.7,141.6,139.0,138.2,133.6,129.6,129.2,127.3,119.4,117.6,114.1,50.8,47.9,30.8,27.1,25.5,20.3,17.9。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例22：(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基-吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000581
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000582
将实施例19中步骤E的产物(145mg，0.35mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(275mg，2.13mmol)。5min后，在0℃下加入(E)-丁-2-烯酰氯(33.4mg，0.32mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(78mg，47％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.35(s,1H),8.18(d,J＝8.5Hz,1H),8.01(d,J＝1.9Hz,1H),7.78(d,J＝8.4Hz,2H),7.63(d,J＝8.3Hz,2H),7.48(dd,J1＝8.5Hz,J2＝2.0Hz,1H),7.20(s,1H),6.83–6.77(m,1H),6.74–6.59(m,3H),6.07(dd,J1＝15.1Hz,J2＝1.7Hz,1H),5.20(dd,J1＝8.0Hz,J2＝4.9Hz,1H),3.77–3.73(m,1H),3.62–3.58(m,1H),2.53–2.46(m,1H),2.37–2.32(m,1H),2.22(s,3H),2.19–2.13(m,1H),2.00–1.94(m,1H),1.80(dd,J1＝6.9Hz,J2＝1.5Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.8,165.4,162.9,149.6,148.8,147.6,142.4,141.5,138.9,138.1,133.5,129.5,129.2,127.3,122.7,119.5,114.1,51.1,47.4,30.7,25.4,18.2,17.8。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例23：(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4- (4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000591
步骤A：制备(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000592
将实施例19中步骤E的产物(145mg，0.35mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(212mg，2.10mmol)。5min后，加入2-氰基乙酸(27.2mg，0.32mmol)和HATU(200mg，0.52mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(95mg，57％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.34(s,1H),8.16(d,J＝8.2Hz,1H),8.02(s,1H),7.78(d,J＝7.7Hz,2H),7.59(d,J＝7.7Hz,2H),7.49(d,J＝8.2Hz,1H),7.02(s,1H),6.74(s,1H),6.27(s,2H),5.24–5.15(m,1H),3.73–3.63(m,1H),3.54–3.45(m,3H),2.69–2.56(m,1H),2.40–2.39(m,1H),2.23(s,3H),2.18–2.16(m,1H),1.97–1.95(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.9,162.9,161.4,149.6,148.6,147.7,141.0,139.1,137.8,133.7,129.4,129.3,127.5,120.4,114.3,114.2,52.4,48.1,30.9,26.3,25.2,17.9。MS(ESI,m/z):473.1[M+H]+。
步骤B：制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4- (4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000601
在0℃下将环丙烷甲醛(7.7mg，0.11mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入吡咯烷(45μL，0.55mmol)，然后加入TMS-Cl(70μL，0.55mmol)。除去冰浴，并将反应混合物搅拌10min，接着加入步骤A的产物(50mg，0.11mmol)。将反应溶液搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝27:1)，得到白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(40mg，69％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.09(s,1H),8.25(d,J＝8.4Hz,1H),8.07(s,1H),7.90(d,J＝8.2Hz,2H),7.70(d,J＝8.1Hz,2H),7.55(d,J＝8.5Hz,1H),6.78(d,J＝11.3Hz,1H),6.56(s,2H),6.46(s,1H),6.28(s,1H),5.31–5.29(m,1H),4.05–4.01(m,1H),3.93–3.90(m,1H),2.49–2.43(m,2H),2.31–2.25(m,4H),2.09–2.00(m,2H),1.24–1.23(m,2H),0.88–0.86(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.8,165.6,162.9,161.4,149.6,148.0,147.7,141.5,139.2,138.0,134.1,129.7,129.5,127.7,119.0,115.5,114.1,107.4,53.0,49.5,30.7,26.1,18.0,15.8,11.1,11.1。MS(ESI,m/z):525.2[M+H]+。
实施例24：(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4,4-二甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2- 基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000611
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4,4-二甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4- (4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000612
在0℃下将新戊醛(9.5mg，0.11mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入吡咯烷(45μL，0.55mmol)，然后加入TMS-Cl(70μL，0.55mmol)。除去冰浴，并将反应混合物搅拌10min，接着加入实施例23中步骤A的产物(50mg，0.11mmol)。将反应溶液搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝27:1)，得到白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4,4-二甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(19mg，31％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.75(s,1H),8.29(d,J＝8.5Hz,1H),8.13–8.12(m,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(d,J＝8.4Hz,2H),7.60–7.58(m,1H),7.12(s,1H),6.62(s,2H),6.14(s,1H),5.59(s,1H),5.33(t,J＝7.4Hz,1H),4.00–3.93(m,1H),3.83–3.78(m,1H),2.58–2.36(m,3H),2.33(s,3H),2.06–1.99(m,1H),1.29(s,9H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:168.6,165.2,162.7,149.4,147.8,147.7,141.6,139.3,138.2,134.3,129.9,129.7,127.9,127.8,118.8,114.6,114.0,108.5,52.8,49.9,35.4,30.8,29.1,26.1,18.0。MS(ESI,m/z):541.2[M+H]+。
实施例25：(S,E)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1- (戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000621
制备(S,E)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2- 烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000622
将实施例19中步骤E的产物(145mg，0.35mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(212mg，2.10mmol)。5min后，加入(E)-戊-2-烯酸(32.0mg，0.32mmol)和HATU(200mg，0.52mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到灰白色固体(S,E)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(88mg，51％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.23(s,1H),8.21(d,J＝8.5Hz,1H),8.04(s,1H),7.84(d,J＝8.3Hz,2H),7.68(d,J＝8.3Hz,2H),7.52(dd,J1＝8.5Hz,J2＝1.9Hz,1H),7.04(s,1H),6.88(dt,J1＝15.1Hz,J2＝6.5Hz,1H),6.75(s,2H),6.46(s,1H),6.06(dt,J1＝15.1Hz,J2＝1.6Hz,1H),5.24(dd,J1＝8.0Hz,J2＝4.9Hz,1H),3.81–3.77(m,1H),3.66–3.62(m,1H),2.58–2.51(m,1H),2.43–2.37(m,1H),2.25(s,3H),2.23–2.16(m,3H),2.05–1.98(m,1H),1.01(t,J＝7.4Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.8,165.6,162.9,149.6,148.7,148.6,147.6,141.6,139.1,138.2,133.7,129.6,129.3,127.4,120.4,119.2,114.1,51.2,47.5,30.8,25.6,25.5,17.9,12.6。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例26：(S)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔 酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000631
制备(S)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基 吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000632
将实施例19中步骤E的产物(145mg，0.35mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(212mg，2.10mmol)。5min后，加入丙炔酸(22.4mg，0.32mmol)和HATU(200mg，0.52mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到黄色固体(S)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(79mg，49％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.55(s,1H),8.28(d,J＝8.5Hz,1H),8.14(d,J＝1.9Hz,1H),7.97(d,J＝8.3Hz,2H),7.78(d,J＝8.3Hz,2H),7.59(dd,J1＝8.4Hz,J2＝2.0Hz,1H),6.65(s,2H),6.21(s,1H),5.46(s,1H),5.32–5.30(m,1H),3.91(t,J＝6.8Hz,2H),3.09(s,1H),2.60–2.54(m,1H),2.53–2.47(m,1H),2.38–2.33(m,4H),2.07–2.02(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.1,162.6,162.1,149.4,148.0,147.4,141.5,139.2,138.3,134.3,130.0,129.7,127.6,118.9,113.8,78.6,76.5,50.9,49.3,31.2,25.0,18.0。MS(ESI,m/z):458.1[M+H]+。
实施例27：(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000641
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000642
将实施例19中步骤E的产物(145mg，0.35mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(212mg，2.10mmol)。5min后，加入丁-2-炔酸(26.8mg，0.32mmol)和HATU(200mg，0.52mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(75mg，45％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.54(s,1H),8.29(d,J＝8.5Hz,1H),8.14(s,1H),7.96(d,J＝8.5Hz,2H),7.79(d,J＝8.5Hz,2H),7.59(dd,J1＝8.6Hz,J2＝1.9Hz,1H),6.72(s,2H),6.37(s,1H),5.42(s,1H),5.27(dd,J1＝8.0Hz,J2＝5.4Hz,1H),3.88–3.86(m,2H),2.59–2.48(m,2H),2.35–2.31(m,4H),2.04–2.00(m,4H)；13C NMR(DMSO,150MHz)δ:165.5,162.2,151.9,150.1,148.3,147.7,138.5,138.0,136.3,132.2,128.8,127.7,127.2,124.7,114.4,88.7,74.3,50.9,48.5,31.1,23.8,17.4,3.3。MS(ESI,m/z):472.2[M+H]+。
实施例28：(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000651
步骤A：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000652
将实施例1中步骤F的产物(21.0g，49mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(250mL)，搅拌并加入HATU(22.5g，59mmol)、二异丙基乙胺(43mL，246mmol)和4-甲氧基吡啶-2-胺(9.1g，73.5mmol)。在80℃下搅拌反应混合物。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭,并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到白色固体(17g，65％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:11.14(s,1H),8.97(s,1H),8.14–8.13(m,2H),8.05(d,J＝1.6Hz,1H),8.01–8.00(m,1H),7.93(d,J＝7.8Hz,2H),6.58(dd,J1＝5.6Hz,J2＝2.0Hz,1H),4.97–4.93(m,1H),4.33–4.26(m,2H),3.89(s,3H),3.53–3.42(m,2H),2.95–2.89(m,1H),2.34–2.07(m,2H),1.99–1.91(m,1H),1.49(s,9H),1.29(t,J＝6.6Hz,3H)。MS(ESI,m/z):536.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基 吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000661
在-10℃下，将步骤A的产物(14g，26mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(50mL)，搅拌并缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(31mL，1M四氢呋喃溶液)。混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(6g，26mmol)，并将得到的混悬液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将反应用盐水淬灭，用乙酸乙酯洗涤三次(3×500mL)。有机部分合并后，经无水Na2SO4干燥，并减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，给出所需产物(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(9g，63％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.75(s,1H),8.07–8.06(m,2H),7.91(d,J＝7.8Hz,2H),7.80(d,J＝7.8Hz,2H),6.66(s,2H),6.62(d,J＝5.5Hz,1H),5.19–5.17(m,1H),4.28–4.25(m,2H),3.91(s,3H),3.59–3.55(m,1H),3.49–3.45(m,1H),2.42–2.37(m,1H),2.27–2.22(m,1H),1.95–1.93(m,2H),1.41(s,7H),1.26–1.21(m,5H)。MS(ESI,m/z):551.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基 吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310000662
将步骤B的产物(3.7g，6.7mmol)溶于甲醇(15mL)，搅拌并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，34mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸除部分溶剂，用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(3.2g，90％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310000671
将步骤C的产物(3.1g，6.0mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，搅拌并加入HATU(3.5g，9.1mmol)、二异丙基乙胺(3.2mL，18.1mmol)和NH4Cl(3.3g，60mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2.5g，80％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.86(s,1H),8.08(s,1H),7.93–7.90(m,3H),7.81–7.73(m,2H),7.07(s,1H),6.65–6.61(m,3H),5.67(s,1H),5.16–5.07(m,1H),3.92(s,3H),3.56–3.53(m,1H),3.47–3.45(m,1H),2.46–2.39(m,2H),2.26–2.20(m,1H),1.97–1.93(m,1H),1.43(s,7H),1.29(s,2H)。MS(ESI,m/z):522.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡 咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000681
将步骤D的产物(180mg，0.34mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(2.1mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):422.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000682
将步骤E的产物(145mg，0.34mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(267mg，2.07mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(27.6mg，0.30mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，给出灰白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基-吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(90mg，56％)。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:9.09(s,1H),8.06(d,J＝5.7Hz,1H),8.04(d,J＝1.9Hz,1H),7.94(d,J＝8.3Hz,2H),7.78(d,J＝8.3Hz,2H),6.78(s,2H),6.69(s,1H),6.62(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.3Hz,1H),6.46(dd,J1＝16.8Hz,J2＝10.3Hz,1H),6.32(dd,J1＝16.8Hz,J2＝1.7Hz,1H),5.97(s,1H),5.71(dd,J1＝10.3Hz,J2＝1.7Hz,1H),5.32(dd,J1＝8.0Hz,J2＝5.0Hz,1H),3.91(s,3H),3.87–3.83(m,1H),3.72–3.68(m,1H),2.64–2.57(m,1H),2.50–2.45(m,1H),2.30–2.24(m,1H),2.09–2.05(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.8,165.8,165.1,162.7,153.4,148.3,148.3,141.6,138.6,133.8,129.9,128.7,128.6,127.6,119.0,108.2,99.1,55.6,51.3,47.7,30.8,25.6。MS(ESI,m/z):476.2[M+H]+。
实施例29：(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基-吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000691
制备(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000692
将实施例28中步骤E的产物(145mg，0.34mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(267mg，2.07mmol)。5min后，在0℃下加入甲基丙烯酰氯(31.3mg，0.30mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，给出灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(88mg，53％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.48(s,1H),8.02–8.01(m,2H),7.90(d,J＝8.2Hz,2H),7.70(d,J＝8.2Hz,2H),6.79(s,1H),6.70(s,2H),6.59(dd,J1＝5.9Hz,J2＝2.2Hz,1H),6.40(s,1H),5.28(s,1H),5.26–5.23(m,1H),5.20(s,1H),3.88(s,3H),3.75–3.69(m,2H),2.55–2.49(m,1H),2.33–2.26(m,2H),1.91–1.86(m,4H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:171.2,167.9,166.0,162.9,153.4,148.5,147.9,141.6,140.7,138.5,133.6,129.7,127.6,119.3,118.0,108.0,99.2,55.6,51.2,50.0,30.9,25.8,19.8。MS(ESI,m/z):490.2[M+H]+。
实施例30：(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1- (3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000701
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基 丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000702
将实施例28中步骤E的产物(145mg，0.34mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(267mg，2.07mmol)。5min后，在0℃下3-甲基丁-2-烯酰氯(35.5mg，0.30mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，给出灰白色固体(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(78mg，46％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.34(s,1H),8.05–8.03(m,2H),7.91(d,J＝8.2Hz,2H),7.75(d,J＝8.2Hz,2H),6.96(s,1H),6.79(s,2H),6.61(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.2Hz,1H),6.12(s,1H),5.77(s,1H),5.25(dd,J1＝7.9Hz,J2＝5.2Hz,1H),3.90(s,3H),3.74–3.70(m,1H),3.61–3.57(m,1H),2.53–2.48(m,1H),2.47–2.42(m,1H),2.26–2.21(m,1H),2.03–1.98(m,4H),1.84(s,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.9,167.0,166.0,162.8,153.3,151.0,148.9,147.9,141.7,138.6,133.5,129.8,127.5,119.2,117.6,108.1,99.1,55.6,50.8,48.0,30.8,27.2,25.6,20.4。MS(ESI,m/z):504.2[M+H]+。
实施例31：(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基- 吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000711
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000712
将实施例28中步骤E的产物(145mg，0.34mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(267mg，2.07mmol)。5min后，在0℃下加入(E)-丁-2-烯酰氯(31.3mg，0.30mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(102mg，61％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.33(s,1H),8.01(d,J＝5.8Hz,1H),7.99(d,J＝2.2Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.71(d,J＝8.3Hz,2H),6.99(s,1H),6.88–6.82(m,1H),6.74(s,2H),6.58(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.3Hz,1H),6.44(s,1H),6.10(dd,J1＝15.1Hz,J2＝1.7Hz,1H),5.25–5.23(m,1H),3.87(s,3H),3.81–3.77(m,1H),3.66–3.62(m,1H),2.58–2.53(m,1H),2.43–2.38(m,1H),2.23–2.17(m,1H),2.05–2.00(m,1H),1.84(dd,J1＝6.9Hz,J2＝1.5Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.6,166.0,165.5,162.9,153.6,148.6,148.4,142.5,141.6,138.4,133.6,129.7,127.5,122.8,119.3,107.9,99.2,55.5,51.2,47.5,30.7,25.5,18.3。MS(ESI,m/z):490.2[M+H]+。
实施例32：(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1- (戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000721
制备(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊- 2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000722
将实施例28中步骤E的产物(145mg，0.34mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(210mg，2.07mmol)。5min后，加入(E)-戊-2-烯酸(31.0mg，0.30mmol)和HATU(194mg，0.51mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(110mg，64％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.37(s,1H),8.02(d,J＝5.8Hz,1H),7.98(s,1H),7.88(d,J＝7.9Hz,2H),7.73(d,J＝7.9Hz,2H),7.07(s,1H),6.92–6.88(m,1H),6.76(s,2H),6.60(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.3Hz,1H),6.29(s,1H),6.08(d,J＝15.1Hz,1H),5.26–5.24(m,1H),3.88(s,3H),3.82–3.79(m,1H),3.69–3.65(m,1H),2.61–2.54(m,1H),2.46–2.41(m,1H),2.26–2.18(m,3H),2.07–2.01(m,1H),1.03(t,J＝7.4Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.8,166.1,165.7,162.9,153.4,148.8,148.7,148.0,141.8,138.6,133.5,129.8,127.5,120.4,119.2,108.0,99.2,55.6,51.2,47.6,30.8,25.7,25.5,12.6。MS(ESI,m/z):504.2[M+H]+。
实施例33：(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙 炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000731
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰 基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000732
将实施例28中步骤E的产物(145mg，0.34mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(210mg，2.07mmol)。5min后，加入丙炔酸(21.0mg，0.30mmol)和HATU(194mg，0.51mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到黄色固体(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(80mg，50％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.84(s,1H),8.10(d,J＝5.5Hz,1H),8.06–8.03(m,1H),7.98(d,J＝8.3Hz,2H),7.79(d,J＝8.3Hz,2H),6.65–6.63(m,3H),6.29(s,1H),5.59(s,1H),5.31–5.29(m,1H),3.92–3.90(m,5H),3.10(s,1H),2.59–2.48(m,2H),2.38–2.32(m,1H),2.07–2.02(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.9,165.5,162.6,153.3,152.2,148.4,147.5,141.5,138.4,134.0,130.0,127.7,119.0,108.2,99.0,78.6,76.4,55.6,50.9,49.3,31.2,25.0。MS(ESI,m/z):474.1[M+H]+。
实施例34：(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基-吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000741
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000742
将实施例28中步骤E的产物(145mg，0.34mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(210mg，2.07mmol)。5min后，加入丁-2-炔酸(26.0mg，0.30mmol)和HATU(194mg，0.51mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(100mg，60％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.70(s,1H),8.10(d,J＝5.8Hz,1H),8.04(d,J＝2.1Hz,1H),7.96(d,J＝8.3Hz,2H),7.80(d,J＝8.3Hz,2H),6.70(s,2H),6.64(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.3Hz,1H),6.47(s,1H),5.53(s,1H),5.27–5.25(m,1H),3.92(s,3H),3.88–3.85(m,2H),2.59–2.54(m,1H),2.52–2.47(m,1H),2.35–2.30(m,1H),2.04–1.99(m,4H)；13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:167.8,165.5,162.5,153.5,153.3,148.6,147.7,141.6,138.6,133.9,130.0,127.6,119.0,108.2,98.9,89.2,74.1,55.6,50.6,49.1,31.2,25.0,4.1。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例35：(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000751
步骤A：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000752
将实施例1中步骤F的产物(28g，65mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(250mL)，搅拌并加入HATU(30g，78mmol)、二异丙基乙胺(60mL，327mmol)和4-乙基吡啶-2-胺(12g，100mmol)。在80℃下搅拌反应混合物。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，得到白色固体(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(29g，84％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:11.22–11.10(m,1H),8.71(s,1H),8.29(s,1H),8.17–8.14(m,3H),7.96–7.94(m,2H),6.92(d,J＝5.0Hz,1H),5.02–4.91(m,1H),4.37–4.29(m,2H),3.53–3.42(m,2H),2.70(q,J＝7.6Hz,2H),2.27–2.09(m,2H),2.00–1.93(m,2H),1.51–1.48(m,9H),1.34–1.26(m,6H)。MS(ESI,m/z):534.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000761
在-10℃下，将步骤A的产物(12g，22mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(50mL)，搅拌并缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(26mL，1M四氢呋喃溶液)。混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(5.2g，22mmol)，并将得到的混悬液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将反应用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机部分合并后，用无水Na2SO4干燥，并减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，给出所需产物(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(8.4g，70％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.60(s,1H),8.29(s,1H),8.19(d,J＝5.1Hz,1H),7.92(d,J＝8.3Hz,2H),7.81(d,J＝8.5Hz,2H),6.93(dd,J1＝5.1Hz,J2＝1.3Hz,1H),6.67(s,2H),5.20–5.18(m,1H),4.28(q,J＝7.2Hz,2H),3.61–3.44(m,2H),2.71(q,J＝7.6Hz,2H),2.45–2.35(m,2H),2.29–2.20(m,1H),1.98–1.91(m,1H),1.42(s,7H),1.31–1.27(m,5H),1.25–1.21(m,3H)。MS(ESI,m/z):549.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310000771
将步骤B的产物(2.0g，3.6mmol)溶于甲醇(15mL)，搅拌并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，18mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。有机层合并后，减压浓缩，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.8g，95％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310000772
将步骤C的产物(3.1g，6.0mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，加入HATU(3.5g，9.1mmol)、二异丙基乙胺(3.2mL，18.1mmol)和NH4Cl(3.3g，60mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2.4g，78％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.96(s,1H),8.23(s,1H),8.15(d,J＝5.1Hz,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,2H),7.78–7.66(m,2H),6.98(s,1H),6.91–6.90(m,1H),6.61(s,2H),6.08(s,1H),5.09–5.07(m,1H),3.57–3.43(m,2H),2.68(q,J＝7.6Hz,2H),2.46–2.38(m,2H),2.26–2.17(m,1H),1.96–1.93(m,1H),1.42(s,7H),1.29–1.25(m,5H)。MS(ESI,m/z):520.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯 烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000781
将步骤D的产物(200mg，0.38mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(2.3mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):420.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000782
将步骤E的产物(160mg，0.38mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(295mg，2.28mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(30.9mg，0.34mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(108mg，60％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:8.81(s,1H),8.26(s,1H),8.17(d,J＝5.0Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.78(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(d,J＝5.0Hz,1H),6.80(s,2H),6.62(s,1H),6.46(dd,J1＝16.8Hz,J2＝10.2Hz,1H),6.32(dd,J1＝16.8Hz,J2＝2.0Hz,1H),5.84(s,1H),5.71(dd,J1＝10.2Hz,J2＝2.0Hz,1H),5.33(dd,J1＝8.0Hz,J2＝5.0Hz,1H),3.88–3.82(m,1H),3.73–3.67(m,1H),2.70(q,J＝7.6Hz,2H),2.64–2.56(m,1H),2.53–2.45(m,1H),2.32–2.23(m,1H),2.12–2.02(m,1H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.5,165.1,162.7,156.2,151.8,148.3,147.7,141.7,138.5,134.0,129.9,128.6,128.6,127.5,120.1,118.9,113.8,51.3,47.7,30.8,28.8,25.6,14.6。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例36：(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基 丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000791
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基丙烯 酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000792
将实施例35中步骤E的产物(160mg，0.38mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(295mg，2.28mmol)。5min后，在0℃下加入甲基丙烯酰氯(35.5mg，0.34mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(120mg，65％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.96(s,1H),8.26(s,1H),8.16(d,J＝4.9Hz,1H),7.95(d,J＝8.3Hz,2H),7.75(d,J＝8.2Hz,2H),6.92(d,J＝4.7Hz,1H),6.74(s,2H),6.56(s,1H),5.95(s,1H),5.30(s,1H),5.29–5.27(m,1H),5.22(s,1H),3.78–3.69(m,2H),2.70(q,J＝7.6Hz,2H),2.60–2.53(m,1H),2.36–2.29(m,2H),1.95–1.90(m,4H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:171.2,165.6,162.8,156.3,151.8,148.4,147.6,141.7,140.8,138.5,134.0,129.9,127.6,120.1,119.1,118.0,113.9,51.2,50.0,30.9,28.8,25.9,19.8,14.5。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例37：(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3- 甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000801
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基 丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000802
将实施例35中步骤E的产物(160mg，0.38mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(295mg，2.28mmol)。5min后，在0℃下加入3-甲基丁-2-烯酰氯(40.3mg，0.34mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(110mg，58％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.06(s,1H),8.30(s,1H),8.21–8.13(m,1H),7.96(d,J＝8.0Hz,2H),7.79(d,J＝8.0Hz,2H),6.94–6.82(m,4H),5.87(s,1H),5.79(s,1H),5.28–5.26(m,1H),3.75–3.71(m,1H),3.62–3.58(m,1H),2.70(q,J＝7.5Hz,2H),2.56–2.45(m,2H),2.28–2.23(m,1H),2.05–1.99(m,4H),1.85(s,3H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.0,165.6,162.7,156.7,151.7,150.9,148.8,147.0,141.7,138.7,133.7,130.0,127.6,120.0,119.1,117.7,114.0,50.8,48.0,30.9,28.9,27.2,25.6,20.4,14.5。MS(ESI,m/z):502.2[M+H]+。
实施例38：(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000811
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000812
将实施例35中步骤E的产物(160mg，0.38mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(230mg，2.28mmol)。5min后，加入丁-2-炔酸(29.0mg，0.34mmol)和HATU(217mg，0.57mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(120mg，65％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.09(s,1H),8.30(s,1H),8.16(d,J＝5.2Hz,1H),7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.79(d,J＝8.4Hz,2H),6.95(d,J＝5.2Hz,1H),6.71(s,2H),6.38(s,1H),5.68(s,1H),5.29–5.25(m,1H),3.88–3.85(m,2H),2.72(q,J＝7.6Hz,2H),2.58–2.46(m,2H),2.37–2.30(m,1H),2.04–1.98(m,4H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H)；13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:165.5,162.7,156.2,153.5,151.8,147.8,147.7,141.6,138.4,134.1,129.9,127.6,120.1,119.0,113.8,89.2,74.1,50.7,49.1,31.2,28.8,25.0,14.6,4.1。MS(ESI,m/z):486.2[M+H]+。
实施例39：(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000821
制备(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000822
将实施例35中步骤E的产物(160mg，0.38mmol)溶于干燥乙腈(5mL)，加入K2CO3(158mg，1.14mmol)。5min后，加入BrCN(40.2mg，0.38mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌6h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，给出黄色固体(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(85mg，50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.73(s,1H),8.27(s,1H),8.19(d,J＝5.1Hz,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(d,J＝8.4Hz,2H),6.95(dd,J1＝5.1Hz,J2＝1.3Hz,1H),5.72(s,2H),5.67(s,2H),5.24–5.21(m,1H),3.71–3.66(m,1H),3.58–3.53(m,1H),2.72(q,J＝7.6Hz,2H),2.58–2.51(m,1H),2.33–2.26(m,2H),2.08–2.01(m,1H),1.30(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.2,162.3,156.3,151.7,148.4,147.8,141.0,137.6,134.7,129.7,128.0,121.2,120.3,117.1,113.8,56.0,51.3,30.5,28.8,25.5,14.6。MS(ESI,m/z):445.2[M+H]+。
实施例40：(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000831
步骤A：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000832
将实施例1中步骤F的产物(15g，37mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(150mL)，搅拌并加入HATU(17g，45mmol)、二异丙基乙胺(33mL，186mmol)和4-氟吡啶-2-胺(6.3g，56mmol)。在80℃下搅拌反应混合物。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到白色固体(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(10g，52％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:11.12(s,1H),8.92(s,1H),8.24–8.15(m,4H),7.94(d,J＝8.3Hz,2H),6.82–6.78(m,1H),5.02–4.91(m,1H),4.37–4.29(m,2H),3.53–3.43(m,2H),2.22–2.08(m,2H),2.00–1.95(m,2H),1.51(s,9H),1.34–1.29(m,3H)。MS(ESI,m/z):524.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000841
在-10℃下，将步骤A的产物(5g，9.5mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(30mL)，搅拌并缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(11mL，1M四氢呋喃溶液)。混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(2.2g，9.5mmol)，并将得到的混悬液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将反应用盐水淬灭，并乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机部分合并后，用无水Na2SO4干燥，并减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，给出所需产物(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(3.1g，60％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.80(s,1H),8.26–8.20(m,2H),7.92(d,J＝8.3Hz,2H),7.82(d,J＝8.4Hz,2H),6.84–6.80(m,1H),6.66(s,2H),5.20–5.17(m,1H),4.28(q,J＝7.0Hz,2H),3.69–3.44(m,2H),2.44–2.20(m,3H),1.97–1.91(m,1H),1.41(s,7H),1.27–1.21(m,5H)。MS(ESI,m/z):539.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310000842
将步骤B的产物(2.0g，3.7mmol)溶于甲醇(15mL)，搅拌并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，18mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.7g，90％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310000851
将步骤C的产物(1.7g，3.4mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，搅拌并加入HATU(2.0g，5.1mmol)、二异丙基乙胺(1.8mL，10.3mmol)和NH4Cl(1.9g，34mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝28:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.4g，80％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.98(s,1H),8.25(dd,J1＝8.5Hz,J2＝5.7Hz,1H),8.20(dd,J1＝11.2Hz,J2＝2.2Hz,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,2H),7.83(d,J＝8.1Hz,2H),6.97(s,1H),6.84–6.80(m,1H),6.60(s,2H),5.75(s,1H),5.11–5.08(m,1H),3.59–3.45(m,2H),2.48–2.39(m,2H),2.26–2.19(m,1H),2.00–1.92(m,1H),1.43(s,7H),1.28(s,2H)。MS(ESI,m/z):510.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷- 2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000861
将步骤D的产物(193mg，0.38mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(2.3mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):410.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000862
将步骤E的产物(155mg，0.38mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(295mg，2.28mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(30.9mg，0.34mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水，分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，给出白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基-吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(123mg，70％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.02(s,1H),8.24(dd,J1＝8.4Hz,J2＝5.8Hz,1H),8.19(dd,J1＝11.2Hz,J2＝2.2Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,2H),7.79(d,J＝8.3Hz,2H),6.84–6.76(m,4H),6.46(dd,J1＝16.8Hz,J2＝10.2Hz,1H),6.33(dd,J1＝16.8Hz,J2＝1.9Hz,1H),5.88(s,1H),5.71(dd,J1＝10.2Hz,J2＝1.9Hz,1H),5.31(dd,J1＝8.0Hz,J2＝4.9Hz,1H),3.88–3.82(m,1H),3.73–3.68(m,1H),2.67–2.56(m,1H),2.52–2.45(m,1H),2.32–2.23(m,1H),2.12–2.03(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:170.1(d,J＝258.2Hz),165.7,165.2,162.6,154.0(d,J＝12.0Hz),150.0(d,J＝9.0Hz),148.5,141.7,138.8,133.4,130.0,128.7,128.6,127.5,119.2,108.3(d,J＝18.1Hz),102.3(d,J＝24.0Hz),51.3,47.7,30.8,25.6。MS(ESI,m/z):464.1[M+H]+。
实施例41：(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000871
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000872
将实施例40中步骤E的产物(155mg，0.38mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(230mg，2.28mmol)。5min后，加入丁-2-炔酸(29.0mg，0.34mmol)和HATU(217mg，0.57mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，给出白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(108mg，60％)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ:11.06(s,1H),8.43(dd,J1＝9.3Hz,J2＝5.7Hz,1H),8.13(s,1H),8.09–8.01(m,3H),7.83(d,J＝8.5Hz,2H),7.71(s,1H),7.14–7.09(m,1H),6.21(s,1.4H),6.05(s,0.6H),5.50–5.47(m,0.3H),5.25–5.22(m,0.7H),3.80–3.77(m,2H),2.31–2.24(m,2H),2.19–2.13(m,1H),2.02(s,2H),2.00–1.95(m,1H),1.88(s,1H),；13C NMR(DMSO-d6,150MHz)δ:168.9(d,J＝254.5Hz),166.1,162.2,154.6,151.9,150.6,148.3,138.3,136.2,131.6,127.8,127.2,124.7,107.8,101.8,88.6,74.3,50.9,48.5,31.0,23.8,3.3。MS(ESI,m/z):476.1[M+H]+。
实施例42：(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000881
步骤A：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000882
将实施例1中步骤F的产物(15g，35mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(150mL)，搅拌并加入HATU(16g，42mmol)、二异丙基乙胺(30mL，175mmol)和4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(8.5g，52mmol)。在80℃下搅拌反应混合物。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到白色固体(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟-甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(10g，50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:11.10(s,1H),8.83(s,1H),8.73(s,1H),8.46(d,J＝5.1Hz,1H),8.19(d,J＝7.8Hz,2H),7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.29(d,J＝5.0Hz,1H),4.99–4.98(m,1H),4.39–4.31(m,2H),3.53–3.43(m,2H),2.32–1.96(m,4H),1.51(s,9H),1.35–1.32(m,3H)。MS(ESI,m/z):574.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲 基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000891
在-10℃下，将步骤A的产物(7.5g，13mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(50mL)，搅拌并缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(16mL，1M四氢呋喃溶液)。混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(3.1g，13mmol)，并将得到的混悬液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将反应用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机部分合并后，用无水Na2SO4干燥，减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，给出所需产物(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟-甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(4.9g，65％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.76(s,1H),8.73(s,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,2H),7.86–7.83(m,2H),7.30(dd,J1＝5.2Hz,J2＝0.9Hz,1H),6.67(s,2H),5.21–5.18(m,1H),4.31–4.26(m,2H),3.61–3.45(m,2H),2.45–2.35(m,2H),2.30–2.20(m,1H),1.98–1.92(m,1H),1.42(s,9H),1.26–1.22(m,3H)。MS(ESI,m/z):589.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲 基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310000901
将步骤B的产物(3.8g，6.4mmol)溶于甲醇(20mL)，搅拌并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，32mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸除部分反应混合物，用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(3.4g，95％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310000902
将步骤C的产物(1.9g，3.4mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，加入HATU(2.0g，5.1mmol)、二异丙基乙胺(1.8mL，10.3mmol)和NH4Cl(1.9g，34mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.6g，83％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.03(s,1H),8.68(s,1H),8.47(d,J＝5.1Hz,1H),7.91(d,J＝8.2Hz,2H),7.82(d,J＝8.2Hz,2H),7.28(d,J＝5.1Hz,1H),7.13(s,1H),6.60(s,2H),5.78(s,1H),5.09–5.06(m,1H),3.58–3.45(m,2H),2.49–2.39(m,2H),2.28–2.19(m,1H),2.01–1.93(m,1H),1.43(s,8H),1.28(s,1H)。MS(ESI,m/z):560.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-2-(吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000911
将步骤D的产物(200mg，0.36mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(2.1mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-2-(吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):460.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000912
将步骤E的产物(165mg，0.36mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(280mg，2.2mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(30.9mg，0.34mmol)。然后将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基-吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(124mg，67％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.37(s,1H),8.65(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,2H),7.72(d,J＝8.4Hz,2H),7.25(d,J＝5.1Hz,1H),7.12(s,1H),6.70(s,2H),6.44(dd,J1＝16.8Hz,J2＝10.2Hz,1H),6.32–6.25(m,2H),5.69(dd,J1＝10.2Hz,J2＝1.9Hz,1H),5.28(dd,J1＝8.0Hz,J2＝4.8Hz,1H),3.86–3.80(m,1H),3.72–3.66(m,1H),2.64–2.53(m,1H),2.49–2.41(m,1H),2.30–2.21(m,1H),2.11–2.03(m,1H)；13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:166.0,165.2,162.7,152.8,149.0,148.7,141.7,140.6(q,J＝33.7Hz),138.7,133.1,129.8,128.8,128.5,127.5,122.8(q,J＝271.7Hz),119.6,115.5,110.6,51.4,47.7,30.8,25.6。MS(ESI,m/z):514.1[M+H]+。
实施例43：(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟-甲 基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000921
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000922
将实施例42中步骤E的产物(165mg，0.36mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(218mg，2.16mmol)。5min后，加入丁-2-炔酸(27.2mg，0.32mmol)和HATU(205mg，0.54mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(氨基甲酰基二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(123mg，65％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.79(s,1H),8.71(s,1H),8.51–8.47(m,1H),7.97(d,J＝7.9Hz,2H),7.84(d,J＝7.5Hz,2H),7.31–7.30(m,1H),6.66–6.61(m,3H),5.49(s,1H),5.26–5.24(m,1H),3.88–3.86(m,2H),2.59–2.49(m,2H),2.36–2.31(m,1H),2.06–2.00(m,4H)；13C NMR(DMSO-d6,100MHz)δ:166.4,162.1,153.4,151.9,149.9,148.3,138.4,138.1,136.1,131.5,127.9,127.1,124.8,124.3,115.1,109.8,88.6,74.3,50.9,48.4,31.0,23.7,3.3。MS(ESI,m/z):526.1[M+H]+。
实施例44：(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000931
步骤A：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-异丙基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000932
将实施例1中步骤F的产物(27g，63mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(200mL)，搅拌并加入HATU(30g，78mmol)、二异丙基乙胺(55mL，315mmol)和4-异丙基吡啶-2-胺(13g，94mmol)。在80℃下搅拌反应混合物。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到白色固体(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(24g，70％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:11.10(s,1H),8.76(s,1H),8.32(s,1H),8.17–8.14(m,3H),7.97–7.96(m,2H),6.95–6.94(m,1H),4.98–4.97(m,1H),4.36–4.29(m,2H),3.53–3.43(m,2H),2.98–2.92(m,1H),2.29–2.09(m,2H),1.99–1.92(m,2H),1.51(s,9H),1.33–1.29(m,9H)。MS(ESI,m/z):548.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-异丙基 吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000941
在10℃下，将步骤A的产物(5.0g，9.1mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(30mL)，搅拌并缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(11mL，1M四氢呋喃溶液)。混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(2.1g，9.1mmol)，并将得到的混悬液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将反应用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机部分合并后，用无水Na2SO4干燥，减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到所需产物(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-异丙基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(3.7g，72％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.89(s,1H),8.32(s,1H),8.13(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,2H),7.79(d,J＝8.5Hz,2H),6.92(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.4Hz,1H),6.64(s,2H),5.20–5.17(m,1H),4.28–4.22(m,2H),3.59–3.43(m,2H),2.97–2.91(m,1H),2.43–2.33(m,2H),2.24–2.20(m,1H),1.97–1.89(m,1H),1.40(s,7H),1.29–1.25(m,8H),1.20(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):563.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-异丙基 吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310000951
将步骤B的产物(1.3g，2.3mmol)溶于甲醇(10mL)，搅拌并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，12mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸除部分溶剂，用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.14g，93％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310000952
将步骤C的产物(0.6g，1.1mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，搅拌并加入HATU(0.66g，1.7mmol)、二异丙基乙胺(0.6mL，3.4mmol)和NH4Cl(0.6g，11mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.5g，85％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.00(s,1H),8.29(s,1H),8.16(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,2H),7.79(d,J＝8.1Hz,2H),6.94–6.88(m,2H),6.60(s,2H),6.04(s,1H),5.11–5.08(m,1H),3.58–3.43(m,2H),2.98–2.91(m,1H),2.47–2.38(m,2H),2.24–2.19(m,1H),1.96–1.93(m,1H),1.42(s,7H),1.29–1.25(m,8H)。MS(ESI,m/z):534.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡 咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000961
将步骤D的产物(145mg，0.27mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(1.6mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):434.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基-吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000962
将步骤E的产物(117mg，0.27mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(210mg，1.63mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(22mg，0.24mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基-吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(83mg，63％)。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:9.13(s,1H),8.28(s,1H),8.14(d,J＝4.9Hz,1H),7.92(d,J＝7.6Hz,2H),7.74(d,J＝7.6Hz,2H),6.92(d,J＝5.0Hz,1H),6.79–6.68(m,3H),6.44(dd,J1＝16.7Hz,J2＝10.4Hz,1H),6.31–6.26(m,2H),5.69(d,J＝10.3Hz,1H),5.31–5.29(m,1H),3.85–3.81(m,1H),3.70–3.66(m,1H),2.95–2.91(m,1H),2.61–2.54(m,1H),2.47–2.42(m,1H),2.27–2.22(m,1H),2.07–2.01(m,1H),1.27(d,J＝6.8Hz,6H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.7,165.1,162.9,160.8,152.0,148.4,147.6,141.6,138.4,133.9,129.8,128.6,128.6,127.6,119.1,118.5,112.7,51.3,47.6,34.1,30.8,25.5,23.2。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例45：(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基-吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310000971
步骤A：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000972
将实施例10中步骤B的产物(500mg，0.94mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，在0-10℃下加入三乙胺(400μL，2.82mmol)，并搅拌30min。然后向该反应混合物中逐滴加入三氟乙酸酐溶液(330μL，2.35mmol)，并在室温下搅拌10h。反应完成后，将混合物用水(50mL)稀释，并将其用饱和NaHCO3(15mL)洗涤。水层用二氯甲烷(2×100mL)洗涤，并合并有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，得到黄色油状物(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(300mg，51％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.80(s,1H),8.22–8.10(m,2H),7.86–7.65(m,4H),6.88(d,J＝4.4Hz,1H),4.75–4.68(m,1H),4.13–3.99(m,2H),3.70–3.61(m,1H),3.45–3.42(m,1H),2.38(s,3H),2.23–2.16(m,3H),1.88–1.84(m,1H),1.40(s,9H),1.13–1.11(m,3H)。MS(ESI,m/z):631.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000981
将步骤A的产物(400mg，0.63mmol)溶于乙腈(10mL)，在0-10℃下加入碳酸钾(265mg，1.91mmol)，并搅拌30min。然后向反应混合物逐滴加入碘甲烷溶液(120μL，1.91mmol)，升温度至80℃后，搅拌6h。反应完成后，将混合物用水(20mL)稀释，并在水和乙酸乙酯(3×50mL)之间萃取。有机层合并后，经无水Na2SO4干燥，减压蒸除溶剂。残余物通过色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)，得到黄色油状物(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(215mg，53％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.88(s,1H),8.29(s,1H),8.14–8.12(m,1H),8.00–7.94(m,3H),7.91–7.89(m,1H),6.92–6.91(m,1H),5.62–5.56(m,1H),4.31–4.22(m,2H),3.92–3.78(m,2H),3.68–3.67(m,2H),3.50(s,1H),2.38(s,3H),2.29–2.15(m,1H),1.91–1.82(m,1H),1.77–1.71(m,1H),1.66–1.60(m,1H),1.41(s,9H),1.15–1.13(m,3H)。MS(ESI,m/z):645.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4- 甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯
Figure BDA0002484555310000991
在10-20℃下，向步骤B的产物(215mg，0.34mmol)的乙醇(5mL)溶液中加入乙醇钠(35mg，0.51mmol)，并搅拌6h。反应完成后，将混合物用水(100mL)稀释，并在真空下浓缩。然后将其在水和乙酸乙酯(3×50mL)之间萃取。有机层合并后，经无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂。残余物通过色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得到白色固体(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸乙酯(180mg，97％)。MS(ESI,m/z):549.2[M+H]+。
步骤D：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4- 甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310000992
将步骤C的产物(180mg，0.33mmol)溶于甲醇(4mL)，搅拌并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，1.7mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸除部分溶剂，用水(10mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯萃取三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，得到(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(168mg，98％)。
步骤E：制备(S)-2-(5-氨基甲酰基-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001001
将步骤D的产物(175mg，0.35mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，搅拌并加入HATU(200mg，0.52mmol)、二异丙基乙胺(190μL，1.05mmol)和NH4Cl(190mg，3.5mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-2-(5-氨基甲酰基-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(128mg，71％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.79(s,1H),8.25(s,1H),8.14(d,J＝5.1Hz,1H),7.99–7.91(m,3H),7.75–7.69(m,1H),7.40–7.33(m,1H),6.90–6.89(m,1H),5.80–5.72(m,1H),5.10–4.99(m,1H),3.60–3.44(m,2H),2.89(d,J＝5.7Hz,2H),2.75(d,J＝5.4Hz,1H),2.57–2.44(m,1H),2.40–2.36(m,4H),2.33–2.21(m,1H),2.02–1.93(m,1H),1.45(s,6H),1.28(s,3H)。MS(ESI,m/z):520.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2- (吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001002
向步骤E的产物(128mg，0.25mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液加入三氟乙酸(1.5mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):420.2[M+H]+。
步骤G：制备(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-(甲基-氨基)-4-(4-((4-甲基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001011
向步骤F的产物(105mg，0.25mmol)在干燥二氯甲烷(5mL)中的溶液加入二异丙基乙胺(192mg，1.48mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(20.4mg，0.23mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(71mg，60％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.15(s,1H),8.23(s,1H),8.11(d,J＝5.1Hz,1H),7.94(d,J＝8.6Hz,2H),7.88(d,J＝8.6Hz,2H),7.80(s,1H),7.47–7.43(m,1H),6.87(d,J＝5.1Hz,1H),6.46(dd,J1＝16.8Hz,J2＝10.1Hz,1H),6.36–6.32(m,2H),5.71(dd,J1＝10.1Hz,J2＝2.0Hz,1H),5.23(dd,J1＝8.1Hz,J2＝3.7Hz,1H),3.89–3.83(m,1H),3.71–3.65(m,1H),2.91(d,J＝5.7Hz,3H),2.73–2.64(m,1H),2.45–2.38(m,4H),2.31–2.24(m,1H),2.13–2.05(m,1H)；13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:165.9,165.2,162.0,151.9,150.1,149.0,147.3,142.6,138.4,133.5,129.9,128.9,128.3,127.2,121.1,119.5,115.1,51.7,47.4,41.0,30.9,25.4,21.5。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例46：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001021
步骤A：制备1-(叔丁基)-2-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1,3-二氧代丙 烷-2-基)(2S)-哌啶-1,2-二羧酸酯
Figure BDA0002484555310001022
向实施例1中步骤C的产物(256g，746mmol)在乙腈(2L)中的溶液加入二异丙基乙胺(141mL，821mmol)和(S)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸(179g，781mmol)，并在室温下搅拌3h，然后蒸发除去所有挥发物。残余物用水(1000mL)稀释，并用乙酸乙酯(3000mL)萃取。分离有机相，经无水Na2SO4干燥并浓缩。残余物通过快速柱色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝8:1)，得到浅黄色油状物1-(叔丁基)-2-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1,3-二氧代丙烷-2-基)(2S)-哌啶-1,2-二羧酸酯(260g，71％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.13(d,J＝7.3Hz,2H),8.01(d,J＝7.5Hz,2H),6.29(d,J＝19.2Hz,1H),5.05–4.86(m,1H),4.39(q,J＝7.1Hz,2H),4.23(q,J＝6.9Hz,2H),4.04–3.88(m,1H),3.10–2.88(m,1H),2.34–2.19(m,1H),1.70–1.67(m,3H),1.44–1.32(m,14H),1.20(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):492.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1H-咪唑-2-基) 哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001023
向1L压力瓶中步骤A的产物(260g，530mmol)的二甲苯(1250mL)溶液加入NH4OAc(490g，6357mmol)。将反应在140℃下加热2.5h。冷却后，残余物用水(1000mL)稀释，并用乙酸乙酯(3000mL)萃取。分离有机相，经无水Na2SO4干燥，并浓缩。残余物通过快速柱色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)，得到浅黄色油状物(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(75g，30％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:10.08(s,1H),8.10–8.06(m,4H),5.44–5.36(m,1H),4.38(q,J＝7.1Hz,2H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),4.07–3.93(m,1H),2.77(t,J＝12.8Hz,1H),2.53(d,J＝12.6Hz,1H),1.91–1.61(m,4H),1.51–1.47(m,10H),1.40(t,J＝7.1Hz,3H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):472.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-4-(2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪 唑-4-基)苯甲酸
Figure BDA0002484555310001031
将步骤B的产物(4.57g，10mmol)溶于1,4-二氧六环(50mL)，加入氢氧化锂水溶液(2mol/L，50mL)，并在室温下搅拌2h。蒸除部分溶剂，用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。通过过滤分离出白色沉淀物，并干燥，得到白色固体(S)-4-(2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-4-基)苯甲酸(3.99g，90％)。
步骤D：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪 唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001032
将步骤C的产物(30.0g，67mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(250mL)，加入HATU(30.6g，80mmol)、二异丙基乙胺(57.7mL，335mmol)和吡啶-2-胺(9.5g，101mmol)，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，得到白色固体(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(29.5g，85％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.49(s,1H),9.18(s,1H),8.37(d,J＝8.4Hz,1H),8.17–8.16(m,1H),8.11(d,J＝8.4Hz,2H),7.93(d,J＝8.2Hz,2H),7.71–7.67(m,1H),6.98(dd,J1＝7.3Hz,J2＝5.8Hz,1H),5.44–5.39(m,1H),4.23(q,J＝7.1Hz,2H),3.97(d,J＝11.9Hz,1H),2.44(d,J＝12.0Hz,1H),1.81–1.61(m,4H),1.50–1.39(m,11H),1.23(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):520.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001041
在-10℃下向步骤D的产物(2.6g，5.0mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(6.0mL，1M四氢呋喃溶液)。混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.2g，5.0mmol)，并将得到的悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯萃取三次(3×100mL)。有机部分合并后，用无水Na2SO4干燥，并减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，得到产物白色固体(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.9g，71％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.80(s,1H),8.40(d,J＝8.4Hz,1H),8.28–8.26(m,1H),7.93(d,J＝8.6Hz,2H),7.84(d,J＝8.6Hz,2H),7.77–7.73(m,1H),7.06(dd,J1＝7.3Hz,J2＝5.9Hz,1H),5.92(s,2H),5.67(d,J＝4.6Hz,1H),4.32–4.24(m,2H),3.95(d,J＝12.8Hz,1H),3.42(td,J1＝13.0Hz,J2＝3.1Hz,1H),2.12–2.04(m,2H),1.92–1.86(m,1H),1.76–1.72(m,1H),1.65–1.61(m,1H),1.53–1.48(m,1H),1.43(s,9H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):535.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001051
将步骤E的产物(1.49g，2.8mmol)溶于甲醇(15mL)，加入2mol/L氢氧化锂水溶液(14mL)，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离出白色沉淀物，并干燥，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.28g，90％)。
步骤G：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001052
将步骤F的产物(1.0g，2.0mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(15mL)，加入HATU(1.1g，2.9mmol)、二异丙基乙胺(1mL，5.9mmol)和NH4Cl(1.1g，20mmol)，并在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.84g，83％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.15(s,1H),8.37(d,J＝8.1Hz,1H),8.30–8.24(m,1H),7.90(d,J＝6.8Hz,2H),7.77–7.72(m,3H),7.05–7.03(m,1H),6.77(s,1H),6.34(s,1H),6.04(s,2H),5.61–5.58(m,1H),3.93(d,J＝12.5Hz,1H),3.32(t,J＝12.9Hz,1H),2.20–2.12(m,2H),1.90–1.86(m,1H),1.75–1.64(m,2H),1.54–1.50(m,1H),1.45(s,9H)。MS(ESI,m/z):506.2[M+H]+。
步骤H：制备(S)-1-氨基-2-(哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001061
将步骤G的产物(190mg，0.39mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(2.5mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-2-(哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):406.1[M+H]+。
步骤I：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001062
将步骤H的产物(166mg，0.41mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(32.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝28:1)，得到白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(117mg，62％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:9.31(s,1H),8.33(d,J＝8.4Hz,1H),8.24(d,J＝4.0Hz,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,2H),7.75–7.69(m,3H),7.32(s,1H),7.03(dd,J1＝6.8Hz,J2＝5.3Hz,1H),6.69(s,1H),6.57(dd,J1＝16.5Hz,J2＝10.7Hz,1H),6.29–6.24(m,3H),6.02–5.97(m,1H),5.69(d,J＝10.5Hz,1H),3.81(d,J＝11.8Hz,1H),3.68(t,J＝11.8Hz,1H),2.39–2.37(m,1H),2.19–2.15(m,1H),1.89–1.83(m,2H),1.70–1.66(m,1H),1.59–1.57(m,1H)；13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:167.2,166.0,162.8,151.9,148.3,147.9,141.2,138.6,138.3,133.5,129.5,128.6,127.8,127.3,120.2,120.0,114.6,44.4,43.0,28.0.25.8,19.7。MS(ESI,m/z):460.2[M+H]+。
实施例47：
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001071
制备(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001072
将实施例46中步骤H的产物(166mg，0.41mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入甲基丙烯酰氯(37.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝28:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(116mg，60％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.23(s,1H),8.38(d,J＝8.3Hz,1H),8.31–8.25(m,1H),7.92(d,J＝8.2Hz,2H),7.80–7.75(m,3H),7.08(dd,J1＝6.7Hz,J2＝5.3Hz,1H),7.03(s,1H),6.77–5.99(m,3H),5.90(s,1H),5.20(s,1H),5.12–5.05(m,1H),3.92–3.78(m,1H),3.64–3.60(m,1H),2.34–2.31(m,1H),2.22–2.20(m,1H),1.95(s,3H),1.93–1.88(m,1H),1.82–1.80(m,1H),1.73–1.70(m,1H),1.58–1.51(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:173.1,165.9,162.8,151.8,148.2,147.6,141.2,140.5,138.8,138.3,133.6,129.9,129.6,127.5,120.1,115.9,114.7,44.3,28.0,26.0,20.6,19.9,14.3。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例48：
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001081
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001082
将实施例46中步骤H的产物(166mg，0.41mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入(E)-丁-2-烯酰氯(37.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝28:1)，得到白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(116mg，60％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.18(s,1H),8.37–8.35(m,1H),8.27–8.24(m,1H),7.89–7.87(m,2H),7.78–7.71(m,3H),7.30(s,1H),7.06–7.04(m,1H),6.90–6.84(m,1H),6.65–6.34(m,3H),6.29–6.26(m,1H),5.95–5.91(m,1H),3.82(d,J＝11.6Hz,1H),3.65–3.60(m,1H),2.42–2.41(m,1H),2.18–2.15(m,1H),2.03–2.01(m,1H),1.94–1.79(m,4H),1.70–1.68(m,1H),1.60–1.58(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.4,166.0,165.9,162.7,151.9,148.3,147.9,142.8,141.3,138.6,138.4,133.5,129.7,127.3,121.7,120.0,114.6,44.3,42.8,28.0,25.8,19.8,18.5。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例49：
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001091
制备(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001092
将实施例46中步骤H的产物(166mg，0.41mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入3-甲基丁-2-烯酰氯(42.7mg，0.36mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝28:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(130mg，65％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.25–9.18(m,1H),8.36–8.35(m,1H),8.30–8.27(m,1H),7.90–7.87(m,2H),7.79–7.73(m,3H),7.24(s,1H),7.05–7.04(m,1H),6.53(s,1H),6.30(s,2H),5.96(d,J＝4.3Hz,1H),5.79(s,1H),3.80(d,J＝12.5Hz,1H),3.58(t,J＝12.4Hz,1H),2.37–2.35(m,1H),2.20–2.17(m,1H),1.92–1.80(m,8H),1.70–1.68(m,1H),1.56–1.54(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:169.0,165.9,162.7,151.9,148.5,147.9,147.0,141.3,138.6,138.4,133.5,129.7,127.3,120.1,120.0,118.0,114.6,43.7,43.5,27.9,26.3,25.8,20.5,19.8。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例50：
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001101
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001102
将实施例46中步骤H的产物(166mg，0.41mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入丁-2-炔酸(30.3mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(97mg，50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.42(s,1H),8.33–8.20(m,2H),7.81(d,J＝8.2Hz,2H),7.69–7.58(m,3H),7.23(s,1H),7.03–6.98(m,1H),6.85(s,1H),6.11(s,2H),5.93–5.89(m,1H),4.24(d,J＝12.4Hz,1H),3.69–3.63(m,1H),2.31–2.22(m,1H),2.14–2.11(m,1H),1.96(s,3H),1.84–1.81(m,2H),1.68–1.65(m,1H),1.57–1.54(m,1H)；13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:166.1,162.8,154.8,151.9,148.1,147.8,140.9,138.5,138.1,133.4,129.4,127.3,120.4,119.9,114.6,90.9,72.9,44.5,43.8,27.8,25.7,19.7,4.2。MS(ESI,m/z):472.2[M+H]+。
实施例51：
(S,E)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001111
制备(S，E)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001112
将实施例46中步骤H的产物(166mg，0.41mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入(E)-戊-2-烯酸(36.0mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(104mg，52％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.39(s,1H),8.37–8.31(m,1H),8.28–8.21(m,1H),7.84–7.82(m,2H),7.73–7.71(m,3H),7.45(s,1H),7.07–7.00(m,1H),6.92–6.87(m,1H),6.72(s,1H),6.42–6.33(s,1H),6.28–6.17(m,2H),5.99–5.89(m,1H),3.82(d,J＝11.6Hz,1H),3.62(t,J＝12.1Hz,1H),2.42–2.41(m,1H),2.21–2.14(m,3H),1.88–1.83(m,2H),1.69–1.67(m,1H),1.61–1.58(m,1H),1.05–1.02(m,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.5,166.1,162.8,151.8,149.1,148.4,147.7,141.3,138.7,138.4,133.3,129.6,127.3,120.1,120.0,119.2,114.7,44.3,42.8,27.9,25.8,19.7,12.6,8.6。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例52：
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001121
步骤A：制备(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001131
将实施例46中步骤H的产物(166mg，0.41mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入2-氰基乙酸(30.6mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到灰白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(97mg，50％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.32–9.23(m,1H),8.34(d,J＝4.5Hz,1H),8.26–8.25(m,1H),7.89–7.85(m,2H),7.75–7.69(m,3H),7.08–7.05(m,1H),6.87(s,1H),6.51(s,1H),5.97(s,2H),5.93(d,J＝5.1Hz,1H),3.96–3.82(m,1H),3.58(s,2H),3.50(d,J＝12.8Hz,1H),2.24–2.13(m,2H),1.89–1.87(m,2H),1.75–1.59(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.9,162.8,162.5,151.8,148.3,147.9,140.8,138.7,138.0,133.7,129.5,127.5,120.5,120.2,114.6,114.2,45.3,44.1,27.8,25.7,25.4,19.2。MS(ESI,m/z):473.2[M+H]+。
步骤B：制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基-丙烯酰基)哌啶-2-基)-4- (4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001132
在0℃下将环丙烷甲醛(8.4mg，0.12mmol)溶于干燥二氯甲烷(5mL)，然后加入吡咯烷(42.7mg，0.60mmol)和TMS-Cl(65.2mg，0.60mmol)。移除冰浴，并将反应混合物搅拌10min，接着加入步骤A的产物(56.6mg，0.12mmol)。将反应溶液搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝23:1)，得到白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(31.4mg，50％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.25(s,1H),8.36(d,J＝8.3Hz,1H),8.28–8.27(m,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,2H),7.76–7.73(m,2.5H),7.66–7.65(m,0.5H),7.08–7.06(m,1H),6.94(s,1H),6.58(d,J＝11.2Hz,1H),6.50–6.47(m,1H),6.22(s,1H),6.04–6.00(m,1H),5.77(d,J＝4.0Hz,1H),3.98–3.94(m,1H),3.87–3.81(m,1H),2.33–2.28(m,1H),2.21–2.16(m,1H),2.09–2.03(m,1H),2.00–1.94(m,1H),1.88–1.86(m,1H),1.77–1.70(m,2H),1.24–1.20(m,2H),0.88–0.85(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.3,165.9,163.1,162.8,151.8,147.8,138.8,138.7,138.1,133.7,129.5,129.2,127.6,127.5,120.1,115.4,114.6,107.6,45.7,45.0,28.3,25.2,19.8,15.8,10.9,10.8。MS(ESI,m/z):525.2[M+H]+。
实施例53：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001141
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001151
将实施例46中步骤C的产物(25.2g，57mmol)溶于干燥N,N-二甲基甲酰胺(230mL)，加入HATU(26.0g，68mmol)、二异丙基乙胺(49.1mL，285mmol)和4-甲基吡啶-2-胺(9.2g，86mmol)，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，得到白色固体(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(25.8g，85％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:10.21(s,1H),8.90(s,1H),8.25(s,1H),8.13(d,J＝8.3Hz,2H),8.09(d,J＝5.0Hz,1H),7.95(d,J＝8.3Hz,2H),6.87(d,J＝5.0Hz,1H),5.42–5.40(m,1H),4.31–4.27(m,2H),4.06–3.94(s,1H),2.80–2.76(m,1H),2.51(d,J＝12.8Hz,1H),2.38(s,3H),1.91–1.90(m,1H),1.83–1.79(m,1H),1.73–1.71(m,1H),1.66–1.64(m,1H),1.52–1.48(m,10H),1.29(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):534.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001152
在-10℃下向步骤A的产物(2.9g，5.5mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(26mL)中的溶液缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(6.6mL，1M四氢呋喃溶液)。混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.3g，5.5mmol)，并将得到的悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。有机部分合并后，用无水Na2SO4干燥，并减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.2g，72％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.73(s,1H),8.26(s,1H),8.14–8.12(m,1H),7.93(d,J＝8.6Hz,2H),7.84(d,J＝8.5Hz,2H),6.90(d,J＝5.1Hz,1H),5.92(s,2H),5.68(d,J＝4.8Hz,1H),4.33–4.24(m,2H),3.95(d,J＝12.6Hz,1H),3.45–3.38(m,1H),2.40(s,3H),2.12–2.05(m,2H),1.92–1.87(m,1H),1.76–1.73(m,3H),1.66–1.62(m,1H),1.54–1.49(m,1H),1.44(s,9H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI,m/z):549.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001161
向步骤B的产物(1.53g，2.8mmol)在甲醇(15mL)中的溶液加入2mol/L氢氧化锂水溶液(14mL)，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，并用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离出白色沉淀物，干燥，得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.38g，95％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001171
向步骤C的产物(1.2g，2.3mmol)在干燥N,N-二甲基甲酰胺(16mL)中的溶液加入HATU(1.3g，3.5mmol)、二异丙基乙胺(1.2mL，6.9mmol)和NH4Cl(1.2g，23mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝32:1)，得到白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.03g，86％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.34(s,1H),8.20(s,1H),8.08(d,J＝4.9Hz,1H),7.85(d,J＝8.0Hz,2H),7.70(d,J＝7.9Hz,2H),6.99(s,1H),6.85(d,J＝4.8Hz,1H),6.68(s,1H),6.04(s,2H),5.61(d,J＝5.4Hz,1H),3.93(d,J＝12.3Hz,1H),3.33(t,J＝11.9Hz,1H),2.36(s,3H),2.18–2.11(m,2H),1.89–1.84(m,1H),1.73–1.71(m,1H),1.64–1.62(m,1H),1.53–1.49(m,1H),1.44(s,9H)。MS(ESI,m/z):520.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶- 2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001172
向步骤D的产物(202mg，0.39mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液加入三氟乙酸(2.5mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):420.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001181
向步骤E的产物(172mg，0.41mmol)在干燥二氯甲烷(5mL)中的溶液加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(32.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(120mg，62％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:9.11(s,1H),8.22(s,1H),8.11(d,J＝5.1Hz,1H),7.89(d,J＝8.4Hz,2H),7.79(d,J＝7.6Hz,2H),7.12(s,1H),6.88(d,J＝4.8Hz,1H),6.61–6.55(m,1H),6.47(s,1H),6.31–6.25(m,3H),5.98–5.97(m,1H),5.70(d,J＝10.5Hz,1H),3.82(d,J＝12.1Hz,1H),3.69(t,J＝12.4Hz,1H),2.38(s,3H),2.20–2.16(m,1H),1.94–1.58(m,5H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.2,165.9,162.8,151.9,150.1,148.2,147.5,141.2,138.3,133.7,129.6,128.7,127.8,127.4,121.2,120.0,115.1,44.4,43.0,28.0,25.8,21.6,19.7。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例54：
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001191
制备(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001192
向实施例53中步骤E的产物(172mg，0.41mmol)在干燥二氯甲烷(5mL)中的溶液加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入甲基丙烯酰氯(37.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝30:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(120mg，60％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.27(s,1H),8.21(s,1H),8.10(d,J＝5.0Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.74–7.73(m,2H),7.08(s,1H),6.87(d,J＝4.9Hz,1H),6.66(s,1H),6.24(s,2H),5.96–5.85(m,1H),5.18–5.14(m,1H),5.08–5.03(m,1H),3.90–3.79(m,1H),3.65–3.61(m,1H),2.37(s,3H),2.35–2.32(m,1H),2.22–2.19(m,1H),1.94(s,3H),1.92–1.87(m,1H),1.81–1.79(m,1H),1.71–1.68(m,1H),1.57–1.49(m,1H)；13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:173.0,165.9,162.9,151.9,150.2,148.2,147.4,141.1,140.5,138.2,133.7,129.5,127.4,121.2,120.2,115.8,115.1,44.2,44.1,28.0,26.0,21.6,20.5,19.9。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例55：
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001201
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001202
向实施例53中步骤E的产物(172mg，0.41mmol)在干燥二氯甲烷(5mL)中的溶液加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入(E)-丁-2-烯酰氯(37.6mg，0.36mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝28:1)，得到白色固体(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)-苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(120mg，60％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.43(s,1H),8.18(s,1H),8.06–8.05(m,1H),7.82(d,J＝7.7Hz,2H),7.77–7.65(m,2H),7.39(s,1H),6.87–6.80(m,3H),6.31–6.24(m,3H),5.98–5.87(m,1H),3.80–3.79(m,1H),3.67–3.55(m,1H),2.43–2.34(m,4H),2.15–2.13(m,1H),1.87–1.83(m,5H),1.66–1.64(m,1H),1.56–1.54(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.2,166.1,162.8,151.9,150.1,148.3,147.2,142.6,141.1,138.3,133.4,129.4,127.2,121.7,121.0,120.2,115.1,44.2,42.7,27.9,25.8,21.5,19.7,18.4。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例56：
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001211
制备(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001212
向实施例53中步骤E的产物(172mg，0.41mmol)在干燥二氯甲烷(5mL)中的溶液加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入3-甲基丁-2-烯酰氯(42.7mg，0.36mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝28:1)，得到白色固体产物(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(134mg，65％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.28(s,1H),8.25(s,1H),8.12(d,J＝4.7Hz,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,2H),7.82–7.81(m,2H),7.16(s,1H),6.90(d,J＝4.6Hz,1H),6.38–6.30(m,3H),5.97–5.96(m,1H),5.78(s,1H),3.79(d,J＝12.4Hz,1H),3.58(t,J＝12.4Hz,1H),2.40(s,3H),2.36–2.32(m,1H),2.20–2.18(m,1H),1.87–1.80(m,8H),1.70–1.67(m,1H),1.58–1.52(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:169.0,165.9,162.7,151.7,150.7,148.5,147.0,146.9,141.2,138.5,133.5,129.7,127.4,121.2,120.0,118.0,115.2,43.7,43.5,28.0,26.3,25.8,21.7,20.5,19.8。MS(ESI,m/z):502.2[M+H]+。
实施例57：
(S,E)-1-氨基-2-(1-肉桂酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001221
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-肉桂酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001222
向实施例53中步骤E的产物(172mg，0.41mmol)在干燥二氯甲烷(5mL)中的溶液加入二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)。5min后，在0℃下加入肉桂酰氯(60.0mg，0.36mmol)。然后将反应混合物升至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝28:1)，得到白色固体(S，E)-1-氨基-2-(1-肉桂酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(113mg，50％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.03(s,1H),8.23(s,1H),8.13(d,J＝5.0Hz,1H),7.92(d,J＝8.3Hz,2H),7.87–7.77(m,2H),7.66(d,J＝15.4Hz,1H),7.52–7.51(m,2H),7.36–7.35(m,3H),7.12(s,1H),6.90–6.88(m,2H),6.38(s,2H),6.31–6.21(m,1H),6.08–5.99(m,1H),4.01–3.88(m,1H),3.81–3.67(m,1H),2.49–2.44(m,1H),2.39(s,3H),2.22–2.20(m,1H),1.97–1.89(m,2H),1.73–1.65(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.4,165.8,162.7,151.8,150.2,148.3,147.5,143.7,141.3,138.4,135.2,133.8,130.0,129.7,129.0,128.0,127.4,121.3,119.9,117.3,115.1,44.6,43.0,28.1,25.9,21.6,19.8。MS(ESI,m/z):550.2[M+H]+。
实施例58：
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001231
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001232
向实施例53中步骤E的产物(172mg，0.41mmol)在干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入丁-2-炔酸(30.3mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(99.5mg，50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.87(s,1H),8.24(s,1H),8.15(d,J＝5.1Hz,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.83(d,J＝8.4Hz,1.7H),7.75(d,J＝8.3Hz,0.3H),6.91(d,J＝4.4Hz,1H),6.80(s,1H),6.15(s,2H),6.02(s,0.5H),5.97–5.96(m,1H),5.92(s,0.3H),5.67(s,0.2H),4.28(d,J＝12.5Hz,1H),3.67(td,J1＝13.2Hz,J2＝3.1Hz,1H),2.41(s,3H),2.37–2.33(m,1H),2.20–2.16(m,1H),2.02(s,3H),1.92–1.83(m,2H),1.74–1.58(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.6,162.6,155.0,151.8,150.2,147.9,147.6,141.2,138.3,133.9,129.8,127.5,121.3,119.9,115.0,90.9,73.0,44.5,43.8,27.8,25.8,21.6,19.9,4.3。MS(ESI,m/z):486.2[M+H]+。
实施例59：
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001241
制备(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001242
向实施例53中步骤E的产物(172mg，0.41mmol)在干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入2-氟丙烯酸(32.4mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(101mg，50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.42(s,1H),8.17(s,1H),8.06(d,J＝5.1Hz,1H),7.81(d,J＝8.3Hz,2H),7.66(d,J＝8.1Hz,2H),7.13(s,1H),6.95(s,1H),6.84(d,J＝4.9Hz,1H),6.19(s,2H),5.88–5.76(m,1H),5.26(d,J＝3.3Hz,0.5H),5.15–5.12(m,1H),5.09(d,J＝3.4Hz,0.5H),3.83–3.74(m,2H),2.35(s,3H),2.31–2.16(m,2H),1.95–1.80(m,2H),1.70–1.59(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.0,163.0,158.2,156.4,151.9,150.1,147.9,147.4,140.9,137.9,133.6,129.3,127.3,121.1,120.5,115.1,99.8,45.3,44.0,28.1,25.8,21.5,19.7。MS(ESI,m/z):492.2[M+H]+。
实施例60：
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4,4-三氟 丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001251
制备(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4,4- 三氟丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001252
向实施例53中步骤E的产物(172mg，0.41mmol)在干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液加入三乙胺(248mg，2.46mmol)。5min后，加入(E)-4,4,4-三氟丁-2-烯酸(50.4mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物继续在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝25:1)，得到白色固体(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4,4-三氟丁-2-烯酰基)-哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(122mg，55％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.23(s,1H),8.19(s,1H),8.09(d,J＝5.0Hz,1H),7.83(d,J＝8.3Hz,2H),7.69(d,J＝8.1Hz,2H),7.04(s,1H),7.01–6.96(m,1H),6.87(d,J＝4.8Hz,1H),6.78(s,1H),6.74–6.65(m,1H),6.15(s,1.6H),6.01–6.00(m,1H),5.89(s,0.3H),5.60(s,0.1H),3.87–3.73(m,2H),2.37(s,3H),2.34–2.19(m,2H),1.95–1.88(m,2H),1.73–1.56(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.9,164.1,162.8,151.8,150.2,148.2,147.4,141.2,138.1,133.7,129.5,128.4,127.3,123.5,121.7,121.3,120.2,115.1,44.9,43.5,28.0,25.8,21.5,19.4。MS(ESI,m/z):542.2[M+H]+。
实施例61：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001261
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001262
向实施例46中步骤C的产物(30.0g，67mmol)在干燥N,N-二甲基甲酰胺(250mL)中的溶液加入HATU(30.6g，80mmol)、二异丙基乙胺(57.7mL，335mmol)和5-甲基吡啶-2-胺(10.9g，101mmol)。在80℃下搅拌反应混合物3h。反应完成后(通过TLC监控)，将混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。有机层合并后，减压浓缩，并通过快速色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，得到白色固体产物(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(30.4g，85％)。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:10.08(s,1H),8.76(s,1H),8.31(d,J＝8.5Hz,1H),8.15(d,J＝8.2Hz,2H),8.10(s,1H),7.96(d,J＝8.3Hz,2H),7.58(dd,J1＝8.5Hz,J2＝1.9Hz,1H),5.40(d,J＝4.1Hz,1H),4.34–4.30(m,2H),4.06–3.96(m,1H),2.76(t,J＝12.9Hz,1H),2.54(d,J＝12.6Hz,1H),2.31(s,3H),1.95–1.89(m,1H),1.84–1.79(m,1H),1.75–1.73(m,1H),1.67–1.65(m,1H),1.52–1.44(m,10H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):534.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001271
在-10℃下向步骤A的产物(2.7g，5.0mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(6.0mL，1M四氢呋喃溶液)，并搅拌20min。在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.2g，5.0mmol)。然后将得到的悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，另外加入N,N-二甲基甲酰胺)。将反应用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。有机部分合并后，用无水Na2SO4干燥，并减压除去溶剂，得到粗残余物，对其进行柱层析色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)，得到白色固体产物(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.9g，70％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.60(s,1H),8.30(d,J＝8.4Hz,1H),8.13(s,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,2H),7.84(d,J＝8.3Hz,2H),7.58(dd,J1＝8.4Hz,J2＝1.6Hz,1H),5.93(s,2H),5.68(d,J＝5.2Hz,1H),4.32–4.26(m,2H),3.95(d,J＝13.1Hz,1H),3.42(td,J1＝13.0Hz,J2＝2.9Hz,1H),2.32(s,3H),2.12–2.05(m,2H),1.92–1.86(m,1H),1.76–1.74(m,1H),1.60–1.49(m,2H),1.44(s,9H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):549.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001281
向步骤B的产物(1.53g，2.8mmol)在甲醇(15mL)中的溶液加入2mol/L氢氧化锂水溶液(14mL)，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化至pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离出白色沉淀物，并干燥，得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.38g，95％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001282
向步骤C的产物(1.04g，2.0mmol)在干燥N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液加入HATU(1.1g，2.9mmol)、二异丙基乙胺(1.0mL，5.9mmol)和NH4Cl(1.1g，20mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×100mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝32:1)，给出白色固体(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.88g，85％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:9.15(s,1H),8.22(d,J＝8.3Hz,1H),8.05(s,1H),7.85(t,J＝6.8Hz,2H),7.72(t,J＝6.8Hz,2H),7.53(d,J＝8.5Hz,1H),6.84(s,1H),6.46(s,1H),6.03(s,2H),5.60(d,J＝4.6Hz,1H),3.92(d,J＝12.5Hz,1H),3.31(td,J1＝13.0Hz,J2＝2.7Hz,1H),2.28(s,3H),2.20–2.17(m,1H),2.14–2.10(m,1H),1.90–1.82(m,1H),1.74–1.71(m,1H),1.65–1.60(m,1H),1.55–1.48(m,1H),1.44(s,9H)。MS(ESI,m/z):520.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶- 2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001291
向步骤D的产物(202mg，0.39mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液加入三氟乙酸(2.5mL)。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到浅黄色油状物(S)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。MS(ESI,m/z):420.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001292
向步骤E的产物(189mg，0.45mmol)在干燥二氯甲烷(6mL)中的溶液加入二异丙基乙胺(349mg，2.70mmol)。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(28.5mg，0.32mmol)。然后将反应混合物加温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并将水相用乙酸乙酯萃取。有机相合并后，用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法纯化(二氯甲烷:甲醇＝28:1)，给出灰白色固体(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(132mg，62％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.34(s,1H),8.25(d,J＝8.5Hz,1H),8.05(s,1H),7.86(d,J＝8.2Hz,2H),7.75–7.74(m,2H),7.55(dd,J1＝8.5Hz,J2＝1.6Hz,1H),7.21(s,1H),6.64–6.54(m,2H),6.39–6.24(m,3H),6.02–5.93(m,1H),5.69(d,J＝10.5Hz,1H),3.81(d,J＝11.8Hz,1H),3.68(t,J＝12.1Hz,1H),2.44–2.32(m,1H),2.28(s,3H),2.17(d,J＝13.2Hz,1H),1.93–1.83(m,2H),1.70–1.57(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.2,165.9,162.8,149.6,148.3,147.3,141.2,139.4,138.3,133.5,129.5,129.4,128.6,127.8,127.4,120.1,114.2,44.4,43.0,28.0,25.8,19.7,17.9。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例62：
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001301
制备(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001302
将二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)加入到实施例61的步骤E的产物(172mg，0.41mmol)的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入甲基丙烯酰氯(37.6mg，0.36mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(120mg，60％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.85(s,1H),8.29(d,J＝8.4Hz,1H),8.12(s,1H),7.95(d,J＝8.2Hz,2H),7.83(d,J＝7.9Hz,2H),7.58(dd,J1＝8.4Hz,J2＝1.9Hz,1H),6.84(s,1H),6.27(s,2H),5.95(s,1H),5.90(s,1H),5.20(s,1H),5.12–5.06(m,1H),3.92–3.79(m,1H),3.61(t,J＝12.1Hz,1H),2.42–2.34(m,1H),2.32(s,3H),2.22(d,J＝13.8Hz,1H),1.95(s,3H),1.93–1.89(m,1H),1.82(d,J＝13.1Hz,1H),1.74–1.71(m,1H),1.59–1.51(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:173.1,165.7,162.8,149.6,148.2,147.6,141.1,140.5,139.3,138.2,133.8,129.6,129.5,127.5,120.0,115.9,114.2,44.2,29.8,28.0,26.0,20.5,19.9,18.0。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例63：
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001311
制备(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001321
将二异丙基乙胺(318mg，2.46mmol)加入到172mg(0.41mmol)实施例61的步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液中。5min后，在0℃下加入3-甲基丁-2-烯酰氯(42.7mg，0.36mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到产物(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(134mg，65％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.10(s,1H),8.25(d,J＝8.4Hz,1H),8.07(s,1H),7.88(d,J＝8.2Hz,2H),7.79(d,J＝7.4Hz,2H),7.55(d,J＝8.3Hz,1H),7.15(s,1H),6.44(s,1H),6.31(s,2H),6.00–5.93(m,1H),5.78(s,1H),3.79(d,J＝11.9Hz,1H),3.59(t,J＝12.5Hz,1H),2.41–2.33(m,1H),2.29(s,3H),2.19(d,J＝13.0Hz,1H),1.97–1.93(m,1H),1.87(s,3H),1.83(s,3H),1.80–1.77(m,1H),1.70–1.67(m,1H),1.56–1.54(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:169.0,165.8,162.7,149.7,148.5,147.8,146.9,141.3,139.1,138.3,133.7,129.6,129.4,127.3,120.0,118.0,114.1,43.7,43.5,28.0,26.3,25.8,20.5,19.9,18.0。MS(ESI,m/z):502.2[M+H]+。
实施例64：
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001322
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001331
将三乙胺(248mg，2.46mmol)加入到172mg(0.41mmol)实施例61的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液中。5min后，加入丁-2-炔酸(30.3mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(99.5mg，50％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.15–9.12(m,1H),8.25(d,J＝8.3Hz,1H),8.08–8.06(m,1H),7.89(d,J＝7.7Hz,2H),7.77(d,J＝7.6Hz,1.4H),7.67–7.62(m,0.4H),7.54(d,J＝8.1Hz,1H),7.33(d,J＝7.6Hz,0.2H),6.98(s,1H),6.42(s,1H),6.20(s,0.3H),6.13(s,1.7H),5.98–5.94(m,1H),4.26(d,J＝12.8Hz,1H),3.66(td,J1＝13.4Hz,J2＝3.1Hz,1H),2.41–2.33(m,1H),2.29(s,3H),2.17–2.14(m,1H),2.00(s,3H),1.86–1.85(m,2H),1.70–1.68(m,1H),1.61–1.55(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.7,162.7,154.9,149.6,148.0,147.7,141.2,139.2,138.2,133.7,129.6,129.5,127.4,120.0,114.2,90.9,73.0,44.5,43.8,27.8,25.8,19.8,18.0,4.3。MS(ESI,m/z):486.2[M+H]+。
实施例65:
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001341
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001342
将HATU(31.9g，84mmol)、二异丙基乙胺(60.3mL，350mmol)和4-苯基吡啶-2-胺(17.9g，105mmol)加入到31.0g(70mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(250mL)溶液中。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱法用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(35.4g，85％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.34(s,1H),9.24(s,1H),8.72–8.66(m,1H),8.22–8.15(m,3H),8.00–7.90(m,2H),7.69–7.64(m,2H),7.44–7.43(m,3H),5.42–5.30(m,1H),4.28–4.27(m,2H),4.10–4.08(m,1H),4.01–3.99(m,1H),2.85–2.79(m,1H),2.51–2.48(m,1H),1.96–1.81(m,2H),1.71–1.63(m,2H),1.49(s,9H),1.28–1.21(m,4H)。MS(ESI,m/z):596.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001351
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(7.2mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到3.6g(6.0mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.7g，7.2mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯萃取三次(3×100mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，得到粗残留物，其经过采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)的柱色谱，得到(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(2.6g，70％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.93(s,1H),8.73–8.72(m,1H),8.30(d,J＝5.2Hz,1H),7.97(d,J＝8.5Hz,2H),7.86(d,J＝8.5Hz,2H),7.74–7.72(m,2H),7.50–7.42(m,3H),7.30(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.6Hz,1H),5.93(s,2H),5.68(d,J＝4.8Hz,1H),4.33–4.25(m,2H),3.95(d,J＝12.6Hz,1H),3.43(td,J1＝13.0Hz,J2＝3.0Hz,1H),2.12–2.05(m,2H),1.93–1.87(m,1H),1.74(d,J＝13.0Hz,1H),1.66–1.63(m,1H),1.57–1.49(m,1H),1.44(s,9H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):611.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-苯基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001361
将2mol/L氢氧化锂水溶液(15mL)加入到1.83g(3.0mmol)步骤B的产物的甲醇(17mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×90mL)。通过过滤分离白色沉淀，并干燥，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.68g，96％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001362
将HATU(1.1g，2.9mmol)、二异丙基乙胺(1.0mL，5.9mmol)和NH4Cl(1.1g，20mmol)加入到1.16g(2.0mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×90mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(32:1)纯化，以得到产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.93g，80％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.21(s,1H),8.67(s,1H),8.30(d,J＝5.0Hz,1H),7.93(d,J＝7.7Hz,2H),7.79(d,J＝7.6Hz,2H),7.71(d,J＝7.3Hz,2H),7.49–7.42(m,3H),7.28–7.27(m,1H),6.87(s,1H),6.32(s,1H),6.03(s,2H),5.61(d,J＝5.6Hz,1H),3.94(d,J＝12.5Hz,1H),3.31(t,J＝13.0Hz,1H),2.21–2.12(m,2H),1.90–1.86(m,1H),1.73(d,J＝12.6Hz,1H),1.65(d,J＝12.5Hz,1H),1.56–1.48(m,1H),1.45(s,9H)。MS(ESI,m/z):582.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶- 2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001371
将三氟乙酸(2.6mL)加入到232mg(0.40mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(6mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI。m/z):482.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001372
将二异丙基乙胺(349mg，2.70mmol)加入到216mg(0.45mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(6mL)溶液中。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(32.6mg，0.36mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，以得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(144mg，60％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.15(s,1H),8.68(s,1H),8.31(d,J＝5.2Hz,1H),7.95(d,J＝8.3Hz,2H),7.84(d,J＝7.5Hz,2H),7.72(d,J＝6.8Hz,2H),7.50–7.41(m,3H),7.29(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.5Hz,1H),7.12(s,1H),6.62–6.56(m,1H),6.41–6.27(m,4H),5.99–5.98(m,1H),5.72(d,J＝10.5Hz,1H),3.83(d,J＝11.9Hz,1H),3.69(t,J＝11.4Hz,1H),2.44–2.42(m,1H),2.19(d,J＝13.3Hz,1H),1.92–1.86(m,2H),1.72–1.69(m,1H),1.62–1.59(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.2,166.0,165.9,162.7,152.5,151.1,148.2,141.2,138.4,138.2,133.6,129.7,129.3,129.1,128.7,127.8,127.4,127.4,118.2,112.3,44.4,43.0,28.0,25.8,19.7。MS(ESI,m/z):536.2[M+H]+。
实施例66：
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001381
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001391
将三乙胺(248mg，2.46mmol)加入到197mg(0.41mmol)实施例65的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(30.3mg，0.36mmol)和HATU(234mg，0.61mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，以得到产物(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(114.4mg，51％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.25(s,1H),8.66(s,1H),8.29(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,2H),7.80(d,J＝8.4Hz,2H),7.70(d,J＝6.8Hz,2H),7.49–7.40(m,3H),7.28(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.5Hz,1H),7.02(s,1H),6.46(s,1H),6.13(s,2H),5.95(d,J＝4.7Hz,1H),4.27(d,J＝12.8Hz,1H),3.67(td,J1＝13.2Hz,J2＝2.8Hz,1H),2.38–2.33(m,1H),2.16(d,J＝13.5Hz,1H),2.00(s,3H),1.87–1.84(m,2H),1.77–1.68(m,1H),1.63–1.56(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.9,162.7,154.9,152.5,151.1,148.2,148.0,141.1,138.3,138.2,133.7,129.6,129.3,129.1,127.5,127.3,120.2,118.2,112.3,90.9,73.0,44.5,43.8,27.8,25.8,19.8,4.2。MS(ESI,m/z):548.2[M+H]+。
实施例67：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001401
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001402
将HATU(27.4g，72mmol)、二异丙基乙胺(51.7mL，300mmol)和4-甲氧基吡啶-2-胺(11.2g，90mmol)加入到26.6g(60mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(240mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×180mL)。合并的有机层用无水Na2SO4干燥，在减压下浓缩，并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(3.5:1)纯化，以得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(28.3g，86％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.08(s,1H),8.89(s,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,2H),8.07–8.05(m,2H),7.96(d,J＝8.6Hz,2H),6.62(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.4Hz,1H),5.41(d,J＝3.9Hz,1H),4.35–4.29(m,2H),4.03–4.00(s,1H),3.91(s,3H),2.76(td,J1＝13.0Hz,J2＝2.8Hz,1H),2.54(d,J＝12.8Hz,1H),1.95–1.92(m,1H),1.86–1.81(m,1H),1.78–1.73(m,1H),1.68–1.65(m,1H),1.55–1.50(m,10H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):550.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001411
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(7.4mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到3.4g(6.2mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(32mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下，加入O-(二苯基氧膦基)羟基胺(1.4g，6.2mmol)，并且所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯萃取三次(3×150mL)。合并的有机部分用无水Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法用石油醚和乙酸乙酯(4:1)纯化，以得到(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(2.6g，75％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.87(s,1H),8.06(d,J＝2.3Hz,1H),8.04(d,J＝5.8Hz,1H),7.93(d,J＝8.6Hz,2H),7.84(d,J＝8.6Hz,2H),6.61(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.4Hz,1H),5.92(s,2H),5.67(d,J＝4.8Hz,1H),4.34–4.22(m,2H),3.94(d,J＝13.1Hz,1H),3.91(s,3H),3.41(td,J1＝13.0Hz,J2＝3.0Hz,1H),2.11–2.03(m,2H),1.92–1.49(m,4H),1.43(s,9H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):565.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001421
将2mol/L氢氧化锂水溶液(25mL)加入到2.82g(5.0mmol)步骤B的产物的甲醇(20mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化，直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(2.63，98％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001422
将HATU(1.3g，3.3mmol)、二异丙基乙胺(1.2mL，6.6mmol)和NH4Cl(1.2g，22mmol)加入到1.18g(2.2mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(16mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×90mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(32:1)纯化，以得到产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.93g，79％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.80(s,1H),8.09(d,J＝5.8Hz,1H),8.04(d,J＝2.3Hz,1H),7.96(d,J＝8.5Hz,2H),7.85(d,J＝8.4Hz,2H),6.84(s,1H),6.63(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.4Hz,1H),6.01(s,2H),5.74(s,1H),5.60(d,J＝4.5Hz,1H),3.98–3.95(m,1H),3.92(s,3H),3.29(td,J1＝13.0Hz,J2＝3.0Hz,1H),2.23–2.12(m,2H),1.93–1.84(m,1H),1.75(d,J＝12.8Hz,1H),1.65–1.49(m,2H),1.46(s,9H)。MS(ESI,m/z):536.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌 啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001431
将三氟乙酸(2.5mL)加入到214mg(0.40mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(6mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):436.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001432
将二异丙基乙胺(395.5mg，3.06mmol)加入到222mg(0.51mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(7mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(41.5mg，0.50mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(28:1)纯化，以得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(155mg，62％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.15(s,1H),8.05(d,J＝5.8Hz,1H),8.02(d,J＝2.3Hz,1H),7.92(d,J＝8.5Hz,2H),7.82(d,J＝7.7Hz,2H),7.10(s,1H),6.61(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.4Hz,1H),6.58–6.55(m,1H),6.36(s,1H),6.30–6.26(m,3H),5.98–5.97(m,1H),5.71(d,J＝10.7Hz,1H),3.90(s,3H),3.84–3.81(m,1H),3.72–3.65(m,1H),2.43–2.40(m,1H),2.18(d,J＝13.0Hz,1H),1.94–1.88(m,2H),1.73–1.58(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.7,167.2,166.0,162.7,153.5,148.5,148.2,141.2,138.4,133.7,129.7,128.7,127.8,127.4,120.0,108.1,99.1,55.6,44.4,43.0,28.0,25.8,19.7。MS(ESI,m/z):490.2[M+H]+。
实施例68：
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基-吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001441
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001442
将三乙胺(308mg，3.06mmol)加入到222mg(0.51mmol)实施例67的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(37.6mg，0.45mmol)和HATU(289mg，0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(127.9mg，50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.47–9.44(m,1H),8.00–7.97(m,2H),7.86–7.83(m,2H),7.74–7.71(m,1.7H),7.64–7.61(m,0.3H),7.13(s,1H),6.79(s,1H),6.58–6.55(m,1H),6.10(s,2H),5.92(d,J＝5.6Hz,1H),4.25(d,J＝12.6Hz,1H),3.86(s,3H),3.65(td,J1＝13.0Hz,J2＝2.4Hz,1H),2.35–2.26(m,1H),2.12(d,J＝13.4Hz,1H),1.98(s,3H),1.85–1.82(m,2H),1.68–1.65(m,1H),1.57–1.54(m,1H)；13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:167.6,166.1,162.8,154.8,153.6,148.4,148.0,140.9,138.2,133.5,129.4,127.4,120.4,107.8,99.2,90.9,72.9,55.5,44.5,43.8,27.8,25.7,19.8,4.2。MS(ESI,m/z):502.2[M+H]+。
实施例69：
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4,4-三 氟丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001451
制备(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4, 4-三氟丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001461
将三乙胺(308mg，3.06mmol)加入到222mg(0.51mmol)实施例67的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入(E)-4,4,4-三氟丁-2-烯酸(63.0mg，0.45mmol)和HATU(289mg，0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(32:1)纯化，以得到(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4,4-三氟丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(142.2mg，50％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.24(s,1H),8.04–8.01(m,2H),7.89(d,J＝8.0Hz,2H),7.74(d,J＝8.0Hz,2H),6.99(d,J＝15.3Hz,1H),6.83(s,1H),6.73–6.68(m,1H),6.61–6.60(m,1H),6.55(m,1H),6.15(s,1.6H),6.02(d,J＝4.3Hz,1H),5.75(s,0.3H),5.56(s,0.1H),3.90(s,3H),3.87–3.83(m,1H),3.77–3.75(m,1H),2.35–2.29(m,1H),2.20(d,J＝13.0Hz,1H),1.95–1.90(m,2H),1.73–1.70(m,1H),1.65–1.59(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.7,165.9,164.1,162.8,153.5,148.5,148.1,141.1,138.2,133.8,129.9,129.6,128.3,127.5,123.5,120.0,108.0,99.2,55.6,44.9,43.6,28.0,25.8,19.5。MS(ESI,m/z):558.1[M+H]+。
实施例70：
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基-吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001471
制备(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001472
将三乙胺(308mg，3.06mmol)加入到222mg(0.51mmol)实施例67的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入2-氟丙烯酸(40.5mg，0.45mmol)和HATU(289mg，0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×60mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(32:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(129.4mg，50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.46(s,1H),8.00–7.98(m,2H),7.84(d,J＝8.3Hz,2H),7.70(d,J＝8.1Hz,2H),7.01(s,1H),6.86(s,1H),6.57(dd,J1＝5.8Hz,J2＝2.4Hz,1H),6.19(s,2H),5.88–5.81(m,1H),5.26(d,J＝3.3Hz,0.5H),5.14–5.13(m,1H),5.09(d,J＝3.5Hz,0.5H),3.87(s,3H),3.83–3.73(m,2H),2.34–2.16(m,2H),1.95–1.81(m,2H),1.71–1.60(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.6,166.1,163.0,158.2,156.4,153.6,148.4,147.8,140.9,138.0,133.7,129.3,127.4,120.4,107.8,99.9,99.3,55.5,45.3,44.0,28.1,25.8,19.8。MS(ESI,m/z):508.2[M+H]+。
实施例71：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001481
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001482
将HATU(24.2g，63.6mmol、二异丙基乙胺(45.7mL，365mmol)和4-异丙基吡啶-2-胺(10.8g，80mmol)加入到23.5g(53mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(230mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×180mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，以得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(25.3g，85％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.17(s,1H),8.82(s,1H),8.33–8.32(m,1H),8.17–8.13(m,3H),7.97(d,J＝8.6Hz,2H),6.94(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.5Hz,1H),5.41(d,J＝3.9Hz,1H),4.31(q,J＝7.1Hz,2H),4.02–4.00(m,1H),2.98–2.91(m,1H),2.77(td,J1＝13.1Hz,J2＝2.8Hz,1H),2.53(d,J＝12.6Hz,1H),1.94–1.92(m,1H),1.85–1.81(m,1H),1.75–1.72(m,1H),1.68–1.64(m,1H),1.51–1.49(m,10H),1.31–1.28(m,9H)。MS(ESI,m/z):562.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001491
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(7.2mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到3.4g(6.0mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.4g，6.0mmol)，并且所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。反应用盐水淬灭，并在真空下浓缩至干。残留物用乙酸乙酯洗涤三次(3×140mL)。合并的有机部分用无水Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到产物(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(2.6g，76％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.67(s,1H),8.34–8.30(m,1H),8.15–8.11(m,3H),7.96(d,J＝8.6Hz,2H),6.93(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.5Hz,1H),5.92(s,2H),5.56(d,J＝3.9Hz,1H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),4.00–3.98(m,1H),3.20(td,J1＝13.0Hz,J2＝2.7Hz,1H),2.98–2.91(m,1H),2.47(d,J＝12.8Hz,1H),1.99–1.94(m,1H),1.86–1.79(m,1H),1.75–1.71(m,1H),1.67–1.62(m,1H),1.50–1.48(m,10H),1.31–1.28(m,9H)。MS(ESI,m/z):577.3[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-异丙基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001501
将2mol/L氢氧化锂水溶液(25mL)加入到2.88g(5.0mmol)步骤B的产物的甲醇(20mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×130mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-异丙基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(2.69g，98％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001502
将HATU(1.3g，3.3mmol)、二异丙基乙胺(1.2mL，6.6mmol)和NH4Cl(1.2g，22mmol)加入到1.21g(2.2mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(16mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×110mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(32:1)纯化，得到产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.96g，80％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.05(s,1H),8.35(s,1H),8.16(d,J＝5.1Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,2H),7.94(d,J＝8.6Hz,2H),7.05(s,1H),6.93(dd,J1＝5.0Hz,J2＝1.5Hz,1H),6.28(s,1H),5.93(s,2H),5.56(d,J＝4.0Hz,1H),3.38(d,J＝13.1Hz,1H),3.20(td,J1＝13.0Hz,J2＝2.7Hz,1H),2.98–2.90(m,1H),2.45(d,J＝12.8Hz,1H),1.96–1.81(m,2H),1.69–1.66(m,1H),1.64–1.60(m,1H),1.53–1.46(m,10H),1.31(s,3H),1.28(s,3H)。MS(ESI,m/z):548.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌 啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001511
将三氟乙酸(3.0mL)加入到274mg(0.50mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(6mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):448.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001512
将二异丙基乙胺(395.5mg，3.06mmol)加入到228mg(0.51mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(7mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(41.5mg，0.50mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(28:1)纯化，得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(166.3mg，65％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.13(s,1H),8.30(s,1H),8.16(d,J＝5.1Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.82(d,J＝7.7Hz,2H),7.04(s,1H),6.95–6.94(m,1H),6.62–6.55(m,1H),6.31–6.25(m,4H),5.98–5.97(m,1H),5.71(d,J＝10.7Hz,1H),3.84–3.63(m,2H),2.98–2.91(m,1H),2.42–2.39(m,1H),2.22–2.17(m,1H),1.94–1.85(m,2H),1.72–1.67(m,1H),1.61–1.58(m,1H),1.30(s,3H),1.28(s,3H)；13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:167.2,165.8,162.7,160.9,152.0,148.2,147.5,141.2,138.4,133.8,129.7,128.7,127.8,127.4,119.9,118.6,112.8,44.4,43.0,34.2,28.0,27.3,25.8,23.2,19.7。MS(ESI,m/z):502.2[M+H]+。
实施例72：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001521
步骤A：制备(S)-2-(4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-5-(乙氧基羰 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001531
将HATU(23.7g，62.4mmol)、二异丙基乙胺(44.8mL，260mmol)和4-氯吡啶-2-胺(10.0g，78mmol)加入到23.0g(52mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(230mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×180mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用石油醚和乙酸乙酯(2.5:1)纯化，得到(S)-2-(4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(20.1g，70％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.70(s,1H),9.60(s,1H),8.58(d,J＝1.7Hz,1H),8.16(d,J＝5.5Hz,1H),8.02(d,J＝8.4Hz,2H),7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.10(dd,J1＝5.5Hz,J2＝1.9Hz,1H),5.46–5.42(m,1H),4.32–4.26(m,2H),4.01–4.00(m,1H),2.84–2.81(m,1H),1.83–1.79(m,2H),1.72–1.71(m,2H),1.68–1.61(m,2H),1.50(s,9H),1.30–1.27(m,3H)。MS(ESI,m/z):554.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-5-(乙氧 基羰基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001532
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(8.4mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到3.9g(7.0mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.6g，7.0mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。反应用盐水淬灭，并在真空下浓缩至干。残留物用乙酸乙酯洗涤三次(3×120mL)。合并的有机部分用无水Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-5-(乙氧基-羰基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(2.8g，71％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.78(s,1H),8.47(s,1H),8.15–8.12(m,1H),7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.86(d,J＝8.4Hz,2H),7.11(dd,J1＝5.5Hz,J2＝1.9Hz,1H),5.95(s,2H),5.43–5.39(m,1H),4.27–4.23(m,2H),3.65(d,J＝12.7Hz,1H),3.34(t,J＝13.0Hz,1H),2.96(d,J＝13.1Hz,1H),1.92–1.81(m,1H),1.75–1.71(m,2H),1.65–1.58(m,2H),1.38(s,9H),1.25–1.23(m,3H)。MS(ESI,m/z):569.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氯吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001541
将2mol/L氢氧化锂水溶液(25mL)加入到2.84g(5.0mmol)步骤B的产物的甲醇(20mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×110mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(2.57g，95％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001551
将HATU(1.3g，3.5mmol)、二异丙基乙胺(1.2mL，6.9mmol)和NH4Cl(1.2g，23mmol)加入到1.24g(2.3mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(12mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.76g，70％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.85(s,1H),8.56(s,1H),8.15–8.12(m,1H),7.89(d,J＝8.0Hz,2H),7.76(d,J＝8.1Hz,2H),7.20(s,1H),7.06(dd,J1＝5.5Hz,J2＝1.9Hz,1H),6.41(s,1H),5.96(s,2H),5.44–5.38(m,1H),3.68(d,J＝12.2Hz,1H),3.59(t,J＝12.9Hz,1H),2.97(d,J＝13.0Hz,1H),2.00–1.87(m,1H),1.84–1.79(m,2H),1.65–1.56(m,2H),1.36(s,9H)。MS(ESI,m/z):540.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2- 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001552
将三氟乙酸(3.6mL)加入到323mg(0.60mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(6mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):440.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001561
将二异丙基乙胺(348.9mg，2.7mmol)加入到198mg(0.45mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(6mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(29.0mg，0.32mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，以得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(133.4mg，60％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.22(s,1H),8.48(s,1H),8.18–8.17(m,1H),7.89(d,J＝8.0Hz,2H),7.81–7.79(m,2H),7.24(s,1H),7.08–7.07(m,1H),6.62–6.55(m,1H),6.41(s,1H),6.31–6.22(m,3H),5.97–5.96(m,1H),5.72(d,J＝10.6Hz,1H),3.83(d,J＝12.6Hz,1H),3.68(t,J＝11.9Hz,1H),2.43–2.40(m,1H),2.19(d,J＝13.3Hz,1H),1.93–1.88(m,2H),1.73–1.69(m,1H),1.63–1.60(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.3,165.9,162.7,152.8,148.5,148.3,146.2,141.3,138.6,133.1,129.7,128.8,127.8,127.4,120.4,120.1,114.7,44.4,43.0,28.0,25.8,19.7。MS(ESI,m/z):494.1[M+H]+。
实施例73：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001571
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001572
将HATU(31.9g，84.0mmol)、二异丙基乙胺(60.3mL，350mmol)和4-乙基吡啶-2-胺(12.8g，105mmol)加入到31.0g(70mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(250mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×180mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(32.5g，85％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:10.13(s,1H),8.88(s,1H),8.29(s,1H),8.15(d,J＝8.5Hz,2H),8.12(d,J＝5.1Hz,1H),7.96(d,J＝8.5Hz,2H),6.90(dd,J1＝5.1Hz,J2＝1.4Hz,1H),5.41–5.40(m,1H),4.32–4.28(m,2H),4.01–4.00(m,1H),2.75–2.73(m,1H),2.69(q,J＝7.6Hz,2H),2.52(d,J＝13.0Hz,1H),1.91–1.89(m,1H),1.84–1.78(m,1H),1.74–1.72(m,1H),1.65(d,J＝13.0Hz,1H),1.50(s,9H),1.48–1.47(m,1H),1.31–1.27(m,6H)。MS(ESI,m/z):548.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001581
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(9.6mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到4.4g(8.0mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.9g，8.0mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。反应用盐水淬灭，并在真空下浓缩至干。残留物用乙酸乙酯洗涤三次(3×130mL)。合并的有机部分用无水Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到产物(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(3.4g，75％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.67(s,1H),8.29(s,1H),8.17(d,J＝5.1Hz,1H),7.93(d,J＝8.5Hz,2H),7.85(d,J＝8.5Hz,2H),6.93(dd,J1＝5.1Hz,J2＝1.4Hz,1H),5.93(s,2H),5.68(d,J＝5.0Hz,1H),4.32–4.26(m,2H),3.95(d,J＝12.5Hz,1H),3.42(td,J1＝13.1Hz,J2＝3.1Hz,1H),2.71(q,J＝7.6Hz,2H),2.11(d,J＝13.3Hz,1H),1.92–1.87(m,1H),1.75(d,J＝13.1Hz,1H),1.66–1.64(m,1H),1.55–1.49(m,1H),1.44–1.42(m,10H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):563.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001591
将2mol/L氢氧化锂水溶液(35mL)加入到3.90g(7.0mmol)步骤B的产物的甲醇(25mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×130mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(3.60g，97％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001592
将HATU(1.7g，4.5mmol)、二异丙基乙胺(1.6mL，9.0mmol)和NH4Cl(1.6g，30mmol)加入到1.60g(3.0mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(17mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×90mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，以得到产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.20g，75％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.74(s,1H),8.27(s,1H),8.18(d,J＝5.1Hz,1H),7.96(d,J＝8.5Hz,2H),7.85(d,J＝8.4Hz,2H),6.94(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.4Hz,1H),6.67(s,1H),6.01(s,2H),5.73(s,1H),5.61–5.60(m,1H),3.93(d,J＝13.0Hz,1H),3.29(td,J1＝13.0Hz,J2＝2.9Hz,1H),2.71(q,J＝7.6Hz,2H),2.23–2.13(m,2H),1.94–1.84(m,1H),1.68–1.61(m,2H),1.57–1.50(m,1H),1.46(s,9H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI,m/z):534.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶- 2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001601
将三氟乙酸(4.8mL)加入到426mg(0.80mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(6mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):434.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001602
将二异丙基乙胺(672.0mg，3.90mmol)加入到281mg(0.65mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(8mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(41.2mg，0.46mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，得到产物(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(237.7mg，75％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.96(s,1H),8.26(s,1H),8.16(d,J＝5.0Hz,1H),7.93(d,J＝7.9Hz,2H),7.83(d,J＝6.8Hz,2H),7.03(s,1H),6.92(d,J＝4.9Hz,1H),6.61–6.56(m,1H),6.32–6.27(m,3H),6.14(s,1H),6.01–5.98(m,1H),5.71(d,J＝10.3Hz,1H),3.83(d,J＝11.5Hz,1H),3.69(t,J＝12.3Hz,1H),2.70(q,J＝7.6Hz,2H),2.43–2.40(m,1H),2.19(d,J＝13.0Hz,1H),1.92–1.88(m,2H),1.72–1.69(m,1H),1.62–1.60(m,1H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.3,165.7,162.6,156.2,151.9,148.2,147.6,141.3,138.4,133.8,129.8,128.7,127.8,127.4,120.1,119.8,113.9,44.4,43.0,28.8,28.0,25.8,19.7,14.6。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例74：
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基丙烯酰基 哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001611
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基丙烯 酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001612
将二异丙基乙胺(672.0mg，3.90mmol)加入到281mg(0.65mmol)实施例73的步骤E的产物的干燥二氯甲烷(8mL)溶液。5min后，在0℃下加入甲基丙烯酰氯(48.1mg，0.46mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(245mg，75％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.22(s,1H),8.25(s,1H),8.14(d,J＝4.9Hz,1H),7.91(d,J＝7.7Hz,2H),7.77(d,J＝6.7Hz,2H),7.02(s,1H),6.91(d,J＝4.8Hz,1H),6.51(s,1H),6.24(s,2H),5.95–5.90(m,1H),5.18(s,1H),5.08(s,1H),3.85–3.83(m,1H),3.64–3.61(m,1H),2.69(q,J＝7.6Hz,2H),2.34–2.32(m,1H),2.20(d,J＝13.2Hz,1H),1.94(s,3H),1.92–1.87(m,1H),1.80(d,J＝12.9Hz,1H),1.70(d,J＝13.2Hz,1H),1.57–1.50(m,1H),1.27(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:173.0,165.9,162.8,156.2,151.9,148.2,147.5,141.1,140.5,138.3,133.8,129.6,127.5,120.1,120.0,115.9,114.0,44.2,29.8,28.8,28.1,26.0,20.5,19.9,14.5。MS(ESI,m/z):502.2[M+H]+。
实施例75：
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001621
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001631
将二异丙基乙胺(672.0mg，3.90mmol)加入到281mg(0.65mmol)实施例73的步骤E的产物的干燥二氯甲烷(8mL)溶液。5min后，在0℃下加入(E)-丁-2-烯酰氯(48.1mg，0.46mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，得到(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(245mg，75％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.32(s,1H),8.24(s,1H),8.12–8.11(m,1H),7.87(d,J＝7.3Hz,2H),7.83–7.72(m,2H),7.29(s,1H),6.89(d,J＝4.3Hz,1H),6.87–6.83(m,1H),6.69(s,1H),6.32(s,2H),6.28–6.25(m,1H),6.01–5.87(m,1H),3.81–3.80(m,1H),3.68–3.57(m,1H),2.67(q,J＝7.3Hz,2H),2.40–2.39(m,1H),2.15(d,J＝12.4Hz,1H),1.93–1.76(m,5H),1.68–1.66(m,1H),1.58–1.56(m,1H),1.26(t,J＝7.5Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.3,166.0,162.8,156.1,152.0,148.3,147.5,142.7,141.2,138.3,133.6,129.5,127.3,121.7,120.1,119.9,114.0,44.3,42.8,28.7,28.0,25.8,19.7,18.4,14.5。MS(ESI,m/z):502.2[M+H]+。
实施例76：
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2- 烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001641
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基 丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001642
将二异丙基乙胺(672.0mg，3.90mmol)加入到281mg(0.65mmol)实施例73的步骤E的产物的干燥二氯甲烷(8mL)溶液。5min后，在0℃下加入3-甲基丁-2-烯酰氯(54.5mg，0.46mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，然后加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4,干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(251mg，75％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.46(s,1H),8.29(s,1H),8.13(d,J＝4.9Hz,1H),7.94(d,J＝8.1Hz,2H),7.80(d,J＝7.3Hz,2H),7.20(s,1H),6.92(d,J＝4.8Hz,1H),6.48(s,1H),6.30(s,2H),6.01–5.91(m,1H),5.77(s,1H),3.79(d,J＝12.4Hz,1H),3.61–3.55(m,1H),2.69(q,J＝7.6Hz,2H),2.37–2.31(m,1H),2.18(d,J＝12.9Hz,1H),1.94–1.79(m,8H),1.69–1.52(m,2H),1.27(t,J＝7.6Hz,3H)；13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:169.0,166.0,162.7,156.9,151.7,148.5,146.9,146.6,141.2,138.5,133.4,129.6,127.5,120.1,119.9,118.0,114.2,43.7,43.5,28.8,27.9,26.2,25.8,20.5,19.8,14.5。MS(ESI,m/z):516.2[M+H]+。
实施例77：
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001651
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001652
将三乙胺(394.6mg，3.9mmol)加入到281mg(0.65mmol)实施例73的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(51.9mg，0.62mmol)和HATU(370.7mg，0.98mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，然后加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(194.8mg，60％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.04(s,1H),8.25(s,1H),8.15(d,J＝5.1Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,2H),7.80(d,J＝8.4Hz,1.7H),7.71(d,J＝8.4Hz,0.3H),6.96(s,1H),6.92–6.90(m,1H),6.30(s,1H),6.13(s,2H),5.95–5.94(m,1H),4.27(d,J＝12.6Hz,1H),3.66(td,J1＝13.2Hz,J2＝3.0Hz,1H),2.69(q,J＝7.6Hz,2H),2.40–2.30(m,1H),2.17–2.14(m,1H),2.00(s,3H),1.90–1.84(m,2H),1.72–1.68(m,1H),1.61–1.56(m,1H),1.27(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.6,162.5,156.3,155.0,151.8,147.9,147.6,141.2,138.3,133.9,129.8,127.5,120.1,119.8,113.9,90.9,73.0,44.5,43.8,28.8,27.8,25.8,19.9,14.6,4.3。MS(ESI,m/z):500.2[M+H]+。
实施例78：
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001661
步骤A：制备(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001662
将三乙胺(394.6mg，3.9mmol)加入到281mg(0.65mmol)实施例73的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入2-氰基乙酸(52.7mg，0.62mmol)和HATU(370.7mg，0.98mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。然后，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，得到(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(195.2mg，60％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.38(s,1H),8.19(s,1H),8.14–8.10(m,1H),7.89–7.83(m,2H),7.70–7.69(m,2H),7.08(s,1H),6.92–6.89(m,1H),6.79(s,1H),6.09–5.82(m,3H),3.87–3.81(m,1H),3.61–3.55(m,2H),3.47–3.45(m,1H),2.72–2.66(m,2H),2.23–2.14(m,2H),1.90–1.83(m,2H),1.65–1.59(m,2H),1.24–1.19(m,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.0,163.0,162.6,156.3,151.9,148.2,147.4,140.7,137.9,133.7,129.3,128.7,127.8,127.4,120.0,114.1,45.3,44.0,28.7,27.7,25.6,25.34,19.2,14.5。MS(ESI,m/z):501.2[M+H]+。
步骤B：制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基-丙烯酰基)哌啶-2-基)-4- (4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001671
在0℃下，将吡咯烷(42.7mg，0.60mmol)和TMS-Cl(65.2mg，0.60mmol)加入到环丙烷甲醛(8.4mg，0.12mmol)的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。除去冰浴，并将反应混合物搅拌10min，随后添加60.1mg(0.12mmol)步骤A的产物。将反应溶液搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为白色固体(33.2mg，50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.17(s,1H),8.31(s,1H),8.18(d,J＝5.0Hz,1H),7.99(d,J＝8.0Hz,2H),7.83(d,J＝7.9Hz,2H),6.97(d,J＝4.8Hz,1H),6.56(d,J＝11.2Hz,1H),6.45(s,1H),6.20(s,2H),5.88(s,1H),5.77(d,J＝4.1Hz,1H),4.03–3.98(m,1H),3.84–3.78(m,1H),2.73(q,J＝7.6Hz,2H),2.36–2.32(m,1H),2.21–2.17(m,1H),2.11–2.04(m,1H),2.01–1.96(m,1H),1.90–1.87(m,1H),1.78–1.70(m,2H),1.30(t,J＝7.6Hz,3H),1.25–1.23(m,2H),0.93–0.83(m,2H)；13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:166.2,165.9,165.7,164.1,162.9,156.2,151.9,147.5,138.0,133.8,129.5,129.2,127.6,127.5,120.0,115.4,114.0,107.6,45.7,45.0,28.7,28.3,25.2,19.7,15.8,14.6,10.9,10.8。MS(ESI,m/z):553.2[M+H]+。
实施例79：
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基 吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001681
制备(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4- 乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001682
在0℃下，将吡咯烷(42.7mg，0.60mmol)和TMS-Cl(65.2mg，0.60mmol)加入到异丁醛(8.6mg，0.12mmol)的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。除去冰浴，并将反应混合物搅拌10min，随后添加60.1mg(0.12mmol)实施例78的步骤A的产物。将反应溶液搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为白色固体(33.3mg，50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.87(s,1H),8.27(s,1H),8.18(d,J＝5.1Hz,1H),7.97(d,J＝8.4Hz,2H),7.82(d,J＝8.4Hz,1.5H),7.77(d,J＝8.4Hz,0.5H)6.94(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.4Hz,1H),6.90(d,J＝10.4Hz,1H),6.56(s,1H),6.22(s,2H),5.98–5.81(m,2H),3.88–3.74(m,1H),3.03–2.90(m,1H),2.71(q,J＝7.5Hz,2H),2.36–2.18(m,2H),2.04–1.94(m,1H),1.89–1.86(m,1H),1.76–1.73(m,3H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H),1.17–1.00(m,6H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.5,162.6,160.6,156.3,151.8,147.6,140.6,138.0,134.1,129.7,129.5,127.7,127.6,120.2,120.1,114.3,113.9,109.5,45.6,45.1,31.8,30.2,28.8,25.2,21.7,21.6,20.0,14.6。MS(ESI,m/z):555.2[M+H]+。
实施例80：
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰 基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001691
制备(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2- 烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001692
将三乙胺(394.6mg，3.9mmol)加入到281mg(0.65mmol)实施例73的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入(E)-戊-2-烯酸(62.1mg，0.62mmol)和HATU(370.7mg，0.98mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。然后加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，得到(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(201.1mg，60％)。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ:9.32(s,1H),8.24(s,1H),8.12(d,J＝4.6Hz,1H),7.88(d,J＝7.9Hz,2H),7.83–7.73(m,2H),7.30(s,1H),6.92–6.87(m,2H),6.69(s,1H),6.35(s,2H),6.23(d,J＝14.6Hz,1H),6.00–5.95(m,1H),3.82–3.81(m,1H),3.65–3.63(m,1H),2.67(q,J＝7.6Hz,2H),2.43–2.41(m,1H),2.23–2.14(m,3H),1.90–1.83(m,2H),1.69–1.67(m,1H),1.59–1.57(m,1H),1.26(t,J＝7.6Hz,3H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H)；13C NMR(150MHz,CDCl3)δ:167.5,166.0,162.8,156.1,152.0,149.0,148.3,147.4,141.2,138.3,133.5,129.6,127.3,120.0,119.9,119.3,114.0,44.2,42.8,28.7,28.0,25.8,25.8,19.7,14.5,12.6。MS(ESI,m/z):516.2[M+H]+。
实施例81：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)- 1-(甲基氨基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001701
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1-(2，2，2-三氟乙酰氨)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001702
在0℃-10℃下，将三乙胺(400μL，2.82mmol)加入到528mg(0.94mmol)实施例73的步骤B的产物的二氯甲烷(5mL)溶液中，并搅拌30min。然后，将三氟乙酸酐溶液(330μL，2.35mmol)滴加到反应混合物中，并在室温下搅拌10h。反应完成后，混合物用水(50mL)稀释，并将其用饱和NaHCO3(15mL)洗涤。水层用二氯甲烷(2×15mL)洗涤，并合并有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用石油醚和乙酸乙酯(2.5:1)纯化，得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(2,2,2-三氟乙酰氨)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为黄色油状物(305g，49％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.03(s,1H),8.30(s,1H),8.17(d,J＝4.6Hz,1H),7.85–7.82(m,4H),6.95(d,J＝4.6Hz,1H),5.39–5.38(m,1H),4.13–4.12(m,2H),3.93–3.91(m,1H),3.36–3.21(m,1H),2.71(q,J＝7.5Hz,2H),2.22–2.17(m,1H),2.09–2.07(m,1H),1.84–1.80(m,1H),1.73–1.65(m,2H),1.50–1.48(m,1H),1.43(s,9H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H),1.14(t,J＝7.0Hz,3H)。MS(ESI,m/z):659.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001711
在0℃-10℃下将碳酸钾(200mg，1.39mmol)加入305mg(0.46mmol)步骤A的产物的乙腈(10mL)溶液，并搅拌30min。然后，将碘甲烷溶液(90μL，1.39mmol)滴加到反应混合物，此时温度被增加至80℃，并将混合物搅拌额外的6h。反应完成后，混合物用(20mL)水稀释，并在水和乙酸乙酯(3×30mL)之间分配。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。残留物通过色谱法用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，以得到产物(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为黄色油状物(130mg，42％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.88(s,1H),8.29(s,1H),8.14–8.12(m,1H),8.00–7.94(m,3H),7.91–7.89(m,1H),6.92–6.91(m,1H),5.62–5.56(m,1H),4.31–4.22(m,2H),3.92–3.80(m,1H),3.68–3.67(m,1.8H),3.50(s,1.2H),2.99–2.81(m,1H),2.70(q,J＝7.6Hz,2H),2.49–2.40(m,1H),
2.29–2.15(m,1H),1.91–1.82(m,1H),1.77–1.71(m,1H),1.66–1.60(m,1H),1.44–1.41(m,10H),1.30–1.22(m,6H)。MS(ESI,m/z):673.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001721
在10℃-20℃下，将乙醇钠(20mg，0.29mmol)加入到130mg(0.19mmol)步骤B的产物的乙醇(5mL)溶液，并搅拌6h。反应完成后，混合物用水(100mL)稀释，并在真空下浓缩。然后，将其在水和乙酸乙酯(3×50mL)之间分配。合并的有机层用无水硫酸钠干燥，并在真空下蒸发。残留物通过色谱法用石油醚和乙酸乙酯(4:1)纯化，得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(104mg，95％)。MS(ESI,m/z):577.3[M+H]+。
步骤D：制备(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001722
将2mol/L氢氧化锂水溶液(0.9mL)加入到104mg(0.18mmol)步骤C的产物的甲醇(3mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用乙酸乙酯(30mL)稀释，用HCl水溶液酸化，直到pH 3。混合物用水洗涤三次(3×90mL)。合并的有机层在减压下浓缩，得到(S)-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-5-羧酸(96mg，97％)。
步骤E：制备(S)-2-(5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001731
将HATU(120mg，0.30mmol)、二异丙基乙胺(110μL，0.6mmol)和NH4Cl(110mg，2.0mmol)加入到110mg(0.20mmol)步骤D的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×70mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(60mg，55％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.06(s,1H),8.27(s,1H),8.15(d,J＝5.1Hz,1H),7.98–7.91(m,4H),6.91(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.4Hz,1H),6.73(s,1H),6.21(s,1H),5.52–5.51(m,1H),3.98–3.89(m,1H),3.39–3.29(m,1H),2.80(d,J＝5.3Hz,3H),2.70(q,J＝7.6Hz,2H),2.14–2.12(m,1H),2.00–1.86(m,2H),1.75–1.73(m,1H),1.66–1.63(m,1H),1.53–1.48(m,1H),1.45(s,9H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI,m/z):548.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(甲基氨基)-2- (哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001741
将三氟乙酸(0.7mL)加入到60mg(0.11mmol)步骤E的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩得到(S)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(甲基氨基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):448.2[M+H]+。
步骤G：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001742
将二异丙基乙胺(85mg，0.66mmol)加入到49mg(0.11mmol)步骤F的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(8.9mg，0.10mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(28:1)纯化，得到产物(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4- 乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(30mg，55％)。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:9.14(s,1H),8.28(s,1H),8.15(d,J＝5.1Hz,1H),7.98–7.94(m,4H),7.67(s,1H),7.08(s,1H),6.91(d,J＝4.7Hz,1H),6.60(dd,J1＝16.6Hz,J2＝10.6Hz,1H),6.32–6.29(m,2H),5.89(d,J＝4.6Hz,1H),5.73(d,J＝10.6Hz,1H),3.85–3.83(m,1H),3.76–3.72(m,1H),2.86(d,J＝5.4Hz,2.6H),2.71–2.66(m,2.4H),2.45–2.41(m,1H),2.19–2.17(m,1H),2.00–1.93(m,1H),1.89–1.87(m,1H),1.72–1.70(m,1H),1.64–1.57(m,1H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.2,165.9,162.0,156.2,152.0,148.3,147.5,142.2,138.4,133.6,129.8,128.8,127.7,127.2,119.9,119.5,114.0,44.4,43.1,41.1,28.8,28.3,25.8,19.6,14.5。MS(ESI,m/z):502.2[M+H]+。
实施例82：(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氰基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001751
步骤A：制备(S)-2-(4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-5-(乙氧基羰 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001752
将HATU(1.3g，3.5mmol)、二异丙基乙胺(2.5mL，14mmol)和2-氨基异烟腈(0.5g，4.2mmol)加入到1.3g(2.8mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用石油醚和乙酸乙酯(2.5:1)纯化，得到(S)-2-(4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.92g，60％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.06(s,1H),8.75(dd,J1＝4.5Hz,J2＝1.3Hz,1H),8.47(dd,J1＝8.4Hz,J2＝1.4Hz,1H),8.34–8.29(m,4H),8.11(s,1H),7.47(dd,J1＝8.4Hz,J2＝4.5Hz,1H),5.43–5.42(m,1H),4.39–4.30(m,3H),4.04–4.01(m,1H),2.79–2.74(m,1H),2.58–2.55(m,1H),1.88–1.82(m,2H),1.79–1.76(m,1H),1.71–1.67(m,1H),1.54(s,9H),1.36(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI,m/z):545.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-5-(乙 氧基羰基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001761
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(2.1mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入0.92g(1.7mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(0.4g，1.7mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。反应用盐水淬灭，并在真空下浓缩至干。残留物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.5g，53％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.79(s,1H),8.73(s,1H),8.45(d,J＝5.0Hz,1H),7.92(d,J＝7.8Hz,2H),7.87(d,J＝8.4Hz,2H),7.29–7.27(m,1H),5.91(s,2H),5.68–5.67(m,1H),4.33–4.26(m,2H),3.97–3.93(m,1H),3.45–3.38(m,1H),2.12–2.06(m,2H),1.92–1.87(m,1H),1.76–1.73(m,1H),1.66–1.63(m,1H),1.53–1.50(m,1H),1.44(s,9H),1.28–1.25(m,3H)。MS(ESI,m/z):560.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氰基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001771
将2mol/L氢氧化锂水溶液(4.5mL)加入到0.5g(0.9mmol)步骤B的产物的甲醇(5mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用(50mL)水稀释，用HCl水溶液酸化，直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(0.4g，80％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001772
将HATU(0.4g，1.1mmol)、二异丙基乙胺(0.4mL，2.2mmol)和NH4Cl(0.4g，7.3mmol)加入到0.4g(0.7mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.2g，54％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.82(s,1H),8.72(t,J＝1.1Hz,1H),8.48(dd,J1＝5.0Hz,J2＝0.8Hz,1H),7.95(d,J＝8.6Hz,2H),7.90(d,J＝8.5Hz,2H),7.29(dd,J1＝5.0Hz,J2＝1.4Hz,1H),6.88(s,1H),6.00(s,2H),5.62–5.58(m,2H),3.95–3.92(m,1H),3.30–3.23(m,1H),2.31–2.21(m,1H),2.17–2.13(m,1H),1.95–1.86(m,1H),1.77–1.74(m,1H),1.70–1.65(m,1H),1.56–1.51(m,1H),1.46(s,9H)。MS(ESI,m/z):531.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶- 2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001781
将三氟乙酸(0.66mL)加入到60mg(0.11mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):431.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氰基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001782
将三乙胺(67mg，0.66mmol)加入到48mg(0.11mmol)步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(8.4mg，0.10mmol)和HATU(63mg，0.16mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(44mg，80％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.45(s,1H),8.66(s,1H),8.43(d,J＝5.0Hz,1H),7.84(d,J＝8.5Hz,2H),7.75(d,J＝8.4Hz,2H),7.33(s,1H),7.26–7.24(m,1H),6.46(s,1H),6.13(s,2H),5.91–5.90(m,1H),4.28–4.25(m,1H),3.66–3.59(m,1H),2.41–2.31(m,1H),2.17–2.14(m,1H),2.00(s,3H),1.88–1.85(m,2H),1.73–1.69(m,1H),1.62–1.57(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.2,162.7,155.0,152.7,149.2,148.2,141.2,138.7,132.7,129.6,127.4,122.5,121.2,120.5,116.7,116.5,91.2,72.9,44.5,43.8,27.8,25.7,19.8,4.3。MS(ESI,m/z):497.1[M+H]+。
实施例83：(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001791
制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001792
将二异丙基乙胺(114μL，0.66mmol)加入到48mg(0.11mmol)实施例82的步骤E的产物的干燥二氯甲烷(3mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(6.2μL，0.10mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×30mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(43mg，80％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.52(s,1H),8.66(s,1H),8.42(d,J＝4.6Hz,1H),7.85(d,J＝8.2Hz,2H),7.82(d,J＝8.2Hz,2H),7.48(s,1H),7.24(d,J＝5.0Hz,1H),6.60–6.56(m,2H),6.33–6.27(m,4H),5.72–5.70(m,1H),3.83–3.81(m,1H),3.70–3.67(m,1H),2.43–2.41(m,1H),2.19–2.17(m,1H),1.92–1.85(m,2H),1.71–1.60(m,2H)。MS(ESI,m/z):485.1[M+H]+。
实施例84：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001801
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001802
将HATU(7.2g，19mmol)、二异丙基乙胺(13.6mL，79mmol)和4-(三氟甲基)吡啶-2-胺(3.8g，24mmol)加入到7.0g(16mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(5.4g，57％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.21(s,1H),9.13(s,1H),8.72(s,1H),8.45(d,J＝5.2Hz,1H),8.17(d,J＝8.4Hz,2H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.28–7.27(m,1H),5.41–5.40(m,1H),4.31(q,J＝7.1Hz,2H),2.83–2.76(m,1H),2.53–2.50(m,1H),1.95–1.90(m,1H),1.86–1.79(m,2H),1.75–1.71(m,1H),1.68–1.64(m,1H),1.50(s,9H),1.48–1.46(m,1H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):588.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001811
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(11mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到5.4g(9.1mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(2.5g，10.9mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×150mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(2.7g，49％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.45(s,1H),8.71(s,1H),8.37(d,J＝5.2Hz,1H),7.91(d,J＝8.6Hz,2H),7.82(d,J＝8.5Hz,2H),7.23(dd,J1＝5.1Hz,J2＝0.9Hz,1H),5.89(s,2H),5.69–5.68(m,1H),4.28–4.20(m,2H),3.96–3.93(m,1H),3.48–3.41(m,1H),2.09–2.06(m,1H),1.96–1.81(m,2H),1.73–1.69(m,1H),1.62–1.59(m,1H),1.51–1.46(m,1H),1.41(s,9H),1.19(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):603.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲 基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001812
将2mol/L氢氧化锂水溶液(23mL)加入到2.7g(4.5mmol步骤B的产物的甲醇(20mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化，直到pH3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(2.5g，96％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001821
将HATU(2.5g，6.5mmol)、二异丙基乙胺(2.2mL，12.9mmol)和NH4Cl(2.3g，43mmol)加入到2.5g(4.3mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(16mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.5g，61％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.80(s,1H),8.71(s,1H),8.49(d,J＝5.1Hz,1H),7.96(d,J＝8.5Hz,2H),7.90(d,J＝8.4Hz,2H),7.30(dd,J1＝5.2Hz,J2＝0.9Hz,1H),6.89(s,1H),6.08(s,1H),6.00(s,2H),5.60–5.59(m,1H),3.95–3.91(m,1H),3.30–3.23(m,1H),2.31–2.22(m,1H),2.17–2.13(m,1H),1.95–1.86(m,1H),1.77–1.74(m,1H),1.70–1.65(m,1H),1.58–1.51(m,1H),1.46(s,9H)。MS(ESI,m/z):574.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2- (哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001831
将三氟乙酸(1.2mL)加入到120mg(0.21mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):474.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001832
将二异丙基乙胺(155mg，1.2mmol)加入到100mg(0.21mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(16.2mg，0.18mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(28:1)纯化，得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(65mg，58％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.44(s,1H),8.67(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),7.85(d,J＝8.2Hz,2H),7.78–7.76(m,2H),7.40(s,1H),7.26–7.25(m,1H),6.62–6.52(m,2H),6.31–6.26(m,3H),6.00–5.96(m,1H),5.72(d,J＝10.5Hz,1H),3.85–3.82(m,1H),3.70–3.64(m,1H),2.45–2.42(m,1H),2.21–2.18(m,1H),1.97–1.85(m,2H),1.73–1.70(m,1H),1.63–1.60(m,1H)。13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.3,166.1,162.7,152.9,149.0,148.4,141.4,140.6(q,J＝33.0Hz),138.7,132.9,129.7,128.8,127.7,127.3,122.8(q,J＝271.5Hz),120.2,115.5,110.6,44.4,43.0,28.0,25.8,19.7。MS(ESI,m/z):528.1[M+H]+。
实施例85：
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001841
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001842
将三乙胺(127mg，1.26mmol)加入到100mg(0.21mmol)实施例84的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(15.8mg，0.19mmol)和HATU(120mg，0.31mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(45mg，40％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.26(s,1H),8.68(s,1H),8.46–8.45(m,1H),7.92–7.89(m,2H),7.84–7.80(m,2H),7.27(d,J＝4.8Hz,1H),7.13(s,1H),6.24(s,1H),6.14(s,2H),5.94–5.92(m,1H),4.29–4.26(m,1H),3.67–3.60(m,1H),2.43–2.34(m,1H),2.19–2.15(m,1H),2.01(s,3H),1.93–1.86(m,2H),1.74–1.70(m,1H),1.63–1.58(m,1H)。13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:160.0,162.6,155.0,152.8,149.1,148.1,141.3,140.7(q,J＝33.0Hz),138.7,133.1,129.8,127.4,122.8(q,J＝271.5Hz),120.2,115.6,110.5,91.1,72.9,44.5,43.8,27.8,25.7,19.8,4.3。MS(ESI,m/z):540.1[M+H]+。
实施例86：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001851
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001852
将HATU(2.0g，5.4mmol)、二异丙基乙胺(3.9mL，22.5mmol)和5-氯吡啶-2-胺(0.9g，6.7mmol)加入到2.0g(4.5mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，以得到产物(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(2.3g，92％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.94(s,1H),8.58(s,1H),8.41(d,J＝8.9Hz,1H),8.28(d,J＝2.4Hz,1H),8.19(d,J＝8.3Hz,2H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),7.73(dd,J1＝8.9Hz,J2＝2.5Hz,1H),5.41–5.40(m,1H),4.36–4.32(m,2H),2.77–2.72(m,1H),2.57–2.55(m,1H),2.03–1.99(m,1H),1.85–1.81(m,1H),1.77–1.75(m,1H),1.68–1.66(m,2H),1.53(s,9H),1.50–1.48(m,1H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):554.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001861
在-10℃下将六甲基二硅氮烷锂(5.0mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到2.3g(4.1mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液，并搅拌20min，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟基胺(1.1g，4.9mmol)。将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。反应用盐水淬灭，并在真空下浓缩至干。残留物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到产物(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.7g，30％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.57(s,1H),8.41(d,J＝8.9Hz,1H),8.28(d,J＝2.4Hz,1H),7.92(d,J＝8.5Hz,2H),7.87(d,J＝8.5Hz,2H),7.74(dd,J1＝8.9Hz,J2＝2.5Hz,1H),5.94(s,2H),5.68–5.67(m,1H),4.33–4.27(m,2H),3.97–3.95(m,1H),3.44–3.39(m,1H),2.12–2.10(m,1H),1.83–1.87(m,1H),1.76–1.74(m,1H),1.66–1.64(m,1H),1.55–1.51(m,1H),1.45(s,9H),1.34–1.29(m,1H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):569.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-氯吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001871
将2mol/L氢氧化锂水溶液(6mL)加入到0.7g(1.2mmol)步骤B的产物的甲醇(7mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化，直到pH3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(0.6g，93％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001872
将HATU(7.2g，1.9mmol)、二异丙基乙胺(0.6mL，3.6mmol)和NH4Cl(6.7g，12mmol)加入到0.68g(1.2mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×100mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.45g，69％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.61(s,1H),8.39(d,J＝8.9Hz,1H),8.28(d,J＝2.4Hz,1H),7.95(d,J＝8.3Hz,2H),7.87(d,J＝8.2Hz,2H),7.73(dd,J1＝8.9Hz,J2＝2.5Hz,1H),6.72(s,1H),6.01(s,2H),5.61–5.60(m,1H),5.50(s,1H),3.95–3.93(m,1H),3.31–3.26(m,1H),2.23–2.20(m,1H),2.16–2.14(m,1H),1.93–1.87(m,1H),1.77–1.74(m,1H),1.68–1.66(m,1H),1.57(s,9H),1.55–1.52(m,1H)。MS(ESI,m/z):540.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2- 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001881
将三氟乙酸(1.1mL)加入到100mg(0.18mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):440.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001882
将二异丙基乙胺(142mg，1.1mmol)加入到79mg(0.18mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(11.7mg，0.13mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(28:1)纯化，得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(50mg，56％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:9.14(s,1H),8.35(d,J＝8.9Hz,1H),8.23(d,J＝2.1Hz,1H),7.84(d,J＝8.3Hz,2H),7.77–7.75(m,2H),7.70(dd,J1＝8.9Hz,J2＝2.4Hz,1H),7.26(s,1H),6.58(dd,J1＝16.4Hz,J2＝10.7Hz,1H),6.33–6.27(m,4H),5.97–5.96(m,1H),5.72(d,J＝10.7Hz,1H),3.84–3.81(m,1H),3.70–3.64(m,1H),2.45–2.42(m,1H),2.22–2.18(m,1H),1.97–1.92(m,1H),1.89–1.85(m,1H),1.73–1.70(m,1H),1.63–1.60(m,1H)。13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.3,165.8,162.6,150.2,148.3,146.6,141.3,138.5,138.2,133.2,129.7,128.8,127.7,127.3,127.0,120.1,115.2,44.4,43.0,28.0,25.8,19.7。MS(ESI,m/z):494.2[M+H]+。
实施例87：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001891
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001892
将HATU(2.0g，5.4mmol)、二异丙基乙胺(3.8mL，22mmol)和4-溴吡啶-2-胺(1.2g，6.7mmol)加入到2.0g(4.5mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.4g，52％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.97(s,1H),8.69(s,1H),8.68(s,1H),8.19(d,J＝8.1Hz,2H),8.12(d,J＝5.3Hz,1H),7.95(d,J＝8.2Hz,2H),7.24(d,J＝5.3Hz,1H),5.40(d,J＝3.8Hz,1H),4.36–4.32(m,2H),2.77–2.73(m,1H),2.56(d,J＝13.0Hz,1H),1.97–1.91(m,1H),1.85–1.80(m,1H),1.77–1.75(m,1H),1.68–1.63(m,2H),1.53(s,9H),1.51–1.49(m,1H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):598.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001901
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(2.7mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入1.4g(2.3mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(0.6g，2.7mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机部分用无水Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.7g，50％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.71(s,1H),8.69(d,J＝1.5Hz,1H),8.12(d,J＝5.3Hz,1H),7.93(d,J＝8.5Hz,2H),7.87(d,J＝8.5Hz,2H),7.25(dd,J1＝5.3Hz,J2＝1.7Hz,1H),5.93(s,2H),5.68(d,J＝4.9Hz,1H),4.34–4.26(m,2H),3.95(d,J＝12.8Hz,1H),3.42(td,J1＝13.1Hz,J2＝3.1Hz,1H),2.12–2.10(m,1H),1.92–1.86(m,1H),1.75(d,J＝13.1Hz,1H),1.66–1.64(m,2H),1.56–1.49(m,1H),1.44(s,9H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):613.1[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001911
将2mol/L氢氧化锂水溶液(6mL)加入到0.72g(1.2mmol)步骤B的产物的甲醇(10mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(0.70g，99％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001912
将HATU(0.7g，1.8mmol)、二异丙基乙胺(0.6mL，3.6mmol)和NH4Cl(0.6g，12mmol)加入到0.7g(1.2mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.5g，71％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.08(s,1H),8.65(d,J＝1.5Hz,1H),8.10(d,J＝5.3Hz,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,2H),7.78(d,J＝8.3Hz,2H),7.23(dd,J1＝5.3Hz,J2＝1.7Hz,1H),6.91(s,1H),6.19(s,1H),6.03(s,2H),5.61–5.60(m,1H),3.94(d,J＝12.9Hz,1H),3.30(td,J1＝13.1Hz,J2＝2.9Hz,1H),2.23–2.21(m,1H),2.14(d,J＝13.6Hz,1H),1.92–1.86(m,1H),1.74(d,J＝13.2Hz,1H),1.67–1.65(m,1H),1.57–1.51(m,1H),1.46(s,9H)。MS(ESI,m/z):584.1[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2- 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001921
将三氟乙酸(0.3mL)加入到30mg(0.05mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):484.1[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001922
将二异丙基乙胺(40mg，0.31mmol)加入到24.2mg(0.05mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(4.1mg，0.045mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(20mg，74％)。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:8.95(s,1H),8.67(d,J＝1.3Hz,1H),8.12(d,J＝5.3Hz,1H),7.93(d,J＝8.2Hz,2H),7.87(d,J＝7.3Hz,2H),7.24(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.3Hz,1H),7.16(s,1H),6.62–6.57(m,1H),6.32–6.29(m,3H),5.97(s,2H),5.74(d,J＝10.5Hz,1H),3.84(d,J＝13.0Hz,1H),3.68(t,J＝12.4Hz,1H),2.46–2.45(m,1H),2.21–2.19(m,1H),1.94–1.88(m,2H),1.74–1.71(m,1H),1.64–1.62(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.3,165.7,162.5,152.5,148.5,148.3,141.4,138.8,134.8,133.2,129.9,128.8,127.8,127.4,123.5,120.0,117.6,44.4,43.0,28.0,25.8,19.7。MS(ESI,m/z):538.1[M+H]+。
实施例88：
(S)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌 啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001931
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(丁-2-炔酰 基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001932
将三乙胺(31mg，0.31mmol)加入到24.2mg(0.05mmol)实施例87的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(3.8mg，0.045mmol)和HATU(28.5mg，0.075mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-溴吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(17mg，62％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.18(s,1H),8.63(d,J＝1.4Hz,1H),8.08(d,J＝5.3Hz,1H),7.87(d,J＝8.3Hz,2H),7.77(d,J＝8.3Hz,2H),7.22(dd,J1＝5.3Hz,J2＝1.6Hz,1H),7.11(s,1H),6.37(s,1H),6.13(s,2H),5.94–5.93(m,1H),4.27(d,J＝12.7Hz,1H),3.64(td,J1＝13.2Hz,J2＝2.9Hz,1H),2.38–2.34(m,1H),2.17–2.15(m,1H),2.00(s,3H),1.90–1.84(m,2H),1.72–1.70(m,1H),1.63–1.58(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.9,162.6,155.0,152.6,148.5,148.1,141.2,138.5,134.7,133.2,129.7,127.4,123.4,120.2,117.6,91.0,73.0,44.5,43.8,27.8,25.7,19.8,4.3。MS(ESI,m/z):550.1[M+H]+。
实施例89：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001941
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001942
将HATU(4.6g，12.2mmol)、二异丙基乙胺(8.7mL，50.5mmol)和4-碘吡啶-2-胺(3.3g，15.1mmol)加入到4.5g(10.1mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，以得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(4.1g，63％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.94(s,1H),8.90(s,1H),8.63(s,1H),8.19(d,J＝8.4Hz,2H),7.98–7.95(m,3H),7.46(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.4Hz,1H),5.41(d,J＝4.6Hz,1H),4.37–4.32(m,2H),2.77–2.72(m,1H),2.56(d,J＝11.8Hz,1H),1.86–1.84(m,1H),1.78–1.75(m,2H),1.69–1.66(m,2H),1.53(s,9H),1.52–1.50(m,1H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):646.1[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001951
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(7.7mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入4.1g(6.4mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.8g，7.7mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×150mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.6g，38％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.89(d,J＝1.2Hz,1H),8.74(s,1H),7.94–7.91(m,3H),7.85(d,J＝8.4Hz,2H),7.44(d,J＝5.2Hz,1H),5.92(s,2H),5.68(d,J＝4.9Hz,1H),4.32–4.26(m,2H),3.95(d,J＝12.8Hz,1H),3.41(td,J1＝13.0Hz,J2＝3.0Hz,1H),2.12–2.08(m,1H),1.93–1.87(m,1H),1.76–1.73(m,2H),1.66–1.63(m,1H),1.54–1.50(m,1H),1.44(s,9H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI,m/z):661.1[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-碘吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310001961
将2mol/L氢氧化锂水溶液(12mL)加入到1.6g(2.5mmol)步骤B的产物的甲醇(15mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.5g，95％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001962
将HATU(1.3g，3.5mmol)、二异丙基乙胺(1.2mL，7.1mmol)和NH4Cl(1.3g，23mmol)加入到1.5g(2.3mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.9g，62％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.87(d,J＝1.0Hz,1H),8.67(s,1H),7.98–7.93(m,3H),7.87(d,J＝8.4Hz,2H),7.46(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.4Hz,1H),6.80(s,1H),6.01(s,2H),5.68(s,1H),5.60(d,J＝4.5Hz,1H),3.93(d,J＝12.4Hz,1H),3.28(td,J1＝13.0Hz,J2＝3.0Hz,1H),2.26–2.13(m,2H),1.94–1.87(m,1H),1.77–1.65(m,2H),1.57–1.52(m,1H),1.46(s,9H)。MS(ESI,m/z):632.1[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2- 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001971
将三氟乙酸(1.7mL)加入到185mg(0.29mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):532.0[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001972
将二异丙基乙胺(224mg，1.74mmol)加入到154mg(0.29mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(23.6mg，0.26mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(112mg，66％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:9.29(s,1H),8.82(d,J＝1.1Hz,1H),7.91(d,J＝5.1Hz,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,2H),7.73(d,J＝7.8Hz,2H),7.41(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.0Hz,1H),7.36(s,1H),6.58(dd,J1＝16.3Hz,J2＝10.7Hz,2H),6.30–6.26(m,3H),5.97–5.96(m,1H),5.71(d,J＝10.6Hz,1H),3.82(d,J＝12.9Hz,1H),3.67(t,J＝12.4Hz,1H),2.42–2.39(m,1H),2.18(d,J＝12.6Hz,1H),1.95–1.84(m,2H),1.72–1.59(m,2H)。MS(ESI,m/z):586.0[M+H]+。
实施例90：
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001981
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001982
将三乙胺(172mg，1.7mmol)加入到154mg(0.29mmol)实施例89的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(22mg，0.26mmol)和HATU(167mg，0.44mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-碘吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(90mg，52％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.26(s,1H),8.81(s,1H),7.90(d,J＝5.2Hz,1H),7.83(d,J＝8.3Hz,2H),7.73(d,J＝8.3Hz,2H),7.40(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.3Hz,1H),7.20(s,1H),6.57(s,1H),6.13(s,2H),5.92(d,J＝4.7Hz,1H),4.26(d,J＝12.7Hz,1H),3.65(td,J1＝13.1Hz,J2＝2.7Hz,1H),2.36–2.33(m,1H),2.17–2.13(m,1H),2.00(s,3H),1.87–1.84(m,2H),1.72–1.69(m,1H),1.61–1.56(m,1H)。MS(ESI,m/z):598.1[M+H]+。
实施例91：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310001991
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310001992
将HATU(5.1g,13.5mmol)、二异丙基乙胺(9.7mL,56.4mmol)和4-(4-氟苯基)吡啶-2-胺(3.1g,16.8mmol)加入到5.0g(11.2mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，以得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(4.6g,67％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:9.99(s,1H),8.93(s,1H),8.69(s,1H),8.31(d,J＝5.2Hz,1H),8.19(d,J＝8.3Hz,2H),7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.72–7.69(m,2H),7.27–7.25(m,1H),7.19–7.15(m,2H),5.41–5.40(m,1H),4.35–4.30(m,2H),2.79–2.72(m,1H),2.56–2.53(m,1H),1.87–1.73(m,3H),1.68–1.65(m,1H),1.52(s,9H),1.49–1.48(m,2H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI,m/z):614.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002001
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(9.0mL,1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到4.6g(7.6mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(2.1g,9.1mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯萃取三次(3×150mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过采用石油醚和乙酸乙酯(2:1)的柱色谱，以得到(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(3.0g,63％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.70(s,1H),8.68(s,1H),8.35(d,J＝4.7Hz,1H),7.96(d,J＝8.6Hz,2H),7.87(d,J＝8.5Hz,2H),7.74–7.72(m,2H),7.28(dd,J1＝5.3Hz,J2＝1.6Hz,1H),7.20–7.16(m,2H),5.90(s,2H),5.68–5.67(m,1H),4.29–4.25(m,2H),3.97–3.93(m,1H),3.43–3.39(m,1H),2.13–2.09(m,1H),1.90–1.87(m,1H),1.75–1.72(m,1H),1.64–1.65(m,2H),1.51–1.48(m,1H),1.44(s,9H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):629.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氟苯 基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002011
将2mol/L氢氧化锂水溶液(24mL)加入到3.0g(4.7mmol)步骤B的产物的甲醇(17mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(2.8g,99％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002012
将HATU(2.7g,7.0mmol)、二异丙基乙胺(2.4mL,14.1mmol)和NH4Cl(2.5g,47mmol)加入到2.8g(4.7mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，以得到产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.5g,53％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.23(s,1H),8.62(s,1H),8.29(d,J＝5.2Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,2H),7.79(d,J＝8.3Hz,2H),7.70–7.65(m,2H),7.23(dd,J1＝5.2Hz,J2＝1.6Hz,1H),7.18–7.12(m,2H),7.00(s,1H),6.37(s,1H),6.05(s,2H),5.61–5.60(m,1H),3.95–3.92(m,1H),3.33–3.26(m,1H),2.27–2.21(m,1H),2.15–2.12(m,1H),1.93–1.83(m,1H),1.75–1.72(m,1H),1.67–1.64(m,1H),1.54–1.48(m,1H),1.45(s,9H)。MS(ESI,m/z):600.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2- (哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002021
将三氟乙酸(1.8mL)加入到180mg(0.30mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(6mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):500.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002031
将二异丙基乙胺(232mg,1.80mmol)加入到150mg(0.30mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(24.4mg,0.27mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇纯化(30:1)，以得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(120mg,72％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.24(s,1H),8.62(s,1H),8.29(d,J＝5.2Hz,1H),7.92(d,J＝8.4Hz,2H),7.82(d,J＝7.8Hz,2H),7.70–7.66(m,2H),7.24–7.22(m,2H),7.18–7.13(m,2H),6.59(dd,J1＝16.5Hz,J2＝10.7Hz,1H),6.43(s,1H),6.33–6.26(m,3H),5.98–5.97(m,1H),5.72(d,J＝10.6Hz,1H),3.84–3.81(m,1H),3.70–3.65(m,1H),2.44–2.41(m,1H),2.20–2.17(m,1H),1.92–1.85(m,2H),1.73–1.68(m,1H),1.62–1.59(m,1H)。MS(ESI,m/z):554.2[M+H]+。
实施例92:
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002041
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002042
将三乙胺(172mg,1.7mmol)加入到145mg(0.29mmol)实施例91的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(22mg,0.26mmol)和HATU(167mg,0.44mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(85mg,52％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.57(s,1H),8.53(s,1H),8.21–8.19(m,1H),7.84–7.82(m,2H),7.72–7.70(m,2H),7.63–7.60(m,2H),7.40(s,1H),7.16–7.15(m,1H),7.12–7.08(m,2H),6.94(s,1H),6.12(s,2H),5.91(d,J＝5.4Hz,1H),4.25(d,J＝12.2Hz,1H),3.68–3.62(m,1H),2.32–2.26(m,1H),2.14–2.10(m,1H),1.96(s,3H),1.84–1.81(m,2H),1.67–1.54(m,2H)。MS(ESI,m/z):566.2[M+H]+。
实施例93:(R)-2-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002051
步骤A：制备(3R)-1-3-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基-羰基)苯基)-1,3-二氧代丙烷- 2-基)哌啶-1,3-二羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002052
将(R)-1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-羧酸(7.1g,31mmol)和二异丙基乙胺(5.6mL,32mmol)加入到10g(29mmol)实施例1的步骤C的产物的乙腈(50mL)溶液。混合物在室温下搅拌3h，然后蒸发掉所有挥发物。残留物用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(300mL)萃取。分离有机相，用Na2SO4干燥并浓缩。残留物通过快速柱色谱用石油醚和乙酸乙酯(7:1)纯化，以得到(3R)-1-3-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1,3-二氧代丙烷-2-基)哌啶-1,3-二羧酸叔丁酯，为淡黄色油状物(12.8g,90％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.13(d,J＝7.9Hz,2H),8.02–8.00(m,2H),6.27(s,1H),4.39(q,J＝7.1Hz,2H),4.23(q,J＝7.1Hz,2H),4.16–4.07(m,1H),3.99–3.80(m,1H),3.03–2.98(m,1H),2.80–2.74(m,1H),2.63–2.58(m,1H),2.14–2.06(m,1H),1.74–1.60(m,2H),1.42–1.38(m,13H),1.19(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):492.2[M+H]+。
步骤B：制备(R)-3-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1H-咪唑-2-基) 哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002061
在150mL耐压瓶中，将NH4OAc(21g,264mmol)加入到11g(22mmol)步骤A的产物的二甲苯(20mL)溶液。反应在140℃下加热3.5h。冷却后，溶液在乙酸乙酯(500mL)和水(200mL)之间分配。浓缩有机层，并且残留物通过色谱法用石油醚和乙酸乙酯(5:1)纯化，以得到(R)-3-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为淡黄色油状物(2.8g,27％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:11.24(s,1H),8.06–8.00(m,4H),4.40–4.28(m,4H),4.13–3.96(m,1H),3.73–3.49(m,2H),3.36–3.06(m,2H),2.54–2.28(m,1H),2.09–2.01(m,2H),1.51–1.47(m,10H),1.39(t,J＝7.1Hz,3H),1.34–1.31(m,3H)。MS(ESI,m/z):472.2[M+H]+。
步骤C：制备(R)-4-(2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪 唑-4-基)苯甲酸
Figure BDA0002484555310002062
将氢氧化锂水溶液(2mol/L,30mL)加入到2.8g(5.9mmol)步骤B的产物的1,4-二烷(30mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(R)-4-(2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-基)-5-(乙氧基-羰基)-1H-咪唑-4-基)苯甲酸(2.3g,88％)。
步骤D：制备(R)-3-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002071
搅拌2.3g(5.2mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液，并加入HATU(2.4g,6.2mmol)、二异丙基乙胺(4.5mL,26mmol)和4-乙基吡啶-2-胺(1.0g,7.8mmol)。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，以得到(R)-3-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(2.3g,81％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.85(s,1H),8.28(s,1H),8.15(d,J＝5.0Hz,1H),8.08–8.03(m,2H),7.94(d,J＝7.9Hz,2H),6.91(d,J＝5.0Hz,1H),4.34–4.28(m,2H),4.16–3.98(m,1H),3.71–3.46(m,2H),3.26–3.12(m,2H),2.69(q,J＝7.6Hz,2H),2.50–2.33(m,1H),2.05–1.95(m,1H),1.55–1.51(m,2H),1.45(s,9H),1.32(t,J＝7.0Hz,3H),1.27(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI,m/z):548.2[M+H]+。
步骤E：制备(R)-3-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002072
在-10℃下搅拌2.3g(4.2mmol)步骤D的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液，并缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(5.1mL,1M四氢呋喃溶液)。在混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.0g,4.2mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。反应用盐水淬灭并在真空下浓缩至干。残留物用乙酸乙酯(3×200mL)洗涤三次。合并的有机部分用Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过采用石油醚和乙酸乙酯(2:1)的柱色谱，以得到期望产物(R)-3-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.3g,55％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.65(s,1H),8.29(s,1H),8.18(d,J＝5.1Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.80(d,J＝8.4Hz,2H),6.93(dd,J1＝5.1Hz,J2＝1.1Hz,1H),5.36(s,2H),4.30–4.24(m,3H),4.14–4.04(m,1H),3.30–3.06(m,2H),2.89–2.78(m,1H),2.71(q,J＝7.6Hz,2H),2.09–2.06(m,1H),1.96–1.88(m,1H),1.85–1.81(m,1H),1.63–1.55(m,1H),1.45(s,9H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):563.2[M+H]+。
步骤F：制备(R)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-基)-4-(4-((4-乙基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002081
搅拌1.3g(2.3mmol)步骤E的产物的甲醇(10mL)溶液，并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L,12mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩以得到(R)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.14g,93％)。
步骤G：制备(R)-3-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002091
搅拌280mg(0.5mmol)步骤F的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液，并加入HATU(300mg，0.75mmol)、二异丙基乙胺(270μL，1.5mmol)和NH4Cl(280mg，5mmol)。反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，以得到(R)-3-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(220mg,82％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.87(s,1H),8.25(s,1H),8.16(d,J＝4.9Hz,1H),7.97(d,J＝7.7Hz,2H),7.72(d,J＝7.6Hz,2H),6.93(d,J＝4.9Hz,1H),5.92–5.82(m,2H),5.58(s,2H),4.24–4.05(m,2H),3.25–3.21(m,1H),3.15–3.04(m,1H),2.87–2.78(m,1H),2.70(q,J＝7.6Hz,2H),2.09–2.07(m,1H),1.96–1.90(m,1H),1.83–1.80(m,1H),1.59–1.56(m,1H),1.45(s,9H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI,m/z):534.2[M+H]+。
步骤H：制备(R)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶- 3-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002092
将三氟乙酸(2.5mL)加入到220mg(0.41mmol)步骤G的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅1h，然后浓缩，以得到(R)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-3-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):434.2[M+H]+。
步骤I：制备(R)-2-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002101
将二异丙基乙胺(318mg,2.46mmol)加入到178mg(0.41mmol)步骤H的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(32.6mg,0.36mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，以得到(R)-2-(1-丙烯酰基-哌啶-3-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(112mg,56％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.15–9.11(m,1H),8.22(s,1H),8.14–8.12(m,1H),7.95–7.89(m,2H),7.67(d,J＝8.0Hz,2H),6.91–6.90(m,1H),6.66–6.55(m,1H),6.46(s,0.6H),6.26–6.22(m,2H),5.96(s,0.4H),5.70–5.61(m,3H),4.70–4.61(m,1H),4.23–4.20(m,0.4H),3.99–3.96(m,0.6H),3.43–3.37(m,0.4H),3.27–3.13(m,1.6H),3.03–2.97(m,0.6H),2.75–2.65(m,2.4H),2.10–1.84(m,3H),1.66–1.52(m,1H),1.26(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(DMSO,150MHz)δ:165.6,164.3,162.5,154.6,152.4,149.8,147.7,138.0,135.8,132.0,128.6,127.7,127.1,126.9,125.1,119.6,113.9,49.1,45.6,45.3,42.0,33.7,32.8,29.4,28.9,27.9,25.6,24.3,14.4。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例94:
(S)-2-(1-丙烯酰基氮杂环庚烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002111
步骤A：制备(2S)-1-叔丁基-2-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基-羰基)苯基)-1,3-二氧 代丙烷-2-基)氮杂环庚烷-1,2-二羧酸酯
Figure BDA0002484555310002112
将(S)-1-(叔丁氧基羰基)氮杂环庚烷-2-羧酸(1.7g,7mmol)和二异丙基乙胺(1.4mL,7.7mmol)加入2.4g(7mmol)实施例1的步骤C的产物的乙腈(20mL)溶液。混合物在室温下搅拌3h，然后蒸发掉所有挥发物。残留物用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(200mL)萃取。分离有机相，用Na2SO4干燥并浓缩。残留物通过快速柱色谱用石油醚和乙酸乙酯(8:1)纯化，以得到(2S)-1-2-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基-羰基)苯基)-1,3-二氧代丙烷-2-基)氮杂环庚烷-1,2-二羧酸叔丁酯，为淡黄色油状物(3.4g,96％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.15–8.12(m,2H),8.05–8.00(m,2H),6.29–6.25(m,1H),4.83–4.54(m,1H),4.44–4.38(m,2H),4.27–4.21(m,2H),3.98–3.77(m,1H),3.03–2.92(m,1H),2.50–2.30(m,1H),1.93–1.87(m,1H),1.81–1.67(m,3H),1.45–1.30(m,15H),1.23–1.19(m,3H)。MS(ESI,m/z):506.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1H-咪唑-2-基) 氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002121
在15mL耐压瓶中，将NH4OAc(3g,38mmol)加入到1.6g(3.1mmol)步骤A的产物的二甲苯(5mL)溶液。反应在140℃下加热3.5h。冷却后，将溶液在乙酸乙酯(200mL)和水(100mL)之间分配。浓缩有机层，并且残留物通过色谱法用石油醚和乙酸乙酯(6:1)纯化，以得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯，为淡黄色油状物(360mg,24％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:11.49(s,1H),8.09–8.02(m,4H),5.12–4.98(m,1H),4.42–4.25(m,4H),3.64–3.53(m,1H),3.07–2.94(m,1H),2.45–2.32(m,2H),2.01–1.96(m,1H),1.86–1.74(m,2H),1.54–1.47(m,10H),1.41–1.38(m,5H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):486.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-4-(2-(1-(叔丁氧基羰基)氮杂环庚烷-2-基)-5-(乙氧基羰基)- 1H-咪唑-4-基)苯甲酸
Figure BDA0002484555310002122
将氢氧化锂水溶液(2mol/L,2mL)加入到360mg(0.7mmol)步骤B的产物的1,4-二烷(2mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(S)-4-(2-(1-(叔丁氧基羰基)氮杂环庚烷-2-基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-4-基)苯甲酸(300mg,93％)。
步骤D：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002131
搅拌430mg(0.94mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液，并加入HATU(430mg,1.13mmol)、二异丙基乙胺(810μL,4.7mmol)和4-乙基吡啶-2-胺(175mg,1.41mmol)。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，以得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(320mg,61％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:10.50(s,1H),8.59(s,1H),8.29(s,1H),8.18(d,J＝5.1Hz,1H),8.13(d,J＝8.3Hz,2H),7.95(d,J＝8.4Hz,2H),6.93(d,J＝5.2Hz,1H),5.12–5.09(m,1H),4.36–4.28(m,2H),3.65–3.62(m,1H),2.99–2.95(m,1H),2.71(q,J＝7.6Hz,2H),2.46–2.32(m,2H),2.02–1.99(m,1H),1.87–1.85(m,1H),1.78–1.75(m,1H),1.55–1.53(m,1H),1.51–1.49(m,9H),1.42–1.39(m,2H),1.33–1.28(m,6H)。MS(ESI,m/z):562.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002132
搅拌320mg(0.57mmol)步骤D的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液，并在-10℃下缓慢加入六甲基二硅氮烷锂(700μL,1M四氢呋喃溶液)。在混合物搅拌10min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(133mg,0.57mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。反应用盐水淬灭并在真空下浓缩至干。残留物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)的柱色谱，以得到期望产物(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(240mg,73％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.60(s,1H),8.29(s,1H),8.19(d,J＝5.1Hz,1H),7.92(d,J＝8.3Hz,2H),7.80(d,J＝8.3Hz,2H),6.93(d,J＝5.0Hz,1H),6.64(s,2H),5.43(dd,J1＝11.8Hz,J2＝6.7Hz,1H),4.31–4.23(m,2H),3.71–3.68(m,1H),3.37–3.33(m,1H),2.71(q,J＝7.6Hz,2H),2.29–2.17(m,2H),1.96–1.93(m,1H),1.89–1.82(m,1H),1.77–1.75(m,1H),1.56–1.50(m,1H),1.46–1.43(m,9H),1.41–1.37(m,2H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):577.3[M+H]+。
步骤F：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)氮杂环庚烷-2-基)-4-(4-((4-乙 基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002141
搅拌240mg(0.41mmol)步骤E的产物的甲醇(4mL)溶液，并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L,2mL)，然后在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(10mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。合并的有机层在减压下浓缩，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)氮杂环庚烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(220mg,98％)。
步骤G：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002151
搅拌260mg(0.47mmol)步骤F的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液，并加入HATU(270mg,0.71mmol)、二异丙基乙胺(250μL,1.42mmol)和NH4Cl(255mg,4.70mmol)。反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，以得到(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(170mg,66％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.67(s,1H),8.28(s,1H),8.19(d,J＝5.1Hz,1H),7.95(d,J＝8.3Hz,2H),7.85(d,J＝8.3Hz,2H),7.08(s,1H),6.93(d,J＝5.1Hz,1H),6.53(s,2H),5.65(s,1H),5.34(dd,J1＝12.1Hz,J2＝6.4Hz,1H),3.66–3.63(m,1H),3.33–3.29(m,1H),2.71(q,J＝7.6Hz,2H),2.39–2.33(m,1H),2.20–2.15(m,1H),1.98–1.94(m,1H),1.88–1.86(m,1H),1.77–1.75(m,1H),1.57–1.50(m,1H),1.47–1.45(m,9H),1.42–1.35(m,2H),1.29(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI,m/z):548.2[M+H]+。
步骤H：制备(S)-1-氨基-2-(氮杂环庚烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002152
将三氟乙酸(1.8mL)加入到170mg(0.31mmol)步骤G的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩，以得到(S)-1-氨基-2-(氮杂环庚烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):448.2[M+H]+。
步骤I：制备(S)-2-(1-丙烯酰基氮杂环庚烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002161
将二异丙基乙胺(240mg,1.86mmol)加入到138mg(0.31mmol)步骤H的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(25.3mg,0.28mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，以得到(S)-2-(1-丙烯酰基-氮杂环庚烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(93mg,60％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.19(s,1H),8.23(s,1H),8.13(d,J＝5.2Hz,1H),7.88(d,J＝8.3Hz,2H),7.74(d,J＝8.3Hz,2H),7.25(s,1H),6.89(d,J＝5.0Hz,1H),6.68(s,2H),6.57(dd,J1＝16.6Hz,J2＝10.4Hz,1H),6.48(s,1H),6.37(dd,J1＝16.6Hz,J2＝1.9Hz,1H),5.73(dd,J1＝10.4Hz,J2＝1.9Hz,1H),5.60(dd,J1＝12.2Hz,J2＝6.4Hz,1H),3.77–3.67(m,2H),2.67(q,J＝7.6Hz,2H),2.39–2.33(m,1H),2.22–2.17(m,1H),1.97–1.89(m,3H),1.54–1.41(m,2H),1.37–1.31(m,1H),1.25(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.6,165.9,162.6,156.0,152.0,148.8,147.6,141.9,138.4,133.7,129.7,129.5,127.4,127.3,119.9,119.6,113.9,49.1,43.6,31.7,30.4,29.0,28.7,25.4,14.5。MS(ESI,m/z):502.2[M+H]+。
实施例95：
2-(2-丙烯酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002171
步骤A：制备2-(叔丁基)6-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1,3-二氧代丙 烷-2-基)2-氮杂螺[3.3]庚烷-2,6-二羧酸酯
Figure BDA0002484555310002172
将2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-羧酸(5g,20.7mmol)和二异丙基乙胺(3.9mL,22.8mmol)加入到7.1g(20.7mmol)实施例1的步骤C的产物的乙腈(20mL)溶液。混合物在室温下搅拌3h，然后蒸发掉所有挥发物。残留物用水(200mL)稀释，用乙酸乙酯(200mL)萃取。分离有机相，用Na2SO4干燥并浓缩。残留物通过快速柱色谱用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，以得到2-(叔丁基)-6-(1-乙氧基-3-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1,3-二氧代丙烷-2-基)2-氮杂螺-[3.3]庚烷-2,6-二羧酸酯，为淡黄色油状物(6.8g,65％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.15(d,J＝8.1Hz,2H),7.98(d,J＝8.0Hz,2H),5.05–4.86(m,1H),4.43(q,J＝7.1Hz,2H),4.26(q,J＝7.1Hz,2H),3.95(s,2H),3.78(s,2H),3.46–3.35(m,1H),2.60–2.43(m,4H),1.42(s,9H),1.38–1.33(m,3H),1.29(t,J＝7.0Hz,3H)。MS(ESI,m/z):504.2[M+H]+。
步骤B：制备叔丁基6-(3-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)环戊-1,3-二 烯-1-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸酯
Figure BDA0002484555310002181
在25mL耐压瓶中，将NH4OAc(367.8mg,4.77mmol)加入到200mg(0.40mmol)步骤A的产物的二甲苯(7mL)溶液，并将反应在140℃下加热2.5h。冷却后，残留物用水(100mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL)萃取。分离有机相，用Na2SO4干燥并浓缩。残留物通过快速柱色谱用石油醚和乙酸乙酯(1:1.5)纯化，以得到产物6-(3-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)环戊-1,3-二烯-1-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯，为淡黄色油状物(39mg,20％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:10.21–10.09(m,1H),8.05(d,J＝8.1Hz,2H),7.97(d,J＝8.0Hz,2H),4.38(q,J＝7.1Hz,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),3.98(s,2H),3.87(s,2H),3.48–3.39(m,1H),2.64–2.45(m,4H),1.42–1.38(m,12H),1.29(t,J＝7.0Hz,3H)。MS(ESI,m/z):484.2[M+H]+。
步骤C：制备4-(4-(2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2-(乙氧基羰 基)环戊n-1-基)苯甲酸
Figure BDA0002484555310002182
将氢氧化锂水溶液(2mol/L,195μL)加入到39mg(0.08mmol)步骤B的产物的1,4-二烷(195μL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，用乙酸乙酯(30mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到4-(4-(2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-2-(乙氧基羰基)环戊n-1-基)苯甲酸，为白色固体(32.8mg,90％)。
步骤D：制备6-(3-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)环 戊-1,3-二烯-1-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002191
将HATU(411mg,1.08mmol)、二异丙基乙胺(776μL,4.5mmol)和4-乙基吡啶-2-胺(165mg,1.35mmol)加入到410mg(0.9mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×70mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱纯用乙酸乙酯化，以得到6-(3-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)环戊-1,3-二烯-1-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯，为白色固体(252mg,50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.61(s,1H),8.29(s,1H),5.12(d,J＝5.1Hz,1H),8.05(d,J＝8.4Hz,2H),7.95–7.93(m,2H),6.94(dd,J1＝5.1Hz,J2＝1.1Hz,1H),6.35(s,1H),4.33(q,J＝7.1Hz,2H),4.02(s,2H),3.89(s,2H),3.46(t,J＝8.5Hz,1H),2.71(q,J＝7.6Hz,2H),2.53(q,J＝7.6Hz,4H),1.44(s,9H),1.31–1.29(m,3H),1.20(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI,m/z):560.2[M+H]+。
步骤E：制备6-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002192
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(288μL,1M四氢呋喃溶液)缓慢加入134mg(0.24mmol)步骤D的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟基胺(67.1mg,0.29mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。反应用盐水淬灭并在真空下浓缩至干。残留物用乙酸乙酯洗涤三次(3×60mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥，并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经受采用乙酸乙酯的柱色谱，以得到产物6-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯，为白色固体(69mg,50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.81(s,1H),8.29(s,1H),8.15(d,J＝5.1Hz,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.80(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(dd,J1＝5.1Hz,J2＝1.3Hz,1H),6.29(s,2H),4.25(d,J＝7.1Hz,2H),4.05(s,2H),3.88(s,2H),3.77(t,J＝8.6Hz,1H),2.73–2.66(m,4H),2.57–2.52(m,2H),1.42(s,9H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H),1.21(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):575.2[M+H]+。
步骤F：制备1-氨基-2-(2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-4-(4- ((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002201
将2mol/L氢氧化锂水溶液(697μL)加入到80mg(0.14mmol)步骤E的产物的甲醇(3mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用乙酸乙酯(80mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用水洗涤三次(3×50mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到1-氨基-2-(2-(叔丁氧基羰基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(69mg,90％)。
步骤G：制备6-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002211
将HATU(63mg,0.17mmol)、二异丙基乙胺(56.8μL,0.33mmol)和NH4Cl(58.8mg,1.1mmol)加入到60mg(0.11mmol)步骤F的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×40mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用二氯甲烷和甲醇(10:1)纯化，以得到产物6-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯，为白色固体(24mg,40％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.02(s,1H),8.24(s,1H),8.14(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(d,J＝8.3Hz,2H),7.69(d,J＝8.3Hz,2H),6.92(dd,J1＝5.0Hz,J2＝1.0Hz,1H),6.05–5.99(m,2H),5.53(s,2H),4.03(s,2H),3.86(s,2H),3.72(t,J＝8.6Hz,1H),2.70(q,J＝7.6Hz,2H),2.65–2.62(m,2H),2.56–2.52(m,2H),1.42(s,9H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI,m/z):546.2[M+H]+。
步骤H：制备1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(2-氮杂螺 [3.3]庚烷-6-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002212
将三氟乙酸(661μL)加入到60mg(0.11mmol)步骤G的产物的二氯甲烷(1.5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):446.2[M+H]+。
步骤I：制备2-(2-丙烯酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基 吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002221
将二异丙基乙胺(113.7μL,0.66mmol)加入到49.0mg(0.11mmol)步骤H的产物的干燥二氯甲烷(2mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(6.2μL,0.08mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL).。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(10:1)纯化，以得到2-(2-丙烯酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(27mg,50％)。1H NMR(DMSO,400MHz)δ:11.19(s,1H),8.32(d,J＝5.4Hz,1H),8.19(s,1H),8.13(d,J＝8.4Hz,2H),8.07(s,1H),7.94(s,1H),7.88(d,J＝8.6Hz,2H),7.19(d,J＝5.3Hz,1H),6.35–6.26(m,1H),6.09(dt,J1＝17.0Hz,J2＝2.6Hz,1H),5.69–5.64(m,1H),4.81(s,2H),4.37(s,1H),4.21(s,1H),4.08(s,1H),3.92(s,1H),3.84(dd,J1＝16.4Hz,J2＝8.4Hz,1H),2.75–2.62(m,6H),1.23(t,J＝7.6Hz,3H)；13C NMR(DMSO,150MHz)δ:165.8,164.4,158.5,158.3,158.1,151.1,150.6,128.1,127.8,127.1,126.3,126.3,125.6,120.0,116.8,114.9,114.3,62.1,60.8,60.0,58.7,37.4,34.3,28.0,14.1。MS(ESI,m/z):500.2[M+H]+。
实施例:96(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔 酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002231
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基 哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002232
将三乙胺(308mg,3.06mmol)加入到214mg(0.51mmol)实施例53的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入丙炔酸(31.5mg,0.45mmol)和HATU(289mg,0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层,并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(120.2mg,50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.84(s,1H),8.25(s,1H),8.15(d,J＝4.8Hz,1H),7.97(d,J＝7.9Hz,2H),7.83(d,J＝8.0Hz,1.6H),7.77(d,J＝7.8Hz,0.4H),6.92(d,J＝4.6Hz,1H),6.50(s,1H),6.09(s,2H),6.00(d,J＝5.1Hz,1H),5.81(s,1H),4.31(d,J＝13.6Hz,1H),3.80–3.72(m,1H),3.18(s,1H),2.41(s,3H),2.36–2.32(m,1H),2.21–2.17(m,1H),1.91–1.88(m,2H),1.74–1.61(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.5,162.5,153.6,151.7,150.3,147.8,147.5,141.1,138.2,134.1,129.8,127.6,121.4,119.8,115.0,80.3,75.5,44.7,44.1,27.9,25.7,21.6,19.8。MS(ESI,m/z):472.2[M+H]+。
实施例97:(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙 炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002241
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰 基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002242
将三乙胺(308mg,3.06mmol)加入到222mg(0.51mmol)实施例67的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入丙炔酸(31.5mg,0.45mmol)和HATU(289mg,0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(124.2mg,50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.87(s,1H),8.09(d,J＝5.8Hz,1H),8.04(s,1H),7.96(d,J＝8.1Hz,2H),7.83(d,J＝8.0Hz,1.6H)7.78(d,J＝8.0Hz,0.4H),6.65–6.63(m,1H),6.53(s,1H),6.08(s,2H),5.99(d,J＝5.3Hz,1H),5.82(s,1H),4.31(d,J＝13.1Hz,1H),3.92(s,3H),3.77(dt,J1＝12.9Hz,J2＝2.3Hz,1H),3.18(s,1H),2.36–2.30(m,1H),2.21–2.17(m,1H),1.91–1.88(m,2H),1.75–1.71(m,1H),1.65–1.61(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.9,165.6,162.5,153.6,153.3,148.5,147.8,141.0,138.3,134.0,130.0,127.6,119.8,108.2,99.1,80.3,75.5,55.6,44.7,44.1,27.9,25.7,19.8。MS(ESI,m/z):488.2[M+H]+。
实施例98:(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氯吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002251
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002252
将三乙胺(308mg,3.06mmol)加入到224mg(0.51mmol)实施例72的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(37.6mg,0.45mmol)和HATU(289mg,0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(129.0mg,50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.41(s,1H),8.43(s,1H),8.12(d,J＝5.3Hz,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,2H),7.70(d,J＝8.0Hz,2H),7.26(s,1H),7.03(d,J＝5.4Hz,1H),6.72(s,1H),6.13(s,2H),5.92(d,J＝5.1Hz,1H),4.26(d,J＝12.7Hz,1H),3.67–3.61(m,1H),2.39–2.30(m,1H),2.17–2.13(m,1H),1.99(s,3H),1.87–1.84(m,2H),1.71–1.68(m,1H),1.63–1.54(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.1,162.7,154.9,152.8,148.6,148.1,146.0,141.1,138.4,133.0,129.5,127.3,120.4,120.3,114.6,91.0,72.9,44.5,43.8,27.8,25.7,19.8,4.2。MS(ESI,m/z):506.1[M+H]+。
实施例99:(S)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰 基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002261
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌 啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002262
将三乙胺(308mg,3.06mmol)加入到224mg(0.51mmol)实施例72的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入丙炔酸(31.5mg,0.45mmol)和HATU(289mg,0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(125.4mg,50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.02(s,1H),8.48(s,1H),8.18(d,J＝5.2Hz,1H),7.92(d,J＝7.9Hz,2H),7.81(d,J＝8.1Hz,2H),7.08(d,J＝5.3Hz,1H),6.78(s,1H),6.10–6.07(m,3H),5.97(d,J＝5.1Hz,1H),4.32–4.28(m,1H),3.78–3.72(m,1H),3.18(s,1H),2.39–2.29(m,1H),2.20–2.17(m,1H),1.91–1.88(m,2H),1.74–1.71(m,1H),1.64–1.61(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.7,162.6,153.7,152.7,148.6,147.9,146.2,141.0,138.5,133.4,129.7,127.5,120.5,120.1,114.6,80.4,75.5,44.7,44.1,27.9,25.7,19.7。MS(ESI,m/z):492.1[M+H]+。
实施例100:(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙 炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002271
制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基 哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002272
将三乙胺(394.6mg,3.9mmol)加入到281mg(0.65mmol)实施例73的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。5min后，加入丙炔酸(43.4mg,0.62mmol)和HATU(370.7mg,0.98mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。然后加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(189.3mg,60％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.13(s,1H),8.32(s,1H),8.19(d,J＝5.1Hz,1H),8.00(d,J＝8.3Hz,2H),7.83(d,J＝8.2Hz,2H),6.97–6.96(m,1H),6.51(s,1H),6.09(s,2H),5.99(d,J＝4.8Hz,1H),5.78(s,1H),4.30(d,J＝13.4Hz,1H),3.77(td,J1＝13.3Hz,J2＝3.0Hz,1H),3.18(s,1H),2.73(q,J＝7.6Hz,2H),2.35–2.32(m,1H),2.21–2.18(m,1H),1.94–1.85(m,2H),1.74–1.71(m,1H),1.65–1.60(m,1H),1.30(t,J＝7.6Hz,3H)；13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:165.6,162.5,153.6,151.6,147.8,146.8,141.1,138.3,133.9,129.8,129.6,127.7,120.1,119.8,114.1,80.3,75.5,44.7,44.1,28.9,27.9,25.7,19.8,14.5。MS(ESI,m/z):486.2[M+H]+。
实施例101:(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002281
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪 唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002282
将HATU(4.2g,11mmol)、二异丙基乙胺(7.8mL,39.5mmol)和哒嗪-3-胺(1.8g,17.4mmol)加入到4.0g(9mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×120mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，以得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(3.3g,71％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.97(s,1H),9.07(s,1H),8.98(dd,J1＝4.7Hz,J2＝1.4Hz,1H),8.67(dd,J1＝9.0Hz,J2＝1.3Hz,1H),8.22(d,J＝8.4Hz,2H),8.00(d,J＝8.4Hz,2H),7.54(q,J＝4.7Hz,1H),5.42(d,J＝4.1Hz,1H),4.37–4.32(m,2H),4.04–4.01(m,1H),2.76–2.72(m,1H),2.56(d,J＝12.9Hz,1H),2.00–1.91(m,1H),1.87–1.69(m,3H),1.56–1.53(m,10H),1.35(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI,m/z):521.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002291
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(7.6mL,1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到3.3g(6.3mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.5g,6.3mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯萃取三次(3×100mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过采用石油醚和乙酸乙酯(2:1)的柱色谱以得到产物(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(2.0g,59％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.97(s,1H),8.93–8.86(m,1H),8.57–8.56(m,1H),8.04–7.97(m,2H),7.80–7.79(m,2H),7.48–7.46(m,1H),5.88(s,2H),5.68–5.63(m,1H),4.29–4.20(m,2H),3.90(d,J＝11.4Hz,1H),3.40(t,J＝12.0Hz,1H),2.10–2.02(m,1H),1.96–1.95(m,2H),1.80–1.65(m,2H),1.57–1.55(m,1H),1.36(s,9H),1.26–1.16(m,3H)。MS(ESI,m/z):536.2[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002292
将2mol/L氢氧化锂水溶液(19mL)加入到1.9g(3.6mmol)步骤B的产物的甲醇(19mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸，为白色固体(1.7g,93％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002301
将HATU(2.5g,6.7mmol)、二异丙基乙胺(2.3mL,13.4mmol)和NH4Cl(2.4g,45mmol)加入到2.2g(4.4mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(15mL)溶液，并在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用二氯甲烷和甲醇(35:1)纯化，以得到产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.4g,77％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.28(s,1H),8.72(d,J＝3.6Hz,1H),8.62(d,J＝8.8Hz,1H),8.03(s,1H),7.86(d,J＝8.2Hz,2H),7.75(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(dd,J1＝9.0Hz,J2＝4.7Hz,1H),7.07(s,1H),6.05(s,2H),5.66(d,J＝5.1Hz,1H),3.95(d,J＝12.2Hz,1H),3.37–3.31(m,1H),2.19–2.09(m,2H),1.93–1.86(m,2H),1.76–1.62(m,2H),1.50(s,9H)。MS(ESI,m/z):507.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-2-(哌啶-2-基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002302
将三氟乙酸(1.4mL)加入到180mg(0.35mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-2-(哌啶-2-基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):407.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002311
向含有二异丙基乙胺(271mg,2.10mmol)的142mg(0.35mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液，在5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(29.1mg,0.32mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(18:1)纯化，以得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(98mg,61％)。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:10.49(s,1H),8.69(s,1H),8.60(d,J＝8.3Hz,1H),8.40(s,1H),7.83(d,J＝7.1Hz,2H),7.73–7.72(m,2H),7.56(s,1H),7.43(dd,J1＝8.5Hz,J2＝4.5Hz,1H),6.66-6.62(m,1H),6.41(d,J＝16.3Hz,1H),6.35(s,2H),6.16–6.12(m,1H),5.77(d,J＝10.0Hz,1H),3.86(d,J＝11.3Hz,1H),3.71–3.69(m,1H),2.38–2.36(m,1H),2.14(d,J＝13.1Hz,1H),1.91–1.85(m,2H),1.69–1.59(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:166.9,166.8,164.0,156.2,148.5,147.7,140.2,138.7,132.4,129.0,128.9,128.5,127.9,127.7,121.2,119.5,50.9,43.1,28.1,26.0,19.8。MS(ESI,m/z):461.1[M+H]+。
实施例102:(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002312
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002321
向含有三乙胺(212mg,2.1mmol)的142mg(0.35mmol)实施例101的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液，在5min后，加入丁-2-炔酸(26.5mg,0.32mmol)和HATU(203mg,0.53mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(20:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(87mg,53％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.67(s,1H),8.63-8.58(m,3H),7.78(d,J＝8.2Hz,2H),7.68–7.58(m,3H)7.43(dd,J1＝9.0Hz,J2＝4.7Hz,1H),6.19–6.09(m,3H),4.31(d,J＝13.0Hz,1H),3.78(t,J＝11.1Hz,1H),4.31(d,J＝13.0Hz,1H),2.23–2.20(m,1H),2.12–2.08(m,1H),2.03(s,3H),1.85–1.83(m,2H),1.66–1.56(m,2H)；13C NMR(CDCl3,100MHz)δ:166.9,164.3,156.2,154.6,148.7,147.6,139.9,138.5,132.4,128.6,128.1,127.9,121.7,119.5,90.6,73.2,44.7,44.0,28.0,26.0,19.8,4.3。MS(ESI,m/z):473.1[M+H]+。
实施例103:2-((1-丙烯酰基哌啶-4-基)甲基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002322
步骤A：制备4-(2-((1-乙氧基-3-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1,3-二氧代丙烷-2-基) 氧)-2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002331
将二异丙基乙胺(6.4mL,37mmol)和2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)乙酸(8.7g,36mmol)加入到11.5g(34mmol)实施例1的步骤C的产物的乙腈(35mL)溶液，并在室温下搅拌3h，然后蒸发掉所有挥发物。残留物用水(150mL)稀释，用乙酸乙酯(500mL)萃取。分离有机相，用Na2SO4干燥并浓缩。残留物通过快速柱色谱用石油醚和乙酸乙酯(8:1)纯化，以得到4-(2-((1-乙氧基-3-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1,3-二氧代丙烷-2-基)氧)-2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为淡黄色油状物(12.9g,76％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.14(d,J＝8.5Hz,2H),8.02(d,J＝8.6Hz,2H),6.29(s,1H),4.40(q,J＝7.1Hz,2H),4.23(q,J＝7.1Hz,2H),4.07–4.05(m,2H),2.78–2.60(m,2H),2.40(d,J＝7.0Hz,2H),1.99–1.93(m,1H),1.71(d,J＝12.6Hz,2H),1.43(s,9H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H),1.21–1.11(m,5H)。MS(ESI,m/z):506.2[M+H]+。
步骤B：制备4-((5-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)甲 基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002332
在150mL耐压瓶中，将NH4OAc(25.8g,336mmol)加入到14.1g(28mmol)步骤A的产物的二甲苯(40mL)溶液。反应在140℃下加热2.5h。冷却后，残留物用水(100mL)稀释和用乙酸乙酯(300mL)萃取。分离有机相，用Na2SO4干燥并浓缩。残留物通过快速柱色谱用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，以得到4-((5-(乙氧基羰基)-4-(4-(乙氧基羰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为淡黄色油状物(4.5g,33％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.25(s,1H),8.06(d,J＝8.6Hz,2H),7.93(d,J＝8.6Hz,2H),4.39(q,J＝7.1Hz,2H),4.31(q,J＝7.1Hz,2H),4.10–4.07(m,2H),2.71–2.69(m,4H),2.04–1.97(m,1H),1.67(d,J＝11.8Hz,2H),1.44(s,9H),1.40(t,J＝7.1Hz,3H),1.31(t,J＝7.1Hz,3H),1.21–1.17(m,2H)。MS(ESI,m/z):486.2[M+H]+。
步骤C：制备4-(2-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)甲基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪 唑-4-基)苯甲酸
Figure BDA0002484555310002341
将氢氧化锂水溶液(2mol/L,22mL)加入到4.46g(9.2mmol)步骤B的产物的1,4-二烷(22mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到4-(2-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)甲基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-4-基)-苯甲酸，为白色固体(3.78g,90％)。
步骤D：制备4-((5-(乙氧基羰基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑- 2-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002342
将HATU(3.6g,9.6mmol)、二异丙基乙胺(6.9mL,39.9mmol)和吡啶-2-胺(1.66g,17.7mmol)加入到3.66g(8.0mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭，并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(1:2)纯化，以得到4-((5-(乙氧基羰基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(3.48g,81％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.25(s,1H),9.69(s,1H),8.33(d,J＝8.5Hz,1H),8.20(d,J＝4.1Hz,1H),8.04(d,J＝8.6Hz,2H),7.85–7.80(m,3H),7.13–7.09(m,1H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),4.09–4.05(m,2H),2.80(d,J＝7.1Hz,2H),2.69–2.66(m,2H),2.07–2.05(m,1H),1.68(d,J＝12.0Hz,2H),1.40(s,9H),1.33–1.24(m,2H),1.23–1.21(m,3H)。MS(ESI,m/z):534.2[M+H]+。
步骤E：制备4-((1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-2-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002351
在-10℃下，六甲基二硅氮烷锂(7.8mL,1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到3.48g(6.5mmol)步骤D的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(40mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟基胺(1.5g,6.5mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下,加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯萃取三次(3×100mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过采用石油醚和乙酸乙酯(1:1)的柱色谱以得到产物4-((1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.8g,51％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.71(s,1H),8.46(d,J＝8.4Hz,1H),8.22(d,J＝4.0Hz,1H),8.01(d,J＝8.6Hz,2H),7.82–7.78(m,3H),7.11–7.08(m,1H),5.33(s,2H),4.26(q,J＝7.1Hz,2H),4.11–4.07(m,2H),2.84(d,J＝7.1Hz,2H),2.71–2.66(m,2H),2.03–2.01(m,1H),1.67(d,J＝11.9Hz,2H),1.44(s,9H),1.31–1.27(m,2H),1.24–1.21(m,3H)。MS(ESI,m/z):549.2[M+H]+。
步骤F：制备1-氨基-2-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-(4-(吡啶-2-基 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002352
将2mol/L氢氧化锂水溶液(18mL)加入到1.8g(3.3mmol)步骤E的产物的甲醇(20mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸发反应混合物，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×60mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，以得到1-氨基-2-((1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)甲基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸，为白色固体(1.62g,95％)。
步骤G：制备4-((1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H- 咪唑-2-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002361
将HATU(1.8g,4.7mmol)、二异丙基乙胺(1.7mL,9.3mmol)和NH4Cl(1.6g,31mmol)加入到1.62g(3.1mmol)步骤F的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液，并在室温下搅拌2h。反应混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×60mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，以得到产物4-((1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.37g,85％)。1H NMR(DMSO,400MHz)δ:10.74(s,1H),8.39(dd,J1＝4.8Hz,J2＝1.1Hz,1H),8.21(d,J＝8.4Hz,1H),8.03–8.01(m,3H),7.86–7.82(m,3H),7.70(s,1H),7.18–7.15(m,1H),6.01(s,2H),3.92(d,J＝11.0Hz,2H),2.69–2.67(m,4H),2.01–1.97(m,1H),1.68(d,J＝11.1Hz,2H),1.39(s,9H),1.18–1.05(m,2H)。MS(ESI,m/z):520.2[M+H]+。
步骤H：制备1-氨基-2-(哌啶-4-基甲基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002362
将三氟乙酸(2.5mL)加入到330mg(0.63mmol)步骤G的产物的二氯甲烷(8mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到1-氨基-2-(哌啶-4-基甲基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):420.2[M+H]+。
步骤I：制备2-((1-丙烯酰基哌啶-4-基)甲基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002371
向含有二异丙基乙胺(442mg,3.42mmol)的240mg(0.57mmol)步骤H的产物的干燥二氯甲烷(8mL)溶液，在5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(41.3mg,0.46mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(18:1)纯化，以得到2-((1-丙烯酰基哌啶-4-基)甲基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(175mg,65％)。1HNMR(DMSO,400MHz)δ:10.71(s,1H),8.39(d,J＝3.8Hz,1H),8.20(d,J＝8.4Hz,1H),8.05–8.01(m,3H),7.87–7.82(m,3H),7.68(s,1H),7.17(dd,J1＝6.9Hz,J2＝5.1Hz,1H),6.83–6.76(m,1H),6.07(dd,J1＝16.3Hz,J2＝2.3Hz,1H),6.03(s,2H),5.64(dd,J1＝10.4Hz,J2＝2.3Hz,1H),4.41(d,J＝12.8Hz,1H),4.03(d,J＝12.8Hz,1H),3.07–3.04(m,1H),2.70–2.61(m,3H),2.16–2.09(m,1H),1.78–1.76(m,2H),1.18–1.11(m,2H)；13C NMR(DMSO,100MHz,)δ:165.7,164.1,162.5,152.3,147.9,147.8,138.2,138.1,136.0,131.9,128.6,127.7,127.0,126.9,124.7,119.7,114.7,45.2,41.6,34.4,32.5,31.7,31.5。MS(ESI,m/z):474.2[M+H]+。
实施例104:1-氨基-2-((1-(丁-2-炔酰基)哌啶-4-基)甲基)-4-(4-(吡啶-2-基氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002381
制备1-氨基-2-((1-(丁-2-炔酰基)哌啶-4-基)甲基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002382
将三乙胺(346mg,3.42mmol)加入到240mg(0.57mmol)实施例103的步骤H的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液。在5min后，加入丁-2-炔酸(42.9mg,0.51mmol)和HATU(325mg,0.85mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(16:1)纯化，以得到1-氨基-2-((1-(丁-2-炔酰基)哌啶-4-基)甲基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(160mg,58％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.86(s,1H),8.37(d,J＝8.3Hz,1H),8.29(d,J＝4.2Hz,1H),7.98(d,J＝8.2Hz,2H),7.79–7.76(m,1H),7.74(d,J＝8.2Hz,2H),7.10–7.08(m,1H),5.81(s,2H),5.52(s,2H),4.51(d,J＝13.4Hz,1H),4.36(d,J＝13.5Hz,1H),3.08–3.03(m,1H),2.86–2.79(m,2H),2.66–2.61(m,1H),2.22–2.12(m,1H),1.99(s,3H),1.81(d,J＝12.7Hz,1H),1.76(d,J＝13.1Hz,1H),1.36–1.30(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.3,162.7,153.2,151.6,150.4,148.0,141.0,138.7,138.0,134.4,129.6,127.9,120.3,119.9,114.5,89.4,73.2,47.2,41.4,35.6,32.6,32.3,31.6,4.2。MS(ESI,m/z):486.2[M+H]+。
实施例105:
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(噻唑-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002391
步骤A：制备(S)-4-(1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-5-氨基甲酰基- 1H-咪唑-4-基)苯甲酸
Figure BDA0002484555310002392
搅拌300mg(0.58mmol)实施例58的步骤D的产物的乙醇(15mL)溶液，并加入氢氧化锂水溶液(2mol/L,3mL)，然后在80℃下搅拌3h。蒸发反应混合物，用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×50mL)。合并的有机层在减压下浓缩以得到(S)-4-(1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-5-氨基甲酰基-1H-咪唑-4-基)苯甲酸，为白色固体(224mg,90％)。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(噻唑-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002393
将HATU(212.7mg,0.56mmol)、二异丙基乙胺(402μL,2.33mmol)和噻唑-2-胺(70mg,0.70mmol)加入到200mg(0.47mmol)步骤A的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用二氯甲烷和甲醇(40:1)纯化，以得到(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-(噻唑-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(120mg,50％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:11.03(s,1H),8.03(d,J＝8.1Hz,2H),7.88(d,J＝8.2Hz,2H),7.44(d,J＝3.5Hz,1H),7.28(s,1H),7.01(d,J＝3.4Hz,1H),6.40(s,1H),5.97(s,2H),5.57(d,J＝5.2Hz,1H),3.93(d,J＝11.7Hz,1H),3.24(dt,J1＝13.3Hz,J2＝2.7Hz,1H),2.33–2.28(m,1H),2.12(d,J＝13.9Hz,1H),1.90–1.88(m,1H),1.75(d,J＝13.0Hz,1H),1.68–1.65(m,1H),1.54–1.51(m,1H),1.47(s,9H)。MS(ESI,m/z):512.2[M+H]+
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(哌啶-2-基)-4-(4-(噻唑-2-基氨基甲酰基)苯基)- 1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002401
将三氟乙酸(587μL)加入到50mg(0.09mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(2mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-2-(哌啶-2-基)-4-(4-(噻唑-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):412.1[M+H]+。
步骤D：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(噻唑-2-基氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002402
将二异丙基乙胺(587μL，0.59mmol)加入到50mg(0.09mmol)步骤C的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。在5min后,在0℃下加入丙烯酰氯(5.5μL,0.07mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×30mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，以得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(噻唑-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(14mg,60％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:11.87(s,1H),8.01(d,J＝8.1Hz,2H),7.78(d,J＝7.9Hz,2H),7.62(s,1H),7.42(d,J＝3.3Hz,1H),7.29(s,1H),6.98(d,J＝3.5Hz,1H),6.66–6.48(m,1H),6.37–6.33(m,1H),6.08(s,2H),5.94–5.93(m,1H),5.76(d,J＝10.6Hz,1H),3.85(d,J＝13.0Hz,1H),3.66(t,J＝12.0Hz,1H),2.40–2.36(m,1H),2.22–2.19(m,1H),1.92–1.86(m,2H),1.71–1.60(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.5,165.2,163.2,160.1,148.4,141.6,138.8,137.4,131.2,129.7,129.0,128.0,120.8,115.4,113.7,44.8,43.1,27.9,25.8,19.7。MS(ESI,m/z):466.1[M+H]+。
实施例106：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002411
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002412
将HATU(4.15g，10.9mmol)、二异丙基乙胺(7.8mL,45mmol)和4-氟吡啶-2-胺(2.2g,20mmol)加入到4.0g(9.1mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(40mL)溶液，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，以得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(3.6g,73％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.23(s,1H),9.12(s,1H),8.22–8.13(m,4H),7.95–7.91(m,2H),6.78(t,J＝7.2Hz,1H),5.39(s,1H),4.31–4.24(m,2H),3.99(d,J＝11.6Hz,1H),2.49(d,J＝11.6Hz,1H),1.88–1.63(m,6H),1.48(s,9H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI,m/z):538.2[M+H]+
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002421
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(8.0mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入3.6g(6.7mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(40mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.9g,8.0mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×150mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.4g,39％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.73(s,1H),8.29–8.2(m,2H),7.93(d,J＝8.0Hz,2H),7.87(d,J＝8.0Hz,2H),6.84(t,J＝6.8Hz,1H),5.92(s,2H),5.68(d,J＝4.8Hz,1H),4.33–4.26(m,2H),3.95(d,J＝13.2Hz,1H),3.42(td,J1＝2.8Hz,J2＝12.8Hz,1H),2.13–2.04(m,2H),1.92–1.88(m,1H),1.77–1.63(m,3H),1.45(s,9H),1.26(t,J＝7.6Hz,3H).MS(ESI,m/z):553.2[M+H]+
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002431
将2mol/L氢氧化锂水溶液(6mL)加入到1.44g(2.61mmol)步骤B的产物的甲醇(10mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸干部分溶剂，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.5g，95％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基) 苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002432
将HATU(1.2g,3.1mmol)、二异丙基乙胺(1.1mL,6.3mmol)和NH4Cl(1.1g,21mmol)加入到1.1g(2.1mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.5g,50％).1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.85(s,1H),7.96(d,J＝8.0Hz,2H),7.88(d,J＝8.0Hz,2H),7.67(d,J＝8.0Hz,1H),7.36(d,J＝8.0Hz,1H),6.84(t,J＝5.6Hz,1H),6.07(s,2H),6.01(s,1H),5.64(d,J＝4.8Hz,1H),5.46(s,1H),3.94(d,J＝13.2Hz,1H),3.35–3.25(m,1H),2.15(d,J＝13.2Hz,2H),1.93–1.87(m,2H),1.54–1.51(m,2H),1.46(s,9H).MS(ESI,m/z):524.2[M+H]+.
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2- 基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002441
将三氟乙酸(2.1mL)加入到180mg(0.34mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(5mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):424.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002442
将二异丙基乙胺(356μL,2.1mmol)加入到143.8mg(0.34mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(25μL,0.31mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为白色固体(95mg,64％).1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:9.36(s,1H),8.23–8.21(m,1H),8.19(dd,J1＝2.4Hz,J2＝11.4Hz,1H),7.88(d,J＝7.8Hz,2H),7.79(d,J＝7.2Hz,2H),7.21(s,1H),6.81–6.80(m,1H),6.61–6.56(m,1H),6.40–6.37(m,1H),6.31–6.27(m,3H),6.00–5.94(m,1H),5.71(d,J＝10.2Hz,1H),3.84–3.82(m,1H),3.71–3.66(m,1H),2.42–2.40(m,1H),2.19–2.17(m,1H),1.92–1.85(m,2H),1.72–1.69(m,1H),1.62–1.60(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:170.1(d,J＝258.0Hz),167.3,166.1,162.7,154.2(d,J＝2.0Hz),149.9(d,J＝9.0Hz),148.3,141.3,138.6,133.2,129.7,128.8,127.8,127.4,120.2,108.2(d,J＝18.0Hz),102.4(d,J＝22.5Hz),44.4,42.98,28.0,25.8,19.7.MS(ESI,m/z):478.2[M+H]+。
实施例107：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲 酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002451
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002452
将HATU(2.0g,5.4mmol)、二异丙基乙胺(3.8mL,22mmol)和5-氟-4-甲基吡啶-2-胺(1.3g,9.9mmol)加入到2.0g(4.5mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液，并在80℃下搅拌3h。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×200mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，以得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.6g,63％).1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:10.09(s,1H),8.65(s,1H),8.31(d,J＝5.6Hz,1H),8.16(d,J＝8.4Hz,2H),8.04(s,1H),7.93(d,J＝8.4Hz,2H),5.40(d,J＝4.0Hz,1H),4.34–4.31(m,2H),4.01(d,J＝11.6Hz,1H),2.53(d,J＝12.8Hz,1H),2.36(s,3H),2.04(t,J＝14.4Hz,2H),1.93(t,J＝13.2Hz,1H),1.85–1.81(m,1H),1.75(t,J＝8.8Hz,1H),1.66(d,J＝10.8Hz,1H),1.51(s,9H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI,m/z):552.3[M+H]+.
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002461
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(3.4mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入1.6g(2.9mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(0.8g,3.4mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×150mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥并在减压下除去溶剂，以得到粗残留物，其经过柱色谱法采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.5g,30％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.59(s,1H),8.32(d,J＝6.0Hz,1H),8.04(s,1H),7.91(d,J＝8.0Hz,2H),7.85(d,J＝8.4Hz,2H),5.92(s,2H),5.68(d,J＝5.6Hz,1H),4.33–4.25(m,2H),3.95(d,J＝12.8Hz,1H),3.45–3.38(m,1H),2.12–2.02(m,2H),1.93–1.84(m,1H),1.75(d,J＝16.8Hz,1H),1.66–1.50(m,2H),1.44(s,9H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI,m/z):567.3[M+H]+
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002471
将2mol/L氢氧化锂水溶液(4mL)加入到0.49g(0.87mmol)步骤B的产物的甲醇(10mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸干部分溶剂，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(0.48g,99％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002472
将HATU(0.5g,1.3mmol)、二异丙基乙胺(0.5mL,2.6mmol)和NH4Cl(0.5g,8.9mmol)加入到0.48g(0.9mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩，并通过快速色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.3g,71％)。MS(ESI,m/z):538.3[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2- (哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002481
将三氟乙酸(1.3mL)加入到123mg(0.22mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(2mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):438.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002482
将二异丙基乙胺(236.7μL,1.37mmol)加入到96.1mg(0.22mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(16.7μL,0.21mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为白色固体(86mg,80％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.26(s,1H),8.25(d,J＝5.6Hz,1H),7.97(s,1H),7.81(d,J＝7.6Hz,2H),7.70(d,J＝7.6Hz,2H),7.31(s,1H),6.67(s,1H),6.60–6.54(m,1H),6.31–6.25(m,3H),6.02–5.92(m,1H),5.69(d,J＝10.4Hz,1H),3.81(d,J＝12.0Hz,1H),3.71–3.65(m,1H),2.40–2.38(m,1H),2.33(s,3H),2.18(d,J＝13.2Hz,1H),1.94–1.83(m,2H),1.71–1.58(m,2H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.2,165.7,162.8,155.9(d,J＝247.5Hz),148.3,147.8,141.3,138.3,136.7(d,J＝15.0Hz),134.5(d,J＝27.0Hz),133.3,129.5,128.7,127.8,127.2,120.1,116.7,44.4,43.0,28.0,25.8,19.6,14.9(d,J＝3.0Hz).MS(ESI,m/z):492.2[M+H]+。
实施例108：
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002491
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002492
将三乙胺(308mg,3.06mmol)加入到223mg(0.51mmol)实施例109的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(37.6mg,0.45mmol)和HATU(289mg,0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(25:1)纯化，得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为灰白色固体(154mg,60％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.85(s,1H),8.29(d,J＝5.6Hz,1H),8.03(s,1H),7.91(d,J＝8.0Hz,2H),7.82(d,J＝8.0Hz,2H),6.90(s,1H),6.14(s,2H),6.01(s,1H),5.94(d,J＝5.2Hz,1H),4.28(d,J＝12.8Hz,1H),3.65(td,J1＝2.8Hz,J2＝13.2Hz,1H),2.36(s,3H),2.17(d,J＝14.8Hz,1H),2.01(s,3H),1.89–1.86(m,2H),1.73–1.70(m,2H),1.63–1.59(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:165.5,162.6,156.0(d,J＝247.5Hz),155.0,148.0,147.7,141.2,138.4,136.7(d,J＝16.5Hz),134.6(d,J＝27.0Hz),133.6,129.7,127.4,120.0,116.6,91.0,73.0,44.5,43.8,27.8,25.7,19.8,14.9(d,J＝3.0Hz),4.3.MS(ESI,m/z):504.2[M+H]+。
实施例109：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002501
步骤A：制备(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002511
将HATU(2.0g,5.4mmol)、二异丙基乙胺(3.8mL,22mmol)和4-(4-氯苯基)吡啶-2-胺(1.4g,6.7mmol)加入到2.0g(4.5mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，得到(S)-2-(5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.5g,52％)。MS(ESI,m/z):630.2[M+H]+。
步骤B：制备(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002512
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(5.3mL,1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到2.7g(4.4mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.2g,5.2mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯萃取三次(3×100mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥并在减压除去溶剂，以得到粗残留物，其经过采用石油醚和乙酸乙酯(3:1)的柱色谱，得到(S)-2-(1-氨基-5-(乙氧基羰基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(1.4g,50％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.79(s,1H),8.69(s,1H),8.34(d,J＝5.2Hz,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.87(d,J＝8.4Hz,2H),7.66(d,J＝8.4Hz,2H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),7.28(d,J＝1.6Hz,1H),2.93(s,2H),5.68(d,J＝4.8Hz,1H),4.32–4.27(m,3H),3.96(d,J＝12.4Hz,1H),3.46–3.39(m,1H),2.11(d,J＝12.4Hz,1H),1.93–1.88(m,1H),1.83–1.73(m,2H),1.66–1.63(m,1H),1.60–1.55(m,1H),1.44(s,9H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI,m/z):645.3[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氯苯 基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002521
将2mol/L氢氧化锂水溶液(6mL)加入到0.2g(0.3mmol)步骤B的产物的甲醇(3mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸除部分溶剂，并用水(10mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×10mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(0.18g,99％)。
步骤D：制备(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure BDA0002484555310002531
将HATU(0.9g,2.4mmol)、二异丙基乙胺(0.8mL,4.8mmol)和NH4Cl(0.9g,16mmol)加入到1.0g(1.6mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用二氯甲烷和甲醇(50:1)纯化，得到产物(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，为白色固体(0.7g,71％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.94(s,1H),8.66(s,1H),8.34(d,J＝5.2Hz,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.86(d,J＝8.4Hz,2H),7.66(d,J＝8.4Hz,2H),7.45(d,J＝8.4Hz,2H),7.27(t,J＝1.2Hz,1H),6.83(s,1H),6.02(s,2H),5.91(s,1H),5.60(d,J＝4.8Hz,1H),3.93(d,J＝12.8Hz,1H),3.28(td,J1＝2.4Hz,J2＝12.8Hz,1H),2.28–2.13(m,2H),1.94–1.88(m,1H),1.68–1.64(m,1H),1.55–1.50(m,2H),1.46(s,9H).MS(ESI,m/z):616.2[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2- (哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002532
将三氟乙酸(1.3mL)加入到120mg(0.20mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(3mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):516.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002541
将二异丙基乙胺(202μL,1.17mmol)加入到103mg(0.2mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(11μL,0.14mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇纯化(30:1)，以得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氟苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为白色固体(73mg,64％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.14(s,1H),8.67(s,1H),8.33(d,J＝5.2Hz,1H),7.97(d,J＝8.0Hz,2H),7.87(d,J＝7.2Hz,2H),7.65(d,J＝8.8Hz,2H),7.45(d,J＝8.4Hz,2H),7.27(s,1H),7.14(s,1H),6.63–6.56(m,1H),6.34–6.27(m,3H),6.08–6.04(m,1H),5.98–5.97(m,1H),5.73(d,J＝10.4Hz,1H),3.85–3.82(m,1H),3.72–3.65(m,1H),2.46–2.43(m,1H),2.22–2.18(m,1H),1.97–1.86(m,2H),1.73–1.70(m,1H),1.63–1.60(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.3,165.8,162.5,152.5,150.1,148.2,148.1,138.6,136.6,135.7,133.5,129.8,129.4,128.8,128.7,127.8,127.4,119.9,118.0,112.1,110.9,44.4,43.0,28.0,25.8,19.7.MS(ESI,m/z):570.2[M+H]+。
实施例110:
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基) 氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002551
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002552
将三乙胺(308mg,3.06mmol)加入到263mg(0.51mmol)实施例109的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(37.6mg,0.45mmol)和HATU(289mg,0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(26:1)纯化，以得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为白色固体(178mg,60％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.00(s,1H),8.67(s,1H),8.34(d,J＝1.8Hz,1H),7.97(d,J＝7.8Hz,2H),7.86(d,J＝7.8Hz,2H),7.66(d,J＝7.2Hz,2H),7.45(d,J＝7.8Hz,2H),7.28(d,J＝4.8Hz,1H),6.88(s,1H),6.15(s,2H),5.95(d,J＝5.4Hz,1H),5.91(s,1H),4.28(d,J＝12.6Hz,1H),3.66(t,J＝13.2Hz,1H),2.43–2.36(m,1H),2.18(d,J＝13.8Hz,1H),2.02(s,3H),1.89–1.87(m,2H),1.73–1.71(m,1H),1.64–1.60(m,1H)；13C NMR(DMSO-d6,150MHz)δ:165.8,162.4,153.1,148.7,147.8,147.4,137.8,136.4,135.0,134.2,132.0,129.3,128.7,128.0,127.9,126.7,125.6,117.4,111.9,91.9,73.2,43.8,40.1,27.9,25.4,19.3,3.4.MS(ESI,m/z):582.1[M+H]+。
实施例111：
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨 基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002561
步骤A：制备叔丁基(S)-2-(4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯 基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸酯
Figure BDA0002484555310002562
将HATU(2.0g,5.4mmol)、二异丙基乙胺(3.8mL,22mmol)和4-(2-氨基吡啶-4-基)苯甲腈(1.3g,6.7mmol)加入到2.0g(4.5mmol)实施例46的步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液。反应混合物在80℃下搅拌。反应完成后(通过TLC监控)，混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用石油醚和乙酸乙酯(2:1)纯化，得到叔丁基(S)-2-(4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基 甲酰基)苯基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸酯，为白色固体(1.5g,52％)。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ:10.01(s,1H),8.81(s,1H),8.73(s,1H),8.40(d,J＝5.2Hz,1H),8.20(d,J＝8.4Hz,2H),7.98(d,J＝8.4Hz,2H),7.82(d,J＝8.4Hz,2H),7.78(d,J＝8.0Hz,2H),7.30–7.28(m,1H),5.41(d,J＝4.0Hz,1H),4.36–4.31(m,2H),4.02(d,J＝10.0Hz,1H),2.79–2.73(m,1H),2.55(d,J＝12.4Hz,1H),1.93–1.74,(m,4H),1.76(d,J＝11.6Hz,1H),1.53(s,9H),1.50(s,1H),1.34(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI,m/z):621.3[M+H]+。
步骤B：制备叔丁基(S)-2-(1-氨基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰 基)苯基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸酯
Figure BDA0002484555310002571
在-10℃下，将六甲基二硅氮烷锂(5.2mL，1M四氢呋喃溶液)缓慢加入到2.7g(4.4mmol)步骤A的产物的无水N,N-二甲基甲酰胺(30mL)溶液。在混合物搅拌20min后，在0℃下加入O-(二苯基氧膦基)羟胺(1.2g,5.2mmol)，并将所得悬浮液在室温下搅拌2h(在反应混合物变得太粘稠的情况下，加入额外的N,N-二甲基甲酰胺)。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯萃取三次(3×100mL)。合并的有机部分用Na2SO4干燥并在减压除去溶剂，得到粗残留物，其经过通过柱色谱使用石油醚和乙酸乙酯(3:1)纯化，得到叔丁基(S)-2-(1-氨基-4- (4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-2-基)哌 啶-1-羧酸酯，为白色固体(1.3g,48％)。1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:8.80(s,1H),8.72(s,1H),8.40(d,J＝5.4Hz,1H),7.96–7.95(m,2H),7.89–7.87(m,2H),7.83–7.81(m,2H),7.79–7.78(m,2H),7.30–7.28(m,1H),5.94(s,2H),5.68(d,J＝4.8Hz,1H),4.33–4.27(m,2H),3.95(d,J＝12.6Hz,1H),3.42(td,J1＝3.0Hz,J2＝13.2Hz,1H),2.12–2.01(m,2H),1.91–1.88(m,1H),1.75(d,J＝12.0Hz,1H),1.66–1.64(m,1H),1.55–1.51(m,1H),1.44(s,9H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H).MS(ESI,m/z):636.3[M+H]+。
步骤C：制备(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氰基苯 基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸
Figure BDA0002484555310002581
将2mol/L氢氧化锂水溶液(12mL)加入到1.47g(2.3mmol)步骤B的产物的甲醇(15mL)溶液，并在室温下搅拌2h。蒸除部分溶剂，并用水(100mL)稀释，用HCl水溶液酸化直到pH 3。混合物用乙酸乙酯洗涤三次(3×100mL)。通过过滤分离白色沉淀并干燥，得到(S)-1-氨基-2-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-羧酸(1.3g,90％)。
步骤D：制备叔丁基(S)-2-(1-氨基-5-氨基甲酰基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶- 2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸酯
Figure BDA0002484555310002582
将HATU(0.2g,0.6mmol)、二异丙基乙胺(0.2mL,1.3mmol)和NH4Cl(0.2g,4.1mmol)加入到0.3g(0.4mmol)步骤C的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌2h。混合物用盐水淬灭并用乙酸乙酯洗涤三次(3×30mL)。合并的有机层在减压下浓缩并通过快速色谱用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到产物叔丁基(S)-2-(1-氨基-5-氨 基甲酰基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1- 羧酸酯，为白色固体(0.13g,53％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.95(s,1H),8.69(s,1H),8.40(d,J＝5.2Hz,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,2H),7.88(d,J＝8.4Hz,2H),7.83–7.76(m,4H),7.30–7.28(m,1H),6.13–6.02(m,3H),5.88(s,1H),5.59(d,J＝4.8Hz,1H),3.93(d,J＝12.4Hz,1H),3.26(td,J1＝2.8Hz,J2＝13.2Hz,1H),2.26(d,J＝12.0Hz,1H),2.14(d,J＝12.8Hz,1H),1.93–1.88(m,1H),1.69–1,65(m,1H),1.55–1.47(m,2H),1.46(s,9H).MS(ESI,m/z):607.3[M+H]+。
步骤E：制备(S)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)- 2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002591
将三氟乙酸(1.3mL)加入到134mg(0.22mmol)步骤D的产物的二氯甲烷(3mL)溶液。混合物在室温下搅拌1h，然后浓缩以得到(S)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为淡黄色油状物。MS(ESI,m/z):507.2[M+H]+。
步骤F：制备(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002601
将二异丙基乙胺(227.5μL,1.32mmol)加入到111.3mg(0.22mmol)步骤E的产物的干燥二氯甲烷(5mL)溶液。5min后，在0℃下加入丙烯酰氯(12.5μL,0.15mmol)。然后，将反应混合物升温至室温，并继续搅拌1h，加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇纯化(30:1)，得到(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为白色固体(81mg,66％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:9.25(s,1H),8.67(s,1H),8.38(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(d,J＝8.0Hz,2H),7.84(d,J＝7.6Hz,2H),7.80(d,J＝8.4Hz,2H),7.76(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(s,1H),7.27(s,1H),6.59(dd,J1＝10.8Hz,J2＝16.4Hz,1H),6.33–6.27(m,4H),6.00–5.96(m,1H),5.73(d,J＝10.8Hz,1H),3.83(d,J＝12.4Hz,1H),3.67(t,J＝12.8Hz,1H),2.46–2.43(m,1H),2.20–2.17(m,1H),1.93–1.86(m,2H),1.73–1.70(m,1H),1.63–1.60(m,1H)；13C NMR(CDCl3,150MHz)δ:167.3,166.0,162.6,152.8,149.0,148.6,148.3,142.7,141.4,138.6,133.3,132.9,129.8,128.8,128.1,127.8,127.4,120.1,118.6,118.0,113.0,112.4,44.4,43.0,28.0,25.8,19.7.MS(ESI,m/z):561.2[M+H]+。
实施例112:
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2- 基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002611
制备(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡 啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002484555310002612
将三乙胺(308mg,3.06mmol)加入到258mg(0.51mmol)实施例111的步骤E的产物的干燥N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液。5min后，加入丁-2-炔酸(37.6mg,0.45mmol)和HATU(289mg,0.76mmol)。反应混合物在室温下继续搅拌2h。加入乙酸乙酯和水。分层，并且水相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水溶液洗涤三次(3×50mL)。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物通过色谱法用二氯甲烷和甲醇(30:1)纯化，得到(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺，为白色固体(175mg,60％).1H NMR(CDCl3,600MHz)δ:9.00(s,1H),8.70(s,1H),8.41(d,J＝4.2Hz,1H),7.97(d,J＝7.8Hz,2H),7.88(d,J＝7.8Hz,2H),7.82(d,J＝7.8Hz,2H),7.78(d,J＝7.8Hz,2H),7.29(d,J＝5.4Hz,1H),6.99(s,1H),6.14(s,2H),5.94(d,J＝6.0Hz,1H),5.87(s,1H),4.28(d,J＝13.2Hz,1H),3.64(t,J＝13.2Hz,1H),2.44–2.38(s,1H),2.18(d,J＝13.8Hz,1H),2.02(s,3H),1.89–1.88(m,2H),1.74–1.72(m,2H)；13CNMR(CDCl3,150MHz)δ:165.8,162.4,155.1,152.7,149.1,148.7,148.0,142.8,141.3,138.7,133.4,133.0,129.9,128.1,127.4,120.1,118.6,118.1,113.1,112.4,91.1,73.0,44.5,43.8,27.8,25.7,19.9,4.3.MS(ESI,m/z):573.2[M+H]+。
实施例113 BTK抑制试验和选择性试验
激酶实验在第三方(Reaction Biology Corporation,PA,USA)或本实验室进行测试。
a)Reaction Biology Corporation所用试剂和操作步骤
基本反应缓冲液：20mM Hepes(pH 7.5)、10mM MgCl2、1mM EGTA、0.02％聚氧乙烯月桂醚Brij35、0.02mg/ml BSA、0.1mM Na3VO4、2mM DTT、1％DMSO。
将需要的协同因子加入到各自的激酶反应中。
化合物处理：待测化合物溶于100％DMSO中，被配成特定的浓度。通过使用IntegraViaflo Assist在DMSO中进行稀释。
反应步骤：
使用上述的新鲜制备的缓冲液配置底物，并在该底物溶液中加入所需要的协同因子。将激酶加入到底物溶液中并将混合物温和地混合。使用声学技术(Echo550；纳米级)将待测化合物的100％DMSO溶液加入到激酶反应混合物中，并将新混合物在室温下孵育20min。然后，将33P-ATP(比活10μCi/μl)加入到反应混合物中开始反应，并将混合物在室温下孵育2小时。使用滤过器-结合方法测量放射活性，并将激酶活性数据表达成与溶媒(二甲基亚砜)相比测试化合物剩余激酶活性的百分数。使用Prism(GraphPad Software)获得IC50值和拟合曲线。结果如表I所示
b)本实验室BTK,BMX,EGFR和ITK抑制试验操作：
采用酶联免疫吸附测定(ELISA)评价化合物的激酶抑制活性。BTK，BMX,EGFR和ITK等激酶购自Carna Bioscience(Kobe,Japan)。总计10ng/mL抗磷酸酪氨酸抗体(PY713)(abcam,Cambridge Science Park,UK)预先包被在96孔ELISA板中。分别将BTK(101.25ng/mL),BMX(90ng/m L),EGFR(90ng/m L)或ITK(120ng/m L)和测试化合物在包含20μmol/L(ITK测试的底物最终浓度为30μmol/L)底物(NH2-ETVYSEVRK-生物素)的1×反应缓冲液(50mmol/L HEPES pH 7.4、20mmol/L MgCl2、0.1mmol/L MnCl2、1mmol/L DTT)中在25℃下孵育1小时。然后，加入总计3μmol/L ATP，并使反应继续2h。将反应产物转移至含有抗体的96孔ELISA板中，在25℃孵育30分钟。孵育后，用PBS洗涤各孔，然后用辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素孵育。使用3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)对每个孔进行成像，加入2mol/LH2SO4终止发色反应，采用多功能读板器(PerkinElmer,USA)在450nm下读出吸光度。结果示于表I-IV中。
表I
Figure BDA0002484555310002631
Figure BDA0002484555310002641
Figure BDA0002484555310002651
注：a)来自Reaction Biology Corporation；b)来自本实验室。表II,代表性化合物对BTK和BMX的选择性
Figure BDA0002484555310002661
表III,代表性化合物对BTK和ITK的选择性
Figure BDA0002484555310002662
表IV，代表性化合物对BTK和EGFR的选择性
Figure BDA0002484555310002671
实施例114体外抗肿瘤活性试验
方法：合肥中科普瑞昇生物医药科技有限公司所用试剂和操作步骤抗细胞增殖活性使用CellTiter-Glo(Promega,USA)方法评价。在DMSO中制成1000×化合物溶液，向49μl生长培养基中加入1μl 1000×化合物，制成20×化合物。将生长培养基中的细胞悬浮液稀释至所需密度，然后将95μl的细胞悬液置于96孔板中。根据板图将5μl 20×化合物添加到96孔板中。每个孔中的最终DMSO浓度为0.1％。然后将细胞在37℃，5％CO2下孵育72小时。测量前将测定板平衡至室温。在每个孔中加入20μl
Figure BDA0002484555310002672
试剂。在轨道振荡器上混合2分钟，以诱导细胞裂解。在室温下孵育10分钟以稳定发光信号。使用EnVision MultilabelReader(PerkinElmer)记录发光。使用以下公式计算细胞活力(CV％)，其相对于用媒介物(DMSO)处理的对照孔：细胞活力(％)＝(RLU化合物-RLU空白)/(RLU对照-RLU空白)*100％。使用GraphPad Prism 6.0软件计算IC50值，拟合四参数方程式以生成浓度响应曲线。所有测定均使用三个平行样品和三个重复进行。
表V,代表性化合物的体外抗肿瘤活性
Figure BDA0002484555310002681
实施例115大鼠药代动力学试验
方法：合肥中科普瑞昇生物医药科技有限公司所用试剂和操作步骤
6-8周龄雄性SD大鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司。大鼠被随机分为两组，每组三只。在iv组，单剂量的化合物84或85通过尾静脉注射给药；po给药组，化合物84或85通过口服给药。给药后2min(只有iv),5min,15min,1h,2h,4h,6h,8h,12h and 24h(只有po)自眼眶后静脉丛采集血样约0.25mL。血样在4℃，4000r/min，离心10min，分离血浆，保存在-20℃冰箱中，直到LC-MS/MS法检测。
如表VI所示，84表现出有利的PK特性。静脉注射5mg/kg,84的半衰期(t1/2)和平均清除率分别为1.32h和13.4mL/min/kg。同时，相同剂量口服时，化合物表现出相当高暴露量Cmax(501ng/mL),AUC(1996h·ng/mL)和令人满意的生物利用度(32.4％)。
表VI.化合物84在大鼠的PK特性
Figure BDA0002484555310002682
a使用剂量5mg/kg溶液(20％水,80％PEG400).b使用剂量5mg/kg溶液(20％水,80％PEG400),n＝3.
化合物85的PK特性使用大鼠评价，分为静脉注射(1mg/kg)和口服(10mg/kg)。口服后，它也展示了令人满意的半衰期t1/2(2.74h),AUC(3247h·ng/mL)和生物利用度(90.6％)。
表VII.化合物85在大鼠的PK特性
Figure BDA0002484555310002691
a剂量1mg/kg溶液(20％水,80％PEG400).b剂量使用10mg/kg溶液(20％水,80％PEG400),n＝3。

Claims (17)

1.式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药：
Figure FDA0002484555300000011
其中
R1选自H、C1-6烷基和R5C(O)-，其中R5独立地选自C1-6烷基和C1-6烷氧基；
Ar选自杂芳基和被以下基团取代的杂芳基：卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C6或C10芳基，所述C6或C10芳基任选被卤素、氰基或被卤素、羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基所取代；
n选自0和1；
X是4-8元含氮杂环基，其中该杂环基上的氮连接有Y；或是含氮螺杂环基，其中该螺杂环基上的氮连接有Y；
Y选自-CN、-C(＝O)P、-S(＝O)P和-S(＝O)2P；其中
P选自
Figure FDA0002484555300000012
并且
Rx选自H、卤素、氰基、C1-6烷基、被卤素取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、苯基和-(CH2)mNR6R7；
R2选自氢，卤素，氰基，C1-6烷基，被选自F、羟基和C1-6烷氧基的取代基取代的C1-6烷基，C3-6环烷基，被F取代的C3-6环烷基；
R3和R4独立地选自氢，卤素，氰基，C6或C10芳基，杂芳基，C1-6烷基，被选自C1-6烷氧基、NR6R7、卤素、羟基、C6或C10芳基和杂芳基的取代基取代的C1-6烷基，C3-6环烷基，被卤素取代的C3-6环烷基，C2-6烯基，被选自C1-6烷氧基、NR6R7、卤素、羟基、C6或C10芳基和杂芳基的取代基取代的C2-6烯基；
R6和R7各自独立地选自氢、C1-6烷基或者与它们所取代的氮一起形成4-6元杂环基；
m是1至3的整数。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R1是H或C1-6烷基。
3.根据权利要求2所述的化合物，其中R1是H或甲基。
4.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Ar选自：
Figure FDA0002484555300000021
其中
R8相同或不同，独立地选自H，C1-6烷基，被卤素取代的C1-6烷基，C1-6烷氧基，卤素，C6或C10芳基，被选自卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基和三氟甲基的取代基取代的C6或C10芳基，杂芳基，和氰基；
R8a、R8b、R8c和R8d独立地选自H，C1-6烷基，被卤素取代的C1-6烷基，C1-6烷氧基，卤素，C6或C10芳基，被选自卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、氰基和三氟甲基的取代基取代的C6或C10芳基，杂芳基，和氰基。
5.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中Ar选自：
Figure FDA0002484555300000022
其中，
R8a是氢；
R8b是氢、C1-6烷基或卤素；
R8c选自H、C1-6烷基、被卤素取代的C1-6烷基、卤素、C1-6烷氧基、C6或C10芳基、被卤素或氰基取代的C6或C10芳基、和氰基；
R8d是氢。
6.根据权利要求1-4中任一项所述的化合物，其中Ar选自：
Figure FDA0002484555300000031
其中，R8是氢。
7.根据权利要求1-5中任一项所述的化合物，其中Ar选自：
Figure FDA0002484555300000032
其中
R8a是H；
R8b独立地选自H、Cl或CH3；
R8c独立地选自H、CH3、CH2CH3、OCH3、F、Cl、Br、I、氰基、CF3、异丙基、苯基、被卤素或氰基取代的苯基；且
R8d是H。
8.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中X选自：
Figure FDA0002484555300000033
其中R9是取代基，其在环上的一个或一个以上的位置取代，且选自H、F、C1-6烷基、被卤素取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基和NR6R7；或者
R9可以在环中形成双键，或者形成与R9取代的环稠合的4-6元环；
R6和R7如权利要求1中所定义。
9.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中在P中，
R2选自H、卤素、氰基、C1-6烷基和被F取代的C1-6烷基；
R3选自氢或C1-6烷基；且
R4选自氢、C6或C10芳基、C3-6环烷基、C1-6烷基和被F取代的C1-6烷基；或者
Rx选自H、C3-6环烷基、C1-6烷基和被F取代的C1-6烷基。
10.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中在P中，
R2独立地选自H、F、氰基、CH3和CF3；
R3选自氢或甲基；且
R4选自氢、苯基、环丙基、甲基、乙基、异丙基、叔丁基、三氟甲基；或者
Rx选自H、甲基和环丙基。
11.根据权利要求9或10的化合物，其中，
X选自
Figure FDA0002484555300000041
12.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中，
X选自
Figure FDA0002484555300000042
其中，Y选自–C(＝O)P,且P选自
Figure FDA0002484555300000043
其中,R2独立选自氢、氟、氰基和三氟甲基；
R3选自氢；
R4选自氢、环丙基、甲基和三氟甲基；或者
Rx选自氢、甲基、和环丙基；
n是0。
13.根据前述权利要求中任一项所述的化合物，其中，在式I中，
Ar由
Figure FDA0002484555300000044
表示，
其中，
R8a,R8b和R8d都是氢；
R8c独立地选自Cl,I,CF3或被F取代的苯基；
X由
Figure FDA0002484555300000051
表示；
Y为–C(＝O)P,且P是
Figure FDA0002484555300000052
其中，
R2是氢；
R3是氢；
R4选自氢和三氟甲基；
Rx选自氢和甲基；
n是0；且
R1是氢。
14.以下化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药：
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4,4-二甲基戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)吡咯烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-氰基吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)吡咯烷-2-基)-4-(4-((4-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基吡咯烷-2-基)-1-(甲基氨基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-肉桂酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4,4-三氟丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-苯基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(4,4,4-三氟丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氟丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-甲氧基-吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-异丙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-甲基丙烯酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(2-氰基乙酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-2-(1-(2-氰基-4-甲基戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S,E)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-(戊-2-烯酰基)哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1-(甲基氨基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(R)-2-(1-丙烯酰基哌啶-3-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
2-(1-丙烯酰基氮杂环庚烷-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
2-(2-丙烯酰基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-基)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-甲氧基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-氯吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-氰基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-4-(4-((4-乙基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-2-(1-丙炔酰基哌啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-(哒嗪-3-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
2-((1-丙烯酰基哌啶-4-基)甲基)-1-氨基-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
1-氨基-2-((1-(丁-2-炔酰基)哌啶-4-基)甲基)-4-(4-(吡啶-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-(噻唑-2-基氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-氟吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氯苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-2-(1-丙烯酰基哌啶-2-基)-1-氨基-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺
(S)-1-氨基-2-(1-(丁-2-炔酰基)哌啶-2-基)-4-(4-((4-(4-氰基苯基)吡啶-2-基)氨基甲酰基)苯基)-1H-咪唑-5-甲酰胺。
15.一种药物组合物，其包含权利要求1至14中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药以及药学上可接受的载体。
16.权利要求1至14中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药在制备用于抑制BTK活性的药物中的用途。
17.权利要求1至14中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、活性代谢物、互变异构体、立体异构体或前药在制备用于治疗选自自身免疫性疾病、炎症性疾病、癌症和过敏的疾病的药物中的用途。
CN202010388187.2A 2019-05-10 2020-05-09 作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1-氨基-1h-咪唑-5-甲酰胺 Active CN111909133B (zh)

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