CN111658652A - 牛磺罗定在制备抗冠状病毒药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
牛磺罗定在制备抗冠状病毒药物中的应用，涉及医药技术领域。本发明首次发现牛磺罗定的新用途，即牛磺罗定在抑制冠状病毒、或者在制备抗冠状病毒药物中的应用，其中冠状病毒为HCoV‑229E、HCoV‑OC43、SARS‑CoV、HCoV‑NL63、HCoV‑HKU1、或者MERS‑CoV。牛磺罗定对人体的安全性已经得到临床实践的检测，本发明发现了牛磺罗定对冠状病毒的明显药效，为抗冠状病毒提供了强有力的理论基础和实践基础，具有开发价值和推广意义。本发明对由冠状病毒感染引发的疾病的治疗提供了新的途径。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种牛磺罗定在制备抗冠状病毒药物中的应用。
背景技术
冠状病毒是具囊膜、基因组为线性单股正链的RNA病毒，是自然界广泛存在的一大类病毒。冠状病毒直径约80～120nm，基因组5′端具有甲基化的帽状结构，3′端具有poly(A)尾，基因组全长约27-32kb，是目前已知RNA病毒中基因组最大的病毒。冠状病毒能够在人和其他哺乳动物以及鸟类中广泛存在，并导致呼吸、消化、肝脏和神经系统等类型的疾病。但目前尚无批准的特异性药物治疗冠状病毒引起的感染，即使针对由SARS-CoV和MERS-CoV感染引起的严重急性呼吸道患者，临床也主要以对症治疗减少患者并发症为主。因此需要研制或者发现可以用于治疗冠状病毒引起的感染的药物。
CN101274921A、CN101285813A的中国专利中公开了牛磺罗定(Taurolidine)的化学名为：4,4′-亚甲基双-(四氢-2H-1,2,4-噻二嗪)-1,1,1′,1′四氧化物，分子式为C7H16N4O4S2，分子量为：284.348，形状为白色或类白色结晶性粉末，其化学结构式如下：
可通过下述合成路线合成：
牛磺罗定是一种广谱的抗菌、抗真菌和抗内毒素的药物。主要用来预防那些患有多种与导尿管相关的血流感染病人的俊学症。也可用于治疗耳炎、胸膜积脓症、骨炎、骨髓炎、皮炎、牙周炎、牙龈炎、痤疮和各种溃疡。但截止到目前为止尚无人发现牛磺罗定可以用于抗冠状病毒的用途。
发明内容
本发明的目的是提供一种牛磺罗定的新用途，即牛磺罗定在抑制冠状病毒、或者在制备抗冠状病毒药物中的应用，其中冠状病毒为HCoV-229E、HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、或者MERS-CoV。
特别的是，牛磺罗定在制备抗严重急性呼吸综合征冠状病毒SARS-CoV的药物中的应用。
特别的是，牛磺罗定在制备抗中东呼吸综合征冠状病毒MERS-CoV的药物中的应用。
在上述技术方案中，所述的牛磺罗定的药物剂型为注射剂、输液剂、片剂、胶囊剂等剂型，优选为输液剂。
本发明的有益效果是：
本发明首次发现牛磺罗定的新用途，即牛磺罗定在抑制冠状病毒、或者在制备抗冠状病毒药物中的应用，其中冠状病毒为HCoV-229E、HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、或者MERS-CoV。牛磺罗定对人体的安全性已经得到临床实践的检测，本发明发现了牛磺罗定对冠状病毒的明显药效，为抗冠状病毒提供了强有力的理论基础和实践基础，具有开发价值和推广意义。本发明对由冠状病毒感染引发的疾病的治疗提供了新的途径。
具体实施方式
为了更好的理解本发明的实质，下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，下述内容是对本发明的解释而非对本发明内容的限制。下面通过在细胞水平上检测牛磺罗定对冠状病毒的抑制效果。
实施例1牛磺罗定对冠状病毒HCoV-229E的抑制实验
一、实验材料：
1.1细胞人肺癌细胞A549，来源于军事兽医研究所病毒学研究室；
1.2毒株HCoV-229E病毒，来源于军事兽医研究所病毒学研究室；
1.3试剂DMEM，0.25％胰蛋白酶，FBS，PBS(FH＝7.0)；
1.4仪器耗材移液器及配套吸头，1.5mL离心管，冰盒，制冰机，生物安全柜，二氧化碳培养箱。
二、实验方法：
2.1细胞培养将人肺癌细胞A549复苏，连续传三代，待细胞长势良好后用于实验研究；
2.2病毒培养将保存的病毒液置冰上缓慢融化后接种于单层人肺癌细胞A549(不超过24小时)，继续培养至72-96小时，根据细胞病变状态收获病毒液。并测定病毒含量，以TCID50/100μL为计算单位。
2.3牛磺罗定抑制作用
药物与病毒混合同时接入细胞：将长势良好的人肺癌细胞A549以胰酶消化后计算细胞含量，接种于96孔板，每孔105个细胞，接种12小时内且单层状态进行药物作用的研究。接种病毒含量为200个TCID50的HCoV-229E病毒与牛磺罗定混合后立刻接种于铺好的6孔板中，2％的牛磺罗定溶液、药物剂量为50μL、25μL、12.5μL、7.5μL、3.75μL。另设立空白细胞对照和牛磺罗定细胞毒性对照，进行3个重复；
将接种后的细胞板置37℃，CO2培养箱中，继续培养，并观察细胞病变。
三、实验结果
按照以上实验方法，在37℃，CO2培养箱中72小时观察细胞状态，镜下观察，以50μL、25μL药物为接种剂量组细胞状态良好，未出现细胞病变。12.5μL、7.5μL、3.75μL均出现不同程度的细胞病变，以3.75μL为接种剂量组与200TCID50引起的细胞病变无差异。
四、结果判定
根据上述实验结果，判定以接种剂量50μL、25μL药物时可以完全抑制200TCID50，以接种剂量12.5μL、7.5μL不能完全抑制200TCID50病毒感染细胞，以接种剂量3.75μL不能抑制200TCID50病毒感染细胞。
实施例2牛磺罗定对冠状病毒SARS-CoV的抑制实验
一、实验材料：
1.1细胞293T细胞，来源于军事兽医研究所病毒学研究室；
1.2毒株SARS-CoV病毒，来源于军事兽医研究所病毒学研究室；
1.3试剂DMEM，0.25％胰蛋白酶，FBS，PBS(FH＝7.0)；
1.4仪器耗材移液器及配套吸头，1.5mL离心管，冰盒，制冰机，生物安全柜，二氧化碳培养箱。
二、实验方法：
2.1细胞培养将293T细胞复苏，连续传三代，待细胞长势良好后用于实验研究；
2.2病毒培养将保存的病毒液置冰上缓慢融化后接种于单层293T细胞(不超过24小时)，继续培养至72-96小时，根据细胞病变状态收获病毒液。并测定病毒含量，以TCID50/100μL为计算单位。
2.3牛磺罗定抑制作用
药物与病毒混合同时接入细胞：将长势良好的293T细胞以胰酶消化后计算细胞含量，接种于96孔板，每孔105个细胞，接种12小时内且单层状态进行药物作用的研究。接种病毒含量为200个TCID50的SARS-CoV病毒与牛磺罗定混合后立刻接种于铺好的96孔板中，2％的牛磺罗定溶液、药物剂量为50μL、25μL、12.5μL、7.5μL、3.75μL。另设立空白细胞对照和牛磺罗定细胞毒性对照，进行3个重复；
将接种后的细胞板置37℃，CO2培养箱中，继续培养，并观察细胞病变。
三、实验结果
按照以上实验方法，在37℃，CO2培养箱中72小时观察细胞状态，镜下观察，以50μL、25μL药物为接种剂量组细胞状态良好，未出现细胞病变。12.5μL、7.5μL、3.75μL均出现不同程度的细胞病变，以3.75μL为接种剂量组与200TCID50引起的细胞病变无差异。
四、结果判定
根据上述实验结果，判定以接种剂量50μL、25μL药物时可以完全抑制200TCID50，以接种剂量12.5μL、7.5μL不能完全抑制200TCID50病毒感染细胞，以接种剂量3.75μL不能抑制200TCID50病毒感染细胞。
实施例3牛磺罗定对冠状病毒MERS-CoV的抑制实验
一、实验材料：
1.1细胞293T细胞，来源于军事兽医研究所病毒学研究室；
1.2毒株MERS-CoV病毒，来源于军事兽医研究所病毒学研究室；
1.3试剂DMEM，0.25％胰蛋白酶，FBS，PBS(FH＝7.0)；
1.4仪器耗材移液器及配套吸头，1.5mL离心管，冰盒，制冰机，生物安全柜，二氧化碳培养箱。
二、实验方法：
2.1细胞培养将293T细胞复苏，连续传三代，待细胞长势良好后用于实验研究；
2.2病毒培养将保存的病毒液置冰上缓慢融化后接种于单层293T细胞(不超过24小时)，继续培养至72-96小时，根据细胞病变状态收获病毒液。并测定病毒含量，以TCID50/100μL为计算单位。
2.3牛磺罗定抑制作用
药物与病毒混合同时接入细胞：将长势良好的293T细胞以胰酶消化后计算细胞含量，接种于96孔板，每孔105个细胞，接种12小时内且单层状态进行药物作用的研究。接种病毒含量为200个TCID50的MERS-CoV病毒与牛磺罗定混合后立刻接种于铺好的96孔板中，2％的牛磺罗定溶液、药物剂量为50μL、25μL、12.5μL、7.5μL、3.75μL。另设立空白细胞对照和牛磺罗定细胞毒性对照，进行3个重复；
将接种后的细胞板置37℃，CO2培养箱中，继续培养，并观察细胞病变。
三、实验结果
按照以上实验方法，在37℃，CO2培养箱中72小时观察细胞状态，镜下观察，以50μL、25μL药物为接种剂量组细胞状态良好，未出现细胞病变。12.5μL、7.5μL、3.75μL均出现不同程度的细胞病变，以3.75μL为接种剂量组与200TCID50引起的细胞病变无差异。
四、结果判定
根据上述实验结果，判定以接种剂量50μL、25μL药物时可以完全抑制200TCID50，以接种剂量12.5μL、7.5μL不能完全抑制200TCID50病毒感染细胞，以接种剂量3.75μL不能抑制200TCID50病毒感染细胞。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (6)
1.一种牛磺罗定在抑制冠状病毒上的应用，其中冠状病毒为HCoV-229E、HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、或者MERS-CoV。
2.一种牛磺罗定在制备抗冠状病毒药物中的应用，其中冠状病毒为HCoV-229E、HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、或者MERS-CoV。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，牛磺罗定在制备抗严重急性呼吸综合征冠状病毒SARS-CoV的药物中的应用。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，牛磺罗定在制备抗中东呼吸综合征冠状病毒MERS-CoV的药物中的应用。
5.根据权利要求2-4任意一项所述的应用，其特征在于，牛磺罗定的药物剂型为注射剂、输液剂、片剂、或胶囊剂。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，牛磺罗定的药物剂型为输液剂。
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| CN113491700A (zh) * | 2020-07-06 | 2021-10-12 | 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所 | 牛磺罗定在抗病毒中的应用 |
| WO2022007713A1 (zh) * | 2020-07-06 | 2022-01-13 | 军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所 | 牛磺罗定在抗病毒中的应用 |
| CN117503777A (zh) * | 2023-03-17 | 2024-02-06 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 化合物在抗病毒中的应用 |
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