CN119698303A - 用于用与疾病缓解剂缀合的igf-1r配体来治疗眼睛的炎性病状的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了用于治疗受试者的眼睛的炎性病状的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的缀合物，所述缀合物包含IGF‑1R配体或其一部分或变体以及疾病缓解剂。

Description

用于用与疾病缓解剂缀合的IGF-1R配体来治疗眼睛的炎性病 状的方法

相关申请交叉引用

本申请要求保护于2022年6月29日提交的美国临时申请第63/367,238号的权益。

技术领域

当前公开的主题总体上涉及用于具体地通过向受试者施用与疾病缓解剂缀合的胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)配体来治疗眼睛的炎性病状的方法。

对序列表的引用

写入文件名称597948SEQLIST.xml中的序列表为17千字节，创建于2023年6月29日，并且特此通过引用并入。

背景技术

眼睛的炎性病状涵盖广泛的病状，其范围从易于治疗到严重威胁视力的紧急情况，所述严重威胁视力的紧急情况可能导致永久性视力丧失。炎症可能响应于眼睛或周围组织的感染、过敏、刺激、损伤或创伤而发生。另外，许多全身性自身免疫性疾病具有眼部表现。

一个实例是甲状腺眼病(TED)，这是一种特征在于进行性炎症和损害眼周围的组织的自身免疫性疾病。TED发生在大约40％的格雷夫斯氏病(Graves'disease)患者中，并且估计影响100,000名女性中的16名和100,000名男性中的2.9名，其中男性的疾病通常更严重。病理学变化涉及眼外肌肥大和眼眶脂肪扩张，从而导致眼球突出，所述眼球突出会导致眼眶充血、眶周水肿和其它有时严重的威胁视力的症状。其它表现包括斜视、复视、眼球运动受限、眼睑退缩、疼痛、视力扭曲、面部毁损和生活质量下降。

本领域仍然需要治疗TED以及眼睛的其它炎性病状的改进的方法。

发明内容

根据本说明书，本申请描述了用与疾病缓解剂缀合的IGF-1R配体进行治疗的方法。

在一个实施例中，本申请提供了一种用于治疗有需要的受试者的眼睛的炎性病状的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的缀合物，其中所述缀合物包含IGF-1R配体和疾病缓解剂。

在一些实施例中，所述眼睛的炎性病状是TED、葡萄膜炎、巩膜炎、角膜炎或结膜炎。

在一些实施例中，所述眼睛的炎性病状是眼眶炎性疾病。在一些实施例中，所述眼眶炎性疾病是特发性眼眶炎症、眼眶炎性假瘤、眼眶肌炎、炎性眼眶蜂窝织炎、视神经周围炎、巩膜周围炎、弥漫性眼眶炎症、眼眶根尖炎或硬化性眼眶炎症。

在一些实施例中，所述眼睛的炎性病状是TED。

在一些实施例中，所述TED是急性TED、非活动性TED、慢性TED、中度至重度TED和威胁视力的(非常严重的)TED。

在一些实施例中，用本发明的缀合物治疗TED使所述受试者的眼球突出减小。在一具体实施例中，所述眼球突出的减小减少了至少2mm、至少3mm或至少4mm。在另一个实施例中，所述眼球突出的减小是通过眼球突度计或眼眶成像评估的。在一具体实施例中，所述眼眶成像是计算机断层摄影扫描或磁共振成像。在一些实施例中，所述眼球突出的减小与眼外肌肉体积和/或眼眶脂肪体积的减小相关。

在一些实施例中，用本发明的缀合物治疗TED使所述受试者的临床活动性评分(CAS)降低。在一具体实施例中，所述CAS降低了至少2分或至少3分。在另一个具体实施例中，所述CAS降低到1或降低到0。

在一些实施例中，用本发明的缀合物治疗TED使所述受试者的复视的严重程度降低。在另一个实施例中，所述复视的严重程度的降低是通过戈尔曼主观复视评分(Gormansubjective diplopia score)测量的。在一些实施例中，所述复视是持续性复视、间歇性复视或非持续性复视。在一些实施例中，所述治疗使复视完全消退。在另一个实施例中，所述受试者的复视的严重程度降低了至少一个等级。

在一些实施例中，用本发明的缀合物治疗TED使所述受试者的生活质量提高。在另一个实施例中，所述生活质量的提高是通过格雷夫斯氏眼病生活质量(GO-QoL)或所述GO-QoL的视觉功能子量表或外观子量表来测量的。在一具体实施例中，在所述GO-QoL量表或所述GO-QoL的视觉功能子量表或所述GO-QoL的外观子量表上，所述生活质量提高了至少8分。

在一些实施例中，所述治疗使视神经病变得以改善。

在一些实施例中，所述治疗使眶后水肿减少。

在一些实施例中，所述治疗使单目转向得以改善。在一具体实施例中，所述单目转向的改善是通过光反射测试测量的。在另一个具体实施例中，所述单目转向的改善是至少10度。

在一些实施例中，所述治疗导致所述受试者的表达IGF-1R的细胞的功能改变或损伤。在其它实施例中，所述治疗使得所述受试者的表达IGF-1R的细胞的数量减少。在一具体实施例中，所述减少是由对表达IGF-1R的细胞的杀伤引起的。在不受理论束缚的情况下，据信，对IGF-1R通路的简单抑制由于通过可以继续充当疾病效应子的其它潜在冗余的通路、或补偿机制或被上调并且可能导致适应性抗性的通路进行的信号传导而不足以作为完全治愈性治疗。因此，疾病缓解性的药剂(包括导致对表达IGF-1R的细胞的杀伤的药剂)的靶向递送可以提供超出(包括优于)简单IGF-1R通路抑制的益处，因为其绕过了所有此类潜在冗余的和/或补偿性的通路的影响。

在另一个具体实施例中，所述表达IGF-1R的细胞是眼眶成纤维细胞(OF)。在另一个实施例中，所述治疗使所述受试者的眶后空间中的透明质烷合成减少或受到抑制。在另一个实施例中，所述治疗使所述受试者的眶后空间中的脂肪生成减少或受到抑制。在另一个实施例中，所述治疗使所述受试者的血清中的IL-6、IL-16和/或RANTES的水平降低。

在另一个具体实施例中，所述表达IGF-1R的细胞是纤维细胞、B淋巴细胞和/或T淋巴细胞。

在另一个实施例中，相对于通过来自健康受试者或未被诊断为患有眼睛的炎性病状的受试者的眶后空间细胞的表达，IGF-1R通过所述受试者的眶后空间细胞过表达。在另一个实施例中，所述受试者的表达IGF-1R的细胞的频率相对于来自健康受试者或未被诊断为患有眼睛的炎性病状的受试者的表达IGF-1R的细胞的频率有所增加。在另一个实施例中，所述表达IGF-1R的细胞的频率是通过流式细胞术或免疫组织化学测量的。

在一些实施例中，所述治疗使所述受试者的疾病得以缓解。

在一些实施例中，所述缀合物包含野生型胰岛素样生长因子1(IGF-1)(SEQ IDNO:3)、野生型胰岛素(SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11)或野生型胰岛素样生长因子2(IGF-2)(SEQ ID NO:12)。在一些实施例中，所述缀合物包含野生型IGF-1(SEQ ID NO:3)的变体、野生型胰岛素(SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11)的变体或野生型IGF-2(SEQ ID NO:12)的变体。在一些实施例中，所述野生型IGF1的变体与IGF-1(SEQ ID NO:3)至少90％相同，所述野生型胰岛素的变体与胰岛素(SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11)至少90％相同，或者所述野生型IGF-2的变体与IGF-2(SEQ ID NO:12)至少90％相同。

在一些实施例中，所述缀合物包含对IGF结合蛋白(IGFBP)的结合亲和力相较于野生型IGF-1(SEQ ID NO:3)对所述IGF结合蛋白的结合亲和力有所降低的IGF-1的变体或对IGF结合蛋白的结合亲和力相较于野生型IGF-2(SEQ ID NO:12)对所述IGF结合蛋白的结合亲和力有所降低的IGF-2的变体。在一些实施例中，所述IGF-1的变体对所述IGF-1R的亲和力相较于野生型IGF-1(SEQ ID NO:3)对所述IGF-1R的亲和力有所增加，或者所述IGF-2的变体对所述IGF-1R的亲和力相较于野生型IGF-2(SEQ ID NO:12)对所述IGF-1R的亲和力有所增加。在一具体实施例中，所述缀合物包含765IGF(SEQ ID NO:2)、IGF132(SEQ ID NO:4)、long-R3-IGF-1(SEQ ID NO:5)、R3-IGF-1(SEQ ID NO:6)、des(1-3)-IGF-1(SEQ ID NO:7)、long-IGF-1(SEQ ID NO:8)或long-G3-IGF-1(SEQ ID NO:9)。

在一些实施例中，所述IGF-1R配体或其一部分或变体包含前导序列。在一具体实施例中，所述前导序列包含SEQ ID NO:1。

在一具体实施例中，所述缀合物包含765IGF(SEQ ID NO:2)。

在一些实施例中，缀合物的疾病缓解剂包含细胞毒性剂。

在一些实施例中，所述细胞毒性剂包含化学治疗剂。在一具体实施例中，所述化学治疗剂是安吖啶(amuscarine)、氮杂胞苷(azacytidine)、博来霉素(bleomycin)、白消安(busulfan)、卡培他滨(capecitabine)、卡铂(carboplatin)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、顺铂(cisplatin)、克拉屈滨(cladribine)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、阿糖孢苷(cytarabine)、更生霉素(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、达卡巴嗪(dacarbazine)、多西他赛(docetaxel)、阿霉素(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、雌莫司汀(estramustine)、依托泊苷(etoposide)、氟尿苷(floxuridine)、氟达拉滨(fludarabine)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、吉西他滨(gemcitabine)、六甲嘧胺(hexamethylmelamine)、伊达比星(idarubicin)、异环磷酰胺(ifosfamide)、依立替康(irinotecan)、洛莫司汀(lomustine)、氮芥(mechlorethamine)、美法仑(melphalan)、巯嘌呤(mercaptopurine)、甲氨喋呤(methotrexate)、丝裂霉素C(mitomycin C)、米托坦(mitotane)、米托蒽醌(mitoxantrone)、奥沙利铂(oxaliplatin)、紫杉醇(paclitaxel)、培美曲塞(pemetrexed)、喷司他丁(pentostatin)、普卡霉素(plicamycin)、丙卡巴肼(procarbazine)、雷替曲塞(raltitrexed)、司莫司汀(semustine)、链脲菌素(streptozocin)、替莫唑胺(temozolamide)、替尼泊苷(teniposide)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、噻替派(thiotepa)、拓扑替康(topotecan)、三甲曲沙(trimetrexate)、戊柔比星(valrubicin)、长春新碱(vincristine)、长春花碱(vinblastine)、长春地辛(vindesine)或长春瑞滨(vinorelbine)。在另一个具体实施例中，所述化学治疗剂是甲氨喋呤。

在一些实施例中，所述细胞毒性剂包含毒素。在一具体实施例中，所述毒素是产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)肠毒素、白喉毒素、蓖麻毒蛋白A链、去糖基化的蓖麻毒蛋白A链、假单胞菌(Pseudomonas)外毒素、A链毒素、核糖体失活蛋白、α-帚曲毒蛋白、曲霉菌素、相思子毒素、限制性霉素、细菌内毒素、细菌内毒素的脂质A部分、霍乱毒素或核糖核酸酶。在一具体实施例中，所述毒素包含产气荚膜梭菌肠毒素或其变体的一部分。在一具体实施例中，所述缀合物包含SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:15。在其它具体实施例中，所述毒素包含白喉毒素或其一部分或变体。在一具体实施例中，所述缀合物包含SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:16。

在其它实施例中，本发明的缀合物的疾病缓解剂选自：糖皮质激素(地塞米松(dexamethasone))；皮质类固醇(甲基强的松(methylprednisolone)、强的松(prednisone)、醋酸曲安奈德(triamcinolone acetonide))；TSHR抑制剂；吗替麦考酚酯；辛伐他汀(simvastatin)；甲福明(metformin)；苯乙福明(phenformin)；环孢素；雷帕霉素或其它mTOR抑制剂；或硫唑嘌呤。

在一些实施例中，患有TED的受试者患有格雷夫斯氏甲状腺机能亢进(Grave'shyperthyroidism)和/或其CAS为至少3或至少4。

在一些实施例中，患有根据本文所述的方法治疗的眼睛的炎性病状的受试者先前未接受针对所述眼睛的炎性病状的治疗，先前已接受针对所述眼睛的炎性病状的治疗，从针对所述眼睛的炎性病状进行的先前治疗中复发，或对针对所述眼睛的炎性病状进行的先前治疗来说是难治性的。

在一些实施例中，先前治疗包含向所述受试者施用IGF-1R抑制剂。

在一具体实施例中，所述IGF-1R抑制剂是抗体。在另一个具体实施例中，抗体是替妥木单抗(teprotumumab)、加尼妥单抗(ganitumab)、芬妥木单抗(figitumumab)、MEDI-573、西妥木单抗(cixutumumab)、达雷妥尤单抗(dalotuzumab)、罗妥木单抗(robatumumab)、AVE1642、BIIB022、珍妥珠单抗(xentuzumab)、艾司妥单抗(istiratumab)、罗尼妥单抗(lonigutamab)、VB421、VRDN-001、VRDN-002或VRDN-003。

在一具体实施例中，所述先前治疗包含施用靶向新生儿Fc受体(FcRn)的抗体或抗体片段。在一具体实施例中，所述抗体或抗体片段是巴托利单抗(batoclimab)、IMVT-1402或艾加莫德(efgartigimod)。

在一具体实施例中，所述先前治疗包含施用靶向IL-6的抗体。在一具体实施例中，所述抗体是TOUR006。

在一具体实施例中，所述IGF-1R抑制剂是小分子。在另一个具体实施例中，所述小分子是林西替尼(linsitinib)、苦鬼臼毒素(picropodophyllin)、AXL1717、BMS-754807、BMS-536924、BMS-554417、GSK1838705A、GSK1904529A、NVP-AEW541、NVP-ADW742、GTx-134、AG1024、KW-2450、PL-2258、NVP-AEW541、NSM-18、AZD3463、AZD9362、BI885578、BI893923、TT-100、XL-228或A-928605。

在一些实施例中，所述IGF-1R抑制剂是放射性免疫缀合物。在一具体实施例中，所述放射性免疫缀合物是FPI-1434。

在一些实施例中，所述IGF-1R抑制剂是抗体-药物缀合物。在一具体实施例中，所述抗体-药物缀合物是W0101。

在一些实施例中，所述缀合物与一种或多种其它疗法组合施用。在一具体实施例中，所述一种或多种其它疗法包含以下中的一种或多种：糖皮质激素(地塞米松)；皮质类固醇(甲基强的松、强的松、醋酸曲安奈德)；利妥昔单抗(rituximab)或其它抗CD20抗体；托珠单抗(tocilizumab)、TOUR006或其它抗IL-6抗体；硒；英夫利昔单抗(infliximab)、阿达木单抗(adalimumab)或其它抗肿瘤坏死因子(TNF)α抗体；促甲状腺激素受体(TSHR)抑制剂；眼眶放射疗法；血管生长因子(VEGF)抑制剂；吗替麦考酚酯；伊卡利单抗(Iscalimab)或其它抗CD40抗体；IMVT-1401、巴托利单抗、艾加莫德或其它新生儿片段可结晶(Fc)受体(FcRN)抑制剂；辛伐他汀；甲福明；苯乙福明；环孢素；硫唑嘌呤(azathioprine)；甲氨喋呤；雷帕霉素或其它雷帕霉素哺乳动物靶蛋白(mTOR)抑制剂；和/或静脉内免疫球蛋白治疗。

在一些实施例中，所述缀合物以约0.05μEq/kg体重、0.10μEq/kg体重、0.20μEq/kg体重、0.40μEq/kg体重、0.80μEq/kg体重、1.0μEq/kg体重、1.5μEq/kg体重、1.6μEq/kg体重、2.0μEq/kg体重、2.5μEq/kg体重、3.0μEq/kg体重、3.5μEq/kg体重、4.0μEq/kg体重、4.5μEq/kg体重、5.0μEq/kg体重、5.5μEq/kg体重、6.0μEq/kg体重、6.5μEq/kg体重、7.0μEq/kg体重、7.5μEq/kg体重、8.0μEq/kg体重、8.5μEq/kg体重、9.0μEq/kg体重、9.5μEq/kg体重或10.0μEq/kg体重的剂量或约0.05-0.5μEq/kg体重、0.5-1.0μEq/kg体重、1.0-1.5μEq/kg体重、1.5-2.0μEq/kg体重、2.0-2.5μEq/kg体重、2.5-3.0μEq/kg体重、3.0-3.5μEq/kg体重、3.5-4.0μEq/kg体重、4.0-4.5μEq/kg体重、4.5-5.0μEq/kg体重、5.0-5.5μEq/kg体重、5.5-6.0μEq/kg体重、6.0-6.5μEq/kg体重、6.5-7.0μEq/kg体重、7.0-7.5μEq/kg体重、7.5-8.0μEq/kg体重、8.0-8.5μEq/kg体重、8.5-9.0μEq/kg体重、9.0-9.5μEq/kg体重或9.5-10.0μEq/kg体重的剂量范围施用。

在一些实施例中，所述缀合物以约0.05mg/kg体重、0.10mg/kg体重、0.15mg/kg体重、0.20mg/kg体重、0.25mg/kg体重、0.30mg/kg体重、0.35mg/kg体重、0.40mg/kg体重、0.45mg/kg体重、0.50mg/kg体重、0.55mg/kg体重、0.60mg/kg体重、0.65mg/kg体重、0.70mg/kg体重、0.75mg/kg体重、0.80mg/kg体重、0.85mg/kg体重、0.90mg/kg体重、0.95mg/kg体重、1.0mg/kg体重、1.1mg/kg体重、1.2mg/kg体重、1.3mg/kg体重、1.4mg/kg体重、1.5mg/kg体重、1.6mg/kg体重、1.7mg/kg体重、1.8mg/kg体重、1.9mg/kg体重、2.0mg/kg体重、2.1mg/kg体重、2.2mg/kg体重、2.3mg/kg体重、2.4mg/kg体重、2.5mg/kg体重、2.6mg/kg体重、2.7mg/kg体重、2.8mg/kg体重、2.9mg/kg体重、3.0mg/kg体重、3.1mg/kg体重、3.2mg/kg体重、3.3mg/kg体重、3.4mg/kg体重、3.5mg/kg体重、3.6mg/kg体重、3.7mg/kg体重、3.8mg/kg体重、3.9mg/kg体重、4.0mg/kg体重、4.1mg/kg体重、4.2mg/kg体重、4.3mg/kg体重、4.4mg/kg体重、4.5mg/kg体重、4.6mg/kg体重、4.7mg/kg体重、4.8mg/kg体重、4.9mg/kg体重、5.0mg/kg体重、5.1mg/kg体重、5.2mg/kg体重、5.3mg/kg体重、5.4mg/kg体重、5.5mg/kg体重、5.6mg/kg体重、5.7mg/kg体重、5.8mg/kg体重、5.9mg/kg体重、6.0mg/kg体重、6.1mg/kg体重、6.2mg/kg体重、6.3mg/kg体重、6.4mg/kg体重、6.5mg/kg体重、6.6mg/kg体重、6.7mg/kg体重、6.8mg/kg体重、6.9mg/kg体重、7.0mg/kg体重、7.1mg/kg体重、7.2mg/kg体重、7.3mg/kg体重、7.4mg/kg体重、7.5mg/kg体重、7.6mg/kg体重、7.7mg/kg体重、7.8mg/kg体重、7.9mg/kg体重、8.0mg/kg体重、8.1mg/kg体重、8.2mg/kg体重、8.3mg/kg体重、8.4mg/kg体重、8.5mg/kg体重、8.6mg/kg体重、8.7mg/kg体重、8.8mg/kg体重、8.9mg/kg体重、9.0mg/kg体重、9.1mg/kg体重、9.2mg/kg体重、9.3mg/kg体重、9.4mg/kg体重、9.5mg/kg体重、9.6mg/kg体重、9.7mg/kg体重、9.8mg/kg体重、9.9mg/kg体重、10.0mg/kg体重、10.1mg/kg体重、10.2mg/kg体重、10.3mg/kg体重、10.4mg/kg体重、10.5mg/kg体重、10.6mg/kg体重、10.7mg/kg体重、10.8mg/kg体重、10.9mg/kg体重、11.0mg/kg体重、11.1mg/kg体重、11.2mg/kg体重、11.3mg/kg体重、11.4mg/kg体重、11.5mg/kg体重、11.6mg/kg体重、11.7mg/kg体重、11.8mg/kg体重、11.9mg/kg体重、12.0mg/kg体重、12.1mg/kg体重、12.2mg/kg体重、12.3mg/kg体重、12.4mg/kg体重、12.5mg/kg体重、12.6mg/kg体重、12.7mg/kg体重、12.8mg/kg体重、12.9mg/kg体重、13.0mg/kg体重、13.1mg/kg体重、13.2mg/kg体重、13.3mg/kg体重、13.4mg/kg体重、13.5mg/kg体重、13.6mg/kg体重、13.7mg/kg体重、13.8mg/kg体重、13.9mg/kg体重、14.0mg/kg体重、14.1mg/kg体重、14.2mg/kg体重、14.3mg/kg体重、14.4mg/kg体重、14.5mg/kg体重、14.6mg/kg体重、14.7mg/kg体重、14.8mg/kg体重、14.9mg/kg体重、15.0mg/kg体重、15.1mg/kg体重、15.2mg/kg体重、15.3mg/kg体重、15.4mg/kg体重、15.5mg/kg体重、15.6mg/kg体重、15.7mg/kg体重、15.8mg/kg体重、15.9mg/kg体重、16.0mg/kg体重、16.1mg/kg体重、16.2mg/kg体重、16.3mg/kg体重、16.4mg/kg体重或16.5mg/kg体重的剂量或约0.05-0.5mg/kg体重、0.5-1.0mg/kg体重、1.0-1.5mg/kg体重、1.5-2.0mg/kg体重、2.0-2.5mg/kg体重、2.5-3.0mg/kg体重、3.0-3.5mg/kg体重、3.5-4.0mg/kg体重、4.0-4.5mg/kg体重、4.5-5.0mg/kg体重、5.0-5.5mg/kg体重、5.5-6.0mg/kg体重、6.0-6.5mg/kg体重、6.5-7.0mg/kg体重、7.0-7.5mg/kg体重、7.5-8.0mg/kg体重、8.0-8.5mg/kg体重、8.5-9.0mg/kg体重、9.0-9.5mg/kg体重、9.5-10.0mg/kg体重、10.0-10.5mg/kg体重、10.5-11.0mg/kg体重、11.0-11.5mg/kg体重、11.5-12.0mg/kg体重、12.0-12.5mg/kg体重、12.5-13.0mg/kg体重、13.0-13.5mg/kg体重、13.5-14.0mg/kg体重、14.0-14.5mg/kg体重、14.5-15.0mg/kg体重、15.0-15.5mg/kg体重、15.5-16.0mg/kg体重或16.0-16.5mg/kg体重的剂量范围施用。

在一些实施例中，所述缀合物以作为最大耐受剂量(MTD)的剂量施用。

在一些实施例中，所述缀合物每天、每隔一天、每三天、每四天、每五天、每六天、每周一次、每两周一次、每三周一次、每四周一次、每月一次、每两个月一次或每三个月一次施用。

在一些实施例中，所述缀合物是静脉内、皮下、通过玻璃体内注射、通过眶内注射或通过眼滴剂施用的。

在一些实施例中，本发明的方法不会在所述受试者中引起不可接受的高血糖。

在一具体实施例中，本文提供了一种用于通过施用有效量的缀合物来治疗有需要的受试者的TED的方法，其中所述缀合物包含765IGF(SEQ ID NO:2)和甲氨喋呤。

下文完整描述了这些和其它实施例。

具体实施方式

本文所述的主题涉及使用针对IGF-1R的靶向疗法来治疗眼睛的炎性病状的方法，所述方法包含IGF-1R配体或其变体与疾病缓解剂的组合。

现在将在下文中更全面地描述当前所公开的主题。然而，受益于前述描述中呈现的教导，当前所公开的主题所涉及的领域的技术人员将想到本文所阐述的当前所公开的主题的许多修改和其它实施例。因此，应当理解的是，当前所公开的主题不限于所公开的具体实施例，并且修改和其它实施例旨在被包括在所附权利要求的范围内。换句话说，本文描述的主题涵盖所有替代方案、修改和等效形式。如果所结合的文献、专利和类似材料中的一个或多个与本申请不同或相矛盾，包括但不限于所定义的术语、术语用法、所描述的技术等，则以本申请为准。除非另有定义，否则本文所使用的所有技术术语和科学术语具有与本领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献均通过引用以其整体并入本文。如果所结合的文献、专利和类似材料中的一个或多个与本申请不同或相矛盾，包括但不限于所定义的术语、术语用法、所描述的技术等，则以本申请为准。

I.定义

如本文所用，患者或受试者等是患有眼睛的炎性病状的任何哺乳动物。如本文所用，术语“哺乳动物”包括但不限于人、小鼠、大鼠、豚鼠、猴、狗、猫、马、牛、猪和绵羊。

如本文所用，术语“缀合物”是指包含IGF-1R配体或其一部分或变体和疾病缓解剂的分子。

如本文所用，术语“细胞毒性剂”是指在根据本文所述的方法进行治疗时能够预防、延迟、降低和/或逆转疾病的活性、严重程度和/或进展的任何药剂。在缀合物和治疗眼睛的炎性病状的方法中可以使用导致细胞杀伤的任何合适的细胞毒性剂。

如本文所用，化学部分或化合物的术语“残基”或“……的残基”是指与分子结合，由此通过结合，至少一个共价键已替代原始化学部分或化合物的至少一个原子，从而在分子中产生化学部分或化合物的残基的化学部分或化合物。

如本文所用，如果受试者未能实现对疗法的应答，使得所述疗法被确定为在治疗上无效(如：未能达到临床终点(包括任何应答)、应答持续时间延长、无疾病生存期、无复发生存期和无进展生存期延长)，则所述受试者对先前治疗来说是“难治性”的。

如本文所用，“和/或”是指并且涵盖关联的所列项中的一个或多个所列项的任何和所有可能组合以及在以替代性方案(“或”)解释时组合的缺少。

如本文所用，当提及如当前主题的化合物或药剂的量、剂量、时间、温度等可测量值时，术语“约”意指涵盖所指定量的±20％、±10％、±5％、±1％、±0.5％或甚至±0.1％的变化。

如本文所用，本文使用的条件语言，如“可以”、“能够”、“可能”、“可”、“例如”等，除非另外特别说明或者在所使用的上下文中以其它方式理解，否则通常旨在传达某些实施例包括某些特征、要素和/或步骤，而其它实施例不包括某些特征、要素和/或步骤。因此，此些条件语言通常不旨在以任何方式暗示特征、要素和/或步骤对于一个或多个实施例是必需的，或者一个或多个实施例必须包括用于在有或没有作者输入或提示的情况下决定这些特征、要素和/或步骤是否被包括在任何特定实施例中或将被执行的逻辑。术语“包含(comprising)”，“包括(including)”，“具有(having)”等是同义的，并且以包含性方式使用，并且不排除另外的要素、特征、动作、操作等。同样，术语“或”以其包容性含义使用(而不是以其排他性含义使用)，因此例如当用于连接要素的列表时，术语“或”意指列表中的一个、一些或全部要素。

另外的术语的定义可以在下文阐述。

II.组合物

用于治疗的药剂

本申请提供了用于治疗有需要的受试者的眼睛的炎性病状的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的缀合物，其中所述缀合物包含IGF-1R配体或其一部分或变体以及疾病缓解剂。

在本发明的此实施例或任何实施例中，缀合物可以包含化学缀合物，在所述化学缀合物中，IGF-1R配体和疾病缓解剂直接或通过化学接头以化学方式连接在一起。在其它实施例中，缀合物是其中缀合物表达为单一多肽的基因重组体。在缀合物是重组缀合物时，经翻译的缀合物优选地包含通过肽键与IGF-1R配体连接的毒素或其一部分或变体。

在某些实施例中，缀合物是美国专利第9,675,671号中描述的融合蛋白，所述美国专利特此通过引用以其整体并入。

IGF-1R配体

IGF-1R是具有激酶活性的由两个细胞外配体结合α亚基和两个跨膜β亚基组成的异四聚体，所述激酶活性介导信号转导。IGF-1R的天然配体是IGF-1、IGF-2和胰岛素。IGF-1R对IGF-1的亲和力最高，之后是对IGF-2的亲和力，并且与胰岛素结合的亲和力可以是前述亲和力的1/100至1/50。IGF-1R还可以通过与胰岛素受体的二聚化来形成混合受体。参见Hakuno等人《分子内分泌学杂志(J Mol Endocrinol.)》61(1):T69-T86(2018)。

在某些实施例中，本发明的缀合物中的IGF-1R配体包含野生型IGF-1(SEQ ID NO:3)、野生型胰岛素(SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11；成熟胰岛素由两条通过二硫键连接的链(对应于SEQ ID NO:10的链A和对应于SEQ ID NO:11的链B)组成，因此叙述了两个SEQ IDNO)或野生型IGF-2(SEQ ID NO:12)。在其它实施例中，缀合物中的IGF-1R配体包含野生型IGF-1(SEQ ID NO:3)的变体、野生型胰岛素(SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11)的变体或野生型IGF-2(SEQ ID NO:12)的变体。在一具体实施例中，野生型IGF-1的变体与IGF-1(SEQ IDNO:3)至少70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％相同，所述野生型胰岛素的变体与胰岛素(SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11)至少70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％相同，或者所述野生型IGF-2的变体与IGF-2(SEQ ID NO:12)至少70％、75％、80％、85％、90％、95％或99％相同。

在另一个具体实施例中，缀合物中的IGF-1R配体包含对IGFBP的结合亲和力相较于野生型IGF-1(SEQ ID NO:3)对所述IGFBP的结合亲和力有所降低的IGF-1的变体或对IGFBP的结合亲和力相较于野生型IGF-2(SEQ ID NO:12)对IGFBP的结合亲和力有所降低的IGF-2的变体。IGFBP属于至少六种与IGF-1和IGF-2以高亲和力结合的蛋白质的家族。IGFBP在循环中与大多数IGF结合，从而增加其半衰期，调节其生物利用度，并且总体上抑制其与IGF受体结合的能力。参见Baxter,《美国生理学-内分泌与代谢杂志(Am J PhysiolEndocrinol Metab.)》,278(6):E967-76(2000)以及Allard等人《内分泌学前沿(Lausanne)(Front Endocrinol(Lausanne))》9；9:117(2018)。因此，与IGFBP的结合减少的IGF-1或IGF-2的变体在体内的生物活性更大。

对IGFBP的结合亲和力降低的IGF-1变体在本领域中是已知的，并且包括：IGF132(公开于美国专利第4,876,242号中)，其中胰岛素的B链(SEQ ID NO:11)的前17个氨基酸替代人IGF-1(SEQ ID NO:3)的前16个氨基酸；R3-IGF-1(SEQ ID NO:6)，其中天然人IGF-1(SEQ ID NO:3)的位置3中的谷氨酸被精氨酸取代；以及des(1-3)IGF-1(SEQ ID NO:7)，其缺乏人IGF-1(SEQ ID NO:3)的前三个氨基酸。R3-IGF-1和des(1-3)IGF-1描述于Francis等人,《分子内分泌学杂志》8(3):213-23(1992)中。在一些实施例中，缀合物包含IGF132(SEQID NO:4)、R3-IGF-1(SEQ ID NO:6)或des(1-3)-IGF-1(SEQ ID NO:7)。

在另一个实施例中，所述IGF-1的变体对所述IGF-1R的亲和力比野生型IGF-1(SEQID NO:3)对所述IGF-1R的亲和力高，或者所述IGF-2的变体对所述IGF-1R的亲和力比野生型IGF-2(SEQ ID NO:12)对所述IGF-1R的亲和力高。

在另一个实施例中，IGF-1R配体或其一部分或变体包含前导序列。前导序列可以并入标签(如聚组氨酸标签)，所述标签用于促进蛋白质纯化以及提供用于疾病缓解剂缀合的位点。在一具体实施例中，所述前导序列包含SEQ ID NO:1。

在一些实施例中，缀合物中的IGF-1R配体包含765IGF(SEQ ID NO:2)、long-R3-IGF-1(SEQ ID NO:5)、long-IGF-1(SEQ ID NO:8)或long-G3-IGF-1(SEQ ID NO:9)。765IGF、long-R3-IGF-1、long-IGF-1和long-G3-IGF-1具有N末端前导序列，所述N末端前导序列如上所述促进蛋白质纯化并提供用于疾病缓解剂缀合的位点。765IGF(SEQ ID NO:2)包含SEQ ID NO:1，所述SEQ ID NO:1之后是R3-IGF-1(SEQ ID NO:6)；long-R3-IGF-1(SEQID NO:5)包含甲硫氨酰猪生长激素的前11个氨基酸，所述前11个氨基酸之后是Val-Asn二肽，所述Val-Asn二肽之后是R3-IGF-1(SEQ ID NO:6)；long-IGF-1(SEQ ID NO:8)包含甲硫氨酰猪生长激素的前11个氨基酸，所述前11个氨基酸之后是Val-Asn二肽，所述Val-Asn二肽之后是人IGF-1(SEQ ID NO:3)；并且long-G3-IGF-1包含甲硫氨酰猪生长激素的前11个氨基酸，所述前11个氨基酸之后是Val-Asn二肽，所述Val-Asn二肽之后是人IGF-1的变体，在所述变体中，天然人IGF-1(SEQ ID NO:3)的位置3中的谷氨酸被甘氨酸取代。在一些实施例中，缀合物包含765IGF(SEQ ID NO:2)。

疾病缓解剂

如本文所用，术语疾病缓解剂是指在根据本发明中描述的方法治疗时能够预防、延迟、降低和/或逆转疾病的活性、严重程度和/或进展的任何药剂。

在一具体实施例中，缀合物的疾病缓解剂是细胞毒性剂。在本发明的缀合物和治疗眼睛的炎性病状的方法中可以使用导致细胞杀伤的任何合适的细胞毒性剂。

在一具体实施例中，细胞毒性剂是化学治疗剂。在本发明的缀合物和治疗眼睛的炎性病状的方法中可以使用导致细胞杀伤的任何合适的化学治疗剂。例如，在特定实施例中，化学治疗剂是安吖啶、氮杂胞苷、博来霉素、白消安、卡培他滨、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、环磷酰胺、阿糖孢苷、更生霉素、柔红霉素、达卡巴嗪、多西他赛、阿霉素、表柔比星、雌莫司汀、依托泊苷、氟尿苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、六甲嘧胺、伊达比星、异环磷酰胺、依立替康、洛莫司汀、氮芥、美法仑、巯嘌呤、甲氨喋呤、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、奥沙利铂、紫杉醇、培美曲塞、喷司他丁、普卡霉素、丙卡巴肼、雷替曲塞、司莫司汀、链脲菌素、替莫唑胺、替尼泊苷、硫鸟嘌呤、噻替派、拓扑替康、三甲曲沙、戊柔比星、长春新碱、长春花碱、长春地辛或长春瑞滨。在一具体实施例中，化学治疗剂是甲氨喋呤。

在某些实施例中，缀合物包含多于一种与IGF-1R配体结合的细胞毒性剂。在某些方面中，缀合物可以包含一种至12种细胞毒性剂、或6种至10种细胞毒性剂、或约8种细胞毒性剂。在某些方面中，缀合物可以包含一种至十二种共价结合的细胞毒性剂、或6种至10种共价结合的细胞毒性剂、或约8种共价结合的细胞毒性剂。在某些方面中，细胞毒性剂与IGF-1R配体上的任何可用位置共价结合。在某些方面中，细胞毒性剂与任何可用的赖氨酸残基共价结合。在某些方面中，细胞毒性剂与前导序列中的任何可用赖氨酸(在存在时)共价结合。

在其它实施例中，细胞毒性剂是毒素。在本发明的缀合物和治疗眼睛的炎性病状的方法中可以使用导致细胞杀伤的任何合适的毒素。毒素可以源自于植物、真菌或细菌。例如，在具体实施例中，毒素是产气荚膜梭菌肠毒素、白喉毒素、蓖麻毒蛋白A链、去糖基化的蓖麻毒蛋白A链、假单胞菌外毒素、A链毒素、核糖体失活蛋白、α-帚曲毒蛋白、曲霉菌素、相思子毒素、限制性霉素、细菌内毒素、细菌内毒素的脂质A部分、霍乱毒素或核糖核酸酶。在一具体实施例中，所述毒素包含产气荚膜梭菌肠毒素或其变体的一部分。在一具体实施例中，所述缀合物包含SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:15。在其它具体实施例中，所述毒素包含白喉毒素或其一部分或变体。在一具体实施例中，所述缀合物包含SEQ ID NO:13或SEQ IDNO:16。

在另一个具体实施例中，本发明的缀合物的疾病缓解剂选自：糖皮质激素(地塞米松)；皮质类固醇(甲基强的松、强的松、醋酸曲安奈德)；TSHR抑制剂；吗替麦考酚酯；辛伐他汀；甲福明；苯乙福明；环孢素；雷帕霉素或其它mTOR抑制剂；或硫唑嘌呤。

表1提供了本文引用的某些序列的列表。

药物组合物

可以将本发明的缀合物调配在药物组合物中以供本文所述的方法使用。在一些实施例中，所述药物组合物包含有效量的本发明的缀合物和药学上可接受的载剂或媒剂。此类药物组合物可以被调配成适于施用于受试者，并且可以呈允许将组合物施用于受试者的任何形式。

用于制备所述药物组合物的材料在所使用的量下可以是无毒的。对于本领域的普通技术人员而言显而易见的是，药物组合物中的活性成分的最佳剂量将取决于多种因素。相关因素包括但不限于受试者的类型(例如，人类)、受试者的整体健康水平、受试者所患的病状的类型、所述组合物作为多药方案的一部分的用途、本发明的组合物的特定形式以及施用方式。所述药物组合物包含有效量的本发明组合物，使得将获得合适的剂量。

术语“载剂”是指与本发明的组合物一起施用的稀释剂、佐剂或赋形剂。可以使用任何助剂、稳定剂、增稠剂、润滑剂和着色剂。在一个实施例中，在施用于受试者时，本发明的组合物和药学上可接受的载剂是无菌的。在本发明的组合物静脉内施用时，水可以是载剂。也可以采用盐溶液以及右旋糖和甘油水溶液作为液体载剂，特别是用于可注射溶液。如有需要，本发明组合物还可以含有少量pH缓冲剂。

本发明的液体组合物，无论其是溶液、悬浮液或其它类似形式，还可以包括以下中的一种或多种：无菌稀释剂，如注射用水、盐水溶液、生理盐水、林格氏溶液(Ringer'ssolution)、等渗氯化钠、固定油(如合成甘油单酯或甘油二酯，其可以用作溶剂或悬浮介质)、聚乙二醇、甘油、环糊精、丙二醇或其它溶剂；抗菌剂，如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，如乙二胺四乙酸；缓冲剂，如乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐；用于调节pH的药剂，如盐酸；以及用于调节张力的药剂，如氯化钠或右旋糖。可以将肠胃外组合物封装在由玻璃、塑料或其它材料制成的安瓿、一次性注射器或多剂量小瓶中。在一些实施例中，生理盐水是佐剂。可注射组合物可以是无菌的。

本发明组合物可以采取溶液、悬浮液、片剂、丸剂、团粒、胶囊、含有液体的胶囊、粉剂、缓释制剂、栓剂、乳剂、气雾剂、喷雾剂、悬浮液的形式或任何其它适合使用的形式。合适的药物载剂的实例描述于E.W.Martin的《雷明顿氏药物科学(Remington'sPharmaceutical Sciences)》中。

在一些实施例中，根据常规程序将本发明的组合物调配为适于静脉内施用于人类受试者的药物组合物。通常，用于静脉内施用的载剂或媒剂是无菌等渗水性缓冲溶液。必要时，所述组合物还可以包括增溶剂。用于静脉内施用的组合物可以任选地包含局部麻醉剂，如用于缓解注射部位的疼痛的利多卡因(lignocaine)。一般地，将成分分开或混合在一起以单位剂型提供，例如，作为在气密密封容器(如指示活性剂的量的安瓿或小药囊)中的干冻干粉或无水浓缩剂。在本发明的组合物要通过输注施用时，其可以例如用含有无菌药用级水或盐水的输注瓶分配。在本发明的组合物通过注射施用时，可以提供无菌注射用水或盐水的安瓿，使得可以在施用之前将成分混合。

可以使用医药领域中众所周知的方法制备药物组合物。例如，可以通过将本发明的组合物与水组合以形成溶液来制备旨在通过注射施用的组合物。可以添加表面活性剂以促进均质溶液或悬浮液的形成。表面活性剂是可以与本发明的组合物非共价相互作用以促进本发明的组合物在水性递送系统中的溶解或均质悬浮的复合物。

III.方法

用于产生IGF-1R缀合物的方法

用于产生本发明的缀合物的方法在本领域中是已知的。

编码IGF-1R配体的核苷酸序列可以通过标准重组DNA技术或通过蛋白质合成技术产生，使用标准分子生物学技术克隆到适当的表达载体中，在细菌细胞、昆虫细胞或哺乳动物细胞中表达，并且通过本领域已知用于纯化蛋白质的任何方法纯化。

包含IGF-1R配体和化学治疗剂的本发明的缀合物可以通过标准化学和蛋白质缀合技术来制备，并且描述于美国专利第7,811,982号；美国专利第9,675,671号；以及美国专利第9,801,923号中。

包含IGF-1R配体和毒素的本发明的缀合物可以通过标准重组DNA技术制备为融合蛋白，并且描述于美国专利第8,017,102号中。

治疗方法

本文提供了使用缀合物来治疗眼睛的炎性病状的方法，其中所述缀合物包含IGF-1R配体或其一部分或变体以及疾病缓解剂。

在一些实施例中，所述眼睛的炎性病状是TED、葡萄膜炎、巩膜炎、角膜炎或结膜炎。

在一些实施例中，眼睛的炎性病状是眼眶炎性疾病。在某些实施例中，眼眶炎性疾病是特发性眼眶炎症、眼眶炎性假瘤、眼眶肌炎、炎性眼眶蜂窝织炎、视神经周围炎、巩膜周围炎、弥漫性眼眶炎症、眼眶根尖炎或硬化性眼眶炎症。

在一具体实施例中，眼睛的炎性病状是TED。TED还可以被称为格雷夫斯氏眼病(Grave's ophthalmopathy)、甲状腺相关眼病、格雷夫斯氏眼病(Graves'eye disease)、格雷夫斯氏眼眶病或甲状腺炎性眼病。

在某些实施例中，本文所述的主题涉及用于治疗受试者的眼睛的炎性病状的方法，所述方法包含向所述受试者施用缀合物，所述缀合物包含IGF-1R配体或其一部分或变体以及细胞毒性剂，其中所述IGF-1R配体或其一部分或变体包含SEQ ID NO:2，所述细胞毒性剂是甲氨喋呤，其中所述甲氨喋呤与SEQ ID NO:2的赖氨酸共价结合，并且所述眼睛的炎性病状选自由以下组成的组：甲状腺眼病、葡萄膜炎、巩膜炎、角膜炎、结膜炎和眼眶炎性疾病。在这些实施例的某个方面，缀合物是LX-101(如上所述的缀合物，其中IGF-1R配体是SEQID NO:2，细胞毒性剂是甲氨喋呤，并且其中至少6个且至多10个、或至少6个且至多9个、或至少7个且至多9个、或至少8个且至多9个甲氨喋呤残基各自与SEQ ID NO:2的赖氨酸残基共价结合)。

在某些实施例中，每种缀合物的甲氨喋呤残基的数量为6、7、8、9或10。在某些实施例中，组合物中的每种缀合物的甲氨喋呤残基的平均数量为6、7、8、9或10。

测量临床功效的方法

如本文所用，术语“受试者”和“患者”可互换使用。

在一些实施例中，用于治疗受试者的TED的包含向有需要的受试者施用本发明的缀合物的方法使受试者的眼球突出减小。眼球突出(还被称为眼球凸出(exophthalmos))是眼球的突出，所述突出导致眼睛隆起，并且可能影响一个或两个眼睛。在TED中，眼球突出是由眼眶脂肪和眼睛后面的肌肉的扩张引起的。参见Khong等人,《英国眼科学杂志(Br JOphthalmol)》,100(1):142-50(2016)。在一些实施例中，眼球突出的减小减小了大于2mm，例如，2.2mm、2.4mm、2.5mm、2.6mm.2.8mm、3mm、3.2mm、3.4mm、3.5mm、3.6mm、3.8mm、4mm、4.1mm、4.2mm、4.3mm、4.4mm、4.5mm、4.6mm、4.7mm、4.8mm、4.9mm、5mm或大于5mm。在一具体实施例中，眼球突出减少了至少2mm、至少3mm或至少4mm。在另一个实施例中，眼球突出的减小与受试者的眼外肌肉体积和/或眼眶脂肪体积的减小相关。在另一个实施例中，所述眼球突出的减小是通过眼球突度计或眼眶成像评估的。在一具体实施例中，所述眼眶成像是计算机断层摄影扫描或磁共振成像。

在一些实施例中，用于治疗受试者的TED的包含向有需要的受试者施用本发明的缀合物的方法使受试者的CAS降低。CAS由七个组成部分(自发性眼球后疼痛、尝试向上或向下凝视时疼痛、眼睑发红、结膜发红、泪阜或半月皱襞肿胀、眼睑肿胀和结膜水肿)组成，每个组成部分以1(存在)或0(不存在)评分。CAS是存在的所有项的总和，并且范围为0-7，其中评分0或1构成非活动性疾病，评分3或更大构成活动性疾病，并且评分7构成严重活动性疾病。参见Bartalena等人《欧洲内分泌学杂志(Eur JEndocrinol.)》185(4):G43-G67(2021)。2分或更多分的变化被视为是具有临床意义的。在一些实施例中，CAS的降低是2分或更多分，例如，3分、4分、5分、6分或7分。在一个实施例中，CAS的降低是2分或更多分。在另一个实施例中，所述降低是3分或更多点。在又另一个实施例中，CAS的降低是4分或更多分。在一具体实施例中，所述CAS降低了至少2分或至少3分。在另一个具体实施例中，所述CAS降低到1或降低到0。

在一些实施例中，用于治疗受试者的TED的包含向有需要的受试者施用本发明的缀合物的方法使受试者的复视的严重程度降低。在另一个实施例中，所述复视的减少是通过戈尔曼主观复视评分测量的。复视是双重祝野的医学术语，并且是通过戈尔曼主观复视评分评估的，所述戈尔曼主观复视评分包括4个类别：无复视(不存在，评分为0)、当患者疲劳或苏醒时主要凝视位置中的复视(间歇性，评分为1)、凝视极端处的复视(非持续性，评分为2)以及在主要位置或阅读位置中的持续复视(持续性，评分为3)。参见Bartalena等人,《欧洲内分泌学杂志》,158(3):273-85(2008)。一个等级或更多等级的改善被视为是具有临床意义的。在某些实施例中，复视是持续性复视、间歇性复视或非持续性复视。在一具体实施例中，治疗使复视完全消退。在另一个具体实施例中，受试者的复视的严重程度降低了至少一个等级。

在一些实施例中，用于治疗受试者的TED的包含向有需要的受试者施用本发明的缀合物的方法使受试者的生活质量得以提高。生活质量是通过GO-QoL评估量表测量的，所述GO-QoL评估量表是自填式问卷，所述自填式问卷由两个各自具有八个问题的子量表组成：视觉功能子量表，所述视觉功能子量表评估视觉功能对日常活动的影响；以及外观子量表，所述外观子量表评估对自我感知到的外观的影响。每个问题评分为0-2，并且总原始评分转换为0-100量表，其中0表示对生活质量的最负面的影响，并且100表示对生活质量没有影响。还将来自两个子量表的原始评分组合并转换为0-100量表。参见Terwee等人,《英国眼科学杂志》,82(7):773-9(1998)。8分或更多分的变化已显示出具有临床意义。在一具体实施例中，生活质量的提高是通过GO-QoL评估量表或所述GO-QoL的视觉功能子量表或外观子量表来测量的。在另一个具体实施例中，在GO-QoL评估量表、所述GO-QoL的视觉功能子量表或所述GO-QoL的外观子量表上，生活质量提高了至少8分。

视神经病变是可能由视神经的压迫或拉伸引起的TED的严重威胁视力的并发症。在一些实施例中，用于治疗受试者的TED的包含向有需要的受试者施用本发明的缀合物的方法使视神经病变得以改善。

在一些实施例中，用于治疗受试者的TED的包含向有需要的受试者施用本发明的缀合物的方法使眶后水肿减少。

由控制眼睛移动的肌肉的肿胀引起的眼球运动受限是TED的另一种并发症。在一些实施例中，用于治疗受试者的TED的包含向有需要的受试者施用本发明的缀合物的方法使单目转向得以改善。在一具体实施例中，所述单目转向的改善是通过光反射测试测量的。在另一个具体实施例中，所述单目转向的改善是至少10度。

在一些实施例中，用于治疗受试者的眼睛的炎性病状的包含向有需要的受试者施用本发明的缀合物的方法使所述受试者的表达IGF-1R的细胞的功能改变或损伤。如本文所用，改变或损伤是指在眼睛的炎性病状中所述表达IGF-1R的细胞的内源功能的任何改变。

在一些实施例中，用于治疗受试者的眼睛的炎性病状的包含向有需要的受试者施用本发明的缀合物的方法使得所述受试者的表达IGF-1R的细胞的数量减少。在一具体实施例中，所述减少是由对表达IGF-1R的细胞的杀伤引起的。在不受理论束缚的情况下，据信，对IGF-1R通路的简单抑制由于通过可以继续充当疾病效应子的其它潜在冗余的通路或被上调并且可能导致适应性抗性的补偿通路进行的信号传导而不足以作为完全治愈性治疗。因此，疾病缓解性的药剂(包括导致对表达IGF-1R的细胞的杀伤的药剂)的靶向递送可以提供超出(包括优于)简单IGF-1R通路抑制的益处，因为其绕过了所有此类潜在冗余的和/或补偿性的通路的影响。

在另一个具体实施例中，所述表达IGF-1R的细胞是眼眶成纤维细胞(OF)。OF是TED的病理生理学的核心。经激活的OF可以增殖并分化成脂肪细胞和肌成纤维细胞，并分泌如透明质烷等细胞外基质蛋白，从而导致软组织扩张，所有这些都促成TED的各种临床表现。透明质烷是透明质酸(HA)的盐。透明质烷和透明质酸在本文中可互换使用。由浸润眼眶的免疫细胞(例如，T细胞、B细胞、肥大细胞和单核细胞)产生的细胞因子和炎性介质可以促进OF分化成肌成纤维细胞和脂肪细胞，从而导致瘢痕形成、组织重塑和组织扩张。肌成纤维细胞是表达平滑肌肌动蛋白(αSMA)的收缩细胞。在一些实施例中，治疗使受试者的眶后空间中的透明质烷合成减少或受到抑制。在一些实施例中，治疗使透明质烷或透明质酸的水平降低。在其它实施例中，治疗使受试者的眶后空间中的脂肪生成减少或受到抑制。在一些实施例中，治疗使受试者的血清中的IL-6、IL-16和/或RANTES的水平降低。在一些实施例中，治疗使OF分化成肌成纤维细胞减少或受到抑制。

在另一个具体实施例中，所述表达IGF-1R的细胞是纤维细胞、B淋巴细胞和/或T淋巴细胞。纤维细胞是源自于骨髓的成纤维细胞样祖细胞，其在外周中循环并且具有组织重塑和免疫激活特性两者。在不受理论约束的情况下，据信，纤维细胞可以渗透眼眶，分化成OF，并且促进TED的病理生理学和眼睛的潜在其它炎性病状。B淋巴细胞产生可能导致组织损伤和/或使细胞信号传导失调的致病性自身抗体。T淋巴细胞可以激活自体反应性B细胞以及OF，并且可能促成炎症和组织损伤。

在一些实施例中，相对于通过来自健康受试者或未被诊断为患有眼睛的炎性病状的受试者的细胞的表达，IGF-1R通过眶后空间中的细胞过表达。在一些实施例中，所述受试者的表达IGF-1R的细胞的频率相对于来自健康受试者或未被诊断为患有眼睛的炎性病状的受试者的表达IGF-1R的细胞的频率有所增加。在一些实施例中，使用本领域已知的技术和细胞表面标志物，通过流式细胞术或免疫组织化学来测量表达IGF-1R的细胞的频率。

在一些实施例中，用于用本发明的缀合物治疗有需要的受试者的眼睛的炎性病状的方法使受试者的疾病得以缓解。如本文所使用，疾病缓解可以指代在根据本发明所述的方法治疗时对受试者的疾病的活动性、严重程度和/或进展的任何预防、延迟、降低和/或逆转。疾病缓解可以由于用本发明的缀合物治疗而由对疾病的潜在病理生理学的直接或间接影响引起。

组合治疗

在一些实施例中，将本发明的缀合物与一种或多种其它疗法组合施用。用于治疗TED的任何疗法可以与本发明的缀合物组合使用，所述缀合物包括：糖皮质激素(地塞米松)；皮质类固醇(甲基强的松、强的松、醋酸曲安奈德)；利妥昔单抗或其它抗CD20抗体；托珠单抗、TOUR006或其它抗IL-6抗体；硒；英夫利昔单抗、阿达木单抗或其它抗TNFα抗体；TSHR抑制剂；眼眶放射疗法；VEGF抑制剂；吗替麦考酚酯；伊卡利单抗或其它抗CD40抗体；IMVT-1401、巴托利单抗、艾加莫德或其它FcRN抑制剂；辛伐他汀；甲福明；苯乙福明；环孢素；硫唑嘌呤；甲氨喋呤；雷帕霉素或其它mTOR抑制剂；和/或静脉内免疫球蛋白治疗。

在一些实施例中，本文所公开的药剂的组合允许以比当作为单一药剂给药时所述药剂将产生效果的剂量低的剂量水平给药一种或多种药剂。

给药和施用

本发明的药剂可以以任何临床相关剂量给药。临床相关意指药剂的剂量对受试者有影响。

在一些实施例中，本发明的缀合物以约0.05μEq/kg体重、0.10μEq/kg体重、0.20μEq/kg体重、0.40μEq/kg体重、0.80μEq/kg体重、1.0μEq/kg体重、1.5μEq/kg体重、1.6μEq/kg体重、2.0μEq/kg体重、2.5μEq/kg体重、3.0μEq/kg体重、3.5μEq/kg体重、4.0μEq/kg体重、4.5μEq/kg体重、5.0μEq/kg体重、5.5μEq/kg体重、6.0μEq/kg体重、6.5μEq/kg体重、7.0μEq/kg体重、7.5μEq/kg体重、8.0μEq/kg体重、8.5μEq/kg体重、9.0μEq/kg体重或10.0μEq/kg体重的剂量施用，其中μEq等同于与IGF-1R配体缀合的化学治疗剂组的μmol。

在一些实施例中，本发明的缀合物以约0.05-0.5μEq/kg体重、0.5-1.0μEq/kg体重、1.0-1.5μEq/kg体重、1.5-2.0μEq/kg体重、2.0-2.5μEq/kg体重、2.5-3.0μEq/kg体重、3.0-3.5μEq/kg体重、3.5-4.0μEq/kg体重、4.0-4.5μEq/kg体重、4.5-5.0μEq/kg体重、5.0-5.5μEq/kg体重、5.5-6.0μEq/kg体重、6.0-6.5μEq/kg体重、6.5-7.0μEq/kg体重、7.0-7.5μEq/kg体重、7.5-8.0μEq/kg体重、8.0-8.5μEq/kg体重、8.5-9.0μEq/kg体重、9.0-9.5μEq/kg体重或9.5-10.0μEq/kg体重的剂量范围施用，其中μEq等同于与IGF-1R配体缀合的化学治疗剂组的μmol。

在一些实施例中，本发明的缀合物以约0.05mg/kg体重、0.10mg/kg体重、0.15mg/kg体重、0.20mg/kg体重、0.25mg/kg体重、0.30mg/kg体重、0.35mg/kg体重、0.40mg/kg体重、0.45mg/kg体重、0.50mg/kg体重、0.55mg/kg体重、0.60mg/kg体重、0.65mg/kg体重、0.70mg/kg体重、0.75mg/kg体重、0.80mg/kg体重、0.85mg/kg体重、0.90mg/kg体重、0.95mg/kg体重、1.0mg/kg体重、1.1mg/kg体重、1.2mg/kg体重、1.3mg/kg体重、1.4mg/kg体重、1.5mg/kg体重、1.6mg/kg体重、1.7mg/kg体重、1.8mg/kg体重、1.9mg/kg体重、2.0mg/kg体重、2.1mg/kg体重、2.2mg/kg体重、2.3mg/kg体重、2.4mg/kg体重、2.5mg/kg体重、2.6mg/kg体重、2.7mg/kg体重、2.8mg/kg体重、2.9mg/kg体重、3.0mg/kg体重、3.1mg/kg体重、3.2mg/kg体重、3.3mg/kg体重、3.4mg/kg体重、3.5mg/kg体重、3.6mg/kg体重、3.7mg/kg体重、3.8mg/kg体重、3.9mg/kg体重、4.0mg/kg体重、4.1mg/kg体重、4.2mg/kg体重、4.3mg/kg体重、4.4mg/kg体重、4.5mg/kg体重、4.6mg/kg体重、4.7mg/kg体重、4.8mg/kg体重、4.9mg/kg体重、5.0mg/kg体重、5.1mg/kg体重、5.2mg/kg体重、5.3mg/kg体重、5.4mg/kg体重、5.5mg/kg体重、5.6mg/kg体重、5.7mg/kg体重、5.8mg/kg体重、5.9mg/kg体重、6.0mg/kg体重、6.1mg/kg体重、6.2mg/kg体重、6.3mg/kg体重、6.4mg/kg体重、6.5mg/kg体重、6.6mg/kg体重、6.7mg/kg体重、6.8mg/kg体重、6.9mg/kg体重、7.0mg/kg体重、7.1mg/kg体重、7.2mg/kg体重、7.3mg/kg体重、7.4mg/kg体重、7.5mg/kg体重、7.6mg/kg体重、7.7mg/kg体重、7.8mg/kg体重、7.9mg/kg体重、8.0mg/kg体重、8.1mg/kg体重、8.2mg/kg体重、8.3mg/kg体重、8.4mg/kg体重、8.5mg/kg体重、8.6mg/kg体重、8.7mg/kg体重、8.8mg/kg体重、8.9mg/kg体重、9.0mg/kg体重、9.1mg/kg体重、9.2mg/kg体重、9.3mg/kg体重、9.4mg/kg体重、9.5mg/kg体重、9.6mg/kg体重、9.7mg/kg体重、9.8mg/kg体重、9.9mg/kg体重、10.0mg/kg体重、10.1mg/kg体重、10.2mg/kg体重、10.3mg/kg体重、10.4mg/kg体重、10.5mg/kg体重、10.6mg/kg体重、10.7mg/kg体重、10.8mg/kg体重、10.9mg/kg体重、11.0mg/kg体重、11.1mg/kg体重、11.2mg/kg体重、11.3mg/kg体重、11.4mg/kg体重、11.5mg/kg体重、11.6mg/kg体重、11.7mg/kg体重、11.8mg/kg体重、11.9mg/kg体重、12.0mg/kg体重、12.1mg/kg体重、12.2mg/kg体重、12.3mg/kg体重、12.4mg/kg体重、12.5mg/kg体重、12.6mg/kg体重、12.7mg/kg体重、12.8mg/kg体重、12.9mg/kg体重、13.0mg/kg体重、13.1mg/kg体重、13.2mg/kg体重、13.3mg/kg体重、13.4mg/kg体重、13.5mg/kg体重、13.6mg/kg体重、13.7mg/kg体重、13.8mg/kg体重、13.9mg/kg体重、14.0mg/kg体重、14.1mg/kg体重、14.2mg/kg体重、14.3mg/kg体重、14.4mg/kg体重、14.5mg/kg体重、14.6mg/kg体重、14.7mg/kg体重、14.8mg/kg体重、14.9mg/kg体重、15.0mg/kg体重、15.1mg/kg体重、15.2mg/kg体重、15.3mg/kg体重、15.4mg/kg体重、15.5mg/kg体重、15.6mg/kg体重、15.7mg/kg体重、15.8mg/kg体重、15.9mg/kg体重、16.0mg/kg体重、16.1mg/kg体重、16.2mg/kg体重、16.3mg/kg体重、16.4mg/kg体重或16.5mg/kg体重的剂量施用，其中mg是指缀合物中存在的IGF-1R配体的量。

在一些实施例中，本发明的缀合物以约0.05-0.5mg/kg体重、0.5-1.0mg/kg体重、1.0-1.5mg/kg体重、1.5-2.0mg/kg体重、2.0-2.5mg/kg体重、2.5-3.0mg/kg体重、3.0-3.5mg/kg体重、3.5-4.0mg/kg体重、4.0-4.5mg/kg体重、4.5-5.0mg/kg体重、5.0-5.5mg/kg体重、5.5-6.0mg/kg体重、6.0-6.5mg/kg体重、6.5-7.0mg/kg体重、7.0-7.5mg/kg体重、7.5-8.0mg/kg体重、8.0-8.5mg/kg体重、8.5-9.0mg/kg体重、9.0-9.5mg/kg体重、9.5-10.0mg/kg体重、10.0-10.5mg/kg体重、10.5-11.0mg/kg体重、11.0-11.5mg/kg体重、11.5-12.0mg/kg体重、12.0-12.5mg/kg体重、12.5-13.0mg/kg体重、13.0-13.5mg/kg体重、13.5-14.0mg/kg体重、14.0-14.5mg/kg体重、14.5-15.0mg/kg体重、15.0-15.5mg/kg体重、15.5-16.0mg/kg体重或16.0-16.5mg/kg体重的剂量范围施用，其中mg是指缀合物中存在的IGF-1R配体的量。

在一些实施例中，本发明的缀合物以最大耐受剂量(MTD)给药。如本文所用，“MTD”是指单个患者可以耐受的药剂的最高剂量。换言之，给定患者的副作用可以决MTD。副作用可能会限制施用比最大耐受剂量高的治疗剂量的能力。因此，给定患者的MTD可能低于治疗的处方信息中所指示的剂量或临床实践中通常使用的剂量。MTD在患者中可能具有有限的临床功效或没有临床功效。

在一些实施例中，每天、每隔一天、每三天、每四天、每五天、每六天、每周一次、每两周一次、每三周一次、每四周一次、每月一次、每两个月一次或每三个月一次施用本发明的缀合物。

可以通过任何方便的途径(例如通过输注或团注注射、通过上皮或皮肤粘膜内层(例如，口腔粘膜、直肠和肠粘膜等)吸收)施用本发明的缀合物。施用可以是全身性的或局部的。各种递送系统是已知的，例如微粒、微胶囊、胶囊等，并且可以用于施用本发明的组合物。施用方法可以包括但不限于口服施用和肠胃外施用；肠胃外施用，包括但不限皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内、皮下；鼻内、硬膜外、舌下、鼻内、脑内、心室内、鞘内、阴道内、经皮、直肠、通过吸入、或局部施用于耳、鼻、眼或皮肤。施用模式由执业者决定，并且将部分取决于医疗病状的部位。

在一些实施例中，肠胃外施用本发明的组合物。在一些实施例中，静脉内施用本发明的组合物。在另一个实施例中，通过连续输注施用本发明的组合物。在一特定实施例中，通过持续15分钟、20分钟、30分钟、45分钟、1小时或2小时的输注来施用本发明的组合物。

在一些实施例中，可能期望将本发明的一种或多种组合物局部施用于需要治疗的区域。这可以例如但不限于通过以下来实现：外科手术期间的局部输注；局部施涂，例如在外科手术后与伤口敷料结合；通过注射；借助于导管；借助于栓剂；或借助于植入物，所述植入物是多孔材料、无孔材料或胶质材料，包括如硅橡胶膜等膜或纤维。在某些实施例中，可以腹膜内注射本发明的一种或多种组合物。

在又另一个实施例中，可以在受控释放系统中递送本发明的组合物。

在一些实施例中，可以使用泵来递送本发明的组合物(参见例如Sefton,《生物医学工程评论综述(CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.)》1987,14,201；Buchwald等人,《外科手术(Surgery)》1980,88:507；Saudek等人,《新英格兰医学杂志(N.Engl.J.Med.)》1989,321:574)。在一些实施例中，泵可以是但不限于胰岛素样泵。

在一些实施例中，本发明的缀合物是静脉内、皮下、通过玻璃体内注射、通过眶内注射或通过眼滴剂施用的。

在一些实施例中，本发明的方法不会在所述受试者中引起不可接受的高血糖。高血糖(hyperglycemia)是高血糖(high blood glucose)的另一个术语，并且可能在体内的胰岛素不足或身体不可以正确使用胰岛素时发生。不可接受的高血糖是指由治疗医师确定的3级或更高级的副作用，和/或不可以用糖尿病药物控制并且导致用本发明的缀合物进行的治疗终止的副作用。

患者群体

TED是具有两个不同阶段的渐进病状。第一阶段是以软组织扩张为特征并且持续6个月至3年的任何时间的急性或活动性炎症阶段。第二阶段是以纤维化和炎症减少为特征的慢性或非活动性阶段。在一些实施例中，向被诊断为患有活动性TED、急性TED、非活动性TED或慢性TED的受试者施用本发明的缀合物。

在一些实施例中，向被诊断为患有中度至重度TED或威胁视力的(非常严重的)TED的受试者施用本发明的缀合物。中度至重度TED包括未患有威胁视力的疾病但其眼病足以影响日常生活以解释免疫抑制(在活动性疾病的情况下)或外科手术干预(在非活动性疾病的情况下)的风险的患者。这些患者通常具有以下中的两种或更多种：睑退缩≥2mm、中度或重度软组织受累、在种族和性别方面眼球突出比正常水平高≥3mm以及非持续性或持续性复视。威胁视力的TED包括患有甲状腺机能障碍视神经病变和/或角膜破裂的患者。参见Bartalena等人《分子内分泌学杂志》185(4):G43-G67(2021)。

在一些实施例中，患有TED的受试者患有格雷夫斯氏甲状腺机能亢进(Grave'shyperthyroidism)和/或其CAS为至少3或至少4。

在一些实施例中，患有根据本文所述的方法治疗的眼睛的炎性病状的受试者先前未接受针对眼睛的炎性病状的治疗。在一些实施例中，患有根据本文所述的方法治疗的眼睛的炎性病状的受试者先前已接受针对眼睛的炎性病状的治疗。

在一些实施例中，先前治疗包含向受试者施用IGF-1R抑制剂。

在一些实施例中，IGF-1R抑制剂是抗体。在一具体实施例中，抗体是替妥木单抗、加尼妥单抗、芬妥木单抗、MEDI-573、西妥木单抗、达雷妥尤单抗、罗妥木单抗、AVE1642、BIIB022、珍妥珠单抗、艾司妥单抗、罗尼妥单抗、VB421、VRDN-001、VRDN-002或VRDN-003。

在一些实施例中，所述先前治疗包含施用靶向新生儿Fc受体(FcRn)的抗体或抗体片段。在一具体实施例中，抗体是巴托利单抗、IMVT-1402或艾加莫德。

在一些实施例中，先前治疗包含施用靶向IL-6的抗体。在一具体实施例中，所述抗体是TOUR006。

在一些实施例中，IGF-1R抑制剂是小分子。在一具体实施例中，所述小分子是林西替尼、苦鬼臼毒素、AXL1717、BMS-754807、BMS-536924、BMS-554417、GSK1838705A、GSK1904529A、NVP-AEW541、NVP-ADW742、GTx-134、AG1024、KW-2450、PL-2258、NVP-AEW541、NSM-18、AZD3463、AZD9362、BI885578、BI893923、TT-100、XL-228或A-928605。

在一些实施例中，所述IGF-1R抑制剂是放射性免疫缀合物。在一具体实施例中，所述放射性免疫缀合物是FPI-1434。

在一些实施例中，所述IGF-1R抑制剂是抗体-药物缀合物。在一具体实施例中，所述抗体-药物缀合物是W0101。

在一些实施例中，受试者已从针对眼睛的炎性病状的先前治疗中复发。

在一些实施例中，受试者对针对眼睛的炎性病状的先前治疗来说是难治性的。如本文所用，如果受试者未能实现对疗法的应答，使得所述疗法被确定为在治疗上无效(如：未能达到临床终点(包括任何应答)、应答持续时间延长、无疾病生存期、无复发生存期和无进展生存期延长)，则所述受试者对先前治疗来说是“难治性”的。

本文所描述的主题包括但不限于以下实施例：

1.一种用于治疗受试者的眼睛的炎性病状的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的缀合物，其中所述缀合物包含(i)胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)配体或其一部分或变体，以及(ii)疾病缓解剂。

2.根据实施例1所述的方法，其中所述眼睛的炎性病状是甲状腺眼病(TED)、葡萄膜炎、巩膜炎、角膜炎、结膜炎或眼眶炎性疾病。

3.根据实施例2所述的方法，其中所述眼眶炎性疾病是特发性眼眶炎症、眼眶炎性假瘤、眼眶肌炎、炎性眼眶蜂窝织炎、视神经周围炎、巩膜周围炎、弥漫性眼眶炎症、眼眶根尖炎或硬化性眼眶炎症。

4.实施例2，其中所述眼睛的炎性病状是TED。

5.根据实施例4所述的方法，其中所述TED是活动性TED、急性TED、非活动性TED、慢性TED、中度至重度TED和威胁视力的(非常严重的)TED。

6.根据实施例4或5所述的方法，其中所述治疗使所述受试者的眼球突出减小。

7.根据实施例6所述的方法，其中眼球突出减小了至少2mm、至少3mm或至少4mm。

8.根据实施例6或7所述的方法，其中所述眼球突出的减小是通过眼球突度计或眼眶成像评估的。

9.根据实施例8所述的方法，其中所述眼眶成像是计算机断层摄影(CT)扫描或磁共振成像。

10.根据实施例6至9中任一项所述的方法，其中所述眼球突出的减小与眼外肌肉体积和/或眼眶脂肪体积的减小相关。

11.根据实施例4至10中任一项所述的方法，其中所述治疗使所述受试者的临床活动性评分(CAS)降低。

12.根据实施例11所述的方法，其中所述CAS降低了至少2分或至少3分。

13.根据实施例11所述的方法，其中所述CAS降低到1分或降低到0分。

14.根据实施例4至13中任一项所述的方法，其中所述治疗使所述受试者的复视的严重程度降低。

15.根据实施例14所述的方法，其中所述复视的严重程度的降低是通过戈尔曼主观复视评分测量的。

16.根据实施例14或15所述的方法，其中所述复视是持续性复视、间歇性复视或非持续性复视。

17.根据实施例14至16中任一项所述的方法，其中所述治疗使复视完全消退。

18.根据实施例15至17中任一项所述的方法，其中所述受试者的复视的严重程度降低了至少一个等级。

19.根据实施例4至18中任一项所述的方法，其中所述治疗使所述受试者的生活质量提高。

20.根据实施例19所述的方法，其中所述生活质量的提高是通过格雷夫斯氏眼病生活质量(GO-QoL)评估量表、或GO-QoL的视觉功能子量表或外观子量表的提高来测量的。

21.根据实施例20所述的方法，其中在所述GO-QoL量表或所述GO-QoL的视觉功能子量表或所述GO-QoL的外观子量表上，生活质量提高了至少8分。

22.根据实施例4至21中任一项所述的方法，其中所述治疗使视神经病变改善。

23.根据实施例4至22中任一项所述的方法，其中所述治疗使眶后水肿减少。

24.根据实施例4至23中任一项所述的方法，其中所述治疗使单目转向得以改善。

25.根据实施例24所述的方法，其中所述单目转向的改善是通过光反射测试测量的。

26.根据实施例25所述的方法，其中所述改善为至少10度。

27.根据实施例1至26中任一项所述的方法，其中所述治疗导致所述受试者的表达IGF-1R的细胞的功能改变或损伤。

28.根据实施例1至26中任一项所述的方法，其中所述治疗使得所述受试者的表达IGF-1R的细胞的数量减少。

29.根据实施例28所述的方法，其中所述减少是由对所述表达IGF-1R的细胞的杀伤引起的。

30.根据实施例27至29中任一项所述的方法，其中所述表达IGF-1R的细胞是眼眶成纤维细胞(OF)。

31.根据实施例4至30中任一项所述的方法，其中所述治疗使眶后空间中的透明质烷合成减少或受到抑制。

32.根据实施例4至31中任一项所述的方法，其中所述治疗使所述受试者的所述眶后空间中的脂肪生成减少或受到抑制。

33.根据实施例4至32中任一项所述的方法，其中所述治疗使所述受试者的血清中的白介素(IL)-6、IL-16和/或RANTES的水平降低。

34.根据实施例27至29中任一项所述的方法，其中所述表达IGF-1R的细胞是纤维细胞、B淋巴细胞和/或T淋巴细胞。

35.根据实施例1至34中任一项所述的方法，其中相对于通过来自健康受试者或未被诊断为患有所述眼睛的炎性病状的受试者的眶后空间细胞的表达，IGF-1R通过所述受试者的眶后空间细胞过表达。

36.根据实施例1至34中任一项所述的方法，其中所述受试者的表达IGF-1R的细胞的频率相对于来自健康受试者或未被诊断为患有所述眼睛的炎性病状的受试者的表达IGF-1R的细胞的频率有所增加。

37.根据实施例36所述的方法，其中所述表达IGF-1R的细胞的所述频率是通过流式细胞术或免疫组织化学测量的。

38.根据实施例1至37中任一项所述的方法，其中所述治疗使所述受试者的疾病得以缓解。

39.根据实施例1至38中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体包含野生型胰岛素样生长因子1(IGF-1)(SEQ ID NO:3)、野生型胰岛素(SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11)或野生型胰岛素样生长因子2(IGF-2)(SEQ ID NO:12)。

40.根据实施例1至38中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体包含野生型IGF-1(SEQ ID NO:3)的变体、野生型胰岛素(SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11)的变体或野生型IGF-2(SEQ ID NO:12)的变体。

41.根据实施例40所述的方法，其中所述野生型IGF-1的变体与IGF-1(SEQ ID NO:3)至少90％相同，所述野生型胰岛素的变体与胰岛素(SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11)至少90％相同，或者所述野生型IGF-2的变体与IGF-2(SEQ ID NO:12)至少90％相同。

42.根据实施例40或41所述的方法，其中：(i)所述IGF-1的变体对胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)的结合亲和力相较于野生型IGF-1(SEQ ID NO:3)对所述IGFBP的结合亲和力有所降低，或所述IGF-2的变体对IGFBP的结合亲和力相较于野生型IGF-2(SEQ IDNO:12)对所述IGFBP的结合亲和力有所降低，和/或(ii)所述IGF-1的变体对所述IGF-1R的亲和力相较于野生型IGF-1(SEQ ID NO:3)对所述IGF-1R的亲和力有所增加，或所述IGF-2的变体对所述IGF-1R的亲和力相较于野生型IGF-2(SEQ ID NO:12)对所述IGF-1R的亲和力有所增加。

43.根据实施例1至38或实施例40至42中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体包含765IGF(SEQ ID NO:2)、IGF-132(SEQ ID NO:4)、long-R3-IGF-1(SEQ ID NO:5)、R3-IGF-1(SEQ ID NO:6)、des(1-3)-IGF-1(SEQ ID NO:7)、long-IGF-1(SEQ ID NO:8)或long-G3-IGF-1(SEQ ID NO:9)。

44.根据实施例1至43中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体或其一部分或变体包含前导序列。

45.根据实施例44所述的方法，其中所述前导序列包含SEQ ID NO:1。

46.根据实施例43至45中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体包含765IGF(SEQ ID NO:2)。

47.根据实施例1至46中任一项所述的方法，其中所述疾病缓解剂包含细胞毒性剂。

48.根据实施例47所述的方法，其中所述细胞毒性剂包含化学治疗剂。

49.根据实施例48所述的方法，其中所述化学治疗剂是安吖啶、氮杂胞苷、博来霉素、白消安、卡培他滨、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、环磷酰胺、阿糖孢苷、更生霉素、柔红霉素、达卡巴嗪、多西他赛、阿霉素、表柔比星、雌莫司汀、依托泊苷、氟尿苷、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、六甲嘧胺、伊达比星、异环磷酰胺、依立替康、洛莫司汀、氮芥、美法仑、巯嘌呤、甲氨喋呤、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、奥沙利铂、紫杉醇、培美曲塞、喷司他丁、普卡霉素、丙卡巴肼、雷替曲塞、司莫司汀、链脲菌素、替莫唑胺、替尼泊苷、硫鸟嘌呤、噻替派、拓扑替康、三甲曲沙、戊柔比星、长春新碱、长春花碱、长春地辛或长春瑞滨。

50.根据实施例49所述的方法，其中所述化学治疗剂是甲氨喋呤。

51.根据实施例47所述的方法，其中所述细胞毒性剂包含毒素。

52.根据实施例51所述的方法，其中所述毒素包含产气荚膜梭菌肠毒素、白喉毒素、蓖麻毒蛋白链A、假单胞菌外毒素、A链毒素、核糖体失活蛋白、α-帚曲毒蛋白、曲霉菌素或核糖核酸酶。

53.根据实施例52所述的方法，其中所述毒素包含产气荚膜梭菌肠毒素或其一部分或变体。

54.根据实施例53所述的方法，其中所述缀合物包含SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:15。

55.根据实施例52所述的方法，其中所述毒素包含白喉毒素或其一部分或变体。

56.根据实施例55所述的方法，其中所述缀合物包含SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:16。

57.根据实施例1至46中任一项所述的方法，其中所述疾病缓解剂选自：糖皮质激素(地塞米松)；皮质类固醇(甲基强的松、强的松、醋酸曲安奈德)；促甲状腺激素受体(TSHR)抑制剂；吗替麦考酚酯；辛伐他汀；甲福明；苯乙福明；环孢素；雷帕霉素或其它雷帕霉素哺乳动物靶蛋白(mTOR)抑制剂；或硫唑嘌呤。

58.根据实施例4至57中任一项所述的方法，其中所述受试者(i)患有格雷夫斯氏甲状腺机能亢进和/或(ii)其CAS为至少3或至少4。

59.根据实施例1至58中任一项所述的方法，其中所述受试者(i)先前未接受针对所述眼睛的炎性病状的治疗；(ii)先前已接受针对所述眼睛的炎性病状的治疗；(iii)从针对所述眼睛的炎性病状进行的先前治疗中复发；或(iv)对针对所述眼睛的炎性病状进行的先前治疗来说是难治性的。

60.根据实施例59所述的方法，其中所述先前治疗包含向所述受试者施用IGF-1R抑制剂。

61.根据实施例60所述的方法，其中所述IGF-1R抑制剂是抗体。

62.根据实施例61所述的方法，其中所述抗体是替妥木单抗、加尼妥单抗、芬妥木单抗、MEDI-573、西妥木单抗、达雷妥尤单抗、罗妥木单抗、AVE1642、BIIB022、珍妥珠单抗、艾司妥单抗、罗尼妥单抗、VB421、VRDN-001、VRDN-002或VRDN-003。

63.根据实施例60所述的方法，其中所述IGF-1R抑制剂是小分子。

64.根据实施例63所述的方法，其中所述小分子是林西替尼、苦鬼臼毒素、AXL1717、BMS-754807、BMS-536924、BMS-554417、GSK1838705A、GSK1904529A、NVP-AEW541、NVP-ADW742、GTx-134、AG1024、KW-2450、PL-2258、NVP-AEW541、NSM-18、AZD3463、AZD9362、BI885578、BI893923、TT-100、XL-228或A-928605。

65.根据实施例60所述的方法，其中所述IGF-1R抑制剂是放射性免疫缀合物。

66.根据实施例65所述的方法，其中放射性免疫缀合物是FPI-1434。

67.根据实施例60所述的方法，其中所述IGF-1R抑制剂是抗体-药物缀合物。

68.根据实施例67所述的方法，其中抗体-药物缀合物是W0101。

69.根据实施例1至68中任一项所述的方法，其中所述缀合物与一种或多种其它疗法组合施用。

70.根据实施例69所述的方法，其中所述一种或多种其它疗法包含以下中的一种或多种：糖皮质激素(地塞米松)；皮质类固醇(甲基强的松、强的松、乙酸曲安奈德)；利妥昔单抗或其它抗CD20抗体；托珠单抗、TOUR006或其它抗IL-6抗体；硒；英夫利昔单抗、阿达木单抗或其它抗肿瘤坏死因子(TNF)α抗体；TSHR抑制剂；眼眶放射疗法；血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂；吗替麦考酚酯；伊卡利单抗或其它抗CD40抗体；IMVT-1401、巴托利单抗、艾加莫德或其它片段可结晶新生儿受体(FcRN)抑制剂；辛伐他汀；甲福明；苯乙福明；环孢素；硫唑嘌呤；甲氨喋呤；雷帕霉素或其它mTOR抑制剂；和/或静脉内免疫球蛋白治疗。

71.根据实施例1至50或实施例57中任一项所述的方法，其中所述缀合物以约0.05μEq/kg体重、0.10μEq/kg体重、0.20μEq/kg体重、0.40μEq/kg体重、0.80μEq/kg体重、1.0μEq/kg体重、1.5μEq/kg体重、1.6μEq/kg体重、2.0μEq/kg体重、2.5μEq/kg体重、3.0μEq/kg体重、3.5μEq/kg体重、4.0μEq/kg体重、4.5μEq/kg体重、5.0μEq/kg体重、5.5μEq/kg体重、6.0μEq/kg体重、6.5μEq/kg体重、7.0μEq/kg体重、7.5μEq/kg体重、8.0μEq/kg体重、8.5μEq/kg体重、9.0μEq/kg体重、9.5μEq/kg体重或10.0μEq/kg体重的剂量或约0.05-0.5μEq/kg体重、0.5-1.0μEq/kg体重、1.0-1.5μEq/kg体重、1.5-2.0μEq/kg体重、2.0-2.5μEq/kg体重、2.5-3.0μEq/kg体重、3.0-3.5μEq/kg体重、3.5-4.0μEq/kg体重、4.0-4.5μEq/kg体重、4.5-5.0μEq/kg体重、5.0-5.5μEq/kg体重、5.5-6.0μEq/kg体重、6.0-6.5μEq/kg体重、6.5-7.0μEq/kg体重、7.0-7.5μEq/kg体重、7.5-8.0μEq/kg体重、8.0-8.5μEq/kg体重、8.5-9.0μEq/kg体重、9.0-9.5μEq/kg体重或9.5-10.0μEq/kg体重的剂量范围施用。

72.根据实施例1至71中任一项所述的方法，其中所述缀合物以约0.05mg/kg体重、0.10mg/kg体重、0.15mg/kg体重、0.20mg/kg体重、0.25mg/kg体重、0.30mg/kg体重、0.35mg/kg体重、0.40mg/kg体重、0.45mg/kg体重、0.50mg/kg体重、0.55mg/kg体重、0.60mg/kg体重、0.65mg/kg体重、0.70mg/kg体重、0.75mg/kg体重、0.80mg/kg体重、0.85mg/kg体重、0.90mg/kg体重、0.95mg/kg体重、1.0mg/kg体重、1.1mg/kg体重、1.2mg/kg体重、1.3mg/kg体重、1.4mg/kg体重、1.5mg/kg体重、1.6mg/kg体重、1.7mg/kg体重、1.8mg/kg体重、1.9mg/kg体重、2.0mg/kg体重、2.1mg/kg体重、2.2mg/kg体重、2.3mg/kg体重、2.4mg/kg体重、2.5mg/kg体重、2.6mg/kg体重、2.7mg/kg体重、2.8mg/kg体重、2.9mg/kg体重、3.0mg/kg体重、3.1mg/kg体重、3.2mg/kg体重、3.3mg/kg体重、3.4mg/kg体重、3.5mg/kg体重、3.6mg/kg体重、3.7mg/kg体重、3.8mg/kg体重、3.9mg/kg体重、4.0mg/kg体重、4.1mg/kg体重、4.2mg/kg体重、4.3mg/kg体重、4.4mg/kg体重、4.5mg/kg体重、4.6mg/kg体重、4.7mg/kg体重、4.8mg/kg体重、4.9mg/kg体重、5.0mg/kg体重、5.1mg/kg体重、5.2mg/kg体重、5.3mg/kg体重、5.4mg/kg体重、5.5mg/kg体重、5.6mg/kg体重、5.7mg/kg体重、5.8mg/kg体重、5.9mg/kg体重、6.0mg/kg体重、6.1mg/kg体重、6.2mg/kg体重、6.3mg/kg体重、6.4mg/kg体重、6.5mg/kg体重、6.6mg/kg体重、6.7mg/kg体重、6.8mg/kg体重、6.9mg/kg体重、7.0mg/kg体重、7.1mg/kg体重、7.2mg/kg体重、7.3mg/kg体重、7.4mg/kg体重、7.5mg/kg体重、7.6mg/kg体重、7.7mg/kg体重、7.8mg/kg体重、7.9mg/kg体重、8.0mg/kg体重、8.1mg/kg体重、8.2mg/kg体重、8.3mg/kg体重、8.4mg/kg体重、8.5mg/kg体重、8.6mg/kg体重、8.7mg/kg体重、8.8mg/kg体重、8.9mg/kg体重、9.0mg/kg体重、9.1mg/kg体重、9.2mg/kg体重、9.3mg/kg体重、9.4mg/kg体重、9.5mg/kg体重、9.6mg/kg体重、9.7mg/kg体重、9.8mg/kg体重、9.9mg/kg体重、10.0mg/kg体重、10.1mg/kg体重、10.2mg/kg体重、10.3mg/kg体重、10.4mg/kg体重、10.5mg/kg体重、10.6mg/kg体重、10.7mg/kg体重、10.8mg/kg体重、10.9mg/kg体重、11.0mg/kg体重、11.1mg/kg体重、11.2mg/kg体重、11.3mg/kg体重、11.4mg/kg体重、11.5mg/kg体重、11.6mg/kg体重、11.7mg/kg体重、11.8mg/kg体重、11.9mg/kg体重、12.0mg/kg体重、12.1mg/kg体重、12.2mg/kg体重、12.3mg/kg体重、12.4mg/kg体重、12.5mg/kg体重、12.6mg/kg体重、12.7mg/kg体重、12.8mg/kg体重、12.9mg/kg体重、13.0mg/kg体重、13.1mg/kg体重、13.2mg/kg体重、13.3mg/kg体重、13.4mg/kg体重、13.5mg/kg体重、13.6mg/kg体重、13.7mg/kg体重、13.8mg/kg体重、13.9mg/kg体重、14.0mg/kg体重、14.1mg/kg体重、14.2mg/kg体重、14.3mg/kg体重、14.4mg/kg体重、14.5mg/kg体重、14.6mg/kg体重、14.7mg/kg体重、14.8mg/kg体重、14.9mg/kg体重、15.0mg/kg体重、15.1mg/kg体重、15.2mg/kg体重、15.3mg/kg体重、15.4mg/kg体重、15.5mg/kg体重、15.6mg/kg体重、15.7mg/kg体重、15.8mg/kg体重、15.9mg/kg体重、16.0mg/kg体重、16.1mg/kg体重、16.2mg/kg体重、16.3mg/kg体重、16.4mg/kg体重或16.5mg/kg体重的剂量或约0.05-0.5mg/kg体重、0.5-1.0mg/kg体重、1.0-1.5mg/kg体重、1.5-2.0mg/kg体重、2.0-2.5mg/kg体重、2.5-3.0mg/kg体重、3.0-3.5mg/kg体重、3.5-4.0mg/kg体重、4.0-4.5mg/kg体重、4.5-5.0mg/kg体重、5.0-5.5mg/kg体重、5.5-6.0mg/kg体重、6.0-6.5mg/kg体重、6.5-7.0mg/kg体重、7.0-7.5mg/kg体重、7.5-8.0mg/kg体重、8.0-8.5mg/kg体重、8.5-9.0mg/kg体重、9.0-9.5mg/kg体重、9.5-10.0mg/kg体重、10.0-10.5mg/kg体重、10.5-11.0mg/kg体重、11.0-11.5mg/kg体重、11.5-12.0mg/kg体重、12.0-12.5mg/kg体重、12.5-13.0mg/kg体重、13.0-13.5mg/kg体重、13.5-14.0mg/kg体重、14.0-14.5mg/kg体重、14.5-15.0mg/kg体重、15.0-15.5mg/kg体重、15.5-16.0mg/kg体重或16.0-16.5mg/kg体重的剂量范围施用。

73.根据实施例1至70中任一项所述的方法，其中所述缀合物以作为最大耐受剂量的剂量施用。

74.根据实施例1至73中任一项所述的方法，其中所述缀合物每天、每隔一天、每三天、每四天、每五天、每六天、每周一次、每两周一次、每三周一次、每四周一次、每月一次、每两个月一次或每三个月一次施用。

75.根据实施例1至74中任一项所述的方法，其中所述缀合物是静脉内、皮下、通过玻璃体内注射、通过眶内注射或通过眼滴剂施用的。

76.根据实施例1至75中任一项所述的方法，其中所述方法不会在所述受试者中引起不可接受的高血糖。

77.一种用于治疗受试者的TED的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的缀合物，其中所述缀合物包含(i)765IGF(SEQ ID NO:2)以及(ii)甲氨喋呤。

以下实例以说明性方式而不是以限制性方式提供。

实例

实例1：评估LX-101对TED眼眶成纤维细胞的功效

LX-101是IGF-1R配体(SEQ ID NO:2)与甲氨喋呤的缀合物，所述甲氨蝶呤是众所周知的二氢叶酸还原酶抑制剂，其最终抑制核苷酸合成。在不希望受理论束缚的情况下，LX-101可以将甲氨喋呤递送到过表达涉及TED的病理学的IGF-1R的细胞，并降低其活力和增殖。从患有TED的经历眼眶减压外科手术的患者中获得原发性眼眶成纤维细胞(OF)，并且将所述OF与LX-101一起在至多2500nM的剂量范围(以IGF-1蛋白表示)内培养。为了进行比较，将一些OF用IGF-1进行处理以激活典型IGF-1R信号传导。使用阿尔玛蓝(Alamar blueassay)测定或本领域已知的任何活力测定来确定活力。使用BrdU掺入或本领域已知的任何增殖测定来确定增殖。

可以用细胞因子对OF进行处理以用于激活，所述细胞因子包括血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)和转化生长因子β(TGF-β)，所述PDGF-BB刺激OF增殖，所述TGF-β促进OF分化成肌成纤维细胞和疤痕组织形成。OF的另外的激活因子包括IL-1、IL-4、IL-6、IL-17、白介素、IGF-1、TNF-α、IFN-γ、CD40L、PPARγ激动剂和来自格雷夫斯氏病患者的自身抗体(例如，TSHR的自身抗体)。研究LX-101对经激活的OF的影响。在不希望受理论束缚的情况下，LX-101对与TED病理学相关的经激活的OF的影响可能更显著。

对于一种细胞活力测定，将OF铺板在具有培养基的黑色96孔板中，连同进行适当处理。使用嘌呤霉素(puromycin)作为细胞毒性的阳性对照。将细胞在处理的情况下温育一定时间段，然后将阿尔玛蓝试剂添加到每个孔中。温育后，测量经氧化的阿尔玛蓝试剂的荧光(激发，470nm；发射，480nm)，并且将所述荧光相对于经媒剂处理的细胞的荧光归一化。

对于一种细胞增殖测定，将OF菌株接种在96孔板中。将细胞在特定处理的情况下一式三份处理一定时间段(例如，2-14天)，之后在18至24小时内添加溴脱氧尿苷(BrdU)，并且使用BrdU细胞增殖测定试剂盒测量增殖。将样品固定并用抗BrdU抗体染色，与对应的辣根过氧化物酶(HRP)缀合的第二抗体一起温育，并使用微板读取器进行评估。

在不希望受理论束缚的情况下，LX-101可以减少由OF产生的透明质酸(HA)的产生，所述HA促成TED的病理学。为了检测和分析HA产生，在用LX-101处理后从OF中收集上清液，并且通过ELISA测量每个样品中的HA的量。

IL-6作为由淋巴细胞、单核细胞以及OF产生的促炎细胞因子以高浓度存在于TED患者中，并且在疾病的发病机制中起重要作用。在不希望受理论束缚的情况下，LX-101可以减少IL-6的产生。为了检测和分析IL-6产生，在用LX-101处理后从OF中收集上清液，并且通过ELISA测量每个样品中的IL-6的量。

在不希望受理论束缚的情况下，LX-101可以抑制OF的炎性表型。可以使用ELISA和蛋白质印迹(Western blot)来检测和分析炎症的分子介质(例如，COX-2)。

还可以研究和比较LX-101在来自非TED患者的OF和/或来自其它组织的成纤维细胞(例如，眼睑或真皮成纤维细胞)中的作用。

由于TED是涉及多种细胞的复杂疾病，因此研究了LX-101对在与免疫细胞的共培养物中生长的OF的影响。淋巴细胞在TED的早期阶段中起着重要作用，并且可以启动炎性过程和细胞因子产生。使OF在与来自TED患者的B细胞和/或T细胞的共培养物中生长，以研究LX-101对OF活力、增殖和表型的影响。

实例2：研究LX-101在TED OF中的作用机制

将来自患有TED的患者的原代OF培养并用不同剂量的LX-101(例如，2500-1.64nM，以IGF-1蛋白表示)处理一定时间段(例如，2-14天)。可以通过用对IGF-1R具有特异性的用于使IGF-1R耗竭的siRNA或非特异性siRNA对照对OF进行处理来研究LX-101靶向IGF-1R的特异性。在不希望受理论束缚的情况下，可以通过IGF-1R表达的耗竭来消除LX-101对OF的影响。

表征了LX-101与IGF-IR在TED OF上的结合亲和力以及与如IGF-1等内源配体的竞争。通过检测如PI3K、AKT、MAPK和JNK等细胞内信号传导蛋白的磷酸化(如通过蛋白质印迹)，确定LX-101对IGF-1R信号传导通路的影响。可以通过如上所述耗竭IGF-1R来确定LX-101靶向IGF-1R信号传导的特异性。另外，确定了LX-101是否诱导TED OF中的凋亡。

实例3：研究LX-101对从TED OF分化的脂肪细胞和肌成纤维细胞的影响

将来自患有TED的患者的原代OF用不同剂量的LX-101(例如，2500-1.64nM，以IGF-1蛋白表示)处理一定时间段(例如，2-14天)，并进一步培养，以分化为肌成纤维细胞或脂肪细胞。在添加和不添加IGF-1的情况下通过添加TGF-β来培养OF，以分化成肌成纤维细胞。通过蛋白质印迹和RT-qPCR(例如，用于如平滑肌肌动蛋白、胶原蛋白和纤连蛋白等靶标)、免疫荧光(例如，用于检测肌动蛋白丝形成、HA累积)和ELISA(HA产生)来测量肌成纤维细胞形成和激活在存在LX-101的情况下的影响。

另外，使用标准脂肪生成培养基来培养OF，以分化成脂肪细胞。通过对脂肪生成标志物(例如，FABP4、PPARγ、脂质累积)进行蛋白质印迹、RT-qPCR和免疫荧光来测量脂肪细胞形成。还测试了LX-101对来自对替妥木单抗无应答的患者的OF的影响。因此，研究了LX-101在靶向肌成纤维细胞和脂肪细胞分化中的作用。在不希望受理论束缚的情况下，LX-101可以抑制OF分化成肌成纤维细胞和脂肪细胞的能力，并且还可以直接抑制经分化的肌成纤维细胞和脂肪细胞的活力。

实例4：研究LX-101对来自TED患者的循环PBMC的活力的影响

获得来自患有TED的患者的外周血单核细胞(PBMC)，并且将所述PBMC用不同剂量的LX-101(例如，2500-1.64nM，以IGF-1蛋白表示)处理一定时间段(例如，2-14天)，并且通过流式细胞术进行评估。通过CD标志物(例如，纤维细胞的CD34、B细胞的CD20、T细胞的CD3和单核细胞的CD14)鉴定细胞。通过7-AAD染色或本领域已知的任何方法测量细胞活力，并且通过BrdU标记或本领域已知的任何方法测量增殖。

在一些PBMC培养物中，使用抗CD28/CD3磁珠和重组IL-2激活T细胞。用IGF-1+/-LX-101对经扩增的T细胞进行处理，并且测量活力和增殖。确定LX-101靶向TED的病理生理学中涉及的另外的细胞类型的能力。在不希望受理论束缚的情况下，LX-101可以抑制来自TED患者的纤维细胞、T细胞和B细胞的活力和/或增殖。另外，将确定LX-101是否靶向来自TED患者的T细胞中的IGF-1信号传导。

虽然已经做出了努力以确保关于使用的数字(例如，量、温度等)的准确性，但是一些实验误差和偏差应当被计算在内。

本领域的技术人员将认识到与本文所述的那些方法和材料类似或等效的许多方法和材料，所述方法和材料可以用于实践本文所述的主题。本公开决不仅限于所描述的方法和材料。

除非另外定义，否则本文使用的技术术语和科学术语具有与本主题所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。

贯穿本说明书和权利要求书，除非上下文另有要求，否则词语“包含(comprise)”、“包含(comprises)”和“包含(comprising)”在非排他性意义上使用。应当理解，本文所描述的实施例包括“由……组成”和/或“基本上由……组成”的实施例。

在提供了值范围的情况下，应当理解，在所述范围的上限与下限之间的每个中间值(到下限单位的十分之一，除非上下文清楚地另外指明)以及在所陈述范围内的任何其它所陈述的值或中间值均被涵盖在本发明之内。还涵盖了可以独立地包括在更小范围之内的这些小范围的上限和下限，这受制于所陈述的范围中的任何具体排除的极限。在所陈述的范围包括极限中的一个或两个极限的情况下，还包括排除那些被包括在内的极限中的任一个或两个极限的范围。

受益于前述描述和相关联的附图中呈现的教导，本发明所属领域的技术人员将想到本文所阐述的本发明的许多修改和其它实施例。因此，应当理解，本发明不限于所公开的具体实施例，并且修改和其它实施例旨在包括在所附权利要求的范围内。虽然本文中采用了特定术语，但所述术语仅在通用意义和描述性意义上使用，而不用于限制目的。

Claims (61)

1.一种用于治疗有需要的受试者的眼睛的炎性病状的方法，所述方法包含向所述受试者施用缀合物，所述缀合物包含胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)配体或其一部分或变体以及疾病缓解剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述眼睛的炎性病状选自由以下组成的组：甲状腺眼病(TED)、葡萄膜炎、巩膜炎、角膜炎、结膜炎和眼眶炎性疾病。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述眼眶炎性疾病选自由以下组成的组：特发性眼眶炎症、眼眶炎性假瘤、眼眶肌炎、炎性眼眶蜂窝织炎、视神经周围炎、巩膜周围炎、弥漫性眼眶炎症、眼眶根尖炎和硬化性眼眶炎症。

4.根据权利要求2所述的方法，其中所述眼睛的炎性病状是TED。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述TED选自由以下组成的组：活动性TED、急性TED、非活动性TED、慢性TED、中度至重度TED和威胁视力的TED。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其中所述方法使所述受试者的眼球突出减小。

7.根据权利要求6所述的方法，其中眼球突出减小了至少2mm、至少3mm或至少4mm。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其中所述眼球突出的减小是通过眼球突度计或眼眶成像评估的。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述眼眶成像是计算机断层摄影(CT)扫描或磁共振成像。

10.根据权利要求6至9中任一项所述的方法，其中所述眼球突出的减小与眼外肌肉体积的减小相关。

11.根据权利要求6至9中任一项所述的方法，其中所述眼球突出的减小与眼眶脂肪体积的减小相关。

12.根据权利要求4至11中任一项所述的方法，其中所述方法使所述受试者的临床活动性评分(CAS)降低。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述CAS降低了至少2分或至少3分。

14.根据权利要求12所述的方法，其中所述CAS降低到1分或降低到0分。

15.根据权利要求4至14中任一项所述的方法，其中所述方法使所述受试者的复视的严重程度降低。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述复视的严重程度的降低是通过戈尔曼主观复视评分(Gorman subjective diplopia score)测量的。

17.根据权利要求15或16所述的方法，其中所述复视选自由以下组成的组：持续性复视、间歇性复视和非持续性复视。

18.根据权利要求15至17中任一项所述的方法，其中所述方法使复视完全消退。

19.根据权利要求16至18中任一项所述的方法，其中所述受试者的复视的严重程度降低了至少一个等级。

20.根据权利要求4至19中任一项所述的方法，其中所述方法使所述受试者的生活质量提高。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述生活质量的提高是通过格雷夫斯氏眼病生活质量(Graves'Ophthalmopathy Quality of Life，GO-QoL)评估量表测量的。

22.根据权利要求20或21所述的方法，其中所述生活质量是通过所述GO-QoL的视觉功能子量表或外观子量表测量的。

23.根据权利要求21或22所述的方法，其中所述生活质量提高了至少8分。

24.根据权利要求4至23中任一项所述的方法，其中所述方法使视神经病变得以改善。

25.根据权利要求4至24中任一项所述的方法，其中所述方法使眶后水肿减少。

26.根据权利要求4至25中任一项所述的方法，其中所述方法使单目转向得以改善。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述单目转向的改善是通过光反射测试测量的。

28.根据权利要求27所述的方法，其中所述改善为至少10度。

29.根据权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述受试者的表达IGF-1R的细胞的数量减少。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述表达IGF-1R的细胞的数量的减少是通过流式细胞术或免疫组织化学测量的。

31.根据权利要求29或30所述的方法，其中所述表达IGF-1R的细胞是眼眶成纤维细胞(OF)。

32.根据权利要求4至31中任一项所述的方法，其中所述方法使眶后空间中的透明质烷合成减少或受到抑制。

33.根据权利要求4至32中任一项所述的方法，其中所述方法使所述受试者的所述眶后空间中的脂肪生成减少或受到抑制或脂肪细胞减少。

34.根据权利要求4至33中任一项所述的方法，其中所述方法使所述受试者的血清中的白介素(IL)-6、IL-16和/或RANTES的水平降低。

35.根据权利要求29或30所述的方法，其中所述表达IGF-1R的细胞选自由纤维细胞、B淋巴细胞和T淋巴细胞组成的组。

36.根据权利要求1至35中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体包含野生型胰岛素样生长因子1(IGF-1)、野生型胰岛素或野生型胰岛素样生长因子2(IGF-2)。

37.根据权利要求36所述的方法，其中所述野生型IGF-1包含SEQ ID NO:3，其中所述野生型胰岛素包含SEQ ID NO:10或11，并且其中所述野生型IGF-2包含SEQ ID NO:12。

38.根据权利要求1至37中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体包含野生型IGF-1的变体、野生型胰岛素的变体或野生型IGF-2的变体。

39.根据权利要求38所述的方法，其中所述野生型IGF-1的变体与SEQ ID NO:3至少90％相同，所述野生型胰岛素的变体与SEQ ID NO:10或11至少90％相同，并且所述野生型IGF-2的变体与SEQ ID NO:12至少90％相同。

40.根据权利要求38或39所述的方法，其中(i)所述野生型IGF-1的变体对胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)的结合亲和力相较于野生型IGF-1对所述IGFBP的结合亲和力有所降低，或所述野生型IGF-2的变体对IGFBP的结合亲和力相较于野生型IGF-2对所述IGFBP的结合亲和力有所降低，和/或(ii)所述野生型IGF-1的变体对所述IGF-1R的亲和力相较于野生型IGF-1对所述IGF-1R的亲和力有所增加，或所述野生型IGF-2的变体对所述IGF-1R的亲和力相较于野生型IGF-2对所述IGF-1R的亲和力有所增加。

41.根据权利要求1至40中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体或其一部分或变体包含前导序列。

42.根据权利要求41所述的方法，其中所述前导序列包含SEQ ID NO:1。

43.根据权利要求1至35和权利要求38至42中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体包含765IGF(SEQ ID NO:2)、IGF-132(SEQ ID NO:4)、long-R3-IGF-1(SEQ ID NO:5)、R3-IGF-1(SEQ ID NO:6)、des(1-3)-IGF-1(SEQ ID NO:7)、long-IGF-1(SEQ ID NO:8)或long-G3-IGF-1(SEQ ID NO:9)。

44.根据权利要求43所述的方法，其中所述IGF-1R配体包含765IGF(SEQ ID NO:2)。

45.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体或其一部分或变体与所述疾病缓解剂共价结合，其中所述疾病缓解剂包含细胞毒性剂。

46.根据权利要求45所述的方法，其中所述细胞毒性剂包含化学治疗剂。

47.根据权利要求46所述的方法，其中所述化学治疗剂是安吖啶(amuscarine)、氮杂胞苷(azacytidine)、博来霉素(bleomycin)、白消安(busulfan)、卡培他滨(capecitabine)、卡铂(carboplatin)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、顺铂(cisplatin)、克拉屈滨(cladribine)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、阿糖孢苷(cytarabine)、更生霉素(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、达卡巴嗪(dacarbazine)、多西他赛(docetaxel)、阿霉素(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、雌莫司汀(estramustine)、依托泊苷(etoposide)、氟尿苷(floxuridine)、氟达拉滨(fludarabine)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、吉西他滨(gemcitabine)、六甲嘧胺(hexamethylmelamine)、伊达比星(idarubicin)、异环磷酰胺(ifosfamide)、依立替康(irinotecan)、洛莫司汀(lomustine)、氮芥(mechlorethamine)、美法仑(melphalan)、巯嘌呤(mercaptopurine)、甲氨喋呤(methotrexate)、丝裂霉素C(mitomycin C)、米托坦(mitotane)、米托蒽醌(mitoxantrone)、奥沙利铂(oxaliplatin)、紫杉醇(paclitaxel)、培美曲塞(pemetrexed)、喷司他丁(pentostatin)、普卡霉素(plicamycin)、丙卡巴肼(procarbazine)、雷替曲塞(raltitrexed)、司莫司汀(semustine)、链脲菌素(streptozocin)、替莫唑胺(temozolamide)、替尼泊苷(teniposide)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、噻替派(thiotepa)、拓扑替康(topotecan)、三甲曲沙(trimetrexate)、戊柔比星(valrubicin)、长春新碱(vincristine)、长春花碱(vinblastine)、长春地辛(vindesine)或长春瑞滨(vinorelbine)。

48.根据权利要求47所述的方法，其中所述化学治疗剂是甲氨喋呤。

49.根据权利要求45所述的方法，其中所述细胞毒性剂包含毒素。

50.根据权利要求49所述的方法，其中所述毒素包含产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)肠毒素、白喉毒素、蓖麻毒蛋白链A、假单胞菌(Pseudomonas)外毒素、A链毒素、核糖体失活蛋白、α-帚曲毒蛋白、曲霉菌素或核糖核酸酶。

51.根据权利要求50所述的方法，其中所述毒素包含产气荚膜梭菌肠毒素或其一部分或变体。

52.根据权利要求51所述的方法，其中所述缀合物包含SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:15。

53.根据权利要求50所述的方法，其中所述毒素包含白喉毒素或其一部分或变体。

54.根据权利要求53所述的方法，其中所述毒素包含SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:16。

55.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述疾病缓解剂选自由以下组成的组：糖皮质激素、皮质类固醇、促甲状腺激素受体(TSHR)抑制剂、吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil)、辛伐他汀(simvastatin)、甲福明(metformin)、苯乙福明(phenformin)、环孢素、雷帕霉素、雷帕霉素哺乳动物靶蛋白(mTOR)抑制剂和硫唑嘌呤。

56.根据权利要求1至55中任一项所述的方法，其中所述缀合物以约0.05μEq/kg体重、0.10μEq/kg体重、0.20μEq/kg体重、0.40μEq/kg体重、0.80μEq/kg体重、1.0μEq/kg体重、1.5μEq/kg体重、1.6μEq/kg体重、2.0μEq/kg体重、2.5μEq/kg体重、3.0μEq/kg体重、3.5μEq/kg体重、4.0μEq/kg体重、4.5μEq/kg体重、5.0μEq/kg体重、5.5μEq/kg体重、6.0μEq/kg体重、6.5μEq/kg体重、7.0μEq/kg体重、7.5μEq/kg体重、8.0μEq/kg体重、8.5μEq/kg体重、9.0μEq/kg体重、9.5μEq/kg体重或10.0μEq/kg体重的剂量或约0.05-0.5μEq/kg体重、0.5-1.0μEq/kg体重、1.0-1.5μEq/kg体重、1.5-2.0μEq/kg体重、2.0-2.5μEq/kg体重、2.5-3.0μEq/kg体重、3.0-3.5μEq/kg体重、3.5-4.0μEq/kg体重、4.0-4.5μEq/kg体重、4.5-5.0μEq/kg体重、5.0-5.5μEq/kg体重、5.5-6.0μEq/kg体重、6.0-6.5μEq/kg体重、6.5-7.0μEq/kg体重、7.0-7.5μEq/kg体重、7.5-8.0μEq/kg体重、8.0-8.5μEq/kg体重、8.5-9.0μEq/kg体重、9.0-9.5μEq/kg体重或9.5-10.0μEq/kg体重的剂量范围施用。

57.根据权利要求1至56中任一项所述的方法，其中所述缀合物以约0.05mg/kg体重、0.10mg/kg体重、0.15mg/kg体重、0.20mg/kg体重、0.25mg/kg体重、0.30mg/kg体重、0.35mg/kg体重、0.40mg/kg体重、0.45mg/kg体重、0.50mg/kg体重、0.55mg/kg体重、0.60mg/kg体重、0.65mg/kg体重、0.70mg/kg体重、0.75mg/kg体重、0.80mg/kg体重、0.85mg/kg体重、0.90mg/kg体重、0.95mg/kg体重、1.0mg/kg体重、1.1mg/kg体重、1.2mg/kg体重、1.3mg/kg体重、1.4mg/kg体重、1.5mg/kg体重、1.6mg/kg体重、1.7mg/kg体重、1.8mg/kg体重、1.9mg/kg体重、2.0mg/kg体重、2.1mg/kg体重、2.2mg/kg体重、2.3mg/kg体重、2.4mg/kg体重、2.5mg/kg体重、2.6mg/kg体重、2.7mg/kg体重、2.8mg/kg体重、2.9mg/kg体重、3.0mg/kg体重、3.1mg/kg体重、3.2mg/kg体重、3.3mg/kg体重、3.4mg/kg体重、3.5mg/kg体重、3.6mg/kg体重、3.7mg/kg体重、3.8mg/kg体重、3.9mg/kg体重、4.0mg/kg体重、4.1mg/kg体重、4.2mg/kg体重、4.3mg/kg体重、4.4mg/kg体重、4.5mg/kg体重、4.6mg/kg体重、4.7mg/kg体重、4.8mg/kg体重、4.9mg/kg体重、5.0mg/kg体重、5.1mg/kg体重、5.2mg/kg体重、5.3mg/kg体重、5.4mg/kg体重、5.5mg/kg体重、5.6mg/kg体重、5.7mg/kg体重、5.8mg/kg体重、5.9mg/kg体重、6.0mg/kg体重、6.1mg/kg体重、6.2mg/kg体重、6.3mg/kg体重、6.4mg/kg体重、6.5mg/kg体重、6.6mg/kg体重、6.7mg/kg体重、6.8mg/kg体重、6.9mg/kg体重、7.0mg/kg体重、7.1mg/kg体重、7.2mg/kg体重、7.3mg/kg体重、7.4mg/kg体重、7.5mg/kg体重、7.6mg/kg体重、7.7mg/kg体重、7.8mg/kg体重、7.9mg/kg体重、8.0mg/kg体重、8.1mg/kg体重、8.2mg/kg体重、8.3mg/kg体重、8.4mg/kg体重、8.5mg/kg体重、8.6mg/kg体重、8.7mg/kg体重、8.8mg/kg体重、8.9mg/kg体重、9.0mg/kg体重、9.1mg/kg体重、9.2mg/kg体重、9.3mg/kg体重、9.4mg/kg体重、9.5mg/kg体重、9.6mg/kg体重、9.7mg/kg体重、9.8mg/kg体重、9.9mg/kg体重、10.0mg/kg体重、10.1mg/kg体重、10.2mg/kg体重、10.3mg/kg体重、10.4mg/kg体重、10.5mg/kg体重、10.6mg/kg体重、10.7mg/kg体重、10.8mg/kg体重、10.9mg/kg体重、11.0mg/kg体重、11.1mg/kg体重、11.2mg/kg体重、11.3mg/kg体重、11.4mg/kg体重、11.5mg/kg体重、11.6mg/kg体重、11.7mg/kg体重、11.8mg/kg体重、11.9mg/kg体重、12.0mg/kg体重、12.1mg/kg体重、12.2mg/kg体重、12.3mg/kg体重、12.4mg/kg体重、12.5mg/kg体重、12.6mg/kg体重、12.7mg/kg体重、12.8mg/kg体重、12.9mg/kg体重、13.0mg/kg体重、13.1mg/kg体重、13.2mg/kg体重、13.3mg/kg体重、13.4mg/kg体重、13.5mg/kg体重、13.6mg/kg体重、13.7mg/kg体重、13.8mg/kg体重、13.9mg/kg体重、14.0mg/kg体重、14.1mg/kg体重、14.2mg/kg体重、14.3mg/kg体重、14.4mg/kg体重、14.5mg/kg体重、14.6mg/kg体重、14.7mg/kg体重、14.8mg/kg体重、14.9mg/kg体重、15.0mg/kg体重、15.1mg/kg体重、15.2mg/kg体重、15.3mg/kg体重、15.4mg/kg体重、15.5mg/kg体重、15.6mg/kg体重、15.7mg/kg体重、15.8mg/kg体重、15.9mg/kg体重、16.0mg/kg体重、16.1mg/kg体重、16.2mg/kg体重、16.3mg/kg体重、16.4mg/kg体重或16.5mg/kg体重的剂量或约0.05-0.5mg/kg体重、0.5-1.0mg/kg体重、1.0-1.5mg/kg体重、1.5-2.0mg/kg体重、2.0-2.5mg/kg体重、2.5-3.0mg/kg体重、3.0-3.5mg/kg体重、3.5-4.0mg/kg体重、4.0-4.5mg/kg体重、4.5-5.0mg/kg体重、5.0-5.5mg/kg体重、5.5-6.0mg/kg体重、6.0-6.5mg/kg体重、6.5-7.0mg/kg体重、7.0-7.5mg/kg体重、7.5-8.0mg/kg体重、8.0-8.5mg/kg体重、8.5-9.0mg/kg体重、9.0-9.5mg/kg体重、9.5-10.0mg/kg体重、10.0-10.5mg/kg体重、10.5-11.0mg/kg体重、11.0-11.5mg/kg体重、11.5-12.0mg/kg体重、12.0-12.5mg/kg体重、12.5-13.0mg/kg体重、13.0-13.5mg/kg体重、13.5-14.0mg/kg体重、14.0-14.5mg/kg体重、14.5-15.0mg/kg体重、15.0-15.5mg/kg体重、15.5-16.0mg/kg体重或16.0-16.5mg/kg体重的剂量范围施用。

58.根据权利要求1至57中任一项所述的方法，其中所述缀合物以作为最大耐受剂量的剂量施用。

59.根据权利要求1至58中任一项所述的方法，其中所述缀合物每天、每隔一天、每三天、每四天、每五天、每六天、每周一次、每两周一次、每三周一次、每四周一次、每月一次、每两个月一次或每三个月一次施用。

60.根据权利要求1至59中任一项所述的方法，其中所述缀合物是静脉内、皮下、通过玻璃体内注射、通过眶内注射或通过眼滴剂施用的。

61.根据权利要求1至35和38至60中任一项所述的方法，其中所述IGF-1R配体是SEQ IDNO:2，所述细胞毒性剂是甲氨喋呤，其中SEQ ID NO:2的每种IGF-1R配体存在6个至10个甲氨喋呤分子，并且所述眼睛的炎性病状是TED。