CN117797137A - 桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物制备技术领域，具体公开了桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，通过建立慢性温和应激抑郁模型和皮质酮诱导抑郁模型，研究了桑色素对抑郁症小鼠的行为影响，发现了桑色素对小鼠抑郁样行为有所改善，表现为增加了糖水偏好率，缩短了强迫游泳和悬尾实验不动时间。本发明中的桑色素在40mg/kg剂量和80mg/kg剂量时能显著增加小鼠糖水偏好率，缩短强迫游泳和悬尾实验不动时间，桑色素具有用于制备抗抑郁症药物的潜力。

Description

桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用

技术领域

本发明涉及药物制备技术领域，具体涉及桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用。

背景技术

抑郁症是现在最常见的一种心理疾病，以连续且长期的心情低落为主要的临床特征，是现代人心理疾病最重要的类型。

临床可见，心情低落和现实过得不开心，情绪长时间地低落消沉，从一开始的闷闷不乐到最后的悲痛欲绝，自卑、痛苦、悲观、厌世，感觉活着每一天都是在绝望地折磨自己，消极，逃避，最后甚至更有自杀倾向和行为。患者患有躯体化症状。胸闷，气短。每天只想躺在床上，什么都不想动。有明显的焦虑感。更严重者会出现幻听、被害妄想症、多重人格等精神分裂症状。抑郁症每次发作，持续至少2周以上、一年，甚至数年，大多数病例有复发的倾向。

抑郁症的病因并不非常清楚，但可以肯定的是，生物、心理与社会环境诸多方面因素参与了抑郁症的发病过程。生物学因素主要涉及遗传、神经生化、神经内分泌、神经再生等方面；与抑郁症关系密切的心理学易患素质是病前性格特征，如抑郁气质。成年期遭遇应激性的生活事件，是导致出现具有临床意义的抑郁发作的重要触发条件。然而，以上这些因素并不是单独起作用的，强调遗传与环境或应激因素之间的交互作用、以及这种交互作用的出现时点在抑郁症发生过程中具有重要的影响。

抑郁症的诊断主要应根据病史、临床症状、病程及体格检查和实验室检查，典型病例诊断一般不困难。国际上通用的诊断标准一般有ICD-10和DSM-IV。国内主要采用ICD-10，是指首次发作的抑郁症和复发的抑郁症，不包括双相抑郁。患者通常具有心境低落、兴趣和愉快感丧失、精力不济或疲劳感等典型症状。其他常见的症状是①集中注意和注意的能力降低；②自我评价降低；③自罪观念和无价值感(即使在轻度发作中也有)；④认为前途暗淡悲观；⑤自伤或自杀的观念或行为；⑥睡眠障碍；⑦食欲下降。病程持续至少2周。

抑郁发作的治疗要达到三个目标：①提高临床治愈率，最大限度减少病残率和自杀率，关键在于彻底消除临床症状；②提高生存质量，恢复社会功能；③预防复发。抑郁症治疗原则主要包括：①个体化治疗；②剂量逐步递增，尽可能采用最小有效量，使不良反应减至最少，以提高服药依从性；③足量足疗程治疗；④尽可能单一用药，如疗效不佳可考虑转换治疗、增效治疗或联合治疗，但需要注意药物相互作用；⑤治疗前知情告知；⑥治疗期间密切观察病情变化和不良反应并及时处理；⑦可联合心理治疗增加疗效；⑧积极治疗与抑郁共病的其他躯体疾病、物质依赖、焦虑障碍等。

药物治疗是中度以上抑郁发作的主要治疗措施。目前临床上一线的抗抑郁药主要包括选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI，代表药物氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、氟伏沙明、西酞普兰和艾司西酞普兰)、5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRI，代表药物文拉法辛和度洛西汀)、去甲肾上腺素和特异性5-羟色胺能抗抑郁药(NaSSA，代表药物米氮平)等。传统的三环类、四环类抗抑郁药和单胺氧化酶抑制剂由于不良反应较大，应用明显减少。

目前对于抑郁症药物比较单一，治疗效果也不甚理想，因此，寻找新型能够用于制备抑郁症药物的成分极为重要，对抑郁症的防治意义重大。

发明内容

为解决抗抑郁症药物单一，治疗效果不明显的技术问题，本发明提供了桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，本发明中的桑色素在40mg/kg剂量和80mg/kg剂量时能显著增加小鼠糖水偏好率，缩短强迫游泳和悬尾实验不动时间，桑色素具有用于制备抗抑郁症药物的潜力。

本发明提供了桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用,所述桑色素的结构式如下：

进一步地，所述桑色素用于制备小鼠的抗抑郁症药物。

进一步地，所述桑色素按照小鼠体重的使用剂量为20-80mg/kg。

进一步地，所述桑色素按照小鼠体重的使用剂量为40-80mg/kg。

进一步地，所述桑色素按照小鼠体重的使用剂量为40mg/kg。

进一步地，所述桑色素按照小鼠体重的使用剂量为80mg/kg。

进一步地，所述药物是以桑色素为活性成分，和药学上任意一种辅料或药物赋形剂制成的药学上允许的任意一种药物剂型。

进一步地，所述剂型包括颗粒剂、片剂、冲剂、软胶丸、胶囊剂、滴丸剂、软膏剂或注射剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

1、本发明通过建立慢性温和应激抑郁模型，研究桑色素对慢性应激诱导小鼠抑郁样行为的影响，发现桑色素中剂量组(40mg/kg)和桑色素高剂量组(80mg/kg)均显著增加了实验小鼠糖水偏好率，缩短了强迫游泳和悬尾实验不动时间，表明中剂量桑色素和高剂量桑色素具有抗抑郁作用；

2、本发明还通过皮质酮诱导小鼠抑郁样行为，并利用桑色素灌胃给药，发现桑色素中剂量组(40mg/kg)和桑色素高剂量组(80mg/kg)均显著增加了糖水偏好率，缩短了强迫游泳和悬尾实验不动时间，表明桑色素具有抗抑郁作用。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1：桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用。

一、慢性温和应激抑郁模型的建立

1、材料与方法

a.实验动物准备

SPF级C57BL/6N雄性小鼠70只，体重18-22g，适应性喂养7天，期间提供充足的饮水和饲料；

b.试剂/药物准备

桑色素、氟西汀、0.9％氯化钠溶液(生理盐水)、1％(w/v)蔗糖溶液和纯水；

所述桑色素的化学式为C15H10O7，CAS No.：480-16-0，分子量：302.24，桑色素的结构式为：

2、模型构建方法

(1)适应性喂养期间进行连续3次糖水偏爱基线测定，并剔除糖水偏爱异常小鼠(暴饮：总摄入量>小鼠平均总摄入量的2倍；少饮：总摄入量<小鼠平均总摄入量的1/2；糖水偏爱比<60％)，结束后将剩余所有小鼠随机分为正常组和慢性刺激组，并保证各组的糖水偏爱比一致；

(2)正常组正常喂养，不接受任何刺激；慢性刺激组单笼喂养并接受慢性温和刺激；

刺激因素：慢性刺激组进行水食剥夺、污笼、斜笼、频闪、噪音、彻夜照明2次、间歇照明、空瓶、束缚、昼夜颠倒和冰水游泳刺激；具体过程如下：

a.水食剥夺(24h)：禁水禁食24h；

b.污笼(24h)：将200mL水加入笼中，达到笼内潮湿环境；

c.斜笼(45°)：将笼子倾斜45°摆放；

d.频闪(150flash/min)：黑暗环境下闪光刺激；

e.噪音(90±5dB)：连续播放噪音；

f.彻夜照明2次：夜间不关灯，连续24h照明；

g.间歇照明(间隔2h)：每间隔2h开关灯一次；

h.空瓶(1h)：在禁水禁食后，给予一个空瓶子；

i.束缚(3h)：将小鼠塞进50mL离心管中固定；

j.昼夜颠倒：白天关灯，夜间开灯；

k.冰水游泳(4℃，5min)：将小鼠放入4℃冷水中游泳5min；

以上a-k全部刺激过程独立并连续进行，每周随机调整刺激顺序，连续刺激12周，每周测定小鼠体重。

二、实验分组及给药

连续刺激8周后进行糖水偏爱测定，并根据糖水偏爱比剔除刺激耐受小鼠(刺激前后糖水偏爱比无显著变化)。按照糖水偏爱比一致的原则，将慢性刺激组的剩余小鼠重新随机分为模型组、桑色素低剂量组(20mg/kg)、桑色素中剂量组(40mg/kg)、桑色素高剂量组(80mg/kg)、阳性对照组(氟西汀，20mg/kg)，每组10只。所有药物以混悬液的形式溶于0.9％氯化钠溶液中，10mL/kg灌胃给药，模型组和正常组小鼠灌胃等体积0.9％氯化钠溶液，给药4周。给药期间同时给予慢性温和刺激。

三、行为学测定方法

1、糖水偏爱实验(Sucrose preference test，SPT)

(1)糖水适应。

测定前，所有小鼠单笼喂养，每笼1瓶1％(w/v)蔗糖溶液和1瓶纯水适应48h，期间每间隔12h交换糖水和纯水水瓶位置，以避免小鼠产生条件性位置偏好。

(2)正式SPT。

适应结束后，小鼠禁食禁水12h，随后给予已称重并标记的新蔗糖水和纯水各1瓶，12h后迅速对将所有糖水瓶和纯水瓶称重记录，根据公式：糖水偏爱比(％)＝[糖水摄入量/(糖水摄入量+纯水摄入量)]×100％，计算小鼠的糖水偏爱比。

(3)强迫游泳实验(Forced swimming test，FST)

将小鼠置于高为25cm、内径为14cm的圆柱桶内，加入15cm高，温度为23±2℃的自来水并确保小鼠尾巴不能触及桶底，使用摄像机记录6min内的活动情况，观察并记录小鼠在后4min内的不动时间。

(4)悬尾实验(Tail suspension test，TST)

将小鼠尾巴粘贴于横杆上，倒悬于桌面上，使用摄像机记录6min内的活动情况，观察并记录小鼠在后4min内的不动时间。

四、实验结果

表1桑色素对慢性应激诱导小鼠抑郁样行为的影响(Mean±SEM,n＝10)

注：与正常组相比，##p<0.01；与模型组相比，*p<0.05，**p<0.01

与正常组相比，模型组小鼠的糖水偏好率显著下降，强迫游泳和悬尾实验不动时间显著延长，表明模型建立成功。与模型组相比，桑色素中剂量组(40mg/kg)和桑色素高剂量组(80mg/kg)均显著增加了糖水偏好率，缩短了强迫游泳和悬尾实验不动时间，表明中剂量桑色素和高剂量桑色素具有抗抑郁作用。

实施例2：桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用。

一、皮质酮诱导抑郁模型的建立

1、材料与方法

a.实验动物准备

雄性ICR小鼠60只，体重18-22g，；

b.试剂/药物准备

桑色素、氟西汀、皮质酮、0.9％氯化钠溶液(生理盐水)、1％(w/v)蔗糖溶液和纯水。

二、实验分组及给药

雄性ICR小鼠随机分为6组，每组10只(n＝10)，6组小鼠分别为正常组，皮质酮组，氟西汀组(20mg/kg)，桑色素低剂量组(20mg/kg)、桑色素中剂量组(40mg/kg)、桑色素高剂量组(80mg/kg)。氟西汀和桑色素的给药方式为灌胃给药，并于给药30min后皮下注射皮质酮(40mg/kg)，给药体积均为10mL/kg，正常组给予等量的生理盐水。连续注射21天后，进行行为学实验。

三、行为学测定方法

1、糖水偏爱实验(Sucrose preference test，SPT)

(1)糖水适应。

测定前，所有小鼠单笼喂养，每笼1瓶1％(w/v)蔗糖溶液和1瓶纯水适应48h，期间每间隔12h交换糖水和纯水水瓶位置，以避免小鼠产生条件性位置偏好。

(2)正式SPT。

适应结束后，小鼠禁食禁水12h，随后给予已称重并标记的新蔗糖水和纯水各1瓶，12h后迅速对将所有糖水瓶和纯水瓶称重记录，根据公式：糖水偏爱比(％)＝[糖水摄入量/(糖水摄入量+纯水摄入量)]×100％，计算小鼠的糖水偏爱比。

(3)强迫游泳实验(Forced swimming test，FST)

将小鼠置于高为25cm、内径为14cm的圆柱桶内，加入15cm高，温度为23±2℃的自来水并确保小鼠尾巴不能触及桶底，使用摄像机记录6min内的活动情况，观察并记录小鼠在后4min内的不动时间。

(4)悬尾实验(Tail suspension test，TST)

将小鼠尾巴粘贴于横杆上，倒悬于桌面上，使用摄像机记录6min内的活动情况，观察并记录小鼠在后4min内的不动时间。

四、实验结果

表2桑色素对皮质酮诱导小鼠抑郁样行为的影响(Mean±SEM,n＝10)

注：与正常组相比，#p<0.05，##p<0.01；与模型组相比，*p<0.05，**p<0.01

与正常组相比，皮质酮组小鼠的糖水偏好率显著下降，强迫游泳和悬尾实验不动时间显著延长，表明抑郁模型建立成功。与皮质酮组相比，桑色素40和80mg/kg组均显著增加了糖水偏好率，缩短了强迫游泳和悬尾实验不动时间，表明具有抗抑郁作用。

尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (8)

1.桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，其特征在于，所述桑色素的结构式如下：

2.根据权利要求1所述的桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，其特征在于，所述桑色素用于制备小鼠的抗抑郁症药物。

3.根据权利要求1所述的桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，其特征在于，所述桑色素按照小鼠体重的使用剂量为20-80mg/kg。

4.根据权利要求3所述的桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，其特征在于，所述桑色素按照小鼠体重的使用剂量为40-80mg/kg。

5.根据权利要求4所述的桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，其特征在于，所述桑色素按照小鼠体重的使用剂量为40mg/kg。

6.根据权利要求4所述的桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，其特征在于，所述桑色素按照小鼠体重的使用剂量为80mg/kg。

7.根据权利要求1所述的桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，其特征在于，所述药物是以桑色素为活性成分，和药学上任意一种辅料或药物赋形剂制成的药学上允许的任意一种药物剂型。

8.根据权利要求7所述的桑色素在制备抗抑郁症药物中的应用，其特征在于，所述剂型包括颗粒剂、片剂、冲剂、软胶丸、胶囊剂、滴丸剂、软膏剂或注射剂。