CN114181196A

CN114181196A - 一种抑制并降解parp酶的化合物及其制备方法和药学上的应用

Info

Publication number: CN114181196A
Application number: CN202111035042.5A
Authority: CN
Inventors: 张晨; 何平; 李凯; 廖鹏飞; 叶飞; 李瑶; 倪佳; 严庞科
Original assignee: Haisco Pharmaceutical Group Co Ltd
Current assignee: Tibet Haisike Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2020-09-14
Filing date: 2021-09-06
Publication date: 2022-03-15

Abstract

本发明涉及一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，及其中间体，以及在PARP相关疾病如肿瘤中的用途。B‑L‑K(I)。

Description

一种抑制并降解PARP酶的化合物及其制备方法和药学上的应用

技术领域

本发明涉及一种通式(I)所述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，及其中间体，以及在PARP相关疾病如肿瘤中的用途。

背景技术

PARP全称为poly-ADP-ribose polymerase，即多聚ADP核糖聚合酶，参与了包括DNA修复、基因组稳定性等在内的一系列细胞过程；该蛋白家族由17个成员组成，包括PARP1、PARP2等。PARP抑制剂通过与PARP1或PARP2催化位点的结合，导致PARP蛋白无法从DNA损伤点脱落。被束缚在DNA上的PARP在DNA复制时会使DNA复制停滞，进一步导致BER受制。此时，细胞会激发同源重组修复，BRCA1、BRCA2和其他称为“类BRCA”的蛋白在同源重复修复中起到重要作用。因此在BRCA突变的癌细胞中，同源重组修复则无法进行。再加上PARP的功能受到了抑制，使癌细胞只能进行容易出错的DNA双链修复方式，导致癌细胞死亡。

PROTAC(proteolysis targeting chimera)分子是一类能够同时结合靶向蛋白和E3泛素连接酶的双功能化合物，此类化合物能够被细胞的蛋白酶体识别，引起靶向蛋白的降解，能够有效地降低靶向蛋白在细胞中的含量。通过在PROTAC分子引入能结合不同靶向蛋白的配体，使PROTAC技术应用于各种疾病的治疗成为可能，该技术近年来同时得到了广泛的关注。

因此，有必要开发新型的PARP抑制剂和E3泛素连接酶的PROTAC药物，用于治疗与PARP相关的肿瘤疾病。

发明内容

本发明开发了一种结构新颖的、药效好、生物利用度高、更安全、能抑制或降解PARP的PARP抑制剂与E3泛素连接酶的PROTAC化合物，用于治疗与PARP相关疾病如肿瘤。

本发明化合物具有选择性好，药效优异，生物利用度高，低毒安全，并且具有较高的药代性能，用于治疗与PARP酶相关的疾病。

本发明涉及一种化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中，化合物选自通式(I)所示的化合物，

B-L-K(I)；

在某些实施方案中，B选自

R^b1选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、CONH₂、COOH、oxo、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基，所述的烷基或者烷氧基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I或OH的取代基所取代，R^b2选自H、C_1-4烷基或C_3-6环烷基，所述的烷基或环烷基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I的取代基所取代，n1各自独立的选自0、1、2、3或4，n2各自独立的选自0、1、2或3，n3各自独立的选自0、1或2；

在某些实施方案中，B选自

R^b1各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、CONH₂、oxo、COOH、甲基或甲氧基，所述甲基或甲氧基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I或OH的取代基所取代，R^b2选自H、甲基或环丙基，所述的甲基或环丙基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I的取代基所取代，n1各自独立的选自0、1、2、3或4，n2各自独立的选自0、1、2或3，n3各自独立的选自0、1或2；

在某些实施方案中，B选自

在某些实施方案中，L选自-Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-；

Ak1、Ak2、Ak3、Ak4和Ak5各自独立的选自O、CH₂、C＝O或者键，且Ak1、Ak2、Ak3、Ak4和Ak5中至少有一个选自O、CH₂或C＝O；

Cy1、Cy2、Cy3、Cy4各自独立的选自键、4-7元杂单环、5-10元杂并环、6-12元杂螺环、7-10元杂桥环、3-7元单环烷基、5-10元并环烷基、6-12元螺环烷基、7-10元桥环烷基、5-10元杂芳基或6-10元芳基，所述芳基、杂芳基、环烷基、杂单环、杂并环、杂螺环或杂桥环任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、COOH、CN、NH₂、oxo、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、羟基取代的C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代，所述的杂芳基、杂单环、杂并环、杂螺环或杂桥环含有1至4个选自O、S、N的杂原子；

条件是Cy1、Cy2、Cy3、Cy4中至少有一个不选自键和三氮唑基；

当Ak5选自键时，Cy4不选自键和哌嗪基；

在某些实施方案中，L选自-Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-；

Cy1、Cy2、Cy3和Cy4各自独立的选自键、4-7元含氮杂单环、5-10元含氮杂并环、7-10元杂桥环或6-12元含氮杂螺环，所述杂单环、杂并环、杂桥环或杂螺环任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、COOH、CN、NH₂、oxo、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、羟基取代的C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代，所述的杂单环、杂并环、杂桥环或杂螺环含有1至4个选自O、S、N的杂原子；

条件是Cy1、Cy2、Cy3、Cy4中至少有一个不选自键和三氮唑基；

当Ak5选自键时，Cy4不选自键和哌嗪基；

在某些实施方案中，L选自-Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-；

Cy1、Cy2、Cy3和Cy4各自独立的选自键或取代的或者未取代的如下基团之一：氮杂环丁基、氮杂环戊基、哌啶、吗啉、哌嗪、环丙基并氮杂环丁基、环丙基并氮杂环戊基、环丙基并氮杂环己基、环丙基并哌啶、环丁基并氮杂环丁基、环丁基并氮杂环戊基、环丁基并氮杂环已基、环丁基并哌啶、环戊基并氮杂环丁基、环戊基并氮杂环戊基、环戊基并氮杂环已基、环戊基并哌啶、环已基并氮杂环丁基、环已基并氮杂环戊基、环已基并氮杂环已基、环己基并哌啶、氮杂环丁基并氮杂环丁基、氮杂环丁基并氮杂环戊基、氮杂环丁基并氮杂环已基、氮杂环丁基并哌啶、氮杂环戊基并氮杂环丁基、氮杂环戊基并氮杂环戊基、氮杂环戊基并氮杂环已基、氮杂环戊基并哌啶、氮杂环已基并氮杂环丁基、氮杂环已基并氮杂环戊基、氮杂环已基并氮杂环已基、氮杂环己基并哌啶、环丁基螺氮杂环丁基、环丁基螺氮杂环戊基、环丁基螺氮杂环已基、环戊基螺氮杂环丁基、环戊基螺氮杂环戊基、环戊基螺氮杂环已基、环已基螺氮杂环丁基、环已基螺氮杂环戊基、环已基螺氮杂环已基、氮杂环丁基螺氮杂环丁基、氮杂环丁基螺氮杂环戊基、氮杂环丁基螺氮杂环已基、氮杂环戊基螺氮杂环丁基、氮杂环戊基螺氮杂环戊基、氮杂环戊基螺氮杂环已基、氮杂环已基螺氮杂环丁基、氮杂环已基螺氮杂环戊基、氮杂环已基螺氮杂环已基、环丁基螺哌啶、环戊基螺哌啶、环己基螺哌啶、氮杂环丁基螺哌啶、氮杂环戊基螺哌啶、氮杂环己基螺哌啶、

当被取代时，任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、COOH、CN、oxo、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、羟基取代的C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

条件是Cy1、Cy2、Cy3、Cy4中至少有一个不选自键和三氮唑基；

当Ak5选自键时，Cy4不选自键和哌嗪基；

在某些实施方案中，L选自-Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-；

Cy1、Cy2、Cy3、Cy4各自独立的选自键或取代的或者未取代的如下基团之一：

当被取代时，任选进一步被0至4个选自H、F、CF₃、甲基、oxo、羟甲基、COOH、CN或NH₂的取代基所取代；

条件是Cy1、Cy2、Cy3、Cy4中至少有一个不选自键和三氮唑基；

当Ak5选自键时，Cy4不选自键和哌嗪基；

在某些实施方案中，L选自

其中左侧与B连接；

或者L选自

其中左侧与B连接；

或者L选自

其中左侧与B连接；

或者L选自

其中左侧与B连接；

在某些实施方案中，K选自

环E、F或H各自独立的选自苯环或者5-6元的杂芳环或5-6元杂环，所述的杂芳环或杂环含有1至2个选自O、S、N的杂原子；

R^k2各自独立的选自CH₂、C＝O、S＝O、SO₂；

R^k1、R^k3或R^k4各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、oxo、OH、NH₂、CF₃、CN、COOH、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

R^k5选自C＝O或

M₁选自键、-CH₂-C(＝O)NH-或-C(＝O)CH₂NH-；

M₂选自-NHC(＝O)-C_1-6烷基或-NHC(＝O)-C_3-6环烷基，所述的烷基或环烷基任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

M₃选自-NH-或-O-；

R^k6选自C_1-6烷基，所述的烷基任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、C_1-6烷基或C_3-6环烷基的取代基所取代；

R^k7各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、OH、SH、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷硫基或C_1-6烷基甲酰氧基，所述的烷基、烷氧基或烷硫基任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^k8、R^k9各自独立的选自H、C_1-6烷基或C_3-6环烷基，所述的烷基或环烷基任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^k10选自5-6元杂芳基，所述的杂芳基任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、CF₃、CN、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、羟基取代的C_1-4烷基、C_1-4烷氧基或C_3-6环烷基的取代基所取代；

R ^k11选自O、C＝O或-N(CH₃)-；

G选自6-10元芳基或5-10元杂芳基，所述的芳基或者杂芳基任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、CF₃、CN、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、羟基取代的C_1-4烷基、C_1-4烷氧基或C_3-6环烷基的取代基所取代，所述的杂芳基含有1至4个选自O、S、N的杂原子；

p1或p2各自独立的选自0、1、2、3或4；

在某些实施方案中，K选自

环E、F各自独立的选自苯或吡啶；

R^k2各自独立的选自CH₂、C＝O、S＝O、SO₂；

R^k1、R^k3或R^k4各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CF₃、CN、COOH、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

R^k5选自C＝O或

M₁选自键、-CH₂-C(＝O)NH-或-C(＝O)CH₂NH-；

p1或p2各自独立的选自0、1、2、3或4；

在某些实施方案中，K选自

R^k2各自独立的选自CH₂或C＝O；

R^k1、R^k3或R^k4各自独立的选自H、CH₃、F、Cl、Br、I、OH或NH₂；

R^k11选自O或-N(CH₃)-；

M₁选自键、-CH₂-C(＝O)NH-或-C(＝O)CH₂NH-；

M₂选自-NHC(＝O)-甲基、-NHC(＝O)-乙基、-NHC(＝O)-环丙基、-NHC(＝O)-环丁基、-NHC(＝O)-环戊基或-NHC(＝O)-环已基，所述的甲基、乙基、环丙基、环丁基、环戊基或环已基任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^k6选自甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、异丁基或仲丁基；

R^k7各自独立的选自H、F、OH、SH、甲基、甲氧基或-SCH₃；

R^k8、R^k9各自独立的选自H、甲基、乙基、环丙基或环丁基；

p1或p2各自独立的选自0、1或2；

在某些实施方案中，K选自

在某些实施方案中，K选自

在某些实施方案中，K选自

作为本发明的第一种实施方案，通式(I)或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中

B-L-K(I)；

B选自

R^b1选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、CONH₂、COOH、oxo、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基，所述的烷基或者烷氧基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I或OH的取代基所取代；

R^b2选自H、C_1-4烷基或C_3-6环烷基，所述的烷基或环烷基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I的取代基所取代；

n1各自独立的选自0、1、2、3或4；

n2各自独立的选自0、1、2或3；

n3各自独立的选自0、1或2；

L选自-Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-；

条件是Cy1、Cy2、Cy3、Cy4中至少有一个不选自键和三氮唑基；

当Ak5选自键时，Cy4不选自键和哌嗪基；

其中K选自

R^k2各自独立的选自CH₂、C＝O、S＝O、SO₂；

R^k5选自C＝O或

M₁选自键、-CH₂-C(＝O)NH-或-C(＝O)CH₂NH-；

M₃选自-NH-或-O-；

R^k7各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、OH、SH、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或C_1-6烷硫基、C_1-6烷基甲酰氧基，所述的烷基、烷氧基或烷硫基任选进一步被0至4个选自H、F、Cl、Br、I、OH、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R ^k11选自O、C＝O或-N(CH₃)-；

p1或p2各自独立的选自0、1、2、3或4。

作为本发明的第二种实施方案，通式(I)或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中，

K选自

环E、F各自独立的选自苯或吡啶；

其余定义与本发明第一种实施方案相同。

作为本发明的第三种实施方案，通式(I)或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中，

R^b1各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、CONH₂、oxo、COOH、甲基或甲氧基，所述甲基或甲氧基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I或OH的取代基所取代；

R^b2选自H、甲基或环丙基，所述的甲基或环丙基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I的取代基所取代；

K选自

R^k2各自独立的选自CH₂或C＝O；

R^k11选自O或-N(CH₃)-；

M₁选自键、-CH₂-C(＝O)NH-或-C(＝O)CH₂NH-；

R^k7各自独立的选自H、F、OH、SH、甲基、甲氧基或-SCH₃；

R^k8、R^k9各自独立的选自H、甲基、乙基、环丙基或环丁基；

p1或p2各自独立的选自0、1或2；

其余定义与本发明第一种或第二种实施方案相同。

作为本发明的第四种实施方案，通式(I)或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中，

B选自

K选自

其余定义与本发明第一、第二、第三种实施方案中任意一种相同。

作为本发明的第五种实施方案，通式(I)或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中，

L选自

其中左侧与B连接；

或者L选自

其中左侧与B连接；

或者L选自

其中左侧与B连接；

或者L选自

其中左侧与B连接；

其余定义与本发明第一、第二、第三、第四种实施方案中任意一种相同。

作为本发明的第六种实施方案，通式(I)或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中，

K选自

其余定义与本发明第一、第二、第三、第四、第五种实施方案中任意一种相同。

作为本发明的第七种实施方案，通式(I)或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，其中，

K选自

其余定义与本发明第一、第二、第三、第四、第五、第六种实施方案中任意一种相同。

作为本发明的一种实施方案，通式(I)所示的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，化合物选自如下结构之一：

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，B选自

R^b1选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、CONH₂、COOH、oxo、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基，所述的烷基或者烷氧基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I或OH的取代基所取代，R^b2选自H、C_1-4烷基或C_3-6环烷基，所述的烷基或环烷基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I的取代基所取代，n1各自独立的选自0、1、2、3或4，n2各自独立的选自0、1、2或3，n3各自独立的选自0、1或2。

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，B选自

R^b1各自独立的选自H、F、Cl、Br、I、OH、NH₂、CN、CONH₂、oxo、COOH、甲基或甲氧基，所述甲基或甲氧基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I或OH的取代基所取代，R^b2选自H、甲基或环丙基，所述的甲基或环丙基任选进一步被0至4选自H、F、Cl、Br、I的取代基所取代，n1各自独立的选自0、1、2、3或4，n2各自独立的选自0、1、2或3，n3各自独立的选自0、1或2。

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，B选自

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，L选自-Ak1-Cy1-Ak2-Cy2-Ak3-Cy3-Ak4-Cy4-Ak5-；

条件是Cy1、Cy2、Cy3、Cy4中至少有一个不选自键和三氮唑基；

当Ak5选自键时，Cy4不选自键和哌嗪基。

条件是Cy1、Cy2、Cy3、Cy4中至少有一个不选自键和三氮唑基；

当Ak5选自键时，Cy4不选自键和哌嗪基。

条件是Cy1、Cy2、Cy3、Cy4中至少有一个不选自键和三氮唑基；

当Ak5选自键时，Cy4不选自键和哌嗪基。

条件是Cy1、Cy2、Cy3、Cy4中至少有一个不选自键和三氮唑基；

当Ak5选自键时，Cy4不选自键和哌嗪基。

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，L选自

其中左侧与B连接；

或者L选自

其中左侧与B连接；

或者L选自

其中左侧与B连接；

或者L选自

其中左侧与B连接。

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，K选自

R^k2各自独立的选自CH₂、C＝O、S＝O、SO₂；

R^k5选自C＝O或

M₁选自键、-CH₂-C(＝O)NH-或-C(＝O)CH₂NH-；

M₃选自-NH-或-O-；

R^k11选自O、C＝O或-N(CH₃)-；

p1或p2各自独立的选自0、1、2、3或4。

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，K选自

环E、F各自独立的选自苯或吡啶；

R^k2各自独立的选自CH₂、C＝O、S＝O、SO₂；

R^k5选自C＝O或

M₁选自键、-CH₂-C(＝O)NH-或-C(＝O)CH₂NH-；

p1或p2各自独立的选自0、1、2、3或4。

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，K选自

R^k2各自独立的选自CH₂或C＝O；

R^k11选自O或-N(CH₃)-；

M₁选自键、-CH₂-C(＝O)NH-或-C(＝O)CH₂NH-；

R^k7各自独立的选自H、F、OH、SH、甲基、甲氧基或-SCH₃；

R^k8、R^k9各自独立的选自H、甲基、乙基、环丙基或环丁基；

p1或p2各自独立的选自0、1或2。

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，K选自

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，K选自

本发明涉及通式(I)的一些实施方案中，K选自

本发明涉及一种药物组合物，包括本发明上述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶，以及药学上可接受的载体。

本发明涉及一种本发明上述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶在用于制备治疗与PARP活性或表达量相关疾病的药物中的应用。

本发明涉及一种本发明上述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶在用于制备治疗与抑制或降解PARP相关疾病的药物中的应用。

本发明涉及的本发明上述的化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶的应用，其特征在于，所述的疾病选自肿瘤。

本领域的参考书和专著，详细介绍了可用于制备本文所述化合物的反应物的合成，或提供了描述该制备方法的文章以供参考。这些参考书和专著包括：“SyntheticOrganic Chemistry”,John Wiley&Sons,Inc.,New York；S.R.Sandler et al.,“OrganicFunctional Group Preparations,”2nd Ed.,Academic Press,New York,1983；H.O.House,“Modern Synthetic Reactions”,2nd Ed.,W.A.Benjamin,Inc.Menlo Park,Calif.1972；T.L.Gilchrist,“Heterocyclic Chemistry”,2nd Ed.,John Wiley&Sons,NewYork,1992；J.March,“Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms andStructure”,4th Ed.,Wiley Interscience,New York,1992；Fuhrhop,J.and Penzlin G.“Organic Synthesis:Concepts,Methods,Starting Materials”,Second,Revised andEnlarged Edition(1994)John Wiley&Sons ISBN:3 527-29074-5；Hoffman,R.V.“OrganicChemistry,An Intermediate Text”(1996)Oxford University Press,ISBN 0-19-509618-5；Larock,R.C.“Comprehensive Organic Transformations:AGuide toFunctional Group Preparations”2nd Edition(1999)Wiley-VCH,ISBN:0-471-19031-4；March,J.“Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure”4thEdition(1992)John Wiley&Sons,ISBN:0-471-60180-2；Otera,J.(editor)“ModernCarbonyl Chemistry”(2000)Wiley-VCH,ISBN:3-527-29871-1；Patai,S.“Patai’s1992Guide to the Chemistry of Functional Groups”(1992)Interscience ISBN:0-471-93022-9；Solomons,T.W.G.“Organic Chemistry”7th Edition(2000)John Wiley&Sons,ISBN:0-471-19095-0；Stowell,J.C.,“Intermediate Organic Chemistry”2ndEdition(1993)Wiley-Interscience,ISBN:0-471-57456-2；“Industrial OrganicChemicals:Starting Materials and Intermediates:An Ullmann’s Encyclopedia”(1999)John Wiley&Sons,ISBN:3-527-29645-X,in 8volumes；“Organic Reactions”(1942-2000)John Wiley&Sons,in over 55volumes；and“Chemistry of FunctionalGroups”John Wiley&Sons,in 73volumes.

通过美国化学会化学文摘社制备的已知化学物质的索引，可以选择性地识别特定和类似的反应物，这些索引可在大多数公共图书馆和大学图书馆以及在线获得。已知但在目录中不可商购的化学品可选地由定制化学合成工厂制备，其中许多标准化学供应工厂(例如，上面列出的那些)提供定制合成服务。制备和选择本文所述化合物的药用盐的参考文献是P.H.Stahl&C.G.Wermuth“Handbook of Pharmaceutical Salts”,VerlagHelvetica Chimica Acta,Zurich,2002.

合成方法一：

通式(Z-1)与通式(Z-2)通过还原胺化、亲核取代反应、缩合反应或者偶联反应得到对应通式(Z-3)，通式(Z-3)脱除保护基得到通式(Z-3′)化合物；通式(Z-3′)再与通式(Z-4)通过亲核取代反应或偶联反应得到对应通式(Ia)；

通式(Z-3′)与通式(Z-5)通过还原胺化、亲核取代反应或者偶联反应得到对应通式(Z-6)，通式(Z-6)脱除保护基得到通式(Z-6′)化合物；通式(Z-6′)再与通式(Z-4)通过亲核取代反应或偶联反应得到对应通式(Ib)；

通式(Z-6′)与通式(Z-7)通过还原胺化、亲核取代反应或者偶联反应得到对应通式(Z-8)，通式(Z-8)脱除保护基得到通式(Z-8′)化合物；通式(Z-8′)再与通式(Z-4)通过亲核取代反应或偶联反应得到对应通式(Ic)；

通式(Z-8′)与通式(Z-9)通过还原胺化、亲核取代反应或者偶联反应得到对应通式(Z-10)，通式(Z-10)脱除保护基得到通式(Z-10′)化合物，通式(Z-10′)再与通式(Z-4)通过亲核取代反应或偶联反应得到对应通式(Id)；

R¹、R⁴、R⁶、R⁸各自独立的选自(＝O)、-CHO、F、Cl、Br、I、OTf、CH₂Cl、CH₂Br、CH₂I、CH₂OTf、CH₂OMs、CH₂OTs、COOH、COCl、COBr；

R²、R⁵、R⁷、R⁹各自独立的选自H、(＝O)、-CHO、F、Cl、Br、I或氨基保护基，优选Boc；

R³、R¹⁰选自独立的H、NH₂、F、Cl、Br、I、OTf、OH；

X和R¹¹各自独立选择F、Cl、Br、I、OTf、卤代镁，B(OH)₂，硼酸酯基，烷基取代的锡基，卤代锌，卤代铜等。

除非有相反的陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。

本发明所述基团和化合物中所涉及的碳、氢、氧、硫、氮或F、Cl、Br、I均包括它们的同位素情况，及本发明所述基团和化合物中所涉及的碳、氢、氧、硫或氮任选进一步被一个或多个它们对应的同位素所替代，其中碳的同位素包括¹²C、¹³C和¹⁴C，氢的同位素包括氕(H)、氘(D，又叫重氢)、氚(T，又叫超重氢)，氧的同位素包括¹⁶O、¹⁷O和¹⁸O，硫的同位素包括³²S、³³S、³⁴S和³⁶S，氮的同位素包括¹⁴N和¹⁵N，氟的同位素包括¹⁷F和¹⁹F，氯的同位素包括³⁵Cl和³⁷Cl，溴的同位素包括⁷⁹Br和⁸¹Br。

“烷基”是指1至20个碳原子的直链或支链饱和脂肪族烃基，优选为1至8个碳原子的烷基，更优选为1至6个碳原子的烷基，进一步优选为1至4个碳原子的烷基。非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、新丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基及其各种支链异构体；所述的烷基可以任选进一步被0至6个选自F、Cl、Br、I、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、烷基氨基、酰胺基、烯基、炔基、C_1-6烷基、C_1-6羟基烷基、C_1-6烷氧基、3至8元碳环基、3至8元杂环基、3至8元碳环基氧基、3至8元杂环基氧基、羧基或者羧酸酯基的取代基所取代，本文中出现的烷基，其定义与本定义一致。

“烷氧基”是指-O-烷基。非限制性实施例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基、环丙氧基和环丁氧基。所述的烷氧基可以任选进一步被0至5个选自F、Cl、Br、I、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、烷基氨基、烯基、炔基、烷基、羟基烷基、烷氧基、碳环基、杂环基、碳环基氧基、杂环基氧基、羧基或者羧酸酯基的取代基所取代。本文中出现的烷氧基，其定义与本定义一致。

“环烷基”是指3至20个碳原子的直链或支链饱和环状脂肪族烃基，优选为3至10个碳原子的环烷基。非限制性实施例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基。所述的环烷基可以任选进一步被0至5个选自F、Cl、Br、I、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、烷基氨基、烯基、炔基、烷基、羟基烷基、烷氧基、碳环基、杂环基、碳环基氧基、杂环基氧基、羧基或者羧酸酯基的取代基所取代。本文中出现的环烷基，其定义与本定义一致。

“杂环基”或”杂环”是指取代的或未取代的饱和或不饱和的芳香环或者非芳香环，芳香环或者非芳香环可以是3至8元的单环、4至12元双环或者10至15元三环体系，且包含1至3个选自N、O或S的杂原子，优选3至8元杂环基，杂环基的环中选择性取代的N、S可被氧化成各种氧化态。杂环基可以连接在杂原子或者碳原子上，杂环基可以连接有桥环或者螺环，非限制性实施例包括环氧乙基、氮杂环丙基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、1,3-二氧戊环基、1,4-二氧戊环基、1,3-二氧六环基、氮杂环庚基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡喃基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、1,3-二噻基、二氢呋喃基、二氢吡喃基、二噻戊环基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、四氢咪唑基、四氢噻唑基、四氢吡喃基、苯并咪唑基、苯并吡啶基、吡咯并吡啶基、苯并二氢呋喃基、氮杂二环[3.2.1]辛烷基、氮杂二环[5.2.0]壬烷基、氧杂三环[5.3.1.1]十二烷基、氮杂金刚烷基和氧杂螺[3.3]庚烷基。所述的杂环基可以任选进一步被0至5个选自F、Cl、Br、I、＝O、羟基、巯基、硝基、氰基、氨基、烷基氨基、酰胺基、烯基、炔基、烷基、羟基烷基、烷氧基、碳环基、杂环基、碳环基氧基、杂环基氧基、羧基或者羧酸酯基的取代基所取代。本文中出现的杂环基，其定义与本定义一致。

“螺环”是指取代的或未取代的单环之间共用一个原子(称螺原子)的5至20元多环基团，其可以包含0至5个双键，且可以含有0至5个选自N、O或S(＝O)_n的杂原子。优选为6至14元，进一步优选为6至12元，更优选6至10元，其非限定性实例包括：

。当被取代时，取代基可以为1至5个选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、甲酸酯、-(CH₂)_m-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_m-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_m-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_mS(＝O)_nR^a、-(CH₂)_m-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_m-炔基-R^a(其中m、n为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c等基团，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。本文中出现的螺环，其定义与本定义一致。

“并环”是指系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环基团，其中一个或多个环可以含有0个或多个双键，且可以是取代的或未取代，并环体系中的各个环可以含0至5个选自N、S(＝O)_n或O的杂原子。优选为5至20元，进一步优选为5至14元，更有选5至12元，再进一步优选5至10元。非限定性实例包括：

当被取代时，取代基可以为1至5个选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、甲酸酯、-(CH₂)_m-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_m-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_m-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_mS(＝O)_nR^a、-(CH₂)_m-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_m-炔基-R^a(其中m、n为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c等基团，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。本文中出现的并环，其定义与本定义一致。

“桥环”是指任意两个不直接连接的原子的多环基团，可以含有0个或多个双键，且可以是取代的或未取代的，并环体系中的任意环可以含0至5个选自N、S(＝O)_n或O杂原子或基团(其中n为1、1、2)。环原子包含5至20个原子，优选为5至14个原子，进一步优选5至12个，在进一步优选5至10个。非限定性实例包括

和金刚烷。当被取代时，取代基可以为1至5个选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、甲酸酯、-(CH₂)_m-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_m-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_m-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_mS(＝O)_nR^a、-(CH₂)_m-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_m-炔基-R^a(其中m、n为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c等基团，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。本文中出现的桥环，其定义与本定义一致。

“杂单环”是指单环体系的“杂环基”或“杂环”，本文中出现的杂单环，其定义与本定义一致。

“杂并环”是指含有杂原子的“并环”。本文中出现的杂并环，其定义与本定义一致。

“杂螺环”是指含有杂原子的“螺环”。本文中出现的杂螺环，其定义与本定义一致。

“杂桥环”是指含有杂原子的“桥环”。本文中出现的杂桥环，其定义与本定义一致。

“杂芳基”或“杂芳环”是指取代或未取代的5至14元芳香环，且含有1至5个选自N、O或S(＝O)_n杂原子或基团，优选5至10元杂芳香环，进一步优选5至6元。杂芳基的非限制性实施例包括但不限于吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡喃基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、硫代吗啉、1,3-二噻烷、苯并咪唑、苯并咪唑、苯并吡啶、吡咯并吡啶等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，非限制性实施例包含

当被取代时，取代基可以为1至5个选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、甲酸酯、-(CH₂)_m-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_m-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_m-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_mS(＝O)_nR^a、-(CH₂)_m-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_m-炔基-R^a(其中m、n为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c等基团，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。本文中出现的杂芳基或杂芳环，其定义与本定义一致。

“含有1至4个选自O、S、N的杂原子”是指含有1、2、3或4个选自O、S、N的杂原子。

“0至X个取代基所取代”是指被0、1、2、3…X个取代基所取代，X选自1至10之间的任意整数。如“0至4个取代基所取代”是指被0、1、2、3或4个取代基所取代。如“0至5个取代基所取代”是指被0、1、2、3、4或5个取代基所取代。如“杂桥环任选进一步被0至4个选自H或F的取代基所取代”是指杂桥环任选进一步被0、1、2、3或4个选自H或F的取代基所取代。

X-Y元的环(X选自小于Y大于等于3的整数，Y选自4至12之间的任意整数)包括了X+1、X+2、X+3、X+4…Y元的环。环包括了杂环、碳环、芳环、芳基、杂芳基、环烷基、杂单环、杂并环、杂螺环或杂桥环。如“4-7元杂单环”是指4元、5元、6元或7元的杂单环，“5-10元杂并环”是指5元、6元、7元、8元、9元或10元的杂并环。

“药学上可接受的盐”或者“其药学上可接受的盐”是指本发明化合物保持游离酸或者游离碱的生物有效性和特性，且所述的游离酸通过与无毒的无机碱或者有机碱，所述的游离碱通过与无毒的无机酸或者有机酸反应获得的盐。

“药物组合物”是指一种或多种本发明所述化合物或者其立体异构体、氘代物、溶剂化物、前药、代谢产物、药学上可接受的盐或共晶和其它化学组分形成的混合物，其中，“其它化学组分”是指药学上可接受的载体、赋形剂和/或一种或多种其它治疗剂。

“载体”是指不会对生物体产生明显刺激且不会消除所给予化合物的生物活性和特性的材料。

“赋形剂”是指加入到药物组合物中以促进化合物给药的惰性物质。非限制性实施例包括碳酸钙、磷酸钙、糖、淀粉、纤维素衍生物(包括微晶纤维素)、明胶、植物油、聚乙二醇类、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂。

“前药”是指可经体内代谢转化为具有生物活性的本发明化合物。本发明的前药通过修饰本发明化合物中的氨基或者羧基来制备，该修饰可以通过常规的操作或者在体内被除去，而得到母体化合物。当本发明的前药被施予哺乳动物个体时，前药被割裂形成游离的氨基或者羧基。

“共晶”是指活性药物成分(API)和共晶形成物(CCF)在氢键或其他非共价键的作用下结合而成的晶体，其中API和CCF的纯态在室温下均为固体，并且各组分间存在固定的化学计量比。共晶是一种多组分晶体，既包含两种中性固体之间形成的二元共晶，也包含中性固体与盐或溶剂化物形成的多元共晶。

“动物”是指包括哺乳动物，例如人、陪伴动物、动物园动物和家畜，优选人、马或者犬。

“立体异构体”是指由分子中原子在空间上排列方式不同所产生的异构体，包括顺反异构体、对映异构体和构象异构体。

“任选”或“任选地”或“选择性的”或“选择性地”是指随后所述的事件或状况可以但未必发生，该描述包括其中发生该事件或状况的情况及其中未发生的情况。例如，“选择性地被烷基取代的杂环基”是指该烷基可以但未必存在，该描述包括其中杂环基被烷基取代的情况，及其中杂环基未被烷基取代的情况。

“DC₅₀”是指降解50％蛋白时的剂量。

“IC₅₀”是对指定的生物过程(或该过程中的某个组分比如酶、受体、细胞等)抑制一半时所需的药物或者抑制剂的浓度。

具体实施方式

为了完成本发明的目的，根据本领域技术人员已知的有机合成技术，从市售的化学品和/或化学文献中描述的化合物开始，制备本文所述反应中使用的化合物“商业上可用的化学品”是从标准的商业来源获得的，包括上海阿拉丁生化科技股份有限公司，上海麦克林生化科技有限公司，Sigma-Aldrich，阿法埃莎(中国)化学有限公司，梯希爱(上海)化成工业发展有限公司，安耐吉化学，上海泰坦科技股份有限公司，科龙化工，百灵威科技有限公司等。

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或(和)质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用(Bruker Avance III 400和Bruker Avance 300)核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)，氘代氯仿(CDCl₃)，氘代甲醇(CD₃OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)；

MS的测定用(Agilent 6120B(ESI)和Agilent 6120B(APCI))；

HPLC的测定使用Agilent 1260DAD高压液相色谱仪(Zorbax SB-C18 100×4.6mm,3.5μM)；

薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm-0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm-0.5mm；

柱层析一般使用烟台黄海硅胶200-300目硅胶为载体。

中间体1A的制备：

4-(4-氟-3-(4-(哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)苄基)酞嗪-1(2H)-酮(1A)

4-(4-fluoro-3-(4-(piperidine-4-carbonyl)piperazine-1-carbonyl)benzylphthalazin-1(2H)-one

第一步：4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1A-2)

tert-butyl 4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidine-1-carboxylate

4-(4-氟-3-(哌嗪-1-羰基)苄基)酞嗪-1(2H)-酮(1A-1)(3.6g，10mmol)、1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(1)(2.0g，10mmol)溶于20mL DMF中，加入N-甲基咪唑(2.0g，17mmol)，四甲基氯代脲六氟磷酸酯(3.9g，14mmol)，然后25℃反应2小时。反应结束后，加入水100mL，过滤，滤饼用200mL二氯甲烷溶解，再用50mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得粗品硅胶柱纯化，洗脱剂：DCM-2％MeOH/DCM-5％MeOH/DCM，得到粗品后经液相制备纯化，得到化合物1A-2，白色固体(4.0g，69％)。

MS m/z＝577.3[M+1]⁺

第二步：4-(4-氟-3-(4-(哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)苄基)酞嗪-1(2H)-酮(1A)

4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1A-2)(4.0g，6.9mmol)溶于100mL二氯甲烷，加入15mL三氟乙酸，室温反应2h。减压除去溶剂和三氟乙酸，加入20mL二氯甲烷，在0℃用碳酸氢钠水溶液调PH＝8,用二氯甲烷萃取2次(50mL×2)，饱和食盐水洗涤一次(20mL×2)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得1A，白色固体(3.0g，产率91％)。

MS m/z＝477.3[M+1]⁺

实施例1

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(3-((4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物1)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-(3-((4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)methyl)azetidin-1-yl)isoindoline-1,3-dione

第一步：叔丁基3-((4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢-酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸酯(1B)

tert-butyl3-((4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piper idin-1-yl)methyl)azetidine-1-carboxylate

将化合物(1A)(267mg，0.56mmol)溶解在8mL甲醇和2mL四氢呋喃的混合溶剂中，加入3-甲酰基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(310mg，1.68mmol)，无水氯化锌(406mg，2.98mmol)，55℃搅拌1h，加入氰基硼氢化钠(140mg，2.24mmol)，继续反应8h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL二氯甲烷和20mL水萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，粗品用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝10:1-5:1)，浓缩得到标题化合物(1B)，土黄色固体(150mg，产率41％)。

MS m/z＝647.3[M+1]⁺

第二步：4-(3-(4-(1-(氮杂环丁烷-3-基甲基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)酞嗪-1(2H)-酮(1C)

4-(3-(4-(1-(azetidin-3-ylmethyl)piperidine-4-carbonyl)piperazine-1-carbonyl)-4-fluorobenzyl)phthalazin-1(2H)-one

将化合物(1B)(150mg，0.23mmol)溶于5mL二氯甲烷，加入1mL三氟乙酸，室温反应2h。减压除去溶剂和三氟乙酸，加入20mL二氯甲烷，在0℃用碳酸氢钠水溶液调PH＝8,用二氯甲烷萃取2次(20mL×2)，饱和食盐水洗涤一次(20mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得粗品化合物(1C)，黄色油状物(90mg，产率93％)直接用于下一步。

MS m/z＝547.3[M+1]⁺

第三步：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(3-((4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物1)

将化合物(1C)(100mg，0.18mmol)、2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(62mg，0.22mmol)溶于2mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(60mg，0.46mmol)，加完后90℃反应2小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，经液相制备纯化，得到标题化合物(化合物1)，黄色固体(20mg，产率14％).

制备条件：仪器及制备柱：采用WATERS 2767制备液相，制备柱型号Xbridge C18,5μm,内径×长度＝19mm×250mm。

制备方法：粗品用DMF溶解，并用0.45μm滤膜过滤，制备成样品液。

流动相体系：乙腈/水(含0.05％氨水)。梯度洗脱：乙腈含量30％-75％，洗脱时间15min。

MS m/z＝803.3[M+1]⁺

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.39–8.34(m,1H),7.97–7.92(m,1H),7.89–7.79(m,2H),7.61(d,1H),7.52–7.45(m,1H),7.40–7.34(m,1H),7.16(t,J＝9.0Hz,1H),6.80–6.76(m,1H),6.65–6.59(m,1H),5.04(dd,1H),4.38(s,2H),4.18(t,2H),3.83–3.63(m,6H),3.53–3.46(m,2H),3.37–3.30(m,2H),3.14–2.79(m,4H),2.78–2.58(m,5H),2.23–2.04(m,3H),1.88–1.64(m,4H).

实施例2

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[(3R)-3-[(4-(4-(2-氟-5-[(4-oxo-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基]哌啶-1-基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-二酮(化合物2)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-[(3R)-3-[(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)methyl]pyrrolidin-1-yl]-2,3-dihydro-1H-isoindole-1,3-dione

第一步：叔丁基(R)-3-((4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)甲基)吡咯烷-1-羧酸酯(2A)

tert-butyl(R)-3-((4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)methyl)pyrrolidine-1-carboxylate

将化合物(1A)(267mg，0.56mmol)溶解在8mL甲醇和2mL四氢呋喃的混合溶剂中，加入(S)-3-甲酰基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(325mg，1.68mmol)，无水氯化锌(406mg，2.98mmol)，55℃搅拌1h，加入氰基硼氢化钠(140mg，2.24mmol)，继续反应8h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL二氯甲烷和20mL水萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，粗品用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝10:1-5:1)，浓缩得到标题化合物(2A)，土黄色固体(155mg，41％)。

MS m/z＝661.3[M+1]⁺

第二步：(S)-4-(4-氟-3-(4-(1-(吡咯烷-3-基甲基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)苄基)酞嗪-1(2H)-酮(2B)

(S)-4-(4-fluoro-3-(4-(1-(pyrrolidin-3-ylmethyl)piperidine-4-carbonyl)piperazine-1-carbonyl)benzyl)phthalazin-1(2H)-one

将化合物(2A)(133mg，0.20mmol)溶于5mL二氯甲烷，加入1mL三氟乙酸，室温反应2h。减压除去溶剂和三氟乙酸，加入20mL二氯甲烷，在0℃用碳酸氢钠水溶液调PH＝8,用二氯甲烷萃取2次(20mL×2)，饱和食盐水洗涤一次(20mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得标题化合物2B粗品(100mg，88％)，直接用于下一步。

MS m/z＝561.3[M+1]⁺

第三步：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[(3R)-3-[(4-(4-(2-氟-5-[(4-oxo-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基]哌啶-1-基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-二酮(化合物2)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-[(3R)-3-[(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)me thyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)methyl]pyrrolidin-1-yl]-2,3-dihydro-1H-isoindole-1,3-dione

将化合物(2B)(100mg，0.18mmol)、2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(62mg，0.22mmol)溶于2mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(60mg，0.46mmol)，加完后90℃反应2小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，经液相制备纯化，得到目标化合物2，黄色固体(20mg，产率14％).

MS m/z＝817.3[M+1]⁺

实施例3

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-((4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)甲基)哌啶-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物3)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-(4-((4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)methyl)piperidin-1-yl)isoindoline-1,3-dione

第一步：叔丁基4-((4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢-酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)甲基)哌啶-1-羧酸酯(3A)

tert-butyl4-((4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piper idin-1-yl)methyl)piperidine-1-carboxylate

将化合物(1A)(267mg，0.56mmol)溶解在8mL甲醇和2mL四氢呋喃的混合溶剂中，加入4-甲酰基哌啶-1-羧酸叔丁酯(340mg，1.68mmol)，无水氯化锌(406mg，2.98mmol)，55℃搅拌1h，加入氰基硼氢化钠(140mg，2.24mmol)，继续反应8h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL二氯甲烷和20mL水萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，粗品用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝10:1-5:1)，浓缩得到目标化合物(3A)，土黄色固体(160mg，产率41％)。

MS m/z＝675.3[M+1]⁺

第二步：4-(4-氟-3-(4-(1-(哌啶-4-基甲基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)苄基)酞嗪-1(2H)-酮(3B)

4-(4-fluoro-3-(4-(1-(piperidin-4-ylmethyl)piperidine-4-carbonyl)piperazine-1-carbonyl)benzyl)phthalazin-1(2H)-one

将化合物(3A)(135mg，0.20mmol)溶于5mL二氯甲烷，加入1mL三氟乙酸，室温反应2h。减压除去溶剂和三氟乙酸，加入20mL二氯甲烷，在0℃用碳酸氢钠水溶液调PH＝8,用二氯甲烷萃取2次(20mL×2)，饱和食盐水洗涤一次(20mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得化合物3B粗品(100mg，88％)，直接用于下一步。

MS m/z＝575.3[M+1]⁺

第三步：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-((4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)甲基)哌啶-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物3)

将化合物(3B)(110mg，0.20mmol)、2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(62mg，0.22mmol)溶于2mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(60mg，0.46mmol)，加完后90℃反应2小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，经液相制备纯化，得到目标化合物3，黄色固体(20mg，产率13％).

MS m/z＝831.3[M+1]⁺

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.39–8.34(m,1H),7.97–7.92(m,1H),7.89–7.80(m,2H),7.64(d,1H),7.52–7.45(m,1H),7.39–7.30(m,2H),7.22–7.13(m,2H),5.05(dd,1H),4.38(s,2H),4.07–3.98(m,2H),3.82–3.63(m,4H),3.55–3.47(m,2H),3.37–3.31(m,2H),3.04–2.92(m,4H),2.91–2.55(m,5H),2.30–2.20(m,2H),2.15–1.99(m,3H),1.93–1.64(m,6H),1.35–1.22(m,2H).

实施例4

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-((3aR，6aS)-5-(4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基哌啶-1-基)六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物4)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-((3aR,6aS)-5-(4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)hexahydrocyclopenta[c]pyrrol-2(1H)-yl)isoin doline-1,3-dione

第一步：叔丁基(3aR，6aS)-5-(4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-羧酸酯(4A)

tert-butyl

(3aR,6aS)-5-(4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carb onyl)piperidin-1-yl)hexahydrocyclopenta[c]pyrrole-2(1H)-carboxylate

将化合物(1A)(424mg，0.89mmol)溶解在8mL甲醇和2mL四氢呋喃的混合溶剂中，加入(3aR,6aS)-5-氧六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(270mg，1.2mmol)，无水氯化锌(545mg，4mmol)，55℃搅拌1h，加入氰基硼氢化钠(188mg，3mmol)，继续反应8h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL二氯甲烷和20mL水萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩。粗品用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝10:1-5:1)，得到目标化合物(4A)(230mg，产率49％)黄色固体。

MS m/z＝687.3[M+1]+

第二步：4-(4-氟-3-(4-(1-(((3aR，6aS)-八氢环戊[c]吡咯-5-基)哌啶-4-羰基]哌嗪-1-羰基)苄基]酞嗪-1(2H)-酮(4B)

4-(4-fluoro-3-(4-(1-((3aR,6aS)-octahydrocyclopenta[c]pyrrol-5-yl)piperidine-4-carbonyl)pipera zine-1-carbonyl)benzyl)phthalazin-1(2H)-one

将化合物(4A)(150mg，0.22mmol)溶于5mL二氯甲烷，加入2mL三氟乙酸，室温反应过夜。减压除去溶剂和三氟乙酸，加入20mL二氯甲烷，在0℃用碳酸氢钠水溶液调PH＝8～9，用二氯甲烷萃取(20mL×2)，饱和食盐水洗涤(20mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得目标化合物(4B),黄色油状物(110mg，86％)，直接用于下一步反应。

MS m/z＝587.3[M+1]⁺

第三步：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-((3aR，6aS)-5-(4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基哌啶-1-基)六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物4)

将化合物(4B)(100mg 0.18mmol)、2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(62mg，0.21mmol)溶于2mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(120mg，0.93mmol)，加完后90℃反应2小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，经液相制备纯化，得到目标化合物4，黄色固体(25mg，17％).

流动相体系：乙腈/(含0.05％氨水)水。梯度洗脱：乙腈含量30％-75％，洗脱时间15min。

MS m/z＝843.3[M+1]⁺

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.39–8.33(m,1H),7.98–7.91(m,1H),7.90–7.79(m,2H),7.63(d,1H),7.52–7.44(m,1H),7.41–7.32(m,1H),7.15(t,1H),7.02–6.97(m,1H),6.87–6.80(m,1H),5.04(dd,1H),4.38(s,2H),3.82–3.55(m,6H),3.54–3.46(m,2H),3.46–3.38(m,2H),3.36–3.30(m,2H),3.15–3.03(m,2H),2.92–2.62(m,7H),2.34–2.21(m,2H),2.20–2.05(m,3H),1.85–1.65(m,4H),1.52–1.40(m,2H).

实施例5

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(2-(4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基苯甲酰基)哌嗪-1-羰基哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬基-7-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物5)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-(2-(4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)isoindoline-1,3-dione

第一步：叔丁基2-(4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢-酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸酯(5A)

tert-butyl2-(4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperi din-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonane-7-carboxylate

将化合物(1A)(424mg，0.89mmol)溶解在8mL甲醇和2mL四氢呋喃的混合溶剂中，加入2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(286mg，1.2mmol)，无水氯化锌(545mg，4mmol)，55℃搅拌1h，加入氰基硼氢化钠(188mg，3mmol)，继续反应8h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL二氯甲烷和20mL水萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，浓缩。粗品用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝10:1-5:1)，得到目标化合物(5A)，黄色固体(220mg，产率37％)。

MS m/z＝701.3[M+1]+

第二步：4-(3-(4-(1-(7-氮杂螺[3.5]壬-2-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苄基)酞嗪-1(2H)-酮(5B)

4-(3-(4-(1-(7-azaspiro[3.5]nonan-2-yl)piperidine-4-carbonyl)piperazine-1-carbonyl)-4-fluorobe nzyl)phthalazin-1(2H)-one

将化合物(5A)(150mg，0.21mmol)溶于5mL二氯甲烷，加入2mL三氟乙酸，室温反应8h。减压除去溶剂和三氟乙酸，加入20mL二氯甲烷，在0℃用碳酸氢钠水溶液调PH＝8,用二氯甲烷萃取(20mL×2)，饱和食盐水洗涤一次(20mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得标题化合物(5B),黄色油状物(110mg，86％)，直接用于下一步，.

MS m/z＝601.3[M+1]+

第三步：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(2-(4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基苯甲酰基)哌嗪-1-羰基哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬基-7-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物5)

将化合物(5B)(110mg，0.18mmol)、2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(62mg，0.22mmol)溶于2mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(120mg，0.93mmol)，加完后90℃反应2小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，经液相制备纯化，得到目标化合物5，黄色固体(22mg，12％).

MS m/z＝857.4[M+1]⁺

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.39–8.35(m,1H),7.97–7.92(m,1H),7.90–7.80(m,2H),7.64(d,1H),7.52–7.45(m,1H),7.39–7.30(m,2H),7.22–7.12(m,2H),5.05(dd,1H),4.38(s,2H),3.82–3.64(m,4H),3.54–3.43(m,4H),3.42–3.37(m,2H),3.36–3.30(m,2H),3.02–2.93(m,2H),2.91–2.67(m,5H),2.15–2.05(m,3H),1.99–1.84(m,2H),1.84–1.63(m,10H).

实施例6

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(3-(2-(4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬基-7-基)氮杂环丁烷-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物6)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-(3-(2-(4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methy l)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)azetidin-1-yl)isoindoline-1,3-dione

第一步：叔丁基3-(2-(4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(6A)

tert-butyl3-(2-(4-(4-(2-fluoro-5-((4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl)benzoyl)piperazine-1-carbonyl)pi peridin-1-yl)-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)azetidine-1-carboxylate

将化合物(5B)(440mg，0.73mmol)溶解在8mL甲醇和2mL四氢呋喃的混合溶剂中，加入1-Boc-3-氮杂环丁酮(285mg，1.66mmol)，无水氯化锌(406mg，2.98mmol)，55℃搅拌1h，加入氰基硼氢化钠(140mg，2.24mmol)，继续反应8h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL二氯甲烷和20mL水萃取。有机相用无水硫酸钠干燥，粗品用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝10:1-5:1)，浓缩得到目标化合物(6A)，土黄色固体(200mg，36％)。

MS m/z＝756.4[M+1]⁺

第二步：4-(3-(4-(1-(7-(氮杂环丁烷-3-基)-7-氮杂螺[3.5]壬基-2-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基]-4-氟苄基)酞嗪-1(2H)-酮(6B)

4-(3-(4-(1-(7-(azetidin-3-yl)-7-azaspiro[3.5]nonan-2-yl)piperidine-4-carbonyl)piperazine-1-carb onyl)-4-fluorobenzyl)phthalazin-1(2H)-one

将化合物(6A)(200mg，0.26mmol)溶于5mL二氯甲烷，加入1mL三氟乙酸，室温反应2h。减压除去溶剂和三氟乙酸，加入20mL二氯甲烷，在0℃用碳酸氢钠水溶液调PH＝8,用二氯甲烷萃取2次(20mL×2)，饱和食盐水洗涤一次(20mL×1)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到目标化合物(6B)，黄色油状物(150mg，产率88％)，直接用于下一步。

MS m/z＝656.4[M+1]⁺

第三步：2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(3-(2-(4-(4-(2-氟-5-((4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基)苯甲酰基)哌嗪-1-羰基哌啶-1-基)-7-氮杂螺[3.5]壬基-7-基)氮杂环丁烷-1-基)异吲哚啉-1,3-二酮(化合物6)

将化合物(6B)(100mg，0.15mmol)、2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(62mg，0.22mmol)溶于2mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(60mg，0.46mmol)，加完后90℃反应2小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，经液相制备纯化，得到目标化合物6，黄色固体(20mg，16％).

MS m/z＝912.4[M+1]⁺

实施例7：

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(4-[(4-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)哌啶-1-基)甲基]哌啶-1-基)-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-二酮(化合物7)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-(4-[(4-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)meth yl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)piperidin-1-yl)methyl]piperidin-1-yl)-2,3-dihydro-1H-isoindole-1,3-dione

第一步：

叔丁基4-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)哌啶-1-羧酸酯(7A)

tert-butyl4-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperi din-1-yl)piperidine-1-carboxylate

将1A(1.5g，3.14mmol)溶解在15mL N，N-二甲基乙酰胺中，加入1-Boc-4-哌啶酮(1.25g，6.29mmol)，无水硫酸镁0.5g，乙酸3滴，70℃搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.33g，6.29mmol)，70℃继续反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL饱和NaHCO₃的水溶液调节pH为8，并用乙酸乙酯(50mL×2)萃取两次，合并乙酸乙酯层，乙酸乙酯层用饱和NaCl的水溶液(50mL×1)洗一次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩后残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1-5:1)，浓缩得到标题化合物无色稠状固体(7A)(0.9g，产率43.47％)。

MS m/z＝661.3[M+H]+

第二步：

(4-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)哌啶-1-基)(7B)盐酸盐

(4-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)piperidin-1-yl)Hydrochloride

将7A(0.9g，1.36mmol)溶解在10mL DCM中，加入饱和1,4-二氧六环的盐酸溶液4mL，室温搅拌1小时，反应完成后，减压浓缩除去反应溶剂即得标题化合物7B白色固体(0.8g，98.52％)，直接用于下一步反应.

MS m/z＝561.2[M+H]+

第三步：

叔丁基4-[(4-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)哌啶-1-基)甲基]哌啶-1-羧酸酯(7C)

tert-butyl4-[(4-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)pi peridin-1-yl)piperidin-1-yl)methyl]piperidine-1-carboxylate

将7B(0.4g，0.067mmol)溶解在8mL N，N-二甲基乙酰胺中，加入1-叔丁氧羰基哌啶-4-甲醛(0.29g，0.134mmol)，无水硫酸镁0.15g，乙酸3滴，70℃搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.29g，0.134mmol)，70℃继续反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入30mL饱和NaHCO₃的水溶液调节pH为8，并用乙酸乙酯(30mL×2)萃取两次，合并乙酸乙酯层，乙酸乙酯层用饱和NaCl的水溶液(30mL×1)洗一次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩后残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1-5:1)，浓缩得到标题7C，白色固体(0.2g，产率39.37％)

MS m/z＝758.2[M+H]+

第四步：

4-[(4-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)哌啶-1-基)甲基]哌啶-1-基(7D)盐酸盐

tert-butyl4-[(4-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)pi peridin-1-yl)piperidin-1-yl)methyl]piperidine-1-yl Hydrochloride

将7C(0.2g，0.026mmol)溶解在10mL DCM中，加入饱和1,4-二氧六环的盐酸溶液1.5mL，室温搅拌1小时，反应完成后，减压浓缩除去反应溶剂即得标题化合物7D，白色固体(0.18g，98.36％)，直接用于下一步反应.

MS m/z＝658.2[M+H]+

第五步：

将7D(180mg，0.026mmol),2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(143mg，0.052mmol)溶于8mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(100mg，0.078mmol)，加完后100℃反应3小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，柱层析(DCM：MeOH＝20:1)，得到标题化合物7，黄色固体(40mg，产率16.87％).

MS m/z＝914.2[M+H]+

实施例8：

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-[(3R)-3-[(4-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)哌啶-1-基)甲基]吡咯烷-1-基]-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-二酮(化合物8)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-[(3R)-3-[(4-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)piperidin-1-yl)methyl]pyrrolidin-1-yl]-2,3-dih ydro-1H-isoindole-1,3-dione

第一步：

叔丁基(3R)-3-[(4-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)哌啶-1-基)甲基]吡咯烷-1-羧酸酯(8A)

tert-butyl

(3R)-3-[(4-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbo nyl)piperidin-1-yl)piperidin-1-yl)methyl]pyrrolidine-1-carboxylate

将7B(0.4g，0.067mmol)溶解在8mL N，N-二甲基乙酰胺中，加入(3S)-3-甲酰基-1-吡咯烷甲酸叔丁酯(267mg，0.13mmol)，无水硫酸镁0.2g，乙酸3滴，70℃搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(284mg，0.13mmol)，70℃继续反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL饱和NaHCO₃的水溶液调节pH为8，并用乙酸乙酯(50mL×2)萃取两次，合并乙酸乙酯层，乙酸乙酯层用饱和NaCl的水溶液(50mL×1)洗一次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩后残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1-5:1)，浓缩得到标题8A，白色固体(0.15g，30.12％)

MS m/z＝744.1[M+H]+

第二步：

4-[(4-氟-3-(4-(1-(1-{[(3S)-吡咯烷-3-基]基}哌啶-4-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)苯基)甲基]-1,2-二氢酞嗪-1-酮(8B)盐酸盐

4-[(4-fluoro-3-(4-(1-(1-{[(3S)-pyrrolidin-3-yl]methyl}piperidin-4-yl)piperidine-4-carbonyl)pipe razine-1-carbonyl)phenyl)methyl]-1,2-dihydrophthalazin-1-one Hydrochloride

将8A(0.15g，0.020mmol)溶解在8mL DCM中，加入饱和1,4-二氧六环的盐酸溶液1.5mL，室温搅拌1小时，反应完成后，减压浓缩除去反应溶剂即得标题化合物8B，白色固体(0.13g，94.89％)，直接用于下一步反应.

MS m/z＝644.2[M+H]+

第三步：

将8B(130mg，0.020mmol),2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(111mg，0.040mmol)溶于8mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(78mg，0.060mmol)，加完后100℃反应3小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，柱层析(DCM：MeOH＝20:1)，得到标题化合物8，黄色固体(25mg，14.53％).

MS m/z＝900.2[M+H]+

实施例9：

2-(2,6-二氢哌啶-3-基)-5-(3-(3-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)氮杂环丁-1-基)氮杂环丁-1-基)-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-二酮(化合物9)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-(3-(3-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methy l]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)azetidin-1-yl)azetidin-1-yl)-2,3-dihydro-1H-isoindol e-1,3-dione

第一步：

叔丁基3-(3-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)氮杂环丁-1-羧酸酯(9A)

tert-butyl3-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperi din-1-yl)azetidine-1-carboxylate

将1A(3g，6.29mmol)溶解在25mL N，N-二甲基乙酰胺中，加入1-Boc-3-氮杂环丁酮(2.15g，12.58mmol)，无水硫酸镁1.5g，乙酸15滴，70℃搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(2.65g，12.58mmol)，70℃继续反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入80mL饱和NaHCO₃的水溶液调节pH为8，并用乙酸乙酯(80mL×2)萃取两次，合并乙酸乙酯层，乙酸乙酯层用饱和NaCl的水溶液(80mL×1)洗一次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩后残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1-5:1)，浓缩得到标题9A，白色固体(2.1g，52.89％)

MS m/z＝633.1[M+H]+

第二步：

4-[(3-(4-(1-(氮杂环丁-3-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苯基)甲基]-1,2-二氢酞嗪-1-酮(9B)盐酸盐

4-[(3-(4-(1-(azetidin-3-yl)piperidine-4-carbonyl)piperazine-1-carbonyl)-4-fluorophenyl)methyl]-1,2-dihydrophthalazin-1-one Hydrochloride

将9A(2.1g，3.32mmol)溶解在15mL DCM中，加入饱和1,4-二氧六环的盐酸溶液5mL，室温搅拌1小时，反应完成后，减压浓缩除去反应溶剂，即得标题化合物9B粗品，白色固体(1.9g)，直接用于下一步反应.

MS m/z＝533.2[M+H]+

第三步：

叔丁基3-(3-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)氮杂环丁-1-基)氮杂环丁-1-羧酸酯(9C)

tert-butyl3-(3-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)pi peridin-1-yl)azetidin-1-yl)azetidine-1-carboxylate

将9B(1g，1.76mmol)溶解在15mL N，N-二甲基乙酰胺中，加入1-Boc-3-氮杂环丁酮(0.75g，3.5mmol)，无水硫酸镁0.8g，乙酸6滴，70℃搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.74g，3.5mmol)，70℃继续反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL饱和NaHCO₃的水溶液调节pH为8，并用乙酸乙酯(50mL×2)萃取两次，合并乙酸乙酯层，乙酸乙酯层用饱和NaCl的水溶液(50mL×1)洗一次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩后残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1-5:1)，浓缩得到标题9C，白色固体(0.75g，2.5％)

MS m/z＝688.1[M+H]+

第四步：

4-[(3-(4-(1-(1-(氮杂环丁-3-基)氮杂环丁-3-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苯基)甲基]-1,2-二氢酞嗪-1-酮(9D)盐酸盐

4-[(3-(4-(1-(1-(azetidin-3-yl)azetidin-3-yl)piperidine-4-carbonyl)piperazine-1-carbonyl)-4-fluor ophenyl)methyl]-1,2-dihydrophthalazin-1-oneHydrochloride

将9C(0.3g，0.43mmol)溶解在5mL DCM中，加入饱和1,4-二氧六环的盐酸溶液1.5mL，室温搅拌1小时，反应完成后，减压浓缩除去反应溶剂即得标题化合物9D粗品，白色固体(0.28g)，直接用于下一步反应.

MS m/z＝588.2[M+H]+

第五步：

将9D(0.28g，0.045mmol),2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(248mg，0.090mmol)溶于10mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(174mg，0.135mmol)，加完后100℃反应3小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，柱层析(DCM：MeOH＝20:1)，得到标题化合物9，黄色固体(50mg，13.22％).

MS m/z＝844.2[M+H]+

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.39–8.33(m,1H),7.98–7.78(m,3H),7.62(d,1H),7.53–7.45(m,1H),7.40–7.31(m,1H),7.15(t,1H),6.84–6.77(m,1H),6.69–6.62(m,1H),5.04(dd,1H),4.38(s,2H),4.14–4.04(m,2H),3.93–3.85(m,2H),3.82–3.63(m,5H),3.60–3.46(m,4H),3.37–3.24(m,2H),3.17–3.00(m,3H),2.91–2.60(m,6H),2.15–1.89(m,3H),1.84–1.64(m,4H).

实施例10：

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(3-[(3-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)氮杂环丁-1-基)甲基]氮杂环丁-1-基)-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-酮(化合物10)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-(3-[(3-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)meth yl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)azetidin-1-yl)methyl]azetidin-1-yl)-2,3-dihydro-1H-isoindole-1,3-dione

第一步：

叔丁基3-[(3-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)氮杂环丁-1-基)甲基]氮杂环丁-1-羧酸酯(10A)

tert-butyl3-[(3-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)pi peridin-1-yl)azetidin-1-yl)methyl]azetidine-1-carboxylate

将9B(0.4g，0.070mmol)溶解在10mL N，N-二甲基乙酰胺中，加入3-甲酰氮杂环丁烷-1-碳酸叔丁酯(0.26g，0.14mmol)，无水硫酸镁0.2g，乙酸6滴，70℃搅拌1h，加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.3g，0.14mmol)，70℃继续反应2h。反应结束后，冷却至室温，加入50mL饱和NaHCO₃的水溶液调节pH为8，并用乙酸乙酯(50mL×2)萃取两次，合并乙酸乙酯层，乙酸乙酯层用饱和NaCl的水溶液(50mL×1)洗一次，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩后残留物用硅胶柱色谱分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝20:1-5:1)，浓缩得到标题10A，白色固体(0.15g，30.42％).

MS m/z＝702.1[M+H]+

第二步：

4-[(3-(4-(1-(1-[(氮杂环丁-3-基)甲基]氮杂环丁-3-基)哌啶-4-羰基)哌嗪-1-羰基)-4-氟苯基)甲基]-1,2-二氢酞嗪-1-酮(10B)盐酸盐

4-[(3-(4-(1-(1-[(azetidin-3-yl)methyl]azetidin-3-yl)piperidine-4-carbonyl)piperazine-1-carbonyl)-4-fluorophenyl)methyl]-1,2-dihydrophthalazin-1-one Hydrochloride

将10A(0.15g，0.021mmol)溶解在5mL DCM中，加入饱和1,4-二氧六环的盐酸溶液1.5mL，室温搅拌1小时，反应完成后，减压浓缩除去反应溶剂即得标题化合物10B，白色固体(0.11g,80.88％)，直接用于下一步反应.

MS m/z＝602.2[M+H]+

第三步：

将10B(0.11g，0.017mmol),2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(95mg，0.034mmol)溶于10mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(67mg，0.051mmol)，加完后100℃反应3小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，柱层析(DCM：MeOH＝20:1)，得到标题化合物10，黄色固体(15mg，10.13％).

MS m/z＝858.2[M+H]+

实施例11：

2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-5-(3-(4-(4-(2-氟-5-[(4-氧代-3,4-二氢酞嗪-1-基)甲基]苯甲酰基)哌嗪-1-羰基)哌啶-1-基)氮杂环丁-1-基)-2,3-二氢-1H-异吲哚-1,3-酮(化合物11)

2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-(3-(4-(4-(2-fluoro-5-[(4-oxo-3,4-dihydrophthalazin-1-yl)methyl]benzoyl)piperazine-1-carbonyl)piperidin-1-yl)azetidin-1-yl)-2,3-dihydro-1H-isoindole-1,3-dione

将9B(0.1g，0.017mmol),2-(2,6-二氧代-3-哌啶基)-5-氟二氢异吲哚-1,3-二酮(95mg，0.034mmol)溶于10mL DMSO中，加入N,N-二异丙基乙胺(67mg，0.051mmol)，加完后100℃反应3小时。反应结束后，冷却至室温，加入水10mL，过滤，滤饼用20mL二氯甲烷溶解，再用5mL饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所得到粗品，柱层析(DCM：MeOH＝20:1)，得到标题化合物11，黄色固体(18mg，13.04％).

MS m/z＝789.2[M+H]+

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.39–8.34(m,1H),7.97–7.40(m,1H),7.91–7.79(m,2H),7.63(d,1H),7.53–7.45(m,1H),7.41–7.32(m,1H),7.16(t,1H),6.86–6.81(m,1H),6.71–6.64(m,1H),5.04(dd,1H),4.38(s,2H),4.20–4.10(m,2H),3.93–3.85(m,2H),3.82–3.63(m,4H),3.56–3.46(m,2H),3.36–3.31(m,2H),3.04–2.93(m,2H),2.90–2.62(m,5H),2.16–1.98(m,3H),1.86–1.69(m,4H).

生物测试例

1.细胞增殖抑制实验

乳腺瘤细胞MDA-MB-436，购置于ATCC，培养基为Leibovitz's L-15+10％FBS，培养于37℃,无CO₂孵箱中。第一天收集处于指数生长期的细胞，用培养基将细胞悬液调整到相应的浓度，MDA-MB-436细胞浓度为4000个/135μL。每孔加135μL细胞悬液于96-孔细胞培养板，孵育过夜。第二天，加入不同浓度的化合物，置于孵箱中培养，MDA-MB-436细胞孵育7天。培养结束后，按照CellTiter-Glo试剂盒(Promega，G7573)操作说明，每孔加入75μL预先融化并平衡到室温的CTG溶液，用微孔板震荡器混匀2分钟，于室温放置10分钟后用Envision2104读板仪(PerkinElmer)测定萤光信号值。抑制率使用式(1)计算，其中RLU_compound为药物处理组的读数，RLU_control为溶剂对照组的平均值，RLU_blank为无细胞孔平均值。应用GraphPad Prism软件，计算IC₅₀值。

IR(％)＝(1–(RLU_compound–RLU_blank)/(RLU_control–RLU_blank))*100％(式1)

本发明化合物对乳腺瘤细胞MDA-MB-436活性测试结果见表1。

表1本发明化合物对乳腺瘤细胞MDA-MB-436活性测试结果

编号	IC<sub>50</sub>(nM)
		Olaparib	247
化合物1	18
		化合物2	6
化合物3	27
		化合物4	25
化合物5	9
		化合物6	30
化合物7	61
		化合物8	35
化合物9	68
		化合物10	25
化合物11	20

结论：运用本发明技术合成的化合物对MDA-MB-436细胞(乳腺癌细胞)具有明显的细胞增殖抑制活性。