CN103153295A - 来氟米特和丙二腈酰胺类似物的新用途 - Google Patents

Abstract

本文中所提供的是用于治疗中枢神经系统（CNS）-创伤相关疾病如骨髓损伤的化合物、单一单位剂量形式，并公开了适用于食疗（CNS）-创伤相关疾病的试剂盒。

Description

来氟米特和丙二腈酰胺类似物的新用途

技术领域

本文中所提供的技术是涉及来氟米特及其活性代谢衍生物在治疗中枢神经系统（CNS）-创伤相关疾病中的新用途。

背景技术

中枢神经系统（CNS）-创伤一般是由伤害所引起，例如不致命的脊柱和头部受伤，给人的身体带来毁灭性的生理和心理的影响。这些伤害许多是由常见事件造成，例如车祸、严重跌落、潜水事故、压倒的工伤和枪伤或刺伤。

脊髓损伤（SCI）和创伤性脑损伤（TBI）通过直接和间接两种方式或继发性方式引起组织损伤。直接的组织损伤通常是由对组织的直接机械性损伤造成。继发性组织损伤被认为是由内源性的、自我毁灭的，神经化学物质的激活引起的。其他类型的急性CNS损伤，如中风或缺氧，也表现出继发性组织损伤，表明许多继发性损伤与神经外伤相关。

创伤性脑损伤（TBI）是机械损伤中的一种。TBI的病理生理学一般可分为原发性损伤和继发性损伤。原发性损伤是在冲击时发生的，而继发性损伤是在对原发性损伤的身体反应的次级影响后发生的。每一个原发性损伤和继发性损伤都可以分为病灶型和弥漫型。病灶型倾向于由接触力引起的，而弥漫型很可能是由非接触、加速-减速、或旋转力引起的。

弥漫性轴索损伤（DAI）是由与加速-减速和旋转损伤相关的力引起的。DAI是一种轴突的轴突剪切损伤，其最经常在中线结构，包括大脑皮层的矢状窦旁白质、胼胝体、以及与脑梗毗邻的脑桥交界处。外伤损伤后可能会发展为脑外伤后综合征。该综合征包括脑积水、意识水平改变、头痛、偏头痛、恶心、呕吐、记忆力减退、头晕、复视、视力模糊、情绪不稳、睡眠障碍、易怒、注意力无法集中、精神紧张、行为障碍、认知功能障碍、以及癫痫。癫痫通常是在挫伤、颅骨凹陷性骨折和头部严重受伤后观察到的。颅内感染是TBI的另一个潜在并发症。当颅底骨折或脑脊液漏时，感染的风险增加。CNS损伤/损害的其他引起原因包括神经化学和细胞的变化、低血压、缺氧、缺血、电解质失衡、伴随脑灌注压（CPP）降低的ICP升高和脑疝的风险。脑区域循环的急性损失会导致脑缺血和相应的神经功能缺失。无论被分类为出血性的或缺血的，中风通常表现为突然发作的病灶性神经功能障碍，例如无力、感知障碍、或语言困难。缺血性中风具有异类的原因，包括血栓形成、栓塞、低灌注，而出血性中风是脑实质的或蛛网膜下的。由于血流量的减少，神经细胞停止运作，和不可逆的神经缺血和损伤使得血流速度不到18mL/100mg/分。

细胞水平的中风损伤所涉及的过程被称为缺血级联。在几秒钟至几分钟内的葡萄糖和氧传递到神经元的损失，开始细胞缺血级联。该过程开始于细胞的电生理功能的停止。在中风后的几小时至几天内结果的神经元和神经胶质细胞的损伤产生水肿，对周围的神经组织造成进一步的伤害。

脊髓损伤（SCI）是一种由对脊髓损害导致的变化，无论是暂时或永久的，在其正常的运动、感知或植物神经功能中。

原发性SCI起因于机械破坏、断裂、硬膜外病变、或神经元素的干扰。这种损伤通常与脊柱骨折和/或脱位同时发生。然而，原发性SCI也可能会发生在没有脊柱骨折或脱位的情况下。由于子弹或武器的穿透伤也可能会导致原发性SCI。更常见的是，位移的骨头碎片造成穿透脊髓或节段脊柱神经损伤。硬膜外病变也可能引起原发性SCI。脊髓硬膜外血肿或脓肿会引起急性脊髓压迫和损伤。来自转移性疾病的脊髓受压是一种常见的肿瘤紧急情况。带或不带脊柱屈曲和/或延长的纵向干扰可能会导致没有脊柱骨折或脱位的原发性SCI。

继发性SCI的病理生理过程涉及众多的细胞和分子事件，在受伤后的最初几天发生。继发性SCI的最重要的原因是对脊髓的血管损伤，由撞击引起的动脉破坏、动脉血栓形成、及血流灌注不足所造成。 SCI通过来自于损害的缺血或脊髓动脉的冲击来持续。 因缺血的SCI可能会在主动脉血流被暂时停止的手术过程中发生。

脊髓损伤也可由毒性引起。在脊髓损伤中一个最引人注目的毒性是由兴奋性氨基酸类神经递质的积累和随后造成的损害所施加的。谷氨酸引起的兴奋性毒性导致细胞内钙升高。升高的细胞内钙离子进而导致钙依赖蛋白酶和脂肪酶的激活，又由于细胞骨架的组成部分破裂进一步造成损害，包括神经丝蛋白和细胞膜溶解。花生四烯酸和类花生酸例如前列腺素的过量产生与脂质过氧化和氧自由基相关。从受损的神经细胞膜的血管活性类花生酸的释放通过诱导血管痉挛从而引起进行性创伤后脑缺血。内源性阿片类药物也有可能参与继发性损伤过程中，或通过其对局部或体循环的影响或通过对脊髓的直接影响。

SCI会导致神经性休克。神经性休克指的是由于自主神经功能障碍和急性SCI中的脊髓交感神经系统控制的中断产生的血流动力学的低血压、心动过缓、和周围血管扩张，并且有别于脊柱和低血容量性休克。低血容量性休克往往是与心动过速有关。脊髓休克定义为所有神经功能的完全丧失，包括反射和直肠音，低于特定水平，与自主神经功能障碍有关。由于儿茶酚胺的释放注意到血压的最初增加，然后是血压过低。观察弛缓性麻痹，包括肠和膀胱，且有时发生持续性阴茎异常勃起。这些症状往往持续数小时至数天，直到反射弧低于损伤再次开始发挥功能的水平。

目前治疗SCI的目的是改善疾病患者的运动功能和感知。目前，没有试剂能持续有效的治疗这种疾病。皮质类固醇是主要的治疗物。皮质类固醇，如甲基强的松龙被认为可减少急性SCI的继发效应，并且在过去十年中，尤其是在北美在非穿透性急性SCI中使用大剂量的甲基强的松龙脊髓一直在增加。然而，结果的有效性是值得怀疑的。

因此，能够治疗CNS-创伤有关的疾病的新的方法和化合物是必要的。

发明概述

在第一方面，本发明披露的实施例提供了用于治疗中枢神经系统（CNS）-创伤相关的疾病的化合物。

在另一方面，本发明披露的实施例提供了包含了本发明公开的化合物的药物组合物、单一单位剂量形式及试剂盒，适合于用于治疗中枢神经系统（CNS）-创伤相关的疾病。

在进一步的方面，本发明公开的实施例涉及治疗和预防CNS-创伤相关的疾病的方法，包括给予需要这种治疗或预防的病人在治疗上或在预防上有效量的本发明公开的化合物。

进一步的，本发明公开的实施例涉及到异恶唑-4 -甲酰胺或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体、笼形物、或它们的前药用于治疗中枢神经系统（CNS）-创伤相关的疾病。

在其它方面，本发明公开涉及丙二腈酰胺类似物或药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体、笼形物、或它们的前药用于治疗中枢神经系统（CNS）-创伤相关的疾病。

进一步的，本发明公开的实施例涉及使用来氟米特或丙二腈酰胺类似物用于治疗中枢神经系统（CNS）-创伤相关的疾病。

附图的简要说明

图1是挫伤和灌服来氟米特后的BBB值。

图2是来氟米特处理动物和赋形剂对照处理动物在DPO63的各个BBB值。

图3是在赋形剂对照动物、来氟米特处理动物和健康对照动物中的探索站立试验结果。

图4是挫伤和灌服20mgHR325治疗后的BBB值。

图5是20mgHR325处理动物和赋形剂对照处理动物在DPO63的各个BBB值。

图6是在赋形剂对照动物、20mgHR325处理动物和健康对照动物中的探索站立试验结果。

图7是挫伤和灌服3mg、20mg和60mg HR325治疗后的BBB值。

图8是3mg、20mg和60mg HR325处理动物和赋形剂对照处理动物在DPO63的各个BBB值。

图9是在赋形剂对照动物、3mg和20mg HR325处理动物和健康对照动物中的探索站立试验结果。

图10是挫伤和灌服3mg和10mg特立氟胺治疗后的BBB值。

图11是3mg和10mg特立氟胺处理动物和赋形剂对照处理动物在DPO63的各个BBB值。

图12是挫伤和灌服10mg和30mgHR325治疗后的BBB值。

图13是10mg和30mg HR325处理动物和赋形剂对照处理动物在DPO63的各个BBB值。

发明详述

本文公开的是使用来氟米特、活性代谢物和/或其衍生物来治疗中枢神经系统（CNS）-创伤相关的疾病。

例如，（CNS）-创伤相关疾病包括完全性脊髓损伤、不完全性脊髓损伤、脊髓挫伤、脊髓压迫症、脊髓创伤、脊髓损伤、截瘫、四肢瘫痪、四肢麻痹、脊髓中央综合症、脊髓半侧损害综合症、前线综合症、脊髓圆锥综合症、马尾综合症、创伤性脑损伤、TBI、脑损伤、脑损害、颅脑损伤、弥漫性轴索损伤（DAI）、头部创伤、脑震荡、脑挫裂伤、硬膜下血肿、硬膜外血肿、蛛网膜下腔出血、脑出血和CNS压缩。

在有利的本发明实施例中，（CNS）-创伤相关疾病是脊髓损伤，如完全性脊髓损伤、不完全性脊髓损伤、脊髓挫伤、脊髓压迫症、脊髓创伤、脊髓损伤。在有利的实施例中，（CNS）-创伤相关疾病是脊髓挫伤。

在进一步有利的实施例中，用于治疗创伤相关疾病的化合物是来氟米特、来氟米特的活性代谢物和/或丙二腈酰胺类似物。

在一个有利的实施例中，来氟米特的活性代谢物是丙二腈酰胺和/或其衍生物。

来氟米特及其主要的代谢物、丙二腈酰胺（MNA）都是第一个由安万特制备。

例如，丙二腈酰胺715（FK778）是衍生自来氟米特特立氟胺的活性代谢物（之前A771726）。

本发明公开的具体化合物是在美国专利号5532259、国际专利申请WO91/717748及在Kuo等（Kuo等，1996）中所描述的衍生物和代谢物， 通过引用的方式包含在本文中。

在一些实施例中，在WO2004/006834A2中所描述的来氟米特类似物也用于在本发明公开中所述的治疗。

根据说明书中所示的在用于化合物的制备的Kuo等（Kuo等，1996）的实施例中，每一个都通过引用包含在本文中。

在有利的实施例中，来氟米特的活性代谢物的衍生物是丙二腈酰胺类似物或其药学上可接受的盐、溶剂化物或立体异构体。

用于治疗（CNS）-创伤相关疾病的化合物的具体的实施例中包括但不限于以下结构的化合物（化合式I至VI）：

在进一步有利的实施例中，化合物是N-（4 -三氟甲基苯基）- 5-甲基异恶唑-4-甲酰胺、N-（4-三氟甲基）-苯基-2-氰基-3-羟基-丁酰胺、1（3 -甲基-4-三氟甲基苯基-氨基甲酰基）-2 -环丙基-2氧代-丙腈、是N-（4-三氟甲基）-苯基-2-氰基-3-羟基-庚-2-烯-6-羧酸酰胺和2-氰基-3-环丙基-3-氧代-（4-氰基苯基）丙酰胺或药学上可接受的盐、溶剂化物或立体异构体。

在有利的实施例中，化合物是1（3-甲基-4-三氟甲基苯基-氨基甲酰基）-2-环丙基-2氧代-丙腈或N-（4 -三氟甲基）-苯基-2 -氰基-3-羟基-巴豆酰胺。

在进一步有利的实施例中，化合物具有化学式为I或III的结构。

在进一步有利的实施例中，根据本发明的化合物在治疗CNS-创伤相关疾病中是使用唯一的生理活性试剂而没有第二种活性试剂。

在另一个有利的实施例中，公开内容涉及用于预防和/或治疗CNS-创伤相关疾病的药物组合物，其包含治疗有效量的本发明公开的化合物混合药学上可接受的载体或者赋形剂。

在有利的实施例中，根据本发明的药物组合物包括一个本发明的化合物且组合物中没有第二活性成分。在一个优选的实施例中，使用来氟米特作为治疗CNS-创伤相关的疾病的唯一活性剂。在一个优选的实施例中，使用来氟米特用于治疗CNS-创伤相关的疾病，而没有一种免疫调节化合物作为第二活性剂。

在有利的实施例中，用于预防和/或治疗CNS-创伤相关的疾病的药物组合物，其中该组合物包括在治疗上有效量的来氟米特或其具有生理功能的衍生物结合药学上可接受的载体或赋形剂。在有利的实施例中，该药物组合物包含丙二腈酰胺类似物，选自N-（4 -三氟甲基）-苯基-2 -氰基-3-羟基-巴豆酰胺、（1（3 -甲基-4-三氟甲基苯基-氨基甲酰基）-2 -环丙基-2氧代-丙腈）、N-（4-三氟甲基）-苯基-2-氰基-3-羟基-庚-2-烯-6-羧酸酰胺和2-氰基-3-环丙基-3-氧代-（4-氰基苯基）丙酰胺或药学上可接受的盐、溶剂化物或立体异构体。

本发明的化合物可以通过市场上购买或者根据出版物公开文本中所描述的方法制备，如本文中所公开的专利或专利公开文本。此外，光学纯的组合物可以不对称合成或者利用已知的拆分试剂或者手性柱及其他标准有机合成化学技术实现。本公开文本中的化合物包括外消旋的、立体异构富集的或者立体异构纯的化合物及药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体、以及它们的前药。

根据本发明使用的优选的化合物是分子量小于约1,000 克/摩尔的小的有机分子，而不是蛋白质、肽、寡核苷酸、寡糖或其它大分子。

如本文中所使用及除非另有说明，术语“药学上可接受的盐”包括术语中所提及的化合物的无毒的酸和碱加成的盐。可接受的非毒性的酸加成盐包括由现有技术中已知的有机和无机的酸或碱衍生的盐，其中包括，例如，盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、甲磺酸、乙酸、酒石酸、乳酸酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、马来酸、山梨酸、乌头酸、水杨酸、邻苯二甲酸、栓塞酸、庚酸和类似物。酸性性质的化合物能与各种药学上可接受的碱形成的盐。用于制备这种酸性化合物的药学上可接受的碱加成盐的碱，可以是那些来自于无毒的碱加成盐，即，如含有药学上可接受的阳离子的盐，例如但不限于碱金属或碱土金属的盐和特别是钙、镁、钠或钾的盐。合适的有机碱包括但不限于N，N-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、莫林、甲苯、乙二胺、葡甲胺（N-甲基葡糖胺）、赖氨酸、和普鲁卡因。

如本文所用，及除非另外指明，术语“溶剂化物”是指在本专利公开的化合物或其盐，进一步包括通过非共价分子间力约束的化学计量或非化学计量的溶剂。其中的溶剂是水时，溶剂化物是水合物。

如本文所用及除非另有指明，术语“前药”指的是在可水解、氧化、或一定生物条件下（体外或体内）以其他方式反应的化合物的衍生来提供的化合物。前药的实施例包括但不限于，根据本公开的化合物的衍生物，包括可生物水解的分子，如可生物水解的酰胺、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲、和可生物水解的磷酸类似物。前药的其它实施例包括公开的免疫调节化合物的衍生物，包括-NO、-NO2、-ONO、或-ONO2分子。前药通常可以使用已知的方法制备，如在伯格的药物化学和药物发现，172-178，949-982（Manfred E. Wolff ed.，第五版，1995）中所描述，和前药的设计（H. Bundgaard ed.， 爱思唯尔，纽约，1985）中所描述。如本文中所使用及除非另有说明，术语“可生物水解的酰胺”，“可生物水解的酯”，“可生物水解的氨基甲酸盐”，“可生物水解的碳酸酯”，“可生物水解的酰脲”，“生物水解的磷酸”分别指的是化合物的酰胺、酯、氨基甲酸酯、碳酸酯、酰脲、或磷酸盐，其或者1）不干扰化合物的生物活性，但可以赋予该化合物在体内好的性能，如吸收、作用持续时间、或起始作用；或2）没有生物活性，但在体内可转化为生物活性化合物。可生物水解的酯的实施例包括但不限于，低级烷基酯、低级酰氧基烷基酯（如乙酰氧基甲基、乙酰氧基乙基、氨基羰基氧基甲基、新戊酰氧甲基、以及新戊酰氧乙基酯）、内酯酯（如苯并呋喃酮和硫代苯并呋喃酮酯）、低级烷氧酰氧烷基酯（如甲氧羰基-氧甲基、乙氧羰氧乙基和异丙酯）、烷氧基烷基酯、胆碱酯和酰氨基烷基酯（如乙酰氨基甲基酯）。可生物水解的酰胺类的实施例包括但不限于，低级烷基酰胺、[α]-氨基酸酰胺、烷氧基酰基酰胺、和烷基氨基烷基羰基酰胺。可生物水解的氨基甲酸酯的实施例包括但不限于，低级烷基胺、取代的乙二胺类、氨基酸、羟烷基胺、杂环基和杂芳族胺、和聚醚胺。

如本文所用，及除非另外指明，术语“立体异构体”包括本文中公开的所有对映体/立体异构纯的和对映体/立体异构的富集化合物。此外，术语“立体异构体”也包括互变异构体，是容易通过化学反应（互变异构）互相转换的有机化合物的互变异构体。

如本文中所使用，及除非另有说明，否则术语“立体异构纯的”或“对映体纯的”是指包括一种立体异构体并且基本没有其反立体异构体或对映体的化合物。例如，一种化合物是立体异构纯的或对映体纯的，当该化合包含80%、90%、或95%或更多的一种立体异构体及20%、10%、或5%或更少的反立体异构体，在某些情况下，本公开的化合物被认为是光学活性或立体异构的/对映体纯的{即，基本是R-构型或基本是S-构型），相对于一个手性中心，当化合物是约80％ee的（对映体过量）或更高，优选地，相对于一个特定的手性中心，等于或大于90％ee，更优选相对于一个特定的手性中心为95％ee。

如本文所使用，及除非另有说明，术语“立体异构富集的”或“对映体富集的”包括外消旋混合物，以及公开的化合物的立体异构体的其他混合物{例如，RIS= 30/70、35/65、40/60、45/55、55/45、60/40、65/35和70/30）。本文公开的各种抑制剂化合物含有一个或多个手性中心，并且可以作为对映异构体的外消旋混合物或非对映异构体混合物存在。本文包括这样的化合物的立体异构体纯的形式的使用，以及这样形式的混合物的使用。例如，包括等量的或不等量的本文中的一个特定的抑制剂化合物的对映体的混合物可以用于本文中的方法和组合物。这些异构体可以利用标准技术不对称合成或溶解，如手性柱或手性拆分剂。参见，例如，Jacques, J.,等，Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley-Interscience, 纽约，1981)；Wilen, S. H., 等, Tetrahedron 33:2725 (1977); Eliel, E. L., Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, 纽约，1962); 及Wilen, S. H., Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p. 268 (E.L. Eliel, Ed., 巴黎圣母院大学出版，巴黎圣母院，印度，1972)。

应该指出的，如果在一个所述结构和对该结构给出的名称之间存在不符，所描绘的结构的份量更重。此外，如果没有表示一个结构的立体化学或一个结构的一部分，例如，粗体或虚线，该结构或部分的一部分应被解释为包括它的所有立体异构体。

本文所使用的术语“生理学功能的衍生物”是指其自身没有药物活性但在体内被转化为它们的药物活性形式的化合物，即服用的该化合物的形式。生理学功能的衍生物的实施例是前药，如在本申请中下面所描述的那些。

本文所用的术语“衍生物”是指衍生自相似的化合物的化合物，或者猜想能从另一化合物产生的化合物，如果一个原子被另一个原子或者原子基团取代。本文中所用的术语“衍生物”是指至少在理论上可以由前体化合物形成（参见生物化学与分子生物学牛津字典，牛津大学出版社，ISBN0-19-850673-2）。在本文公开的有利的实施例中，术语“衍生物”是用于来自于来氟米特和/或来氟米特的活性代谢物如特立氟胺。特立氟胺的衍生物的有利实施例是丙二腈酰胺和/或其衍生物。

本公开文本还涉及化学式为I、II、III、IV、V或VI化合物及其药学上可耐受的盐或具有生理功能的衍生物用于制备预防或治疗CNS-创伤的药物。

根据本公开文本的方法和用途包括预防、治疗和/或负责CNS损伤/损害及相关的综合症及CNS-创伤相关疾病及CNS-创伤相关状况，包括但不限于原发性脑损伤、继发性脑损伤、创伤性脑损伤、病灶性脑损伤、弥漫性轴索损伤、颅脑损伤、脑震荡、脑震荡后综合征、脑挫裂伤、硬脑膜下血肿、表皮血肿、创伤后癫痫、慢性植物人状态、完全性SCI、不完全性SCI、急性SCI、亚急性SCI、慢性SCI伤、脊髓中央综合症、脊髓半侧损害综合症、前线综合症、脊髓圆锥综合症、马尾综合症、神经性休克、脊髓休克、意识水平改变、头痛、恶心、呕吐、记忆力减退、头晕、复视、视力模糊、情绪不稳、睡眠障碍、易怒、注意力无法集中、精神紧张、行为障碍、认知功能障碍、以及癫痫。

与CNS损伤/损害及CNS-创伤相关的症状、状况和/或疾病包括但不限于肌力减退（特别是下肢轻瘫或四肢瘫痪或无呼吸窘迫）；失去感知功能或大小便失禁；性功能障碍；神经性休克症状，如头昏、出汗、心动过缓、体温低、无代偿性心动过速的低血压；呼吸功能不全；上肢和下肢的反射消失的四肢瘫痪；在受影响水平以下的麻木；直肠和膀胱括约肌的张力受损；尿和肠道保留导致腹胀、肠梗阻、及胃排空延迟；患侧眼睑下垂，瞳孔缩小，无汗症；丧失温度感知的麻痹；相对贫乏的触觉、震动和本体感受；分离性感觉缺失；手臂无力，机能障碍水平以下修补感觉受损；机能障碍水平以下的震动和方位感受损，反射亢进，及伸趾标志；同侧节段性麻醉；和多发性神经根病，神经根的感知变化，不对称下运动神经元型腿无力，及括约肌障碍。

采用特定的活性试剂的根据本文公开的化合物的给服的合适的特定途径决定于活性试剂本身（例如，它是否可以口服给药而在进入血流之前不分解）及所治疗的疾病。根据本公开文本的给服化合物的有利实施例是口服。进一步的给药途径对于本技术领域的普通技术人员是已知的。

至少一种化合物的治疗有效量的剂量是变化的并取决于待治疗的每个病人的年龄和状况。在本文公开的一个实施例中，根据本文中所公开的病症和疾病的化合物的建议每日剂量范围，用于预防和/或治疗该疾病的每日剂量为活性成分1mg/10g体重，优选的为5mg/10g体重及更优选的为10mg-2g/体重，且平均单次剂量为约0.5-1 mg、5 mg、10 mg、50 mg、100 mg、250 mg、500 mg、1 g、2 g和3 g。用于预防这种疾病（CNS创伤相关疾病）的每日服药剂量在约0.1-50mg/kg范围内。

在一个优选的实施例中，针对本文中所描述的状况和疾病的根据本文公开的至少一种化合物的建议每日剂量在3至50mg/kg/天范围内，优选的在5-40 mg/kg/天范围内，更优选的在7-30 mg/kg/天范围内。针对本文中所描述的状况和疾病的根据本文公开的至少一种化合物的每日剂量在7至14mg/kg/天范围内，优选的是在人类中。

预防这种疾病（CNS创伤相关疾病）的至少一种化合物的服药时间依赖于类型、需要预防的状况的性质及严重程度而变化的，对于人类服用该化合物通常有短期或长期，即1周至1年。

药物组合物可用于制备单独的、单一单元剂量剂型。本公开的化合物可以以药物组合物中的形式使用，例如，固体、半固体或液体的形式，其中包含一种或多种本文中公开的作为活性试剂的化合物结合药学上可接受的载体或赋形剂，适用于口服，肠胃外的，例如静脉内、肌内、鞘内、皮下，肠内、直肠内或鼻内给药。活性试剂可被复合，例如，结合通常无毒的、药学上可接受的载体用作片剂、丸剂、胶囊剂、栓剂、溶液（例如盐水）、乳液、悬浮液（例如橄榄油）、软膏和任何其他适合使用的形式。可以使用的载体是水、葡萄糖、乳糖阿拉伯树胶、明胶、马尼托、淀粉糊、三硅酸镁、玉米淀粉、角素、胶体二氧化硅、马铃薯淀粉、尿素和其他适合使用在制造制剂中的载体，在固体中，半固体或液体形式，并且除了辅助剂、稳定剂，增稠剂和着色剂及香精也可使用。活性目标化合物以预防和/或治疗该疾病的有效剂量包含在该药物组合物中。

本文公开的单一的单位剂量形式是适用于口服、粘膜（例如鼻、舌下、阴道、颊、或直肠给药）、肠胃外（例如皮下、静脉内、注射法、肌内、或动脉），局部（例如眼滴或其他眼用制剂）、经皮或经皮给药。剂型的实施例包括但不限于：片剂；囊片；胶囊剂，例如软弹性明胶胶囊；扁囊剂；锭剂；菱形；分散体；栓剂；粉末；气溶胶（例如鼻喷雾剂或吸入器）；凝胶；适合于给患者口服或粘膜给药的合适的液体剂型，包括悬浮液（例如水性或非水性液体中的悬浮液，水包油型乳剂，或油包水型液体乳剂），溶液，和酏剂；适合于肠胃外给药的病人的液体剂型；眼药水或其他适合于局部给药的眼用制剂；及可重组以提供适合于肠胃外给药给患者的液体剂型的无菌的固体（例如，结晶的或无定形固体）。

本文公开的组合物、剂型和制剂类型通常依赖于其使用会典型地不同。例如，用于急性治病的制剂形式通常包含比相同疾病的慢性治疗的剂型的含量更大的一种或多种活性制剂。同样的，肠胃外的剂量形式会含有较少量的一个或多个活性剂，与治疗相同疾病的口服制剂相比。本文中公开包含的特定的剂型的这些和其它的方式相互是不同的并且对于本领域的技术人员是显而易见的。参见雷明顿的医药科学，第18版，麦克出版社，宾夕法尼亚州伊斯顿 (1990)。

典型的药物组合物和剂型包括一种或多种赋形剂。合适的赋形剂对于药学领域技术人员是公知的，非限制性的合适的赋形剂的实施例已经在本文中提供。一个特定的赋形剂是否适合于掺入药物组合物或剂型中取决于各种因素，现有技术众所周知的是包括但不限于，以何种方式将剂型对患者给药。例如，口服剂型，如片剂可能含有不适合用于在肠胃外剂型中的赋形剂。一个特定的赋形剂的适用性也可能依赖于剂型在的特定的活性剂。例如，一些活性剂的分解可能会被一些赋形剂所加速如乳糖，或当其置于水时。包括伯或仲胺的活性剂特别容易受到这种加速分解。因此，本公开内容包括药物组合物和剂型，含有少量的，任何，乳糖或其它单-或二糖。如本文所用，术语“无乳糖的”是指存在乳糖的量，如果有的话，是不足以大幅增加的活性成分的降解率。

本公开文本的不含乳糖的组合物包括本领域中是众所周知的赋形剂，并列出，例如，在美国药典（USP）25-NF20（2002年）。在一般情况下，不含乳糖的组合物包括活性成分、粘合剂/填料、和药学相容的和药学上可接受的量的润滑剂。优选的不含乳糖的剂型包括活性成分、微晶纤维素、预胶化淀粉、和硬脂酸镁。

本文公开还进一步包括含活性成分的无水药物组合物和剂型，因为水可以促进一些化合物的降解。例如，在药物领域加入水（例如5％）作为一种模拟长期存储的手段是被广泛接受，以确定如货架寿命或制剂随时间的稳定性等的特性。参见：例如，Jens T. Carstensen，药物稳定性：原理与实践，第二版，Marcel Dekker，纽约，1995，第379-80页。实际上，水和热会加速某些化合物的的分解。因此，制剂的水的效应是具有重要的意义的，因为通常在制造、处理、包装、贮存、装运及制剂的使用期间会遭遇到水分和/或湿度。

本文公开的无水药物组合物和剂型可以通过使用含有原料的无水的或低水分及在低水分或低湿度条件下来制备。包括乳糖和至少一种活性成分的药物组合物和剂型包括伯胺或仲胺，优选是无水的，如果可以预见到在制造、包装、和/或储存过程中与水分和/或湿度的实质性接触。可以制备和贮存无水药物组合物，使得其无水性质被保持。因此，无水的组合物优选使用已知的材料包装以防止暴露于水，以便它们可以包括在合适的处方试剂盒中。合适的包装实施例包括但不限于，密封的箔、塑料、单位剂量容器（例如瓶）、泡罩包装、和带材包。

本文公开还进一步包括药物组合物和剂型，包括一种或多种化合物，减少活性成分分解的速率。这样的化合物，本文中称为“稳定剂”，包括但不限于抗氧化剂如抗坏血酸、pH缓冲剂、或盐缓冲剂。

如同赋形剂的量和类型，剂型中的活性剂的量和特定类型可能会根据不同的因素而有所不同，例如，但不限于，向病人给药的途径。然而，本文本公开的典型的剂型包括本文公开的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体、笼形物、或它们的前药，其量为约0.10至约150mg。典型的剂型包括本发明公开的化合物或药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体、笼形物、或前药，其量为约0.1、1、2、5、7.5、10、12.5、15、17.5、20、25、50、100、150或200mg。在一个特定的实施例中，优选的剂型包含根据本说明书中的的化合物，含量为约1、2、5、10、25或50mg。在一个特定的实施例中，优选的剂型包含根据本说明书中的化合物，含量为约5、10、25或50mg。

本文公开的药物组合物的口服制剂是适合于口服给药的，作为为离散的剂型形式存在，例如但不限于片剂（例如可咀嚼片剂）、囊片、胶囊剂、和液体（例如调味糖浆）。这样的剂型含有预定量的活性成分，并可以通过本领域技术人员周知的制药方法来制备。一般参见雷明顿的药物科学，第18版，Mack出版，伊斯顿PA（1990）。

本文公开的典型的口服制剂形式是根据常规的药物混合物技术通过结合活性成分与至少一种赋形剂紧密结合而制备的。赋形剂可采用各种各样的形式，这依赖于制备所需要服用的剂型。例如，适合使用在口腔液体或喷雾的剂型的赋形剂包括但不限于水、乙二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、和着色剂。适合使用在固体口服剂型{例如粉剂、片剂、胶囊剂、和胶囊）中的赋形剂的例子包括但不限于淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂、和崩解试剂。

由于它们易于给药，片剂和胶囊代表最有利的口服制剂单位形式，在这种情况下，采用固体赋形剂。如果需要，片剂可以通过标准的水性或非水性技术包裹涂覆。通过任何的药学方法都可以制备这样的剂型。在一般情况下，药物组合物和剂型是通过均匀和紧密地混合活性成分与液体载体、细碎的固体载体或两者，然后如果必要将产物定形为所需形式来制备的。

例如，片剂可以通过压缩或模压来制备。压制的片剂可以通过在一个合适的机器中以自由流动的形式压缩活性成分来制备，如粉末或颗粒，可选地与赋形剂混合。模制的片剂可通过在一个合适的机器中将一种惰性液体稀释剂与润湿的粉末状化合物进行混合来成型。

用于本公开文本中的口服剂型的赋形剂的实施例包括但不限于粘合剂、填充剂、崩解剂、和润滑剂。适合在药物组合物和剂型中使用的粘合剂包括但不限于玉米淀粉、马铃薯淀粉、或其他的淀粉、明胶、天然和合成树胶如阿拉伯胶、藻酸钠、藻酸、藻酸盐、西黄蓍胶粉、瓜尔豆胶、纤维素和它的衍生物{例如乙基纤维素、醋酸纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠）、聚乙烯基吡咯烷酮、甲基纤维素、预胶化淀粉、羟丙基甲基纤维素{例如，编号2208、2906、2910）、微晶纤维素，以及它们的混合物。

微晶纤维素的合适形式包括但不限于，作为AVICEL-PH-101、AVICEL-PH-103、AVICEL RC-581、AVICEL- PH-105销售的物质（可向FMC公司、美国粘胶司、微晶纤维素销售、马库斯胡克，PA购买），以及它们的混合物。一个特定的粘合剂是微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的混合物，作为AVICEL RC-581出售。适用于无水或低水分赋形剂或添加剂包括AVICEL-PH-103（TM）和淀粉1500 LM。在本文中公开的药物组合物和剂型中使用适合的填料的实施例包括但不限于滑石、碳酸钙（例如颗粒或粉末）、微晶纤维素、粉状纤维素、葡萄糖结合剂、高岭土、甘露糖醇、硅酸、山梨糖醇、淀粉、预糊化淀粉、以及它们的混合物。在本公开的药物组合物中的粘合剂或填料通常是以从约50至约99％的重量百分比的药物组合物或剂型存在。

当暴露于含水环境时，在本公开的组合物中使用的崩解剂提供片剂的崩解。含有太多的崩解剂的片剂会在存储中崩解，而那些包含太少崩解剂的片剂可能无法在所需的速率或在所需的条件下崩解。因此，既不太多也不太少不利地改变活性成分的释放的足够量的崩解剂应该使用于形成本文公开的固体口服剂型。所用的崩解剂的量根据制剂的类型而变化，并且对于本技术领域的普通技术人员来说是易于辨别的。典型的药物组合物包括从约0.5至约15％重量百分比的崩解剂，优选从约1至约5％重量百分比的崩解剂。

可用于本公开的药物组合物和剂型中崩解剂包括但不限于琼脂、海藻酸、碳酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、波拉克林钾、淀粉羟乙酸钠、马铃薯或木薯淀粉、其它淀粉、预糊化淀粉、其它淀粉、粘土、其它藻胶、其它纤维素、树胶、以及它们的混合物。

在本公开的药物组合物和剂型中使用的润滑剂包括但不限于硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、轻质矿物油、甘油、山梨糖醇、甘露糖醇、聚乙二醇、其它二醇、硬脂酸、硬脂酸月桂基硫酸钠、滑石粉、氢化植物油（例如花生油、棉籽油、葵花籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油）、硬脂酸锌、油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂、和它们的混合物。其它的润滑剂包括，例如，一个硅酸盐硅胶（AEROSIL200，由巴尔的摩的W.R.格雷斯有限公司生产）、合成二氧化硅的凝固气溶胶（钢琴，德固赛公司销售，德克萨斯州）、CAB-O-SIL（由波士顿的卡博特公司销售的一个热解二氧化硅产品，马萨诸塞州），以及它们的混合物。如果使用，润滑油通常使用的量是小于约1％重量百分比的药物组合物或剂型至它们被结合到其中。

本文公开的一种优选的固体口服剂型包括本公开的化合物、无水乳糖、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酸、胶体无水二氧化硅、和明胶。

本公开的活性成分可以通过控制释放方式或那些对于本技术领域的普通技术人员众所周知的输送装置给药。实施例包括但不限于，那些在美国专利号：3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123和4,008,719、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556、和5,733,566中描述，其中每一个都以引用的方式并入本文中。这样的剂型可用于提供缓慢释放或控制释放的一种或多种活性成分，例如，羟丙基甲基纤维素、其他聚合物基质、凝胶、渗透膜、渗透系统、多层涂层、微粒、脂质体、微球、或它们的组合以在不同的比例下提供所需的释放曲线。对于本技术领域的普通技术人员，控制释放的制剂包括在本文所述的那些容易选择与本公开的活性成分使用的制剂。因此，本文公开的包括适合于口服给药的单一单位剂量形式，例如但不限于适于控释的片剂、胶囊剂、软胶囊、囊片。

大多数的控释制剂被设计来初始释放一定量的药物（活性成分），迅速产生所需的治疗效果，并逐渐并持续释放其他量的药物以在一段较长的时间内保持这个治疗或预防效果的水平。为了维持药物在体内的这一恒定水平，该药物必须以一定的速率从剂型中释放出来并将取代药物从体内的代谢和排泄出的量。控制释放的活性成分可以通过各种条件激活，包括但并不限于，pH值、温度、酶、水、或其他的生理条件或化合物。

肠胃外剂型可以通过各种途径向患者给药，包括但不限于皮下、静脉内（包括注射法）、肌内、和动脉内。因为它们的服药通常绕过病人的天然防御污染物，肠胃外的剂型优选的是无菌注射剂型或在给患者服用前能够消毒。肠胃外的剂型的实施例包括但不限于，易于注射的溶液、易于溶解的或用于注射的悬浮在药学可接受的赋形剂中的干燥的产品、易于注射的悬浮液，和乳剂。可用于提供本文所公开的肠胃外剂型的合适的赋形剂对于本领域的技术人员来说是公知的。实施例包括但不限于：注射用水USP；水溶液赋形剂，例如但不限于氯化钠注射液、林格氏注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化钠注射液、及乳酸林格氏注射液，水溶性赋形剂例如但并不限于乙醇、聚乙二醇、和聚丙二醇；和非水载体，例如但不限于玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、和苄基苯甲酸乙酯。

本文所公开的增加一个或多个活性成分的溶解度的化合物也可包含在本公开的非肠道剂型中。例如，环糊精及其衍生物可用于增加本文公开的化合物及其衍生物的溶解度。参见，例如，美国专利号5,134,127，以引用的方式包含在本文中。

公开的局部和粘膜的剂型包括但不限于喷雾剂、气雾剂、溶液、乳液、悬浮液、滴眼剂或其他眼用制剂，或本领域技术人员已知的其他形式。参见，例如雷明顿的药物科学，第16版和第18版，麦克出版社，宾夕法尼亚州伊斯顿（1980年及1990年）；以及药物剂型导论，第4版，LEA＆FEBIGER，费城（1985年）。适用于治疗口腔内的粘膜组织的剂型可以配制成漱口水或作为口服凝胶。

合适的赋形剂{例如载体和稀释剂）和其他材料可用于提供本公开所包含的局部和粘膜的剂型对于药学领域的技术人员来说是公知的，并依赖于给定的药物组合物或剂型将被应用的特定的组织。考虑到该事实，典型的赋形剂包括但不限于水、丙酮、乙醇、乙二醇、丙二醇、丁烷-1,3 -二醇、十四烷酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、矿物油、以及它们的混合物，以形成无毒的和药学上可接受的溶液、乳液或凝胶。如果需要的话，也可以添加保湿剂或湿润剂至药物组合物和剂型中。所有这样的附加成分的实施例在本领域中是公知的。参见，例如，雷明顿的药物科学，第16版和第18版，麦克出版，宾夕法尼亚州伊斯顿（1980年及1990年）。

药物组合物或剂型的pH值也被调整来改善一种或多种活性成分的传送。同样地，溶剂载体的极性、其离子强度、或弹性可以被调整用来改善传送。化合物例如硬脂酸盐可以用来加入至药物组合物或剂型中以有利地改变一种或多种活性成分的亲水性或亲脂性以便于提高传送。在这方面，硬脂酸盐可以作为制剂的脂质载体，作为乳化剂或表面活性剂，以及作为传送增强或增渗剂。可以使用活性成分的不同的盐、水合物或溶剂化物以进一步调整所得到的组合物的性质。

通常情况下，本文公开的活性成分优选不在同一时间或通过相同的给药途径给病人服用。因此，当医生使用时，包含本文公开的试剂盒能简化向病人给服活性成分的合适的量。

本文公开的一个典型的试剂盒包括本公开的化合物的剂型、或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、立体异构体、前药、或其笼形物。包含本文公开的试剂盒可进一步包括附加的活性剂。其他的活性剂的实施例包括但不限于本文公开的那些（参见，例如第4.2节）。本公开的试剂盒可以进一步包括用于给服活性成分的设备。这样的设备的实施例包括但不限于注射器、滴灌袋、贴片和吸入器。在一个有利的实施例中，本公开的试剂盒中包含来氟米特和没有其他的免疫调节化合物。

本公开的试剂盒可以进一步包括用于移植的细胞或血液，以及可用于实施一个或多个活性成分的药学上可接受的载体。例如，如果提供的活性成分是以必须重新配制为用于肠胃外给药的固体形式的，该试剂盒应包括一个合适的载体的密封容器，活性成分可以在其中溶解以形成适合于肠胃外给药的无颗粒的无菌溶液。药学上可接受的载体的实施例包括但不限于：注射用水USP；水溶液载体，例如但不限于氯化钠注射液，林格氏注射液，葡萄糖注射液，葡萄糖和氯化钠注射液，及乳酸林格氏注射液；水-溶性的载体，例如但并不限于乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇；和非水性的载体，例如但不限于玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、和苯甲酸苄酯。

根据本文公开的用于治疗CNS-创伤相关的疾病的化合物的优选实施例是：

A）来氟米特（N-（4-三氟甲基苯基）-5-甲基异恶唑-4-甲酰胺）

B）A77-1726（特立氟胺）（N-（4 -三氟甲基）-苯基-2-氰基-3-羟基-巴豆酰胺）

C）HR325（拉氟莫司）（1（3 - 甲基-4-三氟甲基苯基-氨基甲酰基）-2-环丙基-2氧代-丙腈）

D）FK778（N-（4 -三氟甲基）-苯基-2-氰基-3-羟基庚-2-烯-6–羧酸酰胺）

E）MNA279（2 -氰基-3-环丙基-3-氧代-（4 -氰基苯基）丙酰胺） 提供下面的实施例和方法仅用于说明的目的，而不是以任何方式旨在限制本文公开的范围。

方法和实施例

已经进行了一系列的非临床药理学和毒理学研究以支持根据本发明的化合物在人类受试者的临床评价。这些研究按照国际公认的准则进行了研究设计，并符合优良实验室规范（GLP）的要求，除非另有说明。

实施例1

用来氟米特来治疗以提高大鼠脊髓严重挫伤后的运动功能恢复。

手术方法

13周龄雌性Lewis大鼠（查尔斯河，苏尔茨费尔德，德国）被放置在一个12:12小时黑暗/光照的条件下，并允许任意进食水和食物。在习惯一个星期后，用异氟醚和空气（诱导：5％异氟烷，维持：2.2％异氟烷）对动物进行全身麻醉。在没有破裂硬脑膜时进行一个TH10椎板切除术并且诱导严重的挫裂伤SCI（25 NYU/MASCIS II撞击仪）{格鲁纳，1992年#3}。然后缝合肌肉和皮肤，皮下（皮下）注射5毫升林格氏乳酸。膀胱被手动清空，每日2次，直到返回自发排尿（通常在1周）。病变严重程度通过撞击速度和撞击杆的挫伤深度来确定。撞击速度误差> 5％的动物被排除在进一步的分析之外。在受伤后，每个大鼠被随机分入治疗组。使用下列分组：

第1组：SCI+赋形剂（1.5％CMC于无菌水中）填喂7天

第2组：SCI+LEF（20mg/kg/天）在赋形剂中填喂7天

BBB开放领域的运动功能评定定量表：

BBB运动功能评定量表是一个用来评估大鼠脊髓损伤后的功能恢复的“开放领域运动成绩”（巴索等，1995）。 BBB评分从0到21分，BBB评分为0表示一个完全瘫痪的后肢，而BBB评分为21分表示正常运动。在0点和21点之间，有几个“里程碑式”的功能恢复，严重挫伤后一个最重要的里程碑是一个BBB评分> 9分。BBB评分> 9表示动物已经达到 “承重足底步进”或“行走”的水平。BBB评分<9的动物不能行走。

BBB运动功能评定量表是用于评估本发明的通常的运动表现。在受伤前及在手术后（dpo）通过双盲观察评估该值。

探索站立试验：

当放置在有机玻璃缸中（18cm直径*35.0cm高度），动物自发地竖立并且用它们的前爪接触壁。在3分钟记录期间在玻璃钢内观察编号、持续时间和站立类型（希姆斯等，2006；舒姆斯基等，2003）。

将镜子以一定的角度放置在缸后面，以便可以一直观察到前肢。测试期间录像，并在以后的日子对站立行为盲试打分。

观察不同类型站立的增加高度： 

第1级：倦伏的动物抬起两个前爪离地面高达10 厘米；

第2级：站立的动物站立并且延长躯干与弯曲的后肢达到10和15厘米之间；

第3级：站立的动物站立并且并延长躯干与延长的后肢达到超过15厘米。

在落下之前动物偶尔通过几种类型的站立来前进，在这种情况下，动物花费在每个站立高度的时间通过计数单个视频帧来进行测量。在探索站立试验中，所显示的参数代表每个动物花在不同站立水平的平均时间。大多数动物对探索第1级的饲养高度没有任何问题，因为他们在这一水平上都花了大量相似的时间。对身体更多要求的是在10至15 厘米之间的第2级饲养高度，在此大部分的治疗效果都可以观察到。与赋形剂对照相比较，被治疗的动物在这个水平需要花费更多的摸索时间。这不能被解释为缺乏探索或好奇心，因为在被治疗的动物和赋形剂对照之间站立尝试的数量没有任何的区别。最大的挑战是探索>15厘米的3级。在这个等级上，作为SCI的后果的功能性障碍变得最明显。经过治疗或未经治疗的动物都几乎不能探索这个等级，而对于健康对照动物，这是没有问题的。

结果：

功能恢复：

伴随着受伤后的第2-3周逐渐恢复模式，通过BBB运动功能评定量表作为评定功能恢复。此后，自发的功能恢复达成了“稳定状态”。来氟米特治疗的显著影响在DPO7和DPO56被注意到。图1显示了通过BBB运动功能评定量表来评定的功能恢复（* P <0.05）。

在试验结束时，与赋形剂对照相比，来氟米特治疗的动物表现更好（曼-惠特尼u检验，p= 0.062，见图2）。图2表示来氟米特和赋形剂治疗的动物在DPO63的各个BBB值。

利用探索站立试验来评估损伤后功能恢复的其他方面。在该试验中反映功能恢复的程度的一个参数是每个动物花费在不同站立高度中的时间。该参数的结果在图3中表示。

这些结果清楚地表明，与赋形剂对照动物相比较，来氟米特治疗的动物站立尝试的时间是更长的，并且前爪能达到较高的等级。在第2级（10-15 厘米）中，这种效果是最明显的；与健康对照组动物相比，赋形剂对照动物在第2级花的时间更少，而这是没有来氟米特治疗动物的情况下（见图3）。在第3级（> 15厘米），作为脊髓挫伤后果的损害变得明显，健康对照组动物在最高水平花费了最多他们的探索时间，明显比来氟米特治疗的动物和赋形剂对照的长。图3表示对照控制和来氟米特治疗动物的探索站立试验的结果（*p的<0.05，**P <0.01）。

总之，实施例1的数据说明来氟米特治疗提高了大鼠在严重脊髓挫伤后的功能恢复。

实施例2

HR325（拉氟莫司）治疗能改善大鼠在严重脊髓挫伤后的运动功能。

手术方法参见实施例1。

在损伤后，每个大鼠被随机地分到治疗组中。使用下面的分组：

第1组：SCI+赋形剂（1.5％CMC于无菌水中）填喂7天

第2组：SCI+HR325（20mg/kg/天）在赋形剂中填喂7天

BBB开放领域的运动功能评定定量表参见实施例1。

探索站立试验参见实施例1。

结果：

功能恢复

伴随着受伤后的第2-3周逐渐恢复模式，通过BBB运动功能评定量表作为评定功能恢复。此后，自发的功能恢复达成了“稳定状态”。然而，HR325治疗的动物在BBB值10左右到达一个稳定状态，而赋形剂治疗动物到达BBB值8.3。该效果不同于DPO7一直到DPO63的最后（ANOVA-RM；处理F_1,27=11,3 p=0.002）。图4表示通过BBB运动功能评定量表来评定的功能恢复（*P <0.01）。

在试验结束时，与赋形剂对照相比，HR325特治疗的动物表现显著地更好（曼-惠特尼u检验，p= 0.006，见图5）。图5表示HR325和赋形剂治疗的动物在DPO63的各个BBB值（**p<0.01）。

利用探索站立试验来评估损伤后功能恢复的其他方面。在该试验中反映功能恢复的程度的一个参数是每个动物花费在不同站立高度中的时间。该参数的结果在图6中表示。

这些结果清楚地表明，与赋形剂对照动物相比较，HR325治疗的动物站立尝试的时间是更长的，并且前爪能达到更高。在第2级（见图6）中，这种效果是明显主要的，并且HR325治疗的动物与健康对照动物在该等级花费的探索时间相同。在第3级（> 15厘米），作为脊髓挫伤后果的损害变得明显，健康对照组动物在最高水平花费了最多他们的探索时间，明显比HR325治疗的动物和赋形剂对照花费的时间都显著地长。图6表示对照控制和HR325治疗动物的探索站立试验的结果（**P <0.01）。

实施例3

不同剂量的HR325（拉氟莫司）治疗能改善大鼠在严重脊髓挫伤后的运动功能。

手术方法参见实施例1。

在损伤后，每个大鼠被随机地分到治疗组中。使用下面的分组：

第1组：SCI+赋形剂（1.5％CMC于无菌水中）填喂7天

第2组：SCI+HR325（3mg/kg/天）在赋形剂中填喂7天

第3组：SCI+HR325（20mg/kg/天）在赋形剂中填喂7天

第4组：SCI+HR325（60mg/kg/天）在赋形剂中填喂7天

BBB开放领域的运动功能评定定量表参见实施例1。

探索站立试验参见实施例1。

结果：

功能恢复

如同在之前的实施例中，伴随着受伤后的第2-3周逐渐恢复模式，通过BBB运动功能评定量表作为评定功能恢复。此后，自发的功能恢复到达了“稳定状态”。在DPO56可注意到统计学上的显著性区别，20mgHR325治疗的动物比赋形剂治疗的动物表现得显著地好（单因素方差分析；处理F_2,40=4,45 p <0.05，参见图7）。在试验结束时，仍然可观察到DPO63处的BBB值显著性区别（单因素方差分析；处理F_2,40=3,67 p <0.05，参见图7和图8，*P <0.05）。

利用探索站立试验来评估损伤后功能恢复的其他方面。在该试验中反映功能恢复的程度的一个参数是每个动物花费在不同站立高度中的时间。该参数的结果在图9中表示。

这些结果清楚地表明，与赋形剂对照动物相比较，20mgHR325治疗的动物站立尝试的时间是更长的，并且前爪能达到更高。所有处理组在第1级都表现出了类似的探索时间。在需要体力更多的站立水平，第2级，HR325治疗及赋形剂对照的第一区别就变得明显。20mgHR325治疗的动物与健康对照的表现没有显著区别（**P <0.01）。

实施例4

特立氟胺治疗能改善大鼠在严重脊髓挫伤后的运动功能。

手术方法参见实施例1。

在损伤后，每个大鼠被随机地分到治疗组中。使用下面的分组：

第1组：SCI+赋形剂（1.5％CMC于无菌水中）填喂7天

第2组：SCI+特立氟胺（3mg/kg/天）在赋形剂中填喂7天

第3组：SCI+特立氟胺（10mg/kg/天）在赋形剂中填喂7天

BBB开放领域的运动功能评定定量表参见实施例1。

结果：

功能恢复

如同在之前的实施例中，伴随着受伤后的第2-3周逐渐恢复模式，通过BBB运动功能评定量表作为评定功能恢复。此后，自发的功能恢复到达了“稳定状态”。与之前的实施例相比较，特立氟胺治疗动物与赋形剂对照动物之间存在的差别表现得相对较迟。在DPO49可注意到统计学上的显著性区别，10mg特立氟胺治疗的动物比赋形剂治疗的动物表现得显著地好（单因素方差分析；处理F_2,37=4,30 p <0.05，参见图10）。在试验结束时，仍然可观察到DPO63处的BBB值的显著性区别（单因素方差分析；处理F_2,37=4,31 p <0.05，参见图10和图11）。与赋形剂对照动物相比较，3mg特立氟胺治疗的动物的表现贯穿了整个试验过程。

实施例5

HR325（拉氟莫司）治疗能改善大鼠在严重脊髓挫伤后的运动功能。

手术方法参见实施例1。

在损伤后，每个大鼠被随机地分到治疗组中。使用下面的分组：

第1组：SCI+赋形剂（1.5％CMC于无菌水中）填喂7天

第2组：SCI+HR325（30mg/kg/天）在赋形剂中填喂7天

第3组：SCI+ HR325（10mg/kg/天）在赋形剂中填喂7天

BBB开放领域的运动功能评定定量表参见实施例1。

结果：

功能恢复

如同在之前的实施例中，伴随着受伤后的第2-3周逐渐恢复模式，通过BBB运动功能评定量表作为评定功能恢复。此后，自发的功能恢复到达了“稳定状态”。HR325治疗动物与赋形剂治疗动物的区别在DPO42处观察到并且一直持续到试验结束。10mg HR325治疗的动物比赋形剂治疗的动物在DPO42表现得显著地好（单因素方差分析；处理F_2,40=5,66 p <0.01，参见图12）。10mgHR325治疗动物与赋形剂对照之间的BBB值差异一直持续到结束（单因素方差分析；处理F_2,40=5,80 p <0.01，参见图12和图13）。与赋形剂对照动物相比较，30mgHR325治疗的动物的表现贯穿了整个试验过程。

五个实施例的结果证明，利用本发明化合物如异恶唑-4-甲酰胺或丙二腈酰胺类似物的受控药物可用于治疗CNS-创伤相关疾病例如急性脊髓损伤。

以上描述的公开的实施例的目的仅仅是示例，并且本领域中的技术人员应该意识到，或能通过使用不超过常规的实验、许多与特定化合物等价的化合物、材料或方法就能确定，所有这样的等同物都被认为是在本公开的范围之内。

另外的参考文献

以下的其他公开物是通过引用的方式包含在本文中：

Basso, D. M.,等, 1995. A sensitive and reliable locomotor rating scale for open field testing in rats. J Neurotrauma. 12, 1-21。

Davis, J. P.,等, 1996. The immunosuppressive metabolite of leflunomide is a potent inhibitor of human dihydroorotate dehydrogenase. Biochemistry.35, 1270-3。

Greene, S.,等, 1995. Inhibition of dihydroorotate dehydrogenase by the immunosuppressive agent leflunomide. Biochem Pharmacal. 50, 861-7。

Himes, B. T., 等, 2006. Recovery of function following grafting of human bone  marrow-derived stromal cells into the injured spinal cord. Neurorehabil Neural Repair. 20, 278-96。

Kuo, E. A.,等, 1996. Synthesis, structure-activity relationships, and pharmacokinetic properties of dihydroorotate dehydrogenase inhibitors:2-cyano-3-cyclopropyl-3-hydroxy-N-[3'-methyl-4'-(trifluoromethyl)phenyl] propenamide and related compounds. J Med Chern. 39, 4608-21。

Shumsky, J. S., 等, 2003. Delayed transplantation of fibroblasts genetically modified to  secrete BDNF and NT-3 into a spinal cord injury site is associated with limited recovery of function. Exp Neurol. 184, 114-30。

Williamson, R. A., 等, 1995. Dihydroorotate dehydrogenase is a high affinity binding protein for A771726 and mediator of a range of biological effects of the immunomodulatory compound. I Bioi Chern. 270, 22467-72。

Zielinski, T., 等, 1995. Leflunomide, a reversible inhibitor of pyrimidine biosynthesis? Inflamm Res. 44 Suppl 2, S207-8。

Claims (20)

1.化学式（I）的化合物，

或药学上可接受的盐、溶剂化物或其立体异构体，用于治疗中枢神经系统创伤相关疾病。

2.化学式（I）的化合物，

或药学上可接受的盐、溶剂化物、立体异构体或其衍生物，用于治疗中枢神经系统创伤相关疾病。

3.根据权利要求2所述的用途，其中所述衍生物是丙二腈酰胺类。

4.根据权利要求2所述的用途，其中所述衍生物选自：

i）（1（3 -甲基-4-三氟甲基苯基-氨基甲酰基）-2 -环丙基-2氧代-丙腈

ii）N-（4-三氟甲基）-苯基-2-氰基-3-羟基-庚-2-烯-6-羧酸酰胺

iii）2-氰基-3-环丙基-3-氧代-（4-氰基苯基）丙酰胺

或药学上可接受的盐、溶剂化物或其立体异构体。

5.根据权利要求2的用途，其中所述衍生物选自下面的化学式III至VI的化合物：

或药学上可接受的盐、溶剂化物或其立体异构体。

6.根据权利要求2的用途，其中所述衍生物是

或药学上可接受的盐、溶剂化物或其立体异构体。

7.根据权利要求1至6中任一权利要求的用途，其中所述化合物的立体异构体是R或S对映体。

8.根据权利要求1至7中任一权利要求的用途，其中所述中枢神经系统创伤相关疾病是指完全性脊髓损伤、不完全性脊髓损伤、脊髓挫伤、脊髓压迫症、脊髓创伤、脊髓损伤、截瘫、四肢瘫痪、四肢麻痹、脊髓中央综合症、脊髓半侧损害综合症、前线综合症、脊髓圆锥综合症、马尾综合症、创伤性脑损伤、TBI、脑损伤、脑损害、颅脑损伤、弥漫性轴索损伤（DAI）、头部创伤、脑震荡、脑挫裂伤、硬膜下血肿、硬膜外血肿、蛛网膜下腔出血、脑出血或CNS压缩。

9.根据权利要求1至7中任一权利要求的用途，其中所述中枢神经系统创伤相关疾病是脊髓损伤。

10.根据权利要求1至7中任一权利要求的用途，其中所述中枢神经系统创伤相关疾病是脊髓挫伤。

11.一种用于治疗中枢神经系统创伤相关疾的药物组合物，包括以游离形式或药学上可接受的盐的形式或具有生理功能的衍生物的形式的权利要求1中定义的化合物，结合药学上可接受的稀释剂或载体。

12.一种用于治疗中枢神经系统创伤相关疾的药物组合物，包括以游离形式或药学上可接受的盐的形式或具有生理功能的衍生物的形式的权利要求2中定义的化合物，结合药学上可接受的稀释剂或载体。

13.一种用于治疗中枢神经系统创伤相关疾的药物组合物，包括一种化合物，是以游离形式或药学上可接受的盐的的形式或具有生理功能的衍生物的形式的权利要求2中所定义的化合物的衍生物，结合药学上可接受的稀释剂或载体。

14.根据权利要求13的药物组合物，其中所述衍生物是选自以下的丙二腈酰胺类：

i）（1（3 -甲基-4-三氟甲基苯基-氨基甲酰基）-2 -环丙基-2氧代-丙腈，

ii）N-（4-三氟甲基）-苯基-2-氰基-3-羟基-庚-2-烯-6-羧酸酰胺，及

iii）2-氰基-3-环丙基-3-氧代-（4-氰基苯基）丙酰胺

或药学上可接受的盐、溶剂化物或其立体异构体。

15.用于预防和/或治疗CNS-创伤相关疾病的药物组合物，其包含治疗有效量的来氟米特或具有生理功能的衍生物结合药学上可接受的载体或赋形剂。

16.用于预防和/或治疗CNS-创伤相关疾病的药物组合物，其包括治疗有效量的特立氟胺或其衍生物结合药学上可接受的载体或赋形剂。

17.根据权利要求16的药物组合物，其中衍生物是选自以下的丙二腈酰胺类：

i）（1（3 -甲基-4-三氟甲基苯基-氨基甲酰基）-2 -环丙基-2氧代-丙腈，

ii）N-（4-三氟甲基）-苯基-2-氰基-3-羟基-庚-2-烯-6-羧酸酰胺，及

iii）2-氰基-3-环丙基-3-氧代-（4-氰基苯基）丙酰胺

或药学上可接受的盐、溶剂化物或其立体异构体。

18.权利要求11至17中任一权利要求的药物组合物，其中所述中枢神经系统创伤相关疾病是指完全性脊髓损伤、不完全性脊髓损伤、脊髓挫伤、脊髓压迫症、脊髓创伤、脊髓损伤、截瘫、四肢瘫痪、四肢麻痹、脊髓中央综合症、脊髓半侧损害综合症、前线综合症、脊髓圆锥综合症、马尾综合症、创伤性脑损伤、TBI、脑损伤、脑损害、颅脑损伤、弥漫性轴索损伤（DAI）、头部创伤、脑震荡、脑挫裂伤、硬膜下血肿、硬膜外血肿、蛛网膜下腔出血、脑出血或CNS压缩。

19.权利要求11至17中任一权利要求的药物组合物，其中所述中枢神经系统创伤相关疾病是脊髓损伤。

20.权利要求11至17中任一权利要求的药物组合物，其中所述中枢神经系统创伤相关疾病是脊髓挫伤。

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