CN102643765A - 链霉菌、抗肿瘤化合物Spiro-Indimycin A-D及其制备方法和应用 - Google Patents
链霉菌、抗肿瘤化合物Spiro-Indimycin A-D及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102643765A CN102643765A CN2012100875377A CN201210087537A CN102643765A CN 102643765 A CN102643765 A CN 102643765A CN 2012100875377 A CN2012100875377 A CN 2012100875377A CN 201210087537 A CN201210087537 A CN 201210087537A CN 102643765 A CN102643765 A CN 102643765A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- indimycin
- spiro
- compound
- streptomyces
- volume ratio
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 50
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 title abstract description 9
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 title description 13
- 241000187180 Streptomyces sp. Species 0.000 claims abstract description 33
- PIYWZXUZYMFZSK-DEOSSOPVSA-N dimethyl (7S)-5',9-dichlorospiro[4,13-diazatetracyclo[6.6.1.02,6.012,15]pentadeca-1(14),2,5,8,10,12(15)-hexaene-7,3'-indole]-3,5-dicarboxylate Chemical compound C1=NC2=CC=C(Cl)C=C2[C@]1(C1=C(C(=O)OC)NC(=C11)C(=O)OC)C2=C3C1=CNC3=CC=C2Cl PIYWZXUZYMFZSK-DEOSSOPVSA-N 0.000 claims abstract description 14
- HNJSPDJKLKPYKX-RUZDIDTESA-N dimethyl (3R)-4',5-dichloro-1-methylspiro[2H-indole-3,10'-8,13-diazatetracyclo[7.6.0.02,7.011,15]pentadeca-1(9),2(7),3,5,11,14-hexaene]-12',14'-dicarboxylate Chemical compound C1N(C)C2=CC=C(Cl)C=C2[C@@]21C(NC=1C3=CC(Cl)=CC=1)=C3C1=C(C(=O)OC)NC(C(=O)OC)=C21 HNJSPDJKLKPYKX-RUZDIDTESA-N 0.000 claims abstract description 13
- FEZAUMRIJDPBGI-HSZRJFAPSA-N methyl (3R)-4',5-dichloro-1-methylspiro[2H-indole-3,10'-8,13-diazatetracyclo[7.6.0.02,7.011,15]pentadeca-1(9),2(7),3,5,11,14-hexaene]-12'-carboxylate Chemical compound C1N(C)C2=CC=C(Cl)C=C2[C@@]21C(NC=1C3=CC(Cl)=CC=1)=C3C1=CNC(C(=O)OC)=C21 FEZAUMRIJDPBGI-HSZRJFAPSA-N 0.000 claims abstract description 13
- CANUOBPCCLZMKM-JOCHJYFZSA-N methyl (3R)-4',5-dichlorospiro[1,2-dihydroindole-3,10'-8,13-diazatetracyclo[7.6.0.02,7.011,15]pentadeca-1(9),2(7),3,5,11,14-hexaene]-12'-carboxylate Chemical compound C1NC2=CC=C(Cl)C=C2[C@@]21C(NC=1C3=CC(Cl)=CC=1)=C3C1=CNC(C(=O)OC)=C21 CANUOBPCCLZMKM-JOCHJYFZSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 claims abstract 5
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 60
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 51
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 17
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 13
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 13
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 13
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 10
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 claims description 9
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 claims description 9
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 claims description 9
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 9
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 4
- 238000003820 Medium-pressure liquid chromatography Methods 0.000 claims description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 3
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims description 3
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 claims 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims 2
- 238000003811 acetone extraction Methods 0.000 claims 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 25
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 22
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 19
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 19
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 16
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 13
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 13
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 13
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 9
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 8
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000003919 heteronuclear multiple bond coherence Methods 0.000 description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 241000644365 Streptomyces specialis Species 0.000 description 4
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 4
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 4
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 4
- YYBKJQDTRQASSS-UHFFFAOYSA-N dimethyl 3,4-bis(5-chloro-1h-indol-3-yl)-1h-pyrrole-2,5-dicarboxylate Chemical compound C1=C(Cl)C=C2C(C=3C(C=4C5=CC(Cl)=CC=C5NC=4)=C(C(=O)OC)NC=3C(=O)OC)=CNC2=C1 YYBKJQDTRQASSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 229930188834 lynamicin Natural products 0.000 description 4
- 125000001434 methanylylidene group Chemical group [H]C#[*] 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 4
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 4
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 4
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 4
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 3
- 238000002114 high-resolution electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 238000011392 neighbor-joining method Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N Beta-Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-UHFFFAOYSA-N D-Cellobiose Natural products OCC1OC(OC2C(O)C(O)C(O)OC2CO)C(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- LKDRXBCSQODPBY-IANNHFEVSA-N D-sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LKDRXBCSQODPBY-IANNHFEVSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-OWMBCFKOSA-N L-ribopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-OWMBCFKOSA-N 0.000 description 2
- OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N Lincomycin Natural products CN1CC(CCC)CC1C(=O)NC(C(C)O)C1C(O)C(O)C(O)C(SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 101100397227 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) isp5 gene Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 2
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 acetone Ester Chemical class 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N aldehydo-L-rhamnose Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 238000012742 biochemical analysis Methods 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N ent-staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 229960002737 fructose Drugs 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 2
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 2
- OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N lincomycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N 0.000 description 2
- 229960005287 lincomycin Drugs 0.000 description 2
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000008099 melanin synthesis Effects 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 238000006395 oxidase reaction Methods 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 150000004053 quinones Chemical class 0.000 description 2
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N staurosporine Chemical compound C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1[C@H]1C[C@@H](NC)[C@@H](OC)[C@]4(C)O1 HKSZLNNOFSGOKW-FYTWVXJKSA-N 0.000 description 2
- CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N staurosporine Natural products C12=C3N4C5=CC=CC=C5C3=C3CNC(=O)C3=C2C2=CC=CC=C2N1C1CC(NC)C(OC)C4(OC)O1 CGPUWJWCVCFERF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 101000610620 Homo sapiens Putative serine protease 29 Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 102100040345 Putative serine protease 29 Human genes 0.000 description 1
- 241000387651 Sciscionella marina Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001317796 Streptomyces sp. SCSIO 03032 Species 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- VILAVOFMIJHSJA-UHFFFAOYSA-N dicarbon monoxide Chemical compound [C]=C=O VILAVOFMIJHSJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000002518 distortionless enhancement with polarization transfer Methods 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000001052 heteronuclear multiple bond coherence spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000000990 heteronuclear single quantum coherence spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 125000004492 methyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical group 0.000 description 1
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 1
- SNVLJLYUUXKWOJ-UHFFFAOYSA-N methylidenecarbene Chemical compound C=[C] SNVLJLYUUXKWOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N methyloxidanyl Chemical group [O]C GRVDJDISBSALJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000238 one-dimensional nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N oxazine, 1 Chemical compound C([C@@H]1[C@H](C(C[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)N(C)C)[C@H](O)C[C@]21C)=O)CC1=CC2)C[C@H]1[C@@]1(C)[C@H]2N=C(C(C)C)OC1 AICOOMRHRUFYCM-ZRRPKQBOSA-N 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000013535 sea water Substances 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012916 structural analysis Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/182—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/465—Streptomyces
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
本发明公开了一种链霉菌、抗肿瘤化合物Spiro-Indimycin A-D及其制备和应用。链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032于2011年7月18日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉市武汉大学，其保藏编号为CCTCC NO：M 2011258。本发明提供了一种新的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032，该菌可以生产结构新颖的具有抗肿瘤活性的化合物Spiro-Indimycin A、B、C和D，化合物Spiro-Indimycin A、B、C和D除具有罕见的螺环结构外，还对肿瘤细胞有选择性的、高效的活性，是开发成为高效、低毒的抗肿瘤化合物理想的候选化合物。
Description
技术领域：
本发明属于工业微生物领域，具体涉及一种能够产生多种抗肿瘤化合物的新的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032，以及该菌生产的抗肿瘤化合物Spiro-Indimycin A-D及其制备方法和应用。
背景技术：
近年来，发现新型海洋放线菌资源，并从中筛选新型的活性次生代谢产物成为国际上海洋微生物研究的重要方向。从海洋放线菌中寻找结构新颖、高效、低毒的代谢产物逐渐成为药物寻找的新源泉。
发明内容：
本发明的第一个目的是提供一种新的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032，该菌于2011年7月18日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉市武汉大学，其保藏编号为CCTCC NO：M 2011258。
本发明的新的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032是从印度洋(E 87°59.7′，N 9°59.3′)水深3412米的海底沉积物中分离获得的。
1、形态学特征和生理生化分析
链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032属于革兰氏阳性，好氧放线菌，基丝微黄分枝，气丝灰白色分支并分化成卷曲的孢子链；孢子椭球状(图2)，长0.4-0.7μm，表面光滑。在PDA培养基上长势较弱，在ISP5上生长有可溶性色素产生。接触酶、脲酶、牛奶凝固和胴化反应阳性，明胶液化、黑色素产生和氧化酶反应阴性。能水解淀粉、纤维素、吐温20，40， 80；H2S产生和硝酸盐还原反应阴性；可以利用D-阿拉伯糖，D-纤维二糖，果糖，肌醇，丙酮酸钠，D-棉子糖，L-鼠李糖，D-甘露醇，D-葡萄糖，D-山梨糖和木糖醇，为唯一碳源和能源生长。而不能利用D-半乳糖，D-乳糖，D-甘露糖，D-核糖，D-海藻糖和D-木糖；对甲氧嘧啶和林可霉素敏感。pH、盐浓度和温度的耐受范围分别为pH 6.0-9.0，0-9％和15-40℃。细胞壁含有L-DAP。优势醌为MK-9(H6)和MK-11；主要脂肪酸为i-C15:0(8％)，i-C16:0(24％)，i-C16:1G(14％)，ai-C17:0(15％)和ai-C17:1A(12％)。G+C摩尔含量为71.6(±0.5)％。
2、分子生物学鉴定
常规PCR扩增菌株SCSIO 03032的16S rDNA并测序，其序列如SEQ ID NO.1所示，而后提交到GenBank中，对16S rDNA核苷酸序列进行BLAST分析，结果显示，该菌株与Streptomyces specialis GW41-1564T的相似度为97％，重新构建该属系统发育树显示菌株SCSIO 03032聚在该类群，说明该菌株SCSIO 03032为链霉菌属。如图1所示，通过邻接法清晰地揭示了该菌株与一组链霉菌属物种的系统进化关系，表明该菌属于链霉菌属的一种。
根据以上形态学、生理学、化学等分析，其与已知最接近的菌株与Streptomyces specialis GW41-1564T有较大的差异，且基因组杂交显示其杂交值为23％，远低于种内差异标准的70％(Stackebrandt，E.& Ebers，J.Taxonomic parameters revisited：tarnished gold standards.Microbiol Today.(2006).33，152-155.)；因此，综合分析多项分类数据，鉴定此菌株为链霉菌属(Streptomyces)的一个新种，命名为：链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032，该菌于2011年7月18日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉市武汉大学，其保藏编号为CCTCC NO：M 2011258。
本发明的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032能够产生4种具有新颖结构的抗肿瘤化 合物Spiro-Indimycin A-D。
因此本发明的第二个目的是提供化合物Spiro-Indimycin A-D，其结构式如式(I)所示：
本发明人通过实验发现，化合物Spiro-Indimycin A-D对人癌细胞包括乳腺癌MCF-7，人胰腺癌1990，人肝癌HepG2，人宫颈癌Hale，人黑色素瘤B16，人肺癌H460和人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRF-CEM有选择性细胞毒活性，其中Spiro-Indimycin B对人黑色素瘤B16细胞、人肺癌H460细胞和人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRF-CEM的IC50分别是11μM、36.6μM和4.5μM，而对其它受试细胞株无明显生长抑制活性；Spiro-Indimycin C对人肝癌细胞HepG2和人肺癌H460细胞的IC50分别是14.1μM和35.4μM，而对其它受试细胞株无明显生长抑制活性；Spiro-Indimycin D对人肝癌细胞HepG2、人黑色素瘤B16细胞和人肺癌H460细胞的IC50分别是44.4μM、40.4μM和36.3μM，而对其它受试细胞株无明显生长抑制活性，Spiro-Indimycin A对人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRF-CEM的IC50为44.4μM，而对其它受试细胞株无明显生长抑制活性(表3)。
本发明的第三个目的是提供化合物Spiro-Indimycin A-D在制备抗肿瘤药物中的应用。
优选，所述的化合物Spiro-Indimycin A在制备治疗人急性淋巴细胞白血病药物中的应用。
优选，所述的化合物Spiro-Indimycin B在制备治疗人黑色素瘤、人肺癌或人急性淋巴细胞白血病药物中的应用。
优选，所述的化合物Spiro-Indimycin C在制备治疗人肝癌或人肺癌药物中的应用。
优选，所述的化合物Spiro-Indimycin D在制备治疗人黑色素瘤、人肝癌或人肺癌药物中的应用。
本发明的第四个目的是提供链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032在用于制备化合物Spiro-Indimycin A、B、C或D的应用。
本发明的第五个目的是提供Spiro-Indimycin A、B、C或D的制备方法，其特征在于，所述的化合物Spiro-Indimycin A、B、C或D是从链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的发酵培养物中制备分离得到的。
优选，是通过以下方法从链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的发酵培养物中制备得到化合物Spiro-Indimycin A、B、C或D，具体步骤如下：
a)制备链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的发酵培养物，将该发酵培养物的发酵液和菌丝体分离开，发酵液经大孔树脂吸附，后用丙酮洗脱大孔树脂，洗脱液回收丙酮后剩余的水混合液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经蒸馏浓缩后得到浸膏A；菌丝体先用丙酮浸提，浸取液回收丙酮后剩余的水混合液再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经蒸馏浓缩后得到浸膏B；
b)将浸膏A和浸膏B合并的粗提物经硅胶柱层析，用氯仿/甲醇作为洗脱剂，从体积比100∶0～0∶100进行梯度洗脱，收集氯仿/甲醇体积比95∶5梯度洗脱下来的馏分Fr.1， 后经ODS反相中压液相色谱，用水/甲醇作为洗脱剂，从体积比100∶0～0∶100进行梯度洗脱，收集水/甲醇体积比30∶70梯度洗脱下来的馏分Fr.1-1，再过LH-20凝胶柱，以氯仿/甲醇体积比1∶1作为流动相洗脱，用薄层层析追踪分离，收集薄层板上用氯仿/丙酮体积比为9∶1作为展开剂时Rf值为0.8的馏分，即为Spiro-Indimycin B，Rf值为0.6的馏分，即为Spiro-Indimycin A；收集薄层板上用石油醚/乙酸乙酯体积比为40∶60作为展开剂时Rf值为0.8的馏分，即为Spiro-Indimycin C；收集薄层板上用石油醚/乙酸乙酯体积比为50∶50作为展开剂时Rf值为0.8的馏分，即为Spiro-Indimycin D。
所述的a)步骤的制备链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的发酵培养物优选通过以下方法制备：将活化的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032接入种子培养基，28℃，200rpm，培养48h得种子液，将种子液以10％的接种量接入到发酵培养基中，28℃，200rpm，振荡培养120h，而制得发酵培养物，所述的种子培养基和发酵培养基的配方都为每升培养基中含有：淀粉10g，酵母粉5g，蛋白胨4g，CaCO32g，粗海盐30g，余量为水，pH 7.2。
本发明提供了一种新的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032，该菌可以生产结构新颖的具有抗肿瘤活性的化合物Spiro-Indimycin A、B、C和D，化合物Spiro-Indimycin A、B、C和D除具有罕见的螺环结构外，还对肿瘤细胞有选择性的、高效的活性，是开发成为高效、低毒的抗肿瘤化合物理想的候选化合物。
本发明的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032于2011年7月18日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉市武汉大学，其保藏编号为CCTCC NO：M 2011258。
附图说明：
图1是链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032基于16S rDNA序列的邻接法重建的与之亲缘关系最近的种之间关系的系统发育树；
图2是链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的扫描电镜显微形态；
图3是上清液的提取物-浸膏A和菌丝体的提取物-浸膏B的高效液相色谱图；
高效液相色谱(HPLC)条件：色谱柱为phenomex 150×4.6mm(SphereClone SAX)，流动相包括流动A相和流动B相，流动相A相：10％(体积分数)的乙腈+0.08％(体积分数)的三氟乙酸，溶剂为水，流动B相：90％(体积分数)的乙腈，溶剂为水；进样程序：0-20min，流动相比例为A相/B相(体积比)：95∶5-0∶100，20-21min，流动相比例为A相/B相(体积比)：0∶100，21-22min，流动相比例为A相/B相(体积比)：0∶100-95∶5，22-30min，流动相比例为A相/B相(体积比)：95∶5，检测波长254nm，流速1ml/min，其中1代表化合物1，2代表化合物2，3代表化合物3和4代表化合物4。
图4是化合物1的X-ray结构图；
图5是化合物2的X-ray结构图。
具体实施方式：
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1：
一、链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的分离和鉴定
本发明的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032是从印度洋：(E 87°59.7′，N 9°59.3′)水深3412米的海底沉积物中分离获得的。分离培养基为现有技术中优化的ISP2培养基，每升含有酵母提取粉2.0g，麦芽提取粉2.0g，葡萄糖1.0g，琼脂20.0g，蒸馏水500ml，天然 海水500ml，pH 7.2。分离培养条件为：28℃，14天。由此从海底沉积物分离纯化得到一菌株SCSIO 03032(链霉菌Streptomyces sp.SCSIO 03032)。
1、形态学特征和生理生化分析
该菌属于革兰氏阳性，好氧放线菌，基丝微黄分枝，气丝灰白色分支并分化成卷曲的孢子链；孢子椭球状(图2)，长0.4-0.7μm，表面光滑。在PDA培养基上长势较弱，在ISP5上生长有可溶性色素产生。接触酶、脲酶、牛奶凝固和胴化反应阳性，明胶液化、黑色素产生和氧化酶反应阴性。能水解淀粉、纤维素、吐温20，40，80；H2S产生和硝酸盐还原反应阴性；可以利用D-阿拉伯糖，D-纤维二糖，果糖，肌醇，丙酮酸钠，D-棉子糖，L-鼠李糖，D-甘露醇，D-葡萄糖，D-山梨糖和木糖醇，为唯一碳源和能源生长。而不能利用D-半乳糖，D-乳糖，D-甘露糖，D-核糖，D-海藻糖和D-木糖；对甲氧嘧啶和林可霉素敏感。pH、盐浓度和温度的耐受范围分别为pH 6.0-9.0，0-9％和15-40℃。细胞壁含有L-DAP。优势醌为MK-9(H6)和MK-11；主要脂肪酸为i-C15:0(8％)，i-C16:0(24％)，i-C16:1G(14％)，ai-C17:0(15％)和ai-C17:1A(12％)。G+C摩尔含量为71.6(±0.5)％。
2、分子生物学鉴定
链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032鉴定中涉及的基因组DNA的提取，16S rDNA的PCR扩增，序列比对和系统进化树的构建以及生理学、化学和形态学鉴定等，均参考文献[Tian，X.P.，Zhi，X.Y.，Qiu，Y.Q.，Zhang，Y.Q.，Tang，S.K.，Xu，L.H.，Zhang，S.，Li，W.J.Sciscionella marina gen.nov.，sp.nov.，a marine actinomycete isolated from a sediment in the northern South China Sea.Int J Syst Evol Microbiol，2009，59(Pt 2)：222-228]。
按照参考文献中的方法提取菌株SCSIO 03032的基因组DNA，PCR扩增该菌株的16S rDNA并测序，获得1430个碱基，其序列如SEQ ID NO.1所示，而后提交到GenBank中，对16S rDNA核苷酸序列进行BLAST分析，结果显示，该菌株与Streptomyces specialis GW41-1564T的相似度为97％，重新构建该属系统发育树显示菌株SCSIO 03032聚在该类群，说明该菌株SCSIO 03032为链霉菌属。如图1所示，通过邻接法清晰地揭示了该菌株SCSIO03032与一组链霉菌属物种的系统进化关系，表明该菌属于链霉菌属的一种，通过基因组杂交方法结果显示菌株SCSIO 03032与最相似菌种Streptomyces specialis GW41-1564T的杂交值为23％，该杂交值远低于种内差异标准的70％(Stackebrandt，E.& Ebers，J.Taxonomic parameters revisited：tarnished gold standards.Microbiol Today.(2006).33，152-155.)；同时在形态学、生理学、细胞化学等方面与已知最相似菌株均有较大的差异，因此，综合分析多项分类数据，鉴定此菌株为链霉菌属(Streptomyces)的一个新种，命名为：链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032，该菌于2011年7月18日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉市武汉大学，其保藏编号为CCTCC NO：M 2011258。
二、活性代谢产物Spiro-Indimycin A-D的分离和制备
1、培养基(种子培养和发酵培养基)：每升含有淀粉10g，酵母粉5g，蛋白胨4g，CaCO32g，海盐30g，余量为水，pH 7.2。121℃，灭菌30min；
2、发酵
2.1、种子培养：将培养皿上活化的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的单菌落分别接入18瓶，每瓶含有50mL培养基的250mL的锥形培养瓶中，28℃，200r·min-1，培养48h，制得种子液900mL。
2.2、发酵培养：将种子液以10％的接种量(体积百分比)接入到9L发酵培养基(置于 250mL的锥形培养瓶，每瓶含有50ml培养基，共180瓶)中，28℃，200r·min-1，振荡培养120h，得到9L发酵培养物。
3、萃取：发酵培养物先进行离心分离(3500r·min-1，8min)，得到9L体积的上清液(发酵液)和菌丝体。发酵液经大孔树脂XAD16固相萃取，后用丙酮洗脱大孔树脂3次，洗脱液回收丙酮后剩余的水混合液用乙酸乙酯萃取3次，乙酸乙酯层经蒸馏浓缩后得到上清液提取物-浸膏A(4.1g)；菌丝体用2L丙酮在室温下浸提3次，每次3小时，合并提取液，减压回收丙酮后剩余水混合液用6L乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层减压蒸馏得菌丝体提取物-浸膏B(0.9g)。
4、活性化合物的提取分离和鉴定
4.1化合物Spiro-Indimycin A-D的提取分离和鉴定：分别取少量浸膏A和浸膏B的样品溶于100μl甲醇中，离心取上清10μl，经HPLC进样检测，表明，浸膏A中含有化合物1(1)和2(2)，浸膏B中含有化合物3(3)和4(4)(图3)，将浸膏A和浸膏B合并。将该合并的粗提物经硅胶柱(300-400目)层析，用氯仿/甲醇作为洗脱剂，从体积比100∶0～0∶100进行梯度洗脱，收集氯仿/甲醇体积比95∶5梯度洗脱下来的馏分Fr.1(3.03g)，蒸干，经ODS反相中压液相色谱(YMC*GEL ODS-A球型填料，120A孔径，50um粒径，240×4.0cm I.D.)，流速为25ml/min，用水/甲醇作为洗脱剂，从体积比100∶0～0∶100进行梯度洗脱，收集水/甲醇体积比30∶70梯度洗脱下来的馏分Fr.1-1(1.57g)，再过LH-20凝胶柱(2.5*100cm)，以氯仿/甲醇体积比1∶1作为流动相洗脱，流速为1ml/min，每100ml收集合并为一份，顺序得到Fr.1-1-A-G 7份样品，其中Fr.1-1-C(331mg)，Fr.1-1-D(626mg)，Fr.1-1-E(27mg)。Fr.1-1-C用氯仿/丙酮体积比为9∶1作为展开剂，经过薄层制备，刮取Rf值为0.8的条带，乙酸乙酯 洗脱得到化合物2(18.0mg)(Spiro-Indimycin B)；刮取Rf值为0.6的条带，乙酸乙酯洗脱得到化合物1(5.0mg)(Spiro-Indimycin A)；Fr.1-1-D用石油醚/乙酸乙酯体积比为40∶60作为展开剂，经过薄层制备，刮取Rf值为0.8的条带，乙酸乙酯洗脱得到化合物3(22.0mg)(Spiro-Indimycin C)；Fr.1-1-E用石油醚/乙酸乙酯体积比为50∶50作为展开剂，经过薄层制备，刮取Rf值为0.8的条带，乙酸乙酯洗脱得到化合物4(6.6mg)(Spiro-Indimycin D)。
通过结构分析，对本发明的从链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的发酵培养物中制备得到的4个化合物1-4-化合物Spiro-Indimycin A-D(式(II))对其进行鉴定，其鉴定结果如下：
化合物1：白色晶体，其核磁数据归属如表1所示， 
UV(MeOH)λmax(logε)272nm(4.05)；227nm(4.40)；IR(KBr)λmax 3443，1725，1229cm-1；1H NMR(500MHz，CD3OD)见表1，13C NMR(125MHz，CD3OD)见表2。高分辨质谱HRESIMS m/z C24H15Cl2N3O3(实测值[M-H]-478.0353，计算值为478.0361)，不饱和度为18。化合物1的氢谱显示有2个甲氧基[δH 3.53(3H，s)，4.00(3H，s)]，7个芳香质子，2个活泼氢[δH 11.47(1H，s)，12.20(1H，brs)]。13C NMR和DEPT NMR显示有2个羰基碳[δC 159.6(s)，160.3(s)]，13个季 碳，7个次甲基碳，2个甲基碳。化合物1的氢谱C谱与已知化合物Lynamicin D相比[McArthur，K.A.；Mitchell，S.S.；Tsueng，G.；Rheingold，A.；White，D.J.；Grodberg，J.；Lam，K.S.；Potts，B.C.Lynamicins A-E，chlorinated bisindole pyrrole antibiotics from a novel marine actinomycete，J Nat Prod，2008，71，1732-7.]，发现二者极其相似，不同之处在于：化合物1在分子式中少2个氢，同时多一个不饱和度；化合物1的碳谱中多1个sp3杂化季碳，同时Lynamicin D中少一个sp2杂化的季碳；化合物1中的C-2′的化学位移明显偏向低场(δC 169.2)。根据以上的证据推测，化合物1的C-3′和C-5″相连接成环，同时原C-2′与C-3′间存在的共轭发生转移，变为C-2′与N-1′间的共轭。以上推测通过化合物1的X-ray(图4)进一步证明。且分子中存在的氯原子，使得X-ray可以清晰地将化合物1的绝对构型确定为C-3′S构型。化合物1的结构如式(II)所示，命名为Spiro-Indimycin A。
化合物2：白色晶体。[α]20 D+169.2(c 0.67，MeOH)；UV(MeOH)λmax(logε)252nm(4.77)；209nm(4.66)；IR(KBr)λmax3418，1695，1284cm-1。负离子高分辨质谱在436.0602处给出[M-H]-峰，(计算值为436.0620)，结合碳谱、氢谱得出该化合物的分子式为C23H16Cl2N3O2，包含有16个不饱和度。化合物的1D NMR(1HNMR(500MHz，CD3OD)见表1，13C NMR(125MHz，CD3OD)见表2。)提示氢谱中存在以下信号：1个氮甲基[δH 2.88(1H，s)]，1个氧甲基[δH 3.36(3H，s)]，7个次甲基质子，1个亚甲基质子[δHa3.63(1H，d，J＝8.5Hz)和δHb4.06(1H，d，J＝8.5Hz)]和2个可交换的质子；碳谱中存在以下信号：1个羰基碳，13个季碳(包括12个sp2杂化的季碳及1个sp3杂化的季碳)，7个次甲基碳，1个亚甲基碳，1个氧甲基碳及1个氮甲基碳。比较化合物2与已知化合物Lynamicins A[McArthur，K.A.；Mitchell，S.S.；Tsueng，G.；Rheingold，A.；White，D.J.；Grodberg，J.；Lam，K.S.；Potts，B.C.Lynamicins A-E，chlorinated bisindole pyrrole antibiotics from a novel marine actinomycete，J Nat Prod，2008，71，1732-7.]的氢谱碳谱数据，发现二者相似，提示化合物2与化合物Lynamicins A结构类似，也属于双吲哚类生物碱。化合物2的氢谱中存在着两个ABX偶合体系(H-5′/H-7′/H-8′；H-5″/H-7″/H-8″)，与Lynamicins A相似，表明在化合物2中存在着两个1，2，4-三取代苯环，分别将其归属为1a和1b(式(III))。进一步，1a片段通过以下的HMBC相关建立：从H-5′到C-6′/C-7′/C-9′；从H-7′到C-5′/C-9′；从H-8′to C-6′/C-4(以上相关同时表明氯在C-6′位取代)及从H-2′到C-3′/C-4′/C-9′。H-10′位的氮甲基质子[δH 2.88(s)]到C-2′[δC 64.3(t)]和C-9′[δC 151.9(s)]的HMBC相关把这个氮甲基定位到1a片段的N-1′。1b片段通过下列HMBC得到：从H-5″到C-3″/C-7″/C-6″/C-9″，从H-7″到C-5″/C-6″/，和从H-8″到C-3″/C-5″/C-4″/C-6″/C-9″。1c片段由下列HMBC相关：H-2到C-3/C-4/C-5及H-2/NH-1的COSY相关得到。除此，从H-2到C-3″的弱的HMBC相关提示甲氧酰基在C-5位取代。与已知化合物Lynamicins A不同的是，化合物2形成一个罕见的5/5螺环，关键的HMBC相关：H-2′[δH 3.63(d)]到C-3[δC 140.1(s)]，H-2′[δH 4.06(d)]到C-2″[δC 154.5(s)]及H-2[δH6.91(d)]到C-3″[δC 112.1(s)]支持螺环结构的形成。以上对化合物2的结构推测被X-ray(图5)进一步证明，且分子中存在的氯原子，使得X-ray可以清晰地将化合物2C-3′的绝对构型确定为R构型。化合物2的结构如式(II)所示，命名为Spiro-Indimycin B。
化合物3：白色固体，其核磁数据归属如表1所示。 
UV(MeOH)λmax(logε)251nm(4.44)；210nm(4.63)；IR(KBr)λmax 3417，1701，1285cm-1；1H NMR(500MHz，CD3OD)见表1，13C NMR(125MHz，CD3OD)见表2。HRESIMS m/z[M-H]-422.0499(calcd for C22H14Cl2N3O2422.0463)，其分子式与化合物2相差一个甲基，仔细分析H-谱，C-谱，HSQC及HMBC谱，得出化合物3是化合物2缺失1′-N甲基的同系物，其结构如式(II)所示，命名为Spiro-Indimycin C。
化合物4：白色固体，其核磁数据归属如表1所示。 UV(MeOH)λmax(ε)266nm(4.23)；243nm(26373)；208nm(4.48)；IR(KBr)λmax 3307，1718，1268cm-1；1H NMR(500MHz，CD3OD)见表1，13C NMR(125MHz，CD3OD)见表2。HRESIMS m/z[M-H]-494.0661，(calcd for C25H18Cl2N3O4，494.0674)。将化合物4的氢谱和碳谱与化合物2相比，发现比化合物2多一个甲酯基团，还发现2中的C-2位的sp2杂化的次甲基碳[δH 6.91(d，J＝3.0Hz，H-2)；δC 110.3(d，C-2)]被sp2杂化的季碳[δC 111.5(s，C-2)]所取代，这说明化合物4是化合物2的2位甲酯取代结构类似物，其结构如式(II)所示，命名为Spiro-Indimycin D。
表1：化合物1-4的1H-NMR核磁数据归属(数据于500MHz测定，括号中为偶合常数(Hz))
a样品溶于DMSO检测；b样品溶于CDCl3检测
表2：化合物1-4的13C-NMR核磁数据归属(数据于125MHz测定)
a样品溶于DMSO检测；b样品溶于CDCl3检测
实施例3：Spiro-Indimycin A-D的细胞毒活性测定
Spiro-Indimycin A-D针对七种肿瘤细胞株：人乳腺癌MCF-7细胞，人胰腺癌1990，人肝癌细胞HepG2，人宫颈癌Hale，人黑色素瘤B16细胞，人肺癌H460细胞和人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRF-CEM进行了活性测定，实验方法参考文献[Wu，Z.C.；Li，D.L.；Chen，Y.C.；Zhang，W.M.，A new isofuranonaphthalenone and benzopyrans from the endophytic fungus Nodulisporium sp.A4 from Aquilaria sinensis.Helv.Chim.Acta 2010，93，(5)，920-924.]，以Staurosporine作为对照。
其结果如表3所示，结果表明Spiro-Indimycin A-D有选择性细胞毒活性，其中Spiro-Indimycin B对人黑色素瘤B16细胞、人肺癌H460细胞和人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRF-CEM的IC50分别是11μM、36.6μM和4.5μM，而对其它受试细胞株无明显生长抑制活性；Spiro-Indimycin C对人肝癌细胞HepG2和人肺癌H460细胞的IC50分别是14.1μM和35.4μM，而对其它受试细胞株无明显生长抑制活性；Spiro-Indimycin D对人肝癌细胞HepG2，人黑色素瘤B16细胞和人肺癌H460细胞的IC50分别是44.4μM、40.4μM和36.3μM，而对其它受试细胞株无明显生长抑制活性；Spiro-IndimycinA对人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRF-CEM的IC50为44.4μM，对其它受试细胞株无明显生长抑制活性；与阳性对照Staurosporine相比，Spiro-Indimycin A-D对所测的七种细胞的表现为选择性的抑制作用，且其活性较强，通过生物工程或化学修饰可望开发成为抗肿瘤新药。
表3：Spiro-Indimycin A-D的细胞毒性测定
注：-IC50＞100μg/ml
Claims (10)
1.链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032，其保藏编号为CCTCC NO：M 2011258。
2.化合物Spiro-Indimycin A-D，其结构式如式(I)所示：
3.权利要求2所述的化合物Spiro-Indimycin A-D在制备抗肿瘤药物中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的化合物Spiro-Indimycin A在制备治疗人急性淋巴细胞白血病药物中的应用。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的化合物Spiro-Indimycin B在制备治疗人黑色素瘤、人肺癌或人急性淋巴细胞白血病药物中的应用。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的化合物Spiro-Indimycin C在制备治疗人肝癌或人肺癌药物中的应用。
7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的化合物Spiro-Indimycin D在制备治疗人黑色素瘤、人肝癌或人肺癌药物中的应用。
8.权利要求1所述的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032在用于制备化合物Spiro-Indimycin A、B、C或D的应用。
9.一种化合物Spiro-Indimycin A、B、C或D的制备方法，其特征在于，所述的化合物Spiro-Indimycin A、B、C或D是从权利要求1所述的链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的发酵培养物中制备分离得到的。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
a)制备链霉菌(Streptomyces sp.)SCSIO 03032的发酵培养物，将该发酵培养物的发酵液和菌丝体分离开，发酵液经大孔树脂吸附，后用丙酮洗脱大孔树脂，洗脱液回收丙酮后剩余的水混合液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经蒸馏浓缩后得到浸膏A；菌丝体先用丙酮浸提，浸取液回收丙酮后剩余的水混合液再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经蒸馏浓缩后得到浸膏B；
b)将浸膏A和浸膏B合并的粗提物经硅胶柱层析，用氯仿/甲醇作为洗脱剂，从体积比100∶0～0∶100进行梯度洗脱，收集氯仿/甲醇体积比95∶5梯度洗脱下来的馏分Fr.1，后经ODS反相中压液相色谱，用水/甲醇作为洗脱剂，从体积比100∶0～0∶100进行梯度洗脱，收集水/甲醇体积比30∶70梯度洗脱下来的馏分Fr.1-1，再过LH-20凝胶柱，以氯仿/甲醇体积比1∶1作为流动相洗脱，用薄层层析追踪分离，收集薄层板上用氯仿/丙酮体积比为9∶1作为展开剂时Rf值为0.8的馏分，即为Spiro-Indimycin B，Rf值为0.6的馏分，即为Spiro-Indimycin A；收集薄层板上用石油醚/乙酸乙酯体积比为40∶60作为展开剂时Rf值为0.8的馏分，即为Spiro-Indimycin C；收集薄层板上用石油醚/乙酸乙酯体积比为50∶50作为展开剂时Rf值为0.8的馏分，即为Spiro-Indimycin D。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012100875377A CN102643765B (zh) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | 链霉菌、抗肿瘤化合物Spiro-Indimycin A-D及其制备方法和应用 |
| JP2014541509A JP5826406B2 (ja) | 2012-03-28 | 2012-04-13 | ストレプトマイセス、抗腫瘍化合物スピロインディマイシン（Ｓｐｉｒｏ−Ｉｎｄｉｍｙｃｉｎ）Ａ−Ｄ、その製造方法及び使用、並びに、該スピロインディマイシンを含む抗腫瘍剤及び薬物 |
| PCT/CN2012/074013 WO2013143184A1 (zh) | 2012-03-28 | 2012-04-13 | 链霉菌、抗肿瘤化合物Spiro-Indimycin A-D及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012100875377A CN102643765B (zh) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | 链霉菌、抗肿瘤化合物Spiro-Indimycin A-D及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102643765A true CN102643765A (zh) | 2012-08-22 |
| CN102643765B CN102643765B (zh) | 2013-06-19 |
Family
ID=46656843
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2012100875377A Active CN102643765B (zh) | 2012-03-28 | 2012-03-28 | 链霉菌、抗肿瘤化合物Spiro-Indimycin A-D及其制备方法和应用 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP5826406B2 (zh) |
| CN (1) | CN102643765B (zh) |
| WO (1) | WO2013143184A1 (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111732579A (zh) * | 2020-06-04 | 2020-10-02 | 中国科学院南海海洋研究所 | 一种聚醚聚酮类化合物polydecalinmycin及其制备方法和应用 |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114057811B (zh) * | 2021-12-03 | 2022-12-27 | 贵州大学 | 一种长链脂肪酸甘油醇类化合物Rubracin D、制备方法及其应用 |
| CN116199695B (zh) * | 2022-08-30 | 2024-05-28 | 浙江大学 | 一类桔霉素衍生物及其制备方法和应用 |
| CN115177616B (zh) * | 2022-09-13 | 2022-11-11 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种砖红链霉菌提取物在制备抗衰老产品中的应用 |
| CN119592464B (zh) * | 2024-12-05 | 2025-12-09 | 浙江大学 | 一种链霉菌、其产生的生物碱类化合物及制备方法和应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101126074A (zh) * | 2007-07-13 | 2008-02-20 | 东南大学 | 一种具有抗肿瘤活性海洋链霉菌及其培养方法 |
| CN102295562A (zh) * | 2011-07-01 | 2011-12-28 | 中国科学院微生物研究所 | 抗肿瘤化合物及其制备方法与应用 |
-
2012
- 2012-03-28 CN CN2012100875377A patent/CN102643765B/zh active Active
- 2012-04-13 WO PCT/CN2012/074013 patent/WO2013143184A1/zh not_active Ceased
- 2012-04-13 JP JP2014541509A patent/JP5826406B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101126074A (zh) * | 2007-07-13 | 2008-02-20 | 东南大学 | 一种具有抗肿瘤活性海洋链霉菌及其培养方法 |
| CN102295562A (zh) * | 2011-07-01 | 2011-12-28 | 中国科学院微生物研究所 | 抗肿瘤化合物及其制备方法与应用 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| KATHERINE A. MCARTHUR ET AL.: "Lynamicins A-E, Chlorinated Bisindole Pyrrole Antibiotics from a Novel Marine Actinomycete", 《J. NAT. PROD》 * |
| XIN-PENG TIAN ET AL.: "Streptomyces nanshensis sp. nov., isolated from the Nansha Islands in the South China Sea", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF SYSTEMATIC AND EVOLUTIONARY MICROBIOLOGY》 * |
| XUHUA MO ET AL.: "Cloning and characterization of the biosynthetic gene cluster of the bacterial RNA polymerase inhibitor tirandamycin from marine-derived Streptomyces sp.SCSIO1666", 《BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS》 * |
| 谷晓辉 等: "新型海洋双吲哚类生物碱的研究进展", 《有机化学》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111732579A (zh) * | 2020-06-04 | 2020-10-02 | 中国科学院南海海洋研究所 | 一种聚醚聚酮类化合物polydecalinmycin及其制备方法和应用 |
| CN111732579B (zh) * | 2020-06-04 | 2021-06-29 | 中国科学院南海海洋研究所 | 一种聚醚聚酮类化合物polydecalinmycin及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2013143184A1 (zh) | 2013-10-03 |
| CN102643765B (zh) | 2013-06-19 |
| JP5826406B2 (ja) | 2015-12-02 |
| JP2015502743A (ja) | 2015-01-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gao et al. | A novel anticancer and antifungus phenazine derivative from a marine actinomycete BM-17 | |
| Zhang et al. | New diketopiperazine derivatives from a deep-sea-derived Nocardiopsis alba SCSIO 03039 | |
| Banskota et al. | Isolation and identification of three new 5-alkenyl-3, 3 (2H)-furanones from two Streptomyces species using a genomic screening approach | |
| Vijayabharathi et al. | Assessment of resistomycin, as an anticancer compound isolated and characterized from Streptomyces aurantiacus AAA5 | |
| CN102643765B (zh) | 链霉菌、抗肿瘤化合物Spiro-Indimycin A-D及其制备方法和应用 | |
| MXPA05005672A (es) | Metodo para producir un compuesto a macrolido. | |
| WO1991019716A1 (fr) | Substance antitumorale be-13793c | |
| CN108048369B (zh) | 一种产星形孢菌素的海洋链霉菌及其制备方法 | |
| JP4521145B2 (ja) | 抗生物質カプラザマイシン類およびその製造法 | |
| CN102296039B (zh) | 一种假诺卡氏菌及利用其制备Deoxynyboquinone的方法 | |
| CN115109023B (zh) | 大环内酯类化合物fwyz52-a、其发酵菌株、发酵方法及应用 | |
| CN104087523B (zh) | 一种海洋链霉菌及利用其制备Enterocin的方法以及该菌的应用 | |
| JP5144167B2 (ja) | 新規ｋｂ−３３４６−５物質およびその製造方法 | |
| CN111732579A (zh) | 一种聚醚聚酮类化合物polydecalinmycin及其制备方法和应用 | |
| US7439225B2 (en) | Substances K01-B0171 and process for producing the same | |
| CN102351859A (zh) | 抗生素Pseudonocardian A和B及其制备方法和在制备抗菌、抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN114525224A (zh) | 一株高产抗菌活性物质macrolactinA的解淀粉芽孢杆菌及其应用 | |
| Nishio et al. | Karnamicin, a complex of new antifungal antibiotics I. Taxonomy, fermentation, isolation and physico-chemical and biological properties | |
| CN112725227A (zh) | 一种海绵来源链霉菌及其抑制己糖激酶ii活性物质的制备和应用 | |
| EP0542234B1 (en) | Antibacterial substance BE-24566B | |
| JPH08512330A (ja) | 海洋放線菌から単離した新規なチオデプシペプチド | |
| JP4836783B2 (ja) | 抗腫瘍剤、抗腫瘍剤の製造方法、抗腫瘍剤を含む医薬組成物、及び抗腫瘍剤産生菌 | |
| AU682543B2 (en) | Antitumor antibiotics | |
| Deering et al. | a New Hydroxamate Type Siderophore from the Deep Ocean Sediment-Derived Actinomycete Amycolatopsis albispora WP1T | |
| JP2007131552A (ja) | 新規抗生物質ｓｆ２８５６物質、その製造法および医薬組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |