CA2406157A1 - Unite de culture de cellules et tissus a configuration variable - Google Patents

Abstract

Une unité de culture de cellules et de tissus comprend une base (1) équipée de moyens d'accès (7,8) destinés à être raccordés à un dispositif d'alimentatio n en milieu de culture et délimitant au moins les parois latérales (5) d'une chambre de culture (6) et au moins les parois latérales d'au moins un puits (3- i) communiquant par l'une au moins de ses parties supérieure et inférieure avec la chambre (6), ainsi que des moyens de fermeture amovibles (10, 15-i, 17- i) propres à permettre l'accès à la chambre (6) et au puits (3-i).

Description

UNITE DE CULTURE DE CELLULES ET TISSUS A CONFIGURATION
VARIABLE
L'invention concerne la culture de cellules et de tissus à l'aide d'un s fluide de culture.
Elle concerne plus précisément les unités de culture de cellules et tissus qui comprennent une chambre de culture dans laquelle sont placées des cellules etlou des tissus à cultiver, ainsi que des moyens d'accès à la chambre susceptibles d'être raccordés à un dispositif externe destiné à
zo alimenter et mettre en mouvement le milieu de culture (ou nutriment) pour assurer une culture dynamique dans la chambre.
Les unités de culture connues sont souvent complexes et encombrantes ce qui, du fait de leur intégration dans le dispositif de culture, rend difficile l'observation de l'évolution de ia culture à l'aide d'un 25 microscope. De plus, leur complexité rendant leur coût élevé, ces unités de culture doivent ëtre proposées pour un usage multiple. I! est donc impératif de les démonter avant chaque nouvelle utilisation de manière à les nettoyer, puis de les remonter, ce qui rend leur utilisation encore plus complexe et provoque des variations des résultats dans ie cas de cultures identiques a o successives. Par conséquent, cela nuit à la reproductibilité. Par ailleurs, de par leur conception, ces unités ne permettent pas les interventions sur les cellules et tissus en cours de culture. D'autre part, fa géométrie des chambres ne pouvant pas étre modifiée, à chaque type d'unité correspond généralement une application spécifique.
25 L'invention a pour but de remédier à tout ou partie de ces inconvénients.
Elle propose à cet effet une unité du type de celle décrite dans l'introduction et qui comprend une base délimitant au moins les parois latérales de la chambre et au moins les parois latérales d'au moins un puits 3o communiquant par l'une au moins de ses parties supérieure et inférieure

2 avec la chambre, et des moyens de fermeture amovibles propres à
permettre l'accès à la chambre et au puits.
Du fait de leur grande simplicité et de leur grande adaptabilité, les unités selon l'invention peuvent étre réalisées pour des utilisations à usage s unique. Bien entendu, il est également pôssible de les réutiliser.
Préférentiellement, la base délimite au moins deux puits qui communiquent avec la chambre.
Dans un mode de réalisation préférentiel, les moyens de fermeture comportent un couvercle supérieur amovible qui ferme la partie supérieure 1o de la chambre. II suffit alors d'ôter le couvercle supérieur pour accéder à
la chambre et aulx) puits. Plus préférentiellement encore, le couvercle supérieur comporte, en regard de la partie supérieure de chaque puits, une ouverture adaptée à la réception d'un moyen d'obturation supérieure amovible, tel qu'un bouchon. Cela permet d'intervenir sur un puits sans qu'il 15 faille ôter le couvercle supérieur.
Des moyens d'obturation supérieure présentant des parois d'obturation placées à des niveaux difFérenfis peuvent être utilisés de manière à contraindre le fluide de culture à pénétrer dans les puits.
Avantageusement, le couvercle supérieur comporte au moins une zone équipée d'un moyen (de type septum) permettant l'introduction d'un élément externe tei qu'un capteur de température, un capteur de pH ou une aiguille.
Par ailleurs, lorsque la partie inférieure des puits n'est pas fermée par une partie de la base, on prévoit soit un couvercle inférieur amovible qui 25 ferme tous les puits simultanément, soit des moyens d'obturation inférieure amovibles, tels que des bouchons indépendants les uns des autres.
Le couvercle inférieur ou certains au moins des bouchons inférieurs peuvent être agencés de manière à recevoir un support de culture.
Des bouchons inférieurs présentant des parois d'obturation p(acêes 3o à des niveaux différents peuvent étre utilisés de manière à pouvoir faire

3 varier la hauteur du puits en regard.
L'unité selon l'invention pourra comporter d'autres caractéristiques prises séparément ou en combinaison, et notamment :
- certains au moins des puits pourront comporter au moins une membrane pour définir au moins deux compartiments de culture superposés ;
- certaines au moins des parois latérales de puits pourront délimiter un cylindre ou un tronc de cône ;
les moyens d'accès pourront être réalisés sous la forme de Luers et so être équipés de moyens de contrôle d'accès, tels que des vannes ;
- l'un au moins des septa pourra être agencë de manière à défléchir le flux du fluide de culture, de préférence en direction des puits, ou bien être équipé d'un élément auxiliaire destiné à assurer cette déflexion du flux ;
- la base pourra être réalisée par moulage ou usinage d'un matériau synthétique, de préférence résistant aux hautes températures régnant dans les fours, en particulier dans les autoclaves, ou bien résistant aux rayons gamma ou béta, ou à tout autre type de rayonnement utilisé pour la stérilisation ;
z o - elle est au moins partiellement réalisée dans des matériaux transparents ;
- elle pourra comprendre des moyens de régulation de température.
D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à
l'examen de la description détaillée ci-après, et des dessins annexés, sur lesquels - la figure 1 est une vue en perspective d'une base d'une unité selon l'invention, dans un premier mode de réalisation, - la figure 2 est une vue du dessus d'une variante de la base illustrée sur la figure 1, - la figure 3 est une vue en coupe transversale de la base illustrëe sur

4 la figure 2, - les figures 4A et 4B sont des vue du dessus et vue en coupe transversale d'un premier mode de réalisation de couvercle supérieur destiné à coopérer avec les bases illustrées sur les figures 1 et 2, s - la figure 5 est une vue en perspective d'une unité selon l'invention, dans un second mode de réalisation, - la figure 6 est une vue en perspective de la base de l'unité illustrée sur ia figure 5, la figure 7 est une vue en perspective du couvercle supérieur de 1o l'unité illustrée sur fa figure 5, - la figure 8 est une vue en perspective d'une varianté de couvercle supérieur, - la figure 9 est une vue en perspective de l'unité illustrée sur la figure

5, avant positionnement des bouchons inférieurs, - la figure 10 est une vue en coupe transversale de l'unité illustrée sur la figure 5, - la figure 11 détaille une partie de l'unité illustrée sur la figure 10, et - les figures 12 et 13 sont deux variantes de la partie illustrée sur la figure 11.
ao Les dessins annexés sont, pour l'essentiel, de caractère certain. En conséquence, ils pourront non seulement servir à compléter l'invention, mais aussi contribuer à sa définition, le cas échéant.
Dans la description qui suit, il sera fait référence à une unité de culture destinée à être alimentée en fluide (ou milieu) de culture par un 25 dispositif, quelconque, assurant une circulation continue, ou intermittente, manuelle ou programmable.
On se réfère tout d'abord aux figures 1 à 3 pour décrire un premier mode de réalisation d'unité de culture selon l'invention.
Dans ce premier mode de réalisation, l'unité de culture comporte un 3 o bloc de base 1 comportant une partie inférieure 2 dans laquelle se trouvent) réalisés) un ou plusieurs puits 3-i (ici i = 1 à 3) et prolongée par une partie supérieure 4 qui définit des parois latérales 5 d'une chambre 6.
Ce bloc de base 1 (ou base) est équipé de deux moyens d'accès 7 et 8 destinés à alimenter fa chambre 6,en fluide de culture délivré par un 5 dispositif de culture externe, comme indiqué précédemment. Ces deux moyens d'accès 7 et 8 peuvent être, par exemple, des Luers, mais il pourrait également s'agir de conduits raccordés à des réservoirs du dispositif d'alimentation externe. Par ailleurs, ces moyens d'accès peuvent être équipés de moyens de contrôle d'accès tels que des vannes à commande 1o manuelle ou électronique ou encore par air comprimé.
Un tel bloc de base peut être réalisé dans un matériau synthétique par moulage ou par usinage. De préférence, le matériau synthétique est choisi de manière à résister à des hautes températures du type de celles qui règnent à l'intérieur de fours de décontamination tels que les autoclaves (généralement de 100 à 125°C sur des durées d'environ 30 minutes en ambiance humide). Mais, dans d'autres applications le matériau synthétique peut être choisi de manière à résister à une stérilisation aux rayons gamma, ou béta, ou à .tout autre type de rayonnement, ainsi qu'à tout autre type de stérilisation.
ao Dans l'exemple illustré sur la figure 1, les puits 3-i sont des trous cylindriques circulaires et le fond 9-i de ces puits est directement défini par la partie inférieure 2 de la base 1.
Bien entendu, les puits peuvent présenter n'importe quel type de forme. Ainsi, comme illustré sur les figures 2 et 3, ils pourront être réalisés a 5 sous la forme de troncs de cônes d'angle au sommet sensiblement égal à
60°, par exemple.
Dans ce premier mode de réalisation, la chambre 6 est fermée (isolée de l'extérieur) par un couvercle supérieur 10, du type de celui illustré
sur les figures 4A et 4B.
s o ' Un tel couvercle est également de préférence réalisé dans un

6 matériau synthétique transparent, de manière à permettre l'observation des cellules et tissus qui sont cultivés à l'intérieur de la chambre 6 et surtout des puits 3-i.
On peut également prévoir que le matëriau utilisé pour réaliser la base 1 soit transparent de manière à permettre l'observation des cultures sous plusieurs angles différents, à l'aide d'un microscope. Par ailleurs, et de manière à faciliter une telle observation sous un microscope, l'unité, et par conséquent sa base et son couvercle supérieur 10, présente des dimensions réduites, comme par exemple une largeur d'environ 25 mm et une hauteur 1o d'environ 10 à 15 mm. Mais, bien entendu, les unités pourront présenter des dimensions différentes selon les besoins, et notamment selon les types de culture envisagés.
Comme cela est illustré sur les figures 4A et 4B, le couvercle supérieur 10 comporte, de façon préférée, plusieurs zones 11 équipées de 25 moyens permettant l'introduction d'un élément externe tel qûe, notamment, un capteur de température, un capteur de pH et une aiguille pour injecter ou prélever de la matière à l'intérieur de la chambre 6 ou des puits 3-i.
Préférentiellement, ces moyens adaptés à l'introduction d'un élément externe sont des septa 12 j (ici j = 1 à 4). Dans ('exemple illustré sur les ao figures 4A et 4B, les septa 12 j sont positionnés sur le couvercle supérieur de manière à se retrouver de part et d'autre des différents puits 3-i une fois ledit couvercle supérieur 10 immobilisé relativement à la base 1.
L'un au moins des septa peut être agencé de manière à défléchir le flux du fluide de culture en direction de l'un au moins des puits. Pour ce faire, z5 le septa 12 j peut faire saillie dans la chambre 6, et dans ce cas ü
présente un profil adapté à la déflexion, ou bien étre équipé de moyens de déflexion tels que des éléments auxiliaires de type pattes de profils choisis ou obstacles de formes choisies.
On se réfère maintenant aux figures 5 à 11 pour décrire un second 3o mode de réalisation d'une unité de culture selon l'invention.

7 Dans ce second mode de réalisation, comme illustré sur la figure 7, le couvercle supérieur 10 comporte, entre chacune de ses zones 11 équipées de septa 12 j, une ouverture 13-i (ici i = 1 à 3) entourée de parois sensiblement verticales 14 propres à recevoir un moyen d'obturation tel s qu'un bouchon 15-i (i = 1 à 3).
Prëférentiellement, les parois verticales 14 et les rebords des bouchons 15-i sont équipés de moyens de solidarisation permettant la fixation des bouchons 15-i relativement au couvercle 10, à étanchéité. II
pourra s'agir, préférentiellement, de filetage 20-i permettant le vissage des bouchons supérieurs 15-i sur les extrémités des parois verticales 14 (voir figure 8). Mais bien entendu, tout autre type de moyens de solidarisation peut étre envisagé, comme par exemple des moyens à ~ coopération de forme, ou des moyens de clipsage, ou des pinces élastiques, ou des moyens de verrouillage quart de tour ou demi-tour. La solidarisation pourra 15 également résulter des formes respectives des bouchons et des ouvertures du couvercle supérieur, destinées à tes recevoir. Par exemple, le bouchon pourra être de forme conique et coopérer avec une ouverture tronconique.
Ces bouchons sont, comme illustré sur les figures 9 à 11, destinés à
être positionnés en regard des puits 3-i formés dans la base 1. Ils sont par conséquent, de préférence, réalisés dans un matériau synthétique transparent.
Comme cela est mieux illustré sur la figure 6, dans ce second mode de réalisation, le bloc de base 1 ne comporte pas de parois 9-i qui, comme dans le premier mode de réalisation illustré sur les figures 1 à 4, définissent z5 le fond des puits 3-i. En d'autres termes, dans ce second mode de réalisation, la partie inférieure des puits 3-i est ouverte.
Dans cet exemple, les moyens d'accès 7 et 8 sont portés par la base 1 et agencés pour alimenter la chambre 6 via des ouvertures formées dans la paroi latérale de ladite base. Dans une variante illustrée sur la figure 30 8, les moyens d'accès 7 et 8 sont portés par le couvercle supérieur 10 et

8 agencés pour alimenter la chambre 6 via des ouvertures formées dans la paroi latérale dudit couvercle.
Dans l'exemple illustré sur les figures 9 à 11, chaque partie inférieure de puits est équipée de parois sensiblement verticales 16 destinées à
recevoir un moyen d'obturation inférieur, tel qu'un bouchon inférieur 17-i.
Comme pour les bouchons supérieurs 15-i,'on prévoit à (a fois sur les parois verticales 16 et sur les rebords des bouchons 17-i, des moyens de solidarisation, comme par exemple des filetages 21-i permettant la solidarisation des bouchons 17-i à ia base 1, par vissage. Bien entendu, 1o comme pour les bouchons supérieurs, tout autre type de moyen de solidarisation peut être envisagé.
De la sorte, la paroi d'obturation du bouchon inférieur 17-i définit le fond (9-i) du puits 3-i.
Bien entendu, au lieu d'utiliser plusieurs bouchons inférieurs 17-i z5 pour fermer les parties inférieures des puits 3-i, on pourrait utiliser un couvercle inférieur équipé d'autant de moyens d'obturation qu'il y a de puits formés dans la base 1.
Comme cela est illustré sur la figure 11, grâce aux septa 12 j, il est possible, à l'aide d'une aiguille 18, d'injecter ou d'extraire de la matière (par ao exemple des cellules ou des nutriments) à l'intérieur des puits 3-i, y compris au fond de ces puits.
Comme cela est illustré sur les figures 12 et 13, les moyens d'obturation supérieurs et inférieurs peuvent être réalisés sous différentes formes, de manière à faire varier les géométries des puits. Plus précisément, as en jouant sur la position de la paroi d'obturation 18 des bouchons inférieurs 17-i, il est possible de faire varier la hauteur du puits 3-i, de manière à
éloigner les cellules ou tissus du flux de fluide de culture qui circule dans la chambre 6 (comme illustré sur la figure 11 ) ou bien à les rapprocher de ce flux (comme illustré sur les figures 12 et 13).
30 ' De mëme, en jouant sur la position de la paroi d'obturation 19 des

9 bouchons supérieurs 15-i, on peut créer à l'intérieur de la chambre 6 des "obstacles" (ou moyens de déflexion) qui contraignent le flux de fluide de culture à descendre à l'intérieur des puits 3-i (comme illustré sur la figure 12).
La paroi, qui démit le fond 19 d'un bouchon supérieur, peut présenter une forme particulière de manière à permettre un confirôle de la déflexion. Mais, comme indiqué précédemment, on peut également utiliser les septa pour défléchir le flux de fluide de culture.
Des cultures de types différents peuvent être envisagées dans les différents puits d'une unité selon l'invention. Par conséquent, une unité
1o pourra comporter des puits équipés de bouchons dont les géométries sont différentes.
Par ailleurs, les bouchons pourront ëtre agencés de manière à
recevoir des supports de culture, tels que des lamelles. Cela est particulièrement avantageux, car cela peut permettre de continuer la culture i5 après la désolidarisation du bouchon de l'unité de culture. En effet, certains types de culture nécessitent deux phases distinctes : une première phase « dynamique » effectuée en présence d'un flux de fluide de culture, cette phase étant effectuée dans l'unité de culture selon l'invention, et une seconde phase « statique » effectuée dans un incubateur. Dans cette ao situation, il suffit, par exemple, d'obturer la partie ouverte du bouchon inférieur, puis de le placer dans un incubateur pour achever la culture.
Bien entendu, on peut également envisager de placer directement l'unité de culture dans un incubateur, une fois cette unité désolidarisée du dispositif d'alimentation en fluide de culture. Tous types d'incubateurs 25 peuvent ëtre envisagés, qu'ils soient secs ou humides, de manière à
permettre une régulation de la température des cultures.
En variante, de culture pourra tre quipemoyens l'unit de de rgulationde tempratureinterne, comme par exemple circuit un de rgulationcomportant capteur de temprature et rsistance un une 3 o chauffante.

D'autre part, et bien que cela ne soit pas illustré sur les figures, les bouchons inférieurs 17-i pourront comporter, en plus de la paroi d'obturation 18, une ou plusieurs membranes placées à des niveaux intermédiaires, de manière à subdiviser le puits en sous-compartiments destinés à la culture de 5 cellules ou tissus différents. Dans ce cas, il est particulièrement avantageux que les membranes soient poreuses au fluide de culture, notamment.
Bien entendu, la variabilité de ia géométrie des puits, et ia possibilité
d'utiliser des supports de culture, ou des grilles, ou encore des membranes poreuses, n'est pas limitée aux bouchons inférieurs. On peut envisager 1o d'utiliser un couvercle inférieur muni de moyens d'obturation remplissant le rôle des bouchons.
L'utilisation de bouchons inférieurs, tout comme de bouchons supérieurs, est particulièrement intéressante dans la mesure où elle permet d'intervenir sur une culture effectuée dans un puits sans que cela ne perturbe les cultures effectuées dans les puits voisins. Par ailleurs, cela permet de réduire les éventuelles contaminations qui surviennent lorsque tous les puits sont simultanément à l'air libre.
Enfin, tout type de dispositif permettant de gérer la circulation du fluide (ou milieu de culture) à l'intérieur de l'unité de culture selon l'invention, z o pourra étre utilisé. A titre d'exemple, on pourra citer des dispositifs assurant une circulation continue, ou une circulation alternée, ou des pompes péristaltiques, ou des dispositifs d'injection par seringue, qu'ils soient contrôlés manuellement ou électroniquement (c'est-à-dire programmés).
L'invention s'applique à de très nombreux types de cellules et tissus, tels que notamment - les cellules intestines : Intestine 407, Caco-2, Colo 205, T84, SW
1116, WiDr, HT 29, HT 115, HT 55 ;
- les cellules épidermales : NHEK-Neopooled (Human Epidermal Keratinocyte Neonatal), Equine Dermis ;
- les cellules cancéreuses : HeLa, CHO-K1 ;

- ies cellules fibroplastiques de type intestinales : CCD-18Co - les cellules fibroplastiques de type MRC-5, 3T3, Wi-38 ;
- les myélomes : SP20-Ag14, P3X63 Ag8 653, MPC11;
- les hybridomes ;
- les cellules endothéliales humaines normales ~ NHUVEC (c< Normal Human Ombilical Vein endothelial Cells »), ~ NHUAEC (<c Normal Human Ombilical Artery endothelial Cells »), ~ NHDMC (c< Normal Human Dermal Microvascular Cells ») ;
- les cellules mélanocytes humaines normales : NHEM (c< Normal 1o Human Epidermal Melanocytes ») ;
- les cellules du muscle lisse humaines normales ~ HUASMC («Human Ombilical Artery Smooth Muscle Cells »), ~ HPASMC (ccHuman Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells »), ~ HAOSMC (c<Human.Aorta Smooth Muscle Cells ») ;
- les cellules ostéoblastes humaines normales : NHOB (« Normal Human Osteoblasts ») ;
- les cellules d'insectes : SF9.
Cette liste n'est en aucun cas exhaustive ; il ne s'agit que d'exemples.
z o L'invention ne se limite pas aux modes de réalisation d'unité décrits ci-avant, seulement à titre d'exemple, mais elle englobe toutes ies variantes que pourra envisager l'homme de l'art dans le cadre des revendications ci-après.
Ainsi, on a décrit une unité dans laquelle la chambre était placée au-z5 dessus des puits et par conséquent communiquait avec leur partie supérieure. Mais, !a chambre pourrait être placée au-dessous des puits et par conséquent communiquer avec leur partie inférieure.
Par ailleurs, on a décrit des bases délimitant des puits sensiblement identiques, mais on peut envisager des bases dans lesquelles les puits présentent des formes différentes de manière à effectuer des cultures éventuellement différentes et/ou à recevoir des bouchons de formes différentes.
D'autre part, l'un des puits délimité par fa base pourra être subdivisé
s en plusieurs sous-puits.
De plus, le fond du puits pourra être muni de graduations, ou plus généralement de marques ou modèles, pour faciliter l'observation de l'évolution de la culture.
Enfin, le support de culture pourra être de type tridimensionnel, 1o poreux, ou gélatineux, ou encore solide, de forme quelconque.

Claims (27)

REVENDICATIONS

1. Unité de culture de cellules et tissus du type comprenant une chambre de culture (6) propre à recevoir des cellules ou des tissus à
cultiver, et comportant des moyens d'accès (7,8) destinés à être raccordés à un dispositif d'alimentation en milieu de culture, caractérisée en ce qu'elle comprend une base (1) délimitant au moins les parois latérales (5) de la chambre (6) et au moins les parois latérales d'au moins un puits (3-i) communiquant par l'une au moins de ses parties supérieure et inférieure avec la chambre (6), et des moyens de fermeture amovibles (10,15-i,17-i) propres à permettre l'accès à la chambre (6) et au puits (3-i).

2. Unité selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite base (1) délimite au moins deux puits (3-i) qui communiquent avec ladite chambre (6).

3. Unité selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisée en ce que lesdits moyens de fermeture comportent un couvercle supérieur (10) amovible propre à fermer la partie supérieure de la chambre (6).

4. Unité selon la revendication 3, caractérisée en ce que ledit couvercle supérieur (10) comporte, en regard de chaque puits (3-i), une ouverture (13-i) adaptée pour recevoir un moyen d'obturation supérieure (15-i) amovible.

5. Unité selon la revendication 4, caractérisée en ce que chaque ouverture (13-i) est agencée pour coopérer avec des moyens d'obturation supérieure (15-i) présentant des parois d'obturation (19) placées à des niveaux différents.

6. Unité selon l'une des revendications 3 à 5, caractérisée en ce que ledit couvercle supérieur (10) comporte au moins une zone (11 ) agencée pour permettre l'introduction d'un élément externe choisi dans un groupe comprenant au moins un capteur de température, un capteur de pH
et une aiguille (18).

7. Unité selon la revendication 6, caractérisée en ce que ladite zone (11) est équipée d'un septa (12).

8. Unité selon la revendication 7, caractérisée en ce que l'un au moins des septa (12) est agencé de manière à défléchir le flux de fluide de culture qui circule dans la chambre (6).

9. Unité selon l'une des revendications 7 et 8, caractérisée en ce que l'un au moins des septa (12) est équipé d'un élément auxiliaire propre à
défléchir le flux de fluide de culture qui circule dans la chambre (6).

10. Unité selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que lesdits moyens de fermeture comportent un couvercle inférieur amovible propre à fermer la partie inférieure de chaque puits (3-i).

11. Unité selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que lesdits moyens de fermeture comportent des moyens d'obturation inférieure (17-i) amovibles, indépendants les uns des autres et agencés chacun pour fermer la partie inférieure ouverte d'un puits (3-i).

12. Unité selon l'une des revendications 10 et 11, caractérisée en ce que le couvercle inférieur ou certains au moins des moyens d'obturation inférieure (17-i) sont agencés pour recevoir un support de culture.

13. Unité selon l'une des revendications 11 et 12, caractérisée en ce que chaque partie inférieure ouverte de puits (3-i) est agencée pour coopérer avec des moyens d'obturation inférieure (17-i) ou un couvercle inférieur présentant des parois d'obturation (18) placées à des niveaux différents de manière à faire varier la hauteur du puits (3-i) en regard.

14. Unité selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que la base (1) délimite également les fonds de puits (3-i).

15. Unité selon l'une des revendications 1 à 14, caractérisée en ce que certains au moins des puits (3-i) comportent au moins une membrane placée à un niveau intermédiaire de manière à définir au moins deux compartiments de culture superposés.

16. Unité selon l'une des revendications 1 à 15, caractérisée en ce que certaines au moins des parois latérales de puits (3-i) délimitent un cylindre.

17. Unité selon l'une des revendications 1 à 15, caractérisée en ce que certaines au moins des parois latérales de puits (3-i) délimitent un tronc de cône.

18. Unité selon l'une des revendications 1 à 17, caractérisée en ce que lesdits moyens d'accès (7,8) sont réalisés sous la forme de Luers.

19. Unité selon l'une des revendications 1 à 18, caractérisée en ce que lesdits moyens d'accès (7,8) sont équipés de moyens de contrôle d'accès.

20. Unité selon l'une des revendications 1 à 19, caractérisée en ce que lesdits moyens d'accès (7,8) sont portés par la base (1).

21. Unité selon l'une des revendications 3 à 19, caractérisée en ce que lesdits moyens d'accès (7,8) sont portés par le couvercle supérieur (10).

22. Unité selon l'une des revendications 1 à 21, caractérisée en ce que la base (1) est réalisée par moulage dans un matériau synthétique.

23. Unité selon l'une des revendications 1 à 21, caractérisée en ce que la base (1) est réalisée par usinage d'un bloc de matériau synthétique.

24. Unité selon l'une des revendications 22 et 23, caractérisée en ce que ledit matériau synthétique est résistant aux hautes températures régnant dans les fours, en particulier dans les autoclaves.

25. Unité selon l'une des revendications 22 et 23, caractérisée en ce que ledit matériau synthétique est résistant aux rayonnements utilisés pour la stérilisation et en particulier aux rayonnements choisis parmi les rayonnements gamma et béta.

26. Unité selon l'une des revendications 1 à 25, caractérisée en ce qu'elle est au moins partiellement réalisée dans des matériaux transparents.

27. Unité selon l'une des revendications 1 à 26, caractérisée en ce qu'elle,comprend des moyens de régulation de température.