CA2305786A1 - Utilisation des bloqueurs des canaux potassium neuronaux et lymphocytaires dans le traitement des maladies neurologiques d'origine immunitaire - Google Patents
Utilisation des bloqueurs des canaux potassium neuronaux et lymphocytaires dans le traitement des maladies neurologiques d'origine immunitaire Download PDFInfo
- Publication number
- CA2305786A1 CA2305786A1 CA002305786A CA2305786A CA2305786A1 CA 2305786 A1 CA2305786 A1 CA 2305786A1 CA 002305786 A CA002305786 A CA 002305786A CA 2305786 A CA2305786 A CA 2305786A CA 2305786 A1 CA2305786 A1 CA 2305786A1
- Authority
- CA
- Canada
- Prior art keywords
- cys
- lys
- ktx
- seq
- gly
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Abandoned
Links
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 title claims abstract description 17
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 title claims abstract description 8
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 title claims abstract description 8
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 10
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 title abstract description 10
- 239000011591 potassium Substances 0.000 title abstract description 10
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title abstract description 6
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 title abstract 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 claims abstract description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 6
- VRARWAGTAUYUOO-UHFFFAOYSA-N kaliotoxin Chemical compound N1C(=O)C(CCCNC(N)=N)NC(=O)C(CCSC)NC(=O)CNC(=O)C(C)NC(=O)C(CC(O)=O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(NC(=O)C2CCCN2C(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC2=O)CSSCC(C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)NC(=O)C(CC=3N=CNC=3)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(CCCNC(N)=N)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCSC)NC3=O)CSSCC2NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C2CCCN2C(=O)C(CO)NC(=O)CNC(=O)C(CO)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)C)C(C)CC)CSSCC3NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)CNC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 VRARWAGTAUYUOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 81
- 101001077186 Androctonus mauritanicus mauritanicus Potassium channel toxin alpha-KTx 3.1 Proteins 0.000 claims description 80
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 72
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 54
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 50
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 29
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N alpha-aminobutyric acid Chemical compound CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 26
- 102000004257 Potassium Channel Human genes 0.000 claims description 25
- 108020001213 potassium channel Proteins 0.000 claims description 25
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 24
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 22
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical group CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 14
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 claims description 13
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 13
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 claims description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 11
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 10
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 10
- 230000007830 nerve conduction Effects 0.000 claims description 8
- 241000242759 Actiniaria Species 0.000 claims description 7
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 101001047026 Buthus occitanus tunetanus Potassium channel toxin alpha-KTx 3.9 Proteins 0.000 claims description 5
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002795 scorpion venom Substances 0.000 claims description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 4
- -1 derivative (P12/Abu Chemical compound 0.000 claims description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 4
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 claims description 4
- 230000007823 neuropathy Effects 0.000 claims description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 3
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 claims description 3
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 claims description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims description 3
- 230000004807 localization Effects 0.000 claims description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 claims description 3
- FQKNZJLPBMOCKU-ZDGDVGGMSA-N 3-[(1R,4S,4aS,7R,12R,15S,18S,21S,24S,30S,33S,36S,42S,45S,48R,53R,56S,59S,65S,68S,71S,74R,81S,87S,90S,95S,98S)-53-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]hexanoyl]amino]-4,15,45,68,81,98-hexakis(4-aminobutyl)-7-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1,4-diamino-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]carbamoyl]-87-(2-amino-2-oxoethyl)-71-(3-amino-3-oxopropyl)-56-[(1R)-1-hydroxyethyl]-30,33,59,95-tetrakis(hydroxymethyl)-24-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-36,42-dimethyl-21-(2-methylpropyl)-90-(2-methylsulfanylethyl)-2,5,5a,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,54,57,60,66,69,72,80,83,86,89,92,93,96,99-nonacosaoxo-9,10,50,51,76,77-hexathia-a,3,6,6a,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,55,58,61,67,70,73,79,82,85,88,91,94,97-nonacosazapentacyclo[46.30.14.1412,74.061,65.0100,104]hexahectan-18-yl]propanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@@H]2NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](Cc3ccc(O)cc3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H]3CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H]4CCCN4C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC1=O)[C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N3)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC2=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(N)=O FQKNZJLPBMOCKU-ZDGDVGGMSA-N 0.000 claims description 2
- 206010001014 Acute polyneuropathies Diseases 0.000 claims description 2
- 101001046986 Androctonus australis Potassium channel toxin alpha-KTx 3.5 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000997262 Centruroides noxius Potassium channel toxin alpha-KTx 2.1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101001077188 Leiurus hebraeus Potassium channel toxin alpha-KTx 3.2 Proteins 0.000 claims description 2
- MNSSWZUIQUJZTG-UHFFFAOYSA-N agitoxin 2 Chemical compound C1SSCC(C(NC(CCSC)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)N2)=O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)CNC(=O)C(CC=3C=CC=CC=3)NC(=O)C(CCCNC(N)=N)NC(=O)C(CCSC)NC(=O)CNC(=O)C(C)NC(=O)C(CC(O)=O)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(NC(=O)C3CCCN3C(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(C(C)CC)NC3=O)CSSCC(C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N4C(CCC4)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)NC(=O)C(CC=4N=CNC=4)NC(=O)C2CSSCC3NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C2CCCN2C(=O)C(CO)NC(=O)CNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(NC(=O)CN)C(C)C MNSSWZUIQUJZTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000014440 chronic polyradiculoneuritis Diseases 0.000 claims description 2
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000008482 dysregulation Effects 0.000 claims description 2
- 208000020911 optic nerve disease Diseases 0.000 claims description 2
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 2
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 claims 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 abstract description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 46
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 29
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 20
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 15
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 14
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 13
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 7
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 7
- 150000003927 aminopyridines Chemical class 0.000 description 7
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 7
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 7
- GSUFZRURORXYTM-STQMWFEESA-N Arg-Phe-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(O)=O)CC1=CC=CC=C1 GSUFZRURORXYTM-STQMWFEESA-N 0.000 description 6
- NDSNUWJPZKTFAR-DCAQKATOSA-N Lys-Cys-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN NDSNUWJPZKTFAR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 6
- 238000011694 lewis rat Methods 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- NUKYPUAOHBNCPY-UHFFFAOYSA-N 4-aminopyridine Chemical compound NC1=CC=NC=C1 NUKYPUAOHBNCPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QIHJTGSVGIPHIW-QSFUFRPTSA-N Ile-Asn-Val Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)N QIHJTGSVGIPHIW-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 5
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 5
- DQTIWTULBGLJBL-DCAQKATOSA-N Asn-Arg-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N DQTIWTULBGLJBL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- XELISBQUZZAPQK-CIUDSAMLSA-N Cys-His-Cys Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N XELISBQUZZAPQK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- SYOJVRNQCXYEOV-XVKPBYJWSA-N Gly-Val-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SYOJVRNQCXYEOV-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 4
- BYEBKXRNDLTGFW-CIUDSAMLSA-N Lys-Cys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BYEBKXRNDLTGFW-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 4
- 230000003376 axonal effect Effects 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 4
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 4
- 210000001328 optic nerve Anatomy 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 4
- OVJBOPBBHWOWJI-FYNXUGHNSA-N (2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(aS,1R,3aS,4S,10S,16S,19R,22S,25S,28S,34S,37S,40R,45R,48S,51S,57S,60S,63S,69S,72S,75S,78S,85R,88S,91R,94S)-40-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]hexanoyl]amino]-25,48,78,88,94-pentakis(4-aminobutyl)-a-(2-amino-2-oxoethyl)-22,63,72-tris(3-amino-3-oxopropyl)-69-benzyl-37-[(1R)-1-hydroxyethyl]-34,60-bis(hydroxymethyl)-51,57,75-trimethyl-16-(2-methylpropyl)-3a-(2-methylsulfanylethyl)-2a,3,5a,9,15,18,21,24,27,33,36,39,47,50,53,56,59,62,65,68,71,74,77,80,87,90,93,96,99-nonacosaoxo-7a,8a,42,43,82,83-hexathia-1a,2,4a,8,14,17,20,23,26,32,35,38,46,49,52,55,58,61,64,67,70,73,76,79,86,89,92,95,98-nonacosazahexacyclo[43.35.25.419,91.04,8.010,14.028,32]nonahectane-85-carbonyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@@H]2NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](Cc3ccccc3)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H]3CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H]4CCCN4C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC1=O)[C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N3)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC2=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccc(O)cc1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O OVJBOPBBHWOWJI-FYNXUGHNSA-N 0.000 description 3
- CWEAKSWWKHGTRJ-BQBZGAKWSA-N Ala-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O CWEAKSWWKHGTRJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 3
- 101000997261 Centruroides margaritatus Potassium channel toxin alpha-KTx 2.2 Proteins 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- UVAOVENCIONMJP-GUBZILKMSA-N Gln-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UVAOVENCIONMJP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 3
- OLTFZQIYCNOBLI-DCAQKATOSA-N Pro-Cys-Lys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O OLTFZQIYCNOBLI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- 101710093543 Probable non-specific lipid-transfer protein Proteins 0.000 description 3
- GFRIEEKFXOVPIR-RHYQMDGZSA-N Thr-Pro-Lys Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O GFRIEEKFXOVPIR-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- 241000269370 Xenopus <genus> Species 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 3
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 3
- 108010090333 leucyl-lysyl-proline Proteins 0.000 description 3
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 3
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[[6-amino-2-[[2-[[2-[[5-amino-2-[[2-[[1-[2-[[6-amino-2-[(2,5-diamino-5-oxopentanoyl)amino]hexanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)p Chemical compound C1CCN(C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CCC(N)=O)C1C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N Asn-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(=O)N)N OLVIPTLKNSAYRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- HPNDBHLITCHRSO-WHFBIAKZSA-N Asp-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O HPNDBHLITCHRSO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- VOBMMKMWSIVIOA-SRVKXCTJSA-N Cys-Lys-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CS)N VOBMMKMWSIVIOA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- IQXSTXKVEMRMMB-XAVMHZPKSA-N Cys-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O IQXSTXKVEMRMMB-XAVMHZPKSA-N 0.000 description 2
- 208000016192 Demyelinating disease Diseases 0.000 description 2
- 206010012305 Demyelination Diseases 0.000 description 2
- VLIJYPMATZSOLL-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)CN VLIJYPMATZSOLL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- POJJAZJHBGXEGM-YUMQZZPRSA-N Gly-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN POJJAZJHBGXEGM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N Ile-Lys-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GLYJPWIRLBAIJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N Leu-Lys-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N RTIRBWJPYJYTLO-MELADBBJSA-N 0.000 description 2
- QQYRCUXKLDGCQN-SRVKXCTJSA-N Lys-Cys-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCCCN)N QQYRCUXKLDGCQN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- ZVZRQKJOQQAFCF-ULQDDVLXSA-N Lys-Tyr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O ZVZRQKJOQQAFCF-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- OBVHKUFUDCPZDW-JYJNAYRXSA-N Met-Arg-Phe Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 OBVHKUFUDCPZDW-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- SBSIKVMCCJUCBZ-GUBZILKMSA-N Met-Asn-Arg Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N SBSIKVMCCJUCBZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 102000047918 Myelin Basic Human genes 0.000 description 2
- 101710107068 Myelin basic protein Proteins 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- LYGKYFKSZTUXGZ-ZDLURKLDSA-N Thr-Cys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O LYGKYFKSZTUXGZ-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SJLVYVZBFDTRCG-DCAQKATOSA-N Val-Lys-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N SJLVYVZBFDTRCG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 2
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 210000000133 brain stem Anatomy 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 230000007831 electrophysiology Effects 0.000 description 2
- 238000002001 electrophysiology Methods 0.000 description 2
- 229960004979 fampridine Drugs 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 230000007659 motor function Effects 0.000 description 2
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 210000004248 oligodendroglia Anatomy 0.000 description 2
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- LOUPRKONTZGTKE-LHHVKLHASA-N quinidine Chemical compound C([C@H]([C@H](C1)C=C)C2)C[N@@]1[C@H]2[C@@H](O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-LHHVKLHASA-N 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000542 thalamic effect Effects 0.000 description 2
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N Ala-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 1
- YBPLKDWJFYCZSV-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asn-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N YBPLKDWJFYCZSV-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- WJRXVTCKASUIFF-FXQIFTODSA-N Ala-Cys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WJRXVTCKASUIFF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- XAGIMRPOEJSYER-CIUDSAMLSA-N Ala-Cys-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N XAGIMRPOEJSYER-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ZVFVBBGVOILKPO-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZVFVBBGVOILKPO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- OINVDEKBKBCPLX-JXUBOQSCSA-N Ala-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OINVDEKBKBCPLX-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- XQNRANMFRPCFFW-GCJQMDKQSA-N Ala-Thr-Asn Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N)O XQNRANMFRPCFFW-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- GNYUVVJYGJFKHN-RVMXOQNASA-N Arg-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N GNYUVVJYGJFKHN-RVMXOQNASA-N 0.000 description 1
- GIMTZGADWZTZGV-DCAQKATOSA-N Arg-Lys-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N GIMTZGADWZTZGV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- AUIJUTGLPVHIRT-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Cys Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)CN=C(N)N AUIJUTGLPVHIRT-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- WQSCVMQDZYTFQU-FXQIFTODSA-N Asn-Cys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WQSCVMQDZYTFQU-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- KHCNTVRVAYCPQE-CIUDSAMLSA-N Asn-Lys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O KHCNTVRVAYCPQE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LMIWYCWRJVMAIQ-NHCYSSNCSA-N Asn-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LMIWYCWRJVMAIQ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- HOQGTAIGQSDCHR-SRVKXCTJSA-N Asp-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HOQGTAIGQSDCHR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DZQKLNLLWFQONU-LKXGYXEUSA-N Asp-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O DZQKLNLLWFQONU-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- CXEFNHOVIIDHFU-IHPCNDPISA-N Asp-Trp-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N CXEFNHOVIIDHFU-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- 241000905957 Channa melasoma Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- DCJNIJAWIRPPBB-CIUDSAMLSA-N Cys-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N DCJNIJAWIRPPBB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NLCZGISONIGRQP-DCAQKATOSA-N Cys-Arg-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CS)N NLCZGISONIGRQP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- OLIYIKRCOZBFCW-ZLUOBGJFSA-N Cys-Asp-Cys Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)C(=O)O OLIYIKRCOZBFCW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N Cys-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N KABHAOSDMIYXTR-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XTHUKRLJRUVVBF-WHFBIAKZSA-N Cys-Gly-Ser Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XTHUKRLJRUVVBF-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KCSDYJSCUWLILX-BJDJZHNGSA-N Cys-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N KCSDYJSCUWLILX-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- UCSXXFRXHGUXCQ-SRVKXCTJSA-N Cys-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N UCSXXFRXHGUXCQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VDUPGIDTWNQAJD-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Cys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O VDUPGIDTWNQAJD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- QVLKXRMFNGHDRO-FXQIFTODSA-N Cys-Met-Asn Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O QVLKXRMFNGHDRO-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- WZJLBUPPZRZNTO-CIUDSAMLSA-N Cys-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CS)N WZJLBUPPZRZNTO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WTXCNOPZMQRTNN-BWBBJGPYSA-N Cys-Thr-Ser Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O WTXCNOPZMQRTNN-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 206010061431 Glial scar Diseases 0.000 description 1
- 206010018341 Gliosis Diseases 0.000 description 1
- VVWWRZZMPSPVQU-KBIXCLLPSA-N Gln-Cys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N VVWWRZZMPSPVQU-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- VNCLJDOTEPPBBD-GUBZILKMSA-N Gln-Cys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N VNCLJDOTEPPBBD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- DQLVHRFFBQOWFL-JYJNAYRXSA-N Gln-Lys-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O DQLVHRFFBQOWFL-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- VSMQDIVEBXPKRT-QEJZJMRPSA-N Glu-Cys-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N VSMQDIVEBXPKRT-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- IOUQWHIEQYQVFD-JYJNAYRXSA-N Glu-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O IOUQWHIEQYQVFD-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- VUUOMYFPWDYETE-WDSKDSINSA-N Gly-Gln-Cys Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)CN VUUOMYFPWDYETE-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- BBTCXWTXOXUNFX-IUCAKERBSA-N Gly-Met-Arg Chemical compound CSCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O BBTCXWTXOXUNFX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- ABPRMMYHROQBLY-NKWVEPMBSA-N Gly-Ser-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN)C(=O)O ABPRMMYHROQBLY-NKWVEPMBSA-N 0.000 description 1
- WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WCORRBXVISTKQL-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N Gly-Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN YGHSQRJSHKYUJY-SCZZXKLOSA-N 0.000 description 1
- VCDNHBNNPCDBKV-DLOVCJGASA-N His-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N VCDNHBNNPCDBKV-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- UJWYPUUXIAKEES-CUJWVEQBSA-N His-Cys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O UJWYPUUXIAKEES-CUJWVEQBSA-N 0.000 description 1
- BFOGZWSSGMLYKV-DCAQKATOSA-N His-Ser-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N BFOGZWSSGMLYKV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GYAFMRQGWHXMII-IUKAMOBKSA-N Ile-Asp-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N GYAFMRQGWHXMII-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- NLZVTPYXYXMCIP-XUXIUFHCSA-N Ile-Pro-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O NLZVTPYXYXMCIP-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 206010021639 Incontinence Diseases 0.000 description 1
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- IWMJFLJQHIDZQW-KKUMJFAQSA-N Leu-Ser-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 IWMJFLJQHIDZQW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N Lys-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WGLAORUKDGRINI-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- PGLGNCVOWIORQE-SRVKXCTJSA-N Lys-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PGLGNCVOWIORQE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- JCVOHUKUYSYBAD-DCAQKATOSA-N Lys-Pro-Cys Chemical compound C1C[C@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O JCVOHUKUYSYBAD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QFSYGUMEANRNJE-DCAQKATOSA-N Lys-Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N QFSYGUMEANRNJE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 206010060860 Neurological symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000007542 Paresis Diseases 0.000 description 1
- HBGFEEQFVBWYJQ-KBPBESRZSA-N Phe-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 HBGFEEQFVBWYJQ-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N Phe-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O VJLLEKDQJSMHRU-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- SNIPWBQKOPCJRG-CIUDSAMLSA-N Pro-Gln-Cys Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O SNIPWBQKOPCJRG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- INDVYIOKMXFQFM-SRVKXCTJSA-N Pro-Lys-Gln Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O INDVYIOKMXFQFM-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FIODMZKLZFLYQP-GUBZILKMSA-N Pro-Val-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FIODMZKLZFLYQP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 102000002067 Protein Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010001267 Protein Subunits Proteins 0.000 description 1
- 108700012364 REG1 Proteins 0.000 description 1
- JJKSSJVYOVRJMZ-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Cys Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)CN=C(N)N JJKSSJVYOVRJMZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- MPPHJZYXDVDGOF-BWBBJGPYSA-N Ser-Cys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CO MPPHJZYXDVDGOF-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N Ser-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WNDUPCKKKGSKIQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Pro-Gln Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O WNDUPCKKKGSKIQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SGZVZUCRAVSPKQ-FXQIFTODSA-N Ser-Val-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N SGZVZUCRAVSPKQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- KEGBFULVYKYJRD-LFSVMHDDSA-N Thr-Ala-Phe Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KEGBFULVYKYJRD-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 1
- GMXIJHCBTZDAPD-QPHKQPEJSA-N Thr-Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N GMXIJHCBTZDAPD-QPHKQPEJSA-N 0.000 description 1
- SCSVNSNWUTYSFO-WDCWCFNPSA-N Thr-Lys-Glu Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SCSVNSNWUTYSFO-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- DOBIBIXIHJKVJF-XKBZYTNZSA-N Thr-Ser-Gln Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O DOBIBIXIHJKVJF-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 1
- PZXUIGWOEWWFQM-SRVKXCTJSA-N Tyr-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PZXUIGWOEWWFQM-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OLWFDNLLBWQWCP-STQMWFEESA-N Tyr-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O OLWFDNLLBWQWCP-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- FRUYSSRPJXNRRB-GUBZILKMSA-N Val-Cys-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N FRUYSSRPJXNRRB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PMDOQZFYGWZSTK-LSJOCFKGSA-N Val-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)C(C)C PMDOQZFYGWZSTK-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- JQTYTBPCSOAZHI-FXQIFTODSA-N Val-Ser-Cys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N JQTYTBPCSOAZHI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012072 active phase Substances 0.000 description 1
- 208000002552 acute disseminated encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- OYTKINVCDFNREN-UHFFFAOYSA-N amifampridine Chemical compound NC1=CC=NC=C1N OYTKINVCDFNREN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000000947 anti-immunosuppressive effect Effects 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N cinchonine Natural products C1C(C(C2)C=C)CCN2C1C(O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000004020 conductor Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 108010069495 cysteinyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000003210 demyelinating effect Effects 0.000 description 1
- 210000001787 dendrite Anatomy 0.000 description 1
- 230000000994 depressogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229940116441 divinylbenzene Drugs 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001787 epileptiform Effects 0.000 description 1
- 230000002397 epileptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 208000001780 epistaxis Diseases 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 230000004438 eyesight Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 1
- 230000014726 immortalization of host cell Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000005171 mammalian brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000002025 microglial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003007 myelin sheath Anatomy 0.000 description 1
- 208000011309 nasal bleeding Diseases 0.000 description 1
- 210000004126 nerve fiber Anatomy 0.000 description 1
- 230000007658 neurological function Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 108010024607 phenylalanylalanine Proteins 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Substances [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000003450 potassium channel blocker Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000035752 proliferative phase Effects 0.000 description 1
- 108010015796 prolylisoleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 229960001404 quinidine Drugs 0.000 description 1
- 239000012857 radioactive material Substances 0.000 description 1
- 210000000499 ranvier's node Anatomy 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 238000010405 reoxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 1
- 230000037152 sensory function Effects 0.000 description 1
- 210000002265 sensory receptor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 210000005070 sphincter Anatomy 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010031491 threonyl-lysyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 description 1
- HFFLGKNGCAIQMO-UHFFFAOYSA-N trichloroacetaldehyde Chemical compound ClC(Cl)(Cl)C=O HFFLGKNGCAIQMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- 230000006439 vascular pathology Effects 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
- C07K14/43513—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from arachnidae
- C07K14/43522—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from arachnidae from scorpions
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
- C07K14/43595—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from coelenteratae, e.g. medusae
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Insects & Arthropods (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
La présente invention concerne l'utilisation de bloqueurs des canaux potassium neuronaux et lymphocytaires pour la préparation de médicaments destinés au traitement de maladies neurologiques à composante immunitaire chez l'homme ou l'animal dans lesquelles se produit un blocage de la conduction nerveuse.
L'invention a également pour objet de nouvelles compositions pharmaceutiques, ainsi que de nouveaux bloqueurs des canaux potassium, et leurs utilisations dans le cadre du traitement des pathologies susmentionnées.
L'invention a également pour objet de nouvelles compositions pharmaceutiques, ainsi que de nouveaux bloqueurs des canaux potassium, et leurs utilisations dans le cadre du traitement des pathologies susmentionnées.
Description
WO 99/18123 PGTlFR98/02I36 UTILISATION DES BLOQUEURS DES CANAUX POTASSIUM
NEURONAUX ET LYMPHOCYTAIRES DANS LC TRAITEMENT DES
MALADIES NEUROLOGIQUES D'ORIGINE IMMUNITAIRE
La présente invention concerne l'utilisation d' inhibiteurs (ou Moqueurs) des canaux potassium comme agents thérapeutiques des maladies neurologiques à composante immunitaire dans lesquelles se produit un blocage de la conduction nerveuse, et en particulier la sclérose en plaque (SEP).
La sclérose en plaque (SEP) est la plus fréquente des maladies humaines démyélinisantes du système nerveux avec une prévalence moyenne de 5 à
300/100 000 habitants. Elle atteint l'adulte jeune et 1,5 à 2 fois plus souvent les femmes. La répartition géographique de la SEP n'est pas uniforme puisque sa prévalence augmente avec la latitude, selon trois zones de risque faible, moyen et fort. Le pic de prévalence se situe dans les régions comprises entre 45° et 60°
de latitude nord, donc en particulier en Europe du Nord.
L'évolution de la maladie se fait en poussées, avec apparition de lésions neuronaies pouvant altérer des fonctions motrices et sensitives, la vision, t'équilibre et le contrôle des sphincters. Dans 50 à 60% des cas, une phase progressive de plus en plus invalidante s' installe au bout d' une dizaine d' années mais ces formes progressives apparaissent aussi d'emblée dans i5% des cas.
La prévalence relativement élevée de cette maladie, associée à son caractère progressif pénible et invalidant, expliquent les efforts de Ia communauté scientifique pour améliorer la vie des patients. Ainsi entre 1993 et 1996, 2400 références relatives à la SEP ont été publiées par des journaux spécialisés.
Les données cliniques et anatomo-pathologiques de la SEP sont les suivantes.
La SEP est due à une destruction progressive des gaines de myéline des axones du système nerveux central, sans dégénérescence axonale, accompagnée d'une cicatrice gliale, l'ensemble formant la plaque de sclérose. La myéline lésée n'est pas ou peu reconstituée par les cellules 'zliales (olitodendrocytes), cc qui accentue l'évolution de la maladie. L'examen histopatholcy_ique rcvèlc l'existence d' infiltrats inflammatoires dans la whstance Manche ~t i<~
dissémination des lésions rend compte du polymorphisme dcs symptcimcs. Ces inflammations s'accompagnent de troubles de la conduction nerveuse. lis blocs de conduction, qui sont à l'origine de la perte des I~mctions nervewcs.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26)
NEURONAUX ET LYMPHOCYTAIRES DANS LC TRAITEMENT DES
MALADIES NEUROLOGIQUES D'ORIGINE IMMUNITAIRE
La présente invention concerne l'utilisation d' inhibiteurs (ou Moqueurs) des canaux potassium comme agents thérapeutiques des maladies neurologiques à composante immunitaire dans lesquelles se produit un blocage de la conduction nerveuse, et en particulier la sclérose en plaque (SEP).
La sclérose en plaque (SEP) est la plus fréquente des maladies humaines démyélinisantes du système nerveux avec une prévalence moyenne de 5 à
300/100 000 habitants. Elle atteint l'adulte jeune et 1,5 à 2 fois plus souvent les femmes. La répartition géographique de la SEP n'est pas uniforme puisque sa prévalence augmente avec la latitude, selon trois zones de risque faible, moyen et fort. Le pic de prévalence se situe dans les régions comprises entre 45° et 60°
de latitude nord, donc en particulier en Europe du Nord.
L'évolution de la maladie se fait en poussées, avec apparition de lésions neuronaies pouvant altérer des fonctions motrices et sensitives, la vision, t'équilibre et le contrôle des sphincters. Dans 50 à 60% des cas, une phase progressive de plus en plus invalidante s' installe au bout d' une dizaine d' années mais ces formes progressives apparaissent aussi d'emblée dans i5% des cas.
La prévalence relativement élevée de cette maladie, associée à son caractère progressif pénible et invalidant, expliquent les efforts de Ia communauté scientifique pour améliorer la vie des patients. Ainsi entre 1993 et 1996, 2400 références relatives à la SEP ont été publiées par des journaux spécialisés.
Les données cliniques et anatomo-pathologiques de la SEP sont les suivantes.
La SEP est due à une destruction progressive des gaines de myéline des axones du système nerveux central, sans dégénérescence axonale, accompagnée d'une cicatrice gliale, l'ensemble formant la plaque de sclérose. La myéline lésée n'est pas ou peu reconstituée par les cellules 'zliales (olitodendrocytes), cc qui accentue l'évolution de la maladie. L'examen histopatholcy_ique rcvèlc l'existence d' infiltrats inflammatoires dans la whstance Manche ~t i<~
dissémination des lésions rend compte du polymorphisme dcs symptcimcs. Ces inflammations s'accompagnent de troubles de la conduction nerveuse. lis blocs de conduction, qui sont à l'origine de la perte des I~mctions nervewcs.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26)
2 Lors des phases actives de la maladie, on observe dans le liquide céphalo-rachidien : la présence d'un nombre anormal de lymphocytes T et à un degré
moindre. de lymphocytes E3, une élévation de la concentration des immunoglobulines (IgG) dirigées contre différénts antigènes viraux, et surtout dans certains cas des anticorps dirigés contre les oligodendrocytes et contre ;a protéine basique myélinique. Aucun agent infectieux n'a pu ëtre, à ce jour.
formellement et systématiquement impliqué.
Les lésions sont formées par des infiltrations de monocytes, de lymphocytes B et T (majoritaires) et par des plaques de démyéünisation. Les lymphocytes T expriment majoritairement des récepteurs pour l' interleukine 2 et des molécules HLA, témoins d'une prolifération cellulaire. Les cellules résidentes, astrocytes, cellules microgliales et les cellules endothéliales des capillaires, expriment aussi les molécules HLA de classe II, ce qui témoigne d'une réaction inflammatoire dans le cerveau.
L'inflammation est particulièrement nocive dans le système nerveux central, en générant des compressions, des lésions de démyélinisation, des perturbations de l'influx nerveux. L'une des conséquences aggravantes de la démyélinisation est l'apparition de blocs de conduction dus au dérèglement de l' activité des canaux ioniques responsables de l' influx nerveux dans Les axones.
Les thérapies actuelles de la SEP dérivent de traitements appliqués à
diverses formes d'encéphalomyélites allergiques expérimentales (EAE) qui sont devenues le modèle essentiel de la SEP, et de médicaments anti-inflammatoires, immunosuppresseurs ou immunomodulateurs utilisés dans les cancers, les transplantations d'organes et d'autres processus inflammatoires. Elles sont basées sur l'hypothèse que la SEP est une maladie autoimmune dirigée contre la myéline du SNC. De ce tait, ces thérapies impliquent des traitements, avec l' interféron ou des corticostéroïdes par exemple, qui interfèrent en priorité
avec le système immunitaire pour limiter ou prévenir les processus inflammatoires dans le SNC (Revue par Jacobs et coil., 1994). Les traitements symptomatiques visant à rétablir ou améliorer les fonctions neuroloLiques déficientes sont peu développés et peu efficaces. A l'exception des aminopyridines, ces traitements ne prennent pas en considération le role des canaux potassium dans les blocs dc conduction des nerfs démyélinisés. causes majeures des insuftisances sensorielles et motrices.
Des effets cliniques bénéfiques de Moqueurs des canaux potassium et en particulier des aminopyridines l4-AP ct 3.4-DAP) dans la sclérose en plaque ont été dccrits dès 1983 (voir pour revues: Noseworthv. 1993: Polman et I~arwn'~.
1995). C.'utilisation tics amincyyridines est justifiée Pat' Icnr capacitc à
hlodmr FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26)
moindre. de lymphocytes E3, une élévation de la concentration des immunoglobulines (IgG) dirigées contre différénts antigènes viraux, et surtout dans certains cas des anticorps dirigés contre les oligodendrocytes et contre ;a protéine basique myélinique. Aucun agent infectieux n'a pu ëtre, à ce jour.
formellement et systématiquement impliqué.
Les lésions sont formées par des infiltrations de monocytes, de lymphocytes B et T (majoritaires) et par des plaques de démyéünisation. Les lymphocytes T expriment majoritairement des récepteurs pour l' interleukine 2 et des molécules HLA, témoins d'une prolifération cellulaire. Les cellules résidentes, astrocytes, cellules microgliales et les cellules endothéliales des capillaires, expriment aussi les molécules HLA de classe II, ce qui témoigne d'une réaction inflammatoire dans le cerveau.
L'inflammation est particulièrement nocive dans le système nerveux central, en générant des compressions, des lésions de démyélinisation, des perturbations de l'influx nerveux. L'une des conséquences aggravantes de la démyélinisation est l'apparition de blocs de conduction dus au dérèglement de l' activité des canaux ioniques responsables de l' influx nerveux dans Les axones.
Les thérapies actuelles de la SEP dérivent de traitements appliqués à
diverses formes d'encéphalomyélites allergiques expérimentales (EAE) qui sont devenues le modèle essentiel de la SEP, et de médicaments anti-inflammatoires, immunosuppresseurs ou immunomodulateurs utilisés dans les cancers, les transplantations d'organes et d'autres processus inflammatoires. Elles sont basées sur l'hypothèse que la SEP est une maladie autoimmune dirigée contre la myéline du SNC. De ce tait, ces thérapies impliquent des traitements, avec l' interféron ou des corticostéroïdes par exemple, qui interfèrent en priorité
avec le système immunitaire pour limiter ou prévenir les processus inflammatoires dans le SNC (Revue par Jacobs et coil., 1994). Les traitements symptomatiques visant à rétablir ou améliorer les fonctions neuroloLiques déficientes sont peu développés et peu efficaces. A l'exception des aminopyridines, ces traitements ne prennent pas en considération le role des canaux potassium dans les blocs dc conduction des nerfs démyélinisés. causes majeures des insuftisances sensorielles et motrices.
Des effets cliniques bénéfiques de Moqueurs des canaux potassium et en particulier des aminopyridines l4-AP ct 3.4-DAP) dans la sclérose en plaque ont été dccrits dès 1983 (voir pour revues: Noseworthv. 1993: Polman et I~arwn'~.
1995). C.'utilisation tics amincyyridines est justifiée Pat' Icnr capacitc à
hlodmr FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26)
3 PG"T/FR98/02136 les canaux potassium neuronaux et ainsi à faciliter la conduction axonale. De fait, les essais cliniques ont montré que ia 4-AP et surtout la 3.4-DAI' améliorent significativement les symptômes chez certains patients.
Cependant, les aminopyridines sont peu sélectives et touchent un grand nombre de canaux potassium dépendants du potentiel et entre autres, ceux présents dans les terminaisons synaptiques (Sherrat, Bostock et Sears, 1980).
Il s'agit des canaux Kv de type Kvl.l, Kvl.2, Kvl.3, Kvl.4, Kvl.S mais aussi des canaux d'une autre famille génétique, les canaux Kv3.1 et Kv3.4. Le blocage de-ces canaux facilite la libération de neuromédiateurs excitateurs et induit de nombreux effets annexes périphériques et centraux (Bever, 1994).
L'administration soutenue de 4-AP à des patients atteints de SEP a des effets bénéfiques, mais également des effets neurologiques sérieux avec induction de décharges épileptiformes locales ou généralisées (Polman et coll.. 1994). Par ailleurs, l'efficacité des aminopyridines sur les canaux Kv des lymphocytes T
est relativement faible (Ic50 = 200 ~eM). Ceci explique que la 4-AP (ainsi que la quinidine) se soient révélées incapables d' induire des changements notables dans l'évolution de l'EAE chez le rat Lewis (Uitdehaag et coil., 1994).
Les thérapies à base d'aminopyridines ont pour but de traiter les symptômes neurologiques. Aux concentrations utilisées et du fait de la durée des traitements, elles induisent des effets secondaires dus à leur manque de spécificité.
Par ailleurs, la margatoxine, molécule issue du venin de scorpion, est décrite en tant qu' immunosuppresseur susceptible de pouvoir ëtre utilisée dans le cadre du traitement de maladies autoitnmunes, ou de la prévention du rejet de ~~reffea (Brevet US 5,494,895). Cet effet immunosuppresseur de la margatoxine résulterait de son action de blocage des canaux Kvl.3 des lymphocytes.
Cependant, aucun effet de blocage des canaux Kv neuronaux n'est décrit ni suggéré dans ce brevet US.
La présente invention a pour but de fournir des composés agissant sur un nombre limité de canaux Kv neuronaux, tout en assurant une grande efficacité
sur les pathologies neurologiques dans lesquelles le système immunitaire est impliqué et se produit un hlocage de !a conduction nerveuse. sans pour autant m~zendrer les effets secondaires ~hservés dans le cadre des essais thérapeutiques des connposés de l'art antérieur.
I.a présente invention a cgalement pour hut dc fournir dc nouvelles e:onttpositions pharmaceutiques susceptibles d'étre utilisées dans le cadre du traitement des patholo~~ics neurologiques à composante inununitairc associces ;~
un hluca~_~ de la conduction nerveuse, notamment de la SEP.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 261
Cependant, les aminopyridines sont peu sélectives et touchent un grand nombre de canaux potassium dépendants du potentiel et entre autres, ceux présents dans les terminaisons synaptiques (Sherrat, Bostock et Sears, 1980).
Il s'agit des canaux Kv de type Kvl.l, Kvl.2, Kvl.3, Kvl.4, Kvl.S mais aussi des canaux d'une autre famille génétique, les canaux Kv3.1 et Kv3.4. Le blocage de-ces canaux facilite la libération de neuromédiateurs excitateurs et induit de nombreux effets annexes périphériques et centraux (Bever, 1994).
L'administration soutenue de 4-AP à des patients atteints de SEP a des effets bénéfiques, mais également des effets neurologiques sérieux avec induction de décharges épileptiformes locales ou généralisées (Polman et coll.. 1994). Par ailleurs, l'efficacité des aminopyridines sur les canaux Kv des lymphocytes T
est relativement faible (Ic50 = 200 ~eM). Ceci explique que la 4-AP (ainsi que la quinidine) se soient révélées incapables d' induire des changements notables dans l'évolution de l'EAE chez le rat Lewis (Uitdehaag et coil., 1994).
Les thérapies à base d'aminopyridines ont pour but de traiter les symptômes neurologiques. Aux concentrations utilisées et du fait de la durée des traitements, elles induisent des effets secondaires dus à leur manque de spécificité.
Par ailleurs, la margatoxine, molécule issue du venin de scorpion, est décrite en tant qu' immunosuppresseur susceptible de pouvoir ëtre utilisée dans le cadre du traitement de maladies autoitnmunes, ou de la prévention du rejet de ~~reffea (Brevet US 5,494,895). Cet effet immunosuppresseur de la margatoxine résulterait de son action de blocage des canaux Kvl.3 des lymphocytes.
Cependant, aucun effet de blocage des canaux Kv neuronaux n'est décrit ni suggéré dans ce brevet US.
La présente invention a pour but de fournir des composés agissant sur un nombre limité de canaux Kv neuronaux, tout en assurant une grande efficacité
sur les pathologies neurologiques dans lesquelles le système immunitaire est impliqué et se produit un hlocage de !a conduction nerveuse. sans pour autant m~zendrer les effets secondaires ~hservés dans le cadre des essais thérapeutiques des connposés de l'art antérieur.
I.a présente invention a cgalement pour hut dc fournir dc nouvelles e:onttpositions pharmaceutiques susceptibles d'étre utilisées dans le cadre du traitement des patholo~~ics neurologiques à composante inununitairc associces ;~
un hluca~_~ de la conduction nerveuse, notamment de la SEP.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 261
4 La présente invention a pour 'objet l'utilisation de composés inhibiteurs des canaux potassium neuronaux Kvl.I, Kvl.2, et des canaux p(ltaSSlunl lymphocytaires Kv 1.3, pour la préparation de médicaments destinés au traitement de maladies neurologiques à composante immunitaire chez l' homme ou l'animal, dans lesquelles se produit un blocage de la conduction nerveuse.
Les composés utilisés dans !e cadre de la présente invention, sont davantage caractérisés en ce qu' ils possèdent un effet inhibiteur des canaux potassium neuronaux Kvl.l et Kvl.2 dépendants du potentiel, situés dans les noeuds de Ranvier (lesdits canaux neuronaux étant notamment décrits dans les articles suivants : McNamara et coll., 1996 ; Wang et coll., 1994), et un effet inhibiteur des canaux potassium dépendants du potentiel Kvl.3 que l'on trouve dans les lymphocytes desdits canaux lymphocytaires étant notamment décrits dans Chandy et Gutman, 1994; Grissmer et coll., 1994).
Par canaux potassium dépendants du potentiel, dans ce qui précède et ce qui suit, on entend des protéines membranaires sélectivement perméables aux ions potassium et dont la perméabilité à cet ion dépend du potentiel de ia cellule.
Le flux d' ions potassium à travers le canal constitue un courant potassium.
Les caractéristiques de la relation entre le courant potassium et le potentiel de la cellule ont été décrites par Stühmer et colt. (1989) pour les courants Kvl.l.
Kv 1.2 et Kv 1.3. La séquence de la sous-unité protéique principale (sous-unité
a) constitutive des canaux potassium Kv 1.1, Kv 1.2 et Kv 1.3 est également décrite dans cet article. La classification des canaux potassium dépendants du potentiel est par ailleurs explicitée dans la revue de synthèse de Chandy et Gutman (1994).
Par inhibiteurs (ou bloqueurs) des canaux potassium dépendarns du potentiel, dans ce qui précède et ce qui suit, on entend toute molécule capable de limiter le courant potassium à travers un canal potassium par une action directe sur le canal. Dans le cas particulier de la kaliotoxine, et des autres composés peptidiques (ou pseudopeptidiques) décrits ci-après, le blocage s'effectue par obturation de la partie externe du canal. La mesure du blocage des canaux potassium par les composés de l' invention peut étre effectuée par la méthode du potentiel imposé telle que celle décrite dans l'article Crest et al.. 1992, ausmetuionné.
Panai les pathologies neurologiques, notamment n mmposantc immunitaire, susceptibles d'étre traitées dans le cadre de la présente mve:ntum.
un peut cher - les pathologies neurologiques centrales inllammatoirev à fe»alisation W rchrale ~t médullaire. nonamment la sclérose en plaque e:t maladies FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) apparentées (Balo. Devis, encéphalite aiguë disséminée et hémorragiques, neuropathies optiques isolées);
- les pathologies périphériques inflammatoires ou apparéntées, notamment:
les polyradiculonévrites aiguës et chroniques, les neuropathies liées à des atteintes infectieuses et à des collagénoses, - les pathologies neurologiques dégénératives, notamment la sclérose latérale amyotrophique, les neuropathies avec bloc de conduction, - les pathologies tumorales, primitives ou secondaires, associées à un dérèglement du système immunitaire.
L' invention concerne également l'utilisation susmentionnée des composés décrits ci-dessus dans le cadre du traitement des autres atteintes centrales cérébrales et médullaires, notamment les pathologies d'origine métabolique, les pathologies vasculaires ischémiques artérielles, veineuses et hémorragiques, les pathologies traumatiques, ainsi que les complications centrales des maladies de système, notamment circulatoire, tells que Beheet, Sarcoïdose, et autres vascularites.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation de composés peptidiques tels que décrits ci-dessus, inhibant les canaux potassium neuronaux, Kv I .1, Kv 1.2, et les canaux lymphocytaires Kv I .3, lesdits composés étant issus de venins de scorpion ou d'anémones de mer, pour la préparation de médicaments destinés au traitement des maladies neurologiques à composante mentionnées ci-dessus, à l'exclusion de l'utilisation de la margatoxine dans fe cadre du traitement de maladies neurologiques à composante immunitaire, telle que la SEP.
L'invention concerne plus particulièrement l'utilisation susmentionnée de composés peptidiques issus de venins de scorpion, ou de composés dérivés de ces derniers, ces composés ou dérivés comprenant la séquence en acides aminés répondant à la formule générale suivante (I) suivante Cys-AA9-AA 10-AA 11-AA 12-AA 13-Cys-AA I 5-AA 1 ~-AA I ~-Cys-AA I ~-AA20-AA21-(AA22)n t -AA?3-AA~4-AA~S-AA2~-AA~~-(AAZg)n2-Lys-Cys-AA3 I -AA32-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys (1) clans laquelle - nl, et n2. indépendamment l'un de l'autre, représentent rcro eu I, FEUILLE DE REMPWCEMENT fREGLE 26) - AAg à AA13. AAIS à AA1~, AAIg à AA2g. AA31 n AA33, et AA3~, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé
quelconque, naturel ou non.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée de composés comprenant la séquence en acides aminés de formule (I) dans laquelle nl = n2 = 1, et représentés par la formule (II) suivante:
AA2-AA3-Ile-Asn-Val-Lys-Cys-Thr-Ser-Pro-AA 12-Gln-Cys-AA 15-AA I6-Pro-Cys-Lys-AA20-AA21-AA22-Gly-AA24-AA25-Ala-Gly-AA2g-Lys-C y s-AA31-Asn-Gly-Lys-Cys-Lys-Cys-Tyr-AA3g-AA40 (II) dans laquelle AA2, AAg, AA12, AAIS, AA16, AA2p à AA22, AA24, AA25, AA2g, AA31, AA39, et AA4p, indépendamment les uns des autres représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
L'invention concerne plus particulièrement l'utilisation, à titre de composé
de formule (II), la noxiustoxine (telle qu'issue du venin de scorpion dénommé
Centrudoides noxius) correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO
L'invention a également pour objet l'utilisation susmentionnée de composés, comprenant la séquence en acides aminés de formule (I), dans laquelle n2 = 0, lesdits composés comprenant la séquence représentée par la formule (III) suivante:
AA6-AA~-Cys-AAg-AA l0-Ser-AA 12-AA 13-Cys-AA l 5-AA l 6-AA 1 ~-Cys-Lys-Asp-A!a-(AA22)nl-Giy-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA3I-Asn-AA;3-Lys-Cys-AA3~-Cys-AA3g-AA3g (III) dans laquelle - AA6, AA~. AAg. AAIO. AA12. AA13. AA15. AA1~. AA1~. AA?2.
AA24, AA31, AA33, AA36, AA3g et AA3g, indépendammem I~s uns des autres représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
- n L représente zéro ou 1.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susn~cntic~nnc~.
a titre de composés comprenant la séquence représentée nar la lu,rmul~ (i(l) définie ci-dessus, de la kaliotoxine (KTX), ou des dcrivcs Pehtidiqm' "«
pseudopeptidiques de la KTX.
I_a kaliotoxine est un peptide de 38 acides aminéa. dont la uqu~mu ~n acides .minés est la suivante FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) GVEINVKCSGSPQCLKPCKDAGMRFGKCMNRKCHCTfK
(correspondant encore à la séquence SEQ ID NO 2 représentée ci-après).
Cette séquence a été pour la première fois publiée en 1992 dans l'article, Crest et al, 1992, J. of Biological Chemistry, vol. 267, p1640-1647.
Par dérivés peptidiques ou pseudopeptidiques de la KTX, on entend les composés dérivant de la KTX par addition ou suppression d'un ou plusieurs acides aminés, ou par remplacement d'un ou plusieurs acides aminés par des acides aminés naturels ou non, lesdits dérivés de !a kaliotoxine possédant la propriété de cette dernière d'inhiber les canaux potassium neuronaux Kvl.l et Kv 1.2, ainsi Que les canaux potassium lymphocytaires Kv 1.3 susmentionnés.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée de dérivés de la KTX définis ci-dessus, et répondant à la formule (IV) suivante:
[(Gly)na-Val-AA3-Ile-AAS]nb-Val-AA7-Cys-AA9-AA l p-Ser-AA 12-AA 13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)nl-Gly-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-Thr-Pro-Lys (IV) dans laquelle - na, nb, et nl , indépendamment les uns des autres, représentent 0 ou 1, - AA3, AAS, AA7, AA9, AAIp, AA12, AA13, AA15, AA16, AA17, AA22, AA24, AA31, AA33, et AA36, indépendamment tes uns des autres.
représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
L'invention concerne plus particulièrement l'utilisation susmentionnée de composés de formule (IV) définie ci-dessus dans laquelle n 1 = 0, et - nb = 1, notamment les composés peptidiques suivants . la kaliotoxine 2 correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 3, et pour laquelle na = 0, nb = 1, . la kaliotoxine 3 correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 4, dans laquelle, à la différence de KTX, AA2 représente une glycine, AAS représente une proline, AA7 représente une ccrine. AAg représente une lysine, AA10 représente une histidine. AA12 représente une glycine, et AA16 représente une isoleucinc, et pour laquelle na = O. oh = I
. l'agitoxine 2 correspondant a la séquence en a~icles aminés SEQ ID NO 5, et pour laquelle na = nh = I , - ou nb = 0, notamment la KTX(6-37) représentée par SC(,) lI) N() (, m pour laquelle na = nb = 0.
L'invention a é~~alement pour ohjca l'utilisatimn ausmentionW u pie: dcrivcs de la KTX vomprenant la formule (III) sustnenuonnc~. et plw partimlü:rcment FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGL.E 261 x répondant à la formule (IV) définie: ci-dessus, dans lesquelles n f représente 0 ou l, et:
- l'un au moins de AAI2 ou de AAI7 représente l'acide aminobutyrique (Abu), ' - et/ou, l'un au moins de AA24 ou de AA3I représente un résidu norleucine.
A ce titre, l'invention concerne plus particulièrement l'utilisation susmentionnée des dérivés de la KTX de formule (IV) définie ci-dessus, dans laquelle nl = 0 ou l, et i0 - AA12 représente l'acide aminobutyrique (Abu) ou la lysine, etlou - AAI7 représente l'acide aminobutyrique (Abu) ou la valine, et/ou - X24 et AA3I représentent, indépendamment l'un de l'autre, la méthionine ou la norleucine.
L' invention a plus particulièrement pour objet l' utilisation susmentionnée de dérivés de la KTX de formule (IV) définie ci-dessus, dans laquelle nl représente 0 ou 1, et - l' un au moins de AA I2 ou de AA 17 représente l' acide aminobutyrique (Abu), notamment les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb - 1, et AAI2 et AAI7 représentent Abu, tel que le dérivé de KTX désigné
(P12/Abu, P17/Abu)KTX représenté par SEQ ID NO 7, - etlou l'un au moins de AA24 ou de AA3I représente un résidu norleucine, notamment . les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb = 0, AA 12 et AA I7 représentent Abu, et AA24 et AA31 représentent un résidu norleucine, tel que le dérivé de KTX désigné Kaline ledit dérivé étant représenté
parSEQIDN08, . ou les dérivés de la KTX de formule (IV) dans laquelle nl = 1. na = nb = 1, et répondant à la formule (V) suivante AA1-AA~-AA3-AA4-AA5-AA~-AA7-Cys-AAg-AAIO-Ser-Abu-Gln-Cys-AA15-Lys-Ahu-Cys-Lys-Asp-Ala-Gly-Nle-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-N le-Asn-AA~3-l.ys-Cys-AA3~-Cys-AA3g-AA39-AA40 (V) dans laduelle AAI à AA7. AAg, AAIO. RAIS. nA~3, AA3b. ut AA~g a AA40, indépendamment les uns des autres, représentent un acide amine quelconque naturel ~u non.
L.'inventiott a également plus particulièrement pour ohjet l'utilisation awmentionnée de dérives dc la KTX comprenant la formule (111) susmentionncc.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 2fs) et plus particulièretnent répondant à. la formule (IV) définie ci-cJessus, dans lesquelles n 1 = 1, notamment ceux pour lesquels na = nh = t , tels que - le dérivé de KTX à hélice a modifiée représenté par la séquence SEQ ID
h10 9, dans laquelle, à la différence de KTX. AA l2 représente une lysine, AA 13 représente un acide glutamique, AA t 5 représente un tryptophane, AA 1 G
représente une sérine, AA17 représente une valine, et AA22 représente une tyrosine, - le dérivé de KTX désigné (P12/K, P17/V, F22)KTX correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID IVO 10, dans laquelle, à la différence de KTX, AAI2 représente une lysine, AAI7 représente une valine, et AA22 représente une phénylalanine.
L'invention concerne également l'utilisation susmentionnée de composés peptidiques issus d'anémones de mer, ou de dérivés peptidiques ou pseudopeptidiques de ces composés (à savoir de composés dérivant de ces derniers par addition ou suppression d'un ou plusieurs. acides aminés, ou par remplacement d'un ou plusieurs acides aminés par des acides aminés naturels ou non), lesdits dérivés possédant la propriété des composés issus d'anémones de mer d' inhiber tes canaux potassium neuronaux Kv I .1 et Kv i .2, ainsi que les canaux potassium lymphocytaires KvI.3 susmentionnés, ces composés ou dérivés comprenant la séquence en acides aminés répondant à la formule générale suivante (VI) suivante ( AA 1 )n I -(AA2)n2-CYs-AA4-Asp-AA6-AA7-AAg-AA9-AA l0-AA t 1-Cys-(AA 13)n3-AA 14-(AA 15)n4-AA 16-(AA 17)n5-AA 1 g-(AA 19)n6-AA~O-Cys_ AA22-(AA~3)n7-Ser-AA25-Lys-Tyr-AA2g-(AA29)n8-AA30-Cys-AA32-Lys-Thr-Cys-AA36-AA37-Cys (VI) dans laquelle - n 1 à n8, indépendamment les uns des autres, représentent zéro ou 1, - AA~. AA2, AA4, AAG à AAII, AA22, AA?3, AA~S. AA2g à
AA3p, AA32, AA36 et AA37, indépendamment les uns dee autres. représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée clos composés peptidiques de formule (VI) suivants - la B~~K correspondant à la séquence en acides aminés SrQ ID NC) 11 (telle clu' issue de l'anémone de mer désignée l3unvdvsorncr yranuli~'era), In SItK correspondant à la séquence en acides aminés S~Q ID N() 12 (telle yu' iwm de l'anémone dc mer déaiLnée Stirhcolnwvlu lolicrrrtlm.s).
FEU1L.LE DE REMPLACEMENT (REG1LE 26~
- la kaiiseptine correspondant à .la séquence en acides aminés SCQ ID NO 13 (telle qu'issue de l'anémone de mer désignée Anernonia sulcataf.
L' invention a égaiement pour objet toute composition pi~armaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un ou plusieurs composés peptidiques tels
Les composés utilisés dans !e cadre de la présente invention, sont davantage caractérisés en ce qu' ils possèdent un effet inhibiteur des canaux potassium neuronaux Kvl.l et Kvl.2 dépendants du potentiel, situés dans les noeuds de Ranvier (lesdits canaux neuronaux étant notamment décrits dans les articles suivants : McNamara et coll., 1996 ; Wang et coll., 1994), et un effet inhibiteur des canaux potassium dépendants du potentiel Kvl.3 que l'on trouve dans les lymphocytes desdits canaux lymphocytaires étant notamment décrits dans Chandy et Gutman, 1994; Grissmer et coll., 1994).
Par canaux potassium dépendants du potentiel, dans ce qui précède et ce qui suit, on entend des protéines membranaires sélectivement perméables aux ions potassium et dont la perméabilité à cet ion dépend du potentiel de ia cellule.
Le flux d' ions potassium à travers le canal constitue un courant potassium.
Les caractéristiques de la relation entre le courant potassium et le potentiel de la cellule ont été décrites par Stühmer et colt. (1989) pour les courants Kvl.l.
Kv 1.2 et Kv 1.3. La séquence de la sous-unité protéique principale (sous-unité
a) constitutive des canaux potassium Kv 1.1, Kv 1.2 et Kv 1.3 est également décrite dans cet article. La classification des canaux potassium dépendants du potentiel est par ailleurs explicitée dans la revue de synthèse de Chandy et Gutman (1994).
Par inhibiteurs (ou bloqueurs) des canaux potassium dépendarns du potentiel, dans ce qui précède et ce qui suit, on entend toute molécule capable de limiter le courant potassium à travers un canal potassium par une action directe sur le canal. Dans le cas particulier de la kaliotoxine, et des autres composés peptidiques (ou pseudopeptidiques) décrits ci-après, le blocage s'effectue par obturation de la partie externe du canal. La mesure du blocage des canaux potassium par les composés de l' invention peut étre effectuée par la méthode du potentiel imposé telle que celle décrite dans l'article Crest et al.. 1992, ausmetuionné.
Panai les pathologies neurologiques, notamment n mmposantc immunitaire, susceptibles d'étre traitées dans le cadre de la présente mve:ntum.
un peut cher - les pathologies neurologiques centrales inllammatoirev à fe»alisation W rchrale ~t médullaire. nonamment la sclérose en plaque e:t maladies FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) apparentées (Balo. Devis, encéphalite aiguë disséminée et hémorragiques, neuropathies optiques isolées);
- les pathologies périphériques inflammatoires ou apparéntées, notamment:
les polyradiculonévrites aiguës et chroniques, les neuropathies liées à des atteintes infectieuses et à des collagénoses, - les pathologies neurologiques dégénératives, notamment la sclérose latérale amyotrophique, les neuropathies avec bloc de conduction, - les pathologies tumorales, primitives ou secondaires, associées à un dérèglement du système immunitaire.
L' invention concerne également l'utilisation susmentionnée des composés décrits ci-dessus dans le cadre du traitement des autres atteintes centrales cérébrales et médullaires, notamment les pathologies d'origine métabolique, les pathologies vasculaires ischémiques artérielles, veineuses et hémorragiques, les pathologies traumatiques, ainsi que les complications centrales des maladies de système, notamment circulatoire, tells que Beheet, Sarcoïdose, et autres vascularites.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation de composés peptidiques tels que décrits ci-dessus, inhibant les canaux potassium neuronaux, Kv I .1, Kv 1.2, et les canaux lymphocytaires Kv I .3, lesdits composés étant issus de venins de scorpion ou d'anémones de mer, pour la préparation de médicaments destinés au traitement des maladies neurologiques à composante mentionnées ci-dessus, à l'exclusion de l'utilisation de la margatoxine dans fe cadre du traitement de maladies neurologiques à composante immunitaire, telle que la SEP.
L'invention concerne plus particulièrement l'utilisation susmentionnée de composés peptidiques issus de venins de scorpion, ou de composés dérivés de ces derniers, ces composés ou dérivés comprenant la séquence en acides aminés répondant à la formule générale suivante (I) suivante Cys-AA9-AA 10-AA 11-AA 12-AA 13-Cys-AA I 5-AA 1 ~-AA I ~-Cys-AA I ~-AA20-AA21-(AA22)n t -AA?3-AA~4-AA~S-AA2~-AA~~-(AAZg)n2-Lys-Cys-AA3 I -AA32-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys (1) clans laquelle - nl, et n2. indépendamment l'un de l'autre, représentent rcro eu I, FEUILLE DE REMPWCEMENT fREGLE 26) - AAg à AA13. AAIS à AA1~, AAIg à AA2g. AA31 n AA33, et AA3~, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé
quelconque, naturel ou non.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée de composés comprenant la séquence en acides aminés de formule (I) dans laquelle nl = n2 = 1, et représentés par la formule (II) suivante:
AA2-AA3-Ile-Asn-Val-Lys-Cys-Thr-Ser-Pro-AA 12-Gln-Cys-AA 15-AA I6-Pro-Cys-Lys-AA20-AA21-AA22-Gly-AA24-AA25-Ala-Gly-AA2g-Lys-C y s-AA31-Asn-Gly-Lys-Cys-Lys-Cys-Tyr-AA3g-AA40 (II) dans laquelle AA2, AAg, AA12, AAIS, AA16, AA2p à AA22, AA24, AA25, AA2g, AA31, AA39, et AA4p, indépendamment les uns des autres représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
L'invention concerne plus particulièrement l'utilisation, à titre de composé
de formule (II), la noxiustoxine (telle qu'issue du venin de scorpion dénommé
Centrudoides noxius) correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO
L'invention a également pour objet l'utilisation susmentionnée de composés, comprenant la séquence en acides aminés de formule (I), dans laquelle n2 = 0, lesdits composés comprenant la séquence représentée par la formule (III) suivante:
AA6-AA~-Cys-AAg-AA l0-Ser-AA 12-AA 13-Cys-AA l 5-AA l 6-AA 1 ~-Cys-Lys-Asp-A!a-(AA22)nl-Giy-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA3I-Asn-AA;3-Lys-Cys-AA3~-Cys-AA3g-AA3g (III) dans laquelle - AA6, AA~. AAg. AAIO. AA12. AA13. AA15. AA1~. AA1~. AA?2.
AA24, AA31, AA33, AA36, AA3g et AA3g, indépendammem I~s uns des autres représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
- n L représente zéro ou 1.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susn~cntic~nnc~.
a titre de composés comprenant la séquence représentée nar la lu,rmul~ (i(l) définie ci-dessus, de la kaliotoxine (KTX), ou des dcrivcs Pehtidiqm' "«
pseudopeptidiques de la KTX.
I_a kaliotoxine est un peptide de 38 acides aminéa. dont la uqu~mu ~n acides .minés est la suivante FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) GVEINVKCSGSPQCLKPCKDAGMRFGKCMNRKCHCTfK
(correspondant encore à la séquence SEQ ID NO 2 représentée ci-après).
Cette séquence a été pour la première fois publiée en 1992 dans l'article, Crest et al, 1992, J. of Biological Chemistry, vol. 267, p1640-1647.
Par dérivés peptidiques ou pseudopeptidiques de la KTX, on entend les composés dérivant de la KTX par addition ou suppression d'un ou plusieurs acides aminés, ou par remplacement d'un ou plusieurs acides aminés par des acides aminés naturels ou non, lesdits dérivés de !a kaliotoxine possédant la propriété de cette dernière d'inhiber les canaux potassium neuronaux Kvl.l et Kv 1.2, ainsi Que les canaux potassium lymphocytaires Kv 1.3 susmentionnés.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée de dérivés de la KTX définis ci-dessus, et répondant à la formule (IV) suivante:
[(Gly)na-Val-AA3-Ile-AAS]nb-Val-AA7-Cys-AA9-AA l p-Ser-AA 12-AA 13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)nl-Gly-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-Thr-Pro-Lys (IV) dans laquelle - na, nb, et nl , indépendamment les uns des autres, représentent 0 ou 1, - AA3, AAS, AA7, AA9, AAIp, AA12, AA13, AA15, AA16, AA17, AA22, AA24, AA31, AA33, et AA36, indépendamment tes uns des autres.
représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
L'invention concerne plus particulièrement l'utilisation susmentionnée de composés de formule (IV) définie ci-dessus dans laquelle n 1 = 0, et - nb = 1, notamment les composés peptidiques suivants . la kaliotoxine 2 correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 3, et pour laquelle na = 0, nb = 1, . la kaliotoxine 3 correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 4, dans laquelle, à la différence de KTX, AA2 représente une glycine, AAS représente une proline, AA7 représente une ccrine. AAg représente une lysine, AA10 représente une histidine. AA12 représente une glycine, et AA16 représente une isoleucinc, et pour laquelle na = O. oh = I
. l'agitoxine 2 correspondant a la séquence en a~icles aminés SEQ ID NO 5, et pour laquelle na = nh = I , - ou nb = 0, notamment la KTX(6-37) représentée par SC(,) lI) N() (, m pour laquelle na = nb = 0.
L'invention a é~~alement pour ohjca l'utilisatimn ausmentionW u pie: dcrivcs de la KTX vomprenant la formule (III) sustnenuonnc~. et plw partimlü:rcment FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGL.E 261 x répondant à la formule (IV) définie: ci-dessus, dans lesquelles n f représente 0 ou l, et:
- l'un au moins de AAI2 ou de AAI7 représente l'acide aminobutyrique (Abu), ' - et/ou, l'un au moins de AA24 ou de AA3I représente un résidu norleucine.
A ce titre, l'invention concerne plus particulièrement l'utilisation susmentionnée des dérivés de la KTX de formule (IV) définie ci-dessus, dans laquelle nl = 0 ou l, et i0 - AA12 représente l'acide aminobutyrique (Abu) ou la lysine, etlou - AAI7 représente l'acide aminobutyrique (Abu) ou la valine, et/ou - X24 et AA3I représentent, indépendamment l'un de l'autre, la méthionine ou la norleucine.
L' invention a plus particulièrement pour objet l' utilisation susmentionnée de dérivés de la KTX de formule (IV) définie ci-dessus, dans laquelle nl représente 0 ou 1, et - l' un au moins de AA I2 ou de AA 17 représente l' acide aminobutyrique (Abu), notamment les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb - 1, et AAI2 et AAI7 représentent Abu, tel que le dérivé de KTX désigné
(P12/Abu, P17/Abu)KTX représenté par SEQ ID NO 7, - etlou l'un au moins de AA24 ou de AA3I représente un résidu norleucine, notamment . les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb = 0, AA 12 et AA I7 représentent Abu, et AA24 et AA31 représentent un résidu norleucine, tel que le dérivé de KTX désigné Kaline ledit dérivé étant représenté
parSEQIDN08, . ou les dérivés de la KTX de formule (IV) dans laquelle nl = 1. na = nb = 1, et répondant à la formule (V) suivante AA1-AA~-AA3-AA4-AA5-AA~-AA7-Cys-AAg-AAIO-Ser-Abu-Gln-Cys-AA15-Lys-Ahu-Cys-Lys-Asp-Ala-Gly-Nle-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-N le-Asn-AA~3-l.ys-Cys-AA3~-Cys-AA3g-AA39-AA40 (V) dans laduelle AAI à AA7. AAg, AAIO. RAIS. nA~3, AA3b. ut AA~g a AA40, indépendamment les uns des autres, représentent un acide amine quelconque naturel ~u non.
L.'inventiott a également plus particulièrement pour ohjet l'utilisation awmentionnée de dérives dc la KTX comprenant la formule (111) susmentionncc.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 2fs) et plus particulièretnent répondant à. la formule (IV) définie ci-cJessus, dans lesquelles n 1 = 1, notamment ceux pour lesquels na = nh = t , tels que - le dérivé de KTX à hélice a modifiée représenté par la séquence SEQ ID
h10 9, dans laquelle, à la différence de KTX. AA l2 représente une lysine, AA 13 représente un acide glutamique, AA t 5 représente un tryptophane, AA 1 G
représente une sérine, AA17 représente une valine, et AA22 représente une tyrosine, - le dérivé de KTX désigné (P12/K, P17/V, F22)KTX correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID IVO 10, dans laquelle, à la différence de KTX, AAI2 représente une lysine, AAI7 représente une valine, et AA22 représente une phénylalanine.
L'invention concerne également l'utilisation susmentionnée de composés peptidiques issus d'anémones de mer, ou de dérivés peptidiques ou pseudopeptidiques de ces composés (à savoir de composés dérivant de ces derniers par addition ou suppression d'un ou plusieurs. acides aminés, ou par remplacement d'un ou plusieurs acides aminés par des acides aminés naturels ou non), lesdits dérivés possédant la propriété des composés issus d'anémones de mer d' inhiber tes canaux potassium neuronaux Kv I .1 et Kv i .2, ainsi que les canaux potassium lymphocytaires KvI.3 susmentionnés, ces composés ou dérivés comprenant la séquence en acides aminés répondant à la formule générale suivante (VI) suivante ( AA 1 )n I -(AA2)n2-CYs-AA4-Asp-AA6-AA7-AAg-AA9-AA l0-AA t 1-Cys-(AA 13)n3-AA 14-(AA 15)n4-AA 16-(AA 17)n5-AA 1 g-(AA 19)n6-AA~O-Cys_ AA22-(AA~3)n7-Ser-AA25-Lys-Tyr-AA2g-(AA29)n8-AA30-Cys-AA32-Lys-Thr-Cys-AA36-AA37-Cys (VI) dans laquelle - n 1 à n8, indépendamment les uns des autres, représentent zéro ou 1, - AA~. AA2, AA4, AAG à AAII, AA22, AA?3, AA~S. AA2g à
AA3p, AA32, AA36 et AA37, indépendamment les uns dee autres. représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée clos composés peptidiques de formule (VI) suivants - la B~~K correspondant à la séquence en acides aminés SrQ ID NC) 11 (telle clu' issue de l'anémone de mer désignée l3unvdvsorncr yranuli~'era), In SItK correspondant à la séquence en acides aminés S~Q ID N() 12 (telle yu' iwm de l'anémone dc mer déaiLnée Stirhcolnwvlu lolicrrrtlm.s).
FEU1L.LE DE REMPLACEMENT (REG1LE 26~
- la kaiiseptine correspondant à .la séquence en acides aminés SCQ ID NO 13 (telle qu'issue de l'anémone de mer désignée Anernonia sulcataf.
L' invention a égaiement pour objet toute composition pi~armaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un ou plusieurs composés peptidiques tels
5 due définis ci-dessus, en association avec un véhicule pharmaceuuquement acceptable.
Avantageusement, les compositions pharmaceutiques de l' invention se présentent sous une forme administrable par voies intraveineuse, intramusculaire, anale ou sous-cutanée, notamment à raison d'environ 0.05 à
10 environ 1 mg/kg, ou d'environ 0.5 mglkg à environ 1 mg/kg, à raison de 1 à
prises par jour.
Des compositions pharmaceutiques préférées sont celles contenant la kaliotoxine ou ses dérivés, notamment la kaliotoxine 3, dans le cadre du traitement de la SEP.
D'autres compositions pharmaceutiques préférées sont celles contenant le composé (P121Abu, P17/Abu) KTX, dans le cadre du traitement de la SEP.
L' invention concerne également les dérivés de la KTX, tels que définis ci-dessus, et répondant à la formule (IV) suivante:
[(Gly)na-Vai-AA3-Ile-AAS]nb-Val-AA~-Cys-AA9-AAlO-Ser-AA12-AA13-Cys-AA 15-AA 16-AA 17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)nl-Gly-AA2q.-Arg-Phe-Giy-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-Thr-Pro-Lys (IV) dans laquelle - na, nb, et nl, indépendamment les uns des autres, représentent 0 ou 1.
AA3, AAS, AA~. AA9, AAlO, AA12, AAl3, AA15, AAI~. AAI~, AA22, AA24, AA31, AA33, et AA36, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé quelconque naturel ou non, sous réserve que lorsque nl = 0, alors - nb = 0, - ou AA2 représente une glycine, AAS représente une proline. AA~
représente une sérine, AA9 représente une lysine, AAI~~ représente une histidine. AAI~ représente une glycine, et AAI~ représente um isoleucinc.
- et/ou l' un au nu~ins de: AA l 2 uu de AA 1 ~ représente l' acide ,iminohutyrique (Ahu).
- et/ou, l'un au m«ins de AA24 ou de AA31 représente un résidu ncwleucine.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26~
L' invention a plus particulièrement pour objet les dérivés de la KTX de formule (IV), tels que définis ci-dessus, dans laquelle nl = 0, et - na = 0, nb = l, AA2 représente une glycine, AAS représente une proline. AA7 représente une sérine, AA9 représente une lysine. AA10 représente une histidine. AA12 représente une glycine, et AA 16 représente une isoleucine, notamment la kaliotoxine 3 correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 4, ou - nb = 0, notamment la KTX(6-37) représentée par SEQ ID NO 6.
L'invention concerne plus particulièrement les dérivés de la KTX de formule (IV), tels que définis ci-dessus, dans laquelle nl = 0 ou 1, et - l'un au moins de AAI2 ou de AA17 représente l'acide aminobutyrique (Abu), notamment les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb - 1, et AA12 et AA17 représentent l'acide aminobutyrique (Abu), tel que le dérivé (P12/Abu, P17/Abu)KTX représenté par SEQ ID NO 7, - et/ou, l' un au moins de AA24 ou de AA31 représente un résidu norleucine, notamment . les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb = 0, AA12 et AA17 représentent l'acide aminobutyrique (Abu), AA24 et AA31 représentent un résidu norleucine, tel que la Kaline représentée par SEQ ID NO
8, ou . les dérivés de la KTX de formule (IV) dans laquelle n 1 = 1, na =
nb = 1, et répondant à la formule (V) suivante AA 1-AA2-AA3-AA4-AAS-AA6-AA7-Cys-AA9-AA 10-Ser-Abu-Gln-Cys-AA 15-Lys-Abu-Cys-Lys-Asp-Ala-Gly-Nle-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-Nle-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-AA3 g-AA39-AA40 ( V ) dans laquelle AA1 à AA7, AA9, AA10, AA15, AA33, AA36, et AA3g à
AA40, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé
quelconque naturel ou non.
L'invention a plus particulièrement pour objet les dérivés de la KTX de formule (IV), tels que définis ci-dessus, dans laquelle n l = 1, notamment les composés suivants pour lesquels na = nb = 1, tels que - le dérivé de KTX à hélice a, modifiée représenté par la séquence SEQ ID
NO 9, dans laquelle. à la différence de KTX, AA1~ représente une lysine.
AA 1 ~ représente un acide glutamique, AA 15 représente un tryptophane, AA l~
représente une sérine. AA17 représente une valine, et AA~~ représente une tyrosine.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) - le dérivé de KTX désigné (P12/K. P17/V, F22)KTX correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 10, dans laquelle. , à la différence de KTX. AA12 représente une lysine, AA17 représente une valine, et AA22 représente une phénylalanine.
L' invention concerne également tout peptide dérivé de ceux décrits ci dessus, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, ou tout fragment des peptides décrits ci-dessus, lesdits peptides dérivés ou fragments étant capables de bloquer les canaux potassium neuronaux Kvl.l et Kvl.2, ainsi que les canaux potassium lymphocytaires Kvl.3 susmentionnés.
L' invention concerne également les séquences nucléotidiques codant pour les peptides, ou peptides dérivés, ou fragments de ces derniers, décrits ci-dessus, ainsi que leur utilisation dans le cadre de la préparation desdits peptides, peptides dérivés, ou fragments, par transformation de cellules hôtes avec des vecteurs contenant lesdites séquences nucléotidiques, mise en culture des cellules hôtes ainsi transformées, et récupération des peptides, peptides dérivés produits.
L'invention sera davantage illustrée à l'aide des exemples de synthèse des composés de l' invention, et de leurs effets sur un modèle expérimental animal de !a SEP.
I - Techniques de synthèse La kaliotoxine et ses différents analogues ont été synthétisés par la méthode de synthèse en phase solide en utilisant, pour la protection des acides aminés, soit la chimie Boc selon le protocole explicité dans l' article Romi et colt., 1993, J. of Biological Chemistry, vol. 268, p 26302-26309, soit la chimie Fmoc selon le protocole explicité pour des peptides comparables dans l'article Kharrat et colt., 1996, Eur. J. of Biochemistry 42, p 491-498. Les résines utilisées sont à base de polystyrène 1 %a divinyl-benzène dérivatisé en PAM-résine, paraméthyl-BHA résine, résine HMB, ou résine RINK. Les chaines protectrices des acides aminés sont : cyclohéxyl ou t-hutyl pour Asp et Glu.
benzyl ou t-butyl pour Ser et Thr, carbohenzoxy, tosyl ou trityl pour His, p-méthylbenzyl, Acm, ou trityl pour Cys, xantyl ou trityl pour Asn et Gln, tosyl ou Pmc pour Arg et 2C1-CbZ ou Boc pour Lys. L~assemhia~~e des amino-acides a été réalisé sous forme de HOBt-ester ou par couplage avec le réactif HBTU.
Le clivage et la déprotection des ehaines latérales des amino-acides ont été
réalisés soit en milieu HF, soit en présence de TFA avec différents niè~~es à
FEUILLE DE REMPIJ~CEMENT (REGLE 26) radicaux : p-crésol, éthanedithiol, thioanisole ou phénol. Les peptides ont été
placés en réoxydation en présence d'un tampon Tris-HC1 au contact de l'air. La constitution des ponts disulfures et la restructuration des molécules ont été
suivies par HPLC. Les peptides oxydés ont été purifiés par HPLC préparative et caractérisés par : HPLC analytique, analyse d'acides aminés, spectrométrie de masse, et par différents tests biologiques : électrophysiologie, toxicité chez la souris, fixation sur leurs récepteurs.
Les caractéristiques physico-chimiques sont les suivantes : poudre lyophilisée blanche amorphe, de grande solubilité dans l'eau ( > 10 mg/ml), conservation à 4°C à l'état lyophilisé et à -20°C en solution dans l'eau.
Dégradation rapide en milieux oxydant et réducteur, dégradation rapide en milieu basique et acide extréme ( < 1).
II - Etude de l' effet des composés de l' invention sur un modèle animal de SEP
A) Méthodologie 1) Affinité de la kaliotoxine pour les canaux potassium de type Kv L'affinité de la kaliotoxine (KTX) pour les canaux potassium de type Kv a été déterminée par électrophysiologie (potentiel imposé) après expression d'ARN dans l'ovocyte de xénope (Kushner er coll., 1989).
2) Blocage des canaux Kv lymphocytaires par la KTX
L'activité des canaux potassium est déterminé en enregistrant le courant global d'un lymphocyte à l'aide de la technique; de patch-clamp dans la configuration cellule entière.
3) Effets in vitro de la kaliotoxine sur la prolifération d'une lignée lymphocytaire T
Des lymphocytes T sont maintenus en culture en alternant des cycles d'activation antigénique et des cycles d'amplification dans du milieu de croissance contenant 10% de "T cell growth factors" (TCGF). L'activation antigénique est réalisée en cultivant 3x104 LaT avec 2x106 ceilules présentatrices de l'antigène, Ia protéine basique de la myéline fPBM) (10 mg/ml) /200 mi milieu de stimulation/puits de micropiaque. Au bout de 48 hrs, un précurseur radioactif du DNA (H3-Tdr. lmCi/puits) est ajouté ; 18 hrs plus tard, les cellules sont récoltées, lysées et le matériel radioactif incorporé
dans l'ADN est compté.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26~
WO 99/18123 PC'T/FR98/02136 Les bloqueurs sont ajoutés au début de l' activation antigénique, pour la durée totale de la culture. Chaque concentration de bloqueur est testée en quadreplicat. Les résultats sont exprimés en moyenne de cpm des 4 échantillons ~ écart-type.
4) Effets de la kaliotoxine sur un modèle animal de SEP, l'encéphalomyélite allergique expérimentale (EAE) induite chez le rat L'EAE est induite par transfert adoptif de lymphocytes T (LcT) spécifiques de la protêine basique myélinique (PBM). Ces lymphocytes proviennent d'une lignée lymphocytaire T CD4+, Thl, "PAS", issue de rats Lewis ; ils sont activés par la PBM 48h avant d'être injectés aux receveurs syngéniques normaux.
Cinq groupes (A à E) de 5 rates Lewis àgées de 10 semaines, 200 gr (Charles River) reçoivent ce 2 à 5 millions de LcT (lignée T PAS) spécifiques de la protéine basique myélinique PBM par voie intra-péritonéale au jour 0 (JO). Dans les groupes B et C, la KTX (0,8 et 8 ~.g I0,1 ml PBS/rat) (PBS, tampon phosphate) est injectée par voie sous cutanée le même jour et quotidiennement jusqu'au 6° jour (J6). Un groupe contrôle (groupe A) reçoit en lieu et place de KTX, lml de PBS. Les rats du groupe D reçoivent 8 wg de KTX
après l'apparition des signes cliniques d'EAE. Les rats du groupe E reçoivent au jour 0 des LcT prétraités par KTX in vitro (100 ng/ml) et quotidiennement 8 ~,g de KTX jusqu'à J6. Les rats du sixième groupe (~ reçoivent uniquement KTX
(8 ~.g) de JO à J6.
Une autre expérience a été effectuée en testant KTX à différences doses : 0.8, 8, 16 et 32 ~.g/rat/jour. La dose la plus élevée l32 ~,g) a été
injectée en 1 ou ~ fois dans 0.1 ou 1 ml de PBS. La voie d'administration a été en nous cutanée ; elle a été comparée à la voie intraveineuse au cours d'une seule expérience. L'observation clinique des animaux a été effectuée 1. 2 ou 4 fois par jour.
Les rats sont observés et pesés quotidiennement. Les signes cliniques de l'EAE (identiques à ceux obtenus par induction active) sont notés de 0 à 4. comme suit (d'après Bourdoulous et coll., 1995):
0 = absence de signes neurologiques.
1 = queue flaccide, 2 = parésie des membres postérieurs pouvant s' accompagner de tremblements, 3 = paralysie fiasque des membres postérieurs Pouvant s'accompagner d'incontinence, d'hémorragies oculaires et nasales.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) 4 = état moribond (paralysie des membres supérieurs: troubles respiratoires).
L'EAE clinique moyenne est obtenue en totalisant les signes cliniques d'intensité maximale de chaque rat; les rats ne présentant pas de signes 5 sont inclus et notés 0. La perte pondérale tient compte du poids minimal et maximal de chaque rat au cours des 6 jours de traitement.
5) Levée des blocs de conduction par la kaliotoxine Deux tests ont été retenus 10 Nerf optique de rat in vitro C'est un nerf du système nerveux central, myélinisé par des oligodendrocytes couplés à des astrocytes. Le nerf optique est prélevé chez des rats Lewis et placé dans une chambre perfusée, oxygénée et thermostatée à
36°C. L'enregistrement de l'activité globale des axones est réalisé à
l'aide d'une 15 électrode de succion servant de contention à une extrémité du nerf. Une seconde électrode identique, placée à l'autre extrémité, sert à stimuler le nerf (stimulation donnant une réponse maximale : 0.1 ms, 10 à 30 V). Les contrôles effectués, la préparation est mise en présence de lymphocytes réactifs contre la protéine basique de la myéline (2 105 cellules/ ml) maintenus dans un milieu de culture DMEM.
Potentiels évoqués La détection dans le SNC des potentiels évoqués Par une stimulation appliquée à une patte arrière d'un rat permet d'évaluer l'état fonctionnel des fibres ascendantes du tronc cérébral. La détection se tait au niveau thalamique. Les électrodes métalliques sont implantées à demeure sous contrôle stéréotaxique, deux dans le noyau thalamique ventro-postero-lateral et deux autres sur le scalp. L'animal étant anesthésié au chloral (0.1 ~Irat), la stimulation de la patte arrière droite est réalisée à ('aide d'un hracelet ceinturant la jambe et contenant deux conducteurs. La stimulation seuil (2ms. 25 à 60V) est détectée visuellement par une contraction réflexe. Les potentiels évoqués sont obtenus en moyennant une cinquantaine de stimulations répétées toutes les Ss.
B) Résultats 1) Affinité de la kaliotoxine pour les canaux Kv Les courbes doses-réponses montrent une sensihilité élevée tics canaux Kv l . I (ICSO = I . ~ nM), Kv 1.2 (IC50 = 24 nM ) et Kv I . ~ ( (C50 =
().1 FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 2~) nM) à la KTX. Le canal Kv3.1 est insensible (IC50 > l üM). Par ailleurs, d' autres auteurs ont montré que les canaux neuronaux Kv 1.5 et Kv 3 .1 sont insensibles à la KTX (Grissmer et colt, 1994).
Conclusion : Ce profil d'activité correspond idéalement au plan de charge fixé dans le cadre de la présente invention : affinité élevée pour fe canal Kv 1.3 lymphocytaire; afftnité élevée et sélective pour les canaux Kv axonaux Kv 1.1 et Kv 1.2, par rapport aux autres canaux neuronaux.
Ce profil d'activité est idéal pour combiner un effet immunosuppresseur efficace et un effet neurologique orienté sur la conduction axonale susceptible de permettre d'éviter les effets épileptogènes des aminopyridines.
2) Blocage des canaux Kv lymphocytaires par 1a kaliotoxine $yltats : Sur les diverses lignées lymphocytaires testées, la sensibilité des canaux Kv endog'enes s'exprimant constitutivement ou après activation antigénique est caractérisée par un coefficient de dissociation Kd de 1 à2nM.
Conclusion : Bien que plus faible, cette sensibilité est en accord avec tes données obtenues sur les canaux Kvl.3 exogènes exprimés dans l'ovocyte. de xénope.
3) Effets in vitro de la kaliotoxine sur la prolifération d'une lignée lymphocytaire T encéphaütogène.
Résultats : Ceux d'une expérience type sont présentés dans l'annexe 1. Quatre séries d'expériences indiquent que 10 à ~0 nM de KTX
inhibe à 60% l'incorporation du précurseur radioactif de l'ADN et donc, la prolifération cellulaire.
Conclusion : Ces données confirment ie rôle majeur des canaux Kvl.3 dans les phases prolifératives des lymphocytes T et l'efficacité de l'effet immuno-suppresseur de la KTX.
4) Effets de la KTX sur l'EAE induite chez !e rat 'Resultats : L'analyse montre que, du point de vue clinique, le traitement des rats par voie systémique avec ia KTX (8 et 0.8 ~~~> du jour 0 au jour 6 réduit considérablement la sévérité de la maladie et abolit la mortalité. La rémission est totale en moins de 10 jours. Plus si~~nificatifs encore sont les résultats du groupe D traité après l'apparition des signes cliniques avec 8 ~.~~ de FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) KTX et seulement pendant 2 jours. Les signes cliniques ne dépassent pas une sévérité moyenne de 1.1 et régressent rapidement.
Conclusion Le traitement de rats Lewis par KTX dès le jour du transfert adoptif réduit la sévérité de l'EAE et la perte pondérale. Le traitement par KTX dès l'apparition des signes cliniques, pendant un à trois jours seulement, constitue un traitement efficace de l' EAE (voir Tableau 1 ).
Les conditions optimales à retenir dans le cadre de ces expériences sont 32 ~,g de KTX/rat/jour : dose à laquelle les résultats sont le plus reproductibles, - injection de KTX dans 1 ml PBS, 1 fois par jour, par voie sous cutanée, - pesée et examen clinique des animaux une seule fois/jour.
Tableau 1. Traitement de l'EAE adoptive par KTX
Score -__ ' Clinique EAE
Contrle KTX (32 ~.g) PBS
exprience 1 ~ 1.2 0.7 1.8 n =5 n=5 exprience 2 2.5 1.0 1. l 0.35 n-=7 n=8 exprience 3 ! 3.6 0.4 2.51 1.5 n=7 n=8 exprience 4 2.3 1.6 1.3 n=5 n=5 L'EAE est induite chez des rats Lewis par injection intrapéritonéale de 2 à 5 millions de lymphocytes T "PAS" activés par la PBM au jour 0.
La KTX est injectée par voie sous cutanée dans du PBS dès l' apparition des signes cliniques, durant 1 à 3 jours. L'EAE clinique moyenne est obtenue en totalisant les signes cliniques d'intensité maximale de chaque rat évalués selon l'échelle de Sommer et al. (Nature Med., 1995. 1: 247).
"n" représente le nombre de rats par groupe. L'analyse statistique est réalisée par le test de Manu et Whitney.
Ces données sont une confirmation, sur un modèle animal reconnu représentatif de la sclérose en plaques, de l'action anti-intlammatoire et itnmunosuppressive de la kaliotoxine. De plus, la ~_uérison des animaux du FEU!>LLE DE REMPLACEMENT (RELIE 26) groupe D susmentionné traité tardivement est un argument indirect en faveur d'une action symptomatique de la KTX sur les canaux Kv du SNC. Cette conclusion est confirmée par les deux tests suivants.
5) Levée des blocs de conduction par la kaliotoxine Nerf optique de rat in vitro Résultats : En accord avec les données de Yarom et colt. (1983), !' incubation d'un nerf optique de rat avec des lymphocytes T pré-activés contre la protéine basique de la myéline entraïne, en 1h30-2h, un bloc quasi-total du potentiel global dérivé par une électrode de succion. Une restauration partielle de l' activité contrôle peut alors être obtenue 2 à 3 heures après avoir enlevé les lymphocytes. Par conue, l'addition de KTX (100 nM) restaure rapidement (15-min) la capacité de conduction du nerf méme en présence des lymphocytes.
Conclusion : Ces expériences valident l'hypothèse que les blocs 15 de conduction dans les fibres centrales démyélinisées peuvent étre levés en agissant sur les canaux potassium neuronaux. Elles montrent également que la kaliotoxine, par sa spécificité, exerce cet effet à des concentrations nanomolaires.
Potentiels évoqués 20 Résultats : Sur un animal dont les signes cliniques d'EAE
atteignent le niveau 2 (paralysie du train postérieur), les potentiels évoqués par une stimulation électrique de ia patte arrière sont retardés et déprimés de 80 à
90% par rapport aux enregistrements contrôle effectués avant l' induction de l'EAE. Une injection sous-cutanée de KTX (10 ug) est suivie d'une récupération progressive de l'amplitude et de la latence des potentiels évoqués. La récupération devient totale en 90 minutes.
Çonciusion : Cette expérience menée in vivo montre que les blocs de conduction consécutifs au processus inflammatoire des fibres situées dans la partie lombaire du tronc cérébral sont levés par une injection aiguë
de KTX. Les résultats confirment notre hypothèse d'un effet neurologique positif de la KTX. Ils montrent directement que le bloqueur peut passer lentement la harrière hémato-méningée, probablement au niveau des sites d' intlammation.
Cette dernière conclusion est d'importance quant à la possibilité de restaurer une conduction axonique satisfaisante apte à rétablir une fonction motrice altérée.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) Bever CT, (1994), The current status of studies of aminopyridines in patients with multiple sclerosis. Ann Neurol . 36; S118-12I.
Bourdoulous et coll., (1995), Eur. J. Immunol.. 25, p 1176.
Chandy K.G. et Gutman G. (1994), Voltage-gated K+ genes. In Handbook of Receptors and Charnels, A. North, ed., CRC Press, Boca Raton, FL, p 1.71.
Grissmer S, Nguyen AN, Aiyar J, Hanson DC, Mather RJ, Gutman GA, Karmilowicz MJ, Auperin DD and Chandy KG, ( 1994) Pharmacological characterization of Pive cloned voltage-gated K+ charnels, types Kv 1.1, 1.2, 1.3, 1.5 and 3.1, stably expressed in mammalian cell fines. Molec. Pharmacol.
45; p. 1227.
Jacobs L, Goodkin DE, Rudick RA and Herndorn R, (1994) Advances in specific therapy for multiple sclerosis. Cur. Opin. Neurol. 7; p. 250.
Kushner L, Lerma J, Bennet MVL and Zukin RS, ( 1989) Using the xenopus oocyte system for expression and cloning of neuroreceptors and charnels. In, Methods in Neurosciences . Vol. 1; p. 3. Academic Press Inc.
McNamara N.M.C., Averill S., Wilkin G.P., Dolly J.O., Priestley J.V., (1996), Ultrastructural localization of a voltage-gated K charnel subunit (Kvl.2) in the rat cerabellum, Eur. J. of Neurosciences, 8 p. 688-699.
Noseworthy JH (1993) Clinical trials in multiple sclerosis. Curr. Opin.
Neurosurg. 6; 209-215.
Polman CH, Bertelsman FW, van Loenen AC and Koetsier .lC, ( 1994), 4-aminopyridine in the treatment of patients v~ith multiple sclerosis. Long-term eftïcacy and safety. Arch. Neurol. 51; p. 292.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) WO 99/18123 PCTlFR98/02136 Dolman CH and Hartung HP, (1995) The treatment of multiple scierosis:
current and future. Curr .Opin. Neurol. 8; p. 200.
Sherratt RM, Bostock H and Sears TA, ( 1980) Effects of 4-aminopyridine on normal and demyelinated mammalien nerve fibres. Nature. 283; p. 570.
Stühmer W., Ruppesberg J.P., Schrtiter K.H., Sakmann B., Stocker M., 10 Giese K.P., Perschke A., Baumann A., Pongs O., (1989), Molecular basis of functional diversity of voilage-gated potassium charnel in mammalien brain, The EMBO Journal, 8 : p. 3235-3244.
Uitdehaag BM, Dolman CH, de Groot CJ and Dijkstra CD, ( 1994), Effect 15 of K+ charnel blockers on the clinicat course and histological features of experimental allergic encephalomyelitis. Acte. Neurol. Scand. 90; p. 299.
Wang H., Kunkel D.D., Schwartzkroin P.A., Tempe( B.L., (1994), Localization of Kv 1.1 and Kv 1.2, two K channe( protein, to synaptic tetminals, 20 somata, and dendrites in the moule brain, The J. of Neuroscience, 14 : p.
4599.
Yarom Y, Naparstek Y, Lev-Ram V, Holoshitz J, Ben-Nun A and Cohen IR, ( 1983) Immunospeciiic inhibition of nerve conduction by T lymphocytes reactive to basic protein of myelin. Nature. 303; p 246.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) LISTE DE SÉQUENCES
(1) INFORMATIONS GÉNÉRALES:
(i) DÉPOSANT:
{A) NOM: CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
(B) RUE: 3, rue Michel-Ange (C) VILLE: PARIS
(E) PAYS: FRANCE
(F) CODE POSTAL: F-75016 (ii) TITRE DE L' INVENTION: UTILISATION DES BLOQUEURS DES CANAUX
POTASSIUM NEURONAUX ET LYMPHOCYTAIRES DANS LE TRAITEMENT
DES MALADIES NEUROLOGIQUES D'ORIGINE IMMUNITAIRE
(iii) NOMBRE DE SÉQUENCES: 13 (iv) FORME DÉCHIFFRABLE PAR ORDINATEUR:
(A) TYPE DE SUPPORT: Floppy disk , (B) ORDINATEUR: IBM PC compatible (C) SYSTEME D' EXPLOITATION: PC-DOS/MS-DOS
(D) LOGICIEL: PatentIn Release #1.0, Version #1.30 (OEB) (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: l:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 39 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 1:
Thr Ile Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Ser Lys Pro Cys Lys Glu Leu Tyr Gly Ser Ser Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly Lys Cys Lys Cys Tyr Asn Asn (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 2:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 38 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÉGLÉ 26) (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 2:
Gly Val Glu Ile Asn Val Lys Cys Ser G1y Ser Pro Gln Cys Leu Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 3:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 37 acides aminés (B) TYPE: acide aminë
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 3:
Val Arg Ile Pro Val Ser Cys Lys His Ser Gly Gln Cys Leu Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Gly Lys Cys Asp Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 4:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 37 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 4:
Val Gly Ile Pro Val Ser Cys Lys His Ser Gly G1n Cys Ile Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys i'EUILLE DE REMPi.ACEMENT (RÉGLÉ 26) Asp Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 5:
(i) CARACTERISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 38 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linêaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (ix) CARACTÉRISTIQUE:
(A) NOM/CLE: CDS
(B) EMPLACEMENT:1..114 (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: S:
Gly Val Pro Ile Asn Val Ser Cys Thr Gly Ser Pro Gln Cys Ile Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 6:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 32 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 6:
Val Lys Cys Ser Gly Ser Pro Gln Cys Leu Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro i2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 7:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 38 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGI.E 28) (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 7:
Gly Val Glu Ile Asn Val Lys Cys Ser Gly Ser Abu Gln Cys Leu Lys Abu Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Lys Abu : acide aminobutyrique (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 8:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 32 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: e:
Val Lys Cys Ser Gly Ser Abu Gln Cys Leu Lys Abu Cys Lys Asp Ala Gly Nle Arg Phe Gly Lys Cys Nle Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Abu . acide aminobutyrique Nle . norleucine (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 9:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 39 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 9:
Gly Val Glu Ile Asn Val Lys Cys Ser Gly Ser Lys Glu Cys Trp Ser Val Cys Lys Asp Ala Tyr Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGL,E 26) S
Lys Cys His Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 10:
(i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE:
(A) LONGUEUR: 39 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID N0: 10:
Gly Val Glu Ile Asn Val Lys Cys Ser Gly Ser Lys Gln Cys Leu Lys Val Cys Lys Asp Ala Phe Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 11:
(i) CARACTERISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 37 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID N0: 11:
Val Cys Arg Asp Trp Phe Lys Glu Thr Ala Cys Arg His Ala Lys Ser Leu Gly Asn Cys Arg Thr Ser Gln Lys Tyr Arg Ala Asn Cys Ala Lys Thr Cys Glu Leu Cys ~.2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 12:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 35 acides aminés (8) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÉGIE 26) WO 99118123 6 PC"T/FR98/02136 (ii) TYPE DE MOLECULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 12:
Arg Ser Cys Ile Asp Thr Ile Pro Lys Ser Arg Cys Thr Ala Phe Gln Cys Lys His Ser Met Lys Tyr Arg Leu Ser Phe Cys Arg Lys Thr Cys Gly Thr Cys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 13:
(i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE:
(A) LONGUEUR: 36 acides aminés (B) TYPE: acide aminë
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 13:
Ala Cys Lys Asp Asn Phe Ala Ala Ala Thr Cys Lys His Thr Lys Glu Asn Lys Asn Cys Gly Ser Gln Lys Tyr Ala Thr Asn Cys Ala Lys Thr Cys Gly Leu Cys FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26)
Avantageusement, les compositions pharmaceutiques de l' invention se présentent sous une forme administrable par voies intraveineuse, intramusculaire, anale ou sous-cutanée, notamment à raison d'environ 0.05 à
10 environ 1 mg/kg, ou d'environ 0.5 mglkg à environ 1 mg/kg, à raison de 1 à
prises par jour.
Des compositions pharmaceutiques préférées sont celles contenant la kaliotoxine ou ses dérivés, notamment la kaliotoxine 3, dans le cadre du traitement de la SEP.
D'autres compositions pharmaceutiques préférées sont celles contenant le composé (P121Abu, P17/Abu) KTX, dans le cadre du traitement de la SEP.
L' invention concerne également les dérivés de la KTX, tels que définis ci-dessus, et répondant à la formule (IV) suivante:
[(Gly)na-Vai-AA3-Ile-AAS]nb-Val-AA~-Cys-AA9-AAlO-Ser-AA12-AA13-Cys-AA 15-AA 16-AA 17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)nl-Gly-AA2q.-Arg-Phe-Giy-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-Thr-Pro-Lys (IV) dans laquelle - na, nb, et nl, indépendamment les uns des autres, représentent 0 ou 1.
AA3, AAS, AA~. AA9, AAlO, AA12, AAl3, AA15, AAI~. AAI~, AA22, AA24, AA31, AA33, et AA36, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé quelconque naturel ou non, sous réserve que lorsque nl = 0, alors - nb = 0, - ou AA2 représente une glycine, AAS représente une proline. AA~
représente une sérine, AA9 représente une lysine, AAI~~ représente une histidine. AAI~ représente une glycine, et AAI~ représente um isoleucinc.
- et/ou l' un au nu~ins de: AA l 2 uu de AA 1 ~ représente l' acide ,iminohutyrique (Ahu).
- et/ou, l'un au m«ins de AA24 ou de AA31 représente un résidu ncwleucine.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26~
L' invention a plus particulièrement pour objet les dérivés de la KTX de formule (IV), tels que définis ci-dessus, dans laquelle nl = 0, et - na = 0, nb = l, AA2 représente une glycine, AAS représente une proline. AA7 représente une sérine, AA9 représente une lysine. AA10 représente une histidine. AA12 représente une glycine, et AA 16 représente une isoleucine, notamment la kaliotoxine 3 correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 4, ou - nb = 0, notamment la KTX(6-37) représentée par SEQ ID NO 6.
L'invention concerne plus particulièrement les dérivés de la KTX de formule (IV), tels que définis ci-dessus, dans laquelle nl = 0 ou 1, et - l'un au moins de AAI2 ou de AA17 représente l'acide aminobutyrique (Abu), notamment les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb - 1, et AA12 et AA17 représentent l'acide aminobutyrique (Abu), tel que le dérivé (P12/Abu, P17/Abu)KTX représenté par SEQ ID NO 7, - et/ou, l' un au moins de AA24 ou de AA31 représente un résidu norleucine, notamment . les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb = 0, AA12 et AA17 représentent l'acide aminobutyrique (Abu), AA24 et AA31 représentent un résidu norleucine, tel que la Kaline représentée par SEQ ID NO
8, ou . les dérivés de la KTX de formule (IV) dans laquelle n 1 = 1, na =
nb = 1, et répondant à la formule (V) suivante AA 1-AA2-AA3-AA4-AAS-AA6-AA7-Cys-AA9-AA 10-Ser-Abu-Gln-Cys-AA 15-Lys-Abu-Cys-Lys-Asp-Ala-Gly-Nle-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-Nle-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-AA3 g-AA39-AA40 ( V ) dans laquelle AA1 à AA7, AA9, AA10, AA15, AA33, AA36, et AA3g à
AA40, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé
quelconque naturel ou non.
L'invention a plus particulièrement pour objet les dérivés de la KTX de formule (IV), tels que définis ci-dessus, dans laquelle n l = 1, notamment les composés suivants pour lesquels na = nb = 1, tels que - le dérivé de KTX à hélice a, modifiée représenté par la séquence SEQ ID
NO 9, dans laquelle. à la différence de KTX, AA1~ représente une lysine.
AA 1 ~ représente un acide glutamique, AA 15 représente un tryptophane, AA l~
représente une sérine. AA17 représente une valine, et AA~~ représente une tyrosine.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) - le dérivé de KTX désigné (P12/K. P17/V, F22)KTX correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 10, dans laquelle. , à la différence de KTX. AA12 représente une lysine, AA17 représente une valine, et AA22 représente une phénylalanine.
L' invention concerne également tout peptide dérivé de ceux décrits ci dessus, notamment par substitution, suppression ou addition d'un ou plusieurs acides aminés, ou tout fragment des peptides décrits ci-dessus, lesdits peptides dérivés ou fragments étant capables de bloquer les canaux potassium neuronaux Kvl.l et Kvl.2, ainsi que les canaux potassium lymphocytaires Kvl.3 susmentionnés.
L' invention concerne également les séquences nucléotidiques codant pour les peptides, ou peptides dérivés, ou fragments de ces derniers, décrits ci-dessus, ainsi que leur utilisation dans le cadre de la préparation desdits peptides, peptides dérivés, ou fragments, par transformation de cellules hôtes avec des vecteurs contenant lesdites séquences nucléotidiques, mise en culture des cellules hôtes ainsi transformées, et récupération des peptides, peptides dérivés produits.
L'invention sera davantage illustrée à l'aide des exemples de synthèse des composés de l' invention, et de leurs effets sur un modèle expérimental animal de !a SEP.
I - Techniques de synthèse La kaliotoxine et ses différents analogues ont été synthétisés par la méthode de synthèse en phase solide en utilisant, pour la protection des acides aminés, soit la chimie Boc selon le protocole explicité dans l' article Romi et colt., 1993, J. of Biological Chemistry, vol. 268, p 26302-26309, soit la chimie Fmoc selon le protocole explicité pour des peptides comparables dans l'article Kharrat et colt., 1996, Eur. J. of Biochemistry 42, p 491-498. Les résines utilisées sont à base de polystyrène 1 %a divinyl-benzène dérivatisé en PAM-résine, paraméthyl-BHA résine, résine HMB, ou résine RINK. Les chaines protectrices des acides aminés sont : cyclohéxyl ou t-hutyl pour Asp et Glu.
benzyl ou t-butyl pour Ser et Thr, carbohenzoxy, tosyl ou trityl pour His, p-méthylbenzyl, Acm, ou trityl pour Cys, xantyl ou trityl pour Asn et Gln, tosyl ou Pmc pour Arg et 2C1-CbZ ou Boc pour Lys. L~assemhia~~e des amino-acides a été réalisé sous forme de HOBt-ester ou par couplage avec le réactif HBTU.
Le clivage et la déprotection des ehaines latérales des amino-acides ont été
réalisés soit en milieu HF, soit en présence de TFA avec différents niè~~es à
FEUILLE DE REMPIJ~CEMENT (REGLE 26) radicaux : p-crésol, éthanedithiol, thioanisole ou phénol. Les peptides ont été
placés en réoxydation en présence d'un tampon Tris-HC1 au contact de l'air. La constitution des ponts disulfures et la restructuration des molécules ont été
suivies par HPLC. Les peptides oxydés ont été purifiés par HPLC préparative et caractérisés par : HPLC analytique, analyse d'acides aminés, spectrométrie de masse, et par différents tests biologiques : électrophysiologie, toxicité chez la souris, fixation sur leurs récepteurs.
Les caractéristiques physico-chimiques sont les suivantes : poudre lyophilisée blanche amorphe, de grande solubilité dans l'eau ( > 10 mg/ml), conservation à 4°C à l'état lyophilisé et à -20°C en solution dans l'eau.
Dégradation rapide en milieux oxydant et réducteur, dégradation rapide en milieu basique et acide extréme ( < 1).
II - Etude de l' effet des composés de l' invention sur un modèle animal de SEP
A) Méthodologie 1) Affinité de la kaliotoxine pour les canaux potassium de type Kv L'affinité de la kaliotoxine (KTX) pour les canaux potassium de type Kv a été déterminée par électrophysiologie (potentiel imposé) après expression d'ARN dans l'ovocyte de xénope (Kushner er coll., 1989).
2) Blocage des canaux Kv lymphocytaires par la KTX
L'activité des canaux potassium est déterminé en enregistrant le courant global d'un lymphocyte à l'aide de la technique; de patch-clamp dans la configuration cellule entière.
3) Effets in vitro de la kaliotoxine sur la prolifération d'une lignée lymphocytaire T
Des lymphocytes T sont maintenus en culture en alternant des cycles d'activation antigénique et des cycles d'amplification dans du milieu de croissance contenant 10% de "T cell growth factors" (TCGF). L'activation antigénique est réalisée en cultivant 3x104 LaT avec 2x106 ceilules présentatrices de l'antigène, Ia protéine basique de la myéline fPBM) (10 mg/ml) /200 mi milieu de stimulation/puits de micropiaque. Au bout de 48 hrs, un précurseur radioactif du DNA (H3-Tdr. lmCi/puits) est ajouté ; 18 hrs plus tard, les cellules sont récoltées, lysées et le matériel radioactif incorporé
dans l'ADN est compté.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26~
WO 99/18123 PC'T/FR98/02136 Les bloqueurs sont ajoutés au début de l' activation antigénique, pour la durée totale de la culture. Chaque concentration de bloqueur est testée en quadreplicat. Les résultats sont exprimés en moyenne de cpm des 4 échantillons ~ écart-type.
4) Effets de la kaliotoxine sur un modèle animal de SEP, l'encéphalomyélite allergique expérimentale (EAE) induite chez le rat L'EAE est induite par transfert adoptif de lymphocytes T (LcT) spécifiques de la protêine basique myélinique (PBM). Ces lymphocytes proviennent d'une lignée lymphocytaire T CD4+, Thl, "PAS", issue de rats Lewis ; ils sont activés par la PBM 48h avant d'être injectés aux receveurs syngéniques normaux.
Cinq groupes (A à E) de 5 rates Lewis àgées de 10 semaines, 200 gr (Charles River) reçoivent ce 2 à 5 millions de LcT (lignée T PAS) spécifiques de la protéine basique myélinique PBM par voie intra-péritonéale au jour 0 (JO). Dans les groupes B et C, la KTX (0,8 et 8 ~.g I0,1 ml PBS/rat) (PBS, tampon phosphate) est injectée par voie sous cutanée le même jour et quotidiennement jusqu'au 6° jour (J6). Un groupe contrôle (groupe A) reçoit en lieu et place de KTX, lml de PBS. Les rats du groupe D reçoivent 8 wg de KTX
après l'apparition des signes cliniques d'EAE. Les rats du groupe E reçoivent au jour 0 des LcT prétraités par KTX in vitro (100 ng/ml) et quotidiennement 8 ~,g de KTX jusqu'à J6. Les rats du sixième groupe (~ reçoivent uniquement KTX
(8 ~.g) de JO à J6.
Une autre expérience a été effectuée en testant KTX à différences doses : 0.8, 8, 16 et 32 ~.g/rat/jour. La dose la plus élevée l32 ~,g) a été
injectée en 1 ou ~ fois dans 0.1 ou 1 ml de PBS. La voie d'administration a été en nous cutanée ; elle a été comparée à la voie intraveineuse au cours d'une seule expérience. L'observation clinique des animaux a été effectuée 1. 2 ou 4 fois par jour.
Les rats sont observés et pesés quotidiennement. Les signes cliniques de l'EAE (identiques à ceux obtenus par induction active) sont notés de 0 à 4. comme suit (d'après Bourdoulous et coll., 1995):
0 = absence de signes neurologiques.
1 = queue flaccide, 2 = parésie des membres postérieurs pouvant s' accompagner de tremblements, 3 = paralysie fiasque des membres postérieurs Pouvant s'accompagner d'incontinence, d'hémorragies oculaires et nasales.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) 4 = état moribond (paralysie des membres supérieurs: troubles respiratoires).
L'EAE clinique moyenne est obtenue en totalisant les signes cliniques d'intensité maximale de chaque rat; les rats ne présentant pas de signes 5 sont inclus et notés 0. La perte pondérale tient compte du poids minimal et maximal de chaque rat au cours des 6 jours de traitement.
5) Levée des blocs de conduction par la kaliotoxine Deux tests ont été retenus 10 Nerf optique de rat in vitro C'est un nerf du système nerveux central, myélinisé par des oligodendrocytes couplés à des astrocytes. Le nerf optique est prélevé chez des rats Lewis et placé dans une chambre perfusée, oxygénée et thermostatée à
36°C. L'enregistrement de l'activité globale des axones est réalisé à
l'aide d'une 15 électrode de succion servant de contention à une extrémité du nerf. Une seconde électrode identique, placée à l'autre extrémité, sert à stimuler le nerf (stimulation donnant une réponse maximale : 0.1 ms, 10 à 30 V). Les contrôles effectués, la préparation est mise en présence de lymphocytes réactifs contre la protéine basique de la myéline (2 105 cellules/ ml) maintenus dans un milieu de culture DMEM.
Potentiels évoqués La détection dans le SNC des potentiels évoqués Par une stimulation appliquée à une patte arrière d'un rat permet d'évaluer l'état fonctionnel des fibres ascendantes du tronc cérébral. La détection se tait au niveau thalamique. Les électrodes métalliques sont implantées à demeure sous contrôle stéréotaxique, deux dans le noyau thalamique ventro-postero-lateral et deux autres sur le scalp. L'animal étant anesthésié au chloral (0.1 ~Irat), la stimulation de la patte arrière droite est réalisée à ('aide d'un hracelet ceinturant la jambe et contenant deux conducteurs. La stimulation seuil (2ms. 25 à 60V) est détectée visuellement par une contraction réflexe. Les potentiels évoqués sont obtenus en moyennant une cinquantaine de stimulations répétées toutes les Ss.
B) Résultats 1) Affinité de la kaliotoxine pour les canaux Kv Les courbes doses-réponses montrent une sensihilité élevée tics canaux Kv l . I (ICSO = I . ~ nM), Kv 1.2 (IC50 = 24 nM ) et Kv I . ~ ( (C50 =
().1 FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 2~) nM) à la KTX. Le canal Kv3.1 est insensible (IC50 > l üM). Par ailleurs, d' autres auteurs ont montré que les canaux neuronaux Kv 1.5 et Kv 3 .1 sont insensibles à la KTX (Grissmer et colt, 1994).
Conclusion : Ce profil d'activité correspond idéalement au plan de charge fixé dans le cadre de la présente invention : affinité élevée pour fe canal Kv 1.3 lymphocytaire; afftnité élevée et sélective pour les canaux Kv axonaux Kv 1.1 et Kv 1.2, par rapport aux autres canaux neuronaux.
Ce profil d'activité est idéal pour combiner un effet immunosuppresseur efficace et un effet neurologique orienté sur la conduction axonale susceptible de permettre d'éviter les effets épileptogènes des aminopyridines.
2) Blocage des canaux Kv lymphocytaires par 1a kaliotoxine $yltats : Sur les diverses lignées lymphocytaires testées, la sensibilité des canaux Kv endog'enes s'exprimant constitutivement ou après activation antigénique est caractérisée par un coefficient de dissociation Kd de 1 à2nM.
Conclusion : Bien que plus faible, cette sensibilité est en accord avec tes données obtenues sur les canaux Kvl.3 exogènes exprimés dans l'ovocyte. de xénope.
3) Effets in vitro de la kaliotoxine sur la prolifération d'une lignée lymphocytaire T encéphaütogène.
Résultats : Ceux d'une expérience type sont présentés dans l'annexe 1. Quatre séries d'expériences indiquent que 10 à ~0 nM de KTX
inhibe à 60% l'incorporation du précurseur radioactif de l'ADN et donc, la prolifération cellulaire.
Conclusion : Ces données confirment ie rôle majeur des canaux Kvl.3 dans les phases prolifératives des lymphocytes T et l'efficacité de l'effet immuno-suppresseur de la KTX.
4) Effets de la KTX sur l'EAE induite chez !e rat 'Resultats : L'analyse montre que, du point de vue clinique, le traitement des rats par voie systémique avec ia KTX (8 et 0.8 ~~~> du jour 0 au jour 6 réduit considérablement la sévérité de la maladie et abolit la mortalité. La rémission est totale en moins de 10 jours. Plus si~~nificatifs encore sont les résultats du groupe D traité après l'apparition des signes cliniques avec 8 ~.~~ de FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) KTX et seulement pendant 2 jours. Les signes cliniques ne dépassent pas une sévérité moyenne de 1.1 et régressent rapidement.
Conclusion Le traitement de rats Lewis par KTX dès le jour du transfert adoptif réduit la sévérité de l'EAE et la perte pondérale. Le traitement par KTX dès l'apparition des signes cliniques, pendant un à trois jours seulement, constitue un traitement efficace de l' EAE (voir Tableau 1 ).
Les conditions optimales à retenir dans le cadre de ces expériences sont 32 ~,g de KTX/rat/jour : dose à laquelle les résultats sont le plus reproductibles, - injection de KTX dans 1 ml PBS, 1 fois par jour, par voie sous cutanée, - pesée et examen clinique des animaux une seule fois/jour.
Tableau 1. Traitement de l'EAE adoptive par KTX
Score -__ ' Clinique EAE
Contrle KTX (32 ~.g) PBS
exprience 1 ~ 1.2 0.7 1.8 n =5 n=5 exprience 2 2.5 1.0 1. l 0.35 n-=7 n=8 exprience 3 ! 3.6 0.4 2.51 1.5 n=7 n=8 exprience 4 2.3 1.6 1.3 n=5 n=5 L'EAE est induite chez des rats Lewis par injection intrapéritonéale de 2 à 5 millions de lymphocytes T "PAS" activés par la PBM au jour 0.
La KTX est injectée par voie sous cutanée dans du PBS dès l' apparition des signes cliniques, durant 1 à 3 jours. L'EAE clinique moyenne est obtenue en totalisant les signes cliniques d'intensité maximale de chaque rat évalués selon l'échelle de Sommer et al. (Nature Med., 1995. 1: 247).
"n" représente le nombre de rats par groupe. L'analyse statistique est réalisée par le test de Manu et Whitney.
Ces données sont une confirmation, sur un modèle animal reconnu représentatif de la sclérose en plaques, de l'action anti-intlammatoire et itnmunosuppressive de la kaliotoxine. De plus, la ~_uérison des animaux du FEU!>LLE DE REMPLACEMENT (RELIE 26) groupe D susmentionné traité tardivement est un argument indirect en faveur d'une action symptomatique de la KTX sur les canaux Kv du SNC. Cette conclusion est confirmée par les deux tests suivants.
5) Levée des blocs de conduction par la kaliotoxine Nerf optique de rat in vitro Résultats : En accord avec les données de Yarom et colt. (1983), !' incubation d'un nerf optique de rat avec des lymphocytes T pré-activés contre la protéine basique de la myéline entraïne, en 1h30-2h, un bloc quasi-total du potentiel global dérivé par une électrode de succion. Une restauration partielle de l' activité contrôle peut alors être obtenue 2 à 3 heures après avoir enlevé les lymphocytes. Par conue, l'addition de KTX (100 nM) restaure rapidement (15-min) la capacité de conduction du nerf méme en présence des lymphocytes.
Conclusion : Ces expériences valident l'hypothèse que les blocs 15 de conduction dans les fibres centrales démyélinisées peuvent étre levés en agissant sur les canaux potassium neuronaux. Elles montrent également que la kaliotoxine, par sa spécificité, exerce cet effet à des concentrations nanomolaires.
Potentiels évoqués 20 Résultats : Sur un animal dont les signes cliniques d'EAE
atteignent le niveau 2 (paralysie du train postérieur), les potentiels évoqués par une stimulation électrique de ia patte arrière sont retardés et déprimés de 80 à
90% par rapport aux enregistrements contrôle effectués avant l' induction de l'EAE. Une injection sous-cutanée de KTX (10 ug) est suivie d'une récupération progressive de l'amplitude et de la latence des potentiels évoqués. La récupération devient totale en 90 minutes.
Çonciusion : Cette expérience menée in vivo montre que les blocs de conduction consécutifs au processus inflammatoire des fibres situées dans la partie lombaire du tronc cérébral sont levés par une injection aiguë
de KTX. Les résultats confirment notre hypothèse d'un effet neurologique positif de la KTX. Ils montrent directement que le bloqueur peut passer lentement la harrière hémato-méningée, probablement au niveau des sites d' intlammation.
Cette dernière conclusion est d'importance quant à la possibilité de restaurer une conduction axonique satisfaisante apte à rétablir une fonction motrice altérée.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) Bever CT, (1994), The current status of studies of aminopyridines in patients with multiple sclerosis. Ann Neurol . 36; S118-12I.
Bourdoulous et coll., (1995), Eur. J. Immunol.. 25, p 1176.
Chandy K.G. et Gutman G. (1994), Voltage-gated K+ genes. In Handbook of Receptors and Charnels, A. North, ed., CRC Press, Boca Raton, FL, p 1.71.
Grissmer S, Nguyen AN, Aiyar J, Hanson DC, Mather RJ, Gutman GA, Karmilowicz MJ, Auperin DD and Chandy KG, ( 1994) Pharmacological characterization of Pive cloned voltage-gated K+ charnels, types Kv 1.1, 1.2, 1.3, 1.5 and 3.1, stably expressed in mammalian cell fines. Molec. Pharmacol.
45; p. 1227.
Jacobs L, Goodkin DE, Rudick RA and Herndorn R, (1994) Advances in specific therapy for multiple sclerosis. Cur. Opin. Neurol. 7; p. 250.
Kushner L, Lerma J, Bennet MVL and Zukin RS, ( 1989) Using the xenopus oocyte system for expression and cloning of neuroreceptors and charnels. In, Methods in Neurosciences . Vol. 1; p. 3. Academic Press Inc.
McNamara N.M.C., Averill S., Wilkin G.P., Dolly J.O., Priestley J.V., (1996), Ultrastructural localization of a voltage-gated K charnel subunit (Kvl.2) in the rat cerabellum, Eur. J. of Neurosciences, 8 p. 688-699.
Noseworthy JH (1993) Clinical trials in multiple sclerosis. Curr. Opin.
Neurosurg. 6; 209-215.
Polman CH, Bertelsman FW, van Loenen AC and Koetsier .lC, ( 1994), 4-aminopyridine in the treatment of patients v~ith multiple sclerosis. Long-term eftïcacy and safety. Arch. Neurol. 51; p. 292.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) WO 99/18123 PCTlFR98/02136 Dolman CH and Hartung HP, (1995) The treatment of multiple scierosis:
current and future. Curr .Opin. Neurol. 8; p. 200.
Sherratt RM, Bostock H and Sears TA, ( 1980) Effects of 4-aminopyridine on normal and demyelinated mammalien nerve fibres. Nature. 283; p. 570.
Stühmer W., Ruppesberg J.P., Schrtiter K.H., Sakmann B., Stocker M., 10 Giese K.P., Perschke A., Baumann A., Pongs O., (1989), Molecular basis of functional diversity of voilage-gated potassium charnel in mammalien brain, The EMBO Journal, 8 : p. 3235-3244.
Uitdehaag BM, Dolman CH, de Groot CJ and Dijkstra CD, ( 1994), Effect 15 of K+ charnel blockers on the clinicat course and histological features of experimental allergic encephalomyelitis. Acte. Neurol. Scand. 90; p. 299.
Wang H., Kunkel D.D., Schwartzkroin P.A., Tempe( B.L., (1994), Localization of Kv 1.1 and Kv 1.2, two K channe( protein, to synaptic tetminals, 20 somata, and dendrites in the moule brain, The J. of Neuroscience, 14 : p.
4599.
Yarom Y, Naparstek Y, Lev-Ram V, Holoshitz J, Ben-Nun A and Cohen IR, ( 1983) Immunospeciiic inhibition of nerve conduction by T lymphocytes reactive to basic protein of myelin. Nature. 303; p 246.
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26) LISTE DE SÉQUENCES
(1) INFORMATIONS GÉNÉRALES:
(i) DÉPOSANT:
{A) NOM: CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
(B) RUE: 3, rue Michel-Ange (C) VILLE: PARIS
(E) PAYS: FRANCE
(F) CODE POSTAL: F-75016 (ii) TITRE DE L' INVENTION: UTILISATION DES BLOQUEURS DES CANAUX
POTASSIUM NEURONAUX ET LYMPHOCYTAIRES DANS LE TRAITEMENT
DES MALADIES NEUROLOGIQUES D'ORIGINE IMMUNITAIRE
(iii) NOMBRE DE SÉQUENCES: 13 (iv) FORME DÉCHIFFRABLE PAR ORDINATEUR:
(A) TYPE DE SUPPORT: Floppy disk , (B) ORDINATEUR: IBM PC compatible (C) SYSTEME D' EXPLOITATION: PC-DOS/MS-DOS
(D) LOGICIEL: PatentIn Release #1.0, Version #1.30 (OEB) (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: l:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 39 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 1:
Thr Ile Ile Asn Val Lys Cys Thr Ser Pro Lys Gln Cys Ser Lys Pro Cys Lys Glu Leu Tyr Gly Ser Ser Ala Gly Ala Lys Cys Met Asn Gly Lys Cys Lys Cys Tyr Asn Asn (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 2:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 38 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÉGLÉ 26) (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 2:
Gly Val Glu Ile Asn Val Lys Cys Ser G1y Ser Pro Gln Cys Leu Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 3:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 37 acides aminés (B) TYPE: acide aminë
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 3:
Val Arg Ile Pro Val Ser Cys Lys His Ser Gly Gln Cys Leu Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Gly Lys Cys Asp Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 4:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 37 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 4:
Val Gly Ile Pro Val Ser Cys Lys His Ser Gly G1n Cys Ile Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys i'EUILLE DE REMPi.ACEMENT (RÉGLÉ 26) Asp Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 5:
(i) CARACTERISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 38 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linêaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (ix) CARACTÉRISTIQUE:
(A) NOM/CLE: CDS
(B) EMPLACEMENT:1..114 (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: S:
Gly Val Pro Ile Asn Val Ser Cys Thr Gly Ser Pro Gln Cys Ile Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 6:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 32 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 6:
Val Lys Cys Ser Gly Ser Pro Gln Cys Leu Lys Pro Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro i2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 7:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 38 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGI.E 28) (D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 7:
Gly Val Glu Ile Asn Val Lys Cys Ser Gly Ser Abu Gln Cys Leu Lys Abu Cys Lys Asp Ala Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Lys Abu : acide aminobutyrique (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 8:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 32 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: e:
Val Lys Cys Ser Gly Ser Abu Gln Cys Leu Lys Abu Cys Lys Asp Ala Gly Nle Arg Phe Gly Lys Cys Nle Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Abu . acide aminobutyrique Nle . norleucine (2) INFORMATION POUR LA SEQ ID NO: 9:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 39 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID NO: 9:
Gly Val Glu Ile Asn Val Lys Cys Ser Gly Ser Lys Glu Cys Trp Ser Val Cys Lys Asp Ala Tyr Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGL,E 26) S
Lys Cys His Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 10:
(i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE:
(A) LONGUEUR: 39 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID N0: 10:
Gly Val Glu Ile Asn Val Lys Cys Ser Gly Ser Lys Gln Cys Leu Lys Val Cys Lys Asp Ala Phe Gly Met Arg Phe Gly Lys Cys Met Asn Arg Lys Cys His Cys Thr Pro Lys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 11:
(i) CARACTERISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 37 acides aminés (B) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLÉCULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SÉQUENCE: SEQ ID N0: 11:
Val Cys Arg Asp Trp Phe Lys Glu Thr Ala Cys Arg His Ala Lys Ser Leu Gly Asn Cys Arg Thr Ser Gln Lys Tyr Arg Ala Asn Cys Ala Lys Thr Cys Glu Leu Cys ~.2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 12:
(i) CARACTÉRISTIQUES DE LA SÉQUENCE:
(A) LONGUEUR: 35 acides aminés (8) TYPE: acide aminé
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire FEUILLE DE REMPLACEMENT (RÉGIE 26) WO 99118123 6 PC"T/FR98/02136 (ii) TYPE DE MOLECULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 12:
Arg Ser Cys Ile Asp Thr Ile Pro Lys Ser Arg Cys Thr Ala Phe Gln Cys Lys His Ser Met Lys Tyr Arg Leu Ser Phe Cys Arg Lys Thr Cys Gly Thr Cys (2) INFORMATIONS POUR LA SEQ ID NO: 13:
(i) CARACTERISTIQUES DE LA SEQUENCE:
(A) LONGUEUR: 36 acides aminés (B) TYPE: acide aminë
(C) NOMBRE DE BRINS:
(D) CONFIGURATION: linéaire (ii) TYPE DE MOLECULE: protéine (xi) DESCRIPTION DE LA SEQUENCE: SEQ ID NO: 13:
Ala Cys Lys Asp Asn Phe Ala Ala Ala Thr Cys Lys His Thr Lys Glu Asn Lys Asn Cys Gly Ser Gln Lys Tyr Ala Thr Asn Cys Ala Lys Thr Cys Gly Leu Cys FEUILLE DE REMPLACEMENT (REGLE 26)
Claims (16)
1. Utilisation de composés inhibiteurs des canaux potassium neuronaux Kv 1.1, Kv 1.2, et des canaux potassium lymphocytaires Kv 1.3 , pour la préparation de médicaments destinés au traitement de maladies neurologiques à
composante immunitaire chez l'homme ou l'animal, dans lesquelles se produit un blocage de la conduction nerveuse..
composante immunitaire chez l'homme ou l'animal, dans lesquelles se produit un blocage de la conduction nerveuse..
2. Utilisation selon la revendication 1, pour la préparation de médicaments destinés au traitement des maladies neurologiques à composante immunitaire suivantes:
- les pathologies neurologiques centrales inflammatoires à localisation cérébrale et médullaire, notamment la sclérose en plaque et maladies apparentées (Balo, Devic, encéphalite aiguë disséminée et hémorragiques.
neuropathies optiques isolées);
- les pathologies périphériques inflammatoires ou apparentées, notamment:
. les polyradiculonévrites aiguës et chroniques, . les neuropathies liées à des atteintes infectieuses et à des collagénoses, - les pathologies neurologiques dégénératives, notamment la sclérose latérale amyotrophique, les neuropathies avec bloc de conduction, - les pathologies tumorales à dérèglement du système immunitaire.
- les pathologies neurologiques centrales inflammatoires à localisation cérébrale et médullaire, notamment la sclérose en plaque et maladies apparentées (Balo, Devic, encéphalite aiguë disséminée et hémorragiques.
neuropathies optiques isolées);
- les pathologies périphériques inflammatoires ou apparentées, notamment:
. les polyradiculonévrites aiguës et chroniques, . les neuropathies liées à des atteintes infectieuses et à des collagénoses, - les pathologies neurologiques dégénératives, notamment la sclérose latérale amyotrophique, les neuropathies avec bloc de conduction, - les pathologies tumorales à dérèglement du système immunitaire.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, de composés peptidiques issus de venins de scorpion, ou de composés dérivés de ces derniers, ces composés ou dérivés comprenant la séquence en acides aminés répondant à la formule générale suivante (I) suivante:
Cys-AA9-AA10-AA11-AA12-AA13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-AA19-AA20-AA21-(AA22)n1-AA23-AA24-AA25-AA26-AA27-(AA28)n2-Lys-Cys-AA31-AA32-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys (1) dans laquelle:
- n1, et n2, indépendamment l'un de l'autre représentent zéro ou 1, - AA9 à AA13, AA15 à AA17, AA19 à AA28, AA31 à AA33, et AA36, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé
quelconque, naturel ou non.
Cys-AA9-AA10-AA11-AA12-AA13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-AA19-AA20-AA21-(AA22)n1-AA23-AA24-AA25-AA26-AA27-(AA28)n2-Lys-Cys-AA31-AA32-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys (1) dans laquelle:
- n1, et n2, indépendamment l'un de l'autre représentent zéro ou 1, - AA9 à AA13, AA15 à AA17, AA19 à AA28, AA31 à AA33, et AA36, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé
quelconque, naturel ou non.
4. Utilisation selon la revendication 3, de composés peptidiques de formule (II) suivante:
AA2-AA3-Ile-Asn-Val-Lys-Cys-Thr-Ser-Pro-AA12-Gln-Cys-AA15-AA16-Pro-Cys-Lys-AA20-AA21-AA22-Gly-AA24-AA25-Ala-Gly-AA28-Lys-Cys-AA31-Asn-Gly-Lys-Cys-Lys-Cys-Tyr-AA39-AA40 (II) dans laquelle AA2, AA3, AA12, AA15, AA16, AA20 à AA22, AA24, AA25, AA28, AA31, AA39, et AA40, indépendamment les uns des autres représentent un acide aminé quelconque naturel ou non, tel que la noxiustoxine représentée par SEQ ID NO 1.
AA2-AA3-Ile-Asn-Val-Lys-Cys-Thr-Ser-Pro-AA12-Gln-Cys-AA15-AA16-Pro-Cys-Lys-AA20-AA21-AA22-Gly-AA24-AA25-Ala-Gly-AA28-Lys-Cys-AA31-Asn-Gly-Lys-Cys-Lys-Cys-Tyr-AA39-AA40 (II) dans laquelle AA2, AA3, AA12, AA15, AA16, AA20 à AA22, AA24, AA25, AA28, AA31, AA39, et AA40, indépendamment les uns des autres représentent un acide aminé quelconque naturel ou non, tel que la noxiustoxine représentée par SEQ ID NO 1.
5. Utilisation selon la revendication 3, de composés peptidiques comprenant la séquence de formule (III) suivante:
AA6-AA7-Cys-AA9-AA10-Ser-AA12-AA13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)nl-Gly-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-AA38-AA39 (III) dans laquelle:
- AA6, AA7, AA9, AA10, AA12, AA13, AA15, AA16, AA17, AA22, AA24, AA31, AA33, AA36, AA38 et AA39, indépendamment les uns des autres représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
- nl représente zéro ou 1.
AA6-AA7-Cys-AA9-AA10-Ser-AA12-AA13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)nl-Gly-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-AA38-AA39 (III) dans laquelle:
- AA6, AA7, AA9, AA10, AA12, AA13, AA15, AA16, AA17, AA22, AA24, AA31, AA33, AA36, AA38 et AA39, indépendamment les uns des autres représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
- nl représente zéro ou 1.
6. Utilisation selon la revendication 5, de la kaliotoxine représentée par SEQ ID NO 2, ou de dérivés de la KTX répondant à 1a formule (IV) suivante:
[(Gly)na-Val-AA3-Ile-AA5]nb-Val-AA7-Cys-AA9-AA10-Ser-AA12-AA13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)nl-Gly-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-Thr-Pro-Lys (IV) dans laquelle:
- na, nb, et nl, indépendamment les uns des autres, représentent 0 ou 1, AA3, AA5, AA7, AA9, AA10, AA12, AA13, AA15, AA16, AA17, AA22, AA24, AA31, AA33, et AA36, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
[(Gly)na-Val-AA3-Ile-AA5]nb-Val-AA7-Cys-AA9-AA10-Ser-AA12-AA13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)nl-Gly-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-Thr-Pro-Lys (IV) dans laquelle:
- na, nb, et nl, indépendamment les uns des autres, représentent 0 ou 1, AA3, AA5, AA7, AA9, AA10, AA12, AA13, AA15, AA16, AA17, AA22, AA24, AA31, AA33, et AA36, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
7. Utilisation selon la revendication 6, de composés de formule (IV) dans laquelle n1 = 0, et:
- nb = 1, tels que les composés peptidiques suivants:
. la kaliotoxine 2 représentée par SEQ ID NO 3, . la kaliotoxine 3 représentée par SEQ ID NO 4, . l'agitoxine 2 représentée par SEQ ID NO 5.
- ou nb = 0, tel que la KTX(6-37) représentée par SEQ ID NO 6.
- nb = 1, tels que les composés peptidiques suivants:
. la kaliotoxine 2 représentée par SEQ ID NO 3, . la kaliotoxine 3 représentée par SEQ ID NO 4, . l'agitoxine 2 représentée par SEQ ID NO 5.
- ou nb = 0, tel que la KTX(6-37) représentée par SEQ ID NO 6.
8. Utilisation selon la revendication 6, de dérivés de la KTX de formule (IV), dans laquelle n1 représente 0 ou 1, et:
- l'un au moins de AA12 ou de AA17 représente l'acide aminobutyrique (Abu), tel que le dérivé (P12/Abu, P17/Abu)KTX représenté par SEQ ID NO 7, et/ou - l'un au moins de AA24 ou de AA31 représente un résidu norleucine tel que la Kaline représentée par SEQ ID NO 8, ou les dérivés de la KTX de formule (V) suivante:
AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7-Cys-AA9-AA10-Ser-Abu-Gln-Cys-AA15-Lys-Abu-Cys-Lys-Asp-Ala-Gly-Nle-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-Nle-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-AA38-AA39-AA40 (V) dans laquelle AA1 à AA7, AA9, AA10, AA15, AA33, AA36, et AA38 à
AA40, indépendamment les uns des autres. représentent un acide aminé
quelconque naturel ou non.
- l'un au moins de AA12 ou de AA17 représente l'acide aminobutyrique (Abu), tel que le dérivé (P12/Abu, P17/Abu)KTX représenté par SEQ ID NO 7, et/ou - l'un au moins de AA24 ou de AA31 représente un résidu norleucine tel que la Kaline représentée par SEQ ID NO 8, ou les dérivés de la KTX de formule (V) suivante:
AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7-Cys-AA9-AA10-Ser-Abu-Gln-Cys-AA15-Lys-Abu-Cys-Lys-Asp-Ala-Gly-Nle-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-Nle-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-AA38-AA39-AA40 (V) dans laquelle AA1 à AA7, AA9, AA10, AA15, AA33, AA36, et AA38 à
AA40, indépendamment les uns des autres. représentent un acide aminé
quelconque naturel ou non.
9. Utilisation selon la revendication 6, de dérivés de la KTX de formule (IV) dans laquelle n1 = 1, notamment ceux pour lesquels na = nb = 1, tels que:
- le dérivé de la KTX à hélice .alpha. modifiée représenté par la séquence SEQ
ID NO 9, - le dérivé (P12/K. P17/V, F22)KTX représenté par SEQ ID NO 10.
- le dérivé de la KTX à hélice .alpha. modifiée représenté par la séquence SEQ
ID NO 9, - le dérivé (P12/K. P17/V, F22)KTX représenté par SEQ ID NO 10.
10. Utilisation selon la revendication 1 ou 2. de composés peptidiques issus d'anémones de mer, ou de composés dérivés de ces derniers. ces composés ou dérivés comprenant la séquence en acides aminés répondant à la formule générale suivante (VI) suivante:
(AA1)n1-(AA2)n2-Cys-AA4-Asp-AA6-AA7-AA8-AA9-AA10-AA11-Cys-(AA13)n3-AA14-(AA15)n4-AA16-(AA16)n5-AA18-(AA19)n6-AA20-Cys-AA22-(AA23)n7-Ser-AA25-Lys-Tyr-AA28-(AA29)n8-AA30-CYs-AA32-Lys-Thr-Cys-AA36-AA37-Cys (VI) dans laquelle :
- n1 à n8, indépendamment les uns des autres, représentent zéro ou 1, - AA2, AA2, AA4, AA6 à AA11, AA22, AA23, AA25, AA28 à
AA30, AA32, AA36 et AA37, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
(AA1)n1-(AA2)n2-Cys-AA4-Asp-AA6-AA7-AA8-AA9-AA10-AA11-Cys-(AA13)n3-AA14-(AA15)n4-AA16-(AA16)n5-AA18-(AA19)n6-AA20-Cys-AA22-(AA23)n7-Ser-AA25-Lys-Tyr-AA28-(AA29)n8-AA30-CYs-AA32-Lys-Thr-Cys-AA36-AA37-Cys (VI) dans laquelle :
- n1 à n8, indépendamment les uns des autres, représentent zéro ou 1, - AA2, AA2, AA4, AA6 à AA11, AA22, AA23, AA25, AA28 à
AA30, AA32, AA36 et AA37, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
11. Utilisation selon la revendication 10, des composés peptidiques suivants :
- la BgK correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 11, la ShK correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 12, la kaliseptine correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 13.
- la BgK correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 11, la ShK correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 12, la kaliseptine correspondant à la séquence en acides aminés SEQ ID NO 13.
12. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un ou plusieurs composés peptidiques définis dans l'une des revendications 1 à
13, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
13, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
13. Dérivés de la KTX, répondant à la formule (IV) suivante:
[(Gly)na-Val-AA3-Ile-AA5]nb-Val-AA7-Cys-AAg-AA10-Ser-AA12-AA13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)n1-Gly-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-Thr-Pro-Lys (IV) dans laquelle :
na, nb, et n1, indépendamment les uns des autres. représentent 0 ou 1, - AA3, AA5, AA7, AA9, AA10, AA12, AA13, AA15, AA16, AA17, AA22, AA24, AA31, AA33, et AA36, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
sous réserve que lorsque n1 = 0, alors - nb = 0, - ou AA2 représente une glycine, AA5 représente une proline. AA7 représente une sérine, AA9 représente une lysine. AA10 représente une histidine, AA12 représente une glycine, et AA16 représente une isoleucine.
- et/ou l'un au moins de AA12 ou de AA17 représente l'acide aminobutyrique (Abu), - et/ou, l'un au moins de AA24 ou de AA31 représente un résidu norleucine.
[(Gly)na-Val-AA3-Ile-AA5]nb-Val-AA7-Cys-AAg-AA10-Ser-AA12-AA13-Cys-AA15-AA16-AA17-Cys-Lys-Asp-Ala-(AA22)n1-Gly-AA24-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-AA31-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-Thr-Pro-Lys (IV) dans laquelle :
na, nb, et n1, indépendamment les uns des autres. représentent 0 ou 1, - AA3, AA5, AA7, AA9, AA10, AA12, AA13, AA15, AA16, AA17, AA22, AA24, AA31, AA33, et AA36, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé quelconque naturel ou non.
sous réserve que lorsque n1 = 0, alors - nb = 0, - ou AA2 représente une glycine, AA5 représente une proline. AA7 représente une sérine, AA9 représente une lysine. AA10 représente une histidine, AA12 représente une glycine, et AA16 représente une isoleucine.
- et/ou l'un au moins de AA12 ou de AA17 représente l'acide aminobutyrique (Abu), - et/ou, l'un au moins de AA24 ou de AA31 représente un résidu norleucine.
14. Dérivés de la KTX selon la revendication 13, de formule (IV) dans laquelle nl = 0, et:
- na = 0, nb = 1, AA2 représente une glycine. AA5 représente une proline, AA7 représente une sérine, AA9 représente une lysine, AA10 représente une histidine, AA12 représente une glycine, et AA16 représente une isoleucine, notamment la kaliotoxine 3 représentée par SEQ ID NO 4, - ou nb = 0, notamment la KTX(6-37) représentée par SEQ ID NO 6.
- na = 0, nb = 1, AA2 représente une glycine. AA5 représente une proline, AA7 représente une sérine, AA9 représente une lysine, AA10 représente une histidine, AA12 représente une glycine, et AA16 représente une isoleucine, notamment la kaliotoxine 3 représentée par SEQ ID NO 4, - ou nb = 0, notamment la KTX(6-37) représentée par SEQ ID NO 6.
15. Dérivés de la KTX selon la revendication 13, de formule (IV) dans laquelle nl = 0 ou 1, et - l'un au moins de AA12 ou de AA17 représente l'acide aminobutyrique (Abu), notamment les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb = 1, AA12 et AA17 représentent l'acide aminobutyrique (Abu), tel que le dérivé (P12/Abu, P17/Abu)KTX représenté par SEQ ID NO 7, - et/ou, l'un au moins de AA24 ou de AA31 représente un résidu norleucine, notamment les composés de formule (IV) dans laquelle nl = 0, na = nb = 0, AA12 et AA17 représentent l'acide aminobutyrique (Abu), AA24 et AA31 représentent un résidu norleucine, tel que la Kaline représentée par SEQ ID NO 8, ou tes dérivés de la KTX de formule (V) suivante:
AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7-Cys-AA9-AA10-Ser-Abu-Gln-Cys-AA15-Lys-Abu-Cys-Lys-Asp-Ala-Gly-Nle-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-Nle-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-AA3g-AA39-AA40 (V) dans laquelle AA1 à AA7, AA9, AA10, AA15, AA33, AA36, et AA38 à
AA40, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé
quelconque naturel ou non.
AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6-AA7-Cys-AA9-AA10-Ser-Abu-Gln-Cys-AA15-Lys-Abu-Cys-Lys-Asp-Ala-Gly-Nle-Arg-Phe-Gly-Lys-Cys-Nle-Asn-AA33-Lys-Cys-AA36-Cys-AA3g-AA39-AA40 (V) dans laquelle AA1 à AA7, AA9, AA10, AA15, AA33, AA36, et AA38 à
AA40, indépendamment les uns des autres, représentent un acide aminé
quelconque naturel ou non.
16. dérivés de la KTX selon la revendication 13, de formule (IV) dans laquelle nl = 1, notamment les composés suivants pour lesquels na = nb = 1.
tels que:
- le dérivé de KTX à hélice .alpha. modifiée représenté par la séquence SEQ ID
NO 9.
- le dérivé (P12/K, P17/V, F22)KTX représenté par SEQ ID NO 10.
tels que:
- le dérivé de KTX à hélice .alpha. modifiée représenté par la séquence SEQ ID
NO 9.
- le dérivé (P12/K, P17/V, F22)KTX représenté par SEQ ID NO 10.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9712421A FR2769226B1 (fr) | 1997-10-06 | 1997-10-06 | Utilisation des bloqueurs des canaux potassium dans le traitement des maladies neurologiques |
| FR97/12421 | 1997-10-06 | ||
| PCT/FR1998/002136 WO1999018123A1 (fr) | 1997-10-06 | 1998-10-06 | Utilisation des bloqueurs des canaux potassium neuronaux et lymphocytaires dans le traitement des maladies neurologiques d'origine immunitaire |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CA2305786A1 true CA2305786A1 (fr) | 1999-04-15 |
Family
ID=9511862
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CA002305786A Abandoned CA2305786A1 (fr) | 1997-10-06 | 1998-10-06 | Utilisation des bloqueurs des canaux potassium neuronaux et lymphocytaires dans le traitement des maladies neurologiques d'origine immunitaire |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1021461A1 (fr) |
| JP (1) | JP2001519356A (fr) |
| AU (1) | AU9544298A (fr) |
| CA (1) | CA2305786A1 (fr) |
| FR (1) | FR2769226B1 (fr) |
| WO (1) | WO1999018123A1 (fr) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10007234A1 (de) * | 2000-02-17 | 2001-10-18 | Sension Biolog Detektions Und | Peptid und dafür kodierende Nukleinsäure zur Bestimmung, Diagnostik und Therapie von Erkrankungen des Nervensystems |
| GB0414272D0 (en) * | 2004-06-25 | 2004-07-28 | Cellpep Sa | OsK1 derivatives |
| WO2009075773A2 (fr) * | 2007-12-07 | 2009-06-18 | Goldstein Steven A | Identification de ligands de toxine |
| CN108186976A (zh) * | 2018-04-06 | 2018-06-22 | 王建忠 | 一种治疗低钾性周期性麻痹的中药 |
| CN114728039A (zh) * | 2019-09-20 | 2022-07-08 | 西兰制药公司 | Kv1.3阻断剂 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4341762A (en) * | 1981-04-07 | 1982-07-27 | Haast William E | Use of snake venoms for treatment of neurological and related disorders |
| US5494895A (en) * | 1993-07-22 | 1996-02-27 | Merck & Co., Inc. | Scorpion peptide margatoxin with immunosuppressant activity |
| JPH09278797A (ja) * | 1996-04-05 | 1997-10-28 | Suntory Ltd | サソリ毒素関連ペプチド |
-
1997
- 1997-10-06 FR FR9712421A patent/FR2769226B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-10-06 WO PCT/FR1998/002136 patent/WO1999018123A1/fr not_active Ceased
- 1998-10-06 CA CA002305786A patent/CA2305786A1/fr not_active Abandoned
- 1998-10-06 EP EP98949027A patent/EP1021461A1/fr not_active Withdrawn
- 1998-10-06 JP JP2000514930A patent/JP2001519356A/ja active Pending
- 1998-10-06 AU AU95442/98A patent/AU9544298A/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2001519356A (ja) | 2001-10-23 |
| EP1021461A1 (fr) | 2000-07-26 |
| FR2769226B1 (fr) | 2000-06-02 |
| AU9544298A (en) | 1999-04-27 |
| FR2769226A1 (fr) | 1999-04-09 |
| WO1999018123A1 (fr) | 1999-04-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2662962C2 (ru) | Связанные с пептидом морфолиновые антисмысловые олигонуклеотиды для лечения миотонической дистрофии | |
| EP0898967B1 (fr) | Utilisation des cellules myogeniques transduites pour l'analgésie et pour le traitement des anomalies de comportement et de perception | |
| MXPA97003643A (es) | Metodos para tratamiento de esclerosis multiple usando analogos de peptidos de proteina basica de mielina humana | |
| JP2001504702A (ja) | ストレスタンパク質を含む組成物を使用する免疫応答 | |
| JP2003532618A (ja) | 細胞、神経系−特異的抗原およびそれらの用途 | |
| PT2059256T (pt) | Péptidos imunogénicos e a sua utilização em distúrbios imunológicos | |
| JP2008537736A (ja) | 抗原特異的ｔ細胞の操作に有用な組換えｍｈｃ分子 | |
| JP2008537736A5 (fr) | ||
| JP2000506864A (ja) | スズメバチ抗原５の免疫調節 | |
| WO1995026408A1 (fr) | Adenovirus recombinants codant pour le facteur neurotrophique des cellules gliales (gdnf) | |
| CA2110055C (fr) | Utilisation de peptides du recepteur de lymphocytes t contre les maladies du systeme immunitaire | |
| JPH09508140A (ja) | キメラｔｎｆ結合タンパク質を含有する医薬組成物 | |
| Christ et al. | The application of gene therapy to the treatment of erectile dysfunction | |
| KR0159046B1 (ko) | 포유류의 자기면역 포도막망막염의 치료 또는 예방방법 | |
| CA2187336A1 (fr) | Formulations pharmaceutiques utilisees dans le traitement de la pollinose du cedre du japon | |
| JPH06510750A (ja) | 炎症性関節炎治療を目的としてインタ−ロイキン受容体を標的にした分子 | |
| CA2305786A1 (fr) | Utilisation des bloqueurs des canaux potassium neuronaux et lymphocytaires dans le traitement des maladies neurologiques d'origine immunitaire | |
| EP0415999B1 (fr) | Preparations utilises comme traitement du psoriasis et des deficits neuropsychiatriques | |
| JP2009062379A (ja) | Ｔ細胞抗原受容体ペプチド | |
| US10316075B2 (en) | Recombinant polypeptides comprising MHC class II α1 domains | |
| JPH05255096A (ja) | 初老期痴呆または老年痴呆の治療用医薬組成物 | |
| WO1990011293A1 (fr) | Proteines allergenes tirees de l'ambrosie et utilisations de ces proteines | |
| JP2008517998A (ja) | 胸腺特異的タンパク質 | |
| DE60115475T2 (de) | VARIANTEN DES DERMATOPHAGOIDES-ALLERGENS DER p 2 | |
| JPH08511172A (ja) | 血管障害の遺伝子治療に用いるためのｄｎａ発現ベクター |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FZDE | Dead |