BR9612998B1 - 2-azetidinonas substituÍdas com aÇécar éteis como agentes hipocolesterolÊmicos, composiÇço farmacÊutica e kit contendo as mesmas. - Google Patents

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "2-AZETIDI-NONAS SUBSTITUÍDAS COM AÇÚCAR ÚTEIS COMO AGENTES HIPO-COLESTEROLÊMICOS, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E KIT CON-TENDO AS MESMAS".

Pedido dividido do Pl 9611401-0 depositado em 29.10.1996.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a 2-azetidinonas substituídas comaçúcar úteis como agentes hipocolesterolêmicos no tratamento e prevençãoda aterosclerose, e à combinação de uma 2-azetidinona substituída com a-çúcar desta invenção e um inibidor da biossíntese de colesterol para o tra-tamento e prevenção da aterosclerose.

A doença cardíaca coronária aterosclerótica representa a causaprincipal da morte e morbidez cardiovascular no mundo ocidental. Fatores derisco para a doença cardíaca coronária aterosclerótica incluem hipertensão,diabetes melitus, histórico familiar, pessoas do sexo masculino, hábito dotabagismo e colesterol no soro. Um nível de colesterol total de mais que 225-250 mg/dl está associado com elevação de risco significativo.

Esteres de colesterila, são um componente principal de lesõesateroscleróticas e a maior forma de armazenagem de colesterol nas célulasda parede arterial. A formação de ésteres de colesterila constitui tambémuma etapa chave na absorção intestinal do colesterol da dieta. Além do ajus-tamento do colesterol da dieta, o ajustamento da homeostase do colesterolem todo o corpo em seres humanos e animais, envolve a modulação da bi-ossíntese do colesterol, biossíntese de ácido da bile e o catabolismo de Iipo-proteínas no plasma contendo colesterol. O fígado é o órgão principal res-ponsável pela biossíntese do colesterol e o catabolismo, e por este motivo, éum fator básico determinante dos níveis de colesterol no plasma. O fígado éo local da síntese e secreção de lipoproteínas de densidade muito baixa(VLDL), que são subseqüentemente, metabolizadas em lipoproteínas de bai-xa densidade (LDL) na circulação. LDL são lipoproteínas transportadoras decolesterol predominantes no plasma, e um aumento em sua concentraçãoestá correlacionado com aterosclerose aumentada.Quando a absorção do colesterol nos intestinos é reduzida, sejaporque meio for, menos colesterol é liberado ao fígado. A conseqüência des-ta ação, é uma diminuição da produção de lipoproteína hepática (VLDL) eum aumento no interstício hepático do colesterol do plasma, principalmentecomo LDL. Assim, o efeito de rede de uma inibição da absorção do coleste-rol intestinal, é uma diminuição nos níveis do colesterol plasmático.

Vários compostos 2-azetidinona foram relatados como úteis nadiminuição do colesterol e/ou na inibição da formação de lesões contendocolesterol nas paredes arteriais de mamíferos: WO 93/02048 descreve com-postos de 2-azetidinona, em que o substituinte na posição 3 é arilalquileno,arilalquenileno ou arilalquileno, em que o alquileno, alquenileno ou porçãoalquileno é interrompida por um heteroátomo, fenileno ou cicloalquileno;WO 94/17038 descreve compostos de 2-azetidinona em que o substituintena posição 3 é um grupo arilalquila espirocíclico; WO 95/08532 descrevecompostos de 2-azetidinona em que o substituinte na posição 3 é um grupoarilalquileno substituído na parte alquileno por um grupo hidróxi;PCT/US95/03196, depositado em 22 de março de 1995, descreve compos-tos em que o substituinte na posição 3 é um grupo aril(oxo ou tio) alquilenosubstituído nà parte alquileno por um grupo hidróxi; e U.S. Ns de série08/463.619, depositado em 5 de junho de 1995, descreve a preparação decompostos em que o substituinte na posição 3 é um grupo arilalquileno subs-tituído na parte alquileno por um grupo hidróxi, e em que o grupo alquilenoestá ligado ao anel azetidinona por um grupo -S(0)o-2· Os pedidos de paten-tes citados são aqui incorporados por referência.

Ainda, a Patente Européia 199.630 e Pedido de Patente Euro-peu 337.549, descrevem azetidinonas substituídas com inibidor de elastase,ditas como úteis no tratamento de condições inflamatórias, resultando emdestruição do tecido, que está associada com vários estados doentios, porexemplo, aterosclerose.

Outros hipocolesterolêmicos conhecidos incluem extratos de ve-getais, tais como sapogeninas, em particular, tigogenina e diosgenina. Glico-sídeos derivados de tigogenina e/ou diosgenina estão apresentados em pu-blicações internacionais PCT WO 94/00480 e WO 95/18143.

A inibição da biossíntese do colesterol por inibidores 3-hidróxi-3-metilglutarila coenzima A redutase (EC1.1.1.34) foi demonstrada como umamaneira eficaz em reduzir o colesterol do plasma (Witzum, Circulation, 80, 5(1989), pág. 1101 -1114) e reduzir aterosclerose. A terapia combinada de uminibidor de HMG CoA redutase e um seqüestrante de ácido na bile foi de-monstrada ser mais eficaz em pacientes hiperlipidêmicos humanos do quequalquer agente na monoterapia (lllingworth, Drugs, 36 (Suppl. 3) (1988),pág. 63-71).

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a 2-azetidinonas, substituídascom açúcar, especialmente a conjugados derivados de glicose, 2-aze-tidinonas que abaixam o colesterol, com um grupo arila ou arila substituídacomo um substituinte na posição 1 e com um grupo fenila substituída porhidróxi, especialmente um grupo 4-hidroxifenila na posição 4.

Compostos da presente invenção são representados pela fórmula I

<formula>formula see original document page 4</formula>

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ondeR26 é H ou OG1;

G e G1 são independentemente selecionados dentre o grupo queconsiste de

<formula>formula see original document page 4</formula><formula>formula see original document page 5</formula>

contanto que quando R26 for H ouOH, G não seja H;

R1 Ra e Rb são selecionados independentemente do grupoque consiste de H, -OH, halogênio, -NH2, azido, (Ci-6) alcóxi(Ci-6)-alcóxi ou-W-R-30,

W é independentemente selecionado dentre o grupo que consis-te de -NH-C(O)-, -O-C(O)-, -0-C(0)-N(R31)-, -NH-C(0)-N(R31)- e -O-C(S)-N(R31)-;

R2 e R6 são independentemente selecionados dentre o grupoque consiste de H, (Ci-6) alquila, arila e (C1^) aril alquila;

R3, R4, R5, R71 R3a e R4a são independentemente selecionadosdentre o grupo que consiste de H, (Ci-6) alquila* (Ci-e) aril alquila, -C(0)(Ci-6)alquila e -C(0)arila;

R30 é independentemente selecionado dentre o grupo que con-siste de T substituído com R32, T-(Ci-6)alquila substituída com R32, (C2-4) al-quenila substituída com R32, (Ci-6)alquila substituída com R32, (C3-7) cicloal-quila substituída com R32 e (C3.7)cicloalquila(Ci-6)alquila substituída com R32;

R31 é independentemente selecionado dentre o grupo que con-siste de H e (Ci.4)alquila;

T é independentemente selecionado dentre o grupo que consistede fenila, furila, tienila, pirrolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila,benzotiazolila, tiadiazolila, pirazolila, imidazolila e piridila;

R32 é independentemente selecionado dentre 1-3 substituintes,independentemente selecionados dentre o grupo que consiste de halogênio,(C1-4)alquila, -OH, fenóxi, -CF3, -NO2, (Ci.4)alcóxi, metilenodióxi, oxo,(C1-4)alquilsulfanila, (C1^alquilsulfinila, (Ci-4)alquilsulfonila, -N(CH3)2,-C(0)-NH(Ci.4)alquila, -C(0)-N((Ci^)alquila)2, -C(0)-(C^)alquila,-C(0)-(Ci-4)alcóxi e pirrolidinil carbonila; ou R30 é uma ligação covalente eR31, o nitrogênio AO qual ele está ligado e R30 formam um grupo pirroiidinila,piperidinila, N-metil-piperazinila, indolinila ou morfolinila, ou um grupo pirroii-dinila substituída com (Ci-4)alcoxicarbonila, piperidinila, N-metilpiperazinila,indolinila ou morfolinila.

Ar1 é arila ou arila substituída com R10;

Ar2 é arila ou arila substituída com R11

Q é uma ligação ou o grupo representado abaixo que, com ocarbono do anel na posição 3 da azetidinona, forma um grupo espiro

<formula>formula see original document page 6</formula>

e

R1 é selecionado dentre o grupo que consiste de

-(CH2)q-, em que q é 2-6, contanto que quando Q formar um anelespiro, q possa também ser zero ou 1;

-(CH2)e-E-(CH2)r-, em que E é -O-, -C(O)-, fenileno, -NR22 ou

-S(0)o-2-, e é de 0-5 e r é 0-5, contanto que a soma de e e r seja 1 -6;

-(C2-e)alquenileno-; e

-(CH2)f -V-(CH2)g-, em que V é cicloalquileno C3-6, f é de 1-5 e gé 0-5, contanto que a soma de f e g seja 1-6;

<formula>formula see original document page 6</formula>

-CH-, -CiCv6 alquila)-, -CF-, -C(OH)-, 'C(C6H4-R2s)-, -N-, ou +N0";

R13 e R1.4 são independentemente selecionados do grupo queconsiste de -CH2-, -CH(Ci-6 alquila)-, -CídHC^alquila), -CH=CH- e -C{C,.6alquila)=CH-; ou R12 juntamente com um R13 adjacente, ou R12 juntamentecom um R14 adjacente, forma um grupo -CH=CH- ou um grupo -CH=C(Ci-€alquila);

a e b são independentemente, 0, 1, 2 ou 3, contanto que ambosnão sejam zero;contanto que quando R13 for-CH=CH- ou -C(Ci-e alquila)=CH-,a seja 1;

contanto que quando R14 for -CH=CH- ou -C(Ci-6 alquila)=CH-,b seja 1;

contanto que quando a for 2 ou 3, os R13S possam ser os mes-mos ou diferentes; e

contanto que quando b for 2 ou 3, os R14,s possam ser os mes-mos ou diferentes; e

quando Q for uma ligação, R1 também possa ser:

<formula>formula see original document page 7</formula>

M é -O-, -S-, S(O)- ou -S(O)2-;

X, Y e Z são independentemente selecionados do grupo queconsiste de -CH2-, -CH(Ci-6)alquila- e -C(di-(Ci-6)alquila);

R10 e R11 são independentemente selecionados do grupo queconsiste de 1-3 substituintes independentemente selecionados do grupo queconsiste de (C1-^alquila, -OR19, -O(CO)R19, -O(CO)OR21, -0(CH2)i.50R19,-O(CO)NR19R20, -NR19R20, -NR19(CO)R20, -NR19(CO)OR21,-NR19(CO)NR20R25, -NR19SO2R21, -COOR19, -CONR19R201 -COR19,-SO2NR19R20, S(0)o-2R21, -O(CH2)mo-COOR19, -O(CH2)m0CONR19R20, (Ci-6alquileno)-COOR19, -CH=CH-COOr191 -CF3, -CN, -NO2 e halogênio;

R15 e R17 são independentemente selecionados do grupo queconsiste de ^OR19, -O(CO)R19, -O(CO)OR21 e -O(CO)NR19R20; R16 e R18 sãoindependentemente selecionados do grupo que consiste de H1 (C1-6 alquila)e arila; ou R15 e R16 juntos são =0, ou R17 e R18 juntos são =0;

d é 1,2 ou 3;

h é 0, 1,2, 3 ou 4;s é O ou 1; t é O ou 1; m, η e ρ são independentemente 0-4; con-tanto que pelo menos um dentre s e t seja 1, e a soma de m, n, p, s e t seja1-6;

contanto que quando ρ for O e t for 1, a soma de m, s e η seja 1 -5; e

contanto que quando ρ for O e s for 1, a soma de m, t e η seja 1 -5;

ν é O ou 1;

j e k são independentemente 1-5, contanto que a soma de j, k e

ν seja 1-5;

e quando Q é uma ligação e R1 éR15

<formula>formula see original document page 8</formula>

pode ser também piridila, isoxazolila, furanila, pirrolila, tienila, imidazolila,pirazoüla, tiazolüa, pirazinila, pirimidinila ou piridazinila;

R19 e R20 são independentemente selecionados do grupo queconsiste de H, (Ci-6)alquila, arila e (Ci-6)alquila substituída com arila;

R21 é (C1-6)alquila, arila ou arila substituída com R24;

R22 é H, (C1^alquila, aril (C1^alquila, -C(O)R19 ou -COOR19;

R23 e R24 são independentemente grupos 1-3 independentemen-te selecionados do grupo que consiste de H, (Ci-6)alquila, (Ci.6)alcóxi,-COOH, NO2, -NR19R20, -OH e halogênio; e

R25 é H, -OH ou (Ci-6)alcóxi.

Ar2 é de preferência fenila ou R11-fenila, especialmente fenilasubstituída com (4-R11)-. Definições preferidas de R11 são alcóxi inferior, es-pecialmente metóxi, e halogênio, especialmente flúor.

Ar1 é preferivelmente, fenila ou fenila substituída com R10, espe-cialmente fenila substituída com (4-R10). Uma definição preferida de R10 éhalogênio, especialmente flúor.

Existem várias definições preferidas para a combinação de vari-áveis -R1-Q-:

Q é uma ligação e R1 é alquileno inferior, preferivelmente propileno;Q forma um grupo espiro, como acima definido, em que de pre-ferência R13 e R14 são, cada um, metileno e R12 é

<formula>formula see original document page 9</formula>

R1 é -(CH2)q

em que q é 0-6;

Q é uma ligação e R1 é R15

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que as variáveis são escolhidas de forma que R1 seja -O-CH2-CH(OH)-;

Q é uma ligação e R1 é

<formula>formula see original document page 9</formula>

em que as variáveis são escolhidas de forma que R1 seja -CH(OH)-(CH2)2-;

e

Q é uma ligação e R1 é

-CH(OH)-CH2-S(O)0-2-.

Um composto preferido de fórmula I1 portanto, é um em que G eG1 sejam como acima definido e em que as variáveis restantes tenham asseguintes definições:

Ar1 é fenila ou fenila substituída com R10, em que R10 é halogênio;

Ar2 é fenila ou fenila-R11, em que R11 é de 1 a 3 substituirites,independentemente selecionados do grupo que consiste de C-i-6 alcóxi e ha-logênio;

Q é uma ligação e R1 é alquileno inferior; Q, com o carbono daazetidinona do anel na posição 3, forma o grupo

<formula>formula see original document page 9</formula>em que, de preferência, R13 e R14 são, cada um, metileno e a e b são, cadaum, 2 e em que R12 é

Q é uma ligação e R1 é

-CH(OH)-(CH2)2-; ou

Q é uma ligação e R1 é -CH(OH)-CH2-S(O)0-2-.Variáveis preferidas para grupos G e G1 de fórmula

<formula>formula see original document page 10</formula>

são como a seguir:

R2, R3, R41 R5, R6 e R7 são independentemente selecionados dogrupo que consiste de H, (Ci-6)alquila, benzila e acetila.

Variáveis preferidas para o grupo G ouJ31 de fórmula

<formula>formula see original document page 10</formula>

são como a seguir:

R3, R3a, R4 e R4a são selecionados do grupo que consiste de H,(C1-6)alquila, benzila e acetila:

R, Ra e Rb são independentemente selecionados dentre o grupoque consiste de H, -OH, halogênio, -NH2, azido, (Ci.6)alcóxi(Ci-6)alcóxi e -W-R30, em que W é -O-C(O)- ou -O-C(O)-NR31-, R31 é H e R30 é (Ci-6)alquila,-C(0)-(Ci.4)alcóxi-(Ci-6)alquila, T, T-(Ci-6)alquila), ou T ou T-(Ci-6)alquila,onde T é substituído por um ou dois halogênios ou grupos (Ci-6)alquila.

Substituintes R30 preferidos são 2-fluorfenila, 2,4-difluorfenila,2,6-diclorofenila, 2-metilfenila, 2-tienilmetila, 2-metóxi-carboniletila, tiazol-2-il-metila, 2-furila, 2-metoxicarbonil butila e fenila. Combinações preferidas deR, Ra e Rb são como segue: 1) R, Ra e Rb são independentemente -OH ou-O-C(O)-NH-R30, especialmente onde Ra for -OH e R e Rb forem-O-C(O)-NH-R30 e R30 é selecionado dos substituintes preferidos identifica-dos acima, ou em que R e Ra são -OH e Rb é -O-C(O)-NH-R30 em que R30 é2-fluorfenila, 2,4-difluorfenila, 2,6-diclorofenila; 2) Ra é -OH1 halogênio, azidoou (Ci-eJ-alcóxKC^alcóxi, Rb é H, halogênio, azido ou (Ci.6)alcóxi(Ci-6)-alcóxi, e R é -O-C(O)-NH-R30, especialmente compostos em que Ra é -OH,Rb é H e R30 é 2-fluorfenila; 3) R, Ra e Rb são independentemente -OH ou -O-C(O)-R30 e R30 é (C1^alquila, T, ou T substituído por um ou dois halogê-nios ou grupos (Ci-6)alquila, especialmente compostos em que R é -OH e Rae Rb são -O-C(O)-R30, em que R30 é 2-furila; e 4) R, Ra e Rb são indepen-dentemente -OH ou halogênio. Três classes adicionais dos compostos pre-feridos são aquelas em que o -óxi anomérico C1' é beta, em que o óxi ano-mérico C2 é beta, e em que o grupo R é alfa.

G e G1 são de preferência selecionados dentre:

<formula>formula see original document page 11</formula>onde Ac é acetila e Ph é fenila. De preferência, R26 é H ou OH1 mais preferi-velmente, Η. O substituinte -O-G está preferivelmente na posição 4 do anelfenila ao qual está ligado.

A presente invenção também refere-se ao uso de uma 2-azetidinona substituída com açúcar, especialmente uma de fórmula I, comoo agente hipocolesterolêmico em um mamífero em necessidade de tal trata-mento.

Em um outro aspecto, a invenção refere-se a uma composiçãofarmacêutica, compreendendo uma 2-azetidinona substituída com açúcar,especialmente uma de fórmula I, em um veículo farmaceuticamente aceitá-vel.

A presente invenção também refere-se a um método de reduziros níveis de éster de colesterol hepático, um método de reduzir os níveis decolesterol no plasma, e a um método de tratar ou prevenir aterosclerose,compreendendo administrar a um mamífero em necessidade de tal trata-mento, uma quantidade eficaz de uma combinação de uma 2-azetidinonasubstituída com açúcar desta invenção, especialmente uma de fórmula I eum inibidor da biossíntese de colesterol. Ou seja, a presente invenção refe-re-se ao uso de uma 2-azetidinona substituída com açúcar, para uso combi-nado com um inibidor da biossíntese do colesterol (e, similarmente, uso deum inibidor da biossíntese do colesterol para uso combinado com uma 2-azetidinona substituída com açúcar) para tratar ou evitar aterosclerose oupara reduzir os níveis do colesterol no plasma.

Em ainda um outro aspecto, a invenção refere-se a uma compo-sição farmacêutica compreendendo uma quantidade eficaz de uma 2-azetidinona substituída com açúcar, um inibidor da biossíntese do colesterol,e um veículo farmaceuticamente aceitável. Num aspecto final, a invençãorefere-se a um kit compreendendo em um recipiente uma quantidade eficazde uma 2-azetidinona substituída com açúcar, em um veículo farmaceutica-mente aceitável, e em um recipiente separado, uma quantidade eficaz de uminibidor da biossíntese do colesterol em um veículo farmaceuticamente acei-tável.DESCRIÇÃO DETALHADA:

Como aqui usado, o termo "alquila" ou "alquila inferior" significacadeias alquila lineares ou ramificadas de 1 a 6 átomos de carbono, e "alcó-xi" do mesmo jeito, refere-se a grupos alcóxi com 1 a 6 átomos de carbono.

"Alquenila" significa cadeias de carbono lineares ou ramificadas,com uma ou mais duplas ligações na cadeia, conjugadas ou não conjuga-das. Similarmente, "alquinila" significa cadeias de carbono lineares ou ramifi-cadas, com uma ou mais triplas ligações na cadeia. Onde uma cadeia alqui-la, alquenila ou alquinila se una a duas outras variáveis, e por isso é bivalen-te, os termos alquileno, alquenileno e alquinileno são utilizados.

"Cicloalquila" significa um anel de carbono saturado de 3 a 6 á-tomos de carbono, enquanto "cicloalquileno" refere-se a um anel bivalentecorrespondente, em que os pontos de união a outros grupos inclui todos osisômeros posicionais.

"Halogênio" refere-se a radicais flúor, cloro, bromo ou iodo."Arila" significa fenila, naftila, indenila, tetrahidronaftila, ou indani-la. "Fenileno" significa um grupo fenila bivalente, incluindo substituição orto,meta e para. R24-benzila e R24-benzilóxi referem-se a radicais benzila e ben-zilóxi, que são substituídos no anel fenila.

As declarações acima, em que, por exemplo, R19, R20 e R25 sãoditos independentemente selecionados de um grupo de substituintes, signifi-ca que R19, R20 e R25 são independentemente selecionados, mas tambémque onde ocorra uma variável R19, R20 ou R25, mais de uma vez em uma mo-lécula, essas ocorrências são independentemente selecionadas (por exem-pio, se R10 é -OR19, em que R19 é hidrogênio, R11 pode ser -OR19, onde R19é alquila inferior). Os versados na técnica reconhecerão que o tamanho enatureza do(s) substituinte(s) irão afetar o número de substituintes que po-dem estar presentes.

Os compostos da invenção têm pelo menos um átomo de carbo-no assimétrico e, portanto todos os isômeros, incluindo diasteroisômeros eisômeros rotacionais são contemplados, como fazendo parte desta invenção.A invenção inclui isômeros d e I (dextrógero e levógiro) na forma pura e emmistura, incluindo misturas racêmicas. Isômeros podem ser preparados u-sando técnicas convencionais, reagindo-se materiais de partida ou optica-mente puros ou opticamente enriquecidos, ou por separação dos isômerosde um composto de fórmula I.

Os versados na técnica irão apreciar que para alguns compostosde fórmula I, um isômero irá demonstrar maior atividade farmacológica doque outros isômeros.

Os compostos da invenção com um grupo amino podem formarsais farmaceuticamente aceitáveis com ácidos orgânicos e inorgânicos. E-xemplos de ácidos adequados para formação de sal, são ácido clorídrico,sulfúrico, fosfórico, acético, cítrico, oxálico, malônico, salicílico, málico, fumá-rico, succínico, ascórbico, maléico, metanossulfônico e outros ácidos mine-rais e carboxílicos bem conhecidos aos versados na técnica. O sal é prepa-rado por contato da forma de base livre com uma quantidade suficiente doácido desejado para produzir um sal. A forma de base livre pode ser regene-rada por tratamento do sal com uma solução de base aquosa diluída ade-quada, tal como bicarbonato de sódio aquoso diluído. A forma de base livre,difere de suas respectivas formas de sal, um pouco em algumas proprieda-des físicas, tais como solubilidade em solventes polares, porém o sal é, deoutro modo, equivalente a suas formas de base livre respectivas para finali-dades desta invenção.

Alguns compostos da invenção são ácidos (por exemplo, oscompostos que possuem um grupo carboxila). Esses compostos formamsais farmaceuticamente aceitáveis com bases inorgânicas e orgânicas. E-xemplos de tais sais, são sais de sódio, potássio, cálcio, alumínio, e sais deouro e prata. Também incluem-se sais formados com aminas farmaceutica-mente aceitáveis, tais como amônia, alquil aminas, hidroxialquilaminas, N-metilglucamina e similar.

Inibidores da biossíntese do colesterol para uso na combinaçãoda presente invenção incluem inibidores HMG CoA redutase, tais como Io-vastatin, pravastatin, fluvastatin, simvastatin e CI-981; inibidores de HMGCoA sintetase, por exemplo ácido L-659.699 ((E,E-11-[3'R-(hidroximetil)-4'-oxo-2'R-oxetanil]3,5,7R-trimetil-2,4-undecadienóico; inibidores da esqualeno,sintase por exemplo, esqualestatina 1; e inibidores de esqualeno, eposidase,por exemplo, NB-598 cloridrato de ((E)-N-etil-N-(6,6-dimetil-2-hepten-4-inil)-3-[(3,3'-bitiofen-5-il)metóxi]benzeno metanamina. Inibidores de HMG CoAredutase preferidos são lovastatin, pravastatin, fluvastatin e simvastatin.

As porções 2-azetidinona de abaixamento do colesterol doscompostos de fórmula I podem ser preparadas por métodos conhecidos, porexemplo WO 93/02048 descreve a preparação dos compostos em que -R1-Q- é alquileno, alquenileno ou alquileno interrompido por um heteroátomo,fenileno ou cicloalquileno: WO 94/17038 descreve a preparação de compos-tos em que Q é um grupo espirocíclico; WO 95/08532 descreve a prepara-ção de compostos em que -R1-Q é um grupo alquileno substituído por hidró-xi; PCT/US95/03196 descreve compostos em que -R1-Q- é um alquilenosubstituído com hidróxi unido à porção Ar1 por um grupo -O- ou S(0)o-2-; e apatente U.S. n° de série 08/463.619, depositada em 5 de junho de 1995,descreve a preparação de compostos em que -R1-Q- é um grupo alquilenosubstituído com hidróxi unido ao anel azetidinona por um grupo -S(0)o-2-·

Compostos da presente invenção são geralmente preparadospor reação de um 4-(hidróxi- ou diidróxi)-fenil-2-azetidinona com um derivadode açúcar. Por exemplo, uma azetidinona de fórmula II, em que R26a é H ouOH, é reagido com um equivalente de um derivado de açúcar de fórmula III:

<formula>formula see original document page 15</formula>

em que R30 é hidrogênio ou -CNHCCI3 e as variáveis restantes são comoacima definidas para se obter um composto de fórmula IA, em que R26a é Hou OH. Para preparar um composto de fórmula IB, em que R26 é OG1, emque G1 não é H, e G é H; uma azetidinona de fórmula IiA, em que R26 é OHe R27 é um grupo de proteção hidróxi adequado, é reagida com um derivadode açúcar de fórmula IIIA, em que R30 é como acima definido, seguido porremoção do grupo de proteção R27:

<formula>formula see original document page 16</formula>

Para preparar um composto de fórmula IC, em que ambos G eG1 são iguais, mas não são H, um composto diidróxi de fórmula IIC é reagidocom um excesso de G-OR30:

<formula>formula see original document page 16</formula>

Para preparar compostos de fórmula ID1 em que G e G1 ambosnão sejam H, e não são os mesmos derivados de açúcar, um composto defórmula IA em que R26a é OH pode ser reagido com um açúcar de fórmulaG1-OR30. Alternativamente, um dos substituintes hidróxi na fenila da posição4 de um composto de fórmula IIC é protegido antes da reação com o deriva-do de açúcar a ser ligado ao grupo hidróxi desprotegido, e após reação como primeiro derivado de açúcar, o grupo protetor hidróxi é removido e o se-gundo derivado de açúcar é reagido com o grupo hidróxi previamente prote-gido. Por exemplo:

<formula>formula see original document page 16</formula>Açúcares e os derivados destes, como definido por G-OR30 e G1-OR30 são conhecidos da técnica ou são prontamente preparados por méto-dos conhecidos.

De preferência, as reações descritas acima envolvem um deri-vado de açúcar, em que os grupos hidróxi não reativos são protegidos porgrupos de proteção adequados, como definido acima para R21 R3, R3a, Re,R4a, R5 e R7, diferentes de hidrogênio, de preferência, alquila inferior, acetilaou benzila, cujos grupos podem ser removidos após a reação para prover oconjugado de açúcar. Quando as cadeias laterais da posição 1 e 3 da 2-azetidinona, incluem grupos substituintes que são reativos sob as condiçõesusadas, os citados .grupos reativos são protegidos por grupos de proteçãoadequados, antes da reação com o açúcar ou o derivado deste, e os gruposde proteção são subseqüentemente removidos. Dependendo da naturezados grupos de proteção, os grupos de proteção na porção açúcar e nas ca-deias laterais das posições 1 e 3, da azetidinona podem ser removidos emseqüência, ou simultaneamente.

Por exemplo, compostos de fórmula I em que Ar1-R1O- é Ar1-CH(OH)-(CH2)2-, ou seja, compostos de fórmula Ia e Ib, podem ser prepara-dos de acordo com o seguinte esquema de reação, em que um azetidinonade fórmula Ila é reagida com um derivado de açúcar de fórmula G-OCNHCCI3. O esquema é mostrado para um composto em que R26 é H e umgrupo específico G-OCNHCCi3 é exemplificado, porém um procedimentosimilar pode ser usado para preparar compostos em que R26 é -OG1 e paraoutros grupos G-OCNHCCi3:<formula>formula see original document page 18</formula>

Na primeira etapa, a azetidinona de fórmula íla é reagida com oderivado de açúcar de fórmula Illa na presença de um agente de acoplamen-to, tal como eterato de BF3 em um solvente inerte como CH2CI2. A reação érealizada a temperaturas de -20 a -25°C por um período de cerca de 2 ho-ras. Na segunda etapa, tanto a azetidinona substituída com açúcar de fórmu-la IV é tratada com uma base tal como trietilamina em um solvente tal comometanol e água para remover os grupos de proteção acetila e alquila paraobter um composto de fórmula Ia, como a azetidinona substituída com açú-car de fórmula IV é tratada com um reagente como KCN em um solvente, talcomo metanol, para remover os grupos de proteção acetila, porém deixandoo grupo de proteção alquila, a fim de obter um composto de fórmula lb. Ocomposto de fórmula Ib pode ser ainda reduzido com um reagente comoLiOH para obter o composto de fórmula Ia.

Compostos de fórmula I em que Ar1-R1-Q- é Ar1-(CH2)3-, ou seja,compostos de fórmula Ic, podem ser preparados de acordo com o seguinteesquema de reação, em que a azetidinona de fórmula Ilb é reagida com umderivado de açúcar de fórmula G-OH. O esquema é mostrado para um com-posto onde R26 é hidrogênio e com um grupo G-OH específico, mas um pro-cedimento similar pode ser usado para preparar compostos em que R26 é -OG1 e para outros grupos G-OH:

<formula>formula see original document page 19</formula>

Na primeira etapa, a azetidinona de fórmula Ilb é reagida comum derivado de açúcar de fórmula Illb em um solvente inerte, tal como tetra-hidrofurano na presença de n-tributilfosfina e 1,1'-(azodicarbonil)dipiperidina.A azetidinona substituída com açúcar resultante, é reduzida com um reagen-te como Pd(OH)2/C em um solvente alcoólico sob gás H2 para remover osgrupos de proteção benzila para obter um composto de fórmula I.

Materiais de partida de fórmula Ilb são conhecidos. Compostosde fórmula Ila podem ser preparados da (3-hidróxi-3-Ar1-propil)-2-azetidi-nona correspondente por tratamento com anidrido acético e dimetilaminopi-ridina (DMAP) em um solvente inerte tal como CH2CI2 para obter o compostodi-acetila correspondente, seguido por tratamento com guanidina para obtero composto 4-hidroxifenila. Materiais de partida de fórmula Il em que Ar1-R1-Q- é como definido acima para fórmula I podem ser preparados por métodossimilares ou outros métodos já conhecidos na técnica.

Materiais de partida de fórmula Illb são conhecidos na técnica oupreparados por métodos já conhecidos. Compostos de fórmula Illa são pre-parados por tratamento do composto correspondente de fórmula Illb comtricloroacetonitrila em um solvente inerte tal como CH2CI2) na presença deCs2CO3.

Os grupos reativos não envolvidos nos processos acima podemser protegidos durante as reações com grupos de proteção convencionais,que podem ser removidos por procedimentos padrão após a reação. A Tabe-la 1 a seguir mostra alguns grupos de proteção típicos:

Tabela 1

<table>table see original document page 20</column></row><table>

Verificou-se que os compostos desta invenção diminuem os ní-veis lipídicos no plasma e os níveis de éster de colesterol hepático. Verifi-cou-se que os compostos desta invenção inibem a absorção intestinal docolesterol e reduzem significantemente a formação de ésteres de colesterilano fígado em modelos de animais. Portanto, compostos desta invenção sãoagentes hipocolesterolêmicos, em virtude de sua capacidade de inibir a este-rificação e/ou absorção intestinal do colesterol; eles são portanto, úteis notratamento e prevenção de aterosclerose em mamíferos, em particular emhumanos.

Comparado com os agentes de diminuição de colesterol 2-azetidinona que não são substituídos com açúcar, os compostos desta in-venção possuem diversas vantagens farmacológicas e físicas. Os compos-tos são absorvidos numa taxa mais lenta, fornecem níveis plasmáticos maisbaixos e níveis intestinais mais altos, testes prévios indicaram o intestinocomo o provável ponto de atividade dos compostos de 2-azetidinona care-cendo de um substituinte de açúcar, ver E.J. Sybertz et al, "SCH 48461, umNovo Inibidor da Absorção de Colesterol" Athersclerosis X ed. F.P. Wood-ward et al (Elsevier, 1995) pág., 311-315; e B.G. Salisbury et al, "AtividadeHipercolesterolêmica de um Novo Inibidor da Absorção de Colesterol" A-thersclerosis, 1J5 (1995), pág., 45-63. Os compostos presentemente reivin-dicados, que são excretados na bile, propiciam liberação eficiente do com-posto ao ponto desejado, enquanto minimiza a exposição sistêmica, diminu-indo por esse meio, os problemas de toxidez potenciais.

Além do aspecto do composto, a presente invenção também re-fere-se a um método de abaixar os níveis de colesterol do plasma, cujo mé-todo compreende administrar a um mamífero em necessidade de tal trata-mento, uma quantidade hipocolesterolêmica eficaz de um composto de fór-mula I desta invenção. O composto, é, de preferência, administrado e umveículo farmaceuticamente aceitável adequado para administração oral.

A presente invenção também refere-se a uma composição far-macêutica compreendendo um composto de fórmula I desta invenção e umveículo farmaceuticamente aceitável. Os compostos de fórmula I podem seradministrados em qualquer forma de dosagem oral convencional, tal comocápsulas, comprimidos, pós, "cachets", suspensões ou soluções. As formu-lações e composições farmacêuticas podem ser preparadas com o uso deexcipientes e aditivos farmaceuticamente aceitáveis convencionais e técni-cas convencionais. Tais excipientes e aditivos farmaceuticamente aceitáveisincluem cargas compatíveis não tóxicas, aglutinantes, desintegrantes, tam-pões, conservantes, antioxidantes, lubrificantes, aromatizantes, espessan-tes, agentes de coloração, emulsificantes e similar.

A dosagem hipocolesterolêmica diária de um composto de fór-mula I é de cerca de 0,001 a cerca de 30 mg/kg de peso corporal por dia, depreferência cerca de 0,001 a cerca de 1 mg/kg. Para um peso corporal mé-dio de 70 kg, o nível de dosagem é portanto, de cerca de 0,1 a cerca de 100mg de droga por dia, administrados em uma única dose, ou doses divididasem 2 - 4 vezes. A dosagem exata, contudo, é determinada pelo clínico aten-dente e é dependente da potência do composto administrado, da idade, pe-so, condição e resposta do paciente.

Para as combinações desta invenção, em que a azetidinonasubstituída é administrada em combinação com um inibidor da biossíntesede colesterol, a dose diária típica do inibidor da biossíntese de colesterol éde 0,1 a 80 mg/kg de peso do mamífero, por dia administrado em dosagensúnicas ou divididas, normalmente uma ou duas vezes ao dia: por exemplo,para inibidores de HMG CoA redutase, cerca de 10 a cerca de 40 mg pordose é dada 1 a 2 vezes ao dia, fornecendo uma dose diária total de cercade 10 a 80 mg polipeptídeo ao dia, e para os outros inibidores da biossíntesedo colesterol, cerca de 1 a 1000 mg por dose é fornecida 1 a 2 vezes ao dia,totalizando uma dose diária de cerca de 1 mg a cerca der 2 g por dia. A doseexata de qualquer componente da combinação a ser administrada é deter-minada pelo clínico atendente e é dependente da potência do composto ad-ministrado, da idade, peso, condição e resposta do paciente.

Onde os componentes de uma combinação forem administradosseparadamente, o número de doses de cada componente ministrados pordia, pode não ser necessariamente a mesma, por exemplo, onde um com-ponente tenha uma maior duração de atividade, e precisará, portanto seradministrado com menor freqüência.

Uma vez que a presente invenção refere-se à redução dos ní-veis de colesterol no plasma, por tratamento com uma combinação dos in-gredientes ativos, em que os referidos ingredientes ativos podem ser minis-trados separadamente, a invenção também refere-se à combinação de com-posições farmacêuticas separadas na forma de kit. Ou seja, um kit está en-globado, em que duas unidades separadas são combinadas: uma composi-ção farmacêutica de inibidor da biossíntese de colesterol e uma composiçãofarmacêutica de inibidor da absorção de 2-azetidinona substituída com açú-car. O kit irá incluir preferivelmente, instruções para a administração doscomponentes separados. A forma de kit é particularmente vantajosa, quandoos componentes separados, devem ser administrados em formas de dosa-gem diferentes (por exemplo oral e parenteral) ou são administrados em in-tervalos de doses diferentes.

A seguir apresentam-se exemplos de preparação de compostosde fórmula I. Na estereoquímica relacionada, trata-se de estereoquímica re-Iativa1 a menos que observado de outra forma. Os termos eis e trans refe-rem-se às orientações relativas nas posições 3 e 4 de β-lactama.

Preparação A

1-(4-fluorfenil)-3(R)-f3(S)-acetilóxi-3-(4-fluorfenil)propim-4(S)-(4-hidroxioxifenil)-2-azetidinona

Etapa 1: 1 -(4-fluorfenil-3(R)-[3(S)-acetilóxi-3-(4-fluorfenil)-propil)]4(S)-(4-acetiloxifenil)-2-azetidinona

Adicionar anidrido acético (1,03 ml) 10,95 mmoles) a uma solu-ção à temperatura ambiente de 1-(4-fluorfenil-3(R)-[3(S)-hidróxi-3-(4-fluorfe-nil)propil]-4(S)-(4-hidroxifenil)-2-azetidinona (2,04 g, 4,98 mmoles) e dimeti-Iaminopiridina (DMAP) (1,46 g, 11,96 mmoles) em tetrahidrofurano (THF) (15ml). Após TLC (5% em CH3OH/tolueno) indicar o consumo do material departida (10 min), diluir a mistura com éter (Et2O) lavar com 1M HCI e salmou-ra, secar sobre sulfato de sódio anidro, concentrar até uma espuma clara2,47 g (100%) e usar sem ulterior purificação. RMN (400 MHz, CDCI37,33(2H, d, J=8,6 Hz), 7,27(2H, m), 7,21 (2H, m), 7,11(2H, d, J=8,5 Hz),7,02(2H, t, J=8,6 Hz), 6,94(2H, d, J=8,5Hz, 5,70(1 H, t, J=7Hz), 4,60(1 H, d,J=2,4 Hz), 3,06 (1H, dt, J= 7,9, 2,4 Hz), 2,31 (3H, s), 2,06(3H, s), 2,03(1 H,m), 1,86(21-1, Μ). HRMS (FAB): calc. para M+H: C28H25NO5F2, 493,1701; en-contrado: 493,1695.

Etapa 2: Adicionar etóxido de sódio (0,338 g, 4,97 mmoles) auma solução à temperatura ambiente de cloridrato de guanadina (0,499 g,5,22 mmoles) em CH3OH (15 ml). Após 10 min. adicionar lentamente a solu-ção resultante, por meio de pipeta, a uma solução do produto da etapa 1(2,45 g, 4,97 mmoles) em CH3OH (15 ml). Monitorar a reação por TLC (15%de EtOAc/tolueno). Eluir com o mesmo solvente para obter 1,31 g (95%) docomposto do título como um vidro. HRMS (FAB): calc. para M+H:C26H24NO4F2, 452,1673; encontrado: 452,1661.

Preparação A2

Trans-(3R.4S)-1-(4-(ben2Qil)fenil)-3-(3-feni)propin4-(4-hidróxi)fenil-2-azetidinona

Etapa 1: Submeter a refluxo uma mistura de 4-nitrobenzofenona(20,94 g, 92,2 mmoles), etilenoglicol (25,6 ml, 461 mmoles), ácido para-toluenossulfônico (0,87 g, 4,61 mmoles) e tolueno (125 ml) durante a noitecom remoção azeotrópica de água através de um coletor Dean-Stark. Res-friar a mistura para temperatura ambiente, diluir com Et2O, lavar com NaOH1N, água e salmoura, secar sobre sulfato de sódio anidro, e concentrar paraobter 24,81 g (99%) de um sólido branco, RMN (400 MHz, CDCI3): 8,18(2H,d, J=9,0 Hz), 7,12(2H, d, J=9,0 Hz), 7,50(2H, d, J=8,0 Hz), 7,34(3H, m),4,09(4H, m).

Etapa 2: Dissolver o produto da etapa 1 (24,8 g, 92 mmoles) emEtOAc (75 ml) diluir com etanol (75 ml) e submeter à purga com N2. Lavarníquel de Raney (~40g) três vezes com etanol e transferir para o frasco dereação. Hidrogenar a mistura resultante em um agitador Parr a 0,41 MPa (60psi) até que TLC (30% de EtOAc/hexanos) indique o consumo do material departida (<2h). Filtrar a mistura através de celite sob um lençol de nitrogênio.Lavar a torta de filtro com 50% de EtOAc/etanol e concentrar o filtrado paraobter 21,6 g (97%) de um sólido. RMN (400 MHz, CDCI3): 7,50 (2H, d, J=8,0Hz), 7,30 (5H, m), 6,66 (2H, d, J=8,6 Hz), 4,03(4H, m).

Etapa 3: Dissolver o produto da etapa 2 (8,49 g, 35,2 mmoles) e4-(benzilóxi)benzaldeído (7,47 g, 35,2 mmoles) em isopropanol quente (150ml). Aquecer a mistura até refluxo e deixar o isopropanol escapar até queseja obtido um volume de 75 ml. Diluir a solução resultante com hexanos(200 ml) e deixar repousar durante toda a noite. Coletar os cristais resultan-tes, lavar com hexanos e secar sob vácuo para obter 14,4 g (95%) de cris-tais brancos. RMN (400 MHz, CDCI3): 8,36 (1H, s), 7,54 (4H, m), 7,37 (8H,m), 7,08 (2H, m), 5,15(2H, s), 4,08 (4H, s). ME(CI) 436(M+H, 78), 358(39),149(100).

Etapa 4: Adicionar cloreto de 5-fenilvalerila (10,7 ml, 53,1 mmo-les) a uma solução de refluxo do produto da etapa 3 (15,4 g, 35,4 mmoles) en-tributilamina (25,3 ml, 106,3 mmoles) em tolueno (350 ml) e refluxo duran-te a noite. Resfriar a mistura à temperatura ambiente, resfriar bruscamentecom HCI a 1M, diluir com EtOAc, lavar com HCI a 1M, sal de NaHCO3, águae salmoura, secar sobre sulfato de sódio anidro e concentrar sobre gel desílica suficiente, de modo que resulte um pó que flui livremente. Introduzir opó em uma coluna de cromatografia pré-condensada com EtOAc/hexanos a20% e eluir com o mesmo solvente para obter 14 g de um sólido. Recristali-zar a partir de EtOAc/hexanos para obter 8,54 g (40% de cristais brancos.RMN (400 MHz, CDCI3): 7,30(21 H, m), 6,94 (2H, d, J=8,6 Hz), 5,03(2H, s),4,54(1 H, d, J=2,4 Hz), 4,01 (4H, s), 3,07(1 H, s), 2,63(2H, 6, J=7,0 Hz),1,92(1H, m), 1,81(3H, m).

Etapa 5: Adicionar HCI a 6N (30 ml) a uma solução do produtoda etapa 4 (4,4 g, 7,4 mmoles) em THF (120 ml). Após 7 h, diluir com EtOAc,lavar com NaHCO3 (sal) e salmoura, secar sobre sulfato de sódio anidro econcentrar para obter 4,11 g (100%) de um vidro branco. RMN (400 MHz,CDCI3): 7,72(4H, m), 7,55(1 H, m), 7,40(8H, m), 7,27(3H, m), 7,18(3H, m),6,98(2H, d, J=8,8 Hz), 5,05(2H,s), 4,65(1 H, d, J=2,44Hz), 3,16 (1H, m),2,65(2H, t, 7,6 Hz), 1,98(1H, m), 1,85(3H, m). HMRS(FAB) calc. para M+H,C38H34NO3: 552,2539, encontrado: 552,2541.

Etapa, 6: Adicionar tricloreto de dimetilsulfeto de boro (14 ml,28,3 mmoles, 2M em CH2CI2) a uma solução em temperatura ambiente doproduto da etapa 5 (1,56 g, 2,83 mmoles) em CH2CI2 (30 ml). Quando TLC(20% em EtOAc/hexano) indica o consumo do material de partida, resfriarbruscamente a reação mediante adição de sal de NaHCOs (sat.). Diluir amistura resultante com EtOAc, lavar com NaHCOs (sat.) e salmoura, secarsobre sulfato de sódio anidro e concentrar sobre sílica gel o suficiente paraque resulte um pó de livre fluxo. Introduzir o pó em uma coluna de cromato-grafia pré-condensada com EtOAc/hexanos a 33% e eluir com o mesmo sol-vente para obter 1,02 g (78%)de um vidro branco. RMN (400 MHz1 CDCI3):7,73(4H, m), 7,56 (1H, t, 7,6 Hz), 7,45 (2H, t, J=7,6 Hz), 7,34 (2H, d, J=8,6Hz), 7,28(3H, m), 7,2(2H, m),7,16(2H, d, J=7,3Hz), 6,85(2H, d, J=8,3 Hz),4,65(1 H, d, J=2,4 Hz), 3,15(1 H, m), 2,65(2H, t, J=7,6 Hz), 1,98(1H, m),1,85(3H, m).

Etapa 7: Adicionar anidrido acético (0,43 ml, 4,51 mmoles) auma solução à temperatura ambiente do produto da etapa 6 (1,61 g, 3,75mmoles) e N,N-dimetilaminopiridina (0,69 g, 5,64 mmoles) em CH2Cb (20ml). Quando TLC (30% EtOAc/hexanos) indicar o consumo do material departida, diluir com EtOAc, lavar com HCI a 1M, água e salmoura, secar sobresulfato de sódio anidro e concentrar sobre sílica gel o suficiente para queresulte um pó de livre fluxo. Introduzir o pó em uma coluna de cromatografiapré-condensada com EtOAc/hexanos a 30% e eluir com o mesmo solventepara obter 1,64 g (78%) de um vidro branco. HPLC de preparação quiral(Chiracel coluna OD, EtOH/hexanos a 20%, 65 ml/min) obteve 0,55 g do e-nanciômero A e 0,93 do enanciômero B. RMN (400 MHz1 CDCI3): 7,73(4H,m), 7,56(1 H, t, J=7,2H Hz), 7,46(2H, t, J=7,7 Hz), 7,32(6H, m),7,19(3H, m),7,12(2H, d, J=8,4 Hz), 4,70(1 H, d, J=2,44 Hz), 3,17(1 H, m), 2,67(2H, t, J=7,6Hz), 2,31 (3H, s), 1,97(1 H, m), 1,86(3H, m). MS(CI) 504(M+H, 100), 224(100).HPLC analítico (Chiracel OD, EtOH/hexanos a 20%, 1,0 ml/min) Enanciôme-ro A, Rt=16,83 min, Enanciômero B, Rt=23,83 min.

Etapa 8: Dissolver LiOH (0,098 g, 2,35 mmoles) em água (2,5ml) e adicionar a uma solução, o produto da etapa 7, enanciômero B (0,91 g,1,8 mmoles) em THF (7,5 ml). Agitar durante a noite até que TLC (30% deEtOAc/hexanos) indique o consumo dos materiais de partida. Resfriar brus-camente a reação com HCI a 1M, diluir com EtOAc, lavar com HCI a 1M,água e salmoura, secar sobre sulfato de sódio anidro e concentrar sobre síli-ca gel até que resulte um pó de livre fluxo. Introduzir o pó em uma colunacromatográfica pré-condensada com EtOAc/hexanos a 30% e eluir com omesmo solvente para obter 0,36 g (46%) de um vidro branco. HPLC analítico(Chiracel AS, 20% EtOH/hexanos, 0,5 ml/min) Rt= 26,81 min. RMN (400MHz, CDCI3): 7,77(4H, m), 7,56(1 H, t, J=7,6), 7,45(2H, t, J=7,6 Hz), 7,34(2H,d, J=8,6 Hz), 7,28(2H, m),7,21(3H, m), 7,16(2H, d, J=7 Hz), 6,85(2H, d,J=8,4 Hz), 4,65(1 H, d, J=2,4 Hz), 3,15(1H, m), 2,65(2H,. t, J=7,4 Hz),1,98(1H, m), 1,85(3H, m).

Preparação B

(2.3.4-tri-Q-acetil-D-alicoDiransil)uronato de 1 -(2.2.2-tricloroacetimidato)de metila

Adicionar Cs2CO3 (0,49 g, 1,5 mmoles) a uma solução em tem-peratura ambiente de 2,3,4-tri-O-acetil-D-glicopiranuronato de metila (5,0 g,15 mmoles) e tricloroacetonitrila (3,75 ml, 37,4 mmoles) em CH2CI2 (48 ml) eagitar durante toda a noite. Filtrar a solução marrom resultante, por um tam-pão de algodão, lavar o filtrado com água, secar sobre sulfato de sódio ani-dro e concentrar. Dissolver o resíduo em EtOAc e concentrar sobre sílica obastante para que seja obtido um pó de livre fluxo. Introduzir o pó resultanteem uma coluna de cromatografia condensada com EtOAc/hexanos a 30%.

Eluir com o mesmo solvente e retirar apenas frações mais límpidas para ob-ter 4,35 g (61%) do composto do título como um vidro. RMN (400 MHz, CD-Cl3): 8,74(1 H, s, 6,65(1 H, d, J=3,7 Hz), 5,64(1 H, 6, J=9,8 Hz), 5,27(1 H, t,J=9,5 Hz), 5,15(1 H, dd, J=3,6, 10 Hz), 4,50(1 H, d, J=10,1 Hz), 3,76(3H, s),2,06(6H,s), 2,02(3H,s).

De maneira similar preparar:

Preparação B2

1 -(2.2.2-tricloroacetimidato) de 2.3,6-tri-Q-acetil-4-0-(2.3.4.6-tetra-0-acetil-B-D-alicopiranosiD-g-D-alicòpiranosila

RMN (400 MHz, CDCI3): 8,66(1 H, s), 6,49(1 H, d, J=3,7 Hz),5,53(1 H, 6, J=10 Hz), 5,12(3H, m), 4,94(1 H, t, J=8,2 Hz), 4,53(2H, m),4,40(1 H, dd, J=4,2, 12,6 Hz), 4,12(2H, m), 4,05(1 H, dd, J=2,1, 12,5 Hz), 3,85(1 Η, 6, J=9,4 Hz), 3,67(1 Η, m), 2,12(3Η, s), 2,10(3H,s), 2,05(3H,s), 2,04(3H,s), 2,02(3H, s), 2,01 (3H, s), 2,00(3H,s).

Preparação B3

1 -(2,2.2-tricloroacetimidato) de 2.3,4,6-tetra-O-acetil-a-D-glicopiranosila

RMN (400 MHz, CDCI3): 8,70(1 H, s), 6,57(1 H, d, J=3,8 Hz),5,57(1 H, t, J=9,8 Hz), 5,19(1 H, t, J=9,8 Hz), 5,14(1 H, dd, J=3,7, 10,2 Hz),4,29(1 H, dd, J=4, 12,2 Hz), 4,22(1 H, m), 4,13(1 H, m), 2,09(3H, s), 2,06(3H,s), 2,04(3H, s), 2,03(3H, s), EM (Electrospray): 509(M+NH4).

Exemplo 1

Ácido 1 -Q-í4-ftrans-(3R.4S)-1 -(4-fluorfenil)-2-oxo-3-f3-r(S)-hidróxi-4-fluorfenil)propini-4-azetidinil1fenin-B-D-Qlicurônico

Etapa 1: Éster metílico de ácido 2,3,4-tri-0-acetil-1-0-[4[trans-(3R,4S)-3-[3-[(S)-acetilóxi-3-(4-fluorfenil)propil-1-(4-fluorfenil)-2-oxo-4-azetidinil]fenil]beta-D-glicopiranurônico

Adicionar trifluoreto eterato de boro (0,091 ml, 0,74 mmol) a umasolução a -25°C do produto da preparação A (3,33 g, 7,38 mmoles) e Prepa-ração b (4,24 g, 8,86 mmoles) em CH2CI2 (74 ml) e manter a reação a -20°Cpor 2 horas. Deixar a reação aquecer para 10°C por 2 horas. Resfriar a mis-tura com NH4CI saturado, diluir com EtOAc, lavar com NH4CI saturado, águae salmoura, secar sobre sulfato de sódio anidro e concentrar sobre sílica obastante para que seja obtido um pó de fluxo livre. Introduzir o pó resultanteem uma coluna cromatográfica condensada com EtOAc/hexanos a 40%.

Eluir com o mesmo solvente para obter 5,39 g (95%) como uma espuma.RMN (400 MHz, CDCI3): 7,26 (4H, m), 7,21 (2H, m), 7,01 (4H, m), 6,93 (2H, t,J = 8,4 MHz), 5,69 (1H, t, J = 6,7 Hz), 5,34 (2H, m), 5,29(1 H, m), 5,15(1 H, d,J=7,2 Hz), 4,56(1 H, d, J=2,1 Hz), 4,17(1 H, m), 3,73(3H, s), 3,02(1 H, dt,J=7,6, 2,3 Hz), 2,07(14H, m), 1,85(2H, m). HRMS (FAB): calc. para M+H:C39H40NOi3F2, 768,2468; encontrado: 768,2460.

Etapa 2: Dissolver o produto da etapa 1 (5,08 g, 6,98 mmoles)em uma mistura de CH3OH (127 ml) e trietilamina (Et3N) (127 ml) à tempera-tura ambiente. Adicionar água lentamente (445 ml) por um funil de adiçãodurante 10 min. de modo a manter a solução homogênea, a seguir agitar asolução amarela clara resultante, durante a noite. Resfriar uma pequena alí-quota da mistura de reação em um frasco contendo HCI a 1 M e EtOAc emonitorar o consumo do material de partida por TLC (ácido acético a 5%(HOAc)/20% CH3OH/75% CH2CI2) da camada de EtOAc. Remover o CH3OHe Et3N em um evaporador giratório, acidificar a solução restante com HCI a1M, diluir com EtOAc, e extrair com EtOAc. Combinar os extratos, lavar comHCI a 1M, água e salmoura, secar sobre sulfato de sódio anidro, e concen-trar até um sólido branco 3,82 g (93%). Dissolver o sólido em CH2CI2 e con-centrar sobre sílica o bastante de modo que seja obtido um pó de fluxo livre.Introduzir o pó resultante em uma coluna de cromatografia condensada comsílica e CH3OH/CH2CI2 a 15%. Eluir com HOAc 5%/CH3OH 15%/CH2CI280%. Concentrar as frações contendo o composto do título, submeter primei-ro à azeotropia com tolueno (3X) e a seguir com CH3OH (5X). Aquecer osólido resultante para 60°C sob vácuo para remover qualquer solvente resi-dual e obter o composto do título como um sólido branco 2,6 g (64%) RMN(400 MHz, CD3OD): 7,29(6H, m), 7,09(1 H, d, J=8,6 Hz), 6,70(4H, m),4,96(1 H, m), 4,80(1 H, d, J=2,0 Hz), 4,59(1 H, m), 3,97(1 H, d, J=9,6 Hz),3,59(1 H, m), 3,49 (2H, m), 3,09(1 H, m), 1,86(4H, m), HRMS (FAB): calc. pa-ra M+H: C30H30NO9F2, 586,1889; encontrado: 586,1883.

ExempIoIA

Ácido 1 -044-rtrans-(3R.4S)-1 -(4-iodofenil-2-oxo-3-f3-r(S)-hidróxi-4-fluorfenil)propim-4-azetidininfenin-beta-D-alicurônico

Submeter a tratamento 1-(4-iodofenil)-3(R)-[3(S)-acetilóxi-3-(4-fluorfenil)-propil)]-4-(S)-(4-hidroxioxifenil)-2-azetidinona e o produto da Pre-paração B, de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 1 para obtero composto do título. Ponto de fusão 135-137°C; FAB EM: calc. paraC30H29FINO9 NaCI m/z = 751,05. encontrado: m/z = 751,2.

Exemplo 2

1-0-f4-[trans-(3R.4S)-1-(4-fluorfenil)-4-oxo-3-f3-(S)-hidróxi-3-(4-fluorfenil)propin-2-azetidininfenin-4-0-(beta-D-alicopiranosil)-beta-D-qlicopiranose

Etapa 1:2.3.6-Tri-0-acetil-4-0-(2.3.4.6-tetra-0-acetil-B-D-qlicopi-ranosil)-1-0-[4-[trans-(3R,4S)-3-[3(S)-acetilóxi-3-(4-fluorfenil)-propil-1-(4-fluorfenil)-2-oxo-4-azetidinil]fenil]-beta-D-glicopirano

Usando um procedimento similar ao descrito no Exemplo 1, eta-pa 1, combinar o produto de Preparação A e Preparação B2 para obter ocomposto do título da Etapa 1. RMN (400 MHz, CDCI3): 7,23(6H, m),6,97(6H, m), 5,69(1 H, t, 6,6 Hz), 5,26(1 H1 t, J=9,1 Hz,), 5,11(4H, m),4,95(1 H, t, J= 8,2 Hz), 4,54(3H, m), 4,39(1 H, dd, J=4,3 12,5 Hz), 4,06(2H,m), 3,87(1 H, t, J=9,5 Hz), 3,75(1 H, m), 3,68 (1H, m), 3,02(1 H, dt, J=2,1, 7,6Hz), 2,05(26H, m), 1,85(2H, m). HRMS (FAB): calc. para M+Na:C52H57NO21 F2Na, 1092,3289; encontrado: 1092,3308.

Etapa 2: Usando um procedimento similar ao descrito no Exem-plo 1, Etapa 2, tratar o produto da Etapa 1, acima para obter o composto dotítulo do Exemplo 2. RMN (400 MHz, CD3OD: 7,29(6H, m), 7,10(2H, d, J=8,7Hz),7,01(4H, m), 4,96(1 H, sob CD3OD), 4,81 (1H, d, J=2,2 Hz), 4,60(1 H, m),4,43(1 H, d, J=7,9 Hz), 3,88(3H, m), 3,62(4H, m), 3,51 (1H, d, J=8,9 Hz),3,34(2H, m), 3,24(1 H, t, J=8,8 Hz), 3,08 (1H, m), 1,88(7H, m). EM (FAB): 756(M+Na, 70), 734(M+ 100), 716(716,20).

Exemplo 3

1-0-[4-[trans-(3R.4S)-3-[3(S)-hidróxi-3-(4-fluorfenil)propil)1-(4-fluorfenil)-2-oxo-4-azetidininfenill-B-D-Qlicopiranose

Etapa 1: 2,3,4,6-tetra-0-acetil-1 -0-[4-[trans-(45,3R)-3-[3(S)-acetilóxi-3-(4-fluorfenil)propil]-1-(4-fluorfenil)-4-oxo-2-azetidinil]fenil]-beta-D-glicopiranose

Usando um procedimento similar ao descrito no Exemplo 1, Eta-pa 1, combinar o produto de Preparação A e Preparação B3 para obter ocomposto do título da Etapa 1. RMN (400 MHz, CDCI3): 7,26(4H, m),7,20(2H, m), 7,01 (4H, m), 6,93(1 H, t, J=8,5 Hz), 5,69(1 H, t, J=6,5 Hz), 5,29 (2H,m), 5,18(1 H, t, J=9,7 Hz), 5,09(1 H1 d, J=7,3 Hz), 4,56(1 H, d, J=2,2 Hz),4,29(1 H, dd, J=5,2, 12,2Hz), 4,17(1 H, dd, J=2,2 Hz, 12,2 Hz), 3,85 1H, m),3,03(1 H, dt, J=2,1, 7,5 Hz), 2,06(17H, m), 1,85 (2H, m). HRMS (FAB): calc.para M+Na: C40H4INOi3F2Na1 804,2444; encontrado: 804,2432.

Etapa 2: Usando um procedimento similar ao descrito no Exem-plo 1, Etapa 2, tratar o produto da Etapa 1, acima, para obter o composto dotítulo do Exemplo 3. RMN (400 MHz, CD3OD): 7,29(6H, m), 7,11(2H, d,J=8,8 Hz), 6,98(4H, m), 4,89 (1H, sob CD3OD), 4,80(1 H, d, J=2,2 Hz),4,60(1 H, m), 3,88(1 H, dd, J=2,0, 12,0 Hz), 3,68(1 H1 dd, J=5,4, 12,0 Hz),3,41 (3H, m), 3,08(1 H, m), 1,86(4H, m), EM(FAB): 572(M+H, 40), 392(100).

Exemplo 4

Éster metílico de ácido 1-0-[4-[trans-(3R.4S)-1-(4-fluorfenil)-2-oxo-3-r3-r(S)-hidróxi-4-fluorfeninpropil11-4-azetidinil1fenin-beta-D-alicurônico

Adicionar KCN (0,028 g, 0,43 mmol) a uma solução à temperatu-ra ambiente do produto do Exemplo 1, Etapa 1 (0,312 g, 0,43 mmol) emCH3OH (5 ml) e agitar a mistura durante a noite. Monitorar por TLC(CH3OH/CH2CI2 a 10%); aquecer a mistura para 40°C por 2,5 h. Resfriar amistura à temperatura ambiente, concentrar sobre sílica o suficiente paraque seja obtido um pó de fluxo livre. Introduzir o pó resultante em uma colu-na de cromatografia condensada com sílica e 5% de CH3OH/CH2CI2 a 5%.

Eluir com 5% de CH3OH/CH2CI2 e coletar as frações mais puras para obter0,116 g do composto do título. RMN (400 MHz, CDCh/CDsOD): 7,16(6H, m),6,95(4H, m), 6,86(2H, t, J=8,6 Hz), 4,83(1 H, d, J=7,6 Hz), 4,56(1 H, 6,J=6,3Hz), 4,55(1 H, d, J=2,1 Hz), 3,90(1 H, d, J=9,8 Hz), 3,7(3H, s), 3,67(1 H,t, J= 9,1 Hz, 3,51 (1H, m), 3,46(1 H, t, J=9,2 Hz), 3,30(1 H, s), 2,98(1 H, m),1,80(4H, m). HRMS(FAB): calc. para M+H: CsiH32NO9F2, 600,2045; encon-trado: 600,2049.

Exemplo 5

Éster metílico de ácido 1-Q-[4-[trans-(3R.4S)-1-(4-metoxifenil)-2-oxo-3-[3-fenil) propin-4-azetidinillfenill-beta-D-glicurônico

Etapa 1: Éster metílico de ácido 2,3,4-tri-0-acetil-1-0-[4-[trans-(3R,4S)-3-[3-[(S)-acetilóxi-3-(4-fluorfenil)propil-1-(4-metoxifenil)-2-oxo-4-azetidinil]fenil]-beta-D-glicopiranurônico

Adicionar trifenilfosfina (0,19 g, 0,72 mmol) a ma solução a 0°Cde 1,1'-(azodicarbonil)dipiperdina (0,18g, 0,72 mmol) em THF (3 ml). Após10 min. adicionar (3R, 4S)-4-(4-hidroxifenil)-1-(4-metoxifenil)-3-(3-fenilpropil)-2-azetidinona (0,2 g, 0,52 mmol), seguido por metil-2,3,4-tri-0-acetil-D-glicopiranuronato (0,21 g, 0,62 mmol). Deixar a mistura aquecer à tempera-tura ambiente toda a noite. Concentrar a mistura sobre sílica o suficiente pa-ra que seja obtido um pó de fluxo livre. Introduzir o pó resultante em umacoluna de cromatografia condensada com sílica e 30% de EtOAc/hexanos.Eluir com 30-50% de EtOAc/hexanos para obter 0,198 g de material, que éulteriormente purificado por cromatografia de sílica eluindo com 20% deCH3OH/CH2CI2 para obter 0,074 g do composto do título da Etapa 1. RMN(400 MHz, CDCI3): 7,27(4H, m), 7,17(5H m), 6,98(2H, J=8,5 Hz), 6,77(2H,m), 5,30(3H, m), 5,13(1 H, d, J=7,3 Hz), 4,56(1 H, d, J=1,9 Hz), 4,17(1 H, m),3,74(3H, s), 373(3H, s), 3,04(1 H1 m), 2,64(2H, t, J=7,6 Hz), 2,05(9H, m),1,97(1 H, m), 1,82(3H, m). HRMS (FAB): calc. para M+H: C38H42NOi2:704,2707; encontrado: 704,2696.

Etapa 2: Utilizando um procedimento similar ao do Exemplo 4,tratar o produto da Etapa 1 para obter o composto do título. RMN (400 MHz,CDCI3): 7,27(4H, m), 7,17(5H, m), 7,04(2H, J+8,6 Hz), 6,75(2H, J=9,1 Hz),4,90(1 H, d, J= 7,0 Hz), 4,55(1 H, d, J=1,8 Hz), 3,98(1 H, d, J=9,7 Hz),3,88(1 H, t, J=8,6 Hz), 3,76(8H, m), 3,03(1 H, m), 2,63(2H, t, J=6,7 Hz),1,95(1H, m), 1,81(3H, m). HRMS (FAB): calc. para M+H: C32H36NO9,578,2390; encontrado: 578,2379.

Exemplo 6

Éster metílico de ácido 1-Q-f4-rtrans-(3R,4S)-1-(4-(benzoil)fenil)-2-oxo-3-f3-fenil) propiH-4-azetidininfenin-beta-D-qlicurônico

Etapa 1: Éster metílico de ácido 2,3,4-tri-0-acetil-1-0-[4-[trans-(3R,4S)-1-(4-(benzoil)fenil)-2-oxo-3-(3-fenil)propil]-4-azetidinil]fenil]beta-D-glicurônico

De modo similar ao Exemplo 5, Etapa 1, tratar (3R,4S)-1-(4-benzoilfenil)-4-(4-hidroxifenil)-3-(3-fenilpropil)-2-azetidinona e metil-2,3,4-tri-O-acetil-D-glicopiranuronato para obter o composto do título da etapa 1.RMN (400 MHz, CDCI3): 7,73(4H, m), 7,57(1 H, t, J=7,0 Hz), 7,46(2H, t, J+8,0Hz), 7,30(6H, m), 7,21(1H, d, J=7,1 Hz), 7,16(2H, d, J=8,0 Hz), 7,01(2H, d,J=8,5 Hz), 5,31 (3H, m), 5,15(1 H, d, J=7,3 Hz), 4,67 (1H, d, J=2,2 Hz),4,17(1 H, dd, J=2,7, 6,7 Hz), 3,73(3H, s), 3,14 (1H, m), 2,66(2H, t, J=7,4 Hz),2,06(9H, m), 1,98(1H, m), 1,85(3H, m). HRMS(FAB): calc. para M+H:C44H44NOi2, 778,2864; encontrado: 778,2849.Etapa 2: Usando um procedimento similar ao do Exemplo 4, tra-tar o produto da Etapa 1 para obter o composto do título. RMN (400 MHz,CDCI3): 7,72(2H, sobreposição d, J=8,6, 7,6 Hz), 7,56(1 H, t, J=7,6 Hz),7,45(1 H1 t, 0=7,1 Hz),7,30(6H, m), 7,20(1 H, d, J=7,0 Hz), 7,16(2H, d, J=7,6Hz), 7,08(2H, d, J=8,6 Hz), 4,93 (1H, d, J=7,0 Hz), 4,67 (1H, dd, J=2,1 Hz),3,99(1 H, d, J=9,8 Hz), 3,88(1 H, t, J=8,6 Hz), 3,81 (3H, s), 3,73(2H, m),3,14(1 H, m), 2,65(2H, t, J=7,6 Hz), 1,98(1H, m), 1,84(3H, m). HRMS (FAB):calc. para M+H: C38H38NO9, 652,2547; encontrado: 652,2528.

Exemplo 7

1 -0-[4-[Trans-(3R.4S)-1 -(4-metoxifenil)-2-oxo-3-r3-fenil) propilH-azetidinillfenin-beta-D-qlicopiranose

Etapa 1: 1-0-[4-[trans-(3R,4S)-1-(4-metoxifenil)-2-oxo-3-[3-fenil-propil]-4-azetidinil]fenil]-2,3,4,6-tetra-0-(fenilmetil)-beta-D-glicopiranose

Adicionar n-tributilfosfina (1,45 ml, 5,81 mmoles) a uma soluçãoa 0°C de 1,1'-(azodicarbonil)dipiperdina (1,47 g, 5,81 mmoles) em THF (30ml). Após 5 min. adicionar (3R,4S)-4-(4-hidroxifenil)-1-(4-metóxi-fenil)-3-(3-fenilpropil)-2-azetidinona (1,5 g, 3,87 mmoles) seguido por 2,3,4,6-tetra-O-benzil-D-glicopiranose (2,72 g, 5,03 mmoles). A reação torna-se muito es-pessa, e THF adicional é adicionado para facilitar a agitação (30 ml); a mis-tura é deixada aquecer à temperatura ambiente durante toda a noite. Filtrar amistura por celite, lavar a torta de filtro com EtOAc, e concentrar o filtradosobre sílica o bastante para que seja obtido um pó de fluxo livre. Introduzir opó resultante em uma coluna de cromatografia condensada com sílica e 5%de EtOAc/tolueno. Eluir com o mesmo solvente para obter 3,57 g (-100%)do composto do título da Etapa 1 como um xarope espesso. RMN (400 MHz,CDCI3): 7,16(19H, m), 7,19(10H, m), 7,04(2H, d, J=8,7 Hz), 6,76(2H, d, J=9,2Hz), 4,98(3H, m), 4,83(3H, m), 4,55(4H, m), 3,70(9H, m), 3,05(1 H, m),2,65(2H, t, J=7,3 Hz), 1,96(1H, m), 1,83(3H, m). EM (FAB): 910(M+, 55),568(40, 478(100), 386(55).

Etapa 2: Dissolver o produto da Etapa 1 (0,20 g, 0,35 mmol) emCH3OH (4,5 ml) diluir com EtOAc (4,5 ml) e submeter à purga com nitrogê-nio. Adicionar 20% de Pd(OH2) em carvão (0,35), purgar a mistura resultantecom hidrogênio (3X) e a seguir, agitar sob um balão de hidrogênio durante anoite. Filtrar a mistura por celite e lavar a torta de filtro com EtOAc, seguidopor CH3OH. Concentrar o filtrado até uma espuma clara 0,161 g (83% bruto).Purificar a espuma mais ainda por cromatografia de sílica eluindo com 5%de CH3OH/EtOAc para obter 0,127 g (66% do composto do título como umpó branco. RMN (400 MHz, CD3OD): 7,18(11H, m), 6,78(2H, d, J=8,9 H),4,88(2H, parcialmente obscurecido por CD3OD): 4,72(1 H, d, J=1,2 Hz),3,88(1 H, d, J=11,7 Hz), 3,70(4H, m), 3,41 (4H, m), 3,03(1 H, m), 2,60(2H, t,J=7,0 Hz), 1,79(4H, m). HRMS (FAB): calc. para M+H: C3iH36N08, 550,2441;encontrado: 500,2424.

Exemplo 8

Ácido 1 -0-f4-ftrans-(3R.4S)-1 -(4-metóxifenil)-2-oxo-3-(3-fenilpropil)-4-azetidi-ninfenin-beta-D-qlicurônico

Etapa 1: Éster benzílico de ácido 2,3,4-tri-O-benziM -0-[4-[trans-(3R,4S)-1 -(4-fluorfenil)-2-oxo-3-[3-[(S)-hidróxi-4-fluorfenil)propil]-4-azetidinil]fenil]-beta-D-glicurônico

Utilizar (3R,4S)-4-(4-hidroxifenil)-1 -(4-metóxi-fenil)-3-(3-fenilpro-pil)-2-azetidinona e 2,3,4-tri-O-benzil-D-glicopiranuronato de benzila em umprocedimento similar ao descrito no Exemplo 7, Etapa 1, para obter o com-posto do título da Etapa 1. RMN (400 MHz, CDCI3): 7,22(29H, m), 7,01 (2H,d, J=8,7 Hz), 6,77(2H, d, J=9,1 Hz), 5,15(2H, aprox. d, J=3,8 Hz), 5,01 (1H, d,J=7,2 Hz), 4,97(1 H, d, J=11 Hz), 4,90(1 H, d, J=11 Hz), 4,80(2H, d, J=11 Hz),4,74(1 H, d, J=10,7 Hz), 4,56(1 H, d, J=2,2 Hz), 4,50(1 H, d, J=10,7 Hz),4,04(1 H, d, J=9,6 Hz), 3,93(1 H, t, J=8,6 Hz), 3,73(5H, m), 3,05(1 H, m),2,65(2H, t, J=7,6 Hz), 1,96(1H, m), 1,83(3H, m). HRMS (FAB): calc. paraM+H: C59H58NO9: 924,4112; encontrado 924,4119.

Etapa 2: Utilizando um procedimento similar ao Exemplo 7, Eta-pa 2, tratar o produto da Etapa 1 para obter o composto do título do Exemplo8. RMN (400 MHz, CD3OD): 7,31 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,21 (7H, m), 7,09(2H, d,J=8,7 Hz), 7,81 (2H, d, J=8,9 Hz), 4,97(1 H, dd, J=1,9, 5,5 Hz), 4,76 (1H, d,J=2,0 Hz), 3,97(1 H, d, J=9,7 Hz), 3,72(3H, s), 3,60(1 H, m), 3,49(2H, m),3,08(1 H, m), 2,64(1 H, t, J=7,2 Hz), 1,83(4H, m). HRMS (FAB): calc. paraΜ+Η: CsiH34NO9 564,2234; encontrado: 564,2242.

Exemplo 9

1-Metil-6-0-f4-ftrans-(3R,4S)-1-(4-metoxifenil)-2-oxo-3-(3-fenilDroDil1-4-azetidinil1fenin-alfa-D-alicopiranosídeo

Etapa 1: 1-Metil-2,3,4-tri-0-benzil-6-0-[4-[trans-(3R,4S)-1-(4-metoxifenil)-2-oxo-3-(3-fenilpropil)-4-azetidinil]fenil]-alfa-D-glicopiranosídeo

Utilizar (3R,4S)-4-(4-hidroxifenil)-1-(4-metoxifenil)-3-(3-fenilpro-pil)-2-azetidinona e metil 2,3,4-tri-O-benzil-D-glicopiranosídeo em um proce-dimento similar ao descrito no Exemplo 7, etapa 1, para obter o composto dotítulo da Etapa 1. RMN (400 MHz, CDCI3): 7,26(24H, m), 6,85(2H, d, J=8,6Hz), 6,74(2H, d, J=9 Hz), 5,01 (1H, d, J=10,7 Hz), 4,86(1 H, d, J=H1O Hz),4,85(1 H, d, J=10,7 Hz), 4,82(1H, d, J=12,1 Hz),4,69 (1H, d, J=12,1 Hz),4,63(1 H, d, J=3,6 Hz), 4,54(1 H, d, J=2,3 Hz), 4,51(1 H1 d, J=11,0 Hz),4,09(2H, d, J=2,8 Hz), 4,03(1 H, t, J=9,6 Hz), 3,90(1 H, d, J=10,1 Hz),3,72(3H, s), 3,60(1 H, dd, J=3,6, 9,6 Hz), 3,38(3H, s), 3,06(1 H, m), 2,64(2H, t,J=7,6 Hz), 1,97(1 H, m), 1,83(3H, m).

Etapa 2: Utilizando um procedimento similar ao Exemplo 7, Eta-pa 2, tratar o produto da Etapa 1 para obter o composto do título do Exemplo9. RMN (400 MHz, CDCI3): 7,22(9H, m), 6,94(2H, d, J=8,6 Hz), 6,76(2H, d,J=8,9 Hz), 4,81 (1H, d, J=3,9 Hz), 4,54(1 H, d, J=2,2 Hz), 4,22(2H, m),3,97(1 H, m), 3,71 (5H, m), 3,56(1 H, dd, J=3,9, 9,1 Hz), 3,44(3H, s), 3,06(1 H,m), 2,64(2H, d, J=7,4 Hz), 1,91(1H, m), 1,82(3H, m). HRMS (FAB): calc. paraM+H: C32H38NO8 564,2597, encontrado: 564,2578.

Exemplo 10

Ácido 1 -Q-í4-ftrans-(3R.4S)-1 -(4-(benzoinfenilV2-oxo-3-(3-fenil) propilM-azetidinilIfenin-beta-D-glicurônico

Adicionar LiOH (0,6 ml, 0,6 mmol, 1M) a uma solução em tempe-ratura ambiente do produto do Exemplo 6 (0,064 g, 0,1 mmol) em THF (2ml). Após 50 min. diluir a mistura com EtOAc, resfriar bruscamente com HCI(1 M), lavar com HCI (1M) e salmoura, secar sobre sulfato de sódio anidro econcentrar até uma espuma branca 0,60 g (97%). RMN (400 MHz, CD3OD):7,67(4H, m), 7,60(1 H, m), 7,48(3H, m), 7,36(2H, d, J=8,8Hz) 7,34(2H, d, J=-8,8Hz, 7,23(2H, m), 7,14(2H, d, J=7,5 Hz), 7,10(2H, d, J=8,7 Hz), 4,97(1 H,m), 4,87(1 H, d, J=2,2Hz), 3,97(1 H, d, J=9,7 Hz), 3,60(1 H, m), 3,49(2H, m),3,17(1 H, m), 2,63(2H, t, J=7,4 Hz), 1,89 (1H, m), 1,81(3H, m). HRMS (FAB):calc. para M+H: C37H36NO9 638,2390; encontrado: 638,2377.

Exemplo 11

Ácido 1 -Q-f4-ftrans-(3R.4S)-1 -(4-flüorfenin-2-oxo-3-r3-r(S)-hidróxi-4-iodofenil)propil]]-4-azetidinil]fenin-beta-D-alicurônico

Etapa 1: Condensar 1-(4-fluorfenil)-3(R)-[3(S)-acetilóxi-3-(4-bromofenil)propil)]-4-(S)-(4-hidroxifenil)-2-azetidinona e o produto da Prepa-ração B com trifluoreto eterato de boro, de acordo com o procedimento des-crito no Exemplo 1. A uma solução do tetraacetato resultante (250 mg, 0,30mmol) em CH3OH (2 ml) resfriado para O0C, adicionar KCN (10 mg, 0,15mmol) e agitar à temperatura ambiente por 2 horas, a seguir aquecer para45°C, por 4,5 horas. Resfriar a mistura à temperatura ambiente e dividir en-tre água (20 ml) e EtOAc (30 ml). Lavar a camada de EtOAc com água esalmoura, secar (Na2SO4) e concentrar em vácuo. Adsorver o resíduo (230mg) sobre SiO2 e cromatografar sobre SiO2 (25 g), eluir com 2% de CH3OHem CH2CI2 aumentando para 10% de CH3OH em CH2CI2 para obter, apósconcentração, 84 mg (43%) do brometo de arila como um sólido.

Etapa 2: Ao prpduto da etapa 1 (25 mg, 0,038 mmol) dissolvidoem DMF desgaseifiçado (0,4 ml), adicionar hexabutil-di-estanho (220 mg, 38mmoles) e tetraquis paládio trifenilfosfina (4,4 mg, 0,0038 mmol) e aquecer amistura para 95°C sob argônio por 5 horas. Resfriar a reação, concentrar emvácuo e adsorver o resíduo resultante diretamente sobre SiO2.

Cromatografar sobre SiO2 (4 g), eluir com CH2CI2, aumentandopara 10% de CH3OH em CH2CI2. Cromatografar novamente a fração deseja-da como acima e após concentração obter 7,4 mg (22%) do aril estananodesejado como um sólido ceroso.

Etapa 3: Ao produto da etapa 2 (11,8 mg, 0,0135 mmol) dissolvi-do em CH3OH (2 ml) contendo tampão de fosfato (0,3 ml), pH 5,8, adicionaruma solução de Nal a 1M em água (14 ml, 0,014 mmol). A esta mistura adi-cionar 68 contas de iodo (iodobeads®) (-37 mmoles) e agitar suavemente amistura resultante por 2,5 h à temperatura ambiente. Filtrar as contas de io-do e lavar com EtOH e uma pequena quantidade de éter. Concentrar o filtra-do e dividir o resíduo entre EtOAc e Na2SO3 aquoso a 10%. Secar a camadade EtOAc (MgSO4) e concentrar em vácuo. Adsorver o resíduo sobre SiO2 ecromatografar sobre SiO2 (2 g), eluir com CH2CI2 progredindo para 6% deCH3OH em cloreto de acetileno. Concentrar as frações apropriadas para ob-ter 6,1 mg (64%) do éster metílico do composto do título como um sólido.

Etapa 4: Agitar uma solução do produto da etapa 3 (6,1 mg, 8,6mmoles) em uma mistura de água (0,7 ml), trietilamina (0,2 ml) e CH3OH(0,1 ml) à temperatura ambiente por 30 min. Concentrar a mistura em vácuopara obter 5 mg (83%) do composto do título como um sólido. Ponto de fu-são: 157 - 159°C, FAB EM cale. para C30H30FINO9 m/z = 694,1, encontradom/z = 694,1.

As formulações a seguir exemplificam algumas das formas dedosagem desta invenção. Em cada uma, o termo "composto ativo" designaum composto de fórmula I.

EXEMPLO A - Comprimidos

<table>table see original document page 37</column></row><table>

Misturar itens n— 1 e 2 em um misturador adequado por 10 a 15minutos. Granular a mistura com item n2 3. Triturar os grânulos úmidos poruma peneira grossa (por exemplo, 0,63 cm (%")), caso necessário. Secar osgrânulos úmidos. Peneirar os grânulos secos, caso necessário, e misturarcom o item 4, por 10 - 15 minutos. Adicionar item n2 5 e misturar por 1- 3minutos. Prensar a mistura até o tamanho apropriado e pesar em uma má-quina para comprimido adequada.

EXEMPLO B - Cápsulas

<table>table see original document page 38</column></row><table>

Método de Fabricação

Misturar itens n— 1, 2 e 3 em um misturador adequado por 10 a15 minutos. Adicionar item n- 4 e misturar por 1-3 minutos. Encher a misturaem cápsulas de gelatina dura de dois compartimentos adequadas em umamáquina de encapsulação apropriada.

Formulações representativas compreendendo um inibidor dabiossíntese do colesterol são bem conhecidas na técnica. Contempla-se queonde os dois ingredientes ativos são ministrados, como uma composiçãoúnica, as formas de dosagem apresentadas acima para compostos de azeti-dinona substituídos podem ser prontamente modificadas usando o conheci-mento de uma pessoa versada na técnica.

A atividade in vivo dos compostos de fórmula I pode ser deter-minada pelo seguinte procedimento.

Teste In Vivo de Agentes Hipolipidêmicos Usando Cobaia (Hamster) Hiperli-pidêmico

Os hamsters são separados em grupos de seis e lhes é dadauma dieta de colesterol controlada (Ração Purina n° 5001 contendo coleste-rol a 0,5%) por sete dias. O consumo da dieta é monitorado para determinara exposição do colesterol da dieta na presença dos compostos de teste. Osanimais são dosados com o composto de teste uma vez ao dia, começandocom o início da dieta. A dosagem se faz por administração oral de 0,2 ml deóleo de milho apenas (grupo de controle) ou solução (ou suspensão) docomposto de teste em óleo de milho. Todos os animais moribundos ou emfracas condições físicas são submetidos à eutanásia. Após sete dias, os a-nimais são anestesiados por injeção intramuscular de quetamina e sacrifica-dos por decapitação. O sangue é coletado em tubos Vacutainer® contendoEDTA para a análise de colesterol total no plasma e de triglicerídeo e o fíga-do excisado para análise do tecido quanto a colesterol livre e esterificado e atriglicerídeo. Os dados são relatados como redução percentual do colesterolplasmático e ésteres de colesterol hepáticos, versus níveis de controle.

Utilizando os procedimentos de teste descritos acima, os seguin-tes dados in vivo foram obtidos para compostos de fórmula I. Os dados sãorelatados como alteração percentual (ou seja redução percentual no coleste-rol do plasma e em ésteres de colesterol hepático) versus controle, portanto,números negativos indicam um efeito de baixamento do colesterol positivo.Para compostos racêmicos, de fórmula I ou diastereoisômeros ativos, ouenanciômeros dos compostos de fórmula I, os compostos administrados adoses de 3 a 10 mg/kg demonstram uma faixa de O a -98% de redução nosésteres de colesterol hepático, enquanto compostos ministrados a dosagensde 0,001 a 1 mg/kg demonstram uma faixa de redução de -19 a -94% emésteres de colesterol hepático. Os compostos de preferência mostram umafaixa de -50 a -98% de redução em ésteres de colesterol hepático a umafaixa de dosagem de 0,01 a 1 mg/kg.

Claims (5)

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser 2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-0-[4-[trans-(4S,3R)-3-[3(S)-acetiloxi-3-(4-fluorfenil)propil-1-(4-fluorfe-nil)-4-oxo-2-azetidinyl]fenil]- Beta-D-glicopiranose da fórmula:

2. Composição farmacêutica para o tratamento ou prevenção daaterosclerose, ou para a redução dos níveis de colesterol, caracterizada pelofato de que compreende um composto, como definido na reivindicação 1, eum veículo farmaceuticamente aceitável.

3. Composição de acordo com a reivindicação 2, caracterizadapelo fato de que compreende ainda um inibidor da biossíntese do colesterolselecionado a partir de inibidores HMG CoA redutase, inibidores de HMGCoA sintetase, inibidores da esqualeno sintase e inibidores de esqualenoeposidase.

4. Composição de acordo com a reivindicação 3, caracterizadapelo fato de que o referido inibidor é lovastatin, pravastatin, fluvastatin, sim-vastatin, CI-981,. ácido L-659.699 ((Ε,Ε-11-[3'R-(hidroximetil)-4'-oxo-2'R-oxetanil]-3,5,7-R-trimetil-2,4-undecadienóico), esqualestatina 1 ou NB-598cloridrato de ((E)-N-etil-N-(6,6-dimetil-2-hepten-4-inil)-3-[(3,3'-bitiofen-5-il)metóxi]benzeno metanamina.

5. Kit, caracterizado pelo fato de que compreende em recipientesseparados, em uma única embalagem, composições farmacêuticas parauso, em combinação, no tratamento ou prevenção da aterosclerose, ouredução dos níveis do colesterol, o qual compreende em um recipiente umaquantidade eficaz de um inibidor da biossíntese do colesterol, como definidona reivindicação 3 ou 4, em um veículo farmaceuticamente aceitável e, nosegundo recipiente, uma quantidade eficaz de um composto, como definidoem na reivindicação 1, em um veículo farmaceuticamente aceitável.