BE1032491B1 - Synthèse de traceurs à plusieurs passages sur cassette - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne une cassette (1) pour synthétiser une pluralité de lots en série d'un seul radiotraceur marqué au [18F], caractérisée en ce que ladite cassette comprend : - une et une seule cartouche échangeuse d'anions; - un flacon d'éluant en vrac (3) contenant une partie aliquote d'éluant pour chaque lot ; - au moins une cuve de réaction (4) ; - des flacons de réactifs en vrac (5,5',5'',5''',5''''), chaque flacon contenant une partie aliquote de réactif ou de solvant pour chaque lot ; - éventuellement, une cartouche d'extraction en phase solide, ou EPS, pour d'autres étapes chimiques telles que l'hydrolyse ou la réduction (6) et/ou la purification (7) ; - des moyens de rinçage de la cartouche échangeuse d'anions et du reste de la cassette entre deux passages consécutifs afin d'éviter toute contamination croisée.

Description

1 BE2024/51 78

SYNTHÈSE DE TRACEURS À PLUSIEURS PASSAGES SUR CASSETTES

Domaine technique de l'invention

[0001] L'invention concerne le domaine de la synthèse chimique. Plus particulièrement, cette invention concerne l'équipement et les méthodes conçus pour la production automatisée de composés marqués avec ‘$F. L'accent principal de cette innovation réside dans la production automatisée de lots multiples de composés marqués au 18F, en utilisant une seule cassette jetable, et plus spécifiquement, un système innovant pour capturer et libérer le fluorure de 18F.

Contexte et art antérieur

[0002] La tomographie par émission de positons (TEP) est une technique d'imagerie utile qui permet de produire des images tridimensionnelles des processus en cours dans l'organisme. La TEP mesure la fonction physiologique en observant le flux sanguin, le métabolisme, les neurotransmetteurs et les agents radiomarqués. Cette technique d'imagerie est basée sur la détection indirecte des rayons gamma et des radiations émises par unplu agent radioactif injecté dans le corps. [0003 De tous les émetteurs de positons disponibles pour la TEP, le fluor-18 (['*F]) est le plus idéal en raison de son schéma de désintégration favorable. La demi- vie de ce radionucléide (110 min) laisse le temps d'effectuer une réaction de radiomarquage en plusieurs étapes et d'acheminer des traceurs marqués au [13F] vers des sites d'utilisation éloignés. En outre, la courte portée des positons (2,3 mm) dans les tissus et le processus de désintégration idéal (97% d'émission de positons) contribuent à offrir des images à haute résolution. Par conséquent, la grande majorité des traceurs

TEP utilisés en clinique sont des molécules marquées au [13F]. Le traceur TEP le plus courant contenant du fluor-18 est le 2-désoxy-2-["*F]fluoroglucose ou ['F]fluorodéoxyglucose (['SFJFDG), un analogue du glucose dont le substituant hydroxyle en position deux a été remplacé par son bioisostère, le fluor-18, qui est largement utilisé en oncologie.

2 BE2024/51 78

[0004] Les réactions modernes de fluoration utilisent des sources nucléophiles, électrophiles ou radicales de fluor, avec un solide succès démontré au cours des 15 dernières années environ. Les premières tentatives étaient basées sur des réactions de fluoration électrophile, ce qui est une approche acceptable pour la synthèse de composés de grande valeur, bien que les réactifs de fluoration électrophile soient plus coûteux que le fluorure. Cependant, les réactifs de fluoration électrophile [°F] ne sont pas aussi facilement accessibles. Par exemple, le [13F]-fluorure nucléophile sans addition de porteur (s.a.p., c'est-à-dire sans addition exogène de fluor-19, inactif en TEP) est produit en solution aqueuse par un cyclotron et est beaucoup plus pratique à fabriquer et à manipuler que le gaz hautement réactif ["°F]F, avec addition de porteur (a.a.p.). Alors que le fluorure de F1? est produit par bombardement de protons sur de l'eau lourde, le gaz ['3F]F2 doit être produit à partir d'un échange isotopique 19F/13F entre le gaz porteur F2 et Me['3FJF en appliquant une décharge électrique à haute tension, ce qui est plus encombrant et n'est pas disponible dans tous les cyclotrons. Les principales differences entre ces deux formes chimiques, le ["°F]F2 électrophile et le [13F]-fluorure nucléophile, sont l'activité spécifique (AS = radioactivité/mol) de l'isotope [13F] produit.

Le [!3F]-fluorure nucléophile est produit par la réaction nucléaire efficace 13O(p,n)13F pour donner une grande quantité de radioactivité (>370 GBq/lot) et avec une activité spécifique de l'ordre de 102 GBa/umol, tandis que le ["°F]F2 électrophile a une activité spécifique beaucoup plus faible (100-600 MBq/umol) (O. Jacobson, D.O. Kiesewetter,

X. Chen, Fluorine-18 Radiochemistry, Labeling Strategies and Synthetic, Bioconjugate

Chem. 2015, 26, 1-18).

[0005] Après irradiation, l'anion [‘°F]-fluorure produit est généralement dirigé vers un matériau échangeur d'anions, où le [13F]-fluorure est piégé, tandis que l'eau enrichie en [130] est recueillie. Les radiofluorations sont généralement effectuées en présence de bases faiblement nucléophiles (typiquement des ions carbonate ou bicarbonate). Le [13F] est donc généralement libéré de la résine échangeuse d'anions à l'aide d'un éluant tel que K2CO3 . Bien que l'ion fluorure soit un nucléophile puissant, il forme en solution aqueuse des liaisons hydrogène avec les molécules d'eau environnantes et ne réagit pas à la substitution nucléophile. Pour réaliser la fluoration nucléophile, le ["°F]-fluorure doit être substantiellement déshydraté par évaporation de l'eau et par des réactions de déplacement ultérieures menées dans des solvants organiques aprotiques polaires. La solubilité et la nucléophilie de l'ion fluorure dans les solvants organiques sont renforcées par l'ajout à l'éluant d'un catalyseur de transfert de phase (CTP), tel que les complexes de potassium cryptand Kryptofix222®, ou d'un cation

3 BE2024/51 78 tétrabutylammonium volumineux. L'élimination de l'eau est ensuite facilitée par la distillation azéotropique de l'eau à l'aide de CH3:CN.

[0006] Une fois le processus de séchage terminé, le fluorure peut être introduit par un mécanisme SN2 dans des positions aliphatiques ou par substitution aromatique nucléophile (SNAr) dans des molécules aromatiques. Une large gamme de précurseurs, de groupes partants et de conditions de réaction peut être utilisée pour la substitution nucléophile du [‘*F]-fluorure. Les solvants aprotiques dipolaires tels que le diméthylsulfoxyde (DMSO), le N,N-diméthylformamide (DMF), le diméthylacétamide et

CH3sCN sont les solvants préférés. D'autre part, plusieurs publications décrivent la substitution nucléophile à l'aide des solvants protiques polaires que sont le t-butanol et le tamylalcool, et certaines dans lesquelles l'ajout d'un faible pourcentage d'eau améliore les rendements. L'optimisation des conditions pour une synthèse radiochimique particulière nécessitera l'exploration du solvant, de la température, du contre-ion et de la concentration (R. Halder, T. Ritter, 18F-Fluorination : Challenge and Opportunity for

Organic Chemists, J. Org. Chem. 2021, 86, 13873-13884). Après la fluoration, d'autres étapes chimiques peuvent être nécessaires pour obtenir le traceur radiomarqué souhaité, comme l'hydrolyse acide ou basique d'une partie de la molécule, l'extraction en phase solide (EPS) ou la chromatographie liquide à haute performance (CLHP), la purification intermédiaire ou finale, avant la formulation finale et la stérilisation.

[0007] Les substances radiomarquées destinées à l'imagerie in vivo sont généralement fabriquées à l'aide de synthétiseurs automatisés. Ces synthétiseurs, qui sont facilement disponibles sur le marché, sont des machines sophistiquées conçues pour la production de traceurs. Ils réduisent au minimum l'intervention directe de l'opérateur et l'exposition aux rayonnements, garantissant ainsi la sécurité du personnel contre les risques d'irradiation. En outre, les synthétiseurs automatisés pour le radiomarquage jouent un rôle essentiel en assurant une bonne reproductibilité et en respectant les lignes directrices des BPF, garantissant ainsi la cohérence et la qualité du processus de production pour les diagnostics médicaux et les produits thérapeutiques essentiels, dans la recherche et la production de routine.

[0008] Les appareils de synthèse automatisés peuvent être subdivisés en deux catégories principales. Les premiers sont les systèmes stationnaires où toutes les connexions des tubes (plomberie) et des vannes sont permanentes et ne sont pas modifiées au cours du fonctionnement quotidien (synthétiseurs dits "à tubes fixes"). Le nettoyage consiste à rincer tous les récipients et les tuyaux de raccordement avec des solvants sans les retirer de l'appareil. C'est ce qu'on appelle généralement une

4 BE2024/51 78 procédure de "nettoyage en place" (NEP). La procédure NEP nécessite une validation approfondie pour garantir la sécurité des niveaux de solvants de nettoyage et l'absence de contamination croisée entre les lots. En pratique, pour des raisons de radioprotection, ces systèmes ne sont normalement utilisés qu'une fois par jour, car les niveaux de rayonnement après le nettoyage sont encore élevés pour permettre de recharger les produits chimiques, les cartouches, etc. en toute sécurité.

[0009] Dans d'autres types de systèmes automatisés, toutes les étapes chimiques se déroulent dans une cassette de traitement jetable (kit jetable). La cassette doit être remplacée après chaque lot avec une procédure "sans nettoyage”. Une cassette entièrement jetable contient des flacons de réactifs, des tubes, des seringues et des valves assemblés sur la plate-forme stationnaire. La cassette est connectée aux seringues et à l'entrée de radioactivité. Dans les modules susmentionnés, la cassette ne pouvait pas être retirée à distance après la synthèse en raison des précautions à prendre en matière de radiations, ce qui entraînait des limitations. Pour surmonter ces difficultés, une séquence de nettoyage post-exécution est aujourd'hui couramment introduite pour éliminer la plus grande partie de l'activité restante. Mais même dans ce cas, des périodes de désintégration de plusieurs heures sont susceptibles d'être observées, avant que l'activité résiduelle ne soit tombée en dessous d'une limite de sécurité permettant de manipuler la cassette sans danger. Cela constitue une limitation importante lorsqu'il est nécessaire de produire plusieurs lots au cours d'une même journée.

[0010] En raison de l'augmentation constante de la demande médicale de [8F]FDG, une installation de production de ["°F]FDG typique génère au moins deux lots de ["°F]FDG par jour. En raison de l'activité résiduelle susmentionnée qui reste sur les cassettes et les lignes de transfert après l'achèvement d'un lot, il n'est pas possible, pour des raisons de sécurité, d'effectuer des passes successives sur le même équipement.

Pour produire un deuxième lot de ["°F]FDG le même jour à l'aide de ce procédé, il faut un deuxième appareil dans une cellule chaude séparée, ce qui est souvent peu pratique et financièrement difficile. II serait donc avantageux de mettre au point une méthode permettant de produire plusieurs lots d'un traceur radiomarqué, tel que le ["°F]FDG, dans une seule cellule chaude le même jour.

[0011] Pour résoudre ce problème, WO 2016/075259A1 et WO 2015/071288A 1 présentent une cassette jetable qui permet la production de deux lots consécutifs de [SFJFDG. Les inventeurs affirment que la réutilisation de la cartouche d'échange d'anions destinée à isoler et à purifier le ['3F]-fluorure est difficile, car elle nécessiterait une solution saline pour nettoyer la cartouche entre les deux passages. La cassette

BE2024/51 78 contient donc deux cartouches échangeuses d'anions distinctes, une pour chaque production, et est limitée à la production de deux lots.

[0012] WO 2016/184980A1 divulgue une "multi-cassette" permettant de produire jusqu'à trois lots de traceurs marqués au ['3F]. La multi-cassette est composée de quatre 5 cassettes de synthèse, une pour le piégeage du ["*F]-fluorure fourni par la cible sur un échangeur d'anions et son élution ultérieure, chacune des trois autres pour les étapes ultérieures de synthèse de traceurs radiomarqués. Les étapes de piégeage et d'élution du ['3F]-fluorure sont effectuées en utilisant le même matériel échangeur d'anions et l'équipement associé pour chaque synthèse de la série. Entre les séries suivantes, l'échangeur d'anions est reconditionné en faisant passer une solution saline à travers la cartouche (par exemple une solution de carbonate). Bien qu'élégante, cette solution ne permet que trois passages consécutifs, elle est gourmande en équipement (multi- cassettes) et nécessite une solution de reconditionnement pour le matériel d'échange d'anions.

[0013] La Fig. 7 de WO 2011/127345A1 représente une boîte de synthèse de forme cubique ou rectangulaire, chaque face de la boîte portant une cassette à usage unique. Le système permettrait ainsi jusqu'à quatre productions sans intervention entre les séries, en utilisant quatre cassettes à usage unique. II est évident que l'utilisation de quatre cassettes à usage unique n'est pas économiquement avantageuse.

[0014] Leonardis et a/. (F. De Leonardis, G. Pascali, P.A. Salvadori, P. Watts, N.

Pamme, On-chip pre-concentration and complexation of [18F]fluoride ions via regenerable anion-exchange particles for radiochemical synthesis of Positron Emission

Tomography tracers, Journal of Chromatography A, 1218 (2011) 4714- 4719) et plus tard Lebedev et a/. (A. Lebedev, R. Miraghaie, K. Kotta, C.E. Ball, J. Zhang, M.S.

Buchsbaum, H.C. Kolb, A. Elizarov, Batch-reactor microfluidic device : first human use of a microfluidically produced PET radiotracer, Lab Chip. 2013 January 7 ; 13(1) : 136- 145) ont présenté la réutilisation du matériau échangeur d'anions, à condition qu'il soit reconditionné entre les passages avec une solution de bicarbonate. Leur travail est réalisé sur des synthétiseurs à tubes fixes, ce qui nécessite des procédures NEP indésirables.

[0015] De manière surprenante, la raison pour laquelle il est nécessaire de reconditionner le matériau échangeur d'anions avec une solution saline, par exemple une solution contenant du carbonate ou du bicarbonate pour régénérer (recharger) la phase solide, entre les passages n'est expliquée dans aucun des documents susmentionnés, à savoir WO 2016/07259A1, WO 2015/071288A 1,

6 BE2024/51 78

WO 2016/184980A1, WO 2011/127345A1, Leonardis et al. (F. De Leonardis, G. Pascali,

P.A. Salvadori, P. Watts, N. Pamme, On-chip pre-concentration and complexation of [18F]fluoride ions via regenerable anion-exchange particles for radiochemical synthesis of Positron Emission Tomography tracers, Journal of Chromatography A, 1218 (2011) 4714- 4719) et Lebedev et al. (A. Lebedev, R. Miraghaie, K. Kotta, C.E. Ball, J. Zhang,

M.S. Buchsbaum, H.C. Kolb, A. Elizarov, Batch-reactor microfluidic device : first human use of a microfluidically produced PET radiotracer, Lab Chip. (2013) 7 janvier ; 13(1) : 136-145). Parmi les matériaux échangeurs d'anions fréquemment utilisés figure un matériau échangeur d'anions à base d'ammonium quaternaire, en particulier le méthylammonium quaternaire (MAQ). On peut citer à titre d'exemple les cartouches échangeuses d'ions à base de silice chargées de MAQ, telles que la cartouche Sep-

Pak® Accell Plus QAM Plus Light proposée par Waters Corporation, ou Chromafix®

PSHCO3 de MACHEREY-NAGEL GmbH & Co. Ces cartouches sont disponibles dans le commerce sous leurs formes carbonatées par exemple.

Problème à résoudre

[0016] Les méthodes de l'état de l'art permettant de réaliser des passages dos à dos de radiotraceurs marqués au [SF] présentent des inconvénients tels que la limitation du nombre de synthèses séquentielles possibles, la quantité élevée de cassettes ou de composants de cassettes nécessaires, ainsi que la nécessité d'avoir une étape de reconditionnement qui nécessite la présence d'une solution de reconditionnement, ce qui n'est pas pratique. II existe un besoin urgent d'une méthode permettant un plus grand nombre de synthèses séquentielles automatisées de radiotraceurs marqués au [13F] que les méthodes de l’état de l’art, avec un impact financier et environnemental minimal tout en garantissant la sécurité de l'opérateur.

Résumé de l'invention

[0017] La présente invention vise à fournir un procédé permettant d'effectuer plusieurs synthèses en série, en utilisant une seule cassette qui contient une seule cartouche échangeuse d'anions, tout en garantissant une implication minimale du personnel d'exploitation.

[0018] La méthode de la présente invention permet d'effectuer jusqu'à huit passages consécutifs, sans intervention manuelle, à l'aide d'une seule cassette. Elle est nettement plus performante que les méthodes les plus récentes, notamment en ce qui concerne le nombre de tirages possibles et Ia quantité réduite de déchets générés.

7 BE2024/51 78

[0019] Plus précisément, la présente invention propose de largement réutiliser une cassette unique, jusqu'à huit passages, constituée de composants matériels spécifiques et de produits chimiques nécessaires au processus de synthèse radiopharmaceutique. La cassette de synthèse radiopharmaceutique comprend un ou plusieurs collecteurs équipés de vannes appropriées pouvant être commandées par un synthétiseur. Elle comporte également de multiples connexions, telles que des connecteurs Luer et des tuyaux, ainsi qu'une ou plusieurs cuves de réaction et des flacons contenant les réactifs et autres liquides nécessaires. La cassette ne contient qu'une seule cartouche échangeuse d'anions et, éventuellement, d'autres cartouches de séparation et/ou de purification.

[0020] Selon l'invention, la cassette entière est réutilisée pour chaque lot. Le matériau échangeur d'anions n'est pas reconditionné entre les passages puisqu'il est seulement rincé avec un solvant non reconditionnant, tel qu'un solvant organique contenu dans des flacons déjà piqués sur la cassette, comme l'acétonitrile ou l'éthanol.

A cet égard, l'invention supplante les méthodes de l'état de la technique, puisqu'elle supprime la nécessité d'un flacon de solution de reconditionnement, ce qui libère un emplacement sur la cassette permettant une plus grande liberté en termes de synthèses accessibles, à un moindre coût. Le matériau échangeur d'anions préféré selon la présente invention comprend un matériau échangeur d'anions à base d'ammonium quaternaire, en particulier le méthylammonium quaternaire (MAQ). Le reste de la cassette est également rincé automatiquement entre les passages, à l'aide d'eau pour injection et de solvants contenus dans les flacons piqués sur la cassette, ce qui permet de réduire l'activité résiduelle et d'éviter la contamination croisée d'un passage à l'autre.

[0021] En outre, au cours du développement de la présente méthode, les inventeurs ont constaté qu’abaisser la quantité de phase d'échange d'anions stabilise le rendement de chaque série, quelle que soit la qualité de l'activité de départ. Lorsque l'on effectue des passages consécutifs, la ligne de transfert (du cyclotron au synthétiseur) ne doit pas être rincée entre deux productions de ["“F]-fluorure. Cela est préjudiciable à la synthèse à venir car les impuretés, telles que le [19F]-fluorure froid et d'autres impuretés métalliques, peuvent s'accumuler dans la ligne et menacer la fluoration à venir. De nos jours, les synthétiseurs disponibles dans le commerce utilisent généralement des cartouches MAQ chargées de 130 à 150 mg de sorbant. Dans certains modes de réalisation de la présente invention, la quantité de sorbant MAQ peut atteindre 100 mg.

Dans les modes de réalisation préférés, la quantité de sorbant MAQ est inférieure ou égale à 50 mg.

8 BE2024/51 78

[0022] Selon un aspect de la présente invention, une méthode est fournie pour synthétiser plusieurs lots d'un radiotraceur marqué [°F] dans une seule et unique cassette, caractérisé en ce que ladite méthode comprend les étapes suivantes : - fournir une cassette pour la synthèse d’une pluralité de lots en série d’un seul radiotraceur marqué au [13F] ; - piéger un premier bolus de [13F]-fluorure sur la cartouche échangeuse d'anions ; - faire passer une première partie aliquote d'éluant à travers ladite cartouche d'échange d'anions pour éluer ledit premier bolus de ["*F]-fluorure dans une cuve de réaction ; - éventuellement, effectuer une étape de séchage azéotropique ; - introduire une première partie aliquote d'un composé précurseur dans ladite cuve de réaction et effectuer la réaction de fluoration à température ambiante ou en chauffant ladite cuve de réaction pour obtenir un radiotraceur marqué [13F] brut. Sinon, ledit précurseur peut se trouver dans ladite solution d'éluant. En option, ledit précurseur peut être l'agent d'élution [13F] de la solution d'éluant ; - éventuellement, effectuer d'autres étapes chimiques sur ledit radiotraceur marqué [18F] brut, telles que l'hydrolyse basique ou acide des groupes protecteurs ; - éventuellement, purifier ledit radiotraceur marqué [13F] brut sur une ou plusieurs colonnes EPS (7) ou par CLHP ; - formuler le radiotraceur purifié ou non purifié dans une solution ou un tampon adapté à l'injection ; - rincer la cartouche échangeuse d'anions uniquement, avec un ou plusieurs solvants non-reconditionnants et nettoyer les autres composants de la cassette, tels que les tubes, la cuve de réaction, les cartouches EPS, etc., au moyen d’un solvant ; - répéter l'étape susmentionnée jusqu'à 7 fois, en utilisant à chaque fois une nouvelle partie aliquote de [13F]-fluorure piégée sur la même cartouche d'échange d'anions sur une même cassette unique ; caractérisé en ce que ledit solvant non-reconditionnant pour le rinçage de la cartouche échangeuse d’anions est l’acétonitrile ou l’éthanol, et ledit solvant pour nettoyer les composants de la cassette autres que la cartouche échangeuse d’anions est l’acétonitrile, l’éthanol et/ou l’eau.

[0023] Avantageusement, la cassette utilisée dans la méthode pour la synthèse de plusieurs lots en série d'un seul radiotraceur marqué au [13F] comprend :

9 BE2024/51 78 - une et une seule colonne d'échange d'anions ; - un flacon d'éluant en vrac contenant une partie aliquote d'éluant pour chaque lot ; - au moins une cuve de réaction ; - des flacons de réactifs en vrac, chaque flacon contenant une partie aliquote de réactif ou de solvant pour chaque lot ; - éventuellement, une cartouche d'extraction en phase solide (EPS) pour d'autres étapes chimiques, telles que l'hydrolyse ou la réduction, et/ou pour la purification ; - des moyens de rinçage de la cartouche échangeuse d'anions et du reste de la cassette entre deux passages consécutifs afin d'éviter toute contamination croisée.

[0024] Un radiotraceur marqué au ["*F] est un composé chimique qui comprend un atome [13F] et qui peut être utilisé comme traceur TEP. La méthode selon l'invention peut être utilisée pour une variété de produits radiopharmaceutiques à base de [°F].

Une liste non exhaustive et non limitative de radiotraceurs marqués au [13F] comprend ['8F]NaF, ['8F]FDG, ['3FJFMISO, ['SF]FLT, ['$F]FAZA, [18F]JFCH, [18F]JFDOPA, ['°F]FES, ['°F]FET, des entités marquées au ['°F]JAIF telles que des petites molécules, des peptides, des protéines, des anticorps à domaine unique, des fragments d'anticorps, des nanocorps, des dérivés de ["°F]-FAPI, etc.

[0025] Dans certains modes de réalisation, la cartouche d'extraction en phase solide pour la purification est choisie dans le groupe constitué de C18, tC18, C8, alumine,

CN, diol, HLB, Porapak RDX, NH2, CM, MAX, WAX, MCX, WCX, StrataTM-X, StrataTM-

XL, StrataTM-X-C, StrataTM-X-CW, StrataTM-X-A, StrataTM-X-AW, et toute combinaison de ceux-ci.

[0026] De préférence, le solvant de non-reconditionnement pour le rinçage de la cartouche échangeuse d’anions est l’acétonitrile est l'acétonitrile.

[0027] Selon des modes d’exécution préférés de la méthode, - dans la cassette fournie à la première étape, ladite cartouche échangeuse d'anions est une cartouche échangeuse d'anions à ammonium quaternaire (MAQ) ; - dans la cassette fournie à la première étape, la cartouche échangeuse d'anions contient jusqu'à 150 mg de sorbant, de préférence jusqu'à 100 mg de sorbant, et de préférence encore jusqu'à 50 mg de sorbant.

10 BE2024/51 78

Brève description des dessins

[0028] La figure 1 illustre une représentation schématique d'un exemple non limitatif d'une cassette conçue pour effectuer des synthèses multiples de ["°F]FDG conformément à l'invention.

[0029] La figure 2 représente graphiquement le rendement en ['3F-FDG en fonction du nombre de passages, en utilisant une cartouche MAQ de 130 mg de sorbant.

[0030] La figure 3 représente graphiquement le rendement en ['3F-FDG en fonction du nombre de passages, en utilisant une cartouche MAQ de 46 mg de sorbant.

[0031] La figure 4 représente graphiquement l'efficacité du piégeage MAQ (%), pour deux passages successifs, en fonction du type de traitement MAQ entre les deux passages.

[0032] La figure 5 représente graphiquement l'efficacité d'élution du fluorure de

MAQ [13F] (%) en fonction de la concentration de carbonate (%).

[0033] La figure 6 représente graphiquement le rendement en ['3F-FDG en fonction du nombre de passages, en réutilisant une seule cartouche MAQ pour un maximum de huit passages.

Description des modes de réalisation préférés de l'invention

[0034] Les méthodes de marquage au [°F] pour la préparation de sondes moléculaires marquées au [°F] peuvent être classées en fluorination électrophile, fluorination nucléophile, coordination métal-F et échange d'isotopes ['$F]/['°F]. La fluoration nucléophile, la coordination métal-F et l'échange d'isotopes [18F]/[19F] utilisent des anions ['*F]-fluorure, généralement produits dans un cyclotron. La présente invention propose une réutilisation étendue d'une seule cassette pour jusqu'à 8 productions en série d'un radiotraceur marqué au ["°F] dont la synthèse commence à partir d'anions de fluorure [°F]. Un radiotraceur marqué au [°F] est un composé chimique qui comprend un atome [13F] et qui peut être utilisé comme traceur TEP. La méthode selon l'invention peut être utilisée pour une variété de produits radiopharmaceutiques marqués au [13F], obtenus soit par fluoration nucléophile, soit par coordination métal-F, soit par échange d'isotopes [3F]/[19F]. Une liste non exhaustive et non limitative de radiotraceurs marqués au [°F] comprend ['$F]NaF, ['$F]FDG, ['8F]FMISO, [18F]FLT, [8F]FAZA, [8F]FCH, ["°F]FDOPA, ['$F]FES, ["$F]FET, des entités marquées au ["$F]AIF telles que des petites molécules, des peptides, des protéines, des

11 BE2024/51 78 anticorps à domaine unique, des fragments d'anticorps, des nanocorps, des dérivés de [18F]-FAPI, etc.

[0035] Les cassettes appropriées comprennent des composants matériels spécialisés et des produits chimiques essentiels nécessaires au processus de synthèse radiopharmaceutique. La cassette de synthèse radiopharmaceutique comprend un ou plusieurs collecteurs équipés de vannes appropriées commandées par un synthétiseur.

Dans un mode de réalisation, chaque vanne est une vanne à trois voies. Dans un mode de réalisation, chaque collecteur de la cassette comprend 6 vannes. Les cassettes appropriées peuvent comprendre jusqu'à 6 collecteurs. Certaines vannes sont reliées à un port où des réactifs ou d'autres liquides contenant des flacons peuvent être attachés, généralement par piquage à l'aiguille de flacons à bouchon serti inversé. Les aiguilles de piquage sont de préférence celles décrites dans le document WO 2017/093141A1.

D'autres positions conviennent à la fixation de seringues, de poches d'eau ou de sérum physiologique ou de colonnes d'extraction en phase solide (EPS). La cassette comprend également de nombreux raccords, tels que des connecteurs Luer et des tuyaux, ainsi qu'un ou plusieurs récipients de réaction. Dans un mode de réalisation, une cassette appropriée peut contenir jusqu'à trois cuves de réaction.

[0036] Bien que la configuration de la cassette dépende de la voie de synthèse du radiotraceur marqué au [13F], les cassettes de la présente invention ne contiennent qu'une seule cartouche EPS d'échange d'anions. Cette cartouche d'échange d'anions est destinée à isoler et à purifier les anions fluorures [13F] produits par cyclotron de l'eau enrichie en ["°O] et de quelques autres impuretés. Le choix préféré pour le matériau échangeur d'anions comprend un matériau échangeur d'anions à base d'ammonium quaternaire, en particulier le méthylammonium quaternaire (MAQ). On peut citer à titre d'exemple les cartouches échangeuses d'ions à base de silice chargées de MAQ, telles que la cartouche Sep-Pak® Accell Plus QMA Plus Light proposée par Waters

Corporation, ou Chromafix® PSHCO3 de MACHEREY-NAGEL GmbH & Co. Ces cartouches sont généralement disponibles dans le commerce sous forme de chlorure ou de carbonate. En fonction de la voie de synthèse, les cassettes appropriées peuvent également comprendre d'autres cartouches EPS de séparation et/ou de purification.

[0037] En règle générale, les flacons contenant les réactifs et les liquides essentiels peuvent être obtenus séparément sous la forme d'un kit chimique, tandis que les autres composants matériels de la cassette sont préassemblés.

[0038] La figure 1 illustre une cassette conçue pour effectuer des synthèses multiples de ["°F]FDG conformément à l'invention.

12 BE2024/51 78

[0039] Dans un aspect de la présente invention, une cassette 1 est fournie pour synthétiser une pluralité de lots d'un seul radiotraceur marqué au ["°F], caractérisée en ce que ladite cassette comprend : - une et une seule colonne d'échange d'anions 2, de préférence une cartouche MAQ ; - un flacon d'éluant en vrac 3 contenant une partie aliquote d'éluant pour chaque lot ; - au moins un récipient de réaction 4 ; - des flacons de réactif en vrac 5,5',5",5"",5"", chaque flacon contenant une partie aliquote de réactif pour chaque lot ; - éventuellement, une cartouche d'extraction en phase solide (EPS) pour d'autres étapes chimiques, telles que l'hydrolyse ou la réduction 6 et/ou pour la purification 7 ; - un moyen de rincer la cartouche MAQ et le reste de la cassette entre deux passages consécutifs afin d'éviter toute contamination croisée.

[0040] Selon un autre aspect de la présente invention, une méthode est fournie pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [13F] sur une même cassette unique, caractérisée en ce que ladite méthode comprend : - piéger un premier bolus de [13F]-fluorure sur la cartouche d'échange d'anions 2, de préférence une cartouche MAQ ; - faire passer une première partie aliquote d'éluant 3 à travers la cartouche échangeuse d'anions pour éluer le premier bolus de ['3F]-fluorure dans le récipient de réaction 4 ; - éventuellement effectuer une étape de séchage azéotropique ; - introduire une première partie aliquote d'un composé précurseur 5 dans ladite cuve de réaction et effectuer la réaction de fluoration à température ambiante ou au moyen du chauffage de ladite cuve de réaction pour obtenir un radiotraceur marqué au [1?F] brut. Sinon, ledit précurseur 5 peut se trouver dans ladite solution éluée 3. En option, ledit précurseur 5 peut être l'agent d'élution [13F] de la solution éluée 3 ; - éventuellement, effectuer d'autres étapes chimiques sur ledit radiotraceur marqué au [18F] brut, telles que l'hydrolyse basique ou acide des groupes protecteurs ; - éventuellement, purifier ledit radiotraceur marqué au [13F] brut sur une ou plusieurs colonnes EPS 7 ou par CLHP, - formuler le radiotraceur purifié ou non purifié dans une solution ou un tampon adapté à l'injection,

13 BE2024/51 78 - rincer la cartouche MAQ uniquement avec un solvant non reconditionnant 5' et nettoyer les autres composants de la cassette tels que les tubes, la cuve de réaction, les cartouches EPS, etc. ; - répéter les étapes susmentionnées jusqu'à 7 fois, en utilisant à chaque fois une nouvelle partie aliquote de ['3F]-fluorure piégée sur la même cartouche d'échange d'anions sur la même cassette unique.

[0041] Selon la présente invention, la cassette ne contient qu'une seule cartouche d'échange d'anions destinée à isoler et à purifier le ["°F]-fluorure produit par le cyclotron. La cartouche échangeuse d'anions préférée est une cartouche EPS à ammonium quaternaire (MAQ). Dans les appareils automatisés modernes, le [13F] se récupère à l'aide de cartouches légères SepPak® QMA standard, contenant 130 à 150 mg de sorbants. Ces cartouches MAQ sont connues pour retenir certaines impuretés métalliques générées par le corps de la cible et les feuilles pendant le bombardement (K. Kilian, B. Chabecki, J. Kiec, A. Kunka, B. Panas, M. Wójcik, A.P. Pekal, Synthesis, quality control and determination of metallic impurities in 18F-fludeoxyglucose production process, reports of practical oncology and radiotherapy 19 (2014) S22-S31), ainsi que des anions froids de [19F]-fluorure, au cours du processus de piégeage du [13F]- fluorure. La plupart de ces impuretés piégées accompagneront les anions [13F]-fluorure dans la cuve de réaction pendant la phase d'élution. La présence de ces impuretés dans la cuve de réaction compromet considérablement l'efficacité du radiomarquage et la qualité du produit (réactions secondaires indésirables, pureté radiochimique réduite, produit dangereux, etc.) Selon la présente invention, dans un effort pour optimiser les conditions de réaction afin d'atténuer les effets négatifs du ["°F]-fluorure froid et des impuretés métalliques sur les réactions de marquage au ['3F] successives, on a découvert de manière surprenante que réduire la quantité de sorbant échangeur d'anions améliore de manière significative le rendement global et la qualité de la pureté des radiotraceurs marqués au ['3F] (exemple 1). Dans certains modes de réalisation, la cartouche échangeuse d'anions contient jusqu'à 100 mg de sorbant. Dans un mode de réalisation préféré, la cartouche échangeuse d'anions contient jusqu'à 50 mg de sorbant.

[0042] Bien que toute solution contenant un anion puisse être efficace pour éluer le [‘$F]-fluorure (['3FT) retenu sur le MAQ, pour la plupart des réactions nucléophiles, le ['8F]-fluorure peut être élué du MAQ avec une solution contenant un sel de carbonate tel que K2CO3, ou KHCO3 accompagné d'un cryptand tel que Kryptofix"M (K222) ou du tétrabutyl ammonium (Hamacher K., Coenen H.H., Stöcklin G., Efficient stereospecific synthesis of no-carrier-added 2-[18F]-fluoro-2-deoxy-D-glucose using aminopolyether supported nucleophilic substitution, J Nucl Med (1986) 27 : 235). On peut aussi éluer le

14 BE2024/51 78 [18F]-fluorure de la colonne d'échange d'anions avec le sel de carbonate et l'ajouter à une solution de cryptand dans l'acétonitrile. L'acétonitrile est le solvant de choix pour la solution d'éluant, principalement en raison de l'excellente solubilité du K[$F]/Kryptofix ou du fluorure de tétrabutylammonium ['3F] dans ce solvant. Après évaporation des solvants, le complexe sec [K/K2.2.2] [*13F] obtenu peut être utilisé directement dans des réactions de fluoration nucléophile, évitant ainsi la procédure de séchage azéotropique couramment utilisée. Pour la coordination du [13F]-métal, le [13F]-fluorure retenu sur la résine MAQ est généralement élué avec une solution saline pure ou un mélange de solution saline et d'un solvant organique tel que l'acétonitrile.

[0043] Il est surprenant de constater que la raison pour laquelle il est nécessaire de reconditionner le matériau échangeur d'anions avec une solution saline, par ex. une solution contenant du carbonate ou du bicarbonate pour régénérer (recharger) la phase solide, entre les passages, n'est expliquée dans aucun des documents susmentionnés, à savoir WO 2016/07259A1, WO 2015/071288A1, WO 2016/184980A 1,

WO 2011/127345A1, Leonardis et al. (F. De Leonardis, G. Pascali, P.A. Salvadori, P.

Watts, N. Pamme, On-chip pre-concentration and complexation of [18F]fluoride ions via regenerable anion-exchange particles for radiochemical synthesis of Positron Emission

Tomography tracers, Journal of Chromatography A, 1218 (2011) 4714- 4719) et Lebedev et al. (A. Lebedev, R. Miraghaie, K. Kotta, C.E. Ball, J. Zhang, M.S. Buchsbaum, H.C.

Kolb, À. Elizarov, Batch-reactor microfluidic device : first human use of a microfluidically produced PET radiotracer, Lab Chip. 2013 January 7 ; 13(1) : 136-145). Cependant, les inventeurs étaient persuadés qu'il n'était pas nécessaire de reconditionner le matériau échangeur d'anions entre les cycles. Pour évaluer cette hypothèse, dans le but de proposer une méthode simplifiée, certaines expériences ont été menées comme décrit dans l'exemple 2.

[0044] L'exemple 2 démontre qu'une cartouche MAQ carbonatée, telle que disponible dans le commerce, est automatiquement reconditionnée pendant l'étape d'élution du [13F]-fluorure. Ainsi, selon la présente invention, entre les passages, la cartouche MAQ est seulement rincée avec des liquides non reconditionnants, par exemple un solvant organique tel que l'acétonitrile ou l'éthanol. Le solvant organique préféré est l'acétonitrile. Les exemples 2 et 3 démontrent sans aucun doute que le rinçage avec un solvant organique tel que l'acétonitrile ne doit pas être confondu avec une étape de reconditionnement de la phase de la cartouche MAQ. L'exemple 3 montre qu'une concentration minimale de carbonate de 0,004 M est nécessaire pour éluer le ['*F]-fluorure piégé, c'est-à-dire pour déplacer les anions [13F]-fluorure et les remplacer par des anions carbonate. L'acétonitrile ne contient pas d'anions carbonates et est donc

15 BE2024/51 78 incapable d'éluer le [‘*F]-fluorure piégé et donc de reconditionner la cartouche. La présente invention permet à un synthétiseur dans une cellule chaude de produire en série plusieurs lots d'un radiotraceur marqué au [°F], comme le montre l'exemple 4.

L'exemple 4 montre que, selon la présente méthode, une même cartouche MAQ peut être réutilisée au moins jusqu'à 8 fois, avec une seule étape de rinçage à l'acétonitrile entre les étapes de piégeage et d'élution. Elle démontre également que de bons rendements sont obtenus pour chacun des lots séquentiels de ["°F]FDG. Les analyses de contrôle de la qualité des huit lots montrent que chacun répond aux exigences de la pharmacopée pour le ["$F]FDG.

[0045] Le rinçage de la cassette est un processus au cours duquel une cassette de synthèse radiopharmaceutique est nettoyée pour éliminer l'activité résiduelle et empêcher les contaminations croisées. II s'agit de rincer les composants de la cassette, y compris les cuves de réaction, les cartouches de purification et les tubes, avec des solutions de rinçage appropriées présentes sur la cassette, telles que des solvants organiques (comme l'acétonitrile ou l'éthanol) ou de l'eau, afin de s'assurer qu'il ne reste qu'un maximum de traces radioactives ou d'impuretés provenant des cycles précédents.

Un rinçage efficace est crucial pour maintenir l'intégrité de chaque synthèse et pour minimiser le risque de contamination dans les processus ultérieurs. L'exemple 5 montre que le procédé de rinçage de la présente invention est efficace à cette fin.

EXEMPLES

Exemple 1 - Quantité de sorbant MAQ

[0046] L'objectif des présentes études est de démontrer que réduire la quantité de la phase cartouche permet de stabiliser les rendements dans les cycles de production

Ultérieurs.

[0047] Quatre synthèses de ["°F]FDG ont été réalisées en série, en utilisant la cassette et la méthode de la présente invention, mais en présence d'une activité de type « à faible qualité » (["*F]-fluorure d'activité qui a été contaminé volontairement avec des anions [‘°F]-fluorure froids). Les expériences ont été répétées quatre fois : - Cartouche MAQ Light 130 mg de sorbant et 39 umol d'anions [19F]-fluorure (Fig. 2) ; - Cartouche MAQ Light 130 mg de sorbant et 52 umol d'anions ["°F]-fluorure (Fig. 2) ; - Cartouche MAQ Light 46 mg de sorbant et 39 umol d'anions [19F]-fluorure (Fig. 3) ; - Cartouche MAQ Light 46 mg de sorbant et 52 umol d'anions [19F]-fluorure (Fig. 3).

16 BE2024/51 78

[0048] La figure 2 montre une chute significative du rendement non corrigé pour la désintégration de ["°F]FDG, cycle après cycle, en utilisant une cartouche légère

SepPak® QMA Plus remplie de 130 mg de sorbant, quelle que soit la quantité de fluorure froid ajoutée (repères carrés : 39 umol ; repères triangulaires : 52 mol).

[0049] Au contraire, la Fig. 3 montre de bien meilleurs rendements, particulièrement stabilisés d'un passage à l'autre, d'une cartouche SepPak® QMA Plus

Light remplie de 46 mg de sorbant, quelle que soit la quantité de fluorure froid ajoutée (repères carrés : 39 umol ; repères triangulaires : 52 umol).

Exemple 2 - Une cartouche échangeuse d'anions est reconditionnée au cours de l'étape d'élution du [°F]-fluorure

[0050] Le but de ces expériences est de montrer que la cartouche d'échange d'anions peut être réutilisée après une ou plusieurs applications. En particulier, l'intention est de montrer que la cartouche MAQ ne nécessite pas de reconditionnement après une utilisation antérieure du piège à [13F]-fluorure et de la libération. L'occupation de la cartouche par des ions carbonates est suffisante pour une utilisation répétée. Comme les solvants organiques purs ne contiennent pas d'anions, on ne peut pas les soupçonner d'avoir une capacité d'échange d'anions sur une résine échangeuse d'anions.

[0051] À partir des données brutes, l'efficacité de piégeage du deuxième cycle (piégeage n°2), après le rinçage de la cartouche MAQ, peut être calculée en divisant l'activité corrigée pour la désintégration piégée sur le MAQ par l'activité de départ corrigée pour la désintégration:

Efficacité de piégeage (%) 95 __ activité fixée sur MAQ (désintégration corrigée, MBq) 100 “activité de départ (désintégration corrigée), MBq)

[0052] L'efficacité du piégeage est présentée dans le tableau 1 et la figure 4.

Traitement MAQ entre 2 passages | Efficacité du piégeage

Rinçage à l'azote (sans rinçage)

Rinçage à l'acétonitrile

Tableau 1

[0053] Les résultats permettent de conclure qu'il est préférable de rincer le MAQ avec un liquide pour obtenir un piégeage ultérieur efficace plutôt que de ne pas le rincer

17 BE2024/51 78 du tout. L'efficacité du piégeage sans rinçage n'est pas quantitative (84%), alors que le rinçage de la cartouche MAQ avec un solvant organique tel que l'acétonitrile conduit à un piégeage ultérieur quantitatif du [13F]-fluorure.

[0054] L'acétonitrile ne peut être soupçonné d'une quelconque capacité de reconditionnement de la résine échangeuse d'anions MAQ carbonatée, car le carbonate de potassium n'est pas soluble dans l'acétonitrile. Les anions carbonates ne sont donc pas présents dans l'acétonitrile. Si le piégeage du [13F]-fluorure sur une MAQ usagée lavée avec de l'acétonitrile, qui lui-même ne contient pas d'anions carbonates, est quantitatif, cela implique que la cartouche MAQ était déjà prête à l'emploi, c'est-à-dire suffisamment conditionnée avec du carbonate avant l'étape de rinçage. Cela démontre que la phase solide échangeuse d'anions de la MAQ est reconditionnée avec des anions carbonates pendant l'élution de l'activité du [13F]-fluorure par l'éluant standard de la MAQ qui contient des anions carbonates. Par conséquent, la cartouche échangeuse d'anions ne nécessite aucun reconditionnement.

Exemple 3 - Efficacité de l'élution du [‘*F]-fluorure en fonction de la concentration en carbonate de l'éluant

[0055] L'objectif de ces tests est de trouver la quantité minimale de carbonate de potassium nécessaire pour éluer efficacement le [13F]-fluorure à partir d'une cartouche

MAQ. Le principe est de réduire la concentration de K2COs3 et de suivre le rendement d'élution du [13F]-fluorure à mesure que la concentration de K2CO:3 diminue.

[0056] L'efficacité d'élution est définie comme le rapport entre l'activité corrigée pour la désintégration dans le réacteur et l'activité corrigée pour la désintégration piégée sur le MAQ :

Efficacité d'élution (%) activité dans le réacteur (désintégration corrigée, MBq) = x x x x Fr A x A Tr r A ' 100 activité fixée sur MAQ (désintégration corrigée, MBq)

[0057] Les résultats sont présentés dans le tableau 2 et la figure 5.

Concentration en Concentration de Efficacité de

Solution en carbonate (%) carbonate (mol/L) l'élution

Éluant MAQ "standard” 0.0896 100%

Dilution 1 0.0448 101%

18 BE2024/51 78

Ei | 0) | ve | 8%

Tableau 2

[0058] En utilisant une échelle logarithmique, nous pouvons montrer que l'élution est presque quantitative à une concentration de carbonate de 11,85 (100%) - 1,48 (12,5%) g/L. En dessous de ce point, la concentration de carbonate n'est pas assez élevée pour permettre une élution efficace pour des rendements de production élevés et diminue linéairement avec le logarithme naturel de la concentration en carbonate. Il ressort de ces résultats qu'une concentration de carbonate d'au moins 0,004 mol/L est nécessaire pour éluer efficacement les anions [13F]-fluorure piégés sur une cartouche

MAQ. Ce comportement est évident car une compétition se produit entre le carbonate et les anions [13F]-fluorure pour la phase solide cationique de méthylammonium quaternaire (MAQ). Les anions [13F]fluorure présentent une affinité plus forte pour la phase solide

MAQ que leurs homologues carbonates. Ainsi, les anions ['3F]fluorure peuvent être déplacés par les anions carbonate uniquement si ces derniers sont en grand excès, ce qui est le cas pour l'éluant MAQ pur ou modérément dilué "standard".

[0059] Cet exemple montre qu'un solvant organique, qui ne contient pas d'anions carbonates, ne peut pas être considéré comme un agent de reconditionnement, car il n'élue même pas le ['°F]-fluorure. En d'autres termes, l'acétonitrile ne contient pas suffisamment d'anions carbonates (en fait, il n'en contient pas du tout) pour recharger le matériel d'échange d'anions. Par conséquent, le rinçage d'une cartouche MAQ avec un solvant organique tel que l'acétonitrile entre les passages ne doit pas être considéré comme une étape de reconditionnement.

Exemple 4 - Réutilisation d'une cartouche MAQ sans aucune étape de reconditionnement et synthèses multiples de ["“F]FDG

[0060] L'objectif de ces expériences était d'évaluer le nombre de cycles que peut supporter un MAQ. La configuration de la cassette illustrée à la figure 1 a été utilisée pour produire deux fois quatre lots consécutifs de ["°F]FDG à l'aide d'un synthétiseur

AllinOne® (Trasis SA), en utilisant la même cartouche MAQ (cartouche SepPak® QMA light, 46 mg de sorbant) pour chacune des huit séries. En bref, le [13F]-fluorure obtenu par bombardement d'eau enrichie avec ["°O]-a été piégé sur une cartouche QMA Plus

19 BE2024/51 78 light carbonatée 2 (46 mg de sorbant, la cartouche MAQ a été utilisée telle quelle). Une partie aliquote d'éluant 3 contenant K2CO3/K222 (300 HL) a été utilisée pour éluer le [13F]- fluorure piégé dans la cuve de réaction 4. Après évaporation de l'eau par séchage azéotropique, une partie aliquote du précurseur 5 a été ajoutée au réacteur et le marquage a été effectué à 115°C pendant 1,5 min. L'intermédiaire, ["°F]-FTAG a ensuite été piégé et déprotégé sur la cartouche tC18 6, en faisant passer une partie aliquote d'une solution d'hydroxyde de sodium 5"" à travers la cartouche. Une partie aliquote d'eau a été utilisée pour éluer le ['3F]JFDG brut résultant de la réaction, qui a ensuite été neutralisé avec une partie aliquote de solution tampon citrate 5". Le ['SFJFDG a finalement été purifié à travers deux cartouches de purification 7 et envoyé dans le flacon de produit final. Entre deux passages, les cartouches tC18 6 et de purification 7, ainsi que la cuve du réacteur 4 et les collecteurs sont soigneusement rincés avec des parties aliquotes d'acétonitrile 5' et de l'eau pour injection 5'", alors que le MAQ n'est rincé qu'avec de l'acétonitrile provenant du flacon dopé 5".

[0061] Les résultats obtenus avec cette configuration de cassette sont indiqués dans le tableau 3 ci-dessous et présentés dans la figure 6. Des rendements non corrigés pour la désintégration > 65% sont attendus, ainsi que des puretés radiochimiques > 95%. (Mba) n.d.c) (% radiochimique (% 14 0001 2463 1 FDGQ-240320- 241,3 73% >99%

B1-ACC 14 0001 2463 2 FDGQ-240320- 206,7 73% >99%

B2-ACC 14 0001 2463 3 FDGQ-240320- 216,4 69% >99%

B3-ACC 14 0001 2463 4 FDGQ-240320- 187,9 69% >99%

B4-ACC 14 0001 2465 5 FDGQ-240321- 299,2 63% >99%

A1-ACC

20 BE2024/51 78 14 0001 2465

FDGQ-240321- 178,2 68% >99%

A2-ACC 14 0001 2465 7 FDGQ-240321- 185,7 69% >99%

A3-ACC 14 0001 2465

FDGQ-240321- 204,7 65% >99%

A4-ACC

Tableau 3

[0062] En ce qui concerne le contrôle de la qualité, des mesures du pH, du K222 et des concentrations d'acétonitrile ont été effectuées et tous les résultats étaient conformes aux exigences de la pharmacopée européenne.

[0063] Les résultats démontrent que le rendement en [13F]FDG non corrigé pour la désintégration à l'étape 8 est encore de 65%. Cet exemple démontre que la méthode de la présente invention est efficace pour réaliser des synthèses en série d'un traceur marqué [13F], à l'aide d'une seule cassette contenant une seule cartouche MAQ.

Exemple 5 - L'étape de rinçage des cassettes de la présente méthode entre les passages empêche la contamination croisée

[0064] L'objectif des expériences suivantes est de prouver que l'étape de rinçage de la cassette, telle que mise en œuvre dans la présente invention, aide à prévenir la contamination croisée entre deux passages successifs. L'étude de la contamination croisée a été réalisée pour démontrer que d'éventuels résidus chimiques du premier passage (RUN1) dans le passage suivant (RUN2) peuvent exister mais restent dans des limites acceptables (c'est-à-dire en dessous de la limite de détection et/ou de quantification de la méthode analytique validée par GC et HPLC).

[0065] La présence de radioactivité résiduelle du RUN 1 dans le RUN 2 a également été évaluée au moyen de mesures du calibrateur de dose et du profil des détecteurs gamma (radioTLC et radioHPLC).

Procédure

21 BE2024/51 78

[0066] Les traitements [13F]-FDG ont été réalisés en cas limite, avec un intervalle de 2h entre les deux passages (premier passage double) et avec un intervalle de 26h entre les deux passages (second passage double).

La procédure suivante a été utilisée : - -RUN1 s'est déroulé complètement. - RUN2 (après 2h ou 26 h) a été effectué en tant que lot fictif : RUN2 a été lancé et la ligne de transfert a été rincée. La solution de rinçage a été recueillie dans un flacon placé dans l'isolateur de distribution. Ensuite, toutes les étapes de la synthèse ont été contournées (aucun transfert de radioactivité), jusqu'à l'étape au cours de laquelle la seringue prélève la solution de formulation de tampon citrate. La solution est passée à travers les cartouches de purification et recueillie dans le flacon de solution mère installé dans l'isolateur de distribution.

[0067] Les tests de contrôle de qualité suivants ont été effectués : - RUN1 : analyse complète du CQ. - Solution de rinçage : mesure de la radioactivité résiduelle et de la teneur en EtOH et

ACN résiduels (GC). - RUN2 (lot fictif) : mesure de la radioactivité résiduelle et analyse HPLC, GC, radioTLC.

Résultats

Radioactivité résiduelle a rs ns

Test QC ; ; Spécifications mesurée résiduelle relative % (C/NC/NA) ll | a EE EE 193,5 MBq 0,10% < 1% C le flacon de rinçage

N 58,46 MBq 0,03% <0,5% C le lot fictif 1

PP F Rauiosctté 3 Radiooctitée $ antormite 7 me Qc re | terne Peen] aca mesurée résiduelle relative % (C/NC/NA)

22 BE2024/5178

Radioactivité résiduelle dans / 0 MBq 0% <1% C le flacon de rinçage

Radioactivité résiduelle dans 0 MBq 0% < 0,5% C le lot fictif 2

Tableau 4

23 BE2024/51 78

Produits chimiques résiduels "= TP PASSAGE DOUBLE Produlischimiques MSS 222

GING

5,66: 107% g/L (S/N

RUN 1 =0) <1%

CIDG C* < LODs* 4,50 105 g/L (S/N

RUN 2 = 0)

HPLC

1,27: 10% g/L (S/N

RUN 1 =0) <1%

FDG C* 1,60: 10° g/L (S/N

RUN 2 = 0)

RUN 1 0,0147 g/L

GC ACN <1% NCS

RUN 2 0,1211 g/L

RUN 1 338185 comptes

TLC FDG <1% C

RUN 2 395 comptes

DN PASSAGE OUR PFrodutschmiquesresiduels 222222)

C/NC 6,44 10% g/L (S/N

RUN 1 = 0)

CIDG <1% C* < LODs* 1,0: 10° g/L (S/N

RUN 2 = 0,8)

HPLC

1,92 10% g/L (S/N

RUN 1 = 0)

FDG <1% C* 1,0: 10° g/L (S/N

RUN 2 = 0,9)

RUN 1 0,0148 g/L 0, $

Flacon de <1% c

GC ACN / 0,0000 g/L ringage

RUN 1 389229 comptes

TLC FDG <1% C

RUN 2 (non enregistré)

Tableau 5

24 BE2024/51 78

[0068] (*) Les quantités de CIDG et de FDG détectées dans les échantillons sont inférieures aux valeurs LOD correspondantes : - DBOcps = 1,012 mg/L (> 0,566 mg/L) ; - DBOros = 0,942 mg/L (> 0,127 mg/L).

[0069] (8) La quantité d'ACN dans la solution RUN2 a été supérieure à la spécification. Cela est dû à l'utilisation d'ACN pour le lavage/reconditionnement des cartouches juste avant le début de la synthèse RUN2. Afin de le confirmer, le rinçage de la ligne de transfert a été injecté lors du double passage suivant et les résultats ont confirmé que la ligne de transfert n'était pas contaminée par de l'ACN provenant du

RUN1.

[0070] La présence d'éthanol détectée par GC provient de l'ajout de ce solvant dans le flacon de solution mère en tant que piégeur de radicaux, afin d'augmenter la stabilité du produit.

Commentaires finaux

[0071] Les résultats de cette étude sur la contamination croisée démontrent que la procédure de rinçage des cassettes maintient efficacement toute contamination croisée potentielle dans les limites des spécifications.

Claims (10)

25 BE2024/51 78 REVENDICATIONS

1. Une méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [13F] dans une seule et unique cassette (1), caractérisée en ce que ladite méthode comprend les étapes suivantes : - fournir une cassette (1) pour la synthèse d’une pluralité de lots en série d'un seul radiotraceur marqué au [13F] ; - piéger un premier bolus de [13F]-fluorure sur une cartouche échangeuse d'anions (2) ; - faire passer une première partie aliquote d’éluant (3) à travers ladite cartouche échangeuse d'anions (2) pour éluer ledit premier bolus de ['3F]-fluorure dans un récipient de réaction (4) ; - éventuellement, effectuer une étape de séchage azéotropique ; - introduire une première partie aliquote d'un composé précurseur (5) dans ladite cuve de réaction (4) et effectuer la réaction de fluoration à température ambiante ou en chauffant ladite cuve de réaction pour obtenir un radiotraceur brut marqué au ["$F], ledit précurseur (5) pouvant se trouver dans ladite solution d'éluant (3), ou pouvant être l'agent d'élution [13F] de la solution d'éluant (3) ; - éventuellement, effectuer d'autres étapes chimiques sur ledit radiotraceur marqué au [18F] brut, telles que l'hydrolyse basique ou acide des groupes protecteurs ; - éventuellement, purifier ledit radiotraceur marqué au [13F] brut sur une ou plusieurs colonnes EPS (7) ou par HPLC, - formuler le radiotraceur purifié ou non purifié dans une solution ou un tampon adapté à l'injection ; - rincer la cartouche échangeuse d'anions (2) uniquement, avec un ou plusieurs solvants non-reconditionnants (5") et nettoyer les autres composants de la cassette, tels que les tuyaux, la cuve de réaction, les cartouches EPS, etc., au moyen d’un solvant ; - répéter les étapes susmentionnées jusqu'à 7 fois, en utilisant à chaque fois une nouvelle partie aliquote de [13F]-fluorure piégé sur la même cartouche d'échange d'anions sur la même cassette unique ; caractérisé en ce que ledit solvant non-reconditionnant pour le rinçage de la cartouche échangeuse d'anions (2) est l'acétonitrile ou l'éthanol, et

26 BE2024/51 78 ledit solvant pour nettoyer les composants de la cassette autres que la cartouche échangeuse d'anions (2) est l’acétonitrile, l’éthanol et/ou l’eau.

2. La méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [°F] dans une seule et unique cassette (1) selon la revendication 1, caractérisée en ce que la cassette (1) fournie dans la première étape comprend : - une et une seule cartouche échangeuse d'anions (2) ; - un flacon d'éluant en vrac (3) contenant une partie aliquote d'éluant pour chaque lot ; - au moins une cuve de réaction (4) ; - des flacons de réactif en vrac (5,5',5",5",5""), chaque flacon contenant une partie aliquote de réactif ou de solvant pour chaque lot ; - éventuellement, une cartouche d'extraction en phase solide, ou EPS, pour d'autres étapes chimiques telles que l'hydrolyse ou la réduction (6) et/ou la purification (7) ; - des moyens de rinçage de la cartouche échangeuse d'anions et du reste de la cassette entre deux passages consécutifs afin d'éviter toute contamination croisée.

3. La méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [°F] dans une seule et unique cassette (1) selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit radiotraceur marqué au [13F] est choisi dans le groupe constitué de ['“FINaF, ['$F]FDG, ['$F]FMISO, ['$F]FLT, [$F]FAZA, [SF]FCH, [8F]JFDOPA, [°F]FES, ['$F]FET et ["°F]AIF comme les petites molécules, les peptides, les protéines, les anticorps à domaine unique, les fragments d'anticorps, les nanocorps et les dérivés de ["$F]-FAPI.

4. La méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [°F] dans une seule et unique cassette (1) selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit radiotraceur marqué au [13F] est choisi dans le groupe constitué des entités marquées au ['FJFDG et au ['°FJAIF, telles que les petites molécules, les peptides, les protéines, les anticorps à domaine unique, les fragments d'anticorps, les nanocorps et les dérivés du [$F]-FAPI.

5. La méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [°F] dans une seule et unique cassette (1) selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit radiotraceur marqué au [SF] est choisi dans le groupe constitué d'entités marquées au ["°F]AIF telles que les petites molécules, les peptides, les protéines, les anticorps à domaine unique, les fragments d'anticorps, les nanocorps et les dérivés du ["$F]-FAPI.

27 BE2024/51 78

6. La méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [°F] dans une seule et unique cassette (1) selon la revendication 1, caractérisée en ce que, dans la cassette (1) fournie à la première étape, ladite cartouche échangeuse d'anions (2) est une cartouche échangeuse d'anions à ammonium quaternaire (MAQ).

7. La méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [°F] dans une seule et unique cassette (1) selon la revendication 1, caractérisée en ce que, dans la cassette (1) fournie à la première étape, la cartouche échangeuse d'anions (2) contient jusqu'à 150 mg de sorbant.

8. La méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [°F] dans une seule et unique cassette (1) selon la revendication 7, caractérisée en ce que, dans la cassette (1) fournie à la première étape la cartouche échangeuse d'anions (2) contient jusqu'à 100 mg de sorbant.

9. La méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [°F] dans une seule et unique cassette (1) selon la revendication 7, caractérisée en ce que, dans la cassette (1) fournie à la première étape la cartouche échangeuse d'anions (2) contient jusqu'à 50 mg de sorbant.

10. La méthode pour synthétiser une pluralité de lots d'un radiotraceur marqué au [°F] dans une seule et unique cassette (1) selon la revendication 1, caractérisée en ce que, dans la cassette (1) fournie à la première étape, la cartouche d'extraction en phase solide pour la purification est choisie dans le groupe constitué de C18, tC18, C8, alumine, CN, diol, HLB, Porapak RDX, NH2, CM, MAX, WAX, MCX, WCX, StrataTM-X, StrataTM-XL, StrataTM-X-C, StrataTM-X-CW, StrataTM-X-A, StrataTM-X-AW, et toute combinaison de ceux-ci.